BRPI0908917A2 - Sais de (e)-n-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1h-pirazol-4-il)-benzenossul-fonil]-1h-pirrol-3-il}-acrilamida - Google Patents

Abstract

sais de (e)-n-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil- j 1h-pirazola-il)-benzenossul-fonil]-1h-pirrol-34l}- acrilamida. a presente invenção refere-se a um sal de (e)-n-(2-amino-fenil)- 3-{1-[4-(1-metil4 h-p irazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 h-pirrol-3-ií}-acrilamida selecionado do grupo que consiste em bromidrato, metanossulfonato, hemietano-1,2-dissulfonato, benzenossulfonato, toluenossulfonato e 2- naftalenossulfonato.

Description

Relatótio Descritivo da Patente de lnvenção para "SAlS DE (E)" " Nq2-^No-FEN|L)-3q1-[4-(1-METlL-1H-p|~oL4-lL)-BENzENossUL-

FONIL]-1H-PIRROL-3-lL}-ACRlLAMIDA". Campo da Aplicação da lnvenção 5 A presente invenção refere-se a sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3- {1-[4-(1-metil-1 H-pirazo|-4-il)-bel1zenossulfoniq-1 H-pirro|-3-i|}-acn|am ida, que são usados ría indústria farmacêutica para a produção de composições far- macêuticas.

Antecedentes da Técnica 10 A regulação transcricional nas céluias é um processo biológico complexo.

Um princípio básico é a regulação por modificação pós- transcricional de proteínas do tipo histona, a saber as proteínas histona H2A/B, H3 e H4 formando o complexo de núcleo histona octamérico.

Estas . modificações N-terminais complexas em resíduos Iisina por acetilação ou 15 metilação e em resíduos serina por fosforilação fazem parte do chamado "código histona" (Strahl & Ellis, Nature 403, 41-45, 2000). Em um modelo simples, a acetilação de resíduos lisina positivamente carregados diminui a afinidade para DNA riegativamente carregado, que fica então acessível à entrada de fatores de transcrição. 20 A acetilação e desacetilação da histona são catalisadas por his- tona acetiltransferases (HATS) e histona desacetilases (HDACS). HDACs estão associadas a complexos repressores da transcrição, alterando a cro- matina para uma estrutura silenciosa, transcricionalmente inativa (Marks et al.

Nature Cancer Rev 1 , 194-202, 2001). O oposto ocorre com as HATs 25 que estão associadas a complexos ativadores da transcrição- Três classes diferentes de HDACS foram descritas até o momento, a saber cIasse I (HDAC 1-3, 8) com Mr = 42-55 kDa localizada principalmente no núcleo e sensível à inibição pela tricostatina A (TSA), classe ll (HDAC 4-7, 9, 10) com Mr = 120-130 kDa e sensibilidade à TSA e classe ||| (homólogos de Sir2) 30 que são bastante distintas por sua dependência de NAD" e insensibilidade à TSA (Ruijter et al.

Biochem.j. 370, 737-749, 2003; Khochbin et al.

Curr Opin Gen Dev 11 , 162-166, 2001 ; Verdin et al.

Trends Gen 19, 286-293, 2003).

HDAC 11 com Mr = 39 kDa foi recentemente cIonada e apresentou homolo- gia com membros da família da classe I e da classe ll (Gao et al.

J Biol Chem 277,25748-25755, 2002). HATs e HDACs existem em grandes com- pIexos junto com fator de transcrição e proteínas de plataforma nas béiutas

5 (Fischle et al.

Mol Ceil 9, 45-47, 2002). Surpreendentemente, somente cerca de 2% de todos os genes são regulados pela acetilação de histonas confor- me estimativa com base na análise de exibição diferenciai de 340 genes e TSA como o HDI de referência (von Lint et al.

Gene Expression 5, 245-253, 1996). Novos estudos com SAHA em células de mieloma múltiplo mostra- lO ram que essas alterações transcricionais podem ser agrupadas em classes distintas de genes funcionais, por exemplo, para regulação de apoptose ou proliferação (Mitsiades et al.

Proc Natl Acad Sci 101 , pág. 540, 2004). Existem diferentes substratos para proteínas do tipo histona. . Para HDACs estes incluem fatores de transcrição como p53 e TFII E / ou 15 chaperonas como Hsp90 (Johnstone & Licht, Cancer Cell 4, 13-18, 2003). Assim sendo o nome correto para HDACs seria desacetilases proteicas es- pecíficas para lisina.

Como consequência dessas descobertas, os inibidores de HDACS afetam não apenas a estrutura da cromatina e a transcrição gê- nica como também a função e a estabilidade da proteína regulando a aceti- 20 lação de proteínas em geral.

Esta função das HDACs na acetilação de pro- teínas também pode ser importante para entender a repressão gênica ime- diata por tratamento com HDIS (von Lint et al.

Gene Expression 5, 245-253, 1996). Neste contexto, as proteínas envolvidas na transformação oncogêni- ca, regulação da apoptose e crescimento de células malignas são de parti- 25 cular importância.

Diferentes publicações salientam a importância da acetilação de histonas para o desenvolvimento de câncer (revisado por Kramer et al.

Trends Endocrin Metabol 12, 294-300, 2001 ; Marks et al.

Nature Cancer Rev 1 , 194-202, 2001 ). Estas doenças incluem 30 (i) mutações da proteína fixadora do elemento de resposta à HAT CAMP (CBP) associadas à sÍndrome de Rubinstein-Taybi, uma predis- posição ao câncer (Murata et al.

Hum Mol Genet 10, 1071-1076, 2001),

(ii) recrutamento aberrante da atividade de HDACI por fatores de transcrição em leucemia promielocitica aguda (APL) pelo gene de fusão do receptor cl de ácido PML-retinoico (He et al.

Nat genet 18, 126-135, 1998), 5 (iii) recrutamento aberrante da atividade de HDAC pela proteína BCL6 superexpressa em linfoma não Hodgkins (Dhordain et al.

Nuceic Acid Res 26, 4645- 4651 , 1998), e finalmente (iv) recrutamento aberrante da atividade de HDAC pela proteina de fusão AML-ETO em leucemia mielogênica aguda (subtipo AML M2; Wang et al.

Proc Natl Acad Sci USA 95, 10860-10865, 1998). Neste subtipo de AML, o recrutamento da atividade de HDACI ocasionalmente leva ao silenciamento do gene, um bloco de diferenciação e transformação oncogê- nica- (V) Nocaute do gene HDACI em camundongos mostrou que a HDACI tem uma função profunda na proliferação de células-tronco embrio- nárias reprimindo os inibidores da quinase ciclina-dependente p21"'f1 e p27"p' (Lagger et al.

Embo J. 21, 2672-2681 , 2002). Como a p21w"f' é indu- zida por HDIS em muitas linhagens de células cancerosas, a HDACI tam- bém pode ser um componente crucial na proliferação de células cancerosas.

Experiências de desmantelamento de genes à base de SÍRNA inicíal em cé- lulas HeLa suportam esta hipótese (Glaser et al. 310, 529-536, 2003). (vi) HDAC2 é superexpressa em carcinoma de cólon mediante ativação constitutiva da via sinalizadora de wnt/8-catenina/TCF por perda da proteína adenomatose polipose coIi (APC) funcional segundo recentemente reportado por Zhu et al. (Cancer cell 5, 455-463, 2004). No nível molecular, um grande número de dados publicados com vários inibidores de HDAC como tricostatina A (TSA) mostraram que muitos genes relevante ao câncer são suprarregulados ou infrarregulados.

Estes incluem p21"'f1, ciclina E, fator de transformação do crescimento B

(TGFB), p53 ou os genes supressores de tumor de von Hippel-Lindau (VHL), que são suprarregulados, ao passo que BcI-XL, bcl2, fator induzível de hipo- xia (HIF)1o, fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e ciclina ND são infrarregulados pela inibição de HDAC (revisto por Kramer et al.

Trends ~ Endocrin Metabol 12, 294-300, 2001). Os inibidores de HDAC interrompem as células rias fases Gl e G2/M do ciclo celuiar e fazem a depleção das cé- lulas na fase S, como mostrado para depsipeptídio como um exemplo (San- 5 dor et al., British j Cancer 83, 817-825, 2000). Os compostos inibidores de HDAC induzem a apoptose independente de p53 e caspase 3/8 e têm uma ampla atividade antitumoral.

Também foi descrita atividade antiangiogênica, que pode estar relacionada com a infrarregulação de VEGF e HIFIoc.

Em suma, a inibição de HDAC afeta as células tumorosas em diferentes niveis 10 moleculares e diversas proteínas celulares são atingidas.

Curiosamente, descobriu-se que os inibidores de HDAC indu- . zem a diferenciação celular e esta atividade farmacológicamente também pode contribuir para sua atividade anticâncer.

Por exemplo, recentemente | foi mostrado que o ácido hidroxâmico de suberoilaniliada (SAHA) induz a 15 diferenciação de linhagens celular de câncer de mama, exemplificado pela ressíntese da proteína globular da membrana gordurosa de leite (MFMG), proteína globular gordurosa e Iipidio de Ieite (Munster et al.

Cancer Res. 61, 8492, 2001). Vêm aumentando as explicações para o sinergismo de inibido- 20 res de HDAC com quimioterápicos assim como com fármacos anticâricer específicas para o alvo.

Por exemplo, foi mostrado sinergismo para SAHA com o inibidor da quinase/cdk flavopiridol (Alemenara et al.

Leukemia 16, 1331-1343, 2002), para LAQ-824 com o inibidor da bcr-abl quinase Glivec in CML celts (Nimmanapalli et al.

Cancer Res. 63, 5126-5135, 2003), para 25 SAHA e tricostatina A (TSA) com etoposida (VP16), cisplatina e doxombici- na (Kim et al.

Cancer Res. 63, 7291-7300, 2003) e LBH589 com o inibidor de hsp90 17-alil-amino-desmetóxi-ge!dapamicina (17-AAG: George et al.

Bíood online, Oct,28, 2004). Também foi mostrado que a inibição de HDAC causa re-expressão dos receptores de estrogênio ou androgênio em células 30 de cãncer de mama e de próstata com potencial para ressensibilizar estes tumores à terapia anti-hormonal (Yang et al.

Cancer Res. 60, 6890-6894, 2000: Nakayama et al.

Lab lnvest 80, 1789-1796, 2000).

lnibidores de HDAC de várias classes químicas já foram descri- . tos na literatura, sendo quatro as cIasses mais importantes, a saber (i) aná- " logos de ácido hidroxâmico, (ii) análogos de benzamida, (iii) peptídios cÍcli- cos / peptolídeos e (iv) análogos de ácidos graxos.

Um resumo completo de '5 inibidores de HDAC conhecidos foi recentemente publicado por Miller et al. (J Med Chem 46, 5097-5116, 2003). Existem apenas dados limitados pubii- cados sobre a especificidade desses inibidores de histona desacetilases.

Em geral a maioria dos HDI à base de hidroxamato não são específicos pa- ra as classes I e ll das enzimas HDAC.

Por exemplo, o TSA inibe as 10 HDACS 1, 3, 4, 6 e 10 com valores de lC50 em torno de 20nM, ao passo que a HDAC8 foi inibida com lC50 = 0,49 µM (Tatamiya et al., AACR Annual Meeting 2004, Abstract #2451 ). Mas existem exceções como o HDI Tuba- cina experimental, seletiva para a cIasse ll da enzima HDAC 6 (Haggarty et al., Proc natl Acad Sci USA 100, 4389-4394, 2003). Além disso, vêm surgin- 15 do dados a seletividade dos HDIs de benzamida para a classe I.

O MS-275 inibiu as HDACI e 3 da classe ( com ]C50 = 0,51 µM e 1,7µM, respectiva- mente, e em contraste as HDACS 4, 6, 8 e 10 da classe II foram inibidas com valores de |C5o de >1OOµM, 82,5µM e 94,7µM, respectivamente (Tata- miya et al., AACR Annual Meeting 2004, Abstract #2451 ). Ainda não está 20 claro se a especificidade para as enzimas HDAC classe l ou ll ou para uma única isoenzima definida deveria ser superior em termos de eficácia e indice terapêuticos.

Estudos clínicos em câncer com inibidores de HDAC estão em andamento, a saber, com SAHA (Merck lnc.), ácido valproico, FK228 / Dep- 25 sipeptídio (Gloucester Pharmaceuticals / NCt), MS275 (Berlex-Schering ), NVP LBH-589 (Novartis), PXD-1O1 (Topotarget / Curagen), MGCDO103 (Me- tilgene lnc) e Pivaloiloximetilbutirato / Pivanex (Titan Pharmaceuticals). Es- ses estudos mostraram as primeiras evidências de eficácia clínica, enfatiza- das recentemente por respostas parciais e completas com FK228 / Depsi- 30 peptídio em pacientes com linfoma de células T periféricas (Plekarz et al.

Blood, 98, 2865-2868, 2001 ) e linfoma de células B grandes e difusas com SAHA (Kelly et al.

J.

Clin.

Oncol. 23, 3923-3931 , 2005).

Y Publicações recentes também mostraram o possÍvel uso médico de inibidores de HDAC em doenças diferentes de câncer.

Estas doenças -" incluem lúpus eritematoso sistêmico (Mishra et al. j Clin Invest 111 , 539- 552, 2003, Reilly et al.

J.

Immunol. 173, 4171-4178, 2004), artrite 5 reumatoide (Chung et al.

Mol Therapy 8, 707-717, 2003; Nishida et al.

Arthri- tis & Rheumatology 50, 3365-3376, 2004), doenças inflamatórias (Leoni et al.

Proc Natl Acad Sci USA 99, 2995-3000, 2002) e doenças neurodegene- rativas com doença de Huntington (Steffan et al.

Nature 413, 739-743, 2001 , Hockly et al.

Proc Natl Acad Sci USA 100(4):2041-6, 2003). 10 Quimioterapia contra câncer foi estabelecida com base no con- ceito de que células cancerosas com proliferação descontrolada e uma alta proporção de células em mitose são preferencialmente eliminadas.

Os fár- macos quimioterapêuticos tradicionais contra o câncer finalmente eliminam . as células cancerosas por indução de morte celular programada ("apopto- 15 se") atacando processos celulares básicos e moléculas, a saber, RNNDNA (agentes alquilantes e carbamilantes, análogos de platina e inibidores de topoisomerase), metabolisrno (os fármacos desta classe são chamadas de antimetabólitos) assim como o aparelho do fuso mitótico (inibidores estabiii- zantes e desestabilizantes de tubulina). lnibidores de histona desacetilases 20 (HDIS) constituem uma nova classe de fármacos anticâncer com atividade indutora de diferenciação e apoptose.

Atacando as histona desacetilases, os HDIS afetam a acetilação da histona (proteína) e a estrutura da cromati- na, induzindo uma reprogramação transcricional complexa, exemplificada pela reativação de genes supressores de tumor e repressão de oncogenes. 25 Além de afetar a acetilação de resíduos lisina N-terminais em proteínas do tipo histona de núcleo, existem alvos não histona importantes para a biolo- gia celular do câncer como a proteína de choque térmico 90 (Hsp90) ou a proteína supressora de tumor p53. O uso médico dos HDIS pode não estar limitado à terapia contra o câncer, uma vez que sua eficácia em modelos de 30 doenças inflamatórias, artrite reumatoide e neurodegeneração já foi de- monstrada.

