BE473219A - - Google Patents

Description

  la Société dite: Produits Roche Société Anonyme

  
157, Avenue du Roi, à Forest, Bruxelles,

  
La thrombokinase, qui est le ferment effectuant la transformation de la prothrombine en thrombine, a déjà été l'objet de nombreuses recherches, sans qu'il ait été possible jusqu'à aujourd'hui d'en élucider la constitution et le mécanisme d'action. La thrombokinase comporte d'après Howell

  
 <EMI ID=1.1> 

  
préparation de thrombokinase provenant de poumons bovins, par extraction au moyen d'alcool et d'éther, une fraction lipoidique qui possède une action coagulante. L'action de cette dernière est beaucoup moins marquée que celle de la préparation originale, et le résidu d'extraction, c'est-à-dire la fraction protéinique, est complètement inactif.

  
La possibilité d'emploi pratique d'une thrombokinase préparée à partir d'organes animaux, tels que le cerveau et les poumons, est fortement limitée, du fait que ces préparations ne sont qu'imparfaitement solubles dans l'eau et que, par les méthodes usuelles de stérilisation, telles que chauffage ou filtration par un filtre de Seitz, elles ne peuvent pas être obtenues exemptes de germes, sans perte presque complète de leur activité.

  
Nous avons trouvé que l'on peut obtenir une préparation stérile de thrombokinase très active et soluble dans l'eau, en combinant .'des lipoides végétaux et animaux avec des ferments digestifs tels que la pancréatine et la trypsine. On obtient ainsi, en traitant la pancréatine avec un extrait éthéré de poumons bovins séchés, une préparation de thrombokinase qui n'est guère moins active que les thrombokinases naturelles. Des préparations encore plus actives sont formées quand on utilise la trypsine cristallisée, ou une fraction de trypsine telle qu'elle est obtenue à partir de la pancréatine par précipitation fractionnée avec de l'acétone. Le lipoide est ajouté à la substance protéinique de préférence en quantité d'environ 15%. La tabelle suivante démontre l'action coagulante d'une telle préparation dé thrombokinase: 

  

 <EMI ID=2.1> 


  
Il ressort de cette tabelle que le constituant lipoidique et le constituant protéinique possèdent chacun un certain effet coagulant, et que leur combinaison porte cet effet coagulant à un chiffre environ quatre fois plus élevé.

Exemple 1.

  
Une solution aqueuse de trypsine à 10% est stérilisée par filtration par un filtre de Seitz et additionnée de 2 parties d'acétone, puis le précipité obtenu est séché, après centrifugation, dans des conditions stériles. La poudre ainsi obtenue est ajoutée à une solution stérile de lipoide, dans la proportion de 6 parties de protéine sur 1 partie de lipoide. Après évaporation de l'éther dans le vide, la poudre sèche est mise en ampoules de manière stérile. S'est une préparation jaunâtre, peu hygroscopique, susceptible à l'action de l'oxygène, qui se dissout aisément dans l'eau.

   La solution aqueuse, opalescente par suite de sa teneur en lipoide, perd son activité en partie ou complètement dans toutes les conditions qui provoquent la dénaturation du constituant protéinique ou l'éloignement du constituant lipoidique, par exemple en réchauffant, en acidifiant ou en traitant avec des solvants, non miscibles avec l'eau. 

Exemple 2.

  
100 parties de pancréatine finement pulvérisée sont additionnées d'une solution de 15 parties d'un extrait éthéré de cerveau et le tout est bien mélangé, puis l'éther est évaporé dans le vide. Après avoir séché sur du pentoxyde de phosphore, on pulvérise finement et on conserve la préparation de thrombokinase dans une atmosphère d'azote.

Exemple 3. 

  
On ajoute une solution benzénique de lipoide de graines de soja à de la trypsine cristallisée et finement pulvérisée, dans une proportion de 5 parties de trypsine sur 1 partie de lipoide. On homogénéise_en agitant soigneusement et on évapore le benzène dans le vide. La masse brunâtre obtenue est pulvérisée et conservée dans une atmosphère d'azote.

  
Revendications.

  
1. Procédé pour la préparation d'un composé de thrombokinase, caractérisé par le fait que l'on fait réagir des lipoides animaux et végétaux avec des ferments digestifs et que l'on sèche le ferment coagulant ainsi obtenu dans le vide.

Claims (1)

1. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que l'on effectue la réaction dans un solvant.