BE1030002B1

BE1030002B1 - Compositions inhalables comprenant un complexe de hpbcd et de budesonide ou ciclesonide pour le traitement ou la prevention d'une maladie virale respiratoire

Info

Publication number: BE1030002B1
Application number: BE20216105A
Authority: BE
Inventors: Natacha Rocks; Maurizio Passanisi; Didier Cataldo
Original assignee: Aquilon Pharmaceuticals
Priority date: 2021-12-29
Filing date: 2021-12-29
Publication date: 2023-09-01
Also published as: BE1030002A1

Abstract

Composition inhalable comprenant un complexe d'hydroxypropyl-bêta-cyclodextrine (HPBCD) ou d'un dérivé pharmaceutiquement acceptable de celle-ci et de budésonide ou de ciclésonide pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire.

Description

COMPOSITIONS INHALABLES COMPRENANT UN COMPLEXE DE HPBCD ET DE

BUDESONIDE OU CICLESONIDE POUR LE TRAITEMENT OU LA PREVENTION

D'UNE MALADIE VIRALE RESPIRATOIRE

DOMAINE DE L'INVENTION

La présente invention conceme une composition inhalable comprenant un complexe d'hydroxypropyl-bêta-cyclodextrine (HPBCD) ou de ses dérivés et de budésonide ou de ciclésonide pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire.

Ces demières années, le nombre de maladies virales respiratoires a considérablement augmenté sous l'effet de multiples facteurs, notamment la récente épidémie du virus

Corona.

L'HPBCD a déjà été décrit pour le traitement des maladies inflammatoires :

Cyclodextrines pour le traitement des maladies inflammatoires

EP1799231 à l'Université de Liège propose l'administration directe de cyclodextrines pour le traitement des maladies inflammatoires bronchiques, de préférence l'asthme et la maladie pulmonaire obstructive chronique (MPOC). Cependant, l'utilisation des HPBCD pour le traitement des maladies virales respiratoires n'est pas divulguée.

La demande de brevet intemational WO2021048322A1 à Aquilon Pharmaceuticals divulgue des microparticules sphériques destinées à être utilisées dans le traitement et la prévention des maladies respiratoires comprenant un ou plusieurs supports, de préférence HPBCD et un ou plusieurs ingrédients pharmaceutiques actifs, de préférence le budésonide, dans lesquelles = Les microparticules ont un diamètre aérodynamique massique médian de 0,1 micron ou plus et de 5 microns ou moins ; =» Les microparticules ont une structure cœur-coquille, le support formant la coquille et l'ingrédient pharmaceutique actif formant le cœur ; = Les microparticules présentent une pluralité de dépressions superficielles en forme de balles de golf identifiables par microscopie électronique à balayage ;

= La profondeur maximale moyenne des dépressions de surface est de 5 % ou plus et de 30 % ou moins par rapport au diamètre maximal moyen D des microparticules ; et = 50 % de surface ou plus par rapport à la surface totale des microparticules sont déprimées.

EP3151836 à l'Université de Liège et Paul Maes divulgue l'utilisation de l'HPBCD en conjonction avec le corticostéroïde budésonide pour le traitement et la prévention des maladies inflammatoires bronchiques, de préférence pour la maladie pulmonaire obstructive chronique, telle que la bronchite chronique, la bronchiolite obstructive, l'emphysème, la fibrose pulmonaire, la mucoviscidose et plus préférablement pour la maladie pulmonaire obstructive chronique induite par le tabac et la mucoviscidose.

Cependant, l'utilisation de l'HPBCD respiratoire pour le traitement des maladies virales respiratoires n'est pas divulguée.

Pari, EP1894559, divulgue plusieurs corticostéroïdes solubilisés par des cyclodextrines pour le traitement d'une longue liste de maladies humaines, comprenant la sinusite virale.

Cependant, il ny a pas de divulgation crédible sur l'effet antiviral synergique d'une composition inhalable comprenant un complexe de HPBCD et de budésonide.

Cyclodextrines pour une utilisation directe dans le traitement des maladies virales

WO2021001349 à Aquilon Pharmaceuticals divulgue une composition inhalable comprenant une ou plusieurs cyclodextrines ou leurs dérivés pharmaceutiquement acceptables pour une utilisation dans la prévention ou le traitement des inflammations nasales, dans laquelle le traitement ou la prévention des inflammations nasales est un traitement topique. Une cyclodextrine préférée est l'HPBCD. Cependant, ce document ne divulgue pas l'utilisation de l'HPBCD pour le traitement des maladies virales respiratoires.

Le document EP0423240B1 de l'Université de Pennsylvanie divulgue l'utilisation d'une bêta-cyclodextrine comme agent bloquant pour la préparation d'un médicament destiné à inhiber l'infection des cellules par un virus. Toutefois, ce document ne suggère pas l'utilisation de l'HPBCD ni son utilisation pour le traitement des maladies virales — respiratoires.

WO2019067145 à ASDERA LLC divulgue des compositions de cyclodextrine et des méthodes qui peuvent être utiles dans le traitement et/ou la prévention des maladies respiratoires, y compris, mais sans s'y limiter, la protection contre les infections virales ou bactériennes. Cependant, la sélection spécifique de l'HPBCD pour le traitement topique des maladies virales respiratoires n'est pas divulguée.

Baglivo et al., 2020, Natural small molecules as inhibitors of coronavirus lipid dependent attachment to host cells : a possible strategy for reducing SARS-COV- infectivity ?, Acta

Biomed 2020 ; Vol. 91, N. 1 : 161-164, DOI : 10.23750/abm.v91i1.9402, divulgue l'utilisation de la méthyl-B-cyclodextrine comme inhibiteur moléculaire de l'attachement lipid-dépendant du virus. Toutefois, ce document ne divulgue pas l'utilisation de la HPBCD pour le traitement des maladies virales respiratoires.

Combinaisons comprenant des cyclodextrines utilisées dans le traitement des maladies virales

Carrouel etc, COVID-19 : Une recommandation pour examiner l'effet des bains de bouche à la B-cyclodextrine combinée au Citrox dans la prévention de l'infection et de la progression, J. Clin. Med. 2020, 9, 1126 ; doi:10.3390/cm9041 126, divulgue l'utilisation de bains de bouche et/ou d'applications nasales locales contenant des B-cyclodextrines combinées à des agents flavonoïdes, tels que Citrox, qui pourraient constituer un traitement d'appoint précieux pour réduire la charge virale de la salive et du microbiote nasopharyngé, y compris le portage potentiel du SRAS-CoV-2. Cependant, cela ne révèle pas l'utilisation directe de l'HPBCD.

Kusakabe et al, Intranasal HPBCD-adjuvanted influenzavaccine protects against sub- heterologous virus infection, http://dx.doi.org/10.1016/j.vaccine.2016.04.001, divulgue l'utilisation intranasale de HP-beta-CD comme adjuvant induisant des réponses IgE spécifiques à l'antigène significativement plus faibles que celles induites par l'adjuvant de sel d'aluminium. Kusakabe suggère en outre que l'HPBCD pourrait être un adjuvant — mucosal puissant pour le vaccin contre la grippe saisonnière et pandémique. Ce document suggère en outre l'utilisation de rinçages thérapeutiques du biofilm oral et/ou d'applications nasales pour prévenir la transmission virale par la voie oropharyngée. Cependant, ce document ne divulgue pas l'utilisation directe de l'HPBCD comme ingrédient pharmaceutique actif.

Il existe toujours un besoin pour un traitement efficace des maladies virales respiratoires, en particulier du coronavirus, qui produise moins d'effets secondaires même lorsqu'il est administré sur de longues périodes.

COURTE DESCRIPTION DE L'INVENTION

Les inventeurs ont découvert de manière surprenante que les compositions inhalables comprenant une quantité pharmaceutiquement efficace de HPBCD et de budésonide ou de complexe de ciclésonide ont des effets synergiques en ce qui conceme les maladies virales respiratoires, en particulier en réduisant linflammation neutrophile dans les maladies virales respiratoires. Dans un autre mode de réalisation, les compositions inhalables modulent la réponse des neutrophiles ou des macrophages aux virus. Par conséquent, grâce à la complexation avec le HPBCD, le budésonide ou le ciclésonide peut être administré par inhalation à des doses quotidiennes très faibles et rester efficace contre les maladies virales respiratoires, en particulier le coronavirus humain.

