WO2026007740A1 - 螺环化合物、其制备方法及用途 - Google Patents

螺环化合物、其制备方法及用途

Info

Publication number
WO2026007740A1
WO2026007740A1 PCT/CN2025/102935 CN2025102935W WO2026007740A1 WO 2026007740 A1 WO2026007740 A1 WO 2026007740A1 CN 2025102935 W CN2025102935 W CN 2025102935W WO 2026007740 A1 WO2026007740 A1 WO 2026007740A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
compound
alkylene
alkyl
preparation
cycloalkyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
PCT/CN2025/102935
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
刘金明
任云
唐建川
田强
宋宏梅
俞文胜
葛均友
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sichuan Kelun Biotech Biopharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Sichuan Kelun Biotech Biopharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sichuan Kelun Biotech Biopharmaceutical Co Ltd filed Critical Sichuan Kelun Biotech Biopharmaceutical Co Ltd
Publication of WO2026007740A1 publication Critical patent/WO2026007740A1/zh
Pending legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A61K31/423—Oxazoles condensed with carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/10—Spiro-condensed systems

Definitions

  • This invention belongs to the pharmaceutical field, specifically relating to a class of spirocyclic compounds, their preparation methods, and their uses.
  • RAS is a guanine nucleotide-binding protein with GTPase activity and an intracellular anchoring function.
  • RAS proteins can switch between an inactive state bound to GDP and an active state bound to GTP, influencing multiple downstream signaling pathways such as Raf, PI3K, and RalGDS, and regulating protein synthesis, gene transcription, cell growth, differentiation, apoptosis, and migration.
  • RAS mutations lead to persistent activation of downstream signaling pathways, promoting tumor development and progression.
  • RAS mutations primarily occur in the KRAS (approximately 85%).
  • KRAS GTPase activity is decreased, thus maintaining a persistently activated state.
  • KRAS mutations are closely related to the development of various cancers, including lung cancer, pancreatic cancer, and colorectal cancer.
  • PROTACs Proteolysis-targeting chimeras
  • PROTACs are bifunctional molecules with a structure consisting of three parts: (1) a part that binds to the target protein substrate; (2) a part that binds to the E3 ubiquitin ligase; and (3) a chain connecting the first two parts.
  • PROTACs can recognize both the target protein and the E3 ubiquitin ligase, bringing the target protein closer to the E3 ubiquitin ligase.
  • PROTACs By inducing the recruitment of the E3 ubiquitin ligase to the surface of the target protein, PROTACs initiate ubiquitination and induce the degradation of the target protein.
  • PROTACs possess advantages such as broad pharmacological activity, high target selectivity, applicability for the degradation of refractory target proteins, strong degradation efficacy, and the ability to maintain catalytic degradation even at low concentrations.
  • KRAS PROTACs that are novel in structure, have good biological activity, and are safe and effective.
  • This invention provides compounds that can be used as degraders and/or inhibitors targeting KRAS proteins.
  • the compounds of this invention belong to the PROTAC family, with one end binding to the target protein and the other end containing a high-affinity CRBN (Cereblon) ligand that recruits the target protein to an E3 ubiquitin ligase, leading to ubiquitination and subsequent degradation of the KRAS protein.
  • the compounds of this invention can be used to treat and/or prevent cancers or conditions caused by the aggregation and/or overactivation of the target protein.
  • the present invention provides a compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof, stereoisomer, tautomer, polymorph, solvate, N-oxide, isotopically labeled compound, metabolite or prodrug, said compound having the structure of formula (I):
  • Ring A is a C3-6 cycloalkyl or a 3-6 membered heterocyclic group, wherein the cycloalkyl or heterocyclic group is optionally substituted by one or more substituents selected from halogens, C1-6 alkyl groups and C1-6 haloalkyl groups;
  • Ring B is a 3-12 member nitrogen-containing heterocyclic group
  • X1 and X2 are each independently selected from O and N;
  • X3 , X4 and X5 are each independently selected from CR3 and N;
  • X 6 is selected from CH and N;
  • L is a covalent bond, or can be selected from O, S and NR 4 ;
  • L1 is selected from O, S and NR 5 ;
  • L2 is selected from C1-6 alkylene and halogenated C1-6 alkylene
  • L3 is selected from C1-6 alkylene and halogenated C1-6 alkylene
  • Each R1 is independently selected from hydrogen, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, and 3-6 membered heterocyclic groups;
  • R2 is selected from hydrogen, halogen, cyano, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, C6-10 aryl, 3-12 heterocyclic, 5-10 heteroaryl, -C1-6 alkylene- C3-6 cycloalkyl, -C1-6 alkylene- 3-12 heterocyclic, and -C1-6 alkylene-5-10 heteroaryl, wherein the alkyl, alkylene, cycloalkyl, aryl, heterocyclic, and heteroaryl groups are optionally substituted by one or more substituents selected from halogen, hydroxyl, amino, cyano, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, C1-6 haloalkyl, -OC1-6 alkyl, -C1-6 alkylene-OH, -NR10a R10b , -C1-6 alkylene- OC1-6 alkyl, and -OC1-6 haloalkyl;
  • Each R3 is independently selected from hydrogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, C3-6 cycloalkyl, C1-6 alkoxy, and -OC1-6 haloalkyl;
  • R4 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, and C3-6 cycloalkyl;
  • R5 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R6 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R7 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R8 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R9 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R10a and R10b are each independently selected from hydrogen, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, -C1-6 alkylene-OH and -C1-6 alkylene -OC1-6 alkyl , or R10a and R10b together with the N attached thereto form a 3-6 membered nitrogen-containing heterocyclic group;
  • n is selected from 0, 1, 2, 3, and 4.
  • the present invention provides pharmaceutical compositions comprising preventive and/or therapeutically effective amounts of the compound of the present invention or its pharmaceutically acceptable salts, stereoisomers, tautomers, polymorphs, solvates, N-oxides, isotopically labeled compounds, metabolites or prodrugs, and one or more pharmaceutically acceptable carriers.
  • the present invention provides a kit containing a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt, stereoisomer, tautomer, polymorph, solvate, N-oxide, isotopically labeled compound, metabolite or prodrug, or a pharmaceutical composition comprising the present invention.
  • the present invention provides compounds of the present invention or pharmaceutically acceptable salts, stereoisomers, tautomers, polymorphs, solvates, N-oxides, isotopically labeled compounds, metabolites or prodrugs of the present invention, or pharmaceutical compositions of the present invention, or kits of the present invention, which target the KRAS protein and are used to degrade the KRAS protein.
  • the present invention provides compounds of the present invention or pharmaceutically acceptable salts, stereoisomers, tautomers, polymorphs, solvates, N-oxides, isotopically labeled compounds, metabolites or prodrugs thereof, or pharmaceutical compositions of the present invention, or kits of the present invention, for the prevention and/or treatment of KRAS-mediated diseases.
  • the present invention provides the use of the compounds of the present invention or pharmaceutically acceptable salts, stereoisomers, tautomers, polymorphs, solvates, N-oxides, isotopically labeled compounds, metabolites or prodrugs of the present invention, or pharmaceutical compositions of the present invention, or cassettes of the present invention in the preparation of medicaments for the prevention and/or treatment of KRAS-mediated related diseases.
  • the present invention provides a method for preventing and/or treating KRAS-mediated related diseases, comprising administering to an individual in need a preventive and/or therapeutically effective amount of a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt, stereoisomer, tautomer, polymorph, solvate, N-oxide, isotopically labeled compound, metabolite or prodrug of the present invention, or a pharmaceutical composition of the present invention or a cassette of the present invention.
  • the present invention provides a method for preparing the compounds of the present invention.
  • alkyl is defined as a straight-chain or branched saturated aliphatic hydrocarbon group.
  • C1-6 alkyl and C1-3 alkyl refer to straight-chain or branched groups (e.g., methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, n-pentyl, or n-hexyl) having 1 to 6 carbon atoms and 1 to 3 carbon atoms, respectively, which are optionally substituted with one or more (such as 1, 2, or 3) suitable substituents such as halogens.
  • alkylene refers to a divalent saturated aliphatic hydrocarbon group obtained by removing one hydrogen atom from the corresponding "alkyl”.
  • C1-6 alkylene and C1-3 alkylene refer to alkylenes having 1 to 6 carbon atoms and 1 to 3 carbon atoms, respectively, such as methylene ( -CH2- ), ethylene ( -CH2CH2- ), and isopropylene (-CH( CH3 ) CH2- ), which are optionally substituted with one or more (such as 1 , 2, or 3) suitable substituents such as halogens.
  • alkenyl refers to a straight-chain or branched aliphatic hydrocarbon group having one or more carbon-carbon double bonds.
  • C2-6 alkenyl refers to an alkenyl group (such as vinyl, 1-propenyl, 2-propenyl, 2-butenyl, 3-butenyl, 2-pentenyl, 3-pentenyl, 4-pentenyl, 2-hexenyl, 3-hexenyl, 4-hexenyl, 5-hexenyl, 2-methyl-2-propenyl, or 4-methyl-3-pentenyl, etc.) having 2 to 6 carbon atoms and one, two, or three (preferably one) carbon-carbon double bonds, optionally substituted with one or more (e.g., 1, 2, or 3) suitable substituents such as halogens.
  • suitable substituents such as halogens.
  • alkynyl refers to a straight-chain or branched aliphatic hydrocarbon group having one or more carbon-carbon triple bonds.
  • C2-6 alkynyl refers to an alkynyl group (such as ethynyl, 1-propynyl, 2-propynyl, 2-butynyl, 3-butynyl, 2-pentynyl, 3-pentynyl, 4-pentynyl, 2-hexynyl, 3-hexynyl, 4-hexynyl, or 5-hexynyl, etc.) having 2 to 6 carbon atoms and one, two, or three (preferably one) carbon-carbon triple bonds, optionally substituted with one or more (e.g., 1, 2, or 3) suitable substituents such as halogens.
  • cycloalkyl refers to a saturated or partially unsaturated non-aromatic monocyclic or polycyclic (such as bicyclic) hydrocarbon ring (e.g., monocyclic, such as cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, cyclooctyl, or cyclononyl, or bicyclic, including spirocyclic, fused, or bridged systems, such as bicyclic [1.1.1]pentyl, bicyclic [2.2.1]heptyl, bicyclic [3.2.1]octyl, or bicyclic [5.2.0]nonyl, decahydronaphthyl, etc.), optionally substituted with one or more (such as 1 to 3) suitable substituents.
  • monocyclic such as cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cyclohept
  • C 3-6 cycloalkyl refers to a saturated or partially unsaturated non-aromatic monocyclic or polycyclic (such as bicyclic) hydrocarbon ring (e.g., cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, or cyclohexyl) having 3 to 6 cyclic carbon atoms, optionally substituted with one or more (such as 1, 2, or 3) suitable substituents, such as methyl-substituted cyclopropyl.
  • a saturated or partially unsaturated non-aromatic monocyclic or polycyclic (such as bicyclic) hydrocarbon ring e.g., cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, or cyclohexyl
  • suitable substituents such as methyl-substituted cyclopropyl.
  • cycloalkylene refers to a divalent group obtained by removing one hydrogen atom from the corresponding "cycloalkylene”.
  • halogenated or halogenated is defined as including fluorine, chlorine, bromine or iodine.
  • haloalkyl refers to an alkyl group substituted with one or more (such as 1, 2 , or 3) identical or different halogen atoms.
  • C1-6 haloalkyl and C1-3 haloalkyl refer to haloalkyl groups having 1 to 6 carbon atoms and 1 to 3 carbon atoms, respectively, such as -CF3 , -C2F5 , -CHF2 , -CH2F , -CH2CF3 , -CH2Cl , or -CH2CH2CF3 .
  • heterocyclic group refers to a saturated or partially unsaturated monocyclic or polycyclic group (including bridged, fused, or spirocyclic groups), for example, having 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, or 14 ring atoms in the ring, for example, having 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, or 9 carbon atoms and one or more (e.g., 1, 2, 3, or 4) heteroatoms independently selected from N, O, or S(O)t (where t is 0, 1, or 2), such as 3-12-membered heterocyclic groups, 3-8-membered heterocyclic groups, 5-12-membered heterocyclic groups, 6-12-membered heterocyclic groups, 6-10-membered heterocyclic groups, 7-12-membered heterocyclic groups, 3-7-membered heterocyclic groups, 3-6-membered heterocyclic groups, 5-6-membered heterocyclic groups, 4-8-membered heterocyclic groups, etc.
  • heterocyclic groups e.g., 3-12 membered heterocyclic groups, 4-8 membered heterocyclic groups, 6-10 membered heterocyclic groups, 5-6 membered heterocyclic groups, 3-6 membered heterocyclic groups, 3-6 membered nitrogen-containing heterocyclic groups, 3-8 membered nitrogen-containing mono-heterocyclic groups, 5-12 membered nitrogen-containing bridged heterocyclic groups, 6-12 membered nitrogen-containing anionic heterocyclic groups, 7-12 membered nitrogen-containing spirocyclic groups, 4-8 membered nitrogen-containing heterocyclic groups, 3-12 membered nitrogen-containing heterocyclic groups) include, but are not limited to, ethylene oxide, aziridinyl, azetidinyl, oxetanyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydropyrrolyl, hexahydro-1H-pyrrololine, pyrrolidone, pyrrolidonedione, imidazo
  • the ring system in a heterocyclic group can be a fused ring, a bridged ring, or a spirocyclic system. That is, a heterocyclic group can be a monocyclic group, a bridged heterocyclic group, a fused heterocyclic group, or a spirocyclic group.
  • the heterocyclic groups of the present invention also include fused ring structures formed by heterocyclic groups and heterocyclic groups, cycloalkyl groups, aryl groups or heteroaryl groups, specifically including (but not limited to) heterocyclic fused heterocyclic groups, cycloalkyl fused heterocyclic groups, aryl fused heterocyclic groups, heteroaryl fused heterocyclic groups, such as 4-7-membered (mono) heterocyclic fused 4-7-membered (mono) heterocyclic groups, C 4-7 (mono) cycloalkyl fused 4-7-membered (mono) heterocyclic groups, phenyl fused 4-7-membered (mono) heterocyclic groups (e.g., phenyl fused 5-6-membered (mono) heterocyclic groups), 5-6-membered (mono) heteroaryl fused 4-7-
  • Heterocyclic groups can also be nitrogen-containing heterocyclic groups, oxygen-containing heterocyclic groups, or sulfur-containing heterocyclic groups, etc.
  • nitrogen-containing heterocyclic group refers to a heterocyclic group containing at least one N heteroatom and optionally one or more (e.g., 1, 2, 3 or 4) heteroatoms selected from O or S(O)t (where t is 0, 1 or 2), which may include nitrogen-containing monocyclic heterocyclic groups or polycyclic heterocyclic groups (e.g., nitrogen-containing bridged heterocyclic groups, nitrogen-containing fused heterocyclic groups, nitrogen-containing spirocyclic groups).
  • heterocyclic group refers to a divalent group obtained by removing one hydrogen atom from the corresponding "heterocyclic group”.
  • 3-12 membered heterocyclic group includes 4-8 membered heterocyclic groups, 5-6 membered heterocyclic groups, 6-10 membered heterocyclic groups, 4-8 membered nitrogen-containing heterocyclic groups, 3-12 membered nitrogen-containing heterocyclic groups, etc.
  • Examples of the term "4-8 membered heterocyclic group" include: wait.
  • 6-10 membered heterocyclic group includes phenyl 5-6 membered heterocyclic groups, etc. Examples of the term “phenyl 5-6 membered heterocyclic group” include... wait.
  • 3-12 member nitrogen-containing heterocyclic group includes 3-8 member nitrogen-containing mono-heterocyclic groups, 5-12 member nitrogen-containing bridged heterocyclic groups, 6-12 member nitrogen-containing fused heterocyclic groups, and 7-12 member nitrogen-containing spirocyclic groups, etc.
  • Examples of the terms "3-8 membered nitrogen-containing monoheterocyclic group” or “4-8 membered nitrogen-containing heterocyclic group” include aziridinyl, azetidinyl, tetrahydropyrrolylyl, hexahydro-1H-pyrrololine, pyrrolidone, pyrrolidone-dione, imidazoalkyl, pyrazolylyl, tetrahydropyranyl, piperidinyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, or piperazine, etc., for example. wait.
  • Examples of the term "5-12 nitrogen-bridged heterocyclic group" include: wait.
  • 6-12 member nitrogen-containing heterocyclic group examples include: wait.
  • Examples of the term "7-12 member nitrogen-containing spiroheterocyclic group” include: wait.
  • aryl refers to an all-carbon monocyclic or fused-ring polycyclic aromatic group having a conjugated ⁇ -electron system.
  • C 6-10 aryl or “C 6-10 aromatic ring” refer to an aromatic group containing 6 to 10 carbon atoms, such as phenyl (cyclic) or naphthyl (cyclic).
  • the aryl group is optionally substituted by one or more (such as 1, 2, or 3) suitable substituents (e.g., halogen, -OH, -CN, -NO2 , or C 1-6 alkyl, etc.).
  • heteroaryl or “heteroary ring” refers to a monocyclic, bicyclic, or tricyclic aromatic ring system containing at least one heteroatom selected from N, O, and S, for example having 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, or 14 ring atoms, particularly containing 1, 2, 3, 4, 5, 6, 9, or 10 carbon atoms, and in each case may also be benzofused.
  • the heteroaryl group or heteroaryl ring may be selected from thienyl (ring), furanyl (ring), pyrroleyl (ring), oxazolyl (ring), thiazolyl (ring), imidazoleyl (ring), pyrazolyl (ring), isoxazolyl (ring), isothiazolyl (ring), oxadiazolyl (ring), triazolyl (ring), thiadiazolyl (ring), etc., and their benzo[a] derivatives; or pyridyl (ring), pyridazinyl (ring), pyrimidinyl (ring), pyrazinyl (ring), triazinyl (ring), etc., and their benzo[a] derivatives or fused rings formed by their fusion.
  • 5-12 heteroaryl includes “6-10 heteroaryl”, “6-9 heteroaryl”, and “5-10 heteroaryl”, etc.
  • 6--10 heteroaryl or “6-9 heteroaryl” include benzo[a] derivatives of 6-membered heteroaryl groups, 5-6-membered heteroaryl groups, and fused rings formed by the fusion of 5-6-membered heteroaryl groups, etc., for example...
  • 5-10 heteroaryl includes 5-7 heteroaryl, benzo[a] derivatives of 5-6 heteroaryl, and fused rings formed by 5-6 heteroaryl and 5-6 heteroaryl.
  • Examples of the terms "5-7 membered heteroaryl” or “5-6 membered heteroaryl” include thiophene (ring), furanyl (ring), pyrrolyl (ring), oxazolyl (ring), thiazolyl (ring), imidazole (ring), pyrazolyl (ring), isoxazolyl (ring), isothiazolyl (ring), oxadiazolyl (ring), triazolyl (ring), thiadiazolyl (ring), pyridinyl (ring), pyridazinyl (ring), pyrimidinyl (ring), pyrazinyl (ring), triazinyl (ring), etc., for example wait.
  • 6-membered heteroaryl includes pyridyl (ring), pyridazinyl (ring), pyrimidinyl (ring), pyrazinyl (ring), triazinyl (ring), etc.
  • hybrid aryl refers to a divalent group obtained by removing a hydrogen atom from the corresponding "heteroaryl”.
  • substitution refers to the selective replacement of one or more (e.g., 1, 2, 3, or 4) hydrogen atoms on a specified atom by a designated group, provided that the substitution does not exceed the normal valence of the specified atom in the present case and the substitution forms a stable compound. Combinations of substituents and/or variables are permitted only if such combinations form a stable compound.
  • substituent may be (1) unsubstituted or (2) substituted. If the carbon of the substituent is described as being optionally substituted with one or more of the substituents in the list, then one or more hydrogens on the carbon (to the extent that any hydrogens are present) may be substituted individually and/or together with independently selected substituents or not substituted. If the nitrogen of the substituent is described as being optionally substituted with one or more of the substituents in the list, then one or more hydrogens on the nitrogen (to the extent that any hydrogens are present) may each be substituted with independently selected substituents or not substituted.
  • each substituent is selected independently of the others. Therefore, each substituent may be the same as or different from another (other) substituent.
  • one or more means one or more under reasonable conditions, such as 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 or 10.
  • connection point of a substituent may be derived from any suitable location of the substituent.
  • the wavy lines used in this article refer to the bonding sites of functional groups.
  • the bonding direction is unrestricted unless otherwise defined. For example, when ring E is... This can indicate that the left end of the group is connected to L5 and the right end to L6 , or vice versa . And so on.
  • a group when a group has two connection sites, they are connected in order of position and orientation of the group in the general formula. For example, in some embodiments, when ring E is... When the left end of the group is connected to L5 and the right end is connected to L6, it indicates that the group is connected to L5 .
  • This invention also includes all pharmaceutically acceptable isotopically labeled compounds that are identical to the compounds of this invention, except that one or more atoms are replaced by atoms having the same atomic number but with a different atomic mass or mass number than the dominant atomic mass or mass number found in nature.
  • isotopes suitable for inclusion in the compounds of this invention include, but are not limited to, isotopes of hydrogen (e.g., 2H , 3H , deuterium D, tritium T); isotopes of carbon (e.g., 11C , 13C , and 14C ); isotopes of chlorine (e.g., 37Cl ); isotopes of fluorine (e.g., 18F ); isotopes of iodine (e.g., 123I and 125I ); isotopes of nitrogen (e.g., 13N and 15N ); isotopes of oxygen (e.g., 15O , 17O , and 18O ); isotopes of phosphorus (e.g., 32P ); and isotopes of sulfur (e.g., 35S ).
  • isotopes of hydrogen e.g., 2H , 3H , deuterium D, tri
  • Radioactive isotopes tritium (i.e., 3H ) and carbon-14 (i.e., 14C ) are particularly suitable for this purpose due to their ease of incorporation and detection.
  • Substitution with positron-emitting isotopes e.g., 11C , 18F , 15O , and 13N ) can be used to examine substrate acceptor occupancy in positron emission tomography (PET) studies.
  • PET positron emission tomography
  • Isotopically labeled compounds of the present invention can be prepared by methods similar to those described in the accompanying routes and/or examples and preparations, by using a suitable isotopically labeled reagent instead of the previously used unlabeled reagent.
  • Pharmaceutically acceptable solvates of the present invention include those in which the crystallization solvent can be isotopically substituted, for example, D2O , acetone- d6 , or DMSO- d6 .
  • stereoisomer refers to an isomer formed due to at least one asymmetric center.
  • compounds having one or more (e.g., 1, 2, 3, or 4) asymmetric centers racemic mixtures, single enantiomers, diastereomer mixtures, and individual diastereomers can be produced.
  • Specific individual molecules can also exist as geometric isomers (cis/trans).
  • the compounds of the present invention can exist as mixtures of two or more structurally different forms in rapid equilibrium (commonly referred to as tautomers).
  • Representative examples of tautomers include keto-enol tautomers, phenol-keto tautomers, nitroso-oxime tautomers, imine-enamine tautomers, etc. It is to be understood that the scope of this application covers all such isomers or mixtures thereof in any proportion (e.g., 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%).
  • This invention covers all possible crystalline forms or polymorphs of the compounds of this invention, which may be a single polymorph or a mixture of more than one polymorph in any proportion.
  • compositions of the present invention may exist in their free form for therapeutic purposes, or, where appropriate, in their pharmaceutically acceptable derivative forms.
  • pharmaceutically acceptable derivatives include, but are not limited to, pharmaceutically acceptable salts, solvates, metabolites, or prodrugs, which, upon administration to a patient in need, can directly or indirectly provide the compounds of the present invention or their metabolites or residues. Therefore, when referring to "compounds of the present invention" herein, it is also intended to encompass the various derivative forms of the compounds described above.
  • Pharmaceutically acceptable salts of the compounds of the present invention include their acid addition salts and base addition salts. Suitable acid addition salts are formed by acids that form pharmaceutically acceptable salts. Suitable base addition salts are formed by bases that form pharmaceutically acceptable salts. A review of suitable salts can be found in Stahl and Wermuth's "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" (Wiley-VCH, 2002). Methods for preparing pharmaceutically acceptable salts of the compounds of the present invention are known to those skilled in the art.
  • the compounds of the present invention can exist as solvates (preferably hydrates), wherein the compounds of the present invention contain a polar solvent, particularly, for example, water, methanol, or ethanol, as a structural element of the lattice of the compound.
  • a polar solvent particularly, for example, water, methanol, or ethanol
  • the amount of the polar solvent, particularly water, can be stoichiometric or non-stoichiometric.
  • nitrogen-containing heterocycles can form N-oxides because nitrogen requires available lone pairs of electrons to be oxidized into oxides; those skilled in the art will identify nitrogen-containing heterocycles that can form N-oxides. Those skilled in the art will also recognize that tertiary amines can form N-oxides.
  • N-oxides of heterocycles and tertiary amines are well known to those skilled in the art, including the oxidation of heterocycles and tertiary amines with peroxy acids such as peracetic acid and m-chloroperoxybenzoic acid (MCPBA), hydrogen peroxide, alkyl peroxides such as tert-butyl peroxide, sodium perborate, and dioxiranes such as dimethyldioxirane.
  • MCPBA m-chloroperoxybenzoic acid
  • hydrogen peroxide alkyl peroxides such as tert-butyl peroxide, sodium perborate
  • dioxiranes such as dimethyldioxirane.
  • the scope of this invention also includes metabolites of the compounds of this invention, i.e., substances formed in the body when the compounds of this invention are administered. Such products can be generated, for example, by oxidation, reduction, hydrolysis, amidation, deamidation, esterification, enzymatic hydrolysis, etc., of the administered compound. Therefore, this invention includes metabolites of the compounds of this invention, including compounds obtained by methods that expose the compounds of this invention to mammals for a time sufficient to produce their metabolites.
  • This invention further includes, within its scope, prodrugs of the compounds of the invention, which are certain derivatives of the compounds of the invention that may themselves have little or no pharmacological activity, and which, when administered to or onto the body, can be converted, for example, by hydrolysis and cleavage into the compounds of the invention having the desired activity.
  • prodrugs are functional group derivatives of the compounds that are readily converted in vivo into the desired therapeutically active compounds. Further information regarding the use of prodrugs can be found in “Pro-drugs as Novel Delivery Systems,” Vol. 14, ACS Symposium Series (T. Higuchi and V. Stella) and “Bioreversible Carriers in Drug Design,” Pergamon Press, 1987 (edited by E.B. Roche, American Pharmaceutical Association).
  • the prodrug of the present invention can be prepared, for example, by replacing suitable functional groups present in the compounds of the present invention with certain portions known to those skilled in the art as “pro-moiety” (e.g., “Design of Prodrugs”, as described in H. Bundgaard (Elsevier, 1985)).
  • This invention also covers compounds of the invention containing protecting groups.
  • protection of sensitive or reactive groups on any relevant molecule may be necessary and/or desired, thereby forming a form of chemical protection for the compounds of the invention.
  • This can be achieved by conventional protecting groups, for example, those described in *Protective Groups in Organic Chemistry*, ed. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973; and T.W. Greene & P.G.M. Wuts, *Protective Groups in Organic Synthesis*, John Wiley & Sons, 1991, which are incorporated herein by reference.
  • Protecting groups can be removed at appropriate subsequent stages using methods known in the art.
  • This invention provides compounds of formula (I) or pharmaceutically acceptable salts, stereoisomers, tautomers, polymorphs, solvates, N-oxides, isotopically labeled compounds, metabolites, or prodrugs thereof:
  • Ring A is a C3-6 cycloalkyl or a 3-6 membered heterocyclic group, wherein the cycloalkyl or heterocyclic group is optionally substituted by one or more substituents selected from halogens, C1-6 alkyl groups and C1-6 haloalkyl groups;
  • Ring B is a 3-12 member nitrogen-containing heterocyclic group
  • the ring E is a C6-10 aryl, a 5-12-membered heteroaryl, or a 3-12-membered heterocyclic group, wherein the aryl, heteroaryl, or heterocyclic group is optionally substituted by one or more substituents selected from halogens, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, oxo, -OC1-6 alkyl, -OC1-6 haloalkyl, and -OC3-6 cycloalkyl.
  • X1 and X2 are each independently selected from O and N;
  • X3 , X4 and X5 are each independently selected from CR3 and N;
  • X 6 is selected from CH and N;
  • L is a covalent bond, or can be selected from O, S and NR 4 ;
  • L1 is selected from O, S, and NR5 ;
  • L2 is selected from C1-6 alkylene and halogenated C1-6 alkylene
  • L3 is selected from C1-6 alkylene and halogenated C1-6 alkylene
  • Each R1 is independently selected from hydrogen, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, and 3-6 membered heterocyclic groups;
  • R2 is selected from hydrogen, halogen, cyano, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, C6-10 aryl, 3-12 heterocyclic, 5-10 heteroaryl, -C1-6 alkylene- C3-6 cycloalkyl, -C1-6 alkylene- 3-12 heterocyclic, and -C1-6 alkylene-5-10 heteroaryl, wherein the alkyl, alkylene, cycloalkyl, aryl, heterocyclic, and heteroaryl groups are optionally substituted by one or more substituents selected from halogen, hydroxyl, amino, cyano, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, C1-6 haloalkyl, -OC1-6 alkyl, -C1-6 alkylene-OH, -NR10a R10b , -C1-6 alkylene- OC1-6 alkyl, and -OC1-6 haloalkyl;
  • Each R3 is independently selected from hydrogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, C3-6 cycloalkyl, C1-6 alkoxy, and -OC1-6 haloalkyl;
  • R4 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, and C3-6 cycloalkyl;
  • R5 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R6 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R7 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R8 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R9 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R10a and R10b are each independently selected from hydrogen, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, -C1-6 alkylene-OH and -C1-6 alkylene -OC1-6 alkyl , or R10a and R10b together with the N attached thereto form a 3-6 membered nitrogen-containing heterocyclic group;
  • n is selected from 0, 1, 2, 3, and 4.
  • Ring A is a C3-6 cycloalkyl or a 3-6 membered heterocyclic group, wherein the cycloalkyl or heterocyclic group is optionally substituted by one or more substituents selected from halogens, C1-6 alkyl groups and C1-6 haloalkyl groups;
  • Ring B is a 3-12 member nitrogen-containing heterocyclic group
  • the ring E is a C6-10 aryl, a 5-12-membered heteroaryl, or a 3-12-membered heterocyclic group, wherein the aryl, heteroaryl, or heterocyclic group is optionally substituted by one or more substituents selected from halogens, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, oxo, -OC1-6 alkyl, -OC1-6 haloalkyl, and -OC3-6 cycloalkyl.
  • X1 and X2 are each independently selected from O and N;
  • X3 , X4 and X5 are each independently selected from CR3 and N;
  • X 6 is selected from CH and N;
  • L is a covalent bond, or can be selected from O, S and NR 4 ;
  • L1 is selected from O, S and NR 5 ;
  • L2 is selected from C1-6 alkylene and halogenated C1-6 alkylene
  • L3 is selected from C1-6 alkylene and halogenated C1-6 alkylene
  • Each R1 is independently selected from hydrogen, halogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, and 3-6 membered heterocyclic groups;
  • R2 is selected from hydrogen, halogen, cyano, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, C6-10 aryl, 3-12 heterocyclic, 5-10 heteroaryl, -C1-6 alkylene- C3-6 cycloalkyl, -C1-6 alkylene- 3-12 heterocyclic, and -C1-6 alkylene-5-10 heteroaryl, wherein the alkyl, alkylene, cycloalkyl, aryl, heterocyclic, and heteroaryl groups are optionally substituted by one or more substituents selected from halogen, hydroxyl, amino, cyano, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -OC1-6 alkyl, -C1-6 alkylene-OH, -NR10a R10b , -C1-6 alkylene- OC1-6 alkyl, and -OC1-6 haloalkyl;
  • Each R3 is independently selected from hydrogen, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, C3-6 cycloalkyl, C1-6 alkoxy, and -OC1-6 haloalkyl;
  • R4 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, and C3-6 cycloalkyl;
  • R5 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R6 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R7 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R8 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R9 is selected from hydrogen and C1-6 alkyl groups
  • R10a and R10b are each independently selected from hydrogen, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, -C1-6 alkylene-OH and -C1-6 alkylene -OC1-6 alkyl , or R10a and R10b together with the N attached thereto form a 3-6 membered nitrogen-containing heterocyclic group;
  • n is selected from 0, 1, 2, 3, and 4.
  • R1 is hydrogen
  • m is 0.
  • X1 is 0 and X2 is N.
  • X1 is N and X2 is O.
  • X3 is N
  • X4 is N
  • X5 is CH
  • X3 is CH
  • X4 is N
  • X5 is N
  • the compound of formula (I) has the structure of formula (II-A), formula (II-B), formula (II-C), or formula (II-D):
  • Rings A, B, E, R2 , L, L1 , L2 , L3 , L4 , L5 , L6 and X6 are as defined above.
  • L1 is -O-.
  • L2 is a C1-3 alkylene group.
  • L2 is -CH2- .
  • L3 is a C1-3 alkylene group.
  • L3 is -CH2- .
  • ring A is a C3-6 cycloalkyl group, which is optionally substituted by one or more substituents selected from halogens.
  • ring A is a C3-6 cycloalkyl group, which is optionally substituted with one or more fluorine atoms.
  • ring A is a C3-6 cycloalkyl group.
  • cycloA is selected from cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, ...
  • ring A is cyclopropyl
  • L2 is a C1-3 alkylene
  • L3 is a C1-3 alkylene
  • cycloA is a C3-6 cycloalkyl , wherein the cycloalkyl group is optionally substituted with one or more substituents selected from halogens.
  • L2 is a C1-3 alkylene
  • L3 is a C1-3 alkylene
  • cycloA is a C3-6 cycloalkyl .
  • L2 is -CH2-
  • L3 is -CH2-
  • ring A is a C3-6 cycloalkyl group, said cycloalkyl group is optionally substituted by one or more substituents selected from halogens.
  • L2 is -CH2-
  • L3 is -CH2-
  • ring A is a C3-6 cycloalkyl group.
  • L2 is -CH2-
  • L3 is -CH2-
  • ring A is selected from cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, ...
  • L2 is -CH2-
  • L3 is -CH2-
  • ring A is cyclopropyl
  • ring B is selected from 3-8 member nitrogen-containing monoheterocyclic groups, 5-12 member nitrogen-containing bridged heterocyclic groups, 6-12 member nitrogen-containing fused heterocyclic groups, and 7-12 member nitrogen-containing spiroheterocyclic groups.
  • ring B is...
  • ring B is...
  • ring B is...
  • ring B is...
  • ring B is...
  • ring E is a C6-10 aryl, a 6-10 heteroaryl, or a 6-10 heterocyclic group, wherein the phenyl, heteroaryl, or heterocyclic group is optionally substituted by one or more substituents selected from halogens, C1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, oxo, -OC1-6 alkyl, -OC1-6 haloalkyl, and -OC3-6 cycloalkyl.
  • ring E is a phenyl, a 6-9 membered heteroaryl, or a phenyl-5-6 membered heterocyclic group, wherein the phenyl, heteroaryl, and heterocyclic group are optionally substituted by one or more substituents selected from halogens, C1-3 alkyl, C1-3 haloalkyl, oxo, and -OC1-3 alkyl.
  • ring E is a phenyl, a 6-9 membered heteroaryl, or a phenyl-5-6 membered heterocyclic group, wherein the phenyl, heteroaryl, and heterocyclic group are optionally substituted by one or more substituents selected from halogens, C1-3 alkyl groups, oxo groups, and -OC1-3 alkyl groups.
  • ring E is a phenyl, a 6-9 membered heteroaryl, or a phenyl-5-6 membered heterocyclic group, wherein the phenyl, heteroaryl, and heterocyclic group are optionally substituted by one or more substituents selected from halogens, C1-3 alkyl groups, C1-3 haloalkyl groups, and oxo groups.
  • ring E is a phenyl, a 6-9 membered heteroaryl, or a phenyl-5-6 membered heterocyclic group, wherein the phenyl, heteroaryl, and heterocyclic group are optionally substituted by one or more substituents selected from halogens, C1-3 alkyl groups, and oxo groups.
  • ring E is selected from...
  • ring E is selected from...
  • ring E is selected from...
  • ring E is selected from...
  • ring B is... -L4 -L5 - are covalent bonds
  • ring E is
  • ring B is... -L4 -L5 - are covalent bonds
  • ring E is
  • R8 is selected from hydrogen and C1-3 alkyl groups.
  • R9 is selected from hydrogen and C1-3 alkyl.
  • L6 is a covalent bond, O, or NR8 .
  • L6 is a covalent bond or NR8 .
  • R8 is selected from hydrogen and C1-3 alkyl groups.
  • L6 is a covalent bond, O, or NH.
  • L6 is a covalent bond or NH.
  • L is a covalent bond, or is selected from O and NR4 .
  • R4 is selected from hydrogen and C1-3 alkyl.
  • L is a covalent bond, O, or NH.
  • L represents a covalent bond or O.
  • L is O.
  • R2 is selected from hydrogen, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, C6-10 aryl, 4-8 heterocyclic, 5-7 heteroaryl, -C1-6 alkylene- C3-6 cycloalkyl, -C1-6 alkylene- 4-8 heterocyclic, and -C1-6 alkylene-5-7 heteroaryl.
  • alkyl, alkylene, cycloalkyl, aryl, heterocyclic, and heteroaryl groups are optionally substituted by one or more substituents selected from halogen, hydroxyl, amino, cyano, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, C1-6 haloalkyl, -OC1-6 alkyl, -C1-6 alkylene-OH, -NR10a R10b, -C1-6 alkylene-OC1-6 alkyl, and -OC1-6 haloalkyl, for example, optionally substituted by one or more substituents selected from halogen, hydroxyl, amino, cyano, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, C1-6 alkylene- OC1-6 alkyl , and -OC1-6 haloalkyl, for example, optionally substituted by one or more substituents selected from halogen, hydroxyl, amino, cyano, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, C1-6 alkylene
  • the substituted group is substituted with 1-6 alkyl, C1-6 haloalkyl, -OC 1-6 alkyl, -C1-6 alkylene-OH, -NR 10a R 10b , -C1-6 alkylene-OC 1-6 alkyl and -OC 1-6 haloalkyl, wherein R 10a and R 10b are each independently selected from hydrogen, C1-6 alkyl, C3-6 cycloalkyl, -C1-6 alkylene-OH and -C1-6 alkylene-OC 1-6 alkyl.
  • R2 is selected from C1-6 alkyl and 5-7 heteroaryl groups, wherein the alkyl and heteroaryl groups are optionally substituted by one or more substituents selected from halogens, hydroxyl groups, amino groups, cyano groups, C1-6 alkyl groups, C1-6 haloalkyl groups, -OC1-6 alkyl groups, -C1-6 alkylene groups -OH groups, -C1-6 alkylene groups -OC1-6 alkyl groups, and -OC1-6 haloalkyl groups.
  • R2 is selected from hydrogen
  • R2 is selected from hydrogen
  • R2 is selected from hydrogen
  • R2 is selected from...
  • fragment -LR 2 is selected from hydrogen
  • fragment -LR 2 is selected from hydrogen
  • fragment -LR 2 is selected from hydrogen
  • fragment -LR 2 is selected from...
  • the above-mentioned compounds have the structure of formula (III-A), formula (III-B), formula (III-C), or formula (III-D):
  • Rings A, B, E, R2 , L, L1 , L2 , L3 , L4 , L5 , L6 and X6 are as defined above.
  • This invention covers compounds obtained by any combination of various embodiments. Embodiments obtained by combining technical features or preferred technical features from one embodiment with technical features or preferred technical features from another embodiment are also included within the scope of this invention.
  • the compounds of formula (I) are selected from:
  • KRAS proteins e.g., KRAS mutant proteins, such as KRAS-G12D, etc.
  • the compounds of formula (II-A) of the present invention can be prepared by the method shown in route 1 below:
  • Rings A, B, E, R2 , L, L1 , L2 , L3 , L4 , L5 , L6 and X6 are as defined above;
  • LG 1 , LG 2 , and LG 3 each independently represent a leaving group, such as a halogen, trifluoromethanesulfonate, p-toluenesulfonate, or methanesulfonate group; or,
  • LG3 When L3 is a C1-3 alkylene group, LG3 and the carbon atom attached to L3 together form a carbonyl group;
  • the method includes the following steps:
  • the reaction in step (1) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable base.
  • the organic solvent may be selected from acetonitrile, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, N,N-dimethylacetamide, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, and any combination thereof, preferably N,N-dimethylformamide.
  • the base may be selected from N,N-diisopropylethylamine, triethylamine, potassium carbonate, cesium carbonate, and any combination thereof, preferably cesium carbonate.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0°C to 100°C for 0.5 to 48 hours.
  • the reaction in step (2) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable base.
  • the organic solvent may be selected from acetonitrile, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, N,N-dimethylacetamide, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, and any combination thereof, preferably acetonitrile or tetrahydrofuran.
