BRPI0610049A2

BRPI0610049A2 - inibidores de fosfolipase a2 citosólica

Info

Publication number: BRPI0610049A2
Application number: BRPI0610049-0A
Authority: BR
Inventors: John C Mckew; Katherine L Lee; Lilhren Chen; Richard Vargas; James D Clark; Valerie Clerin; Cara Williams; Suzana Marusic; Kevin Pong
Original assignee: Wyeth Corp
Priority date: 2005-05-27
Filing date: 2006-05-26
Publication date: 2010-05-25
Also published as: US20100022536A1; AR054195A1; US7557135B2; CY1111151T1; JP5116666B2; IL186912A0; NO20075627L; CN102040550B; PL1891006T3; ES2354908T3; CA2607857A1; CN102040550A; DK1891006T3; WO2006128142A3; CN101184729B; US8283373B2; US20100029645A1; JP2008542303A; NI200700287A; AU2006251946B2

Abstract

INIBIDORES DE FOSFOLIPASE A~ 2~ CITOSóLICA. A presente invenção provê inibidores químicos da atividade de várias enzimas fosfolipase, particularmente enzimas fosfolipase A~ 2~ citosólica (CPLA~ 2~), mais particularmente incluindo inibidores de enzimas fosfolipase A~ 2~ alfa citosólica (cPLA<244>). Em algumas modalidades, os inibidores têm a fórmula I; em que as variáveis constituintes são como aqui definidas

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "INIBIDORESDE FOSFOLIPASE A2 CITOSÓLICA".

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a inibidores químicos da atividadede várias enzimas fosfolipase, particularmente enzimas fosfolipase A2 citosó-lica (cPLA2), mais particularmente incluindo inibidores de enzimas alfa fosfo-lipase A2 citosólica (cPLA2oc).

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Os leucotrienos e prostaglandinas são mediadores importantesde inflamação, cada um contribuindo para o desenvolvimento de uma res-posta inflamatória em um modo diferente. Os leucotrienos recruta célulasinflamatórias como neutrófilos para um sítio inflamado, promovem a extrava-sação destas células e estimulam a liberação de superóxido e proteases quedanificam o tecido. Os leucotrienos também desempenham um papel patofi-siológico na hipersensibilidade experimentada pelos asmáticos (vide, porexemplo, enzimas fosfolipase, particularmente enzimas fosfolipase A2 citosó-licas (cPLA2), B. Samuelson et al., Science, 237:1171-76 (1987)]. Prosta-glandinas melhoram a inflamação por aumentarem o fluxo sangüíneo e as-sim infiltração de léucócitos nos sítios inflamados. As prostaglandinas tam-bém potenciam a resposta a dor induzida por estímulos.

As prostaglandinas e leucotrienos são instáveis e não são arma-zenados nas células, mas são, ao contrário, sintetizados [W. L. Smith, Bio-chem. J., 259:315-324 (1989)] de ácido araquidônico em resposta a estímu-los. As prostaglandinas são produzidas a partir de ácido araquidônico pelaação das enzimas COX-1 e COX-2. O ácido araquidônico é também o subs-trato para a via de enzima distinta levando à produção de leucotrienos.

O ácido araquidônico, que é alimentado nestas duas vias infla-matórias distintas, é liberado da posição sn-2 de fosfolipídeos de membranapor enzimas fosfolipase A2 (a seguir PLA2). A reação catalisada por PLA2representa, como se acredita, a etapa de limitação de taxa no processo debiossíntese de mediador de lipídeos, incluindo, mas não limitados à produ-ção de prostaglandinas e leucotrienos inflamatórios. Quando o substrato defosfolipideo de PLA2 é a da classe de fosfotidil colina com uma ligação éterna posição sn-1, o lisofosfolipideo produzido é o precursor imediato de fatorde ativação de plaquetas (a seguir chamado PAF), outro mediador potentede inflamação [S. I. Wasserman, Hospital Practice 15:49-58 (1988)].

A maior parte das terapias antiinflamatórias tem focalizado naprevenção da produção de ou prostaglandinas ou leucotrienos a partir des-tas vias distintas, mas nem todas das mesmas. Por exemplo, ibuprofeno,aspirina, e indometacia são todos NSAIDs que inibem a produção de prosta-glandinas por inibição de COX-1/COX-2, mas não tem um efeito direto sobrea produção inflamatória de leucotrienos a partir de ácido araquidônico nasoutras vias. Inversamente, zileuton inibe somente a via de conversão de áci-do araquidônico em leucotrienos, sem afetar diretamente a produção deprostaglandinas. Nenhum destes agentes antiinflamatórios amplamente usa-dos afeta a produção de PAF.

Conseqüentemente, a inibição direta da atividade de Pl_A2 foisugerida como um mecanismo utilizável para um agente terapêutico, isto é,para interferir com a resposta inflamatória. [Ver, por exemplo, J. Chang et al,Biochem. Pharmacoi., 36:2429-2436 (1987)].

Uma família de enzimas de PLA2 caracterizadas pela presençade um sinal de secreção seqüenciado e por fim secretado da célula foi se-qüenciada e estruturalmente definida. Estas Pl_A2s secretadas tem um pesomolecular de aproximadamente 14 kD e contém sete ligações dissulfeto quenão necessárias para atividade. Estas PLA2 são encontradas em grandesquantidades em pâncreas de mamíferos, veneno de abelha e vários venenosde cobra, [vide, por exemplo referência 13-15 em Chang et al, citado acima,e E. A. Dennis, Drug Devei. Res., 10:205-220 (1987).] No entanto, a enzimapancreática serve, como se acredita, a uma função digestiva e, como tal,não deve ser importante na produção de mediadores inflamatórios cuja pro-dução deve ser estritamente regulada.

A estrutura primária do primeiro PLA2 não pancreático humanofoi determinada. Este PLA2 não pancreático é encontrado em plaquetas, flui-do sinovial, e baço, e é também uma enzima secretada, Esta enzima é ummembro da família acima mencionada, [vide, J. J. Seilhamer et al, J. Biol.Chem., 264:5335-5338 (1989); R. M. Kramer et al, J. Biol. Chem., 264:5768-5775 (1989); e A. Kando et al, Biochem. Biophys. Res. Comm., 163:42-48(1989)]. No entanto, é duvidoso que esta enzima seja importante na síntesede prostaglandinas, leucotrienos e PAF, porque o PI_A2 não pancreatico éuma proteína extracelular que seria difícil de regular, e as próximas enzimasnas vias biossintéticas para estes compostos são proteínas intracelulares.Além disso, existe evidência de que PLA2 é regulado por proteína cinase C eproteínas G [R. Burch e J. Axelrod, Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 84:6374-6378 (1989)] que são proteínas citosólicas que devem atuar em proteínasintracelulares. Seria impossível para PLA2 não pancreática funcionar no cito-sol, porque um potencial de redução elevada iria reduzir as ligações dissulfe-to e inativar a enzima.

Uma PLA2 de murinos foi identificada na linhagem de célulasmacrófagos de murinos, designado RAW 264.7. Uma atividade específica de2 u.mols/min/mg, resistente às condições de redução foi relatada como sen-do associada com uma molécula de aproximadamente 60 kD. No entanto,estabilização não foi purificada até a homogeneidade [vide, C. C. Leslie et al,Biochem. Biophys. Acta., 963:476-492 (1988)]. As referências citadas acimasão incorporadas por referência aqui para informação pertencendo à funçãode enzimas fosfolipase, particularmente PLA2-

Uma fosfolipase A2 alfa citosólica (a seguir "cPLA2a") também foiidentificada e clonada. Vide Pat. U.S. N9s 5.322.776 e 5.354.677, que sãoincorporadas por referência aqui como se totalmente especificadas. A enzi-ma nestas patentes é uma enzima PLA2 intracelular, purificada de sua fontenatural ou de outra forma produzida em forma purificada, que funciona intra-celularmente para produzir ácido araquidônico em resposta a estímulos in-flamatórios.

Os metabólitos bioativos de ácido araquidônico, os eicosanói-des, são reconhecidos como moduladores importantes de sinalização deplaquetas. Os inibidores da via de eicosanóides (por exemplo aspirina) redu-zem a formação de tromboxano A2 (TXA2), um agonista de plaquetas lábil epotente, resultando na depressão da função de plaquetas, formação detrombos, e benefício clínico provado na redução de morbidez e mortalidade.

As plaquetas desempenham um papel central em vários proces-sos biológicos, incluindo trombose. [Vide S. P. Jackson e S. M. Schoenwael-der, Nature Reviews, Drug Discovery Vol. 2, 1-15, Outubro 2003; D.L. Bhatte E.J. Topol, Nature Reviews, Drug Discovery Vol. 2, 15-28, Janeiro 2003].[Vide B. Nieswandt et al., J. Thrombosis and Haemostase, 3: 1725-1736(2005).

Os inibidores de fosfolipase A2 citosólica são descritos em paten-te U.S. Ng 6.797.708, que é incorporada aqui por referência em sua totalida-de.:

Agora que várias enzimas fosfolipase foram identificadas, seriadesejável identificar inibidores químicos da ação de enzimas fosfolipase es-pecíficas, cujos inibidores poderiam ser usados para tratar condições infla-matórias, particularmente onde as inibições de produção de prostaglandinas,leucotrienos e PAF são, todas, resultados desejados.

Assim, permanece a necessidade na técnica para uma identifi-cação destes agentes aniiinfiamatórios para uso terapêutico em vários esta-dos de doenças.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Em algumas modalidades, a invenção prove compostos tendo afórmula I:

<formula>formula see original document page 5</formula>

em que:

n' é 1 ou 2;n2 é 1 ou 2;

n3 é 1 ou 2;

n5 é 0, 1 ou 2;

X2 é uma ligação, O, -CH2- ou S02;

cada R5 é independentemente H ou C1-3 alquila;

R6 é H ou C1-6 alquila;

R7 é selecionado dentre o grupo consistindo em OH, benzilóxi,CH3, CF3, OCF3, d-3 alcóxi, halogênio, COH, CO(d-3 alquila), CO(Od-3alquila), quinolina-5-ila, quinolina-8-ila, 3,5-dimetilisoxazol-4-ila, tiofeno-3-ila,piridin-4-ila, piridina-3-ila, -CH2-Q, e fenila opcionalmente substituída por deum a três grupos R30 independentemente selecionados;

R8 é selecionado dentre o grupo consistindo em H, OH, N02,

CF3l OCF3, d.3 alcóxi, halogênio, CO(Ci-3 alquila), CO(OCi-3 alquila), quino-lina-5-ila, quinolina-8-ila, 3,5-dimetilisoxazol-4-ila, tiofeno-3-ila, -CH2-Q, efenila substituída por de um a três grupos R30 independentemente selecio-nados;

<formula>formula see original document page 6</formula>

R20 é selecionado dentre o grupo consistindo em H, C1-3 alquila eCO(d.3 alquil); e

R30 é selecionado dentre o grupo consistindo em dialquilamino,

CN e O C F3;

desde que:

a) quando cada R5 é H, R6 é H, n5 é 0, e R8 é H, então R7 nãopode ser cloro;

b) quando cada R5 é H, R6 é H, n5 é 0, X2 é O ou -CH2-, e R8 éH, então R7 não pode ser CH3;

c) quando cada R5 é H, e R6 é H, então R7 e R8 ambos não po-dem ser flúor;

d) quando cada R5 é H, R6 é H, e X2 é O, então R7 e R8 ambosnão podem ser cloro;

e) quando cada R5 é H, R6 é H, X2 é O, e R8 é N02, então R7não pode ser flúor; e

f) quando cada R5 é H, R6 é H, X2 é S02, e R8 é H, então R7 nãopode ser flúor ou cloro.

Em algumas modalidades preferidas, os compostos são providostendo a fórmula II:

<formula>formula see original document page 7</formula>

em que:

X é uma ligação ou O;

n-i é 1 ou 2; '

n2 é 1 ou 2;

n6 é 1 ou 2;

R5 é H ou CH3;

R6 é H ou C-i-6 alquila; e

Rs é selecionado dentre o grupo consistindo em H, OH, NO2,CF3, OCF3, OCH3, halogênio, COCH3> COOCH3, dimetilamino, dietilamino e CN.

A presente invenção também prove métodos de tratar inflama-ção causada ou potenciada por prostaglandinas, leucotrienos, ou fator deativação de plaquetas, em um mamífero, o método compreendendo adminis-trar a um mamífero em necessidade do mesmo uma quantidade farmaceuti-camente aceitável de um composto da invenção, ou um sal farmaceutica-mente aceitável do mesmo.

A presente invenção ainda prove métodos de tratar dor causadaou potenciada por prostaglandinas, leucotrienos, ou fator de ativação de pla-quetas, em um mamífero, o método compreendendo administrar a um mamí-fero em necessidade do mesmo uma quantidade farmaceuticamente aceitá-vel de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável domesmo.

A presente invenção ainda prove métodos de tratar ou preveniruma doença ou distúrbio em um mamífero, ou prevenção da progressão desintomas como uma doença ou distúrbio, em que a doença ou distúrbio éselecionada dentre o grupo consistindo em asma, acidente vascular cere-bral, aterosclerose, esclerose múltipla, mal de Parkinson, distúrbios artríti-cos, distúrbios reumáticos, dano do sistema nervoso central resultante deacidente vascular cerebral, dano do sistema nervoso central resultante deisquemia, dano do sistema nervoso central resultante de trauma, inflamaçãocausada ou potenciada por prostaglandinas, inflamação causada ou poten-ciada por leucotrienos, dor, e inflamação causada ou potenciada por fator deativação de plaquetas, em um mamífero, o método compreendendo adminis-trar a um mamífero em necessidade do mesmo uma quantidade farmaceuti-camente aceitável de um composto da invenção, ou um sal farmaceutica-mente aceitável do mesmo.

A presente invenção também prove métodos para tratar ou pre-venir trombose venosa ou arterial em um mamífero, ou prevenção da pro-gressão de sintomas de trombose, o método compreendendo administrar aum mamífero em necessidade do mesmo uma quantidade farmaceuticamen-te aceitável de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente a-ceitável do mesmo. Em algumas modalidades, a trombose é aterotrombose.

A presente invenção também prove composições farmacêuticascompreendendo um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamenteaceitável do mesmo, e um veículo farmaceuticamente aceitável.

Provê-se, também, de acordo com a presente invenção, os saisfarmaceuticamente aceitáveis, e pró-fármacos, dos compostos descritos a-qui.BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

Figura 1 mostra a inibição in vitro de agregação de plaquetas emsangue humano pelos compostos de exemplos 14 e 25, como determinadopelo analisador de função de plaquetas (PFA-100®).

Figura 2 mostra o fluxo de sangue melhorado e redução de for-mação de trombo pelos compostos de exemplos 14 e 15, em um modelo detrombose aguda de rato.

Figura 3 mostra a redução de níveis de B2 tromboxano no soroem ratos submetidos a trombose induzida por cloreto férrico pelos compos-tos de exemplos 14 e 25.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Em algumas modalidades, a invenção prove compostos tendo aformulai: I:

<formula>formula see original document page 9</formula>

em que:

n-\ é 1 ou 2;. n2 é 1 ou 2;n3 é 1 ou 2;n5 é 0, 1 ou 2;

X2 é uma ligação, O, -CH2- ou S02;

cada R5 é independentemente H ou C1-3 alquila;

R6 é H ou C1-6 alquila;

R7 é selecionado dentre o grupo consistindo em OH, benzilóxi,CH3, CF3, OCF3, C1-3 alcóxi, halogênio, COH, CO(Ci-3 alquila), CO(OCi.3alquila), quinolina-5-ila, quinolina-8-ila, 3,5-dimetilisoxazol-4-ila, tiofeno-3-ila,piridin-4-ila, piridina-3-ila, -CH2-Q, e fenila opcionalmente substituída por deum a três grupos R30 independentemente selecionados;

R8 é selecionado dentre o grupo consistindo em H, OH, NO2,CF3) OCF3) Ci.3 alcóxi, halogênio, CO(d-3 alquila), CCKOCvs alquila), quino-lina-5-ila, quinolina-8-ila, 3,5-dimetilisoxazol-4-ila, tiofeno-3-ila, -CH2-Q, efenila substituída por de um a três grupos R30 independentemente selecio-nados;

<formula>formula see original document page 10</formula>

R2o é selecionado dentre o grupo consistindo em H, C-|,3 alquila eCO(d.3 alquil); e <

R30 é selecionado dentre o grupo consistindo em dialquilamino,

CN e O C F3;

desde que:

c) quando cada R5 é H, e R6 é H, então R7 e R8 ambos não po-dem ser flúor;

Em algumas modalidades, X2 é CH2. Em algumas outras moda-lidades, n3 é 1. Em algumas outras modalidades, n-i é 1. Em ainda outrasmodalidades, n2 é 1.

Em algumas modalidades, n3 é 1; n-\ é 1; e n2 é 1. Em algumasdestas modalidades, R6 é H. Em algumas destas modalidades, n3 é 1; r\-\ é 1;n2 é 1; R6 é H; R7 é selecionado dentre o grupo consistindo em CH3, CF3,OCF3, halogênio, COOCH3, COH, CH2OH, dietilaminometila, quinolina-5-ila,quinolina-8-ila, 3,5-dimetilisoxazol-4-ila, tiofeno-3-ila, piridin-4-ila, piridina-3-ila, fenila, 4-dimetilamino-fen-1-ila, 2-trif luorometóxi-fen-1-ila, 2-ciano-fen-1-ila, morfolina-1-il-metila, piperazina-1-il metila, 4-acetil-piperazina-1-il metila,e 4-metil-piperazina-1-il metila; e R8 é selecionado dentre o grupo consistin-do em H, halogênio, CF3 e N02. Em algumas destas modalidades, R5 é H.Em algumas outras modalidades, R5 é CH3.

Em algumas modalidades dos compostos de fórmula I, X2 é O.Em algumas destas modalidades, n3 é 1. Em algumas destas modalidades,n-i é 1. Em algumas destas modalidades, n2 é 1. Em algumas modalidades,R6 é H. Em algumas destas modalidades, n3é 1; ni é 1; e n2é 1. Em algu-mas destas modalidades, n3 é 1; ^ é 1; n2 é 1; R6 é H; R7 é selecionadodentre o grupo consistindo em benzilóxi, OH, halogênio, CH3 e CF3; e Re éselecionado dentre o grupo consistindo em H, halogênio, e N02. Em algu-mas destas modalidades, R5 é H. Em algumas outras modalidades, R5 éCH3. Em algumas modalidades preferidas, R7 é CF3, e R8 é H.

Em algumas modalidades, X2 é S02. Em algumas destas moda-lidades, n5 é 2. Em algumas outras tais modalidades, n3 é 1. Em algumasoutras tais modalidades, n-i é 1. Em algumas outras tais modalidades, n2 é 1.

Em algumas modalidades, R6 é H. Em algumas outras tais modalidades, n3 é1; n-i é 1; e n2 é 1. Em algumas modalidades, X2 é S02; n3 é 1; ni é 1; n2 é 1;R6é H; R7éCF3;e R8é H.

Em algumas modalidades, n-i é 1; n2 é 1 ou 2; n3 é 1, n5 é 0; X2 éCH2, cada R5 e cada R6 é H; e R7 e Re são independentemente selecionadosdentre o grupo consistindo em H, F, CF3, OCF3, OH, quinolina-5-ila e quino-lina-8-ila, desde que R7 e R8 não são ambos H.

Em algumas modalidades preferidas, os compostos são providostendo a fórmula II:<formula>formula see original document page 12</formula>

em que:

X é uma ligação ou O;

n' é 1 ou 2;

n2 é 1 ou 2;

n6 é 1 ou 2;

R5 é H ou CH3;

R6 é H ou C1-6 alquila; e

R8 é selecionado dentre o grupo consistindo em H, OH, N02,CF3, OCF3, OCH3, ihalogênio, COCH3, COOCH3, dimetilamino, dietilamino e CN.

Em algumas modalidades, ni é 1. Em algumas outras modalida-des, n2 é 1. Em algumas outras modalidades, n6 é 2. Em algumas outrasmodalidades, R5 é H. Em algumas outras modalidades, R6 é H. Em algumasoutras modalidades, ni é 1; n2 é 1; e n6 é 2.

Em algumas modalidades preferidas, R5 é H; R6 é H; ni é 1, n2 é1; e n6 é 2. Em algumas destas modalidades, R8 é selecionado dentre o gru-po consistindo em H, CF3, OCF3 e halogênio, preferivelmente H.

A presente invenção também prove métodos de tratar inflama-ção causada ou potenciada por prostaglandinas, leucotrienos, ou fator deativação de plaquetas, em um mamífero, o método compreendendo adminis-trar a um mamífero em necessidade do mesmo uma quantidade farmaceuti-camente aceitável de um composto da invenção, ou um sal farmacêutica-mente aceitável do mesmo.

Provê-se, também, de acordo com a presente invenção, saisfarmaceuticamente aceitáveis, e pró-fármacos, dos compostos descritos a-qui.

Os compostos da presente invenção podem ser usados em umacomposição farmacêutica quando combinados com um veículo farmaceuti-camente aceitável. Esta composição também pode conter (além de um com-posto ou os compostos da presente invenção e um veículo) diluentes, car-gas, sais, tampões, estabilizadores, solubilizadores, e outros materiais bem-conhecido na técnica. O termo "farmaceuticamente aceitável" significa ummaterial não tóxico que não interfere com a eficácia da atividade biológicado(s) ingrediente (s) ativo(s). As características do veículo irão depender davia de administração. A composição farmacêutica pode ainda conter outrosagentes antiinflamatorios. Tais fatores adicionais e/ou agentes podem serinclusos em uma composição farmacêutica para produzir um efeito sinergís-tico com os compostos da presente invenção, ou para minimizar efeitos late-rais causados pelo composto da presente invenção.As composições farmacêuticas da invenção podem estar naforma de um lipossoma ou micelas em que os compostos da presente inven-ção são combinados, além disso para outros veículos farmaceuticamenteaceitáveis, com agentes antipáticos como lipídeos que existem na forma a-gregada como micelas, monocamadas insolúveis, cristais líquidos, ou cama-das lamelares em solução aquosa. Lipídeos apropriados para formulaçãoliposomal incluem, sem limitação, monoglicerídeos, diglicerídeos, sulfatí-deos, lisolecitina, fosfolipídeos, saponina, ácidos de bile, e outros. Prepara-ção de tais formulações lipossomais está de acordo com o nível do versadona técnica, como descrito, por exemplo, nas patentes U.S. números4.235.871; 4.501.728; 4.837.028; e 4.737.323, todas sendo incorporadasaqui por referência.

Como usado aqui, o termo "quantidade farmaceuticamente efi-caz" ou quantidade "terapeuticamente eficaz" como usado aqui significa aquantidade total de cada componente ativo da composição farmacêutica oumétodo que é suficiente para mostrar um benefício significativo para o paci-ente, isto é, tratamento, cura, prevenção, inibição ou melhora de uma res-posta fisiológica ou condição, como uma condição inflamatória ou dor, ou umaumento na taxa de tratamento, cura , prevenção, inibição ou melhora detais condições. Quando aplicado em um ingrediente ativo individual, adminis-trado sozinho, o termo refere-se ao ingrediente sozinho. Quando aplicadoem uma combinação, o termo refere-se a quantidades combinadas de ingre-dientes ativos que resultam no efeito terapêutico, seja administrado emcombinação, em série ou simultaneamente.

Cada um dos métodos de tratamento ou uso da presente inven-ção, como descrito aqui, compreende a administração a um mamífero emnecessidade de tal tratamento ou uso de uma quantidade farmaceuticamen-te ou terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção, ouuma forma de sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos. Os compostosda presente invenção podem ser administrados de acordo com o método dainvenção ou sozinhos ou em combinação com outras terapias como trata-mentos empregando outros agentes antiinflamatórios, citocinas, linfocinas ououtros fatores hematopoieticos. Quando co-administrados com um ou maisoutros agentes antiinflamatórios, citocinas, linfocinas ou outros fatores hema-topoieticos, os compostos da presente invenção podem ser administrados ousimultaneamente com o(s) outro(s) agente(s) antiinflamatório, citocina(s),linfocina(s), outro(s) fator(es) hematopoiético, fatores trombolíticos ou anti-trombóticos, ou seqüencialmente. Se administrado seqüencialmente, o clíni-co atendente irá decidir sobre a seqüência apropriada de administração doscompostos da presente invenção em combinação com outro(s) agente (s)antiinflamatório, cifocina(s), linfocina(s), outro(s) fator(es) hematopoiético(s),fatores trombolíticos ou anti-trombóticos.

A administração dos compostos da presente invenção usadosem uma composição farmacêutica ou para praticar o método da presenteinvenção pode seri realizada em uma variedade de modos convencionais,como ingestão orai, inalação, ou injeção cutânea, subcutânea, ou intraveno-sa.

Quando uma quantidade terapeuticamente eficaz dos compostosda presente invenção é administrada oralmente, os compostos da presenteinvenção estarão na forma de um comprimido, cápsula, pó, solução ou elixir.

Quando administrada na forma de comprimido, a composição farmacêuticada invenção adicionalmente pode conter um veículo sólido como a gelatinaou um adjuvante. Q comprimido, cápsula, e pó contêm de cerca de 5 a 95%de composto da presente invenção, e preferivelmente de cerca de 10% a90% de composto da presente invenção. Quando administrado na forma lí-quida, um veículo líquido como água, petróleo, óleos de origem animal ouplanta como óleo de amendoim, óleos minerais, fosfolipídeos, tweens, trigli-cerídeos, incluindo triglicerídeos de cadeia média, óleo de soja, ou óleo degergelim, ou óleos sintéticos podem ser adicionados. A forma líquida de umacomposição farmacêutica pode ainda conter solução salina fisiológica, dex-trose ou outra solução sacarídeo, ou glicóis como etileno glicol, propilenoglicol ou polietileno glicol. Quando administrada na forma líquida, a composi-ção farmacêutica contém de cerca de 0,5 a 90% em peso de composto dapresente invenção, e preferivelmente de cerca de 1 a 50% de composto dapresente invenção.

Quando uma quantidade terapeuticamente eficaz dos compostosda presente invenção é administrada por injeção intravenosa, cutânea ousubcutânea, os compostos da presente invenção estarão na forma de umasolução aquosa parenteralmente aceitável isenta de pirogênios. A prepara-ção de tais soluções de proteína parenteralmente aceitáveis, com relaçãodevida ao pH, isotonicidade, estabilidade, e outros, está de acordo com oversado na técnica. Uma composição farmacêutica preferida para injeçãointravenosa, cutânea, ou subcutânea deve conter, além dos compostos dapresente invenção, um veículo isotônico como injeção de cloreto de sódio,injeção de Ringer, injeção de dextrose, injeção de dextrose e cloreto de só-dio, injeção de Ringer lactado, ou outro veículo como conhecido na técnica,

A composição farmacêutica da presente invenção pode também conter es-tabilizadores, conservantes, tampões, antioxidantes, ou outros aditivos co-nhecidos dos versados na técnica.

A quantidade de compostos (s) da presente invenção na compo-sição farmacêutica da presente invenção irá depender da natureza e severi-dade da condição sendo tratada, e na natureza de tratamentos anterioresque o paciente sofreu. Por fim, o médico atendente irá decidir a quantidadede composto da presente invenção que irá tratar cada paciente individual.Inicialmente, o médico atendente irá administrar doses baixas de compostosda presente invenção e observar a resposta do paciente. Doses maiores decompostos da presente invenção podem ser administradas até o efeito tera-pêutico ótimo ser obtido para o paciente, e neste ponto, a dosagem não émais aumentada. Contempla-se que as várias composições farmacêuticasusadas para praticar o método da presente invenção devem conter cerca de0,1 ng a cerca de 100 mg (preferivelmente cerca de 0,1 mg a cerca de 50mg, mais preferivelmente cerca de 1 mg a cerca de 2 mg) de composto dapresente invenção por kg de peso do corpo.

A duração de terapia intravenosa usando a composição farma-cêutica da presente invenção irá variar, dependendo da severidade da doen-ça que sendo tratada e da condição e resposta idiossincrática potencial decada paciente individual. Contempla-se que a duração de cada aplicaçãodos compostos da presente invenção estará na faixa de 12 a 24 horas deadministração intravenosa contínua. Por fim, o médico atendente irá decidira duração apropriada de terapia intravenosa usando a composição farma-cêutica da presente invenção. Uma formulação oral com base em lipí-deos desta invenção foi preparada por misturação de 50% PHOSAL.RTM.53MCT (American Lecithin Company), 5% Polisorbato 80, 15% LABRA-SOL.RTM. Glicerídeos macrogol-8 caprilocaproila (Gattefosse Corp.), 15%de carbonato de propileno e compostos inibidores de cPLA2 15% ativos des-ta invenção, sendo cada percentagem listada em peso.

Sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula (I)tendo uma porção acídica podem ser formados a partir de bases orgânica einorgânica. Sais apropriados com bases são, por exemplo, sais de metais,como sais de metal alcalino ou metal alcalino terroso, por exemplo, sais desódio, potássio, ou magnésio; ou sais com amônia ou uma amina orgânica,como morfolina, tiomorfolina, piperidina, pirrolidina, um mono-, di- ou trialqui-lamina inferior, por exemplo, etil-terc-butil-, dietil-, diisopropil-, trietil-, tributil-ou dimeíilpropilamina, ou um mono», di=, ou trihidróxi alquüamina inferior, porexemplo, mono-, di- ou trietanolamina.

A presente invenção também inclui pró-fármacos dos compostosdescritos aqui. Como usado aqui, "pró-fármaco" refere-se a uma porção quelibera um composto da invenção quando administrado a um indivíduo mamí-fero. Pró-fármacos podem ser preparados por modificação de grupos funcio-nais presentes nos compostos em tal modo que as modificações são cliva-das, ou em manipulação de rotina ou in vivo, para os compostos parentais.

Exemplos de pró-fármacos incluem compostos da invenção como descritosaqui que contém uma ou mais porções moleculares apensas a um grupohidroxila, amina, sulfhidrila, ou carboxila do composto, e que quando admi-nistrados a um indivíduo mamífero, cliva in vivo para formar um grupo hidro-xila, amina, sulfhidrila, ou carboxila livre, respectivamente. Exemplos de pró-fármacos incluem, mas não são limitados para, derivados de acetato, forma-to e benzoato de álcool e grupos funcionais amina nos compostos da inven-ção. Preparação e uso de pró-fármacos é discutido em T. Higuchi e V. Stella,"Pro-drugs as Novel Delivery Systems," vol. 14 do A.C.S. Symposium Series,e em Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, AmericanPharmaceutical Association e Pergamon Press, 1987, ambos sendo incorpo-rados aqui por referência em sua totalidade.

Como usado aqui, o termo "alquila" se destina a referir a umgrupo hidrocarboneto saturado que é de cadeia reta ou ramificada. Exem-plos de grupos alquila incluem metila (Me), etila (Et), propila (por exemplo, n-propila e isopropila), butila (por exemplo, n-butila, isobutila, s-butila, t-butila),pentila (por exemplo, n-pentila, isopentila, neopentila) e outros. Grupos alqui-la podem conter de 1 a cerca de 20, 1 a cerca de 10, 1 a cerca de 8, 1 a cer-ca de 6, 1 a cerca de 4, ou 1 a cerca de 3 átomos de carbono. Em algumasmodalidades, grupos alquila podem ser substituídos com até quatro grupossubstituintes, como descrito abaixo. Como usado aqui, o termo "alquila infe-rior" se destina a significar grupos alquila tendo até seis átomos de carbono.

Como usado aqui, "hidróxi" ou "hidroxila" refere-se a OH.

Como usado aqui, "halo" ou "halogênio" incluem flúor, cloro,bromo, e iodo.

Como usado aqui, "ciano" refere-se a CN.

Como usado aqui, "alcóxi" refere-se a um grupo -O-alquila. E-xemplo de grupos alcóxi inclui metóxi, etóxi, propóxi (por exemplo, n-propóxie isopropóxi), t-butóxi, e outros. Um grupo alcóxi pode conter de 1 a cerca de20, 1 a cerca de 10, 1 a cerca de 8, 1 a cerca de 6, 1 a cerca de 4, ou 1 acerca de 3 átomos de carbono.

Como usado aqui, "benzilóxi" refere-se a um grupo -O-benzila.

Em vários lugares nos substituintes de especificação presentede compostos da invenção são descritos em grupos ou em faixa. Pretende-se especificamente que a invenção inclua cada uma e todas as subcombina-ções individuais dos membros de tais grupos e faixas. Por exemplo, o termo"C1-6 alquila" destina-se especificamente a descrever individualmente metila,etila, propila, isopropila, n-butila, sec-butila, isobutila, etc.

