BRPI0706926A2 - método para tratar perda auditiva e composição para tratar perda auditiva. - Google Patents

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Abstract

MéTODO PARA TRATAR PERDA AUDITIVA E COMPOSIçãO PARA TRATAR PERDA AUDITIVA. Uma composição para tratar perda auditiva inclui componentes que funcionam através de diferentes mecanismos biológicos para prover um efeito adicional que é igual a ou maior do que a soma do efeito dos componentes individuais. A composição inclui uma quantidade biologicamente eficaz de pelo menos um expurgador de oxigênio individual, um antioxidante doador, um terceiro antioxidante, e um vasodilador. Um método para tratar a perda auditiva incluindo a etapa de administrar internamente a composição incluindo uma quantidade biologicamente eficvaz de pelo menos um expurgador de oxigênio individual, o antioxidante doador, o terceiro antioxidante, e o vasodilator para um mamífero dentro de três dias após o trauma ao ouvido médio ou o ouvido interno do mamífero.

Description

"MÉTODO PARA TRATAR PERDA AUDITIVA E COMPOSIÇÃO PARA TRATAR PERDA AUDITIVA".
Histórico da invenção
Campo da invenção
A presente invenção refere-se geralmente a uma composição para tratar perda auditiva. Mais especificamente, a presente invenção refere-se a uma composição para tratar a perda auditiva a qual inclui componentes que funcionam através de diferentes mecanismos biológicos e provê um efeito adicional que é igual a ou maior do que a soma dos efeitos dos componentes individuais, e um método para tratar perda auditiva incluindo a etapa de administrar a composição a um mamífero incluindo a etapa de administrar a composição a um mamífero antes de ou dentro de três dias após o trauma do ouvido interno.
Descrição do estado da técnica
Estudos extensivos foram desenvolvidos nas composições para tratar perda auditiva, dentre os quais os métodos para tratar perdas auditivas usando várias composições.
Em particular, descobriu-se que antioxidantes, dentre vários outros componentes, participam de uma forma importante na prevenção da perda auditiva induzida pelo ruído. Antioxidantes específicos demonstram ser parcialmente eficazes na redução da perda auditiva induzida pelo ruído nos modelos animais incluindo glutationa (GSH)/éster monoetil glutationa, N- acetilcisteína (NAC), resveratrol, alopurinol, R- fenilisopropiladenosina, e vitaminas A, C, e E. Efeitos otoprotetores no regime individual dos antioxidantes são bem conhecidos da técnica.
Em adição aos antioxidantes, muitos outros componentes foram investigados separadamente e descobriu-se que são de certa forma eficazes no tratamento da perda auditiva.
Os vasodilatadores são uma classe de componentes que têm sido considerados moderadamente úteis para a prevenção da perda auditiva. É conhecido da técnica que altos níveis de ruídos resultam em uma diminuição no fluxo de sangue ao ouvido interno, apesar de o mecanismo da diminuição deste ruído induzido não ser muito evidente até muito recentemente. Com base na diminuição observada, especulou-se por muito tempo que esta diminuição no fluxo de sangue pode conduzir à morte celular das células sensíveis do pêlo dentro da cóclea do ouvido e, conseqüentemente, um aumento no fluxo de sangue pode proteger as células do ouvido interno da morte induzida pelo ruído. Alguns vasodilatadores promovem um fluxo de sangue aumentado ao ouvido interno e, assim, auxiliam na proteção do ouvido interno a partir do trauma como um resultado de níveis elevados de ruídos. Exemplos específicos dos vasodilatadores comprovando parcialmente a prevenção da perda auditiva incluindo, magnésio, beta-· histina, e amido hidroxietil (HES).
Atualmente, pouco, se algum, efieto adicional foi descoberto existir na combinação de muitos dos componentes conhecidos para tratar a perda auditiva. Os efeitos adicionais, como utilizado aqui, referem-se aos efeitos que são iguais a ou maiores do que a soma dos efeitos dos componentes individuais. Para a maioria, nenhum efeito maior foi observado através da combinação de muitos dos diferentes componentes que são eficazes no tratamento da perda auditiva em comparação aos efeitos de muitos componentes individuais eficazes na composição, ou seja, a combinação dos agentes é apenas eficaz quando os agentes individuais são liberados sozinhos. Por exemplo, a figura 1 mostra os resultados experimentais relativamente aos efeitos adicionais de Trolox®, o qual é um análogo solúvel em água do alfa-tocoferal (vitamina Ε) , e beta-histina. As condições experimentais são descritas em detalhes ainda nas seções dos exemplos da seção abaixo. Como é evidentes a partir da figura 1, o efeito combinado de Trolox® e de beta-histina em minimizar o limiar da mudança, que está correlacionado a perda auditiva, não é mais eficaz do que o Trolox® ou a beta-histina sozinhos em qualquer experimento dados. Como tal, a combinação de Trolox® e beta-histina não produz um efeito adicional no tratamento da perda auditiva. Com o entendimento do mecanismo pelo qual os vários antioxidantes trabalham, torna-se nítido como tratar ou prevenir a perda auditiva, foi descoberto que as combinações de determinados antioxidantes que atuam através da via complementar, mas de forma diferente, os mecanismos bioquímicos pode ser mais eficazes do que os antioxidantes sozinhos. Entretanto, dado o volume e a variedade dos componentes que são conhecidos por afetar a perda auditiva, bem como a perda do conhecimento relativo aos mecanismos específicos pelo qual as funções dos componentes, efeitos adicionais entre componentes foram reconhecidos atualmente.
Apesar do fato que os efeitos adicionais entre vários componentes não serem reconhecidos atualmente, determinados relatos foram feitos de modo que geralmente o grupo junta todos os componentes conhecidos para tratar a perda auditiva. Por exemplo, a patente norte-americana No. 6,093,417 é dirigida a uma composição para tratar os distúrbios auditivos. A composição é topicamente aplicada ao canal do ouvido para tratar o distúrbio auditivo. Apesar da patente 6,093,417 ser dirigida a uma composição que pode incluir muitos componentes que são conhecidos por terem pouco efeito na redução da perda auditiva sozinhos, incluindo as vitaminas A, CeE, dentre aqueles vasodilatadores e sais de magnésio, não existe reconhecimento de um efeito adicional entre qualquer um dos componentes. Como é evidente a partir da descrição acima relativa à figura 1, muitas combinações de componentes não apresentam efeitos adicionais. Como tal, a combinação aleatória dos agentes descritos na patente 6,093,417 não seria esperado, necessariamente, que ela provesse qualquer efeito maior para o tratamento da perda auditiva se incluída na composição. Adicionalmente, a eficácia dos componentes individuais varia muito entre oral, intravenoso, e administração tópica, e composições para tratar a perda auditiva são formuladas diferentemente, dependendo da forma de administração contemplada. Finalmente, a patente 6,093,417 não ensina com especificidade suficiente as quantidades biologicamente eficaz de cada componente que seria suficiente para produzir um efeito individualmente, deixando sozinho os efeitos adicionais entre os vários componentes. Assim, a descrição da patente 6,093,417 não provê ainda quais os ensinamentos já são conhecidos de cada componente, ou seja, que cada componente, quando utilizado individualmente, é modestamente eficaz na prevenção da perda auditiva.
