BRPI0719761A2 - Uso de enzimas hidrolíticas e oxidativas para dissolver biofilme nas orelhas - Google Patents

Uso de enzimas hidrolíticas e oxidativas para dissolver biofilme nas orelhas Download PDF

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BRPI0719761A2
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Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "USO DE EN- ZIMAS HIDROLÍTICAS E OXIDATIVAS PARA DISSOLVER BIOFILME NAS ORELHAS".
REFERÊNCIAS CRUZADAS Este pedido de patente reivindica prioridade do Pedido Provisó-
rio No. 60/868.131 por Michael Pellico, intitulado "Uso de Enzimas Hidrolíti- cas e Oxidativas para Dissolver Biofilme nas Orelhas", depositado em 1o de dezembro de 2006, e do Pedido Provisório No. 60/870.328 por Michael Pelli- co, intitulado "Uso de Enzimas Hidrolíticas e Oxidativas para Dissolver Bio- filme nas Orelhas", depositado em 15 de dezembro de 2006, ambos dos quais são incorporados aqui em sua totalidade por esta referência. CAMPO DA INVENÇÃO
A presente invenção refere-se às composições de limpeza de orelha onde a composição de limpeza contém enzimas de dissolução de bio- filme, em particular enzimas hidrolíticas e enzimas oxidativas. ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
Composições de limpeza de orelha são formuladas para conter ingredientes para a prevenção e tratamento de infecções de orelha.
Otite média e otite externa são particularmente infecções de ore- • 20 lha comuns. Embora comuns, estas infecções de orelha, incluindo otite mé- dia e otite externa, podem ter conseqüências severas. Três entre quatro cri- anças sofrem de otite média até a idade de três anos.
Há dois tipos principais de otite média. O primeiro tipo é chama- do otite média aguda (AOM). Partes da orelha são infetadas e inchadas. Fluido e muco são capturados dentro da orelha. AOM pode ser muito doloro- sa.
O segundo tipo é chamado otite média com efusão (fluido) ou OME. Isto significa que fluido e muco permanecem capturados na orelha após a infecção é pensada estar terminada. OME freqüentemente leva a infecções novas e pode afetar a audição de uma criança. Perda de audição, especialmente em crianças, pode prejudicar a capacidade de aprendizagem e até mesmo retardar o desenvolvimento da fala. Otite média é também sé- ria porque a infecção pode esparramar para as estruturas vizinhas na cabe- ça, especialmente o mastoide. Infecções do mastoide são freqüentemente extremamente difíceis de tratar, até mesmo com antibióticos de espectro amplo.
Otite média ou otite externa usualmente ocorrem quando os ví-
rus, bactérias, ou leveduras/fungos encontram seu caminho no canal auricu- Iar médio ou externo e causam uma infecção. Freqüentemente após a infec- ção aguda ter passado, a efusão permanece e fica crônica, durando por se- manas, meses, ou até mesmo anos. Esta condição leva um sujeito a recor- rências freqüentes da infecção aguda.
Os vírus que causam infecções de orelha são acreditados serem os mesmos que causam infecções respiratórias superiores tais como influ- enza ou coriza (o resfriado comum). Uma das bactérias associadas à infec- ção de orelha é Pseudomonas aeruginosa. Ela é resistente a quase todo possível antibiótico. A tendência infeliz é para a maioria das bactérias serem exterminadas, deixando a infecção com a P. aeruginosa muito resistente e praticamente imortal.
Tratamento atual para antibióticos ainda está com antibióticos, antissépticos, e fungicidas. Porém, mais freqüentemente agora os médicos estão tomando uma espera e veem a atitude. Parte da razão que antibióticos entraram em desfavor para tratar infecções de orelha é o medo que uso em excesso de antibióticos conduzirá a uma proliferação de bactérias resisten- tes a antibióticos. Por muitos anos foi conhecido que bactérias têm a habili- dade para propagar resistência a antibióticos de uma espécies para a outra através da ação de plasmídeos conhecidos como fatores de transferência de resistência (RTFs). Desse modo, se um comensal relativamente inofensivo tal como Escherichia coli torna-se resistente a um antibiótico particular admi- nistrado a um paciente em resposta a uma infecção de orelha, a resistência àquele antibiótico pode ser propagada para outras espécies bacterianas tais como a P. aeruginosa muito mais patogênica, e uma vez propagada pode ser herdada em P. aeruginosa. De significação particular é a geração de plasmídeos que carregam múltiplos genes de resistência. Estes mecanismos "-< são descritos em A. A. Sayers e D. D. Whitt, "Bacterial Pathogenesis: A Mo- lecular Approach" (ASM Press, Washington, DC 1994), pp. 107 a 109, incor- porada aqui por esta referência.
O que foi mostrado repetidamente é que a taxa de resistência de bactérias comuns em países que universalmente prescrevem antibióticos para infecções de orelha é muito mais alta que em países que habitualmente não prescrevem antibióticos. Por exemplo, os investigadores descobriram que 56 % das crianças que tinham sido prescritas com antibióticos abriga- ram bactérias resistentes a multifármacos em seus narizes, comparados com 28 % dos outros.
A razão que antibióticos são freqüentemente ineficazes nesta situação clínica é que recentemente foi descoberto que as bactérias estão vivendo em um estado dormente dentro de um biofilme viscoso. O fluido a- parentemente inócuo atrás da orelha é de fato um biofilme carregado de mi- cróbios que contém bactérias que são ativadas e crescem rapidamente sob as circunstâncias certas. Este biofilme está também no canal auricular exter- no que causa otite externa crônica recorrente, resistente à maioria dos anti- bióticos. Otite externa é tipicamente associada ao desconforto que é limitado ao canal auditivo externo, com eritema (vermelhidão), e com inchação do > 20 canal com descarga variável. Umidade excessiva e trauma podem predispor um indivíduo à ocorrência de otite externa. Otite externa pode ser incapaci- tante o bastante para fazer com que uma fração significativa de pacientes interrompa suas atividades diárias durante vários dias, tipicamente reque- rendo repouso em leito. Se otite externa não for otimamente tratada, especi- almente em pacientes imunocomprometidos, a infecção potencialmente letal pode propagar-se para os tecidos circunvizinhos com conseqüências extre- mamente sérias. Pacientes imunocomprometidos incluem aqueles pacientes com uma deficiência do sistema imune tal como que ocorrendo como resul- tado da infecção por HIV, e aqueles pacientes que adquirem imunossupres- sores tais como tacrolimus para impedir rejeição de transplante. Otite exter- na pode ocorrer junto com otite média; a última pode ser o resultado da pro- pagação da otite externa. Como otite média, a otite externa pode esparramar no mastoide e pode gerar uma infecção extremamente séria, uma que pode ter uma taxa de mortalidade excedendo a 50 %.
Esta compreensão revisada ocorreu porque, previamente, os cientistas estudaram bactérias em sua forma flutuante livre. Bactérias prefe- rem a vida comunal viscosa, porque as protege das toxinas no ambiente. Formação de biofilme ocorre em uma maneira passo a passo. Primeiro, mo- léculas inorgânicas ou orgânicas são adsorvidas em uma superfície. Isto cria uma camada de condicionamento que aumenta a habilidade das bactérias para prenderem-se a uma superfície. Uma vez uma camada de condiciona- mento é formada, a adesão bacteriana segue. Células vivas ou mortas pren- derão às superfícies com tendência similar. Ligação bacteriana é mediada por fimbrias, pelos, e flagelos, e através de polissacarídeos extracelulares.
Quando primeiro formada, a ligação entre a camada de condi- cionamento e a bactéria não é forte e pode ser facilmente removida. Com o tempo, porém, estes ligações são fortalecidas tornando a remoção difícil. Uma vez embebidas dentro de um biofilme, as células bacterianas têm uma oportunidade para reparar o dano celular e metabolizar os nutrientes dentro do biofilme. À medida que o biofilme continua crescendo, os polissacarídeos extracelulares fornecem cada vez mais proteção. Um biofilme fica maduro dentro de 24 horas. Desenvolvimento do biofilme pode ocorrer dentro de uma hora. Após um período de oitos horas, mais que 91 % das bactérias estão fortemente ligadas dentro do biofilme. Morte das bactérias dentro de um biofilme requer até 1000 vezes mais antibiótico que é requerido para ma- tar bactérias flutuantes livres. O filme fisicamente impede de o antibiótico alcançar as bactérias. Além disso, a maioria das bactérias no biofilme estão dormentes e os antibióticos tipicamente matam apenas bactérias que estão se dividindo ativamente.
O tímpano é revestido com um reservatório viscoso de bactérias hibernantes. Estas bactérias inativas não causam sintomas de uma infecção ativa mas eventualmente elas mudam e se tornam bactérias ativas flutuantes livres e causam outra infecção. Este é um dos fatores significativos atrás da existência de infecções recorrentes em tais pacientes. Dados mostram que as bactérias incorporadas nos biofilmes são mais resistentes que as células simples e acredita-se que seja causado por proteção física pela matriz de biofilme ou porfisiologia alterada das células bacterianas no biofilme.
Bactérias têm uma tendência natural de prenderem-se às super- fícies e iniciarem a formação de um biofilme. A matriz de biofilme é uma co- letânea de microcolônias com canais de água entre e um sortimento de célu- las e polímeros extracelulares tais como polissacarídeos, glicoproteínas, e proteínas. Os tipos diferentes de ligações entre os sacarídeos dão origem a um número grande de classes diferentes de polissacarídeos incluindo Ieva- nas, dextranas, celulose, glicogênio, e alginatos. Bactérias têm a capacidade para prenderem-se e colonizarem a superfície da maioria dos materiais. Li- gação freqüentemente resulta na produção de polissacarídeos extracelulares e alterações na morfologia celular e taxas de crescimento. Genes diferentes são expressados nas bactérias que são prendidas às superfícies quando comparadas às bactérias planctônicas. Como resultado, bactérias ligadas à superfície apresentam resistência aumentada às químicas tóxicas e bioci- das. Embora os biocidas provaram-se eficazes em matar bactérias flutuantes livres eles não são eficazes em destruir as bactérias dentro de um biofilme. Torna-se imperativo que o biofilme seja destruído antes dos biocidas pude- > 20 rem se tornar eficazes.
Há muitos métodos conhecidos para remover biofilmes. Os mé- todos que são usados para remover biofilme incluem o uso de hipocloreto, peróxido de hidrogênio, ozônio, detergentes, ou ácidos, a aplicação de calor, o uso de atividade mecânica, ou o uso de ultrassom. Combinações destes métodos são também usadas.
Muitos destes métodos, embora eficazes, não são adequados para o uso em biofilmes que se formam no corpo ou dentro do corpo. Estes métodos são muito severos e rompentes de tecido para o uso neste contex- to. Um método seguro é requerido para remover biofilmes que se formam no corpo ou dentro do corpo.
Enzimas foram usadas para dissolver biofilmes antes, mas não no contexto de biofilmes que se formam no corpo ou dentro do corpo. Em detergentes de lavagem de roupa, as enzimas são usadas para remover de- pósitos que podem, de fato, ser biofilmes. Soluções de lente de contato u- sam enzimas para remover o biofilme que pode crescer em uma lente de contato. No campo dental, dextranase e mutanase são usadas para remover placa, um biofilme, dos dentes.
Consequentemente, há uma necessidade por um método melho- rado para remover biofilmes que se formam no corpo ou dentro do corpo, particularmente atrás do tímpano. O método melhorado deve ser eficaz e seguro. O método melhorado deve também ser compatível com antibióticos e outros tratamentos para infecção bacteriana. SUMÁRIO DA INVENÇÃO
Esta invenção é direcionada às composições que têm a ativida- de de remover biofilme, particularmente na orelha. Composições e métodos de acordo com a presente invenção são adequados para tratamento de in- fecções de orelha tais como otite externa e otite média, particularmente a- quelas causadas por Pseudomonas aeruginosa.