En conséquence, un premier aspect de la présente invention est une composition inhalable comprenant un complexe de HPBCD ou d'un dérivé pharmaceutiquement acceptable de celui-ci et de budésonide ou de ciclésonide pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire, de préférence par inhalation.

Dans un mode de réalisation, le virus respiratoire est choisi dans le groupe constitué par l'adénovirus, le bocavirus humain, le coronavirus humain, Ie métapneumovirus humain, le virus parainfluenza humain, la grippe, le virus respiratoire syncytial humain, le rhinovirus humain, la fièvre pharyngoconjonctivale et tout autre virus provoquant le syndrome respiratoire aigu sévère ou leurs combinaisons.

Dans un mode de réalisation, aucun autre ingrédient pharmaceutique actif n'est présent dans la composition inhalable en quantités thérapeutiquement efficaces pour laquelle l'HPBCD est utilisé pour délivrer un ingrédient pharmaceutique actif à d'autres parties du corps que le système respiratoire ou l'épithélium bronchique.

Dans un mode de réalisation, aucun autre ingrédient pharmaceutique actif n'est présent dans la composition inhalable en quantités thérapeutiquement efficaces pour laquelle le

HPBCD est utilisé pour augmenter la solubilité de l'autre ingrédient pharmaceutique actif dans l'eau.

Dans un mode de réalisation, la composition inhalable est une solution aqueuse, dans — laquelle la concentration de HPBCD est de 5 millimoles à 50 millimoles, de préférence de 7 millimoles à 40 millimoles, encore plus préférablement de 10 millimoles à 30 millimoles.

Dans un autre mode de réalisation, la composition inhalable comprend de l'HPBCD en une quantité de 1 mg/ml à 100 mg/ml, de préférence d'environ 5 mg/ml à environ 80 mg/ml et plus préférablement d'environ 8,00 mg/ml à 60 mg/ml.

Dans un autre mode de réalisation, la composition inhalable comprend du budésonide ou 5 duciclésonide en une quantité de 0,020 mg/ml à 0,70 mg/ml, de préférence d'environ 0,05 mg/ml à environ 0,5 mg/ml et plus préférablement d'environ 0,1 mg/ml à 0,25 mg/ml.

Dans un autre mode de réalisation, la viscosité de la composition inhalable est dans la gamme d'environ 0,0,1 mPa.s à environ 10 mPa.s, de préférence dans la gamme d'environ 0,5 mPa.s à environ 5 mPa.s et plus préférablement dans la gamme d'environ 08 mPas à environ 3 mPas à 20 °C, mesurée par EP/USP (https:/Amww.roquette.com/innovation-hub/pharma/product-profile-pages/kleptose-hpb- oral-grade).

Dans un autre mode de réalisation, la composition est une poudre séchée par pulvérisation.

Dans un autre mode de réalisation, l'HPBCD est administré par inhalation à raison de 0,1 mg à 30 mg par jour, de préférence à raison de 0,5 mg à 20 mg par jour, encore plus préférablement à raison de 1 mg à 10 mg par jour.

Dans un autre mode de réalisation, le budésonide ou le ciclésonide est administré par inhalation à raison de 0,020 mg à 0,700 mg par jour, de préférence à raison de 0,05 mg à 0,5mg par jour, encore plus préférentiellement à raison de 0,07 mg à 0,25 par jour, encore plus préférentiellement à raison de 0,07 mg à 0,15 mg par jour, encore plus préférentiellement à raison de 0,07 mg à 0,10 mg par jour.

Dans un autre mode de réalisation, l'HPBCD est administré à des enfants âgés jusqu'à deux ans par inhalation à raison de 0,1 mg à 1,0 mg par jour et dans lequel le budésonide ouleciclésonide est administré à raison de 0,05 mg à 0,12 mg par jour.

Dans un autre mode de réalisation, l'HPBCD est administré à des enfants âgés de 2 à 6 ans à raison de 0,05 mg à 0,20 mg par jour et dans lequel le budésonide ou le ciclésonide est administré par inhalation à raison de 0,15 mg à 0,20 mg par jour.

Dans un autre mode de réalisation, l'HPBCD est administré à des enfants âgés de 6 à 14 ansäraison de 0,1 mg à 20 mg par jour et dans lequel le budésonide ou le ciclésonide est administré par inhalation à raison de 0,25 mg à 0,5 mg par jour.

Un autre aspect de l'invention est un inhalateur à base de jet de Rayleigh comprenant la composition inhalable de l'invention pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire.

Un autre aspect de l'invention est l'utilisation d'un inhalateur à base de jet de Rayleigh pour délivrer la composition inhalable de l'invention dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire.

Un autre aspect est une méthode de prévention topique ou de traitement topique d'une maladie virale respiratoire, dans laquelle une composition comprenant un complexe de

HPBCD (HPBCD) ou d'un dérivé pharmaceutiquement acceptable de celui-ci et du budésonide ou du ciclésonide est administrée en une quantité thérapeutiquement efficace sans effets secondaires limitant le traitement à un sujet qui en a besoin.

HPBCD

L'HPBCD est un oligosaccharide composé d'unités de glucopyranose. Les principales cyclodextrines non substituées sont généralement préparées par la dégradation enzymatique de l'amidon. L'HPBCD est une cyclodextrine chimiquement modifiée qui peut présenter une meilleure solubilité dans l'eau que les cyclodextrines non modifiées.

Sont également compris les dérivés pharmaceutiquement acceptables de l'HPBCD, pour autant qu'ils soient structurellement et fonctionnellement similaires à l'HPBCD.

Traitement

Le terme "traitement" ou "traiter" décrit tout traitement d'une maladie virale respiratoire, par exemple par inhalation d'un aérosol ou d'une poudre micronisée, en vue de réduire les symptômes ou les causes de la maladie virale respiratoire.

Composition inhalable

Un premier aspect de la présente invention est une composition inhalable comprenant un complexe de HPBCD (HPBCD) ou un dérivé pharmaceutiquement acceptable de celui-ci et de budésonide ciclésonide pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire, de préférence par inhalation. Dans certains modes de réalisation, la composition inhalable est exempte d'alpha ou de gamma- cyclodextrine. Dans d'autres modes de réalisation, la composition inhalable comprend une ou plusieurs autres cyclodextrines, par exemple l'alpha-cyclodextrine, les bêta- cyclodextrines, la gamma-cyclodextrine, et en particulier la 2-hydroxypropyl-gamma- cyclodextrine, la sulfobutyléther-bêta-cyclodextrine et la méthyl-bêta-cyclodextrine.

Le terme "inhalable”, tel qu'il est utilisé ici, désigne une composition qui peut être administrée par inhalation. En particulier, le terme "inhalable" signifie que la composition peut être micronisée à des fins d'inhalation jusqu'à une taille moyenne de particule de 1 micromètre à 20 micromètres, de préférence de 1 micromètre à 10 micromètres et encore plus préférablement de 1 à 5 micromètres. Les dispositifs appropriés pour la micronisation à des fins d'inhalation comprennent les inhalateurs de poudre sèche, les aérosols doseurs oules nébuliseurs.

Traitement topique

La composition de la présente invention est destinée à un traitement topique, notamment par inhalation. Le terme "topique" signifie que la composition de l'invention est appliquée sur le système respiratoire, en particulier sur la muqueuse nasale ou l'épithélium bronchique, par exemple par application intranasale ou par inhalation d'un aérosol généré par un dispositif générateur d'aérosol. Dans certains modes de réalisation, le traitement est un traitement topique respiratoire dans le sens où aucun autre tissu ou partie du corps que le système respiratoire, la muqueuse nasale ou l'épithélium bronchique n'est ciblé par le HPBCD. Dans un autre mode de réalisation, la muqueuse nasale n'est pas ciblée par la composition de la présente invention. Dans un autre mode de réalisation, aucune autre partie du corps que le système respiratoire inférieur n'est ciblée par la composition.

Application directe de l'HPBCD

Le terme "directement" signifie que l'objectif principal de l'HPBCD de la composition de l'invention est l'utilisation pour la prévention topique ou le traitement topique de la maladie virale respiratoire. Par conséquent, dans un mode de réalisation, l'objectif principal des cyclodextrines n'est pas de renforcer ou d'améliorer la délivrance ou la solubilité d'un autre ingrédient pharmaceutique actif.

