BE652148A

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Publication number: BE652148A
Authority: BE
Priority date: 1964-08-19
Also published as: FR87861E

Description


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  "Nouveaux composés de la céphalosporine et procédé de prépara-   tion" .    



   La présente'addition concerne un procédé de préparation- de composés antibiotiques de la série de la céphalosporine et elle constitue une extension de l'invention décrite dans le brevet principal. 



   Le brevet principal concerne les composés de la classe de la céphalosporine C substitués par des groupes hétérocycliques ayant le groupe acylamido substitué en posi- tion 7 de la céphalosphorine C au lieu du groupement 

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5'-amino-N'-adipamyle, trouvé en cette position, dans la céphalosporine C elle-même. Les composés décrits dans le brevet principal appartiennent à la classe de la céphalosporine C dans la mesure   où,   ils comportent la structure à noyaux bicycliques de la céphalosporine C mais avec des variations.dans les groupes substituants qui lui sont rattachés.

   Parmi les dits composés se trouvent ceux qui ont le noyau des produits du type de la céphalosporine connus sous les noms de désacétylcéphalosporine C, céphalosporine Cc, dans laquelle le noyau comporte un cycle lactone accolé, et céphalosporine CA, dans laquelle la position 3 du cycle triazine présente un substituant méthyl- amino tertiaire qui forme un sel interne ou"zwitterion" . le procédé de 
Les nouveaux composés prépares selo la présente invention appartiennent à la classe des composés de la céphalosporine CA, dont la céphalosphorine CA   elle-mme,   est le   prototype:   
 EMI2.1 
 
Les nouveaux composés préparés selon le procédé de la présente invention sont représentés par la formule suivantes :

   

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 EMI3.1 
 dans laquelle R est un radical alpha-thiényle, bêta- thiényle,   alpha-furyle,   ou   bta-furyle,   m et n sont égaux à 0 ou 1, et R1, constituant un substituant en position 3 ou 4 du cycle   pyridino,est   un radical cyano, 
 EMI3.2 
 :arboxy, carbamylej N-méthylcarbamyle, carbo(cl-c4)alkoxy, hydroxy ou (CI-C4)âlkanoyle;

  et ils comprennent leurs sels notamment avec les acides pharmauceutiquement acceptables. préparés selon le procédé 
Pour dénommer les nouveaux composés / de la présente invention, il est convenable de désigner la structure saturée de base bêta-lactame thiazine à cycles accolés sous le nom de "céphame", 
 EMI3.3 
 et de dénommer les composés en tant que dérivés de la structure précitée, le terme   "céphèe"   désignant.la structure de base comportant une seule liaison oléfinique, Selon ce système, la céphalosphorine CA elle-même derait 
 EMI3.4 
 dénommée acide 7-(5-aminoadipamido)--pyriinométhyl- 3eéphème-4-carboxylique, Plus particulièrement, il est commode de considérer les composés ayant le noyau CA comme 

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 des analogues de la céphalosporine CA   elle-mme,

     et de préciser les différences en dénommant le radical relié au groupe   CO-NH-   en position 7 et le composé de pyridine employé pour remplacer le groupe acétoxy en position 3. 
 EMI4.1 
 



  Ainsi, l'acide 7-(alpha-thiénylacétamldo)-3-(4'-carbamyl- pyri.dinométhyl)3-céphème-+-carboxylique peut être désigné sous le nom de   "alpha-thiénylméthyl   isonicotinamide céphalosporine CA". 



   Les composés suivants sont donnés à titre d'illus- tration en exemples des composés.préparés selon le procédé de la présente invention: 
 EMI4.2 
 béta-thiénylméthyl 3-butyrylpyrid1ne céphalosporine CA alpha-furyl acide nicotinique céphalosporine CA bêta-thiényl   isonicotinate   d'éthyle céphalosporine CA 
 EMI4.3 
 alpha-thinëylméthyl nicotinate de sec.-butyle caphalosporine CA alpha-thkenyl 3-aya.,iopyridine céphalosporine CA ,

  alpha-furylméthyl 4-isobutyrylpyridine céphalosporine CA   alpha-furyl     niootinate   de n-propyle céphalosporine CA 
 EMI4.4 
 alpha-furylméthyl 4-hydroxypyridine céphalosporine CA b8ta-furylméthyl 3-acétylpyridine céphalosporine CA bta-thiénylméthyl 3-hydroxypyrîdîne céphalosporine CA bêta-furyl acide isonicotinique céphalosporine CA 
 EMI4.5 
 béta-furylméthyî N'-méthylisonicotinamide céphalosporine CA alpha-thiénylméthyl nicotinamide céphalosporine CA bêta-thiényï 4-cyanopyridine céphalosporine CA alpha-furyl,

  n4.thyl N'-méthylnicotinamide oéphalosphrine CA alpha-thiénylméthyl + prcpionyl.pyridine cephalosporine CA alpha-thiényl nàcotinate de méthyle céphalosporine CA bêta-thiénylméthyl isonicotinamide céphalosporine CA bêta-furyl isonicotinate d'isobutyle céphalospcr1a CA 

