BRPI0611154A2 - derivados de 4-(piridin-3-il)-2-(piridin-2-il)-1,2-dihidro-3h-pirazol-3-on a como inibidores especìficos das hif-prolil-4-hidroxilases para o tratamento de doenças cardiovasculares e hematológicas - Google Patents

derivados de 4-(piridin-3-il)-2-(piridin-2-il)-1,2-dihidro-3h-pirazol-3-on a como inibidores especìficos das hif-prolil-4-hidroxilases para o tratamento de doenças cardiovasculares e hematológicas Download PDF

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BRPI0611154A2 BRPI0611154-8A BRPI0611154A BRPI0611154A2 BR PI0611154 A2 BRPI0611154 A2 BR PI0611154A2 BR PI0611154 A BRPI0611154 A BR PI0611154A BR PI0611154 A2 BRPI0611154 A2 BR PI0611154A2
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hydroxy
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Ingo Flamme
Jens-Kerim Ergueden
Felix Oehme
Kai Thede
Gunter Karig
Alexander Kuhl
Hanno Wild
Joachim Schuhmacher
Peter Kolkhof
Lars Baerfacker
Joachim Huetter
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Bayer Healthcare Ag
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Abstract

O objeto da presente invenção é a disponibilização de novos compostos, que podem ser utilizados para o tratamento de doenças, especialmente de doenças cardiovasculares e hematológicas. No âmbito da presente invenção, descrevem-se, daqui em diante compostos, que atuam como inibidores específicos das HIF-prolil-4-hidroxilases e que, devido a esse mecanismo de ação específico in vivo, causam a indução de genes alvo HIF, tal como por exemplo, eritropoetina e dos processos biológicos causados desse modo, tal como por exemplo, eritropoese, após administração parenteral ou oral. O objeto da presente invenção são compostos da fórmula geral (1), na qual A representa OH ou N, R^1^ representa um substituinte selecionado da série (C~1~-C~6~)-alquila, trifluormetila, halogênio, ciano, nitro, hidróxi, (C~1~ -C~6~)-alcóxi, amina, (C~1~-C~6~)-alcoxicarbonila, hidroxicarbonila e -C(=O)-NH-R^4^, R^2^ representa um substituinte selecionado da série halogênio, ciano, nitro, (C~1~-C~6~)-alquila, trifluormetila, hidróxi, (C~1~-C~6~)-alcóxi, trifluormetóxi, amina, hidroxicarbonila e -C(=O)-NH-R^8^, m representa o número 0, 1 ou 2, n representa o número 0, 1, 2 ou 3, sendo que, no caso de R1 ou ocorrer várias vezes, seus significados em cada caso podem ser iguais ou diferentes e R3 representa hidrogênio, (C1-C6)-alquila ou (03-07)-cicloalquila, bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERIVADOSDE 4-(PIRIDIN-3-IL)-2-(PIRIDIN-2-IL)-1,2-DIHIDRO-3h-PIRAZOL-3-ONACOMO INIBIDORES ESPECÍFICOS DAS HIF-PROLIL-4-HIDROXILASESPARA O TRATAMENTO DE DOENÇAS CARDIOVASCULARES EHEMATOLÓGICAS".
A presente invenção refere-se às novas dipiridil-dihidropirazolonas, processos para a sua produção, sua utilização para otratamento e/ou profilaxia de doenças, bem como sua utilização para aprodução de medicamentos para o tratamento e/ou profilaxia de doenças,especialmente de doenças cardiovasculares e hematológicas, de doençasrenais, bem como para a promoção da cura de feridas.
Uma provisão insuficiente do organismo humano ou de suaspartes com oxigênio, que ou através de sua duração e/ou sua extensãoprejudica uma função normal do organismo ou de suas partes ou esgotacompletamente sua função, é designada como hipóxia. Uma hipóxia podeser provocada por uma diminuição do oxigênio disponível no ar derespiração (por exemplo, na permanência em grandes alturas), devido aperturbações da respiração externa (por exemplo, em conseqüência dafunção perturbada dos pulmões ou congestão das vias respiratórias), devidoa uma diminuição do volume de tempo cardíaco (por exemplo, nainsuficiência cardíaca, em uma sobrecarga aguda do ventrículo direito naembolia pulmonar), devido a uma capacidade baixa demais para transportaroxigênio do sangue (em conseqüência de uma pobreza de sangue (anemia)ou intoxicação, por exemplo, com monóxido de carbono), limitada localmentepor uma menor circulação de sangue em conseqüência de oclusões devasos (estados de isquemia tipicamente, por exemplo, do coração, dasextremidades inferiores ou do cérebro, macro- e microangiopatia diabética)ou também devido à maior necessidade de oxigênio do tecido (por exemplo,em conseqüência de um maior trabalho muscular ou inflamações locais)[Eder, Gedigk (editor), Allgemeine Pathologie und pathologische Anatomie,33a edição, Springer Verlag, Berlin, 1990].
O organismo humano é condicionalmente capaz, de se adaptarde maneira aguda e crônica a situações de baixa provisão de oxigênio. Alémde uma resposta imediata, a qual inclui, entre outros, através demecanismos de controle vegetativo-nervosos, um aumento de volume dotempo cardíaco e de volume do tempo de respiração, bem como umadilatação local de vasos sangüíneos, a hipóxia traz consigo uma modificaçãoda transcrição de inúmeros genes. A função dos produtos do gene serve,neste caso, para a compensação da deficiência de oxigênio. Desse modo,várias enzimas da glicólise e do transportador de glicose 1 são exprimidascom maior intensidade, pelo que a obtenção anaeróbica de ATP aumenta epossibilita uma sobrevida da falta de oxigênio [Schidt, Thes (editor),Physiologie des Mertschen, 27a edição, Springer Verlag1 Berlin, 1997; Lóffler,Petrides (editor), Biochemie und Pathobiochemie, T edição, Springer Verlag,Berlin, 2003].
Além disso, a hipóxia leva à intensa expressão do fator decrescimento das células endoteliais vasculares, VEGF, pelo que aregeneração de vasos sangüíneos (angiogênese) é estimulada nos tecidoshipóxicos. Por esse meio, a circulação do sangue de tecidos isquêmicosmelhora a longo prazo. Em diversas doenças cardiovasculares e doençasvasculares oclusivas essa regulação contrária realiza-se evidentementeapenas de maneira muito insuficiente [sinopse em: Simons und Ware,Therapeutic angiogenesis in cardiovascular disease, Nat. Rev. Drug. Discov.2(11), 863-71 (2003)].
Além disso, na hipóxia sistêmica, o hormônio peptídeoeritropoietina formado principalmente nos fibroblastos intersticiais dos rins éexprimido com maior intensidade. Por esse meio, a formação de hemáciasna medula óssea é estimulada e com isso, aumentada a capacidade detransporte de oxigênio do sangue. Este efeito foi e é utilizado pordesportistas de alto rendimento no chamado treinamento ou resistência.
Uma diminuição da capacidade de transporte de oxigênio do sangue, porexemplo, em conseqüência de uma anemia hemorrágica provocanormalmente um aumento da produção de eritropoietina no rim. Emdeterminadas formas da anemia, esse mecanismo de regulação pode serperturbado ou seu valor teórico ajustado mais baixo. Desse modo, porexemplo, no caso de pacientes, que sofrem de uma insuficiência renal, aeritropoietina é produzida, na verdade, no parênquima renal, no entanto, emrelação à capacidade de transporte de oxigênio do sangue, em quantidadesnitidamente menores, o que tem como conseqüência uma chamada anemiarenal. Especialmente a anemia renal, mas também anemias devido atumores e infecção por HIV1 são usualmente tratadas através deadministração parenteral de eritropoietina humana recombinante (rhEPO).
Atualmente, não existe nenhuma terapia alternativa para essa terapiadispendiosa com um medicamento disponível por via oral [sinopses en:Eckardt, The potential of erythropoietin and related strategies to stimulateerythropoiesis, Curr. Opin. Investig. Drugs 2(8), 1081-5 (2001); Bems,Should the target hemoglobin forpatients with chronic kidney disease treatedwith erythropoietic replacement therapy be changed? Semin. Dial. 18 (1), 22-9 (2005)]. Pesquisas mais recentes confirmam, que a eritropoietina, além deseu crescente efeito de eritropoese, também exerce um efeito protetor(antiapoptótico), independente deste sobre tecidos hipóxicos, especialmenteo coração e o cérebro. Além disso, uma terapia com eritropoietina deestudos mais recentes minimiza o nível médio de gravidade da morbidadeem conseqüência de pacientes com insuficiência cardíaca [sinopse em:Caiola und Cheng, Use of erythropoietin in heart failure management, Ann.Pharmacother. 38 (12), 2145-9 (2004); Katz; Mechanisms and treatment ofanemia in chronic heart failure, Congest. Heart. Fai!. 10 (5), 243-7 (2004)].
Aos genes induzidos por hipóxia descritos acima é comum, queo aumento de sua expressão sob hipóxia seja provocado pelo chamado fatorde transcrição induzível por hipóxia (HIF). No caso de HIF trata-se de umfator de transcrição heterodímero, que consiste em uma subunidade alfa euma beta. Foram descritas três isoformas HIF-alfa, das quais HIF-1 alfa eHIF-2 alfa são altamente homólogos e significativos para a expressão dogene induzida pela hipóxia. Enquanto a subunidade beta (das quais foramdescritas 2 isoformas) também designada como ARNT (aryl hydrocarbonreceptor nuclear translocator) é exprimida constitutivamente, a expressão dasubunidade alfa depende do teor de oxigênio na célula. Sob normóxia, aproteína HIF-alfa é poliubiquitinada e em seguida, degradada de maneiraproteasomal. Sob hipóxia, essa degradação é inibida, de modo que o HIF-alfa pode ser dimerisado com ARNT e ativar seus genes alvo. Nesse caso, oHIF-dímero liga-se aos chamados elementos responsáveis pela hipóxia(HRE) nas seqüências reguladoras de seus genes alvo. Os HRE sãodefinidos por uma seqüência de consenso. HRE funcionais sãocomprovados nos elementos reguladores de inúmeros genes induzidos pelahipóxia [sinopses em: Semenza, Hypoxia-inductible factor 1: oxygenhomeostasis and disease pathophysiology, Trends Mol. Med. 7 (8), 345-50(2001); Wenger und Gassmann, Oxygen(es) and the hypoxia-induciblefactor-1, Biol. Chem. 378 (7), 609-16 (1997)].
O mecanismo molecular, no qual se baseia essa regulação deHIF-alfa, foi esclarecido pelos trabalhos de vários grupos de pesquisadoresindependentes uns dos outros. O mecanismo é conservado de espécie paraespécie: HIF-alfa é hidroxilado por uma subclasse designada com PHD ouEGLN de prolil-4-hidroxilases dependente de oxigênio em dois radicaisprolila específicos (P402 e P564) da subunidade HIF-1 -alfa humana). Nocaso das HIF-prolil-4-hidroxilases trata-se de dioxigenases dependentes deferro, que reagem 2-oxoglutarato [Epstein e outros, C. elegans EGL-9 andmammalian homologs define a family of dioxygenases that regulate HIF byprolyl hydroxylation, Cell 107 (I), 43-54 (2001); Bruick und McKnight, Aconserved family of prolyl-4-hydroxylases that modify HIF1 Science 294(5545), 1337-40 (2001); Ivan e outros, Biochemical purification andpharmacological inhibition of a mammalian prolyl hydroxylase acting onhypoxia-inducible factor, Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A. 99 (21), 13459-64(2002)]. As enzimas foram anotadas em 2001 pela primeira vez como prolil-hidroxilases [Aravind e Koonin, The DNA-repair protein AIkB, EGL-9 andIeprecan define new families of 2-oxoglutarate- and iron-dependentdioxygenases, Genome Biol. 2 (3), research0007.1-0007.8, Epub 19 defevereiro de 2001].
A proteína supressora de tumor pVHL liga-se à subunidade HIF-alfa prolil-hidroxilada, a qual, junto com Elongin BeC forma o chamadocomplexo VBC1 que adapta à subunidade HIF-alfa a uma ubiquitin-ligase E3.Visto que a prolil-4-hidroxilação da subunidade HIF-alfa e sua degradaçãoposterior é efetuada em função da concentração intracelular do oxigênio, asHIF-prolil-4-hidroxilases também foram designadas como sensor de oxigêniocelular. Foram identificadas três isoformas dessas enzimas: EGLN1/PHD2,EGLN2/PHD1 e EGLN3/PHD3. Duas dessas enzimas (EGLN2/PHD1 eEGLN3/PHD3) são mesmo induzidas transcripcionalmente com hipóxia eprovavelmente são responsáveis pela diminuição do nível de HIF-alfa a serconsiderado com hipóxia crônica [sinopse em: Schofield e Ratcliffe, Oxygensensing by HIF hydroxylases, Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 5 (5), 343-54 (2004)].
Uma inibição farmacológica seletiva das HIF-prolil-4-hidroxilasesaponta para o aumento da expressão de gene do gene alvo dependente deHIF e com isso, é útil para a terapia de inúmeras síndromes de doenças.Especialmente no caso de doenças do sistema cardiovascular, espera-seuma melhoria do curso das doenças a partir da indução de novos vasossangüíneos, bem como da mudança da situação metabólica de órgãosisquêmicos da produção de ATP aeróbico para anaeróbico. Uma melhoria davascularização de feridas crônicas promove o processo de cura,especialmente de Ulcera cruris mal curada e outras doenças crônicas dapele.
A indução de eritropoietina endógena em determinadas formasde doenças, especialmente em pacientes com anemia renal, é igualmenteum objetivo terapêutico a ser almejado.
Os inibidores de HIF-prolil-4-hidroxilase descritos na literaturacientífica não preenchem as exigências a serem impostas a ummedicamento. Nesse caso, trata-se ou de análogos de oxoglutaratocompetitivos (tal como, por exemplo, N-oxalilglicina), que são caracterizadospor sua potência de ação muito baixa e consequentemente, até agora nãomostraram nenhum efeito em modelos in vivo no sentido de uma indução degenes alvo HlF. Ou então, trata-se de formadores de complexo de ferro(queladores), tal como desferroxamina, que atuam como inibidores nãoespecíficos de dioxigenases contendo ferro e, embora levem a uma induçãodos órgãos alvo, tal como por exemplo, eritropoietina, in vivo, evidentementeeles reagem contra a eritropoese através da complexação do ferrodisponível.
O objeto da presente invenção é a disponibilização de novoscompostos, que podem ser utilizados para o tratamento de doenças,especialmente de doenças cardiovasculares e hematológicas.
No âmbito da presente invenção, a partir de agora, são descritoscompostos, que atuam como inibidores específicos das HIF-prolil-4-hidroxilases e com base nesse mecanismo de ação específico in vivo, apósadministração parenteral ou oral, causam a indução de genes alvo HlF, talcomo, por exemplo, eritropoetina e dos processos biológicos provocadosdesta maneira, tal como, por exemplo, eritropoese.
2-heteroaril-4-aril-1,2-dihidropirazolonas com efeito bactericidae/ou fungicida são publicadas na EP 165.448 e EP 212.281. A utilização de2-heteroaril-4-aril-1,2-dihidropirazolonas como inibidores de Iipoxigenasepara o tratamento de doenças das vias respiratórias, cardiovasculares einflamatórias é reivindicada na EP 183.159. 2,4-difenil-1,2-dihidropirazolonascom atividade herbicida são descritas na DE 2.651.008. Na Helv. Chim. Acta49 (1), 272-280 (1996) relata-se sobre a preparação e propriedadesfarmacológicas de determinadas 2-piridil-1,2-dihidropirazolonas. Na WO96/12706, WO 00/51989 e WO 03/074550 são reivindicados compostos comestrutura parcial de dihidropirazolona para o tratamento de diversasdoenças :
O objeto da presente invenção são compostos da fórmula geral
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na qualA representa CH ou Ν,
R1 representa um substituinte selecionado da série (Ci-C6)-alquila,trifluormetila, halogênio, ciano, nitro, hidróxi, (CrC6)-alcóxi, amina, (CrCe)-alcoxicarbonila, hidroxicarbonila e -C(=0)-NH-R4, em que(Ci-C6)-alquila, por seu lado, pode ser substituída por hidróxi, (Ci-C4)-alcóxi,amina, mono-(CrC4)-alquilamina, di-(CrC4)-alquilamina ou com um grupoda fórmula -NH-C(=0)-R5, -NH-C(=0)-NH-R6 ou -NH-SO2-R7, em queR5 representa (CrC6)-alquila, que pode ser substituída por hidróxi, (C1-C4)-alcóxi, fenila ou heteroarila com 5 ou 6 membros, ou representa fenila, sendoque a fenila e heteroarila, por seu lado, podem ser substituídas em cadacaso uma até três vezes, igual ou diferente, com halogênio, ciano, (C1-C4)-alquila, hidróxi, (CrC4)-alcóxi, trifluormetila ou trifluormetóxi,R6 representa (CrC6)-alquila, que pode ser substituída por hidróxi ou (C1-C4)-alcóxie
R7 representa (CrC6)-alquilae
R4 representa hidrogênio ou (CrC6)-alquila, que pode ser substituída porhidróxi, (CrC4)-alcóxi ou fenila, sendo que a fenila, por seu lado, pode sersubstituída por halogênio, ciano, (CrC4)-alquila, (CrC4)-alcóxí, trifuormetilaou trifluormetóxi,
R2 representa um substituinte selecionado da série halogênio, ciano, nitro,(CrC6)-alquila, trifluormetila, hidróxi, (CrCe)-alcóxi, trifluormetóxi, amina,hidroxicarbonila e -C(=0)-NH-R8, em que (CrC6)-alquila e (CrC6)-alcóxi,por seu lado, podem ser substituídos com hidróxie
R8 representa hidrogênio ou (CrC4)-alquila,
m representa o número 0, 1 ou 2,
η representa o número 0, 1, 2 ou 3,sendo que, no caso de R1 ou R2 ocorrerem várias vezes, seus significadospodem ser iguais em cada caso ou diferenteseR3 representa hidrogênio, (CrC6)-alquila ou (C3-C7)-cicloalquila,bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
Compostos de acordo com a invenção, são os compostos dafórmula (I) e seus sais, solvatos e solvatos dos sais, os compostosabrangidos pela fórmula (I) das fórmulas mencionadas a seguir e seus sais,solvatos e solvatos dos sais, bem como os compostos abrangidos pelafórmula (I), a seguir mencionados como exemplos de concretização e seussais, solvatos e solvatos dos sais, desde que no caso dos compostosabrangidos pela fórmula (I), mencionados a seguir, já não se trata de sais,solvatos e solvatos dos sais.
Os compostos de acordo com a invenção, dependendo de suaestrutura, podem existir em formas estereoisômeras (enantiômeros,diastereômeros). Por isso, a invenção abrange os enantiômeros oudiastereômeros e suas respectivas misturas. Os componentesestereoisomericamente uniformes podem ser isolados de maneira conhecidaa partir dessas misturas de enantiômeros e/ou diastereômeros.
Conquanto os compostos de acordo com a invenção podemocorrer em formas tautômeras, a presente invenção abrange todas asformas tautômeras.
Como sais no âmbito da presente invenção, preferem-se os saisfisiologicamente inofensivos dos compostos de acordo com a invenção.Também são abrangidos sais, que não são por si mesmos adequados paraaplicações farmacêuticas, no entanto, por exemplo, podem ser utilizadospara o isolamento ou purificação dos compostos de acordo com a invenção.
