BRPI0917807A2 - formulação sólida estável de um polipeptídeo agonista de recepto gc-c adequada para administração oral - Google Patents

Abstract

composição farmacêutica compreen- dendo linaclotida, sua forma de dosagem unitária, seu uso e recipiente vedado a presente invenção refere-se a formulações de linaclotida sóli- das estáveis adequadas para administração oral, que são descritas neste documento como são métodos para preparar tais formulações. as formula- ções descritas neste documento contêm um polipeptídeo consistindo em sequência de aminoácido cys cys glu tyr cys cys asn pro ala cys thr gly cys tyr ("linaclotida") ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. as formulações de linaclotida descritas neste documento são estáveis e têm um tempo de vida em prateleira suficiente para fabricar, estocar e distribuir fár- macoo fármaco.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA COMPREENDENDO LINACLOTIDA, SUA FORMA DE DOSAGEM UNITÁRIA, SEU USO E RECIPIENTE VEDADO.

CAMPO

A presente invenção refere-se a formulações sólidas de um polipeptídeo agonista de receptor de guanilato ciclase C adequado para administração oral e métodos para preparar tais formulações.

REIVINDICAÇÃO DE PRIORIDADE

Este pedido reivindica prioridade do Pedido dos Estados Unidos Número de Série 61/089.422, depositado em 15 de agosto de 2008 e ao Pedido Provisional dos Estados Unidos depositado em 3 de agosto de 2009 e intitulado, Stable Solid Formulation of a GC-C Receptor Agonist Polypeptide Suitable for Oral Administration. O conteúdo completo dos pedidos acima mencionados é incorporado aqui por referência.

ANTECEDENTES

Muitos polipeptídeos terapêuticos são formulados em solução aquosa porque são mais ativos nesta forma. Entretanto, a maioria dos polipeptídeos não é particularmente estável em solução aquosa, de modo que as formulações frequentemente têm uma meia-vida curta e precisam de refrigeração. Embora as soluções aquosas de polipeptídeos possam ser secas por liofilização, atomização ou outros métodos, tais formulações secas podem também ser instáveis e ter uma atividade reduzida relativa a uma solução aquosa do polipeptídeo. Mecanismos de decomposição típicos que ocorrem tanto em solução aquosa quanto em formulações secas incluem agregação e degradação oxidativa ou hidrolítica. Assim, a maioria dos polipeptídeos terapêuticos, seja em solução aquosa ou seca, é estocada sob condições refrigeradas devido a sua estabilidade limitada.

Linaclotida é um peptídeo tendo a sequência de aminoácido Cys Cys Glu Tyr Cys Cys Asn Pro Ala Cys Thr Gly Cys Tyr que ativa o receptor de guanilato ciclase C (GC-C). Linaclotida, que pode ser administrada oralmente, é útil para o tratamento de distúrbios e condições gastrointestinais, incluindo síndrome de intestino irritável (IBS) e constipação crônica (CC).

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Formulações que eqmpreendem. linaclotida têm a necessidade de- ser refrigeradas a fim de evitar a degradação ao longo do tempo. Entretanto,, a refrigeração ê inconveniente tente para a distribuição comercial do Monaco quanto para estocagem petos pacientes, Assim, hâ .uma necessidade de ter uma formulado de li.naclodda sólida que é estável à temperatura· ambiente per peto menos 12 meses.

sumario

Formulações estáveis, sólidas de linaclotída adequadas para administração oral são descritas aqui assim carne são ps métodos para pre10 parar tais formaíações. As formulações descritas aqui contem um polipépié deo consistindo ®n sequência de aminoácido Cys Cys GIu Tyr Cys Cys Asn Pró Alá Cys Thr Gly Cys Tyr f 1inacfotida^i!) ou um sal farmaceuticamente aoeitável do mesmo.

As formulações de linãcfotida descútes aqui são estáveis e têm 15 uma validade suficiente para fabnoar, estocar e distribuir o fármaco. Por e~ xemplo, espera-se que as formulaçõés descritas nesta descrição tenham uma validade de pefo menos 12 meses em condições d® estocagem â temperatura ambiente (por exemplo, 25%3fo0% de umidade relativa (RH)), Em modalidades adicionais, espera-se que as formulações descritas nesta dea20 criçâc tenham uma validade de peto menos 18 meses ou pelo menos 24 meses em condições de estocagem à temperatura ambiente (por exemplo, 25®C/60% de umidade relativa),

Em algumas modalidades, são descritas formulações em que 4 95¾ da quantidade anginal de liaactotida na composição permanecem após 25 três meses quando amostras embaladas são estocadas em condições aceteradas (40^0/75%. de umidade relativa) quando avaliadas em um ensaio em uma base pesc/peso como determinado pela cromatografia líquida de alta pressão (HPLC) contra um padrão de referência de linaçlofida. Em modalidades adicionais, 4 95% da .quantidade original de linaclçtida na composição 30 permanecem após peto menos 6 meses, quando amestras embaladas são estocadas em condições aceleradas (40®C/75%. de umidade relativa). Em outras modalidades, são descritas formulações em que a pureza cromato gráfica dã: linactotida como detèrmfoãda como peménfogem de áma par HPLC permanece a $)5% ao tonga de pelo menos três meses, quando amestras embaladas sâé estocadas em condições aceleradas (4ü%)/75% de umidade relativa). Em modalidades adicionais, a pureza cromatográfica da linaCiotidá coma determinada pela percentagem de área por HPLC permanece a > 90%: ao longa de pelo menos 6 mesas, quando amostras embaladás são esíocadaê em condições aceleradas..(40°C/75% de umidade relativa). Assim, por exemplo^ não mais do que cerca de 10% de linacloiida sofre degradação parà outros produtos, tal como um produto de cxidação de iinacloíida, um produto de hídfoüse de linaclotida eu um produto de imlna mediado por formaideido de linaclotida (produto de imina formatoeído®).

Em uma modalidade, a invençãocompreende uma composição farmacêutica. que compreende linaclotida, em que a pureza cromatográfica da línaclotida diminui por menos de: 10% apôs T8 meses ou 24 meses de estocagem da composição farmacêutica a 25%) a 80% de umidade relativa em um recipiente vedado çonténdo um dessecante. Em uma modalidade adicional, a pureza, cromatugrâfica da linaclotída diminui por menos de 9%, 8%, 7%,. 8%. 5%, 4% ou 2% apôs 18 meses ou 24 meses dê estocagem da composição farmacêutica a 25%) a S0% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecánte. Em outra modálidade, a invenção compreende uma composição farmacêutiça que compreende linactotída, em que a pureza cromatógrâficá da llnaclotida diminui por menos de 10% após 3 mesas ou 6 meses de eetocagem da composição farmacêutica a 4Ô^eC a 757« de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecada. Em uma modalidade adicional, a pureza cromaíográfioa da linaclotída diminui por menos de 5%, 8%. 7%, β%, 5%, 4% ou 2% após 3 meses cu 6 meses de estouagem da composição farmacêutica a 40Χ a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecanta.

Em uma modalidade, a invenção compreende uma forma de dosagem unitária de uma composição farmacêutica que compreende iinaclotida, em que a pureza cromatográfica da linaciotida diminuí por menos de 10% apõs 18 meses ou 24 meses de estocagem da forma de dosagem uni4/53 teria a 25*C á 5084 de umidade relativa em um recipiente vedada contendo um dessecante., Em uma modalidade adicional, a purezá cromatagraáça da linaclotidã diminui por menos de 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4% ou 2%· após 18 meses ou 24 meses de estooagem da forma de dosagem unitária a 25X- a 5 8034 de umidade relative em um recipiente vedadocontendo um dessecante.

Em outra modalidade, a invenção compreende uma forma de dosagem unitária de- uma ocmposlção farmacêutica que .compreende linaclctída, em que a pureza crematógráficá da linaclotida diminui por menos de 10% apôs 3 mesas ou B meses de estocagem da turma de .dosagem unitária a 4CTC .a.

7555 de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um desseoante.

Em uma modalidade adicional, a pureza cromatográfica da linadotida diminui por menos de 9%, 8%, 734, 654, 554, 434 uu 2% após 3 meses ou 8 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 4(FÇ a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.

Em uma modalidade, a invenção compreende um recipiente vedado que compreende uma pluralidade de formas de dosagem unitárias de uma composição farmacêutica que compreende línaciotida, em que a pureza oromatográfica dá llnãcfótida diminui por menos de 1034 apôs 18 meses ou meses de estocagem de recipiente vedado contende um dessecante a

25X a 60% de Umidade relativa.. Em uma modalidade adicional, a pureza crometográfíca, da Onaóloüda diminui por menos de 9%, 8%, 7%, 8%, 5%, 434 ou 254 apôs 18 meses ou 24 meses de estocagem do recipiente vedado contendo um dessecante a 25X a 6034 de umidade relativa. Em outra modalidade, a invenção compreende um recipiente vedado que compreende uma pluralidade de formas.de dosagem unltanaxS de uma. composição formacêutica que compreende linaclotidá;. em que a pureza cromategrâfíca da linadotidá dímmui por menos de 1054 após. 3 meses ou 6 meses de estocagem do recipients vedado contendo um dessecante a 46^tyC a 75% de_: umidade relativa. Em uma modalidade adicionai, a pureza cramategráfina da línacietida diminui per menos de 9%, 8%, 7%, 6%, 554, 4% çu 2% após 3 meses ou B meses de estocagem da forma de dosagem unitária do recipiente vedado contendo um dessecante a 40*C a 75% de umidade relativa.

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Em ümà modalidade, a invenção compreende uma composição fermaceutica que compreende linaciotida, em que o valor do ensaio para linacfòtida determinado em uma base peWpeso dlminiü por méhos de 16% após 18 meses ou 24 meses de estocagem da composição farmacêutica a 5 25¾ a 50% de umidade relativa em um recipiente- vedado contendo um dessecante. Em uma modalidade adiotonaLo vetor d© ensaio para iinaçtotída detemtinado em uma base peso/peso diminui por menos de_: 9%» B%_s 7%_s 6%, 5%, 4%, 3%, 2% ou 1% apôs 18 meses ou 24 meses de estocagem da composição farmacêutica a 25X a 60%. de umidade relativa em um mcipien10 te vedado contendo um deeseeante. Em outra modalidade,, a invenção compreende uma composição farmacêutica que compreende linadotida, ©m que o valor do ensaio para hnaciotida determinada em uma base peso/peso diminiu por menos de 10% apôs 3 meses ou 6 m eses de estoeagem da composição farmacêutica a 4IFC a 75% de umidade relativa em um recipiente 15 vedado contendo um desencante. Em uma modalidade adicional a pureza crumatogrãfica da linacfotida diminui por menos de. 9%.< 8%, 7%, .8%, 5%, 4%, 3%, 2% ou 1% ápós 3 meses oü 6 meses de estecagem da composição farmacêutica a 40^eG a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um desencante.

Em uma modalidade. a invenção compreende uma forma de dosagem unitária de uma composição farmacêutica que compreende linactotída, em que o valor do ensaio para linaclotida determinado em uma base peso/peso diminiu por menos de 10% apôs 18 meses ou 24 meses de estocte gern da forma de dosagem unitária a 25''C a 60% de umidade relativa em 25 um recipiente vedada contendo: um dessecante.. Em uma modáOdade adicionai, p valor do ensaio para linaclotida determinada em uma base peso/peso diminiu por menus çfe 9%, 8%, 7’%,, 6%, 5%, 4%. 3%. 2% ou 1% apòs 18 mesas uu 24 meses de ostocagem da forma de dosagem unitária a 25*C a 50% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante, 3Õ Em outra modalidade, a invenção compreende uma forma de dosagem unitária de uma composição farmacêutica que compreende Urraulotida, em que ç vaiar da ensaio pam maciottoa determinado em uma base peso/peso di6/53 mlhi'u por menos de 10% após 3 meses ou .6 meses de estocagem da forma, de dosagem unitária a 40^BC a 75%· de umidade relativa em am recipiente vedado contendo um dessecante. Ern uma modalidade adicional.. o valor do ensaio para línastotida determinado em uma base peso/peso dírmmu por 5 menos de 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2% ou 1% após 3 meses qu 6 meses de estucagem da forma de dosagem unitária a 40*C a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contende um dessecanfo.

Em uma modalidade, a invenção compreende um recipiente vedado que compreende qma pluralidade de formas de dosagem unitárias de 10 uma composição farmacêutica que compreende lirmclotida, em que o valor do ensaio para hnaclotida determinado em uma base peso/peso diminiu por menos de 10% apos 18 meses nu 24 meses de estocagem do recipiente vedado a 25^ftC a 60% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante. Em uma modalidade adscmnal o valor do ensaio para 15 Imacícfoda determinado em uma base peso/peso diminíu por menos de 9%,

8%., 7%, 6%_:, 5%, 4%, 3%_t 2% ou 1% apôs 18 meses ou 24 meses de estocagem do recipiente vedado contendo um dessecante a SS^C a 60% de umtdade relativa. Em outra modalidade, a invenção aarnpreendo um recipiente vedado que compreende uma pluralidade de formas de dosagem unitárias 20 de uma composição farmacêutica que compreende línaclotida, em que o valor do ensaio para linacicteda determinado em urna base peso/peso diminiu por menos de 16% apôs 3 màsês ou 6 meses de estocagem do recipiente vedado contendo um desseoante a 40’C a 75% de umidade relativa. Em uma modalidade adicional, o valor do ensate para iinaclotida determinado 25 em uma base peso/peso dimWu por menos de 5%< 8%_:, 7%_t. 6%, 5%. 4%,

3%, 2% ou 1% apôs 3 meses ou 6 meses de estocagem do recipiente vedado contendo um dessecante a 40^sG a 75% de umidade relativa.

Em algumas modalidades, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende llnaclotida e um produto de hídrolise que compre36 ende;

H-Cys-Cys-Glu-Tyr-Cys-C5y's-Asp-Pro-.êhd7y'S-ThF“Gly-Cys-TyrO:H

Firn algumas modalidades, o produto de hidrôlise compreende menos.de cerca de 15% em. peso da composição,, menos de cerca de. 10% em peso da composição. menos de cerca de 7% em peso da composição ou menos de cerca de 5% em peso da composição Ern outras modalidades, o 5 produto de hidràBe compreende de cerca de 0,01% a cerca de 15% em peso da composição, cerca de 0,05¾¾ a cerca de 10% em peso da composição, cerca de. 0,0S% a cerca de 7% em peso da composição ou cerca de 0,06% a cerca de 5%. em pese da composição.. Em modalidades adicionais, é fomor· cido um método pare tratar um distúrbio gatrointestínal em um paciente em 10 necessidade do mesmo que compreende administrar uma composição farmacêutica que compreende inadotida e um produto do hidrdlise,.

Em áigumas modalidades, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende llnaclotida e um produto de imína formaldeído que compreende:

Hj,C“CysCysGluTyrCysCysAsnProAia-Cys-Thr-Gly-Cys-Tyr-OF1

Em algumas modalidades, o produto de ímlna tormaldeldo compreende menos de cerca de 15% em peso da composição, menos de cerca de 10% em peso da composição, menos de cerca de 7% em peso da composição ou menos de cerca de 5% em peso da composição. Em outras modalidades exemplares, o produto de imina formaldeido compreende de cerca de 0,01% a cerca de 15% em peso da composição, cerca de 0.05% a cerca de 10% em peso da composição, cerca de 0,05% a cama de ?% em peso da composição ou cerca de 0,05% a cerca de 5% em peso da composição. Em modalidades adicionais, é fornecido um método para tratar um distúrbio ga~ troinfostínal em um paciente em necessidade do mesmo que compreende administrar uma composição farmacêutica que compreende iinaclotida e um produto de imina formaideído.

Em algumas modalidades, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende línaotótida e um produto de mòdeção de línactatida. Em uma modalidade, o produto de oxidaçâo de linaclotida tem um peso mo30 lecuiar de 1542,8, que mais provavelmente se forma como a adição de um

8/53 átomo de oxigênio único a um dós séis enxofres de cisteiofe em linacfotlda, Uma estrutura potencial de produto é descrita .abaixe, embora um versado na. técnica reconheça que 0 âtomè de òxigênio porte ser unido á qualquer ym dos outres cinco enxofres:

H“C^&*Cys^Glu~Tyr-Qys~Cy$~AsmP'rW(la-Cys-ThrraGly-Cys~Tyr~OH

Em outra modalidade, pode haver uma adição de mais de um átomo de oxigênio ã: linaclntida, que aumentaria seu peso molecular por m AU por átomo de oxigênio adicionado.

Em algumas modalidades, o produto da oxidação de iinaclotida compreende menos de cerca de 15% em peso da composição, menos.de cerna de 1 Ô% em peso da composição, menos de cerca de 7% em peso da composição ou menos de cerca de 5% em peso da composição. Em outras modalidades exemplaras, e produto de oxidação de Iinaclotida compreende de cerca de 0,81% a cerca de 15% em peso da composição, cerca dê 0,05% a cerca de 10% em peso da composição, .cerca de 8,83% a cerca de 7% em peso da composição ou cerca de 0,05% a perda, dê 5% em peso da composição. Em modalidades adicionais, é fornecido um método para tratar um distúrbio gatrointestinal em um paciente em necessidade do mesmo que compreende administrar uma composição famnaoêutica que compreende hnadoíida e um produto de oxidaçãu de linactoUda.

O valor do ensaio ern uma base peso/peso (’’ensaio de pesopeso) pode ser determinado comparand^, por exemplo, por HPLC, a quantidade de Iinaclotida em uma amostra, a uma referência de Iinaclotida padrão. Como usado aqui, o peso de hnaclotida em urna composição apôs estocagem à temperatura ambiente ou condições aceleradas em um ponto no tempo especifico (por exemplo, três ou seis meses de estocagem sob condições aceleradas (40**C/75% de umidade relativa] ou 12, 18 ou 24 meses de estocagem sob condições à temperatura ambiente [25 %M0% de umidade relativa]) ê comparado ao peso de iinaclotida em uma composição em um tempo iniosal (por exemplo, o tempo quando a composição farmacêu

9/53 tica é liberada para uso do paciente ou clínico fa data de liberação”)) para fornecer o valor de ensaio pesofpeso, Por exemplo, o peso de linacbtida em uma composição é medido após estooagem durante um tempo espedfco em condições aceleradas (40^/75% de umidade relativa) e comparado ao 5 peso de hnadoüda que estava presente na amostra na data de liberação.

Em outro exemplo, o peso de linadotída em uma composição é medido após estocagern durante um tempo específico em condições de temperatura ambiente (25°C/eQ%. de umidade relativa) e comparado ao peso de linaclotida que estava presente na amostra na data de liberação. Assim, a frase ^f,a W& 10 da quantidade original de lináçhtida na composição permanecem após pelo menos 6 meses quando amostras embaladas são estocadas em condições aeeteradas ,(40^eCP5% de umidade relata)* significa o peso de linaclotida na composição medida em um ensaio em uma base peso/peso como determinada por HPLC após pelo manos 6 meses de estocagam ern condições i 5 aceleradas è a da quantidade de linaclotída na composição presente no tempo inicial (por exemplo, a data de liberação da composição de iinaslotida).

Pureza cromatográfíca da linaclotída pode ser avaliada pelo desempenho de HPLC sob condições descritas aqui, A area sob o pico de lina20 clotida é medida e comparada à area total sob todos os picos excluindo o pico solvente e quaisquer picos ralacionados aos não-pólipeptideós (isto é» picos associados com excipientes que podem ser observados em um placebo). Como usada aqui, a pureza crúmátegrâftca da linacloiida em uma composição após estcuagsm à temperatura ambiente ou condições aceleradas 25 em um ponto no tempo especifico (por exemplo, três ou seis meses de estocagem sob condições ácçleradas [40^0/75¾ de umidade relativa] ou 12, 18 ou 24 meses de estocagem sob condições à temperatura ambiente (25 ^0/60¾ de umidade relativa]) é comparada à pureza cromatográfíca da lirraclotida em uma: composição em um tempo inicial (por exemplo, e tempo 30 quando a composição farmacêutica è liberada para uso do paciente ou clinico (^!,a data de liberação)) para fornecer o valor de pureza crômatográfica. Por exemplo, a pureza cromatografica da íinaclotida em uma composição é medida apds estocágém durante um tempo específico em condições aceleradas (40^&C/75% de umidade relativa) e comparada â pureza cromàtografca da linaclotida n| composição á uma date de liberação. Em outro exemplo, a pureza cromatográfica. da linaclotida em uma composição ê medida após 5 estocagem durante um tempo especifico em condições de temperatura ambiente (25^eC/6Ü% de-umidade relativa) e comparada à pureza ctemàtográfica da linaclotida na composição a uma data de liberação.

Esta descrição possui um método para preparar uma composição farmacêutica que compreende linaulotida ou um sal farmaceuticamente 10 aceitável da mesma, o método que compreende: (a) fornecer uma solução, por exemplo, uma solução aquosa fa solução de revestimento”), que compreende: (i) línadotida ou um sal femiaceutícamente aceitável da mesma; (íí) um cátion selecionado de Mg²*, Ca²\ Zn*\ W²*> K*. Na* ou Al³* e/ou uma amina primária estedcamente impedida (por exemplo, lèucina) e, opcional· 15 mente, (iii) um aglutinante fermaceutíoamente aceitável; e (b) aplicar a solução de revestimento a um agente de enchimento farmaceutíoamente aceitável para gerar agente de enchimento revestido oom polipeptídeo (por exemplo, pulverizar, misturar ou revestir o agente de enchimento farmaceuticamente aceitável com a solução de revestimento), O método pode opcional20 mente incluir um ou mais de: (i) mistura do agente de enchimento revestido com polipeptideó com um agente de deslizamento famiaceutícamente aceitável, um lubrificante farmaceuticamente aceitável ou um aditivo farmaceuti·· comente acmtável que age como ambos um agente de daslizamento e um lubrificante; (il) mistura do agente da enchimento revestido com polipeptídeu 25 com agente de enchimento que não é 'revestido com polipeptídeo, (iii) mistura do agente de enchimento revestido com polipeptídeo com outros aditivos, (iii) aplicação de um aditivo de revestimento farmaceuticamente aceitável ao agente: de enchimento revestido com polipeptídeo. A composição farmacêutica final pode ser colocada em cápsulas (por exemplo, cápsula de gelatina) 30 ou usada para formar comprimidos.

Foi constatado que um cátían selecionado de Mg^x*_f Ca²\ Zn⁴*, Μπ'*. K\ Na* ou Aí³* é útil pára suprimir a formação dé um produto de oxl·

11/53 daçâo de linaclotída durante a estocagem.. Também fal constatado que uma amína primária estericamente impedida, par exemplo, leueín-a, é âtil para suprimir á formação cte um aduto de imína formaldèíde da linadotida f’produto de imma formafaeído) durante a estocagem. Assim, a formulação de 5 feactotída que compreende um cátion selecionado de Mg^:?\. Ce²\ Zn²*, K*_; Ha* ou Al³* (por exemplo, um çàfen dívstente setectonadads Zn²*,

Mg²* nu ,Ce²*) e/ou uma amina primária estericamente impedida, tal como um aminoáeidò, tem uma validade suficiente (çcmc medida pela -pureza cromatográfíoa efou por um ensaio de peso/peso) para fabricar.,. estocar e 18 distribuir o fármãço., Atem disso, enquanto a presença de uma amina esteticamente impedida sozinha pode aumenter a formação de um produto de hidtolise de linactotida durante a estocagem. a combinação de uma amina primária estericamente impedida e um nation, por exemplo, a combinação de leucína e Ca^z+, supre- e formação de produto de hidrõlise de iíaaclótlda assim 15 como o produto da oxidação de íinaclutida durante a estocagem, tevando a uma estabilidade total ainda maior como determinada por um ensaio de peso/peso efou pela pureza cromatogiáfica.