Ingrédient pharmaceutique actif

Le terme "ingrédient pharmaceutique actif' ou "API" désigne toute substance ou combinaison de substances utilisée dans un produit pharmaceutique fini, destinée à fournir une activité pharmacologique ou à avoir un effet direct dans le diagnostic, la guérison, l'atténuation, le traitement ou la prévention d'une maladie, ou à avoir un effet direct dans la restauration, la correction ou la modification des fonctions physiologiques chez les êtres humains. De préférence, le terme "ingrédient pharmaceutique actif" désigne une molécule destinée à être biologiquement active, par exemple dans le but de traiter une maladie, un trouble ou un état inflammatoire, auto-immun ou pulmonaire. De manière encore plus _ préférée, le terme " ingrédient pharmaceutique actif " fait référence à des substances dont la mise sur le marché nécessite une autorisation de mise sur le marché, par exemple comme prévu par la directive 2001/83/CE du 6 novembre 2001 instituant un code communautaire relatif aux médicaments à usage humain.

Virus respiratoires

Les virus respiratoires tels que le virus respiratoire syncytial humain et la grippe sont bien connus pour infecter les voies respiratoires inférieures, et tous deux peuvent provoquer des bronchites, des bronchiolites et des pneumonies. Le rhinovirus humain a traditionnellement été considéré comme un agent pathogène des voies aériennes supérieures en raison de son association avec les symptômes du rhume.

Voici des exemples de virus respiratoires, y compris les abréviations couramment utilisées

HPIV virus parainfluenza humain

HRSV virus respiratoire syncytial humain fièvre pharyngo-conjonctivale syndrome respiratoire aigu sévère

Stéroïdes

Les stéroïdes sont des composés anti-inflammatoires qui sont communément appelés stéroïdes, corticoïdes, glucocorticoides ou analogues du cortisol. Parmi ces corticostéroïdes, on peut citer la béclométhasone, le budésonide, le flunisolide, la fluticasone, le ciclésonide, la mométasone, ou tout composé comprenant la fraction active de l'un de ces corticostéroïdes, comme les sels, les dérivés et les prodrogues de ceux-ci.

En particulier, les corticostéroïdes choisis dans le groupe constitué par la fluticasone et le budésonide. Un corticostéroïde préféré est le budésonide.

Le budésonide est également appelé (R,S)- 1 1 (3,16a, 17,21 -tétrahydroxypregna- 1 ,4- diène-3,20- dione cyclique 16, 17-acétal avec butyraidehyde ou 16, 17- (butylidènebis(oxy))- 1 1 ,21 -dinydroxy-, (1 1 -B,16-a)-pregna-| ,4-diène-3,20-dione. La formule chimique, le poids moléculaire et le numéro CAS du budésonide sont respectivement C25H3406, MW : 430,5 et 51333-22-3. Le budésonide est un racémate constitué d'un mélange des deux diastéréoisomères 22 R et 22 S et est fourni commercialement sous forme d'un mélange des deux isomères (22R et 22 S). Les formulations commerciales de budésonide en solution sont fournies par AstraZeneca LP (Wilmington, Del.) sous la marque Pulmicort.

Le rapport molaire entre le stéroïde, de préférence le budésonide ou le ciclésonide, et l'HPBCD peut varier considérablement. Dans certains modes de réalisation, le rapport molaire est d'environ 1:1 à environ 1:100, de préférence d'environ 1:1 à 1:75 et encore plus préférablement d'environ 1:1 à environ 1:50.

Dans un mode de réalisation, aucun autre ingrédient pharmaceutique actif que le budésonide ou le ciclésonide n'est présent dans la composition inhalable en quantités thérapeutiquement efficaces pour laquelle l'HPBCD est utilisé pour délivrer un ingrédient pharmaceutique actif à d'autres parties du corps que le système respiratoire ou l'épithélium bronchique.

Dans un mode de réalisation, aucun autre ingrédient pharmaceutique actif que le budésonide n'est présent dans la composition inhalable en quantités thérapeutiquement efficaces pour laquelle l'HPBCD est utilisé pour augmenter la solubilité de l'autre ingrédient pharmaceutique actif dans l'eau.

Autres substances non-comprises

Dans un mode de réalisation, la composition est exempte d'agents flavonoïdes, tels que le Citrox. Dans un autre mode de réalisation, la composition est exempte d'huiles.

Bronchodilatateurs

Dans certains modes de réalisation, la composition ne comprend pas de bronchodilatateurs tels que le formotérol. Dans d'autres modes de réalisation, la composition comprend en outre des bronchodilatateurs tels que le formotérol.

Montant effectif

Les termes "quantité efficace" ou "quantité thérapeutiquement efficace", tels qu'ils sont utilisés ici, font référence à une quantité d'un agent actif tel que décrit ici qui contribue à l'obtention d'un ou plusieurs résultats cliniques souhaitables, tels que ceux décrits dans la description du "traitement" ci-dessus. Une quantité "efficace" appropriée dans chaque cas individuel peut être déterminée en utilisant des techniques standard connues dans l'art, telles qu'une étude d'escalade de dose. Dans certains modes de réalisation, tel qu'utilisé ici, leterme "quantité thérapeutiquement efficace" désigne une quantité d'un agent actif ou d'une combinaison d'agents efficace pour améliorer, retarder ou prévenir les symptômes.

La détermination d'une quantité thérapeutiquement efficace est tout à fait à la portée de l'homme de métier.

Effet

Les présents inventeurs ont découvert que l'inhalation d'une composition comprenant un complexe de HPBCD et de budésonide ou de ciclésonide est particulièrement appropriée pour la prévention ou le traitement direct des maladies virales respiratoires. En particulier, les présents inventeurs ont découvert qu'il s'agit de l'effet direct de l'administration topique d'une composition comprenant un complexe de HPBCD et de budésonide ou de ciclésonide sur le système respiratoire, en particulier la muqueuse nasale ou l'épithélium pulmonaire. Dans certains modes de réalisation, la composition est uniquement utilisée pour traiter les voies respiratoires inférieures, mais pas les voies respiratoires supérieures.

Bien que d'autres composés puissent être présents, il n'est pas nécessaire d'administrer d'autres ingrédients pharmaceutiques actifs et en particulier un autre ingrédient pharmaceutique actif anti-inflammatoire pour obtenir un effet positif sur la maladie virale respiratoire.

Dans un mode de réalisation, aucun autre ingrédient pharmaceutique actif que le budésonide ou le ciclésonide n'est présent dans la composition de la présente invention, dans laquelle l'HPBCD est principalement utilisé comme excipient solubilisant ou comme système d'administration de médicament.

Composition aqueuse inhalable

Dans un mode de réalisation, la composition de l'invention est aqueuse, ce qui signifie qu'elle est de préférence une composition liquide comprenant de l'eau comme constituant liquide prédominant. En conséquence, dans certains modes de réalisation, la composition inhalable est une composition comprenant de l'HPBCD, de l'eau et éventuellement un ou plusieurs autres composants appropriés pour une utilisation dans l'administration pharmaceutique, tels que des supports, des stabilisateurs, des diluants, des agents dispersants, des agents de suspension, des agents épaississants, ou des excipients, et des conservateurs antimicrobiens. Typiquement, ces composants sont présents en très faibles quantités, typiquement dans la gamme de 0,1 à 5 mg/ml.

Dans un autre mode de réalisation, la viscosité de la composition aqueuse inhalable est dans la gamme d'environ 0,0,1 mPa.s à environ 10 mPa.s, de préférence dans la gamme d'environ 0,5 mPa.s à environ 5 mPa.s et plus préférablement dans la gamme d'environ 0,8 mPa.s à environ 3 mPa.s à 20 °C, telle que mesurée par la Pharmacopée européenne ou la Pharmacopée américaine (USP) 911 - Viscosité (méthodes du viscosimètre capillaire).

Dans un autre mode de réalisation, la composition comprend une quantité efficace de

HPBCD, de sel ou de dérivé de celui-ci et un support pharmaceutiquement acceptable.

Une composition préférée pour la nébulisation comprend de l'HPBCD, du NaCl et de l'eau.

Lorsqu'elle est administrée sous forme d'aérosol, il est en outre préférable, pour des raisons de sécurité et de tolérance, que l'eau soit le seul liquide présent dans la composition. Toutefois, dans certains cas, il peut être acceptable que les liquides destinés à être inhalés comprennent une certaine quantité d'autres liquides, en particulier un ou plusieurs solvants organiques ayant une toxicité par inhalation relativement faible, tels que l'éthanol, le propylène glycol ou le glycérol. Dans un mode de réalisation, ces liquides sont presents en très faibles quantités, typiquement dans la gamme de 0,1 à 5 mg/ml.