Um aspecto da presente invenção é uma composição para re- moção de biofilme na orelha compreendendo:
(1) uma quantidade de pelo menos uma enzima que catalisa a hidrólise de uma ligação que conecta dois monossacarídeos em um polissa-
carídeo ou que conecta um monossacarídeo com uma molécula de proteína em uma glicoproteína suficiente para destruir o biofilme na orelha; e
(2) um veículo farmaceutícamente aceitável adequado para ad- ministração no canal auricular.
A pelo menos uma enzima que catalisa a hidrólise de uma liga-
ção que conecta dois monossacarídeos em um polissacarídeo ou que co- necta um monossacarídeo com uma molécula de proteína em uma glicopro- teína pode ser selecionada do grupo que consiste em xilanase, β-glucanase, celulase, α-galactosidase, glucanases, amilase, hialuronidase, poligalacturo- nase (pectinase), dextranase, celobio-hidrolase, pululanase, glicosilcerami- dase, glucan 1,4-a-glucosidase, oligo-1,6-glucosidase, fucoidanase, glicosil- ceramidase, glicosilceramidase, tioglucosidase, e glicopeptídeo N- * glicosidase. Tipicamente, a enzima é selecionada do grupo que consiste em xilanase, β-glucanase, celulase, α-galactosidase, glucanases, amilase, hialu- ronidase, poligalacturonase (pectinase), dextranase, e celobio-hidrolase.
A composição pode também compreender pelo menos um in- grediente em uma quantidade eficaz para prevenir ou inibir inflamação na orelha. Este pode ser um esteroide tal como hidrocortisona.
A composição pode também compreender um antibiótico que seja eficaz no tratamento de P. aeruginosa em uma quantidade eficaz para exercer uma ação bactericida contra P. aeruginosa. A composição pode também incluir Iisozima ou lactoferrina. Adi-
cionalmente, a composição pode também incluir pelo menos uma peroxidase em uma quantidade suficiente para exercer uma ação bactericida. Uma pe- roxidase adequada é lactoperoxidase. Quando a composição incluir uma peroxidase, a composição pode também incluir pelo menos um substrato que pode ser convertido em um íon com propriedades bactericidas pela ação enzimática da peroxidase em uma quantidade de modo que uma concentra- ção eficaz do íon com propriedades bactericidas é produzida pela ação cata- lítica da peroxidase. Quando a composição incluir uma peroxidase, a com- posição pode também incluir uma oxidase em uma quantidade bactericida- " 20 mente eficaz, tal como glicose oxidase, como também um substrato para a oxidase, tal como glicose quando a oxidase for glicose oxidase.
Outro aspecto da presente invenção é um método de tratar uma infecção de orelha que compreende a etapa de administrar uma quantidade de uma composição de acordo com a presente invenção a um sujeito com uma infecção de orelha para tratar a infecção. A infecção de orelha é tipica- mente otite externa ou otite média e é causada por Pseudomonas aerugino- sa. O método pode também compreender administrar um antibiótico que se- ja eficaz no tratamento de P. aeruginosa em uma quantidade eficaz para exercer uma ação bactericida contra P. aeruginosa, o antibiótico sendo ad- ministrado por uma rota diferente da rota de administração da composição. Alternativamente, a composição de acordo com a presente invenção pode incluir um antibiótico que seja eficaz no tratamento de P. aeruginosa em cujo caso o método pode também compreender a administração do mesmo anti- biótico ou um antibiótico diferente por uma rota diferente. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
Antibióticos são o tratamento primário para infecção de orelha mas, como debatidos anteriormente, apenas matam as bactérias flutuantes livres. É difícil, se não impossível, para os antibióticos matarem bactérias embebidas em um biofilme.
Pela aplicação de um sistema de enzima de dissolução de bio- filme primeiro à orelha ou juntamente com um antibiótico, o antibiótico torna- se muito mais eficaz.
Em geral, uma enzima de dissolução de biofilme adequada para o uso em métodos de acordo com a presente invenção é uma enzima que catalisa a hidrólise de uma ligação que conecta dois monossacarídeos em um polissacarídeo ou que conecta um monossacarídeo com uma molécula de proteína em uma glicoproteína. Estas enzimas são referidas aqui como "enzima de hidrolização de ligação de glicosídeos".
Enzimas de dissolução de biofilme adequadas para o uso nas composições e métodos de acordo com a presente invenção incluem, mas não são limitadas a, xilanase, β-glucanase, celulase, α-galactosidase, gluca- nases, amilase, hialuronidase, poligalacturonase (pectinase), dextranase, e celobio-hidrolase. Outras enzimas hidrolíticas que são capazes de dissolver uma ligação que conecta dois monossacarídeos em um polissacarídeo ou que conecta um monossacarídeo com uma molécula de proteína em uma glicoproteína podem também ser usadas, incluindo, mas não limitadas a, pululanase, glicosilceramidase, glucan 1,4-a-glucosidase, oligo-1,6- glucosidase, fucoidanase, glicosilceramidase, glicosilceramidase, tioglucosi- dase, e glicopeptídeo N-glicosidase, como também outras enzimas.
Xilanase (EC 3.2.1.8), mais precisamente, endo-1,4-p-xilanase, é o nome dado a uma classe de enzimas que degradam a p-1,4-xilana de polissacarídeo linear na xilose de monossacarídeo. Xilanase catalisa a endo- hidrólise de ligações 1,4^-D-xilosídicas em xilanas. Xilanase é produzida por muitos microorganismos, incluindo Thermomyces lanuginosus. Informa- ção sobre xilanase está disponível em http://www.brenda.uni- koeln.de/php/result_flat.php4?ecno=3.2.1.8.
β-glucanase (EC 3.2.1.6), mais precisamente, endo-1,3(4)-β- glucanase, é uma enzima que catalisa a endo-hidrólise de 1,3- ou 1,4- ligações em β-D-glucanas quando o resíduo de D-glicose cujo grupo redutor é envolvido na ligação a ser hidrolisada for substituído em C-3. Muitas fontes de β-glucanase são conhecidas, particularmente de plantas e fungos, tais como Cândida utilis e Saccharomyces cerevisiae. Informação sobre β- glucanase está disponível em http://www.brenda.uni- koeln.de/php/result_flat.php4?ecno=3.2.1.6.
Celulase (EC 3.2.1.4) é uma enzima que catalisa a endo- hidrólise de ligações 1,4^-D-glucosídicas em celulose, Iiquenina e β-D- glucanas de cereal. Fontes para celulase incluem Aspergillus niger, Clostri- dium thermocelum, e Cellulomonas fimi. Informação sobre celulase está dis- ponível em http://www.brenda.uni-
koeln.de/php/result_flat.php4?ecno=3.2.1.4.
α-galactosidase (EC 3.2.1.22) é uma enzima que catalisa a hi- drólise dos resíduos terminais, não-redutores de alfa-D-galactose em a-D- galactosídeos, incluindo oligosacarídeos de galactose, galactomananas e galacto-hidrolase. Fontes de α-galactosidase incluem A. niger, E. coli, Glyci- ne max (soja), e Lactobacillus plantarum. Informação sobre α-galactosidase está disponível em http://www.brenda.uni-
koeln.de/php/result_flat.php4?ecno=3.2.1.22.
Glucanase, ou 1,3-p-D-glucosidase (EC 3.2.1.39), é uma enzima que catalisa a hidrólise de ligações 1,3^-D-glucosídicas em 1,3-β-ϋ- glucanas. Fontes de glucanase incluem Arabidopsis thaliana, C. thermoce- lum, Hordeum vulgare, e Oryza sativa. Informação sobre glucanase está dis- ponível em http://www.brenda.uni- koeln.de/php/result_flat.php4?ecno=3.2.1.39. Amilase, mais precisamente α-amilase (EC 3.2.1.1) ou β-amilase (EC 3.2.1.2), é uma classe de enzimas que hidrolisam amilose, um compo- nente de amido. A enzima α-amilase catalisa a endo-hidrólise de ligações 1,4-a-D-glucosídicas em polissacarídeos contendo três ou mais unidades de D-glicose ligadas a 1,4-a. Fontes de a-amilase incluem A. niger, Aspergillus oryzae, Bacillus licheniformis, e Bacillus stearothermophilus. A enzima β- amilase catalisa a hidrólise de ligações 1,4-p-D-glucosídicas em polissacarí- deos para remover unidades de maltose sucessivas das extremidades não- redutoras das cadeias. Fontes de β-amilase incluem H. vulgare e Bacillus cereus. Informação sobre α-amilase está disponível em http://www.brenda.uni-koeln.de/php/result_flat.php4?ecno=3.2.1.1. Informa- ção sobre β-amilase está disponível em http://www.brenda.uni- koeln.de/php/result_flat.php4?ecno=3.2.1.2.
Hialuronidase, mais precisamente hialuronato de Iiase (EC 4.2.2.1), catalisa a clivagem de cadeias de hialuronato em uma ligação de β- D-GalNAc-(1-4)^-D-GlcA, por fim quebrando o polissacarídeo até 3-(4- deóxi-p-D-gluc-4-enuronosil)-N-acetil-D-glicosamina. Fontes para hialuroni- dase incluem Cândida albicans e Streptomyces griseus. Informação sobre hialuronidase está disponível em http://www.brenda.uni- koeln.de/php/result_flat.php4?ecno=4.2.2.1.
Poligalacturonase, também conhecida como pectinase, e cujo nome sistemático é poli(1,4-a-D-galacturonida) glicano-hidrolase (EC 3.2.1.15), catalisa a hidrólise de ligações 1,4-a-D-galactosidurônicas em pec- tato e outras galacturonanas. Fontes para poligalacturonase incluem A. niger e G. max. Informação sobre poligalacturonase está disponível em http://www.brenda.uni-koeln.de/php/result_flat.php4?ecno=3.2.1.15. Uma preparação adequada de pectinase é comercializada por Novo Nordisk como Pectinex Ultra SPL™.
Dextranase cujo nome sistemático é 1,6-a-D-glucan 6-glucano- hidrolase, catalisa a endo-hidrólise de ligações 1,6-a-D-glucosídicas em dex- trana. Fontes de dextranase incluem Penieillum funieulosum e Avena sativa. Informação sobre dextranase está disponível em http://www.brenda.uni- koeln.de/php/result_flat.php4?ecno=3.2.1.11.
Celobio-hidrolase, também conhecida como celulase, e cujo no- me sistemático é 1,4-(1,3;1,4)-P-D-glucan 4-glucano-hidrolase (EC 3.2.1.4), catalisa a endo-hidrólise de ligações 1,4-P-D-glucosídicas em celulose, Ii- quenina e β-D-glucanas de cereal. Fontes de celobio-hidrolase incluem A. niger e Clostridium celuloliticum. Informação sobre celobio-hidrolase está disponível em http://www.brenda.uni-
koeln.de/php/result_flat.php4?ecno=3.2.1.4.
Uma ou mais destas enzimas estão incluídas em uma composi- ção de acordo com a presente invenção, juntamente com um veículo farma- ceuticamente aceitável adequado para administração no canal auricular. Consequentemente, uma modalidade da presente invenção é uma composi- ção para remoção de biofilme na orelha compreendendo:
(1) uma quantidade de pelo menos uma enzima que catalisa a hidrólise de uma ligação que conecta dois monossacarídeos em um polissa- carídeo ou que conecta um monossacarídeo com uma molécula de proteína em uma glicoproteína suficiente para destruir o biofilme na orelha; e (2) um veículo farmaceuticamente aceitável adequado para ad-
ministração no canal auricular.
O veículo farmaceuticamente aceitável adequado para adminis- tração no canal auricular podem incluir tampões, ingredientes para controlar a viscosidade da composição, conservantes, e outros ingredientes conven- cionais como conhecidos na técnica. Exemplos de ingredientes específicos incluídos nas composições são fornecidos abaixo na Formulação 1 à Formu- lação 23.