Sais fisiologicamente inofensivos dos compostos de acordo coma invenção, abrangem sais de adição de ácidos de ácidos minerais, ácidoscarboxílicos e ácidos sulfônicos, por exemplo, sais do ácido clorídrico, ácidobromídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metanossulfônico, ácidoetanossulfônico, ácido toluenossulfônico, ácido benzenossulfônico, ácidonaftalenodissulfônico, ácido acético, ácido trifluoracético, ácido propiônico,ácido lático, ácido tartárico, ácido málico, ácido cítrico, ácido fumárico, ácidomaléico e ácido benzóico.Sais fisiologicamente inofensivos dos compostos de acordo coma invenção, abrangem também sais de bases usuais, tais como, por exemploe preferentemente sais de metais alcalinos (por exemplo, sais de sódio epotássio), sais de metais alcalino-terrosos (por exemplo, sais de cálcio emagnésio) e sais de amônio, derivados de amoníaco ou aminas orgânicascom 1 até 16 átomos de carbono, tais como, por exemplo e preferentementeetilamina, dietilamina, trietilamina, etildiisopropilamina, monoetanolamina,dietanolamina, trietanolamina, diciclohexilamina, dimetilaminoetanol,procaína, dibenzilamina, N-metil-morfolina, arginina, lisina, etilenodiamina eN-metilpiperidina.
Como solvatos designam-se no âmbito da invenção, aquelasformas dos compostos de acordo com a invenção, os quais em estado sólidoou líquido formam um complexo através da coordenação com moléculas desolventes. Hidratos são uma forma especial dos solvatos, nos quais acoordenação é efetuada com água. Como solvatos, preferem-se os hidratosno âmbito da presente invenção.
Além disso, a presente invenção abrange também pró-fármacosdos compostos de acordo com a invenção. O termo "pró-fármacos" abrangecompostos, os quais por si mesmos podem ser biologicamente ativos ouinativos, no entanto, durante seu tempo de permanência no corpo, sãoreagidos para formar compostos de acordo com a invenção (por exemplo,metabolicamente ou hidroliticamente).
No âmbito da presente invenção, os substituintes, desde quenão especificados de outro modo, têm o seguinte significado:
(Ci-Cfi)-alquila e (CrC4)-alquila representam no âmbito dainvenção, um radical alquila em cadeia linear ou ramificada com 1 até 6 ou 1até 4 átomos de carbono. É preferido um radical alquila em cadeia linear ouramificada com 1 até 4 átomos de carbono. Por exemplo e preferencialmentesejam mencionados: metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, iso-butila,sec.-butila, terc.-butila, 1-etil-propila, n-pentila e n-hexila.
(C3-C7)-CiCloaIquiIa e (Cg-Ce)-cicloalquila representam no âmbitoda invenção, um grupo cicloalquila monocíclico saturado com 3 até 7 ou 3até 6 átomos de carbono. É preferido um radical cicloalquila com 3 até 6átomos de carbono. Por exemplo e preferencialmente, sejam mencionados:ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclohexila e cicloheptila.
(Ci-Ce)-alcóxi e (Ci-C4)-alcóxi representam no âmbito dainvenção, um radical alcóxi em cadeia linear ou ramificada com 1 até 6 ou 1até 4 átomos de carbono. É preferido um radical alcóxi em cadeia linear ouramificada com 1 até 4 átomos de carbono. Por exemplo e preferencialmentesejam mencionados: metóxi, etóxi, n-propóxi, isopropóxi, n-butóxi e terc.-butóxi.
(Ci-Ce)-alcoxicarbonila e (Ci-CUValcoxicarbonila representam noâmbito da invenção, um radical alcóxi em cadeia linear ou ramificada com 1até 6 ou 1 até 4 átomos de carbono, que está ligado através de um grupocarbonila. É preferido um radical alcoxicarbonila em cadeia linear ouramificada com 1 até 4 átomos de carbono no grupo alcóxi. Por exemplo epreferencialmente sejam mencionados: metoxicarbonila, etoxicarbonila, n-propoxicarbonila, isopropoxicarbonila e terc.-butoxicarbonila.
Mono-ÍC-i-C^-alquilamina representam no âmbito da invenção,um grupo amina com um substituinte alquila em cadeia linear ou ramificada,que apresenta 1 até 4 átomos de carbono. Por exemplo e preferencialmentesejam mencionados: metilamina, etilamina, n-propilamina, isopropilamina, n-butilamina e terc.-butilamina.
Di-(GrC4)-alquilamina representam no âmbito da invenção, umgrupo amina com dois substituintes alquila em cadeia linear ou ramificada,iguais ou diferentes, que apresentam em cada caso 1 até 4 átomos decarbono. Por exemplo e preferencialmente sejam mencionados: N1N-dimetilamina, A/,/V-dietilamina, A/-etil-/\/-metilamina, /V-metil-/V-n-propilamina,A/-isopropil-/V-metilamina, /V,A/-diisopropilamina, /V-n-butil-A/-metilamina, N-terc.-butil-A/-metilamina.
Heteroarila com 5 ou 6 membros representa no âmbito dainvenção, um heterociclo aromático (heteroarômato) com um total de 5 ou 6átomos de anel e até três heteroátomos de anel iguais ou diferentes da sérieΝ, O e/ou S, que está ligado através de um átomo de carbono de anel oueventualmente um átomo de nitrogênio de anel. Por exemplo, sejammencionados: furila, pirrolila, tienila, pirazolila, imidazolila, tiazolila, oxazolila,isoxazolila, isotiazolila, triazolila, oxadiazolila, tiadiazolila, piridila, pirimidinila,piridazinila, pirazinila, triazinila. É preferido um radical heteroarila com 5membros com até dois heteroátomos de anel da série Ν, O e/ou S, tais comopor exemplo, furila, pirrolila, tienila, pirazolila, imidazolila, tiazolila, oxazolila,isoxazolila, isotiazolila.
Haloqênio inclui no âmbito da invenção, flúor, cloro, bromo eiodo. São preferidos o flúor, cloro ou bromo.
Quando radicais são substituídos nos compostos de acordo coma invenção, os radicais, desde que não especificado de outro modo, podemser substituídos uma ou mais vezes. No âmbito da presente invenção éválido, que para todos os radicais, que ocorrem várias vezes, seu significadoseja independente uns dos outros. É preferida uma substituição com um,dois ou três substituintes iguais ou diferentes. A substituição com umsubstituinte é preferida de modo muito particular.
São preferidos compostos da fórmula (I), na qual
A representa CH ou N,
R1 representa um substituinte selecionado da série (CrC6)-alquila,trifluormetila, ciano, nitro, hidróxi, (CrC6)-alcóxi, amina, (C1-Ce)-alcoxicarbonila e hidroxicarbonila,
R2 representa um substituinte selecionado da série halogênio, ciano, nitro,(CrC6)-alquila, trifluormetila, hidróxi, (CrC6)-alcóxi, trifluormetóxi, amina ehidroxicarbonila, na qual (CrC6)-alquila e (Ci-C6)-alcóxi, por seu lado,
podem ser substituídos com hidróxi,m representa o número 0, 1 ou 2,η representa o número 0, 1, 2 ou 3,
sendo que, no caso, de R1 ou R2 ocorrerem várias vezes, seus significadospodem ser em cada caso iguais ou diferentese
R3 representa hidrogênio, (CrC6)-alquila ou (C3-C7)-cicloalquila,bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.Do mesmo modo, são preferidos compostos da fórmula (I), naqual
A representa CH,
R1 representa um substituinte selecionado da série (CrC6)-alquila, flúor,cloro, bromo e -C(=0)-NH-R4, na qual (Ci-C6)-alquila, por seu lado, pode sersubstituída por hidróxi, (CrC4)-alcóxi, amina, mono-(CrC4)-alquilamina, di-(CrC4)-alquilamina ou com um grupo da fórmula -NH-C(=0)-R5, -NH-C(=0)-NH-R6 ou -NH-SO2-R71 na qual
R5 representa (CrC6)-alquila, que pode ser substituída por hidróxi, metóxi,etóxi, fenila ou heteroarila com cinco membros ou fenila, sendo que a fenilae heteroarila, por seu lado, podem ser substituídas em cada caso uma atétrês vezes, igual ou diferente, com flúor, cloro, bromo, ciano, metila, hidróxi,metóxi, etóxi, trifluormetila ou trifluormetóxie
R6 e R7 independentes um do outro, representam (CrC6)-alquilae
R4 representa (CrC6)-alquila, que pode ser substituída por hidróxi, metóxi,etóxi ou fenila, sendo que a fenila, por seu lado, pode ser substituída porflúor, cloro, bromo, ciano, metila, metóxi, etóxi, trifluormetila ou trifluormetóxi,
R2 representa um substituinte selecionado da série flúor, cloro, bromo, ciano,(CrC6)-alquila, trifluormetila, hidroxicarbonila e -C(=0)-NH-R8, na qual (CrC6)-alquila, por seu lado, pode ser substituída por hidróxie
R8 representa (CrC4)-alquila,m representa o número O, 1 ou 2,η representa o número O, 1 ou 2,
sendo que, no caso, de R1 ou R2 ocorrerem várias vezes, seus significadospodem ser em cada caso iguais ou diferentese
R3 representa hidrogênio,
bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
Particularmente, são preferidos compostos da fórmula (I), naqual
A representa CH,
R1 representa um substituinte selecionado da série (CrC4)-alquila,trifluormetila, nitro, (C-i-C4)-alcóxi, amina e (CrC^-alcoxicarbonila,R2 representa um substituinte selecionado da série cloro, bromo, ciano, (CrC4)-alquila, trifluormetila, hidróxi, (Ci-C4)-alcóxi, trifluormetóxi e amina, sendoque (Ci-C4)-alquila e (CrC4)-alcóxi, por seu lado, podem ser substituídoscom hidróxi,
m representa o número 0 ou 1,
η representa o número 0, 1, 2 ou 3,
sendo que, no caso, de R2 ocorrer várias vezes, seus significados podem serem cada caso iguais ou diferentese
R3 representa hidrogênio ou metila,bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
Do mesmo, são particularmente preferidos os compostos dafórmula (I), na qual
A representa CH,
R1 representa um substituinte selecionado da série (Ci-C4)-alquila, flúor,cloro, bromo e -C(=0)-NH-R4, na qual (CrC4)-alquila, por seu lado, pode sersubstituída por hidróxi, amina ou com um grupo da fórmula -NH-C(=0)-R5ou -NH-C(=0)-NH-R6, na qual
R5 representa (CrC4)-alquila, que pode ser substituída por fenila oupirazolila ou fenila, sendo que a fenila e pirazolila, por seu lado, podem sersubstituídas em cada caso, uma até três vezes, igual ou diferente, com flúor,cloro, metila ou trifluormetilae
R6 representa (CrC4)-alquilae
R4 representa (CrC4)-alquila, que pode ser substituída por fenila,
R2 representa um substituinte selecionado da série cloro, bromo, ciano, (CrC4)-alquila e trifluormetila, sendo que (CrC4)-alquila, por seu lado, pode sersubstituída por hidróxi,
m representa o número 0, 1 ou 2,
η representa o número 0, 1 ou 2,
sendo que, no caso, de R1 ou R2 ocorrerem várias vezes, seus significadospodem ser em cada caso iguais ou diferentese
R3 representa hidrogênio,
bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
De particular significado são os compostos da fórmula (I-A)
<formula>formula see original document page 15</formula>
na qual
R1a representa hidrogênio, metila ou trifluormetilae
R2a, R2b e R2c são iguais ou diferentes e independentes uns dos outros,representam hidrogênio, cloro, bromo, ciano, metila, hidroximetila, metóxi ouetóxi,
bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
Do mesmo modo, são de particular significado os compostos dafórmula (I-B)
<formula>formula see original document page 15</formula>
na qual
RIA e RIB são iguais ou diferentes e independentes uns dos outros,representam hidrogênio, flúor, cloro, (CrC4)-alquila ou -C(=0)-NH-R4, naqual (CrC4)-alquila, por seu lado, pode ser substituída por hidróxi, amina oucom um grupo da fórmula -NH-C(=0)-R5, na qual
R5 representa (CrC4)-alquila, que pode ser substituída por fenila oupirazolila ou representa fenila,
sendo que a fenila e pirazolila, por seu lado, podem ser substituídas emcada caso, uma até três vezes, igual ou diferente, com flúor, cloro, metila outrifluormetilae
R4 representa um substituinte selecionado da série cloro, bromo, ciano,metila, hidroximetila ou trifluormetilae
η representa o número 0, 1 ou 2,
sendo que, no caso, de R2 ocorrer várias vezes, seus significados podem seriguais ou diferentes,
bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
As definições dos radicais mencionados isoladamente nasrespectivas combinações ou nas combinações preferidas de radicais, sãosubstituídas independentes das combinações dos radicais respectivamentemencionadas, eventualmente também por definições de radicais de outrascombinações.
De modo muito particular, são preferidas combinações de doisou mais dos âmbitos preferenciais mencionados acima.
Os derivados de 1,2-dihidropirazol-3-ona da fórmula (I) de acordo com a invenção, também podem apresentar-se na forma 1 H-pirazol-5-ol (Γ) tautômera (vide esquema 1 abaixo); as duas formas tautômeras sãoexpressamente abrangidas pela presente invenção.
Esquema 1<formula>formula see original document page 17</formula>
Outro objeto da invenção é um processo para a preparação doscompostos da fórmula (I) de acordo com a invenção, caracterizado pelo fatode se reagir compostos da fórmula (II)
<formula>formula see original document page 17</formula>
na qual R2, R3 e η têm os significados mencionados acima eZ1 representa metila ou eetila,
em um solvente inerte, eventualmente na presença de um ácido, com umcomposto da fórmula (III)
<formula>formula see original document page 17</formula>
na qual A, R1 e m apresentam os significados mencionados acima,para formar compostos da fórmula (IV)<formula>formula see original document page 18</formula>
na qual Z11-A1 R1, R2, R31 m e η apresentam os significados mencionadosacima e em seguida, ciclizá-los em um solvente inerte na presença de umabase e converter os compostos da fórmula (I) eventualmente com os (i)solventes e/ou (ii) bases ou ácidos correspondentes em seus solvatos, saise/ou solvatos dos sais.
Os compostos da fórmula (I) de acordo com a invenção, na qualR3 representa hidrogênio, também podem ser preparados, em que secondensam inicialmente compostos da fórmula (V)
<formula>formula see original document page 18</formula>
na qual Z1, R2 e η apresentam os significados mencionados acima,com um composto da fórmula (VI)
<formula>formula see original document page 18</formula>
na qual
Z1 representa metila ou etila,para formar compostos da fórmula (VII)<formula>formula see original document page 19</formula>
na qual Z1, R2 e η apresentam os significados mencionados acima,em seguida, na presença de um ácido, reagir com um composto da fórmula(III) para formar compostos da fórmula (IV-A)
<formula>formula see original document page 19</formula>
na qual Z1, A, R1, R2, m e η apresentam os significados mencionados acimae em seguida, ciclizá-los com um solvente inerte na presença de uma base.
Os compostos de acordo com a invenção, podem sereventualmente também preparados por meio de transformações seguintesde grupos funcionais de substituintes individuais, especialmente doscompostos da fórmula (I) obtidos partindo do processo acima, citados em R1e R2. Essas transformações são efetuadas por métodos usuais e abrangem,por exemplo, reações, tais como substitução nucleófila ou eletrófila,oxidação, redução, hidrogenação, esterificação, dissociação de éster,eterificação, dissociação de éter, formação de carbonamidas, sulfonamidas euréias, bem como a introdução e remoção de grupos protetores temporários.
Como solventes inertes para os estágios de processo (II) + (III)-> (IV), (IV) -> (I) e (IV-A) -> (I), prestam-se especialmente álcoois, tais comometanol, etanol, n-propanol, iso-propanol, n-butanol ou terc.-butanol.Preferentemente, utiliza-se etanol.
O estágio de processo (II) + (III) -> (IV) pode ser eventualmenteefetuado de maneira vantajosa, com adição de um ácido. Para esse fim, sãoapropriados ácidos inorgânicos ou orgânicos usuais, tais como, por exemplo,cloreto de hidrogênio, ácido acético, ácido trifluoracético, ácidometanossulfônico ou ácido para-toluenossulfônico. Preferentemente, utiliza-se ácido acético.
A reação de (II) + (III) -> (IV) é geralmente efetuada em umafaixa de temperatura de O0C até +100°C, preferentemente de +10°C até+40°C.
Como base para o estágio de ciclização (IV) -> (I) ou (IV-A) (I),prestam-se bases inorgânicas ou orgânicas usuais. Nessas incluem-seespecialmente hidróxidos de metais alcalinos, tais como por exemplo,hidróxido de sódio ou potássio, carbonatos de metais alcalinos ou alcalino-terrosos, tais como carbonato de sódio, potássio, cálcio ou césio, alcoolatosde metais alcalinos, como metanolato de sódio ou potássio, etanolato desódio ou potássio ou terc.-butilato de sódio ou potássio ou hidretos de metaisalcalinos, tal como hidreto de sódio. Preferentemente, utiliza-se etanolato desódio.
A reação de (IV) -> (I) ou (IV-A) -> (I) é geralmente efetuada emuma faixa de temperatura de O0C até +60°C, preferentemente de O0C até+30°C.
A seqüência do processo (II) + (III) -> (IV) -> (I) pode serefetuada com um procedimento de reação de dois estágios ou tambémcomo reação de etapa única, sem isolamento do estágio intermediário (IV).
O estágio do processo (V) + (VI) (VII) é preferentementeefetuado sem solvente na presença de um excesso de (VI) com radiação demicroondas. Em geral, a reação é efetuada em uma faixa de temperatura de+20°C até +150°C, preferentemente de +80°C até +120°C [compare tambémJ.P. Bazureau e outros, Synthesis 1998, 967; ibid. 2001 (4) 581].O estágio do processo (VII) + (III) -> (IV-A) é vantajosamenteefetuado com adição de um ácido. Para este fim, são apropriados ácidosinorgânicos ou orgânicos usuais, tais como por exemplo, cloreto dehidrogênio, ácido acético, ácido trifluoracético, ácido metanossulfônico ouácido para-toluenossulfônico. Preferentemente, utiliza-se ácido acético.
Como solventes inertes para esse estágio do processo podem ser utilizadosálcoois, tais como metanol, etanol, n-propanol, iso-propanol, n-butanol outerc.-butanol. De modo particularmente preferido, a reação é efetuada nopróprio ácido acético, sem adição de um outro solvente.
Em geral, a reação de (VII) + (III) -> (IV-A) é efetuada em umafaixa de temperatura de O0C até +60°C, preferentemente de +10°C até+30°C.
Todos os estágios do processo podem ser efetuados a pressãonormal, alta ou baixa (por exemplo, de 0,5 até 5 bar). Em geral, trabalha-se apressão normal.
Os compostos da fórmula (II) podem ser preparados pormétodos conhecidos da literatura para a acilação-C de ésteres de ácidocarboxílico a partir de compostos da fórmula (V). Os compostos das fórmulas(III), (V) e (VI) são obteníveis comercialmente, conhecidos da literatura oupodem ser preparados em analogia com os processos conhecidos daliteratura.
A preparação dos compostos de acordo com a invenção, podeser mostrada pelos seguintes esquemas de síntese 2-4:
Esquema 2<formula>formula see original document page 22</formula>
[a): NaH, 18-coroa-6, tolueno, 1 hora à temperatura ambiente 1 hora a90°C; b) 1. etanol, 16 horas à temperatura ambiente; 2. NaOEt, etanol, 30minutos à temperatura ambiente; c) etanol, 1 dia à temperatura ambiente; d)NaOEt, etanol, 1 hora à temperatura ambiente].Esquema 3
<formula>formula see original document page 23</formula>
[a): 1. LiHDMS1 tetrahidrofurano, -78°C 1 hora a O0C; 2. anidrido de ácidoacético, -78°C; 3. 36 horas à temperatura ambiente; b): ácido acético glacial,etanol, 16 horas à temperatura ambiente; 2. NaOEt1 etanol, 30 minutos àtemperatura ambiente].
