BE536230A

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Publication number: BE536230A
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Description

La présente invention a pour objet un procédé pour préparer des antibiotiques basiques produits par des espèces de streptomyces en vue d'en éliminer les effets toxiques.

On sait que les antibiotiques basiques produits par des espèces de Streptomyces possèdent des précieuses propriétés antibiotiques. Des exemples de ces antibiotiques basiques produits par des espèces de Strepto- myces sont la streptomycine, la dihydrostreptomyoine, la néomycine produi- te par le Streptomyces ±radiae, et la viomyoine produite par le Strepto- myces punicéus-,. Les antibiotiques mentionnés sont utilisés dans la prati- que médicale tels quels, sous forme de sels, ou sous forme de préparations combinées avec d'autres médicaments. Malheureusement, les antibiotiques mentionnés présentent, dans l'organisme humain et animal, une sérié d'ef- fets secondaires, qui gênent fortement leur utilisation pratique.

Comme effets secondaires, on a surtout signalé des troubles de l'ouie et de l'é- quilibre, des bourdonnements d'oreilles, des tendances au vomissements et des troubles rénaux. Bien que l'on s'efforce depuis assez longtemps déjà de supprimer ou de réduire les effets secondaires, on n'a pas trouvé jus- qu'à présent de solution sàtisfaisante de ce problème.

Or on a trouvé que l'acide panthothénique, ses dérivés fonctionnels tels que ses sels, esters et amides, ainsi que les composés qui peuvent se convertir en acide panthothénique dans l'organisme vivant, ou libérent cet acide, sont capables de supprimer de façon remarquablement simple et pous- sée des effets secondaires des antibiotiques produits par des espèces de
Streptomyces, de sorte que de nouvelles possibilités s'ouvrent ainsi à la thérapeutique dans ce domaine.

Des composés de ce genre sont par exemple l'acide pantothénique ses sels, le pantothénal, le lactone pentothénique, le pantothénol, les amides pantothéniques et les esters d'acide pantothéni- que dans lesquels le groupe hydroxyle de l'acide pantothénique est estéri- fié par des acides, par exemple acide phosphorique, acide acétique ou acide phtalique, ou dans lesquels le groupe carboxyle de l'acide pantothénique est estérifié par des alcools, par exemple alcools inférieurs monovalents, ou inosite.

Le procédé qùi fait l'objet de l'invention consiste à transformer l'antibioque, basique, avec un constituant pantothénique du type mention- né, en un remède à administrer solidairement, par exemple une solution in- jectable ou une pommade contenant les deux constituants, et on l'administre au patient sous cette forme. Le choix du constituant est basé sur l'utili- sation pour laquelle on prépare le remède dans chaque cas d'espèce. Quand il s'agit par exemple de préparer une poudre supportant la conservation, il est recommandé d'utiliser les deux constituants sous la forme de dérivés qui soient stables, non hygroscopiques et stables à la conservation. Par exemple, la streptomycine sous forme de sulfate et l'acide pantothénique sous forme de sel de calcium, se conservent bien et sont peu hygroscopiques.

Quand il s'agit donc de préparer avec ces deux constituants une poudre sup- portant la conservation, on peut, selon l'invention, transformer le sulfate de streptomycine et lepantothénate de calcium en une poudre contenant ces deux constituants. Dans la préparation de solutions injectables, les cons- tituants doivent d'autre part être solubles dans l'eau et être stables en solution.aqueuse.

Suivant une forme de réalisation préférée de la présente invention, qui s'est aussi révélée particulièrement précieuse thérapeutiquement, on fait réagir l'antibiotique basique avec un composé de la série de l'acide pantothénique pour obtenir le pantothénate de l'antibiotique, et on l'uti- lise sous cette forme comme remède contenant les deux constituants. Les pantothénates des antibiotiques basiques mentionnés comme ceux de la strep-

tomyoine, de la dihydrostreptomyoine, de la néomycine et de la viomycine, sont des produits nouveaux, très actifs, de très faible toxicité, qui re- présententum enrichissement appréciable des remèdes antibiotiques existant jusqu'à présent.

Pour préparer les pantothénates à partir de l'antibiotique basi- que et du composé de la série pantothénique, on fait réagir un sel de l'an- tibiotique basique sur un sel du composé de la série pantothénique, et on choidit les deux composants formateurs de sels de façon telle que l'anti- biotique basique se combine à l'acide pantothénique pour former le panto- thénate de l'antibiotique. Par exemple, on peut sans difficulté faire réagir le sulfate de streptomycine ou de dihydrostreptomycine sur le pan- tothénate de calcium en solution aqueuse, pour obtenir le pantothénate de streptomycine ou de dihydrostreptomycine.

