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Publication number: BE556878A
Authority: BE

Description


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  La présente invention est relative à des composes sté- 
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 roldes et plus spécialement à la 1-déhydo-6-méthylcortisone, la   l-déhydro-6-méthylhydrocortisone,   leurs esters et au procédé.de production de ces composés. 



   Les composés et le procédé de la présente invention sont représentés de façon illustrative par la succession suivante de formules : 

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 dans lesquelles R est choisi dansle groupe comprenant le   Il)3 -   
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 hydroxy et le 11-céto, et Rt et. Ruz sont choisis dans le groupe comprenant l'hydrogène et un acyle, le groupe acylique étant d'un acide carboxylique organique, de préférence un acide carboxylique hydrocarboné contenant de 1 à 12 atomes de carbone inclusivement. 



   Le procédé de la présente invention consiste à soumet- 
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 tre une 6-méthyl-17 0 , 21-d.hyàroxy-.-prégnène-3, U-dione oxygéné. en 11,   (l'épimère   6   # ou     6 P )   ou un ester de celle-ci (formule D à une fermentation par un microorganisme produisant une déshydro- 
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 génation dans la position 1 d'un 3'-céto-4-prégnène pour obtenir le composé de la formule II.

   Sont spécialement intéressants pour la déshydrogénation dans la position 1 de stéroïde, les   microorga-   nismes choisis parmi les genres Calonectria,   Alternaria,   Golleto- 
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 trichum, Uylindrocarpon, Ophiobolus, Septomyxa, Didymella, Uorynebacterium, Fusarium, Listeria, Brysipelothrixo Le Septomyxa, spécialement l'espèce Septomyxa affinis ATCO 6737e ç-t le Corynebacterium, spécialement l'espèce Uorynebacterium simplex, sont préférés pour la production de la 6-méthyl-17 of, ,21-dihydroxy l,lr-prégnadiène-3,20-dione oxygénée en 11 correspondantes. 



  L'estérification de la 6-méthyl.-.l d. ,:1-dhydroxy-.,t- prégnadiene-3,20-dione oxygénée en 11 ainsi produite est mise en oeuvre par des méthodes courantes, telles que mélange de la 6- 
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 méthyl-17 0(,,21-aihydro.xy-1,.-préünadiene-3,G--d:.are oxygénée en 

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 11 choisie, avec un agent acylant, tel qu'un   cétène,   un acylate d'isopropényle, un anhydride d'acide ou un halogénure d'acide d'un acide carboxylique organique, de préférence un acide carboxylique hydrocarboné contenant de 1 à 12 atomes de carbone, à des températures comprises entre 0  et 100 , la température ambiante étant préférée (voir exemples 5 à 8 et 11 à 16). 



   L'expression   "oxygéné''   en 11" se réfère ici seulement au 11-hydroxy et au 11-céto. 



   Un but de la présente invention est de -procurer les analogues   6-méthyl-1-déhydro   de cortisone, d'hydrocortisone, et leurs 21-esters, et en particulier leurs   6 #    -épimères,   à savoir; la 1-déhydro-6   # -méthylhydrocortisone   et la   1-déhydro-6 #   -méthylcortisone. Un autre but de la présente invention est de procurer un procédé de production de 6-méthyl-l-déhydrocortisone, -hydrocortisone, et leurs esters. Un but supplémentaire de la présente invention est de procurer d'autres analogues   1-déhydro-6-   alkyle ou   1-déhydro-6-phényle   de cortisone, d'hydrocortisone et leurs composés   épi-F   et esters.

   D'autres buts de la présente invention apparaîtront au fur et à mesure du développement de la description. 



   Les nouveaux composés, 1-déhydro-6-   méthylcorti.sone   et   l-déhydro-6-méthylhydrocortisone,   spécialement sous la forme de   6 #   -épimères, sont des hormones adrénocorticales très actives ayant une plus grande activité glucocorticoïde que l'hydrocortisone, la cortisone, ou les analogues 1-déhydro de l'hydrocortisone et ae la cortisone, comme montré au tableau suivant . 

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  TABLEAU I Activité glucocorticolde relative des nouveaux stéroïdes (comparativement à l'hydrocortisone = 1) 
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<tb> 
<tb> Stéroïde <SEP> Activité <SEP> glucocorticoide
<tb> Voie <SEP> Voie
<tb> buccale <SEP> sous <SEP> cutanée <SEP> 
<tb> Hydrocortisone <SEP> 1 <SEP> 1
<tb> 1-Déhydrohydrocortisone <SEP> 2,9
<tb> 1-Déhydro-6 <SEP> #-méthylhydrocortisone <SEP> 18 <SEP> 10,6
<tb> Cortisone <SEP> 0,60
<tb> 1-Déhydrocortisone <SEP> 3
<tb> 1-Déhydro-6 <SEP> #-méthylcortisone <SEP> 5,6
<tb> 
 
Les nouveaux composés 1-déhydro-6   #-méthycortisone   et   1-déhydro-6 #-méthylhydrocortisone,   ont   l'avantage supplémen-   taire   devoir   une faible rétention de sel et une activité anti-      phlogistique élevée,

   qui les rendent intéressants pour une'utili- sation générale aussi bien que topique. L'activité antiphlogistique (anti-inflammatoire) de la   1-déhydro-6 #-méthylhydrocortiso-   ne, telle que mesurée par le granuloma pouch test, est de 6 à 7 fois celle de l'hydrocortisone. Le composé épi F   l'déhydro-6 #-   méthylé, la 6   #-méthyl-11     OÙ,1?     #,     21-trihydroxy-l,4-prégnadiè-     ne-3,20-dione,   en plus de son activité anti-inflammatoire,' est intéressante comme intermédiaire dans la production des esters de 6   #-méthyl-   1-cortisone, par exemple, par l'oxydation des 6-méthyl épi F 21-acylates avec de l'acide chronique, comme mon- tré à l'exemple 10. 



   D'une façon générale, des compositions contenant les composés de la présente invention peuvent être préparées pour une utilisation pour les animaux ou les humains en les incorporant dans l'une quelconque de diverses formes d'administration conve- nant pour cet usage. Ces formes d'administration comprennent les ingrédients actifs plus un support non toxique qui peut être une 

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 matière solide ou un liquide. Des supports-doux sont évidemment préférés pour l'utilisation par voie buccale. Des exemples de formes d'administration par voie.buccale sont les tablettes, capsules, suspensions ou solutions-liquides. Pour les formes d'administration qui conviennent.spécialement.pour une administration par voie parentérale, un diluant stérile est évidemment nécessaire.

   Lorsque les ingrédients actifsdoivent être utilisés localement, ils peuvent être'préparés sous forme d'un onguent, d'une bougie, d'une lotion ou d'une graisse. Lorsqu'on envisage une utilisation pour l'oeil ou l'oreille, les composés peuvent être préparés sous la forme de gouttes ou d'un onguent. Les composés peuvent également être préparés dans un véhicule aérosol, lorsqu'une utilisation nasale est   envisagée.:Des   exemples de formes d'administration préférées sont'les   suivants..   



   Tablette pour une utilisation par.voie buccale spéciale- ment   pour.l'arthrite:   
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 1-déhydro.-6 0 -méthylhpdrocort.isone . '.''mgr 5 
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<tb> 
<tb> lactose
<tb> sucrosè
<tb> amidon
<tb> stéarate <SEP> de <SEP> calcium
<tb> 
 
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<tb> 
<tb> grains- <SEP> 3,3
<tb> id <SEP> 0,il@
<tb> id <SEP> 0,075
<tb> id <SEP> 0,02
<tb> 
 
D'autres   dosages.de   l'ingrédient actif,la   l-déhydro-6-     méthylhydrocortisone,   peuvent être utilisés avec une variatibn. de 0,5 à 10 mgr par'tablette.

   De   plùs,.   d'autres ingr   .-lents   peuvent être incorporés dans la tablette; tels que des antibiotiques 
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 par exemple, la tétracycline, la chlorotétraeycl.ine, le chloram-   phénol,   la pénicilline, la novobiocine,   l'oxytétracycline,   etc, les sulfamides, l'aspirine et/ou   aes   vitamines. 



   Un exemple de tablettes destinées   à   une utilisation par 
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 voie buccale et cont:nant de l'aspirine est donne ci-après. 

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   50.000 tablettes contenant de l'aspirine et de la 1- déhydro-6-méthylhydrocortisone, comme ingrédients actifs essen- tiels, sont préparées en partant des types et quantités suivantes d'ingrédients : 
Mélange : partie I Acide acétylsalicylique granulaire
USP Stand. n    40   mailles 33 livres 1 once 
Mélange : partie II 
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<tb> 
<tb> l-déhydro-6 <SEP> # <SEP> -méthylhydrocortisone <SEP> 193 <SEP> grains
<tb> Colorant <SEP> 1 <SEP> livre <SEP> 6 <SEP> onces <SEP> 375 <SEP> grains
<tb> Amidon <SEP> tamisé <SEP> 11 <SEP> onces <SEP> 188 <SEP> grains
<tb> Talc <SEP> tamisé <SEP> 1 <SEP> livre <SEP> 6 <SEP> onces <SEP> 375 <SEP> grains
<tb> 
 
Pour un usage local, des onguents peuvent être préparés comme ci-après. 



   Pour la préparation de 500 livres d'un onguent convenant pour un usage local, contenant avantageusement de la néomycine et de la   1-déhydro-6 #   -méthylhydrocortisone comme ingrédients actifs essentiels, les types et quantités ci-après d'ingrédients sont utilisés : 
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<tb> 
<tb> 4% <SEP> de <SEP> Multiwax <SEP> n  <SEP> W-445 <SEP> 20 <SEP> livres
<tb> 20% <SEP> d'huile <SEP> minérale <SEP> légère <SEP> USP
<tb> viscosité <SEP> 180 <SEP> 100 <SEP> livres
<tb> 0,5% <SEP> de <SEP> cholestérol <SEP> USP <SEP> 2 <SEP> livres <SEP> 8 <SEP> onces
<tb> 0,02% <SEP> de <SEP> méthylparabène <SEP> USP <SEP> 1 <SEP> once <SEP> 263 <SEP> grains
<tb> 0,18% <SEP> de <SEP> n-butyl-p-hydroxybenzoate <SEP> 14 <SEP> or¯ces <SEP> 175 <SEP> grains
<tb> 0,5% <SEP> de <SEP> 1-déhydro-6 <SEP> # <SEP> -méthylhydrocortisone
<tb> (micronisée)

   <SEP> 2 <SEP> livres <SEP> 8 <SEP> onces
<tb> 0,6% <SEP> de <SEP> sulfate <SEP> de <SEP> néomycine <SEP> (microatomisé) <SEP> 3 <SEP> livres
<tb> 
 
Petrolatum blanc USP q.s. pour donner 500 livres La cire est une cire microcrystalline de point de fusion élevé provenant de L. Sonneborn and Sons, Inc., New York, N.Y. 