Apesar de muitos dos componentes utilizados para tratar ou prevenir a perda auditiva proverem outras funções benéficas e estarem incluídos nas multi-vitaminas, eles são geralmente utilizados como parte de um regime de dieta regular e não existem dados que sugiram o uso de multi-vitaminas que incluam uma combinação e uma concentração específica de componentes para prevenir a perda auditiva induzida pelo ruído ou outro stress.
O uso da dieta dos antioxidantes para prevenir a disfunção visual é descrito na patente US 6,660,297. A patente 6,660,297 descreve especificamente as vitaminas A, C, e E em quantidades que podem ser biologicamente eficazes para tratar ou prevenir a perda auditiva.
Entretanto, uma combinação de vitaminas A, C, e E sozinhas não é suficiente para resultar em uma proteção clinicamente significante contra as perdas auditivas induzidas por ruídos e a adição de zinco e cobre como descrita na patente 6,660,297 não esperaria que reduzisse a perda auditiva. Além disso, não existe nenhuma sugestão ou ensinamento na patente 6,660,297 que sugira o uso da composição para outra coisa além do tratamento da disfunção visual.
Assim, existe uma oportunidade em prover uma composição e um método para tratar perda auditiva incluindo a etapa de administração da composição que inclui uma combinação específica dos componentes tendo um efeito adicional que é igual a ou maior do que a soma dos efeitos dos componentes individuais no tratamento da perda auditiva quando utilizado em quantidades biologicamente eficazes.
Sumário da invenção e vantagens
O objetivo da invenção é prover uma composição para tratar a perda auditiva incluindo componentes que funcionam através de mecanismos biológicos diferentes para prover um efeito adicional que é igual a ou maior do que a somo dos efeitos dos componentes individualmente. A composição inclui uma quantidade biologicamente eficaz de pelo menos um expurgador de oxigênio individual, um antioxidante doador, um terceiro antioxidante, e um vasodilatador. Pelo menos um expurgador de oxigênio individual está presente para reduzir os radicais livres que contribuem para a perda auditiva. O antioxidante doador está presente para reduzir os radicais peroxil e inibir a propagação da peroxidação dos lipídios que também contribuem para a perda auditiva. O vasodilatador esta presente para prevenir a diminuição tanto no fluxo de sangue coclear e a oxigenação que também contribui para a perda auditiva.
Um objetivo da presente invenção também provê um método para tratar a perda auditiva. O método inclui a etapa de administrar internamente a composição objeto da presente invenção incluindo a etapa de administrar internamente a composição da invenção incluindo uma quantidade biologicamente eficaz de pelo menos um expurgador de oxigênio individual, um antioxidante doador, um terceiro antioxidante, e um vasodilador à um mamífero dentro de três dias após o trauma ao ouvido médio ou interno de um mamífero.
A combinação de pelo menos um expurgador de oxigênio individual, um antioxidante doador, um terceiro antioxidante, e um vasodilatador, em quantidades biologicamente eficazes prove um efeito adicional no tratamento da perda auditiva que é igual ou maior do que a soma do efeito dos componentes individualmente. Ainda mais, a composição da presente invenção pode prover uma eficácia no tratamento da perda auditiva se administrada não mais tarde que três dias após o trauma ao ouvido médio ou interno do mamífero. Como resultado, a composição e o método para tratar a perda auditiva da presente invenção provêem uma promessa maior na ajuda para minimizar a perda auditiva resultante do trauma ao ouvido médio ou ouvido interno de mamífero. Dada a alta incidência de perdas auditivas induzidas por ruídos na população em geral do mundo, existe uma maior necessidade de composições e métodos para tratar a perda auditiva da presente invenção de modo a minimizar os efeitos sócio- econômicos que persistem devido à perda auditiva induzida por ruídos.
Breve descrição dos desenhos
Outras vantagens da presente invenção serão prontamente apreciadas, como as mesmas que se tornam melhor entendidas com referência à descrição detalhada a seguir, quando considerada em combinação com os desenhos que acompanham a presente solução, nos quais:
A figura 1 representa um gráfico mostrando o efeito de um Exemplo Comparativo de uma composição utilizada para tratar a perda auditiva incluindo Trolox® (vitamina E) e beta-histina na redução do deslocamento percentual mínimo, em porquinhos da índia a partir da sensibilidade da linha de base do percentual mínimo de 4, 8, e 16 kHz após exposição de 120 decibéis - Níveis de ruídos de oitavo de banda - SPL, em 4kHz por cinco horas;
A figura 2 representa um gráfico mostrando o efeito de uma composição da presente invenção incluindo vitaminas A, CeEe magnésio, e exemplos comparativos das composições que incluem apenas alguns destes componentes, uma redução média no deslocamento percentual mínimo, em porquinhos da índia a partir da sensibilidade da linha de base do percentual mínimo de 4, 8, e 16 kHz após exposição de 12 0 decibéis - Níveis de ruídos de oitavo de banda - SPL, em 4kHz por cinco horas;
A figura 3 representa um gráfico mostrando o efeito da composição objeto da presente invenção e dos Exemplos Comparativos das composições da figura 2 em uma quantidade de perda das células do pêlo na região da cóclea que é mais danificada após a exposição ao ruído especificada acima para a figura 2; e
A figura 4 representa um gráfico mostrando o efeito da composição do objeto da invenção e dos Exemplos Comparativos das composições da figura 2 em uma quantidade de perda das células do pêlo em toda a cóclea após exposição ao ruído especificado acima para a figura 2.
