BRPI0619518A2 - moduladores do receptor de glicocorticoide, composição farmacêutica que os compreende e usos dos mesmos - Google Patents

Abstract

MODULADORES DO RECEPTOR DE GLICOCORTICóIDE, COMPOSIçãO FARMACêUTICA QUE OS COMPREENDE E USO DOS MESMOS. A presente invenção refere-se a compostos de fórmula I em que A, X, R^ 1^ R^ 2^ e R^ 3^ são como definidos neste relatório e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo. A invenção também se refere a métodos de uso dos compostos de fórmula I e a composições farmacêuticas compreendendo os compostos de fórmula I.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "MODULADORES DO RECEPTOR DE GLICOCORTICOIDE, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA QUE OS COMPREENDE E USO DOS MESMOS".

A presente invenção refere-se a compostos de oxima e propio- namida, e composições associadas e a métodos de uso como agentes tera- pêuticos.

Glicocorticoides oferecem tratamento eficaz para doenças infla- matórias tais como asma e artrite reumatoide. No entanto, efeitos colaterais sistêmicos severos limitam a dose que pode ser dada e sua utilidade a longo prazo. Os efeitos colaterais incluem supressão do eixo hipotalâmico- pituitário-adrenal (HPA)1 osteoporose, crescimento ósseo reduzido no jovem, alterações comportamentais e distúrbios no metabolismo dos lipídios e da glicose.

O receptor de glicocorticoide (GR) é um membro de uma família de genes conhecida como receptores de hormônios nucleares. Depois de ligar seu Iigante cognato, estes receptores são ativados e são capazes de regular a transcrição tanto de forma positiva quanto de forma negativa.

O mecanismo detalhado desta regulação, embora não totalmente entendido, vem ficando cada vez mais claro. Os glicocorticoides podem se espalhar livremente através das membranas plasmáticas entrando na célula onde eles se ligam ao GR presente no citoplasma. Uma vez ligados, uma altera- ção conformacional no receptor causa a liberação de várias proteínas a- companhantes permitindo que o complexo GR/ligante se transloque para o núcleo, dimerize e se ligue específica e firmemente a seqüências de DNA palindrômicas nos promotores de genes regulados. O receptor ligado a hormônio recruta então um grupo de proteínas conhecidas como o comple- xo coativador. Este complexo é necessário para iniciar a transcrição, e fun- ciona recrutando tanto o mecanismo transcricional da célula quanto as his- toria acetiltransferases envolvidas na abertura da cromatina nas proximida- des do promotor. A transcrição de inúmeros genes que contêm GREs (ele- mentos de resposta a glicocorticoides) em seus promotores é ativada pelo GR. Estes incluem genes envolvidos na gliconeogênese, no metabolismo intermediário e na resposta ao estresse.

Além do controle transcricional exercido pelo GR em GREs1 numerosos genes, particularmente aqueles envolvidos na resposta à infla- mação, devem ser controlados através de mecanismos alternativos, visto que GREs não aparecem nos promotores desses genes. Os promotores de numerosos genes pró-inflamatórios contêm sítios de ligação para os fatores de transcrição NF-κΒ e AP-1. Já foi mostrado que o complexo GR/ligante reprime a transcrição de genes pró-inflamatórios interagindo diretamente com NF-κΒ ou AP-1 e prevenindo a supra-regulação transcricional pelos fatores de transcrição. Trabalhos in vitro GR mutantes incapazes de se ligar a DNA demonstraram que a transrepressão mediada por GR pode ser gene- ticamente dissociada da transativação. Esta dissociação é ainda suportada por um estudo onde foram gerados camundongos transgênicos 'knock-in' nos quais o GR do tipo selvagem foi substituído por um mutante de domínio de ligação de DNA semelhante. Esses camundongos foram incapazes de regular genes-alvo de GR GRE-dependentes tais como tirosina amino trans- ferase (TAT) ou genes que são negativamente regulados através de intera- ção com um GRE negativo, tal como pró-opiomelanocortina (POMC). Em contraste, esses camundongos são capazes de causar a transrepressão de genes ativados por NF-κΒ ou AP-1. Por conseguinte, o modelo atualmente aceito para controle de inflamação com corticosteroides prevê que GR, NFkB e AP-1 interagem em uma rede reguladora complexa levando à re- pressão da expressão de citocinas. De acordo com este modelo um modu- Iador de glicocorticoide que reteria a atividade de transrepressão e perderia a atividade de transativação teria menos efeitos colaterais associados à su- pressão adrenal, alterações comportamentais, e gliconeogênese. Os efeitos anti-inflamatórios seriam retidos.

A presente invenção refere-se a compostos de fórmula I:

<formula>formula see original document page 3</formula>

onde A é CH2 ou C=O;

R1 é H ou C1-C6 alquila;

R2 e R3 são cada um independentemente H1 CF3, NO2 ou um anel heteroarila de cinco membros opcionalmente substituído; ou

R2 e R3 juntos formam um anel heteroarila de seis membros substituído com 0-2 substituintes selecionados do grupo que consiste em C1-C6 alquila e oxo, com a condição de que quando R2 e R3 juntos formarem um anel oxazolinila, A é CH2;

X é O ou N-OR4, onde R4 é H ou C1-C6 alquila; e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

Um outro aspecto da invenção refere-se a um método de trata- mento de uma doença anti-inflamatória através da modulação de um recep- tor de glicocorticoide compreendendo administrar a um indivíduo com ne- cessidade do mesmo um composto de fórmula I ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

Um outro aspecto da invenção é uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo; e um excipiente farmaceuti- camente aceitável.

Todas as publicações citadas neste relatório estão aqui incorpo- radas em sua integridade a título de referência.

A menos que de outra forma indicado, os seguintes termos usa- dos neste Pedido, incluindo o relatório descritivo e as reivindicações, têm as definições dadas abaixo. Deve ser observado que, conforme usado no rela- tório descritivo e nas reivindicações anexas, as formas singulares "um", "u- ma" e "o/a" incluem seus correspondentes no plural a menos que o contexto indique nitidamente o contrário.

"Alquila" significa a porção hidrocarboneto saturado, monovalen- te, linear ou ramificado, consistindo somente em átomos de carbono e hi- drogênio, tendo de um a doze átomos de carbono. "Alquila inferior" refere-se a um grupo alquila de um a seis átomos de carbono, isto é, C1-C6 alquila. Exemplos de grupos alquila incluem, porém sem limitação, metila, etila, pro- pila, isopropila, isobutila, sec-butila, terc-butila, pentila, n-hexila, octila, dode- cila, e similares.

"Arila" significa uma porção hidrocarboneto aromático cíclico monovalente consistindo em um anel aromático monocíclico, bicíclico ou tricíclico. O grupo arila pode ser opcionalmente substituído da maneira defi- nida neste relatório. Exemplos de porções arila incluem, porém sem limita- ção, fenila, naftila, fenantrila, fluorenila, indenila, pentalenila, azulenila, oxidi- fenila, bifenila, metilenodifenila, aminodifenila, difenilsulfidila, difenilsulfonila, difenilisopropilidenila, benzodioxanila, benzofuranila, benzodioxilila, benzopi- ranila, benzoxazinila, benzoxazinonila, benzopiperadinila, benzopiperazinila, benzopirrolidinila, benzomorfolinila, metilenodioxifenila, etilenodioxifenila op- cionalmente substituídos, e similares, inclusive derivados parcialmente hi- drogenados dos mesmos.

Os termos "halo", "halogênio" e "halogeneto", que podem ser usados alternadamente, referem-se a um substituinte flúor, cloro, bromo, ou iodo.

"Haloalquila" significa alquila como definido neste relatório onde um ou mais hidrogênios foram substituídos com o mesmo halogênio ou com halogênios diferentes. Haloalquilas exemplificativas incluem -CH2CI, -CH2CF3, -CH2CCl3, perfluoralquila (por exemplo,-CF3), e similares.

"Heteroarila" significa um radical monocíclico ou bicíclico de 5 a 12 átomos no anel tendo pelo menos um anel aromático contendo um, dois ou três heteroátomos no anel selecionados de N, O, ou S, os outros átomos do anel sendo C, ficando entendido que o ponto de ligação do radical hete- roarila será em um anel aromático. O anel heteroarila pode ser opcional- mente substituído como definido neste relatório. Exemplos de porções hete- roarila incluem, porém sem limitação, imidazolila, oxazolila, isoxazolila, tetra- zolila, tiazolila, isotiazolila, oxadiazolila, tiadiazolila, pirazinila, tienila, benzo- tienila, tiofenila, furanila, piranila, piridila, pirrolila, pirazolila, pirimidila, quino- linila, isoquinolinila, benzofurila, benzotiofenila, benzotiopiranila, benzimida- zolila, benzo-oxazolila, benzo-oxadiazolila, benzotiazolila, benzotiadiazolila, benzopiranila, indolila, isoindolila, triazolila, triazinila, quinoxalinila, purinila, quinazolinila, quinolizinila, naftiridinila, pteridinila, carbazolila, azepinila, dia- zepinila, acridinila opcionalmente substituídos e similares, inclusive deriva- dos parcialmente hidrogenados dos mesmos.