   D'autres antibiotiques qu'on peut utiliser avantageuse- 

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 ment à la place de ou avec la néomycine sont le sulfate B de polymyxine, la bacitracine; la gramicidine, la tyrothricine. Une activation de la puissance de la polymyxine et de la néomycine est 
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 obtenue par l'addition de 1-déhydro-6 , méthylhydrocortisone. 



  Au lieu de la 1-dëhydro-6 0 -méthylhydrocortisone, on peut utiliser pour une administration   parentale,   les   21-esters   de celle-ci, comme le 21-acétate, le propionate, le butyrate,   le   benzoate, le phénylacétate, le phénylpropionate, le dinéopentylacétate, le butyl tertiaire acétate, le triméthylacétate'et autres esters comme montré dans les exemples. De plus, la 1-déhy- 
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 dro-6 oC -méthylhydrocô'tisone peut être remplacée par la 1-déhydro-6 UG -méthylcortisone ou ses 21-esters, comme mentionné ciavant, ou par les bu -méthyl épimères, la 1-déhydro-6 -méthyl- hydrocortisone et la   l-déhydro-6-méthylcortisone   ou ses 21 acylates.

   Pour une utilisation par voie parentérale, les esters solubles dans l'eau   d'acidespolybasiques   et leurs sels conviennent spécialement, comme le sel de sodium, de phényléphrine, de N-   méthylglucamine   de   21-hemisuccinate,   diméthylglutarate, glycolate, 
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 tartrate, etc, de l-déhydro-6o( -méthylhydrocortisone, en solution tamponnée.

   De même, dtautres l-déhydro-6cC'-alkylhydrocortisones, 1-dêhydro-6of. -alkylcortisones et leurs esters, de même que les 1-déhydro-6 t....arylhydrocortisones et l--déhydro-6cC - arylcortisone et leurs esters ou les 6 ss -épimères, dans lesquels le groupe alkylique est le méthyle, l'éthyle, le propyle, le butyle, le pentyle, l'hexyle, etc, et le groupe arylique est le phényle, le benzyle, etc, sont intéressants dans des compositions pharmaceutiques, comme décrit ci-avant. 



   En plus de l'utilisation des 6 ss -méthyl épimeres, la 
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 1-déhydro-6 -méthylhydrocortisone et la.1-de>hydro-6 /3 -méthylcortisone, en quantités équivalentes au lieu des 6 ci. -épipiéres, 

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 les 6 ss   -épimères   sont,facilement convertis en   6#   -épimeres ayant une plus grande activité glucocorticoïde, comme montré à l'exemple 10. 



   La préparation des composés ci-avant est réalisée d'une manière courante connue en pratique. 



   La matière de départ pour la présente invention est la 
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 6-mpthyl-17oC ,21-dihydroxy-h-prégnène-3,0-diane 11 oxygénée et ses 21-esters, notamment les   6 # -   et les 6 ss -méthyl épimères préparés, comme montré en détail dans les préparations 1 à 10. 



  De plus, on peut utiliser les 60alky- et les 6-aryl-, spéciale- 
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 ment le 6-phényl-17oC ,21-dihydroxy-4*-prégnène-3,20-diones oxygénées en 11 et leurs esters, pour préparer les b-alkyl- ou les 6-aryl-170é ,21-àfihyàroxy-1,4-prégnaàiène-3,20-àiones oxygénées en 11, qui possèdent également une activité glucocorticolde et anti-inflammatoire et peuvent être substituées, dans la thérapeutique anti-arthritique ou anti-inflammatoire, à la 60C -méthyl- 
 EMI8.3 
 il P ,l7cG 21-trihydroxy-1,4-prégnadiène-3,20-dione ou repectivement la 6oG -méthyl.-170 ,21-dihydroxy-1,Y-prégnadiéne-3,11,20- trione. 



   Le procédé de la présente invention consistant en la déshydrogénation fermentative de la matière de départ est mis en oeuvre sous des conditions telles que décrites en détail dans le brevet U.S.A. n  2.602.769, en utilisant un agent nutritif convenable contenant du carbone assimilable, de l'azote, 'u soufre et du phosphore sous une forme de composé convenable, de même que d'autres composés (vitamines, par exemple, thiamine, thiaminethiazole, hormones végétales, par   exer,iple   auxines) et des minéraux (par exemple, zinc, fer, cobalt, cuivre, potassium,   manganès'     etc.   sous une forme métaboliquement disponible)

   nécessaires pour le maintien en vie et la croissance des   Micro-organismes.     On   

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 laisse pénétrer de l'air dans le mélange de fermentation par une aération contrôlée, par introduction d'air dans des flacons agi- 
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 tés ou autre agencement convenable, et la 6 -méthylcortisone, la 6 0-méthylhydrocortisone ou le composé épi F 6 c(, -méthyié ou leurs esters ou leurs 6 -ép.mères sont ajoutés de préférence mais non   nécessiarement   en solution ou en suspension et après avoir laissé un certain temps pour la croissance du micro-organisme.

   On a trouvé que certains autres spéroides augmentent le rendement de la présente fermentation considérablement et, en vue d'une   récupération   optimum, on ajoute des promoteurs stérol- 
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 des choisis dans le groupe comprenant le J""cétooisnor-4-cholén- 22-al, l'acide 3-cétobisnor-4-cholénique, la 113 ,21-dihydrokyl,4171Oi- prégnatriène-3-one l brute et le progestérone. D'autre: composés de nature stéroïde et non stéroïde peuvent également ai- 
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 der à auE,rmnter le rendement de la ferl1le11't.i,ono D'autres détails de la fe^nentation,de la récupération des stéroïdes et de l'estéri fication sont trouvés dans les exemples,
Les exemples suivants sont   illustratifs   du-procédé et des produits de la présente invention, mais ne sont pas limitatifs. 
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  Préparat:;.,1 - 6 oC -oxydo-il 17 q9 ,21.-r.r:.sydrox,yalloprégnane-3,20-dione 3?0-b.s-(éthya.èn: cétal) aa une solution de 0,901 gr'de ll/?,', 17 cC ,1-trihydroxy 5-prégnène-3,20-dione 3,20-bis-(éthylènè cétal) dans 18 ml de chloroforme, on ajoutait une solution de' 331. nil daede perbenzoïque dal%s 5,19 ml de chloroforme. La solution résultante était laissée au repos dans le réfrigérateur (environ 4 C) pendant une période de 24 heures et ensuite à la température ambiante pendant une période supplémentaire de   72   heures. La solution de réaction était ensuite lavée avec une solution de   bicarbonate   de soude à 5% et de l'eau, séchée sur du sulfate de sodium anhydre et évapo- 

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 rée jusqu'à siccité pour donner 1,031 gr de solide brut.

   Une recristallisation avec de l'acétone donnait 431 mgr de matière ayant un point de fusion de 230 à 247 C. La liqueur mère, après évaporation jusqu'à siccité, était dissoute dans du chlorure de méthylène et soumise à chromatographie sur 25 gr d'alumine lavée à l'acide. La colonne était développée avec trois fractions de chlorure de méthylène (plus 5,10, 15, 2C, 25 et 50% d'acétone), d'acétone, et d'acétone plus 5% de méthanol. Le produit d'élution avec l'acétone plus 5% de méthanol donnait 279 mgr supplémentaires de produit à point de fusion   @evé.   La matière à haut point de 
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 fusion, la 5 0 , 6 oC -oxydo-11 ,17 0. ,21-trihydroxyalloprégnane- 3,20-dione 3,20-vis-(étnyléne cetal) était recristallisée trois fois avec de l'acétone et du méthanol pour donner un produit pur ayant un point de fusion de 263  à 268 C.

   D'autres fractions de produit d'élution ayant un point de fusion inférieur contenaient le 5 ss, 6   /0-isomère.   
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  Préparation 2 - 5 oC,6 oC,-oxydo-11 oC ,17 (Y' ,21-trihydroxyallopré- gnane-3,20-dione 3,20-bis-(éthylène cétal) Exactement de la même manière que pour la préparation 1, 
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 le 11 oG,17 oC,,21--trihydroxy-5-pré éne-3,20-dione 3,20-bis-(éthylè ne cétal) était époxydé avec de l'acide   perbenzoique   dans un milieu de réaction au chloroforme pour donner un mélange de   5 # ,   
 EMI10.4 
 6 0(. -oxydo -et ae 5 A 6 -oxydo-11 OG ,17 c6 21-trihydroxyprégnane-3,20-dione 3,20-bis-(éthylène cétal), qui était séparé par chro matographie de manière a isoler le 5 0(- ,6 P. -oxydo-11 0 ,l',' G , 21-trihydroxyalloprégnane-3,,20-ctione 3,20-bis-(éthylène cétal) désiré, du 5 fi ,6 /3-oxyde isomère. 



  Préparation 3 - 5 OC,6 -oxydo-:l .,a'-dihydroxypré;nane-3,11, 20-trione 3,2-bis-{1,2-propylene cétal) A une solution de 1 gr de 17 .,21.-dihydroxy-5-pré,é e- 

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 EMI11.1 
 3,11,20-trigone 3,20-bis-(1,2-propylène cétal) [cortisone 3,20bis-(1,,2=propylène cétal)] dans du chloroforme, on ajoutait une solution'd;'acide perbenzoïque dans du chloroforme, et la solution résultante était laissée au repos dans un réfrigérateur et ensuite à la température ambiante, suivant le processus de la préparation 1. La solution de réaction était lavée, séchée et évaporée comme dans la préparation 1.

   Une recristallisation dans de l'acétone, avec ensuite un fractionnement de la liqueur mère sur une colonne d'alumine lavée à l'acide, en utilisant la   techni   
 EMI11.2 
 que de la préparation 1, produisait le 5c± 6 cl, -oxydo-17oC ,21dihµàroxyalloprégnane-3,11,2y..rione 3,20-bis-(l,A.-polymère cétal, et le 5 ss ,6 ss -oxydo isomère. 



   L'utilisation, comme matière de départ du cortisone.      



  3,20-bis-(éthylène cétal) qui est le plus couramment disponible 
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 donne le 5 OC ,6 fl2 -oxydo-17 oC ,21-dihydroxyalloprégnane-3,11,àô-      trione   3,20-bis-(éthylène   cétal). 