Os compostos da presente invenção podem conter um átomoassimétrico (também referido como um centro quiral), e alguns dos compos-tos pode conter um ou mais átomos assimétricos ou centros, que pode as-sim dar lugar a isomeros ópticos (enantiomeros) e diastereômeros. A pre-sente invenção inclui tais isomeros ópticos (enantiomeros) e diastereômeros(isomeros geométricos); assim como estereoisômeros R e S enantiomerica-mente puros, racêmicos e resolvidos, assim como outras misturas dos este-reoisômeros R.eSe sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Osisomeros ópticos podem ser obtidos na forma pura por procedimentos pa-drões conhecidos dós versados na técnica, e incluem, mas não são limitadosà formação de sal diastereomérico, resolução cinética, e síntese assimétrica.Também entende-sè que esta invenção engloba todos regioisômeros, e mis-turas dos mesmos, que podem ser obtidos na forma pura por procedimentosde separação padr.ões conhecidos dos versados na técnica, e incluem, masnão são limitados à cromatografia de coluna, cromatografia de camada fina,e cromatografia de líquido de desempenho elevado.

Os novos compostos da presente invenção podem ser prepara-dos em uma variedade de modos conhecidos para um versado na técnica desíntese orgânica. Os compostos da presente invenção podem ser sintetiza-dos usando os métodos como descritos abaixo, juntos com métodos sintéti-conhecidos na técnica de química orgânica sintética ou variações sobreos mesmos, como apreciado pelo versado na técnica.

Os compostos da presente invenção podem ser conveniente-mente preparados de acordo com os procedimentos descritos nos esquemasabaixo, de materiais de partida comercialmente disponíveis, os compostosconhecidos na literatura, ou intermediários facilmente preparados, por em-pregar métodos sintéticos padrões e procedimentos conhecidos dos versa-dos na técnica. Métodos sintéticos padrões e procedimentos para a prepara-ção de moléculas orgânicas e transformações de grupo funcional e manipu-lações podem ser facilmente obtidos da literatura científica relevante ou delivros de texto padrões no campo. Será apreciado que onde as condiçõestípicas ou processo preferido (isto é, temperaturas de reação, tempos, rela-ções mol de reagentes, solventes, pressões, etc.) são dados, outras condi-ções de processo também podem ser usadas salvo indicado em contrário.As condições de reação ótimas podem variar com os reagentes ou solventesparticulares usados, mas tais condições podem ser determinadas por umversado na técnica por procedimentos de otimização de rotina. O versado natécnica de síntese orgânica irá reconhecer que a natureza e ordem das eta-pas sintéticas apresentadas podem ser variadas para o propósito de otimizara formação dos compostos da invenção.

Os processos descritos aqui podem ser monitorados de acordocom qualquer método apropriado conhecido na técnica. Por exemplo, a for-mação de produto pode ser monitorada por meio espectroscópico, como es-pectroscopia de ressonância magnética nuclear (por exemplo, 1H ou 13C)espectroscopia infra-vermelho, espectrofotometria (por exemplo, UV-visível),ou espectrometria em massa, ou por cromatografia como cromatografia lí-quida de desempenho elevado (HPLC) ou cromatografia de camada fina.

A preparação de compostos pode envolver a proteção e despro-teção de vários grupos químicos. A necessidade para proteção e desprote-ção, e a seleção de grupos de proteção apropriados pode ser facilmente de-terminada por um versado na técnica. A química de grupos de proteção po-de ser encontrada,'por exemplo, em Greene, et al., Protective Groups in Or-ganic Synthese, segunda edição, Wiley & Sons, 1991, que é incorporadoaqui por referência em sua totalidade.

As reações dos processos descritos aqui podem ser realizadasem solventes apropriados que podem ser facilmente selecionados por umversado na técnica de síntese orgânica. Os solventes apropriados podemser substancialmente não reativos com os materiais de partidas (reagentes),os intermediários, ou produtos em temperaturas em que as reações são rea-lizadas, isto é, temperaturas que podem estar na faixa da temperatura decongelamento de solvente para a temperatura de ebulição de solvente. Umreator dado pode ser realizado em um solvente ou uma mistura de mais doque um solvente. Dependendo da etapa de reação particular, os solventesapropriados para uma etapa de reação particular podem ser selecionados.

Apesar de não se desejar ficar limitado a qualquer fonte, publi-cações e literaturas como WO 200044723; Li, J. P.; Newlander, K. A.; Yellin,i T. O. Synthese, 1988, 73 - 76; Gilchrist, T. L; Roberts, T. G. J. Chem. Soe.Perkin. Trans 1 1983, 1283 - 1292 são utilizáveis e referências reconhecidasde síntese orgânica conhecidas na técnica. Cada um dos acima é incorpora-do aqui por referência em sua totalidade.

Os compostos da invenção são preparados usando técnicasconvencionais conhecidas dos versados na técnica de síntese orgânica. Osmateriais de partida usados em preparar os compostos da invenção são co-nhecidos, feitos por métodos conhecidos ou são comercialmente disponí-veis.

O versado na técnica de síntese orgânica irá reconhecer que anatureza e ordem das etapas sintéticas apresentadas podem ser variadaspara o fim de otimizar a formação dos compostos da invenção.

Exemplos

Preparação de compostos da invenção

Os seguintes descrevem a preparação de compostos represen-tativos desta invenção em maiores detalhes. Os exemplos seguintes sãooferecidos para propósitos ilustrativos, e não são destinados para limitar ainvenção em qualquer maneira. O versado na técnica irá facilmente reco-nhecer uma variedade de parâmetros não críticos que podem ser mudadosou modificados para dar essencialmente os mesmos resultados.

Dado espectral em massa é registrado como a relação massapara carga, m/z, e para dado espectral em massa de resolução elevada, asmassas calculadas e experimentalmente encontradas, [M+H]+, para a fórmu-Ia neutra M são registradas. Dado de ressonância magnética nuclear é regis-trado como ô em partes por milhão (ppm) acentuada do padrão, tetrametilsi-lano; junto com o solvente, núcleo, e parâmetros de potência. As constantesde acoplamento spin-spin homonuclear são registradas como valores J emhertz; e as multiplicidades são registradas como a: s, singleto; d, dupleto; t,tripleto; q, quarteto; quinteto; ou br, amplo.

Esguema(s) sintético(s) gerais para a preparação de compostos

Os compostos da invenção podem ser preparados pelos proce-dimentos de métodos A-E, mostrados abaixo:Método A

<formula>formula see original document page 22</formula>

2) Ag2C03, Acetona,

<formula>formula see original document page 22</formula>

Como mostrado acima no método A, um indol inicial pode seralquilado na posição C3 (o átomo de carbono na 3-posição da porção indol)com aldeídos ou os acetais correspondentes na presença de um ácido deLewis ou Bronsted, como eterato de trifloureto de boro ou ácido trifluoroacé-tico. O nitrogênio indol pode então ser alquilado por tratamento com umabase forte como bis(trimetilsilil) amida de sódio, n-BuLi, hidreto de sódio ouhidreto de potássio em um solvente como DMF, DMSO ou THF seguido porexposição para o halogeneto de alquila apropriado. O produto resultante po-de ser tratado com tetrabrometo de carbono em tetracloreto de carbono euma quantidade catalítica de peróxido de benzoila para efeito de dibromaçãodo grupo C2 metila. O dibrometo pode então ou ser agitado com carbonatode prata em água acetona ou despejado em DMSO e agitado. Ambos osprocedimentos geram o aldeído que é então submetido à reação aldol nitrocom nitrometano e acetato de amônio em refluxo. O intermediário vinil nitroresultante é reduzido para a amina quando do tratamento com amálgama demercúrio de zinco em uma mistura de THF e HCI concentrado a refluxo. Estaamina pode então ser tratada com o cloreto de sulfonila requerido sob condi-ções bifásicas, bicarbonato de sódio aquoso/diclorometano, ou em solventeorgânico com a adição de uma base amina orgânica impedida. A hidrólisefinal pode ser obtida sob condições básicas com hidróxido de sódio em águae metanol e THF em temperatura ambiente ou em temperatura elevada. Al-ternativamente pode ser clivada por tratamento com tiometóxido de sódio emum solvente como THF ou DMF em temperaturas elevadas (50 °C -100 °C).

Método B: Método Suzuki

<formula>formula see original document page 23</formula>

Como mostrado acima no método B, um halogeneto é colocadoem um vaso com um ácido borônico, uma base (por exemplo, KF), uma fon-te de paládio (por exemplo, Pd(OAc)2) um ligando (por exemplo, PPh3), e umsolvente desgasificado apropriado, por exemplo DMF, MeOH, água ou umacombinação do mesmo. A mistura é então aquecida ou termicamente ou emum reator de microondas. O trabalho padrão dá o produto (éster) protegido,que é então hidrolisado na base para dar o produto de ácido livre.Método C: método de aminacão redutiva

<formula>formula see original document page 24</formula>

Como mostrado no método C acima, um composto contendoformila é tratado com uma amina, uma fonte de ácido se necessário, e umagente de redução apropriado, como NaBH(OAc)3. A reação é deixada agi-tar em temperatura ambiente, ou pode ser aquecida se necessário. O traba-lho padrão dá o produto (éster) protegido, que é então hidrolisado em basepara dar o produto de ácido livre.

Método D

<formula>formula see original document page 24</formula><formula>formula see original document page 25</formula>

Como mostrado no método D acima, uma halo amina apropria-damente substituída é reagido com anidrido trifluoroacético para dar um in-termediário que pode ser tratado com um catalisador de Pd(!l) na presençade uma base como trietilamina, Cul e uma alquina apropriada, sob calor, pa-ra dar o intermediário indol desejado. O álcool primário é protegido como uméter silílico usando um cloreto de silila como cloreto de t-butildifenil silila euma base como imidazol. O indol protegido é então tratado com cloreto deoxalila seguido por metanol que produz o éster oxalato desejado, cujo nitro-gênio indol pode ser alquilado usando uma base apropriada como carbonatode césio em refluxo de acetonitrila e um halogeneto. O oxalato pode entãoser reduzido via a ação de um agente redutor apropriado como borano. Oálcool primário resultante é convertido em um halogeneto usando, por e-xemplo, CBr4 e uma fosfina, que pode então ser deslocada com um nucleófi-lo como um tiofenol. O tioéter resultante pode ser oxidado por uma varieda-de de agentes oxidantes, incluindo oxona e TPAP/NMO. A sulfona resultantepode ser desprotegida via a ação de uma fonte fluoreto como TBAF, CsF ouHF. O álcool resultante pode ser convertido em um halogeneto ou mesilato,por exemplo, usando cloreto de metanossulfonila e uma base orgânica, quepode então ser deslocado por azida de sódio em DMF. A alquil azida resul-tante pode ser reduzida sob a ação de trifenil fosfina e THF úmido. A aminapode ser sulfonilada pela ação de um cloreto de sulfonila sob ou condiçõesSchotten-Baumann bifásicas (bicarbonato aquoso e diclorometano) ou sobcondições anidras consistindo em diclorometano e uma base orgânica comobase Hunigs. O intermediário éster resultante é hidrolisado usando uma ba-se, como NaOH, KOH ou LiOH, e uma mistura de solventes incluindo umsolvente alcoólico, água e tetrahidrofurano.

Método E

<formula>formula see original document page 26</formula>

Como mostrado no método E acima, um aminoácido de partida éesterificado e N-alquilado em um vaso (usando por exemplo um reagentediazo ou um reagente trimetilsilildiazo). Este éster N-alquílico é então sulfoni-lado com um cloreto de sulfonila usando ou condições Schotten-Baumannou solventes orgânicos e base orgânicas. Finalmente, o éster N-alquílico éhidrolisado no produto desejado usando uma base, como NaOH, e um sis-tema solvente apropriado, como THF e um álcool.

Os seguintes compostos foram preparados de acordo com osmétodos A-E acima.

Exemplo 1

Ácido 4-(2-[2-[2-((f2-(benzilóxi) benzill sulfonil) amina^ etin-5-cloro-1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-ill etóxi) benzóicoEtapa 1:

i Ao éster metílico de ácido 4-hidróxi-benzóico (1,0 eq) em DMF

(0,83 M) foi adicionado K2C03 (2,0 eq) seguido por 2-bromo-1,1-dietóxi-etano e a mistura de reação foi agitada a 110 °C durante 2 dias. TLC mos-trou uma marca nova. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila,lavada com 1N de NaOH, água, e salmoura, secada sobre sulfato de sódio,e o solvente foi removido para dar o produto desejado em 84% de rendimen-to. Este material foi usado na próxima etapa sem outra purificação.

Etapa 2:

Ao produto acima 0.0 eq) e 5-cloro-2-metil indol (1,0 eq) em

CH2CI2 (0,12 M) foi adicionado trietilsilano (3,0 eq) seguido por ácido trifluo-roacético (3,0 eq). Após serem agitados durante a noite em temperatura am-biente, água e ácido trifluroacetico (1,0 eq) foram adicionados à mistura dereação, que foi agitada em temperatura ambiente durante dois dias, diluídacom CH2CI2, lavada com IN de NaOH, água, e saimoura, e secada sobresulfato de sódio. A trituraçao do material com CH2CI2 e hexanos deu o indolC3 alquilado em 92% de rendimento.

Etapa 3:

Ao jndol de acima (1,0 eq) em DMF (0,36 M) a 25 °C foi adicio-nado NaH (1,2 eq, 60% de dispersão em óleo). A solução marrom foi agitadaa 0 a -5 °C durante 1 h, e então bromodifenilmetano foi adicionado (1,1 eq).A mistura de reação foi agitada durante a noite, e então resfriada brusca-mente com água, diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura,secada sobre sulfato de sódio e purificada por cromatografia de coluna paradar 72% do produto desejado.

Etapa 4:

Ao indol N-alquilado de acima (1,0 eq) em CCI4 (0,2 M) foramadicionados N-bromossuccinimida (2,0 eq) e uma quantidade catalítica deperóxido de benzoíla. A solução foi aquecida a refluxo durante 3 h, resfriadaa 25 °C, filtrada, e o sólido foi lavado com CCI4. O filtrado foi concentrado em

uma espuma que foi secada in vácuo. A espuma foi dissolvida em acetona, eAg2C03 (1,1 eq.) foi adicionado seguido por água, e a mistura de reação foiagitada durante a noite em temperatura ambiente, e então filtrada e lavadacom acetona. O filtrado foi concentrado em um resíduo, ao qual foi adiciona-da água. Esta mistura foi extraída com acetato de etila, lavada com salmou-ra, e secada sobre sulfato de sódio. A purificação cromatográfica do resíduodeu o produto desejado em 85% de rendimento.

Etapa 5:

Ao aldeído acima (1,0 equiv) em CH3N02 (0,2 M) foi adicionadoacetato de amônio (4 equiv) e a mistura resultante foi aquecida a refluxo du-rante 4 h. A mistura de reação foi então diluída com EtOAc e lavada comsalmoura. A fase aquosa foi extraída com EtOAc. Os extratos orgânicoscombinados foram lavados com salmoura, secados sobre sulfato de sódio, econcentrados até um precipitado sólido cristalino laranja. A mistura foi refri-gerada durante a noite e a nitro olefina (76% de rendimento) foi coletado porfiltração. Evaporação da fase de solução e purificação do resíduo por croma-tografia de coluna (eluição gradiente 100% tolueno -> 1% de EtOAc-tolueno)deu uma quantidade adicional da nitro olefina (23% de rendimento).

Etapa 6:

Pó de zinco (20 equiv) foi colocado em suspensão em 5% desolução de HCI aquoso (8 M Zn/5% HCI). A esta mistura foi adicionado Hg-Cl2 (0,28 equiv). A mistura foi agitada durante 10 min, a fase aquosa foi de-cantada e substituída com 5% de HCI fresco, e novamente a mistura foi agi-tada durante 5 min e a fase aquosa foi removida. A amálgama de zinco-mercúrio assim gerada foi então adicionada a uma mistura de nitro olefina(1,0 equiv) e HCI concentrado (80 equiv) em THF (0,04 M nitro olefina/THF).

A mistura foi mantida em um refluxo suave durante 1 h. A formação de pro-duto foi seguida por análise TLC. A mistura foi resfriada a temperatura ambi-ente e os sólidos foram removidos por filtração através de Celite. NH4OHconcentrado foi adicionado na fase de solução e a mistura foi concentradano evaporador giratório. O resíduo foi dissolvido em CH2CI2 e NH4OH con-centrado. A fase aquosa foi extraída com CH2CI2, e a fase orgânica foi lava-da com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, e concentrada. Purificaçãopor cromatografia de coluna deu o produto desejado (65% de rendimento).Etapa 7:

Sulfito de sódio (4,2 g) foi adicionado a um mistura agitada de 1 -benzilóxi-2-bromometil-benzeno (8,9 g), iodeto de tetrabutilamônio (59 mg) eágua (150 ml).. A mistura foi aquecida a refluxo durante a noite. A misturaresfriada a 0 °C, foi acidificada por 6N de HCI. Extração por acetato de etila(100 ml_ x 6) foi realizada (alguma parte permaneceu na camada aquosa).

As fases orgânicas combinadas foram secadas sobre MgS04. O filtrado foiconcentrado a vácuo. O produto foi triturado por éter etílico para dar ácido(2-benzilóxi-fenil)-métanossulfônico (678 mg, 8%). 1H RMN (400 MHz, DM-SO-D6): ô 3,82 (s, 2 H) 5,09 (s, 2 H) 6,86 (t, J = 7,45 Hz, 1 H) 6,96 (d, J =8,08 Hz, 1 H) 7,14 (t, J= 7,83 Hz, 1 H) 7,32 (d, J= 7,33 Hz, 1 H) 7,38 (t, J =7,33 Hz, 2 H) 7,46 (d, J= 9,09 Hz, 1 H) 7,52 (d, J= 7,07 Hz, 2 H).

Etapa 8: |

Tetrahidrofurano (10 ml), ácido (2-benzilóxi-fenil)- metanossulfônico (138 mg), e N,N-dimetilformamida (2 gotas) foram resfria-dos a -78 °C e cloreto de oxalila (315 mg) foi adicionado lentamente. A mis-tura de reação foi agitada durante 3 h de -78 °C a 0 °C. A mistura de reaçãofoi clarificada por filiração. O filtrado foi lavado com água gelada e heptano,e secado para dar cloreto de (2-benzilóxi-fenil)-metanossulfonila (114 mg,77%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): õ" 5,06 (s, 2 H) 5,15 (s, 2 H) 7,04 (m, 2 H)7,42 (m, 7 H).

Etapa 9:

A 4-{2-[2-(2-aminoetil)-1 -benzhidril-5-cloro-1 H-indol-3-il] etóxi}benzoato de metila;(1,0 equiv, etapa 6) e NaHCÜ3 saturado (0,14 M) emCH2CI2 (0,07 M) foi adicionado cloreto de (2-benzilóxi-fenil)-metanossulfonila(1,0 equiv, etapa 8). Após 16 h a mistura foi despejada em bicarbonato desódio saturado e extraída com CH2CI2. A fase orgânica combinada foi lavadacom salmoura, secada sobre sulfato de sódio e purificada por cromatografiade coluna para dar 77% do produto desejado.

Etapa 10.

O éster resultante foi hidrolisado por agitação com 1N de NaOH(5 equiv) em THF (0,07 M) e suficiente MeOH para produzir uma soluçãolímpida. A reação foi monitorada por TLC (10% de MeOH-CH2CI2) até o de-saparecimento de material de partida. Quando a reação estava completa, amistura foi concentrada, diluída com H20, e acidificada a pH 2-4 usando 1 Mde HCI. A fase aquosa foi extraída com EtOAc e a fase orgânica foi lavadacom salmoura, secada sobre sulfato de sódio, e concentrada para dar o áci-do titular em 97% de rendimento. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) õ 2,86 (d, J =14,40 Hz, 2 H) 2,92 - 3,04 (m, 2 H) 3,13 (t, J= 6,69 Hz, 2 H) 4,12 - 4,23 (m, 2H) 4,28 (s, 2 H) 4,34 - 4,45 (m, 1 H) 4,90 (s, 2 H) 6,47 (d, J= 8,84 Hz, 1 H)6,73 - 6,93 (m, 6 H) 6,95 - 7,08 (m, 4 H) 7,16 - 7,36 (m, 13 H) 7,53 (d, J =1,77 Hz, 1 H) 7,92 - 8,04 (m, 2 H); HRMS calculado para [C46H4iCIN206.S +H"] 783,2301 encontrado 783,2292; pureza H20/MeOH 97%, H20/MeCN 95%.

Exemplo 2

Ácido 4-(2-í5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-lí(2-hidroxibenzil) sulfonill amina) etil)-1 /-/-indol-3-ill etóxi) benzóico

Etapa 1:

Ao ácido 4-{2-[2-[2-({[2-(benzilóxi) benzil] sulfonil} amina) etil]-5-cloro-1 -(difenilmetil)-l H-indol-3-il] etóxi} benzóico (etapa 9, exemplo 1, 109mg, 0,14 mmol) foi'adicionado THF e MeOH. 10% de Pd/C (11 mg) foi adi-cionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente sob H2 (1 atm) du-rante a noite e filtrada através de celite, concentrada, e cromatografada emcoluna (35% de ÈtOAc/hex) para dar éster metílico de ácido 4-(2-{1-benzhidril-5-cloro-2-[2-(2-hidróxi-fenilmetanossulfonilamino)-etil]-1H-indol-3-il}-etóxi)-benzóico (74 mg, 76%), um sólido branco indefinido.

Etapa 2:

O intermediário éster foi hidrolisado de acordo com a etapa 10exemplo 1 para dar o ácido titular em 85% de rendimento. 1H RMN (400MHz, CDCI3) ô 2,87 - 3,01 (m, 2 H) 3,00 - 3,11 (m, 2 H) 3,18 (t, J = 6,57 Hz, 2H) 4,17 (s, 2 H) 4,19 - 4,30 (m, 2 H) 4,52 (t, J= 5,81 Hz, 1 H) 6,52 (d, J =8,84 Hz, 1 H) 6,75 - 6,90 (m, 6 H) 6,99 (dd, J = 7,45, 1,64 Hz, 1 H) 7,01 -7,13 (m, 4 H) 7,13 - 7,22 (m, 1 H) 7,27 - 7,37 (m, 6 H) 7,53 (d, J= 2,02 Hz, 1H) 7,91 - 8,04 (m, 2 H); HRMS calculado para [C39H35CIN206.S + H]695,1977 encontrado 695,1984.

Exemplo 3

Ácido 4-(2-í5-cloro-2-(2-{f(2,6-dibromobenzil) sulfonill amina) etil) -1-(difenilmetil) -1H-indol-3-il1 etóxi) benzóico

Etapa 1.

A uma solução de 2,6-dibromotolueno (5,38 g, 21,53 mmols) embenzeno (1,54 M) foi adicionada N-bromosuccinimida (4,21 g, 23,68 mmols)e peróxido de benzoíla (0,52 g, 2,15 mmols). A mistura foi então aquecida arefluxo durante a noite. A mistura foi resfriada em temperatura ambiente, di-luída com H2O e extraída com EtOAc. A fase orgânica combinada foi lavadacom salmoura, secada sobre MgS04 e concentrada para dar 7,65 g do bro-meto de benzila, um sólido marrom. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 4,83 (s, 2H), 7,01 (t, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,55 (d, J= 8,1 Hz, 2 H).

Etapa 2.

A uma solução de brometo de 2,6-dibromobenzila (1,0 equiv,etapa 1) em DMF (1,30 M) foi adicionado tioacetato de potássio (1,2 equiv.)e a mistura foi deixada para agitar em temperatura ambiente durante 3-4 h.

A reação foi monitorada por LC/MS para desaparecimento de matéria! departida. A mistura foi diluída com H20 e extraída com EtOAc. A fase orgâni-ca combinada foi lavada com salmoura, secada sobre MgS04 e concentradapara dar 6,70 g (89%) do tioacetato de benzila como um óleo marrom.

Etapa 3.

A uma solução de tioacetato (1,0 equiv, 6,70 g, 20,7 mmol) emAcOH (0,19M) e H20 (0,91 M) foi adicionado acetato de sódio (6,7 equiv.).Cloro foi então borbulhado através da mistura de reação vigorosamente du-rante um período de 30-45 min. A mistura foi então concentrada, diluída cométer, lavada com H20 e salmoura, secada com MgS04 e concentrada paradar 5,30 g (74%) do cloreto de 2,6-dibromofenil-metanossulfonila desejado,um sólido marrom. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) õ 5,55 (s, 2 H), 7,17 (t, J= 8,0Hz, 1 H), 7,67 (d, J = 8,1 Hz, 2 H)

Etapa 4.

Ester metílico de ácido 4-{2-[2-(2-amina-etil) -1-benzhidril-5-cloro-1 H-indol-3-il] -etóxi} -benzóico (exemplo 1, etapa 6, 126 mg, 0,23mmol) foi reagido com cloreto de 2,6-dibromofenil-metanossulfonila (etapa 3)de acordo com o procedimento no exemplo 1, etapa 9 para dar 203 mg deda sulfonamida desejada como um sólido branco em rendimento quantitativo.

Etapa 5.

Usando o procedimento no exemplo 1, etapa 10, o éster de sul-fonamida (175 mg, 0,206 mmol) foi hidrolisado para dar 146 mg (85%) doproduto titular, um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) õ 2,87 - 3,03(m, 2 H), 3,06 - 3,14 (m, 2 H), 3,22 (t, J= 6,9 Hz, 2 H), 4,23 (t, J= 6,4 Hz, 2H), 4,53 (t, J= 5,9 Hz, 1 H), 4,72 (s, 2 H), 6,51 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,82 (dd,J= 9,0, 2,1 Hz, 1 H), 6,87 (d, J= 8,8 Hz, 2 H), 6,92 (s, 1 H), 6,97 (t, J= 8,0Hz, 1 H), 7,05 - 7,12 (m, J= 6,2, 2,9 Hz, 4 H), 7,29 - 7,34 (m, 6 H), 7,49 (d, J= 8,1 Hz, 2 H), 7,54 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,00 (d, J = 8,8 Hz, 2 H).

Exemplo 4

Ácido 4-(2-{1 -benzhidril-5-cloro-2-f2-metil-6-nitro-fenilmetanossulfonilamino) -etil-1 -/-/-indol-3-il)-etóxi) -benzóico

Etapa 1.

A uma solução de ácido 2-metil-6-nitrofenilbenzóico (3,02 g,16,67 mmols) em cloreto de tionila (0,56 M) foi adicionado DMF (cat.) e amistura foi aquecida a refluxo durante 5,5 h. A mistura foi então resfriada emtemperatura ambiente e concentrada. O resíduo foi então tomado em THF(30 ml_) e adicionado lentamente durante 20 min a uma suspensão de Na-BH4 em THF (30 mL) que foi pré-resfriado a 0 °C. A mistura foi agitada emtemperatura ambiente durante 2 h e então resfriada bruscamente por adiçãode H20 seguido por 4M de HCI. A mistura foi extraída com EtOAc. A faseorgânica combinada foi lavada com NaHC03 saturado e salmoura, secadasobre MgS04 e concentrada para dar 2,52 g (90%) do álcool benzílico, umsólido laranja. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) õ 2,55 (s, 3 H), 4,70 (s, 2 H), 7,35(t, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,48 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,70 (d, J= 8,3 Hz, 1 H).

Etapa 2.

A uma solução do álcool benzílico (2,52 g, 15,07 mmols) emCH2CI2 (0.12M) resfriada a -78 °C e sob argônio foi lentamente adicionado, BBr3, 1,0M em CH2CI2) (23 ml_, 22,6 mmols). A mistura foi agitada em tem-peratura ambiente durante a noite e então diluída com H20 (150 ml_). Ascamadas foram separadas e a fase orgânica foi lavada com salmoura, seca-da sobre MgS04 e concentrada para dar 2,97 g (86%) brometo de 2-metil-6-nitrobenzila, um sólido marrom. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) õ 2,53 (s, 3 H),4,72 (s, 2 H), 7,36 (t, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,46 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,75 (d, J =8,1 Hz, 1 H).

Etapa 3.

Brometo de 2-metil-6-nitrobenzila (etapa 2, 1,5 g, 6,5 mmol) foireagido com tioacetato de potássio de acordo com o procedimento no exem-plo 3, etapa 2, para dar 1,44 g do tioacetato de benzila, um óleo marrom.

Etapa 4.

Seguindo o procedimento no exemplo 3, etapa 3, o tioacetato debenzila (1,44 g, 6,39 mmols) foi oxidado para dar 1,35 g (84%) de cloreto de(2-metil-6-nitrofenil) metanossulfonila, um sólido laranja. 1H RMN (400 MHz,CDCI3) õ 2,62 - 2,65 (m, 3 H), 5,68 (s, 2 H) amplo, 7,54 (t, J= 7,8 Hz, 1 H),7,58 - 7,60 (m, 1 H), 7,91 (d, J= 7,8 Hz, 1 H).

Etapa 5.

Usando o procedimento no exemplo 1, etapa 9, éster metílico deácido 4-{2-[2-(2-amina-etil) -1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il] -etóxi} -benzóico (exemplo 1, etapa 6, 255 mg, 0,47 mmol) foi reagido com o cloretode sulfonila de etapa 4 para dar 318 mg da sulfonamida, um sólido amareloem 90% de rendimento.

Etapa 6.

O éster de sulfonamida (101 mg, 0,13 mmol) foi hidrolisado deacordo com o exemplo 1, etapa 10 para dar 87 mg (91%) do produto titular,um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) õ 2,48 (s, 3 H), 2,87 - 2,99 (m,2H), 3,03 - 3,10 (m, 2 H), 3,22 (t, J= 6,6 Hz, 2 H), 4,23 (t, J= 6,6 Hz, 2 H),4,33 (t, J= 5,9 Hz, 1 H), 4,77 (s, 2 H), 6,51 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,82 (dd, J =8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,88 (d, J= 8,8 Hz, 2 H), 6,91 (s, 1 H), 7,04 - 7,12 (m, 4 H),7,29 - 7,35 (m, 7 H), 7,42 (d, J= 7,3 Hz, 1 H), 7,54 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 7,66(d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,99 (d, J = 8,8 Hz, 2 H);

Exemplo 5

Ácido 4-(2-l5-cloro-1-(difenilmetil) -2-í2-((r2-(trifluorometil) benzill sulfonil)amina) etill-1 /-/-indol-3-il) etóxi) benzóico

Etapa 1:

Uma mistura de brometo de 2~-(trifluorometil) benzila (25 g, 0,14mol) sulfito de sódio (19,1 g, 0,15 mol), iodeto de tetrabutilamônio (0,224 g,0,6 mmol) e H20 (930 ml_) foi aquecida a refluxo durante 2 d. A mistura foiresfriada em temperatura ambiente e uma fase aquosa foi decantada do re-síduo oleoso e concentrada no rotovap até secura para dar o sal de sódiodesejado (22,2 g, 60%), como um sólido branco, que foi usado sem outrapurificação.

Etapa 2:

Sal de sódio de ácido (2-trifluorometilfenil) metanossulfônico(22,2 g, 84 mmol) foi colocado em suspensão em MeOH (950 ml_) e resfria^do a -20 eC. Nesta temperatura com resfriamento continuado HCI (g) foiborbulhado através da mistura durante 5 min. A suspensão branca resultantefoi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 h, então resfriada em umbanho de gelo. A suspensão resultante foi filtrada e o sólido coletado deixa-do secar ao ar durante a noite para dar ácido (2-trifluorometilfenil) metanos-sulfônico (20,3 g, -100%), um sólido branco, que foi usado sem outra purifi-cação.

Etapa 3:

A uma suspensão de ácido (2-trifluorometilfenil) metanossulfôni-co (20,3 g, 84 mmol) em THF (1,9 L) e DMF (5,0 ml_) a -20 9C foi adicionadocloreto de oxalila (44,7 ml_, 0,5 mol) lentamente em gotas durante 1 hora. Atemperatura do banho foi mantida abaixo de 0 9C durante 4 h, em cujo pontoa reação foi evaporada em um volume de ~ 250 ml_ e diluída com 500 ml_ deacetato de etila. Esta solução foi lavada com salmoura em um funil separa-dor e secada sobre sulfato de magnésio. A solução foi então evaporada emum óleo marrom. Este óleo foi tomado em 500 ml_ de éter de petróleo (30-50°) e aquecido com uma pistola de calor até o óleo sair na solução. A solu-ção foi então colocada em um banho de acetona resfriado com gelo seco,resultando na formação de um material cristalino branco. Este material foicoletado via filtração e secado para dar 19 g (85%) de cloreto de (2-trifluorometilfenil) metanossulfonila como um sólido branco.

Etapa 4:

Como descrito na etapa 9, exemplo 1, 4-{2-[2-(2-aminoetil) -1-benzhidril-5-cloro-1 H-indol-3-il] etóxi} benzoato de metila (etapa 9, exemplo1, 0,15 g, 0,28 mmol) foi reagido com cloreto de 2-(trifluorometilfenil) meta-nossulfonila (0,145 g, 0,50 mmol) para dar 0,220 g da sulfonamida, uma es-puma branca, em 75% de rendimento. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 2,73 -2,88 (m, 2 H), 2,96;- 3,09 (m, 2 H), 3,16 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 3,88 (s, 3 H),4,19 (t, J= 6,6 Hz, 2 H), 4,23 (t, J= 6,4 Hz, 1 H), 4,34 (s, 2 H), 6,51 (d, J =8,8 Hz, 1 H), 6,77 i 6,84 (m, 3 H), 6,86 (s, 1 H), 6,98 - 7,12 (m, 4 H), 7,27 -7,35 (m, 6 H), 7,36'- 7,47 (m, 2 H), 7,53 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 7,59 - 7,69 (m, 2H), 7,95 (d, J= 8,8 Hz, 2 H).

