BRPI0713031A2

BRPI0713031A2 - composto antitumoral, processo para obtenÇço deste, composiÇço farmacÊutica que o compreende e uso deste

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Publication number: BRPI0713031A2
Application number: BRPI0713031-7A
Authority: BR
Inventors: Laura Coello Molinero; Jose Fernando Reyes Benitez; Maria Garranzo Garcia-Ibarrola; Carmen Murcia Perez; Andres Francesch Solloso; Francisco Sanchez Sancho; Maria Del Carmen Cuevas Marchante; Rogelio Fernandez Rodriguez; Alberto Rodriguez Vicente; Ma Jesus Martin Lopez
Original assignee: Pharma Mar Sa
Priority date: 2006-06-16
Filing date: 2007-06-15
Publication date: 2013-03-12
Also published as: US8501968B2; RU2011133128A; US20120190870A1; AU2007259257A8; CN101679340A; AU2007259257A1; TW200811128A; CA2654334A1; SG174830A1; IL195676A0; ES2371942T3; SI2032551T1; US8324406B2; US20100048690A2; NO20111248L; RU2009101150A; BRPI0713031B1; ZA200810315B; EP2032551A1; EP2404913A3

Abstract

COMPOSTO ANTITUMORAL, PROCESSO PARA OBTENÇçO DESTE, COMPOSIÇçO FARMACÊUTICA QUE O COMPREENDE E USO DESTE. São proporcionados compostos antitumorais obtidos a partir de poríferos, da família Raspailiidae, gênero Lithoplocamia, espécie lithistoides e derivados dos mesmos.

Description

COMPOSTO ANTITUMORAL, PROCESSO PARA OBTENÇÃO DESTE, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA QUE O COMPREENDE E USO DESTE DESCRIÇÃO CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção se refere a novos compostos

antitumorais, composições farmacêuticas que os contém e seu uso como agentes antitumorais. ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Em 1990, Gunasekera SP et al. relataram o isolamento de uma nova lactona poliidroxilada, (+)-discodermolida, da esponja de águas profundas do Caribe Discodermia dissoluta (Gunasekera SP et al. J. Org. Chem. 1990, 55, 4912-4915 e J. Org. Chem. 1991, 56, 1346) .

J J

T Y

O OM ^ ^OH

O-

... "í

HO,. ,

1 J

HQj ^

. t. ,0 ,v' Π

O

(+)-Discodermolida

Este composto revelou-se ser um agente antimitótico

potente (Hung DT et al. Chem. Biol. 1996, 3, 287-293 e ter Haar E et al. Biochemistry 1996, 35, 243-250), possuindo um modo de ação similar a esse do agente anticâncer clinicamente provado paclitaxel (Schiff PB et al. Nature 1979, 277, 665-667) . Ambos os produtos naturais detêm o ciclo celular na fase M, promovem a formação de microtúbulo 10

e têm efeitos inibitórios similares contra o carcinoma de câncer de mama (CI50 de 2,4 nM e 2,1 nM, respectivamente).

Por outro lado, alguns dipeptideos lineares não usuais que contêm uma funcionalidade enamida N-acila foram isolados a partir de uma mixobactéria que pertence ao gênero Chondromyces (Kunze B et al. J. Antibiot. 1994, 47, 881-886 e Jansen R et al. J. Org. Chem. 1999, 1085-1089) . Especificamente, estes compostos são crocacinas A, B, C e D e são um grupo de inibidores de transporte de elétrons.

-íí--"

Mte Me

Offe OMe

H

O

Crocacina A; R = Me Crocacina B; R = H

i "-ι Ma Nte

I 1 - l JL

OMe ÕMe

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Croeacina C

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OMe ÕMe

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Croeaeina D

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As crocacinas A-D inibem moderadamente o crescimento de algumas bactérias Gram-positivas e são inibidoras potentes de culturas de células animais e muitas leveduras e fungos. A mais ativa é a crocacina D que mostra um CIM de 1,4 ng/mL contra o fungo Saccharomyces cerevisiae e forte toxicidade (CI50 de 0,06 mg/L) para a cultura celular de fibroblasto de rato L929. O câncer é uma causa importante de morte em animais e seres humanos. Esforços imensos foram feitos e ainda estão sendo empreendidos a fim de obter um agente antitumoral ι ativo e seguro para ser administrado a pacientes que sofrem

de câncer. 0 problema a ser resolvido pela presente invenção é proporcionar compostos que são úteis no tratamento de câncer. SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Em um aspecto, a presente invenção é dirigida a compostos de fórmula geral I ou sais, tautômeros, pró- fármacos ou estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis

em que

R1 é selecionado de hidrogênio, ORa, OCORa, OCOORa, NRaRb, NRaCORb e NRaC(NRa)NRaRb;

cada R2 e R3 é selecionado independentemente de hidrogênio, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída, alquenila C2- Ci2 substituída ou não substituída e alquinila C2-Ci2 substituída ou não substituída;

cada R4i, R42, R43, R44, R45, R46, R47 e R4S é selecionado independentemente de hidrogênio, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída, alquenila C2-Ci2 substituída ou não substituída e alquinila C2-C12 substituída ou não substituída; cada R5, R6 e R7 é selecionado independentemente de hidrogênio, CORa, COORa, alquila C1-C12 substituída ou não substituída, alquenila C2-C12 substituída ou não substituída e alquinila C2-C12 substituída ou não substituída, ou R5 e R4S juntos com o átomo de N e o átomo de C correspondentes aos quais estão ligados podem formar um grupo heterocíclico substituído ou não substituído;

cada Ra e Rb é selecionado independentemente de hidrogênio, alquila C1-C12 substituída ou não substituída, alquenila C2- C12 substituída ou não substituída, alquinila C2-C12 substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído; e

cada linha pontilhada representa uma ligação adicional opcional.

Em outro aspecto, a presente invenção é dirigida a compostos de fórmula I ou sais, tautômeros, pró-fármacos ou estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos para uso como um medicamento, em particular como um medicamento para tratar câncer.

Em um aspecto adicional, a presente invenção também é dirigida ao uso de compostos de fórmula I ou sais, tautômeros, pró-fármacos ou estereoisômeros

farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos no tratamento de câncer, ou na preparação de um medicamento, preferivelmente para o tratamento de câncer. Outros aspectos da invenção são métodos de tratamento e compostos para uso nestes métodos. Portanto, a presente invenção proporciona ademais um método de tratar qualquer mamífero, particularmente um ser humano, afetado por câncer que compreende administrar ao indivíduo afetado uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto tal como definido acima.

Em outro aspecto, a presente invenção é dirigida a composições farmacêuticas que compreendem um composto de fórmula I ou sais, tautômeros, pró-fármacos ou estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis do mesmo junto com um carreador ou diluente farmaceuticamente aceitável.

A presente invenção também se refere ao isolamento dos compostos de fórmula I a partir de um porífero da família Raspailiidae, gênero Lithoplocamia, espécie lithistoides, o processo para obtê-los e a formação de derivados a partir destes compostos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DAS MODALIDADES PREFERIDAS

A presente invenção se refere a compostos de fórmula

geral I tal como definido acima.

Nestes compostos os substituintes podem ser selecionados de acordo com a seguinte orientação:

Os grupos alquila podem ser ramificados ou não ramificados e pref erivelmente têm desde 1 até aproximadamente 12 átomos de carbono. Uma classe mais preferida de grupos alquila tem desde 1 até aproximadamente 6 átomos de carbono. Ainda mais preferidos são os grupos alquila que têm 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono. Metila, etila, propila, isopropila e butila, incluindo terc-butila, sec-butila e isobutila são grupos alquila particularmente preferidos nos compostos da presente invenção. Outra classe preferida de grupos alquila tem desde 6 até aproximadamente átomos de carbono; e ainda mais preferivelmente 7, 8 ou r 6/122

9 átomos de carbono. Heptila, octila e nonila são os grupos alquila mais preferidos desta classe.

Os grupos alquenila e alquinila preferidos nos compostos da presente invenção podem ser ramificados ou não ramificados, têm uma ou mais ligações insaturadas e desde 2 até aproximadamente 12 átomos de carbono. Uma classe mais preferida de grupos alquenila e alquinila tem desde 2 até aproximadamente 6 átomos de carbono. Ainda mais preferidos são grupos alquenila e alquinila que têm 2, 3 ou 4 átomos de carbono. Outra classe preferida de grupos alquenila e alquinila tem desde 4 até aproximadamente 10 átomos de carbono, todavia mais preferivelmente de 6 a aproximadamente 10 átomos de carbono; e ainda mais preferivelmente 7, 8 ou 9 átomos de carbono. Os grupos arila adequados nos compostos da presente

invenção incluem compostos de anéis múltiplos e simples, incluindo compostos de anéis múltiplos que contêm grupos arila separados e/ou fundidos. Os grupos arila típicos contêm desde 1 até 3 anéis separados ou fundidos e desde 6 até aproximadamente 18 átomos de anel de carbono. Preferivelmente, os grupos arila contêm desde 6 até aproximadamente 10 átomos de anel de carbono. Os grupos arila especialmente preferidos incluem fenila substituída ou não substituída, naftila substituída ou não substituída, bifenila substituída ou não substituída, fenantrila substituída ou não substituída e antrila substituída ou não substituída.

Os grupos heterocíclicos adequados incluem grupos heteroaromáticos e heteroalicíclicos que contêm desde 1 até 3 anéis separados ou fundidos e desde 5 até aproximadamente 18 átomos de anel. Preferivelmente, os grupos heteroaromáticos e heteroaliciclicos contêm desde 5 até >< aproximadamente 10 átomos de anel. Os grupos

heteroaromáticos adequados nos compostos da presente invenção contêm um, dois ou três heteroátomos selecionados de átomos de Ν, 0 ou S e incluem, por exemplo, coumarinila incluindo 8-coumarinila, quinolila incluindo 8-quinolila, isoquinolila, piridila, pirazinila, pirazolila,

pirimidinila, furila, pirrolila, tienila, tiazolila, isotiazolila, triazolila, tetrazolila, isoxazolila, oxazolila, imidazolila, indolila, isoindolila, indazolila, indolizinila, ftalazinila, pteridinila, purinila, oxadiazolila, tiadiazolila, furazanila, piridazinila, triazinila, cinolinila, benzimidazolila, benzofuranila, benzofurazanila, benzotiofenila, benzotiazolila,

benzoxazolila, quinazolinila, quinoxalinila, naftiridinila e furopiridila. Os grupos heteroaliciclicos adequados nos compostos da presente invenção contêm um, dois ou três heteroátomos selecionados de átomos de Ν, O ou S e incluem, por exemplo, pirrolidinila, tetrahidrofuranila,

dihidrofuranila, tetrahidrotienila, tetrahidrotiopiranila, piperidila, morfolinila, tiomorfolinila, tioxanila, piperazinila, azetidinila, oxetanila, tietanila,

homopiperidila, oxepanila, tiepanila, oxazepinila, diazepinila, tiazepinila, 1,2,3,6-tetrahidropiridila, 2- pirrolinila, 3-pirrolinila, indolinila, 2H-piranila, 4H- piranila, dioxanila, 1,3-dioxolanila, pirazolinila, ditianila, ditiolanila, dihidropiranila, dihidrotienila, dihidrofuranila, pirazolidinila, imidazolinila,

imidazolidinila, 3-azabiciclo[3.1.0]hexila, 3-

azabiciclo [4.1.0]heptila, 3H-indolila e quinolizinila.

Os grupos mencionados acima podem ser substituídos em uma ou mais posições disponíveis por um ou mais grupos adequados tais como OR', =0, SR', SOR', SO2R', NO2, NHR', N (R') 2, =N-R', NHCOR', N(CORf)2, NHSO2R', NR'C (=NR' ) NR'R', CN, halogênio, COR', COOR', OCOR', OCONHR', OCON(R')2, OH protegido, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído, em que cada um dos grupos R' é selecionado independentemente do grupo que consiste em hidrogênio, 0H, NO2, NH2, SH, CN, halogênio, C0H, CO-alquila, CO2H, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída, alquenila C2-Ci2 substituída ou não substituída, alquinila C2-Ci2 substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído. Onde tais grupos são substituídos em si, os substituintes podem ser escolhidos da lista anterior. Os substituintes halogênios adequados nos compostos da

presente invenção incluem F, Cl, Br e I.

Os grupos protetores adequados para OH são bem conhecidos pelos técnicos no assunto. Uma revisão geral de grupos protetores em química orgânica é proporcionada por Wuts, PGM e Greene TW em Protecting Groups in Organic Synthesis, 4a Ed. Wiley-Interscience e por Kocienski PJ em Protecting Groups, 3a Ed. Georg Thieme Verlag. Estas referências proporcionam seções sobre grupos protetores para OH. Todas estas referências são incorporadas como referência em sua totalidade. Exemplos de tais OH protegidos incluem éteres, silil éteres, ésteres, sulfonatos, sulfenatos e sulfinatos, carbonatos e ã carbamatos. No caso de éteres, o grupo protetor para o OH

pode ser selecionado de metila, metoximetila, metiltiometila, (fenildimetilsilil)metoximetila,

benziloximetila, p-metoxibenziloximetila, [(3,4-

dimetoxibenzil)oxi]metila, p-nitrobenziloximetila, o- nitrobenziloximetila, [(R)-I-(2-nitrofenil)etoxi]metila, (4-metoxifenoxi)metila, metil-guaiacol, [ (p-

fenilfenil)oxi]metila, t-butoximetila, 4-penteniloximetila, siloximetila, 2-metoxietoximetila, 2-cianoetoximetila, bis(2-cloroetoxi)metila, 2,2,2-tricloroetoximetila, 2- (trimetilsilil)etoximetila, mentoximetila, o-bis (2-

acetoxietoxi)metila, tetrahidropiranila,

fluorotetrahidropiraniIa, 3-bromotetrahidropiranila,

tetrahidrotiopiranila, 1-metoxiciclohexila, 4-

metoxitetrahidropiranila, 4-metoxitetrahidrotiopiranila, 4- metoxitetrahidrotiopiranila S,S-dióxido, 1-[(2-cloro-4- metil)fenil]-4-metoxipiperidin-4-ila, 1-(2-fluorofenil)-4- metoxipiperidin-4-ila, 1-(4-clorofenil)-4-metoxipiperidin- 4-ila, 1,4-dioxan-2-ila, tetrahidrofuranila,

tetrahidrotiofuranila, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahidro-7,8,8- trimetil-4,7-metanobenzofuran-2-ila, 1-etoxietila, l-(2-

«

cloroetoxi)etila, 2-hidroxietila, 2-bromoetila, l-[2- (trimetilsilil)etoxi]etila, 1-metil-l-metoxietila, 1-metil- 1-benziloxietila, 1-metil-l-benziloxi-2-fluoroetila, 1- metil-l-fenoxietila, 2,2,2-tricloroetila, 1,1-dianisil- 2,2,2-tricloroetila, 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2- fenilisopropila, 1-(2-cianoetoxi)etila, 2-

trimetilsililetila, 2-(benziltio)etila, 2-

fenilselenil)etila, t-butila, ciclohexila, 1-metil-l'- ciclopropilmetila, alila, prenila, cinamila, 2-fenalila, propargila, p-clorofenila, p-metoxifenila, p-nitrofenila, 2,4-dinitrofenila, 2,3,5,β-tetrafluoro-4-

(trifluorometil)fenila, benzila, p-metoxibenzila, 3,4- dimetoxibenzila, 2,6-dimetoxibenzila, o-nitrobenzila, p- nitrobenzila, pentadienilnitrobenzila,

pentadienilnitropiperonila, halobenzila, 2,6-

diclorobenzila, 2,4-diclorobenzila, 2,β-difluorobenzila, p- cianobenzila, fluorobenzila, 4-fluoroalcoxibenzila,

trimetilsililxilila, p-fenilbenzila, 2-fenil-2-propila, p- acilaminobenzila, p-azidobenzila, 4-azido-3-clorobenzila, 2-trifluorometilbenzila, 4-trifluorometilbenzila, p-

(metilsulfinil)benzila, p-siletanilbenzila, 4-

acetoxibenzila, 4-(2-trimetilsilil)etoximetoxibenzila, 2- naftilmetila, 2-picolila, 4-picolila, 3-metil-2-picolil-N- óxido, 2-quinolinilmetila, 6-metoxil-2-(4-metilfenil-4- quinolinemetila, 1-pirenilmetila, difenilmetila, 4- metoxidifenilmetila, 4-fenildifenilmetila, p,p'-

dinitrobenzidrila, 5-dibenzosuberila, trifenilmetila, tris(4-t-butilfenil)metila, D-naftildifenilmetila, p- metoxifenildifenilmetila, di(p-metoxifenil)fenilmetila,

tri(p-metoxifenil)metila, 4-(4'-

bromofenaciloxi)fenildifenilmetila, 4,4',4''-tris(4,5-

dicloroftalimidofenil)metila, 4, 4' , 4" -

tris(levulinoiloxifenil)metila, 4,4',4''-

tris(benzoiloxifenil)metila, 4, 4' -dimetoxi-3''-[N- (imidazolilmetil)]tritila, 4,4'-dimetoxi-3'' - [N-

(imidazoliletil)carbamoil]tritila, bis(4-metoxifenil)-1'- pirenilmetila, 4-(17-tetrabenzo[a,c,g,i]fluorenilmetil)- 4 , 4 ' '-dimetoxitritila, 9-antrila, 9-(9-fenil)xantenila, 9- feniltioxantila, 9-(9-fenil-10-oxo)antrila, 1,3-

benzoditiolan-2-ila e 4,5-bis(etoxicarbonil)-[1,3] -

dioxolan-2-ila, benzoisotiazolila de S,S-dióxido. No caso de silil éteres, o grupo protetor para o OH pode ser selecionado de trimetilsilila, trietilsilila,

triisopropilsilila, dimetilisopropilsilila,

dietilisopropilsilila, dimetilhexilsilila, 2-

norbornildimetilsilila, t-butildimetilsilila, t-

butildifenilsilila, tribenzilsilila, tri-p-xililsilila, trifenilsilila, difenilmetilsilila, di-t-butilmetilsilila, bis(t-butil)-1-pirenilmetoxisilila,

tris(trimetilsilil)silila, (2-hidroxiestiril)dimetilsilila, (2-hidroxiestiril)diisopropilsilila, t-

butilmetoxifenilsilila, t-butoxidifenilsilila, 1,1,3,3- tetraisopropil-3-[2-(trifenilmetoxi)etoxi]disiloxan-l-ila e silila de flúor. No caso de ésteres, o grupo protetor para o OH pode ser selecionado de formiato, benzoilformiato, acetato, cloroacetato, dicloroacetato, tricloroacetato, tricloroacetamidato, trifluoroacetato, metoxiacetato, trifenilmetoxiacetato, fenoxiacetato, p-clorofenoxiacetato, fenilacetato, difenilacetato, 3-fenilpropionato, propanoila de tipo de cadeia bisfluoro, 4-pentenoato, 4-oxopentanoato, 4, 4-(etilenoditio)pentanoato, 5[3-bis (4-

metoxifenil)hidroximetilfenoxi]levulinato, pivaloato, 1- adamantoato, crotonato, 4-metoxicrotonato, benzoato, p- fenilbenzoato, 2,4,6-trimetilbenzoato, 4-bromobenzoato, 2,5-difluorobenzoato, p-nitrobenzoato, picolinato,

nicotinato, 2-(azidometil)benzoato, 4-azidobutirato, (2- azidometil)fenilacetato, 2-{[(tritiltio)oxi]metil}benzoato, 2-{[(4-metoxitritiltio)oxi]metil}benzoato, 2-

{ [metil(tritiltio)amino]metil}benzoato, 2-{{ [ (4-

metoxitritil)tio]metilamino}-metil}benzoato, 2-

(aliloxi)fenilacetato, 2-(preniloximetil)benzoato, 6- (Ievuliniloximetil)-3-metoxil-2-nitrobenzoato, 6-

(levuliniloximetil)-3-metoxil-4-nitrobenzoato, A-

benziloxibutirato, 4-trialquilsililoxibutirato, 4-acetoxi- 2, 2-dimetilbutirato, 2,2-dimetil-4-pentenoato, 2-

iodobenzoato, 4-nitro-4-metilpentanoato, o-

(dibromometil)benzoato, 2-formilbenzenosulfonato, A-

(metiltiometoxi)butirato, 2-(metiltiometoximetil)benzoato, 2-(cloroacetoximetil)benzoato, 2-[ (2-

cloroacetoxi)etil]benzoato, 2-[2-(benziloxi)etil]benzoato, 2-[2-(4-metoxibenziloxi)etil]benzoato, 2,6-dicloro-4-

metilfenoxiacetato, 2, 6-dicloro-4-(1,1,3,3-

tetrametilbutil)fenoxiacetato, 2,4-bis(l,l-

dimetilpropil)fenoxiacetato, clorodifenilacetato,

isobutirato, monosuccinoato, (E)-2-metil-2-butenoato, o- (metoxicarbonil)benzoato, D-naftoato, nitrato, Ν,Ν,Ν',Ν'- tetrametilfosforodiamidato de alquila e 2-clorobenzoato. No caso de sulfonatos, sulfenatos e sulfinatos, o grupo protetor para o OH pode ser selecionado de sulfato, alilsulfonato, metanosulfonato, benzilsulfonato, tosilato, 2-[(4-nitrofenil)etil]sulfonato, 2-

trifluorometilbenzenosulfonato, A- monometoxitritilsulfenato, 2,4-dinitrofenilsulfenato de alquila, 2,2,5,5-tetrametilpirrolidin-3-ona-l-sulfinato, borato e dimetilfosfinotiolila. No caso de carbonatos, o grupo protetor para o OH pode ser selecionado de carbonato de metila, carbonato de metoximetila, carbonato de 9- fluorenilmetila, carbonato de etila, carbonato de bromoetila, carbonato de 2-(metiltiometoxi)etila, carbonato de 2,2,2-tricloroetila, carbonato de 1,l-dimetil-2,2,2- tricloroetila, carbonato de 2-(trimetilsilil)etila, carbonato de 2-[dimetil(2-naftilmetil)silil]etila,

carbonato de 2-(fenilsulfonil)etila, carbonato de 2- (trifenilfosfonio)etila, carbonato de eis-[4-

[[(metoxitritil)sulfenil]oxi]tetrahidrofuran-3-il]oxila, carbonato de isobutila, carbonato de t-butila, carbonato de vinila, carbonato de alila, carbonato de cinamila, carbonato de propargila, carbonato de p-clorofenila, carbonato de p-nitrofenila, carbonato de 4-etoxi-l-naftila, carbonato de 6-bromo-7-hidroxicoumarin-4-ilmetila,

carbonato de benzila, carbonato de o-nitrobenzila, carbonato de p-nitrobenzila, carbonato de p-metoxibenzila, carbonato de 3,4-dimetoxibenzila, carbonato de antraquinon- 2-ilmetila, carbonato de 2-dansiletila, carbonato de 2— (4- nitrofenil)etila, carbonato de 2-(2,4-dinitrofenil)etila, carbonato de 2-(2-nitrofenil)propila, carbonato de alquil- 2-(3,4-metilenodioxi-6-nitrofenil)propila, carbonato de 2- ciano-l-feniletila, carbonato de 2-(2-piridil)amino-1- feniletila, carbonato de 2-[N-metil-N-(2-piridil)]amino-1- feniletila, carbonato de fenacila, carbonato de 3', 5'- dimetoxibenzoina, ditiocarbonato de metila e tiocarbonato de S-benzila. E no caso de carbamatos o grupo protetor para o OH pode ser selecionado de dimetiltiocarbamato, N- fenilcarbamato, N-metil-N-(o-nitrofenil)carbamato. A menção destes grupos não deve ser interpretada como uma limitação do escopo da invenção, uma vez que foram mencionados como uma mera ilustração de grupos protetores para OH, mas grupos adicionais que têm dita função podem ser conhecidos pelo técnico no assunto e devem ser entendidos como também englobados pela presente invenção. A expressão "sais, derivados, pró-fármacos

farmaceuticamente aceitáveis" se refere a qualquer sal, éster, solvato, hidrato ou qualquer outro composto farmaceuticamente aceitável que, em administração ao paciente é capaz de proporcionar (diretamente ou indiretamente) um composto tal como descrito no presente documento. No entanto, será apreciado que sais não farmaceuticamente aceitáveis também estão dentro do escopo da invenção uma vez que esses podem ser úteis na preparação de sais farmaceuticamente aceitáveis. A preparação de sais, pró-fármacos e derivados poder ser levada a cabo por métodos conhecidos na técnica.