Pirrolil propenamidas benzoil-substuídas ou acetil-substuídas es-

tão descritas na literatura pública como inibidores de HDAC, considerando > que a iigação do grupo acila está na posição 2 ou 3 da estrutura pirrol. (Mai

- et al., Journal Med.Chem. 2004, Vol. 47, No. 5, 1098-1109; ou Ragno et al., Journal Med.Chem. 2004, Vol. 47, No. 5, 1351-1359). Outros derivados de 5 ácido hidroxâmico pirrolil substituídos estão descritos no documento US4960787 como inibidores de lipoxigenase ou no documento US6432999 como inibidores de ciclo-oxigenase.

Vários compostos, que são considerados inibidores de HDAC, estão apresentados no documento WO 01/38322; Journal Med.

Chem. 10 2003, Vol- 46, No. 24, 5097-5116; Journal Med.

Chem. 2003, Vol. 46, No. 4, 512-524; Journal Med.

Chem. 2003, Vol. 46, No. 5, 820-830; e em Current Opinion Drug Discovery 2002, VoI. 5, 487-499. Considerando a necessidade que ainda existe na técnica de no- vos inibidores bem tolerados e mais eficazes de HDACS, o documento WO 15 2006/097474 descreve novos derivados de N-sulfonilpirrol, que diferem con- sideravelmente dos compostos da técnica anterior e são inibidores eficazes das histona desacetilases com propriedades surpreendentes e particular- mente vantajosas.

Entre eles cita-se como exemplo o sal de cIoridrato de (E)-N-(2- 20 amino-fenil)-3-{1-[4-(1-meti|-1H-pirazo|4-iI)-benzenossulfoni]]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida- No entarito, os compostos apresentados no documento WO 2006/097474 ainda experimentam uma solubilidade relativamente baixa e/ou alta higroscopicidade. 25 Descrição da Invenção De acordo com um primeiro aspecto da presente invenção, fo- ram agora sintetizados novos sais de (E)-N-(2-amino-feni|)-311-[4-(1-meti|- 1H-pirazo|A-i|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}--acrilamida, que estão descri- tos mais detalhadamente abaixo e surpreendentemente apresentam um 30 comportamento de dissolução superior ao da base livre e têm uma estabili- dade maior que o sal de cloridrato de (E)-N-(2-amino-fenil)-Q1-[4-(1-metil- 1H-pirazo|A-i|)-benzenossulfoni|]-1H-pirrol-3-iiµacri[amida descrito no docu-

mento WO 2006/097474- Esses sais apresentam formas polimórficas dife- rentes, que também podem resultar em maior biodisponibilidade da subs-

- tância medicamentosa.

A presente invenção refere-se portanto em um primeiro aspecto 5 geral a certos sais de (®-N-(2-almino-feniI)-311-[4-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)- benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida que se caracterizam por um comportamento de dissolução melhorado e menor higroscopicidade em re- lação ao sal de cloridrato conhecido.

Em um outro aspecto a presente invenção refere-se a sais de 10 (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 F|-pirazo|-4-i|)-benzenossulfoni|]-1H- pirrol-3-il}-acrilamida, selecionados do grupo que consiste em bromidrato, metanossulfonato, hemietano-l ,2-dissulfonato, benzenossulfonato, tolue- nossulfonato e 2-naftalenossulfonato- . Um aspecto particularmente preferido da presente invenção é o 15 sal de toluenossulfonato de (E)-N-(2-amino-fenil)-311-{4-(1metil-1H-pirazo|- 4-il)-benzenossulfonil]-1H- pirrol-3-il]-acrilamida.

Foi inesperadamente des- coberto que este sal tem uma velocidade de dissolução particularmente alta, além de alta solubilidade, assim como maior estabilidade, em relação ao sal de cloridrato conhecido, e portanto espera-se que apresente propriedades 20 farmacocinéticas superiores in vivo.

Em um terceiro aspecto a presente invenção refere-se a certos polimorfos do sal de bromidrato, de metanossulfonato, de hemietano 1,2 dissulfonato, de benzenossulfonato, de toluenossulfonato e de 2- naftalenossulfonato, respectivamente, da (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1 -[4-(1- 25 metil-l H-pirazo|A-i|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-ü}-acrilamida, que são caracterizados por seus respectivos difratogramas de raios X por pó e em particular pelos picos principais de seus respectivos difratogramas de raios Xporpó.

Breve Descrição dos Desenhos 30 Figura 1: padrão de XRPD de (E)-N-(2-amino-fenil)-3{1-[4-(1- metil-l H-pirazo|A-i|)-benzeno$sulfoni|F1 H-pirro|-3-i|µacri[amida parcialmente amorfa.

Figura 2: padrão de XRPD de (E)-N-(2-amino-feni|)-311-[4-(1- . metil-l H-pirazo|A-i|)-benzenwsu|foni|]-1H-pirro|-3-i|}-acri|amida cristalina

- polimorfo A.

Figura 3: padrão de XRPD de (E)-N-(2-amino-fenij)-311-[4-(1- 5 metil-l H-pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida cristalina polimorfo B.

Figura 4: padrão de XRPD de monocloridrato de (E)-N-(2-amino- fenil)-3j1-[4-(1-meti!-1 H-pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrok3-il}- acrilamida. 10 Figura 5: padrão de XRPD de dicloridrato de (E)-N-(2-amino- feniI)-341-[4-(1-meti|-1 H-pirazo|-4-i|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-ü}- acrilamida cristalino.

Figura 6: padrâo de XRPD de metanossulfonato de (E)-N-(2- amino-feni|)-3A1-I4-(1-metil-1H-pirazo]A-i])-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}- 15 acrilamida parcialmente amorfo.

Figura 7: padrão de XRPD de metanossulfonato de (E)-N-(2- amino'-feni|)-311-[4-(1-meti]-1H-pirazolA-il)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida cristalino.

Figura 8: padrão de XRPD de hemietano-1,2-sulfonato de (E)-N- 20 {2-amino-feni|)-341-[4-(1-meti|-1 H-pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrok3- il}-acrilamida.

Figura 9: padrão de XRPD de benzenossulfonato de (E)-N-(2- amino-feni|)-3R1-[4-(1-meti|-1F{-pirazo|A-i|)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}- acrüamida. 25 Figura 10: padrão de XRPD de to)ueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-feniI}-341-[4-{1-meti|m H-pirazo[A-i|)-benzer1ossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida cristalino polimorfo A.

Figura 11: padrão de XRPD de tolueno- 4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metj|-·1H-pirazo|A-i])-benzenossulfoni|]-1 H-pirrol-3-il)- 30 acrilamida cristalino polimorfo B.

Figura 12: padrão de XRPD de tolueno- 4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-feni|)-3{1-[4-(1-meti|-1H-pirazo|A-i|)-benzenossu|fonil]-1 H-pirrol-3-il}-

acrilamida cristalinopolimorfo C. . Figura 13: padrão de XRPD de tolueno-4-sulfonato de (E)-N-(2-

- amino-fenil)-311-[411-metil-1H-pirazo|A-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida cristalino polimorfo D. 5 Figura 14: padrão de XRPD de tolueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-feni|)-311-[4-(1-metiI-1 H-pirazol-4-il)-benzenossuifonil]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida cristalino polimorfo E.

Figura 15: padrão de XRPD de tolueno-4-sulfonato de (E)-N-{2- amino-fenj|)-311-[4-{1-meü|--1 H-pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}- 10 acrilamida cristalino polimorfo F.

Figura 16: padrão de XRPD de tolueno- 4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-feni])-311-[4-(1-metil-1H-pirazoIA-il)-benzenossu|foni|]-1H-pirro[-3-i|F acrilamida de cristalino polimorfo G.

Figura 17: padrão de XRPD de tolueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- 15 amino-fenil)-311-[4-(1-meti]-1H-pirazo|A-i|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrot-3-il}- acrilamida de cristalino polimorfo H.

Figura 18: padrão de XRPD de naftaleno-2-sulfonato de (E)-N- (2-amino-fenin-311-[4-(1-meti|-1 H-pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1H-pirroi-3- il}-acrilamida cristalino polimorfo A+B. 20 Figura 19: padrão de XRPD de naftaleno-2-sulfonato de (E)-N- (2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazo[-4-i|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3- il}-acrilamida cristalino polimorfo A+b- Figura 20: padrão de XRPD de nafta!eno-2-sulfonato de (E)-N- (2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-meti|-1H-pirazo|A-i|)-benzenossu|foni|]-1H-pirro|-3- 25 il}-acrilamida cristalino polimorfo C.

Melhor Modo para Realizar a lnvenção Os sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1H-pirazolA-il)- benzenossulfonil]-1H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com a invenção po- dem ser obtidos por dissolução da base livre deste composto em um solven- 30 te adequado (por exemplo uma cetona, tal como uma cetona, metil etil ceto- na ou metil isobuti! cetona, um éter, tal como éter dietilico, tetra-hidrofurano ou dioxano, um hidrocarboneto clorado, tal como cloreto de metileno ou clo-

rofórmio, ou um álcool alifático de baixo peso molecular tal como metano!, - etanol ou isopropanol) que contém o ácido desejado, ou ao qual o ácido de-

- sejado é então adicionado.

Os sais são obtidos por filtração, reprecipitação, precipitação com um não solvente para o sal de adição ou por evaporação 5 do soÍvente.

Os sais obtidos podem ser convertidos por alcalinização ou acidificação para dar o composto livre, que por sua vez pode ser convertido em outros sais.

Desta maneira, sais farmacologicamente intoleráveis po- dem ser convertidos em sais farmacologicamente toleráveis.

Dependendo das condições reacionais usadas, a quantidade do 10 respectivo ânion de ácido contido nos sais pode variar na faixa de cerca de 0,1 a cerca de 5 equivalentes em mol da base Iivre, mais precisamente de cerca de 0,3 a cerca de 3 equivalentes em mol, mais precisamente de cerca de 0,6 a cerca de 2,4 equivalentes em mol, determinada de acordo com pro- cedimentos conhecidos na literatura, por exemplo métodos de titulação ou 15 de NMR.

Sais cristalinos de (E)-N-(2-amino-feni|)-341-[4-(1-meti|-1 H- pirazol-4-i|)- benzenossulfonil]-1H-pirro!-3-il}-acrilamida podem ser obtidos por um processo que compreende a etapa de cristalização ou recristalização de qualquer forma ou misturas de quaisquer formas com ácido em uma so- 20 lução compreendendo um solvente orgânico (por exempio um álcool como metanol ou etanol, ou uma cetona como acetona) ou uma mistura de sol- ventes orgânicos, ou misturas dos mesmos com água, ou apenas água.

PoÍimorfos podem ser obtidos por diversos métodos conhecidos na literatura.

Tais métodos incluem, porém sem limitação, (re)cristaiização 25 em solvente, precipitação com um não solvente, evaporação rápida, evapo- ração lenta, resfriamento rápido, resfriamento lento, entre outros.

Solvatos ou particularmente ou hidratos dos sais de acordo com esta invenção po- dem ser preparados de maneira conhecida per se, por exemplo na presença do soIvente apropriado.

Hidratos podem ser obtidos a partir de água ou de 30 misturas de água com solventes orgânicos polares (por exemplo alcoóis, por exemplo metanol, etanol ou isopropanol, ou cetonas, por exemplo acetona)- Os sais de acordo com a presente invenção incluem todo e qualquer solvato e hidrato que possam ser formados com o mesmo, e toda e qualquer forma cristalina, semicristalina ou amorfa.

As formas cristalinas são geralmente preferidas.

Os exemplos a seguir servem para ilustrar a invenção sem con- 5 tudo limitá-la.

Exemplos As medidas de XRPD (difração de raios X por pó) dadas a se- guir foram feitas em transmissão (U=40 kV, S=30mA, Cu-ka). (E)-N-(2-am ino-fenil)-3{1-[4-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)- 1O benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida Parcialmente amorfa 3,82 g de dicloridrato de (E)-N-(2-Amino-fenjl)-311-[4-(1-metil[- 1H-pirazol-4-il)- benzenossU|foni|]-1H-pjrroI-3-i[}-acrjlamida foram suspendi- dos em 38 ml de água e 2,7 m) de solução aquosa de amônia (25%) foram adicionados.

A suspensão foi agitada por 1 hora e filtrada.

A torta de filtra- do foi lavada com 19 ml de água e sec.

Um sólido esbranquiçado (3,09 g) foi obtido.

Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sa) estão substancialmente resumidos na tabela 1 e substancialmente mostrados na figura 1. Tabela 1: padrão de XRPD de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1 -[4-(1- metil-1 H-piFazo|A-i|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida parcialmente amorfa compreendendo os seguintes picos (intensidades relativas > 10) 2Teta l(rei,) 4,2 100,0 9,9 15,0 10,5 15,6 11,5 11,2 12,8 16,6 16,3 58,5 19,7 21,9 21,1 11,3 23,2 38,5

2Teta l(rel) 24,1 12,6 24,5 11,2 25,9 21,9 5 27,3 18,2 32,6 11,2 Polimorfo cristalino A 10,0 g de dicloridrato de (E)-N-(2-amino-fenil)-Y1-[4-(1-metil- 1H-pirazo]A-i|)-benzenossu|foni|]-1H-pirrol-3-i|¥acri|amida (19,2 mmols) fo- lO ram tratados com uma mistura de 300 ml de THF e 375 ml de uma solução aquosa de Na2CO3 (8 °/0). A fase aquosa foi separada e extraída com 100 ml de THF.

As fases orgânicas combinadas foram tratadas com 235 ml de á- gua e a parte orgânica da mistura foi evaporada.

Com isto, as bases livres se separaram como um sólido acastanhado.

A solução aquosa foi removida por decantação, e o resíduo foi dissolvido em 120 ml de THF, adsorvido em 100 g de sÍlica-gel 60 (Merck) e cromatografado com 470 g de sÍlica-gel 60 (Merck). O composto foi elu ido com CHCl,/MeOH (20:1 ). As frações con- tendo o produto foram cuidadosamente evaporadas. 6,00 g de um sóíido incolor foram obtidos.

Os picos caracterlsticos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 2 e substancialmente mostrados na figura 2. Tabela 2: padrão de XRPD de (E)-N-(2-amino-feni|)-3<1-[441- metil-l H-pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pjrro]-3-il}-acl"j|alnida cristalina polimorfo A compreendendo os seguintes picos (intensidades relativas > 10) 2Teta l(rel) 12,0 14,9 14,5 32,4 14,9 28,4 15,6 26,2 17,5 28,1 18,1 36,8

2Teta l(rei) 18,7 56,3 20,2 100,0 21,1 40,7 5 21,5 20,6 22,4 16,4 23,1 43,7 24,9 11,0 25,7 13,7 26,5 57,0 Polimorfo cristaiino B 20,0 g de dicloridrato de (E)-N-(2-Amino-feni|)-3-{1-l4-(1-metil- 1H-pirazolA-iI)-benzenossU|foni|]-1H-pirrol-3-i|}-acrilamida foram suspendi- dos em 200 ml de água e 100 ml de etano). 8,7 ml de solução aquosa de amônia (25%) foram adicionados e a suspensão foi agitada por 1 hora.

A suspensão foi filtrada; a torta de filtrado foi lavada com 100 ml de água e seca.

Um sólido esbranquiçado (16,4 g) foi obtido, O sólido (10,0 g) foi suspendido em 200 mL de etanol e refluxado por 10 minutos.

