BRPI0709049A2 - composto inibidor da interação entre mdm2 e p53, composição farmacêutica, processo para preparar a referida composição farmacêutica, uso do composto, combinação, e processo para preparar o referido composto - Google Patents

Abstract

COMPOSTO INIBIDOR DA INTERAçãO ENTRE MDM2 E P53, COMPOSIçãO FARMACêUTICA, PROCESSO PARA PREPARAR A REFERIDA COMPOSIçãO FARMACêUTICA, USO DO COMPOSTO, COMBINAçãO, E PROCESSO PARA PREPARAR O REFERIDO COMPOSTO. A presente invenção refere-se a compostos de fórmula (I), seu uso como um inibidor de uma interação de p53-MDM2 bem como composições farmacêuticas compreendendo os referidos compostos de fórmula (I) em que n, m, p, s, t, R^ 1^, R^ 2^, A e Z têm significados definidos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "INIBIDORESDA INTERAÇÃO ENTRE MDM2 E P53".

Campo da invenção

A presente invenção refere-se a compostos e composições con-tendo os referidos compostos que agem como inibidores da interação entreMDM2 e p53. Além disso, a presente invenção fornece processos para apreparação dos inibidores descritos, composições compreendendo-os e mé-todos de utilizá-los, por exemplo, como um medicamento.

p53 é uma proteína supressora de tumor que desempenha umpapel principal no regulamento do equilíbrio entre a proliferação celular einterrupção de crescimento celular/apoptose. Sob condições normais, a meiavida de p53 é muito curta e conseqüentemente, o nível de p53 em células ébaixo. Entretanto, em resposta ao dano de DNA celular ou estresse celular(por exemplo, ativação de oncogene, erosão de telômero, hipoxia), os níveisde p53 aumentam. Este aumento em níveis de p53 leva à ativação da trans-crição de vários genes que dirigem a célula a interrupção de crescimento ounos processos de apoptose. Desse modo, uma função importante de p53 éprevenir a proliferação descontrolada de células danificadas e desse modoproteger o organismo do desenvolvimento de câncer.

MDM2 é um regulador negativo fundamental de função de p53.Forma uma alça auto-reguladora negativa ligando-se ao domínio de transati-vação de terminal de amino de p53 e desse modo MDM2 igualmente inibe acapacidade de p53 ativar a transcrição e alveja p53 para degradação proteo-lítica. Sob condições normais, esta alça reguladora é responsável por manteros baixos níveis de p53. Entretanto, em tumores com p53 tipo silvestre, aconcentração de equilíbrio de p53 ativa pode ser aumentada antagonizando-se a interação entre MDM2 e p53. Isto resultará na restauração dos efeitosantiproliferativos e pró-apoptóticos mediados por p53 em tais células de tumor.

MDM2 é um proto-oncogene celular. A super expressão deMDM2 foi observada em uma faixa de cânceres. MDM2 é superexpressadoem uma variedade de tumores devido à amplificação de gene ou transcriçãoou translação aumentadas. O mecanismo pelo qual a amplificação de MDM2promove a tumorigênese está pelo menos em parte relacionado a sua inte-ração com p53. Em células que superexpressam MDM2, a função protetorade p53 é bloqueada e desse modo as células não são capazes de responderao dano ao DNA ou estresse celular aumentando-se os níveis de p53, le-vando à interrupção do crescimento celular e/ou apoptose. Desse modo, de-pois do dano ao DNA e/ou estresse celular, células que superexpressam oMDM2 estão livres para continuar a proliferar-se e assumir um fenótipo tu-morigênico. Sob estas condições, o rompimento da interação de p53 eMDM2 liberariam a p53 e, desse modo, permitiriam os sinais normais de in-terrupção de crescimento e/ou apoptose funcionar.

MDM2 pode da mesma forma ter funções separadas além dainibição de p53. Por exemplo, foi mostrado que MDM2 interage diretamentecom o fator de transcrição regulado por pRb E2F1/DP1. Esta interação podeser crucial para as atividades oncogênicas independentes de p53 de MDM2.Um domínio de E2F1 mostra similaridade surpreendente ao domínio de liga-ção de MDM2 de p53. Visto que as interações de MDM2 com ambos p53 eE2F1 localizam-se ao mesmo sítio de ligação em MDM2, pode ser esperadoque antagonistas de MDM2/p53 não apenas ativem p53 celular, porém, damesma forma modulem atividades de E2F1, que são geralmente desregula-das em células de tumor.

Da mesma forma, a eficácia terapêutica de agentes de danifica-ção de DNA atualmente utilizados (quimioterapia e radioterapia), pode serlimitada através do regulamento negativo de p53 por MDM2. Desse modo,se a inibição de realimentação de MDM2 de p53 for interrompida, um au-mento em níveis de p53 funcionais aumentará a eficácia terapêutica de taisagentes reestabelecendo-se a função de p53 tipo silvestre que leva à apop-tose e/ou reversão de resistência de fármaco associada a p53. Foi demons-trado que combinar a inibição de MDM2 e tratamentos prejudiciais de DNA invivo leva aos efeitos antitumor sinergísticos (Vousden K.H., Cell, Vol. 103,691-694, 2000).

Desse modo, o rompimento da interação de MDM2 e p53 ofere-ce uma abordagem para intervenção terapêutica em tumores com p53 tiposilvestre, poderia ainda exibir efeitos antiproliferativos em células de tumorque são desprovidas de p53 funcional e, além disso, podem sensibilizar cé-lulas tumorigênicas para quimioterapia e radioterapia.

Antecedentes da invenção

JP 11130750, publicada em 18 de maio de 1999, descreve entreoutros, derivados de fenilaminocarbonilindolila substituídas como antagonis-tas do receptor de 5-HT.

EP1129074, publicada em 18 de maio de 2000, descreve ami-das de ácido antranílico como inibidores de receptores de fator de cresci-mento endotelial vascular (VEGFR) e úteis no tratamento de distúrbios angi-ogênicos.

EP1317443, publicada em 21 de março de 2002, descreve deri-vados de terc-amina tricíclicos, úteis como moduladores de CXCR4 ou Ο-CR5 do receptor de quimiocina para tratar vírus da imunodeficiência humanae vírus da imunodeficiência felina.

EP1379239, publicada em 10 de outubro de 2002, descreve N-(2-ariletil)benzilaminas como antagonistas do receptor de 5-HT6.

WOOO/15357, publicado em 23 de março de 2000, fornece deri-vados de piperazina-4-fenila como inibidores da interação entre MDM2 ep53. EP1137418, publicada em 8 de junho de 2000, fornece compostos tricí-clicos para reestabelecer estabilidade conformacional de uma proteína dafamília de p53.

EP1443937, publicada em 22 de maio de 2003, descreve 1, 4-benzodiazepinas substituídas e os usos destas como inibidores das intera-ções de MDM2-p53.

EP1458380, publicada em 26 de junho de 2003, fornece cis-2,4,5-trifenil-imidazolonas que inibe a interação de proteína de MDM2 compeptídeos similares à p53 e tem atividade antiproliferativa.

EP1519932, publicada em 15 de janeiro de 2004, descrevecompostos de bisarilsulfonamida que ligam-se a MDM2 e podem ser utiliza-dos na terapia de câncer.Continua a ser uma necessidade quanto as moléculas pequenaseficazes e potentes que inibem as interações entre MDM2 e p53.

Os compostos da presente invenção diferem-se da técnica ante-rior na estrutura, em sua atividade farmacológica e/ou na potência farmaco-lógica.

Descrição da invenção

A presente invenção fornece compostos, composições para, emétodos de, inibir as interações entre MDM2 e p53 para tratar o câncer. A-lém disso, os compostos e composições da presente invenção são úteis norealce da eficácia da quimioterapia e radioterapia.

Esta invenção diz respeito aos compostos de fórmula (I)

<formula>formula see original document page 5</formula>

uma forma de N-óxido, um sal de adição ou uma forma estereo-quimicamente isomérica destes, em que

m é 0, 1, ou 2 e quando m for 0, em seguida, uma ligação diretaé pretendida;

η é 0, 1, 2, 3 ou 4 e quando η for 0, em seguida, uma ligaçãodireta é pretendida;

ρ é 0, ou 1 e quando ρ for 0, em seguida, uma ligação direta épretendida;

s é 0, ou 1 e quando s for 0, em seguida, uma ligação direta épretendida;

t é 0 ou 1 e quando t for 0, em seguida, uma ligação direta é pre-tendida;

R1 e R2 são cada qual independentemente hidrogênio, halo, Ci-6alquila, C1^alquiloxi,

arilCi.6alquilóxi, heteroarilCi.6alquilóxi( feniltio, hidróxiCi.6alquilcarbonila,

Ci-çalquila substituída com um substituinte selecionado a partirde amino, arila e heteroarila; ou

C3-7Cicloalquila substituída com um substituinte selecionado apartir de amino, arila e heteroarila;

A é um radical selecionado a partir de

<formula>formula see original document page 6</formula><formula>formula see original document page 7</formula>

em que

R4 e R5 é cada qual independentemente selecionado a partir dehidrogênio, halo, C1-6alquila, polialoC1-6alquila, ciano, cianoC1-6alquila, hidró-xiC1-6alquila, hidróxi, amino, C1-6alquilóxi, C1-6alquilcarbonila, metilsulfonila-min, arila ou heteroarila;

Z é um radical selecionado a partir de

formula>formula see original document page 7</formula>

em que

R6 ou R7 é cada qual independentemente selecionado a partir dehidrogênio, halo, hidróxi, amino, C1- 6alquila, nitro, polialoC1- 6alquila, ciano,cianoC1-6alquila, tetrazoloC1- 6alquila, arila, heteroarila, arilC1- 6alquila, hetero-arilC1- 6alquila, aril(hidróxi)C1- 6alquila, heteroaril(hidróxi)C1- 6alquila, arilcarbo-nila, heteroarilcarbonila, C1- 6alquilcarbonila, arilC1- 6alquilcarbonila, heteroa-rilC1- 6alquilcarbonila, C1- 6alquilóxi, C3-7cicloalquilcarbonila, C3-7Cicloalquil(hidróxi)C1- 6alquila, arilC1- 6alquilóxiC1- 6alquila, C1- 6alquilóxiC1-15 6alquilóxiC1- 6alquila, C1- 6alquilcarbonilóxiC1- 6alquila, C1- 6alquiloxicarbonilC1.6alquilóxiC1- 6alquila, hidróxiC1- 6alquilóxiC1- 6alquila, C1- 6alquiloxicarbonilC2-6alquenila, C1- 6alquilóxiC1- 6alquila, C1- 6alquiloxicarbonila, C1-6alquilcarbonilóxi, aminocarbonila, hidróxiC-i^alquila, aminoC1- 6alquila, hidro-xicarbonila, hidroxicarbonilCi-6alquila e -(CH2)v-(C(=O)r)-(CHR10)u-NR8R9; emque

ν é 0, 1, 2, 3, 4, 5, ou 6 e quando ν for 0, em seguida, uma liga-ção direta é pretendida;

r é 0, ou 1 e quando r for 0, em seguida, uma ligação direta épretendida;

u é 0, 1, 2, 3, 4, 5, ou 6 e quando u for 0, em seguida, uma liga-ção direta é pretendida;

R10 é hidrogênio ou Ci-6alquila;

R8 e R9 são cada qual independentemente selecionado a partirde hidrogênio, Ci-i2alquila,

C1-6alquilcarbonila, Ci-6alquilsulfonila, arilCi.6alquilcarbonila,C3.7cicloalquila, C3-7Cicloalquilcarbonila, -(CH2)k-NR11R12, Ci-12alquila substituída com um substituinte selecionado a partir de hidróxi, hi-droxicarbonila, ciano,

C1-6alquiloxicarbonila, Ci-6alquilóxi, arila ou heteroarila; ouC3-7Cicloalquila substituída com um substituinte selecionado apartir de hidróxi, Ci-6alquilóxi, arila, amino, arilCi-6alquila, heteroarila ou hete-roarilCi-6alquila; ou

R8 e R9 juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligadospodem opcionalmente formar uma morfolinila, piperidinila, pirrolidinila, pipe-razinila, ou piperazinila substituída com um substituinte selecionado a partirde Ci-6alquila, arilCi.6alquila, arilCi-6alquiloxicarbonila, heteroarilCi-6alquila,C3.7cicloalquila e C3.7cicloalquilCi.6alquila; em que

k é 0, 1, 2, 3, 4, 5, ou 6 e quando k for 0, em seguida, uma liga-ção direta é pretendida;

R11 e R12 são cada qual independentemente selecionado a partirde hidrogênio, Ci-6alquila, arilC-i-ealquiloxicarbonila, C3.7cicloalquila, C-i-i2alquila substituída com um substituinte selecionado a partir de hidróxi, C-i-6alquilóxi, arila, e heteroarila; e C3.7cicloalquila substituída com um substitu-inte selecionado a partir de hidróxi, Ci-6alquilóxi, arila, arilCi-6alquila, hetero-arila, e heteroarilCi-6alquila; ouR11 e R12 juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligadospodem opcionalmente formar uma morfolinila, uma piperazinila ou uma pipe-razinila substituída com Ci-6alquiloxicarbonila;arila é fenila ou naftalenila;

cada fenila ou naftalenila podem opcionalmente ser substituídacom um, dois ou três substituintes cada qual independentemente seleciona-do a partir de halo, hidróxi, hidróxiC1-6alquila, C1-6alquila, amino, polialoC1-6alquila e C1-6alquilóxi; e

cada fenila ou naftalenila pode opcionalmente ser substituídacom um radical bivalente selecionado a partir de metilenodióxi e etilenodióxi;

heteroarila é piridinila, indolila, quinolinila, imidazolila, furanila,tienila, oxadiazolila, tetrazolila, benzofuranila ou tetrahidrofuranila;

cada piridinila, indolila, quinolinila, imidazolila, furanila, tienila,oxadiazolila, tetrazolila, benzofuranila, ou tetrahidrofuranila pode opcional-mente ser substituída com um, dois ou três substituintes cada qual indepen-dentemente selecionado a partir de halo, hidróxi, C1-6alquila, amino, polia-loC1-6alquila, arila, arilC1-6alquila ou C1-6alquilóxi; e

cada piridinila, indolila, quinolinila, imidazolila, furanila, tienila,benzofuranila, ou tetrahidrofuranila pode opcionalmente ser substituída comum radical bivalente selecionado a partir de metilenodióxi ou etilenodióxi.