  • the base may be selected from N,N-diisopropylethylamine, triethylamine, sodium hydride, potassium carbonate, cesium carbonate, sodium tert-butoxide, or potassium tert-butoxide, preferably potassium carbonate or cesium carbonate.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 20°C-120°C for 2-48 hours.
  • the reaction in step (2) above is preferably carried out in a suitable solvent and in the presence of a metal catalyst and a base.
  • the metal catalyst may be a palladium metal catalyst, such as selected from tris(dibenzylacetone)palladium, [1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene]palladium dichloride, methanesulfonate [n-butylbis(1-adamantyl)phosphine](2-amino-1,1'-biphenyl-2-yl)palladium(II), tetratriphenylphosphine palladium, and palladium acetate, preferably [1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene]palladium dichloride.
  • the base may be an organic or inorganic base, such as selected from sodium tert-butoxide, potassium carbonate, potassium phosphate, cesium carbonate, and sodium carbonate, preferably potassium carbonate.
  • the solvent may be selected from N,N-dimethylformamide, N-methylpyrrolidone, toluene, ethanol, ethylene glycol dimethyl ether, water, 1,4-dioxane, and any combination thereof, preferably a combination of 1,4-dioxane and water.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 20-120°C for 2-16 hours.
  • the reaction in step (2) above is preferably carried out in a suitable solvent and in the presence of a metal catalyst, a base, and a suitable reagent.
  • the metal catalyst is a palladium catalyst, for example selected from tris(dibenzylacetone)dipalladium, [1,1'-bis(diphenylphosphine)ferrocene]palladium dichloride, methanesulfonate [n-butyldi(1-adamantyl)phosphine](2-amino-1,1'-biphenyl-2-yl)palladium(II), tetratriphenylphosphine palladium, and palladium acetate, preferably palladium acetate.
  • a palladium catalyst for example selected from tris(dibenzylacetone)dipalladium, [1,1'-bis(diphenylphosphine)ferrocene]palladium dichloride, methanesulfonate [n-butyldi(1-adamantyl)phosphine](2-amino-1,1'-biphenyl-2-yl)pal
  • the base can be an organic or inorganic base, for example selected from potassium fluoride, potassium carbonate, potassium phosphate, cesium fluoride, cesium carbonate, and sodium carbonate, preferably potassium fluoride.
  • the suitable reagent is polymethylhydrosiloxane.
  • the solvent can be selected from tetrahydrofuran, ethanol, ethylene glycol dimethyl ether, water, 1,4-dioxane, and any combination thereof, preferably a combination of tetrahydrofuran and water.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-100°C for 0.5-16 hours.
  • the ring-closing reaction in step (3) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable reagent.
  • the organic solvent may be selected from methanol, ethanol, isopropanol, 1,4-dioxane, acetonitrile, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, and any combination thereof, preferably ethanol.
  • the reagent may be selected from morpholine, ammonium acetate, diethylamine, triethylamine, L-proline, sulfur powder, and any combination thereof, preferably a combination of ammonium acetate and sulfur powder.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-100°C for 1-20 hours, for example, 1-12 hours.
  • the reaction in step (4) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of N,N-dimethylformamide dimethyl acetal.
  • the organic solvent may be selected from acetonitrile, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, N,N-dimethylacetamide, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, and any combination thereof, preferably tetrahydrofuran.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 25-100°C for 2-16 hours.
  • the reaction in step (5) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable reagent containing a -LG 3 group and a base.
  • the reagent containing the -LG 3 group may be selected from methanesulfonyl chloride, methanesulfonic anhydride, p-toluenesulfonyl chloride, or trifluoromethanesulfonic anhydride, preferably methanesulfonic anhydride.
  • the base may be selected from N,N-diisopropylethylamine or triethylamine, preferably triethylamine.
  • the organic solvent may be selected from tetrahydrofuran, dichloromethane, toluene, 1,2-dichloroethane, and any combination thereof, preferably dichloromethane.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-40°C for 2-16 hours.
  • the reaction in step (5) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of an oxidizing agent.
  • the oxidizing agent may be selected from Des Martin oxidant, pyridine chlorochromate, or pyridine dichromate, preferably Des Martin oxidant.
  • the organic solvent may be selected from tetrahydrofuran, dichloromethane, toluene, 1,2-dichloroethane, and any combination thereof, preferably dichloromethane.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-40°C for 2-16 hours.
  • the reaction in step (6) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of an inorganic base and an inorganic salt.
  • the inorganic base may be potassium carbonate or cesium carbonate, preferably potassium carbonate.
  • the inorganic salt may be potassium iodide or sodium iodide, preferably potassium iodide.
  • the organic solvent may be acetonitrile, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, N,N-dimethylacetamide, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, or any combination thereof, preferably acetonitrile.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 25-100°C for 2-16 hours.
  • the reaction in step (6) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable reducing agent and a suitable reagent.
  • the organic solvent may be dichloromethane, tetrahydrofuran, acetonitrile, methanol, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, isopropanol, or any combination thereof, preferably dimethyl sulfoxide.
  • the reducing agent may be selected from sodium borohydride, sodium cyanoborohydride, sodium triacetoxyborohydride, and 2-methylpyridineborane, preferably sodium triacetoxyborohydride.
  • Suitable reagents may be selected from tetraethyl titanate, tetraisopropyl titanate, acetic acid, and formic acid, preferably tetraethyl titanate.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-90°C for 1-12 hours.
  • the deprotection reaction in step (7) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable deprotection agent.
  • the organic solvent may be selected from methanol, ethanol, isopropanol, 1,4-dioxane, acetonitrile, N,N-dimethylformamide, tetrahydrofuran, and any combination thereof, preferably tetrahydrofuran.
  • the deprotection agent may be selected from hydrochloric acid, trifluoroacetic acid, acetic acid, and any combination thereof, preferably hydrochloric acid.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-100°C for 1-12 hours.
  • Rings A, B, E, R2 , L, L1 , L2 , L3 , L6 , and X6 are as defined above;
  • LG 1 , LG 2 , and LG 3 each independently represent a leaving group, such as a halogen, trifluoromethanesulfonate, p-toluenesulfonate, or methanesulfonate group; or,
  • LG3 When L3 is a C1-3 alkylene group, LG3 and the carbon atom attached to L3 together form a carbonyl group;
  • PG 1 indicates a protecting group, such as alkoxycarbonyl amino protecting groups, such as benzyloxycarbonyl (Cbz), tert-butyloxycarbonyl (Boc), methoxycarbonyl (Fmoc), allyloxycarbonyl (Alloc), trimethylsilylethoxycarbonyl (Teoc), and methoxycarbonyl (or ethoxycarbonyl); and acyl amino protecting groups, such as phthaloyl (Pht), p-toluenesulfonyl (Tos), trifluoroacetyl (Tfa), o-(p-)nitrobenzenesulfonyl (Ns), tertopenyl, and benzyl...
  • alkoxycarbonyl amino protecting groups such as benzyloxycarbonyl (Cbz), tert-butyloxycarbonyl (Boc), methoxycarbonyl (Fmoc), allyloxycarbony
  • the method includes the following steps:
  • the reaction in step (1) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable base.
  • the organic solvent may be selected from acetonitrile, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, N,N-dimethylacetamide, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, and any combination thereof, preferably N,N-dimethylformamide.
  • the base may be selected from N,N-diisopropylethylamine, triethylamine, potassium carbonate, cesium carbonate, and any combination thereof, preferably cesium carbonate.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0°C to 100°C for 0.5 to 48 hours.
  • the reaction in step (2) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable base.
  • the organic solvent may be selected from acetonitrile, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, N,N-dimethylacetamide, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, and any combination thereof, preferably acetonitrile or tetrahydrofuran.
  • the base may be selected from N,N-diisopropylethylamine, triethylamine, sodium hydride, potassium carbonate, cesium carbonate, sodium tert-butoxide, or potassium tert-butoxide, preferably potassium carbonate or cesium carbonate.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 20°C-120°C for 2-48 hours.
  • the ring-closing reaction in step (3) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable reagent.
  • the organic solvent may be selected from methanol, ethanol, isopropanol, 1,4-dioxane, acetonitrile, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, and any combination thereof, preferably ethanol.
  • the reagent may be selected from morpholine, ammonium acetate, diethylamine, triethylamine, L-proline, sulfur powder, and any combination thereof, preferably a combination of ammonium acetate and sulfur powder.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-100°C for 1-12 hours.
  • the reaction in step (4) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of N,N-dimethylformamide dimethyl acetal.
  • the organic solvent may be selected from acetonitrile, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, N,N-dimethylacetamide, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, and any combination thereof, preferably tetrahydrofuran.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 25-100°C for 2-16 hours.
  • the reaction in step (5) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of an oxidizing agent.
  • the oxidizing agent may be selected from Des Martin oxidants, pyridinium chlorochromate, or pyridinium dichromate, preferably Des Martin oxidants.
  • the organic solvent may be selected from tetrahydrofuran, dichloromethane, toluene, 1,2-dichloroethane, and any combination thereof, preferably dichloromethane.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-40°C for 2-16 hours.
  • the reaction in step (6) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable reducing agent.
  • the organic solvent may be selected from dichloromethane, tetrahydrofuran, acetonitrile, methanol, N,N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, isopropanol, and any combination thereof, preferably dichloromethane.
  • the reducing agent may be selected from sodium borohydride, sodium cyanoborohydride, sodium triacetoxyborohydride, and 2-methylpyridineborane, preferably sodium triacetoxyborohydride.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-90°C for 1-12 hours.
  • the deprotection reaction in step (7) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable deprotection agent.
  • the organic solvent may be selected from methanol, ethanol, isopropanol, dichloromethane, 1,4-dioxane, acetonitrile, N,N-dimethylformamide, tetrahydrofuran, and any combination thereof, preferably dichloromethane.
  • the deprotection agent may be selected from hydrochloric acid, trifluoroacetic acid, acetic acid, and any combination thereof, preferably trifluoroacetic acid.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-100°C for 1-12 hours.
  • the reaction in step (8) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable organic base and a condensing agent.
  • the organic solvent may be selected from dichloromethane, tetrahydrofuran, acetonitrile, N,N-dimethylformamide, and any combination thereof, preferably N,N-dimethylformamide.
  • the organic base may be selected from N,N-diisopropylethylamine, triethylamine, and 1,8-diazacyclo[5,4,0]undec-7-ene, preferably N,N-diisopropylethylamine.
  • the condensing agent may be selected from 2-(7-azobenzotriazole)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate, 1-hydroxybenzotriazole, 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride, N-hydroxy-7-azabenzotriazole, dicyclohexylcarbodiimide, and any combination thereof, preferably 2-(7-azobenzotriazole)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-60°C for 1-12 hours.
  • the deprotection reaction in step (9) above is preferably carried out in a suitable organic solvent and in the presence of a suitable deprotection agent.
  • the organic solvent may be selected from methanol, ethanol, isopropanol, 1,4-dioxane, acetonitrile, N,N-dimethylformamide, tetrahydrofuran, and any combination thereof, preferably tetrahydrofuran.
  • the deprotection agent may be selected from hydrochloric acid, trifluoroacetic acid, acetic acid, and any combination thereof, preferably hydrochloric acid.
  • the reaction is preferably carried out at a temperature of 0-100°C for 1-12 hours.
  • the compounds of formula (II-B), (II-C) or (II-D) of the present invention can be prepared by referring to the method shown in route 1 or 2 above.
  • the present invention provides compounds of formulas II-A1, II-A2, II-A3, II-A5, II-A6, II-A7, II-A8, II-A9, II-A9a, II-A10, II-A10a, II-A11a, and II-A12a, or their salts, stereoisomers, tautomers, polymorphs, solvates, N-oxides, and isotope-labeled compounds.
  • Rings A, B, E, R2 , L, L1 , L2 , L3 , L4 , L5 , L6 , X6 , PG1 , LG1 , LG2 and LG3 are as defined above.
  • the compounds represented by the formulas II-A1, II-A2, II-A3, II-A5, II-A6, II-A7, II-A8, II-A9, II-A9a, II-A10, II-A10a, II-A11a, and II-A12a, or their salts, stereoisomers, tautomers, polymorphs, solvates, N-oxides, or isotopically labeled compounds may be used to prepare the compounds represented by the general formulas herein, or their pharmaceutically acceptable salts, stereoisomers, tautomers, polymorphs, solvates, N-oxides, isotopically labeled compounds, metabolites, or prodrugs.
  • Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a preventive and/or therapeutically effective amount of the compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt, stereoisomer, tautomer, polymorph, solvate, N-oxide, isotopically labeled compound, metabolite or prodrug, and one or more pharmaceutically acceptable carriers.
  • Another object of the present invention is to provide a medicine box comprising the compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt, stereoisomer, tautomer, polymorph, solvate, N-oxide, isotopically labeled compound, metabolite or prodrug, or a pharmaceutical composition of the present invention.
  • the kit may also contain instructions for administering the compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt, stereoisomer, tautomer, polymorph, solvate, N-oxide, isotopically labeled compound, metabolite or prodrug, or the pharmaceutical composition of the present invention.
  • pharmaceutically acceptable carrier refers to a diluent, excipient, vehicle, or medium that is administered co-administered with a therapeutic agent and is suitable, to the extent of reasonable medical judgment, for contact with human and/or other animal tissues without excessive toxicity, irritation, allergic reactions, or other problems or complications commensurate with a reasonable benefit/risk ratio.
  • Pharmaceutically acceptable carriers that can be used in the pharmaceutical compositions or pharmaceutical preparations of the present invention include, but are not limited to, sterile liquids, such as water and oils, including those of petroleum, animal, plant or synthetic origin, such as peanut oil, soybean oil, mineral oil, sesame oil and the like.
  • the pharmaceutical composition may be in the form of, for example, solid dosage forms, semi-solid dosage forms, liquid dosage forms, or gaseous dosage forms.
  • Solid dosage forms may include, for example, tablets, capsules, powders, granules, or suppositories, while liquid dosage forms may include, for example, solutions, suspensions, or injections.
  • the composition may also be in dosage forms such as liposomes or microspheres.
  • compositions of the present invention can act systemically and/or locally.
  • they can be administered via suitable routes, such as by injection (e.g., intravenous, intra-arterial, subcutaneous, intraperitoneal, intramuscular injection, including infusion) or transdermal administration; or by oral, sublingual, nasal, transmucosal, topical, ophthalmic formulations or by inhalation.
  • suitable routes such as by injection (e.g., intravenous, intra-arterial, subcutaneous, intraperitoneal, intramuscular injection, including infusion) or transdermal administration; or by oral, sublingual, nasal, transmucosal, topical, ophthalmic formulations or by inhalation.
  • the content or amount of the compound of the present invention in the pharmaceutical composition may be from about 0.001 mg to about 1000 mg, suitably 0.01-800 mg, preferably 0.05-500 mg, more preferably 0.1-350 mg, and particularly preferably 0.5-100 mg.
  • the present invention provides a method for preparing the pharmaceutical composition of the present invention, the method comprising combining a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt, stereoisomer, tautomer, polymorph, solvate, N-oxide, isotopically labeled compound, metabolite or prodrug with one or more pharmaceutically acceptable carriers.
  • Another object of the present invention is to provide the compounds of the present invention or pharmaceutically acceptable salts, stereoisomers, tautomers, polymorphs, solvates, N-oxides, isotopically labeled compounds, metabolites or prodrugs thereof, or pharmaceutical compositions of the present invention, for the prevention and/or treatment of diseases, particularly KRAS-mediated diseases.
  • Another object of the present invention is to provide the use of the compounds of the present invention or pharmaceutically acceptable salts, stereoisomers, tautomers, polymorphs, solvates, N-oxides, isotopically labeled compounds, metabolites or prodrugs of the present invention, or pharmaceutical compositions of the present invention, in the preparation of medicaments, particularly in the preparation of medicaments for the prevention and/or treatment of KRAS-mediated related diseases.
  • Another object of the present invention is to provide a method for preventing and/or treating KRAS-mediated related diseases, comprising administering to an individual in need a preventive or therapeutically effective amount of a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt, stereoisomer, tautomer, polymorph, solvate, N-oxide, isotopically labeled compound, metabolite or prodrug, or a pharmaceutical composition of the present invention.
  • the KRAS-mediated disease is a tumor or cancer.
  • the tumor or cancer is selected from lung cancer, pancreatic cancer, colorectal cancer, and gastric cancer.
  • the tumor or cancer is associated with KRAS G12D mutation, KRAS G12DV mutation, and/or KRAS G13D mutation.
  • the term "effective amount” refers to an amount sufficient to achieve the desired preventive or therapeutic effect, such as an amount that reduces one or more symptoms associated with the disease to be treated.
  • the dosing regimen can be adjusted to provide the optimal required response. For example, a single bolus injection can be administered, several fractions can be administered over time, or the dose can be proportionally reduced or increased as indicated by the urgency of the treatment situation. It should be noted that dosage values can vary depending on the type and severity of the condition to be alleviated, and may include single or multiple doses. To further understand, for any given individual, the specific dosing regimen should be adjusted over time based on individual needs and the professional judgment of the person administering the composition or supervising its administration.
  • the amount of the compounds of the present invention administered will depend on the individual being treated, the severity of the condition or illness, the rate of administration, the disposal of the compounds, and the prescribing physician's judgment.
  • the effective dose is from about 0.0001 to about 50 mg per kg of body weight per day, for example, from about 0.01 to about 10 mg/kg/day (single or divided doses). For a 70 kg person, this would total from about 0.007 mg/day to about 3500 mg/day, for example, from about 0.7 mg/day to about 700 mg/day.
  • dose levels not exceeding the lower limit of the foregoing range may be sufficient, while in other cases, larger doses may still be used without causing any harmful side effects, provided that the larger dose is first divided into several smaller doses administered throughout the day.
  • prevention includes suppressing and delaying the onset of disease, and includes not only prevention before the development of disease, but also prevention of recurrence of disease after treatment.
  • treatment means to reverse, alleviate or eliminate the progression of one or more symptoms of a condition or illness to which such term is applied.
  • “individual” includes both human and non-human animals.
  • Exemplary human individuals include human individuals suffering from a disease (such as the disease described herein) (referred to as patients) or normal individuals.
  • “non-human animals” includes all vertebrates, such as non-mammals (e.g., birds, amphibians, reptiles) and mammals, such as non-human primates, livestock, and/or domesticated animals (e.g., sheep, dogs, cats, cows, pigs, etc.).
  • the structure of the compound was determined by nuclear magnetic resonance ( 1H NMR) and/or mass spectrometry (MS).
  • the 1H NMR was performed using a JEOL Eclipse 400 NMR spectrometer.
  • the solvents used were deuterated methanol ( CD3OD ), deuterated chloroform ( CDCl3 ), or hexadeuterated dimethyl sulfoxide (DMSO- d6 ).
  • the internal standard was tetramethylsilane (TMS). Chemical shifts ( ⁇ ) were given in parts per million (ppm).
  • the instrument used for MS measurements was an Agilent (ESI) mass spectrometer, manufacturer: Agilent, model: Agilent 6120B.
  • HPLC high-performance liquid chromatography
  • Instrument model Agilent 1260; Column: Waters SunFire Prep C 18 OBD (19mm ⁇ 150mm ⁇ 5.0 ⁇ m); Column temperature: 25°C; Flow rate: 20.0mL/min; Detection wavelength: 214nm; Elution gradient: (0min: 10% A, 90% B; 16.0min: 90% A, 10% B); Mobile phase A: Acetonitrile; Mobile phase B: 0.05% formic acid aqueous solution;
  • TLC thin-layer chromatography silica gel plates
  • the reaction was monitored using thin-layer chromatography (TLC) or LC-MS.
  • TLC thin-layer chromatography
  • the developing solvent systems used included dichloromethane and methanol, n-hexane and ethyl acetate, and petroleum ether and ethyl acetate.
  • the volume ratio of the solvent was adjusted according to the polarity of the compound or by adding triethylamine, etc.
  • reaction temperature is room temperature (20°C-35°C).
  • the reagents used in the examples were purchased from Acros Organics, Aldrich Chemical Company, and TEB Chemicals.
  • Step 1 Preparation of (S)-3-(4-chloro-6-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)pyrimidin-2-yl)-5,6-dihydro-4H-spiro[benzo[d]isoxazol-7,1'-cyclohexane]-2'-one
  • reaction solution was diluted with water (300 mL), extracted three times with ethyl acetate (100 mL), washed with saturated brine (50 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure.
  • Step 2 Preparation of (S)-3-(4-(((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5,6-dihydro-4H-spiro[benzo[d]isoxazol-7,1'-cyclohexanone]-2'-one
  • Step 3 Preparation of (S)-2-amino-3'-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3-nitrile
  • Step 4 Preparation of (S)-N'-(3-cyano-3'-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-2-yl)-N,N-dimethylformamidin
  • Step 5 Preparation of (S)-(1-((2-(3-cyano-2-((dimethylamino)methylene)amino)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3'-yl)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-4-yl)oxy)methyl)cyclopropyl)methyl methanesulfonate
  • 6-Bromo-3-iodo-1-methyl-1H-indazole (8 g, 23.5 mmol) and 2,6-dibenzyloxy-3-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborhexacyclopentan-2-yl)pyridine (9.91 g, 23.5 mmol) were dissolved in tetrahydrofuran (150 mL) and water (15 mL).
  • [1,1'-bis(diphenylphosphine)ferrocene]palladium dichloride dichloromethane complex (1.74 g, 2.35 mmol) and cesium carbonate (19.34 g, 58.76 mmol) were added.
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 4-(3-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,6-dihydropyridine-1(2H)-carboxylic acid
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 4-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidin-1-carboxylic acid
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 3 Preparation of 3-(1-methyl-6-(3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)-1H-indazol-3-yl)piperidine-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 2-(4-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidin-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonane-7-carboxylate
  • Step 2 Preparation of 3-(6-(1-(7-azaspiro[3.5]non-2-yl)piperidin-4-yl)-1-methyl-1H-indazol-3-yl)piperidin-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 2-(4-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidin-1-yl)acetate
  • Step 2 Preparation of 2-(4-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidin-1-yl)acetic acid
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 4-(2-(4-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidin-1-yl)acetyl)piperazine-1-carboxylate
  • reaction mixture was reacted at 25 °C for 2 hours.
  • Step 4 Preparation of 3-(1-methyl-6-(1-(2-oxo-2-(piperazin-1-yl)ethyl)piperidin-4-yl)-1H-indazol-3-yl)piperidin-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 4-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindoline-5-yl)-3,6-dihydropyridine-1(2H)-carboxylate
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 4-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindoline-5-yl)piperidin-1-carboxylic acid
  • Step 3 Preparation of 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-yl)isoindololin-2-yl)piperidin-2,6-dione
  • Step 4 Preparation of tert-butyl 4-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindoline-5-yl)-[1,4'-bipiperidin]-1'-carboxylic acid
  • Step 5 Preparation of 3-(5-([1,4'-bipiperidin]-4-yl)-1-oxoisoindoline-2-yl)piperidin-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 2-(4-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindoline-5-yl)piperidin-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonane-7-carboxylate
  • Step 2 Preparation of 3-(5-(1-(7-azaspiro[3.5]non-2-yl)piperidin-4-yl)-1-oxoisoindoline-2-yl)piperidin-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of 2-(4-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindoline-5-yl)piperidin-1-yl)acetic acid
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 4-(2-(4-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindoline-5-yl)piperidin-1-yl)acetyl)piperazine-1-carboxylate
  • the mixture was reacted at 25 °C for 3 hours.
  • Step 3 Preparation of 3-(1-oxo-5-(1-(2-oxo-2-(piperazin-1-yl)ethyl)piperidin-4-yl)isoindolin-2-yl)piperidin-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 9-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindoline-5-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 2 Preparation of 3-(1-oxo-5-(3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)isoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione
  • reaction solution was diluted with water (50 mL), extracted three times with dichloromethane (50 mL), washed with saturated brine (50 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure.
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3-azaspiro[5.5]undec-8-ene-3-carboxylate
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3-azaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 3 Preparation of 3-(1-methyl-6-(3-azaspiro[5.5]undecane-9-yl)-1H-indazol-3-yl)piperidine-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of (S)-3-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)-6-methylpyrimidin-2-yl)-5,6-dihydro-4H-spiro[benzo[d]isoxazole-7,1'-cyclohexane]-2'-one
  • Step 2 Preparation of (S)-2-amino-3'-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)-6-methylpyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3-nitrile
  • Step 3 Preparation of (S)-N'-(3-cyano-3'-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)-6-methylpyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-2-yl)-N,N-dimethylformamidin
  • Step 4 Preparation of (S)-N'-(3-cyano-3'-(4-((1-formylcyclopropyl)methoxy)-6-methylpyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-2-yl)-N,N-dimethylformamidin
  • Step 1 Preparation of 3-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)-6-(4-(dimethoxymethyl)piperidin-1-yl)-1-methyl-1H-indazole
  • methanesulfonic acid (2-dicyclohexylphosphino-2',6'-diisopropoxy-1,1'-biphenyl)(2-amino-1,1'-biphenyl-2-yl)palladium(II) 130 mg, 154 ⁇ mol
  • anhydrous cesium carbonate (1.02 g, 3.09 mmol)
  • Step 2 Preparation of 1-(3-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidine-4-carboxaldehyde
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 4-((1-(3-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidin-4-yl)methyl)piperazine-1-carboxylate
  • Step 4 Preparation of tert-butyl 4-((1-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidin-4-yl)methyl)piperazine-1-carboxylate
  • tert-butyl piperazine-1-carboxylate (3-(3-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidin-4-yl)methyl)piperazine-1-carboxylate was dissolved in tetrahydrofuran (20 mL), and 50 mg of 10% palladium on carbon was added. The reaction was carried out at 25 °C for 12 hours under a hydrogen atmosphere. The reaction solution was filtered to remove the solid, and the filtrate was concentrated under reduced pressure to give the title compound (190 mg, yield: 66.9%).
  • Step 5 Preparation of 3-(1-methyl-6-(4-(piperazin-1-ylmethyl)piperidin-1-yl)-1H-indazol-3-yl)piperidin-2,6-dione
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)phenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • reaction mixture was reacted at 90 °C for 12 hours.
  • the reaction mixture was cooled to room temperature, and the solid was removed by filtration.
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)phenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 4 Preparation of 3-(3-(3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)phenyl)piperidine-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 9-(3-hydroxy-4-nitrophenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 9-(4-amino-3-hydroxyphenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 9-(2-oxo-2,3-dihydrobenzo[d]oxazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 4 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-2-oxo-2,3-dihydrobenzo[d]oxazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 5 Preparation of 3-(2-oxo-6-(3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)benzo[d]oxazol-3(2H)-yl)piperidine-2,6-dione
  • Step 2 Preparation of 3-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)-6-bromo-1-ethyl-5-fluoro-1H-indazole
  • 6-Bromo-1-ethyl-5-fluoro-3-iodo-1H-indazole 560 mg, 1.50 mmol
  • 2,6-dibenzyloxy-3-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborane-2-yl)pyridine 635 mg, 1.50 mmol
  • tetrahydrofuran 20 mL
  • water 2 mL
  • [1,1'-bis(diphenylphosphine)ferrocene]palladium dichloride 110 mg, 150 ⁇ mol
  • anhydrous cesium carbonate 990 mg, 3.00 mmol
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)-1-ethyl-5-fluoro-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 4 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-ethyl-5-fluoro-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 5 Preparation of 3-(1-ethyl-5-fluoro-6-(3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)-1H-indazol-3-yl)piperidine-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of 2,6-bis(benzyloxy)-3-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)pyridine
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 9-(4-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)-3,5-difluorophenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 9-(4-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-3,5-difluorophenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 4 Preparation of 3-(2,6-difluoro-4-(3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)phenyl)piperidine-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of (S)-3-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)pyrimidin-2-yl)-5,6-dihydro-4H-spiro[benzo[d]isoxazole-7,1'-cyclohexane]-2'-one
  • Step 2 Preparation of (S)-2-amino-3'-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazo]-3-nitrile
  • Step 3 Preparation of (S)-N'-(3-cyano-3'-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-2-yl)-N,N-dimethylformamidin
  • Step 4 Preparation of (S)-(1-(((2-(3-cyano-2-(((dimethylamino)methylene)amino)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3'-yl)pyrimidin-4-yl)oxy)methyl)cyclopropyl)methyl methanesulfonate
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 9-hydroxy-3-azaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 9-(4-iodophenoxy)-3-azaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 9-(4-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)phenoxy)-3-azaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 4 Preparation of tert-butyl 9-(4-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)phenoxy)-3-azaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 5 Preparation of 3-(4-((3-azaspiro[5.5]undecane-9-yl)oxy)phenyl)piperidine-2,6-dione
  • Example 31 Preparation of intermediate methyl methanesulfonate (1-(((6-((8-oxabicyclo[3.2.1]oct-3-yl)oxy)-2-((S)-3-cyano-2-(dimethylamino)methylene)amino)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3'-yl)pyrimidin-4-yl)oxy)methyl)cyclopropyl)methanesulfonate
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 4-(3-(2,4-dioxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,6-dihydropyridine-1(2H)-carboxylate
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 4-(3-(2,4-dioxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidine-1-carboxylic acid
  • Step 3 Preparation of 1-(1-methyl-6-(piperidin-4-yl)-1H-indazol-3-yl)dihydropyrimidine-2,4(1H,3H)-dione
  • Step 4 Preparation of tert-butyl 2-(4-(3-(2,4-dioxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidin-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonane-7-carboxylate
  • Step 5 Preparation of 1-(6-(1-(7-azaspiro[3.5]non-2-yl)piperidin-4-yl)-1-methyl-1H-indazol-3-yl)dihydropyrimidine-2,4(1H,3H)-dione
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2,4-dioxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 2 Preparation of 1-(1-methyl-6-(3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)-1H-indazol-3-yl)dihydropyrimidine-2,4(1H,3H)-dione
  • Step 1 Preparation of 3-(5-(4-(dimethoxymethyl)piperidin-1-yl)-1-oxoisoindololin-2-yl)piperidin-2,6-dione
  • Step 2 Preparation of 1-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindoline-5-yl)piperidin-4-carboxaldehyde
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 4-((1-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindoline-5-yl)piperidin-4-yl)methyl)piperazine-1-carboxylate
  • Step 4 Preparation of 3-(1-oxo-5-(4-(piperazin-1-ylmethyl)piperidin-1-yl)isoindoline-2-yl)piperidin-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2-(allyloxy)-2-oxoethyl)-4-nitrophenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2-(allyloxy)-2-oxoethyl)-4-aminophenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • reaction solution was diluted with ethyl acetate (20 mL), washed twice with saturated brine (20 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and the filtrate was concentrated.
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 9-(3-(2-(allyloxy)-2-oxoethyl)-4-((2,6-dioxopiperidin-3-yl)amino)phenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 4 Preparation of 2-(5-(9-(tert-butoxycarbonyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)-2-((2,6-dioxopiperidin-3-yl)amino)phenyl)acetic acid
  • Step 5 Preparation of tert-butyl 9-(1-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-2-oxoindol-5-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 6 Preparation of 3-(2-oxo-5-(3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)dihydroindol-1-yl)piperidine-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 9-(4-chloro-3-(2,4-dioxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)benzoyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 2 Preparation of 1-(2-chloro-5-(3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carbonyl)phenyl)dihydropyrimidine-2,4(1H,3H)-dione
  • Step 1 Preparation of 1-(3-(2,6-bis(benzyloxy)pyridin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidin-4-one
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 4-(4-chloro-3-(2,4-dioxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)benzoyl)piperazine-1-carboxylate
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 2-(4-(4-chloro-3-(2,4-dioxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)benzoyl)piperazin-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonane-7-carboxylate
  • Step 4 Preparation of 1-(5-(4-(7-azaspiro[3.5]nonan-2-yl)piperazine-1-carbonyl)-2-chlorophenyl)dihydropyrimidine-2,4(1H,3H)-dione
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 9-(2-fluoro-4-nitrophenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • 1,2-Difluoro-4-nitrobenzene 300 mg, 1.85 mmol
  • tert-butyl 3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate 528 mg, 2.03 mmol
  • N,N-diisopropylethylamine 290 mg, 2.22 mmol
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 9-(4-amino-2-fluorophenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 9-(4-((2,6-dioxopiperidin-3-yl)amino)-2-fluorophenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 4 Preparation of 3-((3-fluoro-4-(3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)phenyl)amino)piperidine-2,6-dione
  • Step 1 Preparation of tert-butyl 9-(4-(benzyloxy)phenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 2 Preparation of tert-butyl 9-(4-hydroxyphenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 3 Preparation of tert-butyl 9-(4-((2,6-dioxopiperidin-3-yl)oxy)phenyl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-carboxylate
  • Step 1 Preparation of (S)-3-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(1,4-oxazolidin-4-yl)pyrimidin-2-yl)-5,6-dihydro-4H-spirocyclic [benzo[d]isoxazole-7,1'-cyclohexane]-2'-one
  • Step 2 Preparation of (S)-2-amino-3'-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(1,4-oxazolidin-4-yl)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3-nitrile
  • Step 3 Preparation of (S)-N'-(3-cyano-3'-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(1,4-oxazacycloheptane-4-yl)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-2-yl)-N,N-dimethylformamidin
  • Step 4 Preparation of (S)-N'-(3-cyano-3'-(4-((1-formylcyclopropyl)methoxy)-6-(1,4-oxazacycloheptane-4-yl)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-2-yl)-N,N-dimethylformamidin
  • Step 1 Preparation of (S)-3-(4-chloro-6-((1-(hydroxymethyl)cyclopentyl)methoxy)pyrimidin-2-yl)-5,6-dihydro-4H-spiro[benzo[d]isoxazol-7,1'-cyclohexane]-2'-one
  • reaction solution was diluted with water (20 mL), extracted three times with ethyl acetate (20 mL), washed with saturated brine (50 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure.
  • Step 2 Preparation of (S)-3-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopentyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5,6-dihydro-4H-spiro[benzo[d]isoxazol-7,1'-cyclohexane]-2'-one
  • Step 3 Preparation of (S)-2-amino-3'-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopentyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3-nitrile
  • Step 4 Preparation of (S)-N'-(3-cyano-3'-(4-((1-(hydroxymethyl)cyclopentyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-2-yl)-N,N-dimethylformamidin
  • Step 5 Preparation of (S)-N'-(3-cyano-3'-(4-((1-formylcyclopentyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-2-yl)-N,N-dimethylformamidin
  • Example 1 Preparation of (4S)-2-amino-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)methyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3-nitrile (compound 5)
  • Step 1 Preparation of N'-((4S)-3-cyano-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)methyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-2-yl)-N,N-dimethylformamidin
  • Step 2 Preparation of (4S)-2-amino-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)methyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3-nitrile
  • Step 1 Preparation of N'-((4S)-3-cyano-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-fluoro-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)methyl)cyclopropyl)methoxy)-6-methylpyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-2-yl)-N,N-dimethylformamidin
  • reaction was carried out at 25 °C for 30 min, and sodium triacetoxyborohydride (75 mg, 354 ⁇ mol) was added.
  • the reaction was carried out at 25 °C for 1 h.
  • Step 2 Preparation of (4S)-2-amino-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-fluoro-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)methyl)cyclopropyl)methoxy)-6-methylpyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3-nitrile
  • Step 1 Preparation of N'-((4S)-3-cyano-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-fluoro-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)methyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-2-yl)-N,N-dimethylformamidin
  • reaction was carried out at 25 °C for 30 min, and sodium triacetoxyborohydride (34.7 mg, 163.8 ⁇ mol) was added.
  • the reaction was carried out at 25 °C for 5 h.
  • Step 2 Preparation of (4S)-2-amino-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-fluoro-1-methyl-1H-indazol-6-yl)-3,9-diazaspiro[5.5]undecane-3-yl)methyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3-nitrile
  • Example 28 Preparation of (S)-2-amino-3'-(4-((1-((2-(4-(3-(2,4-dioxotetrahydropyrimidin-1(2H)-yl)-1-methyl-1H-indazol-6-yl)piperidin-1-yl)-7-azaspiro[3.5]non-7-yl)methyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3-nitrile (compound 20)
  • Example 36 Preparation of (4S)-2-amino-3'-(4-((1-((4-((1-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindoline-5-yl)piperidin-4-yl)methyl)piperazin-1-yl)methyl)cyclopropyl)methoxy)-6-(pyrimidin-5-yloxy)pyrimidin-2-yl)-5',6,6',7-tetrahydro-4'H,5H-spiro[benzo[b]thiophene-4,7'-benzo[d]isoxazole]-3-nitrile (compound 11)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及螺环化合物、其制备方法及用途。具体而言，本发明涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，包含其的药物组合物，其制备方法及其在制备用于预防或治疗KRAS介导的相关疾病的药物中的用途。

