BRPI0215213B1 - Peptídeos com capacidade de ligação com o sítio de fosforilação por caseína quinase ii, composição farmacêutica, uso dos peptídeos, e, vetor de expressão em células de mamíferos - Google Patents
Peptídeos com capacidade de ligação com o sítio de fosforilação por caseína quinase ii, composição farmacêutica, uso dos peptídeos, e, vetor de expressão em células de mamíferos Download PDFInfo
- Publication number
- BRPI0215213B1 BRPI0215213B1 BRPI0215213-4A BR0215213A BRPI0215213B1 BR PI0215213 B1 BRPI0215213 B1 BR PI0215213B1 BR 0215213 A BR0215213 A BR 0215213A BR PI0215213 B1 BRPI0215213 B1 BR PI0215213B1
- Authority
- BR
- Brazil
- Prior art keywords
- peptide
- peptides
- ifn
- seq
- pept
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 122
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims description 62
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 7
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 title description 4
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 title description 4
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 title description 4
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 title description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 claims description 36
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 claims description 34
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 11
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 11
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 9
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 claims description 7
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 claims description 7
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 5
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 5
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims description 4
- 102000052052 Casein Kinase II Human genes 0.000 claims description 3
- 108010010919 Casein Kinase II Proteins 0.000 claims description 3
- SLPJGDQJLTYWCI-UHFFFAOYSA-N dimethyl-(4,5,6,7-tetrabromo-1h-benzoimidazol-2-yl)-amine Chemical compound BrC1=C(Br)C(Br)=C2NC(N(C)C)=NC2=C1Br SLPJGDQJLTYWCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 101100152433 Caenorhabditis elegans tat-1 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 2
- VZQHRKZCAZCACO-PYJNHQTQSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]propanoyl]amino]prop-2-enoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N VZQHRKZCAZCACO-PYJNHQTQSA-N 0.000 claims 4
- 101710176384 Peptide 1 Proteins 0.000 claims 3
- OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 Chemical compound C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N 0.000 claims 2
- 208000022361 Human papillomavirus infectious disease Diseases 0.000 description 35
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 33
- 230000008696 hypoxemic pulmonary vasoconstriction Effects 0.000 description 29
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 15
- 108091008819 oncoproteins Proteins 0.000 description 15
- 102000027450 oncoproteins Human genes 0.000 description 15
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 12
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 11
- 241000341655 Human papillomavirus type 16 Species 0.000 description 8
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 7
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 7
- 230000004044 response Effects 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 6
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 6
- 101000767631 Human papillomavirus type 16 Protein E7 Proteins 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 5
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 4
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 3
- 206010064912 Malignant transformation Diseases 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 208000009608 Papillomavirus Infections Diseases 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 230000036212 malign transformation Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 206010059313 Anogenital warts Diseases 0.000 description 2
- 206010008263 Cervical dysplasia Diseases 0.000 description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 101150013359 E7 gene Proteins 0.000 description 2
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 2
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 2
- 108091054729 IRF family Proteins 0.000 description 2
- 102000004374 Insulin-like growth factor binding protein 3 Human genes 0.000 description 2
- 108090000965 Insulin-like growth factor binding protein 3 Proteins 0.000 description 2
- 102000016854 Interferon Regulatory Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 2
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 2
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940021993 prophylactic vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 229940021747 therapeutic vaccine Drugs 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 230000006490 viral transcription Effects 0.000 description 2
- 241000585705 Alicia <angiosperm> Species 0.000 description 1
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 1
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 1
- 208000009458 Carcinoma in Situ Diseases 0.000 description 1
- 108010051109 Cell-Penetrating Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000020313 Cell-Penetrating Peptides Human genes 0.000 description 1
- 206010061765 Chromosomal mutation Diseases 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000959820 Homo sapiens Interferon alpha-1/13 Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 101710128836 Large T antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 1
- 108010077850 Nuclear Localization Signals Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800001169 Protein p48 Proteins 0.000 description 1
- 206010038707 Respiratory papilloma Diseases 0.000 description 1
- 201000000582 Retinoblastoma Diseases 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 101710192266 Tegument protein VP22 Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 1
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 208000007951 cervical intraepithelial neoplasia Diseases 0.000 description 1
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 231100000005 chromosome aberration Toxicity 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000010468 interferon response Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000037841 lung tumor Diseases 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100001222 nononcogenic Toxicity 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 208000003154 papilloma Diseases 0.000 description 1
- 208000029211 papillomatosis Diseases 0.000 description 1
- 108010043655 penetratin Proteins 0.000 description 1
- MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N penetratin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 108091005981 phosphorylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 208000017572 squamous cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000003153 stable transfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 108091006106 transcriptional activators Proteins 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 108010062760 transportan Proteins 0.000 description 1
- PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N transportan Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CN)[C@@H](C)O)C1=CC=C(O)C=C1 PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 229940125575 vaccine candidate Drugs 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/10—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a tag for extracellular membrane crossing, e.g. TAT or VP22
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20032—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Virology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
(54) Título: PEPTÍDEOS COM CAPACIDADE DE LIGAÇÃO COM O SÍTIO DE FOSFORILAÇÃO POR CASEÍNA QUINASE II, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, USO DOS PEPTÍDEOS, E, VETOR DE EXPRESSÃO EM CÉLULAS DE MAMÍFEROS (51) lnt.CI.: C07K 7/64; C07K 7/06; A61K 38/08; A61K 38/12 (30) Prioridade Unionista: 20/12/2001 CU 0309/01 (73) Titular(es): CENTRO DE INGENIERÍA GENÉTICA Y BIOTECNOLOGIA (72) Inventor(es): SILVIO ERNESTO PEREA RODRÍGUEZ; OSVALDO REYES ACOSTA; NELSON FRANCISCO SANTIAGO VISPO; YAQUELÍN PUCHADES IZAGUIRRE; RICARDO SILVA RODRÍGUEZ; ALEJANDRO MORO SORIA; ALICIA SANTOS SAVIO; LUIS JAVIER GONZÁLEZ LÓPEZ; BELKIS GONZÁLEZ BARRIOS (85) Data do Início da Fase Nacional: 18/06/2004 “PEPTÍDEOS COM CAPACIDADE DE LIGAÇÃO COM O SÍTIO DE FOSFORILAÇÃO POR CASEÍNA QUINASE II, E, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA”
A presente invenção refere-se ao ramo da farmacologia 5 molecular e, em particular, refere-se a peptídeos úteis para o tratamento de tumores de origem epitelial associados a tipos oncogênicos de Vírus Papiloma (HPV), já que permitem o bloqueio do domínio de fosforilação por Caseína
Quinase II (CKII) mediante a interação direta com o referido sítio.
A CKII é uma enzima serina/treonina que está envolvida no 10 incremento da proliferação celular e sua localização intracelular é fundamentalmente nuclear durante o processo de transformação maligna (Tawfic S, Yu S, Wang H, Faust R, Davis A, Ahmed K, 2001, Histol.