Depois de esfriar para a temperatura ambiente, a suspensão foi filtrada e seca.

Um sóIido esbranquiçado (8,8 g) foi obtido.

Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 3 e substancialmente mostrados na figura 3. Tabela 3: padrão de XRPD de (E)-N-(2-amino-feni])-3q1-[4-{1- metil-l H-pirazolA-i|)-benzenossu|foni|]-1H-pirrol-3-i]}-acrilamida cristalina polimorfo B compreendendo os seguintes picos (intensidades relativas > 10) 2Teta l(rel)

13,9 15,7

15,3 100,0

16,9 37,7 m 18,9 48,6

19,8 41,3

21,5 13,6

2Teta l(rel) 21,9 16,3 22,2 15,9 23,7 29,3 5 24,2 28,3 25,6 13,5 27,8 17,9 28,0 15,5 Monocloridrato de (E)-NR2-amino-feni|)-31144-(1-meW-1H- pirazok4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acri!amida A 225 mg de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4.-(1-metil-1H-pirazol-4- i|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}--acrilamida (0,50 mmol) em 20 ml de água quente uma soiução (3,13 ml, 0,5 mmol) de HCl em metanol (a 4 mL de HCI,q,O,, 4N metanol foi adicionado até um final de 100 mL = 0,16 mrnol/mL) foram adicionados em gotas. lmediatamente, um óleo amarelado separou- se.

A separação completa se deu por adição de éter dietílico (10 mL). O sólido resultante foi seco por uma noite.

Rendimento: 248 mg (102 %); sóli- do amarelado; p.f.: 150 a 164°C, sinter.

O composto continha 0,91 HCIMOL Os picos caracteristicos do padráo de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 4 e substancialmente mostrados na figura 4. Tabela 4: padrão de XRPD de monocloridrato de (E)-N-(2- amino-feni|)-3-{1-[441-metil-1H-pi|"azolA-i|)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida compreendendo os seguintes picos (intensidades relativas " 10) 2Teta l(rel) 6,7 47,4 9,1 65,0 13,4 70,1 22,2 100,0 27,0 72,2 D icloridrato de (E)-N-(2-aminrfenj|)-3A1-[411-meti|-1H-pirazo|- 4-il)-benzenossulfonil]-1H-pirrd-3-il}-acrilamida

5,0 g de éster terc-butilico do ácido [2-((E)-3{1-[4-(1-metiI-1H- pirazo|4-i[)-benzenossuIfoniq-1H-pirrol-3-i|FacriIoi|amino-feni|]-ca±âm ico foram suspendidos em 90 mL de THF e 7,5 mL de água. 7,5 mL de ácido cloridrico aquoso (37%) foram adicionados e a suspensão foi agitada a 60°C 5 por 4 horas- Depois de esfriar para a temperatura ambiente a suspensão foi filtrada, a torta de fiitrado foi lavada com 20 mL de THF e seca.

Um sóIido esbranquiçado (3,7 g) foi obtido.

O composto continha 1,82 HCI/MOI.

Os pi- cos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 5 e substancialmente mostrados na figura 5. Tabela 5: padrão de XRPD de dicloridrato de (E)-N-(2-amino- feni|)-341-[4-(1-metil-1 H-pirazo|-4-i|)-benzenossu|foni|l-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida cristalino compreendendo os seguintes picos (intensidades relati- vas " 10) 2Teta l(rel) 5,8 27,6 6,7 13,7 13,9 13,3 14,3 100,0 16,5 36,6 17,5 48,9 17,8 12,2 18,3 14,7 19,4 20,1 20,8 17,9 23,0 13,9 23,3 12,6 23,6 33,4 23,8 12,6 24,2 28,5 24,3 31,4 24,7 16,0

2Teta l(rel) 25,5 55,1 26,2 46,0 26,7 11,8 5 26,9 13,8 27,1 19,7 27,8 17,2 28,0 22,3 28,5 14,1 28,8 10,6 29,1 16,2 29,3 10,6 32,0 11,1 Bromidrato de (E)-N-(2-amino-feni|)-311-[411-metil-1H-pjrazo|A- il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida A 0,21 g de (E)-N-(2-amin+fenil)-3-{1-[4(1-meti1-1H-pirazol-4-il)- benzenossulfonil]-1H-pirrol-3-iÍ}-acrilamida em 4 ml de THF uma solução de 0,169 ml de H8r a 48 °/0 (169 µ1, 1,5 mmo!) em 4 ml de THF foi adicionada em gotas.

Um sólido se separou, e este foi tratado com éter dietílico.

O só- lido cristalino resultante foi separado e seco por uma noite- Rendimento: 287 mg (100 °/o); p.f-: 200"C, sinter.

O composto continha 1,86 HBr/Mol.

Metanossulfonato de (E)-N-{2-amino-feni|)-3-{1-I4-(1-metil-1 H- pirazolA-il)-benzenossulfonü]-1 H-pirrol-3-il}-acrüamida Parcia/mente amodo 500 mg de (E)-N-(2-amino-feni|)-311-[4-(1-metj|-1H-pirazo|A-i|)- benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida, 10 ml de água e 1 ml de metanol foram aquecidos até 130°C. 0,435 ml de ácido metanossulfônico foi adicio- nado.

A mistura praticamente d issolveu.

A mistura foi então imediatamente resfriada em um banho de gelo.

Durante o resfriamento, um sólido acasta- nhado separou-se.

A mistura foi tratada com ultrassom.

Subsequentemen- te, o sólido resultante foi recolhido e seco.

A proporção molar de base livre para ácido metanossulfônico foi de 1:0,95.

Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 6 e substancialmente mostrados na figura 6. Tabela 6: padrão de XRPD de metanossulfonato de (E)-N-(2- 5 aminoAenil)-3{1-[4-(1-metil-1 H-pirazol4il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida parcialmente amorfo compreendendo os seguintes picos (intensi- dades relativas > 10) 2Teta l(rel) 3,9 93,9 5,9 18,8 7,8 16,5 8,4 13,3 9,8 98,1 10,2 47,6 11,1 33,4 11,7 44,2 12,2 19,8 16,5 97,3 16,9 65,1 17,6 100,0 17,9 68,2 19,3 19,3 20,1 32,9 21,5 25,4 22,7 65,6 23,4 49,1 24,1 60,6 25,1 38,4 25,9 31,6

26.39 43,5 27,5 63,5 28,7 12,1

2Teta l(rel) 30,3 15,9

- Cristalino 250 rng de (E)-N42-amino-fenil)-311-[4-(1-meti[-1H-pirazo|A-ij)- 5 benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilam ida, 5 m) de água, 0,5 ml de metanol e 0,112 ml de ácido metanossulfônico foram aquecidos até 130"C por 10 minutos.

Depois de agitar à temperatura ambiente por uma noite o sólido foi recolhido e seco.

A proporção molar de base livre para ácido metanossulfô- nico foi de 1:0,66. Os picos característicos do padrão de difração de raios X 10 por pó deste sal estão substancialmente resumidos na Tabela 7 e substan- cialmente mostrados na Figura 7. Tabela 7: Padrão de XRPD de metanossulfonato de (E)-N-(2- amino-fenil)-3j1-[4-{1-metiM H-pirazoM-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida cristalino compreendendo os seguintes picos (intensidades relati- 15 vas > 10) 2Teta l(rel) 3,9 72,0 10,2 13,2 11,1 12,9

20 11,6 14,2 12,2 13,7 16,4 100,0 16,9 59,1 17,4 24,5

25 19,3 20,2 20,1 27,9 21,4 22,1 21,8 10,8 22,3 30,0

30 22,4 32,6 23,3 51,4 24,1 24,3

2Teta l(rel) . 25,1 43,1 - 25,8 34,7 27,2 12,9 5 27,4 20,1 28,7 10,4 Hemietano-1,2-sulfonato de (E)-N-(2-amino-feni|)-311-[4-(1- metil-l H-pirazo|A-j|)-benzenossuifoni|]-1H-pirro|-3-i|}-acri|amida 1,00 g de (E)-N-(2-amino-feni|)-341-[411-metiI-1H-pirazo|A-i|)- 10 benzenossulfonil]-1 H-pirrok3-il}-acrilamida foi suspenso em 20 ml de água- 512 mg de ácido etanodissulfônico hidratado em 5 ml de água foram adicio- nados e a suspensão foi agitada por 18 horas.

A suspensão foi filtrada e seca.

Um sólido esbranquiçado (1,09 g) foi obtido.

A proporção molar de base livre para ácido etanossulfônico foi de 1:0,5 Os picos característicos do 15 padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente re- sumidos na tabela 8 e substancialmente mostrados na figura 8. Tabela 8: padrão de XRPD de hemietano-1,2-sulfonato de (E)- N-(2-amino-feni|)-311-[4-(1-meti|-1H-pirazo|A-j|)-benzenossu[foni[]-1 H-pirrol- 3-il}-acrilamida compreendendo os seguintes picos (intensidades relativas > 20 10) 2Teta l(rel) 7,5 27,2 11,9 16,7 13,1 12,8 25 16,0 100,0 17,6 19,8 19,2 20,9 21,0 21,0 22,7 63,5 30 23,5 11,2 23,9 16,3 25,1 41,2

2Teta l(rel) 26,2 13,3 26,4 22,0 Benzenossulfonato de (E)-N-(2-amino-feni|)-3A1-[411-meti|-1 H- 5 pirazol-4-i1)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-ií}-acrilamida 1,65 g de (E)-NA2-amino-feni|)-311-[4-(1-meti|-1H-piraolA-i|)- benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida foi suspenso em 30 ml de água e 642 mg de ácido benzenossulfônico foram adicionados.

A suspensão foi agitada por 26 horas, filtrada e seca.

Um sólido esbranquiçado (2,04 g) foi obtido.

A proporção molar de base livre para ácido benzenossulfônico foi de 1:0,99. Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 9 e substanciaímente mostrados na figura 9- Tabela 9: padrão de XRPD de benzenossulfonato de (E)-N-(2- amino-fen j[)-3q1-[4A1-meti|-1 H-pirazok4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-in- acrilamida compreendendo os seguintes picos (intensidades relativas > 10) 2Teta l(rel) 4,3 33,2 12,4 31,7 13,7 17,7 14,2 30,6 15,1 33,8 15,4 11,3 16,0 20,8 16,7 12,2 17,1 11,4 18,7 11,4 19,1 100,0 20,4 49,9 22,7 63,1 23,2 25,4

2Teta I(re1) 24,3 17,7 27,3 17,1 27,6 15,8 5 Tolueno-4-sulfonato de (E)-N-(2-amino-fenil)-311-[4-(1meti|-1H- pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il)-acrilamida Polimorfo cristalino A 5,0 g de (E)-N12-amjno-fenil)-311-[4-(1-metil-1H-pirazo|A-i|)- benzenossulfonil]-1H-pirrok3-il}-acrilamida foram suspensos em 150 ml de 10 metanol e 2,38 g de ácido p-toluenossulfônico hidratado foram adicionados, A soluçâo foi agitada por 1 hora e filtrada através de hyflow. O filtrado foi concentrado a vácuo até deixar um volume de 50 mL e foi agitado por 2 ho- ras. O precipitado foi filtrado e seco- O polimorfo forma A foi obtido como . um sõlido esbranquiçado (5,4 g). 15 Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 10 e substancialmen- te mostrados na figura 10. Tabela 10: padrão de XRPD de tolueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-feni|)-311-[4-(1-metj|-1 H-pirazo|A-i|)-benzenossu|foni|l-1H-pirrol-3-ilµ 20 acrilamida cristalino polimorfo A compreendendo os seguintes picos (inten- sidades relativas > 10) 2Teta l(rel) 7,0 82,6 9,7 10,8 25 9,9 18,9 12,8 44,8 13,9 16,2 14,7 39,1 15,0 27,3

30. 15,5 11,6 17,8 12,3 18,0 14,1

2Teta l(rel) 18,5 24,9 18,9 15,0 19,6 87,4 5 19,9 100,0 20,5 18,1 20,7 16,9 21,0 20,0 22,7 36,2 22,9 23,5 23,5 19,9 24,5 19,8 27,0 13,9 28,1 18,7 28,6 14,0 Polimorfo cristalino B 100,0 g de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1H-pirazo!A-il)- benzenossu|foni|]1H-pirro|-3-i|}-acri|amida foram suspensos em 800 mL de isopropanol.

Uma soIução de 46,8 g de ácido p-toluenossulfônico hidratado em 200 mL de isopropanol foi adicionada e a suspensão foi agitada por 22 horas- A suspensão foi filtrada e seca para dar o polimorfo forma B como um sólido esbranquiçado (139,4 g). Os picos caracteristicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 11 e substancialmente mostrados na figura 11. Tabela 11: padrão de XRPD de tolueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- amjnQ-feni|)-311-[4-(1-meti|-1H-pirazo|A-i|)-benzenossuifoniq-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida cristalino polimorfo B compreendendo os seguintes picos (inten- sidades relativas " 10) 2Teta l(rel) 6,0 55,8 9,6 26,0 10,0 18,6

2Teta l(rel)

Y 10,5 35,1 - 11,6 59,9 12,0 43,1 5 12,5 23,4 16,1 54,5 16,6 45,2 17,2 14,1 17,6 19,3 10 17,8 55,1 18,1 100,0 18,7 46,3 18,9 75,3

E 19,4 71,6 1'5 19,7 13,3 . 20,5 34,3 21,2 78,0 22,1 10,1 22,9 85,6 20 23,3 69,3 24,1 37,7 24,4 12,7 24,7 43,0 25,0 15,0 25 25,9 11,2 26,6 12,0 26,9 34,6 27,1 12,6 27,6 25,2 30 28,0 36,8 28,4 16,6 28,8 13,1

29,3 22,5 . 30,8 15,0

- 32,2 11,6 33,0 11,7 5 Polimorfo cristalino C 1,0 g do polimorfo forma B de tolueno-4-su)fonato de (E)-N-(2- amino-feni[)-311-[4-(1-metil-1H-pjrazo|A-i|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida foram suspensos em 10 mL de metanol e a suspensão foi agita- da a 60°C por 48 horas.

A suspensão foi resfriada para a temperatura am- lO biente, filtrada e seco.