Description

螺环化合物、其制备方法及用途
相关申请的交叉引用
本申请是以申请号为202410890471.8，申请日为2024年07月04日的CN申请，以及申请号为202411978204.2，申请日为2024年12月31日的CN申请为基础，并主张其优先权，所有申请的内容在此作为整体引入本申请中。
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及一类螺环化合物、其制备方法及其用途。
背景技术
RAS是具有GTP酶活性的鸟嘌呤核苷酸结合蛋白，具有细胞膜内侧锚定功能。RAS蛋白能够在GDP结合的非活性状态和GTP结合的活性状态之间转换，影响下游Raf、PI3K和RalGDS等多种信号通路，调控蛋白质合成、基因转录、细胞生长、分化、凋亡和迁移等。
RAS突变会导致下游信号通路的持续性激活，促进肿瘤的发生发展，肿瘤中RAS突变主要发生在KRAS(约85％)。在KRAS突变的肿瘤细胞中，KRAS的GTP酶活性下降，从而持续维持在激活状态。KRAS突变与肺癌、胰腺癌和结直肠癌等多种癌症的发生有着密切的关系。
蛋白水解靶向嵌合体(Proteolysis-Targeting Chimeras，PROTAC)是一种双功能分子，其结构包括三个部分：(1)与靶蛋白底物结合的部分；(2)与E3泛素连接酶结合的部分；和(3)连接前两部分的链。PROTAC可以分别识别靶蛋白和E3泛素连接酶，将靶蛋白与E3泛素连接酶的距离拉近，通过诱导招募E3泛素连接酶至靶蛋白表面，引发泛素化过程并诱导靶蛋白降解。PROTAC具有广泛的药理活性、较高的靶点选择性、可用于难成药靶蛋白降解、降解效力强以及在低浓度就可保持催化降解作用等优点。
本领域急需开发结构新颖、生物活性好，安全有效的KRAS PROTAC。
发明概述
本发明提供可用作靶向KRAS蛋白的降解剂和/或抑制剂的化合物。本发明的化合物属于PROTAC，其一端可以与靶蛋白结合，而另一端的高亲和力CRBN(Cereblon)配体能使靶蛋白募集到E3泛素连接酶，导致KRAS蛋白的泛素化和随后的降解。本发明的化合物可以用于治疗和/或预防由靶蛋白的聚集和/或过度活化引起的癌症或病症。
一方面，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，所述化合物具有式(I)的结构：
其中，
环A为C3-6环烷基或3-6元杂环基，所述环烷基或杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-6烷基和C1-6卤代烷基的取代基取代；
环B为3-12元含氮杂环基；
环E为C6-10芳基、5-12元杂芳基或3-12元杂环基，所述芳基、杂芳基或杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代基(O＝)、-O-C1- 6烷基、-O-C1-6卤代烷基和-O-C3-6环烷基的取代基取代；
X1和X2各自独立地选自O和N；
X3、X4和X5各自独立地选自CR3和N；
X6选自CH和N；
L为共价键，或选自O、S和NR4；
L1选自O、S和NR5；
L2选自C1-6亚烷基和卤代C1-6亚烷基；
L3选自C1-6亚烷基和卤代C1-6亚烷基；
L4为共价键，或选自O、NR6、C1-6亚烷基、-O-C1-6亚烷基-、-C1-6亚烷基-O-、-C1-6亚烷基-O-C1-6亚烷基-、-C(＝O)-、-C(＝O)-C1-6亚烷基-和3-12元杂环基，所述杂环基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基的取代基取代；
L5为共价键，或选自O、NR7、C1-6亚烷基、-O-C1-6亚烷基-、-C1-6亚烷基-O-、-C1-6亚烷基-O-C1-6亚烷基-、-C(＝O)-、-C(＝O)-C1-6亚烷基-和3-12元杂环基，所述杂环基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基的取代基取代；
L6为共价键，或选自O、NR8和-C(＝O)-NR9-；
每个R1独立地选自氢、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基和3-6元杂环基；
R2选自氢、卤素、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、3-12元杂环基、5-10元杂芳基、-C1-6亚烷基-C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-3-12元杂环基和-C1-6亚烷基-5-10元杂芳基，所述烷基、亚烷基、环烷基、芳基、杂环基和杂芳基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6卤代烷基、-O-C1-6烷基、-C1-6亚烷基-OH、-NR10aR10b、-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基和-O-C1-6卤代烷基的取代基取代；
每个R3独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧基和-O-C1-6卤代烷基；
R4选自氢和C1-6烷基、C1-6卤代烷基和C3-6环烷基；
R5选自氢和C1-6烷基；
R6选自氢和C1-6烷基；
R7选自氢和C1-6烷基；
R8选自氢和C1-6烷基；
R9选自氢和C1-6烷基；
R10a和R10b各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-OH和-C1- 6亚烷基-O-C1-6烷基，或者R10a和R10b连同与其连接的N形成3-6元含氮杂环基；
m选自0、1、2、3和4。
另一方面，本发明提供药物组合物，其包含预防和/或治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，以及一种或多种药学上可接受的载体。
另一方面，本发明提供药盒，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或者包含本发明的药物组合物。
另一方面，本发明提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，或者本发明的药盒，其靶向KRAS蛋白并用于降解KRAS蛋白。
另一方面，本发明提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，或者本发明的药盒，其用于预防和/或治疗KRAS介导的相关疾病。
另一方面，本发明提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物或者本发明的药盒在制备用于预防和/或治疗KRAS介导的相关疾病的药物中的用途。
另一方面，本发明提供预防和/或治疗KRAS介导的相关疾病的方法，其包括向有此需要的个体给药预防和/或治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物或者本发明的药盒。
另一方面，本发明提供制备本发明的化合物的方法。
发明详述
定义
除非在下文中另有定义，本文中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。提及本文中使用的技术意图指在本领域中通常所理解的技术，包括那些对本领域技术人员显而易见的技术的变化或等效技术的替换。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本发明。
如本文中所使用，术语“包括”、“包含”、“具有”、“含有”或“涉及”及其在本文中的其它变体形式为包含性的(inclusive)或开放式的，且不排除其它未列举的元素或方法步骤。
如本文中所使用，术语“烷基”定义为直链或支链的饱和脂肪族烃基。例如，如本文中所使用，术语“C1-6烷基”和“C1-3烷基”分别指具有1至6个碳原子和1至3个碳原子的直链或支链的基团(例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基或正己基)，其任选地被一个或多个(诸如1、2或3个)适合的取代基如卤素取代。
如本文中所使用，术语“亚烷基”是指从相应的“烷基”再去掉一个氢原子所得到的二价饱和脂肪族烃基。例如，如本文中所使用，术语“C1-6亚烷基”和“C1-3亚烷基”分别指具有1至6个碳原子和1-3个碳原子的亚烷基，例如亚甲基(-CH2-)、亚乙基(-CH2CH2-)、亚异丙基(-CH(CH3)CH2-)，其任选地被一个或多个(诸如1、2或3个)适合的取代基如卤素取代。
如本文中所使用，术语“烯基”是指具有一个或多个碳-碳双键的直链或支链的脂肪族烃基。例如，本文中所使用的术语“C2-6烯基”是指具有2至6个碳原子以及一个、两个或三个(优选一个)碳-碳双键的烯基(如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、2-甲基-2-丙烯基或4-甲基-3-戊烯基等)，其任选地被一个或多个(如1、2或3个)合适的取代基如卤素取代。
如本文中所使用，术语“炔基”是指具有一个或多个碳-碳三键的直链或支链的脂肪族烃基。例如，如本文中所使用的术语“C2-6炔基”是指具有2至6个碳原子以及一个、两个或三个(优选一个)碳-碳三键的炔基(如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基或5-己炔基等)，其任选地被一个或多个(如1、2或3个)合适的取代基如卤素取代。
如本文中所使用，术语“环烷基”指饱和或部分不饱和的非芳族单环或多环(诸如双环)烃环(例如单环，诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基或环壬基，或双环，包括螺环、稠合或桥连系统，诸如双环[1.1.1]戊基、双环[2.2.1]庚基、双环[3.2.1]辛基或双环[5.2.0]壬基、十氢化萘基等)，其任选地被一个或多个(诸如1至3个)适合的取代基取代。例如，术语“C3-6环烷基”指具有3至6个成环碳原子的饱和或部分不饱和的非芳族单环或多环(诸如双环)烃环(例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基)，其任选地被一个或多个(诸如1、2或3个)适合的取代基取代，例如甲基取代的环丙基。
如本文中所使用，术语“亚环烷基”是指从相应的“环烷基”再去掉一个氢原子所得到的二价基团。
如本文中所使用，术语“卤代”或“卤素”基团定义为包括氟、氯、溴或碘。
如本文中所使用，术语“卤代烷基”是指被一个或多个(诸如1、2或3个)相同或不同的卤素原子取代的烷基。例如，术语“C1-6卤代烷基”和“C1-3卤代烷基”分别指具有1至6个碳原子和1至3个碳原子的卤代烷基，例如-CF3、-C2F5、-CHF2、-CH2F、-CH2CF3、-CH2Cl或-CH2CH2CF3。
如本文中所使用，术语“杂环基”指饱和或部分不饱和的单环或多环基团(包括桥环、并环或螺环)，例如其在环中具有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个环原子，例如具有2、3、4、5、6、7、8或9个碳原子和一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)独立地选自N、O或S(O)t(其中t是0、1或2)的杂原子，例如3-12元杂环基、3-8元杂环基、5-12元杂环基、6-12元杂环基、6-10元杂环基、7-12元杂环基、3-7元杂环基、3-6元杂环基、5-6元杂环基、4-8元杂环基等。杂环基(例如3-12元杂环基、4-8元杂环基、6-10元杂环基、5-6元杂环基、3-6元杂环基、3-6元含氮杂环基、3-8元含氮单杂环基、5-12元含氮桥杂环基、6-12元含氮并杂环基、7-12元含氮螺杂环基、4-8元含氮杂环基、3-12元含氮杂环基)的代表性实例包括但不限于环氧乙烷基、氮丙啶基、氮杂环丁基(azetidinyl)、氧杂环丁基(oxetanyl)、四氢呋喃基、四氢吡咯烷基、六氢-1H-吡咯啉、吡咯烷酮基、吡咯烷二酮基、咪唑烷基、吡唑烷基、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基(dithianyl)、硫吗啉基或哌嗪基。杂环基中的环系可以是并环、桥环或螺环体系。也就是说，杂环基可以是单杂环基、桥杂环基、并杂环基或螺杂环基。例如，本发明的杂环基(例如3-12元杂环基或6-10元杂环基)还包括杂环基与杂环基、环烷基、芳基或杂芳基形成的并环结构，具体包括(但不限于)杂环基并杂环基、环烷基并杂环基、芳基并杂环基、杂芳基并杂环基，例如4-7元(单)杂环基并4-7元(单)杂环基、C4-7(单)环烷基并4-7元(单)杂环基、苯基并4-7元(单)杂环基(例如苯基并5-6元(单)杂环基)、5-6元(单)杂芳基并4-7元(单)杂环基，其实例包括但不限于吲哚啉基、异吲哚啉基、二氢苯并咪唑基等。
杂环基也可以是含氮杂环基、含氧杂环基或含硫杂环基等。
如本文中所使用，术语“含氮杂环基”是指至少含有一个N杂原子、任选含有一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)选自O或S(O)t(其中t是0、1或2)的杂原子的杂环基，其可包括含氮单环杂环基或多环杂环基(例如含氮桥杂环基、含氮并杂环基、含氮螺杂环基)。
如本文中所使用，术语“亚杂环基”是指从相应的“杂环基”再去掉一个氢原子所得到的二价基团。
术语“3-12元杂环基”包括4-8元杂环基、5-6元杂环基、6-10元杂环基、4-8元含氮杂环基、3-12元含氮杂环基等。
术语“4-8元杂环基”的实例包括： 等。
术语“6-10元杂环基”包括苯基并5-6元杂环基等。术语“苯基并5-6元杂环基”的实例包括 等。
术语“3-12元含氮杂环基”包括3-8元含氮单杂环基、5-12元含氮桥杂环基、6-12元含氮并杂环基和7-12元含氮螺杂环基等。
术语“3-8元含氮单杂环基”或“4-8元含氮杂环基”的实例包括氮丙啶基、氮杂环丁基(azetidinyl)、四氢吡咯烷基、六氢-1H-吡咯啉、吡咯烷酮基、吡咯烷二酮基、咪唑烷基、吡唑烷基、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、硫吗啉基或哌嗪基等，例如 等。
术语“5-12元含氮桥杂环基”的实例包括： 等。
术语“6-12元含氮并杂环基”的实例包括：等。
术语“7-12元含氮螺杂环基”的实例包括： 等。
如本文中所使用，术语“芳基”或“芳环”指具有共轭π电子系统的全碳单环或稠合环多环芳族基团。例如，术语“C6-10芳基”或“C6-10芳环”指含有6至10个碳原子的芳族基团，诸如苯基(环)或萘基(环)。芳基任选地被1或多个(诸如1、2或3个)适合的取代基(例如卤素、-OH、-CN、-NO2或C1-6烷基等)取代。
如本文中所使用，术语“杂芳基”或“杂芳环”指含有至少一个选自N、O和S的杂原子的单环、双环或三环芳族环系，例如具有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是含有1、2、3、4、5、6、9或10个碳原子，并且另外在每一种情况下可为苯并稠合的。例如，杂芳基或杂芳环可选自噻吩基(环)、呋喃基(环)、吡咯基(环)、噁唑基(环)、噻唑基(环)、咪唑基(环)、吡唑基(环)、异噁唑基(环)、异噻唑基(环)、噁二唑基(环)、三唑基(环)、噻二唑基(环)等，以及它们的苯并衍生物；或吡啶基(环)、哒嗪基(环)、嘧啶基(环)、吡嗪基(环)、三嗪基(环)等，以及它们的苯并衍生物或它们彼此稠合形成的并环。
术语“5-12元杂芳基”包括“6-10元杂芳基”、“6-9元杂芳基”、5-10元杂芳基等。
术语“6-10元杂芳基”或“6-9元杂芳基”的实例包括6元杂芳基、5-6元杂芳基的苯并衍生物、以及5-6元杂芳基稠合5-6元杂芳基形成的并环等等，例如
术语“5-10元杂芳基”包括5-7元杂芳基、5-6元杂芳基的苯并衍生物、以及5-6元杂芳基并5-6元杂芳基形成的并环等。
术语“5-7元杂芳基”或“5-6元杂芳基”的实例包括噻吩基(环)、呋喃基(环)、吡咯基(环)、噁唑基(环)、噻唑基(环)、咪唑基(环)、吡唑基(环)、异噁唑基(环)、异噻唑基(环)、噁二唑基(环)、三唑基(环)、噻二唑基(环)、吡啶基(环)、哒嗪基(环)、嘧啶基(环)、吡嗪基(环)、三嗪基(环)等，例如 等。
术语“6元杂芳基”包括吡啶基(环)、哒嗪基(环)、嘧啶基(环)、吡嗪基(环)、三嗪基(环)等。
如本文中所使用，术语“亚杂芳基”是指从相应的“杂芳基”再去掉一个氢原子所得到的二价基团。
术语“取代”指所指定的原子上的一个或多个(例如1、2、3或4个)氢被从所指出的基团的选择代替，条件是未超过所指定的原子在当前情况下的正常原子价并且所述取代形成稳定的化合物。取代基和/或变量的组合仅仅当这种组合形成稳定的化合物时才是允许的。
如果取代基被描述为“任选地被….取代”，则取代基可(1)未被取代或(2)被取代。如果取代基的碳被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则碳上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可单独和/或一起被独立地选择的取代基替代或未替代。如果取代基的氮被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则氮上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可各自被独立地选择的取代基替代或未替代。
如果取代基被描述为“独立地选自”一组基团，则各取代基独立于另一者被选择。因此，各取代基可与另一(其他)取代基相同或不同。
如本文中所使用，术语“一个或多个”意指在合理条件下的1个或超过1个，例如2、3、4、5、6、7、8、9或10个。
除非指明，否则如本文中所使用，取代基的连接点可来自取代基的任意适宜位置。
当取代基的键显示为穿过环中连接两个原子的键时，则这样的取代基可键连至该可取代的环中的任一成环原子。
本文中所用的波浪线是指基团的连接位置。当某个基团有两个连接位点时，如无特别定义，连接方向不受限制。例如，当环E为时，既可表明该基团的左端与L5连接，右端与L6连接，也可表明该基团的左端与L6连接，右端与L5连接。依此类推。
在一些实施方案中，当某个基团有两个连接位点时，以该基团在通式中的位置和方向顺序连接。例如，在一些实施方案中，当环E为时，其表明该基团的左端与L5连接，右端与L6连接。
本发明还包括所有药学上可接受的同位素标记的化合物，其与本发明的化合物相同，除了一个或多个原子被具有相同原子序数但原子质量或质量数不同于在自然界中占优势的原子质量或质量数的原子替代。适合包含入本发明的化合物中的同位素的实例包括但不限于氢的同位素(例如2H、3H、氘D、氚T)；碳的同位素(例如11C、13C及14C)；氯的同位素(例如37Cl)；氟的同位素(例如18F)；碘的同位素(例如123I及125I)；氮的同位素(例如13N及15N)；氧的同位素(例如15O、17O及18O)；磷的同位素(例如32P)；及硫的同位素(例如35S)。某些同位素标记的本发明的化合物(例如掺入放射性同位素的那些)可用于药物和/或底物组织分布研究(例如分析)中。放射性同位素氚(即3H)及碳-14(即14C)因易于掺入且容易检测而特别可用于该目的。用正电子发射同位素(例如11C、18F、15O及13N)进行取代可在正电子发射断层显像术(PET)研究中用于检验底物受体占据情况。被同位素标记的本发明的化合物可通过与描述于随附路线和/或实施例及制备中的那些类似的方法通过使用适当的被同位素标记的试剂代替之前采用的非标记的试剂来制备。本发明的药学上可接受的溶剂合物包括其中结晶溶剂可被同位素取代的那些，例如，D2O、丙酮-d6或DMSO-d6。
术语“立体异构体”表示由于至少一个不对称中心形成的异构体。在具有一个或多个(例如1、2、3或4个)不对称中心的化合物中，其可产生外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单独的非对映异构体。特定个别分子也可以几何异构体(顺式/反式)存在。类似地，本发明的化合物可以两种或更多种处于快速平衡的结构不同的形式的混合物(通常称作互变异构体)存在。互变异构体的代表性实例包括酮-烯醇互变异构体、苯酚-酮互变异构体、亚硝基-肟互变异构体、亚胺-烯胺互变异构体等。要理解，本申请的范围涵盖所有这样的以任意比例(例如60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％)的异构体或其混合物。
本发明涵盖本发明的化合物的所有可能的结晶形式或多晶型物，其可为单一多晶型物或多于一种多晶型物的任意比例的混合物。
还应当理解，本发明的某些化合物可以游离形式存在用于治疗，或适当时，以其药学上可接受的衍生物形式存在。在本发明中，药学上可接受的衍生物包括但不限于：药学上可接受的盐、溶剂合物、代谢物或前药，在将它们向需要其的患者给药后，能够直接或间接提供本发明的化合物或其代谢物或残余物。因此，当在本文中提及“本发明的化合物”时，也意在涵盖化合物的上述各种衍生物形式。
本发明的化合物的药学上可接受的盐包括其酸加成盐及碱加成盐。适合的酸加成盐由形成药学上可接受盐的酸来形成。适合的碱加成盐由形成药学上可接受盐的碱来形成。适合的盐的综述参见Stahl及Wermuth的“Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use”(Wiley-VCH,2002)。用于制备本发明的化合物的药学上可接受的盐的方法为本领域技术人员已知的。
本发明的化合物可以溶剂合物(优选水合物)的形式存在，其中本发明的化合物包含作为所述化合物晶格的结构要素的极性溶剂，特别是例如水、甲醇或乙醇。极性溶剂特别是水的量可以化学计量比或非化学计量比存在。
本领域技术人员会理解，由于氮需要可用的孤对电子来氧化成氧化物，因此并非所有的含氮杂环都能够形成N-氧化物；本领域技术人员会识别能够形成N-氧化物的含氮杂环。本领域技术人员还会认识到叔胺能够形成N-氧化物。用于制备杂环和叔胺的N-氧化物的合成方法是本领域技术人员熟知的，包括用过氧酸如过氧乙酸和间氯过氧苯甲酸(MCPBA)、过氧化氢、烷基过氧化氢如叔丁基过氧化氢、过硼酸钠和双环氧乙烷(dioxirane)如二甲基双环氧乙烷来氧化杂环和叔胺。这些用于制备N-氧化物的方法已在文献中得到广泛描述和综述，参见例如：T.L.Gilchrist,Comprehensive Organic Synthesis,vol.7,pp 748-750；A.R.Katritzky和A.J.Boulton,Eds.,Academic Press；以及G.W.H.Cheeseman和E.S.G.Werstiuk，Advances in Heterocyclic Chemistry,vol.22,pp 390-392,A.R.Katritzky和A.J.Boulton,Eds.,Academic Press。
在本发明的范围内还包括本发明的化合物的代谢物，即在给药本发明的化合物时体内形成的物质。这样的产物可由例如被给药的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、酶解等产生。因此，本发明包括本发明的化合物的代谢物，包括通过使本发明的化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的时间的方法制得的化合物。
本发明在其范围内进一步包括本发明的化合物的前药，其为自身可具有较小药理学活性或无药理学活性的本发明的化合物的某些衍生物，当被给药至身体中或其上时可通过例如水解裂解转化成具有期望活性的本发明的化合物。通常这样的前药会是所述化合物的官能团衍生物，其易于在体内转化成期望的治疗活性化合物。关于前药的使用的其他信息可参见“Pro-drugs as Novel Delivery Systems”，第14卷，ACS Symposium Series(T.Higuchi及V.Stella)及“Bioreversible Carriers in Drug Design,”Pergamon Press,1987(E.B.Roche编辑，American Pharmaceutical Association)。本发明的前药可例如通过用本领域技术人员已知作为“前-部分(pro-moiety)(例如“Design of Prodrugs”，H.Bundgaard(Elsevier,1985)中所述)”的某些部分替代本发明的化合物中存在的适当官能团来制备。
本发明还涵盖含有保护基的本发明的化合物。在制备本发明的化合物的任何过程中，保护在任何有关分子上的敏感基团或反应基团可能是必需的和/或期望的，由此形成本发明的化合物的化学保护的形式。这可以通过常规的保护基实现，例如，在Protective Groups in Organic Chemistry,ed.J.F.W.McOmie,Plenum Press,1973；和T.W.Greene&P.G.M.Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley&Sons,1991中所述的那些保护基，这些参考文献通过援引加入本文。使用本领域已知的方法，可以在适当的后续阶段移除保护基。
如无特别指明，本申请的数值均由术语“约”修饰。术语“约”是指在所述数值的±20％范围内，优选±10％范围内，更优选±5％范围内，再更优选±2％范围内。
化合物
本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药：
其中，
环A为C3-6环烷基或3-6元杂环基，所述环烷基或杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-6烷基和C1-6卤代烷基的取代基取代；
环B为3-12元含氮杂环基；
环E为C6-10芳基、5-12元杂芳基或3-12元杂环基，所述芳基、杂芳基或杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代基、-O-C1-6烷基、-O-C1-6卤代烷基和-O-C3-6环烷基的取代基取代；
X1和X2各自独立地选自O和N；
X3、X4和X5各自独立地选自CR3和N；
X6选自CH和N；
L为共价键，或选自O、S和NR4；
L1选自O、S和NR5；
L2选自C1-6亚烷基和卤代C1-6亚烷基；
L3选自C1-6亚烷基和卤代C1-6亚烷基；
L4为共价键，或选自O、NR6、C1-6亚烷基、-O-C1-6亚烷基-、-C1-6亚烷基-O-、-C1-6亚烷基-O-C1-6亚烷基-、-C(＝O)-、-C(＝O)-C1-6亚烷基-和3-12元杂环基，所述杂环基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基的取代基取代；
L5为共价键，或选自O、NR7、C1-6亚烷基、-O-C1-6亚烷基-、-C1-6亚烷基-O-、-C1-6亚烷基-O-C1-6亚烷基-、-C(＝O)-、-C(＝O)-C1-6亚烷基-和3-12元杂环基，所述杂环基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基的取代基取代；
L6为共价键，或选自O、NR8和-C(＝O)-NR9-；
每个R1独立地选自氢、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基和3-6元杂环基；
R2选自氢、卤素、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、3-12元杂环基、5-10元杂芳基、-C1-6亚烷基-C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-3-12元杂环基和-C1-6亚烷基-5-10元杂芳基，所述烷基、亚烷基、环烷基、芳基、杂环基和杂芳基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6卤代烷基、-O-C1-6烷基、-C1-6亚烷基-OH、-NR10aR10b、-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基和-O-C1-6卤代烷基的取代基取代；
每个R3独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧基和-O-C1-6卤代烷基；
R4选自氢和C1-6烷基、C1-6卤代烷基和C3-6环烷基；
R5选自氢和C1-6烷基；
R6选自氢和C1-6烷基；
R7选自氢和C1-6烷基；
R8选自氢和C1-6烷基；
R9选自氢和C1-6烷基；
R10a和R10b各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-OH和-C1- 6亚烷基-O-C1-6烷基，或者R10a和R10b连同与其连接的N形成3-6元含氮杂环基；
m选自0、1、2、3和4。
在式(I)的一些实施方案中，
环A为C3-6环烷基或3-6元杂环基，所述环烷基或杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-6烷基和C1-6卤代烷基的取代基取代；
环B为3-12元含氮杂环基；
环E为C6-10芳基、5-12元杂芳基或3-12元杂环基，所述芳基、杂芳基或杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代基、-O-C1-6烷基、-O-C1-6卤代烷基和-O-C3-6环烷基的取代基取代；
X1和X2各自独立地选自O和N；
X3、X4和X5各自独立地选自CR3和N；
X6选自CH和N；
L为共价键，或选自O、S和NR4；
L1选自O、S和NR5；
L2选自C1-6亚烷基和卤代C1-6亚烷基；
L3选自C1-6亚烷基和卤代C1-6亚烷基；
L4为共价键，或选自O、NR6、C1-6亚烷基、-O-C1-6亚烷基-、-C1-6亚烷基-O-、-C1-6亚烷基-O-C1-6亚烷基-、-C(＝O)-、-C(＝O)-C1-6亚烷基-和3-12元杂环基，所述杂环基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基的取代基取代；
L5为共价键，或选自O、NR7、C1-6亚烷基、-O-C1-6亚烷基-、-C1-6亚烷基-O-、-C1-6亚烷基-O-C1-6亚烷基-、-C(＝O)-、-C(＝O)-C1-6亚烷基-和3-12元杂环基，所述杂环基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基的取代基取代；
L6为共价键，或选自NR8和-C(＝O)-NR9-；
每个R1独立地选自氢、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基和3-6元杂环基；
R2选自氢、卤素、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、3-12元杂环基、5-10元杂芳基、-C1-6亚烷基-C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-3-12元杂环基和-C1-6亚烷基-5-10元杂芳基，所述烷基、亚烷基、环烷基、芳基、杂环基和杂芳基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-O-C1-6烷基、-C1-6亚烷基-OH、-NR10aR10b、-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基和-O-C1-6卤代烷基的取代基取代；
每个R3独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧基和-O-C1-6卤代烷基；
R4选自氢和C1-6烷基、C1-6卤代烷基和C3-6环烷基；
R5选自氢和C1-6烷基；
R6选自氢和C1-6烷基；
R7选自氢和C1-6烷基；
R8选自氢和C1-6烷基；
R9选自氢和C1-6烷基；
R10a和R10b各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-OH和-C1- 6亚烷基-O-C1-6烷基，或者R10a和R10b连同与其连接的N形成3-6元含氮杂环基；
m选自0、1、2、3和4。
在本发明的一些实施方案中，R1为氢。
在本发明的一些实施方案中，m为0。
在本发明的一些实施方案中，X1为O，X2为N。
在本发明的一些实施方案中，X1为N，X2为O。
在本发明的一些实施方案中，X3为N，X4为N，X5为CH。
在本发明的一些实施方案中，X3为CH，X4为N，X5为N。
在本发明的一些实施方案中，上述式(I)化合物具有式(II-A)、式(II-B)、式(II-C)或式(II-D)的结构：
其中环A、环B、环E、R2、L、L1、L2、L3、L4、L5、L6和X6如上文中所定义。
在本发明的一些实施方案中，L1为-O-。
在本发明的一些实施方案中，L2为C1-3亚烷基。
在本发明的一些实施方案中，L2为-CH2-。
在本发明的一些实施方案中，L3为C1-3亚烷基。
在本发明的一些实施方案中，L3为-CH2-。
在本发明的一些实施方案中，环A为C3-6环烷基，所述环烷基任选地被一个或多个选自卤素的取代基取代。
在本发明的一些实施方案中，环A为C3-6环烷基，所述环烷基任选地被一个或多个氟原子取代。
在本发明的一些实施方案中，环A为C3-6环烷基。
在本发明的一些实施方案中，环A选自环丙基、环丁基、环戊基、
在本发明的一些实施方案中，环A为环丙基。
在本发明的一些实施方案中，L2为C1-3亚烷基，L3为C1-3亚烷基，环A为C3- 6环烷基，所述环烷基任选地被一个或多个选自卤素的取代基取代。
在本发明的一些实施方案中，L2为C1-3亚烷基，L3为C1-3亚烷基，环A为C3- 6环烷基。
在本发明的一些实施方案中，L2为-CH2-，L3为-CH2-，环A为C3-6环烷基，所述环烷基任选地被一个或多个选自卤素的取代基取代。
在本发明的一些实施方案中，L2为-CH2-，L3为-CH2-，环A为C3-6环烷基。
在本发明的一些实施方案中，L2为-CH2-，L3为-CH2-，环A选自环丙基、环丁基、环戊基、
在本发明的一些实施方案中，L2为-CH2-，L3为-CH2-，环A为环丙基。
在本发明的一些实施方案中，环B选自3-8元含氮单杂环基、5-12元含氮桥杂环基、6-12元含氮并杂环基和7-12元含氮螺杂环基。
在本发明的一些实施方案中，环B为
在本发明的一些实施方案中，环B为
在本发明的一些实施方案中，环B为
在本发明的一些实施方案中，环B为
在本发明的一些实施方案中，环B为
在本发明的一些实施方案中，L4为共价键，或选自O、C1-3亚烷基、-C(＝O)-C1- 3亚烷基-和4-8元含氮杂环基。
在本发明的一些实施方案中，L4为共价键，或选自C1-3亚烷基、-C(＝O)-C1-3亚烷基-和4-8元含氮杂环基。
在本发明的一些实施方案中，L4为共价键，或选自O、-CH2-、-C(＝O)-CH2-、
在本发明的一些实施方案中，L4为共价键，或选自-CH2-、-C(＝O)-CH2-、
在本发明的一些实施方案中，L5为共价键，或选自-C(＝O)-和4-8元含氮杂环基。
在本发明的一些实施方案中，L5为共价键，或选自-C(＝O)-、
在本发明的一些实施方案中，L5为共价键，或选自-C(＝O)-和
在本发明的一些实施方案中，片段-L4-L5-选自：共价键、-O-、-C(＝O)-、
在本发明的一些实施方案中，片段-L4-L5-选自：共价键、-C(＝O)-、
在本发明的一些实施方案中，环E为C6-10芳基、6-10元杂芳基或6-10元杂环基，所述苯基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代基、-O-C1-6烷基、-O-C1-6卤代烷基和-O-C3-6环烷基的取代基取代。
在本发明的一些实施方案中，环E为苯基、6-9元杂芳基或苯基并5-6元杂环基，所述苯基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、氧代基和-O-C1-3烷基的取代基取代。
在本发明的一些实施方案中，环E为苯基、6-9元杂芳基或苯基并5-6元杂环基，所述苯基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-3烷基、氧代基和-O-C1-3烷基的取代基取代。
在本发明的一些实施方案中，环E为苯基、6-9元杂芳基或苯基并5-6元杂环基，所述苯基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基和氧代基的取代基取代。
在本发明的一些实施方案中，环E为苯基、6-9元杂芳基或苯基并5-6元杂环基，所述苯基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-3烷基和氧代基的取代基取代。
在本发明的一些实施方案中，环E选自
在本发明的一些实施方案中，环E选自
在本发明的一些实施方案中，环E选自
在本发明的一些实施方案中，环E选自
在本发明的一些实施方案中，环B为-L4-L5-为共价键，环E为
在本发明的一些实施方案中，环B为-L4-L5-为共价键，环E为
在本发明的一些实施方案中，L6为共价键，或选自NR8和-C(＝O)-NR9-。
在本发明的一些实施方案中，R8选自氢和C1-3烷基。
在本发明的一些实施方案中，R9选自氢和C1-3烷基。
在本发明的一些实施方案中，L6为共价键、O或NR8。
在本发明的一些实施方案中，L6为共价键或NR8。
在本发明的一些实施方案中，R8选自氢和C1-3烷基。
在本发明的一些实施方案中，L6为共价键、O或NH。
在本发明的一些实施方案中，L6为共价键或NH。
在本发明的一些实施方案中，片段选自：

