BRPI0904754A2 - radiofármaco e suas composições para cintilografia de sìtios inflamatórios e infecciosos - Google Patents

Abstract

RADIOFáRMACO E SUAS COMPOSIçõES PARA CINTILOGRAFIA DE SITIOS INFLAMATóRIOS E INFECCIOSOS. A presente invenção refere-se a um radiofármaco constituído de um radionuclídeo complexado a uma molécula análoga da glicose para a cintilografia de processos inflamatórios e infecciosos. A invenção compreende os compostos de tio-açucares e seus derivados, e um radionuclídeo emissor de raios gama ou raios-X, tais como Tc-99m ou ln-111, bem como suas composições radiofarmacêuticas compreendendo veículo fisiologicamente aceitável selecionados do grupo compreendendo água para injetáveis, solução salina estéril, solução tampão. Possibilitando assim a cintilografla de inflamações de luxação, necrose vascular, abscessos, necroses teciduais, edemas, infecções em próteses, identificação de sepsias, inflamações induzidas por neoplasias, inflamações imuno-relacionadas, infecções sépticas e assépticas associadas, inflamações radio induzidas, infecções e inflamações induzidas em implantes e transplantes, doenças reumatóides, artrites, e disfunções nas pequenas e grandes articulações, bem como infecções variadas.

Description

RADIOFÁRMACO E SUAS COMPOSIÇÕES PARA CINTILOGRAFIA DESÍTIOS INFLAMATÓRIOS E INFECCIOSOS"

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a um radiofármaco constituído de umradionuclídeo complexado a uma molécula análoga da glicose para a cintilografiade processos inflamatórios e infecciosos.

A invenção compreende os compostos de tio-açucares e seus derivados, eum radionuclídeo emissor de raios gama ou raios-X, tais como Tc-99m ou ln-111,bem como suas composições radiofarmacêuticas compreendendo veículofisiologicamente aceitável selecionados do grupo compreendendo água parainjetáveis, solução salina estéril, solução tampão. Possibilitando assim acintilografia de inflamações de luxação, necrose vascular, abscessos, necrosesteciduais, edemas, infecções em próteses, identificação de sepsias, inflamaçõesinduzidas por neoplasias, inflamações imuno-relacionadas, infecções sépticas eassépticas associadas, inflamações radio induzidas, infecções e inflamaçõesinduzidas em implantes e transplantes, doenças reumatóides, artrites, edisfunções nas pequenas e grandes articulações, bem como infecções variadas.

ESTADO DA TÉCNICA

O processo inflamatório faz parte do mecanismo natural de defesa doorganismo humano contra agentes externos, acompanhando os processos dereparo dos tecidos acometidos. Fazem parte deste processo: mecanismoscomplexos tais como quimiotaxia, adesão e rolagem de leucócitos, bem comomigração, produção de interleucinas envolvidas em interações celulares, além daativação de diversos tipos células do sistema de defesa acompanhado deinterações moleculares de alta especificidade.

A detecção de processos inflamatórios envolve cintilografia, pela medicinanuclear, bem como, tomografia computadorizada (TC) e ressonância magnéticanuclear (RMN), pela radiologia. Na cintilografia, utiliza-se a técnica de marcaçãode leucócitos com Tc-99m ou com citrato de Galio-67 (67Ga-Citrato), tendo esteúltimo sido aplicado por mais de três décadas.

O complexo 99Tc-hexametilpropilenoamina oxima (HMPAO), identificadopor Tc-99m - HMPAO, consegue marcar seletivamente os leucócitos ex-vivo.Atualmente, ln-111 oxima e Tc-99m HMPAO têm sido usados como padrão ouropara marcação de inflamações. A técnica de cintilografia com leucócitosmarcados com Tc-99m HMPAO auxilia a avaliação da evolução da inflamaçãovisto que a RMN e a TC não têm precisão suficiente para identificar alteraçõesteciduais já instaladas. A sensibilidade desta técnica está associada à capacidadede acompanhar alterações fisiológicas e bioquímicas, aumento da permeabilidadevascular, aumento do fluxo sangüíneo local, o extravasamento celular, em estágioprecoce, antes de alterações anatômicas possam ser identificas. (Brasilerio,Claudia Borges (dissertação); Campos, T.P.R. (orientador) Avaliação deProcessos Inflamatórios na Articulação Temporomandibular EmpregandoTécncias Nucleares em Modelo Animal, Dissertação de Mestrado, Programa deCiências e Técnicas Nucleares, Universidade Federal de Minas Gerais, 2004)