Etapa 5:

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster de sul-fonamida (137 rng,0,18 mmol) foi hidrolisado para dar 86 mg (64%) do pro-duto titular, um pó branco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 3,04 (s, 4 H),3,18 (t, J= 6,6 Hz, 2 H), 4,23 (t, J= 5,9 Hz, 2 H), 4,42 (s, 2 H), 6,48 (d, J =8,8 Hz, 1 H), 6,81 (dd, J= 9,0, 2,1 Hz, 1 H), 6,98 (d, J= 9,1 Hz, 2 H), 7,03 -7,18 (m, 5 H), 7,29 - 7,42 (m, 6 H), 7,48 - 7,62 (m, 3 H), 7,66 (d, J= 2,0 Hz, 2H), 7,72 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,85 (d, J= 8,8 Hz, 2 H), 12,49 (s, 1 H); HRMS:calculado para C40H34CIF3N2O5S + H+, 747,19018; encontrado (ESI-FTMS,[M+H]1+), 747,1886; HPLC pureza H20/CH3CN: 96,2%, H20/MeOH: 95,4%.

Exemplo 6

Ácido 4-(2-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-f2-((r2-flúor-6-(trifluorometil) benzill sul-fonil) amina) etill-1 H-indol-3-ill etóxi) benzóico

Etapa 1:

Usando o procedimento descrito no exemplo 5, etapa 1, brometode 2-flúor-6-(trifluorometilfenil) benzila (15 g, 61 mmols) deu sal de sódio deácido 2-flúor-6-(trifluorometilfenil) metanossulfônico (15 g, 89%), um sólidobranco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) õ 4,02 (s, 2 H), 7,26 - 7,66 (m, 3 H).

Etapa 2:

Usando o procedimento descrito no exemplo 5, etapa 2, sal desódio 2-flúor-6-(trifluorometilfenil) metanossulfônico (15 g, 53 mmols) deuácido 2-flúor-6-(trifluorometilfenil) metanossulfônico (15 g), um óleo laranja-pálido que foi usado sem outra purificação. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ô4,12 (s, 2 H), 7,39 - 7,73 (m, 3 H).

Etapa 3:

Usando o procedimento descrito no exemplo 5, etapa 3, ácido 2-flúor-6-(trifluorómetilfenil) metanossulfônico (15 g, 53 mmols) deu 11 g deproduto bruto que foi purificado por cristalização de temperatura baixa dehexanos para dar cloreto de 2-flúor-6-(trifluorometilfenil) metanossulfonila(9,0 g, 62%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 5,31 (s, 2 H), 7,38 - 7,51 (m, 1 H),7,58 - 7,68 (m, 2 H)J

Etapa 4:

Como descrito na etapa 9, exemplo 1, 4-{2-[2-(2-aminoetil) -1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il] etóxi} benzoato de metila (etapa 6, exemplo1, 0,12 g, 0,22 mmol) foi reagido com cloreto de 2-flúor-6-(trifluorometilfenil)metanossulfonila (0,074 g, 0,27 mmol) para dar 0,164 g da sulfonamida, umaespuma branca, em 95% de rendimento. 1H RMN (400 MHz, CDCI3). ô 2,83 -3,03 (m, 2 H), 3,07 - 3,17 (m, 2 H), 3,21 (t, J= 6,6 Hz, 2 H), 3,88 (s, 3 H),4,22 (t, J= 6,6 Hz, 2 H), 4,31 (t, J= 6,3 Hz, 1 H), 4,43 (s, 2 H), 6,52 (d, J =9,1 Hz, 1 H), 6,76 - 6,89 (m, 3 H), 6,92 (s, 1 H), 7,07 (dd, J= 6,1, 4,3 Hz, 4H), 7,23 (t, J = 8,6 Hz, 2 H), 7,28 - 7,34 (m, 5 H), 7,38 - 7,52 (m, 2 H), 7,54d, J=1,8Hz, 1 H),; 7,95 (d, J=9,1 Hz, 2 H).

Etapa 5:

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster de sul-fonamida (136 mg, 0,17 mmol) foi hidrolisado para dar 130 mg (97%) doproduto titular, um pó branco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ô 3,00 - 3,15(m, 4 H), 3,17 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 4,22 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 4,45 (s, 2 H), 6,46(d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J= 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,97 (d, J= 9,1 Hz, 2 H),7,03 - 7,13 (m, 5 H), 7,16 - 7,41 (m, 6 H), 7,48 - 7,70 (m, 4 H), 7,74 - 7,90 (m,3 H), 12,56 (s, 1 H); HRMS: calculado para C40H33CIF4N2O5S + H+,765,18076; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 765,1814; HPLC purezaH2O/CH3CN: 96,6%, H20/MeOH: 97,9%.

Exemplo 7

Ácido 4-(3-[5-cloro-2-(2-(r(2,6-dibromobenzil) sulfonill amina) etil) -1-(difenilmetil) -IH-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1:

Uma mistura de 4-iodobenzoato de metila (5,3 g, 20,2 mmols),álcool alílico (1,78 g, 30,3 mmols), NaHC03 (4,24 g, 50,5 mmols), Pd(OAc)2(0,14 g, 0,60 mmol), (n-Bu)4NBr (6,55 g, 20,2 mmols) e peneiras moleculares4-A (4,1 g) em DMF anidro (69 ml_) foi agitada em temperatura ambiente du-rante 4 dias. A mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtradodespejado sobre água e extraído com EtOAc. A camada orgânica foi lavadacom salmoura, secada (Na2S04), e concentrada sob vácuo. Cromatografiacintilante (sílica-gel, 10-20 % de EtOAc-hexanos) deu 2,11 g (85% com baseno material de partida recuperado) do éster metílico de ácido 4-(3-oxo-propil)-benzóico desejado como um óleo límpido.

Etapa 2:

A uma solução de 5-cloro-2-metilindol (0,86 g, 5,2 mmols) e és-ter metílico de ácido 4-(3-oxo-propil) -benzóico (1,0 g, 5,2 mmols) em cloretode metileno (50 ml_), foi adicionado TFA (1,78 g, 15,6 mmols), seguido portrietilsilano (1,81 g, 15,6 mmols). A mistura de reação foi agitada durante anoite, resfriada bruscamente com uma solução de NaHCÜ3 saturado (50ml_), e a camada orgânica foi lavada com uma solução de NaHC03 satura-do, água, salmoura, e secada (Na2S04). O solvente foi removido sob pres-são reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia cintilante de colunacom 10-20% de EtOAc/hexanos para dar o produto desejado (1,67 g) em94% de rendimento.

Etapa 3:

A uma solução do produto de etapa 2 (1,66 g, 4,86 mmols) emDMF (20 mL) foi adicionado NaH (60% em óleo mineral, 0,24 g, 5,83 mmols)sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada durante 1h em temperatura ambi-ente, seguido pela adição em gotas de brometo de benzhidrila (1,8 g, 7,29mmols) em DMF (5 ml_). Esta mistura de reação foi agitada durante a noiteem temperatura ambiente. Água (500 ml_) foi adicionada, e a mistura foi ex-traída com EtOAc, lavada com salmoura, secada (Na2S04), e concentradasob pressão reduzida para um xarope marrom, que foi purificado por croma-tografia de sílica-gel usando 10% de EtOAc/hexanos como eluente para iso-lar o N-benzhidrilindol como um sólido branco (1,47g) em 59% de rendimen-to.

Etapa 4:

O produto de acima (1,46 g, 2,87 mmols) foi dissolvido em CCI4(14,5 ml_), seguido pela adição de NBS (1,02 g, 5,73 mmols) e peróxido debenzoíla (2 mg). A mistura de reação foi aquecida a refluxo durante 1h (até... todo o material de partida desaparecer por análise TLC). Esta mistura foiresfriada em temperatura ambiente, filtrada e o sólido foi lavado com CCI4. Ofiltrado foi evaporado em um resíduo marrom, que foi dissolvido em acetona(40 ml_) e água (4 ml_). Ag2CÜ3 (1,75 g, 3,16 mmols) foi então adicionado aesta solução e após ser agitado durante a noite em temperatura ambiente,ele foi filtrado através de celite, o solvente foi evaporado sob pressão reduzi-da, e água foi adicionado no resíduo. Ele foi extraído com EtOAc, lavadocom salmoura, secado (Na2S04), e evaporado em um xarope, que foi purifi-cado por 10% de EtOAc/hexanos para isolar o 2-formil indol (1,13 g) em 75%de rendimento.

Etapa 5:

A uma solução do 2 formil indol de acima (0,52 g, 1 mmol) emCH3NO2 (6,2 ml_) foi adicionado NH4OAc (0,077 g, 1 mmol), a mistura foiaquecida a refluxo durante 1 h, NH4OAc (0,077 g, 1 mmol) foi então adicio-nado, aquecimento em refluxo foi continuado durante um adicional de 1 h,NH4OAC (0,077 g, 1 mmol) foi adicionado novamente e o aquecimento conti-nuado durante ainda 1 h. A mistura de reação foi deixada resfriar em tempe-ratura ambiente e EtOAc (50 ml_) foi adicionado, seguido por água (100 ml_).

A camada aquosa foi extraída com EtOAc, e as camadas orgânicas combi-nadas foram lavadas com salmoura, secadas (Na2S04), e evaporadas emuma espuma amarela, que foi submetida à purificação cromatográfica usan-do 10% de EtOAc/hexanos como um eluente para dar a nitro olefina comouma espuma amarela (0,38 g) em 68% de rendimento.

Etapa 6:

Zn(Hg) foi preparado por adição de HgCI2 (3,4 g, 7,2 mmols) em

uma mistura de pó de Zn (34,7 g, 530,4 mmols) e 5% de HCI (38 ml_) em umbéquer de 100 mL. A mistura foi agitada vigorosamente durante 10 min. Afase aquosa foi decantada, 38 mL de HCI a 5% foram adicionados ao Zn(Hg)e a mistura foi agitada durante 10 min. A fase aquosa foi decantada. O sólidoZn(Hg) foi adicionado ao composto vinil nitro de etapa 5 (15 g, 26,57 mmols)em THF (660 mL) eÍHCI concentrado (64,5 mL). Esta mistura foi agitada emtemperatura ambiente durante 1h, então aquecida a refluxo durante 15 min.

A mistura de reação foi resfriada em temperatura ambiente e filtrada atravésde celite. Uma solução de NH4OH aquosa (200 mL) foi adicionada ao filtra-do, a mistura resultante foi agitada durante 15 min e a mistura foi concentra-da para remover THF. A camada aquosa foi extraída com CH2CI2 e a cama-da orgânica combinada foi lavada com salmoura, secada (Na2S04) e con-centrada em uma espuma marrom, que foi purificada por cromatografia decoluna por eluição da coluna com CHCI3 no começo para remover as impu-rezas não polares, então com MeOH/CHCb a 2% para isolar a amina dese-jada em 46% de rendimento (6,1 g).

Etapa 7.

Como descrito na etapa 9 exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil) -1-benzhidril-5-cloro-1 ^-indol-3-il] propil} benzoato de metila (etapa 6, 128 mg,0,24 mmol) foi reagido com cloreto de 2,6-dibromo-fenil-metanossulfonila(etapa 3, exemplo 3) para dar 203 mg da sulfonamida, um sólido castanhoem 100% de rendimento.

Etapa 8.

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster de sul-fonamida (175 mg, 0,206 mmol) foi hidrolisado para dar 133 mg (77%) doproduto titular, um sólido amarelo. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,91 - 2,02(m, 2 H), 2,75 (t, J= 8,1 Hz, 4 H), 2,86 - 2,94 (m, 2 H), 2,94 - 3,03 (m, 2 H),4,46 - 4,54 (m, 1 H), 4,70 (s, 2 H), 6,49 (d, J= 9,1 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J= 9,0,1,9 Hz, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 6,96 (t, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,04 - 7,11 (m, J = 6,2,2,4 Hz, 4 H), 7,25 - 7,34 (m, 8 H), 7,40 (d, J= 1,8 Hz, 1 H), 7,48 (d, J= 7,8Hz, 2 H), 8,00 (d, J= 7,8 Hz, 2 H).

Exemplo 8

Ácido 4-(3-r5-cloro-2-(2-lf(2,6-diclorobenzi0 sulfonill amina) etil) -1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1:

Usando as condições no exemplo 3, etapa 1, brometo de 2,6-diclorobenzila (3,32 g, 13,84 mmols) foi reagido com tioacetato de potássiopara dar 2,92 g (90%) do tioacetato de benzila.

Etapa 2:

Usando o procedimento no exemplo 3, etapa 2, o tioacetato debenzila (2,90 g, 12)33 mmols) foi oxidado para dar 1,7 g (53%) do cloreto desulfonila, um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 5,43 (s, 2 H), 7,32 -7,39 (m, 1 H), 7,43 - 7,50 (m, 2 H).

Etapa 3:

Còmó descrito na etapa 9, exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil) -1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (exemplo 7, etapa6, 149 mg, 0,28 mmol) foi reagido com cloreto de 2,6-dicloro-fenil-metanossulfonila para dar 170 mg da sulfonamida, um sólido amarelo em80% de rendimento!

Etapa 4.

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster de sul-fonamida (145 mg,; 0,19 mmol) foi hidrolisado para dar 140 mg (99%) doproduto titular, um sólido castanho. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,89 - 2,01(m, 2 H), 2,71 - 2,80 (m, 4 H), 2,84 - 2,92 (m, 2 H), 2,95 - 3,03 (m, 2 H), 4,31(t, J= 6,2 Hz, 1 H), 4,60 (s, 2 H), 6,49 (d, J= 9,1 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J= 8,8,2,0 Hz, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 7,01 - 7,10 (m, 4 H), 7,12 - 7,19 (m, 1 H), 7,25 -7,34 (m, 10 H), 7,41 (d, J=2,0 Hz, 1 H), 8,00 (d, J=8,1 Hz, 2 H);

Exemplo 9

Ácido 4-(3-(1-benzhidril-5-cloro-2-f2-(2-metil-6-nitro-fenilmetanossulfonila-mino)-etil-1 /-/-indol-3-il)-propil) -benzóico

Etapa 1:

Como descrito na etapa 9, exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1 H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (exemplo 7, etapa6, 255 mg, 0,47 mmol) foi reagido com cloreto de 2-metil-6-nitro-fenil-metanossulfonila (exemplo 4, etapa 4) para dar 180 mg da sulfonamida, umsólido amarelo em 51% de rendimento.

Etapa 2:

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster de sul-fonamida (60 mg, 0,080 mmol) foi hidrolisado para dar 48 mg (81%) do pro-duto titular, um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,89 - 2,01 (m, 2H), 2,49 (s, 3 H), 2,75 (q, J= 7,2 Hz, 4 H), 2,82 - 2,89 (m, 2 H), 2,90 - 2,98(m, 2 H), 4,10 - 4,18 (m, 2 H), 4,76 (s, 2 H) amplo, 6,48 (d, J= 8,8 Hz, 1 H),6,79 (dd, J=8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,86 (s, 1 H), 7,02-7,11 (m, J=6,6, 2,5 Hz, 4H), 7,27 - 7,35 (m, 8 H), 7,38 - 7,47 (m, 2 H), 7,67 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 8,00(d, J=8,3Hz, 2H)

Exemplo 10

Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difeniimetii) -2-r2-({r2-(trifluorornetii) benzill sulfonil)amina) etill-1 H-indol-3-il) propil) benzóico

Etapa 1:

A uma suspensão de ácido 4-{3-[2-(2-aminoetil) -1-benzhidril-5-cloro-1 H-indol-3-il] propil} benzóico (preparado como descrito na patenteU.S. número 6797708 B2, incorporada aqui por referência em sua totalidade)(10,0 g, 19 mmols) em CH3CN (100 ml_) e MeOH (25 ml_) foi adicionado (tri-metilsilil) diazometano (solução 2,0 M. em hexanos, 9,6 ml_, 19 mmols). A-pós 16 h a mistura foi filtrada e concentrada para dar o éster metílico (8,8 g,cerca de 86%), uma espuma laranja, que foi usada sem purificação.

Etapa 2:

Como descrito na etapa 9 exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1 H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (exemplo 1, etapa1, 9,1 g, 17 mmols) foi reagido com cloreto de (2-trifluorometilfenil) metanos-sulfonila (exemplo 5, etapa 3, 4,8 g, 17 mmols) para dar 6,1 g da sulfonami-da, uma espuma branca em 47% de rendimento. 1H RMN (400 MHz, CDCI3)6 1,88 - 2,00 (m, 2 H), 2,64 - 2,77 (m, 6 H), 2,83 - 2,95 (m, 2 H), 3,90 (s, 3 H),4,05 (t, J= 5,9 Hz, 1 H), 4,33 (s, 2 H), 6,49 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,70 - 6,88(m, 2 H), 7,04 (dd, J= 6,4, 2,7 Hz, 4 H), 7,24 (s, 1 H), 7,28 - 7,35 (m, 7 H),7,36 - 7,49 (m, 3 H), 7,55 - 7,71 (m, 2 H), 7,95 (d, J= 8,1 Hz, 2 H). Além dis-so, a N-metil sulfonamida por produto (0,70 g, 5%) foi obtida como uma es-puma amarela-pálida. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,82 - 2,02 (m, 2 H), 2,56(s, 3 H), 2,63 - 2,78 (m, 4 H), 2,79 - 2,89 (m, 2 H), 2,89 - 3,01 (m, 2 H), 3,90(s, 3 H), 4,29 (s, 2 H), 6,42 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,77 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 110 H), 6,84 (s, 1 H), 6,98 - 7,11 (m, 4 H), 7,21 - 7,28 (m, 2 H), 7,28 - 7,35 (m, 6H), 7,37 - 7,51 (m, 3 H), 7,63 (d, J= 7,1 Hz, 1 H), 7,70 (d, J= 8,6 Hz, 1 H),7,95 (d, J=8,3Hz, 2 H).

Etapa 3:

Usando- o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster metílico(2,6 g, 3,4 mmols) foi hidrolisado para dar 2,25 g (88%) do produto titular, umsólido amarelo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 1,81 - 1,97 (m, 2 H), 2,66 -2,79 (m, 4 H), 2,95 (s, 4 H), 4,41 (s, 2 H), 6,45 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,78 (dd,J= 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 7,01 - 7,14 (m, 5 H), 7,24 - 7,42 (m, 8 H), 7,46 (d, J =2,0 Hz, 1 H), 7,50 -' 7,66 (m, 4 H), 7,73 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,85 (d, J = 8,3Hz, 2 H), 12,77 (s, 1 H); HRMS: calculado para C^HaeCIFaNgCUS + H+,745,21092; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 745,2132; Anal. calculada paraC41H36CIF3N2O4S: C, 66,08; H, 4,87; N3.76. Encontrado: C, 66,07; H, 4,57;N, 3,67.

Exemplo 11

Ácido 4-(3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-r2-(metil(r2-(trifluorometil) benzill sulfo-nil) amina) etill-1 H-indol-3-il) propiO benzóico

Etapa 1:

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster de sul-fonamida N-Me isolado de exemplo 10, etapa 2 como um produto lateral(0,66 g, 0,85 mmol) foi hidrolisado para dar 0,30 g (46%) do produto titular,um pó amarelo-pálido. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ô 1,76 - 1,93 (m, 2 H),2,63 - 2,81 (m, 9 H), 3,31 (s, 2 H), 4,46 (s, 2 H), 6,46 (d, J= 8,8 Hz, 1 H),6,78 (dd, J= 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,98 - 7,13 (m, 5 H), 7,23 - 7,43 (m, 8 H), 7,46(d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,51 - 7,66 (m, 3 H), 7,72 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,86 (d, J= 8,3 Hz, 2 H), 12,75 (br s, 1 H); HRMS: calculado para C42H38CIF3N2O4S +H+, 759,22657; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 759,2269; HPLC purezaH2O/CH3CN: 96,2%, H20/MeOH: 95,7%.

Exemplo 12

Ácido 4-(3-r2-r2-(ir2,6-bis(trifluorometil) benzill sulfonil) amina) etil1-5-cloro-1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-in propil) benzóico

Etapa 1:

Fluoreto de 2,6-bis(trifluorometil) benzoíla. Usando o procedi-mento descrito por W. Dmowski e K. Piasecka-Maciejewska, TetrahedronLett. 1998, 54, 6781 - 6792, incorporado aqui por referência em sua totalida-de, 7,0 g de ácido 2,6-bis(trifluorometil) benzóico foram convertidos no fluo-reto de ácido (7,0 g, 100%), um sólido laranja. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6)ô 8,17 (t, J= 8,0 Hz, 1 H), 8,40 (d, J= 8,0 Hz, 2 H).

Etapa 2:

Álcool 2,6-bis(trifluorometilfenil) benzílico. Usando o procedimen-to descrito por W. Dmowski e K. Piasecka-Maciejewska, Tetrahedron Lett.1998, 54, 6781 - 6792, incorporado aqui por referência em sua totalidade,7,0 g de fluoreto de 2,6-bis(trifluorometil) benzoíla foram convertidos no ál-cool (6,6g, 100%), um óleo amarelo-pálido. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 84,95 (s, 2 H), 7,59 (t, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,94 (d, J= 7,8 Hz, 2 H).

Etapa 3:

2,6-Brometo de bis (trifluorometilfenil) benzila. A uma solução deálcool 2,6-bis (trifluorometilfenil) benzílico (6,6 g, 28 mmols) e 1,3-bis(difenilfosfino) propano (6,9 g, 17 mmols) em CH2CI2 (50 mL) a 0 9C foilentamente adicionado tetrabrometo de carbono.(11 g, 33 mmols). A misturafoi agitada durante a noite em temperatura ambiente então adicionados viapipeta 200 mL Et20. A mistura foi filtrada através de Celite e concentrada. Oóleo amarelo foi colocado em suspensão em 2% de EtOAc-hex e filtrado a-través de um chumaço de Si02 para dar o brometo (7,2 g, 84%), um óleoincolor. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 4,78 (s, 2 H), 7,59 (t, J= 7,9 Hz, 1 H),7,92 (d, J=7,9Hz, 2H).

Etapa 4:

Sal de sódio de ácido 2,6-bis (trifluorometilfenil) metanossulfôni-co. Uma mistura de brometo de bis (trifluorometilfenil) benzila (7,2 g, 23mmols), sulfito de sódio (3,1 g, 25 mmols), iodeto de tetrabutilamônio (0,043g, 0,1 mmol) e H20 (20 ml_) foi aquecida a refluxo durante 2 d. A mistura foiresfriada em temperatura ambiente e a fase aquosa foi decantada do resí-duo oleoso e concentrada no rotovap até secura para dar bromidrato de salde sódio de ácido 2,6-bis(trifluorometilfenil) metanossulfônico (3,2 g, 32%),um sólido branco, que foi usado sem purificação.

Etapa 5:

Ácido 2,6-bis (trifluorometilfenil) metanossulfônico. Sal de sódiode ácido 2,6-bis (trifluorometilfenil) metanossulfônico (0,19 g, 0,44 mmol) foicolocado em suspensão em MeOH (5 ml_) e resfriado a -20 QC enquantoHCI foi borbulhado através da mistura durante 5 min. A suspensão brancaresultante foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 h, filtrada atra-vés de Celite, e concentrada para dar ácido 2,6-bis (trifluorometilfenil) meta-nossulfônico (0,14 g, 100%), um sólido laranja que foi usado sem outra puri-ficação. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ô 4,25 (s, 2 H), 7,64 (t, J= 8,5 Hz, 1H), 7,96 (d, J=7,8 Hz, 2 H).

Etapa 6:

Cloreto de 2,6-bis (trifluorometilfenil) metanossulfonila. A umasuspensão de ácido 2,6-bis(trifluorometilfenil) metanossulfônico (0,14 g, 0,44mmol) em THF (10 ml_) e DMF (0,05 ml_) a -20 9C foi adicionado cloreto deoxalila (0,24 mL, 2,7 mmols) lentamente em gotas. A temperatura do banhofoi mantida abaixo de 0 9C durante 4 h, então a mistura de reação foi filtradaatravés de Celite e lavada com THF (10 mL) e concentrada a ~5 mL de vo-lume total. A mistura foi resfriada a -40 9C e H20 (0,3 mL) foi adicionado len-tamente. A mistura foi extraída com EtOAc (2x10 mL), lavada com NaHC03saturado (20 mL), H20 (20 mL), e salmoura (20 mL), secada (Na2S04) econcentrada para dar 99 mg de produto bruto que foi purificado por cristali-zação de temperatura baixa de hexanos para dar cloreto de 2,6-bis (trifluo-rometilfenil) metanossulfonila (33 mg, 23%), um pó branco. Concentraçãodos licores-mães deu o produto adicional (57 mg, 40%). 1H RMN (400 MHz,CDCI3) ô 5,56 (s, 2 H), 7,70 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,97 (d, J = 8,0 Hz, 2 H).

Etapa 7:

Como descrito na etapa 9 exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil) -1-benzhidril-5-cloro-1 H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (exemplo 5, etapa6, 148 mg, 0,27 mmol) foi reagido com cloreto de 2,6-bis (trifluorometilfenil)metanossulfonila (90 mg, 0,27 mmol) para dar 137 mg da sulfonamida, umaespuma amarela-pálida em 60% de rendimento. 1H RMN (400 MHz, CDCI3)5 1,83 - 2,03 (m, 2 H), 2,68 - 2,78 (m, 4 H), 2,79 - 2,91 (m, 2 H), 2,92 - 3,03(m,2 H), 3,89 (s, 3 H), 4,21 (t, J=6,4Hz, 1 H), 4,66 (s, 2 H), 6,51 (d, J=9,1Hz, 1 H), 6,81 (dd, J= 8,7, 2,1 Hz, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 7,00 - 7,11 (m, 4 H),7,21 - 7,28 (m, 4 H)i 7,28 - 7,35 (m, 4 H), 7,41 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 7,59 (t, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 7,8 Hz, 2 H), 7,95 (d, J = 8,1 Hz, 2 H).

Etapa 8:

Usando o procedimento na etapa 10 Exemplo 1, o éster de sul-fonamida (119 mg, 0,14 mmol) foi hidrolisado para dar 97 mg (83%) do pro-duto titular, um sólido amarelo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 1,75 - 1,95(m, 2 H), 2,73 (q, J= 7,5 Hz, 4 H), 2,97 (s, 4 H), 4,67 (s, 2 H), 6,45 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 7,04 (s, 1 H), 7,06 - 7,16 (m, 4 H),7,27 - 7,43 (m, 8 H), 7,47 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 7,75 (t, J= 5,2 Hz, 1 H), 7,77 -7,91 (m, 3 H), 8,10 (d, J= 8,1 Hz, 2 H), 12,78 (s, 1 H); HRMS: calculado paraC42H35CIF6N2Ò4S + H+, 813,19830; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+),813,1965. HPLC pureza H20/CH3CN: 95,5%, H20/MeOH: 96,8%.

Exemplo 13

Ácido 4-(3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-f2-({r2-(metoxicarbonil) benzill sulfonil)amina) etill-1 H-indol-3-il) propil) benzóico

Etapa 1:

A uma mistura de 2-metilbenzoato de metila (5,0 g, 0,033 mmol)e N-bromossuccinimida (5,9 g, 0,033 mmol) em CCI4 (50 ml_) foi adicionadoperóxido de benzoíla (0,04 g, 0,00016 mmol). A mistura foi aquecida a reflu-xo durante 1,5 h, resfriada em temperatura ambiente, filtrada através de Celi-te, e concentrada para dar 2-(bromometil) benzoato de metila (7,2 g, cercade 94% de recuperação de massa), que foi contaminada com cerca de 14%de material de partida não reagido e foi usado sem purificação.

Etapa 2:

Uma mistura do brometo bruto de etapa 1 (7,2 g, 0,031 mmol) etiouréia (2,6 g, 35 mmol) em MeOH (40 ml_) foi aquecida a refluxo durante 4h, resfriada em temperatura ambiente, e concentrada para dar bromidrato de2-({[amina(imino)metil] tio} metil) benzoato de metila (10 g, cerca de 100%),que foi usado sem purificação.

Etapa 3:

O sal isotiourônio de etapa 2 (10 g, 0,031 mmol) foi colocado emsuspensão em H20 (100 ml_) e resfriado a 0 9C. Gás de cloro foi borbulhadona mistura durante 30 min. O banho de gelo foi removido e a mistura de rea-ção foi despejada em um funil separador e diluída com EtOAc (250 ml_). Afase orgânica foi separada e lavada com NaHC03 saturado (100 mL), H20(100 mL), e salmoura (100 mL), secada (MgS04) e concentrada para dar umsólido laranja (6,48 g). O produto bruto foi recristalizado de 20% de EtOAc-hexanos a -78 eC para dar 3,63 g (47%) de 2-[(clorossulfonil) metil] benzoa-to de metila, como cristais amarelos pálidos.

Etapa 4:

A uma suspensão de ácido 4-{3-[2-(2-aminoetil) -1 -benzhidril-5-cloro-1 H-indol-3-il] propil} benzóico (0,40 g, 0,76 mmol) em CH2CI2 (5 mL) foiadicionada bis (trimetilsilil) trifluoroacetamida (0,30 mL, 0,29 g, 1,1 mmol). Amistura foi aquecida a refluxo durante 30 min, então resfriada a 35 9C. Piridi-na (0,16 mL, 0,15 g, 2,0 mmols) foi adicionada, seguido por uma solução de2-[(clorossulfonil) metil] benzoato de metila de etapa 3 (0,29 g, 1,1 mmol) emCH2CI2 (2 mL). Após 5 h, a mistura foi resfriada em temperatura ambiente.Uma solução de HCI concentrado (0,17 mL) em H20 (5 mL) foi adicionada ea mistura foi agitada durante 45 min. A fase aquosa foi separada e extraídacom CH2CI2 (50 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados comH20 (25 mL) e salmoura (25 mL), secados (MgS04) e concentrados para daruma espuma dourada (0,40 g). Purificação por HPLC prep. deu o compostotitular (70 mg, 12%), uma espuma amarela-pálida. 1H RMN (400 MHz, DM-SO-d6) õ 1,87 - 2,10 (m, 2 H), 2,85 (t, J = 6,6 Hz, 4 H), 3,03 (s, 2 H), 3,48 (s,2 H), 3,86 (s, 3 H), 4,94 (s, 2 H), 6,57 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,92 (dd, J = 8,8,2,3 Hz, 1 H), 7,14 (s, 1 H), 7,17 - 7,29 (m, 4 H), 7,43 - 7,57 (m, 10 H), 7,57 -7,69 (m, 3 H), 7,90 - 7,97 (m, 1 H), 8,00 (d, J= 8,3 Hz, 2 H), 12,93 (s, 1 H),HRMS: calculado para [C42H39CIN2O6S1 - H]1", 733,2144; encontrado (ESI-FTMS, [M-H]1), 733,2141; HPLC pureza H20/CH3CN: 95,3%, H20/MeOH:100%.

Exemplo 14

Ácido 4-(3-{5-cloro-1 -(difenilmetil) -2-[2-(ir2-flúor-6-(trifluorometil) benzill sul-fonil) amina) etill-1 /-/-indol-3-il) propil) benzóico

Etapa 1:

Usando o procedimento descrito no exemplo 5, etapa 1, brometode 2-flúor-6-(trifluorometilfenil) benzila (15 g, 61 mmols) deu o sal de sódiode ácido 2-flüor-6-(trifluorometilfenil) metanossulfônico (15 g, 89%), um sóli-do branco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 4,02 (s, 2 H), 7,26 - 7,66 (m, 3H).

Etapa 2:

Etapa 3:

Usando o procedimento descrito no exemplo 5, etapa 3, ácido 2-flúor-6-(trifluorometilfenil) metanossulfônico (15 g, 53 mmols) deu 11 g deproduto bruto que foi purificado por cristalização de temperatura baixa dehexanos para dar cloreto de 2-flúor-6-(trifluorometilfenil) metanossulfonila(9,0 g, 62%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 5,31 (s, 2 H), 7,38 - 7,51 (m, 1 H),7,58 - 7,68 (m, 2 H).Etapa 4:

Como descrito na etapa 9 Exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1 H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (exemplo 7, etapa6, 0,12 g, 0,22 mmol) foi reagido com cloreto de 2-flúor-6-(trifluorometilfenil)metanossulfonila, 0,074 g, 0,27 mmol) para dar 0,127 g da sulfonamida, umaespuma amarela-pálida, em 73% de rendimento. 1H RMN (400 MHz, CDCl3)Ô 1,79 - 2,02 (m, 2 H), 2,74 (t, J = 8,0 Hz, 4 H), 2,82 - 2,92 (m, 2 H), 2,92 -3,02 (m, 2 H), 3,89 (s, 3 H), 4,15 (t, J= 5,8 Hz, 1 H), 4,42 (d, 2 H), 6,50 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J= 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 7,07 (dd, J= 6,4,2,7 Hz, 4 H), 7,19 - 7,28 (m, 5 H), 7,29 - 7,35 (m, 5 H), 7,39 - 7,56 (m, 2 H),7,95 (d, J=8,3 Hz, 2 H).

