BRPI0619955A2

BRPI0619955A2 - derivados tricìclicos da lactama, sua produção e seus usos como agentes farmacêuticos

Info

Publication number: BRPI0619955A2
Application number: BRPI0619955-0A
Authority: BR
Inventors: Guy Georges; Bernhard Goller; Hans-Willi Krell; Anja Limberg; Ulrike Reiff; Petra Rueger; Matthias Rueth; Christine Schuell; Mark Stahl
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 2005-12-15
Filing date: 2006-12-13
Publication date: 2011-10-25
Also published as: AU2006326247A1; JP2009519279A; US20090143375A1; EP1966213A1; CA2631034A1; CN101321762A; KR20080063833A; IL190675A0; WO2007068465A1

Abstract

DERIVADOS TRICìCLICOS DA LACTAMA, SUA PRODUçãO E SEUS USOS COMO AGENTES FARMACêUTICOS. A presente invenção refere-se aos compostos de acordo com a Fórmula (I), seus sais farmaceuticamente aceitáveis, suas formas enancioméricas, seus diastereoisómeros e seus racematos, a preparação dos compostos acima mencionados, os medicamentos contendo os mesmos e sua produção, bem como o uso dos compostos acima mencionados no controle ou na prevenção de doenças tais como o câncer.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERIVADOS TRICÍCLICOS DA LACTAMA, SUA PRODUÇÃO E SEUS USOS COMO AGENTES FARMACÊUTICOS".

A presente invenção refere-se aos novos derivados tricíclicos da lactama como inibidores da quinase de proteínas, a um processo para sua produção, as composições farmacêuticas contendo os mesmos e a sua pro- dução, assim como ao uso desses compostos como agentes farmaceutica- mente ativos.

Antecedentes da presente invenção.

As quinases de proteína regulam muitos processos de sinaliza- ção diferentes pela adição de grupos fosfato às proteínas (Hunter, T., Cell 50 (1987) 823-829); particularmente proteínas fosforiladas das quinases das serina/treonina em um meio alcoólico de resíduos de serina ou de treonina. A família da quinase das serina/treonina inclui os membros que controlam o crescimento da célula, a migração, a diferenciação, a expressão de genes, a contração do músculo, o metabolismo da glicose, a síntese da proteína celu- lar, e a regulação do ciclo celular.

As quinases Aurora são uma família das quinases das seri- na/treonina que são consideradas como desempenhando um papel-chave nos eventos de fosforilação da proteína que são essenciais para a conclusão de eventos mitóticos essenciais. A família da quinase Aurora é composta de três membros chave: Aurora A, Aurora B e Aurora C (conhecidos também como a Aurora-2, Aurora-1 e Aurora-3, respectivamente). Aurora-1 e Aurora- 2 são descritas na US 6.207.401 de Sugen e nas patentes e nos pedidos de patente relacionados como, por exemplo, EP 0 868 519 e EP 1 051 500.

Para a Aurora A existe uma evidência cada vez maior de que se trata de um novo onco-gene. O gene Aurora A é uma proteína amplificada e transcrita que é altamente expressada em grande parte das linhagens de células tumorais humanas e câncer colorretal primário, câncer de mama e outros tumores. Foi mostrado que a sobre-expressão da Aurora A conduz à instabilidade genética mostrada por centrossomas amplificados e pelo au- mento significativo das células aneuplóides e dos fibroblastos Ratl transfor- mados e de células NIH3T3 de rato, in vitro. As células NIH3T3 transforma- das da Aurora A crescem como tumores em ratos pelados (Bischoff, J.R., e Plowman, G. D., Trends Cell BioL 9 (1999) 454-459; Giet, R., e Prigent, C, J. Cell Sei. 112 (1999) 3591-3601; Nigg, E.A., Nat. Rev. MoL CelIBiol. 2 (2001) 21-32; Adams1 R.R., et al., Trends Cell Biol. 11 (2001) 49-54). Além disso, a amplificação da Aurora A está associada com a célula aneuplóide e o com- portamento clínico agressivo (Sen, S., et al., J. Natl Câncer Inst. 94 (2002) 1320-1329) e a amplificação de seu Iocus se correlaciona com o fraco prog- nóstico para pacientes com câncer de mama com nodo negativo (Isola, JJ., et al., Am. J. Pathology 147 (1995) 905-911). Por essas razões propõe-se que a sobreexpressão da Aurora A contribua para o fenótipo do câncer es- M tando envolvida na segregação do cromossoma e no controle do ponto de verificação mitótico.

As linhagens de células tumorais humanas esgotam a retenção dos transcritos da Aurora A durante a mitose. Desse modo, a inibição espe- cífica da quinase Aurora por inibidores seletivos é reconhecida por parar a proliferação descontrolada, para reestabelecer o controle do ponto de verifi- cação mitótico e para levar à apoptose das células do tumor. Em um modelo de xenoenxerto, um inibidor da Aurora retarda desse modo o crescimento do tumor e induz a sua regressão (Harrington, E.A., et al., Nat. Med. 10 (2004) 262-267).

Os inibidores de baixo peso molecular para quinases de proteína são amplamente conhecidos no estado da técnica. Para a inibição da Aurora tais inibidores são baseados, por exemplo, nos derivados da quinazolina (por exemplo, o WO 00/44728), nos derivados da pirimidina (por exemplo, WO 03/077921), nos derivados do oxazol e do tiazol (por exemplo, WO 02/96905 ou WO 04/005283).

Os inibidores da quinase Aurora à base dos derivados do pirazol são descritos, por exemplo, nos WO 02/22601; WO 02/22602; WO 02/22603; WO 02/22604; WO 02/22605; WO 02/22606; WO 02/22607; WO 02/22608; WO 02/50065; WO 02/50066; WO 02/057259; WO 02/059111; WO 02/062789; WO 02/066461; WO 02/068415 ou WO 2005/002552. O WO 03/035065 se refere aos derivados do benzoimidazol co- mo inibidores da quinase, especialmente como inibidores contra o domínio de inserção da quinase contendo o receptor da quinase da tirosina (KDR), a quinase da tirosina do esplênico (SYK) e a quinase indutível da célula T (ITK).

Alguns compostos tricíclicos são conhecidos como inibidores da agregação de eritrócito a partir da US 4.835.280A e da US 4.954.498A. Também Mertens, A., et al., no J. Med. Chem. 30 (1987) 1279-1287; von der Saal, W., et al., J. Med. Chem. 32 (1989) 1481-1491; a US 4.666.923A; a US 4.695.567A e a US 4.863.945A descrevem tricíclicos relacionados como ini- bidores da agregação de eritrócito. A US 5.212.186A descreve tricíclicos pa- ra o tratamento da insuficiência cardíaca, da hipertensão e de outras doen- ças. O WO 2006/032519 e o WO 2006/063841 se referem aa pirazolila ben- zoimidazol e aos derivados tricíclicos heterocíclicos do imidazol como agen- tes antitumor.

Sumário da Invenção

A presente invenção se refere aos derivados tricíclicos do ami- nopirazol de acordo com a Fórmula geral I,

<formula>formula see original document page 4</formula>

Fórmula I

Em que:

R1, é alquila, que é substituída uma ou várias vezes por halogênio, nitro, cia- no, hidróxí, amino, heterociclila, -C(O)OH, -C(O)NH2 ou -Y-R6; ou é alqueni- la, que é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por halogênio, ni- tro, ciano, hidróxi, amino, -C(O)OH, -C(O)NH2 ou -Y-R6; ou

É alquinila, que é opcionalmente substituída uma ou várias ve- zes por halogênio, nitro, ciano, hidróxi, amino, -C(O)OH, -C(O)NH2 ou -Y-R6; Y é -C(O)NH-, -C(0)N(alquila)-, -N(alquila)C(0)-, -NHC(O)-, -NHC(O)NH-, - NHC(0)N(alquila)-, -NHS(O)2-, -S(O)2NH-, -S(0)2N(alquila)-, -S(O)2-, -S(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-, -P(0)(alquila)-, -NH-, -N(alquila)-, -O- ou -S-; R6 é alquila, em que a dita alquila é opcionalmente substituído uma ou várias vezes por halogênio, hidróxi, alcóxi, alcoxialcóxi, amino, alquilamino, dialqui- lamino, -C(O)OH ou -C(O)NH2;

É -(CH2)n-arila, em que a arila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por halogênio, ciano, nitro, amino, hidróxi, alquila(C1-C4), alcóxi(C1- C4), alquila(C1-C4)halogenado ou alcóxi(C1-C4)halogenada; heteroarila, em que a heteroarila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por alqui- la; cicloalquila; ou heterociclila; n é O, 1 ou 2;

M R2 é hidrogênio ou alquila;

R3 é hidrogênio ou alquila; ou alternativamente R2 e R3 formam juntamente com o átomo de carbono ao qual estão unidos um anel de cicloalquila; R4 é hidrogênio ou alquila;

R5 é hidrogênio, alquila, alquila halogenado ou cicloalquila; X é uma ligação simples, -CH2- ou -C(alquila)2-; e todos os sais farmaceuti- camente aceitáveis dos mesmos.

Os compostos de acordo com a presente invenção mostram ati- vidade como inibidores da quinase de proteínas. Muitas doenças estão as- sociadas com as respostas celulares anormais provocadas por eventos me- diados pela quinase de proteínas. Essas doenças incluem as doenças auto- imunes, as doenças inflamatórias, as doenças neurológicas e neurodegene- rativas, o câncer, as doenças cardiovasculares, as alergias e a asma, o Mal de Alzheimer ou as doenças relacionadas com hormônios. Desse modo, houve um esforço substancial na química dos medicamentos para encontrar inibidores das quinases de proteínas que fossem eficazes em agir como a - gentes terapêuticos.

Os compostos de acordo com a presente invenção mostram, em particular, atividade como inibidores da quinase da família da Aurora, espe- cialmente como inibidores da quinase Aurora A, e podem conseqüentemente ser úteis para o tratamento das doenças mediadas pela dita quinase. A inibi- ção da Aurora A conduz ao aprisionamento do ciclo celular na fase G2 do ciclo celular e exerce um efeito antiproliferativo nas linhagens das células tumorais. Isto indica que os inibidores da Aurora A podem ser úteis no trata- mento de, por exemplo, doenças hiperproliferativas tais como o câncer e, em particular, do câncer colorretal, do câncer da mama, do câncer do pulmão, do câncer prostático, pancreático, gástrico, da bexiga, ovariano, do melano- ma, do neuroblastoma, do cervical, do câncer dos rins ou renal, das Ieuce- mias, ou dos linfomas. São incluídos o tratamento da leucemia aguda mielo- genosa (AML), da leucemia linfocítica aguda (ALL) e do tumor estromal gas- trointestinal (GIST).