La composition aqueuse est adaptée à une administration sous forme d'aérosol. En particulier, elle est conçue pour être inhalée afin de prévenir ou de traiter une maladie virale respiratoire affectant une région des voies respiratoires supérieures, telle que la muqueuse nasale ou les sinus paranasaux. Dans un autre mode de réalisation, la composition aqueuse est conçue pour être inhalée pour la prévention ou le traitement d'une maladie virale respiratoire affectant les voies respiratoires inférieures, en particulier le système bronchique.

La solution aqueuse peut être isotonique ou hypertonique. Une solution est isotonique lorsque sa concentration osmotique effective est la même que celle du cytosol à l'intérieur des cellules du système respiratoire. Une solution est hypertonique si sa concentration en solutés est supérieure à celle du cytosol à l'intérieur des cellules du système respiratoire. | est en outre préférable que le pH de la composition soit ajusté entre 3,5 et 7,5, de préférence entre 6,5 et 7 et encore plus préférablement entre 4,8 et 5,2. Le pH compris entre 4,8 et 5,2 peut de préférence être obtenu en ajoutant un tampon de pH. Les tampons de pH préférables sont l'acide citrique/citrate/acide ascorbique ou l'acide citrique/citrate/EDT A.

Afin d'ajuster le pH, la tension superficielle, la viscosité, l'osmolalité, la stabilité, le goût et d'autres propriétés de la composition, un ou plusieurs autres excipients peuvent être utilisés. Par exemple, la composition peut comprendre un ou plusieurs excipients choisis parmi les acides organiques pharmaceutiquement acceptables, les sels d'acides organiques, les acides inorganiques, les sels inorganiques, les bases, les sucres, les — alcools de sucre, les stabilisateurs, les antioxydants, les tensioactifs, les conservateurs et les agents masquant le goût.

La composition de la présente invention permet des formulations aqueuses et en poudre sèche dont les propriétés permettent une administration très efficace et pratique en aérosol ou en poudre sèche à l'aide des dispositifs de génération d'aérosols ou des inhalateurs de poudre sèche actuellement disponibles.

En conséquence, un autre objet de l'invention est l'utilisation de la composition de l'invention pour la prévention topique ou le traitement topique de la maladie virale respiratoire par un aérosol ou une poudre micronisée.

L'aérosolisation, au sens de la présente invention, désigne tout procédé de pulvérisation dui produit des gouttelettes. La taille des gouttelettes peut varier. Typiquementt, la taille des gouttelettes est comprise entre 1 et 100 microns, de préférence, entre 1,5 et 10 microns et encore plus préférentiellement entre 2 et 7 microns.

La micronisation, au sens de la présente invention, désigne tout procédé permettant de diminuer la taille des particules de poudres sèches jusqu'à une taille inhalable, de préférence entre 1 et 100 microns, de préférence, entre 1,5 et 10 microns et encore plus de préférence entre 2 et 7 microns.

Inhalateur de poudre sèche, au sens de la présente invention, désigne tout dispositif adapté à la micronisation de compositions de poudre sèche inhalables.

Enfin, la composition de la présente invention peut avoir très peu d'effets secondaires même lorsqu'elle est administrée à des doses très élevées, telles que des doses quotidiennes délivrées jusqu'à 180 mg/kg.

Les exemples suivants représentent des modes de réalisation de la présente invention et ne sont en aucun cas censés avoir une incidence sur la portée de la présente invention.

Quantité d'HPBCD dans la composition

La composition de la présente invention peut être une composition aqueuse ou une poudre.

Dans le cas d'une solution aqueuse, la quantité ou la teneur de la cyclodextrine dans la composition est choisie pour assurer une viscosité suffisamment faible à température ambiante en vue de l'inhalation. La viscosité dynamique, qui peut également être influencée par le choix et la quantité des autres excipients, a également une nette influence sur la distribution granulométrique de l'aérosol formé par nébulisation et sur l'efficacité de la nébulisation. Dans un mode de réalisation, la viscosité peut être ajustée dans une gamme d'environ 0,8 à environ 3 mPas à température ambiante. Dans un autre mode de réalisation, la viscosité dynamique de la composition est dans la gamme d'environ 0,8 à environ 2,5 mPas ou même d'environ 0,9 à environ 1,3 mPas à température ambiante.

Typiquement, la concentration en HPBCD dans la composition selon la présente invention est comprise entre environ 1 millimolaire et environ millimolaire, de préférence entre 5 millimolaires et environ 50 milimolaires, et plus préférablement entre environ 7 millimolaires et environ 40 millimolaires. D'autres concentrations préférées vont d'environ 10 millimolaires à environ 30 millimolaires et d'environ 15 millimolaires à environ 25 millimolaires.

Poudre inhalable

Dans le cas d'une poudre, la composition est de préférence une poudre séchée par pulvérisation.

Dans un autre mode de réalisation, la composition se présente sous la forme d'une poudre inhalable, de préférence sous la forme d'une poudre séchée par pulvérisation.

Dans un autre mode de réalisation, la composition inhalable est sous la forme de microparticules sphériques, dans laquelle a. Les microparticules ont un diamètre aérodynamique massique médian de 0,1 micron ou plus et de 5 microns ou moins ; b. Les microparticules ont une structure cœur-coquille, le support formant la coquille et l'ingrédient pharmaceutique actif formant le cœur ; c. Les microparticules présentent une pluralité de dépressions superficielles en forme de balles de golf identifiables par microscopie électronique à balayage ; d. La profondeur maximale moyenne d des dépressions de surface (1) est de 5 % ou plus et de 30 % ou moins par rapport au diamètre maximal moyen D des microparticules ; et e. 50% de surface ou plus par rapport à la surface totale des microparticules sont déprimées.

Un procédé exemplaire de fabrication de telles microparticules sphériques par séchage par pulvérisation ainsi que des compositions appropriées sont décrits dans l'exemple 1, en particulier dans les tableaux 1 et 2 de la demande internationale de brevet

WO2021048322A1 à Aquilon Pharmaceuticals.

Concentration et dosage quotidien de la cyclodextrine

Dans un mode de réalisation, la composition inhalable est une solution aqueuse et dans laquelle la concentration de HPBCD est de 5 millimoles à 50 millimoles, de préférence de 7 millimoles à 40 millimoles, encore plus préférablement de 10 millimoles à 30 millimoles.

Dans un mode de réalisation, l'HPBCD est administré par inhalation à raison de 0,1 mg à 30 mg par jour. Dans un autre mode de réalisation, l'HPBCD est administré par inhalation à raison de 0,5 mg à 20 mg par jour. Dans un autre mode de réalisation, 'HPBCD est administré par inhalation à raison de 1 mg à 10 mg par jour. Dans un autre mode de réalisation, le HPBCD est administré à des enfants âgés de moins de deux ans par inhalation à raison de 0,1 mg à 0,5 mg par jour. Dans un autre mode de réalisation, le

HPBCD est administré à des enfants âgés de deux à six ans par inhalation à raison de 0,5 mg à 1 mg par jour. Dans un autre mode de réalisation, le HPBCD est administré à des enfants âgés de 6 à 14 ans par inhalation à raison de 1 mg à 2 mg par jour.

Concentration et dose quotidienne de corticostéroïde

Dans un autre mode de réalisation, la composition inhalable comprend du budésonide ou du ciclésonide en une quantité de 0,020 mg/ml à 0,70 mg/ml, de préférence d'environ 0,05 mg/ml à environ 0,5 mg/ml et plus préférablement d'environ 0,1 mg/ml à 0,25 mg/ml.

Si la composition comprend également un composé stéroïde, la dose quotidienne du composé stéroïde est typiquement comprise entre 1 microgramme et 500 microgrammes, de préférence entre environ 30 microgrammes et environ 200 microgrammes par jour.

Dans certains modes de réalisation, la dose journalière du composé stéroïde est comprise entre 50 microgrammes et 150 microgrammes et encore plus préférablement entre 75 microgrammes et 125 microgrammes.

