ES2354908T3 - Inhibidores de fosfolipasa a2 citosólica. - Google Patents

Abstract

Ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]1H-indol-3-il}etil)sulfonil]fenil}-propanoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

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CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a inhibidores químicos de la actividad de diversas enzimas fosfolipasas, particularmente enzimas fosfolipasas A2 citosólicas (cPLA2), más particularmente incluyendo inhibidores de enzimas fosfolipasas A2 alfa citosólicas (cPLA2α). ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Los leucotrienos y las prostaglandinas son mediadores importantes de la inflamación, y cada uno de ellos contribuye al desarrollo de una respuesta inflamatoria de una manera diferente. Los leucotrienos reclutan células inflamatorias tales como neutrófilos en un sitio inflamado, promueven la extravasación de estas células y estimulan la liberación de superóxido y proteasas que dañan el tejido. Los leucotrienos también juegan un papel patofisiológico en la hipersensibilidad experimentada por asmáticos [véase, por ejemplo, B. Samuelson y col., Science, 237:1171-76 (1987)]. Las prostaglandinas aumentan la inflamación aumentando el flujo sanguíneo y, por lo tanto, la infiltración de leucocitos en sitios inflamados. Las prostaglandinas también potencian la respuesta de dolor inducida por estímulos.

Las prostaglandinas y los leucotrienos son inestables y no se almacenan en las células, sino que en su lugar se sintetizan [W. L. Smith, Biochem. J., 259:315-324 (1989)] a partir del ácido araquidónico en respuesta a estímulos. Las prostaglandinas se producen a partir del ácido araquidónico por la acción de enzimas COX-1 y COX-2. El ácido araquidónico también es el sustrato de la ruta enzimática diferenciada que conduce a la producción de leucotrienos.

El ácido araquidónico, que se introduce en estas dos rutas inflamatorias diferenciadas, se libera de la posición sn-2 de fosfolípidos de membrana por enzimas fosfolipasas A2 (en lo sucesivo PLA2). Se cree que la reacción catalizada por PLA2 representa la etapa limitante de la velocidad en el procedimiento de biosíntesis de mediadores lipídicos, incluyendo, pero sin limitación, la producción de prostaglandinas y leucotrienos inflamatorios. Cuando el sustrato fosfolipídico de PLA2 es de la clase de fosfatidil colina con un enlace éter en la posición sn-1, el lisofosfolípido producido es el precursor inmediato del factor activador de plaquetas (denominado en lo sucesivo PAF), otro potente mediador de la inflamación [S. I. Wasserman, Hospital Practice 15: 49-58 (1988)].

La mayoría de las terapias antiinflamatorias se han centrado en la prevención de la producción de prostaglandinas o leucotrienos a partir de estas rutas diferenciadas, pero no en todas ellas. Por ejemplo, el ibuprofeno, la aspirina y la indometacina son AINE que inhiben la producción de prostaglandinas por la inhibición de COX-1/COX-2, pero no tienen efecto directo sobre la producción inflamatoria de leucotrienos a partir de ácido araquidónico en otras rutas. A la inversa, el zileutón inhibe sólo la ruta de conversión de ácido araquidónico en leucotrienos, sin afectar directamente a la producción de prostaglandinas. Ninguno de estos agentes antiinflamatorios usados ampliamente afecta la producción de PAF.

Por consiguiente, se ha sugerido la inhibición directa de la actividad del PLA2 como mecanismo útil para un agente terapéutico, es decir, para interferir con la respuesta inflamatoria. [Véase, por ejemplo, J. Chang y col., Biochem. Pharmacol., 36:2429-2436 (1987)].

Se ha secuenciado y definido estructuralmente una familia de enzimas PLA2 caracterizadas por la presencia de una señal de secreción secuenciada y finalmente secretada por la célula. Estas PLA2 secretadas tienen un peso molecular de aproximadamente 14 kD y contienen siete enlaces disulfuro que son necesarios para la actividad. Estas PLA2 se encuentran en grandes cantidades en páncreas de mamífero, veneno de abeja y diversos venenos de serpiente. [Véanse, por ejemplo, las referencias 13-15 en Chang y col., citado anteriormente; y E. A. Dennis, Drug Devel. Res., 10:205-220 (1987).] Sin embargo, se cree que la enzima pancreática tiene una función digestiva y, como tal, no debe ser importante en la producción de los mediadores inflamatorios cuya producción debería estar estrictamente regulada.

Se ha determinado la estructura primaria de la primera PLA2 no pancreática humana. Esta PLA2 no pancreática se encuentra en plaquetas, líquido sinovial y bazo, y también es una enzima secretada. Esta enzima es un miembro de la familia mencionada anteriormente. [Véase, J. J. Seilhamer y col, J. Biol. Chem., 264:5335-5338 (1989); R. M. Kramer y col, J. Biol. Chem., 264:5768-5775 (1989); y A. Kando y col, Biochem. Biophys. Res. Comm., 163:42-48 (1989)]. Sin embargo, es dudoso que esta enzima sea importante en la síntesis de las prostaglandinas, leucotrienos y PAF, ya que la PLA2 no pancreática es una proteína extracelular que sería difícil de regular, y las siguientes enzimas en las rutas biosintéticas para estos compuestos son proteínas intracelulares. Además, existen indicios de que la PLA2 está regulada por la proteína quinasa C y proteínas G [R. Burch y J. Axelrod, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84:6374-6378 (1989)] que son proteínas citosólicas que deben actuar sobre proteínas intracelulares. Sería imposible que la PLA2 no pancreática funcionara en el citosol, ya que el alto potencial de reducción reduciría los enlaces disulfuro e inactivaría la enzima.

Se ha identificado una PLA2 murina en la línea celular de macrófagos murinos, denominada RAW 264.7. Se notificó que una actividad específica de 2 µmol/min/mg, resistente a condiciones reductoras, estaba asociada con la molécula de aproximadamente 60 kD. Sin embargo, esta proteína no se purificó hasta la homogeneidad. [Véase, C. C. Leslie y col, Biochem. Biophys. Acta, 963:476-492 (1988)].

También se ha identificado y clonado una fosfolipasa A2 alfa citosólica (en lo sucesivo “cPLA2α”). Véanse las Patentes de Estados Unidos Nº 5.322.776 y 5.354.677. La enzima de estas patentes es una enzima PLA2 intracelular, purificada a partir de su fuente natural o producida de otra manera en forma purificada, que funciona intracelularmente para producir ácido araquidónico en respuesta a estímulos inflamatorios.

Los metabolitos bioactivos del ácido araquidónico, los eicosanoides, se reconocen

5 como moduladores importantes de la señalización de plaquetas. Los inhibidores de la ruta de los eicosanoides (por ejemplo, la aspirina) reducen la formación de tromboxano A2 (TXA2), un agonista de plaquetas lábil y potente, que tiene como resultado la depresión de la función de las plaquetas, la formación de trombos y efectos beneficiosos clínicos demostrados en la reducción de la morbilidad y mortalidad.

10 Las plaquetas juegan un papel central en varios procesos biológicos, incluyendo trombosis. [See S. P. Jackson y S. M. Schoenwaelder, Nature Reviews, Drug Discovery Vol. 2, 1-15, Octubre 2003; D.L. Bhatt y E.J. Topol, Nature Reviews, Drug Discovery Vol. 2, 15-28, Enero 2003]. Por consiguiente, se han realizado esfuerzos recientes para caracterizar los receptores de las plaquetas y las rutas de señalización. Además, se han desarrollado varios

15 modelos de roedores para permitir el estudio de posibles agentes terapéuticos en trombosis. [Véase B. Nieswandt y col., J. Thrombosis and Haemostasis, 3: 1725-1736 (2005). En la Patente de Estados Unidos Nº 6.797.708 y en la publicación internacional Nº WO 03/048122 A2 relacionada se desvelan inhibidores de la fosfolipasa A2 citosólica de fórmula (I)

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20 Ahora que se han identificado varias enzimas fosfolipasas, sería deseable identificar inhibidores químicos de la acción de enzimas fosfolipasas específicas, pudiendo usarse dichos inhibidores para tratar afecciones inflamatorias, particularmente en las que sean resultados deseados la inhibición de la producción de prostaglandinas, leucotrienos y PAF. En la técnica sigue existiendo la necesidad de la identificación de dichos agentes antiinflamatorios para su

25 uso terapéutico en una diversidad de estados de enfermedad. SUMARIO DE LA INVENCIÓN En una realización, la invención proporciona el compuesto ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3

il}etil)sulfonil]fenil}propanoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La presente invención también proporciona los compuestos anteriores para tratar la inflamación producida o potenciada por prostaglandinas, leucotrienos o factor de activación de plaquetas, en un mamífero.

La presente invención proporciona además los compuestos anteriores para tratar el dolor producido o potenciado por prostaglandinas, leucotrienos o factor de activación de plaquetas, en un mamífero.

La presente invención proporciona además los compuestos anteriores para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en un mamífero, o prevenir la progresión de los síntomas de dicha enfermedad o trastorno, seleccionándose la enfermedad o trastorno entre el grupo que consiste en asma, ictus, aterosclerosis, esclerosis múltiple, enfermedad de Parkinson, trastornos artríticos, trastornos reumáticos, lesiones del sistema nervioso central debidas a ictus, lesiones del sistema nervioso central debidas a isquemia, lesiones del sistema nervioso central debidas a traumatismo, inflamación producida o potenciada por prostaglandinas, inflamación producida o potenciada por leucotrienos, dolor, e inflamación producida o potenciada por el factor de activación plaquetaria, en un mamífero.

La presente invención también proporciona los compuestos anteriores para tratar o prevenir trombosis arteriales o venosas en un mamífero, o prevenir la progresión de síntomas de trombosis. En algunas realizaciones, la trombosis es aterotrombosis.

La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3-il}etil)sulfonil]fenil}propanoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

La Figura 1 muestra la inhibición in vitro de la agregación plaquetaria en la sangre

humana por los compuestos de los Ejemplos 14 y 25, determinada por el analizador de

la función plaquetaria (PFA-100®).

La Figura 2 muestra la mejora del flujo sanguíneo y la reducción de la formación de

trombos por los compuestos de los Ejemplos 14 y 15, en un modelo de rata de

trombosis aguda.

La Figura 3 muestra la reducción de los niveles en suero de tromboxano B2 en ratas

sometidas a trombosis inducida por cloruro férrico por los compuestos de los Ejemplos

14 y25. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

En una realización, la invención proporciona el compuesto ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1

(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3il}etil)sulfonil]fenil}propanoico que tiene la fórmula:

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o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

5 En otra realización, se proporciona ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3-il}etil)sulfonil]fenil}propanoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso como un medicamento.

La presente invención también proporciona el uso de ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1(difenilmetil)2-[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3

10 il}etil)sulfonil]fenil}propanoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para tratar la inflamación producida o potenciada por prostaglandinas, leucotrienos o el factor de activación de plaquetas, en un mamífero. La presente invención también proporciona el uso de ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3

15 il}etil)sulfonil]fenil}propanoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para tratar el dolor producido o potenciado por prostaglandinas, leucotrienos o el factor de activación de plaquetas, en un mamífero.

Otra realización proporciona el uso de ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3-il}etil)sulfonil]fenil}propanoico, o una sal 20 farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para el

tratamiento del asma en un mamífero.

Una realización adicional proporciona el uso de ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3-il}etil)sulfonil]fenil}propanoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para el

25 tratamiento de trastornos artríticos o reumáticos en un mamífero. En una realización, el trastorno es artritis reumatoide. En otra realización, el trastorno es osteoartritis. En una realización más, el trastorno es artritis juvenil.

Además, la presente invención proporciona el uso de ácido 3-{4-[(2-(5-cloro-1(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3il}etil)sulfonil]fenil}propanoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en un mamífero, o prevenir la progresión de los síntomas de dicha enfermedad o trastorno, en el que la enfermedad o trastorno se selecciona entre el grupo que consiste en ictus, aterosclerosis, esclerosis múltiple, enfermedad de Parkinson, lesión del sistema nervioso central derivada de ictus, lesión del sistema nervioso central derivada de isquemia y lesión del sistema nervioso central derivada de traumatismo.

La presente invención también proporciona el uso de ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3il}etil)sulfonil]fenil}propanoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir la trombosis venosa o arterial en un mamífero, o prevenir la progresión de síntomas de la trombosis. En algunas realizaciones, la trombosis es aterotrombosis.

La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1-(difenil-metil)-2-[2-({[2(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3-il}etil)sulfonil]fenil}propanoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Los compuestos de la presente invención pueden usarse en una composición farmacéutica cuando se combinan con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Una composición de este tipo también puede contener (además de un compuesto o compuestos de la presente invención y un vehículo) diluyentes, cargas, sales, tampones, estabilizadores, solubilizantes y otros materiales bien conocidos en la técnica. La expresión "farmacéuticamente aceptable" significa un material no tóxico que no interfiere con la eficacia de la actividad biológica del principio o principios activos. Las características del vehículo dependerán de la vía de administración. La composición farmacéutica puede contener adicionalmente otros agentes antiinflamatorios. Dichos factores y/o agentes adicionales pueden incluirse en la composición farmacéutica para producir un efecto sinérgico con compuestos de la presente invención, o para minimizar los efectos secundarios provocados por el compuesto de la presente invención.

Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden estar en forma de un liposoma o micelas en los que los compuestos de la presente invención están combinados, además de otros vehículos farmacéuticamente aceptables, con agentes anfipáticos tales como lípidos, que existen en forma agregada como micelas, monocapas insolubles, cristales líquidos,

o capas lamelares en solución acuosa. Los lípidos adecuados para formulación liposomal incluyen, sin limitación, monoglicéridos, diglicéridos, sulfátidos, lisolecitina, fosfolípidos, saponina, ácidos biliares y similares. La preparación de dichas formulaciones liposomales está dentro del nivel de habilidad en la técnica, como se desvela, por ejemplo, en las Patentes de Estados Unidos Nº 4.235.871; 4.501.728; 4.837.028; y 4.737.323.

Como se usan en el presente documento, las expresiones "cantidad farmacéuticamente eficaz" o "cantidad terapéuticamente eficaz", como se usan en el presente documento, se refieren a la cantidad total de cada componente activo de la composición farmacéutica o procedimiento que es suficiente para mostrar un beneficio significativo al paciente, es decir, tratamiento, curación, prevención, inhibición o mejora de una respuesta o afección fisiológica, tal como una afección o un dolor inflamatorio, o un aumento en la velocidad de tratamiento, curación, prevención, inhibición o mejora de dichas afecciones. Cuando se aplica a un principio activo individual, administrado solo, el término se refiere al ese único ingrediente. Cuando se aplica a una combinación, la expresión se refiere a cantidades combinadas de los principios activos que dan como resultado el efecto terapéutico, ya sea administrado en combinación, en serie o simultáneamente.

Una cantidad farmacéutica o terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede administrarse a un mamífero que necesita tratamiento de una o más de las enfermedades o trastornos descritos en el presente documento. Los compuestos de la presente invención pueden administrarse solos o junto con otras terapias tales como tratamientos que emplean otros agentes antiinflamatorios, citocinas, linfocinas u otros factores hematopoyéticos. Cuando se coadministran con uno o más de otros agentes antiinflamatorios, citocinas, linfocinas u otros factores hematopoyéticos, los compuestos de la presente invención pueden administrarse simultáneamente con el otro u otros agentes antiinflamatorios, citocinas, linfocinas, otro u otros factores hematopoyéticos, factores trombolíticos o antitrombóticos, o secuencialmente. Si se administran secuencialmente, el médico decidirá la secuencia apropiada de administración de los compuestos de la presente invención junto con otro u otros agentes antiinflamatorios, citocinas, linfocinas, otro u otros factores hematopoyéticos, factores trombolíticos y antitrombóticos.

La administración de compuestos de la presente invención usados en la composición farmacéutica de la presente invención puede realizarse en una diversidad de vías convencionales, tales como ingestión oral, inhalación, o inyección cutánea, subcutánea o intravenosa.

Cuando una cantidad terapéuticamente eficaz de compuestos de la presente invención se administra por vía oral, los compuestos de la presente invención estarán en forma de un comprimido, cápsula, polvo, solución o elixir. Cuando se administra en forma de comprimidos, la composición farmacéutica de la invención puede contener adicionalmente un vehículo sólido tal como una gelatina o un adyuvante. El comprimido, cápsula y polvo contienen de aproximadamente el 5 al 95% de compuesto de la presente invención, y preferentemente de aproximadamente el 10% al 90% de compuesto de la presente invención. Cuando se administra en forma líquida, puede añadirse un vehículo líquido tal como agua, petróleo, aceites de origen animal o vegetal tales como aceite de cacahuete, aceite minerales, fosfolípidos, tweens, triglicéridos, incluyendo triglicéridos de cadena media, aceite de semilla de soja o aceite de sésamo, o aceites sintéticos. La forma líquida de la composición farmacéutica puede contener además solución salina fisiológica, dextrosa u otra solución de sacarina, o glicoles tales como etilenglicol, propilenglicol o polietilenglicol. Cuando se administra en forma líquida, la composición farmacéutica contiene de aproximadamente el 0,5 al 90% en peso del compuesto de la presente invención, y preferentemente de aproximadamente el 1 al 50% del compuesto de la presente invención.

Cuando una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos de la presente invención se administra por inyección intravenosa, cutánea o subcutánea, los compuestos de la presente invención estarán en forma de una solución acuosa parenteralmente aceptable sin pirógenos. La preparación de dichas soluciones de proteínas parenteralmente aceptables, teniendo especialmente en cuenta el pH, isotonicidad, estabilidad y similares, está dentro de la habilidad en la técnica. Una composición farmacéutica preferida para la inyección intravenosa, cutánea o subcutánea debe contener, además de los compuestos de la presente invención, un vehículo isotónico tal como Inyección de Cloruro Sódico, Inyección de Ringer, Inyección de Dextrosa, Inyección de Dextrosa y Cloruro Sódico, Inyección de Ringer Lactato, u otro vehículo como se conoce en la técnica. La composición farmacéutica de la presente invención también puede contener estabilizantes, conservantes, tampones, antioxidantes u otros aditivos conocidos por el experto en la materia.

La cantidad de compuesto(s) de la presente invención en la composición farmacéutica de la presente invención dependerá de la naturaleza y gravedad de la afección que se trate, y de la naturaleza de tratamientos anteriores que haya experimentado el paciente. En último caso, el médico decidirá la cantidad de compuesto de la presente invención con la que tratar a cada paciente individual. En principio, el médico administrará dosis bajas del compuesto de la presente invención y observará la respuesta del paciente. Pueden administrarse dosis mayores de los compuestos de la presente invención hasta que se obtenga el efecto terapéutico óptimo para el paciente, y en este punto la dosificación ya no se aumenta más. Se contempla que las diversas composiciones farmacéuticas usadas para la práctica del procedimiento de la presente invención deben contener de aproximadamente 0,1 µg a aproximadamente 100 mg (preferentemente de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 50 mg, más preferentemente de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 2 mg) del compuesto de la presente invención por kg de peso corporal.

La duración de la terapia intravenosa usando la composición farmacéutica de la presente invención variará, dependiendo de la gravedad de la enfermedad que se trate y de la afección y respuesta idiosincrásica potencial de cada paciente individual. Se contempla que la duración de cada aplicación de los compuestos de la presente invención estará en el intervalo de 12 a 24 horas de administración intravenosa continua. En último lugar, el médico decidirá la duración apropiada de la terapia intravenosa usando la composición farmacéutica de la presente invención.

Se ha preparado una formulación oral a base de lípidos de la presente invención mezclando PHOSAL.RTM. 53MCT al 50% (American Lecithin Company), Polisorbato 80 al 5%, glicéridos de Caprilocaproil macrogol-8 LABRASOL.RTM. al 15% (Gattefosse Corp.), Carbonato de Propileno al 15% y compuesto(s) inhibidor(es) de cPLA2 activo(s) al 15% de la presente invención, estando cada porcentaje indicado en una proporción en peso.

Las sales farmacéuticamente aceptables del compuesto de la invención pueden formarse a partir de bases orgánicas e inorgánicas. Son sales adecuadas con bases, por ejemplo, sales de metales, tales como sales de metales alcalinos o alcalinotérreos, por ejemplo, sales de sodio, potasio o magnesio; o sales con amoniaco o una amina orgánica, tal como morfolina, tiomorfolina, piperidina, pirrolidina, una mono-, di-o tri-alquilamina inferior, por ejemplo, etil-terc-butil-, dietil-, diiso-propil-, trietil-, tributil-o dimetilpropilamina, o una mono-, di, o trihidroxi-alquilamina inferior, por ejemplo mono-, di-o trietanolamina.

Los compuestos de la presente invención pueden contener un átomo asimétrico (también denominado un centro quiral), y algunos de los compuestos pueden contener uno o más átomos o centros asimétricos, que, de esta manera, pueden dar lugar a isómeros ópticos (enantiómeros) y diastereómeros. La presente invención incluye dichos isómeros ópticos (enantiómeros) y diastereómeros (isómeros geométricos); así como los enantiómeros R y S racémicos y resueltos, enantioméricamente puros, al igual que otras mezclas de los estereoisómeros R y S y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los isómeros ópticos pueden obtenerse en forma pura por procedimientos convencionales conocidos por los expertos en la materia, e incluyen, pero sin limitación, formación de sales diastereoméricas, resolución cinética y síntesis asimétrica. También se entiende que la presente invención incluye todos los regioisómeros posibles, y mezclas de los mismos, que pueden obtenerse en forma pura por procedimientos de separación convencionales conocidos por los expertos en la materia, e incluyen, pero sin limitación, cromatografía en columna, cromatografía de capa fina y cromatografía líquida de alta resolución.

Los nuevos compuestos de la presente invención pueden prepararse por una diversidad de rutas conocidas por un experto en la materia de la síntesis orgánica. Los compuestos de la presente invención pueden sintetizarse usando los procedimientos que se describen a continuación en la presente memoria, junto con procedimientos sintéticos conocidos en la técnica de la química orgánica sintética o variaciones de los mismos como se apreciará por los expertos en la materia.

Los compuestos de la presente invención pueden prepararse convenientemente de acuerdo con los procedimientos indicados en los siguientes esquemas, a partir de materiales de partida disponibles en el mercado, compuestos conocidos en la bibliografía o intermedios preparados de forma sencilla, empleando métodos y procedimientos sintéticos convencionales conocidos por los expertos en la materia. Los métodos y procedimientos sintéticos convencionales para la preparación de moléculas orgánicas y transformaciones y manipulaciones de grupos funcionales pueden obtenerse fácilmente a partir de la bibliografía sintética pertinente o a partir de libros de texto habituales en el campo. Se apreciará que cuando se dan las condiciones de proceso típicas o preferidas (es decir, temperaturas de reacción, tiempos, proporciones molares de reactivos, disolventes, presiones, etc.), también pueden usarse otras condiciones de proceso, a menos que se indique otra cosa. Las condiciones de reacción óptimas pueden variar con los reactivos particulares o disolventes usados, pero dichas condiciones pueden determinarse por un experto en la materia por procedimientos de optimización rutinarios. Los expertos en la materia de la síntesis orgánica reconocerán que la naturaleza y el orden de las etapas sintéticas presentadas pueden variarse con el fin de optimizar la formación de los compuestos de la invención.

Los procedimientos descritos en el presente documento pueden monitorizarse de acuerdo con cualquier procedimiento convencional conocido en la técnica. Por ejemplo, la formación del producto puede monitorizarse por medios espectroscópicos, tales como espectroscopía por resonancia magnética nuclear (por ejemplo, 1H o 13C), espetroscopía por infrarrojos, espectrofotometría (por ejemplo, UV-visible) o espetrometría de masas, o por cromatografía tal como cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) o cromatografía de capa fina.

La preparación de compuestos puede implicar la protección y desprotección de diversos grupos químicos. La necesidad de protección y desprotección, y la selección de grupos protectores apropiados, pueden determinarse fácilmente por un experto en la materia. La química de grupos protectores puede encontrarse, por ejemplo, en Greene, y col., Protective Groups in Organic Synthesis, 2ª Ed., Wiley & Sons, 1991.

Las reacciones de los procedimientos descritos en el presente documento pueden realizarse en disolventes adecuados que pueden seleccionarse fácilmente por un experto en la materia de la síntesis orgánica. Los disolventes adecuados pueden ser sustancialmente no reactivos con los materiales de partida (reactivos), los intermedios o productos a las temperaturas a las que se realizan las reacciones, es decir, temperaturas que pueden variar desde la temperatura de congelación del disolvente hasta la temperatura de ebullición del disolvente. Una reacción dada puede realizarse en un disolvente o una mezcla de más de un disolvente. Los disolventes adecuados para una etapa de reacción particular pueden seleccionarse dependiendo de la etapa de reacción particular.

Aunque no se desea limitarse a ninguna fuente, publicaciones y bibliografías tales como el documento WO 200044723; Li, J. P.; Newlander, K. A.; Yellin, T. O. Synthesis, 1988, 73-76; Gilchrist, T. L.; Roberts, T. G. J. Chem. Soc. Perkin. Trans 1 1983, 1283-1292 son referencias útiles y reconocidas de síntesis orgánica conocidas por los expertos en la materia.

Los compuestos de la invención se preparan usando técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia de la síntesis orgánica. Los materiales de partida usados en la preparación de los compuestos de la invención son conocidos, se fabrican por procedimientos conocidos o están disponibles en el mercado.

Los expertos en la materia de la síntesis orgánica reconocerán que la naturaleza y el orden de las etapas sintéticas presentadas pueden variarse con el fin de optimizar la formación de los compuestos de la invención. Ejemplos

Los siguientes ejemplos describen la preparación de ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometil)ben-zil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3-il}etil)sulfonil]fenil} propanoico y los ejemplos de referencia en más detalle. Los siguientes ejemplos se ofrecen con fines ilustrativos, y no pretenden limitar la invención de ningún modo. Los expertos en la materia reconocerán fácilmente una diversidad de parámetros no críticos que pueden cambiarse o modificarse para producir básicamente los mismos resultados.

Los datos espectrales de masas se indican como la proporción masa a carga, m/z;y para los datos espectrales de masas de alta resolución, las masas calculadas y observadas de forma experimental, se indican como [M+H]+, en las fórmulas neutras M. Los datos de resonancia magnética nuclear se indican como δ en partes por millón (ppm) campo abajo del patrón, tetrametilsilano; junto con los parámetros de disolvente, núcleo e intensidad de campo.

Las constantes del acoplamiento espín-espín homonuclear se indican como valores J en hertzios; y las multiplicidades se indican como: s, singlete; d, doblete; t, triplete; c, cuadruplete; quintete; o a, ancho.

Esquemas Sintéticos Generales para la Preparación de Compuestos

Los compuestos de la invención pueden prepararse por los procedimientos de los Procedimientos A-E, mostrados a continuación:

Procedimiento A

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Como se ha mostrado anteriormente en el Procedimiento A, un indol inicial puede

alquilarse en la posición C3 (el átomo de carbono en la posición 3 del resto de indol) con aldehídos o los acetales correspondientes en presencia de un ácido de Lewis o de Bronsted, tal como eterato de trifluoruro de boro o ácido trifluoroacético. Después, el nitrógeno del indol puede alquilarse por tratamiento con una base fuerte, tal como bis(trimetilsilil)amida sódica, n5 BuLi, hidruro sódico o hidruro potásico en un disolvente, tal como DMF, DMSO o THF seguido de exposición al haluro de alquilo apropiado. El producto resultante puede tratarse con tetrabromuro de carbono en tetracloruro de carbono y una cantidad catalítica de peróxido de benzoílo para realizar la dibromación del grupo metilo C2. Después, el dibromuro puede agitarse con carbonato de plata en acetona-agua o verterse en DMSO y agitarse. Ambos 10 procedimientos generan el aldehído que después se somete a la reacción de nitro aldol con nitrometano y acetato amónico a la temperatura de reflujo. El intermedio de vinil nitro resultante se reduce para dar la amina tras el tratamiento con amalgama de cinc y mercurio en una mezcla de THF y HCl conc. a la temperatura de reflujo. Después, esta amina puede tratarse con el cloruro de sulfonilo requerido en condiciones bifásicas, bicarbonato sódico

15 acuoso/diclorometano, o en un disolvente orgánico con la adición de una base de amina orgánica impedida. La hidrólisis final puede realizarse en condiciones básicas con hidróxido sódico en agua y metanol y THF a temperatura ambiente o a temperatura elevada. Como alternativa, puede escindirse por tratamiento con trimetóxido sódico en un disolvente tal como THF o DMF a temperatura elevadas (50ºC-100ºC).

