BRPI0713784A2

BRPI0713784A2 - compostos orgánicos

Info

Publication number: BRPI0713784A2
Application number: BRPI0713784-2A
Authority: BR
Inventors: Ian Bruce; Gabriele Weitz Schmidt
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2006-06-26
Filing date: 2007-06-25
Publication date: 2012-10-30
Also published as: GB0612630D0; CA2655568A1; JP2009541387A; WO2008000421A3; JP4944954B2; US20100120865A1; EP2035413A2; MX2008016358A; US7799810B2; RU2009102270A; AU2007264033A1; CN101479258A; KR20090024294A; WO2008000421A2

Abstract

COMPOSTOS ORGáNICOS. A presente invenção refere-se a um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou solvato do mesmo, em que os grupos R1-R5 são definidos na descrição, a composições e uso dos compostos no tratamento de doenças melhoradas por inibição de fosfatidilinositol 3-cinase.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOS- TOS ORGÂNICOS".

A presente invenção refere-se a derivados de isoxazol-3-il-uréia, processo para sua produção, seus usos e composições farmacêuticas con- tendo eles.

Mais particularmente, a invenção fornece um composto de fór-

mula I

<formula>formula see original document page 2</formula> em que

Ri é C1-3alquila;

R2 é fenila, naftila ou bifenilila, cada uma sendo opcionalmente

substituída por um ou mais substituintes selecionado de halogênio, SO2Ci- 3alquila, acila e uma heteroarila de 5 ou 6 membros; ou uma heteroarila de 5 ou 6 membros opcionalmente substituída;

R3 é H ou Ci.3alquila;

R4 é fenila, naftila ou bifenilila, cada uma sendo opcionalmente

substituída por Ci.4alquila; ou uma heteroarila de 5 ou 6 membros opcional- mente substituída compreendendo pelo menos um N como heteroátomo; com a condição de que R4 seja outro que não naftila quando R2 for fenila substituída por SO2Ci-Salquila e opcionalmente halogênio; e R5 é H ou Ci-4alquila;

ou um sal do mesmo.

Acila pode ser um radical RaCO em que Ra é Ci.4alquila, C3- 6cicloalquila, fenila ou benzila.

Heteroarila de 5 ou 6 membros pode compreender um segundo heteroátomo selecionado de Ν, O e S. Exemplos de heteroarila de 5 ou 6 membros incluem por exemplo pirrazolila, imidazolila, pirrolila, isoxazolila, piridila ou tienila. Heteroarila pode ser mono- ou di-substituída por C1-4alquila, por exemplo CH3. O substituinte pode estar ligado ou a um áto- mo de carbono e/ou nitrogênio. A heteroarila adequadamente compreende pelo menos um átomo de nitrogênio e/ou um átomo de enxofre dentro do anel. Em certas modalidades, o grupo de heteroarila compreende pelo me- nos um átomo de nitrogênio dentro do anel.

De preferência naftila como R4 é não-substituída.

Halogênio pode ser flúor, cloro ou bromo, de preferência flúor ou

cloro.

Os seguintes significados são preferidos independentemente, coletivamente ou em qualquer combinação ou subcombinação:

1. Ri é CH3

2. R2 é fenila substituída, por exemplo tal como descrito nos e-

xemplos.

3. R2 é fenila monossubstituída por heteroarila, por exemplo pir-

razolila.

4. R2 é heteroarila não-substituída de 5 ou 6 membros, por e- xemplo piridila.

5. R3 é H.

6. R4 é naftila não-substituída

7. R4 é heteroarila não-substituída ou substituída; por exemplo,

tal como descrito nos exemplos. 8. R5 é H.

Os compostos de fórmula I podem existir na forma livre ou na forma de sal, por exemplo, sais de adição com, por exemplo, ácidos orgâni- cos ou inorgânicos, por exemplo, ácido cloridrato ou ácido acético.

Quando os compostos de fórmula I possuem centros assimétri- cos na molécula, vários isômeros ópticos são obtidos. A presente invenção também abrange enantiômeros, racematos, diastereoisômeros e misturas dos mesmos. Por exemplo, o átomo de carbono portando um grupo de alqui- la como R3 pode possuir a configuração R ou S.

A presente invenção também inclui um processo para a produ- ção de um composto de fórmula I, cujo processo compreende reação de um composto de fórmula Il

<formula>formula see original document page 4</formula>

em que Ri e Ffe são tal como definido acima, com um composto de fórmula III

<formula>formula see original document page 4</formula>

em que R3, R4 e R5 são tal como definido acima, e recuperação do composto resultante de fórmula I na forma livre ou na for- ma de um sal, e, onde requerido conversão do composto de fórmula I obtido na forma livre em forma de sal desejada ou vice-versa.

O processo pode ser desempenhado de acordo com métodos conhecidos na técnica, ou tal como descrito abaixo nos Exemplos. Por e- xemplo um composto de fórmula Il pode ser reagido com um composto de fórmula Ill em um solvente, por exemplo dimetilformamida, na presença de uma base por exemplo uma amina orgânica, por exemplo trietilamina.

Compostos de fórmula II, usados como materiais de partida po- dem ser preparados através de reação de um composto de fórmula IV

<formula>formula see original document page 4</formula>

em que Ri e R2 são tal como definido acima, com carbonildiimidazol. A reação pode ser desempenhada em um solvente adequado, por exemplo, tal como descrito em WO 05/021519A2 ou WO 04/096797A1, ou tal como descrito depois disso.

Compostos de fórmula IV podem ser preparados, por exemplo, através de um método tal como descrito em W005/021519A2 ou W004/096797A1. Compostos de fórmula IV podem também ser preparados 4

através de reação de um composto de fórmula V

R2-Hal V

em que R2 é tal como definido acima e Hal é Cl, Br ou I, com um composto de fórmula Vl <formula>formula see original document page 5</formula> em que Ri é tal como definido acima e W é um grupo de proteção de nitro- gênio, por exemplo acetila.

A reação pode ser realizada com um catalisador, por exemplo, um catalisador de paládio, tal como Pd(t-butil)3, na presença de uma base, por exemplo carbonato de césio, em um solvente adequado, por exemplo dimetilformamida, em temperaturas elevadas. A reação pode ser seguida por remoção do grupo de proteção W sob condições padrão.

Alternativamente compostos de fórmula IV podem ser prepara- dos através de reação de um composto de fórmula Vll

<formula>formula see original document page 5</formula> em que R2 é tal como definido acima, com um composto de fórmula Vlll

<formula>formula see original document page 5</formula> em que R1 e W são tal como definido acima. W pode também ser benzidrili- deno.

A reação pode ser realizada com um catalisador, por exemplo um catalisador de paládio, tal como tetracis trifenila fosfina paládio (0), na presença de uma base, por exemplo carbonato de césio, em um solvente adequado, por exemplo dioxano/água, em temperatura elevada, seguida por remoção do grupo de proteção W1 sob condições padrão.

Compostos de fórmulas V e Vll são comercialmente disponíveis ou podem ser preparados de acordo com métodos conhecidos. Compostos de fórmula Ill podem ser preparados através de aco- plamento de um composto de fórmula IX

<formula>formula see original document page 6</formula>

em que R3 é tal como definido acima e Xp é um grupo de proteção de amino, por exemplo tal como usado em uma reação de acoplamento, com um composto de fórmula X

<formula>formula see original document page 6</formula>

em que R4 e R5 são tal como definido acima, seguido por desproteção do grupo de proteção de amino. O grupo de proteção de amino X pode de pre- ferência ser um grupo de t-butiloxicarbonila (BOC) ou benziloxicarbonila (CbZ) e o método preferido de desproteção é tratamento com iodeto de TMS tal como descrito em Lott1 Richard S.; Chauhan, Virander S.; Stammer, Char- Ies H. Trimethylsilyl iodide as a peptide deblocking agent; Journal of Chemi- cal Society, Chemical Communications (1979), (11), 495-6.

Compostos de fórmulas IX e X são comercialmente disponíveis.

Na medida em que a produção dos materiais de partida não é particularmente descrita, os compostos são ou conhecidos ou podem ser preparados analogamente a métodos conhecidos na técnica, por exemplo em WO 05/021519 ou W004/096797, ou tal como descrito mais adiante.

Os seguintes Exemplos são ilustrativos de uma invenção, sem qualquer limitação.