O polimorfo forma C foi obtido como um sóIido es- branquiçado (825 mg). Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 12 e substancialmen- - te mostrados na figura 12. 15 Tabela 12: padrão de XRPD de to!ueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-feni])-3-{1-l4-(1-meÜ|-1 H-pirazo|-4-i|)-benzenossu|fonil]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida cristalino polimorfo C compreendendo os seguintes picos (inten- sidades relativas > 10) 2Teta l(rel) 20 8,9 83,1 11,7 100,0 13,8 22,8 14,8 24,1 15,4 46,3 25 16,7 60,2 17,8 29,3 18,9 60,2 19,6 40,4 19,8 63,4 30 20,3 76,9 20,5 11,2 21,2 31,6

21,5 42,9 21,6 59,6 22,0 31,6 22,2 10,2 5 23,6 27,7 24,5 11,6 25,2 12,9 25,8 12,5 26,8 24,8 10 26,9 10,9 27,7 20,1 28,4 10,0 29,1 17,6

W Polimorfo cristalino D 15 5,0 g de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-{1-metil-1H-pirazolA-il)- benzenDssu|foni|]-1H-pirro|-3-j|}-acrilamida foram suspensos em 75 ml de MIBK e 2,34 g de ácido p-toluenossulfônico hidratado foram adicionados. A suspensão foi agitada por 4 horas, filtrada e seca. O polimorfo forma D foi obtido como um sólido esbranquiçado (6,6 g)- Os picos caracteristicos do 20 padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente re- sumidos na tabela 13 e substancialmente mostrados na figura 13, Tabela 13: padrão de XRPD de to)ueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-feni|)-311-[4-(1-metiI-1|d-pirazoIA-i|)-benzenossulfoni|]-1 H-pirro1-3-il}- acrilamida cristalino polimorfo D compreendendo os seguintes picos (inten- 25 sidades relativas > 10) 2Teta l(rel) 4,8 56,7 14,5 10,0 15,4 14,9 30 17,1 59,5 17,6 22,0 17,7 27,7

2Teta I(rei) 18,7 98,3 19,1 24,9 19,6 14,2 5 21,0 31,3 21,2 16,6 21,6 36,2 22,5 100,0 23,9 11,4 24,8 43,0 25,9 40,3 28,4 26,1 Polimodo cristalino E 1,0 g de polimorfo forma B de tolueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-fenil)-3-{1-[4-{1-metil-1 H-pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida foram suspendidos em 9 mL de metanol e 1 mL de água e a sus- pensão foi agitada à temperatura ambiente por 24 horas.

A suspensão foi filtrada e seca.

O polimorfo forma E foi obtido como um sólido esbranquiça- do (826 mg). Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 14 e substancial- mente mostrados na figura 14, Tabela 14: padrão de XRPD de tolueno- 4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-fer1i|)-311-[4-(1-metil-1 H-pirazolA-iI)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}- acriiamida cristalino polimorfo E compreendendo os seguintes picos (inten- sidades relativas " 10) 2Teta l(rel) 6,6 37,7 6,9 79,7 9,5 27,1 9,7 42,5 10,0 43,3 11,0 11,6

2Teta l(rel) 11,6 15,7 " 12,8 10,6 13,0 43,6 5 13,7 18,0 13,9 20,6 14,3 15,9 14,6 14,0 14,7 23,2 10 14,9 16,6 15,1 10,1 ' 15,3 15,1 16,4 10,5 18,2 10,1 15 18,3 26,9 18,6 26,5 19,1 39,3 19,5 47,8 19,8 100,0 20 20,1 31,8 20,4 45,8 20,7 35,7 21,0 12,1 21,3 23,7 25 21,8 13,9 22,1 14,1 22,5 14,5 22,8 25,5 22,9 17,9 30 23,1 12,3 23,3 13,5 23,9 19,6

2Teta l(rel) 24,5 21,5 24,7 21,1 26,5 11,5 5 27,1 11,1 27,8 23,3 28,0 28,1 28,6 24,1 29,6 15,2 Polimorfo cristalino F 200 mg de polimorfo forma A de tolueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazolA-il)-benzenossulfonü]-1 H-pirrol-3-ií]- acrilamida foram suspendidos em 1,8 ml de etilmetilcetona e 0,2 mL de á- gua e a suspensão foi agitada por 18 horas.

A suspensão foi filtrada e seca.

O polimorfo forma F foi obtido como um sólido esbranquiçado (101 mg). Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 15 e substancialmen- te mostrados na figura 15. Tabela 15: padrão de XRPD de to!ueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-fenil)-3-{1-[4-(1-meti!-1 H-pirazolA-il)-benzenossulfoniI]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida cristalino polimorfo F compreendendo os seguintes picos (inten- sidades relativas > 10) 2Teta !(rel) 5,3 100,0 10,5 70,0 11,4 10,3 15,1 18,4 18,3 19,0 18,6 85,6 18,8 55,5 19,3 11,1 20,4 14,0

2Teta l(rel) 22,6 10,6 22,9 42,9 23,3 13,7 5 25,0 11,2 28,0 15,3 Polimorfo cristalino G 1,00 g de polimorfo forma C de toluenoA-sulfonato de (E)-N-(2- amino-fenií)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazo]-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida foi suspenso em 9 ml de acetona e 1 mL de água e a suspensão foi agitada por 24 horas.

A suspensão foi filtrada e seca.

O polimorfo forma G foi obtido como um sóIido esbranquiçado (867 mg). Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabeta 16 e sLlbstancia|men- te mostrados na figura 16. Tabela 16: padrâo de XRPD de tolueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- amino-feni|)-311-[4-(1-metjl-1ld-pirazo|A-i|)-benzenossulfoni|]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida cristalino polimorfo G compreendendo os seguintes picos (inten- sidades relativas > 10) 2Teta I(rel) 6,6 100.0 8,9 16,0 9,5 36,6 9,7 31,7

10,2 13,2 10,3 10,3 11,5 27,9 13,0 12,6 13,2 18,5

14,3 11,2 15,1 13,8 16,4 19,3

2Teta I(rel) 17,0 12,6 18,3 18,6 18,6 40,1 5 18,9 13,2 19,2 43,2 19,4 21,0 19,8 23,4 20,2 32,4 20,4 59,3 20,7 12,4 21,0 12,1 21,7 32,2 22,5 11,6 22,8 22,8 23,2 17,3 24,4 22,3 26,4 15,3 28,1 21,8 28,5 24,5 28,9 14,5 Polimorfo cristalino H 7,0 g de (E)-N-(2-amino-feni|)-341-[4-(1-metil-1H-pirazo|A-il)- benzenossu[foni|]-1H-pirro|-3-i|}-acri|amida (15,6 mmols) foram suspensos em 126 mL de uma mistura 5:1 de acetona e água.

A suspensão foi aque- cida até o refluxo até que todo o material estivesse dissolvido.

A solução quente foi filtrada através de um fiitro de fibra de vidro e o filtro foi lavado com 4 ml da mistura de solventes quente.

Os filtrados foram combinados. 107 mL do soIvente foi removido por destilação a vácuo, ao passo que a base livre foi novamente cristalizada.

O precipitado foi removido por filtração e usado sem secar. 12,0 g de (E)-N-(2-a|nino-feni|)-3d1-[4-(1-meti|-1|q-pirazo|A-i|)-

,W benzenossulfonil]-1H-pirrol-3-il}-acrilamida (base livre, 15,6 mmols) com um teor de água de 42 °(0 foram suspensos em uma mistura de 53 mL de 2- ' propanol e 107 mL de água à temperatura ambiente. 3,6 g de ácido p- toluenossulfônico mono-hidratado (18,8 mmols) foram dissolvidos em 32 mL

5. de 2-propanol e 8 mL de água. A soIução foi adicionada em gotas à sus- pensão da base livre durante um período de 1 hora. A suspensão foi agitada por mais 3 dias à temperatura ambiente. O precipitado foi removido por fil- tração, lavado com 5 ml da mistura de solventes e usado para cristalização, seco a vácuo a 40°C por 18 horas- Rendimento: 9,43 g; teor de água por 10 titulação de Karl Fischer: 2,7 °/,. Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 17 e substancialmen- te mostrados na figura 17. Tabela 17: padrão de XRPD de tolueno-4-sulfonato de (E)-N-(2- 15 amino4enil)-3-{1-[4-(1-metilA H-pirazo|-4-i|)-benzenossu|foniI]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida cristalino polimorfo H compreendendo os seguintes picos (inten- sidades relativas > 10) 2Teta l(rel) 6,7 96,9 20 9,4 32,1 9,9 18,2 12,8 52,8 13,5 16,3 14,3 30,7 25 15,0 51,1 17,7 43,4 18,4 54,6 19,0 20,8 19,5 100,0 30 19,8 83,3 20,1 39,4 20,3 50,3

2Teta l(rel) 20,7 11,6 21,0 32,5 22,2 19,3 5 22,6 76,8 23,2 25,9 24,1 3,2 24,3 18,7 24,5 12,3 25,7 16,2 26,4 13,8 27,5 14,4 27,9 23,8 28,2 19,1 29,5 10,0 29,9 19,0 30,0 16,0 Naftaleno-2-sulfonato de (E)-N-(2-amino-fenil)-3j1-[4-(1-metil- 1 H-pirazolAA)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida Polimorfo cristalino A+B 2,00 g de (E)-N-(2-amino-feni|)-3A1-[4-(1-metj|-1H-pirwo|A-il)- benzenossulfonil]-1H-pirrol-3-il}-acrilamida foram suspensos em 40 mL de isopropanol. 1,46 g de ácido naftaleno-2-sulfônico (70%) foi adicionado e a suspensão foi agitada por 24 horas.

A suspensão foi filtrada, a torta de fil- trado foi Iavada com 20 mL de isopropanol e seca.

Um sólido esbranquiçado (2,72 g) foi obtido.

Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 18 e substancialmen- te mostrados na figura 18. Tabela 18: padrão de XRPD de naftaleno-2-suifonato de (E)-N- (2-min+feni|)-3R1-[«1-meÜ|-1 H-pirazok4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3- ü}-acrilamida cristalino polimorfo A+B compreendendo os seguintes picos

(intensidades relativas > 10) 2Teta l(rel) 4,6 100,0 7,3 18,2 5 9,4 14,0 13,9 14,1 14,6 10,0 15,3 54,6 15,7 22,3 17,0 20,2 17,6 20,9 18,5 64,0 18,9 41,4 19,6 24,4 21,3 22,4 21,9 13,4 23,8 59,2 24,2 21,5 25,7 16,1 25,9 14,7 26,5 13,7 27,0 11,3 27,4 15,0 27,9 12,8 Polimorfo cristalino A+B 2,00 g de (E)-N-(2-amino-feni|)-3A1-[4-(1-metil-1H-pirazo|A-il)- benzenossulfoni|]-1H-pirro|-3-i|}-acri|amida foram suspendidos em 40 mL de isopropanol- 1,46 g de ácido naftaleno-2-sulfônico (70%) foi adicionado e a suspensão foi agitada por 21 horas.

A suspensão foi filtrada e seca.

Um sólido esbranquiçado (2,82 g) foi obtido.

Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 19 e substancialmen-

te mostrados na figura 19, Tabela 19: padrão de XRPD de naftaleno-2-sulfonato de (E)-N-

" (2-am jno-feni+311-[441-meti|-1 H-pirazoI-4-i])-benzenossu|fonj|]-1 H-pirrol-3- i1}-acrilamida cristalino poIimorfo A+B compreendendo os seguintes picos 5 (intensidades relativas > 10) 2Teta l(rel) 4,7 100,0 5,8 17,2 6,8 73,1 10 7,3 30,1 9,1 16,6 9,5 31,4 9,7 34,0 10,2 16,7 15 12,8 24,7 13,5 22,2 13,9 27,3 14,6 15,9 15,2 11,3 20 15,6 24,2 17,6 11,2 18,0 15,6 18,5 65,2 19,1 55,8 25 19,5 52,5 19,9 20,2 20,8 19,8 21,2 29,6 21,8 16,9 30 22,1 51,4 22,8 12,9 23,8 49,9

2Teta l(rel) 25,0 21,2 25,9 16,3 26,4 18,3 5 27,0 12,7 27,4 20,5 27,7 20,9 28,1 20,4 28,5 15,7 10 Polimorfo cristalino C 1,00 g de (E)-N12-amino-feni|)-311-[4-(1-meti|-1H-pirwo|A-i|)- benzenossulfoniI]-1H-pirrol-3-il}-acriiamida foi suspenso em 15 ml de meta-

r nol. 1,46 g de ácido nafta!eno-2-sulfônico (70%) foi adicionado e a sotução foi filtrada.

Sementes de cristal foram adicionados ao filtrado e a suspensão 15 foi agitada por 1 hora.

A suspensão foi filtrada e seca.

Um sóIido esbranqui- çado (1,28 g) foi obtido- Os picos característicos do padrão de difração de raios X por pó deste sal estão substancialmente resumidos na tabela 20 e substancialmente mostrados na figura 20. Tabela 20: padrão de XRPD de naftaleno-2-sulfonato de (E)-N- 20 (2-amjno-feni])-3A1-[4-(1meti|-1 H-pirazol-4-il)-benzenossulfoniI]-1 H-pirrok3- il)-acrilamida cristalino polimorfo C compreendendo os seguintes picos (in- tensidades relativas > 10) 2Teta I(rel) 5,8 100,0 25 9,4 30,2 9,9 15,5 10,4 14,4 11,4 25,2 11,7 25,2 30 12,3 12,0 15,7 50,2 16,2 42,9

2Teta !(rel) 17,3 78,4 17,9 56,6 18,3 59,9 5 18,8 13,7 19,1 45,6 20,0 27,8 20,7 23,6 20,9 36,3 21,3 11,5 22,4 67,3 22,9 75,3 23,3 11,7 23,6 21,7 24,4 28,7 26,7 21,7 27,0 21,5 27,3 14,0 27,5 27,2 27,8 13,0 28,6 14,3 Utilidade comercial Os sais de (E)-N-(2-amjno-feni|)-341-[4-(1-meti|-1H-pirazolA-ih- benzenossulfoni|]-1H-pirro|-3-i|µacri|amida de acordo com esta invenção possuem propriedades e efeitos farmacológicos valiosos, que torna-os co- mercialmente aplicáveis, tal como por exemplo eles são comercialmente úteis por suas propriedades relacionadas com a inibição da atividade e fun- ção de histona desacetilases. "Histona desacetilase" (HDAC) significa uma enzima com ativi- dade voltada para o grupo +acetila dos resíduos Iisina em uma proteína de substrato.

Substratos de HDAC são as proteinas histona H2A, H2B, H3 ou H4 e suas isoformas mais existem proteínas de substrato diferentes de his-

' tonas tal como, porém sem limitação, proteína do choque térmico 90 " (Hsp90), tubulina ou proteína supressora de tumor p53. Em particular as " histona desacetiiases catalisam a hidrólise do grupo tí-acetila dos resíduos lisina nessas proteínas de substrato, formando o grupo amino Iivre da lisina. 5 lnibição da histona desacetilase pelos sais de (E)-N-(2-amino- fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1H-pimzo!A-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirro1-3-il}-- acrilamida de acordo com esta invenção significa inibição da atividade e função de uma ou rnais isoenzimas de HDAC, em particular isoenzimas se- lecionadas das histona desacetilases conhecidas até o momento, a saber 10 HDAC 1, 2, 3 e 8 (classe t) e HDAC 4, 5, 6, 7, 9 e 10 (classe Il), HDAC 11 assim como a classe lll dependente de NAD+ (homólogos de Sir2)- Em al- gurnas modalidades preferidas esta inibição é de pelo menos cerca de 50°6, mais preferivelmente pelo menos 75% e ainda mais preferivelmente superior

W a 90%. De preferência, esta inibição é específica para uma classe específi- 15 ca de histona desacetilases (por exemplo enzimas HDAC classe I), uma se- leção de isoenzimas da maior importância patofisiolófica (por exemplo enzi- mas HDAC 1, 2, 3) ou uma única isoenzima (por exemplo a enzima HDAC 1). Um inibidor de histona desacetilases no contexto desta invenção é, por- tanto um composto capaz de interagir com uma histona desacetilase e inibir 20 sua atividade, em particular sua atividade enzimática. Neste contexto"grupo líder" ("head group") define os resíduos em um inibidor de histona desaceti- lase responsáveis pela interação com o sÍtio ativo da enzima, por exemplo o Íons Zn2", A inibição de histona desacetilases é determinada em ensaios 25 bioquímicos de vários formatos e fontes de atividade enzimática. A ativida- de de HDAC é usada seja derivada de extratos nucleares ou celufares ou por expressão heteróloga de isoenzimas HDAC definidas em E. coli, células de insetos ou células de maniíferos. Como as isoenzimas HDAC são ativas em complexos multiproteicos e formam homodimeros e heterodímeros, ex- 30 tratos nucleares derivados de células cancerosas humanas, por exemplo a linhagem celular de cervical carcinoma humano HeLa, são preferidos. Es- ses extratos nucleares contêm isoenzimas classe I e classe ll, mas são mais ricos nas enzimas classe I.