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Como se ha mostrado anteriormente en el Procedimiento B, un haluro se coloca en un recipiente con un ácido borónico, una base (por ejemplo, KF), una fuente de paladio (por

5 ejemplo, Pd(OAc)2), un ligando (por ejemplo, PPh3) y un disolvente desgasificado adecuado, por ejemplo DMF, MeOH, agua o una combinación de los mismos. Después, la mezcla se calienta térmicamente o en un reactor de microondas. El tratamiento convencional produce el producto protegido (éster), que después se hidroliza en una base para proporcionar el producto de ácido libre.

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Como se ha mostrado en el Procedimiento C anterior, un compuesto que contiene formilo se trata con una amina, una fuente ácida, si es necesiario, y un agente reductor adecuado, tal como NaBH(OAc)3. La reacción se deja en agitación a temperatura ambiente, o puede calentarse si es necesario. El tratamiento convencional produce el producto protegido (éster), que después se hidroliza en una base para proporcionar el producto de ácido libre.

Procedimiento D

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Como se ha mostrado en el Procedimiento D anterior, una amina halo sustituida de forma apropiada se hace reaccionar con anhídrido trifluoroacético para producir un intermedio 5 que puede tratarse con un catalizador de Pd (II) en presencia de una base tal como trietilamina, Cul y un alquino adecuado, en condiciones de calor para producir el intermedio de indol deseado. El alcohol primario se protege como un silil éter usando un cloruro de sililo, tal como cloruro de t-butildifenil sililo y una base, tal como imidazol. Después, el indol protegido se trata con cloruro de oxalilo seguido de metanol, que produce el éster de oxalato deseado, cuyo nitrógeno del indol puede alquilarse usando una base adecuada, tal como carbonato de cesio en acetonitrilo a la temperatura de reflujo y un haluro. Después, el oxalato puede reducirse a través de la acción de un agente reductor adecuado tal como borano. El alcohol primario 5 resultante se convierte en un haluro usando, por ejemplo, CBr4 y una fosfina, que después puede desplazarse con un nucleófilo, tal como un tiofenol. El tioéter resultante puede oxidarse mediante una diversidad de agentes de oxidación incluyendo oxona y TPAP/NMO. La sulfona resultante puede desprotegerse a través de la acción de una fuente de fluoruro, tal como TBAF, CsF o HF. El alcohol resultante puede convertirse en un haluro o un mesilato, por 10 ejemplo usando cloruro de metanosulfonilo y una base orgánica, que después puede desplazarse con azida sódica en DMF. La azida de alquilo resultante puede reducirse por la acción de trifenil fosfina y THF húmedo. La amina puede sulfonarse por la acción de un cloruro de sulfonilo en condiciones bifásicas de Schotten-Baumann (bicarbonato ac. y diclorometano) o en condiciones anhidras, que consisten en diclorometano y una base orgánica, tal como una

15 base de Hunig. El intermedio de éster resultante se hidroliza usando una base, tal como NaOH, KOH o LiOH, y una mezcla de disolventes, incluyendo un disolvente alcohólico, agua y tetrahidrofurano.

Procedimiento E:

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Como se ha mostrado en el Procedimiento E anterior, un aminoácido de partida se esterifica y se N-alquila en un solo recipiente (usando, por ejemplo, un reactivo diazo o un reactivo trimetilsilildiazo). Después, este éster de N-alquilo se sulfona con un cloruro de sulfonilo usando condiciones de Schotten-Baumann o disolventes orgánicos y bases orgánicas. Finalmente, el éster de N-alquilo se hidroliza para dar el producto deseado usando una base, tal como NaOH, y un sistema de disolventes adecuado, tal como THF y un alcohol.

Los siguientes compuestos se prepararon de acuerdo con los Procedimientos A-E anteriores. Ejemplo 1 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{2-[2-[2-({[2-(benciloxi)bencil]sulfonil}amino)etil]-5-cloro-1-(difenilmetil)-1H-indol-3il]etoxi}benzoico

Etapa 1: A éster metílico del ácido 4-hidroxi-benzoico (1,0 equiv.) en DMF (0,83 M) se le añadió K2CO3 (2,0 equiv.) seguido de 2-bromo-1,1-dietoxi-etano y la mezcla de reacción se agitó a 110ºC durante 2 días. El análisis por TLC mostró un nuevo punto. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, se lavó con NaOH 1 N, agua y salmuera, se secó sobre sulfato sódico y el disolvente se retiró, proporcionando el producto deseado con un rendimiento del 84%. Este material se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 2: Al producto anterior (1,0 equiv.) y 5-cloro-2-metil indol (1,0 equiv.) en CH2Cl2 (0,12 M) se les añadió trietilsilano (3,0 equiv.) seguido de ácido trifluoroacético (3,0 equiv.). Después de agitar durante una noche a temperatura ambiente, a la mezcla de reacción se le añadieron agua y ácido trifluroacético (1,0 equiv.) y se agitó a temperatura ambiente durante dos días, se diluyó con CH2Cl2, se lavó con NaOH 1 N, agua y salmuera, y se secó sobre sulfato sódico. La trituración del material con CH2Cl2 y hexanos, proporcionó el indol alquilado C3 con un rendimiento del 92%.

Etapa 3: Al indol anterior (1,0 equiv.) en DMF (0,36 M) a 25ºC se le añadió NaH (1,2 equiv., dispersión al 60% en aceite). La solución de color pardo se agitó de 0 a -5ºC durante 1 h y después se añadió bromodifenilmetano (1,1 equiv.). La mezcla de reacción se agitó durante una noche, después se inactivó con agua, se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se purificó por cromatografía en columna, produciendo el 72% del producto deseado.

Etapa 4: Al indol N-alquilado anterior (1,0 equiv.) en CCl4 (0,2 M) se le añadieron Nbromosuccinimida (2,0 equiv.) y una cantidad catalítica de peróxido de benzoílo. La solución se calentó a reflujo durante 3 h, se enfrió a 25ºC, se filtró y el sólido se lavó con CCl4. El filtrado se concentró, dando una espuma que se secó al vacío. La espuma se disolvió en acetona, se añadió Ag2CO3 (1,1 equiv.) seguido de agua y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente, después se filtró y se lavó con acetona. El filtrado se concentró, dando un residuo, al que se le añadió agua. Esta mezcla se extrajo con acetato de etilo, se lavó con salmuera y se secó sobre sulfato sódico. La purificación cromatográfica del residuo dio el producto deseado con un rendimiento del 85%.

Etapa 5: Al aldehído anterior (1,0 equiv.) en CH3NO2 (0,2 M) se le añadió acetato amónico (4 equiv.) y la mezcla resultante se calentó a reflujo durante 4 h. Después, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con salmuera. La fase acuosa se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron hasta que precipitó un sólido cristalino de color naranja. La mezcla se refrigeró durante una noche y la nitroolefina (rendimiento del 76%) se recogió por filtración. La evaporación de la fase de solución y la purificación del residuo por cromatografía en columna (gradiente de elución de tolueno al 100% → EtOAc al 1%-tolueno) proporcionaron una cantidad adicional de la nitroolefina (rendimiento del 23%).

Etapa 6: Se suspendió polvo de cinc (20 equiv.) en una solución acuosa al 5% de HCl (Zn 8 M/HCl al 5%). A esta mezcla se le añadió HgCl2 (0,28 equiv.). La mezcla se agitó durante 10 min, la fase acuosa se decantó y se reemplazó con HCl al 5% recién preparado, la mezcla se agitó de nuevo durante 5 min y la fase acuosa se retiró. Después, la amalgama de cinc-mercurio generada de este modo se añadió a una mezcla de la nitrootefina (1,0 equiv.) y HCl conc. (80 equiv.) en THF (nitroolefina 0,04 M/THF). La mezcla se mantuvo a suave reflujo durante 1 h. La formación de producto se siguió de análisis por TLC. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y los sólidos se retiraron por filtración a través de Celite. Se añadió NH4OH conc. a la fase de solución y la mezcla se concentró en el evaporador rotatorio. El residuo se disolvió en CH2Cl2 y NH4OH conc. La fase acuosa se extrajo con CH2Cl2 y la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se concentró. La purificación por cromatografía en columna proporcionó el producto deseado (rendimiento del 65%).

Etapa 7: Se añadió sulfito sódico (4,2 g) a una mezcla agitada de 1-benciloxi-2bromometil-benceno (8,9 g), yoduro de tetrabutilamonio (59 mg) y agua (150 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante una noche. Mientras se enfriaba la mezcla a 0ºC, se acidificó con HCl 6 N. Se realizó la extracción con acetato de etilo (100 ml x 6) (quedó un poco de material en la fase acuosa). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4. El filtrado se concentró al vacío. El producto se trituró con éter etílico, dando ácido (2-benciloxi-fenil)metanosulfónico (678 mg, al 8%). RMN 1H (400 MHz, DMSO-D6): δ 3,82 (s, 2 H) 5,09 (s, 2 H) 6,86 (t, J = 7,45 Hz, 1 H) 6,96 (d, J = 8,08 Hz, 1 H) 7,14 (t, J = 7,83 Hz, 1 H) 7,32 (d, J = 7,33 Hz, 1 H) 7,38 (t, J = 7,33 Hz, 2H) 7,46 (d, J = 9,09 Hz, 1 H) 7,52 (d, J = 7,07 Hz, 2 H).

Etapa 8: Se enfriaron tetrahidrofurano (10 ml), ácido (2-benciloxi-fenil)-metanosulfónico (138 mg) y N,N-dimetilformamida (2 gotas) a -78ºC y se añadió lentamente cloruro de oxalilo (315 mg). La mezcla de reacción se agitó durante 3 h de -78ºC a 0ºC. La mezcla de reacción se aclaró por filtración. El filtrado se lavó con agua enfriada con hielo y heptano y se secó, dando cloruro de (2-benciloxi-fenil)-metanosulfonilo (114 mg, al 77%). RMN 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,06 (s, 2 H) 5,15 (s, 2 H) 7,04 (m, 2 H) 7,42 (m, 7 H).

Etapa 9: A 4-{2-[2-(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]etoxi}benzoato de metilo (1,0 equiv., Etapa 6) y NaHCO3 sat. (0,14 M) en CH2Cl2 (0,07 M) se le añadió cloruro de (2-benciloxi-fenil)-metanosulfonilo (1,0 equiv., etapa 8). Después de 16 h, la mezcla se vertió en bicarbonato sódico saturado y se extrajo con CH2Cl2. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se purificó por cromatografía en columna, proporcionando el 77% del producto deseado.

Etapa 10: El éster resultante se hidrolizó por agitación con NaOH 1 N (5 equiv.) en THF (0,07 M) y una cantidad suficiente de MeOH, produciendo una solución transparente. La reacción se monitorizó mediante análisis por TLC (MeOH al 10%-CH2Cl2) para comprobar la desaparición del material de partida. Cuando la reacción se completó, la mezcla se concentró, se diluyó con H2O y se acidificó a pH 2-4 usando HCl 1 M. La fase acuosa se extrajo con EtOAc y la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se concentró, proporcionando el ácido del título con un rendimiento del 97%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,86 (d, J = 14,40 Hz, 2 H) 2,92-3,04 (m, 2H) 3,13 (t, J = 6,69 Hz, 2 H) 4,12-4,23 (m, 2H) 4,28 (s, 2 H) 4,34-4,45 (m, 1 H) 4,90 (s, 2 H) 6,47 (d, J = 8,84 Hz, 1 H) 6,73-6,93 (m, 6 H) 6,95-7,08 (m, 4 H) 7,16-7,36 (m, 13 H) 7,53 (d, J = 1,77 Hz, 1 H) 7,92-8,04 (m, 2 H); EMAR calc. para [C46H41ClN2O6,S + H] 783,2301 observado 783,2292; pureza de H2O/MeOH al 97%, H2O/MeCN al 95%. Ejemplo 2 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{2-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-hidroxibencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3il]etoxi}benzoico

Etapa 1: A ácido 4-{2-[2-[2-({[2-(benciloxi)bencil]sulfonil}amino)etil]-5-cloro-1(difenilmetil)-1H-indol-3-il]etoxi}benzoico (Etapa 9, Ejemplo 1, 109 mg, 0,14 mmol) se le añadieron THF y MeOH. Se añadió Pd al 10%/C (11 mg). La mezcla se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de H2 (1 atm) durante una noche, se filtró a través de celite, se concentró y se sometió a cromatografía en columna (EtOAc al 35%/hex), dando éster metílico del ácido 4-(2-{1-benzhidril-5-cloro-2-[2-(2-hidroxi-fenilmetanosul-fonilamino)-etil]-1H-indol-3-il}etoxi)-benzoico (74 mg, al 76%), un sólido de color blanquecino.

Etapa 2: El intermedio de éster se hidrolizó de acuerdo con la Etapa 10, Ejemplo 1, proporcionando el ácido del título con un rendimiento del 85%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ

2,87-3,01 (m, 2 H) 3,00-3,11 (m, 2 H) 3,18 (t, J = 6,57 Hz, 2 H) 4,17 (s, 2 H) 4,19-4,30 (m, 2 H) 4,52 (t, J = 5,81 Hz, 1 H) 6,52 (d, J = 8,84 Hz, 1 H) 6,75-6,90 (m, 6 H) 6,99 (dd, J = 7,45, 1,64 Hz, 1 H) 7,01-7,13 (m, 4 H) 7,13-7,22 (m, 1 H) 7,27-7,37 (m, 6 H) 7,53 (d, J = 2,02 Hz, 1 H) 7,91-8,04 (m, 2 H); EMAR calc. para [C39H35ClN2O6,S + H] 695,1977 observado 695,1984. Ejemplo 3 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{2-[5-cloro-2-(2-{[(2,6-dibromobencil)sulfonil]amino}etil)1-(difenilmetil)-1H-indol-3il]etoxi}benzoico

Etapa 1. A una solución de 2,6-dibromotolueno (5,38 g, 21,53 mmol) en benceno (1,54 M) se le añadieron N-bromo-succinimida (4,21 g, 23,68 mmol) y peróxido de benzoílo (0,52 g, 2,15 mmol). Después, la mezcla se calentó a reflujo durante una noche. La mezcla se enfrió a ta, se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 y se concentró, proporcionando 7,65 g del bromuro de bencilo, un sólido de color pardo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 4,83 (s, 2 H), 7,01 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,55 (d, J = 8,1 Hz, 2 H).

Etapa 2. A una solución del bromuro de 2,6-dibromobencilo (1,0 equiv., Etapa 1) en DMF (1,30 M) se le añadió tioacetato de potasio (1,2 equiv.) y la mezcla se dejó en agitación a ta durante 3-4 h. La reacción se monitorizó por CL/EM para comprobar la desparición del material de partida. La mezcla se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 y se concentró, proporcionando 6,70 g (89%) del tioacetato de bencilo en forma de un aceite de color pardo.

Etapa 3. A una solución del tioacetato (1,0 equiv., 6,70 g, 20,7 mmol) en AcOH (0,19 M) y H2O (0,91 M) se le añadió acetato sódico (6,7 equiv.). Después, se burbujeó vigorosamente cloro a través de la mezcla de reacción durante un periodo de 30-45 min. Después, la mezcla se concentró, se diluyó con éter, se lavó con H2O y salmuera, se secó con MgSO4 y se concentró, proporcionando 5,30 g (74%) del cloruro de 2,6-dibromofenil-metanosulfonilo deseado, un sólido de color pardo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 5,55 (s, 2 H), 7,17 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,67 (d, J = 8,1 Hz, 2H).

Etapa 4. Se hizo reaccionar éster metílico del ácido 4-{2-[2-(2-amino-etil)-1-benzhidril-5cloro-1H-indol-3-il]-etoxi}-benzoico (Ejemplo 1, Etapa 6, 126 mg, 0,23 mmol) con cloruro de 2,6-dibromofenil-metanosulfonilo (Etapa 3) de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 1, Etapa 9, proporcionando 203 mg de la sulfonamida deseada en forma de un sólido de color blanco con rendimiento cuantitativo.

Etapa 5. Usando el procedimiento del Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster de sulfonamida (175 mg, 0,206 mmol), proporcionando 146 mg (85%) del producto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,87-3,03 (m, 2 H), 3,06-3,14 (m, 2 H), 3,22 (t, J = 6,9 Hz, 2 H), 4,23 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 4,53 (t, J = 5,9 Hz, 1 H), 4,72 (s, 2 H), 6,51 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,82 (dd, J = 9,0, 2,1 Hz, 1 H), 6,87 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 6,92 (s, 1 H), 6,97 (t, J = 8,0 Hz, 1, H), 7,05-7,12 (m; J = 6,2, 2,9 Hz, 4 H), 7,29-7,34 (m, 6 H), 7,49 (d, J = 8,1 Hz, 2 H), 7,54 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,00 (d, J = 8,8 Hz, 2 H). Ejemplo 4 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(2-{1-benzhidril-5-cloro-2-[2-metil-6-nitro-fenilmetanosulfonilamino)-etil-1-H-indol-3-il}etoxi)-benzoico

Etapa 1. A una solución de ácido 2-metil-6-nitrofenilbenzoico (3,02 g, 16,67 mmol) en cloruro de tionilo (0,56 M) se le añadió DMF (cat.) y la mezcla se calentó a reflujo durante 5,5

h. Después, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. Después, el residuo se recogió en THF (30 ml) y se añadió lentamente durante 20 min a una suspensión de NaBH4 en THF (30 ml) que se había enfriado previamente a 0ºC. La mezcla se agitó a ta durante 2 h y después se inactivó mediante la adición de H2O seguido de HCl 4 M. La mezcla se extrajo con EtOAc. La fase orgánica combinada se lavó con NaHCO3 sat. y salmuera, se secó sobre MgSO4 y se concentró, proporcionando 2,52 g (90%) del alcohol bencílico, un sólido de color naranja. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,55 (s, 3 H), 4,70 (s, 2 H), 7,35 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,48 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1 H).

Etapa 2. A una solución del alcohol bencílico (2,52 g, 15,07 mmol) en CH2Cl2 (0,12 M) enfriado a -78ºC y en una atmósfera de argón se le añadió lentamente BBr3, 1,0 M en CH2Cl2 (23 ml, 22,6 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche y después se diluyó con H2O (150 ml). Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4 y se concentró, proporcionando 2,97 g (86%) de bromuro de 2-metil-6nitrobencilo, un sólido de color pardo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,53 (s, 3 H), 4,72 (s, 2 H), 7,36 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,46(d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,75 (d, J = 8,1 Hz, 1 H).

Etapa 3. Se hizo reaccionar bromuro de 2-metil-6-nitrobencilo (Etapa 2, 1,5 g, 6,5 mmol) con tioacetato potásico de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 3, Etapa 2, proporcionando 1,44 g del tioacetato de bencilo, un aceite de color pardo.

Etapa 4. Siguiendo el procedimiento del Ejemplo 3, Etapa 3, se oxidó el tioacetato de bencilo (1,44 g, 6,39 mmol), proporcionando 1,35 g (84%) de cloruro de (2-metil-6nitrofenil)metanosulfonilo, un sólido de color naranja. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,62-2,65 (m, 3 H), 5,68 (s, 2 H) Ancho, 7,54 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,58-7,60 (m, 1 H), 7,91 (d, J = 7,8 Hz, 1 H).

Etapa 5. Usando el procedimiento del Ejemplo 1, Etapa 9, se hizo reaccionar éster metílico del ácido 4-{2-[2-(2-amino-etil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]-etoxi}-benzoico (Ejemplo 1, Etapa 6, 255 mg, 0,47 mmol) con el cloruro de sulfonilo de la Etapa 4, proporcionando 318 mg de la sulfonamida, un sólido de color amarillo con un rendimiento del 90%.

Etapa 6. El éster de sulfonamida (101 mg, 0,13 mmol) se hidrolizó de acuerdo con Ejemplo 1, Etapa 10, proporcionando 87 mg (91%) del producto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,48 (s, 3 H), 2,87-2,99 (m, 2 H), 3,03-3,10 (m, 2 H), 3,22 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 4,23 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 4,33 (t, J = 5,9 Hz, 1 H), 4,77 (s, 2 H), 6,51 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,82 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,88 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 6,91 (s, 1 H), 7,04-7,12 (m, 4 H), 7,29-7,35 (m, 7 H), 7,42 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,54 (d, J = 2,0 Hz, 1 H); 7,66 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,99 (d, J = 8,8 Hz, 2H); Ejemplo 5 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(2-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3il}etoxi)benzoico

Etapa 1: Una mezcla de bromuro de 2-(trifluorometil)bencilo (25 g, 0,14 mol), sulfito sódico (19,1 g, 0,15 mol), yoduro de tetrabutilamonio (0,224 g, 0,6 mmol) y H2O (930 ml) se calentó a reflujo durante 2 d. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y la fase acuosa se decantó a partir del residuo oleoso y se concentró en el evaporador rotatorio a sequedad, proporcionando la sal sódica deseada (22,2 g, 60%), en forma de un sólido de color blanco, que se usó sin purificación adicional.

Etapa 2: Se suspendió sal sódica del ácido (2-trifluorometilfenil)metanosulfónico (22,2 g, 84 mmol) en MeOH (950 ml) y se enfrió a -20ºC. A esta temperatura con enfriamiento continuo, se burbujeó HCl (g) a través de la mezcla durante 5 min. La suspensión de color blanco resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h y después se enfrió en un baño de hielo. La suspensión resultante se filtró y el sólido recogido se dejó secar al aire durante una noche, proporcionando ácido (2-trifluorometilfenil)metanosulfónico (20,3 g, ~100%), un sólido de color blanco, que se usó sin purificación adicional.

Etapa 3: A una suspensión de ácido (2-trifluorometilfenil)metanosulfónico (20,3 g, 84 mmol) en THF (1,9 l) y DMF (5,0 ml) a -20ºC se le añadió lentamente gota a gota cloruro de oxalilo (44,7 ml, 0,5 mol) durante 1 h. La temperatura del baño se mantuvo por debajo de 0ºC durante 4 h, momento en el que la reacción se evaporó, dando un volumen de ~250 ml y se diluyó con 500 ml de acetato de etilo. Esta solución se lavó con salmuera en un embudo de decantación y se secó sobre sulfato de magnesio. Después, la solución se evaporó, dando un aceite de color pardo. Este aceite se recogió en 500 ml de éter de pet. (30-50ºC) y se calentó con una pistola de calor hasta que el aceite se convirtió en una solución. Después, la solución se puso en un baño de hielo seco-acetona para enfriar la solución, dando como resultado la formación de un material cristalino de color blanco. Este material se recogió por filtración y se secó, proporcionando 19 g (85%) de cloruro de (2-trifluorometilfenil)metanosulfonilo en forma de un sólido de color blanco.

Etapa 4: Como se ha indicado en la Etapa 9, Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{2-[2-(2aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]etoxi}benzoato de metilo (Etapa 9, Ejemplo 1, 0,15 g, 0,28 mmol) con cloruro de 2-(trifluorometilfenil)metanosulfonilo (0,145 g, 0,50 mmol), proporcionando 0,220 g de la sulfonamida, una espuma de color blanco, con un rendimiento del 75%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,73-2,88 (m, 2 H), 2,96-3,09 (m, 2 H), 3,16 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 3,88 (s, 3 H), 4,19 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 4,23 (t, J = 6,4 Hz, 1 H), 4,34 (s, 2 H), 6,51 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,77-6,84 (m, 3 H), 6,86 (s, 1 H), 6,98-7,12 (m, 4 H), 7,27-7,35 (m, 6 H), 7,367,47 (m, 2 H), 7,53 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 7,59-7,69 (m, 2 H), 7,95 (d, J = 8,8 Hz, 2 H).

Etapa 5: Usando el procedimiento de la Etapa 10 Ejemplo 1, el éster de sulfonamida (137 mg, 0,18 mmol) se hidrolizó, proporcionando 86 mg (64%) del producto del título, un polvo de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,04 (s, 4 H), 3,18 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 4,23 (t, J = 5,9 Hz, 2 H), 4,42 (s, 2 H), 6,48 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,81 (dd, J = 9,0, 2,1 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 9,1 Hz, 2 H), 7,03-7,18 (m, 5 H), 7,29-7,42 (m, 6 H), 7,48-7,62 (m, 3 H), 7,66 (d, J = 2,0 Hz, 2 H), 7,72 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,85 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 12,49 (s, 1 H); EMAR: calc. para C40H34ClF3N2O5S + H+, 747,19018; observado (IEN-EMTF. [M+H]1+), 747,1886; pureza por HPLC de H2O/CH3CN: 96,2%, H2O/MeOH: 95,4%. Ejemplo 6 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(2-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-fluoro-6-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1Hindol-3-il}etoxi)benzoico

Etapa 1: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 1, el bromuro de 2fluoro-6-(trifluorometilfenil)bencilo (15 g, 61 mmol) proporcionó la sal sódica del ácido 2-fluoro6-(trifluorometilfenil)metanosulfónico (15 g, al 89%), un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,02 (s, 2 H), 7,26-7,66 (m, 3 H).

Etapa 2: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 2, la sal sódica del ácido 2-fluoro-6-(trifluorometilfenil)metanosulfónico (15 g, 53 mmol) proporcionó ácido 2-fluoro6-(trifluorometilfenil)metanosulfónico (15 g), un aceite de color naranja pálido que se usó sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,12 (s, 2 H), 7,39-7,73 (m, 3 H).

Etapa 3: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 3, el ácido 2-fluoro-6(trifluorometilfenil)metanosulfónico (15 g, 53 mmol) proporcionó 11 g del producto en bruto que se purificó por cristalización a baja temperatura en hexanos, proporcionando cloruro de 2fluoro-6-(trifluorometilfenil)metanosulfonilo (9,0 g, al 62%). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 5,31 (s, 2 H), 7,38-7,51 (m, 1 H), 7,58-7,68 (m, 2 H).

Etapa 4: Como se ha indicado en la Etapa 9, Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{2-[2-(2

aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]etoxi}benzoato de metilo (Etapa 6, Ejemplo 1, 0,12 g, 0,22 mmol) con cloruro de 2-fluoro-6-(trifluorometilfenil)metanosulfonilo (0,074 g, 0,27 mmol), proporcionando 0,164 g de la sulfonamida, una espuma de color blanco, con un rendimiento del 95%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,83-3,03 (m, 2 H), 3,07-3,17 (m, 2 H), 3,21 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 3,88 (s, 3 H), 4,22 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 4,31 (t, J = 6,3 Hz, 1 H), 4,43 (s, 2 H), 6,52 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 6,76-6,89 (m, 3 H), 6,92 (s, 1 H), 7,07 (dd, J = 6,1, 4,3 Hz, 4 H), 7,23 (t, J = 8,6 Hz, 2 H), 7,28-7,34 (m, 5 H), 7,38-7,52 (m, 2 H), 7,54 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 7,95 (d, J = 9,1 Hz, 2 H).

Etapa 5: Usando el procedimiento de la Etapa 10, Ejemplo 1, el éster de sulfonamida (136 mg, 0,17 mmol) se hidrolizó, proporcionando 130 mg (97%) del producto del título, un polvo de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,00-3,15 (m, 4 H), 3,17 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 4,22 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 4,45 (s, 2 H), 6,46 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,97 (d, J = 9,1 Hz, 2 H), 7,03-7,13 (m, 5 H), 7,16-7,41 (m, 6 H), 7,48-7,70 (m, 4 H), 7,747,90 (m, 3 H), 12,56 (s, 1 H); EMAR: calc. para C40H33ClF4N2O5S + H+, 765,18076; encontrado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 765,1814; pureza HPLC de H2O/CH3CN: 96,6%, H2O/MeOH: 97,9%. Ejemplo 7 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-2-(2-{[(2,6-dibromobencil)sulfonil]amino}etil)-1-(difenilmetil)-1H-indol-3il]propil}benzoico

Etapa 1: Una mezcla de 4-yodobenzoato de metilo (5,3 g, 20,2 mmol), alcohol arílico (1,78 g, 30,3 mmol), NaHCO3 (4,24 g, 50,5 mmol), Pd(OAc)2 (0,14 g, 0,60 mmol), (n-Bu)4NBr (6,55 g, 20,2 mmol) y tamices molecualres de 4 Å (4,1 g) en DMF anhidra (69 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 4 días. La mezcla de reacción se filtró a través de celite y el filtrado se vertió en agua y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre (Na2SO4) y se concentró al vacío. La cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, EtOAc al 10-20%-hexanos) dio 2,11 g (85% en base al material de partida recuperado) del éster metílico del ácido 4-(3-oxo-propil)-benzoico deseado en forma de un aceite transparente.