Etapa 4:

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster de sul-fonamida (115 mg, 0,15 mmol) foi hidrolisado para dar 101 mg (89%) doproduto titular, um pó amarelo-pálido. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ô 1,80 -1,95 (m, 2 H), 2,63 - 2,78 (m, 4 H), 2,88 - 3,14 (m, 4 H), 4,45 (s, 2 H), 6,43(d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,76 (dd, J= 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,96 - 7,15 (m, 5 H), 7,20- 7,41 (m, 8 H), 7,45 (d, J= 2,3 Hz, 1 H), 7,50 - 7,59 (m, 1 H), 7,59 - 7,66 (m,2 H), 7,71 (t, J = 5,6 Hz, 1 H), 7,83 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 12,73 (s, 1 H);HRMS: calculado para C41H35CIF4N2O4S + H+, 763,20149; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 763,1998; HPLC pureza H20/CH3CN: 95,4%, H20/MeOH: 96,4%.

Exemplo 15

Ácido 4-f3-(5-cloro-1 -(difenilmetil) -2-(2-r((2-í2-(trifluorometil) fenill etil) sulfo-nil) aminal etil) -1 /-/-indol-3-il) propil benzóico

Etapa 1:

Álcool 2-(trifluorometil) fenetílico (5,0 g, 26 mmols) foi tratadocom CBr4 como no exemplo 12, etapa 3 para dar o brometo (6,6 g, 100%)que foi usado sem purificação.

Etapa 2:

O brometo de etapa 1 (1,5 g, 5,9 mmols) foi tratado com tiouréiacomo no exemplo 13, etapa 2 para dar o sal de isotiourônio (2,2 g) um sólidobranco úmido, que foi usado sem purificação.Etapa 3:

O sal de isotiourônio de etapa 2 (2,2 g, -5,9 mmol) foi colocadoem suspensão em H20 e tratado com gás de Cl2 como no exemplo 13, etapa3 e um óleo laranja (1,15 g) foi obtido. Para o produto bruto foi adicionadohexanos (75 ml_) e a mistura foi aquecida a 60 QC durante 4 h. A fração solú-vel de hexanos foi decantada e resfriada a -78 9C para dar um sólido branco(0,13 g, cerca de 7% de rendimento, 2 etapas) que foi usado sem purificação.

Etapa 4:

Como descrito na etapa 9 exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil) -1-

benzhidril-5-cloro-1 /t/-indol-3-il] propil} benzoato de metila (exemplo 7, etapa6, 98 mg, 0,18 mmol) foi reagido com cloreto de (2-trifluorometilfenil) etanos-sulfonila de etapa ,3, (75 mg, 0,28 mmol) para dar 70 mg da sulfonamida,uma espuma branda em 50% de rendimento. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô1,88 - 2,03 (m, 2 H), 2,70 - 2,83 (m, 4 H), 2,88 - 3,07 (m, 6 H), 3,07 - 3,23 (m,2 H), 3,90 (s, 3 H), 4,07 (t, J= 6,2 Hz, 1 H), 6,51 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,72 -6,86 (m, 1 H), 6,90 (s, 1 H), 7,07 (d, J = 6,8 Hz, 4 H), 7,17 - 7,32 (m, 9 H),7,35 (i, J= 7,6 Hz,1 H), 7,41 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,48 (i, J= 6,9 Hz, 1 H),7,63 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,95 (d, J = 8,3 Hz, 2 H).

Etapa 5:

Usando, o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster de sul-fonamida (70 mg, 0,09 mmol) foi hidrolisado para dar 54 mg (78%) do produ-to titular, um pó branco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ô 1,82 - 2,22 (m, 2 H),2,68 - 2,90 (m, 4 H), 2,99 - 3,24 (m, 8 H), 6,50 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,83 (dd,J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 7,15 (d apar., J = 6,8 Hz, 5 H), 7,32 - 7,44 (m, 8 H),7,45 - 7,55 (m, 3 H), 7,59 (t, J= 5,7 Hz, 1 H), 7,65 (t, J= 7,3 Hz, 1 H), 7,75(d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,83 - 7,98 (m, J= 8,3 Hz, 2 H), 12,83 (s, 1 H); HRMS:calculado para C42H38CIF3N204S + H+, 759,22657; encontrado (ESI-FTMS,[M+H]1+), 759,2277; HPLC pureza H20/CH3CN: 96,0%, H20/MeOH: 98,0%.

Exemplo 16

Ácido 4-(3-r5-cloro-1 -(difenilmetil) -2-(2-(í(2-formilbenzil) sulfonill amina) etil)-1 H-indol-3-ill propil) benzóicoEtapa 1:

A a^bromo-o-tolunitrila (10 g, 51 mmol) em CH2CI2 a 0 °C foi adi-cionado DIBAL-H (1M em hexano, 55 ml_, 55 mmols) e a mistura de reaçãofoi agitada na mesma temperatura durante 3,5 h, então despejada em umasolução de 5% de HBr resfriada a 0 °C. A mistura foi agitada durante 15 min,então as camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída comCH2CI2 e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHC03 eágua, secadas sobre MgS04 e evaporadas para dar um líquido escuro (9,4g). O material foi usado diretamente na próxima etapa sem outra purificação.

Etapa 2:

Sal de sódio de ácido (2-formil-fenil) -metanossulfônico: Usandoo procedimento descrito no exemplo 5, etapa 1, 2-bromometil-benzaldeído-r (1,58 g, 7,94 rnols) deu sal de sódio de ácido (2-formil-fenil)-metanossulfônico (1,40 g, 80%), um sólido branco indefinido.

Etapa 3:

Ácido (2-formil-fenil)-metanossulfônico: usando o procedimentodescrito no exemplo 5, etapa 3, sal de sódio de ácido (2-formil-fenil)-metanossulfônico (1,40 g, 6,30 mmols) deu ácido (2-formil-fenil)-metanossulfônico (418 mg, 33%), um sólido amarelo-pálido.

Etapa 4:

Cloreto de (2-formil-fenil) -metanossulfonila: Usando o procedi-mento descrito no exemplo 5, etapa 4, ácido (2-formil-fenil) metanossulfônico(418 mg, 2,09 mmols) deu cloreto de (2-formil-fenil)-metanossulfonila (367mg, 80%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) Ô 10,15 (s, 1 H), 7,92 (dd, 1 H), 7,74 -7,61 (m, 3 H), 5,67 (s, 2 H).

Etapa 5:

Como descrito na etapa 9 exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (exemplo 7, etapa6, 63 mg, 0,12 mmol) foi reagido com cloreto de (2-formil-fenil)-metanossulfonila (36 mg, 0,16 mmol) para dar 34 mg (40%) da sulfonamida,um sólido amarelo.Etapa 6:

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster de sul-fonamida (28 mg, 0,039 mmol) foi hidrolisado para dar 17 mg (62%) do pro-duto titular, um sólido branco.

Exemplo 17

Ácido 4-(3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-r2-(([2-(morfolin-4-ilmetiu benzill sulfo-nil) amina) etill-1 H-indol-3-il) propil) benzóico

Etapa 1:

A 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-formilbenzil) sulfonil] ami-na} etil)-1 H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (exemplo 16, etapa 5, 58mg, 0,081 mmol) em DCE (2 ml_) a 0°C foram adicionados morfolina (0,0092mL, 0,105 mmol) e NaBH(OAc)3 (27 mg, 0,13 mmol) e a mistura de reaçãofoi deixada aquecer em temperatura ambiente durante a noite. A reação foiresfriada bruscamente com NaHC03 saturado, extraída com EtOAc, e seca-da sobre MgS04. Purificação por cromatografia de sílica-gel (35% a 50% deEtOAc/hexanos) deu o produto desejado como um sólido branco (41 mg, 64%).

Etapa 2.

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster de sul-fonamida (18 mg, 0,039 mmol) foi hidrolisado para dar 15 mg (83%) do pro-duto titular, um sólido branco.

Exemplo 18

Ácido 4-(3-í5-cloro-2-(2-f((2-f(dietilamino) metill benzil) sulfonil) aminal etil) -l-(difenilmetil) -1 H-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1:

Como descrito no exemplo 17, etapa 1 4-{3-[5-cloro-1 -(difenilmetil) -2-(2-{[(2-formilbenzil) sulfonil] amina} etil) -1 H-indol-3-il] propil}benzoato de metila (exemplo 16, etapa 5, 58 mg, 0,081 mmol) foi reagidocom HNEt2 (0,022 mL, 0,21 mmol) e NaBH(OAc)3 (56 mg, 0,26 mmol) emDCE (2 mL) para dar 4-{3-[5-cloro-2-{2-[({2-[(dietilamino) metil] benzil} sulfo-nil) amina] etil} -1 -(difenilmetil)-l H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (26mg, 41%) e o produto lateral 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(hidroximetil) benzil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzoato demetila (8,6 mg, 15%), ambos como sólidos brancos.

Etapa 2.

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, 4-{3-[5-cloro-2-{2-[({2-[(dietilamino) metil] benzil} sulfonil) amina] etil} -1-(difenilmetil)-1H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (20 mg, 0,026 mmol) foi hidrolisado paradar 13 mg (66%) do produto titular, um sólido branco.

Exemplo 19

Ácido 4-(3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-r2-(!r2-(hidroximetil) benzill sulfonil) a- mina) etill-1 H-indol-3-il) propil) benzóico

Etapa 1.

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o produto lateral3. de exemplo 18 etapa 1, 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(hidroximetil)benzil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzoato de metila (8,4 mg,0,0012 mmol) foi hidrolisado para dar 5,0 mg (61%) do produto titular, umsólido branco.

Exemplo 20

Ácido 4-(3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-f2-((r2-(piperazin-1-ilmetil) benzil] sulfo-nil! amina) etill-1 H-índol-3-il) propil) benzóico e exemplo 21 ácido 4-I3-Í2-I2-f((2-f(4-acetilpiperazin-1-il) metil] benzil) sulfonil) amina] etil) -5-cloro-1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1:

Como descrito no exemplo 17, etapa 1, 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-{[(2-formilbenzil) sulfonil] amina} etil) -1 H-indol-3-il] propil}benzoato de metila (exemplo 16, etapa 5, 45 mg, 0,063 mmol) foi reagidocom 1-acetilpiperazina (28 mg, 0,22 mmol) e NaBH(OAc)3 (26 mg, 0,12mmol) em DCE (3 ml_) para dar a sulfonamida (39 mg, 75%) como uma es-puma branca.

Etapa 2.

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, a sulfonamida(37 mg, 0,045 mmol) foi hidrolisado para dar, após separação de HPLC pre-parativo, 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(piperazin-1-ilmetil) benzil]sulfonil} amina) etil]-1H-indol-3-il} propil) benzoato de metila (7,4 mg, 21%) e, 4-{3-[2-{2-[({2-[(4-acetilpiperazin-1-il) metil] benzil} sulfonil) amina] etil} -5-cloro-1 -(difenilmetil) -1H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (7,7 mg, 21%),ambos como sólidos.

Exemplo 22

Ácido 4-r3-(5-cloro-1 -(difenilmetil)-2-{2-r({2-í(4-metilpiperazin-1 -il)metil1benzil)sulfonil)amina1etil)-1H-indol-3-il) propil] benzóico

Etapa 1:

Como descrito no exemplo 17, etapa 1, 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-formilbenzil) sulfonil] amina} etil) -1 H-indol-3-il] propil}benzoato de metila (exemplo 16, etapa 5, 44 mg, 0,061 mmol) foi reagidocom 1-metilpiperazina (0,026ml_, 0,23 mmol) e NaBH(OAc)3 (34 mg, 0,16mmol) em DCE (3 ml_) para dar a sulfonamida (41 mg, 84%) como um sólidobranco.

Etapa 2:

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, a sulfonamida(39 mg, 0,026 mmol) foi hidrolisada para dar 27 mg (69%) do produto titular,um solido branco.

Exemplo 23

Ácido 4-r3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-r«1-r2-(trifluorometil) fenill etil) sulfo-nil) amina] etil) -1 H-indol-3-il) propil] benzóico

Etapa 1:

A brometo de a-metil-2-triflourometil benzila (10,0 g, 39,5 mmols)em DMF (50 ml_) adicionado tioacetato de potássio (8,1 g, 71,1 mmols) deacordo com o procedimento descrito no exemplo 3, etapa 2. Isto deu o tioa-cetato como um óleo laranja (10,49 g, 91%).

Etapa 2:

O tioacetato de etapa 1 (10,49 g, 36,1 mmols) e acetato de sódio(21,5 g, 155,4 mmols) foram dissolvidos em uma mistura de ácido acético(137 ml_) e água (31 mL) e gás de cloro foi borbulhado de acordo com o pro-cedimento no exemplo 3, etapa 3. Isto rendeu, quando da concentração erecristalização em temperatura baixa de hexanos, um sólido branco indefini-do que depois fundiu em um óleo laranja-pálido (4,9 g, 47%). 1H RMN (400MHz, CDCI3) ô 2,01 (d, J= 6,8 Hz, 3 H) 5,32 (q, J= 7,1 Hz, 1 H) 7,56 (t, J =■ 6,7 Hz, 1 H)7,67(t, J=7,8Hz, 1 H) 7,77 (d, J=7,8Hz, 1 H) 7,91 (d, J=8,1Hz, 1 H)

Etapa 3:

Usando o procedimento no exemplo 1, etapa 9, éster metílico deácido 4-{3-[2-(2-amina-etil) -1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il] -propil} -benzóico (exemplo 7, etapa 6, 0,123 g, 0,23 mmol) foi reagido com cloretode 1 -(2-trifluorometil-fenil) -etanossulfonila (0,79 g, 0,29 mmol) para dar0,042 g de uma mistura racêmica de sulfonamidas em 24% de rendimento.

Etapa 4:

O éster de sulfonamida (0,042 g, 0,054 mmol) foi hidrolisado deacordo com o exemplo 1, etapa 10, para dar 0,035 g (85%) do produto titu-lar, um sólido laranja-pálido. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) õ 1,68 (d, J = 7,1Hz, 3 H) 1,93 (t, J= 5,4 Hz, 2 H) 2,02 - 2,08 (m, 1 H) 2,63 - 2,77 (m, 6 H)2,86 (t, J= 7,6 Hz, 2 H) 6,47 (d, J= 8,8 Hz, 1 H) 7,01 - 7,07 (m, 4 H) 7,24 -7,40 (m, 12 H) 7,44 (t, J= 7,5 Hz, 1 H) 7,60 (d, J= 7,6 Hz, 1 H) 7,85 (d, J =8,1 Hz, 1 H) 8,00 (d, J=8,1 Hz, 2 H)

Exemplo 24

Ácido 4-(3-r2-(2-(r(2-bromobenzil) sulfonill amina) etil) -5-cloro-1-(difenilmetil)-1 H-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1: •

Usando o procedimento na etapa 9 exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil) -1 -benzhidril-5-cloro-1 H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (e-xemplo 7, etapa 6, 1,51 g, 2,81 mmols) foi reagido com cloreto de 2-bromo-fenil-metanossulfonila para dar 1,06 g da sulfonamida, um sólido branco, em49% de rendimento.

Etapa 2:

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster de sulfonamida(90 mg, 0,117 mmol) foi hidrolisado para dar 81 mg (91%) do produto titular,um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,89 - 2,02 (m, 2 H), 2,68 -2,78 (m, 4 H), 2,78 - 2,87 (m, 2 H), 2,89 - 2,97 (m, 2 H), 4,21 (t, J= 5,1 Hz, 1H), 4,37 (s, 2 H), 6,48 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H),6.84 (s, 1 H), 7,00 - 7,08 (m, 4 H), 7,09 - 7,17 (m, 1 H), 7,17 - 7,24 (m, 1 H),7,25 - 7,34 (m, 8 H), 7,36 -7,45 (m, 2 H), 7,49 (dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1 H), 8,01(d, J = 8,3 Hz, 2 H). HRMS: calculado para C4oH36BrCIN204S + H+,755,13404; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 755,1341.

Exemplo 25

Ácido 4-(3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-r2-((í2-(trifluorometóxi) benzill sulfonil)amina) etill-1 H-indol-3-il) propil) benzóico

Etapa 1

Usando o procedimento no exemplo 1, etapa 9, 4-{3-[2-(2-aminoetil) -1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (e-xemplo 7, etapa 6, 164 mg, 0,305 mmol) foi reagido com cloreto de 2-trifluorometóxi-fenil-jmetanossulfonila para dar 109 mg da sulfonamida, umsólido branco em 46% de rendimento.

Etapa 2:

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster de sulfonamida(83 mg, 0,107 mmol) foi hidrolisado para dar 80 mg (98%) do produto titular,um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 1,86 - 2,03 (m, 2 H), 2,74 (q,J = 7,6 Hz, 4 H), 2,76 - 2,86 (m, 2 H), 2,90 - 3,00 (m, 2 H), 4,12 (t, J = 6,2 Hz,1 H), 4,19 (s, 1 H), 6,49 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J= 8,8, 2,3 Hz, 1 H),6.85 (s, 1 H), 7,00 : 7,11 (m, 4 H), 7,16 - 7,23 (m, 2 H), 7,24 - 7,28 (m, 2 H),7,28 - 7,37 (m, 8 H), 7,39 - 7,44 (m, 2 H), 8,00 (d, 2 H). HRMS: calculadopara C41H36CIF3N2O5S + H+, 761,20583; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+),761,2057.

Exemplo 26

Ácido 4-(3-f5-cloro-2-(2-(r(3-cloro-6-flúor-2-metilbenzil) sulfonill amina) etil) -1 -(difenilmetil) -1/-/-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1:

2,6-Difluoro-N-(2-hidróxi-1,1-dimetil-etil) -benzamida. A uma so-lução a 0 eC de 2-amina-2-metilpropanol (10,1 g, 113,3 mmols) em CH2CI2(75 ml_) sob nitrogênio foi adicionada, em gotas, uma solução de cloreto de2,6-difluorobenzoíla (10,0 g, 56,6 mmols) em CH2CI2 (50 ml_). A mistura dereação foi então aquecida em temperatura ambiente e agitada durante a noi-te. A mistura de reação foi diluída com H20, e uma fase aquosa foi extraídacom CH2GI2, secada (MgS04) e concentrada. Purificação via trituração comhexanos deu 12,05 g (93%) da amida, um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) S 1,41 (s, 6 H), 3,66 - 3,75 (m, 2 H), 3,77 - 3,87 (m, 1 H), 5,94 (s, 1H), 6,90 - 6,99 (m, 2 H), 7,31 - 7,41 (m, 1 H).

Etapa 2:

2-(2,6-Difluorofenil)-4,4-dimetil-4,5-dihidro-oxazol. A uma solu-ção a 0 9C de amida de etapa 1 (11,9 g, 51,9 mmol) em CH2CI2 (50 ml_) foiadicionado cloreto de tionila (6,4 ml, 88,3 mmol). A mistura de reação foi dei-xada aquecer em temperatura ambiente. Após 4 h, a mistura de reação foiconcentrada e triturada com Et20. O resíduo foi tomado em H20, basificadocom 6N de NaOH e extraído com EtOAc. A fase orgânica combinada foi la-vada com salmoura, secada (MgS04) e concentrada para dar 9,42g (86%)15 do dihidrooxazol, um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,42 (s, 6H), 4,13 (s, 2 H), 6,90 - 7,02 (m, 2 H), 7,32 - 7,44 (m, 1 H).

Etapa 3:

2-(2-Flúor-6-metil-fenil)-4,4-dimetil-4,5-dihidro-oxazol. A uma so-lução a 0 eC do dihidrooxazol de etapa 2 (9,18 g, 43,5 mmols) em THF (140ml_) sob argônio foi adicionado, em gotas, cloreto de metilmagnésio (3,0 Mde solução em THF, 43,5 ml_, 130 mmols). Após 2 h o banho de gelo foi re-movido e a mistura foi agitada durante a noite em temperatura ambiente. Amistura de reação foi resfriada bruscamente com uma solução de NH4CI a-quoso saturado e extraída com EtOAc. A fase orgânica combinada foi lavadacom salmoura, secada (MgS04) e concentrada para dar 8,64 g (96%) do di-hidrooxazol, um óleo incolor límpido. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) Ô 1,42 (s, 6H), 2,40 (s, 3 H), 4,11 (s, 2 H), 6,92 (t, J = 9,0 Hz, 1 H), 6,99 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,21 - 7,30 (m, 1 H).

Etapa 4:

Ácido 2-flúor-6-metil-benzóico. A uma solução do dihidrooxazolde etapa 3 (8,43 g, 40,7 mmols) em CH3CN (70 ml_) foi adicionado iodeto demetila (9,2 ml_, 146 mmols) e a mistura foi aquecida a refluxo durante 6 h. Amistura de reação foi então resfriada em temperatura ambiente e agitadadurante a noite. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi trituradocom Et20. O resíduo foi tomado em 20% de partes iguais de NaOH e meta-nol e aquecido a refluxo durante 6 h. A mistura de reação foi resfriada emtemperatura ambiente e concentrada para remover os solventes orgânicos.A fase aquosa foi lavada várias vezes com EtOAc e acidificada a pH 1. Afase aquosa foi extraída com EtOAc. A fase orgânica combinada foi lavadacom salmoura, secada (MgS04) e concentrada para dar 3,67 g (58%) do á-cido benzóico, um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 2,52 (s, 3 H)6,99 (t, J= 9,09 Hz, 1 H) 7,05 (d, J= 7,83 Hz, 1 H) 7,31 - 7,41 (m, 1 H).

Etapa 5:

A uma solução do ácido de etapa 4 (3,60 g, 23,4 mmols) em clo-reto de tionila (40 ml_) foi adicionado DMF (0,42 ml_) e a mistura foi aquecidaa refluxo durante 5,5 h. A mistura foi resfriada em temperatura ambiente econcentrada. O resíduo foi tomado em THF (40 mL) e adicionado durante 20min em uma suspensão de 0 eC de NaBH4 (3,53 g, 93,4 mmols) em THF (40mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h e então res-friada bruscamente pela adição de H2O e 4 M de MCI e extraída com EtOAc.A fase orgânica combinada foi lavada com NaHC03 saturado e salmoura,secada (MgS04) e concentrada para dar 2,67 g (~ 75%) do álcool benzílico,um sólido amarelo-pálido. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 8 2,42 (s, 3 H), 4,72 (s,2 H), 6,88 (t, J = 9,0 Hz, 1 H), 6,96 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,07 - 7,20 (m, 1 H).

Etapa 6:

A uma solução do álcool benzílico de etapa 5 (2,65 g, 18,9mmols) em CH2CI2 (15 mL) foi adicionado 1,3-bis(difenilfosfino)propano (4,7g, 11 mmols). A mistura foi resfriada a 0 9C e CBr4 (7,4 g, 22 mmols) foi adi-cionado lentamente. A mistura foi agitada durante a noite em temperaturaambiente. A mistura foi diluída com CH2CI2 (50 mL) e despejada em Et20 (75mL). A mistura foi filtrada e a fase de solução foi concentrada. O produto re-sultante foi novamente dissolvido em CH2CI2 (75 mL) e despejado em Et20(100 mL). A filtração e concentração deu 3,27 g (85%) do brometo, um óleolaranja. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 2,42 (s, 3 H), 4,56 (d, J= 1,5 Hz, 2 H),6,91 (t, J=9,1 Hz, 1 H), 6,97 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,08 - 7,24 (m, 1 H).

Etapa 7:

Usando o procedimento de exemplo 3, etapa 2, o brometo debenzila de etapa 6 (3,27 g, 16,1 mmols) foi reagido com tioacetato de potás-sio para dar 3,17 g (98%) do tioacetato de benzila, um óleo marrom. 1H RMN(400 MHz, CDCI3) ô 2,35 (s, 6 H), 4,22 (d, J = 1,5 Hz, 2 H), 6,88 (t, J = 9,0Hz, 1 H), 6,95 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,06 - 7,21 (m, 1 H),

Etapa 8:

Usando o procedimento de exemplo 3, etapa 3, o tioacetato debenzila (3,17 g, 16,0 mmols) foi oxidado para dar 3,30 g (80%) de cloreto de(3-cloro-6-flúor-2-metil-fenil)-metanossulfonila, um sólido castanho. 1H RMN(400 MHz, CDCI3) ô 2,52 (s, 3 H), 5,10 (d, J = 1,3 Hz, 2 H), 7,02 (t, J = 9,0Hz, 1 H), 7,48 (dd, J =9,1,5,3 Hz, 1 H).

Etapa 9:

Usando o procedimento na etapa 9, exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1/-/-indol-3-il] propil} benzoato de metila (e-xemplo 7, etapa 6, 163 mg, 0,303 mmol) foi reagido com cloreto de (3-cloro-6-flúor-2-metil-fenil) -metanossulfonila de etapa 8 para dar 102 mg da sulfo-namida, um sólido branco em 44% de rendimento.

Etapa 10:

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster de sulfonamida(74 mg, 0,097 mmol) foi hidrolisado para dar 65 mg (90%) do produto titular,um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 1,89 - 2,05 (m, 2 H), 2,41 (s,3 H), 2,75 (q, J= 7,6 Hz, 4 H), 2,83 - 2,93 (m, 2 H), 2,92 - 3,02 (m, 2 H), 4,21- 4,31 (m, 3 H), 6,49 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,72 - 6,83 (m, 2 H), 6,87 (s, 1 H),7,01 - 7,13 (m, 4 H), 7,24 - 7,35 (m, 9 H), 7,41 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 8,00 (d, J= 8,1 Hz, 2 H). HRMS: calculado para C41H37CI2FN2O4S + H+, 743,19079;encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+>, 743,1907.

Exemplo 27

Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-r2-((r2-nitro-6-(trifluorometil) benzill sul-fonil) amina) etill-1 H-indol-3-il) propil) benzóico

Etapa 1:2-Bromometil-1-nitro-3-trifluorometil-benzeno. A uma solução de2-metil-1-nitro-3-trifluorometil-benzeno (5,0 g, 24,4 mmols) em CCU (300 ml_)foi adicionada N-bromosuccinimida (4,35 g, 24,4 mmols) e peróxido de ben-zoíla (0,11 g, 0,45 mmol). A mistura foi aquecida a refluxo e exposta à luz(300 W) durante 20 h. A mistura foi resfriada em temperatura ambiente, fil-trada e concentrada. Purificação por cromatografia de coluna (EtOAc-hexanos) deu 3,03 g (44%) do brometo de benzila, um óleo amarelo. 1HRMN (400 MHz, CDCI3) ô 4,93 (s, 2 H), 7,63 (t, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,94 (d, J =7,8 Hz, 1 H), 8,06 (d[ J= 8,1 Hz, 1 H).

Etapa 2:

Usando; o procedimento de exemplo 3, etapa 2, o brometo debenzila etapa 1 (3,02 g, 10,6 mmols) foi reagido com tioacetato de potássiopara dar 2,71 g (91%) do tioacetato de benzila como um óleo marrom. 1HRMN (400 MHz, CDCI3) ô 2,34 (s, 3 H), 4,55 (s, 2 H), 7,58 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,98 (d, J= 8,1 Hz, 1 H).

Etapa 3:

Cloreto de (2-nitro-6-trifluorometilfenil) metanossulfonila. Usandoo procedimento de exemlo 3, etapa 3, o tioacetato de benzila (2,71 g,9,70mmols) foi oxidado para dar 2,42 g (82%) do produto titular como um óleomarrom. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 5,82 (s, 2 H) amplo, 7,84 (t, J= 8,1 Hz,1 H), 8,11 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 8,27 (d, J = 8,1 Hz, 1 H).

Etapa 4:

Usando o procedimento na etapa 9, exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil) -1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (e-xemplo 7, etapa 6, 164 mg, 0,305 mmol) foi reagido com cloreto de (2-nitro-6-trifluorometilfenil) metanossulfonila de etapa 3 para dar 119 mg da sulfo-namida como um sólido amarelo em 49% de rendimento.

Etapa 5:

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster de sulfonamida(94 mg, 0,117 mmol) foi hidrolisado para dar 90 mg (92%) do produto titular,um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,90 - 2,04 (m, 2 H), 2,76 (q,J= 7,5 Hz, 4 H), 2,80 - 2,90 (m, 2 H), 2,93 - 3,01 (m, 2 H), 4,24 (t, J= 6,2 Hz,1 H), 4,87 (s, 2 H) amplo, 6,51 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,81 (dd, J= 9,0, 2,1 Hz,1 H), 6,86 (s, 1 H), 7,08 (dd, J= 6,8, 2,5 Hz, 4 H), 7,23 - 7,36 (m, 9 H), 7,42(d, J= 2,0 Hz,,1 H), 7,61 (t, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,89 - 8,09 (m, 3 H). HRMS:calculado para C41H35CIF3N3O6S + H+, 790,19599; encontrado (ESI-FTMS,[M+H]1+), 790.Í944.

Exemplo 28

Ácido 4-!3-r5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-([(2-fluorobenzil) sulfonill amina) etil)-1 H-indol-3-iH propil) benzóico

Etapa 1.

Usando o procedimento na etapa 9, exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil) -1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il] propil} benzoato de metila (e-xemplo 7, etapa 6, 163 mg, 0,303 mmol) foi reagido com cloreto de (2-nitro-6-trifluorometil-fenil) -metanossulfonila para dar 15 mg da sulfonamida, umsólido branco em 7ò/o de rendimento.

Etapa 2.

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster de sulfonamida(14 mg, 0,020 mmol) foi hidrolisado para dar 12 mg (88%) do produto titular,um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 8 1,88 - 2,03 (m, 2 H), 2,66 -2,78 (m, 4 H), 2,81 ■- 2,90 (m, 2 H), 2,90 - 3,00 (m, 2 H), 4,12 - 4,20 (m, 3 H),6,49 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J= 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,86 (s, 1 H), 6,94 -7,01 (m, 1 H), 7,02 - 7,12 (m, 5 H), 7,23 - 7,36 (m, 10 H), 7,40 (d, J= 2,0 Hz,1 H), 8,00 (d, J= 8,3 Hz, 2 H). HRMS: calculado para C40H36CIFN2O4S + H+,695,21411; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 695,2128.

Exemplo 29

Ácido 4-(3-r2-(2-(r(bifenil-2-ilmetil) sulfonill amina) etil) -5-cloro-1-(difenilmetin-1 /-/-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1.

O brometo de exemplo 24, etapa 1 (83 mg, 0,108 mmol) foi colo-cado em um vaso de reação de microondas com ácido fenilborônico (19,8mg, 0,162 mmol), KF (9,4 mg, 0,162 mmol), Pd(OAc)2 ( 3,4 mg, 0,015 mmol)e PPh3 (11,8 mg, 0,045 mmol). DME (0,12 M), MeOH (0,42 M), H20 (0,42 M)foi adicionado ao vaso e a mistura foi desgasificada sob uma corrente deargônio, tampada, e aquecida no microondas Smith Creator a 120 °C duran-, te 1h. A mistura de reação foi resfriada em temperatura ambiente, filtradaatravés de celite (lavagem com EtOAc), e diluída com H20. A camada aquo-sa foi extraída com EtOAc. A fase orgânica combinada foi lavada com H20 esalmoura, secada sobre MgS04 e concentrada. Purificação do produto brutopor cromatografia de coluna (EtOAc-Hex.) deu 75 mg (91%) do produto Su-zuki, um sólido amarelo.

Etapa 2.

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster (70 mg, 0,091mmol) foi hidrolisado para dar 46 mg (67%) do composto titular, um sólidobranco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,85 - 1,98 (m, 2 H), 2,45 - 2,55 (m, 2H), 2,64 - 2,78 (m, 4 H), 2,82 - 2,90 (m, 2 H), 3,99 (t, J= 6,3 Hz, 1 H), 4,18(s, 2 H), 6,47 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,71 - 6,84 (m, 2 H), 6,97 - 7,08 (m, 4 H),7,15 - 7,24 (m, 3 H), 7,25 - 7,28 (m, 4 H), 7,28 - 7,36 (m, 9 H), 7,40 (d, J =2,0 Hz, 1 H), 7,47 (dd, J= 7,7, 1,1 Hz, 1 H), 8,01 (d, J= 8,3 Hz, 2 H). HRMS:calculado para C46H41CIN2O4S + H+, 753,25483; encontrado (ESI-FTMS,[M+H]1+), 753,253.

Ácido 4-(3-í5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-(r(2-piridin-4-ilbenzil) sulfonW amina)etil) -1H-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1.