Histopathol. 16:573-582).
Devido às verificações que demonstram níveis elevados de 15 CKII em diversos tumores sólidos de origem epitelial, considera-se que a atividade de fosforilação por esta enzima é um evento celular importante na transformação maligna e, além disso, um marcador de progressão do tumor (Seldin DC, Leder P, 1995, Science 267:894-897) (Faust RA, Gapany M, Tristani P, Davis A, Adams GL, Ahmed K, 1996, Câncer Letters 101:31-35).
Por outro lado, a sobre-expressão de CKII em animais transgênicos leva à tumorogênese das glândulas mamárias através do incremento da cascada de sinabzação Wnt/beta-catenina nas células epitebais mamárias (LandesmanBollag E, Romien-Mourez R, Song DH, Sonenshein GE, Cardiff RD, Seldin DC, 2001, Oncogene 20:3247-3257).
Dentro dos tumores de origem epitelial, aqueles associados ao
HPV constituem uma fração consideravelmente grande. Por exemplo, a maior parte de todos os cânceres do trato genitourinário está associada com o HPV, e em 99,7 % dos cânceres de células escamosas do cérvice uterino demonstraPetição 870170087943, de 14/11/2017, pág. 8/12 se a presença de seqüências de DNA viral (Walboormers JM, Jacobs MV, Manos MM, Bosch FX, Kummer JA, Shah KV, Snijders PJ, Peto J, Meijer CJ, Munoz N, 1999, J. Pathol 189:12-19). Por seu lado, a OMS tem reportado historicamente a ocorrência de aproximadamente 500.000 novos casos de câncer cérvico-uterino no mundo a cada ano (Parkin DM, Laara E, Muir CS, 1980, Int. J. Câncer 41:184-1972). Em Cuba, morrem aproximadamente 370 mulheres anualmente devido a esta doença (Organização Panamericana da Saúde, 1999, Basic Country Health Profiles for the Américas. Cuba, 206219). Os HPVs classificam-se em tipos oncogênicos e não oncogênicos de acordo com o fato de se as lesões que se originam podem ou não progredir para a malignidade (Lorincz AT, Temple GF, Kurman RJ, Jenson AB, Lancaster WD, 1987, J. Natl. Câncer Inst. 79:671-677). Os tipos oncogênicos como os HPVs 16 e 18 estão associados a neoplasias intra-epiteliais que, de um modo geral, progridem para malignidade e para mais de 90 % das displasias e carcinomas cervicais (Fujinaga Y, Shimada M, Okasawa K, Fukushima M, Kato I, Fujinaga K, 1991 J. Gen. Virol 72:1039-1044).
Devido à não-disponibilidade, ainda, de uma vacina terapêutica ou profilática para a erradicação do câncer associado ao HPV, impõe-se o emprego de agentes inibidores tanto da transcrição viral como das oncoproteínas virais. Os biomoduladores, como o IFN [interferon], foram empregados com certa eficácia em algumas doenças associadas com o HPV, como o condiloma acuminado, verrugas plantais e papilomatose respiratória (Koromilas AE, Li S, Matlashewski G, 2001. Cytokine & Growth Factor Reviews 12:157-170). Em experimentos anteriores realizados em células humanas transformadas por HPV oncogênicos (HeLa) demonstramos que a exposição contínua com IFNs alfa produz a reversão do fenótipo maligno de referidas células com a paralela inibiu da expressão de RNAm viral (LópezOcejo O, Perea SE, Reyes A, Vigoa L, López-Saura P, 1993. J. IFN Res 13:369-375). No mesmo modelo celular verificamos que o IFN-α modula os ·· ··· ·· níveis de RNAm do HPV mediante a repressão da transcrição viral endógena (Perea SE, López-Ocejo O, García-Milián R, Arana MJ, 1995, J. IFN & Cytokine Res 15:495-501). De acordo com os resultados obtidos em linhas celulares transformadas com HPV, observamos adicionalmente que o tratamento com IFN-α in vivo em pacientes com câncer cérvico-uterino era capaz de modular a expressão de RNAm viral em ensaio clínico piloto (García-Milián R, Rios MA, Díaz D, Silveira M, Guilar O, Amigó M, Arana MJ, Perea SE, 1996, J. IFN and Cytokine Res 16:709-713). Apesar das verificações promissórias sobre o emprego do IFN como regulador da expressão do RNAm do HPV, os resultados indicam conjuntamente uma variabilidade na resposta e, por outro lado, o fenômeno de resistência a esta citocina foi reportado na clínica entre 40 e 50 % dos pacientes (Arany I, Tyring SK, Stanley MA, Tomai MA, Miller RL, Smith MH, McDermott, DJ, Slade HB, 1999, Antiviral Res 43:55-63).
Algumas evidências, tanto em nível molecular como em nível clínico, indicam que a oncoproteína E7 desempenha um papel fundamental no fenômeno da resistência ao IFN. Por exemplo, reportou-se que E7 é capaz de unir-se à proteína celular p48, um fator de transcrição induzido por IFN, afetando assim seu papel como ativador transcripcional e, por fim, resposta a IFN (BRNAard P and McMillan NAJ, 1999, Virology 259:305-313). Também no nível molecular descreveu-se a alteração do fator transcricional induzido por IFN denominado Interferon Regulatory Factor (IRF-1) na presença de E7 (Park JS, Kim EJ, Kwon HJ, Hwang ES, Namkoong SE, Um SJ, 2000, J Biol Chem 275:6764-6769) (Perea SE, Massimi P, Banks L, 2000, J Mol Med 5:661-666). No nível clínico observou-se que a resposta ao IFN depende dos níveis de expressão de E7 em lesões que contêm HPV (Frazer IH, McMillan NAJ, 1997, Papillomatose and condyloma acuminata. Clinicai Applications of the Interferons (R Stuart Harris and RD Penny, eds) pp. 7990, Chapman and Hall Medicai, London). A oncoproteína E7 do HPV c··· ·· · ···· desempenha um papel essencial no processo de transformação maligna induzido por estes vírus oncogênicos. Assim, demonstrou-se que a imortalização de células primárias pelo gene E7 leva à indução de aberrações cromossômicas e mutações desde o início do processo de imortalização (Mougin C, Humbey O, Gay C, Riethmuller D, 2000, J. Gynecol Obstet. Biol. Reprod 29:13-20). Em ensaios independentes demonstramos que a transfecção estável do gene E7 leva à aquisição de um fenótipo de resistência ao IFN por parte de células tumorais que inicialmente apresentavam alta sensibilidade a esta citocina (Moro A, Calixto A, Suárez E, Arana MJ, Perea SE, 1998, Bioch Bioph Res Comm 245:752-756). Por outro lado, demonstrouse que a oncoproteína E7 associa-se e bloqueia a função de genes supressores de tumores, como o Retinoblastoma humano (Rb) e o Insulin like Growth Factor Binding Protein-3 (IGFBP-3) através da Cys 24 e da região Carboxila Terminal respectivamente (Nevins JR, 1992, Science 258:424-429) (Zwerschke W and Jansen-Durr P, 2000, Advances in Câncer Res 78:1-29). Ainda assim, o dubleto de Ser 31/Ser 32 dentro da proteína E7 mostrou ser substrato para a enzima (CKII) (Hashida T, Yasumoto S, 1990, Biochem. Biophys Res. Comm 172:958-964) e, adicionalmente, é essencial tanto para a capacidade transformadora desta oncoproteína (Barbosa MS, Edmonds C, Fisher C, Schiller JT, Lowy DR, Vousden K, 1990, EMBO J 9:153-160) (Chien W-M, Parker JN, Schmidt-Grimminger D-C, Broker TR, Chow LT, 2000, Cell Growth & Differentiation 11:425-435) como para a capacidade de inibir a cascata de sinalização do interferon (IFN) (Perea SE, López-Ocejo O, Garcia Milián R, Banks L, Arana MJ, 1996, Eur. Cytokine Net 7:503).
