BRPI0620251A2

BRPI0620251A2 - compostos de nitroimidazol

Info

Publication number: BRPI0620251A2
Application number: BRPI0620251-9A
Authority: BR
Inventors: Sejal Patel; Thomas Hugo Keller; Clifton E Barry Iii; Cynthia S Dowd; Jan Jiricek
Original assignee: Us Dept Of Health; Novartis Ag
Priority date: 2005-12-23
Filing date: 2006-12-22
Publication date: 2011-11-08
Also published as: JP2009521464A; CA2631661A1; RU2008129726A; EP1984369A2; WO2007075872A3; KR20080079280A; WO2007075872A2; US20080275035A1; AU2006331676A1

Abstract

COMPOSTOS DE NITROIMIDAZOL. A presente invenção refere-se a certos compostos de nitroimidazol que tem propriedades farmaceuticas interessantes. Em particular, os compostos são úteis no tratamento e/ou prevenção de infecções tais como aquelas causadas por Mycobacterium tuberculosis, Trypanosoma cruzi ou Leishmania donovani. A invenção também refere-se às composições farmaceuticas que contem os compostos, assim como processos para a sua preparação.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSTOS DE NITROIMIDAZOL".

CAMPO TÉCNICO

A presente invenção refere-se a compostos de nitroimidazol, a processos para a sua produção, seu emprego como produtos farmacêuticos e composições farmacêuticas que os compreendem.

ANTECEDENTES

Tuberculose (TB), uma das doenças mais antigas conhecidas para a espécie humana, é causada pela bactéria Mycobacterium tuberculo- s/s (MTB). A doença é contagiosa e, como o resfriado comum, pode ser fa- cilmente propagada através do ar pela tosse e espirro. Atualmente, MTB in- fecta um terço da população mundial e é a segunda causa principal de mor- talidade de adulto por uma doença infecciosa depois da AIDS, com uma morte por TB a cada 15 segundos. Durante as últimas duas décadas, houve um ressurgimento de casos de TB, particularmente em áreas como o Sudes- te da Ásia e próximo ao Sahara Africano.

O primeiro fármaco anti-TB eficaz, estreptomicina, foi introduzido em 1946. Entretanto, a monoterapia tornou-se ineficaz rapidamente por cau- sa do desenvolvimento da resistência bacteriana. Como foram descobertos mais antimicobacterianos, terapias de combinação com dois ou mais fárma- cos foram possíveis para reprimir o aparecimento de resistência. O último novo fármaco anti-TB, rifampicina, foi introduzido nos anos sessenta. Duran- te os últimos trinta anos, nenhum fármaco para TB com um novo modo de ação foi introduzido. A terapia atual para TB é eficaz mas envolve múltiplos fármacos. Esta envolve o tratamento inicial com rifampicina, isoniazida, pira- zinamida e etambutol durante dois meses, seguida por terapia de continui- dade com rifampicina e isoniazida durante outros 4 meses. A desvantagem principal deste regime é o tempo de tratamento longo, o que torna a compla- cência do paciente e a implementação adequada um desafio. Mais de dois terços dos pacientes de TB não recebem tratamento de TB completo e ade- quado, o que resulta em uma alta taxa de recaída e surgimento de resistên- cia ao fármaco. Atualmente, cerca de 4% dos casos de TB no mundo inteiro são resistentes a múltiplos fármacos (MDR) isto é resistentes tanto a isonia- zida quanto a rifampicina. MDR-TB é difícil de curar, com tempo de trata- mento de até 2 anos e uma alta taxa de insucessos. Novos fármacos para TB são urgentemente necessários para encurtar o tempo de tratamento e para tratar TB resistente a múltiplos fármacos de um modo mais eficaz.

Leishmaniose é causada por uma dentre mais de 20 variedades de protozoários parasitários que pertencem ao gênero Leishmanial é trans- mitida pela picada de mosquitos pólvora fêmeas. Leishmaniose é endêmica em cerca de 88 países, compreendendo muitas áreas tropicais e subtropi- cais.

Existem quatro formas principais de leishmaniose. Leishmaniose visceral, também chamada calazar, é a forma mais séria e é causada pelo parasita Leishmania donovani. Pacientes que desenvolvem leishmaniose visceral podem morrer em meses a menos que eles recebam tratamento. As duas terapias principais para leishmaniose visceral são os derivados de an- timônio, estibogliconato de sódio (Pentostam®) e antimoniato de meglumina (Glucantim®). Estibogliconato de sódio foi empregado durante aproximada- mente 70 anos e a resistência a este fármaco é um problema crescente. A- lém disso, o tratamento é relativamente longo e doloroso, e pode causar e- feitos colaterais indesejáveis.

A doença de Chagas (também chamada tripanossomíase ameri- cana) é outra doença parasitária humana que é endêmica entre populações pobres no continente americano. A doença é causada pelo parasita protozo- ário Trytanosoma cruzi, que é transmitido a seres humanos por insetos su- gadores de sangue. A doença humana ocorre em duas fases: a fase aguda, que ocorre logo após a infecção, e a fase crônica que pode desenvolver-se durante muitos anos. Infecções crônicas resultam em vários distúrbios neu- rológicos, compreendendo demência, dano ao músculo do coração e às ve- zes dilatação do trato digestivo, assim como perda de peso. Não tratada, a doença crônica é freqüentemente fatal.

Os fármacos atualmente disponíveis para tratamento da doen- ças de Chagas são Nifurtimox e Benznidazol. Entretanto, problemas com estas terapias atuais incluem seus efeitos colaterais adversos, a duração do tratamento, e a exigência quanto à supervisão médica durante o tratamento. Além disso, o tratamento realmente só é eficaz quando administrado durante a fase aguda da doença. A resistência aos dois fármacos da linha de frente já surgiu. O agente antifúngico Anfotericina b foi proposto como um fármaco de segunda linha, mas este fármaco é dispendioso e relativamente tóxico.

Há também por conseguinte uma necessidade com relação a novos fármacos que melhorem os tratamentos atuais de Leishmaniose e doença de Chagas.

W097/01562 descreve vários compostos de nitroimidazol, entre outros PA-824 que é útil para tratamento de TB. Entretanto, PA-824 tem uma rotina dispendiosa de síntese, uma formulação de comprimidos complicada (devido a sua baixa solubilidade) e há uma necessidade quanto à melhora adicional em eficácia.

É um objetivo da presente invenção fornecer compostos melho- rados que sejam adequados para usos farmacêuticos, de preferência tendo uma rotina simples de síntese e propriedades melhoradas com respeito à eficácia, solubilidade e estabilidade.

Surpreendentemente foi descoberto que os compostos de nitro- imidazol da presente invenção têm propriedades vantajosas para uso farma- cêutico.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Em um primeiro aspecto, a invenção fornece um composto de fórmula (I), ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste:

<formula>formula see original document page 4</formula> W é O e V está ausente;

um dentre R1 e R3 é haloarila e o outro é H; e R2 e R4 ambos são

H;

ou:

5 (b) m é 1;

W é N e V é um grupo alquilarila, opcionalmente substituído com um ou mais substituintes de alcóxi;

R1 e R3 ambos são H; e

um dentre R2 e R4 é alcóxi e o outro é H;

ou:

(c) m é 1;

W é O e V está ausente;

um dentre Ri e R3 é alquila ou arila, e o outro é H; e R2 e R4 ambos são H;

ou:

(d) m é 1;

W é O e V está ausente;

um dentre R2 e R4 é -L(B)n-(Z)p, -(L-B)q-(Z)p ou -Y-(B)q-Z, e o ou- tro é H; e

R1 e R3 ambos são H;

em que L é um grupo atômico que tem a fórmula -O-Rs- onde R5 é um alquileno inferior, -C(O)-, alquileno inferior-C(O)-, -C(0)-alquileno infe- rior, alquileno inferior-C(0)-NH-, alquileno inferior-NH-; B é um anel de ciclo- alquila, heterocíclico, de arila ou de heteroarila que é opcionalmente também substituído com um ou mais substituintes; η é 1 ou 2; e Z é halogênio, alquila inferior substituída com pelo menos um halogênio, alcóxi inferior substituído com pelo menos um halogênio ou tioalquila inferior substituída com pelo me- nos um halogênio;

e Y é -NHC(O)-;

η é 1 ou 2; ρ é 0, 1 ou 2; e q é 1 ou 2;

com a condição de que se R2 ou R4 for -L-(B)n-(Z)p em que η é 1, B é fenila e L é -O-CH2-, então ρ não seja 0; e com a condição de que se R2 ou R4 for -(L-B)q-(Z)p em que q é 2, ambos os grupos B são fenila e L é -O-CH2-, então ρ não seja 0;

e com a condição de que se R2 ou R4 for -L-(B)n-(Z)p em que η é 1, B é fenila e L é -O-CH2-, então Z não seja 4-trifluorometóxi, 4-flúor, 4- trifluoroetóxi, 4-pentafluoropropóxi, 4-tetrafluoropropóxi, 4-trifluorometila, 2,4- difluorometila ou 2,4-diflúor.

De preferência o composto é um composto de fórmula (I) em que (d) acima referido aplica-se.

Onde o composto é um composto de fórmula (I) em que (a) aci- ma referido aplica-se, é preferido que um dentre Ri e R3 seja 4-fluorofenila.

Onde o composto é um composto de fórmula (I) em que (b) aci- ma referido aplica-se, é preferido que V seja um grupo benzila opcionalmen- te substituído com um ou mais grupos metóxi. É também preferido que um dentre R2 e R4 seja um grupo metóxi.

Onde o composto é um composto de fórmula (I) em que (c) aci- ma referido aplica-se, é preferido que um dentre Ri e R3 seja um grupo etila, pentila ou fenila.

Onde o composto é um composto de fórmula (I) em que (d) aci- ma referido aplica-se, e em que um dentre R2 e R4 é -Y-(B)q-Z é preferido que B seja um grupo piperidina, pirimidina ou fenila. Também é preferido que p seja 1.

Onde o composto é um composto de fórmula (I) em que (d) aci- ma referido aplica-se, e em que um dentre R2 e R4 é -(L-B)q-(Z)p é preferido que B seja fenila ou cicloexila. Também é preferido que L seja -O-alquileno inferior, mais preferivelmente -O-CH2-.

Onde o composto é um composto de fórmula (I) em que (d) aci- ma referido aplica-se, e em que um dentre R2 e R4 é -L-(B)n-(Z)p é preferido que L seja -OCH2C(O)-, -OCH2C(O)NH-, -OCH2C(O)N-, -OCH2C(O)NHCH2-, -OCH2- ou -OCH2CH2-. Mais preferivelmente L é -OCH2C(O)-. Também é preferido que B seja um anel de cicloalquila, heterocíclico, de arila ou de he- teroarila de 4 a 12, de preferência 5 ou 6 membros. O anel pode opcional- mente ser também substituído com um ou mais substituintes, de preferência selecionados do grupo que consiste em alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino ou alcóxi inferior. Em uma modalidade preferida, B é um anel cíclico selecionado do grupo que consiste em ciclopentila, cicloexila, fenila, morfoli- nila, piperazinila, piperidinila, piridila, pirrolidinila, pirazinila, pirimidinila, puri- nila, piranila, benzimidazolila, benzoxazolila, benztiazolila, naftila, indolila, indolinila, quinolinila, isoquinolinila, 1,2,3,4-tetraidroquinolinila, tiazolila, imi- dazolila, benzotriazolila, indanila, oxadiazolila, pirazolila, triazolila, ou tetrazo- lila. Em uma modalidade ainda mais preferida, B é um anel cíclico selecio- nado do grupo que consiste em piperazinila, fenila, piridila, benzimidazolila, benztiazolila, benzoxazolila, tiazolila. De preferência Z é halogênio, alquila inferior substituída com pelo menos um halogênio ou alcóxi inferior substituí- do com pelo menos um halogênio, tal como por exemplo halometila, dialo- metila, trialometila, pentaaloetila, halometóxi, dialometóxi, trialometóxi, pen- taaloetila ou pentaaloetóxi.

Onde o composto é um composto de fórmula (I) em que (d) aci- ma referido aplica-se, e em que um dentre R2 e R4 é -L-(B)n-(Z)p é preferido que B seja um grupo piperazina, piridina, fenila ou benzimidazol, ou um gru- po oxazol ou tiazol, opcionalmente fundido a um anel de fenila. Também é preferido que ρ seja 1.

Onde o composto é um composto de fórmula (I) em que (d) aci- ma referido aplica-se, é preferido que Z seja F, Br, trifluorometila, trifluorome- tóxi ou -SCF3.

Onde o composto é um composto de fórmula (I) em que (d) aci- ma referido aplica-se, é preferido que ρ seja 1.

De preferência o composto é um composto de fórmula (II), ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste:

<formula>formula see original document page 7</formula>

em que:

L é um grupo atômico que tem a fórmula -OR5- em que R5 é um alquileno inferior, -C(O)-, alquileno inferior-C(O)-, -C(O)-alquileno inferior, alquileno inferior-C(0)-NH-, alquileno inferior-NH-. Em uma modalidade pre- ferida L é selecionado do grupo que consiste em -OCH2C(O)-, -OCH2C(O)NH-, -OCH2C(O)N-, -OCH2C(O)NHCH2-, -OCH2- e -OCH2CH2-;

B é um anel de cicloalquila, heterocíclico, de arila ou de heteroa- rila de 4 a 12, de preferência 5 ou 6 membros. O anel pode opcionalmente ser também substituído com um ou mais substituintes, de preferência sele- cionados do grupo que consiste em alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino ou alcóxi inferior. Em uma modalidade preferida, B é um anel cíclico selecio- nado do grupo que consiste em ciclopentila, cicloexila, fenila, morfolinila, pi- perazinila, piperidinila, piridila, pirrolidinila, pirazinila, pirimidinila, purinila, piranila, benzimidazolila, benzoxazolila, benztiazolila, naftila, indolila, indolini- la, quinolinila, isoquinolinila, 1,2,3,4-tetraidroquinolinila, tiazolila, imidazolila, benzotriazolila, índanila, oxadiazolila, pirazolila, triazolila, ou tetrazolila. Em uma modalidade preferida, B é um anel cíclico selecionado do grupo que consiste em piperazinila, fenila, piridila, benzimidazolila, benztiazolila, ben- zoxazolila, tiazolila;

Z é halogênio, alquila inferior substituída com pelo menos um halogênio ou alcóxi inferior substituído com pelo menos um halogênio, tal como por exemplo halometila, dialometila, trialometila, pentaaloetila, halome- tóxi, dialometóxi, trialometóxi, pentaaloetila ou pentaaloetóxi. De preferência o halogênio é flúor ou cloro, sendo o flúor o halogênio mais preferido. Z pode ser ligado a qualquer posição das estruturas de anel de B, mas é de prefe- rência ligado à posição meta, mais preferivelmente à posição para da estru- tura de anel. No caso em que η = 2, Z é de preferência ligado no anel cíclico externo, isto é, o anel cíclico que não é ligado diretamente à L, η é 1 ou 2, de preferência 2;

com a condição de que se η for 1 então B não seja fenila ou se η for 1 e B for fenila então L seja -OCH2C(O)NH- ou -OCH2C(O)NHCH2-.

Em particular, a presente invenção abrange 2-nitro-6,7-diidro- 5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazina 6-substituída de fórmula (i), e 2-nitro-6,7- diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazina 6-substituída de fórmula (ii). <formula>formula see original document page 9</formula>

Em uma modalidade preferida, a presente invenção refere-se a um composto, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste, da fórmula:

<formula>formula see original document page 9</formula>

em que L e Z são tais como definidos acima para o composto de fórmula (II) e em que X é independentemente C ou N e em que 0, 1, 2, 3 ou 4 X são N, com a condição de que a estrutura de anel seja quimicamente estável e em que cada anel pode independentemente ser também substituído por 1, 2, 3 ou mais substituintes, por exemplo selecionados do grupo que consiste em alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino ou alcóxi inferior. Em uma modali- dade preferida, dois X não adjacentes são Ν, o X ligado ao N da outra estru- tura cíclica é C, L é selecionado do grupo que consiste em -OCH2C(O)-, -OCH2C(O)NHCH2-, -OCH2-, -OCH2CH2- e Z é selecionado do grupo que consiste em -F, -CF3, ou -OCF3. De preferência, Z está na posição 3, mais preferivelmente na posição 4.

Em outra modalidade preferida, a presente invenção refere-se a um composto, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste, da fórmula:

<formula>formula see original document page 9</formula>

em que L e Z são tais como definidos acima para o composto de fórmula (II) e em que X é independentemente C ou N e em que cada anel pode inde- pendentemente ser também substituído por 1, 2, 3 ou mais substituintes, por exemplo selecionados do grupo que consiste em alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino ou alcóxi inferior. Em uma modalidade preferida, L é selecio- nado do grupo que consiste em -OCH2C(O)-, -OCH2C(O)NHCH2-, -OCH2-, -OCH2CH2- e Z é selecionado do grupo que consiste em -F1 -CF3, ou -OCF3. De preferência, Z está na posição 3, mais preferivelmente na posição 4.

<formula>formula see original document page 10</formula>

em que LeZ são tais como definidos acima para o composto de fórmula (II) e em que cada anel pode independentemente ser também substituído por 1, 2, 3 ou mais substituintes, por exemplo selecionados do grupo que consiste em alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino ou alcóxi inferior. Em uma mo- dalidade preferida, L é selecionado do grupo que consiste em -OCH2C(O)-, -OCH2C(O)NHCH2-, -OCH2CH2- e -OCH2- e Z é selecionado do grupo que consiste em -F, -CF3, ou -OCF3. De preferência, Z está na posição 4 ou 7, mais preferivelmente na posição 5 e 6.

<formula>formula see original document page 10</formula>

em que LeZ são tais como definidos acima para o composto de fórmula (II) e em que Y é O ou N e em que cada anel pode independentemente ser tam- bém substituído por 1, 2, 3 ou mais substituintes, por exemplo selecionados do grupo que consiste em alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino ou alcóxi inferior. Em uma modalidade preferida, L é selecionado do grupo que consis- te em -OCH2C(O)-, -OCH2C(O)NH-, -0CH2C0(0)NHCH2-, -OCH2CH2- e -OCH2- e Z é selecionado do grupo que consiste em -F, -CF3, ou -OCF3. De preferência, Z está na posição 4 ou 7, mais preferivelmente na posição 5 e 6.

<formula>formula see original document page 11</formula>

em que L e Z são tais como definidos acima para o composto de fórmula (II) e em que cada anel pode independentemente ser também substituído por 1, 2, 3 ou mais substituintes, por exemplo selecionados do grupo que consiste em alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino ou alcóxi inferior. Em uma mo- dalidade preferida, L é selecionado do grupo que consiste em -OCH2C(O)-, -OCH2C(O)NH-, -OCH2C(O)NHCH2-, -OCH2CH2- e -OCH2- e Z é seleciona- do do grupo que consiste em -F, -CF3, ou -OCF3. De preferência, Z está na posição 3, mais preferivelmente na posição 4.