Por exemplo, sais farmaceuticamente aceitáveis de compostos proporcionados no presente documento são sintetizados a partir do composto de origem, que contém uma fração ácida ou básica, por meio de métodos quimicos convencionais. Geralmente, tais sais são, por exemplo, preparados reagindo as formas de ácido ou base destes compostos com uma quantidade estequiométrica do ácido ou da base apropriada em água ou em um solvente orgânico ou em uma mistura dos dois. Geralmente, são preferidos meios não aquosos como éter, acetato de etila, etanol, isopropanol ou acetonitrilo. Exemplos dos sais de adição de ácido incluem sais de adição de ácido minerais tais como, por exemplo, cloridrato, bromidrato, iodidrato, sulfato, nitrato, fosfato e sais de adição de ácido orgânicos tais como, por exemplo, acetato, trifluoroacetato, maleato, fumarato, citrato, oxalato, succinato, tartrato, malato, mandelato, metanosulfonato e p-toluenosulfonato. Exemplos dos sais de adição de álcali incluem sais inorgânicos tais como, por exemplo, sais de sódio, potássio, cálcio e amônio e sais de álcali orgânicos tais como, por exemplo, etilenodiamina, etanolamina, N,N-dialquilenoetanolamina, trietanolamina e sais de aminoácidos básicos. Os compostos da invenção podem estar em forma

cristalina ou como compostos livres ou como solvatos (por exemplo, hidratos) e pretende-se que ambas as formas estejam dentro do escopo da presente invenção. Métodos de solvatação são geralmente conhecidos na técnica. Qualquer composto que é um pró-fármaco de um composto

de fórmula I está dentro do escopo e do espirito da invenção. O termo "pró-fármaco" é usado em seu sentido mais amplo e engloba aqueles derivados que são convertidos in vivo nos compostos da invenção. Tais derivados facilmente ocorreriam aos técnicos no assunto e incluem, por exemplo, compostos em que um grupo hidroxila livre é convertido em um derivado de éster.

Qualquer composto referido no presente documento pretende-se que represente tal composto especifico, bem como certas variações ou formas. Em particular, os compostos referidos no presente documento podem ter centros assimétricos e, portanto, existem em formas enantioméricas diferentes. Todos os isômeros óticos e estereoisômeros dos compostos referidos no presente documento e misturas dos mesmos, são considerados dentro do escopo da presente invenção. Assim, qualquer composto dado referido no presente documento pretende-se que represente qualquer um de um racemato, uma ou mais formas enantioméricas, uma ou mais formas diastereoméricas, uma ou mais formas atropisoméricas e misturas das mesmas. Particularmente, os compostos da presente invenção representados pela fórmula I descrita acima podem incluir enantiômeros dependendo de sua assimetria ou diastereoisômeros. É também possível estereoisomerismo com relação a dupla ligação, portanto, em alguns casos a molécula poderia existir como isômero (E) ou isômero (Z). Se a molécula contém várias duplas ligações, cada dupla ligação terá seu próprio estereoisomerismo, que pode ser o mesmo ou diferente do estereoisomerismo das outras duplas ligações da molécula. Os isômeros individuais e as misturas de isômeros estão dentro do escopo da presente invenção.

Além disso, os compostos referidos no presente documento podem existir como isômeros geométricos (isto é, isômeros eis e trans) , como tautômeros, ou como atropisômeros. Especificamente, o termo tautômero se refere a um de dois ou mais isômeros estruturais de um composto, que existem em equilíbrio e são facilmente convertidos de uma forma isomérica em outra. Pares tautoméricos comuns são amina-imina, amida-imida, ceto-enol, lactama-lactima, etc. Adicionalmente, qualquer composto referido no presente documento pretende-se que represente hidratos, solvatos e polimorfos e misturas dos mesmos quando tais formas existem no meio. Além disso, os compostos referidos no presente documento podem existir em formas marcadas de maneira isotópica. Todos os isômeros geométricos, tautômeros, atropisômeros, hidratos, solvatos, polimorfos e formas marcadas de maneira isotópica dos compostos referidos no presente documento e misturas dos mesmos, são considerados dentro do escopo da presente invenção.

Para proporcionar uma descrição mais concisa, algumas das expressões quantitativas dadas no presente documento não são qualificadas com o termo "aproximadamente". Entende-se que, se o termo "aproximadamente" é usado explicitamente ou não, qualquer quantidade dada no presente documento significa que se refere ao valor dado real e também significa que se refere à aproximação de tal valor dado que se inferiria razoavelmente baseado no técnico no assunto, incluindo equivalentes e aproximações devido às condições experimentais e/ou de medições para tal valor dado.

Em compostos de fórmula geral I, o Ri particularmente preferido é hidrogênio, ORa e OCORa, em que Ra é selecionado de hidrogênio e alquila Ci-Cx2 substituída ou não substituída. 0 Ra particularmente preferido é hidrogênio e alquila Cx-C6 substituída ou não substituída; e ainda mais preferido é hidrogênio, metila, etila, propila, isopropila e butila, incluindo terc-butila. Hidrogênio, OH e metoxila são os grupos Ri mais preferidos.

Os R2 e R3 particularmente preferidos são hidrogênio e alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída. Os R2 e R3 mais preferidos são hidrogênio e alquila Ci-Ce substituída ou não substituída e ainda mais preferidos são hidrogênio.

Os R4I, R42, R43, R44, R45, R46, R47 e R48 particularmente preferidos são hidrogênio e alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída. Os R4i, R42, R43, R44, R45, R46, R47 e R48 mais preferidos são hidrogênio e alquila Ci-Cg substituída ou não substituída e ainda mais preferidos são hidrogênio, metila substituída ou não substituída, etila substituída ou não substituída, propila substituída ou não substituída, isopropila substituída ou não substituída e butila substituída ou não substituída, incluindo terc-butila substituída ou não substituída, isobutila substituída ou não substituída e sec-butila substituída ou não substituída. Os substituintes preferidos de ditos grupos são OR', =0, SR', SOR', SO2R', NO2, NHR', N(R')2, =N-R', NHCOR', N (CORf) 2, NHSO2R', NR'C (=NR') NR'R', CN, halogênio, COR', C00R', 0C0R', 0C0NHR', 0C0N(R')2, OH protegido, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído, em que cada um dos grupos R' é selecionado independentemente do grupo que consiste em hidrogênio, OH, NO2, NH2, SH, CN, halogênio, COH, CO- alquila, COOH, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída, alquenila C2-Ci2 substituída ou não substituída, alquinila C2-C12 substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída e grupo heterociclico substituído ou não substituído. Onde tais grupos são substituídos em si, os substituintes podem ser escolhidos da lista anterior. Os substituintes ainda mais preferidos dos grupos mencionados acima são 0H, SCH3, SH, NH2, NHC(=NH)NH2, CONH2, C00H, fenila, p-, m- ou o- hidroxifenila, indolila, incluindo 1-, 2- e 3-indolila e imidazolila, incluindo A- e 5-imidazolila. Hidrogênio, metila, isopropila, terc-butila e benzila são os grupos R41, R42, R43, R44, R45, R46, R47 e R4S mais preferidos. Especificamente, R42, R44, R45, R46 e R47 particularmente preferidos são hidrogênio. R4i e R43 particularmente preferidos são metila. E R48 particularmente preferido é isopropila, terc-butila ou benzila.

Os R5 e R6 particularmente preferidos são hidrogênio e alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída. Os R5 e R6 mais preferidos são hidrogênio e alquila Ci-C6 substituída ou não substituída; e ainda mais preferidos são hidrogênio, metila, etila, propila, isopropila e butila, incluindo terc-butila. Hidrogênio é o mais preferido. Em outra modalidade da invenção, também é preferido

que R5 e R48 juntos com o átomo de N e o átomo de C correspondentes aos quais estão ligados formem um grupo heterociclico substituído ou não substituído. 0 grupo heterociclico preferido é pirrolidinila, incluindo 1-, 2- e 3-pirrolidinila.

0 R7 particularmente preferido é hidrogênio, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída e alquenila C2-Ci2 substituída ou não substituída e mais preferivelmente é hidrogênio, alquila C1-Ci2 substituída e alquenila C2-C12 substituída. A alquila substituída e a alquenila substituída preferida podem apresentar não somente um, mas dois ou mais substituintes. Os grupos alquila mais preferidos são aqueles que têm desde 6 até aproximadamente 10 átomos de carbono; e ainda mais preferivelmente 7, 8 ou 9 átomos de carbono. Heptila, octila e nonila são os grupos alquila mais preferidos. Por outro lado, os grupos alquenila mais preferidos são aqueles que têm desde 6 até aproximadamente 10 átomos de carbono; e ainda mais preferivelmente 7, 8 ou 9 átomos de carbono. Octa-1,6- dienila, octa-1,5-dienila, octa-1,4-dienila, octa-1,3- dienila, nona-1,7-dienila, nona-1,6-dienila, nona-1,5- dienila, nona-1,4-dienila, nona-1,3-dienila, hepta-1,5- dienila, hepta-1,4-dienila, hepta-1,3-dienila são os grupos alquenila mais preferidos. Os substituintes preferidos para ditos grupos alquila e alquenila são OR' , =0, SR' , SOR' , SO2R', NO2, NHR', N (R') 2, =N-R', NHCOR', N(CORf)2, NHSO2R', NR'C(=NR')NR'R', CN, halogênio, COR', C00R', 0C0R', 0C0NHR', 0C0N(R')2, OH protegido, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído, em que cada um dos grupos R' é selecionado independentemente do grupo que consiste em hidrogênio, 0H, NO2, NH2, SH, CN, halogênio, C0H, CO-alquila, C00H, alquila C1-C12 substituída ou não substituída, alquenila C2-Ci2 substituída ou não substituída, alquinila C2-Ci2 substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído. Onde tais grupos são substituídos em si, os substituintes podem ser escolhidos da lista anterior. Os substituintes mais preferidos para os grupos alquila e alquenila acima mencionados são halogênio, OR', =0, OCOR', OCONHR', OCON (R') 2 e OH protegido, em que cada um dos grupos R' é preferivelmente selecionado de hidrogênio, alquila C1-C12 substituída ou não substituída, alquenila C2-C12 substituída ou não substituída, alquinila C2-Ci2 substituída ou não substituída e arila substituída ou não substituída. Os substituintes ainda mais preferidos para estes grupos alquila e alquenila são halogênio, OR', =0, OCONHR', OCON(R')2 e OH protegido em que o grupo protetor para o OH é preferivelmente selecionado de trimetilsilila, trietilsilila, triisopropilsilila, dimetilisopropilsilila, dietilisopropilsilila, dimetilhexilsilila, 2-

norbornildimetilsilila, t-butildimetilsilila, t-

butilmetoxifenilsilila, t-butoxidifenilsilila, 1,1,3,3- tetraisopropil-3-[2-(trifenilmetoxi)etoxi]disiloxano-l-ila e silila de flúor e em que cada um dos grupos R' é mais preferivelmente selecionado de hidrogênio, alquila Ci-C6 não substituída e arila substituída ou não substituída. Cl, OH, =0, OCONH2, OCONH-fenila e OH protegido em que o grupo protetor para o OH é preferivelmente selecionado de trimetilsilila, trietilsilila, triisopropilsilila,

dimetilisopropilsilila, dietilisopropilsilila,

dimetilhexilsilila, 2-norbornildimetilsilila, t- butildimetilsilila, t-butildifenilsilila, tribenzilsilila, tri-p-xililsilila, trifenilsilila, difenilmetilsilila, di- t-butilmetilsilila, bis (t-butil)-1-pirenilmetoxisilila,

butilmetoxifenilsilila, t-butoxidifenilsilila, 1,1,3,3- tetraisopropil-3-[2-(trifenilmetoxi)etoxi]disiloxano-l-ila e silila de flúor, são os substituintes mais preferidos para estes grupos alquila e alquenila. É particularmente preferida a presença de uma ou mais

ligações adicionais nos lugares indicados com uma linha pontilhada. É mais preferida a presença de uma ligação adicional em todos os lugares indicados com uma linha pontilhada. Além disso, a estereoquimica de cada dupla ligação pode existir como (E) ou (Z). Os isômeros individuais e misturas dos isômeros estão dentro do escopo da invenção.

Mais particularmente, a invenção proporciona compostos de fórmula geral II ou sais, tautômeros, pró-fármacos ou estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos

em que

Ri é selecionado de hidrogênio, ORa, OCORa, OCOORa, NRaRb, NRaCORb e NRaC(NRa)NRaRb;

cada R4i, R43 e R4e é selecionado independentemente de hidrogênio, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída, alquenila C2-Ci2 substituída ou não substituída e alquinila C2-Ci2 substituída ou não substituída;

cada R5, R6 e R7 é selecionado independentemente de hidrogênio, CORa, COORa, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída, alquenila C2-Ci2 substituída ou não substituída e alquinila C2-C12 substituída ou não substituída, ou R5 e R48 juntos com o átomo de N e o átomo de C correspondentes aos quais estão ligados podem formar um grupo heterocíclico substituído ou não substituído; cada Ra e Rb é selecionado independentemente de hidrogênio, alquila C1-C12 substituída ou não substituída, alquenila C2- C12 substituída ou não substituída, alquinila C2-C12 substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído; e

cada linha pontilhada representa uma ligação adicional opcional.

Em compostos de fórmula geral II, o R1 particularmente preferido é hidrogênio, ORa e OCORa, em que Ra é selecionado de hidrogênio e alquila C1-C12 substituída ou não substituída. 0 Ra particularmente preferido é hidrogênio e alquila C1-Cg substituída ou não substituída; e ainda mais preferido é hidrogênio, metila, etila, propila, isopropila e butila, incluindo terc-butila. Hidrogênio, OH e metoxila são os grupos R1 mais preferidos.

Os R41, R43 e R48 particularmente preferidos são hidrogênio e alquila C1-C12 substituída ou não substituída. Os R4i, R43 e R48 mais preferidos são hidrogênio e alquila C1-C6 substituída ou não substituída e ainda mais preferido é hidrogênio, metila substituída ou não substituída, etila substituída ou não substituída, propila substituída ou não substituída, isopropila substituída ou não substituída e butila substituída ou não substituída, incluindo terc- butila substituída ou não substituída, isobutila substituída ou não substituída e sec-butila substituída ou não substituída. Os substituintes preferidos de ditos grupos são OR', =0, SR', SOR', SO2R', NO2, NHR', N(R')2, =N- R', NHCOR', N (COR') 2, NHSO2R', NR'C (=NR' ) NR'R', CN, halogênio, COR', COOR', OCOR', OCONHR', OCON(R')2, OH protegido, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído, em que cada um dos grupos R' é selecionado independentemente do grupo que consiste em hidrogênio, OH, NO2, NH2, SH, CN, halogênio, COH, CO-alquila, COOH, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída, alquenila C2-Ci2 substituída ou não substituída, alquinila C2-C12 substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído. Onde tais grupos são substituídos em si, os substituintes podem ser escolhidos da lista anterior. Os substituintes ainda mais preferidos dos grupos mencionados acima são OH, SCH3, SH, NH2, NHC(=NH)NH2, CONH2, COOH, fenila, p-, m- ou o- hidroxifenila, indolila, incluindo 1-, 2- e 3-indolila e imidazolila, incluindo 4- e 5-imidazolila. Hidrogênio, metila, isopropila, terc-butila e benzila são os grupos R4i, R43 e R48 mais preferidos. Especificamente, os R4I e R43 particularmente preferidos são metila e o R48 particularmente preferido é isopropila, terc-butila, ou benzila.

Os R5 e Rg particularmente preferidos são hidrogênio e alquila C1-C12 substituída ou não substituída. Os R5 e Rg mais preferidos são hidrogênio e alquila Ci-C6 substituída ou não substituída; e ainda mais preferidos são hidrogênio, metila, etila, propila, isopropila e butila, incluindo terc-butila. Hidrogênio é o mais preferido.

Em outra modalidade da invenção, também é preferido que R5 e R48 juntos com o átomo de N e o átomo de C correspondentes aos quais estão ligados formem um grupo heterocíclico substituído ou não substituído. 0 grupo heterocíclico preferido é pirrolidinila, incluindo 1-, 2- e 3-pirrolidinila.

0 R7 particularmente preferido é hidrogênio, alquila

C1-C12 substituída ou não substituída e alquenila C2-C12 substituída ou não substituída e mais preferivelmente é hidrogênio, C1-C12 alquila substituída e alquenila C2-C12 substituída. Os grupos alquila mais preferidos são aqueles que têm desde 6 até aproximadamente 10 átomos de carbono; e ainda mais preferivelmente 7, 8 ou 9 átomos de carbono. Heptila, octila e nonila são os grupos alquila mais preferidos. Por outro lado, os grupos alquenila mais preferidos são aqueles que têm desde 6 até aproximadamente 10 átomos de carbono; e ainda mais preferivelmente 7, 8 ou 9 átomos de carbono. Octa-I,6-dienila, octa-1,5-dienila, octa-1,4-dienila, octa-1,3-dienila, nona-1,7-dienila, nona- 1, β-dienila, nona-1,5-dienila, nona-1,4-dienila, nona-1,3- dienila, hepta-1,5-dienila, hepta-1,4-dienila, hepta-1,3- dienila são os grupos alquenila mais preferidos. Os substituintes preferidos para ditos grupos alquila e alquenila são OR', =0, SR', SOR', SO2R', NO2, NHR', N(R')2, =N-R', NHCOR', N (COR') 2, NHSO2R', NR'C (=NR' ) NR'R' , CN, halogênio, COR', COOR', OCOR', OCONHR', OCON(R')2, OH protegido, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído, em que cada um dos grupos R' é selecionado independentemente do grupo que consiste em hidrogênio, OH, NO2, NH2, SH, CN, halogênio, C0H, CO-alquila, COOH, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída, alquenila C2-Ci2 substituída ou não substituída, alquinila C2-Ci2 substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído. Onde tais grupos são substituídos em si, os substituintes podem ser escolhidos da lista anterior. Os substituintes mais preferidos para os grupos alquila e alquenila acima mencionados são halogênio, OR', =0, OCOR', OCONHR', OCON (R')2 e OH protegido, em que cada um dos grupos R' é preferivelmente selecionado de hidrogênio, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída, alquenila C2-C12 substituída ou não substituída, alquinila C2-C12 substituída ou não substituída e arila substituída ou não substituída. Os substituintes ainda mais preferidos para estes grupos alquila e alquenila são halogênio, OR', =0, OCONHR', OCON(Rf)2 e OH protegido em que o grupo protetor para o OH é preferivelmente selecionado de trimetilsilila, trietilsilila, triisopropilsilila, dimetilisopropilsilila, dietilisopropilsilila, dimetilhexilsilila, 2- norbornildimetilsilila, t-butildimetilsilila, t-

butildifenilsilila, tribenzilsilila, tri-p-xililsilila, trifenilsilila, difenilmetilsilila, di-t-butilmetilsilila, bis(t-butil)-1-pirenilmetoxisilila, tris(trimetilsilil)silila, (2-hidroxiestiril)dimetilsilila, (2-hidroxiestiril)diisopropilsilila, t-

dimetilisopropilsilila, dietilisopropilsilila,

dimetilhexilsilila, 2-norbornildimetilsilila, t-

butildimetilsilila, t-butildifenilsilila, tribenzilsilila, tri-p-xililsilila, trifenilsilila, difenilmetilsilila, di- t-butilmetilsilila, bis(t-butil)-1-pirenilmetoxisilila,

butilmetoxifenilsilila, t-butoxidifenilsilila, 1,1,3,3- tetraisopropil-3-[2-(trifenilmetoxi)etoxi]disiloxano-l-ila e silila de flúor, são os substituintes mais preferidos para estes grupos alquila e alquenila.

É particularmente preferida a presença de uma ou mais ligações adicionais nos lugares indicados com uma linha pontilhada. É mais preferida a presença de uma ligação adicional em todos os lugares indicados com uma linha pontilhada. Além disso, a estereoquímica de cada dupla ligação pode existir como (E) ou (Z) . Os isômeros individuais e misturas dos isômeros estão dentro do escopo de a presente invenção.

Os compostos particularmente preferidos da invenção

O O

Os compostos 1-8 foram isolados a partir de um

porifero, da familia Raspailiidaef gênero Lithoplocamia, espécie lithistoides.

Uma amostra de Lithoplocamia lithistoides foi depositada no "Instituto de Ciências dei Mar y Limnología" da Universidad Nacional Autônoma de México em Mazatlan, no México, com o código de referência LEB-ICML-UNAM-11-2004. Esta esponja foi coletada manualmente usando mergulho autônomo em Madagascar (S 17° 06,071' / E 49° 51,385') em uma profundidade variando entre 6 e 20 m e sua descrição é a seguinte:

Família Raspailiidae: Raspailiidae Hentschel, 1923 são

esponjas com formas de crescimento incrustantes, massivas, lobulares, em forma de leque ou ramificadas, usualmente com uma superfície bastante híspida. Um esqueleto ectossomal especializado está presente tipicamente, consistindo em escovas de pequenos estilos finos (Hooper & Wiedenmayer 1994: fig. 17) ou óxeas (Hooper & Wiedenmayer 1994: fig. 5), cercando estilos grossos longos individuais ou óxeas. O esqueleto coanossomal varia desde um esqueleto axial comprimido até estruturas reticuladas exclusivamente ou plumo-reticuladas. As fibras de espongina usualmente envolvem completamente as espículas de núcleo (agulhas coanossomais, óxeas ou ambas). Uma categoria especial de estilos espinhosos (Hooper & Wiedenmayer 1994: fig. 22), ou modificações para estilos (por exemplo, Fig. 22-25, 28), fibras equinantes, projetam-se em ângulos direitos das fibras. Microscleras estão usualmente ausentes, embora ráfides simples (Hooper & Wiedenmayer 1994: fig. 109) ou feixes (tricodragma; Hooper & Wiedenmayer 1994: fig. 110) possam ocorrer em alguns gêneros. Raspailiidae são amplamente distribuídos, variando desde águas rasas até pelo menos 2460 m em profundidade (Hartman 1982) .

Gênero Lithoplocamia, espécie lithistoides são formas de crescimento incrustantes e massivas, o esqueleto coanossomal é uma reticulação de acantoestrôngilos densa isodictial ou irregularmente subisodictial, em 1 ou 2 categorias de tamanho, sem condensação axial, sem acantóstilos equinantes, com tratos extra-axial radial de estilos lisos e tipicamente sem um esqueleto ectossomal de raspailiideo especializado (embora quando apresenta espiculas ectossomais são óxeas delgadas longas); microscleras ausentes.

As amostras de Lithoplocamia lithistoides também foram coletadas no Kenia (S 04° 40' 5,5" / E 39° 26' 4,3" e S 03° 38' 36,5" / E 39° 53' 53,8") e na Tanzânia (S 08° 55' 31,7" / E 39° 34' 53,5" e S 05° 24,200' / E 39° 47,730') em uma profundidade variando entre 30 e 40 m.

Adicionalmente, os compostos da invenção podem ser obtidos por meio de síntese. Por exemplo, o composto 1 pode ser feito juntando diferentes fragmentos tal como indicado no esquema 1. V7

R1O7CX ^OMe

RqSn

R11O

CO2R1 + RivHN

NH2

0 +

Fragmento A

R11O

CO2R1

Vr

OR

R11O

CHO

Fragmento B

V7 Ξ—CO2H

ORvi1

S

+ CHO O

DVIII

Fragmento C

H2N CO2H

RvlO

Fragmento D

RviO

V7 OR11

RO'

Esquema 1

onde R, R1, R11, R111, Riv, Rv, Rvi, Rv" e Rviii são o grupo desejado ou um grupo protetor apropriado conforme seja necessário.