Os compostos da fórmula (I) podem da mesma forma existir emsuas formas tautoméricas. Tais formas embora não explicitamente indicadasna fórmula anterior são pretendidas estar incluídas dentro do escopo da pre-sente invenção.

Vários termos utilizados nas definições anteriores e em seguidasão explicados abaixo. Estes termos são, às vezes, utilizados como tais ouem termos compostos.

Quando utilizado nas definições anteriores e em seguida, halo égenérico a flúor, cloro, bromo e iodo; C1-Balquila define radicais de hidrocar-boneto saturados de cadeia linear e ramificada tendo de 1 a 6 átomos decarbono tal como, por exemplo, metila, etila, propila, butila, pentila, hexila, 1-metiletila, 2-metilpropila, 2-metil-butila, 2-metilpentila e similares; hidróxiC,.6alquila define um substituinte de hidróxi em radicais de hidrocarboneto satu-rados de cadeia linear ou ramificada tendo de 1 a 6 átomos de carbono; tria-Iometila define metila contendo três substituintes de halo diferentes ou idên-ticos, por exemplo, trifluorometila; C3-7Cicloalquila inclui grupos hidrocarbone-tos cíclicos tendo de 3 a 10 carbonos, tal como ciclopropila, ciclobutila, ciclo-pentila, ciclopentenila, cicloexila, cicloexenila, cicloeptila, e similares.

O termo "sal de adição" compreende os sais que os compostosda fórmula (I) podem ser capazes de formar com bases orgânicas ou inorgâ-nicas tal como aminas, bases de metal de álcali e bases de metal alcalino-terroso, ou bases de amônio quaternárias, ou com ácidos orgânicos ou inor-gânicos, tal como ácidos minerais, ácidos sulfônicos, ácidos carboxílicos ouácidos contendo fósforo.

O termo "sal de adição" também compreende sais farmaceuti-camente aceitáveis, complexos de metal e solvatos e os sais destes, que oscompostos da fórmula (I) são capazes de formar.

O termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" significa ácido far-maceuticamente aceitável ou sais de adição de base. O ácido farmaceuti-camente aceitável ou sais de adição de base como aqui acima mencionadosão pretendidos compreender as formas de sal de adição de base não-tóxicas e de ácido não-tóxico terapeuticamente ativo que os compostos dafórmula (I) são capazes de formar. Os compostos da fórmula (I) que têm pro-priedades básicas podem ser convertidos em seus sais de adição de ácidofarmaceuticamente aceitáveis tratando-se a referida forma de base com umácido apropriado. Ácidos apropriados compreendem, por exemplo, ácidosinorgânicos tal como ácidos hidroálicos, por exemplo, ácido hidroclórico ouhidrobrômico; sulfúrico; nítrico; fosfórico e ácidos similares; ou ácidos orgâ-nicos tal como, por exemplo, acético, propanóico, hidroxiacético, lático, pirú-vico, oxálico, malônico, sucínico (isto é ácido butanodióico), maléico, fumári-co, málico, tartárico, cítrico, metanossulfônico, etanossulfônico, benzenossul-fônico, p-toluenossulfônico, ciclâmico, salicílico, p-aminosalicílico, pamóico eácidos similares.

Os compostos da fórmula (I) que têm propriedades ácidas po-dem ser convertidos em seus sais de adição de base farmaceuticamenteaceitáveis tratando-se a referida forma de ácido com uma base orgânica ouinorgânica adequada. Formas de sal de base apropriadas compreendem,por exemplo, os sais de amônio, os sais de metal alcalino-terroso e álcali,por exemplo, os sais de lítio, sódio, potássio, magnésio, cálcio e similares,sais com bases orgânicas, por exemplo, a benzatina, N-metil-D-glicamina,sais de hidrabamina, e sais com aminoácidos tais como, por exemplo, argi-nina, Iisina e similares.

Os termos sal de adição de ácido ou base da mesma formacompreendem os hidratos e as formas de adição de solvente que os com-postos da fórmula (I) são capazes de formar. Exemplos de tais formas sãopor exemplo, hidratos, alcoolatos e similares.

O termo "complexos de metal" significa um complexo formadoentre um composto da fórmula (I) e um ou mais sal de metal orgânico ouinorgânico ou sais. Exemplos dos referidos sais orgânicos ou inorgânicoscompreendem as halogenidas, nitratos, sulfatos, fosfatos, acetatos, trifluoro-acetatos, tricloroacetatos, propionatos, tartaratos, sulfonatos, por exemplo,metilsulfonatos, 4-metilfenilsulfonatos, salicilatos, benzoatos e similares dosmetais do segundo grupo principal do sistema periódico, por exemplo, ossais de magnésio ou cálcio, do terceiro ou quarto grupo principal, por exem-plo, alumínio, estanho, chumbo bem como o primeiro ao oitavo grupos detransição do sistema periódico tais como, por exemplo, cromo, manganês,ferro, cobalto, níquel, cobre, zinco e similares.

O termo "formas estereoquimicamente isoméricas de compostosda fórmula (I)", como aqui acima utilizado, define todos os possíveis com-postos feitos do mesmo átomo ligado pela mesma seqüência de ligaçõesporém tendo estruturas tridimensionais diferentes que não são intercambiá-veis, que os compostos da fórmula (I) podem possuir. A menos que de outramaneira mencionado ou indicado, a designação química de um compostoabrange a mistura de todas as possíveis formas estereoquimicamente iso-méricas que o referido composto pode possuir. A referida mistura pode con-ter todos os diastereômeros -e/ou enantiômeros da estrutura molecular bási-ca do referido composto. Todas as formas estereoquimicamente isoméricasdos compostos da fórmula (I) ambas na forma pura ou em mistura umas comas outras são pretendidas estar abrangidas dentro do escopo da presenteinvenção.

De interesse especial são aqueles compostos de fórmula (I) quesão estereoquimicamente puros.

Formas estereoisoméricas puras dos compostos e intermediá-rios como mencionado aqui são definidas como isômeros substancialmentelivres de outras formas enantioméricas ou diastereoméricas da mesma estru-tura molecular básica dos referidos compostos ou intermediários. Em parti-cular, o termo "estereoisomericamente puro" diz respeito a compostos ouintermediários tendo um excesso estereoisomérico de pelo menos 80% (istoé, mínimo de 90% de um isômero e máximo de 10% dos outros possíveisisômeros) até um excesso estereoisomérico de 100% (isto é, 100% de umisômero e nenhum do outro), mais em particular, compostos ou intermediá-rios tendo um excesso estereoisomérico de 90% até 100%, ainda mais emparticular tendo um excesso estereoisomérico de 94% até 100% e mais emparticular tendo um excesso estereoisomérico de 97% até 100%. Os termos"enantiomericamente puro" e "diastereomericamente puro" deveriam ser en-tendidos de uma maneira similar, porém em seguida tendo em consideraçãoo excesso enantiomérico, respectivamente o excesso diastereomérico damistura em questão.

As formas tautoméricas dos compostos de fórmula (I) são pre-tendidas compreender aqueles compostos de fórmula (I) em que, por exem-pio, um grupo enol é convertido em um grupo ceto (tautomerismo de ceto-enol).

As formas de /V-óxido dos compostos de fórmula (I) são preten-didas compreender aqueles compostos de fórmula (I) em que um ou váriosátomos de nitrogênio são oxidados o assim chamado /V-óxido, particular-mente aqueles /V-óxidos em que um ou mais dentre os nitrogênios de piperi-dina, piperazina ou piridazinila são N-oxidados.

Os compostos de fórmula (I) podem ser convertidos às formasde N-óxido correspondentes seguindo os procedimentos conhecidos na téc-nica para converter um nitrogênio trivalente em suas formas de N-óxido. Areferida reação de N-oxidação pode geralmente ser realizada reagindo-se omaterial de partida da fórmula (I) com um peróxido orgânico ou inorgânicoapropriado. Peróxidos inorgânicos apropriados compreendem, por exemplo,peróxido de hidrogênio, metal alcalino ou peróxidos de metal alcalino-terroso, por exemplo, peróxido de sódio, peróxido de potássio; peróxidosorgânicos apropriados podem compreender peroxi-ácidos tal como, por e-xemplo, ácido benzenocarboperoxóico ou ácido benzenocarboperoxóicosubstituído, por exemplo, ácido 3-clorobenzenocarboperoxóico, ácidos pero-xoalcanóicos, por exemplo, ácido peroxoacético, alquilidroperóxidos, por e-xemplo, hidroperóxido de t-butila. Solventes adequados são água, por e-xemplo, água álcoois inferiores, por exemplo, etanol e similares, hidrocarbo-netos, por exemplo, tolueno, cetonas, por exemplo, 2-butanona, hidrocarbo-netos haíogenados, por exemplo, diclorometano, e misturas de tais solventes.

A presente invenção é da mesma forma pretendida incluir qual-quer isótopo de átomos presentes nos compostos da invenção. Por exemplo,isótopos de hidrogênio incluem isótopos de trítio e deutério e de carbonoincluem C-13 e C-14.

Assim que utilizado em seguida, o termo "compostos de fórmula(I)" é pretendido incluir da mesma forma as formas de A/-óxido, o sal de adi-ção de base ou ácido farmaceuticamente aceitável e todas as formas este-reoisoméricas.

Um primeiro grupo de compostos interessantes consiste naque-les compostos de fórmula (I) em que uma ou mais das seguintes restriçõesaplicam-se:

a) m é 0;

b) η é 0 ou 2;

c) ρ é 1 ;

d) s é 0;

e) t é 0;f) R1 e R2 são cada qual independentemente hidrogênio;

g) A é um radical selecionado a partir de (a-15), (a-21), (a-30),(a-39) ou (a-40);

h) R4 e R5 são cada qual independentemente selecionado a par-tir de hidrogênio ou Ci-6alquilóxi;

i) Z é o radical (b-2); ou

j) R6 e R7 são cada qual independentemente selecionado a partirde hidrogênio.

Um segundo grupo de compostos interessantes consiste naque-Ies compostos de fórmula (I) e aqueles compostos do grupo descrito acimaem que uma ou mais das seguintes restrições aplicam-se:

a) m é 0;

b) η é 2;

c) ρ é 1;

d)sé0;

e) t é 0;

f) R1 e R2 são cada qual independentemente hidrogênio;

g) A é um radical selecionado a partir de (a-21), (a-39) ou (a-40);

h) R4 e R5 são cada qual independentemente selecionado a par-tir de hidrogênio ou Ci-6alquilóxi;

i) Z é o radical (b-2); ou

j) R6 e R7 são cada qual independentemente selecionado a partirde hidrogênio.

Um grupo de compostos preferidos consiste naqueles compos-tos da fórmula (I) ou qualquer subgrupo destes, em que m é 0; η é 0 ou 2; ρé 1; s é 0; t é 0; R1 e R2 são cada qual independentemente hidrogênio; A éum radical selecionado a partir de (a-15), (a-21), (a-30), (a-39) ou (a-40); R4e R5 são cada qual independentemente selecionado a partir de hidrogênioou C1-6alquilóxi; Z é o radical (b-2); ou R6 e R7 são cada qual independente-mente selecionado a partir de hidrogênio.

Um grupo de compostos mais preferidos consiste naquelescompostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo destes em que m é 0; η é 2;ρ é 1; s é 0; t é 0; R1 e R2 são cada qual independentemente hidrogênio; A éum radical selecionado a partir de (a-21), (a-39) ou (a-40);

R4 e R5 são cada qual independentemente selecionado a partirde hidrogênio ou Ci-6alquilóxi;

Z é o radical (b-2); ou R6 e R7 são cada qual independentementeselecionado a partir de hidrogênio.

Os compostos mais preferidos são compostos No. 2, compostosNo. 3 ou compostos No. 5.

<table>table see original document page 15</column></row><table>

Os compostos de fórmula (I), seus sais farmaceuticamente acei-táveis e N-óxidos e formas estereoquimicamente isoméricas podem ser pre-parados de maneira convencional. Os materiais de partida e alguns dos in-termediários são compostos conhecidos e estão comercialmente disponíveisou podem ser preparados de acordo com procedimentos de reação conven-cionais como geralmente conhecidos na técnica.

Vários tais métodos de preparação serão descritos em seguidaem mais detalhes. Outros métodos por obter compostos finais de fórmula (I)são descritos nos exemplos.

Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados reagindo-seum intermediário de fórmula (II) com um intermediário da fórmula (III) em queW é um grupo de partida apropriado tal como, por exemplo, halo, por exem-plo, flúor, cloro, bromo ou iodo, ou um radical de sulfonilóxi tais como metil-sulfonilóxi, 4-metilfenilsulfonilóxi e similares. A reação pode ser realizada emum solvente inerte de reação tal como, por exemplo, um álcool, por exemplo,metanol, etanol, 2-metóxi-etanol, propanol, butanol e similares; um éter, porexemplo, 4, 4-dioxano, 1,1'-oxibispropano e similares; uma cetona, por e-xemplo, 4-metil-2-pentanona; ou Ν,Ν-dimetilformamida, nitrobenzeno, aceto-nitrila, ácido acético e similares. A adição de uma base apropriada tal como,por exemplo, um carbonato de metal alcalino ou alcalino-terroso ou carbona-to de hidrogênio, por exemplo, trietilamina ou carbonato de sódio, pode serutilizada para recuperar o ácido que é liberado durante o curso da reação.Uma quantidade pequena de um iodeto de metal apropriado, por exemplo,iodeto de sódio ou potássio pode ser obtida para promover a reação. Agita-ção pode realçar a taxa da reação. A reação pode convenientemente serrealizada em uma temperatura variando entre temperatura ambiente e atemperatura de refluxo da mistura de reação e, se desejado, a reação podeser realizada em uma pressão aumentada.

<formula>formula see original document page 16</formula>

Os compostos de fórmula (I), em que ρ é 1, aqui referidos comocompostos de fórmula (l-a) podem ser preparados convertendo-se os inter-mediários de fórmula (IV) com hidreto de alumínio e lítio em um solvente a-dequado tal como tetrahidrofurano.

<formula>formula see original document page 16</formula>

Os compostos de fórmula (l-a) podem da mesma forma ser pre-parados reagindo-se um carboxaldeído apropriado de fórmula (VI)1 com umintermediário de fórmula (V), na presença de um reagente apropriado, talcomo um boroidreto de sódio por exemplo, tetrahidroborato de sódio ou cia-notriidroborato suportado por polímero, em um solvente adequado, tal comoum álcool por exemplo, metanol.

<formula>formula see original document page 17</formula>

De uma maneira idêntica os compostos de fórmula (I), em que té 1, aqui referidos como compostos de fórmula (l-b), podem ser preparadosreagindo-se um intermediário de fórmula (II) com um carboxaldeído apropri-ado da fórmula (VII).

<formula>formula see original document page 17</formula>

Os compostos de fórmula (I), em que s é 1, aqui referidos comocompostos de fórmula (l-c), podem ser preparados reagindo-se um interme-diário de fórmula (VIII) com hidreto de alumínio e lítio em um solvente ade-quado tal como tetrahidrofurano.

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Os compostos de fórmula (I) ou seus intermediários podem damesma forma ser convertidos em um ao outro por meio de reações conheci-das na técnica ou transformações de grupo funcionais. Várias tais transfor-mações são já descritas aqui acima. Outros exemplos são hidrólise de éste-res carboxílicos ao ácido carboxílico correspondente ou álcool; hidrólise deamidas aos ácidos carboxílicos correspondentes ou aminas; hidrólise de ni-trilas às amidas correspondentes; grupos aminos em imidazol ou fenila po-dem ser substituídos por um hidrogênio por reações de diazotação conheci-das na técnica e substituição subseqüente do grupo diazo por hidrogênio;álcoois podem ser convertidos em ésteres e éteres; aminas primárias podemser convertidas em aminas secundárias ou terciárias; ligações duplas podemser hidrogenadas à ligação simples correspondente; um radical de iodo emum grupo fenila pode ser convertido em um grupo éster por inserção de mo-nóxido de carbono na presença de um catalisador de paládio adequado.

Intermediários de fórmula (II), em que m é 0 e s é 0, aqui referi-dos como intermediários de fórmula (ll-a), podem ser preparados por umnitro à reação de redução de amina partindo com um intermediário de fórmu-la (IX), na presença de um catalisador de metal tal como Níquel de Raney eum redutor apropriado tal como hidrogênio, em um solvente adequado talcomo metanol ou etanol.

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Intermediários de fórmula (X), em que s é 0, podem ser prepara-dos reagindo-se um intermediário de fórmula (XI) com um intermediário dafórmula (XII) na presença de reagentes apropriados tais como N-(etilcarbonimidoil)-N,N-dimetil-1,3-propanodiamina) monocloridrato (EDC) e- 1-hidróxi-1H-benzotriazol (HOBT). A reação pode ser realizada na presençade uma base tal como trietilamina, em um solvente adequado, tal como, umamistura de diclorometano e tetrahidrofurano.<formula>formula see original document page 19</formula>

Os intermediários de fórmula (VI) podem ser preparados reagin-do-se intermediários de fórmula (XIII) com hidreto de alumínio e lítio em umsolvente adequado tal como tetrahidrofurano.

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Os intermediários de fórmula (VIII) podem ser preparados rea-gindo-se um intermediário de fórmula (XIV) com um intermediário de fórmula(XV) na presença de iodeto de 2-Cloro-1-metilpiridínio e trietilamina em umsolvente adequado tal como acetonitrila.

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Os intermediários de fórmula (IX), em que ρ é 1, aqui referidoscomo intermediários de fórmula (IX-a), podem ser preparados reagindo-seum intermediário de fórmula (XVI) com um intermediário de fórmula (XVII),em que Q é um grupo de partida apropriado tal como, por exemplo, halo, porexemplo, flúor, cloro, bromo ou iodo, ou Ci.6alquilóxi, por exemplo, metilóxi,em diisopropiletil amina.

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Os intermediários de fórmula (XIV) podem ser preparados con-vertendo-se um intermediário de fórmula (XVIII) na presença de hidróxido desódio e água, em um solvente adequado, tal como etanol.

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Os intermediários de fórmula (XVIII), em que m é O, aqui referi-dos como intermediários de fórmula (XVIII-a), podem ser preparados reagin-do-se um intermediário de fórmula (XVI), com um intermediário de fórmula(klX), em que Q é como definido acima, em um solvente adequado tal comodiisopropiletil amina.

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Os intermediários de fórmula (V) em que m, η e s são O, aquireferidos como intermediários de fórmula (V-a), podem ser preparados con-vertendo-se um intermediário de fórmula (XX) com solução de cloridrato.

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Os intermediários de fórmula (XX) podem ser preparados rea-gindo-se um intermediário de fórmula (XXI) com um intermediário de fórmula(III) em que W é um grupo de partida apropriado tal como, por exemplo, ha-lo. A reação pode ser realizada em um solvente inerte de reação tal como,por exemplo, ácido acético.

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Os compostos de fórmula (I) e alguns dos intermediários podemter pelo menos um centro estereogênico em sua estrutura. Tal centro este-reogênico pode estar presente em uma configuração R ou S.

Alguns dos compostos de fórmula (I) e alguns dos intermediáriosna presente invenção podem conter um átomo de carbono assimétrico. For-mas estereoquimicamente isoméricas puras dos referidos compostos e refe-ridos intermediários podem ser obtidas pela aplicação de procedimentos co-nhecidos na técnica. Por exemplo, diastereoisômeros podem ser separadospor métodos físicos tais como cristalização seletiva ou técnicas cromatográ-ficas, por exemplo, distribuição contracorrente, cromatografia líquida e méto-dos similares. Enantiômeros podem ser obtidos a partir de misturas racêmi-cas primeiro convertendo-se as referidas misturas racêmicas com agentesde resolução adequados tal como, por exemplo, ácidos quirais, para mistu-ras de sais diastereoméricos ou compostos; em seguida fisicamente sepa-rando as referidas misturas de sais diastereoméricos ou compostos por, porexemplo, cristalização seletiva, cromatografia de fluido supercrítica ou técni-cas cromatográficas, por exemplo, cromatografia líquida e métodos simila-res; e finalmente convertendo os referidos sais diastereoméricos separadosou compostos nos enantiômeros correspondentes. Formas estereoquimica-mente isoméricas puras podem da mesma forma ser obtidas a partir dasformas estereoquimicamente isoméricas puras dos intermediários apropria-dos e materiais de partida, contanto que as reações intermediárias ocorramestereoespecificamente.

Os compostos de fórmula (I), os sais de adição de ácido farma-ceuticamente aceitáveis e formas estereoisoméricas dos mesmos têm pro-priedades farmacológicas valiosas em que elas inibem a interação entre p53e MDM2.

O termo "MDM2" é aqui utilizado para significar uma proteínaobtida como um resultado de expressão do gene mdm2. Dentro do significa-do deste termo, MDM2 abrange todas as proteínas codificadas por mdm2,mutantes destas, proteínas de porção alternativas destes, e proteínas fosfo-riladas destes. Adicionalmente, quando utilizado aqui, o termo "MDM2" incluianálogos de MDM2, por exemplo, MDMX, da mesma forma conhecidos co-mo homólogos de MDM4, e MDM2 e análogos de outros animais, por exem-plo, o homólogo humano HDM2 ou o análogo humano HDMX.

O termo "inibindo a interação" ou "inibidor da interação" é aquiutilizado para significar prevenir ou reduzir o direto de associação indireta deuma ou mais moléculas, peptídeos, proteínas, enzimas ou receptores; ouprevenir ou reduzir a atividade normal de uma ou mais moléculas, peptídeos,proteínas, enzimas, ou receptores.

O termo "inibidor da interação de p53 com MDM2" ou "inibidorde p53-MDM2" é aqui utilizado para descrever um agente que aumenta aexpressão de p53 no ensaio descrito em C.1. Este aumento pode ser causa-do por, porém não está limitado a, um ou mais dos seguintes mecanismosde ação:

- inibição da interação entre p53 e MDM2,

- associação direta com o MDM2 ou a proteína p53,

- interações com alvos a montante ou a jusante, por exemplo,atividades de cinases, ou enzima envolvidas em ubiquitinação ou modifica-ção de SUMO,

- seqüestro ou transporte de MDM2 e p53 em compartimentoscelulares diferentes,

- modulação de proteínas que associam-se com MDM2, por e-xemplo, (porém não limitado a), p73, E2F-1, Rb1 p21waf1 ou cipl,

- sub-regulação ou interferência com expressão de MDM2 e/ouatividade de MDM2, por exemplo, (porém não limitado a), impacto em sualocalização celular, modificação pós-translacíonal, exportação nuclear ouatividade de ubiquitina ligase,

- estabilização direta ou indireta da proteína p53, por exemplo,mantendo-se em sua forma estrutural funcional, ou prevenindo-se a duplica-ção imperfeita,

- realce da expressão de p53 ou expressão de membros da fa-mília p53, por exemplo, p63 e p73.

- aumento da atividade de p53, por exemplo, (porém não limita-da a), aumentando-se sua atividade transcricional e/ou

- aumento da expressão de genes e proteínas da série de rea-ção de sinalização de p53, por exemplo, (porém não limitado a) p21waf1,cipl, MIC-1 (GDF-15), PIG-3 e ATF-3.

Conseqüentemente, a presente invenção descreve os compos-tos de fórmula (I) para uso como uma medicamento.

Além disso, a invenção da mesma forma diz respeito ao uso deum composto para a fabricação de um medicamento para o tratamento deum distúrbio mediado através de uma interação de p53-MDM2, em que oreferido composto é um composto de fórmula (I)

O termo "tratando" ou "tratamento" quando aqui utilizado abran-ge qualquer tratamento de uma doença e/ou condição em um animal, parti-cularmente um ser humano, e inclui: (i) prevenir uma doença e/ou condiçãode ocorrer em um indivíduo que pode ser predisposto à doença e/ou condi-ção porém ainda não foi diagnosticado como tendo isto; (ii) inibir a doençae/ou condição, isto é, interrompendo seu desenvolvimento; (iii) aliviar a do-ença e/ou condição, isto é, causando regressão da doença e/ou condição.

Com o termo "um distúrbio mediado através de uma interação dep53-MDM2" é significado qualquer condição não desejada ou prejudicial queresultam em ou da inibição da interação entre a proteína MDM2 e p53 ououtras proteínas celulares que induzem apoptose, morte celular induzida, ouregulam o ciclo celular.

Esta invenção da mesma forma fornece um método para tratarum distúrbio mediado através de uma interação de p53-MDM2 administran-do-se uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção, a umindivíduo, por exemplo, um mamífero (e mais particularmente um ser huma-no) em necessidade de tal tratamento.

Os compostos da invenção podem ter efeitos antiproliferativosem células de tumor, ainda se tais células são desprovidas de p53 funcional.Mais em particular, os compostos da invenção podem ter efeitos antiprolífe-rativos em tumores com p53 tipo silvestre e/ou em tumores superexpressan-do MDM2.

Desse modo, esta invenção da mesma forma fornece um méto-do para inibir o crescimento de tumor administrando-se uma quantidade efi-caz de um composto da presente invenção, a um indivíduo, por exemplo, aomamífero (e mais particularmente um ser humano) em necessidade de taltratamento.