<formula>formula see original document page 11</formula>

Em outro aspecto, a presente invenção refere-se a um compos- to, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste, da fórmula:

<formula>formula see original document page 12</formula>

em que LeZ são tais como definidos acima para o composto de fórmula (II) e em que Y é S ou N e em que cada anel pode independentemente ser tam- bém substituído por 1, 2, 3 ou mais substituintes, por exemplo selecionados do grupo que consiste em alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino ou alcóxi inferior. Em uma modalidade preferida, L é selecionado do grupo que consis- te em -OCH2C(O)-, -OCH2C(O)NH-, -OCH2C(O)NHCH2-, -OCH2CH2- e -OCH2- e Z é selecionado do grupo que consiste em -F, -CF3, ou -OCF3. De preferência, Z está na posição 4 ou 7, mais preferivelmente na posição 5 e 6.

<formula>formula see original document page 12</formula>

em que L e Z são tais como definidos acima para o composto de fórmula (II) e em que cada anel pode independentemente ser também substituído por 1, 2, 3 ou mais substituintes, por exemplo selecionados do grupo que consiste em alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino ou alcóxi inferior. Em uma mo- dalidade preferida, L é selecionado do grupo que consiste em -OCH2C(O)-, -OCH2C(O)NH-, -OCH2C(O)NHCH2- e -OCH2CH2- e Z é selecionado do gru- po que consiste em -F, -CF3, ou -OCF3. De preferência, Z está na posição 3, mais preferivelmente na posição 4.

Em outro aspecto, a presente invenção refere-se a um compos- to, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste, da fórmula: <formula>formula see original document page 13</formula>

É preferido que qualquer grupo arila no composto de fórmula (I) seja um grupo fenila. O grupo arila pode ser opcionalmente substituído com um ou mais substituintes, de preferência selecionados de haloalquila inferior (mais preferivelmente trifluorometila), haloalcóxi inferior (de preferência tri- fluorometóxi) ou halo (de preferência Br, Cl ou F, mais preferivelmente F).

Em outro aspecto, a presente invenção refere-se a um compos- to, ou um sal deste, da fórmula (V):

<formula>formula see original document page 13</formula>

em que LeZ são tais como definidos acima para o composto de fórmula (II) e em que cada anel pode independentemente ser também substituído por 1, 2, 3 ou mais substituintes, por exemplo selecionados do grupo que consiste em alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino ou alcóxi inferior. Em uma mo- dalidade preferida, L é selecionado do grupo que consiste em -OCH2C(O)-, -OCH2C(O)NH-, -OCH2C(O)NHCH2- e -OCH2CH2- e Z é selecionado do gru- po que consiste em -F, -CF3, ou -OCF3. De preferência, Z está na posição 3, mais preferivelmente na posição 4.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I), (II) ou (V), ou um composto de qualquer das fórmulas (la) a (li) tal como definido acima, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste em combinação com um excipiente, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece um composto de fórmula (I), (II) ou (V), ou um composto de qualquer das fórmulas (la) a (li) tal como definido acima, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste para uso como um medicamento.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece um método de tratamento e/ou prevenção de uma doença causada por um micróbio pato- gênico ou um parasita tal como Mycobacterium tuberculosis, Trypanosoma cruzi ou Leishmania donovani compreendendo administrar a um paciente humano ou animal com necessidade deste uma quantidade terapeuticamen- te eficaz de um composto de fórmula (I), (II) ou (V), ou um composto de qualquer das fórmulas (Ia) a (li) tal como definido acima, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste.

Contudo em outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I), (II) ou (V), ou um composto de qualquer das fórmulas (Ia) a (li) tal como definido acima, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste, para a produção de um medicamento para o tratamento e/ou prevenção de uma doença causada por um micróbio patogênico tal como Mycobaeterium tuberculosis.

Contudo em outro aspecto, a presente invenção providencia o emprego de um composto de fórmula (I), (II) ou (V), ou um composto de qualquer das fórmulas (Ia) a (li) tal como definido acima, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste, para a produção de um me- dicamento para o tratamento e/ou prevenção de uma doença causada por um micróbio patogênico tal como Myeobaeterium tuberculosis.

De preferência a doença é TB, mais preferivelmente TB resisten- te a múltiplos fármacos.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece um método de tratamento e/ou prevenção de uma doença ou distúrbio causado por uma infecção por Trypanosoma cruzi ou Leishmania donovani, compreendendo administrar a um paciente humano ou animal com necessidade deste uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (III), ou um sal, éster ou pró- fármaco farmaceuticamente aceitável deste:

<formula>formula see original document page 14</formula> em que:

(a) m é 0;

W é O e V está ausente;

um dentre R1 e R3 é haloarila ou alquila e o outro é H, ou Rt e R3 ambos são um grupo alquila inferior; e

R2 e R4 ambos são H; ou:

(b) m é 1

R1 e R3 ambos são H; e

um dentre R2 e R4 é alcóxi e o outro é H; ou:

(c) m é 1;

W é O e V está ausente;

um dentre Ri e R3 é alquila ou arila, e o outro é H; e R2 e R4 ambos são H;

ou:

(d) m é 1;

W é O e V está ausente;

um dentre R2 e R4 é -L(B)n-(Z)p, -(L-B)q-(Z)p ou -Y-(B)q-Z1 e o ou- tro é H;

e

R1 e R3 ambos são H;

em que L é um grupo atômico que tem a fórmula -O-R5- onde R5 é um alquileno inferior, -C(O)-, alquileno inferior-C(O)-, -C(0)-alquileno infe- rior, alquileno inferior-C(0)-NH-, alquileno inferior-NH-; B é um anel de ciclo- alquila, heterocíclico, de arila ou de heteroarila que é opcionalmente também substituído com um ou mais substituintes; e Z é halogênio, alquila inferior substituída com pelo menos um halogênio, alcóxi inferior substituído com pelo menos um halogênio ou tioalquila inferior substituída com pelo menos um halogênio; e Y é -NHC(O)-;

n é 1 ou 2; p é 0, 1 ou 2; e q é 1 ou 2.

Contudo em outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I), (II), (III) ou (V), ou um composto de qualquer das fórmulas (Ia) a (Ii) tal como de- finido acima, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste, para a produção de um medicamento para o tratamento e/ou preven- ção de uma doença causada por um parasita tal como Trypanosoma cruzi ou Leishmania donovani.

Contudo em outro aspecto, a presente invenção providencia o emprego de um composto de fórmula (I), (II), (III) ou (V), ou um composto de qualquer das fórmulas (Ia) a (Ii) tal como definido acima, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste, para a produção de um me- dicamento para o tratamento e/ou prevenção de uma doença causada por um parasita tal como Trypanosoma cruzi ou Leishmania donovani.

De preferência a doença é doença de Chagas ou Leishmaniose. Em outro aspecto, a presente invenção fornece um composto de fórmula (I), (II), (III) ou (V), ou um composto de qualquer das fórmulas (Ia) a (li) tal como definido acima, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceutica- mente aceitável deste para emprego em combinação com um fármaco para TB de primeira linha ou um de segunda linha. Entretanto em outro aspecto, a presente invenção fornece uma combinação compreendendo a) um compos- to de fórmula (I), (II), (III) ou (V), ou um composto de qualquer das fórmulas (Ia) a (Ii) tal como definido acima, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceu- ticamente aceitável deste e b) pelo menos um fármaco para TB selecionado do grupo que consiste em Isoniazida, Rifampicina, Pirazinamida, Etambutol, Estreptomicina, Capreomicina, Canamicina, Etioamida, Ácido para-aminos- salicílico (PAS), Ciclosserina, Ciprofloxacinoo, Ofloxacino, Amicacina, Clofa- zimina, Tiacetazona, Gatifloxacino, Moxifloxacino.

Entretanto em outro aspecto, a invenção fornece um método pa- ra a preparação de um composto heterocíclico de nitrogênio, onde o método compreende: reação de um epóxido substituído não impedido estericamente com um composto de haloimidazol, em que a relação molar do epóxido substituído não impedido estericamente para o composto de haloimidazol é menor do que ou igual a 1:1, para formar um aduzido com um grupo funcio- nal de álcool;

proteção do grupo funcional de álcool no aduzido para formar um aduzido protegido por álcool; e

tratamento do aduzido protegido por álcool com um agente de ciclização pa- ra formar o composto heterocíclico de nitrogênio.

De preferência o composto heterocíclico de nitrogênio, na forma livre ou de sal, é representado por um composto de fórmula (IV)

<formula>formula see original document page 17</formula>

em que R1 = nitro, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alco- xicarbonila; R2 = 2-tetraidropiranila, 2-etoxietila, tritila, metila, etila, alila, tri- metilsililetoximetila, 2,2,2-tricloroetila, benzila, trimetilsilila, f-butildimetilsilila, fenildimetilsilila, tri/sopropilsilila ou f-hexildimetilsilila; R3 = H, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila.

De preferência o epóxido substituído não impedido estericamen- te também compreende uma porção de álcool mascarada. Também é prefe- rido que o epóxido substituído não impedido estericamente seja representa- do pelo composto de fórmula (Ij)

<formula>formula see original document page 17</formula>

em que R4 = H, alquila, alquenila, arila, heteroalquila, heteroalquenila ou he- teroarila; R5 = H, alquila, alquenila, arila, heteroalquila, heteroalquenila ou heteroarila; R6 = trimetilsilila, trietilsilila, f-butildimetilsilila, dibutilmetilsilila, difenilmetilsilila, fenildimetilsilila ou difenil-f-butilsilila.

Também é preferido que o composto de haloimidazol seja repre- sentado por um composto de fórmula (Ik)

<formula>formula see original document page 18</formula>

em que X = Cl, Br ou I; Y = H, Li, Na, K, CO2H, CO2", f-butoxicarbonila, N,N- dimetilaminossulfonila, p-toluenossulfonila, ou tri/sopropilsilila; R1 = nitro, aci- la, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila; R3 = H, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila.

Entretanto também é preferido que o aduzido protegido por ál- cool seja representado por um composto de fórmula (Im)

<formula>formula see original document page 18</formula>

em que R1 = nitro, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alco- xicarbonila; R2 = 2-tetraidropiranila, 2-etoxietila, tritila, metila, etila, alila, tri- metilsililetoximetila, 2,2,2-tricloroetila, benzila, trimetilsilila, f-butildimetilsilila, fenildimetilsilila, tri/sopropilsilila ou f-hexildimetilsilila; R3 = H, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila; R4 = H, alquila, al- quenila, arila, heteroalquila, heteroalquenila ou heteroarila; R5 = H, alquila, alquenila, arila, heteroalquila, heteroalquenila ou heteroarila; R6 = H, trimetil- silila, trietilsilila, f-butildimetilsilila, dibutilmetilsilila, difenilmetilsilila, fenildime- tilsilila ou difenil-f-butilsilila; X = Cl, Br ou I.

De preferência a relação molar do epóxido substituído não im- pedido estericamente para o composto de haloimidazol é na faixa de 0,55 a 0,95:1, mais preferivelmente na faixa de 0,6 a 0,9:1, ainda mais preferivel- mente na faixa de 0,65 a 0,85:1, ainda mais preferivelmente na faixa de 0,65 a 0,8:1, ainda mais preferivelmente na faixa de 0,7 a 0,85:1, ainda mais pre- ferivelmente na faixa de 0,7 a 0,8:1.

De preferência o epóxido substituído não impedido estericamen- te é reagido com um composto de haloimidazol, para formar o aduzido com um grupo funcional de álcool em uma faixa de temperaturas de 45 a 105°C, mais preferivelmente 55 a 95°C, ainda mais preferivelmente 65 a 85°C, ain- da mais preferivelmente 60 a 80°C.

De preferência o composto de haloimidazol contém um substitu- inte de halogênio selecionado do grupo que consiste em cloro ou bromo.

Também é preferido que o grupo funcional de álcool no aduzido seja tratado para formar o aduzido protegido por álcool na presença de um catalisador.

De preferência o catalisador é sulfonato de piridínio-p-tolueno. Também é preferido que o agente de ciclização seja selecionado do grupo que consiste em TBAF anidroso, TBABr anidroso ou NaH.

De preferência o aduzido protegido por álcool é tratado com um agente de ciclização para formar o composto heterocíclico de nitrogênio sob condições de microondas.

De preferência o aduzido de álcool desprotegido primário é tra- tado com um agente de ciclização para formar o composto heterocíclico de nitrogênio sob condições de microondas.

Também é preferido que o aduzido protegido por álcool seja tra- tado com um agente de ciclização para formar o composto heterocíclico de nitrogênio a vácuo.

De preferência Fb é tetraidropiranila. De preferência Ffe = H. De preferência R4 e R5 são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio e alquila. De preferência R6 é f-butildimetilsilila (TBDMS).

Mais preferivelmente R3, R4, e R5 são todos H.

De preferência o composto heterocíclico de nitrogênio é um 3- alquilóxi-6-nitro-2H-3,4-diidro-[2-1b]imidazopirano ou um 3-arilóxi-6-nitro-2H- 3,4-diidro-[2-1b]imidazopirano. Mais preferivelmente o 3-alquilóxi-6-nitro-2H- 3,4-diidro-[2-1b]imidazopirano ou o 3-arilóxi-6-nitro-2H-3,4-diidro-[2-1b] imi- dazopirano é um isômero (S) ou (R).

Em uma modalidade preferida, o composto heterocíclico de ni- trogênio é 3(S)-tetraidropiranilóxi-6-nitro-2H-3,4-diidro-[2-1 b]imidazopirano.

Em outra modalidade preferida, o composto heterocíclico de ni- trogênio é 3(R)-tetraidropiranilóxi-6-nitro-2H-3,4-diidro-[2-1 b]imidazopirano.

A invenção também fornece um método para a preparação de um composto heterocíclico de nitrogênio, em que um aduzido protegido por álcool representado pelo composto de fórmula (In)

<formula>formula see original document page 20</formula>

em que R1 = nitro, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alco- xicarbonila; R2 = 2-tetraidropiranila, 2-etoxietila, tritila, metila, etila, alila, tri- metilsililetoximetila, 2,2,2-tricloroetila, benzila, trimetilsilila, f-butildimetilsilila, fenildimetilsilila, tri/sopropilsilila ou f-hexildimetilsilila; R3 = H, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila; R4 = H, alquila, al- 15 quenila, arila, heteroalquila, heteroalquenila ou heteroarila; R5 = H, alquila, alquenila, arila, heteroalquila, heteroalquenila ou heteroarila; R6 = trimetilsili- la, trietilsilila, f-butildimetilsilila, dibutilmetilsilila, difenilmetilsilila, fenildimetilsi- lila ou difenil-f-butilsilila e R6 = H; é tratado com um agente de ciclização, sob condições de microondas para formar um composto heterocíclico de nitrogê- nio representado pela fórmula (IV).

<formula>formula see original document page 20</formula>

De preferência o agente de ciclização é selecionado do grupo que consiste em TBAF anidroso, TBABr anidroso ou NaH. Também é prefe- rido que o aduzido protegido por álcool seja tratado sob condições de micro- ondas sob pressão elevada.

Também é preferido que o aduzido de álcool desprotegido pri- mário seja tratado sob condições de microondas sob pressão elevada.

De preferência o composto heterocíclico de nitrogênio é um isô- mero (R) ou (S).

A invenção também fornece um método tal como descrito acima, também compreendendo a reação de um composto representado pela fór- mula (IV)

<formula>formula see original document page 21</formula>

em que R1 = nitro; R2 = 2-tetraidropiranila, 2-etoxietila, tritila, metila, etila, alila, trimetilsililetoximetila, 2,2,2-tricloroetila, benzila, trimetilsilila, t-butildi- metilsilila, fenildimetilsilila, triisopropilsilila ou t-hexildimetilsilila; R3 = H;

com haleto de 4-(trifluorometóxi)benzila

para formar um composto heterocíclico de nitrogênio represen- tado pela fórmula (Io)

<formula>formula see original document page 21</formula>

em que R1 = nitro; R2 = trifluorometoxibenzila; R3 = H.

De preferência o haleto de 4-(trifluorometóxi)benzila é selecio- nado do grupo que consiste em brometo de 4-(trifluorometóxi)benzila, cloreto de 4-(trifluorometóxi)benzila e iodeto de 4-(trifluorometóxi)benzila.

De preferência o composto representado pela fórmula (IV)

<formula>formula see original document page 21</formula> em que Ri = nitro; R2 = 2-tetraidropiranila, 2-etoxietila, tritila, metila, etila, alila, trimetilsililetoximetila, 2,2,2-tricloroetila, benzila, trimetilsilila, f-butildime- tilsilila, fenildimetilsilila, tri/sopropilsilila ou f-hexildimetilsilila; R3 = H;

é também tratado com um agente de desproteção de álcool an- tes da reação com o haleto de 4-(trifluorometóxi)benzila. De preferência o agente de desproteção de álcool é selecionado do grupo compreendendo ácido acético, TBAF, TBABr.

Também é preferido que o composto heterocíclico de nitrogênio seja um isômero (R) ou (S).

DESCRIÇÃO DETALHADA

Definições

O termo "alquila" tal como empregado aqui inclui ambos os gru- pos alquila de cadeia linear e ramificada. Alquila compreende de preferência 1 a 8 átomos de carbono. Qualquer alquila, alcóxi, alquileno, cicloalquila, resíduo heterocíclico, arila ou heteroarila pode ser, a menos que estabeleci- do de outra forma, não substituído ou substituído por um ou mais substituin- tes selecionados de por exemplo alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino. O termo "alquileno" refere-se a um radical divalente derivado de alquila.

A expressão "alquila inferior" tal como empregado aqui refere-se se a grupos alquila de cadeia linear ou ramificada compreendendo 1 a 5 á- tomos de carbono, de preferência 1 a 3 átomos de carbono como por exem- plo, metila, etila, propila, isopropila, n-propila, n-butila, sec-butila, f-butila. A expressão "alcóxi inferior" tal como empregada aqui refere-se a -OR em que R é mais alquila inferior tal como definido acima. Exemplos de grupos alcóxi inferior incluem por exemplo metóxi, etóxi, t-butóxi.

O termo "alquenila" tal como empregado aqui inclui alquenila de cadeia linear ou ramificada que pode ser por exemplo, C2 - C12 alquenila em todas suas formas isoméricas.

O termo "alcoxicarbonila" significa um grupo RCO em que R é um grupo alcóxi, por exemplo, um grupo C1- C12- alcóxi, em todas as suas formas isoméricas.

"Halo" ou "halogênio" significa F, Cl, Br ou I, de preferência F ou Cl.

As expressões "halogênio de alquila" ou "haloalquila" referem-se a um grupo alquila tal como definido acima para o qual pelo menos um halo- gênio tal como definido acima é ligado. Exemplos são por exemplo fluorome- tila, difluorometila, trifluorometila, pentafluoroetila. A expressão "halogênio de alquila inferior" ou "haloalquila inferior" tem um significado correspondente ao termo "alquila inferior" tal como definido acima.

A expressões " halogênio de alcóxi inferior" ou "haloalcóxi inferi- or" refere-se a um grupo alcóxi inferior tal como definido acima para qual pelo menos um halogênio tal como definido acima é ligado. Exemplos são por exemplo fluorometóxi, difluorometóxi, trifluorometóxi, pentafluoroetóxi.