"Heterociclila" significa uma porção saturada monovalente, con- sistindo em um a três anéis, incorporando um, dois, ou três ou quatro hete- roátomos (escolhidos de nitrogênio, oxigênio ou enxofre). O anel heterocicli- la pode ser opcionalmente substituído como definido neste relatório. Exem- plos de porções heterociclila incluem, porém sem limitação, piperidinila, pi- perazinila, homopiperazinila, azepinila, pirrolidinila, pirazolidinila, imidazolini- la, imidazolidinila, piridinila, piridazinila, pirimidinila, oxazolidinila, isoxazolidi- nila, morfolinila, tiazolidinila, isotiazolidinila, quinuclidinila, quinolinila, isoqui- nolinila, benzimidazolila, tiadiazolilidinila, benzotiazolidinila, benzoazolilidini- la, di-hidrofurila, tetra-hidrofurila, di-hidropiranila, tetra-hidropiranila, tiamorfo- linila, tiamorfolinilsulfóxido, tiamorfolinilsulfona, di-hidroquinolinila, di- hidrisoquinolinila, tetra-hidroquinolinila, tetra-hidrisoquinolinila opcionalmente substituídos, e similares.

"Opcionalmente substituído", quando usado em associação com "arila", "fenila", "heteroarila" "ciclo-hexila" ou "heterociclila", significa uma arila, fenila, heteroarila, ciclo-hexila ou heterociclila que é opcionalmente substituído independentemente com um a quatro substituintes, de preferên- cia um ou dois substituintes selecionados de alquila, cicloalquila, cicloalqui- lalquila, heteroalquila, hidroxialquila, halo, nitro, oxo, ciano, hidróxi, alcóxi, amino, acilamino, monoalquilamino, dialquilamino, haloalquila, haloalcóxi, heteroalquila, -COR (onde R é hidrogênio, alquila, fenila ou fenilalquila), -(CR'R")n-COOR (onde η é um inteiro de 0 a 5, R' e R" são independente- mente hidrogênio ou alquila, e R é hidrogênio, alquila, cicloalquila, cicloalqui- lalquila, fenila ou fenilalquila), ou -(CR'R1VCONRaRb (onde η é um inteiro de 0 a 5, R' e R" são independentemente hidrogênio ou alquila, e Ra e Rb são, independentemente um do outro, hidrogênio, alquila, cicloalquila, cicloalqui- lalquila, fenila ou fenilalquila).

"Farmaceuticamente aceitável" significa que é útil na preparação de uma composição farmacêutica que geralmente é segura, atóxica, e não é biologicamente nem de qualquer outra forma indesejável e inclui o fato de que é aceitável para uso farmacêutico veterinário assim como humano.

"Sais farmaceuticamente aceitáveis" de um composto significa sais que são farmaceuticamente aceitáveis, conforme definido neste relató- rio, e que possuem a atividade farmacológica desejada do composto primiti- vo. Tais sais incluem:

sais de adição de ácido formados com ácidos inorgânicos tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, e similares; ou formados com ácidos orgânicos tais como ácido acético, ácido benzenossulfônico, ácido benzoico, ácido canforassulfônico, ácido cítrico, ácido etanossulfônico, ácido fumárico, ácido glico-heptônico, ácido glicônico, ácido glutâmico, ácido glicólico, ácido hidroxinaftoico, ácido 2-hidroxietanossulfônico, ácido láctico, ácido maleico, ácido málico, ácido malônico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido mucônico, ácido 2-naftalenossulfônico, ácido propiônico, ácido salicílico, ácido succínico, áci- do tartárico, ácido p-toluenossulfônico, ácido trimetilacético, e similares; ou

sais formados quando um próton ácido presente no composto primitivo é substituído por um íon metálico, por exemplo, um íon de metal alcalino, um íon de metal alcalino-terroso, ou um íon de alumínio; ou coor- dena com uma base orgânica ou inorgânica. Bases orgânicas aceitáveis incluem dietanolamina, etanolamina, N-metilglucamina, trietanolamina, tro- metamina, e similares. Bases inorgânicas aceitáveis incluem hidróxido de alumínio, hidróxido de cálcio, hidróxido de potássio, carbonato de sódio e hidróxido de sódio.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis preferidos são os sais formados a partir de ácido acético, ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido metanossulfônico, ácido maleico, ácido fosfórico, ácido tartárico, ácido cítri- co, sódio, potássio, cálcio, zinco e magnésio.

Deve ficar entendido que todas as referências a sais farmaceuti- camente aceitáveis incluem formas de adição de solvente (solvatos) ou for- mas cristalinas (polimorfos) definidas neste relatório, do mesmo sal de adi- ção de ácido. O termo "modular" significa a capacidade de uma molécula para alterar a função de uma molécula-alvo, por exemplo, pela ligação à molécu- la-alvo e estimulação ou inibição das respostas funcionais da molécula-alvo. "Modulador" significa uma molécula que interage com uma molécula-alvo e modula a mesma. As interações incluem, porém sem limitação, agonista, antagonista, e similares, definidas neste relatório.

"Agonista" significa uma molécula que interage com uma molé- cula-alvo e intensifica ou aumenta a função de uma molécula-alvo. Como tal, os agonistas incluem agonistas parciais e agonistas totais.

"Antagonista" significa uma molécula que direta ou indiretamente inibe ou suprime a função de uma molécula-alvo. Como tal, os antagonistas incluem antagonistas parciais e antagonistas totais.

"Doença" e "estado patológico" significam qualquer doença, condição, sintoma, distúrbio ou indicação.

"Doença inflamatória" significa estados ou indicações patológi- cas que são acompanhadas de processos inflamatórios, alérgicos, e/ou pro- liferativos e podem incluir:

(i) Doenças pulmonares: doenças pulmonares obstrutivas crôni- cas de qualquer gênese, particularmente asma brônquica e doença pulmo- nar obstrutiva crônica (COPD); síndrome da angústia respiratória do adulto (ARDS); bronquiectasia, bronquite de várias gêneses; todas as formas de doenças pulmonares restritivas, particularmente alveolite alérgica; todas as formas de edema pulmonar, particularmente edema pulmonar tóxico; todas as formas de doenças pulmonares intersticiais de qualquer gênese, por e- xemplo, pneumonite associada à radiação; e sarcoidose e granulomatoses, particularmente doença de Boeck.

(ii) Doenças reumáticas ou doenças autoimunes ou doenças ar- ticulares: todas as formas de doenças reumáticas, especialmente artrite reumatoide, febre reumática aguda, e polimialgia reumática; artrite reativa; doenças reumáticas do tecido mole; doenças inflamatórias do tecido mole de outras gêneses; sintomas artríticos em doenças articulares degenerativas (artroses); artrite traumática; colagenoses de qualquer gênese, por exemplo, lúpus eritematoso sistêmico, escleroderma, polimiosite, dermatomiosite, sín- drome de Sjõgren, doença de Still1 e síndrome de Felty;

(iii) Doenças alérgicas: todas as formas de reações alérgicas, por exemplo edema angioneurótico, febre do feno, picadas de inseto, reações alér- gicas o fármacos, derivados do sangue, agentes de contraste etc., choque ana- filático (anafilaxia), urticária, edema angioneurótico, e dermatite de contato;

(iv) Doenças do tipo vasculite: panarterite nodosa, poliarterite nodosa, arterite temporal, granulomatose de Wegner, artrite de células gi- gantes, e eritema nodoso;

(v) Doenças dermatológicas: dermatite atópica, particularmente em crianças; psoríase; pitiríase vermelha do pilar; doenças eritematosas desenca- deados por várias influências nocivas, por exemplo, raios, produtos químicos, embriaguez etc.; dermatoses bolhosas; doenças do complexo liquenoide; pruri- do (por exemplo, de gênese alérgica); dermatite seborréica; rosácea; pênfigo vulgar; eritema multiforme exsudativo; balanite; vulvite; perda de cabelo, tal co- mo ocorre na alopecia em áreas; e Iinfomas de células T cutâneas;