Abreviações usadas são como segue: CDI é 1,1'- carbonildiimidazol, DCM é diclorometano, DMF é dimetilformamida, DMSO é dimetilsulfóxido, TEA é trietilamina, THF é tetraidrofurano, EtOAc é acetato de etila, EtOH é etanol, IPA é /'so-propilálcool, MeOH é metanol, MeCN é acetonitrila, TLC é cromatografia em camada fina, WSCD é carbodiimida solúvel em água, HOAT é 1-hidroxi-7-azabenzo-triazol, TMSI é trimetiliodos- silano, Pd2(dba)3 é tris(dibenzilidenoacetona) paládio (0), PCy3 é fosfina de triciclohexila. Intermediário A1: r5-(4-Acetil-fenilM-metil-tiazol-2-il1-amida de ácido imida- zol-1-carboxílico

Etapa 1: Benzidrilideno-(4-metil-tiazol-2-il)-amina

Imina de benzofenona (39,8 g, 0,22 mol) é adicionada a uma solução de 2-amino-4-metil-1,3-tiazol (30 g, 260 ml) em tolueno (450 ml) e aquecida em refluxo sob uma atmosfera inerte durante 18 h. A mistura é res- friada até temperatura ambiente e lavada com tampão de citrato (2 χ 250 ml), água (2 χ 250 ml), salmoura (2 χ 250 ml), secada (MgSO4 e carvão ve- getal descolorante), filtrada e evaporada até um sólido laranja.

Etapa 2: Benzidrilideno-(5-bromo-4-metil-tiazol-2-il)-amina:

<formula>formula see original document page 7</formula>

N-Bromossucimida (26,8 g, 0,15 mol) é adicionada a uma solu- ção de benzidrilideno-(4-metil-tiazol-2-il)-amina (41,9 g, 0,15 mol) em ácido acético glacial (200 ml) e agitada durante 1,25 h. O sólido é filtrado e secado em vácuo. Este é dissolvido em DCM (400 ml) e lavado com solução de bi- 15 carbonato de sódio (2 χ 400 ml), água (2 χ 400 ml), salmoura (2 χ 400 ml), secada (MgSO4), filtrada e evaporada para produzir um sólido amarelo o qual é secado em vácuo.

Etapa 3:1 -{4-[2-(Benzidrilideno-amino)-4-metil-tiazol-5-il]-fenil}-etanona

Ácido borônico de 4-acetilfenila (1,8 g, 0,011 mol, 1,1 eq), tetra- cistrifenilfosfina paládio(O) (0,7 g, 0,6 mmol), carbonato de césio (9,8 g, 0,03 mol) em água (10 ml), são adicionados a uma solução de benzidrilideno-(5- bromo-4-metil-tiazol-2-il)-amina (3,5 g, 0,01 mol) em dioxano (80 ml) e aque- cidos em refluxo durante 6 h. O solvente é removido em vácuo, para produzir uma suspensão oleosa a qual é dividida entre DCM (75 ml) e bicarbonato de sódio saturado (75 ml). As camadas são separadas e as orgânicas lavadas com água (75 ml) e salmoura (75 ml), secadas (MgSO4 e carvão vegetal), filtradas e evaporadas até um sólido marrom.

Etapa 4: 1-r4-(2-Amino-4-metil-tiazol-5-il)-fenil"|-etanona

<formula>formula see original document page 8</formula>

Ácido clorídrico a 2M (45 ml) é adicionado a 1-{4-[benzidrilideno- amino]-4-metil-tiazol-5-il}-fenil}-etanona (4,0 g, 0,01 mol) em THF (175 ml) e agitado durante 1 h. A mistura é dividida entre ácido clorídrico a 0,5 M (50 ml), iso-hexano (100 ml) e EtOAc (50 ml). A fase aquosa é basificada com NaOH a 4M (30 ml) e extraída com DCM (2 χ 100 ml). As orgânicas são se- cadas (MgSO4), filtradas e evaporadas até um sólido amarelo.

Etapa 5: [5-(4-Acetil-fenil)-4-metil-tiazol-2-il]-amida de ácido imidazol-1- carboxílico

(0,57 g, 2,45 mmols) é dissolvida em uma mistura de THF (10 ml) e DCM (20 ml) e aquecida em um banho de óleo marcado para 50°C. CDI é adicionado (0,64 g, 3,92 mmols) e a mistura de reação aquecida em 50°C durante um adicional de 2 horas em que um precipitado amarelo pálido forma-se. Depois 20 de resfriamento até temperatura ambiente o precipitado é filtrado, lavado com DCM e secado sob vácuo elevado para produzir o composto título. Intermediário A2: f4-Metil-5-(4-pirazol-1-il-fenin-tiazol-2-in-amida de ácido

Uma solução de 1-[4-(2-amino-4-metil-tiazol-5-il)-fenil]-etanona

imidazol-1 -carboxílico <formula>formula see original document page 9</formula> Etapa 1:1-f4-(2-Nitro-propil)-fenil1-1 H-pirazol <formula>formula see original document page 9</formula> Uma mistura compreendendo 4-pirazol-1-il-benzaldeído (7,0 g,40,65 mmols), acetato de amônio (0,94 g, 12,19 mmols) e nitroetano (24 ml,333,3 mmols) é agitada em refluxo durante 10 horas. O solvente é removido em vácuo e o sólido resultante é dissolvido em EtOAc e lavado com água (3 50 ml). A porção orgânica é secada (MgSO4) e concentrada em vácuo para produzir o composto título como um sólido laranja. [MH+ 230,1]. Etapa 2: 1 -(4-Pirazol-1 -il-fenil)-propan-2-ona:

Uma suspensão agitada compreendendo ferro (10,7 g, 191,9 mmols) em ácido acético glacial (150 ml) sob uma atmosfera inerte de argô- nio é aquecida até 40°C e em seguida tratada com uma solução de 1-[4-(2- nitro-propil)-fenil]-1 H-pirazol (8,8 g, 38,39 mmols) em ácido acético glacial (100 ml). A mistura de reação é aquecida até 100°C durante 2 horas e em seguida deixada esfriar até temperatura ambiente. A mistura é despejada em água gelada (200 ml), agitada durante 5 minutos e em seguida filtrada por meio de celita lavando completamente com DCM (50 ml). A porção orgânica do filtrado é separada e a aquosa é extraída com DCM (150 ml). As porções orgânicas são combinadas, lavadas com água (3 χ 50 ml), salmoura (1 χ 25 ml), secadas (MgSO4) e concentradas em vácuo para produzir o composto título como um óleo vermelho. [MH+ 201,25].

Etapa 3: 4-Metil-5-(4-pirazol-1 -il-fenil)-tiazol-2-ilamina: Uma solução de 1-(4-pirazol-1-il-fenil)-propan-2-ona (6,9 g, 34,46 mmols) em piridina (30 ml) é tratada com tiouréia (2,6 g, 34,46 mmols) se- guida por iodo (8,7 g, 34,46 mmols) e aquecida até 80°C. Depois de 8 horas, a mistura de reação é deixada esfriar até temperatura ambiente e a suspen- são resultante é filtrada e lavada com EtOAc. O filtrado é concentrado em vácuo para produzir um óleo. O óleo é dissolvido em EtOAc (200 ml) e lava- do com NaHCO3 (2 χ 100 ml), salmoura (100 ml), secado (MgSO4) e concen- trado em vácuo para produzir um sólido pegajoso. EtOH é adicionado ao resíduo bruto e o precipitado resultante é filtrado e secado para produzir o composto título (MH+ 257,29).

