BRPI0609457A2

BRPI0609457A2 - composições alimentìcias para animais de estimação compreendendo dois componentes

Info

Publication number: BRPI0609457A2
Application number: BRPI0609457-0A
Authority: BR
Inventors: Thomas William Maxwell Boileau; Marko Stojanovic; Gregory Dean Sunvold
Original assignee: Iams Company
Priority date: 2005-04-11
Filing date: 2006-04-04
Publication date: 2010-04-06
Also published as: EP1868447B1; ES2347881T3; EP1868447A1; US20060228448A1; IN2007DE07281A; AR053052A1; CA2604838C; DE602006015448D1; MX2007012591A; WO2006110407A1; US20080220126A1; EP2191732A1; ATE473644T1; CA2604838A1; US20080248156A1; AU2006235039A1; JP2008535521A; AU2006235039B2

Abstract

COMPOSIçõES ALIMENTìCIAS PARA ANIMAIS DE ESTIMAçãO COMPREENDENDO DOIS COMPONENTES. As composições alimentícias para animais de estimação compreendendo um primeiro componente, o qual compreende uma fonte de proteína, uma fonte de gordura e uma fonte de carboidrato, e um segundo componente, o qual compreende um produto biológico selecionado do grupo consistindo em um componente probiático, leveduras, enzimas, anticorpos, imunoglobulinas, citoquinas e combinações dos mesmos, são úteis para a obtenção de composições alimentícias para animais de estimação que sejam suficientemente estáveis para que quantidades eficazes do produto biológico estejam presentes nas mesmas no momento da ingestão por um animal de estimação.

Description

COMPOSIÇÕES ALIMENTÍCIAS PARA ANIMAIS DE ESTIMAÇÃOCOMPREENDENDO DOIS COMPONENTES"

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a ' composiçõesalimentícias para animais de estimação compreendendo doiscomponentes, sendo que o primeiro componente compreende umafonte de proteína, uma fonte de gordura, e uma fonte decarboidrato, enquanto o segundo componente compreende umcomponente probiótico. A presente invenção éparticularmente útil para a obtenção de composiçõesalimentícias para animais de estimação que sejamsuficientemente estáveis para que os microorganismosprobióticos estejam presentes nas mesmas no momento de suaingestão por um mamífero, sendo que, de preferência, omamífero é um ser humano e/ou um animal de estimação.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Composições alimentícias para animais de estimaçãocontendo microorganismos probióticos seriam desejáveis natécnica. Embora tenham ocorrido, comercialmente, diversastentativas de obtenção dessas composições, muitas nãoofereciam teores eficazes suficientes de microorganismosprobióticos viáveis, devido a problemas associados àsuscetibilidade dos ditos microorganismos aos procedimentosconvencionais para a fabricação em escala comercial dealimento para animais de estimação, como extrusão. Porexemplo, foram sugeridos esforços no sentido de revestir ourechear formatos convencionais de alimento para animais deestimação com microorganismos probióticos mas, na prática,estes freqüentemente se mostraram pouco práticos. Paraevitar problemas associados à fabricação convencional emescala comercial de alimentos para animais de estimação,outros fabricantes podem oferecer recipientes commicroorganismos probióticos em pó para polvilhar sobrealimentos convencionais para animal de estimação. Isso, noentanto, cria problemas quanto a conveniência econformidade, de modo que um desenvolvimento ainda maiornessa área se faz necessário para a obtenção de umacomposição eficaz de alimento para animais de estimação queseja bem-sucedida no mercado e que obtenha um uso amplamentedisseminado entre guardiões de animais de estimação.

SUMARIO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a composiçõesalimentícias para animais de estimação que possam sersuficientemente estáveis para que um componente biológicoestej a presente nas mesmas no momento da ingestão por umanimal de estimação. As composições alimentícias paraanimais de estimação compreendem:

(a) um primeiro componente compreendendo uma fonte deproteína, uma fonte de gordura e uma fonte decarboidrato; e

(b) um segundo componente, tendo uma atividade de água decerca de 0,2 ou menos, sendo que o segundo componentecompreende um produto biológico selecionado do grupocons i s t i ndo em um component e probi ót i co t endo umacontagem de microorganismos probióticos viáveis de aomenos cerca de IO5 UFC/grama do segundo componente,bem como leveduras, enzimas, anticorpos,imunoglobulinas, citoquinas e combinações dos mesmos.A presente invenção refere-se, também, a métodospara tratamento profilático, terapêutico ou não-terapêuticodestinados a aliviar doenças ou problemas de saúde queafetam o animal de estimação, compreendendo a administraçãode uma composição conforme descrito na presente invenção.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Diversos documentos, inclusive, por exemplo,publicações e patentes, são citados ao longo desta descrição.Todos esses documentos estão, em sua parte relevante, aquiincorporados a título de referência. A menção a qualquerdocumento não deve ser interpretada como admissão de que esterepresente técnica anterior com respeito à presente invenção.Se algum significado ou definição de um termo deste documentoescrito entrar em conflito com algum significado ou definiçãodo termo em um documento incorporado por referência, osignificado ou definição atribuída ao termo neste documentoescrito terá precedência.

Todas as porcentagens e razões são calculadas empeso, exceto onde indicado em contrário. Todas asporcentagens e razões são calculadas com base no total dacomposição, exceto onde indicado em contrário.

São feitas, neste documento, referências a nomescomerciais de componentes que incluem diversos ingredientesutilizados na presente invenção. Os inventores não têm aintenção de limitar-se aos materiais disponíveis sob umdeterminado nome comercial. Materiais equivalentes (porexemplo, aqueles obtidos de diferentes fontes, sob nomes ounúmeros de referência diferentes) aos mencionados pelo nomecomercial podem ser usados nas descrições da presenteinvenção.

Na descrição da invenção, são apresentadas váriasmodalidades ou características individuais. Como ficaráevidente para o versado na técnica, todas as combinaçõesdessas modalidades e características são possíveis, e podemresultar em realizações preferenciais da presente invenção.

As composições da presente invenção podemincluir, consistir essencialmente em, ou consistir emqualquer dos elementos aqui descritos.

Embora diversas modalidades e característicasindividuais da presente invenção tenham sido ilustradas edescritas, várias outras alterações e modificações podemser feitas sem se afastar do espírito e do escopo dainvenção. Como ficará evidente, também, todas ascombinações das modalidades e características apresentadas na descrição anteriormente mencionada são possíveis e podemresultar em realizações preferenciais da invenção.

Para uso na presente invenção, o termo "animal deestimação" significa um animal doméstico incluindo, mas nãose limitando a, cães e gatos domésticos, bem como a cavalos,vacas, furões, coelhos, porcos e similares. Os cães e gatosdomésticos são preferenciais na presente invenção.

Para uso na presente invenção, o termo "composiçãoalimentícia para animais de estimação" significa umacomposição que se destina à ingestão por um animal deestimação. As composições alimentícias para animais deestimação podem incluir, sem limitação, composiçõesnutricionalmente balanceadas adequadas ao uso como raçãodiária, bem como suplementos (por exemplo, petiscos) , osquais podem ou não ser nutricionalmente balanceados.

Para uso na presente invenção, o termo"microorganismo probiótico viável" ou similares significa ummicroorganismo probiótico em seu estado vivo que, pordefinição, inclui, porém não se limita àqueles em estado dedormência ou sob a forma de esporos.

COMPOSIÇÕES DA PRESENTE INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a composiçõesalimentícias para animais de estimação que possam sersuficientemente estáveis para que um produto biológico estejapresente nas mesmas no momento da ingestão por um mamífero,mantendo assim a atividade da composição. As composiçõesalimentícias para animais de estimação compreendem:

(b) um segundo componente, tendo uma atividade de água decerca de 0,2 ou menos, sendo que o segundo componentecompreende um produto biológico selecionado do grupoconsistindo em um componente probiótico tendo umacontagem de microorganismos probióticos viáveis de aomenos cerca de IO5 UFC/grama do segundo componente,bem como leveduras, enzimas, anticorpos,imunoglobulinas, citoquinas e combinações dos mesmos.A composição alimentícia para animais deestimação pode estar em qualquer forma que possa seradministrada oralmente. As composições alimentícias paraanimais de estimação são prontamente compreendidas natécnica, por exemplo alimentos secos (por exemplo, raçõesao menos parcialmente extrudadas) e alimentos menosquebradiços (por exemplo, alimentos semi-úmidos) , oumisturas dos mesmos. Em uma modalidade da presenteinvenção, a composição alimentícia para animais deestimação é uma mistura de um alimento seco (o primeirocomponente) e um alimento menos quebradiço (o segundocomponente, devido ao componente de lipidio ali contido).

0 primeiro e o segundo componentes da composiçãosão componentes fisicamente distintos (por exemplo, oprimeiro e o segundo componentes não estão associados um aooutro como estão a "porção mais macia à base de lipidio" e a"porção de material de cápsula ou de matriz mais rígida" docomponente com textura dual apresentado na patente U.S. n°6.254.910). Em uma modalidade, o segundo componente não éextrudado, de modo a evitar as condições relativamenteadversas que são necessárias ao processo de extrusão. Acomposição alimentícia para animais de estimação pode serfornecida sob a forma de qualquer dentre várias apresentaçõesdiferentes do primeiro e do segundo componentes. Por exemplo,a composição alimentícia para animais de estimação pode serfornecida sob a forma de uma mistura do primeiro e do segundocomponentes sendo que, a título de ilustração, o primeirocomponente pode ser fornecido sob a forma de uma pluralidadede rações (que são ao menos parcialmente extrudadas) ,enquanto o segundo componente pode ser fornecido sob a formade uma pluralidade de peletes, sendo que a composição éfornecida como uma mistura heterogênea de rações e peletes.

Como outro exemplo, o primeiro e o segundocomponentes podem ser fornecidos sob a forma de componentesembalados separadamente, os quais podem ser combinados dequalquer maneira desej ada no momento da alimentação. Atítulo de ilustração, a composição alimentícia para animaisde estimação pode compreender um primeiro dispositivo deembalagem e um segundo dispositivo de embalagem, sendo queo primeiro dispositivo de embalagem contém ao menos umaporção do primeiro componente, enquanto o segundodispositivo de embalagem contém ao menos uma porção dosegundo componente, por exemplo, o primeiro dispositivo deembalagem pode ser uma bolsa, enquanto o segundodispositivo de embalagem pode ser uma lata. Por uma questãode conveniência para o consumidor, a bolsa contendo aomenos uma porção do primeiro componente pode, também,conter a lata contendo ao menos uma porção do segundocomponente. Qualquer uma, dentre diversas apresentações,será bem compreendida pelos versados na técnica.

As composições alimentícias para animais deestimação, ou os componentes das mesmas, podem ou não sernutricionalmente balanceados. Para uso na presenteinvenção, o termo "nutricionalmente balanceado", em relaçãoa composições alimentícias para animais de estimação ou aum componente das mesmas, significa que a dita composiçãoou o dito componente tem nutrientes necessários conhecidospara a manutenção da vida, em quantidades e proporçõesadequadas, com base nas recomendações de autoridadesreconhecidas na indústria de nutrição para animais deestimação, exceto pela necessidade adicional de água.