O termo "cicloalquila" refere-se a um anel cíclico saturado ou parcialmente saturado (não-aromático) que opcionalmente é também substi- tuído, por exemplo com alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino. Exemplos incluem por exemplo ciclopentila, cicloexila, metilcicloexila. O anel de ciclo- alquila é de preferência um anel cíclico de 5 ou 6 membros.

O termo "arila" refere-se a uma estrutura de anel aromático mo- nocíclico ou bicíclico fundido que pode conter de 4 a 12 átomos de carbono, de preferência 5 ou 6 átomos de carbono para anéis monocíclicos e 8, 9 ou 10 átomos de carbono para anéis bicíclicos fundidos. O grupo arila é tam- bém opcionalmente substituído, por exemplo com alquila inferior, halogênio, hidróxi, amino. Um grupo arila pode ser por exemplo fenila ou naftila, de pre- ferência fenila. O termo "haloarila" significa um grupo arila substituído com um ou mais halogênios como definido acima, de preferência um ou mais grupos flúor. O termo "alquilarila" significa -R-arila onde R é um grupo alquila como definido acima e arila é tal como definido acima. Um exemplo é benzi- la.

O termo "heterocíclico" refere-se a um anel saturado ou parcial- mente saturado (não aromático) que compreende adicionalmente 1, 2 ou 3 heteroátomos selecionados do grupo que consiste em N, O e S, e que é op- cionalmente condensado para 1 ou 2 anéis de benzeno e/ou para um anel heterocíclico adicional e opcionalmente também substituído em um C de a- nel ou heteroátomo de anel com por exemplo um grupo alquila inferior, halo- gênio, hidróxi, amino.

O termo "heteroarila" refere-se a um anel de heterocíclico aro- mático, por exemplo um anel heterocíclico aromático de 5 ou 6 membros, opcionalmente condensado para 1 ou 2 anéis de benzeno e/ou para um anel heterocíclico adicional e opcionalmente também substituído em um C de a - nel ou anel de heteroátomo com por exemplo um grupo alquila inferior, halo- gênio, hidróxi, amino. Exemplos de grupos heterocíclicos e heteroarila inclu- em por exemplo morfolinila, piperazinila, piperidinila, piridila, pirrolidinila, pi- razinila, pirimidiiiila, purinila, piranila, benzimidazolila, benzoxazolila, benzti- azolila, indolila, indolinila, quinolinila, isoquinolinila, 1,2,3,4-tetraidroquinoli- nila, tiazolila, imidazolila, benzotriazolila, indanila, oxadiazolila, pirazolila, tri- azolila, ou tetrazolila.

A expressão "composto heterocíclico de nitrogênio" tal como empregado aqui refere-se a uma estrutura cíclica que contém um nitrogênio de sp2 hibridizado em um anel da estrutura.

Tal como empregado aqui, o termo "substituído" é contemplado para incluir todos os substituintes permissíveis dos compostos orgânicos, incluindo formação de sal aniônico ou catiônico. Em um amplo aspecto, os substituintes permissíveis incluindo substituintes aromáticos e não aromáti- cos, carbocíclicos e heterocíclicos, ramificados e não ramificados, acíclicos e cíclicos de compostos orgânicos. Não é pretendido que esta invenção fique limitada de maneira alguma pelos substituintes permissíveis de compostos orgânicos.

Um "epóxido substituído não impedido estericamente" refere-se a epóxidos substituídos onde os substituintes não impeçam estericamente a reação básica e inclui a condição implícita de que a substituição está de a- cordo com a valência permitida do átomo substituído.

A expressão "nitroimidazol substituído" tal como empregado aqui refere-se a um núcleo de imidazol que transporta tanto um substituinte de nitro assim como outro substituinte no núcleo de imidazol, geralmente em uma posição de carbono de anel de imidazol ou em uma posição de nitrogê- nio de anel de imidazol.

A expressão "grupo de proteção" tal como empregada aqui refe- re-se a porções químicas temporárias ou permanentes que protegem um grupo funcional potencialmente reativo de transformações químicas não pre- tendidas. Exemplos de tais grupos de proteção incluem ésteres de ácidos carboxílicos, éteres de silila de álcoois, e acetais e cetais de aldeídos e ce- tonas, respectivamente. O campo da química de grupo de proteção é conhe- cido na técnica; exemplos de grupos de proteção incluem grupos protetores convencionalmente empregados que podem ser encontrados, por exemplo, em "Protectives Groups in Organic Synthesis", T. W. Greene, Ρ. M. Wuts, John Wiley e filhos 1991, páginas 10 a 142).

A expressão "porção de álcool mascarada" tal como empregada aqui refere-se a qualquer grupo geralmente empregado para a proteção temporária do grupo funcional de hidroxila, resultando em mascarar a reati- vidade do grupo álcool livre. Exemplos de grupos de proteção adequados para grupos funcionais de hidroxila incluem mas não estão limitados aos e- xemplos seguintes: grupos alcoxicarbonila, acila, alquilsilila ou alquilarilsilila, e grupos alcoxialquila.

Os termos "desprotegendo" ou "desproteção" tais como empre- gados aqui são conhecidos na técnica de síntese orgânica e referem-se às condições para a remoção de grupos de proteção ou porções químicas que mascaram a reatividade subjacente do grupo funcional, deixando o grupo funcional desprotegido. Exemplos de agentes ou condições de desproteção adequados para vários grupos funcionais podem ser encontrados, por e- xemplo em "Protective Groups in Organic Synthesis", T. W. Greene, Ρ. M. Wuts, John Wiley e filhos 1991).

A expressão "forma livre" tal como empregado aqui refere-se a formas não salinas dos compostos. Adicionalmente, os compostos da pre- sente invenção podem existir em formas não solvatadas assim como formas solvatadas, incluindo formas hidratadas, formas cristalinas e formas polimór- ficas.

As expressões "sais" ou "formas de sais" tais como empregadas aqui referem-se a sais de adição de base que são formados com metais ou aminas, tais como metais de álcali e de alcalinos terrosos ou aminas orgâni- cas. Exemplos de metais empregados como cátions são sódio, potássio, magnésio, cálcio, e similares. Exemplos de aminas adequadas são N1N1- dibenziletilenodianina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, dicicloexilamina, etilenodiamina, N-metilglicamina, e procaína (veja, por exemplo, Berge S. M. e outros "Pharmaceutical salts" J. of Pharma. Sci., 66:1 (1977).

A expressão "grupo de remoção de elétrons" é reconhecida na técnica, referindo-se à tendência de um substituinte para atrair elétrons de valência de átomos adjacentes, isto é, o substituinte é eletronegativo com respeito aos átomos adjacentes. Grupos de remoção de elétrons exemplares incluem nitro, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo, e similares.

A expressão "condições de microondas" tal como empregado aqui refere-se ao emprego de tecnologia para produzir ou simular irradiação de microondas. Exemplos para o emprego de irradiação de microondas em síntese orgânica podem ser encontrados, por exemplo em Tetrahedron, 57:9225-9283 (2001) e Acc. Chem. Soc., 82:14-19 (2004).

A presente invenção também abrange enantiômeros, racematos, diastereoisômeros e misturas dos compostos da invenção. Como é evidente para aqueles versados na técnica, os compostos da invenção contêm áto- mos de carbono assimétricos. Deve ser entendido, por este motivo, que os estereoisômeros individuais são contemplados como estando incluídos den- tro do escopo da invenção. Os termos "R" e "S" para configuração química tais como empregados aqui, são como definidos pela IUPAC em "Recom- mendation for Section E, Fundamental Stereochemistry", Pure Appl. Chem., 45:13-30(1976).

As estruturas dos reagentes e compostos identificados aqui pe- los nomes genéricos ou comerciais podem ser retiradas, por exemplo, de "The Merck Index" ou de bases de dados, por exemplo Patentes Internacio- nais (por exemplo Publicações Mundiais de IMS) e por conseguinte, está facilitando para qualquer pessoa versada na técnica. Compostos da Invenção Os compostos da presente invenção são úteis no tratamento e/ou prevenção de infecções por um patógeno. O patógeno é de preferência uma bactéria ou um protozoário, em particular um Mycobacterium, Clostridi- um, Cryptosporidium, Heiicobacter, Trypanosoma, Leishmania ou Piasmodi- um. Mais especificamente a bactéria ou protozoário pode ser Mycobacterium tuberculosis (em particular Mycobacterium tubercuiosis resistente a múltiplos fármacos), Clostridium difficiie, Cryptosporidium parvum, Heiicobacter pylori, T. brucei rhodesiense, T. brucei gambience, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, L. major, Plasmodium faiciparum, Mycobacterium avium, Myco- bacterium ulcerans. Em particular, o patógeno é Mycobacterium tuberculosis, Trypanosoma cruzi ou Leishmania donovani.

Os compostos da presente invenção, na forma livre ou em forma de sal farmaceuticamente aceitável, exibem valiosas propriedades farmaco- lógicas, por exemplo, como agentes antimicrobianos, por exemplo, como indicado pelos testes dos Exemplos e são por conseguinte indicados para terapia.

Os compostos da presente invenção exibem IC50 contra Leish- mania donovani que é abaixo de 5 μΜ, de preferência abaixo de 4 μΜ, mais preferivelmente abaixo de 3 μm, ainda mais preferivelmente abaixo de 2 μΜ, ainda mais preferivelmente abaixo de 1 μΜ, ainda mais preferivelmente a- baixo de 0,5 μΜ e ainda mais preferivelmente abaixo de 0,1 μΜ. Os compos- tos da presente invenção exibem IC50 contra Trypanosoma cruzi que é abai- xo de 5 μΜ, de preferência abaixo de 4 μΜ, mais preferivelmente abaixo de 3 μΜ, ainda mais preferivelmente abaixo de 2 μΜ, ainda mais preferivelmen- te abaixo de 1 μΜ e ainda mais preferivelmente abaixo de 0,5 μΜ.

Os compostos mostram um MIC contra Mycobacterium tubercu- losis que é de preferência mais baixo que 0,8 μΜ, mais preferivelmente mais baixo que 0,5 μΜ, mais preferivelmente mais baixo que 0,1 μΜ, mais preferi- velmente mais baixo que 0,05 μΜ, mais preferivelmente mais baixo que 0,01 μΜ, mais preferivelmente mais baixo que 0,005 μΜ, mais preferivelmente mais baixo que 0,001 μΜ, mais preferivelmente mais baixo que 0,0005 μΜ.

Os compostos da presente invenção podem existir na forma livre ou em forma de sal, por exemplo sal de adição com por exemplo ácidos or- gânicos ou inorgânicos, por exemplo ácido trifluoroacético ou ácido de clori- drato, ou sais obteníveis quando eles compreendem um grupo carbóxi, por exemplo com uma base, por exemplo sais de álcali tais como sais de sódio, potássio, ou amônio substituído ou não substituído.

Os compostos da presente invenção podem ser administrados como o ingrediente ativo exclusivo ou como um componente ativo em um comprimido de combinação contendo vários componentes ativos, por exem- plo antibióticos.

A dosagem exigida para uso farmacêutico certamente variará dependendo do modo de administração, da condição particular a ser tratada e do efeito desejado. Em geral, resultados satisfatórios são indicados para serem obtidos sistemicamente em dosagens diárias de cerca de 0,03 a 2,5 mg/kg por peso corporal. Uma dosagem diária indicada no mamífero maior, por exemplo seres humanos, é na faixa de cerca de 0,5 mg a cerca de 100 mg, convenientemente administrada, por exemplo, em doses divididas até quatro vezes por dia ou em forma retardada. Formas de dosagem unitárias adequadas para administração oral incluem de aproximadamente 1 a 100 mg de ingrediente ativo.

Os compostos da presente invenção podem ser administrados por qualquer rotina convencional, em particular entericamente, por exemplo, oralmente, por exemplo na forma de comprimidos ou cápsulas, ou parente- ralmente, por exemplo, na forma de soluções ou suspensões injetáveis, topi- camente, por exemplo na forma de loções, géis, ungüentos ou cremes, ou em uma forma nasal ou de um supositório. Composições farmacêuticas compreendendo um composto de fórmula 1 a 8 na forma livre ou em forma de sal farmaceuticamente aceitável em associação com pelo menos um veí- culo ou diluente farmacêutico aceitável podem ser fabricadas de maneira convencional por misturação com um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

Os compostos da presente invenção podem ser administrados na forma livre ou em forma de sal farmaceuticamente aceitável, por exemplo, como indicado acima. Tais sais podem ser preparados de uma maneira con- vencional e podem exibir a mesma ordem de atividade como os compostos livres.

Os compostos de fórmula (i) e (ii) podem ser preparados de a- cordo com o esquema de reação seguinte

<formula>formula see original document page 29</formula>

em que Ffe é nitro, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alco- xicarbonila; R3 é um grupo de proteção, por exemplo 2-tetraidropiranila, 2- etoxietila, tritila, metila, etila, alila, trimetilsililetoximetila, 2,2,2-tricloroetila, benzila, trimetilsilila, t-butiidimetilsilila, fenildimetilsilila, triisopropilsilila ou te- xildimetilsilila, trietilsilila; R4 é H, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila; R5 é H, alquila, alquenila, arila, heteroalquila, hete- roalquenila ou heteroarila; R6 é H, alquila, alquenila, arila, heteroalquila, he- teroarila ou heteroalquenila; R7 é um grupo de proteção, por exemplo trime- tilsilila, trietilsilila, t-butildimetilsilila, dibutilmetilsilila, difenilmetilsilila, fenildi- metilsilila ou difenil-t-butilsilila; X é Cl, Br ou I; W é H, Li, Na, K, CO2H, CO2, t-butoxicarbonila, Ν,Ν-dimetilaminossulfonila, p-toluenossulfonila, ou triiso- propilsilila.

A presente invenção fornece um método para a preparação de um composto heterocíclico de nitrogênio. Em uma modalidade o método compreende reação de um epóxido substituído não impedido estericamente com um composto de haloimidazol, em que a relação molar do epóxido substituído não impedido estericamente para o composto de haloimidazol é menor do que ou igual a 1:1, para formar um aduzido com um grupo funcio- nal de álcool; proteção do grupo funcional de álcool no aduzido para formar um aduzido protegido por álcool; e tratamento do aduzido protegido por ál- cool com um agente de ciclização para formar o composto heterocíclico de nitrogênio. A presente invenção fornece além disso um método para conver- ter o aduzido de álcool bis-protegido para o aduzido de álcool primário mo· no-desprotegido que é reagido com um agente de ciclização para formar o composto heterocíclico de nitrogênio.

De acordo com o método fornecido na presente invenção, o em- prego de dinitroimidazóis explosivos é evitado completamente pelo emprego de haloimidazóis contendo um substituinte de remoção de elétrons. Vantajo- samente também, o método da presente invenção fornece um método efici- ente para preparação de imidazopiranos ao mesmo tempo que requer eta- pas de purificação intensiva de pouca mão de obra. O processo global é mais eficaz e mais acessível para síntese em grande escala, do que, por exemplo, o método descrito em US 6.087.358.

Pelo emprego de uma relação molar adequada dos materiais de partida em uma das etapas da síntese, a produção por etapas assim como a produção global da síntese podem ser aumentadas. Adicionalmente, com o emprego de uma relação molar adequada dos materiais de partida, a neces- sidade laboriosa para purificar o produto formado é obviada. O método desta invenção também pode promover a eficiência da síntese por incorporação de uma etapa de ciclização, para formar o produto de nitroimidazopirano em produção elevada. A ciclização pode ser efetuada em modalidades preferi- das sob condições de microondas, sob pressão elevada ou uma combinação de ambas as condições de microondas e pressão elevada.

A ciclização pode ser efetuada em modalidades preferidas sob condições de microondas, sob pressão elevada ou uma combinação de am- bas as condições de microondas e pressão elevada. A expressão "condi- ções de microondas" tal como empregada aqui refere-se ao emprego de tecnologia empregada para produzir ou simular irradiação de microondas. Exemplos para o emprego de irradiação de microondas em síntese orgânica podem ser encontrados, por exemplo em Tetrahedron, 57:9225-9283 (2001) e Acc. Chem. Soe, 82:14-19 (2004). Por conseguinte em uma modalidade preferida, a presente in- venção fornece um processo para a conversão do composto (Ir) para o com- posto (IV) empregando-se irradiação de microondas.

Em uma modalidade preferida, o composto de haloimidazol é representado por um composto de fórmula (Ip),

<formula>formula see original document page 31</formula>

onde X é Cl, Br ou I; W é H, Li, Na, K, CO2H, grupo de proteção, por exem- plo t-butoxicarbonila, Ν,Ν-dimetilaminossulfonila, p-toluenossulfonila, ou trii- sopropilsilila; R2 é nitro, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila; FU é H, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila.

O composto de haloimidazol pode ser ativado para reação atra- vés de pré-tratamento com uma base fraca aprótica tal como carbonato de potássio anidroso, esponja de próton, DBU e similares. O composto de halo- imidazol é reagido com um epóxido substituído não impedido estericamente na presença de um solvente anidroso tal como etanol anidroso, metanol ani- droso, THF anidroso, anidroso Ν,Ν-dimetilformamida, diclorometano anidro- so e similares. A adição nucleofílica do composto de haloimidazol, na forma livre ou de sal, ao epóxido substituído não impedido estericamente, empre- gando-se relações molares apropriadas, produz um aduzido com um grupo funcional de álcool.

O composto de haloimidazol é um composto heterocíclico de nitrogênio contendo o núcleo de imidazol que transporta um substituinte de halogênio tal como cloro, bromo, iodo e similares. O núcleo de imidazol pode ser também substituído, geralmente aos átomos de anel de nitrogênio ou carbono. Os substituintes nas classes representativas tais como acila, formi- la, sulfonila, silila, trifluorometila, ciano, halo, nitro ou alcoxicarbonila podem ser empregados.

Em um aspecto da invenção, o substituinte em um átomo de a- nel de carbono inclui um grupo de remoção de elétron tal como acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo, nitro ou alcoxicarbonila. Em uma moda- lidade preferida, o substituinte em um átomo de carbono de anel de imidazol é um grupo nitro. Em uma modalidade mais preferida, o substituinte é um grupo nitro na posição 4 no núcleo de imidazol.

Outro aspecto da invenção é a substituição em um átomo de nitrogênio de anel no núcleo de imidazol. O átomo de nitrogênio de imidazol pode ser não substituído, isto é protonado ou derivado, de modo que o áto- mo de nitrogênio seja desprotonado ou transitoriamente protegido para per- mitir a reação nucleofílica com o composto de epóxido. Exemplos de substi- tuintes no átomó de nitrogênio no núcleo de imidazol incluem, mas não estão limitados a Li, Na, K, CO2H, CO2, t-butoxicarbonila, N,N-dimetilaminossulfo- nila, p-toluenossulfonila, e triisopropilsilila. O epóxido substituído não impe- dido estericamehte é um epóxido que contém substituintes que não impe- dem estericamente a reação do epóxido com o haloimidazol. Exemplos de substituintes no epóxido incluem mas não estão limitados a alquila, alqueni- la, arila, heteroalquila, heteroalquenila, heteroarila, incluindo substituintes isoméricos e estereoisoméricos. Os substituintes no epóxido podem estar em qualquer configuração e podem dar origem a epóxidos simétrica ou as- simetricamente substituídos.

