BE638802A - - Google Patents

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BE638802A
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/26Processes using, or culture media containing, hydrocarbons

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  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description


   <Desc/Clms Page number 1> 
 
 EMI1.1 
 



  "Culture do mio:ro-orga.nll1meo" 
 EMI1.2 
 La prdeente invention out relative à un proaddd de pro- duction de raicro -or#iniaa00t par exemple des Itvupta, par culture aur don l1ydrocl1rburw. L'invention 8e rapporta également un procédé oour l'enltvement dthydrocarburen à éhaine droit*, entib- rement ou en partie, à partir de mdlangeu de cou hydrooftrburtf 
 EMI1.3 
 avec d'autres lydrocarbures. 
 EMI1.4 
 la culture de levurea sur des hydrocarbures, et en par- 
 EMI1.5 
 ticulier sur des hydrocarbures de pétrole, comme substrat carbone, 
 EMI1.6 
 donne généralement dea levures qui, aprèn lavage et adchagtg pou- cèdent un g01%t particuJ 1er' qui eut piquant et rance et qui nuit b. 

 <Desc/Clms Page number 2> 

 leur utilisation dans les alimenta destinas à la consommation par 
 EMI2.1 
 leu êtres humains.

   Leu levure traditionnelles, oultivéee sur des mélaas8J, des liqueurs réuiduaireo ou des liqueurs de bi-   aulfite,   ont également un   goût   particulier, différent de celui des levures cultivées sur des   hydrocarbures,   et on a proposé   cer-   tains procédés pour atténuer ce goût, notamment pour atténuer leur 
 EMI2.2 
 amertume, mais aucun do oeo procédés n'a donné natiotactioil aaiu- plète. 



  On a maintenant trouvé que des levures cultivées avec 
 EMI2.3 
 des hydrocarbures comme seule aaurde de carbone ont une teneur de lipides nettement pluu élevée que des levures cultivées sur les 6butrato traditionnels ! mélauoea, liqueurs résiduaires, liqueur  de   biuulfite.     Le'!   lipides consistent essentiellement en acides gras, en esters (avec des degrés plus ou moins élevés 
 EMI2.4 
 d'oxydation), y compris des graissée et deu otér018. On a main- tenant trouvé que l'extraction de ces lipides, en totalité ou en partie, mène z une réduction importante de ce goût oaraotérie- tique dea levures cultivées sur des hydrocarbures ou à   l'élimina-   tion complète de oe goût. 



   Un but de la présente invention est de procurer un pro- cédé amélioré pour la production de micro-organismes* Un autre but est de procurer un procédé de production d'une levure Un autre but encore est de procurer un procédé pour l'enlèvement d' hydrocarbures à chaîne droite, en totalité ou en partie, à partir de mélangea de ces hydrocarbures avec   d'autres   hydrocarbures D'autres buta encore de l'invention apparaîtront au coure de la description suivante. 



   Suivant un aspect de la présente invention, on prévoit un procédé qui comprend la culture d'un   mioro-organisme   en pré- sence d'une charge d'alimentation consistant en totalité ou en partie en hydrocarbures à chaîne droite, la séparation à   partir!du   produit,,   d'une   fraction comprenant le micro-organisme, et   1 'ex-   
 EMI2.5 
 traction de cette fraction grgoo à un solvant. lieu solvants que l'on peut employer sont l'alcool é- 

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 EMI3.1 
 thylique, l'iorropano7,, les hydrocarbures logera, notamment le benzène et les fractions 7dgrec dip platforming, l'éther othyli- que, l'acétone, les solvants chlores et le3 gaz de pétrole lique- 
 EMI3.2 
 .fiée, tels que le butane et le propane.

   Le terme "mioro-organiume", tel qu'utilise ici, englo- 
 EMI3.3 
 be également des mélanges de mioro-organlomeo. 



  Les nticro-orsaniamea qui sont cultivas oommfl décrit i- oi peuvent être des levures, deo moiniaeurea ou dea bactéries Lorsqu'on utilise une levure, oelb-oi est de préférenoa de la famille des Oryptococcuccéea et en particulier de la nouc. famille 1ea CryptaooCCaid3e.; cependant, oi on le désire, on peut utiliser, par exemple, den levurea 1\ooo1Jporogènee de la :Joue-fa- mille dota \uoolH!.roU\ycé1idt5eo. Le:3 genres préférés de la famille des Cryptococeoïdéeu nont le Torulopnia (également connu coua 10 nom de Toi-ula), le Candida et 10 1.!ycocterTM. Lea ,ouohe" préférée.i de levure ioiit celleo qui sont donnée  pur la cuite. On profère en particulier utilioer loei IUf\tHren portant l-1nd,108 de rSi'6ren- ce indiqua; ce.i indices de référence se rcf.iè2 ont ç des matières CBS conM!'VÓO,1 p'\1' 10 "Contraal furcnu voor 3ohic!mQlculture? b. 