Com base no papel do sítio de fosforilação por CKII na resistência do HPV ao IFN, e no desenvolvimento do câncer de forma geral, o desenho de drogas que bloqueiam referido domínio pode converter-se em poderosas ferramentas para a terapêutica do câncer. Até o momento não se descreveram moléculas que bloqueiam o sítio de fosforilação por Caseína
Quinase II dentro da oncoproteína E7 do HPV nem em outros substratos celulares.
Quanto à oncoproteína E7, somente se conhecem soluções técnicas relacionadas com peptídeos inibidores do sítio de ligação com a proteína do Rb (Cys 24) (Webster KR, Koleman KG, 1997, U.S. 5.625.031) (Oliff Al, Riemen MW, EP 0412762 A2 910213) e com o bloqueio de regiões compreendidas na porção C-terminal da oncoproteína (aminoácidos de 39-98) (Pidder J-D, Zwerschke W, 2000, EP0969013).
Até o momento existem em fase experimental candidatos a vacina voltados para o desenvolvimento de resposta celular tipo CTL específica contra a oncoproteína E7 do HPV (Chen C, Wang CC, Hung C, Pardoll DM, Wu T, 2000, Vaccine 18:2015-2022) (Chen CH, Ji H, Suh KW, Choti MA, Pardoll DM, Wu TC, 1999, Gene Ther 12:1972-1981). No entanto, as abordagens empreendidas para incrementar este tipo de resposta passam por diferentes debilidades relacionadas com a Biologia dos HPVs. Por exemplo, os tipos oncogênicos destes vírus regulam negativamente os antígenos MHC de classe I que são essenciais na resposta CTL (Connor ME, Stem PL, 1990, Int J Câncer 46:1029-1034). Adicionalmente, a expressão de E7 está associada com imunossupressão local no ambiente do tumor que também pode afetar o desencadeamento ótimo de uma resposta CTL (Le Buanec H, D'Anna R, Lachgar A, Zagury JF, Bemard J, Ittlele D, d'Alessio P, Hallez S, Giannouli C, Bumy A, Bizzini B, Gallo RC, Zagury D, 1999, Biomed Pharmacother 53:424-431) (Lee SJ, Cho YS, Shim JH, Lee KA, Ko KK, Choe YK, Park SN, Hoshino T, Kim S, Dinarello CA, Yoon DY, 2001, J Immunol 167:497-504). De acordo com os aspectos indicados poderia parecer que o futuro das vacinas de tipo CTL para a infecção por HPV está combinado com fármacos que bloqueiam diretamente a oncoproteína E7. Por seu lado, as variantes experimentais de vacina preventiva da infecção pelo HPV enfrentam o risco da relação custo-beneficio que pode ser afetada por
diferentes aspectos de caráter biológico e social entre os quais encontram-se: O grande período de latência depois da infecção primária, [pois] não se conhece exatamente o mecanismo com que se produz a infecção primária, não existem modelos animais de propagação do HPV ligado à sua especificidade de espécie, e o tempo para avaliar o impacto social da vacina profilática pode ser muito prolongado. Por estas razões a variante de utilizar fármacos inibidores específicos diretos contra as oncoproteínas virais pode oferecer vantagens relativamente às abordagens empreendidas para manipular o sistema imunológico.
Essência da invenção
A essência e novidade da presente invenção reside na descrição, pela primeira vez, de peptídeos com estrutura cíclica que permitem a inibição direta do sítio de fosforilação por CKII in vitro, bem como a produção in vivo de citotoxicidade em células de carcinoma de colo uterino transformadas por HPV-16. Adicionalmente, estes peptídeos incrementam a sensibilidade destas células com efeito citostático do IFN.
Descrição detalhada da invenção:
A invenção refere-se particularmente a peptídeos com capacidade de ligação ao sítio de fosforilação por CKII que apresentam as seqüências:
(a) CSVRQGPVQKC (SEQIDNO. 1) (b) CSSCQNSPALC (SEQ ID NO. 2) (c) CQIPQRTATRC (SEQ ID NO. 3) (d) CAKQRTDPGYC (SEQ ID NO. 4) (e) CWMSPRHLGTC (SEQ ID NO. 5) (f) CRNCTVIQFSC (SEQ ID NO. 6) (g) CHYIAGTVQGC (SEQ ID NO. 7) (h) CPLVSLRDHSC (SEQ ID NO. 8) (i) CKQSYLHHLLC (SEQ ID NO. 9)
···· • · · · ··· · » « « · · · • · · · » · · ·· ·*· ··· ·· ···· fl (j) CFQPLTPLCRC (SEQ ID NO. 10) (k) CQSYHELLLQC (SEQ ID NO. 11)
A invenção também inclui qualquer variante homóloga ou mimética dos peptídeos anteriores, que tenha sido obtida por via sintética ou recombinante, assim como qualquer peptídeo de fusão que os contenha. Compreende-se por variante homóloga qualquer peptídeo cuja estrutura permita bloquear o sítio de fosforilação por CKII nos substratos respectivos. Compreende-se também por variante mimética qualquer molécula de origem química (não protéica) cuja estrutura permita bloquear referido sítio de fosforilação.
Outro objeto da invenção é uma composição farmacêutica que compreende um ou mais dos peptídeos da invenção, bem como um excipiente apropriado.
A invenção também contempla o uso dos peptídeos indicados, sozinhos ou em combinação com alguma outra molécula apropriada, como por exemplo um uma citocina, e, mais especificamente, um interferon, para a inibição da proliferação de células tumorais; para o tratamento do câncer associado com o Vírus Papiloma Humano, bem como de outros tumores não originados por estes oncovírus; e, mais particularmente, para o tratamento de lesões originadas pelo Vírus Papiloma Humano em estágios pré-malignos.