(vi) Doenças renais: síndrome nefrótica; e todos os tipos de nefri- te, por exemplo, glomerulonefrite;

(vii) Doenças hepáticas: desintegração aguda das células hepáti- cas; hepatite aguda de várias gêneses, por exemplo, viral, tóxica, induzida por fármacos; e hepatite cronicamente agressiva e/ou cronicamente intermitente;

(viii) Doenças gastrointestinais: doenças do intestino inflamado, por exemplo, enterite regional (doença de Crohn), colite ulcerosa; gastrite; esofagite péptica (refluxoesofagite); e gastroenterite de outras gêneses, por exemplo, espru não-tropical;

(ix) Doenças proctológicas: eczema anal; fissuras; hemorroidas; e proctite idiopática;

(x) Doenças oculares: ceratite alérgica, uveíte ou irite; conjuntivi- te, blefarite; neurite ótica; coroidite; e oftalmia simpática;

(xi) Doenças da área do ouvido, nariz, e garganta (ENT): rinite alérgica ou febre do feno; otite externa, por exemplo, causada por eczema de contato, infecção etc.; e otite média; (xii) Doenças nurológicas: edema cerebral, particularmente ede- ma cerebral associado a tumor; esclerose múltipla; encefalomielite aguda; meningite; lesão aguda do cordão espinhal; derrame; e várias formas de convulsões, por exemplo, espasmos de nutação;

(xiii) Doenças sangüíneas: anemia hemolítica adquirida; e trom- bocitopenia idiopática;

(xiv) Doenças tumorosas: leucemia linfática aguda; linfoma ma- ligno; linfogranulomatoses; linfossarcoma; metástases extensivas, particu- larmente em carcinoma de mama, carcinoma brônquico e carcinoma de próstata;

(xv) Doenças endócrinas: oftalmopatia endócrina; orbitopatia en- dócrina; crise tirotóxica; tireoidite de Quervain; tireoidite de Hashimoto; do- ença de Basedow; tireoidite granuIomatosa; estruma linfomatosa; e doença de Grave;

(xvi) Transplantes de órgãos e tecidos e doenças do enxerto versus hospedeiro;

(xvii) Estados de choque graves, por exemplo, choque séptico, choque anafilático, e síndrome da resposta inflamatória sistêmica (SIRS);

(xviii) Terapia de reposição em: insuficiência adrenal primária congênita, por exemplo, síndrome adrenogenital; insuficiência adrenal pri- mária adquirida, por exemplo, doença de Addison, adrenalite autoimune, pós-infecção, tumores, metástases etc.; insuficiência adrenal secundária congênita, por exemplo, hipopituitarismo congênito; e insuficiência adrenal secundária adquirida, por exemplo, pós-infecção, tumores, metástases etc.;

(xix) Dor de gênese inflamatória, por exemplo, lumbago; e

(xx) vários outros estados ou condições patológicas inclusive di- abetes tipo I (diabetes dependente de insulina), osteoartrite, síndrome de Guillain-Barre, restenose subsequente à angioplastia coronariana translumi- nal percutânea, mal de Alzheimer, dor aguda e crônica, aterosclerose, lesão de reperfusão, doenças de reabsorção óssea, insuficiência cardíaca conges- tiva, infarto do miocárdio, lesão térmica, lesão de múltiplos órgãos secundá- ria a trauma, meningite purulenta aguda, enterocolite necrotizante e síndro- mes associadas à hemodiálise, Ieucoferese1 e transfusão de granulócitos.

"Indivíduo" significa mamíferos e não-mamíferos. Mamíferos sig- nifica qualquer membro da classe Mammalia incluindo, porém sem limita- ção, seres humanos; primatas não-humanos tais como chimpanzés e outras espécies de símios e macacos; animais de criação tais como gado bovino, eqüino, ovino, e suíno; animais domésticos tais como coelhos, cachorros, e gatos; animais de laboratório incluindo roedores, tais como ratos, camun- dongos, e porquinhos-da-índia; e similares. Exemplos de não-mamíferos incluem, porém sem limitação, pássaros, e similares. O termo "indivíduo" não denota uma idade ou sexo particular.

"Tratar" ou "tratamento" de um estado patológico inclui:

(i) prevenir o estado patológico, isto é, fazer com que os sinto- mas clínicos da doença não se desenvolvam em um indivíduo que pode ser exposto ou predisposto à doença, mas que ainda não sentiu ou apresentou sintomas da doença.

(ii) inibir o estado patológico, isto é, interromper o desenvolvi- mento da doença ou seus sintomas clínicos, ou

(iii) aliviar o estado patológico, isto é, causar uma regressão temporária ou permanente da doença ou seus sintomas clínicos.

Os termos "tratar", "contatar" e "reagir" quando se referem a uma reação química significam adicionar ou misturar dois ou mais reagentes em condições apropriadas para produzir o produto indicado e/ou desejado. De- ve ser observado que a reação que produz o produto indicado e/ou desejado pode não necessariamente resultar diretamente da combinação de dois rea- gentes que foram inicialmente adicionados, isto é, pode haver um ou mais intermediários que são produzidos na mistura que finalmente leva à forma- ção do produto indicado e/ou desejado.

Em uma modalidade a presente invenção fornece um composto da fórmula I e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo onde A é CH2.

Em uma outra modalidade a presente invenção fornece um composto da fórmula I e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo onde A é C=O.

Em uma modalidade a presente invenção fornece um composto da fórmula I e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo onde R1 é H.

Em uma modalidade a presente invenção fornece um composto da fórmula I e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo onde R2 é H e R3 é CF3, NO2 ou um anel heteroarila de cinco membros opcionalmente substituído. Em uma outra modalidade a presente invenção fornece um composto da fórmula I e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo onde R2 é H e R3 é um anel heteroarila de cinco membros opcionalmente substitu- ído. Em ainda uma outra modalidade a presente invenção fornece um com- posto da fórmula I e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo onde R2 é H e R3 é um anel heteroarila de cinco membros opcionalmente substituído que está na posição para.

Em uma modalidade a presente invenção fornece um composto da fórmula I e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo onde R2 e R3 juntos formam um anel heteroarila de seis membros substituído com 2 substituintes selecionados do grupo que consiste em C1-C6 alquila e oxo, com a condição de que quando R2 e R3Juntos formarem um anel oxazolinila, A é CH2.

Em uma modalidade a presente invenção fornece um composto da fórmula I e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo onde X é O ou N-OR4, onde R4 é H ou C1-C6alquila.

Compostos de fórmula (I) onde A é CH2 podem ser preparados pelo método apresentado no esquema 1.

Esquema 1:

<formula>formula see original document page 12</formula>

O intermediário, 1-bromo-3-[1-(2-trifluorometoli-fenil)-ciclobutil]- propan-2-ona, de fórmula (II) pode ser preparado usando os materiais de partida, 1-bromo-2-triflurometil-benzeno e 1-ciclobutilideno-propan-2-ona. Reação do composto de fórmula (II) intermediário com as fenilaminas substi- tuídas de fórmula (III) em uma solução de di-isopropil etilamina e dimetilfor- mamida resulta nos compostos de 2-oxo-propilamina de fórmula (I). Reação adicional com hidroxilamina (com ou sem substituintes alquila) resulta nos compostos de propanona oxima de fórmula (I).

O esquema 2 apresenta a abordagem que é usada para obter compostos de fórmula (I) onde A é C=O como definido acima.

Esquema 2:

<formula>formula see original document page 13</formula>

2-Trifluorometil-fenil acetonitrila é misturada com 1,2-dibromo- propano para produzir o composto de ciclobutanocarbonitrila, que é então reagido com hidreto de di-isobutilalumínio em tolueno resultando no inter- mediário de ciclobutanocarbaldeído de fórmula (IV). Este intermediário é então misturado com éster etílico do ácido dietóxi-fosforil-etóxi-acético, se- guido de duas etapas de hidrólise para produzir o ácido 2-oxo-3-[1- 2(trifluorometil-fenil)-ciclobutil-propiônico de fórmula (V). Por fim, reação com as fenilaminas de fórmula (III) na presença de cloreto de tionila e dimetil acetamida resulta nos compostos de propionamida de fórmula (I).

Em geral, a nomenclatura usada neste Pedido baseia-se no AUTONOM® v.4.0, um sistema computadorizado do Beilstein Institute para a geração da nomenclatura sistemática do IUPAC.

As estruturas químicas mostradas neste relatório foram prepara- das usando o ISIS® versão 2.2. Qualquer valência aberta que aparece em um átomo de carbono, oxigênio ou nitrogênio nas estruturas desta invenção (que não radicais substituintes) indica a presença de um hidrogênio.