Alternativamente, 4-metil-5-(4-pirazol-1-il-fenil)-tiazol-2-ilamina pode ser preparada por meio da trilha de 'Suzuki': Etapa 3a: Benzidrilideno-[4-metil-5-(4-pirazol-1-il-fenil)-tiazol-2-il]-amina

1-(ácido borônico de 4-fenila)-1 H-pirazol (preparação descrita abaixo) (275 mg, 1,44 mmol,), benzidrilideno-(5-bromo-4-metil-tiazol-2-il)- amina (Intermediário A1 etapa 2) (468 mg, 1,31 mmol), Pd2(dba)3 (12 mg, 0,013 mmol), e PCy3 (87 mg, 0,31 mmol) são agitados sob argônio, em uma solução de dioxano (4 ml) e fosfato de potássio aquoso (1,76 ml, 2,23 mmols). A mistura é aquecida em IOO0C durante 18 h. O solvente em exces- so é removido em vácuo e o resíduo pré-absorvido em sílica. Purificação através de cromatografia em sílica eluindo com misturas de gradiente de 10% a 30% de acetato de etila em /'so-hexano fornece o composto título. Preparação de 1-(ácido borônico de 4-fenila)-1 H-pirazol: <formula>formula see original document page 11</formula> 1 -(4-lodofenil)-1 H-pirazol (7,71 g, 28,5 mmols) é dissolvido em

THF (100 ml), sob condições inertes. Boronato de trietila (4,9 ml, 29,07 mmols) é adicionado e a mistura resfriada até -78°C. n-Butil lítio é adicionado lentamente mantendo a temperatura em -78°C. A mistura é deixada esquen- tar até temperatura ambiente durante 18 h. Ácido hidroclórico a 5M (30 ml) é adicionado, a mistura agitada durante 1 h e extraída com acetato de etila (2 χ 200 ml). As orgânicas combinadas são lavadas com salmoura (250 ml), 10% solução de tiossulfato de sódio (250 ml) e solução de hidróxido de sódio a 6M (250 ml). O produto é precipitado da solução básica em adição de áci- do hidroclórico a 5M. O sólido é filtrado e secado em vácuo. [MH+ 189,06] Etapa 3b: 4-Metil-5-(4-pirazol-1 -il-fenil)-tiazol-2-ilamina

pirazol-1 -il-fenil)-tiazol-2-il]-amina analogamente a 1-[4-(2-amino-4-metil- tiazol-5-il)-fenil]-etanona (Intermediário A1 etapa 4). Etapa 4: [4-Metil-5-(4-pirazol-1-il-fenil)-tiazol-2-il]-amida de ácido imidazol-1- carboxílico

(1,5 g, 5,85 mmols) em DCM seco é tratada com CDI (1,1 g, 7,02 mmols) seguida por TEA (1,2 ml, 8,77 mmols). A suspensão laranja resultante é a- quecida até refluxo durante 3 horas e em seguida deixada esfriar até tempe- ratura ambiente durante a noite. A suspensão é filtrada e lavada com DCM para produzir o composto título. [MH+ 315,35].

Este composto é preparado de benzidrilideno-[4-metil-5-(4-

Uma suspensão de 4-metil-5-(4-pirazol-1-il-fenil)-tiazol-2-ilamina

Este sólido consiste em intermediário de imidazol-uréia (A1) jun- to com quantidades variáveis do isocianato e imidazol correspondentes que resultaram de eliminação térmica reversível de imidazol sob as condições de reação. Este sólido é usado nas etapas subseqüentes uma vez que o inter- mediário de imidazol-uréia e intermediário de isocianato são igualmente a- dequados como precursores para uréias.

Intermediário A3: [5-(4-Acetil-3-flúor-fenil)-4-metil-tiazol-2-il]-amida de ácido imidazol-1 -carboxílico

<formula>formula see original document page 12</formula> Etapa 1: N-(4-Metil-tiazol-2-ih-acetamida:

<formula>formula see original document page 12</formula>

A uma solução agitada resfriada (5 0C) de anidrido acético (237 ml, 2,51 mois) é adicionada tiazol de 2-amino-4-metila (80 g, 0,697 mol) em porções. Para permitir dissolução do tiazol de 2-amino-4-metila, a mistura de reação é deixada esquentar mas mantida abaixo de 35°C. Uma vez que uma solução forma-se, a mistura de reação é resfriada a 5°C e agitada durante a noite. O solvente é removido a vácuo e o sólido é secado em um forno de vácuo durante a noite. O sólido resultante é triturado com iso-hexano (100 ml) e secado de novo. Recristalização de EtOAc/iso-hexano fornece o produ- to título como um sólido amarelo pálido.

As seguintes sínteses são representantes da trilha de 'Heck' pa- ra os compostos de fórmula (I) por meio de intermediários de fórmula (VI):

Etapa 2: N-r5-(4-Acetil-3-flúor-fenil)-4-metil-tiazol-2-in-acetamida

<formula>formula see original document page 12</formula>

DMF (25 ml) seco desgaseificado é adicionado a 1 -(4-bromo-2- fluor-fenil)-etanona (WO 2003095441) (1,25 g, 5,76 mmols), N-(4-metil- tiazol-2-il)-acetamida (0,75 g, 4,80 mmols), Bis (tri-t-butilfosfina) paládio (0) (0,245 g, 0,48 mmol) e carbonato de césio (3,13 g, 9,60 mmols), e a mistura de reação aquecida a 150 0C durante 4 horas. A mistura de reação é filtrada por meio de celita e o filtrado reduzido a vácuo. Purificação do produto bruto através de cromatografia em sílica eluindo com iso-hexano : EtOAc de 2:1 fornece o composto título como um sólido amarelo. (MH+) 293,25.

Etapa_3i_1-[4-(2-Amino-4-metil-tiazol-5-il)-2-flúor-fenil]-etanona

<formula>formula see original document page 13</formula>

N-[5-(4-Acetil-3-flúor-fenil)-4-metil-tiazol-2-il]-acetamida (0,46 g, 0,171 mmol) em EtOH (15 ml) é tratada com HCI a 6M (3,14 ml) e aquecida usando radiação de microonda em 100°C. Depois de 90 minutos, o solvente é removido a vácuo e o sólido resultante é dissolvido em água (25 ml). O pH é ajustado a pH 7 por adição de NaOH a 2M. O sólido amarelo que se preci- pita é filtrado e secado a vácuo para produzir o composto título. (MH+ 251,22).

Etapa 4: [5-(4-Acetil-3-flúor-fenil)-4-metil-tiazol-2-il]-amida de ácido imidazol- 1 -carboxílico.

<formula>formula see original document page 13</formula>

DCM seco (10 ml) é adicionado a 1-[4-(2-amino-4-metil-tiazol-5- il)-2-flúor-fenil]-etanona (0,25 g, 1,0 mmol) e CDI (0,259 g, 1,6 mmol) e a mistura é aquecida em refluxo durante 4 horas. A suspensão resultante é filtrada e secada a vácuo para produzir o composto título. Intermediário A4: r5-(4-Metilsulfonil-3-flúor-fenin-4-metil-tiazol-2-il1-amida de ácido imidazol-1 -carboxílico.

Ele pode ser preparado tal como descrito em W005/021519A2. <formula>formula see original document page 14</formula>Ele pode ser preparado tal como descrito em W004/096797A1. Intermediário B1: Iodidrato de 3-amino-N-(5-metil-isoxazol-3-il)- propionamida.

Etapa 1: Éster de terc-butila de ácido [2-(5-metil-isoxazol-3-ilcarbamoil)-etil]- carbâmico. <formula>formula see original document page 14</formula> Uma solução de HOAT (0,216 g, 1,58 mmol) e WSCD (0,985 g,6,34 mmols) em DCM (4 ml) é tratada com 5-metil-isoxazol-3-ilamina (0,57 g,5,81 mmols) e <formula>formula see original document page 14</formula>ra ambiente durante 18 h. A mistura resultante é diluída com DCM (10 ml) e lavada com água seguida por salmoura. A porção orgânica é secada (Mg- SO4) e concentrada a vácuo e o resíduo bruto é purificado através de croma- tografia em sílica eluindo com EtOAc - EtOH (aumentando polaridade se necessário) para produzir o composto título.

Etapa 2: Iodidrato de 3-amino-N-(5-metil-isoxazol-3-il)-propionamida

A uma solução agitada de éster de terc-butila de ácido [2-(5- metil-isoxazol-3-ilcarbamoil)-etil]-carbâmico (0,1 g, 0,37 mmol) em MeCN (3 ml) é adicionada TMSI em gotas (0,11 ml, 0,74 mmol). Depois de 30 minu- tos, MeOH (1 ml) é adicionado para produzir uma suspensão amarela a qual é coletada por filtragem e lavada com EtOAc para produzir o composto título. Além disso, produto é obtido por concentração do filtrado.