  Thal'l1 , PO,,yIJ-!\1J, et ilux umtH'l'EHl i?;'.A, aar,nczr6eo par l'Institut hrrtiar:n2 de In cohprche A;J'onom1quo, à Pari:), France . 
 EMI3.4 
 



  Candida Illiolytica CDS 599 Cnndidn pulohcrrima CB3 610 Candida utili.,., CB3 890 Candide utilio, Va.l'inti major CnS 841 Cnndidn tl'o10f11ia Cobs 2317 
 EMI3.5 
 
<tb> C'1r.di <SEP> da <SEP> arbore* 
<tb> 
 
 EMI3.6 
 Toru1 opd fi col1 iculoo(\ Cadi 133 lîan-icnuia O:lÙ!'J1), 1ft 033 110 01cHum 3acti.! îleronpora aitophila 0 0 a e i-na onucoillote IMA; 3TV 11 
 EMI3.7 
 Parmi lea matibi-ce préoÓdenteo,on préfère tout spécia- 
 EMI3.8 
 lement le Candida lipolytioa. 

 <Desc/Clms Page number 4> 

 



   Si on le désire, le micro-organisme peut être constitué par une moisissure. Une   nouche   convenable est le Pénicillium 
 EMI4.1 
 Expanaum. Ci on le détiirei le micro-organisme peut être une bacté- rie. 



   Leu bactéries sont, de façon convenable, de l'un des 
 EMI4.2 
 ordres ! s Pseudoraonaleo, Eubacterialeo et Actinomycetaleo. leu bactérieu que l'on utilise sont de préférence de la famille des Bacillaoéeo et deo Paeudomonadaoées. Les espèces préférées sont le Bacilluu magatherium, le Eacillus subtilis et le Pscudonomau aeruginoaa. D'autres souches que l'on peut utili- ser oont 8 Bacillus amylobacter Poeudomonao natr1egeuIJ Arthrobaoter op. 



  1.110rooooous ap. 



  Corynebaotcrium michi;anenre Prieudomonai oyringae Xanthoinonan boroniae   Plavobacterium   sp. dévorant   Aoetobaoter   sp. 
 EMI4.3 
 



  Acbinomyoea ut Agrobaoterium op. 



  Aplanobaoter spo Pour lu croiouance du micro-organisme, il sera néoeosai- re de prévoir, en plus de la charge d'alimentation, un milieu nu- tritif aqueux et une alimentation d'oxygène, de préférence sous la forme d'air. 



   Un milieu nutritif convenable pour des levures (et des 
 EMI4.4 
 moicisourec) a la composition nuivante s 
 EMI4.5 
 
<tb> Phosphate <SEP> dianunonique <SEP> 2 <SEP> grammes
<tb> 
 
 EMI4.6 
 Chlorure do potaiaîum 1,15 gramme Sulfate de magnésium. 7tr20 0,65 gramme 
 EMI4.7 
 
<tb> Sulfate <SEP> de <SEP> zinc <SEP> 0,17 <SEP> gramme
<tb> 
 

 <Desc/Clms Page number 5> 

 
 EMI5.1 
 "ulfnto de mnnanl. 00. 1H20 0,045 prenant rulfntft ferreux. 7H20 0,068 gramme Tau de ville 200 grâces Rxtî*ilt de levure 0,05 4ramml Rau dintillda (pour compléter juuquth 1000 ml#) 
 EMI5.2 
 Un milieu nutritif typique pour la croiseance 411 lîofar- dia a la oompooit1on ou1vunte 
 EMI5.3 
 Sulfate d'ammonium 1 gra=e Sulfata dû mn;

  nc.um ô t 20 graaot rxilfato ferreux 4 7F,20 0,003 era=ei Sulfate de mari6*tnt-.je 1!Î2O 0,002 gramtnw Phouphate monopotaH'jiqut 2 grannboo binadique 3 graÉB o Chlorure da calcium 0, gMcasao Carbonate do .nJiM 0,1 gramme nxtrail 4fr levure 0,008 gramm  "'u d iJ.l. SQ (t.our faire 1000 a7. 
 EMI5.4 
 rour d'autres !10er l.fljtJ, un mU,leu. nu.;n '1ilf oonvena Olt a la composition oulvante t 
 EMI5.5 
 Phosphate monoJ.;ota:J!'J1que 7 """"'0 Sulfate de msynaium. ?i20 0,2 gra#mo ; Chlorure de sodium 0, gramao 
 EMI5.6 
 
<tb> 
<tb> 
 
 EMI5.7 
 Chlorure d'ammonium 2, 5 grammes Eau de ville (.4mQrita en tracer) 100 ta1 Extrait de levure 0,025 grtUMl8 ïïau distillée (pour faire 1000 ml). 
 EMI5.8 
 



  Un autre milieu nutritif convenable pour la croisaanot 
 EMI5.9 
 de bactéries !). la composition suivante 
 EMI5.10 
 KH<C1 0,', gramme NaCl 4 gramme, t.!{JSO 4 0,5 gramme r;aIi'0 qu gr6.ma< 1<1:2 PO 4 0,5 gramme "iu pour faire 1000 cent1mttrea oubee. 