Como outros monossacarídeos, os açúcares, carbaçúcares (com átomo denitrogênio e carbono, respectivamente, substituindo o átomo de oxigênio no anelpiranosídico) e os tioaçúcares (com átomo de enxofre em vez do átomo deoxigênio no anel) ganharam importância em glicobiologia e como drogaspotenciais. Quarenta anos da química destes compostos têm produzido umnúmero grande de monotiossacarídeos e de análogos de interesse biológico.

Devido aos açúcares de enxofre poderem participar mais prontamente queos correspondentes de oxigênio em processos heterolíticos, a química dostioaçúcares e os seus análogos é mais tênue e às vezes mais delicada que a dosaldoses e alditois correspondentes. Tioaçúcares com um átomo de enxofre noanel possuem propriedades biológicas interessantes. A síntese de 5-tio-a-D-xilopiranose demonstra o primeiro exemplo de um tioaldose. Em 1984, o primeiroexemplo de um tioaçúcar natural foi identificado, o ácido 5-amino-5-deoxi-4-tio-L-glicero-L-ido-hepturônico. Este faz parte dos açúcares dos antibióticos dealbomicina. Em 1987, 5-tio-D-manose foi isolado da esponja marinha Clathriapyramida (LendenfIed) . Salacinol e Kotalanol foram isolados da SalaciaReticulata, a erva usada em medicina indiana tradicional para diabetes emostrado ser um inibidor potencial de α-glucosidases intestinal.

A substituição do átomo de oxigênio do anel de piranosídeos (cadeia cíclicacom 6 átomos) e furanosídeos (cadeia cíclica com 5 átomos) por um átomo deenxofre é suficiente para modificar a reatividade anomérica (conformações α ou β)dos monossacarídeos correspondentes, para afetar seu estado conformacionalfundamental e, além de tudo, sua flexibilidade. A substituição do átomo deoxigênio no anel do D-glicopiranose pelo átomo de enxofre produz o 5-tio-D-glicopiranose (5α, 5β)

Comparando os espectros de RMN-1H que acoplam constantes de pares deprótons vicinais de tioaçúcares com esses dos açúcares de oxigêniocorrespondentes, distorções de contração significativas foram achadas nos a-anômeros do 5-tio-D-glucopiranose e 5-deoxi-5-tio-D-xilopiranose. Distorçõesmenores foram descobertas dentre os β-anômeros. As distorções de contraçãosão acompanhadas por um movimento dos grupos hidroxila vicinal. Quandoambos ocupam posições equatoriais, eles se põem mais próximos uns para comos outros, considerando que quando eles ocupam posições axiais e equatoriais(HO-C1, HO-C2 em 1, 5), a separação entre eles aumenta.

Comparado com um furanosídeo natural, a flexibilidade conformacional de4-tiohexofuranosídeo é afetada pela maior ligação C-S, pelo menor ângulo de C-S-C e pelos efeitos diferenciais anoméricos entre o S-C-O e O-C-O.

As diferenças das atividades biológicas entre tioaçúcares e os análogos deoxigênio dependem do arranjo geométrico, conformacional e das diferenças deflexibilidade. Elas também dependem das diferenças eletrônicas destescompostos uma vez que o enxofre é menos eletronegativo e mais polarizável queo etéreo correspondente. Em uma tentativa para entender a maior doçura de 5-tio-D-glicose comparado com o D-glicose, cálculos de mecânica quânticamostraram as diferenças em distribuição de carga que poderia fazer um papelsignificante nas interações entre o açúcar e o receptor.

Em água, o 5-tio-D-gIicose existe em uma razão de 85:15 em equilíbrio deα-piranose e seu β-anômero quando comparado com D-glicose para qual a razãoé 32:68 da mistura de α-piranose e β-piranose. 5-tio-oc-D-glicopiranose passa pormutarrotações mais rápido que α-D-glicopiranose em etanol aquoso. Emcontraste, 4-tio-D-gIicose em água prefere a forma de furanose.