   De la même manière que montré pour les préparations 1 
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 à 3, les 5 0(, ,6 4 -oxydo-11 oC 17 irj4 ,,1-trihydroxyallopréânane'- 3,20-dione 3,20-bis- (alkylëne cétals), les 5 OC 6 OC -.oxyda-11 , 17. ,21-trihydroxyalloprégnane-3,20-dione 3,20-biS-(alkylène cé! tals) et les 5 OC, ,6 oG -oxydo-l7cG ,21-dihydroxyalloprégnane-3,ll, 20-trione 3,20-bis-(allcylène cétals) peuvent être préparés en mettant en réaction les cortisone, hydrocortisone et épi F dicétals correspondants dans lesquels le groupe cétal a té formé par réaction de la stéroïde 3,20-dione avec de l'éthylène, du propylène, du 1,2-,1,3- ou 2,3-butylène glycol ou du pentane, de 1' hexane, de l'heptane, ou des octane-diols dans lesquels les groupes alcooliques sont dans des positions voisines telles que   1,2;   2,3;

   3,4 ou autres, ou séparés par un atome de carbone tel que 
 EMI11.5 
 1,3; 2,iF; 3,5, etc, avec un peracide organique, tel que performi- que, peracétique,,   perbénzoique,   monoperphtalique, etc. Pour les 

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 besoins de la présente invention, des composés de départ ayant les groupes éthylène cétal sont préférés, puisque ces cétals sont généralement plus facilement préparés en rendement élevé que les cétals produits par la réaction des composés 3,20-dicéto avec des alkanediols élevés. 



  Préparation 4 -   5 #   ,11 ss   , 17 # ,  21-tétrahydroxy-6 ss -méthylallo- prégnane-3,20-dione   3,20-bis-(éthylène   cétal)
Une solution de 1,115 gr de   5 #    , 6 #     -oxydo-11 #     ,17# ,     21-trihydroxyalloprégnane-3,20-dione     3,20-bis-(éthylene   cétal) dans 165 ml de tétrahydrofurane (le tétrahydrofurane étant séché par distillation sur de l'hydrure d'aluminium et de lithium) -était ajoutée goutte à goutte a une solution de 95 ml de bromure de méthyl magnésium dans de l'éther (le bromure de magnésium ayant une concentration 4-molaire). A ce mélange, on ajoutait 575 ml de benzène et le mélange de réaction était ensuite agité et soumis à reflux pendant 26 heures.

   Après refroidissement, le mélange de réaction était versé dans 700 ml d'une solution de chlorure d'ammonium saturé glacée, agitée pendant une période de 30 minutes, et la'couche de benzène était séparée de la couche aqueuse. La phase aqueuse était extraite avec 3 portions de 200 ml d'acétate d'éthyle et les extraits étaient ajoutés à la couche de benzène. 



  La solution de benzene-acétate d'éthyle combinés était ensuite lavée avec de l'eau, séchée sur du sulfate de sodium anhydre et évaporée jusqu'à siccité pour donner 1,314 gr de solide brut. Une trituration de cette matière avec de l'éther laissait   1,061F   gr de produit cristallin ayant un point de fusion de 221  à 230 C. 



  Une recristallisation de cette matière donnait la   5 # , 11 ss,     17 # , 21-tétrahydroxy-6 ss-méthylalloprégnane-3,20-dione   3,20bis-(éthylène cétal) ayant un point de fusion de 228  à 233  et une rotation   [#]   de -11  dans du chloroforme. 

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  Analyse : Calculé pour C26Hl2 E) .: G: 64,70; H: $,77 Troùvé : U: 6l.., 29; H: 8,69 Préparation 5 - 5   #     ,11     17 #     ,21-tétrahydroxy-6/3   -éthylallo-   prégnane-3',20-dione   3,20-bis-(éthylène cétal)
De la même manière que pour la préparation   4,   la   5 # ,   
 EMI13.2 
 6<(, -oxydo-11 ,17 c(,,21-trihydroxyalloprégnane-3,20-dione 3,20- bis-(éthylène cétal) était mis en réaction avec du bromure d'éthyl 
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 magnésium dans une solution éthérée pour donner la 5 OC. ,11 j3 , 17 Ql ,21-tétrahydroxy-6 -éthylalloprégnane.3,20-dione 3,20-bis- (éthylène cétal) correspondant. 



   De la même manière que pour les préparations 4 et 5, 
 EMI13.4 
 d'autres 5oC ,11 ,17û(, ,21-tétrahydroxy-b -alkylall.oprégnane- 3,20-dione 3,20-bis-(éthylène cétals), 5 c(, ,1. olt 17 oC, 21-tétrahydroxy-6 â -alkylalloprégnane-3,2U-dione 3,20-bis-(éthylène cétals) et 50y ,17 t(, , 21-trihydrôxy-6 -alkylalloprégnane-3;

  11, 20trione 3,20-bis-(éthylène cétals) sont préparés par mise en réaction du 5 0(, ,6 oL -oxydo-17 .,21-dihydroxyalloprégnane-3,20-dione 3,20-bis-(éthylène cétal) correspondant'oxygéné en position 11 avec un alkyl métal ou un'aryl métal,'plus particulièrement un 
 EMI13.5 
 halogénure-dpalkyl métal, tel-que le réactif de Grignard, par exem' ple, les bromures et   les iôdures   dé méthyl, éthyl, propyl, isopropyl, butyl, pentyl, hexyl et.phényl magnésium ou bien des bromures ou   iodures,   d'alkyl cadmium et d'akyl et de phényl calcium. 
 EMI13.6 
 



  Comme produits représentatifs des'alloprêgnanes 6   -alkyiés ainsi préparés,, on a : le 5oG,11 /3 ,17 cG 2l-tétrahyaroxy-6 propylalloprégnane-3,20-dione :3 ,20-bis-( éthylène' citaI), ,le 50C - 11 ,1(c,,,21-tétrahydroxy-6 -butylalloprégnane-3,20-dion j ,2U-bis-(éLhyiëne cétal), le 5 ' ,il A 1,/ 4L,21 tétrahydroxy- 6 --i;obutylallrprcgnane-3, U-dione 3,20-bis-(éthylène cétal) , le 5 0<.., Il f3 , ,1'/ É ,N1-tétrahydroxy-b -pentylalloprégnane-3,?Udione 3,20-bis-(éthylène cétal), le 5 oµ 11 p ,17 0(,,21-tétrahydro, 

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 EMI14.1 
 xy-61' -hexylallti:gnan:e.-;2.U-dixe.:3.j;U-bïs-(ëthyaè.n,e cétal), le 5oeµ ,1:. ,.I7c<I ,;?::J1,.tAtt#.hy;,dro:xy: -.?hénylalloprêgnane-3,2üdione 3,20-M.s-(éthylène xêta les( llc( ,17 ci. ,21-tétrahydroxy-6 -métilallogrégnane:,.2D-dione .3;20-bis-(éthyJ"è.n.e cétal);

   le 50C lle T'70- ,.1-téahydroxy-6 -êthylalloprégnane-3,20dione 3,.2U-(étlëne cétal); le SoGs ,119C ,170C ,21-tëtrahydroxy-6 p aropylalloprëgnae-3,2ü-dionew 3 ,2ú-bis-( éthylne cét,;), le 5 oC , ,1LG , 17d- 21-tétr.ahyàroxy-6 -isopropylalloprénane..... 



  3,2Ô-aione-3,2U-bis-(éthyléne cétal), le 5 ,110( ,17Q(" ,21tétrahytiroxy-6 -butylallopré;ü,ne-3,2U-dione 3,20-biS-(éthylène, cétal), le 5-ci ,110( ,1'/J ,Nl-tétrahydr.oxy-6 -pentylalloprégnane-3,20-dione 3,2U-vis-(éihyléne ceta.l,), le 5 ,11 Gç,l7pe , 21-tétrahyàrcrxy-6 -hexyla731oprégnane-3,;t1-.dione 3)20-bis-(éthylë<ne cétal), le 5 ÓJ ,J:lc.(. ,17 21-teetrahydroxy-6 -phénylalloprégnane-3,20-dione 3,20-bis-(éthylène cétal), leurs 210( -monoacylates et leurs 11 Ô ,21-àiacylates dans lesquels le groupe acylique 
 EMI14.2 
 est a'un acide organique carboxylique et de préférence d'un acide carboxylique hydrocarboné contenant de 1 à.1,2 atomes de carbone 
 EMI14.3 
 inclusivement ou d'un acide benzène-sulfonique;

   le 5 rut el7 ob ,21trihydroxy-6 fl -n].ëthylalloprégnane-3,ll,20-trione 3,20-bis-(éthylè' ne cotai), le 5 o(, ,17 cL , 21-trihydroay-6 -éthylallopréguane- 3,11,20-trione 3,20-bis-(éthylène cétal), le 50 ,17C, ,21-trihydroxy-6f -propylalloprégnane-3,11,20-trione 3,20-bis-(éthylène cétal), le 5 ±,1'/ ,21-trihydroxy-6 /3 -isopropylallorégnane- 3,11,20-trione 3,20-bis-(éthylne cétal), le 5 0(J ,17 dv ,2.1-trihydroxy-6 13 -butylailoprégnane-J,11,20-trione 3,20-bis-(éthylèhe cétal), le 5c ,17 d, ,21-trihydroxy-fi -pentyla1lopregnane-3,11, 20-trione 3 >.U-cis-( éthyl:ne cétal), le 5 t7i, ,17 0(r 21-trihydroxy- 6 -hexylallopré-gl'lane-J,1I,2Ü-trione 3,NU-vis-(ëthylène cétal), le 5 0(, -17 0(, , 21-trihyciroxy-6 f3 -phënylalloprénane-3,11, 2Utrione 3,2C-bis-(éthylène cétal), etc. 



  Préparation 6 - 5 ptl ,11 , ,17 0 21-tétrahydroxy-fi -méthylal10' pré;nane-3,?U-diane . 



  Un préparait une solution contenantjlrb8 gr de 50 ,11 /à j 

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 17   #     ,21-tétrahydroxy-6     -méthylalloprégnane-3,20-dione   3,20bis-(éthylène cétal),   38   ml de méthanol et 7,7 ml d'acide sulfu-   .rique     2N.   Cette solution était   soumise. à   reflux pendant unepériode de 30 minutes, ensuite neutralisée avec une solution de bicarbonate de soude dilué à 5% (environ 100 ml), et concentrée sous pression réduite à 55 C jusqu'à environ 25 ml de volume. Un produit se cristallisait au refroidissement et était récupéré par filtration.

   Ce produit était recristallisé avec de l'acétone et des hexanes Skellysolve B pour donner un échantillon pur analyti- 
 EMI15.1 
 que de 50C ,11 /$ tl7o( ,21-tétrahydroxy-6 fi. -méthylalloprégnane- 3,20-dione ayant un point de fusion de 240 à 244 C (décomposition) et une rotation J de -40  dans le di"oxane. D 
 EMI15.2 
 Analyse : Calculé pour C22H3106 : C 66,98; H: 8,69 Trouvé : C : 66,Él; H: 8,86 Préparation 7 - 5oC , 1113 ,17oC ,21-tétrahydroxy-6 - éth lallo- prégnane-3,20-dione 
 EMI15.3 
 De la même manière qu'à l'exemple 6, du 5e ,11 f3 ' 17 Cl ,21-tétrahydroxy-6 -éthylalloprégnane-3,20-dione 3,20-bis- (éthylène cétal) était hydrolysé avec de l'aciae sulfurique diluée 
 EMI15.4 
 dans une solution d'éthanol, pour donner la 5oC ,110 ,17e( ,21-   tétrahydroxy-6   -éthylalloprégnane-3,20-dione. 



