BRPI0818959B1 - método para detecção de espécies de listeria em uma superfície ambiental - Google Patents
método para detecção de espécies de listeria em uma superfície ambiental Download PDFInfo
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Description
(54) Título: MÉTODO PARA DETECÇÃO DE ESPÉCIES DE LISTERIA EM UMA SUPERFÍCIE AMBIENTAL (51) lnt.CI.: C12M 1/26 (30) Prioridade Unionista: 20/11/2007 US 60/989,356 (73) Titular(es): 3M INNOVATIVE PROPERETIES COMPANY (72) Inventor(es): CYNTHIA D. ZOOK (85) Data do Início da Fase Nacional: 20/05/2010
1/46 “MÉTODO PARA DETECÇÃO DE ESPÉCIES DE LISTERIA EM UMA SUPERFÍCIE AMBIENTAL”
Referência Remissiva a Pedido Relacionado [001] Este pedido reivindica o benefício do pedido de patente U.S. n° 60/001.883, depositado no dia 20 de novembro de 2007, o qual está aqui incorporado em sua totalidade, a título de referência.
Antecedentes [002] Quando as superfícies se tornam contaminadas com bactérias, fungos, leveduras, vírus ou outros micro-organismos (às vezes chamados de micróbios), pode ocorrer doença (morbidez) e, às vezes, óbito (mortalidade). Isto pode ser particularmente verdadeiro quando as superfícies presentes em instalações de processamento de alimentos e estabelecimentos de cuidados com a saúde (por exemplo, hospitais) se tornam contaminadas com micro-organismos.
[003] Em instalações de processamento de alimentos, as superfícies (por exemplo, superfícies sólidas, superfícies de equipamentos, peças de vestuário protetoras, etc.) podem se tornar contaminadas. Tal contaminação pode ser causada por ou transferida para a carne ou outros alimentos. Em estabelecimentos para cuidados com a saúde, os micróbios podem ser depositados sobre superfícies (por exemplo, superfícies sólidas, superfícies de equipamentos, vestuário, etc.) por indivíduos infectados ou por outros meios. Uma vez que uma superfície se torna contaminada com micróbios, o contato com a superfície contaminada pode facilmente e prontamente transferir estes micróbios para outros locais, como outra superfície, um indivíduo, equipamentos, alimentos ou similares.
[004] Como é de conhecimento geral, a contaminação e a transferência microbiana em certos ambientes podem representar riscos
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2/46 significativos para a saúde. Por exemplo, o alimento que deixa uma fábrica de processamento de alimentos será subsequentemente comido, e pode causar doenças e, possivelmente, morte. Micro-organismos como Listeria monocytogenes, Salmonella enteriditis, e Escherichia coli O157:H7 são de particular preocupação.
[005] A contaminação microbiana é de preocupação em estabelecimentos de cuidado com a saúde, uma vez que alguns dos pacientes de tais estabelecimentos sofrem, com frequência, de infecções causadas por micróbios patogênicos e, dessa forma, introduzem os micróbios patogênicos em tais estabelecimentos. Além disso, muitas pessoas que estão presentes em tais estabelecimentos (os pacientes, por exemplo) encontramse enfermas e podem apresentar deficiência imunológica. Esses indivíduos estão, dessa forma, em grande risco de contrair doenças por infecção com micróbios contaminadores.
[006] Em vista dos perigos potenciais representados pela contaminação microbiana, em particular a facilidade com que os micróbios podem se transferir em certos ambientes e os danos à saúde associados à contaminação de certos ambientes, uma variedade de técnicas foram desenvolvidas e empregadas para detectar tal contaminação de modo que esta possa ser prontamente remediada.
[007] Convencionalmente, os testes microbianos do ambiente incluem a obtenção de uma amostra de uma superfície. Isto é tipicamente feito pelo contato (por exemplo, por enxugamento, esfregamento, etc.) com a superfície por meio de um dispositivo esterilizado de coleta, como um chumaço ou uma esponja. As superfícies que são testadas dessa maneira são geralmente bastante limpas; dessa forma, o número de micro-organismos que são coletados pelo dispositivo de coleta é tipicamente bastante baixo. Devido ao reduzido número de micro-organismos, quaisquer micróbios que estão (por exemplo,
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3/46 coletados) no dispositivo de coleta tipicamente precisam ser reproduzidos, ou crescidos ou cultivados, para se fornecer um número suficiente de organismos para análise adicional. Consequentemente, pelo menos uma porção da amostra é, então, tipicamente neutralizada e, opcionalmente, estabilizada, reparada ou enriquecida, então aplicada (por exemplo, por transferência, esfregamento, imersão e agitação, etc.) a um meio de crescimento adequado (por exemplo, ágar (uma gelatina ou material semelhante a gelatina), caldo (um líquido), etc.), que inclui nutrientes que ajudarão os micróbios de interesse a crescerem. O meio de crescimento pode ser seletivo, o que significa que o meio de crescimento pode incluir ingredientes que ajudarão alguns micro-organismos a crescerem em velocidades mais rápidas do que outros micróbios ou pode incluir ingredientes que evitarão o crescimento de pelo menos alguns micróbios indesejados. O meio de crescimento é incubado ou mantido a certa temperatura durante um período de tempo predeterminado, tipicamente cerca de 24 a cerca de 48 horas, ou até que o crescimento microbiano seja nitidamente perceptível.
[008] Depois de a amostra ter tido uma oportunidade suficiente para o crescimento, a quantidade de bactérias (por exemplo, o número de colônias sobre uma placa de ágar) que cresceram pode, então, ser avaliada (por exemplo, por um indivíduo ou com um equipamento automatizado) para fornecer alguma indicação do número e tipo de micróbios que estavam presentes em certa área da superfície no momento em que a amostra foi coletada - geralmente um dia ou dois antes. Teste imunológico ou de outro tipo pode também ser realizado para se determinar ou confirmar a identidade ou identidades de quaisquer micróbios de interesse que estavam presentes na amostra.
[009] Por exemplo, ao se realizar um teste para uma espécie salmonela de bactérias, uma amostra que potencialmente inclua a salmonela pode ser aplicada a um meio de crescimento seletivo. O meio de crescimento seletivo
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4/46 pode, então, ser incubado durante um período de cerca de 24 a cerca de 48 horas até que o crescimento dos micróbios do tipo salmonela se torne visível. Uma vez que as colônias de salmonela estejam visivelmente presentes no meio de crescimento seletivo, as colônias podem ser avaliadas para a confirmação de suas identidades, e, opcionalmente, contadas para uma estimativa do número de microorganismos da salmonela presentes em certa área da superfície testada. Alternativamente, os micro-organismos cultivados podem ser sujeitos a um imunoteste ou teste de ácido nucleico para que se confirmem, mais diretamente, suas identidades.
[0010] Testes mais simples, rápidos e precisos em relação aos organismos ambientais são necessários. Esta invenção fornece dispositivos e métodos para esses testes.
Sumário [0011] Em um aspecto, a invenção apresentada inclui um artigo para coletar amostras e detectar micro-organismos de superfície. O artigo pode incluir um coletor de amostras substancialmente isento de agentes hidrofílicos e uma tira reagente fixada ao mesmo. O coletor de amostras pode incluir um substrato com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos uma superfície principal é impermeável à água e sendo que pelo menos uma superfície principal compreende um material poroso. A tira reagente pode incluir um substrato autossuportado com superfícies principais inferior e superior, sendo que pelo menos parte de uma superfície principal é revestida com um agente gelificante solúvel em água fria e um agente hidrofílico selecionado do grupo consistindo em um nutriente para o crescimento de micro-organismos, um agente seletivo, um tampão, um indicador, e combinações de dois ou mais dos mencionados anteriormente. Opcionalmente, o artigo pode incluir também uma camada de barreira.
[0012] Em outro aspecto, a invenção inclui um artigo para a
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5/46 detecção ou contagem de micro-organismos. O artigo pode incluir um elemento de fundo e uma folha de cobertura fixada ao mesmo. O elemento de fundo pode incluir um substrato autossuportado impermeável à água com superfícies principais superior e inferior sendo que a superfície principal superior compreende uma estrutura de fixação. A folha de cobertura pode incluir superfícies principais superior e inferior sendo que pelo menos parte da superfície principal inferior da folha de cobertura é revestida com um pó solúvel em água fria incluindo pelo menos um agente gelificante. A superfície principal superior do elemento de fundo fica de frente para a superfície principal inferior da folha de cobertura [0013] Em outro aspecto, a invenção inclui um coletor de amostras para a coleta de amostras de uma superfície ambiental. O coletor de amostras pode incluir um substrato com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos uma superfície principal é impermeável à água, sendo que pelo menos uma superfície principal compreende um material poroso, e sendo que o coletor de amostras é substancialmente isento de agentes hidrofílicos.
[0014] Em outro aspecto, a invenção inclui um compartimento de amostras que compreende um elemento de fundo, um espaçador, uma folha de cobertura e uma camada de barreira resistente à água. O elemento de fundo pode incluir um substrato autossuportado impermeável à água com superfícies principais superior e inferior. O espaçador pode incluir uma abertura e deve aderir à superfície superior do elemento de fundo. A folha de cobertura pode incluir um substrato com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos parte de uma superfície principal é revestida com um pó solúvel em água fria incluindo pelo menos um agente gelificante. A camada de barreira resistente à água é posicionada entre a folha de cobertura e o espaçador de modo que uma superfície revestida da folha de cobertura fica de frente para a camada de barreira.
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6/46 [0015] Em outro aspecto, a invenção inclui uma tira reagente para a detecção de micro-organismos. A tira reagente inclui um substrato autossuportado com superfícies principais superior e inferior e um revestimento seco sobre pelo menos uma parte das duas superfícies principais. O revestimento pode incluir um agente hidrofílico que compreende um nutriente para o crescimento de micro-organismos bem como um indicador e um agente gelificante solúvel em água fria.
[0016] Em outro aspecto, a invenção inclui um kit para a coleta de amostras e para a detecção de micro-organismos de superfície. O kit pode incluir um coletor de amostras e uma tira reagente. O coletor de amostras é substancialmente isento de agentes hidrofílicos e pode incluir um substrato impermeável à água com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos uma superfície principal compreende um material poroso. A tira reagente pode incluir um substrato autossuportado com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos parte de uma superfície principal é revestida com um agente gelificante solúvel em água fria e um agente hidrofílico selecionado do grupo consistindo em um nutriente para o crescimento de micro-organismos, um agente seletivo, um tampão, um indicador e combinações de dois ou mais dos mencionados anteriormente.
[0017] Em outro aspecto, a invenção inclui um kit para coleta e contagem de micro-organismos. O kit pode incluir um coletor de amostras, um compartimento de amostras e, opcionalmente, uma tira reagente. O coletor de amostras pode incluir um substrato com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos uma superfície principal é impermeável à água. O compartimento de amostras pode incluir um elemento de fundo e uma folha de cobertura. O elemento de fundo pode incluir um substrato autossuportado impermeável à água com superfícies principais superior e inferior. A folha de cobertura pode incluir um substrato com superfícies principais superior e
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7/46 inferior, sendo que pelo menos parte de uma superfície principal é revestida com um pó solúvel em água fria incluindo pelo menos um agente gelificante.
[0018] Em outro aspecto, a invenção inclui um kit para coleta e contagem de micro-organismos. O kit pode incluir um coletor de amostras, uma folha de cobertura e um elemento de fundo. O coletor de amostras consiste essencialmente em um substrato com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos uma superfície principal é impermeável à água. A folha de cobertura pode incluir um substrato com superfície superior e inferior principais, sendo que pelo menos parte de uma superfície principal é revestida com um pó solúvel em água fria incluindo pelo menos um agente gelificante. O elemento de fundo pode incluir um substrato autossuportado impermeável à água com superfícies superior e inferior e uma estrutura de fixação.