Dans un autre mode de réalisation, le budésonide ou le ciclésonide est administré par inhalation à raison de 0,020 mg à 0,700 mg par jour, de préférence à raison de 0,05 mg à 0,5 mg par jour, encore plus préférentiellement à raison de 0,07 mg à 0,25 par jour.

Inhalateur à base de jet de Rayleigh

Les compositions inhalables des présentes inventions sont de préférence administrées par des inhalateurs à base de jet de Rayleigh.

Dans un mode de réalisation, les inhalateurs à jet de Rayleigh pour solutions aqueuses sont disponibles dans le commerce auprès de Medspray. Ces unités de buse sont basées sur des buses à orifice simple, créant des jets de Rayleigh. Un trou de 2 microns crée un jet qui se décompose en trains de gouttelettes mono-dispersées de 4 microns. Le diamètre des gouttelettes est égal à deux fois la taille de l'orifice. La taille de l'orifice peut être modifiée pour répondre aux exigences spécifiques des dispositifs. Les puces des buses de pulvérisation sont généralement fabriquées à l'aide de technologies généralement vues dans les puces d'ordinateur.

Exemples

Les exemples suivants sont donnés à titre d'illustration. Toutefois, ils ne sont pas destinés à limiter l'invention de quelque manière que ce soit.

Exemple 1.1 - Aq001S

Lot cliniqueLot cliniqueLot clinique

BUAQ-L09 BUAQ-L10 BUAQ-L11 anti par mi 0,125 mg 0,0625 mg 0,250 mg

HPBCD 17,5 mg 875mg

Acide cirigue 0,3064mg® | 0,30626 mg (a) | 0,30626 mg (a) monohydraté

Citrate trisodique 0,500 mg 0,500 mg 0,500 mg dinydraté

Chlorure de 8,00 mg 8,25 mg 8,00 mg sodium

Edétate 0,500 mg 0,500 mg 0,500 mg disodique

7 LL 1

Jusqu'à 1 ml Jusqu'à 1 ml | Jusqu'à 1 ml (a) ajusté avec HCI ou NaOH si nécessaire pour atteindre un pH = 4,5

Exemple 1.2 - AQ3S à base de ciclésonide a 1 ent par mi 0,070 mg 0,035 mg 0140 mg

Acide citrique| 0,3064mg@ | 0,30626 mg (a) | 0,30626 mg (a) monohydraté

Citrate trisodique 0,500 mg 0,500 mg 0,500 mg dinydraté

Chlorure de 8,00 mg 8,25 mg 8,00 mg sodium

Edétate 0,200 mg 0,200 mg 0,200 mg disodique dinydrate

Jusqu'à 1 ml Jusqu'à 1 ml | Jusqu'à 1 ml

Exemple 2 : Évaluation des compositions pharmaceutiques de l'exemple 1 ou de l'exemple 7 sur la physiopathologie liée à l'infection virale, par exemple Covid-19, en utilisant un modèle expérimental in vivo de rongeur par une étude longitudinale. 2.1. Conception de l'étude :

L'étude longitudinale consiste en un suivi d'indicateurs mesurés de manière non invasive avant et après l'infection virale d'animaux rongeurs ; l'étude s'étend sur 16 jours. Les paramètres mesurés de manière non invasive sont décrits dans le paragraphe "indicateurs mesurés”. Lorsque les rongeurs sont sacrifiés, du sang est prélevé pour l'analyse de la réponse sérologique. Cinq groupes de rongeurs appariés en termes de sexe, d'âge et de poids sont comparés : (1) Rongeurs non infectés traités uniquement avec la solution tampon B (voir description 2) (2) Rongeurs infectés traités avec la solution tampon B (voir description 2), (3) Rongeurs infectés traités avec une solution aqueuse contenant de l'hydroxypropyl- bêta-cyclodextrine (HP-bêta-CD) de (voir description 2), choisie parmi les compositions 1 à 4 de l'exemple 1, (4) Rongeurs infectés traités avec une solution aqueuse contenant du HP-bêta-CD qui résulte du mélange adéquat de la solution À et de la solution B (voir description 2) choisie parmi les compositions 5 à 12 de l'exemple 1 (HP-bêta-CD avec budésonide en solution), (5) Rongeurs infectés traités au Monlupiravir sous le nom de code MK-4482, qui est une référence positive contre le virus SARS-CoV-2. Le MK-4482 est administré per os.

Ajouter un résumé du protocole sur les non-rongeurs et le HRSV

La taille de chaque groupe expérimental est de 10 personnes.

Inoculation :

Un stock de virus est préparé, titrant 106 TCID50/mI d'une souche SARS-CoV-2. Un — inoculum constitué de 100 juil du stock de virus est inoculé à chaque rongeur par dépôt de 50 ul dans chaque narine. L'inoculation est effectuée sous une brève anesthésie générale à l'isoflurane. Le réveil des rongeurs intervient après 90 secondes maximum. Le terme

TCID50 décrit la quantité de virus nécessaire à la destruction de 50% des colonies cellulaires infectées.

Inhalation :

Pour chaque jour de l'expérience, une seule administration par inhalation des compositions pharmaceutiques est testée, de préférence par inhalation intranasale pour une meilleure reproductibilité et une meilleure déposition pulmonaire. La première administration par inhalation est réalisée 1 h après l'noculation du virus. Les administrations successives des éléments testés sont réalisées à intervalles de 24 h pendant 14 jours consécutifs. 2.2. Indicateurs mesurés :

Poids corporel deux fois par jour, pendant 16 jours (2 jours avant l'inoculation virale, 14 jours après l'inoculation).

Score clinique, une fois par jour pendant 16 jours (2 jours avant l'inoculation virale, 14 jours après l'inoculation). Les paramètres observés sont résumés dans le tableau 1 suivant selon le tableau mentionné dans la publication : Sci Rep. 2019 ; 9 : 5919. Publié en ligne le 11 avril 2019. doi : 10.1038/s41598-019-42414-4.

Tableau 1 : Fiche de notation :

Tableau 1.1. Observation :

DO ON

ELLIS spontane et Dépréciatio | 1 posture de la n tête mn B LLL LL

Comporteme | Inconscient nt d'élocution | €, trouve les seins imme- diatement

Retardé, 1 difficultés à trouver des seins en PF NY

Soins Suçage infirmiers vigoureux, lait brillant, taches

Tétée 1 réduite, tache de lait faible

Semaine 3 de succion, pas de trace de lait (EE LL

Tableau 1.2. Examen :

Lu Nu Pt

Temps de | <=5 remplissag | secondes e capillaire Fz: 10 7

> 10 3 secondes

Déshydrata | Turgor tion régulier

Diminution 1 de la turgescence (le pli cutané sur le dos reste pendant quelques secondes)

Turgescenc | 3 e fortement diminuée (pli cutané sur le dos reste)

Réaction à | Immédiatem la ent a LD tactile aan 19 |L

Palpation Ventre abdominale | indolore et doux

La défense | 1 circonscrite

Ventre 3 douloureux et dur

Tableau 1.3 : Évaluation A

Notez uniquement le nombre de points le plus élevé attribué à chaque catégorie ; si deux ou plusieurs catégories obtiennent le maximum de 3 points, toutes les valeurs de 3 points sont portées à 4 points.

Tableau 1.4 : Évaluation B

Notez uniquement le plus grand nombre de points attribués par catégorie.

Tableau 1.5 : Évaluation B

Notez uniquement le plus grand nombre de points attribués par catégorie.

Tableau 1.6 : Évaluation C

Faites la somme des points attribués par catégorie

Tableau 1 : scores cliniques (Sci Rep. 2019 ; 9 : 5919. Publié en ligne le 11 avril 2019. doi : 10.1038/s41598-019-42414-4).

Valeurs de la fonction respiratoire, par pléthysmographie du corps entier, avant l'inoculation (j-1) et 3, 5, 7 et 14 jours après l'inoculation. Le terme "pléthysmographie" décrit les mesures de changement de volume dans différentes zones du corps.

Description des altérations histologiques des poumons, des reins, du cœur et du cerveau sur des coupes colorées à l'hématoxyline et éosine au 14e jour après l'inoculation.

Détection du virus SARS-CoV-2 par immunohistochimie au jour 14 après inoculation.

Charge génomique virale pulmonaire (RT-qPCR) au jour 14 après inoculation.

Titre de neutralisation plasmatique anti-SARS-CoV-2, au 14ème jour après inoculation.