Em algumas modalidades, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende um veiculo fármaceuticamente -aceitável,, linaclotí20 da, um eu mais agentes selecionados de-Mg²*, Ce²*, Zn²*, Μη²*, K*_s Ha* ou

Al⁴* e uma amina primária estericarnente impedida, em que o agente melhora pelo menos um atnbuto da composição, relativo a uma composição farmacêutica sem □ cite agente. Em modalidades adicionais, o agente ê Mg®\ Ca²' ou Zn·'. Em uma modalidade adicional, o agente é Ca²⁺ Em algumas 25 modalidades, o cética é fornecido como, sem limitação, acetato de. magnésio_; cloreto de magnésio, fosfato de magnésia, sulfato de magnésio, acetato de cálcio, cloreto de cálcio, fosfato de cálcio, sufeto de cálcio, acetato de zinco, cloreto dé zinco,, fosfato de zinco, sulfato de zinco,, aceteto de manganês, cloreto de manganês, fosfato de manganês, sulfato de manganês, ace30 tato de potássio, cloreto de potássio, fosfato de potássio, sulfato de potássio, acetato de sódio, cloreto de sõdiu, fosfato de sódio, sulfato da sódio, acetate de alumínio, cloreto de alumínio, fosfato de ãlumínic ou sulfata de alumínio.

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Em modalidades adicionais, o cátípn é fornecido como cloreto de magnésio, cloreto de cálcio, fosfato de cálcio, sulfato de cãlcto-, acetato de zinco, cloreto de manganês, cloreto de potassic, cforetO: de sódio ou cloreto de alumínio.. Em outras modalidades, o cation ê fornecido cerne cloreto de cálcio, cloreto 5 de magnésio ou acetátó de zinco.

Em outra modalidade, o agente é uma amina pnmàna estern sarnento impedida. Em uma modalidade adicional, a amina primária esteri» camente impedida á um aminoácido, Em ainda uma modalidade adicionai, a aminuáddo é um aminoácido ocorrendo naturalmente, Em uma modalidade W adicional, o aminoácido ocorrendo naforalmente ê sotecionadç da grupe consistindo emr histidína. fenfelanina, aíanina, âddo glutâmico, ácido aspán tico, glutamine, leucina, metiorana, asparagína, tírwína, treonina, isoteucína, triptofano, metionína e vaüna; ainda mais, o aminoácido ocorrendo naturalmente é leucina, ísoleucína, alamna ou metkmina; em outra modalidade, o 15 aminoácido ocorrendo naturaímente é leucina ou metionina; ainda mais, o aminoácido ocorrendo naturalmente é íeucína. Em outra modalidade, a amína primária estencamente impelida è um aminoácido não ocorrendo naturalmente ou derivado de aminoácido (por exemplo, ácido 1-amínociclohexano carboxiiico, lantfonina ou teanina). Em uma modalidade adicional, a 20 amina primária estencamente impedida ê cicio-bexilamina, 2-metiíbutilamína eu quitosana.

Ern outras modalidades, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende um veículo farmaceutiuamente aceitável, linaclótida, um cation selecionado de Mg²*, Zn²*, K*, Na* çu Al'^v (por sxem25 pio, um cátion divalente sefecionadg de Zn^s*, ou Ca²*) e uma amina primária esierscamente impedida. Em uma modahdado. o càtton é Ca^í;'< Em outra modalidade, o cátion é uma mistura de dors ou três de Mg²*, Ca²*, Zn²*, Mn²*. K\ Na* ou Al^s* (por exémplo, uma mistura dê dois cu três de ΖηΛ Mgⁱ⁺ ou Ca²). Em uma modahdade adicional a composição farmacêu30 tíca ainda compreende um aglutinante famiaceuticamente aceitável e/ou um agente de deslizamento, lubrificante ou aditivo farmaceuticamente aceitável que age como ambos um agente de deslizamento e um lubrificante e/ou um

13/53 antioxidante. Em urn.® modalidade adicional a amina primaria eaíerícamente impedida é um amincácido. Em ainda uma modalidade adicional n aminoácído ê um ammbâcidá ecorrendo naturalmonte, Em ainda uma modalidade adicional c aminoácido ocorrendo naturalmonte é selecionado do grupo consistindo em; hístidina, femlalanina, alánina, ácido glutâmícò, ácido aspártico, glutamína, leucína, metíonína, asparagine, tirosina, treonina, Isoteuclna, triptofano, metionina e valina; ainda mais, o aminoácidô ocorrendo naturalmente é teucína, ísofeuctoa, alanina ou meticnina; em outra modalidade., o. amioõâcído ocorrendo naturalmente é teucma ou metíomna; ainda mais, o 10 aminoácidu ocorrendo naturalmente é leucina. Em outra modalidade, a amina primária esteticamente impedida pode ser uma mistura de mais de uma amina primária estencamente impedida. Por exemplo, a amína primária estericamente impedida pode ser uma mistura de duas ou mais amines primárias estençamente impedidas, por exemplo, uma mistura de dois ou mais amína15 ácidos.

Em alguns casos, uma razão melar de cátion:amína primária astarícamente impedidadmacfotida (par exemplo, Oa^'deucinaJinaelotida) na solução aquosa aplicada ao veiculo é de 5 a 100:5 a 50:1. Pode ser desejá vel para uma razão molar de cátionmmí na primária estancamente impedida 20 (por exemplo, Ca^ Jeudna) ser igual ou maior do que 2:1 (por exemplo, entra 5:1 e 2:1). Assim, em alguns casos, urna razão molar de cátiomamína primária estericamemc impedida' linadotida (por exemplo, Ca'^deucmaJinaclotlda) aplicada,ao veiculo ê 100:60'1, 100:30:1, 00:40:1, 80:30:1, 80:20:1, 60:30:1. 60:20:1, 50:.30'1, 50 20'1, 40:20:1. 20:20:1, 10:10:1, 10:5:1 ου 25 5:10:1, Quando aglutlnante, per exemplo, metilcsíulosa, está presente na soluçác de íinaciotida aplicada ao veículc pede estar presente a 03% - 2,5% em peso (por exemplo, 0,7%-1,7% ou 0,7% -1% ou 1,5% ou 0,75¾).

O peso de linaclotída aplicado a um dado peso do agente de enchimento (per exemplo, celulose micmcnstalina) pode variar de cerca de 30 0,02:100 a cerna de 2,67:100. Assim, cerca de 0,05 mg a cerna de 6,0 mg de linadotida podem ser aplicados a 225 mg de agente de enchimento. Em uma modalidade adicional o peso de linaclotída aplicado a um dado peso do a

14/53 gente de enchimento é cerca dé 0,()5 mg a cerca de 2,0 mg de linaclbtída. (por exemplo, 0,1, 0,2, 0,3. 0,4, 0,5, 0,6, 0,7 mg de peptide© para 225 mg de agéhte de enchimento).

Em várias modalidades: a amine primada estancamenteImpedí5 da é um ãminoàçído (per èxemplo, uni aminoácidé ocòrréndo naturalmente eu sm aminoácido ooorreado naturálmente selecionado de hfetidína, femlalaniná, alanine, ácida giutamlno, ácido aspártíco, gtutamina, metibnina, asparagina, tirçsína, treenína, leucine, isdeudna, triptofeno, ou valina). Em outras cases, a amine primária. esteticamente impedida é um aminoáddó nâo peer10 rendo naturalmente ou derivado de aminoácido (por exemplo, lantionína, teanina ou 1-amlno ciclo-hexano). Em outros casos, a amina primária esteticamente impedida ê um açúcar amino (por exemplo, quitosana ou glucosamine).

Em alguns casos, a amina primjána esteticamente impedida tem a formula:

to

em que R p Rg e R_s são íúdependentemente sefewnados dm H; *“C(O)OH; G1-C6 alquila, opcbnalmente substituídos por eu um arílá ou heteroaril de 5 a 10 membros, CI-C6 alcoxkdquiia: ou C1-Q6 tioalcoxialquíla, em que qualquer um dos grupos alquila ou arila acima pode ser substr 20 tuido simplesmente ou muitiplarnente por halogênio ou •••NHz, e contanto que nâo mais de dóls de Ry Rg o Rs são H, Em uma modaidade adicional, não mais do que um de Rn Rc o Rs é H.

O termo alquila”, como usado aqui, refere-se a um radical hidrocarboneto monovafente de cadeia ramificada ou linear saturada. A menos 25 que especificado de outra maneira, um grupo alquila contém 1-20 átomos de oarbono (por exemplo, 1-20 átomos de carbono, 1-10 átomos de carbono, 1S átomos de carbono, 1-6 átomos de carbono, 14 átomos de carbono ou 1-3 átomos de carbono).. Exemplos de grupos alquila incluem, mas não sáo limitados a, metila, etila, mpropila, isopropila, n-butila, ísóbutíla, s-butila, t-feutila,

15/53 pentila, hexila, heptila, datila e similares.

Os termos ·^!οΙοαχίοΙρυΤ* a 1%..^ tioaicaxialquil significam al~ quita, substituídas por um ou mais grupos alcóxi ou tioalcõxi, conforme seja o caso, em que o número total combinado de carbonos des grupos alquil e 5 aioáxi, ou grupos alquil e tioafedxi, combinados, conforme seja .0 caso, podem estar entre os valores de n e m, Por exemplo, um C« alcoxialquil tem um total de 4 a 6 carbenes divididos entre a porção alquil e alcóxi; por exemplo, pode ser -CHàOCH^CHsCHà, -*CH^C^:H?0CH.gCHa ou ^CHsCHsOHsOCHs.

Como usado aqui, o termo arila” (como em ”anel arila” ou grupo arila”), usado sozinho pu somo parte de uma porção maior, refere-se a um sistema de anel carboxllíco em que pelo menos um anel no sistema é aromático e tem um ponto único de fixação nu resto da molécula. A menos que especificado de outra maneira, um grupo arila pode ser monocíclíco, 15 bfefelfeo ou tnddícc e conter 6 a 18 membros de anel. Exemplos de anéis arila incluem, mas não são limitados a, femla, naftila, indanila, indeníla, feiraline,. fluoreníla, e ántracenilã..

O termo heteroarila (ou heteroaromátice” eu “grupo heteroariIa” ou hetarodclo aromático”) usado sozinho ou como parte de uma porção 20 maior come em heterearalqute” .ou hsteroanlatemd” refere-se a um sistema de anel em que pelo menos um anel no sistema é aromático e contém um ou mais heteruátomos, em que cada anel nu sistema contém 3 a 7 membros de anel e que possui um ponto único de fixação no resto da molécula. A menos que especificado de outra maneira, um sistema de anel heteraanla pode ser 25 monociclico, bídolíço gu tnçfelico e tem um total de cinco a cetera® membros de anel Em uma modalidade, todos os anéis em um sistema hstersarfe são aromáticos. Também inclusos nesta definição são radicais heteroarfe, onde o and heteroania é fu?«dido com um ou mais anèss helerocíclicos ou carboxiclicos aromáticos ou não-aromátícos, ou combinações dos mesmos, enquan30 to o radical ou ponto de fixação está no anel heteroanla. Sistema heteroarontebeu 6,5 bícidico, como usado aqui, por exemplo, é um anel heteroaramático de seis membros fundido a um segunde anel de cinco membros em que

16/53 g radical ou panto da fíxáçãu está no anel deseiá membro s.

Anéis hetemarila incluam, mas nâo sâo limitados aos seguintes monocicltís: 24uranite, 34uraniia, Nemídazulilâ, 2-imidazolila, 44midá^ólílá_s teimídazulfe, 3-isGxazoiíia, 4-isoxazclite, Sdsoxazoiila, 2-oxazaÍila, 45 .Oxazdlila,.. 5-oxazóiiIá, Npinoliia, 2-pirroüla. 3’pírroíila, 2-pindila, 3-pirídilá, 4piridila, 2-p.írimidÍnrla, 4-pinmidinih, 6-pínmidiniia, pindaziaib (par exemple, 3piridázínila), 2-tiazolila, 4-fiazolHa, S-tíazolíla, tetrazblila (por exemplo, 5tetrazoliia), triazoliía^: (por exemplo, 2-tríazolila e 5-tnazoliÍa), 2-tienila, 3fiénila,.. pirazblila (por exemplo, 2-pirawlila), isOfiazóHlá, 1,2,3-oxadiazolila, 10 1,2,0-oxadteoíila, 1_<2,4pxadiazoliia, 1,2,3-ftiazohb, 1,2,3-tiadiaxoiiIa, 1,3,4tiadiazolila, 1,2,5-tiadiazotilá, pirazihilá, 1,3,S4nazínila, e os seguintes biciotos: benzimidazolila, benzofuriia^ benzotíofenM benzopirazinila, benzopiranonila, indoüía (por exemplo, 24nd.olHaX punnilá·. goiholinila (por exemplo, 2quinolinila, 3-quinoliniia, 4~quínQlinila), e ísoquinolínila (por exemplo, 115 Isoquinolinila, 3'4soquínolínllá·, bu 4-isoquinolÍnite).

Ém vários casos: o.anfioxídante é selecionado de BHA (hldroxl· anisol butllado), BHT (hldrexitelueno butiladó), vitamina E, gaiato de prnpiia, áddu ascórbíeo e sais ou ésteres dos mesmos, tocoferol e ésteres dos mesmos, ácido alfa-lipoico, beta-caroteno; o àglutioantè farmaceuticamente 20 aceitável é átecoí de polMmia eu poteinil pírmíidona', o aglutinante farmaeeutíGamonte aceitável é selecionado der um amido (por exemplo, amido de milho, fêcula de batata pré-geiatinizada, amido de arroz,, amido de .trigo, e amido giiooísta de sódio), maitodextrina oy um éter de oelutose (por exemplo, metiteluiose, efiloeluiosa, carboximetiiceiulose, hidmxietií celulose, hidruxie25 tü meliiceiuiose, hídroxipmpii celulose e hidroxipropií metilceiulose); o agente de enchimente farmacéuticãmente aceitável é ceíufese (por exemplo, celulose microfoa çu ce&iose microcristalina, tal como Celphem ÇP-3Õ5 ou Avó cal): o agente de- ançhlmento fámiaeeuticamente sueitáveí é um açúcar ou um álcool de açúcar (por exemplo, manitel, Isomaite, sorbitol, dextrose, xili30 tel sacarose e lactose); o agente de enchimento compreende partículas tendo um diâmetro médio entre 50 ym e WGD pm; o lubrificante e/ou agente de deslizamento é selecionado de: talco, leucine, estearato de magnésio, ácido

17/53 esfeánco e álcool da polivinfe; e o lubrificante e/ou agente de deslizamento é seteçionado de; estearato de nâlcio, óleo mineral óleo vegetal, pòfiétileno glicol (PEG; por exemplo, PEG que é líquido ou sólido á temperalura ambiente). benzoate de sócho, e laurii sulfate de sódic.

Em alguns casos, a solução de linaclotida usada em um método para preparar a formulação tem um pH abaixe de 7 (por exemplo, um pH entre 1 e 3 ou um pH entre cerca de 1,5 e cerna de 2,5). O pH pode ser ajustado com, por exemple, ãado tesfónoo. Em alguns casos, a solução é tamponade. Vários tampões farmaceutícamente aceitáveis podem ser usados 10 (por exemplo, tampão fosfate).

Em alguns casos, a solução de linacletída usada em um. método para preparar a fonnulaçáo compreende tanto um cátion (per exemplo, CaCl?) quanto uma amina primária estencamente impedida (por exemplo, leuema).

Em alguns casos, a solução de línaclotida compreende CaCfe e íeucma; o aglutinante é metílcelulose; o agente de enchimento é celulose microcristahna; o agente de deslizamento e/ou lubrificante compreende talco ou leucina.

Também tornecída e uma composição farmacêutica preparada 20 por qualquer um dos métodos descritos aqui.

Em outro aspecto, uma composição farmacêutica é descrita a qual compreende um veículo fãrmacéuticamente aceitàwl, Imaclcfida, um ou mais agentes selecionados de (1) um cátion selecionado de Mg**, Ca^', Zn*\ Mt/% K\ Na'^! ou Ai''\ uu (ií) uma amina primária estençamente impedida.

Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende pela menos um càticn a polo menos urna amina primária esteriua.mente impedida.

Métodos de usar as composições farmacêuticas para tratar uma variedade da distôrtws gastrointestinais são_: tepqbém desqhtos.

BREVE, OIBGBlCâOOAfíGyÉA

A figura 1 mostra um exemplo de uma análise de iinadotída por

HPLC, em que Oxídação refere-se ao produto de oxidação de linaciotida, Formaideídc Imína” refere-se ao produto de línaclotida de ímina formaldeído e Hidrôlise refere-se ao produto de hidrolíse de línadQtids.

Esta figura é fornecida por meto de exwnpfo e não se destina a limitar o escopo da presente invenção.

DESCRIÇÃO DETALHADA

Composições orais contendo itoadotida podem ser usadas para tratar uma variedade de distúrbios gastrointestinais. Em varias modalidades, o paciente esta sofrendo do um distúrbio gatrointestinal; o paciente está sofrendo de um distúrbio selecionado do grupo consistindo em: distúrbios de motilidade gatrointestinal, pseudo-obstrução intestinal crônica, pseudo10 obstrução oclõnlca. Doença de Grohn, reflexo duodenogastrico., dispapsía, dispepsia funcional, dispepsiã não ulcerosa, um distúrbio gatrointesOnal funcional, pirose funcional. doença do refluxó gastresotágíco (GERD). gastroparesto, slndmme de intestino irritável, íteo põs-operativo, colite ulcerativa. constipação crônica, constipação, dor associada com constipação e distúr15 blos o condições associadas com constipação (por exemplo, constipação associada com uso de analgésicas apiáceos, constipação pós-círúrgica e constipação associada com distúrbios neuropátícas, assim como- outras condições e distúrbios descritos nesta descrição?; o paciente está sofrendo de um distúrbio de motilidade gatrointestinai, pseudo-obstruçàa intestinal crôni20 ca, pseudo-obstrução colõnsca, Doença de Crohn. reftoxQ do duodenogàsth·· co, dispepsia, funcional dispepsia, dispepsia não ulcerosa, um distúrbio gatrointestinai funcional, pirose funcional, doença do refluxo gastresofâgico (GERDj, gasíroparesia, doença do intestino infematóna. síndrome de intestino irritável (por exemplo, sindrome de intestino irritável de diarréia predo25 minante (d-IBS). sindrorne de intestino irritável de constipação predominante (c-IBS.j e/ou síndrome de inteslino irritável alternada (a-IBS)), ileo pòsoperativo, coíite uiçemtiva, constipação crônica, constipação, dor associada com constipação, e distúrbios e condições associadas com constipação (por exemplo, constipação associada com uso dé analgésicos opiáceos, oonsti30 pação pús-cirúqpaa, e constipação associada corn distúrbios neuropáttoos, assim como outras condições e distúrbios descritos nesta descrição); o paciente foi diagnosticada com um distúrbio gatraintestinal funcional de acordo

1:9/53 com o Catena de Rome (per exemplo, Rome li), o_: pan wife foi diagnosticado cbm sindrome de intestino irritável (por exémpto. IBS de diarréia predominante,. I8S de constipação predominante efou BS alternativa), de acordo com o Critério de Rome (per exemplo, Rume II),

O intervalo de dose de línadotida para humanos adotes é geralmente de 26 pg a 6 mg pôr dia oralmente. Em uma modalidade adicional, o intervalo de doca é 25 pg. a 2 mg por dia oraimente. Em algumas modalidades, o intervalo dé dose pare humanos adultos é 50 yg 0 1 mg por dia oralmente (por exemplo, 50 pg, 57,5 yg, 100 yg, 133: pg, 150 yg, 200 pg, 250 pg, 266 yg, 300 pg, 350 yg, <00 pg, .450 pg:, 500 yg, 550 pg, 600 yg, 650 pg, 700 pg, 750 pg, 800 yg, 850 pg, 900 pg, 050 pg ou 1 mg). Em modalidades adicionais, o intervalo de dose é 100 pg a 600 yg por dia oralmente. Em outras modalidades, a dose é 50 pg, 67,5 pg, 100 pg, 133 pg, 150 pg, 200 pg, 266 pg, 300 yg, 400 yg, 500 yg ou 600 pg dé línaclotida pqrcfe oralmente. ** 15 Em uma modalidade,, a composição de linaclotida é fornecida em uma uni* dade discreta, uma forma de dosagem unitária (por exemplo, urn comprimido, uma cápsula, um sache) que é eficaz em tal: dosagem ou como um múltiplo da mesma. Em determinadas modalidades, a forma de dosagem unitária e a dose diária são eqmvalentes. Em várias modalidades, a forma da do20 sagem unitária é administrada com alimento a qualquer hora do dia, sem alimento a qualquer hora do dia, com alimente apôs um je)um (por exemplo, com café da manhã). Em várias modalidades, a forma de dosagem unitária ê administrada uma vez por dia, duas vezes por dia ou três vezes por dia, A forma de dosagem unitária pode opoionalmenfo compreender outros aditi25 vos.. Em algumas modalidades, uma, duas ou três formas de dosagem unitárias irão conter a dose oral dlâria de linaofotida. A. quantidade precisa do composto administrado a um paciente deverá ser de responsabilidade do médico assistente. Entretanto, a dose empregada dependerá de um número de fatores, incluindo a idade e sexo do paciente, o distúrbio preciso a ser tratado, e sus gravidade.

Em uma modahdade. é fornecido um método para tratar siadrome de intestino irritável com constipação (IBS-c) em um paciente adulto em

20/53 necessidade de mas-rm, que compreende administrar ao paciente uma wz ao dia uma quantidade efsoaz de uma composição farmacêutiça descrita οροί Em várias modalidades, a composição fermacaetfea compreende 133 pg ou .266 yg de iínaclotida por dose uriitarte por dia. Em outras modalidades, a 5 composição farmacêutica é administrada durante um periodo de pelo menos um dia, deis dias, três dias, quatro dias, cinco dias, seis dtes, umâ semana, duas semanas, três semanas, quatro semanas ou mais.. Em algumas modalidades, o tratemonto com a composição de linaclotida melhora pelo menos um Sintoma selecionado de dor abdominal reduzida, um aumento no número W de movimentos de Intestino espontâneos completos (CSBM) em uma semana, um aumento no número de movimentos de intestino espontâneos (SBM) em uma semana, consistência de tezes melhorada, esforço reduzido, desconforto abdominal reduzido, inchado reduzido ou gravidade do sintoma de IBS~c reduzida.

