BE903673Q

BE903673Q - Nucleosides de types 1,2,4-triazole, leur preparation et leur utilisation

Info

Publication number: BE903673Q
Application number: BE0/215889A
Authority: BE
Original assignee: Vira Tek Inc
Priority date: 1977-03-28
Filing date: 1985-11-19
Publication date: 1986-05-20

Abstract

Agents antiviraux et leurs intermédiaires, les 1-(beta-D-glycosyl)-1,2,4-triazoles 3-substitués, leurs analogues O-acylés ainsi que les 5'-et 3',5'-phosphates cyliques des nucléosides de triazole, le groupe glycosyle représentant un groupe ribofurannosyle, le triazole aglycone étant substitué en position 3 par un groupe cyano, carboxylate de méthyle, carboxamidoxime, carboxamido, thiocarboxamido ou carboxamidine, ainsi que la préparation de ces composés.

Description


  "Nucléosides de type 1,2,4-triazole, leur préparation et leur utilisation"' "Nucléosides de type 1,2,4-triazole, leur préparation et leur utilisation. 

  
La présente invention est relative à des nucléosides de type 1,2,4-triazole, à leur préparation ainsi qu'à leur utilisation.

  
Actuellement, les deux seuls nucléosides connus comme étant des agents antibiotiques ayant des noyaux hétérocycliques pentagonaux sont la showdomycine et la pyrazomycine, auxquelles on a respectivement attribué les structures (1) et (2) :

  

 <EMI ID=1.1> 


  
Parmi les nucléosides actuellement connus comme  étant des agents antiviraux de synthèse, les plus importants sont

  
 <EMI ID=2.1> 

  
agents, seule la 5-IDU (en solution à 0,1% en poids) est disponible à l'échelle commerciale en particulier comme agent antiviral, ce composé présentant l'inconvénient d'une faible solubilité et d'une toxicité élevée, d'où en résulte la dissolution excessivement élevée sous laquelle on l'utilise actuellement.

  
Alsonso et coll. dans J. Heterocyclic Chem. 7,

  
 <EMI ID=3.1> 

  
Nucleosides Related to Uridine, 2-Deoxyuridine,Thymidine and Cytidine",J. Org. Chem. 35, 2635-41 (1970), Witkowski et Robins suggèrent que divers analogues de nucléosides de 1,2,4-triazole sont candidats à des essais biologiques, mais aucune difficulté particulière n'est notée et les essais ultérieurs effectués par la demanderesse ont montré que, parmi les composés analogues rapportés dans l'article précité,

  
 <EMI ID=4.1> 

  
triazole montre une légère activité antivirale, et l'on pense même que cette activité doit être attribuée, tout simplement, à la cytotoxicité du composé.

  
Suivant la présente invention, on prévoit des composés de formule :

  

 <EMI ID=5.1> 


  
 <EMI ID=6.1> 

  
sentant un groupe cyano, carboxamido, thiocarboxamido, méthylcarboxylate, carboxamidine ou un sel d'addition d'acide physiologiquement acceptable de ce dernier groupe. L'invention englobe également les analogues O-acylés des composés précités et leurs 5'-phosphates et 3', 5'-phosphates cycliques, ainsi que les sels d'ammonium et les sels de métaux alcalins des phosphates. Des formes de réalisation préférées sont des composés de la structure :

  

 <EMI ID=7.1> 


  
dans laquelle R. est tel que défini précédemment et R2 représente de l'hydrogène, R-. représentant un radical hydroxyle, ainsi que leurs 5'-phosphates et leurs 3',5'-phosphates cycliques. Les composés suivant la présente invention montrent une activité antivirale et, sous la forme des composés non acylés ou "débloqués", ils montrent une solubilité dans l'eau sensiblement plus grande que les nucléosides antérieurement

  
 <EMI ID=8.1> 

  
le-3-carboxamide, qui est le nucléoside préféré suivant l'invention, présente un large spectre d'activité antivirale ainsi que, chez les animaux de laboratoire, une activité antitumorale.