O primeiro componente

0 primeiro componente das composiçõesalimentícias para animais de estimação da presente invençãocompreende uma fonte de proteína, uma fonte de gordura euma fonte de carboidrato. Exemplos de um primeirocomponente incluem composições tradicionais de alimentospara animais de estimação, como rações. O primeirocomponente propriamente dito pode, ou não, sernutricionalmente balanceado. Em uma modalidade, o primeirocomponente é nutricionalmente balanceado.

Em uma modalidade, o primeiro componente podecompreender, com base na matéria seca, de cerca de 20% acerca de 50%, ou de cerca de 22% a cerca de 40% de proteínabruta, em peso do -primeiro componente. O material deproteína bruta pode compreender qualquer material tendo umteor de proteínas de ao menos cerca de 15% em peso, sendoque alguns exemplos não-limitadores destes incluemproteínas vegetais como feij ão soj a, caroço de algodão eamendoim, e proteínas animais como caseína, albumina etecido cárneo. Alguns exemplos não-limitadores de tecidocárneo útil à presente invenção incluem carne fresca efarinhas secas ou processadas, como farinha de peixe,farinha de aves, farinha de carne, farinha de ossos esimilares. Outros tipos de fontes adequadas de proteínabruta incluem glúten de trigo ou de milho, e proteínasextraídas de fontes microbianas, como levedura.

O primeiro componente compreende uma fonte degordura. Em uma modalidade, o primeiro componente podecompreender, com base na matéria seca, de cerca de 5% acerca de 35%, de preferência de cerca de 10% a cerca de 30%de gordura, em peso do primeiro componente. As fontes degordura são amplamente conhecidas, inclusive aquelesdelineadas abaixo em relação ao componente de lipídio.

São fontes ilustrativas de carboidrato os grãos oucereais como arroz, milho, milo, sorgo, cevada, alfafa, trigoe similares. Essas fontes de carboidrato, bem como os teorestípicos das mesmas, são amplamente conhecidas em composiçõestradicionais de alimentos para animais de estimação.

Um processo adequado para a preparação do primeirocomponente das composições alimentícias para animais deestimação da presente invenção consiste em extrusão ao menosparcial, embora assamento e outros processos adequadospossam ser usados. Quando extrudado, o alimento seco paraanimais de estimação é geralmente fornecido sob a forma deuma ração. Um processo é descrito em EP 0.850.569.O segundo componente

O segundo componente presente nas composiçõesalimentícias para animais de estimação da invenção tem umaatividade de água de cerca de 0,2 ou menos. O segundocomponente compreende um produto biológico selecionado dogrupo consistindo em um componente probiótico tendo umacontagem de microorganismos probióticos viáveis de ao menoscerca de IO5 UFC/grama do segundo componente, bem comoleveduras, enzimas, anticorpos, imunoglobulinas, citoquinase combinações dos mesmos.

Descobriu-se, na presente invenção, que essa baixaatividade de água é de importância crítica para o sucesso damesma. Por exemplo, sem se ater à teoria, a baixa atividadede água pode permitir a manutenção do estado de dormência dealguns ou de todos os microorganismos probióticos que possamestar presentes ou, de outro modo, preservar a integridade 'doproduto biológico. Determinados alimentos para animal deestimação disponíveis comercialmente, tendo níveis mais altosde atividade de água e contendo microorganismos probióticos,podem não ser estáveis, isto é, quase todos osmicroorganismos ali contidos podem j á não ser viáveis nomomento da comercialização. Um exemplo de alimento paraanimais de estimação disponível comercialmente contendomicroorganismos probióticos é aquele denominado BLUE(anunciado para cães adultos como contendo "pedacinhos devida") , disponível comercialmente junto à The Blue BuffaloCompany. Outros produtos biológicos podem ser menosconhecidos nas matrizes de alimento para animais deestimação.

0 segundo componente tem uma atividade de água decerca de 0,2 ou menos, ou cerca de 0,1 ou menos. Porexemplo, o segundo componente pode ter uma atividade deágua de cerca de 0,5 a cerca de.0,15. Para uso na presenteinvenção, o termo "atividade de água" (aw) geralmenterefere-se à quantidade de água livre disponível paraparticipar em reações químicas. A atividade de água podeser determinada usando-se métodos conhecidos pelos versadosna técnica. Na presente invenção, a atividade de água édeterminada usando-se um medidor de atividade de águaNovaSina TH2 0 0 a 2 5 °C. O medidor é calibrado mediante ouso de sais de calibração. A amostra a ser medida éequilibrada quanto à temperatura, no medidor, e a atividadede água é determinada, em seguida, como a porcentagem deumidade relativa (%RH) dividida por 100, após o equilíbrioter sido alcançado (tipicamente de 10 a 20 minutos).

O segundo componente compreende um produtobiológico selecionado do grupo consistindo em um componenteprobiót ico tendo uma contagem de mi croorgani smosprobióticos viáveis de ao menos cerca de IO5 UFC/grama dosegundo componente, bem como leveduras, enzimas,anticorpos, imunoglobulinas e combinações dos mesmos.

0 segundo componente pode compreender um componenteprobiótico. O componente probiótico compreende um ou maisitens, dentre ou microorganismos bacterianos probióticos,adequados ao consumo por animais de. estimação e eficazes paraa melhoria do equilíbrio microbiano no trato gastrointestinaldos mesmos, ou para a obtenção de outros benefícios para odito animal, como alívio ou profilaxia de doença ou problemade saúde (sendo que os benefícios da presente invenção sãodescritos com mais detalhes na seção de Métodos, mais adianteneste documento) . Diversos microorganismos probióticosconhecidos na técnica são adequados ao uso na presenteinvenção. Vide, por exemplo, WO 03/075676, Societe DesProduits Nestle, publicado em 18 de setembro de 2003.

Em uma modalidade da invenção, o componenteprobiótico é selecionado do grupo consistindo em bactériasdos gêneros Bacillus, Bacteroides, Bifidobacterium,Enterococcus (por exemplo, Enterococcus faecium DSM 10663),Lactobacillus e Leuconostoc, e combinações dos mesmos. Emoutra modalidade da invenção, o probiótico é selecionadodentre bactérias dos gêneros Bifidobacterium, Lactobacilluse combinações dos mesmos.

Aquelas dos gêneros Bacillus podem formar esporos.Em uma modalidade, o componente probiótico não forma esporos.

Alguns exemplos não-limitadores de bactériasformadoras de ácido láctico adequadas ao uso na presenteinvenção incluem cepas de Streptococcus lactis, Streptococcuscremoris, Streptococcus diacetylactis, Streptococcusthermophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillusacidophilus (por exemplo Lactobacillus acidophilus cepa DSM13241,), Lactobacillus helveticus, Lactobacillus bifidus,Lactobacillus casei, Lactobacillus lactis, Lactobacillusplantarum, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus delbruekii,Lactobacillus thermophilus, Lactobacillus fermentii,Lactobacillus salivarius, Lactobacillus reuteri,

Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis,Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium animalis,Bifidobacterium pseudolongum e Pediococcus cerevisiae, oumisturas dos mesmos, de preferência Lactobacillus salivarius fBifidobacterium infantis ou misturas dos mesmos.

Como exemplos não-limitadores, são preferenciais ascepas de Bifidobacterium isoladas do trato gastrointestinalhumano ressecado e lavado, conforme apresentado em WO00/42168. Por exemplo, pode ser usada a cepa Bifidobacteriuminfantis denominada UCC35624, que está descrita comodepositada no National Collections of Industrial and MarineBactéria Ltd (NCIMB) em 13 de janeiro de 1999, e à qual foiatribuído o número de acesso NCIMB 41003. As cepas isoladas apartir de trato gastrointestinal canino ou felino ressecado elavado podem ser particularmente úteis.

Em outro exemplo não-limitador, são preferenciaisas cepas de Lactobacillus salivarius isoladas do tratogastrointestinal humano ressecado e lavado, conformedescrito em WO 98/35014. São mais preferenciais as cepas deLactobacillus salivarius denominadas UCC 1 e UCC 118,descritas como depositadas no National Collections ofIndustrial and Marine Bactéria Ltd (NCIMB) em 2 7 denovembro de 1996, e às quais foram concedidos os números deacesso NCIMB 40830 e 40829, respectivamente.

O segundo componente tem uma contagem demicroorganismos probióticos viáveis de ao menos cerca deIO5, ou ao menos cerca de IO6, ou ao menos cerca de IO8unidades formadoras de colônia (UFC) por grama do segundocomponente. Por exemplo, o segundo componente pode ter umacontagem de microorganismos probióticos viáveis de até cercade 1012, ou até cerca de 1010, ou até cerca de IO9 UFC porgrama do segundo componente. A enumeração, conforme definidapelas UFC, é determinada mediante o uso do método fornecidomais adiante neste documento. Vantajosamente, a composiçãoaqui apresentada compreende um segundo componente que temuma vida em armazenagem de ao menos cerca de três meses,alternativamente ao menos cerca de seis meses,alternativamente de cerca de três meses a cerca de vinte equatro meses e, alternativamente, de cerca de seis meses acerca de dezoito meses. Para uso na presente invenção, otermo "vida em armazenagem" refere-se à propriedade dosegundo componente de acordo com a qual cerca de 1% ou mais,alternativamente cerca de 5% ou mais, alternativamente cercade 10% ou mais, alternativamente cerca de 25% ou mais,alternativamente cerca de 50% ou mais e, alternativamente,cerca de 75% ou mais dos microorganismos probióticos dosegundo componente são viáveis no período de tempomencionado, após exposição às condições ambientais.

O segundo componente pode compreender leveduras.Pode ser utilizada qualquer uma dentre diversas leveduras,conforme é bem conhecido na técnica, como aquelas dosgêneros Saccharomyces (inclusive, por exemplo, Saccharomycescervisiae (às vezes chamado de "fermento de padaria") , eCândida utilis (que pode, também, ser chamado de Torulopsisutilis). Para uso na presente invenção, o termo "leveduras"inclui, porém não se limita a, aquelas que incorporam um oumais componentes incorporados do meio no qual sãocultivadas, como leveduras enriquecida com minerais. Váriosprocessos de fermentação são bem conhecidos na técnica.O segundo componente pode compreender uma ou maisenzimas. Por exemplo, ao serem submetidas a aquecimento oua outras condições de processamento adversas, as enzimaspodem se desnaturar, perdendo assim sua atividadebiológica. As enzimas incluem, particularmente, aquelas queapresentam atividade biológica benéfica em um animal deestimação, como enzimas digestivas ou outras enzimasterapêuticas. Alguns exemplos não-limitadores incluemproteases, colagenases, lipases, amilases, celulases, lisozimas, candidases, lactases, quinases, invertases,galactosidases, pectinases, ribonucleases (inclusivedesoxirribonucleases) e combinações das mesmas.

O segundo componente pode compreender um ou maisanticorpos. Anticorpos contra vírus, bactérias patogênicas,parasitas ou similares são preferenciais para uso napresente invenção. Alguns exemplos não-1imitadores incluemanticorpos contra rinotraqueíte felina, panleucopeniafelina, calicivírus felino, pneumonite felina, leucemiafelina, cinomose canina, parvovírus canino, coronavírus,Borrelia burgdorferi (doença de Lyme) , Toxoplasma gondii,E. coli, campilobactéria, salmonela, ciostrídia,bacteriodes, giardia, tênia, nematelminto, coceidio,criptosporidio, e combinações dos mesmos.

