BRPI0918174A2 - composto que apresenta atividade contra o vírus da hepatite c (hcv), sua composição e seu uso - Google Patents

composto que apresenta atividade contra o vírus da hepatite c (hcv), sua composição e seu uso Download PDF

Info

Publication number
BRPI0918174A2
BRPI0918174A2 BRPI0918174A BRPI0918174A BRPI0918174A2 BR PI0918174 A2 BRPI0918174 A2 BR PI0918174A2 BR PI0918174 A BRPI0918174 A BR PI0918174A BR PI0918174 A BRPI0918174 A BR PI0918174A BR PI0918174 A2 BRPI0918174 A2 BR PI0918174A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
alkyl
phenyl
amino
substituted
hydroxyalkyl
Prior art date
Application number
BRPI0918174A
Other languages
English (en)
Inventor
Yeung Kap-Sun
E. Parcella Kyle
A. Bender John
R. Beno Brett
A. Grante-Young Katharine
Han Ying
Hewawasam Piyasena
F. Kadow John
Nickel Andrew
Original Assignee
Bristol-Myers Squibb Company
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41226922&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=BRPI0918174(A2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol-Myers Squibb Company filed Critical Bristol-Myers Squibb Company
Publication of BRPI0918174A2 publication Critical patent/BRPI0918174A2/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/82—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D307/84—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/10—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D453/00—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/10—Spiro-condensed systems

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

compostos para o tratamento de hepa-tite c a invenção provê compostos de fórmula 1, incluindo seus sais, 5 bem como composições e métodos de uso dos compostos. os compostos têm atividade contra o vírus da hepatite c (hcv) e podem ser úteis em tra-tamento daqueles infectados com hcv.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para COMPOSTO QUE APRESENTA ATIVIDADE CONTRA O VÍRUS DA HEPATITE C (HCV), SUA COMPOSIÇÃO E SEU USO.
REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS
O presente pedido reivindica o benefício do pedido de patente provisório U.S. N° de série 61/096.005 depositado em 11 de setembro de 2008. ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
A invenção refere-se em geral aos novos compostos de Fórmula I, incluindo seus sais, que têm atividade contra o vírus da hepatite C (HCV) (Hepatitis C Virus) e são úteis no tratamento daqueles infectados com HCV. A invenção refere-se também a composições e métodos de uso desses compostos.
O vírus da hepatite C (HCV) é um grande patógeno humano, infectando uma estimativa de 170 milhões de pessoas em todo o mundo mais ou menos cinco vezes o número de infectados pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1. Uma fração substancial desses indivíduos infectados por HCV desenvolve doença do fígado progressiva séria, incluindo cirrose e carcinoma hepatocelular (Lauer, G.M. e outros, N. Engl. J. Med., 345:41-52 (2001)).
O HCV é um vírus de RNA de filamento positivo. Com base em uma comparação da sequência de aminoácido deduzida e da similaridade extensiva na região não traduzida 5’, HCV foi classificado como um gênero separado na família Flaviviridae. Todos os membros da família Flavivirídae têm virions envelopados que contêm um genoma de RNA de filamento positivo codificando todas as proteínas específicas de vírus conhecidas através de tradução de uma estrutura de leitura aberta única, sem interrupção.
Heterogeneidade considerável é encontrada dentro do nucleotídeo e sequência de aminoácido codificada em todo o genoma do HCV. Pelo menos seis genótipos principais foram caracterizados, e mais de 50 subtipos foram descritos. Os genótipos principais de HCV diferem em sua distribuição em todo o mundo, e a significância clínica da heterogeneidade genética do HCV permanece elusiva apesar de vários estudos do possível
2/543 efeito de genótipos sobre patogênese e terapia.
O genoma de RNA do HCV de filamento simples é de aproximadamente 9500 nucleotídeos de comprimento e tem uma estrutura de leitura aberta (ORF) (Open Reading Frame) única codificando uma poliproteína grande única de cerca de 3000 aminoácidos. Em células infectadas, esta poliproteína é clivada em sítios múltiplos através de proteases celular e viral para produzir as proteínas estrutural e não estrutural (NS) (Non-structural). No caso de HCV, a geração de proteínas não estruturais maduras (NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A e NS5b) é realizada por duas proteases virais. A primeira é acreditada ser uma metaloprotease e cliva na junção NS2-NS3; a segunda é uma serina protease contida dentro da região N-terminal de NS3 (também referida como protease NS3) e faz a mediação de todas as clivagens subsequentes a jusante de NS3, ambos em cis, no sítio de divagem NS3-NS4A, e em trans, para os sítios NS4A-NS4B, NS4B-NS5A, NS5ANS5B restantes. A proteína NS4A parece servir funções múltiplas, agindo como um cofator para a protease NS3 e possivelmente auxiliando na localização na membrana de NS3 e outros componentes de replicase viral. A formação do complexo da proteína NS3 com NS4 parece necessária para os eventos de processamento, aumentando a eficiência proteolítica em todos os sítios. A proteína NS3 também exibe atividades de nucleosídeo trifosfatase e RNA helicases. NS5B (também referida como HCV polimerase) é uma polimerase de RNA dependente de RNA que está envolvida na replicação de HCV. A proteína NS5B de HCV é descrita em Structural Analysis of the Hepatitis C Virus RNA Polymerase in Complex with Ribonucleotides (Bressanelli, S. e outros, J. Virol., 3482-3492 (2002); de Defrancesco e outros, Clinics in Liver Disease, 7:211-242 (2003)).
Atualmente, a terapia para HCV mais eficaz emprega uma combinação de alfa-interferon e ribavirin, levando à eficácia sustentada em 40% de pacientes (Poynard, T. e outros, Lancet, 352:1426-1432 (1998)). Resultados clínicos recentes demonstram que o alfa-interferon peguilado é superior a alfa-interferons não modificados como monoterapia (Zeuzem, S. e outros, N. Engl. J. Med., 343:1666-1672 (2000)). No entanto, mesmo com regimes
3/543 terapêuticos experimentais envolvendo combinações de alfa-interferon peguilado e ribavirin, uma fração substancial de pacientes não tem uma redução sustentada em carga viral. Desta maneira, há uma necessidade clara e importante de desenvolver agentes terapêuticos eficazes para tratamento de infecção por HCV.
HCV-796, um inibidor de NS5B de HCV, mostrou uma habilidade em reduzir os níveis de RNA de HCV em pacientes. Os níveis de RNA viral diminuíram transientemente e então se recuperaram durante dosagem quando tratamento era com o composto como um agente único, mas os níveis caíram mais robustamente quando combinado com o padrão de tratamento que é uma forma de interferon e ribavirin. O desenvolvimento deste composto foi suspenso devido à toxidez hepática observada durante dosagem prolongada dos regimes de combinação. A Patente U.S. No. 7.265.152 e o pedido de patente PCT correspondente WO 2004/041201 A2 descrevem compostos da classe HCV-796.
A invenção provê vantagens técnicas, por exemplo, os compostos são novos e são eficazes contra hepatite C. Ainda, os compostos proveem vantagens para usos farmacêuticos, por exemplo, com relação a um ou mais de seus mecanismos de ação, ligação, eficácia de inibição, seletividade alvo, solubilidade, perfis de segurança ou biodisponibilidade.
DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO
Um aspecto da invenção é um composto de fórmula I r2 r20 R3 r4 yJsç^o
R1 R21
I
R1 é R5R6N; alcóxi; (alcoxicarbonilamino)alcóxi; (alquilfenil)alcóxi; (carboxi)alquenila; (alcoxicarbonil)alquenila; (benziloxicarbonil)alquenila; ((N-dimetilbenzil)aminocarbonil)alquenila; ou fenila onde a dita fenila é substituída com 1-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em halo, ciano, alquila, haloalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, (carboxi)alquila, alcóxi, hidroxialquilóxi, alcoxialquilóxi, benzilóxi, tetra
4/543 hidropiranilóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, alquilsulfonila, (carboxi)alquenila, (alcoxicarbonil)alquenila, alquilcarboxamido, alcoxicarboxamido, alquilsulfamido, (alquilsulfamido)alquila, Ar5, SO2NR15R16 e CONR7R8; e onde a dita fenila é também substituída com 0-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em halo; nitro; alquila; cicloalquila; haloalquila; aminoalquila; hidroxialquila; alcoxialquila; hidróxi; alcóxi; OR17; cicloalcóxi; amino; alquilamino; dialquilamino; alquilcarboxamido; alcoxicarboxamido; alcoxialquilcarboxamido; furanila, tienila ou pirazolila substituída com 0-2 substituintes alquila; piridinila substituída com 0-2 substituintes halo, ciano, alquila, hidróxi, alcóxi, amino ou alquilaminocarbonila; pirimidinila; pirimidinodionila; aminopirimidinila; indolila; isoquinolinila; ou fenila substituída com 0-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em halo, alquila, cianoalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, amino, carbóxi, alcoxicarbonila, aminocarbonila, alquilaminocarbonila, dialquilaminocarbonila, alquilcarboxamido, carboxialquenila e fenila;
R2 é hidrogênio, halo, nitro, amino, fenila ou R5R6N;
R3 é ciano, alcoxicarbonila, (cicloalquil)oxicarbonila, (alquilsulfonil)aminocarbonila, CONR11R12, (R11)(R12)NCONH, triazolila, tiazolila ou tetrazolila;
R4 é fenila substituída com 0-2 substituintes halo;
R5 é hidrogênio, alquila ou alquilsulfonila;
R6 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila, alcoxialquila ou alquilsulfonila;
R7 é hidrogênio, alquila, alquenila, alquinila, cianoalquila, haloalquila, hidroxialquila, di-hidroxialquila, alcoxialquila, oxoalquila, aminoalquila, (alquilamino)alquila, (dialquilamino)alquila, (cicloalquil)alquila, cicloalquila, (alquil)cicloalquila, (hidroxialquil)cicloalquila, (tetra-hidrofuranil)alquila, (tetrahidropiranil)alquila, (carboxi)alquila, (alcoxicarbonil)alquila, (alqueniloxicarbonil)alquila, (alcoxicarbonil)hidroxialquila, (CONR13R14)alquila, (CONRT3R14)(hidroxialquil)alquila, (CONR13R14)cicloalquila, (alquilcarbonil)aminoalquila, (fenil)alquila, (piridinil)alquila, alquilsulfonila, fenilsulfonila,
Figure BRPI0918174A2_D0001
5/543
R8 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila;
ou R7R8N, tomados juntos, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, di-hidroindolila ou isoindolinila, e são substituídos com 0-2 substituintes selecionados de alquila, hidroxialquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, dialquilcarboxamido, alquilcarbonilamino, alcoxicarbonilamino, piridinila e fenila onde a dita fenila é substituída com 0-2 substituintes halo ou alquila;
ou onde R7R8N, tomados juntos, são
Figure BRPI0918174A2_D0002
, (quinuclidinil)amino, (quinuclidinil)(alquil)amino, (metilpirrolidinil)(alquil)amino, ((imida zolil)alquil)(hidroxialquil)amino, (alquiltiazolil)amino, ((carboxamido)ciclopentanil)amino, ((halofenil)ciclopentanil)amino, 3Hespiro(isobenzofuranil)piperidinila, (hidroxiindanil)amino ou
Figure BRPI0918174A2_D0003
R9 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila;
R10 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila; ou R9 e R10, tomados juntos, são etileno, propileno, butileno, pentileno ou hexileno;
R11 é hidrogênio, alquila ou cieloalquiia;
R12 é hidrogênio, alquila ou cieloalquiia;
ou R11 e R12, junto com o nitrogênio ao qual eles estão ligados, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila;
R13 é hidrogênio, alquila, cianoalquila, haloalquila, alquenila, alquinila ou tiazolila;
R14 é hidrogênio ou alquila;
R15 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila, cieloalquiia ou benzila;
R16 é hidrogênio ou alquila;
ou R15 e R16, tomados junto com o nitrogênio ao qual eles estão ligados, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila;
R17 é haloalquila, cianoalquila, (cicloalquil)alquila, hidroxialquila,
6/543 alcoxialquila, aminoalquila, (R18)alquila, (Ar4)alquila, alquinila ou aminocicloalquila;
R18 é CONH2, H2NCONH, dibenzilamino, ftalimido, amino, alquilamino, dialquilamino, azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila onde azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila é substituída com 0-3 substituintes alquila ou alcoxicarbonila;
R19 é ciano, hidroxialquila, morfolinilalquila, carbóxi, alcoxicarbonila, cicloalquilsulfoxamido, ((alquil)pirazolil)amino, ((alquil)isoxazolil)amino, (tiadiazolil)amino, (triazinil)amino ou alquinilaminocarbonila;
R20 é hidrogênio, halo, alquila ou alcóxi;
R21 é hidrogênio, halo, alquila ou alcóxi;
Ar1 é fenila, naftalenila, piridinila, furanila, tienila, pirrolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, imidazolila, oxazolila, tiazolila, oxadiazolila, oxadiatiazolila, triazolila, tetrazolila, pirazinila, pirimidinila ou benzotiazolila, e é substituída com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, cicloalquila, haloalquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, amino, alquilamino, dialquilamino, aminocarbonila, piridinila, fenila, halofenila, alquilfenila, e alcoxifenila;
Ar2 é fenila, bifenila ou piridinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, ciano, hidróxi, alcóxi e carbóxi;
Ar3 é pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, imidazolila, oxazolila, tiazolila, triazolila, oxadiazolila, oxatiadiazolila, pirimidinila ou pirizinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de hidróxi, alquila, hidroxialquila e CONR13R14;
Ar4 é furanila, tienila, pirrolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, imidazolila, oxadiazolila, tiadiazolila, triazolila, piridinila, indolila ou fenila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, haloalquila, hidroxila, e alcóxi; e
Ar5 é pirrozolila, imidazolila ou oxadiazolila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de alquila, carbóxi, alcoxicarbonila, benzila, e fenila;
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspecto da invenção é um composto de fórmula I onde R20
7/543 e R21 são hidrogênio.
Outro aspecto da invenção é um composto de fórmula I onde:
R1 é R5R6N; (carboxi)alquenila; (alcoxicarbonil)alquenila; (benziloxicarbonil)alquenila; ou fenila onde a dita fenila é substituída com 1-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em ciano, alquila, alcóxi, hidroxialquila, alcoxialquila, hidroxialquilóxi, alcoxialquilóxi, haloalquila, benzilóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, alquilsulfonila, (carboxi)alquenila, (alcoxicarbonil)alquenila, alquilcarboxamido, alcoxicarboxamido, alquilsulfamido, (alquilsulfamido)alquila, tetra-hidropiranilóxi, Ar5, SO2NR15R16 e CONR7R8; e onde a dita fenila é também substituída com 0-1 substituinte selecionado do grupo consistindo em halo; alquila; hidroxialquila; alcoxialquila; hidroxila; alcóxi; OR17; cicloalcóxi; amino; alquilamino; dialquilamino; alquilcarboxamido; alcoxialquilcarboxamido; furanila; indolila; isoquinolinila; piridinila substituída com 0-2 substituintes halo, alquila, hidróxi ou alcóxi; pirazolila substituída com 0-2 substituintes alquila; e fenila substituída com 0-2 substituintes halo, alquila, cianoalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, aminocarbonila, alquilaminocarbonila, dialquilaminocarbonila, alquilcarboxamido, carboxialquenila ou fenila;
R2 é hidrogênio, nitro ou R5R6N;
R3 é ciano, alcoxicarbonila, (cicloalquil)oxicarbonila, (alquilsulfonil)aminocarbonila, CONR11R12, (R11)(R12)NCONH, triazolila, tiazolila ou tetrazolila;
R4 é fenila substituída com 0-2 substituintes halo;
R5 é hidrogênio, alquila ou alquilsulfonila;
R6 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila, alcoxialquila ou alquilsulfonila;
R7 é hidrogênio, alquila, alquenila, alquinila, cianoalquila, haloalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, oxoalquila, aminoalquila, (alquilamino)alquila, (dialquilamino)alquila, (cicloalquil)alquila, cicloalquila, (alquil)cicloalquila, (hidroxialquil)cicloalquila, (tetra-hidrofuranil)alquila, (tetrahidropiranil)alquila, (carboxi)alquila, (alcoxicarbonil)alquila, (alcoxicarbonil)hidroxialquila, (CONR13R14)alquila, (alquilcarbonil)aminoalquila, (fe8/543
R9 R10 *^R19
Άγ1 niljalquila, (piridinil)alquila, alquilsulfonila, fenilsulfonila, Ar2, Ar3,
R® R10 R9 R10 \/ X Ar1 * Ar1 , * OU
R8 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila;
ou R7R8N, tomados juntos, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila ou di-hidroindolila e são substituídos com 0-2 substituintes selecionados de alquila, hidroxialquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, dimetilcarboxamido, alquilcarbonilamino, alcoxicarbonilamino, piridinila e fenila onde fenila é substituída com 0-2 substituintes selecionados de halo e alquila;
Figure BRPI0918174A2_D0004
N\ ou onde R7R8N, tomados juntos, são 'n , (quinuclidinil)(alquil)amino, (metilpirrolidinil)(alquil)amino, (alquiltiazolil)amino, ((carboxamido)ciclopentanil)amino, ((halofenil)ciclopentanil)amino ou (hidroxiindanil)amino;
R9 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila;
R10 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila;
ou R9 e R10, tomados juntos, são etileno, propileno, butileno ou pentileno;
R11 é hidrogênio, alquila ou cicloalquila;
R12 é hidrogênio, alquila ou cicloalquila;
ou R11 e R12, junto com o nitrogênio ao qual eles estão ligados, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila;
R13 é hidrogênio, alquila, cianoalquila, alquenila ou alquinila;
R14 é hidrogênio ou alquila;
R15 é hidrogênio ou alquila;
R16 é hidrogênio ou alquila;
R17 é haloalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, alquinila, (R18)alquila ou (Ar4)alquila;
R18 é CONH2, dibenzilamino, amino, alquilamino, dialquilamino, azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila onde azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila é substituída com 0-3
9/543 substituintes selecionados de alquila e alcoxicarbonila;
R19 é ciano, ((alquil)pirazolil)amino, ((alquil)isoxazolil)amino (tiadiazolil)amino ou (triazinil)amino;
R20 e R21 are hidrogênio;
Ar1 é fenila, naftalenila, piridinila, tienila, tiazolila ou pirazinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de alquila, halo, hidróxi, alcóxi, amino, alquilamino e dialquilamino;
Ar2 é fenila, bifenila ou piridinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, ciano, hidróxi e alcóxi;
Ar3 é pirazolila, isoxazolila, tiazolila, pirimidinila ou pirizinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de alquila e hidroxialquila;
Ar4 é pirrolila, imidazolila, piridinila, indolila ou fenila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, hidroxila e alcóxi; e
Ar5 é pirrozolila, imidazolila ou oxadiazolila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de alquila, carbóxi, alcoxicarbonila, benzila e fenila;
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspecto da invenção é um composto de fórmula I onde:
R1 é alcóxi; (alcoxicarbonilamino)alcóxi; (alquilfenil)alcóxi; (carboxi)alquenila; ((N-dimetilbenzil)aminocarbonil)alquenila; ou fenila onde a dita fenila é substituída com 1-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em halo, ciano, alquila, haloalquila, hidroxialquila, (carboxi)alquila, alcóxi, hidroxialquilóxi, tetra-hidropiranilóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, (carboxi)alquenila, alquilcarboxamido, alcoxicarboxamido, (alquilsulfamido)alquila, Ar5, SO2NR15R16 e CONR7R8; e onde a dita fenila é também substituída com 0-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em halo; nitro; alquila; cicloalquila; haloalquila; aminoalquila; hidróxi; alcóxi; OR17; cicloalcóxi; amino; alcoxicarboxamido; furanila, tienila ou pirazolila substituído com 0-2 substituintes alquila; piridinila substituída com 0-2 substituintes halo, ciano, alquila, hidróxi, alcóxi, amino ou alquilaminocarbonila; pirimidinila; pirimidinodionila; aminopirimidinila; indolila; isoquinolinila; e fenila substituída com 0-2 substituintes selecionados de halo, cianoalquila, hidroxialquila, alcoxialquila,
10/543 alcóxi, amino, carbóxi, aminocarbonila, alquilaminocarbonila, alquilcarboxamido e carboxialquenila;
R2 é hidrogênio, halo, nitro, amino, fenila ou R5R6N;
R3é CONR11R12;
R4 é fenila substituída com 0-2 substituintes halo;
R5 é hidrogênio ou alquilsulfonila;
R6 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alquilsulfonila;
R7 é hidrogênio, alquila, alquinila, cianoalquila, haloalquila, hidroxialquila, di-hidroxialquila, alcoxialquila, oxoalquila, (dialquilamino)alquila, (cicloalquil)aiquila, cicloalquila, (alquil)cicloalquila, (hidroxialquil)cicloalquila, (tetra-hidrofuranil)alquila, (tetra-hidropiranil)alquila, (carboxi)alquila, (alcoxicarbonil)alquila, (alqueniloxicarbonil)alquila, (alcoxicarbonil)hidroxialquila, (CONR13R14)alquila, (CONR13R14)(hidroxialquil)alquila, (CONR13R14)cicloalquila, (alquilcarbonil)aminoalquila, (fenil)alquila, alquilsulR9 r1° r9 r10 r9 R10 fonila, fenilsulfonila, Ar2, Ar3, * r19 , * Ar1, ou 'χ^Χχαγ1 ;
R8 é hidrogênio, alquila ou alcoxialquila;
ou R7R8N, tomados juntos, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, di-hidroindolila ou isoindolinila e são substituídos com 0-2 substituintes selecionados de alquila, hidroxialquila, alcoxialquila, hidróxi, alcoxicarbonila, dialquilcarboxamido, alquilcarbonilamino, piridinila e fenila onde a dita fenila é substituída com 0-2 substituintes halo ou alquila;
Figure BRPI0918174A2_D0005
ou onde R7R8N tomados juntos, são 'N , (quinuclidinil)amino, (quinuclidinil)(alquil)amino, (metilpirrolidinil)(alquil)amino, ((imidazolil)alquil)(hidroxialquil)amino, (alquiltiazolil)amino, ((carboxami do)ciclopentanil)amino, ((halofenil)ciclopentanil)amino, 3Hespiro(isobenzofuranil)piperidinila, (hidroxi-indanil)amino ou
Figure BRPI0918174A2_D0006
R9 é hidrogênio, alquila ou hidroxialquila; R10 é hidrogênio ou alquila;
11/543 ou R9 e R10, tomados juntos, são etileno ou propileno;
R11 é alquila;
R12 é hidrogênio;
R13 é hidrogênio, alquila, cianoalquila, haloalquila, alquenila ou tiazolila;
R14 é hidrogênio ou alquila;
R15 é alquila, hidroxialquila, cicloalquila ou benzila;
R16 é hidrogênio;
ou R15 e R16, tomados junto com o nitrogênio ao qual eles estão ligados são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila;
R17 é haloalquila, cianoalquila, (cicloalquil)alquila, hidroxialquila, alcoxialquila, aminoalquila, (R18)alquila, (Ar4)alquila, alquinila ou aminocicloalquila;
R18 é CONH2, H2NCONH, dibenzilamino, ftalimido, amino, dialquilamino, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila onde azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila é substituída com 0-3 substituintes alquila ou alcoxicarbonila;
R19 é ciano, hidroxialquila, morfolinilalquila, carbóxi, alcoxicarbonila, cicloalquilsulfoxamido, ((alquil)pirazolil)amino, ((alquil)isoxazolil)amino, (tiadiazolil)amino, (triazinil)amino ou alquinilaminocarbonila;
R20 e R21 são hidrogênio;
Ar1 é fenila, naftalenila, piridinila, furanila, pirazolila, isoxazolila, imidazolila, oxazolila, tiazolila, oxadiazolila, triazolila, tetrazolila, pirazinila, pirimidinila ou benzotiazolila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, cicloalquila, haloalquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, amino, aminocarbonila, piridinila, fenila, halofenila, alquilfenila e alcoxifenila;
Ar2 é fenila, bifenila ou piridinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, ciano, hidróxi, alcóxi e carboxi;
Ar3 é pirazolila, isoxazolila, tiazolila, triazolila, pirimidinila ou pirizinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de hidróxi, alquila e CONR13R14;
Ar4 é furanila, pirrolila, pirazolila, isoxazolila, imidazolila, oxadia
12/543 zolila, triazolila, piridinila, indolila ou fenila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, haloalquila e hidróxi; e
Ar5 é pirrozolila, imidazolila ou oxadiazolila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de alquila, alcoxicarbonila, benzila, e fenila;
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspecto da invenção é um composto de fórmula I onde R1 é fenila substituída com um substituinte CONR7R8e também substituída com 0-2 substituintes halo, alquila ou alcóxi; R2 é hidrogênio, halo ou R5R6N; R3 é CONR11R12; R4 é monofluorfenila; R5 é alquilsulfonila; R6 é hidroxialquila; R7 R9 R10 é * Ar1; R8 é hidrogênio; R9 é alquila; R10 é alquila ou R9 e R10, tomados juntos, são etileno ou propileno; R11 é alquila; R12 é hidrogênio; R20 e R21 são hidrogênio; Ar1 é fenila, piridinila, pirimidinila, isoxazolila, oxazolila ou oxadiazolila e é substituída com 0-1 substituinte halo ou alquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspecto da invenção é um composto de fórmula I onde R1 é fenila substituída com 1-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em halo, ciano, alquila, haloalquila, hidroxialquila, (carboxi)alquila, alcóxi, hidroxialquilóxi, tetra-hidropiraniióxi, carbóxi, alcoxicarbonila, (carboxi)alquenila, alquilcarboxamido, alcoxicarboxamido, (alquilsulfamido)alquila, Ar5, SO2NR15R16 e CONR7R8; e onde a dita fenila é também substituída com 0-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em halo; nitro; alquila; cicloalquila; haloalquila; aminoalquila; hidróxi; alcóxi; OR17; cicloalcóxi; amino; alcoxicarboxamido; furanila, tienila ou pirazolila substituída com 0-2 substituintes alquila; piridinila substituída com 0-2 substituintes halo, ciano, alquila, hidróxi, alcóxi, amino ou alquilaminocarbonila; pirimidinila; pirimidinodionila; aminopirimidinila; indolila; isoquinolinila; e fenila substituída com 0-2 substituintes selecionados de halo, cianoalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, alcóxi, amino, carbóxi, aminocarbonila, alquilaminocarbonila, alquilcarboxamido e carboxialquenila.
Outro aspecto da invenção é um composto de fórmula I onde R1 é fenila substituída com 1 substituinte CONR7R8 e também substituída com 0-2 substituintes halo, alquila ou alcóxi.
13/543
Outro aspecto da invenção é composto de fórmula I onde R7 é
R^R10 * Af1 e pelo menos um de R9 e R10 não é hidrogênio.
Outro aspecto da invenção é composto de fórmula I onde R2 é R5R6N.
Outro aspecto da invenção é composto de fórmula I onde R3 é CONR11R12.
Outro aspecto da invenção é composto de fórmula I onde R4 é fenila ou monofluorfenila.
A menos que de outra maneira especificado, esses termos têm os significados que seguem:
Alquila significa um grupo alquila reto ou ramificado composto de 1 a 6 carbonos.
Alquenila significa um grupo alquila reto ou ramificado composto de 2 a 6 carbonos com pelo menos uma ligação dupla. Cicloalquila significa um sistema de anel monocíclico composto de 3 a 7 carbonos. Hidroxialquila, alcóxi e outros termos com uma porção alquila substituída incluem isômeros retos ou ramificados compostos de 1 a 6 átomos de carbono para a porção alquila. Haloalquila e haloalcóxi incluem todos os isômeros halogenados da alquila mono-halo substituída para alquila per-halo substituída. Arila inclui substituintes aromáticos carbocíclicos e heterocíclicos. Termos parentéticos e multiparentéticos são destinados a esclarecer relações de ligação para aqueles versados na técnica. Por exemplo, um termo tal como ((R)alquila) significa um substituinte alquila substituído adicionalmente com o substituinte R.
Substituintes que são ilustrados por desenho químico para se ligar em posições variáveis em um sistema de anel múltiplo (por exemplo, um sistema de anel bicíclico) são destinados a se ligar ao anel onde eles são desenhados anexos. Por exemplo, substituintes R1 e R2 de fórmula I são destinados a se ligar ao anel benzeno de fórmula I e não ao anel furano.
Etileno significa etanodi-ila ou -CH2CH2-; propileno significa propanodi-Ma ou —CH2CH2CH2-; butileno significa butanodi-ila ou — CH2CH2CH2CH2-; pentileno significa pentanodi-ila ou -CH2CH2CH2CH2CH2-.
14/543
Dioxotiazinila significa
Figure BRPI0918174A2_D0007
Qualquer escopo de qualquer variável incluindo R1, R2, R3, R4,
R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20, R21, Ar1,
Ar2, Ar3, Ar4 ou Ar5 pode ser usado independentemente com o escopo de qualquer outro caso de uma variável.
A invenção inclui todas as formas de sal farmaceuticamente aceitáveis dos compostos. Sais farmaceuticamente aceitáveis são aqueles onde os contraíons não contribuem significantemente para a atividade fisiológica ou toxidez dos compostos e, dessa maneira, funcionam como equivalentes farmacológicos. Esses sais podem ser feitos de acordo com técnicas orgânicas comuns empregando reagentes comercialmente disponíveis. Algumas formas de sal aniônico incluem acetato, acistrato, besilato, brometo, cloreto, citrato, fumarato, glucuronato, bromidrato, cloridrato, iodidrato, iodeto, lactato, maleato, mesilato, nitrato, pamoato, fosfato, succinato, sulfato, tartarato, tosilato e xinofoato. Algumas formas de sal catiônicò incluem amônio, alumínio, benzatina, bismuto, cálcio, colina, dimetilamina, dietanolamina, lítio, magnésio, meglumina, 4-fenilciclo-hexilamina, piperazina, potássio, sódio, trometamina e zinco.
Alguns dos compostos da invenção possuem átomos de carbono assimétricos. A invenção inclui todas as formas estereoisoméricas, incluindo enantiômeros e diastereômeros, bem como misturas de estereoisômeros tais como racematos. Alguns estereoisômeros podem ser feitos usando métodos conhecidos na técnica. Misturas estereoisoméricas dos compostos e intermediários relacionados podem ser separadas em isômeros individuais de acordo com métodos conhecidos na técnica.
A invenção pretende incluir todos os isótopos de átomos ocorrendo nos presentes compostos. Isótopos incluem aqueles átomos tendo o mesmo número atômico, mas números de massa diferentes. A título de exemplo geral e sem limitação, isótopos de hidrogênio incluem deutério e trítio. Isótopos de carbono incluem 13C e 14C. Compostos isotopicamente marcados da invenção podem geralmente ser preparados através de técnicas
15/543 convencionais conhecidas daqueles versados ou através de processos análogos àqueles descritos aqui, usando um reagente isotopicamente marcado apropriado no lugar do reagente não marcado de outra maneira empregado. Tais compostos podem ter uma variedade de usos potenciais, por exemplo, como padrões e reagentes na determinação da atividade biológica. No caso de isótopos estáveis, tais compostos podem ter o potencial em modificar favoravelmente propriedades biológicas, farmacológicas ou farmacocinéticas. MÉTODOS SINTÉTICOS
Os compostos podem ser feitos através de métodos conhecidos na técnica incluindo aqueles descritos abaixo e incluindo variações dentro da habilidade da técnica. Alguns reagentes e intermediários são conhecidos na técnica. Outros reagentes e intermediários podem ser feitos através de métodos conhecidos na técnica usando materiais prontamente disponíveis. As variáveis (por exemplo, numeradas substituintes R) usadas para descrever a síntese de compostos são pretendidas apenas para ilustrar como fazer os compostos e não devem ser confundidas com variáveis usadas nas reivindicações ou em outras seções do relatório. Os métodos que seguem são para propósitos ilustrativos e não pretendem limitar o escopo da invenção.
Abreviações usadas nos esquemas geralmente seguem convenções usadas na técnica. Abreviações químicas usadas no relatório e exemplos são definidas como segue: NaHMDS para bis(trimetilsilil)amida de sódio; DMF para Ν,Ν-dimetilformamida; MeOH para metanol; NBS para Nbromossuccinimida; Ar para arila; TFA para ácido trifluoracético; LAH para hidreto de alumínio lítio; BOC, DMSO para Dimetilsulfóxido; h para horas; r.t. para temperatura ambiente ou tempo de retenção (o contexto vai ditar); min para minutos; EtOAc para acetato de etila; THF para tetrahidrofurano; EDTA para ácido etilenodiaminotetra-acético; Et2O para dietil éter; DMAP para 4-dimetilaminopiridina; DCE para 1,2-dicloroetano; ACN para acetonitrila; DME para 1,2-dimetoxietano; HOBt para hidrato de 1-hidroxibenzotriazol; DIEA para di-isopropiletilamina, ΝΓ para CF3(CF2)3SO2-; e TMOF para trimetilortoformiato.
Conforme mostrado no Esquema 1, alguns compostos da inven
16/543 ção podem ser preparados através de acoplamento de um triflato ou haleto de benzofurano a um ácido fenil borônico que em alguns exemplos contém um ácido carboxílico ou éster do ácido carboxílico. Outras técnicas e condições de acoplamento são também conhecidas no campo bem como outras reações de formação de ligação carbono-carbono. Ácidos e ésteres podem ser convertidos em amidas através de métodos conhecidos na técnica.
Figure BRPI0918174A2_D0008
Acoplamento Suzuki: Por exemplo
Pd(PPh3)4 Cs2CO3
1:5 H20-1,4-Dioxana
C
Y = H ou outro substituinte conforme definido na reivindicação 1 ou NO2 ou NR*R2
Figure BRPI0918174A2_D0009
Figure BRPI0918174A2_D0010
DMF r.t.
GQNH
Figure BRPI0918174A2_D0011
O Esquema 2 mostra um exemplo específico do Esquema 1.
Conforme mostrado no Esquema 2, um grupo nitro no anel benzofurano pode ser reduzido e o grupo amino resultante pode ser funcionali10 zado usando química conhecida. Por exemplo, a amina pode ser convertida em uma monossulfonamida através de reação com um cloreto de sulfonila ou através de preparação de uma bis sulfonamida seguido por hidrólise seletiva. A monossulfonamida pode ser alquilada novamente com uma alquila ou simples ou funcionalizada. No Esquema 3, o grupo hidroxietil etila é não 15 mascarado através de remoção de ácido do grupo de proteção silila.
17/543
Figure BRPI0918174A2_D0012
Figure BRPI0918174A2_D0013
O Esquema 3 mostra a preparação de dois intermediários marcados como intermediários 1 e 2 comuns que podem ser usados para preparar alguns compostos da invenção. Este grupo isopropila é usado para mas5 carar temporariamente o grupo hidróxi C5 de maneira que a metil amida possa ser construída a partir de etil éster. O intermediário 2 mais avançado permite funcionalização da sulfonamida, desproteção de ácido e formação de alguns compostos amida após acoplamento de amidas ao ácido conforme descrito anteriormente.
18/543
Figure BRPI0918174A2_D0014
Figure BRPI0918174A2_D0015
Figure BRPI0918174A2_D0016
Figure BRPI0918174A2_D0017
Figure BRPI0918174A2_D0018
Figure BRPI0918174A2_D0019
O Esquema 4 mostra algumas condições para preparação de alguns dos compostos descritos e para acesso de um intermediário 3 comum
19/543 alternativo que permite formação de amida antes da redução de nitro e funcionalização de amida.
Figure BRPI0918174A2_D0020
Figure BRPI0918174A2_D0021
Figure BRPI0918174A2_D0022
Pd(PPh3)4
CS2CO3 o2n
TfO
H N
Figure BRPI0918174A2_D0023
b^oh
OH
H20/Dioxana
C
HO
H N
Figure BRPI0918174A2_D0024
F
O o2n
Formação de amida
Redução de nitro/ o
HN
Figure BRPI0918174A2_D0025
Funcionalização de amina
F 1 N I r2
O Esquema compostos através da ilustra um método para preparação de alguns preparação de 2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxoborolan-2-il)benzofuran-3-carboxamida no qual o boro está ligado ao benzofurano e o acoplamento a triflatos ou porções arila con20/543 tendo halogênio.
Esquema 5
Figure BRPI0918174A2_D0026
Figure BRPI0918174A2_D0027
Pd(PPh3)4
O Esquema 6 ...—.------r.eparação do benzofurano funcionalizado e o Esquema 7 mostra um método para instalação de funcionalidade 5 nitrogênio que pode então ser funcionalizado conforme descrito nos esquemas anteriores.
Esquema 6 0 ? KOíBu O zr-A /> VV”F + EtO^OEt Ph-CH3 > °\\ / \_/F
EtO7
Figure BRPI0918174A2_D0028
21/543
Esquema 7
Figure BRPI0918174A2_D0029
O Esquema 8 ilustra que um grupo OH fenólico livre pode ser usado para formar alguns compostos éter. O Esquema 9 provê uma alquila5 ção para formação de éteres sob condições suaves ou mais extremas dependendo da reatividade do reagente de alquilação.
Figure BRPI0918174A2_D0030
Figure BRPI0918174A2_D0031
DBAD (3 eq)
Ph3P(4eq)
Dioxana, micro-ondas
Figure BRPI0918174A2_D0032
140 C, 20 min.
22/543
Figure BRPI0918174A2_D0033
O Esquema mostra como um éter com uma amina protegida pode ser ligado, e após desproteção subsequente da ftalimida, uma amina livre é liberada, a qual pode ser ou incorporada em compostos da invenção 5 ou derivatizada adicionalmente através de química padrão para prover aminas ou amidas ou sulfonamidas secundárias ou terciárias.
Esquema 10 ο
Figure BRPI0918174A2_D0034
ο
Br
DBU
Figure BRPI0918174A2_D0035
nh2 nh2nh2
MeOH, refluxo
Figure BRPI0918174A2_D0036
23/543
MÉTODOS BIOLÓGICOS
Os compostos demonstraram atividade contra NS5B de HCV conforme determinado nos ensaios de RdRp de HCV que seguem.
Clonagem, Expressão e Purificação para RdRp de NS5B de HCV
O cDNA codificando a proteína NS5B de HCV, genótipo 1b, foi clonado no vetor de expressão pET21a. A proteína foi expressa com um truncamento C-terminal de 18 aminoácidos para aumentar a solubilidade. A linhagem de célula competente de E. coli BL21(DE3) foi usada para expressão da proteína. As culturas foram cultivadas a 37° C por ~4 horas até que as culturas atingiram uma densidade óptica de 2,0 a 600 nm. As culturas foram esfriadas para 20° C e induzidas com IPTG a 1mM. Ampicilina fresca foi adicionada para uma concentração final de 50 pg/ml e as células foram cultivadas da noite para o dia a 20° C.
Péletes de célula (3 L) foram lisados para purificação para dar 15-24 mg de NS5B purificada. O tampão de lise consistia em Tris-HCI a 20 mM, pH 7,4, NaCI a 500 mM, triton X-100 0,5%, DTT a 1 mM, EDTA a 1 mM, glicerol a 20%, 0,5 mg/ml de lisozima, MgCI2 a 10 mM, 15 ug/ml de desoxirribonuclease I e comprimidos inibidores de protease TM Completos (Roche). Após adição do tampão de lise, péletes de célula congelados foram ressuspensos usando um homogeneizador de tecido. Para reduzir a viscosidade da amostra, alíquotas do lisato foram sonificadas em gelo usando uma microponta presa a um sonificador Branson. O lisato sonificado foi centrifugado a 100.000 x g por 1 hora a 4o C e filtrado através de uma unidade de filtro de 0,2 pm (CORNING®).
A proteína foi purificada usando três etapas de cromatografia sequenciais:
Heparin sepharose CL-6B, polyll sepharose 4B e HITRAP® SP sepharose (Pharmacia). Os tampões de cromatografia eram idênticos ao tampão de lise, mas não continham nenhum inibidor de lisozima, desoxirribonuclease I, MgCI2 ou protease e a concentração de NaCI do tampão foi ajustada de acordo com as necessidades para carregamento da proteína na
24/543 coluna. Cada coluna foi eluída com um gradiente de NaCI que variou em comprimento de volumes de coluna de 5-50 dependendo do tipo de coluna. Após a etapa de cromatografia final, a pureza resultante da enzima é >90% com base em análise SDS-PAGE. A enzima foi separada em alíquota e armazenada a -80°C.
Ensaio da Enzima RdRp de NS5B de HCV Padrão
Ensaios de 1b do genótipo de RdRp de HCV foram realizados em um volume final de 60 μΙ em placas de 96 cavidades (COSTAR® 3912). O tampão de ensaio é composto de Hepes a 20 mM, pH 7,5, KCI a 2,5 mM, MgCI2 a 2,5 mM, DTT a 1 mM, inibidor de RNAse 1,6U (Promega N2515), 0,1 mg/ml de BSA (Promega R3961) e glicerol a 2%. Todos os compostos foram serialmente diluídos (3 vezes) em DMSO e diluídos mais em água de maneira que a concentração final de DMSO no ensaio foi 2%. A enzima de 1b do genótipo de RdRp de HCV foi usada em uma concentração final de 28 nM. Um molde de poliA foi usado a 6 nM e um iniciador oligo-dT12 biotinilado foi usado em uma concentração final de 180 nM. O molde foi comercialmente obtido (Amersham 27-4110). O iniciador biotinilado foi preparado pela Sigma Genosys. 3H-UTP foi usado a 0,6 pCi (0,29 pm de UTP total). As reações foram iniciadas pela adição de enzima, incubadas a 30° C por 60 minutos e paradas através da adição de 25 μΙ de contas de SPA contendo EDTA a 50 mM (4 pg/ml, Amersham RPNQ 0007). As placas foram lidas em um Packard Top Count NXT após >1 hora de incubação em temperatura ambiente.
Ensaio da Enzima RdRp de NS5B de HCV Modificado
Um ensaio de enzima modificado foi realizado essencialmente conforme descrito para o ensaio de enzima padrão exceto pelo que segue: O iniciador oligo dT12 biotinilado foi pré-capturado em contas de SPA revestidas com estreptavidina através de mistura de iniciador e contas em tampão de ensaio e incubação em temperatura ambiente por uma hora. Iniciador não ligado foi removido após centrifugação. As contas ligadas ao iniciador foram ressuspensas em tampão de Hepes a 20 mM, pH 7,5 e usadas no ensaio em concentrações finais de iniciador de 20 mM e 0,67 pg/ml de contas. Or
25/543 dem de adição no ensaio: enzima (14 nM) foi adicionada ao composto diluído seguido pela adição de mistura de molde (0,2 nM), 3H-UTP (0,6 pCi, 0,29 pm) e contas ligadas ao iniciador, para iniciar a reação; as concentrações dadas são finais. As reações foram deixadas prosseguir por 4 horas a 30° C.
Os valores de IC50 para compostos foram determinados usando sete [I] diferente. Valores de IC50 foram calculados a partir da inibição usando a fórmula y = A+((B-A)/(1+((C/x)AD))).
Preparação de Ensaio FRET
Para realizar o ensaio de avaliação FRET de HCV, placas de cultura de célula de 96 cavidades foram usadas. O peptídeo de FRET (Anaspec, Inc.) (Taliani e outros, Anal. Biochem., 240:60-67 (1996)) contém um doador fluorescente, EDANS, próximo a uma extremidade do peptídeo e um aceitador, DABCYL, próximo à outra extremidade. A fluorescência do peptídeo é extinta através de transferência de energia de ressonância intermolecular (RET) (Resonance Energy Transfer3) entre o doador e o aceitador, mas como a protease NS3 cliva o peptídeo, os produtos são liberados da extinção por RET e a fluorescência do doador se torna aparente. O reagente de ensaio foi feito como segue: reagente de lise de cultura de célula de Luciferase de célula 5X da Promega (#E153A) diluído para 1X com dH2O, NaCI adicionado para 150 mM final, o peptídeo de FRET diluído para 20 pm final de um estoque de 2 mM.
Para preparar placas, células de réplicon de HCV, com ou sem um gene repórter da luciferase Renilla, foram tripsinizadas e postas em cada cavidade de uma placa de 96 cavidades com compostos de teste titulados adicionados nas colunas 3 a 12; as colunas 1 e 2 continham um composto de controle (inibidor de protease de HCV) e a fileira do fundo continha células sem composto. As placas foram então postas em uma incubadora de CO2 a 37° C.
Ensaios
Subsequente à adição dos compostos de teste descritos acima (Preparação de Ensaio FRET), em vários momentos a placa foi removida e solução Alamar blue (Trek Diagnostics, No. 00-100) foi adicionada por cavi
26/543 dade como uma medida de toxidez celular. Após leitura em um instrumento CYTOFLUR® 4000 (PE Biosystems), as placas foram enxaguadas como PBS e então usadas para ensaio FRET através da adição de 30 ul do reagente de ensaio de peptídeo FRET descrito acima (Preparação de Ensaio FRET) por cavidade. A placa foi então posta no instrumento CYTOFLUOR® 4000 que tinha sido ajustado para 340 excitação/490 emissão, modo automático para 20 ciclos e a placa lida em um modo cinético. Tipicamente, o sinal para ruído usando uma análise de ponto final após as leituras foi pelo menos três vezes. Alternativamente, após leitura de Alamar blue, as placas foram enxaguadas com PBS, 50 ul de DMEM (alto teor de glicose) sem vermelho fenol foram adicionados e as placas foram então usadas para ensaio de luciferase usando um Promega DUAL-GLO® Luciferase Assay System.
Análise de composto foi determinada através de quantificação da inibição de réplicon de HCV relativa e os valores de citotoxidez relativa. Para calcular os valores de toxidez, os sinais de fluorescência de Alamar Blue das cavidades de controle foram ajustados como 100% não tóxicos. Os sinais individuais em cada uma das cavidades de teste de composto foram então divididos pelo sinal controle médio e multiplicados por 100% para determinar a citotoxidez percentual. Para calcular os valores de inibição de réplicon de HCV, um valor de base médio foi obtido a partir das duas cavidades contendo a quantidade maior de inibidor de protease de HCV no final do período de ensaio. Esses números foram similares àqueles obtidos das células Huh-7 puras.
Os números de base foram então subtraídos do sinal médio obtido das cavidades de controle e este número foi usado como 100% de atividade. Os sinais individuais em cada uma das cavidades de teste de composto foram então divididos pelos valores de controle médios após subtração da base e multiplicados por 100% para determinar a atividade percentual. Valores de EC50 para uma titulação de inibidor de protease foram calculados como a concentração que causou uma redução de 50% em atividade de FRET ou luciferase. Os dois números gerados para a placa de composto, citotoxidez percentual e atividade percentual foram usados para determinar com
27/543 postos de interesse para análise adicional.
Ensaio Repórter de Luciferase Réplicon de HCV
O ensaio de luciferase de réplicon de HCV foi desenvolvido para monitorar os efeitos inibidores de compostos descritos na invenção sobre replicação viral de HCV. Utilização de um ensaio de repórter de luciferase de réplicon foi primeiro descrita por Krieger e outros (Krieger, N. e outros, J. Virol., 75(10):4614-4624 (2001)). Células HUH-7, construtivamente expressando o réplicon de HCV, foram cultivadas em Meio Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM) (Gibco-BRL) contendo Soro bovino fetal a 10% (FCS) (Sigma) e 1 mg/ml de G418 (Gibco-BRL). Os compostos foram serialmente diluídos 3 vezes em DMSO para uma titulação de vinte pontos e subsequentemente transferidos para placas tratadas com cultura de tecido de 384 cavidades (Cat. CORNING® No. 3571). As placas foram então semeadas com 50 pl de células em uma densidade de 3,0 x 103 células/cavidade em DMEM contendo FCS a 4% (concentração de DMSO final a 0,5%). Após incubação de 3 dias a 37° C, as cavidades foram analisadas quanto à atividade de Renilla Luciferase usando o EnduRen como substrato (Cat. Promega No. E6485). O substrato EnduRen foi diluído em DMEM e então adicionado às placas para uma concentração final de 7,5 pm. As placas foram incubadas por 2 h a 37° C e então lidas imediatamente por 30 segundos com VIEWLUX® Imager (PerkiElmer) usando um programa de luminescência. Para avaliar a citotoxidez de compostos, valores de CC50 foram gerados através de multiplexação das placas contendo EnduRen com CELLTITER-BLUE® (Promega, cat. No. G8082). 3 μΙ de CellTiter Blue foram adicionados a cada cavidade e incubados por 8 horas a 37° C. O sinal de fluorescência de cada cavidade foi lido, com um comprimento de onda de excitação a 525/10 nm e um comprimento de onda de emissão de 598/10 nm, usando o VIEWLUX® Imager.
Dados representativos para compostos são relatados nas Tabelas 1a, 1b e 1c.
