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PERFECTIONNEMENTS A L'INDUSTRIE DE TRANSFORMATION DES MATIERES ORGANIQUES EN DERIVES AZOTES UTILISABLES ET PRODUITS DE DESINTEGRATION DES MATIERES GRASSES PAR
CONDUITE DE DIGESTION ARTIFICIELLE
L'invention a pour objet de répéter d'une manière industrielle et in vitro le processus des différentes trans- formations obtenues par la digestion des matières albuminol- des et grasses in vivo . Autrement dit , de scinder d'une part les chaînes peptidiques qui constituent les protéines diverses , d'autre part , de dissocier les complexes azotéo- lipidiques ou lipidiques seuls , et enfin d'amener ces élé-
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ments désintégrés à un état chimique et physique tel que l'assimilation puisse en être aisément faite par un orga- nisme vivant en vue de regroupements ultérieurs .
L'invention vise à,opérer cette désintégration par des voi es naturelles , telles que diastases et ferments ; elle protège la matière traitée et les produits obtenus des actions bactériennes capables soit d'engendrer des produits nocifs ou sans valeur , soit de dégrader les maté- riaux albuminoìdes jusqu'à la formation ae produits ammo- ni acaux etmême d' ammoniaclu e .
L'invention est conçue en vue : a) d'obtenir un milieu biologique présentant aux moments opportuns les caractéristiques optima , tels que le pH ou le pH1 ( point isoélectrique ) . b) de soumettre les albuminoïùes à l'action des diastases ou ferments , soit contenus dans les matières traitées ( autolyse ) , soit apportées de l'extérieur (pro- téolyse ) et à réaliser ainsi une aésintégration qui , en fin d'opération , a respecté les diastases ou ferments ainsi que les @roduits à faible stabilité physique ou chimique qui ne pourraient résister aux hydrolyses acides -ou alcalines .
c) de protéger les albuminìdes traitées des actions bactériennes en agissant , sans entraver en rien les actions diastasiques ou fermentatrices , par des moyens conjugués , sur des groupes spécifiques , cela. sans faire appel à des substances Lifficilement éliminables ( chlorure de sodium , toxiques ( sels ('acide salycilique , de plomb, etc...) inflam:
nables ( éther de pétrole , benzine) dan- @gereuses à manier ou peu actives sur certaines bactéries ( séries nomologues des nitro-méthanes ) , dénaturantes Il
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( pétrole , tétrachlorure de carbone ) , etc... en dépit des propriétés antiseptiques plus ou moins limitées de ces corps protecteurs . d) d'éliminer les agents de protection désignés plus avant soit naturellement en cours de traitement par substi- tution chimique ou hydrolyse ,. soit en fin d'opération par des moyens physiques tels que la chaleur et le vide ou des moyens chimiques tels que la précipitation sous forme d'in- solubles aisément séparables . e) de séparer les divers éléments finaux du traite- ment de manière à obtenir isolés :
- les composés azotés sous la forme la plus simple , soit libres , soit en combinaisons de sels chimiques , cela sans aucune rémanence d'un agent de protection : - les indigestibles ; - les lipides qui accompagnent les albuminoldes , conjointement ou en complexes , et qui ont pu résister aux saponifications et oxydations de la digestion artificielle .
Pour réaliser une digestion artificielle convena- ble selon les visées de l' invention , il convient :
A ) de dépulper le plus soigneusement possible les matières à digérer , de façon à permettre l'action la plus profonde sur les protéines aussi bien des agents diastasi- ques et catalytiques que des agents de protection temporaire .
Si les diastases sur lesquelles on compte pour la diges- ajoutées à la masse, foie, estomac, intestins,ces @ernières tion proviennent de glandes à sécrétion/doivent être égale- ment très finement broyées .
B ) l'opération suivante a pour but d'introduire les agents de protection temporaire , correspondant chacun à des actions bien spécifiques , ainsi que des corps capables,
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à un moment voulu , de réaliser la transformation de tout ou partie de ces agents en produits à activité nulle et non toxiques . Ces corps pourront avantageusement être les sui- vants :
1) Une solution d'un polysulfure de magnésium dans un mélange à parties égales d'acétone , d'alcool isopropyli- que et d'hydrate de phénylhydrazine
2) Conjointement trois corps en mélange ; le chloroforme , le dinitrophénol et un autooxydateur tel un pinène terpénique , le b étap inène par exemple .
