BRPI0614272A2 - derivados de imidazopiridinas como ligantes de receptores canabinóides - Google Patents

Abstract

DERIVADOS DE IMIDAZOPIRIDINAS COMO LIGANTES DE RECEPTORES CANABINóIDES. A presente invenção refere-se a derivados inusitados de imidazopiridinas, composições farmacêuticas que contêm estes compostos e seu uso no tratamento de doenças causadas direta ou indiretamente por um aumento ou decréscimo na atividade do receptor canabinóide.

Description

"DERIVADOS DE IMIDAZOPIRIDINAS COMO LIGANTES DERECEPTORES CANABINÓIDES"

A presente invenção refere-se a derivados inusita-dos de imidazopiridinas, composições farmacêuticas que con-têm estes compostos, e seu uso no tratamento de doenças,particularmente dor, doenças estas que são causadas diretaou indiretamente por um aumento ou decréscimo na atividadedo receptor canabinóide.

Os canabinóides são uma classe especifica de com-postos psicoativos presentes no cânhamo indiano (Cannabissativa), incluindo cerca de sessenta moléculas diferentes,sendo as mais representativas o canabinol, canabidiol e vá-rios isômeros de tetraidrocanabinol. 0 conhecimento da ati-vidade terapêutica da cânabis retroage a dinastias antigasda China, onde, 5.000 anos atrás, a cânabis era usada para otratamento de asma, enxaqueca e alguns distúrbios ginecoló-gicos. Estes usos se tornaram posteriormente tão estabeleci-dos que, ao redor de 1850, os extratos de cânabis foram in-cluídos na farmacopéia norte-americana e permaneceram nelaaté 1947.

Os canabinóides reconhecidamente causam diferentesefeitos sobre vários sistemas e/ou órgãos, sendo o mais im-portante sobre o sistema nervoso central e sobre o sistemacardiovascular. Estes efeitos incluem alterações na memóriae cognição, euforia e sedação. Os canabinóides também aumen-tam a freqüência cardíaca e variam a pressão arterial sistê-mica. Também foram observados efeitos periféricos relaciona-dos à constrição brônquica, imunomodulação, e inflamação. Acapacidade de os canabinóides reduzirem a pressão intra-ocular e afetarem os sistemas respiratório e endócrino tam-bém está documentada. Vide, por exemplo, L.E. Hollister,"Health Aspects of Cannabis", Pharmaceutical Reviews 38:1-20(1986). Mais recentemente, descobriu-se que os canabinóidessuprimem as respostas imunes celulares e humorais e apresen-tam propriedades antiinflamatórias (Wirth et al., "Antiin-flammatory Properties of Cannabichrome", Life Science26:1991-1995 (1980)) .

Apesar dos benefícios precedentes, o uso terapêu-tico da cânabis é controverso, em virtude dos seus efeitospsicoativos (causando dependência e vício), e também em vir-tude de efeitos colaterais diversos que ainda não foram com-pletamente esclarecidos. Embora os trabalhos neste campo te-nham prosseguido desde a década de 40, as evidências que in-dicam que os efeitos periféricos de canabinóides são media-dos diretamente, e não são secundários a um efeito sobre osistema nervoso central, têm sido limitadas pela falta decaracterização de receptores, falta de informações concer-nentes a um ligante canabinóide endógeno, e, até recentemen-te, pela falta de compostos seletivos do subtipo receptor.

O primeiro receptor canabinóide demonstrou estarlocalizado principalmente no cérebro, em linhagens de célu-las neurais e, apenas em menor grau, no nível periférico. Emvirtude da sua localização, ele foi denominado o receptorcentral ("CB1") . Vide Matsuda et al., "Structure of a Can-nabinoid Receptor and Functional Expression of the ClonedcDNA", Nature 346:561-564 (1990). 0 segundo receptor canabi-nóide ("CB2") foi identificado no baço, e presumiu-se queele modula os efeitos não-psicoativos dos canabinóides. VideMunro et al., "Molecular Characterization of a PeripheralReceptor for Cannabinoids", Nature 365:61-65 (1993).

As indicações precedentes e a localização prefe-rencial do receptor CB2 no sistema imunológico confirmam umpapel especifico de CB2 na modulação da resposta imune e an-tiinflamatória a estímulos de diversas origens.

O tamanho total da população de pacientes que so-frem de dor é enorme (quase 300 milhões) , dominado por aque-les que sofrem de dor dorsal, dor osteoartrítica e dor pós-operatória. A dor neuropática (associada a lesões neuronaistais como aquelas induzidas por diabetes, HIV, infecção porherpes, ou acidente vascular cerebral) ocorre com menor pre-valência, mas ainda uma prevalência substancial, como o faza dor de câncer.

Os mecanismos patogênicos que geram sintomas dedor podem ser agrupados em duas categorias principais: ·

- aqueles que são componentes de respostas tecidu-ais inflamatórias (dor inflamatória) ; e

- aqueles que resultam de uma lesão neuronal dealguma forma (dor neuropática).

A dor inflamatória crônica consiste predominante-mente em osteoartrite, dor dorsal inferior crônica e artritereumatóide. A dor resulta de lesão e/ou inflamação aguda econtínua. Pode haver dor espontânea e também provocada.·

Há uma hipersensibilidade patológica subjacentecomo resultado de hiperexcitabilidade fisiológica e libera-ção de mediadores inflamatórios que potencializam ainda maisesta hiperexcitabilidade. Os receptores CB2 são expressadosem células inflamatórias (células T, células B, macrófagos,células-tronco) e medeiam a supressão imunológica através dainibição da liberação de mediadores inflamatórios de intera-ção celular. Os receptores CB2 podem ser expressados tambémem terminais nervosos sensoriais, e portanto, inibem direta-mente a hiperalgesia.

Mais recentemente, os dados sugerem um papel paraa ativação do receptor CB2 no sistema nervoso central. Atérecentemente, o receptor CB2 era tido como estando restritoà periferia; entretanto, dados emergentes sugerem a induçãomediada pela dor inflamatória da expressão do receptor CB2no cordão espinhal do rato, o que coincide com o aparecimen-to de micróglia ativada (Zhang et al., 2003). Além disso, osagonistas do receptor CB2 demonstraram reduzir respostas e-vocadas mecanicamente e o desfecho de neurônios de amplafaixa dinâmica no chifre dorsal do cordão espinhal em mode-los animais de dor inflamatória (Zhang et al., Eur. J. Neu-rosei. 17:2750-2754 (2003); Nackley et al., J.. Neurophys.92:3562-3574 (2004); Elmes et al., Eur. J. Neurosci.20:2311-2320 (2004)).

O papel de CB2 na imunomodulação, inflamação, os-teoporose, doenças cardiovasculares, doenças renais e outrascondições doentias, está sendo agora examinado.

Baseado no texto precedente, há uma necessidade dese obter compostos que têm atividade contra o receptor CB2.Assim sendo, acredita-se que os moduladores de CB2 oferecemuma abordagem singular para a farmacoterapia de distúrbiosimunes, inflamação, osteoporose, isquemia renal e outrascondições patofisiológicas.

Os documentos n^ WO 04/018433, WO 04/018434, WO04/029027 e WO 04/029026 (todos em nome de Glaxo Group Limi-ted) descrevem derivados de pirimidina e piridina úteis notratamento de doenças que são causadas direta ou indireta-mente por um aumento ou decréscimo na atividade do receptorcanabinóide.

A presente invenção fornece derivados inusitadosde imidazopiridinas da fórmula (I) e seus derivados farma-ceuticamente aceitáveis, composições farmacêuticas que con-têm estes compostos ou derivados, e seu uso como moduladoresdo receptor CB2, que são úteis no tratamento de uma série dedistúrbios.

A presente invenção compreende ainda um método pa-ra tratar doenças mediadas por receptores CB2 em um animal,inclusive seres humanos, compreendendo administrar a um ani-mal, que dela necessita, uma quantidade eficaz atóxica de umcomposto da fórmula (I) ou um seu derivado farmaceuticamenteaceitável.

À luz do fato de que os canabinóides atuam sobrereceptores capazes de modular diferentes efeitos funcionais,e tendo em vista a baixa homologia entre CB2 e CBl, umaclasse de fármacos seletivos para o subtipo especifico dereceptor é desejável. Os canabinóides naturais ou sintéticosdisponíveis atualmente não preenchem esta função porque elessão ativos sobre ambos receptores.Em uma modalidade, a presente invenção inclui com-postos que são capazes de modular seletivamente os recepto-res para canabinóides, e portanto, as patologias associadasa tais receptores.

A invenção fornece compostos da fórmula (I):

<formula>formula see original document page 7</formula>

onde:

X1 é NR4 ou O;

R1 é selecionado entre hidrogênio, alquila de Ci_6,ciclo-alquila de C3-6, e halo-alquila de Ci-e;

R2 é hidrogênio ou (CH2)mR3/ onde m é 0 ou 1;ou R1 e R2, em conjunto com o N ao qual eles estãoanexados, fòrmam um anel heterociclila não-aromático com 4 a8 membros opcionalmente substituído;

R3 é um grupo heterociclila não-aromático com 4 a8 membros, um grupo ciclo-alquila de C3-8, um grupo alquilade C1-10 linear ou ramificado, alquenila de C2-I0, ciclo-alquenila de C3-8, alquinila de C2-I0, ciclo-alquinila de C3-8,ou fenila, sendo que qualquer um deles pode ser não-substituído' ou substituído, ou R5;

R4 é selecionado entre hidrogênio, alquila de C1-6,ciclo-alquila de C3-6, halo-alquila de C1-6, COCH3 e SO2ME;R5 é

<formula>formula see original document page 8</formula>

onde ρ é 0, lou2, eXé CH2, O, S ou SO2;R6 é fenila não-substituida ou substituída, ciclo-alquila de C3-6 não-substituída ou substituída ou um anel he-terociclila não-aromático com 4 a 8 membros não-substituidoou substituído;

R7 é OH, alcóxi de Ci-6, NR8aR8b, NHCOR9, NHSO2R9 ouSOqR9;

R8a é H ou alquila de Ci_6;

R8b é H ou alquila de Ci_6;

R9 é alquila de Ci-6;

R10 é hidrogênio, alquila de Ci_6 substituída ounão-substituída ou cloro;

R12 é hidrogênio ou alquila de Ci_6;

R13 é hidrogênio ou alquila de C1-6;

q é 0, 1 ou 2;

e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Em uma modalidade, R1 é hidrogênio.

Em uma modalidade, R2 é (CH2)mR3, onde m é 0 ou 1.

Em uma modalidade, Xi é NR4.

Em uma modalidade, X1 é 0.

Quando R3 ou R6 são selecionados independentementeentre um grupo heterociclila não-aromático, o anel pode con-ter 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos. Em uma modalidade, os hetero-átomos são selecionados entre oxigênio, nitrogênio ou enxo-fre. Os exemplos de grupos com 4 membros são 2- ou 3-azetidinila, oxetanila, tioxetanila, S-óxido de tioxetanila,e S,S-dióxido de tioxetanila. Os exemplos de grupos hetero-ciclila com 5 membros neste caso incluem dioxolanila, pirro-lidinila, tetraidrofuranila, tetraidrotiofenila, S,S-dióxidode tetraidrotiofenila, e S-óxido de tetraidrotiofenila. Osexemplos de grupos heterociclila com 6 membros são morfoli-nila, piperidinila, piperazinila, tetraidropiranila, tetrai-drotiopiranila, S,S-dióxido de tetraidrotiopiranila, tiomor-folinila, S,S-dióxido de tiomorfolinila, tetraidropiridini-la, S,S-dióxido de tetraidropiridinila, tetraidropiridinila,dioxanila, 1,1-dióxido de tetraidropirano e 1-óxido de te-traidropirano. Os exemplos de um anel heterociclila com 7membros são azapina ou oxapina. Os exemplos de grupos com 8membros são azaciclo-octanila, aza-oxi-ciclo-octanila ou a-zatia-ciclo-octanila.

Em uma modalidade, R1 e R2, em conjunto com o ni-trogênio ao qual eles estão anexados, formam um anel morfo-linila, pirrolidinila ou piperidinila. Em outra modalidade,R1 e R2, em conjunto com o nitrogênio ao qual eles estão a-nexados, formam um anel morfolinila.

Em uma modalidade, R6 é uma fenila não-substituidaou substituída.

Em uma modalidade, R7 é OH.

Em uma modalidade, R10 é hidrogênio.

Em uma modalidade, R12 é metila ou hidrogênio. Emoutra modalidade, R12 é metila.

Em uma modalidade, R13 é metila ou hidrogênio. Emoutra modalidade, R13 é hidrogênio.

Quando R6 é substituído, ele pode ser substituídocom 1, 2 ou 3 substituintes, sendo o substituinte ou substi-tuintes selecionados entre: alquila de Ci-6, halo-alquila deCi-6r Por exemplo, triflúor-metila, alcóxi de Ci_6, um grupohidroxila, um grupo ciano, halogênio, um grupo alquil (Ci-β)-sulfonila, -CONH2, -NHCOCH3, -C00H, halo-alcóxi de Ci_6, porexemplo, triflúor-metilóxi e SO2R8aR8b, onde R8a e R8b são comodefinidos acima.

Em uma modalidade, R6 é substituído com 1 ou 2substituintes.

Em uma modalidade, R6 é substituído com substitu-intes selecionados entre halogênio, ciano, metila, triflúor-metila, metóxi e triflúor-metóxi.

Em uma modalidade, R6 é substituído com halogênio,por exemplo, cloro. Em uma modalidade, R6 é 3-cloro-fenila.

Quando R1 e R2, em conjunto com o N ao qual elesestão anexados, formam um anel heterociclila não-aromáticocom 4 a 8 membros, que é substituído, ou quando R3 é substi-tuído, o substituinte ou substituintes podem ser seleciona-dos entre alquila de Ci_6, alcóxi de Ci-6, um grupo hidroxila,halo-alquila de Ci_6, por exemplo, trif lúor-metila, halo-alcóxi de Ci-6, por exemplo, triflúor-metilóxi um grupo cia-no, halogênio ou um grupo sulfonila, metil-sulfonila,NR8aR8b, : -CONH2, -NHCOCH3, (=0), C00H, CONHCH3, COM(CH3)2, eNHSO2CH3, onde R8a e R8b são como definidos acima.Quando R1 e R2, em conjunto com o N ao qual elesestão anexados, formam um anel heterociclila não-aromáticocom 4 a 8 membros, que é substituído, ou quando R3 é substi-tuído, pode haver 1, 2 ou 3 substituintes.

Quando R10 é substituído, os substituintes podemser selecionados entre halogênio.

Em uma modalidade, a invenção inclui compostos dafórmula (Ia):

<formula>formula see original document page 11</formula>

onde

X1 é NR4;

R1 é hidrogênio;

R2 é (CH2)raR3, onde m é 0 ou 1;

ou R1 e R2, em conjunto com o N ao qual eles estãoanexados, formam um anel morfolinila, pirrolidinila ou pipe-ridinila, qualquer um deles podendo ser não-substituído ousubstituído;

R3 é uma alquila de Ci-6 linear ou ramificada, não-substituída ou substituída;

R4 é hidrogênio ou metila;

R6 é fenila não-substituída ou substituída;

R12 é hidrogênio ou metila;e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Em certas modalidades, os compostos da fórmula (I)apresentam seletividade por CB2 em detrimento de CBl.

Em uma modalidade, os compostos da fórmula (I) têmum valor de CE5O no receptor canabinóide CB2 humano clonadode pelo menos 50 vezes os valores de CE50 no receptor cana-binóide CBl humano clonado e/ou têm menos do que 10% de efi-cácia no receptor CBl.

Em uma modalidade, os compostos da fórmula (I) têmum valor de EMR no receptor canabinóide CB2 humano clonadode pelo menos 5 vezes o valor de EMR no receptor canabinóideCBl humano clonado. Em outra modalidade, os compostos dafórmula (I) têm um valor de EMR no receptor canabinóide CB2humano clonado de pelo menos 10 vezes o valor de EMR no re-ceptor canabinóide CBl humano clonado. EMR é a razão molareqüieficaz e os valores podem ser calculados pela equaçãoaqui enunciada abaixo.

Os compostos da fórmula (I) podem ser mais poten-tes e/ou mais solúveis e/ou mais biodisponiveis e/ou produ-zir u aumento mais linear em exposição quando os compostossão administrados por via oral a um mamífero do que os com-postos disponíveis anteriormente que são agonistas de CB2.

A invenção será descrita usando as definições quese seguem, a menos que diferentemente indicado.

