BRPI0915218B1 - Bloco de reação cíclica térmica e aparelhos de monitoramento contínuo em tempo real e uso do mesmo - Google Patents
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Abstract
bloco de reação cíclica térmica em aparelhos de monitorização contínua em tempo real e uso do mesmo" é divulgado um aparelho de tempo real, compreendendo um bloco de reação cíclica térmica com bloco de aquecimento, que é formado de urna peça oca e dividido por uma camada isolante, e um tubo capilar por meio do qual urna amostra é fluiu internamente e/ou externamente e que é enrolada em um bloco de aquecimento, para que as diferentes temperaturas sejam transferidas e, portanto, o ciclo de reação é executado repetidamente; uma fonte de luz, um filtro passa-banda, com uma lente de condensação, um divisor de feixe, um espelho que reflete que é giratoriamente conectado com um motor de forma a transferir a luz de excitação refletida do divisor de feixe para o tubo capilar e refletem a fluorescência gerada a partir da amostra no tubo capilar, e uma parte de detecção de fluorescência.
Description
[001] A presente invenção se refere a um bloco de reação de ciclagem térmica e um aparelho de monitoramento contínuo em tempo real usando o mesmo e, mais particularmente, a um bloco de reação de ciclagem térmica que é capaz de aquecer ou resfriar amostras em diferentes temperaturas, de modo a gerar uma reação em cadeia de polimerase (PCR) e permitir que a PCR seja monitorada em tempo real, e um aparelho de monitoramento contínua em tempo real usando o mesmo.
[002] Uma reação em cadeia de polimerase (PCR) é um método de ampliação de DNA pela síntese múltipla de uma região selecionada do ADN, produzindo uma grande quantidade de DNA clonando a partir de uma quantidade muito pequena de DNA.
[003] Através da PCR, apenas um segmento desejado do DNA pode ser ampliado a partir de um DNA muito grande como o DNA genômico. O (PCR) geralmente inclui processos de desnaturação, recozimento do primer e polimerização de DNA.
[004] Atualmente, a PCR em tempo real é bem conhecida por aqueles que possuem conhecimento no tema. O PCR em tempo real é uma tecnologia que permite o monitoramento do estado de reação em tempo real através da medição de intensidade de fluorescência mostrando o nível de ampliação de DNA a cada ciclo no status em que um produto de reação em gel não é separado por eletroforese. Portanto, na PCR em tempo real, existem algumas vantagens em que a análise quantitativa precisa é permitido, e é possível de forma simples e rápida realizar a análise sem a eletroforese, e também há menos risco de contaminação.
[005] Um aparelho de PCR em tempo real inclui urn termociclador para PCR e urn fluorimetro para detectar a fluorescência de um produto de reação. Um aparelho de PCR em tempo real convencional é composto de um elemento termoelétrico, um bloco térmico de transferência de calor para um tubo de reação na qual uma amostra é recebida, uma fonte de luz para irradiar luz de excitação da amostra no tubo, e uma peça receptora de luz para receber a fluorescência gerada a partir da amostra. Nos aparelhos PCR em tempo real convencionais, os ciclos de refrigeração e de aquecimento são realizados repetidamente usando o elemento termoelétrico de modo a reagir à amostra, e a luz de excitação é irradiada para a amostra usando a fonte de luz e a peça receptora de luz em cada final de cada ciclo e, em seguida uma quantidade de fluorescência gerada a partir da amostra é medido de forma a mostrar o progresso da PCR em tempo real.
[006] No entanto, no aparelho convencional de PCR em tempo real, é possível tratar uma pluralidade de amostras, mas é impossível reagir sucessivamente, as amostras em intervalos regulares de tempo, e também é impossível fornecer outras amostras no tubo de reação durante a reação da amostra até que a reação seja concluída.
[007] Para resolver os problemas acima, tem havido várias propostas para aparelhos de monitoramento contínuo em tempo real.
[008] Na Patente Americana N° 6,033,880, não é divulgado um aparelho de PCR, utilizando um tubo capilar. De acordo com o aparelho de PCR, um bloco de transferência de calor inclui quatro blocos de temperatura constante, e as amostras e reagentes são fornecidos ou retirados do tubo capilar, usando uma solução de fornecimento de unidade. A PCR é realizada através da rotação do bloco de transferência de calor e mudança de temperatura transferida para o tubo capilar utilizando o aparelho acima mencionado. O problema neste tipo de aparelho é que o bloco de transferência de calor deve ser girado para realizar a PCR, e também a reprodutibilidade da PCR é deteriorada desde que a PCR possa ser mudada dependendo de um nível de contato entre o tubo capilar e o bloco de transferência de calor.
[009] Além disso, neste tipo de aparelhos, é impossível realizar a PCR em intervalos de tempo. Além disso, desde aparelhos acima referidos, pode-se medir o progresso da reação apenas após a conclusão da PCR, há um outro problema que um usuário não pode verificar o progresso da reação, antes da realização do PCR.