   De la même manière que   our   les préparations 6 et 7, l'hydrolyse des 6 ss   -alkylalloprégnane   de cétals, tels que le 
 EMI15.5 
 5 dl 11 fi z17 dl ,21-tétrahydroxy-6 f3 -a'Iloprégnane-3,20-dione 3,20-bis-(éthylene cétal), les 5 ci., e 11 ÇC ,17oC ,21-tétrahydroxy- 6 /3 --alloprégnane-3)20-dione 3,20-bis-(éthylène cédais) et leurs 21-monoesters et 11 oe. , 21-diesters, .et le 5 ,17 çC. ,21-trihydro' xy-6 -alky1a11opré;nane-3,11,20-trione 3,2U-bis-(éthylne cétal), de même que les 6 fi -alkylallèprCt;

  nane-3,20-dione 3,20-bis- (cétals) dans lesquels le groupe cétalique est autre que l'éthylene, peut être réalisée pour donner les 5cC ,17- ,21-*trihydroxybu -alkylaliopréànane-3,20-diones correspondantes oxygénées dans la position 11, telles que, par exemple, la 5 cG ,11 LIOC ,21tétrahydroxy-6 -propylalloprégnane-3,20-dione, la 5 ,11 , 1 0(.,21-tétrahydroxy-.b -butylalloprénane...3,2C7-dione, la 

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 EMI16.1 
 5c</ 11 113 ,17 p(, ,21-tétrahydroxy-6 -isobutylalloprénane-3,20dione, la 5(. 11 e 17 t:f., ,21-tétxahydroxy-6 -pentylalloprégnane-3,20-dione, la 5 e ,Il {3 ,17 r:

  f., ,21-trétrahydroxy-6 fi -hexylalloprégnane-3,20-dione, la 3o<. ,11 tl7c(. ,21-tëtrahydroxy.-6 phénylalloprégnane-3,20-dione, la 50, ,11 oC jl7o( ,21-tétrahydroxy-6 -méthylalloprégnane-3,20-dione, la 50 ,lIa{ ,17ck ,21tétahydroa,y-6 / -éthylalloprécnane-3,20-dione, la 5 ,il±± , 17,21-tétrahydroxy-6 -propylallopr:

  gnane-3,.20-ctione, la 5 e 11 QC- ,1 ( 6 , 21-t étrahxdi oxy-6 , -isopropylalloprégnane-3, 20-dione la 5oC ,11 eL ,170(, ,2l-tétrahYdroxy-6 fi -butylalloprégnane-3, 20dione, la 5 dl 11 OC 17 0(- 21-tarahydroxy-b -pentylalloprégnane-3,20-dione, la 5 ,11oC. 17 CC ,2l-tétrahydroxy-6 3 -hexylallo - prégnane-3,20-dione, la 5<. ,11 oC ,17 oC 21-tëtrahydroxy-b phénylalloprégnane-3,20-dione, la 5 0 ,17 fi. ,21-trihydroxy-6 /$ méthylalloprégnane-3,11,20-trione, la 5 CC ,17 OC ,21-trihydroxy- 6 fi -éthylalloprégnane-3,11,20-trione, la 5 ,17 0(.,, 21-trihydroxy-6 -propylalloprégnane-3,11,20-trione, la 50, ,17 ri.. 21-trihydroxy-6 A -isopropylalloprégnane-3,11,20-trione, la 5cl ,17 r:

  L, 21-%rihydroxy-6 () -butylalloprégnane-3,11,20-trione, la 5c(.,, 17 OC. , 21.-trihydroxy-fi -pentylallaprégnane-3,11, 20-trione, la 5 0(, ,17 cC 21-trihydroxy-éi -hexylalloprégnane-3,11, 20-trione, la 5 àl,17 OG,21-trihydroxy-6 -phënylallopréndne-3,11,2U-trione,etc, et notamment les 6 A -alkylallorrègnanes ayant des grou- 
 EMI16.2 
 pes cétaliques dans les positions 3 et 20, tels que Montrés dans la préparation 3. 
 EMI16.3 
 



  Préparation 8 - 6 < -méthylhydrocortisone 
 EMI16.4 
 à barboter Un courant d'azote était amené/à travers une solution 
 EMI16.5 
 de 429 mgr de 5 oC ,11 /3 ,17 ..,,21-tétral:ydroxy-6 -méthylallopré- 
 EMI16.6 
 gnane-3,20-dione, contenus dans luO ml d'alcool absolu dénaturé, 
 EMI16.7 
 pendant une période de 10 minutes.

   A cette solution, on ajoutait 

 <Desc/Clms Page number 17> 

 
4,3 ml de solution de soude caustique 0,1 normale, qui avait éga- lement été traitée avec de   l'azote.   Le mélange était laissé au repos dans une atmosphère d'azote pendant une période   de.10   heures et ensuite acidifié avec de l'acide acétique, et concentré sous pression réduite à 55 C jusqu'à   siccitéo   Le résidu pesant 417 mgr était recristallisé en partant d'acétone-hexanes Skellysolve   B   pour donner en deux récoltes 249 mgr de 6   #-méthlhydrocortisone   fondant entre 184 et 194 C. Un échantillon analytique était pré- paré, fondant à 203-208 C et consistant   en 6 #-méthylhydrocorti-   sone. 



   Analyse : Calculé pour C22H32O5 : C:   70,18;   H : 8,57
Trouvé : C: 70,32; H : 8,50
Les liqueurs mères contenaient,outre la   6 #   -mêthylhy- drocortisone, des -quantités importantes de 6 ss-méthylhydrocorti- sone qui peuvent être isolées par recristallisation, chromatogra- . phie sur papier, processus à contre-courant et autres moyens con- nus en pratique. 



   Préparation 9 -   6   -méthylhydrocortisone
On préparait une solution contenant 27,5gr de   5     11     ,17   ,21-tétrahydroxy-6 ss -méthylalloprégnane-3,20-dione dans 6500 ml d'éthanol dénaturé avec du méthanol. La solution était libérée de l'oxygène de l'air en faisant barboter de l'azo- te exempt d'oxygène à travers cette solution pendant une période de 15 minutes.   A   cette solution, on ajoutait une solution simi- lairement préparée, sans oxygène de l'air, de soude caustique
0,1 normale (235 ml). La solution était laissée au repos à la température ambiante (environ 22 à 24 C) dans une atmosphère d'azote inerte pendant une période de 20 heures et était ensuite acidifiée avec 14 ml d'acide acétique.

   La solution acide ainsi obtenue était évaporée à environ 50  à 60 C sous le vide, le rési- du ainsi produit était dissous dans 200 ml   dacétate   d'éthyle et 

 <Desc/Clms Page number 18> 

 200 ml d'eau, la couche d'eau était séparée de la couche organique et rejetée, la couche organique était lavée avec 350 ml de solution de bicarbonate de soude aqueuse à 5%, ensuite trois fois avec de l'eau et par après séchée sur du sulfate de sodium anhydre et concentrée jusqu'à un volume de 180 ml. Après refroidissement des 180 ml de solution dans un réfrigérateur (environ 5 C), la solution était filtrée, en donnant   Il,9   gr de matière.

   Cette matière était redissoute dans 500 ml d'acétate d'éthyle, la solution d'acétate d'éthyle était concentrée jusqu'à 150 ml, réfrigérée comme ci-avant pour'donner 6,15 gr de   6     -méthylhydrocortisone   
 EMI18.1 
 brute d'un point de fusion de 2209-2230U. 



  Une recristallisation de la 6 -méthylhydrocortisone brute trois fois de plus avec de l'acétate d'éthyle donnait un échantillon analytique de   6 / 3-méthylhydrocortisone   avec un point de fusion de 223 à 227 C, une rotation   [#]   de + 105 dans de
D 95% éthanol l'acétate, une absorption ultraviolette max 243m 
 EMI18.2 
 aI- Vi = 1..500 analyse : Calculé pour C22H32O5 : C : 70,17 ; H :   8,57  
Trouvé C : 70,54;

   H : 8,91 
 EMI18.3 
 Préparation 10 - 6 0(- -éthylhydrocortisone De la même maniere que pour la préparation 8, de la 5 C,11 ,17 dl,21-tétrahydroxy-6 ONC -éthylalloprégnane-3,20- dione était traitée avec une solution de potasse caustique dans du méthanol pour donner à la température ambiante la   6 #   -éthyl-
EtOH 
 EMI18.4 
 hydrocortisone de 223 -226 0 de point.de fusion et d'une t EtOH 21F3j 14-525 - max De la même manière, une déshydratation avec un hydroxyde 
 EMI18.5 
 de métal alcalin en solution alcoolique d'autres 5 d2 ,17 a7,1trihydroxy-6 p-alkylalloprégnane-3,20-diones oxygénées en 11 proauisatt les 6 oC-alkyl-17 t±,21-dihydroxy-6-alkyl-4-prégnène- 3,20-diones oxygénées en 11, telles que la 6Cl-propylhyarocorti- 

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 EMI19.1 
 sone, la 6 cc-butylhydrocortisone,

   la 6 C4-isobutylhydrocortiso*nei la 6 n( -pentylhydrocortisone, la 6 o±-hexylhydrocortisone, la 6 -phénplhydrocortisone, la 6 c4-niëthylcortisone d'un point de fusion de 212,5 à 21 :, la 6 0(,-éthylcortisone, la 6 ç( -propylco:r.. tisone, la 6 ôc-isopropylcortisone, la 6 0(-butylcortisone, la 6 o-pentylcortisone, la 6 C4-hexylcortisone, la 6 0(; -phény lcortiw' sone, la 11 ce,17 ,21-trihydroxy-6 -méthyl-t,.-prégnène-3,20dione, la 11 el.- ,17 "21-tr.hydroxy-6 -propyl-l-prégnène-3,0dione, la 11 eC.,17 ng,21-trihydroxy-6 c<... -isopropyl-l.-prégnène 3,20-dione, la 11 cC ,1? ,1-trihydroxy-6 oC -butyl-1H-prégnène- 3,20-dione, la il 0(. D 17 OC ,l-rihydro.y-6 Q(..-pentyl-1.-prégnène";'. 



  3,20-dione, la 11 d.,17 , 91--trihydroxy-6 cC-hexyl-4-prégnène- 3,20-dione, la Il eL ,17 C± ,21-trihYdroxy6-phényl-J....prégnène-3,20cione, etc. 