28/543
TABELA 1a
Estrutura IC50 EC50
H . .N. />θ ZV T / V J·, Hv° /=\ í x>XXF A A
hnC^° I / ^k hn qi%° - ^iTxMTX \k 'O A A
HN^O I / ÜL^X° _ [I jT/—F \Χό v—y A A
I H T / HN O-/-X° - A A
^^HN^/O T / Cc^z° _ ^ikiMry-F A A
HN^^O I / HN Ou^x° ti jT/—k /)—f v__# A A
29/543
Figure BRPI0918174A2_D0037
30/543
Estrutura IC50 EC50
UL h/ s A A
\/ / 7\ HN A Οι H ll 1 /—v y—f A A
Λ / i \ π Vo HN^A^Jk/xZ /-\ r'0M>F A A
ViAcÁ^ A A
| / 1 // HNx ~ 1 Ol y II || | 7—ç y—f o VkoAA=/ A A
| / XOCxJr rUH> A A
/ ™ fX/xJT /-Λ rUH> A A
Y / Γ n /^° ÍHJXl· B A
31/543
Estrutura IC50 EC50
Qn ·ν· rco<>F A A
à!r°tecy· B A
Iv-r ! UM>f A A
H 1 \XX1_X° r CCr<>F A A
te.Gr v^CteOF A A
z\ / \Z HNK ~ te rte te Π 1^ > V 7—F o teA-o7 w A A
tete / teux\ stete^ci^ B A
GÍT°tec> A A
32/543
Estrutura Π i \ il V^° I W^F IC50 A EC50 A
Λ hUO^JT Ζ-Λ S Ov<XF A A
O / N^ I HN i 1 ii y^° ΓίΧΗχ A A
V'V · F A A
O /^A ?\ / Quiral X—j7 V—NH HN /=\ II 1 )—% f w-r'0 w A A
0. / Quiral F A A
O / /-- V- j[ / NH IX Xf χχχ%Ό w A A
33/543
Estrutura IC50 EC50
[| H N^ / 1 j! o. / MH A A
O l| -Z a—F
ο. ''XX // o -NH A A
HN \\
\^N ^oz
Ν'' ^ijT o O / -NH A A
'''T]
Ο. // o -NH A A
HN / V
|1 Vj^F
/7~~~ H N—z Λ 0 H ,° ^-F 1 A A
t \\ / ir~ _/ -O
H N- O Η ΓΛ B A
N^- \\ ζ/Λ i ii
\ y— — / 0^°
H N~~ O H /N^ .° A A
N^ ----- V N v~- / —o Y^F
H N~ o H /N' ^/0 \-F j A A
c o \ F-o
34/543
Estrutura IC50 EC50
Γ ll ox / s—NH A A
^NH 7—F
°vCl 0 / — NH A A
HN /X Or)
f=( X?=Í^'O/ V ~X7~ — F
°\ / NH A A
0^/¼. -.L-'-LX
NH H ^oz /7—F
O H N^_ O \^F A A
HN^Z
O==3\^ \
0
Quiral F A
o H N^te o F
HN^7
\ / V Ί -o
Quiral A A
o o H N^z zo jCr'1
y=\ hn^ /7 ^o
35/543
Estrutura .OH ox / l· Il %-NH Z==\ /j || I )—ά λ—F NH VV V^Z IC50 A EC50 A
N^° O / \ \ I) HN \ x/--*C \-o A A
A A
F V η M \Aç o z 1 li FH HN^ X/KJJ F \ /=ç / A A
\J H_Z° ^Aç o z \ | ll HN \ B A
A A
A A
· A A
36/543
Estrutura Η z-° 0 / \ \ || HN_\ F Ιθ50 B EC50 A
X '' —o A A
ox / ΊΓ ll %—NH r=\ 1 || 1 ) <a \~ F Η>ς/ '.^-o7 V^Z A A
°yN^O /d V 7 (x JI V—NH Π IT/—<λ #— F oXAo^vj^ N+-o- A A
°yN^O V7 11 Nt /-NH /=\ lí Jl /—% /7 F A A
II 0 A A
37/543
1 Estrutura IC50 EC50
A A
X-NH
\ w NH O 2 -NH
|| >— F
^0
A A
o. ' w
%^-NH o -NH
|| )—F
^0
HN
O=S=O 1
Οχ A A
'X-NH o
VA NH
|| r >—F
h2nZs/ ^0
°. / C A
A—NH
T H
Λνυ Ό* Va — F
AV θ
\=/ 0^ χΝΗ χ A A
NH
0=4
// \k \\ // ^o
HO-V~ NX /O /<
x 'o
331542,
Estrutura IC50 ec50
A A
Η ιΊ ιΊ Η / * ° H!NIXHJ-f A A
Ν ίΑ Λ / 1 1 V—ΝΗ ^iTxVaa \ΑΑ A A
^^F A r ιΐ r j \^° h / Α\/ΝχΑΑγΑΑ\ >_< A 11 II 1 z—v V~f A A
A „ i h rT r ojxy A A
V/h /'ΝΗ ί/Ατ^θχ /Γ~\ Á Λ JL# \ / f \—/ ~N ° H A A
NZ 7 o y—s Vnh /%H #~A ϊ a JLA\ / F 0 UA-o -N H A A
39/543
Estrutura IC50 EC50
F O /--( VNH P /Sm AA/Vp M -N^o H A A
^í?\ / 1 II fo-NH 1 I] 1 7—<x z>—F NH W-o7 A A
N Qx H ζΝ;=η V-N HN J x v—7 E B
Ck o. / H V-nh E F
o^ °\ / N |1 fo^-NH nJXl· E H
°Ύ>° HNk Ox / l^ Π NH \r^O 'í—Z E F
OH L/ΐχ. O / Il 1 ^to-NH E B
40/543
Estrutura ICso EC50
1 ΗΝ,^Ο .X o. / íl 1 X^ÍÍ^O V-UZ C B
H 1 / /k HN Q^_r° _ ^iífoM3^F X/ V B B
HN^O 1 / HN O_r - A A
H /x^N^O N^ | / A HN Ol^L° _ 'k-# B B
Γ Η Ύ-ΝΗ r==\ aJC^'00-hO-f A B
-Õ HN hCOl^T V. » íj/#F B B
.çAoJb- Ι<ϊγ.Ν B B
41/543
Estrutura Ιθ50 ec50
·? i YYi HV° íXXCfo B B
S / k HN hn^Oc^T rCw A B
O z < /X ^Í\ HN HN^Ob^X0^ ΓίΧΧΧ A B
ΖϊΧΧΧ' B B
V HN Y Ol y° Η II | 7—C ?—F ° W^o7 \=/ B B
/ vx Oi O^Y^YVfozyF ° wv \=/ C B
rr°ix>”o - ^N^ A B
42/543
Estrutura Ιθ50 EC50
A B
HN cvOc^r° IOOF B B
O / HNK « HN ϊ3Μ>ρ A B
/ HNx o ί 'ΓΧζ^ρ B B
/ HNK « r Π V^° ,χ,ΑΎχΤο· A B
/ Hv° H / | lí || \ yç v—F N'xk A B
V=\ / N^/S hn kCkkk Í UTk A B
'k. Jkx °x / / N >1 %-NH H kJ\/-'\Ur — || Jj%—/ #“F Mríí^O '--' C B
43/543
Estrutura IC50 EC50
0 \ o / V'NH 1 H L 1 / %coo- E B
íí^ tf •l i 1 N N p|l %--NH —OF A A
H /> N^O Ν-γ / ^?\,F 1 7^~Λ>υ N==/ \^=/Á /-o B B
H J> XN^° N—y / fííí^X^F AA Γ ^-/vA0 B B
A B
0 ’ : · B B
\ J H Z° A ° /νύ Ar HN_JC B B
: .. ' B B
44/543
Estrutura IC50 EC50
S :· 5 ·. B B
OH A B
G B
/<·=?' C B
H x.° j? / Ύ f T /=\ HN-% A B
/ Quiral ^-N B B
Λ J 7 \ ΓΤ B B
45/543
1 Estrutura ü />° F _/ / Ύ f Y ΗΗ ξ IC50 EC50 B B
zz- B B
R A ΑΧ o zN \ \ || hnY /ΥχΥΥ sxt y~\ aY ' O wv/° A B
r<;Z\ °x / í |j 3^NH nXX-zA ΛΑ [1 I 2—ά h—f XZO —J C B
N ίι) Υ7 Jl y~~NH \^ί^Ό E B
HN—λ íA? / 1 Π Xnh E B
JL O. / \ ll 'Xnh li jJ/—C /)~~f B B
46/543
Estrutura IC50 EC50
Ο \^N^O .X o / l· ll B B
—\ VT°Ó çf ' TI B B
C) /---- Vnh Λνη AA aa Ϊ II iy~\ t~f ° [íx H B B
N\\ V?H Anh Aro x T ii jl y\ / f ° nrk H A B
°K / V-nh /'nh <^r°\ ,ΓΆ Ϊ II S-\ / f H B B
/O o. / \ II fo—NH 11 |^/--zT-F -γ^ΝΗ \_JT B B
47/543
Estrutura IC50 EC50
Η r il r π Vs0 h / χ ! JX^Ci- .0. Β Β
-O cr / 1 iX <^-NH θ^χΑ^ΧΑ/Αχ^Α /=\ Xj II 1 /--A Z>— F -y^NH G Β
H ^χ. .O. ^N i r ΓΓ \==θ H f ^%χχ^ N ^>aAX/~~X Η Y \ 7—V- f 0 Όχ \—/ N ° ---' II 0 Β Β
Ox^Xax X o Ύ \ JL ^NH ° 1 1 X X 1L X—\\ // F Λ-νη O \ C C
ο 1 ΗΝ η Vs:O θ'χ^ϊϊχ^Ζ /~~~\ <Χ / ιι 1 > ά Λ—F C
0 Α % ΗΝ η y^o Ν^Χ °\X%xv--Á ,·--\ Α C
1 , Οχ. ^Νχ Οχ / l·” Π '\-'ΝΗ Ν^χ^Χχ^χΧ /=Χ 1 X /—A /7 F C C
48/543
Estrutura IC50 EC50
OH °\ / 0 || η fo—NH \ΧΌ B 0
0. / r ll x-nh 1 lí 1 /—(\ /)—F HN^ N— 1 C c
OH <íL/X\ox / cr || I %—nh ^TXVxry-F C c
/X °x / íl 1 χ-ήη a. y /1 /~\\ # f cr^ C c
H ^N /oJx ó E c
H ^N /xZo°<γ-ΝΗ ^T° C c
49/543
Estrutura 1C50 EC50
θΊ /° °v / ll X—NH ll Jl/—C #~F ^Άό E C
Ck o. / ^1 1 X-nh \Xo E C
1 1 / ck /X o. / II 1 X-NH Νχ<Χ\ΧΧ-Α\ /=\ 1 XaA /teF XXo J E c
1 o S. o. / °Tx ynh ^ιτχνχχρ XX^o E c
Cl tex. °\ / íl i X-nh NxxtexX-te\ /==\ pXxyy^F E c
υ ote^Xx O / 1 0 7 NH lOx-CA C c
HCk Jx O. / ί| X X—-NH 1^ ll z>— F c> xte-o7 vy E c
50/543
1 Estrutura IC50 EC50
J C' \ y— nh Yt>-O-f 1 O=s=o B c
cX HN^^O T / Qixo _ c c
/ HN «jOut^ c c
\zNXc^° T / Qi_xo - [| 1Γ/—Ά A—F c c
°\/N\ 1 / X. HN Cx^z0 - ij jC/—C#~~f ΧίΧ'-'ο —J c c
ΗΟ^γΟ I / X. HN íl 1 1J 1Γ/-Λ #—F B c
51/543
Estrutura IC50 EC50
T / /k HN Cl^1° _ ^ιΓΥ>ΖΖ>= C c
CZ^Nx-x-° I / HN íi i iYHT)-f B c
\^/N— /ii V7 R Jl y— NH ^TT5-hO--f \zo C c
í 1 z> HrV° oh HN'V^:::::>/(^— Ο \Z^~O B c
OH 1 ^ΐΛ'αΗν· C c
/ HV° ΗζΝγ1γ 0 te^X-c> \=/ F C c
/ Z HN 'O H if |7—ç y—f 0 VkoA\=/ C c
52/543
Estrutura ICõo EC5q
/ ^íí\ hn hnJUVXX í’CQC>f B C
I Ϊ 1 ηΙ.Χ1_:7ο ζ...λ Γαχχ B c
/ cCOuxx rCX= B c
xxXa C c
/ A hn r a O ° vOywyF ° vs'a/ C c
/ a“\ HN = N A A A s CxHXf C c
o Y^NH 1 k. Η*· n i Oi o N Η 1 )---V 7—F C c
O z XOuxx ΓααΧ> E c
53/543
Estrutura IC50 EC50
HI I s CQ<>f c C
4°Áo-· c c
N II / > hn r Π Xo H ]| | 7—/ V-f o A^c/X^/ B c
1 / %x HN ° i i ii v° ΓΧΪΧ> C c
HO , . - i / Quiral Ã3oX>- B c
OH y \ HN i \ η y^0 rOX>F C c
/ /^x / ^>x HN ΟΟΧ^ΧθΛΧ ViCa>Of B c
C c
54/543
Figure BRPI0918174A2_D0038
55/543
Estrutura IC50 EC50
F\ />x ll Ί ° ^^Ύ1Ανη __ ^^TY>-O--f \rX-o '—' E c
o HO. A ^<x ox / AjiAA ^elHA \.Άο '—' E c
H-/ 1/ Ά A Aaj <\a f wa rv waJo B c
H /° A° N-γ / A rXX-F X XO N Avr C c
CL· X^X Οχ / H A-NH I || 1 /—ζ #—f ^NH Aa-OZ V/ C c
ο ΗΝγ° F HN \ A/kJ wA/ 0 C c
/ Quiral 0 _/^° n-A0 Avf ►( o \ A HN \ yAxXAA \/~Ά -7 ° A c
HO Quiral C c
56/543
Estrutura IC50 EC50
V ο Chiral A C
Y=o /° Η Ν-^Ζ ζ° \/F
ηνΑ
// \ν_ ν^ // -Ο
Ρ ^^Cfpral B c
fy< r
HO \=
Ο -/-Ο\ B c
HO ΝΗ η a Ν-^
Ο=/
// ___/ /7 C
C c
Quiral
/—ΟΗ /( /° < ΗΝ^Ζ Η Ν^Ζ ^ο x F . J
v__y -ο
Ρ /Ν. Zy yF C c
τ Ύ
0 Ο μ
ΗΟ
Quiral B c
η2ν ηνΑ Η ζΝ ο
// ' /7 0
X-----/
57/543
Estrutura IC50 EC50
B C
O V-° Quiral
H .0
HO NH N
o=/
__/
B C
Quiral
H
/—\ /° N^, /°
HO HN-te
V // χ-°
O^ H N^Z >0 F B c
V 7— \ //
Quiral B c
O / \\ '
y-NHH 0
HNliZ /N'
0— y \ I]
// 'X___/
B c
Quiral
HO NH z H zN- .0 ^^X/F
0=/
// ___/ V-o
Quiral F C c
a—OH /'( z° H zN \ i T
-----------------------------------------------------------------1 6 hn—-7
// ' V-o
\---/
58/543
Estrutura \/ Quiral {J to HO NH / \ I] o=/ /γζΐζ x/-° O tf) f o ° EC50 C
Τ' Y _/Y j? ' Y r Y -' HN—V Y/YZ \ /c F C
°\ / i r 11 V-NH ZY Yy YY JI /=x A Y ]| YY—/\—f ° ° θ VYY A c
0. / r π r π Ύ—NH H / Y Jk /Y Y\ 7. /__. //Sx II 1^7—/ \— F ° 0 o YoYC A c
A i O yNH Y JY „n^ /YA, JL A» π YYY_/ YF ο ο ο 1ΛΟΖΛ Υ G c
Z\ \^° YH ^\/F NH [ ^Y Y Y O=/ HN /Y^YY x/- C c
Cl ^/ϊθΌΐ^' E c
59/543
Figure BRPI0918174A2_D0039
60/543
Estrutura IC50 EC50
.Cl C) / N |J A-NH i 1* X /A //f AAA —J E K
cF Jx. 0 / N |1 '^NH li ίΓζ—z>—F E H
h2n^o .X 0. / 1 H y-NH AA C J
0. / i ri) VNH οΆΑΑ^Άα ΓΠ1Χ> E J
^NH °\ / ° \η y^NH [| jT/—X X— F E J
o / II / O=S-NH O. / 1 Π y-NH vAq v 7 E J
°\ / \ H '^V-NH ovXXaaa\\ /=\ 1 Tl 1 >---<λ /)—F C E
OH °A X^A °\ / A y-NH A-A^o Aa C E
61/543
Estrutura IC50 EC50
hn— ok | NH O^xxJ /=\ y T /—4 F E E
o CL· Z\ Jk o. / OH áy-NH Ύ jT/—C T-F C E
ZX O\ / 0^ > 'y-NH \^O E E
OH kx /^x °\ / ° || ) y^NH fX^Vx>Of \ΐ^Ό X--V C E
0 ll^OH <x O / Íl V-NH 1Γ jT/—#~~F Míí^o C E
^>x °\ / íl 1 A-^nh /=\ 0 U M> E E
/^x °\ / íl 1 %—NH ^'xkkkx/í^j-Z /=\ ü L /—4 // F M^^O Xí—/ E E
Br Λ-χ θκ / íl 1 y-NH /=\ T || 1 Z—<λ Z—F F W^O7 V/ E E
62/543
Figure BRPI0918174A2_D0040
63/543
1 Estrutura Ιθ50 EC501
CK Ό- 1 / HN [Π T° OH XX(/XA F Β E
OH Cl 1 hn Ο k^ % V=O kXO v--J C E
O / Quiral // hn -χ íY Xo HNYn H II I /—C Vf C E
nh2 I <ík HN 0 i r il Ά° I UX>F E E
/ < n k p μ V^° /° /—\ H ) V 7—F E E
1 / i íY Y° HN^rY%X^-xxY\ /—\ h li 1 2—c y-F E E
nh2 ο<ίη 0 k JYí^\ Οχ / Ο3υ~Γνη_ ^ιίΧχΧΧ'ι= E E
64/543
Estrutura IC5o EC50
1 ° L o. / I |^|1 V-NH C Ε
HO^ta O Quiral Ε Ε
O H2hl· A o. / π N rA fo-NH II η / ° ΑΑ/χΑ. γ=\ ujXrF Ε Ε
0 HO Α οκ / Ν Α Τι V-NH 1 XJa^a λ=\ II ΑτΑ:--Ζ /)—F C Ε
ν'^Α ° 1 |^ |) %-ΝΗ ^ιΓχνχΓΤ^ C Ε
1 U / n Ν ιΐ ΆΝΗ Ο 1 /=^ ΑΑΤ Ε Ε
\ Quiral Ο^ ο A °\ / Ζ^Ν |1 %—ΝΗ ^Χ|Τ<ΪΧΓ/—C X~~F ΑΑό \—7 Ε Ε
65/543
Estrutura Ιθ50 EC50
o L. O\ / N Π X-NH η 1 II / E E
o H II / O\ ,n. JI cr / X^ ^X n XXX X-NH 1 H 1 i / HJnh E E
/°Xí^X O L JL ^x °\ / H kJLxx^F xlX> E E
0 Jx^\ °x / - n γΧΧ X-nh H kJLxxx' ^XH> E E
/Cl CL / l· Η X-NH °<γ^Χ^ΧΧΧ^χ>. /=1 °H LA0 7VX~f C E
Ck o. 1 II Ί X—NH θΧ/^χΖ^Χί^ίΧ^-Α /—\ I I || )—</ Vf OH x^AV \=/ C E
a-OH /—( Η O /x. ,F HO NH ZN~\ 1 II °=/ /ΧφΧΧΧ /7 ° c E
/Αχχ1' B E
66/543
Estrutura 1C50 EC50
XXO HN^ \ o=\ HO NH V^0H B E
°S\ Quiral y—nh2 N^° HO NH / \ \ || 0=7 \ /~\ C E
4/4' C E
-4 4 o B E
. 4 4 0 A E
H N Q o Ό\ HN^C NHZ )--v Z=\ / (/ x C E
67/543
Estrutura IC50 EC50
Quiral 1 -te c E
F ° ΊΓ HN^\j /° \ >r\ / °\ N/ / // B E
: 7 '' B E
Quiral _J? /NV /|í Hüte A E
H -'N Oi 'r0 ll Tl /—y— f 0 Az-n \—/ N+ te/ 0 '--' II O C E
zvAAA- A E
68/543
Estrutura ICõO EC50
Quiral B E
°\ 7 K ιΊ fo^NH \ ,.Nk ΧΑ-ΧΑ /A-. Ak z=k Z/S\\ X^ Il ΊΧζ—/)—F o o 0 B E
o AXi °Vnh χ!ΧΑ>Χ- B E
^NH yNY° o=Z —-N I. lx I] E E
rV v XX X~NH v—y 1 E
o \ r$H v X /1 V—NH ικΓμΓ/Η \A^O E E
o /\ XX v X A V—NH ^\íA~^O 'ύ ί/ E E
69/543
Estrutura 1C50 EC5o
ο Χ'-νΧ Αχ, X JI / NH XXX xx E E
O /—\ °7'-nx} ήΗ v <x J] y—NH XXo xx E E
Ato™ rV V' x / nh iTxVcyF XX —'J C E
1 nh2 XN-X° XXf 2—Vo E E
GK,nC^ °\ / 1 ll ^-nh ll jT/—x #—F xX^-o xx F E
TABELA 1b
Estrutura IC50 EC50
/'ολ·»η 1 Η --Nx ~ 1 X > \-o H / X^^x-XA/^XXX^A /— π II 1 \—J te-F B A
70/543
Estrutura Ιθ50 EC50
1 Η X^^n 1 ll Η ^-Ν Ρ=^° A A
ο -Ck Â Ν II Ο <Χ^Ο \—/ 9*f
9 Ε C
Α\χ° Ο / ΝΗ
/Ζ=ΖΆ
—ΝΗ Η ν // -F
^J C Β
γ\.ο Ο. / ΝΗ
0^9 ΖΖ_1_Ϊ\
-^χ^ΝΗ Η // -F
Ε C
γ\.ο Ο. / ΝΗ
--ηχ^ΝΗ Η '^Ο // -F
'° °ν / -ΝΗ A
JI —-'χΧ fTZZZ
^ΝΗ \- F
Η ^\/Ν F Η ^-Ν =ο
Ο Η —F
1 Η χΑ^ /Ν^χ Χ\χ,θ kX/ Η ^-Ν =sO A A
Ο ^Xf η2ν'^ ίΧ^ο7 H-F
71/543
Estrutura Ιθ50 EC50
nh2 I H ϊ r ϊι v^° h / íuXXf
H r il r τ \^° h / χχ7Νχχχ<χχ /—\ X Π Y ] 7—ç y—F o o, AAA \—/ n+ o II 0 A A
(ΑΊ h N A\ AA >° °<;XaXXz<;^X /-\ I ' T I /—\ /—F Xx/NH Χ=ο \=/ A
ν' il A° θΧΑΑΑΑ /—\ I ' h 1 / \ /—F Xx^nh <Xo z A A
A h Ίτ H Y^° /—k 1 ' li i /—\ /—f /X/NH XAo \=/ A
\ νί νΆΑ\ -n lA Ύ° θΑ^ΧΧχ-^Α^Χχ /—\ 1 1 ll 1 /—C 7—F Xx/NH <XoZ \=/ A A
Γ Π H N<sX^\ ,^N =Αγ x=° oXXXaX /—\ 1 ' H i z—\ /~F X\/NH χτο/\χ B A
72/543
Estrutura IC50 EC50
Z /) \\ // H ,-N c=O A A
O, ,NH t 'χ^^'Ο /—F
E
H _-N =0
0, , NH 1 7 λ V~f
0 Xr li H to =0 A A
0„ L. II ,ΝΗ ί 7 X / F
HO. H to =o A B
.NH U xto~to \___ /—F
O. ! H N to C
OH
NH l| 1 to p—F
Λ~~NH H ^N to B A
NH li xl^O <------/ / F
_ N }\ H -N to A
χ^ΝΗ ~to /—F
73/543
Estrutura IC50 EC50
,ci H _^N =χθ A A
_NH Y <Yo —F
0 A A
|| ϊγνΝΗ2 H ^N =0
NH <Yo // \y —F
B C
Π NH H ^-N =o
°< NH // \y —F
CL / OH H ^-N sO A
°< NH Y YO // A — F
zí^ í H _^N =0 B A
°C NH Y // \\ — F
NY. H ^N A A
o. ,NH k x // 'X — F
74/543
Estrutura Ιθ50 EC50
Η ,^ο Η ^Ν ο A A
χ/ΝΗ ΧχΖ0 Af
ο- ν Α Η Η Vo A
ο. _ι Α ,ΝΗ Χζ 0 / -F
) E B
Η z\jZx\ Η Vo
Ο; ,ΝΗ ΓαΧα / \\_ -F
Ν „Ν ' χο Α °νΝΗ f Ζχ/F G B
V 7 1 \ /7 °
αλ Νχ γ ° nA \ ο^ΝΗ ^F E A
V _/ \^°
Η F'XAA Η ^να° A A
/χΝ' ο 'ΧΧ'Ό^ -F
1 jAAg° 0. / Ά-νη A A
0-
Α^ο7 Α y—F
75/543
Estrutura IC50 ec50
x° O / NH A A
o_ X /Άχ S' Z^^Z\
,NH <Ao —<( \—F
H 0 H Vo A A
<X^ /
0 H. 1 /—\ /—F 0 \=J
O^ o // OT---
c B A
ν' j^NH O NH
ΊΟ — F
X. XX ^O
„N v> Λ-s HN A A
O'
o NH O -NH
Ίί 'T —F
X. X/''4'·'· o
=^N 1 NH C C
o
-NH
Ό -F
Ό J
76/543
Estrutura IC50 EC50
/^N A A
o —NH
Ϊ x^ 7—F
fY h JT H Νγ° —F A A
0 -<A^o \=/
H ^N íO C E
HO^ /Y J
O X° l| —\ /—F
H „N N Y A A
HNZ
oA/
°<\^νη Ca o -NH
JY )— F
\Zz LO
οΛ A A
HN
oA/
°yY Q o -NH
γ )—F
X. ^o
77/543
1 Estrutura IC50 EC50
faV Λ/ HN O^A/ Υν'Α A> v7 <N j7 / NH \/'O A A
n^A\ \ ZN z^n' HN O^A/ O<y-NH A) °A_ / (x J7 V—NH ii jT/—C /F~f A A
η h nr y° < s H!HUoK> A A
H /\-F r a r t *· .AÍKte 1 cr po A A
/te. /te^/F ^N [ ii h fX T° \ 0 HN'^tetete'O \=/~ 1 0^0 A A
H AsAcA> E E
78/543
Estrutura IC50 EC50
Η /d /01 _^N OtxOAAA ΓΆχΟ B A
/i) Vχ k Jj v—nh O=S=O A A
H θΙϊΑÈA- A A
H / --N 1 Η A \^O J/N J A/x A ΓΆ o H . JfoI-,/ \—/ F 'N z\z 0 '--' 1 H A A
o7 /O O. / r li VNH οχχχχχχΧνΑ\ /=\ /Jj II | /—1 /)— f -ηΧ^ΝΗ <Αθ V/ B A
líl V7 k j7 ANH HO—X X /X/ ( XF o=s=o 1 A A
79/543
Estrutura ICõO EC50
ο Vnh A
M FNH
}—F
A H /x. A~N fl ί^ V° A A
\xN ,-A O O — NH
HO-\ /X A- X—N '0 Y // -F
O II -ω — II o
A H γύ y° A A
O 0 — NH
h°—x 11 .X X—N Ό V V -F
o=s=o 1
<7 H /^x A—N íl X° A A
X=\ kJ Λ / Anh
ho—\ Jl X—N oZ Aj -F
o=s=o
\/ H /Xx/ F n jfj jr° A A
r\
VA A-nh
H0^\ oZ V_2 -F
O=S=O
80/543
Estrutura IC50 EC50
Ο / Lx Ν s 'Vy-OF c C
Η /Cl Ν r ιΐ r τ Vs0 UJ.X/..A -V Y^vvy^f^F 0 LAc/vx A A
<7 η Γί Vo C|A\X /==^ ο , VA ΛΝΗ y jT/—C f AA 7 A A
\/ H /x. A— ν ÍJ y Vx °. / ví ΐίΥΜΓ^- A A
\/ H (Γγ )^° N J /> V 7 (x JI VNH lT jCz—C z>—F VA^o A A
°H 0 1 / /<X /O HN < Ap y^o 1 ' Π 1^/—\ r~F Vx^NH ÍVo7 \=/ B B
81/543
Estrutura IC50 EC50
\ / AA. /0 HN ΓΎ %° 1 ' II 1 XNH <^Αο/Λ=/ c B
Cl Γ / /A\ /O HN ΓΎ ~r° ο^^^χαχα^Χ /—\ 1 1 Η 1 Z—\ 7—F X/NH XÁ./ W E E
nh2 Ox / \ II y-NH /=A ^NH l[ / A # F r \^o 'A-/ A A
°. / 1 O y^NH /=λ 0^-° X JL /~A XF uas-n'^^o 1 o=s=o
°^x X , /O Ox / ΓΗ %—ΝΗ Z=\ 1 1 1 Z—A Z>—F hn^ χ/χ w A A
82/543
Estrutura IC50 EC50
ô N /O Ov / l· II ox/AX/av /=\ i li Ί| /—<x λ—f HN^ W A A
ll z I /Λ °y-( z=\ \ / V_o /=/ V o A A
V A /O O. / 1 V'NH /=\ 1 II I /—é Vf HN^ V^O7 VjZ A A
0, / r li ^nh /=\ i |1 | )—<x Vf HN^ VV-O VV B A
83/543
Estrutura ICõO EC50
c o o / -NH B A
Ox. J- /----X
HN- y^^ ^o // — F
HN—- kl A A
N^ o 0 / -NH
Ο-, JL l| /------ X
HN- ^o v v — F
N' F F F E E
\ Π °\ / -NH
Ο-, -k J* / ·~· \
HN- X '~~O —F
NH 'N^ A A
xo O. / -NH
O-Z ^kss k* /———-\
HN- y^^^ ^0 V v —F
\ /N-x C B
\r xo °\ / -NH
O-^. L-_. X
HN- X ^O V V —F
84/543
Estrutura IC50 EC50
O, / 1 ll Y-NH θΥ^ΥζγΖΛ —> 1 II I)—4 4—f HN^ VY c C
F F^ Y o. / l· ll Y^NH YyYY/χΥ /=\ i || I)—<x Λ—f V_Y B A
βι-ΎΥ^ /0 o- / Γ ll Y—NH oYx/\YY\\ /=\ I || |2—ζ Λ—f HN^ W-o7 B B
OH ZY° o. / 1 ll y-NH °Υ''^Υ>γχ'Υγ\\ /=\ _»NH |l J / Y /7F A A
9 >O ΥΥΥ/0 O / | Y-NH C
85/543
Estrutura IC50 EC50
NX O l/i Vz (x // y— NH H°_JxJ/ f o=s=o A
nY O HV° íl) V 7 (x J! V—NH h°—x JCZXJ/ <CY~f o~s=o A
\/ H Yi Vo U Ó V' (x J7 y— NH A
\/ H Yi Y° rn v y—NH iytVcjy B
°x / I O X-NH n^o^^kTxrnrnx m 1 |[ 2—ά λ— f HN^nr^o \—' 1 o=s=o 1 C
86/543
Estrutura ICõO EC50
HO. (S '''i / /x /0 HN ΓΎ 1° 1 ' il 1 )—\ /K/NH \—/
HN-N 1 / /x. /O HN ΓΤ r° /X^nh IJ-oH=/f A A
y^NH ? tox to HN ΓΥ Xo °/A\to\/toto /—< 1 ll 1 /—\ r~F /V-NH / A A
\/ H O^Jr° Λ==χ 9. / M ?~NH ιΓΧ^ΗΠ^ A A
Η tox tox /F ^N r \=o H / XÇQM> OH /Sx O|O A A
87/543
Estrutura IC50 EC50
Cx/Z .O CL / l· H ANH o^zAAxA /=\ 1 II | ) k z>— F HN^ /AoZ VA c C
z . /\ /O O. / \ Π VNH °χ/χχχχχΑ\ /=\ i || [ )—<x Af hn-^ LAo VA A A
/O Οχ 1 1 H ANH °VzA\aX\ /=\ 1 lí 1 Z—1 Z>—F HN^ A'OZ VA B B
OH /í^ ^O Ox / 1 H ANH AA hn^ AAo^VA F A A
88/543
1 Estrutura IC50 EC50
.c A A
o. / -NH
Ό — F
| ^N A A
°\ / -NH
r~~—~\
\Z ^0 // —F
A E C
°^v
O / -NH
// / A
HN—\Z ^o \L__7 — F
1 Η η 1 Z /\ ^N. A n yd γ te 0 H —'N \Z^o =:O —F A A
HN A B
o -NZ H __
oV^ ]i^ HN^^ 0 // —F
89/543
IC50 EC50
A HN—Z Hy° λ=Α o / X A ANH HO—x jT AT/ C F o=s=o A A
V Ax °\ / Γ H VNH θΑΑχΧχΑ\ /=\ 1 lí 1 /—4 Af ^NH TAo7 AA B B
ο Άνη oAxAz 1 O=S=O C
O^ AAAc>
Hy° °Λ / (x Jt AnH A-x jOxyyy-F νΝ·ΑΖ^ο 1 o=s=o
90/543
Estrutura ΙΟδΟ EC50
nh2 _ /0^ / 1 \Xo —'J Hl^y Α Α
o. / v , O X—NH θ^ύςοσ^ o=s=o Α
ll ^x XX z í O
H X\X -—N « r ii Xo h / X/ N xxxxA /—\ ΧΓΤίΧ>
O·. ! 1 H X-NH °vtetexx /=\ 1 o lí T Z—<X y~F A NH '.XX-n v /\7 N+ O '--' í 0'
H — N n iT^ te·-'''^ Νχ Η Γ Ζ·ΧχΧΗΖ-
91/543
Estrutura ICõO EC50
1 °\ / X^nh
θ A Γ / \ Nt O' iA-o^ v-aZ — F
| E E
°\ y_- nh
HN x Χο' v_y~ F
H \ /%/ 1 II Η A A
7 ' 0 La^-(j \= /~~F
°\ y^NH A B
oAy
^NH o 1 r -A. Nt ^o- V_y — F
N<^ H ΧΛ X H NX « Gx A A
o \ /—F
(Xa ° / y-NH A A
£^hh OR. 1' / \ Nt O’ ί^-Q V-7 —F
92/543
Estrutura IC50 EC50
Η / _--N p II X° wAAAo AAo \=/ c C
1 , /O cr / l· H VNH OxAJXaJ /=\ i lí T /—(x y~F a NH AAA z /V h2n ° '—' A A
H top ° A || \^° N^AX/foAx // \ /\ h ü 1 /—\ / F \Ao V==/ C B
H o Ato VO AnAUXa °to ΑΎγγχ ° aXXa A A
H /N-n XXX ^Νν=ο -Az w H / h Δ l i /-f v—F A A
H -N Δ i H!NãAoH=af A A
O : Λ O^/NH NH Y Γ H O=K XzA/ # X_/ A A
H o r ít Αχ° II H [ /A ^-N. Ax, A\ 7. .—, ho yd X X XA #X /\ II )—(7 y—f 0 xXoZ \=/^ A C
93/543
Estrutura ICõo EC50
Η N. n r ii Vo H / ho x X YA O. Δ s UHA C C
H XX X r ?r AO H / /\ ,n Αχ A ./x 4 ,__< 1 N Λ TiVA AA °x0 ° UÇa/ F A A
v xx /O cr / \ H A-NH oxaAxxA\ /=\ 1 0 1/-A F HN X/A/ A A
H χχχ Ά n λ r if A° A η ρ zk nxAA\/xA A uaa A A
H XX XX X r π r ir Vo H A A^vnvVAxA\\ z\ η Π 1 > X 7—F ° HN 0^4=/ 1 A OjO A A
H ,ν-n ZW Νχ° \X/N yV^xU XX Η Λ Π I I A-A yp 0 ^^0^4=/ A C
H XX XX/OH - N r π r ii A° h r 4f íjHÃF A A
HO. oK / Η X-NH °<Xx^xAx0 /=\ 01 H |^ / A 0-F ~-Χ^νη μΛο^Α C E
94/543
Estrutura IC50 EC50
nV \Λ \ ΝΗ A V V ο=Κ /Αααα # ά_/ \-° ηο'^Χ^-ν L° °'s\ A A
Η Η ι II Η / aVn\/aV/:aA /—\ OH cr ρο A A
rVoV-- A A
Η Η AY %-ΝΗ χτΑαΧΑ^ A A
°\ r^N>< 1 0 E
95/543
1 Estrutura IC50 ECso
x?\ χτχχ^ίϊ. o / K D K ÍT Ά-ΝΗ lAjAJAxT N δ 0 o E
xkXA
H χ°\/Δ\χα --N r π ii V=° X A ^nl A Jk x. 1 ,—. n yT Y^VXy #v\ 0 9^0^=/ A A
°p/NH2 xO>. E E
^NH2 x\ Ό ox / 1 V T %^NH H / xxA/NxXk^^x-As^Ax /=\ ΓυΧ> A A
H ΆχΔ\ -Nx n Ir π r Ir V=° H / Αχ^Χ^ΝχκχΧ^ΧΧν^%ϊ^Α\ /—\ 2\ Π || \ /—C Z~F A A
96/543
Figure BRPI0918174A2_D0041
97/543
Estrutura IC50 EC50
A A
Η Αο AAA Ά° ΛΑΝγΑΧνί o /\ Η 7—(/ y—f 0 .Z--C - A
H /x. /°\Z\Z ^-N r il T Vs0 h / Α Λ /N. ΛχΛ ./- 1 .—, n /\ X π \ //v\ /\ ll 7—(/ w ° XX \=/ A A
H /7- Fx./Zx/Cl --N r n n Vo h / A A Α- ΛχΑ /x 7X /—v n χ χ χτ /\ II 7—(/ x>—f 0 χ3-·ο - A A
H .N .--N y- 7) \=ro \ Α^/γΑγ^ Α /— VuX>f A A
Ux 0 / 1 ll A-nh >—< ^NH LAo 7HAX_F C E
F\ F toF /jx .O 0. / Γ Π Xnh oAAAaa\ F==\ 1 y 1 /—<( A-f ^NH V# B E
H /íx F- /x. .OH r ii j V=° A A /IK ΛχΑ /XX. A >— n yd >r τι anx // \ ° AAo7 \=/ A B
98/543
Estrutura IC50 EC50
Η XAAcdA' A A
F\ F 1 F ,o cr / L ii VNH ΑΧ oh ΙΛ(Αα F E
F F f-f _o cr / 1 H VNH °vzAAxA\ /=\ 1 π ΊΧ /—ζ z>—F ^NH B A
F\ F P~F /0 0, / \ H VNH Μ NH UQ~VT ' ó B A
H ΑΊ «“/f Ύ 0 zAo7^/ A A
H r π ir \^° H / x A A A L n A >r Aí AA AA /\ II )—(z x)—F A A
H γΑί h rr r° h4YUyvG>f ° UZo7^/ A A
99/543
Estrutura ÍC50 EC50
cA o / Y-NH θΧγΥζχ9\ /=\ i ll 1 /—(\ /)—f ^NH VA V# E B
ΑΑζυ,υυ. °\ || Y^NH θΥγΑνΥΥχ /=\ i |i [)—9 X-F ^j/NH γΥ/ O A
/Υ.γ\ °\ / H2N Y'^ Y-NH ουυΧ/υΛ /=\ 1 II 12 <\ Y-F ^nh xZ o : > A
F fX9 ^ . o / F Yr ll Y^NH θν^ΥΥγχ /=\ 1 ll 12—C #~F ^NH V-O7 !/ B A
1 H / ^-N o r ir \^° II Η Λ k >k Ζγ Z\ 7, z , N tC X YzY\ //X\ h A II 2—(/ y-f A A
H —O zN'O ^'NVrO \___(/ \ Η Γ ° ^Aq/X/ A A
100/543
Estrutura IC50 EC50
I χΝχ 0 0 / B B
-NH
o. Jz — F
N 0 °\ / E C
-NH
/=\ — F
Cx H
N-O H _—N Xo A A
___Λ I Η T 11
| ^Y^ ---<( )>—F
O 'X^X-Q
H
Qi H \ |T -N ;O A A
Nx/xt lí Ύ^χ\ /~F
0
h2n H
--N A A
Yç
N A H [ |
Ç p—F
Λ O \T-o
H
Yn x^ ^-N O L A
0 \ H |[
\ <x< %/x
N 'V' | 'YY —ç y—f
0 \---/
101/543
Estrutura Ιθ50 ec50
N. A
°\ / ^ΝΗ
ox a^Ja / ' X
H ’'Xi ' ν ν~ — F
n^^- ULaa ο / — ΝΗ A A
«A ζ~~~~~ν
χ Ά^ο V—y -F
nh2 A B
Ô!x^. Ίτ h ο / ΝΗ
Οχ AxUA
r ^V; \Χ^ο V ν~ -F
H Ο^Ν-χΟ A
HnA\X\ °\ / ΑνΗ
οΑχΙ /- Ί
^NH ΊΟ -QZ Λ—F
νη2 L A
ν^ ο / ΝΗ
o^AxJX,
F\H \Αο ν ν~ -F
102/543
Estrutura IC50 EC50
o' ΝχΛ /X o. / |l A-nh /=\ I π I ΛΛ y— F ^NH W-OZ AA B
H2N N N<x JL /x. °\ / η x—nh °YY\/%A\ /—\ I b I /—<\ Y ^NH LAo V A
ΝΧ/^·\/^Χχ °\ / |j 4x^NH °<YYn^xA\ f=\ I || | Yí Yf NH /Vo Va B
Sx Yx zX O, / Π V-NH r=\ I II I z—(\ /)—f ^NH A
H VrW- A B
H 1Ί iT^ Υ^Α-θ I H ) nAVNxzAA/xxx /—\ A Π II \ /—/ y—f ° kAoZ AA L A
H HO. /x ,CI ^N O iL \^° x ASxÀJW /-X A Y^iPryAV B
103/543
Estrutura IC50 EC50
c Her HO. V H O H x^CI -N c=^0 )--\ /— F B
OH °\ ! fotoH A B
Οχ,
HN^ Αθ/ )—F
H2N^ °\ / NH A C
i~ \
H TÚ \to^o -X F
HN\, ^O \ l) o / Ύ~ΝΗ A A
O L. J*X
„NH U. xto^O7 /7 F
XN fN% C C
^0 I ll o. / fotoH
O. ,k II
%Aq/ V_ /7—F
104/543
Estrutura ICõO EC50
N^ o / A M
-NH
o ,.NH ) —F
0 o / C C
-NH
°< NH v V —F
0 0. / E B
-NH
°< NH /Z-o V V — F
N^Z o o. / C C
-NH
NH Z^o V v~ — F
I 0 o / C C
-NH
°< NH Z^o ___ /---- — F
105/543
Estrutura IC50 EC50
A^nh Ό X\ o. / I Γ π fo—NH H / XXJXXA A C
J\ 0 / \ ll a—nh Ο.ΑαΧ\/αΧ\ /=\ I II I z—a X-f ^NH XA/ À X E c
X\ o / \ η y-NH oyXAXXyy^y ^nh 'yXo^vTF M c
°\ / \ h y-NH /=\ I II 1/—a X~f ^NH M c
X^N N^X Ό X\ o. / 1 H y-NH /=\ 1 lí 1 Z—A X~F ^NH V-O7 VX C c
106/543
Estrutura Ιθ50 EC50
Quiral C C
Hy O °\ /
NH
0 ZNH |í V 7—F
/ G C
O'N Ox
Γ il V-NH
0-, JL II
NH PPo /7—F
Ύ o o / C c
|Ί NH
ο. , NH II V /—F
o °\ / E c
Tl NH
0, , NH II / F
N
N o A c
'λ -0 o /
II NH
ο „NH II V 7—F
107/543
Estrutura IC50 EC50
JL o / I Π X-NH ΟγΧΧχΜ /=\ ^NH U-o/VJ F B c
N II c> °\ / \ ll X-NH θχΧΧΧ J /=x I Ύ I )—< x-f HN^ V-07 X A A
H X\ X\ -X „ r ii r π Xo u h yukxxX N Δ MTn-fte A A
0 /x ΐ ζΛ —X /7 1 F J NH V\_J ° //^ N /vAn7 X Ml 0 Ml XX^F A A
^N^ x\ /0 <X / i Π Xnh °xXzxM\ /=\ I . ]| | )—4 xf HNy\ \xoz vm o A A
108/543
Estrutura IC50 EC50
OH /ΑαΑ Οχ / I II 8χ_νη /—\ Α.νη η JL / X /)~ν i—3r \ΑΑ X—y A A
ΝΗ2 Λ° Α οχ / I Π V'NH ΟαΑ>ΑζΑΑ\ /=\ I . || | )—χ ρ— f HNy\ νν w ο A A
νη2 ΑΑΑ Οκ / II \ΑΝΗ OaVaAx / Hhl· Λ [[ J /---<λ />—F A4 ΑΑ^ο A A
/Ο οκ / \ Il ΧΑΝΗ /=\ Λ ι ιι Ίρ /—<( ζ>—f ΔρΝΗ W-o7 \JT A A
F AVtxV' A A
109/543
Estrutura 1C50 ec50
/AA <A // /0 o, / (' / Ti XT A—NH n VnvzAa^J\ /=\ /\ II I Λ—1 z>— F A A
cr /\ o, / te/ H A-NH OxÂJk/x/\ /=\ 1 || 1 /—Z λ— F A NH VaV VA Vn B E
H V /\ / —-N ,Μ A ít \-;O Ο 1 Η Γ s <A n // JL 1 ,__, nA ΑρΛγη 0 ' χ- . A
\ H V /°\/\/CI —N /N te \/\/ X.Q 01 \ Η p /\ li y—ç y—f A
nh2 jte^° Ό ex / Γ H ANH O-íx/A/A/Aj-Z /= 1 a lí T z—1 #— F HNy^ zAo7 Va N=\^ w A A
^N^ /\ /O o. / ΓΗ A-nh θ^/Α-^^/Α;·—/\ /=\ I . |1 [ )—<x y—f HN/Ú Wo7 V# ν=Λ W A A
110/543
Estrutura IC50 EC50
An ir χο ΔI χαλαα A
χΑο5α A A
Η ΑχΑχΑ A A
ãaAxA' A A
__ο Η AvAoZcl·· A A
Cl Η ΑχΑχΑ- A A
F αΧΑ> A A
Η δα/ΑοΑ>- B A
Η ο ,ν-ν Χ/Α να^° VnAAvAAXA χχ Η2Ν η X Η ϊ αΜ Α_F A B
111/543
I Estrutura IC50 EC50
\> Η € A!Xo':Yy· A
H κχγΑίχΤο-- A A
A A
A
H Α'ΑθΧΑ, A A
H F\ XN XA ^Nv° c\—// w H / J N'X< χνγΖΑΤ γ-Λ F H Δ Π I I XX y—f A A
X^NH • /O Ok / IN Xnh /=\ I II /—<Λ Xf HN^ AAO Z XX A
112/543
Estrutura IC50 EC50
OCx ox / zU XXX>f A
N xtoxto y π r ir 'to0 I H / /\ Π 0 | 7—7 /—f A
A A
H n tox / _to /to rir 'to0 AVvVyvÍ A A
nh2 x<\ ,0 ox / \ H y-NH °^to%-toxtoxto\ /=\ I . if I )—X /)— f HNyA Vto w N A
%too Zto ι^Ί 1 TI A A
113/543
Estrutura IC50 EC50
nh2 Ayz γΑζ\ o / ΊΤ H Y-nh X uX>f γΧ A A
nh2 γΑζ\ / Ίτ Π Y-nh X uQA>f A A
OH ,o ox / z Y XNH ΟγΛγζγΑ. /=\ HNyA UVvJ F n=9 W A A
OH aAqX' A A
nh2 i 9^° °zXzz° °\ / T ll y— nh /ovAX/yA. /=\ ll I 7—Z>—F o AAoX-T C
114/543
Estrutura IC50 EC50
Η /ZX XX X —-N r il r J h / k A /N. A Λ χ>^ 7 .—, N 7\ kí I Ti //k /\ II I >—ç '>— F N A
H /O\ XX x --N Kií F \^° H I / \/Nx/k/X/kk\ /—\ vnrx>A>F A A
_ H A A
Λ H αααα A A
-N h rr í τ° ^NvYZVXx\\ /-\ ll I >---V 7—F A
Λ H ry\Ân-- A A
H _ XíX.X' -nY h Y° δ s wo N A
H yx ^Νγ° YYvGy F ° Yo/\=/ A A
H A^íAôAx' A A
115/543
Estrutura Ιθ50 EC50
I Η _ °-χ/Χ-χ _^Ν /=η V ιι Α° —Ν Η / X Χχ Ν. Λχ JJx X / ,___, ν Y^AAr L //Α\ Ζλ 11 >—(Ζ 7-F ° υ<ο/Α=/ A A
\ Η η °χ / _-Ν ρ~Ν A A Vs0 ____/ \\ Η Γ 7\ Η Τι /—X y—f ° Α^-ο7 - ./ A A
ΧΑ χ 0 / Α Α άνη Α ΧΧ>ΑΑ ν) A A
Η ηοΤΟΧΙΑ A AAXl· C E
νη2 1 1° / [Γ \s 0. ,0 (\ / (/ / ττ π Ανη W Η / Ν ^ν-Ν χΑαΑ^/χϊχΑχ ζ=\ ΪαΧΑΑ Ν A
ααΑ> B A
Η ααΧα A A
Η Ρ'ν ΑΧΑ ^Ν%° ΑαΜΑχ/ΑΓ λ-λ Α Π μ 1 X—X X—f A
116/543
Figure BRPI0918174A2_D0042
Um valor de 0,002 ou menos até 0,25 μΜ; B >0,25 μΜ - <1,0 μΜ; C 1,0 μΜ - 10,0 μΜ; D >0,67 μΜ mas um valor exato não foi determinado; E >10,0 μΜ; F >0,4 μΜ; mas um valor exato não foi determinado; G > 1,39 μΜ mas um valor exato não foi determinado; H >0,62 μΜ mas um valor exato não foi determinado; I >4 μΜ mas um valor exato não foi determinado; J>3,7 μΜ mas um valor exato não foi determinado; K >1,23 μΜ mas um valor exato não foi determinado; L < 0,02 μΜ mas um valor exato não foi determinado; M >0,50 mas um valor exato não foi determinado, N <0,02 mas um valor exato não foi determinado.
TABELA 1c
Estrutura ICõo (μΜ) EC50 (μΜ)
H 0,02 1.60E-03*
H Y n Ζ Y XX < 0,02 3,04E-04*
F I H r π r ií V10 A γχγνο F 0,01 4.25E-04*
117/543
Estrutura IC50 (μΜ) EC50 (μΜ)
Η Ay Yxr Vo A Y III z—X 7—f 0 xAo7^/ 0,02 7,86E-04*
H a? h nr -v° 0 7<Á'O - 7.20E-03 8.05E-04*
H n^a XV 'M° UXrAA^X XuHX 3.95E-03 8.30E-04*
to O, / l· Π %-NH °A>Xn>Xx^zA^_-/\ /=\ Λ I Ύ | /V /VF Λ NH MM XX 9.95E-03 1.78E-03
Ml H Mf V A /A /A/\ 7, , \ n >r X >r A^\\ /\ II > Ç x)—F 0 \^çC\=/ 0,01 1.83E-03
H r X r ir V=° ζ niiAjAA AΑπΥηΑ 8.60E-03 1.95E-03
MnT^Q /1) 1_ 7 <x JJ y—hh ^TXa-O-f 5.45E-03 2.47E-03
118/543
Estrutura IC5o(|jM) EC50 (μΜ)
/0 O. / / Y VNH z=\ \ ' Ύ I )—% J—f \ NH V_/ 9.65E-03 3.04E-03
H x?\ -Νχ n r π r j ν^° h / if C^f9OF 0,02 3.57E-03
Ο °\\ / V-nh ΗΝχΑ 0 5.90E-03 3.58E-03
/ / x?\ HN aXL_r°^ VüjQ-O 0,29 1,13
Cl > 12,50 1,13
\ Quiral N^° HO NH / y γ |] °=9 # X_/ \-° 0,80 1,25
/— Quiral _J n^° r-t J> /% fT HO HN-X /ΧγχΑγΧ #~A_ 0,60 1,26
119/543
Estrutura IC50(pM) EC50 (μΜ)
cA HNx° I / 0a/° _ iT f MA 1,71 1,34
N II / ruKh 0,80 1,38
OH HO/. Chiral /< /> zNf AV / HN—# ΑχΑ \/~ν< zA ° 1,15 1,39
H rH ^V° HO^aXAxAA\ /-\ Π I II J 7—y—f ° /° 'AO. 4,75 13,26
/ nh2 anv° xvf °=Z -'N Jx/Ax J o-tP^ > 12,50 13,66
π Ί l^ ° L o / I jX || Anh ^nrxVx=yF XA^o 9,92 15,11
\ Quiral <A o A -P/X\ °\ / An Xp || A-nh no>^ 10,39 15,39
120/543
Estrutura IC50(mM) EC5o (μΜ)
, Quiral 0 / // X\ HN Ύ _Xi ril 'r ΓυζΟ 7,13 16,08
H XX XxX [X n [X Tr f Vo 5.68E-03*
* ECsofoi determinada usando método de placa de 384 cavidades COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS E MÉTODOS DE TRATAMENTO
Os compostos demonstram atividade contra NS5B de HCV e podem ser úteis em tratamento de HCV e infecção por HCV. Desta maneira, outro aspecto da invenção é uma composição compreendendo um composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo farmaceuticamente aceitável.
Outro aspecto da invenção é uma composição compreendendo ainda um composto tendo atividade anti-HCV.
Outro aspecto da invenção é uma composição onde o composto tendo atividade anti-HCV é um interferon. Outro aspecto da invenção é onde o interferon é selecionado de interferon alfa 2B, interferon alfa peguilado, interferon de consenso, interferon alfa 2A e interferon linfoblastoide tau.
Outro aspecto da invenção é uma composição onde o composto tendo atividade anti-HCV é uma ciclosporina. Outro aspecto da invenção é onde a ciclosporina é ciclosporina A.
Outro aspecto da invenção é uma composição onde o composto tendo atividade anti-HCV é selecionado do grupo consistindo em interleucina 2, interleucina 6, interleucina 12, um composto que aumenta o desenvolvimento de uma resposta de célula T auxiliar tipo 1, RNA de interferência, RNA antissenso, Imiqimod, ribavirin, um inibidor de inosina 5’-monofosfato desidrogenase, amantadina e rimantadina.
Outro aspecto da invenção é uma composição onde o composto
121/543 tendo atividade anti-HCV é eficaz para inibir a função de um alvo selecionado de metaloprotese de HCV, HCV serina protease, HCV polimerase, HCV helicase, proteína NS4B de HCV, entrada de HCV, montagem de HCV, egresso de HCV, proteína NS5A de HCV, IMPDH e um análogo de nucleosídeo para o tratamento de uma infecção por HCV.
Outro aspecto da invenção é uma composição compreendendo um composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, um veículo farmaceuticamente aceitável, um interferon e ribavirin.
Outro aspecto da invenção é um método de inibição da função do réplicon de HCV compreendendo contato do réplicon de HCV com um composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspecto da invenção é um método de inibição da função da proteína NS5B de HCV compreendendo contato da proteína NS5B de HCV com um composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Outro aspecto da invenção é um método de tratamento de uma infecção por HCV em um paciente compreendendo administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Outro aspecto da invenção é um método de inibição da função do réplicon de HCV. Outro aspecto da invenção é um método de inibição da função da proteína NS5B de HCV.
Outro aspecto da invenção é um método de tratamento de uma infecção por HCV em um paciente compreendendo administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em conjunto com (antes, depois ou concomitantemente) outro composto tendo atividade anti-HCV.
Outro aspecto da invenção é o método onde o outro composto tendo atividade anti-HCV é um interferon.
Outro aspecto da invenção é o método onde o interferon é selecionado de interferon alfa 2B, interferon alfa peguilado, interferon de consenso, interferon alfa 2 e interferon linfoblastoide tau.
Outro aspecto da invenção é o método onde o outro composto
122/543 tendo atividade anti-HCV é uma ciclosporina.
Outro aspecto da invenção é o método onde a ciclosporina é ciclosporina A.
Outro aspecto da invenção é o método onde o outro composto tendo atividade anti-HCV é selecionado de interleucina 2, interleucina 6, interleucina 12, um composto que aumenta o desenvolvimento de uma resposta de célula T auxiliar tipo 1, RNA de interferência, RNA antissenso, Imiqimod, ribavirin, um inibidor de inosina 5’-monofosfato desidrogenase, amantadina e rimantadina.
Outro aspecto da invenção é o método onde o outro composto tendo atividade anti-HCV é eficaz para inibir a função de um alvo selecionado do grupo consistindo em HCV metaloprotease, HCV serina protease, HCV polimerase, HCV helicase, proteína NS4B de HCV, entrada de HCV, montagem de HCV, egresso de HCV, proteína NS5A de HCV, IMPDH e um análogo de nucleotídeo para o tratamento de uma infecção por HCV.
Outro aspecto da invenção é o método onde o outro composto tendo atividade anti-HCV é eficaz para inibir a função de alvo no ciclo de HCV outro que não a proteína NS5B de HCV
Terapeuticamente eficaz significa a quantidade de agente necessária para prover um benefício significante para o paciente conforme compreendido pelos praticantes no campo de hepatite e infecção por HCV.
Paciente significa uma pessoa infectada com vírus HCV e adequada para terapia conforme compreendido pelos praticantes no campo de hepatite e infecção por HCV.
Tratamento, terapia, regime, infeção por HCV e termos relacionados são usados conforme compreendido pelos praticantes no campo de hepatite e infecção por HCV.
Os compostos da presente invenção são geralmente dados como composições farmacêuticas compreendidas de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável e um veículo farmaceuticamente aceitável e podem conter excipientes convencionais. Veículos farmaceuticamente aceitáveis são aqueles veículos
123/543 convencionalmente conhecidos tendo perfis de segurança aceitáveis. As composições compreendem todas as formas sólidas e líquidas incluindo, por exemplo, cápsulas, comprimidos, pastilhas e pós bem como suspensões líquidas, xaropes, elixires e soluções. As composições são feitas usando técnicas de formulação comuns e excipientes (tais como agentes de ligação e umectantes) e veículos convencionais (tais como água e álcoois) são geralmente usados para composições. Vide, por exemplo, Remington’s Pharmaceutical Sciences, 17a edição, Mack Publishing Company, Easton, PA (1985).
As composições sólidas são normalmente formuladas em unidades de dosagem e composições provendo de a partir de cerca de 1 a 1000 mg do ingrediente ativo por dose são preferidas. Alguns exemplos de dosagem são 1 mg, 10 mg, 100 mg, 250 mg, 500 mg e 1000 mg. Em geral, outros agentes estarão presentes em uma faixa de unidade similar aos agentes desta classe usados clinicamente. Tipicamente, isto é 0,25-1000 mg/unidade.
As composições líquidas estão geralmente em faixas de unidade de dosagem. Em geral, a composição líquida estará em uma faixa de dosagem unitária de 1-100 mg/mL Alguns exemplos de dosagens são 1 mg/mL, 10 mg/mL, 25 mg/mL, 50 mg/mL e 100 mg/mL. Em geral, outros agentes estarão presentes em uma faixa unitária similar aos agentes desta classe usados clinicamente. Tipicamente, isto é 1-100 mg/mL.
A invenção compreende todos os modos de administração convencionais; métodos orais e parenterais são preferidos. Em geral, o regime de dosagem será similar a outros agentes usados clinicamente. Tipicamente, a dose diária será 1-100 mg/kg de peso do corpo diariamente. Em geral, mais composto é requerido oralmente e menos parenteralmente. O regime de dosagem específico, no entanto, será determinado por um médico usando julgamento médico seguro.
A invenção compreende também métodos onde o composto é dado em terapia de combinação. Isto é, o composto pode ser usado em conjunto com, mas separadamente de, outros agentes úteis em tratamento de
124/543 hepatite e infecção por HCV. Nesses métodos de combinação, o composto será geralmente dado em uma dose diária de 1-100 mg/kg de peso do corpo diariamente em conjunto com outros agentes. Os outros agentes geralmente serão dados nas quantidades terapeuticamente usadas. O regime de dosa5 gem específico, no entanto, será determinado por um médico usando julgamento médico seguro.
Alguns exemplos de compostos adequados para composições e métodos são listados na Tabela 2.