Este processo pode compreender as seguintes etapas chave:

a) Amidação do derivado iodoalquenila (Fragmento D) com o Fragmento C seguindo procedimentos padrão da

VIII literatura (Kozawa Y et al. Tetrahedron Lett. 2002, 43, 111) para proporcionar a enamida correspondente (fragmento CD) .

b) Reação de acoplamento de Stille entre o Fragmento A e o Fragmento B seguindo procedimentos conhecidos em síntese orgânica (Scott WJ et al. J. Am. Chem. Soe. 1984, 106, 4630; Labadie J W et al. J. Org. Chem. 1983, 48, 4634- 4642; Farina V et al. Organic Reactions 1998, Wiley) para obter o polieno linear (fragmento AB). c) Os fragmentos AB e CD podem ser acoplados seguindo

procedimentos padrão (Bodanszky M e Bodanszky A, The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, 1993) para obter o esqueleto de carbono do composto 1.

d) A desproteção do álcool OR11 seguida por lactonização pode ser alcançada de acordo com procedimentos

conhecidos em síntese orgânica (Greene e Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3a ed. , Wiley-Interscience; Burke e Danheiser, Handbook of Reagents for Organic Synthesis: Oxidizing and Reducing Agents, Wiley; Pla D et al. J. Org. Chem. 2005, 70, 8231).

e) Finalmente, a desproteção do álcool OR111 seguida por formação do carbamato pode ser alcançada por meio de procedimentos padrão da literatura (Love B et al. Organic Syntheses, Coll. Vol. 5, p. 162; Vol. 48, p. 32; Müller E

et al. Metoden der Organisehen Chemie (Houben-Weil), 4a ed., Vol. 8, G. Tieme, Stuttgart, 1952, p. 137) para obter o composto 1.

A seqüência das etapas por ser intercambiada para obter o composto final. Por exemplo, o fragmento BC pode ser preparado em um primeiro estágio e então acoplamento seqüencial com os fragmentos AeD proporciona o esqueleto de carbono do composto 1. Igualmente, o composto 1 pode ser preparado pelo acoplamento seqüencial dos fragmentos A, B, CeD em qualquer ordem. Outra opção é realizar a formação da fração de lactona no fragmento A antes do acoplamento com qualquer outro fragmento.

Os análogos de composto 1 podem ser sintetizados por um processo equivalente como aqueles descritos para o composto 1, encolhendo os substituintes apropriados dos compostos intermediários em cada caso.

Quando necessário, grupos protetores apropriados podem ser usados nos substituintes para assegurar que os grupos reativos não sejam afetados. A síntese pode ser projetada para empregar substituintes precursores que podem ser convertidos no estágio apropriado para o substituinte desejado. A saturação ou insaturação na estrutura de anel pode ser introduzida ou removida como parte da síntese. Materiais de partida e reagentes podem ser modificados como desejado para assegurar a síntese do composto pretendido. Além disso, os análogos também podem ser sintetizados a partir do composto 1 por procedimentos usuais em química orgânica sintética que são conhecidos por um técnico no assunto.

As rotas sintéticas mencionadas acima podem ser

modificadas conforme desejado para dar compostos estereoespecíficos, bem como misturas de estereoisômeros. E possível sintetizar estereoisômeros específicos ou misturas específicas por diversos métodos incluindo o uso de reagentes estereoespecíficos ou introduzindo centros quirais nos compostos durante a síntese. É possível introduzir um ou mais estereocentros durante a síntese e também inverter estereocentros existentes. Além disso, é possível separar estereoisômeros uma vez que o composto foi sintetizado por meio de técnicas de resolução padrão conhecidas pelo leitor especializado.

Uma característica importante dos compostos descritos acima de fórmula I e II é sua bioatividade e em particular sua citotoxicidade e atividade antimitótica.

Com esta invenção se proporcionam composições farmacêuticas inovadoras dos compostos de fórmula geral I e II que possuem atividades citotóxica e antimitótica e seu uso como agentes antitumorais. Assim, a presente invenção proporciona ademais composições farmacêuticas que compreendem um composto desta invenção, um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo com um carreador farmaceuticamente aceitável.

Exemplos de composições farmacêuticas incluem

quaisquer composições sólidas (comprimidos, pílulas, cápsulas, grânulos, etc.) ou líquidas (soluções, suspensões ou emulsões) para administração oral, tópica ou parenteral.

A administração dos compostos ou composições da presente invenção pode ser mediante qualquer método adequado, tal como infusão intravenosa, preparações orais e administração intraperitoneal e intravenosa. Prefere-se que tempos de infusão de até 24 horas sejam usados, mais preferivelmente 1-12 horas, com 1-6 horas sendo o mais preferido. Tempos de infusão curtos que permitem levar a cabo o tratamento sem uma estadia durante a noite em hospital são especialmente desejáveis. No entanto, a infusão poder ser de 12 a 24 horas ou ainda mais longa, se necessário. A infusão pode ser levada a cabo em intervalos adequados de 1 a 4 semanas. As composições farmacêuticas que contêm os compostos da invenção podem ser administradas mediante encapsulamento em nanoesferas ou lipossomas, em formulações de liberação sustentada por outros meios de administração padrão.

A dosagem correta dos compostos variará de acordo com a formulação particular, o modo de aplicação e o local particular, o hospedeiro e o tumor que está sendo tratado. Outros fatores como a idade, o peso corporal, o sexo, a dieta, o tempo de administração, a taxa de excreção, a condição do hospedeiro, as combinações de fármacos, as sensibilidades de reação e a gravidade da doença deverão ser levados em conta. A administração pode ser levada a cabo continuamente ou periodicamente dentro da dose máxima tolerada.

Os compostos e composições desta invenção podem ser usados com outros fármacos para proporcionar uma terapia de combinação. Os outros fármacos podem formar parte da mesma composição, ou serem proporcionados como uma composição separada para administração ao mesmo tempo ou em tempos diferentes.

As atividades antitumorais destes compostos incluem, mas não se limitam a, câncer de pulmão, câncer de colo, câncer de mama e câncer de colo uterino. Exemplos

EXEMPLO 1: DESCRIÇÃO DO ORGANISMO MARINHO E LOCAL DE COLETA Lithoplocamia lithistoides foi coletada manualmente usando mergulho autônomo em Madagascar (S 17° 06,071' / E 49° 51,385') em uma profundidade variando entre 6 e 20 m. O material animal foi identificado por José Luis Carballo (Universidad Autônoma de Méjico). A amostra do espécime foi depositada no "Instituto de Ciências dei Mar y Limnología" da Universidad Nacional Autônoma de México em Mazatlan, no México, com o código de referência LEB-ICML-UNAM-11-2004. EXEMPLO 2: ISOLAMENTO DO COMPOSTO 1

O espécime congelado do exemplo 1 (61 g) foi cortado em cubos e extraído com H2O (3 χ 200 mL) e então com uma mistura de MeOH: diclorometano (1:1, 3 χ 200 mL) a temperatura ambiente. Os extratos orgânicos combinados foram concentrados dando um produto bruto de 1,11 g. Este material foi submetido a VLC em Lichroprep RP-18 com um gradiente em etapas desde H2O até MeOH. 0 composto 1 (1,6 mg) foi isolado das frações eluindo

com MeOH por HPLC de fase reversa semipreparativa (SymmetryPrep C18 7 μιη, 7,8 χ 150 mm, gradiente H2OiMeCN desde 35 até 100% MeCN em 30 min, detecção de UV, fluxo 2,5 mL/min, tr 14,4 min.)· Composto 1: sólido branco amorfo. (+)HRESIMS m/z

606, 2940 [MtH]+ (Calculado para C3IH4535ClN3O7 606, 2946); 1H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja a tabela 1. Tabela 1. Dados de 1H e 13C RMN do composto 1 (CDCl3)

N0 1H (Multiplicidade, J) 13C N0 1H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161, 6 18 6,84 (br dd, 10/8, 9,7) 124, 5 2 - 145,2 19 4,80 (m) 105, 0 3 5,63 (dd, 6,5, 2,6) 108,2 20 2,46 (m) 2,09 (ddd, 14,1, 8,4, 8,1) 30,7 4 2,45 (ddd, 17,3, 11,5, 2,6) 2,37 (ddd, 17,3, 6,5, 4,1) 26, 1 21 4,41 (m) 74,9 4,24 (ddd, 11,5, 7,1, 4,1) 81,9 22 2,33 (m), 2H 33, 0 6 2,85 (ddq, 9,8, 7,1, 6,7) 37,1 23 5,61 (br t, 6,8) 122, 4 7 5,29 (d, 9,8) 134,1 24 - 132, 0 8 - 133, 7 25 2,06 (s), 3H 21,0 9 6,17 (d, 11,6) 140,2 26 3,66 (s), 3H 55, 4 7,30 (dd, 11,6, 11,6) 124, 6 27 1,15 (d, 6,7), 3H 16, 3 11 6,91 (dd, 11,6, 11,6) 137, 6 28 1,82 (s), 3H 17,1 12 5,70 (d, 11,6) 120, 7 29 - 34, 7 13 - 166, 3 30 1,04 (s), 3H 26,7 14 6,51 (d, 9,5) - 31 1,04 (s), 3H 26, 7 4,41 (d, 9,5) 60, 8 32 1,04 (s), 3H 26,7 16 - 168,2 33 - 157,2 17 8,78 (d, 10,8) -

NH2 3^v.

composto 1 EXEMPLO 3: ISOLAMENTO DOS COMPOSTOS 2, 3, 4, 5, 6 e 7

Um segundo grupo de amostras de Lithoplocamia lithistoides (7,66 kg) foi triturado e extraído exaustivamente com uma mistura de MeOH:diclorometano (1:1, 14 L, 2 χ 5 L, 4 L) . 0 solvente foi removido a vácuo e a solução aquosa restante foi extraída com EtOAc (12 L, 3><8 L) . A camada orgânica foi evaporada dando um produto bruto de 21,71 g.

Este material foi submetido a cromatografia em coluna RP-18 com um gradiente em etapas desde H2OiMeOH (4:6) até MeOH. Frações eluídas com H20:Me0H (2:8, 430 mg) foram agrupadas e submetidas a HPLC preparativa (Atlantis dC18, OBD, 5 μπι, 19 χ 150 mm, H2O isocrática: MeOH (39:61), fluxo: mL/min, detecção de UV) dando o compostos puros 1 (160,8 mg), 2 (13,2 mg) e 7 (1,8 mg) e misturas de 3 e 4 (11,4 mg) e 5 e 6 (10,0 mg). Os compostos puros 3 (5,1 mg) e 4 (2,6 mg) foram obtidos depois da purificação final da mistura por HPLC semipreparativa (X-Terra Prep RP-18, 10 Dm, 10 χ 150 mm, gradiente H20:Me0H desde 50 até 70% MeOH em 70 min, fluxo: 2,5 mL/min, detecção de UV). Os compostos 5 (3,6 mg) e 6 (1,0 mg) foram separados de uma maneira similar por HPLC semipreparativa (X-Terra Prep RP-18, 10 Dm, 10 χ 150 mm, H2O isocrática:MeOH (45:55), fluxo: 2,5 mL/min, detecção de UV). Composto 2: sólido branco amorfo. EM (ES) m/z 606,3

[M+H]628, 3 [M+Na]+; 1H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja a tabela 2. Composto 3: sólido branco amorfo. (+)HRESIMS m/z 628, 2774 [M+Na]+ (Calculado para C3iH4435ClN3O7Na 628,2760); 1H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja a tabela 3.

Composto 4: sólido branco amorfo. (+)HRESIMS m/z 594, 3152 [M+Na]+ (Calculado para C3iH45N3O7Na 594, 3150); 1H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja a tabela 4.

Composto 5: sólido branco amorfo. EM (ES) m/z 592,3 [M+H]614,3 [M+Na]+; 1H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja a tabela 5.

Composto 6: sólido branco amorfo. EM (ES) m/z 592,3

[M+H]614,3 [M+Na]+; 1H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja a tabela 6.

Composto 7: sólido branco amorfo. (+)HRESIMS m/z 427,2207 [M+Na]+ (Calculado para C22H3^N2O5Na 427, 2203); 1H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja a tabela 7.

Tabela 2. Dados de 1H e 13C RMN do composto 2 (CDCl3)

N0 1H (Multiplicidade, J) 13C N0 1H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161, 5 18 6,83 (ddd, 10,8, 8,9, 1,2) 124, 4 2 - 145,2 19 4,80 (m) 105, 5 3 5,61 (dd, 6,4, 3,1) 108, 1 20 2,43 (m) 2,12 (m) 30, 6 4 2,41 (ddd, 17,1, 11,3, 3,0) 2,34 m 26, 6 21 4,50 (m) 74, 9 4,18 (ddd, 11,3, 7,8, 4,3) 81, 6 22 2,36 (m), 2H 33,2 6 2,88 (ddq, 10,0, 7,8, 6,7) 37, 4 23 5,61 (br t, 6,5) 122,2 7 5,46 (br d, 10,0) 136, 5 24 - 132, 1 8 - 135, 6 25 2,07 (d, 1,0), 3H 21,0 9 6,41 (d, 15,5) 145,0 26 3,65 (s), 3H 55, 4 7,60 (dd, 15,5, 11,4) 124,2 27 1,16 (d, 6,7), 3H 16, 5 11 6,49 (dd, 11,4, 11,3) 142, 5 28 1,86 (d, 1,0), 3H 13, 1 12 5,63 (d, 11,3) 119, 0 29 - 34, 6 13 - 166, 5 30 1,05 (s), 3H 26, 6 14 6,39 (d, 9,4) - 31 1,05 (s), 3H 26, 6 4,44 (d, 9,4) 60, 7 32 1,05 (s), 3H 26, 6 16 - 168,3 33 - 157,0 17 8,50 (br d, 10,8) -

NH2

O^O

J21

25

Cl composto 2

Tabela 3. Dados de 1H e 13C RMN do composto 3 (CDCl3)

N0 1H (Multiplicidade, J) 13C N0 1H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161, 5 18 6,83 (br dd, 10,7, 9,6) 124, 4 2 - 145, 3 19 4,81 (m) 105, 4 3 5,61 (dd, 6,3, 3,0) 108, 1 20 2,47 (m) 2,10 (m) 30, 8 4 2,39 (m) 2,37 (m) 26, 3 21 4,43 (m) 75, 0 4,21 (ddd, 10,9, 7,6, 4,7) 81,7 22 2,34 (m), 2H 33, 0 6 2,90 (ddq, 10,0, 7,6, 6,6) 37, 4 23 5,62 (br t, 6,5) 122, 4 7 5,46 (br d, 10,0) 136, 4 24 - 132, 0 8 - 135,1 25 2,07 (s), 3H 21,0 9 6,51 (d, 15,3) 144,1 26 3,65 (s), 3H 55, 4 6,27 (dd, 15,3, 11,1) 125, 2 27 1,15 (d, 6,6), 3H 16, 6 11 7,25 (dd, 14,8, 11,1) 141,9 28 1,83 (d, 1,0), 3H 12, 9 12 5,96 (d, 14,8) 122, 9 29 - 35, 1 13 - 166, 0 30 1,03 (s), 3H 26, 6 14 6,39 (d, 9,3) - 31 1,03 (s), 3H 26, 6 4,43 (d, 9,3) 60, 8 32 1,03 (s), 3H 26, 6 16 - 168, 3 33 - 157, 9 17 8,82 (d, 10,7) -

26 MeO

27 28

ΝΊ5 12 H

HN

composto 3

Tabela 4. Dados de 1H e 13C RMN do composto 4 (CDCl3)

N0 1H (Multiplicidade, J) 13C N0 1H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161, 6 18 6,82 (ddd, 10,4, 9,1, 0,9) 124,2 2 - 145,2 19 4,82 (m) 105, 8 3 5,63 (dd, 6,6, 2,7) 108,2 20 2,46 (m) 2,12 (ddd, 14,1, 8,0, 8,0) 30, 9 4 2,44 (m) 2,39 (m) 26,1 21 4,45 (m) 75, 6 4,25 (ddd, 11,3, 7,0, 4,0) 81,9 22 2,35 (m), 2H 31,4 6 2,85 (ddq, 9,9, 7,0, 6,7) 37, 1 23 5,40 (m) 124, 9 7 5,29 (d, 9,9) 134, 1 24 5,60 (m) 127, 1 8 - 133, 8 25 1,63 (dd, 6,8, 1,0), 3H 13, 0 9 6,15 (d, 11,6) 140,2 26 3,66 (s), 3H 55, 4 7,31 (dd, 11,6, 11,6) 124, 4 27 1,15 (d, 6,7), 3H 16, 4 11 6,90 (dd, 11,6, 11,6) 137, 5 28 1,82 (s), 3H 17,1 12 5,72 (br d, 11,6) 120, 8 29 - 34, 8 13 - 166, 3 30 1,04 (s), 3H 26,7 14 6,53 (d, 9,6) - 31 1,04 (s), 3H 26, 7 4,44 (d, 9,6) 60, 7 32 1,04 (s), 3H 26,7 16 - 168,2 33 - 157, 6 17 8,69 (d, 10,4) -

27 28

29 O O

Λ Λ λ Í21

12 Η Jl

composto 4

Tabela 5. Dados de 1H e 13C RMN do composto 5 (CDCl3)

N0 1H (Multiplicidade, J) 13C N0 1H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161, 7 17 8,69 (d, 10,7) - 2 - 145, 1 18 6,84 (ddd, 10,7, 9,8, 0,9) 124, 5 3 5,64 (dd, 6,6, 2,6) 108, 3 19 4,80 (m) 105,2 4 2,48 (ddd, 17,4, 12,0, 2,6) 2,37 (ddd, 17,4, 6,6, 3,9) 26, 0 20 2,45 (m) 2,10 (ddd, 15,0, 7,1, 6,2) 30, 7 4,28 (ddd, 12,0, 6,6, 3,9) 81,9 21 4,44 (m) 74,8 6 2,85 (ddq, 9,7, 6,6, 6,7) 37, 0 22 2,33 (m), 2H 33, 0 7 5,31 (d, 9,7) 134,1 23 5,60 (br t, 7,1) 122, 4 8 - 133, 6 24 - 132, 0 9 6,17 (d, 11,5) 140, 3 25 2,06 (s), 3H 21,0 7,31 (dd, 11,5, 11,5) 124, 5 26 3,66 (s), 3H 55, 4 11 6,93 (dd, 11,5, 11,5) 137, 6 27 1,15 (d, 6,7), 3H 16, 2 12 5,73 (d, 11,5) 120, 5 28 1,82 (br s), 3H 17,1 13 - 166, 5 29 2,22 (m) 31, 1 14 6,54 (d, 9,2) - 30 1,00 (d, 6,8), 3H 19, 3 4,46 (dd, 9,2, 6,4) 58, 5 31 0,96 (d, 6,8), 3H 18, 0 16 - 169,1 32 - 157, 4

NH2

composto 5

Tabela 6. Dados de 1H e 13C RMN do composto 6 (CDCl3)

N0 1H (Multiplicidade, J) 13C N0 1H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161, 5 17 8,59 (d, 10,8) - 2 - 145,2 18 6,84 (br dd, 10,8, 8,7) 124, 5 3 5,61 (dd, 6,8, 2,8) 108,2 19 4,81 (m) 105, 5 4 2,41 (m), 2H 26, 6 20 2,42 (m) 2,13 (ddd, 14,1, 7,5, 7,2) 30, 6 4,18 (ddd, 11,6, 7,7, 4,2) 81,6 21 4,49 (m) 74,7 6 2,88 (ddq, 10,0, 7,7, 6,6) 37, 4 22 2,35 (m), 2H 33, 1 7 5,47 (br d, 10,0) 136, 5 23 5,61 (m) 122, 3 8 - 135, 5 24 - 132, 1 9 6,41 (d, 15,4) 145, 0 25 2,07 (s), 3H 21,0 7,61 (dd, 15,4, 11,3) 124,2 26 3,65 (s), 3H 55, 4 11 6,49 (dd, 11,3, 11,3) 142, 5 27 1,15 (d, 6,6), 3H 16, 5 12 5,63 (d, 11,3) 118, 9 28 1,86 (s), 3H 13, 1 13 - 166, 6 29 2,20 (m) 30, 9 14 6,34 (d, 8,9) - 30 1,01 (d, 6,7), 3H 19, 3 4,42 (dd, 8,9, 7,1) 58, 6 31 0,98 (d, 6,8), 3H 18,2 16 - 169, O 32 - 157, 0

NH2

<Α>

25

Cl composto β Tabela 7. Dados de 1H e 13C RMN do composto 7 (CDCl3)

N0 1H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161, 5 2 - 145, 3 3 5,62 (dd, 6,1, 3,2) 108, 1 4 2,43 (m) 2,38 (m) 26, 3 4,21 (ddd, 12,0, 7,0, 4,8) 81,8 6 2,86 (ddq, 9,9, 7,0, 6,6) 37, 4 7 5,29 (d, 9,9) 134,2 8 - 134,1 9 6,17 (d, 11,6) 140, 2 7,26 (dd, 11,6, 11,5) 124, 1 11 6,90 (dd, 11,5, 11,5) 137, 4 12 5,67 (d, 11,5) 120, 8 13 - 166,2 14 6,22 (d, 9,2) - 4,34 (d, 9,2) 59, 8 16 - 172, 5 17 3,66 (s), 3H 55, 4 18 1,17 (d, 6,6), 3H 16,7 19 1,85 (s), 3H 17,2

26 MeO - 34, 5 21 1,05 (s), 3H 26, 6 22 1,05 (s), 3H 26, 6 23 1,05 (s), 3H 26, 6

EXEMPLO 4: ISOLAMENTO DO COMPOSTO 8 Uma fração que continha o composto 1 (61,6 mg)

proveniente do procedimento de extração revelado no exemplo 3 foi purificado adicionalmente por HPLC semipreparativa (Symmetryprep C-18, 7 Dm, 7,8 χ 150 mm, H2O isocrática:CH3CN (55:45), fluxo: 2,3 mL/min, detecção de UV) e 0,9 mg do composto 8 foram obtidos em uma forma pura.

Composto 8: sólido branco amorfo. EM (ES) m/z 606,2 [M+H]\ 628, 3 [M+Na]+; 1H (500 MHz) e 13C RMN (125 MHz) veja a tabela 8.

Tabela 8. Dados de 1H e 13C RMN do composto 8 (CDCl3)

N0 1H (Multiplicidade, J) 13C N0 1H (Multiplicidade, J) 13C 1 - 161, 6 18 6,83 (ddd, 10,8, 8,7, 1,0) ) 124, 4 2 - 145,2 19 4,80 (m) 105,2 3 5,66 (br t, 4,6) 108, 4 20 2,11 (ddd, 14,2, 8,1, 7,8) 2,45 (m) 30, 7 4 2,45 (m), 2H 26, 6 21 4,46 (m) 75, 0 4,21 (ddd, 7,7, 7,7, 81,7 22 2,34 (t, 6,7), 2H 33, 0 1,1) 6 2,85 (ddq, 10,0, 7,7, 6,7) 37, 4 23 5,60 (td, 7,8, 1,2) 122, 3 7 5,35 (d, 10,0) 135, 1 24 - 132, 0 8 - 134, 6 25 2,06 (s), 3H 21,0 9 6,16 (d, 11,7) 140, 6 26 3,66 (s), 3H 55, 4 6,06 (dd, 11,7, 11,7) 125, 6 27 1,17 (d, 6,7), 3H 16, 6 11 7,71 (dd, 14,7, 11,7) 137, 9 28 1,91 (d, 0,7), 3H 17,0 12 5,95 (d, 14,7) 124, 5 29 - 34, 8 13 - 166, 0 30 1,04 (s), 3H 26, 6 14 6,35 (d, 9,5) - 31 1,04 (s), 3H 26, 6 4,47 (d, 9,5) 61,0 32 1,04 (s), 3H 26, 6 16 - 168, 3 33 - 157,1 17 8,65 (d,10,8) -

Cl composto

EXEMPLO 5: SÍNTESE DO FRAGMENTO A

O esquema 2 proporciona vários exemplos de síntese do fragmento A, de acordo com a nomenclatura proporcionada no esquema 1. TBSCX

,OH SOr Pir TBSO

TBSO

10

CO7Et DIBAL

TBSO 9

TBSO

11

Ph3P= 0 CO2Et

OH MnO7

TBSO

12

PPTS HO

Ph3PCH2I1 I TBS0

NaHMDS

SOrpir

TBSO

14

TBSO 13

TBSO

15

O-P(OEt)2 Xx^CO2Me

CO2Me

HCI

TBSO

16a X=OMe 16b X=H

MeOH

17a X=OMe 17b X=H

Esquema 2 Síntese do intermediário 9

TBSO^

TBSO

A uma solução a O0C de (2S,3S)-3,5-Bis{[(terc butil)dimetilsilil]oxi}-4-metilpentan-l-ol (P. Phukan, S Sasmal e Μ.Ε. Maier Eur. J. Org. Chem. 2003, 1733-1740) (50 g, 0,14 mol) em uma mistura de diclorometano/DMSO (331 mL/14 9 mL) , foi adicionado Et3N (96,1 mL, 0,69 mol) via funil de adição. Depois de 10 min, SO3-Pir (54,8 g, 0,34 mol) foi adicionado em porções e a solução foi agitada durante outras 2 h a 0°C. Então, foi diluída com diclorometano (800 ml) e extinta com HCl (0,5 N, 800 mL) . A camada orgânica foi decantada, seca com MgSO4 e concentrada a vácuo. A purificação por cromatografia em coluna

(hexano/EtOAc de 100:0 a 10:1) proporcionou 45 g (rendimento: 90%) de aldeído 9.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 9,79 (s, 1H) , 4,30 (m, 1H) , 3,65 (m, 2H) , 2,51 (m, 1H) , 1,69 (m, 2H) , 1,04 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 0, 85-0, 88 (m, 18H), 0,03-0, 07 (m, 12H) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 205, 4, 69, 4, 59, 6, 51, 7, 37, 5, 26, 1, 26, 0, 18, 4, 18, 2, 8, 0, -4, 3, -4, 5, -5,2. Síntese do intermediário 10

tolueno (625 mL) foi adicionado carboetoxietilideno- trifenilfosforano (113 g, 0,31 mol) e a mistura foi aquecida a 60°C ao longo de 17 h. Então, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 100:0 a 10:1) proporcionando 53,3 g (rendimento: 96%) de composto éster 10.