[010] Para resolver os problemas acima mencionados, foi proposto um novo aparelho PCR de monitoramento em tempo real na Patente Coreana N°.593263 (intitulado "um dispositivo de elevada capacidade para realizar reações de fluxo contínuo"), em que uma unidade de temperatura que circula pelo PCR, composta de um tubo capilar e um bloco de aquecimento circular é fornecido.
[011] Neste aparelho, o tubo capilar de 3,5 metros de comprimento é ferido 33 vezes em um bloco de cobre de 30 milímetros de diâmetro, que é dividido em fusão, recozimento e regiões de temperatura de extensão. Quando uma mistura de reação fluiu no tubo capilar é divulgada uma vez em tomo do aquecimento do bloco formado por cobre, cada ciclo da PCR é realizado. Neste método, o tubo capilar por meio do qual a amostra flui PCR é enrolada em bloco de aquecimento, e do tubo capilar é digitalizada por uma unidade de varredura com detector de fluorescência. Assim, a unidade de digitalização é um meio para irradiar a luz do tubo capilar ferida no bloco de aquecimento usando uma unidade de irradiação de luz e medir uma quantidade de fluorescência gerada no tubo capilar.
[012] De acordo com o método acima mencionado, a unidade de irradiação de luz para irradiar a luz do tubo capilar no bloco de aquecimento e um sensor para medir a fluorescência gerada a partir do tubo capilar são instalados em um palco em movimento, de modo que a unidade de digitalização é linearmente conduzido e que a luz é irradiada, por sua vez, o tubo capilar de acordo com o movimento da unidade de digitalização. Em seguida, a fluorescência gerada a partir do tubo capilar é medida, por sua vez, de acordo com o movimento da unidade de digitalização.
[013] Na tecnologia acima mencionada, não é divulgada a unidade de digitalização no qual um sensor de detecção de fluorescência e uma fonte de luz para gerar um feixe de luz tendo um comprimento de onda desejado são movidos a uma velocidade constante acima do bloco de aquecimento em que o tubo capilar é ferido. A fonte de luz e o sensor de detecção de fluorescência instalado na digitalização são transportados em uma direção axial que é paralela com um eixo central do bloco de aquecimento no qual o capilar é marcado ou atravessa o eixo central da mesma, de forma a irradiar a luz ao tubo capilar ou medir a fluorescência. Sempre que realize a digitalização, o acompanhamento da PCR é realizado uma vez, e os múltiplos tubos capilares são escaneados sobre o escaneio. Para analisar a fluorescência gerada a partir da amostra no tubo capilar, enquanto a fonte de luz e o sensor de detecção de fluorescência instalados no estádio em movimento são movidos a uma velocidade constante, é necessário fornecer um motor, uma unidade de transporte como meio de transporte do forro, Uma unidade guia de transporte, meios de condução para fornecer energia a unidade de transporte e assim por diante. No entanto, desde a fonte de luz, incluindo uma pluralidade de lentes ópticas utiliza uma lente cara, como uma lente de objeto e também é necessário justamente organizar a fonte de luz e sensor de detecção da fluorescência, a fim de controlar precisamente um caminho óptico, não é um problema que um custo de fabricação do aparelho de PCR é notavelmente aumentado. Além disso, uma vez que o aparelho de PCR inclui a pluralidade de lentes, a unidade de transporte, a unidade de transferência do poder, os meios de condução e assim por diante, isso pode causar aumento de seu tamanho e seu mau funcionamento.
[014] Portanto, há necessidade de fornecer um novo aparelho de monitoramento contínuo de PCR em tempo real que resolve os problemas acima mencionados e tem um efeito de monitoramento excelente, econômico e em tempo real.
[015] Um objeto da presente invenção é fornecer um bloco de reação ciclagem térmica que fornece um aparelho de controle simples, de modo a monitorar continuamente a técnica de PCR (polymerase Chain reaction) em tempo real, e facilmente detecta uma PCR, e aumenta a precisão de detecção do aparelho.
[016] Para alcançar o objetivo da presente invenção, a presente invenção fornece um bloco de reação de ciclagem térmica (100), que compreende um bloco de aquecimento (10) em forma de anel, o qual é composto por um bloco de aquecimento interno (10a) e um bloco de aquecimento externo (10b) dispostos entre uma camada isolante (30) no sentido de formar uma circunferência oca (11) em uma porção central da mesma, de modo a dispor respectivamente, a diferentes temperaturas.
[017] O tubo capilar (20) possui uma entrada (20a) receber uma amostra para ser submetida a uma reação de ciclagem térmica e uma saída (20b) para produzir a amostra após a reação de ciclagem térmica é enrolado no sentido de envolver o bloco de aquecimento (10) , em intervalos regulares a serem repassados a circunferência e oca (11), para que as diferentes temperaturas sejam transferidas e, assim, o ciclo de reação seja repetidamente realizado.