  
Le 1,2,4-triazole-3-carboxylate de méthyle et le 3-cyano-l,2,4-triazole sont des précurseurs dans les diverses voies

  
 <EMI ID=9.1> 

  
l'invention. On peut préparer de façon classique le carboxylate précité par oxydation du 3-méthyl-l,2,4-triazole, puis par estérification de l'acide résultant suivant le procédé de Cipens et de Grinsteins, Latvijas PSR Zinatnu Akad. Vestis., Kim. Ser. (1965) (2)204-08 (voir C.A.63,13243, 1965). On prépare le 3-cyano-l,2,4-triazole par une synthèse à plusieurs stades rapportée par Cipens et coll., supra, ou d'une manière plus appropriée, par la réaction d'addition de cyanogène et d'hydrazine pour former l'hydrazide d'acide 1-cyanoformimidique, que l'on fait suivre par la fermeture du cycle, catalysée par un acide dans de l'orthoformiate de triéthyle, pour obtenir le composé 3-cyano.

   Suivant une voie, on forme avec un rendement quantitatif le dérivé triméthylsilylé du 1,2,4-triazole-3-carboxylate de méthyle par la réaction au reflux avec de l'hexaméthyldisilazane, dérivé triméthylsilylé que l'on fait réagir avec un sucre halogéné O-acylé approprié GX pour former, par exemple, un mélange d'ester méthylique d'acide

  
 <EMI ID=10.1> 

  
que d'acide 5-carboxylique O-benzoylés, c'est-à-dire :

  

 <EMI ID=11.1> 
 

  
 <EMI ID=12.1> 

  
l'ester méthylique d'acide 3-carboxylique par cristallisation fractionnée ou, de préférence, par chromatographie sur colonne sur du gel de

  
 <EMI ID=13.1> 

  
nosyl)-1,2,4-triazole-3-carboxamide.

  
Le procédé préféré de synthèse est la fusion, catalysée par un acide, d'un triazole substitué de façon appropriée avec le

  
 <EMI ID=14.1> 

  

 <EMI ID=15.1> 


  
Suivant une variante, on peut effectuer la fusion à l'aide du 3-cyano-1,2,4-triazole et transformer ensuite le 3-cyano-1-

  
 <EMI ID=16.1> 

  
do nucléoside actif par la réaction avec du peroxyde d'hydrogène en présence d'ammoniac aqueux, mais l'on obtient des rendements moindres que dans le cas où l'on effectue une fusion avec le 1,2,4-triazole-3-carboxylate de méthyle.

  
 <EMI ID=17.1> 

  
syl)-1,2,4-triazole, qu'il soit obtenu par le processus de silylation ou de fusion, est un composé intermédiaire intéressant pour la forma-

  
 <EMI ID=18.1> 

  
1,2,4-triazole avec de l'hydrogène sulfuré en présence de triéthylamine, cette opération étant suivie d'une désacylation, lorsque l'on utilise le nucléoside bloqué comme intermédiaire. D'une façon similaire, on peut préparer les 1,2,4-triazole-3-carboxamidines nucléosidiques en partant du 3-cyano-l,2,4-triazole nucléoside, avec ou sans formation intermédiaire de l'analogue de 3-carboxamidoxime, c'est-à-dire :

  

 <EMI ID=19.1> 


  
où G est un fragment glycosyle tel que défini ci-dessus. On obtient, par la synthèse utilisant la carboxamidoxime comme intermédiaire, la carboxamidine sous forme libre. A l'inverse, la préparation préférée, directement à partir du composé 3-cyano en présence de chlorure d'ammonium, donne la carboxamidine, sous la forme de son chlorhydrate, d'autres sels d'addition d'acide physiologiquement acceptables (par exemple les sels d'addition d'acide bromhydrique, hydroiodique, citrique, acétique, sulfurique, phosphorique) pouvant être obtenus à partir de ce sel par échange d'ions ou bien par neutralisation du sel d'acide chlorhydrique à l'aide de bicarbonate de sodium, et par la réaction ultérieure de la carboxamidine libre résultante avec un acide approprié.

