BRPI0706558A2 - composições farmacêuticas com estabilidade aperfeiçoada - Google Patents

Abstract

COMPOSIçõES FARMACEUTICAS COM ESTABILIDADE APERFEIçOADA. A presente invenção propicia uma composição polimérica biodegradável estabilizada útil como um sistema de administração de liberação controlada para agente peptídico. As composições da presente invenção compreendem a) um sal benéfico de um agente peptídico formado com um ácido forte que minimiza ou impede a interação/reação entre o agente peptídico e o polimero em uma solução orgânica; b) um polimero biodegradável; c) um solvente orgânico farmaceuticamente aceitável; e d) opcionalmente um ou mais excipientes. A presente invenção também se refere a um método de fabricação e um método do uso do mesmo.

Description

COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS COM ESTABILIDADE APERFEIÇOADA

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

Em anos recentes, um grande número e variedade deagentes peptídicos tais como peptideos, oligopeptídeos,polipeptideos, e proteínas foram descobertos e receberammuita atenção como candidatos a medicamentos. Contudo,muitos agentes peptídicos não são estáveis na medida em quesão facilmente hidrolisados ou degradam-se in vivo porenzimas que resultam em uma meia-vida de circulação muitocurta. Por conseguinte, a maior parte de remédiospeptídicos tem sido administrada por injeção, normalmentediversas vezes ao dia.

A administração por injeção, entretanto, é dolorosa,muito dispendiosa, e inconveniente. Freqüentemente, acondescendência do paciente é muito desafiada. Para muitosagentes peptídicos, especialmente hormônios, exige-se que omedicamento seja administrado continuamente em uma taxacontrolada durante um longo período de tempo, e sendo assimum sistema de administração de liberação controlada édesejável. Tais sistemas podem ser propiciados aoincorporar os agentes peptídicos em matrizes de polímerosbiodegradáveis e biocompatíveis. Em uma técnica, o polímeroé dissolvido em um solvente orgânico e em seguida misturadocom os agentes peptídicos que são fabricados nas formas demicro-cápsulas, micro-grânulos ou hastes implantáveis aoremover o solvente orgânico. O agente peptídico é encerradodentro das matrizes de polímeros. Diversos produtos foramdesenvolvidos de forma bem sucedida ao utilizar polímerosbiodegradáveis nas formas de micro-partículas e implantesde hastes sólidas, tais como Lupron, Zoladex, Triptorelin,etc. Embora estes produtos pareçam ser eficazes, os mesmospossuem desvantagens e limitações, tais como o grandevolume de fluidos de suspensão para micro-partículas ouinserção cirúrgica de implantes sólidos. Estes produtos nãosão muito convenientes para o paciente. Além disso, osprocessos de fabricação para produzir produtos estéreis ereproduzíveis são complicados, o que resulta em custoelevado de fabricação. É altamente desejável que umacomposição possa ser fabricada e utilizada facilmente.

Em outra técnica, o polímero biodegradável e osagentes peptídicos são dissolvidos em um solvente orgânicobiocompatível para propiciar uma composição líquida. Quandoa composição líquida é injetada no corpo, o solvente sedissipa no ambiente aquoso circundante, e o polímero formaum depósito sólido ou em gel a partir do qual o agentebioativo é liberado durante um longo período de tempo.Acredita-se que as seguintes Patentes U.S. de referênciaNos. 6.565.874; 6.528.080; RE37, 950; 6.461.631; 6.395.293;6.355.657; 6.261.583; 6.143.314; 5.990.194; 5.945.115;5.792.469; 5.780.044; 5.759.563; 5.744.153; 5.739.176;5.736.152; 5.733.950; 5.702.716; 5.681.873; 5.599.552;5.487.897; 5.340.849; 5.324.519; 5.278.202; 5.278.201; e4.938.763 sejam representativas nesta área e estãoincorporadas aqui mediante referência. Não obstante algumsucesso, aqueles métodos não foram inteiramentesatisfatórios para um grande número de agentes peptídicosque podem ser efetivamente administrados por tal técnica.

É bem reconhecido na técnica que agente bioativo quecontém grupos funcionais básicos interage com polímerobiodegradável para catalisar (ou acelerar) a degradação dopolímero e formar conjugado com o polímero e/ou seusprodutos de degradação. A interação/reação entre os agentesbioativos básicos e carreadores de polímeros pode ocorrer:1) durante formulação quando os agentes bioativos básicossão incorporados no carreador de polímero, tal como micro-encapsulamento, moldagem por injeção, moldagem porextrusão, mistura com soluções de polímero em solventeorgânico, e similares; 2) durante armazenamento e 3)durante o processo de biodegradação e a liberação deagentes bioativos in vivo.

Sabe-se que a degradação de agentes peptídicos epolímeros biodegradáveis, e reações entre os doisnormalmente ocorre muito mais rápido em solução do que emum estado sólido e seco. A interação/reação entre agentesbioativos que contêm grupos funcionais básicos, isto ê,aminas, e polímeros durante o processo de formação demicro-partícula utilizando métodos de evaporação/extraçãoem que o agente bioativo e o polímero foramdissolvidos/dispersos em solventes orgânicos não-polaresfoi descrito [Krishnan M. e Flanagan DR., J ControlRelease. 3 de novembro de 2000; 69 (2) : 273-81] .Quantidade significativa de porções de amida foi formada.Foi claramente mostrado que solventes comumente utilizadospara fabricação de sistemas de administração demedicamentos de polímero biodegradável poderiam permitirreação rápida entre agente bioativo e polímero. Em outradescrição, a degradação acelerada de polímeros por aminasorgânicas em solvente orgânico prótico polar (por exemplo,metanol) foi também relatada [Lin WJ, Flanagan DR, LinhardtRJ. Pharm Res. Julho de 1994; 11 (7) : 1030-4].Uma vez que o sistema de administração de liberaçãocontrolada é comumente fabricado através de uma etapa queenvolve a dissolução/dispersão de agente peptídico emsolução de polímero biodegradável em um solvente orgânico,a estabilização de todos os componentes na composição nestaetapa representa um desafio de formulação muitosignificativo. Uma técnica comum que tem sido utilizadapara superar o desafio de fabricação e estabilidade dearmazenamento de agente peptídico e polímero biodegradávelem solução ou suspensão é manter o agente peptídico e asolução de polímero em dois recipientes separados emisturá-los logo antes do uso. Isto pressupõe que osolvente orgânico possa ser separado da matriz poliméricarapidamente através de difusão, extração ou evaporação apósos agentes peptídicos e solução de polímero seremmisturados. Um exemplo foi descrito nas Patentes U.S. Nos.6.565.8784 e 6.773.714 que descrevem formulações deadministração polimérica de acetato de leuprolídeo que estárelacionado a um produto comercial Eligard® para tratamentode câncer de próstata. A fim de manter a estabilidade dasformulações, este produto é fornecido em seringas separadase os conteúdos nas seringas são misturados logo antes deuso. Contudo, por causa da natureza viscosa das formulaçõesde polímero, é freqüentemente difícil misturar os conteúdosem duas seringas separadas por usuários finais. Auniformidade das formulações preparadas pelo usuário finalpode variar significativamente, onde contaminação podetambém ocorrer e a qualidade do tratamento pode ficarsignificativamente comprometida. Além disso, esta abordagemnão impedirá a interação entre o agente peptídico e opolímero durante mistura e administração. Conforme descritoem US20060034923 Al, quando acetato octreotídeo foicombinado com solução polilactídeo-co-glicolídeo em NMP,mais do que 40% de octreotídeo foi acrilatado dentro de 5horas. Esta modificação do peptídeo pode conduzir a umaperda significativa de atividade ou alteração deimunogenicidade. 0 peso molecular do polímero tambémdiminuiu significativamente dentro do mesmo período detempo. Esta degradação rápida do peptídeo e do polímeroalterará o perfil de liberação do peptídeo e resulta em umresultado de tratamento comprometido. Por conseguinte,controle preciso para o processo de preparação e tempo sãocríticos e isto aumenta significativamente a dificuldadepara o usuário final. Além disso, a formação in vivo doimplante a partir da composição polimérica injetável não éinstantânea. Normalmente o processo de dissipação desolvente pode levar umas poucas horas a diversos diasdependendo dos solventes utilizados. Durante este período,a presença de um solvente orgânico poderia também promovera interação/reação entre os agentes peptídicos e opolímero. Por conseguinte, há a necessidade em desenvolveruma composição farmacêutica que minimizará ou impedirá ainteração/reação entre o agente peptídico e o polímero emuma solução orgânica. É necessário também desenvolver umacomposição farmacêutica que seja estável com uma vidacomercial de armazenamento satisfatória em uma configuraçãode produto pronta-para-uso.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Foi surpreendentemente descoberto que composiçõespoliméricas biodegradáveis injetáveis que compreendemagentes peptídicos na forma de um sal formado com um ácidoforte (por exemplo, ácido clorídrico) exibem estabilidademuito mais elevada do que aquelas na forma de um salformado com um ácido fraco (por exemplo, ácido acético) ouna forma da base livre. Tais sais benéficos de agentespeptídicos podem ser formados através da neutralização dequaisquer grupos básicos dos agentes peptídicos com umácido forte. Quando tais sais benéficos de agentespeptídicos formados com um ácido forte foram formuladosdentro de composições poliméricas biodegradáveisinjetáveis, as interações/reações entre os agentespeptídicos e o polímero são minimizadas ou impedidas.

Utilizar tais sais benéficos de agentes peptídicos formadoscom um ácido forte permite a preparação de uma composiçãoinjetável estabilizada pré-preenchida em uma seringa únicaem uma configuração pronta-para-uso com estabilidade dearmazenamento satisfatória. 0 uso do sal de agentepeptídico formado com um ácido forte da presente invençãopara aperfeiçoar a estabilidade das composições poliméricasinjetáveis não é contemplado pelo estado da técnica.

Conseqüentemente, a presente invenção propicia umacomposição polimérica biodegradável injetável para formarum sistema de administração de liberação controladaeconômico, prático e eficiente para agentes peptídicos. Apresente invenção também propicia um método para fabricaçãoe um método de uso da mesma. De acordo com a presenteinvenção, o sistema de administração de medicamento éproduzido facilmente e convenientemente administrado a umobjeto tal como um mamífero ou humano. As composiçõesadministram quantidade terapêutica de agentes peptídicosdurante um período de tempo desejado, estendido, depreferência de diversas semanas a um ano. As composiçõessão tanto biocompatíveis quanto biodegradáveis, edesaparecem sem causar dano após administrarem a dose dosagentes peptídicos.

As composições de acordo com a presente invençãocompreendem a) um sal benéfico de um agente peptídicoformado com um ácido forte que minimiza ou impede ainteração/reação entre o agente peptídico e o polímero emuma solução orgânica; b) um polímero biodegradável; c) umsolvente orgânico farmaceuticamente aceitável. De acordocom a invenção, a composição farmacêutica podeopcionalmente incluir excipientes para alcançaradministração ideal do agente peptídico. A composiçãofarmacêutica pode ser um líquido viscoso ou não-viscoso,gel ou semi-sólido que se move como um fluido de modo quepossa ser injetado utilizando uma seringa. A composiçãofarmacêutica pode ser pré-preenchida em uma seringa paraformar um produto em uma configuração pronta-para-uso.

O agente peptídico da presente invenção contém pelomenos um grupo básico. O agente peptídico pode ser qualquerpeptídeo, oligopeptídeo, polipeptídeo, ou proteína que sejacapaz de propiciar um efeito biológico, fisiológico outerapêutico em um animal ou ser humano. O agente peptídicopode ser qualquer um ou mais do que um de agente peptídico,oligopeptídeo, polipeptídeo, ou proteína biologicamenteconhecidos reconhecidos em quaisquer documentos citadosaqui ou de outra forma reconhecidos na técnica. O agentepeptídico pode também estimular ou inibir uma atividadebiológica ou fisiológica desejada dentro do animal ou serhumano, incluindo sem limitação, estimular uma respostaimunogênica ou imunológica.

De acordo com uma modalidade da presente invenção, oagente peptídico possui um terminal-N que não é uma aminaprimária (por exemplo, agonistas LHRH, tais comoleuprorelina, goserelina, antagonistas LHRH, tais comocetrorelix, enfuvirtida, timosina al, abarelix, esimilares). Em outra modalidade da presente invenção, oagente peptídico possui tanto uma amina primária determinal-N quanto um grupo de amina primária de cadeialateral covalentemente modificado com porções hidrofílicase/ou lipofílicas que podem ser produzidas através depeguilação, acilação, e similares. Além disso, tanto aamina primária de terminal-N quanto grupos de aminaprimária de cadeia lateral do agente peptídico podem tambémser covalentemente modificados simultaneamente com porçõeshidrofílicas e/ou lipofílicas através de peguilação,acilação, e similares.