A presente invenção inclui composições farmacêuticas compre- endendo pelo menos um composto da presente invenção, ou um isômero individual, uma mistura racêmica ou não-racêmica de isômeros ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, junto com pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável, e opcionalmente similares componen- tes terapêuticos e/ou profiláticos.

Em geral, os compostos da presente invenção serão administra- dos em uma quantidade terapeuticamente eficaz por qualquer um dos mo- dos de administração aceitos para agentes com utilidades semelhantes. As faixas de dosagem adequadas são tipicamente 1 - 500 mg ao dia, tais como 1 - 100 mg ao dia, ou 1 - 30 mg ao dia, dependendo de numerosos fatores tais como a gravidade da doença a ser tratada, a idade e o estado de saúde relativo do indivíduo, a potência do composto usado, a via e a for- ma de administração, a indicação para qual a administração se volta, e as preferências e experiência do profissional de saúde envolvido. Um versado na técnica de tratar tais doenças será capaz, sem experimentação desne- cessária e confiando em seu conhecimento pessoal e na descrição deste Pedido, de determinar a quantidade terapeuticamente eficaz dos compostos da presente invenção para uma dada doença.

Em geral, os compostos da presente invenção serão administra- dos como formulações farmacêuticas inclusive aquelas adequadas para administração oral (incluindo bucal e sublingual), retal, nasal, tópica, pulmo- nar, vaginal, ou parenteral (incluindo intramuscular, intra-arterial, intratecal, subcutânea e intravenosa) ou em uma forma adequada para administração por inalação ou insuflação. O modo de administração preferido geralmente é o oral usando um regime de dosagem diária conveniente que pode ser ajus- tado de acordo com o grau de aflição.

Um composto ou compostos da presente invenção, junto com um ou mais adjuvantes, veículos ou diluentes convencionais, podem ser co- locados na forma de composições farmacêuticas e dosagens unitárias. As composições farmacêuticas e formas de dosagem unitária podem ser com- preendidas de componentes convencionais nas proporções convencionais, com ou sem compostos ou princípios ativos adicionais, e as formas de do- sagem unitária podem conter qualquer quantidade eficaz adequada do com- ponente ativo condizente com a faixa de dosagem diária a ser empregada.

As composições farmacêuticas podem ser empregadas como sólidos, tais como comprimidos ou cápsulas cheias, semissólidos, pós, formulações de liberação sistemática, ou líquidos tais como soluções, suspensões, emul- sões, elixires, ou cápsulas cheias para uso oral; ou na forma de supositórios para administração retal ou vaginal; ou na forma de soluções injetáveis esté- reis para uso parenteral. Formulações contendo cerca de 1 mg de compo- nente ativo ou, de forma mais ampla, cerca de 0,01 a cerca de 100 mg, por comprimido, são por conseguinte formas de dosagem unitária representati- vos adequadas.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados em uma ampla variedade de formas de dosagem para administração oral. As composições farmacêuticas e as formas de dosagem podem compreender um composto ou compostos da presente invenção ou sais farmaceuticamen- te aceitáveis dos mesmos como o componente ativo. Os veículos farmaceu- ticamente aceitáveis podem ser sólidos ou líquidos. Preparações na forma sólida incluem pós, comprimidos, pílulas, cápsulas, cápsulas de gelatina va- zias, supositórios, e grânulos dispersíveis. Um veículo sólido pode ser uma ou mais substâncias que também podem agir como diluentes, agentes flavo- rizantes, solubilizantes, lubrificantes, agentes suspensores, aglutinantes, conservantes, agentes desintegrantes de comprimido, ou um material en- capsulante. Nos pós, o veículo geralmente é um sólido finamente dividido que é uma mistura com o componente ativo finamente dividido. Nos com- primidos, o componente ativo geralmente é misturado com o veículo tendo a capacidade de aglutinação necessária nas proporções adequadas e com- pactado no formato e tamanho desejados. Os pós e comprimidos de prefe- rência contêm de cerca de 1 % a cerca de 70% do composto ativo. Veículos adequados incluem, porém sem limitação, carbonato de magnésio, esteara- to de magnésio, talco, açúcar, lactose, pectina, dextrina, amido, gelatina, tragacanto, metilcelulose, carboximetilcelulose sódica, uma cera de baixo ponto de fusão, manteiga de cacau, e similares. O termo "preparação" pre- tende incluir a formulação do composto ativo com material encapsulante como veículo, oferecendo uma cápsula na qual o componente ativo, com ou sem veículos, é envolvida por um veículo, que está associado à mesma. Da mesma forma, cápsulas de gelatina vazias e pastilhas estão incluídas. Com- primidos, pós, cápsulas, pílulas, cápsulas de gelatina vazias, e pastilhas po- dem ser formas sólidas adequadas para administração oral.

Outras formas adequadas para administração oral incluem pre- parações em forma líquida incluindo emulsões, xaropes, elixires, soluções aquosas, suspensões aquosas, ou preparações em forma sólida que devem ser convertidas imediatamente antes do uso em preparações em forma Ii- quida. Emulsões podem ser preparadas em soluções, por exemplo, em so- luções em propileno glicol aquoso ou podem conter agentes emulsificantes, por exemplo, tais como Iecitina1 mono-oleato de sorbitano ou acácia. Solu- ções aquosas podem ser preparadas por dissolução do componente ativo em água e adição de corantes, flavorizantes, estabilizantes e agentes es- pessantes adequados. Suspensões aquosas podem ser preparadas por dis- persão do componente ativo finamente dividido em água com material vis- coso, tal como gomas naturais ou sintéticas, resinas, metilcelulose, carboxi- metilcelulose sódica, e similares agentes suspensores bastante conhecidos. Preparações em forma sólida incluem soluções, suspensões, e emulsões, e podem conter, além do componente ativo, corantes, flavorizantes, estabili- zantes, tampões, adoçantes artificiais e naturais, dispersantes, espessantes, agentes solubilizantes, e similares.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração parenteral (por exemplo, por injeção, por exemplo injeção de bolo ou infusão continua) e podem ser apresentados em forma de dose uni- tária em ampolas, seringas prontas para uso, infusão de pequeno volume ou recipientes com múltiplas doses com um conservante adicionado. As com- posições podem adquirir formas tais como suspensões, soluções, ou emul- sões em veículos oleosos ou aquosos, por exemplo soluções em polietileno glicol aquoso. Exemplos de veículos, diluentes, solventes ou veículos oleo- sos ou não-aquosos incluem propileno glicol, polietileno glicol, óleos vege- tais (por exemplo, óleo de oliva), ésteres orgânicos injetáveis (por exemplo, oleato de etila), e podem conter agentes de formulação tais como agentes conservantes, umectantes, emulsificantes ou suspensores, estabilizantes e/ou dispersantes.

Alternativamente, o componente ativo pode estar na forma de pó, obtido por isolamento asséptico de sólido estéril ou por liofilização da solução para constituição antes do uso com um veículo adequado, por exemplo, água estéril livre de pirogênio.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração tópica à epiderme como pomadas, cremes ou loções, ou co- mo um emplastro transdérmico. Pomadas e cremes podem, por exemplo, ser formulados com uma base aquosa ou oleosa com a adição de agentes espessantes e/ou gelificantes adequados. Loções podem ser formuladas com uma base aquosa ou oleosa e em geral também vão conter um ou mais agentes emulsificantes, agentes estabilizantes, agentes dispersantes, agen- tes suspensores, agentes espessantes, ou agentes corantes. Formulações adequadas para administração tópica na boca incluem trociscos compreen- dendo agentes ativos em uma base flavorizada, normalmente sacarose e acácia ou tragacanto; pastilhas compreendendo o componente ativo em uma base inerte tal como gelatina e glicerina ou sacarose e acácia; e colutó- rios compreendendo o componente ativo em um veículo líquido adequado.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração como supositórios. Uma cera de baixo ponto de fusão, tal como uma mistura de glicerídeos de ácidos graxos ou manteiga de cacau primeiro é derretida e o componente ativo é dispersado homogeneamente, por exemplo, por agitação. A mistura homogênea derretida é então despeja- da em formas de tamanho conveniente, deixada esfriar, e solidificar.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração vaginal. Pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou sprays contendo além do componente ativo veículos tais como aqueles conhecidos na técnica como apropriados.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração nasal. As soluções ou suspensões são aplicadas diretamente à cavidade nasal por meios convencionais, por exemplo, com um conta- gotas, uma pipeta ou spray. As formulações podem ser apresentadas na forma de dose única ou de doses múltiplas. No caso de um conta-gotas ou pipeta, isto pode ser obtido pelo paciente administrando um volume prede- terminado apropriado da solução ou suspensão. No caso de um spray, isto pode ser obtido por exemplo por meio de uma bomba spray de atomização regulada.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração aerossol, particularmente ao trato respiratório e incluindo a administração nasal. O composto geralmente terá um tamanho de partícula pequeno por exemplo da ordem de 5 (cinco) mícrons ou menos. Este tama- nho de partícula pode ser obtido por meios conhecidos na literatura, por e- xemplo por micronização. O componente ativo é fornecido em uma embala- gem pressurizada com um propelente adequado tal como clorofluorocarbo- no (CFC), por exemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, ou diclo- rotetrafluoroetano, ou dióxido de carbono ou outro gás adequado. O aeros- sol também pode conter convenientemente um tensoativo tal como lecitina. A dose de fármaco pode ser controlada por uma válvula regulada. Alternati- vamente os componentes ativos podem ser fornecidos na forma de um pó seco, por exemplo uma mistura em pó do composto em uma base de pó adequada tal como lactose, amido, derivados de amido tais como hidroxi- propilmetil celulose e polivinilpirrolidina (PVP). O veículo de pó vai formar um gel na cavidade nasal. A composição em pó pode ser apresentada na forma de dose unitária por exemplo em cápsulas ou cartuchos de por exemplo ge- latina ou embalagens tipo bolha das quais o pó pode ser administrado por meio de um inalador.