Descrição detalhada das configurações preferidas
Uma composição para tratar perda auditiva inclui componentes que funcionam através de mecanismos biológicos diferentes para prover um efeito adicional que é igual a ou maior que a soma do efeito dos componentes individualmente. A composição é tipicamente utilizada para tratar perda auditiva resultando de trauma para um ouvido médio ou um ouvido interno de um mamífero. 0 trauma pode ser definido ainda como um trauma metabólico induzido mecanicamente, trauma mecânico/metabólico, trauma por stress, um dano induzido por stress, ou stress do meio. Entretanto, também é possível que a composição possa também ser utilizada para tratar ou prevenir outros tipos de perdas auditivas, incluindo, por exemplo, a perda auditiva relacionada com a idade, a perda auditiva induzida por antibióticos, e a perda auditiva induzida por quimioterápicos. A composição pode ainda ser utilizada para prevenir perdas auditivas durante a restauração cirúrgica realizada no ouvido médio ou ouvido interno.
Foi descoberto que um resultado de trauma por ruído, ou outras entidades que causam pressão tais como idade fármacos como listados acima, é que radicais livres se formam em associação com o trauma metálico. O radical livre danifica a estrutura sensível, tal como as células dos pêlos, dentro do ouvido. A vaso-constricção também ocorre como um resultado do ruído, o que conduz à diminuição do fluxo de sangue ao ouvido médio e interno e causa a morte celular que resulta na perda auditiva. Foi descoberto que a causa fundamental da vaso-constricção é a formação de radicais livres, induzida pelo ruído. Especificamente, uma das moléculas formadas no ouvido interno como resultado da presença dos radicais livres é a alfa 8-isoprostano-2F, que é um agente bio-ativo. O agente bio-ativo induz a constricção dos vasos sangüíneos no ouvido interno, o que causa uma redução no fluxo de sangue. De modo à contra-agir na formação dos radicais livres e na vaso-constricção, a composição da presente invenção inclui, pelo menos, um expurgador de oxigênio individual, um antioxidante doador, um terceiro antioxidante, e um vasodilatador. Inesperadamente, foi descoberto que a composição incluindo pelo menos um expurgador de oxigênio individual, um antioxidante doador, um terceiro antioxidante e um vasodilatador, produz um efeito adicional que é não apenas maior do que o efeito de qualquer um daqueles componentes sozinho, mas pelo menos igual a ou maior do que a soma dos efeitos de cada um dos componentes.
Os antioxidantes agem através de uma variedade de mecanismos. Pelo menos o expurgador de oxigênio individual e o antioxidante doador são duas diferentes classes de antioxidantes que agem através de mecanismos diferentes. 0 terceiro antioxidante, embora tipicamente um expurgador de oxigênio individual, pode ser um antioxidante diferente que age através de um mecanismo diferente. Os expurgadores de oxigênio individuais, reduzem os radicais livres que contribuem para a perda auditiva. Mais especificamente, pela redução dos radicais livres, os expurgadores de oxigênio livres previnem, dentre outros efeitos prejudiciais, o oxigênio individual a partir da reação com lipídios para formar os hidroperóxidos de lipídio. Os hidroperóxidos participam de uma forma importante na causa da perda auditiva. Mesmo dentro da classe de expurgadores de oxigênio individual, acredita-se que vários antioxidantes reagem em diferentes sítios dentro do corpo, em particular, dentro das células para atenuar a formação de radicais livres. Por exemplo, um expurgador típico de oxigênio individual é a vitamina A, que é um termo genérico para a captura de um número de moléculas com uma atividade biológica de retinol ou carotenóide. Primariamente, o método de alimentação formado de vitamina a/retinol inclui ésteres de retinol e beta-caroteno. 0 beta- caroteno é feito de uma cadeia de polieno de 11 conjugados de ligação dupla com ramificações de metila espaçadas dentre da cadeia de polieno, coroado em ambas as extremidades por anéis de ciclohexenila com 1,1,5- trimetil substituído. Outras formas de vitamina A incluem xantofilas, astaxantina, catanxina, luteína, e zeaxantina, as quais incluem uma cadeia principal de beta-carotenos com hidroxila e/ou substituição de carbonila em um ou mais dos anéis de ciclohexenila. Para os propósitos da presente invenção, a vitamina A está presente tipicamente como beta-caroteno. Beta-caroteno é um expurgador poderoso de oxigênio individual, bem como óxido nítrico e peroxinitrito, e pode também expurgar radicais peroxila-lipídios dentro de um compartimento lipofílico de uma membrana mitocondrial. 0 beta-caroteno é um excelente expurgador de radicais livres sob condições fisiológicas normais, presente em muitos tecidos.
Em adição à vitamina A, outros expurgadores de oxigênio individual podem também estar presentes na composição da presente invenção. Resveratrol é mais eficiente no expurgo de radicais de hidroxila do que a vitamina C, e a adição de resveratrol às vitaminas a pode ter efeito adicional. 0 uso de resveratrol em combinação com outros antioxidantes (mas não vitaminas A, C ou E, e não o vasodilatador magnésio ou qualquer outra substância vasodilatadora), é conhecido no estado da técnica para reduzir a perda auditiva relacionada a idade. Pelo menos um expurgador de oxigênio individual está presente na composição em uma quantidade biologicamente efetiva é definida ainda como uma quantidade que é suficiente para produzir um efeito aditivo em uma redução do deslocamento percentual mínimo, quando utilizado em combinação com outros antioxidantes e o magnésio. 0 efeito adicional, como utilizado aqui, refere-se a um efeito que é igual a ou maior que a soma dos efeitos dos componentes individuais. De modo a produzir o efeito aditivo, pelo menos um expurgador de oxigênio individual está tipicamente presente na composição em uma quantidade total de pelo menos 83 0 unidades internacionais (IU) , mais pref erivelmente de 830 a 120,000 IU, mais preferivelmente de cerca de 2,100 a 70,000 IU para uma dosagem para adulto.
A quantidade de vitamina a presente na composição é dependente da forma de vitamina A que é utilizada. Por exemplo, em uma configuração, a vitamina A está presente como retinol em uma quantidade de pelo menos 83 0 IU, mais preferivelmente de 830 a 10,000 IU, mais preferivelmente de 2,100 a 5,900 IU. Como conhecido do estado da técnica, uma conversão de IU em peso para vitamina A é de 3,33 IU/g. Assim, pelo menos 83 0 unidades internacionais (IU) é equivalente a pelo menos 0,25 mg de vitamina A, de 830 a 10,000 IU de vitamina A é equivalente a pelo menos 0,25 a 3 mg de vitamina A, e de 2,100 a 5,900 IU de vitamina A é equivalente de 0,62 a 1,8 mg de vitamina A.