  
On peut convertir les nucléosides du type 3-carboxamido, 3-thiocarboxamido et 3-carboxamidine de l'invention en 5'-phosphates ou en sels d'ammonium ou de métaux alcalins correspondants du phosphate, et les administrer sous cette forme. D'une façon similaire, on peut former les 5'-phosphates des 3-carboxylates de méthyle, des composés 3-cyano et des 3-carboxamidoximes intermédiaires de l'invention avant les opérations sur la position 3 du triazole aglycone menant à la formation des nucléotides actifs. Les spécialistes en ce domaine connaissent très bien l'art et la manière de phosphoryler des nucléosides. Suivant un mode préféré de réalisation de l'invention,

  
 <EMI ID=20.1> 

  
du phosphate de triméthyle, puis hydrolyse dans de l'eau glacée, pour donner le 5'-phosphate libre. La formation du sel d'ammonium et l'aminolyse de l'ester méthylique se produisent simultanément lors du traitement par de l'ammoniac aqueux. On peut ensuite obtenir à partir du sel d'ammonium du phosphate, par échange d'ions, les

  
 <EMI ID=21.1> 
-D-ribofurannosyl)-1,2,4-triazole-3-carboxamide.

  
Pour accroître le transport cellulaire, on peut obtenir les 3',5'-phosphates cycliques des composés actifs de type carboxamido, thiocarboxamido et carboxamidine de l'invention, par cyclisation des 5'-phosphates correspondants à l'aide du dicyclohexylcarbodiimide (DCC). Suivant une variante, on peut cycliser les 5'-phosphates des intermédiaires de type cyano, carboxylate de méthyle et carboxamidoxime, avant les opérations en position 3 du fragment aglycone, conduisant à l'obtention des nucléotides cycliques actifs précités. Dans chacun des cas, on peut utiliser les phosphates cycliques sous forme libre ou sous forme des sels d'ammonium ou de métaux alcalins que l'on obtient comme dans le cas des 5'-phosphates.

  
Bien que l'invention ait été décrite en se référant particulièrement au blocage par un groupe acétyle ou benzoyle, des groupes hydroxyle situés en position 2', 3' et 5' du fragment glysolyle, on notera que l'on peut utiliser n'importe quel groupe acyle pour protéger ces groupes hydroxyle contre des réactions secondaires, telles qu'une déshydratation, pendant la synthèse des agents actifs de l'invention. Sutherland et coll. ont rapporté dans Biochim. et Biophys. Acta 148, 106 (1967) que l'acylation des nucléotides cycliques augmente le transport cellulaire.

   D'une façon similaire, des groupes hydroxyle libres de fragments glycolyle des nucléotides et nucléosides de l'invention peuvent être acylés pour en augmenter la solubilité dans les lipides, ou bien, par exemple, peuvent être pourvus dans le même but de groupes alkyle ou aralkylsulfonyle, tels que, par exemple, des groupes tosyle, mésyle, brosyle, nisyle, etc.

  
Bien que le "groupe qui part ou qui s'éloigne" situé en position l' des sucres dont question ci-dessus, ^ été caractérisé comme étant un groupe acétyle ou bien, dans le processus de silylation, comme étant un atome d'halogène, on notera que l'on peut utiliser n'importe quel fragment déplaçable permettant d'effectuer la séparation d'un sous-produit.

  
L'invention est illustrée et décrite d'une manière plus détaillée par les exemples suivants, dans lesquels toutes les parties et tous les pourcentages sont en poids et toutes les températures sont en degrés centigrades, sauf indications contraires. Toutes les opérations d'évaporation ont été effectuées sur un évaporateur rotatif sous pression réduite à 35[deg.]C.

  
EXEMPLE 1.

  
 <EMI ID=22.1>  3-carboxylate de méthyle. On chauffe au reflux, tout en agitant, une suspension de 1,2,4-triazole-3-carboxylate de méthyle(14,0 g;110 rrmoles) et d'hexaméthyldisilazane (100 ml) jusqu'à ce que cesse le dégagement d'ammoniac (environ 2 heures). On enlève, sous pression réduite, l'excès d'hexaméthyldisilazane, pour obtenir 20,6 g (100%) du dérivé N-triméthylsilylique du 1,2,4-triazole-3-carboxylate de méthyle.
(B) Ribosylation à l'aide d'un sucre halogéné. On maintient à 25[deg.] pendant 3 jours une solution contenant du N-(triméthylsilyl)-1,2,4-triazole-3-carboxylate de méthyle (20,6g; 110 mmoles) et du bromure de 2,3,5-tri-O-benzoyl-D-ribofurannosyle (52,5 g; 100 mmoles) dans de l'acétonitrile anhydre (300 ml). On sépare le solvant et on cristallise le résidu dans de l'éthanol.