Por causa do interesse crescente na bioquímica pelo 5-tio-D-glicose,uma rota alternativa para sua síntese foi altamente desejada. Desde queaçúcares de cloro têm provado ser valiosos intermediários na preparação dedeoxi e amino açúcares, eles poderiam ser usados para prover uma síntesemais curta de 5-tio-D-glicose. As rotas de síntese improvisadas para o 5-tio-D-glicose usa 5,6-anidro-3-0-benzil-1,2-0-isòpropillideno-p-L-idofranose e 5,6-anidro-1,2-0-isopropilideno-P-L-idofuranose.

Ozker et. al,( Ozker K1 Collier BD, Lindner DJ1 Kabasakal L1 Liu Y1 KrasnowAZ, Hellman RS1 Edwards SD1 Bourque CR1 Crane PD. Biodistribution of 99Tcm-labelled 5-thio-D-glucose Nucl Med Commun. 1999 Nov;20(11):1055-8.), estudoua biodistribuição e localização tumoral com Tc-99m marcado com 5-tio-D-glicose(Tc-99m-TDG). 5-tio-D-glicose foi marcado com Tc-99m reduzido diretamentecom íons estanoso. A biodistribuição foi investigada em coelhos normais e ratoscom tumor experimental. Em coelhos, no plasma e a eliminação do (Tc-99m)-tio-D-glicose foi de 14.5 e 11.3 mL/min. Excreção urinaria às 1h foi de 53 mL/min. Ocomposto foi injetado intravenoso em ratos com carcinoma de colo MC26, eamostras de tecidos foram analisados por cintilografia gama em vários períodos.

A captação de TDG no tumor a 1 e 3 h foram 1.6 e 1.2%, a razão tumor/músculofoi de 2.7:1 e 4:1 nos respectivos tempos. A biodistribuição por autoradiografia emrato com MX-1 mama humano xenógrafo mostrou persistente captação maior doque 14C-deoxyglicose (DG). O radiofármaco de Tc-99m acumula no centro dotumor, 14C-DG glicose foi decrescendo na região central. Há discordância entre acaptação da TDG com a 14C-DG, sendo que TDG não age como um análogo deglicose, sugerindo que TDG é ávido para zonas de infarto e necrose, ou zonastumorais isquêmicas.

Atualmente, encontramos disponíveis algumas patentes relacionadas aouso de radiofármacos para dectecção de sítios de inflamação:

A patente US 5792444, intitulada "Labeled chemotactic peptides to imagefocai sites of infection or inflammatiorí' relata um método de detecção de sítios deinfecção ou inflamação, e um método de tratamento de tais infecções ouinflamações em um indivíduo pela administração de um peptídeo com capacidadeterapêutica e de diagnóstico junto com um marcador conjugado. Este peptídeo éum quimiotáctico que acumula substancialmente no sitio de infecção ouinflamação. O peptídeo quimiotáctico possui em sua estrutura um grupo amino,um resíduo aminoácido, uma seqüência espaçadora e um radionuclídeomarcador.A patente US 5376356, intitulada "Imaging tissue sites of inflammatiori",descreve um método de cintilografia de sítios teciduais de inflamaçãoapresentando um marcador de antígeno com regulação própria na superfície dosleucócitos sob ativação. O agente de reconhecimento é selecionado do grupo depeptídeos quimiotáticos, ou peptídeos eosinófilos e agentes que são capazes deinteragirem seletivamente com um receptor quimiotático associado com leucócitosativados. O agente de reconhecimento radiomarcado é aplicado por infusão nopaciente e a região do tecido do paciente é submetida a métodos de imagem afim de se obter monitoramento do tecido inflamado.

A patente US 4926869, intitulada "Method for the diagnosis and treatmentof inflammatiori" relata um método de detecção de inflamação de um indivíduopela administração de uma quantidade detectável de imunoglobulinaradiomarcada ou fragmentos da mesma, onde a imunoglobulina acumulasubstancialmente no sitio onde ocorre a inflamação.