Os objetivos da presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I e os seus tautômeros, seus sais farmaceuticamente aceitá- veis, formas enanciométricas, diastereoisoméricas e racêmicas, seus usos como inibidores da quinase Aurora, a preparação dos compostos acima mencionados, os medicamentos contendo os mesmos e sua produção, as- sim como o uso dos compostos acima mencionados no tratamento, no con- trole ou na prevenção das doenças, especialmente das doenças e dos dis- túrbios, tal como os mencionados acima, como os tumores ou cânceres (por exemplo, colorretal, da mama, do pulmão, prostático, pancreático, gástrico, da bexiga, ovariano, melanoma, neuroblastoma, cervical, câncer dos rins ou renal, Ieucemias ou linfomas) ou na produção de medicamentos correspon- dentes.

Descrição Detalhada da Presente Invenção

O termo "alquila" tal como aqui utilizado significa um hidrocarbo- neto saturado, de cadeia reta ou cadeia ramificada contendo de 1 a 6, prefe- rivelmente de 1 a 4, átomos de carbono, tais como metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, 2-butila, t-butila, n-pentila, n-hexila.

O termo "alquenila" tal como aqui utilizado significa um grupo de hidrocarboneto alifático de cadeia reta ou ramificada insaturada contendo uma dupla ligação e tendo de 2 a 6, preferivelmente de 2 a 4 átomos de car- bono. Os exemplos de tal "grupo alquenila" são vinila (etenila), alila, isopro- penila, 1-propenila, 2-metila-1-propenila, 1-butenila, 2-butenila, 3-butenila, 2- etila-1 -buteniia, 3-metila-2-butenila, 1-pentenila, 2-pentenila, 3-pentenila, 4- pentenila, 4-metila-3-pentenila, 1-hexenila, 2-hexenila, 3-hexenila, 4-hexenila e 5-hexenila, preferivelmente alila.

O termo "alquinila" tal como aqui utilizado significa um grupo de hidrocarboneto alifático de cadeia reta ou ramificada insaturada contendo uma ligação tripla e tendo de 2 a 6, preferivelmente de 2 a 4 átomos de car- bono. Os exemplos de tal do "grupo alquinila" são etinila, 1-propinila, 2- propinila, 1-butinila, 2-butinila, 3-butinila, 1-pentinila, 2-pentinila, 3-pentinila, 4-pentinila, 1-hexinila, 2-hexinila, 3-hexinila, 4-hexinila e 5-hexinila.

O termo "alcóxi" tal como aqui utilizado significa um grupo da alquila-O- em que a alquila é definida tal como acima. Os exemplos incluem, M por exemplo, o metóxi, o etóxi, o isopropóxi, o n-butóxi, o 1-metila-propóxi, o 2-metila-propóxi e similares.

O termo "alcoxialcóxi" tal como aqui utilizado significa um grupa alquila-O-alcóxi em que a alquila e o alcóxi são definidos tal como acima. Os exemplos incluem, por exemplo, 1 metóxi-etóxi, 2-metóxi-etóxi, 2-etóxi-etóxi, 2-propóxi-etóxi, etóxi-metóxi, metóxi-metóxi, e similares.

O termo "alquilamino" tal como aqui utilizado significa um grupa alquila-NH- em que a alquila é definida tal como acima. Os exemplos inclu- em, por exemplo, N-metila-amino, N-etila-amino, N-isopropila-amino, N-(2- metila-propila-1)-amino e similares.

O termo "dialquilamino" tal como aqui utilizado significa um gru- po do (alquila)2N- em que a alquila é definida tal como acima. Os exemplos incluem, por exemplo, Ν,Ν-dimetilamino, N-etila-N-metila-amino, N,N- dietilamino e similares.

O termo "alquila, que é substituída uma ou várias vezes por ha- logênio, nitro, ciano, hidróxi, alcóxi, alcoxialcóxi, amino, heterociclila, - C(O)OH, -C(O)NH2 ou -YR6", tal como aqui utilizado significa uma alquila tal como definida acima que é substituída de uma a seis vezes, preferivelmente de uma a três vezes, por halogênio, preferivelmente pelo flúor ou pelo cloro, especialmente pelo flúor, ou que é substituído de uma a três vezes, preferi- velmente de uma a duas vezes, especialmente uma vez, por nitro, ciano, hidróxi, alcóxi, alcoxialcóxi, amino, alquilamino, dialquilamino, -C(O)OH, - C(O)NH2 ou -Y-R6. Os exemplos de tais grupos alquila substituídos são di- fluorometila, trifluorometila, 2,2,2-trifluoroetila, perfluoretila, difluorometóxi, trifluorometóxi, 2,2,2-trifluoroetóxi, perfluoroetóxi, 2-hidróxi-butila, 2-hidróxi- etila, 2-hidróxi- propila, 3-hidróxi-butila, 2,3-diidróxi-propila, 2,3-diidróxi-butila, 1,2,3-triidróxi-propila, 2-hidróxi-pentila, 2-metóxi-etila, 2-etóxi-etila, 4-metóxi- butila, 2-metóxi-butila, 2-etóxi-propila, 3-propóxi-butila, 2,3-dimetóxi-propila, 2-etóxi-3-metóxi-propila, 2,3-dietóxi-butila, 1,2,3-trimètóxi-propila, 2-metóxi- pentila, 2-(2-metóxi-etóxi)-etila, 2-(2-etóxi-etóxi)-etila, 2-(2-propóxi-etóxi)- etila, 3-(2-metóxi-etóxi)-propila, 3-(1-metóxi-etóxi)-propila, 4-(2-etóxi-etóxi)- butila, 2-amino-butila, 2-amino-etila, 2-amino-propila, 3-amino-propila, 3- amino-butila, 2,3-diamino-propila, 2-metilamino-butila, 2-etilamino-etila, 2- dimetilamino-etila, 2-dimetilamino-propila, 3-dietilamino-propila, 3-amino- butila, 2,3-diamino-propila, preferivelmente, 2,3-diidróxi-propila, 2-metóxi- etila, 2-(2-metóxi-etóxi)-etila, trifluorometila, trifluorometóxi.

O termo "alquenila que é opcionalmente substituído uma ou vá- rias vezes por halogênio, nitro, ciano, hidróxi, alcóxi, alcoxialcóxi, amino, al- quilamino, dialquilamino, -C(O)OH, -C(O)NH2 ou -Y-R6", tal como aqui utili- zado, significa uma alquenila tal como definida acima eu é substituída opcio- nalmente de uma a seis vezes, preferivelmente de uma a três vezes, por halogênio, preferivelmente pelo flúor ou pelo cloro, especialmente pelo flúor, o qual é opcionalmente substituído uma a três vezes, preferivelmente uma a duas vezes, especialmente uma vez por nitro, ciano, hidróxi, alcóxi, alcoxial- cóxi, amino, alquilamino, dialquilamino, -C(O)OH, -C(O)NH2 ou -Y-R6.

O termo "alquinila que é opcionalmente substituída uma ou vá- rias vezes por halogênio, nitro, ciano, hidróxi, alcóxi, alcoxialcóxi, amino, al- quilamino, dialquilamino, -C(O)OH, -C(O)NH2 ou -Y-R6", tal como aqui utili- zado, significa uma alquinila tal como definida acima que é substituída de uma a seis vezes, preferivelmente de uma a três vezes por halogênio, prefe- rivelmente pelo flúor ou pelo cloro, especialmente pelo flúor, ou que é opcio- nalmente substituído uma a três vezes, preferivelmente uma a duas vezes, especialmente uma vez por nitro, ciano, hidróxi, alcóxi, alcoxialcóxi, amino, alquilamino, dialquilamino, -C(O)OH, -C(O)NH2 ou -Y-R6.

O termo "em que a arila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por" tal como aqui utilizado significa que o grupa arila em R6 é opcionalmente substituído de uma a cinco vezes, preferivelmente de uma a três vezes, especialmente de uma a duas vezes.

O termo "em que a heteroarila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por" tal como aqui utilizado significa que o grupa heteroarila em R6 é opcionalmente substituído onde possível, de uma a três vezes, pre- ferivelmente uma vez.

O termo "alquila halogenado" tal como aqui utilizado significa um grupa alquila, tal como definido acima, que é substituído de uma ou várias vezes, preferivelmente de uma a seis e especialmente uma a três vezes, por halogênio, preferivelmente pelo flúor ou pelo cloro, especialmente pelo flúor. Os exemplos são difluorometila, trifluorometila, 2,2,2-trifluoroetila, perfluoreti- la, e similares, especialmente trifluorometila.

O termo "alcóxi halogenado" tal como aqui utilizado significa um grupo alcóxi tal como definido acima que é substituído uma ou várias vezes por halogênio, preferivelmente pelo flúor ou pelo cloro, especialmente pelo flúor. Os exemplos são difluorometóxi, trifluorometóxi, 2,2,2-trifluoroetóxi, perfluoroetóxi e similares, especialmente trifluorometóxi.

O termo "cicloalquila" significa um anel de hidrocarboneto satu- rado monocíclico com 3 a 7, preferivelmente com 3 a 6, átomos no anel. Tais grupos carbocíclicos saturados podem opcionalmente ser substituídos uma ou várias vezes, preferivelmente uma a três vezes por alquila, especialmente uma a duas vezes. Preferivelmente tais grupos carbocíclicos saturados são não substituídos. Os exemplos de tais grupos carbocíclicos saturados são ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila, cicloeptil, 3-metila-ciclopentila, 3,3-dimetila-cicloexila, 3-metila-cicloexila, 2-metila-cicloexila, preferivelmente ciclopropila.

O anel do cicloalquila que é formado por R2 e R3 juntamente com o átomo de carbono ao qual está unido é preferivelmente um anel ciclopenti- la ou um anel cicloexila, especialmente um anel ciclopentila. O anel de ciclo- alquila que é formado por R2 e R3 juntamente com o átomo de carbono ao qual estão ligados é preferivelmente um anel ciclopentila ou um anel cicloexi- la, especialmente um anel ciclopentila.

O termo "heterociclila" significa um anel saturado, monocíclico com os 5 a 7 átomos do anel que contem até 3, preferivelmente 1 ou 2 hete- roátomos selecionados independentemente de Ν, O ou S e os átomos res- tantes do anel sendo átomos de carbono. Tal grupo heterocíclico saturado pode opcionalmente ser substituído uma ou várias vezes, preferivelmente uma ou duas vezes a) por alquila, preferivelmente metila, b) por -C(O)- alquila, preferivelmente acetila, c) por oxo ou d) por -S(0)2-alquila. Os substi- tuintes preferidos são a) alquila ou b) -C(0)-alquila. Os exemplos de tais grupos heterocíclico saturados incluem a pirrolidinila, o morfolinila, o pipera- zinila, o N-metila-piperazinila, o N-acetila-piperazinila, 2-piperazinona, piperi- dila, oxazolidina, tiazolidina, azepano e similares, preferivelmente morfolinila.