Tipicamente, nas composições de acordo com a presente inven- ção, o veículo farmaceuticamente aceitável adequado para administração no canal auricular inclui propileno glicol. Preferivelmente, o veículo farmaceuti- camente aceitável adequado para administração no canal auricular inclui propileno glicol e glicerol. Em outra alternativa preferida, o veículo farmaceu- ticamente aceitável adequado para administração no canal auricular inclui propileno glicol, glicerol, e tripropileno glicol. Composições de acordo com a presente invenção podem tam-
bém incluir pelo menos um ingrediente em uma quantidade eficaz para pre- venir ou inibir inflamação na orelha. Um ingrediente adequado é um esteroi- de, tal como, mas não-limitado a, um esteroide selecionado do grupo que consiste em hidrocortisona, beclometasona, budenosida, ciclesonida, fluniso- Iida1 fluticasona, metilprednisolona, prednisolona, prednisona, e triancinolo- na, e os sais, solvatos, análogos, congêneres, bioisósteres, produtos de hi- drólise, metabolitos, precursores, e profármacos dos mesmos. Um esteroide preferido é hidrocortisona.
Composições de acordo com a presente invenção podem tam- bém incluir um antibiótico que é eficaz no tratamento de P. aeruginosa em uma quantidade eficaz para exercer uma ação bactericida contra P. aerugi- nosa. O antibiótico incluído em uma composição de acordo com a presente invenção pode ser, por exemplo, amicacina; uma penicilina de espectro am- plo tal como, mas não-limitado a, ticarcilina, piperacilina, mezlocilina, ou a- zlocilina; ceftazidima; cefepima; ciprofloxacina; tobramicina; aztreonam; imi- penem; ou meropenem. Alternativamente, um antibiótico, tal como os antibi- óticos citados acima, pode ser administrado separadamente para promover morte das bactérias no biofilme. Se administrado separadamente, o antibióti- co pode ser administrado tópica ou sistemicamente.
Composições de acordo com a presente invenção podem tam- bém incluir uma quantidade de pelo menos uma enzima antibacteriana adi- cional que é selecionada do grupo que consiste em lisozima, lactoferrina, e uma peroxidase em uma quantidade suficiente para exercer uma ação bac- tericida. Tipicamente, a peroxidase é selecionada do grupo que consiste em lactoperoxidase, mieloperoxidase, peroxidase de raiz forte, peroxidase de eosinófilos, e glutationa peroxidase. Preferivelmente, a peroxidase é selecio- nada do grupo que consiste em lactoperoxidase e mieloperoxidase. Mais preferivelmente, a peroxidase é lactoperoxidase. Lactoperoxidase é uma glicoproteína que, em uma modalidade comercial, é um pó Iiofilizado deriva- do de leite. Esta peroxidase comercial tem uma atividade de 80 IU/mg e um peso molecular projetado de 93.000 para iodination de L-tirosina. As proprie- dades fisicoquímicas relatadas para lactoperoxidase incluem um peso mole- cular de 78.000, um volume específico parcial, refletivo da composição de aminoácido, de 0,74, e a presença de 1,0 mol de heme por mol de Iactope- '-<· roxidase.
Se a composição incluir uma enzima de peroxidase tal como Iac- toperoxidase, mieloperoxidase, peroxidase de raiz forte, e peroxidase de eosinófilos, ou glutationa peroxidase, a composição pode também incluir pe- Io menos um substrato que pode ser convertido em um íon com proprieda- des bactericidas pela ação enzimática da enzima de peroxidase. O substrato está presente em uma quantidade de modo que uma concentração eficaz do íon com propriedades bactericidas é produzida pela ação catalítica da enzi- ma de peroxidase. Substratos adequados incluem, mas não são limitados a, sais de metal alcalino de ânions tais como tiocianato, iodato, ou clorato. O sal de metal alcalino é tipicamente um sal de sódio ou potássio, embora ou- tros sais de metal alcalino possam ser usados tais como lítio ou césio alter- nativamente. A enzima de peroxidase catalisa a conversão de tiocianato em hipotiocianato (OSCN), oxigênio molecular (O2), e água. A enzima de pero- xidase similarmente catalisa a conversão de iodato ou clorato para hipoiode- to ou hipocloreto. Estes ânions possuem atividade bactericida.
Em uma composição alternativa de acordo com a presente in- venção que inclui uma peroxidase, um inibidor de catalase é também incluí- do. A eficácia da enzima de peroxidase pode ser afetada pela presença da catalase que está presente em muitos tecidos. Catalase compete com pero- xidase para peróxido de hidrogênio. Para reduzir a perda de peróxido de hi- drogênio pela presença de catalase, uma quantidade eficaz de um inibidor enzimático que é específico para catalase pode ser vantajosamente incorpo- rada em uma composição de acordo com a presente invenção. Inibidores enzimáticos adequados específicos para catalase incluem, mas não são limi- tados a, sais ascórbicos tais como ascorbato de sódio, ascorbato de potás- sio, ascorbato de cálcio, palmitato de ascorbila, ou misturas dos mesmos, e podem ser incluídos em uma composição de acordo com a invenção. Uma concentração eficaz de sal ascórbico nas composições de acordo com a presente invenção é de cerca de 1 χ 10'6 a cerca de 1 χ 10"4 milimoles por grama de composição. Sais de ferro, tais como sulfato ferroso, cloreto ferro- so, ou iodato ferroso, podem ser também incorporados em uma composição de acordo com a presente invenção como um potencializador para o sal as- córbico em seu papel como inibidor da catalase. Um sal de ferro particular- mente preferido é sulfato ferroso.
Composições de acordo com a presente invenção incluindo uma enzima de peroxidase e o pelo menos um substrato que pode ser convertido em um íon com propriedades bactericidas pela ação enzimática da enzima de peroxidase podem ser também vantajosamente formuladas com uma a- mino-hexose a fim de aumentar o rendimento ou acumulação do agente bio- cida aniônico oxidado, a quantidade da amino-hexose sendo eficaz para aumentar o rendimento ou acumulação do agente biocida aniônico oxidado. Tipicamente, a amino-hexose é uma aminoglicose, mas outras amino- hexoses podem ser alternativamente usadas, tais como aminogalactose. Tipicamente, a aminoglicose é selecionada do grupo que consiste em glico- samina, N-acetilglucosamina, e misturas das mesmas. A aminoglucose está tipicamente presente na composição em uma concentração de cerca de 0,0001 milimole a cerca de 0,002 milimole por grama de composição. Prefe- rivelmente, a aminoglicose está presente na composição em uma concentra- ção de cerca de 0,0003 milimole a cerca de 0,001 milimole por grama de composição.
Composições de acordo com a presente invenção que incluem
uma peroxidase podem também incluir uma oxidase em uma quantidade bactericidamente eficaz e, opcionalmente, um substrato para a oxidase em uma quantidade bactericidamente eficaz. A oxidase oxida o substrato e pro- duz peróxido de hidrogênio que é depois usado como um substrato pela pe- roxidase, se presente. O uso de uma oxidase é apenas requerido se uma peroxidase estiver também presente.
A enzima de oxidorreductase é tipicamente selecionada do gru- po que consiste em glicose oxidase, galactose oxidase, urato oxidase, colina oxidase, D-aminoácido oxidase, D-glutamato oxidase, glicina oxidase, glicó- Iico oxidase, L-sorbose oxidase, álcool oxidase, e amina oxidase. Outras enzimas podem ser alternativamente usadas, tais como nitroetano oxidase, D-aspartato oxidase, L-aminoácido oxidase, fosfato piridoxamina oxidase, ■■<■ etanolamina oxidase, piruvato oxidase, oxalato oxidase, hexose oxidase, colesterol oxidase, aril álcool oxidase, piridoxina 4-oxidase, de-hidroorotato oxidase, Iatosterol oxidase, sarcosina oxidase, N-metilaminoácido oxidase, N6-metillisina oxidase, 6-hidróxi-L-nicotina oxidase, 6-hidróxi-D-nicotina oxi- dase, 3-hidroxiantranilato oxidase, aldeído oxidase, e xantina oxidase, como descritas na patente U. S. 4.340.448 para Schiller et al., incorporada aqui por esta referência.
Para estas enzimas, glicose oxidase catalisa a reação de β-D- glicose, água, e oxigênio para produzir peróxido de hidrogênio e ácido glu- cônico. Galactose oxidase catalisa a reação de D-galactose e oxigênio para produzir peróxido de hidrogênio e D-galacto-hexodialdose. Urato oxidase catalisa a reação de ácido úrico, água, e oxigênio para produzir peróxido de hidrogênio, alantoína, e dióxido de carbono. Colina oxidase catalisa a reação de colina e oxigênio para produzir peróxido de hidrogênio e aldeído de beta- ína. D-aminoácido oxidase catalisa a reação de D-aminoácidos tais como D- prolina, D-metionina, D-isoleucina, D-alanina, D-valina, ou D-fenilalanina com água e oxigênio para produzir peróxido de hidrogênio, amônia, e a-ceto ácido correspondendo ao D-aminoácido que é oxidado. D-glutamato oxidase catalisa a reação de ácido D-glutâmico, água, e oxigênio para produzir peró- > 20 xido de hidrogênio, amônia, e 2-cetog luta rato. Glicina oxidase catalisa a rea- ção de glicina, água, e oxigênio para produzir peróxido de hidrogênio, amô- nia, e ácido glioxílico. Ácido glicólico oxidase (também conhecido como 2- hidroxiácido oxidase) catalisa a reação de ácido glicólico e oxigênio para produzir ácido 2-cetoacético e peróxido de hidrogênio. L-sorbose oxidase catalisa a reação de L-sorbose e oxigênio para produzir 5-de-hidro-D-frutose e peróxido de hidrogênio. Álcool oxidase catalisa a reação de um álcool pri- mário inferior ou um álcool insaturado e oxigênio para produzir o aldeído e peróxido de hidrogênio correspondentes. Amina oxidase catalisa a reação de uma amina, tipicamente uma amina primária, mas também, em alguns ca- sos, uma amina secundária ou terciária, água, e oxigênio produzir o aldeído, amônia, e peróxido de hidrogênio correspondentes. Glicose oxidase catalisa a reação de β-D-glicose, água, e oxigênio durante a aplicação à orelha ex- terna para produzir peróxido de hidrogênio e ácido glucônico em uma reação ilustrativa.
As propriedades das várias oxidases preferidas adequadas para o uso nas composições de acordo com a presente invenção são conhecidas.
Por exemplo, glicose oxidase de Aspergillus niger foi determinada ter um peso molecular de 150.000 (Pazur et al. (1965)). A enzima é uma glicoprote- ína que contém duas moléculas da coenzima de redox flavina adenina dinu- cleotíodeo (FAD). A composição de aminoácido foi determinada. O ponto isoelétrico da enzima é 4,2. O pH ótimo da enzima é 5,5 com uma faixa de pH vasto de 4 a 7. Inibidores da enzima incluem íons de prata monovalentes e íons de mercúrio e de cobre divalentes.
Galactose oxidase de Dactilium dendroides tem um peso mole- cular de 42.000. É um metaloenzima que contém um grama-átomo de cobre por mol. A composição de aminoácido foi determinada. O pH ótimo da enzi- ma é 7.
Urato oxidase (uricase) de fígado de porco ou fígado de carne de boi tem um peso molecular de 100.000. É uma metaloenzima contendo um grama-átomo de cobre por mol. O ponto isoelétrico da enzima é 6,3. O pH ótimo da enzima é 9. D-aminoácido oxidase de rim de porco tem um peso molecular
de 90.000. A enzima é uma glicoproteína que contém duas moléculas de dinucleotídeo de adenina de flavina. O pH ótimo da enzima é 9,1. Certos metais pesados são inibidores da enzima.