Os peptídeos da invenção também podem ser empregados para o tratamento de pacientes infectados com Vírus Papiloma Humano resistentes ao tratamento com IFN. Em outra concretização da invenção, esta compreende um vetor de expressão em células de mamíferos que compreende uma seqüência de DNA que codifica para qualquer dos peptídeos referidos previamente.
Os peptídeos da invenção apresentam uma estrutura cíclica e caracterizam-se fundamentalmente por sua capacidade de ligação com o domínio de fosforilação por CKII, e, conseqüentemente, inibição de referido
evento bioquímico. Os peptídeos são descritos na listagem de seqüências anexa. Por outro lado, demonstram-se os efeitos in vivo que os peptídeos objeto da presente invenção produzem em células de carcinoma cérvicouterino transformadas com HPV-16.
Os peptídeos descritos foram definidos por sua capacidade de inibir a fosforilação da seqüência RRREEETEEE previamente descrita como domínio consenso ótimo para a fosforilação por CKII (Promega Cat:V5661) e, adicionalmente, por sua capacidade de inibição do sítio de fosforilação contido na região de 28-38 da oncoproteína E7 do HPV-16 (Ser31/Ser32).
Para a definição dos peptídeos descritos na invenção construiu-se uma biblioteca de peptídeos cíclicos de 11 aminoácidos expressos na região P8 de fagos filamentosos e realizou-se a pesquisa da mesma usando como alvo a região de 28-38 da E7 sintetizada quimicamente e conjugada à biotina para facilitar sua fixação a um suporte sólido. A seleção dos fagos que se ligaram especificamente à região 28-38 da oncoproteína E7 foi realizada através da imunoidentificação destes com um anticorpo contra a região P8 do fago. Finalmente, o DNA correspondente aos peptídeos dos onze fagos com grande capacidade de ligação com a região 28-38 de E7 foi seqüenciado e os peptídeos correspondentes foram sintetizados quimicamente pelo método de fase sólida. Os peptídeos sintéticos foram purificados posteriormente por meio de HPLC, analisados por meio de espectrometria de massas e finalmente avaliados quanto a sua efetividade in vitro e in vivo.
De acordo com esta invenção, os peptídeos cíclicos descritos também são eficazes quanto à sua capacidade de inibir o evento de fosforilação por CKII, apesar das diferenças nas seqüências de aminoácidos de cada um. Este aspecto indica que a interação dos peptídeos com o sítio de fosforilação por CKII baseia-se essencialmente na estrutura dos mesmos e não na seqüência como tal. Nesta invenção, demonstra-se adicionalmente que os peptídeos descritos em forma linear apresentam menor efetividade quanto a sua capacidade de inibição do sítio de fosforilação por CKII. Esta verificação enfatiza a importância da estrutura na capacidade de ligação dos peptídeos com referido domínio e sugere adicionalmente a efetividade de outros peptídeos e moléculas miméticas com capacidade de ligação com o sítio de fosforilação por CKII.
Com o objetivo de obter a ação intracelular sobre os substratos endógenos de CKII, os peptídeos descritos nesta invenção podem ser conjugados quimicamente ou fundidos geneticamente com os conhecidos na arte como peptídeos de penetração intracelular, pertencentes a proteínas como Tat 1 do Vírus da Imunodeficiência Humana (VIH) (Schwarze SR, Dowdy SF, 2000, Trends Pharmacol 21:45-48), o fator transcricional codificado pelo gene da Antenapedia de Drosofila (Derossi D, et al, 1996, J. Biol Chem 271:18188-18193 ), o VP22 do Vírus Herpes Simples (Lindgreen M, et al. (2000) Cell-penetrating peptides. Trends Pharmacol Sei 21:99-103), penetratin e o Transportan (Gariepy J, Kawamura K, 2001, Trends Biotech 19:21-28) entre outros. Para a prova do conceito in vivo nesta invenção, os peptídeos cíclicos de interesse foram sintetizados de maneira fusionada com o peptídeo de penetração intracelular correspondente ao Tatl do VIH (GRKKRRQRRRPPQC) e com uma sinal de localização nuclear correspondente ao antígeno T grande do SV40 (KKKRKVE).
Os resultados mostrados na presente invenção indicam claramente que os peptídeos cíclicos produzem citotoxicidade de uma maneira dependente da dose em células de carcinoma cérvico-uterino transformadas por HPV-16 (CaSki) o que sugere um emprego como ferramenta terapêutica no tratamento de tumores de origem histológica semelhante, bem como de estágios pré-malignos como a neoplasia intraepitelial cervical. Da mesma forma, os dados experimentais in vivo demonstraram uma efetividade maior dos peptídeos em forma cíclica relativamente a sua contraparte em forma linear, o que corrobora a importância da estrutura no efeitos dos mesmos.
Os peptídeos cíclicos descritos nesta invenção também são efetivos em células HeLa que contêm o HPV-18, bem como em células H-82 que provêm de um câncer do pulmão de células pequenas que não contêm HPV. Estas verificações correlacionam-se com os resultados obtidos in vitro nesta invenção que indicam que os peptídeos bloqueiam o sítio de fosforilação por CKII não apenas na E7 do HPV-16 mas também em outras proteínas que contenham referidos sítios. O fato de que os peptídeos descritos são efetivos em células tumorais que não contêm HPV constitui um argumento para seu uso possível em outros tumores de origem epitelial.
Outros resultados na presente invenção indicam que o tratamento das células CaSki com os peptídeos cíclicos descritos, incrementa a sensibilidade de referidas células ao efeito citostático do IFN alfa. Considerando que existem evidências prévias de que o sítio de fosforilação de E7 do HPV-16 é necessário para o bloqueio da cascata de sinalização do IFN que esta oncoproteína exerce (Perea SE, López-Ocejo O, Garcia Milián R, Banks L, Arana MJ, 1996, Eur. Cytokine Net 7:503), os peptídeos descritos na presente invenção podem ser úteis para sobrepassar o fenômeno de resistência ao IFN que comumente se observa na infecção por HPV.
O objeto desta invenção pode ser extensivo também ao DNA que codifica para cada peptídeo aqui descrito. Este DNA poderia ser introduzido em um vetor de expressão em células de mamíferos e posteriormente transfectado em células transformadas por HPV-16 e outros tipos. O vetor que contém o oligonucleotídeo que codifica para cada peptídeo da presente invenção também pode ser usado como alternativa na terapia gênica do câncer associado com o HPV.
Em princípio, os peptídeos descritos podem ser utilizados em combinação com outros agentes nas doenças associadas com o HPV assim como com vacinas terapêuticas baseadas em resposta celular contra o HPV.