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 et leurs sels notamment avec des acides pharmaceutiquement acceptables, par exemple le chlorhydrate, le bromhydrate, le sulfate, le nitrate, l'ortho-phosphate et le naphtalène sulfonate et analogues, 
Les composés sont facilement préparés selon la présente invention à partir du composé céphalosporine C analogue, ayant-le groupe acylamido désiré en position 7 et le groupe   acé.toxyméthyle   caractéristique en position 3,

   par mélangoage en solution aqueuse avec un excès de la pyridine suhstituée appropriée et en laissant réagir à température élevée. La réaction est convenable- ment effectuée dans un'intervalle de pH d'environ 3-8,5, de préférence un pH de   6-7,   et à une température comprise entre environ   40'et   environ 1000C, de préférence environ   50-75 C.   Dans les conditions préférées, une durée, de réaction comprise entre 4 et 8 heures est en général suffisante. Les températures inférieures nécessitent des durées plus   longues,..tandis   que les températures supérieures tendent à provoquer la dégradation du produit. 



  On peut employer'le composé de céphalosporine C sous la forme de l'acide libre ou d'un sel. On doit utiliser le composé de pyridine en un rapport au moins équimolaire par rapport au composé de la céphalosporine C et de préférence en excès notable, par exemple, on utilise un rapport molaire de 3 : 1 à 10 : 1 ou davantage, en vue de rendre maximale la transformation du composé de . céphalosporine C, l'excès pouvant être facilement recueilli pour une nouvelle' utilisation.

   Dans les conditions de la. réaction, le groupe acétoxy est clivé et remplacé par le composé de pyridine substitua la liaison du dit composé 

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 de pyridine au groupe méthylène résiduel étant directement obtenue à l'atome d'azote du hoyau, en formant un dérivé d'ammonium quaternaire qui à son tour forme un sel interne avec le groupe carboxyle en position   4.   



   Le produit désiré est facilement isolé à partir du mélange de produit réactionnel, par évaporation à siccité sous vide, trituration avec   lacétone   pour éliminer les substances de départ et précipitation répétée à partir de la solution aqueuse par addition   d'acétone.   Dans de nombreux cas, le produit peut être cristallisé directement à partir de la solution aqueuse par dissolution dans l'eau à température élevée et par refroidissement consécu-      tif. 



   La.céphalosporine C désirée utilisée comme substance de départ est facilement préparée par acylation de l'acide 7-aminocéphalosporanique avec un agent acylant ayant la structure désirée dans des conditions courantes. 



  Un agent acylant convenable est le chlorure ou le bromure d'acyle substitué par un groupe   thiényle'ou   furyle. On effectue l'acylation dans l'eau ou dans un solvant organique approprié, de préférence dans des conditions pratiquement neutres et de préférence à faible température, à savoir au-dessus du point de congélation du mélange réactionnel, et jusqu'à environ 20 C. Dans un mode opératoire typique, on mélange l'acide   7-aminocéphalosporanique   avec de   l'acétone   aqueuse à 50% en volume et une quantité suffisante de bicarbonate de sodium pour favoriser la mise en solution, la concentration de l'acide 7-aminocéphalosporanique étant d'environ 1   à   environ 4% en poids.

   On refroidit la solution à environ 0 à 5 C et on ajoute une solution de l'agent acylant 

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 en excès d'environ 20%, sous agitation et refroidissement, On laisse ensuite s'échauffer le mélange à la température ambiante, puis on l'acidifie à un   pH   d'environ 2'et on l'extrait avec l'acétate   d'éthyle.ou   un autre solvant organique non miscible. On règle le pH de l'extrait à l'acétate d'éthyle à environ   4,5   avec la potasse ou une autre base et on l'extrait avec de l'eau. On sépare la solution aqueuse et on l'évapore à siccité. On reprend le résidu dans la quantité minimale d'eau et on précipite le produit acylé en ajoutant un grand excès d'acétone et, si cela est nécessaire, de l'éther.

   On filtre la substance cristallisée ainsi obtenue et on la lave avec de l'acétone puis on la sèche. 



   L'acylation du groupe 7-amino peut également être effectuée avec l'acide carboxylique appropriée, employé en conjonction avec une proportion équimolaire 
 EMI7.1 
 ou une quantité supérieure d'unecarbodiimide, et l'acyla- tion s'effectue aux températures ordinaires dans ces cas. 



  Tous les carbodiimides quelconques sont'' efficaces à cet effet, le reste actif étant la structure -N=C=N-. 



