BRPI0611597A2 - aminopirimidinas como moduladores de cinases - Google Patents

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Guozhang Xu
Christian Andrew Baumann
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Abstract

AMINOPIRIMIDINAS COMO MODULADORES DE CINASES. A invenção refere-se a compostos de aminopirimidina de fórmula I: onde R~3~, B, Z, r e R~1~ são como definidos neste relatório, ao uso destes compostos como moduladores da tirosina proteína cinase, particularmente inibidores de FLT3 e/ou c-kit e/ou TrkB, ao uso destes compostos para reduzir ou inibir a atividade de cinase de FLT3 e/ou c-kit e/ou TrkB em uma célula ou em um individuo, e ao uso destes compostos para prevenir ou tratar em um indivíduo um distúrbio proliferativo de células e/ou distúrbios relacionados a FLT3 e/ou c-kit e/ou TrkB. A presente invenção refere-se ainda a composições farmacêuticas compreendendo os compostos da presente invenção e a métodos para tratar condições tais como cânceres e similares distúrbios proliferativos de células.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "AMINOPIRIMIDINAS COMO MODULADORES DE CINASES".
Referência Cruzada a Pedidos Relacionados
Este pedido reivindica prioridade para o Pedido de Patente Pro-visório US N0 60/689,715, depositado em 10 de junho de 2005, e para o Pe-dido de Patente Provisório US N0 60/751,083, depositado em 16 de dezem-bro de 2005, cujos relatórios estão aqui incorporados em sua integridade atítulo de referência.
Campo da Invenção
A invenção refere-se a novos compostos que funcionam comomoduladores da tirosina proteína cinases. Mais particularmente, a invençãorefere-se a novos compostos que funcionam como inibidores de FLT3 e/ouc-kit e/ou TrkB.
Antecedentes da Invenção
A presente invenção refere-se a aminopirimidinas como inibido-res de tirosina cinases, incluindo FLT3, c-kit e/ou TrkB. Já foram reportadaspirimidinas com propriedades terapêuticas úteis: US 5104877 e WO 9214468(preparação de [(tetrazolilbifenil)metilamino]pirimidinacarboxilatos e compos-tos afins para o tratamento de psoríase); DE 10108480 e WO 2002068413(preparação de pirazolilpirimidinas como inseticidas); WO 2002050066, WO 2002066461, WO 2002068415, US 6653300, US 2003036543, US 6664247,US 2003055068, US 2003078275, US 6653301, US 2003105090, US 2003004164, US 6656939, US 2003022885, US 6727251, US 2004116454,US 2004157893, US 2004132781 e US 2004167141; (compostos pirazólicosúteis como inibidores de proteína cinases, e o uso terapêutico dos mesmos)US 6107301 e US 6342503 (preparação de 1-N-alquil-N-arilpirimidinaminascomo inibidores de CRF); WO 2001085700, WO 2001085700 e US 2003171374 (preparação de amino pirimidinas e triazinas substituídas comoinibidores da replicação de HIV); WO 2001085699, WO 2001085699 e US 2003186990 (preparação de pró-drogas de pirimidinas inibidoras da replica-ção de HIV); WO 2001022938 (preparação de azinilaminobenzonitrilas ecompostos afins como virucidas); WO 2000027825, US 2003114472 eUS 2004039005 (preparação de arilaminopirimidinas como inibidores da re-plicação de HIV); WO 2004058762, WO 2004058762 e US 2004152739(preparação de pirrolpiridinonas compostos inibidores da proteína cinase 2ativada por proteína cinase ativada por mitógeno); WO 2003094920 (com-postos microbicidas de pirimidina ou triazina para prevenir transmissão se-xual de HIV); WO 2004005283 e US 2004097531 (preparação de imidazolpi-rimidinas e compostos afins como inibidores da proteína cinase JNK); videtambém: Wardakhan, Wagnat W.; Fleita, Daisy H.; Mohareb1 Rafat M. Reac-tion of 4-aryl-3-thiosemicarbazides with phenyl isothiocyanate: a facile syn-thesis of thiazole, pyrazole and pyrimidine derivatives. Journal of the ChineseChemical Society (Taipei) (1999), 46(1), 97-104; e Taylor, Edward C.; Eh-rhart, Wendell A.; Tomlin, Clive O. S.; Rampal, Jang Β. A novel ring-switching amination: conversion of 4-amino-5-cyanopyrimidine to 4,6-diamino-5-cyanopyrimidine. Heterocycles (1987), 25(1), 343-5. Também dig-nos de nota: JP 9274290 (revelador e método para processamento de mate-rial fotográfico de halogeneto de prata); DE 10060412, WO 2002046151, eUS 2004082586 (3,4-dihidro-2H-pirróis como pesticidas); WO 2004039785 eUS 2004152896 (Processo para a preparação de compostos de pirrolidinilaetilamina via uma arila aminação mediada por cobre).
Proteína cinases são componentes enzimáticos das vias detransdução de sinais que catalisam a transferência do fosfato terminal deATP para formar o grupo hidróxido dos resíduos tirosina, serina e/ou treoni-na das proteínas. Por conseguinte, compostos que inibem as funções dasproteína cinases são ferramentas valiosas para avaliar as conseqüênciasfisiológicas da ativação de proteína cinases. A superexpressão ou expressãoinadequada de proteína cinases normais ou mutantes nos mamíferos temsido um tópico de estudo exaustivo e foi demonstrado que desempenha umpapel significativo no desenvolvimento de muitas doenças, que incluem dia-betes, angiogênese, psoríase, restenose, doenças oculares, esquizofrenia,artrite reumatóide, aterosclerose, doenças cardiovasculares e câncer. Osbenefícios cardiotônicos da inibição de cinases também estão sendo estu-dado. Em suma, inibidores de proteína cinases têm utilidade particular notratamento de doenças humanas e animais.
As tirosina cinases receptoras da família Trk, TrkA1 TrkB1 e TrkC,são os receptores sinalizadores que medeiam as ações biológicas dos hor-mônios peptídicos da família de neurotrofinas. Esta família de fatores decrescimento incluie fator de crescimento dos nervos (NGF), fator neurotróficoderivado do cérebro (BDNF)1 e duas neurotrofinas (NT)1 NT-3, e NT-4. TrkBserve como receptor para o BDNF e para a NT-4. O BDNF promove a proli-feração, diferenciação e sobrevivência dos componentes neurais normaistais como células retinais e células gliais.
Foi recentemente relatado (vide, Nature 2004 Aug 26; 430(7003): 973-4; 1034-40) que a ativação de TrkB é um supressor potente eespecífico da morte celular independente de ancoragem (anoiquia). A sobre-vivência celular independente de ancoragem permite que células tumorosasmigrem através da circulação sistêmica e cresçam em órgãos afastados.
Este processo metastático geralmente é responsável pelo fracasso do trata-mento de câncer e pode causar mortalidade em câncer. Outros estudos (vi-de Câncer Lett. 2003 Apr 10;193(1 ):109-14) também sugeriram que o ago-nismo de BDNF de TrkB é capaz de bloquear a morte celular induzida porcisplatina. Tomados juntos, esses resultados sugerem que a modulação deTrkB é um alvo atraente para o tratamento de doenças proliferativas benig-nas e malignas, especialmente doenças tumorais.
A tirosina cinase receptora c-kit e seu ligando fator de célula-tronco (SCF) são essenciais para hematopoiese, melanogênese e fertilidade.
O SCF age em vários níveis da hierarquia hematopoiética para promover asobrevivência, proliferação, diferenciação, adesão e ativação funcional celu-lares. Ele é de particular importância nas linhagens de mastócitos e eritrói-des, mas também age em células-tronco e células progenitoras multipoten-ciais, megacariócitos, e um subconjunto de progenitores de linfóides (videInt J Biochem Cell Biol. 1999 0ct;31(10):1037-51). Mutações esporádicasde c-kit assim como mecanismos de ativação autócrinos/parácrinos da viade SCF/c-kit também estão envolvidos em várias malignidades. A ativaçãode c-kit contribui para metástases aumentando o crescimento do tumor ereduzindo a apoptose. Além disso, c-kit é freqüentemente alterada e ativadaem tumores estromais gastrointestinais (GISTs), e a ativação de c-kit media-da por ligando está presente em alguns cânceres de pulmão (vide Leuk Res.2004 May;28 Suppl 1:S11-20). O receptor c-kit também é expresso em maisde 10% das células blásticas em 64% das Ieucemias mielogênicas agudasde novo (AMLs) e 95% das AMLs recorrentes. C-kit medeia a proliferação eos efeitos antiapoptóticos em AML (vide Curr Hematol Rep. 2005 Jan; 4(1): 51-8).
A expressão de c-kit já foi documentada em ampla variedade demalignidades humanas, que incluem mastocitose, leucemia de mastócitos,tumor estromal gastrointestinal, Iinfoma de células exterminadoras naturaissinonasais/linfoma de células T1 seminoma, disgerminoma, carcinoma detireóide; carcinoma microcelular de pulmão, melanoma maligno, carcinomacístico adenóide, carcinoma de ovário, leucemia mielogênica aguda, Iinfomade células grandes anaplásicas, angiossarcoma, carcinoma endometrial,ALL de células T pediátricas, linfoma, carcinoma de mama e carcinoma depróstata. Vide Heinrich, Michael C. et al. Review Article: Inhibition of KIT T-yrosine Kinase Activity: A Novel Molecular Approach to the Treatment of KIT-Positive Malignancies.
O ligando (FLT3L) da tirosina cinase 3 semelhante a fms (FLT3)é uma das citocinas que afetam o desenvolvimento das várias linhagenshematopoiéticas. Esses efeitos ocorrem através da ligação de FLT3L ao re-ceptor de FLT3, também chamado de cinase hepática fetal 2 (flk-2) e STK-1,uma tirosina cinase receptora (RTK) expressa células células-tronco e célu-Ias progenitoras hematopoiéticas. O gene FLT3 codifica uma RTK ligada àmembrana que desempenha um papel importante na proliferação, diferenci-ação e apoptose das células durante a hematopoiese normal. O gene FLT3é expresso principalmente por células progenitoras mielóides e linfóidesprematuras. Vide McKenna, Hilary J. et al. Mice Iacking flt3 Iigand have defi-cient hematopoiesis affecting hematopoietic progenitor cells, dendritic cells,and natural killer cells. Blood. Jun 2000; 95: 3489-3497; Drexler, H. G. & H.Quentmeier (2004). "FLT3: receptor and ligand." Growth Factors 22(2): 71-3.O ligando para FLT3 é expresso pelas células estromais da me-dula e outras células e sinergiza com outros fatores de crescimento para es-timular a proliferação de células-tronco, células progenitoras, células dendrí-ticas, e células exterminadoras naturais.
Distúrbios hematopoiéticos são distúrbios pré-malignos dessessistemas e incluem, por exemplo, os distúrbios mieIoproliferativos, tais comotrombocitemia, trombocitose essencial (ET), metaplasia mielóide angiogêni-ca, mielofibrose (MF), mielofibrose com metaplasia mielóide (MMM), mielofi-brose idiopática crônica (IMF)1 e policitemia vera (PV), as citopenias, e sín-dromes mielodisplásicas pré-malignas. Vide Stirewalt, D. L. & J. P. Radich(2003). "The role of FLT3 in haematopoietic malignancies." Nat Rev Câncer3(9): 650-65; Scheijen, B. & J. D. Griffin (2002). "Tyrosine kinase oncogenesin normal hematopoiesis and hematological disease." Oncogene 21(21):3314-33.
Malignidades hematológicas são cânceres do sistema de forma-ção de sangue e do sistema imunológico do sangue, e dos tecidos da medu-la óssea e tecidos linfáticos. Enquanto na medula óssea normal, a expressãode FLT3 é restrita às células progenitoras prematuras, nas malignidadeshematológicas, a FLT3 é expressa em níveis altos ou mutações de FLT3causam uma indução descontrolada do receptor de FLT3 e da via moleculardescendente, possivelmente ativação de Ras. Malignidades hematológicasincluem leucemias, Iinfomas (linfoma non-Hodgkin), doença de Hodgkin(também chamada de linfoma de Hodgkin), e mieloma - por exemplo, leu-cemia linfocítica aguda (ALL), leucemia mielóide aguda (AML), leucemiapromielocítica aguda (APL), leucemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mie-lóide crônica (CML), leucemia neutrofílica crônica (CNL), leucemia não dife-renciada aguda (AUL), linfoma de células grandes anaplásicas (ALCL), leu-cemia prolinfocítica (PML), leucemia mielomonocítica juvenila (JMML), ALLde células T adultas, AML com mielodisplasia de três linhagens (A-ML/TMDS), leucemia de linhagem mista (MLL), síndromes mielodisplásicas(MDSs), distúrbios mieloproliferativos (MPD), mieloma múltiplo, (MM) e sar-coma mielóide. Vide Kottaridis, P. D., R. E. Gale, et al. (2003). "Flt3 mutati-ons and leukaemia." Br J Haematol 122(4): 523-38. O sarcoma mielóidetambém está associado a mutações deFLT3. Vide Ansari-Lari1 Ali et al. FLT3mutations in myeloid sarcoma. British Journal of Haematology. 2004 Sep. 126(6):785-91.
Mutações de FLT3 foram detectadas em cerca de 30% dos pa-cientes com leucemia mielogênica aguda e em um pequeno número de pa-cientes com leucemia linfocítica aguda ou síndrome mielodisplásica. Pacien-tes com mutações de FLT3 tendem ter um prognóstico ruim, com tempos deremissão e sobrevida livre de doenças reduzidos. Existem dois tipos conhe-cidos de mutações de ativação de FLT3. Um é uma duplicação dos aminoá-cidos 4-40 na região de justamembrana (mutação ITD) do receptor (25 - 30%dos pacientes) e o outro é uma mutação pontual no domínio da cinase (5 - 7% dos pacientes). As mutações mais geralmente envolvem pequenas du-plicações em série dos aminoácidos no domínio de justamembrana do re-ceptor e resultam em atividade de tirosina cinase. A expressão de um recep-tor de FLT3 mutante em células de medula murina resulta em síndrome mie-loproliferativa letal, e estudos preliminares (Blood. 2002; 100: 1532-42) suge-rem que a FLT3 mutante coopera com outros oncogenes de leucemia paraconferir um fenótipo mais agressivo.
Tomados juntos, esses resultados sugerem que inibidores espe-cíficos das cinases FLT3 e c-kit individuais, e especialmente do grupo decinases compreendendo FLT3 e c-kit, apresentam um alvo atraente para otratamento de distúrbios hematopoiéticos e malignidades hematológicas.
Inibidores da cinase FLT3 conhecidos na literatura incluemAG1295 e AG1296; Lestaurtinib (também conhecido como CEP 701, antigoKT-5555, Kyowa Hakko1 licenciado para Cephalon); CEP-5214 e CEP-7055(Cephalon); CHIR-258 (Chiron Corp.); EB-IOe IMC-EB10 (ImCIone SystemsInc.); GTP 14564 (Merk Biosciences UK). Midostaurin (também conhecidocomo PKC 412 Novartis AG); MLN 608 (Millennium USA); MLN-518 (antigoCT53518, COR Therapeutics Inc., licenciado para Millennium Pharmaceuti-cals Inc.); MLN-608 (Millennium Pharmaceuticals Inc.); SU-11248 (PfizerUSA); SU-11657 (Pfizer USA); SU-5416 e SU 5614; THRX-165724 (Thera-vance Inc.); AMI-10706 (Theravance Inc.); VX-528 e VX-680 (Vertex Phar-maceuticals USA, licenciado para Novartis (SwitzerIand)1 Merck & Co USA);e XL 999 (Exelixis USA). Os Pedidos Internacionais PCT e os Pedidos dePatente US a seguir apresentam moduladores de cinases adicionais, inclusi-ve moduladores de FLT3: WO 2002032861, WO 2002092599, WO2003035009, WO 2003024931, WO 2003037347, WO 2003057690, WO2003099771, WO 2004005281, WO 2004016597, WO 2004018419, WO2004039782, WO 2004043389, WO 2004046120, WO 2004058749, WO2004058749, WO 2003024969 e Pedido de Patente US N0 20040049032.
Vide também Levis, M., K. F. Tse, et al. 2001 "A FLT3 tyrosinekinase inhibitor is selectively cytotoxic to acute myeloid Ieukemia blasts har-boring FLT3 internai tandem duplication mutations." Blood 98(3): 885-7; TseKF, et al. Inhibition of FLT3-mediated transformation by use of a tyrosinekinase inhibitor. Leukemia. 2001 Jul; 15(7):1001-10; Smith, B. Douglas et al.Single-agent CEP-701, a novel FLT3 inhibitor, shows biologic and clinicaiactivity in patients with relapsed or refractory acute myeloid leukemia Blood,May 2004; 103: 3669 - 3676; Griswold, Ian J. et al. Effects of MLN518, ADual FLT3 and KIT Inhibitor, on Normal and Malignant Hematopoiesis.Blood, Jul 2004; [Epub ahead of print]; Yee, Kevin W. H. et al. SU5416 andSU5614 inhibit kinase activity of wild-type and mutant FLT3 receptor tyrosinekinase. Blood, Sep 2002; 100: 2941 - 294; 0'Farrell, Anne-Marie et al.SU11248 is a novel FLT3 tyrosine kinase inhibitor with potent activity in vitroand in vivo. Blood, May 2003; 101: 3597- 3605; Stone, R.M. et al. PKC 412FLT3 inhibitor therapy in AML: results of a phase Il trial. Ann Hematol. 2004;83 Suppl 1:S89-90; e Murata, K. et al. Selective cytotoxic mechanism ofGTP-14564, a novel tyrosine kinase inhibitor in leukemia cells expressing aconstitutively active Fms-Iike tyrosine kinase 3 (FLT3). J Biol Chem. 2003Aug 29; 278(35):32892-8; Levis, Mark et al. Novel FLT3 tyrosine kinase in-hibitors. Expert Opin. Investing. Drugs (2003) 12(12) 1951-1962; Levis, Market al. Small Molecule FLT3 Tyrosine Kinase lnhibitors. Current Pharmaceuti-cal Design, 2004, 10, 1183-1193.
Sumário da InvençãoA presente invenção fornece novas aminopirimidinas (os com-postos de fórmula I) como moduladores das tirosina proteína cinases, parti-cularmente inibidores de FLT3 e/ou c-kit e/ou TrkB1 e ao uso desses com-postos para reduzir ou inibir a atividade de cinase de FLT3 e/ou c-kit e/ouTrkB em uma célula ou em um indivíduo, e ao uso desses compostos paraprevenir ou tratar em um indivíduo um distúrbio proliferativo de células e/oudistúrbios associados à FLT3 e/ou c-kit e/ou TrkB.
Ilustrativa da invenção é uma composição farmacêutica compre-endendo um composto de fórmula I e um veículo farmaceuticamente aceitá-vel. Uma outra ilustração da presente invenção é uma composição farma-cêutica preparada por mistura de qualquer um dos compostos de fórmula I eum veículo farmaceuticamente aceitável.
Outros aspectos e vantagens da invenção tornar-se-ão aparen-tes a partir da descrição detalhada da invenção a seguir e das reivindicações.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
DEFINIÇÕES
Conforme usado neste relatório, os termos a seguir têm os se-guintes significados (definições adicionais serão fornecidas onde necessárioem todo o relatório descritivo):
O termo "alquenila," seja usado isolado ou como parte de umgrupo substituinte, por exemplo, "C^alquenilaíaril)," refere-se a um radicalhidrocarboneto monovalente de cadeia reta ou ramificada parcialmente insa-turada tendo pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono, sendo que acadeia dupla deriva da remoção de um átomo de hidrogênio de cada um dedois átomos de carbono adjacentes de uma molécula alquila primitiva e oradical deriva da remoção de um átomo de hidrogênio de um único átomo decarbono. Os átomos podem estar orientados em torno da ligação dupla naconformação eis (Z) ou trans (E) . Radicais alquenila típicos incluem, porémsem limitação, etenila, propenila, alila (2-propenil), butenila e similares. E-xemplos incluem grupos C2-salquenila ou C2^alquenila.
O termo "Ca-/)" (onde a e b são inteiros referentes ao número de-signado de átomos de carbono) refere-se a um radical alquila, alquenila, al-quinila, alcóxi ou cicloalquila ou à porção alquila de um radical no qual alqui-la aparece como o prefixo da raiz contendo de a a b átomos de carbono in-clusive. Por exemplo, C1.4 denota um radical contendo 1, 2, 3 ou 4 átomosde carbono.
O termo "alquila," seja usado isolado ou como parte de um gru-po substituinte, refere-se a um radical hidrocarboneto monovalente de ca-deia reta ou ramificada saturada, onde o radical deriva da remoção de umátomo de hidrogênio de um único átomo de carbono. A menos que especifi-camente indicado (por exemplo pelo uso de um termo Iimitativo tal como "á-tomo de carbono terminal"), as variáveis substituintes podem ser colocadasem qualquer átomo da cadeia de carbonos. Radicais alquila típicos incluem,porém sem limitação, metila, etila, propila, isopropila e similares. Exemplosincluem grupos C1-Salquila, Ci-6alquila e C1^alquila.
O termo "alquilamino" refere-se a um radical formado pela re-moção de um átomo de hidrogênio do nitrogênio de uma alquilamina, tal co-mo butilamina, e o termo "dialquilamino" refere-se a um radical formado pelaremoção de um átomo de hidrogênio do nitrogênio de uma amina secundá-ria, tal como dibutilamina. Em ambos os casos espera-se que o ponto deligação ao resto da molécula seja o átomo de nitrogênio.
O termo "alquinila" seja usado isolado ou como parte de umgrupo substituinte, refere-se a um radical hidrocarboneto monovalente decadeia reta ou ramificada parcialmente insaturada tendo pelo menos umaligação tripla carbono-carbono, sendo que a ligação tripla deriva da remoçãode dois átomos de hidrogênio de cada um de dois átomos de carbono adja-centes de uma molécula alquila primitiva e 0 radical deriva da remoção deum átomo de hidrogênio de um único átomo de carbono. Radicais alquinilatípicos incluem etinila, propinila, butinila e similares. Exemplos incluem gru-pos C2-Salquinila ou C2^alquinila.
O termo "alcóxi" refere-se a um radical álcool de hidrocarbonetomonovalente de cadeia reta ou ramificada saturada ou parcialmente insatu-rada derivado da remoção do átomo de hidrogênio do substituinte oxigêniode hidróxido em um alcano, alqueno ou alquina de origem. Onde são dese-jados níveis específicos de saturação, a nomenclatura "alcóxi", "alquenilaóxi"e "alquinilóxi" é usada de forma consistente com as definições de alquila,alquenila e alquinila. Exemplos incluem grupos Ci-ealcóxi ou Ci-4alcóxi.
O termo "alcoxiéter" refere-se a um radical álcool de hidrocar-boneto monovalente de cadeia reta ou ramificada saturada derivado da re-moção do átomo de hidrogênio dó substituinte oxigênio de hidróxido em umhidroxiéter. Exemplos incluem grupos 1-hidroxil-2-metóxi-etano ou 1-(2-hi-droxil-etóxi)-2-metóxi-etano.
O termo "aralquila" refere-se a um grupo C-i-6 alquila contendoum substituinte arila. Exemplos incluem benzila, feniletila ou 2-naftilmetila.Espera-se que o ponto de ligação ao resto da molécula seja o grupo alquila.
O termo "aromático" refere-se a um sistema de anel hidrocar-boneto cíclico tendo um sistema de elétrons õ conjugado e insaturado.
O termo "arila" refere-se a um radical de anel hidrocarbonetocíclico aromático derivado da remoção de um átomo de hidrogênio de umúnico átomo de carbono do sistema de anel. Radicais arila típicos incluemfenila, naftalenila, fluorenila, indenila, azulenila, antracenila e similares.
O termo "arilamino" refere-se a um grupo amino, tal como amô-nia, substituído com um grupo arila, tal como fenila. Espera-se que o pontode ligação ao resto da molécula seja através do átomo de nitrogênio.
O termo "arilóxi" refere-se a um radical átomo de oxigênio subs-tituído com um grupo arila, tal como fenila. Espera-se que o ponto de ligaçãoao resto da molécula seja através do átomo de oxigênio.
O termo "cicloalquila benzofundida" refere-se a um radical sis-tema de anel fundido bicíclico onde um dos anéis é fenila e o outro é um a-nel cicloalquila ou cicloalquenila. Radicais cicloalquila benzofundidas típicosincluem indanila, 1,2,3,4-tetrahidro-naftalenila, 6,7,8,9-tetrahidro-5/-/-benzoci-cloheptenila, 5,6,7,8,9,10-hexahidro-benzociclooctenila e outros. Um sistemade anel cicloalquila benzofundida é um subconjunto do grupo arila.
O termo "heteroarila benzofundida" refere-se a um radical sis-tema de anel fundido bicíclico onde um dos anéis é fenila e o outro é um a-nel heteroarila. Radicais heteroarila benzofundidas típicos incluem indolila,indolinila, isoindolila, benzo[ô]furila, benzo[b]tienila, indazolila, benztiazolila,quinolinila, isoquinolinila, cinnolinila, ftalazinila, quinazolinila, e similares. Umanel heteroarila benzofundida é um subconjunto do grupo heteroarila.
O termo "heterociclila benzofundida" refere-se a um radicalsistema de anel fundido bicíclico onde um dos anéis é fenila e o outro é umanel heterociclila. Radicais heterociclila benzofundidas típicos incluem 1,3-benzodioxolila (também conhecido como 1,3-metilenodioxifenil), 2,3-dihidro-1,4-benzodioxinila (também conhecido como 1,4-etilenodioxifenil), benzo-dihidro-furila, benzo-tetrahidro-piranila, benzo-dihidro-tienila e similares.
O termo "carboxialquila" refere-se a um grupo carbóxi alquiladotal como terc-butoxicarbonila, onde o ponto de ligação ao resto da moléculaé o grupo carboníla.
O termo "heterodionila cíclica" refere-se a um composto hete-rocíclico contendo dois substituintes oxo. Exemplos incluem tiazolidinadioni-Ia, oxazolidinadionila e pirrolidinadionila.
O termo "cicloalquenila" refere-se a um radical cicloalquila par-cialmente insaturado derivado da remoção de um átomo de hidrogênio deum sistema de anel hidrocarboneto que contém pelo menos uma ligaçãodupla carbono-carbono. Exemplos incluem ciclohexenila, ciclopentenila e1,2,5,6-ciclooctadienila.
O termo "cicloalquila" refere-se a um radical anel hidrocarbone-to monocíclico ou bicíclico saturado ou parcialmente insaturado derivado daremoção de um átomo de hidrogênio de um único átomo de carbono. Radi-cais cicloalquila típicos incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclopen-tenila, ciclohexila, ciclohexenila, cicloheptila and ciclooctila. Exemplos adi-cionais incluem Cs-ecicloalquila, C5-8cicloalquila, C3-i2Cicloalquila, C3-20CÍ-cloalquila, decahidronaftalenila, e 2,3,4,5,6,7-hexahidro-1 H-indenila.
O termo "sistema de anel fundido" refere-se a uma moléculabicíclico onde dois átomos adjacentes estão presentes em cada uma dasduas porções cíclicos. Heteroátomos podem opcionalmente estar presentes.
Exemplos incluem benzotiazol, 1,3-benzodioxol e decahidronaftaleno.O termo "hetero" usado como prefixo para um sistema de anelrefere-se à substituição de pelo menos um átomo de carbono do anel comum ou mais átomos independentemente selecionados de N, S, O ou P. E-xemplos incluem anéis onde 1, 2, 3 ou 4 membros do anel são um átomo denitrogênio; ou, O, 1, 2 ou 3 membros do anel são átomos de nitrogênio e 1membro é um átomo de oxigênio ou enxofre.
