BRPI0616255A2 - mÉtodos de localizar um blastoderme dentro de um ovo de ave e de determinar se um ovo de ave É fÉrtil - Google Patents
mÉtodos de localizar um blastoderme dentro de um ovo de ave e de determinar se um ovo de ave É fÉrtil Download PDFInfo
- Publication number
- BRPI0616255A2 BRPI0616255A2 BRPI0616255-0A BRPI0616255A BRPI0616255A2 BR PI0616255 A2 BRPI0616255 A2 BR PI0616255A2 BR PI0616255 A BRPI0616255 A BR PI0616255A BR PI0616255 A2 BRPI0616255 A2 BR PI0616255A2
- Authority
- BR
- Brazil
- Prior art keywords
- blastoderm
- egg
- image
- shell
- exposed
- Prior art date
Links
- 210000001172 blastoderm Anatomy 0.000 title claims abstract description 104
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 52
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims abstract description 129
- 210000000994 inner shell membrane Anatomy 0.000 claims abstract description 35
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 25
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims abstract description 25
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 17
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 claims description 15
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 claims description 14
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 claims description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 14
- 210000003278 egg shell Anatomy 0.000 claims description 13
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 9
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims description 6
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 claims description 5
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 claims description 4
- 230000012447 hatching Effects 0.000 claims description 4
- 230000035558 fertility Effects 0.000 claims description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- 241000726096 Aratinga Species 0.000 claims description 2
- 241000721631 Nymphicus hollandicus Species 0.000 claims description 2
- 241000272534 Struthio camelus Species 0.000 claims description 2
- 241000287531 Psittacidae Species 0.000 claims 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims 2
- 241000272525 Anas platyrhynchos Species 0.000 claims 1
- 241000272814 Anser sp. Species 0.000 claims 1
- 230000004456 color vision Effects 0.000 claims 1
- 210000000998 shell membrane Anatomy 0.000 claims 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 abstract description 9
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 41
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 9
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 8
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 7
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 5
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 4
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 4
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 4
- 238000012014 optical coherence tomography Methods 0.000 description 4
- 210000000993 outer shell membrane Anatomy 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000002298 blastodisc Anatomy 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000007045 gastrulation Effects 0.000 description 2
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- URAYPUMNDPQOKB-UHFFFAOYSA-N triacetin Chemical compound CC(=O)OCC(OC(C)=O)COC(C)=O URAYPUMNDPQOKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241001494315 Cacatuidae Species 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000271571 Dromaius novaehollandiae Species 0.000 description 1
- 241000287530 Psittaciformes Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 210000001691 amnion Anatomy 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 235000019519 canola oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000828 canola oil Substances 0.000 description 1
- 210000003711 chorioallantoic membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000002498 deadly effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000007599 discharging Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000005584 early death Effects 0.000 description 1
- 238000003708 edge detection Methods 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000001087 glyceryl triacetate Substances 0.000 description 1
- 235000013773 glyceryl triacetate Nutrition 0.000 description 1
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000000565 sealant Substances 0.000 description 1
- 210000003765 sex chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000020509 sex determination Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 150000003462 sulfoxides Chemical class 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229960002622 triacetin Drugs 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 210000001534 vitelline membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/02—Food
- G01N33/08—Eggs, e.g. by candling
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K45/00—Other aviculture appliances, e.g. devices for determining whether a bird is about to lay
- A01K45/007—Injecting or otherwise treating hatching eggs
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Birds (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Length Measuring Devices By Optical Means (AREA)
Abstract
MÉTODOS DE LOCALIZAR UM BLASTODERME DENTRO DE UM OVO DE AVE E DE DETERMINAR SE UM OVO DE AVE É FÉRTIL. Métodos localizar não invasivamente bíastodermes dentro de ovos de aves são providos. Uma abertura é formada na casca de um ovo em um local sob o qual um bíastoderme é posicionado com base na orientação do ovo; uma imagem de uma membrana interna de casca exposta e material subjacente é obtido; a imagem obtida é processada para melhorar visibilidade de um blastoderme na imagem; e o blastoderme é localizado na imagem. Um material pode ser aplicado ao ovo para melhorar transparência do membrana interna de casca antes da obtenção da imagem. Localizar o bíastoderme na imagem pode incluir determinar coordenadas de local do blastoderme na imagem. Estas coordenadas de local pode ser transmitidas para equipamento de processamento de ovo para subseqúente processamento do ovo.
Description
"MÉTODOS DE LOCALIZAR UM BLASTODERME DENTRO DE UMOVO DE AVE E DE DETERMINAR SE UM OVO DE AVE É FÉRTIL"
PEDIDO CORRELACIONADO
Este pedido reivindica o benefício de e prioridade do U. S.Pedido de Patente Provisional No. 60/718.778, depositado em 20 de setembrode 2005, cuja exposição é aqui incorporada por referência como se expostasua totalidade.
CAMPO DA INVENÇÃO
A presente invenção refere-se geralmente a ovos e, maisparticularmente, a métodos de processamento de ovos.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
Em incubadoras de aves domésticas e outros equipamentos deprocessamento de ovos, os ovos são manipulados e processados em grandesnúmeros. O termo "processamento" inclui, mas não é limitado a, tratar ovosvivos com medicamentos, nutrientes, hormônios e/ou outras substânciasbenéficas enquanto os embriões ainda estão no ovo (isto é, no ovo). Injeçõesno ovo de várias substâncias em ovos de aves foram empregada para diminuira morbilidade pós-incubação e taxas de mortalidade, aumentar as taxas decrescimento em potencial ou eventual tamanho da ave resultante, e até mesmoinfluenciar a determinação do sexo do embrião. Injeção de vacinas em ovosvivos foi efetivamente empregada para imunizar aves dentro do ovo.
Existe um número de aplicações para as quais é desejávelinjetar ovos contendo embriões primitivos de ave. Por exemplo, pode serdesejável fornecer uma substância a um embrião primitivo, tal como umblastoderme. Para ilustrar, pode ser desejável na indústria processadora deaves domésticas manipular um embrião primitivo no ovo para introduzir umamolécula estranha de ácido nucleico (isto é, para criar uma ave transgênica)ou para introduzir uma célula(s) estranha(s) (isto é, para criar a avequimérica) no embrião em desenvolvimento. Infelizmente, é freqüentementedifícil localizar o blastoderme dentro de um ovo de ave e, mesmo selocalizado, a visibilidade é tipicamente deficiente, particularmente através damembrana interna de casca de um ovo. Em adição, a cor e contraste de umblastoderme e material circundante de ovo são tipicamente similares, tornadoassim ainda mais difícil de visualmente detectar o blastoderme. Oblastoderme pode mais facilmente ser detectado se uma abertura é feita namembrana interna de casca (depois de uma abertura ter sido feita na casca).Todavia, a abertura ou rompimento da membrana interna de casca podedanificar o embrião em desenvolvimento e pode subseqüentemente conduzir àfalha da incubação. Em adição, métodos adicionais de injetar material emblastodermes são freqüentemente não confiáveis por causa da dificuldade delocalizar um blastoderme.