Quando desejado, as formulações podem ser preparadas com revestimentos entéricos adaptados para administração com liberação siste- mática ou controlada do componente ativo. Por exemplo, os compostos da presente invenção podem ser formulados em dispositivos para distribuição transdérmica ou subcutânea de fármacos. Estes sistemas de distribuição são vantajosos quando a liberação sistemática do composto é necessária e quando a complacência do paciente com o regime de tratamento é crucial. Os compostos em sistemas de distribuição transdérmica freqüentemente são presos a um suporte sólido adesivo à pele. O composto de interesse também pode ser combinado um intensificador de penetração, por exemplo, Azona (1-dodecilazaciclo-heptan-2-ona). Os sistemas de distribuição de libe- ração sistemática são inseridos subcutaneamente na camada subdérmica por cirurgia ou injeção. Os implantes subdérmicos encapsulam o composto em uma membrana solúvel em lipídio, por exemplo, borracha de silicone, ou um polímero biodegradável, por exemplo, ácido poliláctico.

As preparações farmacêuticas de preferência estão em formas de dosagem unitária. Nesta forma, a preparação é subdividida em doses unitárias contendo quantidades apropriadas do componente ativo. A forma de dosagem unitária pode ser uma preparação embalada, a embalagem contendo quantidades distintas da preparação, tais como comprimidos em- balados, cápsulas, e pós em frascos ou ampolas. Também, a forma de do- sagem unitária pode ser uma cápsula, comprimido, cachet ou pastilha, ou pode ser o número apropriado de qualquer uma destas formas embaladas.

Outros veículos farmacêuticos adequados e suas formulações estão descritos em Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, editado por Martin, Mack Publishing Company, 19a edição, Easton, Pensil- vânia. Formulações farmacêuticas representativas contendo um composto da presente invenção estão descritas nos exemplos 6-12.

Exemplos

As preparações e os exemplos a seguir são dados para possibili- tar que os versados na técnica entendam mais claramente e pratiquem a presente invenção. Eles não devem ser considerados como limitativos do escopo da invenção, mas simplesmente como ilustrativos e representativos da mesma. As abreviações a seguir podem ser usadas nos exemplos:

EtOAc: acetato de etila; THF: tetra-hidrofurano; TA: temperatura ambiente.

Exemplo 1: 4-Metil-6-{2-oxo-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil1-propilami- no)-benzo[d1f 1,21oxazin-1 -ona

Precursores

1 -f 1 -(2-Trifluorometil-fenil)-ciclobutil1-propan-2-ona

Uma solução de brometo de 2-trifluorometil-fenilmagnésio foi preparada em uma atmosfera de nitrogênio a partir de magnésio (1,02 g, 43 mmols) e 1-bromo-2-trifluorometil-benzeno (10,31 g, 46 mmols) em THF e resfriada para -5°C. Iodeto cuproso (3,53 g, 18,5 mmols) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada a -5°C por 5 minutos, e em seguida rapida- mente resfriada para -70°C. 1-Ciclobutilideno-propan-2-ona (1,2 g, 11 mmols) foi adicionada em gotas por meio de uma seringa à mistura, que foi então agitada por uma hora a -70°C e deixada esquentar até a temperatura ambiente. A mistura reacional foi despejada em uma solução aquosa satu- rada de cloreto de amônio e o THF foi evaporado a vácuo. O resíduo resul- tante foi extraído com cloreto de metileno. Os extratos orgânicos combina- dos foram concentrados por evaporação a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel utilizando um aumento gradual na concentração de eluente (2%-10% éter-hexano) para dar 5,56 g de produto.

1H-RMN (CDCI3), δ 7,63(dd, 1H), 7,45(t, 1H), 7,28(m, 2H), 3,05(s, 2H), 2,52(m, 4H), 2,08(m, 1H), 1,8(m, 1H), 1,68(s, 3H).

1-Bromo-3-ri-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutin-propan-2-ona

A uma solução gelada de 1-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propan-2-ona (2,56 g, 10 mmols) em MeOH (15 ml) foi adicionado Br2 (0,5 ml, 10 mmols) lentamente por meio de uma seringa. A mistura reacional foi agitada por 15 minutos a 0°C, e em seguida 30 minutos à temperatura am- biente. À mistura reacional foi adicionada H2O (15 ml) e a mistura foi agitada por 15 minutos à temperatura ambiente. A reação foi monitorada por TLC, e TLC não mostrou sobra de material de partida 15 minutos depois da adição de H2O. A solução resultante foi extraída duas vezes com 25% de n-hexano em EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados duas vezes com solução aquosa saturada de NaHCO3, secos em sulfato de sódio e concentrados por evaporação a vácuo. O resíduo foi purificado por cromato- grafia em coluna de sílica-gel com 2% de éter-hexano para dar 1,97 g de produto.

1H), 3,32(s, 2H), 3,27(s, 2H), 2,55(t, 4H), 2,12(m, 1H), 1,83(m, 1H). 4-Metil-6-(2-oxo-341-(2-trifluorometil-fenin-ciclobutil]-propilamino}-benzofd- 1,21oxazin-1-ona

<formula>formula see original document page 21</formula>

Uma solução de 0,35 g (1,04 mmol) de 1-bromo-3-[1-(2- trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propan-2-ona, 0,184 g (1,04 mmol) de 6-amino- 4-metil-benzo[d][1,2]oxazin-1-ona e 0,2 ml (1,1 mmol) de di-isopropil etilami- na em 10 ml de DMF foi aquecida a 80°C por uma noite. A mistura reacional foi distribuída entre EtOAc e H2O. A camada orgânica foi separada, lavada duas vezes com H2O, seca e concentrada por evaporação a vácuo. O resí- duo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (EtOAc-hexano a 10% e 20%) para dar 26 mg de produto.

1H-RMN (CDCI3), δ 8,08(d, 1H), 7,67(dd, 1H), 7,38(dd, 1H), 7,28(d, 1H), 7,18(d, 1H), 6,71(dd, 1H), 6,33( d, 1H), 5,25(t, 1H), 3,46(b, 1H), 3,18(s, 2H), 2,59(m, 4H), 2,44(s, 3H), 2,14(m, 1H), 1,86(m, 1H). MS (ei): M(+)+H=431, M+-H=429

Exemplo 2: 1-(4-Metil-1-oxo-1 H-benzoídlM.21oxazin-6-ilamino)-3-ri-(2-trifluo- rometil-fenil)-ciclobutil]-propan-2-ona oxima

<formula>formula see original document page 21</formula>

Uma solução de 29 mg de 4-metil-6-{2-oxo-3-[1-(2-trifluorometil- fenil)-ciclobutil]-propilamino}-benzo[d][1,2]oxazin-1-ona em EtOH (8 ml) foi tratada com 1 ml de uma solução de NH2OH HCl a 50% em H2O e NaOAc (15 mg). A solução foi aquecida ao refluxo por duas horas e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (10%-40% de EtOAc-hexano) para dar 2 mg de produto.

