BE340484A - - Google Patents

Description

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  Prooédé de préparation des trois noyaux phosphores et   ferriques   des protides du jaune d'oeuf. 
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  Depuis que Miescher (mede Cham. Untersuchungen Hoppe- Seylers, fascicule 4, 1871, p.502) démontra la présence de phosphore en combinaison organique dans le jaune d'oeuf épuisé à l'alcool et à l'éther - il admit qu'il s'agissait de nuoléine Traie - différents savants ont cherché   à   en Isoler un composé phosphoré plus ou moins pur d'albumine. L'hématogène de Bunge 
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 (Zeitsohr. f. physiolog. Chemle, vol. IX, p.49, 1885) repré- sente un produit contenant 5,19% P et   0,29%   Fe, alors que la 
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 teneur en P des substances de Miesohor atteignait 6,7 - 7,8%. Puis, Altmann, par sa méthode générale de préparation des ai- dao nuo161quoB, isola du jaune dloouf un produit un4logne oon- tenant environ 7% P (Arohiv fur Anat. und Ph. 1889). Diaprés Milroy ( ZeitBOhr. f. physiolo Chemie, Tpl.

   XXIII, page 307), il ne s'agirait pas d'un véritable acide nucléique, car les 
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 produits d'hydrolysa de.oott substance ne contiennent pas de bases xanthiques; elle donne d'ailleurs très nettement la réac- 

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 tion du biuret, mais non celle de Millon. Teneur en P 7,51 -   7,95%.   



   En 1901,   Lerene   et   Alaberg   (Zeitschr. für physiol. 



   Chemie, Tol. XXXI, 1901, p.543) préparèrent ce qu'ils nomment l'acide avivitellique, par traitement à l'ammoniaque à 25%, à froid, de la vitelline purifiée, puis, par neutralisation au moyen de l'acide acétique, élimination des protides par l'aci- de picrique et précipitation du produit mentionné à l'aide d'alcool. La substance purifiée par reprécipitation contenait, en moyenne, 9,88% P et   0,57%   Fe. Réactions du Muret et de Millon positives. Après   hydrolyse,   les auteurs retrouvèrent 17,8% de l'azote total sous forme d'arginine et 3% sous forme d'histidine. 



   Plus tard, Hugounenq et Moral (Comptes Rendus vol. 



  140, p.1065 [1905]) décrivirent un produit préparé selon Bunge, mais dont la purification fut poussée plus loin, d'a- près une méthode non spécifiée, Ses teneurs en P et en Fe étaient respectivement 8,7% et 0,45%. 



   Il résulte de ces indications bibliographiques qu'on n'a pas réussi   jusqu'ici   à isoler sous forme chimiquement pure le groupement phosphore prosthétique des protides du jaune   d'oeuf.   



   Or, on a pu établir que le jaune d'oeuf contient non pas un, mais bien trois groupements phosphores prosthétiques que nous désignerons par les lettres   ce, 6   et. 



   L'objet du présent brevet est un procédé de préparation d'un mélange de ces 3 noyaux phosphores pur de produits   d'hydro-   lyse étrangers, soit sous forme d'acides libres, soit sous oel- le de leurs sels. Le procédé repose sur les obserTations sui- vantes : 
1. ) Le jaune d'oeuf coagulé et dégraissé ne se laisse pas digérer directement par la trypsine sans digestion préalable par la pepsine en milieu chlorhydrique, 
2.) L'action de la pepsine en milieu chlorhydrique peut 

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 être arrêtée à tout moment par neutralisation aux carbonates alcalins ou par adjonction d'une quantité correspondante d'a- 
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 cétates alcalins, ce qui pr'o1p1te les protides plus ou moins digérés. 
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 3.) La digestion trypsîque sépara les noyaux phosphores. 