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 EMI6.1 
 



  Deu mioio-or6aniiime.,ît et en particulier des levures, loroqu'on les cultive au départ en utilisant dea frxotiono hydro- oarburéoo croissent uouvent avec difficulté et il est souvent né- ooai3aire d'utiliser un inoculum d'un mioro-organinme qui a préala- blement été adapté hune oroisc3sanae mur la fraction h#drooarbu- réa que l'on enviou66 d'utiliser, Da plus, le mioro-organisme, bien que cultivé en présence d'un milieu minéral aqueux contenant leu élément!) nutritif a approprié  , peut croître aveo ditrieultit car la fraction h.ydl'OO!1.rbtlrée ne contient pao leo facteurs de croinsanoe qui existent dans lea charges d'alimentation formées par dea hydrates de axzbond, t moins que l'on ajoute cas facteur$ de oroinoanoe. 



  Dans une opération   discontinue,   le micro-organisme 
 EMI6.2 
 croîtra habituellement au départs une allure lente d'augmenta- tion en ce qui concerne la densité cellulaire (cette période de croissance e at ddoicnée ici par "phaoe retardée"), Ensuite, 10 allure de oro1sfln.noe augmontera plua rapidement; la période de cette allure plun élevée de croissance est déoignée par "phase   exponentielle",   et ensuite de nouveau la denaité cellulaire de- 
 EMI6.3 
 viendra constants (liphaz3e stationnaire,,). 



   Une alimentation du micro-organisme' pour l'amorçage de la fournée   suivante     oera   enlevée de préférence avant la fin de la phase exponentielle. 



   L'opération de croissance sera habituellement arrêtée avant la phase stationnaire. 



   A ce stade, le   micro-organieme   sera habituellement sé- paré de 'la   masse   du milieu nutritif aqueux et de la masse de la fraction d'alimentation non utilisée. 



   La croissance du micro*  organisme utilisé est favorisée par l'addition, au milieu de culture, d'une très petite propor- tion d'un extrait de levure (produit industriel riche en vitamines du groupe B et obtenu par l'hydrolyse d'une levure) ou plue   adné.   ralement d'une petite proportion de vitamines du groupe B et/ou 

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 de biotine. Cette quantité est de préférence de l'ordre de 25 parties par million par rapport au   milieu   de   fermentation   aqueux. 
 EMI7.1 
 



  Cette quantité peut être nupén.eure ou inférieure suivant la* conditions choisieu pour la croissance. la croissance du mici-oqoo7-ganisme A'effectue au détri- ment de la fraction de charge d'alimentation, avec la production   intermédiaire   de corps ayant une fonction   acide,   principalement des acides grau, de manière telle que le pH du milieu minerai 
 EMI7.2 
 aqueux diminue prop;rauaivem8nt.

   Si on ne le oorrige pas, la oroionance ent aunes rapidement arrêtée et la concentration du mioro-orf,nniiJme dana le milieu, ou dtulI:l1.-té 08111.1.11111'8'/ n'augmente pl1.!, de aorte qu'on atteint une phaue dite stationnait* #Rn conséquence, le milieu nutritif aqueux est de prêta-' renée maintenu à un x.u désire pur l'addition graduelle ou continue d'un milieu aqueux d'une valeur élevée de pH* 1-'abi tUtllement, lorsqu'on utilise des mo,,i3nuren ou daa levureo et, en particu- lier, lorsqu'on   utilise   du Candida   lipolytioa,   le pH du milieu 
 EMI7.3 
 nutritif sera maintenu dnna la gamme de 3 à 6, de préférence dnne la gamme de 4 à 5 (leu bP.otÓriel3 exigent uu pH plue élevé, halbi. tuellemont de l'ordre da 6,5 a 8), Den matières alcalines oonve- nnblea pour l'addition au mdlange de o:

  ro1suano. sont la uoudo oauj- tique, la potanne oauotiquf, le phosphate binodique et l'ammoniaque! ooit librea, soit en nolution aqueuoet La température optimum pour le mélange de oroisannoe va- riera auivnnt le type de mloro-organiome employé et elle oe aitue- ra habituellement dans la gamme de 25 11 35*0, 'Lorsqu'on utilise du Candida lipolytica, la pnmme préférât de température va de 28 à 32 C. 