O brometo de exemplo 24, etapa 1 (77 mg, 0,10 mmol) foi reagi-do com ácido piridina-4-borônico de acordo com o procedimento no exemplo29, etapa 1 para dar 33 mg (43%) do produto Suzuki, um sólido branco.

Etapa 2.

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster (33 mg, 0,043mmol) foi hidrolisado para dar 30 mg (91%) do composto titular, um sólidobranco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) Ô 1,90 - 2,01 (m, 2 H), 2,62 - 2,78 (m, 6H), 2,90 (t, J = 7,5 Hz, 2 H), 4,02 (s, 2 H), 4,56 (s, 1 H) amplo, 6,48 (d, J =8,8 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,83 (s, 1 H), 6,99 - 7,10 (m, 4H), 7,19 (dd, J= 7,6, 1,3 Hz, 1 H), 7,22 (dd, J= 4,5, 1,5 Hz, 2 H), 7,24 - 7,28(m, 2 H), 7,28 - 7,34 (m, 7 H), 7,36 - 7,46 (m, 3 H), 7,98 (d, J= 8,3 Hz, 2 H),8,55 (d, J = 5,8 Hz, 2 H). HRMS: calculado para C45H40CIN3O4S + H+,754,25008; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 754,2505.

Exemplo 31

Ácido 4-(3-r5-cloro-1 -(difenilmetil) -2-(2-ff(2-piridin-3-ilbenzil) sulfonill amina)etil) -1 /-/-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1.

O brometo de exemplo 24, etapa 1 (77 mg, 0,10 mmol) foi reagi-do com ácido piridina-3-borônico de acordo com o procedimento no exemplo29, etapa 1 para dar 59 mg (77%) do produto Suzuki, um sólido amarelo.

Etapa 2.

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster (54 mg, 0,070mmol) foi hidrolisado para dar 44 mg (83%) do composto titular, um sólidobranco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) Ô 1,80 - 1,93 (m, 2 H), 2,53 - 2,62 (m, 2H), 2,67 (t, J= 7,5 Hz, 2 H), 2,82 (s, 2 H) amplo, 2,95 - 3,03 (m, 2 H), 4,09 (s,2 H), 5,61 (dd, J = 4,9, 3,4 Hz, 1 H), 6,41 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,76 (dd, J =9,0, 2,1 Hz, 1 H), 6,89 (s, 1 H), 7,01 - 7,12 (m, 5 H), 7,22 - 7,36 (m, 9 H),7,36 - 7,47 (m, 3 H), 7,55 - 7,62 (m, 1 H), 7,68 - 7,74 (m, 1 H), 7,89 (d, J =8,3 Hz, 2 H), 8,60 (dd, J = 5,1, 1,5 Hz, 1 H), 8,90 (d, J = 2,3 Hz, 1 H). HRMS:calculado para C45H40CIN3O4S + H+, 754,25008; encontrado (ESI-FTMS,[M+H]1+), 754,2505.

Exemplo 32

Ácido 4-(3-l5-cloro-1-(difenilmetil) -2-r2-((f2-(3-tienil) benzill sulfonill amina)etill-1 /-/-indol-3-il) propil) benzóico

Etapa 1.

O brometo de exemplo 24, etapa 1 (77 mg, 0,10 mmol) foi reagi-do com ácido tiofeno-3-borônico de acordo com o procedimento no exemplo29, etapa 1 para dar 67 mg (87%) do produto Suzuki, um sólido amarelo.

Etapa 2.

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster (62 mg, 0,080 mmol) foi hidrolisado para dar 51 mg (83%) do composto titular, um sólidobranco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) õ 1,88 - 2,00 (m, 2 H), 2,54 - 2,64 (m, 2H), 2,68 - 2,81 (m, 4 H), 2,88 - 2,99 (m, 2 H), 4,11 (t, J= 6,3 Hz, 1 H), 4,20(s, 2 H), 6,49 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J= 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,82 (s, 1, , H), 7,00 (dd, J= 4,9, 1,4 Hz, 1 H), 7,05 (dd, J= 6,7, 2,4 Hz, 4 H), 7,13 (dd, J= 3,0, 1,3 Hz, 1 H), 7,20 - 7,28 (m, 4 H), 7,28 - 7,34 (m, 8 H), 7,38 - 7,44 (m,2 H), 7,97 - 8,04 (m, 2 H). HRMS: calculado para C44H39CIN2O4S2 + H+,759,21125; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 759,2099

Exemplo 33

Ácido 4-(3-r5-cloro-2-f2-(ír2-(3,5-dimetilisoxazol-4-il) benzill sulfonil) amina)etill-1 -(difenilmetin -1 H-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1.

O brometo de exemplo 24, etapa 1, (77 mg, 0,10 mmol) foi rea-gido com ácido 3,5-dimetilisoxazol-4-borônico de acordo com o procedimen-to no exemplo 29, etapa 1 para dar 36 mg (46%) do produto Suzuki, um sóli-do amarelo.

Etapa 2.

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster (36 mg, 0,046mmol) foi hidrolisado para dar 32 mg (90%) do composto titular, um sólidobranco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,88 - 2,04 (m, 5 H), 2,14 (s, 3 H), 2,68- 2,78 (m, 4 H), 2,78 - 2,85 (m, 2 H), 2,96 (t, 7,5 Hz, 2 H), 3,82 - 3,97 (m,2H), 4,18 - 4,27 (m, 1 H), 6,49 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J= 8,8, 2,0 Hz,1H), 6,83 (d, J= 11,4 Hz, 1 H), 7,06 (dd, J= 3,7, 1,6 Hz, 4 H), 7,12 (dd, J =7,5, 1,1 Hz, 1 H), 7,26 - 7,34 (m, 10 H), 7,34 - 7,40 (m, 1 H), 7,41 (d, J= 2,0Hz, 1 H), 7,99 (d, J = 8,3 Hz, 2 H). HRMS: calculado para C45H42CIN3O5S +H+, 772,26065; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 772,2595.

Exemplo 34

Ácido 4-(3-r5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-(f(2-quinolin-8-ilbenzil) sulfonill ami-na) etil) -1 H-indol-3-in propil} benzóico

Etapa 1.

O brometo de exemplo 24, etapa 1, (77 mg, 0,10 mmol) foi rea-gido com ácido 8-quinolinaborônico de acordo com o procedimento no e-xemplo 29, etapa 1 para dar 67 mg (82%) do produto Suzuki, um sólidobranco.Etapa 2.

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster (60 mg, 0,073mmol) foi hidrolisado para dar 42 mg (72%) do composto titular, um sólidoamarelo. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 1,68 - 1,85 (m, 1 H), 1,99 - 2,13 (m, 1H), 2,23 - 2,37 (m, 1 H), 2,43 - 2,53 (m, 3 H), 2,56 - 2,85 (m, 4 H), 3,91 (d, J= 14,1 Hz, 1 H), 4,28 (d, J= 14,1 Hz, 1 H), 4,83 (t, J= 4,7 Hz, 1 H), 6,39 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,72 - 6,80 (m, 2 H), 6,94 - 7,01 (m, 2 H), 7,01 - 7,09 (m, 2 H),7,19 - 7,27 (m, 4 H), 7,27-7,31 (m, 4 H), 7,32 - 7,37 (m, 1 H), 7,37 - 7,44 (m,4 H), 7,47 - 7,56 (m, 3 H), 7,75 - 7,91 (m, 3 H), 8,22 (dd, J= 8,3, 1,8 Hz, 1 H), 8,94 (dd, J = 4,3, 1,8 Hz, 1 H). HRMS: calculado para C49H42CIN3O4S +H+, 804,26573; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 804,2641.

Exemplo 35

Ácido 4-(3-r5-cloro-2-l2-f(!r4'-(dimetilamino) bifenil-2-inmetill sulfonil) aminaletil) -l-(difenilmetil) -1H-indol-3-il1 propil) benzóico

Etapa 1.

O brometo de exemplo 24, etapa 1 (77 mg, 0,10 mmol) foi reagi-do com ácido 4-(dimetilamino)-fenilborônico de acordo com o procedimentono exemplo 29, etapa 1 para dar 51 mg (cerca de 52%) do produto Suzuki,um sólido branco.

Etapa 2.

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster (51 mg, 0,063mmol) foi hidrolisado para dar 17 mg (ca. 41%) do composto titular, um sóli-do branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,87 - 1,98 (m, 2 H), 2,44 - 2,53 (m,2 H), 2,64 - 2,70 (m, 2 H), 2,70 - 2,77 (m, 2 H), 2,79 - 2,89 (m, 8 H), 4,01 -4,07 (m, 1 H), 4,28 (s, 2 H), 6,46 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,59 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,76 - 6,81 (m, 2 H), 6,99 - 7,07 (m, 6 H), 7,16 - 7,23 (m, 2 H), 7,25 - 7,33(m, 9 H), 7,39 (d, J= 2,3 Hz, 1 H), 7,44 - 7,49 (m, 1 H), 8,00 (d, J= 8,3 Hz, 2H). HRMS: calculado para (C48H46CIN3O4S + 2 H+)7 2, 398,65215; encon-trado (ESI-FTMS, [M+2H]2+), 398,6504

Exemplo 36

Ácido 4-r3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-r((r2'-(trifluorometóxi) bifenil-2-illmetillsulfonil) aminal etil) -1 H-indol-3-il) propil! benzóicoEtapa 1.

O brometo de exemplo 24, etapa 1 (77 mg, 0,10 mmol) foi reagi-do com ácido 2-(trifluorometóxi) fenilborônico de acordo com o procedimentono exemplo 29, etapa 1 para dar 36 mg (ca. 36%) do produto Suzuki, umsólido branco.

Etapa 2.

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster (36 mg, 0,042mmol) foi hidrolisado para dar 23 mg (ca. 75%) do composto titular, um sóli-do branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) S 1,80 - 1,91 (m, 2 H), 2,54 (q, J= 7,2Hz, 2 H), 2,59 - 2,70 (m, 4 H), 2,78 - 2,87 (m, 2 H), 3,90 (q, J= 14,1 Hz, 2 H),4,05 - 4,11 (m, 1 Hj, 6,40 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,67 - 6,76 (m, 2 H), 6,92 -7,02 (m, 4 H), 7,07 - 7,16 (m, 3 H), 7,16 - 7,30 (m, 12 H), 7,31 - 7,36 (m, 2H), 7,93 (d, J = 8,3, Hz, 2 H). HRMS: calculado para C47H40CIF3N2O5S + H+,837,23713; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 837,2375.

Exemplo 37

Ácido 4-(3-r5-cloro-2-f2-((r(2'-cianobifenil-2-il) metill sulfonill amina) etill-1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1.

O brometo de exemplo 24, etapa 1 (73 mg, 0,095 mmol) foi rea-gido com ácido 2-cianofenilborônico para dar 23 mg (30%) do produto Suzu-ki, um sólido amarelo.

Etapa 2.

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster (19 mg, 0,024mmol) foi hidrolisado para dar 10 mg (53%) do composto titular, um sólidobranco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,87 - 2,01 (m, 2 H), 2,62 - 2,79 (m, 6H), 2,92 (t, J = 7,6 Hz, 2 H), 3,91 - 4,14 (m, 3 H), 6,47 (d, J = 8,8 Hz, 1 H),6,75 - 6,85 (m, 2 H), 7,01 - 7,08 (m, 4 H), 7,22 - 7,28 (m, 3 H), 7,28 - 7,36 (m,8 H), 7,36 - 7,44 (m, 4 H), 7,49 - 7,59 (m, 1 H), 7,63 - 7,69 (m, 1 H), 8,00 (d,J = 8,3 Hz, 2 H). HRMS: calculado para C47H40CIN3O4S + H+, 778,25008;

30 encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 778,2489.Exemplo 38

Ácido 3-{4-r(2-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-r2-((í2-(trifluorometin benzill sulfonillamina) etill-1 H-indol-3-iDetil) sulfonill fenil) propanóicoEtapa 1:

2-Bromo-4-cloroanilina (1,0 eq) foi dissolvida em CH2CI2 (0,25M), então trietilamina e anidrido de trifluoroacetila (1,1 eq cada) foram adi-cionados. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante1 hora. O solvente foi evaporado e o resíduo foi purificado por cromatografiacintilante com CH2CI2 como eluente para dar a amida em 97% de rendimen-to. mVz(M-H)" 300,0.

Etapa 2:

N-(2-Bromo-4-clorofenil)-2,2,2-trifluoroâcetamida (etapa 1, 1,0eq) foi misturado co,m 3-butin-1-ol (2,0 eq), diclorobis (trifenilfosfina) paládio(II) (2,5% eq), trietilamina (3,0 eq), Cul (5% eq) em DMF (0,2 M) em um vaso,u vedado sob N2 e aquecida a 120 °C durante 4 horas. A mistura de reação foientão diluída com acetato de etila, lavada com salmoura e secada sobreNa2S04. Purificação por cromatografia cintilante de coluna com 2% de Me-OH/CH2CI2 deu a alquina em 67% de rendimento. m/z(M-H)"194,09.

Etapa 3:

2-(5-Cloro-1 H-indol-2-il) etanol (etapa 2, 1,0 eq) e imidazol (2,0eq) foram dissolvidos em DMF (0,3 M) em temperatura ambiente com agita-ção antes de terc-butilclorodifenilsilano (1,2 eq) ser adicionado. A misturaresultante foi agitada durante a noite em temperatura ambiente antes de serresfriada bruscamente com uma solução de bicarbonato de sódio aquososaturado e extraída com acetato de etila. A fase orgânica foi lavada com á-gua e salmoura e secada sobre Na2SÜ4. Purificação por cromatografia cinti-lante com CH2CI2 como eluente deu o éter silílico como uma goma marromsobre 90% de rendimento. m/z(M-H)'433,0

Etapa 4:

2-({[Terc-butil (difenil) silil] óxi} etil)-5-cloro-1 H-indol (etapa 3, 1,0eq) foi dissolvido em éter (0,4 M) e a solução foi resfriada a 0 °C. Cloreto deoxalila (1,2 eq) foi adicionado na solução fria acima com agitação vigorosa. Amistura de reação foi agitada a 0 °C durante 1 hora antes de EtOH ser adi-cionado, seguido por NEt3. A mistura resultante foi então diluída com maisEtOH antes foi despejada em água e extraída com EtOAc. A fase orgânicai , lavada com salmoura, secada sobre Na2S04, e concentrada para dar o ceto-éster como sólido amarelo em 70% de rendimento. m/z(M-H)"533,0

Etapa 5:

[2-({[Terc-butil (difenil) silil] óxi} etil) -5-cloro-1H-indol-3-il] (oxo)acetato de etila (etapa 4, 1 eq), Ph2CHBr (1,5 eq) e Cs2C03 (1,5 eq) forammisturados em acetonitrila seca (0,1 M). A mistura foi aquecida a refluxo du-rante 2 horas. A mistura de reação foi resfriada a temperatura ambiente, dilu-ída com água e extraída com EtOAc. A fase orgânica foi concentrada e oresíduo foi cromatografado com CH2CI2 como eluente para dar o N-benzhidrilindol como uma goma laranja em 45% de rendimento. m/z(M+H)+701,3

Etapa 6:

A uma solução de [1-benzhidril-2-({[ferc-butil (difenil) silil] óxi}etil) -5-cloro-1 H-indol-3-il] (oxo) acetato de etila (etapa 5, 1 eq) em THF(0,1M) foi adicionado BH3Me2S (2M em THF) (2 eq). A mistura resultante foiaquecida a refluxo durante a noite sob N2. A mistura de reação foi resfriadaem temperatura ambiente, então resfriada bruscamente lentamente com 1Nde NaOH, extraída com EtOAc, e lavada com salmoura. A concentração deuo álcool em 65% de rendimento. m/z(M+H)+645,0

Etapa 7:

A uma solução de 2-[1-benzhidril-2-({[íerc-butil (difenil) silil] óxi}etil) -5-cloro-1 H-indol-3-il] etanol (etapa 6, 1 eq) em CH2CI2 (0.08M) foi adi-cionado 1,3-bis(difenilfosfino)-propano (DPPP, 0,75 eq). A solução foi resfri-ada a 0°C sob N2, então CBr4 (1,25 eq) foi adicionado. A temperatura de re-ação foi deixada retornar à temperatura ambiente durante 2 h. O solvente foievaporado, e o resíduo foi purificado usando uma coluna de sílica-gel curtacom CH2CI2 como eluente para dar o brometo em rendimento quantitativo.m/z(M+H)+708,0

Etapa 8:

1-Benzhidril-3-(2-bromoetil) -2-({[íerc-butil (difenil) silil] óxi} etil) -5-cloro-1 H-indol (etapa 7, 1 eq) foi misturado com 3-(4-mercaptolfenil) propi-onato de metila (1,5 eq) e K2C03 (1,5 eq) em DMF(0,1 M). A mistura resul-tante foi agitada em temperatura ambiente sob N2 durante 2 h, então diluídacom água e extraída com EtOAc. O extrato orgânico foi lavado com salmou-ra, concentrado, e purificado por cromatografia cintilante (CH2CI2 como elu-ente) para dar o tioéter como uma goma acastanhada em 80% de rendimen-to. m/z(M+H)823,0

Etapa 9:

3-[4-({2-[1-Benzhidril-2-({[terc-butil (difenil) silil] óxi} etil) -5-cloro-1 H-indol-3-il] etil} sulfanil) fenil] propanoato de metila (etapa 8, 1 eq) foi dis-solvido em acetonitrila (0,1 M), então peneiras moleculares (pó, 4 A,) e 4-metilmorfolina N-óxiào (NMO) (4eq) foram adicionados sob N2. Após 5 min,n-Pr4NRu04 (TPAP) (5% eq) foi adicionado. A mistura resultante foi aquecidaa 40 °C durante 1,5 h. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificadopor cromatografia cintilante com CH2CI2, então 1% de EtOAc/CH2CI2 comoeluente para dar a sulfona como uma espuma branca em 44% de rendimen-to. m/z(M+H)+855,1

Etapa 10:

3-(4-{2-[1-Benzhidril-2-({[terc-butil (difenil) silil] óxi} etil) -5-cloro-1 H-indol-3-il] etóxi} fenil) propanoato de metila (etapa 9, 1 eq) foi dissolvidoem THF (0,1 M) e resfriado a 0 °C então tratado com nBu4NF (1 M em THF)(1,2 eq). A mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 5 min, então aqueci-da em temperatura ambiente e agitada durante 30 min. O solvente foi evapo-rado e o resíduo foi purificado por cromatografia cintilante com EtO-Ac/CH2CI2 (1:9 a 1:4) como eluente para dar o álcool como uma espumabranca em 90% de rendimento. m/z(M+H)+616,20.

Etapa 11:

3-[4-{2-[1-Benzhidril-5-cloro-2-(hidroxietil) -1 H-indol-3-il] etil} -sulfonil) fenil] propanoato de metila (etapa 10, 1 eq) em CH2CI2 (0,02 M) foitratado a 0 °C com MeS02CI (2,0 eq) e Et3N (2,5 eq) e agitado durante 1hora. O banho de gelo foi removido e a mistura de reação foi agitada durante1 hora em temperatura ambiente antes de ser diluída com CH2CI2, lavadacom NaH2P04, salmoura e secada sobre Na2S04. A evaporação do solventedeu o mesilato em rendimento quantitativo. m/z(M+H)+695,0Etapa 12:

3-(4-{[2-(1-Benzhidril-5-cloro-2-{2-[(metilsulfonil) oxi] etil} -1H-indol-3-il) etil] sulfonil} fenil) propanoato de metila (etapa 11, 1,0 eq) foi dis-solvido em DMF (0,03 M) e tratado com NaN3 (3,0 eq). A mistura resultantefoi aquecida a 60 °C e agitada durante 2 horas, então resfriada em tempera-tura ambiente, diluída com água, extraída com acetato de etila, lavada comsalmoura e secada com Na2S04. A evaporação de solvente deu a azida emrendimento quantitativo, m/z (M+H)+641,1

Etapa 13:

3-[4-({2-[2-(2-Azidoetil)-1 -benzhidril-5-cloro-1 H-indol-3-il] etil} sul-

fonil) fenil] propanoato de metila (etapa 12, 1 eq) foi dissolvido em THF (0,1M), e tratado com trifenilfosfina (1,1 eq). Após 2 dias água foi adicionado, e amistura foi agitada, |durante a noite, concentrada, e purificada por cromato-grafia cintilante usando 4% de MeOH:CH2CI2 como eluente para dar a aminaem 71% de rendimento. m/z(M+H)+615,2

Etapa 14:

Como descrito na etapa 9, exemplo 1, 3-[4-({2-[2-(2-aminoetil) -1-benzhidri!-5-c!oro-1/-/-indol-3-il] etil} sulfonil) fenil] propanoato de etila (eta-pa 13, 200 mg, 0,32 mmol) foi reagido com cloreto de (2-trifluorometilfenil)metanossulfonila (exemplo 5, etapa 3, 110 mg, 0,42 mmol) para dar 250 mgda sulfonamida, uma espuma amarela-pálida, em 93% de rendimento. 1HRMN (400 MHz, CDCI3) 8 1,23 (t, J= 7,2 Hz, 3 H), 2,62 - 2,71 (m, 2 H), 2,76- 2,93 (m, 4 H), 2,98 - 3,17 (m, 4 H), 3,27 - 3,38 (m, 2 H), 4,11 (q, J = 7,2 Hz,2 H), 4,35 (s, 2 H), 4,57 (t, J= 5,3 Hz, 1 H), 6,43 (d, J= 9,1 Hz, 1 H), 6,77(dd, J= 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,81 (s, 1 H), 7,18 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 7,24 - 7,35(m, 10 H), 7,41 (d, J= 8,6 Hz, 3 H), 7,49 (t, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,60 - 7,77 (m, 2H), 7,88 (d, J= 8,6 Hz, 2 H).

Etapa 15:

Usando o procedimento na etapa 10 exemplo 1, o éster de sul-fonamida (220 mg, 0,26 mmol) foi hidrolisado para dar 200 mg (92%) doproduto titular, uma espuma branca. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ô 2,65 (t,J= 7,6 Hz, 2 H), 2,91 - 3,13 (m, 8 H), 3,60 (dd, J= 9,7, 5,4 Hz, 2 H), 4,46 (s,2 H), 6,48 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,83 (dd, J= 8,7, 2,1 Hz, 1 H), 7,05 - 7,16 (m,5 H), 7,19 (d, J= 2,3 Hz, 1 H), 7,33 - 7,47 (m, 6 H), 7,53 - 7,72 (m, 6 H), 7,80(d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,94 (d, J= 8,3 Hz, 2 H), 12,26 (s, 1 H); HRMS: calcula-do para C42H38CIF3N2O6S2 + H+, 823,18847; encontrado (ESI-FTMS,[M+H]1+), 823,1887; HPLC pureza H20/CH3CN: 100 %, H20/MeOH: 100 %.

Exemplo 39

Ácido 3-(4-(r2-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-r«1-r2-(trifluorometin fenil) etil)sulfonil) amina) etil) -1H-indol-3-il) etill sulfonil) fenil) propanóico

Etapa 1:

Usando o procedimento no exemplo 1, etapa 9, 3-[4-({2-[2-(2-aminoetil) -5-cloro-V(difenilmetil) -1H-indol-3-il] etil} sulfonil) fenil] propanoatode etila (exemplo 38, etapa 14) foi reagido com cloreto de 1 -(2-trifluorometil-jií fenil) -etanossulfonila (0,13 g, 0,46 mmol) para dar éster etílico de ácido 3-{4-[2-(1-benzhidril-5-cloro-2-{2-[1-(2-trifluorometil-fenil) -etanossulfonilamino] -etil} -1 H-indol-3Hl)-etanossulfonil] -fenil} -propiônico (0,110 g, 40%).

Etapa 2:

O éster de sulfonamida (0,11 g, 0,13 mmol) foi hidrolisado deacordo com o exemplo 1, etapa 10 para dar 0,068 g (64%) do produto titular,um sólido branco. l'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1,67 (d, J= 6,8 Hz, 3 H) 2,57- 2,72 (m, 4 H) 2,80 (t, J = 6,8 Hz, 2 H) 2,84 - 2,94 (m, 2 H) 3,03 (t, J = 6,4Hz, 2 H) 3,20 - 3,31 (m, 2 H) 5,82 - 5,88 (m, 1 H) 6,37 (s, 1 H) 6,73 - 6,81 (m,2 H) 6,98 (d, J= 4,4 Hz, 2 H) 7,05 (d, J= 5,4 Hz, 2 H) 7,24 - 7,49 (m, 1.1 H)7,63 (d, J= 7,8 Hz, 1 H) 7,80 (d, J= 7,8 Hz, 1 H) 7,88 (d, J= 8,6 Hz, 2 H).

Exemplo 40

Ácido 4-(3-f5-cloro-i-(difenilmetil) -2-(2-(r(2-hidroxibenzil) sulfonil) amina) etil)-1 H-indol-3-ill propil) benzóico

Etapa 1:

Usando o procedimento descrito no exemplo 5, etapa 1, brometode 2-benziloxibenzila (ref. J. Med. Chem. 2006, 49, 31-34, R.V. Somu et al.)(32,2 g, 116 mmols) deu sal de sódio de ácido (2-benzilóxi-fenil)-metanossulfônico (30 g, 86%), um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-db) §3,82 (s, 2 H) 5,09 (s, 2 H) 6,81 - 6,91 (m, 1 H) 6,96 (d, J= 7,58 Hz, 1 H)7,08 - 7,18 (m, 1 H) 7,26 - 7,34 (m, 1 H) 7,34 - 7,41 (m, 2 H) 7,45 (dd, J =,1,77 Hz, 1 H) 7,52 (d, J = 7,07 Hz, 2 H).

Etapa 2:

Usando o procedimento descrito no exemplo 5, etapa 2, sal desódio de ácido (2-benzilóxi-fenil)-metanossulfônico (30 g, 99 mmols) deu á-cido (2-benzilóxi-fenil)-metanossulfônico (15 g), um sólido branco que foi u-sado sem outra purificação. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Ô 3,81 (s, 2 H)5,08 (s, 2 H) 6,80 - 6,92 (m, 1 H) 6,95 (d, J= 7,83 Hz, 1 H) 7,07 - 7,17 (m, 1H) 7,31 (d, J= 6,82 Hz, 1 H) 7,34 - 7,42 (m, 2 H) 7,45 (dd, 1 H) 7,52 (d, J =7,33 Hz, 2 H).

Etapa 3:

Usando o procedimento descrito no exemplo 5, etapa 3, ácido(2-benzilóxi-fenil)-metanossulfônico (7 g, 25,15 mmols) deu cloreto de (2-benzilóxi-fenil)-metanossulfonila (2,6 g, 35%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) Ô5,06 (s, 2 H) 5,15 (s, 2 H) 7,00 - 7,10 (m, 2 H) 7,30 - 7,50 (m, 7 H).

Etapa 4:

Como descrito na etapa 9 Exemplo 1, 4-{3-[2-(2-aminoetil)-1-benzhidri!-5-c!oro-1 H-jndol-3-il] propi!} benzoato de metüa (exemplo 7, etapa6,3,92 g, 7,3 mmols) foi reagido com cloreto de (2-benzilóxi-fenil)-metanossulfonila (2,6 g, 8,76 mmols) para dar 4,1 g de 4-{3-[2-[2-({[2-(benzilóxi) benzil] sulfonil} amina) etil]-5-cloro-1 -(difenilmetil) -1 H-indol-3-il]propil} benzoato de metila, uma espuma branca, em 59% de rendimento. 1HRMN (400 MHz, CDCI3) 5 1,80 - 1,99 (m, 2 H) 2,49 - 2,78 (m, 6 H) 2,85 (t, J =8,84 Hz, 2 H) 3,89 (s, 3 H) 3,96 - 4,05 (m, 1 H) 4,26 (s, 2 H) 4,90 (s, 2 H)6,45 (d, J= 8,84 Hz, 1 H) 6,73 - 6,82 (m, 2 H) 6,83 - 6,93 (m, 2 H) 6,94 - 7,08(m,4H) 7,16- 7,34 (m, 15 H) 7,39 (d, J=2,02 Hz, 1 H) 7,85-7,98 (m, 2 H).

Etapa 5:

4-{3-[2-[2-({[2-(Benzilóxi) benzil] sulfonil} amina) etil]-5-cloro-1-(difenilmetil) -1/-/-indol-3-il] propil} benzoato de metila (5,1 g, 6,4 mmols) foireagido com hidrogênio na presença de paládio em carbono (0,5 g) para daruma mistura de 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-{[(2-hidroxibenzil) sulfonil]amina} etil) -1/-/-indol-3-il] propil} benzoato de metila e 4-{3-[1-(difenilmetil) -2-(2-{[(2-hidroxibenzil) sulfonil] amina} etil) -1 H-indol-3-il] propil} benzoato demetila (3:1) como uma espuma branca em 74% de rendimento global.

Etapa 6:

Usando o procedimento na etapa 10, exemplo 1, a mistura deéster de sulfonamida (3,35 g) foi hidrolisada e purificada por HPLC prepara-tivo para dar 1,18 g (36%) do produto titular, um sólido branco. 1H RMN (400MHz, CDCI3) ô 1,89 - 2,01 (m, 2 H) 2,64 - 2,96 (m, 8 H) 4,16 (s, 2 H) 4,17 -4,25 (m, 1 H) 6,50 (d, J = 8,84 Hz, 1 H) 6,74 - 6,89 (m, 4 H) 6,95 (dd, J =1,64 Hz, 1 H) 7,01 - 7,13 (m, 4 H) 7,11 - 7,23 (m, 1 H) 7,23 - 7,38 (m, 8 H)7,41 (d, J = 2,02 Hz, 1 H) 7,90 - 8,04 (m, 2 H); HRMS: calculado paraC4oH37CIN205S + ,H+, 693,21845; encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+),693,21709; HPLC pureza (CH3CN-H20): 7,24 min, 100,0%. HPLC purezar (MeOH-H20): 8,12 min, 100,0%.

Exemplo 41 ;

Ácido 4-(3-r5-cloro-1-(difenilmetiP -2-(2-(r(2-quinolin-5-ilbenzil) sulfonill ami-na) etil) -1 /-/-indol-3-il1 propil) benzóico

Etapa 1.

O brometo de exemplo 24, etapa 1 foi reagido com ácido 5-quinolinaborônico de acordo com o procedimento no exemplo 29, etapa 1para dar o produto Suzuki.

Etapa 2.

Como descrito no exemplo 1, etapa 10, o éster foi hidrolisado e oproduto purificado por HPLC preparativo para dar o composto titular, um só-lido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 8 1,77 -1,91 (m, 2 H), 2,35 - 2,70 (m, 6 H), 2,76 (t, J=7,2 Hz, 2 H), 3,65 (d, J= 13,9Hz, 1 H), 3,89 (d, J= 13,9 Hz, 1 H), 4,00 (t, J= 5,3 Hz, 1 H), 6,39 (d, J= 9,1Hz, 1 H), 6,63 - 6,79 (m, 2 H), 6,86 - 7,04 (m, 4 H), 7,08 - 7,24 (m, 10 H),7,24 - 7,40 (m, 4 H), 7,43 - 7,51 (m, 1 H), 7,55 (dd, J= 8,6, 7,1 Hz, 1 H), 7,62(d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,84 - 7,94 (m, 2 H), 8,05 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 8,83 (dd, J = 4,3, 1,8 Hz, 1 H). HRMS: calculado para C49H42CIN3O4S + H+, 804,26573;encontrado (ESI-FTMS, [M+H]1+), 804,2663.

Um método alternativo para preparar os compostos intermedia-rios da fórmula geral:

<formula>formula see original document page 73</formula>

onde X é halogenio, preferivelmente cloro, é descrito no pedido de patenteU.S. série número 11/064,241, depositado em 23 de fevereiro de 2005, queé incorporado aqui por referência em sua totalidade. Brevemente, o métodoenvolve a formação de ácido sulfônico antes da conversão do halogeneto desulfonila, de acordo com o esquema geral abaixo:

<formula>formula see original document page 73</formula>

em que L é um grupo de saída; Ar representa uma porção fenila 2,6-di-substituída; R representa uma porção (CHR5)n2, e M é um grupo I ou grupo IIíon de metal. De acordo com o esquema, ácidos sulfônicos de fórmula IVpodem ser convertidos em halogenetos de sulfonila por reação com um rea-gente de substituição de halogenio (isto é, um reagente que pode converterum substituinte não halogenio como, por exemplo, H ou OH, para um substi-tuinte de halogenio; isto é, converter uma porção ácido sulfônico para umaporção de halogeneto de sulfonila), por exemplo, SOCI2, POCI3, C-CU/trifenilfosfina, cloreto de oxalila ou brometo de oxalila, preferivelmentecloreto de oxalila. O agente de substituição de halogenio é preferivelmenteusado em excesso de quantidade, particularmente se há solvente residualou no material de partida, nos solventes ou em ambos. Quando cloreto deoxalila é usado como o agente de substituição de halogenio, ele pode serusado em uma faixa de cerca de 1 a cerca de 6 equivalentes; cerca de 2 acerca de 4 equivalentes ou cerca de 3 a cerca de 3,5 equivalentes com rela-ção a quantidade de reagente de ácido sulfônico (composto de fórmula IV).