A patente US4360509 intitulada "vivo radioassay process", descreve umteste in vivo em que um quelante radioativo de índio-111 e uma molécula de 8-hidroxiquinolina são introduzidos no sangue do animal onde o quelante acumulajunto às regiões inflamadas. Desta forma, o quelante é concentrado na inflamaçãoe serve para varredura por cintilografia do corpo, por alguma técnica de imagemexterna.

Por sua vez, as patentes que investigaram a síntese e aplicação decompostos de tio-D-glicose, podem ser citadas:

A patente US 6,099,822, intitulada "Imaging methods and compositions",relata uma composição útil para cintilografia de tecidos isquêmicos, em especialtumores e infarto do miocárdio, sendo que a composição se resume no complexoformado pelo Tc-99m e 5-tio-D-glicose.Descreve adicionalmente um método degerar imagem in vivo de tecidos isquêmicos e tumor em cobaias através dacaptação de uma quantidade efetiva de (Tc-99m)-5-tio-D-glicose, e apresenta avarredura do sujeito de estudo para determinar a biodistribuição do complexo.

Vários análogos de glicose (glucoheptonato, gluconato, glucarato)marcados com Tc-99m podem ser úteis na detecção de tumores e injúrias agudasnos tecidos. Tc-99m glucarato, um açúcar dicaroxilato com seis carbonos,acumula em tumores e regiões infartadas do miocárdio. Tc-99m-glucaratotambém concentra em tecidos necróticos. Assim, este composto pode ser útil nadetecção de necrose em miocárdio e diferenciação de isquemia do miocárdio comdor aguda no peito. O mecanismo exato de localização do Tc99m-glucarato não éconhecido. A presença de frutose in vitro inibe a captação de glucorato em célulashipóxicas, mas não tem efeito em células aeradas. A captação de glucarato emtumores de mama humano é superior do que Tc-99m-MIBI e Tc-99m-DTPA.

Apesar dos resultados encorajadores deste agente de imagem, este é instável invivo. Um processo de transferência entre outros Iigantes pode estar presente invivo, e conseqüentemente inibe o uso deste composto. Existe uma necessidadede investigação da isquemia aguda de tecidos em especial presentes após ataquedo coração, que devem ser distinguidos de tecidos normais, bem como imagemde tumores.

A patente W000154734 intitulada "188Re-IabeIIed 5-tio-D-glicose forradionucleotide tumor therapy", relata um novo radiofarmaco útil para terapiamedica, consistindo de uma molécula de tio-D-glicose marcada com um isótoporênio. Esta invenção aborda o emprego da molécula de 5-tio-D-glicose marcadacom Re-188 para fins terapêuticos, em especial para tratamento de tumoressólidos. Esta patente apresenta um método de preparo do radiofármaco,envolvendo 5-tio-D-glicose, íons estanoso, e uma solução de Re-188 em umsolvente. Ele sugere que este radiofármaco pode ser aplicado a uma diversavariedade de tumores, que podem ser eliminados por uso deste radiofármaco.

A patente US 4,208,398 descreve compostos mercaptanos radioativos paraavaliação da função dos rins, através da mensuração da capacidade de filtragemdo rim pela perda da atividade.

A patente US3932625 aborda a aplicação de 5-tio-D-glicose em supressãode energia para células infectadas de parasitas; e, conseqüente eliminação deparasitoses.

PROBLEMAS DO ESTADO DA TÉCNICA

O diagnóstico de processos inflamatórios através dos métodos radiológicoscomo tomografia computadorizada (TC) e ressonância magnética nuclear (RMN),apresentam boa sensibilidade, mas baixa especificidade.Através de métodos cintilográficos utiliza-se o complexo 99mTc-hexametilpropilenoamina oxima (HMPAO),que consegue marcar seletivamente osleucócitos ex-vivo.Porém,o complexo processo de marcação dos leucócitos prévioao processo de cintilografia representa uma grande limitação para esta técnica,uma vez que há necessidade de direto contato com sangue, através de suaremoção e manipulação química, para posterior reaplicação. Esta manipulaçãoquímica de sangue humano para marcação ex-vivo representa uma fonte decontaminação de alto risco tanto para o paciente como para o corpo clinico.