Etapa 2: A una solución de 5-cloro-2-metilindol (0,86 g, 5,2 mmol) y éster metílico del ácido 4-(3-oxo-propil)-benzoico (1,0 g, 5,2 mmol) en cloruro de metileno (50 ml) se le añadió TFA (1,78 g, 15,6 mmol) seguido de trietilsilano (1,81 g, 15,6 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante una noche, se inactivó con una solución sat. de NaHCO3 (50 ml) y la fase orgánica se lavó con una solución sat. de NaHCO3, agua y salmuera y se secó (Na2SO4). El disolvente se retiró a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida con EtOAc al 10-20%/hexanos, produciendo el producto deseado (1,67 g) con un rendimiento del 94%.

Etapa 3: A una solución del producto de la etapa 2 (1,66 g, 4,86 mmol) en DMF (20 ml)

se le añadió NaH (al 60% en aceite mineral, 0,24 g, 5,83 mmol) en una atmósfera de N2. La mezcla se agitó durante 1 h a temperatura ambiente seguido de la adición gota a gota de bromuro de benzhidrilo (1,8 g, 7,29 mmol) en DMF (5 ml). Esta mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. Se añadió agua (500 ml) y la mezcla se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó (Na2SO4) y se concentró a presión reducida, dando un jarabe de color pardo, que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando EtOAc al 10%/hexanos como eluyente, aislando el N-benzhidrilindol en forma de un sólido de color blanco (1,47 g) con un rendimiento del 59%.

Etapa 4: El producto anterior (1,46 g, 2,87 mmol) se disolvió en CCl4 (14,5 ml) seguido de la adición de NBS (1,02 g, 5,73 mmol) y peróxido de benzoílo (2 mg). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 h (hasta que todo el material de partida desapareció según se determinó mediante el análisis por TLC). Esta mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se filtró y el sólido se lavó con CCl4. El filtrado se evaporó, dando un residuo de color pardo, que se disolvió en acetona (40 ml) y agua (4 ml). Después, a esta solución se le añadió Ag2CO3 (1,75 g, 3,16 mmol) y después de agitar durante una noche a temperatura ambiente, se filtró a través de celite, el disolvente se evaporó a presión reducida y al residuo se le añadió agua. Se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó (Na2SO4) y se evaporó, dando un jarabe, que se purificó por EtOAc al 10%/hexanos, aislando el 2-formil indol (1,13 g) con un rendimiento del 75%.

Etapa 5: A una solución del 2 formil indol anterior (0,52 g, 1 mmol) en CH3NO2 (6,2 ml) se le añadió NH4OAc (0,077 g, 1 mmol), la mezcla se calentó a reflujo durante 1 h, después se añadió NH4OAc (0,077 g, 1 mmol), el calentamiento a reflujo continuó durante 1 h más, se añadió de nuevo NH4OAc (0,077 g, 1 mmol) y el calentamiento continuó durante 1 h más. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se añadió EtOAc (50 ml) seguido de agua (100 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc, y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4) y se evaporaron, dando una espuma de color amarillo, que se sometió a purificación cromatográfica usando EtOAc al 10%/hexanos como eluyente, produciendo la nitroolefina en forma de una espuma de color amarillo (0,38 g) con un rendimiento del 68%.

Etapa 6: Se preparó Zn(Hg) mediante la adición de HgCl2 (3,4 g, 7,2 mmol) a una mezcla de polvo de Zn (34,7 g, 530,4 mmol) y HCl al 5% (38 ml) en un vaso de precipitados de 100 ml. La mezcla se agitó vigorosamente durante 10 min. La fase acuosa se decantó, se añadieron 38 ml de HCl al 5% al Zn(Hg) y la mezcla se agitó durante 10 min. La fase acuosa se decantó. El sólido de Zn(Hg) se añadió al compuesto de vinil nitro de la Etapa 5 (15 g, 26,57 mmol) en THF (660 ml) y HCl conc. (64,5 ml). Esta mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y después se calentó a reflujo durante 15 min. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de celite. Al filtrado se le añadió una solución ac. de NH4OH (200 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 15 min y la mezcla se concentró para retirar el THF. La fase acuosa se extrajo con CH2Cl2 y la fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó (Na2SO4) y se concentró, dando una espuma de color pardo, que se purificó por cromatografía en columna eluyendo la columna con CHCl3 al principio para retirar las impurezas no polares y después con MeOH al 2%/CHCl3, aislando la amina deseada con un rendimiento del 46% (6,1 g).

Etapa 7. Como se ha indicado en la etapa 9, Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2-(2aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Etapa 6, 128 mg, 0,24 mmol) con cloruro de 2,6-dibromo-fenil-metanosulfonilo (Etapa 3, Ejemplo 3), proporcionando 203 mg de la sulfonamida, un sólido de color castaño con un rendimiento del 100%.

Etapa 8. Usando el procedimiento de la etapa 10, Ejemplo 1, el éster de sulfonamida (175 mg, 0,206 mmol) se hidrolizó, proporcionando 133 mg (77%) del producto del título, un sólido de color amarillo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,91-2,02 (m, 2 H), 2,75 (t, J = 8,1 Hz, 4 H), 2,86-2,94 (m, 2 H), 2,94-3,03 (m, 2 H), 4,46-4,54 (m, 1 H), 4,70 (s, 2 H), 6,49 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J = 9,0, 1,9 Hz, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 6,96 (t, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,04-7,11 (m, J = 6,2, 2,4 Hz, 4 H), 7,25-7,34 (m, 8 H), 7,40 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 7,48 (d, J = 7,8 Hz, 2 H), 8,00 (d, J = 7,8 Hz, 2 H). Ejemplo 8 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-2-(2-{[(2,6-diclorobencil)sulfonil]amino}etil)-1-(difenilmetil)-1H-indol-3il]propil}benzoico

Etapa 1: Usando las condiciones del Ejemplo 3, Etapa 1, se hizo reaccionar bromuro de 2,6-diclorobencilo (3,32 g, 13,84 mmol) con tioacetato potásico, proporcionando 2,92 g (90%) del tioacetato de bencilo.

Etapa 2: Usando el procedimiento del Ejemplo 3, Etapa 2, se oxidó el tioacetato de bencilo (2,90 g, 12,33 mmol), proporcionando 1,7 g (53%) del cloruro de sulfonilo, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 5,43 (s, 2 H), 7,32-7,39 (m, 1 H), 7,43-7,50 (m, 2 H).

Etapa 3: Como se ha indicado en la Etapa 9, Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2-(2aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 7, Etapa 6, 149 mg, 0,28 mmol) con cloruro de 2,6-dicloro-fenil-metanosulfonilo, proporcionando 170 mg de la sulfonamida, un sólido de color amarillo con un rendimiento del 80%.

Etapa 4. Usando el procedimiento de la Etapa 10 Ejemplo 1, se hidrolizó el éster de sulfonamida (145 mg, 0,19 mmol), proporcionando 140 mg (99%) del producto del título, un sólido de color castaño. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,89-2,01 (m, 2 H), 2,71-2,80 (m, 4 H),

2,84-2,92 (m, 2 H), 2,95-3,03 (m, 2 H), 4,31 (t, J = 6,2 Hz, 1 H), 4,60 (s, 2 H), 6,49 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,87 (s, 1H), 7,01-7,10 (m, 4 H), 7,12-7,19 (m, 1 H), 7,25-7,34 (m, 10 H), 7,41 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,00 (d, J = 8,1 Hz, 2 H); Ejemplo 9 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(3-{1-benzhidril-5-cloro-2-[2-(2-metil-6-nitro-fenilmetanosulfonilamino)-etil-1H-indol-3-il}propil)-benzoico

Etapa 1: Como se ha indicado en la Etapa 9, Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2-(2aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 7, Etapa 6, 255 mg, 0,47 mmol) con cloruro de 2-metil-6-nitro-fenil-metanosulfonilo (Ejemplo 4, Etapa 4), proporcionando 180 mg de la sulfonamida, un sólido de color amarillo con un rendimiento del 51%.

Etapa 2: Usando el procedimiento de la Etapa 10, Ejemplo 1, se hidrolizó el éster de sulfonamida (60 mg, 0,080 mmol), proporcionando 48 mg (81%) del producto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,89-2,01 (m, 2 H), 2,49 (s, 3 H), 2,75 (c, J = 7,2 Hz, 4 H), 2,82-2,89 (m, 2 H), 2,90-2,98 (m, 2 H), 4,10-4,18 (m, 2 H), 4,76 (s, 2 H) ancho, 6,48 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,86 (s, 1 H), 7,02-7,11 (m, J = 6,6, 2,5 Hz, 4 H), 7,27-7,35 (m, 8 H), 7,38-7,47 (m, 2 H), 7,67 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 8,00 (d, J = 8,3 Hz, 2 H) Ejemplo 10 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3il}propil)benzoico

Etapa 1: A una suspensión de ácido 4-{3-[2-(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol3-il]propil}benzoico (preparada como se describe en la Patente de Estados Unidos Nº 6797708 B2) (10,0 g, 19 mmol) en CH3CN (100 ml) y MeOH (25 ml) se le añadió (trimetilsilil)diazometano (solución 2,0 M en hexanos, 9,6 ml, 19 mmol). Después de 16 h, la mezcla se filtró y se concentró, proporcionando el éster metílico (8,8 g, aprox. al 86%), una espuma de color naranja, que se usó sin purificación.

Etapa 2: Como se ha indicado en la Etapa 9 Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2-(2aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 1, Etapa 1, 9,1 g, 17 mmol) con cloruro de (2-trifluorometilfenil)metanosulfonilo (Ejemplo 5, Etapa 3, 4,8 g, 17 mmol), proporcionando 6,1 g de la sulfonamida, una espuma de color blanco con un rendimiento del 47%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,88-2,00 (m, 2 H), 2,64-2,77 (m, 6 H), 2,832,95 (m, 2 H), 3,90 (s, 3 H), 4,05 (t, J = 5,9 Hz, 1 H), 4,33 (s, 2 H), 6,49 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,70-6,88 (m, 2 H), 7,04 (dd, J = 6,4, 2,7 Hz, 4 H), 7,24 (s, 1 H), 7,28-7,35 (m, 7 H), 7,36-7,49 (m, 3 H), 7,55-7,71 (m, 2 H), 7,95 (d, J = 8,1 Hz, 2 H). Además, el subproducto de N-metil sulfonamida (0,70 g, al 5%) se obtuvo en forma de una espuma de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,82-2,02 (m, 2 H), 2,56 (s, 3 H), 2,63-2,78 (m, 4 H), 2,79-2,89 (m, 2 H), 2,89-3,01 (m, 2 H), 3,90 (s, 3 H), 4,29 (s, 2 H), 6,42 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,77 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,84 (s, 1 H), 6,98-7,11 (m, 4 H), 7,21-7,28 (m, 2 H), 7,28-7,35 (m, 6 H), 7,37-7,51 (m, 3 H), 7,63 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,70 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,95 (d, J = 8,3 Hz, 2 H).

Etapa 3: Usando el procedimiento de la Etapa 10, Ejemplo 1, se hidrolizó el éster metílico (2,6 g, 3,4 mmol), proporcionando 2,25 g (88%) del producto del título, un sólido de color amarillo.

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,81-1,97 (m, 2 H), 2,66-2,79 (m, 4 H), 2,95 (s, 4 H), 4,41 (s, 2 H), 6,45 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,78 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 7,01-7,14 (m, 5 H), 7,247,42 (m, 8 H), 7,46 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,50-7,66 (m, 4 H), 7,73 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,85 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 12,77 (s, 1 H); EMAR: calc. para C41H36ClF3N2O4S + H+, 745,21092; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 745,2132; Anál. Calc. para C41H36ClF3N2O4S: C, 66,08; H, 4,87; N, 3,76, Observado: C, 66,07; H, 4,57; N, 3,67. Ejemplo 11 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-(metil{[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1Hindol-3-il}propil)benzoico

Etapa 1: Usando el procedimiento de la Etapa 10, Ejemplo 1, se hidrolizó el éster de N-Me sulfonamida aislado del Ejemplo 10, Etapa 2 en forma de un subproducto (0,66 g, 0,85 mmol), proporcionando 0,30 g (46%) del producto del título, un polvo de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,76-1,93 (m, 2 H), 2,63-2,81 (m, 9 H), 3,31 (s, 2 H), 4,46 (s, 2 H), 6,46 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,78 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,98-7,13 (m, 5 H), 7,23-7,43 (m, 8 H), 7,46 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,51-7,66 (m, 3 H), 7,72 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,86 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 12,75 (s a, 1 H); EMAR: calc. para C42H38ClF3N2O4S + H+, 759,22657; observado (IENEMTF, [M+H]1+). 759,2269; pureza por HPLC de H2O/CH3CN: 96,2%, H2O/MeOH: 95,7%. Ejemplo 12 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[2-[2-({[2,6-bis(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-5-cloro-1-(difenilmetil)-1Hindol-3-il]propil}benzoico

Etapa 1: Fluoruro de 2,6-bis(trifluorometil)benzoílo. Usando el procedimiento descrito por W. Dmowski y K. Piasecka-Maciejewska, Tetrahedron Lett. 1998, 54, 6781-6792, se convirtieron 7,0 g de ácido 2,6-bis(trifluorometil)benzoico en el fluoruro ácido (7,0 g, al 100%), un sólido de color naranja. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,17 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 8,40 (d, J = 8,0 Hz, 2 H).

Etapa 2: Alcohol 2,6-bis(trifluorometilfenil)bencílico. Usando el procedimiento descrito por W. Dmowski y K. Piasecka-Maciejewska, Tetrahedron Lett. 1998, 54, 6781-6792, se convirtieron 7,0 g de fluoruro de 2,6-bis(trifluorometil)benzoílo en el alcohol (6,6 g, al 100%), un aceite de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 4,95 (s, 2 H), 7,59 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,94 (d, J = 7,8 Hz, 2 H).

Etapa 3: Bromuro de 2,6-bis(trifluorometilfenil)bencilo. A una solución de alcohol 2,6bis(trifluorometilfenil)bencílico (6,6 g, 28 mmol) y 1,3-bis(difenilfosfino)propano (6,9 g, 17 mmol) en CH2Cl2 (50 ml) a 0ºC se le añadió lentamente tetrabromuro de carbono (11 g, 33 mmol). La mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente y después se añadió mediante una pipeta a 200 ml de Et2O. La mezcla se filtró a través de Celite y se concentró. El aceite de color amarillo se suspendió en EtOAc al 2%-hex y se filtró a través de una capa de SiO2, proporcionando el bromuro (7,2 g, al 84%), un aceite incoloro. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 4,78 (s, 2 H), 7,59 (t, J = 7,9Hz, 1 H), 7,92 (d, J = 7,9 Hz, 2 H).

Etapa 4: Sal sódica del ácido 2,6-bis(trifluorometilfenil)metanosulfónico. Una mezcla de bromuro de bis(trifluorometilfenil)bencilo (7,2 g, 23 mmol), sulfito sódico (3,1 g, 25 mmol), yoduro de tetrabutilamonio (0,043 g, 0,1 mmol) y H2O (20 ml) se calentó a reflujo durante 2 d. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y la fase acuosa se decantó del residuo oleoso y se concentró en el evaporador rotatorio a sequedad, proporcionando el bromhidrato de la sal sódica del ácido 2,6-bis(trifluorometilfenil)metanosulfónico (3,2 g, al 32%), un sólido de color blanco, que se usó sin purificación.

Etapa 5: Ácido 2,6-bis(trifluorometilfenil)metanosulfónico. Se suspendió sal sódica del ácido 2,6-bis(trifluorometilfenil)metanosulfónico (0,19 g, 0,44 mmol) en MeOH (5 ml) y se enfrió a -20ºC mientras se burbujeaba HCl a través de la mezcla durante 5 min. La suspensión de color blanco resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h, se filtró a través de Celite y se concentró, proporcionando ácido 2,6-bis(trifluorometilfenil)metanosulfónico (0,14 g, al 100%), un sólido de color naranja que se usó sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,25 (s, 2 H), 7,64 (t, J = 8,5Hz, 1 H), 7,96 (d, J = 7,8 Hz, 2 H).

Etapa 6: Cloruro de 2,6-bis(trifluorometilfenil)metanosulfonilo. A una suspensión de ácido 2,6-bis(trifluorometilfenil)metanosulfónico (0,14 g, 0,44 mmol) en THF (10 ml) y DMF (0,05 ml) a -20ºC se le añadió lentamente gota a gota cloruro de oxalilo (0,24 ml, 2,7 mmol). La temperatura del baño se mantuvo por debajo de 0ºC durante 4 h y después la mezcla de reacción se filtró a través de Celite, se lavó con THF (10 ml) y se concentró, dando un volumen total de ~5 ml. La mezcla se enfrió a -40ºC y se añadió lentamente H2O (0,3 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml), se lavó con NaHCO3 sat. (20 ml), H2O (20 ml) y salmuera (20 ml), se secó (Na2SO4) y se concentró, proporcionando 99 mg del producto en bruto que se purificó por cristalización a baja temperatura en hexanos, proporcionando cloruro de 2,6bis(trifluorometilfenil)metanosulfonilo (33 mg, 23%), un polvo de color blanco. La concentración de las aguas madre proporcionó más cantidad de producto (57 mg, al 40%). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 5,56 (s, 2 H), 7,70 (t, J = 8,0Hz, 1 H), 7,97 (d, J = 8,0 Hz, 2 H).

Etapa 7: Como se ha indicado en la Etapa 9, Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2-(2aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 5, Etapa 6, 148 mg, 0,27 mmol) con cloruro de 2,6-bis(trifluorometilfenil)metanosulfonilo (90 mg, 0,27 mmol), proporcionando 137 mg de la sulfonamida, una espuma de color amarillo pálido con un rendimiento del 60%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,83-2,03 (m, 2 H), 2,68-2,78 (m, 4 H), 2,792,91 (m, 2 H), 2,92-3,03 (m, 2 H), 3,89 (s, 3 H), 4,21 (t, J = 6,4 Hz, 1 H), 4,66 (s, 2 H), 6,51 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 6,81 (dd, J = 8,7, 2,1 Hz, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 7,00-7,11 (m, 4 H), 7,21-7,28 (m, 4 H), 7,28-7,35 (m, 4 H), 7,41 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 7,59 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 7,8 Hz, 2 H), 7,95 (d, J = 8,1 Hz, 2 H).

Etapa 8: Usando el procedimiento de la Etapa 10, Ejemplo 1, se hidrolizó el éster de sulfonamida (119 mg, 0,14 mmol), proporcionando 97 mg (83%) del producto del título, un sólido de color amarillo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,75-1,95 (m, 2 H), 2,73 (c, J = 7,5 Hz, 4 H), 2,97 (s, 4 H), 4,67 (s, 2 H), 6,45 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 7,04 (s, 1 H), 7,06-7,16 (m, 4 H), 7,27-7,43 (m, 8 H), 7,47 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,75 (t, J = 5,2 Hz, 1 H), 7,77-7,91 (m, 3 H), 8,10 (d, J = 8,1 Hz, 2 H), 12,78 (s, 1 H); EMAR: calc. para C42H35ClF6N2O4S + H+, 813,19830; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 813,1965, pureza por HPLC de H2O/CH3CN: 95,5%, H2O/MeOH: 96,8%. Ejemplo 13 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(metoxicarbonil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol3-il}propil)benzoico

Etapa 1: A una mezcla de 2-metilbenzoato de metilo (5,0 g, 0,033 mmol) y Nbromosuccinimida (5,9 g, 0,033 mmol) en CCl4 (50 ml) se le añadió peróxido de benzoílo (0,04 g, 0,00016 mmol). La mezcla se calentó a reflujo durante 1,5 h, se enfrió a temperatura ambiente, se filtró a través de Celite y se concentró, proporcionando 2-(bromometil)benzoato de metilo (7,2 g, recuperación de masas aprox. al 94%), que estaba contaminado con material de partida sin reaccionar aprox. al 14% y se usó sin purificación.

Etapa 2: Una mezcla del bromuro en bruto de la Etapa 1 (7,2 g, 0,031 mmol) y tiourea (2,6 g, 35 mmol) en MeOH (40 ml) se calentó a reflujo durante 4 h, se enfrió a temperatura ambiente y se concentró, proporcionando bromhidrato de 2({[amino(imino)metil]tio}metil)benzoato de metilo (10 g, aprox. al 100%), que se usó sin purificación.

Etapa 3: La sal isotiouronio de la Etapa 2 (10 g, 0,031 mmol) se suspendió en H2O (100 ml) y se enfrió a 0ºC. Se burbujeó gas cloro en la mezcla durante 30 min. El baño de hielo se retiró, la mezcla de reacción se vertió en un embudo de decantación y se diluyó con EtOAc (250 ml). La fase orgánica se separó y se lavó con NaHCO3 sat. (100 ml), H2O (100 ml) y salmuera (100 ml), se secó (MgSO4) y se concentró, proporcionando un sólido de color naranja (6,48 g). El producto en bruto se recristalizó en EtOAc al 20%-hexanos a -78ºC, proporcionando 3,63 g (47%) de 2-[(clorosulfonil)metil]benzoato de metilo, en forma de cristales de color amarillo pálido.

Etapa 4: A una suspensión de ácido 4-{3-[2-(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol3-il]propil}benzoico (0,40 g, 0,76 mmol) en CH2Cl2 (5 ml) se le añadió bis(trimetilsilil)trifluoroacetamida (0,30 ml, 0,29 g, 1,1 mmol). La mezcla se calentó a reflujo durante 30 min y después se enfrió a 35ºC. Se añadió piridina (0,16 ml, 0,15 g, 2,0 mmol) seguido de una solución de 2-[(clorosulfonil)metil]benzoato de metilo de la Etapa 3 (0,29 g, 1,1 mmol) en CH2Cl2 (2 ml). Después de 5 h, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente. Se añadió una solución de HCl conc. (0,17 ml) en H2O (5 ml) y la mezcla se agitó durante 45 min. La fase acuosa se separó y se extrajo con CH2Cl2 (50 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con H2O (25 ml) y salmuera (25 ml), se secaron (MgSO4) y se concentraron, proporcionando una espuma de color dorado (0,40 g). La purificación por HPLC prep. proporcionó el compuesto del título (70 mg, al 12%), una espuma de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,87-2,10 (m, 2 H), 2,85 (t, J = 6,6 Hz, 4 H), 3,03 (s, 2 H), 3,48 (s, 2 H), 3,86 (s, 3 H), 4,94 (s, 2 H), 6,57 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,92 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 7,14 (s, 1 H), 7,17-7,29 (m, 4 H), 7,43-7,57 (m, 10 H), 7,57-7,69 (m, 3 H), 7,90-7,97 (m, 1 H), 8,00 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 12,93 (s, 1 H), EMAR: calc. para [C42H39ClN2O6S1-H]1-, 733,2144; observado (IEN-EMTF, [M-H]1-), 733,2141; pureza por HPLC de H2O/CH3CN: 95,3%, H2O/MeOH: 100%. Ejemplo 14 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-fluoro-6-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1Hindol-3-il}propil)benzoico

Etapa 1: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 1, el bromuro de 2fluoro-6-(trifluorometilfenil)bencilo (15 g, 61 mmol) proporcionó sal sódica del ácido 2-fluoro-6(trifluorometilfenil)metanosulfónico (15 g, al 89%), un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,02 (s, 2 H), 7,26-7,66 (m, 3 H).

Etapa 2: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 2, la sal sódica del ácido 2-fluoro-6-(trifluorometilfenil)metanosulfónico (15 g, 53 mmol) proporcionó ácido 2-fluoro6-(trifluorometilfenil)metanosulfónico (15 g), un aceite de color naranja pálido que se usó sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,12 (s, 2 H), 7,39-7,73 (m, 3 H).

Etapa 3: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 3, el ácido 2-fluoro-6(trifluorometilfenil)metanosulfónico (15 g, 53 mmol) proporcionó 11 g del producto en bruto que se purificó por cristalización a baja temperatura en hexanos, proporcionando cloruro de 2fluoro-6-(trifluorometilfenil)metanosulfonilo (9,0 g, al 62%). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 5,31 (s, 2 H), 7,38-7,51 (m, 1 H), 7,58-7,68 (m, 2 H).

Etapa 4: Como se ha indicado en la Etapa 9 Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2-(2aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 7, Etapa 6, 0,12 g, 0,22 mmol) con cloruro de 2-fluoro-6-(trifluorometilfenil)metanosulfonilo, 0,074 g, 0,27 mmol), proporcionando 0,127 g de la sulfonamida, una espuma de color amarillo pálido, con un rendimiento del 73%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,79-2,02 (m, 2 H), 2,74 (t, J = 8,0 Hz, 4 H), 2,82-2,92 (m, 2 H), 2,92-3,02 (m, 2 H), 3,89 (s, 3 H), 4,15 (t, J = 5,8 Hz, 1 H), 4,42 (d, 2 H), 6,50 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 7,07 (dd, J = 6,4, 2,7 Hz, 4 H), 7,19-7,28 (m, 5 H), 7,29-7,35 (m, 5 H), 7,39-7,56 (m, 2 H), 7,95 (d, J = 8,3 Hz, 2 H).

Etapa 4: Usando el procedimiento de la Etapa 10, Ejemplo 1, se hidrolizó el éster de sulfonamida (115 mg, 0,15 mmol), proporcionando 101 mg (89%) del producto del título, un polvo de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,80-1,95 (m, 2 H), 2,63-2,78 (m, 4 H), 2,88-3,14 (m, 4 H), 4,45 (s, 2 H), 6,43 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,76 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,96-7,15 (m, 5 H), 7,20-7,41 (m, 8 H), 7,45 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,50-7,59 (m, 1 H), 7,597,66 (m, 2 H), 7,71 (t, J = 5,6 Hz, 1 H), 7,83 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 12,73 (s, 1H); EMAR: calc. para C41H35ClF4N2O4S + H+, 763,20149; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 763,1998; pureza por HPLC de H2O/CH3CN: 95,4%, H2O/MeOH: 96,4%. Ejemplo 15 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-[3-(5-cloro-1-(difenilmetil)-2-{2-[({2-[2-(trifluorometil)fenil]etil}sulfonil)amino]etil}-1Hindol-3-il)propil]benzoico

Etapa 1: Se trató alcohol 2-(trifluorometil)fenetílico (5,0 g, 26 mmol) con CBr4 como en el Ejemplo 12, Etapa 3, proporcionando el bromuro (6,6 g, 100%) que se usó sin purificación.

Etapa 2: El bromuro de la Etapa 1 (1,5 g, 5,9 mmol) se trató con tiourea como en el Ejemplo 13, Etapa 2, proporcionando la sal isotiouronio (2,2 g), un sólido húmedo de color blanco, que se usó sin purificación.

Etapa 3: La sal isotiouronio de la Etapa 2 (2,2 g, ~5,9 mmol) se suspendió en H2O y se trató con gas Cl2 como en el Ejemplo 13, Etapa 3 y se obtuvo un aceite de color naranja (1,15 g). Al producto en bruto se le añadieron hexanos (75 ml) y la mezcla se calentó a 60ºC durante 4 h. La fracción soluble de hexanos se decantó y se enfrió a -78ºC, proporcionando un sólido de color blanco (0,13 g, rendimiento de aprox. el 7%, 2 etapas) que se usó sin purificación.

Etapa 4: Como se ha indicado en la Etapa 9 Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2-(2aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 7, Etapa 6, 98 mg, 0,18 mmol) con cloruro de (2-trifluorometilfenil)etanosulfonilo de la Etapa 3 (75 mg, 0,28 mmol), proporcionando 70 mg de la sulfonamida, una espuma de color blanco con un rendimiento del 50%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,88-2,03 (m, 2 H), 2,70-2,83 (m, 4 H), 2,883,07 (m, 6 H), 3,07-3,23 (m, 2 H), 3,90 (s, 3 H), 4,07 (t, J = 6,2 Hz, 1 H), 6,51 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,72-6,86 (m, 1 H), 6,90 (s, 1 H), 7,07 (d, J = 6,8 Hz, 4 H), 7,17-7,32 (m, 9 H), 7,35 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,41 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,48 (t, J = 6,9 Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,95 (d, J = 8,3 Hz, 2 H).