O termo "heteroaralqüila" refere-se a um grupo C-i-6 alquila con-tendo um substituinte heteroarila. Exemplos incluem furilmetila e piridilpropi-la. Espera-se que o ponto de ligação ao resto da molécula seja o grupo alquila.
O termo "heteroarila" refere-se a um radical derivado da remo-ção de um átomo de hidrogênio de um átomo de carbono do anel de um sis-tema de anel heteroaromático. Radicais heteroarila típicos incluem furila,tienila, pirrolila, oxazolila, tiazolila, imidazolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazo-lila, oxadiazolila, triazolila, tiadiazolila, piridinila, piridazinila, pirimidinila, pira-zinila, indolizinila, indolila, isoindolila, benzo[t»]furila, benzo[b]tienila, indazoli-la, benzimidazolila, benztiazolila, purinila, 4/-/-quinolizinila, quinolinila, isoqui-nolinila, cinnolinila, ftalzinila, quinazolinila, quinoxalinila, 1,8-naftiridinila, pte-ridinila e similares.
O termo "cicloalquila heteroarila-fundida" refere-se a um radi-cal sistema de anel fundido bicíclico onde um dos anéis é cicloalquila e ooutro é heteroarila. Radicais cicloalquila heteroaril-fundido típicos incluem 5,6,7,8-tetrahidro-4H-ciclohepta(£>)tienila, 5,6,7-trihidro-4H-ciclohexa(£>)tieni-la, 5,6-dihidro-4H-ciclopenta(£>)tienila e similares.
O termo "heteroarilóxi" refere-se a um radical átomo de oxigê-nio substituído com um grupo heteroarila, tal como piridila. Espera-se que oponto de ligação ao resto da molécula seja através do átomo de oxigênio.
O termo "heterociclila" refere-se a um radical anel monocíclicosaturado ou parcialmente insaturado derivado da remoção de um átomo dehidrogênio de um único átomo do anel de carbono ou nitrogênio. Radicaisheterociclila típicos incluem 2/-/-pirrol, 2-pirrolinila, 3-pirrolinila, pirrolidinila, 1,3-dioxolanila, 2-imidazolinila (também chamado 4,5-dihidro-1 H-imidazolil),imidazolidinila, 2-pirazolinila, pirazolidinila, tetrazolila, piperidinila, 1,4-dioxa-nila, morfolinila, 1,4-ditianila, tiomorfolinila, 1,1 dióxido tiomorfolinila, pipera-zinila, azepanila, hexahidro-1,4-diazepinila e similares.
O termo "oxo" refere-se a um radical átomo de oxigênio; o refe-rido átomo de oxigênio tendo duas valências abertas que são ligadas aomesmo átomo, mais preferivelmente um átomo de carbono. O grupo oxo éum substituinte apropriado para um grupo alquila. Por exemplo, propanocom um substituinte oxo é acetona ou propionaldeído. Heterociclos tambémpodem ser substituídos com um grupo oxo. Por exemplo, oxazolidina comum substituinte oxo é oxazolidinona.
O termo "substituído" refere-se a uma molécula de núcleo naqual um ou mais átomos de hidrogênio foram substituídos por uma ou maisporções tipo radical funcional. A substituição não é limitada a uma moléculade núcleo, mas também pode ocorrer em um radical substituinte, com o queo radical substituinte passa a ser um grupo de ligação.
O termo "independentemente selecionado" refere-se a um oumais substituintes selecionados de um grupo de substituintes, onde os subs-tituintes podem ser iguais ou diferentes.
A nomenclatura do substituinte usada na descrição da presenteinvenção foi criada indicando primeiro o átomo que tem o ponto de ligação,seguido dos átomos do grupo de ligação no sentido do átomo da cadeia ter-minal da esquerda para a direita, substancialmente como em:
(Ci-6)alquilC(0)NH(Ci.6)alquil(Ph)ou indicando primeiro o átomo da cadeia terminal, seguido dos átomos dogrupo de ligação no sentido do átomo que tem o ponto ligação, substancial-mente como em:
Ph(Ci-6)alquilamido(Ci-6)alquila
sendo que qualquer uma delas se refere a um radical da fórmula:
<formula>formula see original document page 14</formula>
As linhas representadas nos sistemas de anel dos substituintesindicam que a ligação pode estar presa a qualquer dos átomos do anel ade-quados.
Quando qualquer variável (por exemplo R4) ocorre mais de umavez em qualquer modalidade da fórmula I, cada definição deve ser conside-rada independente.
Os termos "compreendendo", "incluindo", e "contendo" são usa-dos neste relatório em seu sentido amplo, não limitado.
NOMENCLATURA
Exceto onde indicado, os nomes dos compostos foram criadosusando normas de nomenclatura bastante conhecidas pelos especialistas natécnica, seja por referências à nomenclatura IUPAC convencional, tais comoNomenclature of Organic Chemistry, Sections A, B1 C, D, E, F and H, (Per-gamon Press, Oxford, 1979, Copyright 1979 IUPAC) e A Guide to IUPACNomenelature of Organie Compounds (Reeommendations 1993), (BlackwellScientific Publications, 1993, Copyright 1993 IUPAC); ou por pacotes desoftware comercialmente disponíveis tais como Autonom (marca de softwarede nomenclatura fornecida no pacote comercial ChemDraw Ultra® comercia-lizado por CambridgeSoft.com); e ACD/Index Name® (marca de software denomenclatura comercial comercializado por Advanced Chemistry Develop-ment, Inc., Toronto, Ontário).
ABREVIAÇÕES
Conforme usado neste relatório, as seguintes abreviações têmos significados a seguir (abreviações adicionais são fornecidas onde neces-sário em todo o relatório descritivo):
ATP trifosfato de adenosinaBoc terc-butoxicarbonilDCM diclorometanoDMF dimetilformamidaDMSO sulfóxido dimetilaDIEA diisopropiletilaminaDTT ditiotreitolEDC cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimidaEDTA ácido etilenodiaminatetraacéticoEtOAc acetato etila
FBS soro bovino fetal
FP polarização da fluorescência
GM-CSF fator estimulante de colônias de granulócitos e macrófagos
HBTU Hexafluorfosfato de 0-benzotriazol-1-il-N,N,N\N'-tetrametilurônio
HOBT hidrato de 1 -hidroxibenzotriazol
HPpCD hidroxipropila β-ciclodextrina
HRP peroxidase de rábano silvestre
/'-PrOH álcool isopropílico
LC/MS (ESI) cromatografia líquida/espectro de massa (ionização por eletro-aspersão)
MeOH álcool metílico
NMM /V-metilmorfolina
RMN ressonância magnética nuclear
PS poliestireno
PBS solução salina tamponada com fosfato
RPMI Rosewell Park Memorial Institute
RT temperatura ambiente
RTK tirosina cinase receptora
NaHMDS hexametildissilazano de sódio
SDS-PAGE eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecila sulfatode sódio
TEA trietilamina
TFA ácido trifluoracético
THF tetrahidrofurano
TLC cromatografia em camada fina
FÓRMULA
A presente invenção compreende compostos de fórmula I:<formula>formula see original document page 17</formula>
e N-óxidos, sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, isômeros geométri-cos e isômeros estereoquímicos do mesmo, onde:r é 1 ou 2;
Z é NH1 N(alquila), ou CH2;
B é fenila, heteroarila (onde a referida heteroarila é de preferên-cia pirrolila, furanila, tiofenila, imidazolila, tiazolila, oxazolila, piranila, tiopira-nila, piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridinil-N-óxido, ou pirrolil-N-óxido, emais preferivelmente pirrolila, furanila, tiofenila, imidazolila, tiazolila, oxazoli-la, piridinila, pirimidinila, ou pirazinila), ou um heteroarila benzofundida denove a dez membros (onde o referido heteroarila benzofundida de nove adez membros é de preferência benzotiazolila, benzooxazolila, benzoimidazo-lila, benzofuranila, indolila, quinolinila, isoquinolinila, ou benzo[b]tiofenila);
<formula>formula see original document page 17</formula>
onde η é 1, 2, 3 ou 4;
Ra é hidrogênio, alcóxi, fenóxi, fenila, heteroarila opcionalmentesubstituída com R5 (onde o referido heteroarila é de preferência pirrolila, fu-ranila, tiofenila, imidazolila, tiazolila, oxazolila, piranila, tiopiranila, piridinila,pirimidinila, triazolila, pirazinila, piridinil-N-óxido, ou pirrolil-N-óxido, e maispreferivelmente pirrolila, furanila, tiofenila, imidazolila, tiazolila, oxazolila, piri-dinila, pirimidinila, triazolila, ou pirazinila), hidroxila, amino, alquilamino, dial-quilamino, oxazolidinonila opcionalmente substituída com R5, pirrolidinonilaopcionalmente substituída com R5, piperidinonila opcionalmente substituídacom R5, heterodionila cíclica opcionalmente substituída com R5, heterociclilaopcionalmente substituída com R5 (onde o referido heterociclila é de prefe-rência pirrolidinila, tetrahidrofuranila, tetrahidrotiofenila, imidazolidinila, tiazo-lidinila, oxazolidinila, tetrahidropiranila, tetrahidrotiopiranila, tiomorfolinila,tiomorfolinil-1,1 -dióxido, piperidinila, morfolinila, ou piperazinila), -COORy,-CONRwRx, -N(Rw)CON(Ry)(Rx), -N(Ry)CON(Rw)(Rx), -N(Rw)C(O)ORx,-N(Rw)CORy, -SRy, -SORy, -SO2Ryi -NRwSO2Ry, -NRwSO2Rx, -SO3Ry,-OSO2NRwRx, ou -SO2NRwRx;
Rw e Rx são independentemente selecionados de: hidrogênio,alquila, alquenila, aralquila (onde a porção arila do referido aralquila é depreferência fenila), ou heteroaralquila (onde a porção heteroarila da referidaheteroaralquila é de preferência pirrolila, furanila, tiofenila, imidazolila, tiazoli-la, oxazolila, piranila, tiopiranila, piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridinil-N-óxido, ou pirrolil-N-óxido, e mais preferivelmente pirrolila, furanila, tiofenila,imidazolila, tiazolila, oxazolila, piridinila, pirimidinila, ou pirazinila), ou Rw e Rxpodem ser opcionalmente tomados juntos para formar um anel de 5 a 7membros, opcionalmente contendo uma heteroporção selecionada de O,NH, N(alquila), SO2, SO, ou S, de preferência selecionada do grupo que con-siste em:
Ry é selecionado de: hidrogênio, alquila, alquenila, cicloalquila(onde o referido cicloalquila é de preferência ciclopentanila ou ciclohexanila),fenila, aralquila (onde a porção arila do referido aralquila é de preferênciafenila), heteroaralquila (onde a porção heteroarila da referida heteroaralquilaé de preferência pirrolila, furanila, tiofenila, imidazolila, tiazolila, oxazolila,piranila, tiopiranila, piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridinil-N-óxido, ou pirro-lil-N-óxido, e mais preferivelmente pirrolila, furanila, tiofenila, imidazolila, tia-zolila, oxazolila, piridinila, pirimidinila, ou pirazinila), ou heteroarila (onde oreferido heteroarila é de preferência pirrolila, furanila, tiofenila, imidazolila,tiazolila, oxazolila, piranila, tiopiranila, piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridi-nil-N-óxido, ou pirrolil-N-óxido, e mais preferivelmente pirrolila, furanila, tiofe-
<formula>formula see original document page 18</formula>nila, imidazolila, tiazolila, oxazolila, piridinila, pirimidinila, ou pirazinila);
R5 é um, dois ou três substituintes independentemente selecio-nados de: halogênio, ciano, trifluormetila, amino, hidroxila, alcóxi, -C(O) al-quila, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2l alquila, C(i.4)alquil-OH, ou alquilamino; e
R3 é um ou mais substituintes independentemente selecionadosde: hidrogênio, alquila, alcóxi, halogênio, alcoxiéter, hidroxila, tio, nitro, ciclo-alquila opcionalmente substituída com R4 (onde o referido cicloalquila é depreferência ciclopentanila ou ciclohexanila), heteroarila opcionalmente subs-tituída com R4 (onde o referido heteroarila é de preferência pirrolila, furanila,tiofenila, imidazolila, tiazolila, oxazolila, piranila, tiopiranila, piridinila, pirimidi-nila, triazolila, pirazinila, piridinil-N-óxido, ou pirrolil-N-óxido; e mais preferi-velmente pirrolila, furanila, tiofenila, imidazolila, tiazolila, oxazolila, piridinila,pirimidinila, triazolila, ou pirazinila), alquilamino, heterociclila opcionalmentesubstituída com R4 (onde o referido heterociclila é de preferência tetrahidro-piridinila. tetrahidropirazinila, dihidrofuranila, dihidrooxazinila, dihidropirrolila,dihidroimidazolila, azepenila, pirrolidinila, tetrahidrofuranila, tetrahidrotiofenila,imidazolidinila, tiazolidinila, oxazolidinila, tetrahidropiranila, tetrahidrotiopiranila,piperidinila, morfolinila, ou piperaziníla), -O(cicloalquila), pirrolidinonila opcio-nalmente substituída com R4, fenóxi opcionalmente substituído com R4j -CN1-OCHF2, -OCF3i -CF3, alquila halogenado, heteroarilóxi opcionalmente subs-tituído com R4, dialquilamino, -NHS02alquila, tioalquila, ou -S02alquila; ondeR4 é independentemente selecionado de halogênio, ciano, trifluormetila, a-mino, hidroxila, alcóxi, -C(0)alquila, -C02alquila, -S02alquila, -C(0)N(al-quila)2, alquila, ou alquilamino.
Conforme usado abaixo, o termo "compostos de fórmula I" tam-bém inclui os N-óxidos, sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, isôme-ros geométricos e isômeros estereoquímicos do mesmo.
MODALIDADES DA FÓRMULA I
Em uma modalidade da presente invenção: N-óxidos estão op-cionalmente presentes em um ou mais de: N-1 ou N-3 (vide figura 1a abaixopara membros do anel).Figura 1a
<formula>formula see original document page 20</formula>
A figura 1a ilustra átomos do anel numerados de 1 a 8, conformeusado no presente relatório descritivo.
Em uma modalidade da presente invenção, o grupo oximina (-0-N=C-) na posição 5 pode ter a configuração Eou a configuração Z.
Constituem modalidades preferidas da invenção os compostosde fórmula I onde estão presentes uma ou mais das seguintes limitações:
r é 1 ou 2;
Zé NH1 N(alquila), ou CH2;
B é fenila ou heteroarila;
R1 é:
<formula>formula see original document page 20</formula>
onde η é 1, 2, 3 ou 4;
Ra é hidrogênio, alcóxi, fenóxi, fenila, heteroarila opcionalmentesubstituída com R5, hidroxila, amino, alquilamino, dialquilamino, oxazolidino-nila opcionalmente substituída com R5, pirrolidinonila opcionalmente substi-tuída com R5, piperidinonila opcionalmente substituída com R5, heterodionilacíclica opcionalmente substituído com R5, heterociclila opcionalmente substi-tuída com R5, -COORy, -CONRwRx, -N(Rw)CON(Ry)(Rx), -N(Ry)CON(Rw)(Rx),-N(Rw)C(O)ORx, -N(Rw)CORy, -SRy, -SORy, -SO2Ry, -NRwSO2Ry, -NRwSO2Rx,-SO3Ry -OSO2NRwRx, ou -SO2NRwRx;
Rw e Rx são independentemente selecionados de: hidrogênio,alquila, alquenila, aralquila, ou heteroaralquila, ou Rw e Rx podem ser opcio-nalmente tomados juntos para formar um anel de 5 a 7 membros, opcional-mente contendo uma heteroporção selecionada de O, NH, N(alquila), SO2,SO, ou S;
Ry é selecionado de: hidrogênio, alquila, alquenila, cicloalquila,fenila, aralquila, heteroaralquila, ou heteroarila;
R5 é um, dois ou três substituintes independentemente selecio-nados de: halogênio, ciano, trifluormetila, amino, hidroxila, alcóxi, -C(0)al-quila, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2, alquila, -C(i.4)alquil-0H, ou alquilamino;e
R3 é um ou mais substituintes independentemente selecionadosde: hidrogênio, alquila, alcóxi, halogênio, alcoxiéter, hidroxila, tio, nitro, ciclo-alquila opcionalmente substituída com R4, heteroarila opcionalmente substi-tuída com R4, alquilamino, heterociclila opcionalmente substituída com R4,-O(cicloalquila), pirrolidinonila opcionalmente substituída com R4, fenóxi op-cionalmente substituído com R4, -CN, -OCHF2, -OCF3, -CF3, alquila haloge-nado, heteroarilóxi opcionalmente substituído com R4, dialquilamino, -NHSO2alquila, tioalquila, ou -S02alquila; onde R4 é independentemente seleciona-do de: halogênio, ciano, trifluormetila, amino, hidroxila, alcóxi, -C(0)alquila,-CO2 alquila, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2, alquila, ou alquilamino.
Constituem outras modalidades preferidas da invenção os com-postos de fórmula I onde estão presentes uma ou mais das seguintes limitações:
r é 1 ou 2;
Zé NH ou CH2;
B é fenila ou heteroarila;
Ri é:
ν ;n
onde η é 1, 2, 3 ou 4;
Ra é hidrogênio, alcóxi, fenóxi, fenila, heteroarila opcionalmentesubstituída com R5, hidroxila, amino, alquilamino, dialquilamino, oxazolidino-nila opcionalmente substituída com R5, pirrolidinonila opcionalmente substi-tuída com R5, piperidinonila opcionalmente substituída com R5, heterodionilacíclica opcionalmente substituído com R5, heterociclila opcionalmente substi-tu ida com R5l -COORyi -CONRwRx, -N(Rw)CON(Ry)(Rx), -N(Ry)CON(Rw)(Rx)1-N(Rw)C(O)ORx, -N(Rw)CORy, -SRy, -SORy, -SO2Ry, -NRwSO2Ry, -NRwSO2Rx,-SO3Ry, -OSO2NRwRx, ou -SO2NRwRx;
Rw e Rx são independentemente selecionados de: hidrogênio,alquila, alquenila, aralquila, ou heteroaralquila, ou Rw e Rx podem ser opcio-nalmente tomados juntos para formar um anel de 5 a 7 membros, opcional-mente contendo uma heteroporção selecionada de O, NH, N(alquila), SO2,SO1 ou S;
Ry é selecionado de: hidrogênio, alquila, alquenila, cicloalquila,fenila, aralquila, heteroaralquila, ou heteroarila;
R5 é um, dois ou três substituintes independentemente selecio-nados de: halogênio, ciano, trifluormetila, amino, hidroxila, alcóxi, -C(0)alquila, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2, alquila, -C(i.4)alquil-OH, ou alqui-lamino; e
R3 é um ou mais substituintes independentemente selecionadosde: hidrogênio, alquila, alcóxi, halogênio, alcoxiéter, hidroxila, cicloalquilaopcionalmente substituída com R4, heteroarila opcionalmente substituídacom R4, heterociclila opcionalmente substituída com R4, -O(cicloalquila),fenóxi opcionalmente substituído com R4, heteroarilóxi opcionalmente subs-tituído com R4, dialquilamino, ou -S02alquila; onde R4 é independentemen-te selecionado de halogênio, ciano, trifluormetila, amino, hidroxila, alcóxi, -C(0)alquila, -C02alquila, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2, alquila, ou alquilami-no.
Constituem ainda outras modalidades preferidas da invenção oscompostos de fórmula I onde estão presentes uma ou mais das seguinteslimitações:
r é 1 ou 2;
Zé NH ou CH2;
B é fenila ou heteroarila;
R1 é:
<formula>formula see original document page 22</formula>
onde η é 1, 2, 3 ou 4;Ra é hidrogênio, alcóxi, heteroarila opcionalmente substituídacom R5, hidroxila, amino, alquilamino, dialquilamino, oxazolidinonila opcio-nalmente substituída com R5, pirrolidinonila opcionalmente substituída comR5, heterociclila opcionalmente substituída com R5, -CONRwRx, -N(Rw)CON(Ry)(Rx)1 -N(Ry)CON(Rw)(Rx), -N(Rw)C(O)ORx, -N(Rw)CORy, -SO2Ry, -NRwSO2Ry, ou -SO2NRwRx;
Rw e Rx são independentemente selecionados de: hidrogênio,alquila, alquenila, aralquila, ou heteroaralquila, ou Rw and Rx podem ser op-cionalmente tomados juntos para formar um anel de 5 a 7 membros, opcio-nalmente contendo uma heteroporção selecionada de O, NH, N(alquila),SO2, SO, ou S;
Ry é selecionado de: hidrogênio, alquila, alquenila, cicloalquila,fenila, aralquila, heteroaralquila, ou heteroarila;
R5 é um, dois ou três substituintes independentemente selecio-nados de: halogênio, ciano, trifluormetila, amino, hidroxila, alcóxi, -C(0)al-quila, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2, alquila, -C(i.4)alquil-OH, ou alquilamino;e
R3 é um ou mais substituintes independentemente seleciona-dos de: hidrogênio, alquila, alcóxi, halogênio, alcoxiéter, hidroxila, cicloal-quila opcionalmente substituída com R4, heteroarila opcionalmente substi-tuída com R4, heterociclila opcionalmente substituída com R4, -0(cicloal-quila), fenóxi opcionalmente substituído com R4, heteroarilóxi opcional-mente substituído com R4, dialquilamino, ou -S02alquila; onde R4 é inde-pendentemente selecionado de halogênio, ciano, trifluormetila, amino,hidroxila, alcóxi, -C(0)alquila, -C02alquilá, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2,alquila, ou alquilamino.
Constituem modalidades particularmente preferidas da invençãoos compostos de fórmula I onde estão presentes uma ou mais das seguinteslimitações:
r é 1;
Z é NH ou CH2;
B é fenila ou heteroarila;<formula>formula see original document page 24</formula>
onde η é 1, 2, 3 ou 4;
Ra é hidrogênio, hidroxila, amino, alquilamino, dialquilamino, he-teroarila, heterociclila opcionalmente substituída com R5, -CONRwRx, -SO2Ry,-NRwSO2Ry, -N(Ry)CON(Rw)(Rx), ou -N(Rw)C(O)ORx;
Rw e Rx são independentemente selecionados de: hidrogênio,alquila, alquenila, aralquila, ou heteroaralquila, ou Rw e Rx podem ser opcio-nalmente tomados juntos para formar um anel de 5 a 7 membros, opcional-mente contendo uma heteroporção selecionada de O, NH1 N(alquila), SO,SO2, ou S;
Ry é selecionado de: hidrogênio, alquila, alquenila, cicloalquila,fenila, aralquila, heteroaralquila, ou heteroarila;
R5 é um substituinte independentemente selecionado de: -C(O)alquila, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2, alquila, ou -C(i.4)alquil-OH; e
R3 é um substituinte independentemente selecionado de: alquila,alcóxi, halogênio, cicloalquila, heterociclila, -O(cicloalquila), fenóxi, ou dial-quilamino.
Constituem modalidades ainda mais particularmente preferidasda invenção os compostos de fórmula I onde estão presentes uma ou maisdas seguintes limitações:
r é 1 ;
Zé NH ou CH2;
B é fenila ou piridinila;
R1 é:
<formula>formula see original document page 24</formula>
onde η é 1, 2, 3 ou 4;
Ra é hidrogênio, dialquilamino, heterociclila opcionalmente subs-tituída com R5, -CONRwRx, -N(Ry)CON(Rw)(Rx), ou -NRwSO2Ry;
Rw e Rx são independentemente selecionados de: hidrogênio,alquila, alquenila, aralquila, heteroaralquila, ou Rw e Rx podem ser opcional-mente tomados juntos para formar um anel de 5 a 7 membros, opcionalmen-te contendo uma heteroporção selecionada de O, NH, N(alquila), SO2, SO, ou S;
Ry é selecionado de: hidrogênio, alquila, alquenila, cicloalquila,aralquila, heteroaralquila, ou heteroarila;
R5 é um substituinte independentemente selecionado de: -C(O)alquila, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2, alquila, ou C(i.4)alquil-OH; e
R3 é um substituinte independentemente selecionado de: alquila,alcóxi, heterociclila, cicloalquila, ou -O(cicíoalquila).
SAIS FARMACEUTICAMENTE ACEITÁVEIS
Os compostos da presente invenção também podem estar pre-sente na forma de sais farmaceuticamente aceitáveis.
Para uso em medicamentos, os sais dos compostos desta in-venção referem-se a "sais farmaceuticamente aceitáveis" atóxicos. As for-mas de sais farmaceuticamente aceitáveis aprovadas pelo FDA (Ref. Inter-national J. Pharm. 1986, 33, 201-217; J. Pharm. Sci., 1977, Jan, 66(1), p1)incluem sais ácidos/aniônicos ou básicos/catiônicos farmaceuticamente acei-táveis.
Sais ácidos/aniônicos farmaceuticamente aceitáveis incluem,porém sem limitação, acetato, benzenossulfonato, benzoato, bicarbonato,bitartarato, brometo, edetato de cálcio, camsilato, carbonato, cloreto, citrato,dicloridrato, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gliceptato, glucona-to, glutamato, glicolilarsanilato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromidrato,cloridrato, hidroxinaftoato, iodeto, isetionato, lactato, lactobionato, malato,maleato, mandelato, mesilato, metilbrometo, metilnitrato, metilsulfato, muca-to, napsilato, nitrato, pamoato, pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturo-nato, salicilato, estearato, subacetato, succinato, sulfato, tanato, tartarato,teoclato, tosilato e trietiodeto. Ácidos orgânicos ou inorgânicos também in-cluem, ps, ácido iodídrico, perclórico, sulfúrico, fosfórico, propiônico, glicóli-co, metanossulfônico, hidroxietanossulfônico, oxálico, 2-naftalenossulfônico,p-toluenossulfônico, ciclohexanossulfâmico, sacarínico ou trifluoracético.
Sais básicos/catiônicos farmaceuticamente aceitáveis incluem,porém sem limitação, alumínio, 2-amino-2-hidroximatil-propano-1,3-diol(também conhecido como tris(hidroximatila)aminometano, trometano ou"TRIS"), amônia, benzatina, f-butilamina, cálcio, gluconato de cálcio, hidróxi-do de cálcio, cloroprocaína, colina, bicarbonato de colina, cloreto de colina,ciclohexilamina, dietanolamina, etilenodiamina, lítio, LiOMe, L-lisina, magné-sio, meglumina, NH3, NH4OH, N-metil-D-glucamina, piperidina, potássio, t-butóxido de potássio, hidróxido de potássio (aquoso) procaína, quinina, só-dio, carbonato de sódio, sócio-2-etilhexanoato (SEH), hidróxido de sódio,trietanolamina (TEA) ou zinco.
PRÓ-DROGAS
A presente invenção inclui em seu escopo pró-drogas dos com-postos da invenção. Em geral, tais pró-drogas serão derivados funcionaisdos compostos que são facilmente conversíveis in vivo em um compostoativo. Portanto, nos métodos de tratamento da presente invenção, o termo"administrar" abrange os meios para tratar, melhorar ou prevenir uma sín-drome, distúrbio ou doença descrita neste relatório com um composto espe-cificamente descrito ou com um composto, ou pró-droga do mesmo, que ob-viamente está incluído no escopo da invenção ainda que não especificamen-te descrito para alguns dos presentes compostos. Procedimentos conven-cionais para a seleção e a preparação de derivados do tipo pró-droga ade-quados estão descritos, por exemplo, em "Desiqn of Prodrugs", ed. H. Bund-gaard, Elsevier, 1985.
ISÓMEROS ESTEREOQUÍMICOS
O especialista na técnica vai perceber que os compostos defórmula I podem ter um ou mais átomos de carbono assimétricos em suaestrutura. A presente invenção pretende incluir em seu escopo as formasenantioméricas simples dos compostos, misturas racêmicas, e misturas deenantiômeros nos quais está presente um excesso enantiomérico.