O termo "derivado farmaceuticamente aceitável"significa qualquer sal, éster, sal deste éster ou solvato(incluindo solvatos de sais, ésteres ou sais de ésteres) doscompostos da fórmula (I), ou qualquer outro composto que,após a administração ao recebedor, é capaz de produzir (di-reta ou indiretamente) um composto da fórmula (I) ou um seumetabólito ou resíduo ativo. Em uma modalidade, o derivadofarmaceuticamente aceitável é um sal ou solvato do compostoda fórmula (I).

Os versados nessas técnicas devem avaliar que oscompostos da fórmula (I) podem ser modificados para produzirseus derivados farmaceuticamente aceitáveis em qualquer umdos grupos funcionais nos compostos, e que os compostos dafórmula (I) podem ser transformados em mais do que uma posição.

Deve-se avaliar que, para uso farmacêutico, ossais, ésteres, sais de ésteres e solvatos referidos acimadevem ser sais, ésteres, sais de ésteres e solvatos fisiolo-gicamente aceitáveis, mas outros sais, ésteres, sais de és-teres e solvatos podem encontrar uso, por exemplo, na prepa-ração de compostos da fórmula (I) e de seus sais, ésteres,sais de ésteres e solvatos fisiologicamente aceitáveis. Ossais farmaceuticamente aceitáveis incluem aqueles descritospor Berge, Bighley e Monkhouse, J. Pharm. Sei. 66:1-19(1977). 0 termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" incluios sais preparados a partir de bases atóxicas farmaceutica-mente aceitáveis, incluindo bases inorgânicas e bases orgâ-nicas. Os sais derivados de bases inorgânicas incluem saisde alumínio, amônio, cálcio, cobre, férricos, ferrosos, lí-tio, magnésio, mangânicos, manganosos, potássio, sódio zin-co, e similares. Os sais derivados de bases atóxicas orgâni-cas farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de aminas pri-márias, secundárias e terciárias, aminas substituídas, in-cluindo aminas substituídas de ocorrência natural, aminascíclicas, e resinas trocadoras de íons básicas, tais comoarginina, betaína, cafeína, colina, N,N'-dibenzil-etilenodiamina,dietil-amina, 2-dietil-aminoetanol, 2-dimetil-aminoetanol,etanol-amina, etilenodiamina, N-etil-morfolina, N-etil-piperidina, glicamina, glicosamina, histidina, hidrabamina,isopropil-amina, lisina, metil-glicamina, morfolina, pipera-zina, piperidina, resinas poliamínicas, procaína, purinas,teobromo, trietil-amina, trimetil-amina, tris-hidróxi-metil-amino-metano, tripropil-amina, trometamina, e similares.Quando o composto da presente invenção é básico, os sais po-dem ser preparados a partir de ácidos atóxicos farmaceutica-mente aceitáveis, incluindo ácidos inorgânicos e orgânicos.

Tais ácidos incluem ácido acético, benzenossulfônico, ben-zóico, canforsulfônico, cítrico, etanossulfônico, fumárico,glicônico, glutâmico, bromídrico, clorídrico, isetiônico,lático, maléico, málico, mandélico, metanossulfônico, múci-co, nítrico, pamóico, pantotênico, fosfórico, succínico,sulfúrico, tartárico, p-touenossulfônico, e similares.

Os exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveisincluem sais de amônio, cálcio, magnésio, potássio e sódio,e aqueles formados a partir dos ácidos maléico, fumárico,benzóico, ascórbico, pamóico, succínico, clorídrico, sulfú-rico, bis-metilenossalicílico, metanossulfônico, etanodis-sulfônico, propiônico, tartárico, salicílico, cítrico, gli-cônico, aspártico, esteárico, palmítico, itacônico, glicóli-co, p-amino-benzóico, glutâmico, benzenossulfônico, ciclo-hexil-sulfâmico, fosfórico e nítrico.

Os termos "halogênio" ou "halo" são utilizados pa-ra representar flúor, cloro, bromo ou iodo.

0 termo "alquila", como um grupo ou parte de umgrupo, significa um grupo alquila com cadeia linear ou rami-ficada, ou combinações deles, por exemplo, metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, sec-butila, t-butila, isobu-tila, pentila, hexila, 1,1-dimetil-etila, heptila, octila,nonila, decila ou combinações deles.

0 termo "alcóxi", como um grupo ou parte de umgrupo, significa um grupo alquila com cadeia linear, ramifi-cada ou cíclica, tendo um átomo de oxigênio anexado à cadei-a, por exemplo, um grupo metóxi, etóxi, n-propóxi, isopropó-xi, n-butóxi, sec-butóxi, t-butóxi, isobutóxi, pentóxi, he-xilóxi, ciclo-pentóxi ou ciclo-hexilóxi.

0 termo "ciclo-alquila" significa um anel fechadosaturado, por exemplo, ciclo-propila, ciclo-butila, ciclo-pentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila ou ciclo-octila.

0 termo "alquenila", como um grupo ou parte de umgrupo, significa uma cadeia de carbonos, linear ou ramifica-da, ou combinações delas, contendo 1 ou mais ligações du-plas, por exemplo, butenila, pentenila, hexenila, heptenilaou octenila.

0 termo "ciclo-alquenila" significa um anel carbô-nico não-aromático fechado, contendo 1 ou mais ligações du-plas, por exemplo, ciclo-butenila, ciclo-pentenila, ciclo-hexenila, ciclo-heptenila ou ciclo-octenila.

0 termo "alquinila", como um grupo ou parte de umgrupo, significa uma cadeia carbônica linear ou ramificada,ou suas combinações, contendo 1 ou mais ligações triplas en-tre carbonos, por exemplo, etinila, propinila, butinila,pentinila, hexinila, ou suas combinações.

O termo "ciclo-alquinila" significa um anel carbô-nico não-aromático fechado, contendo 1 ou mais ligações tri-plas, por exemplo, ciclo-propinila, ciclo-butinila, ciclo-pentinila, ciclo-hexinila, ou suas combinações.

O termo "arila" significa um anel aromático com 5ou 6 membros, por exemplo, fenila, ou um sistema anelar bi-ciclico om 7 a 12 membros, onde pelo menos um dos anéis éaromático, por exemplo, naftila.

A presente invenção fornece também processos paraa preparação de compostos da invenção e os intermediários(II), (III), (IV), (V) , (VI) e (VII) usados neles.

Os compostos da fórmula (I) podem ser preparadoscomo enunciado no Esquema 1:

Esquema 1

<formula>formula see original document page 16</formula><formula>formula see original document page 17</formula>

onde LG1 e LG2 são grupos de saída, por exemplo,halogênio, tal como loro, LG3 é um grupo de saída, por exem-plo, alquila de Ci_6, tal como metila ou etila, PG é hidrogê-nio ou um íon de metal alcalino, por exemplo, Na+, e Xi, R1,R2, R6, R12 e R13 são como definidos para os compostos da fór-mula (I).

Deve-se entender que a presente invenção englobatodos isômeros dos compostos da fórmula (I) e seus derivadosfarmaceuticamente aceitáveis, incluindo todas as formas geo-métricas, tautoméricas e ópticas, e misturas delas (por e-xemplo, misturas racêmicas). Quando centros quirais adicio-nais estão presentes nos compostos da fórmula (I), a presen-te invenção inclui dentro do seu âmbito todos os diastereoi-sômeros possíveis, incluindo misturas deles. As diferentesformas isoméricas podem ser separadas ou resolvidas entre sipor métodos convencionais, ou qualquer dado isômero pode serobtido por métodos sintéticos convencionais ou por síntesesestereoespecificas ou assimétricas.

A invenção em questão inclui também compostos mar-cados de forma isotópica, que são idênticos àqueles enuncia-dos na fórmula (I) e outros, exceto pelo fato de que um oumais átomos foram substituídos por um átomo que tem uma mas-sa atômica ou número atômico diferente da massa atômica ounúmero atômico encontrado usualmente na natureza. Os exem-plos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos dainvenção incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogê-nio, oxigênio, fósforo, flúor, iodo, e cloro, tais como 3H,11C, 14C, 18F, 123I e 125I.

Os compostos da presente invenção e os sais farma-ceuticamente aceitáveis dos ditos compostos, que contêm osisótopos supramencionados e/ou outros isótopos de outros á-tomos, estão dentro do âmbito da presente invenção. Os com-·postos marcados de forma isotópica da presente invenção, por;exemplo, aqueles nos quais isótopos radioativos, tais como.3H ou 14C, estão incorporados, são úteis nos ensaios de fár-macos e/ou de distribuição tecidual de substratos. Os isóto-pos trício, 3H, e carbono 14, isto é, 14C, são particularmen-te preferidos por causa da facilidade de preparação e detec-tabilidade. Os isótopos 11C e 8F são particularmente úteis emPET (tomografia por emissão de pósitrons) , e o isótopo 125I é-particularmente útil em SPECT (tomografia computadorizada:por emissão de um único fóton), sendo todos eles úteis nareprodução de imagens do cérebro. Além disso, a substituiçãopor isótopos mais pesados, tais como deutério, isto é, 2H,pode produzir certas vantagens terapêuticas resultantes damaior estabilidade metabólica, por exemplo, maior meia-vidain vivo ou dosagens menores requeridas, e assim sendo, podemser preferidos em algumas circunstâncias. Os compostos dafórmula (I) marcados de forma isotópica, e após esta inven-ção, podem ser preparados genericamente conduzindo os proce-dimentos descritos nos Esquemas e/ou nos exemplos abaixo,substituindo um reagente não-marcado de forma isotópica porum reagente marcado de forma isotópica facilmente disponível.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser preparados na formacristalina ou não-cristalina, e caso seja cristalino, podeser opcionalmente solvatado. As referências a solvatos nestecaso incluem os hidratos. Esta invenção inclui no seu âmbitoos solvatos estequiométricos (incluindo hidratos), bem comocompostos que contêm quantidades variáveis de água e/o:u sol-vente.

Tendo em vista sua capacidade de se ligar ao re-ceptor CB2, acredita-se que os compostos da invenção devemser úteis no tratamento dos distúrbios que se seguem. Assimsendo, os compostos da fórmula (I) e seus derivados farma-ceuticamente aceitáveis podem ser úteis como analgésicos.

Por exemplo, eles podem ser úteis no tratamento de dor in-flamatória crônica (por exemplo, dor associada a artritereumatóide, osteoartrite, espondilite reumatóide, artritegotosa, e artrite juvenil), incluindo a propriedade de modi-ficação da doença e da preservação da estrutura articular;dor musculoesquelética; dor do dorso inferior e pescoço; en-torses e lesões por esforço excessivo; dor neuropática; dormantida de forma simpática; dor associada a câncer e fibro-mialgia; dor associada a enxaqueca; dor associada a influen-za ou outras infecções virais, tais como resfriado comum;febre reumática; dor associada a distúrbios funcionais dointestino, tais como dispepsia não-ulcerosa, dor não-cardíaca no peito e síndrome do intestino irritável; dor as-sociada a isquemia do miocárdio; dor pós-operatória; cefa-léia; dor de dente; e dismenorréia.

Os compostos da invenção têm também propriedadesde modificação de doenças ou de preservação da estrutura ar-ticular em esclerose múltipla, artrite reumatóide, osteoar-trite, espondilite reumatóide, artrite gotosa e artrite juvenil.

Os compostos da invenção podem ser particularmenteúteis no tratamento de dor neuropática. As síndromes de dorneuropática podem se desenvolver após lesão neuronal e a dorresultante pode persistir por meses ou anos, mesmo depois decurada a lesão original. A lesão neuronal pode ocorrer nosnervos periféricos, raízes dorsais, cordão espinhal ou cer-tas regiões do cérebro. As síndromes de dor neuropática sãoclassificadas tradicionalmente de acordo com a doença ou e-pisódio que as precipitou. As síndromes de dor neuropáticaincluem: neuropatia diabética; ciática; dor dorsal inferiorinespecífica; dor de esclerose múltipla; fibromialgia; neu-ropatia relacionada a HIV; neuralgia pós-herpética; neural-gia trigeminal; e dor resultante de traumatismo físico, am-putação, câncer, toxinas ou condições inflamatórias crôni-cas. Estas condições são difíceis de tratar, e, embora vá-rios fármacos sejam conhecidos por terem eficácia limitada,o controle completo da dor é raramente conseguido. Os sinto-mas de dor neuropática são incrivelmente heterogêneos e sãofreqüentemente descritos como brotamento espontâneo e dorlancinante, ou dor candente constante. Além disso, há a dorassociada a sensações normalmente não-dolorosas tais como"pinos-e-agulhas" (parestesias e disestesias) , maior sensi-bilidade ao toque (hiperestesia), sensação dolorosa após es-timulação inócua (alodinia dinâmica, estática ou térmica),maior sensibilidade a estímulos nocivos (hiperalgesia térmi-ca, ao frio, mecânica), sensação de dor continuada depois daremoção da estimulação (hiperpatia) ou uma ausência de oudéficit em vias sensoriais seletivas (hipoalgesia).

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também no trata-mento de inflamação, por exemplo, no tratamento de condiçõesda pele (por exemplo, queimadura solar, queimaduras, eczema,dermatite, psoríase); doenças oftalmológicas tais como glau-coma, retinite, retinopatias, uveíte e lesão aguda do tecidoocular (por exemplo, conjuntivite); distúrbios pulmonares(por exemplo, asma, bronquite, enfisema, rinite alérgica,síndrome da angústia respiratória, doença dos criadores depombos, pulmão do fazendeiro, doença pulmonar obstrutivacrônica (COPD); distúrbios do trato gastrointestinal (porexemplo, úlcera aftosa, doença de Crohn, gastrite atópica,gastrite de etiologia variada, colite ulcerativa, doença ce-líaca, ileíte regional, sindrome do intestino irritável, do-ença inflamatória do intestino, doença do refluxo gastroeso-fágico); transplante de órgãos; outras condições com um com-ponente inflamatório, tal como doença vascular, enxaqueca,periarterite nodosa, tireoidite, anemia aplásica, doença deHodgkin, esclerodermia, miastenia grave, esclerose múltipla,sindrome nefrótica, sindrome de Bechet, polimiosite, gengi-vite, isquemia do miocárdio, pirexia, lúpus eritematoso sis-têmico, tendinite, bursite e sindrome de Sjogren.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também no trata-mento de hiper-reflexia da bexiga de inflamação da bexiga.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também no trata-mento de doenças imunológicas, tais côo doenças auto-imunes,doenças de deficiência imunológica ou transplante de órgãos.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados farmaceutica-mente aceitáveis podem ser eficazes também para aumentar alatência de infecção por HIV.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também no trata-mento de doenças de função anormal de plaquetas (por exem-pio, doenças vasculares oclusivas).

Os compostos da fórmula -(I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também no trata-mento de neurite, queimação cardíaca, disfagia, hipersensi-bilidade pélvica, incontinência urinária, cistite ou prurido.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ter também ação diurética.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também no trata-mento de impotência ou disfunção erétil.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também para atenu-ar os efeitos colaterais hemodinâmicos de fármacos antiin-flamatórios não-esteróides (NSAIDs) e inibidores de cicloo-xigenase-2 (COX-2).