En ce qui concerne les rapports quantitatifs dans lesquels on utilise l'antibiotique basique et le composé de la série pantothénique, ou dans lesquels on les fait réagir chimiquement l'un sur l'autre, @ il y a lieu de constater ce qui suit :
La streptomycine, sous forme de base, a un poids moléculaire de
581,6, et elle est capable de fixer, sur une mole de streptomycine, 3 mo- les d'un acide monobasique. On peut donc faire réagir 581,6 parties de base streptomycine sur une quantité d'acide pantothénique allant jusqu'à
657 parties, dans le sens de la formation de pantothénates. Des essais sur l'animal et sur l'homme ont montré que même des quantités notablement moindres d'acide pantothénique sont propres à diminuer ou à éliminer les propriétés toxiques de la streptomycine d'une manière décisive pour l'uti- lisation pratique.

Le DM50 pour le sulfate de streptomycine est d'environ 18mg sur 20g de souris, ce qui veut dire que pour cette dose 50% des ani- maux sujets meurent. Si, au lieu de 18mg de sulfate de streptomycine, on utilise un mélange de 18mg de sulfate de streptomycine et 4mg d'acide pan- tothénique (sous forme de sel de calcium), il ne meurt plus que 35 à 40% des animaux sujets. Pour une addition de 6mg d'acide pantothénique, le nom- bre des animaux qui meurent est ramené à 25% environ ; pour une addition de 8mg d'acide pantothénique il est ramené à 14% environ et pour une addi- tion de 12mg d'acide pantothénique, à moins de 5%. En général, il suffit donc d'ajouter, sur 10 parties de sulfate de streptomycine, environ 6 par- ties d'acide pantôthénique, bien que l'invention ne doive naturellement pas être limitée à ce rapport quantitatif.

Pour le sulfate de streptomycine, en injection intraveineuse len- te (7,4 mm3/minute) d'une solution de 50mg sulfate de streptomycine (calcu- lé en base streptomycine) par cm3, la dose mortelle chez le rat est de 23,66 mg de base streptomycine (mort par arrêt de la respiration). Rour une addition de 20% d'acide pantothénique (par rapport à la base streptomy- cine libre), la dose mortelle, dans les mêmes conditions, est de 45,8mg, autrement dit par une addition de 20% acide pantothénique, on porte la do- se mortelle au double environ.

Pour la dihydrostreptomycine, dont les propriétés toxiques sont en soi moindres que pour la streptomycine, on obtient déjà une élimination pratiquement suffisante des effets toxiques avec de faibles additions d'aci- de pantothénique, par exemple 6g d'acide pantothénique sur environ 30-40 g de sulfate de dihydrostreptomyoine.

Dans le cas de la néomycine et de la viomyoine, des additions d'en- viron 3 g acide pantothénique sur 15 g néomycine ou 25 g viomycine sont suffisantes.

Les pantothénates des antibiotiques basiques peuvent être préparés

et utilisés dans des remèdes sous forme de sels simples ou mixtes.

Les effets avantageux que l'on peut obtenir suivant la présente in- vention ressortent des indications suivantes :
1) l'effet bactériostatique des antibiotiques basiques n'est pas diminué par l'addition du constituant pantothénique. Co fait a été consta- té par des essais in vitro, sur des oeufs de poule couvés, sur la souris blanche, sur le cobaye et sur le lapin. Les essais ont conduit, dans tous les cas, au même résultat.

2) La diminution de la toxicité a été vérifiée dans l'essai in anima vili sur la souris blanche, et on a fait ressortir la forte diminu- tion déjà signalée des propriétés toxiques. Pour compléter, on signalera que la dose mortelle pour 50% des animaux sujets (DM50) pour le pantothéna- te de streptomycine, est de 70 mg/20 souris, contre 18 mg/20 g souris pour le sulfate de streptomycine. Les essais in anima vili ont été confir- més par les résultats cliniques.

3) On a pratiqué, notamment sur le chat, des expériences tendant à supprimer l'altération fonctionnelle du nervus statoaousticus, c'est-à- dire l'apparition de troubles de l'équilibre et la réduction de l'ouïe.

La durée du traitement s'est étendue à 20-40 jours ; que la strepto- mycine et la dihydrostreptomycine donnaient à partir de 15ème jour des per- turbations qui, entre le 30ème et le 35ème jour, se présentaient'déjà, en général, sous une forme grave, par contre, lorsqu'on utilisait des produits préparés conformément à l'invention, il n'apparaissait en aucun cas de trou- bles neurologiques ni d'autres signes d'effets secondaires, jusqu'à la fin de la période d'essai. De même sur le rat et sur le cobaye, les syndromes d'intoxication spécifiques de la streptomycine ou de la dihydrostreptomyci- ne ont pu être inhibés par l'addition d'acide pantothénique. Entre temps, les résultats d'expériences'in anima vili ont pu être largement confirmés sur l'homme en clinique .

Pour obtenir des préparations combinées qui, ou- tre la streptomycine et l'acide pantothénique, contiennent en outre d'autres constituants tels que la pénicilline, la pénicilline-procaïne, la pénicil- line-oxyprocaîne, etc..., il est avantageux de commencer par préparer le pantothénate du constituant streptomycine, et de réunir alors le sel ainsi obtenu avec l'autre constituant.