O segundo componente pode compreender uma ou mais imunoglobulinas. Alguns exemplos não-limitadores incluemimunoglobulina A (IgA), imunoglobulina M (IgM),imunoglobulina G (IgG) e combinações dos mesmos.O segundo componente pode compreender uma ou maiscitoquinas. Alguns exemplos não-limitadores incluem fator decrescimento de transformação beta (TGF-beta), interleucina-4,interleucina-10, interleucina-12 e combinações dos mesmos.

Como outros exemplos, o segundo componente podecompreender ao menos cerca de 0,001%, alternativamente aomenos cerca de 0,01%, alternativamente ao menos cerca de0,1%, alternativamente ao menos cerca de 0,5% e,alternativamente, ao menos cerca de 1%, em peso do segundocomponente, do produto biológico. Como exemplos adicionais,o segundo componente pode compreender cerca de 99% oumenos, alternativamente cerca de 75% ou menos,alternativamente cerca de 50% ou menos, alternativamentecerca de 25% ou menos, alternativamente cerca de 10% oumenos e, alternativamente, cerca de 5% ou menos, em peso dosegundo componente, do produto biológico.

O segundo componente pode, também, compreender umprebiótico. O termo "prebiótico" inclui substâncias oucompostos que são fermentados pela flora intestinal doanimal de estimação e, conseqüentemente, promovem aproliferação ou o desenvolvimento de bactérias formadoras deácido lãctico no trato gastrointestinal do dito animal, emdetrimento de bactérias patogênicas. O resultado dessafermentação é uma liberação de ácidos graxos, em particularácidos graxos de cadeia curta, no cólon. Isto tem o feito dereduzir o valor de pH no cólon. Alguns exemplos não-1imitadores de prebióticos adequados incluemoligossacarídeos, como inulina e seus produtos de hidróliseconhecidos como frutooligosacarídeos,galactooligosacarídeos, xilooligossacarídeos, ouoligoderivados de amido. Os prebióticos podem ser fornecidossob qualquer forma adequada. Por exemplo, o prebiótico podeser fornecido sob a forma de material de origem vegetalcontendo essas fibras. Os materiais de origem vegetaladequados incluem aspargo, alcachofras, cebolas, trigo ouchicória, bem como resíduos desses materiais de origemvegetal. Alternativamente, a fibra prebiótica pode serfornecida sob a forma de um extrato de inulina, sendoadequados, por exemplo, os extratos de chicória. Os extratosde inulina adequados podem ser obtidos junto à Orafti SA deTirlemont 3300, Bélgica, sob a marca registrada "Raf tiline".Por exemplo, a inulina pode ser fornecida sob a forma deRaftiline (g) ST, que é um pó branco fino que contém decerca de 90% a cerca de 94%, em peso, de inulina, até cercade 4%, em peso, de glicose e frutose, e de cerca de 4% a 9%,em peso, de sacarose. Alternativamente, a fibra pode estarsob a forma de um frutooligossacarídeo como aquele obtidojunto à Orafti SA de Tirlemont 3300, Bélgica, sob a marcaregistrada "Raftilose". Por exemplo, a inulina pode serfornecida sob a forma de Raf tilose (g) P95. De outro modo,os frutooligosacarídeos podem ser obtidos mediante ahidrolisação da inulina, por métodos enzimáticos, oumediante o uso de microorganismos.

Em uma modalidade da presente invenção, o segundocomponente é um componente revestido, isto é, um componentecompreendendo um núcleo e um revestimento circundando aomenos parcialmente o dito núcleo. Em uma dessasmodalidades, o núcleo compreende ao menos uma porção docomponente probiótico, enquanto o revestimento compreendequalquer um dentre uma variedade de materiais tipicamenteusados para revestimento. Por exemplo, o revestimento podecompreender um componente de lipídio ou um componenteadoçante (ambos os quais são ilustrados mais adiante nestedocumento, por uma questão de conveniência). Por exemplo, orevestimento pode compreender um componente adoçantecompreendendo sacarose, similar a revestimentos em balasconvencionais e materiais semelhantes.

As composições alimentícias para animais deestimação da presente invenção compreendem tanto o primeirocomo o segundo componentes. Em uma modalidade da invenção,o primeiro e o segundo componentes podem estar presentes auma razão de ao menos cerca de 2:1, ou ao menos cerca de5:1, ou ao menos cerca de 10:1, todos em peso. Em outramodalidade da invenção, o primeiro e o segundo componentespodem estar presentes a uma razão de cerca de 2:1 a cercade 50:1, ou de cerca de 5:1 a cerca de 25:1, ou de cerca de10:1 a cerca de 20:1, todos em peso. Em outra modalidade, oprimeiro componente é fornecido como uma pluralidade demassas distintas (por exemplo, rações ao menos parcialmenteextrudadas), enquanto o segundo componente é fornecido comouma pluralidade de massas distintas (por exemplo, massassemi-sólidas). Nesta modalidade, as unidades de massasdistintas do primeiro e do segundo componentes podem estarpresentes a uma razão de ao menos cerca de 2:1, ou ao menoscerca de 5:1, ou ao menos cerca de 10:1. Em outramodalidade da invenção, as unidades de massas distintas doprimeiro e do segundo componentes podem estar presentes auma razão de cerca de 2:1 a cerca de 50:1, ou de cerca de5:1 a cerca de 25:1, ou de cerca de 10:1 a cerca de 20:1.

Outros componentes opcionais

Em adição aos componentes requeridos para oprimeiro e o segundo componentes, o primeiro componente podeconter componentes opcionais, como qualquer daquelesdescritos para o segundo componente enquanto, de maneirasimilar, o segundo componente pode conter componentesopcionais, como qualquer daqueles descritos para o primeirocomponente. Todavia, o primeiro e o segundo componentes sãocomposicionalmente distintos.

As composições alimentícias para animais deestimação podem compreender um ou mais outros componentesadequados a uma composição alimentícia para animais deestimação. Esses componentes opcionais podem estar presentesno primeiro componente, no segundo componente, ou em umoutro componente separado, não descrito explicitamente nestedocumento. Componentes opcionais com finalidade ilustrativa(não-limitadores) são descritos conforme exposto a seguir.

Em uma modalidade, a composição pode compreenderum componente de lipídio, o qual pode ser útil paraotimizar a estabilidade do componente probiotico e, emborao primeiro componente necessite de uma fonte de gordura, ocomponente de lipídio pode, também, ser vantaj osamenteusado no segundo componente. 0 componente de lipídio podeser qualquer componente compreendendo uma fonte de gordura,aqui definida para incluir, por exemplo, ceras, gorduras,ácidos graxos e lipídios. Exemplos específicos de ceras,gorduras, ácidos graxos ou lipídios podem, freqüentemente,ser intercambiáveis de acordo com a nomenclatura de usocomum na técnica, por exemplo um lipídio podefreqüentemente ser também caracterizado como uma gordura.Os inventores da presente invenção não têm a intenção delimitar-se a qualquer designação específica denomenclatura, e as classificações de um material específicocomo cera, gordura, ácido graxo, lipídio ou similar é feitasomente por uma questão de conveniência.

Por exemplo, o componente de lipídio podecompreender uma gordura que é um componente de manteiga decacau sendo que, conforme aqui definido, o componente demanteiga de cacau compreende um ou mais dentre manteiga decacau, um extensor de manteiga de cacau, um sucedâneo demanteiga de cacau ou um substituto de manteiga de cacau. Umadeterminada gordura pode ser classificada como uma dentreextensor de manteiga de cacau, sucedâneo de manteiga decacau ou substituto de manteiga de cacau, ou às vezes comoduas ou mais dentre extensor de manteiga de cacau, sucedâneode manteiga de cacau e substituto de manteiga de cacau.Quando utilizados, cada um dentre o extensor de manteiga decacau, o sucedâneo de manteiga de cacau e o substituto demanteiga de cacau pode ser uma gordura específica dentro daclasse mencionada, ou quaisquer misturas dessas gorduras.A manteiga de cacau é de conhecimento comum natécnica e pode, geralmente, referir-se à gordura extraída degrãos de cacau e usada para preparar chocolate. Os grãos decacau podem ser obtidos a partir dos frutos do cacaueiro{por exemplo, Theobroma cacao).

O componente de manteiga de cacau pode, adicionalou alternativamente, compreender um extensor de manteiga decacau. Esses extensores também são de conhecimento comum natécnica, e podem geralmente referir-se a outras gordurastendo perfis de índice de gordura sólida (SFI) que sãosimilares ao da manteiga de cacau. Os extensores demanteiga de cacau podem compreender gordura contendo ácidosgraxos Cie ou Ci8, ou combinações dos mesmos. Óleo de palma,óleo de carité, manteiga illipe, óleo de caroço de algodãoe óleo de soj a, inclusive em suas formas fracionadas e/ouparcialmente hidrogenadas, são alguns exemplos não-1imitadores de extensores de manteiga de cacau.

O componente de manteiga de cacau pode, adicionalou alternativamente, compreender um sucedâneo de manteiga decacau. Esses sucedâneos também são de conhecimento comum natécnica, e podem geralmente referir-se a gorduras queapresentam ponto de fusão, ou outras propriedades ouestruturas similares àquelas da manteiga de cacau, que têmpor base gorduras não-lãuricas (por exemplo, Cis ou C18) . Estasincluem óleos vegetais como óleo de palma, óleo de caroço dealgodão, óleo de soja e óleo de semente de colza, inclusivefrações e/ou formas parcialmente hidrogenadas das mesmas. Umexemplo é o ASTRAL® R (óleo vegetal (óleo de soja e óleo decaroço de algodão) parcialmente hidrogenado, disponívelcomercialmente junto à Humko Oil Products, Cordova, TN, EUA).

0 componente de manteiga de cacau pode, adicionalou alternativamente, compreender um substituto de manteigade cacau. Esses substitutos também são de conhecimentocomum na técnica, e podem geralmente referir-se a gordurasduras, que apresentam ponto de fusão, ou outraspropriedades ou estruturas similares àquelas da manteiga decacau, mas que têm por base gorduras lãuricas (Ci2) . Essessubstitutos de manteiga de cacau podem tender a apresentarpontos de fusão mais altos que o da manteiga de cacau, oque os torna interessantes para conferir às composições umaresistência ao calor, Estes incluem óleos vegetais comoóleo de caroço de palma e óleo de coco, inclusive fraçõese/ou formas parcialmente hidrogenadas dos mesmos.

Em uma modalidade, caracterizada pelo fato de queo componente de manteiga de cacau compreende ao menos umlipídio selecionado do grupo consistindo em óleo de soja,óleo de caroço de algodão, óleo de coco, óleo de semente decolza, óleo de caroço de palma, frações destes, e formasparcialmente hidrogenadas dos mesmos.

Alternativamente ou adicionalmente, o componentede lipídio pode compreender um componente de gorduraderivada de animais. Como é de conhecimento comum natécnica, o componente de gordura derivada de animaiscompreende uma gordura derivada de um animal. Algunsexemplos não-limitadores incluem materiais de origembovina, aviaria, suína e ovina (por exemplo, banhas esebos). As gorduras lácteas também podem servir comoexemplos, inclusive a gordura de leite, a gordura de leitefracionada e a gordura de manteiga.