   La fixation d'oxygène est essentielle pour la   croissance   
 EMI7.4 
 du raioro-orfianieme. L'oxygène sera habituellement fourni  ou  tor. me d'air. En vue de maintenir une allure rapide de croissance, l'air utilise pour fournir l'oxygène devrait être présent nous la 
 EMI7.5 
 font*  de fines bulles obtenues sous l'action d'une 9 i*tation.   L'ai   peut être introduit à travers une surface frittée. Ce-      

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 pendant, on peut utiliser le système d'aération intime connu souri le nom de "aération tourbillonnante". 



   On a trouvé qu'en utilisant une levure de la souche Candida   lipolytioa   dans un procédé suivant l'invention, dans le- quel l'aération eat réalisée par le système d' "aération tourbil- lonnante", on obtient une allure élevée de croissance, de aorte que le temps de génération se situe dans la gamme de 2 à 5 heures et que la concentration des cellules est accrue d'un facteur al- lant jusqu'à 12 en deux jours. 



   Le micro-organisme est de préférence séparé de la masse de la phase liquide, lorsque c'est possible, par une   centrifuga-   tien, et il peut être récupéré sous forme d'une   crame   ou pâte. 



  Cependant, dans certains cas, la séparation sera réalisée par filtration ou, jusqu'à un certain point, par   décantation.   



   Cette   ordme   ou pâte qui contient une matière aqueuse peut être traitée par une extraction continue par solvant ou par des lavages successifs avec un nolvant, aveo ensuite une séparât e tion de phase.   L'extraction   est mise en oeuvre de façon convenabl dans un récipient fixe   équipée     d'agitateurs à   palettes, tournant de préférence à moins de 10 tours par minute, ou dans un réci- pient qui tourne autour d'un axe horizontal.

   Lorsqu'on réalise une extraction continue par   solvant,   l'extrait est retiré de fa- çon continue et distillé, de façon continue ou par fournée, à la pression atmosphérique ou à une pression réduite, et Te   solvant     eHt     réalimenté   de façon continua à l'appareil d'extraction., Soue ces conditions,   la   levure peut être introduit* et enlevée de fa- çon continue ou discontinue* 
L'extraction par solvant est de préférence réalisée, tandis qu'on alimente le solvant   à   l'appareil d'extraction à une allure périodiquement variable pour créer des pulsations dans la circulation du courant   liquide.   



   Les pulsations du liquide traversant la matière solide provoquent des   oscillations   et des déplacements limités de chaque grain de la matière solide par rapport à ses voisine, ceci   équi-   

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 valant à une agitation mécanique de   1'ensemble.   Pour cette rai- son, l'extraction out   beaucoup   plus rapide et   complète.   



   On prévoit dans l'alimentation du courant liquide, un dispositif qui lui impartit des   pulsations   dont l'amplitude et la fréquence sont réglées par expérience à la valeur la plue fa- vorable pour chaque eau particulier. Ces pulsations sont pro- duites par des procédés convenables quelconques déjà connue, en utilisant do préférence une pompe alternative dont les soupa- peu ont été enlevées. 



   Le nombre de pulsations ce   oitue   de préférence entre 1 et 60 par minute. La mise en oeuvre du procède   sous   l'action des pulsations est encore décrite   dans   la demande de brevet en   Grande-Bretagne     No.   2.234/63 (SFP. 1404). 



   Des solvants convenables pour l'utilisation dans le pro- cédé ont été décrit:  précédemment. Si on le désire, une première phase d'extraction peut être mioe en oeuvre en utilisant un sol- vant polaire, par exemple un solvant alcoolique, tel que l'étha- nol ou l'isopropanol, et ensuite le micro-organisme partiellement purifié peut encore dtre traité dans une seconde phase   d'extrac-   tion, en utilisant un solvant hydrocarbure, par exemple de l'ho- xane normal ou une fraction légère de platforming ou encore du benzène. 



   Dans la seconde phase, on utilise de préférence un sol- vant formé par un mélange d'une proportion importante d'hydrocar- bure avec une petite quantité d'un solvant polaire.   On   emploie de préférence le mélange azéotropique d'hexane avec de   l'ieopropa-   nol ou de l'éthanol. Ci on le désire, les deux phases d'extrao- tion peuvent être mises en oeuvre de façon continue, 
Lorsqu'on utilise un solvant consistant en un mélange d'un hydrocarbure et d'un solvant polaire, on croit que la fonc- tion ou que l'une des fonctions du solvant polaire est d'affaiblir la liaison de la matière   à   extraire (et même la liaison des hydro- carbures qui ne sont pas eux-mêmes solubles dans le solvant po- 

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   lalre).   