Alternativamente, este intermediário pode ser preparado como o sal de cloridrato:

Uma solução de DMAP (9,77g), TEA (55,23ml) e N,N'-

diisopropilcarbodiimida (49,01 ml) em DCM é tratada com 5-metil-isoxazol-3- ilamina (28,8g) e Boc-3-Ala-OH (50g) e agitada em temperatura ambiente durante 18h. A mistura resultante é diluída com DCM (1750 ml) e lavada com ácido cítrico a 10% (2 χ 500 ml), solução de hidrogenocarbonato de só- dio saturada (2 χ 500 ml), e salmoura (600 ml). A porção orgânica é secada (MgSO4), concentrada em vácuo e o resíduo bruto é agitado com iso-hexano (750 ml) durante 1 h. O sólido resultante é dissolvido em dioxano (400 ml) e tratado com HCI a 4M em dioxano (350 ml). Depois de 1 h, o precipitado é filtrado e lavado com dioxano (100 ml) para produzir o cloridrato de 3-amino- N-(5-metil-isoxazol-3-il)-propionamida. (MH+ 169,84)

Intermediário B2: Hidroiodeto de 3-amino-N-piridin-3-il-propionamida:

<formula>formula see original document page 15</formula>

Etapa 1: Éster de terc-butila de ácido[2-(piridin-3-ilcarbamoil)-etil]-carbâmico.

TEA (2,2 ml, 16 mmols) é adicionada a uma solução agitada de BOC-p-alanina (2,4 g, 12,7 mmols), HOAt (0,68 g, 5,0 mmols), EDCI.HCI (2,43 g, 12,7 mmols) em DCM e agitada em temperatura ambiente. Depois de 1 hora, 3-aminopiridina (1,0 g, 10,6 mmols) é adicionada e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante um adicional de 3 horas. A mistu- ra é em seguida diluída com DCM (200 ml) e lavada com HCI a 0,1 M segui- do por NaOH a 1 Μ. A porção orgânica é secada (MgSO4) e concentrada a vácuo para produzir o composto título como um sólido cristalino branco. Etapa 2: Iodidrato de 3-amino-N-piridin-3-il-propionamida:

A uma suspensão agitada de éster de terc-butila de ácido [2- (piridin-3-ilcarbamoil)-etil]-carbâmico (0,075 g, 0,28 mmol) em MeCN (3 ml) é adicionado em gotas TMSI (0,05 ml, 0,34 mmol). Depois de 30 minutos, MeOH (1 ml) é adicionado e a agitação continuou durante um adicional de 20 minutos. O solvente é removido a vácuo e o resíduo bruto é triturado com MeOH/EtOAc para produzir o composto título como um sólido cristalino cre- me.

Intermediários B3: Iodidrato de 2-amino-N-piridin-3-il-propionamida <formula>formula see original document page 16</formula>

Este composto é preparado analogamente ao Intermediário B2 por substituição de 3-aminopiridina com 2-aminopiridina. Intermediários B4: Cloridrato de 3-amino-N-isoxazol-3-il-propionamida

<formula>formula see original document page 16</formula>

Etapa 1: Éster de terc-butila de ácido [2-(isoxazol-3-ilcarbamoil)-etil]- carbâmico:

Uma mistura compreendendo BOC-β-alanina (1 g, 5,29 mmols), WSCD (0,985 g, 6,34 mmols) e HOAT (0,216 g, 1,59 mmol) em DCM é tra- tada com 3-aminoisoxazol (0,43 ml, 5,81 mmols) e deixada agitar durante a noite. A mistura resultante é lavada com água, salmoura, secada (MgSO4 e concentrada a vácuo. O produto bruto é purificado através de cromatografia em sílica eluindo com EtOAc para produzir o composto título como um sólido branco.

Etapa 2: Cloridrato de 3-amino-N-isoxazol-3-il-propionamida

Éster de terc-butila de ácido [2-(isoxazol-3-ilcarbamoil)-etil]- carbâmico (0,702 g, 2,76 mmols) em dioxano (5 ml) é tratado com HCI a 4M em dioxano (3,44 ml) e agitada em temperatura ambiente durante 3 dias. O solvente é removido a vácuo e co-evaporado com tolueno para produzir o composto título como um sólido marrom pálido.

O processo de desproteção pode também ser realizado usando TMSI tal como descrito na preparação de Intermediário B2 (etapa 2). Intermediário B5: 3-Amino-N-(2,5-dimetil-2H-pirazol-3-il)-propionamida

<formula>formula see original document page 16</formula>

Este composto é preparado analogamente ao Intermediário B4 por substituição de 3-aminoisoxazol (etapa 1) com 1,3-dimetilpirazol-5- amina.

Intermediário B6: 3-Amino-N-(2-naftil)-propionamida

Este composto é comercialmente disponível. Exemplo 1: 3-(3-r4-Metil-5-(4-pirazol-1-il-fenil)-tiazol-2-il1-ureído)-N-piridin-3- il-propionamida

Uma suspensão agitada de [4-metil-5-(4-pirazol-1-il-fenil)-tiazol- 2-il]-amida de ácido imidazol-1-carboxílico (Intermediário A1)(0,1 g, 0,28 mmol) e iodidrato de 3-amino-N-piridin-3-il-propionamida (Intermediário B2)(0,083 g, 0,28 mmol) em DMF seco (1 ml) é tratada com TEA. Depois de agitação em temperatura ambiente durante 1 hora, o solvente é removido a vácuo e purificação do resíduo bruto através de cromatografia em sílica elu- indo com EtOAc/EtOH (10:1 aumentando até 5:1) fornece um sólido que é recristalizado de EtOAc/EtOH para produzir o composto título. [MH+ 448,49]

Exemplo 2: N-(5-Metil-isoxazol-3-il)-3-(3-r4-metil-5-(4-pirazol-1 -il-fenil)-tiazol- 2-in-ureído)-propionamida

Uma mistura de cloridrato de 3-amino-N-(5-metil-isoxazol-3-il)- propionamida (Intermediário B1 produzido por desproteção de HCI) (0,1 g, 0,49 mmol) e trietilamina (0,164 ml, 1,18 mmol) é agitada em DMF (4 ml). [4- Metil-5-(4-pirazol-1-il-fenil)-tiazol-2-il]-amida de ácido imidazol-1-carboxílico (Intermediário A2) (0,16 g, 0,47 mmol) é adicionada e a mistura agitada em temperatura ambiente durante 18h. Água (20 ml) é adicionada e a mistura agitada durante 30 min. O sólido é filtrado, lavado com água e secado a vá- cuo em 45°C durante 4h para produzir o composto título.

Por seguimento do procedimento tal como descrito abaixo, com- postos de fórmula Xl

<formula>formula see original document page 18</formula>

são mostrados na Tabela 1 abaixo. Os compostos são obtidos na forma livre.

Procedimento geral para a preparação de exemplos adicionais de intermedi- ários de imidazol-uréia (A) e aminas (B):

A amina (B) (0,12 mmol) em DMF seco (0,12 mmol) é adicionada a uma solução / suspensão do intermediário de uréia de imidazol (A) (0,12 mmol) em DMF (1,0 ml). Trietilamina pode ser adicionada para realçar taxa de reação e especialmente se um ou ambos os materiais de partida está presente como um sal (1,1 equivalentes de Et3N por equiv. de sal). A mistura de reação pode ser sonicada se necessário até que uma solução clara seja obtida. A reação é deixada prosseguir entre temperatura ambiente e 70°C até que o material de partida seja consumido (30 minutos a 24 horas). Quando completa, a mistura é concentrada a vácuo para remover o solven- te. O produto pode ser purificado através de procedimento padrão, por e- xemplo, cristalização, cromatografia ou HPLC.

Tabela 1

<table>table see original document page 18</column></row><table> <table>table see original document page 19</column></row><table>

Os compostos de fórmula I na forma livre ou em forma de sal farmaceuticamente aceitável, exibem propriedades farmacológicas valiosas, por exemplo, como inibidores de enzimas de fosfatidilinositol 3-cinase (PI3K), particularmente a isoforma δ, por exemplo tal como indicaram testes in vitro e in vivo e são por esse motivo indicados para terapia.