Exemplos de tumores que podem ser inibidos, porém não sãolimitados a, câncer de pulmão (por exemplo adenocarcinoma e incluindocâncer de pulmão de célula não-pequena), cânceres pancreáticos (por e-xemplo, carcinoma pancreático tal como, por exemplo, carcinoma pancreáti-co exócrino), cânceres de cólon (por exemplo carcinomas colorretais, taiscomo, por exemplo, adenocarcinoma de cólon e adenoma de cólon), cânceroesofágico, carcinoma escamoso oral, carcinoma de língua, carcinoma gás-trico, câncer nasofaríngeo, tumores hematopoiéticos de linhagem linfóide(por exemplo, leucemia linfocítica aguda, Iinfoma de célula B, Iinfoma deBurkitt), Iinfoma de não-Hodgkin, doença de Hodgkin, Ieucemias mielóides(por exemplo, leucemia mielogenosa aguda (AML)), câncer folicular tiróide,síndrome mielodisplástica (MDS), tumores de origem mesenquimatosa (porexemplo, fibrossarcomas e rabdomiossarcomas), melanomas, teratocarci-nomas, neuroblastomas, tumores cerebrais, gliomas, tumor benigno da pele(por exemplo, ceratoacantomas), carcinoma de mama (por exemplo, câncerde mama avançado), carcinoma de rim, carcinoma de ovário, carcinoma cer-vical, carcinoma endometrial, carcinoma de bexiga, câncer de próstata inclu-indo doença avançada, cânceres testiculares, osteossarcoma, câncer decabeça e pescoço e carcinoma epdérmico.

Os compostos da presente invenção podem da mesma formaser utilizados para o tratamento e prevenção de condições inflamatórias.

Desse modo, esta invenção da mesma forma fornece um méto-do para o tratamento e prevenção de condições inflamatórias administrando-se uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção, a um indi-víduo, por exemplo, um mamífero (e mais particularmente um ser humano)em necessidade de tal tratamento.

Os compostos da presente invenção podem da mesma formaser utilizados para o tratamento de doenças auto-imunes e condições. Como termo "doenças auto-imunes" é significado qualquer doença em que umsistema imune de um animal reage adversamente a um alto-antígeno. Como termo "alto-antígeno" é significado qualquer antígeno que normalmente éencontrado no corpo do animal. Doenças auto-imunes representativas inclu-em, porém, não são limitadas a: tireoidite de Hashimoto, doença de Grave,esclerose múltipla, anemia perniciosa, doença de Addison, diabetes melitoinsulino dependente, artrite reumatóide, lúpus eritematoso sistêmico (SLE oulúpus), dermatomiosite, doença de Crohn, granulomatose de Wegener, Do-ença da Membrana Basal Antiglomerular, Síndrome Antifosfolipídeo, Derma-tite Herpetiforme 25, Encefalomielite Alérgica, Glomerulonefrite, Glomerulo-nefrite Membranosa, Síndrome de Goodpasture, Lambert-Eaton, SíndromeMiastênica, Miastenia Grave, Penfigóide Bolhoso, Poliendocrinopatias, Do-ença de Reiter, e Síndrome do Homem Rígido.

Desse modo, esta invenção da mesma forma fornece um méto-do para o tratamento de condições e doenças auto-imunes e o tratamento dedoenças associadas com proteínas má-duplicadas ou instáveis conformaci-onais administrando-se uma quantidade eficaz de um composto da presenteinvenção, a um indivíduo, por exemplo, um mamífero (e mais particularmen-te um ser humano) em necessidade de tal tratamento.

Os compostos da presente invenção podem da mesma formaser úteis para o tratamento de doenças associadas com proteínas má-duplicadas ou instáveis conformacionais.

Exemplos de doenças associadas com proteínas má-duplicadasou instáveis conformacionais incluem, porém, não são limitados a: íibrosecística (CFTR), síndrome de Marfan (fibrilin), esclerose lateral Amiotrófica(superóxido desmutase), escorbuto (colágeno), doença da urina em xaropede ácer (complexo de alfa-cetoácido desidrogenase), osteogênese imperfeita(typel pró-colágeno pró-alfa), doença de Creutzfeldt-Jakob (príon), doençade Alzheimer (beta-amilóide), amiloidose familiar (lisozima), cataratas (crista-linas), hipercolesterolemia familiar (receptor de LDL), deficiência de ^ I - an-titripsina, doença de Tay-Sachs (beta-hexosaminidase), retinite pigmentosa(rodopsina), e Ieprechaunismo (receptor de insulina).

Desse modo, esta invenção da mesma forma fornece um méto-do para o tratamento de doenças associadas com proteínas má-duplicadasou instáveis conformacionais administrando-se uma quantidade eficaz de umcomposto da presente invenção, a um indivíduo, por exemplo, um mamífero(e mais particularmente um ser humano) em necessidade de tal tratamento.

Devido às suas propriedades farmacológicas úteis, os compos-tos objeto podem ser formulados em várias formas farmacêuticas para pro-pósitos de administração.

Para preparar as composições farmacêuticas desta invenção,uma quantidade eficaz de um composto particular, na forma de sal de adiçãode base ou ácido, como o ingrediente ativo é combinada em mistura íntimacom um veículo farmaceuticamente aceitável, cujo veículo pode tomar umaampla variedade de formas dependendo da forma de preparação desejadapara administração. Estas composições farmacêuticas estão desejavelmenteem forma de dosagem unitária adequada, preferivelmente, para administra-ção oralmente, retalmente, percutaneamente, ou por injeção parenteral. Porexemplo, preparando-se as composições em forma de dosagem oral, quais-quer dos meios farmacêuticas habituais podem ser empregados, tal como,por exemplo, água, glicóis, óleos, álcoois e similares no caso de prepara-ções líquidas orais tais como suspensões, xaropes, elixires e soluções; ouveículos sólidos tais como amidos, açúcares, caulim, lubrificantes, aglutinan-tes, agentes desintegrantes e similares no caso de pós, pílulas, cápsulas ecomprimidos.

Por causa de sua facilidade em administração, comprimidos ecápsulas representam a forma de unidade de dosagem oral mais vantajosa,em que caso veículos farmacêuticos sólidos sejam obviamente empregados.

Para composições parenterais, o veículo compreenderá normalmente águaestéril, pelo menos em grande parte, entretanto outros ingredientes, paraajudar solubilidade, por exemplo, podem ser incluídos. Soluções injetáveis,por exemplo, podem ser preparadas em que o veículo compreende soluçãosalina, solução de glicose ou uma mistura de solução salina e solução deglicose. Suspensões injetáveis podem da mesma forma ser preparadas emque caso veículos líquidos apropriados, agentes de suspensão e similarespodem ser empregados. Nas composições adequadas para administraçãopercutânea, o veículo opcionalmente compreende um agente de realce depenetração e/ou agente de umectação adequado, opcionalmente combinadocom aditivos adequados de qualquer natureza em proporções secundárias,cujos aditivos não causam um efeito danoso significante à pele. Os referidosaditivos podem facilitar a administração à pele e/ou podem ser úteis parapreparar as composições desejadas. Estas composições podem ser admi-nistradas de várias maneiras, por exemplo, como um emplastro trasdérmico,como um manchamento, como um ungüento. É especialmente vantajosoformular as composições farmacêuticas anteriormente mencionadas na for-ma de unidade de dosagem para facilidade de administração e uniformidadede dosagem. Forma de unidade de dosagem quando utilizada no relatóriodescritivo e reivindicações referem-se aqui às unidades fisicamente discretasadequadas como dosagens unitárias, cada unidade contendo uma quantida-de predeterminada de ingrediente ativo calculada para produzir o efeito tera-pêutico desejado em associação com o veículo farmacêutico requerido. E-xemplos de tais formas de unidade de dosagem são comprimidos (incluindocomprimidos marcados ou revestidos), cápsulas, pílulas, pacotes de pó, pas-tilhas, soluções injetáveis ou suspensões, colheres de chá cheias, colheresde sopa cheias e similares, e múltiplos segregados destes.

É especialmente vantajoso formular as composições farmacêuti-cas anteriormente mencionadas na forma de unidade de dosagem para faci-lidade de administração e uniformidade de dosagem. Forma de unidade dedosagem quando utilizada no relatório descritivo e reivindicações referem-seaqui a unidades fisicamente discretas adequadas como dosagens unitárias,cada unidade contendo uma quantidade predeterminada de ingrediente ati-vo, calculada para produzir o efeito terapêutico desejado, em associaçãocom o veículo farmacêutico requerido. Exemplos de tais formas de unidadede dosagem são comprimidos (incluindo comprimidos marcados ou revesti-dos), cápsulas, pílulas, pacotes de pó, pastilhas, soluções injetáveis ou sus-pensões, colheres de chá cheias, colheres de sopa cheias e similares, emúltiplos segregados destes.

O composto da invenção é administrado em uma quantidadesuficiente para inibir a interação entre MDM2 e p53 ou outras proteínas celu-lares que induzem apoptose, induz morle celular, ou regula o ciclo celular.

O potencial oncogénico de MDM2 não é apenas determinadopor sua capacidade de suprimir p53, porém da mesma forma por sua capa-cidade para regular outras proteínas supressoras de tumor, por exemplo, aproteína de retinoblastoma pRb e o fator de transcrição de E2F1 intimamen-te associado.

Desse modo, o composto da invenção é administrado em umaquantidade suficiente para modular a interação entre MDM2 e os fatores detranscrição de E2F.

Aqueles versados na técnica a poderiam determinar facilmente aquantidade eficaz dos resultados de teste apresentados em seguida. Emgeral é considerado que uma quantidade terapeuticamente eficaz seria de0,005 mg/kg a 100 mg/kg de peso corporal, e em particular de 0,005 mg/kg a10 mg/kg de peso corporal. Pode ser apropriado para administrar a doserequerida como única, duas, três, quatro ou mais subdoses em intervalosapropriados ao longo do dia. As referidas subdoses podem ser formuladascomo formas de dosagem unitária, por exemplo, contendo 0,5 a 500 mg, eem particular 10 mg a 500 mg de ingrediente ativo por forma de dosagemunitária.

Como outro aspecto da presente invenção, uma combinação deum inibidor de p53-MDM2 com outro agente anticãncer é considerada, espe-cialmente para uso como um medicamento, mais especificamente no trata-mento de câncer ou doenças relacionadas.

Para o tratamento das condições acima, os compostos da inven-ção podem ser vantajosamente empregados em combinação com um oumais outros agentes medicinais, mais particularmente, com outros agentesanticãncer. Exemplos de agentes anticãncer incluem, porém, não são limita-dos a:

- compostos de coordenação de platina por exemplo, cisplatina,carboplatina ou oxaliplatina;

- compostos de taxano por exemplo, paclitaxel ou docetaxel;

- Inibidores de topoisomerase I tais como compostos de campto-tecina por exemplo, irinotecana ou topotecana;

- inibidores de topoisomerase Il tais como epipodofilotoxinas an-titumor ou derivados de podofilotoxina por exemplo, etoposídeo ou teniposí-deo;

- vinca alcalóides antitumor por exemplo, vinblastina, vincristinaou vinorelbina;

- derivado de nucleosídeo antitumor por exemplo, 5-fluorouracila,leucovorina, gencitabina ou capecitabina;

- agentes de alquilação tal como mostarda nitrogenada ou nitro-souréia por exemplo, ciclofosfamida, clorambucila, carmustina, tiotepa, mefa-Ian ou lomustina;

- derivados de antraciclina antitumor por exemplo, daunorrubici-na, doxorrubicina, doxila, idarrubicina ou mitoxantrona;

- moléculas que alvejam o receptor de IGF-1 por exemplo, picro-podofilina;

- derivados de tetracarcina por exemplo, tetrocarcina A;

- glicocorticóides, por exemplo, prednisona;- anticorpos, por exemplo, trastuzumabe (anticorpo HER2), ritu-ximabe (anticorpo CD20), gentuzamabe, cetuximabe, pertuzumabe ou beva-cizumabe;

- antagonistas do receptor de estrogênio ou moduladores do re-ceptor de estrogênio seletivos por exemplo, tamoxifeno, íulvestranto, toremi-teno, droloxiíeno, íaslodex ou raloxifeno;

- inibidores de aromatase tal como exemestano, anastrozol, Ie-trazol e vorozol;

- agentes de diferenciação tal como retinóides, vitamina D ouácido retinóico e agentes bloqueadores de metabolismo de ácido retinóico(RAMBA) por exemplo, acutane;

- inibidores de DNA metil transíerase, por exemplo, azacitidinaou decitabina;

- antitolatos por exemplo, premetrexede dissódico;

- antibióticos por exemplo, antinomicina D, bleomicina, mitomici-na C, dactinomicina, carminomicina ou daunomicina;

- antimetabólitos por exemplo, clofarabina, aminopterina, arabi-nosídeo de citosina ou metotrexato;

- agentes de indução de apoptose e agentes antiangiogênicos talcomo inibidores de Bcl-2 por exemplo, YC 137, BH 312, ABT 737, gossipol,HA 14-1, TW 37 ou ácido decanóico;

- agentes de ligação de tubulina por exemplo, combrestatina,colchicinas ou nocodazol;

- inibidores de cinase, por exemplo, flavoperidol, mesilato de i-matinibe, erlotinibe ou gefitinibe;

- inibidores de íarnesiltransíerase, por exemplo, tipifarnibe;

- inibidores de histona desacetilase (HDAC) por exemplo, butira-to de sódio, ácido de hidroxamida de suberoilanilida (SAHA), depsipeptídeo(FR 901228), NVP-LAQ824, R306465, JNJ-26481585 ou tricostatina A;

- Inibidores da série de reação de ubiquitina-proteassoma porexemplo, PS-341, MLN .41 ou bortezomibe;

- Yondelis;- Inibidores de Telomerase, por exemplo, telomestatina;

- Inibidores de metaloproteinase matriz, por exemplo, batimasta-te, marimasíate, prinostate ou metastate.