Esquema 4
<formula>formula see original document page 23</formula>
[a): radiação de microondas, 1 hora a 100°C; b): ácido acético glacial, 2horas à temperatura ambiente; 2. processamento, NaHCO3 aquoso; 3.NaOEt, etanol, 30 minutos a 5°C; alternativamente b): ácido canfero-10-sulfônico cat., etanol, 78°C, 12-18 horas].
Os compostos de acordo com a invenção, mostram um espectrode ação farmacológico valioso, não previsível. Consequentemente, eles sãoapropriados para o uso como medicamentos para o tratamento e/ouprofilaxia de doenças no homem e animais.
Os compostos de acordo com a invenção, destacam-se comoinibidores específicos das HlF-prolil-4-hidroxilases.
Os compostos de acordo com a invenção, com base em suaspropriedades farmacológicas, podem ser usados para o tratamento e/ouprofilaxia de doenças cardiovasculares, especialmente de insuficiênciacardíaca, hipertonia essencial, pulmonar e maligna, bem como da doençaoclusiva arterial periférica. Além disso, os compostos são apropriados para otratamento e/ou profilaxia de distúrbios da formação de sangue, tais como,por exemplo, de anemias idiopáticas, anemia renal, anemias acompanhadaspor uma doença de tumor, de uma infecção ou de uma outra doençainflamatória, tal como, por exemplo, artrite reumatóide.
Além disso, os compostos são apropriados para aumentar ohematócrito com o objetivo de obter sangue para a própria doação antes decirurgias.
Além disso, os compostos de acordo com a invenção, podem serusados para o tratamento e/ou profilaxia de estados isquêmicos devido acirurgias e suas manifestações seguintes após intervenções cirúrgicas,especialmente intervenções no coração com o uso de uma máquina decoração-pulmão (por exemplo, operações de devio, implantes de válvulascardíacas), intervenções nas carótidas, intervenções na aorta e intervençõescom abertura instrumental ou penetração da calota craniana. Além disso, oscompostos são apropriados para o tratamento geral e/ou profilaxia emintervenções cirúrgicas com o objetivo de uma aceleração da cura de feridase redução do tempo de reconvalescência.
Além disso, os compostos podem ser usados para o tratamentoe/ou profilaxia de câncer e para o tratamento e/ou profilaxia de um dano doestado de saúde que se manifesta no decorrer do tratamento de câncer,especialmente após terapia com citostáticos, antibióticos e radiações.
Além disso, os compostos são apropriados para o tratamentoe/ou profilaxia do círculo de formação reumático e de outras formaspatológicas a serem atribuídas às doenças autoimunes e especialmentepara o tratamento e/ou profilaxia de um dano do estado de saúde que ocorreno decorrer do tratamento medicamentoso dessas doenças.
Além disso, os compostos de acordo com a invenção, podem serusados para o o tratamento e/ou profilaxia de doenças do olho (por exemplo,glaucoma), do cérebro (por exemplo, Morbus Parkinson, Morbus Alzheimer,demência, sensação dolorosa crônica), doenças renais crônicas,insuficiência renal e falência renal aguda, bem como para a promoção dacura de feridas.
Além disso, os compostos são apropriados para o tratamentoe/ou profilaxia de uma fraqueza corporal geral que ocorre muitas vezesespecialmente em idade muito avançada até a caquexia.
Além disso, os compostos são apropriados para o tratamentoe/ou profilaxia da disfunção sexual.
Além disso, os compostos são apropriados para o tratamentoe/ou profilaxia de diabetes mellitus e suas doenças secundárias, tais como,por exemplo, macro- e microangiopatia, nefropatia diabética e neuropatia.
Além disso, os compostos de acordo com a invenção, sãoapropriados para o tratamento e/ou profilaxia de doenças fibróticas, porexemplo, do coração, do pulmão e do fígado.
Outro objeto da presente invenção é o uso dos compostos deacordo com a invenção, para o tratamento e/ou prevenção de doenças,especialmente das doenças mencionadas acima.
Outro objeto da presente invenção é o uso dos compostos deacordo com a invenção, para a fabricação de um medicamento para otratamento e/ou prevenção de doenças, especialmente das doençasmencionadas acima.
Outro objeto da presente invenção é um processo para otratamento e/ou prevenção de doenças, especialmente das doençasmencionadas acima, com o uso de uma quantidade eficaz de pelo menosum dos compostos de acordo com a invenção.Os compostos de acordo com a invenção, podem ser usadossozinhos ou, caso necessário, em combinação com outras substânciasativas. Outro objeto da presente invenção, são medicamentos, contendopelo menos um dos compostos de acordo com a invenção e uma ou váriasoutras substâncias ativas, especialmente para o tratamento e/ou prevençãodas doenças mencionadas acima. Como substâncias ativas de combinaçãoapropriadas, sejam mencionadas, por exemplo e preferentemente: inibidoresde ACE, antagonistas do receptor Il de angiontensina, bloqueadores doreceptor beta, antagonistas do receptor mineralocorticóide, aspirina,diuréticos, suplementos de ferro, suplementos de vitamina B12 e ácidofólico, antagonistas do cálcio, estatinas e derivados de digitalis (digoxina).
Outro objeto da presente invenção são medicamentos, quecontêm pelo menos um composto de acordo com a invenção, usualmentejunto com um ou vários coadjuvantes inertes, não-tóxicos,farmaceuticamente apropriados, bem como seu uso para as finalidadesmencionadas acima.
Os compostos de acordo com a invenção, podem atuarsistemicamente e/ou localmente. Para esse fim, eles podem ser aplicados demaneira adequada, tal como, por exemplo, por via oral, parenteral, pulmonal,nasal, sublingual, lingual, bucal, retal, dérmica, transdérmica, conjuntival,ótica ou como implante ou stent.
Para esses processos de aplicação, os compostos de acordocom a invenção, podem ser administrados em formas de aplicaçãoapropriadas.
Para a aplicação oral, prestam-se conforme o estado da técnica,as formas de aplicação viáveis, que distribuem os compostos de acordo coma invenção, de maneira rápida e/ou modificada, que contêm os compostosde acordo com a invenção em forma cristalina e/ou amortizada e/oudissolvida, tais como exemplo comprimidos (comprimidos não-revestidos ourevestidos, por exemplo, com revestimentos resistentes ao suco gástrico oude lenta dissolução ou insolúveis, que controlam a liberação do composto deacordo com a invenção), comprimidos de rápida desintegração na cavidadeoral ou filmes/oblatas, filmes/liofilizados, cápsulas (por exemplo, cápsulas degetina dura ou macia), drágeas, granulados, péletes, pós, emulsões,suspensões, aerossóis ou soluções.
A aplicação parenteral pode ocorrer com exclusão de um estágiode reabsorção (por exemplo, por via intravenosa, intraarterial, intracardíaca,intraespinhal ou intralombar) ou com a inclusão de uma reabsorção (porexemplo, intramuscular, subcutânea, intracutânea, percutânea ouintraperitonial). Como formas de aplicação para a aplicação parenteral, sãoapropriadas preparações injetáveis e de infusão na forma de soluções,suspensões, emulsões, Iiofilizados ou pós estéreis.
Para outros processos de aplicação prestam-se, por exemplo,formas medicamentosas de inalação (entre outras, inaladores de pó,nebulizadores), gotas, soluções ou sprays nasais, comprimidos a seremaplicados por via lingual, sublingual ou bucal, filmes/oblatas ou cápsulas,supositórios, preparações auriculares ou oftálmicas, cápsulas vaginais,suspensões aquosas (loções, misturas para agitar), suspensões lipofílicas,pomadas, cremes, sistemas terapêuticos transdérmicos (por exemplo,emplastros), leite, pastas, espumas, pós para pulverizar, implantes ou stents.
Prefere-se a aplicação oral ou parenteral, especialmente aaplicação oral.
Os compostos de acordo com a invenção, podem serconvertidos para as formas de aplicação mencionadas. Isso pode serefetuado de maneira em si conhecida através da mistura com coadjuvantesinertes, não-tóxicos, farmaceuticamente apropriados. Nesses coadjuvantesincluem-se, entre outros, veículos (por exemplo, celulose microcristalina,lactose, manitol), solventes (por exemplo, polietilenoglicóis líquidos),emulsificantes e agentes de dispersão ou umectantes (por exemplo,dodecilsulfato de sódio, oleato de polioxissorbitano), adesivos (por exemplo,polivinilpirrolidona), polímeros sintéticos e naturais (por exemplo, albumina),estabilizadores (por exemplo, antioxidantes, tais como, por exemplo, ácidoascórbico), corantes (por exemplo, pigmentos inorgânicos, tais como, porexemplo, óxidos de ferro) e corretivos de sabor e/ou odor.Em geral, provou-se como sendo vantajoso no caso daaplicação parenteral, administrar quantidades de cerca de 0,001 até 1mg/kg, preferentemente de cerca de 0,01 até 0,5 mg/kg de peso corporalpara obter resultados eficazes. Na aplicação oral, a dosagem importa emcerca de 0,01 até 100 mg/kg, preferentemente cerca de 0,01 até 20 mg/kg ede modo muito particularmente preferido, 0,1 até 10 mg/kg de peso corporal.
Apesar disso, pode ser eventualmente necessário, desviar dasquantidades mencionadas e, na verdade, dependendo do peso corporal,processo de aplicação, comportamento individual frente à substância ativa,tipo da preparação e momento ou intervalo, no qual a aplicação é efetuada.
Desse modo, em alguns casos pode ser suficiente usar menos do que umaquantidade mínima mencionada acima, enquanto em outros casos, o limitesuperior mencionado precisa ser ultrapassado. No caso da aplicação dequantidades maiores, pode ser recomendável, dividi-las em várias dosesúnicas ao longo do dia.
Os seguintes exemplos de concretização elucidam a invenção. Ainvenção não está restrita aos exemplos.
Os dados de porcentagem nos seguintes testes e exemplos,desde que não é indicado de outro modo, são porcento em peso; partes sãopartes em peso. Proporções de solventes, proporções de diluição e dadosde concentração de soluções líquidas/líquidas referem-se em cada caso aovolume.
A. Exemplos
Abreviações e acrônimos:
aq. solução aquosa
cat. cataliticamente
d dia(s)
DCI ionização química direta (na MS)
DMF dimetilformamida
DMSO dimetilsulfóxido
d. Th. da teoria (no rendimento)
El ionização de colisão de elétrons (na MS)ESI ionização de spray eletrônico (na MS)
Et etila
GC-MS espectroscopia de massa acoplada com cromatografia gasosa
h hora(s)
HPLC cromatografia líquida de alta pressão, alta potência
konz. concentrado
LC-MS espectroscopia de massa acoplada à cromatografia líquida
LiHMDS hexametildissilazida de lítio
min minuto(s)
MS espectroscopia de massa
MTBE éter metil-terc.-butílico
NMR ressonância magnética nuclear
Rt tempo de retenção (na HPLC)
RT temperatura ambiente
TFA ácido trifluoracético
THF tetrahidrofurano
Métodos de LC-MS, HPLC e GC-MS:
Método 1:
Instrumento: Micromass Platform LCZ com HPLC Agilent Serie1100; coluna: Hypersil GOLD 3 μ, 20 mmx 4 mm; eluente A: 1 litro de água +0,5 ml de ácido fórmico a 50%, eluente B: 1 litro de acetonitrila + 0,5 ml deácido fórmico a 50%; gradiente: 0,0 min 100% A 0,2 min 100% A 2,9min 30% A ^ 3,1 min 10% A 5,5 min 10% A; forno: 50°C; vazão: 0,8ml/min; detecção de UV: 210 mm.
Método 2:
Instrumento: Micromass Platform LCZ com HPLC Agilent Serie1100; coluna: HyPURITY Aquastar 3 μ, 50 mm χ 2,1 mm; eluente A: 1 litrode água + 0,5 ml de ácido fórmico a 50%, eluente B: 1 litro de acetonitrila +0,5 ml de ácido fórmico a 50%; gradiente: 0,0 min 100% A 0,2 min 100%A 2,9 min 30% A -> 3,1 min 10% A 4 5,5 min 10% A; forno: 50°C; vazão:0,8 ml/min; detecção de UV: 210 mn.Método 3:
Instrumento: Micromass Quattro LCZ com HPLC Agilent Serie1100; coluna: Phenomenex Synrgi 2 μ Hydro-RP Mercury 20 mm χ 4 mm;eluente A: 1 litro de água + 0,5 ml de ácido fórmico a 50%, eluente B: 1 litrode acetonitrila + 0,5 ml de ácido fórmico a 50%; gradiente: 0,0 min 90% A ->2,5 min 30% A -> 3,0 min 5% A 4,5 min 5% A; vazão: 0,0 min 1 ml/min2,5 min/3,0 min/ 4,5 min 2 ml/min; forno: 50°C; detecção de UV: 208-400 mn.
Método 4:
Tipo de aparelho MS: Micromass ZQ; tipo de aparelho HPLC:Waters Alliance 2795; coluna: Phenomenex Synergi 2 μ Hydro-RP Mercury20 mm χ 4 mm; eluente A: 1 litro de água + 0,5 ml de ácido fórmico a 50%,eluente B: 1 litro de acetonitrila + 0,5 ml de ácido fórmico a 50%; gradiente:0,0 min 90% A -> 2,5 min 30% A -> 3,0 min 5% A 4,5 min 5% A; vazão:0,0 min 1 ml/min 2,5 min/3,0 min/ 4,5 min 2 ml/min; forno: 50°C; detecçãode UV: 210.
Método 5:
Tipo de aparelho MS: Micromass ZQ; tipo de aparelho HPLC:HP 1100 Series; UV DAD; coluna: Phenomenex Synergi 2 μ Hydro-RPMercury 20 mm χ 4 mm; eluente A: 1 litro de água + 0,5 ml de ácido fórmicoa 50%, eluente B: 1 litro de acetonitrila + 0,5 ml de ácido fórmico a 50%;gradiente: 0,0 min 90% A -> 2,5 min 30% A 3,0 min 5% A -» 4,5 min 5%A; vazão: 0,0 min 1 ml/min -> 2,5 min/3,0 min/ 4,5 min 2 ml/min; forno: 50°C;detecção de UV: 210.
Método 6:
Instrumento: HP 1100 com detecção DAD; coluna: Kromasil 100RP-18, 60 mm χ 2,1 mm, 3,5 μηι; eluente A: 5 ml de HcIO4 (a 70%)/litro deágua, eluente B: acetonitrila; gradiente: 0 min 2% B 0,5 min 2% B -> 4,5min 90% B -> 6,5 min 90% B 6,7 min 2% B 7,5 min 2% B; vazão: 0,75ml/min; temperatura da coluna: 30°C; detecção de UV: 210 mn.
Método 7:
Instrumento: Micromass GCT, GC6890; coluna:; Restek RTX-35MS, 30 m χ 250 μηη χ 0,25 μιη; vazão constante com hélio: 0,88 ml/min;forno: 60°C; Inlet: 250°C; gradiente: 60°C (manter por 0,30 min), 50°C/min ->120°C, 16°C/min --> 250°C, 30°C/min 300°C (manter por 1,7 minutos).
Método 8:
Instrumento MS: Waters ZQ 2000; instrumento HPLC: Agilent1100, ligação de 2 colunas; mostruário automático: HTC PAL; coluna: YMC-ODS-AQ, 50 mm χ 4,6 mm, 3,0 μιτι; eluente A: água + 0,1% de ácidofórmico, eluente B: acetonitrila + 0,1% de ácido fórmico; gradiente: 0,0 min100% A 0,2 min 95% A -> 1,8 min 25% A 1,9 min 10% A 2,0 min 5%A -> 3,2 min 5% A 3,21 min 100% A 3,35 min 100% A; forno: 40°C;vazão: 3,0 ml/min; detecção de UV: 210 mn.
Compostos de partida e intermediários:
Exemplo 1a
2-hidrazino-4-metilpiridina
<formula>formula see original document page 31</formula>
3,33 g (30,0 mmol) de 2-fluor-4-metilpiridina são previamenteintroduzidos em 40 ml de 2-etoxietanol, a solução é adicionada com 14,6 ml(15,0 g, 300 mmol) de hidrato de hidrazina e a preparação é agitada por 16horas no calor de ebulição (150°C de temperatura do banho). A solução dereação é concentrada no evaporador rotativo, o resíduo é acrescentado a100 ml de água e extraído com éster etílico de ácido acético (três vezes paracada 100 ml). As fases orgânicas combinadas são secadas sobre sulfato desódio, filtradas e concentradas. O resíduo obtido é secado no vácuo.Rendimento: 1,90 g (51 % da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7,83 (d, 1H), 7,22 (s, 1H), 6,51 (s, 1H),6,38 (d, 1H), 4,04 (s, 2H), 2,17 (s, 3H)LC-MS (método 1): Tr = 0.80 min; MS (ESlpos): m/z = 124 [M+H]+.
Exemplo 2a
Éster etílico de ácido 3-hidróxi-2-piridin-3-il-acrílico<formula>formula see original document page 32</formula>
1,65 g (10,0 mmol) de éster etílico de ácido 3-piridilacético sãopreviamente introduzidos em 20 ml de tolueno anidro sob argônio. A soluçãoé adicionada aos poucos com 410 mg (10,3 mmol) de suspensão de hidretode sódio (a 60% em óleo de parafina) e 130 ml (0,50 mmol) de 18-coroa-6 ea preparação é agitada por 30 minutos à temperatura ambiente, em seguida,por 30 minutos a 85°C (temperatura do banho). Depois desse tempo éresfriado e a cerca de 20°C, são acrescentados por gotejamento 1,48 g (20,0mol) de éster etílico de ácido fórmico. Inicialmente, agita-se por 60 minutos àtemperatura ambiente, depois por 60 minutos a 90°C (temperatura dobanho). Depois de resfriar, a solução de reação é acrescentada a cerca de50 ml de solução de cloreto de amônio saturada e extraída com éster etílicode ácido acético (cinco vezes, 40 ml cada). As fases orgânicas combinadassão lavadas com 50 ml de solução de cloreto de sódio saturada, secadassobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. O sólido obtido é lavadocom pentano e secado no vácuo.Rendimento: 1,3 g (67% da teoria)
RMN-1H (400 MHz1 DMSOd6): δ = 11,38 (br, s, 1H), 8,50 (d, 1H), 8,39 (dd,1H), 7,97 (s, 1H), 7,71 (d, 1H), 7,35 (dd, 1H), 4,12 (q, 2H), 1,97 (t, 3H),MS(DCI): m/z= 194 [M+H]+.
Exemplo 3a
Éster etílico de ácido 2-piridin-3-il-3-(piridin-2-il-hidrazono)propiônico<formula>formula see original document page 33</formula>
2,90 g (15,0 mmols) do composto do exemplo 2A e 1,72 g (15,8mmols) de 2-piridil-hidrazina são dissolvidos em 75 ml de etanol e apreparação é agitada por 4 dias à temperatura ambiente. A mistura dereação é liberada de solvente no evaporador rotativo e o resíduo écromatografado através de sílica-gel 60 (solvente de desenvolvimento:diclorometano diclorometano/metanol 10:1 diclorometano/metanol 2:1).As frações do produto são combinadas e o solvente é removido noevaporador rotativo. Após a secagem no vácuo, obtêm-se 3,95. g (93% dateoria) do composto do título.
