BE653244A

BE653244A -

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Publication number: BE653244A
Authority: BE
Priority date: 1964-09-18
Also published as: FR4782M; FR1506269A

Description

"Extraits peptidiques et procédé de préparation-

La présente invention est relative à des extrait* peptidiques de matières organiques, en particulier de foie de boeuf ou de caséine, ces extraits peptidiques ayant une action thérapeutique.

L'invention se rapporte également à un procédé de préparation particulier de tels extraits qui sont produits en soumettant la matière organique, telle que du foie de boeuf ou <EMI ID=1.1>

entre 7 et 8,

Les produits de l'hydrolyse sont ensuite isolés en étant soumis, de préférence, à une extraction, suivie d'une précipita... tion et d'une purification, l'extraction se faisant de préférence au phénol, tandis que la précipitation se fait à l'acétone et

la purification se réalise par passage sur alumine.

Les produits de l'invention sont donc doués de propriétés pharmacologiques,

Les peptides à action thérapeutique suivant l'invention sont caractérisés par les propriétés définies ci-après.

Ils peuvent être obtenus avec un rendement allant jusqu'à environ 10-20%, à partir des matières organiques les plus diverses. Ils sont pratiquement exempts d'amino-acides. A l'état pur, ils se présentent sous la forme d'une poudre légère, de coloration jaune pale. Le poids spécifique est variable; il est essentiellement fonction de la vitesse à laquelle la précipitation se fait à partir de l'acétone.

Des traces d'impuretés rendent le peptide excessivement hygroscopique; de même aussi longtemps que des solvants orga-

Une fois rigoureusement séché sous vide, il est bien résistant. La solubilité dans l'eau est pratiquement illimitée.

Il est insoluble dans les solvants organiques courants
(alcool, benzène, benzine, acétone, éther, trichloroéthylène).

Exposé pendant de longues périodes à la lumière du jour, la poudre s'assombrit. La solubilité n'en est pas modifiée. Des solutions à 10% conservées dans un réfrigérateur sont stables pendant de longues périodes, La détermination du point de fusion suivant Kofler donne

Dans une préparation d'oreille de lapin, aucune modification des vaisseaux n'est observée après l'addition de peptide.

Les peptides n'ont aucun effet sur l'intestin isolé de

acétylcholine).

Ils n'ont aucun effet sur l'utérus isolé de rats et de cobayes.

Ils n'influencent pas la pression sanguine du lapin
(testé jusqu'à 50 mg/ml).

La fréquence et le rythme respiratoires du lapin ne Sont pas influencés par les peptides.

Sur des lapins, avec un apport in vitro, une quantité

jection lente, 2,0 gr/kg. Avec une injection rapide, il se présente à partir de 1,0 gr/kg in vitro des frissons violents, qui disparaissent cependant relativement rapidement. Avec un prélèvement sanguin simultané, sous une injection lente, 2,5 gr/kg

administrés 5 fois par jour in vitro à intervalles de 90 minutes, sont bien supportés par des bêtes de 2,5 kg,

Les peptides n'ont une action ni d'accélération ni de ralentissement sur la coagulation sanguine. Ils ne produisent aucune fièvre.

Les peptides, quatre heures après un apport in vitro, ne peuvent plus être décèles dans le sang. On ne constate aucun reste N et aucune variation de la teneur en albumine dans le sang,

Dans l'urine, on ne rencontre aucune augmentation de

l'urine augmente de 26%. La teneur en urée dans l'urine augmente alors pratiquement de 20%. La teneur en kératine dans l'urine ne subit aucune variation significative.

Découvertes thérapeutiques -

Les découvertes sont basées sur des recherches réalisées pendant des années, pour compléter la thérapeutique antibactérienne utilisée en général dans les maladies infectieuses et la combiner avec une forme de thérapeutique visant les macro-organismes.

Après de longues recherches préalables, les peptides et composés du genre peptide destinés à ce but, que l'on peut obtenir à partir des matières organiques les plus diverses, se sont révélés appropriés. On a utilisé dans ce but surtout des organes d'animaux, des bactéries et des plantes. L'obtention de ces peptides s'est faite toujours suivant le même procédé, qui conduit, suivant la matière première,à un rendement de 10 à 20%

La thérapeutique expérimentale a été appliquée sur des lapins et en fait avec une infection tuberculeuse artificielle qui a tué les sujets de référence environ 140 jours après l'infection. Le traitement s'est fait avec une dose de INH inférieure à la limite (2 mg/kg) et avec 15 et 50 mg de peptide par kg. Les temps de survie du groupe traité combiné étaient nettement prolongés par rapport aux groupes traités uniquement à l'INH. Le résultat du traitement a été contrôlé aussi bien par le temps de survie que par les rayons X pendant le traitement. Des essais sur des êtres humains ont été réalisés et se sont révélés tout aussi satisfai-gants que sur les animaux*

L'invention est encore Illustrée par les exemples

Exemple 1

On met en suspension 1.000 gr de caséine dans 4 1 d'eau, et le pH est ajusté à 7 - 8 par une solution diluée de

de trypsine et on maintient la température à 37* pendant 20 heu-

est concentré sous vide jusqu'à obtention d'une solution contenant 60 à 70% de matière, puis dilué par un égal volume d'eau.

On y ajoute, par litre, 38 gr de sulfate ammonique, et on sépare le précipité formé. A cinq litres du filtrat, on ajoute un litre

écarte la couche aqueuse. La couche phénolique est ensuite lavée jusqu'à disparition des ions chlore. Dans un litre d'acétone, on verse 100 ml de cette solution sous agitation très forte* Le précipité est filtré, lavé à l'acétone, séché à l'air et broyé, Une solution de la poudre obtenue, dans de l'eau, à une concentration de 100 gr pour 1.600 ml, est filtrée à chaud et passée

aqueux) et précipité à nouveau dans l'acétone. On obtient de cette façon un mélange de peptides contenant en moyenne 13,3% d'azote.

Exemple 2

que diluée. Après réchauffage à 80[deg.], la suspension est filtrée ou centrifugée et la partie liquida est concentrée tous vide

Les opérations suivantes sont identiques à celles reprises dans l'exemple 1, On obtient dans ce cas un produit qui, soumis à l'analyse, se comporte comme un peptide unique, sans groupes

isotonique.

Les extraits peptidiques selon l'invention conviennent particulièrement bien à l'utilisation en thérapeutique humaine et vétérinaire. Ils sont intéressants notamment dans le traitement des maladie? infectieuses, et tout particulièrement comme adjuvants dans le traitement de la tuberculose, bien que les extraits peptidiques ainsi obtenus soient dépourvus par eux-mêmes de toute acti'vite anti-bactérienne.

Il sera entendu que les exemples de préparation donnés ci-dessus ne sont qu'illustratifs car d'autres réactifs et phases de réaction pourraient être prévus, notamment suivant les matières organiques particulières utilisées.

Claims

<EMI ID=21.1>

3, Procédé de préparation suivant les revendications

<EMI ID=22.1>

et d'une purification.

<EMI ID=23.1>

caractérisé en ce que les produits de l'hydrolyse sont extraits au phénol, précipités à l'acétone et purifiés par passage sur alumine.

5. Les extraits peptidiques, à action thérapeutique,

<EMI ID=24.1>

seine,:notamment les extraits peptidiques obtenus par applicationdu procédé suivant l'une quelconque des revendications précédentes.

6. Utilisation des extraits peptidiques en thérapeuti-

<EMI ID=25.1>

dies infectieuses, et tout particulièrement comme adjuvants dans le traitement de la tuberculose, bien que ces extraits peptidiques

<EMI ID=26.1>