[0019] Em outro aspecto, a invenção inclui um método de detecção de micro-organismos sobre uma superfície ambiental. O método pode incluir o fornecimento de um meio líquido para suspensão de amostra, coletor de amostras, um compartimento de amostras e uma tira reagente. O coletor de amostras pode incluir um substrato com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos uma superfície principal é impermeável à água. O compartimento de amostras pode incluir um elemento de fundo e uma folha de cobertura que compreende um substrato com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos parte de uma superfície principal da folha de cobertura é revestida com um pó solúvel em água fria incluindo pelo menos um agente gelificante. A tira reagente pode incluir um substrato autossuportado com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos parte de uma superfície principal é revestida com um agente gelificante solúvel em água fria e um agente hidrofílico selecionado do grupo consistindo em um nutriente para o crescimento de micro-organismos, um agente seletivo, um tampão, um indicador e combinações de dois ou mais dos mencionados anteriormente. O método pode
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8/46 incluir, adicionalmente, a obtenção de uma amostra em pelo menos uma superfície principal do coletor de amostras, formando um conjunto ao se colocar o coletor de amostras dentro do compartimento de amostras com pelo menos uma superfície principal compreendendo a amostra orientada em direção à folha de cobertura, ao se aplicar o meio de suspensão de amostra à superfície principal do coletor de amostras compreendendo a amostra, estabelecendo contato da superfície inferior da folha de cobertura com o meio de suspensão de amostra para formar um gel hidratado, colocando uma superfície revestida da tira reagente em contato com o gel hidratado, incubando o conjunto durante certo período de tempo, e observando um indicador do crescimento microbiano [0020] Em outro aspecto, a invenção inclui um método de detecção de micro-organismos sobre uma superfície ambiental. O método pode incluir o fornecimento de uma camada de barreira, um meio de suspensão de amostra, um coletor de amostras, um compartimento de amostras e uma tira reagente. O coletor de amostras pode incluir um substrato com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos uma superfície principal é impermeável à água. O compartimento de amostras pode incluir um elemento de fundo que compreende um substrato autossuportado impermeável à água com superfícies principais superior e inferior e uma folha de cobertura que compreende um substrato com superfícies principais superior e inferior, sendo que pelo menos parte de uma superfície principal é revestida com um pó solúvel em água fria incluindo pelo menos um agente gelificante. O método adicionalmente pode incluir a obtenção de uma amostra em pelo menos uma superfície principal do coletor de amostras; a formação de um conjunto ao se colocar o coletor de amostras dentro do compartimento de amostras com pelo menos uma superfície principal compreendendo a amostra orientada em direção à folha de cobertura; a aplicação do meio de suspensão de amostra à superfície principal do coletor de amostras compreendendo a amostra; a incubação do compartimento de
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9/46 amostras durante certo período de tempo; a remoção de pelo menos uma porção da camada de barreira do compartimento de amostras; a colocação da superfície inferior da folha de cobertura em contato com o meio de suspensão de amostra para formar um gel hidratado; a colocação da superfície revestida da tira reagente em contato com o gel hidratado; a incubação do conjunto durante certo período de tempo; e a observação de um indicador de crescimento microbiano.
[0021] Em outro aspecto, a invenção fornece um método de detecção da Listeria sp em uma amostra ambiental. O método pode incluir o fornecimento de um coletor de amostras com uma superfície, um meio de suspensão de amostra e uma tira reagente; a obtenção de uma amostra na superfície do coletor de amostras; a hidratação da amostra ou da tira reagente; e a colocação da tira reagente em contato com a amostra. A tira reagente inclui um revestimento seco que pode incluir um agente hidrofílico que compreende um nutriente para o crescimento de micro-organismos, um indicador e um agente gelificante solúvel em água fria [0022] Em outro aspecto, a invenção fornece um método de detecção da Listeria sp em uma amostra ambiental. O método pode incluir o fornecimento de um coletor de amostras com uma superfície, um meio de suspensão de amostra, um compartimento de amostras e uma tira reagente; a obtenção de uma amostra na superfície do coletor de amostras; a colocação do coletor de amostras no compartimento de amostras; a hidratação da amostra ou da tira reagente; e a colocação da tira reagente em contato com a amostra. A tira reagente pode incluir um revestimento seco que inclui um agente hidrofílico que compreende um nutriente para o crescimento de microorganismos, um indicador e um agente gelificante solúvel em água fria.
[0023] As palavras preferencial e de preferência referem-se às modalidades da invenção que podem proporcionar certos benefícios, sob certas circunstâncias. Entretanto, outras modalidades podem, também, ser preferenciais
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10/46 sob as mesmas ou outras circunstâncias. Além disso, a recitação de uma ou mais modalidades preferenciais não implica no desuso de outras modalidades e não tem a intenção de excluir outras modalidades do escopo da invenção.
[0024] Os termos compreende e as variações do mesmo não têm um significado limitador, sendo que esses termos aparecem na descrição e nas reivindicações.
[0025] Para uso na presente invenção, um, uma, o, a, ao menos um, ao menos uma, um ou mais e uma ou mais são usados de maneira intercambiável. Dessa forma, por exemplo, um compartimento de amostras que compreende uma camada de barreira pode ser interpretado com o significado de que o compartimento de amostras pode incluir uma ou mais camadas de barreira.
[0026] O termo e/ou significa um ou todos os elementos mencionados ou uma combinação de quaisquer dois ou mais dos elementos listados.
[0027] Para uso na presente invenção, as recitações de faixas numéricas de números inteiros incluem todos os números inclusos dentro desta faixa (por exemplo, 1 a 5 inclui 1, 1,5, 2, 2,75, 3, 3,80, 4, 5, etc.).
[0028] O sumário da presente invenção, apresentado acima, não se destina a descrever cada uma das modalidades apresentadas ou todas as implementações da presente invenção. A descrição a seguir exemplifica mais particularmente as modalidades ilustrativas. Em diversos lugares, durante a aplicação, a orientação é fornecida através de listas de exemplos, nas quais os exemplos podem ser usados de várias maneiras. Em cada instância, a lista recitada serve apenas com um grupo representativo e não deve ser interpretada como uma lista exclusiva.
Breve Descrição dos Desenhos [0029] A invenção será explicada com mais detalhes com
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11/46 referência às figuras listadas abaixo, nas quais estruturas similares são indicadas por números similares em todas as várias vistas.
[0030] A figura 1 é uma vista em perspectiva de uma modalidade exemplificadora de um coletor de amostras, de acordo com a presente invenção.
[0031] A figura 2A é uma vista em perspectiva superior de uma modalidade exemplificadora de um coletor de amostras texturizado, de acordo com a presente invenção.
[0032] A figura 2B é uma vista em perspectiva de uma modalidade exemplificadora de um coletor de amostras que compreende um material poroso, de acordo com a presente invenção.
[0033] A figura 3A é uma vista esquemática em seção transversal de uma modalidade exemplificadora de um compartimento de amostras que compreende um espaçador, de acordo com a presente invenção.
[0034] A figura 3B é uma vista plana do compartimento da amostra da figura 3A.
[0035] A figura 4 é uma vista esquemática em seção transversal de uma modalidade de artigo para coleta de amostras e contagem de microorganismos.
[0036] A figura 5 é uma vista esquemática em perspectiva de uma modalidade de tira reagente, de acordo com a presente invenção.
[0037] A figura 6 é uma vista esquemática em seção transversal de uma modalidade alternativa de artigo para coleta de amostras e contagem de micro-organismos.
[0038] A figura 7 é uma vista esquemática em seção transversal de uma modalidade alternativa de artigo para coleta de amostras e contagem de micro-organismos.
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12/46 [0039] A figura 8 é uma vista esquemática em seção transversal de uma modalidade alternativa de artigo para coleta de amostras e contagem de micro-organismos.
Descrição Detalhada [0040] A presente descrição apresenta artigos e métodos para coleta de amostras em superfícies, temporariamente armazenando a amostra, e para o crescimento e detecção de micro-organismos presentes na amostra. Conforme discutido, em detalhes, a seguir, os dispositivos da invenção incluem os elementos individuais de um coletor de amostras, um compartimento de amostras, uma tira reagente, uma camada de barreira, combinações de dois ou mais dos elementos anteriormente mencionados e métodos para o uso de tais dispositivos. A presente descrição também inclui kits para coleta de amostras em superfícies e para a detecção de micro-organismos bem como os métodos para o uso de tais kits. Alguns procedimentos tradicionais de coleta de amostra microbiana em superfícies envolvem um procedimento de enriquecimento da cultura, após o qual uma fração da cultura de enriquecimento é testada em relação aos micro-organismos-alvo, com o uso de procedimentos subsequentes de teste bioquímico, imunológico ou genético. Outros procedimentos tradicionais de coleta de amostra microbiana em superfícies usam uma esponja ou chumaço umedecido para friccionar a superfície. A esponja é subsequentemente extraída portando tampão neutralizante ou meio de crescimento, e a porção dos micro-organismos-alvo que pode ser extraída da esponja ou do chumaço é testada quanto à presença de micro-organismosalvo. Em contraste, os dispositivos e métodos da presente descrição fornecem meios para testar todo o coletor de amostra original e, por meio disso, têm mais probabilidade de detectar a presença de números muito baixos de microorganismos em uma superfície. Além disso, os dispositivos e métodos da presente descrição são mais simples e mais convenientes do que os métodos
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13/46 tradicionais de detectar organismos em uma amostra de superfície.
[0041] Os dispositivos da presente descrição fornecem um aprimoramento notável quando comparados aos dispositivos e métodos da técnica anterior que dependiam de métodos tradicionais com o uso de placas de ágar bem como outros tipos de testes microbiológicos. Os meios aplicados como revestimento aos dispositivos da presente invenção não contêm matrizes que afetariam, de modo adverso, nossa habilidade de visualizar e isolar colônias bacterianas. Não apenas os meios fornecidos pelos métodos e dispositivos da presente invenção permitirão a contagem das colônias bacterianas que crescem nos dispositivos, mas as colônias poderão ser facilmente isoladas para testes adicionais do mesmo modo que as colônias bacterianas que crescem no meio de ágar convencional em uma placa de petri. Os dispositivos têm a característica adicional de serem muito mais compactos e leves do que as placas de petri e ocuparem menos espaço no laboratório. Além disso, os dispositivos são completamente descartáveis, o que proporciona uma limpeza mais segura e rápida após o uso.
Coletor de Amostras [0042] A figura 1 ilustra uma modalidade de coletor de amostras 110 que tem um substrato relativamente liso 112 para colher amostras em uma superfície ambiental ou em uma superfície de paciente. O substrato 112 tem uma superfície principal superior 114 e uma superfície principal inferior 116. Pelo menos uma das superfícies principais do substrato 112 é impermeável à água e/ou pode compreender um revestimento impermeável à água. Em algumas modalidades, o coletor de amostras 110 é relativamente flexível, o que permite que se adapte a superfícies desiguais e mantenha contato com elas. Pelo menos uma das superfícies principais do coletor de amostras 110 é colocada em contato com a área da amostra para efetuar a transferência de material, como líquidos, sólidos, semissólidos ou
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14/46 combinações dos mesmos, da área da amostra para o coletor de amostras 110. O coletor de amostras 110 pode ser usado para coletar material de uma área da amostra, como uma superfície de contato com alimentos ou um ferimento superficial, que deve ser analisada.
[0043] O substrato 112 do coletor de amostras 110 pode ser construído de vários materiais. Alguns exemplos não-limitadores de materiais adequados incluem filmes plásticos, como polietileno, polipropileno ou poliéster; materiais celulósicos, como papel ou cartolina, que compreendem um revestimento ou uma composição que torna pelo menos uma superfície principal impermeável à água; espumas, como espuma de polietileno ou poliestireno; ou tecidos que têm pelo menos uma superfície principal que é impermeável à água.
[0044] Em algumas modalidades, pelo menos uma superfície principal do coletor de amostras 110 é texturizada. Para uso na presente invenção, a palavra texturizado refere-se ao perfil da superfície que é usado para coletar o material de amostra. Por exemplo, a textura das superfícies principais do coletor de amostras 110 pode ser relativamente lisa, conforme ilustrado na figura 1. Alternativamente, a textura das superfícies principais do coletor de amostras 110 podem ser relativamente ásperas. A figura 2A ilustra uma modalidade de coletor de amostras 210 que inclui uma superfície principal 214 com uma textura relativamente áspera. Nessa modalidade, o substrato 212 pode compreender uma combinação de estruturas elevadas 218 e de estruturas 220 que formam reentrâncias. Alternativamente, o substrato 212 pode compreender estruturas elevadas 218 ou estruturas 220 que formam reentrâncias. Estruturas elevadas 218 podem estar presentes em vários tamanhos e podem estar presentes em diversos formatos, como lombadas, aros, cristas e similares, ou combinações dos mesmos. As estruturas elevadas 218 podem ser distribuídas de modo aleatório na superfície do substrato 212 ou,
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15/46 alternativamente, podem ser espaçadas uniformemente umas das outras. As estruturas 220 que formam reentrâncias podem estar presentes em vários tamanhos e podem estar presentes em diversos formatos, como orifícios, covas, sulcos, rebaixos, canaletas, microcanaletas e similares, ou combinações dos mesmos. As estruturas 218 elevadas ou as estruturas 220 que formam reentrâncias podem ser parte integral do material de substrato 212 do qual o coletor de amostras 210 é feito. Alternativamente, as estruturas podem ser conectadas ao substrato 212. Sem se ater à teoria, crê-se que um coletor de amostras 210 que compreende ou estruturas elevadas 218 ou estruturas que formam reentrâncias 220 pode proporcionar uma vantagem na coleta de material de amostra de uma superfície ambiental ou de uma superfície de paciente ao fornecer estruturas que podem capturar material de amostra e/ou raspar e coletar material da superfície da qual de deseja tirar amostras. Também ilustrada na figura 2A encontra-se uma aba opcional 228, que fornece uma área conveniente na qual se pode prender o coletor de amostras 210 durante a coleta da amostra.