LC-MS (método 2): Tr = 2,10 min; MS (ESlpos): m/z = 285 [M+H]+.
Exemplo 4A
(6-bromopiridin-3-il)metanol
<formula>formula see original document page 33</formula>
1,34 ml (1,34 mmol) de uma solução 1M de hidreto delítioalumínio em THF são previamente introduzidos em 5 ml de THF secosob argônio e uma solução de 500 mg (2,69 mmols) de 6-bromo-3-piridincarbaldeído é acrescentada por gotejamento em 3 ml de THF, a O0C.Agita-se por 1 hora à temperatura ambiente, em seguida, adiciona-se àpreparação com resfriamento em banho de gelo, 25 ml de éster etílico deácido acético e hidrolisa-se lentamente com 50 ml de solução dehidrogenocarbonato de sódio saturada. A fase aquosa é extraída com ésteretílico de ácido acético (três vezes, 20 ml cada). As fases orgânicascombinadas são lavadas com solução de cloreto de sódio saturada, secadasobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas no evaporador rotativo.Depois de remover resíduos de solvente no vácuo, obtêm-se 375 mg (74%da teoria) do composto do título.
LC-MS (método 3): Tr= 1,02 min; MS (ESlpos): m/z = 189 [M+H]+.
Exemplo 5A
(6-cloro-5-metilpiridin-3-il)metanol
<formula>formula see original document page 34</formula>
O composto do título é obtido através da reação de 3,11 g (20,0mmols) de 6-cloro-5-metilnicotin-aldeído [preparação descrita na DE4429465-A1, exemplo 7] com 1,51 g (40,0 mmols) de borohidreto de sódioem 30 ml de água e extração seguinte da fase aquosa com diclorometano. Oproduto obtido após a remoção do solvente no evaporador rotativo, é secadono vácuo e diretamente utilizado posteriormente.
Exemplo 6A
2-bromo-5-(clorometil)piridina
<formula>formula see original document page 34</formula>
3,69 g (19,7 mmols) do composto do exemplo 4A sãopreviamente introduzidos sob argônio e a -60°C (temperatura do banho) sãoacrescentados às gotas de 25 ml de cloreto de tionila. A preparação éagitada por 1 hora a -60°C. Concentra-se à temperatura ambiente noevaporador rotativo e adiciona-se o resíduo com 50 ml de solução dehidrogenocarbonato de sódio saturada e 50 ml de éster etílico de ácidoacético. A fase aquosa é extraída com éster etílico de ácido acético (quatrovezes, 25 ml cada). As fases orgânicas combinadas são secadas sobresulfato de sódio, filtradas, o solvente é removido no evaporador rotativo e oresíduo é secado no vácuo.
Rendimento: 3,71 g (91% da teoria)
LC-MS (método 1): Tr = 3,28 min; MS (ESlpos): m/z = 208 [M+H]+.
Exemplo 7A
2-cloro-5-(clorometil)-3-metilpiridina<formula>formula see original document page 35</formula>
A preparação é efetuada de maneira análoga ao exemplo 6A apartir de 1,00 g (6,35 mmols) de (6-cloro-5-metilpiridin-3-il)metanol e 5 ml decloreto de tionila. São obtidos 1,26 g do composto do título, o qual é reagidosem outra purificação.
LC-MS (método 4): Tr = 1,92 min; MS (ESlpos): m/z = 176 [M]+.
Exemplo 8A
(6-bromopiridin-3-il)acetonitrila
<formula>formula see original document page 35</formula>
3,75 g (18,2 mmols) do composto do exemplo 6A sãopreviamente introduzidos em 20 ml de DMF, acrescentados 979 mg (20,0mmols) de cianeto de sódio e a preparação é agitada por 2 dias àtemperatura ambiente. A mistura de reação é acrescentada a uma misturade 250 ml de solução de cloreto de amônio saturada e 200 ml de éster etílicode ácido acético e a fase aquosa é extraída com éster etílico de ácidoacético (três vezes, 100 ml cada). As fases orgânicas combinadas sãosecadas sobre sulfato de sódio, filtradas, concentradas e o resíduo é secadono vácuo. O produto obtido dessa maneira é reagido sem outra purificação.Rendimento: 3,23 g (90% da teoria)
LC-MS (método 3): Tr = 1,46 min; MS (ESlpos): m/z = 197 [M+H]+.
Exemplo 9A
(6-cloro-5-metilpiridin-3-il)acetonitrila
<formula>formula see original document page 35</formula>
A síntese é efetuada de maneira análoga ao exemplo 3A a partirde 1,26 g (7,14 mmols) do composto do exemplo 7A. O produto bruto obtidoé purificado cromatograficamente através de sílica-gel 60 (solvente dedesenvolvimento: diclorometano -> diclorometano/metanol 50:1).Rendimento: 215 mg (18% da teoria)
LC-MS (método 1): Tr= 2,95 min; MS (ESlpos): m/z = 167 [M+H]+.
Exemplo 10A
Éster etílico de ácido (2-cloropiridin-3-il)acético
<formula>formula see original document page 36</formula>
22,0 g (144 mmols) de (6-cloropiridin-3-il)acetonitrila sãoacrescentados a uma mistura de 270 ml de etanol e 101 ml de ácidosulfúrico concentrado e a preparação é agitada por 24 horas ao refluxo. Amistura de reação é lentamente gotejada, sob agitação, em uma mistura de350 g de hidrogenocarbonato de sódio e 1 litro de água. A fase aquosa éextraída com diclorometano (cinco vezes 400 ml cada). As fases orgânicascombinadas são secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e liberadas dosolvente no evaporador rotativo. Obtêm-se 23,1 g (80% da teoria) docomposto do título, o qual é reagido sem outra purificação.RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8,32 (d, 1H), 7,78 (dd, 1H), 7,49 (d, 1H),4,10 (q, 2H), 3,77 (s, 2H), 1,19 (t, 3H).
LC-MS (método 3): Tr= 1.91 min; MS (ESlpos): m/z = 200 [M+H]+.
De maneira análoga ao exemplo 10A, os compostosmencionados na tabela 1 são obtidos a partir dos produtos de partidacorrespondentes:
Tabela 1
<table>table see original document page 36</column></row><table>Exemplo 13A
Éster etílico de ácido (5-bromopiridin-3-il)acético
<table>table see original document page 37</column></row><table>
1,00 g (4,63 mmols) de ácido (5-bromopiridin-3-il)acético sãopreviamente introduzidos em 20 ml de etanol, adicionados com 2 ml de ácidosulfúrico concentrado e a preparação é agitada durante a noite ao refluxo. Asolução de reação é acrescentada sob agitação, a uma mistura de 100 ml desolução de hidrogenocarbonato de sódio e 100 ml de éster etílico de ácidoacético e a fase aquosa é extraída com éster etílico de ácido acético (trêsvezes 50 ml cada). As fases orgânicas combinadas são secadas sobresulfato de sódio, filtradas, concentradas e o resíduo é liberado de resíduosde solvente durante a noite no vácuo.
Rendimento: 1.06 g (94% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-Cl6):'δ = 8,61 (d, 1H), 8,48 (d, 1H), 8,01 (dd, 1H),4,10 (q, 2H), 3,78 (s, 2H), 1,20 (t, 3H).
LC-MS (método 5): Tr = 2.06 min; MS (ESlpos): m/z = 246 [M+H]+.
Exemplo 14A
Éster etílico de ácido 2-(6-bromopiridin-3-il)-3-(dimetilamina)acrílico
<table>table see original document page 37</column></row><table>
1,30 g (2,98 mmols) do composto do exemplo 11A sãodissolvidos em 6 ml de dimetilformamida-dietilacetal e a preparação éagitada com radiação de microondas por 60 minutos a 100°C. A preparaçãoé concentrada no evaporador rotativo e o resíduo é cromatografado atravésde sílica-gel 60 (solvente de desenvolvimento: ciclohexanociclohexano/éster etílico de ácido acético 1:3).
Rendimento: 854 mg (96% da teoria)
RMN-1H (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 8,11 (d, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,54 (d, 1H),7,48 (dd, 1 Η), 4,01 (q, 2Η), 2,70 (br, s, 6H), 1,12 (t, 3H),
MS (DCI, NH3): m/z = 316 [IVkNH4]+
LC-MS (método 4): Tr= 1.88 min; MS (ESlpos): m/z = 299 [M+H]+.
Os compostos mencionados na tabela 2 são preparados a partirdos produtos de partida correspondentes, de maneira análoga ao exemplo 14A:
Tabela 2
<table>table see original document page 38</column></row><table>Exemplo 18A
Éster etílico de ácido 3-oxo-2-piridin-3-il-butanóico
<formula>formula see original document page 39</formula>
500 mg (3,0 mmols) de acetato de etil-piridina-3 são previamenteintroduzidos em 5 ml de tetrahidrofurano anidro sob argônio e uma soluçãode lítiohexametildisilazida (6,7 ml, 1 M em tetrahidrofurano) é acrescentadaàs gotas a -78°C. Depois de aquecer por 15 minutos a O0C, agita-se por umahora e resfria-se outra vez para -78°C. Após a adição de 340 mg (3,3 mmols)de anidrido de ácido acético, a preparação é agitada por 36 horas àtemperatura ambiente. Adiciona-se com uma solução aquosa de cloreto deamôno, extrai-se com diclorometano, seca-se a fase orgânica sobre sulfatode magnésio e concentra-se no vácuo. Obtêm-se 488 mg do composto dotítulo com pureza de 70%, que são reagidos sem outra purificação.LC-MS (Método 1): Tr = 2.24 min; MS (ESlpos): m/z = 208 [M+H]+.
Exemplo 19A
(5-metilpiridin-3-il)acetonitrila
<formula>formula see original document page 39</formula>
A preparação do composto do título é descrita na DE 2.854.210-C2 (tabela,2, exemplo 37).
Exemplo 20A
Éster etílico de ácido 5-(cianometil)píridín-3-carboxílcio
<formula>formula see original document page 39</formula>
10,5 g (52,6 mmols) de éster etílico de ácido 5-(clorometil)piridin-2-carboxílico [preparação conforme H Barth e outros, Liebigs Ann.Chem.1981, 2164-2179] são previamente introduzidos em 75 ml dedimetilformamida anidra e adicionados à temperatura ambiente, dentro de 3horas, aos poucos com 2,58 g (52,6 mmols) de cianeto de sódio. Emseguida, a preparação é acrescentada a 500 ml de solução saturada decloreto de amônio e extraída com diclorometano (quatro vezes, 100 mlcada). As fases orgânicas combinadas são secadas sobre sulfato de sódio,concentradas e o resíduo é purificado cromatograficamente através de sílica-gel (solvente de desenvolvimento: ciclohexano -> ciclohexano/éster etílicode ácido acético 1:4). Obtêm-se 3,80 g (38% da teoria) do composto dotítulo.
RMN-1H (300 MHz, DMSO-d6): δ = 8,69 (d, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,99 (dd, 1H),4,36 (q, 2H), 4,24 (s, 2H), 1,34 (t, 3H),
LC-MS (método 3): Tr = 1,45 min; MS (ESlpos): m/z = 191 [M+H]+.
De maneira análoga ao exemplo 10A os compostos enumeradosna tabela 3 são obtidos a partir dos produtos de partida correspondentes:
Tabela 3
<table>table see original document page 40</column></row><table>
Exemplo 23A
Éster etílico de ácido (4-metilpiridin-3-il)acético
<formula>formula see original document page 40</formula>
A síntese do composto do título é efetuada de maneira análogaao exemplo 13A a partir de 200 mg (1,32 mmol) de ácido (4-metilpiridin-3-il)acético.
Rendimento: 235 mg (99% da teoria)
RMN-1H (300 MHz1 DMSO-d6): δ = 8,32 (d, 1H), 7,56 (dd, 1H), 7,20 (dd, 1H),4,08 (q, 2H), 3,67 (s, 2H), 2,44 (s, 3H), 1,18 (t, 3H),LC-MS (método 1): Tr =1,86 min; MS (ESlpos): m/z =180 [M+H]+.
Exemplo 24A
Ester etilico de acido (6-metilpiridin-3-il-acetico
<formula>formula see original document page 41</formula>
A sintese do composto do título é efetuada de maneira análogaao exemplo 13A a partir de 493 mg (3,26 mmols) de ácido (6-metilpiridin-3-il)acético [preparação: N. Sperber e outros, J. Am. Chem. Soe. 81, 704-709(1959)].
Rendimento: 580 mg (99% da teoria)
RMN-1H (300 MHz, DMSO-d6): δ = 8,32 (d, 1H), 7,57 (dd, 1H), 7,20 (d, 1H),4,08 (q, 2H), 3,67 (s, 2H), 2,44 (s, 3H), 1,18 (t, 3H).
LC-MS (método 1): Tr = 1,85 min; MS (ESlpos): m/z = 180 [M+H]+.
Os compostos mencionados na tabela 4 são preparados a partirdos produtos de partida correspondentes, de maneira análoga ao exemplo14A.
Tabela 4
<table>table see original document page 41</column></row><table><table>table see original document page 42</column></row><table>
Os compostos mencionados na tabela 5 são obtidos a partir das2-cloropiridinas correspondentes, de maneira análoga ao exemplo 1A. Aoinvés do processamento descrito no exemplo 1A, aqui a solução de reação éconcentrada e o resíduo é misturado com uma mistura de éter dietílico ediclorometano. O cloridrato de hidrazina cristalino em excesso é filtrado, ofiltrado é concentrado, este é secado no vácuo e o produto é reagido semoutra purificação.Tabela 5
<table>table see original document page 43</column></row><table>
Exemplo 33A
Nitrila de ácido 2-hidrazino-isonicotínico
<formula>formula see original document page 43</formula>
20,0 g (144 mmols) de nitrila de ácido 2-cloroisonicotínico sãopreviamente introduzidos em 150 ml de 1-butanol, adicionados com 303 ml(303 mmols) de uma solução 1 M de hidrato de hidrazina emtetrahidrofurano e aquecidos por 16 horas (110°C de temperatura do banho).É concentrado e o resíduo purificado por meio de cromatografia instantâneaem sílica-gel (solvente de desenvolvimento: diclorometano/metanol 10:1).Rendimento: 9,48 g (49% da teoria)
RMN-1H (400 MHz1 DMSOd6): δ = 8,15 (d, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,01 (s, 1H),6,83 (dd, 1H), 4,30 (s, 2H),
LC-MS (método 1): Tr = 0.52 min; MS (ESlpos): m/z = 135 [M+H]+.
Exemplo 34A
(6-hidrazinopiridin-3-il)metanol
<formula>formula see original document page 44</formula>
20,0 g (139 mmols) de (6-cloropiridin-3-il)metanol são aquecidosdurante a noite ao refluxo em 400 ml de uma solução de hidrato de hidrazinaaquosa a 35%. É concentrado, adicionado com tolueno, novamenteconcentrado e o resíduo é misturado com uma mistura de diclorometano,metanol e éter dietílico. O resíduo cristalino é filtrado (hidrazina-cloridrato), ofiltrado é concentrado e secado no vácuo.
Rendimento: 19,3 g (99% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSOd6): δ = 7,91 (d, 1H), 7,40 (dd, 1H), 7,29 (s, 1H),6,66 (d, 1H), 4,93 (s, 1H), 4,31 (s, 2H), 4,14 (s, 2H),LC-MS (método 1): Tr= 0,50 min; MS (ESlpos): m/z = 140 [M+H]+.
Exemplo 35A
Benzofenona-(4-metoxipiridin-2-il)hidrazona
<formula>formula see original document page 44</formula>
500 mg (3,48 mmols) de 2-cloro-4-metoxipiridina, 752 mg (3,83mmols) de benzofenonohidrazona, 469 mg (4,88 mmols) de terc.-butilato desódio, 15,6 mg (0,07 mmol) de acetato de paládio(ll), 21,2 mg (0,17 mmol)de ácido fenilborônico e 43,4 mg (0,07 mmol) de 2,2'-bis-(difenilfosfino)-1,r-binaftila racêmica em tolueno desgaseificado são aquecidos sob argônio a90°C durante a noite. Depois do resfriamento, a mistura de reação é vertidaem água, a fase aquosa é extraída várias vezes com éster etílico de ácidoacético, as fases orgânicas combinadas são secadas sobre sulfato de sódio,filtradas e concentradas. O resíduo é purificado por meio de HPLCpreparatória (coluna RP18; solvente de desenvolvimento: gradiente deacetonitrila/água).
Rendimento: 872 mg (83% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10,8 (s, 1H), 8,07 (d, 1H), 7,70-7,64 (m,5H), 7,50-7,38 (m, 5H), 6,94 (d, 1H), 6,78 (dd, 1H), 3,92 (s, 3H),LC-MS (método 3): Tr = 1,70 min; MS (ESlpos): m/z = 304 [M+H]+.
Exemplo 36A
2-hidrazino-4-metoxipiridina
<formula>formula see original document page 45</formula>
850 mg (2,80 mmols) do composto do exemplo 35A sãoaquecidos em ácido clorídrico concentrado durante a noite, a 65°C. Depoisde resfriar, a mistura de reação é lavada com diclorometano e concentrada.
Obtêm-se 470 mg do produto bruto como cloridrato. 250 mg destes sãomisturados com tris(2-aminoetil)amina ligada com polímero emdiclorometano, durante a noite à temperatura ambiente. É filtrado, o filtrado éconcentrado e secado no alto vácuo.
Rendimento: 170 mg (39% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 7,78 (d, 1H), 7,26 (s, 1H), 6,25 (d, 1H),6,15 (dd, 1H), 4,09 (s, 2H), 3,73 (s, 3H).
LC-MS (método 1): Tr= 0.89 min; MS (ESlpos): m/z = 140 [M+H]+.
Exemplo 37A
3-(clorometil)-2-metilpiridina<formula>formula see original document page 46</formula>
1,00 g (8,12 mmols) de 3-(hidroximetil)-2-metilpiridina sãopreviamente introduzidos e a O0C são lentamente adicionados com 5,9 ml(81,2 mmols) de cloreto de tionila. A preparação é aquecida por 3 horas aorefluxo. É concentrado, o resíduo é adicionado com solução dehidrogenocarbonato de sódio saturada e extraído várias vezes com éterdietílico. As fases orgânicas combinadas são lavadas com solução de cloretode sódio saturada, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas.
Rendimento: 0,98 g (85% da teoria)
GC-MS (método 7): Tr = 4,85 min; MS (Eipos): m/z = 141 [M]+.
Exemplo 38A
(2-metilpiridin-3-il)acetonitrila
<formula>formula see original document page 46</formula>
970 mg (6,85 mmols) do composto do exemplo 37A sãopreviamente introduzidos em 10 ml de dimetilformamida, adicionados com336 mg (6,85 mmols) de cianeto de sódio e a preparação é misturadadurante a noite a 45°C. A mistura de reação é acrescentada a 75 ml desolução de cloreto de amônio saturada e extraída várias vezes comdiclorometano. As fases orgânicas combinadas são secadas sobre sulfato desódio, filtradas e concentradas. O resíduo é purificado por meio decromatografia instantânea em sílica-gel (solvente de desenvolvimento:diclorometano/metanol 20:1).
Rendimento: 795 mg (88% da teoria)
GC-MS (método 7): Tr= 6,14 min; MS (Eipos): m/z = 132 [M]+.
Exemplo 39A
Ester etílico de ácido (2-metilpiridin-3-il)acético
<formula>formula see original document page 46</formula>790 mg (5,98 mmols) do composto do exemplo 38A são
previamente introduzidos em 10 ml de etanol, adicionados lentamente com 4ml de ácido sulfúrico concentrado e aquecidos por 6 horas ao refluxo. Depoisde resfriar, neutraliza-se com 6,00 g de hidrogenocarbonato de sódio esolução de hidrogenocarbonato de sódio saturada. A fase aquosa é extraídavárias vezes com éster etílico de ácido acético e as fases orgânicascombinadas são secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. Oresíduo é reagido sem outra purificação.