Para expressão de isoenzimas HDAC recombi- . nantes, sistemas de expressão mamíferos com as células HEK293 são pre-

- feridos.

A isoenzima HDAC é expressa como uma proteína de fusão com um tag de afinidade, como o epitopo FLAG.

Por cromatografia por afinida- 5 de, a proteína marcada com tag é purificada isolada ou em um complexo com proteínas endógenas (por exemplo outras isoenzimas HDAC e coativa- dores / proteínas de plataforma). Os ensaios bioquímicos já foram descritos e são bastante conhecidos pelos versados na técnica.

Como substratos, proteínas do tipo histona, peptídios derivados de proteínas do tipo histona 10 ou outros substratos de HDAC assim como miméticos de lisina acetilados são usados.

Um substrato de HDAC promíscuo preferido é o tripeptidio Ac- NH-GGK(AC), acoplado ao fluoróforo 7-aminometilcumarina (AMC). A invenção refere-se ainda ao uso dos sais de (E)-N-(2-amino- . fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazo|-4-j|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}- 15 acrilamida de acordo com esta invenção para inibir a atividade de histona desacetilases em células e tecidos, causando hiperacetilação de protelnas de substrato e como consequência funcional, por exemplo, a indução ou repressão da expressão gênica, indução de degradação de proteínas, inter- rupção do ciclo celular, indução de diferenciação e/ou indução de apoptose- 20 A atividade celular de um inibidor de histona desacetilases inclui qualquer efeito celular relacionado à inibição de histona desacetilase, em particular hiperacetilação de proteínas, repressão e ativação transcricional, indução de apoptose, diferenciação, e/ou citotoxicidade.

O termo "indução de apoptose" e termos análogos são usados 25 para identificar um composto que executa morte celular programada em cé- lulas que entram em contato com aquele composto. "Apoptose" é definido por eventos bioquímicos complexos na célula contatada, tais como a ativa- ção de proteinases especificas para cisteina ("caspases") e a fragmentação de cromatina.

A indução de apoptose em células que fizeram contato com o 30 composto pode não estar necessariamente acoplada à inibição da prolifera- ção celular ou diferenciação celular.

De preferência, a inibição de prolifera- ção, indução de diferenciação e/ou indução de apoptose é especifica para

. células com crescimento celular aberrante. . "C itotoxicidade" em geral significa interrupção da proliferação

- e/ou indução de morte celular apoptótica in vitro em células mamiferas, em particular células cancerosas humanas. 5 "lndução de diferenciação" é definida como um processo de re- programação celular que leva a uma interrupção reversível ou irreversível do ciclo celular em GO e re-expressão de um subconjunto de genes típicos pa- ra um certo tipo de células normais particulares ou tecido (por exemplo re- expressão de proteínas de gordura do leite e gordura em células de carci- lO noma mamário)- "Citotoxicidade" em geral significa interrupção da proliferação

" e/ou indução de morte celular apoptótica in vitro em células mamlferas, em particular células cancerosas humanas- . Ensaios para quantificação de proliferação celular, apoptose ou 15 diferenciação são bastante conhecidos pelos versados e pelo estado da técnica, Por exemplo, a atividade metabólica que está ligada à proliferação celular é quantificada usando o ensaio com azul Alamar / Resazurina assay (O'Brian et al.

Eur.

J.

Biochem 267, 5421-5426, 2000) e a indução de apop-

tose é quantificada medindo-se a fragmentação de cromatina com o ELISA 20 de detecção de morte ceiular comercializado pela Roche.

Exempios de en- saios celulares para a determiriação de hiperacetilação de substratos de HDAC são dados medindo-se a acetiiação da historia de núcleo usando an- ticorpos específicos por análise da mancha ocidental, ensaios com genes repórteres usando os respectivos promotores responsivos ou elementos dos 25 promotores (por exemplo o promotor p21 ou o sítio spI como elemento res- ponsivo) ou finalmente por análise de imagem mais uma vez usando anti- corpos específicos para acetilação para proteinas do tipo histona de núcleo.

Os sais de (E)-N-(2-amino-fenil)4-{1-[4-(1-metiF1H-pirazolA-il)- benzenossulfoniÍ]-1H-pirrol-3-iI]-acrilamida de acordo com esta invenção po- 30 dem ser comercialmente úteis devido a sua atividade inibitória de HDAC, antiproliferativa e/ou indutora de apoptose, que pode ser benéfica na terapia ou na profilaxia de doenças responsivas aos mesmos, tais como por exem-

.. plo qualquer uma das doenças mencionadas neste relatório.

A invenção refere-se ainda a um método para inibir, tratar, me-

- lhorar ou prevenir neoplasia celular pela administração de uma quantidade eficaz de um sal de (E)-N-(2-amino-fenj])-311-[4-(1-metj|-1H-pimzo|A-il)- 5 benzenossu|fonj|]-1H-pirro|-3-i|}-acri|amjda de acordo com esta invenção a um mamífero, em particular um ser humano com necessidade de tal trata- mento.

Uma "neopfasia" é definida por células que apresentam proliferação e/ou sobrevivência celular aberrante e/ou um bloco em diferenciação.

O termo "neoplasia" inclui neoplasia benigna, que é descrita por hiperprolifera- lO ção de células, incapazes de formar um tumor agressivo e metastatisante in vivo, e, em contraste, neoplasia maiigna, que é descrita por céiulas com di- versas anormalidades celulares e bioquímicas, capazes de formar um doen- ça sistêmica, por exemplo formando metástase tumoral em órgãos distan- . tes. 15 Os sais de (E)-N-(2-amino-feni|)-3-{1-[4-(1-meti|-1H-pirazo|m-iI)- benzenossu1foni|]-1H-pirrol-3-i|µacri|amida de acordo com esta invenção podem ser particularmente usados para o tratamento de neoplasias malig- nas, também descritas como câncer, caracterizadas por células tumorosas que finalmente metastatisam em órgãos ou tecidos distantes.

Exemplos de 20 neoplasias malignas tratadas com os sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3j1-[4- {l-metil-l H-pirazolA-i[)-benzenossulfoni|]-1H-pirro|-3-i|}-acrilamida de acordo com a presente invenção incluem tumores sóIidos e hematológicos.

Tumo- res sólidos são exemplificados por tumores de mama, bexiga, osso, cérebro, sistema nervoso central e periférica, cólon, glândulas endócrinas (por exem- 25 plo tireoide e córtex adrenal), esôfago, endométrio, células germinativas, cabeça e pescoço, rim, fígado, pulmão, Iaringe e hipofaringe, mesotelioma, ovário, pâncreas, próstata, reto, renal, intestino delgado, tecido mole, testí- culo, estômago, pele, ureter, vagina e vulva- Neoplasias malignas incluem cânceres hereditários exemplificados por retinoblastoma e tumor de Wilms. 30 Além disso, neoplasias malignas incluem tumores primários nos referidos órgãos e tumores securidários correspondentes em órgão distantes ("metás- tases tumorais"). Tumores hematológicos são exemplificados por formas

- agressivas e indolentes de leucemia e linfoma, a saber, doença não Hodg- . kins, leucemia mieloide crônica e aguda (CML / AML), leucemia linfoblástica

' aguda (ALL), doença de Hodgkin, mieloma múltiplo e Iinfoma de células T.

Também estão incluídas a sÍndrome mielodisplásica, neoplasia de células 5 plasmáticas, sÍndromes paraneoplásicas, cânceres de sítio primário desco- nhecido assim como malignidades relacionadas à AIDS.

Deve ser observado que uma doença cancerígena assim como uma neoplasia maligna não requer necessariamente a formação de metás- tases em órgãos distantes.

Certos tumores exercem efeitos devastadores 10 no próprio órgão primário através de suas propriedades de crescimento a- gressivo.

Estas podem levar à destruição da estrutura de tecidos e órgãos resultando finalmente em insuficiência da função do função atacado.

A proliferação celular neoplásica também pode afetar o compor- . tamento das células normais e o funcionamento dos órgãos.

Por exemplo a 15 formação de novos vasos sanguíneos, um processo descrito como neovas- cularização, é induzida por tumores ou metástases tumorais- Os sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazol4-il)-benzenossulfonil]-1 H- pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com esta invenção podem ser comercial- mente úteis para o tratamento de processos patofisiológicos relevantes cau- 20 sadas por proliferação de células benignas ou neoplásicas, tal como, porém sem limitação, neovascularização por proliferação não fisiológica de células endoteliais vasculares.

Resistência a fármacos é de particular importância para o fre- quente fracasso de terápicos tradicionais contra o câncer.

Esta resistência a 25 fármacos é causada por vários mecanismos celulares e moleculares como superexpressão de bombas de efluxo de fármacos, mutação na proteína celular-alvo ou proteinas de fusão formadas por translocações cromossômi- cas.

A aplicabilidade comercial dos sais de (E)-N-(2-amino-fenü}-3j1-[4-(1- metil-l H-pirazoF4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo 30 com a presente invenção não se Iimita ao tratamento de 1" linha dos pacien- tes.

Pacientes com resistência a quimioterápicos contra o câncer ou a fár- macos anticâncer específicos para o alvo também podem ser passíveis ao

.. tratamento com esses sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3A1-[4-(1-meb'|-1|d- pirazo|A-i|)-benzenossu|foni|]-1H-pirrol-3-i|µacrj|amida por exemplo para ci- ' clos de tratamento de 2' ou 3" linha- Um exemplo de destaque é dado por pacientes com leucemia promielocítica aguda com a proteína de fusão PML- 5 RARcz, resistentes à terapia convencional com retinoides.

Esses pacientes podem ser ressensibilizados para retinoides por tratamento com fármacos inibitórios de HDAC como os sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil- 1H-pirazo|A-i|)-benzenossujfoni]]-1H-pirrol-3-i|Facn|amida de acordo com a presente invenção. 10 A invenção oferece ainda um método para tratamento de um rnamífero, em particular um ser humano, portador de uma doença diferente de neoplasia celular, sensivel à terapia como inibidor de histona desacetila- ses, compreendendo administrar ao referido mamífero uma quantidade far- macologicamente ativa e terapeuticamente eficaz e tolerável de um sal de 15 (E)-N-{2-amino-fenil)-3-{1-[4-{1-metil-1 H-pirazo|-4-i|)-benzenossu|foni|]-1H- pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com esta invenção.

Essas doenças não ma- Iignas incluem (i) artropatias e doenças osteopatológicas tais como artrite reu- matoide, osteoartrite, gota, poliartrite e artrite psoriática, 20 (ii) doenças autoimunes como lúpus eritematoso sistêmico e re- jeição de transplante, (iii) doenças hiperproliferativas tais como psoríase ou prolifera- ção de células do músculo liso incluindo distúrbios proliferativos vasculares, aterosclerose e restenose, 25 (iv) doenças inflamatórias agudas e crônicas e doenças dérmi- cas tais como colite ulcerativa, doença de Crohn, rinite alérgica, dermatite alérgica, fibrose cÍstica, bronquite obstrutiva crônica e asma, (v) endometriose, útero fibroide, hiperplasia endometrial e hiper- plasia benigna da próstata, 30 (vi) disfunção cardíaca, (vii) inibição de condições imunossupressores com infecções por HlV,

(viii) distúrbios neuropatológicos como mal de Parkinson, mal de % - Aizheimer ou distúrbios relacionados com poliglutamina, e (ix) condições patológicas passíveis de tratamento por potencia- lização da expressão de genes endógenos assim como intensificação da 5 expressão transgênica em terapia genética.

Os sais de (E)-N-(2-amino-fenin-311-[4-(1-meti|-1H-pirazolA-i|)- benzenossulfonil]-1H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com a presente inven- ção podem ser comercialmente usados para o tratamento, a prevenção ou a melhora das doenças de comportamento benigno e maligno descritas neste 10 retatório, tais como, por exemplo, doenças (hiper)proliferativas e/ou distúr- bios responsivos à indução de apoptose e/ou distúrbios responsivos à dife- renciação celular, por exemplo neoplasias benignas ou malignas, particu- Íarmente câncer, tais como por exemplo qualquer uma das doenças cance- . rígenas descritas acima. 15 No contexto de suas propriedades, funções e utilidades mencio- nadas neste relatório, espera-se que os sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4- (l-metil-l H-pirazok4jl)-benzenossulfonil]-1H- pirrol-3-il}-acrilamida de acor- do com a presente invenção distinguem-se por seus efeitos valiosos e dese- jáveis relacionados com as mesmas, tais como por exemplo baixa toxicida- 20 de, biodisponibilidade superior de modo geral (tal como por exemplo boa absorção entérica), janela terapêutica superior, ausência de efeitos colate- rais significativos, e/ou efeitos benéficos adicionais relacionados com sua adequabilidade terapêutica e farmacêutica (por exemplo comportamento da solubilidade). 25 A presente invenção inclui ainda um método para o tratamento de mamíferos, inclusive seres humanos, que sofrem de uma das condições, doenças, distúrbios ou enfermidades mencionadas acima.

O método com- preende o fato de que uma quantidade farmacologicamente ativa e terapeu- ticamente eficaz e tolerável de um ou mais dos sais de (E)-N-(2-amino-fenil)- 30 341-[4-(1-metil-1H-pirazo|A-il)-benzenossu|foni|]-1H-pirroI-3-i|µacrüamida de acordo com esta invenção, que funcionam inibindo histona desacetilases e - em geral - modulando a acetilação de proteínas, induzindo vários efeitos

.,, celulares, em particular a indução ou repressão de expressão gênica, inter- rompendo a proliferação celular, induzindo a diferenciação celular e/ou indu- ' zindo apoptose, é administrada ao indivíduo com necessidade de tal trata- mento. 5 A invenção inclui ainda um método para o tratamento de doen- ças e/ou distúrbios responsivos ou sensíveis à inibição de histona desaceti- lases, particularmente as doenças mencionadas acima, tais como por e- xemplo neoplasia celular ou doenças diferentes de neoplasia celular como as indicadas acima, em mamíferos, inclusive seres humanos, que sofrem 10 dessas doenças compreendendo administrar aos referidos mamlferos com necessidade da mesma uma quantidade farmacologicamente ativa e tera-

" peuticamente eficaz e tolerável de um ou mais dos sais de (E)-N-(2-amino- feni|)-341-[4-(1-meti|-1 H-pirazol-4-il)-benzenossulfon il]-1 H-pirrol-3-il}- « acrilamida de acordo com a presente invenção. 15' A presente invenção inclui ainda um método terapêutico útil para modular a acetilação de proteínas, a expressão gênica, a proliferação celu- lar, a diferenciação celular e/ou a apoptose in vivo nas doenças menciQna- das acima, em particular câncer, compreendendo administrar a um indivíduo com necessidade de tal terapia uma quantidade farmacologicamente ativa e 20 terapeuticamente eficaz e tolerável de um ou mais dos sais de (E)-N-(2- amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 |q-pirazol-4-i|)-benzenossu|fonjl]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida de acordo com esta invenção, que funcionam inibindo histona desacetilases.