Um versado na técnica irá reconhecer que a quantidade de agente de substi-tuição de halogenio usada irá depender, inter alia, da quantidade de água nomaterial de partida ou solvente e a natureza e reatividade do material de par-tida e solventes.

Os solventes apropriados para a reação de substituição de halo-genio (etapa 3 do esquema acima) incluem qualquer solvente orgânico quepode pelo menos parcialmente dissolver o composto de fórmula IV. Os sol-ventes preferidos incluem os solventes não polares ou fracamente polares,incluindo acetonitrila, hidrocarbonetos aromáticos como benzeno e tolueno,e solventes halogenados como 1,2-dicloroetano e cloreto de metileno. Ossolventes mais preferidos são éteres. Os éteres apropriados incluem tetrahi-drofurano, dioxano, éter dietílico, éter dibutílico, éter diisopropílico ou mistu-ras dos mesmos e outros. Um éter mais preferido é tetrahidrofurano.

A reação de substituição de halogenio pode ser realizada emqualquer temperatura apropriada, por exemplo, a cerca de -40 °C a cerca detemperatura ambiente, preferivelmente abaixo de cerca de -10 °C.

A etapa formando halogeneto de sulfonila (etapa 3 do esquemaacima) também pode ser realizada na presença de um catalisador de trans-ferência acila, como uma amida terciária (por exemplo, dimetilformamida). Ocatalisador de transferência acila pode ser provido em uma quantidade sufi-ciente para acelerar a taxa de reação. O catalisador de transferência acilaestá presente em menos que cerca de um equivalente relativo a quantidadede reagente de ácido sulfônico, preferivelmente em uma quantidade de cer-ca de 0,01 a cerca de 0,5 equivalentes; ainda mais preferido, cerca de 0,1 acerca de 0,2 equivalentes, relativo a quantidade de reagente de ácido sulfônico.

Os compostos de fórmula I podem ser isolados da mistura dereação por precipitação e filtração. Quaisquer métodos numerosos bem-conhecidos para induzir a precipitação podem ser usados. Em algumas mo-dalidades preferidas, um anti-solvente como água ou um solvente contendoágua pode ser adicionado na mistura de reação para induzir a precipitação.Uso de água como um anti-solvente pode reduzir a taxa de decomposiçãodo produto de halogeneto de sulfonila para a taxa de decomposição obser-vada quando um solvente orgânico como heptano é usado, resultando emrendimentos melhorados. A precipitação pode ser facilitada por diminuiçãoda temperatura da mistura de reação para, por exemplo, abaixo de cerca de-20 °C.

Como mostrado no esquema acima, ácidos sulfônicos de fórmu-IV podem ser preparados por reação dos sais de ácido sulfônico (sais sul- fonato) de fórmula III com um ácido prótico. Os ácidos práticos apropriadossão de potência suficiente de modo a serem capazes de converter um salsulfonato em seu ácido correspondente de acordo com o processo da inven-ção. Por exemplo,, p ácido prótico pode ser um ácido inorgânico forte comoHCI, HBr, H3PO4, HNO3, HCIO4, H2SO4, e outros. Alternativamente, o ácidoprótico pode ser um ácido orgânico, como fórmico, ácido metanossulfônico,ácido p-tolueno sulfônico, ácido benzenossulfônico, ácido trifluoroacético eoutros ácidos orgânicos fortes. O ácido prótico pode ser provido na formagasosa. Preferivelmente, o ácido inorgânico é HCI, mais preferivelmente HCigasoso que é adicionado no solvente de reação contendo o sal sulfonato. Oácido prótico é vantajosamente provido em excesso de equivalentes molarrelativo ao sal de ácido sulfônico de fórmula III.

A formação do composto de ácido sulfônico de fórmula IV podeser realizada em qualquer solvente apropriado. Por exemplo, solventes or-gânicos em que o composto de fórmula III é pelo menos parcialmente solú-vel são apropriados. O solvente pode ser escolhido de modo a dissolver fra-camente os sais de halogeneto de metal, como NaCI ou KCI, assim termodi-namicamente dirigindo a reação por precipitação de sal de halogeneto demetal. O solvente pode conter um álcool, como metanol, etanol, isopropanol,e outros, ou uma mistura dos mesmos, preferivelmente metanol. O solventetambém pode conter água. A temperatura de reação pode ser facilmentedeterminada pelo técnico versado. Por exemplo, a reação pode ser realizadaem uma temperatura abaixo da temperatura ambiente, como cerca de -20 acerca de 10°C, preferivelmente a cerca de O ou abaixo de cerca de 10°C.

O composto de ácido sulfônico de fórmula IV pode ser isolado deacordo com os métodos de rotina, como precipitação do produto da misturade reação.

O composto de sal de ácido sulfônico (sal sulfonato) de fórmulaIII pode ser preparado por reagir um composto de fórmula II: Ar-R-L (em queAr, R e L são definidos acima) com um grupo I ou II de sal de sulfito de metalopcionalmente na presença de um catalisador de transferência de fase comomostrado na Etapa 1 do esquema acima. Qualquer grupo I ou II de sal desulfito de metai é apropriado, por exemplo, Li2S03, Na2S03, K2S03, MgS03,CaS03, e outros. Grupo I ou II de sais de sulfito de metal pode ser providoem excesso molar de, por exemplo, cerca de 2 eq, a cerca de 1 eq, relativo a> quantidade de composto de fórmula II. Sais de metal apropriados incluemNa2S03, K2S03 e Na2S03.

15 A formação dos compostos de sal sulfonato de fórmula III pode

ser realizada na presença de um catalisador de transferência de fase, porexemplo, um halogeneto de amônio quaternário, como iodeto de tetrabutilamônio. O catalisador de transferência de fase pode ser provido em umaquantidade apropriada para acelera a taxa de reação, por exemplo, em cer-ca de 0,1 a 2% ou mais preferivelmente 0,5 a 1% em peso.

Qualquer solvente apropriado pode ser empregado, como sol-vente que pode peío menos parcialmente dissolver grupo I ou II de sais desulfito de metal, como água, em uma quantidade de cerca de 50%, mais pre-ferivelmente cerca de 75%, ainda mais preferivelmente mais que cerca de90%, ainda mais preferivelmente mais que cerca de 95%, e ainda mais pre-ferivelmente acima de cerca de 99% água. A reação também pode ser reali-zada em qualquer temperatura apropriada, preferivelmente em temperaturaelevada, por exemplo cerca de 100 °C.

A isolação do composto de fórmula III da mistura de reação podeser realizada por qualquer método de rotina, como a precipitação da misturade reação por, por exemplo, tratamento da mistura de reação com um salinorgânico solúvel em água como NaCI ou KCI, mais preferivelmente NaCI. Aisolação do composto de fórmula III pode ser ainda facilitada pela adição dai mistura de reação de um solvente orgânico que não é substancialmentemiscível com água, como acetato de etila, éteres (por exemplo, éter etílico eoutros), alcanos (por exemplo, hexanos, éter de petróleo, etc), aromáticos(por exemplo, benzeno, tolueno, xileno, etc), e outros, com acetato de etilasendo mais preferido. A mistura de reação também pode ser resfriada (porexemplo, menos que cerca de 10 °C) para ajudar a induzir a precipitação.

PROCEDIMENTOS DE TESTES BIOLÓGICOS

Teste de micelas GLU

O teste foi realizado em um formato de 96 cavidades usandouma leitora de placa fluorescente com um filtro de excitação 355 nM e umfiltro de emissão 460 nM (Lab Systems Fluoroscan II, Helsinki, Finlândia). Otampão de teste continha 940 |xM de Triton X-100, 50 mM de Hepes pH 7,4,0,3 mM de EDTA, 1 mM de CaCI2 e 300 mM de KCI. DTPC (1, 2-0-tetradecii-sn-giicero-3-fosfocolina, Avanti) em uma concentração final de 120(iM foi adicionado o dia do experimento e GLU (7-hidroxicoumarinil-v-linolenato, Biomol Research Lab, Inc.) em uma concentração final de 90 |j.Mfoi adicionado imediatamente anterior em cada teste.

Os compostos (10 ^L) dissolvidos em DMSO foram colocadosem cavidades duplicadas de uma placa preta de 96 cavidades. As cavidadescorrespondentes para os controles positivo e negativo continham DMSOsem inibidores. Justo antes do experimento, 200 u.L de tampão de teste con-tendo 90 |iM de GLU e 120 jxM de DTPC foram adicionados em todas ascavidades na placa de teste. O tampão de teste (50 jiL) foi adicionado nonegativo, e 50 |oL de solução de cPLA2a (5 mg/mL em tampão de teste) fo-ram adicionados em todas as outras cavidades para iniciar a reação. A con-centração final de enzima foi de 1 ng/ml. O conteúdo de cada cavidade foimisturado suavemente durante a adição da enzima, e a placa foi rapidamen-te transferida para a leitora de placa fluorescente. O aumento em fluores-cência foi lido a cada 4 min durante 84 min. A inclinação da linha resultantefoi determinada e a inibição foi calculada usando a equação abaixo:Porcentagem de inibição = [1 - (inclinação com inibidor - controle de inclina-ção negativo)/( controle de inclinação positivo - controle de inclinação nega-tivo)] x 100

Teste de sangue total em rato

Sangue fresco foi coletado em tubos heparinizados por punção cardíaca de ratos Sprague-Dawley machos. Alíquotas de sangue (0,6 ml_)foram incubadas com ou 6 uL de solvente (DMSO), ou 6 jiL de compostosde teste em várias concentrações durante 15 minutos a 37 °C. Isto foi segui-do por incubação do sangue com 6 uL de ionóforo de cálcio, A23187 (SigmaC-7522) diluído em DMSO durante 10 min a 37 °C. A concentração final deA23187 foi de 5 |j,M. DMSO (6 uL) foi adicionado nos controles não estimalados. As reações foram paradas por misturação de 60 \lL de EDTA frio paradar uma concentração final de 20 mM. O sangue foi centrifugado a 6,500rpm durante 10 min em uma microcentrífuga para obter plasma. Uma alíquo-ta de 70 jiL de plasma foi misturada com 400 |iL de metanol frio para precipi-tação de proteína. Após incubação a -80 °C durante 30 min, o sobrenadantefoi obtido por centrifugação a 6.500 rpm durante 10 min, e foi testado paraTXB2 de acordo com o procedimento de fabricação (Assay Designs, lnc.'sELISA kit #900-002).

Resultados do teste de micelas GLU e o teste de sangue total derato para os compostos da invenção são mostrados na tabela 1, abaixo:

<table>table see original document page 78</column></row><table><table>table see original document page 79</column></row><table>

Efeito de inibidor de cPLA? em modelos de trombose O efeito da administração de inibidores de cPLA2 em modelospara trombose foi determinado pelos seguintes procedimentos.Estudo de analisador de função de plaauetas (PFA-100®)

A agregação de plaqueta humana foi estudada usando o anali-sador de função de plaquetas (PFA-100®). O sangue humano foi coletadode voluntários que tinham se recusado a tomar quaisquer medicações inibi-doras de plaquetas durante as duas semanas anteriores. O sangue foi cole-tado em 3,2% de tubos Vacutainer de citrato de sódio (Becton Dickinson).Os tubos foram invertidos 5 vezes e o sangue foi transferido para tubos cô-nicos de 15 ml de polipropileno. 5 |il de inibidor respectivo dissolvidos em100% DMSO de , ácido (4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-flúor-6-(trifluorometil) benzil] sulfonil} amina) etil]-1/-/-indol-3-il} propil) benzóico, e-xemplo 14; ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(trifluorometóxi) ben-zil] sulfonil} amina) etil]-1 /-/-indol-3-il} propil) benzóico, exemplo 25; ácido 4-{3-[1-benzhidril-5-clcjro-2-(2-{[(3,4-diclorobenzil) sulfonil] amina} etil) -1H-indol-3-il] propil} benzóico, composto C) foram adicionados a 1 ml de alíquo-ta de sangue humano total, para dar uma concentração de inibidor respecti-vo e uma concentração de DMSO final de 0,5%. Os tubos foram invertidos10 vezes para misturar, e deixados assentar em temperatura ambiente du-rante 10 minutos anterior a um ciclo em PFA-100. O protocolo dos fabrican-tes foi seguido para o PFA-100 usando cartuchos de colágeno/epinefrina(0,5% DMSO sozinho em sangue total deu tempos de conclusão de 125 +/-13,9 segundos). Tempo de conclusão máximo é de 300 segundos, comodeterminado pelo fabricante.

Os resultados são mostrados na figura 1. O composto C ou ocomposto de exemplo 14 ou exemplo 25 foi deixado incubar com sanguehumano total antes de um teste de desafio em PFA-100. Todos os compos-tos foram eficazes no teste de função de plaqueta. Em uma concentração de1,25 ng/ml, o composto C e o composto de exemplo 14 levaram a um tempode conclusão aumentado, enquanto o composto de exemplo 25 foi eficaz emconcentrações tão baixas como de 0,3 |ig/ml. Estes dados mostram que es-tes três compostos inibem a agregação de plaquetas em sangue humano, invitro.Modelo induzido por FeCla de trombose arterial

Duas horas antes da indução de injúria vascular, ratos cruzadosSprague Dawley (80-100 grama de peso do corpo) receberam ácido 4-(3-{5-cloro-1 -(difenilmetil) -2-[2-({[2-flúor-6-(trifluorometil) benzil] sulfonil} amina)etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzóico (exemplo 14) ou ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(trifluorometóxi) benzil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzóico (exemplo 25) em uma dose de 25 mg/kg por sonda oral.

O volume total de sonda foi de 0,5 ml. O grupo de controle de animais foitratado com apenas veículo. Quinze minutos antes do dano vascular, os ra-tos foram anestesiados por uma injeção intramuscular de uma mistura decetamina/xilazina. Após anestesia a artéria carótida esquerda foi dissecada eexposta para outras medidas. Para indução de injúria protrombótica, um pe-daço redondo de filtro de papel (2 mm em diâmetro) embebido em 10% desolução de FeCI3 foi aplicado sobre a parede do vaso exposto. Após 5 minu-tos o filtro de papel foi removido e a sonda de fluxo 1PRB perivasular Dop-pler (Transonic Systems Inc.) foi fixada em torno da artéria carótida paramedir o fluxo de sangue. O fluxo de sangue foi registrado durante um perío-do total de 30 minutos usando medidor de fluxo íransônico (modeio TS420,Transonic Systems Inc.) e software de aquisição de dados Windaq.

Os resultados, mostrados na figura 2, mostram que ambos oscompostos são eficazes no modelo de trombose de cloreto de férrico de ratoquando dosado oralmente a 25 mg/kg.

Níveis de B? tromboxano em ratos com trombose induzida por FeClg trombose

O sangue foi coletado de ratos que foram dosados com veículo,o composto de exemplo 14 ou o composto de exemplo 25, e submetidos aoprotocolo de dano por cloreto férrico acima. O sangue foi coletado da venacava e coagulação de sangue foi deixada ocorrer durante 1 hora a 37 grausCelsius. O soro foi então isolado e níveis de B2 de tromboxano de soro fo-ram determinados por ELISA.

Os resultados são mostrados na figura 3. Estes dados mostramque ambos os compostos forneceram uma redução em níveis séricos de B2tromboxano.

Efeito de inibidor de cPLA? em um modelo animal de esclerose múltipla.

0 efeito de administração de um inibidor de CPLA2 ern um mode-lo animal de esclerose múltipla foi determinado pelo seguinte procedimento.

Seis grupos de camundongos B6 foram imunizados comMOG/CFA e injetados com toxina de coqueluche para induzir encefalomieliteautoimune experimental (EAE), um modelo animal de esclerose múltipla.Três grupos de camundongos foram tratados com veículo, ácido 4-{3-[1-benzhidril-5-cloro-2-(2-{[(2,6-dimetilbenzil) sulfonil] amina} etil) -1 H-indol-3-il]propil} benzóico (composto A), ou ácido 4-{2-[1-benzhidril-5-cloro-2-(2-{[(3,4-diçlorobenzil) sulfonil] amina} -etil) -1 H-indol-3-il] etóxi} benzóico (compostoB) do dia de imunização (oralmente, 100 mg/kg, duas vezes/dia). Outros três- grupos de camundpngos foram tratados com veículo, o composto A ou ocomposto B partindo no dia de início com EAE (dia 15) (oralmente, 100mg/kg, duas vezes/dia). Neste dia, acima de 20% dos animais mostraram osprimeiros sinais clínicos de EAE e o tratamento começou em todos os ani-mais nestes grupos. Os resultados são mostrados na tabela abaixo, em queo escore clínico médio é um meio de avaliação clínica de cada animal paraeste dia particular. Os animais são classificados como a seguir:

0 - sinais não clínicos de EAE (sem paralisia)

1 - paralisia de cauda

2 - paralisia de cauda e paralisia da perna traseira parcial

3 - paralisia de cauda e paralisia da perna traseira completa

4 - paralisia de cauda, paralisia da perna traseira completa euma paralisia de perna frontal parcial

5 - animal moribundo (todos quatro membros paralisados, faltade sensibilidade, estes camundongos foram imediatamente submetidos aeutanásia).<table>table see original document page 83</column></row><table>

Além disso, os compostos de exemplos 14 e 25 também foramencontrados como sendo eficazes no modelo de encefalomielite autoimuneexperimental de camundongo (EAE) de esclerose múltipla. Como mostrado5 pelos dados na tabela abaixo, estes compostos levaram a um início retarda-do de doença e severidade reduzida de doença quando administrado oral-mente em doses tão baixas como 2,5 mg/kg.

<table>table see original document page 83</column></row><table><table>table see original document page 84</column></row><table>

Estes resultados mostram que o tratamento de camundongos

com inibidores de cPLA2 de exemplos 14, 25, o composto A e o composto Bpodem evitar EAE quando administrados deste o momento de imunização ereduzir a severidade clínica de EAE em camundongos que já desenvolveramEAE ou estão próximos de desenvolver sinais clínicos desta doença.

Efeito de inibidor de cPLA? em aterosclerose

O efeito de administração de um inibidor de CPLA2 no modelo decamundongo de nocaute de apolipoproteína E (ApoE) de aterosclerose foideterminado pelo seguinte procedimento.

Modelo de camundongo ApoE KO

O camundongo de nocaute de apolipoproteína E (ApoE) foi cria-do por marcação de genes em células-tronco embriônicas para romper ogene ApoE. ApoE é uma glicoproteína que é responsável pela absorção dechilomícrons e partículas VLDL pelo fígado, assim prevenindo o acúmulo deresíduos ricos em colesterol na corrente sangüínea. Como um resultado dainativação homozigótica do gene ApoE, camundongos ApoE KO exibem ní-veis elevados de colesterol, que, por sua vez, induz a formação de placasateroescleróticas em áreas de singularidades ao longo da árvore arterial,especificamente no seio aórtico onde perturbações hemodinâmicas elevadasprevalecem e nos sítios de ramificação ao longo da aorta.cPLAp em aterosclerose

Fosfolipase A2 citosólica (cPLA2) preferencialmente media a li-beração de ácido araquidonico quando da ativação de célula. Metabólitos deácido araquidonico, os eicosanóides, são reconhecidos como moduladoresimportantes de processos inflamatórios. A biossíntese diminuída de eicosa-nóides pró-inflamatórios foi mostrada como inibindo a progressão da lesãoaterosclerótica em humanos e camundongos, assim sugerindo um papel po-tencial de cPLA2 em1 aterosclerose (ver Ranke et al., Circulation 1993; 87(6)1873 - 1879; Paul et al., Life Sciences 2000; 68(4): 457 - 465; Cyrus et al.,Circulation 2002; 106(10) 1282 - 1287; Pratico et al., PNAS 2001; 98(6):3358 - 3363; Burleigh et al., Circulation 2002; 105(15): 1816 - 1823; Cayatteet al., ATVB 2000;,20(7): 1724 - 1728; Aiello et al., ATVB 2002; 22(3): 443 -449; Subbanagounder et al., Circ. Res. 1999; 85(4): 311 - 318). Além disso,a expressão cPLA2 foi detectada em artérias ateroscleróticas humanas masnão em artérias humanas saudáveis normais, ver Scháfer Elinder et al.,ATVB 1997; 17(10): 2257 - 2263).

Efeito de um inibidor de cPLA? em aterosclerose em camundongos

Camundongos ApoE KO machos de seis semanas de idade fo-ram tratados com ácido 4-{3-[1-benzhidril-5-cloro-2-(2-{[(3,4-diclorobenzil)sulfonil] amina} etil) -1 H-indol-3-il] propil} benzóico (composto C). Os camun-dongos foram alimentados com uma dieta de ração normal, suplementadacom composto C a 1,3 mg/g e 3,3 mg/g (resultando em -250 ng/mL e -500ng/mL exposição máxima ao fármaco, respectivamente) ou veículo durante20 semanas. Níveis B2 de tromboxano de soro foram significantemente au-mentados após 9 e 20 semanas de tratamento quando comparados paraanimais de controle, como mostrado na tabela abaixo:

Níveis B2 de tromboxano de soro

<table>table see original document page 85</column></row><table><table>table see original document page 86</column></row><table>

Além disso, a carga de placas ateroscleróticas no seio aórtico foidiminuída por 32,7% (349582±132685 vs 519220±100694 |im2, p<0,05) e45,6% (282697±146462 vs 519220±100694 ^im2, p<0,001) em animais queforam administrados com o composto a 1,3mg/g e 3,3mg/g, respectivamen-te, quando comparado para animais de controle. Além disso, como mostradona tabela abaixo, a redução na área de lesão percentual ao longo da aortanão foi significante (ns), demonstrando o papel deste inibidor de cPLA2 paraafetar a doença especificamente em regiões de distúrbios hemodinâmicosmaiores.

Lesões ateroscleróticas ao longo da aorta

<table>table see original document page 86</column></row><table>

Como mostrado na tabela abaixo, a complexidade da lesão ate-rosclerótica foi reduzida em animais tratados com composto C quando com-parados com animais de controle, como atestado por freqüência aumentadade lesões de estágio prematuro e freqüência diminuída de lesões de estadoavançado no seio aórtico. A tabela mostra a porcentagem de animais totaiscom Estágio 1 (lesão fibrograxa), Estágio 2 (placa fibrosa prematura), Está-gio 3 (placa fibrosa avançada), Estágio 4 (lesão complicada estável), e Está-gio 5 (lesão complicada instável) para animais dosados com veículo, com-posto C a 1,3 mg/g e composto C a 3,3 mg/g.

Complexidade da lesão aterosclerótica

<table>table see original document page 86</column></row><table>Níveis de B? tromboxano no modelo de camundonqo ApoE KO de aterosclerose

Camundongos ApoE KO foram alimentados com uma dieta deração normal suplementada com o composto C ou o composto de exemplo10 a 3,3 mg/g ou veículo durante dois dias. O sangue foi coletado através doseio retro-orbital e deixado coagular a 37° C durante uma hora. Soro foi en-tão isolado e testado para tromboxano B2 por ELISA. As concentrações detromboxano (ng/mL) foram encontradas como sendo: veículo: 76,1 ±17,3;composto C (3,3 mg/g): 33,5±11,6; composto de exemplo 10: (3,3 mg/g): 1,4±0,7.

Em um experimento separado, camundongos ApoE KO foramdosados com veículo ou o composto de exemplo 25 a 10 mg/kg por sondaoral. O sangue foi coletado através do seio retro-orbital e deixado coagular a37° C durante uma hora. Soro foi então isolado e testado para tromboxanoB2 por ELISA. As concentrações de tromboxano (ng/mL) foram encontradascomo sendo: Veículo: 267,9±34,3; composto de exemplo 25: 9,4±5,0.Efeito de inibidor de cPLA? em modelos de acidente vascular cerebral

O efeito de administração de um inibidor de cPLA2 em modeiospara acidente vascular cerebral foi determinado pelos seguintes procedimentos.

Culturas de neurônios qranulares cerebelares

Os neurônios granulares cerebelares primários foram isoladosde filhotes de ratos P5-8. Brevemente, os cerebelos foram coletados e reu-nidos em solução salina tamponada com fosfato resfriada com gelo (PBS)sem Ca2+ e Mg2+. O tecido foi finamente cortado e transferido para um meiode dissociação enzimático contendo 20 lU/ml papaína em solução de salequilibrada de Earle's (Worthington Biochemical, Freehold, NJ) e incubadodurante 30 minutos a 37 °C. Após dissociação enzimática, a solução de pa-paína foi aspirada e o tecido mecanicamente triturado com uma pipeta Pas-teur limpa com fogo, em um meio completo [Meio Neurobasal com suple-mento B-27 (Gibco, Grand Island, NY), penicilina/estreptomicina, afidicolina,glutamato, cloreto de potássio] contendo 2.000 lU/ml DNase e 10 mg/ml ini-bidor de protease ovomucóide. As suspensões de células unidas e meiocompleto foram colocadas em placas de 24 cavidades pré-revestidas compoli-L-ornitina/laminina (Becton-Dickinson, Bedford, MA) em uma densidadede 5,0 x 105 células/cavidade. As células foram mantidas durante duas se-manas antes da experiência.

Deprivacão de oxigênio-glucose (OGD) em neurônios cultivados

As culturas foram tratadas com o composto A em várias concen-trações, 60 minutos antes de OGD. Meio foi removido e substituído comtampão desoxigenado em uma câmara anaeróbica (80% nitrogênio, 10%hidrogênio, 10 % de mistura de gás dióxido de carbono). Composto novo A,exemplo 34 ou exemplo 41 foi adicionado às culturas e mantido na câmaraanaeróbica durante 2 horas. No final da incubação, meio novo foi trocado ecomposto A fresco foi adicionado. Culturas foram mantidas durante um adi-cional de 24 horas em um incubador Normoxic. A morte celular foi determi-nada por medida de liberação de desidrogenase de lactato no meio 24 horasdepois (Roche Biochemicals). Na tabela abaixo, valores são mostrados parao controle, OGD, várias concentrações de composto A, e MK801, um anta-gonista receptor de NMDA, que é um controle positivo.

Neuroproteção por inibidores de cPLA2 contra OGD

<table>table see original document page 88</column></row><table><table>table see original document page 89</column></row><table>

Pode-se notar a partir destes dados que a administração decomposto A, o composto de exemplo 34, ou o composto de exemplo 41 foieficaz para proteger os neurônios cultivados com morte celular induzida comOGD Em concentrações tão baixas como 0,1 |iM, a redução estatisticamentesignificante na morte celular percentual foi como observada para estes com-postos,

Efeito de inibidor de cPLA2 em modelos de mal de ParkinsonO efeito^ de administração de um inibidor de CPLA2 em um mode-lo para mal de Parkinson foi determinado pelos seguintes procedimentos.

Culturas de neurônios dopaminérgicos

Os neurônios dopaminérgicos primários foram isolados de em-briões de ratos de E15 como descrito em Pong K., et al., (1997) J. Neuro-chem. 69 986-994. Brevemente, o mesencéfalo ventral foi isolado e o tecidofoi reunido em solução salina tamponada com fosfato resfriada com gelo(PBS) sem Ca2+ e Mg2+. O tecido foi transferido para um meio de dissocia-ção enzimático contendo 20 lU/ml papaína em solução de sal equilibrada deEarle (Worthington Biochemical, Freehold, NJ) e incubado durante 30 minu-tos a 37°C. Após dissociação enzimática, a solução de papaína foi aspiradae o tecido mecanicamente triturado com uma pipeta Pasteur limpa com fogo em meio completo. [Meio Neurobasal com suplemento B-27 (Gibco, GrandIsland, NY), penicilina/estreptomicina, afidicolina, glutamato] contendo 2,000lU/ml DNase e 10 mg/ml inibidor de protease ovomucóide. As suspensõesde células únicas em meio completo foram colocadas em placas de 24 cavi-dades pré-revestidas com poli-L-ornitina/laminina (Becton-Dickinson, Bed-ford, MA) em uma densidade de 5,0 x 105 células/cavidade. As células forammantidas durante uma semana antes da experiência.

Exposição a MPP* em neurônios dopaminérgicos

Culturas foram tratadas com várias concentrações de compostoA, Composto B, Composto C e GDNF (fator neurotrófico derivado de linha-gem celular glial, um controle positivo) horas antes da exposição a neuroto-xina MPP+, o métabolito tóxico de MPTP. As culturas foram expostas a 10u.M MPP+ durante 60 minutos. Após a exposição, meio novo foi trocado e ocomposto fresco foi adicionado. A viabilidade de neurônios dopaminérgicosfoi determinada 24 horas após a medida de absorção de 3 h-dopamina comodescrito em Pong et al., 1997, supra. Os resultados são mostrados na tabelaabaixo:

Neuroprotectina por inibidores de cPLA2 contra MPP+

<table>table see original document page 90</column></row><table>

Pode-se notar a partir destes dados que a administração destescompostos foi eficaz para proteger a viabilidade de neurônios dopaminérgi-cos contra MPP+.

Efeitos de inibidor de cPLA? em modelos de osteoartrite, artrite reumatóide e dor

Estudos de farmacologia in vivo usando o composto de exemplo10 foram conduzidos para demonstrar a eficácia de administração oral emmodelos de inflamação e dor periférica incluindo o modelo de edema da patapor carrageenano (ver Winter, C.A., et al., Proc Soe Exp Biol Med 1962; 111:544 - 547), o modelo de artrite induzida por colágeno (ver Trentham, D.E., etal., J Exp. Med 146; 828 - 833), e o modelo de hiperalgesia induzido por ad-juvante completo de Freund (CFA)- (ver Stein C, et al., Pharmacology Bio-chemistry & Behavior, 1988; 31: 445 - 451). A inibição in vivo de prostaglan-dinas e leucotrienos foi também medida nas partas desafiadas com CFA nomodelo de hiperalgesia.

Teste de edema da pata por carraqeenano

O teste de edema da pata por carrageenano é um modelo agudode inflamação que é particularmente utilizável para a avaliação ín vivo doscompostos que afetam a produção de prostaglandinas. Em particular,NSAIDs inibem o edema em um modo de resposta a dose característiconeste modelo, e a atividade de NSAIDs neste modelo está bem correlacio-nado com a atividade biológica observada em homens (ver Mukherjee A, etal., Inflamm Res. 1996; 45: 531 - 540). Assim, o composto de exemplo 10 foitestado no modelo de edema da pata por carrageenano. Neste modelo, ocomposto foi administrado oralmente 2 horas antes da injeção sub-plantar decarrageenano e a inibição do intumescimento da pata, como determinadonas próximas três horas. O edema da pata foi estatisticamente significante-mente diminuído em doses tão baixas como 3 mg/kg e um ED50 aproximado(com base em uma inibição máxima de 50%) foi determinado como sendode 7,5 mg/kg.

Estes dados demonstram que o composto de exemplo 10 traba-lha em um modelo clássico de inflamação in vivo que foi usado para prever aeficácia de ambos os inibidores NSAIDs e COX-2.

Efeito de composto de exemplo 10 no modelo de artrite induzida por coláqe-no

O composto de exemplo 10 foi testado no modelo de camun-dongo CIA, artrite reumatóide (ver Trentham, D.E., et al., supra). Artrite foiinduzida em camundongos DBA/1 LacJ por injeção intradérmica de uma e-mulsão de colágeno bovino tipo II e CFA seguido por um reforço com umainjeção intradérmica de colágeno bovino tipo II emulsificado em adjuvanteincompleto de Freund's 21 dias após a imunização inicial. A eficácia do com-posto foi avaliada em um regime de dosagem semi- terapêutica que foi inici-ado quando 10% de os animais mostraram sintomas de doença. Neste pon-to, os animais foram aleatoriamente designados a grupos detecção e admi-nistrados com o composto de exemplo 10 (100 mg/kg) PO BID durante 28dias. Os grupos de controle receberam celecoxib, veículo apenas ou foramdeixados não tratados. Todos os animais foram classificados diariamente emum modo cego para sinais visuais de sintomas da doença.

Os escores médios do grupo tratado com o composto de exem-plo 10 foram comparados os valores do grupo de controle de veículo usandoo teste t de Studenfs. Durante o tratamento começando no dia 10, o grupotratado com o composto de exemplo 10 (100 mg/kg BID) mostrou uma dimi-nuição estatisticamente significante nos escores de severidade da doençaem todas as experiências; e o número de animais sem sintomas da doençafoi maior nos grupos que foram tratados com o composto de exemplo 10.