  EXEMPLE 1 1-déhydro-6 oC-méthylhydroco.: t sone (6   -méthylIl /3,17 , 21-trihydroxy-1, l-p= ëgnadiéne- 
3,20-dione)
Six portions de 100 ml d'un milieu dans des flacons d'Erlenmeyer de 250 ml contenant 1% de glucose, 2% de liqueur de trempage de mais (60% de solides) et de l'eau de robinet étaient 
 EMI19.2 
 réglées à un pH de e t,., 9 Ce milieu était stérilisé pencant IF5 mi- nutes à 15 livrer par pouce carré de pression et ensemencé avec 
 EMI19.3 
 une croissance de 1 à 2 jours de Septomixa affinis A.i,c.G.67370 Les flacons d'Erlenmeyer étaient agitésà la tempér,-,t-are ambiante à environ 24 C pendant une période de 3 jours.

   A la fin de cette période, ce volume de 600 ml était utilisé comme inoculum pour 10 litres du même milieu glucose-liqueur de trempage de mais qui, 
 EMI19.4 
 en outre, contenait 10 ml a'un anti-mousse (un mélar,3;E: d'huile de lard eL cloctadécanol). L'appareil de fermentation était placé aans le bain-marié, réglé à 28 C, et le contenu était   agité   (300 tours par minute) et aéré 0,5   1.d'air   par 10 1.

   de bière)Après 17 heures d'incubation, lorsqu'un bonne   croissance   se développait 

 <Desc/Clms Page number 20> 

 et que l'acidité s'élevait jusqu'à un pH de 6,7,-deux gr de   6 # -   méthylhydrocortisone plus 1 gr de   3-cétobisnor-4-cholén-22-al,   dissous dans 115 ml de diméthylformamide, étaient ajoutés, et l'in- cubation (conversion) était réalisée à la même température et aéra- tion pendant 24 heures (pH final de   7,9).   Le mycélium (56 gr : poids à sec) était enlevé par filtration et la matière stéroide était extraite avec du chlorure de   méthylène,,les   extraits au mé- thylène étaient évaporés jusqu'à siccité, et le résidu résultant    était soumis chromatographie sur une colonné de Florisil.

   La était soumis à chromatographie sur une colonne Florisil.   colonne était bourrée avec 200 gr de Florisil;et était développée avec 5 fractions de 400 ml de chlorure de   méthylène,   de mélanges d'acétone et de Skellysolve B de 9/1, de 8/2, de 7/3, de   1/1, .et   de méthanol. La fraction éluée avec du Skellysolve B-acétone (7/3) pesait 1,545 gr et, lors d'une recristallisation à l'acétone, . elle donnait, en trois récoltes,   928   mg de .produit d'un point de fusion de 210 -235 . L'échantillon préparé pour l'analyse fondait à   2450-2470.   La rotation   [#]D   était de +   3    dans du dioxane. 



  Analyse : Calculé pour C22H30O5 : C : 70,56; H : 8,08   @  
Trouvé : C :   70,53; .   7,94   EtOH 243, = 14.875 243, = 14.875   max 
Absorption d'infrarouges dans une suspension d'huile minérale Nujol : 
 EMI20.1 
 
<tb> 
<tb> OH <SEP> 3430
<tb> 20-céto <SEP> 1706
<tb> 3-céto-conjugué <SEP> 1645
<tb> double <SEP> liaison <SEP> 1,4 <SEP> 1592
<tb> 
 
 EMI20.2 
 
<tb> 
<tb> 3330 <SEP> 3180 <SEP> cm-1
<tb> 
 
Au lieu de l'être par une déshydrogénation fermentative, la   l-déhydro-6 #-méthylhydrocortisone   ou un ester de celle-ci peuvent être obtenus par une   déshydrogénàtion   de   6 -méthylhydro-   cortisone ou d'un. ester de celle,,ci, avec du bioxyde de sélénium, comme illustré dans l'exemple lA. 

 <Desc/Clms Page number 21> 

 



  EXEMPLE   lA  
Acétate de   1-déhydro-6 #   -méthylhydrocortisone
Un mélange de 70 mgr d'acétate de   6 #   -méthylhydrocortisone dans 4,5 ml d'alcool butylique tertiaire et 0,45 ml d'acide acétique, et de 24 mgr de dioxyde de sélénium était chauffé jusqu'à 75 C et agité pendant 24 heures. Ensuite, une portion de 24 mgr de bioxyde de sélénium était ajoutée et chauffée jusqu'à 75 C et   l'agitation   était poursuivie. Ensuite, le melange était refroidi, filtré pour enlever le bioxyde de sélénium, et évaporé. 



  Une chromatographie au papier montrait que le résidu contenait environ 50 à   55'le   d'acétate de   1-déhydro-6 #   -méthylhydrocortisone qui pouvait être récupéré du résidu par recristallisation et chromatographie. 



   Absorption d'infrarouge dans une suspension d'huile minérale   Nujol:   
 EMI21.1 
 
<tb> 
<tb> OH <SEP> 3400 <SEP> 3280 <SEP> cm-1
<tb> 11- <SEP> et <SEP> 20-céto <SEP> 1722 <SEP> 1700
<tb> 3-céto <SEP> conjugué <SEP> 1655
<tb> double- <SEP> liaison <SEP> 1,4 <SEP> 1611 <SEP> 1597
<tb> 
 EXEMPLE 2 1-hydro-6   #   -méthylcortisone
De la même manière qu'à l'exemple 1, de la 6   #     -méthyl-   cortisone était soumise à fermentation par des Septomyxa affinis dans le même milieu nutritif avec de la 11 ss ,21-dihydroxy-1,4,17   (20)-prégnatrién   -3-one brute comme promoteur pour donner de la   l-déhydro-6 #   -méthylcortisone ayant un point de fusion de 230 à 232 C. 



   Au lieu du 3-cétobisnor-4-cholen-22-al comme promoteur, on peut utiliser de la progestérone, de la   11     ,21-dihydroxy-   1,4,17(20)-prégnatrién -3-one ou de l'acide 3-cétobisnor-4-cholénique. 

 <Desc/Clms Page number 22> 

 EXEMPLE 
 EMI22.1 
 6-méthyl-llo( ,17 , 2l.-trihydroxy-1,,1-prégnadiène-   3,20-dione     (1-déhydro-6-méthyl   épi F) De la même manière qu'à   1.'exemple   1, de la 6-méthyl- 
 EMI22.2 
 11 oC l7ôC ,21-trihydroxy-iF-prégnène-3,20-dione étai.t, soumise à fermentation par du Septomyxa affinis paur donner de la 6-méthylIl oC ,17 OC ,21-trihydroxy-1,4-prégnadîèàe-3,20-dione qui était isolée. 



  L'utilisation de l'acide 3-'cétobisnor-4-cholénique dans la réaction ci-avant ou l'un quelconque des autres promoteurs stéroïdes ci-avant augmente le rendement en 6-méthyl-11 ,17C( , 21-trihydroxy-l,l,..-prëgnauiène-3,20-dione. 



  EXEMPLE 4   l-déhydro-6   ss -méthylhydrocortisone
De la même manière qu'à l'exemple 1, par fermentation avec du Septomyxa affinis dans un milieu nutritif avec de la 
 EMI22.3 
 Il {) , ,21-dihydroxy-1N,17(2U)-prégnadién -3-one brute comme pro- moteur, la 6 ss -méthylhydrocortisone produisait de la   1-déhydro-   6 ss -méthylhydrocortisone. 



  EXEMPLE 5
1-déhydro-6 ss -méthylcortisone
De la même manière qu'à l'exemple 1, de la 6 ss -méthylcortisone était soumise à fermentation par du Septomyxa affinis 
 EMI22.4 
 dans le même milieu nutritif avec de la 11 /% ,21-dihydroxy-TH,17 (20) -prégnadién-3-one brute comme promoteur pour donner de la   l-déhydro-6   -méthylcortisone.

   
 EMI22.5 
 Au lieu de la 11 ,21-dihydroxy-t,2..7(20)-prégnadién-3- one comme promoteur, on peut utiliser de la progestérone, du 3-   cétobisnor-4-cholén-22-al   ou de l'acide   3-cétobisnor-4-cholénique   
 EMI22.6 
 EX..''..PLIs 6 
De la même manière   qu'à   l'exemple 1, par fermentation avec des micro-organismes des genres   Gorynebacteriwn,     Didymella,   Calonectria, Alternaria,   Golletotrichum,     Cylindrocarpon,   Uphiobo- 

 <Desc/Clms Page number 23> 

 
 EMI23.1 
 lus, Septomyxa, Fusarium, Listeria ou 4x-ysipelothx-ix: a) la   6-éthylhydrocortisone     (6 #   -ou 6 ss -épimère) produisait la   1-déhydro-6-éthylhydrocortisone   correspondante ;

   b) la   6-propylhydrocortisone   produisait la   l-déhydro-6-   
 EMI23.2 
 propylhydrocortisone; c) la 6-butylhydrocortisone produisait la   l-déhydro-6-   butylhydrccortisone;   d)la   6-hexylhydrocortisone produisait la l-déhydro-6hexylhydrocortisone; 
 EMI23.3 
 e) la 6-phenylhydroc'ortisone produisait la l-déhydro-6-   phénylhydrocortisone; ,'   
 EMI23.4 
 f) la 6-éthylcortisone produisait la 1-déhyclro-6-éttiyl- cortisone;   @   g) la   6-propylcortisone   produisait la   ldéhydro-6-pro-   pylcortisone; h) la 6-valérylcortisone produisait la l-déhydro-6- valérylcortisone; i) la 6-phénylcortisone produisait la l-déhydro-6- phénylcortisone;

   
 EMI23.5 
 j) la 6-éthßl-11 oG. , ,170<:, 1-trihydroxy¯i,.-prégnène-3, ü:dione donnait la 6-éthyl-llo(. 17c( ,21-trihydroxy-1,1H-prégnadiène-3,20-dione; k) la b-butyl-lloC ,17 a:;, ,2l-trihydroxy-l.-pré6nène- 3,20-dione donnait la 6-butyl-110C ,17cÇ ,2l-trihY('1 mxy-1,1,-prégnadiène-3,20-dione;

   1) la 6-phényl-11< ,17e ,1.-trihydroxy-.-prégnène- 3,20-dione donnait la 6-phényl-iloc ,170<. ,21 rihydr.oxy-l,l,.pré,;nadiène-3,2U-dione" De la mérae manière qu'aux exe..ples l à b, a'autres 1déhydx-o-6-aikyl-et 1-dëhyclro-6--arylhydrocortisone, cortisone, composés épi 1' (60('- ou 6/3 -épimèros) sont produits en soumettant 

 <Desc/Clms Page number 24> 

 la   cortisone,!'hydrocortisone   et les composés épi F   6-alkylés   ou 6-arylés correspondants ou leurs esters à une fermentation spécialement par du   Uorynebacterium   simple ou du Septomyxa affinis en la présence ou non de promoteurs stéroïdes, tels que 3-céto- 
 EMI24.1 
 bisnor-lé-cholén-22-al,ll e ,21-dihydroxy-1,4,17(20)-prégnatrién- 3-one brute, acide 3-cétobisnor-h-cholénique et progestérone. 