0 ácido forte pode ser qualquer ácido que possui umpKa em água inferior a 3, de preferência inferior a 0, maispreferivelmente inferior a -3. Por exemplo, um ácido fortepode ser selecionado a partir do grupo que consiste emácido clorídrico, ácido hidrobrômico, ácido sulfúrico,ácidos sulfúricos orgânicos, ácidos sulfúricos de alquilade 1-4 0 carbonos, ácido nítricô, ácido crômico, ácidometanosulfônico, ácido sulfônico trifluormetano, ácidossulfônicos orgânicos, ácido tricloroacético, ácidodicloroacético, ácido bromoacético, ácido cloroacético,ácido cianoacético, ácido 2-cloropropanóico, ácido 2-oxobutânico, ácido 2-clorobutanóico, ácido 4-cianobutanóico, ácido perclórico, ácido fosfórico, iodetode hidrogênio, e similares, mas sem se limitar a estes.

0 polímero biodegradável pode ser qualquer polímerobiocompatível e farmaceuticamente aceitável. Os polímerosbiodegradáveis podem ser termoplásticos, os quais derretemsob aquecimento e se solidificam sob esfriamento. Ospolímeros biodegradáveis da invenção são substancialmenteinsolúveis em fluido aquoso ou corporal, porém são capazesde substancialmente se dissolver ou dispersar em umsolvente orgânico miscível em água para formar uma soluçãoou suspensão. Sob contato com um fluido aquoso, o solventeorgânico miscível em água difunde-se/dissipa-se dacomposição da invenção, o que provoca a coagulação dopolímero para formar um gel, ou matriz sólida que encapsulao agente peptídico. Exemplos dos polímeros adequados para apresente composição incluem, sem limitação, polilactídeos,poliglicolídeos, policaptrolactonas, polianidridos, poli-uretanos, poliéster-amidas, poliortoesteres, polioxanonas,poliacetais, poli-cetais, policarbonatos, poliorto-carbonatos, polifosfazenos, polihidrobutiratos, poliidroxi-valeratos, polialquileno oxalatos, polialquileno sucinatos,poli(ácido málico), poli(anidrido maléico), e copolímeros,terpolímeros, ou combinações ou misturas dos mesmos.

Polímeros à base de ácido láctico, e copolímeros de ácidoláctico e ácido glicólico (PLGA), que incluem poli(D,L-lactídeo-co-glicolídeo) e poli(L-lactídeo-co-lactídeo) sãode preferência utilizados na presente invenção. Em algumasmodalidades, os polímeros PLGA possuem uma média de peso depesos moleculares entre aproximadamente 2.000 eaproximadamente 100.000 e razões de monômero de ácidoláctico para ácido glicólico entre aproximadamente 50:50 eaproximadamente 100:0.

Os solventes orgânicos farmaceuticamente aceitáveispodem ser selecionados a partir de um grupo que consiste emN-metil-2-pirrolidona, metoxipolietileno glicol, alcoxi-polietileno glicol, ésteres de polietileno glicol,glicofurol, glicerol formal, metil acetato, etil acetato,metil etil cetona, dimetilformamida, dimetil sulfóxido,tetraidrofurano, caprolactam, decilmetilsulfoxido, benzilbenzoato, etil benzoato, triacetina, diacetina,tributirina, trietil citrato, tributil citrato, acetiltrietil citrato, acetil tributil citrato, trietil-glicérides, trietil fosfato, dietil fosfato, dietiltartrato, etil lactato, propileno carbonato, etilenocarbonato, butirolactona, e l-dodecilazaciclo-heptan-2-ona,e combinações destes.

De acordo com a presente invenção, um ou maisexcipientes pode ser incorporado na composição inventivapara alcançar administração ideal do agente peptídico.Excipientes adequados podem incluir agentes que modificam ataxa de liberação, materiais que reduzem o efeito deruptura, materiais tampão, antioxidantes, e similares.

De acordo com a presente invenção, agentes quemodificam a taxa de liberação adequados incluem compostosou copolímeros anfifilicos, tais como ácidoalcanocarboxílico, ácido oléico, álcool de alquila,lipídios polares, agentes tensoativos, copolímeros depolietileneglicol e polilactídeo ou poli(lactídeo-co-glicolídeo), poloxâmeros, polivinilpirrolidona, poli-sorbatos, e similares; ésteres de ácidos mono-, di-, etricarboxílicos, tais como acetato 2-etoxietil, citratotrietil, citrato acetil tributil, citrato acetil trietil,triacetato glicerol, sebecato di(n-butil), e similares;álcoois poliidroxi, tais como polietileno glicol, sorbitol,e similares; ácidos graxos; triésteres de glicerol, taiscomo triglicérides, triglicérides de meia-cadeia tais comoMIGLYOL 810, 818, 829, 840, e similares, mas sem se limitara estes. Misturas de agentes de modificação de taxa podemtambém ser utilizadas nos sistemas de polímero da invenção.

De acordo com a presente invenção, agentes tampãoadequados incluem sais inorgânicos e orgânicos que incluemcarbonato de cálcio, hidróxido de cálcio, miristato decálcio; oleato de cálcio, palmitato de cálcio, estearato decálcio, fosfato de cálcio, carbonato de magnésio, hidróxidode magnésio, fosfato de magnésio, miristato de magnésio,oleato de magnésio, palmitato de magnésio, estearato demagnésio, carbonato de zinco, hidróxido de zinco, miristatode zinco, oleato de zinco, palmitato de zinco, estearato dezinco, fosfato de zinco, e combinações destes, mas sem selimitar a estes.

De acordo com a presente invenção, antioxidantesadequados incluem acetato d-alfa tocoferol, palmitato deascorbila, hidroxianidol butilado, hidroxianisol butilado,butilatodidroxiquinona, hidroxicornarina, hidroxitoluenobutilado, etil gaiato, propil gaiato, octil gaiato, laurilgaiato, propilidroxibenzoato, triidroxibutilrofenona,vitmina E, vitamina E peguilatada ou vitamina E-TPGSpeguilatada, e similares, mas sem se limitar a estes.

A presente invenção propicia ainda métodos parafabricar e utilizar tais composições. Por exemplo, ummétodo para fabricar tais composições que compreende aneutralização de grupos de amina básicos de agentespeptídicos para formar um sal benéfico para minimizar ouimpedir a interação/reação do grupo de amina básico com opolímero; e a combinação do sal benéfico com outroscomponentes e opcionalmente um ou mais excipientes. Depreferência, o sal benéfico do agente peptídico é formadoprimeiro, e em seguida combinado com o polímero dissolvidoem um solvente orgânico. Tais composições são físico-quimicamente estáveis antes e durante o processo defabricação de um sistema de administração controlado talcomo formação de micro-partícula ou outra formação dematriz capaz de se implantada. De preferência, taiscomposições injetáveis são físico-quimicamente estáveisdurante preparação, armazenamento, e subseqüenteadministração a um objeto e formam implantes de liberaçãoconsistentes e controlados após administração a um local detecido.

A presente invenção propicia ainda um kit paraadministração da composição injetável para formar umsistema de depósito de liberação consistente e controlado,o kit compreendendo: um polímero biodegradável dissolvidoem um solvente farmaceuticamente aceitável; um sal benéficode um agente peptídico que contém pelo menos um grupo deamina básico formado com um ácido forte dissolvido oudisperso no veículo polimérico; e opcionalmente um ou maisexcipientes. A mistura uniforme de todos os componentes éembalada em um recipiente. De preferência, a presenteinvenção também propicia um método que compreende uma etapade enchimento de uma seringa com a composição para formarum produto estável em uma configuração pronta-para-uso.

A presente invenção propicia ainda um método paraformar in situ implante capaz de funcionar como um sistemade administração de liberação controlada do agentepeptídico em um objeto. 0 agente peptídico é de preferênciaincorporado no implante formado in situ, e subseqüentementeliberado nos fluidos de tecido circundantes e no tecido ouórgão de corpo pertinente à medida que o polímero sedegrada. 0 método compreende: administração das composiçõesinjetáveis da presente invenção a um local de implante porqualquer método adequado para aplicar um líquido, como porexemplo, por meio de uma seringa, agulha, cânula, cateter,aplicador de pressão, e similares.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

Figura 1. Estabilidade de LA em Formulações a 4°Capós 16 Meses.

Figura 2. Peso molecular de PLGA em Formulações a 4°Capós 16 Meses.

Figura 3. Efeito de tipo e concentração de PLGA naliberação de leuprolídeo.

Figura 4. Efeito de vitamina E na liberação de LA apartir de composições injetáveis.

Figura 5. Efeito de Miglyol 812 na liberação de LA apartir das composições injetáveis.

Figura 6. Perfil de liberação de LA a partir decomposições poliméricas injetáveis a seguir à administraçãoSC em ratos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

A presente invenção propicia uma composiçãopolimérica biodegradável injetável estabilizada para formarum sistema de administração de liberação controladaeficiente para agentes peptídicos. A presente invençãotambém propicia um método para fabricação e um método deuso da mesma.

As composições da presente invenção compreendem a) umsal benéfico de um agente peptídico formado com um ácidoforte que minimiza ou impede a interação/reação entre oagente peptídico e o polímero em uma solução orgânica; b)um polímero biodegradável; c) um solvente orgânicoaceitável. De acordo com a invenção, a composiçãofarmacêutica pode opcionalmente incluir um ou maisexcipientes para alcançar administração ideal do agentepeptídico. A composição polimérica injetável da presenteinvenção pode ser um líquido viscoso ou não-viscoso, gel ousemi-sólido que se move como um fluido de modo que o mesmopossa ser injetado utilizando uma seringa. A composiçãopolimérica injetável pode ser pré-enchida em uma seringapara formar um kit de produto em uma configuração pronta-para-uso.

0 sistema de administração de liberação controlada dapresente invenção pode ser formado como uma matrizpolimérica capaz de ser implantada in vitro, ou de formaalternativa, pode ser formado in-situ nas formas de um gelou de um implante sólido. Quando administrado a um objeto,a liberação controlada do agente peptídico pode sersustentada por um período desejado de tempo dependendo dacomposição do implante. Com as seleções do polímerobiodegradável e de outros componentes, a duração daliberação sustentada do agente peptídico pode sercontrolada durante um período de tempo de diversas semanasa um ano.

0 termo "um", conforme utilizado aqui, destina-se aser interpretado como "um ou mais" e "pelo menos um".

0 termo "estabilizado", conforme utilizado aqui,refere-se a um aperfeiçoamento significativo naestabilidade dos componentes na composição poliméricainjetável, que é necessária para alcançar um estado estávelexigido para desenvolver um produto viável. O termo"composição polimérica injetável estabilizada" conformeutilizado aqui significa que componentes, por exemplo, opolímero e o agente peptídico, da composição retém pelomenos 80%, de preferência pelo menos 90% do seu pesomolecular, estrutura e/ou atividade biológica originaisdurante a fabricação e após armazenamento por um período detempo extenso, por exemplo, meses a anos, de preferênciamais do que 12 meses, sob condições apropriadas.

O termo "administração de liberação controlada",conforme definido aqui, destina-se a fazer referência àadministração de um agente peptídico in vivo durante umperíodo de tempo longo desejado a seguir à administração,de preferência de pelo menos diversas semanas a um ano.

O termo "agente peptídico" conforme utilizado aquiserve em um sentido genérico para incluir poli(aminoácidos)que são em geral genericamente denominados "peptídeos","oligopeptídeos", e "polipeptídeos" ou "proteínas" que sãoutilizados de forma intercambiável no mesmo. O termo tambéminclui análogos de agente peptídico, derivativos,derivativos acilatados, derivativos glicosilatados,derivativos peguilatados, proteínas de fusão e similares. O"agente peptídico básico" é um peptídeo que é básico pornatureza, que surge da presença de aminoácidos básicos, porexemplo, arginina ou lisina, ou que surge do terminal-N doagente peptídico, ou simplesmente um agente peptídico quecontém pelo menos um grupo básico, opcionalmente napresença de um ou mais grupos de aminoácidos ácidos. 0termo também inclui análogos sintéticos de peptídeos,aminoácidos não naturais que possuem funcionalidade básica,ou qualquer outra forma de basicidade introduzida.

O termo "agente peptídico" destina-se a incluirquaisquer agentes peptídicos que possuem propriedades dediagnóstico e/ou terapêuticas que incluem propriedadesantimetabólica, antifúngica, antiinflamatória, antitumoral,antiinfecciosa, antibióticas, nutriente, agonista eantagonista, mas não se limitam a estas.