Os compostos de fórmula I mostram efeito inibidor em isoforma PI3KÕ tal como determinado em seguintes ensaios:

Ensaio de enzima PI3K delta com base em tecnologia de Ensaio de Proximidade de Cintilação (SPA). PI3K delta humana é expressada como uma proteína recombinante em células de inseto. Atividade de PI3K delta é ensaiada por medição da fosforilação de fosfatidilinositol (PI) usando um en- saio de proximidade de cintilação. Resumidamente, a reação de cinase é desempenhada em um volume final de 50 μΙ/cavidade. As concentrações finais de ATP e Pl no ensaio são 5 μΜ e 6 pg/ml, respectivamente. A reação é iniciada pela adição de PI3K delta e concluída pela adição de 50 μΙ de con- tas de SPA de aglutinina de germe de trigo depois de 90 minutos de incuba- ção em temperatura ambiente. Neste ensaio os compostos de fórmula I exi- bem valores de IC5o (concentrações requeridas para inibição de 50%) vari- ando de 7 nM a 275nM. Por exemplo, o composto de Exemplo 2 possui um valor de IC5o de 5 nM.

Compostos de fórmula I demonstram seletividade sobre as iso- formas α, β ou γ tal como determinado por um ensaio correspondente usan- do a isoforma de PI3K correspondente. Em particular, compostos de fórmula l,por exemplo, composto de Exemplo 2, possuem uma seletividade para a isoforma δ sobre a isoforma α, β ou γ de pelo menos 10 vezes, de preferên- cia pelo menos 20 vezes, mais de preferência pelo menos 40 vezes, tal co- mo medido pela relação do valor de IC5o do composto para a isoforma δ para o valor de IC5o do composto para a isoforma α, β ou γ.

Ensaio de PI3K delta celular. Células de Rat-1 são transitoria- mente transfectadas com uma construção de PI3K delta humana (PIK3 delta de pcDNA3 contendo uma caixa de CaaX na extremidade de terminal C) u- sando o kit de transfecção de FUGENE. A caixa de CaaX sinaliza para a li- gação de uma porção de isoprenóide que ativa PI3K delta através de alve- jamento dela às membranas intracelulares/à membrana plasmática. Subse- qüente, fosforilação de Akt dependente de PI3K delta é quantificada na pre- sença e ausência de compostos a serem testados usando o kit de ELISA de fosfo Akt de R&D Systems. Inibição em porcentagem pelas amostras é cal- culada e as concentrações requeridas para inibição de 50% (valores de IC50) são determinadas. Neste ensaio, os compostos de fórmula I possuem um valor de IC50≤1 μΜ; por exemplo, o composto de Exemplo 2 possui um IC50 de 22 nM.

Além disso, os compostos de fórmula I inibem respostas de célu- la B e T nos seguintes ensaios: Ensaio de proliferação de célula B.

Uma suspensão de célula de baço de camundongos nu/nu Balb/c é preparada e ajustada a 2 χ 106 células/ml em Meio Iscoves comple- to seguida pela adição de 10 pg/ml de anticorpo de IgM de anticamundongo monoclonal (clone b-7-6). Compostos a serem testados são dissolvidos em DMSO em 10 mM e diluídos em Meio Iscoves completo. 100 μΙ da suspen- são de célula são transferidos a cavidades contendo 100 μΙ de solução de composto resultando em concentrações finais de 2 χ 105 de células/cavidade e 5μg/ml de anticorpo de lgM de anticamundongo monoclonal. Placas são incubadas durante 3 dias em 37° C e CO2 a 5%. Proliferação de célula é me- dida por incorporação de [3H] timidina seguindo um pulso de 16 horas. Inibi- ção em porcentagem pelo composto a ser testado é calculada e as concen- trações requeridas para inibição de 50% (valores de IC50) são determinadas. Neste ensaio, os compostos de fórmula I exibem uma IC5o < 1 μΜ. Por e- xemplo, o composto de exemplo 2 possui uma IC50 de 15 nM. Reação de linfócito misto (MLR).

Uma MLR bidirecional é desempenhada de acordo com proce- dimentos padrão. Resumidamente, células de baço de camundongos de CBA e BALB/c (1,6 χ 105 de células de cada cepa por cavidade em placas de micro-título de cultura de tecido de fundo chato, 3,2 χ 105 em total) são incubadas em meio de RPMI contendo soro de bezerro fetal a 10%, 100 U/ml de penicilina, 100 μg/ml de estreptomicina, 50 μΜ de 2-mercaptoetanol e consecutivamente compostos diluídos a serem testados. Depois de quatro dias de incubação, 1 pCi de [3H] timidina é adicionada às culturas. Células são colhidas depois de um período de incubação de cinco horas adicional, e 3H-timidina incorporada é determinada de acordo com procedimentos pa- drão. Inibição em porcentagem pelas amostras é calculada e as concentra- ções requeridas para inibição de 50% (valores de IC5o) são determinadas. Neste ensaio, os compostos de fórmula I possuem valores de IC50 variando de 20nM a 200nM. Composto de Exemplo 2, por exemplo, possui um valor de lC50 de 26 nM.

Os compostos de fórmula I mostram eficácia em inibição de con- dições inflamatórias, por exemplo em doenças inflamatórias das vias aéreas, tal como demonstrado em um modelo de animal, por exemplo um modelo de camundongo ou rato, de inflamação de vias aéreas ou outras condições in- flamatórias, por exemplo tal como descrito em Szarka e outros, J. Immunol. Methods (1997) 202:49-57; Renzi e outros, Am. Rev. Respir. Dis. (1993) 148:932-939; Tsuyuki e outros., J. Clin. Invest. (1995) 96:2924-2931; e Cer- nadas e outros (1999) Am. J. Respir. Cell Mol. Bioi 20:1-8.

Os compostos de fórmula I em forma livre ou de sal farmaceuti- camente aceitável são, por esse motivo, úteis no tratamento e/ou prevenção de condições, doenças ou distúrbios que são mediados pela ativação das enzimas de Pi3 cinase, particularmente condições inflamatórias, alérgicas ou auto-imunes.

Desse modo, compostos de fórmula I são úteis no tratamento de doenças inflamatórias ou obstrutivas das vias aéreas, resultando, por exem- pio, em redução de lesão de tecido, inflamação de vias aéreas, hiper- reatividade brônquica, remodelagem ou progressão de doença. Doenças inflamatórias ou obstrutivas das vias aéreas às quais a presente invenção é aplicável incluem asma de qualquer que seja o tipo ou gênese incluindo tan- to asma intrínseca (não-alérgica) e asma extrínseca (alérgica), asma suave, asma moderada, asma severa, asma bronquítica, asma induzida por exercí- cio, asma ocupacional e asma induzida em seguida à infecção bacteriana. Tratamento de asma também deve ser entendido como abrangendo trata- mento de sujeitos, por exemplo de menos do que 4 ou 5 anos de idade, exi- bindo sintomas asmáticas e diagnosticado ou diagnosticáveis como "crian- ças asmáticas", uma categoria de paciente estabelecida de principal interes- se médico e já freqüentemente identificada como asmáticos incipientes ou de fase precoce. (Por conveniência, esta condição asmática particular é refe- rida como "síndrome da criança asmática".)

Eficácia profilática no tratamento de asma será evidenciada por freqüência ou severidade reduzida de ataque sintomático, por exemplo, de ataque asmático agudo ou broncoconstritor, melhoramento em função pul- monar ou hiper-reatividade de vias aéreas melhoradas. Ela pode também ser evidenciada por exigência reduzida para outra, terapia sintomática, isto é terapia para ou pretendida para restringir ou abortar ataque sintomático quando ele ocorre, por exemplo antiinflamatórios (por exemplo corticosterói- de) ou broncodilatadores. Benefício profilático em asma pode em particular ser aparente em sujeitos propensos à "crise matinal". "Crise matinal" é uma síndrome asmática reconhecida, comum a uma porcentagem substancial de asmáticos e caracterizada por ataque de asma, por exemplo, entre as horas de cerca de 4 a 6 am, isto é em um tempo normalmente substancialmente distante de qualquer terapia de asma sintomática previamente administrada.