Sans entrer dans le détail de réactions chimiques lentes fort complexes , on peut noter que l'invention vise à utiliser les corps précités dans les buts suivants :
Le complexe soufre-magnésium , en présence des albuminnoìdes , se stabilisera sous forme colloïdale , agira suivant ses propriétés électives sur les halogènes , les oxydriles et tous les radicaux électro-négatifs , et fina- lement se décomposera en cours d'opération : le magnésium tendra à procréer des composés ammoniaco-magnésiens inso- lubles ; le soufre entrera en combinaisons haloorganiques avec certains aciaes aminés cycliques lors de leur appari - tion ou opérera des substitutions à forme sulfonée avec le noyau phénol d'un des autres agents .
En présence du soufr.e colloïdal , du chloroforme ( ou d'un corps de la série harmonique de celui-ci ) et au pinène , il se formera , par substitution,oxydation ou dé- placement , de l'orthophénol-monosulfonique , du chloro- méthane naissant ( ou du chloroéthane ou encore du parachlo- rodinitrophénol ) et enfin , par oxydation liée du pinène , de l'acide paraphtalique ( ou un dérivé monochloré de celui- -ci ) . On aurait d'ailleurs avantage à associer le dinitro- phénol à un chlorure â Tacide sulfonique de façon à sulfoner ultérieurement avec plus de sûreté le noyau phénol .
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Ces corps , puissamment antiseptiques à faible dose ( moins de 3 pour 1000 de la masse à traiter ); possèdent la propriété de se former lentement et de se dissocier ensuite lentement par hydrolyse en milieu acide , justement lorsqu'à un moment donné le pH de la masse traitée atteint spontané- ment 6,4 acidité ionique due au caractère des amino-acides alors formés .
Ils peuvent tre remplacés par des corps voisins des séries harmoniques , sans que le principe de l'invention en soit modifié ; au chloroforme peut par exemple se substi-
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tuer le - ni tro,-méthane , au bétapinène le camphrène , au dinitrophénol le diphénylaminosulfone ou le métaphénylène- diamine , ,¯etc.¯., De toute faqon , les corps de substitution obtenue par réaction sont comparables en nature 'et en effet , et les rémanents chlorés ainsi que les radicaux NO2 qui peur vent persister se fixent sur les lipides d'où ils sont fa- cilement extractibles par chauffage à 80 .
Aucun des agents susvisés n'oppose d'action à la réaction d'agents catalytiques-, métalliques qu'on jugerait bon d'employer en vue n'accélérer , la digestion artificielle .
Il faut , en outre , noter , que le bétapinène ou tout autre agent fortementautooxydateur est employé en vue de jouer , par oxydation liée , sur l'arginine ( un des premiers amino-acides libérés de la chaine peptidi que .) pour éviter qu'il ne se forme de la guanine libre . On aura d'ail- leurs avantage à l'employer sous une forme méthylée ou méthy- lique , de façon à aider à la formation de méthylguanidine insoluble . Ce corps agit également dans la formation ulté- rieure des peroxyacides provenant de la désintégration de glycérine d'acides gras non saturés .
C) un brassage très minutieux au moyen d'appareils appropriés est exécuté en vue de mélanger a'abord la solution
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précéaa.nmen décrite de polysulfure ae magnésium , pui s le mélange chloroforme-pinène-dinitrophénol . La masse ainsi traitée peut se conserver et se stocker un temps indéfini : il y a donc dans cette partie de l'invention un moyen de protéger des actions bactériennes toutes les matières périssables pouvant supporter au préalable un état de fine division .
D) Mais une masse ainsi traitée peut , dans certaines conditions , ne pas être à l'abri de bactéries aérobies , de moisissures , de spores , etc... capables de se développer et de produire des fermentations secon- daires . On s'en protégera en recouvrant la masse stockée en cuve d'une fine couche d'huile dans laquelle on aura fait dissoudre à 1/2000 ( à chaud )de l'acide paraoxyben- zolque . Une quantité plus importante de cette solution huileuse au 2000ème malaxée soigneusement avec la masse à traiter préviendra l'oxydation des lipides à acides gras non saturés , ceci tout au moins à froid et pour un temps limité .