Alternativamente, a vitamina a pode estar presente na composição como beta-caroteno, como oposição ao retinol. A atividade equivalente (RAE) para a conversão de retinol em beta-caroteno, que é uma pró-vitamina A carotenóide, é 1 mg a 12 mg. Em termos de conversão das quantidades representadas acima para a vitamina A presente na composição côo retinol para vitamina A presente na composição como beta-caroteno, uma quantidade total de pelo menos 3,0 mg ou pelo menos 10,000 unidades internacionais (IU) de vitamina A em beta-caroteno, mais pref erivelmente de cerca de 3,0 a 36 mg ou 10,000 a 120,000 IU de vitamina A como beta-caroteno, mais pref erivelmente de cerca de 7,5 a 21 mg ou 25,000 a 70,000 IU da vitamina a como beta-caroteno está tipicamente presente para uma dosagem de adultos.
Quantidades específicas da vitamina A presente na composição pode ser dependente do peso do corpo do mamífero. Em um exemplo específico, a quantidade de vitamina A presente como retinol na composição é de cerca de 0,0178 mg/kg de peso corpóreo. Assim, para um ser humano com um peso médio de 70 kg, a quantidade de vitamina A presente como retinol na composição pode ser de cerca de 1,25 mg, ou se a vitamina A estiver na forma de beta-caroteno, o beta-caroteno pode estar presente em uma quantidade de cerca de 15 mg.
Deve ser apreciado que, quando expurgadores adicionais de oxigênio individual tais como resveratrol estão presentes na composição em adição à vitamina A, a quantidade total dos expurgadores de oxigênio individual pode ser maior do que as faixas representadas acima para pelo menos um expurgador de oxigênio individual, tanto quanto para pelo menos um expurgador de oxigênio individual presente nas quantidades representadas acima. Em adição, outros expurgadores de oxigênio individual podem ser utilizados no lugar da vitamina a, tanto quanto a quantidade de pelo menos um expurgador de oxigênio individual está presente dentro das quantidades representadas acima. Quando presente, o resveratrol é tipicamente incluído na composição em uma quantidade de pelo menos 1 mg, mais tipicamente em uma quantidade de 10 mg a 1500 mg, mais tipicamente em uma quantidade de 15 mg a 1000 mg.
Enquanto que pelo menos um expurgador de oxigênio individual previne a formação inicial dos peróxidos de lipídio, o antioxidante doador reduz os radicais peroxila e inibe a propagação da peroxidação de lipídios que contribui para a perda auditiva. Mais especificamente, o antioxidante doador reage com e reduz os radicais peroxila e assim, serve na função de quebra de cadeia para inibir a propagação da peroxidação dos lipídios.
Como é evidente a partir da função de quebra de cadeia do antioxidante doador na peroxidação de lipídios, o antioxidante doador funciona dentro da membrana celular.
Um antioxidante doador específico que é contemplado para uso na composição do objetivo da presente invenção é a vitamina Ε. A vitamina E é um termo genérico para todos os derivados de tocol e tocotrienol com uma atividade biológica de alfa-tocoferol. A forma de dieta primária de vitamina E inclui a própria vitamina e alfa-tocoferol.
Trolox®, um análogo solúvel em água de alfa-tocoferol comercialmente disponível na Hoffman-Laroche, Ltd., da Basel, Suíça, é um agente pesquisado que é tipicamente utilizado como uma fonte de vitamina E.
O antioxidante doador está tipicamente presente na composição em uma quantidade de pelo menos 75 IU, mais preferivelmente de 75 IU a 1500 IU, mais preferivelmente de 150 IU a 800 IU. Como conhecido do estado da técnica, uma conversão de IU em peso para a vitamina E é 0,66 mg/IU. Assim, quando o antioxidante doador for vitamina
E, pelo menos 75 IU de vitamina E são equivalentes a pelo menos 50 mg de vitamina E, de 75 a 1500 IU de vitamina E são equivalentes a cerca de 50 a 1000 mg de vitamina E, e de cerca de 150 a 800 IU de vitamina E são equivalentes de cerca de 150 a 600 mg de vitamina E. Quando da quantidade e tipo de vitamina A, quantidades específicas de vitamina E presente na composição podem ser dependentes do peso do corpo do mamífero. Em uma exemplo específico, a quantidade de vitamina E presente na composição é de cerca de 2,6 mg/kg do peso corpóreo.
Assim, para um ser humano de peso médio de cerca de 70 kg, a quantidade de vitamina e presente na composição pode ser de cerca de 182 mg. Em adição à pelo menos um expurgador de oxigênio individual e a um antioxidante doador, a composição inclui ainda um terceiro antioxidante. Embora o terceiro antioxidante possa ser um expurgador de oxigênio individual, o terceiro antioxidante pode também ser um antioxidante que funciona através de um mecanismo diferente. Quando o terceiro antioxidante é um expurgador de oxigênio individual, pelo menos um expurgador de oxigênio individual está presente ainda na composição como um componente separado a partir do terceiro antioxidante, e está presente ainda na composição em quantidades representadas acima para pelo menos um expurgador de oxigênio individual, a composição resultante teria pelo menos dois expurgadores de oxigênio individuais.
0 terceiro antioxidante é tipicamente vitamina C, o qual é um expurgador de oxigênio individual e espécies de nitrogênio reativo. Deve ser apreciado que, apesar de o terceiro antioxidante é tipicamente vitamina C, outros antioxidantes pode ser utilizado ao invés da vitamina C, e os outros antioxidantes pode funcionar através de mecanismos diferentes do que aquele da vitamina C. 0 termo vitamina C é aplicado as substâncias que possuem atividade antiescorbútica e inclui dois componentes e seis sais: ácido L-ascórbico (comumente denominado de ácido ascórbico) e ácido L-deidroascórbico. Em adição aos já conhecidos como ácido ascórbico e ácido L-ascórbico, a vitamina C também é conhecida como 2,3-dideidro-L-treo- hexano-1, 4-lactona, 3-oxo-L-gulofuranolactona, ácido L- treo-hex-2-enonico, gama-lactona, ácido L-3-keto-treo- hexuronico lactona, ácido L-xilo-ascórbico e vitamina antiescorbútica. A vitamina C é conhecida como expurgador de ambas as espécies de oxigênio reativo e de nitrogênio reativo. Pode ser oxidizado por mais espécies de oxigênio e nitrogênio reativos, incluindo, superóxido, hidroxila, peroxila e radicais nitróxidos, bem como àquelas espécies de reativos não-radicais como oxigênio individual, peroxinitrito e hipoclorito. A vitamina C inibe assim, a peroxidação do lipídio, danos no DNA oxidativo, e danos na proteína oxidativa.
Ao contrário da vitamina A, a qual funciona melhor sob condições presentes em muitos tecidos, a vitamina C solúvel em água é um excelente expurgador de radicais livres em uma fase aquosa para assim, reduzir os radicais livres em um sítio diferente daquele da vitamina A. Mais especificamente, o ácido ascórbico funciona para reduzir os radicais livres no fluido tal como no fluido citoplasmático e/ou no sangue, antes dos radicais livres alcançarem a membrana celular.