Como declarado acima, os compostos da presente invenção damesma forma têm aplicações terapêuticas em células de tumor sensibilizan-tes para quimioterapia e radioterapia.

Portanto, os compostos da presente invenção podem ser utiliza-dos como "radiossensibilizante" e/ou "quimiossensibilizante" ou podem serproduzidos em combinação com outro " radiossensibilizante" e/ou "quimios-sensibilizante".

O termo "radiossensibilizante", quando aqui utilizado, é definidocomo uma molécula, preferivelmente uma molécula de baixo peso molecu-lar, administrada a animais em quantidades terapeuticamente eficazes paraaumentar a sensibilidade das células à radiação por ionização e/ou parapromover o tratamento de doenças que são tratáveis com radiação por ioni-zação.

O termo "quimiossensibilizante", quando aqui utilizado, é defini-do como uma molécula, preferivelmente uma molécula de baixo peso mole-cular, administrada a animais em quantidades terapeuticamente eficazespara aumentar a sensibilidade de células à quimioterapia e/ou promover otratamento de doenças que são tratáveis com quimioterapêuticos.

Vários mecanismos para o modo de ação de radiossensibilizan-tes foram sugeridos na literatura incluindo: radiossensibilizantes de célulahipóxica (por exemplo, compostos de 2-nitroimidazol, e compostos de dióxi-do de benzotriazina) que imitam oxigênio ou alternativamente que comporta-se como agentes biorredutores sob hipoxia; radiossensibilizantes de célulanão-hipóxica (por exemplo, pirimidinas halogenadas) podem ser análogos debases de DNA e preferencialmente incorporar no DNA de células de câncere, desse modo, promover o rompimento induzido por radiação de moléculasde DNA e/ou prevenir os mecanismos de reparo de DNA normais; e váriosoutros mecanismos potenciais de ação foram hipotetizados para radiossen-sibilizantes no tratamento de doença. Muitos protocolos de tratamento decâncer atualmente empregam radiossensibilizantes juntamente com radia-ção de Raios X. Exemplos de radiossensibilizantes ativados por Raios X in-cluem, porém não são limitados aos seguintes: metronidazol, misonidazol,desmetilmisonidazol, pimonidazol, etanidazol, nimorazol, mitomicina C, RSU1069, SR 4233, E09, RB 6145, nicotinamida, 5-bromodesoxiuridina (BUdR),5-iododesoxiuridina (IUdR), bromodesoxicitidina, fluorodesoxiuridina (FudR),hidroxiuréia, cisplatina, e análogos terapeuticamente eficazes e derivadosdos mesmos.

Terapia fotodinâmica (PDT) de cânceres emprega luz visívelcomo o ativador de radiação do agente de sensibilização. Exemplos de ra-diossensibilizantes fotodinâmicos incluem os seguintes, porém não são limi-tados a: derivados de hematoporfirina, Fotofrina, derivados de benzoporfiri-na, etioporfirina de estanho, feoborbeto-a, bacterioclorofil-a, naftalocianinas,ftalocianinas, ftalocianina de zinco, e análogos terapeuticamente eficazes ederivados dos mesmos.

Radiossensibilizantes podem ser administrados juntamente comuma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais outros compostos,incluindo porém não limitados a: compostos que promovem a incorporaçãode radiossensibilizantes às células-alvo; compostos que controlam o fluxo deterapêuticos, nutrientes, e/ou oxigênio às células-alvo; agentes quimiotera-pêuticos que agem no tumor com ou sem radiação adicional; ou outros com-postos terapeuticamente eficazes para tratar câncer ou outra doença.

Ouimiossensibilizantes podem ser administrados juntamentecom uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais outros compos-tos, incluindo, porém, não limitados a: compostos que promovem a incorpo-ração de quimossensibilizantes às células designadas; compostos que con-trolam o fluxo de terapêuticos, nutrientes, e/ou oxigênio às células-alvo; a-gentes quimioterapêuticos que agem no tumor ou outros compostos terapeu-ticamente eficazes para tratar câncer ou outra doença. Antagonista de cál-cio, por exemplo, verapamila, é constatado ser útil em combinação com a-gentes antineoplásicos para estabelecer a quimosensibilidade em células detumor resistentes aos agentes quimioterapêuticos aceitos e para potenciali-zar a eficácia de tais compostos em malignidades sensíveis a fármaco.

Devido às suas propriedades íarmacológicas úteis, os compo-nentes das combinações de acordo com a invenção, isto é, o outro agentemedicinal e o inibidor de p53-MDM podem ser formulados em várias formasfarmacêuticas para propósitos de administração. Os componentes podemser formulados separadamente em composições farmacêuticas individuaisou em uma composição farmacêutica unitária contendo ambos os compo-nentes.

A presente invenção, portanto, da mesma forma refere-se a umacomposição farmacêutica compreendendo o outro agente medicinal e o ini-bidor de p53-MDM juntamente com um ou mais veículos farmacêuticos.

A presente invenção também refere-se ao uso de uma combina-ção de acordo com a invenção na fabricação de uma composição farmacêu-tica para inibir o crescimento de células de tumor.

A presente invenção também refere-se a um produto contendocomo primeiro ingrediente ativo um inibidor de p53-MDM2 de acordo com ainvenção e como segundo ingrediente ativo um agente anticâncer, comouma preparação combinada para uso simultâneo, separado ou seqüencialno tratamento de pacientes que sofrem de câncer.

O outro agente medicinal e inibidor de p53-MDM2 podem seradministrados simultaneamente (por exemplo, em composições separadasou unitárias) ou seqüencialmente em qualquer ordem. No último caso, osdois compostos serão administrados dentro de um período e em uma quan-tidade e maneira que são suficientes para garantir que um efeito vantajosoou sinergístico seja obtido. Será evidenciado que o método preferido e or-dem de administração e as quantidades de dosagem respectivas e regimespara cada componente da combinação dependerão do outro agente medici-nal particular e inibidor de p53-MDM2 que são administrados, sua rotina deadministração, do tumor particular que é tratado e o hospedeiro particulartratado. O método ideal e ordem de administração e as quantidades de do-sagem e regime podem ser facilmente determinados por aqueles versadosna técnica utilizando-se métodos convencionais e devido à informação men-cionada aqui.

O composto de coordenação de platina é vantajosamente admi-nistrado em uma dosagem de 1 a 500 mg por metro quadrado (mg/m2) deárea de superfície corporal, por exemplo, 50 a 400 mg/m2, particularmentepara cisplatina em uma dosagem de cerca de 75 mg/m2 e para carboplatinaem cerca de 300 mg/m2 por curso de tratamento.

O composto de taxano é vantajosamente administrado em umadosagem de 50 a 400 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de superfíciecorporal, por exemplo, 75 a 250 mg/m2, particularmente para paclitaxel emuma dosagem de cerca de 175 a 250 mg/m2 e para docetaxel em cerca de75 a 150 mg/m2 por curso de tratamento.

O composto de camptotecina é vantajosamente administrado emuma dosagem de 0,1 a 400 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de su-perfície corporal, por exemplo, 1 a 300 mg/m2, particularmente para irinote-cana em uma dosagem de cerca de 100 a 350 mg/m2 e para topotecana emcerca de 1 a 2 mg/m2 por curso de tratamento.

O derivado de podofilotoxina antitumor é vantajosamente admi-nistrado em uma dosagem de 30 a 300 mg por metro quadrado (mg/m2) deárea de superfície corporal, por exemplo, 50 a 250 mg/m2, particularmentepara etoposídeo em uma dosagem de cerca de 35 a 100 mg/m2 e para teni-posídeo em cerca de 50 a 250 mg/m2 por curso de tratamento.

O vinca alcalóide antitumor é vantajosamente administrado emuma dosagem de 2 a 30 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de superfí-cie corporal, particularmente para vinblastina em uma dosagem de cerca de3 a 12 mg/m2, para vincristina em uma dosagem de cerca de 1 a 2 mg/m2, epara vinorelbina em dosagem de cerca de 10 a 30 mg/m2 por curso de tra-tamento.

O derivado de nucleosídeo antitumor é vantajosamente adminis-trado em uma dosagem de 200 a 2500 mg por metro quadrado (mg/m2) deárea de superfície corporal, por exemplo, 700 a 1500 mg/m2, particularmentepara 5-FU em uma dosagem de 200 a 500mg/m2, para gencitabina em umadosagem de cerca de 800 a 1200 mg/m2 e para capecitabina em cerca de1000 a 2500 mg/m2 por curso de tratamento.

Os agentes de alquilação tal como mostarda nitrogenada ou ni-trosouréia são vantajosamente administrados em uma dosagem de 100 a500 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de superfície corporal, por e-xemplo, 120 a 200 mg/m2, particularmente para ciclofosíamida em uma do-sagem de cerca de 100 a 500 mg/m2, para clorambucila em uma dosagemde cerca de 0,1 a 0,2 mg/kg, para carmustina em uma dosagem de cerca de150 a 200 mg/m2, e para Iomustina em uma dosagem de cerca de 100 a 150mg/m2 por curso de tratamento.

O derivado de antraciclina antitumor é vantajosamente adminis-trado em uma dosagem de 10 a 75 mg por metro quadrado (mg/m2) de áreade superfície corporal, por exemplo, 15 a 60 mg/m2, particularmente paradoxorrubicina em uma dosagem de cerca de 40 a 75 mg/m2, para daunorru-bicina em uma dosagem de cerca de 25 a 45 mg/m2, e para idarrubicina emuma dosagem de cerca de 10 a 15 mg/m2 por curso de tratamento.

O agente antiestrogênio é vantajosamente administrado em umadosagem de cerca de 1 a 100 mg diariamente dependendo do agente parti-cular e a condição sendo tratada. Tamoxifeno é vantajosamente administra-do oralmente em uma dosagem de 5 a 50 mg, preferivelmente 10 a 20 mgduas vezes por dia, continuando a terapia durante o tempo suficiente paraobter e manter um efeito terapêutico. Toremifeno é vantajosamente adminis-trado oralmente em uma uma dosagem de cerca de 60 mg uma vez por dia,continuando a terapia durante tempo suficiente para obter e manter um efei-to terapêutico. Anastrozol é vantajosamente administrado oralmente em umadosagem de cerca de 1 mg uma vez por dia. Droloxifeno é vantajosamenteadministrado oralmente em uma dosagem de cerca de 20- 100 mg uma vezpor dia. Raloxifeno é vantajosamente administrado oralmente em uma dosa-gem de cerca de 60 mg uma vez por dia. Exemestano é vantajosamenteadministrado oralmente em uma dosagem de cerca de 25 mg uma vez por dia.

Anticorpos são vantajosamente administrados em uma dosagemde cerca de 1 a 5 mg por metro quadrado (mg/m2) de área de superfície cor-poral, ou como conhecido na técnica, se diferente. Trastuzumabe é vantajo-samente administrado em uma dosagem de 1 a 5 mg por metro quadrado(mg/m2) de área de superfície corporal, particularmente 2 a 4 mg/m2 por cur-so de tratamento.

Estas dosagens podem ser administradas, por exemplo, umavez, duas vezes ou mais por curso de tratamento, que podem ser repetidas,por exemplo, a cada 7, 14, 21 ou 28 dias.

Os compostos da fórmula (I), os sais de adição de ácido farma-ceuticamente aceitáveis e formas estereoisoméricas destes podem ter valio-sas propriedades diagnosticas em que eles podem ser utilizados para detec-tar ou identificar uma interação de p53-MDM2 em uma amostra biológicacompreendendo detectar ou medir a formação de um complexo entre umcomposto rotulado e/ou p53 e/ou MDM2 e ou outras moléculas, peptídeos,proteínas, enzimas ou receptores.

Os métodos de detecção ou identificação podem utilizar com-postos que são rotulados com agentes de rotulagem tais como radioisóto-pos, enzimas, substâncias fluorescentes, substâncias luminosas, etc. Exem-plos dos radioisótopos incluem 125I, 131I1 3H e 14C. Enzimas são normalmentetornadas detectáveis por conjugação de um substrato apropriado que, su-cessivamente catalisa uma reação detectável. Exemplos destes incluem, porexemplo, beta-galactosidase, beta-glucosidase, fosfatase alcalina, peroxida-se e malato desidrogenase, preferivelmente peroxidase de rábano picante.

As substâncias luminosas incluem, por exemplo, luminol, derivados de Iumi-nol, luciferina, aequorina e luciferase. Amostras biológicas podem ser defini-das como tecido corporal ou fluidos corporais. Exemplos de fluidos corporaissão fluido cerebroespinal, sangue, plasma, soro, urina, escarro, saliva e simi-lares.

Os seguintes exemplos ilustram a presente invenção.

Parte experimental

Em seguida, "DCM" é definido como diclorometano, "DIPE" édefinido como diisopropil éter, "EtOAc" é definido como acetato de etila, Έ-tOH" é definido como etanol, "MeOH" é definido como metanol e "THF" édefinido como tetrahidrofurano.