  A titre d'illustration, on peut mentionner les exemples 
 EMI7.2 
 de carbodiimides suivantes: NjN'-dïéthylcarboàiimide, N,N'-di-n-propylcarbodiimide, N,NI-diisopropylcarbodi- 1mide.N,N'-d1cyclohexylcarbodi1m1de, N,N'-dially.- carbodilmide, N,N'"b1s-(p-d1-méthylaminophény1)carbo- diimide, N-éthyl-N'-4-(4"-éthylmarpholinyl)carbodl mîde, et analogues, d'autres carbodiimides convenables étant. 
 EMI7.3 
 décrites parSheekan dans le brevet des EUA n  2.938.892 du 31 MAI 1960 et par Hofmann et Collaborateurs dans le brevet des EUA n    3.065.224   du 20 NOVEMBRE 1962. 

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 EMI8.1 
 acylation dU srolBé"rElàl5é àvii 1.i/µÎ]JJµµ" de l'acide carboxylique approprié, d'une manière convenable l'anhydride d'acide ou un anhydride mixte ou l'azide ou un ester activé correspondant.

   D'autres dérivés   conve-   nables peuvent être facilement déterminés par les spécialistes. 



   On peut également préparer les composés selon le procédé de la présente Invention en faisant réagir l'acide   7-amino-céphalosporanique   avec le composé de pyridine substituée approprié dans les conditions décrites ci-dessus, et en soumettant ensuite l'intermédiaire quater- nisé (qui peut être considéré comme le noyau de l'analogue de la céphalosporine CA) à   l'acylation   selon l'un quelconque des modes opératoires décrits ci-dessus. 



   Selon un mode opératoire encore différent, on. fait réagir la céphalosporine C avec le composé de pyridine substituée approprié, pour former l'analogue de   céphalc.sporine   CA correspondant, le dit analogue étant soumis au   clivage '   pour éliminer la chaîne latérale   5-aminoadipyle,   en fournissant. le noyau de l'analogue de la céphalosporine CA et on acyle cet analogue selon l'un quelconque des modes 

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 opératoires décrits ci-dessus. On effectue la réaction de clivage en exposant l'analogue de la céphalosporine CA à l'action du chlorure de nitrosyle ou d'un autre agent nitrosant dans une solution d'acide formique pratiquement anhydre, à une température d'environ   20 à   30 C. 



   L'invention sera plus clairement comprise à partir des exemples de mise en oeuvre suivants qui sont indiqués à titre d'illustration seulement et qui n'ont nullement des caractères limitatifs. 

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   Les activités antibiotiques décrites dans les dits exemples sont déterminées par rapport à Staphylococcus aureus 209 P par une modification appropriée des méthodes sur plaque et disque en papier de Higgens et Collaborateurs, 
 EMI10.1 
 Antibiotics & Chemotherapy, 2' 50-54, (Janvier 1953 at'      Loo et Collaborateurs, Journal of Bacteriology, 50, 701-709 (1945). 



     EXEMPLE   1. 
 EMI10.2 
 alpha-thiénylméthyl isonicotinamide céphalosporine CA On chauffe pendant 40 heures à'37,50C un mélange de 101 g du sel de sodium de l'acide 7-(a,.3.pha-thignylacétami-   do)céphalosporanique,200   g   d'isbnicotinamide   et 1 litre d'eau, et on fait ensuite évaporer le mélange à sicité sous vide. 



  On triture le résidu trois fois acec de l'acétone (10   libres,   5 litres et 5 litres). On triture la substance insoluble dans l'acétone, pesant 105g, avec 300 cm3 d'eau, on chauffe légèrement, on refroidit et on filtre. On agite la substance insoluble dans l'eau avec 700 cm3 d'acétone, puis on   effctue   l'isolement et on sèche à l'air. On dissout le produit ainsi obtenu, pesant 32g, dans l'eau chaude et on le recristallise. 
 EMI10.3 
 



  On obtient un rendement de 18,4 g d'acide.7-(alpha-thiénylaoétamido -,3- ( ' -carbamylpyridinomé tyl ) -3..aêphêfi-4.-c arboxyl,que fondant   à   147-150 C avec décompbsition et ayant des maxima dans son spectre   d'absorption   ultra-violette à 233 et 262   m/u   (   #.   16.650 et 13.550 respectivement). 



   Un échantillon recristallisé du composé produit a une activité antibiotique de 690 unités-de pénicilline   G   par milligramme. On trouve que le produit est stable en solu- tion (10   /ug   par litre) dans un tampon de phosphate 0,1 M dans l'intervalle de pH de   4,5-7,5 )   à 4 C pendant un   mots;   

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   EXEMPLE 3.    
 EMI11.1 
 alpha-thiênylméthylis onicotinamide céphalosporine CA On dissout le sel de sodium de l'acide . 



  7.(alpha-thiénylacétamido)céphalosporanique (1,0 g) et la   nibotinamide     (2,0g)   dans 50 cm3 d'eau. On règle le pH de la solution résultante à 2,5 avec l'acide ohlorhy- drique 1 N et on chauffe pendant 18 heures à 40 C. On fait ensuite évaporer le mélange à siccité sous vide. 