[018] De preferência, o bloco de aquecimento interno (10a) e o bloco de aquecimento externo (10b) inclui ainda um bloco de aquecimento adicional (13), que circunda o bloco de aquecimento externo (10b) aquecendo-o externamente, em que o tubo capilar (20) é raspado, de modo a ser acoplada com um lado exterior do bloco de aquecimento externo (10b).
[019] De preferência, deve-se inserir uma ranhura (12) na superfície externa dos blocos de aquecimento (10a) e (10b) para contato direto do tubo capilar (20) de modo a aumentar a superfície de contato entre os blocos de aquecimento (10a) e (10b) e o tubo capilar (20).
[020] Além disso, a presente invenção fornece um aparelho de monitoramento em tempo real, incluindo no bloco de reação de ciclagem térmica (100) mostrado nas figuras 5/8, com uma fonte de luz (110) para irradiar luz de excitação; um filtro de passagem de banda (130) para passar a luz de excitação de modo a ter apenas um comprimento de onda desejado o qual é irradiado a partir da fonte de luz (110); uma lente de condensação (140) para condensar a luz de excitação; um divisor de feixe (120) que reflete a luz de excitação e passa a fluorescência gerada a partir de uma amostra em um tubo capilar (20); um espelho refletor (150) que está conectado de forma rotativa com um motor (160) de modo a transferir a luz de excitação refletida do divisor de feixe (120) para o tubo capilar (20) refletir a fluorescência gerada a partir da amostra no tubo capilar (20); e uma peça de detecção de fluorescência (170) para a detectar a fluorescência que é refletida pelo o espelho refletor (150) e depois passada através do divisor de feixe (120).
[021] Preferencialmente, a peça de detecção de fluorescência (170) inclui uma lente de condensação de fluorescência (171) para condensar a fluorescência que passa pelo divisor de feixe (120); um filtro de passagem de banda (172) para passar fluorescência condensada tendo apenas um comprimento de onda desejado; e um sensor de detecção de fluorescência (173) para detectar a fluorescência tendo o comprimento de onda desejado passando através do filtro de passagem de banda de fluorescência (172).
[022] Além disso, a peça de detecção de fluorescência (170) ainda inclui uma ou mais lentes de condensação de fluorescência (171); filtros de passagem de banda (172) e divisores de feixe de fluorescência (174) de acordo com uma região de comprimento da onda de fluorescência.
[023] Além disso, a presente invenção fornece um aparelho de monitoramento em tempo real, incluindo no bloco de reação de ciclagem térmica (100), uma fonte de luz (110) para irradiar luz de excitação; um filtro de passagem de banda (130) para passar a luz de excitação de modo a ter apenas um comprimento de onda desejado o qual é irradiado a partir da fonte de luz (110); uma lente de condensação (140) para condensar a luz de excitação; um divisor de feixe (120) que reflete a luz de excitação e passa a fluorescência gerada a partir de uma amostra em um tubo capilar (20); um espelho refletor (150) que está conectado de forma rotativa com um motor (160) de modo a transferir a luz de excitação refletida do divisor de feixe (120) para o tubo capilar (20) refletir a fluorescência gerada a partir da amostra no tubo capilar (20); uma lente de condensação de (141) que está posicionada entre o espelho refletor (150) e o bloco de reação de ciclagem térmica (100) de modo a condensar a luz de excitação refletida pelo espelho refletor (150) e a fluorescência gerada a partir de uma amostra no tubo capilar de (20); e uma peça de detecção de fluorescência (170) para detectar a fluorescência que é refletida pelo espelho refletor (150) e, em seguida, passada pelo divisor de feixe (120).
[024] Preferencialmente, a peça de detecção de fluorescência (170) inclui uma lente de condensação de fluorescência (171) para condensar a fluorescência passando pelo divisor de feixe (120); uma peça de fixação do filtro de passagem de banda de fluorecencia (175) que tem um ou mais filtros de passagem de banda de fluorescência (172) para passar a fluorescência com diferentes comprimentos de onda desejados da fluorescência condensada; um motor (160b) para girar a peça de fixação do filtro de passagem de banda de fluorescência (175) e um sensor de detecção de fluorescência (173) para detectar a fluorescência tendo o comprimento de onda desejado passando através dos filtros passagem de banda de fluorescência (172).
[025] De preferência, os aparelhos de monitoramento em tempo real, incluem ainda um polarizador ou um filme polarizador (131) entre a fonte de luz (110) e a lente de condensação (140) e uma peça de medição de fluorescência.
[026] Preferencialmente, os motores (160a) e (160b) são motores de rotação constante para rotação a uma velocidade constante.
[027] Ao contrário do aparelho convencional, que utiliza a unidade de digitalização no qual a fonte de luz é móvel, a parte móvel de detecção da fluorescência e a pluralidade de lentes objetivas caras são dispostas com precisão, o aparelho de monitoramento contínuo em tempo real da presente invenção utiliza uma fonte de luz fixa e peça de fluorescência fixa de modo a ser controlada apenas pelo motor sem o movimento da fonte de luz e a peça de detecção de fluorescência, de modo que o monitoramento em tempo real é feito em uma posição fixa. Portanto, é fácil detectar a ampliação da amostra e é possível aumentar a precisão de detecção e reduzir o custo de produção e esforço, e também é possível reduzir o mau funcionamento e tamanho dos mesmos.