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também no trata-mento de doenças neurodegenerativas e neurodegeneração taiscomo demência, particularmente demência degenerativa (inclu-indo demência senil, doença de Alzheimer, doença de Pick,coréia de Huntingdon, doença de Parkinson e doença deCreutzfeldt-Jakob, doença de neurônios motores) ; demênciavascular (incluindo demência por múltiplos infartos); bemcomo demência associada ao lesões que ocupam o espaço intra-craniano; traumatismo; infecções e condições relacionadas(incluindo infecção por HIV); demência em doença de Parkin-son; metabolismo; toxinas; anóxia e deficiência vitamínica;e enfraquecimento cognitivo brando associado ao envelheci-mento, particularmente Enfraquecimento da Memória Associadoà Idade. Os compostos podem ser úteis também no tratamentode esclerose lateral amiotrófica (ALS) e neuroinflamação.Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também na neuro-proteção e no tratamento de neurodegeneração após acidentevascular cerebral, parada cardíaca, bypass pulmonar, lesãotraumática do cérebro, lesão do cordão espinhal, ou simila-res.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também no trata-mento de tinido.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também no trata-mento de doenças psiquiátricas, como por exemplo, esquizo-frenia, depressão (termo este que é aqui utilizado para in-cluir depressão bipolar, depressão unipolar, episódios de-pressivos maiores únicos ou recorrentes com ou sem caracte-rísticas psicóticas, características catatônicas, caracte-rísticas melancólicas, características atípicas ou de iníciono pós-parto, distúrbio afetivo sazonal, distúrbios distími-cos com início precoce ou tardio e com ou sem característi-cas atípicas, depressão neurótica, e fobia social, depressãoque acompanha demência, por exemplo, do tipo Alzheimer, dis-túrbio esquizoafetivo ou do tipo deprimido, e distúrbios de-pressivos resultantes de condições médicas gerais, incluin-do, porém sem limitações, infarto de miocárdio, diabetes,aborto espontâneo ou aborto, etc.), distúrbios de ansiedade(incluindo distúrbio de ansiedade generalizada e distúrbiode ansiedade social), distúrbio do pânico, agorafobia, fobiasocial, distúrbio obsessivo-compulsivo e distúrbio de tensãopós-traumática, distúrbios da memória, incluindo demência,distúrbios amnésicos, e enfraquecimento da memória associadoà idade, distúrbios alimentares, incluindo anorexia nervosae bulimia nervosa, disfunção sexual, distúrbios do sono (in-cluindo perturbações do ritmo circadiano, dissonia, insônia,apnéia do sono, e narcolepsia), abandono do abuso de drogastais como cocaína, etanol, nicotina, bezodiazepinas, álcool,cafeína, fenciclidina (compostos semelhantes à fenciclidi-na), opiáceos (por exemplo, cânabis, heroína, morfina), an-fetamina ou drogas relacionadas à anfetamina (por exemplo,dextroanfetamina, metilanfetamina) ou uma combinação delas.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também na preven-ção ou redução da dependência, ou redução da tolerância outolerância inversa a um agente indutor de dependência. Osexemplos de agentes indutores de dependência incluem opiá-ceos (por exemplo, morfina), depressores do sistema nervosocentral (por exemplo, etanol), psicoestimulantes (por exem-plo, cocaína) e;nicotina.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser úteis também no trata-mento de disfunção renal (nefrite, particularmente glomeru-lonefrite proliferativa mesangial, síndrome nefrítica), dis-função hepática (hepatite, cirrose), disfunção gastrointes-tinal (diarréia) e câncer colônico.

Em uma modalidade, os compostos da invenção podemse ligar seletivamente ao receptor CB2; tais compostos podemser particularmente úteis no tratamento de doenças mediadaspelo receptor CB2.

0 termo "tratamento" ou "tratar", como aqui utili-zado, inclui o tratamento de distúrbios estabelecidos e in-clui também a profilaxia deles. 0 termo "profilaxia", comoaqui utilizado, significa prevenir os sintomas em um indiví-duo já afligido ou prevenir a recorrência de sintomas em umindivíduo afligido, e não está limitado à prevenção completade uma aflição.

De acordo com outro aspecto da invenção, fornece-se um composto da fórmula (I) ou um seu derivado farmaceuti-camente aceitável para uso em medicina humana ou veterinária.

De acordo com outro aspecto da invenção, fornece-se um composto da fórmula (I) ou um seu derivado farmaceuti-camente aceitável para uso no tratamento de uma condição me-diada pela atividade de receptores canabinóides 2.

De acordo com outro aspecto da invenção, fornece-se o uso de um composto da fórmula (I) ou de um seu derivadofarmaceuticamente aceitável para a fabricação de um agenteterapêutico para o tratamento de uma condição mediada pelaatividade de receptores canabinóides 2. De acordo com outroaspecto da invenção, fornece-se um método para tratar um ma-mífero, por exemplo, um ser humano, que sofre de uma condi-ção mediada pela atividade de receptores canabinóides 2,compreendendo administrar ao dito indivíduo uma quantidadeatóxica terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula(I) ou de-um seu derivado farmaceuticamente aceitável.

De acordo com outro aspecto da invenção, fornece-se um método para tratar um mamífero, por exemplo, um serhumano, que sofre de um distúrbio imunológico, um distúrbioinflamatório, dor, artrite reumatóide, esclerose múltipla,osteoartrite, ou osteoporose, método este que compreende ad-ministrar ao dito indivíduo uma quantidade atóxica terapeu-ticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ou de um seuderivado farmaceuticamente aceitável.

De acordo com outro aspecto da invenção, fornece-se um composto da fórmula (I) ou um seu derivado farmaceuti-camente aceitável para uso no tratamento de uma condição talcomo um distúrbio imunológico, um distúrbio inflamatório,dor, artrite reumatóide, esclerose múltipla, osteoartrite,ou osteoporose.

De acordo com outro aspecto da invenção, fornece-se o uso de um composto da fórmula (I) ou de um seu derivadofarmaceuticamente aceitável para a fabricação de um agenteterapêutico para o tratamento ou prevenção de uma condiçãotal como um distúrbio imunológico, um distúrbio inflamató-rio, dor, artrite reumatóide, esclerose múltipla, osteoar-tri-te, ou osteoporose.

Em uma modalidade, a condição é dor. Em outra mo-dalidade, a dor é selecionada entre dor inflamatória, dorvisceral, dor de câncer, dor neuropática, dor dorsal inferi-or, dor musculoesquelética, dor pós-operatória, dor aguda eenxaqueca. Por exemplo, a dor inflamatória é uma dor associ-ada- à artrite reumatóide ou osteoartrite.

Para usar um composto da fórmula (I) ou um seu de-rivado farmaceuticamente aceitável para o tratamento de se-res humanos e outros mamíferos, ele é normalmente formuladode acordo com a prática farmacêutica usual como uma composi-ção farmacêutica. Portanto, em outro aspecto da invenção,fornece-se uma composição farmacêutica que compreende umcomposto da fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente a-ceitável, adaptada para uso em medicina humana ou veteriná-ria. Em uma modalidade, a composição farmacêutica compreendeainda um carreador ou diluente farmacêutico para ele.

Como aqui utilizado, o termo "modulador" significaagonista, agonista parcial ou completo e agonista inverso.Em uma modalidade, os presentes moduladores são agonistas.Em outra modalidade, os presentes moduladores são antagonis-tas. Em uma modalidade, os compostos da presente invençãosão agonistas de CB2.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis podem ser administrados de uma ma-neira usual para o tratamento das doenças indicadas, por e-xemplo, por administração oral, parenteral, sublingual, dér-mica, intranasal, transdérmica, retal, por intermédio de i-nalação ou por intermédio de administração bucal.

Os compostos da fórmula (I) e seus derivados far-maceuticamente aceitáveis, que são ativos quando administra-dos por via oral, podem ser formulados como líquidos, com-primidos, cápsulas e pastilhas. Uma formulação líquida deveconsistir genericamente em uma suspensão ou solução do com-posto ou sal em um carreador líquido, por exemplo, etanol,óleo de oliva, glicerina, glicose (xarope) ou água com umsabor, agente de suspensão ou colorante. Quando a composiçãoestá na forma de um comprimido, qualquer carreador farmacêu-tico usado rotineiramente para preparar formulações sólidaspode ser usado. Os exemplos de tais carreadores incluem es-tearato de magnésio, caulim, talco, gelatina, acácia, ácidoesteárico, amido, lactose e sacarose. Quando a composiçãoestá na forma de uma cápsula, qualquer encapsulação rotinei-ra é apropriada, usando, por exemplo, os carreadores supra-mencionados ou um semi-sólido, por exemplo, monoglicerideosou diglicerideos do ácido cáprico, Gelucire™ e Labrasol™,ou uma casca de cápsula dura, por exemplo, gelatina. Quandoa composição está na forma de uma cápsula com casca mole,por exemplo, gelatina, qualquer carreador usado rotineira-mente para preparar dispersões ou suspensões pode ser consi-derado, por exemplo, gomas aquosas ou óleos, e são incorpo-rados em uma casca de cápsula mole.

As composições parenterais típicas consistem emuma solução ou suspensão de um composto ou derivado em umcarreador aquoso ou não-aquoso estéril, contendo opcional-mente um óleo para uso parenteral, por exemplo, polietileno-glicol, poli(vinil-pirrolidona), lecitina, óleo de amendoimou óleo de gergelim.

As composições típicas para inalação estão na for-ma de uma solução, suspensão ou emulsão que pode ser admi-nistrada como um pó seco ou na forma de um aerossol, usandoum propelente convencional, tal como dicloro-diflúor-metanoou tricloro-flúor-metano.

Uma formulação típica de supositório compreende umcomposto da fórmula (!) ou um seu derivado farmaceuticamenteaceitável que é ativo quando administrado desta maneira, comum agente aglutinante e/ou lubrificante, por exemplo, gli-cóis poliméricos, gelatinas, manteiga de cacau ou outras ce-ras ou gorduras de baixo ponto de fusão, ou seus análogossintéticos.

As formulações dérmicas e transdérmicas típicascompreendem um veículo aquoso ou não-aquoso convencional,por exemplo, um creme, pomada, loção ou pasta, ou estão naforma de um emplastro, esparadrapo ou membrana medicada.

Em uma modalidade, a composição está na forma dedosagem unitária, por exemplo, um comprimido, cápsula ou do-se medida de aerossol, de tal modo que o paciente possa ad-ministrar uma única dose.

Cada dosagem unitária para administração oral con-tém adequadamente entre 0,001 mg e 500 mg, por exemplo, 0,01a 500 mg, tal como entre 0,01 mg e 100 mg, sendo que cadaunidade de dosagem para administração parenteral contém ade-quadamente entre 0,001 mg e 100 mg, de um composto da fórmu-la (I) ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável, cal-culada como ácido livre (composto não transformado) . Cadaunidade de dosagem para administração como supositório con-tém adequadamente entre 0,001 mg e 500 mg, por exemplo, 0,01mg a 500 mg, tal como entre 0,01 mg e 100 mg. Cada unidadede dosagem para administração intranasal contém adequadamen-te 1-400 mg, e adequadamente 10 a 200 mg por pessoa. Umaformulação tópica contém adequadamente 0,01 a 5,0% de umcomposto da fórmula (I).

O esquema de dosagem diário para administração o-ral é adequadamente cerca de 0,01 mg/kg a 1.000 mg/kg de umcomposto da fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente a-ceitável, calculado como ácido livre (composto não transfor-mado). O esquema de dosagem diário para administração paren-teral é adequadamente cerca de 0,001 mg/kg a 200 mg/kg de umcomposto da fórmula (I) ou um seu derivado farmaceuticamenteaceitável, calculado como ácido livre (composto não trans-formado). O esquema de dosagem diário para administração desupositório é adequadamente cerca de 0,01 mg/kg a 1.000mg/kg de um composto da fórmula (I) ou um seu derivado far-maceuticamente aceitável, calculado como ácido livre (com-posto não transformado). 0 esquema de dosagem diário paraadministração intranasal e inalação oral é adequadamentecerca de 10 a 500 mg/pessoa. O ingrediente ativo pode seradministrado entre 1 e 6 vezes ao dia, suficiente para apre-sentar a atividade desejada.

Pode ser vantajoso preparar os compostos da pre-sente invenção como nanoparticulas. Isto pode melhorar a bi-odisponibilidade oral dos compostos. Para os propósitos dapresente invenção, "nanoparticulado" é definido como partí-culas sólidas, sendo que 50% das partículas têm um tamanhode partícula menor do que 1 μιτι, por exemplo, menor do que0,75 μιη.

O tamanho de partícula das partículas sólidas docomposto (I) pode ser determinado por difração de laser. Umamáquina apropriada para determinar o tamanho de partículapor difração de laser é um analisador de tamanho de partícu-la a laser Lecotrac, usando uma bancada óptica HELOS equipa-da com uma unidade dispersora QUIXEL.

Inúmeros processos para a síntese de partículassólidas na forma de nanoparticulado são conhecidos. Tipica-mente, estes processos envolvem um processo de moagem, porexemplo, um processo de moagem a úmido na presença de um a-gente modificador de superfície que inibe a agregação e/ou ocrescimento de cristais das nanopartículas depois de cria-das. Alternativamente, estes processos podem envolver umprocesso de precipitação, por exemplo, um processo em ummeio aquoso a partir de uma solução do fármaco em um solven-te não-aquoso.

Conseqüentemente, em um outro aspecto, a presenteinvenção fornece um processo para preparar compostos da fór-mula (I) e seus derivados farmaceuticamente aceitáveis naforma de nanoparticulado, como aqui anteriormente definido,processo este que compreende moagem e precipitação.

Os processos representativos para a preparação dasditas partículas sólidas na forma de nanopaticulado estãodescritos nas patentes e publicações listadas abaixo.

Patente n2 US 4.826.689, expedida para Violanto eFischer, patente n- US 5.145.684, expedida para Liversidgeet al., patente n2 US 5.298.262, expedida para Na e Rajago-palan, patente n- US 5.302.401, expedida para Liversidge etal., patente n2 US 5.336.507, expedida para Na e Rajagopa-lan, patente n2 US 5.340.564, expedida para Illig e Sarpot-dar, patente n2 US 5.346.702, expedida para Na e Rajagopa-lan, patente n2 US 5.352.459, expedida para Hollister etal., patente n2 US 5.354.560, expedida para Lovreich, paten-te η- US 5.384.124, expedida para Courteille et al., patenten- US 5.249.824, expedida para June, patente n2 US5.503.723, expedida para Ruddy et al., patente n2 US5.510.118, expedida para Bosch et al., patente n- US 5.518.,expedida para Bruno et al., patente n2 US 5.518.738, expedi-da para Eickoff et al., patente n2 US 5.534.270, expedidapara De Castro, patente n2 US 5.536.508, expedida para Canalet al., patente n2 US 5.552.160, expedida para Liversidge etal., patente n2 US 5.560.931, expedida para Eickoff et al.,patente n2 US 5.560.932, expedida para Bagehi et al., paten-te n2 US 5.565.188, expedida para Wong et al., patente n2 US5.571.536, expedida para Eiekoff et al., patente n2 US5.573.783, expedida para Desieno e Stetsko, patente n2 US5.580.579, expedida para Ruddy et al., patente n2 US5.585.108, expedida para Ruddy et al., patente n2 US5.587.143, expedida para Wong, patente n2 US 5.591.456, ex-pedida para Franson et al., patente n2 US 5.622.938, expedi-da para Wong, patente n2 US 5.662.883, expedida para Bagehiet al., patente n2 US 5.665.331, expedida para Bagehi etal., patente n2 US 5.718.919, expedida para Ruddy et al.,patente n2 US 5.747.001, expedida para Wiedman et al., docu-mentos n— WO 93/25190, WO 96/24336, WO 97/14407, WO98/35666, WO 99/65469, WO 00/18374, WO 00/27369, WO 00/30615e WO 01/41760.

Esses processos podem ser facilmente adaptados pa-ra a preparação de compostos da fórmula (I) e seus derivadosfarmaceuticamente aceitáveis na forma de nanoparticulado.

Esses processos formam um outro aspecto da invenção.O processo da presente invenção pode usar uma eta-pa de moagem a úmido conduzida em um moinho tal como um moi-nho de dispersão, para produzir uma forma de nanoparticuladodo composto. A presente invenção pode ser colocada em práti-ca usando uma técnica de moagem a úmido, tal como aqueladescrita em Lachman et al., "The Theory and Practice of In-dustrial Pharmacy", Capitulo 2, "Milling" páguna 45 (1986).

Em outro refinamento, o documento n- WO 02/00196(SmithKline Beecham) descreve um procedimento de moagem aúmido usando um moinho no qual pelo menos uma das superfí-cies é feita de nylon (poliamida), compreendendo um ou maislubrificantes internos, para uso na preparação de partículassólidas de uma substância farmacológica na forma de nanopar-ticulado.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece umprocesso para preparar compostos da invenção na forma nano-particulada, compreendendo moer a úmido uma suspensão docomposto em um moinho que tem pelo menos uma câmara e meiosde agitação, sendo que a(s) dita(s) câmara(s) compreende(m)um nylon lubrificado, como descrito o documento n2 WO02/00196.

A suspensão de um composto da invenção para uso namoagem úmida é tipicamente uma suspensão líquida do compostograúdo em um meio líquido. \0 termo "suspensão" significaque o composto é essencialmente insolúvel no meio líquido.Os meios líquidos representativos incluem um meio aquoso.Usando o processo da presente invenção, o tamanho médio departícula do composto da invenção graúdo pode ser de até 1mm de diâmetro. Isto evita vantajosamente a necessidade depré-processar o composto.

Em outro aspecto da invenção, o meio aquoso a sersubmetido a moagem compreende um composto da fórmula (I) ouum seu derivado farmaceuticamente aceitável presente em umaquantidade entre cerca de 1% e cerca de 40% em peso, adequa-damente entre cerca de 10% e cerca de 30% em peso, por exem-plo, cerca de 20% em peso.