Em uma modalidade, o componente de lipídio podecompreender uma combinação de um componente de manteiga decacau e um componente de gordura derivada de animais, a umarazão de cerca de 5:95 a cerca de 95:5, ou de cerca de 5:95a cerca de 25:75, ou de cerca de 5:95 a cerca de 50:50,todos em peso. Em outra modalidade da presente invenção, ocomponente de lipídio compreende o componente de manteigade cacau e o componente de gordura derivada de animais auma razão na faixa de cerca de 20:80 a cerca de 45:55, oude cerca de 25:75 a cerca de 40:60, todos em peso.

Alternativamente ou adicionalmente, o componentede lipídio pode compreender um ácido graxo. Exemplos defontes incluem os ácidos graxos ômega-3 ou ômega-6.

Os ácidos graxos ômega-3 são, de preferência,derivados de fontes marinhas (peixes), inclusive savelha(um peixe semelhante ao arenque) e, como tais, podem serderivados de outras fontes. Alguns exemplos não-limitadoresde fontes de ácido graxo ômega-3 incluem ácidodocosaexaenóico ("DHA") ou ácido eicosapentaenóico ("EPA") ,como OMEGAPURE, disponível comercialmente junto à OmegaProtein, Inc., Houston, TX, EUA. Todas as formas de ácidograxo são, também, contempladas na presente invenção. Porexemplo, o DHA é freqüentemente fornecido sob a forma de umtriglicerídeo. Como tal, quando é mencionado um ácido graxoespecífico (por exemplo, "DHA") , o mesmo inclui tanto aforma livre do dito ácido graxo como outras formas, como otriglicerídeo de ocorrência natural, entre outros. Ostermos DHA, EPA, ou outros termos específicos são usadospor conveniência, como é de entendimento comum na técnica,para incluir todas as formas do material assim denominado.

Os ácidos graxos ômega-6 podem ser utilizados napresente invenção. Conforme é bem compreendido na técnica, osácidos graxos ômega-6 são aqueles materiais de ácido graxoque têm uma ligação dupla posicionada entre o sexto e osétimo átomos de carbono da cadeia de ácido graxo, contando-se a partir do átomo de carbono ômega (distai) da cadeia.

Outros exemplos de ácidos graxos adequados podemincluir ácido oléico, ácido esteárico, ácido palmítico eácidos láuricos, inclusive os sais adequados dos mesmos.Ainda outros exemplos de ácidos graxos adequados incluemésteres ou outros derivados dos mesmos, como palmitato decetila, ácidos graxos mono e diglicerídeos acéticos, láticosou cítricos, palmitato de isopropila, miristato deisopropila, e mono, di e triglicerídeos (alguns dos quais podem, também, ser caracterizados como gorduras).

O componente de lipídio pode compreender umamistura de ácidos graxos ômega-3 e ácidos graxos ômega-6,freqüentemente mediante o uso de diversos materiaiscontendo esses componentes. AS composições preferenciais para uso na presente invenção podem ser enriquecidas com umou mais ácidos graxos ômega-3 ou ômega-6 específicos.

Alternativamente ou adicionalmente, ascomposições podem compreender cera. Por exemplo, exemplosde ceras incluem cera de parafina, cera de abelha (porexemplo, de cor branca ou amarela) , cera de carnaúba, cerade candelila, cera microcristalina, cera de farelo dearroz, cera de éster cetílico e cera emulsificante.

Alternativamente ou adicionalmente, ascomposições podem compreender um polissacarídeo como goma-laca ou quitina.

Qualquer uma, dentre diversas fontes de lipídio,pode ser usada adicional ou alternativamente para formaruma parte ou a totalidade do componente de lipídio dapresente invenção.

As composições alimentícias para animais deestimação podem compreender um componente adoçante, o qualpode ser útil à estabilidade do componente probiótico. Ocomponente adoçante, conforme aqui definido, é ummonossacarídeo, um dissacarídeo, um carboidrato complexo ouqualquer mistura dos mesmos.

Em uma modalidade, as composições alimentíciaspara animais de estimação da presente invenção compreendemum monossacarídeo. Em uma modalidade, o segundo componentecompreende o monossacarídeo. O monossacarídeo usado napresente invenção tem a fórmula geral CnH2n0n/ em que n é umnúmero inteiro igual a ou maior que 3. Alguns exemplos não-limitadores de monossacarídeos que podem ser usados incluemsorbitol, manitol, eritrose, treose, ribose, arabinose,xilose, ribulose, glicose, galactose, manose, frutose,sorbose e qualquer mistura dos mesmos. Em uma modalidade, omonossacarídeo pode incluir sorbitol, manitol, glicose,manose, frutose e qualquer mistura dos mesmos. Em outramodalidade, o monossacarídeo é sorbitol.

Em uma modalidade, as composições alimentíciaspara animais de estimação da presente invenção compreendemum dissacarídeo. Em uma modalidade, o segundo componentecompreende o dissacarídeo. O dissacarídeo usado na presenteinvenção tem a fórmula geral CnH2n-20n-i, em que odissacarídeo tem 2 unidades monossacarídeo conectadas pormeio de uma ligação gli cosi dica. Nessa fórmula, n é umnúmero inteiro igual a ou maior que 3. Alguns exemplos não-limitadores de dissacarídeos que podem ser usados napresente invenção incluem sacarose, maltose, lactitol,maltitol, maltulose, lactose e qualquer mistura dos mesmos.Em outra modalidade, o monossacarídeo é sacarose.

Em uma modalidade, as composições alimentícias paraanimais de estimação da presente invenção compreendem umcarboidrato complexo. Em uma modalidade, o segundo componentecompreende o carboidrato complexo. 0 carboidrato complexousado na presente invenção é um oligossacarídeo, umpolissacarídeo e/ou um derivado de carboidrato, como (porexemplo) um oligossacarídeo e/ou um polissacarídeo. Para usona presente invenção, o termo "oligossacarídeo" significa umamolécula linear digestível que tem de 3 a 9 unidadesmonossacarídeo, em que as unidades estão conectadascovalentemente por meio de ligações glicosídicas. Ospolissacarídeos podem ser cadeias lineares ou ramificadas. Depreferência, o polissacarídeo tem de 9 a cerca de 20 unidadesmonossacarídeo. Os derivados de carboidrato, como um álcoolpoliídrico (por exemplo, glicerol), também podem serutilizados como um carboidrato complexo na presente invenção.

Alguns exemplos não-limitadores de carboidratoscomplexos incluem rafinoses, estaquioses, maltotrioses, maltotetraoses, glicogênios, amiloses, amilopectinas,polidextroses e maltodextrinas.

Em uma modalidade, o carboidrato complexo é umamaltodextrina. As maltodextrinas são uma forma de moléculade carboidrato complexo, que tem várias unidades de glicosede comprimento. Sem se ater à teoria, j á que asmaltodextrinas são hidrolisadas em glicose no tratodigestivo, as mesmas podem ser utilizadas como uma fonteestendida de glicose. As maltodextrinas podem seringredientes de carboidrato secos por atomizaçao, produzidos mediante a hidrólise controlada de amido de milho.

Em uma modalidade, que pode ser particularmentevantajosa para a estabilidade do componente probiótico emque é usado um componente adoçante, o componente adoçantecompreende um monossacarídeo, um dissacarídeo ou umcarboidrato complexo com ponto de fusão de cerca de 80 °C acerca de 140 °C, ou de cerca de 90 °C a cerca de 120 °C.Alguns exemplos não-limitadores incluem monossacarídeos,como sorbitol ou xilitol.

Nos casos em que é usado um componente adoçante,as composições alimentícias para animais de estimação dapresente invenção podem compreender, por exemplo, ao menoscerca de 0,001%, ou ao menos cerca de 0,1%, ou ao menoscerca de 1%, ou ao menos cerca de 5%, ou ao menos cerca de10%, ou ao menos cerca de 2 0% do componente adoçante, todosem peso da composição. Como exemplos adicionais, ascomposições alimentícias para animais de estimação dapresente invenção podem compreender cerca de 99% ou menos,ou cerca de 90% ou menos, ou cerca de 95% ou menos, oucerca de 75% ou menos, ou cerca de 5 0% ou menos docomponente adoçante, todos em peso da composição.

As composições alimentícias para animais deestimação podem compreender um componente como soro deleite seco ou outros subprodutos lácteos.

As composições alimentícias para animais deestimação podem compreender uma fibra. Em determinadasmodalidades, as composições podem compreender uma fonte defibra suplementar (isto é, fibra adicional àquelainerentemente presente, por exemplo, em fontes de proteína,gordura ou carboidrato).

A fonte de fibras suplementar pode compreenderuma fibra fermentável. As fibras fermentãveis são bemconhecidas na técnica. A fibra fermentável pode serqualquer fonte de fibras que as bactérias intestinaispresentes no animal possam fermentar para produzir ácidosgraxos de cadeia curta, ou outros componentes metabólicos.Alguns exemplos não-limitadores dessas fibras fermentáveisincluem polpa de beterraba (obtida a partir de beterrabasprodutoras de açúcar), goma arábica, goma talha, plantago,farelo de arroz, goma de semente de algaroba, polpa decítricôs, pectina, frutooligossacarídeo, mananoligofrutose,fibra de soj a, arabinogalactano, galactooligosacarídeo,arabinoxilano e misturas desses itens.

Em geral, as fibras fermentáveis não sãodigeridas por mamíferos, mas podem ser metabolizadas porespécies bacterianas intestinais, como Bifidobacterium. Noentanto, nem todas as bactérias intestinais podemmetabolizar fibra fermentãvel. Em particular, as bactériascomo Salmonella, E. coli e Clostridia são incapazes deprocessar essas fibra a qualquer grau significativo. Essadigestibilidade preferencial, que é aplicável a fibrasfermentáveis como uma classe, pode ser usada para melhorara flora bacteriana geral no intestino delgado do animal deestimação. Como as fibras fermentáveis alimentam apenas asbactérias "boas", como Lactobacillus e Bifidobacterium, asquantidades de bactérias nocivas como Salmonella, E. coli eClostridia podem diminuir, devido a uma redução em seusrecursos alimentares. Portanto, ao fornecer uma fontealimentar preferencial para espécies bacterianas benéficas,uma dieta suplementada com fibra fermentável pode aumentara quantidade de "boas" bactérias intestinais, ao mesmo tempoem que reduz a quantidade de bactérias "más".

A polpa de beterraba e o frutooligossacarídeo,particularmente a oligofrutose de cadeia curta, são fibrasfermentáveis particularmente preferenciais para uso napresente invenção. Por exemplo, os frutooligosacarídeos sãocompostos de ocorrência natural que podem ser encontrados emdiversas frutas ou vegetais, inclusive banana, cevada, alho,mel, cebola, centeio, açúcar mascavo, tomate, aspargo,alcachofra, trigo, yacon (Polymnia sonchifolia) ou chicória.O frutooligossacarídeo pode, por exemplo, ser fornecido sob aforma de raiz de chicória, como uma oligofrutose de cadeialonga (por exemplo, inulina) , ou como uma oligofrutose decadeia curta. São particularmente úteis à presente invençãoos frutooligossacarídeos compreendendo ao menos um dentre 1-cestose (abreviado como GF2) , nistose (GF3) , e lF-beta-frutofuranosil nistose (GF4) . Embora os frutooligosacarídeospossam ser extraídos de plantas como aquelas mencionadasneste documento, eles podem também ser formadosartificialmente mediante a adição de uma, duas ou trêsunidades de frutose a uma molécula de sacarose através de umaligação B-(2-1)-glicosídica das unidades de frutose à unidadede frutose da sacarose. Como exemplo, os frutooligosacarídeosestão disponíveis comercialmente sob o nome comercialNUTRAFLORA, junto à Golden Technologies Company, Incorporated(uma oligofrutose de cadeia curta compreendendo 1-cestose,nistose e lF-beta-frutofuranosil nistose). Como outroexemplo, uma mistura de frutooligossacarídeo de cadeia curtae inulina pode ser o PREBIOl, ou uma mistura de RAFTILOSE eRAFTILINE disponíveis comercialmente.