Etapa 5: Usando el procedimiento de la Etapa 10 Ejemplo 1, se hidrolizó el éster de sulfonamida (70 mg, 0,09 mmol), proporcionando 54 mg (78%) del producto del título, un polvo de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,82-2,22 (m, 2 H), 2,68-2,90 (m, 4 H), 2,993,24 (m, 8 H), 6,50 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,83 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 7,15 (d ap., J = 6,8 Hz, 5 H), 7,32-7,44 (m, 8 H), 7,45-7,55 (m, 3 H), 7,59 (t, J = 5,7 Hz, 1 H), 7,65 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,75 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,83-7,98 (m, J = 8,3 Hz, 2 H), 12,83 (s, 1 H); EMAR: calc. para C42H38ClF3N2O4S + H+, 759,22657; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 759,2277; pureza por HPLC de H2O/CH3CN: 96,0%, H2O/MeOH: 98,0%. Ejemplo 16 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-formilbencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3il]propil}benzoico

Etapa 1: A α-bromo-o-tolunitrilo (10 g, 51 mmol) en CH2Cl2 a 0ºC se le añadió DIBAL-H (1 M en hexano, 55 ml, 55 mmol), la mezcla de reacción se agitó a la misma temperatura durante 3,5 h y después se vertió en una solución de HBr frío al 5% a 0ºC. La mezcla se agitó durante 15 min, después las fases se separaron, la fase acuosa se extrajo con CH2Cl2 y las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaHCO3 y agua, se secaron sobre MgSO4 y se evaporaron, produciendo un líquido de color oscuro (9,4 g). El material se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa 2: Sal sódica del ácido (2-formil-fenil)-metanosulfónico: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 1, el 2-bromometil-benzaldehído (1,58 g, 7,94 mol) proporcionó sal sódica del ácido (2-formil-fenil)-metanosulfónico (1,40 g, al 80%), un sólido de color blanquecino.

Etapa 3: Ácido (2-formil-fenil)-metanosulfónico: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 3, la sal sódica del ácido (2-formil-fenil)-metanosulfónico (1,40 g, 6,30 mmol) proporcionó ácido (2-formil-fenil)-metanosulfónico (418 mg, al 33%), un sólido de color amarillo pálido.

Etapa 4: Cloruro de (2-formil-fenil)-metanosulfonilo: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 4, el ácido (2-formil-fenil)metanosulfónico (418 mg, 2,09 mmol) proporcionó cloruro de (2-formil-fenil)-metanosulfonilo (367 mg, al 80%). RMN 1H (400 MHz,

CDCl3) δ 10,15,(s, 1 H), 7,92 (dd, 1 H), 7,74-7,61 (m, 3 H), 5,67 (s, 2 H).

Etapa 5: Como se ha indicado en la Etapa 9 Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2-(2aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 7, Etapa 6, 63 mg, 0,12 mmol) con cloruro de (2-formil-fenil)-metanosulfonilo (36 mg, 0,16 mmol), proporcionando 34 mg (40%) de la sulfonamida, un sólido de color amarillo.

Etapa 6: Usando el procedimiento de la Etapa 10 Ejemplo 1, se hidrolizó el éster de sulfonamida (28 mg, 0,039 mmol), proporcionando 17 mg (62%) del producto del título, un sólido de color blanco. Ejemplo 17 [Ejemplo de Referencia]

Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(morfolin-4-ilmetil)bencil]sulfonil}amino)etil]1H-indol-3-il}propil)benzoico

Etapa 1: A 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-formilbencil)sulfonil]amino}etil)-1Hindol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 16, Etapa 5, 58 mg, 0,081 mmol) en DCE (2 ml) a 0ºC se le añadieron morfolina (0,0092 ml, 0,105 mmol) y NaBH(OAc)3 (27 mg, 0,13 mmol) y la mezcla de reacción se dejó calentar a ta durante una noche. La reacción se interrumpió con NaHCO3 sat., se extrajo con EtOAc y se secó sobre MgSO4. La purificación por cromatografía sobre gel de sílice (EtOAc del 35% al 50%/hexanos) dio el producto deseado en forma de un sólido de color blanco (41 mg, 64%).

Etapa 2. Usando el procedimiento de la Etapa 10 Ejemplo 1, se hidrolizó el éster de sulfonamida (18 mg, 0,039 mmol), proporcionando 15 mg (83%) del producto del título, un sólido de color blanco. Ejemplo 18 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-2-{2-[({2-[(dietilamino)metil]bencil}sulfonil)amino]etil}-1-(difenilmetil)-1Hindol-3-il]propil}benzoico

Etapa 1: Como se ha indicado en el Ejemplo 17, Etapa 1, se hizo reaccionar 4-{3-[5cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-formilbencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 16, Etapa 5, 58 mg, 0,081 mmol) con HNEt2 (0,022 ml, 0,21 mmol) y NaBH(OAc)3 (56 mg, 0,26 mmol) en DCE (2 ml), proporcionando 4-{3-[5-cloro-2-{2-[({2[(dietilamino)metil]bencil}sulfonil)amino]etil}-1-(difenilmetil)-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (26 mg, al 41%) y el subproducto 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2(hidroximetil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3-il}propil)benzoato de metilo (8,6 mg, al 15%), ambos en forma de sólidos de color blanco.

Etapa 2. Usando el procedimiento de la Etapa 10 Ejemplo 1, se hidrolizó 4-{3-[5-cloro-2{2-[({2-[(dietilamino)metil]bencil}sulfonil)amino]etil}-1-(difenilmetil)-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (20 mg, 0,026 mmol), proporcionando 13 mg (66%) del producto del título, un sólido

de color blanco. Ejemplo 19 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(hidroximetil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1Hindol-3-il}propil)benzoico.

Etapa 1. Usando el procedimiento de la Etapa 10 Ejemplo 1, se hidrolizó el subproducto del Ejemplo 18, Etapa 1, 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2(hidroximetil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3-il}propil)benzoato de metilo (8,4 mg, 0,0012 mmol), proporcionando 5,0 mg (61%) del producto del título, un sólido de color blanco. Ejemplo 20 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(piperazin-1-ilmetil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1Hindol-3-il}propil)benzoico y Ejemplo 21 Ácido 4-{3-[2-{2-[({2-[(4-acetilpiperazin-1il)metil]bencil}sulfonil)amino]etil}-5-cloro-1-(difenilmetil)-1H-indol-3-il]propil}benzoico

Etapa 1: Como se ha indicado en el Ejemplo 17, Etapa 1, se hizo reaccionar 4-{3-[5cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-formilbencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 16, Etapa 5, 45 mg, 0,063 mmol) con 1-acetil-piperazina (28 mg, 0,22 mmol) y NaBH(OAc)3 (26 mg, 0,12 mmol) en DCE (3 ml), proporcionando la sulfonamida (39 mg, al 75%) en forma de una espuma de color blanco.

Etapa 2. Usando el procedimiento de la Etapa 10 Ejemplo 1, se hidrolizó la sulfonamida (37 mg, 0,045 mmol), proporcionando, después de la separación por HPLC preparativa, 4-(3{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(piperazin-1-ilmetil)ben-zil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3il}propil)benzoato de metilo (7,4 mg, al 21%) y 4-{3-[2-{2-[({2-[(4-acetilpiperazin-1il)metil]bencil}sulfonil)amino]etil}-5-cloro-1-(difenilmetil)-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (7,7 mg, al 21%), ambos en forma de sólidos. Ejemplo 22 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-[3-(5-cloro-1-(difenilmetil)-2-{2-[({2-[(4-metilpiperazin-1il)metil]bencil}sulfonil)amino]etil}-1H-indol-3-il)propil]benzoico

Etapa 1: Como se ha indicado en el Ejemplo 17, Etapa 1, se hizo reaccionar 4-{3-[5cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-formilbencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 16, Etapa 5, 44 mg, 0,061 mmol) con 1-metilpiperazina (0,026 ml, 0,23 mmol) y NaBH(OAc)3 (34 mg, 0,16 mmol) en DCE (3 ml), proporcionando la sulfonamida (41 mg, al 84%) en forma de un sólido de color blanco.

Etapa 2: Usando el procedimiento de la Etapa 10 Ejemplo 1, se hidrolizó la sulfonamida (39 mg, 0,026 mmol), proporcionando 27 mg (69%) del producto del título, un sólido de color blanco. Ejemplo 23 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-[3-(5-cloro-1-(difenilmetil)-2-{2-[({1-[2-(trifluorometil)fenil]etil}sulfonil)amino]etil}-1Hindol-3-il)propil]benzoico

Etapa 1: A bromuro de α-metil-2-triflourometilbencilo (10,0 g, 39,5 mmol) en DMF (50 ml) se le añadió tioacetato potásico (8,1 g, 71,1 mmol) de acuerdo con el procedimiento que se ha indicado en el Ejemplo 3, Etapa 2. Esto proporcionó el tioacetato en forma de un aceite de color naranja (10,49 g, al 91%).

Etapa 2: El tioacetato de la Etapa 1 (10,49 g, 36,1 mmol) y acetato sódico (21,5 g, 155,4 mmol) se disolvieron en una mezcla de ácido acético (137 ml) y agua (31 ml) y se burbujeó gas cloro de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 3, Etapa 3. Esto produjo, después de la concentración y la recristalización a baja temperatura en hexanos, un sólido de color blanquecino que más tarde se fundió en un aceite de color naranja pálido (4,9 g, al 47%). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,01 (d, J = 6,8 Hz, 3 H) 5,32 (c, J = 7,1 Hz, 1 H) 7,56 (t, J = 6,7 Hz, 1 H) 7,67 (t, J = 7,8 Hz, 1 H) 7,77 (d, J = 7,8 Hz, 1 H) 7,91 (d, J = 8,1 Hz, 1 H)

Etapa 3: Usando el procedimiento del Ejemplo 1, Etapa 9, se hizo reaccionar éster metílico del ácido 4-{3-[2-(2-amino-etil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]-propil}-benzoico (Ejemplo 7, Etapa 6, 0,123 g, 0,23 mmol) con cloruro de 1-(2-trifluorometil-fenil)-etanosulfonilo (0,79 g, 0,29 mmol), proporcionando 0,042 g de una mezcla racémica de sulfonamidas con un rendimiento del 24%.

Etapa 4: El éster de sulfonamida (0,042 g, 0,054 mmol) se hidrolizó de acuerdo con el Ejemplo 1, Etapa 10, proporcionando 0,035 g (85%) del producto del título, un sólido de color naranja pálido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,68 (d, J = 7,1 Hz, 3 H) 1,93 (t, J = 5,4 Hz, 2 H) 2,02-2,08 (m, 1 H) 2,63-2,77 (m, 6 H) 2,86 (t, J = 7,6 Hz, 2 H) 6,47 (d, J = 8,8 Hz, 1 H) 7,017,07 (m, 4 H) 7,24-7,40 (m, 12 H) 7,44 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) 7,60 (d, J = 7,6 Hz, 1 H) 7,85 (d; J = 8,1 Hz, 1 H) 8,00 (d, J = 8,1Hz, 2 H) Ejemplo 24 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[2-(2-{[(2-bromobencil)sulfonil]amino}etil)-5-cloro-1-(difenilmetil)-1H-indol-3il]propil}benzoico

Etapa 1: Usando el procedimiento de la Etapa 9 Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 7, Etapa 6, 1,51 g, 2,81 mmol) con cloruro de 2-bromo-fenil-metanosulfonilo, proporcionando 1,06 g de la sulfonamida, un sólido de color blanco, con un rendimiento del 49%.

Etapa 2: Como se ha descrito en el ejemplo 1, etapa 10, se hidrolizó el éster de sulfonamida (90 mg, 0,117 mmol), proporcionando 81 mg (91%) del producto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,89-2,02 (m, 2 H), 2,68-2,78 (m, 4 H), 2,78-2,87 (m, 2 H), 2,89-2,97 (m, 2 H), 4,21 (t, J = 5,1 Hz, 1 H), 4,37 (s, 2 H), 6,48 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,84 (s, 1 H), 7,00-7,08 (m, 4 H), 7,09-7,17 (m, 1 H), 7,17-7,24 (m, 1H), 7,25-7,34 (m, 8 H), 7,36-7,45 (m, 2 H), 7,49 (dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1 H), 8,01 (d, J = 8,3 Hz, 2 H). EMAR: calc. para C40H36BrClN2O4S + H+, 755,13404; observado (IENEMTF, [M+H]1+), 755,1341. Ejemplo 25 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometoxi)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3il}propil)benzoico

Etapa 1: Usando el procedimiento del Ejemplo 1, Etapa 9, se hizo reaccionar 4-{3-[2-(2aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 7, Etapa 6, 164 mg, 0,305 mmol) con cloruro de 2-trifluorometoxi-fenil-metanosulfonilo, proporcionando 109 mg de la sulfonamida, en forma de un sólido de color blanco con un rendimiento del 46%.

Etapa 2: Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster de sulfonamida (83 mg, 0,107 mmol), proporcionando 80 mg (98%) del producto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,86-2,03 (m, 2 H), 2,74 (c, J = 7,6 Hz, 4 H), 2,76-2,86 (m, 2 H), 2,90-3,00 (m, 2 H), 4,12 (t, J = 6,2 Hz, 1 H), 4,19 (s, 1 H), 6,49 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,85 (s, 1 H), 7,00-7,11 (m, 4 H), 7,16-7,23 (m, 2 H), 7,24-7,28 (m, 2 H), 7,28-7,37 (m, 8 H), 7,39-7,44 (m, 2 H), 8,00 (d, 2 H). EMAR: calc. para C41H36ClF3N2O5S + H+, 761,20583; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 761,2057. Ejemplo 26 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-2-(2-{[(3-cloro-6-fluoro-2-metilbencil)sulfonil]amino}etil)-1-(difenilmetil)-1Hindol-3-il]propil}benzoico

Etapa 1: 2,6-Difluoro-N-(2-hidroxi-1,1-dimetil-etil)-benzamida. A una solución a 0ºC de 2-amino-2-metilpropanol (10,1 g, 113,3 mmol) en CH2Cl2 (75 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadió gota a gota una solución de cloruro de 2,6-difluorobenzoílo (10,0 g, 56,6 mmol) en CH2Cl2 (50 ml). Después, la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con H2O y la fase acuosa se extrajo con CH2Cl2, se secó (MgSO4) y se concentró. La purificación por trituración con hexanos proporcionó 12,05 g (93%) de la amida, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,41 (s, 6 H), 3,66-3,75 (m, 2 H), 3,77-3,87 (m, 1 H), 5,94 (s, 1 H), 6,90-6,99 (m, 2 H), 7,31-7,41 (m, 1 H).

Etapa 2: 2-(2,6-Difluorofenil)-4,4-dimetil-4,5-dihidro-oxazol. A una solución a 0ºC de la amida de la Etapa 1 (11,9 g, 51,9 mmol) en CH2Cl2 (50 ml) se le añadió cloruro de tionilo (6,4 ml, 88,3 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Después de 4 h, la mezcla de reacción se concentró y se trituró con Et2O. El residuo se recogió en H2O, se basificó con NaOH 6 N y se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4) y se concentraron, proporcionando 9,42 g (86%) del dihidrooxazol, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,42 (s, 6 H), 4,13 (s, 2 H), 6,90-7,02 (m, 2 H), 7,32-7,44 (m, 1 H).

Etapa 3: 2-(2-Fluoro-6-metil-fenil)-4,4-dimetil-4,5-dihidro-oxazol. A una solución a 0ºC del dihidrooxazol de la Etapa 2 (9,18 g, 43,5 mmol) en THF (140 ml) en una atmósfera de argón se le añadió gota a gota cloruro de metilmagnesio (solución en THF 3,0 M, 43,5 ml, 130 mmol). Después de 2 h, el baño de hielo se retiró y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se inactivó con una solución de NH4Cl ac. saturado y se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4) y se concentraron, proporcionando 8,64 g (96%) del dihidrooxazol, un aceite transparente incoloro. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,42 (s, 6 H), 2,40 (s, 3 H), 4,11 (s, 2 H), 6,92 (t, J = 9,0 Hz, 1 H), 6,99 (d, J = 7,6 Hz, 1 H); 7,21-7,30 (m, 1 H).

Etapa 4: Ácido 2-fluoro-6-metil-benzoico. A una solución del dihidrooxazol de la Etapa 3 (8,43 g, 40,7 mmol) en CH3CN (70 ml) se le añadió yoduro de metilo (9,2 ml, 146 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo durante 6 h. Después, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se trituró con Et2O. El residuo se recogió en NaOH al 20% y metanol a partes iguales y se calentó a reflujo durante 6 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró para retirar los disolventes orgánicos. La fase acuosa se lavó varias veces con EtOAc y se acidificó a pH 1. La fase acuosa se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4) y se concentraron, proporcionando 3,67 g (58%) del ácido benzoico, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,52 (s, 3 H) 6,99 (t, J = 9,09 Hz, 1 H) 7,05 (d, J = 7,83 Hz, 1 H) 7,31-7,41 (m, 1 H).

Etapa 5: A una solución del ácido de la Etapa 4 (3,60 g, 23,4 mmol) en cloruro de tionilo (40 ml) se le añadió DMF (0,42 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 5,5 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El residuo se recogió en THF (40 ml) y se añadió durante 20 min a una suspensión a 0ºC de NaBH4 (3,53 g, 93,4 mmol) en THF (40 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h y después se inactivó mediante la adición de H2O y HCl 4 M y se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaHCO3 sat. y salmuera, se secaron (MgSO4) y se concentraron, proporcionando 2,67 g (~75%) del alcohol bencílico, un sólido de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,42 (s, 3 H), 4,72 (s, 2 H), 6,88 (t, J = 9,0 Hz, 1 H), 6,96 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,07-7,20 (m, 1 H).

Etapa 6: A una solución del alcohol bencílico de la Etapa 5 (2,65 g, 18,9 mmol) en CH2Cl2 (15 ml) se le añadió 1,3-bis(difenilfosfino)propano (4,7 g, 11 mmol). La mezcla se enfrió a 0ºC y se añadió lentamente CBr4 (7,4 g, 22 mmol). La mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con CH2Cl2 (50 ml) y se vertió en Et2O (75 ml). La mezcla se filtró y la fase de solución se concentró. El producto resultante se disolvió de nuevo en CH2Cl2 (75 ml) y se vertió en Et2O (100 ml). La filtración y la concentración proporcionaron 3,27 g (85%) del bromuro, un aceite de color naranja. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,42 (s, 3 H), 4,56 (d, J = 1,5 Hz, 2 H), 6,91 (t, J = 9,1 Hz, 1 H), 6,97 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,08-7,24 (m, 1 H).

Etapa 7: Usando el procedimiento del Ejemplo 3, Etapa 2, se hizo reaccionar el bromuro de bencilo de la Etapa 6 (3,27 g, 16,1 mmol) con tioacetato potásico, proporcionando 3,17 g (98%) del tioacetato de bencilo, un aceite de color pardo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,35 (s, 6 H), 4,22 (d, J = 1,5 Hz, 2 H), 6,88 (t, J = 9,0 Hz, 1 H), 6,95 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,067,21 (m, 1 H).

Etapa 8: Usando el procedimiento del Ejemplo 3, Etapa 3, se oxidó el tioacetato de bencilo (3,17 g, 16,0 mmol), proporcionando 3,30 g (80%) de cloruro de (3-cloro-6-fluoro-2metil-fenil)-metanosulfonilo, un sólido de color castaño. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,52 (s, 3 H), 5,10 (d, J = 1,3 Hz, 2 H), 7,02 (t, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,48 (dd, J = 9,1, 5,3 Hz, 1 H).

Etapa 9: Usando el procedimiento de la Etapa 9, Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 7, Etapa 6, 163 mg, 0,303 mmol) con cloruro de (3-cloro-6-fluoro-2-metil-fenil)-metanosulfonilo de la Etapa 8, proporcionando 102 mg de la sulfonamida, un sólido de color blanco con un rendimiento del 44%.

Etapa 10: Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster de sulfonamida (74 mg, 0,097 mmol), proporcionando los 65 mg (90%) del producto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,89-2,05 (m, 2 H), 2,41 (s, 3 H), 2,75 (c, J = 7,6 Hz, 4 H), 2,83-2,93 (m, 2 H), 2,92-3,02 (m, 2 H), 4,21-4,31 (m, 3 H), 6,49 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,72-6,83 (m, 2 H), 6,87 (s, 1 H), 7,01-7,13 (m, 4 H), 7,24-7,35 (m, 9 H), 7,41 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,00 (d, J = 8,1 Hz, 2 H). EMAR: calc. para C41H37Cl2FN2O4S + H+, 743,19079; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 743,1907. Ejemplo 27 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-nitro-6-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1Hindol-3-il}propil)benzoico

Etapa 1: 2-Bromometil-1-nitro-3-trifluorometil-benceno. A una solución de 2-metil-1nitro-3-trifluorometil-benceno (5,0 g, 24,4 mmol) en CCl4 (300 ml) se le añadieron Nbromosuccinimida (4,35 g, 24,4 mmol) y peróxido de benzoílo (0,11 g, 0,45 mmol). La mezcla se calentó a reflujo y se expuso a la luz (300 W) durante 20 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se filtró y se concentró. La purificación por cromatografía en columna (EtOAc-hexanos) proporcionó 3,03 g (44%) del bromuro de bencilo, un aceite de color amarillo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 4,93 (s, 2 H), 7,63 (t, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,94 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 8,06 (d, J = 8,1 Hz, 1 H).

Etapa 2: Usando el procedimiento del Ejemplo 3, Etapa 2, se hizo reaccionar el bromuro de bencilo de la Etapa 1 (3,02 g, 10,6 mmol) con tioacetato potásico, proporcioanando 2,71 g (91%) del tioacetato de bencilo en forma de un aceite de color pardo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 2,34 (s, 3 H), 4,55 (s, 2 H), 7,58 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,93 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,98 (d, J = 8,1 Hz, 1 H).

Etapa 3: Cloruro de (2-nitro-6-trifluorometilfenil)metanosulfonilo. Usando el procedimiento del Ejemplo 3, Etapa 3, se oxidó el tioacetato de bencilo (2,71 g, 9,70 mmol), proporcionando 2,42 g (82%) del producto del título en forma de un aceite de color pardo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 5,82 (s, 2 H) ancho, 7,84 (t, J = 8,1 Hz, 1 H), 8,11 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 8,27 (d, J = 8,1 Hz, 1 H).

Etapa 4: Usando el procedimiento de la Etapa 9, Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 7, Etapa 6, 164 mg, 0,305 mmol) con cloruro de (2-nitro-6-trifluorometilfenil)metanosulfonilo de la Etapa 3, proporcionando 119 mg de la sulfonamida en forma de un sólido de color amarillo con un rendimiento del 49%.

Etapa 5: Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster de sulfonamida (94 mg, 0,117 mmol), proporcionando 90 mg (92%) del producto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, COCl3) δ 1,90-2,04 (m, 2 H), 2,76 (c, J = 7,5 Hz, 4 H), 2,80-2,90 (m, 2 H), 2,93-3,01 (m; 2 H), 4,24 (t, J = 6,2 Hz, 1 H), 4,87 (s, 2 H) ancho, 6,51 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,81 (dd, J = 9,0, 2,1 Hz, 1 H), 6,86 (s, 1 H), 7,08 (dd, J = 6,8, 2,5 Hz, 4 H), 7,23-7,36 (m, 9 H), 7,42 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,61 (t, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,89-8,09 (m, 3 H). EMAR: calc. para C41H35ClF3N3O6S + H+, 790,19599; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 790,1944. Ejemplo 28 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-fluorobencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3il]propil}benzoico

Etapa 1. Usando el procedimiento de la Etapa 9, Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 7, Etapa 6, 163 mg, 0,303 mmol) con cloruro de (2-nitro-6-trifluorometil-fenil)-metanosulfonilo, proporcionando 15 mg de la sulfonamida, un sólido de color blanco con un rendimiento del 7%.

Etapa 2. Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster de

sulfonamida (14 mg, 0,020 mmol), proporcionando los 12 mg (88%) del producto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,88-2,03 (m, 2 H), 2,66-2,78 (m, 4 H), 2,81-2,90 (m, 2 H), 2,90-3,00 (m, 2 H), 4,12-4,20 (m, 3 H), 6,49 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,86 (s, 1 H), 6,94-7,01 (m, 1 H), 7,02-7,12 (m, 5 H), 7,23-7,36 (m, 10 H), 7,40 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,00 (d, J = 8,3 Hz, 2 H). EMAR: calc. para C40H36ClFN2O4S + H+, 695,21411; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 695,2128. Ejemplo 29 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[2-(2-{[(bifenil-2-ilmetil)sulfonil]amino}etil)-5-cloro-1-(difenilmetil)-1H-indol-3il]propil}benzoico

Etapa 1. Se puso el bromuro del Ejemplo 24, Etapa 1 (83 mg, 0,108 mmol) en un recipiente de reacción para microondas con ácido fenilborónico (19,8 mg. 0,162 mmol), KF (9,4 mg, 0,162 mmol), Pd(OAc)2 (3,4 mg, 0,015 mmol) y PPh3 (11,8 mg, 0,045 mmol). Al recipiente se le añadieron DME (0,12 M), MeOH (0,42 M), H2O (0,42 M) y la mezcla se desgasificó en una corriente de argón, se tapó y se calentó en el microondas Smith Creator a 120ºC durante 1

h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró a través de celite (lavando con EtOAc) y se diluyó con H2O. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con H2O y salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. La purificación del producto en bruto por cromatografía en columna (EtOAc-Hex.) proporcionó 75 mg (91%) del producto de Suzuki, un sólido de color amarillo.

Etapa 2. Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster (70 mg, 0,091 mmol), proporcionando 46 mg (67%) del compuesto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,85-1,98 (m, 2 H), 2,45-2,55 (m, 2 H), 2,64-2,78 (m, 4 H), 2,822,90 (m, 2 H), 3,99 (t, J = 6,3 Hz, 1 H), 4,18 (s, 2 H), 6,47 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,71-6,84 (m, 2 H), 6,97-7,08 (m, 4 H), 7,15-7,24 (m, 3 H), 7,25-7,28 (m, 4 H), 7,28-7,36 (m, 9 H), 7,40 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,47 (dd, J = 7,7, 1,1 Hz, 1 H), 8,01 (d, J = 8,3 Hz, 2 H). EMAR: calc. para C46H41ClN2O4S + H+, 753,25483; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 753,253. Ejemplo 30 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-piridin-4-ilbencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3il]propil}benzoico

Etapa 1. El bromuro del Ejemplo 24, Etapa 1 (77 mg, 0,10 mmol) se hizo reaccionar con ácido piridin-4-borónico de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 29, Etapa 1, proporcionando 33 mg (43%) de producto de Suzuki, un sólido de color blanco.

Etapa 2. Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster (33 mg, 0,043 mmol), proporcionando 30 mg (91%) del compuesto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,90-2,01 (m, 2 H); 2,62-2,78 (m, 6 H), 2,90 (t, J = 7,5 Hz, 2 H), 4,02 (s, 2 H), 4,56 (s, 1 H) ancho, 6,48 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,83 (s, 1 H), 6,99-7,10 (m, 4 H), 7,19 (dd, J = 7,6, 1,3 Hz, 1 H), 7,22 (dd, J = 4,5, 1,5 Hz, 2 H), 7,247,28 (m, 2 H), 7,28-7,34 (m, 7 H), 7,36-7,46 (m, 3 H), 7,98 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 8,55 (d, J = 5,8 Hz, 2 H). EMAR: calc. para C45H40ClN3O4S + H+, 754,25008; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 754,2505. Ejemplo 31 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-piridin-3-ilbencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3il]propil}benzoico

Etapa 1. Se hizo reaccionar el bromuro del Ejemplo 24, Etapa 1 (77 mg, 0,10 mmol) con ácido piridin-3-borónico de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 29, Etapa 1, proporcionando 59 mg (77%) de producto de Suzuki, un sólido de color amarillo.