O meio aquoso pode compreender ainda um ou maiscarreadores solúveis em água, farmaceuticamente aceitáveis,que são apropriados para estabilização estérica e para oprocessamento subseqüente do composto da fórmula (I) ou deum seu derivado farmaceuticamente aceitável depois de moerpara dar uma composição farmacêutica, por exemplo, por ato-mização. Os excipientes farmaceuticamente aceitáveis maisapropriados para a estabilização estérica e atomização sãosurfactantes tais como Poloxâmeros, lauril-sulfato de sódioe Polissorbatos, etc; estabilizadores tais como celuloses,por exemplo, hidróxi-propil-metil-celulose; e carreadorestais como carboidratos, por exemplo, manitol.

Em outro aspecto da invenção, o meio aquoso a sersubmetido à moagem pode compreender ainda hidróxi-propil-metil-celulose (HPMC) presente em uma quantidade entre cercade 0,1 e cerca de 10% em peso.

0 processo da presente invenção pode compreender aetapa subseqüente de secar o composto da invenção para pro-duzir um pó.

Conseqüentemente, em outro aspecto, a presente in-venção fornece um processo para preparar uma composição far-macêutica que contém um composto da presente invenção, pro-cesso este que compreende produzir o composto da fórmula (I)ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável na forma par-ticulada, e em seguida, opcionalmente, secar para produzirum pó, e opcionalmente, misturar com um ou mais carreadoresou excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

Um outro aspecto da invenção é uma composição far-macêutica que compreende um composto da fórmula (I) ou umseu derivado farmaceuticamente aceitável, na qual o compostoda fórmula (I) ou um seu derivado farmaceuticamente aceitá-vel está presente em partículas sólidas na forma de nanopar-ticulado, em mistura com um ou mais carreadores ou excipien-tes farmaceuticamente aceitáveis.

O termo "secar" significa a remoção de qualquerquantidade de água ou outro veículo líquido usado durante oprocesso para manter o composto da fórmula (I) em suspensãoou solução no líquido. Esta etapa de secagem pode ser qual-quer processo de secagem conhecido nessas técnicas, incluin-do secagem por congelamento, granulação por spray. ou atomi-zação. Dentre estes métodos, a secagem por spray é particu-larmente preferida. Todas estas técnicas são bem conhecidasnessa área. A secagem por spray/granulação em leito fluidode composições moídas é conduzida mais adequadamente usandoum atomizador tal como um Mobile Minor Spray Dryer (Niro,Dinamarca), ou uma secadora em leito fluido, como aquelesfabricados por Glatt, Alemanha.

Em outro aspecto, a invenção fornece uma composi-ção farmacêutica, como aqui definida anteriormente, na formade um pó seco obtenivel por moagem a úmido de partículas só-lidas do composto da fórmula (I), e em seguida, atomizaçãoda suspensão resultante.

Em uma modalidade, a composição farmacêutica, comoaqui anteriormente definida, compreende ainda HPMC presenteem uma quantidade menor do que 15% em peso, por exemplo, nafaixa entre 0,1 e 10% em peso.

Os compostos para o receptor CB2 para uso na pre-sente invenção podem ser usados em combinação com outros a-gentes terapêuticos, por exemplo, inibidores de COX-2, taiscomo celecoxib, deracoxib, rofecoxib, valdecoxib, parecoxibou COX-189; inibidores de 5-lipoxigenase; NSAIDs, tais comoaspirina, diclofenaco, indometacina, nabumetona ou ibuprofe-no; antagonistas de receptores de leucotrienos; DMARDs, talcomo metotrexato; agonistas de receptores de adenosina Al;bloqueadores de canais de cálcio, tal como lamotrigina; mo-duladores de receptores NMDA, tais como antagonistas de re-ceptores de glicina; gabapentina e compostos afins; antide-pressivos tricíclicos, tal como amitriptillna; fármacos an-tiepilépticos estabilizadores neuronais; inibidores da ab-sorção de monoaminérgicos, tal como venlafaxina; analgésicosopiáceos; anestésicos locais; antagonistas de 5ΗΤχ, tais co-mo triptanos, por exemplo, sumatriptano, naratriptano, zol-mitriptano, eletriptano, frovatriptano, almotriptano ou ri-zatriptano; ligantes de receptor EPi, ligantes do receptorEP4; ligantes de receptor EP2; ligantes de receptor EP3; an-tagonistas de EP4; antagonistas de EP2 e antagonistas de EP3;ligantes de receptor de bradiquinina e ligante de receptorvanilóide, fármacos para artrite reumatóide, por exemplo,fármacos anti-TNF, por exemplo, enbrel, remicade, fármacosanti-IL-1, DMARDS, por exemplo, leflunamida ou compostos de5HT6. Quando os compostos são usados em combinação com ou-tros agentes terapêuticos, os compostos podem ser adminis-trados seqüencialmente ou simultaneamente por qualquer viaconveniente.

Os inibidores de COX-2 adicionais estão descritosnas patentes n^ US 5.474.995, US 5.633.272, US 5.466.823,US 6.310.099 e US 6.291.523; e nos documentos η25 WO96/25405, WO 97/38986, WO 98/03484, WO 97/14691, WO99/12930, WO 00/26216, WO 00/52008, WO 00/38311, WO 01/58881e WO 02/18374.

Os compostos de 5HT6 apropriados para uma combina-ção apropriada para o tratamento de, por exemplo, doença deAlzheimer ou intensificação cognitiva, podem ser seleciona-dos entre SGS518 (Saegis), BGC20 761· (BTG descrito no docu-mento η2 WO 00/34242), WAY466 (Wyeth);, P04368554 (Hoffman LaRoche) BVT5182 (Biovitron) e LY483518 (Lilly), SB742457(GSK) e/ou compostos descritos nos Exemplos 1 a 50 do docu-mento n2 WO 03/080580.

O composto da presente invenção pode ser adminis-trado em combinação com outras substâncias ativas tais comoantagonistas de 5HT3, antagonistas de NK-1, agonistas de se-rotonina, inibidores seletivos da reabsorção de serotonina(SSRI), inibidores da reabsorção de- noradrenalina (SNRI),antidepressivos triciclicos e/ou antidepressivos dopaminér-gicos.

Os antagonistas de 5HT3 apropriados, que podem serusados em combinação com o composto da invenção, incluem,por exemplo, ondasetrona, granisetrona, metoclopramida.

Os agonistas de serotonina apropriados, que podemser usados em combinação com o composto da invenção, incluemsumatriptano, rauwolscina, yohimbina, metoclopramida.

Os SSRIs apropriados, que podem ser usados em com-binação com o composto da invenção, incluem fluoxetina, ci-talopram, femoxetina, fluvoxamina, paroxetina, indalpina,sertralina, zimeldina.

Os SNRIs apropriados, que podem ser usados em com-binação com o composto da invenção, incluem venlafaxina ereboxetina.

Os antidepressivos triciclicos apropriados, quepodem ser usados em combinação com um composto da invenção,incluem imipramina, amitriptilina, clomipramina e nortriptiIina.

Os antidepressivos dopaminérgicos apropriados, quepodem ser usados em combinação, com um composto da invenção,incluem bupropiona e amineptina.

Os compostos da presente invenção podem ser usadosem combinação com inibidores de PDE4. 0 inibidor de PDE4 ú-til nesta invenção pode ser qualquer composto que reconheci-damente inibe a enzima PDE4 ou que se descobriu atuar comoinibidor de PDE4, e que é apenas ou essencialmente apenas uminibidor de PDE4, e não os compostos que inibem até um graude apresentar um efeito terapêutico sobre outros membros dafamília de PDEs, bem como PDE4. Genericamente, prefere-seusar um antagonista de PDE4 que tem uma razão de CI50 decerca de 0,1 ou mais em relação à CI5o para a forma catalí-tica de PDE4 que se liga a rolipram com uma alta afinidade.

Os compostos da presente invenção ou combinações com PDE4podem ser usados para tratar inflamação e como broncodilata-dores.

Há pelo menos duas formas de ligação em PDE4 re-combinante de monócitos humanos (hPDE 4) nas quais os inibi-dores se ligam. Uma explicação para estas observações é quehPDE 4 existe em duas formas distintas. Uma se liga a seme-lhantes a rolipram e denbufilina com uma alta afinidade, en-quanto que a outra se liga a estes compostos com uma baixaafinidade. Os inibidores de PDE4 preferidos para uso nestainvenção serão aqueles compostos que têm uma taxa terapêuti-ca salutar, isto é, compostos que de preferência inibem aatividade catalítica de AMPc, onde a enzima está na formaque se liga a rolipram com uma baixa afinidade, reduzindodesta forma os efeitos ; colaterais que aparentemente estãorelacionados com a inibi.ção da forma que se liga a rolipramcom uma alta afinidade. Outra maneira de afirmar isto é queos compostos preferidos devem ter uma relação de CI50 decerca de 0,1 ou mais em relação à CI50 para a forma catalí-tica de PDE4 que se liga a rolipram com uma alta afinidadedividido pela CI50 para a forma que se liga a rolipram comuma baixa afinidade.

Faz-se referência à patente n- US 5.998.428 quedescreve estes métodos mais detalhadamente. Esta patente éaqui incorporada como referência na sua totalidade como seaqui enunciada.

Adequadamente, os inibidores de PDE4 são os inibi-dores de PDE4 que têm uma relação de CI50 maior do que 0,5,e particularmente, os compostos que têm uma relação maior doque 1,0.

Outro aspecto da invenção é um modulador de CB2(um composto da fórmula (I) e seus derivados farmaceutica-mente aceitáveis) em combinação com um inibidor de PDE4, ecomposições que compreendem a dita combinação.

Outro aspecto da invenção é um método para tratardistúrbios pulmonares, como por exemplo, asma, bronquite,enfisema, rinite alérgica, sindrome da angústia respirató-ria, doença dos criadores de pombos, pulmão do fazendeiro,doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) e tosse, ou umdistúrbio que pode ser tratado com um broncodilatador, com-preendendo administrar a um mamífero, incluindo um ser huma-no, uma quantidade eficaz de um modulador de CB2 ou de umseu derivado farmaceuticamente aceitável (compostos da fór-mula (I) e seus derivados farmaceuticamente aceitáveis), euma quantidade eficaz de um inibidor de PDE4 ou um seu deri-vado farmaceuticamente aceitável.

Um aspecto adicional da invenção é o uso de umaquantidade eficaz de um modulador de CB2 ou de um seu deri-vado farmaceuticamente aceitável (compostos da fórmula (I) eseus derivados farmaceuticamente aceitáveis), e uma quanti-dade eficaz de um inibidor de PDE4 ou um seu derivado farma-ceuticamente aceitável, na fabricação de um medicamento parao tratamento de distúrbios pulmonares, como por exemplo, as-ma, bronquite, enfisema, rinite alérgica, sindrome da angús-tia respiratória, doença dos criadores de pombos, pulmão dofazendeiro, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) e tos-se, ou para a fabricação de um broncodilatador.

Quando aqui utilizado, o termo "tosse" pode terinúmeras formas e inclui tosse produtiva, não-produtiva, hi-per-reativa, asma e associada a COPD.

Outro aspecto da invenção é uma embalagem para pa-ciente, que compreende uma quantidade eficaz de um moduladorde CB2 ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável (com-postos da fórmula (I) e seus derivados farmaceuticamente a-ceitáveis), e uma quantidade eficaz de um inibidor de PDE4ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável.

Os compostos para PDE4 possíveis são eis-[ciano-4-(3-iclo-pentilóxi-4-metóxi-fenil)-iclo-hexano-l-carboxilato],conhecido também como cilomilast ou Ariflo®, 2-carbometóxi-4- ciano-4- (3-ciclo-propil-metóxi-4- diflúor-metóxi-fenil)-ciclo-hexan-:l-ona, e eis-[4-ciano-4-(3-ciclo-propil-metóxi-4-diflúor-metóxi-fenil) -ciclo-hexan-l-ol]. Eles podem serfabricados pelo processo descrito nas patentes n— US5.449.686 e 5.552.438. Outros inibidores de PDE4, inibidoresespecíficos, que podem ser usados nesta invenção são AWD-12-281 da ASTA MEDICA (Hofgen, N. et al., 15- EFMC Int. Symp.Med. Chem. (6-10 de setembro, Edinburgh) , 1998, Resumo, pá-gina 98); um derivado de 9-benzil-adenina denominado NCS-613(INSERM); D-4418 da Chiroscience e Schering-Plough; um ini-bidor de PDE4 benzodiazepínico identificado como CI-1018(PD-168787; Parke-Davis/Warner-Lambert); um derivado de ben-zodioxol, Kyowa Hakko, descrito no documento n- WO 99/16766;V-11294 da Napp (Landells, L.J. et al., Eur. Resp. J. [Annu.Cong. Eur. Resp. Soe. (19-23 de setembro, Genebra), 1998],1998, 12(Suplemento 28): Resumo P2393); roflumilast (refe-rência CAS n2 162401-32-3) e uma ftalazinona (documento n-WO 99/47505) da Byk-Gulden (agora Altana); ou um compostoidentificado como T-440 (Tanabe Seiyaku; Fuji, K. et AL., J.Pharmacol. Exp. Ther. 284(1):162 (1998)).

Os inibidores de PDE4 adicionais estão descritosnas páginas 2 a 15 do documento no WO 01/13953. São selecio-nados especificamente arofilina, atizoram, BAY-19-8004, be-nafentrina, BYK-33043, CC-3052, CDP-840, cipanfilina, CP-220629, CP-2 93121, D-22888, D-4396, denbufilina, filaminast,GW-3600, ibudilast, KF-17625, KS-506-G, laprafilina, NA-0226A, NA-23063A, ORG-20241, ORG-30029, PDB-093, pentoxifi-Iinar' piclamilast, rolipram, RPR-117658, RPR-122818, RPR-132294, RPR-132703, RS-17597, RS-25344-000, SB-207499, SB-211572, SB-211600, SB-212066, SB-212179, SDZ-ISQ-844, SDZ-MNS-949, SKF-107806, SQ-20006, T-2585, tibenelast, tolafen-trina, UCB-29646, V-11294A, YM-58997, YM-976 e zardaverina.

Em uma modalidade, o inibidor de PDE4 é seleciona-do entre cilomilast, AWD-12-281, NCS-613, D-4418, CI-1018,V-11294A, roflumilast ou T-440.

Os compostos da presente invenção podem ser úteistambém no tratamento de aterosclerose, em combinação com umagente anti-hiperlipidêmico, antiaterosclerótico, antidiabé-tico, antianginoso, anti-hipertensivo, ou um agente parabaixar Lp(a). Os exemplos dos agentes acima incluem inibido-res da síntese de colesterol, tais como estatinas, antioxi-dantes tal como probucol, sensibilizadores de insulina, an-tagonistas de canais de cálcio. Os exemplos de agentes parabaixar Lp(a) incluem os aminofosfonatos descritos nos docu-mentos n— WO 97/02037, WO 98/28310, WO 98/28311 e WO98/28312 (Symphar SA e SmithKline Beecham). Os exemplos deagentes anti-hipertensivos são inibidores da enzima conver-sora de angiotensina, antagonistas de receptores de angio-tensina-II, inibidores de ACE/NEP, bloqueadores, bloqueado-res de canais de cálcio, inibidores de PDE, a critério domédico.

Uma terapia combinada possível será o uso de umcomposto da presente invenção e uma estatina. As estatinassão uma classe bem conhecida de agentes redutores de coles-terol e incluem atorvastatina, sinvarstatina, pravastatina,cerivastatina, fluvastatina, lovastatina e ZD 4522 (tambémreferido com S-4522, Astra Zeneca). Os dois agentes podemser administrados substancialmente na mesma hora ou em horasdiferentes, a critério do médico.

Uma outra terapia combinada possível será o uso deum composto da presente invenção e um agente antidiabéticoou um sensibilizador de insulina. Dentro desta classe, oscompostos possíveis para uso com um composto da presente in-venção incluem os ativadores de PPARgama, por exemplo,G1262570 (Glaxo Wellcome) e tambpem a classe de glitazonastais como rosiglitazona (Avandia, SmithKline Beecham), tro-glitazona e pioglitazona.Deve-se avaliar que os compostos de qualquer umadas combinações acima ou composições podem ser administradassimultaneamente (seja na mesma composição farmacêutica ou emformulações farmacêuticas diferentes), separadamente ou se-qüencialmente.

A invenção fornece, assim, em um outro aspecto,uma combinação que compreende um composto da fórmula (I) ouum seu derivado farmaceuticamente aceitável, junto com umoutro agente ou agentes terapêuticos.

A composição referida acima pode ser apresentadaconvenientemente para uso na forma de uma formulação farma-cêutica, e assim sendo, as formulações farmácêuticas quecompreendem uma combinação definida acima, junto com um car-reador ou excipiente farmaceuticamente aceitável, compreen-dem um outro aspecto da invenção. Os componentes individuaisdessas combinações podem ser administrados seqüencialmenteou simultaneamente em formulações farmacêuticas separadas oucombinadas.