O termo "enantiômero simples" conforme usado neste relatóriodefine todas as formas homoquirais possíveis que os compostos de fórmula Ie seus N-óxidos, sais de adição, aminas quaternárias ou derivados fisiologi-camente funcionais podem possuir.
Formas isoméricas estereoquimicamente puras podem ser obti-das pela aplicação dos princípios conhecidos na técnica. Os diastereoisôme-ros podem ser separados por métodos de separação física tais como crista-lização fracionada e técnicas cromatográficas, e os enantiômeros podem serseparados uns dos outros pela cristalização seletiva dos sais diastereoméri-cas com ácidos ou bases oticamente ativos ou por cromatografia quiral. Es-tereoisômeros puros também podem ser preparados sinteticamente a partirde materiais de partida estereoquimicamente puros apropriados, ou usandoreações estereosseletivas.
O termo "isômero" refere-se a compostos que têm a mesmacomposição e o mesmo peso molecular mas diferem nas propriedades físi-cas e/ou químicas. Tais substâncias têm o mesmo número e o mesmo tipode átomos mas diferem na estrutura. A diferença estrutural pode estar naconstituição (isômeros geométricos) ou na capacidade de girar o plano deluz polarizada (enantiômeros).
O termo "estereoisômero" refere-se a isômeros de constituiçãoidêntica que diferem no arranjo de seus átomos no espaço. Enantiômeros ediastereômeros são exemplos de estereoisômeros.
O termo "quiral" refere-se à característica estrutural de uma mo-lécula que torna impossível sobrepô-la a sua imagem especular.
O termo "enantiômero" refere-se a uma de um par de espéciesmoleculares que são imagens especulares da outra e não podem ser super-postas.
O termo "diastereômero" refere-se a estereoisômeros que nãosão imagens especulares.
Os símbolos "/?' e "S" representam a configuração dos substitu-intes em torno de um átomo(s) de carbono quiral(is).
O termo "racemato" ou "mistura racêmica" refere-se a uma com-posição composta de quantidades equimolares de duas espécies enantiomé-ricas, onde a composição é desprovida de atividade ótica.
O termo "homoquiral" refere-se a um estado de pureza enantio-mérica.
O termo "atividade ótica" refere-se ao grau até o qual uma molé-cuia homoquiral ou uma mistura não racêmica de moléculas quirais gira umplano de luz polarizada.
O termo "isômero geométrico" refere-se a isômeros que diferemna orientação dos átomos substituintes em relação a uma ligação dupla car-bono-carbono, a um anel cicloalquila ou a um sistema bicíclico ligado porponte. Os átomos substituintes (diferentes de H) em cada lado de uma liga-ção dupla carbono-carbono podem estar na configuração E ou Z. Na confi-guração "E" (lados opostos), os substituintes estão em lados opostos emrelação à ligação dupla carbono-carbono; na configuração "Z" (mesmo lado),os substituintes estão orientados no mesmo lado em relação à ligação duplacarbono-carbono. Os átomos substituintes (diferentes de hidrogênio) presosa um anel carbocíclico podem estar em na configuração eis ou trans. Naconfiguração "eis", os substituintes estão no mesmo lado em relação ao pla-no do anel; na configuração "trans", os substituintes estão em lados opostosem relação ao plano do anel. Compostos com uma mistura de espécies "eis"e "trans" são designados "cis/trans".
Deve ficar entendido que os vários estereoisômeros substituin-tes, isômeros geométricos e misturas dos mesmos usados para preparar oscompostos da presente invenção encontram-se comercialmente disponíveis,podem ser preparados sinteticamente a partir de materiais de partida comer-cialmente disponíveis ou podem ser preparados como misturas isoméricas eem seguida obtidos como isômeros resolvidos usando técnicas bastante co-nhecidas pelos especialistas na técnica.
Os indicadores isoméricos "R," "S," Έ," "Z," "eis," e "trans" sãousados conforme descrito neste relatório para indicar as configurações atô-micas em relação a uma molécula de núcleo e devem ser usados da manei-ra definida na literatura (IUPAC Recommendations for Fundamental Stereo-chemistry (Section E), Pure Appi Chem., 1976, 45:13-30).
Os compostos da presente invenção podem ser preparados co-mo isômeros individuais por síntese específica para o isômero ou podem serresolvidos a partir de uma mistura isomérica. Técnicas de resolução conven-cionais incluem a formação da base livre de cada isômero de um par isomé-rico usando um sal oticamente ativo (seguida de cristalização fracionada eregeneração da base livre), a formação de um éster ou amida de cada umdos isômeros de um par isomérico (seguida de separação cromatográfica eremoção do auxiliar quiral) ou a resolução de uma mistura isomérica de ummaterial de partida ou de um produto final usando TLC preparatória (croma-tografia em camada fina) ou uma coluna de HPLC quiral.
POLIMORFOS E SOLVATOS
Além disso, os compostos da presente invenção podem ter umaou mais formas polimorfas ou cristalinas amorfas e como tais estão incluídasno escopo da presente invenção. Além disso, alguns dos compostos podemformar solvatos, por exemplo, com água (isto é, hidratos) ou com solventesorgânicos comuns, e estes também estão abrangidos pelo escopo desta in-venção. Conforme usado neste relatório, o termo "solvato" significa uma as-sociação física de um ou mais compostos da presente invenção com uma oumais moléculas de solvente. Esta associação física envolve graus variáveisde ligação iônico e covalente, inclusive ligação de hidrogênio. Em certos ca-sos o solvato poderá ser isolado, por exemplo, quando uma ou mais molécu-las de solvente são incorporadas na distribuição cristalina do sólido cristali-no. O termo "solvato" abrange solvatos em fase de solução e solvatos isolá-veis. Exemplos não Iimitativos de solvatos adequados incluem etanolatos,metanolatos, e similares. A presente invenção pretende incluir em seu esco-po solvatos dos compostos da presente invenção. Portanto, nos métodos detratamento da presente invenção, o termo "administrar" abrange os meiospara tratar, melhorar ou prevenir uma síndrome, distúrbio ou doença descritaneste relatório com um composto especificamente descrito ou com um com-posto, ou solvato do mesmo, que obviamente está incluído no escopo dainvenção ainda que não especificamente descrito para alguns dos presentescompostos.
N-ÓXIDOS
Os compostos de fórmula I podem ser convertidos nas formasde N-óxido correspondentes seguindo-se procedimentos conhecidos na téc-nica para converter um nitrogênio trivalente em sua forma de N-óxido. A re-ferida reação de N-oxidação geralmente pode ser realizada por reação domaterial de partida de fórmula I com um peróxido orgânico ou inorgânico a-propriado. Peróxidos inorgânicos apropriados compreendem, por exemplo,peróxido de hidrogênio, peróxidos de metal alcalino ou de metal alcalino-terroso, por exemplo, peróxido de sódio, peróxido de potássio; peróxidosorgânicos apropriados podem compreender peroxiácidos tais como, por e-xemplo, ácido benzenocarboperoxóico ou ácido benzenocarboperoxóico ha-lo substituído, por exemplo ácido 3-clorobenzenocarboperoxóico, ácidos pe-roxoalcanóicos, por exemplo ácido peroxoacético, alquila hidroperóxidos, porexemplo t-butila hidroperóxido. Solventes adequados são, por exemplo, á-gua, álcoois inferiores, por exemplo, etanol e similares, hidrocarbonetos, porexemplo tolueno, cetonas, por exemplo 2-butanona, hidrocarbonetos halo-genados, por exemplo, diclorometano, e misturas destes solventes.
FORMAS TAUTOMÉRICAS
Alguns dos compostos de fórmula I também podem existir emsuas formas tautoméricas. Tais formas, embora não explicitamente indica-das no presente pedido, estão incluídas no escopo da presente invenção.
PREPARAÇÃO DOS COMPOSTOS DA PRESENTE INVENÇÃO
Durante qualquer dos processos para preparação dos compos-tos da presente invenção, pode ser necessário e/ou desejável proteger gru-pos sensíveis ou reativos em qualquer das moléculas em questão. Isto podeser obtido por meio de grupos protetores convencionais, tais como aquelesdescritos em Protectinq Groups, P. Kocienski, Thieme Medicai Publishers,2000; e T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Protective Groups in Oraanic Svnthe-sis, 3rd ed. Wiley Interscience, 1999. Os grupos protetores podem ser remo-vidos em um estágio subsequente conveniente usando métodos conhecidosna literatura.Esquema de reação geral
<formula>formula see original document page 31</formula>
Os compostos de fórmula I podem ser preparados por métodosconhecidos pelos especialistas na técnica. Os esquemas de reação a seguirpretendem apenas representar exemplos da invenção e de modo algum limitam a invenção.
Os compostos de fórmula I, onde B1 Z1 r, Ri, e Ra são como defi-nidos na fórmula I, podem ser sintetizados da maneira representada pelocaminho de síntese geral ilustrado no esquema 1. Tratamento de pirimidina-4,6-diol Il nas condições de reação de Vilsmeier (DMF/POCI3) pode formar o4,6-dicloro-pirimidina-5-carbaldeído III, que com tratamento com amônia po-de formar o intermediário chave 4-amino-6-cloro-pirimidina-5-carbaldeído IV.Tratamento de IV com uma amina cíclica V em um solvente tal como DMSOa uma temperatura de 25°C a 150°C na presença de uma base tal como dii-sopropiletilamina pode formar a pirimidina VI. Tratamento de Vl com oR1ONH2 apropriado em um solvente tal como MeOH pode formar o produtofinal I. Apesar de só estar representada a forma anti da fórmula I, acredita-seque ambos os anti isômeros geométricos e syn podem ser formados na rea-ção final. Os isômeros podem ser separados por cromatografia de coluna esão espectroscopicamente distintos via desvios químicos de 1H RMN do hi-drogênio de metina correspondente Ha da oxima (Figura 1b).<formula>formula see original document page 32</formula>
Figuralb
Os espectros de 1H RMN observados do isômero antiprincipalmostram um desvio químico mais descendente característico do hidrogêniode metina Ha em relação ao desvio químico do hidrogênio da metina Ha doisômero syn. A diferença observada nos desvios químicas 1H do hidrogênioHa dos anti isômeros e syn da oxima é consistente com a literatura conheci-da na técnica (Biorg. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 5827-5830).
Esquema 1
<formula>formula see original document page 32</formula>
Os reagentes R1ONH2, onde Ri é como definido na fórmula I,encontram-se comercialmente disponíveis ou podem ser preparados pelaseqüência de reações ilustrada no esquema 2a. Alquilação do benzilidenoVll com um eletrófilo RiLG apropriado, onde LG pode ser um grupo deslocá-vel tal como brometo ou iodeto, e uma base tal como KOH em um solventetal como DMSO pode formar o benzilideno intermediário VIII, que com trata-mento em condições ácidas tais como HCI 4 N pode formar o reagenteRiONH2 desejado. Um método afim para preparar os reagentes R1ONH2,onde n, R1, e Ra são como definidos na fórmula I, está ilustrado no esquema2b. Alquilação do benzilideno Vll com um eletrófilo PGO(CH2)nLG apropria-do, onde PG é um grupo protetor de álcool conhecido e LG pode ser umgrupo deslocável tal como brometo ou iodeto, com uma base tal como KOHem um solvente tal como DMSO pode formar o benzilideno O-alquilado.Desproteção do grupo protetor de álcool conhecida pelos especialistas natécnica em condições convencionais, conversão do álcool em um grupo des-locável apropriado conhecido pelos especialistas na técnica tal como mesila-to, e uma reação subseqüente de deslocamento do SN2 com um heterociclonucleofílico, heteroarila, amina, álcool, sulfonamida, ou tiol apropriado segui-da de remoção do benzilideno mediada por ácido pode formar o reagenteR1ONH2. Se o nucleófilo Ra for um tiol, oxidação posterior do tiol pode formaros sulfóxidos e sulfonas correspondentes. Se o nucleófilo Ra for um amino,acilação do nitrogênio com um agente adiante ou sulfonilante apropriadopode formar as amidas, carbamatos, uréias, e sulfonamidas corresponden-tes. Se o Ra desejado for COORy ou CONRwRx, estes podem ser derivadosdo grupo hidroxila correspondente. Oxidação do grupo hidroxila para o ácidoseguido de formação de éster ou amida em condições conhecidas na técnicapode dar exemplos onde Ra é COORy ou CONRwRx·<formula>formula see original document page 34</formula>
Q é O, NH1 ou N(alquila)
Z é NH ou N(aiquila)
PG é Grupo Proteção
LG é Grupo Saída
Esquema 2a
<formula>formula see original document page 34</formula>
Esquema 2b
<formula>formula see original document page 34</formula>
Os reagentes do tipo amina V, onde Z é NH ou N(alquila) e B, r,e R3 são como definidos na fórmula I, podem ser preparados pela seqüênciade reações ilustrada no esquema 3a. Acilação da N-Boc diamina IX com umagente acilante X apropriado, onde LG pode ser p-nitrofenóxi, cloreto, bro-meto ou imidazol, pode formar o intermediário acilado XI. Remoção do grupoprotetor N-Boc em condições ácidas pode formar a amina V desejada. Osreagentes acilantes X ou se encontram comercialmente disponíveis ou po-dem ser preparados da maneira ilustrada no esquema 3a. Tratamento de umR3BZH apropriado, onde Z é NH ou N(alquila), com um reagente acilanteapropriado tal como carbonildiimidazol ou p-nitrofenilcloroformiato (onde LGpode ser cloreto, imidazol, ou p-nitrofenóxi) na presença de uma base talcomo trietilamina pode formar X. Muitos reagentes R3BZH encontram-secomercialmente disponíveis e podem ser preparados por inúmeros métodosconhecidos (por exemplo Tet Lettl 995, 36, 2411-2414). Um método alterna-tivo de obter V, onde Z é CH2 e B, r, e R3 são como definidos na fórmula I,está apresentado no esquema 3b. Acoplamento de uma amina cíclica IXcom um R3BCH2CO2H apropriado usando um reagente de acoplamentoconvencional tal como cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropila)-3-etilcarbo-diimida (EDC) ou 1-hidroxibenzotriazol (HOBT) pode formar o intermediárioacilado XI. Remoção do grupo protetor N-Boc em condições ácidas podeformar a amina V desejada.
Esquema 3a
<formula>formula see original document page 35</formula>
Esquema 3b
<formula>formula see original document page 35</formula>
Alternativamente os compostos de fórmula I, onde Β, Z, r, R1, eR3 são como definidos na fórmula I, podem ser sintetizados da maneira re-presentada pelo caminho de síntese geral ilustrado no esquema 4. Trata-mento da 4-cloropirimidina IV com uma diamina IX apropriada em um sol-vente tal como acetonitrila na presença de uma base tal como diisopropileti-Iamina pode formar a pirimidina XII. Tratamento da 5-carbaldeído de pirimi-dina Xll com um R1ONH2 apropriado em um solvente tal como MeOH podeformar o intermediário XIII, que com subseqüente desproteção do grupo pro-tetor N-Boc por tratamento com ácido pode formar a diamino pirimidina XIV.Acilação de XIV na presença de uma base tal como diisopropiletilamina comum reagente X apropriado, onde Z é NH ou N(alquila) e LG pode ser cloreto,imidazol, ou p-nitrofenóxi, ou, quando Z é CH2, via acoplamento com umR3BCH2CO2H apropriado usando um reagente de acoplamento convencionaltal como cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropila)-3-etilcarbodiimida (EDC) ou 1-hidroxibenzotriazol (HOBT), pode formar o produto final I. Apesar de sóestar representada a anti forma da fórmula I, acredita-se que ambos os antiisômeros geométricos e syn podem ser formados na seqüência de reações.Os isômeros podem ser separados por cromatografia de coluna e são es-pectroscopicamente distintos.
Esquema 4
<formula>formula see original document page 36</formula>
Alternativamente os compostos de fórmula I, onde Z é NH e B, r,R1, e R3 são como definidos na fórmula I, podem ser sintetizados da maneirarepresentada pelo caminho de síntese geral ilustrado no esquema 5. Trata-mento de 4-cloropirimidina IV com uma diamina IX apropriada em um sol-vente tal como acetonitrila na presença de uma base tal como diisopropileti-lamina pode formar a pirimidina XII. Tratamento da 5-carbaldeído de pirími-dina Xll com um RiONH2 apropriado em um solvente tal como MeOH podeformar o intermediário XIII, que com subsequente desproteção do grupo pro-tetor N-Boc por tratamento com ácido pode formar a diamino pirimidina XIV.Acilação de XIV na presença de uma base tal como diisopropiletilamina comum R3BNCO apropriado pode formar o produto final I. Apesar de só estarrepresentada a forma anti da fórmula I, acredita-se que ambos os anti isôme-ros geométricos e syn podem ser formados na seqüência de reações. Osisômeros podem ser separados por cromatografia de coluna e são espec-troscopicamente distintos.
Esquema 5
<formula>formula see original document page 37</formula>
Um método alternativo para preparar compostos de fórmula I,onde Z é NH ou N(alquila) e B, r, Ri, e R3 são como definidos na fórmula I, érepresentado pelo caminho de síntese geral ilustrado no esquema 6. Trata-mento de 4-cloropirimidina IV com uma diamina IX apropriada em um sol-vente tal como acetonitrila na presença de uma base tal como diisopropileti-Iamina pode formar a pirimidina XII. Desproteção do grupo protetor N-Bocpor tratamento com ácido pode formar a diamino pirimidina XV, que pode sersubseqüentemente acilada com um reagente X apropriado, onde LG podeser cloreto, imidazol, ou p-nitrofenóxi, na presença de uma base tal comodiisopropiletilamina para formar a pirimidina XVI. Tratamento da 5-carbaldeído de pirimidina XVI com RiONH2 apropriado em um solvente talcomo MeOH pode formar o produto final I. Apesar de só estar representadaa forma anti da fórmula I, acredita-se que ambos os isômeros geométricosanti e syn podem ser formados na reação final. Os isômeros podem ser se-parados por cromatografia de coluna e são espectroscopicamente distintos.Esquema 6
<formula>formula see original document page 38</formula>
COMPOSTOS REPRESENTATIVOS
Abaixo estão apresentados compostos representativos da pre-sente invenção sintetizados pelos métodos mencionados acima. Exemplosda síntese de compostos específicos estão apresentados mais adiante. Oscompostos preferidos são os números 1, 2, 7, 12, 13, 16, 17, 18, 19, 27; par-ticularmente preferidos são os números 1, 2, 7, 12 e 17.
<table>table see original document page 38</column></row><table><table>table see original document page 39</column></row><table><table>table see original document page 40</column></row><table><table>table see original document page 41</column></row><table><table>table see original document page 42</column></row><table><table>table see original document page 43</column></row><table><table>table see original document page 44</column></row><table><table>table see original document page 45</column></row><table>EXEMPLO 1
(4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimi-no-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 46</formula>
a. 4,6-Dicloro-pirimidina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 46</formula>
Uma mistura de DMF (3,2 ml) e POCI3 (10 ml) a O0C foi agitadapor 1 hora, tratada com 4,6-dihidroxipirimidina (2,5 g, 22,3 mmols), e agitadapor 0,5 hora à temperatura ambiente. A mistura heterogênea foi aquecida aorefluxo por 3 horas e os voláteis foram removidos à pressão reduzida. O re-síduo foi despejado em água gelada e extraído seis vezes com éter etílico. Afase orgânica foi lavada com NaHCO3 aquoso, secada em IS^SO4 e con-centrada para dar um sólido amarelo (3,7 g, 95%). 1H RMN (CDCI3) δ 10,46(s, 1H), 8,90 (s, 1H).
b. 4-Amino-6-cloro-pirimidina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 46</formula>
Amônia foi borbulhada através de uma solução de 4,6-dicloro-pirimidina-5-carbaldeído (1g, 5,68 mmols) em tolueno (100 ml) por 10 minu-tos e a solução foi agitada à temperatura ambiente por uma noite. O precipi-tado amarelo foi removido por filtração, lavado com EOAc e secado a vácuopara dar o produto puro (880 mg, 99%). 1H RMN (DMSO-d6) δ 10,23 (s, 1H),8,72 (br, 1H), 8,54 (br, 1H), 8,38 (s, 1H).
Método A:
a. éster terc-butílico do ácido 4-(6-Amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1 -carboxílico
<formula>formula see original document page 47</formula>
A uma suspensão de 4-amino-6-cloro-pirimidina-5-carbaldeído(446,8 mg, 2,85 mmols) em CH3CN (2 ml) foi adicionado éster terc-butílicodo ácido piperazina-1-carboxílico (583,1 mg, 3,13 mmols), seguido de DIEA(736,7 mg, 5,7 mmols). A mistura reacional foi agitada a 100°C. Depois de 2horas ela foi resfriada para a temperatura ambiente e o precipitado por re-movido por filtração, lavado com CH3CN (3x4 ml) e secado a vácuo paradar o composto do título como um pó branco (818 mg, 93,6%). 1H RMN (DM-SO-d6) δ 9,75 (s, 1H), 8,28 (br, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,83 (br, 1H), 3,59 (m, 4H),3,43 (m, 4H), 1,41 (s, 9H); LC/MS (ESI) calculado para C14H22N5O3 (MH)+308,2, encontrado 308,2.
b. Éster terc-butílico do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1 -carboxílico
<formula>formula see original document page 47</formula>
Uma mistura de éster terc-butílico do ácido 4-(6-amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1-carboxílico (59,1 mg, 0,19 mmol) e MeONH2-HCI(52 mg, 0,62 mmol) em MeOH (1,5 ml) foi agitada a 75°C por 0,5 hora e osolvente foi evaporado à pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado porcromatografia de coluna instantânea sobre sílica-gel (EtOAc como eluente)para dar o composto do título como um sólido branco (48 mg, 74,6%). 1HRMN (CDCI3) δ 8,19 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,53 (t, J= 5,10 Hz,4Η), 3,33 (t, J = 5,10 Hz, 4Η), 1,47 (s, 9H); LC/MS (ESI) calculado paraC15H25N6O3 (MH)+ 337,2, encontrado 337,3.
c. Sal de ácido de trifluoracético de O-metil-oxima 4-Amino-6-piperazin-1 -il-pirimidina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 48</formula>
Éster terc-butílico do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico (22,1 mg, 0,066 mmol) foi tratado com50% TFA/ CH2CI2 (4 ml). Depois de 14 horas, a mistura foi evaporada e se-cada a vácuo para dar o composto do título. 1H RMN (CD3OD) δ 8,29 (s, 1H),8,15 (s, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,93 (t, J= 5,16 Hz, 4H), 3,35 (t, J = 5,37 Hz, 4H);LC/MS (ESI) calculado para Ci0H17N6O (MH)+ 237,1, encontrado 237,2.
d. éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-lsopropóxi-fenila)-carbâmico
<formula>formula see original document page 48</formula>
A uma solução de 4-isopropoxianilina (9,06 g, 60,0 mmols) emCH2CI2 (120 ml) e piridina (30 ml) foi adicionado cloroformiato de 4-nitrofenila(10,9 g, 54,0 mmols) em gotas com agitação por ~1 minuto com um breveresfriamento em banho de gelo. Depois de agitar à temperatura ambientepor 1 hora, a solução homogênea foi diluída com CH2CI2 (300 ml) e lavadacom HCI 0,6 M (1 χ 750 ml) e HCI 0,025 M (1 χ 1 I). A camada orgânica foisecada (Na2SO4) e concentrada para dar o composto do título como um sóli-do branco-violeta-claro (16,64 g, 98%). 1H RMN (CDCI3) δ 8,31 -8,25 (m, 2H),7,42-7,32 (m, 4H), 7,25-7,20 (m, 2H), 6,93 (br s, 1H), 2,90 (sep, J = 6,9 Hz,1H), 1,24 (d, J = 6,9 Hz, 6H). LC/MS (ESI) calculado para Ci6H17N2O5 (MH)+317,1, encontrado 633,2 (2MH)+.
e. (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxi-imino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 49</formula>
A uma mistura de sal de ácido trifluoracético de O-metil-oximade 4-amino-6-piperazin-1-il-pirimidina-5-carbaldeído (23 mg, 0,066 mmol) eéster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico (22,8 mg, 0,072mmol) em CH3CN (1,5 ml) foi adicionada DIEA (17 mg, 0,13 mmol). A mistu-ra foi aquecida ao refluxo com agitação por 3 horas e os solventes foramevaporados à pressão reduzida. O resíduo amarelo foi purificado por croma-tografia de coluna instantânea sobre sílica-gel (EtOAc como eluente) paradar o composto do título como um sólido branco (12,7 mg, 46,8%). 1H RMN(CDCI3) δ 8,19 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,21 (d, J = 8,93 Hz1 2H), 6,81 (d, J =8,94 Hz, 2H), 6,45 (br, 1H), 4,46 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,58 (m, 4H), 3,42 (m,4H), 1,30 (d, J = 6,06 Hz1 6H); LC/MS (ESI) calculado para C20H28N7O3(MH)+414,2, encontrado 414,2.
Método B:
f. Éster terc-butílico do ácido 4-(4-lsopropóxi-fenilcarbamoií)-piperazina-1 -carboxílico
Uma mistura de éster terc-butílico do ácido piperazina-1-carboxílico (267,4 mg, 1,44 mmol) e éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico (432,1 mg, 1,36 mmol) em CH3CN (2 ml) foiaquecida ao refluxo por 2 horas e resfriada para a temperatura ambiente. Oprecipitado foi removido por filtração, lavado com CH3CN (3x3 ml) e secadoa vácuo para dar o produto como um sólido branco (459 mg, 93%). 1H RMN(CD3OD) δ 7,20 (d, J = 8,81 Hz, 2H), 6,82 (d, J = 8,93 Hz, 2H), 4,52 (sep, J =6,03 Hz, 1H), 3,48 (m, 8H), 1,48 (s, 9H), 1,27 (d, J= 6,04 Hz, 6H); LC/MS(ESI) calculado para Ci9H30N3O4 (MH)+ 364,2, encontrado 364,4.
g. (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 50</formula>
Éster terc-butílico do ácido 4-(4-lsopropóxi-fenilcarbamoila)-piperazina-1-carboxílico (169 mg, 0,47 mmol) foi tratado com 50% TFA/CH2CI2 (15 ml). Depois de 2 horas, ele foi evaporado à pressão reduzida e oresíduo foi neutralizado com NH3 2 M em MeOH. Evaporação dos solventesem alto vácuo dá o composto do título (119 mg, 97%). 1H RMN (CD3OD) δ7,22 (d, J= 8,83 Hz, 2H), 6,83 (d, J= 8,92 Hz, 2H), 4,52 (sep, J= 6,02 Hz,1H), 3,76 (t, J= 4,98 Hz, 4H), 3,24 (t, J= 4,99 Hz, 4H), 1,27 (d, J= 6,03 Hz,6H); LC/MS (ESI) calculado para Ci4H22N3O2 (MH)+ 264,2, encontrado 264,3.
h. (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxi-imino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 50</formula>
A uma mistura de (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido pipera-zina-1-carboxílico (302,1 mg, 1,15 mmol) e 4-amino-6-cloro-pirimidina-5-carbaldeído (157 mg, 1,0 mmol) em DMSO (2 ml) foi adicionada DIEA (258,5mg, 2,0 mmols). A mistura foi mantida em agitação a 100°C por 2 horas eMeONH2-HCI (167 mg, 2,0 mmols) foi adicionado. A mistura resultante foiaquecida a 100°C por 0,5 hora. Ela foi diluída com água e extraída comCH2CI2· Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura,secados (Na2SO4) e concentrados à pressão reduzida. O óleo bruto foi sub-metido à cromatografia de coluna instantânea sobre sílica-gel (EtOAc comoeluente) para dar o composto do título (45 mg, 11%). 1H RMN (CDCI3) δ 8,19(s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,21 (d, J = 8,93 Hz1 2H), 6,81 (d, J = 8,94 Hz, 2H), 6,45(br, 1H), 4,46 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,58 (m, 4H), 3,42 (m, 4H), 1,30 (d, J =6,06 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculado para C20H28N7O3 (MH)+ 414,2, encontrado 414,4.