[0045] A figura 2B ilustra um coletor de amostras 210 com uma superfície texturizada alternativa. O coletor de amostras 210 pode compreender um material ligado 224, como um não-tecido, colado a uma superfície principal do substrato 212 por meio de uma camada adesiva 222. A camada adesiva 222 pode ser insolúvel em água, deve ser não-inibitória ao crescimento dos microorganismos, e deve ser capaz de suportar o processo de esterilização. De preferência, a camada adesiva 222 e o material ligado 224 são suficientemente transparentes quando molhados para capacitar a visualização de colônias bacterianas através do substrato 212 revestido com a camada adesiva 222. Em algumas modalidades, a camada adesiva 222 inclui um adesivo sensível à pressão. Uma modalidade exemplificadora de um material ligado 224 colado ao substrato 212 inclui um material não-tecido, como um não-tecido de malha em
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16/46 forma de laço obtido junto à Gehring Textiles, Inc. (Garden City, NY, EUA) ou um filtro de fibra de vidro, colado a um substrato plástico 212, como poliéster branco (com 5 mil (0,13 mm) de espessura), por meio de uma camada adesiva sensível à pressão 222, como um adesivo copolímero de acrilato de isooctila/ácido acrílico, de alta pressão, do tipo percevejo (96%, em peso, de acrilato de isooctila e 4%, em peso, de ácido acrílico). Alternativamente, o material ligado 224 pode compreender outros materiais texturizados, como espumas (por exemplo, espuma de poliuretano), tecidos, ou materiais celulósicos (por exemplo, papel filtro). Também mostrada na figura 1C está uma aba 228, que é convenientemente removível do coletor de amostras 210 por meio de uma perfuração 226.
O Compartimento de Amostras [0046] O compartimento de amostras é um artigo dentro do qual um coletor de amostras, com material de amostra disposto sobre o mesmo, pode ser colocado e, opcionalmente, armazenado durante certo período de tempo. O compartimento de amostras pode ser usado, além disso, como um artigo ao qual soluções e/ou reagentes podem ser adicionados para facilitar o crescimento, detecção ou contagem de micro-organismos. Em certas modalidades, o compartimento de amostras pode ser usado como um artigo no qual uma amostra é incubada com uma tira reagente e/ou reagentes para facilitar o crescimento, detecção ou contagem de micro-organismos.
[0047] A figura 3A ilustra um compartimento de amostras 360 exemplificador. O compartimento de amostras 360 compreende um elemento de fundo 350, uma camada de barreira 370 e uma folha de cobertura 330.
[0048] O elemento de fundo 350 compreende um substrato autossuportado impermeável à água 352 com superfícies principais superior e inferior. O elemento de fundo 350 é, de preferência, um material relativamente rígido como filme de poliéster, polipropileno ou poliestireno, que não será absorvido nem, de outro modo, afetado pela água. Por exemplo, filmes de
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17/46 poliéster de aproximadamente 0,004 a 0,007 polegadas (0,1-0,2 mm) de espessura, filmes de polipropileno de aproximadamente 0,004 a 0,008 polegadas (0,1-0,2 mm) de espessura e filmes de poliestireno de aproximadamente 0,015 polegadas (0,38 mm) de espessura devem servir bem. Outros substratos adequados incluem papel com um revestimento de polietileno ou outro revestimento à prova d'água. O elemento de fundo 350 pode ser ou transparente ou opaco, dependendo do modo como se deseja visualizar as colônias bacterianas através do elemento de fundo 350. Para facilitar a contagem de colônias bacterianas, o elemento de fundo 350 pode ter um padrão sob forma de grade quadrada estampado sobre o mesmo conforme descrito na patente U.S. n° 4.565.783, que é incorporada na presente descrição a título de referência. Os materiais usados para construir o elemento de fundo 350 devem ser relativamente inertes de micro-organismos e devem ser compatíveis com o processo de esterilização.
[0049] Nesta modalidade, o elemento de fundo 350 compreende adicionalmente uma camada adesiva 354 disposta sobre a superfície superior do substrato 352 e um espaçador 356. A camada adesiva 354 forma um acoplamento entre o espaçador 356 e o substrato 352. A camada adesiva 354 deve ser selecionada de acordo com as diretivas para a camada adesiva 222 do coletor de amostras 210 descritas acima. O espaçador 356, que compreende uma abertura 357, deve ser construído de um material insolúvel em água. As paredes da abertura 357 formam uma cavidade de tamanho e formato predeterminados para confinar um determinado volume de meio líquido adicionado ao compartimento de amostras 360. O espaçador 356 deve ser suficientemente espesso e a abertura 357 grande o bastante para formar uma cavidade do volume desejado, por exemplo, 1 mililitro, 2 mililitros, 3 mililitros ou 5 mililitros. Espuma de polietileno de célula fechada ou espuma de poliestireno são materiais adequados para o espaçador 356, mas qualquer material que é hidrofóbico (que não se molha),
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18/46 inerte de micro-organismos e, de preferência, capaz de suportar um processo de esterilização pode ser usado. Conforme ilustrado na figura 3A, o fundo da cavidade formada pela abertura 357 pode compreender uma camada adesiva 354, que pode ser usada para prender um coletor de amostras (não mostrado na figura 3A). Alternativamente, o fundo da cavidade formado pela abertura 357 pode compreender estruturas de fixação (descritas a seguir) ou pode prescindir da camada adesiva 354 ou das estruturas de fixação.
[0050] Fixada à superfície superior do espaçador 356 está uma camada de barreira 370. Nesta modalidade, o espaçador 356 e a camada de barreira 370 são unidos por uma fita adesiva de dupla-face 340. A camada de barreira 370 deve ser resistente à água. A camada de barreira 370 é, de preferência, transparente para permitir a observação dos objetos localizados sob a camada de barreira 370 e é substancialmente impermeável às bactérias, água e vapor d'água. Em geral, a camada de barreira 370 pode ter as mesmas propriedades que o elemento de fundo 350, mas não precisa ser tão rígida. Materiais exemplificadores da camada de barreira 370 incluem, por exemplo, filme de polipropileno (por exemplo, 1,6 mil de polipropileno biaxialmente orientado (BOPP)) ou filme de polietileno. Em uma outra referência à figura 3A, a camada de barreira 370 é mostrada com uma perfuração opcional 372, que pode ser facilmente alargada para permitir a remoção de pelo menos uma parte da camada de barreira 370 do compartimento de amostras 360. A camada de barreira 370 também é mostrada com uma extensão opcional, ou aba 374, que permite que a camada de barreira 370 seja facilmente empunhada para alargar a perfuração 372.
[0051] Fixada à superfície superior da camada de barreira 370 está uma folha de cobertura 330. A camada de barreira 370 e a folha de cobertura 330 são unidas por uma fita adesiva de dupla-face 340. A fixação do espaçador 356 à camada de barreira 370 e à folha de cobertura 330 próximo à
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19/46 borda do compartimento de amostra 360 convenientemente forma uma região de dobradiça 345 que permite que a camada de barreira 370 e/ou a folha de cobertura 330 sejam levantadas, dessa forma expondo as porções internas do compartimento de amostra 360, enquanto retêm o alinhamento das partes componentes. Certas misturas adesivas de baixa-adesão, como as descritas na patente U.S. n° 5.118.750, podem ser usadas em pelo menos um lado da fita adesiva de dupla-face 340 para formar um acoplamento removível entre os elementos (por exemplo, folha de cobertura, camada de barreira e elemento de fundo). A folha de cobertura 330 e a camada de barreira 370 podem, alternativamente, ser unidas ao elemento de fundo 350 por outros meios, por exemplo por soldagem ultrassônica, com presilhas ou grampeamento.
[0052] A folha de cobertura 330 compreende um substrato 332 com superfícies principais superior e inferior. Aplicada como revestimento sobre pelo menos parte da superfície principal inferior (voltada para a camada de barreira 370) está uma camada adesiva 334. Um pó solúvel em água fria 336 incluindo pelo menos um agente gelificante é colado à camada adesiva 334. Alternativamente, pelo menos uma porção da folha de cobertura 330, como a região de dobradiça 345, pode ser revestida com somente um adesivo ou pode estar substancialmente isenta de qualquer tipo de revestimento.
[0053] A camada adesiva 334 deve ser aplicada como revestimento à folha de cobertura 330 em uma espessura que é, de preferência, menor que o diâmetro das partículas do agente gelificante e/ou nutrientes em pó. O objetivo é aplicar adesivo suficiente à camada adesiva 334 para aderir as partículas ao substrato, mas não tanto que as partículas se tornem completamente encaixadas no adesivo. Uma camada única e uniforme de pó 336 é desejada com área de superfície suficiente exposta para a hidratação. Em geral, uma camada adesiva 334 na faixa de espessura de 0,0002 a 0.0005 polegadas (0,005-0,012 mm) é adequada. Um adesivo
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20/46 exemplificador usado na camada adesiva 334 é um copolímero de acrilato de isooctila/acrilamida (em uma razão molar de 94/6). Outros adesivos sensíveis à pressão que podem ser usados incluem acrilato de isooctila/ácido acrílico (em uma razão molar de 95/5 ou 94/6) e borracha de silicone. Adesivos que se tornam leitosos quando expostos à água são menos preferíveis, mas podem ser usados em conjunto com um substrato não transparente ou onde a visualização das colônias não seja necessária.
[0054] Uma camada única de pó solúvel em água fria 336 é colada uniformemente à camada adesiva 334. O pó 336 pode compreender um agente gelificante ou uma mistura de agentes gelificantes. Conforme usado no relatório descritivo e nas reivindicações, o termo pó designa um material em partículas finamente dividido com um diâmetro médio menor que 400 micrômetros. Conforme usado no relatório descritivo e nas reivindicações, o termo solúvel em água fria designa um material que forma uma solução em água à temperatura ambiente. Agentes gelificantes adequados para inclusão no pó 336 incluem tanto agentes gelificantes naturais quanto sintéticos, que formam soluções em água à temperatura ambiente. Agentes gelificantes como hidroxietil celulose, carboximetil celulose, poliacrilamida, goma de alfarrobeira e algina, formam soluções em água à temperatura ambiente e são agentes gelificantes adequados para fornecer pós que são solúveis em água fria. Os agentes gelificantes preferenciais para o pó 336 são goma guar e goma de xantana, esses agentes gelificantes sendo úteis individualmente ou em cominação um com o outro.
[0055] O agente gelificante está, de preferência, presente em uma quantidade suficiente para formar um gel substancialmente transparente que tem uma viscosidade de Brookfield de pelo menos 1500 cps. Uma quantidade suficiente do agente gelificante deve ser colada à folha de cobertura 330 de modo que uma quantidade predeterminada de água ou de
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21/46 uma amostra aquosa, por exemplo, 1-3 mililitros, colocada no compartimento de amostras 360 forme um gel que tem uma viscosidade de cerca de 1500 cps ou mais quando medida a 60 rpm com um viscômetro Brookfield modelo LVF a 25°C. Os géis com essa viscosidade permitirão manuseio e empilhamento convenientes, e proporcionarão uma distinta identificação de colônia. Na maioria dos casos, 0,025 a 0,050 gramas de goma guar sobre uma área de superfície de 3,14 polegadas2 (5,07 cm2) fornecerão um gel suficientemente viscoso quando hidratado com 1-3 mililitros de uma amostra aquosa. O tamanho das partículas de pó 336 pode ser usado para controlar o peso de revestimento por unidade de área. Por exemplo, aproximadamente 100 camadas de revestimento com goma guar sob a forma de rede sobre um peso de cerca de 0,05 gramas/disco com diâmetro de 2 polegadas (5,1 cm); e 400 camadas de revestimento com goma guar sob a forma de rede a um peso de cerca de 0,025 gramas/disco com diâmetro de 2 polegadas (5,1 cm).
[0056] A folha de cobertura 330 fornece um meio para cobrir o compartimento da amostra 360 para evitar a contaminação durante a armazenagem da amostra e/ou incubação. A folha de cobertura 330 pode ser uma lâmina resistente à água, fixada, direta ou indiretamente, de um modo semelhante a uma região de dobradiça, a uma borda do elemento de fundo 350. A folha de cobertura 330 é, de preferência, transparente para facilitar a contagem das colônias bacterianas, e é substancialmente impermeável às bactérias e ao vapor d'água. Para uso na presente invenção, substancialmente impermeável às bactérias e ao vapor da umidade designa uma folha de cobertura 330 que evita a contaminação indesejada do compartimento de amostras 360 durante o envio, armazenamento e uso dos dispositivos, e que oferece um ambiente que dará suporte ao crescimento de micro-organismos durante o período de incubação. Em geral, esta pode ter as mesmas propriedades do elemento de fundo 350, mas não necessita ser tão rígida. A
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22/46 folha de cobertura 330 pode ser selecionada para fornecer a quantidade de transmissão de oxigênio necessária para o tipo de micro-organismo que se deseja crescer. Por exemplo, os filmes de poliéster têm baixa permeabilidade ao oxigênio (menos que 5 g/100 polegadas2 (645 cm2)/24 horas por 0,001 polegadas (0,025 mm) de espessura) e seriam adequados para o crescimento de bactérias anaeróbicas. Por outro lado, o polietileno tem uma permeabilidade muito alta ao oxigênio (aproximadamente 500 g/100 polegadas2 (645 cm2)/24 horas por 0,001 polegada (0,025 mm) de espessura) e seria adequado para os organismos aeróbicos. Um material preferencial para a folha de cobertura 330 é um filme de polipropileno biaxialmente orientado de 1,6 mil.
[0057] A folha de cobertura 330 pode ser simplesmente levantada, um meio líquido para suspensão de amostra pode ser colocado sobre o substrato e a folha de cobertura 330 pode ser, então, devolvida a sua posição original, dessa forma vedando o meio gelificado em seu interior. A folha de cobertura 330 é, de preferência, transparente para permitir que as colônias bacterianas sejam vistas. Os materiais usados para formar a folha de cobertura 330 podem ser convenientemente selecionados para se obter a desejada permeabilidade a gases como o oxigênio.