Desta forma, há a necessidade de substituir o Tc99m-HMPAO por novosradiofármacos de fácil marcação e rápida cintilografia, com alta especificidade esensibilidade para inflamação-infecção.

Nenhuma das técnicas descritas nas patentes supracitadas é atualmenteutilizada comercialmente. Além disso, o uso de peptídeos ou imunoglobulinas éatrativo, mas a definição e produção de tais moléculas são ainda de extremacomplexidade.

VANTAGENS DA TECNOLOGIA

Com o intuito de solucionar tais limitações existentes tanto no uso doTc99m-HMPAO, bem como das patentes relacionadas, e solucionar o problemade cintilografia de inflamações a presente invenção descreve o processo demarcação, e o processo cintilográfico de inflamação-infecção dos compostos tio-glicose e seus derivados.

Em outro aspecto, foi possível observar que na literatura e nos bancos depatentes, os compostos de tioglicose não foram investigados para diagnóstico deinflamações. Também se observou que o único composto investigado paraimagiamento e terapia de tumores, cujas patentes foram descritas, foi o 5-tio-D-glicose. Da mesma forma, há indicações de uso do 5-tio-D-glicose paraimagiamento de isquemia do coração e mesmo a investigação das funçõesrenais. Porém, em nenhum momento este composto foi investigado para uso eminflamações ou infecções.

Por sua vez, o composto 1-tio-beta-D-glicose, também análogo da glicose,não foi mencionado nas patentes, e mesmo, não há investigação do emprego do1-tio-D-glicose como radiofármaco no diagnóstico por imagem sítios inflamatórios.BREVE DECRIÇÃO DAS FIGURAS

Figura 1: Espectrograma de UV-visível do 5-tio-D-glicose

Figura 2: Espectrograma de UV-visível do 5-tio-D-glicose

Figura 3: Sobreposição dos espectrogramas de UV-vis para o monossacarídeo 5-tio-D-glicose, o padrão tecnécio e suas marcações

Figura 4: Cromatrograma de 5-tio-D-glicose obtido por CLAE

Figura 5: Sobreposição dos cromatogramas de 5-TDG, Tc-99 e marcações Tc1,Tc2 e Tc3

Figura 6: Espectrograma de infravermelho do 5-tio-D-glicose e do complexo Tc-99-5-tio-D-glicose

Figura 7(a): Resposta de cromatografia em camada delgada de Tc-99

Figura 7(b): Resposta de cromatografia em camada delgada de do complexo Tc-99 -5-tio-D-glicose

Figura 8: Resposta cintilográfica de modelo em rato

DESCRIÇÃO DETALHADA DA TECNOLOGIA

A presente invenção descreve um composto a base de tioglicose, taiscomo 1-tio-p-D-glicose e 5-tio-glicose, marcado com radiosiótopo Tc-99m paracintilografia de inflamações agudas e crônicas.

A invenção compreende os compostos de tio-açucares e seus derivados, eum radionuclídeo emissor de raios gama ou raios-X, tais como Tc-99m ou ln-111,bem como suas composições radiofarmacêuticas compreendendo veículofisiologicamente aceitável selecionados do grupo compreendendo água parainjetáveis, solução salina estéril, solução tampão. As mesmas podem seradministradas pelas vias intramuscular, intravenosa, subcutânea, transdérmica oucomo dispositivos que possam ser implantados ou injetados.

Possibilitando assim a cintilografia de inflamações de luxação, necrosevascular, abscessos, necroses teciduais, edemas, infecções em próteses,identificação de sepsias, inflamações induzidas por neoplasias, inflamaçõesimuno-relacionadas, infecções sépticas e assépticas associadas, inflamaçõesradio induzidas, infecções e inflamações induzidas em implantes e transplantes,doenças reumatóides, artrites, e disfunções nas pequenas e grandes articulações,bem como infecções variadas.