EXEMPLO 2
(4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-morfolin-4-il-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 51</formula>
a. ácido trifluoracético de 4-Amino-6-piperazin-1-il-pirimidina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 51</formula>
Éster terc-butílico do ácido 4-(6-Amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1-carboxílico (235 mg, 0,76 mmol) foi tratado com 50% TFA/CH2CI2 (10 ml) e a mistura foi agitada por uma noite. Ela foi evaporada àpressão reduzida dar um sólido branco, que é puro e é diretamente usandona reação da etapa seguinte. 1H RMN (CD3OD) δ 9,83 (s, 1H), 8,29 (s, 1H),4,22 (t, J = 5,23 Hz, 4H), 3,42 (t, J = 5,42 Hz, 4H); LC/MS (ESI) calculadopara C9H14N5O (MH)+ 208,1, encontrado 208,1.
b. (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-(6-Amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1 -carboxílico
<formula>formula see original document page 52</formula>
A uma mistura de sal de ácido trifluoracético de 4-Amino-6-piperazin-1-il-pirimidina-5-carbaldeído (0,76 mmol) e éster 4-nitro-fenílico doácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico (253,7 mg, 0,80 mmol) em CH3CN foiadicionada DIEA (396 mg, 3,06 mmols). A mistura foi aquecida a IOO0C por2 horas, e resfriada para a temperatura ambiente. O precipitado foi filtrado,lavado com CH3CN (2x2 ml) e EtOAc (2 χ 1 ml) e secado a vácuo para daro composto do título como um sólido amarelo-claro (120 mg, 41%). 1H RMN(CDCI3) δ 9,88 (s, 1H), 8,73 (br, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,22 (d, J = 8,97 Hz1 2H),6,84 (d, J = 8,98 Hz, 2H), 6,50 (br, 1H), 6,25 (br, 1H), 4,49 (m, 1H), 3,85 (m,4H), 3,66 (m, 4H), 1,31 (d, J = 6,06 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculado paraC19H25N6O3 (MH)+ 385,2, encontrado 385,2.
c. 0-(2-morfolin-4-il-etila)-oxima de Difenil-metanona
<formula>formula see original document page 52</formula>
Cloridrato de /V-(2-Cloroetila)morfolina (2,10 g, 11 mmols) foiadicionado, aos poucos, a uma suspensão de pó de KOH (1,24 g, 22 mmols)e oxima de benzofenona (1,97 g, 10 mmols) em DMSO (23 ml) à temperatu-ra ambiente. A mistura reacional foi mantida em agitação à temperatura am-biente por 3 dias, diluída com água e extraída com éter etílico. A fase orgâ-nica foi lavada com salmoura, secada (Na2SO4) e evaporada para dar umproduto quase puro. 1H RMN (CDCI3) δ 7,32-7,50 (m, 10H), 4,35 (t, J = 5,59Hz, 2H), 3,69 (t, J= 4,52 Hz, 4H), 2,74 (m, 2H), 2,49 (m, 4H); LC/MS (ESI)calculado para C19H23N2O2 (MH)+ 311,2, encontrado 311,2.
d. dicloridrato de 0-(2-Morfolin-4-il-etila)-hidroxilamina
<formula>formula see original document page 53</formula>
Uma suspensão de difenil-metanona 0-(2-morfolin-4-il-etila)-oxima (2,5 g, 8,06 mmols) em HCI 6 N (13,5 ml) foi aquecida ao refluxo comagitação. Depois de 2 horas, a mistura foi resfriada para a temperatura am-biente e extraída com EtOAc várias vezes. A fase aquosa foi evaporada atéa secura a vácuo para dar o composto do título (740 mg, 63%). 1H RMN(DMSO-de) δ 4,45 (t, J = 4,49 Hz1 2H), 3,89 (t, J= 4,48 Hz1 4H), 3,47 (t, J =4,64 Hz, 2H), 3,29 (m, 4H); LC/MS (ESI) calculado para C6H15N2O2 (MH)+147,1, encontrado 147,1.
e. (4-isopropóxi-fenilã)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-mor-folin-4-il-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 53</formula>
Uma mistura de (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-(6-amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1-carboxílico (20,9 mg, 0,054mmol) e sal de dicloridrato de 0-(2-morfolin-4-il-etila)-hidroxilamina (12 mg,0,054 mmol) em MeOH (1 ml) foi aquecida a 100°C por 0,5 hora e o solventefoi removido. O resíduo foi distribuído entre EtOAc e água. Os extratos orgâ-nicos foram secados (Na2SO4) e evaporados e o resíduo foi purificado porTLC preparatória (5% MeOH/EtOAc) para dar o produto desejado como umsólido branco (16,4 mg, 58,9%). 1H RMN (CD3OD) δ 8,24 (s, 1H), 8,08 (s,1H), 7,21 (d, J = 8,79 Hz, 2H), 6,83 (d, J= 9,03 Hz, 2H), 4,52 (m, 1H), 4,34(t, J = 5,63 Hz, 2H), 3,71 (t, J = 4,84 Hz, 4H), 3,63 (m, 4H), 3,43 (m, 4H),2,75 (t, J= 5,60 Hz, 2H), 2,57 (t, J= 4,96 Hz, 4H), 1,28 (d, J= 6,05 Hz, 6H);LC/MS (ESI) calculado para C25H37N8O4 (MH)+ 513,2, encontrado 513,3.
EXEMPLO 3
(4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(3-hidróxi-propoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 54</formula>
a. 0-(3-hidróxi-propila)-oxima de Difenil-metanona
<formula>formula see original document page 54</formula>
Seguindo o procedimento para a síntese do Exemplo 2c. 1HRMN (CDCI3) δ 7,30-7,52 (m, 10H), 4,35 (t, J =5,83 Hz1 2H), 3,73 (t, J = 5,85Hz, 2H), 1,95 (m, 2H).
b. cloridrato de 3-Aminoóxi-propan-1-ol
<formula>formula see original document page 54</formula>
Seguindo o procedimento para a síntese do Exemplo 2d. 1HRMN (CD3OD) δ 4,26 (t, J = 6,75 Hz, 2H), 3,66 (t, J= 6,11 Hz, 2H), 2,51 (m, 2H).
c. (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(3-hidróxi-propoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 54</formula>
Preparado da maneira descrita no Exemplo 2e com a diferençaque 3-aminoóxi-propan-1-ol foi usado no lugar de 0-(2-morfolin-4-il-etila)-hidroxilamina. 1H RMN (CD3OD) δ 8,22 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,21 (d, J = 8,95Hz, 2H), 6,83 (d, J = 9,01 Hz, 2H), 4,52 (m, 1H), 4,28 (t, J = 6,48 Hz, 2H),3,69 (t, J = 6,35 Hz, 2H), 3,63 (m, 4H), 3,43 (m, 4H), 1,94 (m, 2H), 1,28 (d,J = 6,04 Hz, 6H). LG/MS (ESI) calculado para C22H32N7O4 (MH)+ 458,2, en-contrado 458,2.
EXEMPLO 4
(4-piperidin-1-il-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimi-no-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 55</formula>
a. éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-Piperidin-1-il-fenila)-carbâmico
<formula>formula see original document page 55</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 1 d,usando 4-piperidinoanilina e tolueno como solvente. Cromatografia instantâ-nea sobre sílica (5:2 hex/EtOAc -> EtOAc 9:1 DCM/MeOH) deu o com-posto alvo como um pó cinza (1,416 g, 73%). 1H RMN (CDCI3) δ 8,31-8,25(m, 2H), 7,42-7,36 (m, 2H), 7,34-7,28 (m, 2H), 6,97-6,90 (m, 2H), 6,82 (br s,1H), 3,17-3,09 (m, 4H), 1,77-1,66 (m, 4H), 1,63-1,54 (m, 2H). LC/MS (ESI)calculado para Ci8H19N3O4 (MH+) 342,1, encontrado 342,2.
b. (4-piperidin-1-il-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(meto-xiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico<formula>formula see original document page 56</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 1ecom a diferença que éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-piperidin-1 -il-fenila)-carbâmico foi usado no lugar de éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1H RMN (CDCI3) δ 8,20 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,29 (m, 4H),7,07 (br, 2H), 6,46 (br, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,61 (m, 4H), 3,46 (m, 4H), 3,15 (m,4H), 1,52-1,86 (m, 6H); LC/MS (ESI) calculado para C20H3IN8O2 (MH)+439,3, encontrado 439,2.
EXEMPLO 5
(4-morfolin-4-il-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimi-no-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 56</formula>
a. éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-Morfolin-4-il-fenila)-carbâmico
<formula>formula see original document page 56</formula>
Uma mistura de 4-morfolinoanilina (1,01 g, 5,68 mmols) e Ca-CO3 (743 mg, 7,42 mmols) (pó de 10 mícrons) foi tratada com uma soluçãode cloroformiato de 4-nitrofenila (1,49 g, 7,39 mmols) em CH2CI2 (7,5 ml) emuma atmosfera de ar sobre um banho de gelo. A pasta reacional grossa e defácila agitação foi agitada por 1 - 2 minutos sobre o banho de gelo antes deser agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A pasta foi então com 9:1CH2Cl2/MeOH (7,5 ml) e diretamente aplicada a uma coluna de sílica instan-tânea (95:5 CH2CI2/MeOH) para dar 0,7 g de material. Este foi ainda purifi-cado por trituração com tolueno quente (25 ml) para dar o composto do títulocomo um pó verde-oliva-claro (444 mg, 23%). 1H RMN (CDCI3) δ 8,31-8,25(m, 2H), 7,42-7,31 (m, 4H), 6,95-6,85 (m, 3H), 3,89-3,84 (m, 4H), 3,16-3,11 (m, 4H).
b. (4-morfolin-4-il-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(meto-xiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 57</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 1ecom a diferença que éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-morfolin-4-il-fenila)-carbâmico foi usado no lugar de éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1H RMN (CDCI3) δ 8,20 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,22 (m, 4H),6,87 (br, 2H), 6,26 (br, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,86 (t, J = 4,80 Hz, 4H), 3,60 (m,4H), 3,47 (t, J = 4,47 Hz, 4H), 3,10 (m, 4H); LC/MS (ESI) calculado paraC21H29N8O3 (MH)+ 441,2, encontrado 441,3.
EXEMPLO 6
(6-ciclobutóxi-piridin-3-ila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(meto-xiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 57</formula>
a. 2-Ciclobutóxi-5-nitro-piridina<formula>formula see original document page 58</formula>
Uma mistura de 2-cloro-5-nitropiridina (7,12 g, 45,0 mmols) eciclobutanol (3,40 g, 47,2 mmols) em THF (30 ml) foi vigorosamente agitadaa 0°C, enquanto NaH (1,18 g, 46,7 mmols) era adicionado em três porçõesdurante -10-20 segundos em uma atmosfera de ar (Cuidado: vasto des-prendimento de gás). O resíduo da reação foi enxaguado com THF adicional(5 ml), seguido de agitação sob pressão de argônio positiva no banho degelo por mais 1 - 2 minutos. O banho de gelo foi então removido e a soluçãohomogênea castanha foi agitada por 1 hora. A mistura reacional foi concen-trada à pressão reduzida a 80°C, recuperada em EDTA (sal tetrassódico)0,75 M (150 ml), e extraída com CH2CI2 (1 χ 100 ml, 1 χ 50 ml). As camadasorgânicas combinadas foram secadas (Na2SO4), concentradas, recuperadasem MeOH (2 χ 100 ml) e concentradas à pressão reduzida a 60°C para dar ocomposto do título como um óleo âmbar escuro grosso que cristalizou aorepouso (7,01 g, 80%). 1H RMN (CDCI3) δ 9,04 (dd, J= 2,84 e 0,40 Hz, 1H),8,33 (dd, J =9,11 e 2,85 Hz, 1H), 6,77 (dd, J= 9,11 e 0,50 Hz, 1H), 5,28 (m,1H), 2,48 (m, 2H), 2,17 (m, 2H), 1,87 (m, 1H), 1,72 (m, 1H).
b. 6-Ciclobutóxi-piridin-3-ilamina
<formula>formula see original document page 58</formula>
Um balão contendo 10% p/p Pd/C (485 mg) foi delicadamentepurgado com argônio enquanto MeOH (50 ml) era lentamente adicionadopelas laterais do balão, seguido da adição em porções de ~5 ml de uma so-lução de 2-ciclobutóxi-5-nitro-piridina (4,85 g, 25 mmols), preparada na etapaanterior, em MeOH (30 ml). (Cuidado: a adição em grande escala de orgâni-cos voláteis ao Pd/C na presença de ar pode provocar incêndio). O balão foientão evacuado uma vez e agitado à pressão de balão de H2 por 2 horas àtemperatura ambiente. A reação foi então filtrada, e o filtrado âmbar límpidofoi concentrado, recuperado em tolueno (2 χ 50 ml) para remover o MeOHresidual, e concentrado para dar o composto do título bruto como um óleocastanho escuro translúcido com um leve cheiro de tolueno (4,41 g). 1HRMN (CDCI3) δ 7,65 (d, J = 3,0 Hz, 1Η), 7,04 (dd, J = 8,71 e 2,96 Hz, 1H),6,55 (d, J= 8,74 Hz1 1H), 5,04 (m, 1H), 2,42 (m, 2H), 2,10 (m, 2H), 1,80 (m,1H), 1,66 (m, 1H). LC-MS (ESI) calculado para C9H13N2O (MH+) 165,1, en-contrado 165,2.
c. éster 4-nitro-fenílico do ácido (6-Ciclobutóxi-piridin-3-ila)-carbâmico
<formula>formula see original document page 59</formula>
Uma mistura de 6-ciclobutóxi-piridin-3-ilamina (4,41 g, 25mmols), preparada na etapa anterior, e CaCO3 (3,25 g, 32,5 mmols) (pó de10 microns) foi tratada com uma solução homogênea de cloroformiato de 4-nitrofenila (5,54 g, 27,5 mmols) em tolueno (28 ml) em uma porção à tempe-ratura ambiente, e foi agitada por 2 horas. A mistura reacional foi então car-regada diretamente em uma coluna de sílica instantânea (95:5 DCM/MeOH-> 9:1 DCM/MeOH) para dar 5,65 g de material, que foi ainda purificado portrituração com tolueno quente (1 χ 200 ml) para dar o composto do título(4,45 g, 54%). 1H RMN (CDCI3) δ 8,32-8,25 (m, 2H), 8,12 (d, 1H), 7,81 (m,1H), 7,42-7,36 (m, 2H), 6,85 (br s, 1H), 6,72 (d, 1H), 5,19-5,10 (m, 1H), 2,50-2,40 (m, 2H), 2,19-2,07 (m, 2H), 1,89-1,79 (m, 1H), 1,75-1,61 (m, 1H). LC-MS (ESI) calculado para Ci6H15N3O5 (MH+) 330,1, encontrado 330,1.
d. (6-ciclobutóxi-piridin-3-ila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 59</formula>
Preparado da maneira descrita no Exemplo 1e com a diferençaque éster 4-nitro-fenílico do ácido (6-ciclobutóxi-piridin-3-ila)-carbâmico foiusado no lugar de éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1H RMN (DMSO-de) δ 8,55 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,12 (d, J= 2,74Hz, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,73 (dd, J = 8,72 e 2,72 Hz1 1H), 7,48 (br, 1H), 6,69(d, J = 8,86 Hz, 1H), 5,05 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,54 (m, 4H), 3,34 (m, 4H),2,36 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 1,75 (m, 1H), 1,61 (m, 1H); LC/MS (ESI) calcula-do para C20H27N8O3 (MH)+ 427,2, encontrado 427,2.
EXEMPLO 7
O-metil-oxima de 4-Amino-6-{4-[2-(4-isopropil-fenila)-acetil]-pipe-razin-1 -il}-pirimidina-5-carbaldeído
<formula>formula see original document page 60</formula>
A uma mistura de sal de ácido trifluoracético de O-metil-oxima de4-amino-6-piperazin-1-il-pirimidina-5-carbaldeído bruto (45,3 mg, 0,13 mmol),preparado da maneira descrita no Exemplo 1c, e ácido (4-isopropil-fenila)-acético (23 mg, 0,13 mmol) em THF anidro (2 ml) foi adicionado HOBT (25,7mg, 0,17 mmol), seguido de HBTU (63,6 mg, 0,17 mmol) e DIEA (83,4 mg,0,65 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por uma noite econcentrada à pressão reduzida. O material bruto foi carregado diretamenteem uma placa de TLC preparatória para purificação (5% MeOH/EtOAc) (8,6mg, 16,7%). 1H RMN (CDCI3) 5 8,16 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,17 (m, 4H), 3,95(s, 3H), 3,75 (m, 2H), 3,73 (s, 2H), 3,55 (t, J= 4,81 Hz, 2H), 3,38 (t, J= 4,98Hz, 2H), 3,26 (t, J= 4,79 Hz1 2H), 2,89 (sep, J= 6,81 Hz, 1H), 1,24 (d, J =6,92 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculado para C2i H29N6O2 (MH)+ 397,2, encon-trado 397,3.
EXEMPLO 8
(4-isopropil-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 60</formula><formula>formula see original document page 61</formula>
a. éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-lsopropil-fenila)-carbâmico
<formula>formula see original document page 61</formula>
A uma solução de 4-isopropilanilina (3,02 g, 22,3 mmols) emCH2Cb (40 ml) e piridina (10 ml) foi adicionado cloroformiato de 4-nitrofenila(4,09 g, 20,3 mmols) aos poucos com agitação durante -30 segundos comum breve resfriamento em um banho gelo. Depois de agitar à temperaturaambiente por 1 hora, a solução homogênea foi diluída com CH2CI2 (100 ml) elavada com HCI 0,6 M (1 χ 250 ml), HCI 0,025 M (1 χ 400 ml), água (1 χ 100ml), e NaHCO3 1 M (1 x100 ml). A camada orgânica foi secada (Na2SO4) econcentrada para dar o composto do título como um sólido de cor pêssego-claro (5,80 g, 95%). 1H RMN (CDCI3) δ 8,31-8,25 (m, 2H), 7,42-7,32 (m, 4H),7,25-7,20 (m, 2H), 6,93 (br s, 1H), 2,90 (h, J = 6,9 Hz, 1H), 1,24 (d, J = 6,9Hz, 6H). LC/MS (ESI) calculado para Ci6H16N2O4 (2MH)+ 601,2, encontrado601,3.
b. (4-isopropil-fenila)-amida do ácido piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 61</formula>
Uma mistura de éster terc-butílico do ácido piperazina-1-carboxílico (186 mg, 1,0 mmol) e éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropil-fenila)-carbâmico (300 mg, 1,0 mmol) em CH3CN (1,5 ml) foi aquecida aorefluxo por 2 horas e concentrada à pressão reduzida. O resíduo foi tratadocom 50% TFA/ CH2CI2 (5 ml) e a solução foi agitada por uma noite. Os sol-ventes orgânicos foram evaporados e o resíduo foi neutralizado com NH3 2M em MeOH. Depois de evaporação dos solventes, o resíduo foi distribuídoentre EtOAc e água e a camada orgânica foi secada e concentrada. O mate-rial resultante foi purificado por cromatografia de coluna instantânea sobresílica-gel (EtOAc -> 10% MeOH/EtOAc) para dar o composto do título (126mg, 51%). 1H RMN (CD3OD) δ 7,25 (d, J = 8,53 Hz, 2H), 7,15 (d, J = 8,69Hz, 2H), 3,75 (t, J = 5,17 Hz, 4H), 2,85 (sep, J= 6,91 Hz1 1H), 1,21 (d, J =6,93 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculado para Ci4H22N3O (MH)+ 248,2, encon-trado 248,2.
c. (4-isopropil-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimi-no-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 62</formula>
Seguindo o procedimento para a síntese do 1h, usando (4-isopropil-fenila)-amida do ácido piperazina-1-carboxílico no lugar de (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido piperazina-1-carboxílico. 1H RMN (CD3OD)8,20 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,25 (d, J= 8,63 Hz, 2H), 7,14 (d, J= 8,35 Hz,2H), 3,96 (s, 3H), 3,64 (m, 4H), 3,42 (m, 4H), 2,85 (sep, J = 6,92 Hz, 1H),1,22 (d, J = 6,93 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculado para C20H28N7O2 (MH)+398,2, encontrado 398,3.
EXEMPLO 9
(4-ísopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(etoxiimino-me-tila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1 -carboxílico (anti configuração para -C=N-O-)<formula>formula see original document page 63</formula>
a. éster terc-butílico do ácido 4-[6-Amino-5-(etoxiimino-meti-la)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico {anti configuração para -C=N-O-)
<formula>formula see original document page 63</formula>
Uma mistura de éster terc-butílico do ácido 4-(6-amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1-carboxílico (135,1 mg, 0,44 mmol) e EtONH2-HCI(128,6 mg, 1,32 mmol) em MeOH (1,5 ml) foi agitada a 90°C por 0,5 hora e osolvente foi removido à pressão reduzida. O resíduo foi distribuído entreCH2CI2 e água e a fase orgânica foi secada (Na2SO4). Evaporação do sol-vente deu um sólido branco, que mostrou ser uma mistura de dois isômeros(proporção 2:1) por 1H RMN (CDCI3). Purificação por TLC preparatória (EtO-Ac como eluente) deu dois isômeros puros. O isômero principal é designadocomo o isômero anti (para a configuração de -C=N-O-) (87,7 mg, 56,9%). 1HRMN (CDCI3) 5 8,13 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 4,21 (q, J= 7,06 Hz, 2H), 3,54 (m,8H), 1,47 (s, 9H), 1,33 (t, J = 7,04 Hz, 3H); LC/MS (ESI) calculado paraC16H27N6O3 (MH)+ 351,2, encontrado 351,3.
b. éster terc-butílico do ácido 4-[6-Amino-5-(etoxiimino-meti-la)-pirimidin-4-il]-piperazina-1 -carboxílico (configuração syn para -C=N-O-)<formula>formula see original document page 64</formula>
Preparado da maneira descrita no Exemplo 9a. Corresponde aoisômero secundário e é designado como o isômero syn (para a configuraçãode -C=N-O-) (40 mg, 26%). 1H RMN (CDCI3) δ 8,13 (s, 1H), 7,17 (s, 1H),4,33 (q, J = 7,17 Hz, 2H), 3,65 (m, 4H), 3,53 (m, 4H), 1,48 (s, 9H), 1,35 (t, J =7,04 Hz, 3H); LC/MS (ESI) calculado para Ci6H27N6O3 (MH)+ 351,2, encon-trado 351,3.
c. (4-isopropóxi-fenila) -amida do ácido 4-[6-Amino-5-(etoxi-imino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1 -carboxílico (anti configuração para -C=N-O-)
<formula>formula see original document page 64</formula>
Éster terc-butílico do ácido 4-[6-Amino-5-(etoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-çarboxílico {anti isômero) (36,8 mg, 0,105 mmol)foi tratado com 50% TFA/ CH2CI2(1,3 ml) por 2 horas e os solventes foramremovidos à pressão reduzida. O material resultante foi redissolvido emCH3CN (2 ml), misturado com éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico (36,5 mg, 0,12 mmol) e DIEA (54,3 mg, 0,42 mmol). A mis-tura reacional foi aquecida a 95°C por 1 hora, concentrada e o resíduo foipurificado por cromatografia de coluna instantânea sobre sílica-gel (EtOAc5% MeOH/EtOAc) para dar o composto do título como um sólido branco(14,4 mg, 32%). 1H RMN (CDCI3) δ 8,20 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,23 (d, J =8,88 Hz, 2H), 6,84 (d, J= 8,92 Hz, 2H), 6,30 (br, 1H), 4,49 (sep, J= 6,08 Hz11 Η), 4,21 (q, J = 7,05 Hz, 2Η), 3,61 (m, 4H), 3,45 (m, 4H), 1,34 (t, J= 7,18Hz, 3H), 1,32 (d, J = 6,30 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculado para C2IH30N7O3(MH)+ 428,2, encontrado 428,3.
EXEMPLO 10
(4-isopropóxi-fenila) -amida do ácido 4-[6-Amino-5-(etoxiimino-me-tila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1 -carboxílico (configuração syn para -C=N-O-)
<formula>formula see original document page 65</formula>
Preparado da maneira descrita no Exemplo 9c com a diferençaque o isômero syn do éster terc-butílico do ácido 4-[6-amino-5-(etoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico foi usado no lugar de seu antiisômero. 1H RMN (CDCI3) δ 8,24 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,22 (d, J= 8,97 Hz12H), 6,84 (d, J= 8,96 Hz, 2H), 6,22 (br, 1H), 5,60 (br, 2H), 4,48 (sep, J =6,19 Hz, 1H), 4,33 (q, J= 7,06 Hz, 2H), 3,57 (m, 8H), 1,36 (t, J= 7,08 Hz,3H), 1,31 (d, J = 6,05 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculado para C2IH30N7O3
(MH)+ 428,2, encontrado 428,3.
EXEMPLO 11
(4-piperidin-1-il-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(etoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 65</formula>
Preparado da maneira descrita no Exemplo 9c com a diferençaque éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-piperidin-1-il-fenila)-carbâmico foi usadono lugar de éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1HRMN (CDCI3) δ 8,20 (s, 1 Η), 8,15 (s, 1 Η), 7,27 (m, 4Η), 7,04 (br, 2Η), 6,43(br, 1Η), 4,21 (q, J = 7,07 Hz, 2Η), 3,62 (m, 4H), 3,45 (t, J = 4,82 Hz, 4H),3,13 (m, 4H), 1,54-1,84 (m, 6H), 1,34 (t, J= 7,06 Hz, 3H); LC/MS (ESI) calcu-lado para C23H33N8O2 (MH)+ 453,3, encontrado 453,3.
EXEMPLO 12
(6-ciclobutóxi-piridin-3-ila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(etoxi-imino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 66</formula>
Preparado da maneira descrita no Exemplo 9c com a diferençaque éster 4-nitro-fenílico do ácido (6-ciclobutóxi-piridin-3-ila)-carbâmico foiusado no lugar de éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1H RMN (CDCI3) δ 8,20 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,96 (d, J= 2,65 Hz,1H), 7,73 (dd, J= 8,84 e 2,74 Hz, 1H), 7,26 (br, 2H), 6,66 (d, J= 9,03 Hz,1H), 6,27 (br, 1H), 5,10 (m, 1H), 4,21 (q, J= 7,05 Hz, 2H), 3,61 (m, 4H), 3,47(m, 4H), 2,43 (m, 2H), 2,11 (m, 2H), 1,82 (m, 1H), 1,65 (m, 1H), 1,33 (t, J =7,07 Hz, 3 H); LC/MS (ESI) calculado para C2i H29N8O3 (MH)+ 441,2, encon-trado 441,3.