   Par l'utilisation d'un alcool quelconque dans la pre- mière phase   d'une   extraction à deux phases, telle que décrite   ci-   dessus, la teneurd'eau de   la     crème   ou pâte de   micro-organisme;   est considérablement réduite. Il en résulte que la matière con- tenant le micro-organisme, qui est alimentée à la seconde phase, a une teneur sufflsamment faible d'eau pour assurer que les souil- lures non aqueuses qui sont encore présentes sont miscibles avec le solvant   @   employé dans la seconde phase de   l'extraction,   
Chaque phase d'extraction peut consister en une ou plusieurs sous- phases consistant en un lavage avec le solvant employé dans la phase, suivi par   une   séparation. 



   Si on emploie un seul lavage dans la première phase, la quantité d'éthanol ou d'isopropanol que l'on utilise devrait être de   1,5 à   3 fois le volume d'eau qui est présent dans la crème ou pâte du micro-organisme. Cependant, si on le désire, on peut employer deux lavages avec de   l'éthanol   ou de l'isopropanol, en employant, dans le premier lavage, un volume de solvant égal au volume de l'eau de la crème ou pâte et, dans le-second lavage; une quantité plus petite d'éthanol ou d'ieopropanol, par exemple la moitié de la quantité utilisée dans le premier lavage. 



   Entre les lavages de chaque phase ou sous-phase, on laisse égoutter la crème ou pâte, par exemple par filtration, et une partie du solvant résiduaire est ensuite enlevée de préfé- rence par une'filtration sous vide. 



   Dans la seconde phase, la quantité de solvant que l'on utilise dans le ou dans chaque lavage sera habituellement de 2 à 20 fois le volume du mioro-organisme sec résultant. 



   La phase finale utilisée pour l'enlèvement du solvant est de préférence une évaporation, et ce de façon convenable sous une pression réduite et dans un courant de gaz inerte, par   exem-   ple de l'azote ou de la vapeur surchauffée. 



   Par l'utilisation, dans la seconde phase d'extraction, 

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 d'un solvant qui est constitué par un mélange d'un hydrocarbure et d'un solvant polaire, la composition du solvant de la   seconde   phase, qui   aoquièrera   en tout cas du solvant polaire venant do la première phase d'extraction, peut être stabilisée.

   L'acoumu- lation de solvant polaire peut être évitée au   coure   d'une phase de distillation, dans laquelle le solvant de seconde phase est   récupéré   par l'enlèvement de courante sépares consistant en (a) du solvant polaire destiné à un recyclage à la première phase   d'extraction,     et'(b)   un mélange d'hydrocarbure et de solvant polai- re destiné h un recyclage à la second  phase* Dans une   phase   de distillation, l'extrait obtenu par la seconde phase d'extrac- tion est, de façon   oonvenable,   distillé pour   récupérer   (a) une fraction de tête constituée par un mélange d'hydrocarbure, de solvant polaire et d'eau et destiné à un recyclage à la   seconde   phase d'extraction, et (b)

   une   fraotion   de queue contenant du col- vant polaire, de l'eau et les matières* extraites; cette fraction est de préférence mélangée avec l'extrait obtenu dans la   premiè-   re phase d'extraction, avant que celui-ci ne soit alimenté à la distillation, de sorte que toutes les souillures récupérées par l'extraction par   aolvant   sont enlevées sous forme d'une fraction de dépota dans cette phase de distillation. le solvant polaire eat, de façon convenable, l'éthanol ou l'isopropanol. Le solvant de la   eeoonde   phase est, de façon convenable, un mélange azéotro- pique. 



   La durée optimum de contact variera habituellement in- versement par rapport à la température d'extraction. Il sera ha-   bituellement     indésirable   d'utiliser une température supérieure à 70 C, car dea températures plus élevées mèneront à une certaine dégradation du produit. 



   Si la crème ou pâte de micro-organisme est soumise à un séchage partiel avant l'extraction par solvant, il aéra habituel- lement possible de réaliser   alorer   la première phase d'extraction avec un seul lavage seulement aveo un solvant alcoolique et en utilisant une plus petite quantité de solvant que celle qui 

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 serait nécessaire s'il n'y avait pas de séchage. Si le degré de séchage est important, une première phase d'extraction utilisant un solvant polaire, par exemple un solvant- alcoolique, n'est pas nécessaire; dans ce cas, on peut mettre en oeuvre le procédé d' extraction à une seule phase en utilisant un solvant qui est en- tièrement formé par un hydrocarbure ou qui est constitué par un mélange d'hydrocarbure et de solvant polaire, par exemple un al- cool ou une cétone ou un hydrocarbure chloré. 



   D'une manière générale, il est désirable d'éviter un séchage cous des conditions draconiennes, car ceci mènerait à une décomposition partielle du micro-organisme, par exemple par des-   truction   des vitamines et oxydation des composés non saturés,de plus, les produits de décomposition seraient solubles dans le solvant utilisé dans la distillation extraotive, en étant ainsi perdu pour le produit ou en exigeant des phases complémentaires pour leur récupération. Une levure qui a été libérée de la tota- lité ou d'une partie de ces lipides et des hydrooarbures formant souillures par l'un des procédés décrits ci-dessus et dont le goût a été amélioré constitue un nouveau produit industriel de valeur pour la nutrition des êtres humains. 