在本发明的一些实施方案中，片段选自：

在本发明的一些实施方案中，片段选自：

在本发明的一些实施方案中，片段选自：
在本发明的一些实施方案中，L为共价键，或选自O和NR4。
在本发明的一些实施方案中，R4选自氢和C1-3烷基。
在本发明的一些实施方案中，L为共价键、O或NH。
在本发明的一些实施方案中，L为共价键或O。
在本发明的一些实施方案中，L为O。
在本发明的一些实施方案中，R2选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、4-8元杂环基、5-7元杂芳基、-C1-6亚烷基-C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-4-8元杂环基和-C1-6亚烷基-5-7元杂芳基，所述烷基、亚烷基、环烷基、芳基、杂环基和杂芳基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6卤代烷基、-O-C1-6烷基、-C1-6亚烷基-OH、-NR10aR10b、-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基和-O-C1-6卤代烷基的取代基取代，例如被任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-O-C1-6烷基、-C1-6亚烷基-OH、-NR10aR10b、-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基和-O-C1-6卤代烷基的取代基取代，R10a和R10b各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-OH和-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基。
在本发明的一些实施方案中，R2选自C1-6烷基和5-7元杂芳基，所述烷基和杂芳基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-O-C1-6烷基、-C1-6亚烷基-OH、-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基和-O-C1-6卤代烷基的取代基取代。
在本发明的一些实施方案中，R2选自氢、
在本发明的一些实施方案中，R2选自氢、
在本发明的一些实施方案中，R2选自氢、
在本发明的一些实施方案中，R2选自
在本发明的一些实施方案中，片段-L-R2选自氢、
在本发明的一些实施方案中，片段-L-R2选自氢、
在本发明的一些实施方案中，片段-L-R2选自氢、
在本发明的一些实施方案中，片段-L-R2选自
在本发明的一些实施方案中，上述化合物具有式(III-A)、式(III-B)、式(III-C)或式(III-D)的结构：

其中环A、环B、环E、R2、L、L1、L2、L3、L4、L5、L6和X6如上文中所定义。
本发明涵盖针对各个实施方案进行任意组合所得的化合物。由一个实施方案中的技术特征或优选技术特征与另外的实施方案中的技术特征或优选技术特征组合得到的实施方案也包括在本发明的范围内。
在式(I)的化合物的一些实施方案中，式(I)的化合物选自：






有益效果
本公开提供的化合物能够实现下述至少一种技术效果：
(1)可靶向KRAS蛋白；
(2)可有效降解或抑制KRAS蛋白(例如KRAS突变蛋白，例如KRAS-G12D等)；
(3)可有效抑制KRAS突变的细胞的增殖；
(4)优异的物理化学性质(例如溶解度、物理和/或化学稳定性)；
(5)优异的药物代谢动力学性质(例如良好的生物利用度、合适的半衰期和作用持续时间)；
(6)优异的安全性(较低的毒性和/或较少的副作用，较宽的治疗窗)等。
制备方法
本发明的式(II-A)的化合物可以通过如下路线1所示的方法制备：
路线1

其中：
环A、环B、环E、R2、L、L1、L2、L3、L4、L5、L6和X6如上文所定义；
LG1、LG2和LG3各自独立地表示离去基团，例如卤素、三氟甲磺酸酯基、对甲苯磺酸酯基或甲基磺酸酯基；或者，
当L3为C1-3亚烷基，LG3与L3上和LG3相连的碳共同形成羰基；
所述方法包括以下步骤：
(1)使化合物II-A1与化合物II-A2反应以得到化合物II-A3；
(2)使化合物II-A3与化合物II-A4反应以得到化合物II-A5；或者，使化合物II-A3进行脱卤反应以得到化合物II-A5；
(3)使化合物II-A5与化合物II-A5a进行关环反应以得到化合物II-A6；
(4)使化合物II-A6进行上保护反应以得到化合物II-A7；
(5)使化合物II-A7与含有-LG3基团的试剂进行反应以得到化合物II-A8；或者，使化合物II-A7进行氧化反应以得到化合物II-A8；
(6)使化合物II-A8与化合物II-A9反应以得到化合物II-A10，和
(7)使化合物II-A10进行去保护反应以得到化合物II-A。
上述步骤(1)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的碱存在下进行。所述有机溶剂可选自乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、N,N-二甲基乙酰胺、四氢呋喃、1,4-二氧六环及其任意组合，优选为N,N-二甲基甲酰胺。所述碱可选自N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、碳酸钾、碳酸铯及其任意组合，优选为碳酸铯。反应优选在0℃-100℃的温度下进行0.5-48小时。
上述步骤(2)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的碱存在下进行。所述有机溶剂可选自乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、N,N-二甲基乙酰胺、四氢呋喃、1,4-二氧六环及其任意组合，优选为乙腈或四氢呋喃。所述碱可选自N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、氢化钠、碳酸钾、碳酸铯、叔丁醇钠或叔丁醇钾，优选为碳酸钾或碳酸铯。反应优选在20℃-120℃的温度下进行2-48小时。或者，上述步骤(2)的反应优选在适合的溶剂中并且在金属催化剂和碱的存在下进行。所述金属催化剂可以是钯金属催化剂，例如选自三(二亚苄基丙酮)二钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、甲磺酸[正丁基二(1-金刚烷基)膦](2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)、四三苯基膦钯和醋酸钯，优选为[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯。所述碱可以是有机碱或无机碱，例如选自叔丁醇钠、碳酸钾、磷酸钾、碳酸铯和碳酸钠，优选为碳酸钾。所述溶剂可选自N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、甲苯、乙醇、乙二醇二甲醚、水、1,4-二氧六环及其任意组合，优选为1,4-二氧六环和水的组合。反应优选在20-120℃的温度下进行2-16小时。或者，上述步骤(2)的反应优选在适合的溶剂中并且在金属催化剂、碱和适合的试剂存在下进行。所述金属催化剂是钯金属催化剂，例如选自三(二亚苄基丙酮)二钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、甲磺酸[正丁基二(1-金刚烷基)膦](2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)、四三苯基膦钯和醋酸钯，优选为醋酸钯。所述碱可以是有机碱或无机碱，例如选自氟化钾、碳酸钾、磷酸钾、氟化铯、碳酸铯和碳酸钠，优选为氟化钾。所述适合试剂是聚甲基氢硅氧烷。所述溶剂可选自四氢呋喃、乙醇、乙二醇二甲醚、水、1,4-二氧六环及其任意组合，优选为四氢呋喃和水的组合。反应优选在0-100℃的温度下进行0.5-16小时。
上述步骤(3)的关环反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的试剂存在下进行。所述有机溶剂可选自甲醇、乙醇、异丙醇、1,4-二氧六环、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜及其任意组合，优选为乙醇。所述试剂可选自吗啉、醋酸铵、二乙胺、三乙胺、L-脯氨酸、硫粉及其任意组合，优选为醋酸铵和硫粉的组合。反应优选在0-100℃的温度下进行1-20小时，例如1-12小时。
上述步骤(4)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛的存在下进行。所述有机溶剂可选自乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、N,N-二甲基乙酰胺、四氢呋喃、1,4-二氧六环及其任意组合，优选为四氢呋喃。反应优选在25-100℃的温度下进行2-16小时。
上述步骤(5)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在合适的含有-LG3基团的试剂和碱的存在下进行。所述含有-LG3基团的试剂可选自甲烷磺酰氯、甲磺酸酐、对甲苯磺酰氯或三氟甲磺酸酐，优选为甲磺酸酐。所述碱可选自N,N-二异丙基乙胺或三乙胺，优选为三乙胺。所述有机溶剂可选自四氢呋喃、二氯甲烷、甲苯、1,2-二氯乙烷及其任意组合，优选为二氯甲烷。反应优选在0-40℃的温度下进行2-16小时。或者，上述步骤(5)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在氧化剂的存在下进行。所述氧化剂可选自戴斯-马丁氧化剂、氯铬酸吡啶盐或重铬酸吡啶，优选为戴斯-马丁氧化剂。所述有机溶剂可选自四氢呋喃、二氯甲烷、甲苯、1,2-二氯乙烷及其任意组合，优选为二氯甲烷。反应优选在0-40℃的温度下进行2-16小时。
上述步骤(6)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在无机碱和无机盐的存在下进行。所述无机碱可选自碳酸钾或碳酸铯，优选为碳酸钾。所述无机盐可选自碘化钾或碘化钠，优选为碘化钾。所述有机溶剂可选自乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、N,N-二甲基乙酰胺、四氢呋喃、1,4-二氧六环及其任意组合，优选为乙腈。反应优选在25-100℃的温度下进行2-16小时。或者，上述步骤(6)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的还原剂和适合的试剂存在下进行。所述有机溶剂可选自二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈、甲醇、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、异丙醇及其任意组合，优选为二甲亚砜。所述还原剂可选自硼氢化钠、氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠和2-甲基吡啶硼烷，优选为三乙酰氧基硼氢化钠。所述合适试剂可选自钛酸四乙酯、钛酸四异丙酯、乙酸和甲酸，优选为钛酸四乙酯。反应优选在0-90℃的温度下进行1-12小时。
上述步骤(7)的去保护反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的去保护试剂存在下进行。所述有机溶剂可选自甲醇、乙醇、异丙醇、1,4-二氧六环、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃及其任意组合，优选为四氢呋喃。所述去保护试剂可选自盐酸、三氟乙酸、醋酸及其任意组合，优选为盐酸。反应优选在0-100℃的温度下进行1-12小时。
当L4为共价键且L5为-C(＝O)-时，本发明的式(II-A)的化合物可以通过如下路线2所示的方法制备：
路线2

其中：
环A、环B、环E、R2、L、L1、L2、L3、L6和X6如上文所定义；
LG1、LG2和LG3各自独立地表示离去基团，例如卤素、三氟甲磺酸酯基、对甲苯磺酸酯基或甲基磺酸酯基；或者，
当L3为C1-3亚烷基，LG3与L3上和LG3相连的碳共同形成羰基；
PG1表示保护基，例如烷氧羰基类氨基保护基，例如苄氧羰基(Cbz)、叔丁氧羰基(Boc)、笏甲氧羰基(Fmoc)、烯丙氧羰基(Alloc)、三甲基硅乙氧羰基(Teoc)、甲(或乙)氧羰基；酰基类氨基保护基，例如邻苯二甲酰基(Pht)、对甲苯磺酰基(Tos)、三氟乙酰基(Tfa)、邻(对)硝基苯磺酰基(Ns)、特戊酰基、苯甲酰基、叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基硅乙氧羰基、苄氧羰基、对甲基苯磺酰基、对硝基苯磺酰基、三氟乙酰基、甲氧羰基、或乙氧羰基；烷基类氨基保护基，例如三苯甲基(Trt)、2,4-二甲氧基苄基(Dmb)、4-甲氧基苄基(PMB)、苄基(Bn)，优选为苄氧羰基(Cbz)、叔丁氧羰基(Boc)或苄基；
所述方法包括以下步骤：
(1)使化合物II-A1与化合物II-A2反应以得到化合物II-A3；
(2)使化合物II-A3与化合物II-A4反应以得到化合物II-A5；
(3)使化合物II-A5与化合物II-A5a进行关环反应以得到化合物II-A6；
(4)使化合物II-A6进行上保护反应以得到化合物II-A7；
(5)使化合物II-A7进行氧化反应以得到化合物II-A8；
(6)使化合物II-A8与化合物II-A9a反应以得到化合物II-A10a；
(7)使化合物II-A10a进行去保护反应以得到化合物II-A11a；
(8)使化合物II-A11a与化合物II-A12a反应以得到化合物II-A10，和
(9)使化合物II-A10进行去保护反应以得到化合物II-A。
上述步骤(1)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的碱存在下进行。所述有机溶剂可选自乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、N,N-二甲基乙酰胺、四氢呋喃、1,4-二氧六环及其任意组合，优选为N,N-二甲基甲酰胺。所述碱可选自N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、碳酸钾、碳酸铯及其任意组合，优选为碳酸铯。反应优选在0℃-100℃的温度下进行0.5-48小时。
上述步骤(2)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的碱存在下进行。所述有机溶剂可选自乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、N,N-二甲基乙酰胺、四氢呋喃、1,4-二氧六环及其任意组合，优选为乙腈或四氢呋喃。所述碱可选自N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、氢化钠、碳酸钾、碳酸铯、叔丁醇钠或叔丁醇钾，优选为碳酸钾或碳酸铯。反应优选在20℃-120℃的温度下进行2-48小时。
上述步骤(3)的关环反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的试剂存在下进行。所述有机溶剂可选自甲醇、乙醇、异丙醇、1,4-二氧六环、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜及其任意组合，优选为乙醇。所述试剂可选自吗啉、醋酸铵、二乙胺、三乙胺、L-脯氨酸、硫粉及其任意组合，优选为醋酸铵和硫粉的组合。反应优选在0-100℃的温度下进行1-12小时。
上述步骤(4)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛的存在下进行。所述有机溶剂可选自乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、N,N-二甲基乙酰胺、四氢呋喃、1,4-二氧六环及其任意组合，优选为四氢呋喃。反应优选在25-100℃的温度下进行2-16小时。
上述步骤(5)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在氧化剂的存在下进行。所述氧化剂可选自戴斯-马丁氧化剂、氯铬酸吡啶盐或重铬酸吡啶，优选为戴斯-马丁氧化剂。所述有机溶剂可选自四氢呋喃、二氯甲烷、甲苯、1,2-二氯乙烷及其任意组合，优选为二氯甲烷。反应优选在0-40℃的温度下进行2-16小时。
上述步骤(6)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的还原剂存在下进行。所述有机溶剂可选自二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈、甲醇、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、异丙醇及其任意组合，优选为二氯甲烷。所述还原剂可选自硼氢化钠、氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠和2-甲基吡啶硼烷，优选为三乙酰氧基硼氢化钠。反应优选在0-90℃的温度下进行1-12小时。
上述步骤(7)的去保护反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的去保护试剂存在下进行。所述有机溶剂可选自甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷、1,4-二氧六环、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃及其任意组合，优选为二氯甲烷。所述去保护试剂可选自盐酸、三氟乙酸、醋酸及其任意组合，优选为三氟乙酸。反应优选在0-100℃的温度下进行1-12小时。
上述步骤(8)的反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的有机碱和缩合剂存在下进行。所述有机溶剂可选自二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺及其任意组合，优选为N,N-二甲基甲酰胺。所述有机碱可选自N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、1,8-二氮杂环[5,4,0]十一碳-7-烯，优选为N,N-二异丙基乙胺。所述缩合剂可选自2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、1-羟基苯并三唑、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基-7-氮杂苯并三氮唑、二环己基碳二亚胺及其任意组合，优选为2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯。反应优选在0-60℃的温度下进行1-12小时。
上述步骤(9)的去保护反应优选在适合的有机溶剂中并且在适合的去保护试剂存在下进行。所述有机溶剂可选自甲醇、乙醇、异丙醇、1,4-二氧六环、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃及其任意组合，优选为四氢呋喃。所述去保护试剂可选自盐酸、三氟乙酸、醋酸及其任意组合，优选为盐酸。反应优选在0-100℃的温度下进行1-12小时。
本发明的式(II-B)、式(II-C)或式(II-D)的化合物可以参考如上路线1或2所示的方法制备。
中间体
在一些实施方案中，本发明提供式II-A1、II-A2、II-A3、II-A5、II-A6、II-A7、II-A8、II-A9、II-A9a、II-A10、II-A10a、II-A11a、II-A12a所示的化合物或其盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物，

其中环A、环B、环E、R2、L、L1、L2、L3、L4、L5、L6、X6、PG1、LG1、LG2和LG3如上文所定义。
上述式II-A1、II-A2、II-A3、II-A5、II-A6、II-A7、II-A8、II-A9、II-A9a、II-A10、II-A10a、II-A11a、II-A12a所示的化合物或其盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物可用于制备本文通式所示的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药。
药物组合物和药盒
本发明的另一目的在于提供一种药物组合物，其包含预防和/或治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，以及一种或多种药学上可接受的载体。
本发明的另一目的在于提供一种药盒，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物。
在一些实施方案中，所述药盒还包含施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物的说明书。
本发明中“药学上可接受的载体”是指与治疗剂一同给药的稀释剂、辅剂、赋形剂或媒介物，并且其在合理的医学判断的范围内适于接触人类和/或其它动物的组织而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或与合理的益处/风险比相应的其它问题或并发症。
在本发明的药物组合物或药物制剂中可使用的药学上可接受的载体包括但不限于无菌液体，例如水和油，包括那些石油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。
所述药物组合物可以例如是固体制剂、半固体制剂、液体制剂或气态制剂等的形式。所述固体制剂例如为片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂或栓剂等，所述液体制剂例如为溶液剂、混悬剂或注射剂。所述组合物还可以是脂质体、微球等剂型。
本发明的药物组合物可以系统地作用和/或局部地作用。为此目的，它们可以适合的途径给药，例如通过注射(如静脉内、动脉内、皮下、腹膜内、肌内注射，包括滴注)或经皮给药；或者通过口服、含服、经鼻、透粘膜、局部、以眼用制剂的形式或通过吸入给药。
本发明的化合物在药物组合物中的含量或用量可以是约0.001mg至约1000mg，适合地是0.01-800mg，优选0.05-500mg，更优选0.1-350mg，特别优选0.5-100mg。
在一些实施方案中，本发明提供制备本发明的药物组合物的方法，所述方法包括将本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药与一种或多种药学上可接受的载体组合。
治疗方法和用途
本发明的另一目的在于提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物，其用于预防和/或治疗疾病，特别是KRAS介导的相关疾病。
本发明的另一目的在于提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物在制备药物中的用途，特别是在制备用于预防和/或治疗KRAS介导的相关疾病的药物中的用途。
本发明的另一目的在于提供预防和/或治疗KRAS介导的相关疾病的方法，其包括向有此需要的个体给药预防或治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，或者本发明的药物组合物。
根据本发明的一些实施方案，所述KRAS介导的相关疾病为肿瘤或癌症。在一些实施方案中，所述肿瘤或癌症选自肺癌、胰腺癌、结直肠癌和胃癌。
在一些实施方案中，所述肿瘤或癌症与KRASG12D突变、KRASG12DV突变和/或KRASG13D突变相关。
如本文中所使用的术语“有效量”是指足以实现所需预防或治疗效果的量，例如，实现减轻与待治疗疾病相关的一或多种症状的量。
可调整给药方案以提供最佳所需响应。例如，可给药单次推注，可随时间给药数个分剂量，或可如治疗情况的急需所表明而按比例减少或增加剂量。要注意，剂量值可随要减轻的病况的类型及严重性而变化，且可包括单次或多次剂量。要进一步理解，对于任何特定个体，具体的给药方案应根据个体需要及给药组合物或监督组合物的给药的人员的专业判断来随时间调整。
所给药的本发明的化合物的量会取决于所治疗的个体、病症或病况的严重性、给药的速率、化合物的处置及处方医师的判断。一般而言，有效剂量在每日每kg体重约0.0001至约50mg，例如约0.01至约10mg/kg/日(单次或分次给药)。对70kg的人而言，这会合计为约0.007mg/日至约3500mg/日，例如约0.7mg/日至约700mg/日。在一些情况下，不高于前述范围的下限的剂量水平可以是足够的，而在其它情况下，仍可在不引起任何有害副作用的情况下采用较大剂量，条件是首先将所述较大剂量分成数个较小剂量以在一整天中给药。
如本文中所使用的术语“预防”包括抑制和延迟疾病的发作，并且不仅包括在发展疾病之前的预防，还包括在治疗后预防疾病的复发。
如本文中所使用的术语“治疗”意指逆转、减轻或清除这样的术语所应用的病症或病况或者这样的病症或病况的一或多种症状的进展。
如本文所使用的“个体”包括人或非人动物。示例性人个体包括患有疾病(例如本文所述的疾病)的人个体(称为患者)或正常个体。本发明中“非人动物”包括所有脊椎动物，例如非哺乳动物(例如鸟类、两栖动物、爬行动物)和哺乳动物，例如非人灵长类、家畜和/或驯化动物(例如绵羊、犬、猫、奶牛、猪等)。
实施例
以下结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述。但是本领域技术人员会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。
实施例中未注明具体条件者，均按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
化合物的结构通过核磁共振(1H NMR)和/或质谱(MS)确定。
1H NMR的测定仪器为JEOL Eclipse 400核磁仪，测定溶剂为氘代甲醇(CD3OD)、氘代氯仿(CDCl3)或六氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)，内标为四甲基硅烷(TMS)，化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。
MS的测定仪器为Agilent(ESI)质谱仪，生产商：Agilent，型号：Agilent 6120B。
反相柱层析使用Agela C18反相Flash柱
制备高效液相色谱法条件如下：
(1)仪器型号：Agilent 1260；色谱柱：Waters SunFire Prep C18 OBD(19mm×150mm×5.0μm)；色谱柱温：25℃；流速：20.0mL/min；检测波长：214nm；洗脱梯度：(0min：10％ A，90％ B；16.0min：90％ A，10％ B)；流动相A：乙腈；流动相B：0.05％甲酸水溶液；
(2)仪器型号：Agilent 1260，色谱柱：Waters XBridge Prep C18 OBD(19mm×150mm×5.0μm)；色谱柱温：25℃；流速：20.0mL/min；检测波长：214nm；洗脱梯度：(0min：10％A，90％B；16.0min：90％A，10％B)；流动相A：乙腈；流动相B：0.05％碳酸氢铵水溶液。
薄层色谱硅胶板(TLC)使用Merck产的铝板(20×20cm)，薄层层析分离纯化采用的规格是烟台产GF 254(1mm)。
反应的监测采用薄层色谱法(TLC)或LC-MS；使用的展开剂体系包括：二氯甲烷和甲醇体系，正己烷和乙酸乙酯体系，以及石油醚和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节或者加入三乙胺等进行调节。
柱层析一般使用200～300目硅胶作为载体。洗脱剂体系包括：二氯甲烷和甲醇体系，以及石油醚和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺进行调节。
如无特殊说明，反应温度均为室温(20℃-35℃)。
实施例中所使用的试剂购自Acros Organics、Aldrich Chemical Company、特伯化学等公司。
本文中出现的缩写含义以下表所示。