Especificamente, os agentes peptídicos da invençãopodem ser quaisquer peptídeos capazes de formar um salbenéfico com um ácido forte, especificamente um agentepeptídico que contém um grupo de base doador de elétronscomo um átomo de nitrogênio, por exemplo, uma amina, iminaou anel de nitrogênio. Os agentes peptídicos de preferênciacontêm uma ou mais funcionalidades de amina protonávelexposta. Agentes peptídicos úteis na preparação dascomposições da presente invenção incluem ocitocina,vasopressina, hormônio adrenocorticotrópico (ACTH), fatorde crescimento epidérmico (EGF), fator de crescimentoderivado de plaquetas (PDGF), prolactina, hormônioluteinico, hormônio de liberação de hormônio luteinico(LHRH), agonistas LHRH, antagonistas LHRH, hormônios decrescimento (que incluem humano, suíno, e bovino), fator deliberação de hormônio de crescimento, insulina,eritropoietina (que inclui todas as proteínas com atividadeeritropoiética), somatostatina, glucagona, interleucina(que inclui IL-2, IL-11, IL-12 etc.), interferon-alfa,interferon-beta, interferon-gama, gastrina, tetragastrina,pentagastrina, urogastrona, secretina, calcitonina,enquefalis, endorfinas, angiotensinas, hormônio deliberação de tirotropina (TRH), fator de necrose de tumor(TNF), hormônio paratireóide (PTH), fator de crescimento denervos (NGF), fator estimulante de granulócito-colônia (G-CSF), fator estimulante de macrófago-colônia (GM-CSF),fator estimulante macrófago-colônia (M-CSF), heparinase,fator de crescimento endotelial vascular (VEG-F), proteínamorfogênica óssea (BMP), hANP, peptídeo tipo glucagon (GLP-1) , exenatida, peptídeo YY (PYY), renina, bradiquinina,bacitracinas, polimixinas, colistinas, tirocidina,gramicidinas, ciclosporinas, (que inclui análogossintéticos e fragmentos farmacologicamente ativos dosmesmos), enzimas, citoquinas, anticorpos, vacinas,antibióticos, anticorpos, glico-proteínas, hormônioestimulante de folículo, ciotorfina, taftisina,timopoietina, timosina, timostimulina, fator tumoraltímico, fator tímico de soro, fatores estimulantes decolônia, motilina, bombesina, dinorfina, neurotensina,ceruleina, uroquinase, calicreina, análogos e antagonistasde substância P, angiotensina II, fator de coagulação dosangue VII e IX, gramicidinas, hormônio estimulante demelanocite, hormônio de liberação de hormônio da tireóide,hormônio estimulante de tireóide, pancreozimina,colecistoquinina, lactógeno placental humano, gonadotrofinacoriônica humana, peptídeo estimulante de síntese deproteína, peptídeo inibidor gástrico, peptídeo intestinalvaso-ativo, fator de crescimento derivado de plaquetas, eanálogos sintéticos e modificações e fragmentosfarmacologicamente ativos dos mesmos, mas não se limitam aestes.

Os agentes peptídicos preferidos utilizados aquiincluem os agentes peptídicos em que o terminal-N não é umaamina primária. Por exemplo, o terminal-N dos agentespeptídicos podem ser um ácido piroglutâmico, por exemplo,LHRH, e agonistas LHRH tais como leuprorelina, buserelina,gonadorelina, deslorelina, fertirelina, histrelina,lutrelina, goserelina, nafarelina, triptorelina, esimilares. De forma alternativa, o grupo de amina determinal-N pode ser revestido ou acilatado, por exemplo,cetrorelix, enfuvirtida, timosina al, abarelix, esimilares.

Os agentes peptídicos preferidos utilizados aquitambém incluem os agentes peptídicos em que a aminaprimária de terminal-N é covalentemente modificada comporções hidrofílicas e/ou lipofílicas tais como através depeguilação, acilação, e similares. Os agentes peptídicosutilizados aqui incluem ainda os agentes peptídicos em quea(s) amina(s) primária(s) de cadeia lateral é(são)covalentemente modificada(s) com porções hidrofílicas e/oulipofílicas tais como através de peguilação, acilação, esimilares. Os agentes peptídicos preferidos utilizados aquiincluem ainda os agentes peptídicos em que ambos a aminaprimária de terminal-N e os grupos de amina primária decadeia lateral são covalentemente modificadossimultaneamente com porções hidrofílicas e/ou lipofílicastais como através de peguilação, acilação, e similares.

O termo "porção hidrofílica" refere-se a qualqueroligômero ou polímero linear ou ramificado solúvel em águaque inclui polietileno glicol e polipropileno glicol epolímeros ramificados ou lineares similares, mas não selimita a estes. De preferência, o peso molecular dopolímero varia entre aproximadamente 500 daltons eaproximadamente 50.000 daltons. Polímeros hidrofílicos parauso na presente invenção podem possuir um grupo reativoincorporado para fixação ao agente peptídico de interesseatravés de grupos de amina, carboxílicos, hidroxílicos, oude tiol.

O termo "peguilação" utilizado aqui se refere àconjugação covalente de um polietileno glicol solúvel aosagentes peptídicos. 0 polietileno glicol pode ser preparadode acordo com protocolos padrão com uma extremidaderevestida como com um grupo de metóxi e a outra extremidadeativada para conjugação fácil para grupos ativos em agentespeptídicos. Por exemplo, diversos métodos para prepararpolietileno glicõis e seu uso para peguilações sãodescritos na técnica: [por exemplo, Roberts MJ, BentrleyMD, Harris JM, Química para PEGuilação de peptídeo eproteína. Adv. Drug. Deliv. Rev. 17 de julho de 2002;54(4): 459-76. Veronese FM. PEGuilação de peptídeo eproteína: uma revisão de problemas e soluções.Biomateriais. Março de 2001; 22(5): 405-17 e as PatentesU.S. Nos. 6.113.906; 5.446.090; 5.880.255], que são todosincorporados aqui mediante referência.

0 termo "porções lipofílicas" se refere a quaisquermoléculas que possuem uma solubilidade em água a 20°Cinferior a 5 mg/ml, de preferência inferior a 0,5 mg/ml,mais preferivelmente inferior a 0,1 mg/ml. Tal porçãolipofílica é de preferência selecionada dentre C2.39alquila,C2.39alquenila, C2-39alcadienila e resíduos esteroidais. Ostermos "C2-39alquila, C2-39alquenila, C2.39alcadienila"destinam-se a cobrir hidrocarbonetos de 2-39 átomos decarbono de cadeia reta e ramificada, de preferência decadeia reta, saturada, mono-insaturada e di-insaturada.

A introdução de uma porção lipofílica covalentementea um agente peptídico da mesma conduz a um peptídeolipofilicamente modificado que pode possuir efeitoterapêutico aperfeiçoado quando comparado à moléculanativa. Isto pode ser normalmente feito ao reagir um grupode amina em um agente peptídico com um ácido ou outrosgrupos reativos em uma molécula lipofílica.Alternativamente, a conjugação entre agente peptídico emolécula lipofílica é conseguida através de uma porçãoadicional tal como uma ligação, espaçador, ou porção deligação, que pode ser degradável ou não-degradável. Algunsexemplos são descritos no estado da técnica, [por exemplo,Hashimoto, M., e outros, Pharmaceutical Research, 6:171-176(1989), e Lindsay, D. G., e outros, Biochemical J. 121:737-745 (9171), Patente U.S. No.5.693.609, W095/07931, PatenteU.S. No. 5.750.497, e W096/29342, W098/08871, W098/08872,W099/43708]. Estas descrições são expressamenteincorporadas aqui mediante referência para descreverpeptídeos lipofilicamente modificados e para permitir apreparação dos mesmos.

0 termo "ácido forte", conforme definido aqui,significa incluir quaisquer ácidos com um pKa inferior a 3,de preferência inferior a 0, e mais preferivelmenteinferior a -3. Os ácidos fortes adequados para a presenteinvenção podem ser selecionados a partir do grupo queconsiste em ácido clorídrico, ácido hidrobrômico, ácidonítrico, ácido crômico, ácido sulfúrico, ácidometanosulfônico, ácido sulfônico triflurometano, ácidotricloroacético, ácido dicloroacético, ácido bromoacético,ácido cloropropanóico, ácido 2-oxobutanóico, ácido 2-clorobutanóico, ácido 4-cianobutanóico, ácido pamóico,ácido perclórico, ácido fosfõrico, iodeto de hidrogênio, esimilares, mas não se limitam a estes.

O "ácido forte" da presente invenção também incluiquaisquer ácidos sulfúricos orgânicos tais como ácidossulfúricos de alquila, arila ou alquilarila de 1-40carbonos, de preferência de menos do que 18 carbonos, emais pref erivelmente de menos do que 6 carbonos, e ácidossulfônicos orgânicos tais como alcano, arilalcano, areno,ou ácidos sulfônicos alquenos de 1-4 0 carbonos, depreferência de menos do que 18 carbonos, e maispreferivelmente de menos do que 6 carbonos.

O termo "um sal benéfico de um agente peptídico",conforme definido aqui, significa incluir quaisquer sais deum agente peptídico formado com um ácido forte. Os saisbenéficos de agentes peptídicos podem ser preparados porácido simples e titulação ou neutralização de base. Os saisbenéficos de agentes peptídicos podem ser preparadosdurante sua síntese e processos de purificação. De formaalternativa, os mesmos podem ser preparados a partir deagente peptídico na forma de uma base livre. A base livre édissolvida em um meio líquido adequado. Esta solução doagente peptídico é misturada com uma solução de um ácidoforte para formar os sais benéficos ao remover o solventeatravés de meios adequados tais como filtração ouIiofilização. Se o agente peptídico estiver em sua formacomercialmente disponível comum de um sal formado com umácido fraco (isto é, pKa>3), o ácido fraco pode sersubstituído por um ácido forte através de métodos comuns detroca de íons tais como Iiofilização, precipitação ououtros métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, acetatode leuprolídeo é dissolvido em um meio líquido adequado,por exemplo, água. Esta solução do agente peptídico émisturada com uma solução aquosa de um ácido forte tal comoácido clorídrico. Quando o acetato peptídico e um ácidoforte tal como ácido clorídrico são dissolvidos em água, opeptídeo tende a ser associado com íon de cloreto, namedida em que o ácido forte HCl desloca o ácido acéticocarboxílico mais fraco. O solvente e ácido acético liberado(ou outro ácido carboxílixo fraco, porém volátil) pode serremovido sob vácuo. Sendo assim, a solução de mistura éseca por congelamento para remover água e ácido mais fracopara formar os sais benéficos. Se o agente peptídico não éestável sob pH baixo, os sais benéficos do agente peptídicopodem ser preparados através de diálise extensiva contraconcentração muito baixa de um ácido forte.

As composições poliméricas injetáveis da presenteinvenção podem conter agente peptídico em uma faixa de 0,01a 4 0% em peso. Em geral, o carregamento ótimo demedicamento depende do período de liberação desejado e dapotência do agente peptídico. Obviamente, para agentepeptídico de potência baixa e período maior de liberação,níveis mais elevados de incorporação podem ser exigidos.

O termo "biodegradável" se refere a um material quegradualmente se decompõe, dissolve, hidrolisa e/ou corróiin situ. Normalmente, os "polímeros biodegradáveis" aquisão polímeros que são hidrolisáveis, e/ou bio-corroem insitu principalmente através de hidrólise e/ou enzimólise.

O termo "polímero biodegradável" conforme utilizadoaqui significa incluir quaisquer polímeros naturais esintéticos biodegradáveis e/ou bio-compatíveis que possamser utilizados in vivo, desde que o polímero seja pelomenos substancialmente insolúvel em meio aquoso ou fluidocorporal. O termo "substancialmente insolúvel" conformeutilizado aqui significa que a insolubilidade do polímerodeva ser suficiente para resultar em precipitação dopolímero em meio aquoso ou fluido corporal. De preferência,a solubilidade dos polímeros é inferior a 1% em peso, emais preferivelmente inferior a 0,1%. Quando a solução depolímero em uma água miscível ou solvente orgânicodispersível é misturada com uma solução aquosa, o polímeroprecipitar-se-á para formar um sólido ou matriz gelificadaà medida que o solvente orgânico se dissipa. Polímerosbiodegradáveis adequados são descritos, por exemplo, nasPatentes U.S. Nos. 4.938.763; 5.278.201; 5.278.2012;5.324.519; 5.702.716; 5.744.153; 5.990.194; e 6.773.714.Alguns exemplos não-Iimitantes dos polímeros sãopoliláctidos, poliglicolídeos, policaprolactonas, poli-dioxanonas, policarbonatos, poliidroxibutiratos, poli-alquileno oxalatos, polianidridos, poliesteramidas, poli-uretanos, poliacetais, poliortocarbonatos, polifosfazenos,polihidroxivaleratos, polialquileno sucinatos, poli(ácidomálico), e poliortoésteres, e copolímeros, copolímeros deblocos, copolímeros ramificados, terpolímeros e combinaçõese misturas destes.

Os copolímeros de blocos incluem copolímeros deblocos A-B-A, copolímeros de blocos B-A-B, e/ou copolímerosde bloco A-B e/ou copolímeros ramificados. Os copolímerosde blocos preferidos são aqueles em que o bloco Acompreende um polímero hidrofóbico e o bloco B compreendeum polímero hidrofílico. Especificamente, ao utilizar umdos copolímeros de blocos acima mencionados, as matrizespoliméricas mais preferidas são definidas onde o bloco A éum polímero biodegradável selecionado a partir do grupo queconsiste em polilactídeos, poliglicolídeos, poli(lactídeo-co-glicolídeo)s, polianidridos, poli(orto éster)s, poli-eterésteres, policaprolactonas, poliesteramidas, ρο1ί(ε-caprolactona)s, poli(ácido hidroxibutírico)s, e misturas ecopolímeros destes, e o bloco B é polietileno glicol oupolietileno glicol monofuncionalmente derivado tal comometóxi polietileno glicol. Muitas destas combinações podemformar géis reversíveis térmicos aceitáveis.

