BE723548A

BE723548A -

Info

Publication number: BE723548A
Authority: BE
Priority date: 1968-11-07
Filing date: 1968-11-07
Publication date: 1969-05-07

Description


   <Desc/Clms Page number 1> 
 



  Procédé de préparation de complexes de   dextrarie.   



   La présente invention concerne un nouvel hydrate de   carbone)de   même que sa préparation et son utilisation. 



   On sait qu'on peut utiliser les complexes d'hydroxy- de ferrique et d'hydrate de carbone pour le traitement de l'a- némie par carence de fer. Ainsi,, il   s'est     révèle   qu'un complexe   d'hydroxyde   ferrique et de   dextrane   en solution aqueuse se prête particulièrement bien   au   traitement de l'anémie par carence en fer lorsqu'il est administré par voie intramusculaire ou intra- veineuse. 



   On a découvert également qu'un nouveau   dextrane   mo- difié ou dérivé de dextrane est spécialement utile pour la pré- 

 <Desc/Clms Page number 2> 

 paration de complexes contenant de l'hydroxyde ferrique. 



   Le dextrane est un glucose polymérisé dans lequel des unités d'anhydroglucose sont unies de manière prépondérante par des liaisons a - 1:6. Ces chaînes d'unités d'anhydroglucose peuvent porter un petit nombre de ramifications d'unités   d'anhy- .   droglucose unios à la chaîne par des liaisons   a-1:4   ou a - 1:3. 



  Ainsi, le dextrane linéaire (c'est-à-dire le dextrane dont tou- tes les unités d'anhydroglucose sont unies par des liaisons a - 1:6) répond à la formule: 
Gl - 6G1 - (6G1)n - 6G1 - 6G* où G représente une unité   d'anhydroglucose   et G* une unité d'anhy-   droglucose   réductrice terminale.. 



   Si le   dextrane   est non linéaire   (c'est-à-dire   s'il' contient une certaine proportion de ramifications en a - 1:4 ou a - 1:3), les ramifications sont unies à la chaîne comme indiqué ci-après: 
 EMI2.1 
 
On a découvert à présent que le dextrane peut être mo-   diflé   par un traitement à   l'aide   d'un alcali pour donner un nou- veau dérivé de dextrane. Dans les nouveaux dextranes faisant l'objet de l'invention, les chaînes polymères comprennent au moins une unité terminale de formule., 
 EMI2.2 
 

 <Desc/Clms Page number 3> 

 L'invention a donc pour objet un derivé de dextrano 
 EMI3.1 
 dont les chaînes polyneres comprennent au moins une unité tormi- nale des formules 1 ou II ci-dessus. 



  L'invention a 6calcmcnt pour objet des sels do ces dé- rives de dextrane et des complexes de ces dérivés ou de leurs sels. 



  Il convient de noter que les dérives faisant l'objet de l'inven- 
 EMI3.2 
 tion se lactonisent facilement et que invention a donc 6ga-   lement   pour objet les lactones des dérivés en question et les complexes formés à partir de ces lactones. 



   Le fait que   l'un   ou   1-'autre   dérivé de dextrane par-   ticulier   a la structure ci-dessus peut être établi facilement par dégradation de la molécule en ses unîtes constitutives par   uns   hydrolyse acide, puis détermination de la nature des unités. Par exemple, on peut faire passer le produit hydro- lyse sur une   résine   échangeuse d'anions propre à retenir les fractions acides éventuelles, puis on peut recueillir la frac- 
 EMI3.3 
 tion retenue et on peut confirerJ'elle r6pond en fait à la for- mule ci-dessus en comparant son point de fusion avec celui d'ttn échantillon authentique d'acide laéta-saccharinique ou de la lacto- ne correspondante. L'identité de l'unité terminale peut être mise également en évidence par chromatoGraphie.

   Un essai de routine typique pour une telle dëteraination est le suivant. 



  On hydrolyse d'abord un échantillon dans de   1-'acide   sulfurique   dilué,   puis on neutralise le mélange de réaction avec du carbo- nate de baryum On élimina par filtration le sulfate de baryum précipite, puis on fait passer le filtrat sur une résine échan- 
 EMI3.4 
 geuse dénions COn!11e une de cellulose Dette.