以下制备实施例仅为示例性的，本申请的其它化合物可参考以下制备实施例类似地合成。
中间体的制备
中间体制备例1：(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯的制备
第一步：(S)-3-(4-氯-6-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异噁唑-7,1'-环己烷]-2'-酮的制备
将(S)-3-(4,6-二氯嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺并[苯并[d]异噁唑-7,1'-环己烷]-2'-酮(8g,22.8mmol)溶于DMF(80mL)中，加入1,1-环丙烷二甲醇(3.49g,34.2mmol)和碳酸铯(18.6g,57mmol)，在室温下搅拌2小时。加入水(300mL)稀释反应液，用乙酸乙酯萃取(100mL)三次，用饱和食盐水(50mL)洗涤有机相，用无水硫酸钠干燥有机相，并减压浓缩。将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝3/1，体积比)，得到标题化合物(6.7g，收率：70.5％)。
MS m/z(ESI):418.1[M+H]+。
第二步：(S)-3-(4-(((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺并[苯并[d]异噁唑-7,1'-环己酮]-2'-酮的制备
将(S)-3-(4-氯-6-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异噁唑-7,1'-环己烷]-2'-酮(5.0g,11.99mmol)、5-羟基嘧啶(1.50g,15.59mmol)、三乙烯二胺(201.74mg,1.80mmol)和碳酸钾(1.99g,14.39mmol)悬着于乙腈(75mL)中，在60℃下搅拌8小时。冷却反应液到室温，将反应液倒入水(750mL)中，析出固体，过滤，收集并干燥滤饼，得到标题化合物(5.4g，收率：94.4％)。
MS m/z(ESI):478.2[M+H]+。
第三步：(S)-2-氨基-3'-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3-腈的制备
将(S)-3-(4-(((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺并[苯并[d]异噁唑-7,1'-环己酮]-2'-酮(5.4g,11.32mmol)、醋酸铵(3.49g,45.28mmol)和硫磺(1.45g,45.28mmol)溶于乙醇(35mL)中，在60℃下搅拌15分钟，然后滴加丙二腈(3.74g,56.6mmol)的乙醇(20mL)溶液，在80℃下搅拌8小时。将反应液过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1，体积比)，得到标题化合物(4.3g，收率：68.2％)。
MS m/z(ESI):558.2[M+H]+。
第四步：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-2-氨基-3'-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3-腈(4.3g,7.7mmol)溶于四氢呋喃(50mL)中，加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(1.1g,9.24mmol)，在室温下搅拌2小时。浓缩反应液，得到标题化合物(4.6g，收率：97.9％)。
MS m/z(ESI):613.2[M+H]+。
第五步：(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯的制备
将(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(4.6g,7.5mmol)溶于二氯甲烷(50mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(1.94g,15.0mmol)和甲磺酸酐(1.96g,11.25mmol)，在25℃下反应2小时。向反应液中加水(50mL)，用二氯甲烷(50mL)萃取两次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1，体积比)，得到标题化合物(4.6g，收率：88.8％)。
MS m/z(ESI):691.3[M+H]+。
中间体制备例2：(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-甲氧基嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯的制备
采用中间体制备例1中的合成路线，将第二步反应原料5-羟基嘧啶替换成甲醇钠，得到标题化合物(203mg，收率：55.1％)。
MS m/z(ESI):627.2[M+H]+。
中间体制备例3：3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-溴-1-甲基-1H-吲唑的制备
第一步：6-溴-3-碘-1-甲基-1H-吲唑的制备
将6-溴-3-碘-1H-吲唑(10g,30.97mmol)和氢氧化钾(2.11g,37.16mmol)混合在丙酮(100mL)中，缓慢加入碘甲烷(11.1g,77.42mmol)，在25℃下反应16小时。过滤去除固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1，体积比)，得到标题化合物(8.0g，收率：75.9％)。
MS m/z(ESI):337.3[M+H]+。
第二步：3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-溴-1-甲基-1H-吲唑的制备
将6-溴-3-碘-1-甲基-1H-吲唑(8g,23.5mmol)和2,6-二苄氧基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶(9.91g,23.5mmol)溶于四氢呋喃(150mL)和水(15mL)中，加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(1.74g,2.35mmol)和碳酸铯(19.34g,58.76mmol)，氮气置换三次，在70℃下反应16小时。过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1，体积比)，得到标题化合物(8.3g，收率：69.9％)。
MS m/z(ESI):500.3[M+H]+。
中间体制备例4：3-(1-甲基-6-(哌啶-4-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：4-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的制备
将3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-溴-1-甲基-1H-吲唑(2g,3.96mmol)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.47g,4.75mmol)溶于1.4-二氧六环(50mL)和水(5mL)中，加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(287mg,0.39mmol)和无水碳酸钾(1.64g,11.87mmol)，氮气置换三次，在90℃下反应12小时。过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝3/1，体积比)，得到标题化合物(2.4g，收率：99.6％)。
MS m/z(ESI):603.2[M+H]+。
第二步：4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
将4-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(2.4g,3.94mmol)溶于无水甲醇(80mL)中，加入10％钯碳(500mg)，在氢气氛围中，在25℃下反应12小时。过滤除去固体，滤液减压浓缩，得到标题化合物(1.6g，收率：94.2％)。
MS m/z(ESI):427.3[M+H]+。
第三步：3-(1-甲基-6-(哌啶-4-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg,1.16mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(3mL)，在25℃下反应2小时。反应液减压浓缩，得到标题化合物(420mg，收率：98.7％)。
MS m/z(ESI):327.1[M+H]+。
中间体制备例5：3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：9-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-溴-1-甲基-1H-吲唑(800mg,1.58mmol)和3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(604mg,2.37mmol)溶于无水甲苯(10mL)中，依次加入三(二亚苄基丙酮)二钯(146mg,158.28μmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(75mg,158.28μmol)和叔丁醇钠(358mg,3.17mmol)，氮气置换三次，在90℃下反应2小时。过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1，体积比)，得到标题化合物(620mg，收率：57.5％)。
MS m/z(ESI):674.5[M+H]+。
第二步：9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(620mg,910.9μmol)溶于无水甲醇(20mL)中，加入10％钯碳(200mg)，在氢气氛围中，在25℃下反应12小时。过滤除去固体，滤液减压浓缩，得到标题化合物(360mg，收率：78.9％)。
MS m/z(ESI):496.3[M+H]+。
第三步：3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(150mg,299.63μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，在25℃下反应2小时。反应液减压浓缩，得到标题化合物(130mg，收率：85.1％)。
MS m/z(ESI):396.6[M+H]+。
中间体制备例6：3-(6-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：2-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的制备
将3-(1-甲基-6-(哌啶-4-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮(300mg,818.51μmol)和2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(594mg,2.46μmol)溶于DMF(5mL)中，加入2滴冰醋酸，在25℃下反应5小时，加入氰基硼氢化钠(104mg,1.64μmol)，在25℃下反应5小时。将反应液通过反相柱层析纯化(洗脱剂：纯水/乙腈＝1/1，体积比)，得到标题化合物(420mg，收率：92.4％)。
MS m/z(ESI):550.2[M+H]+。
第二步：3-(6-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将2-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(200mg,360.19μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(3mL)，在25℃下反应2小时。反应液减压浓缩，得到标题化合物(160mg，收率：90.4％)。
MS m/z(ESI):450.3[M+H]+。
中间体制备例7：3-(1-甲基-6-(1-(2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：2-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)乙酸叔丁酯的制备
将3-(1-甲基-6-(哌啶-4-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮(420mg,1.15mmol)溶于DMF(5mL)中，依次加入溴乙酸叔丁酯(339mg,1.72mmol)和三乙胺(293mg,2.86mmol)，在25℃下反应16小时。将反应液通过反相柱层析纯化(洗脱剂：水(含0.05％甲酸)/乙腈＝2/1，体积比)，得到标题化合物(290mg，收率：56.8％)。
MS m/z(ESI):441.2[M+H]+。
第二步：2-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)乙酸的制备
将2-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)乙酸叔丁酯(270mg,606.76μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，在25℃下反应2小时。反应液减压浓缩，得到标题化合物(300mg，收率：98.2％)。
MS m/z(ESI):385.3[M+H]+。
第三步：4-(2-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
将2-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)乙酸(300mg,635.57μmol)和1-甲酸哌嗪叔丁酯(180mg,953.35μmol)溶于DMF(5mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(415mg,3.18mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(440mg,1.14mmol)，在25℃下反应2小时。将反应液通过反相柱层析纯化(洗脱剂：水(含0.05％甲酸)/乙腈＝1/1，体积比)，得到标题化合物(350mg，收率：98.6％)。
MS m/z(ESI):553.5[M+H]+。
第四步：3-(1-甲基-6-(1-(2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将4-(2-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(350mg,626.96μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(3mL)，在25℃下反应2小时。反应液减压浓缩，得到标题化合物(305mg，收率：98.4％)。
MS m/z(ESI):453.4[M+H]+。
中间体制备例8：3-(5-([1,4'-联哌啶]-4-基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的制备
在氮气保护下，将3-(5-溴-1-氧代-异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(1.9g,5.88mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(5.45g,17.64mmol)、1,1'-双(二苯基膦)二茂铁二氯化钯(476.6mg,588.0μmol)和磷酸钾(2.49g,11.76mmol)溶于DMF(20mL)中，在微波中，在100℃下反应4小时。反应液用乙酸乙酯(100mL)稀释，用饱和食盐水(50mL)洗三次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(1.66g，收率：66.3％)。
MS m/z(ESI):426.2[M+H]+。
第二步：4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
将4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(1.66g,3.90mmol)溶于甲醇(30mL)中，向体系中加入10％钯碳(475.23mg)，在氢气氛围中，在25℃下搅拌12小时。反应液垫硅藻土过滤，滤饼用甲醇淋洗三次，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(1.9g，收率：99.5％)。
MS m/z(ESI):428.2[M+H]+。
第三步：3-(1-氧代-5-(哌啶-4-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.9g,4.44mmol)溶于4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(6mL)中，在25℃下搅拌12小时。浓缩反应液，得到标题化合物(0.95g，收率：58.8％)。
MS m/z(ESI):328.2[M+H]+。
第四步：4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)-[1,4'-联哌啶]-1'-甲酸叔丁酯的制备
将3-(1-氧代-5-(哌啶-4-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(95mg,261.11μmol)，醋酸(31.33mg,522.21μmol)溶于DMF(2mL)中，加入4-氧代哌啶-1-甲酸苄酯(182.72mg,783.32μmol)，在25℃下搅拌30分钟，加入三乙酰氧基硼氢化钠(221.35mg,1.04mmol)，在25℃下反应16小时。将反应液通过反相柱层析纯化(洗脱剂：水(含0.05％甲酸)/乙腈＝3/7，体积比)，得到标题化合物(90mg，收率60.12％)。
MS m/z(ESI):511.3[M+H]+。
第五步：3-(5-([1,4'-联哌啶]-4-基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)-[1,4'-联哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(90mg,174.49μmol)溶于4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(1mL)和二氯甲烷(1mL)中，在25℃下搅拌2小时。浓缩反应液，得到标题化合物(76mg，收率：97.4％)。
MS m/z(ESI):411.3[M+H]+。
中间体制备例9：3-(5-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：2-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的制备
将3-(1-氧代-5-(哌啶-4-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(95mg,261.11μmol)，醋酸(31.33mg,522.21μmol)溶于DMF(2mL)中，加入2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(218.47mg,783.32μmol)，在室温下搅拌30分钟，加入三乙酰氧基硼氢化钠(223.35mg,1.04mmol)，在25℃下反应16小时。将反应液通过反相柱层析纯化(洗脱剂：水(含0.05％甲酸)/乙腈＝3/7，体积比)，得到标题化合物(76mg，收率：52.9％)。
MS m/z(ESI):551.3[M+H]+。
第二步：3-(5-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将2-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(76mg,143.82μmol)溶于4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(1mL)和二氯甲烷(1mL)中，在25℃下搅拌2小时。浓缩反应液，得到标题化合物(66.5mg，收率：93.6％)。
MS m/z(ESI):451.3[M+H]+。
中间体制备例10：3-(1-氧代-5-(1-(2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙基)哌啶-4-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：2-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)乙酸的制备
将3-(1-氧代-5-(哌啶-4-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(95mg,261.11μmol)和醋酸(31.33mg,522.21μmol)溶于DMF(2mL)中，加入乙醛酸(58.0mg,783.32μmol)，在25℃下搅拌0.5小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(221.35mg,1.04mmol)，在25℃下搅拌16小时。将反应液通过反相柱层析纯化(洗脱剂：水(含0.05％甲酸)/乙腈＝1/9，体积比)，得到标题化合物(35mg，收率：34.8％)。
MS m/z(ESI):386.2[M+H]+。
第二步：4-(2-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
将2-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)乙酸(35mg,90.81μmol)、N,N-二异丙基乙胺(35.21mg,272.44μmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(33.83mg,181.62μmol)溶于DMF(2mL)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(51.77mg,136.22μmol)，在25℃下反应3小时。反应液用乙酸乙酯(30mL)稀释，用饱和食盐水(10mL)洗三次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(31.5mg，收率：62.7％)。
MS m/z(ESI):554.3[M+H]+。
第三步：3-(1-氧代-5-(1-(2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙基)哌啶-4-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将4-(2-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(31.5mg,56.90μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(1mL)，在25℃搅拌2小时，浓缩反应液，得到标题化合物(24.5mg，收率：87.9％)。
MS m/z(ESI):454.3[M+H]+。
中间体制备例11：3-(1-氧代-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：9-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将3-(5-溴-1-氧代-异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(475mg,1.47mmol)、3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯(560.85mg,2.20mmol)、二氯[1,3-双(2,6-二-3-戊基苯基)咪唑-2-亚基](3-氯吡啶基)合钯(II)(116.23mg,146.99μmol)和碳酸铯(1.44g,4.41mmol)加入到1,4-二氧六环(2mL)中，搅拌均匀，氮气置换三次，在微波中，在100℃下搅拌3小时，冷却反应液到室温，将反应液用二氯甲烷(20mL)和5％乙酸水溶液(20mL)稀释，用饱和食盐水(35mL)洗两次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(152mg，收率：20.8％)。
MS m/z(ESI):497.3[M+H]+。
第二步：3-(1-氧代-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将9-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(76mg,153.04μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(1mL)，在25℃下反应2小时，浓缩反应液，得到标题化合物(59mg，收率：97.2％)。
MS m/z(ESI):397.2[M+H]+。
中间体制备例12：3-(6-([1,4'-联哌啶]-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例6中的合成路线，将第一步反应原料2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯替换为4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯，得到标题化合物(175mg，收率：73.5％)。
MS m/z(ESI):409.2[M+H]+。
中间体制备例13：3-(1-氧代-5-(1-(哌啶-4-基甲基)哌啶-4-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备：
采用中间体制备例9中的合成路线，将第一步反应原料2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯替换成1-叔丁氧羰基哌啶-4-甲醛，得到标题化合物(69mg，收率：97.8％)。
MS m/z(ESI):425.2[M+H]+。
中间体制备例14：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(3g,4.9mmol)溶于二氯甲烷(30mL)中，加入戴斯-马丁氧化剂(3.12g,7.35mmol)，在室温下搅拌4小时。加入水(50mL)稀释反应液，用二氯甲烷萃取(50mL)三次，用饱和食盐水(50mL)洗涤有机相，用无水硫酸钠干燥有机相，并减压浓缩。将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝3/2，体积比)，得到标题化合物(2.3g，收率：76.9％)。
MS m/z(ESI):611.3[M+H]+。
中间体制备例15：(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-((4-甲基嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯的制备
采用中间体制备例1中的合成路线，将第二步反应原料5-羟基嘧啶替换成5-羟基-4-甲基嘧啶，得到标题化合物(160mg，收率：62.3％)。
MS m/z(ESI):705.2[M+H]+。
中间体制备例16：(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-((4,6-二甲基嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯的制备
采用中间体制备例1中的合成路线，将第二步反应原料5-羟基嘧啶替换成4,6-二甲基-5-羟基嘧啶，得到标题化合物(101mg，收率：77.3％)。
MS m/z(ESI):719.2[M+H]+。
中间体制备例17：3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例5中的合成路线，将第一步反应原料3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-溴-1-甲基-1H-吲唑替换成3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-溴-5-氟-1-甲基-1H-吲唑，得到标题化合物(2.01g，收率：65.2％)。
MS m/z(ESI):414.2[M+H]+。
中间体制备例18：3-(1-甲基-6-(3-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：9-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3-氮杂螺[5.5]十一碳-8-烯-3-甲酸叔丁酯的制备
将3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-溴-1-甲基-1H-吲唑(300mg,0.6mmol)和9-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-3-氮杂螺[5.5]十一碳-9-烯-3-甲酸叔丁酯(294mg,0.78mmol)溶于1,4-二氧六环(8mL)和水(2mL)中，依次加入Pd(dppf)Cl2(22mg,30μmol)和碳酸钾(249mg,1.8mmol)，氮气置换三次，在95℃下反应12小时。过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3/1，体积比)，得到标题化合物(302mg，收率：74.9％)。
4MS m/z(ESI):671.5[M+H]+。
第二步：9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3-氮杂螺[5.5]十一碳-8-烯-3-甲酸叔丁酯(302mg,450μmol)溶于无水甲醇(10mL)中，加入10％钯碳(100mg)，在氢气氛围中，在25℃下反应12小时。过滤除去固体，滤液减压浓缩，得到标题化合物(210mg，收率：94.2％)。
MS m/z(ESI):495.3[M+H]+。
第三步：3-(1-甲基-6-(3-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(210mg,424μmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，在25℃下反应2小时。反应液减压浓缩，得到标题化合物(143mg，收率：85.1％)。
MS m/z(ESI):395.3[M+H]+。
中间体制备例19：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
第一步：(S)-3-(4-((1-(羟基甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异恶唑-7,1'-环己烷]-2'-酮的制备
将(S)-3-(4-氯-6-((1-(羟基甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异恶唑-7,1'-环己烷]-2'-酮(620mg,1.47mmol)和2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼烷(370mg,2.94mmol)溶于1,4-二氧六环(20mL)和水(5mL)中，加入Pd(dppf)Cl2(108mg,146μmol)和无水碳酸铯(1.2g,3.67mmol)，在90℃下反应3小时。反应液降至室温，过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/2，体积比)，得到标题化合物(400mg，收率：67.8％)。
MS m/z(ESI):398.2[M+H]+。
第二步：(S)-2-氨基-3'-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3-腈的制备
将(S)-3-(4-((1-(羟基甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异恶唑-7,1'-环己烷]-2'-酮(400mg,996μmol)溶于乙醇(15mL)中，加入乙酸铵(307mg,3.99mmol)和硫磺(127mg,3.99mmol)，在60℃下反应30分钟，加入丙二腈(330mg,4.98mmol)的乙醇(5mL)溶液，在80℃下反应12小时。将反应体系降至室温，过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1，体积比)，得到标题化合物(480mg，收率：99.8％)。
MS m/z(ESI):478.2[M+H]+。
第三步：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-(羟基甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-2-氨基-3'-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3-腈(480mg,995μmol)溶于四氢呋喃(10mL)中，加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(240mg,1.99mmol)，在25℃下反应2小时。反应液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝1/2，体积比)，得到标题化合物(470mg，收率：87.7％)。
MS m/z(ESI):533.2[M+H]+。
第四步：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-(羟基甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(100mg,185μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，将体系降温至0℃，加入戴斯-马丁氧化剂(120mg,278μmol)，在0℃下反应2小时。将反应液过除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝1/2，体积比)，得到标题化合物(95mg，收率：95.3％)。
MS m/z(ESI):531.2[M+H]+。
中间体制备例20：3-(6-(1-(2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例6中的合成路线，将第一步反应原料2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯替换为6-氧代-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯，得到标题化合物(250mg，收率：97.4％)。
MS m/z(ESI):422.3[M+H]+。
中间体制备例21：3-(1-甲基-6-(4-(哌嗪-1-基甲基)哌啶-1-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-1-甲基-1H-吲唑的制备
将3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-溴-1-甲基-1H-吲唑(780mg,1.54mmol)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(250mg,1.54mmol)溶于无水甲苯(15mL)中，依次加入甲磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(130mg,154μmol)和无水碳酸铯(1.02g,3.09mmol)，氮气置换三次，在100℃下反应12小时。将反应液降至室温，过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1，体积比)，得到标题化合物(530mg，收率：58.7％)。
MS m/z(ESI):579.2[M+H]+。
第二步：1-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-4-甲醛的制备
将3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-1-甲基-1H-吲唑(530mg,906μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(2.5mL)，在25℃下反应5小时。反应液减压浓缩，得到标题化合物(516mg，收率：99.0％)。
MS m/z(ESI):533.3[M+H]+
第三步：4-((1-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
将1-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-4-甲醛(516mg,897μmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(506mg,2.69mmol)溶于二氯甲烷(15mL)中，加入2滴乙酸，在25℃下反应1小时，加入三乙酰氧基硼氢化钠(575mg,2.68mmol)，在25℃下反应5小时。反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)，分液，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝1/4，体积比)，得到标题化合物(380mg，收率：59.6％)。
MS m/z(ESI):703.5[M+H]+。
第四步：4-((1-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
将4-((1-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(380mg,535μmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，加入10％钯碳(50mg)，在氢气氛围中，在25℃下反应12小时。反应液过滤除去固体，滤液减压浓缩，得到标题化合物(190mg，收率：66.9％)。
MS m/z(ESI):525.4[M+H]+。
第五步：3-(1-甲基-6-(4-(哌嗪-1-基甲基)哌啶-1-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将4-((1-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(190mg,358μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(1.0mL)，在25℃下反应5小时。将反应液减压浓缩，得到标题化合物(165mg，收率：98.8％)。
MS m/z(ESI):425.3[M+H]+。
中间体制备例22：3-(6-(1-(3-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例6中的合成路线，将第一步反应原料2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯替换为9-氧代-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯，得到标题化合物(250mg，收率：90.6％)。
MS m/z(ESI):478.3[M+H]+。
中间体制备例23：3-(6-(1-(2-氮杂螺[3.5]壬-7-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例6中的合成路线，将第一步反应原料2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯替换为7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁酯，得到标题化合物(160mg，收率：99.5％)。
MS m/z(ESI):450.2[M+H]+。
中间体制备例24：3-(3-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：2,6-双(苄氧基)-3-(3-溴苯基)吡啶的制备
将1-溴-3-碘苯(1.00g,3.50mmol)和2,6-二苄氧基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吡啶(1.48g,3.50mmol)溶于四氢呋喃(200mL)和水(20mL)中，依次加入Pd(dppf)Cl2(260mg,350μmol)和无水碳酸铯(2.88g,8.75mmol)，在70℃下反应12小时。反应液降至室温，过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1，体积比)，得到标题化合物(1.50g，收率：95.0％)。
MS m/z(ESI):446.3[M+H]+。
第二步：9-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将2,6-双(苄氧基)-3-(3-溴苯基)吡啶(1.50g,3.33mmol)和3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(855mg,3.33mmol)溶于无水甲苯(30mL)中，依次加入三(二亚苄基丙酮)二钯(310mg,333μmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(468mg,333μmol)和叔丁醇钠(970mg,9.99mmol)，在90℃下反应12小时。将反应液降至室温，过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1，体积比)，得到标题化合物(1.50g，收率：95.0％)。
MS m/z(ESI):620.4[M+H]+。
第三步：9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(500mg,798μmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，加入10％钯碳(50mg)，在氢气氛围中，在25℃下反应12小时。反应液过滤除去固体，滤液减压浓缩，得到标题化合物(300mg，收率：84.2％)。
MS m/z(ESI):442.3[M+H]+。
第四步：3-(3-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)哌啶-2,6-二酮的制备
将9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(300mg,672μmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入三氟乙酸(2mL)，在25℃下反应3小时。将反应液减压浓缩，得到标题化合物(300mg，收率：96.9％)。
MS m/z(ESI):342.2[M+H]+。
中间体制备例25：3-(2-氧代-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯并[d]恶唑-3(2H)-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：9-(3-羟基-4-硝基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将5-氟-2-硝基苯酚(1.00g,6.30mmol)和3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(1.94g,7.56mmol)溶于二甲基亚砜(20mL)中，加入N,N-二异丙基乙胺(2.47g,18.91mmol)，在110℃下反应3小时。将反应液降至室温，向反应体系中加入乙酸乙酯(50mL)和饱和食盐水(50mL)，分液，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3/1，体积比)，得到标题化合物(2.30g，收率：92.3％)。
MS m/z(ESI):392.2[M+H]+。
第二步：9-(4-氨基-3-羟基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(3-羟基-4-硝基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(2.30g,5.82mmol)溶于冰乙酸(30mL)中，加入锌粉(9.60g,11.64mmol)，在25℃下反应12小时。向反应液内加入乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)，过滤除去固体，滤液分液，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，滤液减压浓缩，向残留物中加入正己烷/乙酸乙酯＝50/1的混合溶剂(30mL)，室温搅拌1小时，过滤，收集并干燥滤饼，得到标题化合物(1.90g，收率：90.3％)。
MS m/z(ESI):362.2[M+H]+。
第三步：9-(2-氧代-2,3-二氢苯并[d]恶唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(4-氨基-3-羟基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(1.00g,2.74mmol)溶于乙酸乙酯(30mL)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(715mg,5.48mmol)和N,N'-羰基二咪唑(672mg,4.11mmol)，在25℃下反应12小时。将反应液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/2，体积比)，得到标题化合物(900mg，收率：83.9％)。
MS m/z(ESI):388.2[M+H]+。
第四步：9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氧代-2,3-二氢苯并[d]恶唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(2-氧代-2,3-二氢苯并[d]恶唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(300mg,766μmol)和3-溴哌啶-2,6-二酮(300mg,1.53mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入无水碳酸钾(215mg,1.53mmol)，在70℃下反应2小时。将反应液降至室温，向反应液中加入乙酸乙酯(50mL)和饱和食盐水(20mL)，分液，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝1/1，体积比)，得到标题化合物(150mg，收率：38.8％)。
MS m/z(ESI):499.3[M+H]+。
第五步：3-(2-氧代-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯并[d]恶唑-3(2H)-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氧代-2,3-二氢苯并[d]恶唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯(150mg,297μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(1.0mL)，在25℃下反应5小时。将反应液减压浓缩，得到标题化合物(130mg，收率：99.3％)。
MS m/z(ESI):399.2[M+H]+。
中间体制备例26：3-(1-乙基-5-氟-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：6-溴-1-乙基-5-氟-3-碘-1H-吲唑的制备
将6-溴-5-氟-3-碘-1H-吲唑(1.00g,2.93mmol)溶于丙酮(20mL)中，依次加入氢氧化钾(200mg,3.52mmol)和碘乙烷(1.16g,7.33mmol)，在25℃下反应12小时。向反应液中加入乙酸乙酯(50mL)和水(20mL)，分液，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝7/1，体积比)，得到标题化合物(560mg，收率：51.2％)。
MS m/z(ESI):368.9[M+H]+。
第二步：3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-溴-1-乙基-5-氟-1H-吲唑的制备
将6-溴-1-乙基-5-氟-3-碘-1H-吲唑(560mg,1.50mmol)和2,6-二苄氧基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吡啶(635mg,1.50mmol)溶于四氢呋喃(20mL)和水(2mL)中，依次加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(110mg,150μmol)和无水碳酸铯(990mg,3.00mmol)，氮气置换三次，在70℃下反应12小时。将反应液降至室温，过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝7/1，体积比)，得到标题化合物(610mg，收率：75.4％)。
MS m/z(ESI):532.1[M+H]+。
第三步：9-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-乙基-5-氟-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-溴-1-乙基-5-氟-1H-吲唑(610mg,1.13mmol)和3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(437mg,1.70mmol)溶于无水甲苯(15mL)中，依次加入三(二亚苄基丙酮)二钯(105mg,113μmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(53mg,113μmol)和叔丁醇钠(330mg,3.40mmol)，氮气置换三次，在90℃下反应12小时。将反应液降至室温，过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1，体积比)，得到标题化合物(400mg，收率：49.4％)。
MS m/z(ESI):706.4[M+H]+。
第四步：9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-乙基-5-氟-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-乙基-5-氟-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(400mg,561μmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，加入10％钯碳(50mg)，在氢气氛围中，在25℃下反应12小时。将反应液过滤除去固体，滤液减压浓缩，得到标题化合物(290mg，收率：96.9％)。
MS m/z(ESI):528.3[M+H]+。
第五步：3-(1-乙基-5-氟-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-乙基-5-氟-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(290mg,544mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(2mL,)，在25℃下反应5小时。将反应液减压浓缩，得到标题化合物(250mg，收率：98.0％)。
MS m/z(ESI):428.4[M+H]+。
中间体制备例27：3-(2,6-二氟-4-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：2,6-双(苄氧基)-3-(4-溴-2,6-二氟苯基)吡啶的制备
将5-溴-1,3-二氟-2-碘苯(630mg,1.98mmol)和2,6-双(苄氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吡啶(824mg,1.98mmol)混合在1,4-二氧六环(10mL)中，依次加入Pd(dppf)Cl2(140.5mg,188.2umol)和碳酸铯(1.88g,5.64mmol)。氮气置换三次，在80℃下反应16小时。过滤去除固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝8/1，体积比)，得到标题化合物(476mg，收率：50％)。
MS m/z(ESI):482.1[M+H]+。
第二步：9-(4-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3,5-二氟苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将2,6-双(苄氧基)-3-(4-溴-2,6-二氟苯基)吡啶(476mg,986.9μmol)和3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(376.5mg,1.48mmol)混合在甲苯(10mL)中，依次加入三(二亚苄基丙酮)二钯(90.4mg,98.7μmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(46.1mg,98.7μmol)和叔丁醇钠(284.5mg,2.96mmol)。氮气置换三次，在90℃下反应12小时。过滤去除固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1，体积比)，得到标题化合物(386mg，收率：59.7％)。
MS m/z(ESI):656.3[M+H]+。
第三步：9-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(4-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3,5-二氟苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(386mg,588.6μmol)溶于四氢呋喃(10mL)中，加入10％钯碳(50mg)，在氢气氛围中，在25℃下反应16小时。过滤除去固体，滤液减压浓缩，得到标题化合物(250mg，收率：89％)。
MS m/z(ESI):478.2[M+H]+。
第四步：3-(2,6-二氟-4-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)哌啶-2,6-二酮的制备
将9-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(250mg,523.5μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，再加入三氟乙酸(2mL)，在25℃下反应2小时。直接将反应液减压浓缩，得到标题化合物(178mg，收率：90％)。
MS m/z(ESI):378.2[M+H]+。
中间体制备例28：(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯的制备
第一步：(S)-3-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异恶唑-7,1'-环己烷]-2'-酮的制备
将(S)-3-(4-氯-6-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异恶唑-7,1'-环己烷]-2'-酮(400mg,957.2μmol)溶于四氢呋喃(10mL)和水(1mL)中，加入醋酸钯(39.8mg,172.3μmol)和氟化钾(102mg,1.72mmol)，再缓慢滴加聚甲基氢硅氧烷(410.8mg,1.8mmol)的四氢呋喃溶液(1mL)。在25℃下搅拌1小时。向反应液中加入碳酸氢钠水溶液(10mL)，乙酸乙酯(10mL)萃取三次，用无水硫酸钠干燥有机相，并减压浓缩，残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝2/1，体积比)，得到标题化合物(330mg，收率：60.4％)。
MS m/z(ESI):384.2[M+H]+。
第二步：(S)-2-氨基-3'-(4-((1-(羟基甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3-腈的制备
将(S)-3-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异恶唑-7,1'-环己烷]-2'-酮(330mg,817.6μmol)溶于乙醇(5mL)中，加入醋酸铵(192.9mg,2.45mmol)和硫磺(80.1mg,2.45mmol)，在60℃下搅拌0.5小时，然后滴加丙二睛(220.5mg,3.27mmol)的乙醇溶液(2mL)，升温至80℃搅拌12小时。将反应液冷却到室温，加水(10mL)稀释反应液，乙酸乙酯(10mL)萃取三次，用无水硫酸钠干燥有机相，并减压浓缩，残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝1/1，体积比)，得到标题化合物(215.5mg，收率：56.9％)。
MS m/z(ESI):464.2[M+H]+。
第三步：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-(羟基甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-2-氨基-3'-(4-((1-(羟基甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3-腈(215.5mg,464.89μmol)溶于四氢呋喃(5mL)中，加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(110.8mg,929.8μmol)，在25℃下搅拌2小时。向反应液中加水(10mL)，乙酸乙酯(10mL)萃取三次，用饱和食盐水(10mL)洗涤有机相，用无水硫酸钠干燥有机相，并减压浓缩，残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝2/1，体积比)，得到标题化合物(220mg，收率：91.2％)。
MS m/z(ESI):519.2[M+H]+。
第四步：(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯的制备
将(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-(羟基甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(220mg,424.2μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，然后加入甲磺酸酐(110.8mg,636.3μmol)和N,N-二异丙基乙胺(109.6mg,848.4μmol)，在25℃下搅拌2小时。向反应液中加水(10mL)，二氯甲烷(10mL)萃取三次，用无水硫酸钠干燥有机相，并减压浓缩，得到标题化合物(217mg，收率：85.8％)。
MS m/z(ESI):597.2[M+H]+。
中间体制备例29：(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-((4-甲基吡啶-3-基)氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯的制备
采用中间体制备例1中的合成路线，将第二步反应原料5-羟基嘧啶替换为4-甲基吡啶-3-醇，得到标题化合物(220mg，收率：93.1％)。
MS m/z(ESI):704.2[M+H]+。
中间体制备例30：3-(4-((3-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)氧基)苯基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：9-羟基-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-氧代-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(400mg,1.42mmol)溶于乙醇(10mL)中，加入硼氢化钠(104.66mg,2.84mmol)，在25℃下反应2小时。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(10mL)淬灭，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，用饱和食盐水(10mL)洗涤有机相，用无水硫酸钠干燥有机相，并减压浓缩，得到标题化合物(340mg，收率：84％)。
MS m/z(ESI):270.2[M+H]+。
第二步：9-(4-碘苯氧基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-羟基-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(340mg,1.2mmol)和4-碘苯酚(277mg,1.2mmol)溶于四氢呋喃(5mL)中，加入偶氮二甲酸二异丙酯(275mg,1.32mmol)和三苯基膦(481mg,1.8mmol)，在25℃下搅拌12小时。将反应液减压浓缩，残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1，体积比)，得到标题化合物(110mg，收率：18.5％)。
MS m/z(ESI):472.1[M+H]+。
第三步：9-(4-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)苯氧基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(4-碘苯氧基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(100mg,210μmol)和2,6-双(苄氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吡啶(115.1mg,273μmol)混合在四氢呋喃(5mL)和水(0.5mL)中，依次加入Pd(dppf)Cl2(15.5mg,21μmol)和碳酸铯(172.8mg,525μmol)。氮气置换三次，在80℃下反应16小时。过滤去除固体，滤液减压浓缩，残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1，体积比)，得到标题化合物(105mg，收率：74.8％)。
MS m/z(ESI):635.3[M+H]+。
第四步：9-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯氧基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(4-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)苯氧基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(105mg,157.1umol)溶于四氢呋喃(5mL)中，加入10％钯碳(10mg)，在氢气氛围中，在25℃下反应16小时。过滤除去固体，滤液减压浓缩，得到标题化合物(63mg，收率：88％)。
MS m/z(ESI):457.2[M+H]+。
第五步：3-(4-((3-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)氧基)苯基)哌啶-2,6-二酮的制备
将9-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯氧基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(63mg,138μmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，在25℃下反应2小时。直接将反应液减压浓缩，得到标题化合物(44mg，收率：90％)。
MS m/z(ESI):357.2[M+H]+。
中间体制备例31：(1-(((6-((8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)氧基)-2-((S)-3-氰基-2-(二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯的制备
采用中间体制备例1中的合成路线，将第二步反应原料5-羟基嘧啶替换为8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-醇，得到标题化合物(26mg，收率：92％)。
MS m/z(ESI):723.2[M+H]+。
中间体制备例32：1-(6-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备
第一步：4-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯的制备
在氮气保护下，将1-(6-溴-1-甲基-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(100mg,294μmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(281.14mg,881.96μmol)，Pd(dppf)Cl2(24.57mg,29.40μmol)和氟化铯(89.31mg,587.97μmol)依次加入到1,4-二氧六环(6mL)中，在100℃下搅拌4小时。将反应液冷却到室温，将反应液用乙酸乙酯(10mL)稀释，用饱和食盐水(5mL)洗三次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(70.mg，收率：51.2％)。
MS m/z(ESI):426.2[M+H]+。
第二步：4-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
将4-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(70mg,156.29μmol)溶于甲醇(3mL)中，向体系中加入10％钯碳(20mg)，在氢气氛围中，在25℃下搅拌12小时。将反应液垫硅藻土过滤，滤饼用甲醇淋洗2～3次，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(50mg，收率：74.8％)。