Por conseguinte, existe uma necessidade na arte por métodosaperfeiçoados de localizar e manipular o blastoderme dentro de ovos de aves esem causar dano no ovo.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
Em vista da discussão acima, métodos de localizarblastodermes dentro de ovos de aves são providos. De acordo com algumasformas de concretização da presente invenção, uma abertura é formada nacasca de um ovo em um local sob o qual um blastoderme é posicionado combase na orientação do ovo e de modo que uma membrana interna de casca éexposta; uma imagem da membrana interna de casca exposta e de materialsubjacente é obtido; a imagem obtida é processada para melhorar visibilidadedo blastoderme na imagem; e o blastoderme é localizado na imagem. Ummaterial pode ser aplicado ao ovo para melhorar transparência da membranainterna de casca antes da obtenção da imagem. Localizar o blastoderme naimagem pode incluir determinar coordenadas de local do blastoderme naimagem. Estas coordenadas de local podem ser transmitidas para equipamentode processamento de ovo para subseqüente processamento do ovo.De acordo com algumas formas de concretização da presenteinvenção, subseqüente processamento de ovo pode incluir estender umdispositivo através da abertura na casca de ovo e para dentro do blastodermelocalizado. O dispositivo pode ser um dispositivo de fornecimento que liberauma substância no interior do blastoderme, e/ou um dispositivo deamostragem que remove material de amostra (por exemplo, célulasblastodermais, células adjacentes ao blastoderme, etc.) a partir doblastoderme, e/ou um dispositivo detector que detecta informação a partir dedentro do ovo.
De acordo com algumas formas de concretização da presenteinvenção, a abertura no ovo pode ser selada após obtenção da imagem oudepois de ulterior processamento (por exemplo, injeção de uma substância noovo, remoção de material do ovo, detecção de informação a partir de dentrodo ovo, etc.). O ovo selado pode então ser incubado até a eclosão.
De acordo com algumas formas de concretização da presenteinvenção, um método de determinar se um ovo de ave é fértil inclui formaruma abertura na porção da casca do ovo; obter uma imagem de umamembrana interna de casca exposta e material subjacente; processar a imagemobtida para determinar a presença de um blastoderme na imagem; e avaliarfertilidade do ovo de ave com base na presença ou ausência de umblastoderme.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
A figura 1 é uma vista em seção lateral de um ovo de aveconvencional.
a figura 2 é um fluxograma ilustrando operações para localizarum blastoderme dentro de um ovo de ave, de acordo com algumas formas deconcretização da presente invenção.
a figura 3A é um diagrama de blocos que ilustra uma câmerade vídeo digital elevada, configurada para obter imagens de um ovo comjanela, de acordo com algumas formas de concretização da presente invenção.
a figura 3B é uma imagem representativa de um blastodermequando obtida pela câmera de vídeo da figura 3A.
a figura 3C ilustra a imagem representativa da figura 3Bdepois de processamento para aumentar contraste do blastoderme, de acordocom algumas formas de concretização da presente invenção.
a figura 3D ilustra a imagem representativa da figura 3 C comum caixa de local colocada ao redor do blastoderme, de acordo com algumasformas de concretização da presente invenção.
as figuras 4A-4D são fotografias de ovo com janelas, em queas membranas de casca interna expostas nas figuras 4A e 4C são não tratadase em que as membranas de casca interna expostas nas figuras 4B e 4D sãotratadas com DMSO para aumentar a visibilidade do blastoderme.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
A presente invenção agora é descrita mais completamente aquicom referência aos desenhos acompanhantes, nos quais formas deconcretização preferidas da invenção são mostradas. Esta invenção, todavia,pode ser incorporada em muitas formas diferentes e não deve ser entendidacomo limitada às formas de concretização aqui expostas; em contraste, estasformas de concretização são providas de modo que sua exposição seráminuciosa e completa, e irá totalmente transmitir o escopo da invenção paraaqueles especializados na arte.
Os mesmos números se referem aos mesmos elementos portoda descrição. Nas figuras, a espessura de certas linhas, camadas,componentes, elementos ou características pode ser exagerada, por clareza.Linhas tracejadas são usadas por clareza para indicar continuação, e podemilustrar características ou operações opcionais, a menos que especificado aocontrário. Todas publicações, pedidos de patente, patentes e outras referênciasmencionadas aqui, são incorporados aqui para referência em suas totalidades.Será entendido que, quando um elemento é referindo comoestando "sobre" um outro elemento, ele pode estar diretamente sobre o outroelemento ou elementos intervenientes podem também estar presentes. Emcontraste, quando um elemento é referido como estando "diretamente sobre"um outro elemento, não existem elementos intervenientes presentes. Seráentendido que, quando um elemento é referido como estando "conectado" ou"fixado" com um outro elemento, ele pode estar diretamente conectado oufixado com um outro elemento ou elementos intervenientes pode estartambém presentes. In contraste, quando um elemento é referido como estando"diretamente conectado" ou "diretamente fixado" com um outro elemento,não existe elementos intervenientes presentes. O termos "para cima", "parabaixo", "vertical", "horizontal" e similares são usados aqui apenas para afinalidade de explicação. Será também apreciado por aqueles deconhecimento na arte que referências a uma estrutura ou característica que édisposta "adjacente" a uma outra característica podem ter porções quesobrepõem ou se sobpõem à característica adjacente.
A menos que definido de outra maneira, todos termos técnicose científicos usados aqui têm o mesmo significado que comumente entendidopor uma pessoa de conhecimento comum na arte à qual esta invençãopertence. A terminologia usada na descrição da presente invenção é somentepara a finalidade de descrever formas de concretização particulares e nãopretende ser limitativa da invenção. Quando usada na descrição da invenção edas reivindicações anexas, as formas singulares "um", "o" e "a" são destinadasa incluir também as formas plurais, a menos que o contexto indiqueclaramente o contrário. Quando usado aqui, o termo "e/ou" inclui quaisquer etodas combinações de um ou mais itens listados associados.
O termos "de ave" e "sujeitos aviários", quando usados aqui,são destinados a incluir machos e fêmeas de quaisquer espécies de aves, massão principalmente destinados a englobar aves domésticas que sãocomercialmente criadas para produção de ovos, carne ou como animais deestimação. Por conseguinte, o termos "de aves" e "sujeito aviário" sãoparticularmente destinados a englobar várias aves, incluindo, mas nãolimitadas a, frangos, perus, patos, gansos, codornizes, faisões, periquitos,papagaios, cacatuas, cockatiel, avestruz, emu, etc.
Quando usado aqui, o termo "embrião primitivo" refere-se aum embrião de ave do instante de fecundação (estágio blastodermal) atéaproximadamente o estágio de desenvolvimento onde células germinaisprimordiais (PGCs) estão em migração. Com particular respeito a embriões defrango, um "embrião primitivo" é geralmente aproximadamente um embriãono estágio embriônico 20 (H&H) ou mais anterior. O estágio dedesenvolvimentos do embrião de frango é bem entendido na arte, ver, porexemplo, The Atlas of Chick Development, R. Bellairs & M. Osmond, eds.,Academic Press, 1998.