O substrato oxidável está tipicamente presente na composição a uma concentração de cerca de 0,015 milimole por mililitro de líquido a cerca de 0,6 milimole por grama de composição. Preferivelmente, o substrato oxi- dável está presente na composição a uma concentração de cerca de 0,025 milimole por grama de composição a cerca de 0,1 milimole por grama de composição. O sal que age como um aceitante de oxigênio está tipicamente presente na composição a uma concentração de cerca de 0,0001 milimole a cerca de 0,01 milimole por grama de composição. O sal que age como um aceitante de oxigênio está preferivelmente presente na composição a uma <· concentração de cerca de 0,001 milimole a cerca de 0,006 milimole por gra- ma de composição.
Tipicamente, a enzima de oxidorreductase está presente na composição em uma concentração de cerca de 0,5 IU a cerca de 500 IU por grama de composição. Preferivelmente, a enzima de oxidorreductase está presente na composição em uma concentração de cerca de 10 IU a cerca de 40 IU por grama de composição. Enzimas de oxidorreductase são fornecidas na forma seca ou líquida com o rótulo especificando a concentração em Uni- dades Internacionais em uma base por grama ou por mililitro, conforme a- propriado.
Uma oxidase particularmente preferida é glicose oxidase. Se glicose oxidase for incluído em uma composição de acordo com a presente invenção, um substrato preferido para a glicose oxidase, a ser incluído na composição, é β-D-glicose. Se outra enzima de oxidase for usada, substra- tos apropriados são descritos acima.
Em particular, as combinações a seguir de enzimas de hidroliza- ção de ligação de glicosídeo e peroxidases, se presentes, podem ser usadas nas composições de acordo com a presente invenção: (1) pectinase como a enzima de hidrolização de ligação de glicosídeo; (2) dextranase e pectinase > 20 como as enzimas de hidrolização de ligação de glicosídeo; (3) dextranase e pectinase como as enzimas de hidrolização de ligação de glicosídeo, mais Iactoperoxidase como a peroxidase; (4) pectinase como a enzima de hidroli- zação de ligação de glicosídeo, mais Iactoperoxidase como a peroxidase; (5) dextranase e xilanase como as enzimas de hidrolização de ligação de glico- sídeo; (6) α-galactosidase e amilase como as enzimas de hidrolização de ligação de glicosídeo; (7) pectinase e amilase como as enzimas de hidroliza- ção de ligação de glicosídeo, mais Iactoperoxidase como a peroxidase; (8) dextranase, pectinase, e β-D-glucosidase como as enzimas de hidrolização de ligação de glicosídeo, mais Iactoperoxidase como a peroxidase; (9) dex- tranase, pectinase, e celulase como as enzimas de hidrolização de ligação de glicosídeo, mais Iactoperoxidase como a peroxidase; e (10) dextranase, pectinase, celulase, amilase, e xilanase como as enzimas de hidrolização de ligação de glicosídeo, mais Iactoperoxidase como a peroxidase. Outras combinações são possíveis. Estes combinações podem ser combinadas com Iisozima e/ou lactoferrina. Adicionalmente, como indicado acima, glicose oxidase ou outra oxidase podem ser incluídas como uma fonte de peróxido, mais um substrato para a oxidase tal como β-D-glicose.
Outros ingredientes em geral conhecidos na técnica farmacêuti- ca podem ser incorporados nas composições de acordo com a presente in- venção, incluindo corantes, agentes quelantes, conservantes, e estabilizan- tes, com a condição que estes ingredientes adicionais não inibam as rea- ções hidrolíticas e de redução de oxidação das quais a atividade das com- posições de acordo com a presente invenção depende.
A composição pode também compreender um espessante para fornecer à composição uma viscosidade imobilizante da enzima que inibe a ação enzimática durante o processamento e acondicionamento. Um espes- sante preferido é hidroxipropilcelulose (Klucel). Outros espessantes são co- nhecidos na técnica e podem ser usados alternativamente. Estes espessan- tes incluem hidroximetil celulose, metil celulose, polivinilpirrolidona (PVP), PVM, copolímeros de PVM/MA, goma xantana, e misturas dos mesmos.
A composição pode ser aquosa ou não-aquosa. Se a composi- ção for aquosa, a concentração de água (p/p) tipicamente é de cerca de 0,150 % a cerca de 5,441 %. Porém, a composição pode ser uma composi- ção não-aquosa com substancialmente nenhum conteúdo de água.
Em uma alternativa, a composição inclui de cerca de 35 % a cerca de 75 % de um hidrocarboneto. Tipicamente o hidrocarboneto é um isoprenoide ou um derivado de um isoprenoide. Se o hidrocarboneto for um isoprenoide ou um derivado de um isoprenoide, preferivelmente o hidrocar- boneto tem de quatro a seis unidades de isopreno. Mais preferivelmente, o hidrocarboneto tem seis unidades de isopreno. Um hidrocarboneto particu- larmente adequado é esqualeno. Outros hidrocarbonetos podem ser usados. Em uma alternativa preferida, a composição é formulada para
tratar otite média. Como aqui usado, os termos "tratar", "tratando", "trata- mento" e terminologia análoga não implica uma cura para otite média ou qualquer outra doença ou condição; de preferência, esta terminologia é usa- da para referir-se clinicamente a qualquer melhoria detectável na doença ou condição sendo tratada, incluindo, mas não limitada a, redução em números bacterianos ou viabilidade, redução em febre, redução em dor, redução em perda de audição, redução em efusão de fluidos, melhoria no bem-estar sub- jetivo experimentado pelo paciente, ou qualquer outra melhoria clinicamente detectável.
Em outra alternativa preferida, a composição é formulada para tratar otite externa.
Em outra alternativa preferida, a composição é formulada para
tratar infecção por Pseudomonas aeruginosa.
A forma física de uma composição de acordo com a presente invenção pode ser, por exemplo, uma solução, um gel, um creme, ou um sólido, dependendo da composição exata e do método de administração se- lecionado, como também do sítio de administração e se é intencionado que a composição trate otite média ou otite externa. Se a solução for um gel, a viscosidade do gel pode ser selecionada para prover aplicação eficiente pelo usuário de acordo com os princípios gerais de composição de gel para com- posições farmacêuticas. O formador ou formadores de gel particulares usa- ► 20 dos em uma composição particular e suas concentrações podem ser deter- minados por alguém de habilidade usual na técnica.
Composições de acordo com a presente invenção podem incluir componentes adicionais, tais como, mas não-limitados a, um componente formador de gel, um componente lipofílico, uma cera, uma componente cal- mante de pele, um componente emulsificante, um componente de volume, um componente de goma, ou outros componentes tais como são em geral usados nas composições farmacêuticas intencionadas para aplicação ao canal auricular, tais como estabilizantes, tampões, um corante, uma fragrân- cia, ou um conservante. Em particular, as composições de acordo com a presente invenção podem incluir um ou mais dos componentes a seguir: (1) álcool benzílico; (2) glicerol; (3) dipropileno glicol; (4) tripropileno glicol; (5) goma xantana; (6) glicerídeo de amêndoa de PEG-20; (7) um éster de iso- propila de um ácido graxo de cadeia longa selecionado do grupo que consis- te em miristato de isopropila, Iaurato de isopropila, e estearato de isopropila, preferivelmente miristato de isopropila; (8) aloe vera; (9) poliacrilato de só- dio/ácido poliacrílico; (10) cera de abelha; (11) estearato de PEG-40; (12) polietileno glicol; e (13) Polawax.
Composições de acordo com a presente invenção podem ser formuladas por técnicas conhecidas na técnica, incluindo técnicas que são convencionais na técnica cosmética e na técnica de venda livre e composi- ção de fármaco de prescrição para misturar componentes solúveis em lipí- dios e componentes solúveis em água para a preparação de líquidos, géis, cremes, ou supositórios. Estas técnicas de mistura incluem mistura manual e mecânica, e inclui mistura por homogeneização e mistura por giro. As técni- cas de mistura a serem usadas podem ser selecionadas por alguém de habi- lidade usual na técnica com base nas variáveis tais como a viscosidade dos componentes a ser misturados e o volume daqueles componentes, como também a proporção relativa dos ingredientes solúveis em lipídios e solúveis em água, a proporção de água, e a forma física final da composição deseja- da.
Modalidades particulares de composições de acordo com a pre- sente invenção incluem, mas não são limitadas ao seguinte:
Formulação 1 é uma composição aquosa incluindo a enzima pectinase. Nestas formulações, as porcentagens são dadas em termos de (P/P)·
Tipicamente, a Formulação 1 compreende:
(1) de cerca de 12,33 % a cerca de 18,49 % de glicerol;
(2) de cerca de 71,661 % a cerca de 83,986 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 0,352 % a cerca de 0,528 % de hidroxipropilcelu-
lose;
(4) de cerca de 2,405 % a cerca de 3,607 % de álcool benzílico;
(5) de cerca de 0,0072 % a cerca de 0,0108 % de pectinase; e
(6) de cerca de 0,92 % a cerca de 1,38 % de água. Preferivelmente, a Formulação 1 compreende:
(1) cerca de 15,41 % de glicerol;
(2) cerca de 79,623 % de propileno glicol;
(3) cerca de 0,440 % de hidroxipropilcelulose;
(4) cerca de 3,006 % de álcool benzílico;
(5) cerca de 0,009 % de pectinase; e
(6) cerca de 1,150 % de água.
Formulação 2 é uma composição aquosa incluindo a enzima pectinase e hidrocortisona como um agente anti-inflamatório. Tipicamente, a Formulação 2 compreende:
(1) de cerca de 28,328 % a cerca de 42,492 % de glicerol;
(2) de cerca de 52,761 % a cerca de 64,485 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 1,152 % a cerca de 1,728 % de tripropileno gli- col;
(4) de cerca de 2,405 % a cerca de 3,607 % de álcool benzílico;
(5) de cerca de 0,80 % a cerca de 1,20 % de hidrocortisona;
(6) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de pectinase; e
(7) de cerca de 0,80 % a cerca de 1,20 % de água. Preferivelmente, a Formulação 2 compreende:
(1) cerca de 35,410 % de glicerol;
(2) cerca de 58,623 % de propileno glicol;
(3) cerca de 1,440 % de tripropileno glicol;
(4) cerca de 3,006 % de álcool benzílico;
(5) cerca de 1,00 % de hidrocortisona;
(6) cerca de 0,010 % de pectinase; e
(7) cerca de 1,00 % de água.
Formulação 3 é uma composição aquosa incluindo as duas en- zimas dextranase e pectinase.
Tipicamente, a Formulação 3 compreende:
(1) de cerca de 24,328 % a cerca de 36,492 % de glicerol;
(2) de cerca de 57,261 % a cerca de 69,985 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 1,152 % a cerca de 1,728 % de tripropileno gli-
col;
(4) de cerca de 2,405 % a cerca de 3,607 % de álcool benzílico; (5) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de dextranase;
(6) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de pectinase; e
(7) de cerca de 1,201 % a cerca de 1,801 % de água. Preferivelmente1 a Formulação 3 compreende:
(1) cerca de 30,410 % de glicerol; (2) cerca de 63,623 % propileno glicol;
(3) cerca de 1,440 % de tripropileno glicol;
(4) cerca de 3,006 % de álcool benzílico;
(5) cerca de 0,010 % de dextranase;
(6) cerca de 0,010 % de pectinase; e (7) cerca de 1,501 % de água.
Formulação 4 é uma composição aquosa incluindo dextranase com hidroxipropilcelulose como um espessante.
Tipicamente, a Formulação 4 compreende: (1) de cerca de 16,328 % a cerca de 24,492 % de glicerol; (2) de cerca de 63,561 % a cerca de 76,506 % de propileno gli-
col;
se;
(3) de cerca de 0,40 % a cerca de 0,60 % de hidroxipropilcelulo-
(4) de cerca de 2,405 % a cerca de 3,607 % de álcool benzílico; (5) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de dextranase; e
(6) de cerca de 4,353 % a cerca de 6,529 % de água. Preferivelmente, a Formulação 4 compreende:
(1) cerca de 20,410 % de glicerol;
(2) cerca de 70,623 % de propileno glicol; (3) cerca de 0,50 % de hidroxipropilcelulose;
(4) cerca de 3,006 % de álcool benzílico;
(5) cerca de 0,010 % de dextranase; e ι
(6) cerca de 5,441 % de água.