A presente invenção pode ser mais bem entendida através dos seguintesexemplos, não Iimitantes de tecnologia:

Exemplo 1: Marcação do 5-tio-D-glicose com tecnécio

Foram feitas três tentativas de marcação do 5-tio-D-glicose com tecnécio,referidas como Tc1, Tc2 e Tc3, dissolvendo-se o monossacarídeo para 1 mL desoro fisiológico (NaCl 0,9 %) num béquer de 10 mL. Adicionou-se cloretoestanoso biidratado e, em seguida, 1 mL de solução de pertecnetato de sódio. Aatividade medida do 99mTc1 como NaTcO4, 6 horas antes de sua manipulação, era9,62 Gbq (26 mCi). No entanto, as marcações foram realizadas com o nuclídeoem seu estado estável, "Tc. A estequiometria destas marcações está expressana tabela I.

Tabela 1. Estequiometria das marcações com Tc.

<table>table see original document page 10</column></row><table>

Exemplo 2: Análise do 5-tio-D-glicose por espectroscopia

Foi realizada análise do 5-tio-D-glicose puro em espectrofotômetro UVPC,o mesmo apresentou comprimento de onda máximo em 209 nm, conformeapresentado na figura 1.

Adicionalmente a figura 2 apresenta o espectrograma de UV-vis do 5-tio-D-glicose puro, segundo o detector UV-vis do cromatógrafo Shimadzu LC 10 AD. Ocomprimento de onda máximo do 5-tio-D-glicose, segundo este detector,corresponde a 197 nm. Os valores obtidos de comprimento de onda máximo doaçúcar puro serão utilizados para determinar os canais utilizados nas análises dosprodutos de marcação dos nuclídeos com o monossacarídeo por CLAE.Exemplo 3: Análise da sobreposição dos espectrogramas de UV-vis para omonossacarídeo 5-tio-D-glicose, o padrão tecnécio e suas marcações

A figura 3 apresenta a sobreposição dos espectrogramas de UV-vis para omonossacarídeo 5-tio-D-glicose, o padrão tecnécio e suas marcações. Os valoresde comprimento de onda máximos que foram extraídos do gráfico da figura 3estão dispostos na tabela 2 para serem analisados. Percebe-se, pela análise dosdados da tabela 3, o deslocamento do comprimento de onda do padrão 99Tc(198,5 nm). As marcações Tc1, Tc2 e Tc3 apresentaram, individualmente, trêscomprimentos de onda máximo em 220, 270 e 300 nm aproximadamente. Destasobservações, pressupõe-se que as aproximações dos orbitais atômicos dosátomos de enxofre no Iigante 5-tio-D-glicose não ocorram orientadas pelos eixoscartesianos (o que levaria a um aumento da energia de repulsão e,conseqüentemente, a uma diminuição do comprimento de onda), mas sim pelasbissetrizes dos eixos, onde esta energia repulsiva é menor, acarretando numdeslocamento do comprimento de onda mais alto, o denominado deslocamentoBatocrômico.

Tabela 2. Valores de comprimento de onda e absorvância do 5-TDG, 99Tc emarcações.

Padrões e produtos marcados

<table>table see original document page 11</column></row><table>

Exemplo 4: Análise por CLAE de 5-tio-D-glicose puro

Conforme observado no cromatograma da figura 4, o 5-tio-D-glicose puroapresentou três picos de tempo de retenção. Seus valores são mostrados natabela 3.Tabela 3. Valores de tempo de retenção (Tr)1 no canal 197 nm,para os picos presentes no cromatograma do 5-TDG não marcado.

<table>table see original document page 12</column></row><table>

Quando marcado, o 5-tio-D-glicose possibilita o aparecimento de novo picoque não estes correspondentes ao monossacarídeo puro, certamenteaumentando seu tempo de retenção devido à formação da ligação coordenada doátomo de enxofre ao metal.

Exemplo 5: Análise da a sobreposição dos cromatogramas de CLAE do 5-TDG, "Tc e marcações Tc1, Tc2 e Tc3

A Figura 5 apresenta a sobreposição dos cromatogramas do 5-TDG, 99Tc emarcações Tc1, Tc2 e Tc3 a 197 nm. As Análises por CLAE das marcações do 5-tio-D-glicose com 99Tc1 pode ser vista a seguir. Eluiu-se, inicialmente, apenas opadrão contendo 99Tc a fim de conhecer seu tempo de retenção (TR) para,posteriormente, compará-lo aos valores de TR das marcações Tc1, Tc2 e Tc3.