1H-RMN (DMSO), δ 7,85(dd, 1H), 7,6(m, 1H), 7,52(d, 1H), 7,32(tt, 1H), 7,23(dd, 1H), 6,92(dd, 2H), 3,69*(d, 2H), 3,42*(d, 2H), 2,78(s, 2H), 2,55(m, 4H), 2,37(s, 3H), 2,0(m, 1H), 1,75(m, 1H). * dois picos distin- guíveis para rotâmeros diferentes, em uma proporção de 2:1. MS (ei): M(+)+H=446

Exemplo 3: 1 -(3-Oxazol-5-il-fenilamino)-3-í1 -(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil1- propan-2-ona oxima

Precursores

4-Nitro-N-(3-oxazol-5-il-fenil)-benzenossulfonamida

Uma solução de 3-oxazol-5-il-fenilamina (0,5 g, 3,1 mmols) e clo- reto de 4-nitro-benzenóssulfonila (0,91 g, 4,1 mmols) em piridina (20 ml) foi agitada durante um fim-de-semana à temperatura ambiente. O resíduo foi distribuído entre EtOAc e H2O. A camada orgânica foi separada, lavada du- as vezes com H2O e uma vez com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca e concentrada por evaporação. O resíduo foi purificado por cro- matografia em coluna de sílica-gel (5%-15% EtOAc-hexano) para dar 0,63 g de produto.

1H-RMN (DMSO), δ 8,47(s, 1H), 8,39(d, 2H), 8,04(d, 2H), 7,67(s, 1H), 7,48(m, 2H), 7,38(t, 1H), 7,1 (d, 1H) MS (ei): M(+)+H=346 1 -Metanossulfonil-4-nitro-benzeno1 -(3-oxazol-5-il-fenilamino)-3-f 1 -(2-trifluo- rometil-fenil)-ciclobutin-propan-2-ona

Uma solução de 0,14 g (0,41 mmol) de 4-nitro-N-(3-oxazol-5-il- fenil)-benzenosulfonamida em 2 ml de DMF em uma atmosfera de nitrogênio foi agitada com NaH (15 mg de dispersão em óleo a 60%, 0,39 mmol) à temperatura ambiente por duas horas. 0,15 g (0,045 mmol) de 1-bromo-3-[1- (2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propan-2-ona foi adicionado. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por uma noite. A mistura reacional foi distri- buída entre EtOAc e H2O. A camada orgânica foi separada, lavada duas vezes com H2O, seca e concentrada por evaporação. O resíduo foi purifica- do por cromatografia em coluna de sílica-gel (5%-20% de EtOAc-hexano) para dar 162 mg de produto como um sólido branco.

1H-RMN (CDCI3)1 δ 8,25(d, 2H), 7,93(s, 1H), 7,71 (d, 2H), 7,59(td, 1H), 7,53(dd, 1H), 7,32(m, 2H), 7,28(d, 1H), 7,03(m, 2H), 6,92(d, 2H), 3,9(b,2H), 3,03(s, 2H), 2,48(t, 4H), 2,08(m, 1H), 1,8(m, 1H). MS (ei): M(+)+H=600

1-(3-Oxazol-5-il-fenilamino)-3-f1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutin-propan-2- ona

Uma mistura de 1-metanossulfonil-4-nitro-benzeno-1-(3-oxazol- 5-il-fenilamino)-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propan-2-ona (160 mg, 0,27 mmol), PhSH (0,082 ml, 0,8 mmol), K2CO3 (149 mg, 1,08 mmol), MeCN (10 ml) e DMSO (0,25 ml) foi aquecida até o refluxo por 30 minutos. A mistu- ra reacional foi distribuída entre EtOAc e H2O. A camada orgânica foi sepa- rada, lavada duas vezes com H2O, seca e concentrada por evaporação. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (5%-15% de EtOAc-hexano) para dar 43,7 mg de produto.

1H-RMN (CDCI3), δ 8,27(d, 1H), 7,66(d, 1H), 7,38(d, 1H), 7,2(m, 3H),7,08(td, 1H), 6,79(t, 1H), 6,45(m, 2H), 4,52(t, 1H), 3,45(b, 2H), 3,13(s, 2H), 2,57(m, 4H), 2,14(m, 1H), 1,87(m, 1H). MS (ei): M(+)+H=415, M(+)- H=413,

1-(3-Oxazol-5-il-fenilamino)-3-ri-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutin-propan-2- ona oxima

<formula>formula see original document page 23</formula>

foi obtida de maneira análoga ao Exemplo 1 a partir de 1-(3-oxazol-5-il- fenilamino)-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propan-2-ona. 1H-RMN (CDCI3), δ 7,88(s, 1Η), 7,7(t, 1H), 7,05-7052(m, 5H), 6,98(m, 1H), 6,67(m, 1H), 6,35(t, 1H), 3,46(b, 2H), 2,86(s, 2H), 2,57(m, 4H), 2,28(m, 1H), 2,08(m, 1H). MS (ei): M(+)+H=430

Exemplo 4: 1 -(4-Oxazol-5-il-fenilamino)-3-[1 -(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propan-2-ona oxima

Precursores

4-Nitro-N-(4-oxazol-5-il-fenil)-benzenossulfonamida foi obtida de maneira análoga a 4-nitro-N-(3-oxazol-5-il-fenil)-benzenossulfonamida com o uso de 4-oxazol-5-il-fenilamina e cloreto de 4-nitro-benzenossulfonila.

MS (ei): M(+)+1=346

1-Metanossulfonil-4-nitro-benzeno1-(4-oxazol-5-il-fenilamino)-3- [1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propan-2-ona foi obtida de maneira análo- ga a 1-metanossulfonil-4-nitro-benzeno1-(3-oxazol-5-il-fenilamino)-3-[1-(2- trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propan-2-ona com o uso de 4-nitro-N-(4-oxazol- 5-il-fenil)-benzenossulfonamida e 1-bromo-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)- ciclobutil]-propan-2-ona.

1H-RMN (CDCI3)1 δ 8,24(d, 2H), 7,95(s, 1H), 7,69(d, 2H), 7,27- 7,58(m, 4H), 6,93-7,18(m, 5H), 3,90(b, 2H), 3,04(s, 2H), 2,48(m, 4H), 2,10(m, 1H), 1,81(m, 1H). MS (ei): M(+)+H=600

1 -(4-Oxazol-5-il-fenilamino)-3-[1 -(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propan-2-ona foi obtida de maneira análoga a 1-(3-oxazol-5-il-fenilamino)-3- [1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propan-2-ona.

1H-RMN (CDCI3), δ 7,81(s, 1H), 7,63(t, 1H), 7,5(m, 1H), 7,4(d, 2H), 7,1-7,3(m, 3H), 6,4(d, 2H), 4,53(b, 1H), 3,42(b, 2H), 3,12(s, 2H), 2,57(m, 4H), 2,13(m, 1H), 1,85(m, 1H). MS (ei): M(+)+H=415

1-(4-Oxazol-5-il-fenilamino)-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propan-2-ona oxima <formula>formula see original document page 25</formula>

foi obtida de maneira análoga a 1-(3-oxazol-5-il-fenilamino)-3-[1-(2- trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propan-2-ona oxima.

1H-RMN (CDCI3)1 δ 7,78(s, 1H), 7,68(t, 1H), 7,55(m, 1H), 7,45(m, 1H), 7,38(d, 2H), 7,32(m, 1H), 7,18(m, 1H), 6,37(d, 2H), 3,42(b, 1H), 3,15*(s, 2H), 2,82*(s, 2H), 2,52(m, 4H), 2,22(m, 1H), 2,05(m, 1H), 1,81(m, 2H) *mistura de syn e anti, a proporção é cerca de 1:1. MS (ei): M(+)+H=430

Exemplo 5: N-(4-Oxazol-5-il-fenil)-2-oxo-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propionamida

Precursores

1-(2-Trifluorometil-fenil)-ciclobutanocarbonitrila

Uma solução de 12,6 g de (2-trifluorometil-fenil)-acetonitrila e 7,6 ml de 1,2-dibromopropano em 36 ml de éter foram adicionados lentamente através de um funil conta-gotas a uma suspensão de 3,62 g de hidreto de sódio em 85 ml de DMSO a 0°C. Depois da adição, o banho de água gelada foi deixado esquentar até a temperatura ambiente lentamente e a mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente por uma noite. A reação foi cautelosamente resfriada bruscamente com isopropila e H2O. A suspensão ficou límpida. A camada orgânica foi separada, e a camada aquosa foi extra- ída duas vezes com éter. Os extratos orgânicos combinados foram combi- nados, secos e concentrados por evaporação a vácuo. O resíduo foi purifi- cado por cromatografia em coluna de sílica-gel (EtOAc-hexano a 2%-4%) para dar 8,5 g de produto como um sólido branco.