TABELA 2
Nome Comercial Tipo de Inibidor ou Alvo Empresa de Origem
Omega IFN IFN-ω Intarcia Terapeutics
BILN-2061 Inibidor de serina prote- ase Boehringer Ingelheim Pharma KG, Ingelheim, German!
Summetrel Antiviral Endo Pharmaceuticals Holdings Inc., Chadds Ford, PA
Roferon A IFN-a2a F. Hoffmann-La Roche Ltd., Basel, Suíça
Pegasis IFN-oc2a PEGuilada F. Hoffmann-La Roche Ltd., Basel, Suíça
Pegasis e Ribavirin IFN-a2a PEGuilada /ribavirin F. Hoffmann-La Roche Ltd., Basel, Suíça
CELLCEPT® Imunossupressor de IgG de HCV F. Hoffmann-La Roche Ltd., Basel, Suíça
Wellferon IFN-an1de linfoblastoide GlaxoSmitKIine pic, Uxbridge, UK
Albuferon - α IFN-a2b de albumina Human Genome Sciences Inc., Rockville, MD
Levovirin Ribavirin ICN Pharmaceuticals, Costa Mesa, CA
IDN-6556 Inibidor de caspase Idun Pharmaceuticals Inc., San Diego, CA
125/543
Nome Comercial Tipo de Inibidor ou Alvo Empresa de Origem
IP-501 Antifibrótico Indevus Pharmaceuticals Inc., Lexington, MA
Actimmune INF-γ InterMune Inc., Brisbane, CA
Infergen A IFN alfacon-1 InterMune Pharmaceuticals Inc., Brisbane, CA
ISIS 14803 Antissenso ISIS Pharmaceuticals Inc, Carlsbad, CA / Elan Pharmaceuticals Inc., Nova York, Nl
JTK-003 Inibidor de RdRp Japan Tobacco Inc., Tóquio, Japão
Pegasis e Ce- plene IFN-a2a PEGuilado / Imunomodulador Maxim Pharmaceuticals Inc., San Diego, CA
Ceplene Imunomodulador Maxim Pharmaceuticals Inc., San Diego, CA
Civacir Imunossupressor de IgG de HCV Nabi Biopharmaceuticals Inc., Boca Raton, FL
Intron A e Zadaxin IFN-a2b/a1-timosina RegeneRx Biopharmaceuticals Inc., Betesda, MD / SciClone Pharmaceuticals Inc, San Mateo, CA
Levovirin Inibidor de IMPDH Ribapharm Inc, Costa Mesa, CA
Viramidine Profármaco de ribavirin Ribapharm Inc, Costa Mesa, CA
Heptazyme Ribozima Ribozyme Pharmaceuticals Inc, Boulder, CO
Intron A IFN-a2b Schering-Plough Corporation, Kenilwort, NJ
PEG-lntron IFN-a2b PEGuilado Schering-Plough Corporation, Kenilwort, NJ
126/543
Nome Comercial Tipo de Inibidor ou Alvo Empresa de Origem
Rebetron IFN-a2b/ribavirin Schering-Plough Corporation, Kenilwort, NJ
Ribavirin Ribavirin Schering-Plough Corporation, Kenilwort, NJ
PEG-lntron 1 Ribavirin IFN-oc2b PEGuilado /ribavirin Schering-Plough Corporation, Kenilwort, NJ
Zadazim Imunomodulador SciClone Pharmaceuticals Inc., San Mateo, CA
Rebif IFN-p1a Serono, Geneva, Suíça
IFN-β e EMZ701 IFN-β e EMZ701 Transition Terapeutics Inc., Ontário, Canadá
Batabulin (T67) Inibidor de β-tubulina Tularik Inc., Sout San Francisco, CA
Merimepodib (VX-497) Inibidor de IMPDH Vertex Pharmaceuticals Inc., Cambridge, MA
Telaprevir (VX-950, LI- 570310) INibidor de NS3 serina protease Vertex Pharmaceuticals Inc., Cambridge, MA / Eli Lilli e Co. Inc., Indianápolis, IN
Omniferon IFN-α Natural Viragen Inc., Plantation, FL
XTL-6865 (XTL- 002) Anticorpo monoclonal XTL Biopharmaceuticals Ltd., Rehovot, Israel
HCV-796 Inibidor de replicase de NS5B Wyet 1 Viropharma
NM-283 Inibidor de replicase de NS5B Idenix / Novartis
GL-59728 Inibidor de replicase de NS5B Gene Labs / Novartis
GL-60667 Inibidor de replicase de NS5B Gene Labs / Novartis
2'C MeA Inibidor de replicase de NS5B Gilead
127/543
Nome Comercial Tipo de Inibidor ou Alvo Empresa de Origem
PSI6130 Inibidor de replicase de NS5B Roche
R1626 Inibidor de replicase de NS5B Roche
SCH 503034 Inibidor de serina protease Schering-Plough
NIM811 Inibidor de ciclofilina Novartis
Suvus Azul de metileno Bioenvision
Multiferon IFN de longa duração Viragen / Valentis
Actilon (CPG10101) Agonista de TLR9 Coley
lnterferon-β lnterferon-β-Ι a Serono
Zadaxin Imunomoduladtor SciClone
Pyrazolopyrimidine compounds e salts From WO 2005/047288 Inibidores de HCV Arrow Terapeutics Ltd.
2'C Metil adenosine Inibidor de replicase de NS5B Merck
GS-9132 (ACH- 806) Inibidor de HCV Achillion / Gilead
DESCRIÇÃO DE MODALIDADES ESPECÍFICAS
As abreviações conforme aqui usado são definidas como segue: 1 x para uma vez, 2 x para duas vezes, 3 x para três vezes, °C para graus Celsius, eq para equivalente ou equivalentes, g para grama ou 5 gramas, mg para milligrama ou milligramas, L para litro ou litros, mL para millilitro ou millilitros, pL para microlitro ou microlitros, N para normal, M para molar, mmol para millimol ou millimols, min para minuto ou minutos, h para hora ou horas, rt para temperatura ambiente, RT para
128/543 tempo de retenção, atm para atmosfera, psi para libra por polegada quadrada, cone. para concentrado, sat ou sat’d para saturado, MW para peso molecular, mp para ponto de fusão, ee para excess enantiomérico, MS ou Mass Spec para espectrometria de massa, ESI para espectroscopia de massa para ionização por eletropulverização, HR para alta resolução, HRMS para espectrometria de massa de alta resolução, LCMS para espectrometria de massa de cromatografia líquida, HPLC para cromatografia líquida de alta pressão, RP HPLC para HPLC de fase reversa, TLC ou tic para cromatografia de camada fina, RMN para espectroscopia por ressonância magnética nuclear, 1H para próton, δ para delta, s para singleto, d para dupleto, t para tripleto, q para quarteto, m para multipleto, br para amplo, Hz para hertz, e α, β, R, S, Έ, e Z são designações estereoquímicas familiares a um versado na técnica.
Figure BRPI0918174A2_D0043
Ácido 2-(4-fluorfenil)-5-isopropóxi-6-(metilsulfonamido)benzofuran-3-carboxílico
NaOH em excesso (10 mL, 1N aq) foi adicionado a uma solução em agitação de 2-(4-fluorfenil)-5-isopropóxi-6-(metilsulfona-mido)benzofuran3-carboxilato de metila (3,0 g, 6,89 mmols) em EtOH (34 mL) e THF (34 mL). Ele foi deixado agitar a 60 °C da noite para o dia. A mistura foi então aquecida para 67 °C e deixada agitar por mais 4 horas. A mistura foi concentrada, então diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI saturado. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto do título (2,7 g, 96%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,31 - 1,38 (m, 6 H) 2,99 (s, 3 H) 4,63 - 4,73 (m, 1 H) 7,32 - 7,41 (m,2 H) 8,00 - 8,08 (m, 2 H) 8,88 (s, 2 H) 13,05 (s, 1 H). Tempo de retenção de LC-MS: 1,03 min; m/z (MH-): 406. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm u
129/543 sando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0044
2-(4-Fluorfenil)-5-isopropóxi-6-(metilsulfonamido)benzofuran-3carboxamida
Amônia (6,1 ml, 12,2 mmols, 2M em MeOH) foi adicionada a uma solução em agitação de HATU (1,1 g, 2,95 mmols) e ácido 2-(4fluorfenil)-5-isopropóxi-6-(metilsulfonamido)benzofuran-3-carboxílico (1,0 g, 2,46 mmols) em DMF (20 ml) a 0 °C. Ela foi deixada aquecer para rt e agitada por 1 h. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCOa sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto do título (925 mg, 93%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) ôppm 1,30 - 1,37 (m, 6 H) 2,98 (s, 3 H) 4,64-4,77 (m, 1 H) 7,19 (s, 1 H)7,30 - 7,41 (m, 2 H) 7,54 (s, 1 H) 7,63 - 7,71 (m, 1 H) 7,89 (s, 1 H) 7,93 - 8,02 (m, 2 H) 8,85 (s, 1 H). Tempo de retenção de LC-MS: 1,26 miri; m/z (MH+) 407. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de re
130/543 tenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0045
N-(3-Ciano-2-(4-fluorfenil)-5-isopropoxibenzofuran-6il)metanossulfonamida.
Anidrido trifluoracético (375 μΙ_, 2,66 mmols) foi adicionado a uma solução em agitação de DIEA (928 μΙ_, 5,31 rnmols), 2-(4-fluorfenil)-5isopropóxi-6 (metilsulfonamido) benzofuran-3-carboxamida (300 mg, 0,738 mmol) em CH2CI2 (4 mL) e THF (4 mL) a 0 °C por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo bruto foi purificado em sílica-gel (BIOTAGE®, gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração em λ = 254 nm) para dar o composto do título (143 mg, 50%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) õppm 1,28 - 1,41 (m, 6 H) 3,01 (s, 3 H) 4,77 - 4,95 (m, 1 H) 7,35 (s, 1 H) 7,44 - 7,57 (m, 2 H) 7,68 (s, 1 H) 8,04 - 8,20 (m, 2 H) 9,01 (s, 1 H). Tempo de retenção de LC-MS: 1,65 min; m/z (MH-): 387. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UVVis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados u131/543 sando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0046
Ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzóico
Carbonato de césio (3,5 g, 10,7 mmol) foi adicionado a Pd(Ph3P)4 (108 mg, 0,093 mmol), trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (3,0 g, 7,19 mmols), ácido 3boronobenzoico (1,97 g, 11,86 mmols). Dioxana (60 ml) e água (12 ml) foram adicionadas em rt. A reação foi desgaseificada 3x e então aquecida até 95° C e deixada agitar da noite para o dia. Ela foi deixada esfriar até rt. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. O precipitado que se formou foi filtrado e seco da noite para o dia a 55 °C sob vácuo. A fase orgânica restante foi concentrada e triturada com DCM, seguido por DCE quente e finalmente MeOH quente para dar o composto do título que foi combinado com o precipitado anteriormente coletado (2,4 g, 87%). Tempo de retenção de LC-MS: 1,19 min; m/z (MH+): 390. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM.V. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10%/ H2O a 90%/ ácido trifluroacético e o solvente B a 0,1% era H2O a 10% / MeOH a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
132/543
Figure BRPI0918174A2_D0047
Figure BRPI0918174A2_D0048
2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-4-nitrobenzofuran-3-carboxilato de etila e
2-(4-fluorfen i I)-5-h id róxi-6-η itrobenzofu ran-3-carboxilato de etila
Ácido nítrico (21 μΙ_, 0,33 mmol) foi adicionado a uma solução 5 em agitação de 2-(4-fluorfenil)-5-hidroxibenzofuran-3-carboxilato de etila (100 mg, 0,33 mmol) em clorofórmio (3,3 mL) a -20 °C. Ele foi deixado agitar por 10 min. Uma razão 9:2 de 2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-4-nitrobenzofuran-3carboxilato de etila para 2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-6-nitrobenzofuran-3carboxilato de etila foi observada. A reação bruta foi purificada em sílica-gel 10 (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar os compostos do título:
2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-6-nitrobenzofuran-3-carboxilato de etila 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,92 (1 H, s), 8,33 (1 H, s), 8,03 - 8,11 (2 H, m), 7,69 (1 H, s), 7,43 (2 H, t, J=8,85 Hz), 4,34 (2 H, q, 15 J=7,22 Hz), 1,33 (3 H, t, J=7,17 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,79 min; m/z (MH-): 344. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma 20 taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os 25 dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-4-nitrobenzofuran-3-carboxilato de etila 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11,03 (1 H, s), 7,92 - 8,01 (2 H, m), 7,86 (1 H, d, J=9,16 Hz), 7,42 (2 H, t, J=8,85 Hz), 7,17 (1 H, d,
133/543
J=8,85 Hz), 4,20 (2 H, q, J=7,12 Hz), 1,21 (3 H, t, 7=7,17 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,56 min; m/z (MH-): 344. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
TfO.
2-(4-fluorfenil)-4-nitro-5-(trifluormetilsulfoniloxi)benzofuran-3carboxilato de etila
Trietilamina (91 pL, 0,652 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de 1,1,1-triflúor-N-fenil-N-(trifluormetilsulfonil)metanossulfonamida (116 mg, 0,326 mmol) e 2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-4nitrobenzofuran-3-carboxilato de etila (75 mg, 0,217 mmol) em DCM (2,2 mL). A reação bruta foi purificada em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar composto titulado (78 mg, 75%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11,03 (1 H, s), 7,92 8,01 (2 H, m), 7,86 (1 H, d, 7=9,16 Hz), 7,42 (2 H, t, J=8,85 Hz), 7,17 (1 H, d, 7=8,85 Hz), 4,20 (2 H, q, 7=7,12 Hz), 1,21 (3 H, t, J=7,17 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,91 min; m/z (MH+): nenhum íon detectado. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B
134/543
100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0049
2-(4-fluorfenil)-4-nitro-5-(3-(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil) benzofuran-3-carboxilato de etila
Etapa 1: Carbonato de césio (333 mg, 1,021 mmol) foi adicionado a Pd(Ph3P)4 (39 mg, 0,034 mmol), 2-(4-fluorfenil)-4-nitro-5(trifluormetilsulfoniloxi)benzofuran-3-carboxilato de etila (325 mg, 0,681 mmol), ácido 3-boronobenzoico (169 mg, 1,021 mmol). Dioxana (5,6 mL) e água (1,1 mL) foram adicionadas em rt. A reação foi desgaseificada 3x e aquecida para 90 °C da noite para o dia. Ela foi deixada esfriar. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o ácido m.
Etapa 2: O ácido m bruto foi diluído com DMF (5 mL) e tratado com HATU (388 mg, 1,021 mmol), 2-fenilpropan-2-amina (138 mg, 1,021 mmol) e DIEA (357 pL, 2,043 mmols) e deixado agitar por 1 h. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto do título que foi purificado em sílica-gel (coluna BIOTAGE® 25+M, Gradiente de EtOAc/hexanos; Rf ~0, para EtOAc 20%/hexanos; coleta de fração a λ = 254 nm) para dar um sólido amarelo claro (294 mg, 76%). Tempo de retenção de LC-MS: 1,97 min; m/z (MH+): 567. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-40AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição emprega
135/543 ram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, urn tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
O2hl· /
2-(4-fluorfenil)-6-nitro-5-(trifluormetilsulfoniloxi)benzofuran-3carboxilato de etila
Trietilamina (121 μΙ_, 0,869 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de 1,1,1-triflúor-N-fenil-N-(trifluormetilsulfonil)metanossulfonamida (155 mg, 0,434 mmol) e 2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-6nitrobenzofuran-3-carboxilato de etila (100 mg, 0,290 mmol) em DCM (3 mL). Ela foi deixada agitar da noite para o dia. A mistura foi concentrada e foi purificada em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título (140 mg, 100%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,91 (1 H, s), 8,10 - 8,19 (3 H, m), 7,48 (2 H, t, 7=8,97 Hz), 4,37 (2 H, q, J=7,07 Hz), 1,34 (3 H, t, J=6,95 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,91 min; m/z (MH+): nenhum ion detectado. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
136/543
HO
Figure BRPI0918174A2_D0050
Ácido 2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-6-nitrobenzofuran-3-carboxílico
NaOH em excesso (11 ml, 11,00 mmols, 1M aq) foi adicionado a uma solução em agitação de 2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-6-nitrobenzofuran-3carboxilato de etila (1,9 g, 5,50 mmols) em EtOH (55 ml) e THF (55 ml) e foi deixado agitar a 64 °C da noite para o dia. A mistura foi concentrada e diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto do título (1,7 g, quant.). 1H RMN (300 MHz, DMSO-de) ôppm 7,31 - 7,48 (m, 2 H) 7,71 (s, 1 H) 8,00 - 8,14 (m, 2 H) 8,29 (s, 1 H) 10,80 (s, 1 H) 13,35 (s, 1 H). Tempo de retenção de LC-MS: 0,99 min; m/z (MH-): 416. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0051
Trifluormetanossulfonato de 2-(4-Fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)-6nitrobenzofuran-5-ila.
Etapa 1: Metanamina (4,4 ml, 8,83 mmols) foi adicionada a uma solução em agitação de DIEA (3 ml, 17,65 mmols), BOP (2,9 g, 6,62 mmols) e ácido 2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-6-nitrobenzofuran-3-carboxílico (1,4 g, 4,41
137/543 mmols) em DMF (44 ml) a 0 °C. Ela foi deixada aquecer para rt e agitada por 1 h. A mistura foi concentrada e diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar um produto bruto que foi triturado com MeOH para dar metilamida, aduto de nitro fenol-hmpa (1,7 g, 78%).
Etapa 2: O aduto de hmpa (100 mg, 0,203 mmol) foi absorvido em EtOH e tratado com NaOH 1M (609 pL, 0,609 mmol) a 70 °C. Ele foi deixado agitar da noite para o dia. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o nitro fenol (50 mg, 75%) como um sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS: 1,34 min; m/z (MH+): 331. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UVVis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Etapa 3: Trietilamina (422 pL, 3,03 mmols) foi adicionada a uma solução em agitação de N-Fenilbis(trifluormetano)sulfonimida (649 mg, 1,817 mmol) e 2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-N-metil-6-nitrobenzofuran-3-carboxamida (400 mg, 1,211 mmol) em DCM (24 mL) em rt. A pasta fluida foi deixada agitar da noite para o dia. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar um resíduo bruto que foi purificado em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, Rf ~0,2 em EtOAc 30%/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título (375 mg, 67%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,83 (1 H, s), 8,55 - 8,65 (1 H, m), 7,98 8,05 (2 H, m), 7,95 (1 H, s), 7,47 (2 H, t, 4=8,85 Hz), 2,84 (3 H, d, 4=4,58
138/543
Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,96 min; m/z (MH-): 461. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0052
Trifluormetanossulfonato de 6-Amino-2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila
Ferro (211 mg, 3,79 rnmols) foi adicionado a uma solução em agitação de 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)-6-nitrobenzofuran-5-il trifluormetanossulfonato (350 mg, 0,757 mmol) em EtOH (8,4 mL) e AcOH (8,4 mL) em rt e então foi aquecido para 100 °C por 10 min. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat seguido por NaOH a 1M e salmoura. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar um sólido branco que era 1:1 de material de partidaiproduto. Ela foi novamente submetida a condições de reação por 15 minutos e trabalhada novamente para dar o composto do título (275 mg, 84%). Tempo de retenção de LC-MS: 1,47 min; m/z (MH+): 433. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a
139/543
100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0053
Trifluormetanossulfonato de 2-(4-Fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)-6(N-(metilsulfonil)metilsulfonamido)benzofuran-5-ila
Cloreto de metanossulfonila (146 pl_, 1,873 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de trifluormetanossulfonato de 6-amino-2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (270 mg, 0,624 mmol) e DIEA (500 μΐ_, 2,86 mmols) em DCM (6,3 mL) a 25 °C. Ele foi deixado agitar por 1 hora e então diluído com EtOAc e lavado com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. Ela foi purificada em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título (300 mg, 82%). Tempo de retenção de LC-MS: 1,49 min; m/z (MH+): 589. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
140/543
Figure BRPI0918174A2_D0054
5-(3-(1 H-Tetrazol-5-il)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofu ran-3carboxamida
Azidotrimetilsilano (161 μΙ_, 1,215 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 5-(3-cianofenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida (225 mg, 0,607 mmol) e dibutilestananona (30 mg, 0,121 mmol) em tolueno (6 mL) em rt. Ele foi aquecido para 105 °C e deixado agitar da noite para o dia. A reação, que permaneceu uma pasta fluida, resultou em -70% de conversão. Equivalentes adicionais de reagentes e solventes foram adicionados e a mistura foi deixada agitar da noite para o dia a 10 °C. A reação foi deixada resfriar e filtrada para dar o composto do título (205 mg, 82%). Tempo de retenção de LC-MS: 1,03 min; m/z (MH+): 414. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0055
3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoato de metila
141/543
Trimetilsilildiazometano (500 pL, 1,00 mmol, 2M em dietil éter) foi adicionado a uma solução em agitação de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (100 mg, 0,257 mmol) em dietil éter (2,5 mL) a 25 °C. Ele foi deixado agitar por 2 horas. A mistura foi concentrada para dar o composto titulado (100 mg, 97%). Tempo de retenção de LCMS: 2,46 min; m/z (MH+): 404. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters SunFire 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM . As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 3 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 4 min onde o solvente A era acetonitrila a 10%/ H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10%/acetonitrila a 90%/ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0056
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-formilfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida
Carbonato de césio (176 mg, 0,539 mmol) foi adicionado a Pd(Ph3P)4 (20 mg, 0,018 mmol), trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (150 mg, 0,359 mmol), ácido 3formilfenilborônico (59 mg, 0,395 mmol). Dioxana (3 mL) e água (600 pL) foram adicionadas em rt. A reação foi aquecida para 90 °C da noite para o dia. A mistura foi diluída com acetato de etila e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada e triturada com DCM para dar o composto do título (55 mg, 41%). Tempo de retenção de LC-MS: 1,49 min; m/z (MH+): 374. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna
142/543
Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
5-(3-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-6-nitrobenzofuran3-carboxilato de etila
Carbonato de césio (1,54 g, 4,71 mmols) foi adicionado a Pd(Ph3P)4 (182 mg, 0,157 mmol), 2-(4-fluorfenil)-6-nitro-5(trifluormetilsulfoniloxi)benzofuran-3-carboxilato de etila (1500 mg, 3,14 mmols), ácido 3-(terc-butoxicarbonil)fenilborônico (768 mg, 3,46 mmols). Dioxana (26 mL) e água (5 mL) foram adicionadas em rt. A reação foi aquecida para 90 °C da noite para o dia. A reação foi deixada esfriar, foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada e purificada em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título (1,10 g, 69%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,60 (1 H, s), 8,08 - 8,18 (2 H, m), 8,02 (1 H, s), 7,95 - 8,01 (1 H, m), 7,88 (1 H, s), 7,58 - 7,70 (2 H, m), 7,46 (2 H, t, 7=8,78 Hz), 4,34 (2 H, q, 7=7,20 Hz), 1,56 (9 H, s), 1,27 (3 H, t, 7=7,14 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 2,13 min; m/z (MH+): origem não ioniza. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um compri
143/543 mento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0057
6-amino-5-(3-(terc-butoxicarbonil)fenil)-2-(4-fluorfenil) benzofuran-3-carboxilato de etila
Ferro (28 mg, 0,495 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 5-(3-(terc-butoxicarbonil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-6-nitrobenzofuran-3carboxilato de etila (50 mg, 0,099 mmol) em EtOH (495 pL) e AcOH (495 pL) a 100 °C. Ele foi deixado agitar for 1 hr. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto do título (45 mg, 96%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,99 - 8,06 (2 H, m), 7,89 - 7,96 (2 H, m), 7,65 7,72 (1 H, m), 7,61 (1 H, t, J=7,65 Hz), 7,55 (1 H, s), 7,31 - 7,40 (2 H, m), 7,00 (1 H, s), 5,10 (2 H, s amplo.), 4,29 (2 H, q, J=7,03 Hz), 1,56 (9 H, s), 1,26 (3 H, t, J=7,15 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 2,03 min; m/z (MH+): origem não ioniza. 420 (-tBu) foi observado. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo
144/543 de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0058
5-(3-(terc-butoxicarbonil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-6-(Nmetilmetilsulfonamido)benzofuran-3-carboxilato de etila
Etapa 1: Cloreto de metanossulfonila (16 pl_, 0,208 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 6-amino-5-(3-(fercbutoxicarbonil)fenil)-2-(4-fluorfenil)benzofuran-3-carboxilato de etila (90 mg, 0,189 mmol) em piridina (2 mL) em rt. Ele foi deixado agitar por 6 h, então 8 pL de MsCI foram adicionados e a reação foi deixada agitar da noite para o dia. A reação foi concentrada e diluída com acetato de etila e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o intermediário sulfonamida NH. Tempo de retenção de LC-MS: 1,93 min; m/z (MH-): 552. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Etapa 2: O resíduo bruto foi diluído com DMF (2mL) e tratado
145/543 com DIEA (99 μΙ_, 0,568 mmol) e lodometano (18 pL, 0,284 mmol) seguido por Na2CO3 (20 mg). A reação foi deixada agitar por 3 dias. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCOa sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto do título (100 mg, 93%). Tempo de retenção de LC-MS: 1,96 min; m/z (MH+): a origem não ioniza. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônioa 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0059
I
Ácido 3-(3-(etoxicarbonil)-2-(4-fluorfenil)-6-(N-metilmetilsulfonamido)benzofuran-5-il)benzoico
TFA (2 mL, 26,0 mmols) foi adicionado a uma solução em agitação de 5-(3-(terc-butoxicarbonil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-6-(N-metilmetilsulfonamido)benzofuran-3-carboxilato de etila (100 mg, 0,176 mmol) em DCE (9 mL) a 25 °C. Ele foi deixado agitar por várias horas, então concentrado para dar o composto do título (92 mg, quant). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,05 - 8,12 (3 H, m), 7,92 - 8,03 (3 H, m), 7,65 - 7,75 (1 H, m), 7,53 - 7,64 (1 H, m), 7,44 (2 H, t, 4=8,91 Hz), 4,33 (2 H, q, 4=7,03 Hz), 3,12 (3 H, s), 2,93 (3 H, s), 1,26 (3 H, t, 4=7,15 Hz). Tempo de retenção de LCMS: 1,17 min; m/z (MH-): 510. Dados de LC foram registrados em um cro146/543 matógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0060
I
2-(4-fluorfenil)-6-(N-metilmetilsulfonamido)-5-(3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxilato de etila
DIEA (51 pl_, 0,293 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de ácido 3-(3-(etoxicarbonil)-2-(4-fluorfenil)-6-(Nmetilmetilsulfonamido)benzofuran-5-il)benzoico (50 mg, 0,098 mmol), 2fenilpropan-2-amina (26 mg, 0,195 mmol), HATU (56 mg, 0,147 mmol) em DMF (1 mL) a 25 °C. Ela foi deixada agitar por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto do título (50 mg, 81%). Tempo de retenção de LC-MS: 1,82 min; m/z (MH+): 629. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e
147/543 um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0061
I
Ácido 2-(4-fluorfenil)-6-(N-metilmetilsulfonamido)-5-(3-(2fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxilico
NaOH (500 pL, 0,500 mmol, 1M aq.) foi adicionado a uma solução em agitação de 2-(4-fluorfenil)-6-(N-metilmetilsulfonamido)-5-(3-(2fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxilato de etila (50 mg, 0,080 mmol) em etanol (795 pL) a 60 °C. A pasta fluida foi deixada agitar da noite para o dia. DMF (2 mL) foi adicionada junto com porção adicional de NaOH e a mistura foi aquecida para 70 °C e deixada agitar da noite para o dia. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto do título (49 mg, quant). Tempo de retenção de LC-MS: 2,36 min; m/z (MH+): 601. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters SunFire 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM . As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 3 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 4 min onde o solvente A era acetonitrila a 10%/ H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10% / acetonitrila a 90%/ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
148/543
Figure BRPI0918174A2_D0062
3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)-6-nitrobenzofuran-5il)benzoato de etila
Carbonato de césio (1,69 g, 5,19 mmols) foi adicionado a Pd(Ph3P)4 (250 mg, 0,216 mmol), 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)-6nitrobenzofuran-5-il trifluormetanossulfonato (2,00 g, 4,33 mmols), ácido 3(etoxicarbonil)fenilborônico (1,01 g, 5,19 mmols). Dioxana (36 mL) e água (7 mL) foram adicionadas em rt e a mistura foi desgaseificada 3x. A reação foi aquecida para 90 °C da noite para o dia. Ela foi deixada esfriar. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. O sólido brudo foi triturado com DCM para dar o composto do título (1,70 g, 85%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δδ ppm 8,55 - 8,61 (1 H, m), 8,54 (1 H, s), 8,00 - 8,09 (3 H, m), 7,95 (1 H, s), 7,73 (1 H, s), 7,61 - 7,70 (2 H, m), 7,45 (2 H, t, 7=8,91 Hz), 4,35 (2 H, q, 7=7,19 Hz), 2,83 (3 H, d, 7=4,52 Hz), 1,34 (3 H, t, 7=7,03 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,62 min; m/z (MH+): 463. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
149/543
Figure BRPI0918174A2_D0063
3-(6-amino-2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoato de etila
Ferro (1,03 g, 18,4 mmols) foi adicionado a uma solução em agitação de 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)-6-nitrobenzofuran-5-il)benzoato de etila (1,70 g, 3,68 mmols) em EtOH (37 mL) e AcOH (37 mL) a 90 °C. A pasta fluida foi deixada agitar por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat seguido por NaOH a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto do título (1,40 g 88%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,25 8,34 (1 H, m), 8,00 - 8,03 (1 H, m), 7,87 - 7,99 (3 H, m), 7,69 - 7,75 (1 H, m), 7,63 (1 H, t, 7=7,65 Hz), 7,26 - 7,37 (2 H, m), 7,20 (1 H, s), 6,98 (1 H, s), 5,07 (2 H, s), 4,35 (2 H, q, J=7,03 Hz), 2,78 (3 H, d, 7=4,52 Hz), 1,34 (3 H, t, 7=7,03 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,46 min; m/z (MH+): 433. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
150/543
Figure BRPI0918174A2_D0064
HN
F
I o=s=o
3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)-6(metilsulfonamido)benzofuran-5-il)benzoato de etila
Cloreto de metanossulfonila (303 μΙ_, 3,88 mmols) foi adicionado a uma solução em agitação de 3-(6-amino-2-(4-fluorfenil)-35 (metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoato de etila (1,40 g, 3,24 mmols) em piridina (32 mL) a 25 °C. Ele foi deixado agitar da noite para o dia em rt. A reação foi concentrada e foi purificada em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título (1,01 g, 61%). Tempo de retenção de LC-MS: 1,53 min; m/z (MH+):
511. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo 20 de eletropulverização.
HO.
HO
Figure BRPI0918174A2_D0065
F
N
O=S=O
151/543
Ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-6-(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico
Etapa 1: (2-Bromoetoxi)(terc-butil)dimetilsilano (189 pL, 0,881 mmol) foi adicionado a uma suspensão em agitação de Na2CO3 (311 mg, 2,94 mmols) e 3-(6-(N-(2-(terc-butildimetilsililoxi)etil)metilsulfonamido)-2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoato de etila em DMF (6 mL) a 100 °C. Ela foi deixada agitar por 5 h, e então deixada esfriar para rt e agitada da noite para o dia. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SC>4, filtrada e concentrada. Tempo de retenção de LC-MS: 2,12 min; m/z (MH+): 669. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Etapa 2: O resíduo foi diluído com EtOH (10 mL) e tratado com NaOH (2938 pL, 2,94 mmols) e deixado agitar a 60 °C por 4 horas. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada.
Etapa 3: O resíduo bruto foi absorvido em THF e tratado com HCI a 1M (perfazendo 30% em THF). A reação foi deixada agitar por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar o composto do título (300 mg, 97%). Tempo de retenção de LC-MS: 1,09 min; m/z (MH+): 527. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm u152/543 sando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0066
Figure BRPI0918174A2_D0067
N-(2-(4-Fluorfenil)-5-isopropóxi-3-(1 H-1,2,4-triazol-5il)benzofuran-6-il)metanossulfonamida, e
N-(2-(4-fluorfenil)-5-isopropóxi-3-(1 H-1,2,4-triazol-5il)benzofuran-6-il)-N-metilmetanossulfonamida
Ν,Ν-Dimetilformamida dimetil acetal (500 pL, 3,76 mmols) e 2-(4fluorfenil)-5-isopropóxi-6-(metilsulfonamido)benzofuran-3-carboxamida (100 mg, 0,246 mmol) foram combinados e aquecidos para 85 °C. DMF (1 mL) foi adicionada. Ela foi deixada agitar por 1 h. A mistura foi concentrada e diluída com dioxana (200 pl), ácido acético (1 ml) e tratada com hidrazina (154 pL, 4,92 mmols) e aquecida a 85 °C por várias horas. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCOs sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo bruto foi purificado através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente adequadamente tamponado e concentrado para dar N-(2-(4-fluorfenil)-5isopropóxi-3-(1 H-1,2,4-triazol-5-il)benzofuran-6-il)metanossulfonamida (25 mg, 0,058 mmol) e N-(2-(4-fluorfenil)-5-isopropóxi-3-(1H-1,2,4-triazol-5il)benzofuran-6-il)-N-metilmetanossulfonamida (11 mg, 0,025 mmol).
N-(2-(4-Fluorfenil)-5-isopropóxi-3-(1 H-1,2,4-triazol-5153/543 il)benzofuran-6-il)metanossulfonamida 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) ôppm 1,30 -1,42 (m, 6 H) 2,99 (s, 3 H) 4,57 - 4,73 (m, 1 H) 7,24 - 7,40 (m,2 H) 7,57 (s, 1 H) 7,67 (s, 1 H) 8,06 8,22 (m, 2 H) 8,68 (s, 1 H). Tempo de retenção de LC-MS:1,30 min; m/z (MH+): 431. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. HPLC adicional foi realizada usando um instrument Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC adicional: Solvente A = CH3CN a 95%/H2O a 5%/ TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/ H2O a 5% /TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 10,71 min, pureza = 94%; Coluna: coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 9,74 min, pureza = 97%.
N-(2-(4-Fluorfenil)-5-isopropóxi-3-(1 H-1,2,4-triazol-5il)benzofuran-6-il)-N-metilmetanossulfonamida 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) ôppm 1,29 -1,41 (m, 6 H) 3,04 (s, 3 H) 3,19 - 3,24 (m, 3 H) 4,61 - 4,80 (m,1 H) 7,28 - 7,39 (m, 2 H) 7,61 (s, 1 H) 7,76 (s, 1 H) 8,08 - 8,27 (m, 2 H) 8,78 (s, 1 H) 14,34 (s, 1 H). Tempo de retenção de LC-MS: 1,36 min; m/z (MH+) 345. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a
154/543
100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC adicional: Solvente A = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 11,30 min, pureza = >95%; Coluna: coluna Waters XBridge fenila 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 10,21 min, pureza = >95%.
Figure BRPI0918174A2_D0068
N-(2-(4-Fluorfenil)-5-isopropóxi-3-(1 H-1,2,4-triazol-5il)benzofuran-6-il)metanossulfonamida
Azidotrimetilsilano (34,2 pL, 0,257 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de óxido de dibutilestanho (6,41 mg, 0,026 mmol) e N(3-ciano-2-(4-fluorfenil)-5-isopropoxibenzofuran-6-il)metanossulfonamida (50 mg, 0,129 mmol) em dioxana (1,3 mL) em rt. Ele foi submetido à irradiação com micro-ondas por 15 min a 150 °C. Ele foi tratado com equivalentes adicionais de reagentes e novamente submetido por 30 min seguido por 60 min. A mistura foi concentrada e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (12 mg, 22%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) õppm 1,29 - 1,39 (m, 6 H) 3,01 (s, 3 H) 4,62 - 4,81 (m, 1 H) 7,28 - 7,45 (m,3 H) 7,65 (s, 1 H) 7,84 - 7,98 (m, 2 H) 8,92 (s, 1 H). Tempo de retenção de LC-MS: 1,04 min; m/z (MH+): 432. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis
155/543
SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 11,56 min, pureza = 94%; Coluna: coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 10,55 min, pureza = 96%.
Procedimento geral: Acoplamento de m-Amida
DIEA (36 pL, 0,205 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de HATU (59 mg, 0,154 mmol), a amina apropriada (0,164 mmol) e ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (40 mg, 0,103 mmol) em DMF (1 mL) em temperatura ambiente. Ela foi deixada agitar da noite para o dia. A reação foi concentrada e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o produto esperado. Este procedimento geral foi aplicado aos Exemplos KP4 a KP14.
Figure BRPI0918174A2_D0069
5-(3-(terc-Butil(metil)carbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 1,54 - 1,57 (m, 9 H) 2,94 -
2,99 (m, 6 H) 7,25 (t, 2 H) 7,35 - 7,40 (m, 1 H) 7,53 (t, 1 H) 7,64 - 7,67 (m, 2
156/543
Η) 7,67 - 7,68 (m, 1 Η) 7,72 - 7,77 (m, 1 Η) 7,88 - 7,90 (m, 1 Η) 7,92 - 7,97 (m,2 Η). Tempo de retenção de LC-MS: 1,71 min; m/z (MH+): 459. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0070
F
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(1-(4-fluorfenil)etilcarbamoil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,10 - 8,15 (1 H, m), 7,90 -
7,99 (3 H, m), 7,84 (2 H, t, 7=9,61 Hz), 7,63 - 7,72 (2 H, m), 7,56 (1 H, t, J=7,78 Hz), 7,40 - 7,47 (2 H, m), 7,22 - 7,29 (2 H, m), 7,03 - 7,10 (2 H, m), 5,24 - 5,30 (1 H, m), 2,97 (3 H, s), 1,59 (3 H, d, J=7,02 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,67 min; m/z (MH-): 509. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O A 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma Ml
157/543
CROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC adicional: Solvente A = MeOH a 5%/H2O a 95%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%/H2O a 5%/ bicarbonate de amônio a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C1 C-18, 4,6 x 150 mm, 3 pm, Rt = 15,64 min, pureza = 97%; Coluna: coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 15,63 min, pureza = 98%.
Figure BRPI0918174A2_D0071
F (S)-2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(1-(4-fluorfenil)etilcarbamoil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,13 (1 H, s), 7,91 - 7,99 (3 H, m), 7,84 (2 H, t, 7=9,31 Hz), 7,64 - 7,72 (2 H, m), 7,56 (1 H, t, 7=7,78 Hz), 7,41 - 7,48 (2 H, m), 7,26 (2 H, t, 7=8,85 Hz), 7,02 - 7,10 (2 H, m), 5,28 (1 H, q, 7=7,22 Hz), 2,97 (3 H, s), 1,59 (3 H, d, 7=7,02 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,67 min; m/z (MH-): 509. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = MeOH a 5% /H2O a 95%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%/H2O a 5%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15
158/543 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C1 C-18, 4,6 x 150 mm, 3 pm, Rt = 15,55 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 15,34 min, pureza = 98%.
Figure BRPI0918174A2_D0072
F (R)-2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(1-(4-fluorfenil)etilcarbamoil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,14 (1 H, s), 7,92 - 7,99 (3 H, m), 7,81 - 7,87 (2 H, m), 7,65 - 7,72 (2 H, m), 7,57 (1 H, t, 7=7,63 Hz), 7,42 - 7,47 (2 H, m), 7,23 - 7,29 (2 H, m), 7,04 - 7,10 (2 H, m), 5,28 (1 H, q, 7=7,02 Hz), 2,97 (3 H, s), 1,59 (3 H, d, 7=7,02 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,66 min; m/z (MH-): 509. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = MeOH a 5%/H2O a 95%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%/H2O a 5%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C1 C-18, 4,6 x 150 mm, 3 pm, Rt = 15,56 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt =
159/543
15,33 min, pureza = 97%.
Figure BRPI0918174A2_D0073
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(2-(4-fluorfenil)propan-2-ilcarbamoil)fenil)-Nmeti Ibenzofura n-3-carboxam id a 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,04 - 8,10 (1 H, m), 7,89 -
7,99 (3 H, m), 7,76 - 7,86 (2 H, m), 7,63 - 7,73 (2 H, m), 7,56 (1 H, t, J=7,78 Hz), 7,42 - 7,51 (2 H, m), 7,26 (2 H, t, 7=8,70 Hz), 6,98 - 7,06 (2 H, m), 2,98 (3 H, s), 1,78 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 1,72 min; m/z (MH-): 523. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = MeOH a 5%/H2O a 95%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%/H2O a 5%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Início B% =10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C1 C-18, 4,6 x 150 mm, 3 pm, Rt = 15,73 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 15,53 min, pureza = 99%.
160/543
Figure BRPI0918174A2_D0074
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,09 (1 H, s), 7,90 - 7,99 (3 H, m), 7,74 - 7,89 (1 H, m), 7,63 - 7,72 (2 H, m), 7,55 (1 H, t, 7=7,63 Hz), 7,47 (2 H, d, 7=7,32 Hz), 7,31 (2 H, t, 7=7,78 Hz), 7,22 - 7,28 (2 H, m), 7,19 (1 H, t, 7=7,32 Hz), 2,97 (3 H, s), 1,79 (6 H, s). Tempo de retenção de LCMS: 1,71 min; m/z (MH-): 505. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = MeOH a 5%/H2O a 95%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%/H2O a 5%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C1 C-18, 4,6 x 150 mm, 3 pm, Rt = 15,79 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 15,53 min, pureza = 98%.
Figure BRPI0918174A2_D0075
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)
161/543 benzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,35 (1 H, s), 8,48 - 8,56 (1 H, m), 8,24 (1 H, s), 7,96 - 8,04 (2 H, m), 7,87 - 7,96 (3 H, m), 7,75 - 7,82 (2 H, m), 7,59 (1 H, t, 4=7,63 Hz), 7,40 (2 H, t, 4=8,70 Hz), 7,21 - 7,29 (4 H, m), 7,16 (1 H, t, 4=7,17 Hz), 2,86 (3 H, d, 4=4,58 Hz), 1,25 - 1,35 (4 H, m). Tempo de retenção de LC-MS: 1,63 min; m/z (MH-): 503. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = MeOH a 5%/H2O a 95%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%/H2O a 5%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C1 C-18, 4,6 x 150 mm, 3 pm, Rt = 15,91 min, pureza = 96%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 15,79 min, pureza = 95%.
Figure BRPI0918174A2_D0076
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(1-fenilciclobutilcarbamoil)fenil) benzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,18 (1 H, s), 8,53 (1 H, q, 4=4,48 Hz), 8,20 (1 H, s), 8,01 (2 H, dd, 4=8,85, 5,49 Hz), 7,92 (1 H, d, 4=1,22 Hz), 7,87 (2 H, dd, 4=7,63, 1,53 Hz), 7,73 - 7,83 (2 H, m), 7,57 (1 H, t, 4=7,78 Hz), 7,52 (2 H, d, 4=7,32 Hz), 7,40 (2 H, t, 4=9,00 Hz), 7,33 (2 H, t,
162/543
J=7,78 Hz), 7,20 (1 H, t, J=7,32 Hz), 2,87 (3 H, d), 2,61 - 2,71 (2 H, m), 2,54 2,58 (2 H, m), 2,01 - 2,11 (1 H, m), 1,82 - 1,92 (1 H, m). Tempo de retenção de LC-MS 2,42 min; m/z (MH+): 519. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD10A em um comprimento de onda de detector de 220nM.V. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 3 min, um tempo de retenção de 1 min, e um tempo de análise de 4 min onde o Solvente A era MeOH a 10% / H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1 % e solvente B era H2O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1 %, Início B% =10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 μιτι, Rt = 14,66 min, pureza = 97%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 13,13 min, pureza = 97%.
Figure BRPI0918174A2_D0077
N-(2-(4-Fluorfenil)-5-isopropóxi-3-(1 H-1,2,4-triazol-5il)benzofuran-6-il)metanossulfonamida 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11,03 (1 H, s), 7,92 - 8,01 (2 H, m), 7,86 (1 H, d, 7=9,16 Hz), 7,42 (2 H, t, 7=8,85 Hz), 7,17 (1 H, d, 7=8,85 Hz), 4,20 (2 H, q, 7=7,12 Hz), 1,21 (3 H, t, 7=7,17 Hz).). Tempo de retenção de LC-MS: 1,70 min; m/z (MH+): 547. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD
163/543
10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 14,86 min, pureza = 99%; Método de HPLC convencional 2: Solvente A = MeOH a 5%/H2O a 95%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%/H2O a 5%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C-18, 4,6 x 150 mm, 3 pm, Rt = 17,53 min, pureza = 99%.
Figure BRPI0918174A2_D0078
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(piridin-4ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11,15 (1 H, s), 8,64 (2 H, d, 4=6,41 Hz), 8,48 - 8,55 (1 H, m), 8,30 (1 H, s), 8,05 - 8,08 (2 H, m), 7,97 8,03 (6 H, m), 7,76 - 7,85 (2 H, m), 7,71 (1 H, t, 4=7,78 Hz), 7,41 (2 H, t, 4=8,70 Hz), 2,83 - 2,92 (3 H, m). Tempo de retenção de LC-MS: 1,45 min; m/z (MH+): 466. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma
164/543 taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = MeOH a 5%/H2O a 95%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%/H2O a 5%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C-18, 4,6 x 150 mm, 3 pm, Rt - 15,11 min, pureza = 97%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 14,81 min, pureza = 96%.
Figure BRPI0918174A2_D0079
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutil(metil)carbamoil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 7,93 - 7,98 (2 H, m), 7,88 7,91 (1 H, m), 7,74 - 7,81 (1 H, m), 7,63 - 7,70 (3 H, m), 7,51 - 7,60 (1 H, m), 7,32 - 7,41 (1 H, m), 7,25 (2 H, t), 3,43 (1 H, d), 3,21 (1 H, d), 3,10 (2 H, s), 3,03 (2 H, s), 2,96 (3 H, s), 2,10 - 2,21 (1 H, m), 1,92 - 2,07 (1 H, m), 1,01 (3 H, d), 0,78 (3 H, d). Tempo de retenção de LC-MS: 1,65 min; m/z (MH+): 459. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era
165/543
H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização.
Figure BRPI0918174A2_D0080
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-4-nitro-5-(3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Etapal: 2-(4-fluorfenil)-4-nitro-5-(3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxilato de etila (300 mg, 0,529 mmol) foi diluído com EtOH (10 mL) e tratado com NaOH (2,1 mL, 2,12 mmols, 1N aq.) e a mistura, que se transformou em uma pasta fluida, foi deixada agitar da noite para o dia a 60 °C. A reação foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada.
Etapa 2: EDC (128 mg, 0,668 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de ácido 2-(4-fluorfenil)-4-nitro-5-(3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxílico bruto (300 mg, 0,557 mmol), metanamina (306 pL, 0,613 mmol), 1-hidróxi-7-azabenzotriazole (83 mg, 0,613 mmol), DIEA (204 pL, 1,170 mmol) em DCM (5,5 mL) em rt. Ela foi deixada agitar por 3 dias. A pasta fluida se transformou em solução durante este período de tempo. A mistura foi concentrada e purificada em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título (220 mg, 95%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 7,90 - 7,99 (3 H, m), 7,85 - 7,90 (1 H, m), 7,82 - 7,84 (1 H, m), 7,49 - 7,56 (3 H, m), 7,45 (2 H, d, 7=7,32 Hz), 7,27 - 7,34 (4 H, m), 7,19 (1 H, t, 7=7,32 Hz), 2,87 (3 H, s), 1,76 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 1,62 min; m/z (MH+): 552. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de
166/543 detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 13,60 min, pureza = 94%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,66 min, pureza = 96%.
Figure BRPI0918174A2_D0081
4-Amino-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Ferro (25 mg, 0,453 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 2-(4-fluorfenil)-N-metil-4-nitro-5-(3-(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil) benzofuran-3-carboxamida (50 mg, 0,091 mmol) em etanol (1 mL) e AcOH (1 mL) em rt. Ele foi posto em um bloco de reação ajustado para 100°C. Ele foi deixado agitar for 1 h. A mistura foi deixada esfriar, foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M, seguido por NaOH a 1N e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada e triturada com Et2O para dar o composto do título (28 mg, 56%). 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ ppm 7,83 - 7,89 (1 H, m), 7,73 - 7,81 (3 H, m), 7,52 - 7,64 (2 H, m), 7,42 - 7,49 (2 H, m), 7,10 - 7,35 (6 H, m), 6,98 (1 H, d, 4=8,42 Hz), 2,87 (3 H, s), 1,76 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 2,33 min; m/z (MH+): 522. Dados de LC
167/543 foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u 018 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM.V. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10%/ H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10%/ MeOH a 90% / ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5% /H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 14,17 min, pureza = 97%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,84 min, pureza = 98%.
v—u
4-Acetamido-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
4-Amino-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida (20 mg, 0,038 mmol) foi diluída em piridina (1 mL) e tratada com cloreto de acetila em excesso (10 pL). A reação foi deixada agitar por 2 horas. A mistura foi concentrada e diluída com MeOH (1mL). O produto começou a quebrar, ele foi sonicado e filtrado e lavado com MeOH para dar o composto do título (8 mg, 34%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,41 (1 H, s), 8,43 (1 H, s), 8,31 - 8,38 (1 H, m), 7,88 - 7,92 (1 H, m), 7,82 - 7,87 (2 H, m), 7,80 (1 H, d, 7=7,63 Hz), 7,71 (1 Η, d, 7=8,55 Hz), 7,54 - 7,60 (1 H, m), 7,43 - 7,49 (2 H, m), 7,36 - 7,43 (5 H, m),
168/543
7,28 (2 H, t, 7=7,78 Hz), 7,17 (1 H, t, 7=7,32 Hz), 2,76 (3 H, d), 1,79 (3 H, s), 1,69 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS 1,42 min; m/z 564 (MH+)- Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,00 min, pureza = 96%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 11,26 min, pureza = 95%.
Figure BRPI0918174A2_D0082
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-6-nitro-5-(3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Etapa 1: Carbonato de césio (143 mg, 0,440 mmol) foi adicionado a Pd(Ph3P)4 (17 mg, 0,015 mmol), 2-(4-fluorfenil)-6-nitro-5(trifluormetilsulfoniloxi)benzofuran-3-carboxilato de etila (140 mg, 0,293 mmol), ácido 3-boronobenzoico (73 mg, 0,440 mmol). Dioxana (2,5 mL) e água (500 pL) foram adicionadas em rt. A reação foi desgaseificada 3x e aquecida para 90 °C da noite para o dia. Ela foi deixada esfriar. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica
169/543 foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada.
Etapa 2: O resíduo foi diluído com DMF e tratado com HATU (167 mg, 0,440 mmol), 2-fenilpropan-2-amina (60 mg, 0,440 mmol) e DIEA (154 pL, 0,880 mmol) e deixada agitar em rt da noite para o dia. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada e purificada em sílica-gel (BlOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar 2-(4-fluorfenil)-6-nitro-5-(3-(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil) benzofuran3-carboxilato de etila. (Tempo de retenção de LC-MS: 1,97 min; m/z (MH+): 567. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização).
Etapa 3: Este material foi tratado com NaOH (1 mL, 1.000 mmols) em etanol (2,93 mL) a 60 °C for 2 h então deixado agitar da noite para o dia enquanto esfriando para rt. A reação foi aquecida para 60 °C por 3 h. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada.
Etapa 4: EDC (58 mg, 0,301 mmol), metanamina (1 mL, 2.000 mmols), 1-hidráxi-7-azabenzotriazol (38 mg, 0,276 mmol), DIEA (92 pL, 0,526 mmol) foram adicionados ao resíduo em DCE (2,5 mL) em rt. Eles foram deixados agitar por 3 dias. A pasta fluida tinha se transformado em solução durante este período de tempo. A reação bruta foi purificada em sílicagel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título (112 mg, 81%). 1H RMN (500 MHz,
170/543
CD3OD) δ ppm 8,32 (1 H, s), 7,97 - 8,06 (2 H, m), 7,82 - 7,90 (2 H, m), 7,75 (1 H, s), 7,47 - 7,56 (2 H, m), 7,45 (2 H, d, 7=7,32 Hz), 7,31 (4 H, t, 7=8,09 Hz), 7,18 (1 H, t, 7=7,32 Hz), 2,94 (3 H, s), 1,77 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 3,10 min; m/z (MH+): 552. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD10A em um comprimento de onda de detector de 220nM.V. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 3 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 4 min onde o Solvente A era MeOH a 10% / H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10%/ MeOH a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 14,12 min, pureza = 96%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,98 min, pureza = 97%.
Figure BRPI0918174A2_D0083
6-Amino-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Ferro (68 mg, 1,22 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 2-(4-fluorfenil)-N-metil-6-nitro-5-(3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida (112 mg, 0,203 mmol) em etanol (2,3 mL) e AcOH (2,3 mL) em rt. Ele foi posto em um bloco de reação ajustado para 100 °C e deixado agitar for 1 h. A mistura foi deixada esfriar e foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M, seguido por NaOH a 1N e NaCI
171/543 sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada e triturada com Et2O para dar o composto do título (52 mg, 47%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 6,58 - 6,65 (3 H, m), 6,52 (1 H, d, J=7,63 Hz), 6,37 (1 H, d, J=7,93 Hz), 6,30 (1 H, t, J=7,63 Hz), 6,18 (2 H, d, J=7,32 Hz), 6,08 (1 H, s), 6,03 (2 H, t, J=7,78 Hz), 5,88 - 5,97 (3 H, m), 5,73 (1 H, s), 1,65 (3 H, s), 0,50 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS 1,54 min; m/z (MH-): 520. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 15,11 min, pureza = 95%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt= 11,11 min, pureza = 94%.
Figure BRPI0918174A2_D0084
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-6-(metilsulfonamido)-5-(3-(2-fenilpropan2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Etapa 1: DIEA (134 pL, 0,765 mmol) foi adicionada a Pd(Ph3P)4 (30 mg, 0,025 mmol), trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)-6-(N-(metilsulfonil) metilsulfonamido)benzofuran-5-ila (150
172/543 mg, 0,255 mmol), ácido 3-(etoxicarbonil)fenilborônico (74 mg, 0,382 mmol). Dioxana (5 mL) e água (1 mL) foram adicionadas em rt. A reação foi desgaseificada 3x e aquecida para 90 °C da noite para o dia. Ela foi deixada esfriar e deixada agitar por 3 dias em rt.
Etapa 2: A mistura foi concentrada e diluída com EtOH (5 mL) e tratada com NaOH a 1N em excesso (~1 mL) e deixada agitar em rt da noite para o dia para dar o meta-ácido. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M. A camada orgânica foi seca em Na2SO4) filtrada e concentrada.