Exemple 3. Évaluation des compositions pharmaceutiques de l'exemple 1 sur la physiopathologie liée à une infection virale, par exemple Covid-19, en utilisant un modèle expérimental in vivo de rongeur par une étude séquentielle : 3.1. Conception de l'étude :

L'étude séquentielle consiste en un suivi séquentiel de la maladie COVID-19 induite, avec sacrifice d'un sous-groupe d'animaux toutes les 48 heures jusqu'au 10ème jour après inoculation (5 points temporels). Les indicateurs invasifs suivis sont décrits dans le paragraphe "indicateurs séquentiels mesurés" et ils sont mesurés à chaque point temporel.

Cinq groupes de rongeurs appariés en termes de sexe, d'âge et de poids sont comparés (1) Rongeurs non infectés traités uniquement avec la solution tampon B (voir description 2), (2) Rongeurs infectés traités avec la solution tampon B (voir description 2), (3) Rongeurs infectés traités avec une solution aqueuse contenant du HP-beta-CD de ( voir description 2), choisie parmi les compositions 1 à 4 de l'exemple 1, (4) Rongeurs infectés traités avec une solution aqueuse contenant du HP-bêta-CD qui résulte du mélange adéquat de la solution À et de la solution B (voir description 2) choisie parmi les compositions 5 à 8 de l'exemple 1 (HP-bêta-CD avec budésonide en solution), (5) Rongeurs infectés traités avec du Monlupiravir sous le nom de code MK-4482, qui est une référence positive contre le virus SARS-CoV-2. Le MK-4482 est administré per os.

La taille de chaque groupe expérimental est de 6 personnes.

Inoculation :

Un stock de virus est préparé, titrant 106 TCID50/mI d'une souche SARS-CoV-2. Un inoculum constitué de 100 ul du stock de virus est inoculé à chaque rongeur par dépôt de 50 ul dans chaque narine. L'inoculation est effectuée sous une brève anesthésie générale à l'isoflurane. Le réveil du rongeur a lieu après 90 secondes maximum.

Inhalation :

Pour chaque jour de l'expérience, une seule administration par inhalation des compositions pharmaceutiques est testée, de préférence par inhalation intranasale pour une meilleure reproductibilité et une meilleure déposition pulmonaire. La première administration par inhalation est réalisée 1 h après l'noculation du virus. Les administrations successives des éléments testés sont réalisées à intervalles de 24 h pendant 10 jours consécutifs. 3.2. Indicateurs mesurés séquentiels :

Poids corporel, deux fois par jour, pendant 12 jours (2 jours avant et 10 jours après l'inoculation virale)

Score clinique, une fois par jour, pendant 12 jours (2 jours avant l'inoculation virale, 10 jours après l'inoculation). Les paramètres observés sont résumés dans le tableau 1 ci-dessus selon le tableau mentionné dans la publication : Sci Rep. 2019 ; 9 : 5919. Publié en ligne le 11 avril 2019. doi : 10.1038/s41598-019-42414-4.

Valeurs de la fonction respiratoire, par pléthysmographie du corps entier, avant — l'inoculation (j-1) et 2, 4, 6, 8 et 10 jours après l'inoculation virale.

Charge génomique virale pulmonaire (RT-gPCR) à chaque point temporel (c'est-à-dire 2, 4 6, 8 et 10 jours après l'inoculation virale).

Charge virale infectieuse pulmonaire (TCID50) à chaque point temporel (c'est-à-dire 2, 4, 6, 8 et 10 jours après l'inoculation virale).

Poids des poumons et description des altérations histologiques des poumons sur des coupes colorées à l'hématoxyline et à l'éosine à chaque moment (c'est-à-dire 2, 4, 6, 8 et 10 jours après l'inoculation virale).

Détection du virus SARS-CoV-2 par immunohistochimie à chaque point temporel (c'est-à- dire 2, 4, 6, 8 et 10 jours après l'inoculation virale).

Suivi de l'expression des cytokines/chimiokines pulmonaires, par exemple IL-1, IL-2, IL-4,

IL-6, IL-10, IL-12p35, TGFb, TNF, IFN et IP10, par RT-gPCR (ELISA ou qPCR) à chaque point temporel (c'est-à-dire 2, 4, 6, 8 et 10 jours après l'inoculation virale).

Exemple 4 : Évaluation des compositions pharmaceutiques de l'exemple 1 ou de l'exemple 1.2 sur la pathophysiologie liée à l'infection virale, par exemple le HRSV, en utilisant un modèle expérimental in vivo de non-rongeur, par exemple le modèle du furet : 4.1. Conception de l'étude :

Préparation du virus : La souche de type sauvage du HRSV du sous-groupe A a été passée exclusivement dans des cellules HEp-2.

Les furets ont été répartis au hasard dans des groupes de traitement de 5 animaux.

Cinq groupes de furets appariés en termes de sexe, d'âge et de poids sont comparés : (1) Furets non infectés traités uniquement avec la solution tampon B (voir description 2), (2) Furets infectés traités avec la solution tampon B (voir description 2), (3) Furets infectés traités avec une solution aqueuse contenant du HP-B-CD choisie parmi les compositions 1 à 4 de l'exemple 1 (dose 1), (4) Furets infectés traités avec une solution aqueuse contenant du HP-B-CD qui résulte du mélange adéquat de la solution A et de la solution B (voir description 2), choisie parmi les compositions 5 à 8 de l'exemple 1 (HP-beta-CD avec budésonide en solution) (dose 2), (5) Furets infectés traités avec un médicament antiviral, qui constitue une référence positive contre les antiviraux.

Inoculation :

Au jour 0, tous les animaux sont infectés par 105 TCID50 de HRSV de type sauvage de faible passage du sous-groupe A par inoculation intra-nasale d'un volume de 0,3 ml. Des écouvillons de gorge et de nez sont prélevés quotidiennement dans un milieu de transport de virus de 3 ml, et des échantillons de sang sont prélevés -3, -2, 0, 2, 4, 6, 14 et 21 jours après l'injection. Les animaux sont euthanasiés par exsanguination à 4, 7 ou 21 jours après l'injection.

Inhalation :

Pour chaque jour de l'expérience, une seule administration par inhalation des compositions pharmaceutiques est testée, de préférence par inhalation intranasale pour une meilleure reproductibilité et une meilleure déposition pulmonaire. La première administration par inhalation est réalisée 1 h après l'inoculation du virus. Les administrations successives des éléments testés sont réalisées à intervalles de 24 h pendant 21 jours consécutifs. 4.2. Indicateurs mesurés :

Après le prélèvement, les lavages de nez, les écouvillons nasaux et les écouvillons de gorge sont traités et les titres de virus infectieux et les concentrations d'ARN viral sont mesurés par isolement du virus et transcription inverse-PCR (RT-PCR).

Des échantillons de poumons droits et de cornets nasaux ainsi que de la trachée et des bronches sont traités avant l'évaluation de la charge virale par isolement du virus et PCR quantitative (qPCR). Les titres de virus infectieux dans les tissus sont exprimés en log10

TCID50 par gramme de tissu, et les titres de virus infectieux dans les lavages de nez et les écouvillons sont exprimés en log10 TCID50/mL.

Les sections de tissu fixées au formol seront traitées de façon routinière, incorporées en paraffine et sectionnées à 3-4 um, puis colorées à l'hématoxyline et à l'éosine pour un examen histopathologique au microscope optique. Pour l'immunohistochimie, des lames — sériées supplémentaires sont sectionnées simultanément et incubées pendant 1 h avec une peroxydase de chèvre anti-HRSV (PO).

Mesure des réseaux d'ADN produits par les neutophiles

Exemple 5 : évaluation des compositions pharmaceutiques de l'exemple 1 ou de l'exemple 7 sur la physiopathologie liée à l'infection par la grippe A en utilisant un modèle expérimental de souris in vivo :

Une variante de l'exemple 2 consiste à infecter des rongeurs, de préférence des souris, avec la souche du virus de l'influenza A/PR8/34 (H1N1). La suspension mère de virus (108 PFU/ml) a été diluée et 50 ul de solution (correspondant à 5 PFU) ont été administrés — à des souris anesthésiées à l'isoflurane (Nat Immunol.2019 November ; 20 (11) : 1444- 1455. doi:10.1038/s41590-019-0496-9). Le terme PFU signifie Plaque Forming Units et il décrit le nombre de particules virales capables de former des plaques par unité de volume.