Quando usado aqui, o termo "blastoderme" tem seu significadoentendido na arte. Geralmente, um blastoderme inclui um embrião do instantede fecundação até o final da gastrulação. O blastoderme é algumas vezesreferido na arte pelas designações alternativas de "disco germinal" ou "discoembriônico". Um blastoderme pode ser descrito como um disco chato decélulas que se formam durante clivagem no embrião primitivo e persiste até ofinal da gastrulação. No instante da fecundação, duas regiões principais doblastoderme são visíveis, a área pelúcida situada centralmente e a área opacalocalizada perifericamente (The Atlas of Chick Development, R. Bellairs &M. Osmond, eds., Academic Press, 1998). Com particular respeito a embriõesde frangos, o blastoderme é tipicamente caracterizado como um embrião doinstante de fecundação (isto é, Estágio IX ou Estágio X EG&K) atéaproximadamente o estágio XIII (EG&K) ou mais alto.
Quando usados aqui, os termos "injeção" e "injetar" englobammétodos de inserção de um dispositivo em um ovo ou embrião, incluindométodos de fornecer ou descarregar uma substância em um ovo ou embrião,métodos de remoção de uma substância (isto é, uma amostra) a partir de umovo ou embrião, e/ou métodos de inserção de um dispositivo detector em umovo ou embrião.
O termos "ave quimérica" ou "embrião quimérico" se refere auma ave receptora ou embrião, respectivamente, que contém células de umaoutra ave ou embrião, referido como um "doador".O termos "ave transgênica"e "embrião transgênico" são usados aqui de acordo com seus significadosgeralmente entendidos na arte. Uma ave transgênica ou embrião transgênicocontém uma seqüência estranha de ácido nucleico em uma ou mais células.
Quando usado aqui, o termo "membrana" se refere a qualquercamada de tecido dentro de um ovo. Membranas de exemplo dentro de umovo incluem, mas não são limitadas a, a membrana externa de casca,membrana interna de casca, membrana corioalantóica, membrana vitelina, emembrana amniótica (amniôn).
Com referência agora à figura 1, um ovo de ave 10 é ilustrado.O ovo 10 ilustrado inclui uma casca 12, uma membrana externa de casca 14,uma membrana interna de casca 16, e uma célula de ar 18 na extremidadeplana do ovo 10 entre as membranas externa e interna de casca 14, 16. O ovo10 ilustrado também inclui uma gema 20 e blastoderme 22 circundado peladelgada albúmen interna 24a, espessa albúmen externa 24b, e delgadaalbúmen externa 24c.
A figura 2 é um fluxograma que ilustra métodos de localizar oblastoderme dentro de ovos de aves, de acordo com algumas formas deconcretização da presente invenção. Deve ser notado que as funções notadasnos blocos pode ocorrer fora da ordem notada na figura 2. Dois (ou mais)blocos mostrados em sucessão podem, de fato, ser executadossubstancialmente ao mesmo tempo ou os blocos podem algumas vezes serexecutados na ordem reversa ou diferente, dependendo da funcionalidadeenvolvida.
Em adição, deve ser notado que formas de concretização dapresente invenção podem ser utilizadas em vários estágios dedesenvolvimento embrionário de um ovo de ave. Formas de concretização dapresente invenção não são limitadas a o estágio de blastoderme de ovos deaves. Por exemplo, formas de concretização da presente invenção podem serutilizadas em estágios após o blastoderme, tal como os dias 3-5 de incubação.
Inicialmente, uma porção da casca de ovo e uma porção damembrana externa de casca de um ovo são removidas para formar umaabertura ou janela que revela a membrana interna de casca (Bloco 100).Preferivelmente, a membrana interna de casca não é adversamente afetadapela formação de uma janela na casca de ovo e permanece essencialmenteintacta. A janela pode ser formada em várias maneiras incluindo, porexemplo, através de um punção, uma broca ou através de outros dispositivosconhecidos por aqueles com conhecimento na arte.
Em adição, a janela pode ser feita em qualquer localapropriado de um ovo, por exemplo, no lado de um ovo próximo ao eixoequatorial, em qualquer extremidade de um ovo, etc. Em algumas formas deconcretização da invenção, a abertura na casca de ovo é introduzida em umaporção voltada para cima da casca de um ovo posicionado geralmentehorizontalmente e sobre a célula de ar. Aqueles com conhecimento na arteapreciarão que embrião primitivo (por exemplo, blastoderme) se localizarátipicamente propriamente em uma área em ou próximo da porção maissuperior de um ovo. Assim, a abertura na casca de ovo será geralmente feitana porção mais superior de um ovo próximo onde é esperado que o embriãoprimitivo (por exemplo, blastoderme) é se localize, a menos que medidassejam tomadas para direcionar o embrião para uma diferente posição dentrode um ovo.
De acordo com algumas formas de concretização da presenteinvenção, a superfície de um ovo, pelo menos ao redor do local de formaçãoda janela, pode ser desinfetada para reduzir contaminação por micróbios (ououtra) (por exemplo, com um álcool ou outra solução de desinfecção).Todavia, a desinfecção de um ovo, incluindo o local da janela, não é requeridacom respeito às formas de concretização da presente invenção.
De acordo com algumas formas de concretização da presenteinvenção, a transparência da membrana interna de casca pode ser aumentada,por exemplo, por meio da aplicação de materiais tais como sulfóxido dedimetila (DMSO) ou glicerina na membrana interna de casca (Bloco 200).Outros materiais que podem melhorar a transparência da membrana interna decasca ou que podem de outra maneira ajudar na formação de imagem podemtambém ser utilizados, incluindo, mas não limitados a, água, álcool, sistematampão fosfatado (PBS), óleo de canola, óleo vegetal, óleo mineral, triacetina,acetona, etileno glicol, éter monometílico, etc.
Uma ou mais imagens digitais são então tomadas da
membrana interna da casca exposta e material subjacente (incluindo oblastoderme) (Bloco 300). Imagens digitais de quadro único podem serobtidas através de uma câmera digital e/ou imagens de vídeo digitais podemser obtidas através de câmera de vídeo digital, de acordo com algumas formasde concretização da presente invenção. Formas de concretização da presenteinvenção não são limitadas à formação de imagens digitais, todavia. Imagensnão digitais da membrana interna de casca exposta e material subjacentepodem ser obtidas e então convertidas para o formato digital para subseqüenteprocessamento de imagem, como descrito abaixo.