Um aspecto da invenção fornece substituintes com grupos fun- cionais tais como grupos hidroxila, silila, alcóxi, alquenila, arila, arilóxi, ami- no, ciano, e acila ou similares que não representam um impedimento esféri- co à reação com o haloimidazol. Grupos funcionais reativos nos substituintes podem ser protegidos de modo que a reatividade seja mascarada. Em uma modalidade, o epóxido substituído não impedido estericamente também compreende uma porção de álcool mascarada. Grupos de proteção de hi- droxila representativos incluem grupos acila, éteres de benzila e tritila, éteres de tetraidropiranila, éteres de trialquilsilila e éteres de alila.

Em uma modalidade da invenção, os substituintes no epóxido podem incluir grupos de proteção de silila tais como trimetilsilila, trietilsilila, t- butildimetilsilila, dibutilmetilsilila, difenilmetilsilila, fenildimetilsilila, difenil-f- butilsilila e radicais de silila alquilados análogos. Em outra modalidade, o epóxido substituído não impedido estericamente também compreende uma porção de amina mascarada. Grupos de proteção de amino representativos incluem grupos formila, acetila, trifluoroacetila, benzila, benziloxicarbonila, t- butoxicarbonila, silila de trimetila, 2-trimetilsilil-etanossulfonila, tritila e tritila substituída, aliloxicarbonila, 9-fluorenilmetiloxicarbonila, nitro-veratriloxicar- bonila, e similares.

Em uma modalidade preferida, o epóxido substituído não impe- dido estericamente é representado pelo composto de fórmula (Iq)

<formula>formula see original document page 33</formula>

em que R5 é H, alquila, alquenila, arila, heteroalquila, heteroalquenila ou he- teroarila; R6 é H, alquila, alquenila, arila, heteroalquila, heteroalquenila ou heteroarila; R7 é trimetilsilila, trietilsilila, f-butildimetilsilila, dibutilmetilsilila, difenilmetilsilila, fenildimetilsilila ou difenil-f-butilsilila.

Um aspecto da invenção refere-se ao emprego de uma relação molar de uma quantidade do epóxido substituído não impedido estericamen- te para o composto de haloimidazol. Em uma modalidade, a relação molar do epóxido substituído não impedido estericamente é menor do que ou igual a 1:1. Em outra modalidade, a relação molar do epóxido substituído não im- pedido estericamente para o composto de haloimidazol é na faixa de 0,55 a 0,95:1. Em outra modalidade, a relação molar de um epóxido substituído não impedido estericamente para o composto de haloimidazol é na faixa de 0,6 a 0,9:1. Em outra modalidade, a relação molar de um epóxido substituído não impedido estericamente para o composto de haloimidazol é na faixa de 0,65 a 0,85:1. Em outra modalidade, a relação molar de um epóxido substituído não impedido estericamente para o composto de haloimidazol é na faixa de 0,65 a 0,8:1. Em outra modalidade, a relação molar de um epóxido substituí- do não impedido estericamente para o composto de haloimidazol é na faixa de 0,7 a 0,85:1. Contudo em outra modalidade, a relação molar de um epó- xido substituído não impedido estericamente para o composto de haloimida- zol é na faixa de 0,7 a 0,8:1.

Outro aspecto da invenção refere-se à reação realizada a tem- peraturas na faixa de cerca de 45 a 105°C. Em uma modalidade preferida, o epóxido substituído não impedido estericamente é reagido com um compos- to de haloimidazol, para formar o aduzido com um grupo funcional de álcool em uma faixa de temperaturas de cerca de 55 a 95°C. Em outra modalidade preferida, o epóxido substituído não impedido estericamente é reagido com um composto de haloimidazol, para formar o aduzido com um grupo funcio- nal de álcool em uma faixa de temperaturas de cerca de 65 a 85°C. Contudo em outra modalidade preferida, o epóxido substituído não impedido esteri- camente é reagido com um composto de haloimidazol, para formar o aduzi- do com um grupo funcional de álcool em uma faixa de temperaturas de cer- ca de 60 a 80°C.

O composto de haloimidazol reage com um epóxido substituído não impedido estericamente para produzir um produto de reação que, em isolamento de maneiras conhecidas para alguém versado na técnica, produz o aduzido com o grupo funcional de álcool como o produto final. Um exemplo da preparação para formar o produto final inclui filtragem, remoção de sol- ventes, extração entre fases aquosas e orgânicas que empregam solventes orgânicos convencionais tais como acetato de etila, éter de dietila, clorofór- riríio, cloreto de metileno e similares, seguida por secagem da fase orgânica sobre agentes de secagem convencionais para produzir, na remoção dos solventes, o aduzido com um grupo funcional de álcool.

O aduzido formado pela reação do epóxido substituído não im- pedido estericamente com o haloimidazol contém um grupo funcional de ál- cool derivado por abertura de anel nucleofílica do epóxido. O aduzido resul- tante contendo o grupo funcional de álcool é isolado em sua forma protona- da e é obtido com uma pureza maior que 90% e em produções iguais a ou maiores que 90% com base no epóxido. Vantajosamente, o aduzido com um grupo funcional de álcool pode ser preparado em grande escala e é empre- gado na etapa subseqüente do método sem a necessidade quanto a purifi- cação adicional. O composto de haloimidazol não reagido empregado como material de partida na reação pode ser recuperado da camada aquosa e re- ciclado para reação, tornando o processo global ainda mais eficaz quanto aos custos, eficiente e acessível para síntese em grande escala.

Em uma modalidade, o aduzido protegido por álcool é represen- tado por um composto de fórmula (Ir)

<formula>formula see original document page 35</formula>

em que R2 é nitro, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alco- xicarbonila; R3 é um grupo de proteção, por exemplo 2-tetraidropiranila, 2- etoxietila, tritila, metila, etila, alila, trimetilsililetoximetila, 2,2,2-tricloroetila, benzila, trimetilsilila, f-butildimetilsilila, fenildimetilsilila, tri/sopropilsilila ou t- hexildimetilsilila, trietilsilila, benziloxicarcbonila, aliloxicarbonila; R4 é H1 acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila; R5 é H, alqui- la, alquenila, arila, heteroalquiía, heteroalquenila ou heteroarila; R6 é H, al- quila, alquenila, arila, heteroalquiía, heteroalquenila ou heteroarila; R7 é H, um grupo de proteção, por exemplo trimetilsilila, trietilsilila, f-butildimetilsilila, dibutilmetilsilila, difenilmetilsilila, fenildimetilsilila, ou difenil-f-butilsilila; X é Cl, Br ou I.

A estereoquímica do método da presente invenção é determina- da pelo enantiômero selecionado para emprego para o epóxido substituído não impedido estericamente. Por conseguinte, o enantiômero fornecido pelo método da presente invenção pode ser ou o enantiômero (S) ou o (R), de- pendendo da escolha do enantiômero empregado no material de partida de epóxido.

A formação seletiva de regioisômeros é outro aspecto desta in- venção. Dependendo da direção da adição nucleofílica, um ou outro regioi- sômero é isolado. De acordo com o método da presente invenção, somente um regioisômero é favorecido e é isolado da reação. O outro regioisômero foi indetectável pelos métodos de detecção que empregam espectroscopia de LC-MS e LC-UV. Outra etapa do método da presente invenção compre- ende a proteção do aduzido de álcool, de preferência na presença de um catalisador, para formar um aduzido protegido por álcool. Métodos para con- versão de um álcool para um aduzido protegido por álcool são conhecidos na técnica, particularmente na técnica de grupos de proteção, por exemplo, no Capítulo Dois de "Protective Groups in Organic Synthesis", T.W. Greene e P.G.M. Wuts, 35 ed. 1999. Por conseguinte, o método desta invenção compreende a etapa de tratamento do aduzido de álcool com um grupo de proteção para converter o aduzido de álcool para o correspondente aduzido protegido por álcool. Exemplos de tais grupos de proteção de álcool incluem mas não estão limitados a diidropiranila, 2-tetraidropiranila, 2-etoxietila, tritila, metila, etila, alila, trimetilsililetoximetila, 2,2,2-tricloroetila, benzila, trimetilsili- la, í-butildimetilsilila, fenildimetilsilila, tri/sopropilsilila e í-hexildimetilsilila. Em uma modalidade, o 3,4-diidro-2H-pirano é empregado para converter o adu- zido de álcool para o correspondente aduzido de álcool protegido por diidro- piranila. 3,4-Diidro-2H-pirano recentemente destilado obtido por exemplo de um mecanismo de destilação de Kugelrohr é preferido.

Na transformação do aduzido com um grupo funcional de álcool para o correspondente aduzido protegido por álcool, condições brandas de reação são empregadas para evitar clivagem de quaisquer grupos reativos ou grupos reativos transitoriamente mascarados derivados do epóxido não impedido este ricamente. As condições brandas incluem agitação da reação a temperaturas ambientes que variam de 15°C a 35°C, durante um período de tempo de aproximadamente 20 a 30 horas. Para facilitar a reação, parti- cularmente a temperaturas mais baixas, um catalisador pode ser adicionado.

Tais catalisadores são conhecidos na técnica e incluem grupos acila, éteres de benzila e tritila, éteres de tetraidropiranila, éteres de trialquilsilila e éteres de alila. Entretanto, constatou-se que o emprego de catalisadores tais como ácido para-toluenossulfônico efetua a clivagem do grupo de proteção de t- butildimetilsilila (TBDMS). Em uma modalidade preferida, o catalisador é sul- fonato de piridínio-p-tolueno. Ao término do período de tempo para a reação entre o aduzido de álcool e o grupo de proteção, a reação pode ser inter- rompida, por exemplo, extinguindo-se a reação, com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada e similares. Na remoção da camada orgânica, a camada aquosa é extraída várias vezes com um solvente orgânico volátil tal como diclorometano, dietiléter e acetato de etila. As camadas orgânicas ob- tidas da extração são combinadas, lavadas com água, salmoura e secadas sobre agentes de secagem convencionais tais como sulfato de magnésio. A remoção dos solventes a vácuo produz um resíduo que é filtrado sobre sílica para remover qualquer catalisador residual que se fixe à coluna. A eluição com EtOAc a 50% em hexanos e remoção dos solventes a vácuo produzem o aduzido protegido por álcool que pode ser empregado subseqüentemente sem a necessidade quanto a purificação adicional. Outro aspecto da inven- ção refere-se à ciclização do aduzido protegido por álcool para formar o composto heterocíclico de nitrogênio. Em uma modalidade, o aduzido prote- gido por álcool é ciclizado na presença de um agente de ciclização, em que o agente de ciclização é selecionado do grupo que consiste em TBAF ani- droso e TBABr anidroso.

Em outra modalidade, o aduzido protegido por álcool é tratado com um agente de ciclização para formar o composto heterocíclico de nitro- gênio sob condições de microondas. Em outra modalidade, o aduzido prote- gido por álcool é tratado com um agente de ciclização sob pressão elevada para formar o composto heterocíclico de nitrogênio. Em uma modalidade preferida da invenção, o aduzido protegido por álcool é tratado com um a- gente de ciclização para formar o composto heterocíclico de nitrogênio em condições de microondas sob pressão elevada. O grupo de agentes de cicli- zação também pode ser estendido para esta reação, inclusive bases como a base de Huenig, trietilamina, e similares e NaH.

Em outra modalidade, o aduzido de álcool desprotegido primário é tratado com um agente de ciclização para formar o composto heterocíclico de nitrogênio sob condições de microondas. Em outra modalidade, o aduzido de álcool desprotegido primário é tratado com um agente de ciclização sob pressão elevada para formar o composto heterocíclico de nitrogênio. Em uma modalidade preferida da invenção, o aduzido de álcool desprotegido primário é tratado com um agente de ciclização para formar o composto he- terocíclico de nitrogênio em condições de microondas sob pressão elevada.

Na reação de ciclização, o aduzido protegido por álcool é dissol- vido em um solvente aprótico anidroso tal como THF antes da adição de um agente de ciclização. O emprego de um coletor de amostras automático para preparar vários vasos de reação de 20 a 30 mL contendo THF anidroso promove assim como gradua o processo de preparação de grandes quanti- dades de THF anidroso para uso. Em uma modalidade preferida, o agente de ciclização é TBAF anidroso. TBAF comercialmente disponível (Aldrich, 1M, solução de THF) é tornado anidroso. Em uma modalidade adicional, TBAF anidroso é desgaseificado, de preferência com nitrogênio ou argônio, antes do uso.

Os vasos de reação contendo o éter em solvente anidroso assim como o agente de ciclização são lacrados antes da exposição a condições de microondas sob pressão elevada em uma faixa de temperaturas de 100°C a 160°C, durante um período de tempo de 10 a 30 minutos. Em uma modalidade, as condições de microondas podem ser geradas empregando- se o sistema Biotage. (http://www.biotagedcg.com/). Ao término do período de tempo, a remoção do solvente do vaso de reação produz um resíduo que na purificação em cromatografia de coluna em sílica-gel, produz o composto heterocíclico de nitrogênio desejado em produções iguais ou maiores que 70%. Por comparação, rotinas sintéticas alternativas para a síntese de 4- nitro-haloimidazóis substituídos por N e nitroimidazopiranos como descritas em WO 2004/035547 apresentam produções de cerca de 50%.

O composto heterocíclico de nitrogênio formado é um imidazopi- rano que transporta um grupo funcional de álcool na posição 3 no anel de pirano. Em uma modalidade, o composto heterocíclico de nitrogênio, na for- ma livre ou de sal, é representado por um composto de fórmula (li)

<formula>formula see original document page 38</formula>

em que R1 = nitro, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alco- xicarbonila; R2 = 2-tetraidropiranila, 2-etoxietila, tritila, metila, etila, alila, tri- metilsililetoximetila, 2,2,2-tricloroetila, benzila, trimetilsilila, f-butildimetilsilila, fenildimetilsilila, tri/sopropilsilila ou í-hexildimetilsilila; R3 = H1 acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila.

Em uma modalidade, o composto heterocíclico de nitrogênio contém um substituinte de nitro na posição 6. Em outra modalidade, o com- posto heterocíclico de nitrogênio formado é um isômero (S). Em uma moda- lidade preferida, o composto heterocíclico de nitrogênio formado é um isô- mero (S), com um substituinte de nitro na posição 6.

Outro aspecto da invenção fornece um método para a prepara- ção de um composto heterocíclico de nitrogênio, em que o composto hetero- cíclico de nitrogênio é um alquilóxi-6-nitro-2H-3,4-diidro-[2-1b]imidazopirano ou arilóxi-6-nitro-2H-3,4-diidro-[2-1b]imidazopirano. Em uma modalidade da invenção, um método é fornecido para a preparação de um composto hete- rocíclico de nitrogênio de fórmula (I), em que o composto heterocíclico de nitrogênio é 3-alquilóxi-6-nitro-2H-3,4-diidro-[2-1b]imidazopirano ou o 3- arilóxi-6-nitro-2H-3,4-diidro-[2-1b]imidazopirano. Em outra modalidade, o composto heterocíclico de nitrogênio pode ser um isômero (S) ou (R). Em uma modalidade da invenção, um método é fornecido para a preparação de um composto heterocíclico de nitrogênio de fórmula (I), em que o composto heterocíclico de nitrogênio é 3(R)-tetraidropiranilóxi-6-nitro-2H-3,4-diidro-[2- 1b]imidazopirano. Em uma modalidade preferida da invenção, um método é fornecido para a preparação de um composto heterocíclico de nitrogênio de fórmula (I), em que o composto heterocíclico de nitrogênio é 3(S)-tetra- idropiranilóxi-6-nitro-2H-3,4-diidro-[2-1 b]imidazopirano.

Outro aspecto da invenção também compreende a conversão de um composto tal como representado pela fórmula (IV)

<formula>formula see original document page 39</formula>

em que R1 = nitro; R2 = 2-tetraidropiranila, 2-etoxietila, tritila, metila, etila, alila, trimetilsililetoximetila, 2,2,2-tricloroetila, benzila, trimetilsilila, í-butildime- tilsilila, fenildimetilsilila, tri/sopropilsilila ou f-hexildimetilsilila; R3 = H, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila;

para um composto tal como representado pela fórmula:

<formula>formula see original document page 40</formula>

em que R1 = nitro; R2 = trifluorometoxibenzila; R3 = H.

Em outro aspecto a presente invenção fornece um processo pa- ra a preparação dos compostos da presente invenção, compreendendo:

a) reação de um composto de fórmula (Is)

<formula>formula see original document page 40</formula>

em que R2 está definido como acima para os compostos (Ip) a (Ir); R4 está 10 definido como acima para os compostos (Ip) a (Ir); R8 é H, alquila, alquenila, arila, heteroalquila, heteroalquenila ou heteroarila e em que X é Cl, Br, I, -OCOO-isobutenila, alquila inferior, fenila;

com um composto de fórmula (It)

<formula>formula see original document page 40</formula>

em que Y é N ou CH; R9 é H, alquila, alquenila, arila, heteroalquila, heteroal- quenila, heteroarila, triflúor-, trifluorometóxi-, flúor-fenila orto-, meta- ou para- substituída, bifenila, heteroarila, benzila;

ou com um composto de fórmula (Iw)

<formula>formula see original document page 40</formula>

em que Z está definido como acima e η = O, 1, 2 ou 3; ou com um composto de fórmula (Ix) <formula>formula see original document page 41</formula>

em que YeZ estão definidos como acima; ou com um composto de fórmula (Iy)

<formula>formula see original document page 41</formula>

em que Z está definido como acima;

b) reação do composto de fórmula (Iz)

<formula>formula see original document page 41</formula>

em que Ffe está definido como acima para os compostos (Ip) a (Ir); R4 está definido como acima para os compostos (Ip) a (Ir); e R3 é H ou um contra-íon como Li, Na, K, Mg, Zn, Ca; com fórmula (laa)

<formula>formula see original document page 41</formula>

e em que X é um halogênio, Cl, Br, I; ou com fórmula (lab)

<formula>formula see original document page 41</formula>

em que R10 é H, alquila, alquenila, arila, heteroalquila, fluoroalquila, fluoroal- quenila, difluoroalquila, trifluoroalquila, pentafluoroetila, heptafluoropropila, nonafluorobutila, heteroalquenila, heteroarila, triflúor-, trifluorometóxi-, flúor- fenila orto-, meta- ou para-substituída, bifenila, heteroarila, benzimidazolila, benzotiazolila, benzoxazolila, benzila e em que X é um halogênio, Cl, Br, I. Métodos Gerais para Preparação de Compostos da Invenção

O esquema 1 ilustra dois importantes intermediários 6 e 7. O esquema 2 ilustra a preparação de um composto de fórmula (If), o esquema 3 para um composto de fórmula (Ig), o esquema 4 para um composto de fórmula (i), (ii), (Ia), (Ic)1 (le), o esquema 5 e o esquema 6 para um composto de fórmula (Id).