O frutooligossacarídeo pode ser uma oligofrutose decadeia curta, a qual é bem conhecida pelos versados natécnica. São particularmente úteis â presente invenção asoligofrutoses de cadeia curta compreendendo 1-cestose(abreviado como GF2) , nistose (GF3) , e lF-beta-frutofuranosilnistose (GF4) . Em uma modalidade preferencial, a oligofrutosede cadeia curta compreende cerca de 25% a cerca de 45% de 1-cestose, cerca de 25% a cerca de 45% de nistose e cerca de 1%a cerca de 2 0% de lF-beta-frutofuranosil nistose, em peso daoligofrutose de cadeia curta ou, alternativamente, cerca de30% a cerca de 40% de 1-cestose, cerca de 50% a cerca de 60%de nistose e cerca de 5% a cerca de 15% de lF-beta-frutofuranosil nistose, em peso da oligofrutose de cadeiacurta. Como exemplo, a oligofrutose de cadeia curta estádisponível comercialmente sob o nome comercial NUTRAFLORA,junto à Golden Technologies Company, Incorporated (umaoligofrutose de cadeia curta que compreende cerca de 35% de1-cestose, 55% de nistose e 10% de lF-beta-frutofuranosilnistose, todos em peso da oligofrutose de cadeia curta).

Em uma modalidade da presente invenção, as fibrasfermentáveis podem exibir determinadas porcentagens dedesaparecimento de matéria orgânica. Nesta modalidadeopcional, as fibras fermentáveis podem apresentar umdesaparecimento de matéria orgânica (DM0) de cerca de 15% acerca de 60%, quando fermentado por bactérias fecais invitro durante um período de 24 horas. Ou seja, cerca de 15%a cerca de 50% do total de matéria orgânica originalmentepresente é fermentado e convertido pelas bactérias fecais. Odesaparecimento de matéria orgânica das fibras é,alternativamente, de cerca de 20% a cerca de 50%, ealternativamente de cerca de 30% a cerca de 40%.

Portanto, a porcentagem de DMO in vitro pode sercalculada da seguinte forma:

(1- ((resíduo de MO - amostra de controle para MO) / MO original) ) x 100em que o resíduo de MO é a matéria orgânica recuperada após2 4 horas de fermentação, amostra de controle para MO é amatéria orgânica recuperada nos tubos de controlecorrespondentes (isto é, tubos contendo o meio e as fezesdiluídas, porém sem substrato), e. MO original é a matériaorgânica colocada no tubo antes da fermentação. Detalhesadicionais sobre o procedimento podem ser encontrados emSunvold et al., J. Anim. Sei., Vol. 73, páginas 1099 - 1109(1995).

Em uma modalidade da presente invenção, ascomposições podem compreender ao menos cerca de 0,25%, empeso da composição, de fibra fermentãvel total. 0 termo"fibra fermentãvel total" significa que o teor mencionado édeterminado mediante a adição das quantidades relativas decada fibra fermentável presente na composição. Por exemplo,nos casos em que uma composição compreenda 1% defrutooligossacarídeo e 0,5% de polpa de beterraba, em pesoda composição, e nenhuma outra fibra fermentável, acomposição compreende 1,5%, em peso da composição, em fibrafermentável total. Alternativamente, as presentescomposições podem compreender ao menos cerca de 0,5%, aomenos cerca de pode compreender 1%, ou ao menos cerca de2%, alternativamente de cerca de 1% a cerca de 20%,alternativamente de cerca de 1% a cerca de 10%,alt ernat ivãmente de cerca de 2 % a cerca de 10%, oualternativamente de cerca de 3% a cerca de 8% de fibrafermentãvel total, todos em peso da composição alimentíciapara animais .de estimação.

Em uma modalidade da presente invenção, ascomposições podem compreender um produto nutriceutico. Parauso na presente invenção, o termo "produto nutriceutico"significa um alimento (como um alimento fortificado ousuplemento dietario) que proporciona benefícios à saúde.

As composições da presente invenção podemcompreender quaisquer dentre diversos componentes que sãosensíveis âs condições de processamento geralmenteencontradas na fabricação de um alimento para animais deestimação. Por exemplo, a integridade desses componentessensíveis pode ser preservada (seja total ou parcialmente).Alguns exemplos não-limitadores de componentes sensíveisincluem componentes que exibem mais que cerca de 10% deperda, alternativamente mais que cerca de 2 0% de perda e,alternativamente, mais que cerca de 5 0% de perda, em peso,durante os processos convencionais de extrusão, quandoincluídos em um alimento para animais de estimaçãoconvencional disponível comercialmente. Os processos deextrusão são bem conhecidos na técnica. Exemplos incluídosou alternativos de componentes sensíveis incluemantioxidantes, como vitaminas incluindo, mas não selimitando a, vitamina A (inclusive formas da mesma comobeta-caroteno e licopenos), vitamina C (inclusive formas damesma), vitamina E (inclusive formas da mesma), vitamina D(inclusive formas da mesma) , fenóis, carotenóides,alcalóides, xantonas, polifenóis, beta-caroteno,organoenxofre, curcumina, caenferol, astaxantina, gama-glutamilcisteínas, cateqüinas, pteroestilbeno,

cantaxantina, sulfóxidos de cisteína, ácido elágico,quercetina, tunaxantina, isotiocianatos, baicalina,tocoferóis, miricetina, zeaxantina, flavonóides,resveratrol, antocianinas, bixina, isoflavonóides,vinpocetina, flavonóis, luteína, Co-QlO, proantocianidinas,licopeno, ácido lipóico e similares.

Material adicional que pode estar presente nacomposição da presente invenção incluem minerais incluindo,mas não se limitando a carbonato de cálcio, cálcio, boro,selênio, cloreto de cálcio, cloreto, fumarato ferroso,acetato de zinco, cloreto de colina, cromo, gluconatoferroso, sulfato de zinco, cromo, tripicolinato, cobalto,oxido de magnésio, gluconato de zinco, fosfato dicálcico,cobre, sulfato de magnésio, sulfato ferroso, iodo,carbonato de magnésio, fosfato monossódico, ferro,picolinato de cromo, cloreto de potássio, magnésio, citratode cálcio, citrato de potássio, manganês, lactato de cálcio, sorbato de potássio, fósforo, gluconato de cálcio,bissulfato de sódio, potássio, cloreto de cromo,hexametafosfato de sódio, sódio, nicotinato de cromo,fosfato tricálcio, zinco e citrato de cromo, bem comolevedura contendo qualquer desses minerais e similares.

MÉTODOS PARA USO DA PRESENTE INVENÇÃO

As presentes composições podem ser usadas paraproporcionar um benefício em seguida ao consumo oral poranimais, de preferência um animal de estimação. Essebenefício geralmente mantém ou melhora a saúde geral doanimal. Alguns elementos não-limitadores da saúde efisiologia animal que se beneficiam, sej a pelo alívioterapêutico de sintomas, seja pela prevenção de doençasmediante profilaxia, ou ainda pela melhoria da saúde geral,inclusive mediante tratamento do sistema imune, do sistemagastrointestinal, da pele ou da pelagem, do estresse, ecombinações dos mesmos. Alguns exemplos não-limitadoresincluem transtornos inflamatórios, imunodeficiência, doençainflamatória intestinal, síndrome do intestino irritável,câncer (particularmente aqueles dos sistemas gastrointestinale imune), otite externa, doença diarréica, diarréia associadaao uso de antibióticos, apendicite, transtornos autoimunes,esclerose múltipla, mal de Alzheimer, amiloidose, artritereumatóide, artrite, mobilidade das articulações, displasiado quadril, diabetes mellitus, resistência à insulina,infecções bacterianas, infecções virais, infecções fúngicas,doença periodontal, doença urogenital, cistite idiopática,cistite intersticial, trauma associado a cirurgia, doençametastática induzida por cirurgia, sepse, perda de peso,ganho de peso, acúmulo excessivo de tecido adiposo, anorexia,controle de febre, caquexia, cura de ferimentos, úlceras,infecção da barreira intestinal, alergia, asma, transtornosrespiratórios, transtornos circulatórios, doença cardíacacoronariana, anemia, transtornos do sistema de coagulaçãosangüínea, doença renal, transtornos do sistema nervosocentral, doença hepática, isquemia, transtornos nutricionais,tratamento ou prevenção de transtornos envolvendo o eixohipotalâmico-hipofisário-adrenal (HPA), osteoporose,

transtornos endócrinos e transtornos da epiderme. Sãopreferenciais o tratamento do trato gastrointestinal,inclusive tratamento ou prevenção de diarréia, regulação dosistema imune, de preferência tratamento ou prevenção dedoença autoimune e inflamação, manutenção ou melhoria dasaúde da pele e/ou da pelagem, de preferência tratamento ouprevenção de doença atópica da pele, tratamento ou prevençãode transtornos envolvendo o eixo hipotalâmico-hipofisário-adrenal, melhoria ou redução dos efeitos do envelhecimento,inclusive consciência mental e níveis de atividade, eprevenção da perda de peso durante e após uma infecção.

Regulação do sistema imune

0 tratamento dos transtornos apresentados acimapode ser medido mediante o uso de técnicas conhecidas pelosversados na técnica. Por exemplo, transtornos inflamatórios,inclusive doença autoimune e inflamação, podem ser detectadose monitorados utilizando-se testes de função imune in vivo,como blastogênese de linfócitos, atividade de células "NaturalKiller", resposta de anticorpos a vacinas, hipersensibilidadede .tipo retardado e combinações desses itens. Esses métodossão brevemente descritos na presente invenção, mas também sãobem conheoidos pelos versados na técnica.