[0058] A figura 3B mostra uma vista superior do compartimento de amostras 360 da figura 3A. A região de dobradiça 345 é localizada ao longo da borda superior do compartimento de amostras 360. A perfuração opcional 372 é adjacente à região de dobradiça 345. A abertura circular 357 no espaçador 356 é localizada na região central do compartimento de amostras 360. A aba 374 da camada de barreira 370 pode ser vista se estendendo além da borda da folha de cobertura 330 na extremidade do compartimento de amostras 360 em posição oposta à região de dobradiça 345.
[0059] A figura 4 ilustra uma modalidade alternativa do
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23/46 compartimento de amostras 460. O compartimento de amostras 460 compreende folha de cobertura 430, camada de barreira 470 e partes do elemento de fundo 450, presas numa região de dobradiça 445, por exemplo, pela fita adesiva de dupla face 440. Nesta modalidade, o elemento de fundo 450 compreende um substrato 452 e uma estrutura de fixação 458 opcional. A estrutura de fixação 458 pode compreender um adesivo, um componente de um meio de fixação com gancho e laço, uma estrutura de manta e haste como os descritos na Publicação de Pedido de Patente U.S. η° 2003/0088946A, ou similares, que podem ser usados para segurar um coletor de amostras em seu lugar. A camada de barreira 470 pode compreender uma perfuração 472 e/ou uma aba 474, e pode ser construída conforme descrito acima. Em certas modalidades, a superfície principal inferior da camada de barreira 470 pode compreender um material de liberação, para evitar a adesão à estrutura de fixação 458. Revestimentos para liberação são conhecidos na técnica e são rotineiramente usados para reduzir a adesão entre adesivos e filmes plásticos. A folha de cobertura 430 compreende um substrato 432, camada adesiva 434 e pó 436, e pode ser construída conforme descrito acima.
Tira Reagente [0060] A figura 5 ilustra uma modalidade de uma tira reagente 580 de acordo com a presente invenção. A tira reagente 580 é composta de um substrato 582 com superfícies principais superior e inferior. Nesta modalidade, pelo menos uma parte das duas superfícies principais do substrato 582 é revestida com um adesivo opcional 584 e um agente hidrofílico 586. Em algumas modalidades, pelo menos uma parte de uma superfície principal do substrato 582 é revestida com o adesivo opcional 584 e/ou com o agente hidrofílico 586. Em algumas modalidades, a tira reagente 580 compreende uma aba opcional 588. A aba pode incluir uma perfuração opcional 589, que permite que a aba 588 seja separada da tira reagente 580.
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24/46 [0061] A detecção de micro-organismos em uma amostra envolve, com frequência, o uso de reagentes, como os agentes hidrofílicos, para promover o crescimento, inibir o crescimento e/ou detectar uma atividade metabólica de certos micro-organismos. Agentes hidrofílicos, para uso na presente invenção, incluem nutrientes (por exemplo, proteínas, peptídeos, carboidratos, vitaminas) em concentrações que podem ser usadas para promover o crescimento de certos micro-organismos, sais (por exemplo, NaCI, LiCI, telurito de potássio) ou inibidores (por exemplo, ácido naladíxico, aztreonam, outros antibióticos, corantes) em concentrações que podem ser usadas para seletivamente inibir o crescimento de certos micro-organismos, corantes ou indicadores (por exemplo, cloreto de trifeniltetrazólio, vermelho de clorofenol, azul de bromotimol, o-nitrofenilfosfato, 5-bromo-4-cloro-3-indolil-3glucopiranosídeo) em concentrações não-inibitórias que podem ser usadas para detectar atividade metabólica como uma atividade enzimática ou um processo de fermentação, e agentes gelificantes (por exemplo, ágar, goma de xantana, goma guar).
[0062] O adesivo 584 pode ser necessário durante a aplicação de certos agentes hidrofílicos 586, como pós, como revestimento sobre o substrato 582, conforme discutido acima. Em algumas modalidades, o agente hidrofílico 586 compreende um agente gelificante que, quando hidratado para formar um gel, pode ser aplicado como revestimento diretamente sobre o substrato 582. O substrato 582 pode ser selecionado a partir de inúmeros materiais, como os materiais descritos acima para a construção do elemento de fundo, da camada de barreira e da folha de cobertura. Em certas modalidades, o substrato 582 da tira reagente 580 é de sustentação independente. Em certas modalidades, o substrato 582 da tira reagente 580 pode ser substancialmente impermeável à água. Em modalidades alternativas, o substrato 582 da tira reagente 580 pode ser absorvente à água, como um papel-filtro ou uma
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25/46 espuma hidrofílica. Em certas modalidades, a tira reagente 580 pode ser construída a partir de papel revestido com polietileno e pode compreender uma grade estampada opcional (não mostrada) para facilitar a contagem de colônias de micro-organismos.
[0063] Pode ser desejável incorporar um corante aos agentes hidrofílicos 586 incluídos na tira reagente 580. O corante pode ser incorporado em um gel ou mistura de pós aplicados como revestimento sobre o substrato 582. Alternativamente, o corante pode ser incorporado ao adesivo 584. Corantes adequados são os que são metabolizados pelos microorganismos em crescimento, e que fazem com que as colônias sejam coloridas para uma visualização mais fácil. Exemplos de tais corantes incluem o cloreto de trifeniltetrazólio, o vermelho de p-tolil tetrazólio, o violeta de tetrazólio, o azul de veratril tetrazólio e os corantes com eles relacionados. Outros corantes adequados são aqueles sensíveis às alterações de pH, como o vermelho neutro ou o vermelho de clorofenol.
[0064] O material empregado no agente hidrofílico 586 sobre a tira reagente 580 é reconstituível em água fria. Para uso na presente invenção, reconstituível em água fria designa material que forma uma solução, sol ou gel em água à temperatura ambiente. Agentes gelificantes adequados para inclusão no revestimento desta modalidade (se estes são contidos no revestimento) incluem os agentes gelificantes descritos acima, como goma guar e goma de alfarrobeira, que formam soluções em água à temperatura ambiente.
[0065] A tira reagente pode ser usada para selecionar certos organismos para o crescimento, como os membros do gênero Listería. Nessas modalidades, os agentes hidrofílicos podem incluir uma combinação de nutrientes e inibidores seletivos que favorecem o crescimento da Listería sp em detrimento de outros micro-organismos que podem estar presentes na amostra de uma superfície. Por exemplo, a tira reagente pode incluir um digesto pancreático de
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26/46 caseína, uma peptona de proteose como a peptona de proteose número 3, extrato de levedura, um sistema de tamponagem como fosfato dissódico e fosfato de monopotássio, cloreto de sódio, cloreto de lítio, ácido naladíxico, acriflavina, moxalactama e sulfato de polimixina B em concentrações que são eficazes para dar suporte ao crescimento da Listeria sp e/ou inibir o crescimento dos que não pertencem à Listeria sp. A tira reagente pode incluir, também, um sistema indicador, como um substrato de enzima cromogênico (por exemplo, 6-cloro-3indoxil-a-D-manopiranosídeo) e, opcionalmente, um induzidor de enzima correspondente (por exemplo, 1 -O-metil-a-D-manopiranosídeo) em concentrações eficazes para detectar a presença da Listeria sp na amostra.
Detecção de Micróbios ou Artigos de Contagem [0066] A presente invenção inclui artigos usados para detectar e/ou contar micro-organismos em uma amostra de superfície. Tais artigos, que incluem os compartimentos de amostras previamente descritos, compreendem várias combinações de elementos (por exemplo, folha de cobertura, coletor de amostras, camada de barreira, elemento de fundo) descritos acima.
[0067] A figura 6 ilustra uma modalidade de artigo 600 para coleta de amostras e contagem de micróbios. O artigo 600 compreende os elementos do coletor de amostras 610 e da tira reagente 680, construídos como descritos acima. O coletor de amostras 610 compreende um substrato impermeável à água 612 e um material ligado 624. O material ligado 624 é fixado à superfície principal inferior do substrato 612 por meio de um adesivo 622. Nesta modalidade, a tira reagente 680 compreende um substrato autossuportado 682 com superfícies superior e inferior, pelo menos uma parte de uma superfície principal sendo revestida com um agente hidrofílico 686. Também mostrado na figura 6 está o adesivo opcional 684. O coletor de amostras 610 e a tira reagente 680 são fixados, nesta modalidade, por uma fita adesiva de dupla face 640 na região de dobradiça 645. Certas misturas com adesivos de baixa adesão, como
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27/46 os descritos na patente U.S. n° 5.118.750, podem ser usados em pelo menos um lado da fita adesiva de dupla face 640 para formar um acoplamento removível (e refixável) entre o coletor de amostras 610 e a tira reagente 680.
[0068] De preferência, o coletor de amostras 610 e a tira reagente 680 são fixados perto de uma borda do artigo 600, formando uma região de dobradiça 645. Uma pessoa versada na técnica reconhecerá outras maneiras adequadas para formar a região de dobradiça 645, como adesivos, ligação a quente, soldagem ultrassônica e similares. É também contemplado que o coletor de amostras 610 e a tira reagente 680 podem ser formados em peça única de material impermeável à água, com a região de dobradiça 645 formada ao se dobrar o material sobre si mesmo (não mostrado).
[0069] A figura 7 ilustra uma modalidade alternativa de artigo 700 para coleta de amostras e contagem de micróbios. O artigo 700 é constituído de coletor de amostras 710, folha de cobertura 730 e componentes do elemento de fundo 750, os componentes construídos como descritos acima. A folha de cobertura 730 é constituída de um substrato 732, uma camada adesiva 734 e pó 736. O coletor de amostras 710 pode ser fixado à folha de cobertura 730 via uma fita adesiva de dupla face 740. O coletor de amostras 710 inclui um material ligado 724, para coleta de amostras, fixado ao substrato 712 por uma camada adesiva 722. Nesta modalidade, o coletor de amostras 710 inclui uma perfuração 726 perto da região de dobradiça 745, para facilitar a remoção do coletor de amostras 710 do artigo 700. O coletor de amostras inclui também uma aba 728 com a qual se pode empunhar o coletor de amostras 710 durante o manuseio. Um elemento de fundo 750 é fixado ao coletor de amostras 710 via uma fita adesiva de dupla face 740. O elemento de fundo 750 compreende um substrato 752 e uma estrutura de fixação 758 opcional, por meio da qual o coletor de amostras 710 poderá ser fixado. A estrutura de fixação 758 pode compreender um adesivo, um
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28/46 componente de um meio de fixação com gancho e laço, ou similares, que podem ser usados para prender um coletor de amostras 710 em seu lugar. Em certas modalidades, a superfície principal do coletor de amostras 710, que está voltada para a estrutura de fixação 758, pode compreender um material de liberação, para controlar a adesão do coletor de amostras 710 à estrutura de fixação 758, quando a dita estrutura de fixação 758 compreende um adesivo. Revestimentos para liberação são conhecidos na técnica e são rotineiramente usados para reduzir a adesão entre adesivos e filmes plásticos.
[0070] A figura 8 ilustra uma modalidade alternativa de um artigo 800 para coleta de amostras e contagem de micróbios. O artigo 800 é constituído de folha de cobertura 830, camada de barreira 870, coletor de amostras 810 e componentes do elemento de fundo 850, os componentes construídos como descritos acima. A folha de cobertura 830 é constituída de um substrato 832, uma camada adesiva 834 e pó 836. O coletor de amostras 810 pode ser fixado à folha de cobertura 830 via uma fita adesiva de dupla face 840. O coletor de amostras 810 inclui um material ligado 824, para coleta de amostras, fixado ao substrato 812 por uma camada adesiva 822. Nesta modalidade, o coletor de amostras 810 inclui uma perfuração 826 perto da região de dobradiça 845, para facilitar a remoção do coletor de amostras 810 do artigo 800. O coletor de amostras inclui também uma aba 828 com a qual se pode empunhar o coletor de amostras 810 durante o manuseio. A camada de barreira 870 é fixada ao coletor de amostras 810 via uma fita adesiva de dupla face 840. A camada de barreira 870 inclui também uma perfuração 872 perto da região de dobradiça 845 e uma aba 874 com a qual se pode empunhar a camada de barreira 870 durante o manuseio. Um elemento de fundo 850 é fixado à camada de barreira 870 via uma fita adesiva de dupla face 840. O elemento de fundo 850 compreende um substrato 852 e uma
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29/46 estrutura de fixação 858 opcional, por meio da qual o coletor de amostras 810 pode ser fixado. A estrutura de fixação 858 pode compreender um adesivo, um componente de um meio de fixação com gancho e laço, ou similares, que podem ser usados para prender um coletor de amostras 810 em seu lugar. Em certas modalidades, a superfície principal da camada de barreira 870, que está voltada para a estrutura de fixação 858, pode compreender um material de liberação para controlar a adesão do coletor de amostras 810 à estrutura de fixação 858, quando a dita estrutura de fixação 858 compreende um adesivo. Revestimentos para liberação são conhecidos na técnica e são rotineiramente usados para reduzir a adesão entre adesivos e filmes plásticos.