Etapa 3: O resíduo bruto foi diluído com DMF (5 mL) e tratado com HATU (145 mg, 0,382 mmol), 2-fenilpropan-2-amina (52 mg, 0,382 mmol) e DIEA (134 pL, 0,765 mmol) e deixado agitar em rt da noite para o dia. A mistura foi concentrada e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente adequadamente tamponado e concentrada. O composto do título isolado foi novamente purificado em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, Rf ~0,2 EtOAc A 50% /hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título (7 mg, 4%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 7,94 - 8,01 (2 H, m), 7,92 (1 H, s), 7,83 (1 H, d, 7=7,63 Hz), 7,77 (1 H, s), 7,63 - 7,68 (2 H, m), 7,59 (1 H, t, 7=7,63 Hz), 7,46 (2 H, d, 7=7,32 Hz), 7,24 - 7,32 (4 H, m), 7,18 (1 H, t, 7=7,32 Hz), 2,94 (3 H, s), 2,88 (3 H, s), 1,77 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 2,25 min; m/z (MH+): 600. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters SunFire 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM . As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 3 min, um tempo de retenção de 1 min, e um tempo de análise de 4 min onde o Solvente A era acetonitrila a 5% / H2O a 95% / TFA a 0,1% e Solvente B era H2O a 5% / acetonitrila a 95% / TFA a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solven
173/543 te A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,87 min, pureza = 96%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt =
Figure BRPI0918174A2_D0085
2-(4-Fluorfenil)-6-(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metil-5-(3(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Etapa 1: Cloreto de metanossulfonila (10 pL, 0,128 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 6-amino-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5(3-(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida (50 mg, 0,096 mmol) em piridina (1 mL) em rt. Ele foi deixado agitar por 2 horas e então concentrado e diluído com EtOAc e lavado com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada.
Etapa 2: O resíduo bruto foi dissolvido em DMF (1 mL) e tratado com (2-bromoetoxi)(terc-butil)dimetilsilano (102 pL, 0,479 mmol) e Na2CO3 (31 mg, 0,288 mmol) em rt. Ele foi aquecido a 100 QC por 4 horas e então diluído com EtOAc e lavado com NaHCO3sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada.
Etapa 3: O resíduo bruto foi absorvido em THF (2 mL) e tratado com 2 mL de HCI a 1N e e deixado agitar por 1 h. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada e triturada com Et2O para dar o composto do título (25 mg, 39%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,14 - 8,21 (1 Η, m), 7,95 - 8,04 (2 H, m), 7,83 - 7,87 (1 H, m), 7,76 - 7,81 (1 H, m), 7,66 - 7,74 (2 H, m), 7,56 (1 H, t, J=7,63 Hz), 7,41 - 7,49 (2 H, m), 7,24 - 7,33 (4 H, m),
174/543
7,17 (1 H, t, J=7,32 Hz), 2,94 (3 H, s), 1,76 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS 1,42 min; m/z (MH+): 644. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,26 min, pureza = 96%; Método de HPLC convencional: Solvente A = MeOH a 5%/H2O a 95%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%/H2O a 5%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C-18, 4,6 x 150 mm, 3 pm, Rt = 13,61 min, pureza = 94%.
Figure BRPI0918174A2_D0086
5-(3-Cianofenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Carbonato de césio (187 mg, 0,575 mmol) foi adicionado a Pd(Ph3P)4 (22 mg, 0,019 mmol), trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (160 mg, 0,383 mmol), ácido 3cianofenilborônico (85 mg, 0,575 mmol). Dioxana (3 mL) e água (600 pL) foram adicionadas em rt. A reação foi desgaseificada 3x e aquecida para 90
175/543 °C da noite para o dia. Ela foi deixada esfriar. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com HCI a 1M e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo bruto foi absorvido em DCM. Um precipitado branco se formou, o qual foi filtrado para dar o composto do títu5 Io. O filtrado foi purificado em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, Rf -.4: EtOAc a 50%/Hex, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título que foi combinado com o precipitado anteriormente coletado (85 mg, 60%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,46 - 8,53 (1 H, m), 8,24 (1 H, s), 8,09 (1 H, d, 7=7,93 Hz), 7,99 - 8,05 (2 H, m), 7,96 (1 Η, d, 7=1,53 Hz), 7,85 (1 H, d, J=7,63 Hz), 7,74 - 7,82 (2 H, m), 7,70 (1 H, t, J=7,78 Hz), 7,40 (2 H, t, J=8,85 Hz), 2,87 (3 H, d, 7=4,58 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 2,17 min; m/z (MH+): 371. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis
SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10% / H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10% / MeOH a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = H3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10,
Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 13,59 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge
4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,29 min, pureza = 99%.
176/543
Figure BRPI0918174A2_D0087
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(5-isopropil-1,3,4-oxadiazol-2-il)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Cloreto de isobutirila (90 mg, 0,847 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 5-(3-(1 H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida (50 mg, 0,085 mmol) em piridina (1 mL) a 100 °C. Ele foi deixado agitar da noite para o dia. A reação foi concentrada e diluída com EtOH (3 mL), tratada com NaOH a 1N em excesso (500 pL) e agitada a 60 °C por 2 horas para hidrolisar a amida acilada. A mistura foi filtrada e o filtrado foi diluído com EtOAc e lavado com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada e purificada em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título (8 mg, 20%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,31 - 8,35 (1 H, m), 8,03 (1 H, d, 4=7,94 Hz), 7,95 - 8,00 (3 H, m), 7,93 (1 H, d, J=7,93 Hz), 7,67 - 7,74 (3 H, m), 7,25 - 7,30 (2 H, m), 3,37 - 3,40 (1 H, m), 2,99 (3 H, s), 1,49 (6 H, d, J=7,02 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 2,28 min; m/z (MH+): 456. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10% / H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10% / MeOH a 90% / ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Mé
177/543 todo de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 14,30 min, pureza = 94%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge
4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,50 min, pureza = 93%.
Figure BRPI0918174A2_D0088
2-(4-Fluorfenil)-5-(1H-indol-4-il)-N-metilbenzofuran-3carboxamida
Carbonato de césio (176 mg, 0,539 mmol) foi adicionado a Pd(Ph3P)4 (20,77 mg, 0,018 mmol), trifluormetanossulfonato de 2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil) benzofuran-5-ila (150 mg, 0,359 mmol), ácido 1H-indol-4-ilborônico (87 mg, 0,539 mmol). Dioxana (3 mL) e água (600 pL) foram adicionadas em rt. A reação foi desgaseificada 3x e então aquecida para 90 °C da noite para o dia. Ela foi deixada esfriar. A mistura foi diluída com acetato de etila e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada e purificada em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título (66 mg, 46%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11,28 (1 H, s amplo.), 8,48 - 8,57 (1 H, m), 7,98 - 8,07 (2 H, m), 7,86 (1 H, s amplo.), 7,79 (1 H, d, 7=8,24 Hz), 7,69 (1 H, d, 7=7,93 Hz), 7,37 - 7,47 (4 H, m), 7,21 (1 H, t, 7=7,63 Hz), 7,14 (1 H, d, 7=7,02 Hz), 6,60 (1 H, s amplo.), 2,84 (3 H, d, 7=4,27 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,53 min; m/z (MH+): 385. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tem
178/543 po de retenção de 1 min e urn tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 13,46 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,27 min, pureza = 97%.
Figure BRPI0918174A2_D0089
5-(3-(2-Benzil-2H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Brometo de benzila (29 pL, 0,242 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 5-(3-(1 H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida (50 mg, 0,121 mmol) e Na2CO3 (26 mg, 0,242 mmol) em DMF (1,2 mL) a 100 °C. Ele foi deixado agitar da noite para o dia. A mistura foi concentrada e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (12 mg, 19%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,48 - 8,56 (1 H, m), 8,30 8,35 (1 H, m), 8,06 (1 H, d, 7=7,63 Hz), 7,98 - 8,03 (2 H, m), 7,90 - 7,93 (2 H, m), 7,78 - 7,83 (1 H, m), 7,72 - 7,77 (1 H, m), 7,69 (1 H, t, 7=7,78 Hz), 7,36 7,46 (7 H, m), 6,04 (2 H, s), 2,86 (3 H, d, 7=4,58 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,78 min; m/z (MH+): 504. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com
179/543 primento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 15,69 min, pureza = 97%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 13,95 min, pureza = 98%.
Figure BRPI0918174A2_D0090
(R)-2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(4-isopropil-4,5-di-hidro-oxazol-2-il)fenil)N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Cloreto de zinco (8 mg, 0,054 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 5-(3-cianofenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida (40 mg, 0,108 mmol) e (R)-2-amino-3-metilbutan-1-ol (111 mg, 1,08 mmol) em PhCI (3 mL) em rt. Ele foi submetido a duas interações à irradiação com micro-ondas por 1 h a 200 °C. A mistura foi concentrada e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (13 mg, 25%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,24 (1 H, s), 7,93 - 7,99 (2 H, m), 7,89 - 7,93 (2 H, m), 7,86 (1 H, d, 7=7,63 Hz), 7,63 - 7,69 (2 H, m), 7,56 (1 H, t, 7=7,78 Hz), 7,26 (2 H,
180/543 t, J=8,55 Hz), 4,52 (1 H, t, 7=9,31 Hz), 4,30 (1 H, t, J=8,09 Hz), 4,14 - 4,22 (1 H, m), 2,98 (3 H, s), 1,87 - 1,97 (1 H, m), 1,04 (3 H, d, J=7,02 Hz), 0,97 (3 H, d, 7=6,71 Hz). Tempo de retenção de LC-MS 1,64 min; m/z (MH+): 457. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10%/ H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10% / MeOH a 90% / ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 10,13 min, pureza = 95%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 10,58 min, pureza = 94%.
Figure BRPI0918174A2_D0091
(S)-2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(4-isopropil-4,5-di-hidro-oxazol-2-il)fenil)N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Cloreto de zinco (8 mg, 0,054 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 5-(3-cianofenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida (40 mg, 0,108 mmol) e (S)-2-amino-3-metilbutan-1-ol (111 mg, 1,080 mmol) em PhCI (3 mL) em rt. Ele foi submetido a duas interações de 1 h à irradiação por micro-ondas a 200 °C. A reação foi concentrada e purifi
181/543 cada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (9 mg, 17%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,24 (1 H, s), 7,93 - 7,99 (2 H, m), 7,89 - 7,93 (2 H, m), 7,86 (1 H, d, 9=7,63 Hz), 7,63 - 7,69 (2 H, m), 7,56 (1 H, t, 9=7,78 Hz), 7,26 (2 H, t, 9=8,70 Hz), 4,52 (1 H, t, 9=9,31 Hz), 4,30 (1 H, t, 9=8,09 Hz), 4,15 - 4,22 (1 H, m), 2,98 (3 H, s), 1,86 - 1,96 (1 H, m), 1,04 (3 H, d, 9=6,71 Hz), 0,97 (3 H, d, 9=6,71 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,63 min; m/z (MH+): 457. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10% / H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10% / MeOH a 90% / ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% =10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 10,06 min, pureza = 95%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 10,53 min, pureza = 95%.
Figure BRPI0918174A2_D0092
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(2-isobutil-2H-tetrazol-5-il)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
1-Bromo-2-metilpropano (23 mg, 0,169 mmol) foi adicionado a
182/543 uma solução em agitação de 5-(3-(1 H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida (35 mg, 0,085 mmol) e Na2CO3 (18 mg, 0,169 mmol) em DMF (1 mL) a 100 °C. Ele foi deixado agitar da noite para o dia. A mistura foi concentrada e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (15 mg, 38%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,49 - 8,56 (1 H, m), 8,34 (1 H, s), 8,08 (1 H, d, 4=7,63 Hz), 7,99 - 8,04 (2 H, m), 7,87 - 7,94 (2 Η, m),
7,79 - 7,84 (1 Η, m), 7,73 - 7,78 (1 Η, m), 7,70 (1 Η, t, 4=7,63 Hz), 7,41 (2 Η, t, 4=8,70 Hz), 4,62 (2 H, d, 4=7,32 Hz), 2,87 (3 H, d, 4=4,27 Hz), 2,31 - 2,39 (1 H, m), 0,95 (6 H, d, 4=6,71 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 2,09 min;
m/z (MH+): 470. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u
C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um compri15 mento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente
B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10%/ H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10%/ MeOH a 90% / ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gra25 diente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 16,08 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 13,89 min, pureza = 99%.
183/543
Figure BRPI0918174A2_D0093
5-(3-(4,4-Dimetil-4,5-di-hidro-oxazol-2-il)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Cloreto de zinco (1 mg) foi adicionado a uma solução em agitação de 5-(3-cianofenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (40 mg, 0,108 mmol) e 2-amino-2-metilpropan-1-ol (10 mg, 0,108 mmol) em PhCl (3 mL) a 130 °C. Ele foi deixado agitar por 7 dias. -20% de conversão foram observados. Quantidades adicionais de ZnCI (8 mg) e 2-amino-2metilpropan-1-ol (50 mg) foram adicionadas e a reação foi aquecida no micro-ondas por 1 hora a 200° C. A reação tinha progredido -50%. A mistura foi concentrada e purificada em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, Rf -0,2 em EtOAc 50% /hexanos; coleta de fração a λ = 254 nm) seguido por HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (7 mg, 14%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,24 (1 H, s), 7,97 (2 H, dd, 7=8,09, 5,65 Hz), 7,93 (1 H, s), 7,88 (2 Η, dd, 7=11,44, 8,39 Hz), 7,68 (2 H, s), 7,57 (1 H, t, 7=7,78 Hz), 7,27 (2 H, t, 7=8,55 Hz), 4,25 (2 H, s), 2,99 (3 H, s), 1,42 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS 1,60 min; m/z (MH+): 443. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma Ml
184/543
CROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,24 min, pureza = 95%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt= 10,02 min, pureza = 95%.
Figure BRPI0918174A2_D0094
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(2-isopropil-2H-tetrazol-5-il)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
2-lodopropano (29 mg, 0,169 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 5-(3-(1 H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida (35 mg, 0,085 mmol) e Na2CO3 (18 mg, 0,169 mmol) em DMF (1 mL) a 100 °C. Ele foi deixado agitar da noite para o dia. A mistura foi concentrada e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (12 mg, 30%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,49 - 8,57 (1 H, m), 8,34 (1 H, s), 8,08 (1 H, d, J=7,32 Hz), 7,99 - 8,05 (2 H, m), 7,87 - 7,94 (2 H, m),
7,79 - 7,83 (1 H, m), 7,72 - 7,78 (1 H, m), 7,70 (1 H, t, J=7,78 Hz), 7,41 (2 H, t, J=8,70 Hz), 5,17 - 5,27 (1 H, m), 2,87 (3 H, d, J=4,58 Hz), 1,66 (6 H, d, J=6,71 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 2,02 min; m/z (MH+): 456. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de
185/543 retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10%/ H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10%/ MeOH a 90% / ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 15,35 min, pureza = 96%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 13,39 min, pureza = 97%.
Figure BRPI0918174A2_D0095
(R)-2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(4-fenil-4,5-di-hidro-oxazol-2il)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Cloreto de zinco (8 mg, 0,054 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 5-(3-cianofenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida (40 mg, 0,108 mmol) e (R)-2-amino-2-feniletanol (148 mg, 1,080 mmol) em PhCI (3 mL) em rt. Ele foi submetido a duas interações de irradiação de micro-ondas a 200 °C por 1 h. O material foi concentrado e purificado através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrado para dar o composto do título (7 mg, 13%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,33 (1 H, s), 7,94 - 8,00 (4 H, m), 7,91 (1 H, d, 7=7,94 Hz), 7,64 - 7,73 (2 H, m), 7,61 (1 H, t, 7=7,78 Hz), 7,32 - 7,42 (6 H, m), 7,26 (2 H, t, 7=8,55 Hz), 5,45 (1 H, t, 7=9,16 Hz), 4,94 (1 H, t, 7=9,31 Hz), 4,36 (1 H, t, 7=8,24 Hz), 2,97 (3 H, s). Tempo de retenção de LC-MS 1,75 min; m/z (MH+): 491. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm u
186/543 sando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = MeOH a 5%/H2O a 95%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%/H2O a 5%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C-18, 4,6 x 150 mm, 3 pm, Rt = 18,32 min, pureza = 97%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge
4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 18,11 min, pureza = 97%.
Figure BRPI0918174A2_D0096
(S)-2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(4-fenil-4,5-di-hidro-oxazol-2il)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Cloreto de zinco (9 mg, 0,067 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 5-(3-cianofenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida (50 mg, 0,135 mmol) e (S)-2-amino-2-feniletanol (93 mg, 0,675 mmol) em PhCI (3 mL) rt. Ele foi submetido a duas interações de irradiação de micro-ondas a 200 °C por 1 h. O material foi concentrado e purificado através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrado para dar o composto do título (16 mg, 23%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,33 (1 H, s), 7,94 - 8,00 (4 H, m), 7,91 (1 H, d, 4=7,94 Hz), 7,64 - 7,73 (2 H,
187/543
m), 7,61 (1 H, t, 7=7,78 Hz), 7,32 - 7,42 (6 H, m), 7,26 (2 H, t, 7=8,55 Hz), 5,45 (1 H, t, 7=9,16 Hz), 4,94 (1 H, t, 7=9,31 Hz), 4,36 (1 H, t, 7=8,24 Hz), 2,97 (3 H, s).Tempo de retenção de LC-MS 1,76 min; m/z (MH+): 491. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = MeOH a 5%/H2O a 95%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%/H2O a 5%/bicarbonato de amônio a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C-18, 4,6 x 150 mm, 3 pm, Rt = 18,32 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge
4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 18,10 min, pureza = 99%.
Figure BRPI0918174A2_D0097
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(5-metil-1,3,4-oxadiazol-2il)fenil)benzofuran-3-carboxamida
DIEA (50 pL, 0,288 mmol) foi adicionada a Pd(Ph3P)4 (6 mg,
4,79 pmols), trifluormetanossulfonato de (4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (40 mg, 0,096 mmol), ácido 3-(5-metil-1,3,4oxadiazol-2-il)fenilborônico (29 mg, 0,144 mmol). Dioxana (1 mL) e água (200 pL) foram adicionadas em rt. A reação foi aquecida para 90 °C da noite
188/543 para o dia. A mistura foi esfriada e purificada através de HPLC de fase reversa em uma coluna C18 usando um gradient de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (16 mg, 37%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,49 - 8,56 (1 H, m), 8,24 (1 H, s), 7,98 - 8,05 (4 H, m), 7,93 (1 H, s), 7,79 - 7,83 (1 H, m), 7,68 - 7,76 (2 H, m), 7,41 (2 H, t, J=8,70 Hz), 2,87 (3 H, d, J=4,58 Hz), 2,62 (3 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 1,41 min; m/z (MH-): 426. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 12,96 min, pureza = 95% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 11,53 min, pureza = 94%.
Figure BRPI0918174A2_D0098
6-(Ciclopropanossulfonamido)-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
189/543
Cloreto de ciclopropanossulfonila (8 μΐ_, 0,058 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de 6-amino-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2fenílpropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida (20 mg, 0,038 mmol) em Piridina (.5 mL) em rt. Ele foi deixado agitar por 2 horas. A mistura foi concentrada, purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (17 mg, 70%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,41 (1 H, s amplo.), 7,91 - 8,01 (3 H, m), 7,78 7,86 (2 H, m), 7,61 - 7,71 (2 H, m), 7,58 (1 H, t, J=7,63 Hz), 7,41 - 7,49 (2 H, m), 7,24 - 7,33 (4 H, m), 7,18 (1 H, t, J=6,87 Hz), 2,94 (3 H, s), 2,34 - 2,43 (1 H, m), 1,77 (6 H, s), 0,80 -1,03 (4 H, m). Tempo de retenção de LC-MS: 1,53 min; m/z (MH+): 626. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 15,40 min, pureza = 99% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 12,65 min, pureza = 99%.
190/543
Figure BRPI0918174A2_D0099
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(5-metil-1,3,4-oxadiazol-2il)fenil)benzofuran-3-carboxamida
DIEA (50 pL, 0,288 mmol) foi adicionada a Pd(Ph3P)4 (6 mg,
4,79 pmols), trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (40 mg, 0,096 mmol), ácido 3-(5-metil-1,3,4oxadiazol-2-il)fenilborônico (29 mg, 0,144 mmol). Dioxana (799 pL) e água (160 pL) foram adicionadas em rt. A reação foi aquecida para 90 °C da noite para o dia. A mistura foi esfriada e purificada através de HPLC prep. para dar o composto do título (16 mg, 37%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,49 - 8,56 (1 H, m), 8,24 (1 H, s), 7,98 - 8,05 (4 H, m), 7,93 (1 H, s), 7,79 7,83 (1 H, m), 7,68 - 7,76 (2 H, m), 7,41 (2 H, t, 7=8,70 Hz), 2,87 (3 H, d, 7=4,58 Hz), 2,62 (3 H, s). Tempo de retenção de LC-MS:1,41 min; m/z (MH): 426. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,96 min, pureza = 95% ; Coluna: Coluna de
191/543 fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 11,53 min, pureza = 94%.
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(3-isopropil-1,2,4-oxadiazol-5-il)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Metóxido de sódio (33 mg, 0,620 mmol) foi adicionado a uma pasta fluida em agitação de 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran5-il)benzoato (50 mg, 0,124 mmol) e (Z)-N'-hidroxi-isobutirimidamida (38 mg, 0,372 mmol) em EtOH (2,5 mL) em rt. A mistura foi submetida à irradiação por micro-ondas por 5 min a 160 °C. A mistura foi concentrada e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (11 mg, 20%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,46 - 8,54 (1 H, m), 8,35 (1 H, s), 8,11 (1 H, d, 4=7,78 Hz), 7,97 - 8,08 (3 H, m), 7,92 - 7,97 (1 H, m), 7,73 - 7,84 (3 H, m), 7,40 (2 H, t, 4=8,91 Hz), 3,12 - 3,23 (1 H, m), 2,87 (3 H, d, 4=4,52 Hz), 1,36 (6 H, d, 4=7,03 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,80 min; m/z (MH+): 456. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min,
192/543
Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 16,33 min, pureza = 99% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 13,72 min, pureza = 99%.
Figure BRPI0918174A2_D0100
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(3-fenil-1,2,4-oxadiazol-5il)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Metóxido de sódio (33 mg, 0,620 mmol) foi adicionado a uma pasta fluida em agitação de 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran5-il)benzoato de metila (50 mg, 0,124 mmol) e (Z)-N'-hidroxibenzimidamida (51 mg, 0,372 mmol) em EtOH (2,5 mL) em rt. A mistura foi submetida à irradiação com micro-ondas por 5 min a 160 °C. A mistura foi concentrada e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (8,7 mg, 14%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,49 - 8,56 (1 H, m), 8,44 - 8,49 (1 H, m), 8,19 - 8,25 (1 H, m), 8,13 - 8,18 (2 H, m), 8,07 - 8,12 (1 H, m), 8,00 - 8,07 (2 H, m), 7,98 (1 H, s), 7,76 - 7,86 (3 H, m), 7,59 - 7,68 (3 H, m), 7,41 (2 H, t, 9=8,91 Hz), 2,88 (3 H, d, 9=4,77 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,94 min; m/z (MH+): 490. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a
193/543
5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 17,39 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 14,58 min, pureza = 98%.
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(4-feniI-1H-imidazol-2il)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Hidrato de 2-oxo-2-fenilacetaldeido (10 mg, 0,066 mmol) em MeOH (1 mL) foi adicionado a uma solução em agitação de 2-(4-fluorfenil)-5(3-formilfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (20 mg, 0,054 mmol) e acetate de amônio (25 mg, 0,324 mmol) em MeOH (1 mL) em rt. Ele foi deixado agitar da noite para o dia. A reação foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (6,5 mg, 24%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12,82 (1 H, s amplo.), 8,51 - 8,58 (1 H, m), 8,35 (1 H, s amplo.), 7,98 - 8,07 (3 H, m), 7,93 7,97 (1 H, m), 7,76 - 7,90 (4 H, m), 7,72 (1 H, d, 7=7,63 Hz), 7,60 (1 H, t, 7=7,78 Hz), 7,36 - 7,45 (4 H, m), 7,19 - 7,29 (1 H, m), 2,88 (3 H, d, 7=4,58 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,57 min; m/z (MH+): 488. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era
194/543
MeOH a 10%/ H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10%/ MeOH a 90% I ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5% /H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 9,54 min, pureza = 96% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 10,41 min, pureza = 97%.
Figure BRPI0918174A2_D0101
5-(3-(1 -(1,3,4-Tiadiazol-2-ilamino)-2-metil-1-oxopropan-2ilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
DIEA (44 pL, 0,253 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de ácido 2-(3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzamido)-2-metilpropanoico (40 mg, 0,084 mmol), 1,3,4-tiadiazol-2amina (17,05 mg, 0,169 mmol) em DMF (843 pL) em rt. NaH (17 mg, 0,422 mmol) foi adicionado e a pasta fluida se transformou em uma solução transparente após 10 min. Ela foi deixada agitar da noite para o dia. A reação foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (22 mg, 45%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12,44 (1 H, s amplo.), 9,14 (1 H, s amplo.), 8,78 (1 H, s amplo.), 8,47 - 8,57 (1 H, m), 8,30 (1 H, s), 7,97 - 8,04 (2 H, m), 7,88 - 7,95 (3 H, m), 7,75 - 7,84 (2 H, m), 7,61 (1 H, t, J=7,78 Hz), 7,41 (2 H, t), 2,86 (3 H, d, J=4,88 Hz), 1,57 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 1,57 min; m/z (MH+): 488. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u
195/543
C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10% I H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10%/ MeOH a 90% I ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 11,23 min, pureza = 97% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 10,56 min, pureza = 96%.
Figure BRPI0918174A2_D0102
5-(3-(1 H-Pirazol-5-il)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida
Carbonato de césio (234 mg, 0,719 mmol) foi adicionado a Pd(Ph3P)4 (20,77 mg, 0,018 mmol), trifluormetanossulfonato de 2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (150 mg, 0,359 mmol), 5-(3(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirazol (146 mg, 0,539 mmol). Dioxana (3 mL) e água (599 pL) foram adicionadas em rt. A reação foi aquecida para 90 °C da noite para o dia. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada e purificada através de trituração com Et2O para dar o composto do título (140 mg, 92%).1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13,40 (1 H, s amplo.), 12,91 (1 H, s amplo.), 8,45 - 8r55 (1 H, m), 8,13
196/543 (1 H, s), 7,97 - 8,08 (2 Η, m), 7,85 - 7,95 (1 Η, m), 7,73 - 7,85 (4 Η, m), 7,59 7,67 (1 Η, m), 7,49 - 7,58 (1 Η, m), 7,35 - 7,45 (2 Η, m), 6,84 (1 Η, s amplo.), 2,87 (3 H, d, 7=4,52 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,41 min; m/z (MH+): 412. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt =11,86 min, pureza = 97% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 10,97 min, pureza = 99%.
Figure BRPI0918174A2_D0103
5-(3-(1 -Benzil-1 H-pirazol-5-il)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida (Bromometil)benzeno (17 mg, 0,097 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de Na2CO3 (11 mg, 0,097 mmol) e 5-(3-(1 H-pirazol-5il)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (20 mg, 0,049 mmol) em DMF (486 pL) a 100 °C. Ele foi deixado agitar da noite para o dia,
197/543 filtrado e purificado através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando gradiente de H2O/CH3N adequadamente tamponado e concentrado para dar o composto do título (8,6 mg, 35%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,49 - 8,57 (1 H, m), 8,06 - 8,11 (1 H, m), 7,98 - 8,04 (2 H, m), 7,92 (1 H, d, 7=2,44 Hz), 7,86 - 7,89 (1 H, m), 7,75 - 7,83 (2 H, m), 7,69 - 7,75 (1 H, m), 7,63 (1 H, d, 7=8,24 Hz), 7,51 (1 H, t, 7=7,63 Hz), 7,34 7,43 (4 H, m), 7,27 - 7,32 (3 H, m), 6,89 (1 H, d, 7=2,44 Hz), 5,41 (2 H, s), 2,86 (3 H, d, 7=4,58 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 2,00 min; m/z (MH+): 502. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10%/ H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10%/ MeOH a 90% / ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% =10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 15,47 min, pureza = 99% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 13,77 min, pureza = 100%.
198/543
Figure BRPI0918174A2_D0104
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2-metil-1-(5-metil-1H-pirazol-3ilamino)-1-oxopropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
DIEA (28 μΙ_, 0,158 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de ácido 2-(3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzamido)-2-metilpropanoico (25 mg, 0,053 mmol), 5-metil-1H-pirazol-3amina (11 mg, 0,105 mmol) em DMF (527 pL) em rt. Ela foi deixada agitar for 30 min. NaH (11 mg, 0,263 mmol) foi adicionado e a reação foi deixada agitar da noite para o dia. A mistura foi tratada com uma gota de MeOH e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (6,4 mg, 21%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11,90 (1 H, s amplo.), 9,84 (1 H, s amplo.), 8,51 - 8,56 (1 H, m), 8,41 (1 H, s amplo.), 8,23 - 8,28 (1 H, m), 7,98 - 8,03 (2 H, m), 7,86 7,93 (3 H, m), 7,76 - 7,83 (2 H, m), 7,59 (1 H, t, 7=7,63 Hz), 7,37 - 7,43 (2 H, m), 6,28 (1 H, s amplo.), 2,87 (3 H, d, 7=4,88 Hz), 2,17 (3 H, s), 1,54 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 1,56 min; m/z (MH+): 554. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10%/ H2O 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a
199/543
10% I MeOH a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 10,47 min, pureza = 97% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 9,58 min, pureza = 96%.
Figure BRPI0918174A2_D0105
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2-metil-1-(3-metilisoxazol-5ilamino)-1-oxopropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
DIEA (28 pL, 0,158 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de ácido 2-(3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzamido)-2-metilpropanoico (25 mg, 0,053 mmol), 3-metilisoxazol-5amina (11 mg, 0,105 mmol) em DMF (527 pL) em rt. Ela foi deixada agitar for 30 min. NaH (11 mg, 0,263 mmol) foi adicionado e a reação foi deixada agitar da noite para o dia. A mistura foi tratada com uma gota de MeOH e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (3,3 mg, 11%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,18 - 8,24 (1 H, m), 7,93 - 8,00 (3 H, m), 7,84 - 7,91 (2 H, m), 7,65 - 7,74 (2 H, m>, 7,58 (1 H, t, 4=7,78 Hz), 7,23 - 7,31 (2 H, m), 2,98 (3 H, s), 2,24 (3 H, s), 1,65 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 1,69 min; m/z (MH+): 555. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u
200/543
C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10% I H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10%/ MeOH a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5% /H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 12,09 min, pureza = 100%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 11,18 min, pureza = 99%.
o.
HN
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2-metil-1-(5-metilisoxazol-3ilamino)-1-oxopropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
DIEA (28 pL, 0,158 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de ácido 2-(3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzamido)-2-metilpropanoico (25 mg, 0,053 mmol), 5-metilisoxazol-3amina (11 mg, 0,105 mmol) em DMF (527 pL) em rt. Ela foi deixada agitar for 30 min. NaH (11 mg, 0,263 mmol) foi adicionado e a reação foi deixada agitar da noite para o dia. A mistura foi tratada com uma gota de MeOH e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18
201/543 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (2,8 mg, 9%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,17 - 8,25 (1 H, m), 7,92 - 8,00 (3 H, m), 7,83 - 7,91 (2 Η, m), 7,66 - 7,76 (2 H, m), 7,58 (1 H, t, 4=7,78 Hz), 7,27 (2 H, t, 4=8,85 Hz), 6,63 (1 H, s), 2,98 (3 H, s), 2,39 (3 H, s), 1,65 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 1,69 min; m/z (MH+): 555. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10% / H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10% / MeOH a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5% /H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 12,20 min, pureza = 95% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt= 11,30 min, pureza = 90%.
Figure BRPI0918174A2_D0106
5-(3-(1 -(1,2,4-Triazin-3-ilamino)-2-metil-1 -oxopropan-2ilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
202/543
DIEA (28 pL, 0,158 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de ácido 2-(3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzamido)-2-metilpropanoico (25 mg, 0,053 mmol), 1,2,4-triazin-3-amina (11 mg, 0,105 mmol) em DMF (527 μΙ_) em rt. Ela foi deixada agitar por 30 min. NaH (11 mg, 0,263 mmol) foi adicionado e a reação foi deixada agitar da noite para o dia. A mistura foi tratada com uma gota de MeOH e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (7,4 mg, 25%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,58 - 8,63 (1 H, m), 8,22 - 8,26 (1 H, m), 7,93 - 8,00 (3 Η, m), 7,85 - 7,93 (2 H, m), 7,66 - 7,75 (2 H, m), 7,59 (1 H, t, 7=7,63 Hz), 7,27 (2
H, t, 7=8,85 Hz), 2,98 (3 H, s), 1,72 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS:
I, 56 min; m/z (MH+): 553. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10% / 90% a H2O / ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10% / MeOH a 90% I ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5% /H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 9,65 min, pureza = 97% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm,
3,5 mm, Rt = 9,58 min, pureza = 97%.
203/543
Figure BRPI0918174A2_D0107
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-6-(N-metilmetilsulfonamido)-5-(3-(2fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Cloreto de oxalila (22 pL, 0,250 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de ácido 2-(4-fluorfenil)-6-(N-metilmetilsulfonamido)-5-(3(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxilico (50 mg, 0,083 mmol) em DCE (832 pL) em rt. DMF (3 pL, 0,042 mmol) foi adicionada. A mistura foi deixada agitar por 30 min, concentrada e diluída com THF. DIEA (59 pL, 0,333 mmol) e metanamina (208 pL, 0,416 mmol, 2M em TF) foram adicionadas. Elas foram deixadas agitar da noite para o dia. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (11 mg, 20%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,46 - 8,56 (1 H, m), 8,36 (1 H, s), 7,97 - 8,05 (3 H, m), 7,94 (1 H, s), 7,86 (1 H, d, J=7,78 Hz), 7,59 - 7,67 (2 H, m), 7,53 (1 H, t, J=7,65 Hz), 7,35 - 7,42 (4 H, m), 7,29 (2 H, t, J=7,78 Hz), 7,17 (1 H, t, 7=7,28 Hz), 3,06 (3 H, s), 3,01 (3 H, s), 2,82 (3 H, d, J=4,52 Hz), 1,69 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 1,51 min; m/z (MH+): 614. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o
204/543 solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 12,89 min, pureza = 92% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 12,11 min, pureza = 91%.
Figure BRPI0918174A2_D0108
5-(3-(ferc-Butilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-6-(N-(2hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida ferc-Butilamina (21 pL, 0,195 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de HATU (45 mg, 0,117 mmol), DIEA (41 pL, 0,234 mmol) e ácido 3-(6-(N-(2-(terc-butildimetilsililoxi)etil)metilsulfonamido)-2-(4-fluorfenil)3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (50 mg, 0,078 mmol) em DMF (780 pL) em rt. Ela foi deixada agitar por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (11 mg, 23%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,04 (1 H, s amplo.), 7,94 8,02 (2 H, m), 7,77 - 7,86 (2 H, m), 7,66 - 7,73 (2 H, m), 7,49 - 7,59 (2 H, m), 7,24 - 7,34 (2 H, m), 3,56 - 3,66 (1 H, m), 3,35 - 3,43 (2 H, m), 3,27 (3 H, s), 2,94 (3 H, s), 2,78 - 2,87 (1 H, m), 1,47 (9 H, s). Tempo de retenção de LCMS: 1,57 min; m/z (MH+): 582. Dados de LC foram registrados em um cro
205/543 matógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5% ZH2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 10,88 min, pureza = 97% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 10,27 min, pureza = 96 %.
Figure BRPI0918174A2_D0109
2-(3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)fenil)-4metil-1 H-imidazol-5-carboxilato de etila
Carbonato de césio (234 mg, 0,719 mmol) foi adicionado a Pd(Ph3P)4 (27,7 mg, 0,024 mmol), trifluormetanossulfonato de 2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil) benzofuran-5-ila (200 mg, 0,479 mmol), 4-metil2-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-5carboxilato de etila (171 mg, 0,479 mmol). Dioxana (4 mL) e água (800 pL) foram adicionadas em rt. A reação foi aquecida para 90 °C da noite para o dia. A mistura foi diluída com acetato de etila e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada e
206/543 foi purificada em sílica-gel (BIOTAGE®, Gradiente de EtOAc/hexanos, coleta de fração a λ = 254 nm) para dar o composto do título (6,8 mg, 3%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13,16 (0,34 H, s), 12,96 (0,66 H, s), 8,54 (1 H, q, 7=4,48 Hz), 8,50 (0,32 H, s), 8,24 (0,68 H, s), 8,10 (0,31 H, d, 7=7,93 Hz), 7,97 - 8,04 (2 H, m), 7,89 - 7,97 (2 H, m), 7,79 - 7,84 (1,35 H, m), 7,70 - 7,79 (2 H, m), 7,54 - 7,63 (1 H, m), 7,37 - 7,44 (2 H, m), 4,33 (0,65 H, q, 7=7,22 Hz), 4,25 (1,42 H, q, 7=7,22 Hz), 2,87 (3 H, d, 7=4,88 Hz), 2,55 (2 H, s), 2,45 (1 H, s), 1,34 (1 H, t, 7=7,02 Hz), 1,31 (2 H, t, 7=7,17 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,46 min; m/z (MH+): 498. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm,
3,5 mm, Rt = 9,90 min, pureza = 99%.
Figure BRPI0918174A2_D0110
2-(4-Fluorfenil)-6-(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metil-5(3-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
207/543
Dicloridrato de de 1-(piridin-2-il)ciclopropanamina (24 mg, 0,114 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de HATU (54 mg, 0,142 mmol), DIEA (50 pL, 0,285 mmol) e ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-6-(N-(2hidroxietil)metilsulfonamido)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (50 mg, 0,095 mmol) em DMF (950 pL) em rt. Ele foi deixado agitar por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (20 mg, 32%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm
9,20 (1 H, s), 8,49 - 8,57 (1 H, m), 8,45 (1 H, d, 7=3,97 Hz), 7,97 - 8,05 (3 H, m), 7,96 (1 H, s), 7,94 (1 H, d, J=7,93 Hz), 7,80 (1 H, d, J=7,93 Hz), 7,64 7,69 (1 H, m), 7,63 (1 H, s), 7,56 (1 H, t, J=7,63 Hz), 7,37 - 7,47 (3 H, m), 7,15 (1 H, dd, J=6,41, 4,88 Hz), 4,91 (1 H, s amplo.), 3,51 - 3,60 (1 H, m), 3,22 (3 H, s), 2,89 - 2,98 (3 H, m), 2,81 (3 H, d), 1,50 - 1,60 (2 H, m), 1,23 1,33 (2 H, m). Tempo de retenção de LC-MS: 1,37 min; m/z (MH+): 643. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3 CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 7,17 min, pureza = 98% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 7,89 min, pureza = 99%.
208/543
Figure BRPI0918174A2_D0111
2-(4-Fluorfenil)-6-(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metil-5-(3(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Cloridrato de 1-fenilciclopropanamina (16 mg, 0,091 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de HATU (43 mg, 0,114 mmol), DIEA (40 pL, 0,228 mmol) e ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-6-(N-(2hidroxietil)metilsulfonamido)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (40 mg, 0,076 mmol) em DMF (760 pL) em rt. Ele foi deixado agitar por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (22 mg, 44%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,12 (1 H, s), 8,49 - 8,56 (1 H, m), 7,97 - 8,05 (3 H, m), 7,95 (1 H, s), 7,90 (1
H, d, 9=7,93 Hz), 7,78 (1 H, d, 9=7,93 Hz), 7,62 (1 H, s), 7,54 (1 H, t, 9=7,78 Hz), 7,37 - 7,46 (2 H, m), 7,28 (2 H, t, 9=7,63 Hz), 7,19 - 7,24 (2 H, m), 7,15 (1 H, t, 9=7,32 Hz), 4,90 (1 H, t, 9=5,19 Hz), 3,50 - 3,58 (1 H, m), 3,25 - 3,28 (1 H, m), 3,21 (3 H, s), 2,88 - 2,96 (2 H, m), 2,82 (3 H, d, 9=4,58 Hz), 1,22 -
I, 32 (4 H, m). Tempo de retenção de LC-MS: 1,57 min; m/z (MH+): 642. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a
209/543
5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5% /H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 11,28 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 10,86 min, pureza = 98%.
Figure BRPI0918174A2_D0112
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(1-(4-fluorfenil)ciclopropilcarbamoil)fenil)-6(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Cloridrato de 1-(4-fluorfenil)ciclopropanamina (22 mg, 0,114 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de HATU (54 mg, 0,142 mmol), DIEA (50 pL, 0,285 mmol) e ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-6-(N-(2hidroxietil)metilsulfonamido)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (50 mg, 0,095 mmol) em DMF (950 pL) em rt. Ele foi deixado agitar por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (30 mg, 47%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,14 (1 H, s), 8,49 - 8,55 (1 H, m), 7,99 - 8,04 (2 H, m), 7,97 - 7,98 (1 H, m), 7,95 (1 H, s), 7,88 (1 H, d, 7=8,24 Hz), 7,78 (1 H, d, 7=7,93 Hz), 7,61 (1 H, s), 7,53 (1 H, t, 7=7,78 Hz), 7,39 - 7,45 (2 H, m), 7,22 - 7,32 (2 H, m), 7,05 - 7,13 (2 H, m), 4,90 (1 H, t, 7=5,04 Hz), 3,50 - 3,58 (1 H, m), 3,24 - 3,28 (1 H, m),
3,20 (3 H, s), 2,93 (2 H, s amplo.), 2,81 (3 H, d, 7=4,58 Hz), 1,25 (4 H, d, 7=9,77 Hz). Tempo de retenção de LC-MS: 1,60 min; m/z (MH+): 660. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado
210/543 com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt =11,49 min, pureza = 99% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 11,04 min, pureza = 99%.
Figure BRPI0918174A2_D0113
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(2-(4-fluorfenil)propan-2-ilcarbamoil)fenil)-6(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
2-(4-Fluorfenil)propan-2-amina (18 mg, 0,114 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de HATU (54 mg, 0,142 mmol), DIEA (50 pL, 0,285 mmol) e 2-(4-fluorfenil)propan-2-amina (18 mg, 0,114 mmol) em DMF (950 pL) em rt. Ela foi deixada agitar por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (18 mg, 28%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,50 - 8,56 (1
211/543
H, m), 8,31 (1 Η, s), 7,98 - 8,05 (3 Η, m), 7,96 (1 Η, s), 7,83 (1 Η, d, 4=7,63 Hz), 7,73 (1 H, d, 4=7,63 Hz), 7,62 (1 H, s), 7,53 (1 Η, t, 4=7,78 Hz), 7,38 7,47 (4 H, m), 7,09 (2 H, t, 4=8,85 Hz), 4,90 (1 H, t, 4=5,19 Hz), 3,50 - 3,58 (1 H, m), 3,26 - 3,29 (1 H, m), 3,23 (3 H, s), 2,87 - 2,93 (2 H, m), 2,82 (3 H, d, 4=4,58 Hz), 1,67 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 1,66 min; m/z (MH+): 662. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 12,11 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 11,48 min, pureza = 100%.
Figure BRPI0918174A2_D0114
5-(3-(1-(4-Clorofenil)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Cloridrato de 1-(4-clorofenil)ciclopropanamina (25 mg, 0,123 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de HATU (59 mg, 0,154 mmol), DIEA (54 pL, 0,308 mmol) e ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3212/543 (metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (40 mg, 0,103 mmol) em DMF (1 mL) em rt. Ele foi deixado agitar por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (8 mg, 14%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,37 (1 H, s), 8,46 - 8,55 (1 H, m), 8,22 (1 H, s), 7,95 - 8,05 (2 H, m), 7,86 - 7,95 (3 H, m), 7,74 - 7,83 (2 H, m), 7,59 (1 H, t, 4=7,63 Hz), 7,38 - 7,44 (2 H, m), 7,30 - 7,36 (2 H, m),
7,20 - 7,28 (2 H, m), 2,86 (3 H, d, J=4,58 Hz), 1,26 - 1,36 (4 H, m). Tempo de retenção de LC-MS: 1,92 min; m/z (MH+): 539. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UVVis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10% / H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era H2O a 10% / MeOH a 90% / ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 14,56 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge
4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 13,20 min, pureza = 97%.
Figure BRPI0918174A2_D0115
213/543
5-(3-(2-(4-Clorofenil)propan-2-ilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
2-(4-Clorofenil)propan-2-amina (21 mg, 0,123 mmol) foi adicionada a uma solução em agitação de HATU (59 mg, 0,154 mmol), DIEA (54 pL, 0,308 mmol) e ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico (40 mg, 0,103 mmol) em DMF (1 mL) em rt. Ela foi deixada agitar por 1 hora. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaHCO3 sat e NaCI sat. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, filtrada, concentrada e foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (32 mg, 57%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,64 (1 H, s), 8,47 - 8,55 (1 H, m), 8,14 (1 H, s), 7,99 - 8,04 (2 H, m), 7,92 (1 H, s), 7,74 - 7,89 (4 H, m), 7,57 (1 H, t, J=7,78 Hz), 7,37 - 7,45 (4 H, m), 7,34 (2 H, d, J=8,85 Hz), 2,87 (3 H, d, J=4,58 Hz), 1,69 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 1,95 min; m/z (MH+): 541. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10u C18 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10A em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era MeOH a 10% / H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1 % e solvente B era H2O a 10%/ MeOH a 90% / ácido trifluoracético a 0,1%. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5% /H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 15,18 min, pureza = 99% ; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 13,66 min, pureza = 99%.
214/543
Figure BRPI0918174A2_D0116
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2-(piridin-4-il)propan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Dicloridrato de 2-(piridin-4-il)propan-2-amina (26 mg, 0,123 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de HATU (59 mg, 0,154 mmol), DIEA (54 pl_, 0,308 mmol) e ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (40 mg, 0,103 mmol) em DMF (1 mL) em rt. Ele foi deixado agitar por 1 hora. A reação foi purificada através de HPLC de fase reversa preparativa em uma coluna C18 usando um gradiente de H2O/CH3CN adequadamente tamponado e concentrada para dar o composto do título (15 mg, 27%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,73 (1 H, s), 8,50 - 8,55 (1 H, m), 8,48 (2 H, dd, 7=4,58, 1,53 Hz), 8,16 (1 H, s), 7,97 - 8,04 (2 Η, m), 7,91 - 7,94 (1 Η, m), 7,88 (1 Η, d, 7=7,63 Hz), 7,85 (1 Η, d, 7=7,93 Hz), 7,75 - 7,82 (2 H, m), 7,58 (1 Η, t, 7=7,63 Hz), 7,36 - 7,43 (4 Η, m), 2,86 (3 H, d, J=4,58 Hz), 1,68 (6 H, s). Tempo de retenção de LC-MS: 1,59 min; m/z (MH+): 508. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XBridge 5u C18 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 ml/min, um gradiente de solvente A a 100%/solvente B a 0% para solvente A a 0%/solvente B a 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de retenção de 1 min e um tempo de análise de 3 min onde o solvente A era acetonitrila a 5%/H2O a 95%/acetato de amônio a 10 mM e solvente B era H2O a 5%/acetonitrila a 95%/acetato de amônio a 10 mM. Os dados de MS foram determinados usando uma MICROMASS® Platform para LC em modo de eletropulverização. Método de HPLC convencional: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFAa 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gra215/543 diente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 8,60 min, pureza = 95%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 4,6 x 150 mm, 3,5 mm, Rt = 9,26 min, pureza = 96%.
H
2-(4-Fluorfenil)-5-isopropóxi-6-(metilsulfonamido)benzofuran-3carbotioamida
A reação foi realizada em duas bateladas e combinada para trabalho. Na primeira batelada, o reagente de Lawesson (27 mg, 0,067 mmol) foi adicionado a uma solução de 2-(4-fluorfenil)-5-isopropóxi-6(metilsulfonamido)benzofuran-3-carboxamida (35 mg, 0,086 mmol) em THF (1,2 mL). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 h, ponto quando mais reagente de Lawesson (8 mg, 0,020 mmol) foi adicionado. Na segunda batelada, reagent de Lawesson (129 mg, 0,32 mml) foi adicionado a uma solução de 2-(4-fluorfenil)-5-isopropóxi-6-(metilsulfonamido) benzofuran-3-carboxamida (125 mg, 0,31 mmol) em THF (3 mL) e foi agitado em r.t. por 1,5 h. As duas bateladas foram então combinadas e divididas entre EtOAC (50 mL) e água (10 mL). A fase orgânica foi lavada com NaHCO3 saturado e salmoura, seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar um oleo amarelo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de sílica-gel (BlOTAGE® 25+S cartucho de sílica-gel, eluição de gradiente: EtOAc a 20% a 80% /hexanos coluna de 20 volumes, coleta de fração a λ = 320 nm) para dar 48 mg (29% de rendimento) do composto do título. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ ppm 7,76 - 7,87 (m, 2 H) 7,71 (d, J = 5,86 Hz, 2 H) 7,53 (s amplo., 1 H) 7,13 - 7,23 (m, 2 H) 6,97 (s, 1 H) 6,90 (s amplo., 1 H) 4,74 (dt, J = 12,08, 6,04 Hz, 1 H) 2,93 (s, 3 H) 1,40 (d, J = 6,22 Hz, 6 H). LC/MS foi realizada usando instrument Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 5% / H2O a 95% / NH4OAc a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95% / H2O a 5% / NH4OAc a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de
216/543
Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: XBridge C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,39 min, (ES+) m/z (MH+) = 423.
H
N-(2-(4-Fluorfenil)-5-isopropóxi-3-(tiazol-2-il)benzofuran-6il)metanossulfonamida
Cloroacetaldeído (solução a 50% em água, 100 pL, 0,79 mmol) foi adicionado a uma suspensão agitada de 2-(4-fluorfenil)-5-isopropóxi-6(metilsulfonamido)benzofuran-3-carbotioamida intermediária (48 mg, 0,11 mmol) em etanol (1,5 mL) e a reação trazida para refluxo (temperatura do banho de óleo 100 °C). Após 4 horas, mais solução de cloroacetaldeído (200 pL, 1,6 mmol) foi adicionada e aquecimento foi continuado da noite para o dia. A reação foi esfriada para r.t., diluída com EtOAc (75 mL), lavada com água (10 mL) e NaHCO3 sat (2x5 mL) e salmoura, seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar um óleo marrom. O resíduo foi purificado em sílicagel (coluna BIOTAGE® 12+M, eluição de gradiente EtOAc a 10% a 40%/hexanos em uma coluna de 20 volumes, coleta de fração a λ = 320 nm) para dar um óleo incolor, 38 mg (75% de rendimento). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ ppm 7,96 (d, J = 3,29 Hz, 1 H) 7,73 - 7,86 (m, 3 H) 7,56 (s, 1 H) 7,37 (d, J=3,29 Hz, 1 H) 7,07 - 7,19 (m, 2 H) 6,98 (s, 1 H) 4,73 (spt, J=6,04 Hz, 1 H) 2,96 (s, 3 H) 1,40 (d, J = 5,86 Hz, 7 H). Uma amostra analiticamente pura foi obtida através de precipitação a partir de Et2O/hexanos para dar um precipitado amarelo, que foi triturado com Et2O e seco ao ar. LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 5% /H2O a 95%/ NH4OAc a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/ NH4OAc a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: XBridge C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,69 min, (ES+) m/z (MH+) = 447. HPLC analítica foi realizada usando um instrument Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm
217/543 e 254 nm. Método de HPLC analítico: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 14,74 min, pureza = 97%; Coluna: Waters XBridge fenila 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 12,86 min, pureza = 98%.
Figure BRPI0918174A2_D0117
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3(metilsulfonilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Em um frasco de 1 dram com barra de agitação foram combinados ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (35 mg, 0,090 mmol), DMAP (33 mg, 0,27 mmol), cloridrato de EDC (26 mg, 0,14 mmol) e metanossulfonamida (25 mg, 0,26 mmol). DMF (0,5 mL) foi adicionado, o frasco foi tampado e a reação foi agitada em r.t. da noite para a o dia. A reação foi filtrada, purificada através de HPLC preparativa e concentrada para dar 30 mg (72% de rendimento) do composto do título como um pó branco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12,36 (s amplo, 1 H) 8,53 (d, J = 4,58 Hz, 1 H) 8,27 (s, 1 H) 7,97 - 8,05 (m, 2 H) 7,84 - 7,96 (m, 3 H) 7,77 - 7,82 (m, 1 H) 7,71 - 7,76 (m, 1 H) 7,56 (t, J = 7,78 Hz, 1 H) 7,40 (t, 7=8,85 Hz, 2 H) 3,17 (s, 3 H) 2,86 (d, 7 = 4,58 Hz, 3 H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10%/H2O a 90% /TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 90% /H2O a 10%/TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,56 min, (ES+) m/z (MH+) = 467. HPLC analítica foi realizada usando um instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3OH a 5%>/H2O a 95%/ NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = CH3OH a 95% ZH2O a 5%/ NH4HCO3a 10
218/543 mM, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C18, 4,6 mm, 3 pm, Rt = 11,93 min, pureza = 100%; Coluna: Waters XBridge fenila 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 13,97 min, pureza = 99%.
Figure BRPI0918174A2_D0118
5-(3-(ferc-Butilsulfonilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Em um frasco de 1 dram com barra de agitação foram combinados ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (35 mg, 0,090 mmol), DMAP (33 mg, 0,27 mmol), cloridrato de EDC (26 mg, 0,14 mmol) e terc-butilsulfonamida (37 mg, 0,27 mmol). 1,2-Dicloroetano (1 mL) e DMF (0,3 mL) foram adicionados, o frasco foi tampado e a reação foi agitada em r.t. da noite para o dia. A reação foi concentrada, filtrada, purificada atraés de HPLC preparativa e concentrada em um SPEEDVA® para dar 14 mg (31%) de rendimento do composto do título como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ ppm 8,12 (s, 1 H) 7,97 (s, 1 H) 7,91 (dd, J = 8,55, 5,19 Hz, 2 H) 7,84 (d, J = 7,63 Hz, 1 H) 7,79 (d, J = 7,32 Hz, 1 H) 7,46 - 7,59 (m, 3 H) 7,19 (t, J = 8,55 Hz, 2 H) 6,04 (s amplo, 1 H) 2,99 (d, J = 4,58 Hz, 3 H) 1,54 (s, 9 H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10% /H2O a 90% /TFA a 0,1%, Solvente B = 90% a CH3CN/ H2O a 10%/TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,71 min, (ES+) m/z (MH+) = 509. HPLC analítica foi realizada usando um instrumento ShimadzuVP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3OH a 5% /H2O a 95%/ NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = CH3OH a 95% ZH2O a 5%/ NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C18, 4,6 mm, 3 pm, Rt =
219/543
16,49 min, pureza = 100%; Coluna: Waters XBridge fenila 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 15,35 min, pureza = 100%.