Etapa 2. Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster (54 mg, 0,070 mmol), proporcionando 44 mg (83%) del compuesto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,80-1,93 (m, 2 H), 2,53-2,62 (m, 2 H), 2,67 (t, J = 7,5 Hz, 2 H), 2,82 (s, 2 H) ancho, 2,95-3,03 (m, 2 H), 4,09 (s, 2 H), 5,61 (dd, J = 4,9, 3,4 Hz, 1 H), 6,41 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,76 (dd, J = 9,0, 2,1 Hz, 1 H), 6,89 (s, 1 H), 7,01-7,12 (m, 5 H), 7,22-7,36 (m, 9 H), 7,36-7,47 (m, 3 H), 7,55-7,62 (m, 1 H), 7,68-7,74 (m, 1 H), 7,89 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 8,60 (dd, J = 5,1, 1,5 Hz, 1 H), 8,90 (d, J = 2,3 Hz, 1 H). EMAR: calc. para C45H40ClN3O4S + H+, 754,25008; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 754,2505, Ejemplo 32 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(3-tienil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3il}propil)benzoico

Etapa 1. Se hizo reaccionar el bromuro del Ejemplo 24, Etapa 1 (77 mg, 0,10 mmol) con ácido tiofeno-3-borónico de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 29, Etapa 1, proporcionando 67 mg (87%) de producto de Suzuki, un sólido de color amarillo.

Etapa 2. Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster (62 mg, 0,080 mmol), proporcionando 51 mg (83%) del compuesto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,88-2,00 (m, 2 H), 2,54-2,64 (m, 2 H), 2,68-2,81 (m, 4 H), 2,882,99 (m, 2 H), 4,11 (t, J = 6,3 Hz, 1 H), 4,20 (s, 2 H), 6,49 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,82 (s, 1 H), 7,00 (dd, J = 4,9, 1,4 Hz, 1 H), 7,05 (dd, J = 6,7, 2,4 Hz, 4 H), 7,13 (dd, J = 3,0, 1,3 Hz, 1 H), 7,20-7,28 (m, 4 H), 7,28-7,34 (m, 8 H), 7,38-7,44 (m, 2 H), 7,97-8,04 (m, 2 H). EMAR: calc. para C44H39ClN2O4S2 + H+, 759,21125; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 759,2099. Ejemplo 33 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-2-[2-({[2-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)bencil]sulfonil}amino)etil]-1-(difenilmetil)

1H-indol-3-il]propil}benzoico.

Etapa 1. Se hizo reaccionar el bromuro del Ejemplo 24, Etapa 1, (77 mg, 0,10 mmol) con ácido 3,5-dimetilisooxazol-4-borónico de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 29, Etapa 1, proporcionando 36 mg (46%) de producto de Suzuki, un sólido de color amarillo.

Etapa 2. Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster (36 mg, 0,046 mmol), proporcionando 32 mg (90%) del compuesto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,88-2,04 (m, 5 H), 2,14 (s, 3 H), 2,68-2,78 (m, 4 H), 2,78-2,85 (m, 2 H), 2,96 (t, J = 7,5 Hz, 2 H), 3,82-3,97 (m, 2 H), 4,18-4,27 (m, 1 H), 6,49 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,83 (d, J = 11,4 Hz, 1 H), 7,06 (dd, J = 3,7, 1,6 Hz, 4 H), 7,12 (dd, J = 7,5, 1,1 Hz, 1 H), 7,26-7,34 (m, 10 H), 7,34-7,40 (m, 1 H), 7,41 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,99 (d, J = 8,3 Hz, 2 H). EMAR: calc. para C45H42ClN3O5S + H+, 772,26065; observado (IENEMTF, [M+H]1+), 772,2595. Ejemplo 34 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-quinolin-8-ilbencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3il]propil}benzoico

Etapa 1. Se hizo reaccionar el bromuro del Ejemplo 24, Etapa 1, (77 mg, 0,10 mmol) con ácido 8-quinolinborónico de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 29, Etapa 1, proporcionando 67 mg (82%) de producto de Suzuki, un sólido de color blanco.

Etapa 2. Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó éster (60 mg, 0,073 mmol), proporcionando 42 mg (72%) del compuesto del título, un sólido de color amarillo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,68-1,85 (m, 1 H), 1,99-2,13 (m, 1 H), 2,23-2,37 (m, 1 H), 2,432,53 (m, 3 H), 2,56-2,85 (m, 4 H), 3,91 (d, J = 14,1 Hz, 1 H), 4,28 (d, J = 14,1 Hz, 1 H), 4,83 (t, J = 4,7 Hz, 1 H), 6,39 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,72-6,80 (m, 2 H), 6,94-7,01 (m, 2 H), 7,01-7,09 (m, 2 H), 7,19-7,27 (m, 4 H), 7,27-7,31 (m, 4 H), 7,32-7,37 (m, 1 H), 7,37-7,44 (m, 4 H), 7,47-7,56 (m, 3 H), 7,75-7,91 (m, 3 H), 8,22 (dd, J = 8,3, 1,8 Hz, 1 H), 8,94 (dd, J = 4,3, 1,8 Hz, 1 H). EMAR: calc. para C49H42ClN3O4S + H+, 804,26573; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 804,2641. Ejemplo 35 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-2-{2-[({[4'-(dimetilamino)bifenil-2-il]metil}sulfonil)amino]etil}-1-(difenilmetil)1H-indol-3-il]propil}benzoico

Etapa 1. Se hizo reaccionar el bromuro del Ejemplo 24, Etapa 1 (77 mg, 0,10 mmol) con ácido 4-(dimetilamino)-fenilborónico de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 29, Etapa 1, proporcionando 51 mg (aprox. 52%) del producto de Suzuki, un sólido de color blanco.

Etapa 2. Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster (51 mg, 0,063 mmol), proporcionando 17 mg (aprox. 41%) del compuesto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,87-1,98 (m, 2 H), 2,44-2,53 (m, 2 H), 2,64-2,70 (m, 2 H), 2,70-2,77 (m, 2 H), 2,79-2,89 (m, 8 H), 4,01-4,07 (m, 1 H), 4,28 (s, 2 H), 6,46 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,59 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 6,76-6,81 (m, 2 H), 6,99-7,07 (m, 6 H), 7,16-7,23 (m, 2 H), 7,257,33 (m, 9 H), 7,39 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,44-7,49 (m, 1 H), 8,00 (d, J = 8,3 Hz, 2 H). EMAR: calc. para (C48H46ClN3O4S + 2 H+) / 2, 398,65215; observado (IEN-EMTF, [M+2H]2+), 398,6504. Ejemplo 36 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-[3-(5-cloro-1-(difenilmetil)-2-{2-[({[2'-(trifluorometoxi)bifenil-2-il]metil}sulfonil)amino]etil}1H-indol-3-il)propil]benzoico

Etapa 1. Se hizo reaccionar el bromuro del Ejemplo 24, Etapa 1 (77 mg, 0,10 mmol) con ácido 2-(trifluorometoxi) fenilborónico de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 29, Etapa 1, proporcionando 36 mg (aprox. 36%) de producto de Suzuki, un sólido de color blanco.

Etapa 2. Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster (36 mg, 0,042 mmol), proporcionando 23 mg (aprox. 75%) del compuesto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,80-1,91 (m, 2 H), 2,54 (c, J = 7,2 Hz, 2 H), 2,59-2,70 (m, 4 H), 2,78-2,87 (m, 2 H), 3,90 (c, J = 14,1 Hz, 2 H), 4,05-4,11 (m, 1 H), 6,40 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,67-6,76 (m, 2 H), 6,92-7,02 (m, 4 H), 7,07-7,16 (m, 3 H), 7,16-7,30 (m, 12 H), 7,31-7,36 (m, 2 H), 7,93 (d, J = 8,3 Hz, 2 H). EMAR: calc. para C47H40ClF3N2O5S + H+, 837,23713; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 837,2375. Ejemplo 37 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-2-[2-({[(2'-cianobifenil-2-il)metil]sulfonil}amino)etil]-1-(difenilmetil)-1H-indol-3il]propil}benzoico.

Etapa 1. Se hizo reaccionar el bromuro del Ejemplo 24, Etapa 1 (73 mg, 0,095 mmol) con ácido 2-cianofenilborónico, proporcionando 23 mg (30%) de producto de Suzuki, un sólido de color amarillo.

Etapa 2. Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, se hidrolizó el éster (19 mg, 0,024 mmol), proporcionando 10 mg (53%) del compuesto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,87-2,01 (m, 2 H), 2,62-2,79 (m, 6 H), 2,92 (t, J = 7,6 Hz, 2 H), 3,91-4,14 (m, 3 H), 6,47 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,75-6,85 (m, 2 H), 7,01-7,08 (m, 4 H), 7,22-7,28 (m, 3 H), 7,28-7,36 (m, 8 H), 7,36-7,44 (m, 4 H), 7,49-7,59 (m, 1 H), 7,63-7,69 (m, 1 H), 8,00 (d, J = 8,3 Hz, 2 H). EMAR: calc. para C47H40ClN3O4S + H+, 778,25008; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 778,2489. Ejemplo 38 Ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol3-il}etil)sulfonil]fenil}propanoico

Etapa 1: Se disolvió 2-bromo-4-cloroanilina (1,0 equiv.) en CH2Cl2 (0,25 M) y después se añadieron trietilamina y anhídrido de trifluoroacetilo (1,1 equiv. de cada uno). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El disolvente se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida con CH2Cl2 como eluyente, dando la amida con un rendimiento del 97%. m/z (M-H)-300,0.

Etapa 2: Se mezcló N-(2-bromo-4-clorofenil)-2,2,2-trifluoroacetamida (Etapa 1, 1,0 equiv.) con 3-butin-1-ol (2,0% equiv.), diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (2,5% equiv.), trietilamina (3,0 equiv.), Cul (5% equiv.) en DMF (0,2 M) en un recipiente cerrado herméticamente en una atmósfera de N2 y se calentó a 120ºC durante 4 horas. Después, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera y se secó sobre Na2SO4. La purificación por cromatografía en columna ultrarrápida con MeOH al 2%/CH2Cl2 proporcionó el alquino con un rendimiento del 67%. m/z (M-H)-194,09.

Etapa 3: Se disolvieron 2-(5-cloro-1H-indol-2-il)etanol (etapa 2, 1,0 equiv.) e imidazol (2,0 equiv.) en DMF (0,3 M) a temperatura ambiente con agitación antes de que se añadiera terc-butilclorodifenilsilano (1,2 equiv.). La mezcla resultante se agitó durante una noche a temperatura ambiente antes de que se inactivara con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y se extrajera con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua y salmuera y se secó sobre Na2SO4. La purificación por cromatografía ultrarrápida con CH2Cl2 como eluyente proporcionó el silil éter en forma de una goma de color pardo con un rendimiento por encima del 90%. m/z (M-H)-433,0.

Etapa 4: Se disolvió 2-({[terc-butil(difenil)silil]oxi}etil)-5-cloro-1H-indol (Etapa 3, 1,0 equiv.) en éter (0,4 M) y la solución se enfrió a 0ºC. Se añadió cloruro de oxalilo (1,2 equiv.) a la solución fría anterior con agitación vigorosa. La mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 1 hora antes de que se añadiera EtOH, seguido de NEt3. Después, la mezcla resultante se diluyó con más EtOH antes de verterla en agua y extraerla con EtOAc. La fase orgánica se lavó salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró, dando el cetoéster en forma de un sólido de color amarillo con un rendimiento del 70%. m/z (M-H)-533,0.

Etapa 5: Se mezclaron [2-({[terc-butil(difenil)silil]oxi}etil)-5-cloro-1H-indol-3il](oxo)acetato de etilo (Etapa 4, 1 equiv.), Ph2CHBr (1,5 equiv.) y Cs2CO3 (1,5 equiv.) en acetonitrilo seco (0,1 M). La mezcla se calentó a reflujo durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se concentró y el residuo se sometió a cromatografía con CH2Cl2 como eluyente, dando el Nbenzhidril indol en forma de una goma de color naranja con un rendimiento del 45%. m/z (M+H)+ 701,3.

Etapa 6: A una solución de [1-benzhidril-2-({[terc-butil(difenil)silil]oxi}etil)-5-cloro-1Hindol-3-il](oxo)acetato de etilo (Etapa 5, 1 equiv.) en THF (0,1 M) se le añadió BH3Me2S (2 M en THF) (2 equiv.). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante una noche en una atmósfera de N2. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, después se inactivó lentamente con NaOH 1 N, se extrajo con EtOAc y se lavó con salmuera. La concentración proporcionó el alcohol con un rendimiento del 65%. m/z (M+H)+ 645,0.

Etapa 7: A una solución de 2-[1-benzhidril-2-({[terc-butil(difenil)silil]oxi}etil)-5-cloro-1Hindol-3-il]etanol (Etapa 6, 1 equiv.) en CH2Cl2 (0,08 M) se le añadió 1,3-bis(difenilfosfino)propano (DPPP, 0,75 equiv.). La solución se enfrió a 0ºC en una atmósfera de N2 y después se añadió CBr4 (1,25 equiv.). Se dejó que la temperatura de reacción volviera a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se evaporó y el residuo se purificó usando una columna corta de gel de sílice con CH2Cl2 como eluyente, dando el bromuro con rendimiento cuantitativo. m/z (M+H)+708,0.

Etapa 8: Se mezcló 1-benzhidril-3-(2-bromoetil)-2-({[terc-butil(difenil)silil]oxi}etil)-5-cloro1H-indol (Etapa 7, 1 equiv.) con 3-(4-mercaptolfenil)propionato de metilo (1,5 equiv.) y K2CO3 (1,5 equiv.) en DMF (0,1 M). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de N2 durante 2 h, después se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. El extracto orgánico se lavó con salmuera, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (CH2Cl2 como eluyente), dando el tioéter en forma de una goma de color parduzco con un rendimiento del 80%. m/z (M+H)823,0.

Etapa 9: Se disolvió 3-[4-({2-[1-benzhidril-2-({[terc-butil(difenil)silil]oxi}etil)-5-cloro-1Hindol-3-il]etil}sulfanil)fenil]propanoato de metilo (Etapa 8, 1 equiv.) en acetonitrilo (0,1 M) y después se añadieron tamices moleculares (polvo, 4 A,) y N-óxido de 4-metilmorfolina (NMO) (4 equiv.) en una atmósfera de N2. Después de 5 min, se añadió n-Pr4NRuP4 (TPAP) (5% equiv.). La mezcla resultante se calentó a 40ºC durante 1,5 h. La mezcla se concentró y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida con CH2Cl2 y después EtOAc al 1%/CH2Cl2 como eluyente, dando la sulfona en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 44%. m/z (M+H)+ 855,1.

Etapa 10: Se disolvió 3-(4-{2-[1-benzhidril-2-({[terc-butil(difenil)silil]oxi}etil)-5-cloro-1Hindol-3-il]etoxi}fenil)propanoato de metilo (Etapa 9, 1 equiv.) en THF (0,1 M), se enfrió a 0ºC y después se trató con nBu4NF (1 M en THF) (1,2 equiv.). La mezcla resultante se agitó a 0ºC durante 5 min, después se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 30 min. El disolvente se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida con EtOAc/CH2Cl2

(1:9 a 1:4) como eluyente, dando el alcohol en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento del 90%. m/z (M+H)+ 616,20.

Etapa 11: Se trató 3-[4-{2-[1-benzhidril-5-cloro-2-(hidroxietil)-1H-indol-3-il]etil}sulfonil)fenil]propanoato de metilo (Etapa 10, 1 equiv.) en CH2Cl2 (0,02 M) a 0ºC con MeSO2Cl (2,0 equiv.) y Et3N (2,5 equiv.) y se agitó durante 1 hora. Se retiró el baño de hielo y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente antes de que se diluyera con CH2Cl2, se lavó con NaH2PO4 y salmuera y se secó sobre Na2SO4. La evaporación del disolvente proporcionó el mesilato con rendimiento cuantitativo. m/z (M+H)+ 695,0.

Etapa 12: Se disolvió 3-(4-{[2-(1-benzhidril-5-cloro-2-{2-[(metilsulfonil)oxi]etil}-1H-indol3-il)etil]sulfonil}fenil)propanoato de metilo (Etapa 11, 1,0 equiv.) en DMF (0,03 M) y se trató con NaN3 (3,0 equiv.). La mezcla resultante se calentó a 60ºC y se agitó durante 2 horas, después se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo, se lavó con salmuera y se secó con Na2SO4. La evaporación del disolvente proporcionó la azida con rendimiento cuantitativo. m/z (M+H)+ 641,1.

Etapa 13: Se disolvió 3-[4-({2-[2-(2-azidoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]etil} sulfonil)fenil]propanoato de metilo (Etapa 12, 1 equiv.) en THF (0,1 M) y se trató con trifenilfosfina (1,1 equiv.). Después de 2 días, se añadió agua y la mezcla se agitó durante una noche, se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida usando MeOH al 4%:CH2Cl2 como eluyente, dando la amina con un rendimiento del 71%. m/z (M+H)+615,2.

Etapa 14: Como se ha indicado en la Etapa 9, Ejemplo 1, se hizo reaccionar 3-[4-({2-[2(2-aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]etil}sulfonil)fenil]propanoato de etilo (Etapa 13, 200 mg, 0,32 mmol) con cloruro de (2-trifluorometilfenil)metanosulfonilo (Ejemplo 5, Etapa 3, 110 mg, 0,42 mmol), proporcionando 250 mg de la sulfonamida, una espuma de color amarillo pálido, con un rendimiento del 93%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,23 (t, J = 7,2 Hz, 3 H), 2,622,71 (m, 2 H), 2,76-2,93 (m, 4 H), 2,98-3,17 (m, 4 H), 3,27-3,38 (m, 2 H), 4,11 (c, J = 7,2 Hz, 2 H), 4,35 (s, 2 H), 4,57 (t, J = 5,3 Hz, 1 H), 6,43 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 6,77 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1 H), 6,81 (s, 1 H), 7,18 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,24-7,35 (m, 10 H), 7,41 (d, J = 8,6 Hz, 3 H), 7,49 (t, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,60-7,77 (m, 2 H), 7,88 (d, J = 8,6 Hz, 2 H).

Etapa 15: Usando el procedimiento de la Etapa 10 Ejemplo 1, se hidrolizó el éster de sulfonamida (220 mg, 0,26 mmol), proporcionando 200 mg (92%) del producto del título, una espuma de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 2,65 (t, J = 7,6 Hz, 2 H), 2,91-3,13 (m, 8 H), 3,60 (dd, J = 9,7, 5,4 Hz, 2 H), 4,46 (s, 2 H), 6,48 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,83 (dd, J = 8,7, 2,1 Hz, 1 H), 7,05-7,16 (m, 5 H), 7,19 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 7,33-7,47 (m, 6 H), 7,53-7,72 (m, 6 H), 7,80 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,94 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 12,26 (s, 1 H); EMAR: calc. para C42H38ClF3N2O6S2 + H+, 823,18847; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 823,1887; pureza por HPLC de H2O/CH3CN: 100%, H2O/MeOH: 100%. Ejemplo 39 [Ejemplo de Referencia] Ácido 3-(4-{[2-(5-cloro-1-(difenilmetil)-2-{2-[({1-[2-(trifluorometil)fenil]etil}sulfonil)amino]etil}-1Hindol-3-il)etil]sulfonil}fenil)propanoico

Etapa 1: Usando el procedimiento del Ejemplo 1, Etapa 9, se hizo reaccionar 3-[4-({2

[2-(2-aminoetil)-5-cloro-1-(difenilmetil)-1H-indol-3-il]etil}sulfonil)fenil]propanoato de etilo (Ejemplo 38, Etapa 14) con cloruro de 1-(2-trifluorometil-fenil)-etanosulfonilo (0,13 g, 0,46 mmol), proporcionando éster etílico del ácido 3-{4-[2-(1-benzhidril-5-cloro-2-{2-[1-(2trfluorometil-fenil)-etanosulfonilamino]-etil}-1H-indol-3-il)-etanosulfonil]-fenil}-propiónico (0,110 g, 40%).

Etapa 2: Se hidrolizó el éster de sulfonamida (0,11 g, 0,13 mmol) de acuerdo con el Ejemplo 1, Etapa 10, proporcionando 0,068 g (64%) del producto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,67 (d, J = 6,8 Hz, 3 H) 2,57-2,72 (m, 4 H) 2,80 (t, J = 6,8 Hz, 2 H) 2,84-2,94 (m, 2 H) 3,03 (t, J = 6,4 Hz, 2 H) 3,20-3,31 (m, 2 H) 5,82-5,88 (m, 1 H) 6,37 (s, 1 H) 6,73-6,81 (m, 2 H) 6,98 (d, J = 4,4 Hz, 2 H) 7,05 (d, J = 5,4 Hz, 2 H) 7,24-7,49 (m, 11 H) 7,63 (d, J = 7,8 Hz, 1 H) 7,80(d, J = 7,8 Hz, 1 H) 7,88 (d, J = 8,6 Hz, 2 H). Ejemplo 40 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-hidroxibencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3il]propil}benzoico

Etapa 1: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 1, el bromuro de 2benciloxibencilo (ref. J. Med. Chem. 2006, 49, 31-34, R.V. Somu y col.) (32,2 g, 116 mmol) proporcionó sal sódica del ácido (2-benciloxi-fenil)-metanosulfónico (30 g, al 86%), un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,82 (s, 2 H) 5,09 (s, 2 H) 6,81-6,91 (m, 1 H) 6,96 (d, J = 7,58 Hz, 1 H) 7,08-7,18 (m, 1 H) 7,26-7,34 (m, 1 H) 7,34-7,41 (m, 2 H) 7,45 (dd, J = 1,77 Hz, 1 H) 7,52 (d, J = 7,07 Hz, 2 H).

Etapa 2: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 2, la sal sódica del ácido (2-benciloxi-fenil)-metanosulfónico (30 g, 99 mmol) proporcionó ácido (2-benciloxi-fenil)metanosulfónico (15 g), un sólido de color blanco que se usó sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,81 (s, 2 H) 5,08 (s, 2 H) 6,80-6,92 (m, 1 H) 6,95 (d, J = 7,83 Hz, 1 H) 7,07-7,17 (m, 1 H) 7,31 (d, J = 6,82 Hz, 1 H) 7,34-7,42 (m, 2 H) 7,45 (dd, 1 H) 7,52 (d, J = 7,33 Hz, 2 H).

Etapa 3: Usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5, Etapa 3, el ácido (2benciloxi-fenil)-metanosulfónico (7 g, 25,15 mmol) proporcionó cloruro de (2-benciloxi-fenil)metanosulfonilo (2,6 g, al 35%). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 5,06 (s, 2 H) 5,15 (s, 2 H) 7,007,10 (m, 2 H) 7,30-7,50 (m, 7 H).

Etapa 4: Como se ha indicado en la Etapa 9 Ejemplo 1, se hizo reaccionar 4-{3-[2-(2aminoetil)-1-benzhidril-5-cloro-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (Ejemplo 7, Etapa 6, 3,92 g, 7,3 mmol) con cloruro de (2-benciloxi-fenil)-metanosulfonilo (2,6 g, 8,76 mmol), proporcionando 4,1 g de 4-{3-[2-[2-({[2-(benciloxi)bencil]sulfonil}amino)etil]-5-cloro-1-(difenilmetil)-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo, una espuma de color blanco, con un rendimiento del 59%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,80-1,99 (m, 2 H) 2,49-2,78 (m, 6 H) 2,85 (t, J = 8,84 Hz, 2 H) 3,89 (s, 3 H) 3,96-4,05 (m, 1 H) 4,26 (s, 2 H) 4,90 (s, 2 H) 6,45 (d, J = 8,84 Hz, 1 H) 6,73-6,82 (m, 2 H) 6,83-6,93 (m, 2 H) 6,94-7,08 (m, 4 H) 7,16-7,34 (m, 15 H) 7,39 (d, J = 2,02 Hz, 1 H) 7,85-7,98 (m, 2 H).

Etapa 5: Se hizo reaccionar 4-{3-[2-[2-({[2-(benciloxi)bencil]sulfonil}amino)etil]-5-cloro-1(difenilmetil)-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (5,1 g, 6,4 mmol) con hidrógeno en presencia de paladio sobre carbono (0,5 g), proporcionando una mezcla de 4-{3-[5-cloro-1(difenilmetil)-2-(2-{[(2-hidroxibencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo y 4-{3-[1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-hidroxibencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3-il]propil}benzoato de metilo (3:1) en forma de una espuma de color blanco con un rendimiento global del 74%.

Etapa 6: Usando el procedimiento de la Etapa 10, Ejemplo 1, se hidrolizó la mezcla de éster de sulfonamida (3,35 g) y se purificó por HPLC preparativa, proporcionando 1,18 g (36%) del producto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,89-2,01 (m, 2 H) 2,64-2,96 (m, 8 H) 4,16 (s, 2 H) 4,17-4,25 (m, 1 H) 6,50 (d, J = 8,84 Hz, 1 H) 6,74-6,89 (m, 4 H) 6,95 (dd, J = 1,64 Hz, 1 H) 7,01-7,13 (m, 4 H) 7,11-7,23 (m, 1 H) 7,23-7,38 (m, 8 H) 7,41 (d, J = 2,02 Hz, 1 H) 7,90-8,04 (m, 2 H); EMAR: calc. para C40H37ClN2O5S + H+, 693,21845; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+), 693,21709; pureza por HPLC de (CH3CN-H2O): 7,24 min, 100,0%. Pureza por HPLC de (MeOH-H2O): 8,12 min, 100,0%. Ejemplo 41 [Ejemplo de Referencia] Ácido 4-{3-[5-cloro-1-(difenilmetil)-2-(2-{[(2-quinolin-5-ilbencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3il]propil}benzoico

Etapa 1. El bromuro del Ejemplo 24, Etapa 1 se hizo reaccionar con ácido 5quinolinborónico de acuerdo con el procedimiento del Ejemplo 29, Etapa 1, proporcionando el producto de Suzuki.

Etapa 2. Como se ha descrito en el Ejemplo 1, Etapa 10, el éster se hidrolizó y el producto se purificó por HPLC preparativa, proporcionando el compuesto del título, un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1H RMN (400 MHz; CDCl3) δ 1,77-1,91 (m, 2 H), 2,35-2,70 (m, 6 H), 2,76 (t, J = 7,2 Hz, 2 H), 3,65 (d, J = 13,9 Hz, 1 H), 3,89 (d, J = 13,9 Hz, 1 H), 4,00 (t, J = 5,3 Hz, 1 H), 6,39 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 6,63-6,79 (m, 2 H), 6,86-7,04 (m, 4 H), 7,08-7,24 (m, 10 H), 7,24-7,40 (m, 4 H); 7,43-7,51 (m, 1 H), 7,55 (dd, J = 8,6, 7,1 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,84-7,94 (m, 2 H), 8,05 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 8,83 (dd, J = 4,3, 1,8 Hz, 1 H). EMAR: calc. para C49H42ClN3O4S + H+, 804,26573; observado (IEN-EMTF, [M+H]1+).

En la Publicación de Patente de Estados Unidos Nº 2005/0187408 A1 se desvela un procedimiento alternativo para preparar compuestos de intermedios de la fórmula general: en la que X es halógeno, preferentemente cloro,. En resumen, el procedimiento implica la formación de ácido sulfónico antes de la conversión en el haluro de sulfonilo, de acuerdo con el esquema general que se indica a continuación:

imagen1

imagen4

en el que L es un grupo saliente; Ar representa un resto fenilo 2,6-disustituido; R representa un resto (CHR5)n2, y M es un ión metálico del grupo I o el grupo II. De acuerdo con el esquema, los ácido sulfónicos de Fórmula IV pueden convertirse en haluros de sulfonilo por reacción con un reactivo de sustituido de halógeno (es decir, un reactivo que puede convertir un sustituyente 10 no halógeno tal como, por ejemplo, H o OH, en un sustituyente halógeno; es decir, convertir un resto de ácido sulfónico en un resto de haluro de sulfonilo), por ejemplo SOCl2, POCl3, CCl4/trifenilfosfina, cloruro de oxalilo o bromuro de oxalilo, preferentemente cloruro de oxalilo. El agente de sustitución de halógeno se usa preferentemente en una cantidad en exceso, particularmente si existe un disolvente residual en el material de partida, en los disolventes o 15 en ambos. Cuando se usa cloruro de oxalilo como el agente de sustitución de halógeno, puede usarse en un intervalo de aproximadamente 1 a aproximadamente 6 equivalentes; de aproximadamente 2 a aproximadamente 4 equivalentes o de aproximadamente 3 a aproximadamente 3,5 equivalentes con respecto a la cantidad de reactivo de ácido sulfónico (compuesto de Fórmula IV). Un experto en la materia reconocerá que la cantidad de agente de 20 sustitución de halógeno dependerá, entre otros, de la cantidad de agua en el material o el

disolvente de partida y de la naturaleza y reactividad del material de partida y los disolventes.