Após completar as experiências, as patas foram processadaspara histologia. Dois patologistas veterinários certificados avaliaram as lâmi-nas em um modo cego. Cada pata recebeu um escore numérico para a se-veridade da artrite e o número geral de juntas afetadas. Os camundongostratados com o composto de exemplo 10 (100 mg/kg BID) tinham os escoresde severidade média do grupo menores e a maior porcentagem de patasnão afetadas (tipo 0). Os camundongos tratados com veículo e não tratadostinham os maiores escores de severidade média do grupo e a maior porcen-tagem combinada de patas afetadas de grau 3 e grau 4. Os camundongostratados com o composto de exemplo 10 (100 mg/kg) tinham um grau deseveridade médio de 0,9/2,1 (patologista 1/patologista 2) enquanto os ani-mais tratados com veículo tinham um escore de severidade médio de2,1/3,0. Resultados similares foram vistos na experiência adicional a 100mg/kg.

Efeito de composto de exemplo 10 modelos de hiperalqesia de ratos

A sensitividade de neurônios sensoriais periféricos pode ser me-lhorada de modo que eles respondam a estímulos tanto nocivos como nãonocivos resultando em dor crônica (ver Julius, D. et al., Nature. 2001;413:203; Woolf, C. J., et al., Science. 200; 288:1765).

Prostaglandinas e leucotrienos no sítio de inflamação e dano aotecido são parcialmente responsáveis por esta potenciação da resposta dedor. Prostaglandinas promovem a fosforilação de canais iônicos, aumentan-do a excitabilidade e abaixando o limiar de dor de neurônios sensoriais. Ana-logamente, leucotrieno B4 e metabólitos de araquidonato relacionados de 12-LO ligam a e ativam o canal iônico do receptor de capsaicina (ou VR-i) emneurônios que respondem a calor e baixo pH (ver Piomelli D., TRENDS inPharmacological Sciences, Jan. 2001; 22(1): 17 - 29). O efeito do compostode exemplo 10 foi medido em um modelo de hiperalgesia induzida por CFA,e produção de mediador de lipídeos em sítios periféricos e centrais.

Os animais foram dosados com Veículo, o composto de exemplo10, naproxeno ou celecoxib, e então CFA foi imediatamente injetado na al-mofada da pata traseira. Para avaliar a hiperalgesia, pressão foi aplicada napata traseira esquerda em uma taxa lenta e constante usando um calibre deforça digital. As medidas foram tomadas em 0 e 6 horas. A aplicação da for-ça foi parada quando o animal emitiu sons ou se debateu. As leituras foramtomadas antes da dosagem e injeção de CFA, e repetidas seis horas após ainjeção de CFA. Duas experiências independentes foram realizadas e osdados analisados em separado. O composto de exemplo 10 pareceu proveruma diminuição estatisticamente significante em dor comparado ao grupo decontrole de veículo a 25 mg/kg.

As patas foram coletadas no final de cada experimento (6 horas)e os níveis de PGE2, LTB4 e TXB2 foram medidos nos exudatos. Níveis dePGE2 na pata foram significantemente inibidos pelo composto de exemplo10 (a 25 mg/kg) e pelos controle de celecoxib e naproxeno. Níveis de TXB2também foram significantemente inibidos por celecoxib, no entanto, a inibi-ção com o composto de exemplo 10 e naproxeno foi maior que a inibiçãocom celecoxib, sugerindo um componente dependente de COX-1 para a sín-tese. Como esperado, os níveis de LTB4 foram significantemente inibidospelo composto de exemplo 10, mas não se teve evidência de desvio desubstrato para a via de 5-lipoxigenase, como os níveis realmente aumenta-ram com naproxeno e celecoxib.

Em resumo, o composto de exemplo 10 foi ativo em modelos deosteoartrite, artrite reumatóide e dor. O composto significantemente inibiuedema a uma dose de 3 mg/kg e foi a 50% do efeito máximo a ~ 7,5 mg/kgno modelo de edema de pata de carrageenano. O tratamento diário com ocomposto de exemplo 10 (100 mg/kg BID) durante 28 dias produziu umaredução significante de doença no modelo de artrite induzido por colágeno,semi- terapêutico, com base tanto em avaliação clínica e histológica. O com-posto também foi eficaz a 25 mg/kg no modelo CFA de hiperalgesia.

O composto de exemplo 10 também foi eficaz na inibição daprodução de ambos prostaglandinas e leucotrienos usando modelos in vivo.

A produção de PGE2 dependente de COX-2, Tromboxano dependente deCOX-1 e leucotrieno B4 dependente de 5-LO foi inibida em patas desafiadascom CFA.

Efeito de composto de exemplo 10 modelos de roedores e ovelhas de asmaAsma foi definida como um distúrbio inflamatório crônico dasviárias aéreas em que muitas células e elementos celulares desempenhamum papel. Em indivíduos suscetíveis, esta inflamação causa episódios recor-rentes ou persistentes de respiração ofegante, falta de dar, dor no peito etosse, particularmente na noite ou na madrugada. Estes episódios são ge-ralmente associados com obstrução do fluxo de ar difundida mas variávelque, com freqüência, se resolve espontaneamente ou com tratamento. Ainflamação pode provocar um aumento associado na hiperresponsividadebronquial existente a uma variedade de estímulos. Os modelos pré-clínicosde asma tem provido uma compreensão clara sobre os mecanismos subja-centes de patologia da doença e tem sido instrumental para o desenvolvi-mento da terapêutica para asma. Particularmente, os modelos de roedoresde inflamação pulmonar induzida por alergênios são utilizáveis para a avali-ação in vivo de compostos que inibem a inflamação associada com asmaalergia e tem sido usados extensivamente para avaliar a eficácia de gluco-corticóides, antagonistas de receptor de leucotrieno, inibidores de 5-LO , einibidores de fosfodiesterase 4 (ver Kumar, R. K. et al, J Pharmacol ExpTher. 2003; 307: 349 - 355; Wu, A. Y. et al. Clin Exp Allergy. 2003; 33: 359 -366; Bell, R. L. et al., J Pharmacol Exp Ther 1997; 280: 1366 - 1373; e Hen-derson, W. R., Jr., et al., J Exp Med. 1996; 184: 1483 -1494).

O composto de exemplo 10 foi testado em modelos tanto de ra-tos como camundongos de inflamação pulmonar induzida por alergênios.

Além dos modelos de inflamação pulmonar induzida por alergê-nios, mudanças induzidas por alergênios na função do pulmão são com fre-qüência avaliados em ovelhas alérgicas. Ovelhas sensibilizadas com Ascarisque são desafiadas 'através das vias aéreas com antígeno de Ascaris suumdemonstraram aspectos de estreitamento da via aérea reversível e AHR. Osestudos realizados neste modelo de animal apresentam uma forte evidênciade que a liberação de metabólitos de ácido araquidônico desempenham umpapel importante no desenvolvimento de respostas bronquiais tardias ao de-safio com antígenos (ver Abraham, W. M., et al, Respiration. 1989; 56: 48 -56). Assim, o composto de exemplo 10 foi avaliado para efeitos em mudan-ças induzidas por alergênios em função de pulmão em um modelo de ovelhade asma.

Modelo de inflamação pulmonar induzida por antígeno de rato

A eficácia do composto de exemplo 10 foi avaliada em um mo-delo de rato Brown Norway em que animais sensibilizados com ovalbumina(OVA)- foram desafiados através das vias aéreas com um aerossol de oval-bumina (OVA) em dias 1 e 2. Ratos sensibilizados com OVA foram desafia-dos via aerossol no dia 1 e dia 2. O composto de exemplo 10 foi administra-do a 30 mg/kg PO BID 1 hora antes do desafio e 10 horas Após desafio du-rante o período de desafio de 2 dias, Dexametasona foi administrada a 3mg/kg IP 1 hora antes do desafio no dia 1 e dia 2. Animais foram sacrifica-dos no dia 3 e as cavidades broncoalveolares lavadas para análise de influ-xo celular. A administração oral de BID A a 30 mg/kg durante o período dedesafio de 2 dias inibiu de modo estatisticamente significante o influxo deeosinófilos no fluido de lavagem broncoalveolar (BALF) em 8 dentre os 8estudos independentes. O composto de exemplo 10 também atenuou demodo estatisticamente significante os números totais de células inflamatóriasdentro do BALF na dose testada mas não teve um efeito significante sobre oinfluxo de linfócitos ou neutrófilos neste modelo.

Efeito de composto de exemplo 10 em um modelo de ovelhas de bronco-constrição de fase prematura e fase tardia induzida por antíqeno e AHR

O estreitamento das vias aéreas reversível induzido por alergê-nios e AHR foram dois aspectos marcantes de asma alérgica que podem serexaminados in vivo em um modelo de ovelha de asma. Estudos realizadosneste modelo de animal apresentam forte evidência de que a liberação demetabólitos de ácido araquidônico desempenham um papel importante odesenvolvimento de respostas bronquiais tardias ao desafio com antígeno.(ver Abraham, W. M., et al., Respiration. 1989; 56: 48 - 56). A liberação deleucotrienos através da via LO durante a constrição bronquial aguda apósinalação de antígenp de Ascaris suum representa o fator chave para a inicia-ção dos subseqüentes, ou seja a resposta de fase tardia e a hiperreatividadebronquial. O inibidor de 5-LO zileuton bloqueia as respostas das vias aéreastardias induzidas por antígenos, inflamação, e AHR neste modelo, enquantouma infusão contínua de IV do antagonista seletivo de receptor de LTD4,montelukast, atenua tanto as respostas asmáticas de fase tardia como pre-matura (ver Abraham, W. M., et al., Eur J Pharmacol 1992; 217: 119 - 126;

Jones, T. R. et al., Can J Physiol Pharmacol. 1995; 73: 191 - 201). Além dis-so, a administração oral de um inibidor dual LTD4/TXB2 pode inibir tanto aresposta de fase prematura como tardia, assim como AHR para carbacol eHistamina (ver Abraham, W. M., et al., J Pharmacol Exp Ther. 1988; 247:1004 - 1011). PAF também foi implicado na resposta de fase tardia nestemodelo provendo outro apoio para o conceito de que um bloqueio maiscompleto dos mediadores de lipídeos por um antagonista de cPLA2a podeprover uma eficácia clínica melhor comparado com os anti-leucotrienos cor-rentes (ver Abraham, W. M., et al., J Appl Physiol. 1989; 66: 2351 - 2357).

O composto de exemplo 10 foi administrado a 3 mg/kg BID (PO)24 h antes do desafio, 2 h antes do desafio e 8 h após o desafio. O aumento% médio na resistência das vias aéreas para 3 ovelhas individuais sobre operíodo de 8 h seguinte foi determinado. Bloqueio completo da resposta as-mática tardia foi observado.

No dia seguinte, a hiperresponsividade (AHR) das vias áreas foiavaliada na mesma ovelha tratada por determinação da concentração cumu-lativa de carbacol que aumenta a resistência específica do pulmão em400%. O tratamento com o composto de exemplo 10 resultou em um com-pleto bloqueio da hiperresponsividade das vias aéreas. Em um regime dedosagem prolongado, o composto de exemplo 10 foi administrado a 3 mg/kgPO BID durante 4 dias antes do desafio, 2 horas antes do desafio no quintodia e 8 h após o desafio.

O aumento % médio na resistência das vias aéreas para 5 ove-lhas individuais durante o período de 8 h seguinte foi determinado, e, nesteregime de dosagem mais prolongado, se nota uma inibição modesta, masestatisticamente significante da resposta asmática prematura além de umbloqueio completo da resposta de fase tardia e um bloqueio completo deAHR para carbacol aerossolizado.

Os dados acima mostram que o composto de exemplo 10 é uminibidor potente de inflamação pulmonar induzida por alergênios, bronco-constrição e AHR em modelos animais de asma.

Os compostos da invenção inibem a atividade de cPLA2 que érequerida para o suprimento do substrato de ácido araquidônico para cicloo-xigenase-1 ou 2 e 5-lipoxigenase, que por sua vez iniciam a produção deprostaglandinas e leucotrienos respectivamente. Além disso, a atividade decPLA2 é essencial para a produção de liso - fosfolipídeo que é o precursorpara PAF. Assim, estes compostos são utilizáveis no tratamento e preven-ção de estados de doença em que leucotrienos, prostaglandinas ou PAFestão envolvidos. Além disso, em doenças onde mais do que um destes a-gentes desempenha um papel, um inibidor de cPLA2 deve ser esperado co-mo sendo mais eficaz do que leucotrieno, prostaglandina ou antagonistas dereceptor de PAF e também mais eficazes do que os inibidores de ciclooxige-nase ou 5-lipoxigenase.

Assim, os compostos, composições farmacêuticas e regimes dapresente invenção são utilizáveis no tratamento e prevenção de distúrbiostratados por inibidores de ciclooxigenase-2, cicloxigenase-1, e 5-lipoxigenase e também antagonistas dos receptores para PAF, leucotrienosou prostaglandinas. Doenças tratáveis pelos compostos desta invenção in-cluem mas não são limitados a: distúrbios pulmonares incluindo doençascomo asma, bronquite crônica, e doenças das vias aéreas obstrutivas rela-cionadas; alergias e reações alérgicas, como rinite alérgica, dermatite decontato, conjuntivite alérgica, e outros; inflamação como artrite ou doençasde intestino inflamatórias, distúrbios da pele como psoríase, eczema atópico,acne, dano de UV, queimaduras e dermatite; distúrbios cardiovascularescomo aterosclerose, angina, isquemia do miocárdio, hipertensão, agregaçãode plaquetas, e outros; e insuficiência renal induzida por imunologia ou pro-dutos químicos. Os fármacos também podem ser crio-protetores, evitandodano à mucosa gastrointestinal por agentes nocivos. Os compostos tambémserão utilizáveis no tratamento de síndrome da falta de ar do adulto, choquede endotoxina e dano induzido por isquemia incluindo dano do miocárdio oucérebro.

O métodos de tratamento, inibição, alívio ou mitigação de asmadesta invenção incluem os para asma extrínseca (também conhecida comoAsma alérgica ou Asma apótica), Asma intrínseca (também conhecido comonão Asma alérgica ou asma não atópica) ou suas combinações, que temsido referidas como asma mista. Os métodos para os experimentando ousujeitos a asma extrínseca ou alérgica incluem incidentes causados ou as-sociados com muitos alergênios como pólens, esporos, gramas ou ervasdaninhas, pêlos de animais domésticos, poeira, ácaros, etc. Como os aler-gênios e outros agentes irritantes estão presentes em variados pontos du-rante o ano, estes tipos de incidentes são também referidos como asma sa-zonal. Também estão incluídas no grupo de asmas extrínsecas as asmasbrônquicas e aspergilose broncopulmonar alérgica.

Asmas intrínsecas que podem ser tratadas ou aliviadas pelospresentes métodos incluem as causadas por agentes infecciosos, como ví-rus de resfriado e gripes em adultos e vírus sincicial respiratório (RSV), rhi-novírus e vírus de influenza comuns em crianças. Também estão incluídasas condições de asma que podem ser ocasionadas em alguns asmáticos porexercícios e/ou ar frio. Os métodos são utilizáveis para asmas intrínsecasassociadas exposições ocupacionais e industriais, como fumaça, ozônio,gases nocivos, dióxido de enxofre, oxido nitroso, fumaças, incluindo isocia-natos, de tintas, plásticos, poliuretanos, vernizes, etc, madeira, planta e ou-tras poeiras orgânicas, etc. Os métodos são também utilizáveis para inciden-tes asmáticos associados com aditivos alimentícios, conservantes e agentesfarmacológicos. Os materiais comuns para estes tipos são colorantes ali-mentícios como Tárirazina conservantes como bissulfitos e metabissulfitos eagentes farmacológicos como aspirina e agentes antiinflamatórios não este-roidais (NSAIDs). Também estão incluídos os métodos para o tratamento,inibição ou alívio dos tipos de asma referidos como asma silente ou asmavariante com tosse,i;

Um outro método de tratamento de asma desta invenção com-preende a administração a um mamífero em necessidade deste tratamentouma quantidade farmaceuticamente eficaz de um composto desta invenção,como descrito acima, e uma quantidade farmaceuticamente eficaz de um oumais agentes antiasma adicionais.

Os agentes antiasma utilizáveis com estas combinações incluemmedicamentos de controle a longo prazo, como corticosteroides (glucocorti-cóides), cromolina .sódica (cromoglicato de dissódio- DSCG), nedocromil,metilxantinas (como teofilina) e modificadores de leucotrieno. Os modificado-res de leucotrieno incluem antagonistas de receptor de leucotrieno, comozafirlukast (ACCOLATE®) e monetlukast (SINGULAIR®), e inibidores de 5-lipoxigenase, como zileuton (ZYFLO®). Corticosteroides utilizáveis incluemprodutos inalados, como dipropionato de beclometasona, Budesonida, Fluni-solida, Fluticasona, e Triamcinolona, assim como as formas de sal farmaceu-ticamente aceitável dos mesmos. Também são utilizáveis os corticosteroidessistêmicos como prednisona, prednisolona e Metilprednisolona.

Também são utilizáveis como medicações antiasma de alíviorápido, como beta2-agonistas de ação longa, beta2-agonistas de ação curta,anticolinérgicos e corticosteroides sistêmicos. Os agentes p-Adrenérgicosque podem ser usados incluem epinefrina, isoproterenol, metaproterenol,terbutalina, isoetarina, albuterol, bitolterol e perbuterol. Os agentes anticoli-nérgicos utilizáveis incluem atropina (e seu derivado brometo de ipatrópio) eglicopirrolato. Os compostos desta invenção também podem ser usados pa-ra tratar asma em conjunto com imunoterapias para alergia, que também sãoreferidas na técnica como terapias de hipossensibilização. Estes compostospodem ser administrados de acordo com as dosagens e regimes bem-conhecidos na técnica.

Os agentes antiasma adicionais que podem ser usados nascombinações desta invenção incluem pranlukast, anakinra, seratrodast, clo-ridrato de olopatadina, cromoglicato lisetil, ramatroban, receptor de interleu-cina-4 (Immunex), urodilatina, daropato de colforsin, salbutamol, LCB-2183,andolast, ciclesonídeo, budesonídeo, formoterol, omalizumab, tranilast, sa-redutant, CDP-835, (anti-IL-5 Mab), fexofenadina HCI, dicloridrato de N-(1-(clorofenil)-l -metiletil) -3-(imidazol-1-il) propilamina (BTS-71-321), cilomilast,bimosiamose, fator de liberação de corticotropina , clenoliximab, brometo detiotrópio, 2H-1,2-benzo selenazina, 3,4-dihidro-4,4-dimetil (BXT-51072), atre-leuton, (R)-salbutamol, 8-metoxiquinolina-5-(N-(2,5-dicloropiridin-3-il)) carbo-xamida (D-4418), triamcinolona acetonídeo, KW-4490 (KF-19514), LAX-300(LX-109), IDEC-152 (ST-152; anticorpo anti-CD23), citocina Traps, ananda-mida, SRL-172, salmeterol + Fluticasona, KCA-757, ácido 2-piridinacarboxílico, 6-(2-(3,4-dietóxifenil)-4-tiazolil)- (OPC-6535), PM-56D9,salbutamol, CT-2820 (inibidores de PDEIV), beclometasona, nepadutant,fumarato de cetotifeno, DHEAS (PB-005), Pharmaprojects número 5163, Ne5278 e Ns 5297, sulfato de salbutamol, EPI-2010 (EpiGenRx), mepolizumab,benzamida, N-(5-(3-((4-clorofenil) sulfonil) propil) -2-(1H-tetrazol-5-ilmetóxi)fenil)-3-((4-(1,1 -dimetiletil) -2-tiazolil) metóxi) -, sal monossódico (YM-158), 2-(4-etoxicarbonilaminobenzil)-6-(3,4-dimetoxifenil)-2,3,4,5-tetrahidro-piridazin-3-ona Pharmaprojects (No.5450), Sch-205528, L-826141 (Pharmaprojectsnúmero 5477), budesonídeo, duramicinas, sal de sódio de ácido 4,4-bis(4-(quinolin-2-ilmetóxi) fenil) pentanóico (VML-530), inibidor de IL-9, dipropiona-to de beclometasona, formoterol, ciclo(MePhe-Leu-Asp-Val-D-Arg-D-Arg)(ZD-7349), salbutamol, etanaminío ,2-(((2-acetil-4-((1-oxohexadecil) amina)fenóxi) hidroxifosfinil) óxi) -N, N, N-trimetil-, sal interno (CPR-2015), PD-168787 (CI-1018), inibidores de catepsina S, SB-240683 (anti-IL-4 Mab),BIIL-284, APC-2059, budesonídeo + formoterol, Bay-16-9996 (antagonistaIL-4), beclometasona, GW-328267, antagonistas de VLA-4, 4-hidróxi-1-metil-3-octilóxi-7-sinapinoilamino-2(1H)-quinolinona (TA-270), CpG-7909 (ProMu-ne), DNK-333A (Pharmaprojects N9 6070), AWD-12-281, LM-1507 (LM-1484), formoterol, MOL-6131, inibidores de catepsina S, CS-615, ibudilast,ácido 2-{N-(4-(4-clorofenilsulfonilamino) butil)-N-{3-(2-(4-ciclobutiltiazol-2-il)etil) benzil} sulfamoil} benzóico (S-36527), e ácido 2-{N-(4-(4-clorofenilsulfonilamino) butil)-N-{3-((4-isopropiltiazol-2-il) metilóxi) benzil} sul-famoil} benzóico (S-36496).

O métodos aqui são também utilizáveis para o tratamento e alí-vio de asma intrínseca associada com refluxo gastroesofageal (GERD), quepode estimular a broncoconstrição. GERD, junto com secreções corporaisretidas, tosse suprimida, e exposição a alergênios e agentes irritantes noleito podem contribuir para as condições asmáticas que tem sido coletiva-mente referidas como asma da noite ou asma noturna. Em métodos de tra-tamento, inibição ou alívio de asma associada com GERD, uma quantidadefarmaceuticamente eficaz dos compostos desta invenção pode ser usadacomo aqui descrito em combinação com uma quantidade farmaceuticamenteeficaz de um agente para o tratamento de GERD. Estes agentes incluem,mas não são limitados para, agentes inibidores da bomba de prótons comoPROTONIX.RTM. marca de comprimidos de pantoprazol de sódio de libera-ção retardada, PRILOSEC.RTM. marca de cápsulas de omeprazol de libera-ção retardada, ACIPHEX.RTM. comprimidos de Rebeprazol de sódio de libe-ração retardada ou PREVACID.RTM. marca de cápsulas de lansoprazol deliberação retardada.

Os compostos desta invenção podem ser usados como um a-gente antipirético. Os compostos desta invenção podem ser usados em mé-todos de tratamento de dor, particularmente a dor associada com inflama-ção. Os métodos específicos incluem, mas não são limitado aos para o tra-tamento de dor centralmente mediada, dor perifericamente mediada, dormúsculo-esqueletal, dor lombosacral, dor relacionada com dano ao tecidomole ou estrutural, dor relacionada com doença progressiva, como oncologiae distúrbios degenerativos, dor neuropática, que podem incluir tanto dor a-guda, como dano agudo ou trauma, dor pré- e pós-cirúrgica, dor de enxa-queca, dor dental, etc, dores crônicas, como condições de dor neuropática,de neuropatia periférica diabética, neuralgia pós-herpética, e fibromialgia, econdições inflamatorias como osteoartrite ou artrite reumatóide, seqüelas dedanos agudos ou trauma e dor relacionada com câncer.

Os compostos desta invenção podem ser usados para aliviar,inibir, mitigar e/ou tratar distúrbios artríticos em um mamífero incluindo, masnão limitados a artrite reumatóide, espondiloartropatias, artrite de gota, artrite- infecciosa, osteoartrite (que incluem osteoartrite erosiva que é também co-nhecida como osteoartrose ou doença de juntas degenerativa ou DJD), lu-pus eritematoso sistêmico, e artrite juvenil. Cada um destes métodos com-preende a administração a um mamífero em necessidade desta ação umaquantidade farmaceuticamente eficaz de um indol substituído da invenção,como aqui descrito, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou forma de és-ter do mesmo.

Os compostos desta invenção podem ser usados para aliviar,inibir, mitigar e/ou tratar condições artríticas associadas com espondilite, in-cluindo espondilite ànquilosante, artrite reativa (síndrome de Reiter), artritepsoriática, artrite associada com doença de intestino inflamatório crônica eespondiloartropatia soronegativa associada com AIDS.

Esta invenção também prove métodos para o tratamento, alívioou inibição de doença e distúrbios reumáticos. Estes métodos são utilizáveispara o tratamento de lúpus eritematoso sistêmica, esclorose sistêmica eformas de escleroderma, polimiosite, dermatomiosite, vasculite necrotizantee outras vasculopatias, vasculite de hipersensibilidade (incluindo Henoch-Schõnlein púrpura), granulomatose de Wegener, arterite de célula gigante,síndrome de linfonodo mucocutâneo (doença de Kawasaki), síndrome deBehcet,Crioglobulinemia, dermatomiosite juvenil, síndrome de Sjógren,síndromes de sobreposição (incluindo doença de tecido conectivo mista),polimialgia reumática, eritema nodoso, polichondrite de relapso, tendonite(tenosinovite), tendinite bicipital, bursite, bursite de Olecranon, capsulite a-desiva do ombro (ombro congelado), dedo de atirador, e doença de Whipple.

O métodos desta invenção são também utilizáveis para o trata-mento, alívio ou inibição de doenças metabólicas e endócrinas com estadosreumáticos, incluindo gota, pseudogota, condrocalcinose, amiloidose, escor-buto, taxas de deficiência de enzimas específicas (incluindo doença de Fa-bry, alcaptonuria, ochonosisi, síndrome de Lesch-Nyhan, e doença de Gau-cher), hiperlipoproteinemias (tipos II, Ma, IV), síndrome de Ehlers-Danlos,síndrome de Marfan , pseudoxantoma elasticum, doença de Wilson . Tam-bém são tratáveis com os presentes métodos os estados reumáticos associ-ados com doenças endócrinas, como diabetes melito, acromegalia, hiperpa-ratiroidismo, miosite Ossificans progressiva, síndrome de hipermobidade,artrogripose multiplex congênita, e doenças da tiróide como tiroidite, hipoti-roidismo e hipertiroidismo. Estes métodos também podem ser usados paracondições reumáticas associadas com neoplasmas como neoplasmas pri-mários (sinovioma), neoplasmas metastáticos, mieloma múltiplo, leucemia elinfomas, sinovite vilonodular pigmentada, osteocondromatose e outros.

Também estão incluídos nos métodos desta invenção são o alívio das con-dições reumáticas associadas com distúrbios neuropáticos incluindo, juntasde Charcot, síndrome de vibração de arma na mão (também conhecido co-mo fenômeno de Rainaud ou dedo branco induzido por vibração), síndromesde estresse repetitivo, distrofia simpatética de reflexo e neuropatias de com-pressão, como aprisionamento periférico (incluindo síndrome do túnel decarpo, síndrome de pronador, síndromes de saída torácica, e síndrome dotúnel tarsal, radicolopatia e estenose espinhal.

Esta invenção ainda prove um método de alívio, inibição mitiga-ção ou tratamento de distúrbios artríticos em um mamífero, o método com-preendendo administrar a um mamífero em necessidade do mesmo umaquantidade farmaceuticamente eficaz de um inibidor químico de enzimasfosfolipase, particularmente enzimas fosfolipase A2, como aqui definido euma quantidade farmaceuticamente eficaz de um agente anti-reumático.

Combinações para o tratamento de distúrbios artríticos podemincluir agentes anti-reumáticos comercialmente disponíveis como, mas nãolimitados a, naproxeno, que é comercialmente disponível na forma de com-primidos de liberação retardada de EC-NAPROSYN.RTM., comprimidos deNAPROSYN.RTM., ANAPROX.RTM. e ANAPROX.RTM. DS e suspensão deNAPROSYN.RTM. de Roche Labs, CELEBREX.RTM. marca de comprimi-dos de celecoxib, VIOXX.RTM. marca de rofecoxib, CELESTONE.RTM.marca de betametasona, CUPRAMINA.RTM. marca de cápsulas de penici-lamina, DEPEN.RTM. marca de comprimidos penicilamina tituláveis, DEPO-MEDROL marca de suspensão injetável de acetato metilprednisolona, ARA-VA.TM. comprimidos de leflunomida, AZULFIDIINE EN-tabs.RTM. marca decomprimidos de liberação retardada de sulfasalazina, FELDENE.RTM. mar-ca de cápsulas de piroxicam, CATAFLAM.RTM. comprimidos de diclofenacpotássico, VOLTAREN.RTM. comprimidos de liberação retardada diclofenacsódico, VOLTAREN.RTM.-XR comprimidos de liberação estendida de diclo-fenac sódico, ENBREL.RTM. produtos de etanerecept, (caso se adicioneoutros agentes biológicos, usar em RA) e outros agentes anti-reumáticoscomercialmente disponíveis.

São também utilizáveis GENGRAF.TM. marca de cápsulas deciclosprina, NEORAL.RTM. marca de cápsulas de ciclosprina ou soluçãooral, IMURAN.RTM. marca de comprimidos de azatioprina ou injeção IV, IN-DOCIN.RTM. marca de cápsulas de indometacina, suspensão oral, e suposi-tórios, , PEDIAPED.RTM. solução oral de fosfato sódico prednisolona, PLA-QUENIL.RTM. marca de sulfato de hidroxicloroquina, PRELONE.RTM. mar-ca de xarope de prednisolona, REMICADE.RTM. infliximab recombinantepara injeção IV, e SOLU-MEDROL.RTM. succinato sódico metilprednisolonapara injeção.

Também são utilizáveis nas combinações desta invenção oscompostos de ouro e produtos utilizáveis no tratamento de artrite e condi-ções reumáticas, como auranofin ou MYOCHRISYINE.RTM. injeção de ourotiomalato sódico.

Cada um destes produtos pode ser administrado de acordo comas dosagens farmaceuticamente eficazes e regimes bem-conhecidos na téc-nica, como os descritos para os produtos no Physicians' Desk Reference, 55Ed. 2001, publicado por Medicai Economics Co., Inc., Montvale, N.J.

Os compostos desta invenção também podem ser administradosnos métodos desta invenção com agentes analgésicos e antiinflamatorioscomo NSAIDs e aspirina e outros salicilatos. Exemplos de agentes utilizáveisincluem ibuprofehó (MOTRIN.RTM., ADVIL.RTM.), naproxeno (NA-PROSYN.RTM.), sulindac (CLINORIL.RTM., diclofenac (VOLTAREN.RTM.),piroxicam (FELDENE.RTM.) cetoprofeno (ORUDIS.RTM.), diflunisal (DOLO-BID.RTM.), nabumetona (RELAFEN.RTM.), etodolac (LODINE.RTM.), oxa-prozin (DAYPRO.RjTM.), indometacina (INDOCIN.RTM.), melicoxam (MOBI-COX.RTM.), valdecoxib e eterocoxib. Aspirina é antiinflamatória quando da-da em doses elevadas, de outra forma é apenas um exterminador de dor,como acetaminofeno (TYLENOL.RTM.).

Os inibidores apropriados de ciclooxigenase 2 (COX-2) para usocom os métodos desta invenção incluem, mas não são limitados para, 2-(4-etóxi-fenil)-3-(4-metanossulfonil-fenil)-pirazolo[1,5-b]piridazina, CDC-501,celecoxib, COX-189, 4-(2-oxo-3-fenil-2,3-dihidrooxazol-4-il) benzenossulfo-namida, CS-179, CS-502, D-1367, darbufelona, DFP, DRF-4367, flosulídeo,JTE-522 (4-(4-ciclohexil-2-metil-5-oxazolil)-2-fluorobenzenossulfonamida), L-745337, L-768277, L-776967, L-783003, L-791456, L-804600, meloxicam,MK663 (etoricoxib), nimesulida, NS-398, parecoxib, 1-metilsulfonil-4-(1,1-dimetil-4-(4-fluorofenil) ciclopenta-2,4-dien-3-il) benzeno, 4-(1,5-dihidro-6-flúor-7-metóxi-3-(trifluorometil)-(2)-benzotiopirano(4,3-c)pirazol-1 -il) benze-nossulfonamida, 4,4-dimetil-2-fenil-3-(4-metilsulfonil) fenil) ciclobutenona, 4-amina-N-(4-(2-flúor-5-trifluorometil) -tiazol-2-il)-benzeno sulfonamida, 1 -(7-terc-butil-2,3-dihidro-3,3-dimetil-5-benzo-furanil)-4-ciclopropil butan-1-ona,Pharmaprojects Ne 6089 (Kotobuki Pharmaceutical), RS-1 13472, RWJ-63556, S-2474, S-33516, SC-299, SC-5755, valdecoxib, UR-8877, UR-8813,UR-8880. Outros inibidores de COX-2 apropriados para uso de acordo coma invenção incluem parecoxib, MK663, 4-(4-ciclohexil-2-metil-5-oxazolil)-2-fluorobenzenossulfonamida (JTE-522), nimesulida, flosulida, DFP e 2-(4-etóxi-fenil)-3-(4-metanossulfonil-fenil)-pirazolo[1,5-b]piridazina, e seus saisfisiologicamente aceitáveis, ésteres ou solvatos.