   On due alors cette colonne à 1''acide acétique et on ùcincent.rc 1-'éî.<.ixt puis on   recueille la     matière dissoute.   On peut   identifie?   le 
 EMI3.5 
 aloes cotise étant de :.'acide rie- ou sa lL±tcne par dC'lermini"iLO11. classique dà poi:115 de ih15ifJfii O* t-%97 shro:M. !.cse?hië Les nouveaux dérivas de iie#:zz-ii=i<; do 11",1:n.Jx,n"uic>ix peu- 

 <Desc/Clms Page number 4> 

 vent être préparas à partir du dextrane proprement dit et en 
 EMI4.1 
 particulier à partir d'un dextrano partiellement dépolyrnér1sé de bas poids moléculaire par traitement de ce dextrane à l'aida d'un alcali, comiie un hydroxydc ou un carbone d'é1m.r;on1t11 ou de métal alcalin, qui est de préférence l'hydroxyde de sodium. 



  Comne indiqué cl--dessus3 il est préférable de partir d'un dextrane de bas poids   moléculaire.   Dans ce cas, le dex- trane a   avantageusement   un poids moléculaire moyen en masse de 500 à 50.000 et de préférence de 1000 à 10.000. Le dextrane     de   bas poids   moléculaire peut   être prépare à partir de dextrane naturel, obtenu lui-même par fermentation réglée du saccharose 
 EMI4.2 
 par Lj3U¯con¯o,so me3ImterQ.J ou bien par hydrolyse du dex-      trane naturel et fractionnement du produit hydrolysé. 



   Le traitement du dextrane au moyen de l'alcali peut être exécuté à une température élevée, par exemple de   40   à 80 C. Suivant un procédé préférer le traitement est exé- cuté par chauffage   d'une   solution alcaline du dextrane ayant 
 EMI4.3 
 un pH de 8 ou davantage et addition de suppl--',i,,ients d-1 alcali au cours du chauffage jusque ce que la solution ne consomme sen- siblement plus   d'alcali.   



   Le dérive de   dextrmie   peut être séparé du mélange 
 EMI4.4 
 de r6action,pa:r exemple par précipitation à l'aide d-'un solvant. 



  Des solvants de précipitation appropriés sont les alcool? in1'éiiew.s, com:110 le zé.thanol¯, 1>él:li>qol <Ju l''isopro" panol et des cétones comme P Ile:Ùt.OTl0 ou la NOthylethylséMne En "Jz,riante, on peut sou;nettre le de réaction à une dialyse contre do 1.> e-xu pour éliminer :Los composés de bas poids moléculaire et composes Lno,g1Liii,ques du dérivé de de,%-- -I;rane qu'en peut alors précipiter comixe ci--dessus si nécessaire. 



  Il set à'iaabitmi-ie préférable de neutralise::,' 2cv-entuei ,:.' :1.1cal au moyen d-'un aeid-3 avant de séparer le dérivé de J<i:<L#'i.n<# é<: sélange d'e rëactiion. 

 <Desc/Clms Page number 5> 

 



   Si on désire   obtenir   un produit plus pur, on peut répéter un ou plusieurs des   procèdes   ci-dessus. En   variante.,   on peut   éliminer   les composés polymères non acides en faisait passer une solution du dérivé de dextrane   dans   une colonne   'une   résine échangeuse d'anions qui retient la fraction recherchée et laisse passer la fraction neutre. On peut alors obtenir le dextrane purifié recherche en éluant la colonne au moyen d'une solution   saline,   par exemple d'acétate de potassium. 



   Le produit obtenu par le   procède   ci-dessus contient d'habitude un sel du nouveau dérivé de   dextrane   de   1-'invention.   



   Le dérivé libre peut   s'obtenir   par acidification du sel. Lors- qu'on désire obtenir des sels autres que ceux qui ont été pro- duits on peut les préparer par neutralisation du dériva de dextrane libre au moyen d'une base convenable,par exemple au moyen d'un hydroxyde ou carbonate de métal alcalin) de métal alcalino-terreux ou d'ammonium, 
Comme indiqué ci-dessus, les dérivés de dextrane faisant l'objet de l'invention et leurs sels forment des comple- xes avec de nombreux métaux.   Toutefois,   les dérivés et leurs sels et spécialement ceux préparés à partir de dextranode bas poids moléculaire se prêtent particulièrement à la préparation de complexes avec l'hydroxyde ferrique.

   L'invention a également pour objet par conséquent des complexes d'hydroxyde ferrique avec les dérivés de dextrane de l'invention ou avec les sels de ces dérivés. 