Los disolventes adecuados para la reacción de sustitución de halógeno (etapa 3 del esquema anterior) incluyen cualquier disolvente orgánico que pueda disolver, al menos parcialmente, el compuesto de Fórmula IV. Los disolventes preferidos incluyen disolventes no polares o polares débiles, incluyendo acetonitrilo, hidrocarburos aromáticos, tales como benceno y tolueno, y disolventes halogenados, tales como 1,2-dicloroetano y cloruro de metileno. Los disolventes más preferidos son éteres. Los éteres adecuados incluyen tetrahidrofurano, dioxano, éter dietílico, éter dibutílico, éter diisopropílico o mezclas de los mismos y similares. Un éter más preferido es tetrahidrofurano.

La reacción de sustitución de halógeno puede realizarse a cualquier temperatura adecuada, por ejemplo de aproximadamente -40ºC a aproximadamente la temperatura ambiente, preferentemente por debajo de aproximadamente -10ºC.

La etapa de formación de haluro de sulfonilo (etapa 3 del esquema anterior) también puede realizarse en presencia de un catalizador de transferencia de acilo, tal como una amida terciaria (por ejemplo, dimetilformamida). El catalizador de transferencia de acilo puede proporcionarse en una cantidad suficiente para acelerar la velocidad de reacción. El catalizador de transferencia de acilo está presente en menos de aproximadamente un equivalente con respecto a la cantidad de reactivo de ácido sulfónico, preferentemente en una cantidad de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 0,5 equivalentes; incluso más preferentemente, de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 0,2 equivalentes, con respecto a la cantidad de reactivo de ácido sulfónico.

Los compuestos de Fórmula I pueden aislarse de la mezcla de reacción por precipitación y filtración. Puede usarse cualquiera de los numerosos procedimientos bien conocidos para inducir la precipitación. En algunas realizaciones preferidas, a la mezcla de reacción se le puede añadir un anti-disolvente, tal como agua o un disolvente que contiene agua para inducir la precipitación. El uso de agua como un anti-disolvente puede reducir la velocidad de descomposición del producto de haluro de sulfonilo con respecto a la velocidad de descomposición observada cuando se usa un disolvente orgánico, tal como heptano, dando como resultado mejores rendimientos. La precipitación puede facilitarse disminuyendo la temperatura de la mezcla de reacción, por ejemplo, por debajo de aproximadamente -20ºC.

Como se ha mostrado en el esquema anterior, pueden prepararse ácidos sulfónico de Fórmula IV haciendo reaccionar sales de ácido sulfónico (sales sulfonato) de Fórmula III con un ácido prótico. Los ácidos próticos adecuados son lo suficientemente fuertes para que sean capaces de convertir una sal sulfonato en su ácido correspondiente de acuerdo con los procedimientos de la invención. Por ejemplo, el ácido prótico puede ser un ácido inorgánico fuerte, tal como HCl, HBr, H3PO4, HNO3, HClO4, H2SO4 y similares. Como alternativa, el ácido prótico puede ser un ácido orgánico, tal como ácido fórmico, ácido metanosulfónico, ácido ptolueno sulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido trifluoroacético y otros ácidos orgánicos fuertes. El ácido prótico puede proporcionarse en forma gaseosa. Preferiblemente, el ácido inorgánico es HCl, más preferentemente HCl gaseoso que se añade al disolvente de reacción que contiene la sal sulfonato. El ácido prótico se proporciona de forma ventajosa en equivalentes molares en exceso con respecto a la sal de ácido sulfónico de Fórmula III.

La formación del compuesto de ácido sulfónico de Fórmula IV puede realizarse en cualquier disolvente adecuado. Por ejemplo, son adecuados los disolventes orgánicos en los que el compuesto de Fórmula III es al menos parcialmente soluble. El disolvente puede seleccionarse de tal forma que disuelvan pobremente sales de haluros metálicos, tales como NaCl o KCl, conduciendo termodinámicamente la reacción por precipitación de sal de haluros metálicos. El disolvente puede contener un alcohol, tal como metanol, etanol, isopropanol y similares, o una mezcla de los mismos, preferentemente metanol. El disolvente también puede contener agua. La temperatura de reacción puede determinarse fácilmente por el experto en la materia. Por ejemplo, la reacción puede realizarse a una temperatura por debajo de la temperatura ambiente, tal como de aproximadamente -20 a aproximadamente 10ºC, preferentemente a aproximadamente 0ºC o por debajo de aproximadamente 10ºC.

El compuesto de ácido sulfónico de Fórmula IV puede aislarse de acuerdo con procedimientos rutinarios, tales como precipitando el producto de la mezcla de reacción.

El compuesto de sal de ácido sulfónico (sal sulfonato) de Fórmula III puede prepararse haciendo reaccionar un compuesto de Fórmula II: Ar-R-L (en la que Ar, R y L son como se han definido anteriormente en el presente documento) con una sal sulfito de metales del Grupo I o II opcionalmente en presencia de un catalizador de transferencia de fase como se ha mostrado en la etapa 1 del esquema anterior. Es adecuado cualquier sal sulfito de metales del Grupo I o el Grupo II, por ejemplo, Li2SO3, Na2SO3, K2SO3, MgSO3, CaSO3 y similares. Las sales sulfito de metales del Grupo I o II pueden proporcionarse en exceso molar de, por ejemplo, aproximadamente 2 equiv., a aproximadamente 1 equiv., con respecto a la cantidad de compuesto de Fórmula II. Las sales metálicas adecuadas incluyen Na2SO3, K2SO3 y Na2SO3.

La formación de los compuestos de sal sulfonato de Fórmula III puede realizarse en presencia de un catalizador de transferencia de fase, por ejemplo un haluro de amonio cuaternario, tal como yoduro de tetrabutilamonio. El catalizador de transferencia de fase puede proporcionarse en una cantidad adecuada para acelerar la velocidad de reacción, por ejemplo en aproximadamente el 0,1 al 2% o más preferentemente el 0,5 al 1% en peso.

Puede emplearse cualquier disolvente adecuado, tal como un disolvente que pueda disolver al menos parcialmente sales sulfito metálicas del Grupo I o II, tal como agua, en una cantidad de aproximadamente el 50%, más preferentemente de aproximadamente el 75%, incluso más preferentemente más de aproximadamente el 90%, aún más preferentemente más de aproximadamente el 95%, y todavía más preferentemente más de aproximadamente el 99% de agua. La reacción también puede realizarse a cualquier temperatura adecuada, preferentemente una temperatura elevada, por ejemplo, a aproximadamente 100ºC.

El aislamiento del compuesto de Fórmula III de la mezcla de reacción puede realizarse mediante cualquier procedimiento rutinario, tal como precipitación de la mezcla de reacción, por ejemplo, tratando la mezcla de reacción con una sal orgánica soluble en agua, tal como NaCl o KCl, más preferentemente NaCl. El aislamiento del compuesto de Fórmula III puede facilitarse adicionalmente mediante la adición a la mezcla de reacción de un disolvente orgánico que es sustancialmente no miscible en agua, tal como acetato de etilo, éteres (por ejemplo, éter etílico y similares), alcanos (por ejemplo, hexanos, éter de petróleo, etc.), aromáticos (por ejemplo, benceno, tolueno, xileno, etc.) y similares, siendo acetato de etilo el más preferido. La mezcla de reacción también puede enfriarse (por ejemplo, a menos de aproximadamente 10ºC) para ayudar a inducir la precipitación. PROCEDIMIENTOS DE ENSAYO BIOLÓGICO Ensayo de Micelas con GLU

El ensayo se realizó en un formato de 96 pocillos usando un lector de placas fluorescentes con un filtro de excitación de 355 nm y un filtro de emisión de 460 nm (Lab. Systems Fluoroscan II, Helsinki, Finlandia). El tampón de ensayo contenía Tritón X-100 940 µM, Hepes pH 7,4 50 mM, EDTA 0,3 mM, CaCl2 1 mM y KCl 300 mM. Se añadió DTPC (1,2-Otetradecil-sn-glicero-3-fosfocolina, Avanti) a una concentración final de 120 µM el día del experimento y se añadió GLU (7-hidroxicumarinil-y-linolenato, Biomol Research Lab, Inc.) a una concentración final de 90 µM inmediatamente antes de cada ensayo.

Los compuestos (10 µl) disueltos en DMSO se pusieron en pocillos por duplicado de una placa negra de 96 pocillos. Los pocillos correspondientes a los controles positivo y negativo contenían DMSO sin inhibidores. Justo antes del experimento, se añadieron 200 µl de tampón de ensayo que contenía GLU 90 µM y DTPC 120 µM a todos los pocillos de la placa de ensayo. Se añadió tampón de ensayo (50 µl) a la solución negativa y se añadieron 50 µl de solución de cPLA2α (5 mg/ml en tampón de ensayo) a todos los demás pocillos para iniciar la reacción. La concentración final de enzima fue de 1 µg/ml. El contenido de cada pocillo se mezcló suavemente durante la adición de la enzima, y la placa se transfirió rápidamente al lector de placas fluorescente. El aumento de fluorescencia se leyó cada 4 minutos durante 84 minutos. La pendiente de la línea resultante se determinó y la inhibición se calculó usando la siguiente ecuación:

Porcentaje de Inhibición = [1 – (pendiente con inhibidor -pendiente de control negativo) / (pendiente de control positivo – pendiente de control negativo)] x 100

Ensayo en Sangre Entera de Rata

5 Se recogió sangre reciente en tubos heparinizados por punción cardíaca de ratas Sprague-Dawley macho. Se incubaron alícuotas de sangre (0,6 ml) con 6 µl de disolvente (DMSO) o 6 µl de compuestos de ensayo a diversas concentraciones durante 15 minutos a 37ºC. Esto se continuó por incubación de la sangre con 6 µl de ionóforo de calcio, A23187 (Sigma C-7522) diluido en DMSO durante 10 minutos a 37ºC. La concentración final de

10 A23187 fue 5 µM. Se añadió DMSO (6 µl) en los controles no estimulados. Las reacciones se detuvieron mezclando 60 µl de EDTA frío para dar una concentración final de 20 mM. La sangre se centrifugó a 6.500 rpm durante 10 minutos en una microcentrífuga para obtener plasma. Una alícuota de 70 µl de plasma se mezcló con 400 µl de metanol frío para la precipitación de proteínas. Después de la incubación a -80ºC durante 30 minutos, el

15 sobrenadante se obtuvo por centrifugación a 6.500 rpm durante 10 minutos y se ensayó con respecto a TXB2 de acuerdo con el procedimiento del fabricante (Assay Designs, kit ELISA de Inc. nº 900-002).

Los resultados del Ensayo de Micelas con GLU y el ensayo de Sangre Entera de Rata para un compuesto de la invención y los ejemplos de referencia se muestran en la Tabla 1 20 presentada a continuación:

Ejemplo Nº

CI50 de Micela con GLU (uM) CI50 de TXB2 en Sangre Entera de Rata (uM)

1

0,26 0,14

2

0,19 0,12

3

0,054 0,06

4

0,054 0,02

5

0,026 0,02

6

0,092 0,08

7

0,018 0,03

8

0,024 0,02

9

0,022 0,02

Ejemplo Nº

CI50 de Micela con GLU (uM) CI50 de TXB2 en Sangre Entera de Rata (uM)

10

0,009 0,02

11

0,28 0,38

12

0,021 0,04

13

0,026 0,03

14

0,03 0,02

15

0,068 0,12

16

0,023 0,05

17

0,01 0,02

18

0,025 0,04

19

0,022 0,03

20

0,014 0,17

21

0,0059 0,03

22

0,021 0,08

23

0,105 0,04

24

0,008 0,03

25

0,013 0,03

26

0,022 0,03

27

0,038 0,03

28

0,03 0,03

29

0,018 0,05

30

0,021 0,06

31

0,016 0,04

32

0,013 0,05

33

0,022 0,02

34

0,016 0,03

35

0,027 0,05

36

0,031 0,07

37

0,025 0,03

38

0,007 0,01

39

0,068 0,02

40

0,072 0,06

41

0,022 -

Efecto de inhibidor de cPLA2 en Modelos de Trombosis

El efecto de la administración de inhibidores de cPLA2 en modelos de trombosis se determinó por los siguientes procedimientos. Estudio de Analizador de la Función Plaquetaria (CFA-100®)

La agregación de plaquetas humanas se estudió usando el analizador de la función plaquetaria (PFA-100®). Se recogió sangre humana de voluntarios que se habían privado de tomar cualquier medicación inhibidora de las plaquetas durante las dos semanas previas. Se recogió sangre en tubos Vacutainer con citrato sódico al 3,2% (Becton Dickinson). Los tubos se invirtieron 5 veces y la sangre se transfirió a tubos cónicos de polipropileno de 15 ml. Se añadieron 5 µl del inhibidor respectivo disuelto en DMSO al 100% (ácido 4-(3-{5-cloro-1(difenilmetil)-2-[2-({[2-fluoro-6-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3il}propil)benzoico, Ejemplo 14; ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2(trifluorometoxi)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3-il}propil)benzoico, Ejemplo 25; ácido 4-{3[1-benzhidril-5-cloro-2-(2-{[(3,4-diclorobencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3-il]propil}benzoico, compuesto C) a una alícuota de 1 ml de sangre humana entera, para dar la concentración de inhibidor respectiva y una concentración final de DMSO del 0,5%. Los tubos se invirtieron 10 veces para mezclar y se dejaron en reposo a temperatura ambiente durante 10 minutos antes de procesarlos en PFA-100. Se siguió el protocolo de los fabricantes para PFA-100 usando cartuchos de colágeno/epinefrina (DMSO al 0,5% solo en sangre entera proporcionó tiempos de cierre de 125 +/-13,9 segundos). El tiempo máximo de cierre es de 300 segundos, establecido por el fabricante.

Los resultados se muestran en la Figura 1. El compuesto C o el compuesto del Ejemplo 14 o el Ejemplo 25 se dejaron incubar con sangre humana entera antes del ensayo de exposición en el PFA-100. Todos los compuestos fueron eficaces en el ensayo de la función plaquetaria. A una concentración de 1,25 µg/ml, el Compuesto C y el compuesto del Ejemplo 14 condujeron a un mayor tiempo de cierre, mientras que el compuesto del Ejemplo 25 fue eficaz a concentraciones tan bajas como 0,3 µg/ml. Estos datos demuestran que estos tres compuestos inhiben la agregación plaquetaria en sangre humana, in vitro. Modelo de trombosis arterial inducida por FeCl3

Dos horas antes de la inducción de la lesión vascular, ratas exogámicas Sprague Dawley (80-100 gramos de peso corporal) recibieron ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2({[2-fluoro-6-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol-3-il}propil)benzoico (Ejemplo 14) o ácido 4-(3-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometoxi)bencil]sulfonil}amino)etil]-1H-indol3-il}propil)benzoico (Ejemplo 25) a una dosis de 25 mg/kg por sonda oral. El volumen total de la sonda fue de 0,5 ml. El grupo de control de animales se había tratado sólo con vehículo.

Quince minutos antes de la lesión vascular, las ratas se anestesiaron mediante una inyección intramuscular de una mezcla de ketamina/xilazina. Después de la anestesia, se diseccionó la arteria carótida izquierda y se expuso para realizar mediciones adicionales. Para la inducción de la lesión protrombótica, se aplicó una pieza redonda de papel de filtro (2 mm de diámetro) empapada en 10% de solución de FeCl3 sobre la pared del vaso expuesto. Después de 5 minutos, se retiró el papel de filtro y se fijó la sonda de flujo Doppler perivascular 1 PRB (Transonic Systems Inc.) alrededor de la arteria carótida para medir el flujo de sangre. El flujo de sangre se registró durante un periodo total de 30 minutos usando un medidor de flujo Transonic (modelo TS420, Transonic Systems Inc.) y un software de adquisición de datos Windaq.

Los resultados, mostrados en la Figura 2, demuestran que los dos compuestos son eficaces en el modelo de trombosis inducida por cloruro férrico en rata cuando se dosifican por vía oral a 25 mg/kg. Niveles de tromboxano B2 en ratas con trombosis inducida por FeCl3

Se recogió sangre de ratas a las que se dosificó vehículo, al compuesto del Ejemplo 14

o el compuesto del Ejemplo 25, y que se sometieron al protocolo de lesión por cloruro férrico anterior. Se recogió sangre de la vena cava y se dejó que tuviera lugar la coagulación sanguínea durante 1 hora a 37 grados Celsius. Después se aisló el suero y se determinaron los niveles de tromboxano B2 en suero por ELISA.

Los resultados se muestran en la Figura 3. Estos datos muestran que los dos compuestos proporcionaron una reducción en los niveles de Tromboxano B2 en suero. Efecto de inhibidor de cPLA 2 en un Modelo Animal de Esclerosis Múltiple

El efecto de la administración de un inhibidor de cPLA2 en un modelo animal de esclerosis múltiple se determinó por el siguiente procedimiento.

Seis grupos de ratones B6 se inmunizaron con MOG/CFA y se les inyectó toxina pertussis para inducir encefalomielitis autoinmune experimental (EAE), un modelo animal de esclerosis múltiple. Tres grupos de ratones se trataron con vehículo, ácido 4-{3-[1-benzhidril-5cloro-2-(2-{[(2,6-dimetilbencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3-il]propil} benzoico (Compuesto A) o ácido 4-{2-[1-benzhidril-5-cloro-2-(2-{[(3,4-diclorobencil)sulfonil]amino}-etil)-1H-indol-3il]etoxi}benzoico (Compuesto B) desde el día de la inmunización (por vía oral, 100 mg/kg, dos veces/día). Otros tres grupos de ratones se trataron con vehículo, Compuesto A o Compuesto B empezando el día del inicio de EAE (día 15) (por vía oral, 100 mg/kg, dos veces/ día). Este día, más del 20% de los animales mostraron los primeros signos clínicos de EAE y el tratamiento empezó en todos los animales de estos grupos. Los resultados se muestran en la tabla proporcionada a continuación, en la que la puntación clínica media es una media de la evaluación clínica de cada animal para ese día particular. Los animales se puntúan como se

indica a continuación: 0 -sin signos clínicos de EAE (sin parálisis) 1 -parálisis de cola

5 2 -parálisis de cola y parálisis parcial de patas traseras 3 -parálisis de cola y parálisis completa de patas traseras 4 -parálisis de cola, parálisis completa de patas traseras y una parálisis parcial de patas delanteras 5 -animal moribundo (las cuatro extremidades paralizadas, ausencia de respuesta,

10 estos ratones se sacrificaron inmediatamente).

Días después de la Inmunización

Control con vehículo día 1 Compuesto A, día 1 Compuesto B, día 1 Control con vehículo, inicio Compuesto A, inicio Compuesto B, inicio

11

0 0 0 0 0 0

12

0 0 0 0 0 0

13

0 0 0 0 0 0

14

0 0 0 0 0 0

15

0,23 0 0 0,37 0,33 0,10

16

0,50 0 0 0,97 0,60 0,45

17

0,63 0 0,06 1,30 0,80 0,80

18

0,93 0 0,06 1,63 1,03 1,05

19

1,03 0 0,11 1,63 1,13 1,10

20

1,47 0 0,39 2,23 1,50 1,00

21

1,63 0,06 0,44 2,40 1,57 1,20

22

2,13 0,09 0,50 2,43 1,60 1,10

23

2,53 0,16 0,67 2,47 1,37 1,40

24

2,73 0,19 0,56 2,47 1,43 1,35

25

2,67 0,25 0,56 2,30 1,23 1,25

26

2,73 0,28 0,56 2,17 0,87 1,40

27

2,63 0,38 0,72 2,17 0,87 1,55

Además, también se descubrió que los compuestos de los Ejemplos 14 y 25 eran eficaces en el modelo de encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) de ratón de esclerosis múltiple. Como se muestra por los datos en la Tabla proporcionada a continuación, estos compuestos condujeron a un retraso del inicio de la enfermedad y a una menor gravedad de la enfermedad cuando se administraron por vía oral en dosis tan bajas como de 2,5 mg/kg.

Días Después de la Inmunización

Control con Vehículo Ejemplo 14 2,5 mg/kg Día 1 Ejemplo 25 2,5 mg/kg Día 1

11

0 0 0

12

0,08 0 0

13

0,50 0 0

14

1,13 0 0,14

15

1,48 0,14 0,20

16

2,00 0,32 0,55

17

2,00 0,50 0,55

18

2,19 0,55 0,55

19

3,31 1,32 0,84

20

3,48 1,41 1,27

21

3,60 1,77 1,68

22

3,60 1,89 1,89

23

3,58 2,00 1,93

24

3,60 2,05 2,00

25

3,71 1,90 1,98

26

3,71 1,89 1,95

27

3,71 1,89 1,93

5

Estos resultados demuestran que el tratamiento de ratones con inhibidores de cPLA2 de los Ejemplos 14, 25, Compuesto A y Compuesto B puede prevenir la EAE cuando se administran desde el momento de la inmunización y reducen la gravedad clínica de EAE en ratones que ya han desarrollado EAE o van a desarrollar próximamente signos clínicos de la 10 enfermedad. Efecto de inhibidor de cPLA2 en aterosclerosis El efecto de la administración de un inhibidor de cPLA2 en el modelo de ratón knockout de apolipoproteína E (ApoE) de aterosclerosis se determinó por los siguientes procedimientos. Modelo de ratón KO para ApoE 15 El ratón knockout para apolipoproteína E (ApoE) se creó por dirección a genes en

células madre embrionarias para alterar el gen de ApoE. ApoE es una glicoproteína que es responsable de la captación de los quilomicrones y las partículas de VLDL por el hígado, previniendo de esta manera la acumulación de residuos ricos en colesterol en la corriente sanguínea. Como resultado de la inactivación homocigota del gen de la ApoE, los ratones KO para ApoE presentan altos niveles de colesterol, lo cual a su vez induce la formación de placas ateroscleróticas en áreas de singularidades a lo largo del árbol arterial, específicamente en el seno aórtico en el que prevalecen altas alteraciones hemodinámicas y en sitios de ramificación a lo largo de la aorta. cPLA2 en aterosclerosis

La fosfolipasa A2 citosólica (cPLA2) preferentemente media la liberación del ácido araquidónico tras la activación celular. Los metabolitos del ácido araquidónico, los eicosanoides, se reconocen como moduladores importantes de procesos inflamatorios. Se ha demostrado que una reducción de la biosíntesis de eicosanoides proinflamatorios inhibe la progresión de la lesión aterosclerótica en seres humanos y ratones, sugiriendo de esta manera un papel potencial de cPLA2 en la aterosclerosis (véase Ranke y col., Circulation 1993; 87(6) 1873-1879; Paul y col., Life Sciences 2000; 68 (4): 457-465; Cyrus y col., Circulation 2002; 106(10) 1282-1287; Praticò y col., PNAS 2001; 98(6): 3358-3363; Burleigh y col., Circulation 2002; 105(15): 1816-1823; Cayatte y col., ATVB 2000; 20(7): 1724-1728; Aiello y col., ATVB 2002; 22(3) 443-449; Subbanagounder y col., Circ. Res. 1999; 85(4): 311-318). Además, se ha detectado expresión de cPLA2 en arterias ateroscleróticas humanas, pero no en arterias humanas sanas normales (véase Schäfer Elinder y col., ATVB 1997; 17 (10): 2257-2263). Efecto de un inhibidor de cPLA2 sobre la aterosclerosis, en ratones

Se trataron ratones KO para ApoE macho de seis semanas de edad con ácido 4-{3-[1benzhidril-5-cloro-2-(2-{[(3,4-diclorobencil)sulfonil]amino}etil)-1H-indol-3-il]propil}benzoico (Compuesto C). Los ratones se alimentaron con una dieta normal suplementada con Compuesto C a 1,3 mg/g y 3,3 mg/g (dando como resultado una exposición máxima de fármaco de ~250 ng/ml y ~500 ng/ml, respectivamente) o vehículo durante 20 semanas. Los niveles en suero de tromboxano B2 se redujeron significativamente después de 9 y 20 semanas de tratamiento en comparación con los animales de control, como se muestra en la tabla proporcionada a continuación: Niveles en Suero de Tromboxano B2

% de Reducción frente al Control

Compuesto C (1,3 mg/g) Compuesto C (3,3 mg/g)

después de 9 semanas de tratamiento

52,5 61,2

después de 20 semanas de tratamiento

36,6 49,5

Además, la carga de placas ateroscleróticas en el seno aórtico se redujo en un 32,7%

5 (349582 ± 132685 frente a 519220 ± 100694 µm2, p<0,05) y en un 45,6% (282697 ± 46462 frente a 519220 ± 100694 µm2, p<0,001) en animales a los que se administró el compuesto a 1,3 mg/g y 3,3 mg/g, respectivamente, en comparación con los animales de control. Además, como se muestra en la tabla proporcionada a continuación, la reducción en el porcentaje del área de lesión a lo largo de la aorta no fue significativa (ns), demostrando el papel de este

10 inhibidor de cPLA2 en la enfermedad, específicamente en regiones de las máximas alteraciones hemodinámicas. Lesiones Ateroscleróticas a lo largo de la Aorta

Compuesto C (1,3 mg/g)

Compuesto C (3,3 mg/g)

% de Reducción frente al Control

32,4 ns 35,2 ns

15 Como se muestra en la Tabla proporcionada a continuación, se redujo la complejidad de la lesión aterosclerótica en animales tratados con Compuesto C en comparación con los animales de control, como se atestigua por una mayor frecuencia de lesiones en las primeras fases y una reducción de la frecuencia de lesiones en fase avanzada en el seno aórtico. La Tabla muestra el porcentaje de animales totales con Fase 1 (lesión fibroadiposa), Fase 2 (placa fibrosa temprana),

20 Fase 3 (placa fibrosa avanzada), Fase 4 (lesión complicada estable) y Fase 5 (lesión complicada inestable) para los animales dosificados con vehículo, Compuesto C a 1,3 mg/g y Compuesto C a 3,3 mg/g. Complejidad de lesión Aterosclerótica

Fase 1

Fase 2 Fase 3 Fase 4 Fase 5

Vehículo

11% 56% 33%

Comp. C 1,3 mg/g

33% 56% 11%

Comp. C 3,3 mg/g

9% 18% 37% 27% 9%

Niveles de Tromboxano B2 en el Modelo de Ratón KO para ApoE de Aterosclerosis

Se alimentaron ratones KO para ApoE con una dieta de pienso normal suplementada con Compuesto C o el compuesto del Ejemplo 10 a 3,3 mg/g de pienso o vehículo durante dos días. Se recogió sangre a través del seno retro-orbital y se dejó coagular a 37ºC durante una hora. Después se aisló suero y se ensayo con respecto al tromboxano B2 por ELISA. Se observó que las concentraciones de tromboxano (ng/ml) eran: Vehículo: 76,1 ± 17,3; Compuesto C (3,3 mg/g): 33,5 ± 11,6; Compuesto del Ejemplo 10: (3,3 mg/g): 1,4 ± 0,7.