Outras tecnologias e técnicas de formação de imagens podemser utilizadas na obtenção de um blastoderme de acordo com formas deconcretização da presente invenção. Por exemplo, Ultra-som de AltaResolução e Tomografia de Coerência Óptica (OCT) podem ser utilizadas.Por exemplo, uma pequena amostra de OCT pode ser posicionada na ponta deuma agulha ou outro dispositivo configurado para ser inserido no ovo. A OCTpoderia produzir uma imagem tridimensional do blastoderme e cavidadesubgerminal subjacente por fazer uma série de vários varrimentos superiores eobservando uma de uma região cheia com fluido. A agulha pode então serinserida em um ovo (por exemplo, sob uma essencialmente intacta membranainterna de casca).
A(s) imagem(s) digital(is) obtida(s) pode(m) então sersujeita(s) a uma ou mais técnicas de processamento de imagens para melhorara visibilidade do blastoderme na imagem (Bloco 400). Todavia, oprocessamento de imagem não é requerido de acordo com formas deconcretização da presente invenção. A visibilidade de um blastoderme podeser suficiente em uma imagem não processada. O blastoderme é entãolocalizado usando software de "visão de máquina" (Bloco 500). Ascoordenadas de local do blastoderme dentro da imagem digital são entãoenviadas ao equipamento de processo que inserirá um dispositivo através dajanela de membrana interna de casca e no interior do blastoderme e/ou áreaadjacente ao blastoderme (Bloco 600). O dispositivo pode injetar material,e/ou pode retirar material de amostra, e/ou pode detectar informação a partirde dentro do ovo. Se o dispositivo inserido no ovo é um dispositivo defornecimento, uma ou mais substâncias podem ser liberadas através dodispositivo de fornecimento e depositadas no interior do blastoderme e/ou emestreita proximidade do mesmo. Uma ou mais substâncias podem também serdepositadas em outros locais dentro do ovo. Formas de concretização dapresente invenção não são limitadas à deposição de uma ou mais substânciasem ou próximo o blastoderme.
Se o dispositivo inserido no ovo é um dispositivo deamostragem, uma ou mais amostras (por exemplo, células blastodermais, etc.)podem ser removidas do blastoderme e/ou da estreita proximidade do mesmo.Uma ou mais amostras podem ser tomadas das porções extra-embriônicas doovo (por exemplo, a gema ou o albúmen). Por exemplo, uma amostra pode sertomada do albúmen para determinar a presença ou ausência de contaminaçãopor micróbios (por exemplo, Salmonela) da mesma, etc.
O dispositivo de amostragem pode ser uma agulha configuradapara puxar material (por exemplo, fluido alantóico, outro fluido, etc.) a partirdo ovo, como seria entendido por aqueles com conhecimento na arte. Porexemplo, a agulha pode ter uma ponta plana e um lúmen que se estendeaxialmente, o qual termina em uma abertura formada dentro da porção daagulha adjacente à agulha. Material pode ser puxado de dentro do lúmenatravés da abertura quando da sujeição do lume ao vácuo. A ponta planaprevine que o lúmen se torne entupido com material.
Tipicamente, uma amostra é removida do ovo para obterinformação do mesmo. A amostra pode ser removida, por exemplo, emconexão com métodos de determinação de sexo ou determinação daviabilidade de um embrião. Para ilustrar, uma amostra contendo células podeser removida do embrião, e as células podem ser analisadas (tipicamentedepois da remoção a partir do ovo) para detectar os cromossomas sexuais ouseqüências específicas de sexo nos cromossomos, como é conhecido poraqueles com conhecimento na arte. A amostra pode também ser usada paraqualquer outro ensaio baseado em ADN, por exemplo, para determinar apresença de um particular gene ou alelo de interesse no embrião.
Em algumas formas de concretização, um dispositivo demúltiplos locais ou de amostragem pode ser usado, por exemplo, comodescrito na Patente US No. 6.032.612. outros dispositivos de exemplo defornecimento e/ou amostragem incluem aqueles descritos na Patente US No.5.136.979; U.S. Patentes Nos. 4.681.063 e 4,903,635; e Patentes US Nos.4.040.388, 4.469.047 e 4.593.646.
Se o dispositivo inserido no ovo é um detector, vários tipos deinformação do interior do ovo podem ser detectados. O detector pode serinserido em um local extra-embriônico do ovo (por exemplo, a gema ou acélula de ar). Alternativamente, o detector pode ser colocado em estreitaproximidade (como definido acima) do embrião. Em outras formas deconcretização, o detector pode ser colocado dentro da área translúcida ou daárea opaca do embrião ou dentro da cavidade subgerminal. O dispositivodetector pode ser usado para coletar informação incluindo, mas não limitadaao, o tamanho do embrião, o local do embrião, o estágio de desenvolvimentodo embrião e/ou quaisquer características do embrião, o sexo do embrião,e/ou a viabilidade do embrião. O dispositivo detector pode obter informaçãocom respeito ao local do embrião e à cavidade subgerminal.
A informação pode ser capturada por meio de um instrumento(por exemplo, um computador ou outro processador de dados) que éconectado com o detector. Vários tipos de detectores podem ser utilizados,incluindo, mas não limitados a, sensores elétricos, sensores ópticos, sensoresquímicos, sensores de temperatura, sensores acústicos, sensores de pressão,ou qualquer outro dispositivo para detectar um parâmetro físico ou químico.Detectores de exemplo são descritos, por exemplo, na Patente US No.6.244.214 de Hebrank.
Após a injeção de uma substância e/ou remoção de umaamostra e/ou detecção de informação a partir do ovo, o dispositivo é retraído apartir do ovo. A pequena abertura na casca de ovo pode ser selada com umselante e o ovo pode ser incubado até a eclosão.
Aqueles com conhecimento na arte apreciarão que os métodosda presente invenção podem ser executados em uma pluralidade de ovos, porexemplo, em uma operação comercial de produção de aves domésticas. Alémdisto, os métodos descritos aqui podem ser completamente manuais,totalmente automáticos, ou semi-automáticos.
Um sistema de formação de imagens, de acordo com algumasformas de concretização da presente invenção, inclui componentes dehardware e software. Os componentes de hardware incluem uma fonte de luz(por exemplo, fonte de luz de halogênio de 150 Watts, etc.), uma câmera devídeo digital e lentes de focalização apropriadas, e um computador ou outroprocessador de dados conectado com a câmera através de, por exemplo, umcartão de vídeo (por exemplo, um cartão IEEE 1394 ("firewire")). De acordocom a particular forma de concretização, uma câmera tendo resolução de 12-bits ou mais elevada, com alta faixa dinâmica, é utilizada. Uma câmera deexemplo é uma monochrome Basler A601 HDR com alta faixa dinâmica (até112dB) com 16-bit resolução e tecnologia de sensor CMOS de exploraçãoprogressiva, várias câmeras podem ser utilizadas. Formas de concretização dapresente invenção não são limitadas a uma câmera, lente, e/ou tecnologia decaptura e armazenagem de imagem particulares (por exemplo, CCD ouCMOS). Formas de concretização da presente invenção não são limitadas aum tipo particular de fonte de luz, ou a uma particular voltagem de fonte deluz, ou a um particular local e/ou orientação de uma fonte de luz.