EXEMPLO 13
O-etil-oxima de 4-Amino-6-{4-[2-(4-isopropil-fenila)-acetil]-pipe-razin-1-il}-pirimidina-5-carbaldeído (anti configuração para -C=N-O-)
<formula>formula see original document page 66</formula>
Éster terc-butílico do ácido 4-[6-Amino-5-(etoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico (uma mistura dos an/y isômeros e syn,37 mg, 0,11 mmol) foi tratado com 50% TFA/CH2CI2 (1,5 ml) por 2 horas e ossolventes orgânicos foram removidos à pressão reduzida. O material resul-tante foi usado para a reação de acoplamento seguinte sem purificação. Auma mistura do material acima e ácido (4-isopropil-fenila)-acético (18,7 mg,0,11 mmol) em THF (3 ml) foi adicionado HOBT (20,9 mg, 0,14 mmol), se-guido de HBTU (51,9 mg, 0,14 mmol) e DIEA (67,9 mg, 0,53 mmol). A solu-ção reacional foi agitada à temperatura ambiente por uma noite e concentra-da. O resíduo foi diretamente submetido à purificação por TLC preparatória(5% MeOH/EtOAc) para dar dois produtos, que se mostraram uma misturados anti isômeros e syn em termos da configuração de -C=N-O-). O isômeroprincipal é um sólido branco (5,3 mg, 12,3% de rendimento isolado). 1H RMN(CDCI3) 5 8,16 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,18 (m, 4H), 4,20 (q, J = 7,08 Hz, 2H),3,75 (m, 2H), 3,74 (s, 2H), 3,57 (t, J = 5,05 Hz, 2H), 3,37 (t, J= 5,08 Hz, 2H),15 3,25 (t, J = 5,06 Hz, 2H), 2,89 (sep, J= 7,25 Hz, 1H), 1,32 (t, J = 7,05 Hz,3H), 1,23 (d, J = 6,92 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculado para C22HaiN6O2(MH)+ 411,2, encontrado 411,3.
EXEMPLO 14
O-etil-oxima de 4-Amino-6-{4-[2-(4-isopropil-fenila)-acetil]-pipera-zin-1 -il}-pirimidina-5-carbaldeído (configuração syn para -C=N-O-)
<formula>formula see original document page 67</formula>
Preparado da maneira descrita no Exemplo 13. O isômero se-cundário é um sólido branco (1,8 mg, 4,2% de rendimento isolado). 1H RMN(CDCI3) 5 8,21 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,18 (m, 4H), 4,31 (q, J =7,10 Hz, 2H),3,74 (s, 2H), 3,73 (m, 2H), 3,54 (m, 2H), 3,39 (m, 2H), 3,30 (m, 2H), 2,89(sep, J= 7,08 Hz, 1H), 1,34 (t, J= 7,07 Hz, 3H), 1,23 (d, J = 6,92 Hz, 6H);LC/MS (ESI) calculado para C22H31N6O2 (MH)+ 411,2, encontrado 411,3.
EXEMPLO 15(4-morfolin-4-il-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(etoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 68</formula>
Preparado da maneira descrita no Exemplo 9c com a diferençaque éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-morfolin-4-il-fenila)-carbâmico foi usadono lugar de éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1HRMN (300 MHz1 CDCI3) δ 8,16 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,20-7,27 (m, 4H), 6,85-6,91 (br, 2H), 6,23 (br, 1H), 4,22 (q, J = 7,08 Hz1 2H), 3,82-3,89 (m, 4H),3,54-3,64 (m, 8H), 3,06-3,14 (m, 4H), 1,33 (t, J= 7,09 Hz, 3H). LC-MS (ESI)calculado para C22H31N8O3 (MH+) 455,2, encontrado 455,2.
EXEMPLO 16
(4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-morfolin-4-il-2-oxo-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 68</formula>
Preparado da maneira descrita no Exemplo 2c com a diferençaque cloridrato de 2-aminoóxi-1-morfolin-4-il-etanona foi usado no lugar de O-(2-morfolin-4-il-etila)-hidroxilamina. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,45 (s,1H), 8,24 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,82 (br, 2H), 7,31 (d, J= 8,95 Hz, 2H), 6,80(d, J= 8,94 Hz, 2H), 4,91 (s, 2H), 4,50 (m, 1H), 3,55 (m, 4H), 3,32-3,46 (m,8H), 3,31 (m, 4H), 1,22 (d, J= 6,03 Hz, 6H). LC-MS (ESI) calculado paraC2IH35N8O5 (MH+) 527,3, encontrado 527,1.
Exemplo 17
(6-ciclopentilóxi-piridin-3-ila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(meto-xiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 69</formula>
a. 2-Ciclopentilóxi-5-nitro-piridina
<formula>formula see original document page 69</formula>
A uma solução de 2-cloro-5-nitropiridina (7,01 g, 44,4 mmols) emTHF (30 ml) e ciclopentanol (3,9 g, 45,3 mmols) foi adicionado hidreto desódio (1,3 g, 54,2 mmols) aos poucos com agitação durante -30 segundoscom resfriamento em um banho de gelo a 0°C. Depois de agitar a O0C por 5minutos, o banho de gelo foi removido e a reação foi agitada à temperaturaambiente por 3 horas. Ela foi então concentrada a vácuo e o resíduo foi dis-solvido em DCM e lavado vigorosamente com NaHCO3 1 M e em seguidasecado em Na2SO4 anidro, filtrado e concentrado a vácuo. O produto brutofoi purificado por cromatografia de coluna instantânea (sílica-gel, 9:1 Hexa-no:Etila Acetato) para obter -ciclopentilóxi-5-nitro-piridina pura 2 (0,4 g, 4%).1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ 9,07 (s, 1Hfc 8,32 (m, 1H); 6,74 (d, 1H), 5,53(m, 1H), 2,00 (m, 2H), 1,81 (m, 4H), 1,66 (m, 2H).
b. 6-Ciclopentilóxi-piridin-3-ilamina
<formula>formula see original document page 69</formula>
A uma solução de 2-ciclopentilóxi-5-nitro-piridina (0,3099 g, 1,49mmol), em MeOH (2 ml) foi adicionado 10% Pd/C (90 mg). A solução foidesgaseificada e foi mantida em agitação em uma atmosfera de hidrogêniopor uma noite. Ela foi filtrada por um chumaço de celite e o filtrado foi evapo-rado para dar o produto desejado como um óleo castanho (248 mg, 94% derendimento). 1H-RMN (300 MHz1 CDCI3): δ 7,69 (d, 1H), 7,04 (m, 1H), 6,56(d, 1H), 5,25 (m, 1H), 1,93 (m, 2H), 1,78 (m, 4H), 1,60 (m, 2H). LC/MS (ESI)calculado para Ci0Hi4N2O 178,23, encontrado [M+41+1]+220,0.
c. éster 4-nitro-fenílico do ácido (6-Ciclopentilóxi-piridin-3-ila)-carbâmico
<formula>formula see original document page 70</formula>
A uma solução de 6-ciclopentilóxi-piridin-3-ilamina (0,248 g, 1,39mmol) em THF (2 ml) foi adicionado cloroformiato de 4-nitrofenila (0,280 g,1,39 mmol) aos poucos. Depois de agitar à temperatura ambiente por 1 hora,formou-se um precipitado pesado na camada orgânica. Filtração da camadaorgânica deu o composto do título como um sólido rosa claro (0,368 g, 77%).1H-RMN (400 MHzl-CDCI3): δ 11,1 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 9,04 (d, 1H), 8,26 (d,2H), 7,40 (d, 2H), 7,14 (d, 1H), 5,36 (m, 1H), 2,11 (m, 2H), 1,97 (m, 2H), 1,84(m, 2H), 1,71 (m, 2H).
d. (6-ciclopentilóxi-piridin-3-ila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimino-metila)-pirimidin-4-ilJ-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 70</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 6dcom a diferença que éster 4-nitro-fenílico do ácido (6-ciclopentilóxi-piridin-3-ila)-carbâmico foi usado no lugar de éster 4-nitro-fenílico do ácido (6-ciclociclobutóxi-piridin-3-ila)-carbâmico. 1H RMN (CDCI3) δ 8,20 (s, 1H), 8,13(s, 1H), 7,97 (d, J = 2,74 Hz, 1H), 7,71 (dd, J = 8,87 e 2,82 Hz, 1H), 6,65 (d,J= 8,87 Hz, 1H), 6,31 (br, 1H), 5,30 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,61 (m, 4H), 3,45(m, 4H), 1,93 (m, 2H), 1,78 (m, 4H), 1,60 (m, 2H); LC/MS (ESI) calculadopara C2i H29N8O3 (MH)+ 441,2, encontrado 441,3.
Exemplo 18
(4-pirrolidin-1-il-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimi-no-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico<formula>formula see original document page 71</formula>
a. cloridrato de éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-Pirrolidin-1-il-fenila)-carbâmico
<formula>formula see original document page 71</formula>
A uma solução agitada de 4,9 g (30,4 mmols) de 4-pirrolidin-1-il-fenilamina em 70 ml de THF anidro à temperatura ambiente, foi adicionadaem gotas uma solução de 6,4 g (32 mmols) de 4-nitrofenila cloroformiato em16 ml de THF anidro. Depois de completada a adição, a mistura foi agitadapor 1 hora e em seguida filtrada. O precipitado foi primeiro lavado com THFanidro (2 χ 10 ml) e em seguida com DCM anidra (3 χ 10 ml) e secado a vá-cuo para dar 10 g de um sólido esbranquiçado. 1H-RMN (300 MHz1 CD3OD):10,39 (s, 1H), 8,32 (d, 2H), 7,73 (d, 2H), 7,60 (d, 2H), 7,48 (d, 2H), 3,86-3,68(bs, 4H), 2,35-2,24 (bs, 4H). LC/MS (ESI): 328 (MH)+.
b. (4-pirrolidin-1-il-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(meto-xiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 71</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 1ecom a diferença que éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-pirrolidin-1-il-fenila)-carbâmico foi usado no lugar de éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1H RMN (CD3OD) δ 8,20 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,11 (d, J =8,77 Hz, 2H), 6,53 (d, J= 8,91 Hz, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,61 (m, 4H), 3,42 (m,4Η), 3,24 (m, 4Η), 2,01 (m, 4H); LC/MS (ESI) calculado para C2IH29N8O2(MH)+ 425,2, encontrado 425,1.
Exemplo 19
(4-ciclohexil-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 72</formula>
a. éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-Ciclohexil-fenila)-carbâmico
<formula>formula see original document page 72</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 8acom a diferença que 4-ciclohexilanilina foi usado no lugar de 4-isopro-pilanilina,1H RMN (DMSO-d6) δ 10,37 (br, 1H), 8,30 (d, J = 9,30 Hz, 2H),7,52 (d, J = 9,00 Hz, 2H), 7,41 (d, J= 8,10 Hz, 2H), 7,18 (d, J= 8,70 Hz, 2H),1,18-1,82 (11H).
b. (4-ciclohexil-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxi-imino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 72</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 1ecom a diferença que éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-ciclohexil-fenila)-carbâmico foi usado no lugar de éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1H RMN (CDCI3) δ 8,20 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,24 (d, J =8,55 Hz, 2Η), 7,13 (d, J= 8,50 Hz, 2H), 6,35 (br, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,60 (m,4H), 3,44 (m, 4H), 2,45 (m, 1H), 1,83 (m, 4H), 1,73 (m, 1H), 1,37 (m, 4H),1,24 (m,1H); LC/MS (ESI) calculado para C23H32N7O2 (MH)+ 438,3, encon-trado 438,3.
Exemplo 20
(4-cloro-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimino-meti-la)-pirimidin-4-il]-piperazina-1 -carboxílico
<formula>formula see original document page 73</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 1ecom a diferença que 4-clorofenila isocianato foi usado no lugar de éster A-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1H RMN (CDCI3) δ8,20 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,30 (d, J = 9,00 Hz, 2H), 7,25 (d, J= 9,00 Hz, 2H),6,42 (br, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,61 (m, 4H), 3,46 (m, 4H); LC/MS (ESI) calcula-do para Ci7H21CIN7O2 (MH)+ 390,1, encontrado 390,2.
Exemplo 21
(4-fenóxi-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1 -carboxílico
<formula>formula see original document page 73</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 1ecom a diferença que 4-fenoxifenila isocianato foi usado no lugar de éster A-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1H RMN (CDCI3) δ20 8,20 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,31 (m, 4H), 7,07 (m, 1H), 6,97 (m, 4H), 6,35 (br,1H), 3,97 (s, 3H), 3,62 (m, 4H), 3,47 (m, 4H); LC/MS (ESI) calculado paraC23H26N7O3 (MH)+ 448,2, encontrado 448,2.
Exemplo 22
(4-dimetilamino-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxi-imino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 74</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 1ecom a diferença que 4-/V,A/-dimetilaminofenila isocianato foi usado no lugarde éster 4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1H RMN(CDCI3) δ 8,21 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,18 (d, J = 9,04 Hz, 2H), 6,70 (d, J =9,06 Hz, 2H), 6,16 (br, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,59 (m, 4H), 3,45 (m, 4H), 2,91 (s,6H); LC/MS (ESI) calculado para C19H27N8O2 (MH)+ 399,2, encontrado399,3.
Exemplo 23
(4-isopropil-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 74</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 1ecom a diferença que 4-isopropilfenila isocianato foi usado no lugar de éster4-nitro-fenílico do ácido (4-isopropóxi-fenila)-carbâmico. 1H RMN (CDCI3) δ8,21 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,25 (d, J = 8,44 Hz, 2H), 7,16 (d, J = 8,38 Hz1 2H),6,31 (br, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,61 (m, 4H), 3,45 (m, 4H), 2,87 (m, 1H), 1,22 (d,J = 6,92 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculado para C20H28N7O2 (MH)+ 398,2, en-contrado 398,3.Exemplo 24
(4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-[6-Amino-5-(metoxiimino-metila)-pirimidin-4-il]-[1,4]diazepano-1 -carboxílico
<formula>formula see original document page 75</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 1ecom a diferença que O-metil-oxima de 4-amino-6-[1,4]diazepan-1-il-pirimidina-5-carbaldeído foi usada no lugar de O-metil-oxima de 4-amino-6-piperazin-1-il-pirimidina-5-carbaldeído. 1H RMN (CDCI3) δ8,09 (2H), 7,20 (d,J= 8,99 Hz, 2H), 6,82 (d, J = 8,97 Hz, 2H), 6,29 (br, 1H), 4,47 (m, 1H), 3,95(s, 3H), 3,79 (m, 2H), 3,75 (m, 2H), 3,68 (t, J= 5,57 Hz, 2H), 3,57 (t, J= 6,01Hz, 2H), 2,06 (m, 2H), 1,30 (d, J= 6,06 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculado paraC21H30N7O3 (MH)+ 428,2, encontrado 428,3.
Exemplo 25
(4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-{6-amino-5-[(2-amino-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 75</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 2ecom a diferença que dicloridrato de 0-(2-amino-etila)-hidroxilamina foi usadono lugar de dicloridrato de 0-(2-morfolin-4-il-etila)-hidroxilamina. 1H RMN(CDCI3) δ 8,20 (2H), 7,22 (d, J= 8,96 Hz, 2H), 6,83 (d, J= 8,99 Hz, 2H), 6,32(br, 1H), 4,48 (m, 1H), 4,19 (t, J= 5,18 Hz, 2H), 3,60 (m, 4H), 3,45 (m, 4H),3,04 (t, J= 5,17 Hz, 2H), 1,31 (d, J= 6,06 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculadopara C2IH31N8O3 (MH)+ 443,2, encontrado 443,3.
Exemplo 26
(4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-(6-Amino-5-{[2-(3-etil-urei-do)-etoxiimino]-metil}-pirimidin-4-ila)-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 76</formula>
A uma solução de (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-{6-amino-5-[(2-amino-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico(44,7 mg, 0,101 mmol) em CH3CN (1,5 ml) foi adicionado etila isocianato(10,8 mg, 0,152 mmol). A mistura foi agitada por 1 hora e os solventes foramevaporados. O resíduo foi lavado com água e MeOH, e secado a vácuo paradar o produto desejado como um sólido branco. 1H RMN (DMSO-d6) δ 8,40(br, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,45 (br, 2H), 7,28 (d, J = 9,03 Hz, 2H),6,77 (d, J = 9,08 Hz, 2H), 5,92 (t, J = 5,99 Hz, 1H), 5,85 (t, J = 5,02 Hz, 1H),4,48 (m, 1H), 4,07 (t, J = 5,53 Hz, 2H), 3,22-3,54 (10H), 2,97 (m, 2H), 1,20(d, J= 6,02 Hz, 6H), 0,94 (t, J= 7,14 Hz1 3H); LC/MS (ESI) calculado paraC24H36N9O4 (MH)+ 514,3, encontrado 514,3.
Exemplo 27
(4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-metanos-sulfonilamino-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 76</formula>
A uma solução de (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-{6-amino-5-[(2-amino-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico(70,8 mg, 0,16 mmol) em CH2CI2 (2 ml) foi adicionado MsCI (45,8 mg, 0,4mmol) e DIEA ((77,6 mg, 0,6 mmol). A reação foi agitada por 1 hora, e distri-buída entre CH2CI2 e água. Os extratos de CH2CI2 foram evaporados e o re-síduo bruto foi purificado por cromatografia de coluna instantânea sobre síli-ca-gel (5% MeOH/EtOAc como eluente) para dar o produto desejado. 1HRMN (CDCI3) δ 8,20 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,24 (d, J = 8,92 Hz, 2H), 6,83 (d,J= 8,99 Hz, 2H), 6,45 (br, 1H), 5,23 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,29 (t, J= 5,36Hz, 2H), 3,60 (m, 4H), 3,47 (m, 4H), 3,32 (m, 2H), 3,00 (s, 3H), 1,30 (d, J =6,05 Hz1 6H); LC/MS (ESI) calculado para C22H33N8O4S (MH)+ 521,2, encon-trado 521,3.
Exemplo 28
(4-pirrolidin-1-il-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-morfolin-4-il-2-oxo-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 77</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 2ecom a diferença que cloridrato de 2-aminoóxi-1-morfolin-4-il-etanona foi usa-do no lugar de dicloridrato de 0-(2-morfolin-4:il-etila)-hidroxilamina. 1H RMN(DMSO-de) δ 8,26 (br, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,60 (br, 2H), 7,19 (d,J= 8,97 Hz, 2H), 6,48 (d, J= 9,59 Hz1 2H), 4,88 (s, 2H), 3,54 (m, 8H), 3,30-3,47 (8H), 3,16 (m, 4H), 1,92 (m, 4H); LC/MS (ESI) calculado paraC26H36N9O4 (MH)+ 538,3, encontrado 538,3.
Exemplo 29
(4-morfolin-4-il-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-morfolin-4-il-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico<formula>formula see original document page 78</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 5b
com a diferença que dicloridrato de 0-(2-morfolin-4-il-etila)-hidroxilamina foiusado no lugar de cloridrato de metoxiamina. 1H RMN (CDCI3) δ 8,21 (s, 1H),8,18 (s, 1H), 7,25 (d, J = 9,07 Hz, 2H), 6,88 (d, J = 9,07 Hz, 2H), 6,22 (br,1H), 4,30 (t, J = 5,84 Hz, 2H), 3,86 (t, J= 4,66 Hz, 4H), 3,74 (t, J= 4,60 Hz,4H), 3,60 (m, 4H), LC/MS (ESI) calculado para C26H38N9O4 (MH)+ 540,3, en-contrado 540,3.
Exemplo 30
(6-ciclobutóxi-piridin-3-ila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-mor-folin-4-il-etoxiimino)-metil]^Írimidin-4-n}-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 78</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 6dcom a diferença que dicloridrato de 0-(2-morfolin-4-il-etila)-hidroxilamina foiusado no lugar de cloridrato de metoxiamina. 1H RMN (CDCI3) δ 8,21 (s, 1H),8,18 (s, 1H), 7,96 (d, J= 2,68 Hz, 1H), 7,74 (dd, J= 8,83 e 2,79 Hz, 1H),6,67 (d, J= 9,16 Hz, 1H), 6,24 (br, 1H), 5,11 (m, 1H), 4,30 (t, J = 5,64 Hz,2H), 3,74 (m, 4H), 3,61 (m, 4H), 3,45 (m, 4H), 2,73 (t, J= 5,71 Hz, 2H), 2,54(m, 4H), 2,44 (m, 2H), 2,12 (m, 2H), 1,59-1,82 (2H); LC/MS (ESI) calculadopara C25H36N9O4 (MH)+ 526,3, encontrado 526,2.
Exemplo 31
(6-ciclobutóxi-piridin-3-ila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-ami-no-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1 -carboxílico
<formula>formula see original document page 79</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 6dcom a diferença que dicloridrato de 0-(2-amino-etila)-hidroxilamina foi usadono lugar de cloridrato de metoxiamina. 1H RMN (CDCI3) δ 8,21 (s, 1H), 8,20(s, 1H), 7,96 (d, J = 2,26 Hz, 1H), 7,74 (dd, J= 8,83 e 2,78 Hz, 1H), 6,67 (d,J= 8,86 Hz, 1H), 6,31 (br, 1H), 5,10 (m, 1H), 4,20 (t, J= 5,22 Hz, 2H), 3,61(m, 4H), 3,45 (m, 4H), 3,04 (m, 2H), 2,42 (m, 2H), 2,11 (m, 2H), 1,59-1,87(2H); LC/MS (ESI) calculado para C2IH30N9O3 (MH)+ 456,2, encontrado456,2.
Exemplo 32
(4-morfolin-4-il-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-amino-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1 -carboxílico
<formula>formula see original document page 79</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 5bcom a diferença que dicloridrato de 0-(2-amino-etila)-hidroxilamina foi usadono lugar de cloridrato de metoxiamina. 1H RMN (CDCI3) δ 8,21 (s, 1H), 8,20(s, 1H), 7,25 (d, J= 9,05 Hz, 2H), 6,87 (d, J= 9,05 Hz, 2H), 6,23 (br, 1H),4,20 (t, J = 5,25 Hz, 2H), 3,86 (t, J = 4,69 Hz, 4H), 3,62 (m, 4H), 3,46 (m,4H), 3,11 (t, J= 4,86 Hz, 4H), 3,04 (t, J= 5,62 Hz, 2H); LC/MS (ESI) calcula-do para C22H32N903 (MH)+ 470,3, encontrado 470,2.
Exemplo 33(6-ciclobutóxi-piridin-3-ila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-me-tanossulfonilamino-etoxiimino)-metil]-pirimidin
<formula>formula see original document page 80</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 27com a diferença que (6-ciclobutóxi-piridin-3-ila)-amida do ácido 4-(6-amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1-carboxílico foi usada no lugar de (4-isopro-póxi-fenila)-amida do ácido 4-(6-amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1-carboxílico. 1H RMN (CDCI3) δ 8,20 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,99 (d,J = 3,19Hz, 1H), 7,74 (dd,J = 8,82 e 2,78 Hz1 1H), 6,65 (d,J= 8,83 Hz, 1H), 6,57 (s,1H), 5,28 (br, 1H), 5,08 (m, 1H), 4,30 (t, J= 4,68 Hz, 2H), 3,61 (m, 4H), 3,45(m, 6H), 3,00 (s, 3H), 2,42 (m,2H), 2,11 (m, 2H), 1,59-1,87 (2H); LC/MS (E-Sl) calculado para C22H32N9O5S (MH)+ 534,2, encontrado 534,2.
Exemplo 34
(4-pirrolidin-1-il-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-amino-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1 -carboxílico
<formula>formula see original document page 80</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 2ecom a diferença que dicloridrato de 0-(2-amino-etila)-hidroxilamina foi usadono lugar de dicloridrato de 0-(2-morfolin-4-il-etila)-hidroxilamina. 1H RMN(CDCI3) δ 8,21 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,16 (d, J= 8,85 Hz, 2H), 6,51 (d ,J =8,89 Hz, 2H), 4,19 (t, J= 5,08 Hz, 2H), 3,58 (m, 4H), 3,45 (m, 4H), 3,26 (m,4H), 3,04 (t, J = 5,30 Hz, 2H), 1,99 (m, 4H); LC/MS (ESI) calculado paraC22H32N9O2 (MH)+ 454,3, encontrado 454,2.
Exemplo 35
(4-pirrolidin-1-il-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-meta-nossulfonilamino-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 81</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 27com a diferença que (4-pirrolidin-1-il-fenila)-amida do ácido 4-(6-amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1-carboxílico foi usado no lugar de (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-(6-amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-pipera-zina-1-carboxílico. 1H RMN (CD3OD) δ 8,26 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,11 (d, J =8,94 Hz1 2H), 6,53 (d, J = 9,00 Hz, 2H), 4,26 (t, J = 5,22 Hz, 2H), 3,62 (m,4H), 3,50 (m, 2H), 3,44 (m, 4H), 3,24 (m, 4H), 2,97 (s, 3H), 2,00 (m, 4H);LC/MS (ESI) calculado para C23H34N9O4S (MH)+ 532,2, encontrado 532,1.
Exemplo 36
(4-pirrolidin-1-il-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-morfolin-4-il-etoxiimino)-metil]-pirimidin-4-il}-piperazina-1 -carboxílico
<formula>formula see original document page 81</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 2ecom a diferença que (4-pirrolidin-1-il-fenila)-amida do ácido 4-(6-amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1-carboxílico foi usado no lugar de (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-(6-amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-pipera-zina-1-carboxílico. 1H RMN (CD3OD) δ 8,24 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,11 (d,J =8,96 Hz1 2Η), 6,53 (d, J = 8,97 Hz, 2Η), 4,34 (t, J = 5,53 Hz, 2H), 3,71 (t, J =4,86 Hz, 4H), 3,62 (m, 4H), 3,43 (m, 4H), 3,24 (m, 4H), 2,75 (t, J= 5,70 Hz,2H), 2,57 (m, 4H), 2,01 (m, 4H); LC/MS (ESI) calculado para C26H38N9O3(MH)+ 524,3, encontrado 524,3.
Exemplo 37
(4-isopropil-fenila)-amida do ácido 4-{6-Amino-5-[(2-morfolin-4-il-etoxiimino)-metil]^irimidin-4-il}-piperazina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 82</formula>
Preparado essencialmente da maneira descrita no Exemplo 2ecom a diferença que (4-isopropil-fenila)-amida do ácido 4-(6-amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1-carboxílico foi usado no lugar de (4-isopropóxi-fenila)-amida do ácido 4-(6-amino-5-formil-pirimidin-4-ila)-piperazina-1-carboxílico. 1H RMN (CD3OD) δ 8,25 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,26 (d, J= 8,57Hz, 2H), 7,14 (d, J= 8,43 Hz, 2H), 4,37 (t, J= 6,36 Hz, 2H), 3,74 (t, J= 4,75Hz, 4H), 3,65 (m, 4H), 3,44 (m, 4H), 2,84 (m, 3H), 2,66 (m, 4H), 1,22 (d, J =6,92 Hz, 6H); LC/MS (ESI) calculado-para C25H37N8O3 (MH)+ 497,2, encon-trado 497,3.
ATIVIDADE BIOLÓGICA
Ensaios In Vitro
Os ensaios in vitro representativos a seguir foram realizados pa-ra determinar as atividades biológicas dos compostos dentro do escopo dainvenção. Eles são dados para ilustrar a invenção de forma não limitativa.
Inibição da atividade enzimática de FLT3, da proliferação deMV4-11 e da fosforilação de Baf3-FLT3 exemplificam a inibição específicados processos celulares e enzimáticos da FLT3 que são dependentes daatividade de FLT3. A inibição da proliferação celular de Baf3 é usada comoum teste de citotoxicidade independente de FLT3, c-Kit e TrkB dos compos-tos dentro do escopo da invenção. Todos os exemplos neste relatório mos-tram inibição significativa e específica das respostas celulares da FLT3 cina-se e dependentes da FLT3. Os exemplos neste relatório também mostraminibição específica da cinase TrkB e c-kit em um ensaio de atividade enzimá-tica. Os compostos da presente invenção também são permeáveis a células.