* 15. Em uma modalidade, é fornecido um método para trater consti’ pação crônica em um paciente adulto em necessidade do mesmo, que coo preende administrar ao paciente uma vez ao día uma quantidade eficaz de uma composição farmacêutica descrita aqui. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 133 yg ou 260: pg d® linaclotida por 20 dose unitária por dia. Em outras modalidades, a composição farmacêutica ê administrada durante um periodo de peto menos um dia, dois dias, três dias, quatro dias, cinco dias, seis dias, uma semana, duas semanas, três semanas, quatro semanas ou mais. Em algumas modalidades, tratamente com a composição de linaciofida melhora pelo menos um sintoma selecionado de .25 um aumento no número de movimentos de intestino espontâneos completes (CS8M) em uma semana, um aumento no numero de movimentes de intestino espontâneas (SBM) em uma semana, consistência de tezes melhorada, esforço reduzido, desconforto abdominal reduzido, inchado reduzido ou gravidade reduzida de constipação.

A consistência de fezes de cada BM pode ser monitorada pela

Escala de Forma Fecal de Bristol de 7 pontos (BSFS) (1 -· caroços duros. 2 salsicha moldada, 3« salsicha ftesurada, 4 ™ salsicha suave, 5 « bolhas &.X?

suaves, 6 ~ peça fofa, 7 ~ aquosa), O esforço evacuatório pode ser monitorado pela Escala de Fácil Passagem de 7 pontos (1 - desençravamento mancat /enema necessárias, 2 ™ esforço evacuatóríç severo, 3 ~ esforço evacuatóno moderado, 4 ~ esforço evacuatonu suave, 5 - sem esforço avacuatórto, 5 ~ urgência, 7 «íncontinente), CS8M pode ser medido pela sensação de vazio completo após um SBM (sim/não). Desconforto abdominal, distensão e gravidade de constipação podem ser medidos usando, por exemplo, uma escala ordinal de § pontos (1 ™ nenhum, 2 - suave, 3 » moderado, 4 ~ severo, § - muito severo),

Um cátion da invenção pode ser fornecido como um sal farmaceuticamente aceitável, isto é, um cation com um contra-fen apropriado, Exempios de sais farmaceuticamente aceitáveis que podem ser usados na invenção incluem, sem limitação, acetato de magnésio, cloreto de magnésio, fosfato d® magnésio, sulfato de magnésio, acetato de cálcio, cloreto de cálcio, fosfato de cálcio, sulfato de cálcio, acetato de zinco, cloreto de zinco, fosfato de zinco, sulfato de zinco, acetato de manganês, cloreto de manganês, fosfato de manganês, sulfato de manganês, acetato de potássio, cloreto dé potássio, fosfato de potássio, sulfato de potássio, acetato de sódio, cloreto de sódio, fosfato da sódio, sulfato de sódio, acetato de alumínio, cloreto de alumínio, fosfato de alumínio ou sulfato de alumínio. Em algumas modalidades, os sais famiáçeufeamente aceitáveis incluem cloreto de cálcio, carbonato da cálcio, acetato de cálcio, cloreto de magnésio, acetato de magnésio, acetato da zinco e cloreto de zinco. Em modalidades adicionais, um sai farmaceuticamente aceitável que pode ser usado è cloreto de cálcso, cloreto de magnésio e acetato de ztnco.

Como usado aqui, o termo foglutínante·'’ refere-se a qualquer agiutinante fermaceutícamente aceitável que pede ser usado na prática da invenção. Exemplos de aglutinastes farmaceuticamente aceitáveis incluem, sem limitação, um amido (por exemplo, amido de milho, amido dé batata a amido pré-gelãtinizado (por exemple. STARCH 1500® e STARCH 1500 LIO, vendidos por Colorcun, Ltd.) e outros amidos}, maltodextona, gelatina, gomas naturms e sintéticas, tais come acácia, tragacanto em pó, goma guar.

celulose e seus derivados (por exemplo, metilcelulose, hidroxietil celulose, hrdroxietil metiteelulose, hidraxipropil çekdose e hidrnxipropil metílcelulose (hípromelosé), etil cefetose, acetato de uqlulose, carboxímatíl celulose de cálcio, cafocximetil celulose de sodio, carboximetilcelulose, celulose microcristalina (por exemplo, AVICEL^W, tais coma, AVICEL-PH-IOI -103™ e 105^-, vendidos por FMG Corporation, Marcus Hook, PA, USA)), álcool, de polivinte, pollvinií plrrolidcna (por exemplo, pollviníl pirrolidona K30), e misturas dos mesmos.

Gomo usado aqui, o termo “agente de enchimento” refere-se a qualquer agente de enchimento farmaceuticamente aceitável que pode ser usado na prática da Invenção. Exemplos de agente de enchimentos fermaceutfcamente aceitáveis incluam, sem limitação, talco, carbonato de cálcio (por exemplo, grânulos ou pós), fosfato de cálcio dibásieo, fosfato de cálcio tribásico. sulfato de cálcio (por exemplo, grânulos ou pós), celulose microcristalina (por exemplo, Ãvícei PH101 ou Òeiphere QP-305), celulose em pô, dextratos, caulim, manltol, ácido silícíco, sorbitol, amido (por exemplo, Amido 1500), amido prá-gelatiníxado, lactose, glicose* frutose, galactose, trehalose, sacarose, maltose* isomalte, râfinose, maititoi* metezítose, estoquiose, lactital, palatmita, xilltol, mioinositol, e misturas dos mesmos,

Exemplos de agente de enchimentos farmaceuticamente aceitáveis que podem ser particularmente usados para revestir com línaclotida inchem, sem limitação, talco, celulose microçristalina (por exemplo,. Avicei PH101 ou Qelphere CP-305), celulose em pò_: dextratos, caulim, manltol, ácido silicico, sorbitol, amido, amido pte-gelatlnizado, lactose, glicose, frutose, gaiactese, trehaiose, sacarem, maltose, isomalte, fosfato de cálcio díbásico, raffinose, maltitol, melezitose, estequiose, lactitql, palatinita, xfiltol, manitol, mioínesitol, e misturas dos mesmos.

Comp usado aqui, a termo “aditivos” refere-se a qualquer aditivo farmaceuticarnente aceitável. Aditivos farmaceuticamente aceitáveis incluem, sem limitação, desintegrantes, aditivos dispemntes, lubrificantes, agente de deslizamentos, antioxidantes, aditivos de revestimento, diluentes, tensoaiivus, aditivos arornatizantes, umectantes. aditsvos promotores de absor

23/53 çao, aditivos de libemção controlada, aditivos antiaglomérantes, agentes antimicrobíanos (por exemple, conservantes), corantes, dessecantes, plastíficantes e corantes,.

€omo usado aqui, um texcipiente¹' é qualquer aditivo farrnaceutí5 comente aceitável, agente de enchimento, aglufinanté ou agente.

Como usado aqui, 'tnadotida purificada” é linaclotida ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma que é maior que ou igual a 90 por cento pura ou maior que ou igual a 95 par cento puro. Em algumas modalidades, li n actotida çamo usada nos métodos ç earn posições descritos aqui é 10 purificada., A pureza de linaçfotida pode ser medida, por exempla, pala pureza cromatugráfica da linaclatida usando HPLC de fase reversa corna descrita n© Exemplo 21. Ensaio de linaclotida (p/p] pode ser determinado, por exemplo, usando HPLC de fase reversa com quantificação através da cahbração externa com uma referência padrão como descrita no Exemplo 21.

Em ura aspecto, a composição farmacêutica pode ser preparada para pulverizar uma solução que compreende linaclotida ou um sai farmaceutícarnente aceitável dá mesma, um agente de enchimento farmaceuticamente aceitável para gerar agente de enchimento revestido com foaclotida. Em uma modalidade, o método compreende: (a) fornecer uma solução, por 20 exemplo, uma solução aquosa (”a solução de revestimento’¹), que compreende. (i) linaclatida ou urn sal farmaceuticamente aceitável da mesma; (íi) um cátion selecionado de Mg'·'*, Ca^<b, Zn^?*. 1/4; K*, Na* ou Al·’’’ e/ou uma amina primária esteríoamente impedida (por exemplo, leucina) e, opcionalmente, (hi) um aglufinante farmaceuticamente aceitável e (b) aplicar a soiu25 ção de revestimento a um agente de enchimento farmaceuticamente aceitável para gerar agente dé enchimento revestida com polípeptideo (por exemplo, pulverizar, misturar ou revestir o agente de enchimento farmaceuticamente aceitável com a solução de revestimento). O método pode opcionalmente Incluir um ou mais de: (i) mistura de agente de enchimento revestido 30 com pçlipfôptkfec corn -úm agente de deslizamento farmaceuticamente aceitável, um lubrificante fermaceutícamente aceitável ou um aditivo farmaceuticamente acedável que age como ambos um agente de deslizamento e um

24/53 lubrificante; (0) mistura da agente de enchimento revestido com polipeptideq cem agente de enchimento que nãe é revestido cem pelipeptideo, (iii) mistura do agente de enchimento revestido com pcâpeptkfeç com outros aditivos; e (iv) aplicação de um aditivo de revestimento famiaceuticàmente aceitável 5 ao agente de enchimento revestido com polipeptideo. A composição farmacêutica final pode ser colocada em cápsulas (por exemplo, cápsula de gelatina) ou usada para formar comprimidos.

Em outra modalidade, a composição farmacêutica é preparada por secagem por atomização, que é uma técnica usada para preparar as 10 micropartículas (por exemplo, microcápsulas ou miçfoésferes) de fámiacos...

Peptideos secados por atomízaçãó geralmente retêm sua atividade biológica mediante dissolução e podem ter características físicas úteis, incluindo um tamanho de partícula uniforme e uma forma esférica. Além disso, as micropartículas preparadas por secagem por afomizaçâo são frequentemente de 15 fluxo livre, as quais são úteis para os processos de fabdcação farmacêuticos tais como formação de comprimidos e preenchimento de cápsulas. Processos de secagem por atomizaçio são também úteis porque podem ser prontamente escalados para fabricação clínica e comercial.

Assim, esta descrição possuí um método para preparar uma 20 composição farmacêutica que ççmpreende linaclotidé ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, o método que compreende' (a) fornecer uma solução, por exemplo, uma solução çígãnkte ou aquosá, quê compreéndê: (I) línaduhda óu um sal farmaceuticamente: aceitável da mesma: e (li) um cation selecionado de Mg⁴*, Ca³*, Zn⁴*, Mf^*_t. Κζ Na* oo Al³* e/ou oma àmi25 na primária: estericamente impedida (por exemple, teucina) e (b) secagem por atomfração a solução contendo linaclotida para produzir micropartícuías. A solução contendo linaclotida pode opcíonalmente incluir um polímero, tais, come um ou mais dos aglutíuantes descritos aqui, um lipídeó nu fqsfolipldee, efou um agente de enchimento, tel como manítol O método pede opcional30 mente incluir uma ou mais etapas adicionais de: (í) mistura de micropartícuias de linaclotida com um agente de deslizamento farmaceuticamente aceitável, um lubrificante farmaceuticamente acóítàvel ou um áditivo fàrmaceuti25/53 camente aceitável que age como ambos um agente de deslizamento e um lubrificante; (li> mistura de mícropartínulas com um agente de enchimento, e/ou (W) mistura de mícroparticuias com outros aditivos, A composição farmacêutica final pode ser colocada- em cápsulas (por exemplo, cápsula de 5 gelatina) ou usada pára formar comprimidos.

Em outras modalidades, a composição farmacêutica é preparada por liofilízaçâo por pulVérízaçáo·, processamento dè fluído supercrltico ôu líoffcação de uma solução, por exemplo, uma solução aquosa ou orgânica, que compreende: (i) línacfotlda ou um sal farmaceuticamente aceitável da 10 mesma; e (íi) um eâifon selecionado de Mg²*, Oa²*, Ζη²ζ Μη*ζ. Κζ Na* ou AF* e/ou urna amina primaria estencamente impedida (por exemplo, leusína).

Em algumas modalidades, a composição de íinaclçtida é fornecida em uma forma sólida para administraçã© oral. Exemplas de tais formas 15 incluem, sem limitação, um comprimido, um sechê, um pêiefe, uma cápsula nu um põ. Em algumas modalidades, as composições podem ser usadas para criar formas de dosagem; unitárias, por exemplo, comprimidos, cápsulas, saches ou péletes. Éómposições administradas oralrnerHe podem incteir, por exemple, aglutinantes, lubrificantes, diluenies inertes, lubnficantes, adife 20 vos de dispemãn ou de superfície ativa, aditivos aromatizantes, e umectantes. Formulações administradas oralmente, tais somo ©s comprimidos podem opcionaímente ser revestidos ou estocados e podem ser formulados de modo a fornecer ema hbemção de linaclotida controlada, atrasada ou sustentada aqui. A hnaclotida poda ser co-adminístrada ou co-formulada com 25 outras medicações. .Em uma modalidade, a -composição de linaclctida pode ser eo-acministrac<s com outras medicações usadas para tratar distúrbios gastrointestinais. A composição de linaclotída pode também ser usada para tratamento de distúrbios fora do traio gafroíniestínai, tais como insuficiência cardíaca nongestíva e hipertrofia benigna da próstata.

As composições podem incluir, por exempla, vários solventes ãdidonais, díspersantes, ravestimentos, aditivos promovendo absorção, aditivos de liberação controlada, e um ou mais aditivos inertes (que incluem, por exemplo, amidos, polWs, aditivos de granulação, celulose mícrucnstaiina, diluentes, lubrificantes. aglufinantes, aditivo® de desintegração,. e similares! etc, Se desejado, as dosagèns de comprimido das composições descritas podem: ser revestidas por técnicas não-aquesas ou aquosas padrão, Com5 posições também podem ihéWr, por exemplo, adíWos antíaglçmerantes, conservantes, aditivos edulcorastes, corantes, aromafeantes, dessecantes, plastiíWntes, corantes, e similares.

Desintegrantes adequados incluem, por exemplo, ágar-ágar, carbonato de cálcio, celulose mícrocristalina, crescarmelose de sódio, cros10 pcvidona, pcvidona, polacnlin de potássio, amido glieoiate da sódio, amido de batata ou tapioca, outros amidos, amido pré-gelaiinixadç, argllas, outras alpinas, outras celuloses, gomas, e misturas dos mesmos.

Lubrificantes adequados indudem, per exemplo, estearato de cálcio, estearate de magnésio, óleo mineral, óleo mineral leve, ghoenna, sor15 bitol, manitel, poliétiléno glicol, outras glicêis, ácido esteànco, lauril sulfato de sódio, talco, óleo vegetal hidrogenado (por exemplo, óteo de amendoim, Óleo de algodão, oleo de girassol, óleo de sésamo, çleo de oliva, óleo de míiho a óleo de soja), estearate de zinco, deato do etila, laurato de etila, ágar, sílicagel de síloide (AEROSIL 200. W.R. Grace Ço., Baltimore, MD USA), um ae· 20 rossol coagulada de sito sintética (Evonik Degussa Co,, Piano, TX USA), um dióxido de silício pirogêníw (CAB-O-S1LA, Cabot Co.,. Boston, MA USA), ® misturas dos mesmos.

Agente de dõshzamentos adequados incluem:, por exemplo, leudna, dióxido de sdicio colddaí, trissiücaio de magnésio, celulose em pó, a25 rnído, talco, e fosfato tribaslca de cáldõ,

Aditivas antiagíomerantes adequados incluem, por exemplo, silicate de cálcio, silicate da magnésio, dióxido de sílída, dióxido de silício caloidal, tálco, e misturas dos mesmos.

Aditivos antimicrãbísnos adequados que podem ser usados, por 30 exemplo, como um conservante para as composições de foaciotida, incluem, por exemplo, cloreto de benzalcônío, cloreto de benzetõnío, âcído benxoico, álcool de benzila, butil parabene, cloreto de Getilpiridínio, cresol, cloro

27Z53 butanol áckfo de de-hidroacètfòô, etílparabeno, metilpárabono, fenol, álcool de feniletlla, fenoxletanol acetato de fenilmercurio, nitrato de fenilmercdrio, sorbató de potássio, propilpárabeno, bèázoatò de sódio, de-hidruacefato d© sódio, propionate de sódio, ácido sõrbico, timersoi, time. e misturas dos 5 mesmos.

Aditivos de revestimento adequados incluem, por exemplo, carboximetil celulose d© sódio, ftalato de acetato de celulose, etileelufose. gelatina, esmalte farmacêutico, hidroxipropil celulose, hidroxipropil metilcelulóse, ftalaio de hidrpxipropil metil celulose, mofílcelulgse, políetlteno glicol, ftalato 1Ô d© acetato d© polivmila, goma-laca, sacaresç, dióxido de titanic, cera de carnaúba, cera mícrocnstallna, e misturas dos mesmos. Revestimentos d© proteção adequados incluem Aquaooat (por exemplo, Aquaceat Etilceíufose Aguaeous Dispersion, 15% em p/p, PMC Biopolymer, ECD-30), Eudragit (por exemplo. Eudragít E PO PE-EL, Roehm Pharma Polymers} e Opadry (por 15 exemplo, Opadry AMB dispersion, 20% era p/p, Cotercon),.

Em determinadas modalidades, os aditivos adequados pars uma composição de linaclotída incluem um ou mais de sacarose, talco, ©steárato de magnésio, crespovidona ou BHA,

Em determinadas modalidades, o termo ”95%” pode ser 95,0%, 20 o termo pode ser 90,0%, o terrao ^<!10%^tt pode ser 10,0%, o termo ^!i9%” ppde ser 9,0%, o termo ”8%*’ pode ser 8,0%, o termo ’7%^<! pode ser 7,0%, o termo ^!!6%” pode ser 6,0%.. o termo ”5% pode? ser 5,0%, o termo ^ί14·%” pode ser 4,0%, o termo ”3%“· poda ser 3,0%, c termo 2%> pode ser 2,0%, e o termo ‘Ί %” pode ser 1_:0%.

25. Em determinadas modalidades, a composição de linaciotida é fornecida, em uma forma de dosagem unitária. Em algumas modalidades, a forma de dosagem unitária é uma cápsula, um cumprimido, um sachê, um pélete ou um pó. Em tal rnodalidade, a terms de dosagem unltána é uma cápsula ou comprimido. Tais formas de dosagans unitárias podem estar can30 tidas em um tecepienfe tal cerno, sem limitação, um. papel ou caixa de cartão, um frasco de plástico ou de vidro ou jarra, uma bolsa com techo (por exemplo, para manter uma ’’recarga” de comprimidos para colocar em um

23/53 reoepiente diferente), óu urn pacote de blister com doses individuais pars pressionar para fora do pacote de acordo com um crcnograma terapêutico. Ê possível que mais dè um receptentê possa ser usado junto em uma única embalagem para fornecer uma forma de dosagem unitária. Por exemplo, 5 comprimidos ou cápsulas podem estàr contidos em um frasco que por sua vez ã contido dentro de uma caixa. Em algumas modalidades, as formas de dosagens unitárias são: fornecidas em um recepíente adicional que compreende um dessecánte. Em uma modalidade adicional as formas de dosagens unitárias, por exemplo, uma quantidade de comprimidos ou cápsulas, são 10 fornecidas em um receptente, por exemplo, um frasco, uma jarra ou umà bolsa com fecho, contendo um dessecánte. Em uma modalidade adicional, o reoepiente contendo uma forma cte dosagem unitária é embalado com instruçôes de .administração ou dosagem. Em determinadas modalidades, uma composição de linactotida è fornecida em um kd. Urna composição de tina·· 15 çtotlda descrita aqui e agentes de terapia d® combinação podem ser embalados como um kit que Incluí doses únicas ou múltiplas de dois ou mais agentes,, cada um embalado ou formulado individualmente, ou dóses únicas ou múltiplas de dc-is ou mais agentes embalados ou formulados em combinação. Assim, a composição de linactotida pode estar presente em um pri20 melra recepiente, e o kit pode opcionalmente incluir um ou mais agentes em um segundo recepíente. O recepsente ou recipientes são colocados dentro de uma embalagem, e a embalagem pode opcionalmente incluir instruções de administração ou dosagem.

i®a

Os seguintes examples da presente invenção são meramente í~ lustrativos e não devem ser küerprçtedoò como limitando o escopo da invenção de quáiquer maneira como multes variações e equivalentes que são abrangidos pote presente invenção se tomarão aparentes para aqueles versados na técnica da presente descrição,

Linactotida ou um sai farmaceuticarnente aceitável da mesma pode ser produzida e purificada usando técnicas padrão conhecidas na área, por exemplo, sínteses químicas ou expressão recombínante seguida por e

W53 purificação usando técnicas padrão.

.ÍãálíêBMJ..^.Eomiyaçãq.A £BMâ^ê„áâ„SâfctíS..dê„&2SS&®flM Aproximadamente 32 g a 42 g de água purificada são misturados com ácido clorídrica para criar 5 uma solução com um pH entre 1,5 a 2,0, O cation, se usado, é adicionado ã solução em uma quantidade para fornecer a concentração desejada, e a solução é misturada durante um período suficiente para produzir uma solução clara. A amina primária esferiçamente impedida, se usada, é adicionada à solução em pma quantidade para fornecer a concentração desejada e a. sold loção é misturada durante um período suficiente para produzir uma solução clara. Outros aditivos, tais como os antioxídantes são, então, adicionados, se desejados. O pH da solução é testado, e ácido cloddríco é adicionado, se necessário, para produzir uma solução tendo um pH entre 1,5 e 2,0. O aglutinante ê, então, adicionado á solução e a mistura é, então, agitada durante 15 um período suficiente para alcançar uma solução clara. A quantidade desejada de línaclotida é adicionada à solução e misturada durante 30 a 100 minutos pata fornecer a solução de revestimento.

Preparação.das^Qontes^Atívas: Aproximadamente 30 a 36 g de cantes de celulose mlcroeristeíina secas são adicionados á um Mini Revesfi·· 20 dor de Leite Fluido de Coluna, As contas de celulose micmçristelina são fluidizadas e aquecidas antes em camadas. A seguir, a solução de revestimento é colocada em camadas pata as contas. A temperature de pulverização ê mntolada entre 24*0 e 55*C cántralandc a temperatura de entrada, taxa de pulverização, pressão de atomízação, e volume de ar, Apàs a solução de 25 revestimento inteira ser qolooda em camadas para as contas, as contas são secadas. O produto deste processo e denominado contas ativas,

Preparação das cordas ativas com Revestidor Protetor: Aproximadamente 35 g de contas ativas são adicionados a um Mini Revasiidor de Leito Fluido de Coluna. As contas ativas são fluidizadas e aquecidas antes 30 do revestimento com Aquacoat (por exemple, Aquacoat Etilcelulose Aquaeous Dispersion, 15% em p/p< FMC Biopolymer. ECD-3Ô), Eudragit (por exemplo, Eudrãgit E RO PE-EL, Roehm Pharma Polymers) õu Opádry (por

30/53 exemplo, Opedry AMB dispersien, 203¾ pm p/p, Colorcon). A seguir, a scluçãc de revestimento é colocada em camadas para as -contas. A temperatura de pulvèrízaçâo é controlada entre 24X e 55’C úontmlando a temperatura de entrada, taxa de pulverização, pressão de atamãraçãç e volume de ar.