MS m/z(ESI):428.2[M+H]+。
第三步：1-(1-甲基-6-(哌啶-4-基)-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备
将4-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(50mg,116.96μmol)溶于4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(2mL)中，在25℃下搅拌12小时。浓缩反应液，得到标题化合物(40.mg，收率：94％)。
MS m/z(ESI):328.2[M+H]+。
第四步：2-(4-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的制备
将1-(1-甲基-6-(哌啶-4-基)-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(40mg,122.18μmol)和醋酸(31.33mg,244.36μmol)溶于DMF(2mL)中，加入2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(87.72mg,366.55μmol)，在室温下搅拌30分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(103.58mg,488.73μmol)，在25℃下反应16小时。将反应液过滤，滤液用反相柱纯化(洗脱剂：乙腈/水(0.05％甲酸)＝7/3，体积比)，得到标题化合物(40mg，收率59.5％)。
MS m/z(ESI):551.3[M+H]+。
第五步：1-(6-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备
将2-(4-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(40mg,72.64μmol)溶于4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(1mL)和二氯甲烷(1mL)中，在25℃下搅拌2小时。浓缩反应液，得到标题化合物(35mg，收率：98.9％)。
MS m/z(ESI):451.3[M+H]+。
中间体制备例33：1-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备
第一步：9-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将1-(6-溴-1-甲基-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(150mg,440.98μmol)，3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(236.15mg,881.96μmol)，二氯[1,3-双(2,6-二-3-戊基苯基)咪唑-2-亚基](3-氯吡啶基)合钯(35.94mg,44.10μmol)和碳酸铯(362.83mg,1.10mmol)依次加入二氧六环(3mL)中，置换氮气三次，在100℃下搅拌3小时。将反应液冷却到室温，用乙酸乙酯(25mL)稀释反应液，用饱和食盐水(15mL)洗两次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(70mg，收率：30.4％)。
MS m/z(ESI):497.3[M+H]+。
第二步：1-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备
将9-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(70mg,133.91μmol)溶于4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(1mL)和二氯甲烷(1mL)中，在25℃下搅拌2小时。浓缩反应液，得到标题化合物(60mg，收率：98.3％)。
MS m/z(ESI):397.3[M+H]+。
中间体制备例34：3-(1-甲基-6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例5中的合成路线，将第一步反应原料3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯替换成2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯，得到标题化合物(200mg，收率：97.1％)。
MS m/z(ESI):368.2[M+H]+。
中间体制备例35：3-(1-甲基-6-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例5中的合成路线，将第一步反应原料3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯替换为2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯，得到标题化合物(130mg，收率：97.2％)。
MS m/z(ESI):382.2[M+H]+。
中间体制备例36：3-(3-((3-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)氧基)苯基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例30中的合成路线，将第二步反应原料4-碘苯酚替换为3-碘苯酚，得到标题化合物(120mg，收率：97.23％)。
MS m/z(ESI):357.3[M+H]+。
中间体制备例37：3-(5-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例32中的合成路线，将第一步反应原料1-(6-溴-1-甲基-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮替换成3-(5-溴-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(60mg，收率：96.6％)。
MS m/z(ESI):466.3[M+H]+。
中间体制备例38：3-(3-甲基-2-氧代-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例33中的合成路线，将第一步反应原料1-(6-溴-1-甲基-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮替换成3-(5-溴-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(240mg，收率：74.6％)。
MS m/z(ESI):412.2[M+H]+。
中间体制备例39：3-(1-氧代-5-(4-(哌嗪-1-基甲基)哌啶-1-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：3-(5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将3-(5-溴-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(500mg,1.47mmol)，4-(二甲氧基甲基)哌啶(477.66mg,2.94mmol)，二氯[1,3-双(2,6-二-3-戊基苯基)咪唑-2-亚基](3-氯吡啶基)合钯(119.82mg,146.99μmol)和碳酸铯(1.45g,4.41mmol)依次加入二氧六环(2mL)中，氮气置换三次，在110℃下搅拌3小时。将反应液冷却到室温，用乙酸乙酯(25mL)稀释反应液，用饱和食盐水(15mL)洗两次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(180mg，收率：28.98％)。
MS m/z(ESI):402.2[M+H]+。
第二步：1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-4-甲醛的制备
将原料3-(5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(180mg,425.95μmol)溶于四氢呋喃(2mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，在室温下搅拌2小时。将反应液浓缩，得到标题化合物(90mg，收率：56.48％)。
MS m/z(ESI):356.2[M+H]+。
第三步：4-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
将1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-4-甲醛(90mg,240.58μmol)和醋酸(31.33mg,481.17μmol)溶于DMF(2mL)中，将哌嗪-1-甲酸叔丁酯(141.50mg,721.75μmol)加入到反应体系中，在室温下搅拌30分钟，加入三乙酰氧基硼氢化钠(206.02mg,962.33μmol)，在25℃下搅拌16小时。将反应液过滤，滤液用反相柱纯化(洗脱剂：乙腈/水(0.05％甲酸)＝3/2，体积比)，得到标题化合物(70mg，收率：55.4％)。
MS m/z(ESI):526.3[M+H]+。
第四步：3-(1-氧代-5-(4-(哌嗪-1-基甲基)哌啶-1-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将4-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(70mg,126.51μmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(0.5mL)，在室温下搅拌2小时。浓缩反应液，得标题化合物(60mg，收率：97.5％)。
MS m/z(ESI):426.2[M+H]+。
中间体制备例40：3-(2-氧代-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)二氢吲哚-1-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：9-(3-(2-(烯丙氧基)-2-氧代乙基)-4-硝基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将2-(5-氟-2-硝基苯基)乙酸烯丙酯(450mg,1.79mmol)，3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(551.04mg,2.14mmol)和N,N-二异丙基乙胺(699.94mg,5.36mmol)溶于二甲基亚砜(5mL)中，在110℃下搅拌3小时。将反应液冷却到室温，用乙酸乙酯(25mL)稀释反应液，用饱和食盐水(20mL)洗两次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(800mg，收率：89.8％)。
MS m/z(ESI):474.3[M+H]+。
第二步：9-(3-(2-(烯丙氧基)-2-氧代乙基)-4-氨基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(3-(2-(烯丙氧基)-2-氧代乙基)-4-硝基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(700mg,1.40mmol)和四羟基二硼(379.15mg,4.21mmol)溶于DMF(10mL)中，然后缓慢加入4,4-联吡啶(22.19mg,140.43μmol)，在25℃下搅拌2小时。用乙酸乙酯(20mL)稀释反应液，用饱和食盐水(20mL)洗两次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(600mg，收率：77.1％)。
MS m/z(ESI):444.3[M+H]+。
第三步：9-(3-(2-(烯丙氧基)-2-氧代乙基)-4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(3-(2-(烯丙氧基)-2-氧代乙基)-4-氨基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(600mg,1.08mmol)和碳酸氢钠(272.69mg,3.25mmol)混合于DMF(6mL)中，加入3-溴哌啶-2,6-二酮(262.45mg,1.3mmol)，在80℃下反应2小时。将反应液过滤，滤液用反相柱纯化(洗脱剂：乙腈/水(0.05％甲酸)＝3/2，体积比)，得到标题化合物(600mg，收率：94.9％)。
MS m/z(ESI):555.3[M+H]+。
第四步：2-(5-(9-(叔丁氧羰基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-2-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)苯基)乙酸的制备
将9-(3-(2-(烯丙氧基)-2-氧代乙基)-4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(600mg,1.03mmol)溶于无水的DMF(10mL)中，加入1,3-二甲基巴比氨酸(480.93mg,3.08mmol)和四三苯基膦钯(237.50mg,205.53μmol)，氮气置换三次，在20℃下反应4小时。将反应液过滤，滤液用反相柱纯化(洗脱剂：乙腈/水(0.05％甲酸)＝3/2，体积比)，得到标题化合物(350mg，收率62.8％)。
MS m/z(ESI):515.3[M+H]+。
第五步：9-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氧代吲哚-5-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将2-(5-(9-(叔丁氧羰基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-2-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)苯基)乙酸(100mg,184.60μmol)溶于DMF(3mL)中，加入苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(85.90mg,221.53μmol)和N,N-二异丙基乙胺(72.30mg,553.81μmol)，在25℃下搅拌12小时。将反应液过滤，滤液用反相柱纯化(洗脱剂：乙腈/水(0.05％甲酸)＝4/3，体积比)，得到标题化合物(80mg，收率：87.3％)。
MS m/z(ESI):497.3[M+H]+。
第六步：3-(2-氧代-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)二氢吲哚-1-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将9-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氧代吲哚-5-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(80mg,153.04μmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，在25℃下反应4小时。浓缩反应液，得到标题化合物(80mg，收率：97.3％)。
MS m/z(ESI):397.3[M+H]+。
中间体制备例41：1-(2-氯-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备
第一步：9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酰基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将4-氯-3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酸(100mg,353.62μmol)和N,N-二异丙基乙胺(144.32mg,1.06mmol)和3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(100.00mg,373.48μmol)溶于DMF(3mL)中，加入苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(212.17mg,530.42μmol)，在25℃下反应3小时。用乙酸乙酯(20mL)稀释反应液，用饱和食盐水(20mL)洗两次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(150mg，收率：79.8％)。
MS m/z(ESI):505.2[M+H]+。
第二步：1-(2-氯-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备
将9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酰基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(150mg,282.18μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(1mL)，在25℃下反应4小时。浓缩反应液，得到标题化合物(125mg，收率：95.3％)。
MS m/z(ESI):405.2[M+H]+。
中间体制备例42：(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-((4-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯的制备
采用中间体制备例1中的合成路线，将第一步反应原料5-羟基嘧啶替换成4-(三氟甲基)嘧啶-5-醇，得到标题化合物(190mg，收率：76.2％)。
MS m/z(ESI):679.2[M+H]+。
中间体制备例43：3-(1-甲基-6-(4-氧代哌啶-1-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：1-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-4-酮的制备
将3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-6-溴-1-甲基-1H-吲唑(500mg,949.3μmol)、哌啶-4-酮(286mg,1.90mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(89mg,94.9μmol)、5-二叔丁基膦-1',3',5'-三苯基-1'H-[1,4']二吡唑(98mg,189.9μmol)和碳酸铯(1.25g,3.8mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，氮气置换三次，在100℃下搅拌反应12小时。浓缩反应液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝10/1，体积比)，得到标题化合物(190mg，收率：38.2％)。
MS m/z(ESI):519.2[M+H]+。
第二步：3-(1-甲基-6-(4-氧代哌啶-1-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
将1-(3-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-4-酮(190mg,362.7μmol)溶于四氢呋喃(3.5mL)和乙醇(3.5mL)的混合溶剂中，加入10％钯碳(25mg)，在氢气氛围中，在25℃下搅拌反应12小时。反应液垫硅藻土过滤，滤饼用乙醇淋洗2～3次，浓缩滤液，得到标题化合物(101mg，收率：77.7％)。
MS m/z(ESI):341.1[M+H]+。
中间体制备例44：1-(5-(4-(7-氮杂螺[3.5]壬喃-2-基)哌嗪-1-羰基)-2-氯苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备
第一步：4-(4-氯-3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
将4-氯-3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)苯甲酸(200mg,707.2μmol)、哌嗪-1-甲酸叔丁酯(166mg,848.7μmol)和N,N-二异丙基乙胺(369mg,2.83mmol)溶于DMF(4mL)，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(357mg,919.4μmol)，在25℃下搅拌反应12小时。反应液加乙酸乙酯(20mL)稀释，用饱和食盐水(10mL)洗2次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(510mg，收率：99.0％)。
MS m/z(ESI):437.2[M+H]+。
第二步：1-(2-氯-5-(哌嗪-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备
将4-(4-氯-3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(510mg,700.4μmol)溶于4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(2.5mL)，在25℃下搅拌反应2小时。浓缩反应液，得到标题化合物(258mg，收率：98.9％)。
MS m/z(ESI):337.1[M+H]+。
第三步：2-(4-(4-氯-3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的制备
将1-(2-氯-5-(哌嗪-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(497mg,692.4μmol)、2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(436mg,1.73mmol)和N,N-二异丙基乙胺(136mg,1.04mmol)溶于DMF(3.5mL)中，在室温下搅拌30分钟，加入氰基硼氢化钠(92mg,1.38mmol)，在25℃下搅拌反应5小时。反应液用乙酸乙酯(50mL)稀释，用饱和食盐水(80mL)洗2次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(167mg，收率：42.6％)。
MS m/z(ESI):560.3[M+H]+。
第四步：1-(5-(4-(7-氮杂螺[3.5]壬喃-2-基)哌嗪-1-羰基)-2-氯苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮的制备
将2-(4-(4-氯-3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(167mg,295.2μmol)溶于4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(1mL)，在25℃下搅拌反应2小时。浓缩反应液，得到标题化合物(128mg，收率：94.3％)。
MS m/z(ESI):460.2[M+H]+。
中间体制备例45：3-(1-甲基-6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例5中的合成路线，将第一步反应原料3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯替换为2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯，得到标题化合物(81mg，收率：81.2％)。
MS m/z(ESI):368.3[M+H]+。
中间体制备例46：3-(1-甲基-6-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例5中的合成路线，将第一步反应原料3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯替换为2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯，得到标题化合物(243mg，收率：98.2％)。
MS m/z(ESI):382.3[M+H]+。
中间体制备例47：3-((3-氟-4-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：9-(2-氟-4-硝基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将1,2-二氟-4-硝基苯(300mg,1.85mmol)和3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(528mg,2.03mmol)溶于四氢呋喃(3mL)中，加入N,N-二异丙基乙胺(290mg,2.22mmol)，在25℃下搅拌反应12小时。用乙酸乙酯(50mL)稀释反应液，用饱和食盐水(70mL)洗2次，分液，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1，体积比)，得到标题化合物(626mg，收率：81.8％)。
MS m/z(ESI):394.2[M+H]+。
第二步：9-(4-氨基-2-氟苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(2-氟-4-硝基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(626mg,1.51mmol)溶于甲醇(10mL)中，加入10％钯碳(184mg)，在氢气氛围中，在25℃下搅拌反应12小时。反应液垫硅藻土过滤，滤饼用甲醇淋洗2～3次，浓缩滤液，得到标题化合物(578mg，收率：99.9％)。
MS m/z(ESI):364.3[M+H]+。
第三步：9-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(4-氨基-2-氟苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(578mg,1.51mmol)、3-溴哌啶-2,6-二酮(444mg,2.27mmol)和碳酸氢钠(385mg,4.53mmol)溶于DMF(7mL)中，在80℃下搅拌反应16小时。用乙酸乙酯(60mL)稀释反应液，用饱和食盐水(50mL)洗2次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(750mg，收率：99.4％)。
MS m/z(ESI):475.3[M+H]+。
第四步：3-((3-氟-4-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮的制备
将9-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(750mg,1.50mmol)溶于4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(5mL)中，在25℃下搅拌反应12小时。浓缩反应液，得到标题化合物(350mg，收率：62.3％)。
MS m/z(ESI):375.3[M+H]+。
中间体制备例48：3-(4-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯氧基)哌啶-2,6-二酮的制备
第一步：9-(4-(苄氧基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将1-苄氧基-4-溴-苯(300mg,1.13mmol)、3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(326mg,1.24mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(105mg,112.9μmol)、2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(111mg,225.7μmol)和叔丁醇钠(332mg,3.39mmol)溶于甲苯(6mL)中，氮气置换三次，在90℃下搅拌反应12小时。浓缩反应液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1，体积比)，得到标题化合物(483mg，收率：97.0％)。
MS m/z(ESI):437.3[M+H]+。
第二步：9-(4-羟基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(4-(苄氧基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(483mg,1.10mmol)溶于四氢呋喃(2mL)和乙醇(10mL)的混合溶剂中，加入10％钯碳(117mg)，在氢气氛围中，在25℃下搅拌反应12小时。反应液垫硅藻土过滤，滤饼用乙醇淋洗2～3次，浓缩滤液，得到标题化合物(360mg，收率：90.1％)。
MS m/z(ESI):347.3[M+H]+。
第三步：9-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将9-(4-羟基苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(360mg,987.1μmol)溶于DMF(9mL)中，加入氢化钠(59mg,1.48mmol)，在室温下搅拌30分钟，加入3-溴哌啶-2,6-二酮(290mg,1.48mmol)，在25℃下搅拌反应3小时。向体系中加入饱和氯化铵水溶液(10mL)淬灭反应，用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，有机相用饱和食盐水(100mL)洗2次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3/1，体积比)，得到标题化合物(94mg，收率：20.6％)。
MS m/z(ESI):458.2[M+H]+。
第四步：3-(4-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯氧基)哌啶-2,6-二酮的制备
将9-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(94mg,203.4μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，加入4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液(1mL)，在25℃下搅拌反应2小时。浓缩反应液，得到标题化合物(76mg，收率：90.1％)。
MS m/z(ESI):358.2[M+H]+。
中间体制备例49：3-(3-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯氧基)哌啶-2,6-二酮的制备
采用中间体制备例48中的合成路线，将第一步反应原料1-苄氧基-4-溴苯替换为1-苄氧基-3-溴苯，得到标题化合物(44mg，收率：99.4％)。
MS m/z(ESI):358.2[M+H]+。
中间体制备例50：(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯的制备
采用中间体制备例1中的合成路线，将第二步反应原料5-羟基嘧啶替换为四氢吡喃-4-醇，得到标题化合物(55mg，收率：63％)。
MS m/z(ESI):697.3[M+H]+。
中间体制备例51：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
第一步：(S)-3-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-(1,4-氧氮杂环-4-基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺环[苯并[d]异恶唑-7,1'-环己烷]-2'-酮的制备
将(7S)-3-[4-氯-6-[[1-(羟甲基)环丙基]甲氧基]嘧啶-2-基]螺[5,6-二氢-4H-1,2-苯并恶唑-7,2'-环己烷]-1'-酮(150mg,341μmol)、1,4-氧氮杂环庚烷(53mg,511.5μmol)和碳酸铯(168mg,511.5μmol)溶于乙腈(5mL)中，在80℃下搅拌反应2小时。浓缩反应液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝3/1，体积比)，得到标题化合物(164mg，收率：99.8％)。
MS m/z(ESI):483.3[M+H]+。
第二步：(S)-2-氨基-3'-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-(1,4-氧氮杂环-4-基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈的制备
将(S)-3-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-(1,4-氧氮杂环-4-基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺环[苯并[d]异恶唑-7,1'-环己烷]-2'-酮(164mg,340.4μmol)、乙酸铵(106mg,1.36mmol)和硫磺(44mg,1.36mmol)溶于乙醇(10mL)中，在60℃下搅拌反应15分钟，加入丙二腈(114mg,1.70mmol)的乙醇(2mL)溶液，在80℃下搅拌反应16小时。浓缩反应液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(166mg，收率：86.5％)。
MS m/z(ESI):563.2[M+H]+。
第三步：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-(羟基甲基)环丙基)甲氧基)-6-(1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-2-氨基-3'-(4-((1-(羟甲基)环丙基)甲氧基)-6-(1,4-氧氮杂环-4-基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(166mg,294.3μmol)溶于四氢呋喃(4mL)中，加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(70mg,588.6μmol)，在25℃下搅拌反应2小时。浓缩反应液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝2/1，体积比)，得到标题化合物(98mg，收率：53.8％)。
MS m/z(ESI):618.3[M+H]+。
第四步：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-(羟基甲基)环丙基)甲氧基)-6-(1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(98mg,158.4μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入戴斯-马丁氧化剂(106mg,237.6μmol)，在25℃下搅拌反应3小时。浓缩反应液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝3/1，体积比)，得到标题化合物(48mg，收率：49.7％)。
MS m/z(ESI):616.3[M+H]+。
中间体制备例52：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环戊基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
第一步：(S)-3-(4-氯-6-((1-(羟甲基)环戊基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异噁唑-7,1'-环己烷]-2'-酮的制备
将(S)-3-(4,6-二氯嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺并[苯并[d]异噁唑-7,1'-环己烷]-2'-酮(0.5g,1.4mmol)溶于DMF(5mL)中，加入1,1-环戊烷二甲醇(278mg,2.14mmol)和碳酸铯(1.16g,3.56mmol)，在室温下搅拌2小时。加入水(20mL)稀释反应液，用乙酸乙酯萃取(20mL)三次，用饱和食盐水(50mL)洗涤有机相，用无水硫酸钠干燥有机相，并减压浓缩。将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝3/1，体积比)，得到标题化合物(0.42g，收率：78.7％)。
MS m/z(ESI):446.2[M+H]+。
第二步：(S)-3-(4-((1-(羟甲基)环戊基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异噁唑-7,1'-环己烷]-2'-酮的制备
将(S)-3-(4-氯-6-((1-(羟甲基)环戊基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异噁唑-7,1'-环己烷]-2'-酮(0.42g,0.94mmol)、5-羟基嘧啶(126mg,1.32mmol)、三乙烯二胺(16.2mg,0.14mmol)和碳酸钾(168.4mg,1.22mmol)悬着于乙腈(10mL)中，在60℃下搅拌16小时。冷却反应液到室温，将反应液倒入水(50mL)中，析出固体，过滤，收集并干燥滤饼，得到标题化合物(0.46g，收率：95.8％)。
MS m/z(ESI):506.2[M+H]+。
第三步：(S)-2-氨基-3'-(4-((1-(羟甲基)环戊基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3-腈的制备
将(S)-3-(4-((1-(羟甲基)环戊基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5,6-二氢-4H-螺[苯并[d]异噁唑-7,1'-环己烷]-2'-酮(0.46g,0.91mmol)、醋酸铵(0.21g,2.73mmol)和硫磺(87mg,2.73mmol)溶于乙醇(10mL)中，在60℃下搅拌15分钟，然后滴加丙二腈(0.24g,3.64mmol)的乙醇(5mL)溶液，在80℃下搅拌16小时。将反应液过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝3/2，体积比)，得到标题化合物(0.35g，收率：66.1％)。
MS m/z(ESI):586.2[M+H]+。
第四步：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-(羟甲基)环戊基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-2-氨基-3'-(4-((1-(羟甲基)环戊基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3-腈(0.35g,0.6mmol)溶于四氢呋喃(5mL)中，加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(178mg,1.5mmol)，在室温下搅拌2小时。浓缩反应液，得到标题化合物(0.38g，收率：99.5％)。
MS m/z(ESI):641.2[M+H]+。
第五步：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环戊基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-(羟甲基)环戊基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(0.38g,0.59mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入戴斯-马丁氧化剂(0.5g,1.18mmol)，在25℃下搅拌反应3小时。浓缩反应液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝3/1，体积比)，得到标题化合物(162mg，收率：42.7％)。
MS m/z(ESI):639.3[M+H]+。
中间体制备例53：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((4-环丙基嘧啶-5-基)氧基)-6-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
采用中间体制备例52中的合成路线，将第一步反应原料1,1-环戊烷二甲醇替换成1,1-环丙烷二甲醇，将第二步反应原料5-羟基嘧啶替换成4-环丙基嘧啶-5-醇，得到标题化合物(77mg，收率：55.3％)。
MS m/z(ESI):651.2[M+H]+。
中间体制备例54：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-((4-异丙基嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
采用中间体制备例52中的合成路线，将第一步反应原料1,1-环戊烷二甲醇替换成1,1-环丙烷二甲醇，将第二步反应原料5-羟基嘧啶替换成4-异丙基嘧啶-5-醇，得到标题化合物(55mg，收率：68.5％)。
MS m/z(ESI):653.2[M+H]+。
中间体制备例55：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((4-乙基嘧啶-5-基)氧基)-6-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
采用中间体制备例52中的合成路线，将第一步反应原料1,1-环戊烷二甲醇替换成1,1-环丙烷二甲醇，将第二步反应原料5-羟基嘧啶替换成4-乙基嘧啶-5-醇，得到标题化合物(101mg，收率：53.2％)。
MS m/z(ESI):639.2[M+H]+。
中间体制备例56：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((3,3-二氟-1-甲酰基环丁基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
采用中间体制备例52中的合成路线，将第一步反应原料1,1-环戊烷二甲醇替换成(3,3-二氟环丁烷-1,1-二基)二甲醇，得到标题化合物(66mg，收率：49.3％)。
MS m/z(ESI):661.2[M+H]+。
中间体制备例57：(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丁基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
采用中间体制备例52中的合成路线，将第一步反应原料1,1-环戊烷二甲醇替换成1,1-环丁烷二甲醇，得到标题化合物(66mg，收率：49.3％)。
MS m/z(ESI):625.2[M+H]+。
中间体制备例58：N'-((4S)-3-氰基-3'-(4-((2,2-二氟-1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
采用中间体制备例52中的合成路线，将第一步反应原料1,1-环戊烷二甲醇替换成(2,2-二氟环丙烷-1,1-二基)二甲醇，得到标题化合物(42mg，收率：41.2％)。
MS m/z(ESI):647.2[M+H]+。
合成实施例
实施例1：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物5)的制备
第一步：N'-((4S)-3-氰基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮(130mg,252.59μmol)和(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯(205mg,252.59μmol)溶于乙腈(5mL)中，依次加入无水碳酸钾(129mg,884.07μmol)和碘化钾(49mg,277.85μmol)，在65℃下反应6小时。反应液过滤除去固体，滤液减压浓缩，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1，体积比)，得到标题化合物(50mg，收率：19.7％)。
MS m/z(ESI):990.2[M+H]+。
第二步：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈的制备
将N'-((4S)-3-氰基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(50mg,49.99μmol)溶于四氢呋喃(2mL)中，加入2M稀盐酸(1mL)，在60℃下反应2小时。反应液减压浓缩，残留物经过高效液相色谱法纯化(条件2)，得到标题化合物(7mg,收率:14.6％)
MS m/z(ESI):935.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.46(d,J＝12.0Hz,1H),6.94(s,2H),6.90(d,J＝12.0Hz,1H),6.82(s,1H),6.77(s,1H),4.39(s,2H),4.26-4.22(m,1H),3.87(s,3H),3.19(s,4H),2.69-2.54(m,4H),2.40(s,4H),2.34-2.13(m,6H),1.98-1.73(m,8H),1.53(s,4H),1.45(s,4H),0.69(s,2H),0.44(s,2H)。
实施例2：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((2-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基))-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物6)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(6-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(30mg，收率：18.4％)。
MS m/z(ESI):989.2[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ9.12(s,1H),8.84(s,2H),7.68(d,J＝8.0Hz,1H),7.39(s,1H),7.11(d,J＝8.0Hz,1H),6.67(s,1H),4.62(s,1H),4.38-4.34(m,1H),4.13(d,J＝12.0Hz,1H),4.02(s,3H),3.42-3.34(m,3H),3.24-3.07(m,4H),2.99-2.95(m,2H),2.79-2.73(m,2H),2.68-2.58(m,4H),2.48-2.41(m,2H),2.34-2.25(m,3H),2.09-1.85(m,19H),1.76-1.70(m,1H),0.97-0.86(m,3H),0.78-0.72(m,1H)。
实施例3：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((4-(2-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基))-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)乙酰基)哌嗪-1-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物8)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-甲基-6-(1-(2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(1.37mg，收率：1.9％)。
MS m/z(ESI):992.5[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.18(s,1H),8.91(s,2H),7.68(d,J＝8.0,1H),7.42(s,1H),7.06(d,J＝8.0,1H),6.95(s,2H),6.79(s,1H),4.48-4.32(m,6H),3.99(s,3H),3.62-3.56(s,6H),3.16-2.98(s,6H),2.66-2.61(m,4H),2.38-2.31(m,2H),2.20-1.71(m,16H),0.94-0.74(m,4H)。
实施例4：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)-[1,4'-联哌啶]-1'-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物3)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(5-([1,4'-联哌啶]-4-基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(14mg，收率：24.7％)。
MS m/z(ESI):950.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.16(s,1H),8.92(s,2H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.47(s,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,1H),6.94(s,2H),6.77(s,1H),5.10(dd,J＝13.2,5.2Hz,1H),4.57-4.20(m,5H),3.04-2.83(m,5H),2.76-2.55(m,5H),2.43-2.1.53(m,23H),1.35(d,J＝12.4Hz,2H),0.69(s,2H),0.42(d,J＝6.0Hz,2H)。
实施例5：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((2-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物4)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(5-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(9mg，收率：13.6％)。
MS m/z(ESI):990.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.63(d,J＝6.8Hz,1H),7.49(s,1H),7.43-7.22(m,1H),6.94(s,2H),6.76(s,1H),5.09(dd,J＝11.2,5.2Hz,1H),4.49-4.18(m,4H),2.92(dd,J＝12.0,4.4Hz,3H),2.69-2.53(m,6H),2.46-2.13(m,6H),2.04-1.59(m,18H),1.55-1.35(m,7H),0.68(s,2H),0.42(s,2H)。
实施例6：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((4-(2-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-1-基)乙酰基)哌嗪-1-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物7)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-氧代-5-(1-(2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙基)哌啶-4-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(3mg，收率：9.0％)。
MS m/z(ESI):993.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.64(d,J＝7.8Hz,1H),7.48(s,1H),7.37(d,J＝1.6Hz,1H),6.94(s,2H),6.78(s,1H),5.10(dd,J＝13.2,5.2Hz,1H),4.48-4.36(m,3H),4.28(d,J＝7.2Hz,1H),3.55(s,3H),3.15(s,2H),2.91(dd,J＝11.2,9.6Hz,4H),2.76-2.55(m,4H),2.47-2.05(m,10H),2.02-1.56(m,13H),1.30-1.17(m,1H),0.71(s,2H),0.46(s,2H)。
实施例7：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物9)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-氧代-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(20mg，收率：23.5％)。
MS m/z(ESI):936.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.49(d,J＝9.2Hz,1H),7.08-6.91(m,4H),6.76(s,1H),5.04(dd,J＝13.2,5.2Hz,1H),4.36(d,J＝12.8Hz,2H),4.31-4.12(m,2H),3.27(d,J＝6.4Hz,4H),2.90(dd,J＝13.6,5.6Hz,1H),2.65-2.54(m,3H),2.38(t,J＝5.6Hz,4H),2.34-2.18(m,6H),2.03-1.84(m,4H),1.86-1.73(m,4H),1.46(dd,J＝17.6,5.6Hz,8H),0.69(s,2H),0.44(s,2H)。
实施例8：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-[1,4'-联哌啶]-1'-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物2)制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(6-([1,4'-联哌啶]-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(2mg，收率：37.2％)。
MS m/z(ESI):984.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ9.08(s,1H),8.84(s,2H),7.63(d,J＝8.4Hz,1H),7.34(s,1H),7.08(d,J＝8.4Hz,1H),6.59(s,1H),4.62-4.33(m,5H),4.00(s,3H),3.21-3.08(m,3H),2.81-2.16(m,12H),2.10-1.54(m,14H),1.33-1.28(m,4H),0.90(t,J＝6.8Hz,1H),0.73(s,2H),0.51(s,2H)。
实施例9：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((4-((4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶)-1-基)甲基)哌啶-1-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲氧基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物1)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-氧代-5-(1-(哌啶-4-基甲基)哌啶-4-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮，将第一步反应原料(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯替换为(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-甲氧基嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯，得到标题化合物(3.7mg，收率：3.9％)。
MS m/z(ESI):900.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ8.51(s,1H),7.75(d,J＝8.0Hz,1H),7.53-7.47(m,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,1H),6.24(s,1H),5.16(dd,J＝13.2,5.2Hz,1H),4.84-4.80(m,1H),4.63(s,1H),4.48(t,J＝17.2Hz,2H),4.09(dd,J＝11.2,2.4Hz,1H),4.06(d,J＝1.2Hz,3H),3.67-3.50(m,2H),3.25(d,J＝3.2Hz,1H),3.18-3.15(m,1H),3.05-2.97(m,1H),2.97-2.79(m,5H),2.78-2.75(m,1H),2.60(t,J＝5.2Hz,2H),2.49(dd,J＝13.2,4.8Hz,1H),2.46-2.37(m,2H),2.35-2.24(m,2H),2.21-1.95(m,11H),1.95-1.89(m,5H),1.67-1.51(m,2H),1.36(d,J＝6.8Hz,1H),0.97-0.90(m,2H),0.87-0.72(m,2H)。
实施例10：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物26)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-甲基-6-(3-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(10mg，收率：18.6％)。
MS m/z(ESI):934.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.88(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.58(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(s,1H),7.02(d,J＝8.0Hz,1H),6.93(s,4H),6.77(s,1H),4.43-4.30(m,4H),3.98(s,3H),2.89-2.52(m,6H),2.45-2.32(m,2H),2.00-1.62(m,18H),1.32-1.18(m,6H),0.69(s,2H),0.44(s,2H)。
实施例11：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物42)的制备
第一步：N'-((4S)-3-氰基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(95mg.177μmol)和3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮(80mg,177μmol)溶于二甲基亚砜(3mL)中，加入钛酸四乙酯(50mg,177μmol)，在25℃下反应30分钟，加入三乙酰氧基硼氢化钠(75mg,354μmol)，在25℃反应1小时。反应液过滤除去固体，将滤液通过反相柱层析纯化(洗脱剂：水(0.05％ TFA)/乙腈＝3/7，体积比)，得到标题化合物(80mg，收率：48.1％)。
MS m/z(ESI):928.3[M+H]+。
第二步：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈的制备
将N'-((4S)-3-氰基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(70mg,74μmol)溶于四氢呋喃(3mL)中，加入2M稀盐酸(1mL)，在65℃下反应3小时。浓缩反应液，残留物经过高效液相色谱法纯化(条件2)，得到标题化合物(10mg，收率：14.5％)。
MS m/z(ESI):873.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.86(s,1H),8.25(s,1H),7.44(d,J＝12.0Hz,1H),7.13(d,J＝8.0Hz,1H),6.96(s,2H),6.88(s,1H),4.35(s,2H),4.28-4.24(m,1H),3.93(s,3H),3.11-3.06(m,2H),3.02-2.97(m,4H),2.65-2.58(m,2H),2.56-2.52(m,2H),2.45(s,3H),2.42-2.36(m,4H),2.33-2.30(m,2H),2.16-2.10(m,1H),2.04-1.92(m,4H),1.88-1.80(m,4H),1.59-1.53(m,4H),1.49-1.43(m,4H),0.68-0.64(m,2H),0.44-0.40(m,2H)。
实施例12：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物30)的制备
第一步：N'-((4S)-3-氰基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(50mg.81.9μmol)和3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮(33.9mg,81.9μmol)溶于二甲基亚砜(2mL)中，加入钛酸四乙酯(37.3mg,163.8μmol)，在25℃下反应30分钟，加入三乙酰氧基硼氢化钠(34.7mg,163.8μmol)，在25℃反应5小时。反应液过滤除去固体，将滤液通过反相柱层析纯化(洗脱剂：水(0.05％ TFA)/乙腈＝6/4，体积比)，得到标题化合物(45mg，收率：54.5％)。
MS m/z(ESI):1008.4[M+H]+。
第二步：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈的制备
将N'-((4S)-3-氰基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(45mg,44.6umol)溶于四氢呋喃(3mL)中，加入2M稀盐酸(1mL)，在65℃下反应3小时。浓缩反应液，残留物经过高效液相色谱法纯化(条件1)，得到标题化合物(15mg，收率：35.3％)。
MS m/z(ESI):953.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.86(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.42(d,J＝12.0Hz,1H),7.13(d,J＝8.0Hz,1H),6.95(s,2H),6.78(s,1H),4.40(dd,J＝12.0,8.0Hz,2H),4.28-4.24(m,1H),3.93(s,3H),3.00(s,4H),2.68-2.53(m,4H),2.40-1.48(m,26H),0.69(s,2H),0.44(s,2H)。
实施例13：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-((4-甲基嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物43)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，将反应原料(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯替换为(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-((4-甲基嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯，得到标题化合物(6mg，收率：6.3％)。
MS m/z(ESI):967.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.85(s,1H),9.01(s,1H),8.73(s,1H),7.42(d,J＝12.0Hz,1H),7.12(d,J＝8.0Hz,1H),6.93(s,2H),6.76(s,1H),4.38(dd,J＝12.0,8.0Hz,2H),4.28-4.24(m,1H),3.93(s,3H),3.00(s,4H),2.66-2.54(m,4H),2.41-1.47(m,29H),0.69(s,2H),0.44(s,2H)。
实施例14：(4S)-2-氨基-3'-(4-((4,6-二甲基嘧啶-5-基)氧基)-6-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物50)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，将反应原料(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯替换为(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-((4,6-二甲基嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯，得到标题化合物(5mg，收率：9.8％)。
MS m/z(ESI):981.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.86(s,1H),8.85(s,1H),7.42(d,J＝12.0Hz,1H),7.12(d,J＝8.0Hz,1H),6.93(s,2H),6.77(s,1H),4.39(dd,J＝12.0,8.0Hz,2H),4.28-4.24(m,1H),3.93(s,3H),3.00(s,4H),2.60-2.52(m,3H),2.48-2.21(m,15H),2.18-1.47(m,18H),0.69(s,2H),0.44(s,2H)。
实施例15：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((6-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-2-氮杂螺[3.3]庚-2-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物18)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(6-(1-(2-氮杂螺[3.3]庚-6-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(13mg，收率：7.1％)。