Quando um composto da fórmula (I) ou um seu deri-vado farmaceuticamente aceitável é usado em combinação comum segundo agente terapêutico ativo contra o mesmo estadodoentio, a dose de cada composto pode diferir daquela quandoo composto é usado isoladamente. As doses apropriadas devemser avaliadas facilmente pelos versados nessas técnicas.

Determinação da Atividade Agonista do Receptor Ca-nabinóide CBl

A atividade agonista do receptor canabinóide CBldos compostos da fórmula (I) foi determinada de acordo com ométodo experimental que se segue.

Método Experimental

Células de levedura (Saccharomyces cerevisiae) queexpressam o receptor canabinóide CBl humano foram geradaspor integração de um cassete de expressão no lócus cromossô-mico ura3 da cepa MMY23 da levedura. 0 cassete consistia naseqüência do DNA que codifica o receptor CBl humano, flan-queada pelo promotor GPD de levedura até a extremidade 5' deCBl, e uma seqüência terminadora transcricional de leveduraaté a extremidade 3' de CBl. MMY23 expressa uma subunidadealfa da proteína G quimérica de levedura/mamífero, na qualos 5 aminoácidos do terminal C de Gpal são substituídos por5 aminoácidos do terminal C de Gail/2 humano (como descritopor Brown et al., Yeast 16:11-22 (2000)). As células foramdesenvolvidas a 30 0C em meio de levedura Sintético Completo(SC) (Guthrie e Fink (1991), "Methods in Enzymology", volume194) sem uracila, triptofano, adenina e leucina até a faselogarítmica tardia (aproximadamente 6 OD6oo/mL) .

Os agonistas foram preparados como insumos comconcentração 10 mM em DMSO. Os valores de EC50 (concentraçãonecessária para produzir 50% da resposta máxima) foram esti-mados usando diluições de 4 vezes (BiomekFX, Beckman) em DM-SO. As soluções dos agonistas em DMSO (volume final do en-saio a 1%) foram transferidas para dentro de placas de mi-crotitulação pretas (384 poços). As células foram colocadasem suspensão em uma densidade de 0,2 OD600/itiL em meio SC semhistidina, uracila, triptofano, adenina e leucina, e suple-mentado com 3-amino-triazol 10 mM, fosfato de sódio 0,1 M,pH 7,0, e di-p-D-glicopiranosídeo fluoresceína 10 ' μΜ (FD-Glu). Esta mistura (50 uL por poço) foi adicionada ao ago-nista nas placas do ensaio (Multidrop 384, Labsystems). De-pois da incubação a 30 0C por 24 horas, a fluorescência re-sultante da degradação de FDGlu à fluoresceina devido à exo-glicanase, uma enzima de levedura endógena, produzida duran-te o crescimento celular estimulado pelo agonista, foi de-terminada usando uma leitora de fluorescência em placas demicrotitulação (Tecan Spectrofluor ou analisador LJL, com-primento de onda de excitação: 485 nm; comprimento de ondede emissão: 535 nm). A fluorescência foi plotada contra aconcentração do composto e a curva foi adaptada de forma i-terativa usando uma adaptação com quatro parâmetros, paragerar um valor do efeito da concentração. A eficácia (Emax)foi calculada a partir da equação:

Emax = Max [composto X] - Min [composto X] /MaX [HU210] - MÍn[HU210]χ 100%

onde Max [composto x] e Min[compOSto x] são o máximo e omínimo adaptados, respectivamente, a partir da curva do e-feito da concentração para o composto X, e Max[Hu2io] eMin[Hu2io] são o máximo e o mínimo adaptados, respectivamente,a partir da curva do feito da concentração para (6aR,10aR)-3- (1,1'—dimetil—heptil)—6a,7,10,1Oa-tetraidro—1—hidróxi — 6, 6-dimetil-6H-dibenzo[b,d]-pirano-9-metanol (HU210; disponívelna Tocris). Os valore da razão molar eqüieficaz (EMR) foramcalculados a partir da equação:

EMR = EC50 [composto X]/EC50 [HU210]

onde EC50[composto x] é a EC50 do composto X e ECso[hu2io]é a EC50 de HU210.

Os compostos dos Exemplos 1 a 22 foram testados deacordo com este método e tiveram valores de EC5O > 1.000 nMe/ou uma eficácia < 30% no receptor canabinóide CBl humanoclonado. Os resultados fornecidos são médias de inúmeros ex-perimentos.

Determinação da Atividade Agonista do Receptor Ca-nabinóide CB2

A atividade agonista do receptor canabinóide CB2dos compostos da fórmula (I) foi determinada de acordo com ométodo experimental que se segue.

Método Experimental

Células de levedura (Saccharomyces cerevisiae) queexpressam o receptor canabinóide CB2 humano foram geradaspor integração de um cassete de expressão no lócus cromossô-mico ura3 da cepa MMY23 da levedura. Este cassete consistiana seqüência do DNA que codifica o receptor CB2 humano,flanqueada pelo promotor GPD de levedura até a extremidade5' de CB2, e uma seqüência terminadora transcricional de le-vedura até a extremidade 3' de CB2. MMY23 expressa uma subu-nidade alfa da proteína G quimérica de levedura/mamífero, naqual os 5 aminoácidos do terminal C de Gpal são substituídospor 5 aminoácidos do terminal C de Gail/2 humano (como des-crito por Brown et al., Yeast 16:11-22 (2000)). As célulasforam desenvolvidas a 30 0C em meio de levedura SintéticoCompleto (SC) (Guthrie e Fink (1991), "Methods in Enzymo-logy", volume 194) sem uracila, triptofano, adenina e leuci-na até a fase logarítmica tardia (aproximadamente 6ODeoo/mL).

Os agonistas foram preparados como insumos comconcentração 10 mM em DMSO. Os valores de EC50 (concentraçãonecessária para produzir 50% da resposta máxima) foram esti-mados usando diluições de 4 vezes (BiomekFX, Beckman) em DM-SO. As soluções dos agonistas em DMSO (volume final do en-saio a 1%) foram transferidas para dentro de placas de mi-crotitulação pretas (384 poços). As células foram colocadasem suspensão em uma densidade de 0,2 OD60o/mL em meio SC semhistidina, uracila, triptofano, adenina e leucina, e suple-mentado com 3-amino-triazol 10 mM, fosfato de sódio 0,1 M,pH 7,0, e di-p-D-glicopiranosideo fluoresceina 10 μΜ (FD-Glu). Esta mistura (50 uL por poço) foi adicionada ao ago-nista nas placas do ensaio (Multidrop 384, Labsystems) . De-pois da incubação a 30 0C por 24 horas, a fluorescência re-sultante da degradação de FDGlu à fluoresceina devido à exo-glicanase, uma enzima de levedura endógena, produzida duran-te o crescimento celular estimulado pelo agonista, foi de-terminada usando uma leitora de fluorescência em placas demicrotitulação (Tecan Spectrofluor ou analisador LJL, com-primento de onda de excitação: 485 nm; comprimento de ondede emissão: 535 nm). A fluorescência foi plotada contra aconcentração do composto e a curva foi adaptada de forma i-terativa usando uma adaptação com quatro parâmetros, paragerar um valor do efeito da concentração. A eficácia (Emax)foi calculada a partir da equação:

Emax = MaX[composto X] ~ Min[C0mp0st0 X] /MaX [HU210] - Min [HU210]χ 100%onde Max [composto χ] e Min [composto x] são o máximo e omínimo adaptados, respectivamente, a partir da curva do e-feito da concentração para o composto X, e Max[Hu2io] eMin[Hu2io] são o máximo e o mínimo adaptados, respectivamente,a partir da curva do feito da concentração para (6aR,10aR)-3- (1, l'-dimetil-heptil)-6a,7,10,10a-tetraidro-l-hidróxi-6, 6-dimetil-6H-dibenzo[b,d]-pirano-9-metanol (HU210; disponívelna Tocris). Os valore da razão molar eqüieficaz (EMR) foramcalculados a partir da equação:

EMR = EC50 [composto X]/EC50 [hu210]

onde EC50[composto x] é a EC50 do composto X e EC50[hu210]é a EC50 de HU210.

Os compostos dos Exemplos 1 a 22 foram testados deacordo com este método e tiveram valores de EC50 < 300 nMe/ou uma eficácia > 50% no receptor canabinóide CB2 humanoclonado. Os resultados fornecidos são médias de inúmeros ex-perimentos.

Medição dos Efeitos Agonistas de CB2 em um Ensaiode Gene Repórter

Método Experimental

Os efeitos agonistas de CB2 foram determinados u-sando um ensaio com gene-repórter. Este estudos foram reali-zados usando uma linhagem de células CHO-Kl que expressamuma construção de gene-repórter "CRE-LUC" que compreende ogene para luciferase sob o controle de promotores de proteí-nas de ligação com elementos de múltiplas respostas de AMPc.Nestas células, os aumentos nos níveis intracelulares deAMPc levam à transcrição do gene de luciferase e à subse-qüente produção de luciferase. A expressão de luciferase émedida pela adição às células de uma mistura patenteada quecontém luciferina, o substrato para luciferase (Luclite,Perkin Elmer, n- do catálogo 6016919) . A reação resultanteleva à geração de luz que é medida em um contador de cinti-lação TopCount. Nas células CHO-Kl CB2 CRE-LUC, as forscoli-na produz um aumento acentuado na expressão de luciferase, eos agonistas de CB2 inibem esta resposta. As células CH0-K1CB2 CRE-LUC expressam rotineiramente um alto nivel de ativi-dade do receptor CB2 constitutivo. Isto foi superado estesexperimentos pré-tratando as células com o agonista inversoSR144528 por 30-60 min antes do uso. Este tratamento demons-trou eliminar a atividade do receptor CB2 constitutiva (Bou-aboula et al., 1999).

Métodos

As células CHO-Kl CB2 CRE-LUC foram desenvolvidasem DMEM/F12 mais meio Glutamax I (Gibco, ns do catálogo31331-028), suplementado com 9% de FBS (Gibco, n- do catálo-go 16000-040) e 0,5 mg/mL de G418 (Gibco, n- do catálogo10131-027) e 0,5 mg/mL de Higromicina (Invitrogen, n- do ca-tálogo 10687-010). As células foram desenvolvidas como umacultura em monocamada em frascos Nunclon ventilados de 162cm2 (NUNC, n£ do catálogo 178883) em 27,5 mL de meio em umaatmosfera umidif içada de 95% de ar e 5% de CO2 a 37 °C.

Quando confluente, o meio de crescimento foi substituído pormeio DMEM/F12 (Gibco, n2 do catálogo 31331-028), contendo100 nM do agonista inverso de CB2, SR144528, e as célulasforam incubadas a 37 0C por 30-60 min. Os frascos foram en-xaguados duas vezes com 25 mL de solução salina tamponadacom fosfato de Dulbecco (PBS, Gibco, n2 do catálogo 14190-094), e depois as células foram colhidas por incubação por10 min em 10 mL de Versene (Gibco, n2 do catálogo 15040-033). As células foram destacadas por uma pancada forte nofrasco e a suspensão das células foi recomposta até 50 mLcom PBS e centrifugada a 250 χ g por 5 min. 0 agregado celu-lar foi recolocado em suspensão em 24 mL de tampão de ensaioDMEM/F12 isento de vermelho de fenol(Gibco, n- do catálogo11039-021), e 50 μΐ da suspensão celular (aproximadamente50.000 células) foram adicionados a placas com 96 poços(Costar, n2 do catálogo 3904 - placas com poços pretos efundo transparente), contendo 50 μL do agonista em teste emforscolina 2 μΜ (concentração final do ensaio 1 μΜ de FSK) .

Os agonistas em teste foram preparadas como soluções 10 mMem DMSO e diluídos em tampão de ensaio DMEM/F12 isento devermelho de fenol, contendo forscolina 2 μΜ, para produziruma solução 20 μΜ do agonista em teste. Diluições· seriaissubseqüentes do agonista em teste foram preparadas no tampãode ensaio, contendo forscolina, e cada agonista em teste foiexaminado rotineiramente em uma faixa de concentrações fi-nais do ensaio de 10 μΜ a 10 mM (ou menor, caso necessário).As placas foram misturadas sobre uma batedeira de placas por5 min (800-1.000 rpm) e depois centrifugadas brevemente (5-10 segundos) a 250 χ g, colocadas em uma Bioplate sem suastampas, e incubadas por 4-5 h em uma atmosfera umidificadade 95% de ar e 5% de CO2 a 37 °C. As placas com 96 poços fo-ram removidas da incubadora e colocadas à temperatura ambi-ente por 10-15 min antes da adição de 25 μί de solução deLuclite, preparada de acordo com as instruções do fabrican-te. As placas foram vedadas com Topseal A (Perkin Elmer, n2do catálogo 6005185), misturadas sobre uma batedeira de pla-cas por 5 min (800-1.000 rpm) e depois centrifugadas breve-mente (5-10 segundos) a 250 χ g. Finalmente, a luminescênciafoi medida usando um contador de cintilação Packard Top-Count.

Análise dos Dados

Para cada composto, a inibição máxima da respostaà forscolina e a EC50 quanto a seu efeito foram determina-das. Em cada experimento, o agonista referencial HU210 foiincluído e o efeito máximo de cada agonista em teste foi ex-presso em relação ao efeito máximo produzido por HU210, parafornecer uma estimativa da atividade intrínseca. Além disso,a EC50 de cada composto foi dividida pela EC50 para HU210,para calcular a razão molar eqüipotente (EMR) para o compos-to em teste.

Resultados

Os compostos dos Exemplos 1-5, 9-10r 17 e 20 tes-tados de acordo com este método e tiveram valores de EMR me-nores do que 30. Os resultados fornecidos são médias de inú-meros experimentos.

Referência

Bouaboula, M., Dussossoy, D., Casellas, P., "Regu-lation of peripheral cannabinoid receptor CB2 phosphorylati-on be the inverse agonist SR 144528. Implications for recep-tor biological responses", J. Biol. Chem. 274 (29) :20397-405(1999).

Os exemplos que se seguem são ilustrativos, porémnão limitativos das modalidades da presente invenção.

Abreviaturas:

AcOH (ácido acético), Bn (benzila), Bu, Pr, Me, Et(butila, propila, metila, etila), DMSO (sulfóxido de dimeti-la), DCM (dicloro-metano), DME (1,2-dimetóxi-etano) , DMF(dimetil-formamida), EDC (1-(3-dimetil-amino-propil) -3-etil-carbodiimida), EtOAc (acetato de etila), EtOH (etanol), HPLC(cromatografia liquida de alto desempenho), LC/MS (cromato-grafia liquida/espectrometria de massas), MDAP (Autopurifi-cação Direcionada para Massas), MeCN (acetonitrila), MeOH(metanol), NMR (Ressonância Magnética Nuclear (espectro)),NMP (N-metil-pirrolidona), SCX (trocadora de cátions forte,por exemplo, cartuchos Isolute SCX-2), SPE (Extração de FaseSólida), TFA (ácido triflúor-acético) , THF (tetraidrofura-no) , s, d, t, q, m, br (singlete, dublete, triplete, quarte-to, multiplete, amplo)

Hardware

Módulo de Gradiente Binário Waters 2525

Bomba de Reposição Waters 515Módulo de Controle da Bomba WatersColetor de Injeção Waters 2767Controle Fluidico da coluna WatersDetector de Arranjos (Arrays) de Fotodiodos Waters2996

Espectrômetro de Massas Waters ZQColeto de Frações Gilson 202Coletor de Rejeitos Gilson AspecSoftware

Waters Masslyynx Versão 4 SP2Coluna

As colunas usadas são Waters Atlantic, cujas di-mensões são 19 mm χ 100 mm (pequena escala) e 30 mm χ 100 mm(larga escala). 0 tamanho de partícula da fase estacionáriaé de 5 μπι.

Solventes

A: Solvente aquoso = Água + 0,1% de ácido fórmico

B: Solvente orgânico: cetonitrila + 0,1% de ácidofórmico

Solvente de Reposição = Metanol:Água 80:20

Solvente de enxágüe da agulha = Metanol

Métodos

Há quatro métodos usados, dependendo do tempo deretenção analítica do composto de interesse. Todos eles têmum tempo de corrida de 13,5 min, que compreende um gradientede 10 min, e em seguida, purga (f^ush) da coluna de 3,5 min,e uma etapa de reequilíbrio.