Formulação 5 é uma composição aquosa incluindo dextranase e pectinase, e também incluindo Iactoperoxidase como uma fonte de peróxido de hidrogênio. Formulação 5 também inclui hidroxipropilcelulose. Tipicamente, a Formulação 5 compreende:
(1) de cerca de 16,328 % a cerca de 24,492 % de glicerol;
(2) de cerca de 63,561 % a cerca de 76,490 % de propileno gli-
col; se;
(3) de cerca de 0,40 % a cerca de 0,60 % de hidroxipropilcelulo-
(4) de cerca de 2,405 % a cerca de 3,607 % de álcool benzílico;
(5) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de dextranase;
(6) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de lactoperoxidase;
(7) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de pectinase; e (8) de cerca de 4,353 % a cerca de 6,529 % de água.
Preferivelmente, a Formulação 5 compreende:
(1) cerca de 20,410 % de glicerol;
(2) cerca de 70,623 % de propileno glicol;
(3) cerca de 0,50 % de hidroxipropilcelulose; (4) cerca de 3,006 % de álcool benzílico;
(5) cerca de 0,010 % de dextranase;
(6) cerca de 0,010 % de lactoperoxidase;
(7) cerca de 0,010 % de pectinase; e
(8) cerca de 5,441 % de água.
Formulação 6 é uma composição aquosa incluindo dextranase e
pectinase, e também incluindo Iisozima e lactoferrina. Formulação 6 também inclui hidroxipropilcelulose.
Tipicamente, a Formulação 6 compreende: (1) de cerca de 20,328 % a cerca de 30,492 % de glicerol; (2) de cerca de 59,061 % a cerca de 72,185 % de propileno gli-
col;
(3) de cerca de 0,40 % a cerca de 0,60 % de hidroxipropilcelulo- se;
(4) de cerca de 2,405 % a cerca de 3,607 % de álcool benzílico;
(5) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de lisozima;
(6) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de lactoferrina;
(7) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de lactoperoxidase;
(8) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de pectinase; e
(9) de cerca de 4,353 % a cerca de 6,529 % de água. Preferivelmente, a Formulação 6 compreende:
(1) cerca de 25,410 % de glicerol; (2) cerca de 65,523 % de propileno glicol;
(3) cerca de 0,50 % de hidroxipropilcelulose;
(4) cerca de 3,006 % de álcool benzílico;
(5) cerca de 0,010 % de lisozima;
(6) cerca de 0,010 % de lactoferrina;
(7) cerca de 0,010 % de lactoperoxidase;
(8) cerca de 0,010 % de pectinase; e
(9) cerca de 5,441 % de água.
Formulação 7 é uma composição aquosa incluindo dextranase, lactoperoxidase, e pectinase. Formulação 7 omite álcool benzílico. Tipicamente, a Formulação 7 compreende:
(1) de cerca de 16,830 % a cerca de 25,246 % de glicerol;
(2) de cerca de 65,518 % a cerca de 78,248 % de propileno gli-
col; lose;
(3) de cerca de 0,412 % a cerca de 0,618 % de hidroxipropilcelu-
(4) de cerca de 0,00824 % a cerca de 0,0124 % de dextranase;
(5) de cerca de 0,00824 % a cerca de 0,0124 % de lactoperoxi-
dase;
(6) de cerca de 0,00824 % a cerca de 0,0124 % de pectinase; e (7) de cerca de 4,486 % a cerca de 6,730 % de água.
Preferivelmente, a Formulação 7 compreende: (1) cerca de 21,038 % de glicerol; 10
20
25
30
(2) cerca de 72,798 % de propileno glicol;
(3) cerca de 0,515 % de hidroxipropilcelulose;
(4) cerca de 0,0103 % de dextranase;
(5) cerca de 0,0103 % de lactoperoxidase;
(6) cerca de 0,0103 % de pectinase; e
(7) cerca de 5,608 % de água.
Formulação 8 é uma composição aquosa incluindo dextranase, lactoperoxidase, e pectinase e que inclui glicerol, propileno glicol, e tripropi- Ieno glicol. Formulação 8 omite álcool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 8 compreende: (1) de cerca de 25,201 % a cerca de 37,813 % de glicerol; 2) de cerca de 47,114 % a cerca de 57,584 % de propileno gli-
col;
col;
dase;
3) de cerca de 8,375 % a cerca de 12,563 % de tripropileno gIi-
4) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de dextranase;
5) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de Iactoperoxi-
6) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de pectinase; e (7) de cerca de 4,510 % a cerca de 6,766 % de água. Preferivelmente, a Formulação 8 compreende: (1) cerca de 31,511 % de glicerol;
2) cerca de 52,349 % de propileno glicol;
3) cerca de 10,469 % de tripropileno glicol;
4) cerca de 0,0104 % de dextranase;
5) cerca de 0,0104 % de lactoperoxidase;
6) cerca de 0,0104 % de pectinase; e (7) cerca de 5,638 % de água.
Formulação 9 é uma composição aquosa incluindo dextranase e xilanase e que inclui glicerol, propileno glicol, e tripropileno glicol. Formula- ção 9 omite álcool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 9 compreende: (1) de cerca de 16,919 % a cerca de 25,379 % de glicerol;
(2) de cerca de 56,440 % a cerca de 68,982 % de propileno gli-
(3) de cerca de 8,383 % a cerca de 12,575 % de tripropileno gli-
(4) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de dextranase;
(5) de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de xilanase; e
(6) de cerca de 4,510 % a cerca de 6,766 % de água. Preferivelmente, a Formulação 9 compreende:
(1) cerca de 21,149% de glicerol;
(2) cerca de 62,711 % de propileno glicol;
(3) cerca de 10,479 % de tripropileno glicol;
(4) cerca de 0,104 % de dextranase;
(5) cerca de 0,104 % de xilanase; e
(6) cerca de 5,638 % de água.
Formulação 10 é uma composição aquosa incluindo a- galactosidase e amilase e que inclui glicerol e propileno glicol. Formulação omite álcool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 10 compreende: (1) de cerca de 12,348 % a cerca de 18,522 % de glicerol;
(2) de cerca de 73,051 % a cerca de 84,927 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 0,460 % a cerca de 0,690 % de hidroxipropilcelu-
lose;
(4) de cerca de 0,0092 % a cerca de 0,0138 % de a-
galactosidase;
(5) de cerca de 0,0092 % a cerca de 0,0138 % de amilase; e
(6) de cerca de 2,247 % a cerca de 3,371 % de água. Preferivelmente, a Formulação 10 compreende:
(1) cerca de 15,435 % de glicerol;
(2) cerca de 81,168 % de propileno glicol;
(3) cerca de 0,575 % de hidroxipropilcelulose;
col; col;
10 ι
(4) cerca de 0,0115 % de α-galactosidase;
(5) cerca de 0,0115 % de amilase; e
(6) cerca de 2,809 % de água.
Formulação 11 é uma composição aquosa incluindo Iactoperoxi- dase, pectinase, e amilase e que inclui glicerol e propileno glicol. Formulação 11 omite álcool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 11 compreende:
(1) de cerca de 14,596 % a cerca de 21,894 % de glicerol;
(2) de cerca de 69,818 % a cerca de 82,069 % de propileno gli-
col; dase;
(3) de cerca de 0,00944 % a cerca de 0,0141 % de Iactoperoxi-
(4) de cerca de 0,0474 % a cerca de 0,0710 % de pectinase;
(5) de cerca de 0,0190 % a cerca de 0,0284 % de amilase; e (6) de cerca de 3,259 % a cerca de 4,889 % de água.
Preferivelmente, a Formulação 11 compreende:
(1) cerca de 18,245 % de glicerol;
(2) cerca de 77,576 % de propileno glicol;
(3) cerca de 0,0118 % de lactoperoxidase; (4) cerca de 0,0592 % de pectinase;
(5) cerca de 0,0237 % de amilase; e
(6) cerca de 4,074 % de água.
Formulação 12 é uma composição aquosa incluindo dextranase, lactoperoxidase, e pectinase. Formulação 12 inclui glicerol, propileno glicol, e tripropileno glicol. Formulação 12 também inclui tiocianato de potássio. For- mulação 12 omite álcool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 12 compreende:
(1) de cerca de 25,204 % a cerca de 37,806 % de glicerol;
(2) de cerca de 47,105 % a cerca de 57,572 % de propileno gli-
col;
(3) de cerca de 8,374 % a cerca de 12,560 % de tripropileno gli- col; (4) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de dextranase;
(5) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0248 % de Iactoperoxida-
se;
(6) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de pectinase;
(7) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de tiocianato de
potássio; e
(8) de cerca de 4,510 % a cerca de 6,764 % de água. Preferivelmente, a Formulação 12 compreende: (1) cerca de 31,505 % de glicerol; (2) cerca de 52,339 % de propileno glicol;
(3) cerca de 10,467 % de tripropileno glicol;
(4) cerca de 0,0104 % de dextranase;
(5) cerca de 0,0207 % de lactoperoxidase;
(6) cerca de 0,0104 % de pectinase;
(7) cerca de 0,0104 % de tiocianato de potássio; e
(8) cerca de 5,637 % de água.
Formulação 13 é uma composição não-aquosa incluindo dextra- nase e lactoperoxidase. Formulação 13 inclui glicerol e propileno glicol. For- mulação 13 também inclui tiocianato de potássio. Formulação 13 omite álco- ol benzílico.
Tipicamente, a Formulação 13 compreende:
(1) de cerca de 12,846 % a cerca de 19,268 % de glicerol;
(2) de cerca de 75,510 % a cerca de 87,112 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de dextranase;
(4) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0250 % de lactoperoxida- se;
(5) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de pectinase; e
(6) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de tiocianato de
potássio.
Preferivelmente, a Formulação 13 compreende: (1) cerca de 16,057 % de glicerol; (2) cerca de 83,901 % de propileno glicol;
(3) cerca de 0,0104 % de dextranase;
(4) cerca de 0,0208 % de lactoperoxidase;
(5) cerca de 0,0104 % de pectinase; e
(6) cerca de 0,0104 % de tiocianato de potássio.
Formulação 14 é uma formulação não-aquosa incluindo dextra- nase, lactoperoxidase, e pectinase. Formulação 14 também inclui Iisozima e iodato de potássio. Formulação 14 inclui glicerol e propileno glicol; omite ál- cool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 14 compreende:
(1) de cerca de 12,834 % a cerca de 19,250 % de glicerol;
(2) de cerca de 75,439 % a cerca de 87,100 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de dextranase;
(4) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0250 % de lactoperoxida-
se;
(5) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0250 % de pectinase;
(6) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0250 % de lisozima; e
(7) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de iodato de
potássio.
Preferivelmente, a Formulação 14 compreende:
(1) cerca de 16,042 % de glicerol;
(2) cerca de 83,821 % de propileno glicol;
(3) cerca de 0,0104 % de dextranase;
(4) cerca de 0,0208 % de lactoperoxidase;
(5) cerca de 0,0208 % de pectinase;
(6) cerca de 0,0208 % de lisozima; e
(7) cerca de 0,0104 % de iodato de potássio.
Formulação 15 é uma composição não-aquosa incluindo dextra- nase, lactoperoxidase, e pectinase. Formulação 15 inclui glicerol, propileno glicol, e tripropileno glicol, como também lisozima, lactoferrina, e iodato de potássio. Formulação 15 omite álcool benzílico. Tipicamente, a Formulação 15 compreende:
(1) de cerca de 8,670 % a cerca de 13,004 % de glicerol;
(2) de cerca de 75,439 % a cerca de 87,091 % de propileno gli-
col;
(3) de cerca de 4,164 % a cerca de 6,246 % de tripropileno gli-
col;
(4) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de dextranase;
(5) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0250 % de Iactoperoxida-
se;
(6) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0250 % de pectinase;
(7) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0250 % de lisozima;
(8) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de lactoferrina;
e
(9) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de iodato de
potássio.