[028] O quanto descrito acima e outros objetivos, as características e vantagens da presente invenção se tornarão aparentes a partir da seguinte descrição de modalidades preferidas dado em conjunto com os desenhos que acompanham, em que:
[029] Figura 1 é uma visão em perspectiva de um bloco de aquecimento, de acordo com uma modalidade da presente invenção.
[030] Figura 2 é uma visão em perspectiva transversal do bloco de aquecimento, de acordo com a personificação da presente invenção.
[031] Figura 3 É uma visão transversal do bloco de aquecimento, de acordo com outra modalidade da presente invenção.
[032] Figura 4 é uma visão em perspectiva de um bloco de reação cíclica térmica, de acordo com a personificação da presente invenção.
[033] Figura 5 e 6 são vistas em perspective, mostra uma estrutura esquemática de um aparelho de monitoramento em tempo real usando o bloco de reação de ciclagem térmica, de acordo com uma modalidade da presente invenção.
[034] Figura 7 e 8 são pontos de vista esquemático mostrando o aparelho de monitoramento em tempo real usando o bloco de reação cíclica térmica, de acordo com outra modalidade da presente invenção.
[035] Descrição detalhada dos elementos principais 10: bloco de aquecimento em forma de anél 11: circunferência oca 12: ranhura 13: bloco de aquecimento adicional 20: tubo capilar 30: camada de isolamento 100: bloco de reação de ciclagem térmica 110: fonte de luz 120: divisor de feixe 130: filtro de passagem de banda 131: filme polarizador ou polarizador 132: Filtro ND 133: 141: lente de condensação 150: Espelho refletor 160: motor 170: peça de detecção de fluorescência 171: lente de condensação de fluorescência 172: filtro de passagem de banda de fluorescência 173: sensor de detecção de fluorescência 174: divisor de feixe de fluorescência 175: peça de fixação do filtro de passagem de banda de fluorescência
[036] A seguir, as incorporações da presente invenção serão descritas em detalhes com referência aos desenhos que o acompanham.
[037] Figura 1 é uma visão em perspectiva de um bloco de aquecimento, de acordo com uma modalidade da presente invenção, Figura 2 é uma vista em perspectiva transversal do bloco de aquecimento, de acordo com a modalidade da presente invenção, Figura 3 é uma visão transversal do bloco de aquecimento, de acordo com outra modalidade da presente invenção, e Figura 4 é uma visão em perspectiva de um bloco de ciclismo reação térmica de acordo com a modalidade da presente invenção.
[038] Como mostrado nos desenhos, um bloco de reação de ciclagem térmica (100) tem uma circunferência oca (11) em uma porção central da mesma, compreendendo no bloco de aquecimento (10) composto pelo bloco de aquecimento interno (10a) bloco de aquecimento externo (10b) divididos por uma camada isolante (30) de forma a proporcionar diferentes temperaturas, respectivamente, e um tubo capilar (20) através do qual uma amostra é escoada para dentro e para fora e enrolada nos blocos de aquecimento (10a) e (10b), em intervalos regulares a serem repassados na circunferência oca (11), para que as diferentes temperaturas sejam transferidas e, assim, o ciclo de reação seja repetidamente realizado.
[039] Reação em cadeia da polimerase atípica (PCR) inclui processo de desnaturação a 94°C, um processo de recozimento entre 45° e 67°C e um processo de polimerização a 72°C. No entanto, embora o processo de polimerização seja omitido, ele não tem nenhum problema na PCR. Assim, a PCR em tempo real, tem uma tendência a eliminar o tempo de reação do processo de polimerização, a fim de reduzir o tempo. Embora os blocos de aquecimento com duas divisões (10a) e (10b) são descritos nos desenhos da presente invenção, o bloco de aquecimento pode ainda, ser mais divididos.
[040] Neste momento, já que a interferência de temperatura entre as partições do bloco de aquecimento (10a) e (10b) é interrompida pela cama de isolamento (30) fica fácil controlar a temperatura. A camada de isolamento (30) é formada de um material com uma taxa de transferência de calor muito baixa para manter a facilmente as diferentes temperaturas em cada partição dos blocos de aquecimento (10a) e (10b).
[041] Nos desenhos da presente invenção, embora os blocos de aquecimento (10a) e (10b) possuem uma forma de buraco longo, eles podem ter várias formas, como uma forma circular, uma forma elíptica, uma forma poligonal e uma retangular.
[042] Além disso, o bloco de reação de ciclagem térmica (100) da presente invenção pode ter um bloco de aquecimento adicional (13), que circunda o bloco de aquecimento externo (10b), em que o tubo capilar (20) é raspado, de modo a ser acoplado com um lado de fora do bloco de aquecimento externo (10b). Este é um método de transferência de calor de um lado do bloco de aquecimento externo (10b) para uma direção dentro do mesmo, quando se transferem o calor para o tubo capilar (20) através do bloco de aquecimento adicional (13). Assim, o calor é mais eficientemente transferido para o tubo capilar (20).