  On triture deux fois le résidu avec l'acétone (100 cm3 et 50 cm3). On dissout la substance insoluble dans l'acétone dans 3,5 cm3 d'eau et on la reprécipite en ajoutart   36,5om3   d'acétone. Les substances solides sont ensuite triturées avec 40 cm3 d'acétone et séchées sous pression réduite. 
 EMI11.2 
 



  On obtient un rendement de 420 mg d'acide 7-(alpha-thiÔnyl- acétamido)-µ-(J'-carbamylpyridinométhyl)-µ-céphéme-4- carboxylique ayant des maxima dans son spectre d'absorption ultra-violette à 232 et 260   m/u     (=     0.700   et 7.750 respectivement, et une activité antibiotique de   260   unités de pénicilline G par milligramme. 



    EXEMPLE 3.    
 EMI11.3 
 alpha-thiénylméthyl 3 hydroacypyridine céphalosporine C . 



  On prépare l'acide 7-(alpha-thiénrlacétamida)..3- (j'-hydroxypyridinométhyl)-3-céphéme-4-carboxyiique, 200 mg, par mise en réaction de 1,0 g du sel de sodium de l'aoido 7-(alpha-thiénylaaébamido)céphalosporanique avec 2,0 g de 3-hydroxypyridine, selon le mode opératoire de l'exemple 2. 



  Le produit présente des maxima dans son spectre d'absorption ultra-violette à 236 et 322 1"a (±±  12.000 et 2.200   respootivement)   et une activité antibiotique de 200 unités do   pénicilline   0 par milligramme. 

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    EXEMPLE   4. 
 EMI12.1 
 alpha-thiénylméthyl 3-(NLméth²car.bamyl)p-Yr1d1e céphalosporine CA- 
On prépare l'acide   7-(alpha-thiénylacétamido)-3-   
 EMI12.2 
 {3t Nn¯méthylcarbamylpyrid.nométhyl)-3-céphème-- carboxylique, 370 mg, par la mise en réaction de 1,0 g 
 EMI12.3 
 .du sel de sodium de l'acide 7-(alpha-thïénylauétamido)oépha- losporonique avec 2,0 g de 3-(Nt-méthylcarbamyl)-pyridine selon le mode opératoire de l'exemple 2, Le produit présente; des maxima dans son   sotre   d'absorption ultra-violette à 235 et 260 m/u   #=     13.500   et 8.900 respectivement) et une activité antibiotique de   260   unités de pénicilline G -par milligramme. 



   Un échantillon du produit recristallisé présente une   activité antibiotique   de 570 unités de pénicilline G par mg. 



    EXEMPLE 5.    
 EMI12.4 
 alpa-th1énYlméthyl 4-acétylpyridine céphalosporine CA On prépare l'acide 7-{alpha-thiénylacétamido)-.. 



  (41-acêtyll-iyridînométhyl)-3-céphème-4-carboxylique, 490 mg, par la mise en réaction de 1,0 g du sel de sodium de l'acide 7-(alpha-thiénylaaétamido)céphalosporanique avec 2,0 g de 4-acétylpyridine selon le mode opératoire de l'exemple 2. Le produit présente des maxima dans son spectre d'absorption ultra-violette à 234 et 260 m/u   (#-   13.900   et:     8.650,   respectivement) et une activité antibiotique de   100   unités de pénicilline G par milligramme. 

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  EXEMPLE 6. 
 EMI13.1 
 al ha-thién lméth 1 4- (N'-méthylcarbamMI) 2àEidine céphalosporine 1. A T .. 



  On prépare l'acide 7-(alpha-thiénylacétamido)-3- (4'-fN"-méthyl)carbamyl Jpyridinométhyl-5-céphéme-4- carboxylique, 450 mg , par mise en réaction de 1,0 du sel de sodium de l'acide   7-(alpha-thiénylacétamido)-céphalos-   
 EMI13.2 
 poranique avec 2,0 g de 4-(N'-méthylcarbamyl)pyridine à pH 2,9, en utilisant par ailleurs le mode opératoire et les conditions de réaction mentionnés dans l'exemple 2, On purifie un échantillon de   340   mg du produit ainsi obtenu en le dissolvant dans 2 cm3 d'eau, en le précipitant avec 
 EMI13.3 
 40 cm3 d' acétonq, ¯en le filtrant, en le tri tunant avec 40 cm3 d'acétone et en le séchant sous vide.

   On obtient un rendement de 220 mg en produit purifié, ayant des   n,axima   dans son spectre d '.absorption ultra-violette à 
 EMI13.4 
 2j2 et 264 mou s( C = 11,6>,1> et 6.550, respectivement) et une activité antibiotique de 490 unités de pénicilline G par milligramme. 