De acordo com algumas formas de concretização da presenteinvenção, componentes adicionais que podem ser utilizados incluemcomponentes ópticos, tais como filtros de luz e/ou fontes de luz (incluindoaqueles comercialmente disponíveis de fontes tais como Edmund Optics,Omega Optics, etc.) que ajudam no contraste do blastoderme (branco) comrelação às suas circunvizinhanças (amarelas). Por exemplo, as depositantesverificaram que um blastoderme se torna muito mais visíveis se luz azul forusada para a iluminação do mesmo. Luz azul pode ser produzida por meio deuma fonte de luz azul ou por meio de uma fonte de luz branca filtrada com ummeio de filtragem de azul (por exemplo, lente, etc.). Esta melhoria emvisibilidade ajuda o componente de software, o qual contém o algoritmo deobtenção e processamento de imagem que pesquisa o blastoderme em cadaimagem obtida.
O processamento de imagem, de acordo com algumas formasde concretização da presente invenção, é utilizado para localizar umblastoderme em uma imagem, e, opcionalmente, para melhorar o contraste doblastoderme na imagem. O processamento de imagem para localizar umblastoderme inclui algoritmos, tais como de adequação de padrões e análisede Blob ("Binary Large Object"). O processamento de imagem para melhoraro contraste de um blastoderme em uma imagem inclui extrações de plano deRGB (vermelho-verde-azul) e vários outros algoritmos de filtragem (porexemplo, alisamento, detecção de borda, Gaussiano, etc.). Técnicas deprocessamento de imagem de exemplo que podem ser utilizadas de acordocom formas de concretização da presente invenção são descritas na PatenteUS Nos.: 6.219.452; 6.222.940; 6.229.921; 6.256.625; 6.370.270; 6.366.686;6.493.079; e 6.535.640.
Por exemplo, na adequação de padrões, um usuário selecionauma imagem de gabarito para o software para encontrar em imagenssubseqüentes, e então ajusta outros parâmetros, tais como o número decoincidências, para encontrar a profundidade de busca (fina até grosseira),limitações de classificação, e padrões girados. A adequação de padrões,análise de Blob ("Binary Large Object"), extração de plano de RGB(vermelho-verde-azul) e outras técnicas de processamento de imagem sãobem conhecidas por aqueles com conhecimento na arte e não precisam serdescritas mais detalhadamente aqui.
Software de formação de imagens, de exemplo, que pode serusado de acordo com formas de concretização da presente invenção, inclui"Vision Builder for Automated Inspection", disponível de NationalInstruments, Inc. Este software se integra bem com o software LabVIEW,também disponível de National Instruments, Inc. e que é utilizado com outrosprocedimentos de processamento de ovos, incluindo detecção de pressão einjeção.
Com referência à figura 3 A, uma câmera de vídeo superior 30é configurada para obter imagens de um ovo com janela 10 (isto é, um ovocom uma abertura formada na casca, como descrito acima) mantido no localatravés de uma fixação ou berço 32. Ovos podem ser mantidos no localatravés de vários tipos de dispositivos, sem limitação. Além disto, múltiplosovos podem ser processados conjuntamente, de acordo com algumas formasde concretização da presente invenção. Por exemplo, uma bandeja de ovospode funcionar como um berço 32 para uma pluralidade de ovos.
Uma imagem representativa de um blastoderme 22, comoobtida pela câmera de vídeo 30 é mostrada na figura 3B. O blastodermeilustrado 22 é apenas distinguível da gema circundante 20.
Formas de concretização da presente invenção não sãolimitadas à orientação ilustrada da fonte de luz. De acordo com outras formasde concretização da presente invenção, um iluminador difuso axial(disponível, por exemplo, de Advanced Illumination, Inc.) pode serposicionado entre a câmera e o ovo. O iluminador difuso axial tem espelhosdicróicos angulados circundados com LEDs (azuis) para orientar a luzapropriadamente para o blastoderme e então de volta para a câmara 30.
Com referência à figura 3C, o processamento da imagem dafigura 3B através de software de processamento de imagem produz umaimagem onde o blastoderme 22 a imagem aumentada em seu contraste emrelação à gema 20. Na figura 3D, o software detecta o blastoderme 22 ecoloca uma caixa 40 ao redor de o blastoderme 22 na imagem. Ascoordenadas desta caixa (por exemplo, o ponto central geométrico) podem serprovidas para um dispositivo para ser inseridas em e/ou adjacentes aoblastoderme 22, como descrito acima.
De acordo com algumas formas de concretização da presenteinvenção, um sistema de formação de imagens como descrito acima pode seradaptado para manipular múltiplos ovos de uma vez, e pode incluir múltiplascâmeras. Além disto, ovos em virtualmente qualquer orientação, incluindohorizontal, vertical, inclinada, etc., podem ser processados de acordo comalgumas formas de concretização da presente invenção.
Algumas formas de concretização da presente invenção sãoparticularmente adaptadas para precisamente e rapidamente localizar oblastoderme em ovos de 0 dia férteis, não incubados. Algumas formas deconcretização da presente invenção podem também ser utilizadas emformação de imagens de embriões durante a incubação, por exemplo, durante os dias 0-5.
Algumas formas de concretização da presente invenção nãosão limitadas a localizar o blastoderme dentro de ovos de aves. O crescimentode embrião pode ser monitorado por meio de algumas formas deconcretização da presente invenção. De acordo com algumas formas deconcretização da presente invenção, o local de vasos sangüíneos específicospode ser determinado para facilitar o fornecimento de uma proteína ou vetorpara o sistema circulatório. De acordo com algumas formas de concretizaçãoda presente invenção, técnicas de formação de imagens podem ser utilizadaspara determinar se um ovo está fértil ou infértil. De acordo com algumasformas de concretização da presente invenção, técnicas de formação deimagens podem ser utilizadas em conjunção com técnicas de orientação eposicionamento de embrião. Técnicas de orientação e posicionamento deembrião são descritas no Pedido de Patente US Serial No. 10/216.427, o qualé comumente cedido para a cessionária do presente pedido.
Um blastodisco (tipicamente apenas uma ou duas células) é aregião na superfície de uma gema de ovo onde a formação do embrião ocorre,independentemente de se ou não o ovo foi fertilizado. Uma vez quando ele éfertilizado, o blastodisco eventualmente se tornará o blastoderme (isto é, oblastodisco se multiplicará de uma ou duas células para dezenas de milharesde células). Assim, um ovo não fértil não terá um blastoderme.
De acordo com algumas formas de concretização da presenteinvenção, um método de determinar se um ovo de ave é fértil, inclui formaruma abertura na porção da casca do ovo, e obter uma imagem de umamembrana de casca interna exposta e material subjacente. A imagem obtida éprocessada para determinar a presença de um blastoderme na imagem. Afertilidade do ovo é baseada na detecção da presença ou ausência de umblastoderme na imagem. Se um blastoderme não for detectado ou se umaforma na imagem não coincidir com as características de um blastoderme (porexemplo, forma, tamanho, etc.), o ovo é considerado não fértil.