O termo "arila" significa um anel aromático monocíclico ou bicí- clico, com 6 a 10 átomos de carbono do anel. Os exemplos de tais grupos arila são fenila e naftila, preferivelmente fenila.

O termo "heteroarila" significa um anel aromático monocíclico ou bicíclico com 5 a 10, preferivelmente 5 a 6, átomos do anel, que contenha até 3, preferivelmente 1 ou 2 heteroátomos selecionados independentemen- te de Ν, O ou S e os átomos restantes do anel sendo átomos de carbono. Os exemplos de tais grupos heteroarila incluem a pirrolila, a imidazolila, a pira- zolila, a triazolila, a tetrazolila, a furanila, a oxazolila, a isoxazolila, a tienila, a tiazolila, a piridila, a pirimidila, a piridazinila, a pirazinila, a indolila, a indazoli- la, a benzimidazolila, a benzotiofenila, a benzofuranila, a quinolila, a isoqui- nolila, a quinazolinila e similares, preferivelmente, piridila.

Tal como aqui utilizado, o termo "veículo farmaceuticamente a- ceitável" se destina a incluir todo e qualquer material compatível com a ad- ministração farmacêutica incluindo solventes, meios de dispersão, revesti- mentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes isotônicos e de re- tardamento da absorção, e outros materiais e compostos e compatíveis com a administração farmacêutica. Exceto quando qualquer meio ou agente con- vencional seja incompatível com o composto ativo, o uso dos mesmos é con- templado nas composições de acordo com apresente invenção. Os compos- tos ativos suplementares também podem ser incorporados nas composi- ções.

Tal como aqui utilizado, o termo "uma quantidade terapeutica- mente eficaz" de um composto significa uma quantidade de composto que é eficaz para impedir, aliviar ou melhorar sintomas da doença ou prolongar a sobrevivência do paciente que esteja sendo tratado. A determinação de uma quantidade terapeuticamente eficaz está incluída nas habilidades da técnica.

A quantidade ou a dosagem terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a presente invenção podem variar dentro de am- 1,1 pios limites e podem ser determinados de um modo conhecido na técnica. Tal dosagem será ajustada às necessidades individuais em cada caso parti- cular incluindo o composto específico que está sendo administrado, a via de administração, a condição que está sendo tratada, bem como o paciente que está sendo tratado. Em geral, no caso de uma administração oral ou paren- teral a seres humanos adultos que pesam aproximadamente 70 kg, uma do- sagem diária de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 10.000 mg, preferivelmente de aproximadamente 200 mg a aproximadamente 1.000 mg, deve ser apropriada, embora o limite superior possa ser excedido quando indicado. A dosagem diária pode ser administrada como uma dose única ou em doses divididas, ou para uma administração parenteral, pode ser suprida na forma de uma infusão contínua.

Tal como aqui utilizado, em relação à espectrometria de massa (MS) o termo "API+" se refere ao modo de ionização positiva da pressão at- mosférica, o termo "API-" se refere ao modo de ionização negativa da pres- são atmosférica, o termo "ESI+" se refere ao modo de ionização positiva do eletrospray, o termo "ESI-" se refere ao modo de ionização negativa do ele- trospray.

Tal como aqui utilizado, em relação à ressonância magnética nuclear (RMN) o termo "D6-DMSO" se refere ao dimetilsulfóxido deuterado.

Os compostos de acordo com a Fórmula I podem existir em for- mas tautoméricas diferentes e em misturas variáveis das mesmas. Todas as formas tautoméricas dos compostos de acordo com a Fórmula I e das mistu- ras dos mesmos são um objeto da presente invenção. Por exemplo, a parte imidazol do sistema tricíclico do anel de acordo com a Fórmula I pode existir em duas formas tautoméricas tal como mostrado aqui abaixo:

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Fórmula I

Também, por exemplo, o anel pirazol, de acordo com a Fórmula I, pode existir em duas formas formas tautoméricas tal como mostrado aqui abaixo:

<formula>formula see original document page 12</formula>

Fórmula I

Uma modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que: R1 é uma alquila, que é substituída uma ou várias vezes por halogênio, nitro, ciano, hidróxi, amino, heterociclila, -C(O)OH, -C(O)NH2 ou -Y-R6; ou é uma alquenila.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que:

R1 é uma alquila, que é substituída uma ou várias vezes por ciano, amino, heterociclila ou -Y-R6; ou é uma alquenila.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que: R1 é alquila, que é substituída uma ou várias vezes por ciano, amino, hete- rociclila ou -Y-R6.

R1 é alquila, que é substituída uma ou várias vezes por -Y-R6.

R1 é alquila, que é substituída uma ou várias vezes por ciano ou por amino.

Tais compostos, por exemplo, podendo ser selecionados de um grupo consistindo em: 5-(2-amino-etila)-7,7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3- il)-5,7-diidro-1H-imidazo[4,5-f]indolin-6-ona; e [7,7-dimetila-2-(5-metila-1H- pirazol-3-il)-6-oxo-6,7-diidro-1H-imidazo[4,5-f]indol-5-il]-acetonitrila.

R1 é alquila, que é substituída uma ou várias vezes por uma heterociclila.

Tais compostos, por exemplo, podem ser selecionados de um grupo consistindo em: 7,7-dimetila-5-(3-morfolin-4-il-propila)-2-(5-propila-2H- pirazol-3-il)-5,7-diidro-1H-imidazo[4,5-f]indolin-6-ona; 7,7-dimetila-2-(5- metila-2H-pirazol-3-il)-5-(3-morfolin-4-il-propila)-5,7-diidro-1H-imidazo[4,5- f]indolin-6-ona; e 7,7-dimetila-5-(3-morfolin-4-il-propila)-2-(5-trifluorometila- 2H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-1 H-imidazo[4,5-f]indol-6-ona.

R1 é alquenila.

Tal composto, por exemplo, pode ser selecionado de: 5-alila-7,7- dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f]indol-6-ona.

R4 é hidrogênio.

R2 é hidrogênio ou alquila;

R3 é hidrogênio ou alquila;

R4 é hidrogênio;

R5 é alquila ou alquila halogenada; e X é uma ligação simples.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que: R2 é hidrogênio ou alquila; R3 é hidrogênio ou alquila; R4 é hidrogênio; R5 é alquila; e X é uma ligação simples.

Y é -C(O)NH-, -NHC(O)-, -NHC(O)NH-, NHS(O)2-, -S(O)2-, -S(O)-, -C(O)O-, - C(O)-, -NH-, -N(alquila)-, -O- ou -S-.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que: Y são -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)-, -N(alquila)- ou -O-.

Y é -C(O)NH-.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são 20 os compostos de acordo com a Fórmula I, em que:

Y é -C(O)-.

Y é -C(O)O-, -N(alquila)- ou -O-.

R6 é alquila, a dita alquila sendo opcionalmente substituído uma ou várias vezes por halogênio, hidróxi, alcóxi, alcoxialcóxi, amino, alquilamino, dialqui- lamino, -C(O)OH ou -C(O)NH2.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que: R6 é alquila. Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que:

R6 é -(CH2)n-arila, em que a arila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por halogênio ou alcóxi(C1-C4); e n é 0 ou 1.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que: R6 é heteroarila, sendo que a heteroarila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por alquila.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que: R6 é cicloalquila.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que: R6 é heterociclila.

Compreender-se-á que as modalidades acima podem ser com- binadas para formar modalidades adicionais da presente invenção. Tais mo- dalidades combinadas são, por exemplo:

Uma modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que:

R1 é alquila, que é substituída uma ou várias vezes por ciano, amino, hete- rociclila ou -Y-R6; ou

É alquenila;

Y é -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)-, -N(alquila)- ou -O-; R6 é alquila; -(CH2)n-arila, em que a arila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por halogênio ou alcóxi(C1-C4); ou

É heterociclila;

n é O ou 1;

R2 é hidrogênio ou alquila;

R3 é hidrogênio ou alquila;

R4 é hidrogênio;

R5 é alquila ou alquila halogenada; e X é uma ligação simples.

R1 é alquila, que é substituída uma ou várias vezes por ciano, amino, hete- rociclila ou -Y-R6;

Y é -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)-, -N(alquila)- ou -O-; R6 é alquila;

-(CH2)n-arila, em que a arila é opcionalmente substituída uma ou várias ve- zes por halogênio ou alcóxi(CrC4); ou É heterociclila; η é O ou 1; 1,1 R2 é hidrogênio ou alquila; R3 é hidrogênio ou alquila; R4 é hidrogênio; R5 é alquila; e

X é uma ligação simples.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que: R1 é alquenila; R2 é hidrogênio ou alquila; R3 é hidrogênio ou alquila; R4 é hidrogênio; R5 é alquila; e X é uma ligação simples.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção são

os compostos de acordo com a Fórmula I, em que: R1 é aquila, que é substituída uma ou várias vezes por-Y-R6;

Y é -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)-, -N(alquila)- ou -O-; e R6 é alquila.

Tais compostos, por exemplo, podem ser selecionados de um

grupo consistindo em: éster etílico do ácido [7,7-dimetila-2-(5-metila-1 H- pirazol-3-il)-6-oxo-6,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f]indolil-5]-acético; 5-(2-metóxi- etila)-7,7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H-imidazo[4,5- f]indol-6-ona; e 5-(2-dietilamino-etila)-7,7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)- 5,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f]indol-6-ona.

R1 é alquila, que é substituída uma ou várias vezes por -Y-R6;

Y é -C(O)NH-,-C(O)O-,-C(O)-,-N(alquila)-ou-O-; e

R6 é -(CH2)n-arila, em que a arila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por halogênio ou alcóxi(C1-C4); e

η é O ou 1.

Tais compostos, por exemplo, podem ser selecionados de um grupo consistindo em:

N-benzila-2-[7,7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-6-oxo-6,7-diidro-3H- imidazo[4,5-f]indolil-5]-acetamida; composto com ácido acético;

2-[7,7-dimetila-2-(5-metila-1 H-pirazol-3-il)-6-oxo-6,7-diidro-3H-imidazo[4,5- f]indolil-5]-N-(4-flúor-fenila)-acetamida;

N-(3,5-dimetóxi-benzila)-2-[7,7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-6-oxo-6,7- diidro-3H-imidazo[4,5-f]indolil-5]-acetamida; e

2-[7,7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-6-oxo-6,7-diidro-3H-imidazo[4,5- f]indolil-5]-N-(4-flúor-benzila)-acetamida.

Uma outra modalidade, de acordo com a presente invenção, são os compostos de acordo com a Fórmula I, em que: R1 é alquila, que é substi- tuída uma ou várias vezes por -Y-R6;

Y é -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)-, -N(alquila)- ou -O-; e R6 é heterociclila.

Tal composto, por exemplo, pode ser selecionado de: 7,7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5-(2-morfolin-4-il-2-oxo-etila)-etila)- 5,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f] indol-6-ona.