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3(fenilsulfonilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Em um frasco de 1 dram foram combinados ácido 3-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (35 mg, 0,090 mmol), DMAP (33 mg, 0,27 mmol), cloridrato de EDC (26 mg, 0,14 mmol) e benzenosulfonamida (43 mg, 0,27 mmol). 1,2-Dicloroetano (1 mL) e DMF (0,3 mL) foram adicionados, o frasco foi tampado e a suspensão foi agitada em r.t. da noite para o dia, momento durante o qual os sólidos dissolveram. A reação foi concentrada, filtrada, purificada através de HPLC prep e concentrada para dar 32 mg (67% de rendimento) do composto do título como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 12,78 (s amplo, 1 H) 8,52 (q, J = 4,48 Hz, 1 H) 8,24 (s, 1 H) 7,97 - 8,06 (m, 4 H) 7,90 - 7,97 (m, 2 H) 7,85 (d, J = 7,94 Hz, 1 H) 7,74 - 7,81 (m, 2 H) 7,66 - 7,73 (m, 1 H) 7,63 (t, J = 7,63 Hz,
H) 7,58 (t, J = 7,63 Hz, 1 H) 7,40 (t, J = 8,85 Hz, 2 H) 2,87 (d, J = 4,58 Hz,
H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10%/H2O a 90% /TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 90%/ H2O a 10%/TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,77 min, (ES+) m/z (MH+) = 529, HPLC analítica foi realizada usando um instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3OH a 5% /H2O a 95%/ NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = CH3OH a 95%/H2O a 5%/ NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C18, 4,6 mm, 3 pm, Rt = 15,70 min, pureza = 100%; Coluna: Waters XBridge fenila 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 14,90 min,
220/543 pureza = 99%.
Figure BRPI0918174A2_D0119
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(metil(fenilsulfonil)carbamoil)fenil) benzofuran-3-carboxamida
Em um frasco de 1 dram com barra de agitação foram combinados ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (35 mg, 0,090 mmol), DMAP (33 mg, 0,27 mmol), cloridrato de EDC de (26 mg, 0,14 mmol) e /V-metilbenzenosulfonamida (50 pL, 0,26 mmol). 1,2Dicloroetano (0,5 mL) e DMF (0,5 mL) foram adicionados, o frasco foi tampado e a reação foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. A reação foi filtrada, purificada através de HPLC preparativa e concentrada em um SPEEDVAC® para dar 27 mg (55% de rendimento) do composto do título como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ ppm 7,91 - 8,02 (m, 5 H) 7,75 - 7,82 (m, 2 H) 7,65 (t, J = 7,48 Hz, 1 H) 7,47 - 7,60 (m, 6 H) 7,15 - 7,24 (m, 2 H) 5,91 (d, J = 4,27 Hz, 1 H) 3,36 (s, 3 H) 3,04 (d, J = 4,88 Hz, 3 H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10%/H2O a 90%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 90%/H2O a 10%/TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,89 min, (ES+) m/z (MH+) = 543. HPLC analítica foi realizada usando um instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3OH a 5%/H2O a 95%/ NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = CH3OH a 95%/H2O a 5%/ NH4HCO3 a 10 mM, Início B% =10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C18, 4,6 mm, 3 pm, Rt = 17,42 min, pureza = 92%; Coluna: Waters XBridge fenila 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 17,86 min, pureza >90%.
221/543
Figure BRPI0918174A2_D0120
5-(3-(1-(Ciclopropilsulfonilcarbamoil)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Em um frasco de cintilação de 7 mL foram combinados ácido 3(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (30 mg, 0,077 mmol), cloridrato de 1-amino-A/-(ciclopropilsulfonil)ciclopropanocarboxamida (20 mg, 0,083 mmol) e HATU (40 mg, 0,10 mmol). DMF (0,4 mL) e DIPEA (0,1 mL, 0,57 mmol) foram adicionadas, o frasco foi tampado e a solução foi agitada em r.t. por 45 min. A reação foi diluída com MeOH, filtrada, purificada através de HPLC preparativa e as frações coletadas foram concentradas em um SPEEDVAC® para dar o composto do título (23 mg, 52% de rendimento) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 8,99 (s amplo, 1 H) 8,53 (q, J = 4,78 Hz, 1 H) 8,25 (s amplo, 1 H) 8,00 (dd, J = 8,85, 5,49 Hz, 2 H) 7,93 (s, 1 H) 7,89 (t, J = 7,78 Hz, 2 H) 7,72 - 7,83 (m, 2 H) 7,58 (t, J = 7,48 Hz, 1 H) 7,40 (t, J = 8,85 Hz, 2 H) 7,07 (s amplo, 1 H) 2,89 - 2,98 (m, 1 H) 2,87 (d, J = 4,58 Hz, 3 H) 1,35 - 1,56 (m, 2 H) 0,77 - 1,28 (m, 6 H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10%/ H2O a 90%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 90%/ H2O a 10%/TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,59 min, (ES+) m/z (MH+) = 576. HPLC analítica foi realizada usando um instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3OH a 5%/H2O a 95%/ NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = CH3OH a 95%/H2O a 5%/ NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C18, 4,6 mm, 3 pm, Rt = 15,39 min, pureza = 100%; Coluna: Waters XBridge fenila 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 14,50 min, pureza = 100%.
222/543
Figure BRPI0918174A2_D0121
5-(3-((1 R,2S)-1 -(Ciclopropilsulfonilcarbamoil)-2vinilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida
Em um frasco de cintilação foram combinados ácido 3-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (30 mg, 0,077 mmol), (1 R,2S)-1 -amino-/V-(ciclopropilsulfonil)-2-vinilciclopropanecarboxamida 4metilbenzenossulfonato (30 mg, 0,075 mmol) e HATU (40 mg, 0,10 mmol). DMF (0,4 mL) e DIPEA (0,1 mL, 0,57 mmol) foram adicionadas, o frasco foi tampado e a solução foi agitada em r.t. por 45 min. A reação foi diluída com MeOH, filtrada, purificada através de HPLC preparativa e as frações coletadas foram concentradas em um SPEEDVAC® para dar o composto do título (25 mg, 54% de rendimento) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ ppm 8,01 (s, 1 H) 7,97 (s, 1 H) 7,88 (dd, J = 8,85, 5,19 Hz, 2 H) 7,80 (d, J = 7,63 Hz, 1 H) 7,74 (d, J = 7,63 Hz, 1 H) 7,59 (s amplo, 1 H) 7,52 (s, 2 H) 7,48 (t, J= 7,63 Hz, 1 H) 7,18 (t, 7= 8,55 Hz, 2 H) 6,00 (d, 7= 3,97 Hz, 1 H) 5,61 5,73 (m, 1 H) 5,39 (d, 7 = 17,09 Hz, 1 H) 5,20 (d, 7 = 10,99 Hz, 1 H) 3,02 (d, 7 = 4,88 Hz, 3 H) 2,91 - 2,99 (m, 1 H) 2,34 (q, 7 = 8,44 Hz, 1 H) 2,05 - 2,09 (m, 1 H) 1,49 (dd, 7 = 9,31, 5,95 Hz, 1 H) 1,41 (dd, 7 = 5,80, 4,58 Hz, 1 H) 1,30-1,35 (m, 1 H) 1,22-1,30 (m, 1 H) 1,04-1,12 (m, 1 H) 0,96-1,04 (m, 1 H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10%/H2O a 90% /TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 90%/ H2O a 10%/TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,73 min, (ES+) m/z (MH+) = 602. HPLC analítica foi realizada usando um instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3OH a 5%/H2O a 95%/ NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = CH3OH a 95%/H2O a
223/543
5%/ NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: PHENOMENEX® Gemini C18, 4,6 mm, 3 pm, Rt = 16,26 min, pureza = 100%; Coluna: Waters XBridge fenila 4,6 x 150 mm, 3,5 pm, Rt = 15,28 min, pureza = 100%.
Figure BRPI0918174A2_D0122
Ácido 2-(3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzamido)-2-metilpropanoico
HATU (450 mg, 1,18 mmol) foi adicionado a uma suspensão de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (400 mg, 1,03 mmol), cloridrato de metil 2-amino-2-metilpropanoato (180 mg, 1,17 mmol) e DIPEA (0,6 mL, 3,4 mmols) em DCE (10 mL). Após 5 minutos, os sólidos não tinham dissolvido. Adicionar DMF (0,5 mL) e continuar a agitar a suspensão em r.t da noite para o dia. Ã reação foi então concentrada para dar uma suspensão espessa (DMF permaneceu após a concentração). Água e Et2O foram adicionados e o frasco serpenteado até que uma suspensão cinza fina se formasse. O precipitado foi coletado através de filtragem, enxaguado com HCI a 1N, água e éter e seco ao ar para dar 550 mg (110% de rendimento) do composto do título como um sólido cinza. LC/MS foi realizada em um instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/NH4OAc a 10 mM, Solvente B = CH3CN a 95%/ H2O a 5%/ NH4OAc a 10 mM, Início B% = 0, sinal B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: XBridge C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,49 min, (ES+) m/z (MH+) = 489. A uma suspensão do éster bruto acima (~0,1 mmol) em MeOH (7 mL)/H2O (2,1 mL) em um frasco de cintilação de 20 mL com barra de agitação foi adicionada solução de NaOH a 10N (0,4 mL, 4,00 mmols). O frasco foi tampado, agitado em r.t. da noite para o dia, então extinto vertendo 8 mL de HCI a 1N. Um precipitado branco se formou. A suspensão foi extraída com EtOAc e o sólido cinza in
224/543 solúvel foi coletado através de filtragem e seco ao ar (61 mg). A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para dar um pó branco. Este foi triturado com Et2O e coletado através de filtragem para dar 360 mg do pó branco. Ambas as culturas de precipitado eram idênticas através de LC/MS e foram combinadas para dar 421 mg (86% em duas etapas) do composto do título como um pó esbranquiçado. 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ ppm 8,59 (s, 1 H) 8,50 (d, J = 3,29 Hz, 1 H) 8,10 - 8,16 (m, 1 H) 7,91 - 8,01 (m, 3 H) 7,83 (dd, J = 12,99, 7,87 Hz, 2 H) 7,64 - 7,74 (m, 2 H)
7,56 (t, J = 7,68 Hz, 1 H) 7,27 (t, J = 8,78 Hz, 2 H) 2,95 - 3,02 (m, 3 H) 1,62 (s, 6 H). LC/MS foi realizada em um instrumento Shimadzu-VP com deteção UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/ NH4OAc a 10 mM, Solvente B = CH3CN a 95%/ H2O a 5%/ NH4OAc a 10 mM, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: XBridge C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,06 min, (ES+) m/z (MH+) = 475. HPLC analítica foi realizada usando um instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3CN a 5% /H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18,
3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 10,91 min, pureza = 98%; Coluna: Waters XBridge fenila 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 10,21 min, pureza = 98%.
5-(3-(1-(Dimetilamino)-2-metil-1-oxopropan-2-ilcarbamoil)fenil)-2(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Uma solução de dimetilamina em THF (2 molares, 0,10 mL, 0,20 mmol) foi adicionada a ácido 2-(3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzamido)-2-metilpropanoico (17 mg, 0,036 mmol) e HATU (15 mg, 0,039 mmol) em um frasco de 1 dram. DMF (0,3 mL) foi adicionada, o frasco foi tampado e a solução homogênea foi agitada em
225/543
r.t. por 1 h, em cujo ponto DIPEA (50 pL, 0,29 mmol) foi adicionada. Agitação foi continuada por 3 h, em cujo ponto a reação foi filtrada e purificada diretamente através de HPLC preparativa. Concentração das frações coletadas deu o composto do título como um sólido branco (13 mg, 71% de rendimento). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,09 - 8,17 (m, 1 H) 7,90 - 7,98 (m, 3 H) 7,86 (d, J = 7,94 Hz, 1 H) 7,79 - 7,84 (m, 1 H) 7,63 - 7,72 (m, 2 H)
7,57 (t, J = 7,63 Hz, 1 H) 7,20 - 7,32 (m, 2 H) 3,14 (s amplo, 3 H) 2,98 (s, 6 H) 1,61 (s, 6 H). LC/MS foi realizada em um instrumento Shimadzu-VP com deteção UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/ NH4OAc a 10 mM, Solvente B = CH3CN a 95%/ H2O a 5%/ NH4OAc a 10 mM, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: XBridge C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt - 1,29 min, (ES+) m/z (MH+) = 502, Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 14,80 min, pureza = 100%; Coluna: Waters XBridge fenila 3,5 pm
4,6 x 150 mm, Rt= 10,37 min, pureza = 100%.
ci
5-(3-((Cis)-2-(4-clorofenil)ciclopentilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Em um frasco de 1 dram foram combinados ácido 3-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (20 mg, 0,051 mmol), c/s-2-(4-clorofenil)ciclopentanamina (14 mg, 0,072 mmol) e HATU (31 mg, 0,082 mmol). DMF (0,4 mL) e DIPEA (50 pL, 0,29 mmol) foram adicionadas e o frasco foi tampado e agitado em r.t. por 2 h, então diluído com MeOH, filtrado e purificado diretamente através de HPLC preparativa. Concentração
226/543 deu o composto do título (15 mg, 52% de rendimento) como um sólido branco fofo. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,47 - 8,59 (m, 1 H) 8,06 (d, J = 8,85 Hz, 1 H) 7,97 - 8,03 (m, 2 H) 7,86 (d, J = 1,83 Hz, 1 H) 7,75 - 7,82 (m, 2 H) 7,68 (s, 1 H) 7,65 (dd, J = 8,55, 1,83 Hz, 1 H) 7,45 - 7,53 (m, 2 H) 7,40 (t, J = 8,85 Hz, 2 H) 7,27 (s, 4 H) 4,60 - 4,71 (m, J = 7,67, 7,67, 7,55, 7,32 Hz, 1 H) 3,33 - 3,41 (m, 1 H) 2,87 (d, J = 4,58 Hz, 3 H) 1,99 - 2,15 (m, 3 H) 1,89 - 1,98 (m, 1 H) 1,72 - 1,82 (m, 1 H) 1,57 -1,71 (m, 1 H). LC/MS foi realizada em um instrumento Shimadzu-VP com deteção UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10%/ H2O a 90%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 90%/H2O a 10%/TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 2,02 min, (ES+) m/z (MH+) = 567, Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3CN a 5% /H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 15,42 min, pureza = 98%; Coluna: Waters XBridge fenila 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 13,74 min, pureza = 97%.
5-(3-(Bifenil-2-ilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Em um frasco de 1 dram foram combinados ácido 3-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (30 mg, 0,077 mmol), bifenil-2-amina (17 mg, 0,10 mmol) e HATU (40 mg, 0,105 mmol). DMF (0,4 mL) e DIPEA (50 pL, 0,29 mmol) foram adicionados e o frasco foi tampado e agitado em r.t. da noite para o dia, então diluídos com MeOH, filtrados e purificados diretamente através de HPLC preparativa. Concentração deu o composto do título (17 mg, 41% de rendimento) como um sólido branco fofo. 1H
227/543
RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,96 (s, 1 H) 8,53 (q, J = 4,58 Hz, 1 H) 7,96 - 8,06 (m, 3 H) 7,85 - 7,91 (m, 2 H) 7,80 (d, J = 8,55 Hz, 1 H) 7,77 (d, J = 7,32 Hz, 1 H) 7,70 (dd, J = 8,55, 1,83 Hz, 1 H) 7,57 - 7,61 (m, 1 H) 7,56 (d, J = 6,10 Hz, 1 H) 7,48 (d, J = 7,32 Hz, 2 H) 7,36 - 7,46 (m, 7 H) 7,31 (t, J = 7,48 Hz, 1 H) 2,87 (d, J = 4,88 Hz, 3 H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10%/ H2O a 90%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 90% / H2O a 10%/TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 2,02 min, (ES+) m/z (MH+) = 541. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 15,37 min, pureza = 100%; Coluna: Waters XBridge fenila 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 13,75 min, pureza = 100%.
Figure BRPI0918174A2_D0123
5-(3-(Benzil(metil)carbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
DIPEA (50 pL, 0,29 mmol) e /V-metilbenzilamina (20 pL, 0,16 mmol) foram adicionadas a uma solução agitada de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (20 mg, 0,051 mmol) e HATU (25 mg, 0,066 mmol) em DMF (0,5 mL) e a reação foi agitada em r.t. da noite para o dia. A reação foi então diluída com MeOH, filtrada, purificada através de HPLC preparativa e concentrada para dar o composto do título como um pó castanho (12 mg, 47% de rendimento). 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) δ ppm 8,50 (s amplo, 1 H) 8,01 (dd, J = 8,39, 5,65 Hz, 2 H) 7,66 - 7,93 (m, 5 H)
7,58 (s amplo, 1 H) 7,42 - 7,50 (m, 1 H) 7,35 - 7,42 (m, 4 H) 7,31 (d, J = 5,80
228/543
Hz, 1 Η) 7,23 (d, J = 4,58 Hz, 1 Η) 4,72 (s amplo, 1 Η) 4,54 (s amplo, 1 Η) 2,83 - 3,00 (m, 6 H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10%/ H2O a 90%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 90%/H2O a 10% /TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,85 min, (ES+) m/z (MH+) = 493. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 16,26 min, pureza = 99%; Coluna: Waters XBridge fenila 3,5 pm
4,6 x 150 mm, Rt = 12,81 min, pureza = 98%.
Figure BRPI0918174A2_D0124
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isoindolino-2-carbonil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Isoindolina (20 pL, 0,18 mmol) foi adicionada a uma suspensão agitada de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico (20 mg, 0,051 mmol), HATU (25 mg, 0,066 mmol) e DIPEA (50 pL, 0,29 mmol) em DMF (0,5 mL). A reação foi agitada em r.t. da noite para o dia. A reação foi então diluída com MeOH e um precipitado esbranquiçado formado. O precipitado foi coletado através de filtragem, triturado com MeOH e seco ao ar para dar o composto do título (17 mg, 68% de rendimento). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,50 (q, J = 4,58 Hz, 1 H) 7,99 - 8,05 (m, 2 H) 7,90 - 7,95 (m, 2 H) 7,85 (dt, J = 6,10, 2,44 Hz, 1 H) 7,77 - 7,81 (m, 1 H) 7,73 - 7,77 (m, 1 H) 7,58 - 7,64 (m, 2 H) 7,36 - 7,45 (m, 3 H) 7,30 - 7,34 (m, 1 H) 7,29 (s, 2 H) 4,91 (s, 2 H) 4,84 (s, 2 H) 2,86 (d, J = 4,88 Hz, 3 H). LC/MS foi realizada em um instrumento Shimadzu-VP com deteção UV a 220 nm e
229/543
Waters MICROMASS® Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10%/ H2O a 90%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 90% / H2O a 10% /TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 3 min, Tempo de Parada = 4 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 2,48 min, (ES+) m/z (MH+) = 491. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 13,81 min, pureza = 100%; Coluna: Waters XBridge fenila 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 13,81 min, pureza = 100%.
\Vo 'A
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(2-fenilpirrolidina-1carbonil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
2-Fenilpirrolidina (20 mg, 0,14 mmol) foi adicionada a uma suspensão agitada de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico (20 mg, 0,051 mmol), HATU (25 mg, 0,066 mmol) e DIPEA (50 pL, 0,29 mmol) em DMF (0,5 mL). A reação foi agitada em r.t. da noite para o dia. A reação foi então diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa. Concentração deu o composto do título (21 mg, 78% de rendimento) como um sólido rosa claro. 1H RMN (~3:2 razão de rotâmeros de amida, 500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,44 - 8,56 (m, 1 H) 7,96 - 8,07 (m, 2 H) 7,74 - 7,89 (m, 3 H) 7,56 - 7,67 (m, 2 H) 7,30 - 7,45 (m, 5,4 H) 7,16 - 7,29 (m, 2,6 H) 7,09 (d, J = 7,02 Hz, 1 H) 5,19 (t, J = 6,71 Hz, 0,6 H) 4,98 (d, J = 6,41 Hz, 0,4 H) 3,75 - 3,92 (m, 1,4 H) 3,53 - 3,64 (m, 0,6 H) 2,87 (m, 3 H)
2,40 (dd, J = 12,36, 6,56 Hz, 0,6 H) 2,30 - 2,38 (m, 0,4 H) 1,73 - 1,92 (m, 3 H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por
230/543
UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10% /H2O a 90% /TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 90%/H2O a 10% /TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 3 min, Tempo de Parada = 4 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,86 min, (ES+) m/z (MH+) = 519. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 14,38 min, pureza = 99%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 13,01 min, pureza = 99%.
Figure BRPI0918174A2_D0125
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(3-(4-fluorfenil)pirrolidino-1-carbonil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Cloridrato de 3-(4-fluorfenil)pirrolidina (25 mg, 0,12 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (20 mg, 0,051 mmol), HATU (25 mg, 0,066 mmol) e DIPEA (50 pL, 0,29 mmol) em DMF (0,5 mL). A reação foi agitada em r.t. da noite para o dia, então diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa. Concentração deu o composto do título (22 mg, 79% de rendimento) como um sólido rosa. 1H RMN (-1:1 razão de rotâmeros de amida, 500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,44 - 8,54 (m, 1 H) 7,98 - 8,06 (m, 2 H) 7,66 - 7,91 (m, 5 H) 7,52 - 7,61 (m, 2 H) 7,36 - 7,44 (m, 3 H) 7,33 (dd, J = 8,55, 5,49 Hz, 1 H) 7,18 (t, J = 8,85 Hz, 1 H) 7,12 (t, J = 8,85 Hz, 1 H) 4,01 (dd, J = 11,14, 7,17 Hz, 0,5 H) 3,72 - 3,82 (m, 1,5 H) 3,56 3,69 (m, 1,5 H) 3,36 - 3,55 (m, 1,5 H) 2,87 (d, J = 4,58 Hz, 1,5 H) 2,84 (d, J =
4,58 Hz, 1,5 H) 2,27 - 2,34 (m, 0,5 H) 2,24 (dd, J = 6,56, 3,51 Hz, 0,5 H) 2,04 -2,12 (m, 0,5 H) 2,00 (dd, J = 19,84, 10,38 Hz, 0,5 H). LC/MS foi realizada
231/543 em um instrumento Shimadzu-VP com deteção UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 10% / H2O a 90%/FFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 90%/H2O a 10% /TFA a 0,1%, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 3 min, Tempo de Parada = 4 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: Sunfire C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,89 min, (ES+) m/z (MH+) = 537. Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 14,43 min, pureza = 99%; Coluna: Waters XBridge fenila 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt =13,18 min, pureza = 99%.
5-(3-(ferc-Butilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran3-carboxamida
DIEA (50 pL, 0,29 mmol) foi adicionada a uma solução de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (50 mg, 0,13 mmol) e HATU (60 mg, 0,16 mmol) em DMF (0,5 mL). Os sólidos foram dissolvidos durante 5 minutos, em cujo ponto ferc-butilamina (20 pL, 0,19 mmol) foi adicionada. A solução foi agitada em r.t. por 1 h, então diluída com CH3CN (1 mL), filtrada, purificada através de HPLC preparativa, concentrada e seca em um forno a vácuo durante o final de semana a 40° C para dar o composto do título (39 mg, 69% de rendimento) como um pó branco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,53 (q, J = 4,37 Hz, 1 H) 8,08 (s, 1 H) 8,01 (dd, J = 8,24, 5,80 Hz, 2 H) 7,92 (d, J = 7,93 Hz, 2 H) 7,84 (d, J = 7,63 Hz, 1 H) 7,77 - 7,82 (m, 2 H) 7,73 - 7,77 (m, 1 H) 7,55 (t, J = 7,63 Hz, 1 H)
7,40 (t, J = 8,85 Hz, 2 H) 2,87 (d, J = 4,58 Hz, 3 H) 1,42 (s, 9 H). 13C RMN (125 MHz, DMSO-d6) δ ppm 166,20 (s) 163,22 (s) 162,66 (d, J = 246 Hz) 152,56 (s) 152,52 (s) 140,06 (s) 136,53 (s) 135,76 (s) 129,38 (d, J= 12 Hz) 129,36 (s) 128,70 (s) 127,86 (s) 126,27 (s) 125,86 (s) 125,70 (d, J = 2,5 Hz) 124,83 (s) 118,90 (s) 115,93 (d, J = 20 Hz) 113,88 (s) 111,60 (s) 50,85 (s)
232/543
28,60 (s) 26,19 (s). Método LC/MS: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/ NH4OAc a 10 mM, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/ NH4OAc a 10 mM, Início B% = 0, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: XBridge C18 5 pm 4,6 x 50 mm; HPLC Rt = 1,57, (ES-) m/z (IVT) = 443, Método de HPLC analítica: Solvente A = CH3CN a 5%/H2O a 95%/TFA a 0,1%, Solvente B = CH3CN a 95%/H2O a 5%/TFA a 0,1%, Início B% = 10, final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min. Coluna: Waters Sunfire C-18, 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt = 11,71 min, pureza = 100%; Coluna: Coluna de fenila Waters XBridge 3,5 pm 4,6 x 150 mm, Rt =
Figure BRPI0918174A2_D0126
2-(4-Fluorfenil)-5-hidróxi-N-metil-6-nitrobenzofuran-3carboxamida
A uma mistura de 2-(4-fluorfenil)-5-isopropóxi-N-metil-6nitrobenzofuran-3-carboxamida (210,5 mg, 0,565 mmol) em CH2CI2 (14 mL) a 0 °C sob N2 foi adicionado tricloroborano (1,70 mL, 1,7 mmol) (solução a 1M em CH2CI2). A mistura foi então agitada em r.t. por 17 h. A mistura foi evaporada. Ao resíduo laranja avermelhado foram adicionados Ί ml de H2O, e então 3,5 ml de HCI a 1N, e deixado descansar até que o sólido ficou amarelo. O produto sólido amarelo foi então filtrado e lavado com 3 x 3ml de H2O e seco (182 mg, 93%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 10,18 (s amplo, 1H), 8,53 (m, 1H), 8,31 (s, 1H), 7,98 (dd aparente, J= 8,85, 5,49, 2H), 7,43 (t aparente, J = 8,85, 2H), 7,28 (s, 1H,), 2,84 (apareceu como d, J = 4,58, 3H). LC/MS foi realizada utilizando um instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 331,21, HPLC Rt =
233/543
1,442 min.
Figure BRPI0918174A2_D0127
Trifluormetanossulfonato de 2-(4-Fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)-6nitrobenzofuran-5-ila
A uma mistura de 2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-N-metil-6nitrobenzofuran-3-carboxamida (100 mg, 0,303 mmol) em CH2CI2 (4 mL) em r.t. sob N2 foi adicionada trietilamina (0,084 mL, 0,606 mmol). A mistura foi então resfriada para 0 °C e então adicionada 1,1,1-triflúor-N-fenil-N(trifluormetilsulfonil)metanossulfonamida (162 mg, 0,454 mmol). A suspensão laranja foi então agitada em r.t. por 23 h. A mistura foi evaporada. Ao resíduo acinzentado-verde foram adicionados 3 ml de H2O, o produto sólido filtrado e lavado com 3 x 3 ml de H2O e seco (130,8 mg, 89%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) δ 8,84 (s, 1H), 8,62 (s amplo, 1H), 8,02 (td, J = 5,65, 2,44, 2H), 7,96 (s, 1H»), 7,48 (td, J = 8,77, 2,59, 2H), 2,85 (apareceu como d, J = 3,97, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 463,25, HPLC Rt = 1.700 min.
Figure BRPI0918174A2_D0128
Procedimento geral: Uma mistura de trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (ou o análogo 6-nitro) (0,3 mmol, 1 equiv.), ácido 3-boronobenzoico (1,5 equiv.), carbonato de césio (1,7 equiv.) e Pd(PPh3)4 (0,1 equiv.) em uma mistura de H2O (0,6 mL)/1,4dioxana (3,00 mL) sob N2 foi agitada a 90 °C por cerca de 1,5 a 5 h. A mistura foi resfriada para r.t. e diluída com 3 ml de 1,4-dioxana. A mistura foi filtra
234/543 da em um disco Whatman PTFE de 4,5 uM e concentrada. À mistura foram adicionados 4 ml de HCI a 1N, diluído com 5 ml de H2O. Os precipitados foram filtrados e lavados com 3 x 4 ml de H2O e secos. O material bruto foi purificado conforme indicado ou usado para a etapa de acoplamento de amida sem purificação adicional. A uma mistura de derivado do ácido 3(benzofuran-5-il)benzoico obtido acima (0,074 mmol, 1 equiv.), amina (1,5 equiv.) e tetrafluorborato de 2-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)-1,1,3,3tetrametilisourônio (2 equiv.) em DMF (1 mL) em r.t. sob N2 foi adicionada N,N-di-isopropiletilamina (3 equiv.). A mistura foi agitada em r.t. por cerca de 23 h. A mistura foi diluída com MeOH e purificada conforme indicado, por exemplo, através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP.
HO
Ácido 4-flúor-3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 13,17 (s, 1H), 8,51 (q, J = 4,27,
1H), 8,13 (dd, J = 7,78, 1,98, 1H), 8,01 (dd aparente, J = 8,70, 5,34, 3H), 7,81 (d, J = 8,54, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,61 (d, J = 8,54, 1H), 7,49 (dd, J = 10,07, 8,85, 1H), 7,41 (t aparente, J = 8,85, 2H), 2,85 (aparecia como d, J = 4,58, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 408,29. HPLC Rt = 1,693 min.
Figure BRPI0918174A2_D0129
5-(2-Flúor-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
235/543
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,79 - 9,35 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 9,33 (s, 1H), 8,51 (q, J = 4,58, 1H), 8,15 (dd, J= 7,48, 2,29, 1H), 8,00 (dd, J = 9,00, 5,34, 2H), 7,97 (m, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,82 (d, J= 8,60, 1H), 7,64 (d, J = 8,55, 1H), 7,46 (dd, J = 10,22, 8,70, 1H),
7,41 (t, 9= 9,00, 2H), 7,29 (t, J = 7,63, 1H), 7,28 (d, J= 7,32, 1H,), 7,23 (apparent d, J = 7,10, 2H), 7,17 (t, J = 7,17, 1H), 2,85 (aparecia como d, J = 4,58, 3H), 1,30 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 523,44. HPLC Rt = 1.803 min.
Figure BRPI0918174A2_D0130
5-(2-Flúor-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10% -TEA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada =12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,47 - 9,09 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD, apareceu como uma mistura de dois isômeros) δ 8,06-8,04 (m, 1H), 8,00-7,97 (m, 2H), 7,90-7,87 (m, 2H), 7,70 (d, J = 8,50, maior) e 7,69 (d, J = 8,50, menor) (1H), 7,63-7,62 (m, 1H), 7,36-7,27 (m de
236/543 sobreposição, 3H), 3,23 (d, J = 7,02, maior) e 3,23-3,22 (d, menor) (2H), 2,98 (s, maior) e 2,97 (s, menor) (3H), 1,97 (m, 1H), 1,00 (d, J = 6,71, maior) e 0,99 (d, J = 6,71, menor) (6H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 463,38. HPLC Rt = 1.772 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%- H2O a 95% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,85 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,44 min.
Figure BRPI0918174A2_D0131
5-(2-Cloro-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 9,28 - 9,85 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD, aparecia como uma mistura de dois isômeros) δ 9,36 (s amplo, 1H), 7,98-7,94 (m de sobreposição, 3H), 7,85 (dd, J = 8,39, 2,29, maior) e 7,86-7,83 (dd, menor) (1H), 7,75 (d, J = 1,83, maior) e 7,757,74 (d, menor) (1H), 7,66 (d, J = 8,55, maior) e 7,66-7,64 (d, menor) (1H), 7,633 (d, J = 8,00, maior) e 7,626 (d, J = 8,50, menor) (1H), 7,48 (dd, J = 8,55, 1,83, maior) e 7,49-7,47 (dd, menor) (1H), 7,29-7,25 (m de sobreposi
237/543 ção, 6H), 7,17 (m, 1H), 2,95 (s, maior) e 2,94 (s, menor) (3H), 1,36-1,34 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 539,37, 541,38. HPLC Rt = 1.868 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%- H2O a 5% -TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 10,84 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,37 min.
Figure BRPI0918174A2_D0132
5-(2-Cloro-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10% -TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 9,01 - 9,47 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD, aparecia como uma mistura de dois isômeros) δ 7,98 (maior) e 7,97 (menor) (dd, 2H), 7,91 (d, J = 2,14, maior) e 7,91-7,90 (d, menor) (1H), 7,82 (dd, J = 8,24, 2,14, maior) e 7,82-7,80 (dd, menor) (1H), 7,75 (m, 1H), 7,65 (dd, J = 16, 8,39, maior) e 7,64 (dd, J= 16,5, 8,55, menor) (2H), 7,49 (dd, J = 8,24, 1,83, maior) e 7,49-7,47 (dd, menor) (1H), 7,27 (t, J = 8,85, maior) e 7,29-7,25 (m aparente, menor) (2H), 3,22 (d, J = 7,02, maior) e 3,21 (d, J = 7,02, maior) (2H), 2,96 (s, maior) e 2,95 (s, menor) (3H),
238/543
1,95 (m, 1H), 0,98 (d, J = 6,71, maior) e 0,97 (d, J = 6,71, menor) (6H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 479,33, 481,36. HPLC Rt = 1.830 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,66 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,19 min.
Figure BRPI0918174A2_D0133
Ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)-6-nitrobenzofuran-5i l)-4-metoxibenzoico
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%- H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 465,31. HPLC Rt = 1,568 min.
Figure BRPI0918174A2_D0134
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-metoxifenil)-N-metil-6nitrobenzofuran-3-carboxamida
239/543
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10% -TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,79 - 8,36 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,62 (q, J = 4,48, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,46 (t, J = 5,80, 1H), 8,05 (dd, J = 9,00, 5,34, 2H), 7,96 (dd, 1H), 7,95 (s aparente, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,46 (t, J = 8,85, 2H), 7,14 (d, J = 8,55, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,11 (d amplo, 2H), 2,83 (aparecia como d, J = 4,58, 3H), 1,87 (m, 1H), 0,91 (d, J = 6,71, 6H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 520,40, HPLC Rt = 1,688 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5% -H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,93 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,30 min.
Figure BRPI0918174A2_D0135
Ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)-6-nitrobenzofuran-5il)benzoico
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Pa
240/543 rada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,98 - 7,51 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 13,17 (s, 1H), 8,60 (m, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,088,05 (m de sobreposição, 2H), 8,02 (d, J = 7,63, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,67-7,61 (m de sobreposição, 2H), 7,46 (t aparente, J = 8,85, 2H), 2,84 (aparecia como d, J = 4,58, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 435,27. HPLC Rt = 1.588 min.
Figure BRPI0918174A2_D0136
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-6-nitro-5-(3-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-6-nitro-5-(3-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida foi preparada conforme descrito no procedimento geral. A mistura de reação foi concentrada e então adicionada água em excesso. Os precipitados esbranquiçados do produto foram filtrados, lavados com água 3 vezes e secos. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) δ 9,31 (s, 1H), 8,60 (m, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,05 (m, 2H), 7,99-7,97 (m de sobreposição, 2H), 7,75 (s, 1H), 7,59-7,53 (m de sobreposição, 2H), 7,46 (t, J = 8,70, 2H), 7,29 (t, J = 7,02, 2H), 7,24 (s, 1H), 7,23 (d, J = 7,02, 1H), 7,17 (t, J = 6,71, 1H,), 2,83 (s, 3H), 1,29 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA®. MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 550,45, HPLC Rt = 1,738 min.
241/543
Figure BRPI0918174A2_D0137
F
6-Amino-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(3-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-6-nitro-5-(3-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida (83,3 mg, 0,152 mmol) sob N2 em temperatura ambiente foi dissolvida em DMF (2 ml) e então adicionado acetato de etila (10 mL). A mistura permaneceu como uma solução marrom-clara transparente. À mistura foi adicionado paládio (97 mg, 0,045 mmo, 5%/C), recebeu fluxo com H2 usando um balão e a mistura agitada sob H2 por cerca de 8 h. A mistura foi diluída com EtOAc e filtrada em um disco Whatman PTFE 45 uM. O filtrado foi evaporado. O resíduo foi triturado com 3x1 ml de Et2O (a solução de Et2O foi removida usando uma pipeta), e o produto sólido laranja claro secou (64,4 mg, 82%). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 9,26 (s, 1H), 8,32 (q, J = 4,17, 1H), 7,94-7,89 (m de sobreposição, 3H), 7,97 (s, 1H), 7,62 (d, J= 6,8, 1H), 7,58 (q, 1H), 7,34 (t, J = 8,70, 2H), 7,29 (t, 1H), 7,28 (d, 4 = 7,50, 1H), 7,23 (s, 2H), 7,227 (d, J= 8,00, 1H), 7,17 (t, 4= 7,17, 1H,), 6,99 (s, 1H), 5,09 (s, 2H), 2,79 (aparecia como d, 4= 3,97, 3H), 1,29 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 520,39, HPLC Rt = 1.497 min.
Figure BRPI0918174A2_D0138
2-(4-Fluorfenil)-6-(2-metoxiacetamido)-N-metil-5-(3-(1242/543 fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de ácido 2-metoxiacético (10,40 mg, 0,115 mmol) em THF (3 mL) em r.t. sob N2 foi adicionado 1,1’-carbonildi-imidazol (CDI) (28,1 mg, 0,173 mmol). A mistura foi agitada a 55° C por 1 h. A mistura foi então transferida para um frasco contendo 6-amino-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5(3-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida (30 mg, 0,058 mmol) em r.t. sob N2. 1,8-Diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (DBU) (0,035 mL, 0,231 mmol) foi então adicionado e a mistura foi agitada a 55° C por 2 h 35 min. A mistura foi então deixada descansar em r.t da noite para o dia. A mistura foi novamente agitada a 55° C por 3 h. A mistura foi resfriada para r.t., diluída com MeOH e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%- H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,28 - 7,84 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 9,29 (s, 1H), 9,04 (s, 1H), 8,49 (q, J = 4,58, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,03-8,00 (m de sobreposição, 3H), 7,98 (m, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,625 (d, J = 2,44, 1H), 7,40 (t, J = 9,00, 2H), 7,28 (t aparente, 4= 7,63, 2H,), 7,23 (d aparente, 2H,), 7,17 (t, 4 = 7,17, 1H,), 3,90 (s, 2H), 3,18 (s, 3H), 2,83 (aparecia como d, 4 = 4,58, 3H), 1,28 (s, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%- H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 592,49, HPLC Rt = 1.652 min.
NHBoc
HO
Ácido
Ácido 3-(terc-butoxicarbonilamino)-5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico
243/543
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%- H2O a 90% -TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M - Me2CCH2 + H)+ = 449,35, HPLC Rt = 1,808 min.
NHBoc
3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-5 (isobutilcarbamoil)fenilcarbamato de terc-butila
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 70, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,13 - 7,93 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6)) δ 9,57 (s, 1H), 8,55 (dt, J = 10,38, 5,19, 1H), 8,50 (s amplo, 1H), 8,01-7,98 (m, 3H), 7,89 (s, 1H), 7,86-7,85 (m, 1H), 7,81 (d aparente, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,70 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,41 (t aparente, J = 8,85, 2H), 3,11 (t, J = 6,41, 2H), 2,87 (aparecia como d, J = 4,58, 3H), 1,88 (ddd, J = 13,50, 6,64, 6,41, 1H), 1,55 (s) e 1,51 (s) (9H), 0,92 (d, J = 6,50, maior) e 0,91 (d, J = 6,50, menor) (6H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%- H2O a 10% -TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 560,40, HPLC Rt = 1.898 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%244/543
TFA a 0,1%, Solvente Β = MeCN a 95% -H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 70, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,77 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 3,70 min.
HN
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)fenil)-N-metil-6 nitrobenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,89 - 8,57 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,59 (m, 2H), 8,54 (s, 1H), 8,05 (m, 2H), 7,93 (d, J = 7,63, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,57 (t aparente, J = 7,63, 1H), 7,54 (t aparente, 1H), 7,46 (t aparente, J = 8,85, 2H), 3,11 (t, J = 6,41, 2H), 2,84 (aparecia como d, J = 4,58, 3H), 1,87 (m, 1H), 0,91 (d, J = 6,71, 6H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 490,41, HPLC Rt = 1,693 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 70, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,09 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,38 min.
245/543
Figure BRPI0918174A2_D0139
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10% -TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,92 - 9,62 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,97 (dd, J = 8,85, 5,49, 2H), 7,79 (m, 2H), 7,65-7,64 (d se sobrepondo a s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,42 (m, 1H), 7,37 (dd, J = 8,24, 1,83, 1H), 7,29-7,26 (m de sobreposição, 6H), 7,16 (m, 1H), 2,95 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 1,36-1,33 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%- H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 519,40, HPLC Rt = 1.832 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%- H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,93 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,64 min.
Figure BRPI0918174A2_D0140
5-(3-Flúor-5-(propilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
246/543
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%- H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%- H2O a 10% -TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,32 - 8,96 min. (Detecção por UV a 220 nmj. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,00-7,97 (m de sobreposição, 4H), 7,74-7,69 (m de sobreposição, 2H), 7,65-7,62 (m, 1H), 7,58-7,55 (m, 1H), 7,29 (t, J = 8,70, 2H), 3,39 (t, J = 7,00, 2H), 3,00 (s, 3H), 1,69 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,48, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 449,40, HPLC Rt = 1,752 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,08 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,87 min.
Figure BRPI0918174A2_D0141
5-(3-(ferc-Butilcarbamoil)-4-fluorfenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100
247/543 mm S5, Coleta da Fração: 8,48 - 9,02 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,97-7,94 (m de sobreposição, 2H), 7,90 (dd, J = 6,87, 2,59, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,78 (ddd, J = 8,47, 4,65, 2,44, 1H), 7,64 (m, 2H), 7,30-7,25 (m de sobreposição, 3H), 2,99 (s, 3H), 1,50 (2, 9H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 463,36, HPLC Rt = 1.788 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,97 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,81 min.
NH
5-(3-Amino-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Obtida como um sal de cloridrato a partir da proteção de 3-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-5(isobutilcarbamoil)fenilcarbamato ferc-butila usando HCI a 4 M em 1,4dioxana (r.t.). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,26 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,97 (dd, J = 7,63, 5,49, 2H), 7,87 (s, 2H), 7,75 (s, 2H), 7,30 (t, J = 8,39, 2H), 3,28 (d, J = 7,02, 2H), 2,99 (s, 3H), 2,00 (m, 1H), 1,02 (d, J = 6,71,6H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada
248/543 = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 460,42, HPLC Rt = 1,510 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,96 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,23 min.
H íY y no./^A/kA /—\
Y T Y l?—\ y— f
O OMe X^A-O7 \=/
Ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2metoxibenzoico
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,02 - 7,76 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,00-7,97 (m de sobreposição, 2H), 7,84 (d, J = 1,53, 1H), 7,81 (dd, J = 7,63, 1,83, 1H), 7,67 (d, J = 8,50, 1H), 7,63-7,60 (m de sobreposição, 2H), 7,32-7,26 (m de sobreposição, 3H), 3,50 (s, 3H), 2,97 (s, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%>-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 420,27, HPLC Rt = 1.623 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%249/543
H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,08 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 4,83 min.
o OMe \__/
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-metóxi-3-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,65 - 9,45 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,99-7,96 (m de sobreposição, 2H), 7,87 (d, J = 1,83, 1H), 7,69-7,63 (m de sobreposição, 3H), 7,57 (dd, J =7,48, 1,68, 1H), 7,40 (d, J= 7,63, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,34-7,27 (m de sobreposição, 5H), 7,20 (t, J= 7,17, 1H), 3,41 (s, 3H), 2,97 (s, 3H), 1,40-1,37 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 535,45, HPLC Rt = 1.833 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,93 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,75 min.
250/543
Figure BRPI0918174A2_D0142
5-(2-Cloro-5-(1-(2-clorofenil)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 80, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 5,53 - 6,33 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,99-7,96 (m de sobreposição, 2H), 7,84 (d, J = 2,14, 1H), 7,79 (dd, J= 7,17, 1,98, 1H), 7,74 (dd, J= 8,39, 2,29, 1H), 7,72 (d, J = 1,53, 1H), 7,65 (d, J = 8,55, 1H), 7,58 (d, J = 8,54, 1H), 7,45 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,37 (dd, J = 7,25, 1,75, 1H), 7,30-7,23 (m de sobreposição, 4H), 2,95 (s, 3H), 1,34-1,24 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 573,38, HPLC Rt = 1.945 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN 95%-H2O 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 12,00 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,98 min.
Figure BRPI0918174A2_D0143
5-(2-Cloro-5-(3-fenilpentan-3-ilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N
251/543 metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 80, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,08 - 6,89 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,00-7,97 (m de sobreposição, 2H), 7,87 (d, J = 2,14, 1H), 7,80 (dd, J = 8,24, 2,14, 1H), 7,76 (d, J = 1,53, 1H), 7,68 (d, J = 8,54, 1H), 7,64 (d, J = 8,00, 1H), 7,50 (dd, J = 8,55, 1,53, 1H), 7,42 (d, J = 7,32, 2H), 7,34-7,27 (m de sobreposição, 4H), 7,20 (d, J= 7,32, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,35 (m, 2H), 2,08 (m, 2H), 0,80 (t, J = 7,32, 6H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 569,47, HPLC Rt = 1.972 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 13,37 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 10,24 min.
Figure BRPI0918174A2_D0144
6-Acetamido-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(3-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Preparado a partir de 6-amino-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(3-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida de uma maneira
252/543 similar à descrita. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 9,34 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,48 (m, 1H), 8,03-8,00 (m de sobreposição, 3H), 7,93 (m, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,58-7,56 (m de sobreposição, 3H), 7,40 (t, J = 8,85, 2H), 7,30-7,27 (m de sobreposição, 2H), 7,23-7,21 (m de sobreposição, 2H), 7,17 (t, J= 7,32, 1H), 2,83 (aparecia como d, J = 4,58, 3H), 1,92 (s, 3H), 1,29 (aparecia como s, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 562,42, HPLC Rt = 1.547 min.
HN
6-Amino-2-(4-fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)fenil)-N metilbenzofuran-3-carboxamida
Obtido a partir da redução de 2-(4-fluorfenil)-5-(3(isobutilcarbamoil)fenil)-N-metil-6-nitrobenzofuran-3-carboxamida usando H2 com Pd/C a 5% como catalisador (1:6 DMF/EtOAc, r.t.) de uma maneira similar à descrita. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,54 (t, J = 5,95, 1H), 8,33 (q, J = 4,58, 1H), 7,94-7,91 (m de sobreposição, 3H), 7,85 (d, J = 7,32, 1H), 7,61-7,55 (m de sobreposição, 2H), 7,34 (t, J = 8,70, 2H), 7,23 (s, 1H), 6,99 (s, 1H), 5,05 (s, 2H), 3,11 (d, J = 7,02, 2H), 2,80-2,79 (aparecia como d, 3H), 1,87 (m, 1H), 0,91 (d, J = 6,71,6H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Finai B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 460,38, HPLC Rt = 1.407 min.
253/543
Figure BRPI0918174A2_D0145
5-(2-Flúor-5-(1 -fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetil-6-nitrobenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 9,33 (s, 1H), 8,64 (s, 2H), 8,12 (dd, J = 7,32, 2,14, 1H), 8,08-8,05 (m de sobreposição, 3H), 7,83 (s, 1H), 7,47 (t, J = 8,85, 2H), 7,42 (t, J = 9,30, 1H), 7,31-7,28 (m de sobreposição, 2H), 7,25-7,23 (m de sobreposição, 2H), 7,17 (t, J= 7,17, 1H), 2,84 (aparecia como d, J = 4,58, 3H), 1,31-1,28 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 568,39, HPLC Rt = 1,768 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,28 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,82 min.
Figure BRPI0918174A2_D0146
Figure BRPI0918174A2_D0147
6-Amino-5-(2-flúor-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Obtido a partir da redução de 5-(2-flúor-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metil-6-nitrobenzofuran-3carboxamida usando H2 com Pd/C a 5% como catalisador (1:5 DMF/EtOAc, r.t.) de uma maneira similar à descrita. LC/MS foi realizada usando instru
254/543 mento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 538,41, HPLC Rt = 1.510 min.
Figure BRPI0918174A2_D0148
6-Amino-5-(2-flúor-5-(1-fenilpropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Obtida como um subproduto a partir da redução em excesso de 5-(2-flúor-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metil-6nitrobenzofuran-3-carboxamida sob as condições usando H2 com Pd/C a 5% como catalisador (1:5 DMF/EtOAc, r.t.). O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,52 - 7,08 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, 1H), 7,93-7,91 (m de sobreposição, 3H), 7,51 (s, 1H), 7,40-7,38 (m de sobreposição, 2H), 7,34 (d, 4= 7,60, 1H), 7,33 (t, 4 = 7,78, 2H), 7,27-7,23 (m de sobreposição, 4H), 4,99 (t, 4 = 7,48, 1H), 2,92 (s, 3H), 1,94 (m, 2H), 0,99 (t, 4 = 7,32, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 540,45, HPLC Rt = 1.587 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e
255/543
254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 urn, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,56 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,42 min.
Figure BRPI0918174A2_D0149
5-(2-Flúor-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetil-6-(metilsulfonamido)benzofuran-3-carboxamida
Preparada a partir do acoplamento entre 6-amino-5-(2-flúor-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida e cloreto de metanossulfonila (/V,/V-di-isopropiletilamina, ClCH2CH2CI, r.t.), seguido por hidrólise do intermediário N(metilsulfonil)metanossulfonamida (Cs2CO3, 1:5 H2O/1,4-dioxana, 90 °C). Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,70 - 7,25 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,00-7,95 (m de sobreposição, 4H), 7,83 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,35 (t, J = 9,00, 1H), 7,30-7,27 (m de sobreposição, 6H), 7,18 (m, 1H), 2,94 (s, 3H), 2,88 (s, 3H), 1,37-1,35 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 616,48, HPLC Rt = 1.563 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm
256/543 e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,57 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,80 min.
Figure BRPI0918174A2_D0150
5-(2-Flúor-5-(1-fenilpropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metil6-(metilsulfonamido)benzofuran-3-carboxamida
Preparada de uma maneira similar a 5-(2-flúor-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metil-6(metilsulfonamido)benzofuran-3-carboxamida. Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,35 - 7,81 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,00-7,93 (m de sobreposição, 4H), 7,83 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,41 (d se sobrepondo com, J = 8,00, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,35-7,32 (m de sobreposição, 3H), 7,29 (t, J = 8,10, 2H), 7,25 (t, J = 7,93, 1H), 4,99 (t, J = 7,48, 1H), 2,94 (s, 3H), 2,89 (s, 3H), 1,94 (m, 2H), 1,00 (t, 7= 7,17, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 618,48, HPLC Rt = 1.637 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%
257/543
TFA a 0,1%, Solvente Β = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 urn, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,76 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 urn, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,37 min.
Figure BRPI0918174A2_D0151
2-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-iloxi)acetato de metila
A um frasco de fundo redondo de 50 mL foram adicionados 2-(4fluorfenil)-5-hidróxi-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (285 mg, 1 mmol), carbonato de potássio (207 mg, 1.500 mmol) e bromoacetato de metila (0,101 ml, 1,1 mmol) em DMF (3 mL) para dar uma suspensão amarela. A mistura foi agitada em temperatura ambiente sob nitrogênio da noite para o dia. O produto bruto foi diluído com 100 mL de diclorometano, lavado com água, então salmoura e seco em sulfato de magnésio. O resíduo foi purificado usando um Biotage® Horizon empregando um gradiente de 0 a 30% de metanol em diclorometano e uma coluna de sílica-gel 40+M. O produto foi então triturado com acetato de etila frio para dar um rendimento de produto de 73% (259 mg), um sólido amorfo branco após secagem sob vácuo.
Os dados de LC/MS foram obtidos em um LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® 10pm C18, 4,6 x 30mm com um gradiente de Β 0-100%> (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau metanol), em 2 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 5 mL/minuto. Os espectros de RMN foram registrados em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX300. Mudanças químicas foram relatadas em ppm com relação ao solvente deuterado usado. Constantes de acoplamento foram relatadas em hertz. Multiplicidade de pico foi relatada usando as abreviações que seguem: s (singleto), d (dupleto), dd (dupleto de dupletos), t (tripleto), m
258/543 (multipleto), br (amplo). 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ ppm 2,93 (s, 3 H), 3,79 (s, 3 H), 4,75 (s, 2 H), 7,01 (dd, J= 8,97, 2,38 Hz, 1 H), 7,15 (d, J = 2,38 Hz, 1 H), 7,22 (t, J = 8,78 Hz, 2 H), 7,46 (d, J = 8,97 Hz, 1 H), 7,88 (m, 2 H). LCMS m/z 358,27 (M+H), /7/1,553 min, 97,4% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0152
Ácido 2-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5iloxi)acético
A um frasco de fundo redondo de 50 mL foram adicionados 2-(2(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofurano-5-iloxi)acetato de metila (132,3 mg, 0,370 mmol) e 2 equivalentes de trimetilsilanolato de potássio (95 mg, 0,740 mmol) junto com uma solução 1:1 de tetra-hidrofurano/diclorometano (10 ml) para dar uma mistura heterogênea amarela. A mistura foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. O produto bruto foi então resfriado para 0o C, diluído mais com diclorometano e acidificado com HCI a 1N. O produto foi extraído, lavado com água, então salmoura e seco em sulfato de magnésio. Após evaporação do solvente, o produto foi triturado com hexano para dar um rendimento de 91% (115 mg), um sólido amorfo branco após secagem sob vácuo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® 10pm C18, 4,6 x 30mm, com um gradiente de B 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau metanol), em 2 minutos com retenção em 1 minuto em uma taxa de 5 mL/minuto. Os espectros de RMN foram registrados em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX300. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,82 (d, J = 4,39 Hz, 3 H), 4,72 (s, 2 H), 7,00 (dd, J = 8,78, 2,56 Hz, 1 H), 7,08 (d, J = 2,56 Hz, 1 H), 7,35 (t, J = 8,97 Hz, 2 H), 7,57 (d, J = 8,78 Hz, 1 H), 7,92 (dd, J = 8,78, 5,49 Hz, 2 H), 8,34 (m,1 H). LCMS m/z 344,27 (M+H), Rt 1,450 min, 96,0% de pureza.