Grande/Pequena Escala 1,0-1,5 = 5-30% de B

Grande/Pequena Escala 1,5-2,2 = 15-55% de B

Grande/Pequena Escala 2,2-2,9 = 30-850% de B

Grande/Pequena Escala 2,9-3,6 = 50-99% de B

Grande/Pequena Escala 3,6-5,0 = 80-99% de B (em 6min)

Vazão

Todos os métodos acima têm uma vazão de 20 mL/min(pequena escala) ou 40 mL/min (grande escala)Sistemas de LCMS Analítica

Hardware

Bomba com Gradiente Agilent 1100Auto-amostrador Agilent 1100

Detector Agilent 1100 DADDesgaseificador Agilent 1100Estufa Agilent 1100Controlador Agilent 1100Espectrômetro de Massas Waters ZQ

Sedere Sedex 75 ou Sedere Sedex 85 ou Polymer LabsPL-ELS-2100

Software

Waters MassLynx Versão 4.0 SP2Coluna

A coluna usada é uma Waters Atlantis, cujas dimen-sões são 4,6 mm χ 50 mm. 0 tamanho de partícula da fase es-tacionária é de 3 μιτι.

Solventes =

A: Solvente aquoso = Água + 0,05% de ácido fórmico

B: Solvente orgânico = Acetonitrila + 0,05% de á-cido fórmico

Método

0 método genérico usado tem um tempo de corrida de5 min.

<table>table see original document page 56</column></row><table><table>table see original document page 57</column></row><table>

Vazão

O método acima tem uma vazão de 3 mL/min

Condições Usadas para a NMR

Hardware

Bruker 400 MHz UltrashieldAuto-amostrador Bruker B-ACS60Console Bruker Advance 400Software

Interface do Usuário - NMR Kiosk

Software de Controle - XW na versão 3.0 de NMR

Condições Usadas para o Microondas

Iniciador Biotage

Especificações:

Temperatura·de aquecimento até 250 0CRadiação de microondas 50-300 W a 2,45 GHzIntermediário 1: 6-cloro-4- (metil-amino)-5-nitro-

3-piridino-carboxilato de etilaPreparação (a) : Metil-amina (33% em etanol, 1 mL)foi adicionada sob a forma de gotas a uma solução em refluxode 4,6-dicloro-5-nitro-piridino-carboxilato de etila (podeser preparado de acordo com Sanchez et al., J. HeterocyclicChem. 30:855 (1993)) (2, 65 g) e trietil-amina (1,4 mL) emetanol (10 mL) . A reação foi refluxada por 30 min e depois,evaporada. O resíduo foi extraído com acetato de etila fer-vente que foi depois evaporado. O produto bruto resultantecom hexano fervente, o que, após resfriamento, produziu ocomposto do título como cristais amarelos (1,82 g); ponto defusão (p.f.): 70-72 °C.

Preparação (b): Adicionou-se trietil-amina (40 mL,0,287 mol) a uma solução de 4,6-dicloro-5-nitro-piridino-carboxilato de etila (75,96 g, 0,287 mol) em etanol (596mL) , e a mistura foi aquecida até o refluxo. Adicionou-semetil-amina (35,6 mL, 33%) em etanol sob a forma de gotas àmistura em refluxo durante lh:35min. Depois de completada aadição, a mistura foi refluxada por 25 min e deixada resfri-ar. A mistura dqi reação foi evaporada em um evaporador rota-tivo Buchi sob .vácuo. O resíduo obtido foi agitado em DCM(200 mL) por 10 min; o sólido foi removido por filtração elavado com DCM (100 mL) . As camadas de DCM foram combinadase extraídas com água (2 χ 250 mL) . A camada em água foi ex-traída novamente com DCM (200 mL) . As camadas em DCM foramcombinadas, secadas usando MgSO4. 0 MgSO4 foi removido porfiltração e a camada de DCM foi evaporada para dar um óleomarrom-avermelhado. Este material solidificou ao descansar.O sólido foi captado em etanol (150 mL) e aquecido até que osólido estivesse solubilizado. A mistura foi deixada resfri-ar durante a noite inteira, os cristais formados foram remo-vidos por filtração, e lavados com etanol gelado (100 mL) .Os cristais foram secados ao ar sob vácuo, para dar o 6-cloro-4-(metil-amino)-5-nitro-3-piridino-carboxilato de eti-Ia (52,1 g, 69%).

NMR (400 MHz, DMS0-d6) HNC121277 δ: 1,40-1,44 (3H,t), 2, 92-2, 94 (3H, d), 4, 37-4, 43 (2H, q) , 8,73 (1H, s),9,00-9,10 (1H, br). Consistente com a estrutura proposta

Produto da LC/MS em 3,10 min, [MH+] 260 consisten-te com a fórmula molecular C9HioN3ClO4. 8% de uma impurezapresentes em 2,45 min, [MH+] 255.

Intermediário 2: 5-amino-6-cloro-4- (metil-amino)-3-piridino-carboxilato de etila

Preparação (a): Uma suspensão de 6-cloro-4-(metil-amino) -5-nitro-3-piridino-carboxilato de etila (15 g) em e-tanol foi hidrogenada na presença de niquel de Raney à tem-peratura ambiente e pressão atmosférica. Depois de completa-da a hidrogenação, o catalisador foi removido por filtraçãoe o filtrado foi evaporado, para dar um óleo escuro. A tri-turação com hexano produziu o composto do titulo como um só-lido rosa-escuro (12 g); p.f.: 50-52 °C.Preparação (b): Adicionou-se etanol (300 mL) ao 6-cloro-4-(metil-amino)-5-nitro-3-piridino-carboxilato de eti-la (52,1 g, 0,2 mol). Adicionou-se níquel de Raney (6 mL deuma lama a 50% em água) a esta suspensão, sob argônio. A re-ação foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio à tempera-tura ambiente de um dia para o outro (23 horas). O níquel deRaney foi removido por filtração usando diatomita sob argô-nio. O etanol foi evaporado em um evaporador rotativo Buchisob vácuo, para dar o 5-amino-6-cloro-4-(metil-amino)-3-piridino-carboxilato de etila (49,7 g, 107%) como um resíduomarrom viscoso. A mistura foi retirada sem purificação adi-cional.

NMR (400 MHz, DMSO-d6) HNC121277 δ: Consistentecom a estrutura proposta

Produto da LC/MS em 2,05 min, [MH+] 230. Quantida-de de impurezas presente entre 2% e 9%. Produto consistentecom a fórmula molecular CgHi0N3ClO4.

Intermediário 3: 4-cloro-l-metil-lH-imidazo [4,5-c] T-piridino-7-carboxilato de etila

Preparação (a) : Uma mistura de 5-amino-6-cloro-4-(metil-amino)-3-piridino-carboxilato de etila (12 g) e orto-formiato de trietila (50 mL) foi refluxada por 3 horas (oetanol foi removido). A solução quente foi filtrada e depoisdeixada resfriar. O sólido resultante foi removido por fil-tração e lavado com éter, e depois secado, para produzir ocomposto do titulo como um sólido cristalino marrom (8,8 g);p.f.: 112-114 °C.

Preparação (b): Adicionou-se orto-formiato de tri-etila (216 mL, 1,26 mol) ao 5-amino-6-cloro-4-(metil-amino)-3-piridino-carboxilato de etila (49,7 g, 0,21 mol), e a mis-tura foi aquecida até o refluxo por 1 hora. A mistura foideixada resfriar e foi evaporada em um evaporador rotativoBuchi sob vácuo, para dar um semi-sólido viscoso. Adicionou-se etóxi-etano (500 mL) ao semi-sólido e a mistura foi agi-tada à temperatura ambiente por 10 min. O sólido marrom foiremovido por filtração e lavada ainda mais com etóxi-etano(250 mL). O sólido foi secada ao ar sob vácuo, para dar o 4-cloro-l-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilato deetila (31,7 g, 61%).

NMR (400 MHz, Clorofórmio-d6) HNC121507 δ: 1,46 -1,49 (3H, t), 4,16 (3H, s), 4,45-4,15 (2H, q), 7,99 (1H, s).Consistente com a estrutura proposta.

Intermediário 4: 4- [(3-bromo-fenil)- amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilato de etila

Uma suspensão de 4-cloro-l-metil-lH-imidazo [4,5-c]-piridino-7-carboxilato de etila (650 mg) em 1,4-dioxano(5 mL) foi preparada em um frasco de microondas de 20 mL.

Adicionou-se 3-bromo-anilina (935 mg) à suspensão, e em se-guida, ácido metanossulfônico (0,35 mL). O frasco da reaçãofoi vedado e aquecido até 180 0C por 30 min. Neste ponto, amistura reativa foi combinada com um lote de outra reaçãocompletada da mesma maneira, porém usando 4-cloro-l-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilato de etila (100 mg).

Esta mistura de reações combinadas foi fracionada entre di-cloro-metano e água, e acamada orgânica foi coletada passan-do-a através de uma frita hidrofóbica. A solução em dicloro-metano foi evaporada sob vácuo, e o composto foi purificadopor cromatografia em silica (cartucho de 50 g, eluindo com0-100% de acetato de etila em hexano), para produzir o com-posto do titulo que foi secado sob vácuo, para produzir umsólido de cor creme (1,1 g).

LC/MS [MH+] 377 consistente com a fórmula molecu-lar C16H1581BrN4O2

Intermediário 5: 4- [(3-bromo-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilato de sódio

<formula>formula see original document page 62</formula>

O 4- [(3-bromo-fenil) -amino] -1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilato de etila (1,1 g) foi colocadoem um frasco de microondas de 20 mL e dissolvido em metanol(15 mL) , e depois adicionou-se hidróxido de sódio 2 N (4mL). O frasco foi vedado e aquecido a 120°C por 5 min. Asolução foi então secada sob vácuo, para dar o composto dotitulo como um sólido branco (8,7 g, incluindo o excesso dehidróxido de sódio).

LC/MS [MH+] 34 9 consistente com a fórmula molecu-lar C14Hn81BrN4O2

Intermediário 5; 4-[ (2,4-dicloro-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilato de etila

<formula>formula see original document page 63</formula>

Uma suspensão de 4-cloro-l-metil-lH-imidazo [4,5-c]—piridino—7—carboxiIato de etila (650 mg) em 1,4-dioxano(5 mL) foi feita em um frasco de microondas de 20 mL. Adi-cionou-se 2,4-dicloro-anilina (880 mg) e depois ácido meta-nossulfônico (0,35 mL) a esta suspensão. O frasco da reaçãofoi vedado e aquecido até 180°C por 30 min. Neste ponto, amistura reativa foi combinada com um lote de outra reaçãocompletada da mesma maneira, mas usando quantidades de 100mg de 4-cloro-l-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilatode etila. Esta mistura de reações combinadas foi fracionadaentre diclóro-metano e água, e a camada orgânica foi coleta-da passando-a através de uma frita hidrofóbica. A solução emdicloro-metano foi evaporada sob vácuo. O resíduo foi puri-ficado por cromatografia em silica (cartucho de 50 g, eluin-do com 0—100% de acetato de etila em hexano); entretanto,algum precipitado permaneceu depois de carregar na coluna.Este material foi lavado com metanol em um cartucho SCX (5g) e analisado, produzindo o composto do titulo. A fraçãocorreta da purificação foi secada sob vácuo e combinada como precipitado, para dar um sólido marrom (700 mg).

LC/MS [MH+] 365 consistente com a fórmula molecu-lar Ci6Hi435Cl2N4O2

Intermediário 7: Sal cloridrato do ácido 4-[(2,4-dicloro-fenil) -amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilico

<formula>formula see original document page 64</formula>

0 4-[(2,4-dicloro-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridi no—7—carboxilato de etila foi colocado em umfrasco de microondas de 20 mL e dissolvido em metanol (15mL), e depois adicionou-se hidróxido de sódio 2 N (4 mL) . 0frasco foi vedado e aquecido a 120 0C por 5 min. A soluçãofoi então evaporada sob vácuo e redissolvida em metanol (30mL). Adicionou-se hidróxido de sódio 2 N (4 mL) e a reaçãofoi refluxada por 3 horas a 100 0C. A mistura reativa foisecada sob vácuo e acidificada usando ácido clorídrico 2 N,a suspensão foi filtrada, e o sólido fi secado sob vácuo pa-ra dar o composto do titulo (540 mg).

LC/MS [MH+] 337 consistente com a fórmula molecu-lar C14H10 CI2N4O2

Intermediário 8; 4-[(3-cloro-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilato de etila

<formula>formula see original document page 65</formula>

Preparação (a) : Uma suspensão do 4-cloro-l-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilato de etila (1 g, 4,1mmol) e 3-cloro-anilina (0,9 mL, 8,9 mmol) em 1,4-dioxano(25 mL) foi aquecida a 100°C durante a noite inteira. Amistura reativa bruta foi evaporada e fracionada entre ace-tato de etila e água (aproximadamente 100 mL de cada). A ca-mada de acetato de etila foi secada, filtrada e evaporada,para dar o composto do titulo como um óleo bruto cor de la-ranja (1,8 g).

LC/MS [MH+] 331 consistente com a fórmula molecu-lar C16Hi535ClN4O2

Preparação (b): Adicionou-se 1,4-dioxano (410 mL),3-cloro-anilina (27,93 mL, 0,26 mol) e ácido metanossulfôni-co (17,19 mL, 0,26 mol) ao 4-cloro-l-metil-lH-imidazo[4,δ-ε] —piridino—7—carboxiIato de etila (31,7 g, 0,13 mol). No-tou-se uma pequena reação exotérmica. A mistura foi aquecidaa 105°C por 4 horas. O dioxano foi removido em um evapora-dor rotativo Buchi sob vácuo. Adicionou-se acetato de etila(1 litro) e água (500 mL) ao resíduo, e esta solução foineutralizada pela adição de solução aquosa saturada de bi-carbonato de sódio (350 mL). A camada de acetato de etilafoi separada e a camada aquosa foi extraída novamente comacetato de etila (500 mL). As camadas de acetato de etilaforam combinadas e evaporadas em um evaporador rotativo Bu-chi sob vácuo. Adicionou-se hexano (1,5 litro) ao resíduo, ea mistura foi aquecida até o refluxo por 45 min. Depois deresfriar, o sólido obtido foi removido por filtração e aque-cido até o refluxo com mais quantidade de hexano (1 litro).Depois de resfriar, o sólido foi removido por filtração, pa-ra dar o 4-[(3-cloro-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]—piridino—7—carboxiIato de etila (37,9 g, 86%) como um só-lido marrom-escuro.

NMR (400 MHz, Clorofórmio-d6) HNC121507 δ: 1,41 -1,44 (3H, t), 4,14 (3H, s), 4, 37-4, 42 (2H, q) , 7,02-7,05(1H, m), 7,25-7,29 (1H, m) , 7, 57-7, 60 (1H, m), 7,93 (1H, s) ,7,80-8,10 (1H, br), 8,12 (1H, s) , 8,74 (lH,s). Consistentecom a estrutura proposta.

Tempo de retenção do produto na LC/MS: 3,19 min,[MH+] 331 consistente com a fórmula molecular Ci6Hi5N4ClO2

Intermediário 9: Ácido 4-[(3-cloro-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxílicoPreparação (a): 0 4-[(3-cloro-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilato de etila (1,8 g)foi dissolvido em metanol (5 mL) e hidróxido de sódio 2 N (5mL) , e aquecido sob condições de microondas a 120 0C por 5min. O composto foi então fracionado entre acetato de etilae água (100 mL). A camada de acetato de etila foi secada,filtrada e evaporada. O material bruto foi então dissolvidoem água e levado a um pH 4-3 com ácido clorídrico 2 Ν, o quelevou a um precipitado decantando na água. Adicionou-se ace-tato de etila, o que fez com que a mistura formasse uma e-mulsão. A emulsão inteira foi evaporada e a amostra foi pu-rificada usando um cartucho de amino-propila SPE (50 g), e-luindo com amônea 2 M em metanol, para produzir o compostodo título (1,1 g).

LC/MS [MH+] 303 consistente com a fórmula molecu-lar Ci4Hii35ClN4O2

Preparação (b) : Adicionou-se etanol (330 mL) e emseguida solução aquosa 3 M de hidróxido de sódio (130 mL,0,25 mol) ao 4-[(3-cloro-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilato de etila (32,9 mg, 0,099mol). A mistura foi aquecida sob agitação até o refluxo por1 hora. Ao resfriar, a mistura solidificou, adicionou-se e-tanol (100 mL) para formar uma lama. A lama foi evaporada emum evaporador rotativo Buchi, para dar um sólido marrom. Es-te material foi captado em água (1 litro) e a solução foiresfriada em um banho de gelo até 15 °C, e acidificada atépH 1 usando soluça aquosa 2 M de ácido clorídrico. 0 preci-pitado formado foi removido por filtração, e o sólido foilavado com água (2 χ 200 mL) . O sólido foi secado sob vácuoa 40°C até atingir um peso constante (48 horas), para dar oácido 4- [(3-cloro-fenil) -amino]-1-metil-lH-imidazo[4, 5-c]-piridino-7-carboxíIico (28,19 g, 93%), como um sólido marrom.