   Une recristallisation de la matière dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'éthanol et une chromatographie des filtrats sur une colonne de gel de silice, à l'aide de chloroforme, donnent l'ester méthylique d'acide 1-(2,3,5-triO-benzoyl- &#65533; -D-ribofurannosyl)-1,2,4-triazole-3-carboxylique (25,1 g; 44,0%) avec un point de fusion de 137-139[deg.]C.

  
Analyse:

  
Calculé pour C30H25N30 (pour cent):C:63,04; H:4,41; N:7,35.

  
Trouvé (pour cent): C:62,91; H:4,17; N:7,10.

  
On fait cristalliser dans de l'éthanol le constituant qui migre le plus vite de la colonne de gel de silice pour obtenir

  
 <EMI ID=23.1> 

  
2,4-triazole-5-carboxylique (13,2 g; 23,1%) avec un point de fusion de 122-124[deg.]C.

  
Analyse:

  
Trouvé (pour cent): C:63,20; H:4,35;N:7,12.

  
EXEMPLE 2.

  
 <EMI ID=24.1> 

  
4-triazole-3-carboxylique (procédé de fusion).

  
On chauffe dans un bain d'huile maintenu à 160-165[deg.] un mélange de 1,2,4-triazole-3-carboxylate de méthyle (12,7 g; 100

  
 <EMI ID=25.1> 

  
g;110 mmoles). Après fusion du sucre, on ajoute tout en agitant
400 mg de phophate de bis-(p-nitrophényle) et l'on chauffe le mélange sous pression réduite à 160-165[deg.] pendant 15 à 20 minutes. Une cristallisation du résidu dans un mélange d'acétate d'éthyle et de méthanol donne 42,5 g(74,5%) de produit avec un point de fusion de 137-139[deg.]C. EXEMPLE 3.

  
 <EMI ID=26.1> 

  
triazole-3-carboxylique.

  
On chauffe dans un bain d'huile maintenu à 160-
165[deg.], jusqu'à fusion du sucre, un mélange de 1,2,4-triazole-3-carboxyla-

  
 <EMI ID=27.1> 

  
rannose (31,8 g; 0,10 mole). On ajoute du phosphate de bis(p-nitrophényle) (250 mg) et l'on poursuit le chauffage à 160-165[deg.] avec agitation sous pression réduite pendant 15 à 20 minutes. On dissout le résidu dans du benzène chaud, on filtre la solution et l'on ajoute du cyclohexane au filtrat pour obtenir le produit cristallin (30,0 g, 77,8%) avec un point de fusion de 107-109[deg.].

  
Analyse:

  
 <EMI ID=28.1> 

  
Trouvé (pour cent): C:46,88; H:5,03; N:10,64.

  
EXEMPLE 4.

  
Ester méthylique d'acide 1-(&#65533;-D-ribofurannosyl)-1,2,4-triazole-3-carboxylique.

  
On chauffe au reflux pendant 45 minutes une solu-

  
 <EMI ID=29.1> 

  
syl)-1,2,4-triazole-3-carboxylique (25,0 g; 43,8 mmoles) et de méthylate de sodium (400 mg) dans du méthanol (200 ml). On neutralise la réaction par du Bio-Rad AG50-X2 (H), on filtre et l'on concentre le filtrat jusqu'à l'obtention d'un sirop. La cristallisation du sirop dans un mélange de méthanol et d'acétate d'éthyle fournit 8,0 g -
(70,5%) de produit avec un point de fusion de 117-119[deg.].

  
Analyse:

  
 <EMI ID=30.1> 

  
Trouvé (pour cent): C:41,57; H:5,13; N:16,16.