Os compostos de acordo com a Fórmula I podem ser prepara- dos por qualquer processo conhecido que possa ser aplicável à preparação de compostos quimicamente relacionados. Tal preparação é um objeto da presente invenção. Uma modalidade de acordo com a presente invenção é um pro- cesso para a preparação dos compostos de acordo com a Fórmula I, com- preendendo as etapas de:

a) Reagindo um composto de acordo com a Fórmula II,

<formula>formula see original document page 18</formula>

Em que de R1 a R3 e X possuem o significado dado acima para a Fórmula I;

com um composto de acordo com a Fórmula IV,

<formula>formula see original document page 18</formula>

Fórmula IV

Em que A é -OH, -Cl, -H ou -OMe e R4 e R5 possuem o significado dado a- cima para a Fórmula I; para formar os compostos de acordo com a Fórmula I,

<formula>formula see original document page 18</formula>

Em que R1 a R5 e X possuem o significado dado acima para a

Formula I;

b) isolando o dito composto de acordo com a Fórmula I de uma mistura reacional, e

c) se desejável, convertendo o dito composto em um sal ou éster farmaceuticamente aceitável.

Os compostos de acordo com a Fórmula I, ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, que são objetos da presente invenção, po- dem ser preparados por qualquer processo conhecido a ser aplicável na preparação de compostos quimicamente relacionados. Tais processos, quando usados para preparar um composto de acordo com a Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo são ilustrados pelos seguin- tes Esquemas representativos dos exemplos de 1 a 3 em que, a menos que indicados de outro modo, R1, R2, R3, R4, R5 e X possuem os significados da- dos aqui anteriormente para a Fórmula I. Os materiais de partida necessá- rios são, ou comercialmente disponíveis, ou podem ser obtidos por procedi- mentos padrão em química orgânica. A preparação de tais materiais de par- tida é descrita dentro dos exemplos anexos ou na literatura cited abaixo em relação ao Esquema de 1 a 3. Os materiais de partida alternativamente ne- cessários são obtidos por procedimentos análogos àqueles ilustrados, que estão dentro das capacidades normais de um técnico em química orgânica.

Uma via para a preparação dos compostos de acordo com a Fórmula I inicia a partir de diaminas de acordo com a Fórmula II:

<formula>formula see original document page 19</formula>

Fórmula II

Na Fórmula II, os compostos X, R1, R2 e R3 possuindo os mes- mos significados dados acima para a Fórmula I.

A sintese das diaminas de acordo com a Formula II, ou dos pre- cursores das mesmas, é descrita em Mertens, A., et al., J. Med. Chem. 30 (1987) 1279-1287; von der Saal, W., et al., J. Med. Chem. 32 (1989) 1481- 1491; nas US 4.666.923A, US 4.695.567A, US 4.863.945A e na US 4.985.448A. Por exemplo, as diaminas de acordo com a Fórmula II, em que X é uma ligação simples são denominadas de IIa e podem ser sintetizadas de acordo com a US 4.666.923A, a DE 34 10 168 e Mertens, A., et al., J. Med. Chem. 30 (1987) 1279-1287, tal como mostrado no Esquema la: <formula>formula see original document page 20</formula>

No Esquema Ia, R11 R2 e R3 possuem o significado tal como da- do acima para a Fórmula I, exceto que R1 não é hidrogênio, e L representa um grupo de saída como, por exemplo, o iodo, o bromo, o cloro, o triflato e similares.

Em um procedimento alternativo as diaminas de acordo com a Fórmula II de podem ser obtidas por uma alquilação das diaminas de acordo com a Fórmula III tal como mostrado no Esquema lb. As diaminas de acordo com a Fórmula III podem ser sintetizadas de acordo com o Esquema 1 pela omissão da etapa 5.

<formula>formula see original document page 20</formula>

No Esquema Ib, R1, R2 e R3 possuem o significado tal como da- do acima para a Fórmula I, exceto que R1 não é hidrogênio, e L representa um grupo de saída como, por exemplo, o iodo, o bromo, o cloro, o triflato e similares. A reação de alquilação é realizada tipicamente na presença de uma base tal como o hidreto de sódio, o hidreto de potássio e similares, es- pecialmente hidreto de sódio, em solventes inertes tais como a dimetilfor- mamida (DMF), N-metila-pirolidinona (NMP), tetraidrofurano e similares.

As diaminas de acordo com a Fórmula II são empregadas sub- seqüentemente na formação do sistema do anel do imidazol de acordo com a Fórmula I. Diferentes caminhos de síntese para essa ciclização são descri- tos na literatura (por exemplo, veja Mertens, A., et 3.1., J. Med. Chem. 30 (1987) 1279-1287 e a US 4.695.567A).

Por exemplo, tal como mostrado no Esquema 2, as diaminas de acordo com a Fórmula Il podem ser reagidas com os ácidos carboxílicos (compostos do pirazol de acordo com a Fórmula IV em que A é hidróxi), os cloretos ácidos (compostos do pirazol de acordo com a Fórmula IV em que A é cloro), os aldeídos (compostos do pirazol de acordo com a Fórmula IV em que A é hidrogênio), os carboxilatos de metila (compostos do pirazol de a- cordo com a Fórmula IV em que A é metóxi) ou os ésteres ativados (com- postos do pirazol de acordo com a Fórmula IV em que A é, por exemplo, hi- droxibenzotriazol). Para procedimentos detalhados veja Mertens, A., et al., J. Med. Chem. 30 (1987) 1279-1287 e a US 4.695.567A.

<formula>formula see original document page 21</formula>

Esquema 2

No Esquema 2, R1, R2, R3, R5 e X tem o significado tal como da- do acima para a Fórmula I e A é hidróxi, cloro, hidrogênio, metóxi ou, por exemplo, hidroxibenzotriazol.

Os pirazóis, de acordo com a Fórmula IV, são comercialmente disponíveis ou podem ser preparados por procedimentos padrão da química orgânica (veja, por exemplo, Stanovnik, B., e Svete, J., Science of Synthesis 12 (2002) 15-225), por exemplo, a condensação de um composto 1,3- dicarbonil com hidrazina (veja, por exemplo, WO 04/032928 ou van Herk, T., et al., J. Med. Chem. 46 (2003) 3945-3951) ou cicloadição 1,3-dipolar entre um composto diazo e um acetileno (veja, por exemplo, Sewald, N., et al., Liebigs Ann. Chem. (1992) 947-952).

Os pirazóis de acordo com a Fórmula IV em que R4 é hidrogê- nio, R5 é trifluorometila e A é hidróxi, podem ser preparados em um proce- dimento de três etapas de acordo com o Esquema 3: condensação de 4,4,4- triflúor-1-(2-furil)-1, 3-butanodiona com a benzila hidrazina sob condições ácidas, degradação oxidativa do anel do furano com permanganato de po- tássio para a funcionalidade do ácido carboxílico (veja, por exemplo, Djuric, S.W., et al., J. Med. Chem. 43 (2000) 2975-2981; Jia, Z.J., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 12 (2002) 1651-1655 ou Pruitt, J.R., et al., J. Med. Chem. 46 (2003) 5298-5315) e a clivagem do grupo protetor benzila fornece o ácido 5-trifluorometila-2H-pirazol-3-ilcarboxilico desejado.

<formula>formula see original document page 22</formula>

Esquema 3

Esse procedimento envolvendo o grupo N-benzila ou alternati- vamente o grupo p-metoxibenzila (Subramanyam, C, Synth. Commun. 25 (1995) 761-774) como o grupo protetor intermediário pode também ser apli- cado par a preparação de outros pirazóis necessários como o material de partida.

Determinados substituintes nos grupos R1 podem não ser inertes para as condições das seqüências da síntese acima descritas e podem ne- cessitar da proteção realizada pelos grupos protetores padrão, conhecidos na técnica. Por exemplo, um grupo amino ou hidroxila pode ser protegido como um derivado acetila ou um derivado terc-butiloxicarbonila (BOC). Al- ternativamente, alguns substituintes podem ser derivados de outros no fim da seqüência da reação. Por exemplo, um composto de acordo com a Fór- mula I pode ser sintetizado carregando um nitro, um ciano, uma etoxicarbo- nila, um éter, um substituinte do ácido sulfônico no grupo R11 cujos substitu- intes são finalmente convertidos a (a) um grupo amino (por exemplo, pela redução de um grupo nitro, pela redução de um grupo ciano ou pela cliva- gem de um grupo de proteção amino apropriado (por exemplo, pela remoção de um grupo BOC com ácido trifluoroacético (TFA))), (b) um grupa alquilami- na (por exemplo, pela aminação redutora de um grupo amina), (c) um grupo dialquilamina (por exemplo, pela alquilação de um grupo amino, a redução de um grupo acilamino apropriado com o hidreto de alumínio e lítio ou a rea- ção de Eschweiler-Clarke com um grupo amino ou alquilamino apropriado), (d) um grupo acilamino (por exemplo, pela formação da amida a partir de um grupo amino, por exemplo, com os halides de acila apropriados ou com áci- dos carboxílicos apropriados, após suas ativações com 1,1'- carbonildiimidazol (CDI), cloridrato de 1-etila-3-[3-dimetila amino propila] carbodiimida (EDC), etc.), (e) um grupo alquilsulfonilamino (por exemplo, pela reação de um grupo amino com cloretos de sulfonila), (f) um grupo substituinte arila-sulfonil-amino (por exemplo, pela reação de um grupo ami- no com cloretos de sulfonila), (g) um grupo hidroxila (por exemplo, pela cli- vagem de um grupo de proteção hidroxila apropriado (por exemplo, pela re- moção hidrogenolítica de um éter benzílico ou pela clivagem oxidativa de um éter p-metóxi- benzílico ou pela clivagem auxiliada do fluoreto de um grupo protetor sila), (h) um grupo éter (por exemplo, pela síntese de éter de Willi- amson a partir de um grupo hidroxila), (i) um grupo carboxamida (por exem- pio, pela formação da amida a partir de um grupo ácido carboxílico com am- nas apropriadas após a ativação do grupo ácido carboxílico com CDI, EDC, etc, ou conversão a um cloreto de acila), ou (j) um grupo sulfonamida atra- vés de procedimentos padrão.

Os compostos de acordo com a presente invenção podem existir na forma de seus sais farmaceuticamente aceitáveis. O termo "sal farmaceu- ticamente aceitável" se refere aos sais convencionais de adição ácida que retêm a eficácia e as propriedades biológicas dos compostos de acordo com a Fórmula I e são formados dos ácidos orgânicos ou inorgânicos não tóxicos apropriados. As amostras dos sais de adição ácida incluem aqueles deriva- dos dos ácidos inorgânicos tais como o ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido iodídrico, ácido sulfúrico, ácido sulfâmico, ácido fosfórico e ácido nítri- co, e aqueles derivados dos ácidos orgânicos tais como o ácido p- toluenossulfônico, o ácido naftalenossulfônico, o ácido naftalenodissulfônico, o ácido metanossulfônico, o ácido etanossulfônico e similares. A modificação química de um composto farmacêutico (isto é, um fármaco) em um sal é uma técnica bem conhecida dos químicos farmacêuticos para se obter esta- bilidade física e química melhoradas, a higroscopicidade melhorada, a flui- dez melhorada e a solubilidade melhorada dos compostos. Veja, por exem- M pio, Stahl, P. H., e Wermuth, G., (editores), Handbook of Pharmaceutical Salts, Verlag Helvetica Chimica Acta (VHCA), Zurich1 (2002) ou Bastin, R.J., et al., Organic Proc. Res. Dev. 4 (2000) 427-435.