  Des 1-déhydro-6e -alkyl- et 1-dihydro-6 -aryl-17 c(., ,21-dihydroxy-l,lr-prégnadiène-3,20-diones oxygénées en 11 représentatives ainsi produites sont : la 1-déhydro-6 0(,-valérylhydrocortisone, la 1-déhydro-6 -hexylhydrocortisone, la l-déhydro-6 0<. -isopropylcortisone, la l-déhydro-6 o( -isobutylhydrocortisone, la 1-déhydro-6ol -butylcortisone, la 1-déhyàro-6 0( -hexylcortisone, 7.a 1-déhydro-6 ri.. -isopropylhydrocortisone, la 1-déhydro-6 et -isopropylcortisone, la 1-déhydro-6 d -isobutylcortisone, la 6 o 7isopropyl-11 d ,17 o(,wl-trihydroxy-l,h-prégnadiène-3,2U-dione, le 6 <,isobutyl-11 0 ,17 0(. 21-trihydro-1,4-prégnadiene-3,20-dione,, la, 6 oC -pentyl-11 0( ,17 0( ,2l-trihydroxy-l,4-prégnadiène-3,20-dione, la b os .-hexyl-11o(, 17   ,21 -'trihydroxy-l,4-prégnadiène-3,20-dione, etc. 



  EXEMPEL 7 
 EMI24.2 
 Acétate de l-déhydro-6 c( -mëthylhydrocortisone On préparait un mêlante contenant 500 mgr de 1-déhydro- 6 0{ -méthylhydrocortisone dans 5 ml de pyridine et 5 ml dtanhydri- de acétique. Le mélange était maintenu à la température ambiante (22 à 24 C) pendant une période de 6 heures,ensuite versé dans 100 ml d'eau glacée, et le mélange aqueux résultant était extrait avec 3 portions de 25 m1 de chlorure ue methylene.

   Les solutions au chlorure de méthylene comoinées étaient lavées, séchées sur du sulfate de sodium et   év@porées,   et   'le   résidu ainsi   obtenu   était recristallisé trois fois avec de l'acétone et des hexanes Skelly- 
 EMI24.3 
 solve tu pour donner le 4'l-acétate de 1-déhydro-b c{ -metl1ylhydrocortisone pur(6-méthyl-11 A 1'1 -dihyaroxy-21-acétoxy-l,t,.pror:nddiene-3,20-dione). 

 <Desc/Clms Page number 25> 

   EXELPLE   8 
 EMI25.1 
 Benzoate de 1-dëhydro-b -méthylcortisone Un mélange de 500 mgr de 1-déhydx-o-6-méthylcortisone, de 5 ml de pyridine et de 5 ml de chlorure de benzoyle était maintenu à la température ambiante pendant une période de 8 heures. 



  Ensuite, le mélange   était*versé   dans un excès d'eau, les extraits à l'eau étaient neutralisés avec du bicarbonate de soude et ensuite le mélange était réfrigéré. Le mélange était ensuite filtré 
 EMI25.2 
 et le benzoate de 1-dèîlydx-o-6-niétîiylcox-tisone ainsi obtenu était recristallisé dans du méthanol pour donner du benzoate de 1-déhydro-6 0(, -méthy+cortisone pur (6 of.. -meihyl-1'/ e -hydroxy-21-benzoyloxy-l, l-prégnacüéne.-3, ll, ü-tr.one ) . 



  BXl!;l-lPL:J:; 9 6 Cl -méthyl-11 oC 17 eN -dihydroxy-21-tr:'f'l8thylacétoxyl,i,-prégnadiène-3,20-dione . 



  Un mélange de 500 mgr de 6- 0( -métlflyl-ll ,17 OC ,21trihydroxy-l,IH-prêgnadiène-3,wU-dione, de 5 ml de pyridine et de 0,5,mil de chlorure de triméthyla:cëtyle était laissé au repos à la température ambiante pendant 4 heures. Ensuite, le mélange était versé dans un excès d'eau et était extrait avec du chlorure de   m&thylene.   Les extraits au méthylène étaient lavés à l'eau, séchés et évaporés, et le résidu ainsi obtenu était recristallisé à partir d'acétone-hexanes Skellysolve   B   pour donner la 6   #-méthyl-   
 EMI25.3 
 11 0 ,1' -dihydroxy-l-triméthylacétoxy-1,IH-pré;nadiëne-3,?ü- dione. 



  EXEMPLE 10 
 EMI25.4 
 6 c(, -rnêthyl-17 oC -hydroxy-11 0 , ,21-diacétoxy-l,i.-prégnadiène.-3,,20-dione De la rnénie manière qu'à l'exemple '(, de la b oC.-methyl- 11.  ,1'/ o,l-l;rihydroxy-l,h-.pré;nadiène-3,ü-dione éthit acétylée avec de l'anhydride acétique dans une solution de pyriaine pour donner le diester 6  -méttiyi-17 oG-hydroxy-11 cG ,21-diacétoxy- 

 <Desc/Clms Page number 26> 

   1,4-prégnadiène-3,20-dione.   



    EXEMPLE   11   l-déhydro-6-méthylcortisone   
 EMI26.1 
 A 225 mgr (0,6 millimole) de 1-déhydro-6 tG -méthylhydro-' cortisone; (6-méthyl-11# ,17 o(. ,21-trihydroxy-1,4-prégnadiène- 3,20-dione) dans 9 ml de méthanol, on ajoutait 0,2 ml de pyridine, op2F ml d'eau et 166 mgr de N-bromoacétamide (1,2 mole). Le mélan- ge de réaction était maintenu à la température ambiante pendant la nuit et alors une titration d'une aliquote indiquait qu'on avait utilisé environ 1,43 équivalent molaire d'oxydant. A ce stade, on ajoutait 25 ml d'une solution diluée de sulfate de sodium 
 EMI26.2 
 pour détruire l'excès de hf-bromoacétaxnide, et le mélange était concentré sous pression réduite jusqu'à ce qu'une cristallisation absorbante se produise.

   Le mélange était refroidi à 0 C pendant 
 EMI26.3 
 ,3U minutes et filtré pour produire 155 mgr de l-déhydro-6 OC -mé- thylcortisone ayant un point de fusion de   230-232 G.   



  EXEMPLE   12     21-triméthylacétate   de   1-déhydro-6     #   -méthylcortisone 
 EMI26.4 
 Un mélange contenant de la 6oC -méthyl-11 GC ,17 oC -dihydroxy-21-tritaéthylacétoxy-1,4-prêgnadiène-3,2U-dione (200 ml), dans 2 ml d'acide acétique, deux gouttes d'eau et 50 mgr d'anhydride chromique était laissé au repos à la température ambiante (environ 24 C) pendant une période de 3 heures. Ensuite, 1 ml d'éthanol était utilisé , le mélange était agité et ensuite versé.dans 50 ml d'eau glacé.

   La solution aqueuse était ensuite extraite avec 3 portions de 15 ml de chlorure de méthylène, les extraits au chlorure de méthylene étaient combinés, évaporés, et le résidu était recristallisé à partir de methanol pour donner le 21-trimé- 
 EMI26.5 
 thylacéta.te de 1-déhydro-6 oG -m6thylcortisoe (6 C(- -méthyl-17 0(, hydroxy-21-triméthylacétoxy-1,4-préignadiéne-3,11,20-tx-ione). 

 <Desc/Clms Page number 27> 

 EXEMPLE 13 21-hémisuccinate de   1-déhydro-6 #   -méthylhydrocortisone   @   A une solution agitée de 2,5 gr d'anhydride succinique. 
 EMI27.1 
 dans 25 ml de pyridine, on ajoutait 2 gr de 1-déhydro-6-méthylhydrocortisone. L'agitation était poursuivie"'jusqu'à ce que la 1-   déhydro-6oC     -méthylhydrocortisone   soit totalement dissoute. 



  Après repos pendant la nuit, le mélange de réaction ètait lentement versé dans un mélange vigoureusement agité de 30 ml d'acide chlorhydrique concentré,de 102 ml d'eau et de 127 gr de glace. 
 EMI27.2 
 



  L'agitation était poursuivie pendant 1 heure et le. 21-hémisuccinat" de l-déhydro-60(, -mét,l1ylhydrocortisone cristallin' brut était sé- paré par filtration. Le produit était lavé sur le filtre avec de l'eau, jusqu'à ce que le filtrat ait un pH de 4, séché et recristallisé avec   45   ml ce méthyl éthyl cétone   et. 36   ml d'hexanes   Skel-'   
 EMI27.3 
 lysolve B pour donner le 21-hémisuccinate de 1-déiiydro-6±/r-méthylhydrocortisone pur. 



  \t EXËi.jPLh 14 
Sel sodique du 21-hémisuccinate de   1-déhydro-6 #   -mé- thylhydrocortisone
Une solution de soude caustique (0,1 normale ) était lentement ajoutée à une solution agitée   de--2   gr de   21-hémisuccinat.   
 EMI27.4 
 de 1-déhydro-6 eL -méthylhydrocortisone dans"'50 ml d'acétone jus- qu'à ce que le pH atteigne 7,4. Suivant l'addition de la solution de NaOH, on ajoutait également 100 ml d'eau. 



   La solution était concentrée à 25 C sous le vide pour enlever l'acétone.. La solution aqueuse résultante de sel sodique 
 EMI27.5 
 du 2l-hémisucdnate de 1-dchydro-6 el -méthylhydrocortisone était 1'11'\..1'0e eu séchée par congélation, puis recristallisée pour donner le sel codique pur du 21-héniisuccinate de 1-.déhydro-b (, -méthylhyo'ro cortisone. 

 <Desc/Clms Page number 28> 

 



    EXEMPLE   15   21- (ss, ss-diméthylglutarate) de 1-déhydro-6 #-méthylhy-   drocortisone
A une solution de 260 mgr   d'anhydride /3 ,   ss-diméthylglutarique dans 2 ml de pyridine, on ajoutait 200 mgr de 1-déhydro-6   #-méthylhydrocortisone.   Le mélange était agité jusqu'à ce que la 1-déhydro-6   OC-méthylhydrocortisone   soit   totalement   dissoute et le récipient était soumis à un balayage d'azote. Le mélange était laissé au repos pendant la,nuit pendant 18 hueres et, ensuite il était versé lentement dans une solution froide agitée de 2,4 ml d'acide chlorhydrique concentré et de 18 ml d'eau.