TBSO

20

Sobre uma solução de aldeído 9 (45 g, 0,12 mol) em 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 6,71 (dd, 1Η, J = 1,5, 10,2 Hz), 4,19 (m, 2Η) , 3,77 (m, 1Η) , 3,66 (m, 2Η) , 2,61 (m, 1Η) , 1,85 (d, 3Η, J = 1,5 Hz), 1,68 (m, 2Η) , 1,30 (t, 3Η, J = 7,2 Hz), 0,98 (d, 3Η, 6,9 Hz), 0,90 (m, 18H) , 0,05 (m,

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 168, 3, 145, 4, 126, 7, 72, 2, 60, 4, 59,7, 38,4, 38,0, 25,9, 18,2, 18,1, 14,3, 14,3, 12,6, -4,4, -4,6, -5,4.

TBSO

Sobre uma solução de éster 10 esfriada a -78°C (46,7 g, 0,105 mol) em THF anidro (525 mL) sob atmosfera de argônio, foi adicionado hidreto de diisobutilalumínio (DIBAL) 1 M em tolueno (231 mL, 0,231 mol) ao longo de um período de 10 min e a mistura foi agitada a -78°C. Depois de 4 horas, a reação foi extinta com MeOH (10 mL) e uma solução saturada de tartrato de sódio e potássio foi adicionada (800 mL) e diluída com EtOAc (1000 mL) . Esta mistura foi agitada durante 2 h e então a camada orgânica foi decantada. O resíduo aguoso foi extraído com EtOAc adicional (2 χ 400 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4) e o solvente foi evaporado. O óleo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 20:1 a 10:1) proporcionando 32,5 g (rendimento: 77%) de álcool 11.

12H).

Síntese do intermediário 11

10 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 5,31 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 3,98 (m, 2H) , 3,66 (m, 3H) , 2,49 (m, 1H) , 1,67 (s, 3H) , 1,70- 1,62 (m, 2H), 0,91 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 0,88 (m, 18H), 0,03 (m, 12H).

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 133, 9, 129, 8, 73, 1, 69, 1, 59, 9, 37,8, 37,5, 25,9, 18,3, 18,1, 15,9, 13,9, -4,4, -4,4, -5,3. Síntese do intermediário 12

Sobre uma solução de álcool 11 (31,2 g, 77,5 mmol) em

etil éter (387 mL) sob atmosfera de argônio, foi adicionado MnO2 (101 g, 1,16 mol) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. Esta mistura foi filtrada sobre uma coluna de sílica gel eluindo com EtOAc (3 L) e a solução resultante foi seca sob pressão reduzida proporcionando 29,1 g (rendimento: 94%) de aldeído 12. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 9,37 (s, 1H) , 6,44 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 3,82 (dd, 1H, J = 6,3, 10,8 Hz), 3,65 (m, 2H) , 2,82 (m, 1H), 1,74 (s, 3H) , 1,67 (m, 2H), 1,02 (d, 3H, J = 6, 9 Hz), 0,86 (s, 18H) , 0,04-0,01 (m, 12H) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 195, 4, 157, 8, 138, 3, 134, 5, 72, 0, 59,5, 36,7, 37,5, 25,8, 18,2, 18,1, 14,3, 9,4, -4,4, -4,5, -5,4.

Síntese do intermediário 13

25 A uma suspensão de iodeto de iodometiltrifenilfosfônio (Gilbert Stork, KZ. Tetrahedron letters 1989, 30(17), 2173) (96,3 g, 181. 7 mmol) em THF (727 mL) a 0°C, uma solução 1 M de hexametildisilazano de sódio (NaHMDS) (181,7 mL, 181,7 mmol) foi adicionada lentamente, via funil de adição, ao longo de um período de 10 min. Depois de agitar durante 5 min adicionais, a solução foi esfriada até -78°C e 1,3- dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(IH)-pirimidinona (DMPU) (43,9 mL, 363,4 mmol) foi então adicionada via cânula, seguido pela adição de aldeído 12 (29,1 g, 72,7 mmol) dissolvido em THF (727 mL). Δ temperatura foi mantida a -78°C enquanto a mistura de reação foi agitada durante 2 horas. Foi adicionado hexano (1 L) e a pasta resultante foi filtrada em celite e lavada com hexano adicional (3 L) . 0 filtrado foi evaporado sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 100:0 a 20:1) proporcionando 32 g (rendimento: 84%) de iodeto 13.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 6,73 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,09 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz), 5,57 (dd, 1H, J = 9,6, 1,2 Hz), 3,63-3,71 (m, 3H) , 2,58 (m, 1H) , 1,90 (s, 3H) , 1,70 (m, 2H) , 0,96 (dd, 3H, J = 6,6, 1,2 Hz), 0,88 (s, 18H) , 0,04 (m, 12H).

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 142, 3, 138, 1, 131, 8, 74, 6, 72, 9, 59,8, 38,1, 37,9, 26,0, 18,3, 18,2, 15,7, 15,7, -4,4, -5,2, -5,2.

Síntese do intermediário 14 HO

TBSO

A uma solução de iodeto 13 (12 g, 22,9 mmol) em EtOH (114 mL) foi adicionado p-toluenosulfonato de piridinio (PPTS) (2,01 g, 8,0 mmol) e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 25 horas. Então, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc 10:1) proporcionando 8,7 g (rendimento: 93%) de álcool 14. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 6,69 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,12 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,47 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 3,67-3,87 (m, 4H) , 2,71 (m, 1H) , 1,89 (s, 3H) , 1, 73-1, 86 (m, 2H) , 1,01 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 0,91 (s, 9H) , 0, 087-0, 115 (m, 6H) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 142, 4, 136, 4, 132, 6, 75,8, 75, 2, 60, 0, 38, 1, 36, 4, 26, 1, 18, 2, 17, 1, 16, 0, -4, 1, -4, 2. Síntese do intermediário 15

uma mistura de diclorometano/DMSO (50,9 mL/22,9 mL) , foi adicionado Et3N (14,8 mL, 106 mmol) via funil de adição. Depois de 10 min, SO3-pir (8,43 g, 53,0 mol) foi adicionado em porções e a solução foi agitada durante outras 2 h a 0°C. Então, foi diluída com diclorometano (800 mL) e extinta com HCl (0,5N, 50 mL) . A camada orgânica foi decantada, seca com MgSO4 e concentrada a vácuo. A

TBSO

A uma solução a O0C de álcool 14 (8,7 g, 21,2 mmol) em purificação por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc 10:1) proporcionou 6, 9 g (rendimento: 80%) de aldeido 15. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 9,89 (t, 1H, J= 1,5 Hz), 6,67 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,13 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,43 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 3,98 (m, 1H) , 2, 59-2, 69 (m, 3H) , 1,85 (s, 3H), 1,01 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 0,86 (s, 9H) , 0,06 (s, 3H), 0,03 (s, 3H).

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: D201, 8, 141, 9, 135, 2, 133, 3, 76, 3, 71, 9, 49, 3, 39, 3, 25, 8, 18, 0, 16, 7, 15, 9, -4, 4, -4, 5. Síntese do intermediário 16a

TBSO

A uma solução de

(metoxi[metoxicarbonil]metil)fosfonato de dietila (5,51 g, 14,45 mmol) e 18-coroa-6 (11,5 g, 43,34 mmol) em THF seco (390 mL) agitada sob atmosfera de argônio a -78°C, foi adicionada gota a gota uma solução de

bis(trimetilsilil)amida de potássio (KHMDS) 0,5 M (43,34 mL, 21,67 mmol). Depois de 15 min foi adicionado gota a gota aldeido 15 (5,9 g, 14,45 mmol) em THF seco ao longo de um período de 30 min e agitado a -78°C durante 90 min. Então, a reação foi extinta com uma solução de NH4Cl saturada (200 mL) , aquecida até temperatura ambiente e diluída com diclorometano (1000 mL) . A fase orgânica foi seca (Na2SO4) e evaporada sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia em coluna (hexano/Et20 20:1) proporcionou 4,2 g (59%) de (E)-16a puro. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 6,70 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,08 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,47 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 5,37 (t, 1H, J = 7,2 Hz), 3,78 (s, 3H), 3,60 (s, 3H) , 3,60 (m, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,52-2,67 (m, 2H), 1,83 (s, 3H), 0,99 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 0,89 (s, 9H), 0,05 (s, 3H), 0,04 (s, 3H).

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 163, 7, 145, 9, 142, 1, 137, 3, 132,1, 110,4, 75,4, 74,8, 55,4, 51,9, 38,1, 32,3, 25,9, 18,1, 16,5, 15,7, -4,3, -4,5. Síntese do intermediário 16b

10

A uma solução de [bis(2,2,2-

trifluoroetoxi)fosfinil]acetato de etila (0,16 mL, 0,66 mmol) e 18-coroa-6 (350 mg, 1,32 mmol) em THF seco (2,4 mL) agitada sob atmosfera de argônio a 0°C, foi adicionado gota a gota KHMDS (1,23 mL, 0,62 mmol). Depois de 30 min foi adicionado gota a gota aldeido 15 (180 mg, 0,44 mmol) em THF seco e agitado a -78°C durante 60 min. Então, a reação foi extinta com solução de NH4Cl saturada, aquecida até temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi seca (Na2SO4) e evaporada sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 100:1 a 15:1) proporcionou 172 mg (rendimento: 82%) de (Z)- 16b.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 6,70 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,44- 6,36 (m, 1H), 6,09 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 5,86-5,81 (m, 1H) , 5,47 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,14 (q, 2H, J = 7,2 Hz), 3,69- 3,64 (m, 1Η), 3, 06-3,00 (m, 1Η) , 2, 85-2, 75 (m, 1Η), 2,59- 2,51 (m, 1Η), 1,84 (s, 3Η) , 1,28 (t, 3Η, J = 7,2 Hz), 1,00 (d, 3Η, J = 6,6 Hz), 0,89 (s, 9Η) , 0,06 (s, 3Η), 0,05 (s, 3Η) .

EM (ES) m/z 501,0 [M+Na]+ Síntese do intermediário 17a

A uma solução de éster 16a (4,15 g, 8,39 mmol) em MeOH (125 mL) a temperatura ambiente, foi adicionado HCl a 37% (1,04 mL) e a mistura de reação foi agitada durante 6 horas. Então, a mistura foi neutralizada com uma solução saturada de NaHCO3 (pH 7-8) e o solvente orgânico foi evaporado sob pressão reduzida. A suspensão resultante foi extraída com diclorometano (3 χ 200 mL) , seca e evaporada. A filtração por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 10:1 a 2:1) proporcionou 2,76 g (rendimento: 94%) de lactona 17a.

1H RMN (500 MHζ, CDCl3) □: 6,68 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 6,20 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 5,63 (dd, 1H, J = 2,5, 6,5 Hz), 5,43 (d, 1H, J = 10,0 Hz), 4,19 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 2,84 (m, 1H), 2,55 (m, 1H), 2,43 (dc, J = 1H, 3,0, 12,0, 15,0, 18,0 Hz), 1,87 (s, 3H) , 1,16 (d, 3H, J = 6,5 Hz). 13C RMN (125 MHz, CDCl3) □: 161, 6, 145, 2, 141, 8, 134, 4, 132, 7, 108, 3, 81, 7, 77, 4, 55, 4, 37, 1, 26, 6, 16, 5, 16, 1. Síntese do intermediário 17b Δ uma solução de éster 16b (172 mg, 0,36 mmol) em MeOH (4,5 mL) a temperatura ambiente, foi adicionado HCl a 37% (0,03 mL) e a mistura de reação foi agitada durante 3 horas. Então, a mistura foi neutralizada com uma solução saturada de NaHCO3 (pH 7-8) e o solvente orgânico foi evaporado sob pressão reduzida. A suspensão resultante foi extraída com diclorometano, seca e evaporada. A filtração por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 10:1 a 5:1) proporcionou 70 mg (rendimento: 61%) de lactona 17b.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 6,91-6,85 (m, 1H) , 6,68 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,62 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,02 (dd, 1H, J = 2,7, 9,6 Hz), 5,45 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,19 (m, 1H) , 3,65 (s, 3H) , 4,26-4,18 (m, 1H) , 2, 92-2, 79 (m, 1H) , 2,57-2,48 (m, 1H) , 2, 39-2,28 (m, 1H) , 1,88 (s, 3H), 1,17 (d, 3H, J = 6,6 Hz).

EXEMPLO 6: SÍNTESE DO FRAGMENTO D

O esquema 3 proporciona vários exemplos de síntese de fragmento D, de acordo com a nomenclatura proporcionada no esquema 1. ^-^OTBS 18

i)mCPBA, DCM

ii)(R,R)Co-salen AcOH, H2O

^OTBS

BuLi, BF3OEt2, THF

19

OTBS

20

OTBS

22a R=PMB, Y=CI 22b R=TBDPS, Y=H

PMBTCA

Sc(OTf)3 CH2CI2

TBAF

THF

PPh3CH2U

24a R=PMB, Y=CI 24b R=TBDPS, Y=H

OTBS

i) Cp2ZrHCI, Tol

ii) NCS

21a R=PMB 21b R=TBDPS

OR

BAIB/TEMPO CH2CI2

23a R=PMB, Y=CI 23b R=TBDPS, Y=H

NaHMDS /THF -78°C

25a R=PMB1Y=CI 25b R=TBDPS, Y=H 25c R=TBS, Y= Cl

Esquema 3 Síntese do intermediário 19

O,,

^OTBS

A uma solução de intermediário 18 (72,3 g) em diclorometano (DCM) (918 mL) a temperatura ambiente foi adicionado em porções o ácido 3-cloroperbenzóico (m-CPBA) (100 g, 0,58 mol) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 18 h. 0 precipitado branco foi extinto com solução saturada de NaHCO3, extraído com DCM (3 χ 250 mL) e lavado novamente com solução saturada aquosa de NaHC03 (3 χ 250 mL) . As camadas orgânicas foram combinadas, secas com Na2SO4 e concentradas a vácuo. 0 óleo resultante foi purificado em silica gel (hexano-AcOEt; 15:1) proporcionando epóxido como um óleo incolor (64,5 g, 82%). A uma solução de epóxido racêmico (30 g) em THF anidro (7,5 mL) foi adicionado o complexo (R,R)Co(II) (448 mg, 0,74 mmol) , seguido por AcOH (0,14 mL) . A solução foi esfriada até 0°C e água (1,2 mL) foi adicionada gota a gota. A reação foi permitida aquecer até temperatura ambiente e agitar durante 18 h. Depois deste tempo os materiais voláteis foram concentrados a vácuo e o produto bruto foi diretamente carregado em uma coluna de silica gel. Cromatografia flash usando hexano/EtOAc (de 15:1 a 12:1) como eluente, proporcionou epóxido quiral (+)—19 (13,6 g, rendimento: 46%) como um óleo incolor. [□]D = +14,1 (c= 1, CHCl3) . 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 3,74 (t, 2H, J = 6,3 Hz), 3,01 (m, 1H) , 2,74 (t, 1H, J = 4,6 Hz), 2,48 (dd, 1H, J = 5,1, 3,1 Hz), 1,70 (m, 2H), 0,87 (s, 9H), 0,04 (s, 6H). 13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 60, 2, 50, 2, 47, 3, 36, 1, 26, 1, 18,4, -5,2. Síntese do intermediário 20

OH

Propino foi condensado a -78°C e dissolvido em THF anidro (165 mL) . n-Butillítio foi adicionado gota a gota sob Ar ao longo de 30 min e a suspensão branca resultante foi agitada durante 30 min adicionais a -78°C. Então, a solução de (+)(R)-2-[2-(terc-

butildimetilsililoxi)etil]oxirano 19 (23,7 g) em THF anidro (125 mL) foi adicionada gota a gota seguido por adição de BF3OEt2. A mistura foi agitada durante lha -78°C e durante uma hora adicional a 0°C. A reação foi extinta com solução saturada aquosa de NH4Cl (150 mL) e extraída com Et2O (3 χ 150 mL) .As camadas orgânicas combinadas foram secas com NaSO4, filtradas e concentradas. A cromatografia flash (hexano/EtOAc de 10:1 a 1:1) proporcionou 22,7 g, (rendimento: 80%) de álcool 20 como um óleo incolor. [□] D = +5,6 (c= 0,1, CHCl3).

1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ: 3, 75-3, 90 (m, 3H) , 3,47 (d, 1H, J = 2,7 Hz, OH), 2,34 (m, 2H) , 1,79, (t, 3H, J = 2,4 Hz), 1,75 (m, 2H), 0,89 (s, 9H), 0,07 (s, 6H).

13C RMN (125 MHz, CDCl3) δ: 77, 8, 75, 8, 70, 7, 62, 4, 37, 6, 27,6, 26, 1, 18, 3, 3, 7, -5, 3, -5, 4.

EM (ES) m/z 243,2 [M+H]\ 265, 2 [M+Na] + Síntese do intermediário 21a

A solução de intermediário 20 (22, 7 g) e p- metoxibenziltricloroacetimidato (PMBTCA) em DCM foi tratado com Sc(OTf)3. A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h (controle por TLC) e a reação foi concentrada a

(hexano/EtOAc de 50:1 a 15:1) dando 21a como um óleo amarelo (18,3 g; rendimento: 55%).

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,25 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 6,90

(d, 2H, J = 8,7 Hz), 4,45 (m, 2H) , 3,80 (s, 3H) , 3,65 (m,

OPMB

OTBS

vácuo e purificada por cromatografia em coluna 3Η), 2,40 (m, 2Η) , 1,82 (m, 2Η) , 1,79 (t, 3Η, J = 2,4 Hz), 0, 92 (s, 9Η) , 0, 05 (s, 6Η) . Síntese do intermediário 21b

OTBDPS

Uma solução de álcool 20 (2, 88 g, 11,9 rtimol) , cloreto de terc-butildifenilsilila (4,39 mL, 16,89 mmol) e 4- (dimetilamino)piridina (43,6 mg) em N,N-dimetilformamida (DMF) (14 mL) foi agitada durante a noite a temperatura ambiente. A mistura foi diluída com água e extraída com Et2O e a fase orgânica foi lavada com salmoura, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada. A cromatografia flash (hex/EtOAc, 95:1) deu o silil éter 21b (5,3 g, rendimento: 93%) como um líquido incolor. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7, 70-7, 66 (m, 4H) , 7, 40-7, 34 (m, 6H) , 3, 99-3, 95 (m, 1H) , 3, 70-3, 62 (m, 2H) , 2, 23-2, 22 (m, 2H), 1,84-1,81 (m, 2H), 1,69 (t, 3H, J = 2,7 Hz), 1,05 (s, 9H), 0,84 (s, 9H), 0,01 (s, 6H) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 136,1; 134,6; 129,7; 127,8; 77,8; 76,2; 69,9; 60,1; 39,6; 27,5; 27,2; 26,2; 19,6; 18,5; 3,7; -5,1.

Síntese do intermediário 22a

OPMB

A uma solução de 21a em tolueno anidro, sob Ar e a 0°C

foi adicionado reagente de Schwartz (cloridrato de bis(ciclopentadienil)zircônio(IV), Cp2ZrHCl) e a reação foi agitada 5 min a temperatura ambiente. A temperatura da reação foi elevada até 50°C ao longo de um período de 20 min e agitada a 50°C durante 2:30 h. Durante este tempo a solução de reação se tornou de cor laranja. A reação foi esfriada até 0°C e N-clorosuccinimida foi adicionada em uma porção. A agitação foi continuada durante 30 min a temperatura ambiente e a reação foi diluída com hexano/EtOAc (95:5; 500 mL). A remoção do sólido por filtração e evaporação de voláteis proporcionou 22a como um óleo amarelo que foi usado sem purificação adicional (15,1 g; rendimento: 8 6%).

[□] D = +20,5 (c = 1, CHCl3) .

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,25 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 6,87 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 5,64 (td, 1H, J = 7,8, 0,9 Hz), 4,45 (q, 2H, J = 11,1 Hz), 3,80 (s, 3H) , 3,70 (m, 2H), 3,62 (m, 1H), 2,27 (t, 2H, J = 6,9 Hz), 2,03 (s, 3H) , 1,70 (m, 2H), 0,89 (s, 9H), 0,05 (s, 6H).

13C RMN (75 MHz, CDCl3) □: 159, 4, 130, 9, 130, 7, 129, 6, 124,2, 114,0, 75,2, 71,4, 59,8, 55,5, 37,7, 33,8, 26,1, 21,2, 18,5, -5,1.

Síntese do intermediário 22b

Um frasco contendo uma mistura de 21b (4,73 g, 9,85 mmol), quinolina (0,582 mL, 4,92 mmol) e catalisador de Lindlar (2,18 g) em acetato de etila foi evacuado e lavado com jato de H2. A mistura de reação foi agitada a

OTBDPS

OTBS temperatura ambiente sob H2 (1 atm) durante 2 h e então filtrada através de um tampão de celite. 0 tampão foi enxaguado com acetato de etila e os filtrados combinados foram lavados com HCl a 0,1%. A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e concentrada dando o intermediário 22b (4,27 g, rendimento: 90%) como um óleo incolor que foi usado sem purificação adicional.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,70-7,67 (m, 4H), 7,44-7,36 (m, 6H) , 5,48 (m, 1H) , 5,36-5,27 (m, 1H) , 3, 95-3, 87 (m, 1H) , 3,71-3,55 (m, 2H), 2,16 (dd, 2H, J = 6,9, 6,3 Hz), 1,73- 1,66 (m, 2H), 1,41 (dd, 3H, J = 6,6, 1,2 Hz), 1,05 (s, 9H), 0,84 (s, 9H), -0,02 (s, 6H).

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) 0:136,2; 134,8; 129,8; 127,8; 126,4; 125,8; 70,9; 60,4; 39,6; 34,8; 27,3; 26,2; 19,7; 18,5; 13,1; -5,1.

Síntese do intermediário 23a

OPMB

A uma solução de 22a (23 g) em THF anidro sob Ar e a 0°C foi adicionada gota a gota uma solução de fluoreto de tetrabutilamônio (TBAF) ao longo de um período de 20 min (a solução se tornou vermelha). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h e então foi extinta com solução saturada aquosa de NH4Cl (200 mL) . As camadas combinadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída inteiramente com EtOAc (3 χ 150 mL) . As camadas orgânicas combinadas foram secas com NaSO4, filtradas e concentradas. A cromatografia flash (hexano /EtOAc de 4:1 a 1:1) proporcionou 23a como um óleo incolor (11,9 g; rendimento: 73%).