   On a observé qu'il est possible de séparer les une des autres,soit   individuellement,  soit par groupes de deux, 
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 les trois noyaux phosphores  9 et r9 ceci grâce , la solubi- lité différente des acides libres ou de leurs sels dans des dissolvants tels que l'eau, l'alcool, etc, 
Le noyau   phosphoré     est peu soluble dans l'eau froi- de, complètement' insoluble en milieu d'acide minéral en pré-   senoe de   sels inorganiques, ce qui permet de l'isoler. Ses sels 
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 alcalins sont solubles, ses sels aloalino-terreux ne le sont pas. Le phosphore et l'azote y sont continua dana des rapporte atomiques allant de 1:1,75 à, ls2.'ll donne une belle réaction du biurefcj pas. de réactions de Mo1iech et de Millon.

   Apres hy- drolyse par les acides minéraux bouillants, on n'obtient comme produits azotés que de   l'ammoniaque,   de la sérine et de la ly- sine* Ceci est d'autant plus remarquable que les nombreux au- teurs qui ont étudié les produits d'hydrolyse de la vitelline 
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 (p.e. Abderhalden et Hunter, Zeîtachr. f. physiol. Chomîe, vol. 48, p. 505,   [1906J ,     Osborne   et Jones,   Americ.   Journ. of 
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 physiol. vol. 24, page 173, C1906j, Levene et Alsberg, Journ. biolog. Ohem. vol. 2, p. 817, [.90 ) n'ont pu en retirer de la sérine. Les quatre restes de l'acide   phosphorique   sont pro- bablement éthérifiés par les hydroxyles des serines. La teneur 
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 en P du composé oscille entre .2,5 et 13,5%. 



  C'est sur le noyan'phos'''ord P qu'est fixé le fer de la vitelline. Ses propriétés'physiques et chimiques sont ana- logues à celle du noyau   ce.   Il   contient   environ 3,5%   Fe,     c'est-   à-dire plus de 7 fois la teneur du produit   d'Bugounenq   et Morel Comptes Rendus, Yole 140, p. 1065   [19053 )   et 12 fois celle de 

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 l'kématogène de Bunge (loo.oit.). P = 12% environ. Rapport 
P ;N   atomique - 1 :   2. 



   Le noyau phosphoré est tout différent. Il est très soluble dans l'eau, ses sels alcaline-terreux également, les sels de métaux lourds sont insolubles. P - environ 8%. Rapport atomique P :N - 1:3. Ce produit donne les réactions du biuret et de Molisck. Point de réaction de Millon. 



   Le noyau   phosphore   Ó représente environ 55%, le noyau ss 27%, le   noyau!     18%   du P total des protides du jaune   d'oeuf.   



   Le procédé de séparation est basé sur les observations suivantes : 
1.) Si à une solution aqueuse du mélange des sels sodiques des 3 noyaux   et, 13   etpréparés d'après l'exemple 2, on ajoute un sel alcalino-terreux, les sels alcalino-terreux des noyaux Ó   et 13   sont précipités. 



   2.) Si à la solution aqueuse du   même   mélange de sels so- diques on ajoute petit à petit, en agitant, de l'alcool, il se forme subitement un précipité floconneux qui représente le sel de soude du noyau ferrique ss. 



   3.) Les sels alcalino-terreux solubles précipitent d'un mélange des sels alcalins des noyaux ce   et?1   le sel alcalino- terreux du noyau Ó, le noyau restant en solution en raison de la solubilité des sels correspondants. 



   4.) Si l'on sature de sel marin, puis additionne d'acide minéral une solution aqueuse du mélange des sels sodiques des noyaux   et, 13     et # ,   les noyaux Ó   et 13   sont précipités, le noyau   #   reste en solution. 



   5.) Le noyau peut être précipité, à son tour, par l'al- cool, soit comme acide libre, soit sous forme de sel aloalino- terreux, 
Ces nouveaux produits se prêtent à des usages tkéra- peutiques. 



   Les exemples qui suivent sont destinés à illustrer le   procédé.   

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  Exemple'1. 