1. Blastogênese de linfócitos: Este ensaio mede aresposta proliferativa in vitro de linfócitosisolados a partir de sangue integral fresco obtido deanimais de teste e de controle para diversosmitogênios, e é uma medida da função geral dascélulas T e B. Em resumo, as células mononucleares dosangue periférico. (PBMC, ou "peripheral bloodmononucleocytes") são isolados a partir de sangueintegral por meio de métodos Ficoll-Hypaque decentrifugação por densidade, conhecidos pelosversados na técnica. As PBMCs isoladas são lavadasduas vezes em meio celular RPMI 1640 suplementado comHEPES, L-glutamina e penicilina/estreptomicina. Ascélulas lavadas são ressuspensas em RPMI 164 0 econtadas, e a densidade de células é adequadamenteajustada. As 2xl05 células são expostas a uma gama deconcentrações (de 0,1 /xg/mL a 100 /xg/mL) de diversosmitogênios, exemplos dos quais incluem mitogênio decaruru-de-cacho (Gibco), fitoemaglutinina (Gibco) econcanavalina A (Sigma), em triplicata, durante 72horas a 37°C e 5% de C02 com 10% de soro fetal bovino(Sigma) . A 54 horas, as células são pulsadas com1 /xCi 3H-timidina e coletadas, e as contagens decintilação são lidas em um TopCount NXT a 72 horas.Atividade de células "Natural Killer": Conformedescrito na patente U.S. N° 6.310.090, este ensaiomede a atividade efetora in vitro de células "naturalkiller" isoladas a partir de sangue integral fresco deanimais de teste e de controle. As células "naturalkiller" (NK) são um componente da função imune inatade um mamífero. As células de adenocarcinoma detiróide canina são usadas como células-alvo naavaliação da atividade citotóxica de células NK. Foianteriormente demonstrado que essa linhagem de célulasé suscetível à morte por células NK caninas, Àscélulas-alvo são cultivadas em um frasco T75 com 20 mLde meio mínimo essencial (MEM; Sigma Chem. Co., St.Louis, MO, EUA), suplementado com 10% de soro fetal debezerro (FCS) , 100 U/mL de penicilina e 100 /xg/mL deestreptomicina. Quando confluentes, as células-alvosão tripsinizadas, lavadas 3 vezes e ressuspensas a5x105 células/mL em meio completo (RPMI-164 0 + 10%FCS+100 U/mL de penicilina + 100 [ig/mL deestreptomicina) . Triplicatas de alíquotas de 100 /zLdas células-alvo foram pipetadas em placas com 96cavidades de fundo em U (Costar, Cambridge,Massachussets, EUA) e incubadas durante 8 horas parapermitir a aderência das células, Os linfócitos(células efetoras, 100 fih) isolados mediante separaçãoFicoll-Hypaque (conforme descrito acima) são, então,adicionados às células-alvo até obter-se uma razãoef etor/célula alvo (E: T) de 10:1. Após 10 horas deincubação a 37°C, são adicionados 20 fil de umsubstrato contendo 5 /xg de brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazólio (MTT). A mistura éincubada durante 4 horas a 37°C, após os quais o MTTnão-metabolizado é removido por aspiração. Os cristaisde formazan são dissolvidos mediante a adição de200 /zL de etanol a 95%. A densidade óptica (DO) émedida a 57 0 nm, utilizando-se um leitor demicroplacas. A porcentagem de morte celular específicapara célula NK é calculada conforme exposto a^seguir:

Citotoxicidade específica (%) = 100 x {l - [(DO de células-alvo ecélulas efetoras - DO de células efetoras)/(DO de células-alvo)]}

3. Resposta de anticorpos a vacinas: Os indivíduos deteste receberam um conjunto (até 5) de vacinas após aomenos 12 semanas de alimentação probiotica ou decontrole. As vacinas podem ser uma mistura de vacinasnovas e redundantes. Alguns exemplos não-limitadores deconjuntos de vacina que podem ser usado incluemmisturas de vacinas preparadas por Fort Dodge AnimalHealth. Alguns exemplos não-limitadores de vacinasadequadas ao uso na presente invenção incluem cinomosecanina, adenovírus, coronavírus, parainfluenza, eparvovírus. A história de vacinação do indivíduodeterminará as vacinas a serem utilizadas. Asquantidades, no sangue, de anticorpos específicos paraas vacinas administradas são medidas durante 3 semanas,sendo comparadas a duração e a intensidade da respostanos grupos com alimentação de controle e probiotica.

4. Hipersensibilidade de tipo retardado: Este é um métodoin vi vo não-invas ivo para avaliação do estado dosistema imune. Este teste compreende uma inj eçãointradérmica do mitogênio policlonal fitoemaglutinina(PHA) em combinação com eritrócitos de ovelha, umavacina multivalente, histamina (100 [ih de fosfato dehistamina a 0,0275 g/L, Greer, Lenoir, NC) , ou PBS(100 fih de solução salina tamponada com fosfato a8,5 g/L, Sigma). A resposta imunológica ao antígeno éregistrada como espessura da dobra de pele, usandocalibres, em intervalos de tempo de 0, 24, 48 e 72horas após a injeção. Um aumento na espessura da dobrade pele indica uma maior resposta dehipersensibilidade, que deve diminuir mediante otratamento com as bactérias da presente invenção.

Métodos adicionais para a avaliação do efeito dascomposições da presente invenção são descritos nas patentesU.S. N° 6.133.323 e 6.310.090.

Composição corporal

A melhoria quanto aos efeitos do envelhecimentopode ser determinada mediante o uso de absorptometria dedupla emissão de raios X ou tomografia computadorizada paramedir a composição corporal, inclusive massa corporalgorda, massa corporal magra e conteúdo mineral ósseo. Demodo similar, esse método pode ser usado para determinaralterações de anatomia como perda de peso ou densidadeóssea em indivíduos, após infecção.

Redução de estresse

A presente invenção também pode ser usada em ummétodo para redução de transtornos associados à atividadeexcessiva do eixo hipotalâmico-hipofisãrio-adrenal (HPA),como redução dos níveis de estresse, inclusive com melhoriado estado de humor ou redução da depressão em animais deestimação. As concentrações sangüíneas de hormônios deestresse, inclusive epinefrina, norepinefrina, dopamina,cortisol e proteína C-reativa, podem ser medidas paradeterminar os níveis de estresse e sua redução ou manutenção.Esses hormônios são reconhecidos biomarcadores de estresse, epodem ser prontamente medidos mediante o uso de técnicasconhecidas pelos versados na técnica. Adicionalmente, como ahipertrofia adrenal é uma conseqüência da atividade aumentadano eixo HPA, também pode ser usada a medição direta dotamanho adrenal por meio de imagens de tomografiacomputadorizada. As medições bioquímicas e fisiológicas daatividade do eixo HPA podem, também, ser acompanhadas deavaliação comportamental para confirmação do estado de humorou nível de estresse do mamífero.

Saúde da pele e da pelagem

Além disso, a manutenção ou a melhoria da saúde dapele ou da pelagem em animais de estimação, inclusive emdoença atópica da pele, melhoria da função de barreira dapele ou otimização da ecologia microbiana da pele, pode sermedida mediante o uso de avaliações da pele e da pelagem,conduzidas por dois indivíduos treinados. Exemplos decritérios examinados durante essas avaliações incluem:

a) índice de queda de pêlos: Um índice de queda de pêlosé atribuído a cada indivíduo de teste mediante acoleta de pêlos produzidos durante uma sessão deescovação padronizada. Os pêlos são retidos e pesados,e os indivíduos de controle e de teste são comparados.

b) Avaliações subj etivas de pele/pelagem: Examinadorestreinados avaliam subjetivamente as condições de pelee pelagem, mediante a determinação de queda de pêlos,caspa, brilho, uniformidade, maciez e densidade.c) Avaliação funcional da pele: A função de barreira dapele pode ser avaliada mediante a esfregação dasuperfície da pele com uma gaze encharcada em acetona.

Essa técnica perturba, de maneira eficaz, a função debarreira da pele ao remover da camada córnea camadascelulares individuais, juntamente com as frações delipídio a estas associadas. A perturbação da barreira équantificada por meio da medição do aumento na perdatransepidérmica de água (PTEA) e do grau de vermelhidãodo local ofendido, mediante o uso de métodos conhecidospelos versados na técnica. As pontuações paravermelhidão (eritema) são obtidas mediante o uso dosistema de câmera e iluminação anteriormente descrito.

Os registros de PTEA e as pontuações de vermelhidão sãoobtidos imediatamente antes e depois da perturbação,bem como nos pontos finais às cinco e às 24 horas, paraavaliar as propriedades de proteção e cura da pele.

Saúde gastrointestinal

O uso da presente invenção para otimizar a saúdeintestinal, ou para tratar ou evitar doenças intestinais,inclusive diarréia e doença inflamatória intestinal, emanimais de estimação pode ser medido mediante o uso depontuação das fezes. A pontuação das fezes pode serregistrada diariamente, de acordo com as seguintesdiretrizes, sendo os grupos de controle e de testecomparados antes e depois da alimentação com as bactérias,de acordo com a presente invenção.

Pontuação: 5 Extremamente seca

Estas fezes são duras e não aderem a superfícies.Estas fezes rolam quando empurradas. Não são produzidasindentações quando estas fezes são apanhadas. Estas fezessão freqüentemente defecadas em grupos de unidadesindividuais, em vez de uma unidade completa. Estas fezesmantêm seu formato original após a coleta.

Pontuação: 4 Firme (fezes ideais)

Estas fezes são firmes, bem formadas ecilíndricas. Estas fezes não se rompem facilmente quandoapanhadas. Estas fezes podem deixar resíduos sobresuperfícies e luvas. Estas fezes são freqüentementedefecadas como uma só unidade. Estas fezes mantêm seuformato original após a coleta.

Pontuação: 3 Mole, com formato

Estas fezes são moles, no entanto têm formatosdefinidos. Estas fezes se rompem facilmente e,definitivamente, deixam resíduos sobre superfícies e luvas.Estas fezes freqüentemente perdem seu formato original apósa coleta. Estas fezes freqüentemente se apresentam emconj unto com outra pontuação, mas podem compreender atotalidade da amostra.

Pontuação: 2 Mole, sem formato

Estas fezes são moles e não apresentam formatocilíndrico. O formato freqüentemente associado a um "tipo 2"é aquele conhecido como "excremento de vaca". Estas fezesperdem o formato original quando coletadas, e definitivamentedeixam resíduos sobre superfícies e luvas. Estas fezesfreqüentemente se apresentam em conjunto com outra pontuação,mas podem compreender a totalidade da amostra. Estas amostraspodem se espalhar por uma área de vários centímetros.

Pontuação: 1 Líquida

As fezes com esta pontuação sempre parecerãolíquidas, e pode ou não haver a presença de matériaparticulada. Estas fezes são freqüentemente defecadas emgrupos de montes, em vez de uma unidade completa. Muco estáfreqüentemente presente nas amostras deste tipo. As amostrasdeste tipo de fezes são de coleta muito difícil, e sempredeixa resíduos em superfícies e luvas. Estas amostras podemse espalhar por uma área de vários centímetros.

Além disso, são registradas outras observações,inclusive: presença de sangue, de objetos estranhos ou demuco nas fezes.

Os métodos para uso da presente invenção podem serusados para reduzir o odor das fezes e/ou da caixa de areia,mediante a redução da produção de compostos causadores deodor nas. fezes e na urina. Alguns exemplos não-limitadoresde compostos causadores de odor incluem amônia, indóis,fenóis, aminas, ácidos graxos de cadeia ramificada ecompostos voláteis contendo enxofre. Por exemplo, asconcentrações fecais de amônia podem ser medidas após otratamento dos animais com a presente invenção, utilizando-se os seguintes métodos: amostras fecais frescas (5,0 g, noestado) são pesadas em frascos plásticos contendo 4 0 mL de2 N HCl. As amostras são armazenadas a 4°C até o final doperíodo de amostragem. As amostras são, então, preparadaspara análise de NH3 N e lactato. O sobrenadante dessapreparação é usado para análise colorimétrica de NH3 N e delactato. Adicionalmente, o odor fecal observado pode serpontuado por seres humanos, conforme exposto a seguir. Apósa coleta de amostras fecais, as mesmas são pontuadas quantoa seu odor, por pessoas treinadas. A pontuação do odor fecaltem por base, também, uma escala de 1 a 5, em que 1corresponde ao mínimo de cheiro, e 5 ao máximo.