Rendimento: 614 mg (57% da teoria)
RMN-1H (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 8,34 (dd, 1H), 7,57 (dd, 1H), 7,18 (dd,1H), 4,10 (q, 2H), 3,73 (s, 2H), 2,40 (s, 3H), 1,18 (t, 3H),LC-MS (método 1): Tr= 1,84 min; MS (ESlpos): m/z = 180 [M+H]+.
Exemplo 40A
Éster etílico de ácido (6-trifluormetilpiridin-3-il)-acético
<formula>formula see original document page 47</formula>
4,23 g (20,6 mmols) de ácido (6-trifluormetilpiridin-3-il)acético[obtenível a partir de [6-(trifluormetil)-piridin-3-il]metanol de maneira análogaà seqüência de reação dos exemplos 37A, 38A e 41] são previamenteintroduzidos, sob argônio, em 200 ml de etanol, adicionados com 0,2 ml deácido sulfúrico concentrado e aquecidos por 5 horas ao refluxo. Depois deresfriar, a solução de reação é concentrada, o resíduo é retomado em ésteretílico de ácido acético e lavado com solução de hidrogenocarbonato desódio saturada. A fase aquosa é reextraída várias vezes com éster etílico deácido acético e as fases orgânicas combinadas são secadas sobre sulfato desódio, filtradas e concentradas. O resíduo é purificado por meio decromatografia instantânea em sílica-gel (solvente de desenvolvimento:gradiente ciclohexano ciclohexano/éster etílico de ácido acético 1:1).
Rendimento: 3,24 g (67% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-de): δ = 8,69 (s, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,89 (d, 1H),4,13 (q,2H), 3,91 (s,2H), 1,21 (t, 3H).LC-MS (método 3): Tr= 2.12 min; MS (ESlpos): m/z = 234 [M+H]+.Exemplo 41A
Éster etílico de ácido 3-hidróxi-2-(6-trifluormetilpiridin-3-il)-acrílico
<formula>formula see original document page 48</formula>
3,46 g (14,8 mmols) do composto do exemplo 40A sãopreviamente introduzidos, sob argônio, em 50 ml de tolueno anidro, aospoucos são adicionados com 712 mg (17,8 mmols) de suspensão de hidretode sódio (a 60% em óleo de parafina) e agitados por 1 hora à temperaturaambiente e, em seguida, por 20 minutos a 80°C. Depois de resfriar, sãoacrescentados às gotas 392 mg (1,48 mmol) de 18-coroa-6 e, em seguida,com liofilização, 2,20 g (29,7 mol) de éster etílico de ácido fórmico.Inicialmente é agitado por 1 hora a O0C, depois por 1 hora à temperaturaambiente. Em seguida, é acrescentada uma mistura de 100 ml de ésteretílico de ácido acético e 150 ml de ácido clorídrico 0,1 M, as fases sãoseparadas, a fase aquosa é extraída várias vezes com éster etílico de ácidoacético, as fases orgânicas combinadas são secadas sobre sulfato de sódio,filtradas e concentradas. O resíduo é purificado por meio de cromatografiainstantânea em sílica-gel (solvente de desenvolvimento: gradiente deciclohexano/éster etílico de ácido acético).Rendimento: 3.9 g (100% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 11,8 (s, 1H), 8,70 (d, 1H), 8,03 (s, 1H),8,00 (d, 1H), 7,87 (d, 1H), 4,15 (q, 2H), 1,21 (t, 3H).
Exemplo 42A
Éster etílico de ácido 3-(dimetilamina)-2-piridin-3-il-acrílico<formula>formula see original document page 49</formula>
37,4 g (226 mmols) de éster etílico de ácido piridin-3-ilacéticosão aquecidos em 100 g (679 mmols) de dimetilamida-dietilacetal durante anoite, a 100°C. Depois do resfriar, concentra-se e purifica-se o resíduo pormeio de cromatografia instantânea em sílica-gel (solvente dedesenvolvimento: gradiente de ciclohexano/éster etílico de ácido acético 1:1-> éster etílico de ácido acético/etanol 9:1). O produto obtido é submetido auma purificação fina através de destilação no vácuo (1 mbar, 200°C detemperatura do banho).Rendimento: 35.0 g (70% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8,37 (dd, 1H), 8,31 (dd, 1H), 7,59 (s, 1H),7,51 (dt, 1H), 7,29 (ddd, 1H), 4,00 (q, 2H), 2,67 (s, 6H), 1,11 (t, 3H),LC-MS (método 1): Tr= 2,38 min; MS (ESlpos): m/z = 221 [M+H]+.
Exemplo 43A
Éster etílico de ácido 3-(dimetilamina)-2-(2-metilpiridin-3-il)-acrílico
<formula>formula see original document page 49</formula>
600 mg (3,35 mmols) do composto do exemplo 39A sãoaquecidos em 1,7 ml (10,0 mmols) de dimetilformamida-dietilacetal durante anoite a 100°C. Depois de resfriar, concentra-se e purifica-se o resíduo pormeio de HPLC preparatória (coluna RP18; solvente de desenvolvimento:gradiente de acetonitrila/água).
Rendimento: 619 mg (79% da teoria)
RMN-1 H (400 MHz, DMSOd6): δ = 8,30 (dd, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,38 (dd, 1H),7,13 (dd, 1H), 4,05-3,92 (m, 2H), 2,62 (s, 6H), 2,30 (s, 3H), 1,08 (t, 3H),LC-MS (método 1): Tr= 2,19 min; MS (ESlpos): m/z = 235 [M+H]+.
Exemplos de concretização:
Exemplo 1
4-piridin-3-il-2-pirimidin-2-il-1,2-dihidro-3H-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 50</formula>
193 mg (1 mmol) do composto do exemplo 2A e 116 mg (1,05mmol) de 2-hidrazinopirimidina são previamente introduzidos em 2 ml deetanol anidro sob argônio e a preparação é agitada por 20 horas àtemperatura ambiente. Em seguida, acrescentam-se aos poucos 40 mg (1mmol) de suspensão de hidreto de sódio (a 60% em óleo de parafina),formando-se uma nítida turvação da solução de reação. É agitado por 10minutos à temperatura ambiente. A seguir, a mistura de reação escura éadicionada com 1 ml de ácido clorídrico 1 M, separando-se um precipitado. Éaspirado, o resíduo é lavado com água (2 χ 1 ml) e secado no vácuo. Sãoobtidos 173 mg (72% da teoria) do composto do título.
RMN-1H (300 MHz, DMSO-d6): δ = 12,8 (br, s, 1H), 9,04 (d, 1H), 8,92 (d,2H), 8,38 (m, 2H), 8,19 (d, 1H), 7,50 (dd, 1H), 7,42 (dd, 1H),LC-MS (método 5): Tr = 0,59 min; MS (ESlpos): m/z = 240 [M+H]+.
Exemplo 2
2-(4-metilpiridin-2-il)-4-piridin-3-il-1,2-dihidro-H-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 50</formula>
1,53 a (7,90 mmols) do composto do exemplo 2A e 2,92 g (23,7mmols) do composto do exemplo 1A são dissolvidos em 2 ml de etanolanidro sob argônio e a preparação é agitada por 16 horas à temperaturaambiente. São acrescentados 537 mg (7,90 mmols) de etanolato de sódio,sendo que a solução de reação tinge-se de vermelho escuro. É agitado por30 minutos à temperatura ambiente e em seguida, adicionados 7,9 ml deácido clorídrio 1 Μ. A solução é parcialmente concentrada, sendo quesepara-se um precipitado. Este é filtrado, lavado com água (duas vezes com5 ml cada) e com MTBE (5 ml) e secado no vácuo. Obtêm-se 435 mg (22%da teoria) do composto do título.
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,06 (d, 1H), 8,35 (m, 3H), 8,20 (d, 1H),8,08 (s, 1H), 7,37 (dd, 1H), 7,21 (d, 1H), 2,45 (s, 3H).LC-MS (método 5): Tr = 1,42 min; MS (ESlpos): m/z = 253 [M+H]+.
Exemplo 3
4-piridin-3-il-2-[5-(trifluormetil)piridin-2-il]-1,2-dihidro-3H-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 51</formula>
O composto é preparado de maneira análoga ao exemplo 2 apartir de 580 mg (3,00 mmols) do composto do exemplo 2A e 558 mg (3,00mmols) de 2-hidrazino-5-(trifluormetil)piridina.Rendimento; 55 mg (6% da teoria)HPLC (método 6): Tr =3,7 min.MS (ESlpos): m/z = 307 [M+H]+
RMN-1H (do produto de adição de etanol) (300 MHz, DMSO-d6): δ = 13,3 (s,1H), 9,14 (d, 1H), 8,86 (d, 1H), 8,66 (d, 1H); 8,60 (s, 1H), 8,31-8,41 (m, 3H),7,40 (dd, 1H), 4,36 (s, 1H), 3,45 (q, 2H), 1,05 (t, 3H).
Exemplo 4
Éster terc.-butílico de ácido 2-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1/-/-pirazol-1-il)isonicotínicoO composto é preparado de maneira análoga ao exemplo 2 apartir de 500 mg (2,59 mmols) do composto do exemplo 2A e 662 mg (2,85mmols) de éster terc.-butílico de ácido 2-hidrazino-isonicotínico. Obtêm-se288 mg (33% da teoria) do composto do título como sólido amarelo.
RMN-1H (300 MHz, CDCI3): δ = 12,7 (br, s, 1H), 8,97 (d, 1H), 8,47-8,41 (m,3H), 8,03 (dt, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,76 (dd, 1H), 7,32 (dd, 1H), 1,64 (s, 9H),LC-MS (método 5): Tr= 1,75 min; MS (ESlpos): m/z = 339 [M+H]+,
Exemplo 5
4-piridin-3-il-2-[4-(trifluormetil)piridin-2-il]-1,2-dihidro-3/-/-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 52</formula>
O composto é preparado de maneira análoga ao exemplo 2 apartir de 18 mg (0,09 mmol) do composto do exemplo 2A e 18 mg (0,10mmol) de 2-hidrazino-4-(trifluormetil)piridina [R.A. Evans, C. Wentrup, J.Chem. Soe. Chem. Commun. 15, 1062-1064 (1992)]. Obtêm-se 11,7 mg(41% da teoria) do composto do título como sólido amarelo.RMN-1H (400 MHz1 CDCI3): δ = 12,6 (br, s, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,53 (d, 1H),8,46 (d, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,01 (d, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,32 (dd, 1H).
LC-MS (método 5): Tr= 1.50 min; MS (ESlpos): m/z = 307 [M+H]+.
Exemplo 6
2-piridin-2-il-4-piridin-3-il-1,2-dihidro-3H-pirazol-3-ona<formula>formula see original document page 53</formula>
3,95 g (13,9 mmols) do composto do exemplo 3A sãopreviamente introduzidos em 80 ml de etanol anidro, sob argônio e àtemperatura ambiente adicionados aos poucos com 945 mg (13,9 mmols) deetanolato de sódio. Depois de agitar por 30 minutos, são gotejados 13,9 mlde ácido clorídrico 1 Μ. O precipitado separado é aspirado, lavado cometanol frio (20 ml) e com água (2 vezes, 20 ml cada) e secados no vácuo.Obtêm-se 2,80 g (85% da teoria) do composto do título.
RMN-1H (400 MHz, CDCI3): δ = 13,5 (br, s, 1H), 8,97 (d, 1H), 8,44 (dd, 1H),8,34 (d, 1H), 8,05-7,91 (m, 3H), 7,87 (s, 1H), 7,31 (dd, 1H), 7,25 (m, 1H),HPLC (método 6): Tr= 3,00 min.MS (DCI): m/z = 239 [M+H]+.
Exemplo 7
5,06 g (19,9 mmols) do composto do exemplo 16A e 4,34 g (39,7mmols) de 2-hidrazinopiridina são agitados em 100 ml de ácido acéticoglacial por 2 horas à temperatura ambiente. A preparação é concentrada, oresíduo é retomado em 300 ml de éster etílico de ácido acético e lavado comsolução de hidrogenocarbonato de sódio saturada (duas vezes, 100 mlcada). A fase orgânica é secada sobre sulfato de sódio, filtrada econcentrada. O resíduo obtido é retomado em 100 ml de etanol, comresfriamento em banho de gele é adicionado aos poucos com 1,49 g (21,9mmols) de etanolato de sódio e a preparação é agitada por 30 minutos aO0C. A solução de reação é adicionada a O0C com 22 ml de ácido clorídrico 1M e agitada por mais 30 minutos nesta temperatura. O precipitado formado éaspirado e lavado com etanol frio. Depois de secar no vácuo, obtêm-se 3,18g (59% da teoria) do composto do título.
RMN-1H (300 MHz, DMSO-d6): δ = 8,93 (s, 1H), 8,50 (d, 2H), 8,34 (d, 2H),8,05 (dd, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,36 (dd, 1H).
LC-MS (método 3): Tr = 2.27 min; MS (ESlpos): m/z = 273 [M+H]+.
Os exemplos enumerados na tabela 6 são preparados demaneira análoga ao exemplo 7 a partir dos produtos de partidacorrespondentes:
Tabela 6
<table>table see original document page 54</column></row><table>
Exemplo 11
5-[2-(4-metilpiridin-2-il)-3-oxo-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il]piridin-2-carbonitrila
<formula>formula see original document page 54</formula>
100 mg (0,35 mmol) do composto do exemplo 8, 81,9 mg (0,70mmol) de cianeto de zinco e 40,3 mg (0,03 mmol) detetraquis(trifenilfostino)paládio(0) são previamente introduzidos, sob argônio,em 4 ml de dimetilformamida anidra e a mistura de reação é agitada por 90minutos a 190°C com radiação de microondas (aparelho Single-ModeExplorer da firma CEM). A mistura de reação é aspirada através de terra deinfusórios, o resíduo lavado com dimetilformamida e o filtrado concentradono evaporador rotativo. O resíduo obtido dessa maneira é cromatografadoatravés de HPLC preparatória (coluna: YMC GEL ODS-AQ S-5/15 pm;gradiente: acetonitrila/água + 0,2% de TFA 10:90 95:5). O sólido obtidodas frações de produto combinadas é lavado com 6 ml de diclorometano,aspirado e secado no vácuo.
Rendimento: 7 mg (7% da teoria)
RMN-1H (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 9,23 (d, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,43 (dd, 1H),8,35 (d, 1H), 8,15 (S, 1H), 7,94 (d, 1H), 7,25 (d, 1H), 2,47 (s, 3H),LC-MS (método 3): Tr = 2,01 min; MS (ESlpos): m/z = 278 [M+H]+.
Exemplo 12
5-3-oxo-2-piridin-2-il-2,3-dihidro-1 H-pirazol-4-il)piridin-2-carbonitrila
<formula>formula see original document page 55</formula>
A preparação é efetuada de maneira análoga ao exemplo 11 apartir de 100 mg (0,37 mmol) do composto do exemplo 7.
Rendimento: 12 mg (12% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,27 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 8,50 (m, 2H),8,35 (d, 1H), 8,08 (dd, 1H), 7,97 (d, 1H), 7,38 (dd, 1H),
LC-MS (método 3): Tr = 1,70 min; MS (ESlpos): m/z = 264 [M+H]+.
Exemplo 13
4-(5-bromopiridin-3-il)-2-piridin-2-il-1,2-dihidro-3/-/-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 55</formula>
A síntese do composto do título é efetuada de maneira análogaao exemplo 7 a partir de 1,40 g (3,50 mmols) do composto do exemplo 17A.Rendimento: 345 mg (31% da teoria)
LC-MS (método 5): Tr= 2,24 min; MS(ESIpos): m/z = 319 [M+H]+.
Exemplo 14
5-(3-oxo-2-piridin-2-il-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-il)nicotinonitrila
<formula>formula see original document page 56</formula>
A preparação é efetuada de maneira análoga ao exemplo 11 apartir de 50 mg (0,16 mmol) do composto do exemplo 13.Rendimento: 20 mg (48% da teoria)
RMN-1H (300 MHz, DMSO-Cl6): δ = 9,40 (d, 1H), 8,76 (d, 1H), 8,72 (m, 1H),8,61 (s, 1H), 8,51 (d, 1H), 8,36 (d, 1H), 8,07 (dd, 1H), 7,37 (dd, 1H),LC-MS (método 3): Tr = 1,65 min; MS (ESlpos): m/z = 264 [M+H]+.
Exemplo 15
5-metil-2-piridin-2-il-4-piridin-3-il-1,2-dihidro-3/-/-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 56</formula>
22 μL de ácido acético glacial são acrescentados a uma soluçãode 58 mg (0,28 mmol) do composto do exemplo 18A e 34 mg (0,31 mmol) de2-hidrazinopiridina em 0,4 ml de etanol absoluto e a mistura é agitadadurante a noite à temperatura ambiente. São adicionados 19 mg de etilatode sódio, agitado por 30 minutos à temperatura ambiente e depois,neutralizado com ácido clorídrico 1 N. Após adicionar água, é extraído comdiclorometano, a fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtradae concentrada. O resíduo é misturado com éter diisopropílico e o sólido éaspirado. Após a secagem, obtêm-se 13,5 mg (19% da teoria) do compostodo título.
RMN-1H (400 MHz, CDCI3): δ = 13,28 (br, s, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,47 (d, 1H),8,30 (d, 1H), 7,95-7,86 (m, 3H), 7,33 (dd, 1H), 7,18 (t, 1H), 2,44 (s, 3H),LC-MS (método 1): Tr= 2,11 min; MS (ESlpos): m/z = 253 [M+H]+.
Exemplo 16
4-(6-hidroxipiridin-3-il)-2-piridin-2-il-1,2-dihidro-3H-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 57</formula>
50,0 mg (0,18 mmol) do composto do exemplo 7 e 600 mg (7,74mmols) de acetato de amônio são aquecidos como suspensão em 3 ml deácido acético glacial em um microondas single mode (Explorer da FirmaCEM) por 2 horas, a 180°C. Depois de se verificar uma completa conversãoatravés de HPLC analítica, acrescenta-se tolueno e destilam-se oscomponentes voláteis azeotropicamente. O resíduo é retomado em água e osólido remanescente é filtrado. Em seguida, o pó levemente acastanhado élavado com água e depois com MTBE. Depois da secagem, obtêm-se 39 mg(84% da teoria) do composto do título.
RMN-1 H (300 MHz1 DMSO-d6): δ = 12,7 (br, s, 1H), 11,58 (br, s, 1H), 8,47 (d,1H), 8,32 (m, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,01 (m, 2H), 7,87 (dd, 1H), 7,32 (dd, 1H),6,39 (d, 1H).
LC-MS (método 3): Tr= 1.31 min; MS (ESlpos): m/z = 255 [M+H]+.
Os exemplos enumerados na tabela 7 são preparados demaneira análoga ao exemplo 7 a partir dos produtos de partidacorrespondentes:
Tabela 7
<table>table see original document page 57</column></row><table><table>table see original document page 58</column></row><table>
[* Purificação do produto bruto através de HPLC preparatória (coluna: YMCGel ODS-AQ S-5/15 μητι; gradiente: acetonitrila/água + 0,2% de ácidotrifluoracético 10:90 -> 95:5)].