Exemplo 1
Um impedimento principal em injetar um blastoderme atravésda membrana interna de casca é que é freqüentemente difícil observar oblastoderme através da membrana porque a membrana, embora um poucotranslúcida, tipicamente não é transparente. Para contornar esta dificuldade,tentamos tornar a membrana mais transparente por revesti-la com váriassubstâncias líquidas. Ovos foram armazenados de acordo com a prática daindústria (75% de umidade relativa, 16°C, 8 dias) antes da manipulação. Acasca e membrana externa de casca foram removidas no local da célula de ar,expondo a membrana interna intacta da casca. A membrana interna de cascafoi revestida com um de 4 líquidos diferentes (água, óleo mineral, glicerina,ou DMSO) usando uma mecha de algodão.
O uso de água e óleo mineral não teve virtualmente nenhumefeito sobre a claridade da membrana interna de casca. Glicerina e DMSO,ambos, tiveram o efeito de 'clarear' a membrana interna de casca. Embora elanão tenha sido tornada transparente a clareza foi definitivamente melhorada.
Em casos onde o blastoderme foi um pouco visível, a adição de ou DMSOmelhorou a visibilidade do blastoderme e a percepção de profundidade. Emalguns casos onde o blastoderme não era de modo algum visível, a adição deglicerina ou DMSO usualmente permitiu a visualização do blastoderme, emelhorou a capacidade de distinguir ovos inférteis (ver as figuras 4A-4D).As figuras 4A-4D ilustram a visibilidade aumentada doblastoderme dentro de ovos usando DMSO. As figuras 4A e 4C ilustram ovosnão tratados e as figuras 4B e 4D ilustram os mesmos ovos tamponados comDMSO. Os blastodermes nas figuras 4B e 4D são ilustrados por meio da setaA. Note que, embora o blastoderme na figura 4A pareça como um borrãolanoso, o tratamento com DMSO grandemente melhorou a nitidez doblastoderme na imagem. Na figura 4C, onde o blastoderme não é sobretudovisível, a adição de DMSO tornou o blastoderme claramente visível naimagem, como mostrado na figura 4D.
Pareceu que o DMSO fornece uma visibilidade ligeiramentemelhor que glicerina. Glicerina apresentou a tendência de ser difícil de setrabalhar (pegajosa e deixou um globo sobre a membrana interna de casca). ODMSO rapidamente se evaporou ou difundiu através da membrana, e nãodeixou traço. O tratamento da membrana interna de casca com DMSO podeser uma técnica muito útil para ajudar na visualização do blastoderme parainjeção manual.
Exemplo 2
Para avaliar a toxicidade de DMSO no desenvolvimentoembriônico, embriões foram tratados com DMSO, como descrito no Exemplo1 e colocados para chocar, e então comparados com embriões com nenhumtratamento com DMSO. Para avaliar mais detalhadamente os efeitos deDMSO sobre o clareamento da membrana interna de casca, foram usadosovos que foram armazenados por somente 4 dias. Três grupos de tratamentoforam usados:
A) Janela+DMSO: Ovos com janela na extremidade plana,sem dano da membrana interna de casca. A membrana interna de casca foitamponada com DMSO. Somente ovos com um visível blastoderme forammantidos neste grupo de tratamento. O blastoderme foi perfurado com umamicropipeta de Humagen, cheio com meio de KRB, para similar injeção. Osovos foram selados com silicone + fita. N=42 (isto é, 42 ovos estavam nestegrupo).
B) Janela + nenhum DMSO: Ovos foram providos com janelasna extremidade plana, sem dano da membrana interna de casca. Os ovosforam selados com silicone + fita. N=39 (isto é, 39 ovos estavam nestegrupo).
C) Não manipulados: Ovos foram totalmente não manipuladose colocados para chocar. N=54 (isto é, 54 ovos estavam neste grupo).
Resultados de Incubação:
<table>table see original document page 20</column></row><table>
Deve ser notado que existiram ovos podres na incubadora (deum outro estudo), que deixaram vazar bactérias sobre o grupo de tratamentoA, provavelmente resultando na classificação 'podres', e os pintostardiamente mortos.
Existiu uma redução na chocagem dentre aqueles ovos tratadoscom DMSO em comparação com ovos que foram exatamente providos comjanela e selados. Parte desta redução pode ser causada por contaminação porbactérias a partir dos ovos na incubadora. Existem mais ovos precocementemortos no grupo A que no grupo B ou C. Uma vez que existe menos ou nãoexistem ovos inférteis no grupo A, é provável que este aumento de mortesprecoces é devido à toxidade de DMSO. O pequeno risco de toxidade deDMSO pode ser ponderado por visibilidade e injetabilidade aumentadas doblastoderme.
O precedente é ilustrativo da presente invenção e não deve serentendido como limitação da mesma. Embora poucas formas de concretizaçãode exemplo desta invenção tenham sido descritas, aqueles com conhecimentona arte apreciarão facilmente que muitas modificações são possíveis nasformas de concretização de exemplo sem fugir dos ensinamentos novos evantagens desta invenção. Por conseguinte, todas de tais modificações sãodestinadas a serem incluídas dentro do escopo desta invenção como definidanas reivindicações. A invenção é definida pelas seguintes reivindicações, comequivalentes das reivindicações a serem aqui incluídos.
Claims (23)
1. Método de localizar um blastoderme dentro de um ovo deave, caracterizado pelo fato de que compreende:formar uma abertura na casca de um ovo em um local sob oqual um blastoderme é posicionado e de modo que uma membrana interna decasca é exposta;obter uma imagem digital da membrana interna de cascaexposta e material subjacente;processar a imagem digital obtida para melhorar visibilidadede um blastoderme na imagem digital; elocalizar o blastoderme na imagem digital via um software devisão de máquina.
2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelofato de que ainda compreende aplicar um material ao ovo na membranainterna de casca para melhorar sua transparência antes da obtenção daimagem.
3. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelofato de que localizar o blastoderme na imagem compreende determinarcoordenadas de local do blastoderme na imagem, e ainda compreendendotransmitir as coordenadas de local do blastoderme para o equipamento deprocessamento de ovo.
4. Método de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelofato de que ainda compreende estender um dispositivo através da abertura nacasca de ovo e no interior do blastoderme em resposta a receber ascoordenadas de local.
5. Método de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelofato de que o dispositivo é um dispositivo de fornecimento que libera umasubstância no interior do blastoderme.
6. Método de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelofato de que o dispositivo é um dispositivo de amostragem que removematerial de amostra a partir do blastoderme.
7. Método de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelofato de que o dispositivo é um dispositivo detector que detecta informação apartir de dentro do ovo.
8. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelofato de que o ovo é selecionado do grupo consistindo de ovos de frango, peru,pato, ganso, codorniz, faisão, periquito, papagaio, cacatua, cockatiel, avestruze emu.
9. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelofato de que ainda compreende selar a pequena abertura na casca de ovo apósobtenção da imagem.
10. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que ainda compreende incubar o ovo até a eclosão.
11. Método de acordo com a reivindicação 5, caracterizadopelo fato de que o dispositivo é um dispositivo de fornecimento de múltiplasinjeções.
12. Método de acordo com a reivindicação 6, caracterizadopelo fato de que o material de amostra removido do ovo compreende célulasblastodermais.
13. Método de acordo com a reivindicação 7, caracterizadopelo fato de que o dispositivo detector é selecionado do grupo consistindo desensores elétricos, sensores ópticos, sensores químicos, sensores detemperatura, sensores acústicos, e sensores de pressão.
14. Método de localizar um blastoderme dentro de um ovo deave, caracterizado pelo fato de que compreende:formar uma abertura na casca de um ovo em um local sob oqual um blastoderme é posicionado e de modo que uma membrana interna decasca é exposta;aplicar um material na membrana interna de casca paramelhorar sua transparência;obter uma imagem digital da membrana interna de cascaexposta e material subjacente;processar a imagem digital obtida para melhorar visibilidadede um blastoderme na imagem digital;determinar coordenadas de local do blastoderme na imagemdigital via software de visão de máquina; etransmitir as coordenadas de local para o equipamento deprocessamento de ovo.
15. Método de acordo com a reivindicação 14, caracterizadopelo fato de que ainda compreende estender um dispositivo através daabertura na casca de ovo e no interior do blastoderme em resposta a receber ascoordenadas de local.
16. Método de acordo com a reivindicação 15, caracterizadopelo fato de que o dispositivo é um dispositivo de fornecimento que liberauma substância no interior do blastoderme.
17. Método de acordo com a reivindicação 15, caracterizadopelo fato de que o dispositivo é um dispositivo de amostragem que removematerial de amostra a partir do blastoderme.
18. Método de acordo com a reivindicação 15, caracterizadopelo fato de que o dispositivo é um dispositivo detector que detectainformação a partir de dentro do ovo.
19. Método de acordo com a reivindicação 15, caracterizadopelo fato de que ainda compreende selar a pequena abertura na casca de ovoapós obtenção da imagem.
20. Método de determinar se um ovo de ave é fértil,caracterizado pelo fato de que compreende:formar uma abertura na casca de um ovo em um local sob oqual um blastoderme está provavelmente posicionado e de modo que umamembrana interna de casca é exposta;obter uma imagem digital da membrana interna de cascaexposta e material subjacente;processar a imagem digital obtida para determinar se umblastoderme está presente na imagem digital; eavaliar fertilidade do ovo de ave com base na presença ouausência de um blastoderme na imagem.
21. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que ainda compreende iluminar a membrana interna de cascaexposta e subjazer material para luz azul durante a etapa de obter imagemdigital.
22. Método de acordo com a reivindicação 14, caracterizadopelo fato de que ainda compreende iluminar a membrana interna de cascaexposta e subjazer material para luz azul durante a etapa de obter imagemdigital.
23. Método de acordo com a reivindicação 20, caracterizadopelo fato de que ainda compreende iluminar a membrana interna de cascaexposta e subjazer material para luz azul durante a etapa de obter imagemdigital.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US71877805P | 2005-09-20 | 2005-09-20 | |
| US60/718778 | 2005-09-20 | ||
| PCT/US2006/036541 WO2007035768A2 (en) | 2005-09-20 | 2006-09-20 | Methods for rapidly and accurately locating avian egg blastoderms |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BRPI0616255A2 true BRPI0616255A2 (pt) | 2011-06-14 |
Family
ID=37889478
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BRPI0616255-0A BRPI0616255A2 (pt) | 2005-09-20 | 2006-09-20 | mÉtodos de localizar um blastoderme dentro de um ovo de ave e de determinar se um ovo de ave É fÉrtil |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20080289578A1 (pt) |
| EP (1) | EP1926812A4 (pt) |
| JP (1) | JP2009513949A (pt) |
| CN (1) | CN101283087A (pt) |
| BR (1) | BRPI0616255A2 (pt) |
| CA (1) | CA2621380A1 (pt) |
| WO (1) | WO2007035768A2 (pt) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102010006161B3 (de) * | 2010-01-21 | 2011-01-13 | Technische Universität Dresden | Verfahren und Vorrichtung zur Bestimmung des Geschlechtes von befruchteten und nicht bebrüteten Vogeleiern |
| DE102012016911B3 (de) * | 2012-08-22 | 2013-06-20 | Technische Universität Dresden | Verfahren und Anordnung zur Detektion von Keimscheiben in befruchteten unbebrüteten Geflügeleieern |
| HK1225226A1 (zh) * | 2013-10-17 | 2017-09-08 | Merial Inc. | 选择性胚胎结构靶向和物质递送装置 |
| CN104745527B (zh) * | 2015-04-22 | 2018-01-05 | 扬州大学 | 一种新的快速鸡胚盘的分离方法 |
| ES2687143T3 (es) * | 2015-07-29 | 2018-10-23 | Agri Advanced Technologies Gmbh | Procedimiento y dispositivo para la incorporación de una abertura en la cáscara calcárea en la zona del polo romo de huevos de ave incubados con embrión |
| DE102016005974B4 (de) * | 2016-05-13 | 2018-06-14 | Hochschule für Technik und Wirtschaft Dresden | Verfahren und Vorrichtung zur Einstellung des Laserfokus eines Anregungslasers in Blut durchflossenen Gefäßen für optische Messungen zur Bestimmung des Geschlechtes von Vogeleiern |
| DE102016114085B4 (de) * | 2016-07-29 | 2023-09-07 | Systamatec GmbH | Vorrichtung zur automatisierten Toxizitätsprüfung von Substanzen an einer Gesamtheit von befruchteten Geflügeleiern und Verfahren |
| DE102016215127A1 (de) * | 2016-08-12 | 2018-02-15 | Seleggt Gmbh | Eieruntersuchungseinrichtung |
| DE102017114654B4 (de) * | 2017-06-30 | 2019-03-28 | Evonta-Technology Gmbh | Verfahren und Vorrichtung zur Untersuchung von Fischeiern |
| JP6867629B2 (ja) * | 2018-01-31 | 2021-04-28 | 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス | 画像処理方法、プログラムおよび記録媒体 |
| WO2019154493A1 (en) * | 2018-02-07 | 2019-08-15 | Seleggt Gmbh | Method for sampling an egg |
| EP4145389A1 (en) * | 2021-09-01 | 2023-03-08 | SCREEN Holdings Co., Ltd. | Image processing method, fertilized egg evaluation method, computer program and recording medium |
| JP2024013335A (ja) * | 2022-07-20 | 2024-02-01 | 国立大学法人京都大学 | 種卵の非破壊検査装置及び種卵の非破壊検査方法 |