Após a solução de revestimento inteira ser çolocada em camadas para as contas, as contas são secadas.

Esquema de Formulação B

Preparação da Solução, de. Revestimento: Aproximadamente 8,3 kg de água purificada são misturados com ácido clorídrico para criar uma 1'0 solução com um pH entra 1,5 e 2,0. O cation, se usado, é adicionado á solução em uma quantidade para fornecer a concentração desejada, e a solução é misturada durante um período suficiente para produzir uma solução clara. A amina primária estericamente impedida, se usada, é adicionada à solução em uma quantidade para fornécer a concentração desejada, e a solução é 15 misturada durante um período suficiente para produzir uma solução clara.

Outras aditivos, tais como os antfoxidantes são, então, adicionados, se desejadas. O agiutinante é, então, adicionado â solução e a solução é misturada durante urn período suficiente para alcançar uma solução dara, O pH da solução é testado e ácido clonddco é adicionado, se necessário, para produ20 :zir urna solução tendo um pH entre 1,5 e 2,0. Esta é a Solução 1. Aproximadamente O kg de água purificada são misturados com ácido ctorídricó para criar uma solução com um pH entre 1.5 e 2,0. A quantidade desejada de línadotida é adicionada à solução e misturada durante 10 a 30 minutos. O p-H da solução é testado, e ácido clorídrico é adicionado se necessário para 25 produzir uma solução tendo um pH entre 1,5 e 2,0 Esta è a Solução 2. Solução 1 e Solução 2 são, então, misturadas juntas. O pH da solução ê testa do, e ácido doridnco é adicionado se necessário para produzir uma solução tendo um pH entre 1,5 e 2,0. Esta é a solução de revestimento.

RteOteçlp. das.Atentas.Ativas;. Aproximadamente 24,10 kg de 30 contas de celulose microcfístalina são adicionados a uma Coluna de Wuraíer de um Glatt GPCG-30 Fluid Bed. As contas de celulose micrócristalina são tiuídizadas e aquecidas para produzir temperatura de 45 a 47*0. A seguir, a

31/53 solução de revestimento é ootocada em camadas para as contas. A temperatura de pulverização do produto é controlada entre 37*0 e 47© Controlando a temperatura de entrada, taxa de pulverização, pressão de atomização, e volume de an Apõs, a solução inteira de revestimento é colocada em camadas para as contas, as contes são secadas com uma temperatura de pulverização do produto de 37C a 47©, O produto deste processo e denominado como contas ativas.

41.5LPrepatiçto..de.Fprmu|ãçõés.de.ynaçigtya

As formulações de línaclotida dos Exemplos 1 a 15 foram produzidas essencialmente como deserto rfo Esquema de Formulação A em que a Tabela 1 fornece as quantidades de çátion, amina primária estericamente impedida, aglutinarto, toacletída e coutas, enquanto a Tabela 2 fornece as condições sob as quais as contas foram revestidas:

Jâbetel

Exemplo	Quantidade de Cátion ir	Quantidade de Amina □	Quantidade de Ag 1 ut inant e	Quantidade de Linaclofi- x<x da	Quantidade de ©on-; tes
	CaCh^HaÕ 0,8740g W]	Leudna 0,2006g [20]	Hlpromelose I.OWg	0,1282g	Celphere CP-305
2	CaCL2H?O 0,6740g [60]	Leucine 0,3007g [30]	hjprome- lose 0,3063o	0,1329g	©elphere i CP-3D5 ; 33,87g
1 3	CaCb,2H 0 0.2247g [20]	Leucma 1,002g [100]	hipromelose àOSSSg	0<1282g	Celphere ; CP-305 ; 33,86g
4	GaCI?.2H?Q 1,123g [100]	leucina 0.20G5g [201	hipmrnelose 1,969g	0.1262s	Celphere ; CP-305 32,36g
5	©aQb.2HgQ 0,4493g [40]	Leucina 0,4009g	hípromelU se 0,3425g	0.1282g	Celphere CP-305 33,78g
8	MgChíW) 0.2590g [10]	Leucins 0.334lg [29]	nípromelose 0,6636g	0,2100g	Celphere CP-305 33,83g

32/53

Exemplo	Quantidade de Cátion ir	Quantidade de A~ mina JJ	Quantidade de Agíutinante	Quantidade de Linaclotída* **	Quantidade de Contas
7	ZnÃciH^Õ 0s2790g [101	Leucina 0,3341'g [20]	Mpromol©se 0 6ô36g	0.2 WSg	Celphere CP-305 33s82g
8	N/A	Leucina 0,8944g [27]	p % G g S f I	0,4387g	Celphere CP-305 33,40g
9 ...........................	CaClj.2H2O 0,3745g [101	N/A	hipromelose Q,6636g	Ô,4227g	Ceíphere CP-305 33.83$]
10	N/A	N/A	hipromelo- se 0,6811g	0,2114g	Celphere CP-305 34.28g |
11	N/A	N/A	hipromelose 0,6636g	0,42270	Celphere CP-305 34,l3g
12	CuCE,2H..O 0.4342g [10]	N/A	hiprameíose (W36g	0,4227g	Celphere CP-305 33,79g
13	ZuAc,2M-0 0,5590g [10] '	N/A	hípramato se Ô.663eg	0,4227c	Celphere CP-305 33,68g
14	MgCI?>6HsO 0,5178g [101	N/A	hspromelcs· se 0,6636g	0,4227g	Celphere CP-305 33,72.g
15	N/A	Metíonina (},0-38()g [1] '	Ivprome lose (}.6636g	0,4387g	Celphere CP-305 34,08g |

* “Cation* refere-se a© cátíun divatente contido no sal usado no exemplo, Amina’' refere-se à amina primàna estencamente impedida, [] refere-se a uma razão molar decátion efou amina para linaclotida.

** A quantidade de linadótida neste e em todos os seguintes Exemplos é determinada com base no conteúdo do peptlden e na pureza cromatográfica como listados no Certificado de-Análise fornecido para cada lota fabricado do Ingrediente Farmacêutico Ativo de Línadotida (API),

33/53

Exemplo	Temp, de puivar. do produto (:>C)	Temp, de entrada f:C)	Taxa de pulver, (ml/mm)	Pressão de atomifação fow)	Fluxe de Ar
1	34,0 - 37,0	55,7 - 57,7	0,33 - 0,40	20	Baixe
2	27,4 - 32,3	37,01—42,1	0,40	22	Baixe
3	32,6 - 34,7	60,0-60,1	0,33 - 0.40	20	Baixe
4	35,3-39,3	58,3-59,2	0,40	18	Baixo
5	27,8-27,3	58,7-59,8	0 35 - 0.33	20	Baixo
6	32,1 -33,3	42,0 - 53,4	0 39 - 0.75	22	Baixo
7	31,7-39,3	50,0-52,5	0 27-0.57	22	Baixo
8	33,3-41,3	50,5 - 57,0	0 57 - 0.65	22	Baixo
9	33,2-40,0	49,5 - 58.7	0,82 - 1.00	20	Baixo
10	42,5	59,5	0.49	22	Baixo
11	39,7	52,0	0.68	22	Basxo
12	30,6 - 40,0	47,2 - 54.8	0,65-0,75	20 22	Baixo
13	32,4	57.4	0.65	22	Baixe
14	34,0	43,0	0.75	20	Baixç {
15	24,1 -39.9	48.5-55,9	0.33-0.85	22-23	Baixo |

A formulação de linadotida d© Exemplo IS fol produzida essenclaimants cama descrite » Esquema de Formulação 8 em qua a Tabela 3 fomace as quantidades de oafton, amína primária estenoamente impedida, aglutinaste, linadatida e contas, enquanto a Tabela 4 fornece as condições sob as quais as contas foram revestidas:

Tabela 3

i Exem- i	Quantidade de Cátion Π	Quantidade de Amina Π	Quantidade [ Quaniida·· deAglub- I de de l..inante | naclotída	Quantidade de contas Celphere CP-305 24.19 kg
16	CaCls 2H;=O 385/1 g	Leucinã 171,8 g [3òf	hipromelo- | 73,5 g se 175,0 g J

34/53

Exem xemplo	Temp, de pulver. do produto	Temp, de en- UwU« CO	Taxa de pulver. (g/mín)	Pressão de Atomização (bar)	Processo de Volume de ar (cfm)	Temp, de secagem do produto ra
16	64,9 - 65,1	W	150	2,0	515-564	54,9 —55,0

A formulação de llnedotida de Exemplo 17 foi produzida essen cialmente como deserta no Esquema de Formulação A exceto que a formu5 lação continha 22,B6 mg de hidroxianisol butilado (BHA). em que a Tabela 5 fornece as quantidades de cation, amina primária estericamente impedida, aglutínante, Ifaactotida e contes, enquanto a Tabela 6 fornece as. condições sob as quais as contas foram revestidas. Tabeía.5

Exem xempio	Quantidade de Cation (1 ;	Quantidade de Amina 11	Quantidade de Aglutinante	Quantidade de I.Jnadotida	Quantidade de contas
17	CaChJHaO ; 0,3745g w	N/Á	hipromelo·' se 0,S636g	0.2100g	Celphere CP-305 33,93g

Exem-	Temp, de	Temp, de	Taxa de	Pressão de	F nxo
pie	pulver. do	entrada	pulver.	Atomização	de Ar
	produto (<;C)	{ C)	(mt/min)	(psig)	Baixo
17	33.5 - 34.3	47 ? - 48,6	0,56 - 0,74	25	Baixo

Exemplo ..18:..Prmmcâo..de Cápsulas Opntendo Formufaçao dé

O conteúdo de Imaclotida em contas ativas pude ser medido como descrito no Exemplo 21 ou por outros métodos equivalentes.

Para formar cápsulas adequadas para administração oral,, uma quantidade apropriada de contas ativas é usada para preencher as cápsulas de gelatina (por exemplo, cápsulas de gelatina de tamanho 2). Uma quantidade apropriada de contas ativas pode conter 50 pg a 2 mg da llnaclotida

35/53 por cápsula com uma faixa de ± 5%. Em algumas modalidades, a quantidade apropriada de iinaciotida em contas ativas pode ser 50 pg, 67,5 pg, WÔ pg, 133 pg, 150 pg, 200 p§, 266 pg , 36Õ pg, 460 pg, 500 pg, 000 pg, 700 pg, 800 pg, 000 pg; 1 mg, 2 mg, 4 mg eu 6 mg, Em uma modalidade particular; a 5 quantidade apropriada de linadlotídá em contas ativas é 67,5 pg, 1.00 pg, 133 pg, 150 pg, 200 pg, 200 pg, 300 pg, 400 pg, 500 pg, 600 pg, Em uma modalidade mais particular, a quantidade apropriada de linaolofida em contas ativas é 67,5 pg, 133 pg, 150 pg, 266 pg ou 30Q pg por cápsula.

Em outra modalidade, uma quantidade apropriada de contas ati10 vas para preencher um número desejado de cápsulas de gelatina é esteada em um recepiente, Um ou mais agente de enchimentos farmaceutíoamente aceitáveis ou outros aditivos farmaceuticamente aceitáveis podem ser adicionados, se desejados, ao recepiente, Em algumas modalidades, um agente de enchimento ou aditivo é talco, leucína, celulose microcrístelina ou marti15 tol, Gs conteúdos do recepiente são misturados e a mistura é usada para preencher as cápsulas de gelatina com uma quantidade apropriada de contas ativas contendo linaclotida (por exemplo, 50 pg a 2 mg de íinaclotida por cápsula cem uma faixa de ± 5%).

Em uma modalidade alternativa, uma quantidade apropriada de 20 contas ativas é usada para preencher as cápsulas de gelatina e um ou mais agente de enchimentos farmaceuticamente aceitáveis ou outros aditivos farmaoeuticamente aceitáveis sáo adicionados ás cápsulas de gelatina,

Unscteda

Preparação da solução de revestimento: Primeiro, 41,98 g de água punficada foram misturados cura 1,13 g de ácido clorídrico a fim de criar uma solução oom um pH entre 1,5 e 2,0. A seguir. 7,49 g de hidrato de cloreto de cálcio e 6.58 g de leucína foram adicionados à solução, a qual fo; então misturada durante 3Q minutos a fim de produzir uma solução ciara. 0 30 pH foi testado e 1,0 g de ácido clorídrico foi adicionado para produzir uma solução tendo um pH entre 1,5 e 2,0. A seguir, 13,27 g de hipromelose (hidroxípropil metilceiuíose; Dow Chemical Company; Midland, Ml) foram adi

36/53 cionaçlos à solução e a mistura foi agitada durante 69 minutos para alcançar uma solução ciara, A seguir, 4,39 g da uma linaolotida foram adicionados à solução e misturados durante 90 minutos. 0 pH da solução foi de 1,73, Esta foi a solução de revestimento.

Preparação de contes ativas: 674,5 g da contas de celulose microcnstalina (Celphere CP-305; Ashai Kasei Corporation (Tóquio; Japão) foram adicionados a uma Coluna de Wurster de um Leito de Fluido Glatt GPCG-2. As contas de celulose mlçrocristalina foram fluldizadas e aquecidas durante 30 minutos a uma temperatura de produto de 60°C. A seguir, a 10 solução de revestimento foi colocada em camadas para as contas, A temperatura do produto foi controlada entre 45^eC e 49°C por uma temperatura de entrada de StFC, taxa de pulverização de 5,0 a 11 g/min, uma pressão de atomízação de 2,0 bar, e volume de ar de 40 a 50 π/h. Apôs, a solução de revestimento total foi colocada em camadas para as contas, as cantas foram 15 secas durante W minutos com uma temperatura de produto de 46,9*0 a 50.9^t:G. O produto deste processo foi referido como as contas ativas.

Crcmátógmfiá líquida de fase reversa de llnaclotida extraida de uma formulação preparada como descrita anima demonstrou que a íinaulotída extraída e uma linaclotida de referência padrão exibiu o mesmo tempo de 29 retenção o que não houve mudança significativa na pureza como um resultado: do processa dá formulação.

Para formar cápsulas, 49,59 g de contàs ativas fôrarn adicionados a um saco desobstruído, A seguir, 0,25 g de leucina, selecionada através de uma tela de malha 60, foi adicionado ao saco. O saco foi amarrado e 25 misturado por 125 voltas a fim de misturar todos os materiais, A seguir, 0,25 g de talco, selecionado através de uma teia de malha 60, foi adicionado ao saco. O saco foi amarrado a misturado por 125 voltas a fim cfe misturar todos os materiais. Depois de todos os materiais serem misturados, a mistura foi usada para preencher as cápsulas de gelatins de tamanho 2 ao pese alvo de 227 mg/fcâpsula com uma faixa de ± 5%, gxemplg.20:J/reperagãq.de.Cápsutes..Cgntsndp.fterrnulação de

Lmacfohda

Contas ativas foram preparadas de acordo acra a Exemplo 16. As contas ativas foram testadas para o conteúdo de linaclotida. Com base nô ensaio das contas ativas, ema quantidade apropriada de contas ativas (98 mg - 123 mg) foi preenchida no tamanho 2 de cápsulas de gelatina du6 ràs usando uma máquina de encapsuiaçlo Futura MG2_t para alcançar uma concentração de linaclotida de 300 pg.

Contas ativas tbram preparadas de acordo com o Exempla 15. As contas ativas foram testadas para nçnteudo de linaciotída. Com base no ensaio das contas ativas, uma quantidade apropriada de contas ativas (48 10 mg - 62 mg) foi preenchida no tamanho 2 de cápsulas de gelatina duras usendo uma máquina de encapsulação Futura MG2, para alcançar uma concentração de linaçlctída de 150 pg

Exempla 21' Medição de Conteúdo e Pureza de. Linaciotída

Conteúdo e pureza de linaciotída, assim como a medição de 15 substancias relacionadas à llnaciotida podem ser determinados por crematográfia líquida de gradiente de fase reversa usando um Sistema 1100 LG de Série Agilent cem Chemstation Rev A,09.03 software ou equivalente. Uma coluna de YMC Pro^?M C13 (dimensões: 3,0 χ 150 mm, 3,5 um, 120 A; Waters Corp., Milford, MA) ou equivalente é usada e é mantida a 40*C, Fase 20 movei A (MPA) consiste em água corn 0,1% de ácido trífluoroacétfeo enquanto a fase móvel B (MPB) consiste em 95% de acetonitrite:5% de água com 0,1 % de acids tnfluoroacético. Eluição de Imackteda e suas substâncias relacionadas são realizadas com um gradiente de 0% a 47% de MPB em 28 minutos seguido por uma rampa a 100% de MPB em 4 minutos com 5 mine25 tos mantidos a 100% de MPB para lavar a coluna. O reequillbrio da coluna é realizado executando a 0% de MPB em 1 minute seguido por 10 minutos mantido a 100% de MPA, A taxa de fluxo é Ô,8 mL/mín e a detecção é realizada por UV a 220 am.

Amostras para análise são preparadas pela adição dos conteú30 dos de cápsulas de linaolotlda a 0,1 de N. HCI para obter uma concentraçãoaivo de 20 pg d® iinaclotida/mL· 100 pl desta solução são injetados na coluna.

38/53

Conteúdo de linaclotída é medido determinando a concentração de linaclotida na amostra preparada contra uma iinantóída externa padrão preparada similarmente..

Um exemplo de uma análise de linactotida por HPLC é mestrado 5 na Figura 1, em que/OxidaçãrP refere-se ao produto de oxtdaçãê de linaclotida, Tormaldeido Imina·’ refere-se ao produto de imina formaídeidc de linadetida e ’’Hídrelíse” refere-se produto de hídrólise de linaclotida.

Exemplo 22: Teste de Estabilidade de Formulação de Linaclotida

Para as formulações de Exemplos 1-15 e 17, cápsulas de gelati10 na foram preenchidas com aproximadamente 225 mg de contas ativas. Cinco cápsulas preenchidas furam colocadas em frascos de plástica. Os frascos continham de 1 a 2 g de desseçante e foram selados por indução. Os frascos foram estocados a 4(TC/75% de umidade relativa por seis meses.

Conteúdo © pureza de linaclotida assim como a quantidade de 15 substâncias relacionadas à iínaclotida foram medidas essencialmente como descritas no Exemplo 21 ou por método equivalente. Resultadãs são fornecidos na Tabela 7.

Tjbeia.’Z.
Exem- §	% Inicial	1 *	7$ de área po	' HPLC
i pio 1	de Ensais	> Ϊ Linaclotida.	Oxida- Ϊ	Hídróií- | Formaidei-
	[p/p]	s (% Inicial)	cão	ses j da Imina
l· 1 1	107,56	| 96,88(99,13)	0,11 i	0,24 J 0,19
I 3 1	98,87	| 97.36(99,42) [ 95,61 (97.83)	0,07 <	0s52 | 9,15
i 4 |	95,67	0,10 |	0.16 I 0,24
1 § |	103,41	I 95,87(98.68)	0.07 I	0.25 | 0,24
	99.46	| 93,04(95,51)	0.14 J	OJO I 0,55
i 7	98.64	| 93,44 (95,38)	0.45 |	1.45 I 0,63
8 ]	92,81	| 88,20(94.90)	0.,37 [	1y85 j 0,49
| 9 |	93,53	| 93,81 (96,55)	0.2 I	0,41 I 1,06
| io |	77,12	[ 84,85 (87,77)	0 37 |	0,29 | 4,45
i 11 1	86.73	i 89.09(91.63) ....4—.....................	1,18 I	0.49 I 1,38
1 12 ΐ	33.60	| 41.98(43.15)	ND |	ND | ND

| 13 | 87,69 [ 91,91(94.01) | 1.98 | 0.74 | 0.86

I 14 | 86.94 | 90,59(92.70) | 0.25 [ 0.54 [ 1.23

39/53

Exem- I % Inicial	Ϊ	% de área por HPLC
pio | de Ensaia	Linaclotida	i Oxida- I Hidtóll· : Formakteí-
| ί,ΡΦΙ	i (% Inicial)	| çãc 1 ses | do imina
15 87,71	| 87,54 (93,24)	í 0,24 | 0.66 | 1,67
17 | 98,94	| 93,65 (95, bto	NO 1 0,32 i 0.73

Para as formulações do ( xomplo-16, cápsula® de gelatina foram preenchidas com aproximadamente 113- mg de contes totais. 35 cápsulas preenchidas foram colocadas em frascos de plástica Os frascas continham 2 g de dessecenté e foram selados por indução. Os frascos foram, estocados 5 a 40*0/75 % de umidade relativa por um mês.

Conteúdo e pureza de linaclctída assim como a quantidade de substâncias relacionadas à linaclotida podem ser medidos essendalmènte como descritos no Exemplo 21 ou por um método equivalente. Resultados são mostrados na Tabela S.

Tabela 8

ί Exem- | % Iniciai ΐ		A de área por HPU	J·
| pio | de Ensaio |	l.ínaçiotida	Oxídaçào i Hidré	í- i F	ormaldeí- J
i [pfol	i% Inicial}	| ses	i	io Imina |
| 16 | 97.01 |	97,12 (99,79}	«0,1 I <0,1		0,34 |

Exemplo 23: Isolamento e Preparação de Produto de Hidrólise de..Linac|qtida

O produto de hidrólise de línaclotida ocorre como uma transformação de Asn na posição 7 para Asp (a numeração de hnaclcíida micia com 15 1 no N-terminal de Cys). Sua estrutura é descrita abaixo:

R Cys Cys Glu-Tyr Cys-Cys-,Asp“Prc-Aia-CyS“Thr-G(y-CyS'Tyr-OH

I L·™---------------------------1-----------f“S“S..............................^J í

O produto de hidrólise de linactotída foi sintetizado independem temente para a confirmação de identidade usando técnicas de sínteses de peptideo de tese sóhda padrão, O produto de hidrólise de linaclotida também pode ser preparado por outros métodos conhecidos na técnica , por exemplo, 20 por isolamento de preparações de linaclotida usando técnicas cromatográficas ou per expressão recembinante de um ácido nucleic© codificando o pro

40/53 duto de hídrõlise de linadotida (Gys Cys Glu Tyr Cys Gys .Asp Rm A!a Cys Thr Gly Cys Tyr), opcionalmente seguido por oxidação de resíduos de cistetna para formar íigaçõés de dissulfeto.