Pontos de fusão

Para vários compostos, indicados por (Kofler), pontos de fusãoforam obtidos com um banco quente de Kofler, consistindo em uma placaaquecida com gradiente de temperatura linear, um ponteiro deslizante e umaescala de temperatura em graus Celsius.LCMS

Procedimento geral

O gradiente de HPLC foi fornecido por um sistema Alliance HT2795 (Waters) compreendendo uma bomba quaternária com desgaseifica-dor, um classificador automático e um detector de disposição de diodo(DAD). Fluxo da coluna foi dividido em um detector de EM. O detector de EMfoi configurado com uma fonte de ionização por eletrovaporização. A volta-gem da agulha capilar foi de 3 kV e a temperatura da fonte foi mantida a100°C no LCT (Tempo de espectrómetro de massa de Trajetória-Z-spray deWaters. Nitrogênio foi utilizado como o gás do nebulizador. Aquisição de da-dos foi realizada com um sistema de dados Waters-Micromass MassLinx-Openlinx.

Método A

Além do procedimento geral: HPLC de fase reversa foi realizadaem uma coluna Xterra-RP C18 (5 pm, 3,9 χ 150 mm) com uma taxa de fluxode 1,0 ml/min em uma temperatura de 30°C. Duas fases móveis (fase móvelA: 100% de 7 mM de acetato de amônio; fase móvel B: 100 % de acetonitri-la; foram empregadas para conduzir uma condição de gradiente de 85% deA, 15% de B (sustentação durante 3 minutos) para 20% de A, 80% de B em5 minutes, sustentação a 20% de A e 80% de B durante 6 minutos e reequi-libradas com condições iniciais durante 3 minutos. Um volume de injeção de20 11 foi utilizado. Voltagem do cone foi de 20 V para o modo de ionizaçãopositivo e negativo. Espectros de massa foram adquiridos varrendo-se de100 a 900 em 0,8 segundo utilizando um atraso de intervarredura de 0,08segundo.Método B

Além do procedimento geral: HPLC de fase reversa foi realizadaem uma coluna Xterra-RP C18 (5 μιτι, 3,9 χ 150 mm) com uma taxa de fluxode 1,0 ml/min em uma temperatura de 30°C. Duas fases móveis (fase móvelA: 100% de 7 mM de acetato de amônio; fase móvel B: 100 % de acetonitri-la; foram empregadas para conduzir uma condição de gradiente de 100% deA (sustentação durante 1 minuto) para 50% de A. 50% de B em 4 minutos,sustentação a 50% de A e 50 % de B durante 9 minutos e reequilibradascom condições iniciais durante 3 minutos. Um volume de injeção de 20 _ I foiutilizado. Voltagem do cone foi 20 V para modo de ionização positivo e 20 Vpara modo de ionização negativo. Espectros de massa foram adquiridos var-rendo-se de 100 a 900 em 0,8 segundo utilizando um atraso de intervarredu-ra de 0,08 segundo.

A. Preparação dos compostos intermediários

Exemplo A1

Preparação do intermediário 1

<formula>formula see original document page 38</formula>

Uma mistura de benzo[b]furan-3-ona (400 mg, 0,0029 mol) e N-metóxi-N-metil(trifenilfosforanilideno)acetamida (1,19 g, 0,0032 mol) em xile-no (10 ml) foi agitada a 135°C durante 35 horas. A reação foi extinguida comágua e basificada com uma solução saturada de hidrogenocarbonato de só-dio. A mistura foi extraída com EtOAc, a camada orgânica foi separada, se-cada (MgSO4)1 filtrada e o solvente foi evaporado. O resíduo foi purificadopor cromatografia de coluna em sílica-gel (40-63 pm) (eluente: EtO-Ac/cicloexano 50/50). As frações puras foram coletadas e o solvente foi eva-porado, produzindo 210 mg (32%) de intermediário 1 como um óleo marrom.

1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,63 (m, 2H), 7,46 (d, 1H, J=7,1),7,25 (m, 2H), 3,84 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,22 (s, 3H).

EM (ES+) m/z 220 (M+1).

Exemplo A2

a) Preparação do intermediário 2<formula>formula see original document page 39</formula>

Uma mistura de 1 H-pirrolo[2,3-b]piridina-3-etanamina (0,014mol), 1-flúor-4-nitro-ben2eno (0,015 mol) e DIPE (0,048 mol) foi agitada a210°C durante 30 minutos. DIPE foi evaporado. O precipitado foi dissolvidoem DCM/MeOH. A camada orgânica foi lavada com carbonato de potássio a10%, secada (MgSO4)1 filtrada e o solvente foi evaporado. O resíduo (2g) foipurificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (15-40 pm) (eluente:DCM/Me0H/NH40H 97/3/0,3). As frações puras foram coletadas e o solven-te foi evaporado, produzindo 0,152g (28%) de intermediário 2, ponto de fu-são 2010C (Kofler).

b) Preparação do intermediário 3

<formula>formula see original document page 39</formula>

Uma mistura do intermediário 2 (0,004 mol) e Níquel de Raney(1g) em MeOH (20ml) foi hidrogenada em temperatura ambiente durante 2horas sob uma pressão de 0,3 mPa (3 bar), em seguida filtrada em celite.Celite foi lavada com MeOH. O filtrado foi evaporado, produzindo 0,92g(100%) do intermediário 3.

Exemplo A3

a) Preparação do intermediário 4

Uma mistura de imidazo[1,2-a]piridina-3-acetonitrila (0,028 mol)e Rh/Al203 a 5% (4,5g) em EtOH (45ml) e MeOH/NH3 (12,5ml) foi hidroge-20 nado em temperatura ambiente durante 72 horas sob uma pressão de 0,3mPa (3 bar), em seguida filtrada em celite. Celite foi lavada com DCM/EtOH.O filtrado foi evaporado. O resíduo foi dissolvido em DCM. A camada orgâni-ca foi lavada com carbonato de potássio a 10%, secada (MgSO4), filtrada e osolvente foi evaporado, produzindo: 3,4g (73%) do intermediário 4.25 b) Preparação do intermediário 5<formula>formula see original document page 40</formula>

Uma mistura do intermediário 4 (0,006 mol), 1 -flúor-4-nitro-benzeno (0,007 mol) e DIPE (0,021 mol) foi aquecida a 21 OeC durante 30minutos. DIPE foi evaporado. O óleo bruto foi diluído em DCM e EtOH(90/10). A camada orgânica foi lavada com carbonato de potássio a 10%,secada (MgSO4), filtrada e o solvente foi evaporado. O resíduo (1,3 g) foipurificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (20 - 45 pm) (eluente:DCM/MeOH 98/2). As frações puras foram coletadas e o solvente foi evapo-rado. O resíduo (0,36 g) foi cristalizado a partir de acetonitrila. O precipitadofoi filtrado e secado, produzindo 0,199 g do intermediário 5, ponto de fusão1719C (Kofler).

c) Preparação do intermediário 6

Uma mistura do intermediário 5 (0,003 mol) e Níquel de Raney(1g) em MeOH (20 ml) foi hidrogenada em temperatura ambiente durante 3horas sob uma pressão de 0,3 mPa (3 bar), em seguida filtrada em celite.15 Celite foi lavada com MeOH. O filtrado foi evaporado, produzindo 1g(>100%) do intermediário 6.

Exemplo A4

a) Preparação do intermediário 7

Uma mistura de 1-flúor-4-nitro-benzeno (0,0083 mol), 1H-indol-5-amina (0,0076 mol) e DIPE (0,0166 mol) foi agitada a 210°C durante 18 ho-ras, em seguida tomada em DCM. A camada orgânica foi lavada com ácidoclorídrico a 3N, em seguida com NaHCO3, secada (MgSO4)1 filtrada, e o sol-vente foi evaporado. O resíduo foi tomado em EtOH. O precipitado foi filtra-do, lavado com éter dietílico e secado, produzindo 1,08 g (65%) do interme-diário 7, ponto de fusão 180°C.

b) Preparação do intermediário 8<formula>formula see original document page 41</formula>

Uma mistura do intermediário 7 (0,0039 mol) e Níquel de raney(1g) em MeOH (20ml) foi hidrogenada em temperatura ambiente durante 2horas sob uma pressão de 0,3 mPa (3 bar), em seguida filtrada em celite.Celite foi lavada com DCM/MeOH. O filtrado foi evaporado, produzindo 1 g(>100%) do intermediário 8.

Exemplo A5

Preparação do intermediário 9

<formula>formula see original document page 41</formula>

1,1'-CarboxiIdiimidazoI (315 mg, 0,0019 mol) foi adicionado gotaa gota em uma solução de ácido (6-metóxi-benzofuran-3-il)-acético (400 mg,0,0019 mol) em DCM (10 ml). A mistura foi agitada em temperatura ambien-te durante 3 horas. Cloridrato de Ο,N-Dimetil-hidroxilamina (190 mg, 0,0019mol) foi adicionado e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante4 horas. A reação foi extinguida com gelo e basificada com uma solução a4N de hidróxido de sódio. A mistura foi extraída com DCM, a camada orgâ-nica foi separada, secada (MgSO4)1 filtrada e o solvente foi evaporado. Oresíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (40-63 pm)(eluente: EtOAc/cicloexano 50/50). As frações puras foram coletadas e osolvente foi evaporado, produzindo 410 mg (85%) do intermediário 9 comoum óleo incolor.

1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,54 (m, 2H), 6,99 (s, 1H), 6,88 (d,1H, J=6,4), 3,83 (s, 3H), 3,79 (s, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,21 (s, 3H).

Exemplo A6

a) Preparação de intermediário 10

<formula>formula see original document page 41</formula>

Uma mistura de ácido (3-iodo-2-tienil)-carbámico, éster de 1,1-dimetiletílico (0,0105 mol), ácido 4-bromo-2-butenóico, éster etílico (0,0158mol) e carbonato de potássio (0,021 mol) em Ν,Ν-dimetilformamida (100ml)foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. Trifenilfosfina (0,001mol) e acetato de paládio (0,0005mol) foram adicionados. A mistura foi agi-tada a 70°C durante 8 horas, em seguida lavada com água. A camada orgâ-nica foi separada com EtOAc, secada (MgSO4) e o solvente foi evaporado. Oresíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (eluente: E-tOAc/cicloexano 10/90), produzindo 2,3 g (70%) do intermediário 10.

b) Preparação de intermediário 11

<formula>formula see original document page 42</formula>

Uma solução do intermediário 10 (0,0016 mol) em THF (10ml) foiagitada a -78°C sob argônio. Uma solução de cloridrato de N1O-dimetilidroxilamina (0,0004 mol) em THF (40ml) foi agitada a -78°C sob ar-gônio. Butil-lítio (1,6 M em hexano) (0,016 mol) foi adicionado gota a gota a -78°C ao cloridrato de Λ/,Ο-dimetilidroxilamina (0,0004 mol). A mistura foi agi-tada em temperatura ambiente durante 20 minutos, em seguida resfriadanovamente a -78°C. Intermediário 10 foi adicionado gota a gota. A mistura foiagitada a -IQ0C durante 2 horas, vertida em NH4CI saturado a -7Q°C e foiextraída com EtOAc. A camada orgânica foi separada, secada (MgSO4), fil-trada e o solvente foi evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografiade coluna em sílica-gel (eluente: EtOAc/cicloexano 10/90 a 30/70). As fra-ções puras foram coletadas e o solvente foi evaporado, produzindo 0,4 g(77%) do intermediário 11.

c) Preparação do intermediário 12

<formula>formula see original document page 42</formula>Intermediário 11 (0,0012 mol) foi dissolvido em DCM e absorvidoem sílica-gel. A mistura foi agitada a 60°C durante 24 horas em vácuo. Oresíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (eluente: E-tOAc/cicloexano 80/20). As frações puras foram coletadas e o solvente foievaporado, produzindo (62%) do intermediário 12.

d) Preparação do intermediário 13

<formula>formula see original document page 43</formula>

Hidreto de lítio e alumínio (0,0008 mol) foi adicionado lentamentea 0°C em uma solução do intermediário 12 (0,0008 mol) em THF (4 ml, se-co). A mistura foi agitada a O0C durante 1 hora, vertida em gelo, lavada comKHSO4 a 5% e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi separada, seca-da (MgSO4), filtrada e o solvente foi evaporado, produzindo intermediário 13.Este produto foi diretamente utilizado na próxima etapa de reação.

B. Preparação dos compostos finais

<formula>formula see original document page 43</formula>

Exemplo B1

Preparação do composto 1

Uma solução de hidreto de alumínio e lítio a 1N em THF (0,65ml) foi adicionada gota a gota a 0°C a uma suspensão do intermediário 1(162 mg, 0,00065 mol) em THF (4 ml). A mistura foi agitada durante 1 hora a0°C. A reação foi extinguida a 0°C por adição lenta de uma solução de bis-sulfato de potássio a 5% em água e extraída duas vezes com EtOAc. A ca-mada orgânica foi separada, secada (MgSO4), filtrada, e o solvente foi eva-porado para produzir benzofuran-3-il-acetaldeído. Em uma solução de N-4-piridinil-1,4-benzenodiamina em MeOH (3 ml) e ácido acético (4 gotas) foiadicionado cianoboroidreto de sódio (57 mg, 0,00091 mol) e o aldeído préviodissolvido em MeOH (1 ml). A mistura foi agitada em temperatura ambientedurante 18 horas. O solvente foi evaporado, o óleo residual tomado em EtO-Ac e lavado com uma solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio. Acamada orgânica foi separada, secada (MgSO4)1 filtrada e o solvente foi e-vaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel(40-63 pm) (eluente: DCM/MeOH 95/5). As frações puras foram coletadas eo solvente foi evaporado, produzindo 41 mg (20%) do composto 1, ponto defusão 152°C - 154°C.