   L'extrait lipide qui a été récupéré par évaporation du solvant est également un nouveau produit industriel qui peut être utilisé, soit comme tel, soit comme matière première pour la séparation de ses stérols, de ses acides gras (avant   saponifi-   cation ou après) ou de ses autres constituants. 



   L'invention est illustrée mais non limitée par les exem- ples 1 et 2 suivants. Les expériences 1 et 2 qui ne constituent pas une opération suivant l'invention sont données pour des be- soins de comparaison. 



   Exemple 1 
Une levure de la souche Candida   lipolytioa   est mise à croître en utilisant un gas-oil paraffinique comme charge d'ali- mentation, et ce à la façon décrite dans le brevet en Grande-Bre-      

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 tagne numéro provisoire   44.606/62     (SFP.1300).   



   Cette levure   aohe   contient 44% de protéines et   18,5   de lipides, Elle possède un goût piquant et rance qui est   oarao-     tériatique   des levures préparées en partant de fractions de   pétro-   le Les lipides sont extraite de cette levure dans un appareil d'extraction de   Soxhiet   avec un mélange de 80%   d'hexane   et de 20% d'alcool éthylique. 



   Après évaporation du solvant, on obtient une levure contenant 52% de protéines et 3% de lipides. 



   En partant de 100 grammes de levure, on obtient, par l'extraction par solvant, 16 grammes d'un extrait consistant prin- cipalement en   stérols,   en esters et en acides gras oxydés et non oxydée, 
La levure qui a   ainsi   été libérée de la majeure partie de ses lipides présente un goût absolument neutre qui permet son utilisation pour la consommation par les   êtres   humaine,, 
Exemple 2 
Une crème de levure a été préparée comme décrit dans la demande de brevet en Grande-Bretagne   No.   44.606/62, avec   référence   au diagramme qui accompagne cette demande de brevet.

   Il sera entendu que la matière utilisée dans le présent exemple est la crame de levure obtenue après lavage avec une levure tensio-active et avec de l'eau et avant la phase de séchage   décrite   avec réfé- rence au diagramme précité. 



   Dans une série de traitements, on   a   pompé de façon conti- nue un solvant dans un appareil d'extraction oontenant une four- née de la crème de levure.   L'appareil   d'extraction   ust   sous la forme d'un tambour de filtration qui est mis en rotation en ayant son axe horizontal. 



   La crême de levure contenant deux parties en poids de levure sèche et huit parties en poids d'eau est chargée dans l' appareil d'extraction avec 16 parties d'éthanol. Le mélange est maintenu 60 C pendant 30 minutes, tandis qu'on fait tourner le tambour. 

 <Desc/Clms Page number 14> 

 



   Le solvant est soutiré, finalement sous vide. On ob- tient ainsi un mélange de deux parties de levure et de deux parties de solvant,qui consiste en un tiers d'eau et en deux tiers d'é- thanol, aveo une certaine quantité de souillures   restée*   
Ce mélange est traité avec dix parties en poids d'un mé- lange solvant constant en 81% en poids d'hexane normal et en 
20% en poids d'éthanol. 



   Le mélange est maintenu 4   60*C   pendant 15 minutes et le solvant est soutiré, finalement sous vide. Le lavage avec ce mé- lange solvant est répété plusieurs fois (si un produit de levure d'une haute pureté est requis, la phase de lavage peut être répé- tée jusqu'à dix foia par exemple). Finalement, le produit de levure est   séché   dans de la vapeur surchauffée. t'analyse de la crème de levure avant l'extraction par solvant et' de la levure produite est montrée au tableau suivant. 



   Tableau 
 EMI14.1 
 
<tb> crame <SEP> de <SEP> levure <SEP> Levure <SEP> produite
<tb> 
<tb> Azote, <SEP> en <SEP> poids <SEP> de <SEP> la <SEP> le-
<tb> 
 
 EMI14.2 
 vure st-clie 7% 7)8% 
 EMI14.3 
 
<tb> Poids <SEP> total <SEP> de <SEP> lipides <SEP> par
<tb> 
<tb> rapport <SEP> au <SEP> poids <SEP> de <SEP> levure
<tb> 
<tb> 
<tb> sèche <SEP> 10% <SEP> 0,5%
<tb> 
   Exemple   
La crme de levure décrite à l'exemple 2 a été* extraite de façon continue dans un tambour ayant son axe vertical et com- portant un dispositif d'agitation à palettes, qui tourne a dix tours par minute. Dans des traitements séparés, le solvant a été constitué respectivement par de l'éthanol, de l'éthanol puis de l'hexane normal, et de   l'isopropanol.   