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,25 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 6,86

(d, 2H, J = 8,7 Hz), 5,62 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 4,45 (m,

2H), 3,80 (s, 3H), 3,70 (m, 3H) , 2,35 (m, 2H) , 2,03 (s, 3H) , 1,75 (m, 2H) . Síntese do intermediário 23b

PPTS (837, 7 mg, 3,33 mmol) foi adicionado em uma

porção a uma solução de 22b (4 g, 8,33 mmol) em etanol (80 mL). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 7 h e então foi concentrada. O resíduo foi diluído em DCM e lavado com uma solução saturada de NaHCO3. A camada orgânica foi extraída, seca com Na2S04, filtrada e concentrada. A cromatografia flash (hex/EtOAc, 95:1) deu o silil éter 23b (2,12 g, rendimento: 69%) como um óleo incolor.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7, 73-7, 69 (m, 4H), 7, 44-7, 36 (m, 6H) , 5, 44-5, 38 (m, 1H) , 5,21-5,17 (m, 1H) , 4,01-3,94 (m, 1H), 3, 84-3, 76 (m, 1H) , 3, 69-3, 64 (m, 1H) , 2,32-2,14 (m, 2H) , 1, 89-1, 78 (m, 1H) , 1, 70-1, 60 (m, 1H) , 1,37 (d, 3H, J = 6, 9 Hz) , 1,07 (s, 9H) .

13C RMN (CDCl3, 75 MH ζ) □: 136,2; 134,1; 130,0; 127,8; 126,3; 125,9; 72,3; 60,1; 37,7; 34,3; 27,2; 19,5; 13,0. Síntese do intermediário 24a

OPMB (Diacetoxiiodo)benzeno (BAIB) (11,5 g, 35,7 mmol) foi adicionado a uma solução de álcool 23a (9,2 g, 32 4 mmol) e 2,2, 6,β-tetrametilpiperidina 1-oxila (TEMPO) (515 mg, 3,3 mmol) em diclorometano anidro (92 mL) . A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 20 h até que o álcool não era mais detectável (TLC) e então foi extinta com uma solução saturada aquosa de NH4Cl e extraído com DCM (3 χ 100 mL). As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc de 4:1 a 1:1) dando 24a como um óleo incolor (6,3 g; rendimento: 70%) 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 9,78 (s, 1H) , 7,25 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 6,85 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 5,64 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 4,45 (q, 2H, J = 11,1 Hz), 4,02 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 2,60 (m, 2H), 2,35 (m, 2H), 2,03 (s, 3H).

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 201, 159, 6, 132, 1, 130, 1, 129, 7, 122,8, 114,1, 73,3, 71,5, 55,5, 48,3, 33,5, 21,3. Síntese do intermediário 24b

BAIB (1,97 g, 6,11 mmol) foi adicionado a uma solução de álcool 23b (2,05 g, 5,56 mmol) e TEMPO (86,87 mg, 0,56 mmol) em 25 mL de DCM. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 16-18 h até que o álcool não fosse mais detectável (TLC) e então foi extinta com uma solução saturada aquosa de NH4Cl e extraído com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com NaaSO4,

OTBDPS

20 filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash (hexano/DCM de 5:1 a 1:2) dando 24b (1,733 mg, rendimento: 79%) como um óleo incolor. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 9,72 (t, IHf J = 2,7 Hz), 7,74- 7,67 (m, 4H), 7,48-7,37 (m, 6H), 5,56-5,45 (m, 1H), 5,32- 5,23 (m, 1H), 4,29-4,20 (m, 1H), 2,51-2,48 (m, 2H), 2,31- 2,27 (m, 2H), 1,43 (dd, 3H, J = 6,9, 1,5 Hz), 1,06 (s, 9H). 13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 202, 3; 136,1; 134,0; 130,1; 127,9; 127,4; 125,1; 69,4; 50,1; 35,1; 27,2; 19,5; 13,1. Síntese do intermediário 25a

OPMB

A uma suspensão de iodeto de iodometiltrifenilfosfônio (16,6 g; 31 mmol) em THF anidro (126 mL) , a temperatura ambiente, foi adicionada lentamente uma solução de NaHMDS 1 M em THF (31,27 mL) . Depois de agitar durante 2 min, a mistura amarela foi esfriada até -78°C e então a solução de 24a (6,3 g, 22 mmol) em THF (82 mL) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada a -78°C durante 2 h e a temperatura ambiente durante 5 min, diluída com hexano e filtradas através de um tampão de celite. O tampão foi enxaguado com hexano e os filtrados combinados foram evaporados sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 12:1 a 8:1) proporcionando 25a como um óleo amarelo (5,6 g; rendimento: 62%). 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,25 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 6,85 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 6,25 (m, 2H) 5,64 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 4,42 (m, 2H), 3,80 (s, 3H) , 3,55(m, 1H), 2,40 (m, 2H), 2,25 (m, 2H), 2,03 (s, 3H). Síntese do intermediário 25b

A uma suspensão de iodometiltrifenilfosforano (3,32 g, 6,38 mmol) em THF (60 mL) a temperatura ambiente foram adicionados lentamente 6,83 mL de uma solução de NaHMDS 1 M (6,38 mmol) em THF. Depois de agitar durante 2 min, a mistura amarela foi esfriada até -78°C e a solução de 24b (1,67 g, 4,56 mmol) em THF (40 mL) foi então adicionada. A mistura de reação foi agitada a -78°C durante 90 min, então a temperatura ambiente durante 5 min, diluída com hexano e filtradas através de um tampão de celite/Si02. O tampão foi enxaguado com hexano/EtOAc (de 10:1 a 5:1) dando o composto 25b (2 g, rendimento: 89%) como um óleo incolor que foi usado sem purificação adicional.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7, 70-7, 66 (m, 4H) , 7, 45-7, 34 (m, 6H) , 6,21-6,31 (m, 2H) , 5, 49-5, 43 (m, 1H) , 5,35-5, 27 (m, 1H) , 3, 94-3, 75 (m, 1H) , 2, 30-2, 27 (m, 2H) , 2,24-2, 04 (m, 2H), 1,43 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 1,06 (s, 9H). 13C RMN (CDCl3, 75 MH ζ) □: 138,2; 136,2; 134,3; 129,9; 127,8; 126,4; 126,0; 84,1; 71,9; 41,6; 34,5; 27,2; 19,6; 13,2.

Síntese do intermediário 25c

OTBDPS OTBS

2,3-Dicloro-5,6-diciano-p-benzoquinona (DDQ) (3,6g, 16 mmol) foi adicionada a uma solução de 25a (5 g; 12 mmol) em DCM-H2O (20:1) sob atmosfera de Ar a temperatura ambiente. Depois de 1:30 h (TLC hexano/EtOAc 4:1 não mostrou material de partida) a reação foi extinta vertendo em Et2O (200 mL) e lavando com NaOH 1 M (3 χ 50 mL) e salmoura (50 mL) . A fase orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e concentrada. A separação cromatográfica de p-metoxibenzaldeido foi facilitada pela redução a álcool p-metoxibenzilico. Com este fim, uma solução do resíduo obtido em MeOH com NaBH4 sob atmosfera de Ar foi mantida a temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi então extinta vertendo em Et2O (100 mL) e lavando com HCl 1 M (40 mL) e salmoura (40 mL) . A fase orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e concentrada. 0 óleo resultante foi purificado em sílica gel (hexano/EtOAc de 10:1 a 4:1) proporcionando o álcool secundário como um óleo incolor. (2,8 g; rendimento: 80%). A uma solução de álcool secundário (2,8 g; 10 mmol) em

DCM anidro, sob Ar e a O0C foi adicionada gota a gota 2,6- lutidina, seguido por adição de trifluorometanosulfonato de terc-butildimetilsilila (TBSOTf) (TLC hexano/DCM 4:1 não mostrou material de partida). Neste ponto, a mistura de produto bruto foi extinta com HCl 0,5 M (25 mL) e extraída com DCM (2 χ 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com uma solução saturada aquosa de NaHCO3 e salmoura. A fase orgânica foi seca com NaSO4, filtrada e concentrada. A cromatografia flash (hexano /EtOAc de 100:1 a 20:1) proporcionou 25c como um óleo incolor (3,14 g; rendimento: 80%).

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 6,25 (m, 2H) 5,64 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 3,82 (m, 1H) , 2,38 (t, 2H, J = 6,0 Hz), 2,20 (t, 2H, J = 6,3 Hz), 2,03 (s, 3H), 0,86 (s, 9H), 0,05 (s, 6H). 13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 137, 7, 130, 9, 124, 3, 84, 6, 70, 6, 42, 5, 36, 6, 25, 9, 21, 3, 18,2, -4, 4.

EXEMPLO 7: SÍNTESE DO FRAGMENTO BCD

O esquema 4 proporciona vários exemplos de síntese de fragmento BCD, de acordo com a nomenclatura proporcionada no esquema 1. 25a R=PMB, Y=CI 25b R=TBDPS, Y=H 25c R=TBS, Y= Cl

R2

R1HN^f O

NH,

Cul / K2CO3 NN-DMEDA DMF / 90°C

R5

200 0C

kI^NHR1 O

26a R=TBS, Y=CI, R1= Boc, R2= tBu 26b R=TBDPS, Y=H, R1= Boc, R2=tBu 26c R=TBS, Y= Cl, R1= Boc, R2= iPr 26d R=TBS, Y= Cl, R1= H, R2=CH2Ph

R9

Bu3Sn CO2H

HATU HOAt, DIPEA DCM, DMF

Bu3Sn

Y^NH2 O

27a R=TBS, Y=CI, R2=tBu 27b R=TBDPS1 Y=H, R2= tBu 27c R=TBS, Y= Cl, R2= iPr

Esquema 4 Sintese do intermediário 26a

^nV

H Jl

(Z)-28a R=TBS, Y=CI, R2=tBu (Z)-28b R=TBDPS, Y=H, R2= tBu (Z)-28c R=TBS, Y= Cl, R2= iPr (Z)-28d R=TBS, Y= Cl, R2=CH2Ph (E)-28e R=TBS, Y=CI, R2=tBu

OTBS

Um tubo de Schlenk resselável foi carregado com iodeto de cobre (I) (148 mg, 0,78 mmol), carbonato de potássio (1,076 g, 7,78 mmol) e Boc-terc-LeuCONH2 (preparado seguindo o procedimento descrito em Pozdnev, V. F., Tetrahedron Letters 1995, 36, 7115-7118) (0,96 g, 4,15 mmol), evacuado e enchido com argônio. NfN'- Dimetiletilenodiamina (DMEDA) (0,166 mL, 1,55 mmol), iodeto de vinila 25c (l,04g, 2,59 mmol) e DMF seco (15 mL) foram adicionados sob argônio. 0 tubo de Schlenk foi selado, aquecido a 90°C durante 16-18 h e esfriado até temperatura ambiente. A mistura resultante foi diluída com EtOAc e extinta com água. A camada orgânica foi lavada com água e seca com Na2S04. 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (hexano/ EtOAc, de 20:1 a 15:1). 0 intermediário 26a (670 mg, rendimento, 53%) foi obtido como um óleo.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,72 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 6,70 (t, 1H, J = 9,6 Hz), 5,54 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 5,35 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 4,76 (q, 1H, J = 7,8 Hz), 3,89 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 3, 73-3, 68 (m, 1H) , 2,12 (m, 4H) , 1,98 (s, 3H), 0,971 (s, 9H), 0,84 (s, 9H), 0,02 (s, 3H), 0,01 (s, 3H).

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 168, 9, 156, 0 131, 1, 123, 9, 122, 6, 108, 2, 79, 9, 71, 6, 62,5, 36, 5, 34, 8, 33, 8, 28, 1, 26, 7, 25,9, 21,2, 18,3, -4,3, -4,4. Síntese do intermediário 26b

OTBDPS

Um tubo de Schlenk resselável foi carregado com iodeto

de cobre (I) (232,4 mg, 1,22 mmol), carbonato de potássio (1,688 g, 12,23 mmol) e Boc-terc-LeuCONH2 (2,474 g, 6,12 mmol), evacuado e enchido com argônio. N,N'- Dimetiletilenodiamina (0,26 mL, 2,45 mmol), iodeto de vinila 25b (2 g, 4,08 mmol) e DMF seco (35 mL) foram adicionados sob argônio. 0 tubo de Schlenk foi selado, aquecido a 90°C durante 16-18 h e esfriado até temperatura ambiente. A mistura resultante foi diluída com EtOAc e extinta com água. A camada orgânica foi lavada com água e seca com NaaSO4. 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (hexano/ EtOAc, 20:1 to 15:1). 0 intermediário 26b (1,06 g, rendimento: 44%) foi obtido como um óleo.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7, 70-7, 67 (m, 4H) , 7, 43-7, 35 (m, 6H), 7,13 (d, 1H, J = 10,5 Hz), 6,67 (dd, 1H, J = 10,2, 9,6 Hz), 5, 56-5, 45 (m, 1H) , 5, 36-5, 28 (m, 2H) , 4, 86-4, 78 (m, 2H), 3, 88-3, 77 (m, 1H), 2,26-2, 04 (m, 4H) , 1,44 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 1,43 (s, 9H) , 1,06 (s, 9H) , 0,96 (s, 9H) . Síntese do intermediário 26c

Um tubo de Schlenk resselável foi carregado com iodeto de cobre (I) (40,4 mg, 0,213 mmol), carbonato de potássio (294 mg, 2,13 mmol) e Boc-Val-CONH2 (preparado seguindo o procedimento descrito em Pozdnev, V. F., Tetrahedron Letters 1995, 36, 7115-7118) (230 mg, 1,06 mmol), evacuado e enchido com argônio. N,N'-Dimetiletilenodiamina (45 DL, 0,426 mmol), iodeto de vinila 25c (283 mg, 0,71 mmol) e DMF seco (35 mL) foram adicionados sob argônio. 0 tubo de Schlenk foi selado, aquecido a 90°C durante 16-18 h e esfriado até temperatura ambiente. A mistura resultante foi diluída com EtOAc e extinta com água. A camada orgânica foi

OTBS

15

O

Cl lavada com água e seca com Na2SO4. 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (hexano/EtOAc, 7:1 to 3:1). 0 intermediário 26c (270 g, rendimento: 77%) foi obtido como um óleo.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,80 (d, 1H, J = 9,3), 6,79-6,73 (m, 1H) , 5,58 (t, 1H, J = 7,5 Hz), 5,02 (br s, 1H) , 4,85- 4,76 (m, 1H), 3,93 (dd, 1H, J = 8,4, 6,0 Hz), 3,80-3,73 (m, 1H) , 2,12-2,22 (m, 5H) , 2,02 (s, 3H) , 1,45 (s, 9H) , 0,98 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 0,93 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 0,89 (s, 9H) , 0, 07 (s, 3H), 0,06 (s, 3H) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 169, 3, 131, 1, 124, 0, 122, 7, 108, 9, 71, 6, 36, 5, 33,8, 30, 6, 28, 5, 26, 1, 21, 3, 19, 6, 18,3, 17,9, -4,3, -4,4. Síntese do intermediário 26d

Um tubo de Schlenk resselável foi carregado com iodeto de cobre (I) (14,2 mg, 0,075 mmol), carbonato de potássio (104 mg, 0,75 mmol) e Fmoc-Fe-CONH2 (preparado seguindo o procedimento descrito em Pozdnev, V. F., Tetrahedron Letters 1995, 36, 7115-7118) (145 mg, 0,375 mmol), evacuado e enchido com argônio. N,N'-Dimetiletilenodiamina (16 DL, 0,15 mmol) iodeto de vinila 25c (100 mg, 0,25 mmol) e DMF seco (2,5 mL) foram adicionados sob argônio. 0 tubo de Schlenk foi selado, aquecido a 90°C durante 16-18 h e esfriado até temperatura ambiente. A mistura resultante foi

OTBS

O

Cl diluída com EtOAc e extinta com água. A camada orgânica foi lavada com água e seca com Na2SO4. 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (hexano/EtOAc, 4:1 to 1:1). 0 intermediário 26d (46 mg, rendimento: 42%) foi obtido como um óleo.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 9,19 (d, 1H, J = 11,1 Hz), 7,36- 7,21 (m, 5H) , 6,77 (ddd, 1H, J = 10,2, 9,3, 0,9), 5,60 (br t, 1H, J = 7,8 Hz), 4, 82-4, 78 m, 1H) , 3,79-3,71 (m, 1H) , 3, 67 (dd, 1H, J = 9,6, 3,9 Hz), 3,32 (dd, 1H, J = 13,8, 3,9 Hz), 2,69 (dd, 1H, J = 13,8, 9,6 Hz), 2,20-2,11 (m, 4H) , 1,99 (s, 3H), 0,89 (s, 9H) , 0,05 (s, 3H), 0,04 (s, 3H) . 13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 171, 9, 137, 9, 130, 9, 129, 5, 129, 1, 127,2, 124, 1, 122, 5, 107, 9, 71, 4, 56, 6, 40, 9, 36, 3, 33, 6, 26, 1, 21, 3, 18, 3, -4, 4, -4, 5.

EM (ES) m/z 437, 1 [M+H]+, 459, 0 [M+Na] + Síntese do intermediário 27a

OTBS

Uma solução de derivado 26a amino protegido (670 mg, 1, 33 mmol) em etilenoglicol (30 mL) foi aquecida a 200°C durante 10-20 min. A mistura de reação foi então esfriada a temperatura ambiente, diluída com DCM, extinta com salmoura e vertida em água. Algumas gotas de NaOH 3 M foram adicionadas até que a solução alcançou pH 14 e então foi extraída inteiramente com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo dando a amina primária 27a (510 mg, rendimento: 95%) como um óleo amarelo que foi usado sem purificação adicional.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 8,77 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 6,71 (t, 1H, J = 9,6 Hz), 5,56 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 4,71 (m, 1H) , 3,72 (m, 1H) , 3,14 (s, 1H) , 2,14 (m, 4H) , 1,97 (s, 3H), 0,97 (s, 9H), 0,84 (s, 9H), 0,02 (s, 6H). 13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 171, 2, 131,0, 124, 1, 122, 5, 107,1, 71,5, 64,3, 36,2, 34,5, 33,8, 26,5, 26,0, 21,2, 18,2, -4,4, -4,5.

Síntese do intermediário 27b

O

Uma solução de derivado 26b amino protegido (847 mg, 1,43 mmol) em etilenoglicol (50 mL) foi aquecida a 200°C durante 10-20 min. A mistura de reação foi então esfriada a temperatura ambiente, diluída com DCM, extinta com salmoura e vertida em água. Algumas gotas de NaOH 3 M foram adicionadas até que a solução alcançou pH 14 e então foi extraída inteiramente com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtrada e concentrada a vácuo dando a amina primária 27b (435 mg, 62%) como uma espuma branca depois de purificação por cromatografia flash (hexano/EtOAc de 10:1 a 1:2).

1H RMN (CDCl3, 300 MHζ) □: 8,50 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 7,70- 7, 66 (m, 4H) , 7, 45-7, 33 (m, 6H) , 6,67 (dd, 1H, J = 11,1, 9,3 Hz), 5, 48-5,40 (m, 1H) , 5, 36-5, 28 (m, 1H) , 4,79 (dd,

OTBDPS IH, J = 16,2, 7,5 Hz), 3, 87-3, 79 (m, 1Η) , 3,08 (s, 1Η) , 2,22-2,14 (m, 4Η), 1,43 (d, 3Η, J = 6,9 Hz), 1,05 (s, 9Η), 0,97 (s, 9Η) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 171,0; 136,1; 134,5; 129,8; 127,8; 126,3; 126,2; 122,1; 107,6; 72,6; 64,4; 34,0; 34,4; 32,8; 27,2; 26,9; 19,6; 13,2. Síntese do intermediário 27c

0, 52 mmol) em etilenoglicol (15 mL) foi aquecida a 200°C durante 10-20 min. A mistura de reação foi então esfriada a temperatura ambiente, diluída com DCM, extinta com salmoura e vertida em água. Algumas gotas de NaOH 3 M foram adicionadas até que a solução alcançou pH 14 e então foi extraída inteiramente com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo dando a amina primária 27c (170 mg, 85%) como um óleo amarelo que foi usado sem purificação adicional.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 9,27 (d, 1H, J = 10,2), 6,76 (dd, 1H, J = 11,1, 9,6 Hz), 5,61 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 4,80- 4,72 (m, 1H), 3,81-3,73 (m, 1H), 3,31 (d, 1H, J = 3,6 Hz) 2, 44-2, 33 (m, 1H) , 2,20-2,16 (m, 4H) , 2,03 (s, 3H) , 1,59 (br s, 2H) , 1,00 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 0,89 (s, 9H) , 0,82 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 0,05 (s, 6H).

OTBS

O

Cl

Uma solução de derivado 26c amino protegido (255 mg, 13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 172, 1, 131,1, 124, 1, 122, 5, 107,4, 71,5, 36,5, 33,7, 30,8, 26,0, 21,3, 20,0, 16,1, - 4,3, -4,4.

Síntese do intermediário 28a

A uma solução de amina 27a (918 mg, 2,27 iratiol) em DCM/DMF (10:1, 39,6 mL) , foi adicionada uma solução de ácido (Z)-3-tributilestanilpropenóico (1028 mg, 2,84 mmol) em DCM seco, sob atmosfera de argônio e então foi esfriada a 0°C. Diisopropiletilamina (DIPEA) (0,6 mL, 3,4 mmol), 1- hidroxi-7-azabenzotriazol (HOAt) (310 mg, 2,27 mmol) e hexafluorofosfato de Ν,Ν,N',N'-tetrametil-O-(7-

azabenzotriazol-l-il)urônio (HATU) (860 mg, 2,27 mmol) foram adicionados à solução e depois de 30 min, o banho frio foi removido. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4Cl, vertida em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2S04, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc de 20:1 a 15:1) dando a amida 28a (1110 mg; rendimento: 66%) como um óleo.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,63 (d, 1H, J = 10,5 Hz), 6,97 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,75 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,72 (t, 1H, J = 9,5 Hz), 6,50 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 5,56 (t, 1H, J = 6, 6 Hz), 4,83 (q, 1H, J = 9,0 Hz), 4,41 (d, 1H, J = 9,6 Hz) 3,76 (m, 1H), 2,17 (m, 4H) , 2,01 (s, 3H) , 1,45 (m, 6H) ,

OTBS

5 1,25 (m, 8Η) , 1,0 (s, 9Η) , 0,88 (s, 9Η) , 0,84 (m, 13Η) , 0,06 (s, 6Η) .