Preferivelmente, a Formulação 15 compreende:
(1) cerca de 10,847 % de glicerol;
(2) cerca de 83,821 % de propileno glicol;
(3) cerca de 5,205 % de tripropileno glicol; (4) cerca de 0,0104 % de dextranase;
(5) cerca de 0,0208 % de lactoperoxidase;
(6) cerca de 0,0208 % de pectinase;
(7) cerca de 0,0208 % de lisozima;
(8) cerca de 0,0104 % de lactoferrina; e
(9) cerca de 0,0104 % de iodato de potássio.
Formulação 16 é uma composição não-aquosa incluindo dextra- nase, lactoperoxidase, pectinase, e β-D-glucosidase. Formulação 16 tam- bém inclui iodato de potássio, como também glicerol, propileno glicol, e tri- propileno glicol. Formulação 16 omite álcool benzílico. Tipicamente, a Formulação 16 compreende:
(1) de cerca de 8,678 % a cerca de 13,016 % de glicerol;
(2) de cerca de 75,512 % a cerca de 87,104 % de propileno gli- col; col;
(3) de cerca de 4,168 % a cerca de 6,252 % de tripropileno gli-
(4) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de dextranase;
(5) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0250 % de Iactoperoxida-
se;
(6) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de pectinase;
(7) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de β-D- glucosidase;
(8) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de iodato de
potássio.
Preferivelmente, a Formulação 16 compreende:
(1) cerca de 10,847 % de glicerol;
(2) cerca de 83,902 % de propileno glicol;
(3) cerca de 5,210 % de tripropileno glicol;
(4) cerca de 0,0104 % de dextranase;
(5) cerca de 0,0208 % de lactoperoxidase;
(6) cerca de 0,0104 % de pectinase;
(7) cerca de 0,0104 % de β-D-glucosidase; e
(8) cerca de 0,0104 % de iodato de potássio.
Formulação 17 é uma formulação não-aquosa que inclui dextra- nase, lactoperoxidase, pectinase, e celulase. Formulação 17 inclui glicerol, propileno glicol, e tripropileno glicol. Formulação 17 também inclui tiocianato de potássio. Formulação 17 omite álcool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 17 compreende:
(1) de cerca de 17,014 % a cerca de 25,520 % de glicerol;
(2) de cerca de 66,134 % a cerca de 78,768 % de propileno gli-
col;
col;
(3) de cerca de 4,168 % a cerca de 6,252 % de tripropileno gli-
(4) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de dextranase;
(5) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0250 % de Iactoperoxida- (6) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de pectinase;
(7) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de celulase; e
(8) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de tiocianato de
potássio.
Preferivelmente, a Formulação 17 compreende:
(1) cerca de 21,267 % de glicerol;
(2) cerca de 73,482 % de propileno glicol;
(3) cerca de 5,210 % de tripropileno glicol;
(4) cerca de 0,0104 % de dextranase;
(5) cerca de 0,0208 % de lactoperoxidase;
(6) cerca de 0,0104 % de pectinase;
(7) cerca de 0,0104 % de celulase; e
(8) cerca de 0,0104 % de tiocianato de potássio.
Formulação 18 é uma composição não-aquosa incluindo dextra- nase, lactoperoxidase, pectinase, celulase, amilase, e xilanase, como tam- bém tiocianato de potássio. Formulação 18 inclui glicerol, propileno glicol, e tripropileno glicol. Formulação 18 omite álcool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 18 compreende:
(1) de cerca de 16,998 % a cerca de 25,496 % de glicerol;
(2) de cerca de 66,070 % a cerca de 78,763 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 4,164 % a cerca de 6,246 % de tripropileno gli- col;
(4) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de dextranase;
(5) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0250 % de lactoperoxida- se;
(6) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de pectinase;
(7) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de celulase;
(8) de cerca de 0,0166 % a cerca de 0,0250 % de amilase;
(9) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de xilanase; e
(10) de cerca de 0,00832 % a cerca de 0,0125 % de tiocianato de potássio.
Preferivelmente, a Formulação 18 compreende:
(1) cerca de 21,247 % de glicerol;
(2) cerca de 73,411 % de propileno glicol;
(3) cerca de 5,205 % de tripropileno glicol;
(4) cerca de 0,0104 % de dextranase;
(5) cerca de 0,0208 % de lactoperoxidase;
(6) cerca de 0,0104 % de pectinase;
(7) cerca de 0,0104 % de celulase;
(8) cerca de 0,0208 % de amilase;
(9) cerca de 0,0104 % de xilanase; e
(10) cerca de 0,0104 % de tiocianato de potássio.
Formulação 19 é uma composição não-aquosa incluindo dextra- nase, lactoperoxidase, glicose oxidase, pectinase, celulase, amilase, e xila- nase, como também iodato de potássio. Formulação 19 inclui glicerol e pro- pileno glicol. Formulação 19 também inclui β-D-glicose. Formulação 19 inclui álcool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 19 compreende:
(1) de cerca de 19,311 % a cerca de 28,967 % de glicerol;
(2) de cerca de 65,497 % a cerca de 78,212 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 2,194 % a cerca de 3,296 % de álcool benzílico;
(4) de cerca de 0,220 % a cerca de 0,330 % de β-D-glicose;
(5) de cerca de 0,00731 % a cerca de 0,0110 % de dextranase;
(6) de cerca de 0,00658 % a cerca de 0,00988 % de lactoperoxi- dase;
(7) de cerca de 0,00585 % a cerca de 0,00877 % de glicose oxi- dase;
(8) de cerca de 0,00658 % a cerca de 0,00988 % de pectinase;
(9) de cerca de 0,00731 % a cerca de 0,0110 % de dextranase;
(10) de cerca de 0,0146 % a cerca de 0,0220 % de amilase;
(11) de cerca de 0,00731 % a cerca de 0,0110 % de xilanase; e (12) de cerca de 0,00731 % a cerca de 0,0110 % de iodato de
potássio.
Preferivelmente, a Formulação 19 compreende:
(1) cerca de 24,139 % de glicerol;
(2) cerca de 72,775 % de propileno glicol;
(3) cerca de 2,747 % de álcool benzílico;
(4) cerca de 0,275 % de β-D-glicose;
(5) cerca de 0,00914 % de dextranase;
(6) cerca de 0,00823 % de lactoperoxidase;
(7) cerca de 0,00731 % de glicose oxidase;
(8) cerca de 0,00823 % de pectinase;
(9) cerca de 0,00914 % de celulase;
(10) cerca de 0,0183 % de amilase;
(11) cerca de 0,00914 % de xilanase; e
(12) cerca de 0,00914 % de iodato de potássio.
Formulação 20 é uma composição não-aquosa incluindo dextra- nase, lactoperoxidase, glicose oxidase, e pectinase. Formulação 20 inclui glicerol e propileno glicol. Formulação 20 também inclui hidrocortisona e io- dato de potássio. Formulação 20 também inclui álcool benzílico. Tipicamente, a Formulação 20 compreende:
(1) de cerca de 19,142 % a cerca de 28,712 % de glicerol;
(2) de cerca de 64,924 % a cerca de 77,702 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 2,178 % a cerca de 3,268 % de álcool benzílico;
(4) de cerca de 0,725 % a cerca de 1,087 % de hidrocortisona;
(5) de cerca de 0,218 % a cerca de 0,328 % de β-D-glicose;
(6) de cerca de 0,00725 % a cerca de 0,0109 % de dextranase;
(7) de cerca de 0,00652 % a cerca de 0,00978 % de lactoperoxi- dase;
(8) de cerca de 0,00580 % a cerca de 0,00870 % de glicose oxi- dase;
(9) de cerca de 0,00725 % a cerca de 0,0109 % de pectinase; e (10) de cerca de 0,00725 % a cerca de 0,0109 % de iodato de
potássio.
Preferivelmente1 a Formulação 20 compreende:
(1) cerca de 23,927 % de glicerol;
(2) cerca de 72,138 % de propileno glicol;
(3) cerca de 2,723 % de álcool benzílico;
(4) cerca de 0,906 % de hidrocortisona;
(5) cerca de 0,273 % de β-D-glicose;
(6) cerca de 0,00906 % de dextranase;
(7) cerca de 0,00815 % de lactoperoxidase;
(8) cerca de 0,00725 % de glicose oxidase;
(9) cerca de 0,00906 % de pectinase; e
(10) cerca de 0,00906 % de iodato de potássio.
Formulação 21 é uma composição aquosa que contém uma quantidade mínima de água. Formulação 21 inclui lactoperoxidase, glicose oxidase, e pectinase, e β-D-glicose. Formulação 21 inclui glicerol e propileno glicol, como também hidroxipropilcelulose. Formulação 21 também inclui hi- drocortisona e álcool benzílico, como também Iactoferrina e lisozima.
Tipicamente, a Formulação 21 compreende:
(1) de cerca de 28,328 % a cerca de 42,492 % de glicerol;
(2) de cerca de 52,761 % a cerca de 64,485 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 1,152 % a cerca de 1,728 % de hidroxipropilcelu- lose;
(4) de cerca de 2,405 % a cerca de 3,607 % de álcool benzílico;
(5) de cerca de 0,120 % a cerca de 0,180 % de água;
(6) de cerca de 0,800 % a cerca de 1,200 % de hidrocortisona;
(7) de cerca de 0,241 % a cerca de 0,361 % de β-D-glicose;
(8) de cerca de 0,0064 % a cerca de 0,0096 % de lactoperoxida- se;
(9) de cerca de 0,0008 % a cerca de 0,0012 % de glicose oxida- se; (10) de cerca de 0,0064 % a cerca de 0,0096 % de lactoferrina;
(11) de cerca de 0,0064 % a cerca de 0,0096 % de lisozima;
(12) de cerca de 0,0080 % a cerca de 0,0120 % de pectinase; e
(13) de cerca de 0,028 % a cerca de 0,042 % de iodato de po-
tássio.
Preferivelmente, a Formulação 21 compreende:
(1) cerca de 35,410 % de glicerol;
(2) cerca de 58,623 % de propileno glicol;
(3) cerca de 1,440 % de hidroxipropilcelulose; 3 (4) cerca de 3,006 % de álcool benzílico;
(5) cerca de 0,150 % de água;
(6) cerca de 1,000 % de hidrocortisona;
(7) cerca de 0,301 % de β-D-glicose;
(8) cerca de 0,008 % de lactoperoxidase; > (9) cerca de 0,001 % de glicose oxidase;
(10) cerca de 0,008 % de lactoferrina;
(11) cerca de 0,008 % de lisozima;
(12) cerca de 0,010 % de pectinase; e
(13) cerca de 0,035 % de iodato de potássio.
Formulação 22 é igual à Formulação 21 exceto que substitui tio- cianato de potássio na Formulação 22, por iodato de potássio na Formula- ção 21.
Tipicamente, a Formulação 22 compreende:
(1) de cerca de 28,328 % a cerca de 42,492 % de glicerol;
(2) de cerca de 52,761 % a cerca de 64,485 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 1,152 % a cerca de 1,728 % de hidroxipropilcelu- lose;
(4) de cerca de 2,405 % a cerca de 3,607 % de álcool benzílico;
(5) de cerca de 0,120 % a cerca de 0,180 % de água;
(6) de cerca de 0,800 % a cerca de 1,200 % de hidrocortisona;
(7) de cerca de 0,241 % a cerca de 0,361 % de β-D-glicose; (8) de cerca de 0,0064 % a cerca de 0,0096 % de Iactoperoxida-
se;
(9) de cerca de 0,0008 % a cerca de 0,0012 % de glicose oxida-
se;
(10) de cerca de 0,0064 % a cerca de 0,0096 % de lactoferrina;
(11) de cerca de 0,0064 % a cerca de 0,0096 % de Iisozima;
(12) de cerca de 0,0080 % a cerca de 0,0120 % de pectinase; e
(13) de cerca de 0,028 % a cerca de 0,042 % de tiocianato de
potássio.