A presente invenção oferece ainda um método para regular a a- 25 tividade de promotor endógeno ou heterólogo pelo contato de uma célula com um sal de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)- benzenossu|foni]]-1H-pirrol-3-i|}-acri|amida de acordo com esta invenção.

A invenção refere-se ainda ao uso dos sais de (E)-N-(2-amino- fenil)-3-{1 -[4-(1-metil-1 H-pirazolA-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}- 30 acrilamida de acordo com a presente invenção para a produção de compo- sições farmacêuticas que são empregadas para o tratamento e/ou a profila- xia e/ou a melhora das doenças, distúrbios, enfermidades e/ou condições

W . mencionadas neste relatório.

A invenção refere-se ainda ao uso dos sais de (E)-N-(2-amino- " feni])-311-[4-(1-metil-1 H-pjrazol-4-i|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida de acordo com a presente invenção para a produção de compo- 5 sições farmacêuticas que são empregadas para o tratamento e/ou a profila- xia de doenças e/ou distúrbios responsivos ou sensiveis à inibição de histo- na desacetilases, particularmente as doenças mencionadas acima, tais co- mo por exemplo neoplasia celular ou doenças diferentes de neoplasia celu- lar como as indicadas acima. 10 A invenção refere-se ainda ao uso dos sais de (E)-N-{2-amino- fenil)-3-{1-[4-{1 -metil-l H-pirazoi-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il)- acrilamida de acordo com a presente invenção para a produção de compo- sições farmacêuticas com atividade inibitória de histona desacetilases.

A invenção refere-se ainda ao uso dos sais de (E)-N-{2-amino- 15 fenil)A{1-[4-(1-metiM H-pirazolA-ii)-benzenossulfonil]-1H-pirrol-3-il}- acrilamida de acordo com a presente invenção para a produção de compo- sições farmacêuticas para inibir ou tratar neoplasia celular, tal como neopla- sias benignas ou malignas, por exemplo câncer.

A invenção refere-se ainda ao uso dos sais de (E)-N-(2-amino- 20 feni|)-341-[4-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirro!-3-il}- acrilamida de acordo com a presente invenção para a produção de compo- sições farmacêuticas que podem ser usadas para o tratamento, a prevenção ou a meíhora de doenças responsivas à interrLípção do crescimento de célu- Ias aberrantes, tais como por exemplo doenças (hiper)proliferativas de com- portamento benigno ou maligno, tais como por exemplo qualquer uma das doenças mencionadas neste relatório, particuíarmente câncer, tais como por exemplo qualquer uma das doenças cancerigenas descritas acima.

A invenção refere-se ainda ao uso dos sais de (E)-N-(2-amino·- fenii)-3R1-[4-(1-meti|-1 H-pirazQlA-i|)-benzenossulfoni[]-1H-pirro[-3-i|F acrilamida de acordo com a presente invenção para a produção de compo- sições farmacêuticas que podem ser usadas para o tratamento, a prevenção ou a melhora de distúrbios responsivos à indução de apoptose, tais como

.. por exemplo qualquer uma das doenças mencionadas neste relatório, parti- cularmente câncer, tais como por exemplo qualquer uma das doenças can- ' cerígenas descritas acima.

A invenção refere-se ainda ao uso dos sais de (E)-N-(2-amino- 5 feni])-3A1-[4A1-meti|-1H-pirazoiA-i|)-benzenossulfoni|]-1 H-pirroi-3-il}- acrilamida de acordo com a presente invenção para a produção de compo- sições farmacêuticas que podem ser usadas para o tratamento, a prevenção ou a melhora de distúrbios responsivos à indução de diferenciação, tais co- mo por exemplo qualquer uma das doenças mencionadas neste relatório, 10 particularmente câncer, tais como por exemplo qualquer uma das doenças cancerígenas descritas acima.

A invenção refere-se ainda ao uso dos sais de (E)-N-(2-amino- feni|)-311-[4-(1-lnetil-1 H-pirazof-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}- u acrilamida de acordo com a presente invenção para a produção de compo- 15 sições farmacêuticas que podem ser usadas para o tratamento, a prevenção ou a melhora de neoplasias benignas ou malignas, particularmente câncer, tais como por exemplo qualquer uma das doenças cancerigenas descritas acima.

A invenção refere-se ainda ao uso dos sais de (E)-N-(2-amino- 20 fenil)-3j1-[4-(1-metiM H-pirazo|-4-i|)-benzenossL||foni|]-1 H-pirroí-3-il}- acrilamida de acordo com a presente invenção para a produção de compo- sições farmacêuticas para o tratamento de uma doença diferente de uma neoplasia celular e sensível à terapia com inibidores de histona desacetila- se, tais como as doenças não malignas mencionadas acima. 25 A invenção refere-se ainda ao uso dos sais de (E)-N-(2-amino- fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazolA-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-i[}- acrilarnida de acordo com a presente invenção para a produção de compo- sições farmacêuticas para inibir a atividade de histona desacetilases no tra- tamento de doenças responsivas à referida inibição ou às consequências 30 funcionais da mesma.

A invenção refere-se ainda a um método para o tratamento, a prevenção ou a melhora das doenças, distúrbios, enfermidades e/ou cond j-

.. ções mencionadas neste relatório em um mamlfero, em particular um paci- ente humano, compreendendo administrar uma quantidade farmacologica- mente ativa e terapeuticamente eficaz e tolerável de um ou mais sais de (E)- N-(2-amino-feniÍ)-311-[4-(1-metil-1H-pjrazolA-il)-benzenossu|foni[]-1 H-pirro1- 5 3-il}-acrilamida de acordo com a presente invenção ao referido mamífero com necessidade da mesma.

A invenção refere-se ainda aos sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3- {1-[4-(1-metil-1 H-pirazoM-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com esta invenção para uso no tratamento e/ou na profilaxia de do- lO eriças, especialmente as doenças mencionadas.

A invenção refere-se ainda a composições farmacêuticas com- preendendo um ou mais dos sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil- 1H-pirazoM-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirroF·3-il}-acrilamida de acordo com r esta invenção e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável. 15 A presente invenção refere-se ainda a composições farmacêuti- cas compreendendo um ou mais dos sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3{1-[4-(1- metil-1H-pirazol-4-il)-benzenossulfonii]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com esta invenção e auxiliares e/ou excipientes farmaceuticamente aceitá- veis. 20 A invenção refere-se ainda a uma combinação compreendendo um ou mais dos sais de (E)- N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1H-pimzolA- i|)-benzenossu|foni]]-1H-pirro|-3-i|}-acri|amjda de acordo com esta invenção e um diluente, excipiente e/ou veículo farmaceuticamente aceitável, por e- xemplo para o tratamento, a prevenção ou a melhora de doenças (hi- 25 per)proliferativas de comportamento benigno ou maligno e/ou distúrbios res- ponsivos à indução de apoptose, tais como, por exemplo, neoplasias benig- nas ou malignas, por exemplo câncer, tais como por exemplo qualquer uma das doenças cancerígenas descritas acima.

A invenção refere-se ainda a composições farmacêuticas de a- 30 cordo com esta invenção com atividade inibidora das histona desacetilases.

A invenção refere-se ainda a composições farmacêuticas de a- cordo com esta invenção com atividade indutora de apopotse.

A invenção refere-se ainda a composições farmacêuticas de a- b . cordo com esta invenção com atividade antiproliferativa.

A invenção refere-se ainda a composições farmacêuticas de a- cordo com esta invenção com atividade iridutora de diferenciação celular. 5 A invenção refere-se ainda ao uso de uma composição farma- cêutica compreendendo um ou mais dos sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1- [4-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida de a- cordo com esta invenção e um veículo ou diluente farmaceuticamente acei- tável na fabricação de um produto farmacêutico, tal como, por exemplo, uma 10 embalagem comercial, para uso no tratamento e/ou na profilaxia de doenças como aquelas mencionadas.

Adicionalmente, a invenção refere-se a um produto industrializa- do, que compreende material de embalagem e um agente farmacêutico con- tido no referido material de embalagem, onde o agente farmacêutico é tera- 15 peuticamente eficaz para inibir os efeitos das histona desacetilases, melho- rar os sintomas de um distúrbio mediado por histona desacetilases, e onde o material de embalagem compreende um rótulo ou uma bula indicando que o agente farmacêutico é útil para prevenir ou tratar distúrbios mediados pelas histona desacetilases, e onde o referido agente farmacêutico compreende 20 um ou mais sais de (E)-N-(2-amino-fenih-3-{1-[4-(1-metil-1H-pirazo|A-i|)- ber1zenossu|foni|]-1H-pirrol-3-i|}-acri|amida de acordo com a invenção.

O material de embalagem, rótulo ou bula é igual ou parecido aos materiais de embalagem, rótulos e bulas geralmente considerados padrão para fármacos com utilidades relacionadas.

As composições farmacêuticas de acordo com esta invenção são preparadas por processos que são conhecidos per se e familiares aos versados na técnica.

Como composições farmacêuticas, os sais de (E)-N- (2-amino-feni])-311-[4-(1-meti|-1H-pirazoiA-i|)-benzenossu|foni|]-1H-pirro|-3- il}-acrilamida da invenção (= compostos ativos) são empregados como tais, ou de preferência em combinação com auxiliares e/ou excipientes farmacêu- ticos adequados, por exemplo na forma de comprimidos, comprimidos re- vestidos, cápsulas, comprimidos ovais revestidos, supositórios, emplastros

.. (por exemplo como TTS), emulsões, suspensões, géis ou soluções, o teor de composto ativo vantajosamente variando entre 0,1 e 95°/) e onde, com a ' escolha adequada dos auxiliares e/ou excipientes, é possÍvel obter uma forma de administração farmacêutica (por exemplo uma forma de liberação 5 lenta ou uma forma entérica) exatamente adequada para o composto ativo e/ou para o início de ação desejado.

O versado na técnica está familiarizado com auxiliares veiculos, excipientes, diluentes, carregadores ou adjuvantes que são adequados para as formulações, preparações ou composições farmacêuticas desejadas por 10 causa de seu conhecimento técnico.

Além de solventes, formadores de gel, bases para pomada e outros excipientes para compostos ativos, por exem- plo antioxidantes, dispersantes, emulsificantes, conservantes, solubilizantes, corantes, agentes complexantes ou promotores de permeação podem ser usados. 15 A administração dos sais de (E)-Nj2-aminoÁenil)-3-{1-[4-(1- metil-l H-pirazo|A-i[)-benzenossu|foni!]-1H-pirro|-3-i|µacri|amida, composi- ções ou combinações de acordo com a invenção pode ser efetuada por qualquer um dos modos de administração geralmente aceitos disponíveis na literatura.

Exemplos ilustrativos de modos de administração adequados in- 20 cluem distribu ição intravenosa, oral, nasal. parenteral, tópica, transdérmica e retal.

A distribuição oral e intraveriosa são preferidas.

Para o tratamento de dermatoses, os sais de (E)-N-(2-amino- fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazo|4-il)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida de acordo com esta invenção são em particular administrados na 25 forma das composições farmacêuticas que são adequadas para aplicação tópica.

Para a produção das composições farmacêuticas, os sais de (E)-N- (2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazolA-il)-benzenossulfonil]-1H-pirrok3- il}-acrilamida da invenção (= compostos ativos) são de preferência mistura- dos com auxüiares farmacêuticos adequados e ainda processados para dar 30 formulações farmacêuticas adequadas.

Formulações farmacêuticas ade- quadas são, por exemplo, pós, emulsões, suspensões, sprays, óIeos, po- madas, pomadas gordurosas, cremes, pastas, géis ou soluções.

N: As composições farmacêuticas de acordo com a invenção são ¥ preparadas por conhecidos per se.

A dosagem dos sais de (E)-N-(2-amino- ' fenil)-3j1-[4-(1-metiP1 H-pirazol-4-i|)-benzenQssulfoni|]-1 H-pirrol-3-il}- acrilamida da invenção (= compostos ativos) é calculada na ordem de gran- 5 deza usual para inibidores de histona desacetilases.

As formas de aplica- ção tópica (tais como pomadas) para o tratamento de dermatoses contém assim os compostos ativos em uma concentração de, por exemplo, 0,1 a 99%. A dose usual no caso de terapia sistêmica (p.o-) pode variar entre 0,03 e 60 mg/kg por dia, (i.

V.) pode variar entre 0,03 e 60 mg/kg/h.

Em uma 10 outra modalidade, a dose usual no caso de terapia sistêmica (p.o-) varia en- tre 0,3 e 30 mg/kg por dia, (i.

V.) varia entre 0,3 e 30 mg/kg/h.

A escolha do regime de dosagem ideal e da duração de medica- ção, particularmente a dose ideal e a maneira de administração dos com- . postos ativos necessárias em cada caso podem ser determinadas pelo ver- 15 sado na técnica com base em seu conhecimento técnico.

Dependendo da doença particular a ser tratada ou prevenida, agentes ativos terapêuticos adicionais, que são normalmente administrados para tratar ou prevenir aquela doença, podem ser opcionalmente coadminis- trados com os sais de (E)-N-(2-amino-feni|)-341-[4-(1-meti]-1H-pirazD|A-il)- 20 benzenossu|for)i|]-1H-pirro[-3-i|}-acrilamida de acordo com a presente inven- ção.

Conforme usado neste relatório, agentes terapêuticos adicionais que são normalmente administrados para tratar ou prevenir uma doença particu- lar são conhecidos como apropriados para a doença sendo tratada.

Por exemplo, os sais de (E)-N-{2-amino--fenil)-3j1-[4-(1 -meti1- 25 1H-pirazo|A-i|)-benzenossu!foni|]-1H-pirro|-3-i|µacri|amida de acordo com esta invenção podem ser combinados com um ou mais agentes terapêuticos tradicionais ou com radiação usados para o tratamento das doenças men- cionadas acima.

Por conseguinte, em uma modalidade particular os sais de (E)- 30 N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazolA-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol- 3-il}-acrilamida de acordo com esta invenção podem ser combinados com um ou mais agentes anticâncer conhecidos na técnica, tal como por exem-

, n plo com um ou mais agentes quimioterapêuticos e/ou agentes anticâncer especificos para o alvo conhecidos na técnica como descrito abaixo, e/ou ' com radiação.