Ensaio de cinase por polarização da fluorescência de FLT3
Para determinar a atividade dos compostos da presente inven-ção em um ensaio de cinase in vítro, inibição do domínio de cinase isoladado receptor de FLT3 humano (a.a. 571-993) foi efetuada usando o seguinteprotocolo de polarização da fluorescência (FP). O ensaio de FLT3 FP utilizao fosfopeptídio marcado com fluoresceína e o anticorpo antifosfotirosina in-cluído no kit "Panvera Phospho-Tyrosine Kinase" (Green) fornecido pela Invi-trogen. Quando a FLT3 fosforila a polyGlu4Tyr, o fosfopeptídio marcado comfluoresceína é deslocado do anticorpo antifosfotirosina pela poli GIu4Tyr fos-forilada, diminuindo assim o valor da FP. A reação da cinase FLT3 é incuba-da à temperatura ambiente por 30 minutos nas seguintes condições: 10 nMde FLT3 571-993, 20 ug/ml de poli GIu4Tyr, 150 uM de ATP, 5 mM de MgCI2,1% de composto em DMSO. A reação da cinase é interrompida com a adi-ção de EDTA. O fosfopeptídio marcado com fluoresceína e o anticorpo anti-fosfotirosina são adicionados e incubados por 30 minutos à temperatura am-biente.
Todos os pontos de dados são a média de amostras em triplica-ta. A análise dos dados de inibição e de IC50 foi feita com o GraphPad Prismusando um ajuste de regressão não linear com uma equação de dose-resposta sigmoidal (curvatura variável) de multiparâmetros. O IC50 para ainibição de cinase representa a dose de um composto que resulta em umainibição de 50% da atividade de cinase em relação ao controle com veículo DMSO.
Ensaio de cinase por polarização da fluorescência de c-Kit
Os compostos da presente invenção também são inibidores es-pecíficos da c-kit. A seleção dos compostos de fórmula I para uso como ini-bidores da c-Kit foi efetuada da seguinte maneira usando um ensaio de cina-se in vitro para medir a inibição do domínio de cinase isolada do receptor dec-kit humano em um protocolo de polarização da fluorescência (FP). O en-saio de c-kit utilizou o fosfopeptídio marcado com fluoresceína e o anticorpoantifosfotirosina incluído no kit "Panvera Phospho-Tyrosine Kinase" (Green)fornecido pela Invitrogen. Quando a c-kit fosforilou a poli GIu4Tyr1 o fosfopep-tídio marcado com fluoresceína foi deslocado do anticorpo antifosfotirosinapela poli GIu4Tyr fosforilada, diminuindo assim o valor da FP. A reação dacinase c-kit cinase foi incubada à temperatura ambiente por 45 minutos nasseguintes condições: 1 nM de c-kit (ProQinase, lote SP005), 100 ug/ml depoli GIu4Tyr1 50uM de ATP, 5 mM de MgCI2,1 mM de DTT, 0,01% de Tween-20, 1% de DMSO ou composto em 100 nM de Hepes, pH 7,5. A reação dacinase foi interrompida com a adição de EDTA. O fosfopeptídio marcadocom fluoresceína e o anticorpo antifosfotirosina foram adicionados e incuba-dos por 30 minutos à temperatura ambiente e a polarização da fluorescênciafoi lida. Os pontos de dados foram a média de amostras em triplicata. A aná-lise dos dados de inibição e de IC5o foi feita com o GraphPad Prism usandoum ajuste de regressão não linear com uma equação de dose-resposta sig-moidal (curvatura variável) de multiparâmetros. O IC50 para a inibição de ci-nase representa a dose de um composto que resultou em uma inibição de50% da atividade de cinase em relação ao controle com veículo DMSO.
Ensaio de cinase por polarização da fluorescência de Trk B (dados de TrkBICssl
Os compostos da presente invenção também são inibidores es-pecíficos da TrkB. A seleção dos compostos de fórmula I para uso como ini-bidores da TrkB foi efetuada da seguinte maneira. O ensaio de TrkB utilizouo fosfopeptídio marcado com fluoresceína e o anticorpo antifosfotirosina in-cluído no kit "Panvera Phospho-Tyrosine Kinase" (Green) fornecido pela Invi-trogen. Quando a TrkB fosforilou a poli GIu4Tyr, o fosfopeptídio marcadocom fluoresceína foi deslocado do anticorpo antifosfotirosina pela poliGIu4Tyr fosforilada, diminuindo assim o valor da FP. A reação da cinaseTrkB cinase foi incubada à temperatura ambiente por 30 minutos nas seguin-tes condições: 50 nM de TrkB (Upstate, catálogo # 14-507M), 20 de ug/mlpoli GIu4Tyr, 150 uM de ATP, 5 mM de MgCI2,1% de composto em DMSO. Areação da cinase foi interrompida com a adição de EDTA. O fosfopeptídiomarcado com fluoresceína e o anticorpo antifosfotirosina foram adicionadose incubados por 30 minutos à temperatura ambiente. Os pontos de dadosforam a média de amostras em triplicata. A análise dos dados de inibição ede IC5O foi feita com o GraphPad Prism usando um ajuste de regressão nãolinear com uma equação de dose-resposta sigmoidal (curvatura variável) demultiparâmetros. O IC5o para a inibição de cinase representa a dose de umcomposto que resultou em uma inibição de 50% da atividade de cinase emrelação ao controle com veículo DMSO.
Inibição da proliferação de células MV4-11 e Baf3
Para avaliar a potência celular dos compostos da presente in-venção, a inibição do crescimento específico de FLT3 foi medida na linha-gem celular leucêmica MV4-11 (ATCC Número: CRL-9591). As células MV4-11 são provenientes de um paciente com leucemia mielomonocítica infantilaaguda com uma translocação de 11q23 resultando em um rearranjo gênicode MLL e contendo uma mutação FLT3-ITD (subtipo M4 de AML)(1,2). Ascélulas MV4-11 não conseguem crescer e sobreviver sem a FLT3ITD ativa.
A linhagem celular do Iinfoma de células B murinas dependentede IL-3, Baf3 foi usada como controle para confirmar a seletividade doscompostos da presente invenção medindo-se a inibição de crescimento i-nespecífica pelos compostos da presente invenção.
Para medir a inibição da proliferação pelos compostos de teste,foi usado o reagente CeIITiterGIo à base dé Iuciferase (Promega), que quan-tifica o número de células totais com base na concentração de ATP celulartotal. As células são plaqueadas a 10.000 células por compartimento em 100ul de no meio RPMI contendo penicilina/estreptavidina, 10% de FBS e 1ng/ml de GM-CSF ou 1 ng/ml de IL-3 para as células MV4-11 e Baf3, respec-tivamente.
Diluições de compostos ou DMSO a 0,1% (controle com veículo)são adicionados às células e as células são deixadas crescer por 72 horasem condições normais de crescimento de células (37°C, 5% CO2). Para me-didas da atividade em células MV4-11 cultivadas em 50% de plasma, as cé-lulas foram plaqueadas a 10.000 células por compartimento em uma mistura1:1 de meio de crescimento e plasma humano (volume final de 100 μΙ). Paramedir o crescimento de células totais um mesmo volume do reagente CeIITi-terGIo foi adicionado a cada compartimento, de acordo com as instruções dofabricante, e a luminescência foi quantificada. O crescimento de células to-tais foi quantificado como a diferença em contagens Iuminescentes (unida-des de luz relativa, RLU) do número de células no dia 0 comparado com onúmero de células totais no dia 3 (72 horas de crescimento e/ou tratamentocom composto). Uma inibição de cem por cento é definida como um equiva-lente de RLU para a leitura no dia 0. Uma inibição de zero por cento foi defi-nida como o sinal de RLU para o controle com veículo DMSO no dia 3 docrescimento. Todos os pontos de dados são a média de amostras em tripli-cata. O IC5O para inibição de crescimento representa a dose de um compostoque resulta em uma inibição de 50% do crescimento de células totais no dia3 do controle com veículo DMSO. A análise dos dados de inibição e de IC5ofoi feita com o GraphPad Prism usando um ajuste de regressão não linearcom uma equação de dose-resposta sigmoidal (curvatura variável) de multi-parâmetros.
As células MV4-11 expressam a mutação por duplicação em sé-rie interna da FLT3, e portanto são totalmente dependentes da atividade daFLT3 para crescer. Uma forte atividade contra as células MV4-11 é conside-rada uma qualidade desejável da invenção. Em contraste, a proliferação decélulas Baf3 é induzida pela çitocina IL-3 e assim sendo elas são usadascomo um controle de toxicidade inespecífica para os compostos de teste.
Todos os exemplos de compostos na presente invenção apresentaram umainibição < 50% a uma dose de 3 uM (dados não incluídos), sugerindo que oscompostos não são citotóxicos e possuem boa seletividade para FLT3.Elisa do Receptor de FLT3 baseado em células
A inibição celular específica da fosforilação de FLT3 do tipo sel-vagem induzida por ligando foi medida da seguinte maneira: células Baf3FLT3 superexpressando o receptor de FLT3 foram adquiridas com o Dr. Mi-chael Heinrich (Oregon Health and Sciences University). As linhagens celula-res Baf3 FLT3 foram criadas por transfecção estável de células Baf3 de ori-gem (uma linhagem de Iinfoma de células B murinas dependente da citocinaIL-3 para crescimento) com FLT3 do tipo selvagem. As células foram sele-cionadas quanto a sua capacidade de crescer na ausência de IL-3 e na pre-sença do ligando de FLT3.
As células Baf3 foram mantidas em RPMI 1640 com 10% deFBS1 penicilina/estreptavidina e 10 ng/ml do ligando de FLT a 37°C, 5% CO2.Para medir a inibição direta da atividade do receptor de FLT3 do tipo selva-gem e a fosforilação, foi desenvolvido um método de ELISA tipo sanduíchesemelhante àqueles desenvolvidos para outras RTKs (3,4). 200 μΙ de célulasBaf3FLT3 (1x106/ml) foram plaqueados em pratos de 96 cavidades em RPMI1640 com 0,5% de soro e 0,01 ng/ml de IL-3 por 16 horas antes da incuba-ção por 1 hora com o composto ou com o veículo DMSO. As células foramtratadas com 100 ng/ml do ligando Flt (R&D Systems Cat# 308-FK) por 10minutos a 37°C. As células foram peletizadas, lavadas e Iisadas em 100 ulde tampão de Iise (50 mM de Hepes, 150 mM de NaCI, 10% de glicerol, 1%de Triton -X-100, 10 mM de NaF, 1 mM de EDTA, 1,5 mM de MgCI2, 10 mMde pirofosfato de Na) suplementado com fosfatase (Sigma Cat# P2850) einibidores de protease (Sigma Cat #P8340). Os Iisados foram clarificados porcentrifugação a 1000xg por 5 minutos a 4°C. Os Iisados de células foramtransferidos para placas de microtitulação de 96 cavidades de paredes bran-cas (Costar #9018) revestidas com 50 ng/cavidade de anticorpo anti-FLT3(Santa Cruz Cat# sc-480) e bloqueadas com o reagente SeaBIock (PierceCat#37527). Os Iisados foram incubados a 4°C por 2 horas. As placas foramlavadas 3x com 200 ul/cavidade de PBS/0,1% de Triton-X-100. As placasforam então incubadas com uma diluição 1:8000 de anticorpo antifosfotirosi-na conjugado com HRP (Clone 4G10, Upstate Biotechnology Cat#16-105)por 1 hora à temperatura ambiente. As placas foram lavadas 3x com 200ul/cavidade de PBS/0,1% de Triton-X-100. A detecção de sinal com o rea-gente Super Signal Pico (Pierce Cat#37070) foi feita de acordo com as ins-truções do fabricante com um luminômetro de microplaca Berthold. Todos ospontos de dados são a média de amostras em triplicata. As unidades de luzrelativa total (RLU) da fosforilação de DLT3 estimulada com o ligando Flt napresença de 0,1% de DMSO de controle foi definida como 0% de inibição e100% de inibição foi a RLU total de Iisado no estado basal. A análise dosdados de inibição e de IC50 foi feita com o GraphPad Prism usando um ajus-te de regressão não linear com uma equação de dose-resposta sigmoidal(curvatura variável) de multiparâmetros.
REFERÊNCIAS DE PROCEDIMENTOS BIOLÓGICOS
1. Drexler HG. The Leukemia-Lymphoma Cell Line Factsbook. AcademicPres: San Diego, CA1 2000.
2. Quentmeier H, Reinhardt J, Zaborski M, Drexler HG. FLT3 mutations inacute myeloid Ieukemia cell lines. Leukemia. 2003 Jan;17:120-124.
3. Sadick, MD, Sliwkowski, MX1 Nuijens, A, Bald, L1 Chiang, N, Lofgren,JA, Wong WLT. Analysis of Heregulin-Induced ErbB2 Phosphorylationwith a High-Throughput Kinase Receptor Activation Enzyme-Linked Im-munsorbent Assay, Analytical Biochemistry. 1996; 235:207-214.
4. Baumann CA, Zeng L, Donatelli RR, Maroney AC. Development of aquantitative, high-throughput cell-based enzyme-linked immunosorbentassay for detection of colony-stimulating factor-1 receptor tyrosine kina-se inhibitors. J Biochem Biophys Methods. 2004; 60:69-79.
DADOS BIOLÓGICOS
Dados biológicos para FLT3
A atividade de compostos representativos da presente invençãoestá apresentada nas tabelas abaixo. Todas as atividades estão em mM eapresentam as seguintes incertezas: FLT3 cinase: +10%; MV4-11 e Baf3-FLT3: + 20%.
<table>table see original document page 88</column></row><table><table>table see original document page 89</column></row><table><table>table see original document page 90</column></row><table><table>table see original document page 91</column></row><table>
Dados biológicos para TrkB
A atividade de compostos representativos da presente invençãoestá apresentada nas tabelas abaixo. Todas as atividades estão em mM eapresentam as seguintes incertezas: TrkB IC50: ±10 %.
<table>table see original document page 91</column></row><table><table>table see original document page 92</column></row><table>
MÉTODOS DE TRATAMENTO / PREVENÇÃO
Em um outro aspecto desta invenção, os compostos da invençãopodem ser usados para inibir a atividade de tirosina cinases, incluindo a ati-vidade de Flt3, e/ou a atividade de c-kit, e/ou a atividade de TrkB, ou parareduzir a atividade de cinases, incluindo a atividade de Flt3, e/ou a atividadede c-kit, e/ou a atividade de TrkB, em uma célula ou em um indivíduo, oupara tratar distúrbios relacionados com a atividade ou expressão da cinaseFLT3, e/ou c-kit e/ou TrkB em um indivíduo.
Em uma modalidade deste aspecto, a presente invenção forneceum método para reduzir ou inibir a atividade de cinase da FLT3 e/ou c-kite/ou TrkB em uma célula compreendendo a etapa de contatar a célula comum composto de fórmula I. A presente invenção também fornece um métodopara reduzir ou inibir a atividade de cinase da FLT3 , e/ou c-kit e/ou TrkB emum indivíduo compreendendo a etapa de administrar um composto de fórmu-la I ao indivíduo. A presente invenção fornece ainda um método para inibir aproliferação celular em uma célula compreendendo a etapa de contatar acélula com um composto de fórmula I.
A atividade de cinase da FLT3, c-kit ou TrkB em uma célula ouem um indivíduo pode ser determinada por procedimentos bastante conhe-cidos na literatura, tais como o ensaio de cinase FLT3 descrito neste relató-rio, o ensaio de cinase c-kit descrito neste relatório, o ensaio de cinase TrkBdescrito neste relatório.
O termo "indivíduo" conforme usado neste relatório, refere-se aum animal, de preferência um mamífero, mais preferivelmente um ser huma-no, que foi objeto de tratamento, observação ou experiência.
O termo "contatar" conforme usado neste relatório, refere-se àadição de um composto a células para que tal composto seja absorvido pelacélula.
Em outras modalidades deste aspecto, a presente invenção for-nece métodos profiláticos e terapêuticos para tratar um indivíduo com riscode (ou suscetível a) desenvolver um distúrbio proliferativo de células ou umdistúrbios relacionado com FLT3 e/ou c-kit e/ou TrkB.
Em um exemplo, a invenção fornece métodos para prevenir emum indivíduo um distúrbio proliferativo de células ou um distúrbio relacionadocom FLT3 e/ou c-kit e/ou TrkB, compreendendo administrar ao indivíduouma quantidade profilaticamente eficaz de uma composição farmacêuticacompreendendo o composto de fórmula I e um veículo farmaceuticamenteaceitável. A administração do referido agente profilático pode ocorrer antesda manifestação de sintomas característicos do distúrbio proliferativo de cé-lulas ou do distúrbio relacionado com FLT3 e/ou c-kit e/ou TrkB, para que taldoença ou distúrbio seja prevenido ou, alternativamente, tenha sua evoluçãoretardada.
Em um outro exemplo, a invenção refere-se a métodos para tra-tar em um indivíduo um distúrbio proliferativo de células ou um distúrbio re-lacionado com FLT3 e/ou c-kit e/ou TrkB compreendendo administrar ao in-divíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farma-cêutica compreendendo o composto de fórmula I e um veículo farmaceuti-camente aceitável. A administração do referido agente terapêutico pode o-correr concorrentemente com a manifestação de sintomas característicos dodistúrbio, de modo que o agente terapêutico serve como terapia para com-pensar o distúrbio proliferativo de células ou distúrbios relacionados comFLT3 e/ou c-kit e/ou TrkB.
O termo "quantidade profilaticamente eficaz" refere-se a umaquantidade de um composto ativo ou agente farmacêutico que inibe ou re-tarda em um indivíduo o aparecimento de um distúrbio que está sendo pro-curado pelo pesquisador, veterinário, médico ou outro clínico.
O termo "quantidade terapeuticamente eficaz" conforme usadoneste relatório, refere-se a uma quantidade de composto ativo ou agentefarmacêutico que cria a resposta biológica ou medicinal em um indivíduo queestá sendo procurada pelo pesquisador, veterinário, médico ou outro clínico,que inclui alívio dos sintomas da doença ou distúrbio sendo tratado.
Métodos para determinar as doses terapeuticamente e profilati-camente eficazes para a presente composição farmacêutica são conhecidosna literatura.
Conforme aqui usado, o termo "composição" abrange um produ-to compreendendo os compostos especificados nas quantidades especifica-das, assim como qualquer que resulte, direta ou indiretamente, de combina-ções dos compostos especificados nas quantidades especificadas.
Conforme aqui usado, os termos "distúrbios relacionados comFLT3", ou "distúrbios relacionados com o receptor de FLT3", ou "distúrbiosrelacionados com a tirosina cinase receptora de FLT3" incluem doenças as-sociadas à atividade de FLT3 ou envolvendo a atividade de FLT3, por exem-plo, a superatividade de FLT3, e condições que acompanham estas doen-ças. O termo "superatividade de FLT3" refere-se a 1) superexpressão deFLT3 em células que normalmente não expressam FLT3; 2) expressão deflt3 por células que normalmente não expressam FLT3; e 3) expressão au-mentada de FLT3 levando à proliferação celular indesejada; ou 4) mutaçõeslevando à ativação constitutiva de FLT3. Exemplos de "distúrbios relaciona-dos com FLT3" incluem distúrbios resultantes da superestirçiulação de FLT3devido à quantidade anormalmente alta de FLT3 ou de mutações em FLT3,ou distúrbios resultantes de quantidade anormalmente alta de atividade deFLT3 devido à quantidade anormalmente de FLT3 ou de mutações em FLT3.Sabe-se que a superatividade de FLT3 está envolvida na patogênese deinúmeras doenças, que incluem distúrbios proliferativos de células, distúrbiosneoplásicos e cânceres listados abaixo.
O termo "distúrbios proliferativos de células" refere-se à prolife-ração celular indesejada em um ou mais subconjuntos de células em umorganismo multicelular que resulta em dano (isto é, desconforto ou expecta-tiva de vida reduzida) aos organismos multicelulares. Distúrbios proliferativosde células podem ocorrer em diferentes tipos de animais e seres humanos.Por exemplo, conforme aqui usado "distúrbios proliferativos de células" in-cluem distúrbios neoplásicos e similares distúrbios proliferativos dè células.
Conforme aqui usado, um "distúrbio neoplásico" refere-se a umtumor resultante de crescimento celular anormal ou descontrolado. Exem-plos de distúrbios neoplásicos incluem, porém sem limitação, distúrbios he-matopoiéticos tais como, por exemplo, os distúrbios mieloproliferativos, taiscomo trombocitemia, trombocitose essencial (ET), metaplasia mielóide ag-nogênica, mielofibrose (MF), mielofibrose com metaplasia mielóide (MMM),mielofibrose idiopática crônica (IMF), e policitemia vera (PV), as citopenias, esíndromes mielodisplásicas pré-malignas; cânceres tais como cânceres ce-rebrais, cânceres de pulmão, cânceres de mama, cânceres colorretais, cân-ceres de próstata, cânceres gástricos, cânceres de esôfago, cânceres decólon, cânceres pancreáticos, cânceres de ovário, e malignidades hematoló-gicas, que incluem mielodisplasia, mieloma múltiplo, Ieucemias e linfomas.Exemplos de malignidades hematológicas incluem, por exemplo, leucemias,linfomas (linfoma não-Hodgkin), doença de Hodgkin (também chamada delinfoma de Hodgkin), e mieloma - por exemplo, leucemia linfocítica aguda(ALL), leucemia mielóide aguda (AML), leucemia promielocítica aguda (APL),leucemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mielóide crônica (CML), leuce-mia neutrofílica crônica (CNL), leucemia não diferenciada aguda (AUL)1 lin-foma de células grandes anaplásicas (ALCL), leucemia prolinfocítica (PML),leucemia mielomonocítica juvenila (JMML)1 ALL de células T adultas, AMLcom mielodisplasia de três linhagens (AML/TMDS), leucemia de linhagemmista (MLL)1 síndromes mielodisplásicas (MDSs)1 distúrbios mieloproliferati-vos (MPD),e mieloma múltiplo, (MM).
Exemplos de similares distúrbios ρroIiferativos de células inclu-em, porém sem limitação, aterosclerose (Libby P, 2003, "Vascular biology ofatherosclerosis: overview and state of the art", Am J Cardiol 91(3A):3A-6A)vasculopatias induzidas por transplante (Helisch A, Schaper W. 2003, Arteri-ogenesis: the development and growth of collateral arteries. Microcirculation,10(1):83-97), degeneração macular (Holz FG et al., 2004, "Pathogenesis ofIesions in late age-related macular disease", Am J Ophthalmol. 137(3):504-10), hiperplasia da neoíntima e restenose (Schiele TM et. al., 2004, "Vascu-lar restenosis - striving for therapy." Expert Opin Pharmacother. 5(11):2221-32), fibrose pulmonar (Thannickal VJ et al., 2003, "Idiopathic pulmonary fi-brosis: emerging concepts on pharmacotherapy, Expert Opin Pharmacother.5(8): 1671 -86), glomerulonefrite (Cybulsky AV, 2000, "Growth factor pathwaysin proliferative glomerulonephritis", Curr Opin Nephrol Hypertens " 9(3):217-23), glomerulosclerose (Harris RC et al., 1999, "Molecular basis of injury andprogression in focai glomerulosclerosis" Nephron 82(4):289-99), displasiarenal e fibrose renal (Woolf AS et al., 2004, "Evolving concepts in human re-nal dysplasia", J Am Soc Nephrol115(4):998-1007), retinopatia diabética(Grant MB et al., 2004, "The role of growth factors in the pathogenesis of di-abetic retinopathy", Expert Opin Investig Drugs 13(10):1275-93) e artritereumatóide (Sweeney SE1 Firestein GS, 2004, Rheumatoid arthritis: regulati-on of synovial inflammation, Int J Biochem Cell Biol. 36(3):372-8).
Conforme aqui usado, os termos "distúrbios relacionados comTrkB", ou "distúrbios relacionados com o receptor de TrkB" ou "distúrbiosrelacionados com a tirosina cinase receptora de TrkB" incluem doenças as-sociadas à atividade de TrkB ou envolvendo a atividade de TrkB, por exem-plo, a superatividade de TrkB, e condições que acompanham estas doenças.O termo "superatividade de TrkB" refere-se a 1) expressão de TrkB em célu-las que normalmente não expressam TrkB; 2) expressão de TrkB por célulasque normalmente não expressam TrkB; e) expressão aumentada de TrkBlevando à proliferação celular indesejada; ou 4) expressão aumentada deTrkB levando à sobrevivência celular independente de adesão; 5) mutaçõeslevando à ativação constitutiva de TrkB. Exemplos de "distúrbios relaciona-dos com TrkB" incluem 1) distúrbios resultantes da superestimulação deTrkB devido à quantidade anormalmente alta de TrkB ou de mutações emTrkB, ou 2) distúrbios resultantes da quantidade anormalmente alta de ativi-dade de TrkB devido à quantidade anormalmente alta de TrkB ou de muta-ções em TrkB.
Distúrbios relacionados com TrkB incluem inúmeras doenças,que incluem cânceres, tais como, por exemplo, neuroblastoma, tumor deWilm, mama, cólon, próstata e pulmão. Vide, por exemplo, Brodeur GM,(2003) "Neuroblastoma: biological insights into a clinicai enigma." Nat Rev-Cancer; 3(3):203-16; Eggerl A et al. (2001) "Expression of the neurotrophinreceptor TrkB is associated with unfavorable outcome in Wilms1 tumor" J ClinOncol. 19(3):689-96; Descamps S et al. (2001) "Nerve growth factor stimula-tes proliferation and survival of human breast câncer cells through two dis-tinct signaling pathways." J Biol Chem. 276(21): 17864-70; Bardelli A, et al.(2003) "Mutational analysis of the tyrosine kinome in colorectal cancers."Science 300(5621 ):949; Weeraratna AT et al. (2000) "Rational basis for Trkinhibition therapy for prostate câncer." Prostate 45(2): 140-8,19(3):689-96;Ricci et al., (2001) "Neurotrophins and neurotrophin receptors in human Iungcâncer." Am J Respir Cell Mol Biol. 25(4):439-46.
Conforme aqui usado, os termos "distúrbios relacionados com c-kit", ou "distúrbios relacionados com o receptor de c-kit", ou "distúrbios rela-cionados com a tirosina cinase receptora de c-kit" incluem doenças associa-das à atividade de c-kit ou envolvendo atividade de c-kit, por exemplo, a su-peratividade de c-kit, e condições que acompanham estas doenças. O termo"superatividade de c-kit" refere-se a 1) expressão de c-kit em células quenormalmente não expressam c-kit; 2) expressão de c-kit em células quenormalmente não expressam c-kit; 3) expressão aumentada de c-kit levandoà proliferação celular indesejada; ou 4) mutações levando à ativação consti-tutiva de c-kit. Exemplos de "distúrbios relacionados com c-kit" incluem dis-túrbios resultantes da superestimulação de c-kit devido à quantidade anor-malmente alta de c-kit ou de mutações em c-kit, ou distúrbios resultantes daquantidade anormalmente alta de atividade de c-kit devido à quantidade a-normalmente alta de c-kit ou de mutações em c-kit.
Distúrbios relacionados com c-kit incluem inúmeras doenças,tais como mastocitose, leucemia de mastócitos, tumor estromal gastrointes-tinal, Iinfoma de células exterminadoras naturais sinonasais/linfoma de célu-las T, seminoma, disgerminoma, carcinoma de tireóide; carcinoma microce-Iular de pulmão, melanoma maligno, carcinoma cístico adenóide, carcinomade ovário, leucemia mielogênica aguda, Iinfoma de células grandes anaplá-sicas, angiossarcoma, carcinoma endometrial, ALL de células T pediátricas,linfoma, carcinoma de mama e carcinoma de próstata. Vide Heinrich, Micha-el C. et al. Review Article: Inhibition of KIT Tyrosine Kinase Activity: A NovelMolecular Approach to the Treatment of KIT-Positive Malignancies.
Em uma outra modalidade deste aspecto, a invenção abrangeuma terapia combinada para tratar ou inibir o aparecimento de um distúrbioproliferativo de células ou um distúrbio relacionado com FLT3 e/ou c-kit e/ouTrkB em um indivíduo. A terapia combinada compreende administrar ao indi-víduo uma quantidade terapeuticamente ou profilaticamente eficaz de umcomposto de fórmula I, e uma ou mais outras terapias antiproliferação celularque incluem quimioterapia, terapia com radiação, terapia genética e imunote-rapia.