Pesos moleculares adequados para polímeros podem serdeterminados por uma pessoa versada na técnica. Fatores quepodem ser considerados ao determinar pesos molecularesincluem taxa de degradação de polímero desejada,resistência mecânica, e taxa de dissolução de polímero emsolventes orgânicos. Normalmente, uma faixa adequada depesos moleculares médios em peso de polímeros está entreaproximadamente 2.000 Daltons e aproximadamente 100.000Daltons com uma polidispersividade entre 1,1 e 2,5,dependendo de qual polímero é selecionado para uso, dentreoutros fatores.

As composições poliméricas injetáveis da presenteinvenção podem conter polímero biodegradável em uma faixaentre 10% e 70% em peso. A viscosidade das composiçõesinjetáveis da invenção depende do peso molecular dopolímero e do solvente orgânico utilizado. Normalmente,quando o mesmo solvente é utilizado, quanto mais elevado opeso molecular e a concentração do polímero, mais elevada aviscosidade. De preferência a concentração do polímero nascomposições é inferior a 70% em peso. Mais preferivelmentea concentração do polímero nas composições está entre 30 e60% em peso.

Poli(ácido láctico), e copolímeros de ácido láctico eácido glicólico (PLGA), que incluem poli(D,L-lactídeo-co-glicolídeo) e poli(L-lactídeo-co-glicolídeo) são depreferência utilizados na presente invenção. Os polímeros(ou poliésteres termoplásticos) possuem razões de monômerosde ácido láctico para ácido glicólico entre aproximadamente50:50 e aproximadamente 100:0 e pesos moleculares de médiade peso entre aproximadamente 2.000 e aproximadamente100.000. Os poliésteres termoplásticos biodegradáveis podemser preparados utilizando os métodos conhecidos na técnica,por exemplo, policondensação e polimerização de abertura deanel (por exemplo, Patentes U.S. Nos. 4.443.340; 5.242.910;5.310.865, que são todas incorporadas aqui mediantereferência). Os grupos terminais do poli(DL—lactídeo-co-glicolídeo) podem tanto ser hidroxila, carboxílico, ouéster dependendo do método de polimerização. Os polímerosadequados podem incluir um álcool monofuncional ou umresíduo de poliol e podem não possuir um terminal de ácidocarboxílico. Exemplos de álcoois multifuncionais sãometanol, etanol, ou 1-dodecanol. 0 poliol pode ser um diol,triol, tetraol, pentaol e hexaol que inclui etileno glicol,1,6-hexanediol, polietileno glicol, glicerol, sacarídeos,sacarídeos reduzidos tais como sorbitol, e similares.

Muitos PLGAs adequados estão disponíveiscomercialmente, e os PLGAs de composições específicas podemser prontamente preparados de acordo com o estado datécnica. Os PLGAs de diversas razões de monômero e pesosmoleculares estão disponíveis de Boehringer-Ingelheim(Petersburg, Va, USA), Lakeshore Biomaterials (Birmingham,AL, USA), DURECT Corporation (Pelham, AL).

O tipo, peso molecular, e quantidade de polímerobiodegradável presente nas composições podem influenciar operíodo de tempo no qual o agente peptídico é liberado apartir do implante de liberação controlada. A seleção dotipo, peso molecular, e quantidade de polímerobiodegradável presente nas composições para alcançarpropriedades desejadas do implante de liberação controladapode ser determinada por experimentações simples.

Em uma modalidade preferida da presente invenção, acomposição líquida pode ser utilizada para formular umsistema de administração de liberação controlada parahidrocloreto de leuprolídeo. Em tal modalidade, o poliéstertermoplãstico biodegradável pode de preferência ser 85/15poli(DL-lactídeo-co-glicolídeo) que contém um grupoterminal de hidroxila e um terminal de éster lauril; podeestar presente entre aproximadamente 3 0% e aproximadamente60% da composição em peso; e pode possuir um peso molecularmédio entre aproximadamente 15.000 e aproximadamente50 . 000 .

Em outra modalidade preferida da presente invenção, acomposição líquida pode ser utilizada para formular umsistema de administração de liberação controlada parahidrocloreto de leuprolideo. Em tal modalidade, o poliéstertermoplãstico biodegradável pode de preferência ser 85/15poli(DL-lactídeo-co-glicolídeo) que contém dois gruposterminais de hidroxila; pode estar presente entreaproximadamente 30% e aproximadamente 60% da composição empeso; e pode possuir um peso molecular médio entreaproximadamente 15.000 e aproximadamente 50.000.

Em ainda outra modalidade preferida da presenteinvenção, a composição líquida pode ser utilizada paraformular um sistema de administração de liberaçãocontrolada para hidrocloreto de leuprolideo. Em talmodalidade, o poliéster termoplástico biodegradável pode depreferência ser 85/15 poli(DL-lactídeo-co-glicolídeo) quecontém grupos terminais de ácido carboxílico; pode estarpresente entre aproximadamente 3 0% e aproximadamente 60% dacomposição em peso; e pode possuir um peso molecular médioentre aproximadamente 15.000 e aproximadamente 50.000.

Em ainda outra modalidade preferida da presenteinvenção, a composição pode ser utilizada para formular umsistema de administração de liberação controlada deleuprolideo. Em tal modalidade, o polímero biodegradávelpode de preferência ser 100/0 poli(DL-lactídeo) com ou semgrupos terminais de ácido carboxílico; pode estar presenteentre aproximadamente 40% e aproximadamente 60% dacomposição em peso; e pode possuir um peso molecular médioentre aproximadamente 8.000 e aproximadamente 50.000.O termo "solvente orgânico farmaceuticamenteaceitável" significa incluir quaisquer solventes orgânicosbiocompatíveis que sejam miscíveis ou dispersáveis emfluido corporal ou aquoso. 0 termo "dispersível" significaque o solvente é parcialmente solúvel ou miscível em água.De preferência, um solvente único ou uma mistura desolventes possui uma solubilidade ou miscibilidade em águamaior do que 0,1% em peso. Mais preferivelmente, o solventepossui uma solubilidade ou miscibilidade em água maior doque 3% em peso. Mais preferivelmente, o solvente possui umasolubilidade ou miscibilidade em água maior do que 7% empeso. 0 solvente orgânico adequado deveria ser capaz dedifundir-se em fluido corporal de modo que a composiçãolíquida coagulasse ou se solidificasse. Mistura e/ousolventes únicos podem ser empregados; a adequação de taissolventes pode ser determinada prontamente porexperimentações simples.

Exemplos de solvente orgânico farmaceuticamenteaceitável incluem N-metil-2-pirrolidona, metoxipolietilenoglicol, alcoxipolietileno glicol, ésteres de polietilenoglicol, glicofurol, glicerol formal, metil acetato, etilacetato, metil etil cetona, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, tetraidrofurano, caprolactam, decilmetil-sulfóxido, benzil benzoato, etil benzoato, triacetina,diacetina, tributirina, trietil citrato, tributil citrato,acetil trietil citrato, acetil tributil citrato,trietilglicérides, trietil fosfato, dietil pfalato, dietiltartrato, etil lactato, propileno pfalato, dietil tartrato,etil lactato, propileno carbonato, etileno carbonato,butirolactona, e l-dodecilazaciclo-heptan-2-ona, ecombinações destes, mas não se limitam a estes.

A solubilidade dos polímeros biodegradáveis emdiversos solventes orgânicos farmaceuticamente aceitáveisdiferirá dependendo das características dos polímeros e suacompatibilidade com diversos solventes. Sendo assim, omesmo polímero não será igualmente solúvel em diferentessolventes. Por exemplo, PLGA possui uma solubilidade muitomais elevada em N-metil-2-pirrolidona (NMP) do que emtriacetina. Contudo7 guando a solução PLGA em NMP estiverem contato com solução aquosa, NMP dissipará muitorapidamente para formar uma matriz de polímero sólidadevido a sua miscibilidade em água elevada. A taxa dedifusão rápida do solvente pode resultar em um implantesólido rapidamente, contudo, pode conduzir também a umaliberação de ruptura inicial elevada. Quando a solução PLGAem triacetina estiver em contato com a solução aquosa,triacetina dissipará muito lentamente devido a suamiscibilidade em água baixa. A taxa de difusão lenta dosolvente pode levar muito tempo para transformar um líquidoviscoso em uma matriz sólida. Pode haver um balanço idealno qual o solvente se difunda e a coagulação do polímeroencapsule agentes peptídicos. Por conseguinte, pode servantajoso combinar solventes diferentes para obter umsistema de administração desejável. Os solventes demiscibilidade em água baixa e elevada podem ser combinadospara aperfeiçoar a solubilidade do polímero, modificar aviscosidade da composição, otimizar a taxa de difusão, ereduzir a liberação de ruptura inicial.

As composições poliméricas injetáveis da presenteinvenção normalmente contêm um solvente orgânico em umafaixa entre 30% e 80% em peso. A viscosidade dascomposições injetáveis da invenção depende do pesomolecular do polímero e do solvente orgânico utilizado. Depreferência a concentração do polímero nas composições éinferior a 70% em peso. Mais preferivelmente a concentraçãodo polímero em soluções está entre 3 0 e 60% em peso.

O termo "excipiente" conforme utilizado aquisignifica incluir qualquer ingrediente útil na composiçãoalém do agente peptídico ou dos polímeros biodegradáveisutilizados para formar a composição. Excipientes adequadosincluem agentes de modificação de taxa de liberação,materiais de redução de efeito de ruptura, materiaistampão, antioxidantes, e similares.

De acordo com a presente invenção, agentes demodificação de taxa de liberação adequados incluemcompostos anfifílicos ou copolímeros, tais como ácidoalcanecarboxílico, ácido oléico, álcool de alquila,lipídios polares, agentes tensoativos, copolímeros depolietilenoglicol e polilactídeo ou poli(lactídeo-co-glicolídeo), poloxâmeros, polivinilpirrolidona,polisorbatos, e similares; ésteres de ácidos mono-, di-, etricarboxílicos, tais como 2-etoxietil acetato, trietilcitrato, acetil tributil citrato, acetil trietil citrato,glicerol triacetato, di(n-butil) sebecato, e similares;álcoois de polihidróxi, tais como polietileno glicol,sorbitol, e similares; ácidos graxos; triésteres deglicerol, tais como triglicérides, triglicérides de cadeiamédia tais como MIGLYOL 810, 812, 818, 829, 840, esimilares, mas não se limitam a estes. Misturas de agentesde modificação de taxa podem também ser utilizadas nossistemas de polímeros da invenção.

Os agentes de modificação de taxa de liberação podemestar presentes na composição polimérica injetável em umaquantidade eficaz para reduzir a ruptura inicial de agentepeptídico liberado da composição polimérica durante asprimeiras 24 horas após implantação. De preferência, acomposição polimérica inclui entre aproximadamente 1% eaproximadamente 50% em peso, mais preferivelmente entreaproximadamente 2% e aproximadamente 20% em peso dosagentes de modificação de taxa de liberação.

De acordo com a presente invenção, agentes tampãoadequados incluem sais orgânicos e inorgânicos que incluemcarbonato de cálcio, hidróxido de cálcio, miristato decálcio, fosfato de cálcio, carbonato de magnésio, hidróxidode magnésio, fosfato de magnésio, miristato de magnésio,oleato de magnésio, plamitato de magnésio, estearato demagnésio, carbonato de zinco, hidróxido de zinco, miristatode zinco, oleato de zinco, palmitato de zinco, estearato dezinco, fosfato de zinco, e combinações destes, mas não selimitam a estes.

Os agentes tampão podem ser representados nacomposição polimérica injetável em uma quantidade eficazpara estabilizar o pH dentro dos implantes durante oprocesso de degradação. De preferência, a composiçãopolimérica inclui entre aproximadamente 1% em peso eaproximadamente 30% em peso, mais preferivelmente entreaproximadamente 2% em peso e aproximadamente 15% em pesodos agentes tampão.

De acordo com a presente invenção, antioxidantesadequados incluem d-alfa tocoferol acetato, ascorbilacetato, hidroxianidol butilatado, hidroxianisolbutilatado, butilatedidroxiquinona, hidroxicomarin,hidroxitolueno butilatado, etil glato, propil gaiato, octilgaiato, lauril gaiato, propilidroxibenzoato, triidroxi-butilrofenona, vitamina E, vitamina E peguilatada ouvitamina E-TPGS, e similares, mas não se limitam a estes.

Os antioxidantes podem estar presentes na composiçãopolimérica injetável em uma quantidade eficaz para recolherquaisquer radicais ou peróxidos gerados dentro dosimplantes. De preferência, a composição polimérica incluientre aproximadamente 1% em peso e aproximadamente 3 0% empeso, mais preferivelmente entre aproximadamente 3% em pesoe aproximadamente 15% em peso dos antioxidantes.

Em um aspecto a presente invenção propicia umacomposição polimérica biodegradável injetável estabilizadapara formar um sistema de administração de liberaçãocontrolada eficiente para agentes peptidicos que compreendea) um sal benéfico de um agente peptidico formado com umácido forte que minimiza ou impede a interação/reação entreo agente peptidico e o polímero em uma solução orgânica; b)um polímero biodegradável; c) um solvente orgânicofarmaceuticamente aceitável; e d) opcionalmente um ou maisexcipientes para alcançar administração ideal do agentepeptidico. De preferência, a composição injetável éembalada em um kit que compreende uma etapa para encher acomposição dentro de uma seringa em uma configuraçãopronta-para-uso. A composição no kit é estável por umperíodo razoável de tempo, de preferência pelo menos umano, para possuir um tempo comercial de vida dearmazenamento adequado sob condições de armazenamentocontroladas. A composição é de preferência injetada em umobjeto para formar um implante in si tu, a partir do qual oagente peptldico seja liberado em uma quantidadeterapêutica eficaz durante um período de tempo estendido,desejado.