Esquema 1.1

<formula>formula see original document page 42</formula>

Esquema 1.2

<formula>formula see original document page 42</formula>

Esquema 2

<formula>formula see original document page 42</formula> Esquema 3

<formula>formula see original document page 43</formula>

Esquema 4

<formula>formula see original document page 43</formula>

Esquema 5

<formula>formula see original document page 43</formula>

Esquema 6

<formula>formula see original document page 43</formula>

EXEMPLOS

A invenção está descrita em relação aos exemplos seguintes. Deve ser observado que a invenção não está limitada aos exemplos.

Exemplo 1

(S)-1-(terc-Butil-dimetil-silanilóxi)-3-(2-cloro-4-nitro-imidazol-1-il)-propan-2-ol (3)

<formula>formula see original document page 43</formula> Uma mistura de 2-cloro-4-nitroimidazol (20,0 g, 0,14 mol, 100% em mol) é dissolvida em EtOH anidroso (200 mL), K2CO3 anidroso (2,82 g, 0,020 mol, 15% em mol) é adicionado a temperatura ambiente, seguido pelo ferc-butil-dimetil-((S)-1-oxiranilmetóxi)-silano (22,2 mL, 0,11 mol, 0,78% em mol). A mistura reacional é aquecida a 70°C durante 6 a 10 horas. O solven- te é em seguida removido a vácuo e a mistura reacional é absorvida em E- tOAc. A camada orgânica é lavada várias vezes com água, HCI a 0,5 N, á- gua, salmoura e o solvente é removido a vácuo para produzir o álcool bruto como um sólido amarelado. O sólido é suspenso em éter de dietila e filtrado para produzir o composto final como um pó incolor. O filtrado restante é con- centrado e o processo de precipitação do produto com éter de dietila é repe- tido duas vezes.

MS: M+ 336,3.

Ponto de Fusão: 116 a 118°C.

[a]21 d = -29,43 (C = 0,003, MeOH).

Exemplo 2

1-í(S)-3-(terc-Butil-dimetil-silanilóxi)-2-(tetraidro-Diran-2-ilóxi)-DroDill-2-cloro- 4-nitro-1H-imidazol (4)

<formula>formula see original document page 44</formula>

(S)-1 -(ferc-Butil-dimetil-silanilóxi)-3-(2-cloro-4-nitro-imidazol-1 -il)- 20 propan-2-ol (3,0 g, 8,9 mmols, 100% em mol) é dissolvido em diclorometano (100 mL) e 3,4-diidro-2H-pirano recentemente destilado (1,5 g, 17,8 mmols, 200% em mol) é adicionado à solução, seguido por sulfonato de piridínio-p- tolueno (3,4 g, 13,4 mmols, 150% em mol). A mistura reacional é agitada a temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura reacional é extinguida com solução de NaHCO3 aquosa saturada. A camada orgânica é separada e a parte aquosa é extraída com diclorometano. As camadas orgânicas com- binadas são lavadas com água, salmoura, secadas em MgS04 e o solvente é removido a vácuo para produzir 1-[(S)-3-(terc-Butil-dimetil-silanilóxi)-2- (tetraidro-piran-2-ilóxi)-propil]-2-cloro-4-nitro-1H-imidazol como óleo incolor. MS: M+ 420,6.

Exemplo 3

(S)-2-Nitro-6-(tetraidro-Diran-2-ilóxi)-6.7-diidro-5H-imidazoí2.1-bl-f 1,3loxazina (5}

<formula>formula see original document page 45</formula>

1-[(S)-3-(íerc-Butil-dimetil-silanilóxi)-2-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-pro- pil]-2-cloro-4-nitro-1H-imidazol (0,74 g, 1,76 mmol, 100% em mol) é dissolvi- do em THF anidroso (180 mL) e TBAF (solução a 1M em THF, 1,76 mL, 100% em mol) é adicionado à solução. O tubo de reação é lacrado e exposto a microondas a 140°C durante sete minutos. O solvente é removido a vácuo e o resíduo é purificado em sílica para produzir (S)-2-Nitro-6-(tetraidro-piran- 2-ilóxi)-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b]-[1,3]oxazina como um óleo amarelado.

(S)-3-(2-Cloro-4-nitro-imidazol-1-il)-2-(tetraidro-piran-2-ilóxi)- propan-1-ol (0,053 g, 0,172 mmol, 100% em mol) é dissolvido em THF ani- droso (17 mL) e TBAF (solução a 1M em THF, 0,17 mL, 100% em mol) é adicionado à solução. O tubo de reação é lacrado e exposto a microondas a 140°C durante sete minutos. O solvente é removido a vácuo e o resíduo é purificado em sílica para produzir (S)-2-Nitro-6-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-6,7- diidro-5H-imidazo[2,1-b)-[1,3]oxazina como um óleo amarelado. MS: M+ 270.

Exemplo 4

(S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazoí2.1-blí 1.3]oxazin-6-ol (6)

<formula>formula see original document page 45</formula>

(S)-2-Nitro-6-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b]- [1,3]oxazina (4,35 g, 16,1 mmols, 100% em mol) é dissolvido em HO- Ac/THF/Água 4:2:1 (72:36:18 ml) e a mistura reacional é aquecida a 60°C e agitada durante 18 horas. A mistura reacional é deixada esfriar até tempera- tura ambiente e é triturada com CH2CI2 gota a gota para precipitar o produto. Após a filtragem, o volume do filtrado é reduzido e o processo de trituração é repetido várias vezes para produzir (S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1- b][1,3]oxazin-6-ol como um sólido amarelado. MS: M+186,4

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 8,07 (s, 1H), 5,65 (s, 1H), 4,4 (dd, J = 11,3, 0,9 Hz, 1H), 4,3 (dt, J = 11,3, 2,4 Hz, 1H), 5,25 (m, 1H), 4,19 (dd, J= 12,9, 3,3 Hz, 1H), 3,95 (dt, J= 12,9, 2,4 Hz, 1H).

Ponto de Fusão: 212 a 214°C.

[α]21D = -68,46 (c = 0,0027, MeOH).

Exemplo 5 (S)-2-Nitro-6-f2-(4-trífluorometóxi-fenil)-tiazol-4-ilmetoxil-6,7-diidro-5H- imidazo[2,1-b][1,3]oxazina (11)

<formula>formula see original document page 46</formula>

4-Trifluorometóxi-benzamida (2,5 g, 12,2 mmols, 100%) é dissol- vido em 25 ml de dimetoxietano (DME). O reagente de Lawesson (2,5 g, 6,1 mmols, 50%) é adicionado e a reação é agitada durante a noite a temperatu- ra ambiente. A reação é concentrada e purificada através de cromatografia de sílica para produzir 4-trifluorometóxi-tiobenzamida como sólido amarelo.

(M+ 222,2).

4-trifluorometóxi-tiobenzamida (3,7 g, 16,6 mmols, 100% em mol) e KHCO3 (13,3 g, 132,7 mmols, 800% em mol) é dissolvido em THF (26 ml) e sonicado durante 5 minutos. Em seguida, bromopiruvato de etila (6,2 mL, 49,7 mmols, 300% em mol) é adicionado e reação agitada durante 2 horas. A reação é resfriada até 0°C e mistura de 2,6-lutidina (16,4 mL, 141,0 mmols, 850% em mol), anidrido trifluoroacético (9,20 mL, 66,3 mmols, 400% em mol) em THF é adicionado. A reação é lentamente aquecida a tempera- tura ambiente e agitada durante 1 hora adicional. A reação é concentrada a vácuo e EtOAc é adicionado. A camada orgânica é lavada duas vezes com água, secada em MgS04 e o solvente é removido a vácuo. O material bruto é purificado empregando-se cromatografia de sílica para produzir éster de etila de ácido 2-(4-trifluorometóxi-fenil)-tiazol-4-carboxílico como sólido bran- co (M+318,1).

Éster de etila de ácido 2-(4-trifluorometóxi-fenil)-tiazol-4-carboxí- lico (3,0 g, 9,5 mmols, 100% mo) e LiAlH4 (1,0 g, 26,7 mmols, 280% em mol) é dissolvido em THF seco (20 ml) a 0°C e a reação é agitada durante 30 mi- nutos. A reação é extinguida com 2 mL de água seguida por 1 mL de solu- ção de NaOH a 15%. Os sólidos são filtrados e lavados várias vezes com EtOAc. O filtrado é concentrado a vácuo para produzir [2-(4-trifluorometóxi- fenil)-tiazol-4-il]-metanol.

[2-(4-Trifluorometóxi-fenil)-tiazol-4-il]-metanol (2,5 g, 9,1 mmols, 100% em mol) é adicionado HBR a 33% em ácido acético (acesso) e aque- cido até 100°C. A reação é resfriada até O°C e extinguida com paletas de NaOH até que o pH seja 8,0. O produto é extraído com EtOAc, secado sobre MgSO4 e concentrado a vácuo para produzir o óleo bruto que é purificado empregando-se cromatografia de sílica para produzir 4-bromometil-2-(4- trifluorometóxi-fenil)-tiazol.

A O°C sob Ar, NaH (60% em óleo mineral, 0,16 g, 3,9 mmols, 150% em mol) é adicionado à solução agitada de (S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H- imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ol (0,49 g, 2,64 mmols, 100% em mol), 4-bromo- metil-2-(4-trifluorometóxi-fenil)-tiazol (1,05 g, 3,17 mmols, 120% em mol), e iodeto de tetrabutilamônio (0,05 g, 0,13 mmol, 5% em mol) em DMF anidroso (10,0 mL). A mistura é deixada aquecer até a temperatura ambiente e agita- da durante a noite. A reação é resfriada até 0°C e extinguida com água ge- lada. O produto é extraído duas vezes com 250 mL de EtOAc, secado sobre MgSO4 e concentrado a vácuo para produzir óleo de marrom bruto que é purificado empregando-se LC preparativa de fase reversa para produzir (S)- 2-Nitro-6-[2-(4-trifluorometóxi-fenil)-tiazol-4-ilmetóxi]-6,7-diidro-5H- imidazo[2,1-b][1,3]oxazina.

MS: M+ 443,1.

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 8,03 (m, 3H), 7,67 (s, 1H), 7,48 (d, J = 8,06 Hz, 2H), 4,78 (abq, J = 12,93, 1,69 Hz, 2H), 4,70 (dt, J = 11,96, 2,45 Hz, 1H), 4,48 (d, J= 11,82 Hz, 1H), 4,26 (m, 3H). Ponto de Fusão: 140 a 141 °C.

Análise calculada para C17H13F3N4O5S: C, 46,15; H, 2,97; N, 12,66, encontrado: C, 45,68; H, 2,71; N, 12,40. Exemplo 6

Ácido (S)-2-nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1 b][1,3]oxazin-6-ilóxi)-acético (7)

<formula>formula see original document page 48</formula>

A 0°C sob Ar, NaH (60% em óleo mineral, 0,13 g, 3,24 mmols, 120% em mol) é adicionado a solução agitada de (S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H- imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ol (0,50 g, 2,70 mmols, 100% em mol), í-butilbro- nio (0,05 g, 0,14 mmol, 5,% em mol) em DMF anidroso (10,0 mL). A mistura é deixada aquecer até temperatura ambiente e agitada durante a noite. A reação é resfriada até 0°C e extinguida com água gelada. O precipitado é filtrado e secado a vácuo para produzir éster de ferc-butila de ácido ((S)-2- nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ilóxi)-acético. Ácido trifluoroa- cético a 50% em CH2CI2 (100 mL) é adicionado ao éster acima (1,40 g, 4,71 mmols, 100% em mol) e deixado agitar a temperatura ambiente durante 0,5 hora. O solvente é removido a vácuo e os traços de TFA são removido por adição de tolueno seguido por evaporação. Este procedimento é repetido até que o sólido de branco claro de fluxo livre seja obtido de Ácido ((S)-2-nitro- 6,7-diidro-5H-imidazo[2,1 -b][1,3]oxazin-6-ilóxi)-acético. moacetato (0,48 mL, 3,20 mmols, 120% em mol), e iodeto de tetrabutilamô-

MS: Metil+ 242,2.

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 8,04 (s, 1H), 4,59 (dt, J = 11,92, 2,47 Hz, 2H), 4,43 (d, J = 11,83 Hz, 2H), 4,20 (m, 3H).

Ponto de Fusão: 178 a 179°C.

Procedimento geral para síntese de 12 e 13 <formula>formula see original document page 49</formula>

12, R = CF3 13, R = OCF3

Em uma atmosfera inerte, Ácido acético ((S)-2-nitro-6,7-diidro- 5H-imidazo[2,1-b][1,3)oxazin-6-ilóxi)-(100% em mol) é dissolvido em CH2CI2 anidroso (0,20 M) e adicionado HATU (120% em mol) e DIEA (120% em mol). A reação é agitada a temperatura ambiente durante 5 minutos seguida por adição de 1 benzeno, 2-diamino-substituído (120% em mol). A mistura reacional resultante é agitada durante a noite a temperatura ambiente. A re- ação é concentrada e dissolvida em EtOAc e lavada com água três vezes. A camada orgânica é secada sob Na2S04 anidroso, concentrada e purificada através de LC preparativa de fase reversa para produzir sólido marrom-claro. Este sólido é dissolvido em ácido acético glacial (0,33 M) e aquecido até 95°C durante 30 minutos. A mistura reacional bruta é concentrada e resíduo obtido é purificado através de LC preparativa de fase reversa para produzir sólido branco.

Exemplo 7

(S)-2-Nitro-6-(6-trifluorometil-1H-benzoimidazol-2-ilmetóxi)-6.7-díidro-5H- imidazo[2.1 -blf1.31oxazina 12)

<formula>formula see original document page 49</formula>

MS: M+ 383,9

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 8,50 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,71 (d, J = 8,43 Hz, 1H), 7,49(dd, J= 8,48, 1,45 Hz, 1H), 4,92 (s, 2H), 4,70 (dt, J= 12,04, 2,50 Hz, 1H), 4,48 (d, J= 11,99 Hz, 1H), 4,34 (dd, J= 13,31, 1,89 Hz, 2H), 4,24 (dd, J= 13,25, 2,97 Hz, 1H).

Ponto de Fusão: 120 a 121 °C. Análise calculada para C19H20F3N5O6*HCO2H: C1 44,76; H, 3,29; N, 16,30, encontrado: C, 45,26; H, 3,32; N, 16,65.

Exemplo 8

(S)-2-Nitro-6-(6-trifluorometóxi-1H-benzoimidazol-2-ilmetóxi)-6,7-diidro-5H- imidazol[2,1-b][1.3]oxazina (13)

<formula>formula see original document page 50</formula>

MS: M+ 399,8.

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 12,73 (d, J= 13,72 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,55 (m, 2H), 7,17(m, 1H), 4,89 (S1 2H), 4,70 (dt, J = 11,98, 2,39 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 11,98 Hz, 1H), 4,32 (m, 2H), 4,24 (dd, J= 13,86, 3,57 Hz, 1H).

Ponto de Fusão: 99 a 100°C. [a]21 d = -42,844 (c = 0,0031, MeOH).

Procedimento geral para síntese de 14 a 21

Em uma atmosfera inerte, ácido ((S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H-imida- zo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ilóxi)-acético (100% em mol) é dissolvido em CH2Cl2 anidroso (0,2 M) e adição de HATU (120% em mol) e DIEA (120% em mol). A reação é agitada a temperatura ambiente durante 5 minutos seguida por adição de amina (120% em mol). A mistura reacional resultante é agitada durante a noite a temperatura ambiente. A reação é concentrada e dissolvida em EtOAc e lavada com água três vezes. A camada orgânica é secada sob Na2SO4 anidroso, concentrada e purificada através de LC preparativa de fase reversa para produzir o produto desejado.

Exemplo 9

2-((S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ilóxi)-N-(4- trifluorometóxi-feniDacetamida (14)

<formula>formula see original document page 50</formula> MS: M+ 403,4.

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 9,98 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,70 (d, J= 9,09 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,48 Hz, 1Η), 4,69 (dt, J = 11,97, 2,49 Hz, 1H), 4,46 (d, J= 11,86 Hz, 1H), 4,31 (m, 2H) 4,27 (s, 2H), 4,23 (dd, J = 13,13, 3,02 Hz, 1H).

Ponto de Fusão: 157 a 158°C. [a]21 d = -50,01 (c = 0,005, MeOH).

Análise calculada para Ci5Hi3F3N4O6: Ci 44,78; Hi 3;26; Ni 13,92, encontrado: C, 43,67; H, 2,87; N, 13,36.

Exemplo 10

<formula>formula see original document page 51</formula>

2-((S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazof2.1-blí 1.31oxazin-6-ilóxi)-N-(4- trifluorometóxi-benzil)-acetamida (15)

MS: M+417,4

1HRMN (MeOD, 400 MHz): 0 7,73 (s, 1H), 7,35 (d, J = 8,70 Hz,

2H), 7,19 (d, J= 8,70 Hz, 2H), 4,72 (dt, J= 12,25, 2,50 Hz, 1H), 4,45 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 4,40 (s, 2H), 4,35 (dt, J = 11,7, 2,5 Hz, 1H), 4,22 - 4,3 (m, 2 H), 4,2 (d, J= 3,7 Hz, 2H).

Ponto de Fusão: 110 a 111 °C. [oc±)21d = -46,69 (c = 0,0027, MeOH).

Análise calculada para Ci6H15F3N4O6: C, 46,16; H, 3,64; N, 13,45, encontrado: C, 46,06; H, 3,67; N13,05.

Exemplo 11

2-((S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-blí 1.31oxazin-6-ilóxi)-N-[4-(4- trifluorometóxi-fenil)-tiazol-2-ill-acetamida (16)

<formula>formula see original document page 51</formula> 5 MS: M+ 486,4.

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 1,31 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,00 (ad, J = 8,80 Hz1 2H), 7,73 (s, 1H), 7,42 (d, J= 8,65 Hz, 2H) 4,68 (dt, J = 11,95, 2,46 Hz1 1H), 4,46 (d, J = 11,86 Hz, 1H), 4,42 (s, 2H), 4,35 (m, 2H), 4,23 (dd, J = 14,09, 3,88 Hz, 1H).

Ponto de Fusão: 120 a 121 °C. [a]21 d = -30,67 (c = 0,0028, MeOH).

Análise calculada para Ci9H20F3N5O64H2O: C/42,94; Hj 3,21; N, 13,90, encontrado: C, 42,65; H, 3,31; N, 13,48. Exemplo 12

2-(2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazoí2.1-blf1.31oxazin-6-ilóxi)-N-(6- trifluorometóxi-benzotiazol-2-il)-acetamida (17)

<formula>formula see original document page 52</formula>

MS: M+ 460,2.

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 12,45 (s, 1H), 8,12 (m, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,82 (d, J = 8,82 Hz 1H), 7,42 (m, 1 H)1 4,69 (dt, J = 11,99, 2,53 Hz, 1 H)1 4,46 (d, J = 11,54 Hz, 2H), 4,35 (m, 2H), 4,23 (dd, J= 13,72, 3,61 Hz, 1H).