Em uma modalidade da presente invenção, o composto da pre-sente invenção pode ser administrado em combinação com quimioterapia.Conforme aqui usado, quimioterapia refere-se a uma terapia envolvendo umagente quimioterápico. Uma variedade de agentes quimioterápicos podemser usados nos métodos de tratamento combinado descritos nesta invenção.
Agentes quimioterápicos contemplados como exemplificativos, incluem, po-rém sem limitação: compostos à base de platina (por exemplo, cisplatina,carboplatina, oxaliplatina); compostos à base de taxano (por exemplo, pacli-taxcel, docetaxol); compostos à base de campototecina (irinotecano, topote-cano); alcalóides da vinca (por exemplo, vincristina, vimblastina, vinorelbina);derivados de nucleosídeo antitumorais (por exemplo, 5-fluoruracila, Ieucovo-rina, gencitabina, capecitabina); agentes alquilantes (por exemplo, ciclofos-famida, carmustina, lomustina, tiotepa); epipodofilotoxinas / podofilotoxinas(por exemplo, etoposida, teniposida); inibidores de aromatase (por exemplo,anastrozol, letrozol, exemestano); compostos antiestrogênicos (por exemplo,tamoxifeno, fulvestrant), antifolatos (por exemplo, premetrexed dissódico);agentes hipometilantes (por exemplo, azacitidina); biológicos (por exemplo,gemtuzamab, cetuximab, rituximab, pertuzumab, trastuzumab, bevacizumab,erlotinib); antibióticos/antraciclinas (por exemplo idarubicina, actinomicina D,bleomicina, daunorubicina, doxorubicina, mitomicina C, dactinomicina, car-minomicina, daunomicina); antimetabólitos (por exemplo, aminopterina, clo-farabina, citosina arabinosídeo, metotrexato); agentes fixadores de tubulina(por exemplo, combretastatina, colchicina, nocodazol); inibidores de topoi-somerase (por exemplo, camptotecina). Outros agentes úteis incluem vera-pamila, um antagonista de cálcio que se mostrou útila em combinação comagentes antineoplásicos para estabelecer a quimiossensibilidade em célulastumorosas resistentes aos agentes quimioterápicos aceitos e para potencia-lizar â eficácia de tais compostos em malignidades sensíveis a drogas. VideSimpson WG, The calcium channel blocker verapamila and câncer chemo-therapy. Cell Calcium. 1985 Dec;6(6):449-67. Adicionalmente, agentes qui-mioterápicos ainda em desenvolvimento são contemplados como sendo Ci-teis em combinação com o composto da presente invenção.
Em uma outra modalidade da presente invenção, o composto dapresente invenção pode ser administrado em combinação com terapia porradiação. Conforme aqui usado, "terapia por radiação" refere-se a uma tera-pia compreendendo expor o indivíduo com necessidade da mesma a umaradiação. Tal terapia é conhecida pelos especialistas na técnica. O esquemaapropriada da terapia por radiação será semelhante àqueles já empregadosem terapias clínicas onde a terapia por radiação é usada isolada ou emcombinação com outros quimioterápicos.
Em uma outra modalidade da presente invenção, o composto dapresente invenção pode ser administrado em combinação com uma terapiagenética. Conforme aqui usado, "terapia genética" refere-se a uma terapiavetorizada para genes particulares envolvidos no desenvolvimento de tumor.Estratégias de terapia genética possíveis incluem a restauração de genesinibitórios de câncer defeituosos, transdução ou transfecção de células comDNA anti-sentido correspondente a genes codificando fatores de crescimen-to e seus receptores, estratégias à base de RNA tais como ribozimas, iscasde RNA, RNAs mensageiros anti-sentido e moléculas de RNA interferentepequeno (siRNA) e os chamados 'genes suicidas'.
Em outras modalidades desta invenção, o composto da presenteinvenção pode ser administrado em combinação com uma imunoterapia.Conforme aqui usado, "imunoterapia" refere-se a uma terapia vetorizada pa-ra uma proteína particular envolvida no desenvolvimento de tumor por meiode anticorpos específicos para tal proteína. Por exemplo, anticorpos mono-clonais contra o fator de crescimento endotelial vascular vêm sendo usadosno tratamento de cânceres.
Onde se usa um segundo fármaco além de um composto dapresente invenção, os dois fármacos podem ser administrados simultanea-mente (por exemplo em composições separadas ou unitárias), seqüencial-mente em qualquer ordem, aproximadamente ao mesmo tempo, ou em pro-gramas de dosagem separados. Neste último caso, os dois compostos serãoadministrados dentro de um período de tempo e em quantidade e de manei-ra que seja suficiente para garantir que será obtido um efeito vantajoso ousinergístico. Será observado que o método e a ordem de administração pre-feridos e as respectivas quantidades de dosagem e regimes para cada com-ponente da combinação vão depender do agente quimioterápico particularsendo administrado em conjunto com o composto da presente invenção, suavia de administração, o tumor particular sendo tratado e o hospedeiro parti-cular sendo tratado.
Como será entendido pelos especialistas na técnica, as dosesapropriadas de agentes quimioterápicos geralmente serão iguais ou meno-res que aquelas já empregadas em terapias clínicas onde os quimioterápicossão administrados isolados ou em combinação com outros quimioterápicos.
O método ideal e a ordem de administração e as quantidades eo regime de dosagem podem ser facilmente determinados pelos especialis-tas na técnica usando métodos convencionais e tendo em vista as informa-ções fornecidas neste relatório.
A título de exemplo apenas, os compostos à base de platina sãovantajosamente administrados em uma dosagem de 1 a 500 mg por metroquadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por exemplo 50 a 400 mg/m2,particularmente para cisplatina em uma dosagem de cerca de 75 mg/m2 epara carboplatina em cerca de 300 mg/m2 por curso de tratamento. A cispla-tina não é absorvida por via oral e portanto deve ser distribuída por injeçãointravenosa, subcutânea, intratumoral ou intraperitoneal.
A título de exemplo apenas, os compostos à base de taxano sãovantajosamente administrados em uma dosagem de 50 a 400 mg por metroquadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por exemplo 75 a 250 mg/m2,particularmente para paclitaxel em uma dosagem de cerca de 175 a 250mg/m2 e para docetaxel em cerca de 75 a 150 mg/m2 por curso de tratamento.
A título de exemplo apenas, os compostos à base de camptote-cina são vantajosamente administrados em uma dosagem de 0,1 a 400 mgpor metro quadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por exemplo 1 a300 mg/m2, particularmente para irinotecano em uma dosagem de cerca de100 a 350 mg/m2 e para topotecano em cerca de 1 a 2 mg/m2 por curso detratamento.A título de exemplo apenas, os alcalóides da vinca podem servantajosamente administrados em uma dosagem de 2 a 30 mg por metroquadrado (mg/m2) de área superficial corporal, particularmente para vimblas-tina em uma dosagem de cerca de 3 a 12 mg/m2, para vincristina em umadosagem de cerca de 1 a 2 mg/m2, e para vinorelbina em uma dosagem decerca de 10 a 30 mg/m2 por curso de tratamento.
A título de exemplo apenas, os derivados de nucleosídeo anti-tumorais podem ser vantajosamente administrados em uma dosagem de200 a 2500 mg por metro quadrado (mg/m2) de área superficial corporal, porexemplo 700 a mg/m2. 5-fluoruracila (5-FU) é comumente usado por admi-nistração intravenosa com doses variando de 200 a 500mg/m2 (de preferên-cia de 3 a 15 mg/kg/dia). A gencitabina é vantajosamente administrada emuma dosagem de cerca de 800 a 1200 mg/m2 e a capecitabina é vantajosa-mente administrada em cerca de 1000 a 2500 mg/m2 por curso de tratamen-to.
A título de exemplo apenas, os agentes alquilantes podem servantajosamente administrados em uma dosagem de 100 a 500 mg por metroquadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por exemplo 120 a 200 mg/m2,particularmente para ciclofosfamida em uma dosagem de cerca de 100 a500 mg/m2, para clorambucila em uma dosagem de cerca de 0,1 a 0,2 mg/kgde peso corporal, para carmustina em uma dosagem de cerca de 150 a 200mg/m2, e para Iomustina em uma dosagem de cerca de 100 a 150 mg/m2 porcurso de tratamento.
A título de exemplo apenas, os derivados de podofilotoxina po-dem ser vantajosamente administrados em uma dosagem de 30 a 300 mgpor metro quadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por exemplo 50 a250 mg/m2, particularmente para etoposida em uma dosagem de cerca de35 a 100 mg/m2 e para teniposida em cerca de 50 a 250 mg/m2 por curso detratamento.
A título de exemplo apenas, os derivados de antraciclina podemser vantajosamente administrados em uma dosagem de 10 a 75 mg por me-tro quadrado (mg/m2) de área superficial corporal, por exemplo 15 a 60mg/m2, particularmente para doxorrubicina em uma dosagem de cerca de 40a 75 mg/m2, para daunorubicina em uma dosagem de cerca de 25 a45mg/m2, e para idarubicina em uma dosagem de cerca de 10 a 15 mg/m2por curso de tratamento.
A título de exemplo apenas, os compostos antiestrogênicos po-dem ser vantajosamente administrados em uma dosagem de cerca de 1 a100 mg ao dia dependendo do agente particular e da condição sendo trata-da. O tamoxifeno é vantajosamente administrado por via oral em uma dosa-gem de 5 a 50 mg, de preferência 10 a 20 mg duas vezes ao dia, continuan-do a terapia por tempo suficiente para obter e manter um efeito terapêutico.
O toremifeno é vantajosamente administrado por via oral em uma dosagemde cerca de 60 g uma vez ao dia, continuando a terapia por tempo suficientepara obter e manter um efeito terapêutico. O anastrozol é vantajosamenteadministrado por via oral em uma dosagem de cerca de 1 mg uma vez aodia. O droloxifeno é vantajosamente administrado por via oral em uma dosa-gem de cerca de 20-100 mg uma vez ao dia. O raloxifeno é vantajosamenteadministrado por via oral em uma dosagem de cerca de 60 mg uma vez aodia. O exemestano é vantajosamente administrado por via oral em uma do-sagem de cerca de 25 mg uma vez ao dia.
A título de exemplo apenas, os biológicos podem ser vantajosa-mente administrados em uma dosagem de cerca de 1 a 5 mg por metroquadrado (mg/m2) de área superficial corporal, ou de maneira conhecida natécnica, se de forma diferente. Por exemplo, o trastuzumab é vantajosamen-te administrado em uma dosagem de 1 a 5 mg/m2 particularmente 2 a4mg/m2 por curso de tratamento.
As dosagens podem ser administradas, por exemplo uma, duasou mais vezes por curso de tratamento, que pode ser repetido por exemplo acada 7, 14, 21 ou 28 dias.
Os compostos da presente invenção podem ser administrados aum indivíduo por via sistêmica, por exemplo, por via intravenosa, oral, subcu-tânea, intramuscular, intradérmica ou parenteral. Os compostos da presenteinvenção também podem ser administrados a um indivíduo localmente. E-xemplos não Iimitativos de sistemas de distribuição local incluem o uso dedispositivos médicos intraluminais que incluem cateteres para distribuiçãointravascular de drogas, fios metálicos, stents farmacológicos e calçamentoendoluminal. Os compostos da presente invenção podem ser ainda adminis-trados a um indivíduo em combinação com um agente vetorizador para obteralta concentração local do composto no sítio alvo. Além disso, os compostosda presente invenção podem ser formulados para liberação rápida ou paraliberação lenta com o objetivo de manter as drogas ou agentes em contatocom os tecidos alvo por um período que varia de horas a semanas.
A presente invenção também fornece uma composição farma-cêutica compreendendo um composto de fórmula I em associação com umveículo farmaceuticamente aceitável. A composição farmacêutica pode con-ter entre cerca de 0,1 mg e 1000 mg, de preferência cerca de 100 a 500 mg,do composto, e pode ser formulada em qualquer forma adequada para omodo de administração selecionado.
A expressão "farmaceuticamente aceitável" refere-se a entida-des moleculares e composições que não produzem reações adversas, alér-gicas ou desagradáveis quando administradas a um animal ou a um ser hu-mano, quando apropriado. Usos veterinários estão igualmente incluídos nainvenção e formulações "farmaceuticamente aceitáveis" incluem formulaçõespara uso clínico e/ou veterinário.
Veículos incluem excipientes farmacêuticos inertes e necessá-rios, que incluem, porém sem limitação, aglutinantes, agentes de suspensão,lubrificantes, flavorizantes, adoçantes, conservantes, corantes e revestimen-tos. Composições adequadas para administração oral incluem formas sóli-das, tais como pílulas, comprimidos, comprimidos ovais ("caplets"), cápsulas(cada uma incluindo formulações de liberação imediata, de liberação contro-lada e de liberação sistemática), grânulos, e pós, e formas líquidas, tais co-mo soluções, xaropes, elixires, emulsões e suspensões. Formas úteis paraadministração parenteral incluem soluções, emulsões e suspensões estéreis.
A composição farmacêutica da presente invenção também incluiuma com posição farmacêutica para liberação lenta de um composto da pre-sente invenção. A composição inclui um veículo de liberação lenta (tipica-mente, um veículo polimérico) e um composto da presente invenção.
Veículos biodegradáveis de liberação lenta são bastante conhe-cidos na literatura. Estes são materiais que podem formar partículas quecapturam um composto(s) ativo(s) e se decompõem/dissolvem lentamenteem um ambiente adequado (por exemplo, aquosa, ácido, básico etc.) e des-sa forma se decompõem/dissolvem nos líquidos corporais e liberam os com-postos ativos. As partículas são de preferência nanopartículas (isto é, nafaixa de cerca de 1 a 500 nm de diâmetro, de preferência cerca de 50 - 200nm de diâmetro, e mais preferivelmente cerca de 100 nm de diâmetro).
A presente invenção também fornece métodos para preparar ascomposições farmacêuticas desta invenção. O composto de fórmula I, comoo composto ativo, é intimamente misturado com um veículo farmacêutico deacordo com técnicas de combinação farmacêutica convencionais, veículoeste que pode ter uma ampla variedade de formas dependendo da forma depreparação desejada para administração, por exemplo, oral ou parenteral talcomo intramuscular. Na preparação de composições em forma de dosagemoral, pode-se empregar qualquer dos meios farmacêuticos usuais. Portanto,para preparações orais líquidas, tais como por exemplo suspensões, elixirese soluções, veículos e aditivos adequados incluem água, glicóis, óleos, álco-ois, agentes flavorizantes, conservantes, agentes corantes e similares; parapreparações orais sólidas tais como, por exemplo, pós, cápsulas, comprimi-dos ovais ("caplets"), cápsulas gelatinosas e comprimidos, veículos e aditi-vos adequados incluem amidos, açúcares, diluentes, agentes granulantes,lubrificantes, aglutinantes, agentes desintegrantes e similares. Por sua facili-dade de administração, comprimidos e cápsulas representam a forma unitá-ria de dosagem oral mais vantajosa, em cujo são obviamente empregadosveículos farmacêuticos sólidos. Se desejado, os comprimidos podem ser re-vestidos cóm açúcar ou com revestimento entérico por técnicas tradicionais.
Para parenterais, o veículo normalmente compreende água estérila, emboraoutros compostos, por exemplo, com finalidades tais como auxiliar a solubili-dade ou para preservação, possam ser incluídos. Também podem ser pre-paradas suspensões injetáveis, e neste caso podem ser empregados veícu-los líquidos apropriados, agentes de suspensão e similares. Na preparaçãopara liberação lenta, primeiro são dissolvidos ou dispersados em um solven-te orgânico um veículo de liberação lenta, tipicamente um veículo polimérico,e um composto da presente invenção. A solução orgânica obtida é entãoadicionada a uma solução aquosa para obter uma emulsão do tipo óleo emágua. De preferência, a solução aquosa inclui agentes tensoativos. Subse-qüentemente, o solvente orgânico é evaporado da emulsão do tipo óleo emágua para obter uma suspensão coloidal de partículas contendo o veículo deliberação lenta e o composto da presente invenção.
As composições farmacêuticas desta invenção vão conter, porunidade de dosagem, por exemplo, comprimido, cápsula, pó, injeção, colhere outras, uma quantidade do composto ativo necessária para distribuir umadose eficaz como acima descrito. As composições farmacêuticas desta in-venção vão conter, por unidade de dosagem, por exemplo, comprimido, cáp-sula, pó, injeção, supositório, colher e outras, de cerca de 0,01 mg a 200mg/kg de peso corporal por dia. De preferência, a faixa é de cerca de 0,03 acerca de 100 mg/kg de peso corporal por dia, mais preferivelmente de cercade 0,05 a cerca de 10 mg/kg de peso corporal por dia. Os compostos podemser administrados em um regime de 1 a 5 vezes ao dia. As dosagens, noentanto, podem variar dependendo da exigência dos pacientes, da severida-de da doença sendo tratada e do composto sendo empregado. Pode serempregado o uso de administração diária ou dosagem pós-periódica.
De preferência estas composições estão em formas de dosagemunitária tais como comprimidos, pílulas, cápsulas, pós, grânulos, soluções oususpensões parenterais estéreis, sprays aerossóis ou líquidos regulados,gotas, ampolas, dispositivos autoinjetores ou supositórios; para administra-ção parenteral oral, intranasal, sublingual ou retal, ou para administração porinalação ou insuflação. Alternativamente, a composição pode ser apresenta-da em uma forma adequada para administração uma vez por semana ouuma vez por mês; por exemplo, um sal insolúvel do composto ativo, tal comoo sal de decanoato, pode ser adaptado para fornecer uma preparação dedepósito para injeção intramuscular. Para preparar composições sólidas taiscomo comprimidos, o composto ativo principal é misturado com um veículofarmacêutico, por exemplo ingredientes de tabletagem convencionais taiscomo amido de milho, lactose, sacarose, sorbitol, talco, ácido esteárico, es-tearato de magnésio, fosfato dicálcico ou gomas, e similares diluentes far-macêuticos, por exemplo, água, para formar uma composição de pré-formulação sólida contendo uma mistura homogênea de um composto dapresente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Quando nos referidos a estas composições de pré-formulação como homo-gêneas, isto quer dizer que o composto ativo é dispersado uniformementeem toda a composição de modo que a composição pode ser facilmente sub-dividida em formas de dosagem igualmente eficazes tais como comprimidos,pílulas e cápsulas. Esta composição de pré-formulação sólida é então subdi-vidida em formas de dosagem unitárias do tipo descrito acima contendo de0,1 a cerca de 500 mg do composto ativo da presente invenção. Os compri-midos ou pílulas da nova composição podem ser revestidos ou então com-postados para proporcionar uma forma de dosagem que oferece a vantagemde ação prolongada. Por exemplo, o comprimido ou pílula pode compreen-der um componente de dosagem interno e um componente de dosagem ex-terno, este último estando na forma de um envoltório sobre o primeiro. Osdois componentes podem ser separados por uma camada entérica que ser-ve para resistir à desintegração no estômago e permite que o componenteinterno passe intato para o duodeno ou tenha a liberação retardada. Umavariedade de materiais pode ser usada para tais camadas ou revestimentosentéricos, tais materiais incluindo inúmeros ácidos poliméricos com materiaistais como goma-laca, álcool acetílico e acetato de celulose.
As formas líquidas nas quais o composto de fórmula I pode serincorporado para administração por via oral ou por injeção incluem soluçõesaquosas, xaropes adequadamente aromatizados, suspensões aquosas ouoleosas, e emulsões aromatizadas com óleos comestíveis tais como óleo dealgodão, óleo de gergelim, óleo de coco ou óleo de amendoim, assim comoelixires e veículos farmacêuticos similares. Agentes dispersantes ou de sus-pensão adequados para suspensões aquosas incluem gomais sintéticas enaturais tais como tragacanto, acácia, alginato, dextrana, carboximetilcelulo-se sódica, metilcelulose, polivinilpirrolidona ou gelatina. As formas líquidasem agentes de suspensão ou dispersão adequadamente aromatizados tam-bém podem incluir gomas sintéticas e naturais, por exemplo, tragacanto, a-cácia, metila celulose e outras. Para administração parenteral, são deseja-das suspensões e soluções estéreis. Preparações isotônicas que geralmentecontêm preservativos adequados são empregadas quando se deseja a ad-ministração intravenosa.
Vantajosamente, os compostos de fórmula I podem ser adminis-trados em uma única dose diária, ou a dosagem diária total pode ser admi-nistrada em doses fracionadas duas, três ou quatro vezes ao dia. Além dis-so, os compostos da presente invenção podem ser administrados na formaintranasal pelo uso tópico de veículos intranasais adequados, ou por emplas-tros transdérmicos bastante conhecidos pelos especialistas na técnica. Paraser administrada na forma de um sistema de distribuição transdérmica, aadministração da dosagem será naturalmente contínua em lugar de intermi-tente durante o regime de dosagem.
Por exemplo, para administração oral na forma de um comprimi-do ou cápsula, o componente medicamentoso ativo pode ser combinadocom um veículo inerte farmaceuticamente aceitável, atóxico, oral tal comoetanol, glicerol, água e similares. Além disso, quando desejado ou necessá-rio, aglutinantes, lubrificantes, agentes desintegrantes e agentes corantesadequados também podem ser incorporados na mistura. Aglutinantes ade-quados incluem, sem limitação, amido, gelatina, açúcares naturais tais comoglicose ou beta-lactose, adoçantes de milho, gomas naturais e sintéticos taiscomo acácia, tragacanto ou oleato de sódio, estearato de sódio, estearato demagnésio, benzoato de sódio, acetato de sódio, cloreto de sódio e similares.Desintegrantes incluem, sem limitação, amido, metila celulose, ágar, bento-nita, goma xantana e similares.
A dosagem diária dos produtos da presente invenção pode vari-ar em uma ampla faixa de 1 a 5000 mg por humano adulto por dia. Para ad-ministração oral, as composições são de preferência oferecidas na forma decomprimidos contendo 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0,50,0, 100, 150, 200, 250 e 500 miligramas do composto ativo para o ajustesintomático da dosagem ao paciente a ser tratado. Uma quantidade eficazda droga normalmente é suprida em um nível de dosagem de cerca de 0,01mg/kg a cerca de 200 mg/kg de peso corporal por dia. Particularmente, afaixa é de cerca de 0,03 a cerca de 15 mg/kg de peso corporal por dia, emais particularmente, de cerca de 0,05 a cerca de 10 mg/kg de peso corpo-ral por dia. O composto da presente invenção pode ser administrado em umregime de até quatro ou mais vezes ao dia, de preferência de 1 a 2 vezes ao dia.
As dosagens ótimas a serem administradas podem ser facilmen-te determinadas pelos especialistas na técnica, e vão variar com o compostoparticular usado, o modo de administração, a potência da preparação, o mo-do de administração, e a evolução da doença. Além disso, fatores associa-dos com o paciente particular sendo tratado, que incluem a idade do pacien-te, o peso, a dieta e o tempo de administração, vão resultar na necessidadede ajustar as dosagens.
Os compostos da presente invenção também podem ser admi-nistrados na forma de sistemas de distribuição de lipossomas, tais como ve-sículas unilamelares pequenas, vesículas unilamelares grandes, e vesículasmultilamelares. Os lipossomas podem ser formados a partir de uma varieda-de de lipídios, incluindo porém sem limitação Iipfdios antipáticos tais comofosfatidilcolinas, esfingomielinas, fosfatidiletanolaminas, fosfatidilcolinas, car-diolipinas, fosfatidilserinas, fosfatidilgliceróis, ácidos fosfatídicos, fosfatidili-nositóis, diacila trimetilamônio propanos, diacila dimetilamônio propanos, eestearilamina, lipídios neutros tais como triglicerídeos, e combinações dosmesmos. Eles podem conter colesterol ou podem ser livres de colesterol.
Os compostos da presente invenção também podem ser admi-nistrados localmente. Pode-se utilizar qualquer dispositivo de distribuição, talcomo cateteres para distribuição intravascular de drogas, fios metálicos,stents farmacológicos e calçamento endoluminal. O sistema de distribuiçãopara tal dispositivo pode compreender um cateter para infusão local que dis-tribui o composto a uma taxa controlada pelo administrador.
A presente invenção fornece um dispositivo de distribuição dedrogas compreendendo um dispositivo médico intraluminal, de preferênciaum stent, e uma dosagem terapêutica de um composto da invenção.
O termo "stent" refere-se a qualquer dispositivo que pode serdistribuído por um cateter. Um stent é normalmente usado para prevenir fe-chamento vascular devido a anomalias físicas tais como crescimento interiorindesejado de tecido vascular devido a trauma cirúrgico. Geralmente, eletem uma estrutura tubular do tipo treliça expansível apropriada para ser dei-xada dentro do lúmen de um dueto para liberar uma obstrução. O stent temuma superfície de contato com a parede do lúmen e uma superfície expostaao lúmen. A superfície de contato com a parede do lúmen é a superfície ex-terna do tubo e a superfície exposta ao lúmen é a superfície interna do tubo.O stent pode ser polimérico, metálico ou polimérico e metálico, e pode seropcionalmente biodegradável.
Comumente, os stents são inseridos no lúmen na forma não ex-pandida e são então expandidas de forma autônoma, ou com a ajuda de umsegundo dispositivo in situ. Um método de expansão típico ocorre através douso de um balão de angioplastia preso a úm cateter que é inflado no interiordo vaso estenosado ou no meato corporal para cisalhar e romper as obstru-ções associadas aos componentes de parede do vaso e para obter um lú-men dilatado. Stents auto-expansivos como os descritos na Patente US6.776.796 (Falotico et al.) também podem ser utilizados. A combinação deum stent com drogas, agentes ou compostos que previnem inflamação eproliferação pode oferecer os tratamentos mais eficaz para restenose pós-angioplastia.
Os compostos da invenção podem ser incorporados ou fixadosao stent de inúmeras maneiras e utilizando-se qualquer número de materiaisbiocompatíveis. Em uma modalidade exemplificativa, o composto é direta-mente incorporado em uma matriz polimérico, tal como o polímero polipirrol,e subseqüentemente aplicado como revestimento à superfície externa dostent. O composto elui da matriz por difusão através do polímero. Stents emétodos para aplicar drogas como revestimento de stents estão discutidosdetalhadamente na literatura. Em uma outra modalidade exemplificativa, ostent é primeiro revestido com uma camada de base compreendendo umasolução do composto, etileno-co-vinila acetato, e metacrilato de polibutila.
Em seguida, o stent é ainda revestido com uma camada externa compreen-dendo somente polibutila metacrilato. A camada externa age como uma bar-reira de difusão para impedir que o composto elua rápido demais e entre nostecidos circundantes. A espessura da camada externa ou camada de cober-tura determina a taxa à qual o composto elui da matriz. Stents e métodos derevestimento estão discutidos detalhadamente na publicação WIPOW09632907, na Publicação US N0 2002/0016625 e nas referências ali citadas.
A solução do composto da invenção e os materiais/polímerosbiocompatíveis podem ser incorporados dentro ou sobre um stent de diver-sas maneiras. Por exemplo, a solução pode ser aspergida sobre o stent ou ostent pode ser mergulhado na solução. Em uma modalidade preferida, a so-lução é aspergida sobre o stent e em seguida deixada secar. Em uma outramodalidade exemplificativa, a solução pode ser eletricamente carregada comuma polaridade e o stent eletricamente carregado com a polaridade oposta.
Desta maneira, a solução e o stent serão atraídos um pelo outro. Usandoeste tipo processo de aspersão, é possível reduzir o desperdício e obtermaior controle sobre a espessura do revestimento. O composto é de prefe-rência preso somente à superfície do stent que faz contato com um tecido.