Il s'agit d'une mesure de substitution plutôt que d'une mesure de la quantité absolue de particules : les particules virales défectueuses ou qui ne parviennent pas à infecter leur cellule cible ne produiront pas de plaque et ne seront donc pas comptées.

Une autre variation par rapport à l'exemple 2 sera le moment du sacrifice : certains animaux étant déjà sacrifiés 24 heures après l'inoculation. Autres moments de sacrifice : 2, 4,6, 8 et 10 jours après l'inoculation virale.

Indicateurs mesurés : = Poids corporel, deux fois par jour, pendant 12 jours (2 jours avant et 10 jours après l'inoculation virale) = Score clinique, une fois par jour, pendant 12 jours (2 jours avant et 10 jours après l'inoculation virale). Les paramètres observés sont résumés dans le tableau 1 ci- dessus selon le tableau mentionné dans la publication : Sci Rep. 2019 ; 9 : 5919.

Publié en ligne le 11 avril 2019. doi : 10.1038/s41598-019-4241444. =» Poids des poumons et description des altérations histologiques pulmonaires sur des coupes colorées à l'hématoxyline et à l'éosine à chaque moment (c'est-à-dire 24 heures, 2, 4, 6, 8 et 10 jours après l'inoculation virale). = Sous-types de cellules inflammatoires : macrophages (alvéolaires, interstitiels), neutrophiles polynucléaires, lymphocytes, cellules NK, cellules dendritiques, granulocytes, production de NET à chaque point temporel (c'est-à-dire 24 heures, 2, 4, 6, 8 et 10 jours après l'inoculation virale) filets ADN

Exemple 6 : évaluation de l'efficacité / pharmacodynamique (PD) des compositions pharmaceutiques de l'exemple 1 sur les symptômes liés à l'infection à Covid-19 par unessai clinique de phase 2a : 6.1. Objectif :

Les objectifs de l'essai clinique sont d'évaluer l'efficacité/pharmacodynamique et la sécurité des produits pharmaceutiques liquides composés de HP-beta-CD et de

Budesonide dans le traitement des symptômes du COVID-19 chez les patients — hospitalisés, pendant et après leur hospitalisation. 6.2. Méthodologie :

- Etude clinique de phase 2a, randomisée, en double aveugle, contrôlée par placebo, menée en parallèle, dans plusieurs centres et à doses multiples chez des adultes admis à l'hôpital avec un test RT-PCR positif confirmé pour le SRAS-CoV-2. - Taille de l'étude : Un total de 99 patients adultes seront recrutés dans l'essai. - Deux (2) doses de compositions pharmaceutiques (cf. ci-dessous) sont testées dans l'étude clinique et comparées à une solution d'inhalation placebo. - Les traitements seront administrés pendant 28+2 jours. - Deux évaluations intermédiaires des données de sécurité et d'efficacité seront effectuées après les 30 premiers patients et les 60 premiers patients. 6.3. Composition : La composition pharmaceutique testée dans cet essai clinique est composée de 17,5 mg/ml de HP-beta-CD et de 0,125 mg/ml de budésonide. La composition liquide comprend également des antioxydants, à savoir de l'EDTA, de l'acide citrique monohydraté et du citrate trisodique dinydraté, ainsi qu'un ajusteur de pH compris entre 4 et 7. L'osmolarité de la solution est ajustée avec des quantités adéquates de chlorure de sodium. Deux doses de cette solution pharmaceutique seront testées dans l'essai clinique. Le placebo est une solution saline, par exemple une solution parentérale isotonique de NaCl à 0,9 %. La composition pharmaceutique et le placebo sont administrés aux patients à l'aide de dispositifs d'inhalation, par exemple les inhalateurs

PulmoSprayTM SP et PulmoSprayTM ST à brume souple lorsque le patient est hospitalisé ou avec le système d'inhalation PARI BOY® Classic lorsque le patient sort de l'hôpital.

PulmoSprayTM SP est un inhalateur à brume souple à utiliser en combinaison avec le

Respi Lever DriveTM RP004 lorsque le patient est hospitalisé mais n'est pas sous ventilation mécanique.

PulmoSprayTM ST est un inhalateur à brume souple à utiliser sans Respi Lever DriveTM

RP004 lorsque le patient est hospitalisé et sous ventilation mécanique. 6.4.. Indicateurs mesurés :

Pour le critère d'évaluation efficacité/PD, l'efficacité est évaluée par :

Échelle de progression clinique COVID-19, c'est-à-dire une échelle composite permettant — l'analyse de paramètres de bien-être reproductibles, non invasifs et largement utilisés décrivant l'évolution clinique de la maladie. Le critère d'évaluation sera le changement entre le début de l'étude et le jour 28 +2, et sur la période d'administration. L'expression ‘échelle de progression clinique" reflète la trajectoire des patients et l'utilisation des ressources au cours de la maladie clinique (https://doi.0rg/10.1016/5S1473- 3099(20)30483-7).

Changement de l'échelle de dyspnée modifiée du Medical Research Council (MMRC) de la ligne de base au jour 28 +2, et à chaque visite pendant la période d'administration.

L'échelle de dyspnée modifiée (MMRC) quantifie l'incapacité attribuable à l'essoufflement et est utile pour caractériser la dyspnée de base chez les patients atteints de maladies respiratoires. (J C Bestall, E À Paul, R Garrod, R Garnham, P W Jones JAW. Usefulness of the Medical Research Council (MRC) dyspnoea scale as a measure of disability in patients with chronic obstructive pulmonary disease. (Thorax 1999 ; 54:581-586) ; hnttps://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10377201/).

Changements dans les évaluations de la fonction pulmonaire de la ligne de base au jour 28+2, et à chaque visite pendant la période d'administration.

Changements de la capacité de diffusion du monoxyde de carbone entre la ligne de base et le jour 28+2, et à chaque visite pendant la période d'administration.

Changements dans la tomographie pulmonaire assistée par ordinateur (CT Scan) entre la ligne de base et le jour 2842.

Pour le critère d'efficacité/PD, le PD est évalué par : = Changements des biomarqueurs inflammatoires et cardiovasculaires systémiques entre le début de l'étude et le jour 28+2, et à chaque visite pendant la période d'administration. = Changements dans les taux d'immunoglobulines de la ligne de base au jour 28+2, et à chaque visite pendant la période d'administration. = Les principaux critères d'évaluation de la sécurité sont les événements indésirables (El) et les événements indésirables graves (EIG), la tolérance générale, les paramètres de laboratoire pour l'hématologie, la biochimie et l'analyse d'urine, la tolérance locale, la fréquence respiratoire et la saturation en oxygène.

Les points finaux exploratoires sont : = Résultats du test de marche de 6 minutes (6MWT) au jour 28£2 = Changements dans l'oxymétrie noctume de la ligne de base au jour 28+2

= Changements dans le questionnaire de Saint-Georges de la ligne de base au jour 28+2 = Changements de la douleur thoracique sur l'échelle visuelle analogique entre le début de l'étude et le jour 28+2, et à chaque visite pendant la période d'administration. Le terme échelle visuelle analogique (EVA) définit une échelle de réponse psychométrique qui peut être utilisée dans les questionnaires. II s'agit d'un instrument de mesure des caractéristiques ou attitudes subjectives qui ne peuvent être mesurées directement. Lorsqu'ils répondent à un item de l'EVA, les répondants précisent leur niveau d'accord avec une affirmation en indiquant une position le long d'une ligne continue entre deux points extrêmes. = Changements dans le questionnaire de qualité de vie Asthma Control

Questionnaire -5 (ACQ-5) entre le début de l'étude et le jour 28+2, et à chaque visite pendant la période d'administration. = Mesure des niveaux d'exosomes circulants dans le sang à partir de la ligne de base et jusqu'au jour 28+2, et à chaque visite pendant la période d'administration.

Exemple 7

AQ001S Pharmacologie dans des modèles de rongeurs d'inflammation respiratoire aiguë induite par le LPS (axée sur les types de cellules neutrophiles et macrophages)

Des souris naïves seront exposées à de faibles doses de LPS et traitées par instillation intratrachéale d’AQ001S (différentes doses). Les paramètres d'inflammation aiguë et chronique seront évalués respectivement 24 heures et 7 jours après la stimulation par le

LPS.