[043] A amostra é escoada internamente e/ou externamente através do tubo capilar (20) através da entrada e saída de fluxo (20a) e (20b). Preferencialmente, o tubo capilar (20) é passado através da circunferência oca (11) em espiral no bloco de aquecimento externo (10b) a intervalos regulares, para que as diferentes temperaturas sejam transferidas para cada bloco de aquecimento (10a) e (10b) e assim o ciclo de reação é executado repetidamente. Portanto, enquanto o tubo capilar (20) em série e repetidamente contatado com os blocos de aquecimento (10a) e (10b) tendo a temperatura diferente, o PCR é realizado de modo a ampliar o gene (DNA, etc). A razão pela qual o tubo capilar (20) é raspado em intervalos regulares é para manter uniformemente o PCR e assim facilmente girar em um ângulo constante e refletir em um espelho a ser descrito posteriormente.
[044] Uma ranhura de inserção (12) na qual uma parte do tubo capilar (20) é inserida pode ser formado em uma superfície externa dos blocos de aquecimento (10a) e (10b), de modo a aumentar a superfície de contato entre o bloco de aquecimento (10a) e (10b) e o tubo capilar (20).
[045] Como mostrado na figura 4, pela ranhura de inserção espiral (12) em que uma parte do tubo capilar (20) é inserida de forma fixa e que tem um tamanho constante e um intervalo constante, a superfície de contato entre os blocos de aquecimento (10a) e (10b) e o tubo capilar (20) é aumentada e assim, o calor é mais eficientemente transferidos dos blocos de aquecimento (10a) e (10b)
[046] Além disso, uma vez que a área de superfície de contato entre os blocos de aquecimento (10a) e (10b) e o tubo capilar (20) está associada com o tempo de reação da PCR, a área de superfície de contato pode ser alterada de acordo com a condição do tempo de reação. O tempo de reação pode ser controlado alterando uma largura radial da partição do s blocos de aquecimento (10a) e (10b). E uma posição da camada isolante (30) s blocos de aquecimento (10a) e (10b) também pode ser alterada de acordo com a largura radial do s blocos de aquecimento (10a) e (10b).
[047] O bloco de reação de ciclagem térmica (100), como descrito acima é usado em um aparelho de monitoramento em tempo real para medir a ampliação de DNA em tempo real.
[048] Figuras 5 e 6 são vistas em perspectiva e mostra uma estrutura esquemática de um aparelho de monitoramento em tempo real usando o bloco de reação de ciclagem térmica (100), de acordo com uma modalidade da presente invenção.
[049] Como mostrado nos desenhos, o aparelho de monitoramento em tempo real usando o bloco de reação de ciclagem térmica (100), de acordo com uma modalidade da presente invenção inclui uma fonte de luz de (110) para irradiar luz de excitação; um filtro de passagem de banda (130) para passar a luz de excitação tendo apenas um comprimento de onda desejado irradiada a partir da fonte de luz (110); uma lente de condensação (140) para condensar a luz de excitação; um divisor de feixe (120), que reflete a luz de excitação e passa a fluorescência gerada a partir de uma amostra em um tubo capilar (20); um espelho refletor (150) o qual é rotativamente conectado com um motor (160) de modo a transferir a luz de excitação refletida no divisor de feixe (120) para o tubo capilar (20) e reflete a fluorescência gerada a partir da amostra no tubo capilar (20); e uma peça de detecção de fluorescência (170) para a detecção da fluorescência que é refletida pelo o espelho refletor (150) e, em seguida repassada ao divisor de feixe (120).
[050] A fonte de luz de (110) funciona para gerar luz de excitação e inclui uma fonte de luz branca, como uma lâmpada alógena de tungsténio e uma lâmpada de descarga de xénon, e uma fonte única cor de luz, como LED e laser. Mas a fonte de luz (110) não se limita a eles.
[051] O filtro de passagem de banda (130) funciona para passar a luz de excitação tendo apenas um comprimento de onda desejado, irradiada a partir da fonte de luz (110).
[052] A lente de condensação de (140) funciona para condensar a luz de excitação irradiada a partir da fonte de luz (110). A lente de condensação (140) inclui qualquer lente que condensa a luz de excitação, de preferência, uma lente convexa dupla.
[053] O divisor de feixe (120) funciona para refletir a luz de excitação irradiada a partir da fonte de luz (110) e passar a fluorescência gerada a partir da amostra no tubo capilar (20). De preferência, o divisor de feixe (120) é um divisor de feixe dicroico.
[054] A luz de excitação refletida pelo divisor de feixe (120) é transferida para o espelho refletor (150), e a fluorescência passa pelo divisor de feixe (120) e é transferida para a peça de detecção de fluorescência (170).