  
EXEMPLE 5.

  
 <EMI ID=31.1> 

  
On maintient à 25[deg.] pendant 3 jours, dans un récipient à pression scellé, une solution d'ester méthylique d'acide 1-(2,3,5tri-0-benzoyl- &#65533; -D-ribofurannosyl)-l,2,4-triazole-3-carboxylique (16,0 g; 28,0 mmoles) dans du méthanol (300 ml, saturé au préalable par de l'ammoniac anhydre à 0[deg.]). On sépare le solvant et on fait cristalliser le produit dans de l'éthanol pour obtenir 6,7 g (98%) d'une matière dont le point de fusion se situe à 174-176[deg.]. Une recristallisation du produit dans de l'éthanol aqueux donne une seconde forme cristalline du nucléoside avec un point de fusion de 166-168[deg.].

  
Analyse:

  
Calculé pour C8H12N405 (pour cent): C:39,34; H:4,95; N:22,94. 

  
Trouvé (pour cent): G39,08; H:5,10; N:22,67.

  
 <EMI ID=32.1> 

  
On maintient à 25[deg.] pendant 18 heures dans un recipient sous pression scellé une solution d'ester méthylique d'acide

  
 <EMI ID=33.1> 

  
(10,0 g; 26,0 mmoles) dans du méthanol (70 ml) saturée à 0[deg.] par de l'ammoniac anhydre. On fait cristalliser le produit dans de l'éthanol pour obtenir le 1-( &#65533;-D-ribofurannosyl)-1,2,4-triazole-3-carboxamide
(5,70 g;90,0%).

  
 <EMI ID=34.1> 

  
mg; 2,0 mmoles), d'ammoniac aqueux à 28% (20 ml) et de peroxyde d'hydrogène à 30% (3,0 ml). On ajoute ensuite une portion supplémentaire de 3,0 ml de peroxyde d'hydrogène à 30% et l'on continue à agiter à 25[deg.] pendant 12 heures. On détruit l'excès de peroxyde d'hydrogène par addition de noir de platine, on filtre la solution et on évapore le filtrat jusqu'à siccité. On dissout le résidu dans du méthanol et l'on ajoute du gel de silice (5,0 g) à la solution. On sépare le solvant et l'on applique le mélange contenant du gel de silice sur une colonne de gel de silice. Une élution à l'aide d'un mélange d'acétate d'éthyle et de méthanol (1/1) donne du l-(&#65533;-D-ribofurannosyl)-1,2,4-triazole-3-carboxamide (250 mg; 51,2%).

  
EXEMPLE 6.

  
 <EMI ID=35.1> 

  
1,2,4-triazole-3-carboxamide.

  
On ajoute de la 4-morpholine-N,N'-dicyclohexylcarboxamidine (4,65 g; 15,9 mmoles) à du sel d'ammonium de 5'-phosphate de 1-( &#65533;-D-ribofurannosyl)-1,2,4-triazole-3-carboxamide (5,7 g; 15,9 mmoles) dans de la pyridine et on évapore la solution résultante sous vide plusieurs fois avec de la pyridine pour obtenir un sirop anhydre. On dissout le sirop dans un litre de pyridine et on ajoute goutte à goutte cette solution (en une période d'une heure), par l'intermédiaire d'un réfrigérant à reflux, dans une solution anhydre et chauffée au reflux de dicyclohexylcarbodiimide (16,4 g; 79,6 mmoles) dans 3 litres de pyridine. On chauffe au reflux la solution pendant 2 heures supplémentaires et on ajoute lentement 200 ml d'eau. Après environ 12 heures, on évapore la solution sous vide et on ajoute au résidu 200 ml d'eau et 50 ml d'éther.