Os compostos de acordo com a Fórmula I podem conter um ou vários centros quirais e podem então estar presentes em uma forma racêmi- ca ou oticamente ativa. Os racematos podem ser separados de acordo com métodos conhecidos em seus enanciômeros. Por exemplo, os sais diastere- oisoméricos que podem ser separados pela cristalização são formados das misturas racêmicas pela reação com um ácido oticamente ativo tal como, por exemplo, o ácido D- ou L-canforsulfônico. Alternativamente a separação dos enanciômeros pode também ser conseguida usando a cromatografia em HPLC de fases quirais (HPLC: Cromatografia líquida de alto desempenho) que estão comercialmente disponíveis.

A Atividade Farmacolóqica

Os compostos de acordo com a Fórmula I e seus sais farmaceu- ticamente aceitáveis possuem propriedades farmacológicas valiosas. Foi encontrado que os ditos compostos mostram atividade como inibidores da família da quinase Aurora e mostram também atividade antiproliferativa. Conseqüentemente os compostos da presente invenção são úteis na terapia e/ou na prevenção das doenças com sobre-expressão conhecida das quina- ses da família da Aurora preferivelmente Aurora A, especialmente na terapia e/ou na prevenção das doenças acima mencionadas. A atividade dos pre- sentes compostos como inibidores da família da quinase Aurora é demons- trada pelos seguintes ensaios biológicos: A Determinação do ICgn para Inibidores da Quinase Aurora A Princípios do Ensaio

A Aurora A é uma quinase da serina envolvida na estruturação do feixe e na segregação cromossômica.

O ensaio é tipicamente um ensaio do tipo ELISA, onde o subs- trato (GST-Histone H3) é ligado na placa de ensaio e é fosforilado pela qui- nase. A fosforilação é detectada por um mAb de rato antifosfopeptídio e por um pAb HRP marcado anti-rato. O ensaio é validado para a determinação de IC50.

As atividades da quinase foram medidas pelo ensaio imunossor- bente ligado à enzima (ELISA): As placas Maxisorp de 384 cavidades (Nunc) foram revestidas com a proteína de fusão recombinante compreendendo os resíduos 1 a 15 da histona-H3 fundida na terminação N da glutationa-S- transferase. As placas foram então bloqueadas com uma solução de 1 mg/mL de l-block (Tropix catálogo nQ T2015-forma altamente purificada da caseína) em tampão de fosfato salino. As reações da quinase foram realiza- das nas cavidades da placa de ELISA combinando uma quantidade apropri- ada de quinase Aurora A mutante com o composto do teste e 30 μΜ de ATP. O tampão da reação foi o tampão da quinase 10X (célula de sinalização ca- tálogo ne 9802) suplementado com 1 pg/mL de l-block. As reações foram paradas após 40 minutos pela adição de EDTA a 25 mM. Após a lavagem, a fosforilação do substrato foi detectada pela adição da antifosfo-Histone H3 (Ser 10) 6G3 mAb (célula de sinalização catálogo ne 9706) e pAb-HRP de carneiro anti-rato (Amersham catálogo n5 NA931V), seguido pelo desenvol- vimento colorimétrico com TMB (3,3',5,5'-tetrametilbenzidina da Kirkegaard & Perry Laboratories). Após a leitura da absorvância, os valores de IC50 foram calculados usando uma curva de ajuste não linear (XLfit software (ID Busi- ness Solution Ltd., Guilford, Surrey, UK)). Resultados: Tabela 1

<table>table see original document page 26</column></row><table>

Atividade Atiproliferativa

A atividade dos presentes compostos como agentes antiprolife- rativos é demonstrada pelos seguintes ensaios biológicos: Esaio Ce I ITiter-G Io® em HCT 116 células.

O ensaio de viabilidade de célula Iuminescente CelITiter-GIo® 1,1 (Promega) é um método homogêneo para determinar o número de células viáveis na cultura baseada na quantificação do ATP presente, que sinaliza a presença de células metabolicamente ativas.

Células HCT 116 (carcinoma humano do cólon, ATCC-no. CCI- 247) foram cultivadas em um meio RPMI 1640 com GlutaMAX® I (Invitrogen, Catálogo Ne. 61870-010), 2,5 % Soro Fetal de Vitela (FCS, Sigma Catálogo Ne. F4135 (FBS)); 100 Unidades/ml de penicilina/100 pg/ml (= Pen/Strep da Invitrogen catálogo Ne. 15140). Para o ensaio as células foram semeadas em placa de 384 cavidades, 1000 células por cavidade, no mesmo meio. Os compostos ao teste foram adicionados no dia seguinte nas várias concentra- ções variando de 30 μΜ a 0,0015 μΜ (10 concentrações, 1:3 diluído). Após 5 dias o ensaio Ce I ITiter-G Io® foi feito de acordo com as instruções do fabri- cante (ensaio de viabilidade de célula Iuminescente CellTiter-GIo® (Prome-ga)).

Em resumo: a placa contendo as células é equilibrada até temperatura am- biente por aproximadamente 30 minutos e então o reagente CelITiter-GIo® foi adicionado. Os conteúdos foram cuidadosamente misturados por 15 mi- nutos para induzir a Iise da célula. Após 45 minutos o sinal de luminescência foi medido no Victor 2, (espectrofotômetro de varredura de múltiplas cavida- des, Wallac). Detalhes: 1° dia:

- meio: RPMI 1640 com GlutaMAX® I (Invitrogen, Catálogo N° 61870), 5 % do FCS (Sigma Catálogo N°. F4135), Pen/Strep (Invitrogen, Catálogo N°. 15140).

- HCTI 16 (ATCC-N°. CCI-247): 1000 células em 60 μl por cavidade da placa de 384 cavidades (Greiner 781098, pClear placa branca)

- Após semear incubar as placas por 24 h a 37 °C, em CO2 a 5% 2° dia:

Indução (tratamento com compostos. 10 concentrações):

A fim de conseguir uma concentração final de 30 μΜ como a mais elevada concentração, 3,5 μl da solução de 10 mM conservada em es- toque do composto foram adicionados diretamente a 163 μl do meio. Foi se- guida então a etapa e) do procedimento de diluição descrito abaixo.

A fim de conseguir a segunda mais elevada concentração para as concentrações mais baixas, uma diluição em série com etapas da diluição de 1:3 foi seguida de acordo com os procedimentos (de "a" a "e") tal como descrito aqui abaixo:

a) para a segunda concentração mais elevada adiciona-se 10 μl da solução conservada em estoque de 10 mM do composto a 20 μl de dime- tilsulfóxido (DMSO);

b) dilui-se 8x1:3 (sempre de 10 μl a 20 μl de DMSO) na linha de diluição de DMSO (resultados em 9 cavidades com concentrações de 3333,3 μΜ a 0,51 μΜ);

c) diluem cada concentração 1:47,6 (diluição composta de 3,5 μl a 163 μl de meio);

e) adicionam 10 μl de cada concentração a 60 μΙ de meiol na célula da placa tendo por resultado a concentração final de DMSO: 0,3 % em cada cavidade e tendo por resultado uma concentração final em 10 dos compostos variando de 30 μΜ a 0,0015 μΜ.

Cada um composto é testado em triplicata. Incubados por 120 h (5 dias) a 37 °C, em CO2 a 5%: Análise:

- Adicionar 30 μΙ do reagente CelITiter-GIo® (preparado a partir do Tampão CelITiter-GIo® e substrato CelITiter-GIo® (IiofiIizado) comprado da Promega) por cavidade;

- Agitar por 15 minutos na temperatura ambiente;

- Incubar mais 45 minutos na temperatura ambiente sem agita- ção.

Medição:

- Espectrômetro Victor 2 de varredutra de multicavidades (Wallac), modo de luminescência (0,5 seg/leitura, 477 nm).

- Determinação de IC50 usando uma curva não linear ajustada (software XLfit 1,1 (ID Business Solution Ltd. Guilford, Surrey, Reino Unido).

Com todos os compostos foi detectada uma inibição significativa da viabili- dade da célula HCT 116, o que é exemplificado pelos compostos mostrados na Tabelai.

Resultados: Tabela 2

<table>table see original document page 28</column></row><table>

Os medicamentos contendo um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuti- camente aceitável são um objeto da presente invenção, tal como é um pro- cesso para sua produção, compreendendo colocar aquele ou mais compos- tos da presente invenção e/ou dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis e, se desejável, um ou mais de outras substâncias terapeuticamente valio- sas para fomar juntas uma administração galênica, com um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis.

De acordo com a invenção os compostos da presente invenção bem como seus sais farmaceuticamente aceitáveis são úteis no controle ou na prevenção de doenças. Baseado em sua inibição da quinase Aurora e em sua atividade antiproliferativa, os ditos compostos são úteis para o tratamen- to das doenças tais como o câncer nos seres humanos ou nos animais e para a produção de medicamentos correspondentes. A dosagem depende de vários fatores tais como o modo de administração, da espécie, da idade e/ou do estado de saúde do indivíduo.

Uma modalidade de acordo com a presente invenção são os compostos de acordo com a Fórmula I para o seu uso como agentes farma- cêuticos.

Uma modalidade de acordo com a presente invenção é uma composição farmacêutica, contendo um ou mais dos compostos de acordo com a Fórmula I, juntamente com veículos farmaceuticamente aceitáveis.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é um medicamento contendo um ou mais dos compostos de acordo com a Fórmu- la I como ingredientes ativos juntamente com veículos farmaceuticamente aceitáveis para o tratamento das doenças mediadas por uma ativação im- própria de quinases da família da Aurora.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é uma composição farmacêutica, contendo um ou mais dos compostos de a- cordo com a Fórmula I, para a inibição do crescimento de tumor.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é um medicamento contendo um ou mais dos compostos de acordo com a Fórmu- la I como ingredientes ativos juntamente com veículos farmaceuticamente aceitáveis para o tratamento de colorretal, da mama, pulmão, prostático, pancreático, gástrico, bexiga, ovariano, melanoma, neuroblastoma, cervical, câncer dos rins ou renal, Ieucemias ou linfomas.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é um medicamento contendo um ou mais dos compostos de acordo com a Fórmu- la I como ingredientes ativos juntamente com veículos farmaceuticamente aceitáveis para o o tratamento da leucemia aguda mielogenosa (AML), da leucemia linfocítica aguda (ALL) e do tumor estromal gastrointestinal (GIST).