   L'extrait a été distillé de façon continue en vue de la récupération des lipides et des hydrocarbures, et le solvant a été recycle   à   l'appareil d'extraction. 



   Les conditions et les résultats obtenus sont donnes au tableau suivant. 

 <Desc/Clms Page number 15> 

 



    Tableau   
 EMI15.1 
 
<tb> Traitement, <SEP> No. <SEP> 4 <SEP> 7 <SEP> 8
<tb> Solvant <SEP> et <SEP> période <SEP> de <SEP> trai- <SEP> Zthanol <SEP> (11 <SEP> heures) <SEP> hanol <SEP> (20 <SEP> heures <SEP> Isoropanol <SEP> (40 <SEP> heures)
<tb> tement <SEP> et <SEP> période <SEP> de <SEP> frai- <SEP> Ethanol <SEP> (11 <SEP> heures) <SEP> Hexane <SEP> (9 <SEP> heures <SEP> Isopropanol <SEP> (40 <SEP> heures)
<tb> Taux <SEP> d'alimentation <SEP> du <SEP> solvant <SEP> 600 <SEP> cm <SEP> /heure <SEP> 600 <SEP> en/heure <SEP> 600 <SEP> cm <SEP> /heure <SEP> 
<tb> Température <SEP> 60 C <SEP> 60 C <SEP> 60 C
<tb> Poids <SEP> de <SEP> la <SEP> pâte <SEP> de <SEP> levure
<tb> (grammes)

   <SEP> 1000 <SEP> 1000 <SEP> 1000
<tb> Analyse <SEP> Avant <SEP> Après <SEP> Avant <SEP> Après <SEP> Avant <SEP> Après
<tb> traitement <SEP> traitement <SEP> traitement <SEP> traitement <SEP> traitement <SEP> traitement
<tb> Levure <SEP> sèche
<tb> Poids <SEP> (gramme) <SEP> 210 <SEP> 140 <SEP> 210 <SEP> 200 <SEP> 210 <SEP> 200
<tb> % <SEP> d'azote <SEP> 6,05 <SEP> 9,0 <SEP> 5,65 <SEP> 7,45 <SEP> 5,65 <SEP> 3,50
<tb> en <SEP> poids <SEP> total <SEP> de <SEP> lipides
<tb> dans <SEP> la <SEP> levure <SEP> 41,2 <SEP> 5,0 <SEP> 42,9 <SEP> 4,2 <SEP> 42,9 <SEP> 6,9
<tb> Extraits
<tb> Poids <SEP> (grammes) <SEP> 72 <SEP> 200 <SEP> 100
<tb> 
 

 <Desc/Clms Page number 16> 

 
A titre comparatif, on donne également une description   oi-après   des expériences 1 et 2 qui ne constituent pas des opéra- tions suivant l'invention. 



   Expérience1 
Le procédé décrit dans l'exemple 1 a été répété saufque la 'levure utilisée était une levure   Saccharomyces   Cerevisia, cul- tivée de la manière connue sur un substrat de mélasses de   bottera-'   ves. On a trouvé qu'aucune amélioration perceptible en ce qui con- cerne le   goût   caractéristique de cette levure n'a été obtenu. 



   Expérience 2 
Une expérience similaire a été réalisée en partant d'une      levure Torula cultivée d'une manière connue sur une liqueur de bi- n' sulfite de cellulose. On a trouvé également que l'on/obtenait aucune amélioration perceptible en oe qui concerne le goût   caracté-   ristique de cette levure. 



   REVENDICATIONS 
1. Un procédé qui comprend la culture d'un micro-organis- me en présence d'une charge d'alimentation constituée totalement ou en partie d'hydrocarbures à chaîne droite, la séparation à par- tir du produit, d'une fraction comprenant le   micro-organisme,   et   l'extraction   de cette fraotion grâce à un solvant.

Claims (1)