O terceiro antioxidante está presente tipicamente em uma quantidade de pelo menos 4,000 IU, mais preferivelmente de 6,000 a 40,000, mais preferivelmente de 8,000 a 20,000 IU. Usando a vitamina C como um exemplo para conversão de IU em unidades em peso para o terceiro antioxidante, como conhecido da técnica, uma conversão de IU em peso para a vitamina C é 0,05 mg/lU. Assim, pelo menos 4,000 IU de vitamina C é iquivalente a pelo menos 2 00 mg de vitamina C, de 6,000 a 40,000 IU de vitamina C é equivalente a cerca de 3 00 a 2,000 mg de vitamina C, e de 8,000 a 20,000 IU de vitamina C é equivalente de cerca de 400 a 1,000 mg de vitamina C. Quando com vitaminas AeE, quantidades específicas da vitamina C ou outro terceiro antioxidante presente na composição pode ser dependente do peso do corpo do mamífero. Em um exemplo específico, a quantidade de vitamina C presente na composição é de cerca de 7,14 mg/kg do peso corpóreo. Assim, para um ser humano de peso médio de cerca de 7 0 kg, a quantidade de vitamina C presente na composição pode ser de cerca de 500 mg.
Como representado acima, a composição inclui ainda um vasodilatador. Tipicamente, o vasodilatador inclui magnésio, entretanto, o vasodilatador, para o propósito da presente invenção, pode incluir outros vasodilatadores em lugar de ou em adição ao magnésio, ou pode incluir apenas magnésio. Os vasodilatadores são conhecidos da técnica para uso na prevenção de perda auditiva. Os vasodilatadores incluindo magnésio previnem a diminuição no fluxo de sangue coclear e a oxigenação via mecanismos bioquímicos envolvendo mudanças na concentração de cálcio e prostaglantdinas. Fluxo de sangue coclear deficiente e perda de oxigenação são fatores que contribuem para a perda auditiva por causarem a morte celular nas células sensíveis do pêlo dentro da cóclea do ouvido. Tem sido descoberto que os vasodilatadores incluindo magnésio melhoram a eficácia da terapia imunosupressora ou a terapia de inalação de carbógeno na recuperação da súbita perda auditiva. Além disso, foi descoberto que a deficiência de magnésio conduz a uma permeabilidade aumentada do canal de cálcio e um maior influxo de cálcio dentro das células do pêlo coclear, uma liberação de glutamato aumentada, e uma excitotoxidade do nervo auditivo, cada uma destas participando de uma forma importante na saúde do ouvido médio e interno. Apesar de
os vasodilatadores serem conhecidos do estado da técnica, para tratar a perda auditiva, os vasodilatadores, especialmente magnésio, apresenta um efeito adicional inesperado quando combinado com quantidades biologicamente eficazes de pelo menos um expurgador de oxigênio individual, o antioxidante doador, e o terceiro antioxidante, especialmente quando pelo menos um expurgador de oxigênio individual é vitamina a, o antioxidante doador é vitamina E, e o terceiro antioxidante é vitamina C. 0 efeito adicional é maior do que apenas uma maior eficácia do componente para tratamento da perda auditiva, mas tipicamente maior do que a soma dos efeitos de cada dos componentes para tratamento da perda auditiva. Embora outros vasodilatadores além de magnésio sejam previstos para os propósitos da presente invenção, efeitos adicionais não são observados com todos os vasodilatadores. Por exemplo, beta-histina, que é um outro vasodilatador conhecido, não apresenta um efeito adicional como é evidente a partir da Figura 1. Efeitos específicos da composição da matéria da presente invenção no tratamento da perda auditiva estão descritos abaixo em detalhes adicionais.
0 vasodilatador incluindo magnésio incluem tipicamente um sal de magnésio ou um complexo do sal de magnésio, mais especificamente, sulfato de magnésio ou citrato de magnésio. Outros vasodilatadores incluem magnésio que pode ser apropriado para os propósitos da matéria objeto da presente invenção incluindo: acetato de magnésio, aspartato de magnésio, carbonato de magnésio, cloreto de magnésio, fumarato de magnésio, gluconato de magnésio, glicinato de magnésio, hidróxido de magnésio, lactato de magnésio, óxido de magnésio, salicilato de magnésio, estearato de magnésio, e sulfato de magnésio. Outros sais representativos incluem, mas não estão limitados a: hidrobrometo, hidrocloreto, bissulfato, nitrato, arginato, ascorbato, oxalato, valerato, oleato, palmitato, laurato, borato, benzoato, fosfato, tosilato, maleato, fumarato, succinato, taurato, tartrato, naftilato mesilato, glucoheptonato, lactobionato e sais de laurilsulfonato.
Tipicamente, o vasodilatador está presente na composição em uma quantidade de pelo menos 50 mg. Por exemplo, quando o vasodilatador é magnésio, o magnésio está tipicamente presente em uma quantidade de cerca de 50 a 450 mg, mais preferivelmente de 100 a 350 mg. Quando com vitaminas A, C, e E, quantidades específicas do vasodilatador presente na composição podem ser dependentes do peso corpóreo do mamífero. Em um exemplo específico, a quantidade de vasodilatador incluindo magnésio presente na composição é de cerca de 2,14 mg/kg do peso corpóreo. Assim, para um ser humano de peso médio de cerca de 70 kg, a quantidade de vasodilatador incluindo magnésio presente na composição pode ser de cerca de 150 mg.
Quantidades de componentes típicos incluídos na composição, entre quantidades maiores e mais preferidas, estão resumidas na tabela 1 abaixo:
<table>table see original document page 18</column></row><table>
Apesar de nenhum experimento ter sido realizado até o presente, as quantidades especificadas para os antioxidantes e os vasodilatadores correlatos, em termos de eficácia biológica, as quantidades utilizadas em estudos animais em porquinhos da índia. Além disso, deve ser apreciada que quantidades biologicamente eficazes de antioxidantes e vasodilatadores podem ser inferiores dentro das faixas acima para as crianças mais do que o ser humano médio, com base nas doses diárias recomendadas para os Estados Unidos permitiram níveis máximos e aplicáveis para crianças. É evidente com base nas dosagens típicas na tabela 1 com base no mg/kg.
Em adição aos antioxidantes e vasodilatadores, outros componentes podem também estar presentes na composição para tratamento da perda auditiva. Por exemplo, em uma configuração, a composição inclui ainda, um vitanolídeo.