Preferivelmente, a Formulação 22 compreende:
(1) cerca de 35,410 % de glicerol;
(2) cerca de 58,623 % de propileno glicol;
(3) cerca de 1,440 % de hidroxipropilcelulose;
(4) cerca de 3,006 % de álcool benzílico;
(5) cerca de 0,150 % de água;
(6) cerca de 1,000 % de hidrocortisona;
(7) cerca de 0,301 % de β-D-glicose;
(8) cerca de 0,008 % de lactoperoxidase;
(9) cerca de 0,001 % de glicose oxidase;
(10) cerca de 0,008 % de lactoferrina;
(11) cerca de 0,008 % de lisozima;
(12) cerca de 0,010 % de pectinase; e
(13) cerca de 0,035 % de tiocianato de potássio. Formulação 23 é uma composição aquosa com uma quantidade
mínima de água que inclui lactoperoxidase, glicose oxidase, pectinase, e dextranase. Formulação 23 inclui glicerol e propileno glicol, como também hidroxipropilcelulose. Formulação 23 também inclui lactoferrina e lisozima, como também β-D-glicose e tiocianato de potássio. Formulação 23 também inclui álcool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 23 compreende:
(1) de cerca de 28,328 % a cerca de 42,492 % de glicerol;
(2) de cerca de 53,652 % a cerca de 65,574 % de propileno gli- col;
(3) de cerca de 1,152 % a cerca de 1,728 % de hidroxipropilcelu-
lose;
(4) de cerca de 2,405 % a cerca de 3,607 % de álcool benzílico; (5) de cerca de 0,120 % a cerca de 0,180 % de água; (6) de cerca de 0,241 % a cerca de 0,361 % de β-D-glicose; (7) de cerca de 0,0064 % a cerca de 0,0096 % de Iactoperoxida
se;
(8) de cerca de 0,0008 % a cerca de 0,0012 % de glicose oxida-
se;
(9) de cerca de 0,0064 % a cerca de 0,0096 % de lactoferrina;
(10) de cerca de 0,0064 % a cerca de 0,0096 % de lisozima;
(11) de cerca de 0,0080 % a cerca de 0,0120 % de pectinase;
(12) de cerca de 0,0080 % a cerca de 0,0120 % de dextranase;
e
(13) de cerca de 0,028 % a cerca de 0,042 % de tiocianato de
potássio.
Preferivelmente, a Formulação 23 compreende:
(I) cerca de 35,410 % de glicerol;
(2) cerca de 59,613 % de propileno glicol;
(3) cerca de 1,440 % de hidroxipropilcelulose;
(4) cerca de 3,006 % de álcool benzílico;
(5) cerca de 0,150 % de água;
(6) cerca de 0,301 % de β-D-glicose;
(7) cerca de 0,008 % de lactoperoxidase;
(8) cerca de 0,001 % de glicose oxidase;
(9) cerca de 0,008 % de lactoferrina;
(10) cerca de 0,008 % de lisozima;
(II) cerca de 0,010 % de pectinase; (12) cerca de 0,010 % de dextranase;
(13) cerca de 0,035 % de tiocianato de potássio.
Formulação 24 é uma composição aquosa que também inclui o hidrocarboneto isoprenoide esqualeno e que inclui Iactoperoxidase e pecti- nase. Formulação 24 inclui propileno glicol e glicerol. Formulação 24 tam- bém inclui Iactoferrina e lisozima, como também tiocianato de potássio como um substrato para a lactoperoxidase. Formulação 24 omite álcool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 24 compreende:
(1) de cerca de 61,2 % a cerca de 74,4 % de esqualeno;
(2) de cerca de 6,8 % a cerca de 10,2 % de propileno glicol;
(3) de cerca de 16,32 % a cerca de 24,48 % de glicerol;
(4) de cerca de 2,4 % a cerca de 3,6 % de água;
(5) de cerca de 0,012 % a cerca de 0,018 % de lactoperoxidase;
(6) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de lactoferrina;
(7) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de lisozima;
(8) de cerca de 0,048 % a cerca de 0,072 % de tiocianato de po- tássio; e
(9) de cerca de 0,0096 % a cerca de 0,0144 % de pectinase.
Preferivelmente, a Formulação 24 compreende:
(1) cerca de 68 % de esqualeno;
(2) cerca de 8,5 % de propileno glicol;
(3) cerca de 20,4 % de glicerol;
(4) cerca de 3 % de água;
(5) cerca de 0,015 % de lactoperoxidase;
(6) cerca de 0,010 % de lactoferrina;
(7) cerca de 0,010 % de lisozima;
(8) cerca de 0,060 % de tiocianato de potássio; e
(9) cerca de 0,012 % de pectinase.
Formulação 25 é uma composição aquosa que também inclui o hidrocarboneto isoprenoide esqualeno e que inclui lactoperoxidase e amila- se. Formulação 25 inclui propileno glicol e glicerol. Formulação 25 também inclui lactoferrina e lisozima, como também iodato de potássio como um
substrato para a lactoperoxidase. Formulação 25 omite álcool benzílico.
Tipicamente, a Formulação 25 compreende:
(1) de cerca de 38,16 % a cerca de 46,64 % de esqualeno; (2) de cerca de 5,2 % a cerca de 7,8 % de propileno glicol;
(3) de cerca de 43,2 % a cerca de 52;8 % de glicerol;
(4) de cerca de 2,4 % a cerca de 3,6 % de água;
(5) de cerca de 0,012 % a cerca de 0,018 % de lactoperoxidase;
(6) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de lactoferrina;
(7) de cerca de 0,008 % a cerca de 0,012 % de lisozima;
(8) de cerca de 0,032 % a cerca de 0,048 % de iodato de potás- sio; e
(9) de cerca de 0,0096 % a cerca de 0,0144 % de amilase.
Preferivelmente, a Formulação 25 compreende:
(1) cerca de 42,4 % de esqualeno;
(2) cerca de 6,5 % de propileno glicol;
(3) cerca de 48 % de glicerol;
(4) cerca de 3 % de água;
(5) cerca de 0,015 % de lactoperoxidase;
(6) cerca de 0,010 % de lactoferrina;
(7) cerca de 0,010 % de lisozima;
(8) cerca de 0,04 % de iodato de potássio; e
(9) cerca de 0,012 % de amilase.
Em outra alternativa, uma composição de acordo com a presen-
te invenção pode também incluir um antibiótico que é eficaz no tratamento de P. aeruginosa em uma quantidade eficaz para exercer uma ação bacteri- cida contra P. aeruginosa. Estes antibióticos são descritos acima.
Outras formulações podem ser preparadas que são similares às
descritas em detalhes acima.
Outra modalidade da presente invenção é um método de tratar uma infecção de orelha compreendendo a etapa de administrar uma quanti- dade de uma composição de acordo com a presente invenção como descrita acima a um sujeito com uma infecção de orelha para tratar a infecção. A
quantidade terapeuticamente eficaz precisa para um sujeito dependerá da idade do sujeito, tamanho, peso, e saúde, da extensão da infecção de ore- lha, a bactéria que causa a infecção de orelha, da presença de outras condi- ções tais como reações alérgicas que podem complicar a infecção de orelha, e as terapêuticas ou combinação de terapêuticas selecionadas para adminis- tração, como também variáveis tais como função do fígado e do rim que afe- tam a farmacocinética das terapêuticas administradas. Desse modo, não é útil especificar uma quantidade eficaz exata com antecedência. Porém, a quantidade eficaz para uma situação dada pode ser determinada por expe- rimentação rotineira e está dentro do julgamento do clínico. A freqüência de administração, também, pode ser determinada por alguém de habilidade u- sual na técnica com referência aos parâmetros acima. Tipicamente, a infecção de orelha é otite externa ou otite média.
Tipicamente, a infecção de orelha é causada por Pseudomonas aeruginosa.
O método de tratar a infecção de orelha pode também compre- ender a administração de um antibiótico que seja eficaz no tratamento de P. aeruginosa em uma quantidade eficaz para exercer uma ação bactericida contra P. aeruginosa, o antibiótico sendo administrado por uma rota diferente da rota de administração da composição de acordo com a presente inven- ção. Se a composição de acordo com a presente invenção incluir um antibió- tico, o antibiótico que é administrado pela rota diferente da rota de adminis- tração da composição de acordo com a presente invenção pode ser o mes- > 20 mo antibiótico incluído na composição ou pode ser um antibiótico diferente. Se a composição de acordo com a presente invenção não incluir um antibió- tico, o antibiótico administrado pela rota adicional pode ser quaisquer dos antibióticos descritos acima como sendo eficazes no tratamento de P. aeru- ginosa. A rota de administração, dose administrada, e a freqüência de admi- nistração podem ser determinadas por alguém de habilidade usual na técni- ca para referência aos parâmetros descritos acima, tais como a idade do sujeito, tamanho, peso, e saúde, a extensão da infecção de orelha, a bacté- ria causando a infecção de orelha, a presença de outras condições tais co- mo reações alérgicas que podem complicar a infecção de orelha, e as tera- pêuticas ou combinação de terapêuticas selecionadas para administração, como também variáveis tais como função do fígado e do rim que afetam a farmacocinética das terapêuticas administradas, e as propriedades do anti- biótico tais como seu peso molecular e grau relativo de hidrofobicidade ou hidrofilicidade, como também sua suscetibilidade à hidrólise no trato digesti- vo. Tipicamente, administração do antibiótico administrado pela rota adicio- nal é pela rota oral ou parenteral; se parenteral, tipicamente o antibiótico é administrado intramuscularmente. Em alguns casos de infecção severa, ad- ministração intravenosa pode ser requerida. Informação sobre antibióticos específicos e rotas ótimas de administração pode ser encontrada, por exem- plo, em J. G. Hardman & L. E. Limbird, eds., "Goodman & GiIman1S The Pharmacological Basis of Therapeutics" (10a ed., McGraw-HiII, Nova Iorque, 2001), as porções relevantes desta são incorporadas aqui por esta referên- cia.
VANTAGENS DA INVENÇÃO
A presente invenção provê meios seguros e eficazes para tratar infecções de orelha, particularmente otite externa e otite média, e particular- mente aquelas infecções de orelha causadas por P. aeruginosa. Composi- ções e métodos de acordo com a presente invenção, em remover biofilme carregado com bactéria, não só proveem tratamento mais eficaz de tais in- fecções, mas também impedem recorrência das infecções, tais como otite externa e otite média. Composições e métodos de acordo com a presente invenção são adequados para o uso com outras modalidades de tratamento, tais como administração antibiótica, e não causam inflamação ou outros efei- tos colaterais.
Consequentemente, composições e métodos de acordo com a presente invenção possuem aplicabilidade industrial para a preparação de fármacos para o tratamento de infecções de orelha, especialmente otite ex- terna e otite média, e especialmente para o tratamento de infecções causa- das por P. aeruginosa.
As invenções ilustrativamente descritas aqui podem ser pratica- das adequadamente na ausência de qualquer elemento ou elementos, Iimi- tação ou limitações, não especificamente revelados aqui. Desse modo, por exemplo, os termos "compreendendo", "incluindo", "contendo" etc. devem ser lidos expansivamente e sem limitação. Adicionalmente, os termos e ex- ί
pressões empregados aqui foram usados como termos de descrição e não de limitação, e não há nenhuma intenção no uso de tais termos e expres- sões de excluir quaisquer equivalentes do futuro mostrados e descritos ou qualquer porção dos mesmos, e é reconhecido que várias modificações são possíveis dentro do escopo da invenção reivindicada. Desse modo, deveria ser entendido que embora a presente invenção tenha sido especificamente revelada pelas modalidades preferidas e características opcionais, modifica- ção e variação das invenções aqui reveladas podem ser recorridas por aque- les versados na técnica, e que tais modificações e variações são considera- das estarem dentro do escopo das invenções reveladas aqui. As invenções foram descritas ampla e genericamente aqui. Cada uma das espécies mais estreitas e agrupamentos subgenéricos que se enquadrem no escopo da revelação genérica também fazem parte destas invenções. Isto inclui a des- crição genérica de cada invenção com uma condição ou limitação negativa removendo qualquer assunto do gênero, independente se ou não os materi- ais excisados especificamente resididos nele.