Exemplos de agentes quimioterapêuticos anticâncer conhecidos 5 frequentemente usados em terapia combinada incluem, porém sem limita- ção (j) agentes a[qui|antes/carbami|antes tais como ciclofosfamida (Endo- xan®), lfosfamida (Holoxan®), Tiotepa (Thiotepa Lederle®), Melfalo (Alke- ran®), ou cIoroetilnitrosoureia (BCNU); (ii) derivados de platina como cis- platina (Platinex® BMS), oxaliplatina ou carboplatina (Cabroplat® BMS); (iii) 10 agentes antimitóticos / inibidores de tubulina tais como alcaloides da vinca (vincristina, vinblastina, vinorelbina), taxanos tais como Paclitaxel (Taxoi®), Docetaxel (Taxotere®) e análogos assim como novas formulações e conju- gados dos mesmos, epotilonas tais como Epotilona B (Patupilone®), Azae- - potilona (lxabepilone®) ouZK-EPO, um anóloga da epotilona B totalmente 15 sintético; (iv) inibidores da topoisomerase tais como antraciclinas (exemplifi- cadas por Doxorubicina / Adriblastina®), epipodofilotoxinas (exemplificadas por Etoposida / Etopophos®) e camptotecina e análogos de camptotecina (exemplificados por irinotecano / Camptosar® ou Topotecanu / Hycamtin®); (v) antagonistas de pirimidina tais como 5-fluorouracila (5- FU), Capecitabina 20 (Xeloda®), Arabinosilcitosina / Citarabina (Alexan®) ou gencitabina (Gem- zar®); (vi) antagonistas da purina tais como 6-mercaptopurina(Puri-Nethol®), 6-tioguanina ou fludarabina (Fludara®) e finalmente (vii) antagonistas do ácido fõlico tais como metotrexato (Farmitrexat®) ou premetrexed (Alimta®). Exemplos de classes de fármacos anticâncer específicos para o 25 alvo usadas em terapia experimental ou tradicional contra o câncer incluem, porém sem limitação, (i) inibidores de quinases tais como por exemplo lma- tinib (Glivec®), ZD-1839 / Gefitinib (iressa®), Bay43-9006 (Sorafenib), SU11248 / Sunitinib (Sutent®) ou OSl-774 / Erlotinib (Tarceva®); (ii) inibido- res de proteassomas tais como PS-341 / Bortezumib (Velcade®); (iii) inibido- 30 res da proteína de choque térmico 90 como 17-alilaminogeldanamicina (17- AAG); (iv) agentes vetorizados para os vasos sangulneos (VTAS) como fos- fato de combretastina A4 ou AVE8062 / AC7700 e fármacos antiangiogêni-

cos como anticorpos de VEGF, tais como Bevacizumab (Avastin®), ou inibi- c dores da KDR tirosina quinase tais como PTK787 / ZK222584 (Vatalanib); ' (v) anticorpos monoclonais tais como Trastuzumab (Herceptin®) ou Rituxi- mab (MabThera / Rituxan®) ou Alemtuzumab (Campath®) ou Tositumab 5 (Bexxar®) ou C225/ Cetuximab (Erbitux®) ou Avastina (vide acima) assim como mutantes e conjugados de anticorpos monoclonais, por exemplo Gem- tuzumab ozogamicina (Mylotarg®) ou lbritumomab tiuxetano (Zevalin®), e fragmentos de anticorpos; assim como mutantes e conjugados de anticorpos monoclonais e fragmentos de anticorpos; (vi) terápicos à base de oligonu- 1O cleotídeos como G-3139 / Oblimersen (Genasense®); (vii) receptor similar a TOII / agonistas de TLR 9 como Promune®, agonistas de TLR 7 como lmi- quimod (Aldara®) ou lsatoribina e análogos da mesma, ou agonistas de TLR 7/8 como Resiquimod assim como RNA imunoestimulador como agonistas + de TLR 7/8; (viii) iriibidores da protease; (ix) terápicos hormonais como anti- 15 estrogên ios (por exemplo Tamoxifeno ou Raioxifeno), antiandrogênios (por exemplo Flutamida ou Casodex), análogos de LHRH (por exemplo Leuproli- da, Goserelina ou Triptorelina) e inibidores da aromatase.

Outros agentes anticâncer específicos para o alvo conhecido que podem ser usados para terapia combinada inciuem bleomicina, retinoi- 20 des tais como ácido transretinoico (ATRA), inibidores da DNA metiltransfe- rase tais como o derivado de 2-desoxicitidina Decitabina (Docagen®) e 5- Azacitidina, alanosina, citocinas tais como interleucina-2, interferons tais como interferon a2 ou interferon-Y, agonistas dos receptores de morte, tais como TRAIL, anticorpos agonísticos de DR4/5, agonistas de FasL e TNF-R, 25 e.finalmente inibidores das histona desacetilases diferentes dos sais de (E)- N-(2-amino-feni|)-311-[4-(1-meti|-1 H-pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol- 3-il}-acrüamida de acordo com esta invenção tais como SAHA, PXD1O1 , MS275, MGCDO103, Depsipeptídio / FK228, NVP-LBH589, NVP-LAQ824, ácido valproico (VPA) e butiratos. 30 Como agentes anticâncer exemplificativos para uso em combi- nação com os sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-meti1-1H-pirazolA-il)- benzenossu|foniq-1H-pirro(-3-j|Facri|amida de acordo com esta invenção nas coterapias mencionadas neste relatório qualquer um dos fármacos a seguir

Q pode ser mencionado, porém sem limitação, 5 FU, actinomicina D, ' ABARELIX, ABCIXIMAB, ACLARUBICINA, ADAPALENE, ALEMTUZUMAB, ALTRETAMINA, AMINOGLUTETIMIDA, AMIPRILOSE, ANRUBICINA, 5 ANASTROZOL, ANCITABINA, ARTEMISINlNA, AZATIOPRINA, BASILIXIMAB, BENDAMUSTINA, BEVACIZUMAB, BEXXAR, BICALUTAMIDA, BLEOMICINA, BORTEZOMIB, BROXURIDINA, BUSULFANO, CAMPATH, CAPECITABINA, CARBOPLATÍNA, CARBOQUONA, CARMUSTINA, CETRORELIX, CLORAMBUCÍL, 10 CLORMETINA, CISPLATINA, CLADRIBINA, CLOMIFENO, CICLOFOSFAMIDA, DACARBAZINA, DACLIZUMAB, DACTINOMICINA, DAUNORUBICINA, DECÍTABINA, DESLORELINA, DEXRAZOXANO, DOCETAXEL, DOXIFLURIDINA, DOXORUBICINA, DROLOXIFENO, DROSTANOLONA, EDELFOSINA, EFLORNITINA, EMITLFUR, 15 EP|RUB]C|NA, EPITIOSTANOL, EPTAPLATINA, ERBITUX, ERLOTINIB, ESTRAMUSTINA, ETOPOSIDA, EXEMESTANO, FADROZOL, FINASTERIDA, FLOXURIDÍNA, FLUCITOSINA, FLUDARABINA, FLUOROURACIL, FLUTAMIDA, FORMESTANO, FOSCARNET, FOSFESTROL, FOTEMUSTINA, FULVESTRANT, GEFITINIB, 20 GENASENSE, GENCITABINA, GLIVEC, GOSERELINA, GUSPERIMUS, HERCEPTINA, WJARUBICINA, IDOXURIDINA, IFOSFAMIDA, IMATINIB, IMPROSULFANO, lNFLIXIMAB, IRINOTECANO, IXABEPILONA, LANREOTIDA, LETROZOL, LEUPRORELINA, LOBAPLATINA, LOMUSTINA, LUPROLIDA, MELFALANO, MERCAPTOPURINA, METOTREXATO, METUREDEPA, MIBOPLATINA, MIFEPRISTONA, MILTEFOSINA, MIRIMOSTIM, MITOGUAZONA, MITOLACTOL, MITOMICINA, MITOXANTRONA, MIZORIBINA, MOTEXAFINA, MYLOTARG, NARTOGRASTIM, NEBAZUMAB, NEDAPLATINA, NILUTAMIDA, NIMUSTINA, OCTREOTIDA, ORMELOXIFENO, OXALIPLATINA, PACLITAXEL, PALIVIZUMAB, PATUPILONA, PEGASPARGASE, PEGFILGRASTIM, PEMETREXED, PENTETREOTIDA, PENTOSTATINA, PERFOSFAMIDA, PTPOSULFANO, PIRARUBICINA,

PLICAMICINA, PREDNIMUSTINA, PROCARBAZINA, PROPAGERMÂNIO, r

CLORETO DE PROSPÍDIO, RALOXIFENO, RALTITREXED, ' RANIMUSTINA, RANPIRNASE, RASBURICASE, RAZOXANO, RITUXIMAB, RIFAMPICINA, RITROSULFANO, ROMURTIDA, RUBOXISTAURINA, 5 SARGRAMOSTIM, SATRAPLATINA, SIROLIMUS, SOBUZOXANO, SORAFENIB, SPIROMUSTINA, STREPTOZOCINA, SUNITINIB, TAMOXIFENO, TASONERMINA, TEGAFUR, TEMOPORFINA, TEMOZOLOMÍDA, TENIPOSIDA, TESTOLACTONA, TIOTEPA, TIMALFASINA, TIAMIPRINA, TOPOTECANO, TOREMIFENO, TRAIL, 10 TRASTUZUMAB, TREOSULFANO, TRIAZIQUONA, TRIMETREXATO, TRIPTORELINA, TROFOSFAMIDA, UREDEPA, VALRUBICINA, VATALANIB, VERTEPORFINA, VINBLASTINA, VINCRISTINA, VINDESINA, VINORELBINA, VOROZOL e ZEVALINA.

Os agentes anticâncer mencionados acima como parceiros de 15 combinação dos sais de (E)-N42-amino-feni[)-3-'{1-[4-{1-meti|-1 H-pirazol-4- il)-benzenossulfonil]-1 H- pirrol-3-il}-acriiamida de acordo com esta invenção incluem derivados farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, tais como por exemplo seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

O especialista na técnica conhece, com base em sua experiên- 20 cia, o tipo, a dosagem diária total e a forma de administração dos agentes terapêuticos adicionais coadministrados.

As referidas dosagens diárias to- tais podem variar dentro de um amplo Iimite.

Na prática da presente invenção e dependendo dos detalhes, características ou finalidades dos usos mencionados acima, os sais de (E)- 25 N-(2-amino-feni|)-3-{1-I4-(1-metil-1H-pirazo|-4-i|)-benzenossu|foni|]-1H-pirrol- 3-il}-acrilamida de acordo com a presente invenção podem ser administra- dos em terapia combinada seja separadamente, sequencialmente, simulta- neamente, concorrentemente ou de forma cronologicamente escalonada (tal como por exemplo como formas de dosagem unitárias combinadas, como 30 formas de dosagem unitárias separadas, como formas de dosagem unitárias distintas e adjacentes, como combinações fixas ou não fixas, como kit de partes ou como misturas) com um ou mais terápicos tradicionais, em parti-

cular agentes anhcâncer conhecidos na literatura (agentes quimioterapêuti- r cos e/ou agentes anticâncer específicos para o alvo), tais como por exemplo ' qualquer um daqueles mencionados acima.

Neste contexto, a presente invenção refere-se ainda a uma 5 combinação compreendendo um primeiro princípio ativo, que é pelo menos um sal de (E)-N-(2-am ino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-p irazol-4-il)- benzenossulfonil]-1H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com esta invenção, e um segundo princípio ativo, que é peío menos um terápico tradicional co- nhecido na literatura, por exemplo um agente anticâncer conhecido na litera- lO tura, tal como por exemplo um ou mais daqueles mencionados acima, para uso separado, sequencial, simultâneo, concorrente ou cronologicamente escalonado em terapia, tal como por exemplo na terapia de qualquer uma das doenças mencionadas neste relatório. - O termo "combinação" de acordo com esta invenção pode ser 15 apresentado como uma combinação fixa, uma combinação não fixa ou um kit de partes.

Uma "combinação fixa" é definida como uma combinação na qual o referido primeiro princípio ativo e o referido segundo princípio ativo estão presentes juntos em uma dosagem unitária ou em uma única entida- 20 de.

Um exemplo de uma "combinação fixa" é uma composição farmacêutica na qual o referido primeiro princípio ativo e o referido segundo princípio ativo estão presentes em uma mistura para administração simultânea, tal como em uma formulação.

Um outro exemplo de uma "combinação fixa" é uma combinação farmacêutica na qual o referido primeiro princípio ativo e o refe- 25 rido segundo princípio ativo estão presentes em uma unidade sem estarem em mistura.

Um "kit de partes" é definido como uma combinação na qual o referido primeiro princípio ativo e o referido segundo princípio ativo estão presentes em mais de uma unidade.

Um exemplo de um "kit de partes" é 30 uma combinação na qual o referido primeiro princípio ativo e o referido se- gundo princípio ativo estão presentes separadamente- Os componentes do kit de partes podem ser administrados separadamente, sequencialmente,

simuttaneamente, concorrentemente ou de forma cronologicamente escalo- g nada.

A presente invenção refere-se ainda a uma composição farma- cêutica compreendendo um primeiro princípio ativo, que é pelo menos um 5 sal de (E)-N-(2-amjno-feni[)-341-[4-(1-meti|-1 H-pirazo!-4-il)- benzenossulfonil]-1 H-pirro|-3-i|µacri|amjda de acordo com esta invenção, e um segundo princípio ativo, que é pelo menos um agente anticâncer conhe- cido na Iiteratura, ta! como por exemplo um ou mais daqueles mencionados acima, e, opcionalmente, um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitá- lO vel, para uso separado, sequencial, simultâneo, concorrente ou cronologi- camente escalonado em terapia, tal como por exemplo na terapia de doen- ças responsivas ou sensíveis à inibição de histona desacetilases, particu- larmente doenças (hiper)proliferativas e/ou distúrbios responsivos à indução . de apoptose, tais como por exemplo qualquer uma das doenças menciona- 15 das neste relatório, como neoplasia benigna ou maiigna, especialmente câncer, particularmente qualquer uma das doenças cancerígenas descritas acima.

A presente invenção refere-se ainda a um produto combinado compreendendo a.) pelo menos um sal de (E)-N-(2-amino-fenil)-Y1-[4-(1- 20 meti[-1H-pirazo|A-i|)-benzenossulfoni|]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com esta invenção formulado com um veículo ou diluente farmaceuticamen- te aceitável, e b.) pelo menos um agente anticâncer conhecido na Iiteratura, tal como por exemplo um ou mais daqueles mencionados acima, formulados com um veículo ou d iluente farmaceuticamente aceitável. 25 A presente invenção refere-se ainda a um kit de partes compre- endendo uma preparação de um primeiro princípio ativo, que é um sal de (E)-N-(2-amino-feni|)-3-{1-[4-(1-meti|-1H-pirazo|A-i|)-benzenossulfoni|]-1 H- pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com esta invenção, e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável; uma preparação de um segundo princípio ati- 30 vo, que é um agente anticâncer conhecido na literatura, tal como um daque- ies mencionados acima, e um veiculo ou diluente farmaceuticamente aceitá- vel; para uso simultâneo, concorrente, sequencial, separado ou cronologi-

camente escabnado em terapia.

Opcionalmente, o referido kit compreende r instruções de uso do mesmo em terapia, por exemplo para tratar doenças ' responsivas ou sensíveis à inibição de histona desacetilases, tais como por exemplo neoplasia celular ou doenças diferentes da neoplasia celular como 5 indicado acima, particularmente câncer, tal como por exemplo qualquer uma das doenças cancerígenas descritas acima.

A presente invenção refere-se ainda a uma preparação combi- nada compreendendo pelo menos um sal de (E)-N-(2-amino-feni|)-3A1-[4-(1- metil-l H-pirazo|A-il)-benzenossu|foniÍ]-1H-pirro|-3-il}-acrilamida de acordo 10 com esta invenção e pelo menos um agente anticâncer conhecido na litera- tura para administração simultânea, concorrente, sequencial ou separada- Neste contexto, a presente invenção refere-se ainda a combina- ções, composições, formulações, preparações ou kits de acordo com a pre- sente invenção tendo atividade inibitória de histona desacetilases- 15 Também neste contexto, a presente invenção refere-se ainda a combinações, composições, formulações, preparações ou kits de acordo com a presente invenção tendo atividade anti-(hiper)proliferativa e/ou induto- ra de apoptose.