Outras doenças inflamatórias ou obstrutivas das vias aéreas e condições às quais a presente invenção é aplicável incluem lesão pulmonar aguda (ALI), síndrome da angústia respiratória de adulto (ARDS), doenças pulmonares, das vias aéreas ou do pulmão crônicas obstrutivas (COPD, COAD ou COLD), incluindo bronquite crônica ou dispnéia associada com isso, enfisema, assim como exacerbação de hiper-reatividade das vias aé- reas conseqüente à outra terapia de fármaco, em particular, outra terapia de fármaco inalado. Uma invenção é também aplicável ao tratamento de bron- quite de qualquer que seja o tipo ou gênese incluindo, por exemplo, bronqui- te aguda, araquídica, catarral, crupal, crônica ou ftinóide. Doenças inflamató- rias ou obstrutivas das vias aéreas adicionais às quais a presente invenção é aplicável incluem pneumoconiose ( uma doença comumente ocupacional inflamatória dos pulmões, freqüentemente acompanhada por obstrução das vias aéreas, seja crônica ou aguda, e ocasionada por inalação repetida de pós) de qualquer que seja tipo ou gênese, incluindo, por exemplo, alumino- se, antracose, asbestose, calicose, fibrose cística, ptilose, siderose, silicose, tabacose e bissinose.

Levando em consideração sua atividade anti-inflamatória, em particular em relação à inibição de ativação de eosinófilo, agentes de uma invenção são também úteis no tratamento de distúrbios relacionados a eosi- nófilo, por exemplo eosinofilia, em particular distúrbios relacionados a eosi- nófilo das vias aéreas (por exemplo envolvendo infiltração eosinofílica mór- bida de tecidos pulmonares) incluindo hiper-eosinofilia quando ele efetua as vias aéreas e/ou pulmões assim como, por exemplo, distúrbios relacionados a eosinófilo das vias aéreas conseqüente ou concomitante a síndrome de Lõffler, pneumonia eosinofílica, infestação (incluindo eosinofilia tropical) pa- rasitária (em particular metazoário), aspergilose broncopulmonar, poliarterite nodosa (incluindo síndrome de Churg-Strauss), granuloma eosinofílico e dis- túrbios relacionados a eosinófilo afetando as vias aéreas ocasionadas por reação de fármaco.

Os compostos de fórmula I são além disso, indicados no trata- mento de condições inflamatórias ou alérgicas da pele, por exemplo psoría- se, dermatite de contato irritante, dermatite de contato alérgica, e outras dermatites eczematosas, dermatite seborréica, manifestações cutâneas de distúrbios imunologicamente mediados, dermatite atópica, alopecia em á- reas, eritema multiforme, dermatite herpetiforme, escleroderma, vitiligo, angi- íte por hipersensibilidade, urticária, penfigóide bolhoso, lúpus eritematoso, pênfigo, epidermólise bolhosa adquirida, e outras condições inflamatórias ou alérgicas da pele.

Os compostos de fórmula I são também indicados para a pre- venção ou tratamento de outras doenças ou condições, em particular doen- ças ou condições possuindo um componente inflamatório, por exemplo, tra- tamento de doenças e condições do olho tal como conjuntivite, ceratoconjun- tivite seca e conjuntivite vernal, e doença inflamatória em que reações auto- imunes são implicadas ou possuindo um componente auto-imune ou etiolo- gia, incluindo distúrbios hematológicos auto-imunes, por exemplo anemia hemolítica, anemia aplásica, anemia eritrocitária pura, trombocitopenia idio- pática e anemia perniciosa, lúpus eritematoso sistêmico, policondrite, escle- roderma, granulomatose de Wegener, dermatomiosite, tiróide de hashimoto, miastenia grave, síndrome de Steven-Johnson, espru idiopática, doenças inflamatórias auto-imunes opcionalmente com reações aberrantes básicas, por exemplo doença inflamatória do intestino, doença de Crohn ou colite ul- cerativa, oftalmopatia endócrina, doença de Grave, sarcoidose, alveolite, pneumonite por hipersensibilidade crônica, esclerose múltipla, cirrose biliar primária, uveíte, fibrose de pulmão intersticial, artrite psoriática e lesão glo- merular inflamatória, por exemplo glomerulonefrite (com e sem síndrome nefrótica, por exemplo incluindo síndrome nefrótica idiopática ou nefropatia de alteração minai).

Outras doenças ou condições que podem ser tratadas com a- gentes de uma invenção incluem rejeição aguda ou crônica de alo- ou xeno- enxertos de célula, tecido ou órgão ou função de enxerto atrasada, doença do enxerto versus hospedeiro, trombose, hipertensão, isquemia do coração, pancreatite, choque séptico, artrite reumatóide, osteoartrite, artrite psoriática, doenças proliferativas tais como câncer, ateroesclerose, obesidade, resteno- se, diabetes tipo I ou Il e os distúrbios associados com isso, vasculite, sín- drome de Sjoegren, oftalmopatia de Graves, retinopatia, tal como retinopatia diabética ou retinopatia induzida por oxigênio hiperbárico, condições caracte- rizadas por pressão intraocular elevada ou secreção de humor aquoso ocu- lar, tal como glaucoma, e outros, doenças alérgicas, por exemplo, rini- te/conjuntivite alérgica, doenças diarréicas, lesão pulmonar inflamatória, le- são do fígado inflamatória, cistite, por exemplo, cistite intersticial ou inconti- nência urinária incluindo hiper-reflexia do detrusor da bexiga e hipersensibili- dade da bexiga, doença ocular inflamatória, ceratoconjuntivite, miocardite ou hepatite, por exemplo hepatite aguda ou crônica, lesão de isquemi- a/reperfusão, por exemplo infarto do miocárdio, acidente vascular cerebral, insuficiência cardíaca tal como (aguda e crônica) insuficiência cardíaca con- gestiva, disfunção do ventrículo esquerdo incluindo contractilidade cardíaca melhorada, cardiomiopatia hipertrófica, miopatia cardíaca diabética e outros tipos de disfunção cardíaca prejudicial e remodelagem, isquemia de intesti- no, insuficiência renal ou choque de hemorragia, choque traumático, síndro- me nefrótica, doenças infecciosas, por exemplo choque tóxico (por exemplo induzido por super-antígeno), síndrome da angústia respiratória de adulto ou infecções virais, por exemplo AIDS, hepatite viral, por exemplo hepatite B ou C, infecção bacteriana crônica, ou doenças neurodegenerativas, por exem- pio doença de Alzheimer, esclerose lateral amiotrófica ou demência senil. Exemplos de transplantes de célula, tecido ou órgão sólido incluem, por e- xemplo, ilhas pancreáticas, células-troco, medula óssea, tecido corneano, tecido neuronal, coração, pulmão, coração-pulmão combinados, rim, fígado, intestino, pâncreas, traquéia ou esôfago. Para os usos acima, a dosagem requerida certamente variará dependendo do modo de administração, a condição particular a ser tratada e o efeito desejado.

Em geral, resultados satisfatórios são indicados serem obtidos sistemicamente em dosagens diárias de cerca de 0,03 a 10,0 mg/kg por pe- so corporal. Uma dosagem diária indicada no mamífero maior, por exemplo, humanos, é na faixa de cerca de 0,5 mg a cerca de 1 g, convenientemente administrada, por exemplo, em doses divididas até quatro vezes ao dia ou em forma retardada. Formas de dosagem unitária adequadas para adminis- tração oral compreendem de cerca de 0,1 a 500 mg de ingrediente ativo.

Os compostos de fórmula I podem ser administrados através de qualquer rotina convencional, em particular entericamente, por exemplo o- ralmente, por exemplo na forma de comprimidos ou cápsulas, ou parente- ralmente, por exemplo na forma de soluções ou suspensões injetáveis, topi- camente, por exemplo na forma de loções, géis, ungüentos ou cremes, por inalação, por exemplo no tratamento de doença inflamatória ou obstrutiva das vias aéreas, intranasalmente, por exemplo no tratamento de rinite alérgi- ca, ou em uma forma de supositório. Composições farmacêuticas compre- endendo um composto de fórmula I na forma livre ou em forma de sal farma- ceuticamente aceitável em associação com pelo menos um veículo ou dilu- ente farmacêutico aceitável podem ser fabricadas de maneira convencional através de mistura com um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.

Os compostos de fórmula I podem ser administrados na forma livre ou em forma de sal farmaceuticamente aceitável por exemplo tal como indicado acima. Tais sais podem ser preparados de maneira convencional e exibem a mesma ordem de atividade como os compostos livres.