Isolamento e Preparação de Produto de imina for* ntefoeidu deltadotfcla

O produto de imirra formaldeido ocorra como a adição de uma imine so N-terminal de Cys (Cyst) através de urna reação mediada por formaldeídc. Uma estrutura proposta do produto ê descrita abaixo;

H2C'Cys-Cys-Glu-Tyr~CySCyto~Asn~Pru~Aía~Cys~Thr~Gly-Cys-'Tyr~OH

G produto de ímina formaldeído de Hnaclotída foi independentemente sintetizado para confirmação da identidade reagindo linautotida corn fermaldeído (1:5 razão molar) em etanol absoluto à temperatura ambiente durante 4 dias. O produto de imína formaldeído também pode ser preparado por outros métodos conhecidos na técnica, por exemplo, por isolamento de preparações de linaciotida usando técnicas cromatográfícas ou por sínteses de peptídeo químico ou expressão reocmbinante de um ácido nucteico oodP ficando linaclobda seguido por formulação como descrito aqui ou por outros métodos conhecidos na técnica, opcionalmente seguidos por oxídação da resíduos de císteína para formar ligações de dissulfeto,

Exemplo 25; Isolamsmto e Preparação de Produto de Oxidação de Línaciotida

O produto de oxidaçüe de linacíotlda tem um peso motecufár de 1542,8. Q produto de oxidaçào mais provavelmente se forma como a adição de um átomo de oxigênio unicu a um dos seis enxofres de císteíníla em iina~ detida. Uma estrutura potencial do produto ê descrita abaixo, embora um versado na técnica reconhecerá que o átomo de oxigênio pode ser unido a qualquer um dos outros cinco enxofres:

H-Cys-Cys-Glu-TynCys-Cys-Asrr-ProAla-C-ys-Thr-Giy-Cys-TyoOH

Para suportar esta identificação, o produto de oxidação de Una detida foi produzida reagindo linaclptida com perâxkfo de hidrogênio (3% aquosc) à temperatea ambiente ou 40^BC por até 24 horas. O produto resultante é enriquecido no produto de oxidação por 1 a 103¾. O produto de oxídação de iinadotida também pode ser preparado por outros métodos coche5 cidos na técnica, por exemplo, por isolamento de preparações de linadotída usando técnicas cromatográficas ou por sínteses de peptídeo químico ou expressão reccmbinante de um ácido nucteico codificando linadotida seguido por çxidáçãa de residues de cistáfoa para formar as Hgações de dissulfé to seguidas por reação de línaclotida ççm peroxide de hidrogênio. ou reagen10 te de oxidação similar para formar o produto de oxídação de linaulotida,

Granulapão de Leito Fluido

Linaclotida, CaCb, feucina e poliviníi pirrolidona (WP) K39 foram dissolvidos em 0,0001 N HGI para formar a solução de revestimento: (vèr Ιοί 5 bela 9). Isomalte foi carregado para a bacia do leito fluído,. Com ftuidização do pó ísomalte, a solução da fármaco foi pulverizada superíomiente a uma velocidade dé ^IGg/min, com temperatura de produto de ~400C para revestir o pó com a solução de revestimento. Ao terminar a pulverização, os grânulos de línaclotida foram secos durante 30 minutos e o produto foi descer20 regado.

Tabela 9

Exemplo	Quantidade de Càtton u	Quantidade de Am ma □	Quantidade de Aglutinaste	Quantldadede Linadotrda	Quantidade dé Agente de enchimento
26A	CaCl;.2H;;O 15,4 g |60f	Leucina 6,9 g [30]	PVP K30 40 g	3,()8g	Isomalte 035 g

Difosfato de cálcio ou Avicéí foi também usado como agente de enchimento para granulação de leito fluido, êlioyl^oúmida

Línaclotida foi pesada e dissolvida sob agitação em 250 g de 0,1

N HCI (pH 1,7) para formar a Solução 1 (ver Tabela 10). CaCh e íeucina fo42/53 ram pesados e dissolvidos scb agitação em 100 g de 0, 1 N HGI para formar a Solução 2. Seleção 1 e Seleção 2 foram misturadas juntas sob agitação para formar a solução de revestimento. Avisei foi adicionado para a bacia de um granulàdor de alto cisalhamento. Com a mistura a 500 rpm, a solução de 5 revestimento foi adraonada em Avicel Ao terminar a adição da solução, os grânulos foram misturados e picados durante 1 minuto. Os grânulos úmidos obtidos foram carregados para a bacia de um leito fluído, e secos durante 15 minutos e, então os grânulos de linaclotida foram desoarregadus.

Tabela 10

Exemplo	Quantidade de Càtmn Π	Quantia de de Amina ii	Quantidade de Aglutinante	Quantidade de Linaclotida	Quantidade de Agente de enchimento
26B	QaCÇ.2H^) 7,68 g W	Leucína 3,42 g M	N/A	'1,540	Isumalte 488 g

He fórmula de granulação úmida, uma razão molar de CaCfe a leucina para llnaetotlda foi ajustada na faixa de 60 a 100 e 30 a 50, respectivamente. Também, sacarose foi adicionada em um exemplo. Ver Tabela TI. BWall

Exemplo	Resistência (Li~ naclotida/Age nte de enchimento)	Agente de enchimento	Caci/.Leu: Li- naclotída	Saca- rose	HCI
26C	600 pg/225 mg	Avicel	60:30.1	Nu	0.1N
26D	600 pg/225 mg	Avicel	80:40:1	No	0,1N
26 E	600 pg/225 mg	Amuei	100.50:1	No	0.1N
26F	600 pg/225 mg	Avicel	60:30.1	5%	0.1N

Formulação de Qompnmidé

Os· grânulos de linaclotida foram misturados com os seguintes exelpientes (ver Tabela 12) e comprimidos em comprimidos com uma dureza de 4kp.

r—™—— Função do Ingrediente	Peso em comprimido de 200 mg com 150 pg de Linactobda	Peso em comprimido de 422 mg com 300 pg de Linaclotida	Peso em comprimido de 800 mg com 600 pg de Linactebda	Pese em comprimido de 1600 mg corn 1200 pg de Linaclotida
Grânulos de Unaclotida API	53.4 mg	106,8 mg	213,6 mg	427,1 mg
Agente de enchimento de comprimida Isomalfe	134/1 mg	268.2 mg	536 4 mg	1072,8 mg
Desintegram te de Crospovidona	10 mg	20 mg	40 mg	80 mg
Lubrificante de estes rato de magnésio	15 mg	3 mg	S mg	12 mg
Agente de deslizamento de Talco	1 mg	2 mg	4 mg	8 mg
Total de ma- terial seco	?00mg	400 mg	800 mg	1600 mg

iscmalte, amido 1560 ou difosfeto de cálcio foi também usado como agente de enchimento de comprimido com base na fórmula acima (ver Tabela 13).

S IWÈJ3

G? anula-	Agente de en-	CaC-b.leuci-	Agente de enchimento de
ção	chimentc	na.íJnaclotida	Comprimido
Leito tluido	isomalte	60:30:1	isomalte
			amido 1500
			difosfato de cálcio
Leito fluido	Avicel	60:30:1	amido 1500
Granulaçié úmida	Avíceí	100:50.1	amido 1500

44/53

Granuleção	Agente de enchimento	CaCFdeuci- na.Unaclotída	Agente de enchimento de Comprimido
Granulação úmida	Avicel	60 30:1 + 5% sacarosfô	amido 1500

Após duas semanas de estocagem a 4(FC e 75% de umidade relativa, todos os comprimidos descritos na Tabela 13 exibiram os valores de ensaio de linaclctída maiores do que 90%.

Exemplos 27 a 53: Preparação de Formulações de Linadatsda

Ás formulações de línadotida de Exemplos 27-53 foram produzidas esseodaimente como descritas no Esquema de Formulação A e Exemplos 1 a 15. A solução de revestimento de linaclotide continha 0,7% de agiutmante (p/v) e a solução de revestimento foi pulwizada em contas de Celphere CP-305 como descrita nos Exemplos 1 a 15. Tabela 14 fornece e tipo de cation, amina e/ou outro excipients ao longo com suas razões molares relativas à linaclotida, assim como o tipo de agiutinante usado, enquanto Tabela 15 fornece as condições sob as quais as contas foram revestidas:

TabeteU

Exemplo	Çátion	Amina	Razão molar	Aglutinante	Aditivo
27	CaCI?»2HsO	.K.»	20:0:1	Hiprumeiose
28	MnCE*4H2O		20:0:1	Hípromelose
29	KCI		20Ό. 1	Hipromelose	-->· i
30	AICI3*6HxO		20'0' 1	Hiprcmelcse
31	CaCl2*2H2O	Leucina	60-30:1	Hipromelose
32	Alginate de ' Ca	L.eucina	60:30:1	Hipromelose	-A.
33	CaHPCU	Leucina	60:30:1	Hipmmefose
34	Estearato de Ca	Leucina	60.30.1	Hipmmeícse	—
35		Leucina	60 30 1	Hiprameluse
36	ZnfOAch	L.eucina	60:30:1	Hspremelcse
37	CaCl2*2H2O	ísoleuclna	60:30:1	Hspromelose
38	CaCbvHjQ	Vahna	60:30.1	Hipromelose
39 .......................	CaCh*2H?O	Metionina	60:30.1	Hspromelose

45/53

Exemplo	Cátion	Amina	Razão molar	Aglutínante	Aditivo
40	CaCh*2H20	Fenílalanl- na	60:30:1	Hipromeiose
41		Hístidina	0:20:1	Hipromeloee
42	' ,-x—:	Triptofano	0:20:1	Hipromelose	.>.v
43	CaCh’MO		0:20:1:28 (W. E)	Hípromelose	Vitamí · na E
44 xy	*·.*·.	aodo 1- amsnocb clo-hexano carboxílico	0:20.1	Hlprcmelosc
45	' >. ..	ciclo· hexílamina	0:20:1	Hipromelose
46	Ά·Λ	2metílbutilâmina	0:20.1	Hipromelose
47	....	guítosana	0:20:1	Hipromeicse
48	CaCh’SHyO	Leuçina	60:30:1	Folivíml párolidona
49 ............................	CáCb«2HâO	Leucina	60.30.1	Metil celulose (Methocel Al 5)
50	CaCfe-2H2O	Leucsna	60:30:1	Hidroxlprcpil celulose
51	NaCI	—	20:0.1	Hipromelose	...X
52	CaCl-rZHjQ	t.euclna	60:30.1	Gelatina
53	CaCb^HjO	Glicina	60.30:1	Ripromelose

* Cátion” refere-se ao cátion contido no sal usado no exemplo. Amina refere-se è amina primária esterioanwnte impedida. Razão molar refêre-se a uma mão molar de cátíananiina-.línaciotida.Aditivo (sé aplicável).

abola 1 §

Exemplo

Temp, de pulver. do produto CC)

25.1-35.1

24. t-35.8

Temp, de entrada CC)	Taxa de pulverização (g/mln)	Pressão de Atomizaçâo (psig)	Fluxo | de Ar |
37.0-50.1	0.44-0.62	20	Baixo
37.3-50.9	0.30-0.61	18-20	Baixo

Exemplo	Temp, de pulver, do produto PC)	.................... Wmp„ de entrada m	Ta xa de pulverização (g/mm)	Pressão de Átomízação (psig)	Fluxo de Ar
29	28,1 347	37,6-47.8	0,50-0.63	18	Baixo
30	29,8 35,0	33,9-50.2	0,32-0,47	20	Baixo
31	25 5 35,1	! 34,6-50,4	0,40-0,61	20	Baixo
33	30 4 35,2	38.7-51,0	0,48-0,52	20	Baixo
35	29,9-34,9	37,8-50,4	0,37-0,76	20	Baixo
36	29.9 35,4	38,0-50,1	0.38-0,50	21	Baixo
37	27,3 34.$)	36,2-50,1	0.45-0,54	20	Baixo
38	27,0 36.2	36,9-47,3	0.43-0,86	20	Baixe
39	30,1 35,8	40,,6-47,1	0.30-0,48	20	Barxo
40	31,7-37,5	41,3-51,0	0,40-0,67	18	Brnxu
41	29,4-36,2	41,7-49,5	0,48-0,53	20	Ba^xo
42	31,6-38,6	42,4-51,2	0,52-0,64	20	Baixo
44	31,0-37,6	39,5-48,8	0.40-0,46	18	Báixo
45	28,7-36,5	37.1-49,2	0.49-0,61	18	Baixo
46	28.6-35,2	37.1-47.2	0,39-0,53	18	Baixo
47	33.4-38,7	40.6-48.5	048-0,4/	18-26	Baixe
48	31.6-36,1	41,6-46.7	0.38-0,72	18	Baixe
49	28,5-36,5	36,8-48,1	0.45-0,51	18	Baixo
50	27,9-36,4	37,1-48,6	0.35-0,60	18	Baixo
51 , ....................	29.3-37,9	36,7-49,2	0.42-0,55	18	Baixo
52	29,8-36,3	36.1-49,1	0.44-0,54	18	Baixo
53	28,9-35,8	36,5-47,7	0,45-0.52	18	Baixo

Problemas de processamento foram confinrrados durante pulverização nas contas para os exempfos 32 (Alginafo de Cálcio), 34 (Estearato de cálcfo) e 43 (CaCIgrVítamína E), Assim, a solução de revestimento foi misturada sum contas.de Qelphera.e. as .contas foram secas em. uma bandeja.

Para as formulações de Exemplos 27-53, cápsulas de gelatina furam preenchidas com aproximadamente 225 mg de contas ativas (600 pg de linaolótida/càpsula), Cinco cápsulas preenchidas foram colocadas em frascos de plástico, Os frascos continham 1g de dessecante e foram selados por indução. Os frascos foram estocados a 40*0/75% de umidade relativa

47753 por três meses nu seis meses.

Conteúdo de Línaçlotida (pg/mg) e por cento de pureza àrcmafográffca (U de CP) foram essencialraente medidas come descritos no Exempto 21 ou por um método equivalents. Resultados são fornecidos na Ta5 bale 16A (três mesas de estabilidade) ou Tabela 168 (seis meses de estabilidade).

BdebibA

Exemplo	% de Ensaio Inicial fo/pf	% de CP	% de CP [% Imclai]
27	96, 30	93,98 %	98,07
28	96,82	93,59 %	96,07
29	10156	92,71 %	95.40
30	109,06	93.07 %	95,76
31	103,59	95,98 %	99,12
32	66,53	82.66 %	85.27
33	96.81	91,94 %	93.55
34	30.75	55.47 %	56.88
35	101.37	93.07 %	95,02
36	105.27	91.49 %	93.45
37	109.22	95.73 7o	97,99
38	<24	95.79 %	97,59
39	95,22	95.76 %	97,82
40	102.98	95.68 %	97,68
41	110.92	94.03 %	96,30
42	120.05	88.57 %	91,65
43	58,51	70.99 %	74,06
44	98,83	93,84 %	06,88
45	91,72	90,07 %	93,71
46	90,17	89,45 39	91.67
47	105.70	88,59 7«	91.31
48	106,92	95,11 %	97,62
49	98,48	94,62 %	96.60
50	112.30	95,86 %	98.98
51	102.92	91,80 %	99,79
52	108,12	83,10 %	86.80

4M3

A.

í—................................................ Exemplo	% de Ensaio Inicial [p/pf	% de CP	% de CP [% IniciaO
53	104,22	95,25 %	97,95

* VariaMidarte nos valores durante Ensaio (¾ em p/p Inicial) rétlet® ô contrate impsrfeto sobre a uniformidade do conteúdo para esses lotes de cápsulas, os quais são fabricados em escala menor.

Acredita-se que as dificuldades encontradas durante o praces5 semente e o procedimento de processamento modificado resutente para os Exemples 32, 34 e 43 (ver acima) poderíam explicar a estabilidade inferior observada nessas amestras.

BfeeiaW

Exem	% de En-	% de Area por HPLC
pio	saio Inicial (p/pl	Linaclotida (% Inicial)	Oxidação	Hidrbii- ses	Formaldeído Imina
27	91,58	89,68 (93,58)	0,09	0,60	1.59
28	93,36	88,44 (90,78)	0,24	0,41	1.55
29	93,73	87,79 (90.34)	0 18	0.53	1.82
30	108..63	93,93 (96,65)	0.39	1.11	0.44
31	94,53	86.83 (89,67)		0.41	0.98
32	69,28	73.15(75,46)	6 97	1.93	1.69
33	83,91	85,96 (87,46)	0 97	3.86	0.17
34	77,37	70,42 (72.21)	6.67	0.99	1.78
35	95,34	88,85 (90,71)	0.39	1,80	0.33
36	102,83	87,27 (89,14)	3.31	1.86	0,21
37	99,33	87,23 (89,29)	-	0.59	0,25
38	93.97	86,27 (87,89)	-	0.42	0,45
30	87.78	85,23 (87,07)	ss.	0.40	0,31
40	94,36	86,28 (88,01)	-	0.46	0,41
41	104,28	90.04 (92,22)	0,33	1,61	0,52
42	117.92	76,85 (79,52)	0,14	1,21	0,10
43	54,21	59,54 (62,12)	5,92		1.83
44	92,56	90,24(93,17)	0.16	1.47	0.54
45	76,23	79,57 (82.78)	0.17	0,87	1.22
46	73,07	78,92 (80.88)	0.51	0.66	0,65
47	97,65	82,73 (85,27)	0.92 ................:....................	0.60	2.68

X. *

49/53

Exemplo	% de Ensaio Inicialfp/pl	% de Área por HP LC
linanfotida (14 Inicial)	Oxidação	Hidrúli- ses	.Farmàldeida Imina
48	93,94	85,24 (87,49)	0.05	0,69	0,20
49	51,55	63.46 (6479)	0,96	0,58	2,24
50	194,75	92.61 (95.62)		0,38	0,48
51	94,15	88.19 (92.01)	Λ,·	0,58	1,35
62	100,06	72,81 (75,62)	0,06	0,49	0,41
53	95.74	89,80 (92.35)	0,06	0,36 ..............:..................	1,40

Qs valores de pureza cmmafogra^ca para es Exemplas 27 a 53 no ponto no tempo de seis mesas aparecem tipicamente abaixo, particularmente oom relação ao ponto no tempo de Ws meses para estes amestras. Tendências relativas para efeitos de estabilização e desestebillzação podem ser determinadas por comparação com o Exemplo 27 e o Exemplo 31 como experimentos de referência infernos, para os quais os valoras de pureza cromatográfica são aproximadamente 6 a 8% mais baixos do que consistem temente observados em outros estudos que foram conduzidas (wr,. por e~ xempío, Exemplos 2 e 9). Os dados da três meses fornecidos na Tabela ISA para as mesmas formulações mostraram valeres de pureza cmmatogrâfica mais típicas. Assim, os valores baixos da pureza cmmafográfica em seis meses são provavelmente devidos a uma capacidade de dessecante deficiente em seis meses para estes cúndições de sstooagem particulares. Esta hipótese é suportada pelos picos de impureza que são observados a que são indicativos de exposição à umidade.

ExemplpJi5;..Teste

Para as formulações de Exemplos 8 a 1'5 ei 7, cápsulas de gelatina foram preenchidas com aproximadamente 225 mg de contas ativas. Cinco cápsulas preenchidas foram colocadas em frascos de plástico. Os frascas continham 1 g de desseuartte e foram selados por indução.. Os frascos foram estocados a 25XM0%. de umidade relativa por 24 meses.

Conteúdo e pureza de línacloiidá, assim como a quantidade de substâncias relacionadas â línadotida foram medidos essenclalmente eomo

50/53 descritos no Exemplo 21 eu por um método equivalente. Resultados sãç fornecidns na Tabefe 17.

Tabelã17

T

Exemplo	% de Ensaie Inicial (p/pj	% de Àma por HPLC
Linaclotida (% Iniclál)	Oxídaçào	Hteràlises Furmalden | do Imine
8	94,36	94.58 (101.7)	0,21	1,26	I 0.53
0	94 08	95,09 (97,86)	0,14	0,36	1 0.93
10	8888	87.82 (98.84)	0.38	0,26	j 3,77
10a ' :	89,29	91,55 (94 95	0,50	0,39	] 1.60
105	_ 88,41	91,19 (95,02)	0,44	0,34	| 1.61
10c	72,35	72,36 (75,76)	0,30	0,26	| 19,13
11	87,50	90,25 (92,82)	1,03	0,42	| 194
12	62,82	66,77 (68,62)	2,20	1,24	2,11 I
13	90,59	93,79 (95,93)	1,21	0.65	0,77 )
14	91,41	94,88 (97,09)	0 18	0,47	1 0,65 |
15	90,91	90,31 (96,18)	0,17	0.56	1 1,64 |
17	91,45	92,92 (96,81)	0,71	0,56	| 0,73 1

ⁿ Quanto ao Exemplo 10 com revestimento protetor adicional de Aquacoat (Aquacoat Etílcelulnse Aquaeous Dispersion, 15% p/p, FMC Biopolymer, ECD-30) ^A! Quanto ao Exemplo 10 com revàsíímento protetor adicionai de Opadry (0padry AM8 dispersion, 20% p/p. Colorcon).

³⁾ Quanto ao Exemplo TO com revestimento protetor adicional de Eudragít 10 (Eudragh E PO, Degussa, Roehm Pharma Polymers; SLS, Ácido esteárico)

Exemplo 56: Formulação de Comprimido de Línaclotida e Teste de.Estapviyjade

Os grânulos de linaciotida ativos foram feitos essarteíalmsnto por granufeção em leito fluido como descritos no Exemplo 26 usando os reàgon15 tes descrdos na Tabela 18. Os grânulos de linaclotida foram misturados com os excipientes descritos na Tabela 19 s comprimidos em comprimidos com uma dureza de -~4kp.

comprimidos foram embalados em um frasco de 60 cm® com

51/53 gramas dé dessêcante è estocadas ã. 40*C/75% da umidade relativa por até 3 meses- ou 30^sC/@5% de umidade relativa por até 3 meses,

Conteúdo e pureza de linaclotida assim como a quantidade de substâncias relacionadas Onaclotida foram essencialmente medidas como descrito na Exemplo 21 oú par um método equivalente, Resultados são fornecidos na Tabela 20,

ΣΜΟΟ

Ingredientes	Função	Grânulo, 150 pg de linacíotida/granutes de 53,7 mg
Lhadotida	API	0,15 mg
Manltoi, USP	agente da en chimento de grânulo	50 mg
Leucina, USP	estabilizador	0,64 mg
CaCI^HgO, USP	estabilizador	0,72 mg
PVP K30, USP	Aglutinanie	2,2 mg
| Sotoçàc de HCl (pH 2,5)	-χ.χ.

Ingredientes	Função	Comprimido (peso total de 200 mg)
Grânulos de l inadotida	Ativa	53,4
Isomaíte, USP	Agente de enchimento de comprimido	134,1
Croscarmelose de sódio, USP	Disintegrante	10
Estearato de magnésio, USP	Lubrrftcante	ti
Talco, USP	Agente de deslizamento	1,0

,TabeLa20

Condição	Tempo	Mudança no Ensaio %	Degradação Total
4O'C/75% de um-nade relativa	Inicial	100	2,27
41)'0/75% no um.oado raíativa	1 mês	96,2	2,09

52/53

Condição	Tempo	Mudança no Ensaio %	Degradação Total
40X/7f?A de um idade relativa	2 meses	102	2,15
4O'C/75% de umidade relativa	3 meses	93,5	1,52
3(TC/65% de umidade relativa	3 meses	100,1	1,19

Ê.x*n^

A formulação d.p linaclotida do Exemplo 57 fdi produzida essenclaimants como .descrita no Exemplo 1'6. Tabela 21 fornece os ingredientes dá solução de revestimento e seus pesos teóricos (mg/g) e (kg/Batelada) 5 para a completa Solução de Camada de Fârmaco de Contas de Linadotidá.

Tabela 22 fornece os ingredientes e pesos teóricas (mg/g) e (kg/Batelada) para a preparação para as Contas Ativas de Linadotida. A formulação de linadotída foi ewapsulada em cápsulas de gelatina duras, tamanho 2 (peso de 61 mg), essenciãlmente como descrita nd Exempla 20. As cápsulas de 10 linaclotida de 150 pg continham 56 mg de contas de linaclotida (600 pg de íinadolídaZ225 mg de contas) enquanto 300 pg de cápsulas da linaclotida continha 113 mg. de contas de linadctída (600 pg de línaolotida/225 mg de contas).