Ponto de Fusão: 89 a 90°C. Análise calculada para Ci6H12F3N5O6S^CO2H: C1 41,62; H, 3,11; N, 13,48, encontrado: C, 41,53; H, 2,66; N, 13,85. Exemplo 13

2-((S-2-Nitro-6,7-diidro-5H-midazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-Hóxi)-1-[4-(4- trifluorometóxi-fenil)-DÍDerazin-1-ill-etanona (18)

<formula>formula see original document page 52</formula>

MS: M+ 472,3. 1H RMN (MeOD, 400 MHz): δ 7,79 (S1 1Η), 7,12 (d, J = 9,2 Hz1 2Η), 6,9 (d, J = 9,2 Hz, 2Η), 4,7 - 4,8 (m, 1H), 4,45 - 4,55 (m, 2H), 4,32 - 4,42 (m, 2H), 4,2 - 4,3 (m, 2H), 3,7 - 3,8 (m, 1H), 3,5 - 3,7 (m, 3H), 3,05 - 3,25 (m, 3H), 2,95-3,05 (m, 1H).

Ponto de Fusão: 77 - 79°C.

[a]21D =-44,46 (c = 0,006, MeOH).

Análise calculada para C19H20F3N5O6: C, 48,41; H, 4,29; N, 18.85. encontrado: C: 48:28; H: 4;07: N: 14:85.

Exemplo 14

1-[4-(4-Flúor-fenil)-Diperazin-1-il-2-((S)-2-nitro-6.7-diidro-5H-imidazo[2,1- b][1.3]oxazin-6-ilóxi)etanona (19)

<formula>formula see original document page 53</formula>

MS: M+ 406,5.

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 8,06 (s, 1H), 7,03 (m. 2H), 6,93 (m, 2H), 4,64 (dt, J= 11,94, 2,35 Hz, 1H), 4,39 (m, 3H), 4,23 (m, 3H), 3,50 (m, 4H), 2,93 (m, 4H). Ponto de Fusão: 73 - 74°C.

Análise calculada para C18H20FN5O5O1SHCO2H: C, 51,86; Hf 4,95; N, 16,34, encontrado: C, 51,67; H, 4,83; N, 15,68.

Exemplo 15

2-((S)-2-Nitro-6.7-diidro-5H-imidazo[2.1-b][1.3]oxazin-6-ilóxi)-1-[4-[5- trifluorometil-piridin-2-il)-piperazin-1-il]-etanona (20)

<formula>formula see original document page 53</formula>

MS: M+ 475,2.

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 8,41 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,80 (dd, J = 9,10, 2,5 Hz, 1H), 6,93 (d,J= 9,09 Hz, 1H), 4,64 (dt, J= 11,94, 2,35 Hz, 1 Η), 4,40 (m, 3Η), 4,23 (m, 3Η), 3,58 (m. 6Η), 3,43 (m, 2Η). Ponto de Fusão: 189 - 190°C. [a]21 d = -31,96 (C = 0,0026, MeOH).

Análise calculada para C18Hi9F3N6O5: C, 47,37; H, 4,20; N, 18,40, encontrado: C, 47,17; H, 3,77; N, 18,00. 2-((S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazof2.1-bin.3loxazin-6-Hóxi)-1-í4-(5- trifluorometóxi-1 H-benzoimidazol-2-il)-piDeridin- 1-il-etanona (21)

<formula>formula see original document page 54</formula>

MS: M+511,5. 1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 8,05 (s, 1H), 7,56 (d, J = 8,66 Hz, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,13 (d, J= 8,68 Hz, 1H), 4,64 (bd, J = 11,87 Hz, 1H), 4,35 (m, 6H), 3,73 (bd, J = 12,03 Hz, 1H), 3,15 (m, 3H), 2,81 (t, J = 11,35 Hz, 1H), 2,06 (m, 2H), 1,72 (m, 2H).

Ponto de Fusão: 131 a 132°C.

Análise calculada para C21H2IF3N6O6*H20*2*HC02H: C1 44,52; H, 4,39; N, 13,54, encontrado: C, 44,30; H, 3,79; N, 13,60, Exemplo 17

4-((S)-2-nitro-6.7-diidro-5H-imidazoí2.1-blí 1.3loxazin-6-iloximetil)-benzóico (22)

<formula>formula see original document page 54</formula>

A 0°C sob Ar, NaH (60% em óleo mineral, 0,26 g, 6,48 mmols, 120% em mol) é adicionado a solução agitada de (S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H- imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ol (1,0 g, 5,40 mmols, 100% em mol), metil-4- (bromometil)-benzoato (1,48 g, 6,48 mmols, 120% em mol), e iodeto de te- trabutilamônio (0,10 g, 0,27 mmol, 5% em mol) em DMF anidroso (20,0 ml_). A mistura é deixada aquecer até temperatura ambiente e é agitada durante a noite. A reação é resfriada até O0C e extinguida com água gelada. O precipi- tado é filtrado e secado a vácuo para produzir sólido branco pálido. MS: M+ 333,9.

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 8,02 (s, 1H), 7,90 (d, J = 6,69 Hz, 2H), 7,43 (d, J - 8,23 Hz, 2H), 4,69 (m, 3H), 4,46 (d, J = 11,91 Hz, 1H), 4,25 (m, 3H), 3,83 (s, 3H).

Ponto de Fusão: 169 a 170 0G=

Solução de NaOH a 1N (3,60 mL, 3,60 mmols, 200% em mol) é adicionado ao éster sólido acima (0,60 g, 1,80 mmol, 100% em mol) em DMF (4,0 mL) e a mistura reacional resultante é aquecida até 95°C durante a noite. O Solvente é removido a vácuo seguido por 1 mL de adição de água.

A mistura reacional é em seguida acidificada com ácido acético glacial para o pH 2:0. O produto é extraído empregando-se EtOAc (3*100 mL), as cama- das orgânicas combinadas são secadas sobre Na2SO4 anidroso e concen- tradas para produzir ácido 4-((S)-2-nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3] oxazin-6-iloximetil)-benzóico.

MS: M+319,9.

1H RMN (CD3SOCD3, 400 MHz): δ 12,99 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,90 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,41 (d, J= 8,39 Hz, 2H), 4,70 (m, 3H)1 4,46 (d, J = 11,89 Hz, 1H), 4,24 (m, 3H).

Ponto de Fusão: 212 - 213°C.

Exemplo 18

(S)-2-Nitro-644-(5-trifluorometóxi-1H-benzoimidazol-2-ill·^ 5H-imidazolí2.1-blí1.3loxazina (23)

<formula>formula see original document page 55</formula>

Em uma atmosfera inerte, ácido 4-((S)-2-nitro-6,7-diidro-5H- imidazo[2,1-b)[1,3]oxazin-6-iloximetil)-benzóico (100% em mol) é dissolvido em CH2CI2 anidroso (0,20 M) e adicionado HATU (120% em mol) e DIEA (120% em mol). A reação é agitada a temperatura ambiente durante 5 minu- tos seguida por adição de benzeno 1,2-diamino-substituído (120% em mol). A mistura reacional resultante é agitada durante a noite a temperatura ambi- ente. A reação é concentrada e dissolvida em EtOAc e lavada com água três vezes. A Camada orgânica é secada sob Na2S04 anidroso e concentrada para produzir sólido marrom pálido que é dissolvido em ácido acético glacial (0,36 Μ). A mistura reacional é aquecida a 95°C durante 30 minutos. A mis- tura reacional bruta é concentrada e resíduo obtido é purificado através de LC preparativo de fase reversa para produzir o composto final como sólido macio.

MS: M+ 476,4.

1H RMN (CD3OH, 400 MHz): δ 8,05 (d. J = 8,18 Hz, 2H), 7,74 (s, 1H), 7,62 (d, J =8,76 Hz, 1H), 7,50 (m, 3H), 7,18 (dd, J= 8,73, 1,24 Hz, 1H), 4,87 (s, 2H), 4,73 (m, 2H), 4,48 (d, J = 12,05 Hz, 1H), 4,30 (m, 2H).

Ponto de Fusão: 98 a 99°C. [a]21 d = -37,81 (C = 0,003, MeOH).

Exemplo 19

4-(2-nitro-6,7-diidro-5H-imidazof2,1 -bU1,31oxazin-6-iloximetil-benzonitrila (24)

<formula>formula see original document page 56</formula>

A 0°C sob Ar, NaH (60% em óleo mineral, 0,16 g, 4,05 mmols, 150% em mol) é adicionado a solução agitada de 2-Nitro-6,7-diidro-5H- imidazo[2,1-b][1,3)oxazin-6-ol (0,50 g, 2,70 mmols, 100% em mol), 4-bromo- metil-benzonitrila (0,63 g, 3,20 mmols, 120% em mol), e iodeto de tetrabuti- lamônio (0,050 g, 0,14 mmol, 5% em mol) em DMF anidroso (12 ml). A mis- tura é deixada aquecer até a temperatura ambiente agitada durante 4 horas. A reação é extinguida com metanol, e o solvente é removido sob pressão reduzida. Cloreto de Metileno é adicionado ao resíduo e a mistura é filtrada para remover sais inorgânicos. A camada orgânica é concentrada a vácuo e purificada através de LC de fase reversa para obter 4-(2-nitro-6,7-diidro-5H- imidazo[2,1 -b][1,3]oxazin-6-iloximetil)-benzonitrila. MS: M+ 301,2.

1H RMN (CD3SOCD3 400 MHz): δ 8,02 (s, 1H), 7,80 (d, J = 8,30 Hz, 2H), 7,48 (d, J = 8,34 Hz, 2H), 4,74 (abq, J= 13,16, 3,32 Hz, 2H), 4,67 (dt, J= 12,02, 2,37 Hz, 1H), 4,47 (d, J= 11,91 Hz, 1H), 4,24 (m, 3H). Ponto de Fusão: 166 a 167°C.

Exemplo 20

2-Nitro-6-[4-{5-trifluorometóxi-benzooxazol-2-il-benzilóxi]-6,7-diidro-5H- imidazo[2,1-b][1,3]oxazina (25)

<formula>formula see original document page 57</formula>

A 0°C sob Ar, cloreto de acetila (3500% em mol) é adicionado à solução agitada de 4-(2-nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6- iloximetil)-benzonitrila (100% em mol) em EtOH (0,16 Μ). A mistura é deixa- da aquecer até a temperatura ambiente e agitada durante 5 horas. A reação é concentrada a vácuo e levada para a próxima etapa. O Resíduo é dissolvi- do novamente em EtOH seco (0,30 M), 1,2-aminofenol (120% em mol) e trie- tilamina (120% em mol) é adicionado e mistura reacional resultante é agitada durante a noite. A reação é concentrada e produto final é purificado através de LC preparativa de fase reversa para produzir o composto final como um pó marrom.

MS: M+ 477,0.

1H RMN (CD3CI, 400 MHz): δ 8,22 (d, J - 8,30 Hz, 2H), 7,62 (s, 1H), 7,57 (d, J = 8,82 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,26 Hz, 2H), 7,40 (s, 1H)1 7,22 (m, 1 H)1 4,75 (abq, J = 44,57, 12,4 Hz1 2H), 4,65 (m, 1H), 4,37 (d, J = 12,16 Hz, 1H), 4,17 (m, 2H).

Ponto de Fusão: 187 a 188°C.

Análise calculada para C2IHi5F3N4O6: C, 52,94; H, 3,18; N, 11,75, encontrado: C, 52,77; H, 3,22; N, 11,21. Exemplo 21 (S)-1-(terc-Butil-dimetil-silanilóxi)-3-(2-cloro-4-nitro-imidazol-1-in-propan-2-ol (26)

<formula>formula see original document page 58</formula>

Uma mistura 2-eloro-4-nitroimidazoi (20,0 g; 0;14 mol; 100% em mol) é dissolvido em EtOH anidroso (200 mL), K2CO3 anidroso (2,82 g, 0,020 mol, 15% em mol) é adicionado a temperatura ambiente, seguido pelo terc-Butil-dimetil-((S)-1-oxiranilmetóxi)-silano (22,2 mL, 0,11 mol, 0,78% em mol). A mistura reacional é aquecida a 70°C durante 6 a 10 horas. O solven- te é em seguida removido a vácuo e a mistura reacional é absorvida em E- tOAc. A camada orgânica é lavada várias vezes com água, HCI a 0,5 N, á- gua, salmoura e o solvente é removido a vácuo para produzir o álcool bruto (35,7 g, 90,2%), como um sólido amarelado. O sólido é suspenso em éter de dietila e filtrado para produzir o composto final como um pó incolor. O filtrado restante é concentrado e o processo de precipitação do produto com éter de dietila é repetido duas vezes.

MS: M+336,3.

Exemplo 22

1-[(S)-3-(terc-Butil-dimetil-silanilóxi)-2-(tetraidro-Diran-2-ilóxi)propil]-2-cloro-4- nitro-1H-imidazol (27)

<formula>formula see original document page 58</formula>

(S)-1 -(íerc-Butil-dimetil-silanilóxi)-3-(2-cloro-4-nitro-imidazol-1-il)- propan-2-ol (3,0 g, 8,9 mmols, 100% em mol) é dissolvido em diclorometano (100 mL) e recentemente destilado 3,4-diidro-2H-pirano (1,5 g, 17,8 mmols, 200% em mol) é adicionado à solução, seguido por sulfonato de piridínio-p- tolueno (3,4 g, 13,4 mmols, 150% em mol). A mistura reacional é agitada a temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura reacional é extinguida com solução de NaHCOa aquosa saturada. A camada orgânica é separada e a parte aquosa é extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com água, salmoura, secadas em MgSO4 e o sol- vente é removido a vácuo para produzir 1-[(S)-3-(terc-Butil-dimetil-silanilóxi)- 2-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-propil]-2-cloro-4-nitro-1 H-imidazol como óleo inco- lor.

MS: M* 420.6.

Exemplo 23

(S)-2-Nitro-6-(tetraidro-Diran-2-ilóxi)-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1 -b]-[1,3]oxazina (28)

<formula>formula see original document page 59</formula>

1-[(S)-3-(íerc-Butil-dimetil-silanilóxi)-2-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-pro- pil]-2-cloro-4-nitro-1 H-imidazol (0,74 g, 1,76 mmol, 100% em mol) é dissolvi- do em THF anidroso (180 mL) e TBAF (solução a 1M em THF, 1,76 mmol, 15 100% em mol) é adicionado à solução. O tubo de reação é lacrado e exposto a microondas a 140°C durante sete minutos. O solvente é removido a vácuo e o resíduo é purificado em sílica para produzir (S)-2-Nitro-6-(tetraidro-piran- 2-ilóxi)-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b]-[1,3]oxazina como um óleo amarelado. Exemplo 24

(S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ol (29)

<formula>formula see original document page 59</formula>

(S)-2-Nitro-6-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b]- [1,3]oxazina (4,35 g, 16,1 mmols, 100% em mol) é dissolvido em HO- Ac/THF/Água 4:2:1 (72:36:18 ml) e a mistura reacional é aquecida a 60°C e agitada durante 18 horas. A mistura reacional é deixada resfriar para tempe- ratura ambiente e é triturada com CH2CI2 gota a gota para precipitar o produ- to após filtragem. O volume filtrado reduzido e o processo de trituração é várias vezes repetidos para produzir (S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b] [1,3]oxazin-6-ol como um sólido amarelado.

MS: M+ 186,4

Exemplo 25

Procedimento geral para alguilacão de (S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1- b][1,3]oxazin-6-ol (29)

A 0°C sob Ar, NaH (60% em óleo mineral, 0,16 g, 3,9 mmols, 150% em mol) é adicionado a solução agitada de (S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H- imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ol (2,64 mmols, 100% em mol), haleto de benzila (120% erin mol), e iodeto de tetrabutilamônio (0,05 g, 0,13 mmol, 5% em mol) em DMF anidroso (10,0 mL). A mistura é deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. A reação é resfriada até 0°C e extingui- da com água gelada. Produto é extraído duas vezes com 250 ml de EtOAc, secado sobre MgSO4 e concentrado a vácuo para produzir óleo marrom bru- to que é purificado empregando-se LC preparativa de fase reversa para pro- duzir o produto.

Exemplo 26

<formula>formula see original document page 60</formula>

O composto 30 está preparado tal como descrito no exemplo 25 de 2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ol (6) e 1-bromo-4-cloro- metilbenzeno.

MS: M+ 356,3

Exemplo 27

<formula>formula see original document page 60</formula>

O composto 31 é preparado tal como descrito no exemplo 25 de 2-nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3)oxazin-6-ol (6) e 1 -clorometil-4-trifluo- rometoxibenzeno.

MS: M+ 360,3

Exemplo 28

<formula>formula see original document page 61</formula>

O composto 32 é preparado tal como descrito no exemplo 25 de 2-nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ol (6) e i-clorometil-2-trifluo- rometoxibenzeno.

MS: M+ 360,3

Exemplo 29

<formula>formula see original document page 61</formula>

O composto 33 é preparado tal como descrito no exemplo 25 de 2-nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ol (6) e 1-bromometil-3,5- ditrifluorornetilbenzeno.

MS: M+412,3

Exemplo 30

<formula>formula see original document page 61</formula>

O composto 34 é preparado tal como descrito no exemplo 25 de 2-nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ol (6) e 1-bromometilben- zeno.

MS: M+ 275,7

Exemplo 31

<formula>formula see original document page 61</formula> O composto 35 é preparado tal como descrito no exemplo 25 de 2-nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ol (6) e i-bromometil-4- cicloexilmetoxibenzeno.

MS: M+ 388,1

Exemplo 32

<formula>formula see original document page 62</formula>

Uma mistura de brometo de 4-fluorobenzila (1,89 g, 10,0 mmols), álcool de 4-hidroxibenzila (1,24 g, 10,0 mmols) e CS2CO3 (6,52 g, 20,0 mmols) em CH3CN anidroso (30 ml) é aquecido sob refluxo durante 18 horas. A mistura é resfriada até temperatura ambiente, filtrada e o solvente é removido sob pressão reduzida para produzir um sólido marrom-claro que é triturado com quantidade pequena de CH2CI2 para produzir 36 como um só- lido cristalino amarelo-claro.

Ponto de fusão: 132,0 a 133,4°C.

1H RMN (CDCI3) 4,63 (s, 2H), 5,03 (s, 2H), 6,93 - 7,11 (m, 4H). MS: M+388,1

Exemplo 33

<formula>formula see original document page 62</formula>

O composto 37 é preparado tal como descrito no exemplo 25 de 2-nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazin-6-ol (29) e 1-clorometil-4-(4- fluorobenzilóxi)benzeno). A preparação forneceu 37 como um sólido amare- lo-claro.

Ponto de Fusão: 150,2 - 150,9°C.

1H RMN (CDCI3) δ 4,09 - 4,22 (m, 3 H), 4,36 (d, 12,0 Hz, 1H), 4,56 - 4,64 (m, 2 H), 4,70 (d, 12,0 Hz, 1H), 5,06 (s, 2 H), 6,96 - 7,15 (m, 4 H), 7,25 - 7,46 (m, 5 H). 13C RMN (CDCI3) δ 48,0, 67,6, 68,9, 69,8, 70,9, 115,6, 116,0, 117,4, 130,4, 130,6, 131,1, 134,5, 148,3, 159,5, 161,7, 164,9. Exemplo 34

<formula>formula see original document page 63</formula>

Cloreto de Mesila (0,78 mL, 10,0 mmols) é adicionado a uma solução agitada de 29 (0,93 g, 5,0 mmols) e trietilamina (2,1 mL, 15,0 mmols) em DMF (40 mL) às 0°C. A mistura reacional é em seguida também agitada a 0°C durante 1 hora. O solvente e os reagentes excessivos são re- movidos sob pressão reduzida. H2O (50 mL) é adicionado ao resíduo mar- rom-claro. A mistura é em següida filtrada, e o sólido lavado com H2O (50 mL) para produzir 38 como um sólido de amarelo/branco.