1H-RMN (CDCI3), δ 7,72 (dd, 1H), 7,58(t, 1H), 7,45(, 1H), 7,33(d, 1H) 2,92(m, 2H), 2,71(m, 2H), 2,54(m, 1H), 1,96(m, 1H).

1-(2-Trifluorometil-fenil)-ciclobutanocarbaldeido

50,7 ml de hidreto de di-isobutilalumínio foram adicionados em gotas durante duas horas a uma solução de 8,5 g de 1 -(2-trifluorometil-fenil)- ciclobutanocarbonitrila em 85 ml de tolueno a 0°C. Depois da adição, o ba- nho de água gelada foi deixado esquentar até a temperatura ambiente len- tamente e a mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente por uma noite. A mistura reacional foi despejada em 200 ml de ácido sulfúrico a 5% em água gelada, e agitada por 10 minutos. A mistura foi extraída quatro ve- zes com éter. Os extratos etéreos combinados foram secos e concentrados por evaporação a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em colu- na de sílica-gel (EtOAc-hexano a 5%) para dar 6,2 g de produto. 1H-RMN (CDCI3), δ 9,7(s, 1H), 7,68(d, 1H), 7,57(t, 1H), 7,4(t, 1H),

7,27(d, 1H), 2,77(m, 2H), 2,62(m, 2H), 2,12(m, 1H), 1,87(m, 1H) Éster etílico do ácido 2-etóxi-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutin-acrílico

4,4 Ml (11 mmols) n-butillítio foram adicionados em gotas a uma solução de 1,28 ml (9,2 mmols) de di-isopropilamina em 25 ml de THF a O0C e agitados por mais 30 minutos a 0°C. Em seguida 1,97 g (7,4 mmols) de fosfonato, éster etílico do ácido (dietóxi-fosforil)-etóxi-acético foi adicionado em gotas e agitado por mais 20 minutos a 0°C. 1,4 g (6,1 mmols) de 1-(2-tri- fluorometil-fenil)-ciclobutanocarbaldeído em 5 ml de THF foi adicionado em gotas a 0°C. O banho de água gelada foi deixado esquentar até a tempera- tura ambiente lentamente e a mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente por um fim-de-semana. A reação foi resfriada bruscamente com cloreto de amônio aquoso saturado. A mistura resultante foi extraída com EtOAc. A solução de EtOAc foi levada com solução aquosa saturada de clo- reto de sódio, seca e concentrada por evaporação a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (EtOAc-hexano a 3%) para dar 0,61 g de produto.

1H-RMN (CDCI3) δ 6,93-7,61(m, 3H), 7,27(q, 1H), 6,75*( d, 1H), 5,77*(d, 1H)3,92(q, 2H), 3,79(q, 2H), 2,42-2,73(m, 4H), 2,07(m, 1H), 1,78(m, 1H)1,32(t, 3H), 1,11(t, 3H). *mistura de syn e anti, a proporção é cerca de 2:1.

Ácido 2-etóxi-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutin-acrílico

4,6 G de éster etílico do ácido 2-etóxi-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)- ciclobutilj-acrílico, 4,3 g de hidróxido de sódio, 100 ml de EtOH e 50 ml de água (etanol-água 2:1) foram misturados e agitados por duas horas à tem- peratura ambiente. O solvente foi evaporado a vácuo, o resíduo foi distribuí- do entre água e EtOAc1 e a solução aquosa foi acidificada com ácido clorí- drico a 1 N, e extraída com EtOAc. Os extratos de EtOAc foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos e concentrados por evaporação a vácuo. 4,3 g de produto foram obtidos e usados na reação seguinte sem purificação posterior.

1H-RMN (CDCI3), δ 7,629 (d, 1H), 7,42(q, 1H), 7,28(q, 1H), 7,18(t, 1H), 6,87(b, 1H), 3,97(q, 2H), 2,55(m, 4H), 2,12(m, 1H), 1,85(m, 1H), 1,17(t, 3H).

Ácido 2-oxo-3-f1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutill-propiônico 4,6 g de ácido 2-etóxi-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- acrílico foram agitados em 100 ml de ácido sulfúrico a 1 M e 15 ml de ácido acético concentrado por uma noite a 100°C. Água foi adicionada, extraída com EtOAc, e a solução de EtOAc foi seca e concentrada por evaporação a vácuo. O produto (4,1 g) foi obtido como um óleo marrom.

1H-RMN (CDCI3), δ 7,62( d,1H), 7,42(t, 1H), 7,3(d, 1H), 7,22(d, 1H), 3,56(s, 2H), 2,57(m, 4H), 2,15(m,1H), 1,85(m, 1H). MS (ei): M(+)-H=285

N-(4-oxazol-5-il-fenil)-2-oxo-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propionamida

0,1 g de ácido 2-oxo-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propiônico em 2 ml de dimetil acetamida a -5°C, e agitado por 30 minutos a -5°C. Em seguida 56 mg de 4-oxazol-5-il-fenilamina foram adicionados em forma sólida e agi- tados por uma hora à temperatura ambiente. Carbonato de potássio foi adi- cionado e agitado por uma noite à temperatura ambiente. A reação foi res- 0,052 M1 de cloreto de tionila foi adicionado a uma solução de friada bruscamente com água e extraída com EtOAc. Os extratos de EtOAc combinados foram lavados duas vezes com água, secos e concentrados por evaporação. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica- gel (EtOAc-hexano a 10%-20%) para dar 63 mg de produto.

1H-RMN (CDCI3)1 δ 7,83(d, 2H), 7,62(s, 1H), 7,15(s, 1H), 6,77(d, 2H), 3,92(b, 2H). MS (ei): M(+)+H=161

Exemplo 6: N-(3-lsoxazol-5-il-feniD-2-oxo-3-[1 -(2-trifluorometil-fenil)-ciclobu- till-propionamida

<formula>formula see original document page 28</formula>

foi obtida de maneira análoga à N-(4-oxazol-5-il-fenil)-2-oxo-3-[1-(2- trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propionamida com o uso de ácido 2-oxo-3-[1 -(2- trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propiônico e 3-isoxazol-5-il-fenilamina.

1H-RMN (CDCI3) δ 8,62(s,1H), 8,0(d, 2H), 7,7(s, 1H), 7,6(m, 3H), 7,39(t, 1H), 7,27(m, 2H), 3,68(s, 2H), 2,58(m, 4H), 2,16(m,1H), 1,86(m, 1H). MS (ei): M(+)+H=429, M+-H=427

Exemplo 7: Formulações

Preparações farmacêuticas para distribuição por várias vias são formuladas da maneira mostrada nas Tabelas a seguir. "Componente ativo" ou "composto ativo" conforme usado nas Tabelas significa um ou mais dos compostos de fórmula I.

Composição para administração oral

<table>table see original document page 28</column></row><table>

Os componentes são misturados e dispensados em cápsulas contendo cerca de 100 mg cada; uma cápsula é aproximadamente a dosa- gem diária total. Composição para administração oral

<table>table see original document page 29</column></row><table>

Os componentes são combinados e granulados usando um sol- vente tal como metanol. A formulação é então seca e transformada em comprimidos (contendo cerca de 20 mg de composto ativo) com uma má- quina de fazer comprimidos apropriada.

Composição para administração oral

<table>table see original document page 29</column></row><table>

Os componentes são misturados para formar uma suspensão para administração oral.

<table>table see original document page 29</column></row><table> O componente ativo é dissolvido em uma porção da água para injeção. Uma quantidade suficiente de cloreto de sódio é então adicionada com agitação para a solução ficar isotônica. A solução completada até o pe- so com o restante da água para injeção, filtrada através de um filtro- membrana de 0,2 mícron e acondicionada em condições estéreis.

Formulacao para supositorio

<table>table see original document page 30</column></row><table>

Os componentes são derretidos e misturados em um banho vapor, e despejados em formas contendo um peso total de 2,5 g. Formulação tópica <table>table see original document page 30</column></row><table>

Todos os componentes, exceto a água, são combinados e aque- cidos até cerca de 60°C com agitação. Uma quantidade suficiente de água a cerca de 60°C é então adicionada com agitação vigorosa para emulsificar os componentes, e água é então adicionada q.s. cerca de 100 g.