1H RMN (300 MHz, MeOH-d4) δ 7,98 (d, 2H, J=6,6), 7,59 (m,2H), 7,43 (d, 1H, J=7,4), 7,24 (m, 2H), 7,00 (dd, 2H, J=8-7, J=3,3), 6,68 (m,4H), 3,45 (t, 2H, J=7,2), 2,98 (t, 2H, J=7,2).

MS (ES+) m/z 330 (M+1).

Exemplo B2

Preparação do composto 2

<formula>formula see original document page 44</formula>

Uma mistura do intermediário 3 (0,004 mol) e cloridrato de A-bromo-piridina (0,004 mol) em ácido acético (5ml) foi agitada a 140°C duran-te 15 minutos, em seguida evaporada. O resíduo foi dissolvido emDCM/MeOH. A camada orgânica foi lavada com carbonato de potássio a10%, secada (MgSO4), filtrada e o solvente foi evaporado. O resíduo (1g) foipurificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (15-40 pm) (eluente:DCM/Me0H/NH40H 90/10/1). As frações puras foram coletadas e o solven-te foi evaporado. O resíduo (0 - 74 g, 63%) foi cristalizado a partir de aceto-nitrila. O precipitado foi filtrado e secado, produzindo 0,541 g do composto 2,ponto de fusão 182°C (Kofler).

1H RMN (DMSO-de) δ 2,96(2H, t, J = 7,7 Hz), 3,30 (2H, t, J = 7,7Hz), 5,6 (1H, br, t, J = 7,6 Hz), 6,58 (4H, m), 6,95 (2H, d, J = 7,7 Hz), 7,03(1H, m), 7,33 (1H, m), 7,96 (1H, d, J = 7,7Hz), 8,03 (2H, d, J = 7,6 Hz), 8,17-8,21 (1 H,m), 8,22 (1H, br, s), 11,38 (1H, br, s).

LCMS (ES+) m/z 330 (M+1), Rt = 7,10, Método A.

Exemplo B3

Preparação do composto 3<formula>formula see original document page 45</formula>

Cloridrato de 4-bromo-piridina (0,004 mol) foi adicionado a umasolução do intermediário 6 (0,004 mol) em ácido acético (10 ml). A misturafoi aquecida a 140°C durante 15 minutos em um forno de microonda. Ácidoacético foi evaporado. O óleo bruto foi dissolvido em DCM/EtOH (90/10). Acamada orgânica foi lavada com carbonato de potássio, secada (MgSO4),filtrada e o solvente foi evaporado. O resíduo (1 g) foi purificado por croma-tografia de coluna em sílica-gel (15-40 pm) (eluente: DCM/Me0H/NH40H90/10/0,5 a 90/10/1). As frações puras foram coletadas e o solvente foi eva-porado, produzindo 0,63 g (48%) do composto 3.

1H RMN (DMSO-de) δ 1,75-1,93 (4H, m), 2,65-2,78 (4H, m), 3,32(2H, s), 3,70 (2H, t, J = 6,1 Hz), 5,62 (1H, br, t, J = 7,6 Hz), 6,58-6,53 (5H,m), 6,95 (2H, d, J = 7,7Hz), 8,05 (2H, d, J = 7,6 Hz), 8,24 (1H, s).

LCMS (ES+) m/z 334 (M+1), R, 5,18, Método B.

Ponto de fusão 256°C (Kofler).

Exemplo B4

Preparação do composto 4

<formula>formula see original document page 45</formula>

Cloridrato de 4-bromo-piridina (0,002 mol) foi adicionado a umasolução do intermediário 8 (0,0022 mol) em ácido acético (2,8 ml). A misturafoi aquecida a 110°C durante 30 minutos, vertida em água gelada e basifica-da com carbonato de potássio a 10%. O precipitado foi filtrado e secado. Oresíduo (0 - 739 g) foi purificado por cromatografia de coluna em kromasil (5Mm) (eluente: DCM/Me0H/NH40H 96/4/0,4 a 88/12/1,2). As frações purasforam coletadas e o solvente foi evaporado, produzindo 0,018 g do composto 4.

1H RMN (DMSOd6) δ 6,32 (1 Η, br s), 6,68 (1 H, d, J = 5,6Hz),6,9 (1 H, dd, J = 10,2 Hz, J = 2,5 Hz), 6,55 (2H, d, J = 10,2 Hz), 7,0 (2 H, d, J= 10,2 Hz), 7,27 (1 Η, m), 7,32 (1 Η, d, J = 10,2 Hz), 7,7 (1 Η, br s), 8,17 (1Η, dd, J =10,2 Hz, J = 2,5 Hz), 8,37 (1 Η, brs), 10,9(1 Η, br s).LCMS (ES+) m/z 301 (M+1), R, 7-73, Método A.

Exemplo B5

Preparação do composto 5

<formula>formula see original document page 46</formula>

Uma solução de hidreto de alumínio e lítio a 1N em THF (1,0 ml)foi adicionada gota a gota a OcC a uma suspensão do intermediário 9 (249mg, 0,0010 mol). A mistura foi agitada durante 1 hora a 0°C. A reação foiextinguida a 0°C por adição lenta de uma solução de bissulfato de potássio a5% em água e extraída duas vezes com EtOAc. A camada orgânica foi se-parada, secada (MgSO4)1 filtrada, e o solvente foi evaporado para produzir o(6-metóxi-benzofuran-3-il)-acetaldeído. Em uma solução de N-4-piridinil-1,4-benzenodiamina em MeOH (5 ml) e ácido acético (5 gotas) foi adicionadocianoboroidreto de sódio (90 mg, 0,0014 mol) e o aldeído prévio dissolvidoem MeOH (1 ml). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 18horas. O solvente foi evaporado, o óleo residual apreendido em EtOAc e la-vado com uma solução saturada de hidrogeno carbonato de sódio. A cama-da orgânica foi separada, secada (MgSO4), filtrada e o solvente foi evapora-do. O resíduo foi lavado com MeOH e secado, produzindo 125 mg (34%) docomposto 5, ponto de fusão 184°C-186°C.

1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,23 (s, 1H), 8,01 (dd, 2H,J=6,3, J=1,5), 7,71 (s, 1H), 7,51 (d, 1H, J=8,5), 7,14 (d, 1H, J=2,1), 6,92 (d,2H, J=8,6), 6,85 (dd, 1H, J=8,5, J=2,2), 6,58 (m, 4H), 5,64 (t, 1H, J=5,6),3,77 (s, 3H), 3,30 (t, 2H, J=7,0), 2,48 (t, 2H, J=7,0).

MS (ES+) m/z 360 (M+1).

Exemplo B6

Preparação do composto 6<formula>formula see original document page 47</formula>

Ácido acético (algumas gotas), em seguida intermediário 13(0,0004 mol) foram adicionados gota a gota a uma solução de Ν-4-piridiníl-1,4-benzenodiamina (0,0008 mol) e cianoboroidreto de sódio (0,001 mol) emMeOH (4 ml). Intermediário 13 (0,0004 mol) foi dissolvido em MeOH (4 ml).

A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 20 horas, vertida emágua, lavada com NaHCO3 saturado e extraída com EtOAc. A camada orgâ-nica foi separada, secada (MgSO4), filtrada e o solvente foi evaporado. Oresíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (eluente:DCM/MeOH 85/15). As frações puras foram coletadas e o solvente foi eva-porado, produzindo 0,086 g (34%) do composto 6.

Tabela F-1 lista os compostos que foram preparados em um dosexemplos acima.

Tabela F-1

<table>table see original document page 47</column></row><table>C. Exemplo Farmacolóqico:

A capacidade dos compostos preservar p53 em células deA2780 foi medida com o ensaio imunossorvente ligado à enzima p53. O en-saio de p53 é um imunoensaio de enzima "sanduíche" empregando dois an-ticorpos policlonais. Um anticorpo policlonal, específico para a proteína dep53, foi imobilizado sobre a superfície das cavidades plásticas. Qualquer p53presente na amostra a ser analisada se ligará ao anticorpo de captura. Oanticorpo policlonal de detector biotinilado da mesma forma reconhece prote-ína de p53, e se ligará a qualquer p53; que foi retida pelo anticorpo de captu-ra. O anticorpo de detector, sucessivamente, é ligado por estreptavidina con-jugada por peroxidase de rábano picante. O peroxidase de rábano picantecatalisa a conversão de o-fenileno diamina de substrato cromogênico, a in-tensidade da qual é proporcional à quantidade de ligação de proteína de p53à placa. O produto de reação colorido é quantificado utilizando um espec-trômetro. Quantificação é obtida pela construção de uma curva-padrão utili-zando concentrações conhecidas de proteína p53 alvejada de HIS recombi-nante purificada (veja exemplo C.1.).

Atividade celular dos compostos da fórmula (I) foi determinadaem células de tumor U87MG utilizando um ensaio colorimétrico para toxici-dade celular ou sobrevivência (veja exemplo C.2).

Células de U87MG são células de glioblastoma humanas comp53 tipo silvestre. Nesta linhagem celular MDM2 firmemente controla ex-pressão de p53.

C.1. P53 ELISA

Células de A2780 (ATCC) foram cultivadas em RPMI 1640 su-plementadas com 10% de soro de bezerro fetal (FCS), 2 mM de L-glutaminae gentamicina a 37-C em uma incubadora umedecida com 5% de CO2.

Células A2780 foram semeadas em 20,000 células por cavidadeem uma placa de 96 cavidades, cultivadas durante 24 horas e tratadas comcomposto durante 16 horas a 37°C em uma incubadora umedecida. Depoisda incubação, as células foram lavadas uma vez com solução salina tampo-nada de fosfato e 30 μl, por cavidade, tampão de RIPA de sal baixo (20 mMde íris, pH 7,0, 0,5 mM de EDTA, 1% de Nonidet P40, 0,5% de DOC, 0,05%de SDS, 1 mM de PMSF, 1 μ g/m I de aprotinina e 0,5 μ/ml de leupeptina) foiadicionado. Placas foram colocadas em gelo durante 30 minutos para com-pletar a lise. Proteína p53 foi detectada em Iisados utilizando o ELISA sandu-íche, descrito abaixo.

Placas de 96 cavidades EIA/RIA de poliestireno de ligação alta(Costar 9018) foram revestidas com o anticorpo de captura pAb1801 (Abcamab28-100) em uma concentração de 1 μg/ml em tampão de revestimento(0,1 M NaHCO3 pH 8,2), 50 μΙ por cavidade. O anticorpo foi permitido aderirdurante a noite a 4°C. Placas revestidas foram lavadas uma vez com solu-ção salina tamponada de fosfato (PBS)/0,05% de Tween 20 e 300 μΙ detampão de bloqueio (PBS, 17o de albuminas de soro bovinas (BSA)) foramadicionados, durante um período de incubação de 2 horas em temperaturaambiente. Diluições de proteína p53 rotulada por HIS recombinante purifica-da, variando de 3-200 ng/ml, foram preparadas em tampão de bloqueio eutilizadas como padrões. Placas foram lavadas duas vezes com PBS/0,05%de Tween 20 e tampão de bloqueio ou padrões foram adicionados a 80μΙ/cavidade. Aos padrões, 20 μΙ de tampão de Iise foram adicionados. Asamostras foram adicionadas às outras cavidades em 20 μΙ de Iisa-do/cavidade. Depois de uma incubação durante a noite a 4°C, as placas fo-ram lavadas duas vezes com PBS/0,05% de Tween 20. Alíquotas de 100 μΙde p53 anticorpo policlonal secundário (FL-393) (Tebubio, sc-6243) em umaconcentração de 1 μg/ml de tampão de bloqueio foram adicionadas a cadacavidade e permitidas aderir durante 2 horas em temperatura ambiente. Pla-cas foram lavadas três vezes com PBS/0,05% de Tween 20. HRP anticoelhode anticorpo de detecção (sc-2004, Tebubio) em 0,04 μg/ml em PBS/1% deBSA foi adicionado e incubado durante 1 hora em temperatura ambiente.Placas foram lavadas três vezes com PBS/0,05% de Tween 20 e 100 μΙ detampão de substrato foi adicionado (tampão de substrato foram preparadoslogo antes do uso adicionando-se 1 comprimido de 10 mg de o-fenileno dia-mina (OPD) de Sigma e 125 μΙ 3% de H2O2 a 25 ml de tampão de OPD: 35mM de ácido cítrico, 66 mM de Na2HPO4, pH 5,6). Depois de 5 a 10 minutos,reação de cor foi parada adicionando-se 50 μΙ de tampão de interrupção (1M de H2SO4) por cavidade. A absorvência em comprimentos de onda duaisde 490/655 nm foi medida utilizando uma leitora de microplaca Biorad e osresultados foram, em seguida, analisados. Para cada experiência, controle(não contendo fármaco) e uma incubação nula (não contendo célula ou fár-maco) foram conduzidos em paralelo. O valor em branco foi subtraído detodo o controle e valores de amostra. Para cada amostra, o valor de p53 (emunidades de absorvência) foi expresso como a porcentagem do valor parap53 presente no controle. Preservação de porcentagem mais alta do que140% foi definida como significante. Aqui, os efeitos de compostos teste sãoexpressos como a dose mais baixa produzindo pelo menos 140% do valorpara p53 presente no controle (LAD) (veja tabela F-2).