Estas composições são também utilizáveis no tratamento de eó-licas menstruais, trabalho de parto prematuro, tendonite, bursite, neurite a-lérgica infecção por citomegalovírus, apoptose, incluindo apoptose induzidapor HIV, lumbago, doença de fígado incluindo hepatite.

Os métodos são também utilizáveis no tratamento de condiçõesgastrointestinais como doença de intestino inflamatório, doença de Crohn,gastrite, síndrome de intestino irritável e colite ulcerativa e para a prevençãode tratamento de câncer como câncer colorectal. Os compostos e composi-ções da presente invenção são também utilizáveis para o tratamento ou pre-venção de tumores benignos e malignos/neoplasia incluindo canceres comocâncer colorectal, câncer do cérebro, câncer de ossos, neoplasia derivadade células epiteliais, (carcinoma epitelial) como carcinoma de célula basal,adenocarcinoma, câncer gastrointestinal, incluindo câncer dos lábios, câncerda boca, câncer esofageal, câncer do intestino delgado e câncer do estôma-go, câncer do colori, câncer de fígado, câncer de bexiga, câncer pancreático,câncer ovariano, câncer cervical, câncer de pulmão, câncer de mama, ecanceres de pele, como canceres de célula escamosa e célula basal, câncerda próstata, carcinoma de célula renal, e outros canceres conhecidos queafetam as células epiteliais em todo o corpo. Neoplasias para as quais ascomposições da invenção são contempladas como sendo particularmentetilizáveis são câncer gastrointestinal, esôfago de Barrett, câncer de fígado,câncer de bexiga, câncer de pâncreas, câncer ovariano, câncer prostático,câncer cervical, câncer do pulmão, câncer de mama, e câncer da pele, comocanceres de célula escamosa e célula basal. Os compostos e métodos destainvenção também podem ser usados para tratar a fibrose ocorrendo comterapia de radiação. Estas composições podem ser usadas para tratar indi-víduos tendo pólipos adenomatosos, incluindo os com polipose adenomato-sa familiar (FAP). Adicionalmente, tais composições podem ser usadas paraevitar pólipos de se formarem em pacientes em risco de FAP. Os compostosdesta invenção são utilizáveis no tratamento de cânceres devido a seus efei-tos antiangiogênicos.

Outros usos incluem o tratamento de inflamação em tais doen-ças como doenças vasculares, enxaqueca, periarterite nodosa, tiroidite, a-nemia aplásica, doença de Hodgkin, esclerodoma, febre reumática, diabetesde tipo I, doença de junção neuromuscular incluindo miastenia grave, doen-ça de matéria branca incluindo esclerose múltipla, sarcoidose, síndrome ne-frótica, síndrome de Behcet, polimiosite, gengivite, nefrite, hipersensibilidade,intumescimento ocorrendo após dano incluindo edema no cérebro, isquemiamiocardíaca, e outros. São também incluídos os tratamentos de doençasoftálmicas, como retinite, conjuntivite, retinopatias, uveite, fotofobia ocular, ede dano agudo ao tecido do olho. Os compostos desta invenção serão usa-dos no tratamento de inflamação pós operação incluindo a seguinte cirurgiaoftálmica como cirurgia de catarata ou cirurgia refrativa. Também são inclu-sos os tratamentos de inflamação do trato respiratório superior e pulmonar,como associado com infecções virais e fibrose cística, e em ressorção ósseacomo osteoporose acompanhante. Estes compostos e composições são uti-lizáveis no tratamento de alguns distúrbios do sistema nervoso central, comodemências corticais incluindo mal de Alzheimer, neuro-degeneração , e danodo sistema nervoso central resultante de acidente vascular cerebral, isque-mia e trauma. Os compostos da invenção são também utilizáveis no trata-mento de mal de Parkinson.

Os métodos de tratamento de dor compreendem a administra-ção a um mamífero submetido a esta dor de uma quantidade farmaceutica-mente eficaz de um composto desta invenção sozinho ou em combinaçãocom um ou mais agentes farmaceuticamente eficazes adicionais para o tra-tamento de dor ou inflamação ou a condição médica subjacente relacionada.

Os exemplos de agentes de fármacos que podem ser combinados com ospresentes compostos são analgésicos, agentes antiangiogênicos, agentesantineoplásicos. Estes compostos podem ser também combinados comcompostos anti-epilépticos que tem propriedades de aliviar a dor, como ga-bapentina e pregabalina.

Um tal método de combinação desta invenção compreende aadministração a um mamífero em necessidade do mesmo de uma quantida-de farmaceuticamente eficaz de um composto desta invenção e uma quanti-dade farmaceuticamente eficaz de um antagonista de receptor de N-metil- D-aspartato não tóxico (NMDA) e/ou um agente que bloqueia pelo menos umaconseqüência intracelular principal de ativação de receptor de NMDA. Osexemplos de antagonistas de receptor de NMDA utilizáveis nestes métodosincluem dextrometorfano, dextrorfano, amantadina e memantina, ou seussais farmaceuticamente aceitáveis.

Outro método aqui de tratamento de inflamação e distúrbios in-flamatórios compreende a co-administração a um mamífero em necessidadedo mesmo de um inibidor de oxido nítrico sintase induzida com um compostodesta invenção. A administração desta combinação é utilizável para a admi-nistração profilática ou terapêutica em um mamífero experimentando ou su-jeito a um nível anormalmente baixo de atividade de oxido nítrico sintase(NOS), particularmente os sujeitos a hipertensão ou em risco elevado de hi-pertensão pulmonar, acidente vascular cerebral isquêmico, infarto do mio-cárdio, falha cardíaca, doença renal progressiva, trombose, dano de reperfu-são, ou um distúrbio degenerativo do sistema nervoso, como mal de Alzhei-mer, ou os cronicamente expostos a condições hipóxicas.

Os métodos desta invenção também incluem aqueles para o tra-tamento ou a prevenção de um distúrbio de neoplasia em um mamífero, in-cluindo um ser humano, em necessidade de tal tratamento ou prevenção. Ométodo compreende o tratamento do mamífero com uma quantidade tera-peuticamente eficaz de um composto desta invenção em combinação comum inibidor de MMP. Estes dois componentes podem ainda ser opcional-mente combinados com um ou mais agentes selecionados dentre agenteantiangiogenese, um agente antineoplásico, um agente adjuntivo, um agenteimunoterapêutico, um agente analgésico, e/ou um agente radioterapêutico.

Uma tal terapia com componentes múltiplos compreende a administração aomamífero em necessidade da mesma de um composto desta invenção, uminibidor de metaloproteinase de matriz e um agente antineoplásico.

Os métodos e combinações desta invenção podem ser usadospara o tratamento ou prevenção de distúrbios de neoplasia incluindo mela-noma lentiginoso acral, ceratoses atínicas, adenocarcinoma, carcinoma cís-tico adenóide, adenomas, adenosarcoma, carcinoma adenoescamoso, tumo-res astrocíticos, carcinoma de glândula cartolina, carcinoma de célula basal,carcinomas da glândula bronquial, capilar, carcinóides, carcinoma, carcino-sarcoma, cavernoso, colangiocarcinoma, condosarcoma, papilo-ma/carcinoma de plexo corióide, carcinoma de célula clara, cistadenoma,tumor seio endodermal, hiperplasia endometrial, sarcoma estromal endome-trial, adenocarcinoma endometrióide, ependimal, epitelóide, sarcoma de E-wing , fibrolamelar, hiperplasia nodular focai, gastrinoma, tumores de célulagerminal, glioblastoma, glucagonoma, hemangiblastomas, hemangioendote-lioma, hemangiomas, adenoma hepático, adenomatose hepática, carcinomahepatocelular, insulinoma, neoplasia intaepitelial, interepitelial, neoplasia decélula escamosa, carcinoma de célula escamosa invasiva, carcinoma de cé-lula grande, leiomiosarcoma, melanomas lentigo malignos, melanoma malig-no, tumores mesoteliais malignos, meduloblastoma, meduloepitelioma, me-lanoma, meningeal, mesotelial, carcinoma metastático, carcinoma mucoepi-dermóide, neuroblastoma, melanoma nodular de adenocarcinoma neuroepi-telial, carcinoma de "oat-cell", oligodendroglial, osteosarcoma, polipeptídeopancreático, adenocarcinoma seroso papilar, célula pineal, tumores pituitá-rios, plasmacitoma, pseudosarcoma, blastoma pulmonar, carcinoma de célu-la renal, retinoblastpma, osarcoma rhabdomi, sarcoma, carcinoma seroso,carcinoma de célula pequena, carcinomas de tecido mole, tumor secretantosomatostatina, carcinoma escamoso, carcinoma de célula escamosa, sub-mesotelial, melanoma de difusão superficial, carcinoma não diferenciado,melanoma uveal, carcinoma verrucoso vipoma, carcinoma bem diferenciado,e tumor de Wilm.

Agentes antineoplásicos utilizáveis nas terapias de combinaçãoaqui incluem anastrozol, carbonato de cálcio, capecitabina, carboplatina, cis-platina, Vias celulares CP-461, docetaxel, doxorubicina, etoposídeo, fluorou-racil, fluoximestrina, gemcitabina, goserelina, irinotecan, cetoconazol, letro-zol, leucovorina, levamisol, megestrol, mitoxantrona, paclitaxel, raloxifeno,ácido retinóico, tamoxifeno, tiotepa, topotecan, toremifeno, vinorelbina, vin-blastina, vincristina, selênio (selenometionina), ácido ursodeoxicólico, sulin-dac sulfona, exemestano e eflornitina (DFMO), 1-[4-(2-azepan-1il-etóxi)-benzil]-2-(4-hidróxi-fenil)-3-metil-1H-indol-5-ol (também conhecido comoTSE-424) e 2-(4-hidróxi-fenil)-3-metÍI-1 -(4-(2-piperidin-1 -il-etóxi)-benzil]-1 H-indol-5-ol (também conhecido como ERA-923).

Esta invenção também inclui métodos de utilização dos compos-tos aqui em combinação com um inibidor de interleucina-1 proteináceo, co-mo um antagonista,de receptor de IL-1 (IL-Ira), para a prevenção ou trata-mento de doenças inflamatórias em um mamífero. As doenças inflamatóriasmediadas por interleucina-1 (IL-1) de interesse nestes métodos incluem, masnão são limitadas ,a pancreatite aguda; ALS; mal de Alzheimer; caquexi-a/anorexia; asma; aterosclerose; síndrome de fadiga crônica, febre; diabete(por exemplo, diabete dependente de insulina); glomerulonefrite; rejeição deenxerto versus hospedeiro, choque hemorrágico; hiperalgesia, doença infla-matória do intestino; condições inflamatórias de uma junta, incluindo osteoar-trite, artrite psoriática e artrite reumatóide; dano isquêmico, incluindo isque-mia cerebral (por exemplo, dano cerebral como um resultado de trauma, epi-lepsia, hemorragia ou acidente vascular cerebral, sendo que cada pode levarà neurodegeneração); doenças do pulmão (por exemplo, ARDS); mielomamúltiplo; esclerose múltipla; leucemia mielogenosa (por exemplo, AML eCML) e outras, miopatias (por exemplo, metabolismo da proteína no múscu-Io, especificamente em sepsia); osteoporose; mal de Parkinson; dor; trabalhode parto prematuro; psoríase; dano de reperfusão; choque séptico; efeitoslaterais de terapia com radiação, doença de junta mandibular temporal, me-tástase de tumor; ou uma condição inflamatória resultante de esforço, dis-tensão, dano da cartilagem, trauma, cirurgia ortopédica, infecção, ou outrosprocessos de doença.

Esta invenção também prove um método de administração deum ou mais dos compostos desta invenção a uma pessoa do sexo femininoem necessidade do mesmo para substancialmente evitar ou reduzir as pos-sibilidades no sistema reprodutivo da pessoa associada com o início ou con-tinuação do trabalho de parto. Também é provido um método de evitar oureduzir substancialmente a contratibilidade uterina ou ocorrendo durante agravidez ou associada com menorragia. Estes métodos podem incluir opcio-nalmente a co-administração de um composto desta invenção com um pro-gestogênio, uma progetina ou um agente progestacional.

A fosfolipase citosólica A2oc (cPLA2 oc) é uma enzima ubiquamen-te expressada que preferívelmente media a liberação de ácido araquidônicoquando da ativação das células. Os metabólitos bioativos de ácido araquidô-nico, os eicosanóides, são reconhecidos como importantes moduladores desinalização de plaquetas. Os inibidores da via de eicosanóides (por exemploaspirina) reduzem a formação de tromboxano A2 (TXA2), um agonista deplaquetas lábil e potente, resultando em depressão de função de plaquetas,formação de trombos, e benefício clínico provado na redução de morbidez emortalidade.

Os compostos da invenção inibem a atividade de cPLA2 que érequerida para o suprimento de substrato de ácido araquidônico para cicloo-xigenase -1 ou 2 e 5-lipoxigenase, que, por sua vez, iniciam a produção deprostaglandinas de leucotrienos respectivamente. Além disso, a atividade decPLA2 é essencial para produzir o liso-fosfolipídeo que é o precursor paraPAF. Assim, estes compostos são utilizáveis no tratamento e prevenção deestados de doença, em que os leucotrienos, prostaglandinas ou PAF estãoenvolvidos. Além disso, em doenças onde mais do que um destes agentesdesempenha um papel, um inibidor de cPLA2 deve ser esperado como sen-do mais eficaz do que leucotrieno, prostaglandina ou antagonistas de recep-tor de PAF e também mais eficaz do que os inibidores de ciclooxigenase ou5-lipoxigenase.

Assim, os compostos, composições farmacêuticas e regimes dapresente invenção são utilizáveis em tratar e prevenir os distúrbios tratadospor ciclooxigenase-2, cicloxigenase-1, e inibidores de 5-lipoxigenase e tam-bém antagonistas dos receptores para PAF, leucotrienos ou prostaglandinas.Esta invenção também prove métodos para tratar ou prevenirtrombose arterial ou venosa em um mamífero, ou prevenção da progressãode sintomas de trombose, o método compreendendo administrar a um ma-mífero em necessidade do mesmo uma quantidade farmaceuticamente acei-tável de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitáveldo mesmo. Em algumas modalidades, a trombose é aterotrombose.

Cada um dos métodos desta invenção compreende a adminis-tração a um mamífero em necessidade deste tratamento uma quantidadefarmaceuticamente ou terapeuticamente eficaz de um composto desta in-venção. Nos casos de terapias de combinação descritos aqui, será entendi-do que a administração inclui uma quantidade farmaceuticamente ou tera-peuticamente eficaz do segundo agente farmacêutico em questão. O segun-do ou adicionais agentes farmacológicos descritos aqui podem ser adminis-trados nas doses e regimes bem-conhecidos na técnica.

Os compostos desta invenção também podem ser usados méto-dos de tratamento veterinários comparáveis/particularmente para o trata-mento veterinário, inibição ou alívio de inflamação e dor. Estes métodos seráentendidos como sendo de interesse particular para mamíferos de compa-nhia, como cachorros e gatos, e para uso em mamíferos de fazenda, comogado, cavalos, mulas, burros, cabras, porcos, ovelhas, etc. Estes métodospodem ser usados para tratar os tipos de inflamação e dor experimentadosem medicina veterinária incluindo, mas não limitados a dor e inflamação as-sociada com artrite, imperfeições das juntas, defeitos de juntas devido aodesenvolvimento, como displasia das ancas, tendonite, inflamação do liga-mento suspensório, laminite, barbela e bursite, ou dor ou inflamação associ-ada com cirurgia, acidentes, trauma ou doença, como Doença de Lyme. Es-tes compostos também podem ser usados no tratamento de inflamação daspassagens aéreas, como em condições de asma, laringite, traqueite, bron-quite, rinite e faringite.

Cada um destes métodos veterinários compreende a administra-ção ao mamífero em necessidade do mesmo uma quantidade farmaceuti-camente eficaz de um composto desta invenção, ou uma forma de sal far-maceuticamente aceitável do mesmo. Os compostos desta invenção podemser usados para métodos em seres humanos ou veterinários em conjuntocom outros medicamentos ou suplementos dieteticos conhecidos na técnicapara o tratamento, inibição ou alívio de inflamação ou dor. Estes podem in-cluir aspirina (incluindo aspirina tamponada, aspirina com Maalox e aspirinarevestida entérica), inibidores de COX-2, como celecoxib, ácidos carboxílicosnão acetilados, como salicilato de magnésio, salicilamida ou salicilato de só-dio, ácidos acéticos, como doclofenac ou etodolac, ácidos propiônicos, comoibuprofeno, naproxeno (disponível em marcas NAPROSYNO.RTM. e EQUI-PROXEN.RTM.), cetoprofeno, RIMADYL.RTM. (carprofeno), flunixin meglu-mina, ácidos fenâmicos, como ácido tolfenâmico, ácido mefanâmico, ácidomeclofenâmico (ARQUEL.RTM.) ou ácido niflumico, ácidos enólicos, comooxifenbutazona, fenilbutazona, piroxicam ou dipirona, ou compostos não ací-dicos como nabumetona. Também usados em aplicações veterinárias sãodimetilsulfóxido (DMSO), orgoteína (como PALOSEIN.RTM. marca de orgo-teína), glicosaminoglicanos polissulfatado ou PS-GAGs (como ADE-QUAN.RTM. marca polissulfatado glicosaminoglicano), ácido hialurônico eseus análogos natural e sintético, Cetoroiac trimetamina (como a marca TO-RADOL.RTM.), FELDENE.RTM. (piroxicam), ou METACAM.RTM. (meloxi-cam).

Suplementos dieteticos usados em aplicações humanas ou vete-rinárias incluem glucosaminas, sulfato de condroitina, metilsulfonilmetano(MSM), de ácidos graxos de ômega 3 e outros óleos de peixes de água fria.

Os compostos e métodos desta invenção também podem ser usados emconjunto com terapia física humana e veterinária, massagem, tratamentosquiropráticos e acupuntura, e regimes. Cada um destes medicamentos esuplementos dieteticos pode ser administrado ao mamífero em questão u-sando regimes e dosagens eficazes conhecidos na técnica.

Pretende-se que cada uma das patentes, pedidos e publicaçõesincluindo livros mencionados neste documento de patente seja incorporadoaqui por referência em sua totalidade

Como os versados na técnica irão notar, numerosas mudanças emodificações podem ser feitas nas modalidades da invenção preferidas semsair do espírito da invenção. Pretende-se que todas estas variações estejamdentro do escopo da invenção.

Claims

1. Composto tendo a Fórmula I: <formula>formula see original document page 115</formula> em que:n1 é 1 ou 2;n2 é 1 ou 2;n3 é 1 ou 2;n5 é 0, 1 ou 2;X2 é uma ligação, O, -CH2- ou S02;cada R5 é independentemente H ou C1-3 alquila;R6 é H ou C-i-6 alquila;R7 é selecionado dentre o grupo consistindo em OH, benzilóxi,CH3, CF3, OCF3, C1-3 alcóxi, halogênio, COH, CO(C!.3 alquila), CO(Od-3alquila), quinolina-5-ila, quinolina-8-ila, 3,5-dimetilisoxazol-4-ila, tiofeno-3-ila,piridin-4-ila, piridina-3-ila, -CH2-Q, e fenila opcionalmente substituída por deum a três grupos R30 independentemente selecionados;Re é selecionado dentre o grupo consistindo em H, OH, N02,CF3, OCF3, Ci-3 alcóxi, halogênio, CO(Ci-3 alquila), CO(OCi-3 alquila), quino-lina-5-ila, quinolina-8-ila, 3,5-dimetilisoxazol-4-ila, tiofeno-3-ila, -CH2-Q, efenila substituída por de um a três grupos R3o independentemente selecio-nados; <formula>formula see original document page 115</formula> Q é OH, dialquilamino,R20 é selecionado dentre o grupo consistindo em H, d.3 alquila eCXKCvg alquil); eR3o é selecionado dentre o grupo consistindo em dialquilamino,CNeOCF3;desde que:a) quando cada R5 é H, R6 é H, n5 é 0, e R8 é H, então R7 nãopode ser cloro;b) quando cada R5 é H, R6 é H, n5 é 0, X2 é O ou -CH2-, e R8 éH, então R7 não pode ser CH3;c) quando cada R5 é H, e R6 é H, então R7 e R8 ambos não po-dem ser flúor; ,d) quando cada R5 é H, R6 é H, e X2 è O, então R7 e R8 ambosnão podem ser cloro;e) quando cada R5 é H, R6 é H, X2 é O, e R8 é N02l então R7não pode ser flúor; ef) quando cada R5 é H, R6 é H, X2 é S02, e R8 é H, então R7 nãopode ser flúor ou cloro;ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 1, em que X2éCH2.

3. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 2, em que n3

4. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 2, em que ni

5. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 2, em que n2 é1.

6. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 2, em que n3é 1; nt é 1; e n2 é 1.

7. Composto ou sal de acordo qualquer uma das reivindicações-1 a 6, em que R6 é H.

8. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 7, em que:R7 é selecionado dentre o grupo consistindo em OH, benzilóxi,CH3) CF3) OCF3, halogênio, COOCH3, COH, CH2OH, dietilaminometila, qui-nolina-5-ila, quinolina-8-ila, 3,5-dimetilisoxazol-4-ila, tiofeno-3-ila, piridin-4-ila,; piridina-3-ila, fenila, 4-dimetilamino-fen-1-ila, 2-trifluorometóxi-fen-1-ila, 2-ciano-fen-1-ila, morfolina-1-il-metila, piperazina-1-il metila, 4-acetil-piperazina-1-il metila, e 4-metil-piperazina-1-il metila; eR8 é selecionado dentre o grupo consistindo em H, halogênio,CF3 e N02.

9. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 8, em que R5 é H.

10. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi-cações 1 a 8, em que R5 é CH3.

11. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi-cações 1 a 10, em que X2 é O.

12. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 11, em quen3é1,n1é1;en2é1 eR6éH.

13. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi-cações 1 a 12, em que:R7 é selecionado dentre o grupo consistindo em benzilóxi, OH,halogênio, CH3 e CF3;eRe é selecionado dentre o grupo consistindo em H, halogênio, eN02.

14. Composto ou sal de acordo com qualquer umas reivindica-ções 1 a 13, em que R7 é CF3, e R8 é H.

15. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi-cações 1 a 14, em que X2 é S02.

16. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi-cações 1 a 15, em que n5 é 2.

17. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 1, em que n-ié 1; n2é 1 ou 2; n3 é 1, n5 é 0; X2 é CH2, cada R5 e cada R6 é H; R8 é H, F,CF3, OCF3, OH, quinolina-5-ila ou quinolina-8-ila, e R7 é F, CF3, OCF3, OH,quinolina-5-ila ou quinolina-8-ila.

18. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 17, em quen2 é 1.

19. Composto de fórmula II: <formula>formula see original document page 115</formula> em que:X é uma ligação ou O;rn e 1 qu 2;n2 é 1 ou 2;n6 é 1 ou 2;R5éHouCH3;R6 é H ou Cv8 alquila; eR8 é selecionado dentre o grupo consistindo em H, OH, N02, CF3) OCF3( OCH3, halogênio, COCH3, COOCH3) dimetilamino, dietilamino eCN;ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

20. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 19, em quen1 é 1.

21. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 19, ou rei-vindicação 20, em que n2 é 1.

22. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi-cações 19 a 21, em que n6 é 2.

23. Composto ou sal de acordo com as reivindicações 19 a 22,em que R5 é H.

24. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi-cações 19 a 23, em que R6 é H.

25. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi-cações 19 a 24, em que Rg é selecionado dentre o grupo consistindo em H,CF3, OCF3 e halogênio.

26. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi-cações 19 a 24, em que Rs é H.

27. Composto de acordo com a reivindicação 1, que é selecio-nado dentre o grupo consistindo em:a) ácido 4-{2-[2-[2-({[2-(benzilóxi) benzil] sulfonil} amina) etil]-5-cloro-1 -(difenilmetil) ±1 H-indol-3-il] etóxi} benzóico;b) ácido 4-{2-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-hidroxibenzil) sul-fonil] amina} etil) -1 W-indol-3-il] etóxi} benzóico;c) ácido 4-{2-[5-cloro-2-(2-{[(2,6-dibromobenzil) sulfonil] amina}etil) -1 -(difenilmetil), !-1 H-indol-3-il] etóxi} benzóico;d) ácido 4-(2-{1-benzhidril-5-cloro-2-[2-metil-6-nitro-fenilmetanossulfonilamino) -etil-1-/-/-indol-3-il}-etóxi) -benzóico;e) ácido 4-(2-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(trifluorometil)benzil] sulfonil} amina) etil]-1/-/-indol-3-il} etóxi) benzóico;f) ácido 4-(2-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-flúor-6-(trifluorometil) benzil] sulfonil} amina) etil]-1 /-/-indol-3-il} etóxi) benzóico;g) ácido 4-{3-[5-cloro-2-(2-{[(2,6-dibromobenzil) sulfonil] amina}etil) -1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-il] propil} benzóico;h) ácido 4-{3-[5-cloro-2-(2-{[(2,6-diclorobenzil) sulfonil] amina}etil) -1 -(difenilmetil) -1 H-indol-3-il] propil} benzóico;i) ácido 4-(3-{1-benzhidril-5-cloro-2-[2-(2-metil-6-nitro-fenilmetanossulfonilamino) -etil-1 H-indol-3-il}-propil) -benzóico;j) ácido 4-(3-{5-cloro-1 -(difenilmetil) -2-[2-({[2-(trifluorometil) ben-zil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzóico;k) ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-(metil{[2-(trifluorometil)benzil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzóico;I) ácido 4-{3-[2-[2-({[2,6-bis(trifluorometil) benzil] sulfonil} amina)etil]-5-cloro-1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-il] propil} benzóico;m) ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(metóxicarbonil)benzil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzoico;n) ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-flúor-6-(trifluorometil) benzil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzoico;o) ácido 4-[3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-{2-[({2-[2-(trifluorometil)fenil] etil} sulfonil) amina] etil} -1 H-indol-3-il) propil] benzoico;p) ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-{[(2-formilbenzil) sulfo-nil] amina} etil) -1 H-indol-3-il] propil} benzoico;q) ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(morfolin-4-ilmetil)benzil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzoico;r) ácido 4-{3-[5-cloro-2-{2-[({2-[(dietilamino) metil] benzil} sulfonil)amina] etil} -1 -(difenilmetil) -1 H-indol-3-il] propil} benzoico;s) ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(hidroximetil) ben-zil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzoico;t) ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(piperazin-1-ilmetil)benzil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzoico;u) ácido 4-{3-[2-{2-[({2-[(4-acetilpiperazin-1-il) metil] benzil} sulfo-nil) amina] etil} -5-cloro-1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-il] propil} benzoico;v) ácido 4-[3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-{2-[({2-[(4-metilpiperazin--1-il) metil] benzil} sulfonil) amina] etil} -1 H-indol-3-il) propil] benzoico;w) ácido 4-[3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-{2-[({1-[2-(trifluorometil)fenil] etil} sulfonil) amina] etil} -1 H-indol-3-il) propil] benzoico;x) ácido 4-{3-[2-(2-{[(2-bromobenzil) sulfonil] amina} etil) -5-cloro--1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-il] propil} benzoico;y) ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(trifluorometóxi)benzil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzoico;z) ácido 4-{3-[5-cloro-2-(2-{[(3-cloro-6-flúor-2-metilbenzil) sulfonil]amina} etil) -1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-il] propil} benzoico;aa) ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-nitro-6-(trifluorometil) benzil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzoico;ab) ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-{[(2-fluorobenzil) sul-fonil] amina} etil) -1 H-indol-3-il] propil} benzoico;ac) ácido 4-{3-[2-(2-{[(bifenil-2-ilmetil) sulfonil] amina} etil) -5-cloro-1 -(difenilmetil) -1 H-indol-3-il] propil} benzóico;ad) ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-{[(2-piridin-4-ilbenzil)sulfonil] amina} etil) -1 H-indol-3-il] propil} benzóico;ae) ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-{[(2-piridin-3-ilbenzil)sulfonil] amina} etil) -1 H-indol-3-il] propil} benzóico;af) ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(3-tienil) benzil]sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il} propil) benzóico;ag) ácido 4-{3-[5-cloro-2-[2-({[2-(3,5-dimetilisoxazol-4-il) benzil]sulfonil} amina) etil]-1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-ÍI] propil} benzóico;ah) ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-{[(2-quinolin-5-ilbenzil) sulfonil] amina} etil) -1 H-indol-3-il] propil} benzóico;ai) ácido 4-{3-[5-cloro-2-{2-[({[4'-(dimetilamino) bifenil-2-il]metil}sulfonil) amina] etil} -1-(difenilmetil) -1 H-indol-3-il] propil} benzóico;aj) ácido 4-[3-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-{2-[({[2'-(trifluorometóxi)bifenil-2-il]metil} sulfonil) amina] etil} -1 H-indol-3-il) propil] benzóico;ak) ácido 4-{3-[5-cloro-2-[2-({[(2'-cianobifenil-2-il) metil] sulfonil}amina) etil]-1-(difenilmetil)-1/-/-indol-3-il] propil} benzóico;al) ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1-(difenilmetil) -2-[2-({[2-(trifluorometil)benzil] sulfonil} amina) etil]-1 H-indol-3-il}etil) sulfonil] fenil} propanóico;am) ácido 3-(4-{[2-(5-cloro-1-(difenilmetil) -2-{2-[({1-[2-(trifluorometil) fenil] etil} sulfonil) amina] etil} -1 H-indol-3-il) etil] sulfonil} fenil)propanóico;an) ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-{[(2-hidroxibenzil) sul-fonil] amina} etil) -1 /-/-indol-3-il] propil} benzóico; eao) ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil) -2-(2-{[(2-quinolin-5-ilbenzil) sulfonil] amina} etil) -1 H-indol-3-il] propil} benzóico;ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

28. Método de tratamento de inflamação causada ou potenciadapor prostaglandinas, leucotrienos, ou fator de ativação de plaquetas, em ummamífero, o método compreendendo administrar a um mamífero em neces-sidade do mesmo uma quantidade farmaceuticamente aceitável de um com-posto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 27, ou um salfarmaceuticamente aceitável do mesmo.

29. Método de tratamento de dor causada ou potenciada porprostaglandinas, leucotrienos, ou fator de ativação de plaquetas, em ummamífero, o método compreendendo administrar a um mamífero em neces-sidade do mesmo uma quantidade farmaceuticamente aceitável de um com-posto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 27, ou um salfarmaceuticamente aceitável do mesmo.

30. Método de tratamento de asma em um mamífero, o métodocompreendendo administrar a um mamífero em necessidade do mesmo umaquantidade farmaceuticamente eficaz de um composto como definido emqualquer uma das reivindicações 1 a 27, ou um sal farmaceuticamente acei-tável do mesmo.

31. Método de tratamento de distúrbios artríticos e reumáticosem um mamífero, ó,método compreendendo administrar a um mamífero emnecessidade do mesmo uma quantidade farmaceuticamente eficaz de umcomposto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 27, ou umsal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

32. Método de acordo com a reivindicação 31, em que o distúr-bio é artrite reumatóide.

33. Método de acordo com a reivindicação 31, em que o distúr-bio é osteoartrite.

34. Método de acordo com a reivindicação 31 em que o distúrbioé artrite juvenil.

35. Método de tratamento ou prevenção de uma doença ou dis-túrbio em um mamífero, ou prevenção da progressão de sintomas como umadoença ou distúrbio, em que a doença ou distúrbio é selecionada dentre ogrupo consistindo em acidente vascular cerebral, aterosclerose, esclerosemúltipla, mal de Parkinson, dano do sistema nervoso central resultante deacidente vascular cerebral, dano do sistema nervoso central resultante deisquemia, e dano do sistema nervoso central resultante de trauma, o métodocompreendendo administrar a um mamífero em necessidade do mesmo umaquantidade farmaceuticamente aceitável de um composto como definido emqualquer uma das reivindicações 1 a 27, ou um sal farmaceuticamente acei-tável do mesmo.

36. Método de acordo com a reivindicação 35, em que a doençaou distúrbio é acidente vascular cerebral.

37. Método de acordo com a reivindicação 35, em que a doençaou distúrbio é aterosclerose.

38. Método de acordo com a reivindicação 35, em que a doençaou distúrbio é esclerose múltipla.

39. Método de acordo com a reivindicação 35, em que a doençaou distúrbio é mal de Parkinson.

40. Método de acordo com a reivindicação 35, em que a doençaou distúrbio é dano do sistema nervoso central resultante de acidente vascu-lar cerebral, de isquemia, ou de trauma.

41. Método para tratar ou prevenir trombose venosa ou arterialem um mamífero, ou prevenir a progressão de um sintoma de referida trom-bose, o método compreendendo administrar a um mamífero em necessidadedo mesmo uma quantidade farmaceuticamente aceitável de um compostocomo definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 27, ou um sal farma-ceuticamente aceitável do mesmo.

42. Método de acordo com a reivindicação 41, em que a trombo-se é aterotrombose.

43. Composição farmacêutica compreendendo um compostocomo definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 27, ou um sal farma-ceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo farmaceuticamente aceitá-vel.