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é o uso de um ou mais compostos de acordo com a Fórmula I para a produção de medicamentos para o tratamento das doenças mediadas por uma ativa- ção imprópria de quinases da família da Aurora.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é o uso de um composto de acordo com a Fórmula I, para a produção de medi- camentos correspondentes para a inibição do crescimento de tumor.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é o uso de um composto de acordo com a Fórmula I, para a produção de medi- camentos correspondentes para o tratamento de colorretal, da mama, pul- 1,1 mão, prostático, pancreático, gástrico, bexiga, ovariano, melanoma, neuro- blastoma, cervical, câncer dos rins ou renal, Ieucemias ou linfomas.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é o uso de um composto de acordo com a Fórmula I1 para o o tratamento da leucemia aguda mielogenosa (AML), da leucemia linfocítica aguda (ALL) e de tumor estromal gastrointestinal (GIST).

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é o uso dos compostos de acordo com a Fórmula I como inibidores da quinase Aurora A.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é o uso dos compostos de acordo com a Fórmula I como agentes antiproliferati- vo.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é o uso de um ou mais compostos de acordo com a Fórmula I para o tratamento do câncer.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuti- camente eficaz de um composto de acordo com a Fórmula I como ingredien- tes ativos e um veículo farmaceuticamente aceitável.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é um método de tratar o câncer compreendendo a administração a uma pessoa que esteja necessitando do mesmo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a Fórmula I.

Uma outra modalidade de acordo com a presente invenção é um método de tratar o câncer colorretal, o câncer de mama, o câncer de pul- mão, o câncer do prostático, câncer pancreático, câncer gástrico, câncer da bexiga, câncer ovariano, melanoma, neuroblastoma, câncer cervical, câncer do kidney ou câncer renal, Ieucemias ou Iinfomas compreendendo a admi- nistração a uma pessoa que esteja necessitando do mesmo de uma quanti- dade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a Fórmula I.

Os compostos de acordo com a presente invenção e seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser usados como medicamentos, por exemplo, na forma de composições farmacêuticas. As composições farma- cêuticas podem ser administradas por via oral, por exemplo, na forma de pílulas, pílulas revestidos, drágeas, cápsulas de gelatina dura ou macia, so- luções, emulsões ou suspensões. A administração pode, entretanto, também ser realizada por via retal, por exemplo, na forma de supositórios, ou via pa- ranteral, por exemplo, na forma de soluções para injeção.

As composições farmacêuticas acima mencionadas podem ser obtidas pelo processamento dos compostos de acordo com a presente in- venção com os veículos farmaceuticamente aceitáveis, inorgânicos ou orgâ- nicos. A lactose, o amido de milho ou os derivados do mesmo, o talco, os ácidos esteáricos ou seus sais e similares podem ser usados, por exemplo, como tais veículos para pílulas, pílulas revestidas, drágeas e cápsulas de gelatina dura. Os veículos apropriados para cápsulas de gelatine macias são, por exemplo, óleos vegetais, ceras, gorduras, polióis semi-sólidos e lí- quidos e similares. Dependendo da natureza da substância ativa nenhum veículo, entretanto, é geralmente necessário na embalagem das cápsulas de gelatina macia. Os veículos apropriados para a produção das soluções e de xaropes são, por exemplo, água, polióis, glicerol, óleo vegetal e similares. Os veículos apropriados para os supositórios são, por exemplo, óleos naturais ou endurecidos, ceras, gorduras, polióis semi-1 íquidos ou líquidos e simila- res. As composições farmacêuticas podem, além disso, conter con- servantes, solubilizante, estabilizantes, agentes umectantes, emulsificantes, adoçantes, corantes, aromatizantes, sais para variação da pressão osmóti- ca, tampões, agentes de mascaramento ou antioxidantes. Também podem conter ainda outras substâncias terapeuticamente valiosas.

As composições farmacêuticas compreendem, por exemplo, o

seguinte:

a) Formulação para Pílulas (qranulação úmida):

<table>table see original document page 32</column></row><table>

Procedimentos para Produção:

1. Misture os itens 1, 2, 3 e 4 e granule com água purificada.

2. Seque os grânulos a 50°C.

3. Passe os grânulos através de equipamento de moagem apropriado.

4. Adicione o item 5 e misture-o por três minutos; comprima em uma prensa apropriada.

b) Formulação para Cápsulas:

<table>table see original document page 32</column></row><table>

Procedimentos de Produção:

1. Misture os itens 1, 2 e 3 em um misturador apropriado por 30 minutos. 2. Adicione os itens 4 e 5 e misture-os por 3 minutos.

3. Encha em uma cápsula apropriada.

Os seguintes exemplos e referências são fornecidos para ajudar na compreensão da presente invenção, no verdadeiro alcance que é deter- minado nas reivindicações adicionadas. Compreende-se que as modifica- ções podem ser feitas a partir dos procedimentos determinados sem fugir do espírito da presente invenção. Procedimentos Experimentais: Exemplo 1:

5-(2-metóxi-etila)-7.7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H- imidazof4,5-f1indol-6-ona

i) 5,6-diamino-1-(2-metóxi-etila)-3.3-dimetila-1,3-diidro-indol-2-ona

A solução de 5,6-diamino-1-(2-metóxi-etila)-3,3-dimetila-1,3- diidro-indol-2-ona (preparada de acordo com a US 4.666.923A) (500 mg, 2,61 mmols) em Ν,Ν-dimetilformamida anidra (DMF) (10ml) foi tratada com o hidreto de sódio (72,6 mg, 2,87 mmols) e agitado por 1 h na temperatura am- biente. O 1 -bromo-2-metóxi-etano (259 μΙ, 382,5 mg, 2,61 mmols) foi adicio- nado gota-a-gota. Após 3h na temperatura ambiente também foram adicio- nados o hidreto de sódio (31,4 mg, 1,31 mmol) e 1 -bromo-2-metóxi-etano (191,2 mg, 1,31 mmol) e a agitação foi continuada na temperatura ambiente por mais uma hora. Então a mistura reacional foi derramada em água e ex- traída com acetato de etila. As fases orgânicas combinadas foram secas so- bre sulfato de magnésio, o solvente foi removido sob a pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por cromatografia de HPL para fornecer 210 mg de 5,6-diamino-1 -(2-metóxi-etila)-3,3-dimetila-1,3-diidro-indol-2-ona (32%).

ii) 5-(2-metóxi-etila)-7.7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5.7-diidro-3H- imidazo[4.5-f1indol-6-ona

A mistura de 5,6-diamino-1-(2-metóxi-etila)-3,3-dimetila-1,3- diidro-indol-2-ona (210 mg, 0,842 mmol), 5-metila-1H-pirazol-3-ilcarbaldeído (preparado de acordo com Tetrahedron 1995, 51(16), 4779-800; 93 mg, 0,842 mmol) e o enxofre (29,7 mg, 0,926 mmol) em Ν,Ν-dimetilformamida (DMF) (6 ml) foi aquecida a 160°C por 65 minutos. Após resfriar até a tempe- ratura ambiente a mistura reacional foi derramada em água (40 ml). Após agitar por 60 minutos a 0°C o precipitado extraído por filtração, lavado com água e dissolvido em acetato de etila. O líquido da água mãe foi extraído com acetato de etila e as fases orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de magnésio. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resí- duo foi seco a vácuo para fornecer 186 mg de 5-(2-metóxi-etila)-7,7-dimetila- 2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f]indol-6-ona (65%).

MS: M = 340,2 (ESI+).

1H-RMN (400 MHz. Dg-PMSO): δ (ppm) = 1,31 (s, 6H), 2,31 (s, 3H), 3,25 (s, 3H), 3,59 (t, 2H), 3,89 (t, 2H), 6,56 (s, 1H), 7,03 e 7,25 (bm, 1H), 7,35 e 7,55 (bm, 1H), 12,59 (m, 1H), 12,88 (m, 1H).

1,1 De um modo análogo tal como descrito no exemplo, 1 os seguin- tes exemplos 2 e 3 foram preparados a partir dos materiais de partida apro- priados: <table>table see original document page 34</column></row><table>

Exemplo 4:

7,7-dimetila-5-(3-morfolin-4-il-propila)-2-(5-trifluorometila-2H-pirazol-3-il)-5,7- diidro-1H-imidazo[4,5-f]indol-6-ona.

i) ácido 5-trifluorometila-2H-pirazol-3-ilcarboxílico.

a) 1 -benzila-5-fura-2-nil3-trifluorometila-1 H-pirazol.

A uma solução de 4,4,4-triflúor-1-(2-furil)-1,3-butanodiona (50 g, 0,240 mol) 1M em solução de ácido clorídrico em etanol (EtOH) (24 ml, 0,024 mol) e EtOH adicional (520 ml) foi adicionado em uma pequena parte de dicloridrato de benzilidrazina (50 g, 0,248 mol) na temperatura ambiente. A mistura reacional foi aquecida então sob refluxo por 7 h. Após resfriar até a temperatura ambiente a mistura reacional foi neutralizada com NaHCO3 saturado, o EtOH foi extraído por filtração e a mistura residual de óleo/água foi extraída com diclorometano (300 ml). A fase orgânica foi lavada duas ve- zes com água (100 ml) e seca sobre Na2SO4 e concentrada a vácuo para fornecer 73,7 g de 1-benzila-5-fura-2-nil3-trifluorometila-1H-pirazol na forma de um óleo marrom que. Foi usado bruto para a reação seguinte. MS: M = 293,0 (API+).

b) ácido 2-benzila-5-trifluorometila-2H-pirazol-3-ilcarboxílico

A uma solução de 1-benzila-5-fura-2-nil-3-trifluorometila-1H- pirazol (9,5 g, 0,0325 mol) em acetona (350 ml) foi adicionado o permanga- nato de potássio (27,2 g, 0,172 mol) em água (450 ml). A mistura reacional foi aquecida a 60°C por 4 h. Após resfriar até a temperatura ambiente 2- propanol (200 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada durante a noite, foi filtrada através de uma almofada do celite e lavada com acetona (1L). O fil- trado foi concentrado a vácuo, reduzindo até 15 ml. O resíduo foi dissolvido em NaOH a 2M (20 ml) e em água (150 ml). A fase aquosa resultante foi lavada duas vezes com éter dietílico (70 ml) e acidificada então com solução de HCI 5M (30 ml). A suspensão foi extraída com acetato de etila (200 e 50 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (30 ml) e salmoura (5 ml) e concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de silicone (CH2CI2 com ácido acético a 1%) para fornecer 6,1 g do ácido 2-benzila-5-trifluorometila-2H-pirazol-3-ilcarboxílico (0,022 mol, 67%) como um sólido esbranquiçado. MS: M = 271,1 (ESI+).

c) ácido 5-trifluorometila-2H-pirazol-3-ilcarboxílico.