   EXEMPLE 7.   alpha-thiénylméthyl     4-oyanopyridine   céphalosporine CA 
On dissout le sel de sodium de l'acide 7-alpha- 
 EMI13.5 
 thiénylacétamido)èéphalosporanique (3g) dans 150 cm3 d'eau et on règle le pH à 2,8 avec l'acide chlorhydrique 1N. On ajoute 'a la solution la 4-cyanopyridine (6g) et on chauffe le mélange à 40 C pendant 20 heures. On évapore le mélange du produit réactionnel à siccité sous vide et 
 EMI13.6 
 on triture. La zàjpioi% ay=a %p l'ao4tone en portions de 500o, 256'' -o sèohe sous vide. Le rendement 

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On dissout le solide ainsi obtenu dans 4 cm3 d'eau, on précipite avec 80 cm3 d'acétone, on refroidit, on sépare par décantation, .on triture avec   100   cm3 d'acétone et on sèche sous vide. Le rendement est de 1,75g.

   On dissout de nouveau la substance solide dans   4'cm3   d'eau, on précipite avec 100 cm3 d'acétone, on sépare par décanta- tion, on triture avec 100 cm3 d'acétone,.on sèche ensuite      sous vide. Rendement : 1,16 g. On dissout le solide dans 3 cm3 d'eau et on le refroidit'pendant trois jours et pendant cette durée, il se forme un solide cristallisé. On fragmente cette substance et on   l'agite.*On   refroidit le mélange.dans la glace et on le'centrifuge puis on décante la phase liquide. On ajoute 1 cm3 d'eau et on répète la centrifugation et la décantation. On triture la substance solide avec 5 cm3 d'acétone   eton   la sèche sous vide. 
 EMI14.1 
 



  Le rendement est de 70 mg en acide 7-alp$a-thiénylacétami- do ) .. ( ' -cyanopy id.nométhyl ) 3-céphème-+-carboxylique, ayant des maxima dans son spectre d'absorption ultra-violette à 232 et 236 m/u,   (#=   20. 600 et   11,300;   respectivement) et une activité antibiotique de 500 unités de pénicilline G par milligramme. 



     EXEMPLE   8. 
 EMI14.2 
 alpha-thiénylméthyl 4-carbomëthoxypyridine céphalosporire CA      
On dissout le sel de sodium   de.l'acide   7-(alpha- thiénylacétamido)céphalosporanique (259)'dans 250 cm3 d'eau et on ajoute   à   la solution 50 g   d'isonicotinate   de méthyle.. On chauffe le mélange   à   37 C pendant 41 heures et on l'évapore ensuite à siccité'sous vide; On triture pendant quatre fois le résidu avec   des.portions   de 1250 cm3 d'acétone puis on le sèche sous vide. Rendement ; 18,13g. 

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   On dissout le produit impur dans 40 cm3 d'eau et on refrodit la solution. Les substances solides ainsi produites sont recueillies par filtration (environ 4 g) recristallisées à partir de 40 cm3 d'eau, triturées avec 40 cm3 d'acétone et séchées sous vide. Le rendement est de 
 EMI15.1 
 1,6 g en acide 7-(alpha-thiénylacétamido)-3-(.'-carbomf thoxy. pyridine)-µ-céphème-4-carboxylique, ayant des maxima dans son spectre d'absorption ultra-violette à 226-236 m/u (   #   =   18. 600   et 12.030 respectivement) et Une activité an- tibiotique de 430 unités de pénicilline G par milligramme. 



    EXEMPLE 9.      alpha-thiénylméthyl 3-cyanopyridine   céphalosporine CA 
On fait réagir le sel de sodium de l'acide 
 EMI15.2 
 7-(alpha-thiénylacétamido)céphalospvranique (3g) avec la   3-cyanopyridine   (6g) pendant une durée de 17,5 heures comme décrit dans l'exemple 7. 



   On dissout le résidu provenant du mélange des .produits réactionnels, et pesant 2,69g, dans 5,3cm3 d'eau, on refroidit pour laisser reposer des matières solides, on les décante, on les triture avec 2 cm3 d'eau, on les centrifuge et on les décante, on les triture avec      10 cm3 d'acétone, on les décante et on les sèche sous vide. 
 EMI15.3 
 



  Le rendement est de 0,47g d'acide 7..(alpha-thiénylacétarido) -3..(3'..oyanopyrid3,ne)-3-céphème-4-carboxylique, fondant à 127-128 C et ayant des maxima dans son   spectrr   d'absorption ultra-violette à 235 et 264 m/u   (#=     14.700     e   10.750, respectivement), et une activité antibiotique de 407 unités de pénicilline G par milligramme. 

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  EXEMPLE 10. 
 EMI16.1 
 



  Aci,de. al ha-thién lactarn.da - idinaméth 1- - cépheme-4-ca.rboxylique - , On règle le pH d'une solution de 200 g . de 7-(alpha-thiénylacétamido),céphalosporanate de sodium, 100g de thiocyanate de potassium et 100 g de 
 EMI16.2 
 pyii.dîne dans 500 om3 d'eau,au pH de 6,5 avec 10 em3 d'acide phosphorique sirupeux, puis on chauffe à 60 C pendant 6 heures en agitant. 