Síntese do intermediário 28b

DCM/DMF (4:1, 12,5 mL), foi adicionada uma solução de ácido (Z)-3-tributilestanilpropenóico (505,6 mg, 1,4 mmol) em DCM seco, sob atmosfera de argônio e então foi esfriada a 0°C. DIPEA (0,243 mL, l,76mol), 7-hidroxibenzotriazol (HOBt) (189,2 mg, 1,4 mmol) e HATU (532, 28 mg, 1,4 mmol) foram adicionados à solução e depois de 30 min, o banho frio foi removido. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4Cl, vertida em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2S04, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc de 20:1 a 15:1) dando a amida 28b (780, 4 mg; rendimento: 77%) como uma espuma branca.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7, 70-7, 68 (m, 4H) , 7, 43-7, 36 (m, 6H), 7,02 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 7,00 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 6,75 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,66 (t, 1H, J = 9,3 Hz), 6,26 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 5,57-5,34 (m, 1H), 5,38-5,28 (m, 1H), 4,83 (dd, 1H, J = 16,5, 7,8 Hz), 4,31 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 3, 89-3, 82 (m, 1H) , 2,26-2, 02 (m, 4H) , 1, 50-1, 42 (m, 6H) ,

OTBDPS

5

A uma solução de amina 27b (575 mg, 1,17 mmol) em 1,43 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 1,33-1, 20 (m, 6H) , 1,06 (s, 9H), 0,96 (s, 9H), 0,95-0, 83 (m, 15H) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 168,0; 166,2; 153,8; 136,3;

136,1; 134,3; 130,0; 127,8; 126,7; 126,0; 121,6; 109,0; 72,6; 60,7; 35,7; 34,0; 32,7; 29..5; 27,7; 27,2; 26,7; 19,5; 14,0; 13,2; 11,8. Síntese do intermediário 28c

DCM/DMF (10:1, 7,7 mL), foi adicionada uma solução de ácido (Z)-3-tributilestanilpropenóico (197,2 mg, 0,546 mmol) em DCM seco, sob atmosfera de argônio e então foi esfriada a 0°C. DIPEA (0,11 mL, 0, 655 mmol), HOAt (59,4 mg, 0,437 mmol) e HATU (166 mg, 0,437 mmol) foram adicionados à solução e depois de 30 min, o banho frio foi removido. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4Cl, vertida em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2S04, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia fIash (hexano/EtOAc de 20:1 a 15:1) dando a amida 28c (250 mg, rendimento: 78%) como uma espuma branca.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,94 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 7,00 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,75 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,72 (t, 1H, J = 9,5 Hz), 6,50 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 5,56 (t, J = 6,6 Hz, 1H) , 4,83 (q, 1H, J = 9,0 Hz), 4,41 (t, 1H, J = 9,0

OTBS

A uma solução de amina 27c (170 mg, 0, 437 mmol) em Hz), 3,76 (m, 1Η) , 2,17 (m, 4Η) , 2,01 (s, 3Η) , 1,45 (m,

7Η) , 1,25 (m, 8Η) , 0,88 (s, 9Η) , 0,84 (m, 19Η) , 0,06 (s, 6Η) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 169, 2, 166, 8, 153, 8, 136, 2, 131,1, 123,9, 122,6, 108,7, 71,6, 59,2, 36,5, 33,7, 31,4,

29, 5, 29, 4, 27,6, 26, 1, 21, 3, 19, 5, 18, 5, 18, 3, 14, 0, 11, 8, -4,3, -4,4.

Síntese do intermediário 28d

DCM/DMF (10:1, 1,3 mL), foi adicionada uma solução de ácido (Z)-3-tributilestanilpropenóico (45 mg, 0,125 mmol) em DCM seco, sob atmosfera de argônio e então foi esfriada a 0°C. DIPEA (26 DL, 0,15 mmol), HOAt (13,6 mg, 0,1 mmol) e HATU (38 mg, 0,1 mmol) foram adicionados à solução e depois de min, o banho frio foi removido. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4Cl, vertida em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc de 20:1 a 15:1) dando a amida 28d (60 mg, rendimento: 80%) como um óleo.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,43 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 7,34- 7, 22 (m, 5H) , 7,02 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,70 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,66 (dd, 1H, J = 9,9, 9,3 Hz), 6,34 (d, 1H, J =

OTBS

10

A uma solução de amina 26d (44 mg, 0,1 mmol) em 7,8 Hz), 5,51 (dd, 1Η, J = 8,1, 7,5 Hz), 4,81-4,71 (m, 2Η) , 3,68-3,59 (m, 1Η), 3,18 (dd, IHf J = 13,5, β Hz), 2,69 (dd, IH, J = 13,5, 8,4 Hz), 2,11-2,04 (m, 2Η) , 2,01 (s, 3Η) , 1, 96-1, 87 (m, 1Η) , 1, 80-1, 70 (m, 1Η) , 1, 53-1, 43 (m, 8Η) , 1,31-1,24 (m, 10Η) , 0, 89-0, 85 (rti, 9Η) , 0,88 (s, 9Η) , 0,04 (s, 3Η), 0,01 (s, 3Η).

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 168, 5, 166, 5, 154, 4, 136, 7, 135,9, 131,0, 129,5, 129,1, 127,4, 124,0, 122,3, 108,8, 71, 5, 55, 1, 38, 8, 36, 6, 33, 3, 29, 5, 29, 4, 27, 6, 26, 0, 21, 3, 18,2, 14,0, 11,8, -4,3, -4,5.

EM (ES) m/z 781,2 [Μ+Η]+, 803,2 [M+Na]+ Síntese do intermediário 28e

DCM/DMF (10:1, 1 mL) , foi adicionada uma solução de ácido (E)-3-tributilestanilpropenóico (33,5 mg, 0, 095 mmol) em DCM seco, sob atmosfera de argônio e então foi esfriada a 0°C. DIPEA (19 QL, 0,11 mol), HOAt (10 mg, 0, 075 mmol) e HATU (27,5 mg, 0,075 mmol) foram adicionados à solução e depois de 30 min, o banho frio foi removido. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4Cl, vertida em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc 6:1) dando a amida 28e (25 mg, rendimento: 45%) como um óleo.

OTBS

A uma solução de amina 27a (30 mg, 0, 075 mmol) em 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,68 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 7,52 (d, 1H, J = 18,9 Hz), 6,73 (t, 1H, J = 9,2 Hz), 6,28 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 6,25 (d, 1H, J = 18,9 Hz), 5,60 (t, 1H, J = 7,2 Hz), 4,83 (q, 1H, J = 9,2 Hz), 4,40 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 3,77 (m, 1H) , 2,17 (m, 4H) , 2,01 (s, 3H) , 1,45 (m, 6H) , 1,25 (m, 8H) , 1,0 (s, 9H) , 0,88 (s, 9H) , 0,84 (m, 13H), 0,06 (s, 6H). EXEMPLO 8

O esquema 5 proporciona a síntese de vários compostos da invenção. Y

(Z)-28a R=TBS, Y=CI1 R2=tBu (2)-28b R=TBDPS, Y=H, R2=tBu (Z)-28c R=TBS, Y= Cl, R2= iPr (Z)-28d R=TBS, Y= Cl, R2=CH2Ph (E)-28e R=TBS, Y=CI, R2=tBu

(7E,9Z,11Z)-29a R=TBS, R2=tBu, X=OMe, Y=CI (7E,9Z,11Z)-29b R=TBDPS, R2=tBu, X=OMe, Y=H (7E,9Z,11Z)-29c R=TBS, R2=iPr, X=OMe, Y=CI (7E,9Z,11Z)-29d R=TBS, R2=CH2Ph, X=OMe, Y=CI (7E,9Z,11E)-29e R=TBS, R2=tBu, X=OMe, Y=CI (7E,9Z,11Z)-29f R=TBS, R2=tBu, X=H, Y=CI

CI3CCONCO, DCM

AI2O3

Y

(7E,9Z,11Z)-30a R2=tBu, X=OMe, Y=CI (7E,9Z,11Z)-30b R2=tBujX=OMejY=H (7E,9Z,11Z)-30c R2=iPr, X=OIVIe, Y=CI (7E,9Z,11Z)-30d R2= CH2Ph, X=OMe, Y=CI (7E,9Z,11E)-30e R2=tBu, X=OMe, Y=CI (7E,9Z,11Z)-30f R2=tBu1X=H1Y=CI

(7E, 9Z, 11Z) - Composto 4 R2=tBu, X=OMe, Y=H (7E, 9Z, 11Z) - Composto SR2=iPr, X=OMe, Y=CI (7E,9Z,11Z)-Composto 31 R2= CH2Ph, X=OMe, Y=CI (7E,9Z,11E)- Composto 8 R2=1Bu1 X=OMe, Y=CI Esquema 5

Síntese do composto 29a

A uma solução de alquenilestanano 28a (1,1 g, 1,47 mmol) e 17a (0,62 g, 1,77 mmol em l-metil-2-pirrolidinona (NMP) (14,7 inL) a 0°C, foi adicionado tiofenocarboxilato de cobre (CuTC) (422 mg, 2,2 mmol). A reação foi agitada a 0°C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura de produto bruto foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HCl 0,5N (3 χ 15 mL) . A solução orgânica foi seca e evaporada dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 5:1 a 1:1) dando o trieno 29a (0,66 g, rendimento: 66%) como um óleo.

1H RMN (CDCl3, 300 MHζ) □: 7,89 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 7,22 (dd, 1H, J = 12,3, 11,4 Hz), 6,86 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz), 6,70 (dd, 1H, J = 9,9, 9,3 Hz), 6,35 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 6,13 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5,66 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5, 60 (dd, 1H, J = 5,4, 3,9 Hz), 5,55 (br t, 1H, J = 7,8 Hz), 5,26 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 4, 84-4, 76 (m, 1H) , 4,3 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,20-4,16 (m, 1H), 3, 77-3, 69 (m, 1H) , 3,63 (s, 3H) , 2, 89-2, 77 (m, 1H) , 2,41-2,33 (m, 2H) , 2,19-2,13 (m, 4H) , 2,00 (s, 3H) , 1,82 (s, 3H) , 1,13 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 1,02 (s, 9H), 0,86 (s, 9H) , 0,4 (s, 3H), 0,03 (s, 3H) . 13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 168,5; 166,4; 161,8; 145,4; 140,3, 137,3; 134,4; 134,3; 131,0, 124,3; 124,1, 122,4; 121,2; 108,7; 108,4; 82,0; 71,6; 60,6; 55,6; 37,5; 36,5, 35,1; 33,8; 26,5; 26,0; 21,3, 18,3, 17,4, 16,9, -4,3, -4,4. Síntese do composto 29b

A uma solução de alquenilestanano 28b (780,4 mg, 0,904 mmol) e 17a (377,4 mg, 1,085 mmol) em NMP (9 mL) a 0°C, foi adicionado tiofenocarboxilato de cobre (258,5 mg, 1,36 mmol). A reação foi agitada a 0°C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura de produto bruto foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HCl 0,5N (3 χ 10 mL) . A solução orgânica foi seca e evaporada dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 5:1 a 1:1) dando o trieno 29b (459,7 mg, rendimento: 66%) como um óleo. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7, 66-7, 64 (m, 4H) , 7, 43-7, 32 (m, 7H), 7,23 (t, 1H, J = 11,7 Hz), 6,85 (t, 1H, J = 11,7 Hz), 6,62 (dd, 1H, J = 10,5, 9,3 Hz), 6,41 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 6,11 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 5,66 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5,60 (dd, 1H, J = 5,7, 5,1 Hz), 5,49-5,41 (m, 1H), 5,32-5,27 (m, 1H) , 5,25 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4, 83-4, 75 (m, 1H), 4,32 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,22-4,15 (m, 1H) , 3, 83-3, 78 (m, 1H) , 3,62 (s, 3H), 2, 86-2, 78 (m, 1H) , 2, 40-2, 35 (m, 2H) , 2,20-2,04 (m, 4Η) , 1,81 (s, 3Η) , 1,40 (d, 3Η, J = 6,9 Hz), 1,13 (d, 3Η, J = 6,9 Hz), 1,03 (s, 9Η), 0,97 (s, 9Η). 13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 168,3; 166,3; 161,8; 145,4; 140,2, 137,3; 136,1; 134,8; 134,4; 134,3; 129,9; 127,8;126,4; 126,1; 124,4; 121,7; 121,2; 108,4; 109,1; 82,0; 72,6; 60,6; 55,6; 37,5; 35,2; 32,7; 31,1; 27,2; 26,8, 26,5; 19,5; 17,4; 16,9; 13,1. Síntese do composto 29c

A uma solução de alquenilestanano 28c (250 mg, 0,34 mmol) e 17a (142 mg, 0,409 mmol) em NMP (2,5 mL) a 0°C, foi adicionado tiofenocarboxilato de cobre (97 mg, 0,51 mmol). A reação foi agitada a 0°C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura de produto bruto foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HCl 0, 5N (3 χ 10 mL) . A solução orgânica foi seca e evaporada dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 10:1 a 6:1) dando o trieno 29c (150 mg, rendimento: 67%) como um óleo.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 8,21 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 7,28

(t, 1H, J = 11,7 Hz), 6,88 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz),

6,72 (dd, 1H, J = 10,2, 9,3 Hz), 6,42 (d, 1H, J = 8,4 Hz),

6, 15 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 5,66 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5,61

Me"

10

Cl (dd, IH, J = 5,7, 3,6 Hz), 5,56 (br t, 1H, J = 8,1 Hz), 5,27 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4, 85-4, 77 (m, 1H) , 4,30 (dd, 1H, J = 8,1, 7,5 Hz), 4,24-4,16 (m, 1H) , 3, 79-3, 72 (m, 1H) , 3,66 (s, 3H), 2,88-2,80 (m, 1H), 2,42-2,37 (m, 2H), 2,18- 2,14 (m, 5H) , 2,00 (s, 3H) , 1,83 (s, 3H) , 1,14 (d, 3H J = 6,9 Hz), 0,97 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 0,96 (d, 3H, J = 6,6 Hz) , 0,86 (s, 9H), 0,4 (s, 6H) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 169, 2 166, 8; 161,8; 145,4; 140,5, 137,7; 134,6; 134,3; 131,0, 124,3; 124,2, 122,6; 121,2; 108,6; 108,4; 82,0; 71,5; 58,9; 55,6; 37,5; 36,4; 33,8; 30, 8, 26, 5; 26,1; 21,3, 19,6, 18,5, 18,3, 17,4, 16,9, -4,3, -4,4.

Síntese do composto 29d

A uma solução de alquenilestanano 28d (60 mg, 0,08 mmol) e 17a (32,4 mg, 0,09 mmol) em NMP (1 mL) a 0°C, foi adicionado tiofenocarboxilato de cobre (22 mg, 0,12 mmol). A reação foi agitada a 0°C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura de produto bruto foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HCl 0, 5N (3 χ 10 mL) . A solução orgânica foi seca e evaporada dando o produto bruto que foi purificado por

Me~

15

Cl cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 4:1 a 1:1) dando o trieno 29d (13 mg, rendimento: 25%) como um óleo. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,59 (d, 1H, J = 11,1 Hz), 7,33- 7,24 (m, 5H), 7,23 (t, 1H, J = 11,7 Hz), 6,90 (dd, IHf J = 11,7, 11,4 Hz), 6,66 (dd, 1H, J = 10,5, 9 Hz), 6,24 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 6,17 (d, 1H, J = 12,0 Hz), 5, 63-5,58 (m, 2H) , 5,51 (td, 1H, J = 7,8, 1,2 Hz), 5,28 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 4, 79-4, 67 (m, 2H) , 4,24-4,17 (m, 1H) , 3,66 (s, 3H), 3,65- 3,62 (m, 1H) , 3,22 (dd, 1H, J = 13,5, 6,3 Hz), 3,04 (dd, 1H, J = 13,8, 8,4 Hz), 2,89-2,81 (m, 1H) , 2, 43-2, 37 (m, 2H) , 2,11-2,04 (m, 2H) , 2,00 (s, 3H) , 1,84 (s, 3H), 1,93- 1,72 (m, 2H) , 1,16 (d, 3H, J = 6,9 Hz), 0,86 (s, 9H) , 0,03 (s, 3H), 0,01 (s, 3H).

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 168, 4, 166, 5, 161, 7, 145, 5, 140,8, 138,1, 136,8, 134,5, 134,3, 131,0, 129,5, 129,1, 127,4, 124,2, 124,1, 122,3, 120,4, 108,7, 108,3, 82,0, 71, 4, 55, 7, 54, 9, 38,3, 37, 5, 36, 6, 33, 4, 26, 5, 26, 0, 21, 3, 18,2, 17,4, 16,9, -4,3, -4,4. EM (ES) m/z 711,2 [M+H]+ Síntese do composto 29e

MeO

A uma solução de alquenilestanano 28e (50 mg, 0,067 mmol) e 17a (28 mg, 0,08 mmol) em NMP (1 mL) a 0°C, foi adicionado tiofenocarboxilato de cobre (19,1 mg, 0,10 mmol). A reação foi agitada a 0°C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura de produto bruto foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HCl 0,5N (3 χ 10 mL) . A solução orgânica foi seca e evaporada dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 5:1 a 1:1) dando o trieno 29e (33 mg, rendimento: 50%) como um óleo.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,73 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 7,70 (dd, 1H, J = 14,1, 11,7 Hz), 6,71 (dd, 1H J = 9,9, 9,7 Hz), 6,30 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 6,13 (d, 1H, J = 12,9 Hz), 6,04 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz), 5,93 (d, 1H, J = 15,0 Hz), 5,63 (br t, 1H, J = 4,5 Hz), 5, 58-5, 53 (m, 1H) , 5,34 (d,

1H, J = 9,9 Hz), 4,85-4, 78 (m, 1H) , 4,41 (d, 1H, J = 9,3), 4,24-4,16 (m, 1H), 3, 77-3, 72 (m, 1H) , 3,64 (s, 3H), 2,90- 2,78 (m, 1H), 2,45-2,41 (m, 2H) , 2,19-2,12 (m, 4H) , 2,01 (s, 3H) , 1,91 (s, 3H), 1,16 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 1,02 (s, 9H), 0,87 (s, 9H), 0,06 (s, 3H), 0,04 (s, 3H).

13C RMN (CDCl3, 75 MH ζ) □: 168, 5, 166, 1, 161, 8, 145, 4, 140,7, 138,0, 135,3, 134,9, 131,1, 125,8, 124,9, 124,0, 122, 4, 108, 7, 108, 5, 81, 9, 71, 6, 60, 9, 55, 6, 37, 6, 36, 5, 35,2, 33,8, 29,9, 26,8, 26,1, 21,3, 18,3, 17,3, 16,9, -4,3, -4,4.

Síntese do composto 29f A uma solução de alquenilestanano 28a (60 mg, 0,083 mmol) e 17b (29 mg, 0,09 iranol) em NMP (0,9 mL) a 0°C, foi adicionado tiofenocarboxilato de cobre (24 mg, 0,12 mmol).

A reação foi agitada a 0°C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura de produto bruto foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HCl 0,5N (3 χ 10 mL) . A solução orgânica foi seca e evaporada dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 5:1 a 1:1) dando a amida 29f (27 mg, rendimento: 50%) como um óleo. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 7,62 (d, 1H, J = 10,5 Hz), 7,25 (dd, 1H, J = 12,6, 11,4 Hz), 6,94-6,84 (m, 2H), 6,73 (dd, 1H, J = 10,5, 9,0 Hz), 6,23 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 6,17 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 6,06-6,01 (m, 1H), 5,66 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5,60-5,55 (m, 1H), 5,29 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,88-4,80 (m, 1H), 4,34 (d, 1H, J= 9,3 Hz), 4,27-4,19 (m, 1H), 3,79- 3,72 (m, 1H), 2,90-2,81 (m, 1H) , 2, 36-2, 30 (m, 2H), 2,21- 2, 13 (m, 4H), 2,03 (s, 3H) , 1,85 (s, 3H) , 1,17 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 1,03 (s, 9H) , 0,89 (s, 9H) , 0,08 (s, 3H) , 0,06 (s, 3H) .

Sintese do composto 30a A uma solução de 29a (275 mg, 0,41 mmol) em THF (6 mL) sob N2 e a temperatura ambiente, foi adicionado TBAF 1 M em THF (0,82 mL, 0,82 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com uma solução saturada aquosa de NH4Cl e extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) dando o álcool 30a (175 mg; rendimento: 76%) como um sólido branco. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 9,00 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 7,25 (dd, 1H, J = 12,0, 11,4 Hz), 6,86 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz), 6,72 (dd, 1H, J = 9,6, 8,7 Hz), 6,68 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,13 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 5,68 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5,63-5,58 (m, 2H), 5,27 (d, 1H, J= 10,2 Hz), 4,85-4,76 (m, 1H), 4,42 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,25-4,17 (m, 1H), 3,70-3,69 (m, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,48 (br s, 1H), 2, 89-2, 75 (m, 1H) , 2, 42-2, 36 (m, 2H) , 2,22-2,11 (m, 4H) , 2,04 (s, 3H) , 1,82 (s, 3H), 1,14 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 1,03 (s, 9H). O isômero (21S)- do composto 30a foi obtido quando o

processo sintético foi realizado partindo do fragmento racêmico D. A mistura final de isômeros [(2IS)-composto 30a e (21R)-composto 30a] foi separada por HPLC semipreparativa de fase reversa (SymmetryPrep C18 7 Dm, 7,8 χ 150 mm, gradiente H20:MeCN desde 50 até 60% MeCN em 30 min, detecção de UV, fluxo 2,5 mL/min, [tr ((21S)-30a): 15,4 min, tr ( (21R)-30a) : 14,7 min]) e o (21S)-composto 30a foi obtido em forma pura:

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 8,62 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 7,28- 22 (m, 1H) , 6, 93-6, 86 (m, 1H) , 6,81-6,75 (m, 1H) , 6,32 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 6,17 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 5,68-5,58 (m, 3H), 5,28 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 4,93-4,84 (m, 1H), 4,32 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,25-4,17 (m, 1H), 3,78-3,67 (m, 1H), 3,66 (s, 3H) , 2,89-2,81 (m, 1H) , 2, 43-2, 38 (m, 2H) , 2,28-2,20 (m, 4H) , 2,08 (s, 3H) , 1,84 (s, 3H) , 1,16 (d, 3H J = 6,9 Hz) , 1,02 (s, 9H) .

Síntese do composto 30b

A uma solução de 29b (586 mg, 0,76 mmol) em THF (7,5

mL) sob N2 e a temperatura ambiente, foi adicionado TBAF 1 M em THF (1,53 mL, 2 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com uma solução saturada aquosa de NH4Cl e extraída com EtOAc.

As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por

Cl cromatografia flash (hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) dando o álcool 30b (320 mg, rendimento: 80%) como um sólido branco. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 8,95 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 7,25 (t, 1H, J = 12,0 Hz), 6,85 (t, 1H, J = 11,7 Hz), 6,73 (t, 1H, J = 9,6 Hz), 6,57 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,12 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5,67 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5,61 (dd, 1H, J = 5,4, 3,9 Hz), 5, 63-5, 58 (m, 1H), 5, 44-5, 35 (m, 1H) , 5,26 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,86 (q, 1H, J = 8,1 Hz), 4,38 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,24-4,16 (m, 1H), 3,81-3,71 (m, 1H) , 3,64 (s, 3H) , 2, 96-2, 92 (m, 1H) , 2,86-2, 79 (m, 1H) , 2,41-2,37 (m, 2H) , 2,28-2,14 (m, 4H), 1,82 (s, 3H) , 1,61 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 1,14 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 1,02 (s, 9H) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 168,7; 166,6; 161,8; 145,4; 140,3; 137,5; 134,4; 134,3; 127,7; 126,0; 124,4; 123,7; 121,1; 108,9; 108,4; 82,0; 72,1; 60,9; 55,7; 37,6; 35,0; 34,8; 33,2; 2 6,9; 26,5; 17,4; 16,9; 13,3. Síntese do composto 30c

mL) sob N2 e a temperatura ambiente, foi adicionado TBAF 1 M em THF (0,45 mL, 0,45 mmol) . A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4Cl e extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por

Me"

Cl

A uma solução de 29c (150 mg, 0,23 mmol) em THF (4,8 cromatografia flash (hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) dando o álcool 30c (90 mg, rendimento: 73%) como um sólido branco. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 9,16 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 7,26 (dd, 1H, J = 12,0, 11,1 Hz), 6,87 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz), 6, 79-6, 70 (m, 2H) , 6,14 (d, 1H, J= 11,7 Hz), 5,68 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 5, 63-5, 58 (m, 2H) , 5,27 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4, 85-4, 76 (m, 1H), 4,35 (dd, 1H, J = 8,4, 7,5 Hz), 4,24-4,17 (m, 1H) , 3, 70-3, 69 (m, 1H) , 3,63 (s, 3H) , 3,43 (br s, 1H), 2,89-2,76 (m, 1H), 2,42-2,36 (m, 2H), 2,21-2,14 (m, 4H) , 2,03 (s, 3H) , 1,82 (s, 3H) , 1,13 (d, 3H J = 6,9 Hz), 0,96 (d, 6H, J= 6,6 Hz).