Exemplo 21
4-[6-(hidroximetil)piridin-3-il]-2-piridin-2-il-1,2-dihidro-3H-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 58</formula>
Em 20 ml de etanol introduzem-se previamente 73 mg (1,93mmol) de borohidreto de sódio e a O0C1 acrescentam-se 115 mg (1,03 mmol)de cloreto de cálcio. O composto do exemplo 20 (400 mg, 1,29 mmol) éacrescentado aos poucos e a preparação é agitada por 1 hora a O0C, depoispor 4 horas à temperatura ambiente. Para completar a reação, acrescentam-se mais 73 mg (1,93 mmol) de borohidreto de sódio e agita-se a preparaçãopor 20 horas à temperatura ambiente. Hidrolisa-se com 5 ml de água eacidifica-se fracamente com ácido clorídrico 1 N. Em seguida,a mistura éagitada por 1 hora à temperatura ambiente. Concentra-se, retoma-se oresíduo em cerca de 16 ml de mistura de dimetilformamida/água (1:1) epurifica-se aos poucos através de HPLC preparatória (coluna: YMC GelODS-AQ S-5/15 μιτι; gradiente: acetonitrila/água + 0,2% de ácidotrifluoracético 10:90 -> 95:5).
Rendimento: 332 mg (96% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,19 (s, 1H), 8,71 (d, 1H), 8,64 (s, 1H),8,51 (d, 1H), 8,37 (d, 1H), 8,09 (dd, 1H), 7,81 (d, 1H), 7,38 (dd, 1H), 4,77 (s, 2H).
LC-MS (método 3): Tr= 0.65 min; MS (ESlpos): m/z = 269 [M+H]+.
Exemplo 22
2-piridin-2-il-4-(6-trifluormetilpiridin-3-il)-1,2-dihidro-3/-/-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 59</formula>
261 mg (1,00 mmol) do composto do exemplo 41A e 115 mg(1,05 mmol) de 2-hidrazinopiridina são dissolvidos sob argônio em 5 ml deetanol anidro e a preparação é agitada por 20 horas à temperatura ambiente.
São acrescentados 68 mg (1,00 mmol) de etanolato de sódio, agitados por30 minutos à temperatura ambiente e depois é acrescentado 1 ml de ácidoclorídrico IMe pouco etanol, separando-se um precipitado. Este é filtrado,lavado com pouco etanol e secado no vácuo.
Rendimento: 180 mg (59% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSOd6): δ = 9,26 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,55 (d, 1H),8,51 (d, 1H), 8,35 (d, 1H), 8,05 (t, 1H), 7,87 (d, 1H), 7,37 (dd, 1H),LC-MS (método 4): Tr = 2,15 min; MS (ESlpos): m/z = 307 [M+H]+.
Exemplo 23
Cloridrato de 2-(5-hidroximetil-piridin-2-il)-4-piridin-3-il-1,2-dihidro-3/-/-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 59</formula>4,00 g (18,2 mmols) do composto do exemplo 42A, 2,70 g (19,4mmols) do composto do exemplo 34A e 450 mg (1,94 mmol) de ácidocanfero-10-sulfônico são dissolvidos em 120 ml de etanol anidro e apreparação é aquecida durante a noite ao refluxo. Depois do resfriamento, oprecipitado formado é aspirado, lavado com etanol e éter dietílico, suspensoem metanol, adicionado com um excesso de uma solução de cloreto dehidrogênio 4 N em 1,4-dioxano e novamente concentrado. O resíduo émisturado com uma mistura de metanol e diclorometano, aspirado e secado.Rendimento: 3,23 g (66% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,36 (s, 1H), 8,91 (d, 1H), 8,72 (s, 1H),8,61 (d, 1H), 8,45-8,43 (m, 1H), 8,36 (d, 1H), 8,04 (dd, 1H), 7,98 (dd, 1H),4,58 (s,2H).
LC-MS (método 1): Tr= 2.12 min; MS (ESlpos): m/z = 269 [M+H]+.
Os compostos enumerados na tabela 8 são preparados a partirdos produtos de partida correspondentes, de maneira análoga ao exemplo23. A purificação do respectivo precipitado pode ser efetuadaalternativamente por meio de HPLC preparatória (coluna RP18; solvente dedesenvolvimento: gradiente de acetonitrila/água, com ou sem adição de0,1% de ácido clorídrico concentrado).
Tabela 3
<table>table see original document page 60</column></row><table><table>table see original document page 61</column></row><table><table>table see original document page 62</column></row><table>
Exemplo 29
2-(4-cianopiridin-2-il)-4-piridin-3-il-1,2-dihidro-3H-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 62</formula>
545 mg (4,06 mmols) do composto do exemplo 33A e 1,07 g(4,88 mmols) do composto do exemplo 42A são agitados em 15 ml de ácidoacético glacial por 2 horas à temperatura ambiente. A preparação éconcentrada o resíduo é retomado em 300 ml de éster etílico de ácidoacético e lavado várias vezes com solução de hidrogenocarbonato de sódiosaturada. A fase orgânica é secada sobre sulfato de sódio, filtrada econcentrada. O resíduo é retomado em 30 ml de etanol, à temperaturaambiente é adicionado com 133 g (4,88 mmols) de uma solução a 25% deetanolato de sódio em etanol e agitada por 30 minutos. Mediante adição deácido clorídrico 1 M, ajusta-se um valor de pH de 5, aspira-se o sólidoformado, lava-se o mesmo com éter dietílico e seca-se no alto vácuo.Rendimento: 890 mg (83% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,01-8,98 (m, 2H), 8,54 (dd, 1H), 8,18 (dt,1H), 8,01 (dd, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,39 (dd, 1H), 7,14 (dd, 1H),LC-MS (método 5): Tr= 1,13 min; MS (ESlpos): m/z = 264 [M+H]+.
Exemplo 30
2-(5-cloropiridin-2H'l)-4-piridin-3H'l-1,2-dihiclro-3H-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 63</formula>
250 mg (1,74 mmol) do composto do exemplo 30A e 460 mg(2,09 mmols) do composto do exemplo 42A são agitados em 4 ml de ácidoacético glacial por 0,5 hora à temperatura ambiente. A preparação éconcentrada, o resíduo retomado em éster etílico de ácido acético e lavadovárias vezes com solução de hidrogenocarbonato de sódio saturada. A faseorgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. Oresíduo é retomado em 9 ml de etanol, adicionado à temperatura ambientecom 664 mg (2,44 mmols) de uma solução a 25% de etanolato de sódio emetanol e agitado por 1 hora. Mediante adição de ácido clorídrico 1 M, ajusta-se um valor de pH de 5, agita-se durante a noite à temperatura ambiente,aspira-se o sólido formado, lava-se o mesmo com água e seca-se no altovácuo.
Rendimento: 239 mg (50% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,04 (d, 1H), 8,51 (d, 1H), 8,39 (d, 1H),8,22 (dt, 1H), 8,10 (dd, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,92 (dd, 1H), 7,20 (dd, 1H),LC-MS (método 5): Tr = 1,33 min; MS (ESlpos): m/z = 273 [M+H]+.
Exemplo 31
2-(5-iodopiridin-2-il)-4-piridin-3-il-1,2-dihidro-3/-/-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 63</formula>
A síntese do composto do título é efetuada de maneira análogaao exemplo 30, a partir de 250 mg (1,06 mmol) do composto do exemplo32A e 281 mg (1,28 mmol) do composto do exemplo 42A.
Rendimento: 80 mg (21 % da teoria)RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,12 (s, 1Η), 8,70 (s, 1H), 8,54-8,46 (m,1 Η), 8,40-8,25 (m, 4H), 7,43-7,36 (m, 1H).
LC-MS (método 3): Tr= 1.44 min; MS (ESlpos): m/z = 365 [M+H]+.
Exemplo 32
2-(5-bromopiridin-2-il)-4-piridin-3-il-1,2-dihidro-3H-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 64</formula>
A síntese do composto do título é efetuada de maneira análogaao exemplo 30, a partir de 250 mg (1,33 mmol) do composto do exemplo31A e 351 mg (1,60 mmol) do composto do exemplo 42A.Rendimento: 166 mg (39% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,06 (d, 1H), 8,50 (d, 1H), 8,46 (s, 1H),8,24 (d, 1H), 8,16 (d, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,08 (dd, 1H), 7,24 (dd, 1H),LC-MS (método 5): Tr= 1,40 min; MS (ESlpos): m/z = 318 [M+H]+.
Exemplo 33
2-(5-bromo-4-metilpiridin-2-il)-4-piridin-3-il-1,2-dihidro-3/-/-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 64</formula>
300 mg (1,49 mmol) do composto do exemplo 29A e 392 mg(1,78 mmol) do composto do exemplo 42A são agitados por 36 horas àtemperatura ambiente em 7 ml de ácido acético glacial. A preparação éconcentrada, o resíduo retomado em éster etílico de ácido acético e lavadovárias vezes com solução de hidrogenocarbonato de sódio saturada. A faseorgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. Oresíduo é retomado em 13 ml de etanol, adicionado à temperatura ambientecom 566 mg (2,08 mmols) de uma solução a 25% de etanolato de sódio emetanol e agitado por 1 hora. Mediante adição de ácido clorídrico 1 M, ajusta-se um valor de pH de 5, concentra-se e purifica-se o resíduo por meio deHPLC preparatória (coluna RP19; solvente de desenvolvimento: gradiente deacetonitrila/água com adição de 0,1% de ácido clorídrico concentrado).Rendimento: 55 mg (11 % da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,41 (s, 1H), 8,99 (d, 1H), 8,86 (s, 1H),8,67 (d, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,03 (dd, 1H), 2,47 (s, 3H),LC-MS (método 3): Tr= 1,53 min; MS (ESlpos): m/z = 331 [M+H]+.
Exemplo 34
Cloridrato de 4-(6-cianopiridin-3-il)-2-(4-metilpiridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 65</formula>
50 mg (136 pmol) do composto do exemplo 24 são dissolvidosem 0,6 ml de 1-metil-2-pirrolidona, adicionados com 31,9 mg (272 μηιοΙ) decianeto de zinco e 15,7 mg (14 μιτιοΙ) de tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) eaquecidos por 30 minutos a 200°C no microondas. A mistura de reação éfiltrada através de terra de infusórios e eluída com metanol. Mediante adiçãode ácido clorídrico 1 Μ, o filtrado é ajustado para um valor de pH levementeacidificado, o precipitado é filtrado e este é purificado por meio de HPLCpreparatória (coluna RP18; solvente de desenvolvimento: gradiente deacetonitrila/água com adição de 0,1% de ácido clorídrico concentrado).
Rendimento: 13 mg (31% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSOd6): δ = 9,25 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,44 (d, 1H),8,36 (d, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,25 (d, 1H), 2,47 (s, 3H),LC-MS (método 4): Tr= 2,20 min; MS (ESlpos): m/z = 278 [M+H]+.
Exemplo 35
Dicloridrato de 2-[4-(4-aminometil)piridin-2-il]-4-piridin-3-il-1,2-dihidro-3H-pirazol-3-ona<formula>formula see original document page 66</formula>
100 mg (380 μιτιοΙ) do composto do exemplo 29 são dissolvidosem 10 ml de ácido acético glacial, adicionados com 50,0 mg de catalisador(10% de paládio sobre carvão) e agitados durante a noite com atmosfera dehidrogênio a pressão normal e temperatura ambiente. Em seguida, a misturade reação é filtrada, concentrada e o resíduo é purificado por meio de HPLCpreparatória (coluna RP18; solvente de desenvolvimento: gradiente deacetonitrila/água com adição de 0,1% de ácido clorídrico concentrado).
Rendimento: 64 mg (49% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-de): δ = 9,38 (s, 1H), 8,93 (d, 1H), 8,79 (s, 1H),8,75 (S, 3H), 8,64 (d, 1H), 8,56 (d, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,99 (dd, 1H), 7,54 (d,1H), 4,21 (q, 2H).
LC-MS (método 1): Tr = 1.39 min; MS (ESlpos): m/z = 268 [M+H]+.
Exemplo 36
Cloridrato de /V-{[2-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1 H-pirazol-1-il)piridin-4-il]metiljbutanamida
<formula>formula see original document page 66</formula>
80,0 mg (235 μιτιοΙ) do composto do exemplo 35 e 22,8 mg (259pmol) de ácido butíricò são dissolvidos em 5 ml de dimetilformamida, sobliofilização são adicionados com 119 mg (1,18 mmol) de trietilamina e 90,2mg (470 pmol) de cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida eagitados durante a noite à temperatura ambiente. Em seguida, a mistura dereação é diretamente purificada por meio de HPLC preparatória (colunaRP18; solvente de desenvolvimento: gradiente de acetonitrila/água comadição de 0,1% de ácido clorídrico concentrado).Rendimento: 7 mg (7% da teoria)
RMN-1H (400 MHz1 DMSO-d6): δ = 9,33-9,31 (m, 1H), 8.87 (d, 1H), 8,66 (s,1H), 8,61-8,56 (m, 2H), 8,43 (d, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,96 (dd, 1H), 7,26 (d, 1H),4,41 (d, 1H), 2,19 (t, 2H), 1,58 (sext, 2H), 0,90 (t, 3H).
LC-MS (método 1): Tr= 2.26 min; MS (ESlpos): m/z = 338 [M+H]+.
Exemplo 37
Cloridrato de A/-isopropil-/\/-{[2-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1 H-pirazol-1 -il)piridin-4-il]metil}uréia
<formula>formula see original document page 67</formula>
40,0 mg (470 μιηοΙ) de isopropilisocianato são dissolvidos sobargônio em 5 ml de dimetilformamida, adicionados com 80,0 mg (235 pmol)do composto do exemplo 35 e 71,4 mg (705 μιτιοΙ) de trietilamina e agitadosdurante a noite à temperatura ambiente. Em seguida, concentra-se epurifica-se o resíduo por meio de HPLC preparatória (coluna RP18; solventede desenvolvimento gradiente de acetonitrila/água com adição de 0,1% deácido clorídrico concentrado).
Rendimento: 80 mg (85% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,35 (s, 1H), 8,95 (d, 1H), 8,66 (s, 1H),8,59 (d, 1H), 8,42 (d, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,02 (dd, 1H), 7,27 (d, 1H), 6,55 (s,1H), 4,35 (s, 2H), 3,76-3,63 (m, 1H), 2,75 (s, 1H), 1,08-1,03 (m, 6H),LC-MS (método 1): Tr = 2,81 min; MS (ESlpos): m/z = 353 [M+H]+.
Exemplo 38
Cloridrato de A/-{[2-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1 /-/-pirazol-1-il)piridin-4-il]metil}metanossulfonamida<formula>formula see original document page 68</formula>
80,0 mg (235 μπιοΙ) do composto do exemplo 35 e 53,9 mg (470μmol) de cloreto de ácido metanossulfônicò são dissolvidos, sob argônio eliofilização, em 5 ml de dimetilformamida, adicionados com 152 mg (1,18mmol) de Λ/,/V-diisopropiletilamina e agitados durante a noite à temperaturaambiente. Em seguida, a mistura de reação é diretamente purificada pormeio de HPLC preparatória (coluna RP18; gradiente de acetonitrila/águacom adição de 0,1 % de ácido corídrico concentrado).
Rendimento: 31 mg (34% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSOd6): δ = 9,34 (s, 1H), 8,88 (d, 1H), 8,69 (s, 1H),8,59 (d, 1H), 8,47 (d, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,95 (dd, 1H), 7,89 (t, 1H), 7,36 (d,1H), 4,36 (d, 2H), 2,99 (s, 3H).
LC-MS (método 1): Tr= 2.35 min; MS (ESlpos): m/z = 346 [M+H]+.
Exemplo 39
Ácido 6-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1 H-pirazol-1 -il)-nicotínico
<formula>formula see original document page 68</formula>
1,49 g (4,81 mmols) do composto do exemplo 25 são dissolvidosem 60 ml de 1,4-dioxano, adicionados com 40 ml de uma solução dehidróxido de lítio aquosa 1 M e aquecidos por 1 hora ao refluxo. Em seguida,a mistura de reação é resfriada a O0C, ajustada com 40 ml de ácido clorídrico1 M para um valor de pH fracamente ácido e agitada por 2 horas a O0C. Oprecipitado formado é aspirado, lavado com água e éter dietílico e secado noalto vácuo.
Rendimento: 1,20 g (88% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,40 (s, 1H), 9,00-8,94 (m, 2H), 8,90 (s,1 Η), 8,66 (d, 1 Η), 8,60-8,54 (m, 1Η), 8,49 (dd, 1H), 8,02 (dd, 1H),LC-MS (método 3): Tr= 0,63 min; MS (ESlpos): m/z = 283 [M+H]+.
Exemplo 40
Cloridrato de /V-benzil-6-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1 H-pirazol-1 -il)-nicotinamida
<formula>formula see original document page 69</formula>
50 mg (177 μιηοΙ) do composto do exemplo 39 são dissolvidosem 2 ml de dimetilformamida, adicionados com 1,9 mg (16 μιτιοΙ) de 4-N1N-dimetilaminopiridina, 71,0 mg (549 pmol) de Λ/,/V-diisopropiletilamina e 98,0mg (188 pmol) de hexaf Iuorofosf ato de (benzotriazol-1-ilóxi)-tripirrolidinofosfônio e agitados por 15 minutos à temperatura ambiente. Sãoacrescentados 25,2 mg (235 μηιοΙ) de benzilamina e agitado por mais 5horas à temperatura ambiente. Para completar a conversão, sãoacrescentados mais 25 mg (235 pmol) de benzilamina e agitado durante anoite à temperatura ambiente. A mistura de reação é purificada por meio deHPLC preparatória (coluna RP18; solvente de desenvolvimento: gradiente deacetonitrila/água com adição de 0,1% de ácido clorídrico concentrado) ecromatografia instantânea posterior em sílica-gel (solvente dedesenvolvimento: gradiente de diclorometano/metanol), o produto bruto éprecipitado em metanol e o precipitado é novamente purificado por meio deHPLC preparatória (coluna RP18; solvente de desenvolvimento: gradiente deacetonitrila/água com adição de 0,1% de ácido clorídrico concentrado).
Rendimento: 21 mg (30% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,41 (s, 1H), 9,38-9,33 (m, 1H), 9,01 (s,1H), 8,95 (d, 1H), 8,87 (s, 1H), 8,64 (d, 1H), 8,56-8,49 (m, 2H), 7,99 (dd, 1H),7,38-7,32 (m, 4H), 7,30-7,24 (m, 1H), 4,53 (d, 2H).LC-MS (método 5): Tr= 1,50 mi.n; MS (ESlpos): m/z = 372 [M+H]+.
Exemplo 41
Ácido 2-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1 H-pirazol-1 -il)-isonicotínico<formula>formula see original document page 70</formula>
200 mg (760 μιτιοΙ) do composto do exemplo 29 são suspensosem uma mistura de 6 ml de etanol e 4 ml de água, adicionados com 0,6 mlde soda cáustica a 50% e aquecidos por 1 hora ao refluxo. Depois doresfriamento, é ajustado com ácido clorídrico 1 M para um valor de pHfracamente ácido e o precipitado é aspirado, lavado com água e secado.
Rendimento: 180 mg (84% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,11 (d, 1H), 8,86 (s, 1H), 8,62 (d, 1H),8,46 (s, 1H), 8,32 (dd, 1H), 8,28 (dt, 1H), 7,69 (dd, 1H), 7,36 (dd, 1H),LC-MS (método 1): Tr= 2,19 min; MS (ESlpos): m/z = 283 [M+Hf.
Exemplo 42
Éster metílico de ácido 2-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1/-/-pirazol-1-il)-isonicotínico
150 mg (531 pmol) do composto do exemplo 41 são dissolvidosem 20 ml de metanol, adicionados com 1 ml de ácido sulfúrico concentrado eaquecidos durante a noite ao refluxo. Depois do resfriamento, o precipitadoformado é aspirado, lavado com metanol e secado.