Todos os valores de TR são apresentados na tabela 4 juntamente com asinterpretações de seus valores.Tabela 4. Valores de tempo de retenção (Tr) para os picos presentes noscromatogramas do padrão 99Tc e suas marcações nos canais 197 e 210 nm.Eluente acetonitrila/água 3:1.

<table>table see original document page 13</column></row><table>

Considera-se aqui, primariamente, que o chamado padrão 99Tc é naverdade uma mistura da eluição oriunda da coluna do gerador de tecnécio. Esta,por sua vez, apresenta impureza química, que podem ser permolibdenato MoO4",metais livres como Mo e Tc e ainda seus óxidos, nos quais seus estados deoxidação podem variar de 1+ a 7+. Para o pico Tr1, a 197 nm, nota-se poucaalteração do tempo de retenção do padrão 99Tc (3,295 min) para as tentativas demarcação Tc1 (3,320 min), Tc2 (3,214) e Tc3 (3,396 min). O mesmo pico Tr1, nocanal 210 nm, apresentou comportamento similar ao do canal 197 nm com Tc(3,286 min) e as marcações Tc1 (3,337 min), Tc2 (3,209 min) e Tc3 (3,390 min).

Logo, o pico Tr1 pode ser o nuclídeo livre tanto na solução do padrão quanto nassoluções das tentativas de marcação. O pico Tr2 (4,126 min), em 197 nm,identificado no padrão Tc parece sofrer um deslocamento com ganho de temponos produtos de marcação, originando o pico Tr3 nas marcações como Tc1(6,022 min), Tc2 (6,095 min) e Tc3 (6,273 min). Em Tc2 não houve a percepçãodo pico de retenção indicado por Tr2 em ambos os comprimentos de onda. Em210 nm, observa-se que Tr2 apresenta-se em 4,163 min e nas marcações comoTc1 (6,035 min), Tc2 (6,147 min) e Tc3 (6,189 min). Sugere-se que Tr3 então sejaao nuclídeo tecnécio marcando 5-tio-D-glicose.Exemplo 7: Análise do espectrograma de infravermelho do 5-tio-D-gIicose edo complexo "Tc-5-tio-D-glicose

A Figura 6 apresenta o espectrograma de infravermelho do 5-tio-D-glicose(linha fina) e do complexo 99Tc-5-tio-D-glicose (linha com marcador) em seusprincipais picos de absorção. É importante ressaltar a ocorrência de dois picos noespectrograma do complexo "Tc-5-tio-D-glicose, a saber, 1396 e 1240 cm"1, quenão são encontrados no espectrograma do açúcar puro. Logo, credita-se que taispicos correspondam à ligação tão esperada entre os dois compostos.Pela sobreposição dos espectrogramas do açúcar 5-tio-D-glicose e do complexo"Tc-5-tio-D-glicose, observa-se: i) as freqüências comuns entre os doiscompostos em que são nítidas as ligações OH e CH; ii) as freqüências queapareceram apenas no espectrograma do produto complexado 99Tc-5-tio-D-glicose podem corresponder à ligação covalente coordenada do átomo de enxofredo anel piranosídico com o íon 99Tc. Porém, não se pode confirmar claramente talligação, pois não há menção na literatura no que se refere á análise porinfravermelho envolvendo metais de transição interna como o tecnécio. iii) aintensidade de transmitância dos picos g e h referem-se à baixa concentração dotecnécio nas amostras.

Tabela 6. Principais freqüências de absorção de radiação infravermelha para ocomplexo 99Tc-5-tio-D-glicose. Os valores de freqüência entre parênteses são dereferência encontrados na literatura, os valores anteriores são experimentais.