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 169, 7, 167, 1, 161, 8, 145, 4, 140,5, 137,8, 134,6, 134,2, 131,6, 124,4, 123,9, 123,8, 120,7, 108,5, 108,4, 82,0, 59,1, 55,7, 37,5, 36,4, 33,5, 31, 0, 26, 5, 21, 3, 19, 5, 18, 7, 17, 4, 16, 8. EM (ES) m/z 549,0 [MtH]+, 571,1 [M+Na]+ Síntese do composto 30d

mL) sob N2 e a temperatura ambiente, foi adicionado TBAF 1 M em THF (0,03 mL, 0,03 mmol) . A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4Cl e extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por

Me"

Cl

A uma solução de 29d (11 mg, 0,02 mmol) em THF (0,32 cromatografia flash (hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) dando o álcool 30d (6 mg, rendimento: 65%) como um sólido branco. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 8,54 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 7,34- 7,23 (m, 5H), 7,20 (t, 1H, J = 11,7 Hz), 6,89 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz), 6,72 (dd, 1H, J = 9,9, 9,3 Hz), 6,27 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 6,17 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 5,63-5,53 (m, 3H) , 5,28 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 4, 84-4, 76 (m, 1H) , 4,75- 4,68(m, 1H), 4,25-4,17 (m, 1H) , 3,66 (s, 3H) , 3, 67-3, 65 (m, 1H) , 3,18 (dd, 1H, J = 13,8, 6,3 Hz), 3,06 (dd, 1H, J = 13,8, 8,1 Hz), 2,89-2,81 (m, 1H), 2,43-2,38 (m, 2H), 2,15- 2,10 (m, 3H), 2,06 (s, 3H) , 1, 92-1, 87 (m, 1H) , 1,84 (s, 3H) , 1, 16 (d, 3H, J = 6,6 Hz) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 168, 6, 166, 6, 160, 8, 145, 8, 140,8, 138,1, 136,8, 134,6, 134,2 ,129,6, 129,0, 127,2, 124,1, 124,0, 123,4, 120,4, 108,3, 108,2, 82,0, 71,6, 55,7, 55, 0, 38, 4, 37, 5, 36, 4, 33, 0, 26, 5, 21, 3, 17, 4, 16, 9. EM (ES) m/z 597,2 [M+H]\

A uma solução de 29e (32 mg, 0,047 mmol) em THF (1 mL)

sob N2 e a temperatura ambiente, foi adicionado TBAF 1 M em THF (0,094 mL, 0,094 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4Cl e extraído com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) dando o álcool 30e (14 mg, rendimento: 55%) como uma espuma branca.

1H RMN (CDCl3, 500 MHz) □: 8,97 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 7,71 (dd, 1H J = 14,7, 11,7 Hz), 6,74 (dd, 1H J = 9,3, 9,9 Hz), 6,57 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 6,15 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 6,03 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz), 5,95 (d, 1H, J = 14,7 Hz), 5,65-5,58 (m, 2H), 5,35 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,87-4,78 (m, 1H) , 4,42 (d, 1H, J = 9,3), 4,25-4,18 (m, 1H) , 3,72-3,68 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,25 (br s, 1H), 2,87-2,79 (m, 1H), 2, 45-2, 40 (m, 2H) , 2,23-2,12 (m, 4H) , 2,04 (s, 3H) , 1,89 (s, 3H), 1,15 (d, 3H, J = 6,6 Hz).1,03 (s, 9H). 13C RMN (CDCl3, 75 MH ζ) □: 168, 8, 166, 5, 161, 68, 145, 3, 140,9, 138,2, 135,4, 134,7, 132,0, 125,68, 124,6, 123,9, 123, 6, 108, 6, 108, 4, 81, 9, 71, 7, 61, 3, 55, 7, 37, 5, 36, 5, 36, 3, 34, 9, 33, 3, 26,9, 26, 7, 21, 3, 17, 0, 16, 7. EM (ES) m/z 563, 3 [M+H]+, 585, 2 [M+Na] + Sintese do composto 30f

A uma solução de 29f (28 mg, 0,04 mmol) em THF (1 mL) sob N2 e a temperatura ambiente, foi adicionado TBAF 1 M em THF (0,09 mL, 0,09 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4Cl e extraída com EtOAc. As

20

Cl fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SC>4, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) dando o álcool 30f (17 mg; rendimento: 75%) como um sólido branco.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 9,05 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 7,35 (m, 2H), 7,0 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz), 6,73 (dd, 1H, J = 9,6, 8,7 Hz), 6,56 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,05 (m, 3H) , 5,63- 5,58 (m, 2H), 5,30 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 4,78 (m, 1H), 4,50 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 3,68 (m, 1H) , 3,48 (br s, 1H) , 2,45 (m, 1H) , 2, 42-2, 36 (m, 2H) , 2,22-2,11 (m, 4H) , 2,04 (s, 3H), 1,82 (s, 3H), 1,14 (d, 3H J = 6,6 Hz), 1,03 (s, 9H). Síntese do composto 1

diclorometano (7,5 mL) a 0°C, foi adicionado isocianato de tricloroacetiIa (TCAI) (76 Dl, 0,64 mmol) . A reação foi agitada a 0°C durante 30 min e então óxido de alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida em uma almofada de óxido de alumínio. 0 produto foi lavado usando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. 0 filtrado foi evaporado a vácuo dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 2:1 a 1:2). O composto 1 (0,26 g, rendimento: 81%) foi obtido como um sólido branco e exibiu

Me"

Cl

A uma solução de 30a (300 mg, 0,53 mmol) em 13

características espectroscópicas e físicas (1H, C RMN e EM) equivalentes àquelas reportadas no exemplo 2.

0 isômero (21S)- de composto 1 foi obtido por quaisquer destes dois métodos: A.- seguindo o mesmo procedimento partindo da mistura

de isômeros (21R)- e (21S)-composto 30a e separação final de (21S)-composto 1 por HPLC semipreparativa de fase reversa (SymmetryPrep C18 7 Dm, 7,8 χ 150 mm, gradiente H2OiMeOH desde 50 até 100% MeOH em 30 min, detecção de UV, fluxo 2,5 mL/min, [tr ((21S)-1): 19,2 min, tr ((21R)-1): 19,8 min]) .

B.- seguindo o mesmo procedimento como revelado para o composto 1, mas partindo do (21S)-composto 30a puro.

Cl (21S)-composto 1

1H RMN (CDCl3, 500 MHz) □: 8,69 (d, 1H, J = 10,5 Hz), 7,30 (t, 1H, J = 11,5 Hz), 6,90 (t, 1H, J = 11,5 Hz), 6,86-6,82 (m, 1H) , 6,34 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 6,17 (d, 1H, J = 11,5 Hz), 5,66 (d, 1H, J = 11,5 Hz), 5, 64-5, 62 (m, 1H) , 5,59- 5,56 (m, 1H), 5,29 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,81-4,77 (m, 1H) , 4,50-4,45 (m, 1H), 4,42 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,25-4,20 (m, 1H), 3,66 (s, 3H) , 2,89-2,81 (m, 1H) , 2,44-2,31 (m, 5H) , 2,24-2,17 (m, 1H), 2,06 (s, 3H) , 1,84 (s, 3H) , 1,16 (d, 3H, J= 6,5 Hz), 1,04 (s, 9H).

13C RMN (125 MHz, CDCl3) □: 168, 4, 166, 1, 157, 2, 148, 3, 145,2, 140,2, 137,4, 134,1, 134,0, 132,0, 124,7, 124,2, 122,4, 120,7, 108,1, 104,7, 81,8, 75,0, 60,8, 55,4, 37,2, 34, 8, 32, 5, 30, 3, 26, 7, 26, 2, 21, 0, 17, 1, 16, 6.

A uma solução de 30b (56 mg, 0,105 mmol) em

diclorometano (1 mL) a 0°C, foi adicionado isocianato de tricloroacetila (15 DL, 0,126 mmol). A reação foi agitada a 0°C durante 30 min e então óxido de alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida em uma almofada de óxido de alumínio. O produto foi lavado usando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. O filtrado foi evaporado a vácuo dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2). O composto 4 (57,6 mg, rendimento: 96%) foi obtido como uma espuma branca e exibiu características espectroscópicas e físicas (1H, 13C RMN e EM) equivalentes àquelas reportadas no exemplo 3.

A uma solução de 30c (115 mg, 0,21 mmol) em

diclorometano (2 mL) a 0°C, foi adicionado isocianato de tricloroacetila (27 Dl, 0,23 mmol). A reação foi agitada a 0°C durante 30 min e então óxido de alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida em uma almofada de óxido de alumínio. O produto foi lavado usando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. O filtrado foi evaporado a vácuo dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2). O composto 5 (71 mg, rendimento: 57%) foi obtido como uma espuma branca e exibiu características espectroscópicas e físicas (1H, 13C RMN e EM) equivalentes àquelas reportadas no exemplo 3.

A mistura final de isômeros (15 mg) foi separada por HPLC semipreparativa de fase reversa (SymmetryPrep C18 7 □m, 7,8 χ 150 mm, gradiente H20:Me0H desde 50 até 70% MeOH em 75 min, detecção de UV, fluxo 2,5 mL/min, [tr ((15R)-7): 18,15 min, tr ( (15S)-7]) : 19,62 min) e foi obtido 3,1 mg de (15R)-composto 7 puro e 2, 9 mg de (15S)-composto 7 puro:

O isômero (21S)- do composto 5 foi isolado quando 5 foi purificado por HPLC semipreparativa de fase reversa (SymmetryPrep C8, gradiente H20:MeCN desde 45 até 50% MeCN em 30 min, detecção de UV, fluxo 4,7 mL/min, [tr ((21S)- 5):21,6 min, tr ((21R)-5): 23,6 min). Partindo de uma amostra (50 mg) que continha ambos os isômeros, depois da separação acima mencionada, foi obtido 39 mg de (21R)- composto 5 puro e 6,1 mg de (21S)-composto 5 puro.

MeO

O'

25

O

Cl (21S)-composto 5 1H RMN (CDCl3, 500 MHz) □: 8,74 (d, 1H, J = 10,5 Hz), 7,29 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz), 6,94 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz), 6,84 (dd, 1H, J = 10,5, 9,3 Hz), 6,22 (m, 2H) , 5,68 (d, 1H, J = 11,5 Hz), 5,63 (m, 2H) , 5,42 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,81 (m, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,41 (m, 1H) , 4,23 (m,1H), 3,66 (s, 3H), 2,91 (m, 1H), 2,49-2,38 (m, 3H), 2,35-2,31(m, 2H), 2,24-2,17 (m, 2H) , 2,05 (s, 3H) , 1,82 (s, 3H) , 1,15 (d, 3H J = 6,6 Hz), 0,99 (d, 3H, J = 6,9 Hz) 0,96 (d, 3H, J = 6,9 Hz).

EM (ES) m/z 592,3 [MtH]+ Síntese do composto 31

A uma solução de 30d (5 mg, 0, 008 mmol) em diclorometano (0,7 mL) a 0°C, foi adicionado isocianato de tricloroacetila (1,1 Dl, 0,009 mmol). A reação foi agitada a 0°C durante 30 min e então óxido de alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida em uma almofada de óxido de alumínio. O produto foi lavado usando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. O filtrado foi evaporado a vácuo dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2). O composto 31 (3,5 mg, rendimento: 66%) foi obtido como um sólido branco

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 8,43 (d, 1H, J = 10,5 Hz), 7,29- 7, 19 (m, 6H,) , 6,91 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz), 6,77 (br

Me"

Cl dd, 1Η, J = 10,2, 9,6 Hz), 6,51 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 6,16 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5, 69-5, 63 (m, 2H), 5,59-5, 54 (m, 1H) , 5,31 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 5,12 (br s, IH,), 4,91-4,84 (m, 1H), 4,76-4,70 (m, 1H), 4,31-4,13 (m, 2H, CH-5), 3,66 (s, 3H) , 3,20 (dd, 1H, J = 13,5, 6,9 Hz), 3,09 (dd, 1H, J = 13,5, 6,6 Hz), 2,89-2,81 (m, 1H), 2,48-2,35 (m, 2H), 2,28- 2,23 (m, 3H), 2,05 (s, 3H) , 2,01-1,90 (m, 1H) , 1,81 (s, 3H) , 1,15 (d, 3H, J = 6,6 Hz).

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 168,9, 166, 5, 161,9, 157, 1 145 ,4, 140,6, 137, 9 , 136,4, 134,4, 133, 9, 132,1, 129, 7 128 ,8, 127,2, 124, 6 , 124,6, 122,7, 120, 7, 108,5, 105, 6 82, 1, 74,8, 55, 7, 54 ,6, 38,7, 37,2, 33,1, 30, 5, 2 6,2, 21, 2

17,3, 16,4.

Síntese do composto 8

Cl

A uma solução de 30e (13 mg, 0, 023 mmol) em diclorometano (1,7 mL) a 0°C, foi adicionado isocianato de tricloroacetila (3 Dl, 0,025 mmol). A reação foi agitada a 0°C durante 30 min e então óxido de alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida em uma almofada de óxido de alumínio. O produto foi lavado usando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. O filtrado foi evaporado a vácuo dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2). O composto 8 (14,3 mg, rendimento: 100%) foi obtido como um sólido branco e exibiu características espectroscópicas e físicas (1H, 13C RMN e EM) equivalentes àquelas reportadas no exemplo 4. EXEMPLO 9

O esquema 6 representa um processo sintético para vários compostos da invenção. Eto2C-^^Ρί

TBSO,

MeO 0Μβ TBSO

CO2Et

TBSO

12

32

CO9Et DMP

TBSO

DCM

TBSO

33

34

CO2Et

OiP(OEt)2 MeO^CO2Me

CO2Me

MeO

CO2Et

TBSO

1) LiOH1 DioxiH2O

2) HCI/MeOH

35

MeO

27a

HATU1 HOAt

36

OTBS

37

38

Cl

OH

Cl

OCONHn

TBAF THF

TCAI

Cl

Composto 3

Esquema 6 Síntese do intermediário 32

TBSO

A uma solução de 4-fosfonocrotonato de trietila (3,7 g, 14,66 mmol) e 18-coroa-6 (6,2 g, 23,46 mmol) em THF seco (59 mL) agitada sob atmosfera de argônio a -78°C foi adicionado gota a gota KHMDS (28,1 ml, 14,07 mmol). Depois de 15 min foi adicionado gota a gota aldeído 12 (2,35 g, 5,86 mmol) e agitado durante 20 horas a temperatura ambiente. Então, a reação foi extinta com solução de NH4Cl saturada (200 mL) e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi seca (Na2SO4) e evaporada sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 20:1 a 10:1) proporcionou 2,7 g (rendimento: 93%) de trieno 32 .

1H RMN (300 MH ζ, CDCl3) □: 7,31 (dd, 1H, J = 11,2, 15,3 Hz), 6,53 (d, 1H, J = 15,0 Hz), 6,21 (dd, 1H, J = 11,7, 13,8 Hz), 5,84 (d, 1H, J = 15,1 Hz), 5,61 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,17 (m, 2H) , 3,72 (m, 1H) , 3,63 (m, 2H) , 2,61 (m, 1H), 1,78 (s, 3H), 1,67 (m, 2H), 1,26 (m, 3H), 0,94 (d, 3H, J= 6,7 Hz), 0,87 (s, 18H), 0,01 (m, 12H).

Síntese do intermediário 33

TBSO

A uma solução de 32 (3, 75 g, 7,54 mmol) em EtOH (38 mL) , foi adicionado p-toluenosulfonato de piridínio (663 mg, 2,64 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 17 horas. Então, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 4:1 a 1:1) proporcionando 2,11 g (rendimento: 73%) de álcool 33.

1H RMN (300 MHz, CDCl3) □: 7,31 (dd, 1H, J = 10,8, 15,0 Hz), 6,52 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 6,23 (dd, 1H, J = 11,1, 15,0 Hz), 5,86 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 5,52 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,18 (q, 2H, J = 7,5 Hz), 3,72 (m, 3H) , 2,73 (m, 1H), 1,82 (s, 3H), 1,68 (m, 2H) , 1,28 (t, 3H, J = 7,2 Hz), 0,98 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 0,88 (s, 9H), 0,08 (m, 6H). Síntese do intermediário 34

O álcool 33 (130 mg, 0,34 mmol) foi agitado a temperatura ambiente em DCM (3,4 mL) sob uma atmosfera inerte e foi adicionado em uma porção periodinano (DMP) (288,5 mg, 0,68 mmol). A reação foi agitada até a conclusão (TLC, aproximadamente 1 hora) e então foi extinta com NaHCO3 (solução saturada), extraído com DCM, lavada com salmoura, seca com sulfato de magnésio, filtrada e concentrada a vácuo. 0 produto foi purificado por cromatografia em coluna eluindo com EtOAc/hexano 1:4 rendendo aproximadamente 125 mg (rendimento: 96%) de aldeído 34 como um óleo incolor.

1H RMN (300 MHz, CDCl3) □: 9,79 (s, 1H) , 7,31 (dd, 1H, J = 11,1, 15,3 Hz), 6,52 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 6,25 (dd, 1H, J = 11,1, 15,3 Hz), 5,87 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 5,48 (d, 1H, J = 10,5 Hz), 4,19 (q, 2H, J = 7,2 Hz), 4,03 (m, 1H) , 2,69

TBSO 10

15

20

(m, 1Η) , 2,54 (m, 2Η) , 1,80 (s, 3Η) , 1,29 (t, 3Η, J = 6,9 Hz), 1,01 (d, 3Η, J = 6,9 Hz), 0,88 (s, 9Η), 0,06 (m, 6Η). Síntese do intermediário 35

A uma solução de fosfonato (170 mg, 0,67 mmol) e 18- coroa-6 (357 mg, 1,35 mmol) em THF seco (10 mL) agitada sob atmosfera de argônio a -78°C foi adicionado gota a gota KHMDS (1,34 ml, 0,67 mmol). Depois de 15 min foi adicionada gota a gota uma solução de aldeído 34 (170 mg, 0,45 mmol) em THF seco (8,5 mL) ao longo de um período de 30 min e agitada a -78°C durante 90 min. Então, a reação foi extinta com solução de NH4Cl saturada, aquecida até temperatura ambiente e diluída com diclorometano. A fase orgânica foi seca (Na2SO4) e evaporada sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 20:1 a 10:2) proporcionou 170 mg (rendimento: 82%) de (E)- 35.

1H RMN (300 MH ζ, CDCl3) □: 7,29 (dd, 1H, J = 10,8, 15,3 Hz), 6,50 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 6,19 (dd, 1H, J = 10,8, 15,0 Hz), 5,83 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 5,48 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 5,33 (t, 1H, J = 7,2 Hz), 4,17 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,61 (m, 1H), 3,58 (s, 3H) , 2,73 (m, 1H) , 2,57 (m, 2H) , 1,71 (s, 3H), 1,25 (m, 3H) , 0,97 (d, 3H, J = 6,7 Hz), 0,88 (s, 9H), 0,03 (m, 6H). Síntese do intermediário 36

TBSO LiOH (15,8 mg, 0,66 mmol) foi adicionado a uma solução de éster 35 (140 mg, 0,30 mmol) em 20% água/dioxano (7 mL) e a mistura foi agitada durante 4 horas a 60°C. A mistura foi esfriada, diluída com DCM e lavada com HCl (0,5N, 10 mL) . A fase aquosa foi extraída repetidamente com DCM e as camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e evaporadas dando o produto bruto diácido que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

HCl concentrado (43 DL) foi adicionado a uma solução de produto bruto em MeOH (5,2 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora a temperatura ambiente. Então, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o óleo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 1:4 a EtOAc/MeOH 5:1) proporcionando 72 mg (rendimento: 70%) do ácido 36 como um óleo incolor.

1H RMN (300 MH ζ, CDCl3) □: 7,40 (dd, 1H, J = 10,8, 15,0 Hz), 6,57 (d, 1H, J = 15,0 Hz), 6,31 (dd, 1H, J = 11,4, 15,3 Hz), 5,89 (d, 1H, J = 15,0 Hz), 5,60 (m, 1H), 5,52 (d, 1H, J = 10,2 Hz), 4,22 (m, 1H) , 3,64 (s, 3H) , 2,90 (m, 1H), 2, 38 (m, 2H), 1,84 (s, 3H) , 1,15 (d, 3H, J = 6,9 Hz).

A uma solução de amina 27a (37,6 mg, 0, 093 mmol) em DCM/DMF (10:1, 1,3 mL), foi adicionada uma solução de ácido 36 (30 mg, 0,103 mmol) em DCM seco, sob atmosfera de argônio e então foi esfriada a 0°C. DIPEA (26 DL, 0,14 itimol) , HOAt (12,7 mg, 0,093 mmol) e HATU (35,4 mg, 0,093 mmol) foram adicionados à solução e depois de 30 min, o banho frio foi removido. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 3 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4Cl, vertida em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2S04, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc de 2:1 a 1:4) dando a amida 37 (34,7 mg, rendimento: 55%) como um óleo.

1H RMN (CDCl3, 500 MHz) □: 7,88 (d, 1H J = 10,5 Hz), 7,26 (dd, 1H, J = 14,4, 11,4 Hz), 6,72 (dd, 1H, J = 9,9, 9,6 Hz), 6,50 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 6,31-6,22 (m, 2H), 5,94 (d, 1H, J = 14,7 Hz), 5,61-5,54 (m, 2H) , 5,44 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,87-4,79 (m, 1H), 4,45 (d, 1H, J = 9,3), 4,24-4,16

(m, 1H) , 3, 77-3, 44 (m, 1H) , 3,64 (s, 3H) , 2,96-2,2.81 (m, 1H), 2, 39-2, 35 (m, 2H) , 2,16-2,15 (m, 4H) , 2,01 (s, 3H) , 1,82 (s, 3H) , 1,14 (d, 3H, J = 6,6 Hz).1,02 (s, 9H) , 0,87 (s, 9H), 0,06 (s, 3H), 0,05 (s, 3H) .

A uma solução de 37 (28 mg, 0,04 mmol) em THF (0,6 mL) sob N2 e a temperatura ambiente, foi adicionado TBAF 1 M em THF (83 DL, 0,08 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 18 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4Cl e extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia fIash (hexano/EtOAc de 3:1 a 1:2) dando o álcool 38 (22 mg, rendimento: 96%) como um sólido branco.

1H RMN (CDCl3, 500 MHz) □: 9,06 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 7,24 (dd, 1H, J = 14,7, 10,5 Hz), 6,76 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 6,74 (dd, 1H, J = 9,6, 9,6 Hz), 6,50 (d, 1H, J = 15,3 Hz), 6,25 (dd, 1H, J = 15,3, 11,1 Hz), 5,99 (d, 1H, J = 14,7 Hz), 5,65-5,60 (m, 2H), 5,45 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,87-4,81 (m, 1H) , 4,45 (d, 1H, J = 9,3), 4,24-4,16 (m, 1H) , 3,74-3,64 (m, 1H) , 3,64 (s, 3H) , 3,22-3,17 (m, 1H), 2, 95-2, 2.82 (m, 1H) , 2, 40-2, 35 (m, 2H) , 2,23-2,16 (m, 4H) , 2,05 (s, 3H) , 1,81 (s, 3H), 1,13 (d, 3H, J = 6,6 Hz), 1,03 (s, 9H). Síntese do composto 3

Cl

A uma solução de composto 38 (20 mg, 0,04 ramol) em

diclorometano (0,35 ml) a 0°C, foi adicionado isocianato de tricloroacetila (5,1 DL, 0,04 mmol). A reação foi agitada a 0°C durante 30 min e então óxido de alumínio neutro foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5-30 min e então foi embebida em uma almofada de óxido de alumínio. O produto foi lavado usando uma mistura de DCM/MeOH 50:1. O filtrado foi evaporado a vácuo dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (hexano/EtOAc de 1:1 a 1:3). 0 composto 3 (13,6 mg, rendimento: 63%) foi obtido como uma espuma branca e exibiu características espectroscópicas e físicas (1H, 13C RMN e EM) equivalentes àquelas reportadas no exemplo 3. EXEMPLO 10

O esquema 7 representa um processo sintético para o composto 7.