Vantagens da invenção:
1. Proporciona fármacos com amplo espectro de aplicação que não apenas são úteis em doenças associadas com o HPV, mas também podem ser aplicados em tumores sólidos em que existe grande atividade endógena de CKII.
2. O fato de que a região de 28-38 é conservada nos HPVs, proporciona a este fármaco a possibilidade de seu emprego em todas as doenças associadas com diferentes tipos de HPV.
3. Os peptídeos, como moléculas terapêuticas, apresentam baixa antigenicidade quando são administrados a humanos.
r
4. E um fármaco de fácil obtenção e baixo custo de produção. Breve Descrição das Figuras:
Figura 1: Efeito dos peptídeos sobre a fosforilação por CKII
Figura 2: Efeito dos peptídeos sobre a fosforilação da E7 do
HPV
Figura 3 A: Efeito dos peptídeos sobre a proliferação de células CaSki
Figura 3 B: Efeito dos peptídeos sobre a proliferação de células HeLa
Figura 4: Efeito dos peptídeos sobre a proliferação de células tumorais de pulmão
Figura 5: Efeito dos peptídeos na resposta a IFN de células transformadas por 5 HPV-16 (CaSki)
Figura 6: Efeito antitumoroso do peptídeo inibidor da fosforilação por CKII em modelos de tumores humanos implantados em camundongos atímicos
EXEMPLOS
Exemplo 1: Efeito dos peptídeos descritos sobre o sítio de fosforilação por CKII.
Este ensaio consiste de uma reação de fosforilação in vitro em que se usou como substrato a seqüência RRREEETEEE que representa o domínio consenso otimizado para a fosforilação por CKII. A mistura de reação é realizada em 50 μΐ de tamponador Tris:HCL 25 mM pH 7,5, 1 pCi de 32P- yATP, 100 μΜ de ATP, 2 mg/ml do peptídeo de substrato, 0,2 M de NaCl, 10 mM de MgCl e 1 unidade da enzima CKII (Promega). A reação é o
incubada a 37 C durante 10 minutos. Em seguida aplica-se 5 μΐ da reação em papel de filtro Whatmann PE-81 e realiza-se quatro lavagens com 10 mM de H3PO4 Finalmente lê-se a radioatividade associada com o papel de filtro e a quantidade de cpm por amostra reflete diretamente a atividade enzimática de CKII. Paralelamente inclui-se como controle no ensaio a heparina, que é um inibidor específico de referida enzima. Os resultados deste exemplo representados na Figura 1, demonstraram que os peptídeos em sua forma cíclica inibem a fosforilação por CKII em um 80 %. A variante dos peptídeos em sua forma linear também inibiram a fosforilação da região de 28-38 da E7 por CKII embora em menor grau, se comparado com a variante cíclica. Estas evidências indicam que os peptídeos descritos nesta invenção são efetivos na inibição do sítio de fosforilação por CKII e que a estrutura é essencial para sua interação com a seqüência-alvo.
Exemplo 2: Efeito dos peptídeos descritos sobre a fosforilação de E7 (HPV16) por CKII.
Este ensaio consiste de uma reação de fosforilação in vitro em que se usou como substrato a oncoproteína E7 do HPV-16 expressa em E. coli como proteína de fusão com Glutationa S-Transferase (GST). Antes da reação enzimática, a E7-GST foi purificada por cromatografia de afinidade usando Glutationa-Sefarose (Pharmacia). A mistura de reação é realizada em 50 μΐ de tamponador Tris:HCl 25 mM pH 7,5, 1 pCi de 32Ρ-γΑΤΡ, 100 μΜ de ATP, 40 μΐ da resina que contém E7-GST, 0,2 M de NaCl, 10 mM de MgCl e 1 unidade da enzima CKII (Promega). A reação é incubada a 37°C durante 40 minutos. Em seguida realiza-se três lavagens da resina com 0,5 ml do tamponador de reação e finalmente o nível de fosforilação da E7-GST é analisado numa eletroforese PAGE a 10 %. A visualização da proteína fosforilada foi realizada mediante a revelação de placas de raios X previamente expostas no gel seco. A quantificação da fosforilação de E7 foi realizada por meio de análise de densitometria das respectivas placas. Os resultados observados na Figura 2 indicam que os peptídeos descritos nesta invenção também são efetivos na inibição do sítio de fosforilação da CKII na E7 do HPV-16.
Exemplo 3: Efeito do peptídeo da presente invenção sobre o crescimento de células transformadas pelo HPV-16 (células CaSki) e pelo HPV-18 (células Hela).
Para este ensaio as células CaSki foram semeadas em placas de 96 poços (Costar) a uma densidade de 2 x 104 células/ml em meio
Dulbecco (DMEM) (Gibco) suplementado com Soro Fetal Bovino (Gibco). Ao final de 24 horas, os peptídeos foram adicionados no meio de cultivo numa faixa de dosagem compreendida entre 15 μΜ e 500 μΜ. A incubação foi realizada durante um período de 96 horas na presença deCC>2 a 5 % e ao final da mesma adicionou-se 20 μΐ de uma solução de MTS a 1,90 mg/ml. As placas foram mantidas durante mais 1 hora nas mesmas condições de incubação e finalmente realizou-se a leitura de absorbância a 490 nm. Os resultados são mostrados como percentual de crescimento dos controles sem peptídeo. Para este ensaio, cada peptídeo descrito, tanto em sua forma linear como cíclica, foi sintetizado fundido quimicamente ao peptídeo de penetração intracelular correspondente ao Tatl do VIH que demonstrou sua capacidade de transportação até o núcleo e o citoplasma (Schwarze SR, Dowdy SF, 2000, Trends Pharmacol 21:45-48). Os resultados obtidos neste ensaio demonstraram que os peptídeos descritos nesta invenção são capazes de produzir um efeito dependente da dose sobre a proliferação tanto das células
CaSki (HPV-16) (Figura 3 A) como das células HeLa (HPV-18) (Figura 3B). Este exemplo demonstra que os peptídeos descritos nesta invenção são efetivos não apenas o HPV-16 mas também para o HPV-18.
Exemplo 4: Efeito dos peptídeos sobre o crescimento de células tumorais não 5 associadas com o HPV.
Para este ensaio as células H-82 (carcinoma de células pequenas do pulmón) foram semeadas em placas de 96 poços (Costar) a uma densidade de 2 χ 104 células/ml em meio Dulbecco (DMEM) (Gibco) suplementado com Soro Fetal Bovino (Gibco). Ao cabo de 24 horas, cada peptídeo foi adicionado ao meio de cultivo numa faixa de dosagem entre 15 μΜ e 500 μΜ. A incubação foi realizada durante 96 horas na presença de CO2 a 5 % e ao final da mesma adicionou-se 20 μΐ de uma solução de MTS a 1,90 mg/ml. As placas foram mantidas durante mais 1 hora nas mesmas condições de incubação e finalmente realizou-se a leitura da absorbância a 490 nm. Os resultados são mostrados como percentual de crescimento dos controles sem peptídeo. Para este ensaio empregou-se os peptídeos da presente invenção em sua forma cíclica fundidos ao peptídeo de penetração intracelular correspondente ao Tatl do VIH referido antes. Os resultados obtidos neste ensaio demonstram que os peptídeos desta invenção produzem um efeito dependente da dose sobre a proliferação das células H-82. Na Figura 4 demonstra-se que os peptídeos descritos nesta invenção são efetivos não só para células transformadas mas também para células tumorais de outras localizações e tipos histológicos como as do carcinoma do pulmão de células pequenas.