NMR (400 MHz, DMS0-d6) HNC121878 δ: 4,07 (3H, s),7, 04-7, 06 (1H, m) , 7,31-7,36 (1H, t) , 7, 92-7, 94 (1H, m) ,8,23-8,24 (1H, m), 8,33 (1H, s), 8,49 (1H, s), 9,82 (1H, s) ,12,00-13,50 (sinal amplo). Consistente com a estrutura pro-posta

Tempo de retenção do produto da LC/MS em 2,17 min,[MH+] 303 consistente com a fórmula molecular Ci4H1IN4ClO2.

Intermediário 10; Sal cloridrato do ácido 4 — [ (3 —cloro-fenil) -oxi] -1-metil-lH-imidazo [4,5-c] -piridino-7-carboxilico

Uma mistura de 3-cloro-fenol (1,8 mL, 16,7 mmol)em 1,4-dioxano (4 mL) foi agitada intensamente. Depois, adi-cionou-se lentamente hidreto de sódio (60% em óleo mineral,701 mg). Adicionou-se mais 1,4-dioxano (18 mL) à suspensão,junto com 4- cloro-l-metil-lH-imidazo [4,5-c] -piridino-7-carboxilato de etila (1 g, 4,2 mmol). A amostra foi aquecidasob condições de microondas a 180 0C por 10 horas. O materi-al foi então evaporado até secar tanto quanto possível, re-dissolvido em água e acidificado até pH 1 com ácido clorí-drico 2 N. Foi obtido um precipitado sólido que foi removidopor filtração e secado em uma estufa a vácuo a 40 0C de umdia para o outro (1,3 g).

LC/MS [MH"] 304 consistente com a fórmula molecu-lar Ci4Hio35ClN3O3

Intermediário 11: Ácido 4-cloro-l-metil-lH-imidazo[4, 5-c]-piridino-7-carboxílico

O 4- cloro-l-metil-lH-imidazo [4,5-c] -piridino-7-carboxilato de etila (8,80 g) , metanol (90 mL) e hidróxidode sódio 2 N foram agitados juntos à temperatuía ambientepor 2 horas. A adição de ácido clorídrico 2 N produziu umprecipitado que foi removido por filtração e secado sob vá-cuo a 50 °C, para produzir o composto do título ' como um póvermelho (6,7 g).

LC/MS [MH+] 212 consistente com a fórmula molecu-lar C8H635ClN3O2

Intermediário 12: 4-cloro-l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridinaUma mistura de ácido 4-cloro-l-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilico (1,0 g) em dimetil-formamida(30 mL), N,N-diisopropil-etil-amina (4,12 mL) , morfolina(0,82 mL) e hexaflúor-fosfato de 0-(lH-benzotriazol-1-il) Ν, N, N', N'-tetrametil-urônio (2, 688 g) foi agitada à tempe-ratura ambiente por 45 min. A mistura reativa foi dissolvidaem água e acetato de etila. A camada orgânica foi lavada du-as vezes com solução aquosa saturada de bicarbonato de só-dio, e depois, com água. A camada orgânica foi evaporada, aslavagens com água foram evaporadas, e as lavagens com bicar-bonato de sódio combinadas foram evaporadas. O resíduo daevaporação das lavagens com bicarbonato de sódio foi agitadoem dicloro-metano, o sólido foi removido por filtração e ofiltrado foi combinado com os resíduos da Evaporação da ca-mada orgânica e o resíduo das lavagens com água. A misturaresultante foi evaporada, e o resíduo foi purificado porcromatografia (coluna Ci8, 50 g) , usando um gradiente de 0-100% de metanol em água, para produzir o composto do títulocomo um sólido esbranquiçado (940 mg).

LC/MS [MH+] 281 consistente com a fórmula molecu-lar Ci2Hi335ClN4O2

Exemplo 1: Sal cloridrato da N-(3-bromo-fenil)-1-metil-7-(1-piperidinil-carbonil)-ΙΗ-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina

O 4-[(3-bromo-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilato de sódio (250 mg, incluindo o hi-dróxido de sódio) foi colocado em um tubo fervente, onde elefoi combinado com hidróxi-benzotriazol hidratado (107 mg),N-(3-dimetil-amino-propil)-N-etil-carbodiimida (123 mg), N-etil-morfolina (0,183 mL) , piperidina (0, 092 mL), e isto foidissolvido em dimetil-formamida (8 mL). A reação foi agitadaà temperatura ambiente por 48 horas. A mistura reativa foievaporada sob vácuo e acidificada usando ácido clorídrico 2N e depois evaporada sob vácuo. O sólido resultante foi com-binado com hidróxi-benzotriazol hidratado (107 mg), N-(3-dimetil-amino-propil)-N-etil-carbodiimida (123 mg), piperi-dina (0, 092 mL) , excesso de N-etil-morfolina, e isto foidissolvido em dimetil-formamida (8 mL) . Este material foientão agitado por 24 horas à temperatura ambiente. A misturareativa foi evaporada sob vácuo e combinada com água e di-cloro-metano. A camada orgânica foi coletada por intermédiode uma frita hidrofóbica e evaporada sob vácuo. 0 resíduofoi purificado por cromatografia em sílica (cartucho de 10g, eluindo com 1-2% de amônea 2 M em metanol em dicloro-metano). A solução resultante foi evaporada sob vácuo e de-pois purificada usando HPCL direcionada a massas. As fraçõescorretas foram combinadas e evaporadas sob vácuo, para pro-duzir um sólido que foi dissolvido em metano e acetonitrila,e adicionou-se ácido clorídrico 1 M em etóxi-etano. A solu-ção foi evaporada sob vácuo, para produzir um sólido que foidissolvido em 1,4-dioxano e água, e colocado em uma secadorapor congelamento para dar um sólido branco (136 mg).

LC/MS [MH+] 416 consistente com a fórmula molecu-lar Ci9H2081BrN5O

Exemplo 2: Sal cloridrato da N-(3-bromo-fenil)-1-metil-7- (1-morfolinil-carbonil)-ΙΗ-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina

0 composto do título'foi preparado de uma maneirasimilar ao Exemplo 1 a partir 'do 4-[(3-bromo-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo [4,5-c]-piridino -7-carboxilato de sódio(250 mg), onde a morfolina (94 μ!,) foi usada no procedimentode acoplamento. Um sólido branco foi obtido (77 mg).

LC/MS [MH+] 418 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8Hi881BrN5O2

Exemplo 3: Sal cloridrato da N-(3-bromo-fenil)-1-metil-7-(1-pirrolidinil-carbonil)-ΙΗ-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina<formula>formula see original document page 73</formula>

O composto do título foi preparado de uma maneirasimilar ao Exemplo 1 a partir do 4-[(3-bromo-fenil)-amino]-1-metil -ΙΗ-imidazo [4,5-c]-piridino-7-carboxilato de sódio(250 mg), onde a pirrolidina (89 μΐ,) foi usada no procedi-mento de acoplamento. Um sólido branco foi obtido (154 mg).

LC/MS [MH+] 402 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8Hi881BrN5O

Exemplo 4: Sal cloridrato da 4-[(3-bromo-fenil)-amino]-1-metil-N-(2-metil-propil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-4-carboxamida

<formula>formula see original document page 73</formula>

O composto do título foi preparado de uma maneirasimilar ao Exemplo 1 a partir do 4-[ (3-bromo-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo [4,5-c]-piridino-7-carboxilato de sódio(250 mg), onde a isobutil-amina (108 μί) foi usada no proce-dimento de acoplamento. Exceto que, quando a mistura reativafoi secada sob vácuo e combinada com dicloro-metano e água,permaneceu um precipitado que foi removido por filtração edepois lavado com acetonitrila a 30% em água, para dar umsólido branco. Este sólido foi dissolvido em metano e ácidoclorídrico 1 M, e adicionou-se etóxi-etano. O solvente foiremovido sob vácuo, para produzir um sólido que foi dissol-vido em 1,4-dioxano e água, e colocado em uma secadora porcongelamento, para dar um sólido branco (154 mg).

LC/MS [MH+] 404 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8H2081BrN5O

Exemplo 5: Sal cloridrato da N-(2,4-dicloro-fenil)-l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-ΙΗ-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina

<formula>formula see original document page 74</formula>

O sal cloridrato do ácido 4-[(2,4-dicloro-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxiIico (135mg) foi colocado em tubo fervente, onde ele foi combinadocom hidróxi-benzotriazol hidratado (59 mg), N-(3-dimetil-amino-propil)-N-etil-carbodiimida (68 mg), N-etil-morfolina(0,1 mL), morfolina (0,052 mL), e isto foi dissolvido em di-metil-formamida (8 mL) . A reação foi agitada à temperaturaambiente por 24 horas. A mistura reativa foi então secadasob vácuo e combinada com água e dicloro-metano. A camadaorgânica foi coletada com uma frita hidrofóbica, evaporadasob vácuo e purificada em um cartucho Cxs (5 g), eluindo comum gradiente de 0-50% de acetonitrila em água. As fraçõescorretas foram combinadas e evaporadas sob vácuo, para pro-duzir um sólido que foi dissolvido em acetonitrila, e adi-cionou-se ácido clorídrico 1 M em etóxi-etano. Este materialfoi então secado sob vácuo, para dar um sólido. 0 sólido foientão dissolvido em 1,4-dioxano e água, e colocado em umasecadora por congelamento, para dar um sólido branco (44mg) .

LC/MS [MH+] 406 consistente com a fórmula molecu-lar C18Hi735Cl2N5O2

Exemplo 6: Sal cloridrato da N-(2,4-dicloro-fenil)-l-metil-7-(1-piperidinil-carbonil)-ΙΗ-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina

<formula>formula see original document page 75</formula>

O composto do título foi preparado de uma maneirasimilar à do Exemplo 5 a partir do sal cloridrato do ácido4- [(2,4-dicloro-fenil) -amino] -1-metil-lH-imidazo [4,5-c]-piridino-7-carboxílico (135 mg), onde a piperidina (51 μ!,)foi usada no procedimento de acoplamento. Um sólido brancofoi obtido (19 mg).

LC/MS [MH+] 404 consistente com a fórmula molecu-lar Ci9Hi935Cl2N5OExemplo 7: Sal cloridrato da N-(2,4-dicloro-fenil)-l-metil-7-(1-pirrolidinil-carbonil)-ΙΗ-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina

<formula>formula see original document page 76</formula>

O composto do titulo foi preparado de uma maneirasimilar à do Exemplo 5 a partir do sal cloridrato do ácido4- [(2,4-dicloro-fenil) -amino] -1-metil-lH-imidazo [4,5-c]-piridino-7-carboxílico (135 mg), onde a pirrolidina (50 μΐ^)foi usada no procedimento de acoplamento. Um sólido brancofoi obtido (37 mg).

LC/MS [MH+] 390 consistente com a fórmula molecu-lar C1.8H17 CI2N5O

Exemplo 8: Sal cloridrato da 4-[(2,4-dicloro-fenil)-amino]-1-metil-N-(2-metil-propil)-ΙΗ-imidazo[4,5-c]-piridino-4-carboxamida

<formula>formula see original document page 76</formula>

O composto do titulo foi preparado de uma maneirasimilar à do Exemplo 5 a partir do sal cloridrato do ácido4- [(2,4-dicloro-fenil) -amino] -1-metil-lH-imidazo [4,5-c]-piridino-7-carboxílico (135 mg), onde a isobutil-amina (60μία) foi usada no procedimento de acoplamento. Exceto que amistura da reação foi evaporada sob vácuo, o resíduo foidissolvido parcialmente em acetonitrila e sulfóxido de dime-tila. O sólido remanescente foi filtrado e secado sob vácuo,e depois dissolvido em metanol e depois adicionou-se ácidoclorídrico 1 M em etóxi-etano, e colocado em uma secadorapor congelamento, para dar um sólido branco (42 mg).

LC/MS [MH+] 392 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8Hi935Cl2N5O

Exemplo 9a: Sal cloridrato da N-(3-cloro-fenil)-1-metil-7- (4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina

<formula>formula see original document page 77</formula>

Adicionou-se ácido 4-[(3-clorofenil)amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]piridina-7-carboxílico (275 mg, 0,91 mmol),dimetilformamida (8 mL), 4-etilmorfolina (230 μί, 1,8 mmol),morfolina (120 μΐ,, 1,36 mmol), hidrato de 1-hidroxi-benzotriazol (135 mg, 1 mmol) e cloridrato de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (155 mg, 1 mmol) e asolução foi agitada a temperatura ambiente durante a noite.

Os solventes foram evaporados. 0 resíduo foi particionado ementre água e diclorometano usando uma frita hidrofóbica. 0extrato em diclorometano foi evaporado e purificado por cro-matografia (10 g de sílica) eluindo com diclorometano. A co-luna foi lavada com volumes de 3 colunas de diclorometano,volumes de 2 colunas de (amônia 2M em metanol)/diclorometanoa 2%, volumes de 2 colunas de (amônia 2M em metanol)/ diclo-rometano a 5% e 2 volumes de coluna de (amônia 2M em meta-nol)/diclorometano a 10%. A amostra foi tratada com um ex-cesso de cloreto de hidrogênio etéreo (5 mL) e então liofi-lizada para obter o composto título como um sólido brancogelo (177 mg).

LC/MS [MH+] 372 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8Hi8 CIN5O2

Exemplo 9b: N-(3-clorofenil)-l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-ΙΗ-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina

<formula>formula see original document page 78</formula>

Adicionou-se N,N-diisopropil-etil-amina (78,26 mL,0,45 mol) e hexaflúor-fosfato de 0-(lH-benzotriazol-l-il)Ν,Ν,Ν',Ν'-tetrametil-urônio (51,18 g, 0,135 mol) a uma sus-pensão do ácido 4-[(3-cloro-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxilico (27,19 g, 0,09 mol) em DMF(680 mL), sob agitação. Neste ponto, a reação começa a ficarmais viscosa. Adicionou-se lentamente morfolina (15,72 mL,0,18 mol) a esta mistura durante 5 min. A reação forma umasolução escura. A mistura reativa foi agitada à temperaturaambiente por 2 h. A reação foi evaporada para remover 595 mLde DMF. O óleo marrom-escuro foi captado em acetato de etila(3 litros), e depois lavado sucessivamente com água (1 li-tro) e solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (1litro). Um precipitado fino se formou na camada de acetatode etila e ele foi removido por filtração. A camada de ace-tato de etila foi lavada sucessivamente com água (1 litro),solução aquosa 2 M de hidróxido de sódio (2 χ 500 mL), água(1 litro) e salmoura (1 litro). A camada de acetato de etilafoi secada (MgSO4) e evaporada, para dar um sólido marrom-claro. Este sólido foi captado em DCM (200 mL), contendo me-tanol (20 mL) , ao qual foi adicionada silica (125 g) , e amistura foi evaporada. 0 sólido foi cromatografado em umacoluna Biotage Flash 75, eluindo com DCM/metanol (97:3), pa-ra dar um sólido amarelo-pálido que foi secado sob vácuo a60°C de um dia para o outro. O sólido obtido foi captado emsolução aquosa 2 M de ácido clorídrico (1 litro) , e esta so-lução foi lavada com acetato de etila (2 χ 500 mL) . A faseaquosa foi então basificada usando bicarbonato de sódio só-25 lido até pH 8. O precipitado formado foi removido por fil-tração e secado sob vácuo a 40 0C durante a noite inteira,para dar a N-(3-cloro-fenil)-l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina (25,01 g, 74%), como umsólido esbranquiçado.

NMR (400 MHz, DMSO-d6) HNC122148 δ: 3,3-3,90 (11H,m), 6, 96-6, 99 (1H, m) , 7,27-7,31 (1H, t), 7, 92-7, 94 (2H, m),8,29 (1H, s), 8, 33-8, 34 (1H, m) , 9,51 (1H, s) . Consistentecom a estrutura proposta

Tempo de retenção do produto da LC/MS em 2,23 min,[MH+] 372 consistente com a fórmula molecular Ci8Hi8ClN5O2.

Exemplo 10: Sal cloridrato da N-(3-cloro-fenil)-1-metil-7-(1-piperidinil-carbonil)-ΙΗ-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina

<formula>formula see original document page 80</formula>

O composto do titulo foi preparado de uma maneirasimilar à do Exemplo 9a a partir do ácido 4-[(3-cloro-fenil) -amino]-l-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxílico(275 mg), onde a piperidina (120 μΐ,) foi usada no procedi-mento de acoplamento. Um sólido branco foi obtido (250 mg).