A composição polimérica biodegradável injetávelestabilizada da presente invenção pode ser preparada aocombinar adequadamente um sal benéfico de um agentepeptídico, um polímero biodegradável, um solvente orgânicofarmaceuticamente aceitável, e um excipiente opcional deadministração. A composição para administração pode serconvenientemente apresentada em forma unitária de dosagem epode ser preparada por qualquer dos métodos conhecidos natécnica farmacêutica. Um método preferido para preparar acomposição da presente invenção é dissolver um polímerobiodegradável e/ou um excipiente em um solvente orgânicofarmaceuticamente aceitável para obter uma primeirasolução/suspensão uniforme de polímero. Em seguida o salbenéfico de um agente peptídico é adicionado a estasolução/suspensão. Os componentes são completamentemisturados utilizando quaisquer meios para obter umasolução ou suspensão uniforme. Em seguida uma quantidadeadequada da solução ou suspensão é transferida para dentrode uma seringa para obter um produto pronto-para-uso.

O nível de incorporação do sal benéfico e do polímerona composição da invenção variará naturalmente, dependendoda potência do componente de agente peptídico, do períodode tempo durante o qual a administração do agente édesejada, da solubilidade do polímero no solvente, e dovolume e viscosidade da composição injetável que é desejadaadministrar.

Em certas modalidades preferidas da presenteinvenção, a composição polimérica biodegradável injetávelpara formar um sistema de administração de liberaçãocontrolada eficiente, econômico e prático para agentespeptidicos contém entre aproximadamente 0,01% e 40% do salbenéfico de um agente peptidico e entre aproximadamente 10%e 70% de um polímero poli(lactídeo-co-glicolídeo). Acomposição contém ainda entre aproximadamente 30% e 70% deum solvente orgânico farmaceuticamente aceitável.

Em uma modalidade preferida da presente invenção, acomposição contêm ainda entre aproximadamente 1% e 4 0% deum excipiente que inclui agentes de modificação de taxa deliberação, materiais de redução de efeito de ruptura,materiais tampão, antioxidantes, agentes de transporte detecidos e similares conforme definidos acima.

De acordo com a presente invenção, a composiçãoinjetável é transferida para dentro de um recipienteestéril adequado para administração de injeção, porexemplo, uma seringa. 0 recipiente é embalado paraarmazenamento e os componentes da composição retêm pelomenos 8 0%, de preferência 90%, de seu peso molecularoriginal, estrutura e/ou atividade biológica duranteprocessos de fabricação e armazenamento ou antes daadministração a um objeto tal como um animal ou ser humano.

Sendo assim, de acordo com a presente invenção, ascomposições estabilizadas podem ser administradas a umobjeto onde a administração de liberação controlada de umagente peptidico seja desejada. Conforme utilizado aqui, otermo "objeto" destina-se a incluir animais de sanguequente, de preferência mamíferos, mais preferivelmentehumanos.

Conforme utilizado aqui, o termo "administrado a umobjeto" destina-se a referir armazenamento, administraçãoou aplicação de uma composição (por exemplo, formulaçãofarmacêutica) a um objeto por qualquer via adequada paraadministração da composição ao local desejado no objeto. Depreferência, a composição da presente invenção pode seradministrada por injeção e/ou implantação subcutânea,intramuscular, intraperitoneal, ou intradérmica parapropiciar a dosagem desejada com base nos parâmetrosconhecidos para tratamento das diversas condições médicascom o agente peptídico.

O termo "administração de liberação controlada",conforme definido aqui, refere-se à administração contínuade um agente peptídico in vivo durante um período de tempoque segue a administração, de preferência de pelo menosdiversas semanas a um ano. A administração de liberaçãocontrolada sustentada do agente pode ser demonstrada, porexemplo, pelo efeito terapêutico continuado do agente aolongo do tempo (por exemplo, para um análogo LHRH, aadministração sustentada do análogo pode ser demonstradapor supressão continuada de síntese de testosterona aolongo do tempo). De forma alternativa, a administraçãosustentada do agente peptídico pode ser demonstrada aodetectar a presença do agente in vivo ao longo do tempo.

A quantidade da composição injetável administradadependerá normalmente das propriedades desejadas doimplante de liberação controlado. Por exemplo, a quantidadeda composição injetável pode influenciar o intervalo detempo no qual o agente peptídico é liberado do implante deliberação controlado.

Em uma modalidade preferida, o volume da composiçãopolimérica injetável da presente invenção a ser injetada aum objeto varia entre 0,1 mL e 2,0 mL; de preferência entre0,2 mL e 1,0 mL; e ainda mais preferivelmente entre 0,3 mLe 0,5 mL.

A presente invenção propicia ainda um método paraformar in situ um implante em um objeto que compreendeadministrar a um objeto uma quantidade eficaz da composiçãoinjetável que compreende: a) um sal benéfico de um agentepeptídico formado com um ácido forte que minimiza ou impedea interação/reação entre o agente peptídico e o polímero emuma solução orgânica; b) um polímero biodegradável; c) umsolvente orgânico farmaceuticamente aceitável; e d)opcionalmente um ou mais excipientes para alcançaradministração ideal do agente peptídico; e permitir aosolvente dissipar-se dentro do ambiente aquoso circundantepara transformar a composição líquida em um depósito porseparação de fase. O depósito pode ser um gel viscoso, umsemi-sólido, ou uma matriz sólida. O depósito pode tambémser poroso ou não-poroso. O depósito serve como o sistemade administração a partir do qual o agente peptídico éliberado durante um período de tempo estendido e desejado.

Em outra modalidade preferida, a composição injetávelda presente invenção pode ser administrada para caber emuma cavidade corporal para formar um sistema de depósito.Tais cavidades incluem as cavidades criadas após umacirurgia ou cavidade corporal natural tal como a vagina, oânus, ou similares.Em outro aspecto, a presente invenção propicia umacomposição polimérica biodegradável líquida estabilizadapara formar um sistema de administração de liberaçãocontrolada econômico, prático e eficiente para agentespeptídicos que compreende a) um sal benéfico de um agentepeptidico formado com um ácido forte que minimiza ou impedea interação/reação entre o agente peptidico e o polímero emuma solução orgânica; b) um polímero biodegradável; c) umsolvente orgânico; e d) opcionalmente um ou maisexcipientes para alcançar administração ideal do agentepeptidico. A composição polimérica biodegradável líquidapode ser fabricada dentro de matrizes poliméricasimplantáveis, onde a composição polimérica biodegradávellíquida retém pelo menos 90%, de preferência 95%, ou seupeso molecular original, estrutura e/ou atividade biológicaantes e durante o processo de fabricação.

Conforme utilizado aqui, o termo "matrizespoliméricas implantáveis" destina-se a incluir partículas,películas, bolinhas, cilindros, discos, micro-cápsulas,micro-esferas, nano-esferas, micro-partículas, bolachas, eoutras configurações poliméricas conhecidas utilizadas paraadministração de medicamentos.

Métodos para formar diversos carreadores de polímerosfarmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos na técnica.Por exemplo, diversos métodos e materiais são descritos nasPatentes U.S.: 6.410.044; 5.698.213; 6.312.679; 5.410.016;5.529.914; 5.501.863; e Publicações PCT Nos. WO 93/16687;4.938.763; 5.278.201; 5.278.202; EP 0.058.481; que sãotodas incorporadas aqui mediante referência.

De acordo com a presente invenção, as matrizespoliméricas implantáveis na forma de micro-esferas sãoproduzidas ao encapsular o sal benéfico de agentespeptídicos no polímero. 0 sal benéfico de agentespeptídicos pode ser encapsulado utilizando diversospolímeros biocompatíveis e/ou biodegradáveis que possuempropriedades únicas que são adequadas para administração aambientes biológicos diferentes ou para realizar funçõesespecíficas. A taxa de dissolução e, por conseguinte,administração de agente peptídico é determinada pelatécnica de encapsulamento específico, composição depolímero, encadeamento de polímero, espessamento depolímero, solubilidade de polímero, tamanho e solubilidadede complexo de composto/poliânion biologicamente ativo.

Os sais benéficos de agentes peptídicos a seremencapsulados são dissolvidos ou suspensos em uma solução depolímero em um solvente orgânico. A solução de polímerodeve ser concentrada o suficiente para cobrir completamenteo sal benéfico após o mesmo ser adicionado à solução. Talquantidade é uma que propicie uma razão de peso do salbenéfico de agentes peptídicos para polímero entreaproximadamente 0,01 e aproximadamente 50, de preferênciaentre aproximadamente 0,1 e aproximadamente 30. 0 salbenéfico de agentes peptídicos deveria ser mantido suspensoe não deixado agregar na medida em que os mesmos sãocobertos por contato com o polímero.

Uma solução de polímero dos sais benéficos de agentespeptídicos pode, por conseguinte ser submetida a umavariedade de técnicas de micro-encapsulamento que incluemsecagem por pulverização, congelamento por pulverização,emulsão, e emulsão por evaporação de solvente.De acordo com uma modalidade da invenção, o salbenéfico de agentes peptídicos é dissolvido ou suspenso emuma solução de polímero em um solvente orgânico. A soluçãoou suspensão é transferida para um volume maior de umasolução aquosa que contém um emulsificador. Na soluçãoaquosa, a fase orgânica é emulsifiçada, onde o solventeorgânico evapora ou se difunde para longe do polímero. Opolímero solidificado encapsula o sal benéfico de agentespeptídicos para formar uma matriz de polímero. Oemulsificador auxilia a reduzir a tensão de superfícieinterfacial entre as diversas fases de matéria no sistemadurante a fase de endurecimento do processo. De formaalternativa, se o polímero de encapsulamento possui algumaatividade de superfície inerente, pode não ser necessária aadição de um agente de superfície-ativa separado.

Emulsificadores úteis para preparar o sal benéficoencapsulado de agentes peptídicos de acordo com a presenteinvenção incluem poloxâmeros e álcool polivinílico comoexemplificado aqui, agentes tensoativos e outros compostosativos de superfície que podem reduzir a tensão desuperfície entre o sal benéfico encapsulado de polímero deagentes peptídicos e a solução.

Solventes orgânicos úteis para preparar as micro-esferas da presente invenção, exceto para aquelas descritasacima, também incluem ácido acético, acetona, metilcloreto, etil acetato, clorofórmio e outros solventes não-tóxicos que dependerão das propriedades do polímero.Solventes deveriam ser escolhidos para dissolver o polímeroe são em princípio não tóxicos.

Sendo assim, de acordo com a presente invenção, estasmatrizes poliméricas implantáveis podem ser administradas aum objeto onde a administração de liberação controladasustentada de um agente peptídico seja desejada. Depreferência, as matrizes poliméricas implantáveis dainvenção podem ser administradas por injeção e/ouimplantação subcutânea, intramuscular, intraperitoneal, ouintradérmica para propiciar a dosagem desejada com base nosparâmetros conhecidos para tratamento das diversascondições médicas com o agente peptídico.

Todos os livros, artigos e patentes mencionados aquisão completamente incorporados mediante referência.

EXEMPLOS

Os exemplos que se seguem ilustram as composições emétodos da presente invenção. Os exemplos que se seguem nãodeveriam ser considerados como limitações, porém deveriammeramente ensinar como produzir as composições úteis deadministração de medicamento de liberação controlada.

Exemplo 1. Preparação de sais benéficos de agentespeptídicos e derivados peptídicos formados com ácidosfortes.

O agente peptídico ou derivado de peptídeo que contémpelo menos um grupo funcional básico é dissolvido em água.Quantidades estequiométricas de um ácido forte sãoadicionadas à solução aquosa do agente peptídico,resultando em neutralização dos grupos básicos no agentepeptídico. 0 sal é obtido por precipitação, filtração e/ouliofilização.

Exemplo 2. Preparação de hidrocloreto de leuprolídeo

Leuprolídeo é um hormônio luteinizante que liberaagonista de hormônio (LHRH) que contém 9 resíduos deaminoácidos e duas funcionalidades básicas (um grupo dehistidina e um de arginina) . Sua amina de terminal-N foibloqueada na forma de ácido piroglutâmico. Tem sidoutilizada no tratamento de câncer de próstata eendometriose. Acetato de leuprolídeo (LA-Ac) foi obtido apartir de Polipeptides Laboratories, Inc. (PPL Lot#PPL-LEUP04 OlA) . Hidrocloreto de leuprolídeo (LA-HCl) foipreparado ao substituir ácido acético com HCl através de umprocesso de troca de íons e Iiofilização. Tipicamente,1.000 mg de acetato de leuprolídeo foram dissolvidos em 30mL de água. 3,189 mL de 0,5 N HCl (HC1:LA - 2,2:1) foramadicionados e bem misturados. A solução foi seca porcongelamento por 72 horas para remover ácido acético. 0 póseco foi re-dissolvido em água e seco por congelamento denovo.