Além disso, onde características ou aspectos de uma invenção forem descritos em termos do grupo de Markush, aqueles escolados na téc- nica reconhecerão que a invenção é também assim descrita em termos de qualquer membro individual ou subgrupo de membros do grupo de Markush. É também para ser entendido que a descrição acima é intencionada ser ilus- trativa e não restritiva. Muitas modalidades serão evidentes àqueles de habi- lidade usual na técnica ao revisar a descrição acima. O escopo da invenção deve, portanto, não ser determinado com referência à descrição acima, mas, do contrário, deve ser determinado com referência às reivindicações em a- nexo, juntamente com o escopo total de equivalentes aos quais tais reivindi- cações são intituladas. As revelações de todos os artigos e referências, in- cluindo publicações de patente, são incorporadas aqui por referência.

Claims (15)

1. Composição para remoção de biofilme na orelha compreen- dendo: (a) uma quantidade de pelo menos uma enzima que catalisa a hidrólise de uma ligação que conecta dois monossacarídeos em um polissa- carídeo ou que conecta um monossacarídeo com uma molécula de proteína em uma glicoproteína suficiente para destruir o biofilme na orelha; e (b) um veículo farmaceuticamente aceitável adequado para ad- ministração no canal auricular.
2. Composição de acordo com a reivindicação 1, em que pelo menos uma enzima que catalisa a hidrólise de uma ligação que conecta dois monossacarídeos em um polissacarídeo ou que conecta um monossacarí- deo com uma molécula de proteína em uma glicoproteína é selecionada do grupo que consiste em xilanase, β-glucanase, celulase, a-galactosidase, glucanases, amilase, hialuronidase, poligalacturonase (pectinase), dextrana- se, celobio-hidrolase, pululanase, glicosilceramidase, glucan 1,4-a- glucosidase, oligo-1,6-glucosidase, fucoidanase, glicosilceramidase, glicosil- ceramidase, tioglucosidase, β-D-glucosidase e glicopeptídeo N-glicosidase.
3. Composição de acordo com a reivindicação 1, em que a com- posição também compreende pelo menos um ingrediente em uma quantida- de eficaz para prevenir ou inibir inflamação na orelha.
4. Composição de acordo com a reivindicação 3, em que o pelo menos um ingrediente em uma quantidade eficaz para prevenir ou inibir in- flamação na orelha é um esteroide.
5. Composição de acordo com a reivindicação 4, em que o este- roide é um esteroide selecionado do grupo que consiste em hidrocortisona, beclometasona, budenosida, ciclesonida, flunisolida, fluticasona, metilpred- nisolona, prednisolona, prednisona, e triancinolona, e os sais, solvatos, aná- logos, congêneres, bioisósteres, produtos de hidrólise, metabolitos, precur- sores, e profármacos dos mesmos.
6. Composição de acordo com a reivindicação 1, em que o veí- culo farmaceuticamente aceitável adequado para administração no canal auricular é selecionado do grupo que consiste em propileno glicol, glicerol e tripropileno glicol.
7. Composição de acordo com a reivindicação 1, em que a com- posição também compreende uma substância em uma quantidade suficiente para exercer uma ação bactericida contra Pseudomonas aeruginosa sele- cionada do grupo que consiste em amicacina, ticarcilina, piperacilina, mezlo- cilina, azlocilina, ceftazidima, cefepima, ciprofloxacina, tobramicina, aztreo- nam, imipenem, meropenem, Iisozima e lactoferrina.
8. Composição de acordo com a reivindicação 1, também inclu- indo pelo menos uma peroxidase em uma quantidade suficiente para exercer uma ação bactericida.
9. Composição de acordo com a reivindicação 8, em que a pelo menos uma peroxidase é selecionada do grupo que consiste em Iactopero- xidase, mieloperoxidase, peroxidase de raiz forte, peroxidase de eosinófilo, e glutationa peroxidase.
10. Composição de acordo com a reivindicação 8, em que a composição também inclui pelo menos um substrato que pode ser converti- do em um íon com propriedades bactericidas pela ação enzimática da pero- xidase em uma quantidade de modo que uma concentração eficaz do íon com propriedades bactericidas é produzida pela ação catalítica da peroxida- se.
11. Composição de acordo com a reivindicação 10, em que o pelo menos um substrato é um sal de metal alcalino de tiocianato, iodato, ou clorato.
12. Composição de acordo com a reivindicação 8, em que a composição também inclui um inibidor de catalase.
13. Composição de acordo com a reivindicação 10, em que a composição também inclui uma amino-hexose em uma quantidade eficaz para aumentar o rendimento ou acumulação de agente biocida aniônico oxi- dado.
14. Composição de acordo com a reivindicação 8, em que a composição também inclui uma oxidase em uma quantidade suficiente para exercer uma ação bactericida selecionada do grupo que consiste em glicose oxidase, galactose oxidase, urato oxidase, colina oxidase, D-aminoácido o- xidase, D-glutamato oxidase, glicina oxidase, glicólico oxidase, L-sorbose oxidase, álcool oxidase, e amina oxidase.
15. Método de tratar uma infecção de orelha compreendendo a etapa de administrar uma quantidade da composição como definido na rei- vindicação 1, a um sujeito com uma infecção de orelha a fim de tratar a in- fecção.
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Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007123271A2 (en) * 2006-04-21 2007-11-01 Kao Corporation Composition of biofilm control agent
WO2008045696A2 (en) * 2006-10-10 2008-04-17 Laclede, Inc. Methods and compositions for the treatment of vaginal diseases employing peroxide-producing enzymes and peroxidases
BRPI0719761A2 (pt) * 2006-12-01 2014-01-21 Laclede Inc Uso de enzimas hidrolíticas e oxidativas para dissolver biofilme nas orelhas
US20110059062A1 (en) * 2007-07-06 2011-03-10 Michael A Pellico Use of hydrolytic and oxidative enzymes to dissolve biofilm in airway passages
US20130004477A1 (en) * 2009-10-26 2013-01-03 Zhe Lu Methods for Treating Inflammation and Oxidative Stress Related Diseases
AU2011304133A1 (en) * 2010-09-17 2013-03-28 Teikoku Seiyaku Co., Ltd. Method for using hydrogel sheet for treating wound
GB201021186D0 (en) * 2010-12-14 2011-01-26 Novabiotics Ltd Composition
RU2548803C2 (ru) * 2011-11-28 2015-04-20 Общество с ограниченной ответственностью " Фарматренд" ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЛАЗНЫХ ИНФЕКЦИЙ P. Aeruginosa, СОДЕРЖАЩАЯ РЕКОМБИНАНТНЫЙ ЛИЗОЦИМ
US9504752B2 (en) 2011-12-01 2016-11-29 Az Co., Ltd. Sterilizer, oral cavity sterilizer, sterilization method, sterilization apparatus, and sterilizer evaluation method
BR112018077060A2 (pt) * 2016-06-30 2019-04-24 Next Science IP Holdings Pty Ltd composição antimicrobiana e métodos que empregam a mesma
US11878050B2 (en) 2018-07-16 2024-01-23 Texas Tech University System Glycoside hydrolases to treat biofilm-associated infections
ES2985441T3 (es) 2018-07-30 2024-11-05 Virbac Utilización novedosa de glucocorticoides para el tratamiento de infecciones microbianas epiteliales de un órgano que contiene fluidos con un orificio exterior natural en mamíferos
CN111759796B (zh) * 2019-03-15 2022-02-11 华东师范大学 一种抗生物被膜的抗生素水凝胶及其制备方法和应用
WO2022112511A1 (en) * 2020-11-26 2022-06-02 Alain Moussy Pharmaceutical composition for treatment of inner ear disorders through local administration in the tympanic area
US11672773B2 (en) 2020-12-13 2023-06-13 Next Science IP Holdings Pty Ltd Methods for treating ciliated cavities
CN114381447A (zh) * 2022-01-24 2022-04-22 哈德逊（苏州）水技术有限公司 一种胶黏物去除酶
CN115747180B (zh) * 2022-11-08 2023-09-15 青岛农业大学 一种酶组合物及其应用
US11904046B1 (en) 2022-11-14 2024-02-20 Eton Pharmaceuticals, Inc. Hydrocortisone oral liquid formulations

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4340448A (en) 1978-08-28 1982-07-20 University Of Pittsburgh Potentiometric detection of hydrogen peroxide and apparatus therefor
EP0236610A1 (en) * 1986-03-13 1987-09-16 Laclede Professional Products, Inc. Enzymatic bandages and pads
JPS62249931A (ja) * 1986-04-21 1987-10-30 Morinaga Milk Ind Co Ltd 抗菌性組成物
NL9001388A (nl) * 1990-06-19 1992-01-16 Unilever Nv Recombinant dna, cel die daarvan afgeleid dna bevat, enzym waarvoor het recombinant dna codeert en toepassingen daarvan.
AU5386996A (en) * 1995-04-05 1996-10-23 Picower Institute For Medical Research, The Agents for binding to advanced glycosylation endproducts, an d methods of their use
CA2294586C (en) 1997-06-18 2009-01-27 The Research And Development Institute, Inc. Homoserine lactones biofilm regulating compounds and their methods of use
US5871714A (en) * 1997-10-16 1999-02-16 Pharmacal Biotechnologies, Inc. Compositions for controlling bacterial colonization
US20020037260A1 (en) * 1997-10-16 2002-03-28 Budny John A. Compositions for treating biofilm
US6830745B1 (en) * 1997-10-16 2004-12-14 Pharmacal Biotechnologies, Llc Compositions for treating biofilm
US6214339B1 (en) * 2000-01-12 2001-04-10 Michael A. Pellico Di-enzymatic treatment of outer ear infection in dogs and cats
ES2162593B1 (es) * 2000-01-20 2002-07-01 Univ Madrid Complutense Procedimiento enzimatico para fluidificar o desprender biofilms de distintas interfases.
EP1524974A4 (en) 2001-05-04 2007-12-05 Paratek Pharm Innc TRANSCRIPTION FACTOR MODULATING COMPOUNDS AND METHODS OF USE
PL367523A1 (en) * 2001-07-03 2005-02-21 Alcon, Inc. Compositions for removing human cerumen
JP2003137809A (ja) * 2001-10-26 2003-05-14 Kakunai Juyotai Kenkyusho:Kk 口腔衛生用途に用いるタンパク質組成物
AU2002950862A0 (en) 2002-08-19 2002-09-12 Biosignal Pty Ltd Furanone derivatives and methods of making same
JP2006513162A (ja) 2002-11-01 2006-04-20 パラテック ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 転写因子調節化合物およびその使用方法
US7220431B2 (en) * 2002-11-27 2007-05-22 Regents Of The University Of Minnesota Methods and compositions for applying pharmacologic agents to the ear
US20050159369A1 (en) * 2003-08-20 2005-07-21 Qtm Llc Method of treatment of otitis externa
EP1621205A1 (en) 2004-07-28 2006-02-01 OctoPlus Technologies B.V. Antimicrobial peptides derived from CAP18
CN101040052A (zh) * 2004-09-10 2007-09-19 诺维信北美公司 防止、去除、减少或破坏生物膜的方法
WO2006099325A2 (en) * 2005-03-10 2006-09-21 3M Innovative Properties Company Methods of treating ear infections
BRPI0719761A2 (pt) * 2006-12-01 2014-01-21 Laclede Inc Uso de enzimas hidrolíticas e oxidativas para dissolver biofilme nas orelhas

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