En un experimento separado, a ratones KO para ApoE se les dosificó con vehículo o el compuesto del Ejemplo 25 a 10 mg/kg por medio de una sonda oral. Se recogió sangre a través del seno retro-orbital y se dejó coagular a 37ºC durante una hora. Después se aisló el suero y se ensayó con respecto al tromboxano B2 por ELISA. Se observó que las concentraciones de tromboxano (ng/ml) eran: Vehículo: 267,9 ± 34,3; Compuesto del Ejemplo 25: 9,4 ± 5,0. Efecto de inhibidor de cPLA2 en Modelos de Ictus

El efecto de la administración de un inhibidor de cPLA2 en modelos de ictus se determinó mediante los siguientes procedimientos. Cultivos de neuronas de gránulos cerebelares

Se aislaron neuronas de gránulos cerebelares primarias a partir de crías de rata P5-8. En resumen, se recogieron cerebelos y se vertieron en solución salina tamponada con fosfato (PBS) enfriada con hielo sin Ca2+ y Mg2+. El tejido se trituró en trozos muy pequeños y se transfirió a un medio de disociación enzimático que contenía 20 UI/ml de papaína en solución salina equilibrada de Earle (Worthington Biochemical, Freehold, NJ) y se incubó durante 30 minutos a 37ºC. Después de la disociación enzimática, la solución de papaína se aspiró y el tejido se trituró mecánicamente con una pipeta Pasteur pulida al fuego en medio completo [Medio Neurobasal con suplemento B-27 (Gibco, Grand Island, NY), penicilina/estreptomicina, afidicolina, glutamato, cloruro potásico] que contenía 2.000 UI/ml de DNasa y 10 mg/ml de inhibidor de proteasa ovomucoide. Se cultivaron suspensiones de una sola célula en medio completo en placas de 24 pocillos de poli-L-ornitina/laminina revestidas previamente (Becton-Dickinson, Bedford, MA) a una densidad de 5,0 x 105 células/pocillo. Las células se mantuvieron durante dos semanas antes de la experimentación. Privación de Oxígeno-Glucosa (OGD) en Neuronas Cultivadas

Los cultivos se trataron con Compuesto A a diversas concentraciones, 60 minutos antes de la OGD. El medio se retiró y se reemplazó con tampón desoxigenado en una cámara anaerobia (mezcla de gas de un 80% de oxígeno, un 10% de hidrógeno y un 10% de dióxido de carbono). Se añadió Compuesto A nuevo, Ejemplo 34 o Ejemplo 41 a los cultivos y se mantuvo en la cámara anaerobia durante 2 horas. Al final de la incubación, se cambió el medio por medio nuevo y se añadió Compuesto A nuevo. Los cultivos se mantuvieron durante 24 horas más en un incubador normóxico. La muerte celular se determinó midiendo la liberación de lactato deshidrogenasa en el medio 24 horas después (Roche Biochemicals). En la tabla proporcionada a continuación, se muestran valores para el control, OGD, diversas concentraciones de Compuesto A, y MK801, un antagonista del receptor NMDA, que es un control positivo.

Neuroprotección por Inhibidores de cPLA2 Contra OGD

Control

OGD 0,1 µM 0,3 µM 1 µM 3 µM

Control

Media

14 51

Des. Típica

3 5

Comp. A

Media

38 31 27 20

Des. Típica

2 5 4 2

Ejemplo 34

Media

35 28 21 18

Des. Típica

4 3 3 2

Ejemplo 41

Media

40 33 30 24

Des. Típica

6 4 5 4

Por estos datos puede verse que la administración de Compuesto A, el compuesto del

10 Ejemplo 34 o el compuesto del Ejemplo 41 era eficaz en la protección de las neuronas cultivadas frente a la muerte celular inducida por OGD. A concentraciones tan bajas como de 0,1 µM, se observó una reducción estadísticamente significativa del porcentaje de muerte celular para estos compuestos. Efecto de inhibidor de cPLA2 en Modelos de la Enfermedad de Parkinson

15 El efecto de la administración de un inhibidor de cPLA2 en un modelo de enfermedad de Parkinson se determinó por los siguientes procedimientos. Cultivos de Neuronas Dopaminérgicas

Se aislaron neuronas dopaminérgicas primarias a partir de embriones de rata E15 como se describe en Pong K., y col., (1997) J. Neurochem. 69 986-994. En resumen, se aisló el

mesencéfalo ventral y el tejido se vertió en solución salina tamponada con fosfato (PBS) enfriada con hielo, sin Ca2+ y Mg2+ . El tejido se transfirió a un medio de disociación enzimático que contenía 20 UI/ml de papaína en solución salina equilibrada de Earle (Worthington Biochemical, Freehold, NJ) y se incubó durante 30 minutos a 37ºC. Después de la disociación enzimática, la 5 solución de papaína se aspiró y el tejido se trituró mecánicamente con una pipeta Pasteur pulida al fuego en medio completo [Medio Neurobasal con suplementos de B-27 (Gibco, Grand Island, NY), penicilina/estreptomicina, afidicolina, glutamato] que contenía 2.000 UI/ml de DNasa y 10 mg/ml de inhibidor de proteasa ovomucoide. Se cultivaron suspensiones de una sola célula en medio completo en placas de 24 pocillos de poli-L-ornitinlaminina revestidas previamente

10 (Becton-Dickinson, Bedford, MA) a una densidad de 5,0 x 105 células/pocillo. Las células se mantuvieron durante una semana antes de la experimentación. Exposición a MPP+ en Neuronas Dopaminérgicas

Los cultivos se trataron con diversas concentraciones de Compuesto A, Compuesto B, Compuesto C y GDNF (factor neurotrófico derivado de línea de células gliales, un control 15 positivo) horas antes de la exposición a la neurotoxina MPP+, el metabolito tóxico de MPTP. Los cultivos se expusieron a MPP+ 10 µM durante 60 minutos. Después de la exposición, se cambió el medio por medio nuevo y se añadió compuesto nuevo. La viabilidad de las neuronas dopaminérgicas se determinó 24 horas después midiendo la captación de 3H-dopamina como se describe en Pong y col., 1997, mencionado anteriormente. Los resultados se muestran en la

20 Tabla proporcionada a continuación:

Neuroprotección por Inhibidores de cPLA2 contra MPP+

Control

MPI 10 µM 0,3 µM 1 µM 3 µM 10 µM

Media

100 56,6

Desv. Típica

8,2 2,2

Compuesto A

Media

76,9 83,4 78,8 81,1

Desv. Típica

3,4 5,7 3,3 6,4

Compuesto B

Media

74 71,6 78,6 83,2

Desv. Típica

3 2 5,5 5,1

Compuesto C

5

10

15

20

25

30

66 (continuación)

Control

MPI 10 µM 0,3 µM 1 µM 3 µM 10 µM

Media

68,6 70,6 75,9 79,6

Desv. Típica

3,8 3,6 2,6 1,3

Por estos datos puede verse que la administración de estos compuestos era eficaz para proteger la viabilidad de neuronas dopaminérgicas frente a MPP+. Efectos de Inhibidor de cPLA2 en Modelos de Osteoartritis, Artritis Reumatoide y Dolor

Se realizaron estudios de farmacología in vivo usando el compuesto del Ejemplo 10 para demostrar la eficacia de la administración oral en modelos de inflamación y dolor periférico incluyendo el modelo de edema de pata de carragenina (véase Winter, C.A., y col., Proc Soc Exp Biol Med 1962; 111: 544-547), el modelo de artritis inducida por colágeno (véase Trentham, D.E., y col., J Exp. Med 146; 828-833), y el modelo de hiperalgesia inducida por adyuvante completo de Freund (CFA) (véase Stein C, y col., Pharmacology Biochemistry & Behavior, 1988; 31: 445-451). También se midió la inhibición in vivo de prostaglandinas y leucotrienos en las patas expuestas a CFA en el modelo de hiperalgesia. Ensayo de Edema de Pata Inducido por Carragenina

El ensayo de edema de pata inducido por carragenina es un modelo agudo de inflamación que es particularmente útil para la evaluación in vivo de compuestos que tienen como resultado la producción de prostaglandinas. En particular, los AINE inhiben el edema de una forma característica de respuesta a la dosis en este modelo, y la actividad de AINE en este modelo se correlaciona bien con la actividad observada en el ser humano (véase Mukherjee A, y col., Inflamm Res. 1996; 45: 531-540). Por lo tanto, el compuesto del Ejemplo 10 se ensayó en el modelo de edema de pata inducido por carragenina. En este modelo, el compuesto se administró por vía oral 2 horas antes de la inyección subplantar de carragenina y se determinó la inhibición del hinchamiento de la pata durante las tres horas siguientes. El edema de la pata se redujo de una forma estadísticamente significativa a dosis tan bajas como de 3 mg/kg y se determinó un valor de DE50 aproximado (basado en una inhibición máxima del 50%) de 7,5 mg/kg.

Estos datos demuestran que el compuesto del Ejemplo 10 funciona en un modelo clásico de inflamación in vivo que se ha usado para predecir la eficacia de AINE e inhibidores de COX-2. Efecto del Compuesto del Ejemplo 10 en el Modelo de Artritis Inducida por Colágeno

El compuesto del Ejemplo 10 se ensayó en el modelo CIA de ratón, que tiene muchas similitudes inmunológicas y patológicas con la artritis reumatoide humana (Véase Trentham, D. E., y col., mencionado anteriormente). Se indujo artritis en ratones DBA/1LacJ por inyección intradérmica de una emulsión de colágeno bovino de tipo II y CFA seguido de un refuerzo con una inyección intradérmica de colágeno bovino de tipo II emulsionado en Adyuvante Incompleto de Freund 21 días después de la inmunización inicial. La eficacia del compuesto se evaluó en un régimen de dosificación semi-terapéutico que se inició cuando el 10% de los animales mostraron síntomas de la enfermedad. En ese momento, los animales se asignaron aleatoriamente a grupos de tratamiento y recibieron el compuesto del Ejemplo 10 (100 mg/kg) PO BID durante 28 días. Los grupos de control recibieron celecoxib, vehículo solo o se dejaron sin tratar. Todos los animales se evaluaron diariamente de una forma ciego con respecto a los signos visuales de síntomas de la enfermedad.

Las puntuaciones medias del grupo tratado con el compuesto del Ejemplo 10 se compararon con los valores del grupo de control con vehículo usando el ensayo t de Student. Durante el tratamiento que empezaba el día 10, el grupo tratado con el compuesto del Ejemplo 10 (100 mg/kg BID) mostró una reducción estadísticamente significativa de las puntuaciones de gravedad de la enfermedad en todos los experimentos; y el número de animales sin síntomas de la enfermedad fue el máximo en los grupos que se trataron con el compuesto del Ejemplo 10.

Después de finalizar los experimentos, las patas se procesaron para histología. Dos juntas de patólogos veterinarios certificados evaluaron los portaobjetos con un diseño ciego. A cada pata se le asignó una puntuación numérica tanto para la gravedad de la artritis como para el número general de articulaciones afectadas. Los ratones tratados con el compuesto del Ejemplo 10 (100 mg/kg BID) tuvieron las menores puntuaciones de gravedad media por grupo y el mayor porcentaje de patas sin afectar (grado 0); los ratones tratados con vehículo y no tratados tuvieron las máximas puntuaciones de gravedad media del grupo y el máximo porcentaje combinado de patas afectadas de grado 3 y grado 4. Los ratones tratados con el compuesto del Ejemplo 10 (100 mg/kg) tuvieron un grado de gravedad media de 0,9/2,1 (patólogo 1/patólogo 2), mientras que los animales tratados con vehículo tuvieron una puntuación media de gravedad de 2,1/3,0. Se observaron resultados similares en un experimento adicional a 100 mg/kg. Ejemplo del Compuesto del Ejemplo 10 en Modelos de Hiperalgesia de Rata

La sensibilidad de neuronas sensoriales periféricas puede aumentarse de tal forma que respondan tanto a estímulos nocivos como a estímulos no nocivos dando como resultado dolor crónico (véase Julius, D. y col., Nature. 2001; 413: 203; Woolf, C. J., y col., Science. 200; 288: 1765). Las prostaglandinas y leucotrienos en el sitio de inflamación y las lesiones tisulares son parcialmente responsables de esta potenciación de la respuesta de dolor. Las prostaglandinas promueven la fosforilación de canales iónicos, aumentando la excitabilidad y reduciendo el umbral del dolor de las neuronas sensoriales. De forma análoga, el leucotrieno B4 y metabolitos de araquidonato relacionados de 12-LO se unen y activan el canal iónico del receptor de capsaicina (o VR1) en neuronas que responden al calor y al bajo pH (véase Piomelli D., TRENDS in Pharmacological Sciences, Enero 2001; 22(1): 17-29). El efecto del compuesto del Ejemplo 10 se midió en el modelo de hiperalgesia inducida por CFA, y la producción de mediador lipídico se midió en sitios periféricos y centrales.

Los animales se dosificaron con vehículo, el compuesto del Ejemplo 10, naproxeno o celecoxib, y después se inyectó inmediatamente CFA en la almohadilla plantar de una pata trasera. Para evaluar la hiperalgesia, se aplicó presión a la pata trasera izquierda a una velocidad lenta y constante usando un medidor de fuerza digital. Se tomaron medidas a 0 y 6 horas. La aplicación de la fuerza se detuvo cuando el animal emitió sonidos o forcejeó. Se tomaron lecturas antes de la dosificación y la inyección de CFA, y se repitieron seis horas después de la inyección de CFA. Se realizaron dos experimentos independientes y los datos se analizaron por separado. El compuesto del Ejemplo 10 parecía proporcionar una reducción estadísticamente significativa del dolor en comparación con el grupo de control con vehículo a 25 mg/kg.

Se cogieron las patas al final de cada experimento (6 horas) y se midió el nivel de PGE2, LTB4 y TXB2 en los exudados. Los niveles de PGE2 en la pata se inhibieron significativamente por el compuesto del Ejemplo 10 (a 25 mg/kg) y por los controles de celecoxib y naproxeno. Los niveles de TXB2 también se inhibieron significativamente por celecoxib, sin embargo, la inhibición con el compuesto del Ejemplo 10 y naproxeno fue mayor que la inhibición con celecoxib, lo que sugiere un componente dependiente de COX-1 para la síntesis. Como era de esperar, los niveles de LTB4 se inhibieron significativamente por el compuesto del Ejemplo 10, pero hubo pruebas de cambio de sustrato a la ruta de 5-lipoxigenasa, ya que los niveles aumentaron realmente con naproxeno y celecoxib.

En resumen, el compuesto del Ejemplo 10 era activo en modelos de osteoartritis, artritis reumatoide y dolor. El compuesto inhibía significativamente el edema a una dosis de 3 mg/kg y estaba al 50% del efecto máximo a ∼ 7,5 mg/kg en el modelo de edema de pata inducido por carragenina. El tratamiento diario con el compuesto del Ejemplo 10 (100 mg/kg BID) durante 28 días produjo una reducción significativa de la enfermedad en el modelo semi-terapéutico de artritis inducida por colágeno basado tanto en la evaluación clínica como en la evaluación histológica. El compuesto también fue eficaz a 25 mg/kg en el modelo CFA de hiperalgesia.

El compuesto del Ejemplo 10 también fue eficaz en la inhibición de la producción tanto de prostaglandinas como de leucotrienos usando modelos in vivo. La producción de PGE2 dependiente de COX-2, tromboxano dependiente de COX-1 y leucotrieno B4 dependiente de 5LO se inhibió en patas expuestas a CFA. Efecto del Compuesto del Ejemplo 10 en Modelos de Asma de Roedor y Oveja

El asma se ha definido como un trastorno inflamatorio crónico de las vías respiratorias en el que intervienen muchas células y elementos celulares. En individuos susceptibles, esta inflamación produce episodios recurrentes o persistentes de respiración sibilante, falta de aliento, opresión en el pecho y tos, particularmente por la noche o por la mañana temprano. Estos episodios normalmente están asociados con una obstrucción del flujo de aire generalizada pero variable, que con frecuencia se resuelve espontáneamente o con tratamiento. La inflamación también produce un aumento asociado en la hiperrespuesta bronquial existente a una diversidad de estímulos. Los modelos preclínicos de asma han proporcionado una nueva percepción de los mecanismos subyacentes de patología de enfermedad y han sido instrumentales en el desarrollo de agentes terapéuticos para el asma. En particular, los modelos de roedores de inflamación pulmonar inducida por alérgeno son útiles para la evaluación in vivo de compuestos que inhiben la inflamación asociada con el asma alérgica y se han usado considerablemente para evaluar la eficacia de glucocorticoides, antagonistas de receptores de leucotrienos, inhibidores de 5-LO e inhibidores de fosfodiesterasa 4 (véase Kumar, R. K. y col. J Pharmacol Exp Ther. 2003; 307: 349-355; Wu, A. Y. y col. Clin Exp Allergy. 2003; 33: 359-366; Bell, R. L. y col., J Pharmacol Exp Ther. 1997; 280: 1366-1373; y Henderson, W. R., Jr., y col., J. Exp Med. 1996; 184: 1483-1494).

El compuesto del Ejemplo 10 se ensayó tanto en modelos de rata como en modelos de ratón de inflamación pulmonar inducida por alérgeno.

Además de los modelos de inflamación pulmonar inducida por alérgeno en roedores, con frecuencia se evalúan cambios inducidos por alérgeno en la función pulmonar en ovejas alérgicas. Las ovejas sensibilizadas a áscaris que se exponen a través de las vías respiratorias con el antígeno de Ascaris suum presentan características de estrechamiento reversible de las vías respiratorias y AHR. Los estudios realizados en este modelo animal presentan fuertes indicios de que la liberación de metabolitos del ácido araquidónico juega un papel importante en el desarrollo de respuestas bronquiales tardías a la exposición a antígenos (véase Abraham, W. M., y col., Respiration. 1989; 56: 48-56). De esta manera, el compuesto del Ejemplo 10 se evaluó con respecto a los efectos sobre cambios inducidos por alérgeno en la función pulmonar en un modelo de asma de oveja. Modelo de Inflamación Pulmonar Inducida por Antígeno en Rata

La eficacia del compuesto del Ejemplo 10 se evaluó en un modelo de rata Brown Norway en el que se expusieron animales sensibilizados a ovalbúmina (OVA) a través de las vías respiratorias con un aerosol de ovalbúmina (OVA) los días 1 y 2. Las ratas sensibilizadas a OVA se expusieron a través del aerosol el día 1 y el día 2. El compuesto del Ejemplo 10 se administró a 30 mg/kg PO BID 1 hora antes de la exposición y 10 horas después de la exposición durante el periodo de exposición de 2 días. Se administró dexametasona a 3 mg/kg IP 1 hora antes de la exposición el día 1 y el día 2. Los animales se sacrificaron el día 3 y las cavidades broncoalveolares se lavaron para el análisis de la entrada de células. La administración oral BID a 30 mg/kg durante el periodo de exposición de 2 días inhibió de una forma estadísticamente significativa la entrada de eosinófilos en el fluido de lavado broncoalveolar (BALF) en los 8 estudios independientes. El compuesto del Ejemplo 10 también atenuó de una forma estadísticamente significativa el número total de células inflamatorias dentro del BALF a la dosis ensayada, pero no tuvo ningún efecto significativo sobre la entrada de linfocitos o neutrófilos en este modelo.

Efecto del Compuesto del Ejemplo 10 en un Modelo de Oveja de Broncoconstricción en Fase Temprana y Tardía Inducida por Antígeno y AHR

El estrechamiento reversible de las vías respiratorias inducido por alérgeno y la AHR son dos características principales del asma alérgica que pueden examinarse in vivo en un modelo de asma de oveja. Los estudios realizados en este modelo animal presentan fuertes pruebas de que la liberación de metabolitos del ácido araquidónico juega un papel importante en el desarrollo de respuestas bronquiales tardías a la exposición al antígeno (véase Abraham, W.M., y col., Respiration. 1989; 56: 48-56). La liberación de leucotrienos a lo largo de la ruta LO durante la constricción bronquial aguda después de la inhalación de antígeno de Ascaris suum representa el factor clave para la iniciación de los acontecimientos posteriores, particularmente la respuesta de fase tardía y la hiperreactiviad bronquial. El inhibidor de 5-LO zileuton bloquea las respuestas de las vías respiratorias tardías inducidas por antígeno, inflamación y AHR en este modelo, mientras que una infusión IV continua del antagonista selectivo del receptor de LTD4, montelukast, atenúa las respuestas asmáticas tanto de fase temprana como de fase tardía (véase Abraham, W.M., y col., Eur J Pharmacol 1992; 217: 119126; Jones, T.R. y col., Can J Physiol Pharmacol. 1995; 73: 191-201). Además, la administración oral de un inhibidor doble de LTD4/TXB2 puede inhibir la respuesta tanto en fase tardía como en fase temprana, así como la AHR a carbacol e histamina (véase Abraham, W.M., y col., J Pharmacol Exp Ther. 1988; 247: 1004-1011). El PAF también se ha implicado en la respuesta de fase tardía en este modelo proporcionando un apoyo adicional al concepto de que un bloqueo más completo de los mediadores lipídicos por un antagonista de cPLA2α puede proporcionar una mejor eficacia clínica en comparación con los anti-leucotrienos actuales (véase Abraham, W.M., y col., J Appl Physiol. 1989; 66: 2351-2357).

El compuesto del Ejemplo 10 se administró a 3 mg/kg BID (PO) 24 horas antes de la exposición, 2 horas antes de la exposición y 8 horas después de la exposición. Se determinó el porcentaje de aumento medio en la resistencia de las vías respiratorias para 3 ovejas individuales durante el periodo de 8 horas siguiente. Se observó un bloqueo completo de la respuesta asmática tardía

Al día siguiente, se evaluó la hiperrespuesta de las vías respiratorias (AHR) en estas mismas ovejas tratadas determinando la concentración de carbacol acumulativa que aumentaba la resistencia pulmonar específica en un 400%. El tratamiento con el compuesto del Ejemplo 10 tuvo como resultado un bloqueo completo de la hiperrespuesta de las vías respiratorias. En un régimen de dosificación prolongado, el compuesto del Ejemplo 10 se administró a 3 mg/kg PO BID durante 4 días antes de la exposición, 2 horas antes de la exposición el quinto día y 8 horas después de la exposición.

Se determinó el porcentaje medio de aumento en resistencia de las vías respiratorias para 5 ovejas individuales durante el periodo de 8 horas siguiente y en este régimen de dosificación más extendido, hubo una inhibición modesta pero estadísticamente significativa de la respuesta asmática temprana además de un bloqueo completo de la respuesta en fase tardía y un bloqueo completo de AHR a carbacol aerosolizado.

Los datos anteriores muestran que el compuesto del Ejemplo 10 es un potente inhibidor de la inflamación pulmonar inducida por alérgeno, broncoconstricción y AHR en modelos animales de asma.

Los compuestos de la invención inhiben la actividad de cPLA2 que se requiere para suministrar sustrato de ácido araquidónico a la ciclooxigenasa-1 o 2 y 5-lipoxigenasa, que a su vez inician la producción de prostaglandinas y leucotrienos respectivamente. Además, la actividad de cPLA2 es esencial para producir el lisofosfolípido que es el precursor del PAF. De esta manera, estos compuestos son útiles en el tratamiento y prevención de estados de enfermedad en los que están implicados leucotrienos, prostaglandinas o PAF. Además, en enfermedades en las que intervienen más de uno de estos agentes, sería de esperar que un inhibidor de cPLA2 fuera más eficaz que antagonistas del receptor de PAF, prostaglandinas o leucotrienos y también más eficaz que los inhibidores de ciclooxigenasa o 5-lipoxigenasa.

Por lo tanto, los compuestos, composiciones farmacéuticas y regímenes de la presente invención son útiles en el tratamiento y prevención de los trastornos tratados por inhibidores de la ciclooxigenasa-2, ciclooxigenasa-1 y lipoxigenasa y también antagonistas de los receptores para PAF, leucotrienos o prostaglandinas. Las enfermedades que pueden tratarse por los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación: trastornos pulmonares que incluyen enfermedades tales como asma, bronquitis crónica y enfermedades obstructivas de las vías respiratorias relacionadas; alergias y reacciones alérgicas tales como rinitis alérgica, dermatitis de contacto, conjuntivitis alérgica y similares; inflamación tal como artritis o enfermedades inflamatorias del intestino, trastornos de la piel tales como psoriasis, eccema atópico, acné, lesiones UV, quemaduras y dermatitis; trastornos cardiovasculares tales como aterosclerosis, angina, isquemia de miocardio, hipertensión, agregación plaquetaria, y similares; e insuficiencia renal inducida por agentes inmunológicos o químicos. Los fármacos también pueden ser citoprotectores, previniendo lesiones en la mucosa gastrointestinal por agentes nocivos. Los compuestos también serán útiles en el tratamiento del síndrome de insuficiencia respiratoria en adultos, choque endotóxico y lesiones inducidas por isquemia, incluyendo lesiones miocárdicas o cerebrales.

Los procedimientos de tratamiento, inhibición, alivio o mitigación del asma incluyen los del Asma Extrínseca (también conocida como Asma Alérgica o Asma Atópica), Asma Intrínseca (también conocida como Asma No Alérgica o Asma No Atópica) o combinaciones de ambas, que se han denominado Asma Mixta. Los procedimientos para los que experimentan o son propensos a padecer Asma Extrínseca o Alérgica incluyen incidentes producidos o asociados con muchos alérgenos tales como pólenes, esporas, pastos o hierbas, caspa de mascotas, polvo, ácaros etc. Como los alérgenos y otros irritantes se presentan en diversos puntos a lo largo del año, estos tipos de incidentes también se denominan Asma Estacional. También se incluyen en el grupo de Asmas Extrínsecas las asmas bronquiales y la aspergilosis broncopulmonar alérgica.

Las Asmas Intrínsecas que pueden tratarse o aliviarse por los procedimientos anteriores incluyen las producidas por agentes infecciosos tales como virus del resfriado y la gripe en adultos y el virus sincitial respiratorio (RSV), rinovirus e influenzavirus comunes en niños. También se incluyen las condiciones de asma que pueden producirse en algunos asmáticos por el ejercicio y/o aire frío. Los procedimientos son útiles para Asmas Intrínsecas asociadas con exposiciones industriales y ocupacionales, tales como humo, ozono, gases nocivos, dióxido de azufre, óxido nitroso, humos, incluyendo isocianatos, de pintura, plásticos, poliuretanos, barnices etc., madera, plantas u otros polvos orgánicos, etc. Los procedimientos también son útiles para incidentes asmáticos asociados con aditivos alimentarios, conservantes

o agentes farmacológicos. Son materiales comunes de estos tipos colorantes alimentarios tales como Tartrazina, conservantes tales como bisulfitos y metabisulfitos, y agentes farmacológicos tales como aspirina y antiinflamatorios no esteroideos (AINE). También se incluyen procedimientos para tratar, inhibir o aliviar los tipos de asma conocidos como Asma Silenciosa o Asma con Tos Variante.

Un procedimiento adicional de tratamiento de asma comprende administrar a un mamífero que necesita dicho tratamiento una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, como se ha descrito anteriormente, y una cantidad farmacéuticamente eficaz de uno o más agentes contra el asma adicionales.

Los agentes antiasmáticos útiles con estas combinaciones incluyen medicaciones de control a largo plazo tales como corticosteroides (glucocorticoides), cromolín sódico (cromoglicato disódico -DSCG), nedocromil, metilxantinas (tales como teofilina) y modificadores de leucotrieno. Los modificadores de leucotrieno útiles incluyen antagonistas de receptores de leucotrienos tales como zafirlukast (ACCOLATE®) y monetlukast (SINGULAIR®) e inhibidores de 5-lipoxigenasa tales como zileutón (ZYFLO®). Los corticosteroides útiles incluyen productos inhalados tales como dipropionato de Beclometasona, Budesonida, Flunisolida, Fluticasona y Triamcinolona, así como las formas de sal farmacéuticamente aceptables de los mismos. También son útiles corticosteroides sistémicos tales como prednisona, prednisolona y metilprednisolona.

También son útiles medicaciones antiasmáticas de alivio rápido tales como agonistas beta2 de acción prolongada, agonistas de beta2 de acción corta, anticolinérgicos y corticosteroides sistémicos. Los agentes β-adrenérgicos que pueden usarse incluyen epinefrina, isoproterenol, metaproterenol, terbutalina, isoetarina, albuterol, bitolterol y perbuterol. Los agentes anticolinérgicos útiles incluyen atropina (y su derivado bromuro de ipatropio) y glicopirrolato. Los compuestos de la presente invención también pueden usarse para tratar asma junto con inmunoterapias de alergia, que también se conocen en la técnica como terapias de hiposensibilización. Estos compuestos pueden administrarse de acuerdo con las dosificaciones y regímenes conocidos en la técnica.