De acordo com o antecedente a presente invenção também for- nece: 1.1 um método para prevenção ou tratamento de condições, dis-

túrbios ou doenças mediados pela ativação das enzimas de Pi3 cinase, por exemplo a isoforma δ, por exemplo tal como indicado acima, em um sujeito em necessidade de tal tratamento, cujo método compreende administração ao referido sujeito de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável deste;

1.2 um método para prevenção ou tratamento de rejeição de transplante agudo ou crônico ou doenças alérgicas ou inflamatórias ou auto- imunes, por exemplo, tal como indicado acima, em um sujeito em necessi- dade de tal tratamento, cujo método compreende administração ao referido sujeito de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável mesmo;

2. Um composto de fórmula I, na forma livre ou em uma forma de sal farmaceuticamente aceitável para uso como um farmacêutico, por exem- plo em quaisquer dos métodos tal como indicado sob 1.1 ou 1.2 acima.

3. Uma composição farmacêutica, por exemplo, para uso em quaisquer dos métodos como em 1.1 ou 1.2 acima compreendendo um composto de fórmula I na forma livre ou forma de sal farmaceuticamente a- ceitável em associação com um diluente ou veículo farmaceuticamente acei- tável por esse motivo.

4. Um composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo para uso na preparação de uma composição farmacêutica para uso em qualquer do método como em 1.1 ou 1.2 acima.

Os compostos de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitá- vel do mesmo podem ser administrados como o único ingrediente ativo ou em conjunção com, por exemplo como um adjuvante a, outros fármacos por exemplo agentes imunossupressores ou de imunomodulação ou outros a- gentes antiinflamatórios, por exemplo para o tratamento ou prevenção de rejeição de alo- ou xenoenxerto agudo ou crônico ou distúrbios inflamatórios ou auto-imunes, ou um agente quimioterapêutico, por exemplo um agente anti-proliferativo de célula maligna. Por exemplo, os compostos de fórmula I podem ser usados em combinação com um inibidor de calcineurina, por e- xemplo ciclosporina A ou FK 506; um inibidor de mTOR, por exemplo rapa- micina, 40-0-(2-hidroxietil)-rapamicina, CCI779, ABT578, AP23573, bioli- mus-7 ou biolimus-9; uma ascomicina possuindo propriedades imunossu- pressoras, por exemplo ABT-281, ASM981, etc.; corticosteróides; ciclofos- famida; azatiopreno; metotrexato; leflunomida; mizoribina; ácido ou sal mico- fenólico; micofenolato de mofetila; 15-desoxispergualina ou um homólogo imunossupressor, análogo ou derivado do mesmo; um inibidor de PKC, por exemplo tal como descrito em WO 02/38561 ou WO 03/82859, por exemplo o composto de Exemplo 56 ou 70; um agonista de receptor S1P ou modula- dor, por exemplo FTY720 opcionalmente fosforilado ou um análogo do mesmo, por exemplo 2-amino-2-[4-(3-benziloxifeniltio)-2-clorofenil]etil-1,3- propanodiol opcionalmente fosforilado ou ácido 1-{4-[1-(4-ciclohexil-3- trifluorometil-benziloxiimino)-etil]-2-etiI-benzil}-azetidina-3-carboxílico ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis; um inibidor de JAK3 cinase, por exemplo a-ciano-(3,4-diidroxi)-N-benzilcinamamida de N-benzil-3,4-diidroxi- benzilideno-cianoacetamida (Tyrphostin AG 490), prodigiosina 25-C (PNU156804), [4-(4'-hidroxifenil)-amino-6,7-dimetoxiquinazolina] (WHI- P131), [4-(3'-bromo-4'-hidroxilfenil)-amino-6,7-dimetoxiquinazolina] (WHI- P154), [4-(3',5,-dibromo-4'-hidroxilfenil)-amino-6,7-dimetoxiquinazolina] WHI- P97, KRX-211, 3-{(3R,4R)-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)- amino]-piperidin-1-il}-3-oxo-propionitrila, na forma livre ou em uma forma de sal farmaceuticamente aceitável, por exemplo mono-citrato (também chama- do CP-690,550), ou um composto tal como descrito em WO 04/052359 ou WO 05/066156; anticorpos monoclonais imunossupressores, por exemplo, anticorpos monoclonais para receptores de leucócito, por exemplo, MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD8, CD25, CD28, CD40, CD45, CD52, CD58, CD80, CD86 ou seus ligantes; outros compostos imunomodulatórios, por exemplo uma molécula de ligação recombinante possuindo pelo menos uma porção do domínio extracelular de CTLA4 ou um mutante do mesmo, por exemplo uma porção extracelular pelo menos de CTLA4 ou um mutante do mesmo ligado a uma seqüência de proteína não-CTLA4, por exemplo C- TLA4lg (por ex. ATCC 68629 designado) ou um mutante do mesmo, por e- xemplo LEA29Y; inibidores de molécula de adesão, por exemplo antagonis- tas de LFA-1, antagonistas de ICAM-1 ou -3, antagonistas de VCAM-4 ou antagonistas de VLA-4; ou um agente quimioterapêutico, por exemplo pacli- taxel, gencitabina, cisplatina, doxorrubicina ou 5-fluorouracila; ou um agente antiinfeccioso.

Os compostos de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitá- vel do mesmo são também úteis como agentes co-terapêuticos para uso em combinação com outras substâncias de fármaco tais como substâncias de fármaco antiinflamatório, broncodilatador, anti-histamina ou antitussígeno, particularmente no tratamento de doenças obstrutivas ou inflamatórias das vias aéreas tais como aquelas mencionadas mais acima, por exemplo como potenciadores de atividade terapêutica de tais fármacos ou como um meio de reduzir dosagem requerida ou efeitos colaterais potenciais de tais fárma- cos.

Fármacos antiinflamatórios adequados incluem esteróides, em particular glicocorticosteróides tais como budesonida, dipropionato de be- clametasona, propionato de fluticasona, ciclesonida ou furoato de mometa- sona, ou esteróides descritos em WO 02/88167, WO 02/12266, WO 02/100879, WO 02/00679 (especialmente aqueles de Exemplos 3, 11, 14, 17, 19, 26, 34, 37, 39, 51, 60, 67, 72, 73, 90, 99 e 101), WO 03/035668, WO 03/048181, WO 03/062259, WO 03/064445, WO 03/072592, agonistas re- ceptores de glicocorticóide não-esteroidal, tais como aqueles descritos em WO 00/00531, WO 02/10143, WO 03/082280, WO 03/082787, WO 03/104195, WO 04/005229; antagonistas de LTB4 tal LY293111, CGS025019C, CP-195543, SC-53228, BIIL 284, ONO 4057, SB 209247 e aqueles descritos em US 5451700; antagonistas de LTD4 tais como monte- Iucaste e zafirlucaste; inibidores de PDE4 tais cilomilast (Ariflo® GIaxoSmi- thKline), Roflumilast (Byk Gulden),V-11294A (Napp), BAY19-8004 (Bayer), SCH-351591 (Schering-Plough), Arofilina (Almirall Prodesfarma), PD189659 / PD168787 (Parke-Davis), AWD-12-281 (Asta Medica), CDC-801 (Celgene), SeICID(TM) CC-10004 (Celgene), VM554/UM565 (Vernalis), T-440 (Tana- be), KW-4490 (Kyowa Hakko Kogyo), e aquele descrito em WO 92/19594, WO 93/19749, WO 93/19750, WO 93/19751, WO 98/18796, WO 99/16766, WO 01/13953, WO 03/104204, WO 03/104205, WO 03/39544, WO 04/000814, WO 04/000839, WO 04/005258, WO 04/018450, WO 04/018451, WO 04/018457, WO 04/018465, WO 04/018431, WO 04/018449, WO 04/018450, WO 04/018451, WO 04/018457, WO 04/018465, WO 04/019944, WO 04/019945, WO 04/045607 e WO 04/037805; agonistas de A2a tais co- mo aqueles descritos em EP 409595A2, EP 1052264, EP 1241176, WO 94/17090, WO 96/02543, WO 96/02553, WO 98/28319, WO 99/24449, WO 99/24450, WO 99/24451, WO 99/38877, WO 99/41267, WO 99/67263, WO 99/67264, WO 99/67265, WO 99/67266, WO 00/23457, WO 00/77018, WO 00/78774, WO 01/23399, WO 01/27130, WO 01/27131, WO 01/60835, WO 01/94368, WO 02/00676, WO 02/22630, WO 02/96462, WO 03/086408, WO 04/039762, WO 04/039766, WO 04/045618 e WO 04/046083; antagonistas de A2b tais como aqueles descritos em WO 02/42298; e agonistas de adre- noceptor beta-2 tal como albuterol (salbutamol), metaproterenol, terbutalina, salmeterol, fenoterol, procaterol, e especialmente, formoterol e sais farma- ceuticamente aceitáveis do mesmo, e compostos (em forma livre ou de sal ou solvato) de fórmula I de WO 0075114, cujo documento é incorporado aqui através de referência, de preferência compostos dos Exemplos do mesmo, especialmente o composto 5-[(R)-2-(5,6-Dietil-indan-2-ilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona, e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, assim como compostos (na forma livre ou de sal ou solvato) de fórmula I de WO 04/16601, e também compostos de WO 04/033412.