   10 Kg. de jaune d'oeuf   épuisé 'à   l'alcool bouillant, séché et finement, pulvérisée sont suspendus dans 500 1. d'eau. 



  On ajoute 2,8   Kg.   d'acide chlorhydrique concentre et 100 gr. de pepsine ou une quantité correspondante d'extrait   chlorhydri-   que de muqueuse stomacale de pore. On chauffe à 37 - 40 0 en agitant, jusque dissolution*   Apres   environ 10 h., on ajoute 3,8 Kg. d'acétate de soude ou 1,5 Kg. de carbonate de soude et 1 Kg. d'acide acétique glacial, On filtre, de préférence   à-.la   presse, lave à l'eau, reprend le résidu par une solu- tion de 1,2 Kg. de carbonate de soude dans 40 1. d'eau, ajou- te 100 gr.   de-pancréas   finement hâché et abandonne le tout 24 à 48 h. à 40 . La liqueur de digestion est acidulés à   l'acide   acétique, filtrée;le filtrat est additionné de chlo- rure ou d'acétate de calcium, puis dilué d'un volume d'alcool. 



  Le précipité formé est filtre, lavé à l'alcool et   8.0-6. on   obtient de oette manière une poudre blanc-jaunâtre, insipide, en partie seulement soluble dans   l'eau   et contenant environ   10,5%   P,   1%   Fe et 9 - 10% Ca. 



   Exemple 2. 



   La liqueur de digestion   trypsique   de l'exemple précé- dent est acidulée par   l'acide   acétique, filtrée et complète- ment précipitée par une solution d'acétate de plomb. Le pré- cipité plombique est filtré, lavé à l'eau, trituré avec une solution de carbonate de   soude à   20% jusqu'à coloration légè-   romont     roma   du papior à la phtoléine do phénol. Les   empois*!*    phosphores passent on solution à   l'état   de   sala   de soude, le plomb restant comme carbonate   insoluble, -la   solution des sels sodiques est fortement concentrée dans le vide. On la précipi- te par   l'alcool   et sèche le précipité dans le vide.

   On obtient de cette manière, les sels sodiques des trois noyaux du jaune d'oeuf sous forme d'une poudre jaunâtre, soluble dans   l'eau.   

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   exemple   3. 



   La solution des sels sodiques, préparée selon l'exem- ple 2, est additionnée de chlorure ou d'acétate de calcium. 



   On achève la précipitation par un volume d'alcool. On obtient le même sel calcique que dans l'exemple 1. 



   Exemple 4. 



   La solution des sels sodiques, obtenue selon l'exem- ple 2. est Tersée dans de l'alcool contenant 3% d'acide ohlor- hydrique. Le précipité est filtré, lavé à   fond 4   l'alcool et séché. La substance ainsi préparée représente les noyaux phos-   phores   du jaune d'oeuf à l'état d'acide libre. C'est une poudre blanche, en partie seulement soluble dans l'eau., donnant des sels alcalins solubles, des sels   alcalino-terreux   et des Mé- taux lourds en partie solubles, en partie insolubles dans   l'eau,   résistante à l'action des acides minéraux froids, très insolubles en présence.des alcalis caustiques. Elle donne une réaction du biuret très nette, point de réaction de   Millon,   par contre, une réaction de Molisch. 



   Il Ta de soi qu'au lieu de carbonate de soude on peut employer du carbonate de potasse pour la digestion trysique, de même la digestion pepsique pourrait s'effectuer en présence d'un autre acide minéral que l'acide chlorhydrique. D'autre part, il est possible de remplacer les sels de plomb par   d'au-   tres sels métalliques, tels que, les sels de ouivre, de mercu- re, de fer, etc. Enfin, pour transformer les sels de métaux lourds en sels alcalins, on peut, à la place des carbonates alcalins, employer d'autres composés alcalins dont les anions forment des combinaisons peu solubles avec les métaux lourds correspondants. 



   Exemple 5. 



   Le mélange des sels sodiques des trois noyaux   phospho-   rés provenant de 10 kilos de jaune d'oeuf épuisé à l'alcool bouillant et préparé selon l'exemple 2 est dissous dans 10 1. 

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 d'eau. On ajoute petit à petit, en agitant, 2,5- 3 1. d'alcool, Il se forme subitement un précipité   floconneux   qu'on filtre, redissout dans l'eau, en ajoutant, s'il est nécessaire, un peu de carbonate de soude, reprécipite par l'aloool, lave et sèche dans le vide: Le sel sodique du noyau phosphoré ss se présente sous forme d'une poudre jaunâtre, se 'dissolvant lentement dans l'eau. 