Tabela 21

Ingredientes i	Função	Peso teórico	Peso teórico (kg/bateiada)
Linaclotida |	API	2,67	0,067
CaCI2*2H2O; USP, EF, | Esiabtador BP, JP |	15,41	0,365
L-Leudna, USP |	Estabilizador	6.87	u,1 Z2
Hidroxipropd metilceluiO'	Agiutinante	7,00	0 1 75
Vxkx· 13 sWCj&x s iA-w J Premium L Vi |
Água pmiticadm USP |	,.w	16,666
HCl {36.5-33.0?. Ni |		0,114

53/53 «

ingredientes	Função	Peso teórico (Ws)	Peso ieonco (kg/batelada)
Solução de Camada de Fármaco de Contas de Linaciotída	Solução de revestimento	31..95	OJW
Esferas de Celulose micrecnslalina NF (Celphere CP-305)	Contas	963,05	24,201
Total Final: Contas de Linaciotída. 600 pg/225 mg)	Contas atives	1000	25.000

* 15

Claims (31)

1. RE1VINOICA0ÕES

   1,. Cfomposiçãç fermacêutica, campreendendo linaelotida e excipiente farmaaeuticamente aceitável, em que a pureza mematográfiça da IV nadatida diminui em menos de 1014 após (a) 10 meses de estocagem da composição farmacêutica a 25*C a 6014; de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante ou (b) δ meses de estocagem da composição farmacêutica a 4ÕX a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dêssecante.
2. 2. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 1„ em que a pureza oromatográfica da linaclotida diminui em menos de 9%, 8%, 7%, 6%, 5% ou 4% após (a) 18 meses de estocagem da composição farmacêutica a 2TC a 50% de umidade relativa em um recipiente vedado contenda um dessecante eu (b) 8 meses de estocagem da composição farmacêutica a 4(TC a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.
3. 3. Forma de dosagem unitária de uma composição farmacêutica, compreendendo linaclotida e excipient© farmacautícamente aceitável em que a pureza arematógráfica da línaclptlda diminuí em menos de 1ü% após (a) 18 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 25^SÍC a 80% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante ou-(b) '6 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 40°C a 75% de umidade reiátiva ern um recipiente vedado contendo um dessecante.
4. 4. Forma de dosagem unitária, de acordo com a reivindicação 3, em que a pureza cromatográfica da línaçiotidã dimínuiem menos dè 9%_f B%, 7%_:, 6%, 5% ou 4% apás (á) 18 mesas de astocagem da forma de dosagem unitária a 25^eC a 69% da umidade relativa em um recipiente vedado çonteru do um dasseçante ou (b) β mesas de estocagem da forma de dosagem unitana a 40^çG a 75% da umidade relativa em um recipiente vedado: contendo um dessecante.
5. 5. Recipiente vedado, compreendendo uma pluralidade de formas de dosagem unitárias de uma composição farmacêutica compreendendo linaclotida © excspíente farmacauncamente aceitável em que a pureza cromatcgráflca da linadotida dimínulem manos de 10% após (a) 18 meses de estocagem do recipiente vedado contende um dessecante a 25*0 a 60% de umidade relativa ou (b) 8 meses de estocagem do recipiente vedado contenda um desencante a 40’0 a 75% de umidade relativa,
6. 6, Recipiente vedado, de acordo com a reivmdicáçãò 5, em que a pureza cromatográfica da linaclotída diminuí em menos de 8%, 8%, 7%, 8%, 5% ou 4% apôs (a) 18 meses de estocagem do recipient© vedado contendo um dessecanle a 25 C a 60% de umidade relativa ou (b) 6 meses de estocagem do recipiente vedada contenda um dessea-mte a 4(FC a 75% de umidade relativa,.
7. 7, Composição farmacêutica, compreendendo linaclotida e excípíente farmaceutlcamente aceitável era que o valor de ensaio para Hnactótida determinado em uma base peso/peso diminui em menos de 10% apôs (a) 18 meses de estocagem da composição Farmacêutica a 25^;'Ç a 80% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante ou (b) 6 meses de estocagem da composição farmacêutica a 40’Ç a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dassocanfe.
8. 8, Composição farmacêutica,, açordó com a reivindicaçãq 7, em que o valor de ensaio para a linaclotida diminui em menos de 9%, 8%, 7%; 6%, 5%, 4%, 2% ou 135 apôs (a) 18 meses de estocagem da composição farmacêutica a 25*0 a 60% de umidade relativa em um rebiptente vedado contendo um dsssecante ou (b) 8 meses de estocagem da composição farmacêutica a 4(20 a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante,
9. 9, Forma de dosagem unitária de uma composição farmacêutica, compreendendo iinaclotida e excipiente famlaceuticamedte aceitável, ém que o valor de ensaio para línactotida determinado em uma base peso/peso diminui em menos de 10% apôs (a) 18 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 25*C a 6055 do umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante ou (b) 6 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 40’C a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.

   ·*

   3/35
10. 10. Forma dó dosagem unitária, de acordo oom a reivindicação 9, em que o valor de ensaio para a linaclotida diminuí em menos de 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2% ou 1%. apôs (a) 18 meses de àstocagam da forma de dosagem unitária a 25*C a 60% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecartfe ou (b) 6 meses de estooagem da forma de dosagem unitária a 4(FQ a 75% da umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.
11. 11. Recipiente vedadõ. compreendendo uma pluralidade de formas de dosagem unitárias de uma composição farmacêutica çompreondendo linaclofida e excipients farmaceuticamente aceitável, em que o vaiar de ensaio para ilnaçíatídá na forma de dosagem unitária determinado em uma base peso/peso diminui em menos de 10% apôs (à) 18 meses de estocagem do recipiente vedado contendo um desencante a 25X a 80% de umidade relativa ou (b) 6 meses de estocagem do recipiente vedado contendo um de^ecante.:a 4CFQ a 75% de umidade relativa.
12. 12. Recipiente vedadó, de acento com a reivindicação 11, em que o valor de ensaio para a línantotida diminui em monos de 9%, 8%, 7%, 6%. 5%. 4%. 3%. 2% ou 1% apôs (a) 18 meses de estocagem do recipiente vedado çpntendo um dessecante a 25*C a 60% de umidade relativa ou (b) 6 meses de estccagem do recipiente vedado contendo um dessecante a 40*C a 75% de umidade relativa.
13. 13. Forma de dosagem unitária, de acordo com qualquer uma das reivindicações 3 a 4 eu 9 a 10_; em que cada forma de dosagem unitária conter da 50 ug a 2 mg de linaclotida.
14. 14. Recipiente vedado, da acordo com qualquer uma das reivindicações 5 e 6 ou 11a 12, em que cada forma de dosagem unitária contém de 50 pg a 2 mg cfe linaclotída.
15. 15. Gumpòsição farmacêutícá, de acordo com cada uma das reivindicações 1 ou 2. em qw a pureza cromatogràfica da Ünaclotida diminui em menos de 10% apôs (a) 24 meses de esfocagem da composição farmacêutica a 25*C a 60% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessécante ou (b j 6 meses de estocágem da composição fannacéuti

    4/35 ca a 4(FC a 75% de umidade relativa am um recipiente vedado contendo um dessecante.

    18. Forma de dosagem unitária, de acordo com a rervindroação 3 ou 4. em que a pureza cromatugráflua da íinadotida diminui em menos de

    5 10% apos (a) 24 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 25-0 a 60% de umidade relativa em um recipiente vedado contenda um dêssecante ou (b) 6 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 40*0 a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dassecanta.

    17. Recipiente vedado, de acordo com a reMndiçação § ou 8,

    10 em que a pureza crcmafogrãfièa da líriaciotidá diminui em menos de 10% apôs (a) 24 meses de estocagem da composição farmacêutica a 25*C a 60% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante ou (b) 6 meses de estocagem da composição farmacêutica a 40* Ca 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.

    15 18. Composição farmacêutica, de acorde com a reivindicação 7 ou 8, um que o valor de ensaio da linaolotída diminui em menos de 10% apõs (á) 24 meses de estocagem da composição farmacêutica a 26*C a -60% de umidade? relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante ou (b) 6 meses de esfocagam da composição farmacêutica a 40®C a 75% de

    20 umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecanté.

    19. Forma de dosagem unitária, de acordo com a reivindicação 9 ou 10, em que o valor de ensaie da linaclotida diminui em menos de '10% apôs (a) 24 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 25^CC a 60%i de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante

    26 ou (b) 6 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 40^:>C a 75% dé umidáde relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.

    20. Recipiente vedado, de acordo çom a reivindicação 11 ou 12, em que o valor de ensaio da linaclutida diminui em menos de 16% apês (a) uns primeiros 24 meses de estocagem do recipiente vedado contendo um

    30 dessecante a 25*0 a 60% de umidade relativa ou (b) 6 meses de estocagem do recipiente vedado contendo um dessecánte a 4(FC a 75% de umidada relativa

    21. Composição farmacêutica, compreendendo um veiculo farmaceuticamente aceitável hnactotida um ou mais agentes selecionados de (i) um cátion selecionado de Mg²*, Ca³*, Zn²*, Μη²*, K*, Na* ou .Al¹* ou (ii) uma amina primária esterícamente impedida, em què o agente melhora pelo menos um atributo da composição em relação a uma composição farmacêutica sem o dito agente, apõe (a) uns primeiros 18 meses de estocagem da composição farmacêutíça a 2FC a 60% de umidade relativa em um recipiente vedado centrando um dessecante ©u (b) uns primeiros 6 meses de estocagem da composição farmacêutica a 40X a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante, em que o dito atributo é selecionado dentre uma diminuição na taxa de degradação de linaciotída, como medida pelo teor de linaciotída, uma diminuição na taxa de degradação de linaciotída, como medida por pureza cromatográBca de iínactotida, uma diminuição na quantidade de um produto de oxidação de linaciotída em ralação à quantidade de linaciotída, uma diminuição na quantidade de um produto de hídrõlíse de linaciotída em ralação à quantidade de línáclotidá, ou uma diminuição na quantidade de um produto de imína de formaideído de línaclotida de linaciotída em relação a quantidade de linóclctida,

    22. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    21, ern que o dito agente é Mg, Ca²*, Zn²*, Μη²*, Κζ Na* ou Al**.

    23. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    22, em que o dito Mg²*, CaC Zh²*, Mr?’*, Κζ Na* ou Al³* é fornecido como acetato de magnésio, cloreto de magnésio» fosfato de magnésio, sulfato de magnésic, acetato de uàlcid, cloreto de cálcio, fosfato de cálcio, sulfato de cálcio, acetato de zinco,, clorato de zinco, fosfato de zinco, sulfato de zinco, acetato de manganês, cloreto de manganês, fosfato de manganês, sulfato de manganês, acetato de potássio, cloreto de potássio, fosfato de potássio, sulfato de potássio, acetato de audio, cloreto de sódio, fosfato de sódio, sulfato.de sódio, acetato de alumínio, cloreto de alumínfo, fosfato de alumínio ou sulfato de alumínio.

    24. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    23, em que o dito Mg. Ca, Zn, Mn, K^f. Na ou Ai** è fornecido como cloreto de magnésio, cloreto de cálcio, fosfato de cálcio, sulfato de cálcio, acetato de zinco, cloreto de manganês, cloreto de potássio, cloreto de sódio ou cloreto de àlumínio,.

    25. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 5 22, em que o dito agente é Ca** ou Zn²⁺.

    26. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 25, **²*²*em que © dito Mg²q Ca** ou Zn^z* é fornecido como cloreto de magnésio, Cloreto de cáícfo óu acetato de zinco.

    27. Composição farmacêutica, de acorde oom a reivindicação 16 22, em que o dito agente é

    26. Composição farmacêutica, de acorda com a reivindicação 27, ‘tem que e dito Ca²* é fornecida como cloreto de cálcio.

    29. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    21, em que o dito agente é uma amina primária estericamente impedida,
16. 16 3d Composição famiacêutioa, dé acordo com a reivindicação

    29, em que a amina primária estericamente impedida é um amínoãcido.

    31, Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    30, ém que o aminoácido é um aminuâcidu ocorrendo naturaímente,

    32, Composição farmacêutica, do acordo com a reivindicação

    20 31, em que e aminoãeido^ ooorrenda nafuralmente a histidine, tenilalanina, alardea, ácido giutârniáp, ácido àspártico, glutamine, teucína, metíonma, a§paragina, tirosina, ueonsna, isoleucina, tnptofanoou vahna.

    33. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    32, em que α aminoàcído ocorrendo naturaimenle é histidína, fenílalanina, 23 ieuclna, mettonína, isoteuclna, tnptofano ou vallna,

    34. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    33, - em que © amincácido acorrendo naturalmente ê teuoína, isateucína, afenina ou metsonma.

    35.. Composição farmacêutica, de ansrdo com a reivindicação 30 34, em que o aminoàcído ocorrendo naturalmente ê leuçina ou metionína.

    36. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    35, em que o smineâcido ocorrendo naturalmente é ieucina,

    7/35

    377 Composição farmacêutica, de acordo com a rmvindioação 30, em que a amina primária esteríoamente impedida é um aminoácído não ocorrendo ftaturalmente ou um derivado de amínoácido.

    38. Composição fern^cêutíoa, de acordo çom a reivindicação

    5 37, êm que o amínoácido não ocorrendo naturslménte é ácido l-áminocicíahexano uarboxíiico, lantánina ou teanina.

    39. Composiçãò farmacêutiça, de acordo com a reivindicáção

    29, em que a amina primária sstencamente impedida tem a formula:

    Rs to Lxfo ' < · em que Ru Rç e Rs sâo independentemente selecionados de: H; ”C(O)OH:

    10. CrC§ alquila, opcionalmente substituídos por -COgH, -ÇOHHg, ou uma arila ou heteroarila de 5 a 10 membros: CrCs alcoxialquila; ou C_rQ tiealeoxiaF quila, em qué qualquer um dós grupos alquila ou arila acima pode ser suhstê tuido simplesmente ou multiplamente por halogênio ou —NH?, e contanto que ’ nâò niais dê dois de R?, Rs e Rs sejam H.

    15 40. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    39, em que a amina primária estençamente impedida é cíclp-hexílamina ou 2~mefilbutilamina.

    41. Composição farmacêutica, de acorde com a reivindicação

    29, em que a amina primária esterícamente impedida é uma amina pohméri·· 20 ca.

    42. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 41, em que a amina polimérica é quitosenm

    43. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 29 á 42, em que a dita composição farmacêutica compreen-

    25 der ainda MQ²*, Ca²*, Zn²*_f Μη²*, K*, Há' ou Al³*.

    44. Composição famiaoâutica, de acordo com a reivindicação 43, em que o dito Mg²*, Ca²*, Zn²\ Μη²*, K'. Na* ou AP‘ è fornecido come acetato de magnésio, cloreto de magnésio, fosfato de magnésio, sulfato de magnésio, acetato de cálcio, cloreto de cálcio, fosfato de cálcio, sulfato de

    8Z35 cálcio, acetato de zinco, cloreto de zinco, fosfato do zinco, sulfato de zinco, acetato de manganês, cloreto de manganês, fosfate de manganês, sulfato de manganês, acetato de potássio, cloreto de potássio, fosfato de potássio, sulfato de potássio, acetato de sodlo, cloreto de sódio, fosfato de sódio, sul5 feto de sódio, acetato de alumínio, cloreto de alumínio, fosfato de alumínio ou sulfato de alumínio.

    45, ©omposiçãó farmacêutica, de acordo com a reivindicação 44, em que o dito Mg²*, Ca²*, Zn²*, Μη²*, K* Na* ou AI²* ê fornecido como cloreto de magnésio, cloreto de cálcio, fosfato de cálcio, sulfato de cálcio, 10 acetato de zinco, cloreto de manganês, cloreto de potássio, cloreto de sódio ou cloreto de alumínio,.

    48, Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 28 a 42, em que a dita composição farmacêutica compreender ainda Mg²*, Ca²* ou Zn²*,.

    15 47,. Composição farmacêutica, de acorde cem a reivindicação

    46,²*²*²*êm que o dito Mg²*, Ca²* ou Zn²* ê fornecido como cloreto de magnésio, cloreto de cálcio ou acetato de zinco,

    48, Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    46, em que a dita composição farmacêutica compreende ainda Cã²*,

    28 40, Composição farmacêutica, de acordo com ã reivindicação

    48, ²*em que o dito .Cá** é fornecido como cloreto de cálcio.

    50, Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 49, ainda compreendendo um antioxidante.

    51, Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 25 50, ® que o dito ããtiuxidanfe ê BHA, vitamina E ou gaiato de propila.

    52, Composição farmacêutica, compreendendo um veiculo farmaceutiuamente aceitável, linaclotida, um cátion selecionado de Mg²*, Ca²*, Zn²’, Mn⁴*, K\ Na* ou A.C' e uma amina primária esterioamente impedida.

    53, Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 30 52, caracterizada por o dito Mg⁴*, Ca''*, Zn²*, Μη⁴*, K*. Na* ou Al³* é fornecido como acetato de magnésio, cloreto de magnésio, fosfato de rnagnêsio, sulfato da magnésio, acetato de cálcio, cloreto de cálcio, fosfato de cálcio.

    sulfata de çálçfo, acetato de zinco,, cloreto de zinco, fosfato de zinco, sulfato de zinca, acetato de manganês, cloreto de manganês, fosfato de manganês, sulfata de manganês, acetato de potássio, cloreto de potássio, fosfato de paiásslo, sulfate de potássio, acetato de sódio, cloreto de sódio, fosfato de 5 sódio, sulfato de sódio, aeetato de alumínio,. cloreto de alumínio, fosfato de alumínio ou sulfato de alumínio.

    54. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação S3, em que o dito Mg^z*_;, Ca²*\ Zn²*, Mn²*. K\ Na* ou Al³* ser fornecido como cloreto de magnésio, cloreto de cálcio, fosfato de cálcio, sulfato de cálcio,

    10 acetato de zinco, cloreto de manganês, cloreto de potássio, cloreto de sódio ou cloreto de alumínio..

    55, Composição fanrnacêutíca, de acordo com a raívindícação

    52, em que o dito càticn ê selecionado de Mg²*, Ca²* ou Zn²*,

    58 > Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 15 S5_:, **^>2*®m que o dito Mg²*,, Ca²* ou Zn²* ê fornecido como cloreto de magnésio, cloreto de cálcio ou acetato de zinco,

    57, Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    55, em que o dito cátien é Ca²*

    58, Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 20 -5T_S ²*em que o dito -Ça** é fornecido como cloreto de cálcio,

    59, Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 52 a 56, em que a amina primária estenoamante impedida é um amínoácido.

    60, Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    25 59, em que o aminoácidu ê um aminoácido nçarrendc naturalmentê,

    61, Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    60. em que o aminoácido ocorrendo naturalmente é histidine, fenilaianina, alanina, ácido glutâmíco, ácido aspártico, glutamína, leucina, metionína, asparagína, tlrosina, treonina, isoleucina, triptofano, metíonina ou valina.

    30 62. Composição farmacêutica, de acorda com á reivindicação

    61, em que o amínoácido ocorrendo naturalmente é histidine, fenilaianina, íeucina, metionina. isoleucina, triptofano ou valina.

    10/35

    53., Composição termacêutlca, de acordo com a reivindicação

    62, ®m qu® & aminóàcido oççrreadç naturalmente é teucína, isoleucina, atenina ou mefionina.

    64, Composição farmacêutica, d® acordo com a reivindicação

    5 63, em que o aminoácído ocorrendo naturalmente é feucína,

    65. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    52, em que a amina primaria estericamente impedida é um aminoacido não ocorrendo naturalmente ou um derivado de aminoácido.

    W Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    10 :65, ãm q ue o aminoacido não ocorrendo náturalmente ê ácido 1-aminooiclóhexanp carboxilico, lantanina ou teanina.

    07. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    52, em que a amina primária esteticamente ímpedidá tem a fórmula: em que Ri, R? e R₅ são independentemente selecionados de: H; ~C(O)OH;

    15 Cí-Cô alquila, opcionalmente substituídos por -COaH, -CONH?, ou um arila ou heteroariia dê 5 a 10 membros; C_rC§ álcoxiálquila; ou CrC§ iidafcoxM quite, em que qualquer um dos grupos alquila ou ante acima pode ser substituído simplesmente ou múltipla mente por halogêmo ou -NH _g , e conta nto que não mais de dois de R₅, R._ã e Rs sejam H.

    20 68. Composição farmacêutica, do acordo com a reivindicação

    67, em que a amina primária estericamente impedida é cíelo-nexítemina ou 2~meíilbutüamina,

    69, Composição fam^acêutica, d® acordo com a reivindicação

    52, em que a amina pumária esteticamente impedida è uma amina polimèru 25 ca..

    70 Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    69, em que a amina primária eteericamente impedida ê qultosana,

    71, Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 52 a 70, ainda compreendendo um agente de deslizamento,

    11/36 lubrificante ou aditrvn farmaceuticamente aceitável que age come ambus um agente de deslizamento e um lubrificante,

    72. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 52 a 71, ainda compreendendo um anfexldante.

    5 73. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    72. em que o dito antioxidante ê BHA. vitamina E ou gaiato de propiia.

    74. Composição farrnacâutíoa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 52 a 73. ainda compreendendo um aglutlnante farmacêuticamente aceitável,

    10 75, Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    74, em que u agíutinante farmaceutímmente aceitável é selecionado dentre álcool de polivinila, polívinilpirrolidona (povidona), um amido, maltodextrina ou um éter de celulose.

    76, Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    15 75, em que o aglutinante farmaeeuticamente_: aceitável ê um éter de celulose.

    77, Composição farmacêutica, de acorda com a reivindicação

    76, em que o éter de celulose é selecíenads dentre: metlleelulose, efilcelulose, carboximetilcelulose, hidruxíetíi celulose, hidroxietil metiloelulose. hidroxipropil celulose e hidraxípropil metilcelulose.

    20 78, Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 52 a 77, ainda compreendendo um agente de enchimento farmaceuticamente aceitável.

    79. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    78. em que o agente de enchimento farmaceutmamnnte aceitável è celulose,

    25 isomalfe, manitol ou fosfato de cálcio dibásico.

    80. Composição farmacêutica. de acorde cem a reivindicação

    79, em que a celulose é selecionada de celulose mícrofina e celulose microcristalina.

    81. Composição farmacêutica, da acordo com qualquer uma das

    30 reivindicações 78 a 80, em que o agente de enchimento farmacaufcamente aceitável compreende partículas tendo um diâmetro medio entre 150 pm e 1000 pm.

    *

    12/35

    82. Composição farmacêutioa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 52 a 81, em que a composição farmacêutica compreender um agente de enchimento e a razão em peso de iinaclotida para agente de enchimento farmaceuticamente aceitável estar entre 1:25 e 1 2,500.

    83. Composição farmacêutica, de acordo corn a reivindicação

    82, em que a razão em peso de ííhaclotida para agente de enchimento farmaceutícamente aceitável está entre T: 100 e 1:2000.