Além disso, o tratamento de infecçãogastrointestinal em animais de estimação pode compreender amelhoria da ecologia microbiana intestinal em animais deestimação. A otimização da ecologia microbiana em animaisde estimação compreende, de preferência, a redução dosteores de bactérias patogênicas nas fezes dos mesmos. Osteores de bactérias patogênicas presentes nas fezes deanimais de estimação podem ser enumerados mediante o uso dométodo padrão de contagem em placa, conhecido pelosversados na técnica. Com mais preferência, as bactériaspatogênicas são selecionadas a partir do grupo consistindoem Clostridia, Escherichia, Salmonella, Bacteroides,Campylobacter e combinações desses itens. Alguns exemplosnão-limitadores de cepas de bactérias patogênicas adequadasincluem C. perfringens, C. difficile, Eschericia coli,Salmonella typhimurium e combinações desses itens.Saúde do trato urinario

Os métodos da presente invenção podem tambémincluir o tratamento, seja profilãtico ou terapêutico, dotrato urinãrio de animais, de preferência animais de estimação. Alguns exemplos não-limitadores de tratamentos dotrato urinario incluem tratamento ou prevenção de infecçõesdo trato urinário, tratamento ou prevenção de doenças renais,inclusive pedras no trato urinãrio, tratamento ou prevençãode inf ecções na bexiga, e similares. Sem se ater à teoria,acredita-se que a presente invenção seja útil na prevençãodessas doenças como resultado de sua capacidade para degradaros cristais contendo ácido oxálico, estruvita ou urato,conforme demonstrado in vitro. O ácido oxálico é umsubproduto do metabolismo urinário que pode formar precipitados insolúveis, os quais resultam na formação depedras nos rins, na bexiga e em outras partes do tratourinário, e que podem resultar em infecções. Ao degradar oácido oxálico entérico e, portanto, potencialmente evitar suaprecipitação e acúmulo no trato urinário, a presente invençãopode tratar e prevenir infecções e outras doenças do tratourinário. A degradação do ácido oxálico pode ser medida invitro mediante o uso do kit para teste de ácido oxálico cat #755699, disponível comercialmente junto à BoehringerMannheim/R-Biopharm, e medido em amostras de urina mediante o uso de cromatografia líquida de alta eficiência.

Digestão de nutrientes

A presente invenção pode ser usada em um métodopara melhoria ou manutenção da saúde de animais deestimação, compreendendo a melhoria na digestão ou naabsorção de fibras, gorduras, proteínas, vitaminas eminerais (coletivamente mencionadas como "digestão denutrientes") . A melhoria da digestão de fibras é desejãvel,pois promove a proliferação das ditas bactérias probioticas,bem como da microflora endógena benéfica, o que auxilia nasupressão de algumas bactérias potencialmente patogênicas.Além disso, uma diminuição na quantidade de metabolitostóxicos e enzimas nocivas que resultam da fermentaçãocolônica foi documentada em seres humanos (Tomomatsu,"Health effects of oligosaccharides", (1994) Food Technol.,Volume 48, páginas 61 a 65)- A digestão de fibras pode serdeterminada mediante o uso do método descrito em Vickers etal., "Comparison of fermentation of selectedfructooligosaccharides and other fiber substrates by caninecolonic microflora", (2001) Am. J". Vet. Res. , Volume 61, n°4, páginas 609 a 615, exceto pelo fato de que em vez deinocular usando amostras fecais diluídas, cada experimentousou culturas puras das cepas bacterianas em questão.

Saúde das articulações

Além disso, a presente invenção pode ser usadapara tratar ou evitar transtornos articulares em animais deestimação, aumentando assim a atividade e a qualidade devida desses animais. Exemplos de transtornos articularesincluem comprometimento da mobilidade, osteoartrite,artrite reumatóide, displasia de quadril, cotovelo ejoelho, espondilose, e inflamação articular pós-traumática.Por exemplo, cães com algum grau de claudicação podem seralimentados com a presente composição durante um total de9 0 dias, sendo então examinados por um veterinário em 0,30, 60 e 90 dias, para avaliação de peso corporal,pontuação da condição corporal, avaliação de pele e pelageme avaliação ortopédica. A avaliação ortopédica incluirágrau de claudicação, suporte de peso, resistência a suportede peso com provocação, extensão da pata posterior eimpacto visual sobre a capacidade do cão para caminhar etrotar. Os ângulos das articulações e o grau de movimentopodem, também, ser determinados por meio de mediçõesgoniómétricas manuais. Adicionalmente, pode ser usadaanálise por placa de força para determinar a saúde dasarticulações. Os donos completam questionários nos dias 0,30, 60 e 90, para avaliar a qualidade geral de vida e asaúde das articulações observada no animal.

Em uma modalidade, os métodos referem-se àadministração oral, diretamente a um animal de estimação, deuma composição aqui descrita. As diversas modalidades dacomposição usada neste método, inclusive as formas ou acomposição e os teores de diversos componentes ali contidos,são descritas em detalhe na presente invenção.

Para uso neste documento, em relação aos processosda presente invenção, os termos "administrado oralmente","administração oral" ou similares significam que o animal deestimação ingere ou é feito ingerir uma ou mais dascomposições aqui descritas, ou o dono do dito animal deestimação é orientado a fornecer ao mesmo uma ou maiscomposições. Nos casos em que o dono for orientado afornecer, essa orientação pode ser tal que o instrua ouinforme que o uso da composição irá, ou poderá, proporcionarum ou mais dos benefícios aqui descritos, como tratamento dotrato gastrointestinal ou outros métodos de uso aquidescritos. Adicional ou alternativamente, a orientação podeser de que a composição contém culturas probióticas vivas(inclusive, opcionalmente, orientação quanto ao teor deculturas probióticas vivas presentes ou garantidas). Essaorientação pode incluir, por exemplo, orientação oral (porexemplo, por meio de instrução oral de, por exemplo, umveterinário ou outro profissional de saúde, um profissionalou uma organização de vendas, e/ou um meio de comunicação porrádio ou televisão (isto é, anúncios)), ou orientação escrita(por exemplo, por meio de orientação escrita de, por exemplo,um veterinário ou outro profissional de saúde (por exemplo,receitas), um profissional ou uma organização de vendas (porexemplo, por meio de brochuras de marketing, panfletos ououtros materiais educativos), meios de comunicação escrita(por exemplo, internet, correio eletrônico ou outros meiosrelacionados a computadores), e/ou por meio de dispositivosde embalagem associados à composição (por exemplo, um rótulo,presente em um pacote contendo a composição).

As composições podem ser administradas em umavariedade de freqüências ou durações. Por exemplo, ascomposições são, tipicamente, administradas ao menos umavez por semana, ou ao menos três vezes por semana, ou deuma vez por dia a cerca de quatro vezes por dia,alternativamente de uma vez por dia a cerca de três vezespor dia, alternativamente de uma vez por dia a cerca deduas vezes ao dia, e alternativamente ad libitum. Para queos benefícios da presente invenção sej am alcançados, épreferencial que as composições sejam administradas por aomenos cerca de uma semana, alternativamente ao menos cercade duas semanas, alternativamente ao menos cerca de trêssemanas, alternativamente ao menos cerca de quatro semanas,alternativamente ao menos cerca de seis semanas,alternativamente ao menos cerca de oito semanas, ou por umperíodo ilimitado.

MÉTODOS ANALÍTICOS

O segundo componente da presente invençãocompreende um componente probiótico tendo uma contagem demicroorganismos probióticos viáveis de ao menos cerca deIO5 UFC/grama do segundo componente. A contagem demicroorganismos probióticos viáveis é enumerada de acordocom o método descrito a seguir.

Preparação de amostras

Em uma bolsa homogeneizadora de amostras estéril(disponível comercialmente junto à Interscience LaboratoriesInc., Weymouth, MA, EUA), a amostra (segundo componente)para medição é pesada assepticamente, e o peso é registrado.A amostra é diluída mediante a adição de água para diluiçãotamponada com fosfato (solução de Butterfield) à temperaturaambiente (Bacteriological Analytical Manual, 8a Edição) atéuma diluição de 1:10 (ou seja, se a amostra pesa 3 gramas,adicionar o tampão até que a balança apresente uma leiturade 30 gramas). Permitir que a amostra amoleça durante cercade 2 0 a 3 0 minutos, achatar e romper a amostra em pedaçospequenos e, então, colocá-la em um homogeneizador deamostras MINIMIX (disponível comercialmente j unto àInterscience Laboratories Inc., Weymouth, MA, EUA) durante 2minutos, na velocidade 9.

Diluição da amostra

Uma vez completa a homogeneização, transferir1 mililitro da amostra misturada para um tubo de diluição de9 mililitros contendo solução de Butterfield (obtendo umadiluição a -2). Diluir a amostra de maneira serial, mediantea transferência de 1 mililitro da diluição a -2 para um outrotubo de diluição de 9 mililitros (obtendo uma diluição a -3).Essa etapa é repetida até que se tenha atingido a diluiçãodesejada para semeadura em placas. Cada tubo é submetido avórtice antes de se realizar a diluição seguinte.

Semeadura das amostras em placas

A amostra é semeada em placas em duplicata, sobreDifco Lactobacilli MRS Agar (DeMan, Rogosa and Sharpe Agar)a diluições de -6, -7 e -8. Para semear em placas a diluiçãode -8, é transferido 0,1 mililitro do tubo de diluição a -7para uma placa de MRS â temperatura ambiente. As diluiçõesadequadas são repetidas, submetendo-se o tubo a vórticeimediatamente antes da semeadura em placas. As amostras sãoespalhadas de maneira uniforme sobre toda a superfície daplaca, mediante o uso de um espalhador estéril. As placassão posicionadas, invertidas, em um recipiente anaeróbico de7 litros (Mitsubishi). Um indicador anaeróbico (Oxoid) écolocado no interior do recipiente. Três sachês deAnaeroPack (Mitsubishi) são obtidos e abertos, com um sachê em um compartimento lateral e dois sachê s no outro compartimento lateral. A tampa é colocada sobre o recipiente, verificando-se que haja uma boa vedação. 0 recipiente anaeróbico é colocado em uma incubadora a 3 7 °C +/- 2 °C durante um período de incubação de 48 horas. Enumeração de microorganismos probioticos

Após incubação durante 48 horas, as placas são removidas da incubadora e as colônias bacterianas são contadas manualmente usando um contador de colônias Quebec para ampliar as colônias. As placas são enumeradas na faixa de 2 5 a 2 50 colônias. Uma vez completada uma contagem bruta (número de colônias contadas na placa), a diluição é levada em consideração e, portanto, a contagem bruta é multiplicada pela recíproca da diluição, de modo a se obter o valor de UFC/grama da amostra.

Exemplos

Esses exemplos são fornecidos para ilustrar a invenção, e não se destinam a limitar, em nenhum aspecto, o escopo da mesma. Os exemplos são ilustrados pelo uso de um componente probiótico, porém esse componente pode ser substituído ou suplementado por um ou mais dentre leveduras, enzimas, anticorpos, imunoglobulinas, citoquinas e combinações dos mesmos.