E) Avant de mettre la masse à digérer dans les cuves de maturation , il convient de l' amener au pH con- venable pour amorcer les réactions diastasiques . Ce pH vari naturellement selon la matière : poisson , viande d'herbivore , ovalbumine , chair ou organes de carnas- siers et même légumineuses . Mqis elle est toujours in- férieure à pH 7 et le point optimum est obtenu par l'a- cidification légère de la masse .
Ce tte opération a lieu en même stemps que le malaxage avec les corps protecteurs définis ci-avant , @ dans le cas d'une digestion immédiate . Par contre , en cas de stockage , elle n'a lieu qu'au moment de la mise , en cuve de maturation , par un second malaxage car elle
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amorcerait une lyse lente à froid de la masse en conserva- tion
F) La masse protéine-diastases ainsi préparée est ensuite mise à digérer en cuve dematuration , de con- tenance quelconque . La température est telle que la désin- tégration azotée se produise aussi vite que possible,sans cependant qu'il y ait coagulation des albumines libres et destruction des diastases ou ferments .
La mise en tem- pérature doitêtre réalisée rapidement , il convient donc d'agir sur une masse divisée qu'on malaxe d'une manière continue ou non , en évitant les surchauffes locales et les croûtages .
Le pH s'abaisse progressivement à 6,4 puis re- monte vers 6,8 . Lorsqu'il atteint cette valeur approxima- tive et s'y tient , on tamponne à la soude jusqu'à attein- dre le pHi ; la fonction basique des amino-acides (lesquels sont amphotères ) jouera ainsi librement et il se formera ainsi des sels de ces amino-acides , du sulfate d'histidine, par exemple .
G) La digestion est arrêtée quand le pH est revenu de lui-même au pH 6,8 et s'y maintient vingt-quatre heures . La durée totale de digestion varie selon la na- ture des corps à traiter , de la température , de la na- ture et de l'importance des diastases .
H) La masse pâteuse mise à digérer se présente en fin d'opération sous forme d'un li qui de dans lequel a sédimenté une couche d'indigérés . La partieliquide est constituée d'une solution aqueuse de polypeptides et d'a- mino-acides ( ou de sels ) , de lipides libres et de lipi- aes peroxydés en suspension ou de matières saponifiées .
On séparera ces divers corps par décantation , défécation au tanin et à la chaux , centrifugation , filtration ou
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ul tracentrifuga in " ces procédés mécaniques pouvant t0
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combinés utilisés à chaud ou à froid , selon qu'on veut iso- ler dans telle partie des corps solubles au-dessus d'une température donnée .
Finalement , on obtient : a) des indigestibles : cartilages , corps conjonc- tifs , os , arêtes , écailles , etc. selon les corps trai- tés ; b) des produits azotés en solution aqueuse ; ceux- ci ne présentent plus aucune trace des agents de protection temporaire ; il importe donc de les concentrer car il peut alors se produire des actions bactériennes diverses . Comme le liquide se conserve indéfiniment dès qu'il est privé de 50 @ de son eau de constitution , on peut avec avantage enlever l'excès d'eau soitsous vide , soiten ruissellement, soit par exposition en couche mince , soit par cryogénie ou absorption ou par tout autre procédé n'entrainant ni une décarboxylation ni une désamination mais enlevant par contre certains produits ammoniacaux .
Cette concentration peut être poussée jusqu'à la pâte ou même le point sec : les amino-acides ou leurs sels se présentent alors sous la forme cristallisée ; c) des dégras onctueux restant sur filtre ou sépa- rés par décantation ou centrifugation . Ceux-ci représentent en réalité un mélange d'indigérés , aes chromoprotéines , des peroxydes d'acides gras et des lipides divers , des sels de différents acides phosphoriques , des amino-alcools , des lécithines , des alcools supérieurs , souvent avec fixation de rémanents chlorés ou ae radicaux nitriles .
I) Après remise en digestion de ces dégras pour éliminer définitivement les indigérés qui avaient été bloqués au plafond de digestion lors de la première maturation ,
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les différents produits sont exposés en couchè mince soit au vide soit à une chaleur convenable respectant les diastases organoleptiques de façon à éliminer les ré- manents chlorés volatils .
De ces nouveaux dégras épuisés , on sépare l'excès de lipides libres par décantation , pression ou: centrifugation . Puis on traite par les solvants conve- nables la masse résiduelle de façon à n'entrainer que les corps gras . Les produits qui pourraient être dissous ,au- tres que les lipides , seront alors précipités dans les solvants . On obtiendra finalement une masse hétérogène de corps phosphoaminés qu'il est aisé , si nécessaire , de séparer par les moyens habituels de lavage , de solu- bilité fractionnée et de précipitation chimique .