   Les complexes faisant l'objet de l'invention peuvent s'obtenir par réaction du dérivé de dextrane ou de son sel avec de l'hydroxyde ferrique, de préférence   colloïdale qui   peut avoir été formé en tout ou partie in situ en présence du dérivé de   àextrane.   En variante, l'hydroxyde ferrique peut avoir été forme au préalable, comme dans le cas de l'hydroxyde ferrique dialysé.   L'hydroxyde   ferrique colloïdal est préparé générale- 

 <Desc/Clms Page number 6> 

 ment par une doubla décomposition entre un sel ferrique et un alcali.

   Des sels ferriques appropries sont notamment le chlo-   rure     ferrique,   le nitrate ferrique, le perchlorate ferrique, le trichloroacétate ferrique, l'acétate ferrique et ammonique, le citrate ferrique, le citrate ferrique et ammonique et di- vers oxy sels ferriques. Des alcalis   appropries   sont l'hydroxyde de sodium, le carbonate de sodium,,   l'hydroxyde   de potassium, le carbonate de potassium,   l'hydroxyde   d'ammonium, le carbonate d'ammonium, etc. 



   Dans un procédé préfère pour complexer le dérivé de dextrane avec   l'hydroxyde   ferrique, on forme   l'hydroxyde   ferrique   colloïdal   partiellement au préalable par neutralisa- tion partielle lente d'un sel ferrique au moyen d'un alcali, avant la réaction avec le dérivé de dextrane, et   on achevé   la neutralisation en présence du dérivé de dextrane. 



   Lorsqu'on prépare le complexe en formant partielle- ment ou complètement l'hydroxyde ferrique in situ en présence du dérivé de dextrane, la solution aqueuse résultante du com- plexe contient aussi le sel formé par   Iranien   du sel ferrique et le cation de l'alcali. On peut débarrasser le complexe de cette impureté, soit en soumettant la solution à une dialyse contre de l'eau courante, soit en précipitant le complexe par addition   d'un   non-solvant hydroxmiscible convenable pour le com- plexe, comme l'alcool méthylique ou   éthylique,et   en redissolvant ensuite le complexe dans de   l'eau   distillée . Il convient de noter que cette purification est analogue à celle réalisée lors- que le dérivé de dextran.e est isolé du mélange de réaction dans lequel il est formé.

   Il n'est donc pas nécessaire   d'iso-   ler le dérivé do extrane de son mélange de réaction et on peut utiliser le mélange de réaction comme produit de   départ   pour la préparation des complexes avec le dérivé de dextrane. 



   Comme on 1'a indiqué ci-dessus, les complexes d'hy- 

 <Desc/Clms Page number 7> 

 
 EMI7.1 
 droxyùe forrlque et de dextrane faisant 1''objet do l'invention conviennent   spécialement   pour le traitement de l'anémie par carence de fer. L'invention a donc également pour objet une 
 EMI7.2 
 composition pharocaccutique qui comprend un tel complexe. 



   Lorsque les dérivés de dexrtrane de l'invention sont utilisés pour la préparation des complexes de fer et de dex- trane à   administrer   par voie parentérale, la solution des cois- plexes peut requérir un traitement mineur   supplémentaire   la rendant plus appropriée à une telle fin.   Ainsi,   il peut être nécessaire d'ajouter dos quantités appropriéesdo composas tels que le glucose et le   chlorure   de sodium pour rendre ces solutions sensiblement isotoniques.

   Il peut être nécessaire 
 EMI7.3 
 aussi d''ajuster le pIi des solutions du complexe de fer et de dextrane au moyen d'un acide ou d'un alcali pour qu'il tombe dans 1-"intervzille de 5,5 à à et de préferûncc de 5,5 à po et de soumettre les solutions encore à un chauffage à. une item- pérature élevé, par exemple de 50 à 1300C et de pr6fdrence de 90 à 120 C., Avantaeuscn1entJ! ce chauffage supplémentaire peut avoir lieu pendant le passage du produit à l'autoclave. 



   On a découvert qu'il est possible d'obtenir des solutions   concentrons   stables des   complexes ce   fer préparés à partir des dérivés de dextrane de   l'invention.   On a ainsi pu   atteindre   une DL50   i.v.   de plus de 2000   mg/kg   chez la souris. 



  Ces complexes sont stables au stockage et à la stérilisation à 
 EMI7.4 
 l'autoclave, qul est le procédé courant de stérilisation d'un produit de ce genre, bien que les produits puissent évidúmment être stérilises autrement, par exemple par 1â..ltr..''s.C3np L'invention est davantage illustrée,sans être limitée,par 1>exe;;p?e suivant ,d;;"1S lequel toutes les parties sont en poids et les  symboles   M etM   représentent   la normalité et la   polarité   des   solutions,respectivement.   