| CN118429218B (zh) * | 2024-07-02 | 2024-08-30 | 中国人民解放军空军军医大学 | 一种飞行测试系统 |
Family Cites Families (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4040388A (en) * | 1976-02-27 | 1977-08-09 | Agrimatic Corporation | Method and apparatus for automatic egg injection |
| US4593646A (en) * | 1982-06-01 | 1986-06-10 | Agrimatic Corporation | Egg injection method and apparatus |
| US4469047A (en) * | 1983-10-25 | 1984-09-04 | Miller Gary E | Apparatus and method for injecting eggs |
| US4681063A (en) * | 1986-07-02 | 1987-07-21 | Embrex Inc. | High speed automated injection system for avian embryos |
| US4903635A (en) * | 1986-07-02 | 1990-02-27 | Embrex, Inc. | High speed automated injection system for avian embryos |
| US5136979A (en) * | 1991-09-25 | 1992-08-11 | Embrex, Inc. | Modular injection system for avian embryos |
| US5504572A (en) * | 1994-06-28 | 1996-04-02 | Taylor; Mark A. | Electronic imaging apparatus for determining the presence of structure within opaque objects and methods of making the same |
| JPH08159712A (ja) * | 1994-12-09 | 1996-06-21 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | パターン認識方法 |
| SK163598A3 (en) * | 1996-05-31 | 1999-06-11 | Scripps Research Inst | Methods and compositions useful for inhibition of angiogenesis |
| UY25347A1 (es) * | 1998-01-12 | 1999-05-14 | Embrex Inc | Procedimiento de inyeccion multiple para el tratamiento de embriones aviarios in ovo, y aparato automatizado para la inyeccion in ovo. |
| US6522777B1 (en) * | 1998-07-08 | 2003-02-18 | Ppt Vision, Inc. | Combined 3D- and 2D-scanning machine-vision system and method |
| US6256625B1 (en) * | 1998-09-15 | 2001-07-03 | National Instruments Corporation | Video acquisition system including objects with dynamic communication capabilities |
| US6219452B1 (en) * | 1999-01-06 | 2001-04-17 | National Instruments Corporation | Pattern matching system and method which performs local stability analysis for improved efficiency |
| US6229921B1 (en) * | 1999-01-06 | 2001-05-08 | National Instruments Corporation | Pattern matching system and method with improved template image sampling using low discrepancy sequences |
| US6370270B1 (en) * | 1999-01-06 | 2002-04-09 | National Instruments Corporation | System and method for sampling and/or placing objects using low discrepancy sequences |
| US6222940B1 (en) * | 1999-01-06 | 2001-04-24 | National Instruments Corporation | Pattern matching system and method which detects rotated and scaled template images |
| US6244214B1 (en) * | 1999-01-06 | 2001-06-12 | Embrex, Inc. | Concurrent in ovo injection and detection method and apparatus |
| US6366686B1 (en) * | 1999-01-19 | 2002-04-02 | National Instruments Corporation | Video acquisition system including an improved event architecture |
| US6535640B1 (en) * | 2000-04-27 | 2003-03-18 | National Instruments Corporation | Signal analysis system and method for determining a closest vector from a vector collection to an input signal |
| US6493079B1 (en) * | 2000-09-07 | 2002-12-10 | National Instruments Corporation | System and method for machine vision analysis of an object using a reduced number of cameras |
| US7339090B2 (en) * | 2001-02-13 | 2008-03-04 | Avigenics, Inc. | Microinjection devices and methods of use |
| US7041439B2 (en) * | 2001-04-17 | 2006-05-09 | Embrex, Inc. | Methods and apparatus for selectively processing eggs having identified characteristics |
| GB0109765D0 (en) * | 2001-04-20 | 2001-06-13 | Reeves Sidney J | Apparatus and method for determining the viability of eggs |
| JP4381139B2 (ja) * | 2001-08-13 | 2009-12-09 | エンブレクス，インコーポレイテッド | 鳥類の卵の処理方法 |
| JP2004073398A (ja) * | 2002-08-14 | 2004-03-11 | Rikogaku Shinkokai | 画像処理による運動中の生理指標の推定方法 |
-
2006
- 2006-09-20 CA CA002621380A patent/CA2621380A1/en not_active Abandoned
- 2006-09-20 WO PCT/US2006/036541 patent/WO2007035768A2/en not_active Ceased
- 2006-09-20 JP JP2008532327A patent/JP2009513949A/ja active Pending
- 2006-09-20 US US12/064,305 patent/US20080289578A1/en not_active Abandoned
- 2006-09-20 EP EP06814970A patent/EP1926812A4/en not_active Withdrawn
- 2006-09-20 CN CN200680034356.0A patent/CN101283087A/zh active Pending
- 2006-09-20 BR BRPI0616255-0A patent/BRPI0616255A2/pt not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2621380A1 (en) | 2007-03-29 |
| EP1926812A2 (en) | 2008-06-04 |
| US20080289578A1 (en) | 2008-11-27 |
| CN101283087A (zh) | 2008-10-08 |
| EP1926812A4 (en) | 2009-06-03 |
| WO2007035768A2 (en) | 2007-03-29 |
| JP2009513949A (ja) | 2009-04-02 |
| WO2007035768A3 (en) | 2007-10-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| BRPI0616255A2 (pt) | mÉtodos de localizar um blastoderme dentro de um ovo de ave e de determinar se um ovo de ave É fÉrtil | |
| JP4568602B2 (ja) | 胚の心拍数および／または動きを検出することによって生存卵を識別するための方法および装置 | |
| KR101133805B1 (ko) | 알 검란 방법 및 알 검란 장치 | |
| US7249569B2 (en) | Methods for injecting avian eggs | |
| AU2013297168B2 (en) | Gender, viability and/or developmental stage determination of avian embryos in ovo | |
| JP2012150120A (ja) | 生きている卵を識別するための方法および装置 | |
| BRPI0516096B1 (pt) | aparelho de injeção em um ovo | |
| JP5235410B2 (ja) | 鳥卵内の気室を操作する方法 | |
| Deeming et al. | MEAT AND EGG SCIENCE Effect of strain and flock age on fertility and early embryonic mortality of broiler breeder eggs | |
| BR112019016326A2 (pt) | Método de redução de patógenos em operações de incubação de aves | |
| Delany et al. | Photographic candling analysis of the embryonic development of orange-winged Amazon parrots (Amazona amazonica) | |
| WO2008096233A1 (fr) | Procede et installation de mirage des oeufs avec examen du reseau sanguin des oeufs fecondes | |
| Hubbard | Egg residue breakout analysis for backyard birds | |
| EP1344452A1 (en) | Method and device for shell-less in vitro culture of avian embryos |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B06F | Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette] | ||
| B08F | Application dismissed because of non-payment of annual fees [chapter 8.6 patent gazette] |
Free format text: REFERENTE A 7A ANUIDADE. |
|
| B08K | Patent lapsed as no evidence of payment of the annual fee has been furnished to inpi [chapter 8.11 patent gazette] |
Free format text: REFERENTE AO DESPACHO 8.6 PUBLICADO NA RPI 2260 DE 29/04/2014. |