Exemplo 1

Uma composição alimentícia nutricionalmente balanceada para animais de estimação, compreendendo umprimeiro componente e um segundo componente, é preparada de acordo com os procedimentos apresentados a seguir.

O primeiro componente compreende uma pluralidade de rações, sendo que cada ração é uma composição alimentícia nutricionalmente balanceada para animais de estimação. Por exemplo, o primeiro componente pode consistir em. rações adequadas para cães adultos, obtidas junto à The Iams Company, Dayton, OH, EUA.

O segundo componente compreende os componentes individuais apontados a seguir, nas quantidades indicadas.

<table>table see original document page 54</column></row><table>

O segundo componente é preparado conforme exposto a seguir: cerca de 75% (em peso) da manteiga de cacau são aquecidos até uma temperatura de 100 °C durante cerca de 1 hora e, então, resfriados até 40 °C. Cerca de 50% (em peso) de Bifidobacterium infantis são adicionados à manteiga de cacau em uma caixa-luva, a 10% de umidade relativa. O Culturetech 064 (aquecido de um dia para outro em um forno a 82 °C) , o óleo de caroço de palma (a 121 °C) , o ácidolãctico em pó (aquecido de um dia para outro em um forno a 82 °C) e o revestimento branco cremoso (seco por rotação de um dia para outro, a cerca de 60 °C) são misturados um ao outro a uma temperatura de 3 5 °C durante um período de cerca de 3 0 minutos a 1 hora, para se obter uma mistura para revestimento branca. 0 restante da manteiga de cacau e Bifidobacterium infantis são picados em pedaços de cerca de 1 a 2 mm de diâmetro, e dispersos por toda a mistura para revestimento branca. A mistura final é resfriada até 15 °C para solidificar, sendo reduzida a pedaços pequenos, adequados a uma composição alimentícia para animais de estimação. Antes do uso, o segundo componente é armazenado em bolsas de papel alumínio purgadas com nitrogênio.

O primeiro e o segundo componentes são fornecidos sob a forma de uma mistura de uma pluralidade de rações e uma pluralidade de pedaços, respectivamente, a uma razão de peso de cerca de 10:1. No momento do consumo por um animal de estimação, o segundo componente apresenta uma contagem de microorganismos probióticos viáveis de cerca de 6 x IO9 UFC/grama do segundo componente.

Exemplo 2

Uma composição alimentícia nutricionalmente balanceada para animais de estimação, compreendendo um primeiro componente e um segundo componente, é preparada de acordo com os procedimentos apresentados a seguir.

O primeiro componente compreende uma pluralidade de rações, sendo que cada ração é uma composição alimentícia nutricionalmente balanceada para animais deestimação. Por exemplo, o primeiro componente pode consistir em rações adequadas para cães adultos, obtidas junto à The Iams Company, Dayton, OH, EUA.

<table>table see original document page 56</column></row><table>

O segundo componente é preparado conforme exposto a seguir: cerca de 75% (em peso) da gordura de leite são aquecidos até uma temperatura de 10 0 °C durante cerca de 1 hora ê são, então, resfriados até 40 °C. Cerca de 50% (em peso) de Bifidobacterium animalis são adicionados à gordura de leite em uma caixa-luva, a 10% de umidade relativa. O Culturetech 064 (aquecido de um dia para outro em um forno a 82 °C) , o óleo de caroço de palma (a 121 °C) , o ácido láctico em pó (aquecido de um dia para outro em um forno a 82 °C) e o revestimento branco cremoso (seco por rotação de um dia para outro, a cerca de 60 °C) são misturados um ao outro a uma temperatura de 3 5 °C durante um período de cerca de 3 0 minutos a 1 hora, para se obter uma mistura pararevestimento branca. O restante da gordura de leite e Bifidobacterium animalis são picados em pedaços de cerca de 1 a 2 mm de diâmetro, e dispersos por toda a mistura para revestimento branca. A mistura final é resfriada até 15 °C para solidificar, sendo reduzida a pedaços pequenos, adequados a uma composição alimentícia para animais de estimação. Antes do uso, o segundo componente é armazenado em bolsas de papel alumínio purgadas com nitrogênio.

O primeiro e o segundo componentes são fornecidos a uma razão de peso de cerca de 7:1. 0 primeiro componente está contido no interior de uma lata grande, cujo rótulo informa que "probioticos vivos e ativos" estão contidos na composição (inclusive, opcionalmente, declarações quanto ao teor de culturas vivas presentes na composição, ou em porções da composição), enquanto o segundo componente está contido no interior de uma lata menor, a qual é colocada no interior da lata grande, antes da comercialização. No momento do consumo pelo animal de estimação, o consumidor remove a lata menor, enche uma tigela com a quantidade desejada ou recomendada do primeiro componente obtido a partir da lata grande, e adiciona a quantidade desejada ou recomendada do segundo componente obtido a partir da lata menor. No momento do consumo por um animal de estimação, o segundo componente apresenta uma contagem de microorganismos probioticos viáveis de cerca de 4 x IO9 UFC/grama do segundo componente. Exemplo 3

O primeiro componente compreende uma pluralidade de rações, sendo que cada ração é uma composição alimentícia nutricionalmente balanceada para animais de estimação. Por exemplo, o primeiro componente pode consistir em rações adequadas para cães adultos, obtidas junto à The Iams Company, Dayton, OH, EUA.

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A manteiga de cacau é aquecida até uma temperatura de 100 °C durante 1 hora e, então, resfriada até 40 °C. O microorganismo probiótico é adicionado à manteiga de cacau em uma caixa-luva com umidade relativa a 10%. O sorbitol é aquecido até uma temperatura de 204 °C e, então, resf riado até 4 9 °C, a 12 % de umidade relativa. 0 sorbitol é misturado à manteiga de cacau e à mistura de microorganismos probióticos, para se obter um material distribuído de maneira uniforme. Esse material é vertido em uma pluralidade de moldes com formato e tamanho desejados, sendo deixado resfriar ainda mais. O primeiro e o segundo componentes são fornecidos a uma razão de peso de cerca de 7:1.

O primeiro componente está contido no interior de umalata grande, sendo que peças separadas (obtidas de moldes) do segundo componente estão contidas no interior de uma embalagem blister, a qual está fisicamente associada à lata grande no momento da comercialização. No momento do consumo pelo animal de estimação, o consumidor enche uma tigela com a quantidade desejada ou recomendada do primeiro componente obtido a partir da lata grande, e adiciona a quantidade desejada ou recomendada do segundo componente obtido a partir da embalagem blister. No momento do consumo por um animal de estimação, o segundo componente apresenta uma contagem de microorganismos probioticos viáveis de cerca de 8 x IO7 UFC/grama do segundo componente.

Exemplo 4

0 primeiro componente compreende uma pluralidade de rações, sendo que cada ração é uma composição alimentícia nutricionalmente balanceada para animais de estimação. Por exemplo, o primeiro componente pode consistir em rações adequadas para cães adultos, obtidas junto à The Iams Company, Dayton, OH, EUA.

<table>table see original document page 59</column></row><table><table>table see original document page 60</column></row><table>

O segundo componente é preparado conforme exposto a seguir: cerca de 75% (em peso) da manteiga de cacau são aquecidos até uma temperatura de 100 °C durante cerca de 1hora e, então, resfriados até 40 °C. Cerca de 50% (em peso) de Bifidobacterium infantis são adicionados à manteiga de cacau em uma caixa-luva, a 10% de umidade relativa. 0 sorbitol é aquecido até uma temperatura de 2 04 °C sendo, então, resfriado até 49 °C, a 12% de umidade relativa. A mistura de manteiga de cacau, Bifidobacterium infantis, ácido cítricô, sabor de framboesa e corantes alimentícios é misturada ao sorbitol para obter-se um material distribuído de maneira uniforme. Esse material é vertido em uma pluralidade de moldes com formato e tamanho desej ados,sendo deixado resfriar ainda mais. Antes do uso, o segundo componente é armazenado em bolsas de papel alumínio purgadas com nitrogênio.

O primeiro e o segundo componentes são fornecidos sob a forma de uma mistura de uma pluralidade de rações euma pluralidade de pedaços, respectivamente, a uma razão de peso de cerca de 10:1.

Claims

1. Composição alimentícia para animais de estimação, caracterizada pelo fato de compreender:(a) um primeiro componente compreendendo uma fonte de proteína, uma fonte de gordura e uma fonte de carboidrato; e(b) um segundo componente, fisicamente distinto do primeiro componente, tendo uma atividade de água de 0,2 ou menos, sendo que o segundo componente compreende um produto biológico selecionado de um componente probiótico tendo uma contagem de microorganismos probioticos viáveis de ao menos IO5 UFC/grama do segundo componente, bem como leveduras, enzimas, anticorpos, imunoglobulinas, citoquinas, antioxidantes, minerais, produtos nutriceuticos e combinações dos mesmos.

2. Composição alimentícia para animais de estimação, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o primeiro componente compreende, ainda, uma fonte de fibras suplementar, enquanto o segundo componente compreende um componente selecionado de um componente de lipídio, um componente adoçante, um componente antioxidante, um componente mineral e combinações dos mesmos.

3. Composição alimentícia para animais de estimação, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pelo fato de que o primeiro componente é ao menos parcialmente extrudado.

4. Composição alimentícia para animais de estimação, de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesanteriores, caracterizada pelo fato de que o produto biológico compreende o componente probiótico que tem uma coritagem de microorganismos probióticos viáveis de ao menos IO5 UFC/grama, de preferência de IO5 a IO12 UFC/grama do segundo componente.

5. Composição alimentícia para animais de estimação, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pelo fato de que o componente probiótico compreende gêneros selecionados de Bacillus,Bacteroides, Bifidobacterium, Enterococcus, Lactobacillus e Leuconostoc, bem como combinações dos mesmos sendo que, de preferência, o componente probiótico compreende Bifidobacterium.

6. Composição alimentícia para animais de estimação, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pelo fato de que o segundo componente compreende, ainda, um prebiotico.

7. Composição alimentícia para animais de estimação, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pelo fato de que o primeiro componente e o segundo componente estão presentes a uma razão de ao menos 2:1, de preferência ao menos 5:1 e, com mais preferência, ao menos 10:1, em peso.

8. - Composição alimentícia para animais de estimação, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pelo fato de ser uma composição alimentícia nutricionalmente balanceada para animais de estimação.

9. Composição alimentícia para animais de estimação, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pelo fato de compreender, ainda, um primeiro e um segundo dispositivos de embalagem, sendo queo primeiro dispositivo de embalagem contém ao menos uma porção do primeiro componente, enquanto o segundo dispositivo de embalagem contém ao menos uma porção do segundo componente.

10. Uso de uma composição alimentícia para animais de estimação, de acordo com qualquer uma das reivindicaçõesanteriores, para a fabricação de um medicamento para melhorar a saúde de um animal de estimação, caracterizado pelo fato de que a melhora da saúde é selecionada do grupo consistindo no tratamento de doenças do sistema imunológico, tratamento de doenças do sistema gastrointestinal, tratamento de doenças da pele ou da pelagem, tratamento do estresse, melhora da saúde gastrointestinal e combinações dos mesmos.

11. Uso, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que a melhora da saúde compreende a administração oral do medicamento, a qual se dá de uma vez por dia a quatro vezes por dia, de preferência ao menos uma vez por semana e, com mais preferência, ao menos uma vez por mês.