Pontode Fusão: 213 a 214. 1H RMN (Actona-de) δ 3,30 (s, 1H), 4,58 (br d, 14,1 Hz, 1H), 4,69 (dd, 3,3 Hz, 14,1 Hz, 1H), 4,77 - 4,78 (m, 2 H), 5,56 - 5,60 (m, 1H), 7,86 (s, 1H). 13C RMN (DMSO-C6 ) δ 37,9, 47,6, 68,6, 69,1, 117,9, 142,2, 146,5. Exemplo 35

<formula>formula see original document page 63</formula>

Uma mistura de 38 (1,68 g, 6,3 mmols), NaN3 (5 g, 76 mmols) em DMF (20 mL) é aquecido até 70°C sob atmosfera inerte durante 48 ho- ras. O solvente é removido sob pressão reduzida. H2O (100 mL) é adiciona- do ao resíduo. A mistura é extraída com acetato de etila (3 χ 80 mL). Os ex- tratos orgânicos são combinados, lavados com salmoura (200 mL), e seca- dos sobre MgSO^. O solvente é em seguida removido sob pressão reduzida par produzir um sólido marrom que é purificado por cromatografia de coluna (sílica-gel, metanol em cloreto de metileno a 0 a 5%) para produzir 39 como um sólido amarelo.

Ponto de Fusão: 152,0 a 152,4°C. 1H RMN (acetona-d6) δ 4,36 (dt, 2,4 Hz, 13,5 Hz, 1H), 4,58 (dd, 3,6 Hz, 13,5 Hz, 1Η), 4,62 - 4,74 (m, 3Η), 7,83 (s, 1Η).

Exemplo 36

<formula>formula see original document page 64</formula>

Uma mistura de 39 (40 mg, 0,19 mmol) e Pd/C (paládio sobre carbono ativado a 10%, 38 mg) em EtOAc (8 mL) é agitada sob uma atmos- fera de hidrogênio (balão) a temperatura ambiente durante 2 horas. TLC (MeOH em CHCI3 a 5%) mostrou que o material de partida é consumido. O mesmo TLC é também desenvolvido em MeOH em CHCI3 a 25% para mos- trar uma mancha em Rf = 0,20. A mistura é filtrada, e a solução é concentra- da sob pressão reduzida para produzir 40 como um filme marrom-claro (17 mg, 50%).

1H RMN (CD3OD) δ 3,54 - 3,60 (m, 1H), 3,88 (ddd, 1,4 Hz, 5,5 Hz, 12,8 Hz, 1H), 4,23 - 4,30 (m, 2H), 4,47 (ddd, 1,6 Hz, 2,7 Hz, 12,8 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H).

Exemplo 37

<formula>formula see original document page 64</formula>

Cloreto de acetila 4-(Trifluorometóxi)fenóxi (1,2 g, 4,6 mmols) é adicionado a uma solução agitada de amina bruta 40 (amina bruta de redu- ção de azida, -1,1 mmol) e trietilamina (1,1 ml, 8,0 mmols) em DMF (20 mL) a temperatura ambiente. A mistura de reação é também agitada a tempera- tura ambiente durante 18 horas. O solvente e o(s) reagente(s) excessivo(s) são removidos sob pressão reduzida. H2O (50 mL) é adicionado. E a mistura é extraída com CH2CI2 (3 χ 50 mL). Os extratos orgânicos são combinados, lavados com H2O (2 χ 100 mL), e secados sobre MgSO4. O solvente em se- guida removido sob pressão reduzida para produzir uma goma marrom que é purificada por meio e TLC preparatória (eluída com MeOH em CH2CI2 a 5%) para produzir 41 como um sólido amarelo.

Ponto de Fusão: 158,0 a 159,5°C.

1H RMN (CDCI3) δ 4,18 (br d, 13,2 Hz, 1H), 4,29 (dd, 4,7 Hz, 13,2 Hz, 1H), 4,43 (dd, 1,7 Hz, 11,7 Hz, 1H), 4,53 - 4,62 (m, 3 H), 4,78 - 4,88 (m, 1H), 6,82 - 7,14 (m, 1,4-bissubstituído padrão, 4H, H aromático), 7,28 (s, 1H, imidazol-H), 8,20 (br d, 7,8 Hz, 1H, amida-H). Cal'd: C 44,78, H N 3,26, N 13,93; analisou C 44,89, H 3,25, N 13,75.

Exemplo 38

<formula>formula see original document page 65</formula>

Em uma atmosfera inerte 40 (100% em mol) é dissolvido em DMF anidroso (0,2 M), e adicionado cloreto de 1-(4-trifluorometil-pirimidin-2- il)-piperidina-4-carbonila (120% em mol) e trietilamina (200% em mol). A mis- tura reacional resultante é agitada durante a noite a temperatura ambiente. A reação é concentrada e dissolvida em EtOAc e lavada com água três vezes.

A camada orgânica é secada sob Na2SO4 anidroso, concentrada e purificada através de LC preparativa de fase reversa para produzir 42. MS: M+ 442,3

Exemplo 39

A uma solução de 2-(4-fluorofenil)-oxirano (2,17 mmols) em eta- nol em um tubo lacrado é adicionado *2,6 mmols de 2-cloro-4-nitroimidazol) em uma porção e aquecida a 70°C durante 16 horas. A mistura reacional é concentrada e o resíduo é dissolvido em DCM e filtrado. O filtrado é concen- trado para produzir o composto bruto. O composto bruto é purificado sobre coluna de sílica-gel (malha 60 a 120) empregando-se gradiente de 10% a 25% de acetato de etila: éter de pet. como eluente para produzir 204 mg de álcool 43.

MS: M+ 251,3

Exemplo 40

<formula>formula see original document page 66</formula>

A uma suspensão de NaH (lavada com hexano seco antes do uso) (1,4 mmol) em THF é adicionado uma solução de álcool 43 (0,7 mmol) em THF a temperatura ambiente e agitada a 80°C durante 2 horas.

O solvente é removido a vácuo e o resíduo é dissolvido em DCM, lavado com água, salmoura, secado (sobre Na2S04). A camada orgâ- nica é concentrada para produzir o produto bruto. O composto bruto é purifi- cado sobre sílica-gel (malha 60 a 120) empregando-se 15% a 25% de gradi- ente de acetato de etila: éter de pet. como eluente para produzir 45 mg do composto 44 desejado.

MS: M+250,2

Exemplo 41

<formula>formula see original document page 66</formula>

A uma solução agitada de 3-cloro-1-fenil-1-propanol (1,1 mmol) em DCM seco é adicionado imidazol (2,33 mmols) seguido por DMAP (0,11 mmol) e agitada durante 1 horas e meia. Em seguida TBDMSCI 4,68 mmols) é adicionado e agitado durante 12 horas a temperatura ambiente e a reação é monitorada por TLC. A mistura reacional diluída com água e extraída com DCM (3 χ 30 mL) e lavada com água comum, salmoura e secada (sobre NaaSO4) e concentrada a vácuo abaixo de 40°C empregando-se rotavapor.

MS: M+ 284,9 Exemplo 42

<formula>formula see original document page 67</formula>

A uma solução agitada de composto 45 (0,7 mmol) em DMF se- co e adicionado K2CO3 (1,4 mmo!) e Nal (0,066 mmol) e agitados durante 30 minutos a temperatura ambiente. Em seguida o composto 2-cloro-4-nitro- imidazol (0,84 mmol) é adicionado a temperatura ambiente e agitado durante a noite a 80°C e a reação é monitorada por TLC. A mistura reacional é diluí- da com água e extraída com DCM (3 x 25 mL) e lavada com água, salmoura e secada (sobre Na2S04) e concentrada a vácuo. O composto bruto é purifi- cado sobre alumínio neutro empregando-se 30% de EtOAc/pet-éter como eluente para produzir 46.

MS: M+ 396,3

Exemplo 43

<formula>formula see original document page 67</formula>

A uma solução do composto 46 (0,5 mmol) em THF é adicionada a um TBAF-THF a 1 M (1,5 mmol) a temperatura ambiente e agitada durante 12 horas a 60°C e a reação é monitorada por TLC. A mistura reacional é ex- tinguida em água e extraída com DCM (3 x 25 mL) e lavada com água, sal- moura e secada sobre NazSÜ4 e concentrada a vácuo a 40°C. A análise de CTLC do composto bruto indica a presença de produto desejado e derivado de álcool pelo desproteção simples. Estes dois componentes estão separa- dos através de cromatografia de coluna sobre sílica-gel (malha 100 a 200) empregando-se 40% de EtOAc/pet-éter como eluente. O álcool é tratado novamente com TBAF-THF a 60°C para produzir uma quantidade adicional de produto ciclizado. MS: M+ 246,3

Exemplo 44

<formula>formula see original document page 68</formula>

Uma mistura de 2-cloro-4 nitroimidazol (4,11 mmol) e trietil ami- na(1,58 mmol) em 1,4-dioxano e agitada durante 30 minutos. Em seguida 1- octeno-3-ona (3,16 mmols) é adicionado à mistura acima e agitada a 60°C durante 12 horas em um tubo lacrado. A reação é diluída com água e extraí- da com EtOAc (3 χ 30 mL) e é lavada com água, salmoura e secada sobre Na2SO4) e concentrada. A amostra bruta é empregada para a próxima etapa com qualquer purificação adicional. MS: M+274,2

Exemplo 45

<formula>formula see original document page 68</formula>

A uma solução pré-resfriada (O0C) do composto 48 (2,2 mmols) em MeOH seco, é adicionada a Na2BH4 (2,2 mmols) em porção e agitada durante 2 horas a 0°C. A reação é extinguida com acetona e agitada durante 30 minutos seguida por evaporação do solvente orgânico. A reação é diluída com água e extraída com EtOAc (3 χ 30 mL). A camada orgânica é lavada com água, salmoura e secada sobre Na2SO4, e concentrada. O composto bruto é filtrado por uma coluna pequena de alumínio neutro empregando a- cetato de etila como eluente. A evaporação do solvente produziu 49. MS: M+ 276,2

Exemplo 46

<formula>formula see original document page 68</formula> A uma solução do composto 49 (1,8 mmol) em THF seco é adi- cionado TBAF (5,4 mmols) lentamente a temperatura ambiente e agitada durante 12 horas a 60°C. A reação é diluída com água e extraída com EtOAc (3 x 30 mL). A camada orgânica é lavada com água, salmoura e secada so- bre Na2SO4 e concentrada para produzir o bruto 50. O composto obtido é purificado sobre sílica-gel (malha 100 a 200) com 5% de EtOAC: CHCl3. a evaporação dos solventes produziu o puro 50. MS: M+ 240.3

Exemplo 47

<formula>formula see original document page 69</formula>

2-Azidometil-oxirano (6,5 g, 65,6 mmols), 2-cloro-4-nitro-1 H- imidazol (10,6 g, 72,2 mmols), e carbonato de potássio (1,8 g, 13,1 mmols) são agitados em etanol seco (100 ml) e aquecidos até 70°C durante 18 ho- ras. O solvente é removido a vácuo e o produto bruto é purificado através de cromatografia instantânea para produzir 1-azido-3-(2-cloro-4-nitro-imidazol- 1 -il)-propan-2-ol como sólido viscoso amarelo-claro.

MS: 246,61; M+ = 247,2; M" = 245,1.

1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 7,92 (s, 1H), 4,35 (bs, 1H), 4,19 - 4,14 (m, 2H), 4,05 - 3,99 (m, 1H), 3,49 - 3,38 (m, 2H).

Hidrido de sódio (60% em óleo mineral) e iodeto de metila (120% em mol) é adicionado a uma solução de 1-azido-3-(2-cloro-4-nitro-imidazo-1- il)-propan-2-ol (120% em mol) em DMF anidroso (25 ml) a -20°C e agitada durante 4 horas. A mistura reacional é extinguida com água gelada (100 ml) e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 100 ml). As cama- das orgânicas combinadas são secadas sobre sulfato de sódio anidroso, concentradas a vácuo e purificada através de cromatografia instantânea pa- ra produzir 1-(3-azido-2-metóxi-propil)-2-cloro-4-nitro-1H-imidazol como sóli- do viscoso amarelo-claro que é reduzido à amina correspondente empre- gando-se reação de Staudinger. 1-(3-Azido-2-metóxi-propil)-2-cloro-4-nitro- 1H-imidazol (100% em mol) e trifenilfosfina (120% em mol) é dissolvido em CH2Cl2 e a reação agitada a temperatura ambiente durante 6 horas. A rea- ção é extinguida empregando-se HCl a 1 N para produzir 3-(2-cloro-4-nitro- imidazo-1 -il)-2-metóxi-propilamina.

4-(Metoxi)benzaldeido (150% em mol) e adicionado a uma solu- ção agitada de 3-(2-cloro-4-nitro-imidazol-1-il)-2-metóxi-propilamina (amina bruta de redução de azida. ~ 100% em mol) em DMF a temperatura ambien- te, seguido por adição de ácido acético glacial (100% em mol). Depois de 30 =minutos, NaBH3CN (200% em mol) é adicionado. A mistura reacional foi também agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. O solvente é re- movido sob pressão reduzida. H2O (50 mL) é adicionado ao resíduo. A mis- tura é extraída com CH2Cl2 (3 χ 50 mL). Os extratos orgânicos são combina- dos, lavados com H2O (100 mL), e secados sobre MgS04. O solvente é em seguida reomovido sob pressão reduzida para produzir uma goma marrom, que é dissolvida em DMF. DBU (150% em mol) é adicionado, e reação irra- diada em microondas durante 10 minutos a 120°C para produzir 6-metóxi-8- (4-metóxi-benzil)-2-nitro-5,6,7,8-tetraidro-imidazo[1,2a]pirimidina após purifi- cação de HPLC preparativa.

Massa: M+319,3

Exemplo 48

(S)-2-Nitro-6-(4-trifluorometilsulfanil-benzilóxi)-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1 - b][1,3]oxazina (52)

<formula>formula see original document page 70</formula>

A 0°C sob Ar, NaH (60% em óleo mineral, 150% em mol) é adi- cionado a solução agitada de (S)-2-Nitro-6,7-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3] oxazin-6-ol (100% em mol), 1-bromometil-4-trifluorometilsulfanil-benzeno (120% em mol), e iodeto de tetrabutilamônio (5% em mol) em DMF anidroso. A mistura é deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. A reação é resfriada até 0°C e extinguida com água gelada. Produto é extraído duas vezes com 250 mL de EtOAc1 secado sobre MgSO4 e concen- trado a vácuo para produzir óleo de marrom bruto que é purificado empre- gando-se LC preparativa de fase reversa para produzir (S)-2-Nitro-6-(4- trifluorometilsulfanil-benzilóxií-ej-diidro-5H-imidazo[2,1-b][1,3]oxazina, 52. Massa: M+ 376,3.

Exemplo 49

2-Nitro-6-[4-(4-trifluorometóxi-fenil)-piperazin-1-ilmetil]-6,7-diidro-5H- imidazo[2,1-b][1,3]oxazina (53)

<formula>formula see original document page 71</formula>

Clorocromato de Piridínio (10,54 g, 48,9 mmols) é dissolvido em diclorometano (100 ml) e celita (10 g) é adicionado e a suspensão é agitada durante 30 minutos. Uma solução de (2,2-dimetil-1,3-dioxan-5-il)metanol (5 g, 34,2 mmols) em diclorometano seco é adicionada gota a gota à mistura reacional e agitada durante 2 horas a temperatura ambiente. A mistura rea- cional é diluída com éter de dietila (80 ml), agitada durante 10 minutos, filtra- da por celita, várias vezes lavadas com éter e o solvente é removido a vácuo para produzir 2,2-dimetil-[1,3]dioxano-5-carbaldeído, que é empregado na próxima etapa sem purificação adicional.

2,2-dimetil-1,3-dioxano-5-carbaldeído (3,52 g, 24,4 mmols) é dissolvido em 1,2-dicloroetano (250 ml) e 1 -[4-(trifluorometóxi)fenil] piperazi- na (6,01 g, 24,4 mmols) em 1,2-dicloroetano (50 ml) é adicionado. A mistura reacional é mantida a temperatura ambiente durante 1 hora. A esta mistura reacional é adicionado sodiotriacetoxiboroidreto (20,72 g, 97,7 mmols) em porções pequenas. A mistura reacional é deixada agitada a temperatura am- biente durante 9 horas. Água é adicionada à mistura reacional e é extraída com clorofórmio. A camada orgânica é secada e concentrada a produzir 1- (2,2-dimetil-[1,3]dioxan-5-ilmetil)-4-(4-trifluorometóxi-fenil)-piperazina.

O derivado de piperazina (7,09 g, 18,9 mmols) é dissolvido em metanol (80 ml), água é adicionada (3 ml), seguida por ácido />toluenos- sulfônico (3,91 g, 22,7 mols) e a mistura reacional é aquecida sob refluxo para 6°C durante 3 horas. A mistura reacional é concentrada e neutralizada com solução de NaHCO3 aquosa a 10% seguida por extração com clorofór- mio. O solvente é removido a vácuo para produzir 2-[4-(4-trifluorometóxi- fenil)-piperazin-1-ilmetil]-propano-1,3-diol que é empregado na próxima eta- pa sem purificação adicional.

Uma suspensão de hidrido de sódio (2,58 g, 64,6 mmols) em DMF seco (100 ml) é resfriada a -20°C e o diol (4,5 g, 16,1 mmols) em DMF (25 ml) é adicionada à mistura reacional e agitada durante 1 hora. Uma solu- ção de cloreto de í-butildimetilsilila (2,92 g, 19,3 mmols) em DMF seco é adi- cionada à mistura reacional gota à gota e agitada durante 1 hora. A mistura reacional é extinguida com água gelada e extraída com acetato de etila. A camada orgânica é lavada com água, salmoura, secada sobre Na2SO4 e concentrada e purificada através de cromatografia de coluna para produzir 3- (terc-butil-dimetil-silanilóxi)-2-[4-(4-trifluorometóxi-fenil)-piperazin-1-ilmetil]- propan-1-ol.

1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,2 (d, 2H), 6,9 (d, 2H), 3,9 (dd, 1H), 3,7 (dd, 1H), 3,5 (h, 1H), 3,2 (bs, 4H), 3,2 (m, 2H), 2,8 (bs, 4H), 2,2 (m, 1H), 1,3 (s, 9H), 0,1 (s, 6H).

Massa: M+449,6.

O álcool acima (100% em mol) é dissolvido em DCM e DMAP (0,07% em mol) é adicionado, seguido por trietilamina (157% em mol) e NsCI (100% em mol) a 0°C. A mistura reacional é deixada aquecer a temperatura ambiente e agitada durante 5 horas. O solvente é removido a vácuo e o re- síduo é absorvido em EtOAc, lavado com água, HCI a 0,5 N, água, salmoura e secado em MgSO4, filtrado e concentrado. O resíduo é empregado na pró- xima etapa sem purificação adicional.