Quand on utilise comme constituants, pour préparer les nouveaux mélanges de corps, des sels, esters ou amides de l'a- cide pantothénique ou d'autres constituants empruntés à la série pantothé- nique au sens de la présente invention, il faut utiliser, pour former le constituant pantothénique, des matières premières qui, dans une décomposi- tion du constituant pantothénique dans l'organisme humain ou animal, ne peu- vent déployer aucun effet nuisible pour l'organisme humain ou animal.

Exemple 1.

On ajoute, à une solution de 14,56 g de sulfate de streptomycine dans 30 cm3 d'eau, une solution aqueuse de 14,22 g de pantothénate de cal- cium. On laisse reposer une nuit la solution réactionnelle dans le réfri- gérateur, on sépare alors du sulfate de calcium par filtration, et on con- centre le filtrat clair sous vide à 0 . On obtient le pantothénate de strep- tomycine avec un rendement proche de 100%, sous forme de masse cristalline blanche, qui est très facilement soluble dans l'eau. Le nouveau sel se dé- compose entre 130 et 140 .

EXEMPLE 2.

On procède comme dans l'exemple 1, en utilisant 14,6 g de sulfate de dihydrostreptomyoine et 14,22 g de pantothénate de calcium, Le rendement est d'environ 86% du rendement théorique. Le sel se décompose entre 130et

140 C. Il est très soluble dans l'eau.

Exemple 3.

On prend un mélange intime de quantités de sulfate de streptomy- cine et sulfate de dihydrostreptomycine correspondant chacune à 0,5 g res- pectivement de base streptomycine et dihydrostreptomycine, et de 0,25 g de pantothénate de calcium; on y ajoute 2,5 cm3 d'eau et on agite bien pendant quelque- temps, après quoi la réaction est terminée.

Exemple 4.

On mélange intimement 70mg de pénicilline-G-sodium, 400 mg de pénicilline-procaîne, la quantité de sulfate de dihydrostreptomycine corres- pondant à 500 mg de base dihydrostreptomycine, et 200 mg de pantothénate de calcium, et on ajoute 2,5 cm3 d'eau. Après une vigoureuse agitation, la réaction du sulfate de dihydrostreptomycine sur le pantothénate de cal- cium est terminée.

Exemple 5.

On mélange bien 400 mg de pénicilline-oxyprocaine, 1,3g de sulfate de dihydrostreptomycine et 500 mg de pantothénate de calcium, et on ajoute alors 3 cm3 d'eau. On agite quelque temps la suspension, après quoi la réaction de sulfate de dihydrostreptomycine sur le pantothénate de calcium est terminée.

Exemple 6.

On malaxe mécaniquement dans un récipient stérile 12,8g de sulfate de streptomycine avec 12,6 g de pantothénate de sodium ; de l'air ambiant ne doit pas dépasser 80%. Le produit résultant ne présente aucune propriété hygroscopique notable. Ce fait est surprenant parce que les deux matières premières sont fortement hygroscopiques. Le malaxage mécanique provoque probablement une réaction entre les matières premières avec forma- tion d'un sel nouveau.

Exemple 7.

On prend une solution aqueuse concentrée de sulfate du complexe néomycine, et, en agitant, on y ajoute lentement une solution aqueuse, éga- lement concentrée, de pantothénate de calcium, jusqu'à ce qu'il ne se sépa- re plus de sulfate de calcium. On laisse reposer une nuit en réfrigérateur,. on sépare du sulfate de calcium par filtration, et on évapore l'eau sous vi- de à basse température. Le pantothénate du complexe néomycine, ainsi obte- nu, forme une masse cristalline blanche, qui est très facilement soluble dans l'eau.

Exemple 8.

On procède essentiellement comme dans l'exemple 1, en utilisant du sulfate de viomycine et du pantothénate de calcium. De cette manière on obtient le pantothénate de viomycine sous forme de masse cristalline très facilement soluble dans l'eau.

Claims

RESUME.

L'invention a pour objet un procédé de préparation d'antibiotiques basiques produits par des espèces de Streptomyces en vue d'en éliminer les effets toxiques; le procédé est caractérisé par les points suivants considé- rés séparémsnt ou en combinaison : 1 ) On prépare un remède à administrer solidairement, avec d'une part un antibiotique basiqùé produit par une espèce de Streptomyces, d'autre <Desc/Clms Page number 5> part, l'acide pantothénique, ou un dérivé fonctionnel de l'acide pantothé- nique, ou un composé qui, dans l'organisme vivant, peut se transformer en acide pantothénique, ou libérer ce corps.

2 ) A partir de l'antibiotique et du constituant pantothénique, on prépare le pantothénate de l'antibiotique.

3 ) L'antibiotique est la streptomycine ou son produit d'hydrogé- nation.