On a ainsi.) finalement réalisé , en opérant sui- vant les phases décrites de cette invention , une diges- tion artificielle lente mais absolument complète , certai- nement beaucoup pluspoussée que dansles opérations na- turelles des organismes vivants . On a scindé à l'extrême les molécules complexes de protéine ( objet principal de l'Opération ) ; on a également transformé une partiedes lipides en corps simples .
L'ensemble des produits obtenus , les indigestibles à part , représente, des éléments parti- culièrement assimilables par un organisme vivant , à haut pouvoir alimentaire et à valeur thérapeutique élevée : -
On obtient ainsi des produits alimentaires qui , sauf séparation ou suppression voulues d'au moins la moitié des radicaux définis plus avant , contiennent la totalité des acides aminés provenant de la lyse des matières traitées .
Ces produits présentent la caracté- ristique de pouvoir , à moins de séparations provoquées ,
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contenir la gamme totale des radicaux existant initialement dans lesprotéines d'origine animale ou végétale soumises à la désintégration , mais les dits radicaux , au lieu de faire partie de chaines organiques complexes , sont à l'état libre sous forme d'acides aminés ou combinés sous forme de sels de ceux-ci .
Il est à remarquer , d'autre part , que ces produits finis sont stables bien qu'ils ne contiennent ni chlorure àe sodium ni aucun autre agent de conservation .
De préférence , les produits sont traités de manière à se présen ter sous forme d'un milieu impropre à l'ensemence- ment , afin de n'être plus susceptibles de transformation ultérieures non contrôlées .
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IMPROVEMENTS IN THE INDUSTRY OF TRANSFORMATION OF ORGANIC MATERIALS INTO USABLE NITROGEN DERIVATIVES AND FAT DESINTEGRATION PRODUCTS BY
CONDUCT OF ARTIFICIAL DIGESTION
The object of the invention is to repeat in an industrial manner and in vitro the process of the various transformations obtained by the digestion of albuminol- and fatty substances in vivo. In other words, to split on the one hand the peptide chains which constitute the various proteins, on the other hand, to dissociate the nitrogen-lipid or lipid complexes alone, and finally to bring these elements.
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elements disintegrated to a chemical and physical state such that it can easily be assimilated by a living organism with a view to subsequent regrouping.
The invention aims to operate this disintegration by natural methods, such as diastases and ferments; it protects the treated material and the products obtained from bacterial actions capable either of generating harmful or worthless products or of degrading albuminoid materials until the formation of ammonia and even ammonia products.
The invention is designed with a view to: a) obtaining a biological medium exhibiting at the appropriate times the optimum characteristics, such as the pH or the pH1 (isoelectric point). b) to subject the albuminoids to the action of diastases or ferments, either contained in the treated materials (autolysis), or brought from outside (proteolysis) and thus to achieve a disintegration which, at the end of the operation, has respected diastases or ferments as well as @ products with low physical or chemical stability which could not withstand acid-or alkaline hydrolysis.
c) to protect the treated albuminides from bacterial actions by acting, without in any way hindering the diastatic or fermentative actions, by conjugated means, on specific groups. without using substances which are difficult to remove (sodium chloride, toxic (salts (salicylic acid, lead, etc.) inflam:
nables (petroleum ether, benzine) dangerous to handle or not very active on certain bacteria (nomologic series of nitro-methanes), denaturing It
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(petroleum, carbon tetrachloride), etc ... despite the more or less limited antiseptic properties of these protective bodies. d) to eliminate the protective agents designated above either naturally during treatment by chemical substitution or hydrolysis,. either at the end of the operation by physical means such as heat and vacuum or chemical means such as precipitation in the form of easily separable insolubles. e) to separate the various final elements of the treatment so as to obtain isolated:
- nitrogenous compounds in the simplest form, either free or in combinations of chemical salts, without any persistence of a protective agent: - indigestible; - the lipids which accompany the albumin, jointly or in complexes, and which could resist the saponifications and oxidations of artificial digestion.
To achieve a suitable artificial digestion according to the aims of the invention, it is necessary:
A) to pulp the materials to be digested as carefully as possible, so as to allow the deepest action on the proteins, both of the diastatic and catalytic agents and of the temporary protection agents.