Les marqueurs directs de la pharmacodépendance suivants seront utilisés comme indicateurs pour évaluer l'efficacité du médicament dans ce modèle expérimental : = Nombre et phénotype des neutrophiles dans les tissus pulmonaires (analysés par cytométrie de flux) (après 24h) = Libération de NETS dans les poumons (analysée par western blot sur des extraits de protéines pulmonaires sur l'histone 3 citrullinée, ou par microscopie confocale sur des coupes de tissus) (après 24h) = Présence d'ADN extracellulaire ou de complexes MPO-ADN dans le LBA (après 24h)

= Production de cytokines pro-inflammatoires dans le surnageant pulmonaire total (après 24h) = Nombre et phénotype des monocytes, des macrophages alvéolaires et des macrophages interstitiels dans les tissus pulmonaires (analysés par cytométrie de flux) (après 24h) = Nombre, phénotype et fonctions régulatrices des monocytes, des macrophages alvéolaires et des macrophages interstitiels dans les tissus pulmonaires (analysés par cytométrie de flux) (après 7 jours)

Évaluation ex vivo de la sécrétion de cytokines anti-inflammatoires ou pro-inflammatoires par les différents types de macrophages isolés des poumons de souris stimulées par le

LPS et traitées ou non par AQ001S.

L'inflammation et la réparation des tissus seront évaluées par microscopie biphotonique (pour identifier le dépôt de collagène), examen histologique (7 jours).

Des investigations seront menées pour étudier les lésions pulmonaires aiguës (emphysème, inflammation pulmonaire …) et leur évolution en réponse au traitement par

AQ001S (données in vivo en temps réel combinées aux données histologiques). Plus précisément, les résultats d'imagerie suivants sont attendus :

La uCT permettra de mettre en évidence diverses opacités radiologiques et des schémas spécifiques aux maladies dans les poumons avec une haute résolution, tant in vivo qu'ex vivo. Ces images pourraient être utilisées par RDX pour déterminer et valider de nouveaux biomarqueurs pour le diagnostic non invasif de différentes conditions inflammatoires dans les poumons au moyen de ses outils de traitement de l'IA. Pour obtenir des images à haute résolution, le mouvement respiratoire doit être minimisé. Dans ce but, différentes stratégies seront testées et évaluées sur HCT pour le gating pulmonaire, c'est-à-dire l'acquisition d'images synchronisées avec le cycle respiratoire de l'animal.

L'utilisation de fluorodéoxyglucose (18F-FDG) et de neutrophiles radiomarqués comme radiotraceurs dans les expériences de uPET fournira des données de quantification in vivo dans le temps liées à inflammation pulmonaire et au recrutement des neutrophiles, puisque les deux molécules radiomarquées s'accumulent dans les sites inflammatoires avec des cinétiques différentes.

Les paramètres histologiques seront corrélés avec les données d'imagerie recueillies tout au long du modèle, avec un intérêt particulier pour le moment du développement de inflammation et sa réponse au traitement par AQ001S.

Les solutions d'AQ001M pourraient également être testées dans ces expériences afin de fournir des données de transition entre les deux formulations de budésonide.

Exemple 8

Pharmacologie de l'AQ001S dans des modèles de culture in vitro ou dans des échantillons provenant d'expériences in vivo.

Les paramètres suivants seront étudiés sur des modèles in vitro : = Apoptose des neutrophiles et production de ROS (cytométrie de flux), = Expression des marqueurs des TNE (myéloperoxydase, élastase neutrophile, peptidyl-arginine désaminase 4, MTOR et MEK/ERK) (qRT-PCR). = Analyse dynamique et cinétique de la formation et de la libération des NETs (microscopie à fluorescence en temps réel) = Composition dynamique de la membrane des pneumocytes (et/ou neutrophiles) et modifications des propriétés biophysiques (microscopie confocale à fluorescence en temps réel ou microscopie à disque rotatif) = Modifications subcellulaires (microscopie à fluorescence à haute résolution, microscopie électronique) = Les solutions d'AQ001M pourraient également être testées dans ces expériences afin de foumir des données de transition entre les deux formulations de budésonide.

Claims

REVENDICATIONS

1. Composition inhalable comprenant un complexe d'hydroxypropyl-bêta- cyclodextrine (HPBCD) ou d'un dérivé pharmaceutiquement acceptable de celle- ci et de budésonide ou de ciclésonide pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire.

2. Composition inhalable destinée à être utilisée dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire selon la revendication 1, dans laquelle le virus respiratoire est choisi dans le groupe constitué par les adénovirus, le bocavirus humain, le coronavirus humain, le métapneumovirus humain, le virus parainfluenza humain, le virus respiratoire syncytial humain, le rhinovirus humain, la fièvre pharyngo-conjonctivale, et tout autre virus provoquant le syndrome respiratoire aigu sévère ou leurs combinaisons.

3. Composition inhalable destinée à être utilisée dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire de l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle a. aucun autre ingrédient pharmaceutique actif n'est présent en quantités thérapeutiquement efficaces pour lequel l'HPBCD est utilisé pour délivrer un ingrédient pharmaceutique actif à d'autres parties du corps que le système respiratoire ou l'épithélium bronchique.

b. aucun autre ingrédient pharmaceutique actif n'est présent en quantités thérapeutiquement efficaces pour lequel l'HPBCD est utilisé pour augmenter la solubilité de l'autre ingrédient pharmaceutique actif dans l'eau.

4. Composition inhalable destinée à être utilisée dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire de l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la composition inhalable comprend du HPBCD en une quantité de 1 mg/ml à 100 mg/ml, de préférence d'environ 5 mg/ml à environ 80 mg/ml et plus préférablement d'environ 8,00 mg/ml à 60 mg/ml.

5. Composition inhalable destinée à être utilisée dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire de l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la composition inhalable comprend du budésonide ou du ciclésonide en une quantité comprise entre 0,020 mg/ml et 0,70 mg/ml, de préférence entre environ 0,05 mg/ml et environ 0,5 mg/ml et plus préférablement entre environ 0,1 mg/ml et 0,25 mg/ml.

6. Composition inhalable pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire de l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la viscosité de la composition inhalable est dans la gamme d'environ 0,0,1 mPa.s à environ 10 mPa.s, de préférence dans la gamme d'environ 0,5 mPa.s à environ 5 mPa.s et plus préférablement dans la gamme d'environ 0,8 mPa.s à environ 3 mPa.s à 20°C telle que mesurée selon

USP.

7. Composition inhalable pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire de l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la composition est une poudre séchée par pulvérisation.

8. Composition inhalable destinée à être utilisée dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire de l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle le HPBCD est administré par inhalation à raison de 0,1 mg à 30 mg par jour, de préférence à raison de 0,5 mg à 20 mg par jour, encore plus préférentiellement à raison de 1 mg à 10 mg par jour.

9. Composition inhalable pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire de l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle le budésonide ou le ciclésonide est administré par inhalation à raison de 0,020 mg à 0,700 mg par jour, de préférence à raison de 0,05 mg à 0,5 mg par jour, encore plus préférablement à raison de 0,07 mg à 0,25 par jour.

10. Composition inhalable pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire de l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la composition inhalable est administrée à des enfants âgés jusqu'à deux ans par inhalation, dans laquelle le HPBCD est administré en une quantité de 0,1 mg à 1,0 mg par jour et dans laquelle le budésonide ou le ciclésonide est administré en une quantité de 0,05 mg à 0,12 mg par jour.

11. Composition inhalable pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire de l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la composition inhalable est administrée à des enfants âgés de 2 à 6 ans par inhalation, dans laquelle le HPBCD est administré à raison de 0,05 mg à 0,20 mg par jour et dans laquelle le budésonide ou le ciclésonide est administré par inhalation à raison de 0,15 mg à 0,20 mg par jour.

12. Composition inhalable pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire de l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle la composition inhalable est administrée à des enfants âgés de 6 à 14 ans par inhalation, dans laquelle le HPBCD est administré à raison de 0,1 mg à 20 mg par jour et dans laquelle le budésonide ou le ciclésonide est administré par inhalation à raison de 0,25 mg à 0,5 mg par jour.

13. Inhalateur à base de jet de Rayleigh comprenant la composition inhalable de l'une quelconque des revendications précédentes pour une utilisation dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire.

14. Utilisation d'un inhalateur à base de jet de Rayleigh pour délivrer la composition inhalable de l'une quelconque des revendications 1 à 12 dans la prévention topique ou le traitement topique d'une maladie virale respiratoire.