A amônia (aproximadamente 50 ml) foi condensada em um fras- co de três pescoços em um banho de gelo seco e etanol e foi adicionado o ácido 2-benzila-5-trifluorometila-2H-pirazol-3-ilcarboxílico (100 mg, 3,70 mmols). À solução o sódio (aproximadamente 260 mg, 11,3 mmols) foi adi- cionada em pequenas partes até que a cor azul permanecesse por mais de 5 minutos. A amônia foi evaporada durante a noite. A águâ foi adicionada e acidificada com solução 2N de HCI. A fase aquosa foi extraída duas vezes com acetato de etila, as fases orgânicas combinadas foram secas sobre o Na2SO4, o solvente foi evaporado a vácuo para fornecer 560 mg do ácido 5- trifluorometila-2H-pirazol-3-ilcarboxílico (3,11 mmols, 84%) como um sólido amarelo que foi usado sem purificação adicional. MS: M = 179,0 (API -). ii) 5.6-diamino-3.3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-1.3-diidro-indol-2-ona.

a) 3.3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-6-nitro-1.3-diidro-indolin-2-ona.

Uma solução de 3,3-dimetila-6-nitro-1,3-diidro-indolin-2-ona (preparada de acordo com a US 4.666.923A; 6,3 g, 30,6 mmols) em N1N- 1,1 dimetilformamida anidra (40 ml) foram tratados com o hidreto de sódio (0,953 g, 39,7 mmols). A suspensão resultante foi agitada por 1h a 60°C. Uma solução de 4-(3-cloro-propila)-morfolina (5,0 g, 30,5 mmols) em DMF (10 ml) foi adicionada gota-a-gota. A mistura foi aquecida até 100°C por 10 minutos, permitido então resfriar até a temperatura ambiente e agitando por 1 h. Depois que a remoção do solvente a mistura foi interrompida brusca- mente com água (100 ml) e extraída com acetato de etila (3 χ 100 ml). As fases orgânicas combinadas foram secas sobre o Na2SO4, evaporadas e o produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna na sílica-gel. A elu- ção com acetato de etila produziu 8,15 g de 3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il- propila)-6-nitro-1,3-diidro-indolin-2-ona (80%).

b) 6-amino-3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-1.3-diidro-indolin-2-ona.

A uma solução de 3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-6-nitro- 1,3-diidro-indolin-2-ona (8,1 g, 24,3 mmols) em tetraidrofurano (THF) e palá- dio sobre carvão foi adicionada e a mistura foi hidrogenada na temperatura ambiente por 4h. Após a filtração e a evaporação do solvente 7,3 g de 6- amino-3,3-dimetila-1 -(3-morfolin-4-il-propila)-1,3-diidro-indolin-2-ona (99%) foram isolados.

c) N-í3,3-dimetila-1 -(3-morfolin-4-il-propila)-2-oxo-2,3-diidro-1 H-indol-6-ill acetamida.

Uma solução de 6-amino-3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)- 1,3-diidro-indolin-2-ona (7,3 g, 24,1 mmols) em anidrido acético (100 ml) foi agitada na temperatura ambiente por 4 h. A mistura foi derramada sobre á- gua com gelo e deixada aquecer até a temperatura ambiente. A mistura foi- alcalinizada com solução aquosa de NaOH e foi extraída com acetato de etila. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre o sulfato de sódio e o solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer 7,8 g de N-[3,3- dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-2-oxo-2,3-diidro-1H-indol-6-il]-acetamida (94%).

d) N-[3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-5-nitro-2-oxo-2.3-diidro-1H-indol- 6-ill-acetamida.

A uma solução de N-[3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-2- oxo-2,3-diidro-1H-indol-6-il]-acetamida (7,8 g, 22,6 mmols) em ácido acético (60 ml), o ácido nítrico (65%, 3,2 g, 2,3 ml, 33,9 mmols) foi adicionado gota- a-gota a 0 °C. A mistura foi agitada por 4h, a seguir derramada sobre água. A mistura foi ajustada a um pH 8-9 com solução aquosa do NaOH e extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre o sulfato de sódio e o solvente foi evaporado. O produto bruto foi recristali- zado em isopropanol e o líquido-mãe concentrado e purificado por cromato- grafia de coluna de gel de silicone (acetato de etila/metanol = 9:1) para for- necer conjuntamente 3,2 g de N-[3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-5- nitro-2-oxo-2,3-diidro-1H-indol-6-il]-acetamida (36%).

e) 6-amino-3.3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-5-nitro-1,3-diidro-indol-2- ona.

N-[3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-5-nitro-2-oxo-2,3-diidro-1H-indol-6- il]-acetamida (3,2 g, 8,2 mmols) foi dissolvido em etanol (40 ml). Após a adi- ção do ácido clorídrico (25%, 4 ml, 40,8 mmols) a mistura foi aquecida sob refluxo por 3h. A maior parte do solvente foi evaporada e a água foi adicio- nada. A mistura foi alcalinizada com uma solução aquosa do NaOH e foi ex- traída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre o sulfato de sódio e o solvente evaporado. O produto bruto foi triturado com iso-hexano e seco para fornecer 2,6 g de 6-amino-3,3-dimetila-1-(3- morfolin-4-il-propila)-5-nitro-1,3-diidro-indolin-2-ona (91 %). f) 5,6-diamino-3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-1,3-diidro-indol-2-ona.

Á uma solução de 6-amino-3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il- propila)-5-nitro-1,3-diidro-indol-2-ona (2,6 g, 6,7 mmols) em tetraidrofurano (THF) /metanol (1:1, 80ml) o paládio sobre carvão ativo (10%, 0,8 g) foi adi- cionado e a mistura hidrogenada em 4 MPa (40 mbar) na temperatura ambi- ente por 6,5 h. Após a filtração e a evaporação dos solventes, o produto bru- to foi triturado com éter dietílico e algumas gotas de isopropanol para forne- cer 2,1 g de 5,6-diamino-3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-1,3-diidro- indol-2-ona, (99%).

iii) 7,7-dimetila-5-(3-morfolin-4-il-propila)-2-(5-trifluorometila-2H-pirazol-3-il)- 5,7-diidro-1H-imidazo[4,5-f]indol-6-ona.

A 5,6-diamino-3,3-dimetila-1-(3-morfolin-4-il-propila)-1,3-diidro- indol-2-ona (198 mg, 0,622 mmol) e o ácido 5-trifluorometila-2H-pirazol-3- ilcarboxílico (112 mg, 0,622 mmol) foram misturados completamente. O áci- do polifosfórico (4260 mg, 43,5 mmols) e o pentóxido de fósforo (460 mg, 3,24 mmols) foram adicionados e misturados outra vez completamente por espátula. A mistura foi aquecida até 150°C sob uma atmosfera de nitrogênio por 6 h. Após resfriar até a temperatura ambiente a mistura reacional foi in- terrompida bruscamente com água gelada (20 ml) e a suspensão resultante foi ajustada a pH 7 ~ 8 pela adição de amônia aquosa a 25%. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila, as fases orgânicas combinadas foram lava- das com água, secas sobre Na2SO4 e o solvente foi evaporado a vácuo. O resíduo foi lavado com éter dietílico e seco a vácuo para fornecer 102 mg de 7,7-dimetila-5-(3-morfolin-4-il-propila)-2-(5-trifluorometila-2H-pirazol-3-il)-5,7- diidro-1 H-imidazo[4,5-f]indol-6-ona, (34%).

MS: M = 463,1 (API+).

1H-RMN (400 MHz. Dfi-DMSO): δ (ppm) = 1,33(s, 6H), 1,78(m, 2H), 2,30(m, 6H), 3,57(m, 4H), 3,79(t, 2H), 7,18-7,28(br m, 2H), 7,56-7,67(br m, 1H), 12,98(br, 1H), 14,64(br, 1H).

De um modo análogo ao descrito para o Exemplo 4, na etapa iii os seguintes exemplos 5 e 6 foram preparados a partir de 5,6-diamino-3,3- dimetila-1-(3-morfolin-4-il-priopil)-1,3-diidro-indol-2-ona e dos ácidos pirazol- 3-ilcarboxílicos apropriados:

<table>table see original document page 39</column></row><table>

Exemplo 7:

Éster etílico do ácido r7.7-dimetila-2-(5-metila-1 H-pirazol-3-il)-6-oxo-6.7- diidro-3H-imidazo[4,5-f|indol-5-il1-acético.

À uma solução do ácido 5-metila-1H-pirazol-3-ilcarboxílico (365 mg, 2,89 mmols), dos hidrate do 1 hidroxibenzotriazol (535 mg, 3,49 mmols) e de trietilamina (900 mg, 8,90 mmols) em Ν,Ν-dimetilformamida (DMF) (5 ml) foi adicionado o cloridrato de N'-(3-dimetilaminopropila)-N- etilcarbodiimida de (668 mg, 3,48 mmols). Após 90 minutos na temperatura ambiente uma solução de éster etílico do ácido (5,6-diamino-3,3-dimetila-2- oxo-2,3-diidro-indolil-1)-acético (preparado de maneira análoga ao descrito no Exemplo 1, etapa i, usando éster etílico do ácido iodo-acético em vez de 1 -bromo-2-metóxi-etano como o agente de alquilação; 820 mg, 2,95 mmols em DMF (10ml) foram adicionados e agitados continuamente durante a noi- te. A solução aquosa saturada de bicarbonato foi adicionada e a fase aquosa foi extraída três vezes com acetato de etila. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre o sulfato de magnésio e o solvente foi evaporado. O resí- duo foi purificado pela cromatografia em gel de silicone (acetato de etila). O produto intermediário foi dissolvido então em etanol (50 ml), tratado com HCI concentrado (1,75 ml) e aquecido sob refluxo por 3,5 h. A mistura reacional foi alcalinizada sob refrigeração com gelo com uma solução aquosa saturada de bicarbonato em pH 7-8 e a maior parte do etanol foi evaporado. A água foi adicionada e a fase aquosa foi extraída três vezes com acetato de etila. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgS04 e o solvente foi evaporado. O resíduo foi submetido à cromatografia em gel de silicone (ace- tato de etila) para fornecer 380 mg de Éster etílico do ácido [7,7-dimetila-2- (5-metila-1H-pirazol-3-il)-6-oxo-6,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f]indol-5-il]-acético (38%).

MS: M = 368.34 (ESI+).