O nosilato bruto é dissolvido em DMF e 2-CI-nitroimidazol (150% em mol) e carbonato de potássio (120% em mol) é adicionado e a mistura reacional é aquecida em uma microondas para 150°C durante 5 minutos. O solvente é removido e o resíduo é dissolvido em EtOAc e lavado várias ve- zes com HCI a 0,5 N, água, salmoura, secado em MgSO4 e o solvente é re- movido a vácuo. O resíduo é purificado através de cromatografia de coluna para produzir 1 -[3-(terc-Butil-dimetil-silanilóxi)-2-(2-cloro-4-nitro-imidazol-1 - ilmetil)-propil]-4-(4-trifluorometóxi-fenil)-piperazina. Massa: M+ 578,6= 1-[3-(terc-Butil-dimetil-silanilóxi)-2-(2-cloro-4-nitro-imidazol-1- ilmetil)-propil]-4-(4-trifluorometóxi-fenil)-piperazina (100% em mol) é dissolvi- do em THF anidroso e TBAF (solução a 1M em THF, 100% em mol) é adi- cionado à solução. O tubo de reação é lacrado e exposto a microondas a 140°C durante oito minutos. O solvente é removido a vácuo e o resíduo é purificado em sílica e HPLC preparativa para produzir o composto 53 como um sólido amarelado.

Massa: M+428,6. Exemplo 50

<formula>formula see original document page 73</formula>

O composto 54 é sintetizado tal como mostrado no Esquema abaixo. <formula>formula see original document page 74</formula>

Exemplo 51

<formula>formula see original document page 74</formula>

O composto 55 é sintetizado tal como descrito em Eur J Med Chem 24, 1989, 631-633.

Exemplo 52: Atividade contra Mvcobacterium tuberculosis

Os valores de MIC dos compostos de teste e padrões são testa- dos contra dois organismos de referência Bacilo Calmette Guerin (BCG) Pasteur de Mycobacterium bovis (ATCC 35745) e Myeobaeterium tuberculo- sis H37Rv (ATCC 27294). As bactérias são cultivadas em caldo Middlebrook 7H9 (Becton Dickinson) suplementado com solução salina de albumina- dextrose a 10% (v/v) [ADS: NaCI a 0,81%, fração de BSA V a 5% (Roche, Mannheim, Alemanha) e glicose a 2%], glicerol a 0,2%, Tween-80 a 0,05%.

O teste de suscetibilidade ao fármaco é realizado em placas de 96 cavidades de fundo plano empregando-se o método de caldo de microdi- luição (NCCLS, National Committee for Clinicai Laboratory Standards. 2003 Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bactéria that Grow Aerobically; Approved Standard. Sexta Edição), com algumas modificações. Estreptomicina e PA-824 são empregados como os fármacos padrão. Cultu- ras de mycobacterium ativamente crescente (OD600~0,2) são diluídas em caldo 7H9 completo para obter-se uma densidade óptica de OD600~0,04 (aproximadamente 106 CFU/ml). Volume igual (100 μL) da cultura diluída é adicionado às cavidades contendo fármacos diluídos em série (100 pL). As microplacas de MIC são lacradas para impedir a evaporação e são incuba- das a 37°C durante 4 - 7 dias. O crescimento das bactérias é quantificado ou pelo emprego do corante de redox azul Alamar (Serotec Ltd., Oxford, Reino Unido) ou por medição de densidade óptica (OD600).

Para os ensaios de MIC de azul Alamar, 50 μl da mistura de 1:1 recentemente preparada de Azul Alamar e Tween-80 a 10% são adicionados à cada cavidade. As microplacas são incubadas a 37°C durante outras 24 horas. O crescimento bacteriano é quantificado por medição de fluorescên- cia empregando-se comprimentos de onda de excitação e emissão de 530 nm e 590 nm, respectivamente (SpectraMax M2, Molecular Devices) e um valor de unidade de fluorescência relativa (RFU) a baixo de 15000 é consi- derado como nenhum crescimento. Por conseguinte, MIC é definido como a concentração de fármaco mais baixa que produção uma leitura de RFU ≤ 15000.

Para o método de MIC de turbidometria, o valor de OD600 das microplacas são registrados (SpectraMax M2, Molecular Devices) depois de 7 dias. MIC é definido como a concentração de fármaco mais baixa que pro- duz uma leitura de absorvência ≤ 1/10 para o valor obtido para o controle de crescimento sem antibiótico. Ambos os ensaios de MIC forneceram resulta- dos consistente e reproduzíveis; para o fármaco padrão estreptomicina, os valores de MIC são 06-0,13 e 0,25 pg/mL para M. bovis BCG e M. tubercu- losis H37Rv, respectivamente. Exemplo 53: Atividade Contra Trypanosoma cruzi

A cepa de Trypanosoma cruzi Tulahuen C2C4 é empregada. Os estágios de amastigota e tripomastigota infectantes são cultivados em célu- las L-6 (uma linhagem de células de mioblasto esquelético de rato) em meio RPMI 1640 suplementado com L-glutamina a 2 mM e soro bovino fetal inati- vado por calor a 10% em frascos de cultura de tecido de 12,5 cm2. Amastigo- tas desenvolvem-se intracelularmente, diferenciam-se em tripomastigotas e deixam a célula ospedeira. Estes tripomastigotas infectam novas células L-6 e são os estágios empregados para iniciar uma infecção no ensaio. Todas culturas e ensaios são conduzidos a 37 °C sob uma atmosfera de CO2 a 5% em ar.

Soluções de composto de cepa são preparadas em dimetilsulfó- xido a 100% (DMSO) a 10 mg/mL, e aquecidas ou sonicadas se necessário para dissolver a amostra= Após o uso as cepas são mantidas a -20°C Para os ensaios, o composto é novamente diluído para a concentração adequada empregando-se meio completo. A concentração de DMSO nas cavidades com a concentração de fármaco mais alta não excede a 1 %.

Os ensaios são executados em placas de microtítulo de 96 cavi- dades estéreis, cada cavidade contendo 100 μL de meio com 2 x103 células L-6. Depois de 24 horas, 50 μL de uma suspensão de tripanossomo conten- do 5 x 103 formas de corrente sangüínea de tripomastigota de cultura são adicionados às cavidades. Quarenta e oito horas depois, o meio é removido das cavidades e substituído por 100 pL de meio fresco, com ou sem uma diluição de composto em série. Neste momento as células L-6 devem ser infetadas com amastigotas e nenhum tripomastigota livre deve ficar no meio. Sete diluições de composto de 3 vezes são empregadas, abrangendo uma faixa de 90 μ/mL a 0,123 pg/mL. Cada composto é testada em duplicata. Os compostos ativos são testados duas vezes para confirmação. Depois de 96 horas de incubação as placas são inspecionados sob um microscópio inver- tido para assegurar o crescimento dos controles e esterilidade.

Em seguia o substrato CPRG/Nonidet (vermelho clorofenol-D- galactopiranosídeo (CPRG, Roche Diagnostics Ltd; 15,19 mg) mais 250 pL Nonidet P-40 são dissolvido em 100 mL de salina tamponda por fosfato esté- ril (pH 7,2), fornecendo 5x a concentração desejada final de CPRG em 0,25% Nonidet P-40/PBS), 50 pL são adicionados a todas as cavidades. Uma reação de cor torna-se visível em 2 - 6 horas e pode ser lida fotometri- camente a 540 nm. Os dados são transferidos para um programa de gráfi- cos, curvas de inibição de sigmoidais determinadas e valores de de IC50 calculados.

Exemplo 54: Atividade Contra Leishmania donovani

A cepa de Leishmania donovani MHOM/ET/67/L82 (obtida de Dr. S. Croft, Escola de Londres de Higiene e Medicina Tropical) é empregada. A cepa é mantida no hamster sírio Dourado. Amastigotas são coletadas do baço de um hamster infetado. Amastigotas são desenvolvidos em cultura axênica a 37°C em meio SM (Cunningham I., J. Protozool. 24, 325-329, 1977) em pH 5;4 suplementado com soro bovino fetal (FBS) inativado por calor a 10% sob uma atmosfera de CO2 a 5% em ar.

Soluções de composto de cepa são preparadas em dimetilsulfó- xido a 100% (DMSO) a 10 mg/mL, e aquecidas ou sonicadas se necessário para dissolver a amostra. Após o uso as cepas são mantidas a -20°C. Para os ensaios, o composto é novamente diluído para a concentração adequada empregando-se meio completo. A concentração de DMSO nas cavidades com a concentração de fármaco mais alta não excede a 1 %.

Os ensaios são executados em placas de microtítulo de fundo plano de 96 cavidades (Costar, Corning Inc.), cada cavidade contendo 100 μL de meio de cultura com 105 amastigotas de cultura axênica com ou sem uma diluição de fármaco em série. A concentração de amastigotas é deter- minada em um sistema de análise celular CASY (Schàrfe system, Reutlin- gen, Alemanha). Antes dos amastigotas serem contados, a cultura de parasi- tas é passada duas vezes através de uma agulha de calibre 22 para separar grupos de amastigotas.

A concentração mais alta para os compostos de teste é 90 pg/mL. Sete diluições de 3 vezes são empregadas, abrangendo uma faixa de 30 pg/mL a 0,041 pg/mL. Cada composto é testado em duplicata. Os compostos ativos são testados duas vezes para confirmação. Depois de 72 horas de incubação, as placas são inspecionados sob um microscópio inver- tido para assegurar crescimento dos controles e condições estéreis.

10 I de Azul Alamar (12,5 mg de resazurina dissolvidos em 100 ml água destilada) são em seguida adicionados a cada cavidade e as placas são incubadas durante outras 2 horas. Em seguida as placas são lidas com um fluorômetro de microplaca Spectramax Gemini XS (Molecular Devices Cooperation, Sunnyvale, CA, E.U.A) empregando-se um comprimento de ondas de excitação de 536 nm e um comprimento de onda de emissão de 588 nm.

Os dados são analisados empregando-se o software de leitora de microplaca Softmax Pro (Molecular Devices Cooperation, Sunnyvale, CA1 E.U.A.). A diminuição de fluorescência (isto é inibição) é expressa como por- centagem da fluorescência de culturas de controle e plotada contra as con- centrações de fármaco. O valor de IC5o é calculado a partir da curva de inibi- ção sigmoidal pelo programa de software.

APLICABILIDADE INDUSTRIAL

Os compostos de nitroimidazol da presente invenção têm propri- edades farmacêuticas úteis. Em particular, os compostos são úteis no trata- mento e/ou prevenção de infecções tais como aquelas causadas por Myco- bacterium tuberculosis, Trypanosoma cruzi ou Leishmania donovani.

Claims

1. Composto de fórmula (I), ou um sal, éster ou pró-fármaco far- maceuticamente aceitável deste: <formula>formula see original document page 79</formula> em que: (a) m é 0; W é O e V está ausente; um dentre R1 e R3 é haloarila e o outro é H; e R2 e R4 ambos são H; ou: (b) m é 1; W é N e V é um grupo alquilarila, opcionalmente substituído com um ou mais substituintes de alcóxi; R1 e R3 ambos são H; e um dentre R2 e R4 é alcóxi e o outro é H; ou: (c) m é 1; W é O e V está ausente; um dentre R1 e R3 é alquila ou arila, e o outro é H; e R2 e R4 ambos são H; ou: (d) m é 1; W é O e V está ausente; um dentre R2 e R4 é -L(B)n-(Z)p, -(L-B)q-(Z)p ou -Y-(B)q-Z, e o ou- tro é H; e R1 e R3 ambos são H; em que L é um grupo atômico que tem a fórmula -O-R5- onde R5 é um alquileno inferior, -C(O)-, alquileno inferior-C(O)-, -C(O)-alquileno inferior, alquileno inferior-C(0)-NH-, alquileno inferior-NH-; B é um anel de cicloalquila, heterocíclico, de arila ou de heteroarila que é opcionalmente também substituído com um ou mais substituintes; e Z é halogênio, alquila inferior substituída com pelo menos um halogênio, alcóxi inferior substituído com pelo menos um halogênio ou tioalquila inferior substituída com pelo me- nos um halogênio; e Y é -NHC(O)-; η é 1 ou 2; ρ é O, 1 ou 2; e q é 1 ou 2; com a condição de que se Ffe ou FU for -L-(B)n-(Z)p em que η é 1, B é fenila e L é -O-CH2-, então ρ não seja 0; e com a condição de que se R2 ou R4 for -(L-B)q-(Z)p em que q é 2, ambos os grupos B são fenila e L é -O-CH2-, então ρ não seja 0; e com a condição de que se R2 ou R4 for -L-(B)n-(Z)p em que η é 1, B é fenila e L é -O-CH2-, então Z não seja 4-trifluorometóxi, 4-flúor, 4- trifluoroetóxi, 4-pentafluoropropóxi, 4-tetrafluoropropóxi, 4-trifluorometila, 2,4- difluorometila ou 2,4-diflúor.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste em que: m é 1; W é O e V está ausente; um dentre R2 e R4 é -L(B)n-(Z)p, -(L-B)q-(Z)p ou -Y-(B)q-Z, e o ou- tro é H; e R1 e R3 ambos são H; em que L é um grupo atômico que tem a fórmula -O-R5- onde R5 é um alquileno inferior, -C(O)-, alquileno inferior-C(O)-, -C(0)-alquileno infe- rior, alquileno inferior-C(0)-NH-, alquileno inferior-NH-; B é um anel de ciclo- alquila, heterocíclico, de arila ou de heteroarila que é opcionalmente também substituído com um ou mais substituintes; e Z é halogênio, alquila inferior substituída com pelo menos um halogênio, alcóxi inferior substituído com pelo menos um halogênio ou tioalquila inferior substituída com pelo menos um halogênio; e Y é -NHC(O)-; η é 1 ou 2; ρ é 0, 1 ou 2; e q é 1 ou 2; com a condição de que se Ffe ou R4 for -L-(B)n-(Z)p em que η é 1, B é fenila e L é -O-CH2-, então ρ não seja 0; e com a condição de que se R2 ou R4 for -(L-B)q-(Z)p em que q é -2, ambos os grupos B são fenila e L é -O-CH2-, então ρ não seja 0; e com a condição de que se R2 ou R4 for -L-(B)n-(Z)p em que η é -1. B é fenila e L é -O-CH2-. então Z não seja 4-trifluorometóxi. 4-flúor. 4- trifluoroetóxi, 4-pentafluoropropóxi, 4-tetrafluoropropóxi, 4-trifluorometila, 2,4- difluorometila ou 2,4-diflúor.

3. Composto de acordo com a na reivindicação 1 ou reivindica- ção 2, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste, em que um dentre R2 e R4 é -L-(B)n-(Z)p onde B é um grupo piperazina, piri- dina, fenila ou benzimidazol, ou um grupo oxazol ou tiazol, opcionalmente fundido a um anel de fenila.

4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste, em que L é -OCH2C(O)-.

5. Composto de fórmula (II), ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste: <formula>formula see original document page 81</formula> em que: L é um grupo atômico que tem a fórmula -O-R5- em que R5 é um alquileno inferior, -C(O)-, alquileno inferior-C(O)-, -C(0)-alquileno inferior, alquileno inferior-C(0)-NH-, alquileno inferior-NH-; B é um anel de cicloalquila, heterocíclico, dé arila ou de heteroa- rila que é opcionalmente também substituído com um ou mais substituintes; η é 1 ou 2; e Z é halogênio, alquila inferior substituída com pelo menos um halogênio ou alcóxi inferior substituído com pelo menos um halogênio; com a condição de que se η for 1 então B não seja fenila ou se η for 1 e B for fenila então L seja -OCH2C(O)NH- ou -OCH2C(O)NHCH2-.

6. Composição farmacêutica compreendendo um composto co- mo definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste, em combinação com um excipiente, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

7. Método de tratamento e/ou prevenção de uma doença ou dis- túrbio causado por uma infecção por Mycobacterium tuberculosis. Trypano- soma cruzi ou Leishmania donovani compreendendo administrar a um paci- ente com necessidade deste uma quantidade eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou um sal, éster ou pró- fármaco farmaceuticamente aceitável deste.

8. Método de tratamento e/ou prevenção de uma doença ou dis- túrbio causado por uma infecção por Trypanosoma cruzi ou Leishmania do- novani, compreendendo administrar a um paciente com necessidade deste uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (III), ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste: <formula>formula see original document page 82</formula> em que: (a) m é 0; W é O e V está ausente; um dentre R1 e R3 é haloarila ou alquila e o outro é H, ou R1 e R3 ambos são um grupo alquila inferior; e R2 e R4 ambos são H; ou: (b) m é 1 W é N e V é um grupo alquilarila, opcionalmente substituído com um ou mais substituintes de alcóxi; R1 e R3 ambos são H; e um dentre R2 e R4 é alcóxi e o outro é H; ou: (c) m é 1; W é O e V está ausente; um dentre Ri e R3 é alquila ou arila, e o outro é H; e R2 e R4 ambos são H; ou: (d) m é 1; WéOeV está ausente; um dentre R2 e R4 é -L(B)n-(Z)p, -(L-B)q-(Z)p ou -Y-(B)q-Z, e o ou- tro é H; e R1 e R3 ambos são H; em que L é um grupo atômico que tem a fórmula -O-R5- onde R5 é um alquileno inferior, -C(O)-, alquileno inferior-C(O)-, -C(0)-alquileno infe- rior, alquileno inferior-C(0)-NH-, alquileno inferior-NH-; B é um anel de ciclo- alquila, heterocíclico, de arila ou de heteroarila que é opcionalmente também substituído com um ou mais substituintes; e Z é halogênio, alquila inferior substituída com pelo menos um halogênio, alcóxi inferior substituído com pelo ménosum halogênio ou tioalquila inferior substituída com pelo menos um halogênio; e Y é -NHC(O)-; η é 1 ou 2; ρ é 0, 1 ou 2; e q é 1 ou 2; ou um sal, éster ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste.

9. Método para a preparação de um composto heterocíclico de nitrogênio, compreendendo: reação de um epóxido substituído não impedido estericamente com um composto de haloimidazol, em que a relação molar do epóxido substituído não impedido estericamente para o composto de haloimidazol é menor do que ou igual a 1:1, para formar um aduzido com um grupo funcio- nal de álcool; proteção do grupo funcional de álcool no aduzido para formar um aduzido protegido por álcool; e tratamento do aduzido protegido por álcool com um agente de ciclização pa- ra formar o composto heterocíclico de nitrogênio.

10. Método de acordo com a reivindicação 9, em que o compos- to heterocíclico de nitrogênio, na forma livre ou de sal, é representado por um composto de fórmula (IV) <formula>formula see original document page 84</formula> em que R1 = nitro, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alco- xicarbonila; R2 = 2-tetraidropiranila, 2-etoxietila, tritila, metila, etila, alila, tri- metilsililetoximetila, 2,2,2-tricloroetila, benzila, trimetilsilila, f-butildimetilsilila, fenildimetilsilila, tri/sopropilsilila ou f-hexildimetilsilila; R3 = H, acila, formila, sulfonila, trifluorometila, ciano, halo ou alcoxicarbonila.