Exemplo 3. Preparação de mesilato de leuprolídeo

343,5 mg de acetato de leuprolídeo (PPL Lot#PPL-LEUP04 01A) foram dissolvido em 20 mL de água. 32 mL deácido metanosulfônico foram adicionados e bem misturados(razão molar de acetato de leuprolídeo para ácidometanosulfônico -1:2). A solução foi seca por congelamentopor 72 horas para remover ácido acético. 0 pó seco foi re-dissolvido em água e seco por congelamento novamente.

Exemplo 4. Preparação de hidrocloreto de goserelina

766 mg de acetato de goserelina (PPL Lot#0603-219)foram dissolvidos em 20 mL de água. 2,12 mL de 0,5 N HCl(razão molar de HCl: acetato de goserelina - 2,2:1) foramadicionados e bem misturados. A solução foi seca porcongelamento por 72 horas para remover ácido acético. 0 póseco foi re-dissolvido em água e seco por congelamentonovamente.

Exemplo 5. Preparação de Palmitol-Octreotido (PAL-OCT)

50 ng de acetato de octreotido foram dissolvidos em1.000 uL de DMSO anidroso 100 u/l /TEA. 17,1 mg de éster N-hidroxisunimida de ácido Palmítico (Mw 353.50) foramdissolvidos em 3 mL de DMSO anidroso e adicionados porinjeção direta à solução peptídica. Permitiu-se que areação prosseguisse durante a noite em temperaturaambiente. A mistura foi despejada em dietil éter paraprecipitar octreotido palmitolado. 0 precipitado foi lavadocom dietil éter duas vezes e em seguida seco sob vácuo. 0agente peptídico resultante estava na forma de pó branco. 0sal benéfico do peptídio acilatado foi formado aoneutralizar os grupos de amina básicos residuais utilizandoum ácido forte.

Exemplo 6. Preparação de Decanal-Octreotido (DCL-OCT)

50 mg de octreotido foram dissolvidos em 2 mL desolução de cianoboroidrato de sódio 20 mM (Mw 62,84,NaCNBH2) (2,51 mg) em tampão de acetato 0,1 M em pH 5. 13,7mg de Decanal (Mw 156.27) (0CT:DCL = 1:2) foram adicionadospor injeção direta à solução peptídica. Permitiu-se que areação prosseguisse durante a noite a 4°C. A mistura foiseparada por centrifugação. 0 PAL-0CT precipitado foi secopor congelamento. 0 sal benéfico do peptídeo acilatado foiformado ao neutralizar os grupos de amina básicos residuaisque utilizam um ácido forte.

Exemplo 7. Preparação de octreotido PEGuilatado

Uma solução de octreotido acetato (10 mg/mL) em águafoi adicionada a um frasco contendo 2 quantidadesequivalentes molares de sucinimidil propionato monotoxi PEG(SPA-mPEG, MW 2.000 dalton) em 0,1 M de tampão de fosfatoem pH 7,4. Permitiu-se que a reação prosseguisse comagitação a 4°C durante a noite. Em seguida a mistura dereação foi separada ao utilizar HPLC de fase revertida (RP-HPLC) em C-18 (YMC ODS-A 4,6x250 mm, 5 um, WatersCorporation). A fase móvel consistiu em 0,1% de TFA em água(A) e CAN que contém 0,1% TFA (Β). A fase móvel foiexecutada com um gradiente linear entre 30 e 60% de eluenteB por 2 0 minutos a uma taxa de fluxo de Iml/min e aabsorção de UV da elução foi monitorada a 215 nm. Asfrações de elução que correspondem a picos respectivosforam coletadas separadamente, depuradas com nitrogênio, eliofilizadas.

De forma alternativa, PEGuilação específica de localde octreotido pode ser obtida. Uma solução de octreotidoacetato (10 mg/mL) em 20 mM de cianoboroidrato de sódio(NaCNBH3) e 0,1 M de tampão de acetato a pH 5 foiadicionado a um frasco contendo 3 quantidades equivalentesmolares de monotoxi PEG-propionaldeído (ALD-mPEG, MW 2.000dalton) em água. Permitiu-se que a reação prosseguisse comagitação a 4°C durante a noite. Em seguida a mistura dereação foi separada ao utilizar HPLC de fase reversa (RP-HPLC) em C-18 (YMC ODS-A 5 um, 4,6x250 mm, WatersCorporation). A fase móvel consistiu de 0,1% TFA em água(A) e CAN contendo 0,1% TFA (Β). A fase móvel foi executadacom um gradiente linear entre 30 e 60% de eluente B por 20min a uma taxa de fluxo de Iml/min e a absorção UV daelução foi monitorada a 215 nm. As frações de elução quecorrespondem a picos respectivos foram coletadasseparadamente, depuradas com nitrogênio, e Iiofilizadas. Osal benéfico do peptídeo peguilatado é formado aoneutralizar os grupos de amina básicos residuais queutilizam um ácido forte.

Exemplo 8. Estabilidade de agente peptídico epolímero biodegradável em composições poliméricasinjetáveis.

Poli(DL-lactídeo-co-glicolídeo) (PLGA) de uma razão85/15 de lactídeo para glicolídeo (DLPLG85/15, IV: 0,28)com um grupo final de éster de laurila foi dissolvido em N-metil-2-pirrolidona (NMP) para fornecer uma solução 50% empeso. Os sais de leuprolideo foram misturados com umasolução PLGA em NMP para fornecer uma composição injetáveluniforme em razões mostradas na Tabela 1. As composiçõesinjetáveis foram cheias em seringas de polipropileno de 1,2mL com pontas de conector com mecanismo de travamento. Emseguida as seringas pré-cheias foram vedadas utilizandotampas de conector com mecanismo de travamento. As seringascobertas foram embaladas em um recipiente e vedadas em umabolsa plástica a vácuo e em seguida armazenadas a 4°C etemperatura ambiente (~22°C) por até 18 meses. A composiçãoinjetável foi amostrada em instantes de tempo de 24 horas,1, 2, 3, 6, 12, e 18 meses. A pureza de leuprolideo naamostra foi determinada por HPLC. 0 peso molecular dopolímero foi determinado por cromatografia de permeação emgel (GPC) que utiliza padrões de poliestireno com pesosmoleculares conhecidos.

Tabela 1: Formulações poliméricas injetáveis testadas

<table>table see original document page 45</column></row><table><table>table see original document page 46</column></row><table>

Verificou-se surpreendentemente que o uso dehidrocloreto e sais de mesilato de leuprolídeo ao invés deacetato significativamente reduziu a degradação deleuprolídeo e polímero em soluções PLGA em NMP tanto a 4°Cquanto em temperatura ambiente ao longo do tempo. AsTabelas 2 e 3 mostraram a degradação de leuprolídeo emsoluções PLGA em NMP a 4°C e temperatura ambiente ao longodo tempo respectivamente. A 4°c, até 23% de leuprolídeo foidegradado na composição polimérica que contém acetato deleuprolídeo, enquanto menos do que 2% de leuprolídeo foidegradado por aquelas formulações que contém hidrocloretode leuprolídeo e mesilato de leuprolídeo após 18 meses. Emtemperatura ambiente, mais do que 35% de degradação deleuprolídeo foi observado para formulações de acetato deleuprolídeo, enquanto apenas aproximadamente 11% paraformulações de hidrocloreto de leuprolídeo e mesilato deleuprolídeo após 12 meses. Além disso, em temperaturaambiente, a alteração de cor (de leitoso para amarelo paracor de ferrugem) e separação de fase foram observados. Aseparação de fase resultou em formulações heterogêneas edegradação desigual do peptídeo e do polímero naformulação. A heterogeneidade das formulações pode ser acausa da flutuação dos resultados obtidos em diversospontos de tempo.Tabela 2. Estabilidade de Leuprolideo em FormulaçãoPLGA/NMP a 4°C

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Tabela 3. Estabilidade de Leuprolídeo em FormulaçãoPLGA/NMP a Temperatura Ambiente

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As Tabelas 4 e 5 mostraram as alterações de pesomolecular do polímero em formulações diferentes. Aocomparar o controle em branco, o peso molecular de PLGA emacetato de leuprolídeo a formulação diminuiu mais do que10% a 4°C e mais do que 90% em temperatura ambiente após 6meses. O peso molecular de PLGA em formulações dehidrocloreto de leuprolídeo e mesilato de leuprolídeo foi omesmo daquele do controle em branco tanto em 4°C quanto atemperatura ambiente mesmo após 12 meses. Contudo, após 12meses, mais do que 90% do polímero proveniente tanto decontrole em branco quanto formulações de hidrocloreto deleuprolídeo e mesilato de leuprolídeo foram degradados. Osresultados indicam que os sais de leuprolídeo formados comácido forte tais como HCl e ácido metanosulfônico impedemcompletamente a interação/reação entre o peptldeo e PLGA emsolução, enquanto o ácido fraco tal como ácido acético nãoimpede a interação/reação nociva entre o peptldeo e PLGA emsolução. Sendo assim, o aperfeiçoamento da estabilidade daformulação ao utilizar o sal do peptideo formado com umácido forte permite a fabricação de uma composiçãoinjetável pronta-para-uso com uma estabilidade dearmazenamento satisfatória de pelo menos um ano.

Tabela 4. Peso molecular de PLGA em Formulações diferentescom o tempo a 4°C

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Tabela 5. Pesos moleculares de PLGA em formulaçõesdiferentes com o tempo em temperatura ambiente.

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Exemplo 9. Estabilidade de leuprolídeo e polímero emcomposições poliméricas injetáveis

Poli(DL-lactídeo-co-glicolídeo) (PLGA) de uma razão85/15 de lactídeo para glicolídeo (DLPLG85/15, IV: 0,28)com um grupo final de éster de laurila foi dissolvido emdimetilsulfóxido (DMSO) para fornecer uma solução a 50% empeso. Os sais de leuprolídeo foram misturados com a soluçãoem DMSO para fornecer uma composição injetável uniforme emrazões mostradas na Tabela 6. As composições injetáveisforam cheias em seringas de polipropileno de 1,2 mL compontas de conector com mecanismo de travamento. Em seguidaas seringas pré-cheias foram vedadas utilizando tampas deconector com mecanismo de travamento. As seringas cobertasforam embaladas em um recipiente e vedadas em uma bolsaplástica a vácuo e em seguida armazenadas a 40C etemperatura ambiente (~22°C) por até 16 meses. A composiçãoinjetável foi amostrada em instantes de tempo de 24 horas,1, 2, 3, 6, 12, e 18 meses. A pureza de leuprolídeo naamostra foi determinada por HPLC. 0 peso molecular dopolímero foi determinado por cromatografia de permeação emgel (GPC) que utiliza padrões de poliestireno com pesosmoleculares conhecidos.

Tabela 6: composições poliméricas injetáveis testadas

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Verificou-se surpreendentemente que o uso dehidrocloreto e sais de mesilato de leuprolídeo ao invés deacetato significativamente reduziu a degradação deleuprolídeo e polímero em soluções PLGA em NMP a 4°C aolongo do tempo. As Figuras 2 e 3 mostraram a degradação deleuprolídeo em PLGA em soluções em DMSO a 4°C ao longo dotempo. Até aproximadamente 20% de leuprolídeo foi degradadono caso de acetato de leuprolídeo, enquanto menos do que 5%de leuprolídeo foi degradado por formulações dehidrocloreto de leuprolídeo e mesilato de leuprolídeo após16 meses. A Figura 5 mostrou as alterações de pesomolecular de PLGA em formulações diferentes. Comparando ocontrole em branco, o peso molecular de PLGA em formulaçãode acetato de leuprolídeo diminuiu aproximadamente 4 0% a4°C após 16 meses. 0 peso molecular de PLGA em composiçõespoliméricas injetáveis contendo hidrocloreto de leuprolídeoe mesilato de leuprolídeo foi comparável àquele do controlea 4°C após 16 meses. Os resultados indicam que os sais deleuprolídeo formados com ácido forte tais como HCl e ácidometanosulfônico quase impedem completamente a interação/reação entre o peptídeo e PLGA em solução DMSO. Embora oácido fraco tal como ácido acético não impeça ainteração/reação nociva entre o peptídeo e PLGA em soluçãoDMSO.

Exemplo 10. Liberação in vitro de leuprolídeo a partir deformulações poliméricas injetáveis

Três soluções de veículo de polímero foram preparadascomo se segue: PLG 85/15 (0,28 IV) com um grupo final deéster de laurila foi dissolvido em NMP a 50% e 55% em peso,e RG503 (0,42 IV) com um grupo final de ácido carboxílicofoi dissolvido em NMP a 50% em peso. Em seguida quantidadeadequada de hidrocloreto de leuprolídeo (LAHCl) e mesilatode leuprolídeo (LAMS) foi misturada com as soluções depolímero a 6% em peso cada. As formulações foramcompletamente misturadas para obter formulações uniformes.

Uma alíquota da suspensão de formulação(aproximadamente 100 mg) foi injetada em solução salinatampão de fosfato de 3 mL em pH 7,4 com 0,1% de azida desódio a 37°C. O fluido de recepção foi substituído eminstantes de tempo selecionados com solução tampão fresca,e a solução tampão removida diluída 2-vezes com tampão defosfato em pH 7,4 foram analisadas por concentração demedicamento por HPLC. A quantidade liberada em cadainstante de tempo foi calculada. A Figura 3 mostra aliberação cumulativa de leuprolídeo para formulaçõesdiferentes ao longo do tempo.