C.2. Ensaio de proliferação

Todos os compostos testados foram dissolvidos em DMSO eoutras diluições foram feitas em meio de cultura. Concentrações de DMSOfinais nunca excederam 0,1% (v/v) em ensaios de proliferação celular. Con-troles continham células U87MG e DMSO sem composto e nulos continhamDMSO, porém, nenhuma célula.

Células U87MG foram semeadas em placas de cultura de célulade 96 cavidades em 3000 células/cavidade/100 μΙ. 24 horas depois, o meiofoi mudado e o composto e/ou solvente foram adicionados em um volumefinal de 200 μΙ. Seguindo 4 dias de incubação, o meio foi substituído por 200μΙ de meio fresco e crescimento celular foi avaliado utilizando um ensaiocom base em MTT. Portanto, 25 μΙ da solução de MTT (0,5% de grau depesquisa de MTT de Serva em solução salina tamponada de fosfato) foramadicionados a cada cavidade e as células foram também incubadas durante2 horas a 37°C. O meio foi, em seguida, cuidadosamente aspirado e o pro-duto de MTT-formazana azul foi dissolvido adicionando-se a cada cavidade25 μΙ de 0,1 M de glicina e 100 μΙ de DMSO. As placas foram agitadas duran-te outros 10 minutos em um agitador de microplaca antes de ler absorvênciaem 540 nm por uma leitora de microplaca Biorad. Dentro de uma experiên-cia, os resultados para cada condição experimental são os meios de 3 cavi-dades de réplica. Para propósitos de avaliações iniciais, compostos foramtestados em uma única concentração fixa de 10"5 M. Para compostos ativos,as experiências foram repetidas para estabelecer curvas de resposta deconcentração totais. Para cada experiência, controles (não contendo fárma-co) e uma incubação nula (não contendo célula ou fármaco) foram conduzi-dos em paralelo. O valor nulo foi subtraído de todo o controle e valores deamostra. Para cada amostra, o valor médio para crescimento celular (emunidades de absorvência) foi expresso como uma porcentagem do valor mé-dio para crescimento celular do controle. Quando apropriado, valores de IC50(concentração do fármaco, necessária para reduzir o crescimento celular em50% do controle) foram computados utilizando-se a análise de unidade paradados classificados (Finney, D.J., Probit Analyses, 2a Ed. Capítulo 10, Gra-ded Responses, Cambridge University Press, Cambridge 1962). Aqui, osefeitos de compostos teste são expressos como plC50 (o valor de Iog negati-vo do valor de IC5o) (veja tabela F-2).

Em algumas das experiências o ensaio de proliferação foi adap-tado para e utilizado em placas de cultura de 384 cavidades (veja tabela F-2).

<table>table see original document page 51</column></row><table>

D. Exemplo de composição: Comprimidos revestidos com películaPreparação de núcleo de comprimido

Uma mistura de 100 g de um composto da fórmula (I), 570 g deIactose e 200 g de amido é bem-misturada e depois disso umedecida comuma solução de 5 g de dodecil sulfato de sódio e 10 g de polivinil-pirrolidonaem cerca de 200 ml de água. A mistura de pó úmida é peneirada, secada epeneirada novamente. Em seguida, são adicionados 100 g de celulose mi-crocristalina e 15 g de óleo vegetal hidrogenado. O total é bem-misturado eprensado em comprimidos, produzindo 10.000 comprimidos, cada qual com- preendendo 10 mg de um composto da fórmula (I).

Revestimento

Em uma solução de 10 g de metil celulose em 75 ml de etanoldesnaturado é adicionada uma solução de 5 g de etil celulose em 150 ml dediclorometano. Em seguida, são adicionados 75 ml de diclorometano e 2,5 ml de 1,2,3-propanotriol, 10 g de polietileno glicol são fundidos e dissolvidosem 75 ml de diclorometano. A última solução é adicionada à anterior e, emseguida, são adicionados 2,5 g de octadecanoato de magnésio, 5 g de poli-vinil-pirrolidona e 30 ml de suspensão de cor concentrada e o total é homo-genado. Os núcleos de comprimido são revestidos com a mistura desse mo- do obtida em um aparelho de revestimento.

Claims (10)

1. Composto de fórmula (I)1<formula>formula see original document page 53</formula>uma forma de /V-óxido, um sal de adição ou uma forma estereoquimicamente isomérica dos mesmos, em quem é 0, 1, ou 2 e quando m for 0, então, uma ligação direta é pretendida;η é 0, 1, 2, 3 ou 4 e quando η for 0, então, uma ligação direta épretendida;ρ é 0, ou 1 e quando ρ for 0, então, uma ligação direta é preten-dida;s é 0, ou 1 e quando s for 0, então, uma ligação direta é preten-dida;t é 0 ou 1 e quando t for 0, então, uma ligação direta é pretendi-da;R1 e R2 são cada qual independentemente hidrogênio, halo, Ci-6alquila, Ci-6alquilóxi, arilC^alquilóxi, heteroarilCi-6alquilóxi, feniltio, hidró-xiCi-6alquilcarbonila, Ci-6alquila substituída com um substituinte selecionadoa partir de amino, arila e heteroarila; ouC3-7Cicloalquila substituída com um substituinte selecionado apartir de amino, arila e heteroarila;A é um radical selecionado a partir de<formula>formula see original document page 53</formula><formula>formula see original document page 54</formula>R4 e R5 são cada qual independentemente selecionado a partirde hidrogênio, halo, C1-6alquila, polialoC1-6alquila, ciano, cianoC1-6alquila,hidróxiC1-6alquila, hidróxi, amino, C1-6alquilóxi, C1-6alquilcarbonila, metilsulfo-nilamino, arila ou heteroarila;Z é um radical selecionado a partir de<formula>formula see original document page 55</formula>em queR6 ou R7 é cada qual independentemente selecionado a partir dehidrogênio, halo, hidróxi, amino, Ci.6alquila, nitro, polialoCi.6alquila, ciano,cianoCi-6alquila, tetrazoloCi.6alquila, arila, heteroarila, arilCi-6alquila, hetero-arilCi-6alquila, aril(hidróxi)C1-6alquila, heteroaril(hidróxi)Ci.6alquila, arilcarbo-nila, heteroarilcarbonila, Ci-6alquilcarbonila, arilCvealquilcarbonila, heteroa-rilCi-6alquilcarbonila, C1^alquiloxi, C3-7CÍcloalquilcarbonila, C3-7cicloalquil(hidróxi)Ci-6alquila, arilCi-6alquilóxiCi-6alquila, Ci-6alquilóxiCi.6alquilóxiCi-6alquila, Ci-6alquilcarbonilóxiCi-6alquila, Ci-6alquiloxicarbonilCi.6alquilóxiCi-6alquila, hidróxiCi-6alquilóxiCi-6alquila, Ci-6alquiloxicarbonilC2.6alquenila, Ci-6alquilóxiCi.6alquila, Ci-6alquiloxicarbonila, Ci-6alquilcarbonilóxi, aminocarbonila, hidróxiCi-6alquila, aminoCi-6alquila, hidro-xicarbonila, hidroxicarbonilCvealquila e - (CH2)v-(C(=O)r)-(CHR10)u-NR8R9;em queν é 0, 1, 2, 3, 4, 5, ou 6 e quando ν for 0, então, uma ligação di-reta é pretendida;r é 0, ou 1 e quando r for 0, então, uma ligação direta é pretendida;u é 0, 1, 2, 3, 4, 5, ou 6 e quando u for 0, então, uma ligação di-reta é pretendida;R10 é hidrogênio ou Ci-6alquila;R8 e R9 são cada qual independentemente selecionado a partirde hidrogênio, Ci-12alquila, Cvealquilcarbonila, Ci-6alquilsulfonila, arilCi-6alquilcarbonila, C3.7Cidoalquila, C3-7Cicloalquilcarbonila, -(CH2)k-NR11R12, Ci-12alquila substituída com um substituinte selecionado a partir de hidróxi, hi-droxicarbonila, ciano, C1-6alquiloxicarbonila, C1-6alquilóxi, arila ou heteroarila;ou C3.7cicloalquila substituída com um substituinte selecionado a partir dehidróxi, C1-6alquiloxi, arila, amino, arilC1-6alquila, heteroarila ou heteroarilC1- 6alquila; ouR8 e R9 juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligadospodem opcionalmente formar uma morfolinila, piperidinila, pirrolidinila, pipe-razinila, ou piperazinila substituída com um substituinte selecionado a partirde C1-6lquila, arilC^alquila, arilCvealquiloxicarbonila, heteroarilC^ealquila,C3-7cicloalquila e C3.7cicloalquilC1-6alquila; em quek é O, 1, 2, 3, 4, 5, ou 6 e quando k for O, então, uma ligação di-reta é pretendida;R11 e R12 são cada qual independentemente selecionado a partirde hidrogênio, C1-Balquilal arilC^ealquiloxicarbonila, C3-7Cicloalquila, C1- 12alquila substituída com um substituinte selecionado a partir de hidróxi, C1-6alquilóxi, arila, e heteroarila; C3-7cicloalquila substituída com um substitu-inte selecionado a partir de hidróxi, C1-6lquiloxi, arila, arilC1-6alquila, hetero-arila, e heteroarilC1-6alquila; ouR11 e R12 juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligadospodem opcionalmente formar uma morfolinila, uma piperazinila ou uma pipe-razinila substituída com C1-6alquiloxicarbonila;arila é fenila ou naftalenila;cada fenila ou naftalenila pode opcionalmente ser substituídacom um, dois ou três substituintes cada qual independentemente seleciona-do a partir de halo, hidróxi, hidróxiCvealquila, Cvealquila, amino, PolialoC1.6alquila e C1-6alquilóxi; ecada fenila ou naftalenila pode opcionalmente ser substituídacom um radical bivalente selecionado a partir de metilenodióxi e etilenodióxi;heteroarila é piridinila, indolila, quinolinila, imidazolila, furanila,tienila, oxadiazolila, tetrazolila, benzofuranila ou tetrahidrofuranila;cada piridinila, indolila, quinolinila, imidazolila, furanila, tienila,oxadiazolila, tetrazolila, benzofuranila, ou tetrahidrofuranila pode opcional-mente ser substituída com um, dois ou três substituintes cada qual indepen-dentemente selecionado a partir de halo, hidróxi, Ci-6alquila, amino,polialoCi.6alquila, arila, arilCi-6alquila ou Cn-6alquilóxi; ecada piridinila, indolila, quinolinila, imidazolila, furanila, tienila,benzofuranila, ou tetrahidrofuranila pode opcionalmente ser substituída comum radical bivalente selecionado a partir de metilenodióxi ou etilenodióxi.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, em que;m é 0; η é 0 ou 2; ρ é 1; s é 0; t é 0; R1 e R2 são cada qual inde-pendentemente hidrogênio; A é um radical selecionado a partir de (a-15), (a--21), (a-30), (a-39) ou (a-40);R4 e R5 são cada qual independentemente selecionado a partirde hidrogênio ou Ci-6alquilóxi; Z é o radical (b-2); ou R6 e R7 são cada qualindependentemente selecionado a partir de hidrogênio.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em quem é 0; η é 2; ρ é 1; s é 0; t é 0; R1 e R2 são cada qual indepen-dentemente hidrogênio; A é um radical selecionado a partir de (a-21), (a-39)ou (a-40);R4 e R5 são cada qual independentemente selecionado a partirde hidrogênio ou Ci-6alquilóxi;Z é o radical (b-2); ou R6 e R7 são cada qual independentementeselecionado a partir de hidrogênio.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, 2 ou 3, em que ocomposto é composto No. 2, composto No. 3 ou composto No. 5.<table>table see original document page 57</column></row><table>

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, 2, 3 ou 4, parauso como um medicamento.

6. Composição farmacêutica compreendendo veículos farmaceu-ticamente aceitáveis e como um ingrediente ativo uma quantidade terapeuti-camente eficaz de um composto de acordo com as reivindicações 1 a 4.

7. Processo de preparar uma composição farmacêutica comodefinida na reivindicação 6, em que os veículos farmaceuticamene aceitáveise um composto como definido nas reivindicações 1 a 4 são intimamente mis-turados.

8. Uso de um composto como definido na reivindicação 1, 2, 3ou 4, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de um distúr-bio mediado por uma interação de p53-MDM2.

9. Combinação de um agente anticâncer e um composto comodefinido na reivindicação 1,2,3 ou 4.

10. Processo, para preparar um composto como definido na rei-vindicação 1, caracterizado por,a) reagir um intermediário de fórmula (II) com um intermediáriode fórmula (III) em que W é uma saída apropriada tal como, por exemplo,halo,<formula>formula see original document page 58</formula>b) converter um intermediário de fórmula (IV) em compostos defórmula (I), em que ρ é 1, aqui referido como compostos de fórmula (l-a), napresença de hidreto de alumínio de lítio em um solvente adequado,<formula>formula see original document page 59</formula>c) reagir um carboxaldeído apropriado de fórmula (VI), com umintermediário de fórmula (V), na presença de um reagente apropriado, emum solvente adequado,<formula>formula see original document page 59</formula>d) reagir um intermediário de fórmula (II) com um carboxaldeídoapropriado de fórmula (VII) com a formação de um composto de fórmula (I),em que t é 1, aqui referido como compostos de fórmula (l-b), ou<formula>formula see original document page 59</formula>e) reagir um intermediário de fórmula (VIII) com hidreto de alu-mínio e lítio em um solvente adequado, com a formação de um composto defórmula (I), em que s é 1, aqui referido como compostos de fórmula (l-c),<formula>formula see original document page 60</formula>