     A   partir de la solution de ce sel, on peut, par double décomposition au moyen   des   sels   aloalino-terreux   ou de métaux lourds solubles, préparer les sels   alcalino-terreux   ou de mé- taux lourds insolubles correspondants, tels, par exemple, que les sels de magnésium, de calcium, de fer, de mercure, etc. le filtrat alcoolique du noyau   phosphore p   est débar- rassé, par distillation dans le vide, de son alcool et addition- né d'une solution de chlorure ou d'acétate de calcium, ce qui précipite le sel   oaloique   du noyau phosphoré   ce.   On filtre, lave à l'eau et sèche. Le sel   oaloiquo   ainsi préparé représente une poudre blanche, insipide et insoluble dans l'eau.

   Par traitement au moyen de la quantité calculée d'oxalate de soude à chaud, on transforme le sel calcique en sel sodique. A partir de ce dernier, par double   décomposition,   au moyen des sels alcalino- terreux ou de métaux lourds solubles, on peut préparer les dif- férents sels correspondants. 



   Enfin, le filtrat du sel calcique du   noyau     est pré- cipité à l'alcool pour préparer le sel calcique du noyau phos-   phorique #     à   l'état solide, ou encore additionné d'acétate de plomb ; le précipité plombique est décomposé à l'hydrogène sul- furé, on filtre le sulfure de plomb, chasse par un courant d'air   l'excès   d'hyrogène sulfuraprécipite la solution par l'alcool, filtre, lave à l'alcool et sèohe dans le vide le   précipita.   La poudre blanche ainsi obtenue   représente    le noyau   phosphore # à   l'état libre. 



   A partir de cette poudre soluble dans l'eau, on peut, par neutralisation avec les alcalis, les bases   alcalino-ter-   reuses ou les sels de métaux lourds, préparer les sels oorrea-   pondants.    

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   En traitant le précipité plombique par une solution de carbonate de soude, il est possible de préparer directement le sel sodique du noyau phosphore   #.   



   Il est évident que pour précipiter le noyau phosphoré   #   on peut employer, au lieu de sel de plomb, des sels d'autres métaux lourds, tels que ceux de cuivre, de mercure, etc. et que, d'autre part, pour préparer les sels alcalins, à partir des sels de métaux lourds, d'autres composés alcalins, p. e. le carbonate de potasse sont susceptibles de remplacer le car- bonate de soudé. 



   Exemple 6. 



   Le liqueur de digestion trypsique, préparée selon l'exemple 1, est précipitée par du chlorure ou de l'acétate de calcium sans addition d'alcool. On filtre, lave et sèche. 



  On obtient cindsi une poudra blanc-jaunâtre, insipide, conte- nant environ 11% P,   1,25   Fe et 10% Ca. Ce produit représen- te un mélange des sels de chaux des noyaux   phosphores   Ó et Le noyau phosphoré peut être isolé du filtrat d'après   l'ex-   emple 5. 



   Exemple 7. 



   La solution des sels sodiques obtenue selon l'exemple 2, est additionnée d'une solution de chlorure ou d'acétate de calcium; le précipité est filtré, lavé et séché. On obtient le même sel caloique que dans l'exemple 6. Le filtrat peut être traité comme dans l'exemple 5. 



   Exemple 8. 



   Le mélange des sels sodiques des trois noyaux phos-   phorés     ce, ±   et   #,   préparé selon l'exemple 8 et provenant de 10 ES. de   jaune.d'oeuf   épuisé à l'alcool bouillant, est dis- sous dans 10 1.   d'eau   On sature la solution de sel marin, ajoute 200 cc. d'acide chlorhydrique concentré, filtre le précipité formé,   lave   à l'acide chlorhydrique dilué, puis, à   @   

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   l'alcool.   Ce précipité qui est un mélange des noyaux phosphores Ó et ss, est dissous dans une quantité suffisante d'une solution de carbonate de soude, on ajoute, petit à petit, en agitant,de        l'alcool   Jusque formation brusque d'un précipité.

   Celui-ci re- présente ,le noyau [phosphoré ss; on le traite suivant l'exemple 5. 