   On agite vigoureusement la suspension puis on la filtre. On sépare la couche aqueuse et on extrait par deux fois 100 ml d'éther. On fait passer la couche aqueuse sur une

  
 <EMI ID=36.1> 

  
le produit d'élution pour obtenir un sirop. On ajoute au sirop environ
100 ml d'éthanol et on laisse le mélange résultant au repos à la température ambiante pendant environ 12 heures. On filtre le précipité brut et on laisse le filtrat reposer à la température ambiante pendant 2 semaines. On dissout le précipité résultant (1,2 g) dans 5 ml d'eau chaude et l'on ajoute ensuite 40 ml d'éthanol. On filtre les cristaux

  
 <EMI ID=37.1> 

  

 <EMI ID=38.1> 


  
Point de fusion de 245[deg.]C (avec décomposition). Analyse:

  
 <EMI ID=39.1> 

  
Trouvé (pour cent): C:29,86; H: 4,67; N: 21,47.

  
EXEMPLE 7.

  
Sel d'ammonium de 5'-phosphate de l-(p-D-ribofurannosyl)-l,2,4-triazole-3-carboxamide.

  
On agite à 0[deg.] pendant 1,5 heure une solution d'ester

  
 <EMI ID=40.1> 

  
(259 mg; 1,00 mmole), de phosphate de triméthyle (3,0 ml) et de chlorure de phosphoryle (0,20 ml). On ajoute de l'eau glacée et on neutralise la solution par une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium. On extrait la solution par du chloroforme et l'on refroidit la solution aqueuse à 0[deg.] puis on la sature d'ammoniac. On maintient

  
 <EMI ID=41.1>  le filtrat jusqu'à l'obtention d'un faible volume. Une addition d'éthanol donne un précipité que l'on dissout dans de l'eau et que l'on fait passer dans une colonne de 20 ml de Bio-Rad AG50W-X2 (NH4). Une concentration des fractions contenant le nucléotide donne le sel d'ammonium de 5'-phosphate de l-(P-D-ribofurannosyl)-l,2,4-triazole-3-carboxamide (190 mg; 53,0%).

  
Analyse:

  
 <EMI ID=42.1> 

  
Trouvé (pour cent): C:26,78; H: 5,23; N:19,68.

  
EXEMPLE 8.

  
 <EMI ID=43.1> 

  
On agite à 25[deg.] un mélange de 3-cyano-l-(2,3,5-tri0-acétyl-P-D-ribofurannosyl)-l,2,4-triazole (8,0 g; 22,7 mmoles), de triéthylamine (14,0 ml) et d'éthanol (200 ml) tout en faisant passer de l'hydrogène sulfuré gazeux dans la solution pendant 2 heures. On sépare le solvant et on traite le résidu par une solution de méthylate de sodium (600 mg) dans le méthanol (150 ml) pendant 3 heures

  
 <EMI ID=44.1> 

  
(H), on filtre celle-ci et l'on sépare le solvant. Une cristallisation du produit dans de l'éthanol aqueux donne 4,5 g (76,0%) du thiocarboxamide avec un point de fusion de 173-175[deg.].

  
Analyse:

  
Calculé pour C8H12N40S (pour cent): C:36,92; H:4,65; N:21,53;S:12,32. Trouvé (pour cent): C:37,12; H:4,90; N:21,26; 5:12,02.

  
EXEMPLE 9.

  
 <EMI ID=45.1> 

  
On chauffe dans un bain d'huile à 50[deg.] un mélange de 3-cyano-l,2,4-triazole (9,41 g; 0,10 mole) et de 1,2,3,5-tétra-O-acétyl-P-D-ribofurannose (31,8 g; 0,10 mole). On ajoute du bis(p-nitrophényl)phosphate (100 mg) tout en poursuivant l'agitation et l'on continue

  
 <EMI ID=46.1> 

  
le résidu dans du chloroforme, on filtre la solution et l'on sépare le solvant. Une cristallisation du résidu dans de l'éther donne 28,2 g (80%) d'un produit dont le point de fusion est de 96-97[deg.]. 

  
Analyse:

  
 <EMI ID=47.1> 

  
Trouvé (pour cent): C:47,79; H:4,63; N:15,95.

  
EXEMPLE 10.

  
 <EMI ID=48.1> 

  
triazole (7,04g; 20,0 mmoles), de chlorure d'ammonium (1,07 g; 20,0 mmoles) et d'ammoniac anhydre (150 ml). Après avoir séparé l'excès d'ammoniac, on cristallise le résidu dans un mélange d'acétonitrile et d'éthanol pour donner 5,30 g (95%) de produit avec un point de fusion de 177[deg.]-179[deg.] (avec décomposition).