Os vitanolídeos foram sugeridos para uso em aplicações anti-inflamatória, anti-tumoral, citotóxicas, e aplicações imunológicas. Um exemplo de um vitanolídeo específico que pode ser incluído na composição da matéria objeto da presente invenção é o vitanolídeo extraído a partir de plantas de lírio. O extrato é um antioxidante potente natural que pode ser eficaz na prevenção da morte celular no ouvido interno através da interrupção da via de morte-celular iniciada pelo término da influência do nervo auditivo. Quando incluído na composição, o vitanolídeo pode estar presente em uma quantidade de pelo menos 10 ppm, mais preferivelmente de 10 a 1000 ppm. Um método para tratar perda auditiva inclui a etapa de administrar internamente na composição da matéria objeto da presente invenção a um mamífero. Mais preferivelmente, a composição pode ser administrada oralmente ao mamífero, tal como na forma de um tablete, líquido, gel, etc..
Alternativamente, a composição pode ser administrada intravenosamente ao mamífero através de uma IV ou uma injeção da composição. A composição pode também ser administrada localmente ao redor da janela da membrana da cóclea. Como um exemplo específico, as vitaminas A, C1 e E o vasodilatador incluindo magnésio, e os componentes opcionais podem ser primeiro combinados para formar a composição, com a composição então sendo administrada ao mamífero. Alternativamente, as vitaminas A, CeE, o vasodilatador incluindo magnésio, e o outro componente opcional pode ser administrado, separadamente, no caso em que a composição se forma dentro do mamífero.
Para o propósito da matéria objeto da presente invenção, a perda auditiva é objetivamente medida em termos de diferenças nos limites de deslocamento. Nos estudos com os porquinhos da índia, a perda auditiva e a eficácia da composição da presente invenção para perda auditiva é medida como uma diferença média no limite de deslocamento obtido do limite de sensibilidade da linha de base em 4, 8, e 16 kHz, quando comparado a um controle não tratado, após a exposição a 120 decibéis - Níveis de ruído de oitavo de banda - SPL centrado em 4 kHz por cinco horas.
Diferenças amplas no limite de deslocamento estão relacionadas a uma menor perda auditiva e a uma maior eficácia da composição para tratamento da perda auditiva. Foi demonstrado que a perda das células dos pêlos está relacionada ao limite de deslocamento. Por exemplo, no ouvido dos porquinhos da índia que recuperam a partir de um limite temporário de deslocamento, danos morfológicos estão limitados a inclinação do estereocílio em uma terceira linha das células externas do pêlo (OHCs) enquanto que o ouvido dos animais com um limite de deslocamento permanente foi danificado nas três linhas de OHCs e, em alguns casos, as células dos pêlos internos (IHCs) , com danos por todo o comprimento dos estereocílios bem como do corpo da célula do pêlo.
A composição d apresente invenção é administrada ao mamífero dentro de três dias do trauma ao ouvido médio ou interno do mamífero de modo a aliviar o limite de deslocamento permanente. Deve ser apreciado que por administração da composição dentro de três dias do trauma, o tratamento antes do trauma é também contemplado através do método da presente invenção. Os dados obtidos dos estudos com animais indicam que um limite de deslocamento temporária medida 24 horas pós-trauma é bem correlacionado com o limite de deslocamento permanente. Dada a relação entre o limite de deslocamento temporário e o permanente, é clinicamente benéfico reduzir o deslocamento limite temporário. Assim, a composição é preferivelmente administrada dentro de um dia do trauma ao ouvido médio ou interno do mamífero. Deste modo, é esperado que um tratamento dentro de três dias com a composição da presente invenção seja substancialmente efetivo na minimização do deslocamento limite permanente quando do tratamento dentro de um dia.
O tratamento dentro três dias é mais apropriado quando o mamífero tem sustentado o trauma ao ouvido médio ou interno através de ruídos autos inesperados ou outros traumas. De modo ideal, a composição é administrada ao mamífero antes do trauma ao ouvido médio ou interno. 0 tratamento antes do trauma é mais praticável quando do mamífero é preparado para manter o trauma ao ouvido médio ou interno. Por exemplo, a composição pode ser administrada antes da restauração cirúrgica realizada no ouvido médio ou interno. Como um outro exemplo, se um técnico no assunto anima-se ou participa de um evento tal como um concerto de rock, a pessoa pode começar o tratamento antes de acontecer o trauma ao ouvido médio ou interno para alcançar os melhores resultados. Após o início da administração da composição, a composição é tipicamente administrada ao mamífero a cada dia por pelo menos cinco dias seguidos ao trauma ao ouvido médio ou ouvido interno do mamífero. Apesar dos excelentes resultados conseguidos com através do referido tratamento, dever ser entendido que outros regimes de tratamento podem também provê eficácia para o propósito da presente invenção.
Como descrito em detalhes nos Exemplos da seção abaixo, uma diferença média no deslocamento limite nos mamíferos a partir do deslocamento da sensibilidade limite da linha de base em 4, 8, e 16 kHz, quando comparado a um controle inalterado, é pelo menos 25 decibéis após a exposição aos 120 decibéis = Níveis de ruído em oitavo de banda - SPL em 4 kHz durante cinco dias. Mais especificamente, o deslocamento limite em mamíferos tratados com a composição da presente invenção é esperado ser de pelo menos 25 decibéis a menos que o deslocamento limite em mamíferos que são tratados com uma solução controle salina. Para obter àqueles resultados, a composição é administrada oralmente uma hora antes da exposição a um ruído e administrada novamente a cada dia por cinco dias subseqüentes à exposição ao ruído. O deslocamento limite é medido 10 dias após a exposição ao ruído usando o teste de resposta auditiva da haste do cérebro (ABR).
Resultados similares seriam antecipados usando outras medidas alternativas da função celular auditiva ou sensorial, tal como testes psicofísicos ou medidas de emissão otoacústica.
Em adição, a perda da célula do pêlo externa e a perda da célula do pêlo interno são ambas medidas na cóclea completa e em uma região de trauma da cóclea. Após o tratamento de acordo com o método da presente invenção, a perda da célula do pêlo em toda a cóclea é menor do que 10%, e a perda de célula do pêlo interno em toda a cóclea é menor que 5%. A perda de célula do pêlo externo na região de trauma é menor que 2 0%, enquanto a perda de célula de pêlo interno na região de trauma é menor que 10%.
Os exemplos a seguir, como apresentado aqui, pretendem ilustrar e não limitar a presente invenção.