  Le filtrat alcoolique contenant le noyau phosphoré   est débar- rassé de son alcool et précipite par un sel alcalino-terreux ou encore versé dans de l'alcool contenant de l'acide ohlorhy- drique afin d'en isoler le   noyau à     l'état     diacide   libre* 
Il est clair que la portée de cette invention n'est pas limitée aux exemples ci-dessusr, mais que dans le procédé décrit rentre toute méthode équivalente permettant, soit l'iso- lement global des produits de digestion des trois noyaux phos- phorés à l'état d'acides libres ou de leurs sels, soit la sé- paration les uns des autres des différents noyaux grâce à   la'   solubilité'inégale des acides libres ou de ..leurs sels" dans des dissolvants neutres, tels que l'eau, l'alcool, etc. 



   Résumé. 

**ATTENTION** fin du champ DESC peut contenir debut de CLMS **.

Claims (1)

1. La' présente invention vise : 1.) Procédé de préparation des noyaux phosphores et ferri- uqes des protides du jaune d'oeuf consistant à soumettre le jau- ne d'oeuf épuisé à l'alcool à une digestion pepsique en présen- ce d'un acide minéral, à interrompre celle-ci, à un moment vou- lu, soit par neutralisation de l'acide minéral, soit par substi- tution à l'acide minéral d'un acide organique, à filtrer le pré- cipité formé et à la soumettre, en milieu faiblement alcalin, à une digestion trypsique, à aciduler légèrement la liqueur de digestion obtenue et, après filtration,

   à précipiter par les sels alcalino-terreux et l'alcool les sels alcalnio-terreux du mélange des noyaux phosphores ou à séparer par addition de sels de métaux lourds les sels correspondants des noyaux phosphores, à traiter ces derniers par des composés alcalins dont les anions forment des combinaisons insolubles avec la métal lourd présent, afin d'obtenir les noyaux phosphores sous forme de leurs sels @ <Desc/Clms Page number 10> alcalins, à partir desquels on peut préparer à volonté les noyaux phosphores individuels ou par groupe de deux grâce à la solubilité inégale des acides libres et de leurs sels dans des dissolvants neutres, tels que l'eau, l'alcool, etc.

   2.) Une variante du procédé indiqué au 1 1 consistant à précipiter les sels alcalins des noyaux phosphores préparés selon le µ 1 sous forme de leurs combinaisons alcalino-ter- reuses par adjonction de sels alcalino-terreux.

   3.) Une variante du procédé indiqué sous µ 1 consistant . à précipiter les noyaux phosphorés à l'état d'acides libres, en traitant par l'alcool acidulé le mélange des sels alcalins obtenu selon le µ 1.

   4. ) Procédé, suivant le µ 1, consistant à précipiter par l'alcool, du mélange des sels alcalins des trois noyaux phosphores, le sel alcalin du noyau phosphoferrique ss, à préci- piter du filtrat oontenant les sels alcalins des noyaux ce et /, par adjonction de sels alcalino-terreux solubles, le sel correspondant du noyau Ó, puis, soit à précipiter par l'alcool du nouveau filtrat le sel alcalino-terreux du noyau}', soit à traiter ce filtrat par des sels de métaux lourds, à décomposer le sel métallique du noyau # ainsi obtenu par des combinaisons hydrogénées ou alcalines dont les anions forment avec les métaux lourds présents des sels insolubles et à pré- parer ainsi la noyau sous forme d'acide libre ou de sel al- calin.

   5.) Procédé, suivant le µ 1, consistant à précipiter, par des sels aloalino-terreux solubles, de la solution du mélange des sels alcalins des noyaux Ó, ss et #, préparé selon µ 1, les sels alcalino-terreux des noyaux Ó et ss et, à volonté, à isoler le noyuau # conformément au # 4.

   6. ) Procédé, suivant le µ 1, consistant à saturer d'un sel neutre comme, p.e.,de sel marin, le mélange des sels al- calins des noyaux Ó, ss et et à l'additionner d'un acide mi- néral afin d'isoler les noyaux Ó et ss, pour les traiter en- suite d'après le µ 5. <Desc/Clms Page number 11>

   7.) Les produits susceptibles d'être prépaya d'après le procédé des µ 1 à 6 et leur emploi industriel.