   Le mélange était extrait avec 3 portions de 5 ml d'acétate d'éthyle, la couche d'acétate d'éthyle était levée avec de l'acide chlorhyurique diluée et de l'eau, séchée sur du sulfate de magnésium anhydre et concentrée jusqu'à 1,5 ml sous pression réduite. On ajoutait alors 1 ml d'hexanes Skellysolve   B,   et le mélange était laissé à refroidir jusqu'à 0 C. Après 24 heures, le mélange était filtré pour donner des cristaux de 21-( ss, ss-diméthyl glutarate)deldéhydro-6   o-méthylhydrocortisone.   Le spectre infrarouge de celuici, mesuré dans une huile normale   Nujol,   correspondait à la structure supposée du composé. 



   Un sel de métal du 21-( ss, ss-diméthylglutarate)de 1déhydro-6   #-méthylhydrocortisone   peut être préparé comme illustré ci-après. 



  EXEMPLE 16
Sel sodique du 21-( ss , ss-diméthylglutarate) de 1-déhydro-6   #   -méthylhydrocortisone
Une solution de soude caustique (0,1 normale) était lentement ajoutée à une solution agitée de 2 gr de 21-( ss , ss-diméthylglutarate) de   1-déhydro-6     #-méthylhydrocortisone   dans 100 ml d'acétate jusqu'à ce que le pH atteigne 7,4. Durant l'ac-aition de la solution --le soude caustique, on ajoutait également 100 ml d'eau. 

 <Desc/Clms Page number 29> 

 



   La solution était concentrée, à   5 C   sous le vide pour enlever l'acétone. La solution aqueuse résultante était filtrée et séchée par congélation pour donner le sel sodique du 21-( ss,ss - 
 EMI29.1 
 diméthylglutarate) de 1-déhydro-6 .-méthylhydrocortisone. 



  EXEMPLE 17
De la même manière qu'à   1 exemple   7, par traitement dans une solution de pyridine g 
 EMI29.2 
 a) la 1-déhydro-6 ± -méthylhydrocortifSONe avec de 1" an- hydride propionique donnait le   21-propionate   de   1-déhydro-6 # -     méthylhydrocortisone.;   
 EMI29.3 
 b) la .déhydro-6 =,xnéthylhydrocortisoaae avec de l'anhydride donnait le 21-butyrate de ldéhydro-6 4 -méthylhydrocortisone c) la ladéhydr-6 néthy.hydrocortisone avec de l'an- hydride valérique donnait le 21-valérate de   1-déhydro-6 #   -méthylhydrocortisone; 
 EMI29.4 
 d) la 1-déhydro-6 <<-méthylhydrocortisone avec du bromure d'hexanoyle donnait le 21-hexanoate de 1-déhydro- r Z4 -méthylhydro- .cortisone ;

   e) la 1-déhydro-6 OC-métlylhydrocortisone avec du bromure d'heptanoyle donnait le 21-heptanoate de I-déhydro=6 c<-méthylhydrocortisone; f) la 1-déhydx-o-6 ca ..méthylhydrobort:sone avec du chlorure d'octanoyle donnait le 21-octanoatè de . déhydro-6 -méthylhydrocortisone ; g) la 1-déhydr.o-6± -méthylhydrocortisone a";jC du chloru re de benzoyle donnait le 21-benzoate de 1-déhydrooe6 o±-méthylhydrl cortisone; h) la 1-déhydro-6 OL-méthylllydrocortisone avec du chloru- phényl dé 
 EMI29.5 
 re dei acétyle donnait la 21-phênylacétate de l-hydro-6 -méthylhydrocortisone ; i) la 1déhydro-6 c(-méthylhydrocortisone avec du bro- 

 <Desc/Clms Page number 30> 

 
 EMI30.1 
 mure de fb-cyclopentylpropionyle donnait le 21-( -cyclopentylpropionate) de 1-déhydx-o-6 À -méthylhydrocortisone;

   j) la 60± -éthylhydrocortisone avec de l'anhydride acétique donnait l'acétate de 1-déhydro-6 0(.--éthylhydrocortisone; k) la 6 0(, -propylhydrocortisone avec de l'anhydride acétique donnait l'acétate de 1-déhydro-6 0-propylhydrocortisone; 1) la l-déhydro-6 0±-isopropyihydrocortisone avec de l'anhydride acétique donnait l'acétate de l-déhydro-6   #-isporo-   pylhydrocortisone; 
 EMI30.2 
 m) la 1-dé.hydro-6 (, -butylhydrocortisone avec de l'anhydride acétique donnait l'acétate de 1-ciéhydro-b C(,-butylhydrocortisone; n) la 1-déliydro-6 -phénylhydrocortisone avec de l'anhy dride acétique produisait l'acétate de   1-déhydro-6     #-hénylhydro-   cortisone; 
 EMI30.3 
 o) la 1-déhydro-6 Dl -méthylcortisone avec de l'anhydride acétique donnait le 21-acétate de 1-ctéhydro-6 ce -méthylcortisone;

   p) la 1-dëhydro-6   -niéthylcortisone avec de l'anhydride propionique donnait le 21-propionate de 1-déhydro-6 o -méthylcor- tisone; q) la   1-dehydro-6 #   -méthylcortisone avec de l'anhydride 
 EMI30.4 
 succinique donnait du 21-succinate de 1-déhydro-6 oL -méthylcorti- sone; r) la 1-déhydro-6   #   -méthylcortisone avec du chlorure 
 EMI30.5 
 de 2-furoyle donnait le 21-(2-furoate) de 1-déhydro-tr oL -méthyl-   cortione;   s) la   1-déhydro-6 #   -méthylcortisone avec l'anhydride de 
 EMI30.6 
 fi , /$ (lue donnait le 21-( f3 -diméthylglutaraLe)<.e l-û.éhydro-'-'-n6U.ylcortisone; t) la 1-cic.hydro-6 oC -I)h8nylcortÜ.:one avec l'anhydride acé ti4ue donnait le 21-acétate de l-cléhydro-6 c. -phénylcortisone;

   

 <Desc/Clms Page number 31> 

 u) la   1-déhydro-6 #   -éthylcortisone avec ltanhydride butyrique donnait le 21-hutyrate de 1-déhydro-6oC   -éthylcortisone'   
 EMI31.1 
 v) la 1-déhydro-6 Ci-propylcortisone avec du chlorure   d'hexanoyle   donnait la 21-hexanoate de   1-déhydro-6 #   -propylcortisone ; 
 EMI31.2 
 w) la 1-déhydro-6 CC -isopropylcortisone avec dqehloruri de benzoyle donnait la 21-benzoate de 1-déhydro-6 OC -isopropylco1 tisone ;

   x) la 1-déhydro-6 oC-butylcortisone avec le chlorure de toluènesulfonyle donnait le   21-toluénesulfonate   de 1-déhydro- 6   #     -butylcortisone;   
 EMI31.3 
 y) la 1-déhydr-o-t o( -pentylcortisone avec du chlorure de para-chlorobenzènesulfonyle donnait le 21-para-chlorobenzène- 
 EMI31.4 
 sulfonate de l-déhydro-6 oC-pentylcortisone; z) la   1-déhydro-6     o(-hexylcortisone   avec du chlorure de   cinnamyle   donnait la 21-cinnamate de   1-déhydro-6 #   -hexylcortisone EXEMPLE 18
De la même manière   qu'à   l'exemple 7, par réaction dans une solution de pyridine :

   
 EMI31.5 
 a) de la 6 d -méthyl-11 OC , l7 au , 21-trihydroxy-l,lp-prégnadiène-3,20-dione avec du chlorure de tx-iélsl.;.lacétyle dans des proportions à peu près équimoléculaires produisait essentiellement la 6 oC -méthyl-11 0 ,17-dihydroxy-l-triéthylacêtoxy-l,h-prégnadiène-3,20-digne;

   b) de la 6 oC -méthyl-11 el. ,17 oC a l-trihydrw .=y-1, h-prégnadiène-3,20-dione avec du chlorure de dinéopenty.a7.cétyle dans des proportions à peu près équimoléculaires produisait essentiellement la 6 o -méthyl-11 CI( , 17-dihydroxy-2l-dinéopentylacétoxy'-1 ,11'prégnadiène-3,20-dionej c) de la 6 0( -éthyl.-11 0( ,17 oC , :L-trihydroxy-1, t-prë . gnadiène-3,20-dioùe avec du chlorure de triméthylacétyle dans des proportions   à¯peu   près équimoléculaires produisait essentiellement 

 <Desc/Clms Page number 32> 

 
 EMI32.1 
 la 6 oc -méthyl-11 ci- ,17-dihydroxy-1-triméthylacétoxy-l,l-prégnadiène-3,20-dione;

   d) de la 6 oG -phënyl-11 t ,17 <:t 1-trihydroxy-l, l.-pré-   gnadiène-3,20-dione   avec du chlorure de triméthylacétyle dans des proportions à peu près équimoléculaires produisait essentiellement 
 EMI32.2 
 la 6 o':-phényl-11 0[17-dihydroxy-1-triméthylacétoxy-1,4-prégnadiène-3,20-dione. 



  Les 21-esters de 1-déhydro-fi o -alkyl--11-épi-hyc(rocorti- sone peuvent être oxydés avec de l'anhydride chromique, comme montré à l'exemple 12, pour donner les 21-esters de 1-déhydro-6   # -   alkylcortisone correspondants. L'hydrolyse du 21-ester de 1-déhy- 
 EMI32.3 
 dro-6 oc-alkylcortibone, dissous dans de l'alcool, avec'une bàse, telle que de la soude ou la potasse caustique ou du carbonate de potassium ou de sodium, de préférence dans une atmosphère d'azote, 
 EMI32.4 
 donne la l-déhydro-6 c(-alkylcortisone libre. 



  EXEMPLE 19 l-déhydro-6oC -mêthylhydrocortisone à partir de 1-déhy-   dro-6 /3   -méthylhydrocortisone On préparait une solution contenant 1 gr de l-déhydro- 
 EMI32.5 
 6 j3-méthylhydrocortisone brute (impureté de 1-déhydro-6 oG -méthyl" hydrocortisone) dans 35 ml de méthanol. A cette solution, à la température ambiante, on ajoutait 5 ml d'une solution aqueuse d'acide sulfurique 2-normale. Le mélange de réaction était laissé au repos pendant une nuit (la heures) à la'température ambiante, ensuite neutralisé avec 25 ml d'une solution aqueuse de bicarbonate de soude à 5% et puis concentrée au bain-marie à environ 50  à 55 C jusqu'à un volume d'environ 20 ml.

   Le mélange était ensuite filtré, et le précipité ainsi récupéré était lavé avec 3U ml d'eau et séché dais un four à vide à 65 C pour donner un solide,
La solution aqueuse était extraite avec 3 portions de 20 ml d'acétate xx d'éthyle, les extraits étaient combinés, lavés 

 <Desc/Clms Page number 33> 

 avec 3 portions de 20 ml d'eau, séchés sur du sulfate de sodium anhydre et évaporés sous pression réduite à 55 C pour donner un résidu.