    84, Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    83, em que a razão em peso de linaclotida para agente de enchimento farmaceuticamente aceitável está entre 1.100 e 1:1000.

    85, Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 52 a 84, em que a amina esteticamente impedida ê leucina e a razão molar de leucina para linaclotida ê de pelo menos 10:1,

    88. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    85, em que a razão melar de leucina para íinacioiida é de pelo menos '20:1,

    87. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindíúaçáo

    86, em que a razão molar de leucina para linaclotida é de pelo menos 30:1.

    88. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 52 a 87, em que o câtton ê Ca²* e a razão molar de Ca^s* para leucina 4 de pelò menos 1:1,

    89. Composição farmacêutica, de acordo com a raivindicação

    88. em que a razão molar de Qa'^:* para leucina ser de pelo menos 1.5:1.

    90. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    89. em que a razão molar da Ca^;?* para leucina è de pelo menos 21.

    91. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 52 a 84, em que a razão molar de cationramina primária êstericamente impédidalinaciotídá ser 40 a 100:20 a 50/1,

    92.. Composição farmacêutica,, de acordo com a reivindicação SI , em que c nation é Ca²* e a amina primária esteticamente impedida é leucina.

    S3. Composição farmacêutica, de acorda com a reivindicação 92, em que a razão mofar de Ca²⁺.leucina.linaciotida é 100.30.1, 80.40:1,

    80:30:1, 80:20:1, 60:30:1, 60:20:1, 50:30:1., 50:20:1., 40:20:1, 20:20:1

    10:10:1,10:5:1,5:10:1 ou 5:5:1.

    94. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 93, em que a razão molar de Ca^:teUcina:linaclotida é 60:30:1,

    95. Composição fermaeêufca, de acordo com qualquer uma das reivindicações 92 a 94, caracterizada pórCá'** ser fornecido corno CaCfe.

    96. Fo-rma de dosagem unitária, compreendendo a composição farmaceutícá como definida em qualquer uma das reivindicações 92 a 95.

    97. Forma de dosagem unitaria, de acordo som a reivindicação

    96, em que cada forma de dosagem unitária compreende 60 pg a 1 mg dé linaclotida,

    98. Forma de dosagem unitária, dé acordo com a reivindicação

    97. em que cada forma de dosagem unitária é uma cápsula ou comprimido e em que a dita forma de dosagem unitária compreendé 87,5 pg, 109 pg, 133 pg, 150 pg, 200 pg. 266 pg, 300 pg, 400 yg, 500 pg ou 600 pg de linaciotidã.

    99. Método para preparar uma composição farmacêutica compreendendo linaclotída ou um sal da mesma, o método compreendendo:

    (a) proporcionar uma solução aquosa compreendendo:

    (i) línaelotida ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma (ii) um ou mais dentre um oáfson selecionado de Mg²*, Ca²', Zn²'*, Mn²*, K*. Na* ou Al’* ou uma amina primária esterfcamenfe impedida; 6 (íh> opaionalmenie um aglutinante farmacêutica mente aceitável, (b) aplicar a solução aquosa a um agente de enchimento farnw ceuticamente aceitável para gerar agente de enchimento revestido corn Unaclotída.

    196. Mêtodó, de acordo com a reivindicação 99, em que a solução aquosa compreender uma amina primária estencamente Impedida,

    101. Método, de acordo com a reivindicação 99, em que o dito Mg··*, Ca·⁵', ZrÀ*. Μπ²*, K*. Na* ou Ah* é fornecido coma acetato de magnésio, cloreto de magnésio,, fosfato dé magnásso, sulfato de magnésio, acetato

    14/35 de .cálcio, cloreto de cálcio, fosfato de cálcio, sulfato de cáteio, acetato de zinco, cloreto de zinco, fosfato de zinco, sulfato de zinco, acetato dê manganês, cloreto de manganês, fosfato de manganês, sulfato dê manganês, acetato de potássio, cloreto de potássio, fosfato de potássio, sulfato dê potássio, 5 acetato de sódio, cloreto de sódio, fosfato de sódio, sulfato de sódio. acetato de alumínio, cloreto de alumínio, fosfato de alumínio ou sulfato de alumínio,

    102. Método, de acordo com a reivindicação 101, em que o dito

    Mg'^;*, Ca'·'*, Ζπ’’*, Μη²*, K*, Na* ou Al⁵* é fornecido como cloreto de magnésio, cloreto de cálcto, fosfato de cálcio, sulfato de cálcio, acetato de zinco, 10 cloreto de manganês, eldrefo de pofâssío, cloreto de sódio ou cloteto de alumínío.

    103. Método, de acordo com à reivindicação 99, em qué o dito cátton é selecionado de Mg²*. Ca²* ou Zn²*,

    104 Método, de acordo com a reivindicação 103. que o 15 dito Mg²*, Ca²* eu Zn²* é fornecido corno cloreto de magnésio, cloreto da cálcio ou acetato de zinco.

    105. Método, de acordo com a reivindicação 103, em que o dito cátion é Ca²*

    106. Método, de acordo com a reivindicação 105, **em que o di20 to Ca*’* é fornecido como cloreto de cálcio.

    107. Método, de acordo com a reivindicação 99, em que a amina primária esterícamente impedida é um aminoácido,

    108. Método, de acordo com a reivindicação 107, em que oaminoácido é um aminoácido ocorrendo naturaímente.

    25 109. Método, de acordo com a reivindicação 108, em que o aminoacido çcômendo natoralmente é hístidina, feniialante, alanina, ácido glu~ támico, ácido aspártico. glutamina, leucina, metionina, asparagína, tirosina, treonina,. iséisudna,. triptofana, métfonina ou valina.

    110, Método, de acordo com a reivindicação 199, em que o ami30 noáckfo ocorrendo náturalmente é hisUdina, fenílalanina, leucína, metionina, isoieucina, triptofanu ou valina,

    T11. Método, de acordo com a reivindicação 110, em que o amè

    15/35 noáçidç ocorrendo naturalmente é feuclRa, isoleucina, alanina ou metionína,

    112 Método, de acordo com o reMndicaçáo 111, em que o aminuácído ocorrendo naturalmente é teucina.

    TI 3, Método, de acordo com a reivindicação 99, eni que a amíoa primária esterica mente impedida é um amínoácído não ocorrendo naturalmente ou um derivado de ammoãcido.

    114. Método, de acordo com a reivindicação 113, em que o amínoácido não ocorrendo naturalmente é ácido 1-aminoolclo-hòxano carbcsxílico, fentanina ou teanína.

    '115. Método, de acordo com a reivindicação 99, em que a atnina primária estericamerite impedida tem a fórmula:

    

    nh₂ em que Rí, R_? e Rg são independãntenwte selecionados de: H; -C:(O).OH; Ct«Cg alquila, opcionalmente substituídos por—GQ^H, -COMHa, ou uma afila ou heteroarílâ de 5 a 10 membros; C^-Cg alupxialquíla; ou Cri-Cg tloalcoxlalquia, em que qualquer um dos grupos alquila ou arila acima pode ser substituído simplesmente ou multipíamente por halogênio ou -NH^, é contanto que nãe mais de dois de R_t, R_g e R₃ sejam H.

    116. Método, de acordo com a reívindioação 115, em que a aml~ na primária estericamerrte impedida é. ciclo-hexilamíoa ou 2-mettlbutílamina.

    117. Método, de acordo com a reivindicação 99, em que a amina primária estericamente impedida é uma amína poiimériea,

    1TS, Método, de acordo com a reivindicação 117, em que a amine primária estericamente impedida é quítosana,

    I IS, Método, de acordo com as reivindicações 99 a 118, em que a solução aquosa ainda compreende um antíoxídante.

    120. Método, de awdo com a reivindicáçãa 119, em que o dito antioxidants é BHA, BHT, vitamina E, gaiato de propila, ácido ascórbíço e saís ou ésteres dos mesmos, tocoferol e ésteres dos mesmos, ácido alfallpoico ou beta-carotenu..

    16/35

    121, Método, de acordo com a reivindicação 99, em que a solução aquosa compreender tanto o céticm sotecionado de Mg²*, Cã²*, Zn²*, Mn²*, K*_y Na*^:o« Aí²* quanto a amina primária estericamente impedida,

    122, Método, de acordo com a reivindicação 121, em que o dite

    5 Mg²*, Ca²*, Zn²*, Ma²*, K*, Ma* ou AF* ê fornecido como acetãto de magnésio, cloreto de magnésio, fosfate de magnésio, sulfato dé magnésio, acetato de cálcio, cloreto de cálcio, fosfato de cálcio, sulfato de cálcio, acetato de zinco, cloreto dé zinco, fosfato de zinco, sulfato de zinco, acetato de manganês, cloreto de manganês, fosfato de manganês, sulfato de manganês, ace10 tato de potássio, cloreto de potássio, fosfato de potássio, sulfato de pôtâssiò, acetato de sódio, cloreto de sódio, fosfato de sódio, sulfato de sódiç, acetato de alumínio, cloreto de àluminíó, fosfato de alumínio ou sulfato de alumínio,

    123. Método, de acorde çam a reivindicação 122, em que o dito

    Mg²* Ca²* Zn²*, Μη²*, K* Ma* ou Al³* é fornecido como cloreto dé magné15 sio, cloreto de cálcio, fosfato de calcic, sulfato de cálcio, acetato de zinco, cloreto de manganês, cloreto de potássio, cloreto de sódio ou cloreto de alumínio,

    124. Método, de acordo com a reivindicação 121, em que o dito cátion é selecionado de Mg²* Ca²* ou Zn²*

    20 125. Método, de acordo com a reivindicação 124,²*²*²*em que o dito Mg²*, Ca²* ou Zn²* é fornecido como cloreto de magnésio, cloreto de cálcio ou acetato de zmeo.

    126.. Método, de acordo com a reivindicação 124, em que o dito cátion é Ca²*.

    25 127. Método, de acordo com a reivindicação 126,²*om que o dito Ca²* é fornecido como cloreto de cálcio,

    128. Método, de acorda com a reivindicação 121, em que a amina primária estenoamente impedida é um amínoácido,

    129. Método, de acordo com a reivindicação 128, em que o aml30 noâcido é um amínçáddo acorrendo naturalmente.

    138. Método, de acordo com a reivindicação 128, em que o amínoácidü acorrendo naturalmente é histidine, fenilalarana, atanina, ácido glu
17. 17/35 tâmico, ácfciq aspãrtico, glutamina, toudna, metionína, asparagína, tirosina, treóhfna, ísoleucma, tóptofan©, méftonina 'ou vslina.

    131. Método, de acordo com a reivindicação 130, em que o aminoácido ocorrendo naturalmente é histidina, fenílalanína, leucina, metlonína, isoteuana, tnptofanq ou valína,

    132. Método, de acordo com a reivindicação 131, em que o aminoácído ocorrendo naturalmente ê leucina, isoteucina, alanína ou metíonina,

    133. Método, de acordo com a reivindicação 132, em que o aminoácido ocorrendo naturalmente ê teucina.

    134. Método, de acordo com a reivindicação 121, em que a ami~ na primária ssterícamente impedida é um aminoácido não ocorrendo naturalmente ou um derivado de aminoacído.

    135. Método, de acordo com a reivindicação 134, em que o aminoácído não ueorrendo nateralmonio o ácido 1 -aminociclo-hsxano carboxílí co, lantenina ou teanina.

    136. Método, de acordo com a reivindicação 121, em que a ami- na primária esterícamente impedida tem a fórmula:

    R_? %

    em que R?_s R₂ e R_s são índependentemente salecionados de: H; ~-Ô(O)OH; CrCgàlquila, opcionaimente substituídos por -CO^H, CGMH.g, ou uma arila ou heteroanla de 5 a 1.0 membros; C.r€$ alcoxialquíla; ou CrCs ticalcoxial quila, em que qualquer um dos grupos alquila ou arila acima pude ser substituído simplesmente ou muftiptemente por halogênia ou --ΝΗχ, e contanto que não mais de dois de R>, R-? e R₃ sejam: H.

    137.. Método, de acordo com a reivindicação 136, em que a amine primária estencamente impedida é cicio-hexítamina ou 2-metiíbutilamína.

    13S. Método, de acordo com a reivindicação 121, em que a amína primária ssteríeamente impedida é uma amina puhménca.

    139. Método, de acordo com a reivindicação 138, em que a amína primária esterícamento impedida é quitosana..
18. 18/35

    140. Método, d® acerdo com as reivindicações 121 a 140, que a solução aquosa ainda ççmprèend® um .anttoxidantè,

    141. Método, de acordo com a reivindicação 140, em que o dito antioxidant® é BHA, BHT, vitamina E, gaiato de propila, ácido ascorbic® e sais ou êsteres dos mesmos, tocoferol e ésteres dos mesmos, ácido alfalipoico ou beta-caroteno.

    142. Método, de acordo com a reivindicação 141, em que o anticxidante é BHA.

    143. Método, de acorde com qualquer ume das reivindicações W a 142, em que o agiutinante está presente e é selecionado dè álcool dè políviniía, pelivínílpirrolidona (povidena), um amido, maltodextana ou um éter de celulose.

    144. Método, de acordo com a reivindicação 143, em que o agiutinante farmaceuticamente aceitável é um éter dè celulose.

    145. Método, de acordo com a reivindicação 144, em que o éter de celulose é selecionado de: metíluelulose, etilcelulose, cartexímetilcelulose, hidroxtetíi celulose, hidroxietíl metilceluíose, hídroxipropíl celulose e hid roxipro ρί I meti ioel u lose..

    146. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 90 a 145, em que o agente de enchimento ser selecionado de celulose, isomalte, manítol ou fosfato de cálcio díbâsíco.

    147. Método, de acordo com a reivindicação 146, em que o agente de enchimento é celulose microfina ou selutose micrõcristãlina.

    148. Método, de acordo ucm qualquer uma das reivindicações 90 a 147, em que a solução aquosa é aplicada ao ágeáte de enchimento por pulverização.

    149. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 99 a 147, em que a solução aquosa é aphcada ao agente de enchimento por mistura..

    150. Método, de acento cem qualquer uma das reivindicações 09 a 149, em que a razão em peso de linaclotida para agente de enchimento farmaceuticamente aceitável estar entre 1:100 e 1:2500.
19. 19/35

    151.. Método, de acordo com a reivindiçação 150» em que a razão em peso de línãclotidq para agente dé enchimento farmadeuticaménte aceitável está entre 1:100 e 1:1000.

    152. Método» de acordo com qualquer uma das mlvíndioaçáes

    5 121 a 151, em que a razão molar de cátíonmmlna primária esteticamente impedida: línadmida é 40-100:20-30:1;.

    153. Método, d®, acento cume reivindiceção 152, em que o cátion é Ca²*.

    154. Método, de acorda com a reivindicação 152, em que a ami10 na primária estericaraente impedida é leuciná:.

    155. Método, de acorda com a reivindicação 152, em que o cátion é Ca²* e a amina primária esteticamente impedida è leucíúa e a razão molar de Ca²*:leucina:linaclutida ser 100:30:1, 80:40:1, 80:30:1, 80:20:1, 00:30:1, 00:20:1, 50:30:1, 50:20:1,40:20:1,20:20:1,10:10:1,10:5:1 pu 5:5:1.

    15 156, Método, de acorde cem a reivindicação 155, um que a razão molar de Ca²*:leuci?w:línaciotida é 60:30:1.

    157. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 152 a 156, em que o agente de enchimento farmaceulicamente aceitável é selecionado de celulose, ísomaíte, manltol eu fosfato de cálcio díbásico.
20. 20 158. Método, de acordo com a reivindicação 157, em que o agente de enchimento farmaceuticamente aceitável é celulose microãna ou celulose mtoreoristato.

    159. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações

    152 a 158, em que o aglutinante farmaceuticamente aceitável é álcool de 25 polivíníla, põlívinilpirrolidona (povidona), um amido, maltodextrina óu um éter de celulose.

    150. Método, de acordo com a reivindicação 159. em que o agíutinante fermsceuticamente aceitável é um éter de celulose..

    161. Método, de acordo com a reivindicação 159, em que o agiu30 tinante farmaceutícamente aceitável é metfcelulose, eiiícelutose, carboximatilceluíose, hidroxietil celulose, hidroxielil metilcemiose. hidroxipropil celulose é hidroxipreplí metiicelulese.

    20/35

    162:. Método, d.e acordo corn qualquer uma das reivindicações

    99 a 161, em que ò método ainda çompreende (c) aplicar um revestimento ao agente de enchimento revestido com linactotída.

    163. Método,, dé acordo com a reivíndiçaçãa 182, em que o dito

    5 revestimento é selecionado dentre Aquacoat, Eudrqgit ou Opadry.

    164. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações

    99-163, em que © agente de enchimento revestido cem linaclotída ê misturado com um ou mais aditivos farmaueutícamenté aceitáveis,

    165. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações

    16 99 a 164, em que ainda compreende comprimir ou encapsular ò agente de enchimento revestido com linaclotída em um comprimido ou cápsula, respectivamente.

    166·. Método, de acordo com a reivindicação 185, em que o dito agente de enchimento revestido com iinadotida é encapsulado em uma oap15 sula.

    167. Método, de acordo com a reívtndíçação 166, em que a cápsula ser uma cápsula de gelatina,

    168. Método, de acordo com qualquer uma dás reivindicações

    165 a 167, em que cada cápsula ou comprimido contém 50 pg a 1 mg de 20 linaclotida.

    169. Método, de acordo com a reivindicação 158.. em cada cápsula, ou comprimido conter 50 pg, 67,5 pg, 100 pg, 133 pg, 150 yg, 200 pg, 286 pg, 300 pg, 400 pg, 500 pg ou 600 pg de linaclotida.

    170. Método, de acordo com a reivindicação 189, em que cada 25 cápsula ou comprimido contém 67,5 pg, 133 pg, 150 pg, 286 pg ou 300 pg de Imacfôtidá.

    171. Método para tratar um paciente sofrendo de meíilídade intestinal enfraquecida:, síndrome de intestino irritável, constipação, dor associada com constipação:, dispepsia, gastroparesia, pseudo-obstrução intèsti-

    36 nal crônica, Doença de Crohn, colite ulcerativa, ou doença do intestino infla·· matéria, compreendendo administrar as paciente uma quantidade eficaz da composição farmacêutica como definida, em qualquer uma das reivindica
21. 21/35 çêes 1 a 98.

    '1721 Método, de acordo com a reivindiçaçâa 171, em que a dítá sindrorne de intestino irritável é sindrome de intestino irritável do constipação predominante ou sindrorne de intestino ifntâvei alternada,

    173. Método, de acordo com a reivindicação 172, em que a dita sindrorne de intestino irritável é sindrorne de mtestino Irntável de constipação predominante,

    174. Método, de acordo com a reivindicação 171, em que a dita constipação é constipação crônica, constipação idtopátíca, ileo pôs-operatiw ou constipação causada por uso de opiáceá

    175. Método, de acordo com a reivindicação 174, em que a dite constipação ê constipação crônica.

    176. Método, de acordo com qualquer urna das reivindicações 171 a 175, em que a composição fermacêutica contêm 50 pg a 1 mg de lineclotida.

    177. Método, de acordo corn a reivindicação 176, em que a composição farmacêutica contém 50 pg, 67,5 pg, -1.00 pg_s. 133 pg, 150 pg, 200 pg, 266 yg, 300 pg, 400 pg, 500 pg ou 600 yg de iinaclotida.

    178. Método, de acordo com a reivindicação 177, em que a composição farmacêutica contém 67,5 pg, 133 pg, 150 pg, 260 pg ou 300 pg de línacfotida..

    179. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 171 a 178, em que a composição farmacêutica êé administrada uma vez ao dia, duas vezes ao dia, três vezes ao dia ou quatro vozes an dia,

    180. Método, de acordo com a reivindicação 179, em que a composição farmacêutica éé administrada uma vez ao dia ou duas vezes ao dia.

    181. Método, de acordo com a reivindicação 180, em que a çampusíção farmacêutica é administrada uma vez ao dia.

    182. Método, de acordo com a reivindicação 181, em que a composição farmacêutica é administrada urna vez ao dia corno um ou doss comprimidos ou cápsulas.
22. 22/35

    183. Método, de acordo eom a reivindicação 182, em que a composição farmacêutica é administrada como um único comprimido ou cápsula,

    184. Composição, caracterizada por ser pato menos 1033, pelo 5 menos 2036, pelo menos 30%, pelo menos 4034 ou pelo menos 3034 em peso um produto de hidrélise de linaclotida.

    185. Composição, de acordo com a reivindicação 184, em que a composição ê pelo menos 8036, pelo menos 7034 ou pelo menos .8036 em peso um produto de hidrélise de linaclotida.

    10 188, Composição, de acordo com a reivindicação 185, em que a composição ê pelo menos 9034, pelo menós 95% ou pelo menos 9834 em peso um produto de hidrélise de línactótida.

    187. Composição, caracterizada por ser peto menos 10%,. pelo menos 20%, pelo· monos 30%, pelo menos 40% eu pelo menos §0% em pe-

    15 so um produto de oxidação de linaclotida,

    188. Composição, de acordo com a reivindicação 187, em que a composição ê pelo menos 6034, peto menos 7034 ou pelo menos 80% em peso um produto de oxídáção de linactoiida.

    189. Composição, de acordo cem a reivindicação 188, em que a 20 composição ê pelo menos 9034, pelo menos 95% ou pelo menos 9834 em peso um produto de oxidação de línactotida.

    190. Composição, que é peto menos 1034, pelo menos 2034, pelo menos 30%, pelo menos 4014 ou peto menos 50% em peso um produto de formaldeídu imína de hnactolida.

    25 191, Composição, de acordo com a reivindicação 190, em que a composição é pelo menos 60%, peto menos 70% ou peto menos 80% era peso um produto de formafdeído imína de linaclotida.

    192. Composição, de acordo com a reivindicação 191, em que a composição é peto menos 90%, pelo menos 9534 oy pelo menos 98% em

    30 pese ura produto de formaldeído imína de linaclotida.

    193, Método para avaliar a pureza de uma formulação farmacêutica compreendendo linaclotida, o método compreendendo:
23. 23/35 (a) fornecer uma amostra da formulação fermacêutica compreendendo linàçiotídà;

    (b) medir a quantidade de pelo menos um produto de degradação na amostra selecionado do grupo consistindo em: um produto de oxida-

    5 ção de línaclotlda, um produto de hídrõlise de iinaclotlda e um produto de formaldeido imina de iinaciotída; e (c) comparar a quantidade medida do produto de oxidação de H~ naciotida, do produto de hídrólise de llnaclotída e/ou do produto deformãldeido imina de linaototida com uma quantidade padrao de referência do produto to dè oxídaçâo de linacíotida, do produto de hídrolise de iinãctótida ou do produto de formaldeído imina para avaliar a pureza da formulação farmacêutica.