1H-RMN (400 MHz. Dg-DMSO-DMSO): δ (ppm) = 1,20 (m, 3H), 1,34 (s, 6H), 2,31 (s, 3H), 4,15 (m, 2H), 4,60 (s, 2H), 6,55 (s, 1H), 6,94 e 7,17 (bm, 1H), 7,38 e 7,59 (bm, 1H), 12,63 (m, 1H), 12,90 (m, 1H). Exemplo 8

N-benzila-2-r7.7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-6-oxo-6,7-diidro-3H- imidazor4.5-flindol-5-in-acetamida.

ma mistura de éster etílico do ácido [7,7-dimetila-2-(5-metila-1 H- pirazol-3-il)-6-oxo-6,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f]indol-5-il]-acético (30 mg, 0,082 mmol), benzilamina (107 mg, 110 μΙ, 1,0 mmol) e cloreto de amônio (2,5 mg, 0,047 mmol) foi aquecida em frasco selado sob uma atmosfera do nitrogênio a 160°C por 3h. Após resfriar até a temperatura ambiente a mistura reacional foi tratada com água. A fase aquosa foi extraída três vezes com acetato de etila. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre MgSÜ4 e o solvente foi evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia de HPL para forne- cer 21 mg de N-benzila-2-[7,7-dimetila-2-(5-metila-1 H-pirazol-3-il)-6-oxo-6,7- diidro-3H-imidazo[4,5-f]indol-5-il]-acetamida (53%).

De um modo análogo ao descrito para o Exemplo, 8 os seguin-

tes exemplos de 9 a 12 foram preparados a partir das aminas apropriadas:

<table>table see original document page 40</column></row><table> <table>table see original document page 41</column></row><table>

Exemplo 13:

5-(2-dietilamino-etila)-7,7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H imidazo[4,5-flindol-6-ona.

i) 5,6-diamino-1-[2-(terc-butila-dimetila-silanilóxi)-etila1-3,3-dimetila-1,3-di indolin-2-ona.

O 5,6-diamino-1-[2-(terc-butila-dimetila-silanilóxi)-etila]-3,3-dime- tila-1,3-diidro-indol-2-ona foi preparado de um modo análogo ao descrito no Exemplo 1, etapa i, usando-se (2-bromo-etóxi)-terc-butila-dimetila-silano em vez do 1-bromo-2-metóxi-etano de como o agente de alquilação.

ii) 5-[2-(terc-butila-dimetila-silanilóxi)-etila1-7,7-dimetila-2-(5-metila-1H- pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H-imidazor4,5-flindol-6-ona. O 5-[2-(terc-Butil-dimetila-silanilóxi)-etila]-7,7-dimetila-2-(5-meti- la-1H-pirazol-3-il)-5,-diidro-3H-imidazo[4,5-f]indolin-6-ona, foi preparado de um modo análogo ao descrito no Exemplo 1, na etapa ii, a partir do 5-metila- 1H-pirazol-3-ilcarbaldeído e do 5,6-diamino-1-[2-(terc-butila-dimetila- silanilóxi)-etila]-3,3-dimetila-1,3-diídro-indolin-2-ona.

iii) 5-(2-hidróxi-etila)-7.7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H- imidazo [4,5-fl indol-6-ona

À uma solução de 5-[2-(terc-butila-dimetila-silanilóxi)-etila]-7,7- dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f]indol-6-ona (790 mg, 1,80 mmol) em tetraidrofurano (THF) (4ml) foi adicionada uma so- lução de fluoreto tetra-N-butilamônio (1M em THF, 5391 μΙ, 5,39 mmols). Depois de 1 h na temperatura ambiente o solvente foi removido e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila. A fase orgânica foi lavada com água e se- ca sobre sulfato de sódio. O solvente foi evaporado e o resíduo foi seco sob vácuo elevado para fornecer 585 mg de 5-(2-hidróxi-etila)-7,7-dimetila-2-(5- metila-1H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f]indolin-6-ona que foi usado sem purificação adicional.

iv) 5-(2-bromo-etila)-7.7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5.7-diidro-3H- imidazo[4,5-f|indol-6-ona.

À uma solução de 5-(2-hidróxi-etila)-7,7-dimetila-2-(5-metila-1 H- pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f] indolin-6-ona (585 mg, 1,80 mmol) em diclorometano (20 ml) forma adicionados o tetrabrometo de carbono (1431 mg, 4,32 mmols), a trifenilfosfina (1132 mg, 4,32 mmols) e a trietilami- na (182 mg, 1,80 mmol). Depois de 5h na temperatura ambiente o solvente foi evaporado e ao resíduo foi adicionado acetato de etila. A fase orgânica foi lavada com salmoura. As fases aquosa combinadas foram extraídas com CH2Cfe. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre o sulfato de magnésio e o solvente foi evaporado. O resíduo foi submetido à cromatogra- fia de gel de silicone (acetato de etila/metanol 100:0-95:5-90:10) e à croma- tografia de HPL para fornecer o 5-(2-bromo-etila)-7,7-dimetila-2-(5-metila- 1 H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f] indol-6-ona.

v) 5-(2-dietilamino-etila)-7.7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5.7-diidro- 3H-imidazo[4,5-f]indol-6-ona.

A uma solução de 5-(2-bromo-etila)-7,7-dimetila-2-(5-metila-1H- pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H-imidazo[4,5-f]indolin-6-ona (58,5 mg, 0,15 mmol) em toluene (livre de água, 5 ml) foi adicionada a dietilamina (551 mg, 7,53 mmol). Depois do aquecimento sob refluxo por 2h o solvente foi evaporado e o resíduo foi purificado por cromatografia de HPL para fornecer 28,6 mg de 5-(2-dietilamino-etila)-7,7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-3H- imidazo[4,5-f]indolin-6-ona (50%).

MS: M = 379,1 (ESI -).

1H-RMN (400 MHz. Pg-DMSO): δ (ppm) = 0,89 (t, 6H), 1,30 (s, 6H), 2,31 (s, 3H), 2,50 (m, 4H), 2,63 (t, 2H), 3,76 (t, 2H), 6,56 (s, 1H), 7,06 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 12,55 (s, 2H).

Exemplo 14:

5-(2-amino-etila)-7,7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-1H- imidazo[4,5-f]indol-6-ona.

A [7,7-dimetila-2-(5-metila-1 H-pirazol-3-il)-6-oxo-6,7-diidro-1H- imidazo[4,5-f]indol-5-il]-acetonitrila (170 mg, 0,531 mmol) foi hidrogenada em amônia metanólica 2M (20 ml) na presença de Niquel-Raney (5 mg) por 5h a 4MPa (40 mbar). O catalizador extraído por filtração e o solvente evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia de HPL para fornecer 13,7 mg de 5-(2-amino-etila)-7,7-dimetila-2-(5-metila-1H-pirazol-3-il)-5,7-diidro-1H- imidazo[4,5-f]indol-6-ona.

MS: M = 325.2 (ESI+).

1H-RMN (400 MHz, Dfi-DMSO): δ (ppm) = 1,32 (m, 6H), 1,91 (s, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,96 (m, 2H), 3,89 (m, 2H), 6,57 (s, 1H), 7,04 e 7,57 (s, 1H, dois formas tautoméricas), 7,38 (s, 1H), 12,65 e 12,90 (s, 2H, duas formas tautoméricas).

Claims

1. Composto de acordo com a Fórmula I, <formula>formula see original document page 44</formula> Fórmula I Em que: R1, é alquila, que é substituída uma ou várias vezes por halogênio, nitro, da- no, hidróxi, amino, heterociclila, -C(O)OH1 -C(O)NH2 ou -Y-R6; ou é alqueni- la, que é opcionalmente substituído uma ou várias vezes por halogênio, ni- tro, ciano, hidróxi, amino, -C(O)OH, -C(O)NH2 ou -Y-R6; ou É alquinila, que é opcionalmente substituída uma ou várias ve- zes por halogênio, nitro, ciano, hidróxi, amino, -C(O)OH, -C(O)NH2 ou -Y-R6; Y é -C(O)NH-, -C(O)N(alquila)-, -N(alquila)C(O)-, -NHC(O)-, -NHC(O)NH-, - NHC(O)N(alquila)-, -NHS(O)2-, -S(O)2NH-, -S(O)2N(alquila)-, -S(O)2-, -S(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-, -P(O)(alquila)-, -NH-, -N(alquila)-, -O- ou -S-; R6 é alquila, em que a dita alquila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por halogênio, hidróxi, alcóxi, alcoxialcóxi, amino, alquilamino, dialqui- lamino, -C(O)OH ou -C(O)NH2; É -(CH2)n-arila, em que a arila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por halogênio, ciano, nitro, amino, hidróxi, alquila(C1-C4), alcóxi(Cr C4), alquila(C1-C4) halogenado ou alcóxi(C1-C4) halogenado; heteroarila, em que a heteroarila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por alqui- la; cicloalquila; ou heterociclila; n é O, 1 ou 2; R2 é hidrogênio ou alquila; R3 é hidrogênio ou alquila; ou alternativamente R2 e R3 formam juntamente com o átomo de carbono ao qual estão unidos um anel de cicloalquila; R4 é hidrogênio ou alquila; R5 é hidrogênio, alquila, alquila halogenado ou cicloalquila; X é uma ligação simples, -CH2- ou -C(alquila)2-; e todos os sais farmaceuti- camente aceitáveis dos mesmos.

2. Compostos de acordo com a reivindicação 1, em que: R1 é alquila, que é substituída uma ou várias vezes por ciano, amino, heterociclila ou -Y-R6; ou É uma álquenila.

3. Compostos de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 2, em que: R2 é hidrogênio ou alquila; R3 é hidrogênio ou alquila; R4 é hidrogênio; R5 é alquila alquila ou halogenado; e X é uma ligação simples.

4. Compostos de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 3, em que: Y é -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)-, -N(alquila)- ou -O-.

5. Compostos de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a -4, em que: R6 é alquila; É -(CH2)n-arila, em que a arila é opcionalmente substituída uma ou várias vezes por halogênio ou alcóxi(C1-C4); ou heterociclila; e n é 0 ou 1.

6. Processo para a preparação dos compostos de acordo com a Fórmula I, como definido na reivindicação 1, compreendendo as etapas de: a) reagir um composto de acordo com a Fórmula II, <formula>formula see original document page 45</formula> Fórmula II Em que: R1 a R3 e a X possuem o significado dado acima para a Fórmula I; Com um composto de acordo com a Fórmula IV, <formula>formula see original document page 46</formula> Em que A é -OH, -CI, -H ou -OMe e R4 e R5 possuem o significado dado a- cima para a Fórmula I; para fornecer os compostos de acordo com a Fórmu- Ia I, Fórmula I Em que de R1 a R5 e X possuem o significado dado acima para a Fórmula I; b) isolar o dito composto de acordo com a Fórmula I da mistura reacional, e c) se desejado, converter o dito composto em um sal ou éster farmaceutica- mente aceitável.

7. Composição farmacêutica, contendo um ou mais compostos como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 5, juntamente com veículos farmaceuticamente aceitáveis.

8. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 7, para o tratamento do câncer.

9. Uso de um composto como definida em qualquer uma das reivindicações de 1 a 5, para a produção dos medicamentos corresponden- tes para o tratamento do câncer.

10. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 5, para o tratamento do câncer.