1 OH BoC2° I NH !>Ηα/ΜθΟΗ .

BocHNaY0H--BocNHAYNH2 -"

β NH4OCO2H & ii)NH3/MeOH

pir

39

h2NVh>

O

40

O "Ψ"

VV*

n O

Esquema 7

Síntese do intermediário 40

H2N^Yh*

O

A uma solução de Boc-terc-LeuC0NH2 39 (preparado

seguindo o procedimento descrito em Pozdnev, V. F., Tetrahedron Letters 1995, 36, 7115-7118) (1,9 g, 8,26 mmol) em MeOH, foram adicionados 66 mL de uma solução 1,25 M de

H H

}=={ Bu3Sn

Bu3Sn CO2H

HATU, HOAt

DIPEA DCM/DMF

41

MeO

CuTC,17a NMP

Composto 7 HCl em MeOH. A mistura de reação foi agitada durante 2 horas a temperatura ambiente e então foi concentrada sob pressão reduzida. Então, o sólido foi suspenso em MeOH e neutralizado com hidróxido de amônio concentrado. 0 solvente foi removido por evaporação giratória e o produto bruto foi dissolvido em diclorometano. A solução foi seca com Na2SO4, filtrada e concentrada dando 730 mg (rendimento: 68%) do intermediário 40 como um sólido branco.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 6, 65-6, 55 (br s, 1H) , 5,65-5,55 (br s, 1H) , 3,18 (s, 1H) , 1, 65-1, 55 (br s, 2H) , 1,05 (s, 9H) .

Síntese do intermediário 41

DCM/DMF (10:1, 7,7 mL), foi adicionada uma solução de ácido (Z)-3-tributilestanilpropenóico (306 mg, 0,85 mmol) em DCM seco, sob atmosfera de argônio e então foi esfriada a 0°C. DIPEA (0,27 mL, 1,54 mmol), HOAt (115,6 mg, 0,85 mmol) e HATU (323 mg, 0,85 mmol) foram adicionados à solução e depois de 30 min, o banho frio foi removido. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h, extinta com uma solução saturada aquosa de NH4Cl, vertida em água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc de

15

A uma solução de amina 40 (100 mg, 0,77 mmol) em 10:1 a 1:1) dando a amida 41 (228 mg, rendimento: 63%) como uma espuma branca.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 6,99 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,77 (d, 1H, J = 12,3 Hz), 6,47 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 6,38 (br s, 1H), 6,12 (br s, 1H), 4,46 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 1,48-1,40 (m, 6H), 1,31-1,19 (m, 12H) , 1,00 (s, 9H) , 0, 89-0, 83 (m, 9H) .

13C RMN (CDCl3, 75 MHz) □: 173, 4, 166, 6, 153, 4, 136, 6, 60, 0, 35,0, 29, 6, 27,6, 26, 8, 14, 0, 11, 7. Síntese do composto 7

A uma solução de alquenilestanano 41 (227,6 mg, 0,48 mmol) e 17a (200,9 mg, 0,58 mmol) em NMP (5 mL) a 0°C, foi adicionado tiofenocarboxilato de cobre (19,1 mg, 0,10 mmol) . A reação foi agitada a 0°C durante 45 min e 20 min a temperatura ambiente. Então, a mistura de produto bruto foi filtrada através de um tampão de alumina neutra, lavada com EtOAc/Éter 50:50 e os filtrados combinados foram lavados com HCl a 0,1%. A solução orgânica foi seca e evaporada dando o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna (diclorometano/MeOH de 100:1 a 10:1) dando o composto 7 (65,7 mg, rendimento: 34%) como uma espuma branca. Este produto sintético exibiu características espectroscópicas e físicas (1H, 13C RMN e EM) equivalentes àquelas reportadas no exemplo 3.

Me" O isômero (15R)- de composto 7 foi obtido quando uma mistura racêmica do aminoácido (Boc-terc-LeuCONH2) foi usada para levar a cabo estas reações. A mistura final de isômeros (15 mg) foi separada por HPLC semipreparativa de fase reversa (SymmetryPrep C18 7 Dm, 7,8 χ 150 mm, gradiente H2OtMeOH desde 50 até 70% MeOH em 75 min, detecção de UV, fluxo 2,5 mL/min, [tr ((15R)-7): 18,15 min, tr ( (15S) -7 ] ) : 19,62 min) e foi obtido 3,1 mg de (15R)- composto 7 puro e 2,9 mg de (15S)-composto 7 puro:

1H RMN (MeOD, 500 MHz) □: 7,23 (dd, 1H, J = 12,5, 11,5 Hz), 6,94 (dd, 1H, J = 12,5, 11,5 Hz), 6,18 (d, 1H, J = 12,0 Hz), 5,91-5,88 (m, 1H), 5,86 (t, 1H, J = 4,5 Hz), 5,34 (d, IHf J = 10,0 Hz), 4, 33-4,28 (m, 1H) , 3,64 (s, 3H) , 2,92- 2, 88 (m, 1H), 2, 47-2, 44 (m, 2H) , 1,85 (s, 3H) , 1,17 (d, 3H, J = 6, 6 Hz ) , 1, 02 (s, 9H) .

13C RMN (MeOD, 125 MH ζ) □: 175, 3, 168, 6, 164, 0, 146, 0, 140,8, 138,2, 135,4, 135,4, 125,5, 121,9, 111,1, 83,5, 61,8, 55,9, 38,4, 35,0, 27,2, 27,1, 17,3, 16,8. EXEMPLO 11

O esquema 8 representa os processos para obter os compostos 42 e 43.

Me"

10

O (15R)-composto 7 PhNCO

30a

DMP1 DCM

43

Esquema 8

A uma solução de álcool 30a (5 mg, 8,8 Dmol) em piridina (0,45 mL) , fenilisocianato (29 mL, 0,27 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada a temperatura ambiente durante 20 horas e então extinta com solução saturada aquosa de NH4Cl e extraído com EtOAc. As fases orgânicas

concentradas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia fIash (hexano/EtOAc de 20:1 a 1:1) dando o composto 42 (2,7 mg, rendimento: 44%) como um sólido branco.

1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 8,81-8,77 (m, 1H) , 7,46- 7,43 (m, 2H) , 7, 34-7,23 (m, 3H) , 7,11-7,06 (m, 2H) , 6,88- 6,77 (m, 2H), 6,39 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 6,10 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 5, 67-5,57 (m, 3H) , 5,27 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4, 85-4, 78 (m, 1H), 4, 62-4, 56 (m, 1H) , 4,54 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,25-4,17 (m, 1H) , 3,66 (s, 3H) , 2, 87-2, 80 (m, 1H) , 2,41-2,38 (m, 5H) , 2,21-2,13 (m, 1H) , 2,08 (s, 3H) , 1,82 (s, 3H), 1,16 (d, 3H J = 6,6 Hz), 1,07 (s, 9H).

O álcool 30a (5 mg, 8,88 Dmol) foi agitado a temperatura ambiente em DCM (0,1 mL) sob uma atmosfera inerte e periodinano (7,5 mg, 0,018 mmol) foi adicionado em uma porção. A reação foi agitada até conclusão (TLC, aproximadamente 1 hora) e então foi extinta com NaHCO3 (solução saturada), extraída com DCM, lavada com salmoura, seca com sulfato de magnésio, filtrada e concentrada a vácuo. O produto foi purificado por cromatografia em coluna eluindo com EtOAc/hexano 1:1 rendendo aproximadamente 4,5 mg (rendimento: 90%) da cetona 43 como um óleo incolor.

combinadas foram secas com Na2SO4

filtradas e

Síntese do composto 43 Me"

15

Cl 1H RMN (CDCl3, 300 MHz) □: 8,32 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 7,31- 7,23 (m, 1H), 6,91 (dd, 1H, J = 11,7, 11,4 Hz), 6,84 (dd, 1H, J = 9,9, 8,7 Hz), 6,26 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,18 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5,78-5, 73 (m, 1H) , 5,68 (d, 1H, J = 11,4 Hz), 5,64-5,61 (m, 1H) , 5-30-5, 27 (m, 1H) , 4, 94-4, 86 (m, 1H) , 4,41 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 4,25-4,17 (m, 1H) , 3,66 (s, 3H) , 3,18 (dd, 4H, J = 18,3, 7,2 Hz), 2, 89-2, 75 (m, 1H) , 2, 44-2,38 (m, 2H), 2,04 (s, 3H) , 1,84 (s, 3H) , 1,16 (d, 3H J= 6,9 Hz) , 1, 05 (s, 9H) . EXEMPLO 12: BIOENSAIOS PARA A DETECÇÃO DE ATIVIDADE ANTITUMORAL

O objetivo deste ensaio é avaliar a atividade citostática (habilidade para atrasar ou deter o crescimento celular tumoral) ou citotóxica (habilidade de matar células tumorais) in vitro das amostras que estão sendo testadas.

Linhagens celulares

Nome N0 ATCC Espécie Tecido Características A549 CCL-185 ser humano pulmão carcinoma de pulmão (NSCLC) HT29 HTB-38 ser humano colo adenocarcinoma colorrectal MDA-MB-231 HTB-2 6 ser humano mama adenocarcinoma de mama

Avaliação da atividade citotóxica usando o ensaio colorimétrico SRB

Um tipo de ensaio colorimétrico, usando reação de sulforodamina B (SRB) foi adaptado para a medição quantitativa de crescimento celular e viabilidade (seguindo a técnica descrita por Skehan P et al. J. Natl. Câncer Inst. 1990, 82, 1107-1112). Esta forma de ensaio emprega microplacas de cultura celular de 96 poços SBS-padrão (Faircloth et al. Methods in cell science, 1988, 11(4), 201-205; Mosmann et al, Journal of. Immunological. Methods, 1983, 65(1-2), 55-63). Todas as linhagens celulares usadas neste estudo, derivadas de tipos diferentes de câncer humano, foram obtidas da American Type Culture Collection [Coleção de cultura de tipo americana] (ATCC).

As células foram mantidas em meio Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) suplementado com soro fetal bovino (FBS) a 10%, L-glutamina 2 mM, 100 U/mL de penicilina e 100 U/mL de estreptomicina a 37°C, 5% de CO2 e 98% de umidade. Para estes experimentos, as células foram colhidas culturas subconfluentes usando tripsinização e ressuspensas em meio recente antes de contar e inocular em placa.

As células foram semeadas em placas de microtitulação de 96 poços em 5 χ IO3 células por poço em alíquotas de 150 □L e foi permitido que se unissem a superfície da placa durante 18 horas em meio livre de fármaco. Uma placa de controle (não tratada) de cada linhagem celular foi fixada (tal como descrito abaixo) e usada como valor de referência de tempo zero. Subseqüentemente, amostras de teste foram adicionadas às culturas de dez diluições seriais, em alíquotas de 50 DL, variando desde 10 até 0,00262 Dg/mL. Depois de 48 horas de exposição, o efeito antitumoral foi estimado pelo método SRB: Brevemente, as células foram lavadas duas vezes com PBS, fixadas durante 15 min em solução de glutaraldeído a 1%, enxaguadas duas vezes em PBS e coradas em solução de SRB a 0,4% durante 30 min a temperatura ambiente. Então, as células foram enxaguadas várias vezes com solução de ácido acético 1% e seca ao ar. Então, o SRB foi extraído em solução de trizma base 10 mM e absorbância foi medida em um leitor de placa espectrofotométrico automático a 490 nm. A sobrevivência celular foi expressa como porcentagem do crescimento celular de controle. O efeito final da amostra sendo testada foi estimado aplicando o algoritmo NCI (Boyd MR e Paull KD. Drug Dev. Res. 1995, 34, 91-104). Usando a media + DP de culturas em triplicata, uma

curva de resposta à dose foi gerada automaticamente usando análise de regressão não linear. Três parâmetros de referencia foram calculados (algoritmo NCI) por interpolação automática: IC50 = concentração que produz 50% de inibição de crescimento; ICT = inibição do crescimento total (efeito citostático) e CL50 = concentração que produz 50% de morte celular líquida (efeito citotóxico). Protocolo do ensaio antimitótico

A razão mitótica das culturas celulares (percentagem de células detidas em mitose) foi estimada usando um imunoensaio em microplaca de 96 poços específico que detecta quantitativamente um marcador mitótico específico. Células HeLa (carcinoma de colo de útero-h, ATCC n° CCL-2) foram incubadas durante 18 horas na presença ou ausência das amostras que estão sendo tratadas. Subseqüentemente, as células foram lavadas com PBS e lisadas em gelo em 75 DL de tampão de Iise preparado recentemente (EGTA 1 mM (pH 7,5), PMSF 0,5 mM e NaVO3 1 mM) durante 30 min. Uma alíquota do extrato celular (60 DL) foi transferida a uma placa de ELISA de superfície de alta ligação e seca em um Speed-vac durante 2 h a temperatura ambiente. Então, as placas foram bloqueadas em 100 μ!,. PBS-1% BSA durante 30 min a 30°C e seqüencialmente incubada com anticorpo monoclonal de rato primário anti-MPM2 (Upstate Biotechnology, cat n° 05-368) durante 18 h a 40C e anticorpo secundário conjugado com peroxidase apropriado durante lha 30°C. Depois de lavagem intensiva em Tween-20 a 0,02%, a reação a peroxidase foi realizada usando 30 DL de TMB (3,3' , 5,5'-tetrametil- benzidina) durante 30 min a 30°C. A reação foi parada adicionando 30 DL de uma solução de H2SC^ a 4%. O ensaio foi quantificado medindo a D.O. a 450 nm em espectrofotômetro de microplaca. Os resultados foram expressos como CI5o, concentração de amostra que produz detenção mitótica de 50% em culturas celulares tratadas, quando comparadas às culturas de controle não tratadas.

As tabelas 9 e 10 ilustram os dados da atividade biológica de compostos da presente invenção.

Tabela 9. Ensaio de citotoxicidade - Dados de atividade (molar)

composto 1 composto 2 composto 3 composto 4 MDA-MB- 231 IC50 4,45E-10 9,85E-09 9,24E-10 6,13E-10 ICT 9,90E-10 2,15E-08 2,47E-09 1,49E-09 CL50 2,80E-09 7,2 0E-08 9,57E-09 8,23E-09 HT29 IC50 4,62E-10 8,31E-09 4,45E-10 < 4,31E-10 ICT 6,10E-10 1,09E-08 7,59E-10 9,28E-10 CL50 9,90E-10 1,72E-08 > 1,65E-07 1,12E-09 A549 IC50 3,7 9E-10 8,63E-09 1,02E-09 5,95E-10 ICT 1,09E-09 2,37E-08 4,29E-09 2,45E-09 CL50 > 1,65E-07 1,65E-05 > 1,65E-07 > 1,64E-06 Tabela 9. (cont.)

composto 5 composto 6 composto 7 composto 8 MDA-MB- 231 IC50 1,03E-10 4,90E-10 4,20E-07 3,46E-09 ICT 4,56E-10 3,21E-09 8,41E-07 1,01E-08 CL5O 4,90E-09 1,55E-08 2,45E-06 4,12E-08 HT29 IC50 4,39E-11 5,91E-10 4,20E-07 2,14E-09 ICT 1,28E-10 1,01E-09 5,44E-07 3,13E-09 CL50 > 1,69E-07 4,90E-09 8,16E-07 6,27E-09 A549 IC50 6,08E-11 7,60E-10 6,18E-07 3,63E-09 ICT 3,21E-10 > 1,64E-06 1,19E-06 1,30E-08 CL5O > 1,69E-07 > 1,64E-06 > 2,47E-06 > 1,65E-0 6

Tabela 9. (cont.)

composto 29a composto 2 9d composto 29e composto 30a MDA-MB- 231 IC50 1,18E-06 1,10E-06 1,14E-06 1,95E-09 ICT 2,80E-06 1,39E-06 1,48E-06 9,41E-09 CL50 6,20E-06 1,83E-06 2,07E-06 8,52E-08 HT2 9 IC50 6,05E-07 8,29E-07 2,07E-06 1,35E-09 ICT 1,42E-06 8,72E-07 2,21E-06 2,13E-09 CL50 4,43E-06 9,28E-07 2,36E-06 1,01E-08 A549 IC50 8,86E-07 4,64E-07 1,15E-06 2,31E-09 ICT 3,40E-06 8,01E-07 1,77E-06 1,37E-07 CL5Q 8,56E-06 1,38E-06 2,66E-06 > 1,78E-06 Tabela 9. (cont.) composto 30b composto 30c composto 30d composto 30f MDA-MB- 231 IC50 2,08E-08 9,83E-10 3,ÍOE-IO 6,94E-07 ICT 5,11E-07 5,83E-09 7,03E-10 1,07E-06 CL50 5,11E-06 5,28E-08 > 1,67E-08 1,61E-06 HT29 IC50 9,84E-09 4,74E-10 1,32E-10 4,88E-07 ICT 9,27E-08 8,38E-10 2,51E-10 7,13E-07 CL50 4,73E-06 > 1,82E-07 > 1,67E-08 1,05E-06 A549 IC50 2,27E-08 7,lOE-10 3,18E-10 4,88E-07 ICT 3,22E-07 3,10E-09 1,06E-09 6,57E-07 CL5O > 1,8 9E-05 > 1,82E-07 > 1,67E-08 9,19E-07

Tabela 9. (cont.)

composto 30e composto 31 composto 37 composto 38 MDA-MB- 231 IC50 2,31E-08 7,50E-11 3,10E-06 6,04E-08 ICT 6,57E-08 1,50E-10 5,61E-06 > 1,7 8E-07 CL50 2,66E-07 3,59E-10 > 1,48E-05 > 1,7 8E-07 HT2 9 IC50 1,35E-08 4,06E-11 1,92E-06 3,91E-08 ICT 2,13E-08 1,02E-10 2,95E-06 6,39E-08 CL50 4,44E-08 > 1,56E-08 1,00E-05 > 1,78E-07 A549 IC50 3,55E-08 9,22E-11 3,54E-06 4,62E-08 ICT 3,02E-07 2,19E-10 6,64E-06 6,75E-08 CL50 3,55E-06 > 1,56E-08 1,39E-05 > 1,7 8E-07

Tabela 9. (cont.)

composto (21S)-1 composto (21S)-5 composto (15R)-7 composto (21S)-30a MDA-MB- 231 IC50 1,65E-09 4,56E-09 7,66E-07 2,49E-09 ICT 5,77E-09 1,86E-08 2,47E-06 2,13E-08 CL50 3,46E-08 1,03E-07 > 2,47E-05 2,84E-07 HT2 9 IC50 8,91E-10 2,53E-09 3,46E-07 2,66E-09 ICT 1,63E-09 2,87E-09 5,93E-07 3,02E-09 CL5O 2,31E-08 3,88E-09 1,31E-06 > 1,63E-0 6 A549 IC50 2,14E-09 6,92E-09 1,04E-06 3,73E-09 ICT 4,29E-08 2,87E-08 3,46E-06 1,95E-07 CL50 > 1,65E-06 > 1,69E-0 6 > 2,47E-05 > 1,63E-0 6

Tabela 10. Ensaio antimitótico - Dados de atividade (molar) dos compostos 1 e 2.

CI50 composto 1 2,64E-8 composto 2 2,64E-8

Claims

1. Composto de fórmula geral I <formula>formula see original document page 124</formula> caracterizado pelo fato de que Ri é selecionado de hidrogênio, ORa, OCORa, OCOORa, NRaRb, NRaCORb e NRaC (NRa)NRaRb; cada R2 e R3 é selecionado independentemente de hidrogênio, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída, alquenila C2- Ci2 substituída ou não substituída e alquinila C2-Ci2 substituída ou não substituída; cada R4i, R42, R43, R44, R45, R46, R47 e R4S é selecionado independentemente de hidrogênio, alquila Ci-Ci2 substituída ou não substituída, alquenila C2-Ci2 substituída ou não substituída e alquinila C2-C12 substituída ou não substituída; cada R5, R6 e R7 é selecionado independentemente de hidrogênio, CORa, COORa, alquila Ci-C12 substituída ou não substituída, alquenila C2-C12 substituída ou não substituída e alquinila C2-C12 substituída ou não substituída, ou R5 e R48 juntos com o átomo de N e o átomo de C correspondentes aos quais estão ligados podem formar um grupo heterocíclico substituído ou não substituído; cada Ra e Rb é selecionado independentemente de hidrogênio, alquila C1-C12 substituída ou não substituída, alquenila C2- C12 substituída ou não substituída, alquinila C2-C12 substituída ou não substituída, arila substituída ou não substituída e grupo heterocíclico substituído ou não substituído; e cada linha pontilhada representa uma ligação adicional opcional; ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a seguinte fórmula II <formula>formula see original document page 125</formula> R41 R43 Rs 0 (li) em que Ri, R41, R43 e R48, R5, R6 e R7 são tal como definido na reivindicação 1, ou um sal, derivado, tautômero, pró- fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R2 e R3 são cada um independentemente selecionado de hidrogênio e alquila Ci-Cô substituída ou não substituída, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que R2 e R3 são hidrogênio, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Composto, de acordo com quaisquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que Ri é selecionado de hidrogênio, ORa e OCORa, em que Ra é selecionado de hidrogênio e alquila C1-C6 substituída ou não substituída, ou um sal, derivado, tautômero, pró- fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que Ri é hidrogênio ou metoxila, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

7. Composto, de acordo com a reivindicação 1 e -3-6, caracterizado pelo fato de que os grupos R42, R44, R45, R46, R47 são selecionados independentemente de hidrogênio, alquila C1-C6 substituída ou não substituída, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

8. Composto, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que os grupos R42, R44, R45, R46/ R47 são selecionados independentemente de hidrogênio, metila substituída ou não substituída, isopropila substituída ou não substituída e terc-butila substituída ou não substituída, ou um sal, derivado, tautômero, pró- fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Composto, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que R42, R44, R45, R46 e R47 são hidrogênio, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

10. Composto, de acordo com quaisquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que os grupos R4i, R43 e R48 são selecionados independentemente de hidrogênio e alquila Ci-C6 substituída ou não substituída, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

11. Composto, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que os grupos R4i, R43 e R4g são selecionados independentemente de hidrogênio, metila substituída ou não substituída, isopropila substituída ou não substituída e terc-butila substituída ou não substituída, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

12. Composto, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que R4I e R43 são metila, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

13. Composto, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que R48 é selecionado de isopropila, terc-butila e benzila, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

14. Composto, de acordo com quaisquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que R5 e R6 são cada um independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio e alquila Ci-C6 substituída ou não substituída, ou um sal, derivado, tautômero, pró- fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

15. Composto, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que R5 e R6 são hidrogênio, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

16. Composto, de acordo com quaisquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que R7 é selecionado de hidrogênio, alquila C1-C12 substituída ou não substituída e alquenila C2-Ci2 substituída ou não substituída, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

17. Composto, de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato de que R7 é selecionado de hidrogênio e alquenila C2-Ci2 substituída, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

18. Composto, de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que R7 é um grupo alquenila que está substituído em uma ou mais posições com halogênio, OR', =0, OCOR', OCONHR', OCON (R')2 e OH protegido, em que cada um dos grupos R' é selecionado independentemente de hidrogênio, alquila C1-C12 substituída ou não substituída, alquenila C2-C12 substituída ou não substituída, alquinila C2-C12 substituída ou não substituída e arila substituída ou não substituída, ou um sal, derivado, tautômero, pró- fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

19. Composto, de acordo com quaisquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que uma ligação adicional está presente em todos os lugares indicados com uma linha pontilhada, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

20. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que tem a seguinte fórmula <formula>formula see original document page 130</formula> ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

21. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que tem a seguinte fórmula MeOv <formula>formula see original document page 130</formula> <formula>formula see original document page 131</formula> <formula>formula see original document page 132</formula> <formula>formula see original document page 133</formula> <formula>formula see original document page 134</formula> ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

22. Processo para obter um composto tal como definido em quaisquer das reivindicações anteriores, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que compreende realizar as etapas de extração e isolamento de Lithoplocamia lithistoides.

23. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende um composto conforme descrito em quaisquer das reivindicações 1 a 21, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo e um carreador ou diluente farmaceuticamente aceitável.

24. Composto de acordo com quaisquer das reivindicações 1 a 21, ou um sal, derivado, tautômero, pró- fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo caracterizado pelo fato de que é para uso como um medicamento.

25. Composto de acordo com quaisquer das reivindicações 1 a 21, ou um sal, derivado, tautômero, pró- fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo caracterizado pelo fato de que é para uso como um medicamento para tratar câncer.

26. Uso de um composto conforme descrito em quaisquer das reivindicações 1 a 21, ou um sal, derivado, tautômero, pró-fármaco ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo caracterizado pelo fato de que é na preparação de um medicamento.

27. Uso, de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que o medicamento é para uso no tratamento de câncer. «