    104. Método para identificar uma impureza em uma amostra compreendendo íinaclotídà. compreendendo:

    15 (a) fornecer uma amostra de referência compreendendo um marcador de referência e li naciotida;

    (b) conduzir HPLC na amostra de referência para determinar o tempo de retenção relativo do marcador de referência comparado ao da IInaciotida;

    20 (c) conduzir HPLC na amostra compreendendo linacfotida para determinar o tempo de retenção relativo da impureza comparado ao da linaclotsda;

    (d) comparar os tempos de retenção relativos determinados nas etapas (b) e (c); onde, se os tempos de retenção relativos foram substancl-
24. 25 almente os mesmos, a impureza é identificada como sendo a mesma que o marcador de referência;:

    em que o marcador de referência ê setecionado do grupo consistindo em um produto de oxidação de iinanlotida; iw produto de hídrólise da iinaciotida ou um produto de formaideido irmna de iinadotida.

    30 195. Método para determinar a quantidade da uma impureza em uma amostra de línaclotida, compreendendo:

    (a) adicionar uma quantidade conhecida de uma amostra de re~ ferência â amostra de linactotida;

    (b) submeter a amostra de llhadètida ã HPLC;

    (o) identificar e medir a. área de um pico de HPLC associado à impureza;

    (d) identificar e medir a área de um pica de HPLC associado ao padrão de referência;

    (e) calcular a quantidade da impureza na amostra de line detida com base nos resultados das etapas (c) e (d);

    em quo a amestra de referencia ê selecionada de grupo consistindo em um produto de oxidaçãu de linadotída; um produto de hferolise de linaclotida ou um produto de formaideído ímina de linacíotida.

    196. Método pára determinar a quantidade de uma impureza ém uma amostra de Ilnaclotída compreendendo:

    (a) fornecer uma amostra de tínaçtotida contendo urna concen tração desconhecida da impureza:

    (b) fornecer uma amestra de uma concentração conhecida da impureza;

    (c) submeter pelo menos uma porção da amostra de linadotsda e pelo menos uma porção da amostra de impureza a HPLQ;

    (d) medir a área dos picos de impureza obtidos da amostra de línaclefida e da amostra de impureza; e (e) calcular a quantidade da impureza na amestra de linaclotida com base nas medmòes da etapa (d);

    em que a impureza é selecionada do grupo consistindo em um produto de óxidação de linactotída; um produto de hídrolíse de línaclótida úu um produto de formaldaido ímina de línactotida.

    197< Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 2, 15 ou 21 a fto, forma de dosagem unitária, da acordo com qualquer uma das reivindicações 3, 4, 16 ou 96 a 98, ou recipiente vedado, de acordo com qualquer uma das reivíndieações 5, 6, 17 eu 236, caractedzadu por um produto de hidrúhse lendo uma estrutura de compreender menos de 2% em peso comparado ao peso da linaclotida.

    198. Composição fermacêutica, forma de dosagem unitária ou recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 197, em que o produto de hHrôiise compreende menos de 1¾ em peso ou menos de 0,5% em peso

    5 comparado ao peso da linacfótida.

    199. Composição farmacêutica, forma de dosagem unitária ou recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 198, em que o produto de hldrõfee compreender menos de 0,1% em peso ou menos de 0,05% em peso comparado ao peso da linaclotida.

    10 209. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 15 ou 21 a 95, forma de dosagem unitária, de acordo com qualquer uma das reivindicações 3, 4, 16 ou 96 a 98, ou recipiente vedado, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5, 8, 17 ou 238, caracterizado por um produto de fermaídeldò imina tendo uma estrutura de

    H._?C~^?-C^\s-Cys-Glú~Tyr-Cy§-Q^%sn-Prf>Aia-Cys-Thr-Gly-Cys-’Tyr-ÔH

    

    15 compreender menos de 2% em peso comparado ao peso da linaclotida.

    201, Composição farmacêutica, forma dá dosagem unitária ou recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 200, em que o produto de formaldeído imina compreender menos de 1% em peso ou menos de 0,5% em peso comparado ao peso da linaclotida.

    20 202, Composição farmacêutica, forma de dosagem unitária ou recipiente vedado, de acordo corn a reivindicação 201, em que o produto de fçrmaldeldo imíria compreender menos de 0,1% em peso ou menos de 0,05% em peso comparado ao peso da línaelotidã.

    293, Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma

    25 das reivindicações 1, 2, 15 ou 21 a 95. forma de dosagem unitária, de acordo com qualquer uma das reivindicações 3, 4, 16 ou 96 a 98, ou recíptente vedado, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5, 6, 17 ou 238, caracterizado por um produto de uxidação de linaclotida tendo um peso mo

    2.6/35 leuular da 1542,8 compreender menos de 2% em peso comparado ao peso da iínaclotida,

    204. Composição farmacêutica, forma de dosagem unitária ou recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 203, em que o produto de oxídação d® línaçlotida compreender menos de 1% em peso ou menos dê 6,5% ern peso comparado ao peso da Iínaclotida.

    205. Composição farmacêutica, forma de dosagem unitária óu recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 204, em que o predate de oxídação de loactotida compreender menos de 0,1% em peso ou menos de 0,05% em peso comparado ao peso da linaclotida.

    206, Composição farmacêutica compreendendo foadutída e -excipiente farmaceutioamènte aceitável em que a pureza çrumategráfica da linaciotída ser maior que ou igual a 90% apes (a) 18 meses de estocagem da composição farmacêutica a 25⁶C a 60% do umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante ou (b) 6 meses de estocagem da composição farmacêutica a 4{FC a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.

    207. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 206, em que a pureza cromatografíca da linaciotída é maior que ou igual a 91%,. 92%, 93%, 94%, 95% ou 96% após (a) 18 meses de estocagem da composição farmacêutica a 25*C a 60% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante ou (b) 6 meses de estocagem da composição farmacêutica a 40^eC a 7.5% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.

    208, Forma de dosagem unitária de uma composição fermacêutica compreendendo lioaclotidã e excipiente farmaceuticamente aceitável, em que a pureza cromatografica da linactetída é maior que ou igual a 90% apõs (a) 18 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 25*C a 6Ô% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante ou (b) 6 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 4(FC a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante,

    209, Forma de dosagem unitária, de acordo com a reivindicação

    208, em que a pureza oromaíográfiQa da línacloiida é maior que ou igual a 91%, 92%, 9333, 94%, 95% ou 98% apôs (á) 18 mesas de estocagem dá forma de dosagem unitária a 25X a 8Ô% de umidade relativa em um recipients vedado contendo um dessçcante ou (b) 6 meses de estocagem da for5 ma de dosagem unitaria a 40X a 75%: de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante,

    210. Recipiente vedado, compreendendo uma pluralidade de fdmias dê dosagem unitárias de uma composição farmacêutica compreendendo línacíotida e excipients farmaceuticamente aceitável em que a pureza

    10 crdmatogreficá da lináclotida e maior que ou igual a 9033 após (á) 18 meses de estocagem de recipiente vedado contenda um dessecante a 25*C a 5033 de umidade relativa ou (b) 6 meses de estocagem do recipiente vedado contendo um dessecante a 4GX a 75% de umidade relativa.

    211. Recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 210, em

    15 que a pureza cromatográfíca da línaclotida è maior que ou igual a 91 %, 92%,

    9385, 9433, 95% ou 95% apôs (a) 18 meses dé estocagem do recipiente vedado contendo um dessecante a 25^WC a 60% de umidade relativa ou (b) 6 meses de estocagem do recipiente vedado contendo um dessêcante a 40X a 75% de umidade relativa,

    20 212. Composição farmacêutica compreendendo linaclotída e excípíente farmaceuticamente aceitável, em que o valor de ensaio para linaclotida: determinado em uma base peso/peso ser maior que ou Igual a 90% apõs (a) 18 meses de estocagem da composição farmacêutica a 25*0 a 80% de umidade relativã em um recipiente vedado contendo um dessscante ou 25 (b) 6 meses de estocagem da composição farmacêutica a 4Õ’X a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.

    213. uomposlçãc farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    212, em que o vafor de ensaio pare a llnaciotida ê maior que ou igual a 91%, 92%, 933Í, 9433, 95%, B6%, 9733, 98% ou 99% apôs (a) 1.8 meses de esto30 cagam da composição farmacêutica a 25Χ a S0% de umidade relativa em um recipiente vedado contando um desseeante ou (b) 6 meses de estocagem da ccmposição farmacêutica a 40X a 75% de umidade relativa em um
25. 28/35 recipiente vedado contendo um dessecante.

    214. Forma de dosagem unitária de uma composição farmacêutica compreendendo linadntida e excipiente faonaceuticamente aceitável, em que 0 valor de ensaio para linaclotída determinado em uma base pe~ 5 so/peso ser maior que ou Igual a 90%. apôs (a) 18 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 25^<!G a 60% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante cu (b) 8 meses de estocagem da fôrma de dosagem unitária a 40X a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecanta.

    10 215. Forma de dosagem unitária, de acordo com a reivindicação

    214, em que o valor de ensaio para a linaciotida ser maior que ou igual a 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ou 99% após (a) 18 meses de estooagern da forma de dosagem unitária a 25*0 a 60% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um desseeante ou (b) 6 meses de esto15 cagem da forma de dosagem unitária a -40X a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.

    216. Recipiente vedado, compreendendo uma pluralidade de formas de dosagem unitárias dé uma composição farmacêutica compreen dendo línaclotlda e excipíente farmaceutícamente aceitável em que 0 valor 20 de ensaie para linaclotida na forma de dosagem unitária determinado em uma base peso/peso é maior que ou igual a 90% após (a) 18 meses de es~ tocagem do recipiente vedado contendo um dessucante a 25* C a 60% de umidade relativa ou (b) 6 meses de estocagem do recipiente vedada contendo um dessecante a 40*G a 75% de umidade relativa.

    25 217. Recipiente vedado, de acordo com a reivindicação .216, cm que o valor de ensaio para a linaçíetida é maior que ou igual á 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ou 99% após (a) 18 meses de estooagem do recipiente vedado contendo um dessecante a 25X e 66% de umidade relativa ou (b) 6 meses de estecagem de recipiente vedado contendo um 30 dessecante a 4(TC a 75% de umidade relativa.

    218. Forma de dosagem unitária, de acordo com qualquer urna das reivindicações 208 e 209 ou 214 © 215, ou o retípiente vedada, de acor
26. 29/35 do com qualquer urna das reivindicações 210 e 211 ou 216 e 217, em que cada forma, de dosagem unitária canter de 50 pg a 2 mg de linaclotida,

    210. Forma de dosagem unlteria ou recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 218, em que cada forma de dosagem unitária contém

    5 67,5 pg, 100 pg, 133 pg, 150 pg, 200 pg, 266 yg, 300 pg, 400 yg. 500 yg ou 600 pg de linaclotida.

    220. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    206 ou 207, em que a pureza cromatográfíca da linaclotida é maior que 90% após (a) 24 meses de estocagem da composição farmacêutica a 25^;'C a

    10 60% de umidade relativa em urn recipiente vedado contendo um dessecante ou (b) 6 meses de estocagem da composição farmacêutica a 4fFC a 75%· de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.

    221. Forma de dosagem unitária, de acordo com a reivindicação

    208 ou 209. em que a pureza cromatográfica da linaclotida é maior que 90%

    15 após (a) 24 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 25*C a 60% de umidade relativa em um recipiente vedado contenda um dessecante au (b) 6 meses de estocagem da forma de dosagem unitária a 40X a 75% de umidade relativa, em um recipiente vedada contendo um dessecante.

    222. Recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 210 ou

    20 211, em que a pureza cromatografica da linaclotida è maior que 90% apõs (a) uns primeiros 24 meses de estocagem do recipiente vedado contenda um dessecante a 25*Q â 60% de umidade relativa ou (b) uns primeiros 6 meses de estocagem do recipiente vedado contendo um dessecante a 4(FC a 75% de umidade relativa.,

    25 223, Composição farmacêutica, de acordo oam a reivindicação

    212 ou 213, em que o valor de ensaio da linaciotida é maior que 90% apõs (a) uns primeiras 24 meses de estocagem da composição farmacêutica a 25X a 60%. de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante ou (b) uns primeiros 6 meses da estocagem da composição far*
27. 30 macêutica a 40X a 75% de umidade relativa em um recipiente vedado contendo um dessecante.

    224, Forma de dosagem unitária, de acordo com a reivindicação

    30/35

    214 pu 215., em que o valor de ensaio da linaclatida e maior que 90% apôs (a) uns primeiros 24 meses de estocagem da forma da dosagem 'únltáriã a 25^eC a 50% de umidade relativa em um recipiente vedada contendo um dossecante ou (b) uns primeiros 6 meses de astonagem da forma de dosa5 gem unitária a 40X a 75% de umidade relativa -em um recipiente vedado contendo um dessecante.

    225, Recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 218 ou 217, em que. o valor de ensaio da linaolotida é maior que 90% apôs (à) uns primeiros 24 meses de estoGagem do recipiente vedado contendo um des-

    10 secante a 25X a 80% de umidade relativa ou (b) uns primeiros 6 meses de esfôcagem do recipiente vedado contendo um dessecante a 40^-C a 75% de umidade relativa.

    226. Composição farmacêutica,, de acordo com qualquer uma dás réivindleáções 206, .207 ou 223, fôrma de dosagem unitária, de acordo

    15 com a reivindicação 208, 209 ou 224, ou recipiente vedado, de acorde com qualquer uma das reivindicações 210, 211 ou 225, em que um produto de hidrólise tende a estrutura de

    H^Cy&'Cys-Glu-TyrC^s-Cys-Asp-^o-Ala-CyS'Ttv-G^Cys-Tyr-GH compreender menos de 2% -em peso comparado ao peso da linaclotitía.

    227, Compossçào farmacêutica, forma de dosagem unitária ou 20 recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 226, em que o produto de hidrólise compreende menos de 1% em peso ou menos de 0,5% em peso comparado ac peso da Imaolotida.

    226. Composição fomiaoêutica, forma de dosagem unitária ou recipiente vedado, de acordo corn a reivindicação 227, sm que o produto de 25 hidrófee compreende menos de 0,1% em peso ou menos de 0,85% em peso comparado ao peso da linaclotída.

    229. Composição farmacêutica, da acordo com qualquer uma das reivindicações 206, 207 ou 223, forma de dosagem unitária, de acordo com qualquer uma das reivindicações 208, 209 ou 224, ou recipiente veda30 do, de acordo oom qualquer uma das reivindicações 210, 211 ou 225, em
28. 31/35 que um produto de formaldeido imina tendo a estrutura, de

    H_;;C~'~Cyg Cy€-Glu--Tyr-'GyS“Cys^fomFra~AH-Oys-Thr-Gb'~Cys-Tyr-QH compreender menos de 2% em peso comparado ào peso da Onaclotida.

    230. Composição farmacêutica, turma de dosagem unitária ou recipiente vedado, de acorde com a reivindicação 229. em que o produto de

    5 formaldeldo imina compreende menos de í% em peso ou menos de 0,5% em peso comparado ao peso da ilnaciotida.

    231. Composição farmacêutica* forma de dosagem unitária ou recipiente vedada, de acordo com a reivindicação 230, em que o produto de formaldekto imina compreender menos de 0,1% em peso ou menos de

    10 0,05% em pese comparado ao peso da linaclotída,

    232. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 206, 207 ou 223, forma de dosagem unitária, de acordg com qualquer uma das reivindicações 208, 200 ou 224, ou recipiente vedado, de acordo com qualquer uma das reivindicações 210, 211 ou 225, carac-

    15 terizado por um produto de oxídação de ílnaclotida tendo um peso molecular de 1542,8 compreender menos de 2% em peso comparado ao peso da linadotida.

    233. Composição fermacêutíca, forma de dosagem unitária ou recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 225, em que o produto de

    2.0 oxidaçào de hnaciouda compreende menos de 1% em peso ou menos de 0,5% em peso comparado ao peso da linaclotlda,

    234. Composição farmacêutica, forma de cfosagem unitária ou recipiente vedado, de acordo com a reivindicação 233, em que o produto de oxidação de linaclótida compreende menos de 0,1% em peso ou menos de

    25 0,05% em peso comparado ao pese da linaclótida.

    235. Forma de dosagem unitária, compreendendo composição farmacêutica como definida em uma das reivindicações 21 a 95,

    236. Forma de dosagem unitária, de acordo com a reivindicação 235, em que a dite forma de dosagem unitária contém 50 pg a 1 mg de lina-

    30 clotida.

    237. Forma de dosagem unitária, de acordo com a reivindicação 236, em que a dita forma de dosagem unitária é uma cápsula ou comprimido e em que cada forma de dosagem unitária contem 67,5 pg. 100 pg. 133 yg, 150 pg, 200 pg, 266 pg, 300 yg, 400 pg, 500 pg ou 600 yg de linaclotida.

    238. Recipiente vedado, compreendendo urna pluralidade de formas de dosagem unitárias como definidas em qualquer uma das reivindicações 96 a 98 eu 235 a 237.

    239. Método para tratar síndrome de intestino irritável com constipação (IBS-c) em um paciente adulto necessfendo do mesmo, compreendendo ádmmistrar ao paciento uma vez ao dia uma quantidade eficaz da composição farmacêutica como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 95

    240. Método, de acordo com a reivindicação 239, em que a dito quantidade eficaz ser 266 pg de hnaclotida.

    2:41. Método, de acorde com a reivindicação 239, em que a dita quantidade eficaz ser 133 pg de ifaadotida,

    242. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 239 a 241, em que o dito tratamento é por um período de pato menos uma semana.

    243. Método, de acorda com a reivindicação 242, em que o dito tratamento é per um pentode de peto menos quatro semanas.

    244. Método, de acorda com a reivindtoaçãp 239, em que o dito tratamento melhora pelo menos um sintoma selecionado de dor abdominal reduzida, um aumento no número de movimentos de intestino espontâneos completos (CSBM) em uma semana, um aumento no número de movimentos de intestino espontâneos (SBM) em uma semana, consistência de fezes melhorada, esforço reduzido, desconforta abdominal reduzido, inchaço reduzido eu gravidade do sintoma de IBS-c reduzida.

    245. Método, de acordo com: a reivindicação 244, ém que o dito tratamento melhora pelo menus um sintoma safeciunado de dor abdominal reduzida, desconforto abdominal reduzida ou inchado reduzido.

    246. Método, de acordo com a reivindicação 244, em que o dito
29. 33/35 tratamento melhora peto menos um sintoma selecionado de um aumento no número de CSBM em uma semana, um aumento no ndmem de movimentos de intestino espontâneos SBM em uma semana, consistência de fezes melhorada ou esforço reduzida,

    5 247. Método, de acardo com qualquer uma das reivindicações

    239 a 248, em que uma cápsula ou comprimido compreender a dita composição farmacêutica.

    248. Método para tratar constipação crônica èm um paciente humano adulto necessitando do mesmo, compreendendo administrar ao pato ciente uma vez ao dia uma quantidade eficaz da composição farmacêutica como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 95,

    249. Método, de acordo com a reivindicação 248, em que a dita quantidade eficaz ê 288 pg de liaadotida,

    250. Método, de acordo com a reivindicação 248, em que a dita

    15 quantidade eficaz é 133 pg de linaclotida,

    251. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 248 a 250, em que o dito tratamento é por um penedo de pelo menos uma semana.

    252. Método, de acordo com a reivindfcação 2S1, em que o dito 20 tratamento ê por um período dé polo men os quatro sem anas.

    253.. Método, de acordo com a reivindicação 248, ern que o dito tratamento melhora pelo menus um sintoma selecionada de um aumento no número da movimentos de intestino espontâneos completos (CSBM) em uma semana, um aumento no numero de movimentos de intestino sspontâ25 naos (SBM) em uma semana, consistência de fezes melhorada, esforço reduzsdo, desconforto abdominal reduzido, inchado reduzido ou gravidade reduzida de constipação

    254. Método, de acordo com a reivindicação 253, em que o dito tratamento melhora peto menos um sintoma selecionado de desconforto ab-

    30 dominai reduzido, inchado reduzido ou gravidade reduzida de constipação.

    255, Método, de acordo com a reivindicação 253, em que o dito tratamento melhora pelo menos um sintoma selecionado de um aumento no
30. 34/35 numera de CSBM em uma semana, um aumento no número de movimentos de intestino espontâneos SBM em uma semana, consistência de fezes melhorada ou esforço reduzido.

    258. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 248 a 255, em que uma cápsula ou um comprimida compreende a dita composição farmacêutica.

    257, Método para preparar uma composição farmacêutica, compreendendo Imaelafida ou um sal da mesma, o método compreendendo:

    (a) fornecer uma solução compreendendo:

    10 (I) linadotidà ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma;

    (li) um ou mais de um cátiou selecionado de Mg'^;*, Ca²'\ Zrri*,

    M-h²*, K* Ne* ou AH* ou uma ámina primária estericamente impedida; e (b) secar por pulverização a solução para produzir micropartículas de linaclotida.

    15 258. Método, de acordo com a reivindicação 257, em que a dita solução é aquosa.

    259. Método, de acordo com a reivindicação 257, em que a dita solução ainda compreende um aglutinante ou um agente de enchimento.

    260. Composição farmacêutica< compreendendo;

    20 linaclotida;

    Ca²*;

    leucine, a hidroxipropii mettelulose, em que a linaclotida está presente na composição farmacêutica 25 em uma quantidade entre lOOpg a SÔOyg e a razão molar de Ça²*:leucina:linaciotida está entre 5-100:5-50:1.

    261. Cempésição femnacêutiça, de acordo com a reivindicação 280, em que a linaclotida é apresentada em uma quantidade de 266yg.

    262. Composição farmacêutica, de acordo com as reivindicações 30 260 e 261, em que o Ca²* é fornecido como CaCh..

    263. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 262, em que c CáCfe está presente em uma quantidade de 1541 pg.
31. 35/35

    234. Composição farmacêutica, de acurdc com as reivindicações 260 a 253_s êm que á ieueina esta presente em ürha quantidade de 687pg,

    265. Composição farmacêutica, de acordo com as reivindicações

    260 a 264, em que a hídroxlpropil metiloeíulose está presente em uma quantidade de 700pg

    266. Composição farmacêutica, compreendendo contas revr^stidas, em que as contas são revestidas com uma solução de revestimento compreendendo línaclçtlda.

    267. Composição farmacêutica, de acorda com a reivindicação

    266, em que a solução de revestimento compreender:

    línaclotida;

    Ca^s<:

    Ieueina; e hidroxípropil metilce lu lose, em que a linaclotida está presente na composição farmacêutica em uma quantidade entre lOOpg a 600pg e a razão melar de Ca²*:ièusina:línaclotida este entre 5-105:5-50:1.

    268. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação

    267, em que a linaclotida está presente em uma quantidade de 266pg.

    260. Composição farmacêutica, de acordo com as reivindicações 267 e 268, em que o Ca²* ê fornecido como CaCb.

    270. Composição farmacêutica, da acordo com a reivindicação 259, em que o CaCh está presente em uma quantidade de 1541pg.

    271; Composição farmacêutica, de acordo com as reivindicações 257 a 270, em que a teucína está presente em uma quantidade de 587pg,

    272. Composição farmacêutica, de acorde com as reivindicações 267 a 271, em que a hidroxipropií metilceiulose está presente em uma quantidade de 700pg.

    273. Cornpossção farmacêutica, de acordo com as reivindicações

    267 a 272, em que as contas compreendem celulose niíorocnstalina.