MS m/z(ESI):961.5[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.90(s,1H),9.90(s,1H),9.19(s,1H),8.92(s,2H),7.69(d,J＝8.0Hz,1H),7.40(s,1H),7.04(d,J＝8.0Hz,1H),6.95(s,1H),6.83(s,1H),4.40-4.29(m,4H),4.28-4.15(m,4H),3.98(s,3H),3.66-3.58(m,2H),3.32-3.30(m,1H),3.05-2.83(m,4H),2.78-2.56(m,6H),2.41-2.31(m,2H),2.22-1.72(m,16H),0.86-0.74(m,4H)。
实施例16：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物28)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(3-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(12mg，收率：11.4％)。
MS m/z(ESI):881.2[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),9.15(s,1H),8.90(s,2H),7.13(t,J＝8.0Hz,1H),6.92(s,2H),6.83-6.79(m,1H),6.77-6.74(m,2H),6.57(d,J＝8.0Hz,1H),4.42-4.35(m,2H),3.76-3.72(m,1H),3.13-3.04(m,4H),2.65-2.55(m,2H),2.42-2.34(m,4H),2.34-2.30(m,2H),2.29-2.08(m,3H),2.05-1.60(m,11H),1.52-1.46(m,4H),1.44-1.38(m,4H),0.72-0.64(m,2H),0.46-0.40(m,2H)。
实施例17：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氧代-2,3-二氢苯并[d]恶唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物35)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(2-氧代-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯并[d]恶唑-3(2H)-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(12mg，收率：11.4％)。
MS m/z(ESI):938.3[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.18(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.08-7.03(m,2H),6.94(s,2H),6.78-6.74(m,2H),5.31-5.26(m,1H),4.41-4.35(m 2H),3.09-3.01(m,4H),2.89-2.82(m,1H),2.72-2.59(m,3H),2.47-2.41(m,4H),2.37(s,2H),2.33-2.06(m,4H),1.99-1.73(m,8H),1.54-1.48(m,4H),1.47-1.41(m,4H),0.72-0.66(m,2H),0.48-0.42(m,2H)。
实施例18：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((7-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-2-氮杂螺[3.5]壬-2-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物16)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(6-(1-(2-氮杂螺[3.5]壬-7-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(2.1mg，收率：1.4％)。
MS m/z(ESI):989.5[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.91(s,1H),9.15(s,1H),8.79(d,J＝8.0Hz,2H),7.68-7.63(m,1H),7.45(s,1H),7.06(d,J＝8.0Hz,1H),6.95(s,2H),6.84(s,1H),4.44-4.31(m,4H),4.01-3.98(m,1H),3.96(s,3H),3.90-3.85(m,2H),3.62-3.60(m,1H),3.48-3.46(m,2H),3.20-3.16(m,2H),3.08-2.98(m,4H),2.75-2.71(m,1H),2.63-2.57(m,2H),2.44-2.38(m,3H),2.18-2.08(m,6H),1.87-1.71(m,15H),0.88(s,4H)。
实施例19：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(4-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物17)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(6-(1-(3-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(2.0mg，收率：1.2％)。
MS m/z(ESI):1017.6[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.91(s,1H),9.19(s,1H),8.92(s,2H),7.68(d,J＝8.0Hz,1H),7.40(s,1H),7.04(d,J＝8.0Hz,1H),6.96(s,2H),6.75(s,1H),4.45-4.32(m,4H),3.99(s,3H),3.60-3.50(m,5H),3.20-3.02(m,8H),2.76-2.72(m,1H),2.64-2.58(m,2H),2.46-2.44(m,1H),2.38-2.35(m,1H),2.20-2.07(m,7H),1.86-1.62(m,14H),1.52-1.43(m,4H),0.94-0.90(m,2H),0.84-0.80(m,2H)。
实施例20：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((4-((1-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物10)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-甲基-6-(4-(哌嗪-1-基甲基)哌啶-1-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(36mg，收率：28.6％)。
MS m/z(ESI):964.5[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.18(s,1H),8.92(s,2H),7.51(d,J＝8.0Hz,1H),6.94(d,J＝8.0Hz,2H),6.89(s,1H),6.78(s,1H),4.43-4.34(m,2H),4.28-4.24(m,1H),3.90(s,3H),3.84-3.78(m,2H),2.97-2.89(m,2H),2.82-2.74(m,4H),2.65-2.54(m,4H),2.46-2.39(m,2H),2.33-2.23(m,2H),2.22-2.12(m,3H),2.02-1.67(m,14H),1.38-1.22(m,5H),0.84-0.76(m,2H),0.69-0.58(m,2H)。
实施例21：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-乙基-5-氟-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物46)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-乙基-5-氟-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(35mg，收率：26.8％)。
MS m/z(ESI):967.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.16(s,1H),8.91(s,2H),7.42(d,J＝12.0Hz,1H),7.15(d,J＝8.0Hz,1H),6.95(s,2H),6.77(s,1H),4.43-4.25(m,5H),3.00(s,4H),2.65-2.55(m,3H),2.46-2.41(m,4H),2.37-2.32(m,3H),2.27-2.09(m,3H),2.02-1.74(m,9H),1.60-1.55(m,4H),1.52-1.46(m,4H),1.33(t,J＝8.0Hz,3H),0.72-0.68(m,2H),0.48-0.44(m,2H)。
实施例22：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物31)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(2,6-二氟-4-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(8mg，收率：33.9％)。
MS m/z(ESI):917.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.92(s,1H),9.22(s,1H),8.98(s,2H),7.49(d,J＝12.4Hz,1H),7.19(d,J＝7.2Hz,1H),6.99(s,2H),6.83(s,1H),4.50-4.31(m,4H),4.00(s,3H),3.08-2.97(m,3H),2.83-2.60(m,4H),2.57-1.80(m,14H),1.75-1.57(m,9H),0.77(s,2H),0.53(s,2H)。
实施例23：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物32)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯替换为(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯，将反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(3-甲基-2-氧代-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(1mg，收率：10.6％)。
MS m/z(ESI):857.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.06(s,1H),8.64(s,1H),7.04-6.87(m,4H),6.81(s,1H),6.62(d,J＝8.4Hz,1H),5.35-5.25(m,1H),4.37(s,2H),3.20-3.02(m,8H),2.71-2.65(m,5H),2.42-2.31(m,5H),2.04-1.85(m,10H),1.52-1.42(m,9H),0.69(s,2H),0.43(s,2H)。
实施例24：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-((4-甲基吡啶-3-基)氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物36)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯替换为(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-((4-甲基吡啶-3-基)氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯，得到标题化合物(3mg，收率：20.3％)。
MS m/z(ESI):948.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.86(s,1H),8.40(d,J＝6.0Hz,2H),7.48-7.43(m,2H),7.11-6.71(m,4H),6.62(s,1H),4.39-4.33(m,2H),4.26-4.22(m,1H),4.15-4.11(m,3H),3.87(s,3H),3.18-3.16(m,3H),2.71-2.54(m,3H),2.47-1.67(m,18H),1.71-1.42(m,8H),1.23(s,2H),0.68(s,2H),0.43(s,2H)。
实施例25：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-((4-甲基吡啶-3-基)氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物39)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯替换为(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-((4-甲基吡啶-3-基)氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯，将反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(1.5mg，收率：7.6％)。
MS m/z(ESI):966.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.88(s,1H),8.42(d,J＝6.4Hz,2H),7.76-7.28(m,2H),7.14(d,J＝7.2Hz,1H),6.95(s,2H),6.63(s,1H),4.42-4.26(m,3H),3.95(s,3H),3.01(s,4H),2.69-2.60(m,4H),2.41-2.33(m,8H),2.21-1.76(m,13H),1.58-1.48(m,8H),0.70(s,2H),0.45(s,2H)。
实施例26：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯氧基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物38)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(4-((3-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)氧基)苯基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(22mg，收率：39％)。
MS m/z(ESI):896.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),9.15(s,1H),8.90(s,2H),7.09(d,J＝8.4Hz,2H),7.00-6.81(m,4H),6.76(s,1H),4.41-4.29(m,3H),3.78-3.74(m,1H),2.73-2.55(m,2H),2.41-1.71(m,20H),1.62-1.09(m,12H),0.68(s,2H),0.43(s,2H)。
实施例27：(4S)-3'-(4-((8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)氧基)-6-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-2-氨基-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物47)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯替换为(1-(((6-((8-氧杂双环[3.2.1]辛-3-基)氧基)-2-((S)-3-氰基-2-(二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯，将反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(4mg，收率：27％)。
MS m/z(ESI):985.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.86(s,1H),7.42(d,J＝12.4Hz,1H),7.12(d,J＝7.2Hz,1H),6.97(s,2H),6.29(s,1H),5.54-5.41(m,1H),4.43(s,2H),4.43-4.28(m,3H),3.93(s,3H),3.12-2.99(m,5H),2.71-2.58(m,4H),2.43-2.23(m,7H),2.21-1.74(m,15H),1.69-1.43(m,9H),1.25-1.22(m,2H),0.65(s,2H),0.41(s,2H)。
实施例28：(S)-2-氨基-3'-(4-((1-((2-(4-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物20)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为1-(6-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮，得到标题化合物(5mg，收率：17.6％)。
MS m/z(ESI):990.5[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.55(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.53(d,J＝8.4Hz,1H),7.46(s,1H),7.03(d,J＝8.8Hz,1H),6.95(s,2H),6.76(s,1H),4.37(s,2H),3.96(s,3H),3.90(t,J＝6.8Hz,2H),2.91(d,J＝6.4Hz,2H),2.75(t,J＝6.8Hz,2H),2.70-2.57(m,3H),2.38-2.15(m,4H),2.03-1.59(m,22H),1.55-1.38(m,5H),0.71-0.65(m,2H),0.42(s,2H)。
实施例29：(S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物12)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为1-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮，得到标题化合物(7mg，收率：14.8％)。
MS m/z(ESI):936.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.51(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.42(d,J＝9.2Hz,1H),6.94(s,2H),6.90(d,J＝9.2Hz,1H),6.79(d,J＝13.2Hz,2H),4.39(s,2H),3.88(d,J＝6.4Hz,5H),3.21(s,6H),2.79-2.64(m,2H),2.41(s,5H),2.34(s,2H),1.97(d,J＝10.4Hz,4H),1.86-1.75(m,4H),1.68(s,1H),1.53(s,4H),1.46(s,4H),0.73-0.66(m,2H),0.49 -0.42(m,2H)。
实施例30：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((2-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物27)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-甲基-6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(0.97mg，收率：5.4％)。
MS m/z(ESI):907.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.84(s,1H),9.15(d,J＝2.4Hz,1H),8.91(s,2H),7.46(d,J＝8.8Hz,1H),6.94(s,2H),6.78(s,1H),6.39-6.28(m,2H),4.38(d,J＝11.2Hz,2H),4.23(dd,J＝9.2,5.2Hz,1H),3.83(s,2H),3.64-3.52(m,4H),2.65-2.55(m,4H),2.36-2.09(m,5H),2.07-1.88(m,2H),1.87-1.64(m,11H),1.24(s,4H),0.89-0.81(m,1H),0.71(s,2H),0.45(s,2H)。
实施例31：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((2-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物25)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-甲基-6-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(8mg，收率：15.4％)。
MS m/z(ESI):921.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.84(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.44(d,J＝8.8Hz,1H),6.94(s,2H),6.77(s,1H),6.56-6.56(m,1H),6.36-6.29(m,1H),4.41(s,2H),4.22(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),3.83(s,3H),3.14(s,2H),2.81-2.54(m,5H),2.42-2.30(m,5H),2.30-2.10(m,3H),2.07-1.87(m,2H),1.86-1.62(m,11H),1.54(s,4H),0.70(s,2H),0.45(s,2H)。
实施例32：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-甲氧基嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物37)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯替换为(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺环)[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-甲氧基嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯，将反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(8mg，收率：9.4％)。
MS m/z(ESI):889.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.85(s,1H),7.42(d,J＝12.4Hz,1H),7.12(d,J＝7.2Hz,1H),6.95(s,2H),6.33(s,1H),4.51-4.17(m,3H),3.95(d,J＝14.4Hz,6H),3.15-2.94(m,5H),2.80-2.54(m,5H),2.45-2.19(m,4H),2.18-1.91(m,6H),1.85(d,J＝5.6Hz,3H),1.52(d,J＝9.2Hz,8H),1.30-1.21(m,3H),0.67(s,2H),0.42(s,2H)。
实施例33：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯氧基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物33)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(3-((3-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)氧基)苯基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(7mg，收率：14.9％)。
MS m/z(ESI):896.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.82(s,1H),9.15(s,1H),8.90(s,2H),7.20(t,J＝8.0Hz,1H),6.93(s,2H),6.86-6.72(m,4H),4.48-4.25(m,3H),3.80(dd,J＝11.2,4.8Hz,1H),2.71-2.57(m,2H),2.43-2.11(m,9H),2.07-1.86(m,4H),1.78(d,J＝11.6Hz,5H),1.67-1.31(m,12H),1.22(d,J＝8.4Hz,2H),0.68(s,2H),0.43(s,2H)。
实施例34：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((2-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物21)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(5-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(6mg，收率：7.9％)。
MS m/z(ESI):1005.5[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.09(s,1H),9.16(s,1H),8.91(s,2H),7.10(s,1H),7.02-6.85(m,4H),6.76(s,1H),5.33(dd,J＝12.4,5.6Hz,1H),4.37(s,2H),3.09-2.83(m,3H),2.77-2.58(m,3H),2.44-2.15(m,3H),2.07-1.87(m,6H),1.89-1.60(m,12H),1.49(d,J＝13.2Hz,6H),1.23(d,J＝7.6Hz,5H),1.04-0.95(m,3H),0.90-0.77(m,2H),0.69(s,2H),0.44(s,2H)。
实施例35：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物13)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(3-甲基-2-氧代-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(30mg，收率：21.2％)。
MS m/z(ESI):951.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.06(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),6.99-6.87(m,3H),6.86-6.73(m,2H),6.62(dd,J＝8.8Hz,2.4Hz,1H),5.28(dd,J＝12.8,5.6Hz,1H),4.44-4.33(m,2H),3.29(s,3H),3.04(d,J＝6.4Hz,4H),2.96-2.79(m,1H),2.74-2.53(m,4H),2.44-2.28(m,6H),2.30-2.15(m,1H),2.05-1.60(m,8H),1.60-1.46(m,10H),0.69(s,2H),0.44(s,2H)。
实施例36：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((4-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物11)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-氧代-5-(4-(哌嗪-1-基甲基)哌啶-1-基)异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(5mg，收率：17.6％)。
MS m/z(ESI):965.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.56-7.44(m,1H),7.13-6.89(m,4H),6.76(s,1H),5.04(dd,J＝13.2,5.2Hz,1H),4.44-4.26(m,3H),4.18(d,J＝16.8Hz,1H),3.85(d,J＝12.4Hz,2H),3.00-2.71(m,4H),2.70-2.52(m,5H),2..42-2.16(m,9H),2.09(d,J＝6.4Hz,2H),2.03-1.88(m,4H),1.78-1.65(m,9H),1.25-1.05(m,2H),0.68(s,2H),0.43(s,2H)。
实施例37：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氧代吲哚-5-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物44)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(2-氧代-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)二氢吲哚-1-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(1.7mg，收率：12.0％)。
MS m/z(ESI):936.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ9.10(s,1H).8.88-8.81(m,2H),7.06(d,J＝2.4Hz,1H),6.87(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.78(d,J＝8.8Hz,1H),6.61(d,J＝1.2Hz,1H),5.17(d,J＝12.0Hz,1H),4.54-4.34(m,3H),3.61-3.42(m,1H),3.18-2.99(m,4H),2.90-2.85(m,1H),2.82-2.66(m,2H),2.61-2.28(m,8H),2.16-1.80(m,6H),1.79-1.67(m,1H),1.67-1.49(m,8H),1.29(d,J＝7.2Hz,4H),1.00-0.82(m,1H),0.73(s,2H),0.52(s,2H)。
实施例38：(S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酰)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物15)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为1-(2-氯-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮，得到标题化合物(1.75mg，收率：4.6％)。
MS m/z(ESI):944.3[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ9.11(s,1H),8.83(s,2H),8.52(s,1H),7.67(d,J＝8.4Hz,1H),7.54(d,J＝2.0Hz,1H),7.43(d,J＝8.4Hz,1H),6.67(d,J＝6.0Hz,1H),5.10(s,1H),4.68-4.55(m,1H),4.18-3.90(m,1H),3.79(t,J＝6.8Hz,2H),3.70(s,2H),3.44(d,J＝7.6Hz,2H),3.16(d,J＝5.6Hz,3H),2.91-2.87(m,3H),2.55(s,2H),2.42(d,J＝17.2Hz,1H),2.31-2.16(m,1H),2.11-1.97(m,2H),1.96-1.87(m,4H),1.82(s,7H),1.73-1.58(m,2H),1.49(s,2H),0.94(d,J＝11.2Hz,3H),0.78-0.66(m,1H)。
实施例39：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-((4-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物51)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯替换为(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-((4-(三氟甲基)嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯，将反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(70mg，收率：36.9％)。
MS m/z(ESI):1021.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.38(s,2H),7.43(d,J＝12.4Hz,1H),7.12(d,J＝7.2Hz,1H),6.93(d,J＝10.0Hz,3H),4.40(t,J＝10.8Hz,2H),4.27(t,J＝6.8Hz,1H),3.93(s,5H),3.66-3.46(m,2H),3.00(s,4H),2.60(s,3H),2.37(d,J＝12.0Hz 7H),2.24-2.07(m,2H),2.04-1.70(m,5H),1.52(d,J＝8.0Hz,7H),1.39-1.19(m,2H),0.70(s,2H),0.45(s,2H)。
实施例40：(S)-2-氨基-3'-(4-((1-((2-(4-(4-氯-3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物23)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为1-(5-(4-(7-氮杂螺[3.5]壬喃-2-基)哌嗪-1-羰基)-2-氯苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮，得到标题化合物(2.56mg，收率：13.5％)。
MS m/z(ESI):999.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.52(s,1H),9.15(s,1H),8.90(s,2H),7.64(d,J＝8.4Hz,1H),7.55(d,J＝2.0Hz,1H),7.38(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),6.94(s,2H),6.75(s,1H),4.36(s,2H),3.77-3.72(m,1H),3.64-3.56(m,3H),2.76-2.70(m,3H),2.63(d,J＝7.6Hz,2H),2.24(s,5H),2.21-2.16(m,3H),1.96(t,J＝7.2Hz,3H),1.89-1.73(m,10H),1.72-1.58(m,2H),1.47-1.42(m,7H),0.67(s,2H),0.41(s,2H)。
实施例41：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((7-(3-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)环丙基)甲乙氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物24)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-甲基-6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(2.05mg，收率：4.9％)。
MS m/z(ESI):907.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.85(s,1H),9.15(s,1H),8.91(s,2H),7.47(d,J＝8.8Hz,1H),6.93(s,2H),6.89(d,J＝10.0Hz,1H),6.80(d,J＝15.2Hz,2H),4.35-4.29(m,2H),4.24(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),3.87-3.56(m,4H),3.16-3.01(m,7H),2.63-2.58(m,2H),2.30(s,1H),2.26-2.12(m,3H),2.01-1.87(m,4H),1.87-1.84(m,2H),1.79-1.71(m,8H),1.68-1.62(m,1H),1.23(s,1H),0.67(s,2H),0.44(s,2H)。
实施例42：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((8-(3-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)甲基)环丙基)甲乙氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物29)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(1-甲基-6-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(1.96mg，收率：13.9％)。
MS m/z(ESI):921.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83(s,1H),9.14(s,1H),8.90(s,2H),7.46(d,J＝8.8Hz,1H),6.91(s,2H),6.88(dd,J＝9.2,1.6Hz,1H),6.80(s,1H),6.76(s,1H),4.40(dd,J＝23.6,10.8Hz,2H),4.24(dd,J＝9.2,5.2Hz,1H),3.86(s,3H),3.22-3.10(m,4H),2.59-2.52(m,5H),2.43-2.36(m,4H),2.31-2.21(m,2H),2.21-2.13(m,1H),2.02-1.83(m,4H),1.82-1.74(m,4H),1.59(dd,J＝17.6,10.4Hz,6H),1.23(s,2H),0.67(s,2H),0.45(s,2H)。
实施例43：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物14)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-((3-氟-4-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(1.9mg，收率：9.0％)。
MS m/z(ESI):914.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ9.09(s,1H),8.84(s,2H),7.35(dd,J＝14.4,2.4Hz,1H),7.13-7.02(m,2H),6.60(s,1H),4.72(dd,J＝8.4,3.6Hz,2H),4.34(d,J＝11.6Hz,1H),3.01-2.98(m,3H),2.81-2.68(m,5H),2.63-2.47(m,5H),2.34-2.29(m,2H),2.15-2.05(m,3H),2.02-1.81(m,8H),1.76-1.73(m,1H),1.67(d,J＝3.2Hz,6H),1.31(dd,J＝10.4,7.6Hz,2H),0.95-0.84(m,1H),0.81(s,2H),0.64(s,2H)。
实施例44：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氧基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物45)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(4-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯氧基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(2.43mg，收率：26.1％)。
MS m/z(ESI):897.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ9.09(s,1H),8.83(s,2H),6.97(s,4H),6.59(s,1H),4.61(s,4H),3.07-2.99(m,4H),2.83-2.64(m,4H),2.63-2.52(m,6H),2.36-2.24(m,2H),2.23-2.08(m,2H),2.07-1.97(m,3H),1.94(dd,J＝9.6,3.2Hz,2H),1.63(d,J＝4.4Hz,4H),1.59(s,4H),1.37-1.23(m,2H),0.75(s,2H),0.56(d,J＝3.2Hz,2H)。
实施例45：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氧基)苯基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物41)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(3-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)苯氧基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(3.2mg，收率：29.5％)。
MS m/z(ESI):897.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.91(s,1H),9.18(s,1H),8.91(s,2H),7.13-7.06(m,1H),6.94(s,1H),6.77(s,1H),6.58(d,J＝8.0Hz,2H),6.44(d,J＝7.2Hz,1H),5.17(dd,J＝10.4,5.2Hz,1H),4.39(dd,J＝26.0,11.6Hz,2H),3.18-3.07(m,8H),3.04(s,1H),2.90(d,J＝6.0Hz,1H),2.76-2.68(m,1H),2.63-2.56(m,1H),2.22-2.05(m,4H),1.98-1.58(m,16H),1.49(s,2H),1.23(d,J＝6.8Hz,1H),0.92(s,2H),0.82(s,2H)。
实施例46：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(4-(2,6-二氧哌啶-3-基)苯甲酰基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d][异恶唑]-3-腈(化合物34)的制备
第一步：(S)-9-((1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯的制备
将(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(40mg,64.9μmol)和3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(22mg,84.3μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，在25℃下搅拌反应1小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(42mg,194.5μmol)，在25℃下搅拌反应6小时。浓缩反应液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(53mg，收率：96.7％)。
MS m/z(ESI):849.4[M+H]+。
第二步：(S)-N'-(3'-(4-((1-((3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-3-氰基-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将(S)-9-((1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(71mg,62.7μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，加入三氟乙酸(0.5mL)，在25℃下搅拌反应3小时。浓缩反应液，得到标题化合物(52mg，收率：95.1％)。
MS m/z(ESI):749.4[M+H]+。
第三步：N'-((4S)-3-氰基-3'-(4-((1-((9-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯甲酰基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒的制备
将N'-(3'-(4-((1-((3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-3-氰基-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(52mg,60.3μmol)、4-(2,6-二氧代-3-哌啶基)苯甲酸(15mg,63.7μmol)和N,N-二异丙基乙胺(42mg,318.4μmol)溶于DMF(1mL)中，加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(37mg,95.5μmol)，在25℃下搅拌反应12小时。反应液加乙酸乙酯(20mL)稀释，用饱和食盐水(10mL)洗2次，用无水硫酸钠干燥有机相，过滤，浓缩滤液，将残留物通过硅胶柱层析分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1，体积比)，得到标题化合物(14mg，收率：22.6％)。
MS m/z(ESI):964.3[M+H]+。
第四步：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(4-(2,6-二氧哌啶-3-基)苯甲酰基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d][异恶唑]-3-腈的制备
将N'-((4S)-3-氰基-3'-(4-((1-((9-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯甲酰基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒(14mg,14.4μmol)溶于四氢呋喃(3mL)中，加入2M盐酸溶液(1.5mL)，在70℃下搅拌反应2小时。反应液减压浓缩，残留物经过高效液相色谱法纯化(条件2)，得到标题化合物(2.7mg，收率：20.3％)。
MS m/z(ESI):909.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.15(s,1H),8.90(s,2H),7.30(dd,J＝12.0,8.0Hz,4H),6.93(s,2H),6.76(s,1H),4.42-4.32(m,2H),3.91(dd,J＝11.6,4.8Hz,1H),3.59-3.54(m,1H),3.08-2.92(m,1H),2.69-2.66(m,2H),2.40-2.34(m,2H),2.30-2.16(m,5H),2.08-1.88(m,6H),1.87-1.73(m,6H),1.71-1.59(m,2H),1.54-1.25(m,9H),0.70(s,2H),0.43(s,2H)。
实施例47：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6)-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-(1,4-氧氮杂环-4-基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物40)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒替换为(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒，得到标题化合物(9.2mg，收率：25.3％)。
MS m/z(ESI):958.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.85(s,1H),8.19(s,1H),7.42(d,J＝12.4Hz,1H),7.12(d,J＝7.2Hz,1H),6.94(s,2H),6.03(d,J＝4.4Hz,1H),4.28-4.19(m,3H),3.93(s,3H),3.73(s,3H),3.65-3.59(m,3H),3.00(s,6H),2.69-2.63(m,2H),2.60(dd,J＝11.2,5.2Hz,2H),2.55(dd,J＝7.2,4.0Hz,1H),2.43(s,3H),2.37-2.30(m,4H),2.16-2.10(m,1H),2.06-1.78(m,10H),1.54(d,J＝32.8Hz,8H),0.64(s,2H),0.40(s,2H)。
实施例48：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物48)的制备
采用实施例1中的合成路线，将第一步反应原料(S)-(1-((2-(3-氰基-2-((二甲基氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异噁唑]-3'-基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯替换为(S)-(1-(((2-(3-氰基-2-(((二甲氨基)亚甲基)氨基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3'-基)-6-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)甲磺酸甲酯，将反应原料3-(1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮替换为3-(5-氟-1-甲基-6-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)-1H-吲唑-3-基)哌啶-2,6-二酮，得到标题化合物(2.01mg，收率：12.8％)。
MS m/z(ESI):959.5[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.86(s,1H),7.42(d,J＝12.4Hz,1H),7.12(d,J＝7.2Hz,1H),6.95(d,J＝6.0Hz,2H),6.34(s,1H),5.31-5.21(m,1H),4.34-4.23(m,3H),3.93(s,3H),3.90-3.85(m,2H),3.53-3.47(m,2H),3.32(s,4H),2.99(s,4H),2.63-2.56(m,4H),2.38(s,3H),2.29(s,2H),2.08-1.94(m,7H),1.86-1.83(m,2H),1.68-1.64(m,2H),1.58-1.54(m,4H),1.48-1.43(m,4H),1.23(s,2H),0.65(s,2H),0.41(s,2H)。
实施例49：(4S)-2-氨基-3'-(4-((4-环丙基嘧啶-5-基)氧基)-6-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物57)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒替换为(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((4-环丙基嘧啶-5-基)氧基)-6-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒，得到标题化合物(11.6mg，收率：18.3％)。
MS m/z(ESI):993.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),8.94(s,1H),8.65(s,1H),7.43(d,J＝12.4Hz,1H),7.12(d,J＝7.2Hz,1H),6.94(s,2H),6.79(s,1H),4.37(dd,J＝24.0,10.8Hz,2H),4.26(dd,J＝9.6,5.2Hz,1H),3.93(s,3H),3.00(s,4H),2.64-2.54(m,4H),2.43-2.35(m,4H),2.35-2.30(m,2H),2.10(dd,J＝12.8,9.6Hz,3H),1.99-1.90(m,3H),1.88-1.74(m,5H),1.70(dd,J＝7.2,3.6Hz,1H),1.58(s,5H),1.48(s,4H),1.10-1.01(m,4H),0.70(s,2H),0.46(s,2H)。
实施例50：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环戊基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物53)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒替换为(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环戊基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒，得到标题化合物(33.38mg，收率：23.8％)。
MS m/z(ESI):981.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.16(s,1H),8.92(s,2H),7.41(d,J＝12.0Hz,1H),7.10(d,J＝8.0Hz,1H),6.95(s,2H),6.77(s,1H),4.35-4.24(m,3H),3.92(s,3H),3.02-2.96(m,4H),2.59-2.54(m,4H),2.48-2.42(m,4H),2.39(s,2H),2.28-2.08(m,4H),2.00-1.76(m,10H),1.70-1.50(m,8H),1.48-1.38(m,6H)。
实施例51：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)-3,3-二氟环丁基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物54)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒替换为(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((3,3-二氟-1-甲酰基环丁基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒，得到标题化合物(30.2mg，收率：25.1％)。
MS m/z(ESI):1003.3[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.16(s,1H),8.92(s,2H),7.41(d,J＝12.0Hz,1H),7.11(d,J＝4.0Hz,1H),6.95(s,2H),6.78(s,1H),4.58-4.51(m,2H),4.28-4.24(m,1H),3.93(s,3H),3.02-2.96(m,4H),2.72-2.54(m,8H),2.42-2.38(m,4H),2.38-2.10(m,4H),2.00-1.76(m,10H),1.60-1.40(m,8H)。
实施例52：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-((4-异丙基嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物56)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒替换为(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-((4-异丙基嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒，得到标题化合物(3mg，收率：15.3％)。
MS m/z(ESI):995.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.86(s,1H),9.09(s,1H),8.72(s,1H),7.43(d,J＝12.4Hz,1H),7.12(d,J＝7.2Hz,1H),6.93(s,2H),6.80(s,1H),4.43-4.24(m,3H),3.93(s,3H),3.17-3.14(m,1H),3.00(s,3H),2.73-2.52(m,4H),2.47-2.28(m,7H),2.25-1.35(m,18H),1.23-1.14(m,8H),0.69(s,2H),0.44(s,2H)。
实施例53：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)-2,2-二氟环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物55)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒替换为N'-((4S)-3-氰基-3'-(4-((2,2-二氟-1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒，得到标题化合物(1.51mg，收率：2.7％)。
MS m/z(ESI):989.4[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ8.99(s,1H),8.74(s,2H),7.24(d,J＝12.4Hz,1H),6.93(d,J＝6.8Hz,1H),6.53(s,1H),5.24(d,J＝4.8Hz,1H),4.69(d,J＝12.0Hz,1H),4.56(dd,J＝22.8,12.0Hz,2H),4.17(dd,J＝9.2,5.2Hz,1H),3.86(s,3H),2.97(t,J＝5.6Hz,4H),2.75-2.54(m,2H),2.47(s,2H),2.37(d,J＝7.6Hz,4H),2.18(dd,J＝13.6,6.0Hz,1H),2.03-1.71(m,5H),1.56(d,J＝6.8Hz,4H),1.46(s,4H),1.29(d,J＝11.6Hz,1H),1.19(s,6H),0.79(d,J＝7.2Hz,2H)。
实施例54：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丁基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物52)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒替换为(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丁基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒，得到标题化合物(1.32mg，收率：6.6％)。
MS m/z(ESI):967.5[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ9.09(s,1H),8.84(s,2H),7.34(d,J＝12.4Hz,1H),7.02(d,J＝6.8Hz,1H),6.61(s,1H),4.71(d,J＝2.4Hz,1H),4.62(s,1H),4.27(dd,J＝9.2,5.2Hz,1H),3.96(s,3H),3.10-3.03(m,4H),2.83-2.62(m,5H),2.62-2.49(m,6H),2.48-2.26(m,4H),2.11-1.89(m,12H),1.66(s,4H),1.57(s,4H),1.35-1.29(m,2H)。
实施例55：(4S)-2-氨基-3'-(4-((1-((9-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)环丙基)甲氧基)-6-((4-乙基嘧啶-5-基)氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-3-腈(化合物58)的制备
采用实施例12中的合成路线，将第一步反应原料(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)-6-(嘧啶-5-基氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒替换为(S)-N'-(3-氰基-3'-(4-((4-乙基嘧啶-5-基)氧基)-6-((1-甲酰基环丙基)甲氧基)嘧啶-2-基)-5',6,6',7-四氢-4'H,5H-螺[苯并[b]噻吩-4,7'-苯并[d]异恶唑]-2-基)-N,N-二甲基甲脒，得到标题化合物(1.70mg，收率：3.1％)。
MS m/z(ESI):981.5[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ9.02(s,1H),8.64(s,1H),8.54(s,1H),7.36(d,J＝12.4Hz,1H),7.03(d,J＝6.8Hz,1H),6.67(s,1H),4.61(s,2H),4.31-4.22(m,2H),3.98(s,3H),3.15-3.04(m,5H),2.83-2.75(m,4H),2.74-2.71(m,1H),2.55(s,2H),2.49-2.14(m,6H),2.09-1.96(m,3H),1.92(d,J＝10.8Hz,4H),1.76(d,J＝17.6Hz,10H),1.26(t,J＝7.6Hz,3H),0.90(s,2H),0.74(s,2H)。
生物学实施例：
试验例1：化合物对细胞中的KRAS-G12D蛋白降解试验
●试验系统和参数：
细胞：人结肠癌细胞GP2D
蛋白定量：PierceTMBCA Protein Assay Kit(Thermofisher)
蛋白电泳：电泳槽(Thermo)180V恒压电泳
蛋白转印：转印槽(BIO-RAD)300mA恒流转膜
●试验步骤
(1)化合物处理细胞
将细胞铺板于六孔板中，每孔细胞量为1.5×106个细胞。贴壁培养过夜，加入化合物(浓度为0、0.8、4nM)处理24h。
(2)样品处理
1)弃去培养基，加入2ml PBS，清洗细胞。弃去洗液，加入适量裂解液(CST,9803)，置于冰上裂解30min，然后在4℃下以12000rpm离心10分钟，并取出上清液。
2)参考BCA试剂盒说明书，取40μL标准浓度蛋白(2mg/ml)和裂解液1:1梯度稀释到1、0.5、0.25、0.125、0.0625mg/ml，取10μL样品上清稀释液和标准浓度蛋白稀释液分别加入到96孔板样品孔中，每孔加入200μL A与B试剂混合液(50:1)。在37℃下震荡30分钟，然后检测562nm的OD值。拟合标准曲线，根据曲线计算出样品浓度并将样品调整至相同浓度。
3)将5X SDS上样缓冲液(碧云天，P0015L)加入样品中，100℃变性蛋白10分钟。
(3)蛋白分离转印和显影
1)使用NuPAGE 4-12％梯度蛋白预制胶(Thermofisher)，通过180V恒压电泳分离蛋白样品。凝胶使用转印槽在4℃300mA恒流转膜90分钟，并封闭于5％脱脂奶粉中，封闭1小时。
2)使用Ras(G12D特异性突变)抗体(CST,14429)和α-Tubulin抗体(CST,2125S)根据抗体说明书稀释比例稀释后分别与膜在4℃下孵育过夜，用TBST洗涤3次，10分钟/次。使用山羊抗兔HRP二抗(CST,7074)参考抗体说明书稀释比例稀释后与膜室温孵育1小时，使用TBST洗涤3次，10分钟/次。
3)将膜浸泡于ECL发光液(Millipore\WBKLS0500)中，使用Bio-rad凝胶成像仪采集荧光信号。
●数据处理
对结果图片进行定量，通过与不加化合物的对照组进行对比计算KRAS G12D蛋白的降解率，计算公式如下：
降解率(％)＝(1-(实验组KRAS-G12D灰度/实验组α-Tubulin灰度)/(对照组KRAS-G12D灰度/对照组α-Tubulin灰度))×100％。
●试验结果
按照上述方法测定化合物对GP2D细胞中KRAS G12D蛋白降解作用，结果如表1-1所示。
表1-1.化合物对KRAS G12D蛋白的降解率
●试验结论
试验结果表明，本发明的化合物对KRAS-G12D具有较高的降解率，例如，化合物30在0.8nM剂量时即可达到63.1％降解率。
试验例2：化合物的细胞增殖抑制活性测试试验
●试验系统和步骤
AsPC-1(人转移胰腺腺癌细胞)、GP2D(人结肠癌细胞)、LOVO(人结肠癌细胞)、SK-CO-1(人结直肠腺癌细胞)及MKN1(人胃癌细胞)体外单层培养，培养条件为：AsPC-1和MKN1细胞使用RPMI1640+10％胎牛血清(FBS)培养基，GP2D和LOVO细胞使用DMEM+10％FBS培养基，SK-CO-1细胞使用MEM+10％FBS+1％非必须氨基酸+1mM丙酮酸钠培养基，置于37℃的二氧化碳培养箱中进行培养。使用96孔平底细胞培养板铺板细胞，2000个/孔，次日，加入预先稀释的化合物，阴性对照组加DMSO，空白对照组加培养基，DMSO终浓度为1％。
化合物分别与AsPC-1细胞、GP2D细胞、SK-CO-1细胞、LOVO细胞和MKN1细胞在37℃的二氧化碳培养箱中孵育5天后使用CellCounting-LiteTM 2.0试剂(南京诺唯赞公司)，在酶标仪化学发光检测模式下读取相对化学发光单位值(RLU)。
●数据处理
按照下述公式计算不同浓度化合物的百分比抑制率：
百分比抑制率＝(1-(测试化合物的化学发光信号值-空白对照的化学发光信号值)/(阴性对照的化学发光信号值-空白对照的化学发光信号值))*100％，按照四参数模型拟合曲线，计算化合物的半数抑制浓度(IC50)。
●试验结果
按照上述方法测定化合物对KRAS突变细胞的增殖抑制活性，结果如表2-1、表2-2、表2-3、表2-4和表2-5中所示。
表2-1.化合物对KRASG12D突变细胞(AsPC-1)的增殖抑制活性