No entanto, para alguns compostos, todo o stent pode ser revestido. A com-binação da dose de composto aplicada ao stent e do revestimento poliméricoque controla a liberação da droga é importante na eficácia da droga. O com-posto de preferência fica no stent por pelo menos três dias até aproximada-mente seis meses e mais preferivelmente entre sete e trinta dias.
Pode-se utilizar qualquer número de polímeros biocompatíveisnão erodíveis junto com o composto da invenção. É importante observar quepolímeros diferentes podem ser utilizados para stents diferentes. Por exem-plo, a matriz de acetato etileno-co-vinila e metacrilato de polibutila descritaacima funciona bem com stents de aço inoxidável. Outros polímeros podemser utilizados de forma mais eficaz com stents formados de similares materi-ais, incluindo materiais que apresentam propriedades superelásticas taiscomo ligas de níquel e titânio.
Restenose é a responsável por uma morbidade e mortalidadesignificativas subseqüente à angioplastia coronariana. A restenose ocorreatravés de uma combinação de quatro processos que incluem recuo elásti-co, formação de trombos, hiperplasia da íntima e remodelagem da matrizextracelular. Recentemente foram identificados vários fatores de crescimentoque desempenham um papel nesses processos que levam à restenose (videSchiele TM et al., 2004, "Vascular restenosis - striving for therapy." ExpertOpin Pharmacother. 5(11):2221-32). Deve-se notar que os Iigandos BDNFde TrkB e neurotrofinas assim como TrkB são expressos por células dosmúsculos lisos vasculares e células endoteliais (vide Ricci A, et al. 2003,"Neurotrophins and neurotrophin receptors in human pulmonary arteries". JVasc Res. 37(5):355-63; vide também Kim H, et al., 2004 "Paracrine nad au-tocrine functions of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and nervegrowth factor (NGF) in brain-derived endothelial cells", J Biol Chem.279(32):33538-46). Além disso, TrkB pode desempenhar um papel na angi-ogênese periférica e na hiperplasia da íntima por causa de sua capacidadede prevenir anoiquia e prolongar a sobrevivência das células (vide Douma S1et al.,2004, "Suppression of anoikis and induction of metastasis by the neuro-trophic receptor TrkB", Nature. 430(7003): 1034-9). Portanto, a inibição deTrkB durante e subseqüente à angioplastia coronariana usando um stentrevestido apresenta uma estratégia terapêutica viável.
Por conseguinte, a presente invenção fornece um método para otratamento de distúrbios relacionados com TrkB, que incluem restenose, hi-perplasia ou inflamação da íntima, nas paredes dos vasos sangüíneos, emum indivíduo compreendendo administrar ao indivíduo um composto da in-venção em quantidades terapeuticamente eficazes pela distribuição contro-lada, por liberação de um dispositivo médico intraluminal, tais como umstent, do composto da invenção.
Métodos para introduzir um stent em um lúmen de um corpo sãobastante conhecidos e os stents revestidos com composto desta invençãosão de preferência introduzidos usando um cateter. Como será observadopelos especialistas na técnica, os métodos vão variar ligeiramente com basena localização de implante do stent. Para implante de stent coronariano, ocateter de balão contendo o stent é inserido na artéria coronariana e o stenté posicionado no local desejado. O balão é inflado, expandindo o stent.Quando o stent expande, o stent contata a parede do lúmen. Depois de ostent ser posicionado, o balão é desinflado e removido. O stent fica no lugarcom a superfície de contato com o lúmen contendo o composto contatandodiretamente a superfície da parede do lúmen. O implante do stent pode seracompanhado de terapia anticoagulante se necessário.
As condições ótimas para distribuição dos compostos para usono stent da invenção podem variar com os diferentes sistemas de distribui-ção local usados, assim como com as propriedades e concentrações doscompostos usados. As condições que podem ser otimizadas incluem, porexemplo, as concentrações dos compostos, o volume de distribuição, a taxade distribuição, a profundidade de penetração da parede do vaso, a pressãode inflamação proximal, a quantidade e o tamanho das perfurações e o ajus-te do balão do cateter para distribuição de drogas. As condições podem serotimizadas para inibição da proliferação de células do músculo liso no localda lesão para que não ocorra bloqueio arterial significativo devido à resteno-se, medido, por exemplo, pela capacidade proliferativa das células do mús-culo liso, ou por alterações na resistência vascular ou no diâmetro do lúmen.As condições ótimas podem ser determinadas com base nos dados de estu-dos em modelos animais usando métodos computadorizados de rotina.
Um outro método alternativo para administrar os compostos des-ta invençãò pode ser por conjugação do composto a um agente vetorizadorque direciona o conjugado para o local de ação desejado, isto é, para as cé-lulas endoteliais vasculares ou para células de tumor. É possível usar agen-tes vetorizadores do tipo anticorpo e não-anticorpo. Por causa da interaçãoespecífica entre o agente vetorizador e seu parceiro de ligação correspon-dente, um composto da presente invenção pode ser administrado com con-centrações locais altas no local alvo ou perto dele dessa forma tratando odistúrbio no local alvo de forma mais eficaz.
Os agentes vetorizadores do tipo anticorpo incluem anticorposou fragmentos fixadores de antígeno dos mesmos, que se ligam a um com-ponente vetorizável ou acessível de uma célula do tumor, da vasculatura dotumor ou do estroma do tumor. O "componente vetorizável ou acessível" deuma célula do tumor, da vasculatura do tumor ou do estroma do tumor é depreferência um componente expresso na superfície, acessível pela superfí-cie ou localizado na superfície. Os agentes vetorizadores do tipo anticorpotambém incluem anticorpos ou fragmentos fixadores de antígeno dos mes-mos, que se ligam a um componente intracelular que é liberado de uma célu-la necrótica do tumor. De preferência tais como anticorpos são anticorposmonoclonais, ou fragmentos fixadores de antígeno dos mesmos, que se li-gam aos antígenos intracelulares insolúveis presentes em células que po-dem ser induzidas a se tornarem permeáveis, ou em células-fantasmas decélulas substancialmente neoplásicas e normais, mas que não estão presen-tes nem são acessíveis no exterior das células vivas normais de um mamífero.
Conforme aqui usado, o termo "anticorpo" refere-se de um modogeral a qualquer agente de ligação imunológico tal como IgG, IgM, IgA, IgE,F(ab')2, um fragmento univalente tal como Fab', Fab, Dab, assim como anti-corpos construídos tais como anticorpos recombinantes, anticorpos humani-zados, anticorpos biespecíficos, e similares. O anticorpo pode ser policlonalou monoclonal, embora o monoclonal seja preferido. Existe um espectromuito amplo de anticorpos conhecidos na literatura que possuem especifici-dade imunológica para a superfície celular de virtualmente qualquer tipo detumor sólido (vide Summary Table on monoclonal antibodies for solid tumorsna Patente US N0 5.855.866 concedida a Thorpe et al.). Os especialistas natécnica conhecem métodos para produzir e isolar anticorpos contra tumor(vide Patente US N0 5.855.866 concedida a Thorpe et al., e Patente US N06.342.219 concedida a Thorpe et al.).
Técnicas para conjugar uma porção terapêutica a anticorpos sãobastante conhecidas (vide, por exemplo, Amon et al., "Monoclonal AntibodiesFor Immunotargeting Of Drugs In CancerTherapy", in Monoclonal Antibodiesand Câncer Therapy, Reisfeld et al. (eds.), páginas 243- 56 (Alan R. Liss,Inc. 1985); Hellstrom et al., "Antibodies For Drug Delivery", in ControlledDrug Delivery (2nd Ed.), Robinson et al. (eds.), páginas 623-53 (Mareei Dek-ker, Inc. 1987); Thorpe, "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In CâncerTherapy: A Review", in Monoclonal Antibodies '84: Biological and ClinicaiApplications, Pinchera et al. (eds.), páginas 475-506 (1985)). Técnicas simi-lares também podem ser aplicadas para prender compostos da invenção aagentes vetorizadores do tipo não-anticorpo. Os especialistas na técnica co-nhecem, ou são capazes de determinar, métodos de formação de conjuga-dos com agentes vetorizadores do tipo não-anticorpo, tais como moléculaspequenas, oligopeptídios, polissacarídeos, ou outros compostos polianiônicos.
Embora qualquer porção de ligação que seja razoavelmente es-tável no sangue possa ser usada para ligar os compostos da presente in-venção ao agente vetorizador, ligações biologicamente liberáveis e/ou espa-çadores seletivamente cliváveis são preferidos. "Ligações biologicamenteliberáveis" e "espaçadores ou Iigantes seletivamente cliváveis" ainda possu-em estabilidade razoável na circulação, mas são liberáveis, cliváveis ou hi-drolisáveis somente ou de preferência em certas condições, isto é, em umcerto ambiente, ou em contato com um agente particular. Estas ligações in-cluem, por exemplo, ligações dissulfeto e trissulfeto e ligações lábeis a áci-dos, como descrito nas Patentes US Nos 5.474.765 e 5.762.918 e ligaçõessensíveis a enzimas, incluindo ligações peptídicas, ésteres, amidas, fosfodi-ésteres e glicosídeos como descrito nas Patentes US Nos 5.474.765 e5.762.918. Estes aspectos de modelo de liberação seletiva facilitam a libera-ção sistemática dos compostos a partir dos conjugados no local alvo desejado.A presente invenção fornece uma composição farmacêuticacompreendendo uma quantidade eficaz de um composto da presente inven-ção conjugado a um agente vetorizador e um veículo farmaceuticamenteaceitável.
A presente invenção fornece ainda um método para tratar umdistúrbio relacionado com FLT3 e/ou c-kit e/ou TrkB, particularmente um tu-mor, compreendendo administrar a um indivíduo uma quantidade terapeuti-camente eficaz de um composto de fórmula I conjugado a um agente vetori-zador.
Quando proteínas tais como anticorpos ou fatores de crescimen-to, ou polissacarídeos são usados como agentes vetorizadores, eles são depreferência administrados na forma de composições injetáveis. A solução deanticorpo injetável será administrada em uma veia, artéria ou no líquido espi-nham durante um período de 2 minutos a cerca de 45 minutos, de preferênciade 10 a 20 minutos. Em certos casos, a administração intradérmica e intraca-vitária são vantajosas para tumores restritos a áreas próximas a regiões par-ticulares da pele e/ou a cavidades particulares do corpo. Além disso, a ad-ministração intratecal pode ser usado para tumores localizados no cérebro.
A dose terapeuticamente eficaz do composto da presente inven-ção conjugado a um agente vetorizador depende do indivíduo, do tipo dedoença, do estado da doença, do método de administração e de outras vari-áveis clínicas. As dosagens eficazes são facilmente determináveis usandodados de um modelo animal. Animais experimentais com tumores sólidossão freqüentemente usados para otimizar as doses terapêuticas apropriadasantes de serem levadas para um ambiente clínico. Sabe-se que tais modelossão confiáveis para prever estratégias anticâncer eficazes. Por exemplo,camundongos com tumores sólidos são bastante usados em testes pré-clínicos para determinar a gama funcional de agentes terapêuticos que pro-porcionam efeitos antitumorais benéficos com toxicidade mínima.
Embora o relatório descritivo ensine os princípios da presenteinvenção, com exemplos oferecidos a título ilustrativo, ficará entendido que aprática da invenção abrange todas as variações, adaptações e/ou modifica-ções usuais que estejam dentro do escopo das reivindicações a seguir eseus equivalentes.

Claims (72)

1. Composto de fórmula I:<formula>formula see original document page 118</formula>e N-óxidos, sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos, isômeros geométri-cos e isômeros estereoquímicos do mesmo, onde:r é 1 ou 2;Z é NH, N(alquila), ou CH2;B é fenila, heteroarila, ou um heteroarila benzofundida de nove adez membros;<formula>formula see original document page 118</formula>onde η é 1, 2, 3 ou 4;Ra é hidrogênio, alcóxi, fenóxi, fenila, heteroarila opcionalmentesubstituída com R5, hidroxila, amino, alquilamino, dialquilaminò, oxazolidino-nila opcionalmente substituída com R5, pirrolidinonila opcionalmente substi-tuída com R5, piperidinonila opcionalmente substituída com R5, heterodionilacíclica opcionalmente substituído com R5, heterociclila opcionalmente substi-tuída com R5, -COORy, -CONRwRx, -N(Rw)CON(Ry)(Rx), -N(Ry)CON(Rw)(Rx),-N(Rw)C(O)ORxi-N(Rw)CORy, -SRy,-SORy, -SO2Ry, -NRwSO2Ry, -NRwSO2Rx,-SO3Ry, -OSO2NRwRx, ou -SO2NRwRx;Rw e Rx são independentemente selecionados de; hidrogênio,alquila, alquenila, aralquila, ou heteroaralquila, ou Rw e Rx podem ser opcio-nalmente tomados juntos para formar um anel de 5 a 7 membros, opcional-mente contendo uma heteroporção selecionada de O, NH, N(alquila), SO2,SO, ou S;Ry é selecionado de: hidrogênio, alquila, alquenila, cicloalquila,fenila, aralquila, heteroaralquila, ou heteroarila;Rs é um, dois ou três substituintes independentemente selecio-nados de: halogênio, ciano, trifluormetila, amino, hidroxila, alcóxi, -C(0)al-quila, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2l alquila, CG^alquil-OH, ou alquilamino; eR3 é um ou mais substituintes independentemente selecionadosde: hidrogênio, alquila, alcóxi, halogênio, alcoxiéter, hidroxila, tio, nitro, ciclo-alquila opcionalmente substituída com R4, heteroarila opcionalmente substi-tuída com R4, alquilamino, heterociclila opcionalmente substituída com R4,-O(cicloalquila), pirrolidinonila opcionalmente substituída com R4, fenóxi op-cionalmente substituído com R4, -CN, -OCHF2, -OCF3, -CF3, alquila halogena-do, heteroarilóxi opcionalmente substituído com R4, dialquilamino, -NHSO2 al-quila, tioalquila, ou -S02alquila; onde R4 é independentemente selecionadode: halogênio, ciano, trifluormetila, amino, hidroxila, alcóxi, -C(0)alquila, -CO2alquila, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2, alquila, ou alquilamino.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, onde: Rw e Rxsão independentemente selecionados de: hidrogênio, alquila, alquenila, aral-quila, ou heteroaralquila, ou Rw e Rx podem ser opcionalmente tomados jun-tos para formar um anel de 5 a 7 membros selecionado do grupo que consiste em:Z é NH ou CH2; eR3 é um ou mais substituintes independentemente selecionadosde: hidrogênio, alquila, alcóxi, halogênio, alcoxiéter, hidroxila, cicloalquila
3. Composto de acordo com a reivindicação 2, ondeB é fenila ou heteroarila.
4. Composto de acordo com a reivindicação 1, onde:B é fenila ou heteroarila.
5. Composto de acordo com a reivindicação 4, onde:opcionalmente substituída com R4, heteroarila opcionalmente substituídacom R4, heterociclila opcionalmente substituída com R4, -O(cicloalquila), fe-nóxi opcionalmente substituído com R4, heteroarilóxi opcionalmente substitu-ído com R4, dialquilamino, ou -SC>2alquila.
6. Composto de acordo com a reivindicação 5, onde: Ra é hidro-gênio, alcóxi, heteroarila opcionalmente substituída com R5, hidroxila, amino,alquilamino, dialquilamino, oxazolidinonila opcionalmente substituída comR5, pirrolidinonila opcionalmente substituída com R5, heterociclila opcional-mente substituída com R5, -CONRwRx, -N(Rw)CON(Ry)(Rx), -N(Ry)CON(Rw)(Rx),-N(Rw)C(O)ORx,-N(Rw)CORy,-SO2Ry,-NRwSO2Ry, ou-SO2NRwRx.
7. Composto de acordo com a reivindicação 6, onde:r é 1;Ra é hidrogênio, hidroxila, amino, alquilamino, dialquilamino, he-teroarila, heterociclila opcionalmente substituída com R5, -CONRwRx, -SO2Ry,-NRwSO2Ry,-N(Ry)CON(Rw)(Rx), ou-N(Rw)C(O)ORx;R5 é um substituinte independentemente selecionado de:-C(0)alquila, -S02alquila, -C(0)N(alquila)2, alquila, ou -C(i-4)alquil-OH; eR3 é um substituinte independentemente selecionado de: alquila,alcóxi, halogênio, cicloalquila, heterociclila, -O(cicloalquila), fenóxi, ou dial-quilamino.
8. Composto de acordo com a reivindicação 7, onde:B é fenila ou piridinila;Ra é hidrogênio, dialquilamino, heterociclila opcionalmente subs-tituída com R5, -CONRwRx, -N(Ry)CON(Rw)(Rx), ou -NRwSO2Ry; eR3 é um substituinte independentemente selecionado de: alquila,alcóxi, heterociclila, cicloalquila, ou -O(cicloalquila).
9. Composto selecionado do grupo que consiste em:<formula>formula see original document page 121</formula><formula>formula see original document page 122</formula><formula>formula see original document page 123</formula>
10.
11. Composição farmacêutica compreendendo um composto decomo definido nas reivindicações 1-10, e um veículo farmaceuticamente a-ceitável.
12. Composto como definido em qualquer uma das reivindica-ções 1 a 10, para uso como medicamento.
13. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações 1 a 10, para a produção de um medicamento para o tratamen-to de um distúrbio proliferativo de células.
14. Método para reduzir a atividade de cinase de FLT3 em umacélula compreendendo a etapa de contatar a célula com um composto deacordo dom as reivindicações 1-10.
15. Método para inibir a atividade de cinase de FLT3 em umacélula compreendendo a etapa de contatar a célula com um composto comodefinido nas reivindicações 1-10.
16. Método para reduzir a atividade de cinase de TrkB em umacélula compreendendo a etapa de contatar a célula com um composto comodefinido nas reivindicações 1-10.
17. Método para inibir a atividade de cinase de TrkB em umacélula compreendendo a etapa de contatar a célula com um composto comodefinido nas reivindicações 1-10.
18. Método para reduzir a atividade de cinase de c-Kit em umacélula compreendendo a etapa de contatar a célula com um composto comodefinido nas reivindicações 1-10.
19. Método para inibir a atividade de cinase de c-Kit em uma cé-lula compreendendo a etapa de contatar a célula com um composto comodefinido nas reivindicações 1-10.
20. Método para reduzir a atividade de cinase de FLT3 em umindivíduo compreendendo a etapa de administrar um composto como defini-do nas reivindicações 1-10 ao indivíduo.
21. Método para inibir a atividade de cinase de FLT3 em um in-divíduo compreendendo a etapa de administrar um composto como definidonas reivindicações 1-10 ao indivíduo.
22. Método para reduzir a atividade de cinase de TrkB em umindivíduo compreendendo a etapa de administrar um composto como defini-do nas reivindicações 1-10 ao indivíduo.
23. Método para inibir a atividade de cinase de TrkB em um indi-víduo compreendendo a etapa de administrar um composto como definidonas reivindicações 1-10 ao indivíduo.
24. Método para reduzir a atividade de cinase de c-Kit em umindivíduo compreendendo a etapa de administrar um composto como defini-do nas reivindicações 1-10 ao indivíduo.
25. Método para inibir a atividade de cinase de c-Kit em um indi-víduo compreendendo a etapa de administrar um composto como definidonas reivindicações 1-10 ao indivíduo.
26. Método para prevenir em um indivíduo um distúrbio relacio-nado a FLT3 compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade profi-Iaticamente eficaz de uma composição farmacêutica compreendendo umcomposto como definido nas reivindicações 1-10, e um veículo farmaceuti-camente aceitável.
27. Método para prevenir em um indivíduo um distúrbio relacio-nado a TrkB1 compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade profi-Iaticamente eficaz de uma composição farmacêutica compreendendo umcomposto como definido nas reivindicações 1-10, e um veículo farmaceuti-camente aceitável.
28. Método para prevenir em um indivíduo um distúrbio relacio-nado a c-Kit, compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade profi-Iaticamente eficaz de uma composição farmacêutica compreendendo umcomposto como definido nas reivindicações 1-10, e um veículo farmaceuti-camente aceitável.
29. Método para tratar em um indivíduo um distúrbio relacionadoa FLT3 compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuti-camente eficaz de uma composição farmacêutica compreendendo um com-posto como definido nas reivindicações 1-10, e um veículo farmaceuticamen-te aceitável.
30. Método para tratar em um indivíduo um distúrbio relacionadoa TrkB compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuti-camente eficaz de uma composição farmacêutica compreendendo um com-posto como definido nas reivindicações 1-10, e um veículo farmaceuticamen-te aceitável.
31. Método para tratar em um indivíduo um distúrbio relacionadoa c-Kit compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuti-camente eficaz de uma composição farmacêutica compreendendo um com-posto como definido nas reivindicações 1-10, e um veículo farmaceuticamen-te aceitável.
32. Método de acordo com a reivindicação 26, compreendendoainda a administração de um agente quimioterápico.
33. Método de acordo com a reivindicação 26, compreendendoainda a administração de terapia genética.
34. Método de acordo com a reivindicação 26, compreendendoainda a administração de imunoterapia.
35. Método de acordo com a reivindicação 26, compreendendoainda a administração de terapia radioativa.
36. Método de acordo com a reivindicação 27, compreendendoainda a administração de um agente quimioterápico:
37. Método de acordo com a reivindicação 27, compreendendoainda a administração de terapia genética.
38. Método de acordo com a reivindicação 27, compreendendoainda a administração de imunoterapia.
39. Método de acordo com a reivindicação 27, compreendendoainda a administração de terapia radioativa.
40. Método de acordo com a reivindicação 28, compreendendoainda a administração de um agente quimioterápico.
41. Método de acordo com a reivindicação 28, compreendendoainda a administração de terapia genética.
42. Método de acordo com a reivindicação 28, compreendendoainda a administração de imunoterapia.
43. Método de acordo com a reivindicação 28, compreendendoainda a administração de terapia radioativa.
44. Método de acordo com a reivindicação 29, compreendendoainda a administração de um agente quimioterápico.
45. Método de acordo com a reivindicação 29, compreendendoainda a administração de terapia genética.
46. Método de acordo com a reivindicação 29, compreendendoainda a administração de imunoterapia.
47. Método de acordo com a reivindicação 29, compreendendoainda a administração de terapia radioativa.
48. Método de acordo com a reivindicação 30, compreendendoainda a administração de um agente quimioterápico.
49. Método de acordo com a reivindicação 30, compreendendoainda a administração de terapia genética.
50. Método de acordo com a reivindicação 30, compreendendoainda a administração de imunoterapia.
51. Método de acordo com a reivindicação 30, compreendendoainda a administração de terapia radioativa.
52. Método de acordo com a reivindicação 31, compreendendoainda a administração de um agente quimioterápico.
53. Método de acordo com a reivindicação 31, compreendendoainda a administração de terapia genética.
54. Método de acordo com a reivindicação 31, compreendendoainda a administração de imunoterapia.
55. Método de acordo com a reivindicação 31, compreendendoainda a administração de terapia radioativa.
56. Método para o tratamento de um distúrbio proliferativo decélulas em um indivíduo compreendendo administrar ao indivíduo um com-posto como definido nas reivindicações 1-10, em uma quantidade terapeuti-camente eficaz pela distribuição controlada por liberação de um dispositivomédico intraluminal do referido composto.
57. Método para o tratamento de um distúrbio relacionado aFLT3 em um indivíduo compreendendo administrar ao indivíduo um compos-to como definido nas reivindicações 1-10, em uma quantidade terapeutica-mente eficaz pela distribuição controlada por liberação de um dispositivomédico intraluminal do referido composto.
58. Método para o tratamento de um distúrbio relacionado aTrkB em um indivíduo compreendendo administrar ao indivíduo um compos-to como definido nas reivindicações 1-10, em uma quantidade terapeutica-mente eficaz pela distribuição controlada por liberação de um dispositivomédico intraluminal do referido composto.
59. Método para o tratamento de distúrbios relacionados a c-Kitem um indivíduo compreendendo administrar ao indivíduo um composto dasreivindicações 1-10 em uma quantidade terapeuticamente eficaz pela distri-buição controlada por liberação de um dispositivo médico intraluminal doreferido composto.
60. Método de acordo com a reivindicação 56, onde o referidodispositivo médico intraluminal compreende um stent.
61. Método de acordo com a reivindicação 57, onde o referidodispositivo médico intraluminal compreende um stent.
62. Método de acordo com a reivindicação 58, onde o referidodispositivo médico intraluminal compreende um stent.
63. Método de acordo com a reivindicação 59, onde o referidodispositivo médico intraluminal compreende um stent.
64. Composição farmacêutica compreendendo uma quantidadeeficaz um composto como definido nas reivindicações 1-10, conjugado a umagente vetorizador e um veículo farmaceuticamente aceitável.
65. Método para o tratamento de um distúrbio proliferativo decélulas compreendendo administrar a um indivíduo uma quantidade terapeu-ticamente eficaz de um composto como definido nas reivindicações 1-10,conjugado a um agente vetorizador.
66. Método para o tratamento de um distúrbio relacionado aFLT3 compreendendo administrar a um indivíduo uma quantidade terapeuti-camente eficaz de um composto como definido nas reivindicações 1-10, con-jugado a um agente vetorizador.
67. Método para o tratamento de um distúrbio relacionado aTrkB compreendendo administrar a um indivíduo uma quantidade terapeuti-camente eficaz de um composto como definido nas reivindicações 1-10, con-jugado a um agente vetorizador.
68. Método para o tratamento de um distúrbio relacionado a c-Kitcompreendendo administrar a um indivíduo uma quantidade terapeuticamen-te eficaz de um composto como definido nas reivindicações 1-10, conjugadoa um agente vetorizador.
69. Combinação de um agente quimioterápico e um compostode acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10.
70. Processo para a preparação de um composto como definidona reivindicação 1, o referido processo compreendendo reagir um compostode fórmula IV: <formula>formula see original document page 129</formula> com um composto de fórmula V: <formula>formula see original document page 129</formula> na presença de uma base.
71. Processo para a preparação de composto como definido nareivindicação 1, o referido processo compreendendo reagir um composto defórmula XII: <formula>formula see original document page 129</formula> com um composto compreendendo R1ONH2.
72. Composição farmacêutica compreendendo o produto feitopelo processo como definido nas reivindicações 70-71.
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Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060281755A1 (en) * 2005-06-10 2006-12-14 Baumann Christian A Synergistic modulation of flt3 kinase using aminopyrimidines kinase modulators
US20090306038A1 (en) * 2005-09-13 2009-12-10 Carceller Gonzalez Elena 2-Aminopyrimidine derivatives as modulators of the histamine H4 receptor activity
MX2009008981A (es) 2007-03-02 2009-09-02 Genentech Inc Prediccion de respuesta a un inhibidor her.
WO2013113716A1 (en) 2012-02-03 2013-08-08 Basf Se Fungicidal pyrimidine compounds
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JP2015511940A (ja) 2012-02-03 2015-04-23 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピアＢａｓｆ Ｓｅ 殺菌性ピリミジン化合物
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US20220143049A1 (en) 2019-03-21 2022-05-12 Onxeo A dbait molecule in combination with kinase inhibitor for the treatment of cancer
EP4054579A1 (en) 2019-11-08 2022-09-14 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Methods for the treatment of cancers that have acquired resistance to kinase inhibitors
WO2021148581A1 (en) 2020-01-22 2021-07-29 Onxeo Novel dbait molecule and its use

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU5636900A (en) * 1999-06-30 2001-01-31 Merck & Co., Inc. Src kinase inhibitor compounds
WO2003026664A1 (en) * 2001-09-26 2003-04-03 Bayer Corporation 2-phenylamino-4- (5-pyrazolylamino) -pyramidine derivatives as kinase inhibitors, in particular, src kinase inhibitors

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