If the diastases which are relied on for digestion - added to the mass, liver, stomach, intestines, these last ones come from secretory glands / must also be very finely ground.
B) the following operation aims to introduce temporary protection agents, each corresponding to very specific actions, as well as capable bodies,
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at a desired time, to transform all or part of these agents into products with zero activity and non-toxic. These bodies could advantageously be the following:
1) A solution of a polysulfide of magnesium in a mixture of equal parts of acetone, isopropyl alcohol and phenylhydrazine hydrate
2) Jointly three bodies in mixture; chloroform, dinitrophenol and an autooxidator such as a terpene pinene, for example b etap inene.
Without going into the details of very complex slow chemical reactions, it can be noted that the invention aims to use the aforementioned bodies for the following purposes:
The sulfur-magnesium complex, in the presence of the albuminnoids, will stabilize in colloidal form, will act according to its elective properties on the halogens, the oxydriles and all the electro-negative radicals, and finally will decompose during operation: the magnesium will tend to produce insoluble ammonia-magnesian compounds; the sulfur will enter into haloorganic combinations with certain cyclic amino acids during their appearance or will effect substitutions in the sulphonated form with the phenol nucleus of one of the other agents.
In the presence of colloidal sulfur, chloroform (or a body of the harmonic series thereof) and pinene, there will be formed, by substitution, oxidation or displacement, orthophenol-monosulfonic acid, nascent chloromethane (or chloroethane or even parachlorodinitrophenol) and finally, by bound oxidation of pinene, paraphthalic acid (or a monochlorinated derivative thereof). It would, moreover, be advantageous to combine the dinitrophenol with a sulfonic acid chloride so as to sulfonate the phenol nucleus subsequently with greater safety.
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These bodies, powerfully antiseptics at low doses (less than 3 per 1000 of the mass to be treated); have the property of forming slowly and then dissociating slowly by hydrolysis in an acidic medium, precisely when at a given moment the pH of the treated mass spontaneously reaches 6.4 ionic acidity due to the character of the amino acids then formed .
They can be replaced by neighboring bodies of the harmonic series, without the principle of the invention being modified; chloroform can, for example, be substituted
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kill - ni tro, -methane, betapinene, camphrene, dinitrophenol, diphenylaminosulfone or metaphenylaminosulfone,, ¯etc.¯. , and the chlorinated residues as well as the NO2 radicals which fear wind to persist bind to the lipids from where they are easily extractable by heating at 80.
None of the above-mentioned agents opposes the reaction of catalytic agents, metallic which it would be advisable to use in order to accelerate the artificial digestion.
It should also be noted that betapinene or any other strongly autooxidizing agent is used with a view to acting, by linked oxidation, on arginine (one of the first amino acids released from the peptide chain.) To prevent free guanine is not formed. It will moreover be advantageous to use it in a methylated or methylated form, so as to aid in the formation of insoluble methylguanidine. This body also acts in the subsequent formation of peroxyacids resulting from the disintegration of glycerin from unsaturated fatty acids.
C) very careful stirring by means of suitable apparatus is carried out in order to first mix the solution.
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Précéaa.nmen described ae magnesium polysulphide, pui s the chloroform-pinene-dinitrophenol mixture. The mass thus treated can be preserved and stored for an indefinite time: there is therefore in this part of the invention a means of protecting from bacterial actions all the perishable materials which can first withstand a state of fine division.
D) But a mass thus treated may, under certain conditions, not be immune to aerobic bacteria, molds, spores, etc. capable of developing and producing secondary fermentations. This will be protected by covering the mass stored in the tank with a thin layer of oil in which the paraoxybenzolque acid has been dissolved at 1/2000 (hot). A larger quantity of this oily solution at the 2000th level, mixed carefully with the mass to be treated, will prevent the oxidation of the lipids with unsaturated fatty acids, at least when cold and for a limited time.
E) Before placing the mass to be digested in the maturation tanks, it should be brought to the appropriate pH to initiate the diastatic reactions. This pH naturally varies according to the material: fish, herbivorous meat, ovalbumin, meat or organs of predators and even legumes. However, it is always lower than pH 7 and the optimum point is obtained by the slight acidification of the mass.