259/543
Figure BRPI0918174A2_D0153
Ácido 2-cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico
A um tubo de 250 mL foram adicionados trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (3,55 g, 8,5 mmols), dioxana (50 mL), água (10 mL), tetracis(trifenilfosflno)paládio(0) (0,196 g, 0,170 mmol), ácido 5-borono-2-clorobenzoico (2,55 g, 12,75 mmols) e carbonato de césio (4,15 g, 12,75 mmols). O tubo foi vedado e aquecido em um banho de óleo da noite para o dia a 85° C. A mistura de reação foi então esfriada, diluída com 300 mL de HCI a 0,5M frio e agitada por 30 minutos. O sólido resultante foi lavado com HCI a 0,5N, então com água e deixado secar sob vácuo dando um rendimento quantitativo de ácido 2-cloro-5-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico que foi usado sem purificação adicional. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (Β = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. LCMS m/z 424,77 (M+H), Rt 2,150 min, 90% de pureza.
Cl
Figure BRPI0918174A2_D0154
Ácido 3-cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico
A um frasco de 250mL vedado foram adicionados trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (3,55 g, 8,5 mmols), dioxana (50 mL), água (10 mL), Tetracis(trifenilfosfino)paládio(0) (0,196 g, 0,170 mmol), ácido 5-borono-3-clorobenzoico (2,55 g, 12,75
260/543 mmols) e carbonato de césio (4,15 g, 12,75 mmols). O tubo foi vedado e aquecido em um banho de óleo da noite para o dia a 85 °C. A mistura de reação foi então esfriada, diluída com 300mL de HCI a 0,5M frio e agitada por 30 minutos. O sólido resultante foi lavado com HCI a 0,5 N, então com água e deixado secar sob vácuo dando um rendimento quantitativo de ácido 3Cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico que foi usado sem purificação adicional. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% I HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. LCMS m/z 424,09 (M+H), Rf 2,658 min, 88% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0155
Ácido 4-cloro-3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico
A um frasco de 250mL vedado foram adicionados trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (3,55 g, 8,5 mmols), dioxana (50 mL), água (10 mL), Tetracis(trifenilfosfino)paládio(0) (0,196 g, 0,170 mmol), 3-borono-4-clorobenzoico ácido (2,55 g, 12,75 mmols) e carbonato de césio (4,15 g, 12,75 mmols). O tubo foi vedado e aquecido em um banho de óleo da noite para o dia a 85 °C. A mistura de reação foi então esfriada, diluída com 300mL de HCI a 0,5M frio e agitada por 30 minutos. O sólido resultante foi lavado com HCI a 0,5 N, então com água e deixado secar sob vácuo dando um rendimento quantitativo de ácido 4Cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico que foi usado sem purificação adicional. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x
261/543
50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1% I HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando um LC analítica Shimadzu a 220 nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10 mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (500 MHz, DMF-d7) δ ppm 2,95 (d, J = 4,58 Hz, 3 H), 7,39 - 7,47 (m, 2 H), 7,57 (dd, J = 8,55, 1,83 Hz, 1 H), 7,81 (dd, J = 15,72, 8,39 Hz, 2 H), 7,87 (d, J = 1,83 Hz, 1 H), 8,04 - 8,14 (m, 4 H), 8,40 (d, J = 4,58 Hz, 1 H). LCMS m/z 424,90 (M+H), Rt 2,287 min. HPLC Rt 9,749min. (Sunfire C18) e 10.518min. (XBridge fenila C18), 94% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0156
5-(4-Cloro-3-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um RBF de 250 mL foram adicionados ácido 2-cloro-5-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (3,62 g, 8,55 mmols), 2-metilpropan-1 -amina (1,274 mL, 12,83 mmols), /V-etil-/V,/V-diisopropilamina (2,98 mL, 17,10 mmols) e 3 eq. de HATU, hexafluorfosfato(V)
262/543 de (2-(3H-[1,2,3]triazol[4l5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisourônio (9,75 g, 25,7 mmols)) junto com 114ml_ de DMF. A mistura foi agitada da noite para ο dia em temperatura ambiente. A mistura de reação bruta foi transferida para um funil de separação, diluída com 300 mL de diclorometano e lavada com
100mL de HCI a 1N, água e salmoura. Após secagem em sulfato de magnésio, o resíduo bruto foi passado por um tampão de sílica-gel e evaporado para um sólido castanho. O sólido foi triturado com dietil éter, então acetonitrila fria para dar um rendimento de 48% de 5-(4-cloro-3-(isobutilcarbamoil) fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida, como um pó amarelo claro. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX500. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1 %/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando um LC analítica Shimadzu a 220 nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm
4,6 x 150mm água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a
95% de grau água / bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (500 MHz, acetona-d6) δ ppm 1,02 (d, J=6,71 Hz, 6
263/543
Η), 1,92 - 2,01 (m, 1 Η), 2,99 (d, J = 4,88 Hz, 3 H), 3,28 (t, J = 6,41 Hz, 2 H), 7,33 (t, J = 8,70 Hz, 2 H), 7,56 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 7,61 (s amplo, 1 H), 7,66 (s amplo, 1 H), 7,68 - 7,74 (m, 2 H), 7,74 - 7,82 (m, 2 H), 8,01 - 8,06 (m, 1 H), 8,13 (dd, J=8,70, 5,34 Hz, 2 H). LCMS m/z 479,06 (M+H), Rt 2,367 min. HPLC Rt 10,263min. (Sunfire C18) e 11,753min. (XBridge fenila C18), 93% de pureza.
5-(4-Cloro-3-(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de 2 dram foi adicionado ácido 2-cloro-5-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (42,4 mg, 0,1 mmol) em DMF (2 mL) junto com cumilamina (0,029 mL, 0,200 mmol), N,N-diisopropiletilamina (0,035 mL, 0,200 mmol) e HATU (114 mg, 0,300 mmol) para dar uma solução amarela. O frasco foi agitado em temperatura ambiente da noite para o dia. A mistura de reação bruta foi então evacuada até quase secar, absorvida em 2 mL de metanol e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando metanol/água/TFA a 0,1% onde o solvente A era MeOH a 10% / H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era H2O a 10%/ MeOH a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10pm C18 30x100mm em um gradiente de B 30-100% e a taxa de fluxo de 40 mL/min durante 10 minutos com uma retenção de 10 minutos. Os tubos contendo produto purificado foram evaporados da noite para o dia em um Savant/Termo SPEEDVAC® para dar um rendimento de 45% de 5-(4-cloro-3-(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida como um pó branco. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX300. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido
264/543 trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando um LC analítica Shimadzu a 220 nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna de LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (300 MHz, clorofórmio-d) δ ppm 1,87 (s, 6 H), 3,02 (d, J = 4,76 Hz, 3 H), 6,03 (d, J = 4,76 Hz, 1 H), 6,62 (s, 1 H), 7,13 - 7,23 (m, 2 H), 7,24 - 7,31 (m, 1 H), 7,33 - 7,42 (m, 2 H), 7,45 (d, J = 8,42 Hz, 1 H), 7,48 - 7,63 (m, 5 H), 7,83 8,00 (m, 4 H). LCMS m/z 542,90 (M+H), Rt 2.608 min. HPLC Rt 11,069min. (Sunfire C18) e 12,111 min. (XBridge fenila C18), 97,8% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0157
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)bifenil-4il)benzofuran-3-carboxamida
A um frasco de micro-ondas de 2 mL foram adicionados dioxana (2 mL), água (0,200 mL), (S-Phos) diciclo-hexil (2',6'-dimetoxibifenil-2il)fosfina, (1,912 mg, 4,66 pmols), 5-(4-cloro-3-(2-fenilpropan-2ilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (0,0126 g, 0,023 mmol), fosfato de potássio tribásico (0,020 g, 0,093 mmol), acetato de
265/543 paládio(ll) (1,046 mg, 4,66 pmols) e ácido fenilborônico (8,52 mg, 0,070 mmol). O frasco foi tampado, desgaseificado, recebeu fluxo de N2 e aquecido no micro-ondas por 10 minutos a 150° C. O produto bruto foi absorvido em solução 1:1 de DMF/acetonitrila e purificado através de uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/TFA a 0,1%/água onde solvente A era acetonitrila a 10%/ H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era H2O a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters-Atlantis OBD 19 x 100mm 5pm em um gradiente de B a 50-100% e a taxa de Fluxo de 25 mL/min. durante 10 minutos com uma retenção de 10 minutos. O produto purificado foi evaporado até secar da noite para o dia em um Savant Termo SPEEDVAC® para dar um rendimento de 73% de 2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(2-(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)bifenil-4-il) benzofuran-3-carboxamida. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1% I HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 220 nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC
266/543 a 95% de grau água / bicarbonate de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 1,54 (s, 6 H), 3,01 (s, 3 H), 7,15 - 7,20 (m, 1 H), 7,21 - 7,33 (m, 6 H), 7,43 - 7,50 (m, 3 H), 7,51 - 7,55 (m, 3 H), 7,69 - 7,72 (m, 1 H), 7,72 - 7,76 (m, 1 H), 7,80 (d, J = 1,53 Hz, 1 H), 7,84 (dd, J = 7,93, 1,83 Hz, 1 H), 7,96 - 8,02 (m, 3 H), 8,10 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 583,03 (M+H), Rt 2,811 min. HPLC Rt 11,683min. (Sunfire C18) e 12,609min. (XBridge fenila C18), 99% de pureza.
ci
Figure BRPI0918174A2_D0158
5-(3-Cloro-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de fundo redondo de 250mL foram adicionados ácido 3-cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (3,62 g, 8,55 mmols), 2-metilpropan-1-amina (1,274 mL, 12,83 mmols), AZ-etil-A/, ΛΛdi-isopropilamina (2,98 mL, 17,10 mmols) e 3 eq. de HATU, hexafluorfosfato de (2-(3H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisourônio (V), (9,75 g, 25,7 mmols)) junto com 114mL de DMF. A mistura foi agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. A mistura de reação foi transferida para um funil de separação, diluída com 300 mL de diclorometano e lavada com 100 mL de HCI a 1N, água e salmoura. Após secar em sulfato de magnésio, o resíduo bruto foi passado por um tampão de sílica-gel e evaporado para um sólido castanho. O sólido foi triturado com dietil éter, então acetonitrila fria para dar um rendimento de 52% de 5-(4-cloro-3-(isobutilcarbamoil) fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida, como um pó amarelo claro. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX500. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A
267/543 = HPLC a 90% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando um LC analítica Shimadzu a 220 nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutes com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de mL/minuto. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,94 (d, J = 6,41 Hz, 6 H), 1,72 -1,97 (m, 1 H), 2,87 (d, J = 4,58 Hz, 3 H), 3,10 (t, J = 6,26 Hz, 2 H), 7,40 (t, J = 8,85 Hz, 2 H), 7,59 (d, J = 8,55 Hz, 1 H), 7,69 - 7,75 (m, 2 H), 7,76 - 7,82 (m, 2 H), 7,90 (s amplo, 1 H), 7,97 - 8,07 (m, 2 H), 8,55 (s amplo,
H). LCMS m/z 479,04 (M+H), Rt 2,658 min. HPLC Rt 10,810min. (Sunfire C18) e 12,154min. (XBridge fenila C18), 92% de pureza.
HO.
Ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4metoxibenzoico
A um tubo vedado de 150mL foram adicionados trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (1,252 g, 3 mmols), ácido 3-borono-4-metoxibenzoico (0,882 g, 4,50 mmols), carbonato de césio (1,466 g, 4,50 mmols), tetracis(trifenil fosfino)paládio(O) (0,069 g, 0,060 mmol), dioxana (18 mL) e água (3,60 mL). O frasco foi vedado e a268/543 quecido em um banho de óleo da noite para o dia a 85° C. A mistura de reação foi então filtrada em CELITE® e concentrada a vácuo. HCI 0,5N frio foi então adicionado e a mistura heterogênea foi agitada por 30 minutos. O produto resultante, um sólido branco, foi filtrado, lavado com água e seco da noite para o dia para dar um rendimento quantitativo de ácido 3-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metoxi benzoico que foi usado sem purificação adicional. LCMS m/z 420,88 (M+H), Rt 2.002 min, 88% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0159
Ácido 5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2metoxibenzoico
A um tubo vedado de 150mL foram adicionados trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (1,252 g, 3 rnmols), ácido 5-borono-2-metoxibenzoico (0,882 g, 4,50 rnmols), carbonato de césio (1,466 g, 4,50 rnmols), tetracis(trifenil fosfino)paládio(O) (0,069 g, 0,060 mmol), dioxana (18 mL) e água (3,60 mL). O frasco foi vedado e aquecido em um banho de óleo da noite para o dia a 85° C. A mistura de reação foi filtrada em CELITE® e concentrada a vácuo. HCI frio a 0,5N foi então adicionado e a mistura heterogênea foi agitada por 30 minutos. O produto resultante, um sólido branco, foi filtrado, lavado com água e seco da noite para o dia para dar um rendimento quantitativo de ácido 5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metoxi benzoico que foi usado sem purificação adicional. LCMS m/z 420,92 (M+H), Rt 2.003 min, 87% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0160
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-metoxifenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco contendo ácido (5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metoxibenzoico (378,5 mg, 0,902 mmol))
269/543 foram adicionados DMF (5 mL), /V,-etil-/V,/V-di-isopropilamina (0,786 mL, 4,51 mmols), 2-metilpropan-1-amina (0,448 mL, 4,51 mmols), e HATU, hexafluorfosfato de (2-(3H-[1,2,3]triazol[4,5-b]pirid i n-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisourônio (V) (1029 mg, 2,71 mmols)). O frasco foi tampado e a solução agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. O produto bruto foi diluído com acetato de etila, lavado com HCI a 0,5M e extraído. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca em sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. A mistura de reação bruta foi absorvida em acetonitrila, filtrada e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA onde solvente A era acetonitrila a 10%/ H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era H2O a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma PHENOMENEX® Luna 10pm C18 30x1 OOmm em um gradiente de B a 40-100% e a taxa de Fluxo de 25 mL/min durante 10 minutos com uma retenção de 10 minutos.O produto purificado foi concentrado a vácuo para dar 38% de rendimento de 2-(4-fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4metoxifenil)-N-metilbenzo-furan-3-carboxamida como um sólido branco. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX500. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando um LC analítica Shimadzu a 220 nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna
270/543
LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (500 MHz, acetona-de) δ ppm 1,00 (d, J= 6,41 Hz, 6 H), 1,92 -1,96 (m, 1 H), 3,01 (d, J = 4,27 Hz, 3 H), 3,30 (t, J = 6,26 Hz, 2 H), 4,09 (s, 3 H), 7,23 - 7,39 (m, 3 H), 7,61 (s amplo, 1 H), 7,69 (s, 2 H), 7,84 (dd, J = 8,39, 1,98 Hz, 1 H), 7,99 (s, 1 H), 8,13 (dd, J = 7,93, 5,49 Hz, 3 H), 8,39 (d, J = 2,14 Hz, 1 H). LCMS m/z 475,15 (M+H), Rt 2,452 min. HPLC Rt 10,648min. (Sunfire C18) e 12,301min. (XBridge fenila C18), 100% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-metóxi-3-(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)N-metilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco contendo ácido (5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metoxibenzoico (61 mg, 0,145 mmol)) foram adicionados DMF (2 mL), /V,-etil-/V,A/-di-isopropilamina (0,050 mL, 0,29 mmol), cumilamina (39,3mg, 0,291 mmol) e finalmente TBTU, tetrafluorborato de o-benzotriazol-1-il-A/,A/,A/',/V-tetrametilurônio (140 mg, 0,436 mmol)). O frasco foi tampado e a solução agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. O produto bruto foi diluído com acetato de etila, lavado com HCI a 1M e extraído. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca em sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. A mistura de reação bruta foi absorvida em acetonitrila, filtrada e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA onde o solvente A era acetonitrila a 10% / H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era H2O a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma PHENOMENEX® Luna 10pm C18 30x1 OOrnm em um gradiente de B a 40-100% e a taxa de fluxo de 25 mL/min durante 10 minutos com retenção de 10 minutos. O produto puri
271/543 ficado foi concentrado a vácuo para dar um rendimento de 42% de 2-(4fluorfenil)-5-(4-metóxi-3-(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran3-carboxamida como um sólido branco. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX500. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 220 nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 1,69 - 1,88 (m, 6 H), 2,99 (s, 3 H), 4,09 (s, 3 H), 7,20 - 7,32 (m, 4 H), 7,36 (t, J = 7,63 Hz, 2 H), 7,52 (d, J = 8,24 Hz, 2 H), 7,57 - 7,64 (m, 2 H), 7,79 - 7,89 (m, 2 H), 7,96 (t, J = 6,10 Hz, 2 H), 8,12 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 537,13 (M+H), Rt 2,705 min. HPLC Rt 11,563min. (Sunfire C18) e 12,876min. (XBridge fenila C18), 93% de pureza.
272/543
Figure BRPI0918174A2_D0161
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-metoxifenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de fundo redondo de 100mL foram adicionados ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metoxibenzoico (1258 mg, 3 mmols), DMF (40mL), 2-metilpropan-1 -amina (447 pL, 4,50 mmols), /V-etil-/V,/V-di-isopropilamina (1,1 mL, 6,00 mmols), e finalmente HATU, hexafluorfosfatode (2-(3H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3tetrametilisourônio (V) (3422 mg, 9,00 mmols)). A mistura foi agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. O produto bruto foi diluído com acetato de etila, lavado com HCI a 1M e extraído. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca em sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. O resíduo foi carregado em coluna BIOTAGE® a 40M e purificado usando uma BIOTAGE® Horizon com 2200mL de metanol a 0-6% em DCM). O produto foi concentrado a vácuo, então triturado com acetonitrila fria para dar um rendimento de 60% de 2-(4-fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-metoxifenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida como um sólido amarelo claro. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX500. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (Β = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 220 nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a
273/543
5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 0,89 -1,07 (m, 6 H), 1,96 (dt, J =13,43, 6,71 Hz, 1 H), 2,97 (s, 3 H), 3,22 (d, J = 6,10 Hz, 2 H), 3,80 - 3,98 (m, 3 H), 7,19 (d, J = 9,46 Hz, 1 H), 7,24 - 7,33 (m, 2 H), 7,52 - 7,57 (m, 1 H), 7,57 - 7,65 (m, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,84 - 7,92 (m, 2 H), 7,96 - 8,02 (m, 2 H), 8,46 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 475,02 (M+H), Rt 2,290 min. HPLC Rt 14.374min. (Sunfire C18) e 15,689min. (XBridge fenila C18), 95% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de 250mL vedado foram adicionados tolueno (150 mL), 2-(4-fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-metoxifenil)-N-metilbenzofuran3-carboxamida (1,187 g, 2,50 mmols) e finalmente, sob uma corrente uniforme de N2, complexo de tribrometo de boro-sulfeto de metila (8,76 g, 28,0 mmolses) foi rapidamente adicionado. O tubo foi vedado e aquecido para 100° C em um banho de óleo por 30 horas. A mistura de reação bruta foi resfriada para temperatura ambiente, filtrada, lavada com hexano úmido, então dietil éter e seca da noite para o dia sob vácuo para dar um rendimento de 96% de um sólido castanho. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX500. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando 0 conjunto de condições que segue: coluna
274/543
Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 220 nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I bicarbonate de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (500 MHz, DMF-dy) δ ppm 0,92 (d, J =
6,71 Hz, 6 H), 1,86 -1,97 (m, 1 H), 2,94 - 2,98 (m, 3 H), 3,17 - 3,23 (m, 2 H), 7,19 (d, J = 8,55 Hz, 1 H), 7,42 (t, J = 9,00 Hz, 2 H), 7,66 - 7,75 (m, 2 H), 7,88 (dd, J = 8,39, 2,29 Hz, 1 H), 8,06 - 8,14 (m, 3 H), 8,37 - 8,46 (m, 2 H). LCMS m/z 461,95 (M+H), Rt 2,033 min. HPLC Rt 8,929min. (Sunfire C18) e 11,454min. (XBridge fenila C18), 96% de pureza.
R I .0
Procedimento geral: A um frasco de 2 dram foram adicionados 2-(4-fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida (46,0 mg, 0,1 mmol), DMF (2 mL) e 1,5 equivalente (0,15mmol) ou de trietil amina ou carbonato de potássio e 1,5 equivalente (0,15mmol) de
275/543 brometo de alquila. Os frascos foram vedados e agitados a 22-70° C em um banho seco. Quando do término da reação, os produtos brutos foram concentrados, diluídos com 2mL de acetonitrila e purificados usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA a 0,1%, onde o solvente A era acetonitrila a 10%/ H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era H2O a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5ym C18 4,6 x 100mm em um gradiente de B a 30-100% e a taxa de fluxo de 40 mL/min durante 8 minutos com retenção de 10 minutos. Os produtos desejados foram evaporados até secar em um Savant SPEEDVAC® da noite para o dia obtendo rendimento de 25-60% do éter desejado como pós brancos.
Figure BRPI0918174A2_D0162
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-isopropoxifenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 1,00 (d, J = 6,71 Hz, 6 H), 1,32 (d, J = 6,10 Hz, 6 H), 1,87 - 2,05 (m, 1 H), 2,98 (s, 3 H), 3,22 (d, J = 7,02 Hz, 2 H), 4,64 - 4,79 (m, 1 H), 7,18 (d, J = 8,55 Hz, 1 H), 7,24 - 7,36 (m, 2 H), 7,57 - 7,67 (m, 2 H), 7,85 (dd, J = 8,55, 2,44 Hz, 1 H), 7,87 (s, 1 H), 7,90 (d, J = 2,44 Hz, 1 H), 7,95 - 8,01 (m, 2 H). LCMS m/z 503,12 (M+H), Rt 2,368 min. HPLC Rt 10,789min. (Sunfire C18) e 12,428min. (XBridge fenila C18), 98,7% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0163
5-(2-(Ciclobutiloxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
276/543 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 0,99 (d, J = 6,41 Hz, 6 H),
1,71 -1,81 (m, 1 H), 1,83 - 1,91 (m, 1 H), 1,92 - 2,00 (m, 1 H), 2,08 - 2,20 (m, 2 H), 2,45 - 2,56 (m, 2 H), 2,99 (s, 3 H), 3,22 (d, J = 6,71 Hz, 2 H), 4,80 4,84 (m, 1 H), 7,01 (d, J = 8,55 Hz, 1 H), 7,28 (t, J = 8,55 Hz, 2 H), 7,58 7,66 (m, 2 H), 7,83 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 7,86 - 7,92 (m, 2 H), 7,96 - 8,03 (m, 2 H). LCMS m/z 515,21 (M+H), Rt 2,613 min. HPLC Rt 11.161min. (Sunfire C18) e 12.693min. (XBridge fenila C18), 97% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0164
5-(2-(Ciclopentiloxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04 (d, J = 6,78 Hz, 6 H), 1,63 - 1,82 (m, 4 H), 1,83 - 2,08 (m, 5 H), 3,02 (s, 3 H), 3,27 (d, J = 7,03 Hz, 2 H), 5,02 (ddd, J = 5,21, 2,89, 2,70 Hz, 1 H), 7,21 (d, J = 8,78 Hz, 1 H), 7,28 - 7,36 (m, 2 H), 7,58 - 7,69 (m, 2 H), 7,88 (dd, J = 8,53, 2,51 Hz, 1 H), 7,91 (d, J = 1,25 Hz, 1 H), 7,95 (d, J = 2,26 Hz, 1 H), 7,99 - 8,06 (m, 2 H). LCMS m/z 529,16 (M+H), Rt 2.685 min. HPLC Rt 12.879min. (XBridge fenila C18), 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0165
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-propoxifenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04 (m, 9 H), 1,75 - 1,90 (m, 2H), 1,93-2,10 (m, 1 H), 3,02 (s, 3 H), 3,27 (d, J = 7,03 Hz, 2 H), 4,11 (t, J = 6,15 Hz, 2 H), 7,21 (d, J = 8,53 Hz, 1 H), 7,32 (t, J = 8,78 Hz, 2 H), 7,59 277/543
7,72 (m, 2 Η), 7,88 - 7,98 (m, 3 Η), 7,98 - 8,08 (m, 2 H). LCMS m/z 503,14 (M+H), Rt 2,548 min. HPLC Rt 12,554min. (XBridge fenila C18), 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0166
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(isopentiloxi)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,93 -1,01 (m, 6 H), 1,04 (d, J = 6,78 Hz, 6 H), 1,69 (q, J = 6,53 Hz, 2 H), 1,83 (ddd, J = 13,61, 6,71, 6,53 Hz, 1 H), 2,01 (dt, J = 13,74, 6,81 Hz, 1 H), 3,03 (s, 3 H), 3,27 (d, J = 7,03 Hz, 2 H), 4,18 (t, J = 6,27 Hz, 2 H), 7,22 (d, J = 8,78 Hz, 1 H), 7,28 - 7,39 (m, 2 H), 7,56 - 7,72 (m, 2 H), 7,86 - 7,98 (m, 3 H), 7,99 - 8,09 (m, 2 H). LCMS m/z 531,16 (M+H), Rt 2,791 min. HPLC Rt 13,122min. (XBridge fenila C18), 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0167
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-etoxifenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04 (d, J = 6,53 Hz, 6 H), 1,42 (t, J = 6,78 Hz, 3 H), 1,90 - 2,11 (m, 1 H), 3,02 (s, 3 H), 3,27 (d, J = 7,03 Hz, 2 H), 4,22 (q, J = 6,78 Hz, 2 H), 7,18 - 7,24 (m, 1 H), 7,29 - 7,38 (m, 2 H), 7,64 - 7,67 (m, 2 H), 7,87 - 7,93 (m, 2 H), 7,93 - 7,96 (m, 1 H), 8,00 - 8,08 (m, 2 H). LCMS m/z 489,15 (M+H), Rt 2,432 min. HPLC Rt 10,571 min. (Sunfire C18) e 12,193min. (XBridge fenila C18), 93% de pureza.
278/543
Figure BRPI0918174A2_D0168
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-metóxi-5-(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)N-metilbenzofuran-3-carboxamida
A um RBF de 50 mL foram adicionados ácido 3-(2-(4-fluorfenil)3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metoxibenzoico (433,9 mg, 1,035 mmol), DMF (15 mL), 2-fenilpropan-2-amina (210 mg, 1,552 mmol), N-etil-Nisopropilpropan-2-amina (0,360 mL, 2,069 mmols) e finalmente HATU, hexafluorfosfatode 2-(3H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisourônio (V) (1180 mg, 3,10 mmols)). A mistura foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. A mistura resultante foi diluída com diclorometano, lavada com HCI a 0,5M, então salmoura e seca em MgSO4. A solução foi concentrada para dar um óleo castanho. O produto bruto foi absorvido em 10mL de acetonitrila e purificado usado uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA a 0,1% onde o solvente A era acetonitrila a 10% / H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era H2O a 10%/ acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10pm C18 30 x 100mm em um gradiente de B a 40-100% e a taxa de fluxo de 40 mL/min. Durante 8 minutos com retenção de 12 minutos para dar um rendimento de 80% de produto como um pó branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando um LC analítica Shimadzu a 220 nm e 256nm com uma coluna Wa
279/543 ters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5%> de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutes com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. Todos os espectros de RMN foram registrados em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX400. LCMS m/z 537,18 (M+H), Rt 2,492 min. HPLC Rt 10,694 min. (Sunfire C18), 99,6% pureza e 12.230 min. (XBridge fenila C18), 99,6% de pureza. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,82 (s, 6 H), 3,01 (s, 3 H), 3,94 (s, 3 H), 7,18 - 7,27 (m, 2 H), 7,28 - 7,40 (m, 4 H), 7,50 (d, J= 7,53 Hz, 2 H), 7,57 - 7,67 (m, 2 H), 7,85 (d, J = 1,00 Hz, 1 H), 7,89 - 7,95 (m, 2 H), 7,98 - 8,09 (m, 2 H).
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-metóxi-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um RBF de 50mL foram adicionados ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metoxibenzoico (433,9 mg, 1,035 mmol), DMF (15 mL), 1-fenilciclopropan- amina, HCI (214 mg, 1,259 mmol), N-etil-Nisopropilpropan-2-amina (0,438 mL, 2,52 mmols, e finalmente HATU, hexafluorfosfatode 2-(3H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisourônio
280/543 (V) (1180 mg, 3,10 mmols)). A mistura foi agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. A mistura de reação foi diluída com diclorometano, lavada com HCI a 0,5M, então salmoura e seca em MgSO4. A solução foi concentrada para dar um óleo castanho. O produto foi absorvido em 10mL de acetonitrila e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA a 0,1 % onde o solvente A era acetonitrila a 10% / H2O a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era H2O a 10%/ acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10pm C18 30 x 100mm em um gradiente de B a 40-100% e a taxa de fluxo de 40 mL/min durante 8 minutos com retenção de 12 minutos para dar um rendimento de 77% de produto como um pó branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando um LC analítica Shimadzu a 220 nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. Todos os espectros de RMN foram registrados em
281/543 temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX400. LCMS m/z 535,16 (M+H), Rt 2,373 min. HPLC Rt 10.314 min. (Sunfire C18), 95,78% pureza e 12,230 min. (XBridge fenila C18), 99,6% de pureza. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,40 (dd, J = 7,03, 2,01 Hz, 4 H), 3,01 (s, 3 H), 3,94 (s, 3 H), 7,18 - 7,26 (m, 2 H), 7,28 - 7,38 (m, 6 H), 7,56 - 7,62 (m, 1 H), 7,62 7,67 (m, 1 H), 7,85 (d, J = 1,51 Hz, 1 H), 7,94 - 8,05 (m, 4 H).
Figure BRPI0918174A2_D0169
Procedimento geral: A um frasco de micro-ondas BIOTAGE® (25 mL) foram adicionados 5-(4-cloro-3-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)N-metilbenzofuran-3-carboxamida (0,075 mmol, 1 eq.) em 1,4-Dioxana seca (I mL) junto com o ácido boronico desejado (0,150 mmol, 2 eq.), fosfato de potássio, tribásico (0,300 mmol, 52,3 mg) em água (0,2 mL), diciclohexil(2’,6’-dimetoxifenil-3-il)fosfina (S-Phos) (6,16 mg, 0,015 mmol) e finalmente acetato de paládio(ll) (3,37 mg, 0,015 mmol) em 1,4-dioxana (0,5 mL). O frasco recebeu fluxo de nitrogênio, então tampado e posto em um microondas BIOTAGE® por 10 minutos a 150° C. O solvente foi removido em um Termo/Savant SPEEDVAC® e os produtos brutos foram dissolvidos em DMF (1,8 mL) e purificados através de HPLC preparativa empregando um sistema de HPLC Prep DIONEX® equipado com um detector de ELS (Evaporative Light Scattering ( Difração de Luz Evaporative)). Uma coluna PHENOMENEX® Gemini 5pm C18 21,2 x 250mm foi usada com acetonitrila/HPLC de grau água/acetato de amôino a 20 mM onde o solvente A era HPLC de grau água com acetato de amônio a 20 mM e o solvente B era acetonitrila a 100% em um gradiente de B a 30-95% em 23,5 minutos com retenção de 2,5 minutos a 20 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma Waters ZQ com espectrômetro de massa ESCi com uma coluna SUPELCO® Ascentis 2,7 pm C18 4,6 x 50mm empregando acetonitrila/HPLC de grau água/ácido trifluoracético a 0,1% onde o solvente A era acetonitrila a 5%, HPLC a 95% de grau água com ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era acetonitrila a 95%, HPLC a 5% de grau água com ácido trifluoracético a
282/543
0,1% em um gradiente de 10-95% de B em 8 minutos com retenção de 1 minuto em 2mL/minuto. Os espectros de RMN foram registrados em temperatura ambiente usando um espectrômetro de fluxo Varian 400 MHz. Mudanças químicas foram relatadas em ppm com relação ao solvente de DMSO5 de/CDCb usado.
Figure BRPI0918174A2_D0170
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-(piridin-3-il)fenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 522,19 (M+H), Rt 3,21 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0171
2-(4-Fluorfenil)-5-(3'-(hidroximetil)-2-(isobutilcarbamoil)bifenil-410 il)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,76 (d, J = 6,74 Hz, 6 H), 1,68 (m, 1 H), 2,29 (s, 3 H), 2,81 - 3,00 (m, 4 H), 7,07 - 7,18 (m, 1 H), 7,22 (t, J = 7,47 Hz, 1 H), 7,26 - 7,37 (m, 2 H), 7,39 (s, 1 H), 7,48 (d, J = 7,91 Hz, 1 H), 7,72 (s amplo, 2 H), 7,80 (d, J = 8,20 Hz, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 8,01 (dd, J = 7,47, 5,42 Hz, 2 H), 15 8,22 (s, 2 H), 8,46 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 551,23 (M+H), Rt 4,23 min,
100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0172
5-(3'-Etóxi-2-(isobutilcarbamoil)bifenil-4-il)-2-(4-fluorfenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 565,24 (M+H), Rt 5,28 min, 93,4% pureza.
283/543
Figure BRPI0918174A2_D0173
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-(1-metil-1H-pirazol-4il)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,93 (d, J = 6,74 Hz, 6 H), 1,82 - 1,99 (m, 1 H),
2,37 (s, 3 H), 2,89 - 3,00 (m, 2 H), 3,94 (s, 3 H), 7,15 - 7,25 (m, 1 H), 7,25 -
7,33 (m, 1 H), 7,39 (t, J = 8,20 Hz, 1 H), 7,62 - 7,82 (m, 5 H), 7,93 (d, J =
12,89 Hz, 1 H), 8,02 - 8,12 (m, 1 H), 8,36 - 8,45 (m, 1 H), 8,53 (d, 1 H). LCMS m/z 525,21 (M+H), Rt 4,00 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0174
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-(isoquinolin-4-il)fenil)A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,64 (d, J = 6,44 Hz, 6 H), 1,38 - 1,48 (m, 1 H),
2,37 (s, 3 H), 2,93 - 3,02 (m, 2 H), 7,14 - 7,24 (m, 2 H), 7,25 - 7,33 (m, 2 H),
7,40 (t, J = 8,79 Hz, 1 H), 7,57 (d, J = 7,32 Hz, 1 H), 7,75 (s amplo, 2 H), 7,81
- 7,90 (m, 1 H), 7,95 - 8,03 (m, 2 H), 8,08 (s amplo, 2 H), 8,18 - 8,25 (m, 1 H),
8,31 - 8,37 (m, 1 H), 8,48 (s, 1 H), 8,55 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 572,22 (M+H), Rt 3,49 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0175
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-(2-metoxipiridin-3il)fenil)-/V-metilbenzo-furan-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,88 (d, J = 6,74 Hz, 6 H), 1,68 - 1,83 (m, 1 H),
2,37 (s, 3 H), 2,96 (d, J = 4,69 Hz, 2 H), 3,86 (s, 3 H), 7,04 - 7,13 (m, 1 H),
284/543
7,21 (d, J = 7,32 Hz, 1 Η), 7,28 (d, J = 7,03 Hz, 1 Η), 7,39 (t, J = 8,05 Hz, 1 H), 7,48 (d, J = 8,49 Hz, 1 H), 7,67 (d, J = 7,03 Hz, 1 H), 7,82 (s, 2 H), 7,88 (s amplo, 2 H), 8,04 (s, 1 H), 8,06 - 8,12 (m, 1 H), 8,18 (d, J = 4,98 Hz, 1 H), 8,54 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 552,21 (M+H), Rt4,56 min, 90,5% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0176
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-(isobutilcarbamoil)-4'-isopentilbifenil-4-il)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,99 (dd, J= 12,74, 6,59 Hz, 9 H), 1,23 -1,37 (m, 3 H), 1,59 - 1,70 (m, 1 H), 1,88 - 2,00 (m, 1 H), 2,37 (s, 3 H), 2,76 - 2,87 (m, 2 H), 2,91 - 2,99 (m, 2 H), 3,10 - 3,20 (m, 2 H), 7,14 - 7,25 (m, 1 H), 7,29 (t, J = 7,32 Hz, 1 H), 7,38 (t, J = 8,05 Hz, 2 H), 7,64 (s, 1 H), 7,72 (dd, J = 16,26, 8,05 Hz, 2 H), 7,93 (s, 1 H), 8,01 - 8,11 (m, 2 H), 8,44 (s amplo, 1 H), 8,52 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 515,26 (M+H), Rt 5,63 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0177
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-(isobutilcarbamoil)-2'-metoxibifenil-4-il)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,85 (d, J = 6,74 Hz, 6 H), 1,63 - 1,77 (m, 1 H),
2,37 (s, 3 H), 2,96 (d, J = 4,39 Hz, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 6,99 - 7,09 (m, 1 H),
7,21 (d, J = 7,62 Hz, 1 H), 7,29 (t, J = 7,62 Hz, 2 H), 7,34 - 7,46 (m, 3 H), 7,76 - 7,88 (m, 3 H), 7,92 - 7,98 (m, 1 H), 8,02 (s, 1 H), 8,09 (dd, J = 7,76, 6,00 Hz, 2 H), 8,54 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 551,22 (M+H), Rt 5,07 min, 93,7% de pureza.
285/543
Figure BRPI0918174A2_D0178
Ácido (E)-3-(4'-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)-2'-(isobutilcarbamoil)bifenil-3-il)acrílico 1H RMN δ ppm 0,81 (d, J = 6,44 Hz, 6 H), 1,65 - 1,77 (m, 1 H),
2.37 (s, 3 H), 2,96 (d, J = 4,39 Hz, 2 H), 6,55 (d, J = 15,82 Hz, 1 H), 7,14 -
7,25 (m, 2 H), 7,25 - 7,33 (m, 1 H), 7,40 (t, J = 8,49 Hz, 2 H), 7,47 - 7,56 (m, 1 H), 7,61 (d, J = 8,20 Hz, 1 H), 7,67 (s amplo, 1 H), 7,73 (s amplo, 1 H), 7,80 (s amplo, 2 H), 7,90 (d, J = 7,91 Hz, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 8,04 - 8,13 (m, 1 H), 8,36 (s amplo, 1 H), 8,53 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 591,23 (M+H), Rt
4.37 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0179
Ácido 4'-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2'(isobutilcarbamoil)bifenil-3-carboxílico 1H RMN δ ppm 0,80 (d, J = 6,74 Hz, 6 H), 1,67 - 1,79 (m, 1 H),
2,37 (s, 3 H), 2,96 (d, J = 4,69 Hz, 2 H), 7,16 - 7,25 (m, 2 H), 7,26 - 7,32 (m,
H), 7,33 - 7,44 (m, 2 H), 7,50 - 7,62 (m, 2 H), 7,66 - 7,73 (m, 1 H), 7,76 15 7,84 (m, 2 H), 7,90 (d, J = 7,91 Hz, 1 H), 7,95 - 8,02 (m, 1 H), 8,04 - 8,14 (m,
H), 8,32 - 8,37 (m, 1 H), 8,55 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 565,22 (M+H), Rt
4,22 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0180
286/543
5-(4-(1/-/-lndol-6-il)-3-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 560,23 (M+H), R/4,90 min, 97,2% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0181
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-(1-propil-1H-pirazol-4il)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 553,25 (M+H), Rt 4,49 min, 96% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0182
5-(2'-Cloro-2-(isobutilcarbamoil)bifenil-4-il)-2-(4-fluorfenil)-A/metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,85 (d, J = 6,44 Hz, 6 H), 1,65 - 1,80 (m, 1 H),
2,37 (s, 3 H), 2,93 - 2,97 (m, 2 H), 7,06 (s amplo, 1 H), 7,15 - 7,24 (m, 2 H),
7,25 - 7,35 (m, 2 H), 7,35 - 7,47 (m, 4 H), 7,49 - 7,55 (m, 1 H), 7,79 - 7,86 (m, 1 H), 7,87 - 7,93 (m, 1 H), 7,98 - 8,13 (m, 2 H), 8,21 - 8,27 (m, 1 H), 8,53 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 556,19 (M+H), Rt 5,28 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0183
4-(2-(4-Fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-/V2isobutilbifenil-2,2'-dicarboxamida 1H RMN δ ppm 0,69 (d, J = 6,44 Hz, 6 H), 1,42 - 1,54 (m, 1H),
2,37 (s, 3 H), 2,92 - 2,97 (m, 2 H), 7,13 - 7,23 (m, 2 H), 7,23 - 7,33 (m, 2H),
7,39 (t, J = 8,64 Hz, 1 H), 7,43 - 7,51 (m, 2 H), 7,61 (d, J = 4,69 Hz, 1H),
7,75 - 7,82 (m, 2 H), 7,86 (s, 1 H), 7,96 - 8,03 (m, 1 H), 8,08 (d, J = 5,27 Hz,
H), 8,13 - 8,18 (m, 1 H), 8,51 (s amplo, 1 H), 8,65 (s amplo, 1 H). LCMS
287/543 m/z 564,24 (M+H), Rt 4,07 min, 98,9% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0184
5-(2'-Acetamido-2-(isobutilcarbamoil)bifenil-4-il)-2-(4-fluorfenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,50 - 0,73 (m, 6 H), 1,33 - 1,50 (m, 1 H), 1,90 (s, 5 3 H), 2,37 (s, 3 H), 2,92 - 2,97 (m, 2 H), 7,20 (t, J = 7,91 Hz, 3 H), 7,25 - 7,44 (m, 6 H), 7,75 - 7,82 (m, 2 H), 7,91 (s, 1 H), 7,96 - 8,03 (m, 1 H), 8,04 - 8,11 (m, 1 H), 8,24 (s amplo, 1 H), 8,52 (s amplo, 1 H, 9,89 - 9,96 (m, 1 H). LCMS m/z 578,24 (M+H), R/4,26 min, 93,5% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0185
2-(4-Fluorfenil)-5-(2'-(hidroximetil)-2-(isobutilcarbamoil)bifenil-410 il)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,71 (d, J = 5,27 Hz, 6 H), 1,45 - 1,57 (m, 1 H),
2,37 (s, 3 H), 2,90 (s amplo, 2 H), 2,96 (d, J = 4,69 Hz, 2 H), 7,13 - 7,25 (m, 2 H), 7,25 - 7,35 (m, 1 H), 7,35 - 7,44 (m, 3 H), 7,56 (d, J = 7,32 Hz, 1 H), 7,81 (s, 2 H), 7,83 - 7,89 (m, 2 H), 8,01 (s, 1 H), 8,09 (dd, J= 8,64, 5,42 Hz, 2 H), 15 8,52 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 551,22 (M+H), Rt 4,58 min, 96% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0186
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-(isobutilcarbamoil)-2'-(metoximetil)bifenil-4il)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,64 - 0,79 (m, 6 H), 1,47 -1,59 (m, 1 H), 2,37 (s,
H), 2,86 - 2,93 (m, 2 H), 2,93 - 2,99 (m, 2 H), 3,25 (s, 3 H), 7,15 - 7,25 (m,
288/543
Η), 7,26 - 7,32 (m, 1 Η), 7,33 - 7,44 (m, 4 Η), 7,49 - 7,55 (m, 1 Η), 7,81 (s,
Η), 7,87 (s amplo, 2 Η), 8,02 (s amplo, 1 H), 8,05 - 8,12 (m, 1 H), 8,53 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 565,22 (M+H), Rt 5,30 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0187
5-(3'-(Cianometil)-2-(isobutilcarbamoil)bifenil-4-il)-2-(4-fluorfenil)5 A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,83 (d, J = 6,44 Hz, 6 H), 1,67 - 1,81 (m, 1 H),
2,37 (s, 3 H), 2,96 (d, J = 4,39 Hz, 2 H), 4,08 (s, 2 H), 7,14 - 7,25 (m, 2 H),
7,26 - 7,32 (m, 1 H), 7,35 - 7,44 (m, 2 H), 7,48 (d, J = 5,27 Hz, 2 H), 7,56 (d, J = 7,91 Hz, 1 H), 7,80 (s amplo, 2 H), 7,90 (d, J = 7,62 Hz, 1 H), 8,00 (s, 1
H), 8,04 - 8,13 (m, 2 H), 8,35 (s amplo, 1 H), 8,54 (d, J = 3,81 Hz, 1 H).
LCMS m/z 560,23 (M+H), Rt 4,67 min, 91,5% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0188
N3'-Etil-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-/V2isobutilbifenil-2,3'-dicarboxamida
LCMS m/z 592,26 (M+H), Rt 4,28 min, 94,1% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0189
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-(furan-3-il)-3-(isobutilcarbamoil)fenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN δ ppm 0,86 - 1,03 (m, 6 H), 1,80 - 1,94 (m, 1 H), 2,37 (s,
289/543
Η), 2,92 - 3,00 (m, 2 Η), 6,79 (s, 1 Η), 7,15 - 7,24 (m, 2 Η), 7,28 (d, J = 7,03 Hz, 2 H), 7,35 - 7,42 (m, 1 H), 7,69 (t, J = 7,91 Hz, 2 H), 7,73 - 7,85 (m, 3 H), 7,94 (d, J= 19,33 Hz, 1 H), 8,04 - 8,12 (m, 1 H), 8,41 - 8,48 (m, 1 H), 8,53 (d, 1 H). LCMS m/z 511,17 (M+H), R/4,69 min, 86,5% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0190
3'-Fenil-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-/V2isobutilbifenil-2,3'-dicarboxamida 1H RMN δ ppm 0,75 (d, J = 6,74 Hz, 6 H), 1,59 - 1,72 (m, 1 H),
2,37 (s, 3 H), 2,94 - 2,98 (m, 2 H), 7,15 - 7,24 (m, 3 H), 7,25 - 7,33 (m, 2 H), 7,34 - 7,47 (m, 4 H), 7,49 - 7,58 (m, 2 H), 7,63 - 7,74 (m, 2 H), 7,75 - 7,83 (m, 10 3 H), 7,89 (s amplo, 1 H), 8,00 (s, 1 H), 8,07 (s amplo, 1 H), 8,54 (s amplo, 1
H). LCMS m/z 597,27 (M+H), Rt 5,74 min, 80% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0191
Os procedimentos gerais (para formações de amida) abaixo pertencem aos procedimentos experimentais. Alguns dos compostos foram feitos com escalas diferentes dos ácidos. O ácido (0,075 mmol, 1 eq.) foi dis15 solvido em DMF seco e seguido por adição de HATU (0,090 mmol, 1,2 eq.) e DIPEA (0,225 mmol, 3,0 eq.). A solução foi agitada por 2 minutos e adicionada em amina (0,090 mmol, 1,2 eq.) em temperatura ambiente. A mistura foi agitada 14 h e purificada através de HPLC preparativa.
Figure BRPI0918174A2_D0192
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(3290/543 metilbenzilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6-CDCI3) δ ppm 9,15 (1 H, t, J=5,86 Hz), 8,48 (1 H, d, J=4,69 Hz), 8,27 (2 H, d, J=4,69 Hz), 8,00 - 8,08 (1 H, m), 7,92 - 7,97 (2 H, m), 7,89 (1 H, d, J=7,62 Hz), 7,77 (2 H, s), 7,61 (1 H, t, J=7,62 Hz), 7,37 (2 H, t, J=8,50 Hz), 7,24 (1 H, t, J=7,32 Hz), 7,14 - 7,22 (2 H, m), 7,08 (1 H, d, J=7,03 Hz), 4,54 (2 H, d, J=5,86 Hz), 2,92 (3 H, d, J=4,10 Hz), 2,34 (3 H, s).
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3(neopentilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6-CDCI3) δ ppm 8,44 - 8,51 (m, 2 H),
8,27 (s, 1 H), 8,20 (s, 1 H), 8,02 - 8,07 (m, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 7,88 (t, J=7,32 Hz, 2 H), 7,77 (s, 2 H), 7,59 (t, J=7,62 Hz, 1 H), 7,37 (t, J=8,50 Hz, 2 H), 3,20 (d, J=6,44 Hz, 2 H), 2,92 (d, J=4,69 Hz, 3 H), 0,98 (s, 9 H).
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(3-(4metilbenzilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxarnida 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6-CDCI3) δ ppm 9,14 (t, J=5,86 Hz, 1
H), 8,48 (d, J=4,69 Hz, 1 H), 8,27 (s, 1 H), 8,25 (s, 1 H), 8,01 - 8,06 (m, 1H),
7,95 (s, 1 H), 7,93 (d, J=7,62 Hz, 1 H), 7,89 (d, J=7,62 Hz, 1 H), 7,77 (s, 2H),
7,61 (t, J=7,62 Hz, 1 H), 7,37 (t, J=8,50 Hz, 2 H), 7,27 (d, J=7,62 Hz, 2H),
7,16 (d, J=7,62 Hz, 2 H), 4,52 (d, J=5,86 Hz, 2 H), 2,92 (d, J=4,10 Hz, 3H),
2,30 - 2,35 (m, 3 H).
Pureza de HPLC foi determinada usando um Espectrômetro de
Massa Waters LCT com LC analítica de fonte MUX four way a 220 nm empregando acetonitrila e água ou Waters ZQ com espectrômetro de massa ESCi. A = CH3CN 5:95:Água; B = CH3CN 95:5:Água; Modificador = NH4OAc
291/543 a 10 mM. Tempo de retenção foi registrado em minutos.
Método Analítico A:
Coluna Waters XTERRA® 2,1x50mm 5 um C18
Tempo % de B Fluxo
0,00 0 1,0
4,00 100 1,0
5,00 100 1,0
Método Analítico B:
_________ Coluna: Waters XBridge 2,1x50mm 5 um C18
Tempo % de B Fluxo
0,00 0 1,0
4,00 100 1,0
5,00 100 1,0
5,05 100 1,0
6,00 0 1,0
Método Analítico C: Coluna: Waters XBridge 4,6x50mm Tempo 0,00 5umC18 % de B 0 Fluxo 2,0
8,00 100 2,0
9,00 100 2,0
Método Analítico D: Coluna: Waters XBridge 4,6x50mm Tempo 5umC18 % de B Fluxo
0,00 0 1,0
8,00 100 1,0
9,00 100 1,0
9,10 100 1,0
1,00 0 10
Método Analítico E:
Waters ZQ com Espectrômetro de massa ESCi Coluna: SUPELCO® Ascentis 4,6x50mm 2,7 um C18
292/543
I Tempo % de B Fluxo
0,00 10 3,00
5,30 95 3,00
6,00 95 3,00
6,20 10 3,00
7,00 10 3,00
Método Analítico F:
Waters ZQ com Espectrômetro de massa ESCi
Coluna: PHENOMENEX® Gemini 4,6x150mm 3 um C18
Tempo % de B Fluxo
0,00 10 1,0
10,00 95 1,0
13,00 95 1,0
13,50 10 1,0
15,00 10 1,0
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. 458,93 Método de HPLC
Y i / N Xj-ízO XzA) 2,81 100 Método A
(Y γ 1 1 ο n-^ZZZ' 0 NX (ϊηΥ 2,75 100 494,89 Método A
X T i / N X^O ywy yXo \=/ 2,38 100 468,9 Método A
o Y L / N γζγ \=/ 2,22 100 472,91 Método A
293/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
VYVvY'rTl· V\ ° XA0A=/ 2,46 100 482,9 Método A
a 1 rVVfYAn F nv% ° aV \=/ M 2,68 95,0177 493,92 Método A
A fYvB-/y V. ° 2,5 98,5972 494,9 Método A
/ i A zrW- 2,42 100 460,91 Método A
/ N \ il \^o Γ Υ^ιθΓνΧΎ-ρ A ° um- La n 2,34 100 494,9 Método A
Jfo x CüUV ruV- 3,05 100 472,96 Método A
X A aXVaJTz-x YvuWr^ ο ΥΛο/λΑ 2,48 100 426,91 Método A
^wJr Y^íYyWF o \^cT\=/ 2,86 100 513,92 Método A
294/543
Estrutura Rt de Pureza íon de Método
HPLC % MS de HPLC
Obs.
or 1 ΓΗ / N ^o 2,89 100 513,91 Método A
OOA FT) oo —F
ο O^to^-o \—J
<oC jH / N -0 2,69 100 456,95 Método A
ϊ Ί 'toto^C) H / —F
ζ =?o 2,8 100 495,94 Método A
JL
0 ίΎ$ Ozto^o —F
F\ to\ XX 1 \ H / N 2,84 100 513,93 Método A
Yxi >_<o —F
\^to^o \=J
? X, N/ 2,85 100 498,9 Método A
1 Oil ',0
X 1 ~\ /- —F
o \ y / N .0 2,56 100 486,94 Método A
-OCX
T I X^to^Ct ξ/ /“ —F
quiral
O / N 0 2,1 100 458,91 Método A
vX X.X,
0 < \to^C) —F
dl 2,93 100 509,94 Método A
/
S^0
N\ to
0 H | ^oz \ -/ —F
/ 2,53 100 504,9 Método A
fto^ π \í^°
\ to\ toxx o γρ l[ /i —F
^o ' <----/
295/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. 485,92 Método de HPLC
/ /A /A N ' N 1 \ M L .N. Ja. JL /A J t__k ^ίγόΜ 2,23 100 Método A
0 A / i Π K Y^^pry/A, 0 A^o7 \=/ 2,11 100 473,91 Método A
s / \Χλ/χΖ° Y^iPry#V-= 0 W \=/ 2,51 100 460,92 Método A
N. >a JK /a J ___, ow 2,89 100 458,94 Método A
χ η 1 N. J<A J^A /X Λ >--. T^om-’ 2,62 100 459,94 Método A
/ /^A N UaOa/^Γλλ L YhTThV < 0 w \=/ 2,85 100 475,95 Método A
VwJr [I ll | \>—(/ V—F ° W \=J 2,72 100 444,94 Método A
\ / TAA/y- » // \=J 2,91 100 475,95 Método A
296/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
2,97 100 509,93 Método A
Y i ί Π Λ 2 100 473,92 Método A
X / A ZX N 1 \ il Y^0 n\JaX\Z%A _ Π T 1 Z \ / F ° XAoz \=J 2,89 100 475,95 Método A
ΓΊ / | jQ Xo V0yX/A_f 2,43 100 486,93 Método A
ο t° .KL 0<x 0x xx J t__, ( γ^γγν/γ F NAY ° aA0 ^=/ 2,44 100 485,85 Método A
v n y 8 uHY 2,39 100 856,65 Método B
0Jr ϊ xxx> 2,81 96,6226 494,8 Método B
297/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
Χαγ t iaHV 2,75 100 940,66 Método B
/ s sí^ N o r il Xs?° Λ. .n. A>. JL J ____. u FuM 2,89 99,0179 988,56 Método B
Ύ 7 ÒvOM 0 AAV \=/ 2,7 100 1056,6 Método B
O / ιαΟαΑΆ T uH> 2,94 89,8624 968,67 Método B
Oa »z iFCa_f° TAW' 2,75 100 984,61 Método B
N II XOuV TAJKX 2,29 100 455,82 Método B
/ N r—1 |<^ || x^o íÁxk AA \ ufaM 2,92 98,0936 980,59 Método B
298/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
/ N 2,32 98,0376 479,8 Método B
/ kkk Ó ° 2,35 100 472,83 Método B
1 / k\ N 0 1 ill \^° YkfYWyF 0 o-0/\=/ 2,56 100 972,64 Método B
quiral 9 y S N cOOc^jr0^ ^Y^kky/y F ° \=j 2,26 100 472,83 Método B
°L / kXJk Ϊ UH> 2,06 98,6458 892,65 Método B
/ N o n k kkk^’ 2,43 100 884,66 Método B
/v / CCCk^Zk kkx>^ 2,81 100 940,69 Método B
ò.aJc- <, ·γ^0Α^. 2,82 100 940,7 Método B
299/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
Pi / I \ ιΊ Ύ^° N. Jx JY /^\ J ___. v'TYV/v 0 LW \=/ 2,93 100 968,72 Método B
ΨηΛ· rUM> 2,95 100 968,7 Método B
z\ / \ / N vOu^rv rv>v 2,6 100 884,67 Método B
/·. / CUCL·/^ Y UH> 2,35 100 856,66 Método B
/ /x N r il \^° 2,34 96,8795 958,6 Método B
/WW ( γ^ΑΡΆ_ΛΑ f X 0 !// \^ Ν\<ί^ 2,26 100 479,81 Método B
/ N \ H \s^° J<x. JL /x / ---- Υ^ΥΡγΑΥΑ F W0 W/ w 2,82 100 806,66 Método B
300/543
Estrutura Rt de Pureza íon de Método
HPLC % MS de HPLC
Obs.