Amostras e Micro-organismos [0071] Um aspecto da presente invenção é que ela pode ser usada para detectar organismos presentes numa ampla variedade de superfícies. Os dispositivos e métodos da presente invenção podem ser usados para uma variedade de aplicações nas quais é desejável testar os organismos presentes em uma superfície, incluindo, mas não se limitando a, superfícies de alimentos (por exemplo, carcaças de carne bovina, superfícies exteriores dos produtos vegetais), superfícies onde os alimentos são processados, superfícies aquosas ou com filmes aquosos, superfícies de pacientes, superfícies de tratamento em pacientes, superfícies ambientais de hospitais, superfícies ambientais de clínicas e superfícies ambientais forenses. As amostras podem consistir substancialmente de material sólido, semissólido, gelatinoso ou líquido, individualmente ou em várias combinações. O aparelho e o sistema da invenção, bem como os métodos da invenção, podem ser usados para determinar, qualitativa ou quantitativamente, a presença de um ou mais micro-organismos de interesse.
[0072] Um analito clínico exemplificador, de interesse, a ser detectado é o Staphylococcus aureus (S. aureus). Este é um patógeno que
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30/46 causa um grande espectro de infecções, incluindo: lesões superficiais como pequenos abscessos cutâneos e infecções em ferimentos; condições sistêmicas e que colocam a vida em perigo, como endocardite, pneumonia e septicemia; bem como toxinoses como intoxicação alimentar e síndrome do choque tóxico. Algumas cepas (por exemplo, S. aureus resistente a meticilina ou MRSA) são resistentes a todos, exceto a alguns antibióticos selecionados.
[0073] Analitos exemplificadores, de interesse, a serem detectados em áreas onde ocorre o processamento de alimentos são membros do gênero Listeria. Listeria é classificada como bactérias grampositivas, em formato de bastão e consistem da espécie Listeria monocytogene, L. innocua, L. welshimeri, L. seeligeri, L. ivanovii e L. grayi. Dentre estas, a L. monocytogenes é responsável pela maior parte dos casos de listeriose humana, e pessoas com imunidade comprometida, mulheres grávidas, idosos e recém-nascidos têm maior susceptibilidade à infecção. Os sintomas mais comuns de listeriose são septicemia, meningite e abortos espontâneos.
[0074] Outros micro-organismos de interesse especial para propósitos analíticos incluem os organismos procariontes e eucariontes, particularmente as bactérias gram-positivas, as bactérias gram-negativas, os fungos, o micoplasma e a levedura. Os organismos particularmente relevantes incluem os membros da família Enterobacteriaceae, ou da família Micrococcaceae ou os gêneros estafilococo spp., Streptococcus spp., Pseudomonas spp., Enterococcus spp., Salmonella spp., Legionella spp., Shigella spp. Yersinia spp., Enterobacter spp., Escherichia spp., Bacillus spp., Vibrio spp., Clostridium spp., Corynebacteria spp. bem como Aspergillus spp., Fusarium spp., e Candida spp. Organismos especialmente virulentos incluem Staphylococcus aureus (incluindo cepas resistentes como Staphylococcus aureus resistente à meticilina (SARM)), S. epidermidis, Streptococcus
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31/46 pneumoniae, S. agalactiae, S. pyogenes, Enterococcus faecalis, Enterococcus resistente à vancomicina (ERV), Staphylococcus aureus resistente à vancomicina (SARV), - Staphylococcus aureus resistente intermediário à vancomicina (SARIV), Bacillus anthracis, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Aspergillus niger, A. fumigatus, A. c/avatus, Fusarium solani, F. oxysporum, F. chlamydosporum, Vibrio cholera, V. parahemolyticus, Salmonella cholerasuis, S. typhi, S. typhimurium, Candida albicans, C. glabrata, C. krusei, Enterobacter sakazakii, Escherichia coli 0157, micro-organismos que contêm ESBL, e variedades gram-negativas resistentes a drogas múltiplas (RDM).
Artigos de Fabricação [0075] Compartimentos de amostras e/ou artigos da invenção podem ser combinados com material para embalagem e vendidos como um kit para coleta de amostras e detecção de micro-organismos em superfícies. Por exemplo, os kits podem compreender dois ou mais componentes (por exemplo, elemento de fundo, espaçador, camada de barreira, folha de cobertura e/ou tira reagente; sendo cada componente conforme descrito acima) embalados juntos. Em algumas modalidades, dois ou mais componentes (por exemplo, elemento de fundo, camada de barreira e folha de cobertura) podem ser fornecidos fixados um ao outro, de preferência formando uma região de dobradiça, conforme mostrado nas modalidades ilustradas. Nessas modalidades, certos componentes (por exemplo, o coletor de amostras, a tira reagente e/ou a camada de barreira) podem ser removíveis. Em outras modalidades, os componentes podem ser fornecidos separadamente e podem ser montados durante o uso. Os kits podem compreender, ainda, acessórios para coleta e teste das amostras, como um meio de suspensão de amostra, uma pipeta, um rótulo, um suporte de amostras ou luvas.
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Métodos de Coleta de Amostras e Detecção [0076] A presente descrição inclui métodos para a detecção de micro-organismos em uma superfície ambiental. Os métodos da presente invenção podem ser usados para detectar a presença ou ausência de um micro-organismo-alvo pela observação de um indicador de crescimento microbiano do micro-organismo-alvo. Os métodos da presente invenção adicionalmente podem ser usados para a contagem dos micro-organismos presentes em uma amostra. Os elementos que são usados nestes métodos (por exemplo, coletor de amostras, folha de cobertura, camada de barreira, etc.) podem ser fornecidos separadamente ou podem fazer parte de um conjunto, como os compartimentos de amostra descritos acima. Além disso, os elementos individuais e/ou conjuntos podem ser fornecidos em um kit, como descrito acima. As modalidades aqui descritas:
[0077] Em uma modalidade, o método compreende o fornecimento de um meio líquido para suspensão de amostra; um coletor de amostras como o coletor de amostras 210 (figura 2B), um compartimento de amostras como o compartimento de amostras 460 (figura 4), que compreende um elemento de fundo 450 e folha de cobertura 430, e uma tira reagente como a tira reagente 580 (figura 5). O método compreende adicionalmente a colocação de uma das superfícies principais (como um material ligado 224) do coletor de amostras 210 em contato com a superfície ou material a ser testado. Tipicamente, o(a) operador(a) pode usar fórceps esterilizado, ou similares, ou pode vestir luvas em uma das mãos para poder segurar o coletor de amostras 210 enquanto a amostra é coletada. Coloca-se o coletor de amostras 210 em contato físico (por exemplo, por meio do toque, enxugamento ou esfregação) com uma área de superfície prescrita, como 5 cm por 5 cm, 10 cm por 10 cm ou 25 cm por 25 cm, a fim de se estimar o número de organismos em uma área de dimensões conhecidas. Nesta modalidade, a camada de barreira 470 é levantada do elemento de fundo 450 e o
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33/46 coletor de amostras 210 é posto em contato com a estrutura de fixação 458, tendo a amostra sido orientada na direção da camada de barreira 470. O método compreende adicionalmente a aplicação do meio de suspensão da amostra ao material ligado 224 do coletor de amostras 210 que compreende a amostra. O meio de suspensão de amostra pode ser aplicado com o uso de uma pipeta ou por outros meios adequados. Após a adição do meio de suspensão de amostra, a camada de barreira 470 pode ser baixada. Opcionalmente, a amostra pode ser incubada durante certo período de tempo, como pelo menos 30 minutos, pelo menos 60 minutos, ou pelo menos 120 minutos, dependendo do micro-organismoalvo, para permitir a recuperação dos micro-organismos danificados. A temperatura de incubação pode ser escolhida de acordo com o micro-organismoalvo. Após o período de incubação opcional, a folha de cobertura 430 é levantada e a camada de barreira 470 é removida, por exemplo pela separação da camada de barreira 470 na perfuração 472. O método compreende adicionalmente a colocação da superfície inferior da folha de cobertura 430 em contato com o meio de suspensão de amostra para formar um gel hidratado. Isso pode ser realizado, por exemplo, ao se segurar a folha de cobertura 430 com uma mão, enquanto se segura o elemento de fundo 450 com a outra mão, e ao se levantar a folha de cobertura 430. Embora o gel hidratado seja formado em poucos segundos, é preferível permitir que o gel se forme durante pelo menos 5-10 minutos, com mais preferência, pelo menos 10-30 minutos, antes de se abrir o dispositivo para expor o gel hidratado. O gel pode permanecer fixado à folha de cobertura 430, o gel pode permanecer fixado ao coletor de amostras 210, ou porções separadas do gel podem permanecer fixadas à folha de cobertura 430 e ao coletor de amostras 210. Opcionalmente, o método compreende adicionalmente a colocação de uma superfície revestida da tira reagente 580 em contato com o gel hidratado. Enquanto a folha de cobertura 430 está levantada, uma tira reagente 580 pode ser inserida no compartimento de amostras 460, com o agente hidrofílico 586 da tira
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34/46 reagente 580 orientado na direção do gel. O compartimento de amostras 460 é incubado durante certo período de tempo para permitir que o número de microorganismos presentes na amostra aumente e/ou para permitir que a atividade metabólica dos micro-organismos cause uma alteração detectável em um indicador. O dispositivo é tipicamente incubado a temperaturas de 25-45 Ό, de preferência, 25-37 Ό. Em certas modalidades, os micro-organismos formam colônias descontínuas no gel hidratado. O número de micro-organismos na amostra original pode ser aferido pela contagem das colônias.
[0078] Em outra modalidade, o método compreende o fornecimento de um meio líquido para suspensão de amostra; qualquer coletor de amostras (consulte, por exemplo, as figuras 1 e 2A-B); um compartimento de amostras como o compartimento de amostras 360 (figura 3A) que compreende um elemento de fundo 350, uma camada de barreira 370, e uma folha de cobertura 330; e uma tira reagente como a tira reagente 580 (figura 5). O método compreende adicionalmente a colocação de uma das superfícies principais do substrato ou material ligado do coletor de amostras em contato com a superfície ou material a ser testado, conforme descrito acima. O coletor de amostras pode ser colocado dentro do compartimento de amostras 360 com a amostra orientada na direção da camada de barreira 370. Nesta modalidade, a camada de barreira 370 pode ser levantada e o coletor de amostras pode ser colocado dentro da cavidade formada pela abertura 357 com a amostra voltada para cima (na direção da camada de barreira 370). Em algumas modalidades, o coletor de amostras pode ser dimensionado e formatado de modo que se encaixe completamente dentro da cavidade formada pela abertura 357. O método compreende adicionalmente a dispensação do meio de suspensão de amostra à cavidade contendo o coletor de amostras. O meio de suspensão de amostra pode ser dispensado com o uso de uma pipeta ou por outros meios adequados. Após a adição do meio de suspensão de amostra, a camada de barreira 370 pode ser baixada. Opcionalmente, a
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35/46 amostra pode ser incubada durante certo período de tempo, como pelo menos 30 minutos, pelo menos 60 minutos, ou pelo menos 120 minutos, dependendo do micro-organismo-alvo, para permitir a recuperação dos micro-organismos danificada. Após o período de incubação opcional, a folha de cobertura 330 é levantada e a camada de barreira 370 é removida, por exemplo pela separação da camada de barreira 370 na perfuração 372. O método compreende adicionalmente a colocação da superfície inferior da folha de cobertura 330 em contato com o meio de suspensão de amostra para formar um gel hidratado, conforme descrito acima. Embora o gel hidratado se forme em poucos segundos, é preferível permitir que o gel se forme, de preferência, durante pelo menos 510 minutos ou, com mais preferência, durante pelo menos 10-30 minutos, antes de se abrir o dispositivo para expor o gel hidratado. Opcionalmente, o método compreende, adicionalmente, a colocação de uma superfície revestida da tira reagente 580 em contato com o gel hidratado. Neste processo, a folha de cobertura 330 é levantada para expor o gel hidratado, a tira reagente 580 é posicionada em e/ou perto da abertura 357 no compartimento de amostras 360, e a folha de cobertura 330 é baixada para colocar a tira reagente em contato com o gel hidratado. O compartimento de amostras 360 é, então, incubado durante certo período de tempo, após o qual o dispositivo é observado em busca de um indicador de crescimento microbiano. O dispositivo é tipicamente incubado a temperaturas de 20-45 Ό, de preferência, 25-37 Ό. O dispositivo é incubado durante certo período de tempo (por exemplo, 18-48 horas, dependendo da taxa de crescimento dos micro-organismos-alvo e do sistema de indicador) para permitir que os inúmeros micro-organismos presentes na amostra aumentem e/ou para permitir que a atividade metabólica dos micro-organismos cause uma mudança detectável em um indicador. Em certas modalidades, os microorganismos formam colônias descontínuas no gel hidratado. O número de microorganismos na amostra original pode ser aferido pela contagem das colônias.
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Exemplos
Exemplo 1
Detecção e Contagem de Listeria Innocua de uma Superfície.