<table>table see original document page 14</column></row><table>Exemplo 8: resposta de cromatografia em camada delgada

A figura 7 (a) apresenta medidas de cromatografia de camada delgada emsílica gel, obtidas da corrida do eluente retirado do gerador de Tc-99m, emacetona, através de equipamento radiodetector. Observou-se que o tecnécio livrecorre na cromatografia atingindo a distância máxima do papel, a integral dográfico TLC fornece Rf de 0.942, em um total de 92.41%. Na figura 7(b) pode-seobservar o gráfico de cromatografia de camada delgada em sílica gel docomposto de açúcar 1-thio-d-glucose marcado com Tc-99m eluído do gerador,com pH corrigido para 6.0, corrido após marcação, em acetona. Observou-se queo composto marcado não corre da mesma forma que o Tc-99m livre, demostrandoclaramente a marcação do açúcar. A integral do gráfico TLC para o açúcarmarcado fornece Rf de 0,021 e o rendimento de marcação foi de 95.38%, obtidoda área sob a curva.

Exemplo 9: resposta cintilográfica de modelo em rato

A Figura 8 ilustra uma resposta cintilográfica de modelo em rato obtidoapós indução da inflamação na articulação temporomandibular esquerda, tomada30 minutos após injeção do composto marcado com Tc-99m por via intravenosa.Observa-se na cabeça pequena captação cerebral e abaixo elevada captação naATM (articulação temporomandibular) esquerda inflamada.

Claims (11)

1. RADIOFÁRMACO PARA CINTILOGRAFIA DE SÍTIOS INFLAMATÓRIOSE INFECCIOSOS, caracterizado por compreender uma molécula de análogo deaçúcar complexada a um radionuclídeo emissor de raios-gama ou raios-X.

2. RADIOFÁRMACO PARA CINTILOGRAFIA DE SÍTIOS INFLAMATÓRIOSE INFECCIOSOS, de acordo reivindicação 1, caracterizado por o análogo doaçúcar ser selecionado do grupo compreendendo: tioglicose, tiopiranose outiofuranose.

3. RADIOFÁRMACO PARA CINTILOGRAFIA DE SÍTIOS INFLAMATÓRIOSE INFECCIOSOS, de acordo reivindicação 2, caracterizado por o análogo doaçúcar apresentar um grupo S para ligação com o radionuclídeo, independente desua posição no anel e ocorrência de radicais orgânicos R em outra posições.

4. RADIOFÁRMACO PARA CINTILOGRAFIA DE SÍTIOS INFLAMATÓRIOSE INFECCIOSOS, de acordo com as reivindicações 2 e 3 caracterizado por oanálogo do açúcar ser preferencialmente os compostos: 1-beta-d-tio-glicose e 5-tio-glicose.

5. RADIOFÁRMACO PARA CINTILOGRAFIA DE SÍTIOS INFLAMATÓRIOSE INFECCIOSOS, de acordo reivindicação 1 caracterizado pelo radionuclídeo sermetaestável ou emissor por captura eletrônica, selecionados do grupocompreendendo Tc-99m, ln-111, 1-123, Ga-67 ou TI-201.

6. RADIOFÁRMACO PARA CINTILOGRAFIA DE SÍTIOS INFLAMATÓRIOSE INFECCIOSOS, de acordo com as reivindicações 1 a 6, caracterizado pormanter as mesmas propriedades químicas da molécula marcada.

7. COMPOSIÇÕES RADIOFARMACÊUTICAS, caracterizadas porcompreenderem o radiofármaco descrito na reivindicação 1, e pelo menos umveículo farmacêutica e fisiologicamente aceitável.

8. COMPOSIÇÕES RADIOFARMACÊUTICAS, de acordo com areivindicação 8, caracterizadas pelo veículo ser selecionado do grupocompreendendo água para injetáveis, solução salina estéril, solução tampão.

9. COMPOSIÇÕES RADIOFARMACÊUTICAS, de acordo com asreivindicações 1 a 9, caracterizadas por serem administradas pelas viasintramuscular, intravenosa, subcutânea, transdérmica ou como dispositivos quepossam ser implantados ou injetados.

10. COMPOSIÇÕES RADIOFARMACÊUTICAS, de acordo com asreivindicações 8 a 10, caracterizadas por ser na preparação de medicamentospara diagnóstico de processos inflamatórios ou infecciosos

11. MÉTODO PARA DIAGNÓSTICO DE PROCESSOS INFLAMATÓRIOS EINFECCIOSOS, caracterizado pela administração da composição descrita nasreivindicação 8 a 10.