  
Analyse:

  
 <EMI ID=49.1> 

  
N:25,04

  
Trouvé (pour cent): C:34,39; H:5,06; CI: 12,73; N:24,99. EXEMPLE 11.

  
 <EMI ID=50.1> 

  
syl)-1,2,4-triazole (3,0 g; 8,52 mmoles) et d'un excès d'hydroxylamine dans de l'éthanol (100 ml). On sépare le solvant et on fait cristalliser le produit dans de l'éthanol aqueux pour obtenir 2,0 g (90,7%) de la carboxamidoxine avec un point de fusion de 212-214[deg.] (avec décomposition).

  
Analyse:

  
 <EMI ID=51.1> 

  
Trouvé (pour cent): C:36,80; H:4,92; N:27,23.

  
EXEMPLE 12.

  
 <EMI ID=52.1> 

  
mmoles) dans de la pyridine (10,0 ml) contenant de l'anhydride acétique
(1,0 ml). On ajoute de l'éthanol (1,0 ml) et l'on agite la solution à la température ambiante pendant 2 heures. On sépare le solvant et on ajoute de l'eau au résidu. On extrait le mélange par du chlorure de méthylène (3 portions de 20 ml chacune) et l'on extrait la couche organique par une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium et par de l'eau. On sèche la phase organique sur du sulfate de magnésium, on la filtre et on l'évapore pour obtenir un sirop que l'on applique sur une colonne de gel de silice. Une élution à l'aide d'un système de chloroforme et de méthanol (19/1), donne le produit pur sous forme d'un solide amorphe (560 mg; 75,6%).

  
Analyse:

  
 <EMI ID=53.1> 

  
Trouvé (pour cent): C:45,36; H:4,66; N:14,90.

  
Lorsqu'on l'administre par la voie orale deux fois

  
 <EMI ID=54.1> 

  
la grippe, ce produit augmente sensiblement le nombre des survivants, ainsi que la durée moyenne de survie des animaux traités par rapport à des animaux témoins.

  
EXEMPLE 13.

  
On soumet des agents antiviraux de l'invention à des essais de détermination de leur activité contre de petits et de gros virus appartenant aussi bien au type de l'acide AD N qu'au type ARN par le procédé de cotation de l'activité antivirale (AV) de Sidwell et coll., Appl. Microbiol. 22, 797 (1971). Un indice ou une cotation d'activité antivirale supérieure à 1, indique une nette activité antivirale; un indice d'activité antivirale compris entre 0,5 et 0,9 indique une activité antivirale modérée, et un indice d'activité antivirale inférieur à 0,5 suggère l'existence d'une légère activité antivirale ou l'absence apparente d'activité antiviralé.

   Les résultats donnés le Tableau ci-après et qui, à titre comparatif, comprennent des données obtenues à l'aide de divers agents antiviraux connus, ont été obtenus par des essais sur des panneaux de matière plastique Microtest II (Falcon Plastics) à l'aide d'une monocouche de cellules de bacilles de Koch (KB ou de RK 13). 

  

 <EMI ID=55.1> 


  

 <EMI ID=56.1> 
 

  
Le composé 1 ci-dessus a été essayé sur des lapins et des hamsters, à des doses non toxiques et montre une nette activité contre le virus de la kératite HSV. Le composé inhibe sensiblement le développement des lésions provoquées par le virus HSV sur les queues de souris, lorsqu'on administre localement le composé sur l'infection. Ce composé a également subi des essais

  
 <EMI ID=57.1> 

  
le parainfluenza 1, et l'on a nettement vu dans ces expériences une très forte activité antivirale. Ce composé, comme on pourra le noter d'après le Tableau ci-dessus, présente un spectre d'activité antivirale sensiblement plus large que le spectre présenté par les composés IDU, Ara-A ou Ara-C. En plus de l'activité antivirale présen-

  
 <EMI ID=58.1> 

  
le-3-carboxamide inhibait la croissance des bactéries Pseudomonas  aeruginosa et des champignons Candida albicans et Cryptococcus diffluens.