Preparação das Tiras Reagentes [0079] O meio líquido de crescimento para crescimento e detecção da Listeria spfoi produzido de acordo com a fórmula mencionada na tabela 1. O indutor de enzima (1-O-metil-a-D-manopiranosídeo) e o substrato de enzima cromogênico (6-cloro-3-indoxil-a-D-manopiranosídeo) foram obtidos junto à Biosynth International (Naperville, IL, EUA). A goma lavada com etanol M150 foi obtida junto à Danisco (Kreutzlingen, Suíça).
Tabela 1. Meio do tipo Caldo para o Crescimento e Detecção da Listeria sp.
| Ingrediente | Concentração (g/L) |
| Digesto pancreático de caseína | 10,0 |
| Peptona de proteose número 3 | 10,0 |
| Ácido nalidíxico | 0,036 |
| Acriflavina | 0,03 |
| Moxalactama | 0,03 |
| Sulfato de polimixina B (7690 unidades/mg) | 0,001 |
| Extrato de levedura | 8,0 |
| Cloreto de sódio | 40,0 |
| Cloreto de lítio | 4,5 |
| Fosfato dissódico | 12,0 |
| Fosfato de monopotássio | 6,0 |
| 1 -O-metil-a-D-manopiranosídeo | 5,0 |
| 6-cloro-3-indoxil-a-D-manopiranosídeo | 2,0 |
| Goma de xantana | 8,0 |
| Goma guar lavada com etanol M150 | 4,0 |
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37/46 [0080] O substrato usado para o revestimento da tira reagente era um filme de poliéster límpido de 8,5” de largura e 2,91 mil (0,07 mm) de espessura. O meio líquido foi aplicado como revestimento sobre o primeiro lado do substrato com o uso de um dispositivo de aplicação de revestimento em forma de faca com um vão de 7 mil (0,18 mm), e subsequentemente passou-se o substrato revestido por um forno de secagem aquecido a aproximadamente 230°F (110Ό). O tempo de secagem no forno foi de aproximadamente dois minutos e meio. O procedimento de revestimento e secagem foi repetido no lado oposto do substrato, resultando em um filme plástico que foi aplicado como revestimento nos dois lados com o mesmo meio de crescimento. O peso de revestimento aproximado para cada lado do filme revestido foi de 0,230 g/24 polegadas2 (0,230 g/155 cm2). O substrato duplamente revestido foi cortado por matriz em círculos, cada círculo tendo um diâmetro de 2,875 polegadas. (7,30 cm).
Preparação dos Dispositivos do Compartimento de Amostras [0081] Os dispositivos do compartimento de amostras foram construídos pela montagem dos seguintes componentes em uma única unidade: um elemento de fundo, um espaçador de espuma, uma camada de barreira e uma folha de cobertura. O espaçador de espuma foi fixado ao elemento de fundo por um adesivo que foi aplicado como revestimento sobre o elemento de fundo, conforme descrito a seguir. A camada de barreira foi fixada ao longo de uma borda do espaçador de espuma com o uso de. uma fita adesiva de dupla face de 3/8 polegadas (9,5 mm). O filme de cobertura foi fixado (ao longo da mesma borda) à camada de barreira com o uso da fita adesiva de dupla face. Os desenhos desta construção podem ser vistos nas figuras 3A e 3B.
[0082] O elemento de fundo consistiu de papel polirevestido de 6,3 mil (0,16 mm) de espessura (grade amarela HD RHI-Lease FA 34 de 83 libras,
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38/46 grau 406-83010, obtido junto à Wausau-Moisinee Paper Corp., Rhinelander, Wl, EUA). Uma grade amarela (linhas perpendiculares espaçadas a 1 cm de distância em toda a área) foi estampada no lado (fundo) não-siliconado do papel. O lado (topo) tratado com silicone do papel foi revestido com um adesivo de copolímero de acrilato de isooctila/acrilamida (96%, em peso, de acrilato de isooctila e 4%, em peso, de acrilamida obtidos junto à 3M Company, St. Paul, MN, EUA. o peso de revestimento de aproximadamente 145-200 mg/200 cm2).
[0083] O espaçador consistiu de material de espuma de poliestireno (CL3V Capliner, branco, 8,5 polegadas (21,6 cm) de largura, 20 mil (0,51 mm) de espessura; obtido junto à American Fuji Seal, Bardstown, KY, EUA). Um círculo de 2,875 polegadas (7,30 cm) foi cortado por matriz e removido do material do espaçador. O material do espaçador foi, então, laminado ao lado revestido do adesivo do elemento de fundo ao se fazer passar o elemento de fundo e o espaçador cortado por matriz através de um cilindro de estrangulamento. O círculo recortado do material do espaçador formou uma depressão circular ou cavidade e o elemento de fundo formou a superfície de fundo da cavidade no laminado, conforme mostrado na figura 3A.
[0084] O filme de barreira consistiu de poliéster (filme de poliéster de calibre 200, cor azul claro K399, obtido junto à CPFilms Inc., Martinsville, VA, EUA). Um material de liberação foi aplicado como revestimento sobre um lado do filme de barreira. O filme de barreira foi fixado ao longo de uma borda do espaçador de espuma com o uso de fita adesiva de dupla face, de modo que o lado do filme de barreira revestido com o material de liberação ficou voltado para o elemento de fundo.
[0085] A folha de cobertura foi construída a partir de um filme de polipropileno biaxialmente orientado (BOPP) de 1,6 mil (0,04 mm) de espessura que foi anteriormente revestido com um adesivo de copolímero de
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39/46 acrilato de isooctila/acrilamida (96%, em peso, de acrilato de isooctila e 4%, em peso, de acrilamida, peso de revestimento de aproximadamente 165260 mg/200 cm2). O lado revestido do adesivo do filme BOPP foi subsequentemente revestido com pó de goma guar lavado com não-etanol M150 (obtido junto à Danisco; peso do revestimento por pó de aproximadamente 0,30-0,60 g/24 polegadas2 (0,30-0,60 g/155 cm2). A folha de cobertura foi fixada à camada de barreira com fita adesiva de dupla-face, conforme descrito acima.
Preparação de Coletores de Amostra [0086] Dois tipos de coletores de amostras foram construídos. O tipo I de coletores de amostras foi construído com o uso de filme de poliéster límpido de 3 mil. O filme foi cortado por matriz em círculos de 2,875 polegadas (7,3 cm) de diâmetro. O tipo II de coletores de amostras foi construído pela laminação de materiais não-tecidos a um substrato plástico. Para o tipo II de coletores de amostras, um adesivo de copolímero de acrilato de isooctila/ácido acrílico, sensível à alta pressão, sob a forma de percevejo (96%, em peso, de acrilato de isooctila e 4%, em peso, de ácido acrílico, número de peça AZ-1229, 3M Company, St. Paul, MN, EUA, espessura de revestimento de aproximadamente 2 mils (0,05 mm)) foi laminado a um filme de poliéster branco de 5 mil (0,13 mm) de espessura (226Melinex, obtido junto à DuPont Teijin Films, Hopewell, VA, EUA) e um material absorvente (mostrado na tabela 2) foi subsequentemente laminado no adesivo. Depois que os laminados foram produzidos, os coletores de amostras do tipo II foram cortados por matriz em círculos de 2,875 polegadas (7,24 cm) de diâmetro. A tabela 2 apresenta uma lista dos coletores de amostras usados nesses experimentos.
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Tabela 2. Coletores de Amostras
| Amostra Coletor | Descrição | Tipo | Não-tecido |
| A | Filme de poliéster límpido de 3 mil (0,08 mm) | 1 | Nenhum |
| B | Laminado de poliéster | II | Laço de malha (Estilo n°WW1112, GehringTextiles, Inc., Garden City, NY, EUA) |
| C | Laminado de poliéster | II | Filme 40 HEX VisPore (de 0,000125 polegadas de calibre, Tredegar Film Products, Richmond, VA, EUA) |
Preparação de Superfícies Inoculadas [0087] A Listeria innocua (ATCC#33091) foi cultivada em caldo triptcaseína de soja com 0,6% de extrato de levedura de um dia para o outro a 35°C. Setenta e cinco microlitros da cultura obtida de um dia para o outro foram diluídos em 50 mL de caldo triptcaseína de soja com 0,6% de extrato de levedura. A suspensão foi agitada e duas amostras de 0,5 mL foram borrifadas em seções de 4x4 polegadas de aço inoxidável plano e esterilizado com o uso de um aplicador encastoado com poliéster Dacron esterilizado. Permitiu-se que as superfícies de aço inoxidável secassem à temperatura ambiente. Depois que as superfícies de aço secaram, os dispositivos descritos acima foram usados para coletar e quantificar os micróbios sobre a superfície do aço inoxidável.
Procedimento de Teste de Superfície [0088] O procedimento experimental descrito a seguir foi avaliado em comparação com um método padrão, que consistiu de i) uma esponja pré-umedecida com tampão neutralizante (Nasco, Whirl-Pak Hydrated Speci-Sponge Bag de 18 onças, identificação de produto BO1422WA, obtida junto à Hardy Diagnostics, Santa Maria, CA, EUA) foi esfregada contra uma área inoculada de 4 polegadas por 4 polegadas (103 cm2) e colocada dentro da bolsa de onde foi tirada, ii) cinco mililitros de água de peptona tamponada foram adicionados à bolsa contendo a esponja e
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41/46 a bolsa foi manualmente massageada durante aproximadamente 30 segundos para a liberação das bactérias da esponja, iii) permitiu-se que a bolsa contendo a esponja e água de peptona tamponada permanecesse à temperatura ambiente durante 1-1,5 horas, iv) três mililitros da suspensão líquida foram removidos da bolsa com o uso de uma pipeta e foram dispensados a uma placa Petrifilm™ Environmental Listeria (3M Company, St. Paul, MN, EUA), e v) a placa Petrifilm foi incubada e a aparição de quaisquer colônias bacterianas foi interpretada de acordo com as instruções do fabricante.
[0089] No procedimento experimental, o coletor de amostras foi esfregado contra a seção de 4 polegadas por 4 polegadas (103 cm2) da superfície inoculada e secada de aço inoxidável durante um período de 30 a 60 segundos. Em alguns casos, o coletor de amostras estava seco. Em outros casos, o coletor de amostras foi pré-umedecido pela aplicação de um aerosol leve (de aproximadamente 0,5-1,0 mililitros de água de peptona tamponada) ao coletor de amostras com o uso de uma garrafa aspersora).
[0090] O coletor de amostras foi posto dentro do compartimento de amostras na cavidade formada pelo espaçador de espuma, com o lado da amostra voltado para cima (na direção da camada de barreira de poliéster). O compartimento de amostras foi subsequentemente mantido à temperatura ambiente durante aproximadamente 25 minutos. O filme de cobertura e o filme de barreira foram levantados do espaçador de espuma; o filme de barreira foi removido e 3 ml_s de água de peptona tamponada foram pipetados para o coletor de amostras. O filme de cobertura foi refixado ao espaçador de espuma com uma fita adesiva de dupla-face e o filme de cobertura foi subsequentemente baixado sobre o espaçador de espuma, colocando a goma guar, em pó, em contato com a água de peptona tamponada para formar um gel. O compartimento de amostras foi mantido em uma superfície plana durante
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42/46 aproximadamente 60 minutos para permitir o crescimento adicional dos microorganismos. Depois disso, o filme de cobertura foi levantado e a tira reagente duplamente revestida foi inserida no compartimento de amostras de modo que um lado da tira reagente entrasse em contato com o coletor de amostras e o outro lado entrasse em contato com a porção hidratada do filme de cobertura. O compartimento de amostras foi, então, posto dentro de um incubador a 35°C durante 26 horas. A tira reagente foi examinada quanto à presença de colônias bacterianas (que tipicamente aparecem como pequenos pontos de tamanhos diversos, tendo diferentes matizes de cor avermelhada). Os resultados deste teste são mostrados na tabela 3 e na tabela 4.
Tabela 3: Contagens Microbianas (Cada Número Representa uma
Contagem da Colônia de uma Placa Individual.)
| Material do coletor de amostras | Unidades formadoras de colônia/amostra | |
| Coletor de amostra seca | Coletor de amostra molhada | |
| Método padrão | NA | 29 |
| Filme de poliéster | 0 | 70 |
| Laço de malha | 35 | 32 |
| Filme 40 HEX VisPore | 17 | 41 |
Tabela 4: Aparecimento de Colônias
| Material do coletor de amostras | Aparecimento de colônias após 26 horas de incubação | |
| Coletor de amostra seca | Coletor de amostra molhada | |
| Filme de poliéster - 3 mil | Não há colônias visíveis. | As colônias tinham os mesmos tamanho, formato e cor (vermelha) que no método padrão. |
| Laço de malha | As colônias tinham aproximadamente | As colônias tinham os mesmos |
| os mesmos tamanho e formato que | tamanho, formato e cor que no | |
| no método padrão, embora a cor da colônia fosse de um matiz mais claro de vermelho e as margens da colônia | método padrão. |
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| Material do coletor de amostras | Aparecimento de colônias após 26 horas de incubação | |
| fossem menos distintas do que no caso das colônias observadas no método padrão. | ||
| Filme 40 HEX VisPore | As colônias tinham aproximadamente | As colônias tinham aproximadamente |
| os mesmos tamanho e formato que | os mesmos tamanho e formato que no | |
| no método padrão, embora a cor da | método padrão, embora a cor da | |
| colônia fosse de um matiz mais claro | colônia fosse de um matiz mais claro | |
| de vermelho e as margens da colônia | de vermelho e as margens da colônia | |
| fossem menos distintas do que no | fossem menos distintas do que no | |
| caso das colônias observadas no | caso das colônias observadas no | |
| método padrão. | método padrão. |
Exemplo 2
Detecção e Contagem de Staphylococcus Aureus de uma Superfície.