Exemplo 5: Efeito dos peptídeos sobre a resposta do HPV-16 a IFN em células CaSki.
Para este ensaio as células CaSki foram semeadas em placas de 96 poços (Costar) a uma densidade de 2 χ 104 células/ml em meio Dulbecco (DMEM) (Gibco) suplementado com Soro Fetal Bovino (Gibco).
Ao final de 24 horas, cada peptídeo foi adicionado ao meio de cultivo a uma concentração de 120 μΜ. Ao final de 24 horas adicionou-se o IFN alfa numa faixa de dosagem entre 1000 e 31,5 U/ml. A incubação foi realizada durante 96 horas na presença de CO2 a 5 % e ao término da mesma adicionou-se 20 μΐ de uma solução de MTS a 1,90 mg/ml. As placas foram mantidas durante mais 1 hora nas mesmas condições de incubação e finalmente realizou-se a leitura da absorbância a 490 nm. Os resultados são mostrados como percentual de crescimento do controle. Para este ensaio empregou-se os peptídeos da presente invenção em sua forma cíclica fundidos ao peptídeo de penetração intracelular correspondente ao Tatl do VIH referido previamente. Os resultados observados na Figura 5 demonstraram que a incubação prévia das células CaSki com os peptídeos da presente invenção são capazes de sensibilizar as mesmas ao efeito antiproliferativo do IFN alfa o que sugere a utilidade destes no tratamento de pacientes infectados com HPV que mostram resistência ao tratamento con referida citocina.
Exemplo 6: Efeito antitumoroso do peptídeo inibidor da fosforilação por CKII em modelos de tumores humanos implantados em camundongos atímicos.
Nestes ensaios utilizou-se camundongos BalbC de sexo feminino e entre 6 e 8 semanas de nascidos. Para a implantação do tumor neste modelo, utilizou-se as células H-125 procedentes de um carcinoma do pulmão de células não pequenas que foram ressuspensas em solução salina (PBS) a uma concentração de 1.000.000 células por mililitro. A suspensão celular foi inoculada por via subcutânea na cavidade abdominal. A administração do peptídeo (seq. 1 na lista) foi realizada paralelamente à das células e, depois, foi continuada em dias alternados até completar um mês de tratamento. Nestes ensaios avaliou-se doses compreendidas numa faixa entre lelO mg de peptídeo por kg de peso. Os parâmetros avaliados para medir o efeito antitumoroso do peptídeo de interesse foram a massa tumoral e a sobrevida dos animais. Como se pode observar na figura 6, as três doses de
peptídeo empregadas foram efetivas no que se refere à capacidade de inibir a progressão do tumor. Estes resultados evidenciam a eficácia antitumorosa do peptídeo inibidor da fosforilação por CKII em um modelo de tumores humanos implantados em animais experimentais.
1/1
Claims (4)
1/4
FIGURA 1
80000 -τ
70000 60000 _ 50000 Ο 40000 ° 30000 20000 10000 0 -
Controle Peptídeos cíclicos
Peptídeos lineares
Variantes
S peptídeo 1 B peptídeo 2 □ peptídeo 3 □ peptídeo 4 B peptídeo 5 © peptídeo 6 (9 peptídeo 7 □peptídeo 8 peptídeo 9 s peptídeo 10 □peptídeo 11
FIGURA 2
90000
80000
70000
60000
50000
40000
30000
20000
10000 c
o o
□ peptídeo 1 EI peptídeo 2 □ peptídeo 3 □ peptídeo 4 Q peptídeo 6 θ peptídeo 7 ® peptídeo 8 □ peptídeo 9 B peptídeo 10 Ξ peptídeo 11
Variantes
1. Peptídeos com capacidade de ligação com o sítio de fosforilação por Caseína Quinase II (CKII), caracterizados pelo fato de que apresentam as sequências:
(a) CSVRQGPVQKC (SEQ ID NO. 1) (b) CSSCQNSPALC (SEQ ID NO. 2) (c) CQIPQRTATRC (SEQ ID NO. 3) (d) CAKQRTDPGYC (SEQ ID NO. 4) (e) CWMSPRHLGTC (SEQ ID NO. 5) (f) CRNCTVIQFSC (SEQ ID NO. 6) (g) CHYIAGTVQGC (SEQ ID NO. 7) (h) CPLVSLRDHSC (SEQ ID NO. 8) (i) CKQSYLHHLLC (SEQ ID NO. 9) (j) CFQPLTPLCRC (SEQ ID NO. 10) (k) CQSYHELLLQC (SEQ ID NO. 11).
2/4
FIGURA 3 A —♦—peptídeo 1 —®— peptídeo 2 —ô—peptídeo 3 —μ—peptídeo 4 x peptídeo 5 —e—peptídeo 6 —(—peptídeo 7 __ peptídeo 8 —^.peptídeo 9 _o_peptídeo 10 _θ_ peptídeo 11 —peptídeo 1 —o— peptídeo 2 peptídeo 3 )t peptídeo 4 χ peptídeo 5
-«—peptídeo 6 _h_peptídeo 7 _—peptídeo 8 _ peptídeo 9 —o—peptídeo 10 —o peptídeo 11 • ·
2. Peptídeos de acordo com a reivindicação 1, caracterizados pelo fato de que apresentam, de preferência, uma estrutura cíclica.
3/4
ÍXT-r*
FIGURA 4 —♦—peptídeo 1 -a—peptídeo 2 —ώ—peptídeo 3 _k_ peptídeo 4 x peotídeo 5 peptídeo 6 -peptídeo 7
-peptídeo 8 —peptídeo 9 —o-peptídeo 10 _o_ peptídeo 11
FIGURA 5
Dose de IFN (U/ml)
-IFN
-IFN + pept.1
- IFN + pept.2 -IFN + pept.3 -IFN + pept.4 -IFN + pept.5 -IFN + pept.6
- IFN + pept.7 -IFN + pept.8 -IFN + pept.9 -IFN + pept.10 -IFN + pept.11
3. Peptídeos de acordo com as reivindicações 1 e 2, caracterizados pelo fato de que fazem parte de um peptídeo de fusão com o peptídeo Tat-1, que apresenta a sequência GRKKRRQRRRPPQ (SEQ ID NO. 12).
4. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um ou mais dos peptídeos das reivindicações de 1 a 3, e também um veículo apropriado.
5. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 4, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente uma citocina.
6. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo fato de que a referida citocina é um interferon.
Petição 870180034037, de 26/04/2018, pág. 7/9
4/4
FIGURA 6 —·— 1 mg/kg —o— 5 mg/kg —Δ— 10mg/kg v controle
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CU20010309A CU23225A1 (es) | 2001-12-20 | 2001-12-20 | PéPTIDOS PARA EL TRATAMIENTO DEL CáNCER ASOCIADO AL VIRUS PAPILOMA HUMANO (VPH) Y DE OTROS TUMORES EPITELIALES |
| CU0309/01 | 2001-12-20 | ||
| PCT/CU2002/000010 WO2003054002A1 (es) | 2001-12-20 | 2002-12-04 | Péptidos para el tratamiento del cáncer asociado al virus papiloma humano (vph) y de otros tumores epiteliales |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BR0215213A BR0215213A (pt) | 2004-12-07 |
| BRPI0215213B1 true BRPI0215213B1 (pt) | 2018-09-11 |
| BRPI0215213C1 BRPI0215213C1 (pt) | 2021-05-25 |
Family
ID=40091679
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BRPI0215213A BRPI0215213C1 (pt) | 2001-12-20 | 2002-12-04 | peptídeos com capacidade de ligação com o sítio de fosforilação por caseína quinase ii, e, composição farmacêutica |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7374767B2 (pt) |
| EP (2) | EP2383282A1 (pt) |
| JP (1) | JP4056476B2 (pt) |
| KR (1) | KR100642437B1 (pt) |
| CN (1) | CN100368431C (pt) |
| AR (1) | AR037825A1 (pt) |
| AT (1) | ATE520704T1 (pt) |
| AU (1) | AU2002361922B2 (pt) |
| BR (1) | BRPI0215213C1 (pt) |
| CA (1) | CA2471110C (pt) |
| CR (1) | CR7361A (pt) |
| CU (1) | CU23225A1 (pt) |
| DK (1) | DK1491553T3 (pt) |
| DO (1) | DOP2002000548A (pt) |
| ES (1) | ES2371239T3 (pt) |
| HN (1) | HN2002000377A (pt) |
| HR (1) | HRP20040663B1 (pt) |
| IL (2) | IL162633A0 (pt) |
| IS (1) | IS2906B (pt) |
| MA (1) | MA27868A1 (pt) |
| MX (1) | MXPA04005832A (pt) |
| MY (1) | MY133530A (pt) |
| NO (1) | NO333259B1 (pt) |
| NZ (1) | NZ534170A (pt) |
| PE (1) | PE20030861A1 (pt) |
| PT (1) | PT1491553E (pt) |
| RU (1) | RU2290410C2 (pt) |
| SI (1) | SI1491553T1 (pt) |
| TN (1) | TNSN04114A1 (pt) |
| UA (1) | UA81403C2 (pt) |
| UY (1) | UY27602A1 (pt) |
| WO (1) | WO2003054002A1 (pt) |
| ZA (1) | ZA200405514B (pt) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CU23225A1 (es) * | 2001-12-20 | 2007-08-30 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | PéPTIDOS PARA EL TRATAMIENTO DEL CáNCER ASOCIADO AL VIRUS PAPILOMA HUMANO (VPH) Y DE OTROS TUMORES EPITELIALES |
| CU23431B6 (es) * | 2005-05-12 | 2009-10-16 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Método para la inhibición de la proliferación de células tumorales y el tratamiento del cáncer |
| GB2433740A (en) * | 2005-12-23 | 2007-07-04 | Rapid Biosensor Systems Ltd | Detection of tuberculosis infection |
| CU23511B6 (es) * | 2006-02-28 | 2010-04-13 | Biorec B V | Combinación farmacéutica para el tratamiento y/o quimiosensibilización de tumores refractarios a drogas anticancerígenas |
| GB2441131A (en) * | 2006-08-24 | 2008-02-27 | Univ Dundee | Modulation of binding of CK2a to NDPK |
| CN100522992C (zh) * | 2007-02-12 | 2009-08-05 | 中国科学院昆明动物研究所 | 一种环状小肽ba |
| EP2133083A4 (en) * | 2007-03-27 | 2012-02-15 | Taiko Pharmaceutical Co Ltd | THERAPEUTIC FOR SKIN OR MOLECULE INFECTIONS |
| US20110305706A1 (en) | 2009-02-23 | 2011-12-15 | Scott Thomas Brady | Compositions and Methods for Treating a Disease Mediated by Soluble Oligomeric Amyloid Beta |
| CA2755245A1 (en) * | 2009-03-13 | 2010-09-16 | Egen, Inc. | Compositions and methods for the delivery of biologically active rnas |
| IL290457B2 (en) | 2015-12-30 | 2025-02-01 | Kodiak Sciences Inc | Antibodies and their conjugates |
| CU20200103A7 (es) * | 2020-12-18 | 2022-07-08 | Ct Ingenieria Genetica Biotecnologia | Péptido sintético para la inducción de inmunidad antitumoral y antiviral |
| CU24766B1 (es) | 2021-07-09 | 2025-08-13 | Ct Ingenieria Genetica Biotecnologia | Péptidos lineales que inhiben la fosforilación mediada por ck2 |
| CN118370805B (zh) * | 2024-04-29 | 2025-02-14 | 广州中科佰氏健康产业有限公司 | 一种抑菌妇科凝胶及其制备方法 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IE902820A1 (en) | 1989-08-07 | 1991-02-27 | Merck & Co Inc | Peptide inhibitors of human papilloma virus protein binding¹to retinoblastoma gene proteins |
| JPH05310784A (ja) * | 1991-09-04 | 1993-11-22 | Merck & Co Inc | ヒト乳頭腫ウイルスタンパク質と網膜芽細胞腫遺伝子タンパク質との結合のペプチド阻害剤 |
| GB9313556D0 (en) | 1993-07-01 | 1993-08-18 | British Tech Group | Synthetic peptides of human papillomavirus |
| US5625031A (en) * | 1994-02-08 | 1997-04-29 | Bristol-Myers Squibb Company | Peptide inhibitors of the p33cdk2 and p34cdc2 cell cycle regulatory kinases and human papillomavirus E7 oncoprotein |
| ATE235509T1 (de) * | 1998-06-30 | 2003-04-15 | Deutsches Krebsforsch | Peptide zur inhibition von hpv e7 proteinen |
| US6641994B2 (en) * | 1999-08-25 | 2003-11-04 | Pharmacia & Upjohn Company | Methods of identifying anti-viral agents |
| AU2001238347A1 (en) * | 2000-02-28 | 2001-09-12 | Hyseq, Inc. | Novel nucleic acids and polypeptides |
| CU23225A1 (es) * | 2001-12-20 | 2007-08-30 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | PéPTIDOS PARA EL TRATAMIENTO DEL CáNCER ASOCIADO AL VIRUS PAPILOMA HUMANO (VPH) Y DE OTROS TUMORES EPITELIALES |
-
2001
- 2001-12-20 CU CU20010309A patent/CU23225A1/es unknown
-
2002
- 2002-04-12 UA UA20040705927A patent/UA81403C2/uk unknown
- 2002-12-04 CA CA2471110A patent/CA2471110C/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-04 EP EP11168526A patent/EP2383282A1/en not_active Ceased