   Ce résidu était combiné avec le solide, préalablement obtenu, et recristallisé avec de l'acétate d'éthyle pour donner de la 1-déhydro-6   #   -méthylhydrocortisone ayant une pureté d'environ   90µla  
Au lieu d'un acide minéral, tel que sulfurique, chlorhydrique, chlorique, nitrique dilué, perchlorique, etc, une base, de préférence un hydrate de métal alcalin, tel que de la potasse ou de la soude caustique, ou un carbonate de sodium ou de potassium, ou d'autres agents énolysants acides ou basiques, capables dténolyser temporairement le groupe 3-céto en groupe 3-énol peuvent 
 EMI33.1 
 être utilisés. pour épitnériser la l-déhydro-6 - -inéthylhydrocorti- sone en   l-déhydro-6     #   -méthylhydrocortisone plus stable.

   La conversion avec une base peut être réalisée de la manière suivante . 
 EMI33.2 
 1 gr de l-déhydro-6 /3-mêthylhydrocortisone, dissous dans 40 ml de méthanol, était traité à la température ambiante avec 0,5 gr de soude caustique, dissous dans 3ml d'eau. Le mélange était laissé au repos pendant 16 heures la nuit, dilué ensuite avec 175 ml d'eau, neutralisé avec   de-l'acide   chlorhydrique aqueux   à 5%, et extrait avec 3 portions de 50 ml de chlorure de méthylèLes extraits au chlorure de méthylène ne.étaient lavés de façon répétée avec de l'eau, sèches sur du ainsi   sulfate de sodium anhydre, évaporés,

   et le résidu/obtenu était recristallisé à partir d'acétone pour donner la 1-déhydro-6   # -   
 EMI33.3 
 méthylhydrocortisoneo   Il   doit être entendu que l'invention n'est pas limitée aux détails operatoires exacts ou aux composés exacts donnés et décrits, car des modifications et équivalents évidents apparattront aux spécialistes en ce domaine. 
 EMI33.4 
 nJVBtJDIUA'1'ION.'3 

**ATTENTION** fin du champ DESC peut contenir debut de CLMS **.

Claims

1. Un composé de la formule <Desc/Clms Page number 34> EMI34.1 dans laquelle R est choisi dans le groupe comprenant le 11 3 -hydroxy et le 11-céto, et dans laquelle R' est choisi dans le groupe comprenant l'hydrogène et un acyle, le groupe acyle étant d'un acide carboxylique hydrocarboné contenant de 1 à 12 atomes de. carbone inclusivement.

2. La 1-déhydro-6-méthylhydrocortisone. EMI34.2

3. La 1-déhydro-6 0 -méthylhydrocortisone.

4. La 1-déhydro-6.-méthylcartisone.

5. La 1-déhydro-6 c(-méthylcortisone.

6. La 21-acétate de 1-déhydro-6-méthylhydrocortisone. 7. La 21-acétate de l-déhydro-6 0 -méthylhydrocortisone. 8. La 21-acétate de 1-déhydro-6-méthylcortisone. EMI34.3

9.La 21-acétate de 1-déhydro-6 c,-méthylcortisone6 10. La 21-hémisuccinate de 1-déhydro-6-méthylh%drocor- tisone.

11. La 21-hémisuccinate de l-déhydro-6 #-méthlhydro- cortisone. ' EMI34.4 12. Dans un procédé de production d'un 6-méthyl-l,4 -prégnadiène oxygéné en 11, choisi dans le groupe comprenant la 1-dél1yo.ro-b-m8tnylhyarocortisone, la l-déhydro-6-méthylcortisone et leurs 21-acyl esters, la phase qui consiste à faire croître un r!licro-or, ;anisl ,e choit;! dotin le groupe comprenant les genres Gorynebacterium, Didymella, Calou8ctria,Alternaria, Uolletotrichum, <Desc/Clms Page number 35> Gylindrocarpon, Ophiobolus, Septomyxa, Fusarium, Listeria et Erysipelothrix dans un milieu nutritif contenant du carbone non stéroïde assimilable, de l'azote et du phosphore, et un stéroïde EMI35.1 1.-prënéne de la formule CH20R' 1 C=Q R CH 3 - ¯. ¯..

OH 0 jazz CH3 dans laquelle R est choisi dans le groupe comprenant le 11 ss hydroxy et le 11-céto et R' est choisi dans le groupe comprenant l'hydrogène et un acyle, le groupe.acyle étant d'un acide carboxy- lique organique contenant de 1 à 12 atomes de carbone inclusive- EMI35.2 ment, et à récupérer la 6-alYyl-l' oL ,21-dihydroxy-l,4-prégnadiène- 3,20-dione oxygénée en 11 correspondante. EMI35.3 13.

Dans un procédé de production d'un 6-méthyl-I,4-pré- gnadiène oxygéné en 11, choisi dans le groupe comprenant la 1déhydro-6-méthylhydrocortisone, la l-déhydro-6-méthylcortisone et leurs 21-acyl esters, la phase qui consiste à faire croître un micro-organisme du genre Septomyxa dans un milieu nutritif contenant du carbone non stéroide assimilable, de l'azote et du phosphore, et un stéroïde 4-prégnëne de la formule EMI35.4 <Desc/Clms Page number 36> dans laquelle R est choisi dans le groupe comprenant le 11 ss hydroxy et le 11-céto et R' est choisi dans le groupe comprenant l'hydrogène et un acyle, le groupe acyle étant d'un acide cdrboxy lique organique contenant de 1 à 12 atomes de carbone inclusive- EMI36.1 ment, et à récupérer la b-alkyl-170l ,

21-dihydroxy-l,t.-prégna- diène-3,20-dione oxygénée en 11 correspondante.

14. Dans un procédé de production d'un 6-méthyl-l,4- prégnadiène oxygéné en 11, choisi dans-Le groupe comprenant la 1- déhydro-6-méthylhydrocortisone, la l-dehydro-6-méthylcortisone et leurs 21-acyl esters, la phase qui consiste à taire croître un micro-organisme du genre Septomyxa dans un milieu nutritif contenant du carbone non stéroïde assimilable, de l'azote et du photphore, et en présence d'un promoteur stéroïde choisi dans le grou, pe comprenant le 3-cétobisnor-4-cholén-22-al, la 11 ss ,21-dihy- EMI36.2 droxy-1,4,17(20)-prégnatrién"3-pne, l'acide 3-cétobisnor-4-cholénique et la progestérone, et un stéroïde 4-prégnène de la 4ormule-.

EMI36.3 dans laquelle R est choisi dans le groupe comprenant le 11 ss -hydroxy et le 11-céto et R' est, choisi dans le groupe comprenant l'hydrogène et un acyle, le groupe acyle étant d'un acide carboxylique organique contenant de 1 a 12 atomes de carbone inclusive- EMI36.4 ment, et à récupérer la o-alkyl-'17cC ,21-dihydroxy-l,4-prégnadiène- 3,20-dione oxygénée en 11 correspondante.

15. Un procédé de production de 1-déhydro-6 # -méthyl- <Desc/Clms Page number 37> hydrocortisone, qui consiste à faire croître un micro-organisme du genre Septomyxa dans un milieu nutritif contenant du carbone non stéroïde assimilable, de ltazote et du phosphore, et de la 6 # -méthylhydrocortisone, et à récupérer la 1-déhydro-6-méthylhydrocortisone ainsi produite. EMI37.1

16. Un procédé de production de l-déhydro-6oC -méthyl- hydrocortisone, qui consiste à faire croître un micro-organisme de l'espèce Septomyxa affinis dans un milieu nutritif contenant du carbone non stéroïde assimilable, de l'azote et du phosphore, EMI37.2 du 3-cétobisnor-IF-ch.o'Lén-2,-,al, et de la 6 ci,. -méthylhydrocortisone et à récuprérer la 1;

déhydro.-E." -niétl,3rlhyùrocoruisolie ainsi. obtenue, 17. Un procédé de production d'un 21-acylate de 1-déhy- EMI37.3 dro-6 oG -méthylhydrocortisone, qui consiste à faire croître un Septomyxa affinis dans un milieu nutritif micro-organisme de l'espèce/contenant du carbone non stéroïde EMI37.4 assimilable, de l'azote, et du phosphore, du 3-cétobisnor"4-cholén-22-al, et de la 6 -méthylhydrocortisone, à récupérer la 1déhydro-6 0( -méthylhydrocortison.e ainsi obtenue et à estérifier celle-ci avec un agent acylant choisi dans le groupe comprenant les anhydrides et halogénures d'acides carboxyliques organiques contenant de 1 à 12 atomes de carbone inclusivement.

18. Un procédé de production de 21-acétate de 1-déhydro- EMI37.5 6 e -méthylhydnocort.sone qui consiste à faire croître un micro- organisme de l'espèce Septomyxa affinis dans un milieu nutritif contenant du carbone non stéroïde assimilable, de l'azote et du EMI37.6 phosphore, d.u 3-cétobisnor-t..-cholén-,:-a.D et de la 6oC -méthylhydrocortisone, à récupérer la l-déhydro-6 (XL-méthylhydrocortisone ainsi obtenue eu à faire réagir la l-dBhydro-6cC-méthylhydrocor- tisone ainsi obtenue avec de l'anhydride acétique pour obtenir la 21-acétate de l-déhydro-6-méthylhydrocortisoneo EMI37.7 19.

Un proc;cdé de production de 1-d:hydro-6 a-méthyl.cor tisone, qui consiste à l'aire croître un micro-organisme de l'espèce <Desc/Clms Page number 38> Septomyxa affinis dans un milieu nutritif contenant du carbone non stéroïde assimilable, de l'azote et.du phosphore, de la EMI38.1 Il {) 1-dihydroxy-1, IH, l'7 ( 0 ) -prégnatrién-3-one, et de la 6-méthylcortisone, et à récupérer la. 1-déhydro-6-méthylcortisone ainsi obtenue.

20. Un procédé de production de 21-acylate de 1-déhydro-' 6 # -méthylcortisone, qui consiste à faire croître un micro-organisme de l'espèce Septomyxa affinis dans un milieu nutritif con tenant du carbone non stéroïde assimilable, de l'azote et du phos- EMI38.2 phore, de la 11 , 2l-dihydroxy-1,1,17(Oj-prégnatriën-3-one, et de la 6oC -méthylcortisone, à récupérer la 1-déhydro-6 Or -méthyl- cortisone, et à estérifier celle-ci avec un agent acylant choisi dans le groupe comprenant des anhydrides et halogénures d'acides carboxyliques organiques contenant de 1 à 12 atomes de carbone EMI38.3 inclusivement, pour obtenir le 21-acylate de l-déhydro-6 0(, ':-mé±hyl- cortisone ainsi produit,