[055] O espelho refletor (150) que reflete a luz de excitação refletida pelo divisor de feixe (120) e é transferida e disposto na circunferência oca (11) do bloco de reação de ciclagem térmica (100). O espelho refletor (150) funciona para transferir a luz de excitação refletida do divisor de feixe (120) para o tubo capilar (20) que é raspado em espiral no bloco de reação de ciclagem térmica (100) e também funciona para refletir a fluorescência gerada a partir da amostra no tubo capilar (20) para o divisor de feixe (120). A fluorescência refletida pelo espelho refletor (150) é passada através do divisor de feixe (120) e, em seguida, transferida para a peça de detecção de fluorescência (170). O espelho refletor (150) é conectado com o motor (160) para rodar o espelho refletor (150). O motor de (160) funciona para girar o espelho refletor (150) para que a luz seja refletida para a excitação da amostra no tubo capilar de (20) no espelho refletor (150) e a fluorescência gerada a partir da amostra é refletida na peça de detecção de fluorescência (170). Preferencialmente, o motor (160) é um motor de rotação constante para girar o espelho refletor (150) a uma velocidade constante.
[056] A peça de detecção de fluorescência (170) funciona para detectar a fluorescência que é refletida pelo espelho refletor (150) e, em seguida, passa através do divisor de feixe (120), estimando assim, a ampliação do DNA.
[057] A peça de detecção de fluorescência (170) pode incluir uma lente de condensação de fluorescência (171) para condensar a fluorescência passando pelo divisor de feixe (120), um filtro de passagem de banda (172) para a passagem da fluorescência condensado com apenas um comprimento de onda desejado, e um sensor de detecção de fluorescência (173) para detectar a fluorescência tendo o comprimento de onda desejado passando pelo filtro de passagem de banda (172). Figura 5 mostra um status de detecção da fluorescência que tem um comprimento de onda.
[058] Como mostrado na figura 6, a fim de detectar a fluorescência tendo vários tipos de comprimentos de ondas, a peça de detecção de fluorescência (170) pode ainda incluir uma ou mais lentes de condensação de fluorescência (171), filtros de passagem de banda de fluorescência (172) e divisores de feixe de fluorescência (174) de acordo com uma região de comprimento de onda de fluorescência. Neste momento, os divisores de feixe de fluorescência (174a) e (174b) são equipados de forma diferente um do outro de acordo com um comprimento de onda da fluorescência a ser detectada. As lentes de fluorescência de condensação (171a), (171b) e (171c) são equipados deforma diferente uma de outra de acordo com a distância entre o tubo capilar (20) e os sensores de detecção de fluorescência (173a), (173B) e (173c). Os filtros de passagem de banda de fluorescência (172), (172b) e (172c) também são equipados de forma diferente uns dos outros de acordo com o comprimento de onda da fluorescência a ser detectado.
[059] Preferencialmente, os divisores de feixe de fluorescência (174) e (174b) são divisores de feixe dicroico pelo qual passa um comprimento de onda longo e um comprimento de onda curta é refletido com base no comprimento de onda desejado. O comprimento de onda desejado é alterado de acordo com corantes fluorescentes.
[060] Figuras 7 e 8 são pontos de vista esquemáticos mostrando o aparelho de monitoramento em tempo real usando o bloco de reação de ciclagem térmica (100), de acordo com outra modalidade da presente invenção.
[061] O aparelho de monitoramento em tempo real usando o bloco de reação de ciclagem térmica (100), de acordo com outra modalidade da presente invenção inclui uma fonte de luz (110) para irradiar luz de excitação; um filtro de passagem de banda (130) para passar a luz de excitação tendo apenas um comprimento de onda desejado irradiada a partir da fonte de luz (110); uma lente de condensação (140) para condensar a luz de excitação; um divisor de feixe (120), que reflete a luz de excitação e passa a fluorescência gerada a partir de uma amostra em um tubo capilar (20); um espelho refletor (150) que é rotativamente conectado com um motor (160a), de modo a transferir a luz de excitação refletida do divisor de feixe (120) para o tubo capilar (20) e refletir a fluorescência gerada a partir da amostra no tubo capilar (20); uma lente de condensação de (141), que está posicionada entre o espelho refletor (150) e o bloco de reação de ciclagem térmica (100) de modo a condensar a luz de excitação refletida no espelho refletor (150) e a fluorescência gerada a partir de uma amostra em um tubo capilar de (20); e uma peça de detecção de fluorescência (170) para detectar a fluorescência que é refletida pelo espelho refletor (150) e, em seguida, passada através do divisor de feixe (120).
[062] A fonte de luz (110) pode incluir uma fonte de luz branca, como uma lâmpada alógena de tungsténio e uma lâmpada de descarga de xénon, e uma fonte de luz de cor única, como LED e laser, mas a fonte de luz (110) não se limita a elas. No caso de a fonte de luz (110) ser lazer; um filtro (ND) (132) de densidade neutra pode ser adicionalmente fornecido para controlar a intensidade do laser.