Além disso, a presente invenção refere-se ainda a um método 20 de tratamento por terapia combinada de doenças responsivas ou sensiveis à inibição de histona desacetilases, tais como por exemplo aquelas mencio- nadas acima, por exemplo doenças (hiper)prolifetivas e/ou distúrbios res- ponsivos à indução de apoptose, como câncer, em um paciente compreen- dendo administrar uma combinação, composição, formulação, preparação 25 ou kit como os descritos neste relatório ao referido paciente com necessida- de do mesmo.

Além disso, a presente invenção refere-se ainda a um método para tratar doenças responsivas ou sensíveis à inibição de histona desaceti- lases, tais como por exemplo câncer, em um paciente compreendendo ad- 30 ministrar em terapia combinada seja separadamente, simultaneamente, concorrentemente, sequencialmente ou de forma cronologicamente escalo- nada uma quantidade farmaceuticamente ativa e terapeuticamente eficaz e tolerável de uma composição farmacêutica, que compreende um sal de (E)"

C N-(2-amino-feni|)-3d1-{411- metil-l H-pirazo]A-ij)-benzenDssu]fonil]-1H-pirro|- ' 3-il}-acrilamida de acordo com esta invenção e um veículo ou diluente far- maceuticamente aceitável, e uma quantidade farmaceuticamente ativa e 5 terapeuticamente eficaz e tolerável de um ou mais agentes anticâncer co- nhecidos na literatura, tais como por exemplo um ou mais daqueles mencio- nados neste relatório, ao referido paciente com necessidade do mesmo. Além disso, a presente invenção refere-se a um método para tratar, prevenir ou melhorar doenças (hiper)proliferativas e/ou distúrbios res- lO ponsivos à indução de apoptose, tais como por exemplo neoplasias benig- nas ou malignas, por exemplo câncer, particularmente qualquer uma das doenças cancerígenas mencionadas neste relatório, em um paciente com- preendendo administrar seja separadamente, simultaneamente, concorren- temente, sequencialmente ou de forma cronologicamente escalonada ao 15 referido paciente com necessidade da mesma uma quantidade de um pri- meiro composto ativo, que é um sal de (E)-N-(2-amino-feni|)-3A1-[4-(1-meti|- 1H-pjrazo|A-i|)-benzenossulfoni|]-1H-pirro|-3-i|µacr'i1amida de acordo com a presente invenção, e uma quantidade de pelo menos um segundo composto ativo, o referido pelo menos um segundo composto ativo sendo um agente terapêutico tradicional, particularmente pelo menos um agente anticâncer conhecido na literatura, tal como por exemplo um ou mais dos agentes qui- mioterapêuticos e agentes anticâncer específicos para o alvo mencionados neste relatório, onde as quantidades do primeiro composto ativo e do referi- do segundo composto ativo resultam em um efeito terapêutico. Ainda adicionalmente, a presente invenção refere-se a um mé- todo para o tratamento, a prevenção ou a melhora de doenças (hi- per)proliferativas e/ou distúrbios responsivos à indução de apoptose, tais como por exemplo neoplasias benignas ou malignas, por exemplo câncer, particularmente qualquer uma das doenças cancerígenas mencionadas nes- te relatório, em um paciente compreendendo administrar uma combinação de acordo com a presente invenção. Além disso, a presente invenção refere-se ainda ao uso de uma composição, combinação, formulação, preparação ou kit de acordo com es- e ta invenção na fabricação de um produto farmacêutico, tal como por exem- ' pIo uma embalagem comercial ou um medicamento, para o tratamento, a prevenção, ou a melhora de doenças responsivas ou sensíveis à inibição de 5 histona desacetilases, particularmente as doenças mencionadas neste rela- tório, tais como por exemplo neoplasias benignas ou malignas, particular- mente câncer.

A presente invenção refere-se ainda a uma embalagem comer- cial compreendendo um ou mais sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-{1- 10 meti|-1H-pirazo|A-i|)-benzenossu|foni|]-1H-pjrro[-3-i|Facrj]amida da presente invenção junto com instruções para uso simultâneo, concorrente, sequencial ou separado com um ou mais agentes quimioterapêuticos e/ou agentes an- ticâncer específicos para o aivo, tais como por exemplo qualquer um daque- . les mencionados neste relatório. 15 A presente invenção refere-se ainda a urna embalagem comer- cial consistindo essencialmente em um ou mais sais de (E)-N-(2-amino- fenil)-3-{1-|4-(1-metil-1 H-pirazo[-4-i|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-ü}- acrilamida da presente invenção como o único princípio ativo junto com ins- truções para uso simultâneo, concorrente, sequencial ou separado com um 20 ou mais agentes quimioterapêuticos e/ou agentes anticâncer específicos para o alvo, tais como por exemplo qualquer um daqueles mencionados neste relatório.

A presente invenção refere-se ainda a uma embalagem comer- cial compreendendo um ou mais agentes quimioterapêuticos e/ou agentes 25 anticâncer específicos para o alvo, tais como por exemplo qualquer um da- queles mencionados neste relatório, junto com instruções para uso simultâ- neo, concorrente, sequencial ou separado com um ou mais sais de (E)-N-(2- amino-fenil)-341-[4-{1-metiI-1H-pirazolA-i|)-benzenossulfoni|]-1H-pirro[-3-i|}- acrilamida de acordo com a presente invenção. 30 As compos ições, combinações, preparações, formulações, kits ou embaíagens mencionados no contexto da terapia combinada de acordo com esta invenção também podem incluir mais de um dos sais de (E)-N-(2-

amino-feni|)-3A1-[4-(1-meti]-1 H-pjrazo|A-il)-benzenossu]foni[]-1 H-pirro!-3-il}- g acrilamida de acordo com esta invenção e/ou mais de um dos agentes anti- ' câncer conhecidos na Iiteratura mencionados. Os primeiro e segundo princípios ativos de uma combinação ou 5 kit de partes de acordo com esta invenção podem ser apresentados como formulações separadas (isto é, independentemente um do outro), que são subsequentemente reunidos para uso simultâneo, sequencial, separado ou cronologicamente escalonado em terapia combinada; ou embalados e apre- sentados juntos como componentes separados de uma embalagem combi- IO nada para uso simultâneo, concorrente, sequencial, separado ou cronologi- camente escalonado em terapia combinada.

. O tipo de formulação farmacêutica dos primeiro e segundo prin- cÍpios ativos de uma combinação ou kit de partes de acordo com esta in- venção pode ser o mesmo, isto é, ambos os princípios são formulados como 15 comprimidos ou cápsulas separadas, ou pode ser diferente, isto é, adequa- do para formas de administração diferentes, tais como por exemplo um prin- cÍpio ativo é formulado como comprimido ou cápsula e o outro é formulado por exemplo para administração intravenosa. As quantidades dos primeiro e segundo princípios ativos das 20 combinações, composições ou kits de acordo com esta invenção podem juntos compreender uma quantidade terapeuticamente eficaz para o trata- mento, a profilaxia ou a melhora de uma doença responsiva ou sensível à inibição de histona desacetilases, tal como, por exemplo, uma das doenças mencionadas neste relatório, por exemplo neopíasias benigna ou malignas, 25 particularmente câncer, como qualquer uma das doenças cancerígenas mencionadas neste relatório. Além disso, os sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1H- pirazo|-4-i|)-benzenossu|foni|]-1H-pirro|-3-i|}-acri|amida de acordo com a pre- sente invenção podem ser usados no tratamento pré-cirúrgico ou pós- 30 cirúrgico de câncer. Além disso, os sais de (E)-N-(2-amino-feni|)-u1-[4-(1-meti|-1H- pirazolA-il)-benzenossulfonü]-1 H-pirrd-3-il}-acrilamida de acordo com a pre-

* sente invenção podem ser usados em combinação com radioterapia, em

T particular na sensibilização de pacientes com câncer para radioterapia tradi- ' cional. Uma combinação de acordo com esta invenção pode indicar 5 uma composição compreendendo tanto os sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3- {1-j4-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com esta invenção quanto os outros agentes anticâncer ativos em uma combinação fixa (forma de dosagem unitária fixa), ou uma embalagem de medicamento compreendendo dois ou mais princípios ativos como for- lO mas de dosagem separadas e distintas (combinação não fixa). No caso de uma embalagem de medicamento compreendendo os dois ou mais princí- pios ativos, os princípios ativos são de preferência embalados em blisters que são adequadas para aumentar a aceitação. Cada blister de preferência contêm os medicamentos a serem 15 tomados em um dia de tratamento. Se os medicamentos tiverem que ser tomados em horas diferentes do dia, os medicamentos podem ser dispostos em seções diferentes do blister de acordo com os diferentes períodos do dia em que os medicamentos devem ser tomados (por exemplo manhã e tarde ou manhã, meio-dia e tarde). As cavidades da embalagem para os medi- camentos a serem tomados juntos em um periodo particular do dia são a- comodados na respectiva faixa de períodos do dia. Os vários períodos do dia também são, naturalmente, colocados na embalagem de forma nitida- mente visivel. Também é possÍvel, naturalmente, indicar, por exemplo, um período no qual os medicamentos devem ser tomados, por exemplo estipu- lando as horas. As seções diárias podem representar uma (inha do blister, e as horas do dia são então indicadas em sequência cronológica nesta coluna- Medicamentos que devem ser tomados junto em uma hora par- ticular do dia são colocados juntos na hora apropriada no blister, de prefe- rência a uma pequena distância, permitindo que os mesmos sejam facilmen- te retirados do blister, e tendo como efeito de que a remoção da forma de dosagem do blister não será esquecida.

Claims (13)

REIVINDICAÇÕES 4'

1. Sal de (E)-N-(2-amino-fenii)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)- - benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida, caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo que consiste em bromidrato, metanossulfonato, hemi- 5 etano-l ,2-dissulfonato, benzenossulfonato, toluenossulfonato e 2- naftalenossulfonato.

2. Sal de metanossulfonato de (E)-N-(2-arnino-fenil)-3-{1-[4-(1- metil-1H-pirazo|-4-j|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que em sua forma polimó- lO fica A os picos de difração de raios X por pó, incluem, porém sem Iimitação: 3,9,16,4e16,9±0,1("20).

3. Sal de hemietano-1,2-dissulfonato de (E)-N-(2-amino-fenil)-3- {1 -[4-(1-metil-1 H-pirazol-4-ü)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que em sua forma polimófica A os picos de difração de raios X por pó, incluem, porém sem limitação: 16,0, 22,7 e 25,1 ± 0,1 (°20).

4. Sal de benzenossulfona'to de (E)-N-(2-amino-fenil)-3A1-[4-{1- meti[-1H-pirazo[A-i|)-benzenossulfoni|]-1H-pirrol-3-i|}-acri|amida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que em sua forma polimó- fica A, os picos de difração de raios X por pó, incluem, porém sem limitação: 19,1,20,4e22,7±0,1(°20).

5. Sa! de toluenossulfonato de (E)-N-(2-amino-feni|)-311-[4R1- metil-l H-pjrazo|-4-i|)-benzenossujfoni|]-1H-pirro|-3-i|}-acrilamida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que em qualquer uma das seguintes formas poIimórficas: forma polimórfica A, os picos de difração de raios X por pó, in- cluem, porém sem limitação: 7,0, 19,6 e 19,9 ± 0,1 (°20): forma polimórfica B, os picos de difração de raios X por pó, in- cluem, porém sem limitação: 18,1 , 21,2 e 22,9 ± 0,1 (°20); forma polimórfica C, os de difração de raios X por pó, incluem, porém sem Iimitação: 8,9, 11,7 e 20,3 ± 0,1 (°20); forma poIimórfica D, os picos de difração de raios X por pó, in-

àuem, porém sem Iimitação: 17,1 , 18,7 e 22,5 ± 0,1 (°20); -r forma polimórfica E, os picos de difração de raios X por pó, in- - cIuem, porém sem Iimitação: 6,9, 13,0 e 19,8 ± 0,1 (°20). forma poiimórfica F, os picos de difração de raios X por pó, in- 5 cluem, porém sem limitação: 5,3, 10,5 e 18,6 + 0,1 (°20); forma polimórfica G, os picos de difração de raios X por pó, in- cluem, porém sem Iimitação: 6,6, 19,2 e 20,4 ± 0,1 (°20): e forma polimórfica H, os picos de difração de raios X por pó, in- cIuem, porém sem iimitação: 6,7, 19,5 e 19,8 ± 0,1 (°20).

6. Sal de 2-naftalenossulfonato de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4- (1-meti|-1H-pirazo|A-i|)-benzenossu|fonil]-1H-pirrol-3-il}-acri|amida, de acor- do com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que em quaiquer uma das seguintes formas polimórficas: forma poIimórfica A+B, os picos de difração de raios X por pó, incluem, porém sem limitação: 4,6, 18,5 e 23,8 ± 0,1 (°20); forma poIimórfica A+B, os picos de difração de raios X por pó, incluem, porém sem limitação: 4,7, 6,8 e 18,5 ± 0,1 (°20); e forma polimórfica C, os picos de difração de raios X por pó, in- cIuem, porém sem limitação: 5,8, 17,3 e 22,9 ± 0,1 (°20).

7. Sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-methyH H-pirazol-4-il)- benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizados pelo fato de que são para uso no tratamento de doenças.

8. Sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)- benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizados pelo fato de que são para uso no tratamento, na prevenção ou na melhora de neoplasias benignas e/ou ma- lignas, tais como por exemplo câncer.

9. Sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-{1 -metil-l H-pirazol-4-il)- benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizados pelo fato de que são para uso no tratamento de doenças responsivas ou sensíveis à inibição da atividade de )

histona desacetilase.

C

10. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que : compreende um ou mais dos sais (E)-N-(2-amino-feniI)-311-[4-(1-·metj|-1H- pirazo|-4-i|)-benzenossu|foni|]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida, de acordo com qual- 5 quer uma das reivindicações 1 a 6, junto com excipientes, diluentes e/ou veículos farmacêuticos usuais.

11. Uso dos sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1 -[4-(1 -metil-l H- pirazol-4-il)- benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é pa- lO ra a produção de composições farmacêuticas para o tratamento, a preven- ção ou a melhora de neoplasias benignas e/ou malignas, tais como por e- . xemplo câncer. . 12. Uso dos sais de (E)-N-(2-amino-fenil)-3-{1-[4-(1 -metil-l H-

W pirazol-4-il)- benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida de acordo com 15 qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é pa- ra a produção de composições farmacêuticas para o tratamento de doenças responsivas ou sensíveis à inibição da atividade de histona desacetilase.

13. Método para o tratamento, a prevenção ou a melhora de do- enças hiperproliferativas de comportamento benigno ou maligno e/ou de dis- 20 túrbios responsivos à indução de apoptose, tais como, por exemplo, neopla- sia benigna ou maligna, por exemplo câncer, em um paciente, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao referido paciente uma quanti- dade terapeuticamente eficaz e tolerável de um sal de (E)-N-(2-amino-fenil)- 3-{1 -[4-(1-metil-1 H- pirazol-4-il)-benzenossulfonil]-1 H-pirrol-3-il}-acrilamida 25 de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6.