  
Tous les composés (1-3,5,6) précités présentent une faible toxicité et sont solubles dans les milieux aqueux.

  
 <EMI ID=59.1> 

  
mide présente également une activité antitumorale intéressante. A trois groupes (6 animaux par groupe) de souris C 57 Blk, on administre des implants sous-cutanés d'adénocarcinome 755. Deux groupes reçoivent le composé (100 mg/kg pendant 7 jours et 200 mg/kg pendant 7 jours) par voie intrapéritonéale, alors que le troisième groupe témoin ne reçoit que du sérum salin physiologique. Au 16ème jour, les animaux traités montrent respectivement 18% et 63% d'inhibition de la tumeur comparativement aux animaux témoins. Dans une expérience similaire, des souris DBA/2 auxquelles on a inoculé la leucémie L-1210 (1 x 10 cellules par animal), montrent une augmentation de 31% de la durée moyenne de survie par rapport à des animaux témoins, lorsque les souris sont traitées par le composé (250 mg/kg pendant 7 jours).

   Lorsqu'on l'administre à la dose de 250 mg par kg pendant 14 jours, le composé produit 80% de survivants chez des souris Swiss portant des implants intrapéritonéaux du carcinome ascitique d'Ehrlich. On a également constaté une activité marginale in vivo contre l'hépatome de Novikoff.

  
On a également constaté que le 1,2,4-triazole-3carboxamide présentait lui-même une nette activité antivirale. Lors d'essais effectués par le mode opératoire ci-dessus, on a obtenu les résultats suivants d'activité antivirale. Virus de type 1 de l'herpès : 0,6; 1,0; vaccine : 0,8; et parainfluenza : 9,6; 0,6. Les résultats d'activité antivirale, lorsque l'on essaye ce composé contre des virus de type adénovirus et de type rhinovirus 13, sont respectivement de 0,0 et de 0,3.

  
Il doit être entendu que la présente invention n'est en aucune façon limitée aux formes de réalisation ci-dessus et que bien des modifications peuvent y être apportées sans sortir du cadre du présent brevet. 

REVENDICATIONS.

  
1. Composé de la structure :

  

 <EMI ID=60.1> 


  
dans laquelle G représente un groupe &#65533;-D-ribofurannosyle et R.  est choisi dans le groupe constitué par :
 <EMI ID=61.1> 
(d) les sels d'addition d'acide acceptables du point de vue physiologique de (c) 
 <EMI ID=62.1> 
2. Composé choisi dans le groupe comprenant les 5'-phosphates et les 3',5'-phosphates cycliques d'un composé

Claims

suivant la revendication 1.

3. Composé choisi dans le groupe comprenant (I) les composés de structure : <EMI ID=63.1> dans laquelle R 3 représente un groupe hydroxyle et R 2 représente <EMI ID=64.1> <EMI ID=65.1>

(d) les sels d'addition d'acide physiologiquement acceptables de (c),

<EMI ID=66.1>

(II) les 5'-phosphates des composés (I) et (III) les 3',5'-phosphates cycliques des composés (1).

4. Composé suivant la revendication 3, caractérisé en ce que les groupes hydroxyles glycosyliques par ailleurs libres sont bloqués par un groupe acyle.

5. Composé suivant la revendication 3, caractérisé en ce que R représente un groupe (a), (b), (c) ou (d).

6. Composé suivant la revendication 3, caractérisé en ce que R représente un groupe (a), (b) ou (d). <EMI ID=67.1>

9.. Un composé (II) suivant la revendication 3.

1Q. Un composé (III) suivant la revendication 3.

<EMI ID=68.1>

2,4-triazole-3-carboxamide.

16. Le chlorhydrate de 1-(�D-ribofurannosyl)-1,2,4-triazole-3-carboxamide.

17. Le 3',5'-phosphate cyclique de 1-(�D-ribofu-

<EMI ID=69.1>

18.. Sel d'ammonium du composé suivant la revendication 18.

19. Les nucléosides de type 1, 2, 4-triazole, leur préparation et leur utilisation, tels que décrits ci-dessus, notamment dans les exemples donnés.