   On refroidit le mélange de produits réactionnels et on le lave avec 25%   d'Amberlite     LA-1   (un échangeur d'anions organique liquide constitue par une amine, et utilisé sous la forme acétate) dans la méthylisobutyl-   cétone,   une première fois avec 1,0 litre et une eutre fois avec 0,75 litre, la durée de contact étant d'environ 20 minutes dans chaque cas, On termine le lavage avec 500 cm3 de   méthylisobutylcétone.   



   On ensemence la couche aqueuse lavée avec des 
 EMI16.3 
 cristaux d'acide 7-(alpha-thiénylacétamido)-5- yridinomethyl-3-cépheme-4-*oarboxylique et on procède   à   un refroidissement intense pendant une nuit. Le solide cristallisa obtenu ainsi est filtré, lavé deux fois avec des faibles volumes d'eau froide, puis avec un excès d'éther éthylique et   séché   sous vide. Le rendement est 
 EMI16.4 
 de 41 g en acide 7-(alpha-thiénylacétamido)-µ-pyridino-   méthyl-3-céphème-4-carboxylique,   sous la forme du sel interne. 

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  Analyse : 
Calculée C 54,92, H 4,12, N 10,11, S   15,43;   
Trouvé : C   54,65,   H   4,36,   N 10,06, S   14,31,   14,70 
Le produit a un spectre d'absorption infra-rouge et un spectre de résonance nucléaire   nagnétique   conforme à la structure attendue. Il présente un poids moléculaire apparent de 425 par titrage et un pK a de   3,2.   Son spectre d'absorption ultra-violette ppésente des maxima à 239 et 252 millimicrons avec des coefficients d'extinction moléculaire de 15. 160 et   13.950,.respectivement'.   Il présente une activité antibiotique de   1590,   unités de pénicilline G par milligramme dans un essai biologique par rapport aux 'staphylocoques sensibles à la   pénicilline.   



   Les composés préparés selon la présente invention      sont caractérisés par la résistance à l'action   réductrice   de la pénicinillase, par une toxicité minimale, par une activité élevée vis-à-vis d'un grand nombre d'agents pathogènes   Gram-positifs   et une activité inférieure mais efficace vis-à-vis de nombreux agents pathogènes Gram- négatifs et une action prolongée par injection intra- musculaire,   se.   prolongeant pendant 7 à 14 jours ou davantage. 

 <Desc/Clms Page number 18> 

 



   Les composés de la présente invention ont une efficacité élevée   vis-à-vis   de la souche Staphylococcus aureus résistante à la pénicilline, même en présence de sérum. Le tableau suivant indique les intervalles de concentrations inhibitrices minimales (CIM) des composés indiqués dans les exemples de-mise en oeuvre, aussi bien en présence qu'en l'absence.du sérum sanguin chez l'homme,   vis-à-vis   de quatre souches Isolées cliniques de S.

   Aureus résistantes à la pénicilline, mesurées par la technique du gradient sur plaque: 
CIM, u/cm3 
 EMI18.1 
 
<tb> Exemple <SEP> n  <SEP> En <SEP> l'absence <SEP> de <SEP> ' <SEP> En <SEP> présence <SEP> de
<tb> 
<tb> 
<tb> 
<tb> 
<tb> 
<tb> sérum, <SEP> sérum
<tb> 
 
 EMI18.2 
 l 0, 4 - z9 o,4 - o, g -0,3 -0,5 
 EMI18.3 
 
<tb> 2 <SEP> 0,4- <SEP> 0,9 <SEP> 1,0
<tb> 
 
 EMI18.4 
 3 0,5 - 2r .

   I,0 - 2,0 4 z . l, o - 1, 2 5 110 - 3 ¯ 1,0 - 23 
 EMI18.5 
 
<tb> 6 <SEP> 0,9 <SEP> - <SEP> 4,2 <SEP> 0,8 <SEP> 1,9
<tb> 
<tb> 7 <SEP> 0,5 <SEP> 0,4
<tb> 
<tb> 
<tb> 8 <SEP> 0,8 <SEP> - <SEP> 1,8 <SEP> -
<tb> 
<tb> 
<tb> 9 <SEP> 0,3 <SEP> - <SEP> 0,5 <SEP> '0,7 <SEP> - <SEP> 1,0
<tb> 
<tb> 
<tb> 10 <SEP> 0,4 <SEP> 0,3
<tb> 
 

 <Desc/Clms Page number 19> 

 
Les composés de la présente invention ont également une efficacité élevée vis-à-vis des strepto- coques hémolytiques, comme   le-démontrent   les résultats suivants, qui indiquent la dose efficace moyenne   (DE 50)   vis-à-vis de la souche bêta-hémolytique de Streptococcus 
0203 chez la souris, par administration par voie orale une heure après l'infection et de nouveau 4 heures plus tard :

   
 EMI19.1 
 
<tb> EXEMPLE <SEP> n  <SEP> DE <SEP> 50' <SEP> mg/kg, <SEP> x2
<tb> 
<tb> 1 <SEP> 1,05
<tb> 
<tb> 4 <SEP> 6.3
<tb> 
<tb> 5 <SEP> 12, <SEP> 4 <SEP> 
<tb> 
<tb> 6 <SEP> 1,8
<tb> 
<tb> 8 <SEP> 2,6
<tb> 
<tb> 9 <SEP> 2,6
<tb> 
<tb> 10 <SEP> 1,1
<tb> 
 
On observe également un degré élevé d'activité due aux composés de la présente invention vis-à-vis de nombreux agents pathogènes Gram-négatifs.