EXEMPLO
O método de tratamento de perda auditiva com a composição da presente invenção é realizado em porquinhos da índia (NIH cepa de cultura exógena, 250-300 gramas) devido ao seu uso extensivo em pesquisas auditivas, incluindo estudos de perdas auditivas induzidas por ruído, e devido ao fato de ela prover um modelo similar ao humano em termos de desenvolvimento. Seis porquinhos da índia foram submetidos ao tratamento com a composição da presente invenção. De modo a determinar a eficácia da composição da presente invenção no tratamento da perda auditiva, a sensibilidade do deslocamento limite da linha de base dos porquinhos da índia foi medido binariamente usando o teste da resposta auditiva da haste do cérebro em 4, 8, e 16 kHz. Os porquinhos da índia foram então tratados com vitamina A, C, E, e magnésio (relacionados na Figura 2 como "ACEMg") nas quantidades mostradas na Tabela 2. As quantidades mostradas na tabela 2 são aproximadamente doses humanas 10 vezes esperadas com base em um metabolismo mais rápido dos porquinhos da índia em relação aos humanos.
<table>table see original document page 22</column></row><table> Uma hora mais tarde, os porquinhos da índia são expostos a 12 0 dB - Níveis de ruído em oitavo de Banda - SPL centrado em 4 kHz durante 5 horas para causar trauma ou ouvido médio ou ao interno dos porquinhos da índia. 0 ruído é suficiente para causar um deslocamento limite permanente, ou seja, uma perda auditiva permanente. A composição da presente invenção é administrada imediatamente após-exposição ao ruído, e novamente a cada dia durante 5 dias após o trauma. Dez dias depois do trauma, a sensibilidade auditiva é medida usando ABR. Para o teste ABR, os porquinhos da índia são anestesiados com 4 0 mg/kg de Cetamina e 10 mg/kg de Xilazina e colocados em uma almofada aquecida em uma câmara de som atenuado. O deslocamento ABR foi determinado em 4,8 e 16 kHz de freqüência. Para testar o deslocamento ABR, tons de explosão de 10 ms de duração (0,5 ms elevação/queda) foram apresentados em uma taxa de 17/segundos. Até 1024 respostas serem colhidas e calculadas as médias para cada freqüência de sinal para prover uma medida do deslocamento limite em cada freqüência. A estimativa de perda auditiva permanente, mostrada na figura 2 em termos de deslocamento limite em decibéis, foi calculada como a média de deslocamento limite através do ouvido e através de freqüências.
Após o teste ABR, os porquinhos da índia foram profundamente anestesiados e decapitados. O osso temporal foi rapidamente removido, abertos para dissecar e fixados com 4% de paraformaldeído. O dia seguinte, uma cápsula ótico, parede lateral, e membrana tectorial foram removidos, e um áster ossudo é cuidadosamente descolado.
0 órgão do tecido Corti, ligado ao áster, é permeabilizado com 0,3% de Triton-X e incubado com rodamina faloidina diluuída 1:100 em salina tamponada com fosfato (30 minutos). Após a lavagem do tecido, o retorno individual ao órgão de Corti foi dissecado, montado em lâminas de microscópio, e examinado e fotografado usando um microscópio epifluorescência Leica DMRB. A contagem das células dos pêlos foi conduzida, e citococleogrmas foram preparados conforme conhecido do estado da técnica. Referindo-se às figuras 3 e 4, as porcentagens de perda de células do pêlo interno (IHC) e das células dos pêlos externos (OHC) foram determinadas com base na contagem de células do pêlo.
EXEMPLO COMPARATIVO 1
Os porquinhos da índia foram tratados com outras composições de modo a comparar a eficácia das composições da presente invenção com as outras composições. Por exemplo, os porquinhos da índia são tratados separadamente do mesmo modo como especificado acima no Exemplo com a composição a seguir: uma composição salina (NaCl) como um controle, uma composição incluindo apenas sulfato de magnésio (2,85 mmol/kg) como o ingrediente ativo, ou uma composição incluindo apenas vitaminas A (2,1 mg/kg de beta-caroteno), vitamina C (71,4 mg/kg - ácido ascórbico), e vitamina E (26 mg/kg Trolox®) ("ACE") como o ingrediente ativo. Os porquinhos da índia são submetidos ao mesmo teste de ABR, e os componentes do ouvido foram dissecados como descrito acima no Exemplo para prover a informação do deslocamento limite e da perda das células do pêlo. O deslocamento limite e a perda das células do pêlo resultante do tratamento com outras composições estão mostrados nas figuras 2-4.
EXEMPLO COMPARATIVO 2
Os porquinhos da índia foram tratados com uma composição de vitamina E sozinha, beta-histina sozinha, ou uma combinação de beta-histina e vitamina E, para determinar se os resultados similares àqueles conseguidos com a composição da presente invenção incluindo magnésio que pode ser conseguido pela substituição de beta-histina por magnésio. Os resultados do tratamento com vitamina E, beta-histina, ou uma combinação de vitamina E e beta- histina são mostrados na Figura 1. Em um exemplo comparativo, os porquinhos da índia são tratados uma vez ao dia com 100 mg/kg de vitamina e (Trolox®), 30 mg/kg de beta-histina, ou uma combinação de 100 mg/kg de Trolox® e 30 mg/kg de beta-histina. Cinco porquinhos da índia foram tratados com cada uma das diferentes composições. Em um outro exemplo comparativo, quatro porquinhos da índia são tratados separadamente com 50 mg/kg de Trolox® duas vezes ao dia, 18 mg/kg beta-histina (uma dose imediatamente após a pré-exposição ao ruído), ou uma combinação de 50 mg/kg de vitamina E (Trolox®) e 18 mg/kg de beta-histina (N=4 animais por grupo). Dados controle são de 18 animais tratados com salina liberada tanto em IP (N=ll) ou IV (N=7). Os porquinhos da índia são submetidos ao teste ABR, e os componentes do ouvido são dissecados, ambos como descritos acima no Exemplo, para prover a informação do deslocamento limite e da perda da célula do pêlo.
Referindo-se às figuras 2-4, o efeito no tratamento da perda auditiva com a composição da presente invenção incluindo vitaminas A, C, E, e magnésio é claramente maior do que àquele associado com a eficácia de uma composição incluindo apenas magnésio ou apenas vitaminas A, C, e E. Mais especificamente, o tratamento com a composição da presente invenção resulta em um deslocamento limite do que 2 0 decibéis, quando calculado a média acima de todas as freqüências, embora o tratamento com uma solução de salina controle resulta em um deslocamento limite de cerca de 45. Como tal, uma diferença no deslocamento limite entre o tratamento com a composição da presente invenção e o tratamento com a solução salina controle é acima de 25 decibéis. Além disso, a diferença no deslocamento limite entre a composição da presente invenção e a solução salina controle é maior do que a soma das diferenças no deslocamento limite para o magnésio ou a vitamina A, C, e E sozinhas e a solução salina controle. Especificamente, a soma das diferenças no deslocamento limite para o magnésio e a vitamina A, C e E sozinhas é de cerca de 12 decibéis. Consistente com a redução na perda auditiva induzida por ruído, contagem de células no pêlo revelou uma redução significativa na morte das células sensoriais com Mg ou A, C, e E, com uma proteção maior observada após o tratamento com as vitaminas A, C, E, e magnésio.