This head operation takes place at the same time as the mixing with the protective bodies defined above, @ in the case of immediate digestion. On the other hand, in the event of storage, it does not take place until the moment of placing, in the maturation tank, by a second mixing because it
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would initiate a slow cold lysis of the mass in storage
F) The protein-diastase mass thus prepared is then digested in a maturation tank, of any capacity. The temperature is such that the nitrogenous disintegration takes place as quickly as possible, without, however, any coagulation of the free albumins and destruction of the enzymes or ferments.
The temperature must be brought up quickly; it is therefore advisable to act on a divided mass which may or may not be mixed continuously, avoiding local overheating and crusting.
The pH gradually drops to 6.4 and then rises to 6.8. When it reaches this approximate value and stays there, it is buffered with sodium hydroxide until the pHi is reached; the basic function of amino acids (which are amphoteric) will thus operate freely and salts of these amino acids, for example histidine sulfate, will thus be formed.
G) Digestion is stopped when the pH returns by itself to pH 6.8 and is maintained there for twenty-four hours. The total duration of digestion varies according to the nature of the bodies to be treated, the temperature, the nature and the magnitude of the diastases.
H) The pasty mass put to digest is presented at the end of the operation in the form of a li which of in which a layer of indigents has sedimented. The liquid partial consists of an aqueous solution of polypeptides and amino acids (or salts), free lipids and peroxidized lipids in suspension or saponified materials.
These various bodies will be separated by decantation, defecation with tannin and lime, centrifugation, filtration or
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ul tracentrifuga in "these mechanical processes which can t0
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Combinations used hot or cold, depending on whether it is desired to isolate soluble bodies above a given temperature in a given part.
Finally, we obtain: a) Indigestibles: cartilages, connective bodies, bones, edges, scales, etc. according to the bodies treated; b) nitrogenous products in aqueous solution; these no longer show any trace of the temporary protection agents; it is therefore important to concentrate them because various bacterial actions can then occur. As the liquid can be preserved indefinitely as soon as it is deprived of 50 @ of its water of constitution, it is advantageously possible to remove the excess water either under vacuum, either in runoff, or by exposure in a thin layer, or by cryogenics or absorption or by any other process that does not lead to decarboxylation or deamination, but on the other hand removing certain ammoniacal products.
This concentration can be pushed to the paste or even the dry point: the amino acids or their salts are then present in the crystallized form; (c) unctuous grease remaining on the filter or separated by decantation or centrifugation. These actually represent a mixture of indigents, chromoproteins, fatty acid peroxides and various lipids, salts of different phosphoric acids, amino alcohols, lecithins, higher alcohols, often with fixation of residuals chlorinated or nitrile radicals.
I) After re-digestion of these fatty substances to definitively eliminate the indigents who had been blocked at the digestion ceiling during the first maturation,
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the various products are exposed in a thin layer either to vacuum or to a suitable heat respecting the organoleptic diastases so as to eliminate the volatile chlorinated residues.
From these new depleted fat, the excess free lipids are separated by decantation, pressure or: centrifugation. Then the residual mass is treated with suitable solvents so as to entrain only the fatty substances. The products which could be dissolved, other than the lipids, will then be precipitated in the solvents. Finally, a heterogeneous mass of phosphoamino bodies will be obtained which can be easily separated, if necessary, by the usual means of washing, fractional solubility and chemical precipitation.
A slow but absolutely complete artificial digestion was thus finally achieved, by operating following the described phases of this invention, certainly much more thorough than in the natural operations of living organisms. The complex protein molecules (main object of the Operation) have been severed to the extreme; some of the lipids have also been transformed into simple bodies.
All the products obtained, apart from indigestible ones, represent elements which can be assimilated in particular by a living organism, with high nutritional power and high therapeutic value: -
Food products are thus obtained which, unless desired separation or removal of at least half of the radicals defined above, contain all of the amino acids resulting from the lysis of the treated materials.
These products have the characteristic of being able, unless separations provoked,
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contain the full range of radicals initially existing in proteins of animal or plant origin subjected to disintegration, but the said radicals, instead of being part of complex organic chains, are in the free state in the form of amino acids or combined in the form of salts thereof.
It should be noted, on the other hand, that these end products are stable although they do not contain sodium chloride or any other preservative.
Preferably, the products are treated in such a way as to appear in the form of a medium which is unsuitable for inoculation, so as not to be susceptible to subsequent uncontrolled transformation.
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