Rendimento: 117 mg (74% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,41 (d, 1H), 8,99-8,94 (m, 2H), 8,86 (s,1H), 8,71 (d, 1H), 8,66 (d, 1H), 8,01 (dd, 1H), 7,78 (dd, 1H), 3,96 (s, 3H),LC-MS (método 4): Tr = 1,03 min; MS (ESlpos): m/z = 297 [M+H]+.
Exemplo 43
Cloridrato de 2-[4-(hidroximetil)piridin-2-il]-4-piridin-3-il-1,2-dihidro-3/-/-pirazol-3-ona
<formula>formula see original document page 71</formula>
197 mg (1,77 mmol) de cloreto de cálcio e 319 mg (8,44 mmols)de borohidreto de sódio são previamente introduzidos em 26 ml de etanol, aO0C adicionados aos poucos com 50 mg (169 μιτιοΙ) do composto doexemplo 42 e agitados durante a noite à temperatura ambiente. Medianteadição de ácido clorídrico 1 M, a mistura de reação é ajustada para um valorde pH levemente ácido, concentrada e o resíduo é purificado por meio deHPLC preparatória (coluna RP18; solvente de desenvolvimento gradiente deacetonitrila/água com adição de 0,1% de ácido clorídrico concentrado).
Rendimento: 32 mg (63% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,34 (s, 1H), 8,93 (d, 1H), 8,66 (s, 1H),8,58 (d, 1H), 8,42 (d, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,00 (dd, 1H), 7,34 (d, 1H), 4,68 (s, 2H).
LC-MS (método 1): Tr = 2.14 min; MS (ESlpos): m/z = 269 [M+H]+.
Exemplo 44
Ácido 5-(3-oxo-2-piridin-2-il-2,3-dihidro-1/-/-pirazol-4-il)-nicotínico
<formula>formula see original document page 71</formula>
100 mg (380 μιτιοΙ) do composto do exemplo 14 são suspensosem uma mistura de 3 ml de etanol e 2 ml de água, adicionados com 0,3 mlde soda cáustica a 50% e aquecidos por 2 horas ao refluxo. Depois doresfriamento, o precipitado é aspirado, lavado com éter dietílico e secado.Rendimento: 50 mg (47% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.04 (d, 1H), 8.47-8.42 (m, 2H), 8.36-8.33(m, 2H), 7.75-7.70 (m, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.01 -6.97 (m, 1H).LC-MS (método 5): Tr= 1.28 min; MS (ESlpos): m/z = 283 [M+H]+.
Exemplo 45
N-metil-5-(3-oxo-2-piridin-2-il-2,3-dihidro-1
<formula>formula see original document page 72</formula>
45,0 mg (159 μηΊοΙ) do composto do exemplo 44 são dissolvidosem 1 ml de dimetilformamida, adicionados com 1,9 mg (16 pmol) de 4-N,N-dimetilaminopiridina, 24,7 mg (191 μιηοΙ) de A/,/V-diisopropiletilamina e 100mg (191 μηιοΙ) de hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-ilóxi)-tripirrolidinofosfônio e agitados por 15 minutos à temperatura ambiente. Sãoacrescentados 120 μΙ (239 μιτιοΙ) de uma solução 2 M de metilamina emtetrahidrofurano e agitado durante a noite à temperatura ambiente. Paracompletar a conversão, acrescentam-se mais 120 μΙ (239 μιτιοΙ) da solução 2M de metilamina em tetrahidrofurano e agita-se novamente durante a noite àtemperatura ambiente. A mistura de reação é purificada diretamente pormeio de HPLC preparatória (coluna RP18; solvente de desenvolvimento:gradiente de acetonitrila/água).
Rendimento: 23 mg (49% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,18 (s, 1H), 8,74 (d, 1H), 8,64-8,57 (m,2H), 8,53-8,44 (m, 2H), 8,40-8,25 (m, 1H), 8,09-8,03 (m, 1H), 7,40-7,34 (m,1H), 2,83 (d, 3H).
LC-MS (método 3): Tr = 1.21 min; MS (ESlpos): m/z = 296 [M+H]+.
Exemplo 46
Cloridrato de A/-{[2-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1 H-pirazol-1-il)piridin-4-il]metil}-2-fenilacetamida
<formula>formula see original document page 72</formula>80,0 mg (25 μηιοΙ) do composto do exemplo 35 e 35,2 mg (259pmol) de ácido fenilacético são dissolvidos em 5 ml de dimetilformamida,com liofilização, são adicionados com 119 mg (1,18 mmol) de trietilamina,90,2 mg (470 pmol) de cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida bem como 127 mg (941 pmol) de hidrato de 1-hidróxi-1H-benzotriazol e agitados durante a noite à temperatura ambiente. Oprecipitado é filtrado e o filtrado é purificado por meio de HPLC preparatória(coluna RP18; solvente de desenvolvimento: gradiente de acetonitrila/águacom adição de 0,1 % de ácido clorídrico concentrado).
Rendimento: 58 mg (57% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,38 (d, 1H), 8,97 (dt, 1H), 8,88 (t, 1H),8,72 (s, 1H), 8,62 (d, 1H), 8,41 (d, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,04 (dd, 1H), 7,36-7,29(m, 4H), 7,26-7,21 (m, 2H), 4,42 (d, 2H), 3,56 (s, 2H),LC-MS (método 3): Tr = 1,30 min; MS (ESlpos): m/z = 386 [M+H]+.
Exemplo 47
Cloridrato de /V-{[2-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1H-pirazol-1-il)piridin-4-il]metil}acetamida
<formula>formula see original document page 73</formula>
80,0 mg (235 pmol) do composto do exemplo 35 são dissolvidosem 5 ml dé dimetilformamida, com liofilização, são adicionados com 71,4 mg(705 pmol) de trietilamina e 20,3 mg (259 μιτιοΙ) de cloreto de acetila eagitados durante a noite. A mistura de reação é diretamente purificada pormeio de HPLC preparatória (coluna RP18; solvente de desenvolvimento:gradiente de acetonitrila/água com adição de 0,1% de ácido clorídricoconcentrado).
Rendimento: 33 mg (41 % da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSOd6): δ = 9,37 (s, 1H), 8,97 (d, 1H), 8,71 (s, 1H),8,68 (t, 1H), 8,61 (d, 1H), 8,43 (d, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,03 (dd, 1H), 7,28 (d,1 Η), 4,40 (d, 2Η), 1,95 (s,
LC-MS (método 1): Tr = 2.09 min; MS (ESlpos): m/z = 310 [M+H]+.
Exemplo 48
Cloridrato de /V-{[2-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1 H-pirazol-1 -il)piridin-4-il]metil}benzamida
<formula>formula see original document page 74</formula>
60,0 mg (176 μιηοΙ) do composto do exemplo 35 são dissolvidosem 4 ml de dimetilformamida, com liofilização, adicionados com 53,5 mg(529 μιηοΙ) de trietilamina e 27,3 mg (194 μιτιοΙ) de cloreto de benzoila eagitados durante a noite à temperatura ambiente. A mistura de reação édiretamente purificada por meio de HPLC preparatória (coluna RP18;solvente de desenvolvimento: gradiente de acetonitrila/água com adição de0,1 % de ácido clorídrico concentrado).
Rendimento: 36 mg (50% da teoria)
RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,35-9,29 (m, 2H), 8,91 (d, 1H), 8,68 (s,1H), 8,59 (d, 1H), 8,44 (d, 1H), 8,34 (s, 1H), 8,01 -7,92 (m, 3H), 7,62-7,48 (m,3H), 7,35 (d, 1H), 4,62 (d, 2H).
LC-MS (método 4): Tr= 1.07 min; MS (ESlpos): m/z = 372 [M+H]+.
Exemplo 49
/V-benzil-2-(5-oxo-4-pirÍdin-3-il-2,5-dihidro-1 /-/-pirazol-1-il)-isonicotinamida
<formula>formula see original document page 74</formula>
60,0 mg (213 pmol) do composto do exemplo 41 são dissolvidosem 24 ml de dimetilformamida, adicionados com 2,6 mg (21 pmol) de A-N,N-dimetilaminopiridina, 65,9 mg (510 μηιοΙ) de Λ/,AAdiisopropiIetiIamina e 265mg (510 μιτιοΙ) de hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-ilóxi)-tripirrolidinofosfônio e agitados por 45 minutos à temperatura ambiente. Sãoacrescentados 68,3 mg (638 μιτιοΙ) de benzilamina e é agitado durante anoite à temperatura ambiente. Para completar a conversão, sãoacrescentados mais 65,9 mg (510 μιτιοΙ) de Λ/,/V-diisopropiletilamina e 265mg (510 μιτιοΙ) de hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-ilóxi)-tripirrolidinofosfônio, é agitado por 45 minutos à temperatura ambiente,acrescentados mais 68,3 mg (638 μιτιοΙ) de benzilamina e em seguida,agitado durante a noite à temperatura ambiente. É concentrado e o resíduopurificado por meio de HPLC preparatória (coluna RP18; solvente dedesenvolvimento: gradiente de acetonitrila/água com adição de 0,1% deácido fórmico).
Rendimento: 35 mg (44% da teoria)
RMN-1 (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9,49 (t, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,79 (s, 1H),8,70-8,62 (m, 3H), 8,52 (d, 1H), 7,76-7,70 (m, 2H), 7,37-7,34 (m, 4H), 7,31-7,24 (m, 1H), 4,52 (d, 2H).
LC-MS (método 5): Tr = 1.57 min; MS (ESlpos): m/z = 372 [M+H]+.
Exemplo 50
3-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)-/\/-{[2-(5-oxo-4-piridin-3-il-2,5-dihidro-1 H-pirazol-1 -il)piridin-4-il]metil}propanamida
<formula>formula see original document page 75</formula>
17,5 mg (100 μιτιοΙ) de ácido 3-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)propanóico, 41,7 mg (130 μιτιοΙ) de tetrafluoroborato de 0-(benzotriazol-1-il)-/V,/V,A/',/\/'-tetrametilurônio e 20,2 mg (200 μιτιοΙ) de trietilamina sãodissolvidos em 0,2 ml de dimetilsulfóxido. Acrescenta-se uma solução de33,9 mg (100 μηιοΙ) do composto do exemplo 35 em 0,2 ml dedimetilsulfóxido e agita-se a mistura de reação durante a noite à temperaturaambiente. O precipitado formado é filtrado e o filtrado é purificado por meiode HPLC (método 8).
Rendimento: 5,8 mg (14% da teoria)
LC-MS (método 8): Tr= 1,20 min; MS (ESlpos): m/z = 424 [M+H]+.
Os compostos enumerados na tabela 9 são preparados demaneira análoga ao exemplo 50 a partir do exemplo 35 e os ácidoscarboxílicos correspondentes.
Tabela 9
<table>table see original document page 76</column></row><table><table>table see original document page 77</column></row><table><table>table see original document page 78</column></row><table>
[em relação ao exemplo 55: A síntese do material de partida ácido 3-(4-hidróxi-3,5-dimetilfenil)propiônico é descrita em J. Med. Chem. 1995, 38, 695-707],
B. Avaliação da eficácia farmacológica
As propriedades farmacológicas dos compostos de acordo coma invenção, podem ser mostradas nos seguintes ensaios:
Abreviações:
DMEM Dulbecco's Modified Eagle Médium
FCS Fetal Calf Serum
TMB 3,3',5,5'-tetrametilbenzidina
Tris tris(hidroximetil)-aminometano
1. Testes in vitro para a determinação da atividade e seletividade deinibidores de HIF-prolil-4-hidroxilase
1.a) Inibição da atividade de HIF-prolil-hidroxilase
HIF hidroxilada liga-se especificamente ao complexo Hippel-Lindau Protein-Elongin B-Elongin C (complexo VBC). Essa interação sóocorre, quando a HIF está hidroxilada a um radical prolila conservado. Ela éa base para a determinação bioquímica da atividade HIF-prolil-hidroxilase. Oteste é efetuado tal como descrito [Oehme F., Jonghaus W., Narouz-Ott L.,HuetterJ., Flamme I., Anal. Biochem. 330 (1), 74-80 (2004)]:
Uma placa de microtitulação clara de 96 furos (Fa. Pierce)revestida com NeutrAvidin HBC é incubada por 30 minutos com caseínabloqueadora. Em seguida, a placa é lavada três vezes com 200 μΙ cada detampão de lavagem (50 mM de Tris, pH 7,5, 100 mM de NaCI, 10% (v/v) decaseína bloqueadora, 0,05% (v/v) de Tween 20) por furo. O peptídeo biotina-DLDLEMLAPYIPMDDDFQL (Fa. Eurogentec1 4102 Seraing1 Bélgica) éacrescentado em uma concentração de 400 nM em 100 μΙ de tampão delavagem. Este peptídeo serve como substrato para a prolil-hidroxilação e éligado à placa de microtitulação. Após incubação de 60 minutos, a placa élavada três vezes com tampão de lavagem, incubada por 30 minutos com 1mM de biotina na caseína bloqueadora e depois lavada novamente comtampão de lavagem.
Para efetuar a reação de prolil-hidroxilase, o substrato depeptídeo ligado à placa é incubado por 1 até 60 minutos com um Iisado decélulas contendo prolil-hidroxilase. A reação realiza-se em 100 μΙ de tampãode reação (20 mM de tris, pH 7,5, 5 mM de KCI, 1,5 mM de MgCI2, 1 μΜ-1mM de 2-oxo-glutarato, 10 μΜ de FeSO4, 2 mM de ascorbato) à temperaturaambiente. Além disso, a mistura de reação contém o inibidor da prolil-hidroxilase a ser testado em diferentes concentrações. A substância de testeé preferida, mas não é exclusivamente usada em concentrações entre 1 nMe 100 μΜ. A reação é interrompida através de tripla lavagem com tampão delavagem.
Para a determinação quantitativa da prolil-hidroxilação,acrescenta-se uma proteína de fusão, que contém tanto tioredoxina de E.coli, quanto também o complexo VBC, em 80 μΙ de tampão de ligação (50mM de tris, pH 7,5, 120 mM de NaCI). Depois de 15 minutos, sãoacrescentados 10 μΙ de uma solução de anticorpo anti-tioredoxina policlonalde coelho em tampão de ligação. Depois de mais 30 minutos, acrescentam-se 10 μΙ de uma solução de imunoglobulina anti-coelho acoplado comperoxidade de rábano em tampão de ligação. Após incubação de 30 minutosà temperatura ambiente, lava-se três vezes com tampão de lavagem, pararemoveer o complexo VBC ligado e anticorpo. Para determinar a quantidadede complexo VBC ligado, incuba-se por 15 minutos com TMB. A reaçãocolorida é concluída através da adição de 100 μΙ de ácido sulfúrico 1 M.
Através da medição da densidade ótica a 450 mn, determina-se aquantidade de complexo VBC ligado. Ela é proporcional à quantidade deprolina hidroxilada no substrato de peptídeo.
Para a detecção da prolil-hidroxilação, alternativamente pode serusado um complexo VBC acoplado com európio (Fa. Perkin Elmer). Nessecaso, a quantidade de complexo VBC ligado é determinado por fluorescênciaem tempo real. Além disso, é possível o uso de complexo VBC marcado com[35S]-metionina. Para esse fim, o complexo VBC pode ser preparado atravésde transcrição-translação in vitro no Iisado de reticulócitos.
Os compostos de acordo com a invenção, inibem a atividade daHIF-prolil-hidroxilase nesse teste com um valor IC5o de < 10 μΜ. Resultadosrepresentativos estão enumerados na tabela 10.
Tabela 10
<table>table see original document page 80</column></row><table>
1 .b) Teste funcional celular in vitro:
A quantificação da eficácia dos compostos de acordo com ainvenção, é efetuada com auxílio de uma linha de células recombinante. Acélula deriva originalmente de uma linha de células de carcinoma de pulmãohumano (A549, ATCC: American Type Culture, Collection, Manassas VA20108, EUA). A linha de células de teste é transfectada de maneira estávelcom um vetor, que contém o gene repórter da Photinus pyralis-Luciferase (aseguir mencionada Luciferase) sob o controle de um promotor mínimoartificial. O promotor mínimo consiste em dois elementos responsáveis pelahipóxia corrente acima de um box TATA [Oehme F., Ellinghaus P., Kolkhof-P., Smith T.J., Ramakrishnan S., Hütter J., Schramm M., Flamme I.,Biochem. Biophys. Res. Commun. 296 (2), 343-9 (2002)]. Com a ação dahipóxia (por exemplo, cultivo na presença de 1 % de oxigênio por 24 horas)ou com a ação de inibidores de dioxigenase não seletivos (por exemplo,desferroxamina em uma concentração de 100 μΜ, cloreto de cobalto emuma concentração de 100 μΜ ou éster N-oxalilglicindietílico em umaconcentração de 1 mM), a linha de células de teste produz luciferase, quepode ser detectada e quantificada com auxílio de reagentes debioluminescência apropriados (por exemplo, Steady-GIo® Luciferase AssaySystem, Promega Corporation, Madison, Wl 53711, EUA) e com umluminômetro apropriado.
Curso do teste: As células são chapeadas no dia antes do teste em umaquantidade exatamente medida de meio de cultura (DMEM, 10% de FCS, 2mM de glutamina) em placas de microtitulação com 384 ou 1536 furos emantidas em uma incubadora de células (96% de umidade atmosférica, 5%v/v de CO2, 37°C). No dia do teste, acrescentam-se as substâncias do testeao meio de cultura em concentrações escalonadas. Em preparações queservem como controle negativo, não se acrescentam substância de teste àscélulas. Como controle positivo para a determinação da sensibilidade dascélulas para inibidores, acrescenta-se por exemplo, desferroxamina em umaconcentração final de 100 μΜ. Seis até 24 horas após a transferência dassubstâncias de teste para os furos das placas de microtitulação, mede-se osinal luminoso resultante no luminômetro. Com base nos valores medidos, émontada uma relação do efeito da dose, que serve como base para umadeterminação da concentração semi-máxima do efeito (a seguir, designadocomo valor EC50).
Os compostos de acordo com a invenção, apresentam no testeaqui descrito, valores EC5O de < 30 μΜ. Resultados representativos sãoenumerados na tabela 11:Tabela 11
<table>table see original document page 82</column></row><table>
1 .c) Teste funcional celular in vitro para a modificação da expressão do gene:
Para examinar a expressão de mRNAs específicos em linhas decélulas humanas após o tratamento com substâncias de teste, sãocultivadas as seguintes linhas de células em placas com 6 ou 24 furos:células de hepatoma humanas (HUH, JCRB Cell Bank, Japão), fibroblastosrenais embrionários humanos (HEK/293, ATCC, Manassas, VA 20108,EUA), células de carcinoma cervical humanas (HeLa, ATCC, Manassas, VA20108, EUA), células endoteliais de veias do cordão umbilical humanas(HUVEC1Cambrex, East Rutheford, Nova Jersey 07073, EUA). 24 horasapós a adição das substâncias de teste, as células são lavadas com soluçãosalina tamponada com fosfato e desta obtém-se o RNA total com o uso deum método adequado (por exemplo, reagente Trizol®, Invitrogen GmbH,76131 Karlsruhe, Alemanha).