Mais especificamente, menos que 10% de células de pêlo externas e menos que 5% de células de pêlo internas em toda a cóclea foram perdidas após o tratamento com a composição da presente invenção incluindo Mg e vitaminas A, C, e E. Na região do trauma, menos que 2 0% de células de pêlo externa e menos que 10% de células de pêlo internas em toda a cóclea foram perdidas após o tratamento com a composição da presente invenção incluindo Mg e vitaminas A, CeE. Como mostrado pelas figuras 3 e 4, a redução na porcentagem de perda das células do pêlo após o tratamento com a composição da presente invenção é maior do que a soma da redução na perda das células do pêlo observada quando o magnésio ou as vitaminas A, C, e E são utilizadas sozinhas quando comparado â porcentagem de perda de células de pêlo quando a salina é utilizada.
Além disso, como mostrado na figura 1, os exemplos comparativos nos quais a vitamina e, beta-histina, ou uma combinação de vitamina E e beta-histina são utilizados não exibe claramente o mesmo efeito aditivo que é observado quando o magnésio é utilizado como o vasodilatador em combinação com as vitaminas. Mais especificamente, a salina tratada nos animais controle (barra branca) mostram uma maior perda auditiva 10 dias após o ruído. Os animais tratados com a vitamina E (Trolox®: 100 mg/kg uma vez ao dia ou 50 mg/kg duas vezes ao dia, barras alinhadas na diagonal) tiveram menor perda auditiva permanente do que os animais controle. Animais tratados com o vasodilatador beta-histina (30 mg/kg, uma vez ao dia, barras listradas verticais; ou uma dose 18 mg/kg pré-ruído, barras listradas horizontais) mostram aproximadamente a mesma quantidade de proteção que àqueles tratados com a vitamina E. Os animais tratados com uma combinação de vitamina E e beta-histina (50 mg/kg de Trolox® duas vezes ao dia + 18 mg/kg de beta-histina duas vezes ao dia ou 100 mg/kg de Trolox® uma vez/dia + 30 mg/kg de beta-histina uma vez/dia; ver as barras escuras com diagonal branca hachurada) não tiveram qualquer proteção adicional além daquela de cada um dos agentes únicos sozinhos. Deste modo, nem todos os vasodilatadores são tão efetivos quanto magnésio em combinação com as vitaminas.
A invenção foi descrita de uma forma ilustrativa, e deve ser entendido que a terminologia que foi utilizada aqui deve ser entendida na natureza das palavras da descrição e não como uma forma limitativa. Obviamente, muitas modificações e variações da presente invenção são possíveis em função dos ensinamentos acima, e a invenção pode ser praticada de outra forma além daquela especificamente descrita.

Claims (15)

1. Composição para tratar perda auditiva, incluindo componentes que funcionam através de diferentes mecanismos biológicos, para tratar perda auditiva e prover um efeito adicional que é maior que a soma do efeito dos componentes individuais, a referida composição caracterizada pelo fato de compreender pelo menos um expurgador de oxigênio individual, dito expurgador sendo definido ainda, como vitamina A, presente como beta- caroteno quando o referido beta-caroteno estiver presente em uma quantidade de 3,0 a 21 mg para reduzir os radicais livres que contribuem para a perda auditiva; um antioxidante doador, presente em uma quantidade de pelo menos 75 IU para reduzir os radicais peroxil e inibir a propagação da peroxidação do lipidio que contribui para a perda auditiva; um terceiro antioxidante, presente em uma quantidade de pelo menos 4,000 IU; e um vaso-dilatador, presente em uma quantidade de pelo menos 50 mg para prevenir a diminuição do fluxo de sangue coclear e da oxigenação que contribuem para a perda auditiva.
2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de produzir uma diferença média na troca limiar em mamíferos a partir do limite de sensibilidade na linha de base de 4, 8 e 16 kHz, quando comparado a um controle não tratado, de pelo menos 25 decibéis após exposição a 120 decibéis - Níveis de ruído de oitavo de Banda - SPL centrado em 4 kHz por cinco horas.
3. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizada pelo fato de o referido terceiro antioxidante ser definido ainda como vitamina C.
4. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2 ou 3, caracterizada pelo fato de um dos referidos expurgadores de oxigênio individual ser definido adicionalmente como resveratrol.
5. Composição, de acordo com a reivindicação 4, caracterizada pelo fato de dito resveratrol estar presente em uma quantidade de 15 a 1000 mg.
6. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de o referido antioxidante doador ser definido ainda como vitamina E.
7. Composição, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de a referida vitamina E ser definida ainda como um análogo solúvel em água de alfa- tocoferal.
8. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de dito vaso-dilatador compreender magnésio.
9. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 8, caracterizada pelo fato de compreender ainda um vitanolideo.
10. Composição, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de o referido vitanolideo estar presente em uma quantidade de 10 a 1000 ppm.
11. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 10, caracterizada pelo fato de ser utilizada para tratar perdas auditivas.
12. Composição, de acordo com a reivindicação 11, caracterizada pelo fato de ser para tratar perda auditiva resultante de trauma no ouvido médio ou interno de um mamífero antes de ou dentro de três dias seguido o trauma.
13. Composição, de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de ser para tratar perda auditiva provendo um efeito aditivo que é igual a ou maior que a soma dos efeitos de cada componente individual.
14. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 13, caracterizada pelo fato de ser na forma de um tablete, um líquido ou um gel.
15. Método para formar uma composição para tratar perda auditiva, caracterizado pelo fato de compreender: pelo menos um expurgador de oxigênio individual, dito expurgador sendo definido ainda como vitamina A presente como beta-caroteno para reduzir os radicais livres que contribuem para a perda auditiva; um antioxidante doador para reduzir os radicais peroxil e inibir a propagação da peroxidação do lipidio que contribui para a perda auditiva; um terceiro antioxidante; e um vaso-dilatador para prevenir a diminuição do fluxo de sangue coclear e da oxigenação que contribuem para a perda auditiva.
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