1 / N 2,75 100 970,55 Método B
n. /s 1 H -0
N jl JL 0 Ote XX~o __# te ---F
,0 / 2,48 100 480,8 Método B
i ll N xO
o \X^o __H te --F
/ 2,77 100 479,81 Método B
\ Π N zO
JL II 0 __h te —F
/ N =^° 2,7 98,233 480,8 Método B
c /N. Jx, I T ΤΪ; \ f/ te —F
0
Ί / 2,57 100 465,64 Método B
1 |1 N ;O
Nx 0 XX~—o \--/ — F
2,85 97,8741 958,25 Método B
} /
Ύ :O
Νχ 0 1 Ol> xX^o __π te —F
|1 / 2,64 100 930,26 Método B
i Π N :O
Nx jl JL 0 1 \jXo __π te — F
301/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
0 1 / i l \ ιΊ L .N. Jx JJ\ x-\ J ___, Y^yfyyxAF 0 AAo/ W 2,24 100 972,33 Método B
. 0 θ\ / / n |Ί y__N 5,21 100 444,95 Método C
0 Χ/-χ \ / γ n jp |1 1___N 4,95 100 444,96 Método C
quiral jj °K / Z bT |j 1__N o. / /χ H UM/ 3,74 100 499,93 Método C
A V' aXZ 4,54 100 507,94 Método C
CXA . / 1 ML/^-T /=\ ^tAAA AjA O '--' 4,37 100 507,93 Método C
✓0^ a o N jp |] %~-N 4,32 100 460,91 Método C
\ /N~T 0 x/A A^z\ °\ / 1 UAT AA> 3,68 100 485,94 Método C
302/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % Ion de MS Obs. Método de HPLC
N |1 %—-Ν AqAcy 5,31 100 510,91 Método C
0 Ο·Χ Αχ ^x 0. / — ν |1 y__N vkz 3,78 100 432,93 Método C
A° „N.xP /—Y / fííA^-F XfAA AY 4,68 93,1925 466,91 Método D
A0 /y° 5,72 96,6697 464,93 Método D
Ν Y /«A ^χ aX Kay 5,57 96,8314 489,9 Método D
Nv χΎ° avf 5,72 94,0943 478,93 Método D
//° ζΝχχ^-0 /A / A Av tí λΑ a/A^-° 4,93 94,4826 455,9 Método D
N Z-° /A /x Ν'-A / zííÍÍK^F Γ\ A XÁ Y N 'V(ao 5,26 88,6355 469,92 Método D
/γΟ ^xF «A A /=<aa -^V^° 4,7 100 466,92 Método D
303/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
Y 0ΧΑχ Λ Αγγο \ 5,59 97,7461 494,92 Método D
/ 'y° rr f n—\ zx x A <xy 4,06 100 497,98 Método D
~~\ r~( _j /ΝΎ AY 0 X N—V AzA/ ° QrYY 5,05 97,6492 502,96 Método D
Chiral O /=° /x /F -</ -Y fY n—\ /xZ^Z \ C /7—° 4,7 100 474,95 Método D
0 y~N ,o /- * x< ctxx tHr 4,7 100 501,98 Método D
quiral 0 A p Ύ fyf /A N \ Λ-γγ> nxn ç\-Ç\Y 3,74 100 512,96 Método D
°ay \ J 7° /-X /F Aj fY n—v A/Az A \x__/ A° 5,2 97,5131 486,97 Método D
304/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
quiral Ύ- o tXr 5,05 100 488,95 Método D
quiral N /P rA foA to oto 4,74 100 508,95 Método D
.0 A j zA fx __ N—<Ç /ΧΧΧ /N0 /X/foY NX A/to# 4,79 100 482,96 Método D
JY to tovF O N /^\ \ |T o=\ /\toto>to // %__/ \—-° 4,18 100 490,94 Método D
quiral / 0 .0 f <.....Q 00J (/ Ά_/ Ao 4,8 100 474,98 Método D
quiral .. ,° zí\ J O tXr1 4,43 100 499,97 Método D
z° _z\ z-F A CLCT 0 QX° 0 4,04 95,8428 481,93 Método D
305/543
Estrutura Rt de Pureza íon de Método
HPLC % MS de HPLC
Obs.
quiral 0 \-- 4,5 93,8873 487,97 Método D
N N--V N^. 0 X \xF J
\---/ Υ // 0
Οχ
quiral ,ο 4,26 100 490,94 Método D
Q N
0==\
\--/ A // —ο
0 Ζ° χ~ xxF 4,88 100 488,93 Método D
N—
—-0
0
quiral ____/ ζθ X? χ χΕ 5,11 100 488,97 Método D
/---\ /° '/ ('k'
0 N—
Π 'A__ Y /) 0
/0 s S í^F
0 |l 4,81 100 522,93 Método D
/ —
0
quiral 0 0 N— 0 ζ X Jr 5,06 100 520,93 Método D
XjO o ν / f 0
o 2— /Ο Λ 5,74 100 516,94 Método D
/—\ /°
N—/ \ Γ==( —0
\—/
306/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
quiral
0 , 4,26 100 473,94 Método D
y~N L. zO
N.„/ T
o=< ' \ /7 ° H
// 5,85 100 504,94 Método D
quiral \χ ,o Λ
0 '' iT
N- \ ____ / / v^-°
quiral .o xí\ XF 4,69 100 474,96 Método D
O N x ΪΓ
0= _____ / / \__o
.0
0 1 4,74 100 479,92 Método D
N--
X--/ __/ \-^θ
N zP x<\ /F
0 4,71 100 493,93 Método D
/_L=1\ N—
w \--/ >k^°
quiral 4,19
/ _^N 100 513,95 Método D
,o
0
N- //
\—/
307/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
quiral r° 0 A 5,04 100 488,97 Método D
y.....\J | π
\ 'y- V / __0
quiral ^y ,0 4,97 100 488,96 Método D
0 N
0=/
h ( // A
C d Y—N 4,7 98,2446 519,93 Método D
o x<\ AF
A z°
í N--Z
Η V_ V\ // —o
quiral 0 5,64 100 522,94 Método D
o7 0 Γ ΪΓ
^1-Z H
7^0
0 Λ 5,97 100 487 Método D
/—\ /° V'
----' N--
\--/ \\ / y- °
o yN-A ,Q _XF 6,1 100 520,96 Método D
n—y
//
/ \
308/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
o s' \ /F 3,168 100 455,14 Método E
N- —-o
A 0 /ΝΆ ,0 . F 2,754 100 461,15 Método E
\ n- 0 /=/ --O
F \ F—] F \ /° N—(/ N—. 0 , \ xF 3,53 95,5615 499,12 Método E
4,061 100 501,23 Método E
0 N-~Z ,° \/F
\ / ( X // —0
N- o /N~A '° s' \/F 3,539 98,8021 459,19 Método E
\ /7 —o
/° 1 N—\ /N 0 3,496 100 523,18 Método E
Y—0
A AY z° N-- /N. 0 J 3,008 100 506,17 Método E
309/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % íon de MS Obs. Método de HPLC
j T F 3,896 98,8111 539,22 Método E
A (XCT A(Xr —o 3,608 100 537,21 Método E
A VXT V_vHZa 3,868 98,488 557,22 Método E
z° / ° νγ N-\ 1 Ax > s— wn \ / A /7 0 3,179 100 472,1 Método E
V/ a nvo 0 U\x \zzte N 2,536 100 488,16 Método E
A /S jcxy^y~F — /^o 2,718 100 502,19 Método E
310/543
Estrutura Rt de HPLC Pureza % Ion de MS Obs. Método de HPLC
Ο 0 As Λ awa 0 UAAo 3,025 100 557,15 Método E
N. 0 A ΓΧΧΑ A JJ /A *~-N 2,664 100 513,16 Método E
°v / X A ΠΑΑ ° UAAo AA N 2,835 100 514,17 Método E
yX I l| I H----V 7---F “ UA. AA 2,87 100 538,16 Método E
0 A N > A^0 οχχΑ /— u XXuO 8,435 100 423,19 Método F
Λ n η V^0 Ν\χ* °\xu' /—\ AT uXr 8,778 100 490,13 Método F
311/543
Figure BRPI0918174A2_D0193
Os procedimentos gerais abaixo pertencem aos procedimentos experimentais. Alguns dos compostos foram feitos com escalas diferentes. Trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5ila (0,100 mmol, 1 eq.) foi dissolvido em 1,4-Dioxana seca (1 mL) e adiciona5 do em frasco de micro-ondas BIOTAGE® (0,5-2 mL) contendo ácido borônico (0,340 mmol, 3,4 eq.). Então CS2CO3 (0,300 mmol, 3 eq.) foi adicionado como um sólido e seguido pela adição de água (0,25 mL). O frasco recebeu fluxo de nitrogênio e Pd(PPh3)4 foi adicionado. Após o frasco receber novamente fluxo com nitrogênio e ser tampado, ele foi aquecido em um reator de 10 micro-ondas BIOTAGE® a 150° C por 15 minutos. A mistura foi filtrada com um filtro de 0,45 um e seca com um SPEEDVAC®. A amostra foi dissolvida em DMF (1,6 mL) e purificada através de HPLC prep.
Figure BRPI0918174A2_D0194
5-(3-Acetamidofenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6-CDCI3) δ ppm 10,03 (s amplo, 1
H), 8,49 (d, J=4,69 Hz, 1 H), 8,28 (s, 1 H), 8,03 (dd, J=8,79, 5,27 Hz, 2 H), 7,93 (s amplo, 1 H), 7,84 (s, 1 H), 7,75 (d, J=8,20 Hz, 1 H), 7,64 (d, J=6,44 Hz, 2 H), 7,29 - 7,45 (m, 3 H), 2,92 (s, 3 H), 2,12 (s, 3 H).
Figure BRPI0918174A2_D0195
5-(2-(Benziloxi)-4-fluorfenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3312/543 carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6-CDCI3) δ ppm 8,41 (d, J=4,69 Hz, 1 H), 8,28 (s, 1 H), 8,03 (dd, J=8,79, 5,27 Hz, 2 H), 7,82 (s, 1 H), 7,67 (d, J=8,20 Hz, 1 H), 7,55 (d, J=7,03 Hz, 1 H), 7,34 - 7,47 (m, 7 H), 7,13 (d, J=9,37 Hz, 1 H), 6,83 - 6,94 (m, 1 H), 5,19 (s, 2 H), 2,88 (d, J=4,10 Hz, 3 H).
Figure BRPI0918174A2_D0196
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-isobutoxifenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6-CDCI3) δ ppm 8,46 (d, 9=4,69 Hz, 1 H), 8,28 (s, 1 H), 8,04 (dd, 9=8,50, 5,57 Hz, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,67 - 7,73 (m, 1 H), 7,60 - 7,67 (m, 2 H), 7,36 (t, 9=8,79 Hz, 1 H), 7,05 (d, 9=8,79 Hz, 2 H), 3,83 (d, 9=6,44 Hz, 2 H), 2,91 (d, 9=4,69 Hz, 3 H), 2,09 (ddd, 9=13,33, 6,59, 6,44 Hz, 1 H), 1,05 (d, 9=7,03 Hz, 6 H).
Pureza de HPLC foi determinada usando um Espectrômetro Waters LCT Mass com LC analítica com fonte MUX *four way a 220nm empregando acetonitrila e água ou Waters ZQ com Espectrômetro de massa ESCi. A = 5:95 CH3CN:Água; B = 95:5 CH3CN:Água; Modificador = NH4OAc 10 mM. Tempo de retenção foi registrado em minutos.
Método Analítico A:
Coluna Waters XTERRA®2,1x50mm 5 um C18
Tempo % de B Fluxo
0,00 0 1,0
4,00 100 1,0
5,00 100 1,0
Método Analítico B:
Coluna: Waters XBridge 2,1x50mm 5 um C18
Tempo ___________________% de B__Fluxo
313/543
Tempo % de B Fluxo
0,00 0 1,0
4,00 100 1,0
5,00 100 1,0
5,05 100 1,0
6,00 0 1,0
Método Analítico F:
Waters ZQ com Espectrômetro de massa ESCi
Coluna: PHENOMENEX® Gemini 4,6x150mm 3 um C18_______
Tempo % de B ........ Fluxo
0,00 10 1,0
10,00 95 1,0
13,00 95 1,0
13,50 10 1,0
15,00 10 1,0
Estrutura Rt de % de íon de Método
HPLC Pureza MS Obs. HPLC
0 il °\\ / 7,23 100 390,16 Método F
XX OV-7 —F
°x\ / 3,842 100 460,23 Método F
n XN-- xx^ov—y —F
O °x\ / 7,666 100 416,18 Método F
xxyo ---F
314/543
Estrutura Rt de HPLC % de Pureza Ion de MS Obs. Método HPLC
Xi X ιΗμΧ \Α^·ο X--/ 7,018 100 403,2 Método F
/ a γ\ n I, 7 \ 5,322 100 336,23 Método F
o / Wl γ ° 5 cX>W AA^O V—7 7,091 100 396,13 Método F
o / χχχγ ^ΧΤΥΧΥΥ AAO V—7 12,982 100 470,3 Método F
/x. o / XXV - αΥκΥ AA-q \—/ 13,755 100 418,33 Método F
cl °k / χχ^γ - ÍThaf A^íA—o '—' 12,669 100 446,26 Método F
LX °x / η γ Ύ XVv /^f \Α^0 V—7 10,775 100 395,28 Método F
315/543
Estrutura Rt de HPLC % de Pureza íon de MS Obs. Método HPLC
1 /° N\// / ° l l vn 8,933 100 439,24 Método F
O / |j y---N j| —Z ύ—f F <Αοζ 10,716 100 395,31 Método F
N 0 / U z- / - \ζί^·Ό V—y 11,858 100 461,33 Método F
Cl /L o / O V TTXH> 10,916 100 399,21 Método F
Q ο<ί^ΧχΎ;?^χι °a / XX- Jy iCuhTM ^^^'0 v_7 2,49 100 443,06 Método B
O xX>s °K\ ! íl 1 y-N ykkF 2,56 100 410 Método B
316/543
Estrutura Rt de HPLC % de Pureza íon de MS Obs. Método HPLC
0 μ / \χΧθ v-7 2,36 100 376,05 Método B
,hk Z) i / \ I 1 N texkl· x^x^O x-- 2,75 90,0925 457,45 Método B
cX ν^,ο T / x\ N \ Η \=^° ^iTxMAM \zX V—7 2,36 95,5596 447,39 Método B
νθΜΓ/=. JuH> 3,34 100 446,41 Método B
\___/N\^° X i Q. ,., A° - ^iTxhAA V---'J 2,43 100 417,4 Método B
Χ/Χχ° N QaA° - ^ιίζΜΓΧ \z^o v—u 2,67 97,2446 445,4 Método B
317/543
Estrutura Rt de % de íon de Método
HPLC Pureza MS Obs. HPLC
/ N y=° 2,37 100 417,33 Método B
l| Ά,θ/ —/j —F
°\to° / N \=to 2,02 100 416,3 Método B
l| ^Ύv—y —F
/ N \^° 2,92 100 471,37 Método B
toto^o7 v—y ---F
2,76 100 445,37 Método B
N\/° / N toto
V--7 — F
ddN''to° / N to^O 2,71 100 457,35 Método B
Π -Τ' ov—y — F
318/543
Estrutura Rt de HPLC % de Pureza íon de MS Obs. Método HPLC
X Cl _ ϊ A—/ —f A^C V-7 2,52 100 431,35 Método B
1 / A. N 1 H X° AXO V—7 2,725 94,4043 445,36 Método B
1 ! Λ, N 3„ γ - ux> 2,38 95,3608 442,32 Método B
T / A. N íl ϊ Χ^° || 1 p---/ \--F XAA v-7 2,56 100 431,34 Método B
^τγΧ° T / >s. N 1 Η X^0 AX^O V—7 2,76 97,5284 445,38 Método B
Figure BRPI0918174A2_D0197
Os procedimentos gerais abaixos pertencem a procedimentos
319/543 experimentais. 2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (0,120 mmol, 1 eq.) em THF (2,3 mL) adicionada em frasco de micro-ondas BIOTAGE® (5mL) contendo ROH (2,29 eq.) e PPh3 (1,4 eq.). Então DEAD (1,4 eq.) foi adicionado puro. O frasco recebeu fluxo de nitrogênio, tampado e aquecido a 140° C por 20 minutos em um reator de micro-ondas BIOTAGE®. A mistura foi seca com SPEEDVAC®, dissolvida em DMF (1,6 mL) e purificada através de HPLC prep.
Figure BRPI0918174A2_D0198
5-(2-(4-terc-Butilfenoxi)etoxi)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6-CDCI3) δ ppm 8,36 (d, J=4,69 Hz, 1 H), 8,27 (s, 1 H), 7,99 (dd, J=8,50, 5,57 Hz, 1 H), 7,56 (d, J=8,79 Hz, 1 H), 7,28 - 7,39 (m, 3 H), 7,21 (d, J=2,34 Hz, 1 H), 7,05 (dd, J=9,37, 2,34 Hz, 1 H), 6,94 (d, J=8,79 Hz, 3 H), 4,28 - 4,45 (m, 4 H), 2,89 (d, J=4,69 Hz, 3 H), 1,30 (s, 9H).
Pureza de HPLC foi determinada usando um Spectrômetro de Massa Waters LCT com LC analítica de fonte MUX four way a 220nm empregando acetonitrila e água. A = 5:95 CH3CN :Água; B = 95:5 CH3CN:Água; Modificador = NH4OAc a 10 mM. O tempo de retenção foi registrado em minutos.
Método Analítico B:
Coluna: Waters XBridge 2,1x50mm 5 um C18
320/543
Tempo_________________________ % de B Fluxo______
0,00 0 1,0
4,00 100 1,0
5,00 100 1,0
5,05 100 1,0
6,00 0 1,0
| Estrutura Rt de HPLC % de Pureza íon de MS Obs. Método de HPLC
—-N V:O .a zx j J ΎΧυΥΠΥ 3,63 100 461,8073 Método B
__N j T jyy Y X ΧχΧο v—'J 2,81 100 442,825 Método B
Figure BRPI0918174A2_D0199
Os procedimentos gerais abaixo pertencem aos procedimentos experimentais. trifluormetanossulfonato de 4-[2-(4-fluorfenil)-35 (metilcarbamoil)benzofuran-5-il]-2-(isobutilcarbamoil)fenila (0,076 mmol, 45 mg), diciclo-hexil(2',6'-dimetoxibifenil-2-il)fosfina (S-Phos) (6,24 mg, 0,02
321/543 mmol), ácido borônico (0,175 mmol) e fosfato de potássio (0,190 mmol, 40,2 mg) foram adicionados em frasco de micro-ondas BIOTAGE® (5mL) e seguido por adição de dioxana (3 mL) e água (0,3 mL). O frasco recebeu fluxo de nitrogênio e Pd(OAc)2 (0,076 mmol, 1,7 mg) foi adicionado. O frasco foi a5 quecido em um inibidor BIOTAGE® a 110° C por 10 minutos e seco com um
SPEEDVAC®-250 a 40° C da noite para o dia. As amostras foram dissolvidas em DMF-MeOH, filtradas em uma placa com filtros e purificadas através de
HPLC preparativa. Prep-HPLC: DIONEX® APS-30000, UV 220nm, Coluna:
Waters XBridge 19 x 200 mm, 5 um, C18, Solventes: A = Água, NH4OH a 20 10 mM, B = Acetonitrila).
Método Analítico A:
Espectrômetro de massa Waters LCT com fonte MUX four way. Condições de LC:
Coluna: Ascentis 4,6x50mm 5 um C18
Fase Móvel: A = 5:95 MeCN:Água; B = 95:5 MeCN:Água; Modificador = NH4OAc a 10 mM
Tempo de retenção Rt foi registrado em minutos.
Tempo % de B 0 Fluxo
0,00' 2,0
8,00' 100 2,0
9,00’ 100 2,0
Estrutura Rt de HPLC % de Pureza íon de MS Obs. Método HPLC
eV ÓV v' γ Urtr 5,77 96 569,286 Método A
322/543
Estrutura Rt de HPLC 4,86 % de Pureza íon de MS Obs. Método HPLC
95 536,2426 Método A
Xm / 5,20 97 536,26428 Método A
F aOaT” Ji UACA 5,93 100 557,2553 Método A
Os exemplos/intermediários que seguem foram preparados através do acoplamento Suzuki do trifluormetanossulfonato de benzofurano-5-ila correspondente com ácido 3-borônico (ou éster) do ácido benzoico correspondente, e o intermediário ácido obtido foi acoplado à ciclopropilamina con-
Figure BRPI0918174A2_D0200
Ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4metilbenzoico
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solven10 te A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 404,04, HPLC Rt = 1,728 min.
323/543
Figure BRPI0918174A2_D0201
Figure BRPI0918174A2_D0202
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1 -(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC preparativa de fase reversa Shimadzu-VP primeiro usando ο método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,80 - 9,26 min. (Detecção por UV a 220 nm). As frações desejadas coletadas foram evaporadas e o sólido branco obtido foi purificado novamente através do mesmo método exceto com Início B % = 50, Final B% = 100, Coleta da Fração: 5,34 - 6,15 min. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,61 (d, J = 5,80, 1H), 8,44 (t, J = 7,32, 1H), 7,97 (dd, J = 8,85, 5,19, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,85 (d, J= 6,71, 1H), 7,83-7,81 (m, 2H), 7,67 (d, J = 8,24, 1H), 7,64 (d, J = 0,92, 1H), 7,47 (d, J = 8,55, 1H), 7,38 (dd, J = 8,39, 1,68, 1H), 7,29 (t, J = 8,85, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 1,82 (m, 2H), 1,75 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 520,41, HPLC Rt = 1,513 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,90 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,43 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%324/543
NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%- NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila, Rt = 13,20 min.
Figure BRPI0918174A2_D0203
Figure BRPI0918174A2_D0204
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(piridin-4-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 5,07 - 5,88 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,68 (d, J= 7,32, 1H), 7,97 (dd, J= 8,85, 5,19, 2H), 7,87 (d, J = 2,14, 1H), 7,86 (m sobreposto com d, 1H), 7,81 (d, J = 7,02, 1H), 7,67 (d, J = 8,55, 1H), 7,65 (d, J = 1,22, 1H), 7,48 (d, J = 8,55, 1H), 7,39 (dd, J = 8,39, 1,68, 1H), 7,28 (t, J = 8,85, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 1,83 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 520,15, HPLC Rt = 1,435 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,03 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm (Início B%
325/543 = 10, Final B% = 100), Rt = 14,09 min.
Figure BRPI0918174A2_D0205
Figure BRPI0918174A2_D0206
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(piridin-3il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP primeiro usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 5,05 - 5,76 min. (Detecção por UV a 220 nm). As frações desejadas coletadas foram evaporadas e o resíduo obtido foi purificado novamente através do mesmo método exceto que Início B% = 10, Final B% = 100, Coleta da Fração: 8,74 - 9,27 min. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,76 (d, J = 2,44, 1H), 8,71 (dd, J= 5,80, 0,92, 1H), 8,50 (ddd, J = 8,32, 2,21, 1,37, 1H), 8,04 (dd, J= 8,39, 5,65, 1H), 7,96 (dd, J= 9,00, 5,34, 2H), 7,83 (d, J = 1,53, 1H), 7,82 (m sobreposto com d, 1H), 7,66 (d, J= 8,24, 1H), 7,64 (d, J = 1,83, 1H), 7,45 (d, J = 8,55, 1H), 7,28 (t, J = 8,70, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 1,60 (aparecia como td, J = 4,20, 2,59, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 520,08, HPLC Rt = 1,482 min.
Figure BRPI0918174A2_D0207
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(1-(4-fluorfenil)ciclopropilcarbamoil)-2metilfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
326/543
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunflre 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 9,08 - 9,63 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,97 (dd, J = 8,85, 5,19, 2H), 7,78 - 7,77 (m de sobreposição, 2H), 7,65 (d, J= 8,55, 1H), 7,63 (d, J= 1,22, 1H), 7,41 (d, J =
8,55, 1H), 7,37 - 7,33 (m de sobreposição, 3H), 7,28 (t, J = 8,85, 2H), 7,01 (t, J = 8,85, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 1,32 (m, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 537,08, HPLC Rt = 1,840 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 10,20 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm (Início B% = 10, Final B% = 100), Rt = 8,16 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 14,20 min.
Figure BRPI0918174A2_D0208
Ácido 4-cloro-3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico
327/543
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 424,26, 426,25, HPLC Rt= 1,763 min.
Figure BRPI0918174A2_D0209
Figure BRPI0918174A2_D0210
5-(2-Cloro-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP primeiro usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,02 - 6,54 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,62 (dd, J= 5,80, 0,61, 1H), 8,44 (td, J= 7,93, 1,53 1H), 8,04 (d, J= 2,44, 1H), 7,96 (dd, J= 8,85, 5,19, 2H), 7,93 (dd, J= 8,39, 2,29 1H), 7,84 .-7,81 (m de sobreposição, 2H), 7,76 (d, J = 1,83, 1H), 7,69 (d, J = 2,44, 1H), 7,67 (d, J = 2,75, 1H), 7,50 (dd, J = 8,55, 1,53, 1H), 7,28 (t, J = 8,70, 2H), 2,95 (s, 3H), 1,83 (m, 2H), 1,76 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 540,33, 542,33, HPLC Rt = 1,568 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a
328/543
95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,19 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,89 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%>NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%- NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila, Rt = 16,19 min.
Figure BRPI0918174A2_D0211
5-(2-Cloro-5-(1-(3-metoxifenil)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP primeiro usando 0 método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 70, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,61 - 7,41 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,97 (dd, J = 8,70, 5,34, 2H), 7,94 (d, J = 2,14, 1H), 7,85 (dd, J = 8,39, 1,98, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,65 (dd, J = 12,51,
8,55, 2H), 7,49 (dd, J = 8,55, 1,53, 1H), 7,28 (t, J = 8,70, 2H), 7,20 (t, J = 7,93, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,85 (m sobreposto com s, 1H), 6,75 (dd, J = 8,70, 1,68, 1H), 3,77 (s, 3H), 2,95 (s, 3H), 1,34 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 569,39, HPLC Rt = 1,858 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220
329/543 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 10,33 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,96 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3, Rt = 14,80 min.
Figure BRPI0918174A2_D0212
5-(2-Cloro-5-(3H-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidino]-1 ilcarbonil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 70, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,88 - 8,49 min. (Detecção por UV a 220 nm). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 595,39, HPLC Rt = 1,952 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo
330/543 de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 11,75 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,68 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%- NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, taxa de tluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3, Rt = 15,85 min.
Figure BRPI0918174A2_D0213
5-(5-Amino-2-metilfenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida
O acoplamento Suzuki com 4-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)anilina foi realizado usando: diciclo-hexil(2',6'dimetoxibifenil-2-il)fosfina (S-Phos), Pd(OAc)2, K2CO3, (1:2 H2O/1,4-dioxana, 90 °C). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 375,22, HPLC Rt = 1,362 min.
Figure BRPI0918174A2_D0214
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1fenilciclopropanecarboxamido)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP primeiro usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada =12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19
331/543 χ 100 mm S5, Coleta da Fração: 10,05 -10,51 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,97 (dd, J = 8,85, 5,49, 2H), 7,60 (d, J =
8,55, 1H), 7,55 (d, J= 1,53, 1H), 7,52 (dd sobreposto com s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,44 (t, J = 7,48, 2H), 7,36 (m, 1H), 7,30 (dd sobreposto com m, J = 1,53, 1H), 7,29 - 7,27 (m de sobreposição, 3H), 7,25 (d, J = 2,14, 1H), 7,21 (aparecia como d, 1H), 2,95 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,60 (m, 2H), 1,19 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+Na)+ = 541,36, HPLC Rt = 1,952 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 12,49 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,11 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3, Rt = 15,98 min.
Figure BRPI0918174A2_D0215
Ácido 4-cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)-2-metoxibenzoico
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente
332/543 = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 453,93, HPLC Rt = 1,757 min.
Figure BRPI0918174A2_D0216
Figure BRPI0918174A2_D0217
5-(2-Cloro-4-metóxi-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,00 - 6,58 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,61 (d, J = 5,80, 1H), 8,42 (td, J = 8,01, 1,68, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,96 (m, J = 8,85, 5,19, 2H), 7,87 (d, J= 8,24, 1H), 7,79 (ddd, J= 7,40, 6,03, 0,92, 1H), 7,69 (d, J = 1,83, 1H), 7,64 (d, J = 8,55, 1H), 7,44 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,27 (t, J = 8,85, 2H), 4,10 (s, 3H), 2,95 (s, 3H), 1,84 (m, 2H), 1,75 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 569,90, 570,79, 571,82, HPLC Rt = 1,592 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,56 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,97 min. Método de HPLC analí
333/543 tica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%- NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 16,35 min.
Figure BRPI0918174A2_D0218
1-(4-cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2metoxibenzamido)ciclopropanocarboxilato de metila
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 551,02, HPLC Rt = 1,753 min.
Figure BRPI0918174A2_D0219
Ácido 4-cloro-2-flúor-5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 441,91, HPLC
Rt = 1,803 min.
Figure BRPI0918174A2_D0220
o o
334/543
5-(2-Cloro-4-flúor-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 5,63 - 6,40 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,60 (d, J = 5,49, 1H), 8,34 (td, J = 7,93, 1,83, 1H), 7,97 (m, J = 8,85, 5,19, 2H), 7,90 (d, J = 7,63, 1H), 7,83 (d, J = 8,24, 1H), 7,73 (sobreposição, 2H), 7,68 (d, J = 8,54, 1H), 7,56 (d, J= 10,38, 1H), 7,47 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,29 (t, J= 8,70, 2H), 2,95 (s, 3H), 1,82 (m, 2H), 1,70 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 558,04, HPLC Rt = 1,558 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 3,10 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 3,60 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%- NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 13,24 min.
335/543
Figure BRPI0918174A2_D0221
5-(5-(terc-Butilcarbamoil)-2-metilfenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida. Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,62 - 9,21 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ7,98 (m, J = 8,85, 5,49, 2H), 7,67 (d sobrepondo com, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,55, 1H), 7,63 (d, J = 1,22, 1H), 7,38 (d sobrepondo com dd, 1H), 7,37 (dd, J = 1,53, 1H), 7,28 (t, J = 8,70, 2H), 2,96 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 1,47 (s, 9H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 459,31, HPLC Rt = 1,763 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 17,08 min; XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 14,81 min.
Figure BRPI0918174A2_D0222
5-(5-(1-Cianociclopropilcarbamoil)-2-metilfenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shi
336/543 madzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-Η2θ a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,13 - 7,85 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, J = 8,70, 5,34, 2H), 7,77 (d sobrepondo com, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,66 (d, J= 8,24, 1H), 7,63 (d, J= 1,53, 1H), 7,44 (d, J = 8,24, 1H), 7,37 (dd, J = 8,39, 1,68, 1H), 7,28 (t, J = 8,85, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 1,59 (m, 2H), 1,36 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 468,28, HPLC Rt = 1,633 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 14,21 min; XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 12,79 min.
H
MeO'
1-(3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4metilbenzamido)ciclopropanocarboxilato de metila
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,26 - 7,97 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H
337/543
RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, J = 8,85, 5,19, 2H), 7,77 (dd, J = 4,27, 2,14, 2H), 7,66 (d, J = 8,55, 1H), 7,63 (d, J = 1,22, 1H), 7,42 (d, J = 8,55, 1H), 7,37 (dd, J= 8,39, 1,68, 1H), 7,28 (t, J = 8,85, 2H), 3,71 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 1,59 (m, 2H), 1,26 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 501,23, HPLC Rt = 1,657 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,81 min; XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,58 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%—NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3, Rt = 12,48 min.
H
HO'
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(1-(hidroximetil)ciclopropilcarbamoil)-2metilfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,78 - 9,06 min. (Detecção por UV a 220 nm). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV
338/543 a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 urn, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 473,33, HPLC Rt = 1,827 min.
Figure BRPI0918174A2_D0223
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(prop-2inilcarbamoil)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,43 - 7,91 min. (Detecção por UV a 220 nm). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 524,21, HPLC Rt = 1,642 min.
Figure BRPI0918174A2_D0224
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(2-metil-1-morfolinopropan-2ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 20, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo =
339/543 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,64 - 8,27 min. (Detecção por UV a 220 nm). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 544,38, HPLC Rt = 1,503 min.
5-(5-(2-Ciclopropilpropan-2-ilcarbamoil)-2-metilfenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 9,21 - 9,86 min. (Detecção por UV a 220 nm). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 485,34, HPLC Rt = 1,842 min.
5-(2-Ciclopropil-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação atra340/543 vés de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,26 - 6,59 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,54 (d, J = 5,19, 1H), 8,17 (m, 1H), 7,98 (m, J = 8,85, 5,19, 2H), 7,87 - 7,86 (m sobreposto, 2H), 7,77 (d, J = 1,53, 1H), 7,69 (d sobreposto com d, 1H), 7,68 (d, J= 8,24, 1H), 7,58 (m, 1H), 7,50 (dd, J= 8,55, 1,83, 1H), 7,29 (t, J= 8,85, 2H), 7,11 (d, J= 8,55, 1H), 2,96 (s, 3H), 1,98 (m, 1H), 1,77 (m, 2H), 1,61 (m, 2H), 0,96 (m, 2H), 0,82 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 546,04, HPLC Rt = 1,603 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,71 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 10,26 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-10 mM a NH4HCO3, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-10 mM a NH4HCO3, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 13,95 min.
Figure BRPI0918174A2_D0225
2-(4-fluorfenil)-5-(2-metil-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-6
341/543 nitrobenzofuran-3-carboxilato de etila
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 579,41, HPLC Rt = 2,032 min.
Figure BRPI0918174A2_D0226
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Uma mistura de 5-(2-cloro-4-metóxi-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (62,7 mg, 0,11 mmol, bruta), diciclo-hexil(2’,4',6'-tri-isopropilbifenil-2-il)fosfina (52,4 mg, 0,11 mmol), MeBF3K (20,12 mg, 0,165 mmol), diacetoxipaládio (12,35 mg, 0,055 mmol) e carbonato de potássio (76 mg, 0,550 mmol) em uma mistura de H2O (0,2 mL)/TF (2 mL) foi agitada a 90 °C sob N2 por 6 horas 30 min. A mistura foi deixada descansar em r.t. da noite para o dia, então, diluída com MeOH e filtrada em PVDF de 0,45 um Whatman com disco GMF. O filtrado foi purificado através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 70, Final B% = 90, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 2,26 - 2,77 min. (Detecção por UV a 220 nm) para obter o produto como um sal de TFA. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,60 (d, J = 5,80, 1H), 8,41 (m, 1H), 7,96 (m, J = 9,00, 5,34, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,85 (d, J= 9,00, 1H), 7,79 (t, J= 6,56, 1H), 7,64 (d, J= 8,24, 1H), 7,58 (d, J= 1,53, 1H), 7,33 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,28 (t, J = 8,85, 2H), 4,09 (s, 3H), 2,95 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 1,84 (m, 2H), 1,75 (m, 2H).
342/543
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 550,00, HPLC Rt = 1,588 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% =10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,12 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,82 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 13,46 min.
Figure BRPI0918174A2_D0227
Figure BRPI0918174A2_D0228
5-(4-Flúor-2-metil-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP duas vezes usando o método e separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de gradiente = 10 min, Tempo de parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 5,58 - 5,94 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,57 (d, J = 5,49, 1H), 8,26 (td, J = 7,93, 1,53, 1H), 7,97 (m, J = 9,16, 5,19, 2H), 7,79 (d, J = 8,24, 1H), 7,73 (d, J = 7,63, 1H), 7,67 (d, J = 8,55, 1H), 7,65 (m sobrepondo com d, 1H), 7,62 (d, J= 1,83, 1H), 7,35 (dd, J
343/543 = 8,39, 1,68, 1 Η), 7,29 (t, J = 8,85, 2H), 7,25 (d, J = 11,90, 1 Η), 2,95 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 1,80 (m, 2H), 1,66 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 538,04, HPLC Rt = 1,497 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,46 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,66 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 12,95 min.
5-(4-Flúor-2-hidróxi-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
5-(4-Flúor-2-hidróxi-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida foi obtida como um subproduto durante a síntese de 5-(4-flúor-2-metil-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida. O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP duas vezes usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50,
344/543
Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 4,16 - 4,55 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,55 (d amplo, J = 3,66, 1H), 8,19 (t, J = 7,78, 1H), 7,97 (m, J = 8,85, 5,19, 2H), 7,86 (d, J = 8,54, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,74 (d, J = 8,24, 1H), 7,61 (t sobrepondo com dd, 1H), 7,58 (dd, 2H), 7,28 (t, J= 8,70, 2H), 6,79 (d, J = 12,51, 1H), 2,97 (s, 3H), 1,78 (aparecia como s, 2H), 1,63 (aparecia como s, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 540,07, HPLC Rt = 1,342 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% =10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,06 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,56 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%- NH4HCO3 a 10 mM, Início B% =10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 13,91 min.
Figure BRPI0918174A2_D0229
Figure BRPI0918174A2_D0230
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida foi obtida como um subproduto a partir de
345/543 uma reação similar. Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP duas vezes usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,79 - 8,24 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, J = 9,00, 5,34, 2H), 7,91 (d, J = 2,14, 1H), 7,88 (d, J = 1,53, 1H), 7,76 (dd, J = 8,55, 2,14, 1H), 7,65 - 7,61 (m de sobreposição, 2H), 7,29 - 7,27 (m de sobreposição, 6H), 7,16 (m, 1H), 7,00 (d, J= 8,55, 1H), 2,97 (s, 3H), 1,35 (m, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 521,28, HPLC Rt = 1,695 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,84 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,71 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%- NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila, Rt = 12,68 min.
1-(5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metóxi4-metilbenzamido)ciclopropanocarboxilato de metila
346/543
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,07 - 8,45 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, 2H), 7,85 (s, 1H), 7,63 (d, J = 8,55, 1H), 7,58 (d, J = 1,22, 1H), 7,33 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,27 (t, J = 8,85, 2H), 7,11 (s, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 1,61 (m, 2H), 1,28 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 531,23, HPLC Rt= 1,715 min.
Figure BRPI0918174A2_D0231
Ácido 4-ciclopropil-3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico
Ácido 4-ciclopropil-3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico foi preparado de uma maneira similar à descrita usando ciclopropiltrifluorborato de potássio. LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 430,07, HPLC Rt = 1,802 min.
347/543
Figure BRPI0918174A2_D0232
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(3-metil-1,2,4-oxadiazol-5il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Uma mistura de 1-(3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzamido)ciclopropanocarboxilato de metila (25,3 mg, 0,051 mmol), N’-hidroxiacetimidamida (11,23 mg, 0,152 mmol) e K2CO3 (41,9 mg, 0,303 mmol) em tolueno (1 mL) sob N2 em um tubo reutilizável foi agitada a 150° C por duas horas. A mistura foi evaporada, diluída com MeOH e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%), Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada =12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,54 - 8,08 min. (Detecção por UV a 220 nm), para dar o produto como um sólido branco (19,9 mg, 75%). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, J = 9,00, 5,34, 2H), 7,82 (d, J = 2,14, 1H), 7,81 (m de sobreposição, 1H), 7,66 (d, J = 8,55, 1H), 7,65 (d, J = 1,50, 1H), 7,44 (d, J = 8,55, 1H), 7,38 (dd, J = 8,24, 1,83, 1H), 7,28 (m, J = 8,85, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 1,75 (m, 2H), 1,58 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 525,12, HPLC Rt = 1.700 min.
Figure BRPI0918174A2_D0233
5-(5-(1-(3-Ciclopropil-1,2,4-oxadiazol-5-il)ciclopropilcarbamoil)-2metilfenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
348/543
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,32 - 8,92 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, J = 8,85, 5,49, 2H), 7,81 (d, J = 1,83, 1H), 7,80 (s amplo sobrepondo com com d, 1H), 7,66 (d sobrepondo com d, 1H), 7,64 (d, J= 1,53, 1H), 7,44 (d, J = 8,55, 1H), 7,38 (dd, J= 8,39, 1,68, 1H), 7,28 (m, J= 8,85, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,02 (m, 1H), 1,72 (m, 2H), 1,54 (m, 2H), 1,04 (m, 2H), 0,95 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 551,09, HPLC Rt = 1,763 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm,
Rt = 8,73 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,96 min.
Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3a 10mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm,
Rt= 13,22 min.
Figure BRPI0918174A2_D0234
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(1-(3-(metoximetil)-1,2,4-oxadiazol-5349/543 il)ciclopropilcarbamoil)-2-metilfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,92 - 8,52 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, J = 9,00, 5,34, 2H), 7,82 (d, J = 2,14, 1H), 7,81 (t sobreposto com d, 1H), 7,66 (d sobreposto com d, 1H), 7,65 (d, J = 1,83, 1H), 7,45 (d, J = 8,55, 1H), 7,38 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,28 (t, J = 8,70, 2H), 4,51 (s, 2H), 3,42 (s, 3H), 2,95 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 1,79 (m, 2H), 1,60 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 555,23, HPLC Rt = 1,700 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,11 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,57 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3a 10mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 12,51 min.
350/543
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(3-(piridin-2-il)-1,2,4oxadiazol-5-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de 5 separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,83 - 8,56 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,71 10 (d, 4 = 4,88, 1H), 8,19 (d, 4 = 7,93, 1H), 8,08 (td, 4 = 7,78, 1,53, 1H), 7,97(m,
4= 9,00, 5,34, 2H), 7,85 (s, 1H), 7,84 (m sobrepondo com s, 1H), 7,66 -7,63 (m de sobreposição, 3H), 7,45 (d, 4= 8,55, 1H), 7,38 (dd, 4= 8,55, 1,83, 1H), 7,28 (m, 4= 8,85, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 1,91 (m, 2H), 1,67 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV 15 a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 588,07, HPLC Rt = 1,728 min. 20 HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 25 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,96 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x
150 mm, Rt = 5,83 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: X30 Bridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt =13,15 min.
351/543
Figure BRPI0918174A2_D0235
2-(4-FI uorfen il)-5-(4-metóxi-2-meti 1-5-(1 -(3-meti I-1,2,4-oxad iazo I5-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,80 - 8,36 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, J = 9,00, 5,34, 2H), 7,86 (s, 1H), 7,63 (d, J = 8,55, 1H), 7,59 (d, J = 1,83, 1H), 7,33 (dd, J = 8,24, 1,83, 1H), 7,27 (t, J = 8,85, 2H), 7,13 (s, 1H), 4,06 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 1,77 (m, 2H), 1,60 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 555,10, HPLC Rt = 1,723 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,98 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 12,98 min.
352/543
Figure BRPI0918174A2_D0236
5-(2-Cloro-4-metóxi-5-(1 -(3-metil-1,2,4-oxadiazol-5il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,06 - 8,56 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,99-7,96 (m sobrepondo com s, 2H), 7,97 (s, 1H), 7,71 (d, J = 1,53, 1H), 7,64 (d, J = 8,55, 1H), 7,45 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,27 (t, J = 8,85, 2H), 4,06 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 1,78 (m, 2H), 1,61 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 575,08, HPLC Rt = 1,752 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,23 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,39 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 13,49 min.
353/543
Figure BRPI0918174A2_D0237
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(5-metil-4/-/-1,2,4-triazol-3il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Uma mistura de 5-(5-(1-cianociclopropilcarbamoil)-2-metilfenil)-2(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (33,8 mg, 0,072 mmol), aceto-hidrazida (16,07 mg, 0,217 mmol) e K2CO3 (9,99 mg, 0,072 mmol) em nBuOH (1 mL) sob N2 em um tubo vedado reutilizável foi agitada a 150° C por quatro horas. A mistura foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 5,93 - 6,53 min. (Detecção por UV a 220 nm) para obter o produto como um solvato de TFA. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,97 (m, J = 8,85, 5,49, 2H), 7,85 (s, 1H), 7,85 (m sobreposto com s, J = 1,83, 1H), 7,66 (d, J = 8,55, 1H), 7,64 (d, J = 1,22, 1H), 7,45 (d, J = 7,63, 1H), 7,38 (dd, J = 8,39, 1,68, 1H), 7,29 (t, J = 8,70, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,56 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 1,68 (m, 2H), 1,57 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 524,23, HPLC Rt = 1,545 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt =11,80 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt= 12,13
354/543 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-10 mM a NH4HCO3, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-10 mM a NH4HCO3, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3, Rt = 11,87 min.
Figure BRPI0918174A2_D0238
5-(5-(1-(5-Ciclopropil-4/7-1,2,4-triazol-3-il)ciclopropilcarbamoil)-2metilfenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,05 - 8,58 min. (Detecção por UV a 220 nm) para obter o produto como um solvato de TFA. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,97 (m, J = 8,85, 5,19, 2H), 7,85 (s, 1H), 7,84 (dd sobrepondo com, J = 1,83, 1H), 7,67 (d, J = 8,24, 1H), 7,64 (d, J = 1,53, 1H), 7,45 (d, J = 7,63, 1H), 7,38 (dd, J= 8,39, 1,68, 1H), 7,29 (t, J= 8,85, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,15 (m, 1H), 1,66 (m, 2H), 1,55 (m, 2H), 1,23 (m, 2H), 1,11 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 500,00, HPLC Rt = 1,598 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um,
355/543
4,6 x 150 mm, Rt = 9,45 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 urn, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,81 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%- NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila, Rt = 15,29 min.
Figure BRPI0918174A2_D0239
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(5-fenil-4H-1,2,4-triazol-3il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,48 - 7,03 min. (Detecção por UV a 220 nm) para obter o produto como um solvato de TFA. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,99 - 7,95 (m de sobreposição, 4H), 7,88 - 7,85 (m de sobreposição, 2H), 7,67 - 7,65 (m de sobreposição, 2H), 7,49 - 7,45 (m de sobreposição, 3H), 7,44 (d, J = 7,93, 1H), 7,39 (dd, J = 8,55, 1,53, 1H), 7,28 (t, J = 8,70, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 1,72 (m, 2H), 1,48 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 585,89, HPLC Rt = 1,765 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18
356/543 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,85 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,81 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila, Rt = 13,04 min.
Figure BRPI0918174A2_D0240
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(1-(Nhidroxicarbamimidoil)ciclopropilcarbamoil)-2-metilfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida
A uma mistura de 5-(5-(1 -cianociclopropilcarbamoil)-2-metilfenil)2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (43,5 mg, 0,093 mmol) em etanol (1,5 mL) em r.t. sob N2 foi adicionado cloridrato de hidroxilamina (12,93 mg, 0,186 mmol), seguido por Et3N (0,039 mL, 0,279 mmol). A mistura foi agitada em refluxo (115° C) por cerca de 4 horas. A mistura foi resfriada para r.t. e evaporada. O resíduo foi usado para a etapa seguinte sem purificação adicional. LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 501,13, HPLC Rt= 1,385 min.
Figure BRPI0918174A2_D0241
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(5-metil-1,2,4-oxadiazol-3il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de 2-(4-fluorfenil)-5-(5-(1-(Nhidroxicarbamimidoil)ciclopropilcarbamoil)-2-metilfenil)-N-metilbenzofuran-3
357/543 carboxamida (46,5 mg, 0,093 mmol, bruta) em piridina (0,5 mL, 6,18 mmols) em r.t. sob N2 foi adicionado cloreto de acetila (0,020 mL, 0,279 mmol). A mistura foi agitada a 115 °C por 2 horas. A mistura foi resfriada para r.t., diluída com MeOH e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de preparação: Solvente A = MeOH a 10%H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H20 a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,64 - 7,95 min. (Detecção por UV a 220 nm). O resíduo obtido após evaporação das frações combinadas foi purificado mais através de TLC preparativa, MeOH a 10%/CH2CI2, duas placas de 20 cm x 20 cm x 0,5 mm. Rf de cerca de 0,67 (MeOH a 10%/CH2CI2). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, J = 9,00, 5,34, 2H), 7,81 (s, 1H), 7,80 ((m sobreposto com s, J = 2,14, 1H), 7,66 (d, J= 8,55, 1H), 7,65 (d, J= 1,22, 1H), 7,43 (d, J = 8,55, 1H), 7,36 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,28 (m, J = 8,70, 2H), 2,96 (s, 3H), 2,54 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 1,59 (m, 2H), 1,43 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 525,07, HPLC Rt = 1,682 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,67 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,22 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: X358/543
Bridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 12,36 min.
Figure BRPI0918174A2_D0242
Ácido 1-(3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4metilbenzamido)ciclopropanocarboxilico 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, J = 9,00, 5,34, 2H), 7,78 (s, 1H), 7,77 (m overlapping com s, 1H), 7,66 (d, J = 8,55, 1H), 7,64 (d, J = 1,22, 1H), 7,42 (d, J = 8,55, 1H), 7,38 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,28 (t, J = 8,70, 2H), 2,96 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 1,60 (m, 2H), 1,25 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+Hf = 487,27, HPLC Rt = 1,625 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,38 min; XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 4,43 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%- NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3, Rt = 10,67 min.
Figure BRPI0918174A2_D0243
2-(1-(3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4metilbenzamido)ciclopropanocarbonil)hidrazinocarboxilato de terc-butila
A uma mistura de ácido 1-(3-(2-(4-fluorfenil)-3
359/543 (metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzamido)ciclopropanocarboxílico (41,6 mg, 0,086 mmol), hidrazinocarboxilato de terc-butila (16,95 mg, 0,128 mmol) e tetrafluorborato de 2-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)-1,1,3,3tetrametilisourônio (54,9 mg, 0,171 mmol) em DMF (1 mL) em r.t sob N2 foi adicionada N,N-di-isopropiletilamina (0,060 mL, 0,342 mmol). A mistura foi agitada em r.t. por 19 horas. À mistura foram adicionados 5 ml de H2O. Os precipitados brancos foram filtrados, lavados com H2O 3 x 2 ml e secos (33,1 mg) e foram usados sem purificação adicional. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; HPLC Rt = 1,750 min.
Figure BRPI0918174A2_D0244
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(1-(hidrazinocarbonil)ciclopropilcarbamoil)-2metilfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
A 2-(1-(3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4metilbenzamido)ciclopropanocarbonil)hidrazinocarboxilato de terc-butila (33,1 mg, 0,055 mmol) em um frasco de fundo redondo em r.t. sob N2 foi adicionado HCI (1 ml, 4,00 mmols, 4 M em 1,4-dioxana). A mistura foi agitada em r.t. por quatro horas. A mistura foi evaporada e o sal de cloridrato bruto usado sem purificação adicional. LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 501,06, HPLC Rt = 1,483 min.
Figure BRPI0918174A2_D0245
360/543
5-(5-(1 -(5-Amino-1,3,4-oxadiazol-2-il)ciclopropilcarbamoil)-2metilfenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de cloridrato de 2-(4-fluorfenil)-5-(5-(1(hidrazinocarbonil)ciclopropilcarbamoil)-2-metilfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida (29,5 mg, 0,055 mmol, bruto) em 1,4-dioxana (1 ml) em r.t. foi adicionada uma solução de brometo ciânico (58,3 mg, 0,550 mmol) em acetonitrila (0,5 mL) e então NaHCO3 aq. sat. (0,1 ml). A mistura foi agitada em r.t. por cerca de 5 horas. À mistura foi adicionado 0,3 ml de HCI a 1N, diluído com MeOH e purificado através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,53 - 7,18 min. (Detecção por UV a 220 nm) para obter o produto como um sal de TFA. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,97 (dd, J = 8,55, 5,19, 2H), 7,80 (s, 1H), 7,80 ((m sobreposto com s, 1H), 7,66 (d, J= 8,55, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,44 (d, J= 8,55, 1H), 7,37 (dd, J= 8,24, 1,22, 1H), 7,29 (t, J = 8,70, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 1,64 (m, 2H), 1,49 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 526,05, HPLC Rt = 1,577 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 3,23 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 3,39 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%
361/543
H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 urn, 4,6 x 150 mm, Rt = 11,04 min.
Figure BRPI0918174A2_D0246
5-(5-(1-(1H-Tetrazol-5-il)ciclopropilcarbamoil)-2-metilfenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de 5-(5-(1 -cianociclopropilcarbamoil)-2-metilfenil)2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (25,1 mg, 0,054 mmol) em DMF (1 mL) em r.t. sob N2 foi adicionado cloreto de amônio (8,62 mg, 0,161 mmol), e então azida de sódio (6,98 mg, 0,107 mmol). A mistura foi agitada a 120° C por cerca de 4 horas. A mistura foi resfriada para r.t. e adicionada com mais 18 mg de NH4CI e então 14 mg de NaN3. A mistura foi agitada a 120° C por 14,5 horas. A mistura foi resfriada para r.t. e adicionada com outros 26 mg de NH4CI, seguido por 21 mg de NaN3. A mistura foi novamente agitada a 120° C por 24 horas. A mistura foi resfriada para r.t. e diluída com MeOH e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa ShimadzuVP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada =12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,82 - 7,27 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,97 (m, J = 9,00, 5,34, 2H), 7,85 (d, J = 1,22, 1H), 7,84 (dd sobrepondo com d, J= 1,83, 1H), 7,67 (d, J = 8,24, 1H), 7,65 (d, J = 1,22, 1H), 7,45 (d, J = 7,63, 1H), 7,39 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,29 (t, J = 8,85, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 1,70 (m, 2H), 1,58 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x
362/543 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 511,28, HPLC Rt = 1,595 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,10 min; XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 4,23 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3, Rt = 10,58 min.
Figure BRPI0918174A2_D0247
Ácido 2-(4-fluorfenil)-5-(2-metil-5-(1 fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-6-nitrobenzofuran-3-carboxílico
Preparado através da hidrólise de 2-(4-fluorfenil)-5-(2-metil-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-6-nitrobenzofuran-3-carboxilato de etila. LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 551,34, HPLC Rt = 1,895 min.