LC/MS [MH+] 370 consistente com a fórmula molecu-lar Ci9H2035ClN5O

Exemplo 11: Sal cloridrato da N-(3-cloro-fenil)-1-metil-7-(1-pirrolidinil-carbonil)-ΙΗ-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina<formula>formula see original document page 81</formula>

O composto do titulo foi preparado de uma maneirasimilar à do Exemplo 9a a partir do ácido 4-[(3-cloro-fenil)-amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxílico(275 mg), onde a pirrolidina (110 μl,) foi usada no procedi-mento de acoplamento. Um sólido branco foi obtido (103 mg).

LC/MS [MH+] 356 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8Hi835ClN5O

Exemplo 12: Sal cloridrato da 4-[(3-cloro-fenil)-amino]-1-metil-N-(2-metil-propil)-ΙΗ-imidazo[4,5-c]-piridino-4-carboxamida

<formula>formula see original document page 81</formula>

O composto do titulo foi preparado de uma maneirasimilar à do Exemplo 9a a partir do ácido 4-[(3-cloro-fenil) -amino]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxílico(275 mg) , onde a isobutil-amina (73 pL) foi usada no proce-dimento de acoplamento. Um sólido esbranquiçado foi obtido(144 mg).LC/MS [MH+] 358 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8H2035ClN5O

Exemplo 13: Sal cloridrato da 4-[(3-cloro-fenil)-oxi]-l-metil-7- (1-piperidinil-carbonil)-ΙΗ-imidazo [4,5-c]-pirldina

<formula>formula see original document page 82</formula>

O sal cloridrato do ácido 4-[ (3-cloro-fenil)-oxi]-1-metil-lH-imidazo [ 4,5-c]-piridino-7-carboxiIico (325 mg,1,07 mmol), dimetil-formamida (8 mL) , 4-etil-morfolina (230μΐι, 1,8 mmol), piperidina (140 μΙ>, 1,66 mmol), 1-hidróxi-benzotriazol hidratado (165 mg, 1,1 mmol) e cloridrato de 1-(3-dimetil-amino-propil) -3-etil-carbodiimida (190 mg, 1,1mmol) foram juntados e a solução foi agitada à temperaturaambiente durante a noite inteira. Os solventes foram evapo-rados. O resíduo foi fracionado entre água e dicloro-metano,usando uma frita hidrofóbica. 0 extrato em dicloro-metanofoi evaporado e purificado por cromatografia (10 g de síli-ca), eluindo com dicloro-metano. A coluna foi lavada com 3volumes da coluna de 10% de (amônea 2 M em metanol)/dicloro-metano. A amostra foi tratada com solução 1 M de ácido clo-rídrico em etóxi-etano (aproximadamente 1-2 mL) , e depoisevaporada até secar. A amostra foi então dissolvida em umacombinação de 1,4-dioxano e água, e secada por congelamentodurante a noite inteira, para obter o composto do titulo co-mo um sólido esbranquiçado (280 mg).

LC/MS [MH+] 371 consistente com a fórmula molecu-lar Ci9Hi935ClN4O2

Exemplo 14: Sal cloridrato da 4-[(3-cloro-fenil)-oxi]-l-metil-7- (4-morfolinil-carbonil) -ΙΗ-imidazo [4,5-c]-piridina

<formula>formula see original document page 83</formula>

P composto do titulo foi preparado de uma maneirasimilar à do Exemplo 13 a partir do sal cloridrato do ácido4-[(3-cloro-fenil)-oxi] -1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxílico (325 mg), onde a morfolina (140 μί) foi usadano procedimento de acoplamento. Um sólido esbranquiçado foiobtido (182 mg).

LC/MS [MH+] 373 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8H1735ClN4O3

Exemplo 15: Sal cloridrato da 4-[(3-cloro-fenil)-oxi]-l-metil-7-(1-pirrolidinil-carbonil)-lH-imidazo [4,5-c]-piridina<formula>formula see original document page 84</formula>

O composto do titulo foi preparado de uma maneirasimilar à do Exemplo 13 a partir do sal cloridrato do ácido4-[(3-cloro-fenil) -oxi]-1-metil-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-7-carboxílico (325 mg), onde a pirrolidina (120 μΐ) foi usa-da no procedimento de acoplamento. Um sólido esbranquiçadofoi obtido (300 mg).

LC/MS [MH+] 357 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8Hi735ClN4O2

Exemplo 16: Sal cloridrato da 4-[(3-cloro-fenil)-oxi]-1-metil-N-(2-metil-propil)-lH-imidazo [4,5-c]-piridino-7-carboxamida

<formula>formula see original document page 84</formula>

O composto do titulo foi preparado de uma maneirasimilar à do Exemplo 13 a partir do sal cloridrato do ácido4-[(3-cloro-fenil)-oxi]-1-metil-lH-imidazo [4,5-c]-piridinò-7-carboxíIico (325 mg), onde a isobutil-amina (120 μΐι) foiusada no procedimento de acoplamento. Um sólido esbranquiça-do foi obtido (248 mg).

LC/MS [MH+] 359 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8Hi935ClN4O2

Exemplo 17: Sal cloridrato de l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-N-{3-[(triflúor-metil)oxi]-fenil}-lH-imidazo [4,5-c]-piridino-4-amina

<formula>formula see original document page 85</formula>

Uma mistura de 4-cloro-l-metil-7- (4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo [4,5-c]-piridina (150 mg), ácido meta-nossulfônico (0,207 mL) e 3-flúor-metóxi-anilina (0,143 mL)em 1,4-dioxano (5 mL) foi aquecida sob condições de microon-das a 180 0C por 30 min. A mistura foi concentrada sob vá-cuo, purificada por MDAP, colocada em suspensão em metanol,tratada com ácido clorídrico 2 N em éter (0,5 mL), evaporadae secada, para produzir o composto do título (27 mg)·.

LC/MS [MH+] 422 consistente com a fórmula molecu-lar Ci9H18F3N5O3

Exemplo 18: Sal cloridrato de N-(3-flúor-fenil)-1-metil-7- (4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina<formula>formula see original document page 86</formula>

O composto do título (36 mg) foi preparado de umamaneira similar à do Exemplo 17 a partir de 4-cloro-l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo [4,5-c]-piridina (150 mg)e 3-flúor-anilina (0,103 mL) , exceto que o tempo de reaçãofoi de 15 min.

LC/MS [MH+] 356 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8Hi8FN5O2

Exemplo 19; Sal cloridrato de N-(3,4-diflúor-fenil)-l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina

<formula>formula see original document page 86</formula>

O composto do título (72 mg) foi preparado de umamaneira similar à do Exemplo 17 a partir de 4-cloro-l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridina (150 mg)e 3,4-diflúor-anilina (0,106 mL), exceto que o tempo de rea-ção foi de 15 min.

LC/MS [MH+] 374 consistente com a fórmula molecu-lar C18H17F2N5O2Exemplo 20: Sal cloridrato de 1-metil-N-[2-metil-3-(triflúor-metil)-fenil]-7-(4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina

<formula>formula see original document page 87</formula>

O composto do titulo (32 mg) foi preparado de umamaneira similar à do Exemplo 17 a partir de 4-cloro-l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridina (150 mg)e 2-metil-3-triflúor-metil-anilina (187 mg), exceto que otempo de reação foi de 15 min.

LC/MS [MH+] 420 consistente com a fórmula molecu-lar C20H20F3N5O2

Exemplo 21: Sal cloridrato de N- [2- flúor-3-(triflúor-metil) -fenil]-l-metil-7- (4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridino-4-amina

<formula>formula see original document page 87</formula>

O composto do titulo (33 mg) foi preparado de umamaneira similar à do Exemplo 17 a partir de 4-cloro-l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridina (150 mg)e 2-flúor-3-triflúor-metil-anilina (0,138 mL) , exceto que otempo de reação foi de 20 min. O composto do titulo era umóleo e teve de ser co-evaporado a partir de dicloro-metanopara produzir um sólido espumoso.

LC/MS [MH+] 424 consistente com a fórmula molecu-lar C19Hi7F4N5O2

Exemplo 22: Sal cloridrato de N-(3-cloro-4-flúor-fenil)-l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo [4,5-c]-piridino-4-amina

<formula>formula see original document page 88</formula>

0 composto do titulo (57 mg) foi preparado de umamaneira similar à do Exemplo 17 a partir de 4-cloro-l-metil-7-(4-morfolinil-carbonil)-lH-imidazo[4,5-c]-piridina (150 mg)e 3-cloro-4-flúor-anilina (156 mig) , exceto que o tempo dereação foi de 20 min. O composto do titulo foi purificadoadicionalmente por trituração com hexano, para produzir umsólido branco.

LC/MS [MH+] 390 consistente com a fórmula molecu-lar Ci8Hi735ClFN5O2

As formulações para uso farmacêutico, que incorpo-ram os compostos da presente invenção, podem ser preparadasem várias formas e com inúmeros excipientes. Os exemplos detais formulações são fornecidos abaixo.Exemplo 23: Formulação de Inalante

Um composto da fórmula (I) ou um seu derivado far-maceuticamente aceitável (1 mg a 100 mg) é transformado emaerossol a partir de um inalador com dose medida para dis-tribuir a quantidade desejada do fármaco por uso.

Exemplo 23: Formulação de Comprimido

<table>table see original document page 89</column></row><table>

Procedimento para'a formulação de comprimidos:

Os ingredientes 1, 2, 3 e 4 são misturados em ummisturador apropriado. Adiciona-se ága suficiente em parce-las à mistura sob agitação cuidadosa depois de cada adição,até que a massa fique com uma consistência para permitir suaconversão em grânulos úmidos. A massa unida é convertida emgrânulos passando-a através de um granulador oscilante, u-sando uma peneira com malha de 2,38 mm (8 mesh). Os grânulosúmidos são então secados em uma estufa a 60°C (140 °F) atésecar. Os grânulos secos são lubrifiçados com o ingredienten2 5, e os grânulos lubrificados são prensados em uma prensaapropriada para comprimidos.

Exemplo 25: Formulação Parenteral

Uma coposição farmacêutica para administração pa-renteral é preparada dissolvendo uma quantidade apropriadade um composto da fórmula (I) em polietilenoglicol sob aque-cimento. Esta solução é então diluída com água para injeções(Farmacopéia Européia) (até 100 mL) . A solução é então tor-nada estéril por filtração através de um filtro com membranade 0,22 mícron e selada em recipientes estéreis.

Claims (21)

1. Composto da fórmula (I):<formula>formula see original document page 91</formula>CARACTERIZADO pelo fato de que:X1 é NR4 ou O;R1 é selecionado entre hidrogênio, alquila de Ci_6,ciclo-alquila de C3_6, e halo-alquila de Ci_6;R2 é hidrogênio ou (CH2)mR3, onde m é O ou 1;ou R1 e R2, em conjunto com o N ao qual eles estãoanexados, formam um anel heterociclila não-aromático com 4 a 8 membros opcionalmente substituído;R3 é ium grupo heterociclila não-aromático com 4 a 8 membros, um grupo ciclo-alquila de C3_8, um grupo alquilade C1-10 linear ou ramificado, alquenila de C2-10/ ciclo-alque nila de C3-8, alquinila de C2-Io, ciclo—alquinila de C3-8,ou fenila, sendo que qualquer um deles pode ser não-substituído ou substituído, ou R5;R4 é selecionado entre hidrogênio, alquila de Ci-6,ciclo-alquila de C3-6, halo-alquila de Ci_6, COCH3 e SO2ME;R5 é :<formula>formula see original document page 92</formula> onde péO, 1 ou 2, eXé CH2, O, S ou SO2;R6 é fenila não-substituída ou substituída, ciclo-alquila de C3_6 não-substituída ou substituída ou um anel he-terociclila não-aromático com 4 a 8 membros não-substituídoou substituído;R7 é OH, alcóxi de Ci_6, NR8aR8b, NHCOR9, NHSO2R9 ouSOqR9;R8a e H ou alquila de Ci_6;R8b é H ou alquila de Ci_6;R9 é alquila de Ci_6;R10 é hidrogênio, alquila de Ci_6 substituída ounão-substituída ou cloro;R12 é hidrogênio ou alquila de Ci-6;R13 é hidrogênio ou alquila de Ci_6;q é 0, 1 ou 2;ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que R1 é hidrogênio.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou-2, CARACTERIZADO pelo fato de que R2 é (CH2)mR3, onde m é 0 ou 1.

4. Composto, de acordo com qualquer uma das rei-vindicações precedentes, CARACTERIZADO pelo fato de que R3 éum grupo alquila de Ci_6 não-substituído ou substituído.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que R1 e R2, em conjunto com onitrogênio ao qual eles estão anexados, formam um anel mor-folinila, pirrolidinila ou piperidinila.

6. Composto, de acordo com qualquer uma das rei-vindicações precedentes, CARACTERIZADO pelo fato de que R6 éum grupo fenila não-substituído ou substituído.

7. Composto, de acordo com qualquer uma das rei-vindicações precedentes, CARACTERIZADO pelo fato de que Xi éNR4.

8. Composto, de acordo com qualquer uma das rei-vindicações precedentes, CARACTERIZADO pelo fato de que R4 éalquila de C1-6 ou hidrogênio, por exemplo, metila ou hidro-gênio.

9. Composto, de acordo com qualquer uma das rei-vindicações precedentes, CARACTERIZADO pelo fato de que R10é hidrogênio.

10. Composto, de acordo com qualquer uma das rei-vindicações precedentes, CARACTERIZADO pelo fato de que R12é metila.

11. Composto, de acordo com qualquer uma das rei-vindicações precedentes, CARACTERIZADO pelo fato de que R13é hidrogênio.

12. Composto da fórmula (Ia):<formula>formula see original document page 94</formula> CARACTERIZADO pelo fato de queX1 é NR4;R1 é hidrogênio;R2 é (CH2)mR3, onde m é 0 ou 1;ou R1 e R2, em conjunto com o N ao qual eles estãoanexados, formam um anel morfolinila, pirrolidinila ou pipe-ridinila, qualquer um deles podendo ser não-substituido ousubstituído;R3 é uma alquila de Ci_6 linear ou ramificada, não-substituída ou substituída;R4 é hidrogênio ou metila;R6 é fenila não-substituida ou substituída;R12 é hidrogênio ou metila;ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável.

13. Composição farmacêutica, CARACTERIZADA pelofato de que compreende um composto de acordo com qualqueruma das reivindicações precedentes ou um seu derivado farma-ceuticamente aceitável.

14. Composição farmacêutica, de acordo com a rei-vindicação 13, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende a-inda um carreador ou diluente farmaceuticamente aceitávelpara o composto.

15. Composição farmacêutica, de acordo com a rei-vindicação 13 ou 14, CARACTERIZADO pelo fato de que compre-ende ainda um segundo agente terapêutico.

16. Composto da fórmula (I), de acordo com qual-quer uma das reivindicações 1 a 12, ou um seu derivado far-maceuticamente aceitável, CARACTERIZADO pelo fato de que épara uso em medicina humana ou veterinária.

17. Composto da fórmula (I), de acordo com qual-quer uma das reivindicações 1 a 12, ou um seu derivado far-maceuticamente aceitável, CARACTERIZADO pelo fato de que épara uso no tratamento de uma condição mediada pela ativida-de dê receptores canabinóides 2.

18. Uso de um composto da fórmula (I), de acordocom qualquer uma das reivindicações 1 a 12, ou um seu deri-vado farmaceuticamente aceitável, CARACTERIZADO pelo fato deque é para a fabricação de um agente terapêutico para o tra-tamento de uma condição mediada pela atividade de receptorescanabinóides 2.

19. Método para tratar um mamifero, por exemplo,um ser humano, que sofre de uma condição mediada pela ativi-dade do receptor canabinóide 2, CARACTERIZADO pelo fato deque compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidadeterapeuti camente eficaz atóxica de um composto da fórmula(I) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, oude um seu derivado farmaceuticamente aceitável.

20. Composto de acordo com a reivindicação 17 ouuso de acordo com a reivindicação 18 ou método de acordo coma reivindicação 19, CARACTERIZADO pelo fato de que a condi-ção mediada pela atividade do receptor canabinóide 2 é umdistúrbio imunológico, um distúrbio inflamatório, dor, ar-trite reumatóide, esclerose múltipla, osteoartrite ou osteo-porose.

21. Composto, uso ou método, de acordo com a rei-vindicação 20, CARACTERIZADO pelo fato de que a dor é sele-cionada entre dor inflamatória, dor visceral, dor de câncer,dor neuropática, dor dorsal inferior, dor musculoesqueléti-ca, dor pós-operatória, dor aguda e enxaqueca.