- 2002-12-04 RU RU2004122084/13A patent/RU2290410C2/ru active
- 2002-12-04 PT PT02796490T patent/PT1491553E/pt unknown
- 2002-12-04 KR KR1020047009771A patent/KR100642437B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2002-12-04 AU AU2002361922A patent/AU2002361922B2/en not_active Ceased
- 2002-12-04 MX MXPA04005832A patent/MXPA04005832A/es active IP Right Grant
- 2002-12-04 BR BRPI0215213A patent/BRPI0215213C1/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-12-04 AT AT02796490T patent/ATE520704T1/de active
- 2002-12-04 CN CNB028282698A patent/CN100368431C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-04 DK DK02796490.7T patent/DK1491553T3/da active
- 2002-12-04 IL IL16263302A patent/IL162633A0/xx active IP Right Grant
- 2002-12-04 JP JP2003554718A patent/JP4056476B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2002-12-04 US US10/499,458 patent/US7374767B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-04 SI SI200230967T patent/SI1491553T1/sl unknown
- 2002-12-04 WO PCT/CU2002/000010 patent/WO2003054002A1/es not_active Ceased
- 2002-12-04 HR HRP20040663AA patent/HRP20040663B1/hr not_active IP Right Cessation
- 2002-12-04 EP EP02796490A patent/EP1491553B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-04 ES ES02796490T patent/ES2371239T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-04 NZ NZ534170A patent/NZ534170A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-12-11 MY MYPI20024638A patent/MY133530A/en unknown
- 2002-12-13 AR ARP020104844A patent/AR037825A1/es not_active Application Discontinuation
- 2002-12-17 DO DO2002000548A patent/DOP2002000548A/es unknown
- 2002-12-19 HN HN2002000377A patent/HN2002000377A/es unknown
- 2002-12-20 UY UY27602A patent/UY27602A1/es active IP Right Grant
-
2003
- 2003-01-06 PE PE2003000006A patent/PE20030861A1/es not_active Application Discontinuation
-
2004
- 2004-06-04 CR CR7361A patent/CR7361A/es unknown
- 2004-06-15 MA MA27740A patent/MA27868A1/fr unknown
- 2004-06-16 IS IS7320A patent/IS2906B/is unknown
- 2004-06-17 TN TNP2004000114A patent/TNSN04114A1/en unknown
- 2004-06-20 IL IL162633A patent/IL162633A/en not_active IP Right Cessation
- 2004-07-12 ZA ZA2004/05514A patent/ZA200405514B/en unknown
- 2004-07-20 NO NO20043112A patent/NO333259B1/no not_active IP Right Cessation
-
2008
- 2008-04-08 US US12/099,646 patent/US7947287B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7947287B2 (en) | Peptides for the treatment of cancer associated with the human papilloma virus (HPV) and other epithelial tumors | |
| ES2985967T3 (es) | Métodos y composiciones para el tratamiento del cáncer | |
| US9314497B2 (en) | E2F as a target of hormone refractory prostate cancer | |
| EP3684783B1 (en) | Gene expression inhibitors | |
| US8598126B2 (en) | Peptides for inhibiting the HPV-E6 oncoprotein | |
| Dymalla et al. | A novel peptide motif binding to and blocking the intracellular activity of the human papillomavirus E6 oncoprotein | |
| US7235244B2 (en) | Compositions and methods for treating papillomavirus-infected cells | |
| Donne et al. | Scientific and clinical aspects of the use of cidofovir in recurrent respiratory papillomatosis | |
| US20240226036A1 (en) | 2-s rimantadine and 2-r rimantadine for treating cancer | |
| JP7333538B2 (ja) | 抗ウイルス性ペプチドおよびその利用 | |
| Wilson et al. | Molecular targets for papillomavirus therapy | |
| HK1068901B (en) | Peptides for the treatment of cancer associated with the human papilloma virus (hpv) and other epithelial tumours | |
| US20210380642A1 (en) | Antiviral peptide and use thereof | |
| JP2002519357A (ja) | Ｈｐｖｅ７タンパク質を阻害するペプチド | |
| Noya | Modulation of S-phase re-entry in differentiated keratinocytes by the human papillomavirus E7 gene | |
| Hoppe-Seyler et al. | Peptide aptamers targeting the viral E6 oncoprotein induce apoptosis in HPV-positive cancer cells | |
| Genovese | The mechanism of human papillomavirus E7 protein mediated s-phase reentry in the squamous epithelium | |
| CN1372598A (zh) | 诱导细胞死亡的方法 | |
| Yu | MAPKs regulate nuclear import of human papillomavirus type 11 replicative helicase E1 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B06F | Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette] | ||
| B07D | Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette] | ||
| B07E | Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette] |
Free format text: NOTIFICACAO DE ANUENCIA RELACIONADA COM O ART 229 DA LPI |
|
| B06A | Patent application procedure suspended [chapter 6.1 patent gazette] | ||
| B06A | Patent application procedure suspended [chapter 6.1 patent gazette] | ||
| B09A | Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette] | ||
| B16A | Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette] | ||
| B16C | Correction of notification of the grant [chapter 16.3 patent gazette] |
Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 21/08/2018, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. (CO) REFERENTE A RPI 2485 DE 21/08/2018, QUANTO AO TITULO. |
|
| B16C | Correction of notification of the grant [chapter 16.3 patent gazette] |
Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 04/12/2002 OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. PATENTE CONCEDIDA CONFORME ADI 5.529/DF |
|
| B21F | Lapse acc. art. 78, item iv - on non-payment of the annual fees in time |
Free format text: REFERENTE A 20A ANUIDADE. |
|
| B24J | Lapse because of non-payment of annual fees (definitively: art 78 iv lpi, resolution 113/2013 art. 12) |
Free format text: EM VIRTUDE DA EXTINCAO PUBLICADA NA RPI 2699 DE 27-09-2022 E CONSIDERANDO AUSENCIA DE MANIFESTACAO DENTRO DOS PRAZOS LEGAIS, INFORMO QUE CABE SER MANTIDA A EXTINCAO DA PATENTE E SEUS CERTIFICADOS, CONFORME O DISPOSTO NO ARTIGO 12, DA RESOLUCAO 113/2013. |