Formulações para sprav nasal

Diversas suspensões aquosas contendo de cerca de 0,025 - 0,5% de composto ativo são preparadas como formulações para spray na- sal. As formulações opcionalmente contêm componentes inativos tais como, por exemplo, celulose microcristalina, carboximetilcelulose sódica, dextrose, e similares. Ácido clorídrico ou hidróxido de sódio pode ser adicionado para ajustar o pH. As formulações para spray nasal podem ser distribuídas por meio de um bomba de spray nasal regulada distribuindo tipicamente cerca de 50 - 100 μΙ de formulação por acionamento. Um programa de dosagem típico é 2 - 4 sprays a intervalos de 4 -12 horas.

Exemplo 8: Ensaio de ligação do receptor de glicocorticoide

A afinidade de antagonistas do receptor de glicocorticoide para o receptor de glicocorticoides foi determinada em ensaios de ligação competitiva pela capacidade do antagonista para competir com dexametasona tritiada.

Todas as etapas do ensaio foram realizadas em gelo em placas de 96 poços. O tampão de ligação continha fosfato de potássio a 10 mM pH 7,4, Na2Mo4 a 20 mM, EDTA a 100 μΜ, 2% de DMSO, e 5 mM de DTT. O receptor de glicocorticoide recombinante humano purificado foi usado a 1 nM. Os com- postos testados tinham uma concentração final de até 2% de DMSO. A condi- ção de ligação inespecífica foi de dexametasona a 1 μΜ. O radioligante usado para o ensaio de competição foi 3H-dexametasona a 2 nM (83 Ci/mmol de solu- ção de estoque). Tampão, compostos ou veículos, GR, e radioligante foram incubados a 4°C por uma noite. Placas-filtro de 96 poços Unifilter GF/B foram tratadas com 0,5% de PEI depois da incubação. As amostras foram transferidas para as placas-filtro por uma ceifeira de células. As placas-filtro foram lavadas cinco vezes com o tampão de lavagem Tris a 50 mM pH 7,5 e EDTA a 5 mM. As amostras foram secas a 65°C por cerca de uma hora. Fluido de cintilação foi adicionado às placas-filtro a 50 μΙ/poço e 3H cpm foram medidos no contador de cintilação TopCount. Os resultados do ensaio de ligação de diversos compostos da presente invenção estão mostrados na Tabela 1.

Tabela 1

<table>table see original document page 31</column></row><table> Exemplo 9: Atividade transrepressão: Inibição da produção de citocina em células mononucleares do sangue periférico humano estimuladas com LPS

Sangue é coletado de voluntários humanos saudáveis por veni- puntura em tubos heparinizados. O sangue é diluído 1:1 com solução salina tamponada com fosfato da Dulbecco (PBS) e depositado em camadas sobre Histopaque-1,077 em tubos-centrífuga de 50 ml. Os tubos são centrifugados a 800 χ g por 25 minutos à temperatura ambiente. As células mononuclea- res na interface plasma/Histopaque são recolhidas, lavadas três vezes com PBS, e ressuspensas a 1 χ 10^6 células/ml no meio RPMI 1640 suplementa- do com 10% de soro bovino fetal (FBS) e 100 unidades/ml de penicilina/100 μg/ml de estreptomicina. Alíquotas (250 μl) desta suspensão de células são pré-incubadas com compostos a várias diluições (a concentração final de DMSO é 0,5%) em placas de polipropileno estéreis por 30 minutos a 37°C, 5% a CO2. LPS é adicionado a 1 ng/ml e as placas são novamente coloca- das na incubadora por mais três horas. Alíquotas do meio são removidas e congeladas a -80°C. Os níveis de citocina (TNFa, IL6 e IL8) nestas amostras são determinados usando os kits BD-Pharmingen OptEIA de acordo com as instruções do fabricante. A IC50 é definida como a concentração de com- posto que diminui a produção de citocina em resposta a 1 ng/ml de LPS pa- ra 50% daquela nos poços de controle sem os compostos da invenção.

Exemplo 10: Atividade de transativação: atividade de tirosina aminotransfe- rase em células de fígado de rato

Células de hepatoma de rato H4IIE são plaqueadas (4 χ 105 cé- lulas/ml em uma placa de 24 poços) em cDMEM suplementado com 10% de FBS e incubado por 24 horas a 37°C, 5% de CO2 Compostos a várias dilui- ções (a concentração final de DMSO é 0,5%) são adicionados e as placas são incubadas por mais 24 horas. O meio é removido, a monocamada de células é lavada cautelosamente uma vez com PBS, e 0,2 ml de tampão de lise de células (Tris a 10 mM pH 7,5, EDTA a 10 mM, sacarose a 0,25M) é adicionado. As placas podem ser guardadas a -70°C. As células são Iisadas por congelamento e descongelamento 3 vezes; os Iisados são clarificados por centrifugação por 5 minutos. 40 μl/poço de p-hidroxibenzaldeído como referência, tampão de controle, ou alíquotas de Iisado são adicionados a uma placa de 96 poços limpa. 20 μl/poço de tampão TAT (KH2PO4 a 50 mM pH 7,6, 5 mg/ml de BSA, EDTA a 1 mM, DTT a 0,1 mM) são adicionados, seguidos de 140 μl/poço de mistura de ensaio (solução de tirosina a 8,2 mM, KH2PO4 a 0,125 M, α-cetoglutarato a 20 mM, 5-fosfato de piridoxal a 0,3 mM). As reações são incubadas a 37°C por 15 minutos, e interrompidas pela adição de 20 μl/poço de KOH a 7 N, seguida da incubação a 37°C no escuro por 30 minutos. A formação de produto é monitorada pela absorvência a 340 nm, e é expressa como nmols/min/mg de proteína, calculada a partir da cur- va-padrão de p-hidroxibenzaldeído. A EC50 para cada composto é definida como a concentração de composto resultante em 50% da indução máxima de TAT para aquele composto.

Claims (9)

1. Composto caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula I <formula>formula see original document page 34</formula> em que: A é CH2 ou C=O; R1 é H ou C1-C6 alquila; R2 e R3 são cada um independentemente H1 CF3, NO2 ou um anel heteroarila de cinco membros opcionalmente substituído; ou R2 e R3 juntos formam um anel heteroarila de seis membros substituído com 0-2 substituintes selecionados do grupo que consiste em C1-C6 alquila e oxo, com a condição de que quando R2 e R3 juntos formarem um anel oxazolinila, A é CH2; X é O ou N-OR41 em que R4 é H ou C1-C6 alquila; e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe- Lo fato de que A é CH2 e R1 é H.

3. Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pe- lo fato de que R2 é selecionado do grupo consistindo em oxazolila, isoxazoli- la, oxadiazolila e tetrazolila.

4. Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pe- lo fato de que R2 e R3 juntos formam um anel oxazolinila substituído por 0-2l substituintes selecionados do grupo consistindo em C1-C6 alquila e oxo.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe- lo fato de que é selecionado do grupo consistindo em -6-{2-hidróxi-imino-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propilami- no}-4-metil-benzo[d][1,2]oxazin-1-ona; -4-metil-6-{2-oxo-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]-propilami- no}-benzo[d][1,2]oxazin-1-ona; -1-(4-isoxazol-5-il-fenilamino)-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propan-2-ona oxima; -1-(3-isoxazol-5-il-fenilamino)-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propan-2-ona oxima; -1-(3-oxazol-5-il-fenilamino)-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propan-2-ona oxima; -1-[3-(1H-tetrazol-5-il)-fenilamino]-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclo- butil]-propan-2-ona oxima; -1-(4-oxazol-5-il-fenilamino)-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propan-2-ona oxima; -2-etóxi-imino-N-(4-oxazol-5-il-fenil)-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)- ciclobutil]-propionamida; N-(4-isoxazol-5-il-fenil)-2-oxo-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobu- til]-propionamida; N-(3-isoxazol-5-il-fenil)-2-oxo-3-[1-(2-trifluorometil-fenil)-ciclobu- til]-propionamida; e N-(4-oxazol-5-il-fenil)-2-oxo-3-[1 -(2-trifluorometil-fenil)-ciclobutil]- propionamida.

6. Método para tratar uma doença inflamatória através da modu- lação de um receptor de glicocorticoide, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um indivíduo com necessidade do mesmo um composto de fórmula I, como definido na reivindicação 1, ou sais farmaceu- ticamente aceitáveis do mesmo.

7. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade eficaz de composto de fórmula I, como defini- do na reivindicação 1, ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo; e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

8. Uso de um composto de fórmula I, como definido na reivindi- cação 1, ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um medicamento para o tratamento de uma doença inflamatória através da modulação de um receptor de glico- corticoide.

9. Invenção como descrita acima.