Preparação dos Dispositivos do Compartimento de Amostras [0091] Os dispositivos do compartimento de amostras usados neste experimento foram as placas do sistema de contagem expresso (STX) 3M PETRIFILM Staph, obtidos junto à 3M Company (St. Paul, MN, EUA). Os meios secos em cada placa foram hidratados com 1 mililitro do diluente de fosfato de Butterfield; permitiu-se, então, que gelificassem antes do uso das placas neste experimento.
Preparação dos Coletores de Amostras [0092] Os coletores de amostras do tipo I foram construídos com o uso de filme de poliéster límpido de 3 mil, conforme descrito no exemplo 1. Os coletores de amostras do tipo II foram construídos pela laminação do material ligado (por exemplo, gaze) designado ao filme de polietileno límpido de 3 mil com o uso de um adesivo à base de acrílico sensível à pressão. O material não-tecido CEREX G192988 foi obtido junto à CEREX Advanced
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Fabrics (Cantonment, FL, EUA). O politereftalato de etileno (PET) produzido por deposição a úmido da marca Hanes Hydroguard 150 HEM/celulose foi obtido junto à Hanes Industries (Conover, NC, EUA). O material Hanes foi prétratado com SPAN 20 (obtido junto à Uniquema, Stanford, FL, EUA) para tornálo hidrofílico. O pré-tratamento consistiu do enxugamento do material do tecido com solução de SPAN-20 (monolaurato de sorbitano SPAN-20 a 2,5%, em peso por volume, em álcool isopropílico a 97,5%, em peso por volume) até que o tecido ficou saturado com a solução. Permitiu-se que o tecido secasse exposto ao ar à temperatura ambiente. Uma porção do tecido tratado foi testada pela transferência de algumas gotas de água para uma superfície do tecido para observar se a água foi absorvida (como ocorrería com um pavio ou mecha) pelo tecido.
Preparação de Superfícies Inoculadas [0093] Staphylococcus aureus ATCC 25923 foi cultivada em caldo triptcaseína de soja durante 18 horas a 35°C. Vinte microlitros da cultura produzida de um dia para o outro foram diluídos em 99 mL de diluente de fosfato de Butterfield e a mistura resultante foi agitada para distribuir uniformemente as bactérias na suspensão. Um mililitro da suspensão bacteriana tamponada foi transferido para uma segunda garrafa (99 mL) de diluente de fosfato de Butterfield. A suspensão diluída foi agitada e três amostras de 0,5 mL foram espalhadas em seções de 4x4 polegadas de cupons planos, separados e esterilizados de aço inoxidável com o uso de um distribuidor de vidro esterilizado. Permitiu-se que as superfícies de aço inoxidável secassem à temperatura ambiente durante 30-60 minutos em uma capota de fluxo laminar. Estimou-se que cada cupon de aço inoxidável foi inoculado com aproximadamente 60 unidades formadoras de colônia (UFC) de células de S. aureus neste procedimento. Depois que as superfícies de aço estão secas, os coletores de amostras descritos acima foram usados para
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45/46 coletar e quantificar os micróbios sobre a superfície do aço inoxidável. Procedimento de Teste de Superfícies [0094] Os coletores de amostras foram umedecidos pela aplicação de um aerosol leve de diluente de fosfato de Butterfield (aproximadamente 0,5-1,0 mL) ao coletor de amostras com o uso de uma garrafa aspersora. As amostras foram coletadas pela esfregação vigorosa de uma superfície do coletor de amostras em uma seção de 4 polegadas por 4 polegadas (103cm2) da superfície inoculada e seca do aço inoxidável. A superfície foi esfregada de lado a lado em uma direção e, então, esfregada de lado a lado em uma direção que era perpendicular à direção em que a superfície foi inicialmente esfregada.
[0095] A folha de cobertura de uma placa pré-hidratada de PETRI Fl LM STX foi levantada, expondo a cavidade no centro do espaçador de espuma (isto é, o gel formado pelos meios desidratados permaneceu fixado à folha de cobertura). O coletor de amostras foi colocado dentro do compartimento de amostras (na cavidade formada pela abertura no espaçador de espuma) com o lado da amostra voltado para cima (na direção da folha de cobertura). A folha de cobertura foi baixada, colocando o gel hidratado em contato com a amostra sobre o coletor de amostras. O compartimento de amostras foi posto dentro de um incubador a 35°C durante cerca de 18 horas e as colônias, que apareceram como pequenos pontos vermelhos, foram contadas. O número de colônias em cada placa é mostrado na tabela 5. A ausência de unidades formadoras de colônia no experimento com uma amostra de filme de polietileno como coletor pode se dever à perda de viabilidade das bactérias inoculadas nas superfícies de teste durante o curso do experimento.
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Tabela 5. Contagens Microbianas (Cada Número Representa uma
Contagem de Colônia de uma Placa Individual.)
| Material de base do coletor de amostras/material ligado | Unidades formadoras de colônia/amostra |
| Filme de polietileno/ | 0 |
| Nenhuma | |
| Filme de polietileno/ | 10 |
| Gaze | |
| Filme de polietileno/ | 8 |
| CEREXG192988 |
[0096] A presente invenção foi descrita, até aqui, com referência a várias realizações específicas previstas pelo inventor para as quais descrições capacitadoras estão disponíveis. Modificações insubstanciais da invenção, incluindo modificações que não foram previstas presentemente, podem, não obstante, constituir equivalentes da mesma. Dessa forma, o escopo da presente invenção não deveria ser limitado pelos detalhes e estruturas aqui descritos, mas, em vez disso, apenas pelas reivindicações a seguir, e equivalentes das mesmas.
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1/3
Claims (15)
- Reivindicações1. MÉTODO PARA DETECÇÃO DE ESPÉCIES DE LISTERIA EM UMA SUPERFÍCIE AMBIENTAL, caracterizado por compreender:- fornecer:um coletor de amostras (110, 210, 610, 710, 810) com superfícies principais superior (114) e inferior (116);em que uma ou ambas as superfícies principais do coletor de amostras (110, 210, 610, 710, 810) são impermeáveis a água;um meio para suspensão da amostra e uma tira reagente (580, 680);em que a tira reagente (580, 680) compreende um substrato autossuportado (582, 682) com superfícies principais superior e inferior, em que uma superfície principal é total ou parcialmente revestida com um revestimento a seco que inclui um agente hidrofílico (586, 686) que compreende um nutriente para cultivo de micro-organismos, um agente seletivo, um indicador, um agente gelificante solúvel em água fria e combinações de quaisquer dois ou mais destes componentes;um compartimento de amostra (360, 460) que compreende: um membro inferior (350, 450) que compreende um substrato impermeável a água autossuportado (352, 452) com superfícies principais superior e inferior;uma folha de cobertura (330, 430) que compreende um substrato (332, 432) com superfícies principais superior e inferior, em que uma superfície principal é total ou parcialmente revestida com uma camada adesiva (334) que compreende um pó solúvel em água fria que inclui um agente gelificante; e uma camada de barreira (370, 470, 870);Petição 870180067155, de 02/08/2018, pág. 13/16
- 2/3- obter uma amostra em uma ou ambas as superfícies principais do coletor de amostras (110, 210, 610, 710, 810);- colocar o coletor de amostras (110, 210, 610, 710, 810) no compartimento de amostra (360, 460), em que o coletor de amostras (110, 210, 610, 710, 810) é para uso na amostragem de uma superfície ambiental ou superfície de um paciente;- hidratar a amostra e a tira reagente (580, 680) com um meio de suspensão de amostras; e- colocar a tira reagente (580, 680) em contato com a amostra.2. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por compreender ainda, após a colocação do coletor de amostras (110, 210, 610, 710, 810) no compartimento de amostra (360, 460), remover total ou parcialmente a camada de barreira do compartimento de amostra.
- 3. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pela tira reagente compreender ainda um inibidor seletivo.
- 4. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo inibidor seletivo ser selecionado a partir do grupo que consiste em cloreto de sódio, cloreto de lítio, ácido naladíxico, acriflavina, moxalactama, sulfato de polimixina B e combinações de dois ou mais dos anteriores.
- 5. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo inibidor seletivo consistir em cloreto de sódio, cloreto de lítio, ácido naladíxico, acriflavina, moxalactama e sulfato de polimixina B.
- 6. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pela tira reagente compreender ainda um sistema de tampão.
- 7. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pela tira reagente compreender quantidades eficazes de uma peptona, um sistema de tampão, cloreto de sódio, cloreto de lítio, ácido naladíxico, acriflavina, moxalactama e sulfato de polimixina B.Petição 870180067155, de 02/08/2018, pág. 14/163/3
- 8. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo indicador da tira reagente compreender um substrato de enzima.
- 9. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo substrato de enzima ser um substrato de a-D-manosidase.
- 10. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 9, caracterizado pelo substrato de enzima ser 6-cloro-3indoxil-a-D-manopiranosídeo.
- 11. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pela tira reagente compreender ainda um indutor de enzima.
- 12. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo indutor de enzima ser 1-O-metil-a-D-manopiranosídeo.
- 13. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por compreender ainda a etapa de contar micro-organismos na amostra.
- 14. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por compreender ainda isolar uma colônia.