表2-2.化合物对KRASG12D突变细胞(GP2D)的增殖抑制活性

表2-3.化合物对KRASG12V突变细胞(SK-CO-1)的增殖抑制活性
表2-4.化合物对KRASG13D突变细胞(LOVO)的增殖抑制活性

表2-5.化合物对野生型KRAS细胞(MKN1)的增殖抑制活性
●试验结论
本发明的化合物对KRAS突变的细胞表现出较强的增殖抑制活性。
上述实施例不以任何方式限制本发明的范围。除本文中描述的那些外，根据前述描述，本发明的多种修改对本领域技术人员而言会是显而易见的。这样的修改也意图落入所附权利要求书的范围内。本申请中所引用的各参考文献(包括所有专利、专利申请、期刊文章、书籍及任何其它公开)均以其整体援引加入本文。

Claims (19)

  1. 化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，所述化合物具有式(I)的结构：
    其中，
    环A为C3-6环烷基或3-6元杂环基，所述环烷基或杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-6烷基和C1-6卤代烷基的取代基取代；
    环B为3-12元含氮杂环基；
    环E为C6-10芳基、5-12元杂芳基或3-12元杂环基，所述芳基、杂芳基或杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代基、-O-C1-6烷基、-O-C1-6卤代烷基和-O-C3-6环烷基的取代基取代；
    X1和X2各自独立地选自O和N；
    X3、X4和X5各自独立地选自CR3和N；
    X6选自CH和N；
    L为共价键，或选自O、S和NR4；
    L1选自O、S和NR5；
    L2选自C1-6亚烷基和卤代C1-6亚烷基；
    L3选自C1-6亚烷基和卤代C1-6亚烷基；
    L4为共价键，或选自O、NR6、C1-6亚烷基、-O-C1-6亚烷基-、-C1-6亚烷基-O-、-C1-6亚烷基-O-C1-6亚烷基-、-C(＝O)-、-C(＝O)-C1-6亚烷基-和3-12元杂环基，所述杂环基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基的取代基取代；
    L5为共价键，或选自O、NR7、C1-6亚烷基、-O-C1-6亚烷基-、-C1-6亚烷基-O-、-C1-6亚烷基-O-C1-6亚烷基-、-C(＝O)-、-C(＝O)-C1-6亚烷基-和3-12元杂环基，所述杂环基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基的取代基取代；
    L6为共价键，或选自O、NR8和-C(＝O)-NR9-；优选地，L6为共价键，或选自NR8和-C(＝O)-NR9-；
    每个R1独立地选自氢、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基和3-6元杂环基；
    R2选自氢、卤素、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、3-12元杂环基、5-10元杂芳基、-C1-6亚烷基-C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-3-12元杂环基和-C1-6亚烷基-5-10元杂芳基，所述烷基、亚烷基、环烷基、芳基、杂环基和杂芳基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6卤代烷基、-O-C1-6烷基、-C1-6亚烷基-OH、-NR10aR10b、-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基和-O-C1- 6卤代烷基的取代基取代；
    优选地，R2选自氢、卤素、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、3-12元杂环基、5-10元杂芳基、-C1-6亚烷基-C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-3-12元杂环基和-C1-6亚烷基-5-10元杂芳基，所述烷基、亚烷基、环烷基、芳基、杂环基和杂芳基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-O-C1-6烷基、-C1-6亚烷基-OH、-NR10aR10b、-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基和-O-C1-6卤代烷基的取代基取代；
    每个R3独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧基和-O-C1-6卤代烷基；
    R4选自氢和C1-6烷基、C1-6卤代烷基和C3-6环烷基；
    R5选自氢和C1-6烷基；
    R6选自氢和C1-6烷基；
    R7选自氢和C1-6烷基；
    R8选自氢和C1-6烷基；
    R9选自氢和C1-6烷基；
    R10a和R10b各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-OH和-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基，或者R10a和R10b连同与其连接的N形成3-6元含氮杂环基；
    m选自0、1、2、3和4。
  2. 权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，所述化合物具有式(II-A)、式(II-B)、式(II-C)或式(II-D)的结构：
    其中环A、环B、环E、R2、L、L1、L2、L3、L4、L5、L6和X6如权利要求1中所定义。
  3. 权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中L1为-O-。
  4. 权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中：
    L2为C1-3亚烷基，L3为C1-3亚烷基，环A为C3-6环烷基，所述环烷基任选地被一个或多个选自卤素的取代基取代；
    优选地，L2为C1-3亚烷基，L3为C1-3亚烷基，环A为C3-6环烷基；
    优选地，L2为-CH2-，L3为-CH2-，环A为C3-6环烷基，所述环烷基任选地被一个或多个选自卤素的取代基取代；
    优选地，L2为-CH2-，L3为-CH2-，环A为C3-6环烷基；
    更优选地，L2为-CH2-，L3为-CH2-，环A选自环丙基、环丁基、环戊基、
    更优选地，L2为-CH2-，L3为-CH2-，环A为环丙基。
  5. 权利要求1-4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中：
    环B选自3-8元含氮单杂环基、5-12元含氮桥杂环基、6-12元含氮并杂环基和7-12元含氮螺杂环基；
    优选地，环B为
    优选地，优选地，环B为
    更优选地，环B为
    更优选地，环B为
  6. 权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中
    L4为共价键，或选自O、C1-3亚烷基、-C(＝O)-C1-3亚烷基-和4-8元含氮杂环基；
    优选地，L4为共价键，或选自C1-3亚烷基、-C(＝O)-C1-3亚烷基-和4-8元含氮杂环基；
    优选地，L4为共价键，或选自O、-CH2-、-C(＝O)-CH2-、
    优选地，L4为共价键，或选自-CH2-、-C(＝O)-CH2-、
  7. 权利要求1-6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中：
    L5为共价键，或选自-C(＝O)-和4-8元含氮杂环基；
    优选地，L5为共价键，或选自-C(＝O)-、
    优选地，L5为共价键，或选自-C(＝O)-和
  8. 权利要求1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中：
    片段-L4-L5-选自：共价键、-O-、-C(＝O)-、
    优选地，片段-L4-L5-选自：共价键、-C(＝O)-、
  9. 权利要求1-8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中：
    环E为C6-10芳基、6-10元杂芳基或6-10元杂环基，所述苯基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氧代基、-O-C1-6烷基、-O-C1-6卤代烷基和-O-C3-6环烷基的取代基取代；
    优选地，环E为苯基、6-9元杂芳基或苯基并5-6元杂环基，所述苯基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、氧代基和-O-C1-3烷基的取代基取代；
    优选地，环E为苯基、6-9元杂芳基或苯基并5-6元杂环基，所述苯基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个选自卤素、C1-3烷基、氧代基和-O-C1-3烷基的取代基取代；
    更优选地，环E选自
    更优选地，环E选自
    再更优选地，环E选自
    再更优选地，环E选自
  10. 权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中：
    L6为共价键，或选自O、NR8和-C(＝O)-NR9-；优选地，L6为共价键，或选自
    NR8和-C(＝O)-NR9-；
    R8选自氢和C1-3烷基；
    R9选自氢和C1-3烷基；
    优选地，L6为共价键、O或NR8；优选地，L6为共价键或NR8；
    R8选自氢和C1-3烷基；
    更优选地，L6为共价键、O或NH；
    更优选地，L6为共价键或NH。
  11. 权利要求1-11中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中：
    片段选自：
    优选地，片段选自：
    优选地，片段选自：
    优选地，片段选自：
  12. 权利要求1-12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中：
    L为共价键，或选自O和NR4；
    R4选自氢和C1-3烷基；
    优选地，L为共价键、O或NH；
    更优选地，L为共价键或O。
  13. 权利要求1-12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中：
    R2选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、4-8元杂环基、5-7元杂芳基、-C1-6亚烷基-C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-4-8元杂环基和-C1-6亚烷基-5-7元杂芳基，所述烷基、亚烷基、环烷基、芳基、杂环基和杂芳基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6卤代烷基、-O-C1-6烷基、-C1-6亚烷基-OH、-NR10aR10b、-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基和-O-C1-6卤代烷基的取代基取代，R10a和R10b各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-OH和-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基；
    优选地，R2选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基、4-8元杂环基、5-7元杂芳基、-C1-6亚烷基-C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-4-8元杂环基和-C1-6亚烷基-5-7元杂芳基，所述烷基、亚烷基、环烷基、芳基、杂环基和杂芳基任选地被一个或多个选自卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、-O-C1-6烷基、-C1- 6亚烷基-OH、-NR10aR10b、-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基和-O-C1-6卤代烷基的取代基取代，R10a和R10b各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-C1-6亚烷基-OH和-C1-6亚烷基-O-C1-6烷基；
    优选地，R2选自氢、
    优选地，优选地，R2选自氢、
    优选地，片段-L-R2选自氢、
  14. 权利要求1-13中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，所述化合物具有式(III-A)、式(III-B)、式(III-C)或式(III-D)的结构：

    其中环A、环B、环E、R2、L、L1、L2、L3、L4、L5、L6和X6如权利要求1-14任一项中所定义。
  15. 权利要求1-14所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中所述化合物选自：







  16. 药物组合物，其包含预防和/或治疗有效量的权利要求1-15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，以及一种或多种药学上可接受的载体。
  17. 权利要求1-15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者权利要求16所述的组合物在制备药物中的用途，特别是在制备用于预防和/或治疗疾病，特别是KRAS介导的相关疾病的药物中的用途；
    优选地，所述疾病为肿瘤或癌症。
  18. 制备式(II-A)化合物的方法，其包括如路线1中所示的步骤(1)至步骤(7)中的一步或多步：
    路线1

    其中：
    环A、环B、环E、R2、L、L1、L2、L3、L4、L5、L6和X6如权利要求1-15中任一项所定义；
    LG1、LG2和LG3各自独立地表示离去基团，例如卤素、三氟甲磺酸酯基、对甲苯磺酸酯基或甲基磺酸酯基；或者，
    当L3为C1-3亚烷基，LG3与L3上和LG3相连的碳共同形成羰基；
    所述路线1包括以下步骤：
    (1)使化合物II-A1与化合物II-A2反应以得到化合物II-A3；
    (2)使化合物II-A3与化合物II-A4反应以得到化合物II-A5；或者，使化合物II-A3进行脱卤反应以得到化合物II-A5；
    (3)使化合物II-A5与化合物II-A5a进行关环反应以得到化合物II-A6；
    (4)使化合物II-A6进行上保护反应以得到化合物II-A7；
    (5)使化合物II-A7与含有-LG3基团的试剂进行反应以得到化合物II-A8；或者，使化合物II-A7进行氧化反应以得到化合物II-A8；
    (6)使化合物II-A8与化合物II-A9反应以得到化合物II-A10和
    (7)使化合物II-A10进行去保护反应以得到化合物II-A；
    或者，所述方法包括如路线2中所示的步骤(1)至步骤(9)中的一步或多步：
    路线2

    其中：
    环A、环B、环E、R2、L、L1、L2、L3、L4、L5、L6和X6如利要求1-15中任一项所定义；
    LG1、LG2和LG3各自独立地表示离去基团，例如卤素、三氟甲磺酸酯基、对甲苯磺酸酯基或甲基磺酸酯基；或者，
    当L3为C1-3亚烷基，LG3与L3上和LG3相连的碳共同形成羰基；
    PG1表示保护基，例如烷氧羰基类氨基保护基，例如苄氧羰基(Cbz)、叔丁氧羰基(Boc)、笏甲氧羰基(Fmoc)、烯丙氧羰基(Alloc)、三甲基硅乙氧羰基(Teoc)、甲(或乙)氧羰基；酰基类氨基保护基，例如邻苯二甲酰基(Pht)、对甲苯磺酰基(Tos)、三氟乙酰基(Tfa)、邻(对)硝基苯磺酰基(Ns)、特戊酰基、苯甲酰基、叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、烯丙氧羰基、三氯乙氧羰基、三甲基硅乙氧羰基、苄氧羰基、对甲基苯磺酰基、对硝基苯磺酰基、三氟乙酰基、甲氧羰基、或乙氧羰基；烷基类氨基保护基，例如三苯甲基(Trt)、2,4-二甲氧基苄基(Dmb)、4-甲氧基苄基(PMB)、苄基(Bn)，优选为苄氧羰基(Cbz)、叔丁氧羰基(Boc)或苄基；
    所述方法包括以下步骤：
    (1)使化合物II-A1与化合物II-A2反应以得到化合物II-A3；
    (2)使化合物II-A3与化合物II-A4反应以得到化合物II-A5；
    (3)使化合物II-A5与化合物II-A5a进行关环反应以得到化合物II-A6；
    (4)使化合物II-A6进行上保护反应以得到化合物II-A7；
    (5)使化合物II-A7进行氧化反应以得到化合物II-A8；
    (6)使化合物II-A8与化合物II-A9a反应以得到化合物II-A10a；
    (7)使化合物II-A10a进行去保护反应以得到化合物II-A11a；
    (8)使化合物II-A11a与化合物II-A12a反应以得到化合物II-A10和
    (9)使化合物II-A10进行去保护反应以得到化合物II-A。
  19. 如下所示的化合物或其盐、立体异构体、互变异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物，

    其中环A、环B、环E、R2、L、L1、L2、L3、L4、L5、L6、X6、PG1、LG1、LG2和LG3如权利要求18所定义。
PCT/CN2025/102935 2024-07-04 2025-06-24 螺环化合物、其制备方法及用途 Pending WO2026007740A1 (zh)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202410890471 2024-07-04
CN202410890471.8 2024-07-04
CN202411978204 2024-12-31
CN202411978204.2 2024-12-31

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2026007740A1 true WO2026007740A1 (zh) 2026-01-08

Family

ID=98317634

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/CN2025/102935 Pending WO2026007740A1 (zh) 2024-07-04 2025-06-24 螺环化合物、其制备方法及用途

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2026007740A1 (zh)

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004104000A1 (ja) * 2003-05-23 2004-12-02 Japan Tobacco Inc. トリサイクリック縮合環化合物およびその医薬用途
CN1942471A (zh) * 2004-04-06 2007-04-04 詹森药业有限公司 取代的二氮杂－螺－[5.5]－十一烷衍生物及其作为神经激肽拮抗剂的应用
WO2023099608A1 (en) * 2021-12-01 2023-06-08 Boehringer Ingelheim International Gmbh Annulated 2-amino-3-cyano thiophenes and derivatives for the treatment of cancer
WO2023099612A1 (en) * 2021-12-01 2023-06-08 Boehringer Ingelheim International Gmbh Annulated 2-amino-3-cyano thiophenes and derivatives for the treatment of cancer
WO2023099623A1 (en) * 2021-12-01 2023-06-08 Boehringer Ingelheim International Gmbh Annulated 2-amino-3-cyano thiophenes and derivatives for the treatment of cancer
WO2023099624A1 (en) * 2021-12-01 2023-06-08 Boehringer Ingelheim International Gmbh Annulated 2-amino-3-cyano thiophenes and derivatives for the treatment of cancer

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004104000A1 (ja) * 2003-05-23 2004-12-02 Japan Tobacco Inc. トリサイクリック縮合環化合物およびその医薬用途
CN1942471A (zh) * 2004-04-06 2007-04-04 詹森药业有限公司 取代的二氮杂－螺－[5.5]－十一烷衍生物及其作为神经激肽拮抗剂的应用
WO2023099608A1 (en) * 2021-12-01 2023-06-08 Boehringer Ingelheim International Gmbh Annulated 2-amino-3-cyano thiophenes and derivatives for the treatment of cancer
WO2023099612A1 (en) * 2021-12-01 2023-06-08 Boehringer Ingelheim International Gmbh Annulated 2-amino-3-cyano thiophenes and derivatives for the treatment of cancer
WO2023099623A1 (en) * 2021-12-01 2023-06-08 Boehringer Ingelheim International Gmbh Annulated 2-amino-3-cyano thiophenes and derivatives for the treatment of cancer
WO2023099624A1 (en) * 2021-12-01 2023-06-08 Boehringer Ingelheim International Gmbh Annulated 2-amino-3-cyano thiophenes and derivatives for the treatment of cancer

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2024060966A1 (zh) 一种pan-KRAS抑制剂化合物
WO2024083258A1 (zh) Kras g12d降解剂及其制备方法和应用
WO2024118966A1 (en) Glutarimide-containing pan-kras-mutant degrader compounds and uses thereof
JP2025537851A (ja) 汎ｋｒａｓ阻害剤化合物
AU2015253232B2 (en) Substituted 4-phenylpiperidines, their preparation and use
CN108778278B (zh) 适用作ssao抑制剂的氨基嘧啶化合物
CN104812748B (zh) 二氢吡唑gpr40调节剂
CN115087440A (zh) Trpml调节剂
WO2019158019A1 (zh) 嘧啶并环化合物及其制备方法和应用
WO2022194269A1 (zh) 新型egfr降解剂
WO2025190158A1 (zh) 螺环化合物、其制备方法及用途
CN110467615A (zh) 吡咯并嘧啶类化合物、包含其的药物组合物及其制备方法和用途
CN114163444A (zh) 一种用于雄激素受体蛋白靶向降解的嵌合体化合物、其制备方法及其在医药上的应用
WO2025209533A1 (zh) 一种pan-RAS抑制剂化合物
CN121487953A (zh) 一种pan-RAS抑制剂化合物
TW201211053A (en) Spiro compound and drug for activating adiponectin receptor
WO2024140637A1 (zh) 氧代异吲哚啉基取代哌啶二酮衍生物及其应用
WO2019158070A1 (zh) A2a和/或a2b受体拮抗剂
US20200352931A1 (en) Oxalamides as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
WO2024094171A1 (zh) 取代的氨基嘧啶类化合物、其制备方法及其在医药上的应用
AU2018276190B2 (en) 5,6-fused-bicyclic compounds and compositions for the treatment of parasitic diseases
CN113365696A (zh) 药物化合物和其作为泛素特异性蛋白酶19(usp19)抑制剂的用途
CN115066423B (zh) Pd-l1拮抗剂化合物
CN114981270B (zh) Mll1抑制剂和抗癌剂
WO2025108411A1 (zh) 一种ep300/cbp调节剂及其制备方法和用途

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 25832093

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1