   Le tableau suivant indiquent les concentrations inhibitrices minimales des composés des exemples 1 à 9   vis-à-vis   d'un certain nombre d'organismes   Gram-négatifs,     mesurées par   la technique de gradient sur   'Plaque-  : 

 <Desc/Clms Page number 20> 

 
 EMI20.1 
 
<tb> Organisme <SEP> CIM, <SEP> mg/cm3
<tb> 
 
 EMI20.2 
 Exemple:

   1 2 @ 4 5 6 ," 8 
 EMI20.3 
 
<tb> Shigella <SEP> sonnei <SEP> 4 <SEP> 20 <SEP> 23 <SEP> 18 <SEP> 14 <SEP> 22 <SEP> 7 <SEP> 8 <SEP> 15
<tb> 
<tb> Shigella <SEP> N-9 <SEP> 3,6 <SEP> 19 <SEP> 23 <SEP> 15 <SEP> 16 <SEP> 18 <SEP> 13 <SEP> 43 <SEP> 44
<tb> 
<tb> E. <SEP> coli <SEP> N-10% <SEP> 5 <SEP> 25 <SEP> 49 <SEP> 23 <SEP> 16 <SEP> 21 <SEP> 5 <SEP> 8 <SEP> 15
<tb> 
<tb> E.

   <SEP> coli <SEP> N-26% <SEP> 4 <SEP> 19 <SEP> 25 <SEP> 19 <SEP> 15 <SEP> 18 <SEP> 6 <SEP> 7 <SEP> 15
<tb> Klebsiella <SEP> pneumoniae <SEP> 4 <SEP> 16 <SEP> 6 <SEP> 6 <SEP> 12 <SEP> 13 <SEP> 7 <SEP> 10 <SEP> 11
<tb> 
 
 EMI20.4 
 E, neumoniae K-lK 3 19 8 11 12 15 7 2 29 
 EMI20.5 
 
<tb> Aerobacter <SEP> aerogenes <SEP> 4 <SEP> 21 <SEP> 8 <SEP> 12 <SEP> 13 <SEP> 17 <SEP> 6 <SEP> 2 <SEP> 13
<tb> 
 % Souche isolée clinique 
Le composé de l'exemple 10 présente vis-à-vis 
 EMI20.6 
 d'une diversité de mïcro-organînmee les concentrations inhibitrices minimales suivantes: 
 EMI20.7 
 Organisme CIM, mg/cm3..

   CIM, m/cm3T 
 EMI20.8 
 
<tb> Aerobacter <SEP> aerogenes <SEP> 3,8
<tb> 
<tb> Shigella <SEP> sonnei <SEP> 3,8
<tb> 
<tb> Shigella <SEP> sp. <SEP> 5,6
<tb> 
<tb> Escherichia <SEP> coli <SEP> 2,4 <SEP> - <SEP> 2,8
<tb> 
 
 EMI20.9 
 Klebsiella pneumoniae 4,2 - 4,5 
 EMI20.10 
 
<tb> Bacillus <SEP> subtilis <SEP> 0,1
<tb> 
<tb> Sarcina <SEP> lutea <SEP> 0,1
<tb> 
<tb> Staphylococcus <SEP> albus <SEP> 0,1
<tb> 
<tb> Streptococcus <SEP> pyogencs <SEP> 0,0078
<tb>

Claims

REVENDICATIONS - 1.Composés antibiotiques de la série de la céphalospo- rine répondant à la formule : EMI21.1 es leurs sels avec des acides, notamment des acides pharmacenti- quement acceptables ; dans la formule ci-dessus R est un radical EMI21.2 alpha-thiényle, beta-thiénylp, alpha-furyle ou bèta-furyle; si et n sont égaux à 0 ou 1, et R1 est un radical cyano, carboxy, dar- EMI21.3 bamyle, N-méthyl-carbamyle, carbo(Cl-C4)alkoxy, hydroxy, ou (Cl-C4'alkanoYle, ledit radical étant relié au cycle pyridini en position 3 ou 4* 2. L'acide -(a-thiénylacéta.xido)-3-(4'-carbamylpyii- dinométhyh ) -3c eplième-4-.ca rboxyli que .

. 3, L'acide 7-(a-thiénylacétamido)-3-(3'-carbamylpyAi.- dinométhyl)-3-cephème-4-carboxylique.