  EXEMPLE- 
 EMI7.5 
 On. dissout 300 parties de dextrane de bas poids 

 <Desc/Clms Page number 8> 

   moléculaire   (poids moléculaire moyen en masse de 5000) dans de l'eau pour obtenir une solution à 22,2%   poids/volume   de dextrane. 
 EMI8.1 
 On ajoute à cette solution une solution dhydroxydo de sodium      ION pour obtenir une solution IN en alcali, après quoi on chauffe 
 EMI8.2 
 le mélange à 60 C. On ajoute des suppléments d'hydro,yc3e de so- dium ION pour maintenir la solution IN en alcali et on maintient la température à 60 C jusqu'àla fin de la   consommation   de l'hydro- xyde de   sodium.   



   On soumet le mélange de dégradation alcalin à la dialyse contre de   1? eau   courante pendant 16 heures,au terne des- quelles le pH de la solution est   tombé à   environ   8.Par     addition   
 EMI8.3 
 déthanol, on précipite alors de la solution lo dextrane traité à   l'alcali   brut, 
On dissout 200 partiesdu   dextrane   précipité dans   700   volumes d'eau et on fait descendre la solution dans une coloune 
 EMI8.4 
 (50 cm x 10 ça) de cellulose 3s E le prépayée sous forme .ta#' te par des lavages excessifs avec de l' <1i"':.ate de potaius,,i>1 0, M et de 1.1 eau.

   On 1.aif<e alors la '.:iln t' .4 k?Tâ,', .',,.I1 CR7.'  f 1.'eau Jusqu-"à ce que l ' Ili.1 âU.'. ,?;'!i': a'1'C,i'x'ì.i::'. d,C carbon comme on peut 1''établir par I:42:.zi13'¯- . avoir 'otatoi:(,"1) de l élua1; Le produit obtenu par (:;:";::<' fi l'eau est le doc; .:"0 3¯nclalA On Ó2,}," ".d,'3 la colonne au moyen, c.'acétate de po-> t, 'islu1:1 10 H ;7  - ,   f;Ln de 1'.u;.I de 1'Ysyclxav<o de carbone. 



  Un 1,;..<le le ' J:(; de dextrane (sous la .forme de son sel de po- t.s-iu) ' "'éluat en le précipitant au moyen d'éthanol aqueux, . ce qui' ..:.l'::l('t do .f':cuei1.l1r environ 80% du dextranc dégrade en "I..1 -i alcalin Je départ., On utilise alors ce produit pour préparer le coaplexp ..<. îdi' et de 1;é>it.m;c cu;1,.0 décrit C: -n.7,p's '.-..' On ajoute crie solution u-ù carbonate de soùiua (120 volumep :

   vs 9 i;..rbc" solution à jjjj 'OOG . 5,''C.L?:c? en heures à *'"1" .:'oLuti3n a;;itc& 1 interruption de chlorure ferrique 

 <Desc/Clms Page number 9> 

 (50,4   parties)   dans   de   l'eau (159   volumes).   On   maintient   la température du mélange à 30 C de manière   constante.   Au   terme   de l'addition, le pH de la   solution   est de 1,55. On ajoute alors une solution aqueuse du dériva de   dextrane   préparé comme ci- dessus   (104   volumes d'une solution à   20,5%     poids/volume)   de ma-   nière   analogue en 1 heure et 30 minutes.

   On ajoute ensuite une solution de carbonate de sodium (75 volumes d'une solution à 16%) pour amener le pH de la solution finale à 4,3 
On précipite le complexe de fer et de dextrane par addition   d'éthanol     (1000   volumes) et on recueille le préci-   pite   par centrifugation. Après   lavage à   'trois reprises au moyen d'éthanol à 60%, on dissout le précipite dans de l'eau distillée   (500   volumes) et on ajuste le pH à 6,0 par addition d'une solution d'hydroxyde de sodium (12 volumes d'une solution à 10%). On chauffe la solution à 90 C pendant 2 heures en main- tenant le pH à 5,9-6,0 par addition de suppléments d'alcali. 



   On concentre la solution sous vide à   45 C   jusqu'à 100 volumes,puis on la filtre et on la passe à l'autoclave pen- dant 30 minutes. 



   Le produit final a un pH de 6,1. Sa teneur en fer est de   15,4%   et sa teneur totale en solides est de   46,2%.   La DL50 chez la souris n'est pas inférieure à 2500 mg de Fe/kg. 