Los agentes antiasmáticos adicionales que pueden usarse en las combinaciones de la presente invención incluyen pranlukast, anakinra, saratrodast, clorohidrato de olopatadina, cromoglicato lisetil, ramatroban, receptor de interleucina-4 (Immunex), urodilatina, colforsina daropato, salbutamol, LCB-2183, andolast, ciclesonida, budesonida, formoterol, omalizumab, tranilast, saredutant, CDP-835 (anti-IL-5 Mab), fexofenadina HCl, diclorhidrato de N-(1(Clorofenil)-1-metiletil)-3-(imidazol-1-il)propilamina (BTS-71-321), cilomilast, bimosiamosa, factor de liberación de corticotropina, clenoliximab, bromuro de tiotropio, 2H-1,2Benzoselenazina, 3,4-dihidro-4,4-dimetilo (BXT-51072), atreleutona, (R)-salbutamol, 8Metoxiquinolina-5-(N-(2,5-dicloropiridin-3-il))carboxamida (D-4418), acetónido de triamcinolona, KW-4490 (KF-19514), LAX-300 (LX-109), IDEC-152 (ST-152; anticuerpo anti-CD23), trampas para citocinas, anandamida, SRL-172, salmeterol + Fluticasona, KCA-757, ácido 2Piridinacarboxílico, 6-(2-(3,4-dietoxifenil)-4-tiazolil)-(OPC-6535), PM-56D9, salbutamol, CT2820 (inhibidores de PDEIV), beclometasona, nepadutant, fumarato de ketotifeno, DHEAS (PB-005), Pharmaprojects Nº 5163, Nº 5278 y Nº 5297, sulfato de salbutamol, EPI-2010 (EpiGenRx), mepolizumab, Benzamida, N-(5-(3-((4-clorofenil)sulfonil)propil)-2-(1H-tetrazol-5ilmetoxi)fenil)-3-(4-(1,1-dimetiletil)-2-tiazolil)metoxi)-, sal monosódica (YM-158), 2-(4etoxicarbonilaminobencil)-6-(3,4-dimetoxifenil)-2,3,4,5-tetrahidro-piridazin-3-ona Pharmaprojects (Nº 5450), Sch-205528, L-826141 (Pharmaprojects Nº 5477), Budesonida, duramicina, sal de sodio del ácido 4,4-Bis(4-(quinolin-2-ilmetoxi)fenil)pentanoico (VML-530), inhibidor de IL-9, dipropionato de beclometasona, formoterol, ciclo (MePhe-Leu-Asp-Val-D-ArgD-Arg) (ZD-7349), salbutamol, 2-(((2-acetil-4-((1-oxohexadecil)amino)fenoxi)hidroxifosfinil)oxi)N,N,N-trimetil-etanaminio, sal interna (CPR-2015), PD-168787 (CI-1018), inhibidores de catepsina S, SB-240683 (Mab anti-IL-4), BIIL-284, APC-2059, budesonida + formoterol, Bay16-9996 (antagonista de IL-4), beclometasona, GW-328267, antagonistas de VLA-4, 4-hidroxi1-metil-3-octiloxi-7-sinapinoilamino-2(1H)-quinolinona (TA-270), CpG-7909 (ProMune), DNK333A (Pharmaprojects Nº 6070), AWD-12-281, LM-1507 (LM-1484), formoterol, MOL-6131, inhibidores de catepsina S, CS-615, ibudilast, ácido 2-{N-(4-(4-Clorofenilsulfonilamino)butil)-N{3-(2-(4-ciclobutiltiazol-2-il)etil)bencil}sulfamoil}benzoico (S-36527), y ácido 2-{N-(4-(4Clorofenilsulfonilamino)butil)-N-{3-((4-isopropiltiazol-2-il)metiloxi)bencil}sulfamoil}benzoico (S36496).

Los compuestos y composiciones de la presente invención también son útiles para el tratamiento y alivio del Asma Intrínseca asociada con el reflujo gastroesofágico (GERD), que puede estimular la broncoconstricción. El GERD, junto con secreciones corporales retenidas, tos reprimida y exposición a alérgenos e irritantes en la habitación puede contribuir a afecciones asmáticas, y esta asma se han denominado colectivamente Asma Durante la Noche o Asma Nocturna. En procedimientos de tratamiento, inhibición o alivio del asma asociada con GERD, puede usarse una cantidad farmacéuticamente eficaz de los compuestos de la presente invención como se describe en el presente documento en combinación con una cantidad farmacéuticamente eficaz de un agente para tratar GERD. Estos agentes incluyen, pero sin limitación, agentes inhibidores de la bomba de protones tales como la marca PROTONIX.RTM de comprimidos de pantoprazol sódico de liberación retardada, la marca PRILOSEC.RTM de cápsulas de omeprazol de liberación retardada, la marca ACIPHEX.RTM de comprimidos de rebeprazol sódico de liberación retardada o la marca PREVACID.RTM de cápsulas de lansoprazol de liberación retardada.

Los compuestos de la presente invención pueden usarse como un agente antipirético. Los compuestos de la presente invención pueden utilizarse en procedimientos para tratar dolor, particularmente el dolor asociado con la inflamación. Los procedimientos específicos incluyen, pero sin limitación, los que sirven para tratar dolor mediado centralmente, dolor mediado periféricamente, dolor musculoesquelético, dolor lumbosacro, dolor relacionado con lesiones estructurales o de tejidos blandos, dolor relacionado con una enfermedad progresiva tal como trastornos oncológicos y degenerativos, dolor neuropático que puede incluir tanto dolor agudo, tal como lesión aguda o traumatismo, pre-y post-quirúrgico, dolor de migraña, dolor dental etc., dolores crónicos tales como afecciones de dolor neuropático de neuropatía periférica diabética, neuralgia y fibromialgia post-herpética y afecciones inflamatorias tales como osteoartritis o artritis reumatoide, secuelas de lesiones agudas o traumatismos y dolor relacionado con cáncer.

Los compuestos de la presente invención pueden usarse para aliviar, inhibir, mitigar y/o tratar trastornos artríticos en un mamífero incluyendo, pero sin limitación, artritis reumatoide, espondiloartropatías, artritis gotosa, artritis infecciosa, osteoartritis (que incluye osteoartritis erosiva y también se conoce como osteoartrosis o enfermedad degenerativa de las articulaciones

o DJD), lupus sistémico eritematoso y artritis juvenil. Cada uno de estos procedimientos comprende administrar a un mamífero que necesita dicha acción una cantidad farmacéuticamente eficaz de un indol sustituido de la presente invención, como se describe en el presente documento, o una forma de sal o éster farmacéuticamente aceptable del mismo.

Además, los compuestos de la presente invención pueden usarse para aliviar, inhibir, mitigar y/o tratar afecciones artríticas asociadas con espondilitis, incluyendo espondilitis anquilosante, artritis reactiva (síndrome de Reiter), artritis psoriásica, artritis asociada con enfermedad crónica inflamatoria del intestino y espondiloartropatía seronegativa relacionada con SIDA.

La presente invención también proporciona el uso de los compuestos anteriores para tratar, aliviar o inhibir enfermedades y trastornos reumáticos. Estos compuestos son útiles para el tratamiento de lupus eritematoso sistémico, esclerosis sistémica y formas de esclerodermia, polimiositis, dermatomiositis, vasculitis necrosante y otras vasculopatías, vasculitis de hipersensibilidad (incluyendo púrpura de Henoch-Schönlein), granulomatosis de Wegener, arteritris de células gigantes, síndrome del nódulo linfático mucocutáneo (enfermedad de Kawasaki), síndrome de Behcet, crioglobulinemia, dermatomiositis juvenil, síndrome de Sjögren, síndromes solapantes (incluyendo enfermedad mixta del tejido conectivo), polimialgia reumática, eritema nodosa, policondritis recidivante, tendinitis (tenosinovitis), tendinitis Bicipital, bursitis, bursitis del olécranon, capsulitis adhesiva del hombro (hombro congelado), dedo en gatillo y enfermedad de Whipple.

Los compuestos de la presente invención también son útiles para el tratamiento, alivio o inhibición de enfermedades metabólicas y endocrinas con estados reumáticos, incluyendo gota, seudogota, condrocalcinosis, amiloidosis, escorbuto, estados de deficiencia enzimática específica (incluyendo enfermedad de Fabry, alcaptonuria, ocronosis, síndrome de Lesch-Nyhan y enfermedad de Gaucher), hiperlipoproteinemias (tipos II, IIa y IV), síndrome de Ehlers-Danlos, síndrome de Marfan, pseudoxantoma elasticum, enfermedad de Wilson. También se pueden tratar con los presentes compuestos los estados reumáticos asociados con enfermedades endocrinas tales como diabetes mellitus, acromegalia, hiperparatiroidismo, miositis ossificans progresiva, síndromes de hipermotilidad, artrogriposis múltiple congénita y enfermedades del tiroides tales como tiroiditis, hipotiroidismo e hipertiroidismo. Los presentes compuestos también pueden usarse para afecciones reumáticas asociadas con neoplasmas tales como neoplasmas primarios (sinovioma), neoplasmas metastásicos, mieloma múltiple, leucemia y linfomas, sinovitis villonodular pigmentada, osteocondromatosis y otras. También se incluyen entre los usos de los compuestos de la presente invención el alivio de afecciones reumáticas asociadas con trastornos neuropáticos que incluyen articulaciones de Charcot, síndrome de vibración mano-brazo (también conocido como dedo blanco inducido por vibraciones o fenómeno de Raynaud), síndromes de estrés repetitivos, distrofia simpática refleja y neuropatías de compresión tales como atrapamiento periférico (incluyendo síndrome de túnel del carpo, síndrome del pronador, síndromes del opérculo torácico y síndrome de túnel del tarso), radiculopatía y estenosis espinal.

La presente invención además proporciona el compuesto de la invención para alivio, inhibición, mitigación o tratamiento de trastornos artríticos en un mamífero.

Las combinaciones para el tratamiento de trastornos artríticos pueden incluir agentes antirreumáticos disponibles en el mercado tales como, pero sin limitación, naproxeno, que está disponible en el mercado en forma de comprimidos de liberación retardada ECNAPROSYN.RTM., comprimidos DS NAPROSYN.RTM., ANAPROX.RTM. y ANAPROX.RTM. y suspensión NAPROSYN.RTM. de Roche Labs, marca CELEBREX.RTM. de comprimidos de celecoxib, marca VIOXX.RTM de rofecoxib, marca CELESTONE.RTM. de betametasona, marca CUPRAMINE.RTM. de cápsulas de penicilamina, marca DEPEN.RTM. de comprimidos de penicilamina titulables, marca DEPO-MEDROL de suspensión inyectable de acetato de metilprednisolona, comprimidos ARAVA.TM. de leflunomida, marca AZULFIDIINE ENtabs.RTM de comprimidos de liberación retardada de sulfasalazinas, marca FELDENE.RTM de cápsulas de piroxicam, comprimidos CATAFLAM.RTM. de diclofenaco potásico, comprimidos VOLTAREN.RTM. de liberación retardada de diclofenaco sódico, comprimidos VOLTAREN.RTM.-XR de liberación prolongada de diclofenaco sódico, productos ENBREL.RTM. de etanerecept (se podrían añadir otros usos biológicos en RA) y otros agentes antirreumáticos disponibles en el mercado.

También son útiles la marca GENGRAF.TM. de cápsulas de ciclosporina, la marca NEORAL.RTM de cápsulas o solución oral de ciclosporina, la marca IMURAN.RTM. de comprimidos o inyección de IV de azatioprina, la marca INDOCIN.RTM. de cápsulas, suspensión oral y supositorios de indometacina, solución oral de PEDIAPED.RTM. de fosfato sódico de prednisolona, marca PLAQUENIL.RTM. de sulfato de hidroxicloroquina, marca PRELONE.RTM. de jarabe de prednisolona, REMICADE.RTM. infliximab recombinante para inyección IV, y SOLU-MEDROL.RTM., succinato sódico de metilprednisolona para inyección.

También son útiles en las combinaciones anteriores compuestos de oro y productos útiles en el tratamiento de artritis y afecciones reumáticas tales como auranofina o inyección de tiomalato sódico de oro MYOCHRISYINE.RTM.

Cada uno de estos productos puede administrarse de acuerdo con las dosificaciones farmacéuticamente eficaces y regímenes conocidos en la técnica, tales como los descritos para los productos en el Physicians’s Desk Reference, 55 Edición, 2001, publicado por Medical Economics Co., Inc., Montvale, N.J.

Los compuestos de la presente invención también pueden administrarse con agentes analgésicos y antiinflamatorios tales como AINE y aspirina y otros salicilatos. Los ejemplos de agentes útiles incluyen ibuprofeno (MOTRIN.RTM., ADVIL.RTM.), naproxeno (NAPROSYN.RTM.), sulindac (CLINORIL.RTM.), diclofenaco (VOLTAREN.RTM.), piroxicam (FELDENE.RTM.), ketoprofeno (ORUDIS.RTM.), diflunisal (DOLOBID.RTM.), nabumetona (RELAFEN.RTM.), etodolac (LODINE.RTM.), oxaprozin (DAYPRO.RTM.), indometacina (INDOCIN.RTM.), melicoxam (MOBICOX.RTM.), valdecoxib y eterocoxib. La aspirina es antiinflamatoria cuando se administra a altas dosis, en los demás casos sólo es un agente para disminuir el dolor tal como acetaminofeno (TYLENOL.RTM.).

Los inhibidores de ciclooxigenasa 2 (COX-2) adecuados para su uso con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación 2-(4-etoxi-fenil)-3-(4metanosulfonilfenil)-pirazolo[1,5-b]piridazina, CDC-501, celecoxib, COX-189, 4-(2-oxo-3-fenil2,3-dihidrooxazol-4-il)bencenosulfonamida, CS-179, CS-502, D-1367, darbufelona, DFP, DRF4367, flosulida, JTE-522 (4-(4-ciclohexil-2-metil-5-oxazolil)-2-fluorobencenosulfonamida), L745337, L-768277, L-776967, L-783003, L-791456, L-804600, meloxicam, MK663 (etoricoxib), nimesulida, NS-398, parecoxib, 1-metilsulfonil-4-(1,1-dimetil-4-(4-fluorofenil)ciclopenta-2,4-dien3-il)benceno, 4-(1,5-dihidro-6-fluoro-7-metoxi-3-(trifluorometil)-(2)-benzotiopirano(4,3-c)pirazol1-il)bencenosulfonamida, 4,4-dimetil-2-fenil-3-(4-metilsulfonil)fenil)ciclobutenona, 4-amino-N-(4(2-fluoro-5-trifluorometil)-tiazol-2-il)-bencenosulfonamida, 1-(7-terc-butil-2,3-dihidro-3,3-dimetil5-benzo-furanil)-4-ciclopropil butan-1-ona, Pharmaprojects Nº. 6089 (Kotobuki Pharmaceutical), RS-1 13472, RWJ-63556, S-2474, S-33516, SC-299, SC-5755, valdecoxib, UR-8877, UR8813, UR-8880. Otros inhibidores de COX-2 adecuados para su uso de acuerdo con la invención incluyen parecoxib, MK663, 4-(4-ciclohexil-2-metil-5-oxazolil)-2fluorobencenosulfonamida (JTE-522), nimesulida, flosulida, DFP y 2-(4-etoxi-fenil)-3-(4metanosulfonil-fenil)-pirazolo[1,5-b]piridazina y sus sales, ésteres o solvatos fisiológicamente aceptables.

Estas composiciones también son útiles en el tratamiento de calambres menstruales, parto prematuro, tendinitis, bursitis, neuritis alérgica, infección por citomegalovirus, apoptosis, incluyendo apoptosis inducida por VIH, lumbago, y enfermedad hepática incluyendo hepatitis.

Otros usos incluyen tratamiento de la inflamación en enfermedades tales como enfermedades vasculares, migrañas, periarteritis nodosa, tiroiditis, anemia aplásica, enfermedad de Hodgkin, esclerodermia, fiebre reumática, diabetes tipo I, enfermedad de unión neuromuscular incluyendo miastenia grave, enfermedad de materia blanca incluyendo esclerosis múltiple, sarcoidosis, síndrome nefrótico, síndrome de Behcet, polimiositis, gingivitis, nefritis, hipersensibilidad, hinchazón que se produce después de una lesión incluyendo edema cerebral, isquemia de miocardio y similares. También se incluyen tratamientos de enfermedades oftálmicas tales como retinitis, conjuntivitis, retinopatías, uveítis, fotofobia ocular y lesiones agudas en el tejido ocular. Los compuestos de la presente invención serán útiles en el tratamiento de la inflamación postoperatoria incluyendo la que se produce después de una cirugía oftálmica tal como cirugía de cataratas o cirugía refractaria. También se incluyen tratamientos de inflamación pulmonar y del tracto respiratorio superior, tales como la asociada con infecciones virales y fibrosis quística, y en reabsorción ósea tal como la que acompaña a la osteoporosis. Los presentes compuestos y composiciones son útiles para el tratamiento de ciertos trastornos del sistema nervioso central distintos tales como demencias corticales, incluyendo enfermedad de Alzheimer, neurodegeneración y lesión en el sistema nervioso central debida a ictus, isquemia y traumatismo. Los compuestos de la presente invención también pueden ser útiles en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.

Los procedimientos de tratamiento de dolor comprenden administrar a un mamífero con dicho dolor una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención solo o en combinación con uno o más agentes farmacéuticamente eficaces adicionales para el tratamiento del dolor o la inflamación o la afección médica subyacente relacionada. Los ejemplos de agentes farmacéuticos que pueden combinarse con los presentes compuestos son analgésicos, agentes anti-angiogénicos y agentes anti-neoplásicos. Estos compuestos también pueden combinarse con compuestos antiepilépticos que tienen propiedades de alivio del dolor tales como gabapentina y pregabalina.

Uno de estos procedimientos de combinación comprende administrar a un mamífero que lo necesita una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención y una cantidad farmacéuticamente eficaz de un antagonista del receptor N-metil-Daspartato (NMDA) no tóxico y/o un agente que bloquee al menos una consecuencia intracelular importante de la activación del receptor NMDA. Los ejemplos de antagonistas del receptor NMDA útiles en estos procedimientos incluyen dextrometorfano, dextrorfano, amantadina y memantina o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Otro procedimiento para tratar la inflamación y trastornos inflamatorios comprende la coadministración a un mamífero que lo necesita de un inhibidor de la óxido nítrico sintasa inducida con un compuesto de la presente invención. La administración de esta combinación es útil para la administración profiláctica o terapéutica en un mamífero que experimenta o es propenso a tener un nivel anormalmente bajo de actividad de óxido nítrico sintasa (NOS), particularmente los propensos a padecer hipertensión o un riesgo elevado de hipertensión pulmonar, ictus isquémico, infarto de miocardio, insuficiencia cardiaca, enfermedad renal progresiva, trombosis, lesión de reperfusión o un trastorno degenerativo del sistema nervioso tal como enfermedad de Alzheimer, o los expuestos de forma crónica a condiciones hipóxicas.

La presente invención también incluye los compuestos del presente documento en combinación con un inhibidor proteico de interleucina-1, tal como el antagonista del receptor de IL-1 (IL-Ira), para prevenir o tratar enfermedades inflamatorias en un mamífero. Las enfermedades inflamatorias mediadas por interleucina-1 (IL-1) agudas y crónicas de interés en estos procedimientos incluyen, pero sin limitación, pancreatitis aguda; ALS; enfermedad de Alzheimer; caquexia/anorexia; asma; aterosclerosis; síndrome de fatiga crónica, fiebre; diabetes (por ejemplo, diabetes dependiente de insulina); glomerulonefritis; rechazo de injerto contra huésped; choque hemorrágico; hiperalgesia, enfermedad inflamatoria del intestino; afecciones inflamatorias de una articulación, incluyendo osteoartritis, artritis psoriásica y artritis reumatoide; lesión isquémica incluyendo isquemia cerebral (por ejemplo, lesión cerebral como resultado de traumatismo, epilepsia, hemorragia o ictus, cada una de las cuales puede conducir a una neurodegeneración); enfermedades pulmonares (por ejemplo, ARDS); mieloma múltiple; esclerosis múltiple; leucemia mielógena (por ejemplo, AML y CML) y otras leucemias; miopatías (por ejemplo, metabolismo de proteínas musculares, en sepsis); osteoporosis; enfermedad de Parkinson; dolor; parto prematuro; psoriasis; lesión de reperfusión; choque séptico; efectos secundarios de radioterapia, enfermedad articular mandibular temporal, metástasis tumoral; o una afección inflamatoria debida a una torcedura, esguince, lesión del cartílago, traumatismo, cirugía ortopédica, infección u otros procesos de enfermedad.

La fosfolipasa A2α citosólica (cPLA2α) es una enzima que se expresa de forma ubicua que preferentemente media la liberación del ácido araquidónico después de la activación celular. Los metabolitos bioactivos del ácido araquidónico, los eicosanoides, se reconocen como moduladores importantes de la señalización de las plaquetas. Los inhibidores de la ruta de eicosanoides (por ejemplo, la aspirina) reducen la formación de tromboxano A2 (TXA2), un agonista de plaquetas lábil y potente, dando como resultado la depresión de la función de las plaquetas, formación de trombos y un efecto clínico beneficioso demostrado en la reducción de la morbilidad y la mortalidad.

Los compuestos de la presente invención también pueden usarse en procedimientos veterinarios comparables de tratamiento, particularmente para el tratamiento veterinario, inhibición o alivio de la inflamación y dolor. Estos procedimientos se considerarán de un interés particular para mamíferos de compañía, tales como perros y gatos, y para su uso en mamíferos de granja, tales como vacas, caballos, mulas, burros, cabras, cerdos, ovejas, etc. Estos procedimientos pueden usarse para tratar los tipos de inflamación y dolor experimentados en medicina veterinaria incluyendo, pero sin limitación, el dolor y la inflamación asociados con artritis, imperfecciones de las articulaciones, defectos de las articulaciones relacionados con el desarrollo tales como displasia de cadera, tendinitis, inflamación de ligamentos suspensores, laminitis, curb y bursitis, o dolor o inflamación asociados con una cirugía, accidente, traumatismo o enfermedad, tal como la enfermedad de Lyme. Los presentes compuestos también pueden usarse en el tratamiento de inflamación en las vías de paso de aire, tales como en condiciones de asma, laringitis, traqueítis, bronquitis, rinitis y faringitis.

Cada uno de estos procedimientos veterinarios comprende administrar al mamífero que lo necesita una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención,

o una forma de sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Los compuestos de la presente invención pueden usarse para procedimientos humanos o veterinarios junto con otros medicamentos o suplementos de la dieta conocidos en la técnica para el tratamiento, inhibición

o alivio de la inflamación o dolor. Éstos pueden incluir aspirina (incluyendo aspirina tamponada, aspirina con Maalox y aspirina con revestimiento entérico), inhibidores de COX-2 tales como celecoxib, ácidos carboxílicos no acetilados tales como salicilato de magnesio, salicilamida o salicilato sódico, ácidos acéticos tales como diclofenaco o etodolaco, ácidos propiónicos tales como ibuprofeno, naproxeno (disponible en las marcas NAPROSYNO.RTM y EQUIPROXEN.RTM), ketoprofeno, RIMADYL.RTM (carprofeno), flunixin meglumina, ácidos fenámicos tales como ácido tolfenámico, ácido mefenámico, ácido meclofenámico (ARQUEL.RTM.) o ácido niflúmico, ácidos enólicos tales como oxifenbutazona, fenilbutazona, piroxicam o dipirona, o compuestos no ácidos tales como nabumetona. También se usan en aplicaciones veterinarias dimetilsulfóxido (DMSO), orgoteína (tal como la marca PALOSEIN.RTM. de orgoteína), glucosaminoglicanos polisulfatados o PS-GAG (tales como la marca ADEQUAN.RTM. de glucosaminoglucano polisulfatado) ácido hialurónico y sus análogos naturales y sintéticos, ketorolac trimetamina (tal como la marca TORADOL.RTM.), FELDENE.RTM. (piroxicam) o METACAM.RTM. (meloxicam).

Los suplementos dietéticos usados en aplicaciones humanas o veterinarias incluyen glucosaminas, sulfato de condroitina, metilsulfonilmetano (MSM) y ácidos grasos omega 3 y otros aceites de peces de agua fría. Los compuestos de la presente invención también pueden usarse junto con terapia física humana o veterinaria, masajes, tratamientos y regímenes quiroprácticos y de acupuntura. Cada uno de estos medicamentos y suplementos dietéticos pueden administrarse al mamífero en cuestión usando regímenes y dosificaciones eficaces conocidas en la técnica.

Claims (35)

1.

Ácido 3-{4-[(2-{5-cloro-1-(difenilmetil)-2-[2-({[2-(trifluorometil)bencil]sulfonil}amino)etil]1H-indol-3-il}etil)sulfonil]fenil}-propanoico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2.

Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

3.

Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 2, que contiene un agente antiinflamatorio adicional.

4.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso como un medicamento.

5.

El uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para tratar la inflamación producida o potenciada por prostaglandinas, leucotrienos o el factor de activación de plaquetas en un mamífero.

6.

El uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para tratar el dolor producido o potenciado por prostaglandinas, leucotrienos o el factor de activación de plaquetas en un mamífero.

7.

El uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para el tratamiento del asma en un mamífero.

8.

El uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para el tratamiento de trastornos artríticos y reumáticos en un mamífero.

9.

El uso de la reivindicación 8, en el que el trastorno es artritis reumatoide.

10.

El uso de la reivindicación 8, en el que el trastorno es osteoartritis.

11.

El uso de la reivindicación 8, en el que el trastorno es artritis juvenil.

12.

El uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en un mamífero, o prevenir la progresión de los síntomas de dicha enfermedad o trastorno, en el que la enfermedad o trastorno se selecciona entre el grupo que consiste en ictus, aterosclerosis, esclerosis múltiple, enfermedad de Parkinson, lesión del sistema nervioso central derivada de ictus, lesión del sistema nervioso central derivada de isquemia y lesión del sistema nervioso central derivada de traumatismo.

13.

El uso de la reivindicación 12, en el que la enfermedad o trastorno es ictus.

14.

El uso de la reivindicación 12, en el que la enfermedad o trastorno es aterosclerosis.

15.

El uso de la reivindicación 12, en el que la enfermedad o trastorno es esclerosis múltiple.

16.

El uso de la reivindicación 12, en el que la enfermedad o trastorno es la enfermedad de Parkinson.

17.

El uso de la reivindicación 12, en el que la enfermedad o trastorno es lesión del sistema nervioso central derivada de ictus, isquemia o traumatismo.

18.

El uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir la trombosis venosa o arterial en un mamífero, o prevenir la progresión de un síntoma de dicha trombosis.

19.

El uso de la reivindicación 18, en el que la trombosis es aterotrombosis.

20.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para el tratamiento de la inflamación producida o potenciada por prostaglandinas, leucotrienos

o el factor de activación de plaquetas en un mamífero.

21.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para el tratamiento del dolor producido o potenciado por prostaglandinas, leucotrienos o el factor de activación de plaquetas en un mamífero.

22.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para el tratamiento del asma en un mamífero.

23.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para el tratamiento de trastornos artríticos y reumáticos en un mamífero.

24.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para el tratamiento de artritis reumatoide.

25.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para el tratamiento de osteoartritis.

26.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para el tratamiento de artritis juvenil.

27.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en un mamífero, o prevenir la progresión de los síntomas de dicha enfermedad o trastorno, en el que la enfermedad o trastorno se selecciona entre el grupo que consiste en ictus, aterosclerosis, esclerosis múltiple, enfermedad de Parkinson, lesión del sistema nervioso central derivada de ictus, lesión del sistema nervioso central derivada de isquemia y lesión del sistema nervioso central derivada de traumatismo.

28.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en un mamífero, o prevenir la progresión de los síntomas de dicha enfermedad o trastorno, en el que la enfermedad o trastorno es ictus.

29.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en un mamífero, o prevenir la progresión de los síntomas de dicha enfermedad o trastorno, en el que la enfermedad o trastorno es aterosclerosis.

30.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en un mamífero, o prevenir la progresión de los síntomas de dicha enfermedad o trastorno, en el que la enfermedad o trastorno es esclerosis múltiple.

31.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en un mamífero, o prevenir la progresión de los síntomas de dicha enfermedad o trastorno, en el que la enfermedad o trastorno es enfermedad de Parkinson.

32.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno en un mamífero, o prevenir la progresión de los síntomas de dicha enfermedad o trastorno, en el que la enfermedad o trastorno es lesión del sistema nervioso central derivada de ictus, isquemia o traumatismo.

33.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para tratar o prevenir la trombosis venosa o arterial en un mamífero, o prevenir la progresión de un síntoma de dicha trombosis.

34.

El compuesto o composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para tratar o prevenir la trombosis venosa o arterial en un mamífero, o prevenir la progresión de un síntoma de dicha trombosis, en el que la trombosis es aterotrombosis.

35.

El uso del compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un agente contra el asma adicional, en la preparación de un medicamento para el tratamiento del asma.