Conforme mostrado na Figura 3, não há diferençasignificativa em liberação de leuprolídeo entre LACHCl eLAMS. Contudo, o tipo e a concentração de PLGA parecemafetar a liberação de leuprolídeo significativamente. Ataxa de liberação de leuprolídeo proveniente de formulaçãoRG5 03H foi muito mais rápida do que aquela proveniente deformulações PLG85/15. Sendo assim, RG503H pode ser adequadopara administração de mais curto prazo de leuprolídeo,enquanto PLG85/15 pode ser útil para administração de maislongo prazo do peptídeo. A taxa de liberação do peptídeopode também ser ainda modificada ao alterar a concentraçãodo PLGA. Uma vez que a concentração de PLG85/15 foiaumentada de 50% para 55%, a taxa de liberação inicial deleuprolídeo foi significativamente reduzida. Sendo assim,os parâmetros para uma formulação específica para opeptídeo alcançar um perfil de liberação desejado podem serprontamente obtidos através de experimentações simples.Exemplo 11. Efeito de excipientes na liberação in vitro deleuprolídeo

As soluções de veículo de polímero com e semexcipientes foram preparadas como se segue: PLA 100DLPL(0,26 IV, Lakeshore, AL) com um grupo final de éster delaurila e vitamina E TPGS foram dissolvidos em NMP emquantidade adequada de acordo com a Tabela 7. Em seguida aquantidade adequada de hidrocloreto de leuprolídeo (LAHCl)foi misturada com as soluções de polímero em 15% em peso.

As formulações foram completamente misturadas para obterformulações uniformes.

Tabela 7. Efeito de excipientes na liberação in vitro deleuprolídeo

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Uma alíquota da suspensão de formulação(aproximadamente 100 mg) foi injetada em solução salinatampão de fosfato de 3 mL em pH 7,4 com 0,1% de azide desódio a 37°C. O fluido de recepção foi substituído eminstantes de tempo selecionados com solução tampão fresca,e a solução tampão removida diluída 10-vezes com PBS em pH7,4 foi analisada para concentração de medicamento porHPLC. A quantidade liberada em cada ponto de tempo foicalculada. A Figura 4 mostra a liberação acumulativa deleuprolldeo para formulações diferentes com o tempo.

Conforme mostrado na Figura 4, a incorporação devitamina E TPGS não afeta a ruptura inicial, mas parecereduzir a taxa de liberação de leuprolldeo em estágiosposteriores. Sendo assim, a vitamina E TPGS pode ser útilpara estender a administração do peptídeo e tambémfuncionar como um antioxidante.

Exemplo 12. Efeito de excipientes na liberação in vitro deleuprolldeo

As soluções de veículo de polímero com e semexcipientes foram preparadas como se segue: PLA 100D040(0,34 IV, Durect, CA) com um grupo final de éster delaurila e Miglyol triglicéride de cadeia média 812 foramdissolvidos em NMP em quantidade adequada de acordo com aTabela 8. Em seguida a quantidade adequada de hidrocloretode leuprolldeo (LAHCl) foi misturada com as soluções depolímero em 15% em peso. As formulações foram completamentemisturadas para obter formulações uniformes.

Tabela 8. Efeito de excipientes na liberação in vitro deleuprolldeo

<table>table see original document page 53</column></row><table> Uma alíquota da suspensão de formulação(aproximadamente 100 mg) foi injetada em um frasco soluçãocontendo 3 mL de solução salina tampão de fosfato em pH 7,4com 0,1% de azide de sódio a 37°C. O fluido de recepção foisubstituído em instantes de tempo selecionados com soluçãotampão fresca, e a solução tampão removida diluída 10-vezescom PBS em pH 7,4 foi analisada para concentração demedicamento por HPLC. A quantidade liberada em cadainstante de tempo foi calculada de volta utilizando umacurva padrão. A Figura 5 mostra a liberação cumulativa deleuprolídeo para formulações diferentes com o tempo.

Conforme mostrado na Figura 5, a incorporação deMiglyol 812 não reduziu significativamente a liberação deruptura inicial de leuprolídeo, mas parece manter a taxa deliberação de leuprolídeo em estágios posteriores. Sendoassim, Miglyol 812 pode ser útil para estender aadministração do peptídeo. Comparando aos resultados emExemplo 1, parece que o peso molecular do polímero tambémafeta significativamente a liberação de ruptura inicial deleuprolídeo. Parece que quanto menor o peso molecular doPLA, menor a taxa de liberação de ruptura inicial deleuprolídeo.

Exemplo 13. Liberação in vivo de leuprolídeo

Poli(DL-lactídeo-co-glicolídeo) de uma razão 85/15 delactídeo para glicolídeo (DLPLG85/15, IV: 0,28) que contémum grupo final de éster de laurila foi dissolvido em N-metil-2-pirrolidona (NMP) para fornecer uma solução 55% empeso. O sal de leuprolídeo, isto é, mesilato de leuprolídeoou leuprolídeo HCl, foi misturado com uma solução PLGA emNMP para fornecer uma formulação injetável uniforme em umacarga de medicamento de aproximadamente 12%. As formulaçõesinjetáveis foram transferidas para dentro de seringas depolipropileno de 1,2 mL com pontas de conector commecanismo de travamento e uma agulha de parede fina debitola 19 fixada. Cada formulação foi em seguida injetadanos ratos de forma subcutânea em um volume deaproximadamente 100 pL com 6 animais por grupo. As amostrasde soro foram coletadas de cada animal em 3 horas, 1, 3, 7,14, 28, 42, 56, e 70 dias pós-injeção. As amostras de soroforam analisadas para concentração de leuprolideo por ELISAutilizando os kits disponíveis de Península LaboratoriesInc. O leuprolideo restante que permaneceu nos implantes emdiversos tempos foi analisado por HPLC.

A Figura 6 mostra o perfil de liberação de leuprolideo de duas formulações diferentes até 70 dias.Ambas as formulações mostraram liberação de ruptura inicialde leuprolideo. A formulação que contém LAHCl alcançou Cmaxde 661,6 ng/mL em 3 horas, e a formulação que contém LAMSalcançou Cmax de 370,6 ng/mL também em 3 horas. Ambas asformulações mostraram liberação sustentada de leuprolideoao longo de um período de tempo estendido. A formulação quecontém LAMS mostrou um nível de soro mais constantes deleuprolideo do que aquele obtido a partir da formulação quecontém LAHCl.

Exemplo 14. Liberação in vivo de leuprolideo

Poli(DL-lactídeo-co-glicolídeo) de uma razão 85/15 delactídeo para glicolídeo (DLPLG85/15, IV: 0,27) que contémuma porção de 1,6-hexanediol é dissolvido em N-metil-2-pirrolidona (NMP) para fornecer uma solução 50% em peso. 0sal de leuprolideo, isto ê, acetato de leuprolideo ouleuprolideo HCl, é misturado com uma solução PLGA em NMPpara fornecer uma formulação injetável uniforme em umacarga de medicamento de aproximadamente 12%. As formulaçõesinjetáveis são transferidas para dentro de seringas depolipropileno de 1,2 mL com pontas de conector commecanismo de travamento e uma agulha de parede fina debitola 19 fixada. Cada formulação é em seguida injetada nosratos de forma subcutânea em um volume de aproximadamente100 pL com 6 animais por grupo. As amostras de soro foramcoletadas de cada animal em 3 horas, 1, 3, 7, 14, 28, 42,56, 70, 91, 112, 133, 154, 175 e 206 dias pós-injeção. Asamostras de soro são analisadas para concentração deleuprolídeo por ELISA utilizando os kits disponíveis dePenínsula Laboratories Inc. O leuprolídeo restante quepermaneceu nos implantes em diversos tempos pode seranalisado por HPLC.

Experimentos similares podem ser projetados erealizados utilizando outros análogos de LHRH tais comobuserelina, deslorelina, fertirelina, histrelina,lutrelina, goserelina, nafarelina, triptorelina,cetrorelix, abarelix, e outros peptídeos, tais como GLP-I,PYY etc., e outros polímeros e solventes.

Exemplo 15. Uso de composições poliméricas injetáveisestabilizadas.

A administração da composição polimérica injetávelestabilizada a um paciente pode ser conseguida de diversasformas. Uma composição polimérica biodegradável pode serinjetada de forma subcutânea ou intramuscular para formarum implante in situ, aplicado como um creme transdérmico, etambém introduzido ao paciente como um supositório retal ouvaginal.

Exemplo 16. Preparação de micro-esferas de polímero quecontêm LAHCl

Micro-esferas de Poli(DL-lactídeo-co-glicolídeo)(PLGA) são preparadas por uma técnica de emulsão única(O/W) óleo-em-água. PLGA é dissolvido em cloreto demetileno (DCM). Para o encapsulamento de LAHCl, omedicamento é misturado com a solução de PLGA em DCM. Asolução ou suspensão misturada é emulsificada em 500 mL de0,5-1% (w/v) PVA (PVA, 88% hidrolizado, peso molecularmédio de 31,000-50,000, Sigma-Aldrich) solução pré-esfriadano refrigerador a 4°C. A emulsão é agitada continuamentepor 3 horas em temperatura ambiente para evaporar o DCM. Asmicro-esferas endurecidas são coletadas, lavadas três vezescom água deionizada, e em seguida secas por congelamento.

Exemplo 17. Uso de composição polimêrica líquidaestabilizada para preparar matrizes de polímeroimplantáveis

O polímero biodegradável que consiste em poli-(ácidoláctico -co- ácido glicólico) que possui uma razão delactídeo para glicolídeo de 50:50 a 100:0 tal como RG503H(Boehringer Ingelheim Chemicals, Inc. USA) é dissolvido emum solvente orgânico volátil, tal como etil acetato oucloreto de metileno. Uma quantidade apropriada de salbenéfico conforme definido aqui tal como goserelin mesilato(0,01%-30% em peso relativo ao polímero) édissolvido/disperso na solução de polímero. A solução écompletamente misturada para obter uma solução ou suspensãouniforme. Após a mistura estar completa, o solvente éremovido por evaporação. Isto é feito por um processo desecagem por pulverização para formar pequenas partículasuniformes por injeção. Isto pode ser deito também em ummolde para formar um implante. As matrizes de polímeroresultantes podem também ser reduzidas a um pó e formuladascomo uma suspensão injetável.

Sendo assim formas de dosagem sólidas obtidas podemser injetadas de forma subcutânea ou intramuscular, oupodem ser colocadas cirurgicamente sob a pele na forma deum implante, ou oralmente fornecidas como parte de umsistema de administração oral para agentes peptídicos. Asmicro-partículas sólidas podem também ser preparadas comouma suspensão ou uma solução não aquosa, que pode tambémser administrada a um paciente via inalação, poradministração de medicamento pulmonar. As micro-partículaspodem também ser suspensas em óleo e introduzidas aopaciente como um supositório retal ou vaginal.

Claims (39)

1. Composição polimérica injetável caracterizada pelofato de compreender:a) um sal de um agente peptideo formado com um ácidoforte selecionado do grupo que consiste em ácidoclorídrico, ácido hidrobrômico, ácido hidroiõdico, ácidosulfúrico, ácido nítrico, ácido crômico, ácidometanossulfônico, ácido trifluormetano sulfônico, ácidotricloroacético, ácido dicloroacético, ácido bromoacético,ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido 2-cloropropanõico, ácido 2-oxobutanóico, ácido 2-clorobutanóico, ácido 4-cianobutanóico, ácido perclórico, eácido fosfórico;b) um polímero biodegradável;c) um solvente orgânico farmaceuticamente aceitável,que dissolva o polímero biodegradável e seja miscível oudispersível em líquido aquoso ou fluido biológico; ed) opcionalmente um ou mais excipientesfarmaceuticamente aceitáveis.

2. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato de ser sob a formade solução, suspensão, gel ou semi-sólido.

3. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato do agente peptideoconter pelo menos um grupo amina básico.

4. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato do agente peptideoser selecionado do grupo que consiste em oxitocina,vasopressina, hormônio adrenocorticotrópico (ACTH), fatorde crescimento epidérmico (EGF), fator de crescimentoderivado das plaqueta (PDGF), prolactina, hormônioluteinizante, hormônio luteinizante que libera hormônio(LHRH), agonistas do LHRH, antagonistas do LHRH, hormôniosde crescimento, fator de liberação do hormônio decrescimento, insulina, eritropoietina, somatostatina,glucagon, interleucina, alfa interferon, beta interferon,gama interferon, gastrina, tetragastrina, pentagastrina,urogastrona, secretina, calcitonina, encefalinas,endorfinas, angiotensinas, tirotropina que libera hormônio(TRH) , fator de necrose tumoral (TNF), hormônio daparatireóide (PTH), fator de crescimento dos neurônios(NGF), fator de estimulação de colônias de granulócitos (G-CSF) , fator de estimulação de colônias de granulócitos emacrófagos (GM-CSF), fator de estimulação de colônias demacrófagos (M-CSF), heparinase, fator de crescimentoendotelial vascular (VEG-F), proteínas morfogênicas ósseas(BMP), hANP, peptideo similar ao glucagon (GLP-I) ,exenatide, peptideo II (PII), renina, bradicinina,bacitracinas, polimixinas, colistinas, tirocidina,gramicidinas, enzimas ciclosporinas, citocinas, anticorpos,vacinas, antibióticos, glicoproteínas, hormônio deestimulação do folículo, o kiotorfina, o tuftsin,timopoietina, timosina, timostimulina, fator humoraltímico, fator tímico do soro, fatores de colônia, motilina,bombesina, dinorfina, o neurotensina, o ceruleína, ouroquinase, calicreína, análogos da substância P eantagonistas da estimulação, angiotensina II, fator decoagulação VII e IX do sangue, gramicidinas, hormônio deestimulação do melanócite, hormônio da tiróide que liberahormônio, hormônio de estimulação da tiróide,pancreozimina, colecistoquinina, lactogen placental humano,gonadotrofina coriônica humana, peptídeo de estimulação dasíntese de proteína, peptídeo inibitório gástrica, peptídeointestinal vasoativo, fator de crescimento derivado deplaquetas, e análogos e modificações sintéticas efragmentos farmacologicamente ativos disso.

5. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o agentepeptídeo tem um N-terminal que não é uma amina primária.

6. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 5, caracterizada pelo fato de que o agentepeptídeo é selecionado do grupo que consiste em hormônioluteinizante que libera hormônio (LHRH), análogos de LHRH,agonistas e antagonistas.

7. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 5, caracterizada pelo fato de que o agentepeptídeo é selecionado do grupo que consiste emleuprorelina, buserelina, gonadorelina, deslorelina,fertirelina, histrelina, lutrelina, goserelina, nafarelina,triptorelina, cetrorelix, enfuvirtide, timosina al, e doabareIix.

8. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato do agente peptídeoter uma amina primária do N-terminal e/ou a amina primáriada cadeia(s) lateral(is) que sejam modificadascovalentemente com partes hidrófilas.

9. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 8, caracterizada pelo fato de que as parteshidrófilas incluem todos os oligômeros solúveis em água oupolímeros lineares ou ramificados de um peso molecularmédio que varia de aproximadamente 500 daltons aaproximadamente 50.000 daltons.

10. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 8, caracterizada pelo fato de que as parteshidrófilas são polietilenoglicol e/ou seus derivados.

11. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o agentepeptídeo tem uma amina primária de N-terminal e/ou aminaprimária de cadeia(s) lateral(is) que é modificadacovalentemente com partes lipofílicas.

12. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 11, caracterizada pelo fato de que as parteslipofílicas são selecionadas do grupo que consiste em -alquil C2-39, alquenil C2-39/ alcadienil C2-39 e resíduosesteroidais.

13. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato do agente dopeptídeo estar presente em aproximadamente 0.01% aaproximadamente 4 0% da composição por peso.

14. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o polímerobiodegradável é selecionado do grupo que consiste empolilactídeos, poliglicolídeos, poli(lactídeos-co-glicolídeos), policaprolactonas, polidioxanonas,policarbonato, polihidroxibutiratos, oxalatos depolialquilenos, polianidridos, poliesteramidas,poliuretanos, poliacetáis, poliortocarbonatos,polifosfazenos, polihidroxivaleratos, succinatos depolialquileno, poliortoésteres, e copolímeros, copolímerosde bloco, copolímeros ramificados, terpolímeros ecombinações e misturas disso.

15. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o polímerobiodegradável é copolímeros poli(lactídeo-co-glicolídeo)que têm um ácido láctico em uma proporção em relação aoácido glicólico entre aproximadamente o 50:50aproximadamente ao 100:0, e um peso molecular médio deaproximadamente 2.000 a aproximadamente 100.000.

16. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 15, caracterizada pelo fato de que oscopolímeros (lactídeos-co-glicolídeos) contêm um grupohidroxil, carboxílico, ou éster terminal.

17. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 15, caracterizada pelo fato de que oscopolímeros (lactídeos-co-glicolídeos) contêm um álcoolmonofuncional ou um resíduo de poliol e não tem um ácidocarboxílico terminal.

18. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o polímerobiodegradável está presente em aproximadamente 30% a 70% dacomposição em peso.

19. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato do solventeorgânico farmaceuticamente aceitável ser selecionado dogrupo que consiste em N-metil-2-pirrolidona,dimetilsulfóxido, glicerol formal, glicofurol,metóxipolietileno glicol 350, alcóxipolietilene glicol,ésteres de polietileno glicol, benzil benzoato, etilbenzoato, ésteres de ácido cítrico, triacetina, diacetina,citrato trietil, citrato trietil do acetil, e misturasdisso.

20. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o solventeorgânico farmaceuticamente aceitável está presente em cercade 30% a aproximadamente 80% da composição por peso.

21. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato de aindacompreender um ou mais agentes de alteração da taxa deliberação.

22. Composição polimérica injetável, de'acordo com areivindicação 21, caracterizada pelo fato dos agentes dealteração da taxa de liberação serem selecionados do grupoque consiste em ácido alcanocarboxílico, ácido oléico,alquil álcool, lipídios polares, tensoativos, copolimerosde polietilenoglicol e polilactídeos ou poli(lactídeo-co-glicolídeo) poloxâmeros, polivinilpirrolidona,polisorbatos, 2-etoxietil acetato, triacetina, trietilcitrato, acetil tributil citrato, acetil trietil citrato,triacetato glicerol, di(n-butil) sebecato,polietilenoglicol, sorbitol, triglicerídeos, triglicerídeosde cadeia média e misturas disso.

23. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato de aindacompreender um ou mais agentes de proteção.

24. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 23, caracterizada pelo fato de que os agentesde proteção são selecionados do grupo que consiste emcarbonato de cálcio, hidróxido de cálcio, miristato decálcio; oleato de cálcio, palmitato de cálcio, estearato decálcio, fosfato de cálcio, carbonato de magnésio, hidróxidode magnésio, fosfato de magnésio, miristato de magnésio,oleato de magnésio, palmitato de magnésio, estearato demagnésio, carbonato de zinco, hidróxido de zinco, miristatode zinco, oleato de zinco, palmitato de zinco, estearato dezinco, fosfato de zinco, e combinações disso.

25. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 1, caracterizada pelo fato de aindacompreender um ou mais antioxidantes.

26. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 25, caracterizada pelo fato de que osantioxidantes são selecionados do grupo que consiste emacetato de d-alfa tocoferol, ascorbil palmitato,hidroxianidol butilado, hidroxianisol butilado,hidroxiquinona butilada, hidroxicumarina, hidroxitoluenobutilado, gaiato de etila, gaiato de propila, gaiato deoctila, lauril gaiato, propilhidroxibenzoato,trihidroxibutilrofenona, vitamina E, vitamina E peguilada evitamina E-TPGS.

27. Composição polimérica injetável caracterizada pelofato de que compreende:a) um hidrocloro ou um sal de mesilato de um agonistaou antagonista de LHRH;b) um copolimero poli(lactídeo-co-glicolídeo), no quala relação do lactideo:glicolideo do copolimero é de 50:50 acerca de 100:0;c) N-metil-2-pirrolidona (NMP); ed) um triglicerídeo e/ou uma vitamina E ou seusderivados.

28. Composição polimérica injetável, de acordo com areivindicação 27, caracterizada pelo fato do agonista ouantagonista de LHRH serem selecionados do grupo queconsiste em leuprorelina, buserelina, gonadorelina,deslorelina, fertirelina, histrelina, lutrelina,goserelina, nafarelina, triptorelina, cetrorelix,enfuvirtide, timosina al, ou abarelix.

29. Método para preparar um sal de um agente peptideocaracterizado pelo fato de compreender as etapas dedissolver uma base livre de um agente peptideo em um meiolíquido para formar uma solução, e misturar a solução comuma solução aquosa de um ácido forte para formar o sal doagente peptideo.

30. Método para preparar um sal de um agente peptideocaracterizado pelo fato de que compreende:a) dissolver um primeiro sal do agente peptideoformado com um ácido fraco volátil em um meio líquidoapropriado para formar a solução;b) misturar a solução com uma solução aquosa de umácido forte para formar a mistura;c) remover o solvente da mistura ed) remover o ácido fraco para formar um segundo sal doagente peptideo.

31. Método para preparar uma composição poliméricainjetável para formar um sistema de liberação controladaprolongada para distribuir uma quantidade terapêutica doagente peptideo a um sujeito caracterizado pelo fato de quecompreende as etapas de:a)dissolver um polímero biodegradável em um solventeorgânico farmaceuticamente aceitável;b)combinar um sal de um agente peptideo formado com umácido forte com a solução do polímero da etapaa) misturar para formar uma composição injetável;onde o ácido forte é selecionado do grupo que consiste emácido clorídrico, ácido hidrobrômico, ácido hidroiódico,ácido sulfúrico, ácido nítricô, ácido crômico, ácidometanossulfônico, ácido trifluormetano sulfônico, ácidotricloroacético, ácido dicloroacético, ácido bromoacético,ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido 2-cloropropanóico, ácido 2-oxobutanóico, ácido 2-clorobutanóico, ácido 4-cianobutanóico, ácido perclórico, eácido fosfórico.

32. Método, de acordo com a reivindicação 31,caracterizado pelo fato do polímero biodegradável serdissolvido com um ou vários excipientes farmaceuticamenteaceitáveis em um solvente orgânico farmaceuticamenteaceitável.

33. Método para a formação in situ de um implantedentro de um corpo vivo caracterizado pelo fato decompreender:a. administrar uma composição polimérica injetável nocorpo de um sujeito, a composição compreendendo um sal deum agente peptídeo formado com um ácido forte, um polímerobiodegradável, um solvente orgânico farmaceuticamenteaceitável e opcionalmente, um ou mais excipientesfarmaceuticamente aceitáveis;b. permitir que o solvente orgânico farmaceuticamenteaceitável dissipe-se da composição para formar um implantebiodegradável; onde o ácido forte é selecionado do grupoque consiste em ácido clorídrico, ácido hidrobrômico, ácidohidroiódico, ácido sulfúrico, ácido nítricô, ácido crômico,ácido metanossulfônico, ácido trifluormetano sulfônico,ácido tricloroacético, ácido dicloroacético, ácidobromoacético, ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido-2-cloropropanóico, ácido 2-oxobutanóico, ácido 2-clorobutanóico, ácido 4-cianobutanóico, ácido perclórico, eácido fosfórico.

34. Método, de acordo com a reivindicação 33,caracterizado pelo fato de que a composição poliméricainjetável é administrada por via subcutânea.

35. Método, de acordo com a reivindicação 33,caracterizado pelo fato da composição polimérica injetávelser administrada por via intramuscular.

36. Método para produzir uma composição poliméricacomo um sistema de liberação controlada para distribuir umaquantidade terapêutica de um agente peptídeo a um sujeito,o método caracterizado pelo fato de que compreende:a)dissolver um polímero biodegradável em um solventeorgânico;b)dissolver ou fazer uma suspensão de um sal do agentepeptídeo formado com um ácido forte na solução do polímeroda etapa a) para formar uma formulação uniforme; ec)formar micropartículas ou nanopartícuias quecompreendem o polímero biodegradável que encapsula o agentedo peptídeo , onde o ácido forte é selecionado do grupo queconsiste em ácido clorídrico, ácido hidrobrômico, ácidohidroiódico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido crômico,ácido metanossulfônico, ácido trifluormetano sulfônico, noácido tricloroacético, ácido dicloroacético, ácidobromoacético, ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido-2-cloropropanóico, ácido 2-a-oxobutanóico, ácido 2-clorobutanóico, ácido 4-cianobutanóico, ácido perclórico, eácido fosfõrico.

37. Método para produzir uma composição polimérica comum sistema da liberação controlada para distribuir umaquantidade terapêutica de um agente peptídeo a um sujeito,o método caracterizado pelo fato de incluir:a) dissolver um polímero biodegradável em um solventeorgânico; eb) dissolver ou fazer uma suspensão de um sal doagente peptídeo formado com um ácido forte na solução dopolímero da etapa a) para forma uma formulação uniforme; ec) formar uma matriz sólida do polímero que compreendeo polímero biodegradável que encapsula o agente peptídeo,onde o ácido forte é selecionado do grupo que consiste emácido clorídrico, ácido hidrobrômico, ácido hidroiódico,ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido crômico, ácidometanossulfônico, ácido trifluormetano sulfônico, ácidotricloroacético, ácido dicloroacético, ácido bromoacético,ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido 2-cloropropanóico, ácido 2-oxobutanóico, ácidoclorobutanóico, ácido 4-cianobutanóico, ácido perclórico, eno ácido fosfórico.

38. Método, de acordo com a reivindicação 37,caraterizado pelo fato da matriz sólida do polímero ser soba forma de micropartícuias, nanopartículas, haste,película, grão, cilindro ou wafer.

39. Método, de acordo com a reivindicação 38,caracterizado pelo fato da matriz contínua do polímero serapropriada para a administração parenteral, administraçãona mucosa, administração oftálmica; injeção subcutânea ouintramuscular ou inserção; ou inalação.