   Le produit injecte par voie intramusculaire dans la patte arrière   d'un   lapin en une dose de 40 mg de Fe/kg. laisse subsister moins de 20% du fer au lieu de l'injection après 7 jours,

Claims

R E V F N D I C A T I 0 N S, 1 - Dérive de dextrane, caractérisé en ce que ses chaï- nes polymères comprennent au moins une unité terminale de formule: EMI10.1 ou sel ou lactone de ce dérivé de dextrane, ou bien complexe du dérivée du sel ou de la lactone.

2 - Dérivé d'un dextrane, sel ou lactone de ce dérivé ou bien complexe du dérivé de dextrane, du sel ou de la lactone suivant la revendication 1, caractérisé en ce que le dextrane dont il provient a un poids moléculaire moyen en masse de 500 à 50.000.

3 - Complexe suivant la revendication 1 ou 2, ca- ractérisé en ce qu'il est un complexe avec l'hydroxyde ferri- que.

4- Procédé de préparation d'un sel d'un dérivé de dextrane suivant la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce qu'on traite du dextrane par un alcali.

5- Procédé suivant la revendication 4, caractérisé en ce qu'on exécute le traitement à une température élevée.

6 - Procédé suivant la revenaication 5, caractérisé en ce que la température est de 40 à 80 C.

7 - Procédé suivant l'une quelconque des revendica- tions 4 à 6, caractérisé en ce qu'on exécute le traitement par chauffage d'une solution alcaline de dextrane ayant un pH d'au moins 8, 8 - Procédé suivant l'une quelconque des revendica- tions 4 à 7, caractérisé en ce qu'on poursuit l'ddition de l'al- <Desc/Clms Page number 11> EMI11.1 caü au dextrane jusqu'à ce que la consomssation de l'alcali soit sensiblement achevée.

9 - Procédé suivent l'une quelconque des revendications 4 à 8, caractérisé en ce qu'on répare ensuite le dérivé de dex- trane recherché du mélange ae réaction.

10 - Procédé suivant la revendication 8, caractérisé en ce qu'on exécute la séparation par précipitation à l'aide d'un solvant.

11 - Procédé suivant la revendication 9, caractérisé en ce qu'on purifie le dérivé de dextrane, ou bien le sel ou la lactone de ce dérivé en faisant passer une solution de ce dérivé, ou bien du sel ou de la lactone sur une résine échangeuse d'anions.

12 - Procédé suivant l'une quelconque des revendica- tions 4. à 11, caractérisé en ce qu'on libère le dérivé de dextrane ou sa lactone du sel du dérivé.

13 - Procédé de traitement alcalin du dextrane, en substance comme décrit ci-dessus.

14 - Dérivé de dextrane ou sel ou lactone du dériva du dextrane obtenu par un procédé suivant l'Orne quelconque des revendications 4 à 13.

15 - Procédé de préparation d'un complexe d'hydroxyde EMI11.2 ferrique et de dextrane,, caractérisé en ce queen fait r'<mi.::1L:r un dérivé de de#trane ou une lactone oa un1 se], de ce détiré sx11- vant l'une quelconque des revE-.nclicl1D.1tI@1IJ),$ 1., 2 et 14 avec de 1-*hy- dioxyde ferrique colloïdal à une ta:Jl!D'r.m1t:wl"e élevée.

16 - Procédé suivant la rew'l/Dlüc1t.i# 3Lr, cUQIct.tf:rj!,:;,# en ce qu'au -.oins une fraction de 1"h,.i11i2rotiIle ferrite c@Uc!cf1111J1. a été fornée au préalable par neu:tral1sati@!I'JI. partielle lente d'une solution d'un sel ferrique à l'aide d'i±x alesli, ]La n<a- traJ.1satlon étant achevée en présence du dérivé tie detrne.

17 - Procédé suiVEnt la revcRication 15, caractérisé <Desc/Clms Page number 12> en ce que l'hydroxyde ferrique est formé in situ.

18 - Procédé suivant la revendication 15, caractérisa en ce que la réaction est exécutée à une température de 50 à 130 C.

19 - Procédé de préparation d'un complexe d'hydroxyde ferrique et de dextrane, en substance comme décrit dans l'exemple. ci-dessus.

20 - Complexe d'hydroxyde ferrique et de dextrane obtenu par un procède suivant l'une quelconque des revendications ' 15 à 19.

21 - Composition pharmaceutique, caractériser en ce qu'elle comprend une solution d'un complexe suivant l'une quelcon-- que des revendications 1, 3 et 20.