4. L'acide '7-(a-fihiénylacétamido)-3-(t-cyanopyridlno méthyl)-3-cephème-4-carboxylique.

5. L'acide ?-(a-thiénylacétamido ).3-(lt..carboaéthoy- pyridino )-3-cephètae-4-carboxylique.

6. L'acide 7-(a-thiénylacêtamido)-3-pyridinométhyl3.. cephème-4-carboxylique.

7. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce du' elle comprend un excipient et au moins l'un des composée défi'nia suivant l'une quelconque des revendications précédentes* 8. Procédé pour préparer les composés antibiotidues EMI21.4 de la série de la céphalosporine uyant la formule générale swi- vante : <Desc/Clms Page number 22> EMI22.1 et leurs sels avec des acidésj notamment des acides pharmaceuti- quement acceptables ;

dans la formule ci-dessus R est un radical alpha-thiényle, bâta-thiényle, alpha-furyle ou bêta-furyle; m et n sont égaux à 0 ou 1, et R1 est un radical cyano, carboxy, carbamyle, N-méthyl-carbamyle, carbo(C1-C4)alkoxy, hydroxy, ou (C1-C4)alkanoyle, ledit radical étant relié au cycle pyridine en position 3 ou 4, caractérisé en ce qu'on chauffe un composé ayant la formule générale suivante , EMI22.2 pu l'un de ses sels solubles dans l'eau, dans laquelle formule R est défini comme spécifié ci-dessus, avec une pyridine substituée ayant la formule générale suivante EMI22.3 dans laquelle R1 et m sont définis comme spécifié ci-dessus, en présence d'eau. <Desc/Clms Page number 23>

9. Procédé suivant la revendication 8, peur préparer EMI23.1 l'acide ?-(alpha-thénylacétamido)-3-(ly -carbamulpyridinométhy.j- 3-oéphème-4-éarboxylique, caractérisé en ce qu'on chauffe un'b solution aqueuse du sel de sodium de l'acide 7L(alpha-thiényl.- acétamido)céphalospbranique et d'isonicotinamide.

10. Procédé suivant la revendication 8, pour préparer EMI23.2 l'acide 7-(alpha.-thÉénylacétamido)-3-(3'-carbamylpyridino- méthyl)-3-cephème-4-carboxylique, caractérisé en ce qu'on chauffe une solution aqueuse du sel de sodium de l'acide 7-(alpha-tbié- nylacétamido)céphalosporanique et de nicotinamide.

11. Procédé suivant la revendication 8, pour préparer EMI23.3 l'acide 7-(alpha-thiénylacétamido)-3-(4'-cyanopyridinométhyl)-3- cephëme-4-carboxylique, caractérisé en ce qu'on chauffe une so- lution aqueuse acidifiée du sel de sodium de l'acide 7(-alpha- thiénylacétamido)céphalosporanique et de 4-cyanopyridine.

12, Procédé suivant la revendication 8, pour préparer EMI23.4 l'acide 7-(alpha-thiénylacétamido)-5-(y'-carbométhoxypyridinv)- 3-céphëme-tr-carboxylique, caractérisé en ce qu'on chauffe un mélange aqueux du sel de sodium de l'acide 7-(alpha-thiényl- acétamido)céphalosporanique et d'isonicotinate de méthyle.

13. Procédé suivant la revendication 8, pour préparer EMI23.5 l'acide 7-lpha-thiénylacétan!ido)-3-pyridinoméhyl-3-cephèm<f- 4-carboxylique, caractérisé en ce qu'on chauffe une solution! aqueuse comprenant le sel de sodium de ltacide'7-(alphs-thidnyla- cétamido)-céphalosporanique et la pyridine.

14. Procédé pour préparer un sel non',,toxique d'un composé répondant à la formule : EMI23.6 <Desc/Clms Page number 24> EMI24.1 dans laquelle R est un radical alpha-tiényle, bèta-thïényle, alpha-furyle ou bta-furyle; et n sont égaux à 0 ou 1, et R1 est un radical cyano, carboxy carbamyle N-méthyl-carbamyle, EMI24.2 carbo(Cl-C4)alkoxy, hydroxy, ou (Cl-C4), alkanoyle ledit radical étant relié au cycle pyridine en position 3 ou 4, caractérisé en ce qu'on fait réagir ledit composé avec un acide pharmaceutique- ment acceptable.

15. Procédé pour préparer une composition antibiotique, caractérisé en ce qu'il consiste à mélanger un excipient pharma- ceutiquement acceptable avec au moins un composé répondant à la ' formule : EMI24.3 ou avec un sel non toxique de ce composé; dans la formule R est un radical alpha-thiényle, bêta-thiényle, alpha-furyle ou bêta- furyle; m et n sont égaux à 0 ou 1, et R1 est un radical cyano, carboxy, carbamyle, N-méthyl-carbamyle, carbo(C1-C4)alkoxy, EMI24.4 hydroxy, ou (Ci-c4)alkanoylei ledit radical étant relié au oyel. pyridine en position 3 ou 4.

16. Procédé pour préparer des composés antibiotiques de la série de la céphalosporine, tels que définis dans la reven- dication 1, tel que décrit ci-avant, en particulier dans l'un quelconque des exemples.