[063] Preferencialmente, a lente de condensação (141), que está posicionado entre o espelho refletor (150) e e o bloco de reação de ciclagem térmica (100), de modo a condensar a luz de excitação refletida no espelho refletor (150) e a fluorescência gerada a partir de uma amostra em um tubo capilar (20), deve ser uma lente esférica.
[064] A peça de detecção de fluorescência (170) pode incluir uma lente de condensação de fluorescência (171) para condensar a fluorescência que passa pelo divisor de feixe (120); uma peça de fixação de filtro de passagem de banda de fluorescência (175) que tem um ou mais filtros de passagem de banda de fluorescência (172) para passar a fluorescência com diferentes comprimentos de onda desejados da fluorescência condensada; um motor (160b) para girar a peça de fixação de filtro de passagem de banda de fluorescência (175); e um sensor de detecção de fluorescência (173) para detectar a fluorescência com comprimento de onda desejado, passando através dos filtros de passagem de banda de fluorescência (172).
[065] A peça de detecção de fluorescência (170) tem um ou mais filtros passagem de banda de fluorescência (172) previstos na peça de fixação do filtro de passagem de banda de fluorescência (175). A peça de fixação do filtro de passagem da banda de fluorescência (175) é conectada com o motor (160b) para ser girados, assim que a fluorescência é passada através de cada filtro de passagem de banda de fluorescência (172) previstos na peça de fixação do filtro de passagem da banda de fluorescência (175) e então detectado aumentando assim a detecção de fluorescência e eficiência do espaço.
[066] Em outras palavras, como mostrado na figura 6, se vários filtros de passagem de banda de fluorescência forem utilizados nos aparelhos de monitoramento em tempo real, é necessário fornecer várias lentes condensadoras de fluorescência (171), filtros de passagem de banda de fluorescência (172) e divisores de feixe de fluorescência (174) de acordo com a região de comprimento de onda desejada da fluorescência. No entanto, como mostrado nas Figuras 7 e 8, uma vez que o aparelho de monitoramento em tempo real de acordo com outra modalidade da presente invenção tem múltiplos filtros de passagem de banda de fluorescência de (172) previstos na peça de fixação do filtro de passagem de banda de fluorescência (175), os divisores de feixe de fluorescência (174) da Figura 6 não são necessárias. Além disso, uma vez que é necessária apenas uma lente de condensadora de fluorescência (171), é possível reduzir o custo de produção e uma ocupação do espaço.
[067] Preferencialmente, o motor (160b) é um motor de rotação constante para rotação da peça de fixação do filtro de passagem de banda de fluorescência (175) incluindo o filtro de passagem da banda de fluorescência (172) a uma velocidade constante.
[068] Preferencialmente, o sensor de detecção de fluorescência (173) é um tubo foto multiplicador, e a lente de condensação de fluorescência (171) é uma lente esférica, mas o sensor de detecção de fluorescência (173) e a lente de condensação de fluorescência (171) não se limitam a elas.
[069] Além disso, a fim de melhorar uma eficiência de separação entre a luz de excitação e de fluorescência, como mostrado na Figura 8, o aparelho de monitoramento em tempo real da presente invenção pode incluir ainda um polarizador ou um filme polarizador (131) entre a fonte de luz (110) e a lente de condensação de (140) e na peça de medição de fluorescência.
[070] Embora a presente invenção tem sido descrita com relação a incorporações específica, será evidente para aqueles hábeis na arte que várias mudanças e modificações podem ser feitas sem se afastar do espírito e escopo da invenção, tal como definido nas reivindicações seguinte.
[071] De acordo com a presente invenção, uma vez que o aparelho de monitoramento em tempo real utiliza uma fonte de luz fixa e o sensor de detecção de fluorescência fixa de modo a ser fixado em uma posição controlada pela rotação do motor, é fácil detectar a ampliação da amostra, e é possível aumentar a precisão de detecção e reduzir o custo e esforço de produção, e também é possível reduzir o mau funcionamento e tamanho dos mesmos.
Claims (11)
1. BLOCO DE REAÇÃO CÍCLICA TÉRMICA caracterizado por compreender um bloco de aquecimento (10) em forma de anel, formado por um bloco de aquecimento interno (10a) e um bloco de aquecimento externo (10b) ambos, separados por uma camada isolante (30) formando uma circunferência oca (11) no centro do bloco de aquecimento interno (10b), um tubo capilar (20) com uma entrada de fluxo (20a) e uma saída (20b) o qual é enrolado em tomo do bloco de aquecimento (10) em intervalos regulares do exterior para a circunferência oca (11) de modo a ficar em contato com as superfícies do dito bloco de aquecimento externo (10b) e com o bloco de aquecimento interno (10a).
2. BLOCO DE REAÇÃO CÍCLICA TÉRMICA de acordo com a reivindicação 1 é caracterizado ainda por conter um bloco de aquecimento adicional (13) em torno do bloco de aquecimento externo (10b).