Para um experimento de análise típico, cada 1 pg do RNA totalobtido dessa maneira é digerido com DNase I e com o uso de uma reaçãode transcriptase reversa apropriada (ImProm-II Reverse TranscriptionSystem, Promega Corporation, Madison, Wl 53711, EUA) transfere-se paraum DNA complementar (cDNA). 2,5% da preparação de cDNA obtida dessamaneira, são usados em cada caso para a reação em cadeia de polimerase.O nível de expressão do mRNA dos genes a serem pesquisados, éexaminado por meio da real time quantitative polymerase chain reaction[TaqMan-PCR; Heid C.A., Stevens J., Livak K.J., Williams P.M., GenomeRes. 6 (10), 986-94 (1996)] com o uso de um instrumento de detecção deseqüência ABI Prism 7700 (Fa. Applied Biosystem, Inc.). As combinações deprimer-sondas usadas nesse caso, são geradas por meio do Primer Express1.5 Software (Fa. Applied Biosystem, Inc.). Nos seus pormenores, os mRNAsão examinados pela eritropoetina, carboanidrase IX, Iactatodehidrogenase
A e fator de crescimento de célula endotelial vascular.
Substâncias de acordo com a presente invenção, levam a umsignificativo aumento dependente de dose dos genes mRNA induzidos porhipóxia em células de origem humana.
2. Teste in vivo para comprovar o efeito no sistema cardiovascular
2.a) Teste in vivo para modificar a expressão do gene:
Compostos de teste dissolvidos nos solventes apropriados sãoadministrados a camundongos ou ratos ou por via oral através de aplicaçãode sonda esofágica, por via intraperitonial ou intravensa. Dosagens típicassão 0,1, 0,5, 1, 5, 10, 20, 50, 100 e 300 mg de substância por kg de pesocorporal e ministração. Animais de controle recebem apenas solventes. 4, 8ou 24 horas após a administração da substância de teste, os animais sãosacrificados com uma superdosagem de isofluran e posterior fratura dopescoço e os órgãos a serem examinados são removidos. Partes dos órgãossão congelados por choque em nitrogênio líquido. Das partes dos órgãosobtém-se o RNA total descrito como em B.1.a) e este é transferido para umcDNA. O nível de expressão dos mRNA dos genes a serem pesquisados éexaminado por meio da real time quantitative polymerase chain reaction[Ta1 Man-PCR; Heid C.A., Stevens J., Livak K.J., Williams P.M., GenomeRes. 6 (10), 986-94 (1996)] com o uso de um instrumento de detecção deseqüência ABI Prism 7700 (Fa. Applied Biosystems, Inc.).
Substâncias de acordo com a presente invenção, emcomparação com o controle do placebo após administração oral ouparenteral, levam a um significativo aumento dependente de dose dosmRNA da eritropoetina no rim.
2.b) Determinação do nível de erotropoetina no soro:
A substância do teste em um solvente apropriado é administradaa camundongos ou ratos ou por via intraperitonial ou oral uma a duas vezesao dia. Dosagens típicas são 0,1, 0,5, 1, 5, 10, 20, 50, 100 e 300 mg desubstância por kg de peso corporal e administração. Animais de controle doplacebo recebem apenas solventes. Antes da aplicação e quatro horas apósa última administração da substância, são colhidos 50 μΙ de sangue dosanimais, sob anestesia curta, do plexo venoso retroorbital ou da veia caudal.
O sangue é tornado não-coagulável mediante adição de lítio-heparina.
Através de centrifugação, obtém-se o plasma do sangue. O teor deeritropoetina no plasma do sangue é determinado com auxílio de umaELISA-eritropoetina (Quantikine® mouse Epo Immunoassay, R&D Systems,Inc., Minneapolis, EUA) de acordo com a instrução do fabricante. Os valoresmedidos são calculados em pg/ml com base em uma medição de referênciaexgida para eritropoetina de camundongo.
Substâncias de acordo com a presente invenção, apósadministração oral e parenteral, levam a um significativo aumentodependente de dose na eritropoetina do plasma comparado com o valor departida e do controle do placebo.
2.c) Determinação da composição celular do sangue periférico:
A substância de teste em um solvente apropriado é administradaaos camundongos ou ratos ou por via intraperitonial ou oral uma ou duasvezes ao dia durante vários dias. Dosagens típicas são, por exemplo, 0,1,0,5, 1, 5, 10, 20, 50, 100 e 300 mg de substância por kg de peso corporal eadministração. Animais de controle recebem apenas solventes. Ao final doensaio, colhe-se sangue dos animais, sob anestesia curta, do plexo venosodo canto do olho ou da veia caudal e através da adição de citrato de sódio,torna-se o sangue não-coagulável. Em um aparelho de medição eletrônicaapropriado, determinam-se as concentrações de eritrócitos, leucócitos etrombócitos nas amostras de sangue. A concentração dos reticulócitos édeterminada através de seleção microscópica de 1000 eritrócitos cada combase em esfregaços de sangue, que são tingidos com uma solução coloridaapropriada para esse fim (Fa. KABE Labortechnik, Nümbrecht). Para adeterminação do hematócrito, colhe-se sangue do plexo venoso retroorbitalpor meio de um capilar de hematrócrito e o valor do hematócrito, após acentrifugação do capilar, é lido manualmente em uma centrífuga apropriadapara este fim.
Substâncias de acordo com a presente invenção, apósadministração oral e parenteral, levam a um significativo aumentodependente de dose do hematócrito, do número de eritrócitos e dosreticulócitos em comparação com o valor de partida e do controle doplacebo.
C. Exemplos de concretização para composições farmacêuticas
Os compostos de acordo com a invenção, podem sertransformados da seguinte maneira em preparações farmacêuticas:
Comprimido:
Composição
100 mg do composto de acordo com a invenção, 50 mg delactose (monohidrato), 50 mg de amido de milho (natural), 10 mg depolivinilpirrolidona (PVP 25) (Fa. BASF, Ludwigshafen, Alemanha) e 2 mg deestearato de magnésio.
Peso do comprimido 212 mg. Diâmetro 8 mm, raio da curvatura 12 mm.
Preparação:
A mistura do composto de acordo com a invenção, Iactose eamido é granulada com uma solução a 5% (m/m) da PVP em água. Após asecagem, o granulado é misturado com estearato de magnésio por 5minutos. Essa mistura é prensada com uma prensa para comprimidos usual(formado do comprimido vide acima). Como diretriz para a prensagemutiliza-se uma força de pressão de 15 kN.
Suspensão aplicável por via oral:
Composição:
1000 mg do composto de acordo com a invenção, 1000 mg deetanol (96%), 400 mg de Rhodigel® (goma xantana da Fa. FMC1 Pensilvânia,EUA) e 99 g de água.
Uma dose única de 100 mg do composto de acordo com ainvenção, correspondem a 10 ml de suspensão oral.
Preparação:
O Rhodigel é suspenso em etanol, o composto de acordo com ainvenção é acrescentado à suspensão. A adição da água é efetuada comagitação. Agita-se por cerca de 6 horas até a conclusão do intumescimentodo Rhodigel.
Solução aplicável por via oral:
Composição:
500 mg do composto de acordo com a invenção, 2,5 g depolissorbato e 97 g de polietilenoglicol 400. 20 g de solução oralcorrespondem a uma dose única de 100 mg do composto de acordo com ainvenção.
Preparação:
O composto de acordo com a invenção, é suspenso na misturade polietilenoglicol e polisorbato com agitação. O processo de agitação éprosseguido até a completa dissolução do composto de acordo com ainvenção.
Solução intravenosa
O composto de acordo com a invenção, é dissolvido em umaconcentração abaixo da solubilidade de saturação em um solventefisiologicamente tolerável (por exemplo, solução de cloreto de sódioisotônica, solução de glicose a 5% e/ou solução de PEG 400 a 30%). Asolução é filtrada estéril e envasada em recipientes de injeção estéreis elivres de pirógenos.

Claims (15)

1. Composto da fórmula (I)<formula>formula see original document page 87</formula>na qualA representa CH ou N1R1 representa um substituinte selecionado da série (CrC6)-alquila,trifluormetila, halogênio, ciano, nitro, hidróxi, (CrC6)-alcóxi, amina, (CrCe)-alcoxicarbonila, hidroxicarbonila e -C(=0)-NH-R4, na qual (CrC6)-alquila,por seu lado, pode ser substituída por hidróxi, (CrC4)-alcóxi, amina, mono-(Ci-C4)-alquilamina, di-(Ci-C4)-alquilamina ou com um grupo da fórmula -NH-C(=0)-R5, -NH-C(=0)-NH-R6 ou -NH-SO2-R7, na qualR5 representa (Ci-C6)-alquila, que pode ser substituída por hidróxi, (CrC4)-alcóxi, fenila ou heteroarila com 5 ou 6 membros ou representa fenila, sendoque a fenila e heteroarila, por seu lado, podem ser substituídas em cadacaso uma até três vezes, igual ou diferente, com halogênio, ciano, (CrC4)-alquila, hidróxi, (CrC4)-alcóxi, trifluormetila ou trifluormetóxi,R6 representa (CrC6)-alquila, que pode ser substituída por hidróxi ou (CrC4)-alcóxieR7 representa (CrC6)-alquila eR4 representa hidrogênio ou (CrC6)-alquila, que pode ser substituída porhidróxi, (CrC4)-alcóxi ou fenila, sendo que fenila, por seu lado, pode sersubstituída por halogênio, ciano, (CrC4)-alquila, (CrC4)-alcóxi, trifluormetilaou trifluormetóxi,R2 representa um substituinte selecionado da série halogênio, ciano, nitro,(CrC6)-alquila, trifluormetila, hidróxi, (CrC6)-alcóxi, trifluormetóxi, amina,hidroxicarbonila e -C(=0)-NH-R8, na qual(CrC6)-alquila e (CrC6)-alcóxi, por seu lado, podem ser substituídas comhidróxi eR8 representa hidrogênio ou (Ci-C4)-alquila,m representa o número 0, 1 ou 2,η representa o número 0, 1, 2 ou 3,sendo que, no caso de R1 ou R2 ocorrerem várias vezes, seus significadospodem ser em cada caso iguais ou diferenteseR3 representa hidrogênio, (Ci-C6)-alquila ou (C3-C7)-cicloalquila,bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
2. Composto da fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, naqualA representa CH ou N1R1 representa um substituinte selecionado da série (Ci-C6)-alquila,trifluormetila, ciano, nitro, hidróxi, (CrC6)-alcóxi, amina, (CrCe)-alcoxicarbonila e hidroxicarbonila,R2 representa um substituinte selecionado da série halogênio, ciano, nitro,(CrC6)-alquila, trifluormetila, hidróxi, (CrC6)-alcóxi, trifluormetóxi, amina e hidroxicarbonila, na qual (CrC6)-alquila e (CrC6)-alcóxi, por seu lado,podem ser substituídas com hidróxi,m representa o número 0, 1 ou 2,η representa o número 0, 1, 2 ou 3,sendo que, no caso, de R1 ou R2 ocorrerem várias vezes, seus significadospodem ser em cada caso iguais ou diferenteseR3 representa hidrogênio, (CrC6)-alquila ou (C3-C7)-CiCloaIquiIa,bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
3. Composto da fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, naqualA representa CH,R1 representa um substituinte selecionado da série (CrC6)-alquila, flúor,cloro, bromo e -C(=0)-NH-R4, na qual (Ci-C6)-alquila, por seu lado, pode sersubstituída por hidróxi, (CrC4)-alcóxi, amina, mono-(CrC4)-alquilamina, di-(Ci-C4)-alquilamina ou com um grupo da fórmula -NH-C(=0)-R5, -NH-C(=0)-NH-R6 ou -NH-SO2-R7, na qualR5 representa (Ci-C6)-alquila, que pode ser substituída por hidróxi, metóxi,etóxi, fenila ou heteroarila com cinco membros ou fenila, sendo que a fenilae heteroarila, por seu lado, podem ser substituídas em cada caso uma atétrês vezes, igual ou diferente, com flúor, cloro, bromo, ciano, metila, hidróxi,metóxi, etóxi, trifluormetila ou trifluormetóxi eR6 e R7 independentes um do outro, representam (CrC6)-alquilaeR4 representa (CrC6)-alquila, que pode ser substituída por hidróxi, metóxi,etóxi ou fenila, sendo que a fenila, por seu lado, pode ser substituída porflúor, cloro, bromo, ciano, metila, metóxi, etóxi, trifluormetila ou trifluormetóxi,R2 representa um substituinte selecionado da série flúor, cloro, bromo, ciano,(CrC6)-alquila, trifluormetila, hidroxicarbonila e -C(=0)-NH-R8, na qual (CrC6)-alquila, por seu lado, pode ser substituída por hidróxi eR8 representa (CrC4)-alquila,m representa o número 0, 1 ou 2,η representa o número 0, 1 ou 2,sendo que, no caso, de R1 ou R2 ocorrerem várias vezes, seus significadospodem ser:em cada caso iguais ou diferentes eR3 representa hidrogênio,bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
4. Composto da fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1 ou 2, na qualA representa CH,R1 representa um substituinte selecionado da série (CrC6)-alquila,trifluormetila, nitro, (CrC4)-alcóxi, amina e (Ci-C4)-alcoxicarbonila,R2 representa um substituinte selecionado da série cloro, bromo, ciano, (CrC4)-alquila, trifluormetila, hidróxi, (CrC4)-alcóxi, trifluormetóxi e amina, sendoque (CrC4)-alquila e (CrC4)-alcóxi, por seu lado, podem ser substituídascom hidróxi,m representa o número 0 ou 1,η representa o número 0, 1, 2 ou 3,sendo que, no caso, de R1 ou R2 ocorrerem várias vezes, seus significadospodem ser em cada caso iguais ou diferenteseR3 representa hidrogênio ou metila,bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
5. Composto da fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1 ou-3, na qualA representa CH,R1 representa um substituinte selecionado da série (CrC4)-alquila, flúor,cloro, bromo e -C(=0)-NH-R4, na qual (CrC4)-alquila, por seu lado, pode sersubstituída por hidróxi, amina ou com um grupo da fórmula -NH-C(=0)-R5ou -NH-C(=0)-NH-R6, na qualR5 representa (CrC4)-alquila, que pode ser substituída por fenila oupirazolila ou fenila, sendo que a fenila e pirazolila, por seu lado, podem sersubstituída em cada caso, uma até três vezes, igual ou diferente, com flúor,cloro, metila ou trifluormetilaeR6 representa (CrC4)-alquilaER4 representa (C-i-C4)-alquila, que pode ser fenila substituídaR2 representa um substituinte selecionado da série cloro, bromo, ciano, (CrC4)-alquila e trifluormetila, sendo que (CrC4)-alquila, por seu lado, pode sersubstituída por hidróxi,m representa o número 0, 1 ou 2,η representa o número 0, 1 ou 2,sendo que, no caso, de R1 ou R2 ocorrerem várias vezes, seus significadospodem ser em cada caso iguais ou diferenteseR3 representa hidrogênio,bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
6. Composto da fórmula (I-A)<formula>formula see original document page 91</formula>na qual R1a representa hidrogênio, metila ou trifluormetilaeR2a, R2b e R2c são iguais ou diferentes e independentes uns dos outros,representam hidrogênio, cloro, bromo, ciano, metila, hidroximetila, metóxi ouetóxi,bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
7. Composto da fórmula (I-B)<formula>formula see original document page 91</formula>na qualRia e Rib são iguais ou diferentes e independentes uns dos outros,representam hidrogênio, flúor, cloro, (CrC4)-alquila ou -C(=0)-NH-R4, naqual (CrC4)-alquila, por seu lado, pode ser substituída por hidróxi, amina oucom um grupo da fórmula -NH-C(=0)-R5, na qualR4 Vepresenta (C1 -C4)alquila, que pode ser sustituída por fenilaR5 representa (CrC4)-alquila, que pode ser substituída por fenila oupirazolila ou fenila,sendo que a fenila e pirazolila, por seu lado, podem ser substituídas emcada caso, uma até três vezes, igual ou diferente, com flúor, cloro, metila outrifluormetilaeR4 representa um substituinte selecionado da série cloro, bromo, ciano,metila, hidroximetila ou trifluormetilaeη representa o número 0, 1 ou 2,sendo que, no caso, de R2 ocorrer várias vezes, seus significados podem seriguais ou diferentes,bem como seus sais, solvatos e solvatos dos sais.
8. Processo para a produção de um composto da fórmula (I),.(I-A) ou (l-B), tal como definido nas reivindicações 1 até 7, caracterizado pelofato de que compostos da fórmula <formula>formula see original document page 92</formula> na qual R2, R3 e η têm em cada caso os significados mencionados nasreivindicações 1 até 7 eZ1 representa metila ou etila,são reagidos em um solvente inerte eventualmente na presença de um ácidocom um composto da fórmula (III) <formula>formula see original document page 92</formula> na qual A, R1 e m têm em cada caso os significados mencionados nasreivindicações 1 até 7,para formar compostos da fórmula (IV)<formula>formula see original document page 93</formula>na qual Z11 A, R11 R2, R31 m e η têm os significados mencionados acimae em seguida, esses são ciclizados com um solvente inerte na presença deuma base e os compostos da fórmula (I), (I-A) ou (I-B) são eventualmenteconvertidos com os (i) solventes e/ou (ii) bases correspondentes para seussolvatos, sais e/ou solvatos dos sais.
9. Processo para a produção de um composto da fórmula (I), (I-A) ou (I-B)1 tal como definido nas reivindicações 1 até 7, no qual R3representa hidrogênio, caracterizado pelo fato de que inicialmentecompostos da fórmula (V)<formula>formula see original document page 93</formula>na qual R2 e η têm em cada caso os significados mencionados nasreivindicações 1 até 7 eZ1 representa metila ou etila,são condensados com um composto da fórmula (VI)<formula>formula see original document page 94</formula>na qualZ2 representa metila ou etila,para formar compostos da fórmula (VII)<formula>formula see original document page 94</formula>na qual Z11 R2 e η têm os significados mencionados acima,em seguida, são reagidos na presença de um ácido com um composto dafórmula (III)<formula>formula see original document page 94</formula>na qual A, R1 e m têm em cada caso os significados mencionados nasreivindicações 1 até 7,para formar compostos da fórmula (IV-A)<formula>formula see original document page 95</formula> na qual Z1, A, R11 R2, m e η apresentam os significados mencionados acimae então, esses são ciclizados em um solvente inerte na presença de umabase.
10. Composto, de acordo com uma das reivindicações 1 até 7,para o tratamento e/ou profilaxia de doenças.
11. Utilização de um composto, como definido em uma dasreivindicações 1 até 7, para a fabricação de um medicamento para otratamento e/ou profilaxia de doenças cardiovasculares, insuficiênciacardíaca, anemia, doenças renais crônicas e insuficiência renal.
12. Medicamento contendo um composto, como definido emuma das reivindicações 1 até 7, em combinação com um coadjuvante inerte,não-tóxico, farmaceuticamente apropriado.
13. Medicamento contendo um composto, tal como definido emuma das reivindicações 1 até 7, em combinação com uma outra substânciaativa selecionada do grupo constando em inibidores ACE, antagonistas doreceptor angiotensina II, bloqueador do receptor beta, antagonistas doreceptor mineralocorticóide, aspirina, diuréticos, suplementos de ferro,suplementos de vitamina B12 e de ácido fólico, antagonistas do cálcio,estatinas e derivados de Digitalis (digoxina).
14. Medicamento de acordo com a reivindicação 12 ou 13, parao tratamento e/ou profilaxia de doenças cardiovasculares, insuficiênciacardíaca, anemia, doenças renais crônicas e insuficiência renal.
15. Processo para o tratamento e/ou profilaxia de doençascardiovasculares, insuficiência cardíaca, anemia, doenças renais crônicas einsuficiência renal no homem e animais com a utilização de uma quantidadeeficaz de pelo menos um composto, tal como definido em uma dasreivindicações 1 até 7, ou de um medicamento, como definido em uma dasreivindicações 12 até 14.
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