- 15. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pela espécie de Listeria detectada ser L. monocytogenes.Petição 870180067155, de 02/08/2018, pág. 15/161/4
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Families Citing this family (49)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2235203B1 (en) | 2007-12-21 | 2014-10-08 | 3M Innovative Properties Company | Microbiological systems and methods of fluid sample analysis |
| JP2011072279A (ja) * | 2009-09-30 | 2011-04-14 | Dainippon Printing Co Ltd | 微生物培養シート |
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| MX2013013255A (es) * | 2011-05-20 | 2014-01-08 | 3M Innovative Properties Co | Articulos de deteccion de salmonella y metodos de uso. |
| CN102286608B (zh) * | 2011-06-08 | 2014-06-25 | 郑州安图生物工程股份有限公司 | 衣原体诊断方法和试剂盒 |
| EP2771456B1 (en) * | 2011-10-27 | 2018-08-15 | The Governors of the University of Alberta | Device and method for bacterial culture and assay |
| CN104203116B (zh) * | 2012-03-30 | 2017-07-21 | Sca卫生用品公司 | 流体取样装置和用于取样的方法 |
| JP5931776B2 (ja) * | 2013-02-26 | 2016-06-08 | シスメックス株式会社 | 体液収集体保持シートの支持キット、体液収集体の保護方法、及び体液収集体の取出方法 |
| US8993868B2 (en) * | 2013-03-11 | 2015-03-31 | Anastasios Nikolas Angelopoulos | Universal pickup |
| US9568902B2 (en) * | 2013-03-15 | 2017-02-14 | Vivint, Inc. | Home security system with touch-sensitive control panel |
| SE538197C2 (sv) * | 2014-03-24 | 2016-04-05 | Expertus Kemiteknik Ab | Anordning för ytprovtagning |
| NL2013316B1 (en) * | 2014-08-11 | 2016-09-21 | Jan Peter Eversdijk Martin | Forensic device for collecting a sample. |
| EP3183332A1 (en) * | 2014-08-20 | 2017-06-28 | 3M Innovative Properties Company | Self-contained anaerobic culture device for sulfate-reducing microorganisms |
| CN104745458B (zh) * | 2015-03-25 | 2016-09-21 | 广西师范大学 | 一种分析自然条件下特定种类微生物间相互作用的装置 |
| DE202015102416U1 (de) * | 2015-05-11 | 2015-06-01 | Jochen Lehmkuhl | Spurensicherungsfolie |
| CN105219634B (zh) * | 2015-06-30 | 2018-02-09 | 原春锋 | 微生物快速检测多环测试片、无菌培养基及其制备方法 |
| US10563164B1 (en) | 2015-10-08 | 2020-02-18 | Charm Sciences, Inc. | Plate reader |
| AU2017218430B2 (en) * | 2016-02-08 | 2022-07-07 | Becton, Dickinson And Company | Prepared plated media product |
| US10495563B1 (en) | 2016-04-28 | 2019-12-03 | Charm Sciences, Inc. | Plate reader observation methods and operation |
| WO2018047245A1 (ja) * | 2016-09-06 | 2018-03-15 | 株式会社島津製作所 | スワブ材 |
| CA3039370A1 (en) | 2016-10-04 | 2018-04-12 | Ch2M Hill, Inc. | Passive device for vapor intrusion sampling |
| US20200056136A1 (en) * | 2016-12-28 | 2020-02-20 | 3M Innovative Properties Company | Microbial detection devices and methods of using the same |
| JP7088602B2 (ja) | 2016-12-28 | 2022-06-21 | スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー | 接着剤マスクされた栄養素を含む微生物検出デバイス、及びその使用方法 |
| JP6891970B2 (ja) * | 2017-03-28 | 2021-06-18 | 栗田工業株式会社 | 皮膜形成アミンの判定方法 |
| CN111107939B (zh) | 2017-09-21 | 2022-04-12 | 贝克顿·迪金森公司 | 引导有害污染物样品的收集的系统和模板及使用其的方法 |
| AU2018337027B2 (en) | 2017-09-21 | 2024-06-06 | Becton, Dickinson And Company | Hazardous contaminant collection kit and rapid testing |
| EP3684944B1 (en) | 2017-09-21 | 2025-01-01 | Becton, Dickinson and Company | Hazardous contaminant collection kit and rapid testing |
| CN111278987B (zh) * | 2017-09-21 | 2024-02-23 | 贝克顿·迪金森公司 | 以高拾取和脱落效率收集有害污染物的采样系统和技术 |
| USD859683S1 (en) | 2017-09-21 | 2019-09-10 | Becton, Dickinson And Company | Collection device |
| US12391907B2 (en) | 2017-12-13 | 2025-08-19 | Neogen Food Safety Us Holdco Corporation | Water-reconstitutable culture medium resistant to liquefaction by microorganisms |
| SG11202100721SA (en) | 2018-07-23 | 2021-02-25 | Univ Alberta | Genetically-encoded bicyclic peptide libraries |
| CN109399788B (zh) * | 2018-09-06 | 2021-10-26 | 浙江利欧环保科技有限公司 | 一种对聚氨酯海绵填料的改性方法及改性得到的亲水聚氨酯海绵填料 |
| CN109439579A (zh) * | 2018-11-14 | 2019-03-08 | 浙江海洋大学 | 一种石油微生物检测工具箱用培养基组 |
| CN113383222A (zh) | 2019-01-28 | 2021-09-10 | 贝克顿·迪金森公司 | 具有集成的拭子和测试装置的有害污染物收集装置 |
| CN113544283A (zh) * | 2019-03-14 | 2021-10-22 | 默克专利股份公司 | 用于微生物的长期监控的新型取样方法 |
| CN113891932A (zh) * | 2019-06-25 | 2022-01-04 | 3M创新有限公司 | 用于生长微生物的装置 |
| JP7362119B2 (ja) * | 2020-02-03 | 2023-10-17 | 国立研究開発法人物質・材料研究機構 | 測定装置 |
| WO2021170606A1 (en) * | 2020-02-26 | 2021-09-02 | Merck Patent Gmbh | Device and method for testing differential growth of microorganisms |
| US20210278320A1 (en) * | 2020-03-05 | 2021-09-09 | Robert Laughlin | Decontamination Assessment |
| WO2021255593A2 (en) * | 2020-06-19 | 2021-12-23 | 3M Innovative Properties Company | Device for growing microorganisms |
| US11519904B2 (en) * | 2020-07-04 | 2022-12-06 | Soheila Salahshoor Kordestani | Infection detection device and method using same |
| CN112877200B (zh) * | 2020-12-25 | 2023-04-18 | 杭州师范大学 | 一种丝状真菌取样装置 |
| WO2023002406A1 (en) * | 2021-07-22 | 2023-01-26 | 3M Innovative Properties Company | Protected sample collection media |
| CN114018812B (zh) * | 2021-11-10 | 2023-10-20 | 重庆大学 | 一种细菌采集检测一体化微流控荧光芯片及其应用 |
| CN114574350A (zh) * | 2022-03-03 | 2022-06-03 | 合肥檀泰环保科技有限公司 | 生活饮用水微生物检测系统及检测方法 |
| GB2631673A (en) * | 2023-03-20 | 2025-01-15 | Smiths Detection Watford Ltd | Sample swabs and method of production |
| US20250347622A1 (en) * | 2023-09-25 | 2025-11-13 | Craig Ellins | Organic plant material microbial test kit devices and processing method |
| US12228511B1 (en) * | 2023-09-25 | 2025-02-18 | Craig Ellins | Organic plant material microbial test kit devices and processing method |
Family Cites Families (70)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1005381B (it) * | 1974-02-15 | 1976-08-20 | Sclavo Inst Sieroterapeut | Attrezzatura per l esecuzione del controllo di qualita nei laboratori di batteriologia clinica e industriale e procedimento per la preparazione di essa |
| US4279995A (en) | 1979-12-03 | 1981-07-21 | Mcdonnell Douglas Corporation | Selective salmonella carbohydrate and medium constructed therefrom |
| EP0070310B1 (en) * | 1981-01-27 | 1986-05-07 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Dry culture media |
| US4575783A (en) | 1983-09-16 | 1986-03-11 | Manville Service Corporation | Reflector for illuminating signs |
| GB2185039B (en) * | 1985-12-30 | 1990-01-31 | Pioneer Hi Bred Int | Method for differentiation with film medium of lactobacillus organisms from streptococcus organisms. |
| US4868110A (en) | 1986-10-06 | 1989-09-19 | Biocontrol Systems, Inc. | Methods and device for detection of microorganisms |
| US5385826A (en) | 1989-04-21 | 1995-01-31 | Gundersen Medical Foundation, Ltd. | Diagnostic assay for lyme disease |
| US5194374A (en) | 1989-04-27 | 1993-03-16 | Eurec | Isolating medium for identifying the salmonella bacterium |
| US5089413A (en) * | 1989-05-19 | 1992-02-18 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Method and apparatus for culturing with microbiological dry culture medium |
| US5118750A (en) | 1990-04-20 | 1992-06-02 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Pressure-sensitive adhesive comprising solid tacky microspheres and macromonomer-containing binder copolymer |
| US5096668A (en) | 1990-04-26 | 1992-03-17 | Difco Laboratories | Diagnostic test slide |
| US5348861A (en) | 1990-10-23 | 1994-09-20 | Lonza Ltd. | Device and method for the detection of microorganisms which produce low-molecular-weight metabolites |
| WO1992007899A2 (en) | 1990-10-30 | 1992-05-14 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Articles having a hydrophilic polymeric shell and method for preparing same |
| FR2671100B1 (fr) | 1990-12-28 | 1993-03-05 | Bio Merieux | Procede d'analyse bacteriologique, et milieu de detection des bacteries genre salmonella. |
| US5232838A (en) | 1991-12-09 | 1993-08-03 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Culture media device and method of use |
| CA2138272A1 (en) | 1992-07-13 | 1994-01-20 | Steven P. Floeder | A technique to count objects in a scanned image |
| US5364766A (en) | 1993-05-14 | 1994-11-15 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Culture medium for rapid count of coliform bacteria |
| WO1995018324A1 (en) | 1993-12-28 | 1995-07-06 | Toto Ltd. | Hot and cold water mixing device |
| US5443963A (en) | 1994-01-31 | 1995-08-22 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Method for detecting staphylococci |
| US5629170A (en) | 1994-03-25 | 1997-05-13 | General Electric Company | Method for detecting dehalogenation of halogenated aromatic compounds |
| US5462860A (en) | 1994-06-06 | 1995-10-31 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Conditioned culture medium for rapid growth and detection of microbes |
| US5601998A (en) | 1994-08-18 | 1997-02-11 | Minnesota Mining & Mfg | Culture medium and device for detection and enumeration of enterobacteriaceae |
| US5565783A (en) * | 1994-09-29 | 1996-10-15 | Pacific Gas And Electric Company | Fault sensor device with radio transceiver |
| FI98379C (fi) | 1995-03-24 | 1997-06-10 | Orion Yhtymae Oy | Elatusaine ja menetelmä salmonellojen tunnistamiseksi |
| US5681712A (en) | 1995-06-02 | 1997-10-28 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Surface colony counting device and method of use |
| JPH08336381A (ja) | 1995-06-12 | 1996-12-24 | Dainippon Printing Co Ltd | 培養装置 |
| TW369562B (en) | 1996-07-17 | 1999-09-11 | Chisso Corp | Devices for detecting microorganisms and culture media for use in said devices |
| US6022682A (en) * | 1996-08-14 | 2000-02-08 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Article and method for detection of enterotoxigenic staphylococci |
| EP1045923B2 (en) | 1996-09-16 | 2008-01-23 | R & F Products, Inc. | Method for isolation and identification of (escherichia coli) 0157:h7 and plating media for said process |
| US5879951A (en) | 1997-01-29 | 1999-03-09 | Smithkline Diagnostics, Inc. | Opposable-element assay device employing unidirectional flow |
| WO1998055644A1 (en) | 1997-06-04 | 1998-12-10 | Freeman Group Of Hospitals Nhs Trust | Identification of salmonella |
| US6002789A (en) | 1997-06-24 | 1999-12-14 | Pilot Industries, Inc. | Bacteria colony counter and classifier |
| US6984499B2 (en) | 1997-10-02 | 2006-01-10 | Idexx Laboratories, Inc. | Method and apparatus for concurrently detecting pathogenic organisms and antimicrobial susceptibility |
| US6596532B1 (en) | 1997-12-12 | 2003-07-22 | BIOMéRIEUX, INC. | Device for isolation and surface culture of microorganisms from bulk fluids |
| US5976827A (en) | 1997-12-12 | 1999-11-02 | Akzo Nobel, N.V. | Sensor device for detecting microorganisms and method therefor |
| US6174699B1 (en) | 1999-03-09 | 2001-01-16 | 3M Innovative Properties Company | Disc assay device with inoculation pad and methods of use |
| US6251624B1 (en) | 1999-03-12 | 2001-06-26 | Akzo Nobel N.V. | Apparatus and method for detecting, quantifying and characterizing microorganisms |
| JP4143219B2 (ja) | 1999-05-19 | 2008-09-03 | 日水製薬株式会社 | 簡易培地及びその製造方法 |
| CA2379565A1 (en) | 1999-07-21 | 2001-02-01 | Kenneth C. Hou | Microorganism filter and method for removing microorganism from water |
| US6391626B1 (en) | 1999-08-23 | 2002-05-21 | 3M Innovative Properties Company | Culture medium and device using ballasted pH indicators for detection and enumeration of microorganisms |
| US6649406B1 (en) * | 1999-11-23 | 2003-11-18 | 3M Innovative Properties Company | Device for propagation and storage of microorganisms |
| CA2405122A1 (en) | 2000-04-04 | 2001-10-11 | Home Health Science Inc. | Method and kit for detecting microorganisms |
| JP2001321196A (ja) | 2000-05-15 | 2001-11-20 | Chisso Corp | サルモネラ菌検出用培地積層物およびシート状培地 |
| US6756225B2 (en) | 2000-12-08 | 2004-06-29 | 3M Innovative Properties Company | Automated imaging and harvesting of colonies on thin film culture devices |
| FR2819266B1 (fr) | 2001-01-05 | 2004-01-16 | Alain Rambach | Milieu de culture pour la detection et/ou la discrimination des bacteries du genre listeria et procede de mise en oeuvre |
| US7150977B2 (en) | 2001-06-20 | 2006-12-19 | R&F Products, Inc. | Plating media for the identification of Salmonella |
| US7703179B2 (en) | 2001-11-09 | 2010-04-27 | 3M Innovative Properties Company | Microreplicated surface |
| JP4147063B2 (ja) | 2002-07-26 | 2008-09-10 | 日水製薬株式会社 | サルモネラ簡易検出法 |
| US7298885B2 (en) | 2002-11-27 | 2007-11-20 | 3M Innovative Properties Company | Biological growth plate scanner with automated image processing profile selection |
| US20040102903A1 (en) | 2002-11-27 | 2004-05-27 | Graessle Josef A. | Biological growth plate scanner |
| US20040101954A1 (en) | 2002-11-27 | 2004-05-27 | Graessle Josef A. | Back side plate illumination for biological growth plate scanner |
| US7496225B2 (en) | 2003-09-04 | 2009-02-24 | 3M Innovative Properties Company | Biological growth plate scanner with automated intake |
| US7298886B2 (en) * | 2003-09-05 | 2007-11-20 | 3M Innovative Properties Company | Counting biological agents on biological growth plates |
| FR2873714B1 (fr) | 2004-07-27 | 2006-11-17 | Rambach Alain | Milieu d'enrichissement selectif des salmonelles comprenant du tetrathionate et un sel de magnesium |
| JP2006230219A (ja) | 2005-02-22 | 2006-09-07 | Nitto Denko Corp | 微生物の計数検査方法及び該方法に用いる微生物検査用粘着シート |
| EP1877533A2 (en) | 2005-04-18 | 2008-01-16 | Dsm Ip Assets B.V. | Biochip and process for the production of a biochip |
| US20060257967A1 (en) | 2005-05-13 | 2006-11-16 | Lawrence Restaino | Chromogenic plating media for the identification of Enterobacter sakazakii |
| US8071597B2 (en) | 2005-08-26 | 2011-12-06 | Merck Serono Sa | Pyrazine compounds and uses as PI3K inhibitors |
| US20070259393A1 (en) | 2006-05-02 | 2007-11-08 | Lawrence Restaino | Plating media for the presumptive identification of Listeria sp, Listeria monocytogenes and Listeria ivanovii |
| US20100190204A1 (en) | 2007-03-22 | 2010-07-29 | Nanologix, Inc. | Detection and Identification of Microorganisms on Transparent Permeable Membranes |
| BRPI0811355A2 (pt) | 2007-05-31 | 2014-10-29 | 3M Innovative Properties Co | Dispositivos, processo e kit destinados a coletar e concentrar amostras para análise microbiológica |
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