3. BLOCO DE REAÇÃO CÍCLICA TÉRMICA de acordo com a reivindicação 1 é caracterizado pelo fato de conter uma ranhura de na superfície externa dos blocos de aquecimento (10a) e (10b).
4. APARELHO DE MONITORAMENTO EM TEMPO REAL, de acordo com as reivindicações 1 a 3 caracterizado pelo bloco de reação de ciclagem térmica (100) incluir: uma fonte de luz de (110); um filtro de passagem de banda (130); uma lente de condensação (140); um divisor de feixe (120); um espelho refletor (150) conectado de forma rotativa a um motor (160) e; uma peça de detecção de fluorescência (170).
5. APARELHO DE MONITORAMENTO EM TEMPO REAL, de acordo com a reivindicação 4 é caracterizado pelo fato de que a peça de detecção de fluorescência (170) incluir: uma lente de condensação de fluorescência (171); um filtro de passagem banda de fluorescência (172) e; um sensor de detecção de fluorescência de (173).
6. APARELHO DE MONITORAMENTO EM TEMPO REAL de acordo com a reivindicação 5 é caracterizado pelo fato de que a peça de detecção de fluorescência (170) inclui um ou mais lentes de condensação de fluorescência (171), filtros de passagem de banda (172) e divisores de feixe de fluorescência (174) de acordo com uma região de comprimento da onda de fluorescência.
7. APARELHO DE MONITORAMENTO EM TEMPO REAL de acordo com a reivindicação 4 é caracterizado pelo fato de que o motor (160) ser um motor de rotação constante para girar a uma velocidade constante.
8. APARELHO DE MONITORAMENTO EM TEMPO REAL, de acordo com as reivindicações 1 a 3 caracterizado pelo bloco de reação de ciclagem térmica (100) incluir: uma fonte de luz de (110); um filtro de passagem de banda (130); uma lente de condensação (140); um divisor de feixe (120); um espelho refletor (150); uma lente de condensação de (141) posicionada entre o espelho refletor (150) e o bloco de reação de ciclagem térmica (100) e; uma peça de detecção de fluorescência (170).
9. APARELHO DE MONITORAMENTO EM TEMPO REAL de acordo com a reivindicação 8 é caracterizado pelo fato de que a peça de detecção de fluorescência parte (170) inclui: uma lente de condensação de fluorescência (171); uma peça de fixação do filtro de passagem de banda de fluorescência (175) com um ou mais filtros de passagem de banda de fluorescência (172); um motor (160b) e; um sensor de detecção de fluorescência de (173).
10. APARELHO DE MONITORAMENTO EM TEMPO REAL de acordo com a reivindicação 8 é caracterizado ainda por conter um polarizador ou um filme polarizador (131) entre a fonte de luz (110) e a lente de condensação (140) e uma peça de medição de fluorescência.
11. APARELHO DE MONITORAMENTO EM TEMPO REAL de acordo com a reivindicação 8 é caracterizado pelo fato de que os motores (160a) e (160b) serem de rotação constante para girar a uma velocidade constante.
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Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5270183A (en) * | 1991-02-08 | 1993-12-14 | Beckman Research Institute Of The City Of Hope | Device and method for the automated cycling of solutions between two or more temperatures |
| US5207183A (en) * | 1991-12-06 | 1993-05-04 | Martha Praschnik | Flea-rid and grooming apparatus and methods |
| DE69429038T2 (de) | 1993-07-28 | 2002-03-21 | Pe Corporation (Ny), Norwalk | Vorrichtung und Verfahren zur Nukleinsäurevervielfältigung |
| US5415839A (en) | 1993-10-21 | 1995-05-16 | Abbott Laboratories | Apparatus and method for amplifying and detecting target nucleic acids |
| CA2159830C (en) * | 1994-04-29 | 2001-07-03 | Applied Biosystems, Llc | System for real time detection of nucleic acid amplification products |
| GB9621357D0 (en) | 1996-10-12 | 1996-12-04 | Central Research Lab Ltd | Heating apparatus |
| US7410793B2 (en) * | 1999-05-17 | 2008-08-12 | Applera Corporation | Optical instrument including excitation source |
| US6900059B1 (en) * | 1999-11-26 | 2005-05-31 | Associates Of Cape Cod, Inc. | Reader for conducting assays |
| US6930314B2 (en) * | 2000-10-27 | 2005-08-16 | Molecular Devices Corporation | Light detection device |
| AUPR707101A0 (en) * | 2001-08-16 | 2001-09-06 | Corbett Research Pty Ltd | Continuous flow thermal device |
| US20060270026A1 (en) * | 2005-05-13 | 2006-11-30 | Applera Corporation | Low-Mass Thermal Cycling Block |
| US8293471B2 (en) * | 2004-01-28 | 2012-10-23 | Marshall University Research Corporation | Apparatus and method for a continuous rapid thermal cycle system |
| KR100593263B1 (ko) | 2004-02-02 | 2006-06-26 | 학교법인 포항공과대학교 | 연속 흐름상 반응 장치 |
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