  1. 2. Un procédé suivant la revendication 1, dans lequel le micro-organisme est une levure.
    3. Un procédé suivant la revendication 2, dans lequel la levure est de la famille des Cryptococcoaccées.
    4. Un'procédé suivant la revendication 3, dans lequel la levure est de la sous-famille des Cryptococcoïdées.
    5. Un procédé suivant la revendication 4, dans lequel la levure est du genre Torulopsis.
    6. Un prooéd.é suivant la revendication 4, dans lequel la levure est du genre Candida.
    7. Un procédé suivant la revendication 4, dans lequel la levure est le Candida Lipolytica, <Desc/Clms Page number 17> 8. Un procédé suivant l'une quelconque des revendication précédentes, dans lequel la levure est mise à croître en présence d'un milieu nutritif contenant des vitamines du groupe B.
    9, Un procédé suivant l'une quelconque des revendioa- tions précédentes, ans lequel la levure oot mise à croître en présence d'un milieu nutritif contenant un extrait de levure.
    10. Un procédé uuivant la revendication 1, dans lequel le micro-organisme est un baotérie.
    11. Un procédé suivant l'une quelconque des revendicá- tions précédentes, dans lequel le produit obtenu par culture du micro organisme est traité en vue de la séparation d'une fraction conte- nant le micro-organisme à partir de la masse de la phase liquide, et dans lequel la fraotion contenant le micro-organisme, ainsi sé- parée, ou une fraotion modifiée obtenue par un traitement ulté- rieur de cette fraction, par exemple par séchage complet ou par- tiel, est soumise à une extraction par solvant.
    12. Un procédé suivant la revendication 11, dans lequel la fraction contenant le micro-organisme et qui a été modifiée est une fraotion qui a été au moins partiellement séchée à une tempé- rature non supérieure à 70 C.
    13.Un procédé suivant la revendication 11, dans lequel la fraotion contenant le micro-organisme est extraite avec un sol- un et vant hydrocarbure ou un mélange d'/solvant hydrocarbure /d'un sol- vant polaire, 14. Un procédé suivant la revendication 11, dans lequel la fraction oontenant le micro-organisme est sous la forme d'une crème ou pâte contenant de l'eau et dans lequel l'extraction par solvant est mise en oeuvre en deux phases, la première phase étant réalisée en présence d'un solvant polaire, tandis que la seconde phase est mise en oeuvre en présence d'un solvant mixte consistant en un solvant hydrocarbure et en un solvant polaire.
    15. Un procédé suivant la revendication 14, dans lequel la fraotion contenant le micro-organisme est traitée dans une pre- mière phase comprenant une ou plusieurs sous-phases, la fraction <Desc/Clms Page number 18> étant, dans chaque sous-phase, lavée avec un solvant polaire et l'extrait étant séparé, une ou plusieurs fractions d'extrait étant mélangées aveo une fraotion de reoyolage de seconde phase et le mélange étant distillé en vue de récupérer un solvant de première phase qui est reoyolé et une fraction de résidu, le produit raffi- né de la première phase étant envoyé à un traitement de seconde phase comprenant une ou plusieurs sous-phases, la fraction étant, dans chaque sous-phase, lavée avec un mélange d'un solvant hydro- carbure et d'un solvant polaire et l'extrait étant séparé,
    une ou plusieurs fractions de seconde phase étant distillées aveo récupé- ration de t (a) un solvant de première phase qui est recyclé à la première phase, (b) une fraotion contenant du solvant hydrocarbure et du solvant polaire et qui est reoyolée à la seconde phase d'extraotion, et (c) une fraction de queue contenant les matières extraites et qui constitue la fraction de reoyolage de seconde phase.
    16. Un procédé suivant l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel le solvant polaire est l'éthanol ou l'iso- propanol.
    17. Un procédé suivant l'une quelconque des revendica- tions, dans lequel le solvant hydrocarbure est l'hexane normal, le benzène ou une fraction légère de platforming.
    18. Un procédé suivant l'une quelconque des revendica- tions précédentes, dans lequel le solvant hydrocarbureet le mélangea solvant polaire forment un mélange azéotropique, 19. Un procédé suivant l'une quelconque des revendica- tions précédentes, dans lequel des hydrocarbures à;
    chaîne droite sont séparés d'une fraction de pétrole avec production d'un micro- organisme, dans lequel la charge d'alimentation utilisée pour la croissance du micro-organisme est une fraction de pétrole consistant en partie en hydrocarbures à chaîne droite, et dans lequel on récu- père à partir du produit de la croissance du micro-organisme, une fraction de pétrole ayant une proportion réduite d'hydrocarbures <Desc/Clms Page number 19> à chaîne droite ou qui est exempte de tels hydrocarbures à chaîne droite.
    20, Un procède suivant la revendication. 19, pour l'enlè- vement total ou partiel de cires à partir d'un gas-oil de pétrel- contenant des cires, dans lequel la charge d'alimentation est un gas-oil de pétrole contenant des cires et dans lequel on récupère, EMI19.1 à partir du produit de la croissance du mioro-organieme, un gas- oil d'une teneur réduite en cires.
    21. Un procédé, tel que décrit ci-dessus, notamment dans les exemples donnés.
    22. Un micro-organisme, lorsqu'il est produit et traite par un procédé suivant l'une quelconque des revendications précé- dentes.
    23. Un extrait, lorsqu'il est obtenu par croissance et traitement d'un micro-organisme par un procède suivant l'une quelconque de.3 revendications 1 à 21.
    BRUXELLES, le 17 octobre 1963 EMI19.2 11, Pon de la société dite THE 3tTTxâ!T PBSROLKUM COMPANY LIMITEZ Po ]?on de J, GKVERS & Co. l)
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