Fármacos broncodilatadores adequados incluem agentes antico- linérgicos ou antimuscarínicos, em particular brometo de ipratrópio, brometo de oxitrópio, sais de tiotrópio e CHF 4226 (Chiesi), e glicopirrolato, mas tam- bém aqueles descritos em WO 01/04118, WO 02/51841, WO 02/53564, WO 03/00840, WO 03/87094, WO 04/05285, WO 02/00652, WO 03/53966, EP 424021, US 5171744, US 3714357, WO 03/33495 e WO 04/018422.

Substâncias de fármaco de antihistamina adequados incluem cloridrato de cetirizina, acetaminofeno, fumarato de clemastina, prometazina, loratidina, desloratidina, cloridrato de difenidramina e fexofenadina, activasti- na, astemizol, azelastina, ebastina, epinastina, mizolastina e tefenadina as- sim como aqueles descritos em WO 03/099807, WO 04/026841 e JP2004107299.

Outras combinações úteis de agentes de uma invenção com fármacos antiinflamatórios são aqueles com antagonistas de receptores de 30 quimiocina, por exemplo antagonistas de CCR-1, CCR-2, CCR-3, CCR-4, CCR-5, CCR-6, CCR-7, CCR-8, CCR-9 e CCR10, CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4, CXCR5, particularmente CCR-5 tais como antagonistas de Sche- ring-Plough SC-351125, SCH-55700 e SCH-D1 antagonistas de Takeda tais como cloreto de N-[[4-[[[6,7-diidro-2-(4-metnfenil)-5H-benzo-cidohepten-8- il]carbonil]amino]fenil]-metil]tetraidro-N,N-dimetil-2H-piran-4-amín (TAK- 770), e antagonistas de CCR-5 descritos em US 6166037 (particularmente reivindicações 18 e 19), WO 00/66558 (particularmente reivindicação 8), WO 00/66559 (particularmente reivindicação 9), WO 04/018425 e WO 04/026873.

Compostos de fórmula I podem também ser combinados com um bloqueador de receptor de angiotensina, por exemplo, valsartana (um bloqueador de receptor de angiotensina), losartana, irbesartana, eprosarta- na, forasartana, olmesartana, ripisartana, saprisartana, candesartana, taso- sartana ou telmisartana.

Compostos de fórmula I podem também ser usados em combi- nação com um agente quimioterapêutico, por exemplo, paclitaxel, gencitabi- na, cisplatina, doxorrubicina, 5-fluorouracila, um agente hormonal ou anta- gonista, por exemplo um antiandrogênio ou mitoxantrona, um antiestrogênio, por exemplo tamoxifeno, fulvestrante, raloxifeno e cloridrato de raloxifeno, um inibidor de aromatase, por exemplo atamestano, exemestano e formes- tano e, em particular, não-esteróides, especialmente aminoglutetimida, rogle- timida, piridoglutetimida, trilostano, testolactona, cetoconazol, vorozol, fadro- zol, anastrozol ou letrozol, um antimetabólito, um alcalóide vegetal, um modi- ficador de resposta biológica, de preferência uma Iinfocina ou interferons, um inibidor de proteína tirosina cinase e/ou serina/treonina cinase, ou um agente com outro mecanismo ou desconhecido de ação, por exemplo qualquer epi- tolona ou derivado de epitolona.

Onde os compostos de fórmula I são administrados em conjun- ção com outro fármaco, por exemplo, tal como descrito acima, dosagens do fármaco co-administrado certamente variará dependendo do tipo de co- fármaco empregado, no fármaco específico empregado, na condição sendo tratada e assim por diante.

De acordo com o antecedente, a presente invenção fornece ainda em outro aspecto: .5. Um método tal como definido acima compreendendo co- administração, por exemplo, concomitantemente ou em seqüência, de uma quantidade não-tóxica terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos uma se-

gunda substância de fármaco, por exemplo, tal como indicado acima.

.6. Uma combinação farmacêutica, por exemplo um kit, compre- endendo a) um primeiro agente que é um composto de fórmula I tal como descrito aqui, na forma livre ou em forma de sal farmaceuticamente aceitá- vel, e b) pelo menos um co-agente, por exemplo tal como descrito acima. O

kit pode compreender instruções para sua administração.

Os termos "co-administração" ou "administração combinada" ou similares tal como utilizado aqui pretendem abranger administração dos a- gentes terapêuticos selecionados a um único paciente, e pretendem incluir regimes de tratamento nos quais os agentes não são necessariamente ad- ministrados pela mesma rotina de administração ou ao mesmo tempo.

O termo "combinação farmacêutica" tal como usado aqui quer dizer um produto que resulte da mistura ou combinação de mais do que um ingrediente ativo e inclui tanto combinações fixas quanto não-fixas dos in- gredientes ativos. O termo "combinação fixa" quer dizer que os ingredientes ativos, por exemplo um composto de fórmula I e um co-agente, são ambos administrados a um paciente simultaneamente na forma de uma única enti- dade ou dosagem. O termo "combinação não-fixa" quer dizer que os ingredi- entes ativos, por exemplo um composto de fórmula I e um co-agente, são ambos administrados a um paciente como entidades separadas ou simulta- neamente, concorrentemente ou seqüencialmente sem limites de tempo es- pecíficos, em que tal administração fornece níveis terapeuticamente eficazes dos dois compostos no corpo do paciente. O último também aplica-se à te- rapia de coquetel, por exemplo a administração de três ou mais ingredientes ativos.

Claims

1. Composto de fórmula I <formula>formula see original document page 33</formula> em que Ri é C1-3alquila; R2 é fenila, naftila ou bifenilila, cada uma sendo opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados de halogênio, SO2Ci- 3alquila, acila e uma heteroarila de 5 ou 6 membros; ou uma heteroarila de 5 ou 6 membros opcionalmente substituída; R3 é H ou Ci-3alquila; R4 é fenila, naftila ou bifenilila, cada uma sendo opcionalmente substituído por C1-4alquila; ou uma heteroarila de 5 ou 6 membros opcional- mente substituída compreendendo pelo menos um N como heteroátomo; com a condição de que R4 seja outro que não naftila quando R2 for fenila substituída por SO2C1-SaIquiIa e opcionalmente halogênio; e R5 é H ou Ci-3alquila; ou um sal do mesmo.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que Ri é metila.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, em que R3 é H.

4. Composto de acordo com qualquer reivindicação precedente, em que R5 é H.

5. Composto de acordo com qualquer reivindicação precedente, em que R2 é fenila substituída por halogênio, S02Ci-3alquila, C(0)Ci.3alquila ou uma heteroarila de 5 membros; ou uma heteroarila de 5 ou 6 membros.

6. Composto de acordo com qualquer reivindicação precedente, em que R4 é naftila ou uma heteroarila de 5 ou 6 membros opcionalmente substituída por Ci-3alquila.

7. Composição farmacêutica compreendendo um composto co- mo definido em quaisquer das reivindicações 1 a 6, e um excipiente farma- ceuticamente aceitável.

8. Uso de um composto sto como definido em quaisquer das rei- vindicações 1 a 6, como um medicamento.

9. Uso de um composto sto como definido em quaisquer das rei- vindicações 1 a 6, no tratamento de uma doença mediada por fosfatidilinosi- tol 3-cinase.

10. Uso de um composto sto como definido em quaisquer das reivindicações 1 a 6, na fabricação de um medicamento para tratamento de uma doença mediada por fosfatidilinositol 3-cinase.