Figure BRPI0918174A2_D0248
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-6-nitrobenzofuran-3-carboxamida
Preparada através do acoplamento de ácido 2-(4-fluorfenil)-5-(2metil-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-6-nitrobenzofuran-3-carboxílico com cloridrato de metilamina sob as condições conforme descrito. LC/MS foi rea363/543 lizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 564,36, HPLC Rt = 1,768 min.
Figure BRPI0918174A2_D0249
Figure BRPI0918174A2_D0250
6-Amino-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Obtida como um sal de TFA a partir da redução de 2-(4fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-6nitrobenzofuran-3-carboxamida usando H2 com Pd/C a 5% como catalisador (2:5 DMF/EtOAc, r.t.) após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: WatersSunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,17 - 6,79 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,94 (m, J = 8,85, 5,19, 2H), 7,87 (dd, J = 8,09, 1,98, 1H), 7,74 (d, J = 1,83, 1H), 7,50 (d, J = 7,93, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,17 (m, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,29 - 7,25 (m de sobreposição, 5H), 2,92 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,35 (m, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 534,26, HPLC Rt = 1,563 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%
364/543
TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 11,58 min; XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 4,96 min (Início B% = 50). Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%- NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila, Rt = 15,09 min.
Figure BRPI0918174A2_D0251
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-6-(metilsulfonamido)benzofuran-3carboxamida
A uma mistura de 6-amino-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida (53,3 mg, 0,100 mmol) (bruto) em CICH2CH2CI (1 ml) em r.t. sob N2 foi adicionada piridina (0,024 mL, 0,300 mmol). À mistura foi então adicionada uma solução de cloreto de metanossulfonila (22,88 mg, 0,200 mmol) em CICH2CH2CI (0,3 ml) e agitada por cerca de 22 horas. A mistura foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC de fase reversa preparatia Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,75 - 7,37 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, 4= 8,85, 5,19, 2H), 7,85 (dd, 4= 8,09, 1,98, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,75 (d, 4 = 1,53, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,47 (d, 4 = 7,93, 1H), 7,17 (m, 1H), 7,30 - 7,26 (m de sobreposição, 5H), 7,29 (s, 1H), 2,93 (s, 3H), 2,88 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,35 (aparecia como d, 4H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shi
365/543 madzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 612,34, HPLC Rt = 1,583 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,48 min; XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,24 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila, Rt = 11,46 min.
Figure BRPI0918174A2_D0252
2-(4-Fluorfenil)-6-(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metil-5-(2metil-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
2-(4-Fluorfenil)-6-(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metil-5-(2metil-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida foi preparada a partir da alquilação de 2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-6-(metilsulfonamido)benzofuran-3carboxamida usando (2-bromoetoxi)(ferc-butil)dimetilsilano (K2CO3, DMF a 55 °C) seguido por desproteção usando HCI em 1,4-dioxana em r.t. Purificação foi realizada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada =12 min,
366/543
Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,32 - 6,81 min. (Detecção por UV a 220 nm). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 656,06, HPLC Rt = 1,563 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,05 min; XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,38 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%>-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 11,42 min.
Figure BRPI0918174A2_D0253
Figure BRPI0918174A2_D0254
5-(2-Flúor-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-6(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação foi realizada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 30, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,06 - 8,30 min. (Detecção por UV a 220 nm). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção
367/543 por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: XTERRA® MS 7 um, C18, 3,0 x 50 mm; (ES+) m/z (M+H)+ = 660,50, HPLC Rt = 1,530 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,68 min; XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,18 min.
Figure BRPI0918174A2_D0255
Procedimento geral: A um frasco de micro-ondas BIOTAGE® (25 mL) foi adicionado ou 5-(4-cloro-3-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)N-metilbenzofuran-3-carboxamida (0,075 mmol, 1 eq.) ou trifluormetano sulfonato de 4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2(isobutilcarbamoil)fenila (0,075 mmol, 1 eq.) em 1,4-Dioxana seca (I mL) junto com o ácido borônico desejado (0,150 mmol, 2 eq.), fosfato de potássio, tribásico (0,300 mmol, 52,3 mg) em água (0,2 mL), diciclo-hexil(2',6dimetoxibifenil-3-il)fosfina (S-Fos) (6,16 mg, 0,015 mmol) e finalmente acetato de paládio(ll) (3,37 mg, 0,015 mmol) em 1,4-dioxana (0,5 mL). O frasco recebeu fluxo com nitrogênio, então tampado e posto no micro-ondas BIOTAGE® por 10 minutos a 150° C. O solvente foi removido em um Termo/Savant SPEEDVAC® e os produtos brutos foram dissolvidos em DMF (1,8 mL) e purificados através de HPLC preparativa usando uma HPLC Prep. Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA a 0,1% onde o solvente A era acetonitrila a 10% / H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era H2O a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 30x100mm em um gradiente de B 30-100%
368/543 e a taxa de fluxo de 40 mL/min durante 8 minutos com uma retenção de 10 minutos. Os tubos com produto desejado foram evaporados da noite para o dia em um Termo/Savant SPEEDVAC®. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ TFA a 0,1% I HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / TFA HPLC 0,1% /10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ TFA a 0,1% com um gradiente de B a 20-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna PHENOMENEX® Gemini C18 3pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio 10mM com um gradiente de B a 20-100% (B = HPLC 95% de grau metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I bicarbonate de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. Rt representa o tempo de retenção de LC em minutos. Todos os espectros de RMN foram registrados em temperatura ambiente usando solventes de RMN deuterados.
Figure BRPI0918174A2_D0256
369/543
5-(4-(2-(4-Fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2(isobutilcarbamoil)fenil)-/V-metilpicolinamida 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,75 (d, J=7 Hz, 6 H), 1,63 1,71 (m, 1 H), 2,93 (d, 9=5 Hz, 6 H), 3,00 (t, 9=6 Hz, 2 H), 7,23 (t, 9=9 Hz, 2 H), 7,37 (t, 9=6 Hz, 1 H), 7,44 - 7,51 (m, 1 H), 7,53 (d, 9=8 Hz, 1 H), 7,60 7,66 (m, 1 H), 7,67 - 7,73 (m, 1 H), 7,80 - 7,88 (m, 2 H), 7,98 (dd, 9=8, 2 Hz, 1 H), 8,05 (s, 1 H), 8,08 - 8,18 (m, 3 H), 8,30 (d, 9=5 Hz, 1 H), 8,66 (d, J=2 Hz, 1 H). LCMS Rt 2,125 min, m/z 579,32 (M+H), HPLC Rt 8,594 min. (Sunfire C18), 98,7 % pureza e 11,276 min. (Gemini C18), 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0257
4-(2-(4-Fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-/V2isobutilbifenil-2,4'-dicarboxamida 1H RMN (400 MHz, DMF-d7) δ ppm 0,81 (d, 9=6,78 Hz, 6 H), 1,71 - 1,82 (m, 1 H), 3,00 (d, 9=4,77 Hz, 3 H), 3,06 (t, 9=6,40 Hz, 2 H), 7,42 7,48 (m, 2 H), 7,57 (d, 9=8,28 Hz, 1 H), 7,62 (m, 2 H), 7,78 (d, 9=8,28 Hz, 1 H), 7,84 (m, 2 H), 7,94 (d, 9=8,03 Hz, 1 H), 8,00 (d, 9=8,28 Hz, 2 H), 8,06 8,08 (m, 1 H), 8,10 - 8,14 (m, 2 H), 8,20 (t, 9=5,77 Hz, 1 H), 8,40 (d, 9=4,52 Hz, 1 H). LCMS Rt 2,020 min, m/z 564,25 (M+H). HPLC Rt 8,224 min. (Sunfire C18), 98,2 % de pureza e 11,098 min. (Gemini C18), 98,3% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0258
5-(4-(5-Cianopiridin-3-il)-3-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,82 (d, 9=6,78 Hz, 6 H),
370/543
1,74 - 1,80 (m, 1 Η), 2,93 (d, J=4,52 Hz, 3 H), 3,01 - 3,11 (m, 2 H), 7,18 7,30 (m, 2 H), 7,42 - 7,51 (m, 1 H), 7,55 (d, J=7,78 Hz, 1 H), 7,56 - 7,61 (m, 1 H), 7,62 - 7,67 (m, 1 H), 7,68 - 7,75 (m, 1 H), 7,83 - 7,92 (m, 2 H), 8,04 - 8,15 (m, 3 H), 8,20 (t, J=2,13 Hz, 1 H), 8,85 (dd, J=13,93, 2,13 Hz, 2 H). LCMS Rt 2,278 min, m/z 547,23 (M+H). HPLC Rt 9,246 min. (Sunfire C18), 96,0 % de pureza e 11,343 min. (Gemini C18), 98,6% de pureza.
Uma abordagem alternativa para o acoplamento. A um frasco de micro-ondas pequeno foram adicionados 5-(4-cloro-3(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (47,9 mg, 0,1 mmol), BuOH (2 mL), ácido/éster borônico (0,150 mmol), diciclo-hexil(2',4',6'-tri-isopropilbifenil-2-il)fosfina (19,07 mg, 0,040 mmol), fosfato de potássio, tribásico (85 mg, 0,400 mmol) e finalmente tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (18,31 mg, 0,020 mmol). O frasco foi tampado e submetido a aquecimento em micro-ondas (130° C) por 12 minutos. Butanol foi removido sob uma corrente de nitrogênio e os produtos brutos foram dissolvidos em DMF (1,8 mL) e purificado através de HPLC preparativa empregando um sistema de HPLC Prep. DIONEX® equipado com um detector de ELS (Difração de Luz Preparativa). Uma coluna Waters XBridge 19x200mm 5 um C18 foi usada com acetonitrila/HPLC de grau água/acetato de amônio a 10 mM onde o solvente A era HPLC de grau água com acetato de amônio a 10 mM e o solvente B era acetonitrila a 100% em um gradiente de B a 30-95% em 30 minutos com a taxa de fluxo de 25 mL/minuto. LCMS foram realizadas usando um Waters ZQ com Espectrômetro de massa ESCi com uma coluna SUPELCO® Ascentis Express 3 pm C18 4,5 x 50mm empregando acetonitrila/HPLC de grau água/acetato de amônio a 10 mM onde o solvente A era acetonitrila a 5%, HPLC 95% de grau água com acetato de amônio a 10mM e o solvente B era acetonitrila a 95%, HPLC a 5% de grau água com acetato de amônio a lOmM ém um gradiente de B a 0-100% em 8 minutos com retenção de 1 minuto em 2 mL/minuto.
371/543
Figure BRPI0918174A2_D0259
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-(2-metilpiridin-3-il)fenil)A/-metilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 535,90 (M+H), Rt 4,89 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0260
5-(4-(5-Aminopiridin-3-il)-3-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(45 fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 536,96 (M+H), Rt 4,37 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0261
5-(4-(2,4-Dioxo-1,2,3,4-tetra-hidropirimidin-5-il)-3(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 554,94 (M+H), Rt 3,88 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0262
5-(4-(2-Aminopiridin-4-il)-3-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4372/543 fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 536,97 (M+H), Rt4,55 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0263
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-(5-metoxipiridin-3il)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 551,96 (M+H), Rt 4,97 min, 89% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0264
5-(4-(2-Aminopirimidin-5-il)-3-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 537,97 (M+H), Rt 4,23 min, 96% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0265
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-(5-metilpiridin-3-il)fenil)10 A/-metilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 535,95 (M+H), Rt 4,99 min, 100% de pureza.
373/543
Figure BRPI0918174A2_D0266
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-(tiofen-3-il)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 526,96 (M+H), Rt 5,83 min, 74% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0267
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-(pirimidin-5-il)fenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando CH3CN/água/TFA onde o solvente A era acetonitrila a 10% / H2O a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era H2O a 10%/ acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 30x100mm em um gradiente de 30-100% de B e a taxa de fluxo de 40 mL/min durante 10 minutes com uma retenção de 10 minutos. Os dados de LC/MS de purificação foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu/LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ TFA a 0,1% HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água I TFA a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. A pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254 nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água
374/543
I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com a retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna PHENOMENEX® Gemini C18 3pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC 95% de grau metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,76 (d, 4=6,78 Hz, 6 H), 1,61 - 1,74 (m, 1 H), 2,87 (d, 4=4,52 Hz, 3 H), 2,96 (t, 4=6,27 Hz, 2 H), 7,39 (t, 4=8,91 Hz, 2 H), 7,64 (d, 4=8,03 Hz, 1 H), 7,77 - 7,87 (m, 3 H), 7,91 - 8,07 (m, 4 H), 8,47 - 8,60 (m, 2 H), 8,81 (s, 2 H), 9,16 (s, 1 H). LCMS m/z 523,22 (M+H), Rt 2,052 min. HPLC Rt 8,908 min. (Sunfire C18), 96,0 % de pureza e 11,353 min. (Gemini C18), 98,6% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0268
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(2-metoxietoxi)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de micro-ondas pequeno foram adicionados 2-(4fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(isobutilcarbamoil) fenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida (33 mg, 0,072 mmol), tetra-hidrofurano (2 mL), trifenilfosfina (37,6 mg, 0,143 mmol), 2-metoxietanol (0,011 mL, 0,139 mmol) e azodicarboxilato de di-terc-butila (33,0 mg, 0,143 mmol). O frasco foi grampeado e aquecido a 100° C por 10 minutos. Após retornar para temperatura ambiente tetra-hidrofurano foi removido sob uma corrente de nitrogênio. O produto bruto foi absorvido em 2 mL de acetonitrila e purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA a 0,1% onde o solvente A era acetonitrila a 10%/ água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o
375/543 solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 30 x 100mm em um gradiente de B a 40-100% e a taxa de fluxo de 40 mL/min durante 8 minutos com retenção de 10 minutos. O material desejado foi concentrado até secagem. O sólido branco resultante (41% de rendimento) foi posto sob vácuo alto antes da análise final. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando a LC Shimadzu analítica a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna de LC Shimadzu analítica com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX400. Mudanças químicas foram registradas em ppm com relação ao solvente deuterado usado. Constantes de acoplamento foram relatadas em hertz. Multiplicidade de pico foi relatada usando as abreviações que seguem: s (singleto), d (dupleto), dd (dupleto de dupletos), t (tripleto), m (multipleto), br (amplo). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04 (d,
376/543
J = 6,53 Hz, 6 H), 1,35 - 1,40 (m, 3 H), 1,96 - 2,08 (m, 1 H), 2,97 - 3,10 (m, 3 H), 3,24 - 3,32 (m, 2 H), 3,73 - 3,82 (m, 2 H), 4,25 - 4,34 (m, 2 H), 7,24 (d, J = 8,53 Hz, 1 H), 7,29 - 7,38 (m, 2 H), 7,63 - 7,72 (m, 2 H), 7,91 (dd, J = 8,53, 2,26 Hz, 1 H), 7,94 - 7,99 (m, 2 H), 8,00 - 8,09 (m, 2 H), 8,48 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 519,25 (M+H), Rt 2,292 min. HPLC (Sunfire C18) Rt 10,054 min, 96% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt 11,846 min, 97% de pureza.
Exemplos adicionais de compostos ligados por éter são mostrados abaixo. Os compostos foram sintetizados da mesma maneira que acima. O solvente (tetra-hidrofurano) foi removido sob uma corrente de nitrogênio e os produtos brutos foram dissolvidos em DMF (1,8 mL) e purificados através de HPLC preparativa empregando um sistema de HPLC Prep. DIONEX® equipado com um detector ELS (Difração de Luz Evaporativa). Uma coluna SUPELCO® Ascentis 5pm C18 21,2 x 250mm foi usada com acetonitrila/HPLC de grau água/acetato de amônio a 10mM onde o solvente A era HPLC a 99,9% de grau água com acetato de amônio a 10mM e o solvente B era acetonitrila a 100% em um gradiente de B a 30-95% em 20 minutos com retenção de 2,5 minutos a 20mL/minuto. LCMS foi realizada usando uma Waters ZQ com espectrômetro de massa ESCi com uma coluna SUPELCO® Ascentis Express 3 pm C18 4,5 x 50mm empregando acetonitrila/HPLC de grau água/acetato de amônio a 10mM onde o solvente A era acetonitrila a 5%>, HPLC a 95% de grau água com acetato de amônio a 10mM e o solvente B era acetonitrila a 95%, HPLC a 5% de grau água com acetato de amônio a 10mM em um gradiente de B a 0-100% em 8 minutos com retenção de 1 minuto em 2mL/minuto. Os espectros de RMN foram registrados em temperatura ambiente usando um espectrômetro de fluxo de 600 MHz Varian. Mudanças químicas foram relatadas em ppm com relação ao solvente de DMSO-d6a 75%/ CDCI3 a 25% (v/v) usado.
377/543
OH
Figure BRPI0918174A2_D0269
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-(4-hidroxifenetoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCh) õ ppm 0,88 (d, 7=7,03 Hz,
H), 1,85 (ddd, 7=13,33, 6,59, 6,44 Hz, 1 H), 2,77 - 2,94 (m, 5 H), 3,08 (t, 5 7=6,15 Hz, 2 H), 4,20 (t, 7=6,44 Hz, 2 H), 6,59 - 6,68 (m, 2 H), 6,98 (d,
7=8,20 Hz, 2 H), 7,13 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,32 (t, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,41 (d,
7=8,79 Hz, 1 H), 7,59 (d, 7=8,20 Hz, 1 H), 7,75 (s, 1 H), 7,81 - 7,91 (m, 2 H), 8,00 (dd, 7=8,20, 5,27 Hz, 1 H), 8,33 (t, 7=5,57 Hz, 1 H), 8,39 (d, 7=4,10 Hz,
H). LCMS m/z 581,48 (M+H), Rt 5,30 min, 90% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0270
5-(2-(3-(1 H-Pirrol-1 -il)propoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCh) δ ppm 0,89 (d, 7=6,44 Hz, 6 H), 1,80 - 1,91 (m, 1 H), 2,07 (m, 2 H), 2,79 (d, 7=4,10 Hz, 3 H), 3,09 (t,
7=6,44 Hz, 2 H), 3,90 - 4,01 (m, 4 H), 5,94 (s, 2 H), 6,61 (s, 2 H), 7,08 (d,
7=8,79 Hz, 1 H), 7,32 (t, 7=8,50 Hz, 2 H), 7,58 (d, 7=8,20 Hz, 1 H), 7,70 (d,
7=8,79 Hz, 1 H), 7,79 - 7,87 (m, 2 H), 7,92 (s, 1 H), 7,97 (dd, 7=8,50, 5,57
Hz, 2 H), 8,32 - 8,42 (m, 2 H). LCMS m/z 568,47 (M+H), Rt 5,98 min, 100% de pureza.
378/543
Figure BRPI0918174A2_D0271
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-(4-clorofenetoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCI3) δ ppm 0,88 (d, 7=7,03 Hz,
H), 1,80 - 1,90 (m, 1 H), 2,84 (d, 7=4,69 Hz, 3 H), 2,96 (t, 7=6,15 Hz, 2 H),
3,08 (t, 7=6,15 Hz, 2 H), 4,26 (t, 7=6,44 Hz, 2 H), 7,14 (d, 7=8,79 Hz, 1 H),
7,19 (d, 7=8,20 Hz, 2 H), 7,23 - 7,27 (m, 2 H), 7,29 - 7,39 (m, 3 H), 7,58 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,73 (s, 1 H), 7,83 - 7,89 (m, 2 H), 8,00 (dd, 7=8,50, 5,57 Hz, 2 H), 8,33 (t, 7=5,27 Hz, 1 H), 8,38 (d, 7=4,10 Hz, 1 H). LCMS m/z 599,47 (M+H), Rt 6,52 min, 92% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0272
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-((6-(hidroximetil)piridin-2-il)metoxi)-5(isobutilcarbamoil) fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCIs) δ ppm 0,89 (d, 7=6,44 Hz, 6 H), 1,79 - 1,91 (m, 1 H), 2,82 (d, 7=4,10 Hz, 3 H), 3,09 (t, 7=6,44 Hz, 2 H), 4,56 (s, 2 H), 5,23 (s, 2 H), 7,24 (t, 7=9,37 Hz, 2 H), 7,32 (t, 7=8,79 Hz, 2 H),
7,37 (d, 7=8,20 Hz, 1 H), 7,60 - 7,65 (m, 1 H), 7,66 - 7,70 (m, 1 H), 7,75 (t,
7=7,62 Hz, 1 H), 7,84 - 7,90 (m, 2 H), 7,93 (s, 1 H), 7,96 - 8,03 (m, 2 H), 8,36 (t, 7=5,57 Hz, 1 H), 8,40 (d, 1 H). LCMS m/z 582,48 (M+H), Rt 4,57 min, 93% de pureza.
379/543
Figure BRPI0918174A2_D0273
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(3morfolinopropoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCfe) δ ppm 0,89 (d, 7=7,03 Hz,
H), 1,77 -1,91 (m, 3 H), 2,23 - 2,43 (m, 6 H), 2,84 (d, 7=4,10 Hz, 3 H), 3,08 (t, 7=6,44 Hz, 2 H), 3,53 (s amplo, 4 H), 4,09 (t, 7=5,86 Hz, 2 H), 7,14 (d,
7=8,20 Hz, 1 H), 7,32 (t, 7=8,79 Hz, 2 H), 7,53 (d, 7=9,37 Hz, 1 H), 7,65 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,84 - 7,92 (m, 2 H), 7,98 (dd, 7=7,91, 5,57
Hz, 2 H), 8,31 - 8,43 (m, 2 H). LCMS m/z 588,40 (M+H), Rt 4,05 min, 98,7% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0274
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(2-morfolinoetoxi)fenil)A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCI3) δ ppm 0,89 (d, 7=6,44 Hz, 6 H, 1,79 - 1,91 (m, 1 H), 2,38 (s amplo, 4 H), 2,64 (t, 7=5,57 Hz, 2 H), 2,84 (d, 7=4,10 Hz, 3 H), 3,08 (t, 7=6,15 Hz, 2 H), 3,52 (t, 7=4,39 Hz, 4 H), 4,17 (t,
7=5,57 Hz, 2 H), 7,16 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,32 (t, 7=8,79 Hz, 2 H), 7,56 7,61 (m, 1 H), 7,61 - 7,66 (m, 1 H), 7,75 (s, 1 H), 7,83 - 7,91 (m, 2 H), 7,98 (dd, 7=8,20, 5,86 Hz, 2 H), 8,35 (t, 7=5,27 Hz, 1 H), 8,38 (d, 1 H). LCMS m/z 574,35 (M+H), Rt 3,95 min, 100% de pureza.
380/543
Figure BRPI0918174A2_D0275
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(piridin-2-ilmetoxi)fenil)/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCb) δ ppm 0,89 (d, 4=7,03 Hz,
H), 1,82 - 1,91 (m, 1 H), 2,79 - 2,86 (m, 3 H), 3,09 (t, 4=6,44 Hz, 2 H), 5,27 5 (s, 2 H), 7,22 - 7,30 (m, 2 H), 7,33 (t, 4=8,50 Hz, 2 H), 7,40 (d, 4=7,62 Hz, 1
H), 7,62 (d, 4=8,79 Hz, 1 H), 7,66 - 7,71 (m, 1 H), 7,76 (t, 4=7,62 Hz, 1 H),
7,84 - 7,91 (m, 2 H), 7,94 (s, 1 H), 7,99 (dd, 4=8,50, 5,57 Hz, 2 H), 8,35 -
8,44 (m, 2 H), 8,53 (d, 4=4,69 Hz, 1 H). LCMS m/z 552,29 (M+H), Rt 4,29
Figure BRPI0918174A2_D0276
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(2-(pirrolidin-1il)etoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCb) δ ppm 0,89 (d, J=6,44 Hz, 6 H), 1,64 (s amplo, 4 H), 1,80 - 1,91 (m, 1 H), 2,47 (s amplo, 4 H), 2,75 2,82 (m, 2 H), 2,84 (d, 4=4,10 Hz, 3 H), 3,08 (t, 4=6,44 Hz, 2 H), 4,16 (t, 15 4=5,27 Hz, 2 H), 7,16 (d, 1 H), 7,32 (t, 4=8,79 Hz, 2 H), 7,56 - 7,61 (m, 1 H),
7,61 - 7,66 (m, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,86 (d, 4=8,20 Hz, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,98 (dd, 4=8,20, 5,27 Hz, 2 H), 8,31 - 8,43 (m, 2 H). LCMS m/z 558,37 (M+H), Rt 3,52 min, 100% de pureza.
381/543
Figure BRPI0918174A2_D0277
Figure BRPI0918174A2_D0278
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(2-(piperidin-1il)etoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCI3) δ ppm 0,89 (d, 4=6,44 Hz,
H), 1,32 - 1,38 (m, 2 H), 1,38 - 1,43 (m, 2 H), 1,44 - 1,52 (m, 2 H), 1,79 5 1,93 (m, 1 H), 2,32 - 2,45 (m, 4 H), 2,57 - 2,68 (m, 2 H), 2,84 (d, 4=4,10 Hz, 3
H), 3,08 (t, 4=6,15 Hz, 2 H), 4,10 - 4,20 (m, 2 H), 7,16 (d, 4=8,79 Hz, 1 H), 7,32 (t, 4=8,79 Hz, 2 H), 7,61 (q, 4=8,79 Hz, 2 H), 7,76 (s, 1 H), 7,86 (d, 4=8,20 Hz, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,98 (dd, 4=8,20, 5,86 Hz, 2 H), 8,31 - 8,44 (m, 2 H). LCMS m/z 572,37 (M+H), Rt 3,89 min, 95,4% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0279
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(2-(piridin-2il)etoxi)fenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-ds/CDCI3) δ ppm 0,88 (d, 4=6,44 Hz, 6 H), 1,79 - 1,91 (m, 1 H), 2,84 (d, 4=4,69 Hz, 3 H), 3,08 (t, 4=6,15 Hz, 2 H), 3,21 (t, 4=6,15 Hz, 2 H), 4,47 (t, 4=6,15 Hz, 2 H), 7,20 (dd, 4=19,92, 8,20 Hz,
2 H), 7,29 - 7,41 (m, 4 H), 7,50 (d, 4=8,79 Hz, 1 H), 7,67 (s, 1 H), 7,79 - 7,91 (m, 3 H), 8,00 (dd, 4=8,50, 5,57 Hz, 2 H), 8,34 (t, 4=5,57 Hz, 1 H), 8,45 (d, 4=4,10 Hz, 1 H), 8,51 (d, 4=4,69 Hz, 1 H). LCMS m/z 566,34 (M+H), Rt 4,32 min, 100% de pureza.
382/543
Figure BRPI0918174A2_D0280
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-((2-metil-1H-imidazol-4il)metoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCI3) δ ppm 0,89 (d, 7=6,44 Hz,
H), 1,85 (dd, 7=12,01, 6,74 Hz, 1 H), 2,14 - 2,38 (m, 3 H), 2,81 - 2,88 (m, 3
H), 3,04 - 3,12 (m, 2 H), 5,00 (s, 1 H), 6,91 - 7,03 (m, 1 H), 7,32 (t, 7=9,08
Hz, 2 H), 7,50 - 7,68 (m, 2 H), 7,70 (d, 7=6,44 Hz, 1 H), 7,79 (d, 7=4,10 Hz, 2 H), 7,86 (d, 7=11,72 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,96 - 8,04 (m, 1 H), 8,34 (t, 7=5,57 Hz, 1 H), 8,40 (d, 7=4,69 Hz, 1 H). LCMS m/z 555,34 (M+H), Rt 3,57
Figure BRPI0918174A2_D0281
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-((5-(trifluoimetil)piridin2-il)metoxi) fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCh) õ ppm 0,90 (d, 7=7,03 Hz, 6 H), 1,82 - 1,92 (m, 1 H), 2,79 (d, 7=4,69 Hz, 3 H), 3,09 (t, 7=6,15 Hz, 2 H), 5,39 (s, 2 H), 7,27 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,34 (t, 7=8,50 Hz, 2 H), 7,62 (t, 15 7=8,50 Hz, 2 H), 7,71 (d, 7=8,20 Hz, 1 H), 7,89 (d, 7=8,20 Hz, 1 H), 7,92 (s, 1
H), 7,95 - 8,02 (m, 3 H), 8,16 (d, 7=8,20 Hz, 1 H), 8,39 (t, 7=5,57 Hz, 1 H),
8,44 (d, 7=4,69 Hz, 1 H), 8,90 (s, 1 H). LCMS m/z 620,32 (M+H), Rt 5,09 min, 97,9% de pureza.
383/543
Figure BRPI0918174A2_D0282
5-(2-((1H-lmidazol-4-il)metoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
LCMS m/z 541,29 (M+H), Rt 3,51 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0283
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-((1-metil-1F/-imidazol-45 il)metoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCI3) δ ppm 0,88 (d, 7=6,44 Hz,
H), 1,83 (dt, 7=13,48, 6,74 Hz, 1 H), 2,84 (d, 7=4,69 Hz, 3 H), 3,06 (t,
7=6,44 Hz, 2 H), 3,63 (s, 3 H), 3,88 (s, 2 H), 7,00 (s, 1 H), 7,32 (t, 7=8,79 Hz,
H), 7,55 (d, 7=8,20 Hz, 1 H), 7,63 - 7,70 (m, 3 H), 7,74 (d, 7=14,65 Hz, 2
H), 7,94 (s, 1 H), 7,99 (dd, 7=8,20, 5,27 Hz, 2 H), 8,23 (s, 1 H), 8,39 (d,
7=4,10 Hz, 1 H). LCMS m/z 555,35 (M+H), Rt 4,11 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0284
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-(hex-2-iniloxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-A/metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCI3) δ ppm 0,83 - 0,97 (m, 9 H),
1,36 - 1,40 (m, 2 H), 1,82 - 1,90 (m, 1 H), 2,16 (t, 7=6,74 Hz, 2 H), 2,84 (d,
384/543
7=4,69 Hz, 3 H), 3,09 (t, 7=6,44 Hz, 2 H), 4,82 (s amplo, 2 H), 7,23 (d, 7=8,20 Hz, 1 H), 7,29 - 7,33 (m, 2 H), 7,51 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,65 (d, 7=8,20 Hz, 1 H), 7,72 (s, 1 H), 7,84 - 7,91 (m, 2 H), 7,99 (dd, 7=8,20, 5,27 Hz, 2 H), 8,36 (t, 7=5,57 Hz, 1 H), 8,40 (d, 7=4,10 Hz, 1 H). LCMS m/z 541,35 (M+H), Rt 5,20 min, 95,3% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0285
5-(2-(2,2-Difluoretoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6/CDCI3) δ ppm 0,89 (d, 7=6,44 Hz, 6 H), 1,86 (dt, 7=13,48, 6,74 Hz, 1 H), 2,84 (d, 7=4,10 Hz, 3 H), 3,09 (t, 7=6,44 Hz, 2 H), 4,39 (td, 7=14,35, 2,93 Hz, 2 H), 6,15 - 6,40 (m, 1 H), 7,23 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,32 (t, 7=8,79 Hz, 2 H), 7,56 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,66 (d, 7=8,20 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,89 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,93 (s, 1 H), 7,99 (dd, 7=8,20, 5,27 Hz, 2 H), 8,35 - 8,44 (m, 2 H). LCMS m/z 525,27 (M+H), Rt
4,44 min, 97,4% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0286
5-(2-((2-Bromopiridin-4-il)metoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (600 MHz, DMSO-de/CDCh) δ ppm 0,89 (d, 7=6,44 Hz, 6 H), 1,81 -1,91 (m, 1 H), 2,82 (d, 7=4,69 Hz, 3 H), 3,09 (t, 7=6,15 Hz, 2 H),
5,27 (s, 2 H), 7,21 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,33 (t, 7=8,50 Hz, 2 H), 7,37 (d, 7=4,69 Hz, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,61 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,70 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,83 (s, 1 H), 7,89 (d, 7=8,79 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,99 (dd, 7=8,20,
385/543
5,27 Hz, 2 Η), 8,32 (d, J=5,27 Hz, 1 H), 8,38 (d, J=4,69 Hz, 2 H). LCMS m/z 630,26 (M+H), Rt4,71 min, 98,4% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0287
5-(2-(2-(Dibenzilamino)etoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida
Dados de LC/MS pós-purificação foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu/LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX400. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,96 (d, J = 6,53 Hz, 6 H), 1,83 - 2,07 (m, 1 H), 2,81 (t, J= 5,40 Hz, 2 H), 2,90 (s, 3 H), 3,19 (d, J = 7,03 Hz, 2 H), 3,53 (s, 4 H), 4,10 (t, J = 5,40 Hz, 2 H), 6,99 (d, J = 8,53 Hz, 1 H), 7,14 (dd, J = 5,52, 3,01 Hz, 2 H), 7,17 - 7,23 (m, 8 H), 7,23 - 7,29 (m, 2 H), 7,41 - 7,47 (m, 1 H), 7,48 - 7,55 (m, 1 H), 7,75 - 7,82 (m, 2 H), 7,84 (d, J = 2,26 Hz, 1 H), 7,92 (dd, J = 8,66, 5,40 Hz, 2 H). LCMS m/z 684,40 (M+H),
386/543
Rt = 1,897min. HPLC Rt 14,159 min. (XBridge fenila C18), 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0288
Figure BRPI0918174A2_D0289
5-(2-(3-Aminociclopentiloxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
Dados de LC/MS pós-purificação foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu/LC LC MICROMASS® Platform (ESI+/-) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Luna de 10pm C18, 3,0 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ acetato de amônio a 10mM/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I acetato de amônio a 10mM/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 5 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Gemini C18 3,0pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX400. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,93 (d, J = 6,78 Hz, 6 H), 1,77 - 1,97 (m, 3 H), 2,04 - 2,19 (m, 2 H), 2,19 - 2,32 (m, 2 H), 2,90 (d, J = 4,52 Hz, 3 H), 3,17 (t, J = 6,40 Hz, 2 H), 3,69 - 3,82 (m, 2 H), 7,04 (d, J = 8,53 Hz, 1 H), 7,21 (t, J = 8,78 Hz, 2 H), 7,41 - 7,50 (m, 1 H), 7,50 - 7,56 (m, 1 H), 7,60-7,72 (m, 2 H), 7,81 (dd, J= 8,66, 2,13 Hz, 1 H), 7,85 (d, J = 1,25 Hz, 1 H), 7,90 (d, J = 2,01 Hz, 1 H), 7,99 - 8,10 (m, 2 H), 8,42 (s amplo, 2 H). LCMS Rt 1,937min, m/z 542,34 (M-H) e m/z 544,29 (M+H). HPLC Rt 6,870 min. (Sunfire C18), 99,1 % de pureza e 11,133 min. (Gemini C18), 98,9% de pureza.
387/543
Uma síntese alternativa para esses análogos ligados a éter foi realizada usando molde de fenol em DMF com brometos de alquila e DBU. A um frasco de 2 dram foram adicionados 2-(4-fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5(isobutilcarbamoil)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida (46,0 mg, 0,1 mmol), DMF (2 mL), 4,0 equivalentes de DBU, 1,8-Diazabiciclo[5,4,0]undec7-eno (0,4mmol) e 3,0 equivalentes (0,3mmol) de brometo de alquila. Os frascos foram vedados e agitados a 75° C em um banho seco. Quando do término da reação, os produtos brutos foram concentrados, diluídos com 2 mL de acetonitrila e purificados usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA a 0,1% onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10%/ acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 4,6 x 100mm em um gradiente de 30-100% de B e a taxa de fluxo de 40 mL/min durante 8 minutos com retenção de 10 minutos. Os produtos desejados foram evaporados até secagem em um Savant SPEEDVAC® da noite para o dia obtendo 25-60% de rendimento dos éteres desejados como pós. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX400. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna
388/543 usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto.
Figure BRPI0918174A2_D0290
5-(2-(2-Amino-2-oxoetoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-ds) δ ppm 0,86 - 1,02 (m, 6 H), 1,81 1,99 (m, 1 H), 2,91 (d, J = 4,77 Hz, 3 H), 3,06 - 3,29 (m, 2 H), 4,46 (s, 2 H),
6,43 (s amplo, 1 H), 6,69 (s amplo, 1 H), 7,08 (d, J = 8,78 Hz, 1 H), 7,16 -
7,27 (m, 2 H), 7,53 (s amplo, 1 H), 7,56 - 7,62 (m, 2 H), 7,86 (dd, J = 8,53,
2,26 Hz, 1 H), 7,93 (d, J = 2,26 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 8,09 - 8,19 (m, 2 H).
LCMS m/z 518,36 (M+H), Rt 1,880 min. HPLC (Sunfire C18) Rt 8,209min, 100% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt 11,254 min, 99,8% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0291
5-(2-(2-(1H-lndol-3-il)etoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 0,92 - 1,04 (m, 6 H), 1,87 2,03 (m, 1 H), 2,95 (s, 3 H), 3,15 - 3,24 (m, 4 H), 4,37 (t, J = 6,71 Hz, 2 H),
389/543
6,94 (t, J= 7,48 Hz, 1 H), 6,98 (s, 1 H), 7,07 (t, J = 7,63 Hz, 1 H), 7,18 (d, J =
8,55 Hz, 1 H), 7,24 - 7,36 (m, 3 H), 7,44 - 7,50 (m, 2 H), 7,51 - 7,56 (m, 1 H),
7,84 (td, J = 4,27, 2,44 Hz, 2 H), 7,88 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 7,94 - 8,03 (m, 2
H). LCMS m/z 604,31 (M+H), Rt 2,621 min. HPLC Rt 11,054 min. (Sunfire 5 C18), 98,1 % de pureza e 12,561 min. (XBridge fenila C18), 97,8% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0292
5-(2-(2-(1 H-lndol-3-il)etoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 0,87 - 1,03 (m, 6 H), 1,83 10 2,00 (m, 1 H), 2,17 (dd, J = 9,77, 5,49 Hz, 2 H), 2,81 - 2,90 (s, 3 H), 2,90 3,00 (s, 3 H), 3,12 - 3,25 (m, 4 H), 3,42 (s amplo, 8 H), 4,21 (t, J = 5,65 Hz, 2 H), 7,17 (d, J = 8,85 Hz, 1 H), 7,22 - 7,33 (m, 2 H), 7,53 (dd, J =8,55, 1,83 Hz, 1 H), 7,65 (d, J = 8,24 Hz, 1 H), 7,86 (td, J = 8,47, 2,29 Hz, 3 H), 7,89 7,96 (m, 2 H). LCMS m/z 601,36 (M+H), Rt 1,375 min. HPLC Rt 6,010 min.
(Sunfire C18), 99,3% de pureza e 11,793 min. (XBridge fenila C18), 98,4% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0293
5-(2-(2-(3,5-Dimetil-1H-pirazol-4-il)etoxi)-5(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 0,89 - 1,01 (m, 6 H), 1,86
390/543
1,98 (m, 1 Η), 2,02 (s, 6 Η), 2,90 (t, 7=5,95 Hz, 2 H), 2,95 (s, 3 H), 3,14 - 3,22 (m, 2 H), 4,24 (t, 7=5,95 Hz, 2 H), 7,18 (d, 7=8,55 Hz, 1 H), 7,24 - 7,33 (m, 2 H), 7,37 (dd, 7=8,39, 1,68 Hz, 1 H), 7,59 (d, 7=8,55 Hz, 1 H), 7,68 (d, 7=1,83 Hz, 1 H), 7,80 (d, 7=2,44 Hz, 1 H), 7,85 (dd, 7=8,70, 2,29 Hz, 1 H), 7,93 8,02 (m, 2 H). LCMS m/z 583,32 (M+H), Rt 1,698 min. HPLC Rt 7,270 min. (Sunfire C18), 92,6 % de pureza e 11,994 min. (XBridge fenila C18), 92,0% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-(2-hidroxibutoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,93 - 1,15 (m, 9 H), 1,45 1,61 (m, 1 H), 1,61 -1,77 (m, 1 H), 2,01 (dt, 7=13,55, 6,78 Hz, 1 H), 3,03 (s, 3 H), 3,27 (d, 7=7,03 Hz, 2 H), 3,81 - 3,90 (m, 1 H), 4,10 (d, 7=5,02 Hz, 2 H), 7,24 (d, 7=8,78 Hz, 1 H), 7,28 - 7,38 (m, 2 H), 7,62 - 7,72 (m, 2 H), 7,91 (dd, 7=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 7,96 (d, 7=2,01 Hz, 2 H), 8,00 - 8,08 (m, 2 H). LCMS m/z 533,30 (M+H), Rt 2,238 min. HPLC Rt 11,383 min. (Sunfire C18), 95,4 % de pureza e 11,896 min. (XBridge fenila C18), 98,5% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-(2-hidroxipropoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04 (d, 7=6,53 Hz, 6 H),
1,27 (d, 7=6,27 Hz, 3 H), 1,93 - 2,08 (m, 1 H), 3,03 (s, 3 H), 3,27 (d, 7=7,03 Hz, 2 H), 3,97 - 4,15 (m, 3 H), 7,23 (d, 7=8,53 Hz, 1 H), 7,32 (t, 7=8,91 Hz, 2 H), 7,67 (d, 7=1,00 Hz, 2 H), 7,86 - 7,93 (m, 1 H), 7,96 (d, 7=2,26 Hz, 2 H),
391/543
8,03 (dd, 4=9,04, 5,27 Hz, 2 H). LCMS m/z 519,28 (M+H), Rt 2,100 min. HPLC Rt 9,279 min. (Sunfire C18), 98,4 % de pureza e 11,674 min. (XBridge fenila C18), 98,8% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(2-(piperidin-2il)etoxi)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 0,92 - 1,04 (m, 6 H), 1,32 1,48 (m, 2 H), 1,59 (d, 4=14,34 Hz, 1 H), 1,78 (s amplo, 2 H), 1,88 - 2,06 (m, 3 H), 2,11 - 2,25 (m, 1 H), 2,85 (m, 1 H), 2,96 (s, 3 H), 3,11 - 3,27 (m, 4 H), 4,17 - 4,37 (m, 2 H), 7,23 (d, 4=8,85 Hz, 1 H), 7,26 - 7,36 (m, 2 H), 7,55 (dd, 4=8,55, 1,83 Hz, 1 H), 7,70 (d, 4=8,55 Hz, 1 H), 7,83 - 8,01 (m, 5 H). LCMS m/z 572,33 (M+H), Rt 1,663 min. HPLC Rt 7,638 min. (Sunfire C18), 98,8 % de pureza e 12,003 min. (XBridge fenila C18), 97,3% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(piridin-4-ilmetoxi)fenil)/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 0,98 (d, 4=6,71 Hz, 6 H), 1,83 - 2,07 (m, 1 H), 2,92 (s, 3 H), 3,22 (d, 4=7,02 Hz, 2 H), 5,54 (s, 2 H), 7,19 - 7,39 (m, 3 H), 7,62 (dd, 4=8,55, 1,53 Hz, 1 H), 7,65 - 7,72 (m, 1 H), 7,88 - 7,99 (m, 5 H), 8,01 (d, 4=6,41 Hz, 2 H), 8,79 (d, 4=6,71 Hz, 2 H). LCMS m/z 552,28 (M+H), Rt 1,600 min. HPLC Rt 6,831 min. (Sunfire C18), 99,5 % de pureza e 11,871 min. (XBridge fenila C18), 99,3% de pureza.
392/543
Figure BRPI0918174A2_D0294
2-((2-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4(isobutilcarbamoil)fenoxi)metil)pirrolidino-1 -carboxilato de ferc-butila 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04 (d, 7=6,53 Hz, 6 H),
1,48 (s, 9 H), 1,65 - 1,84 (m, 2 H), 1,91 - 2,12 (m, 3 H), 3,02 (s, 3 H), 3,06 5 3,21 (m, 1 H), 3,27 (d, 7=7,28 Hz, 2 H), 3,29 - 3,34 (m, 1 H), 4,09 (s amplo, 1
H), 4,18 - 4,30 (m, 2 H), 7,26 (d, 7=7,53 Hz, 1 H), 7,29 - 7,37 (m, 2 H), 7,58 (s amplo, 1 H), 7,68 (d, 7=8,53 Hz, 1 H), 7,82 - 7,96 (m, 3 H), 7,99 - 8,08 (m,
H). LCMS m/z 666,32 (M+Na), Rt 2,716 min. HPLC Rt 11,711 min. (Sunfire C18), 98,4 % de pureza e 12,663 min. (XBridge fenila C18), 98,8% de pure10 za.
Figure BRPI0918174A2_D0295
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(pirrolidin-2ilmetoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida, TFA.
A um RBF de 10 mL foram adicionados dicloroetano (1 mL), 2((2-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-415 (isobutilcarbamoil)fenoxi)metil)pirrolidino-1 -carboxilato de ferc-butila (10,2 mg, 15,8 pmols) e TFA, ácido trifluoracético, (800 pL). A solução foi agitada poor 30 minutos em temperatura ambiente, então evaporada no rotovap. O produto foi diluído com dicloroetano e evaporado mais uma vez para dar um sólido branco (99% de rendimento). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,04
393/543 (d, 4=6,53 Hz, 6 Η), 1,93-2,12 (m, 4 Η), 2,24 - 2,37 (m, 1 Η), 3,00 (s, 3 Η), 3,13 - 3,22 (m, 1 Η), 3,25 - 3,30 (m, 2 Η), 3,30 - 3,36 (m, 1 Η), 4,10 (dd, 4=7,15, 2,89 Hz, 1 Η), 4,29 (dd, 4=10,67, 7,15 Hz, 1 H), 4,51 (dd, 4=10,54, 3,26 Hz, 1 H), 7,28 (d, 4=8,53 Hz, 1 H), 7,35 (t, 4=8,78 Hz, 2 H), 7,60 (dd, 4=8,53, 1,51 Hz, 1 H), 7,73 (d, 4=8,53 Hz, 1 H), 7,92 - 8,08 (m, 5 H). LCMS m/z 544,22 (M+H), Rt 1,577 min. HPLC Rt 6,775 min. (Sunfire C18), 99,7 % de pureza e 11,724 min. (XBridge fenila C18), 100% de pureza.
NH
Sal de TFA
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(pirrolidin-3ilmetoxi)fenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida, TFA
H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,93 (d, 4=6,78 Hz, 6 H), 1,77
- 1,98 (m, 2 H), 2,10 (dd, 4=13,05, 6,78 Hz, 1 H), 2,76 - 2,86 (m, 1 H), 2,88 2,98 (m, 3 H), 3,18 (t, 4=6,40 Hz, 5 H), 3,55 (s amplo, 1 H), 4,02 - 4,26 (m, 2 H), 7,08 (d, 4=8,53 Hz, 1 H), 7,23 (t, 4=8,78 Hz, 2 H), 7,48 (dd, 4=8,53, 1,76 Hz, 1 H), 7,59 (d, 4=8,53 Hz, 1 H), 7,70 (t, 4=5,77 Hz, 1 H), 7,80 - 7,89 (m, 2 H), 7,94 (dd, 4=9,79, 1,76 Hz, 2 H), 7,99 (dd, 4=8,91, 5,40 Hz, 2 H). HPLC Rt 6,130 min. (Sunfire C18), 98,9 % de pureza e 10,184 min. (XBridge fenila C18), 98,6% de pureza. LCMS m/z 544,18 (M+H), Rt 1,557min.
H Sal de TFA
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(piperidin-3ilmetoxi)fenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida, TFA 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,93 (d, 4=6,78 Hz, 6 H), 1,40
- 1,57 (m, 1 Η), 1,75 - 2,00 (m, 4 Η), 2,33 (s amplo, 1 Η), 2,80 - 3,00 (m, 5 Η),
394/543
3,18 (t, 4=6,40 Hz, 2 H), 3,32 (d, 4=12,05 Hz, 1 H), 3,45 (d, 4=10,79 Hz, 1 H), 3,90 - 4,12 (m, 2 H), 7,03 (d, 4=8,53 Hz, 1 H), 7,22 (t, 4=8,78 Hz, 2 H), 7,47 (dd, 4=8,53, 1,51 Hz, 1 H), 7,58 (d, 4=8,53 Hz, 1 H), 7,71 (t, 4=5,65 Hz, 1 H), 7,75 - 7,86 (m, 2 H), 7,92 (s, 2 H), 8,01 (dd, 4=8,78, 5,52 Hz, 2 H). LCMS m/z 558,20 (M+H), Rt 1,595min. HPLC Rt 6,443 min. (Sunfire C18), 99,2 % de pureza e 10,418 min. (XBridge fenila C18), 99,2% de pureza.
5-(2-(3-Amino-3-oxopropoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,88 - 0,97 (m, 6 H), 1,77 (dt,
4=6,71, 3,29 Hz, 1 H), 1,89 (dt, 4=13,36, 6,74 Hz, 1 H), 2,65 (s amplo, 1 H), 2,96 (s, 3 H), 3,10 - 3,21 (m, 3 H), 3,60 - 3,65 (m, 1 H), 6,90 (d, 4=8,28 Hz, 1 H), 7,16 - 7,25 (m, 2 H), 7,48 - 7,56 (m, 1 H), 7,66 - 7,73 (m, 2 H), 7,73 - 7,80 (m, 2 H), 7,84 (t, 4=5,40 Hz, 1 H), 7,89 (s amplo, 1 H), 7,92 - 8,03 (m, 3 H). LCMS Rt 1,835min, m/z 532,26 (M+H). HPLC Rt 7,465 min. (Sunfire C18), 100% de pureza e 10,929 min. (XBridge fenila C18), 92,9% de pureza.
OH
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-(2-hidroxietoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de tampa com rosca pequeno foram adicionados 2(4-fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-/V-metilbenzofuran-3carboxamida (92 mg, 0,2 mmol) em DMF (4 mL), (2-Bromoetoxi)-tercbutildimetilsilano (0,129 mL, 0,600 mmol) e DBU (0,121 mL, 0,800 mmol). O frasco foi tampado e agitado a 80° C da noite para o dia. A DMF foi removida
395/543 sob uma corrente de nitrogênio para dar um óleo castanho que foi absorvido em 6 mL de acetonitrila e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/acetato de amônio a 1OmM onde o solvente A era acetonitrila a 5% / H2O a 95% / acetato de amônio a 10 mM e o solvente B era H2O a 5% / acetonitrila a 95% / acetato de amônio a 10mM com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10pm C18 30x1 OOmm em um gradiente de B a 40-100% e a taxa de fluxo de 30 mL/min durante 8 minutos com retenção de 10 minutos. O solvente foi removido no rotovap para dar 44 mg do álcool protegido com TBS como um óleo incolor claro. LCMS m/z 619,47 (M+H), Rt 3,123 min, 96% de pureza. Ao álcool protegido com TBS foram então adicionados 2,5 mL de tetra-hidrofurano junto com 2 eq. de solução de HCI a 1M (0,14 mmol, 140 pL). A mistura foi agitada por 1 hora em temperatura ambiente. A mistura de reação foi transferida para um funil de separação, diluída com acetato de etila, lavada com bicarbonate de sódio, salmoura e seca em sulfato de magnésio. O solvente orgânico foi evaporado e o produto posto sob vácuo. O produto bruto foi diluído com 2 mL de acetonitrila e purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/acetato de amônio onde o solvente A era acetonitrila a 5% / H2O a 95% / acetato de amônio a 10mM e o solvente B era H2O a 5% / acetonitrila a 95% / acetato de amônio a 10mM com uma coluna XBridge C18 5pm OBD 19 x 100mm em um gradiente de 30-100% de B e a taxa de fluxo de 20 mL/min durante 7 minutos com retenção de 13 minutos. 18,3 mg de um sólido branco (17% de rendimento, 2 etapas) foram obtidos após evaporação do solvente.
1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,93 (d, J = 6,78 Hz, 6 H), 1,80-1,98 (m, 1 H), 2,91 (d,J = 4,77 Hz, 3 H), 3,13-3,23 (m, 2 H), 3,79 (t, J = 4,89 Hz, 2 H), 4,10 (t, J = 4,89 Hz, 2 H), 7,08 (d, J = 8,53 Hz, 1 H), 7,21 (t, J = 8,78 Hz, 2 H), 7,52 (s amplo, 1 H), 7,52 - 7,54 (m, 2 H), 7,59 (s amplo, 1 H), 7,84 (dd, J = 8,53, 2,26 Hz, 1 H), 7,92 (d, J = 2,26 Hz, 1 H), 8,02 (s, 1 H), 8,09 - 8,20 (m, 2 H). LCMS m/z 505,36 (M+H), Rt 2,013min. HPLC Rt 8,901 min. (Sunfire C18), 92,5 % de pureza e 11,479 min. (XBridge fenila C18), 92,0% de pureza. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica
396/543
Shimadzu I LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto.
nh2
5-(2-(2-Aminoetoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de 2 dram foi adicionada 2-(4-fluorfenil)-5-(2-hidróxi5-(isobutilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (92,0 mg, 0,20 mmol) em 3 mL de DMF junto com 2-(2-bromoetil) isoindolino-1,3-diona (152 mg, 0,600 mmol) e DBU (0,120 mL, 0,800 mmol). O frasco foi tampado e
397/543 agitado a 75° C de um dia para o outro. A mistura de reação bruta foi então evacuada até quase secagem, absorvida em 6 mL de acetonitrila e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA a 0,1% onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10%/ acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 30x1 OOmrn em um gradiente de B a 40-100% e a taxa de fluxo de 40 mL/min durante 10 minutos com retenção de 10 minutos para dar 5-(2-(2-(1,3dioxoisoindolin-2-il)etoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida como um sólido branco (30mg, 23% de rendimento). 1H RMN (400 MHz, DMF-d7) δ ppm 0,93 (d, 7=6,78 Hz, 6 H), 1,86 - 1,99 (m, 1 H), 2,97 (d, 7=4,77 Hz, 3 H), 3,14 - 3,26 (m, 2 H), 4,06 (t, 7=5,90 Hz, 2 H), 4,47 (t, 7=5,90 Hz, 2 H), 7,33 (d, 7=9,29 Hz, 1 H), 7,36 - 7,49 (m, 4 H), 7,74 - 7,86 (m, 5 H), 7,97 - 8,02 (m, 2 H), 8,11 - 8,17 (m, 2 H), 8,20 (d, 7=4,27 Hz, 1 H), 8,42 (s, 1 H). LCMS m/z 634,25 (M+H), Rt 2,408 min. HPLC Rt 9,339 min. (Sunfire C18), 100% de pureza e 11,696 min. (Gemini C18), 98,9% de pureza. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de 30-100% de B (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analitica Shimadzu com uma coluna Waters XBridge fenila C18 3pm 4,6 x
398/543
150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 30-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10 mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A um RBF de 100mL equipado com um condensador de refluxo foi adicionada 5(2-(2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)N-metilbenzofuran-3-carboxamida (26,4 mg, 0,042 mmol) em metanol e solução de hidrazina anidra (1,308 pL, 0,042 mmol) (Aldrich, 215155-50G). O frasco foi posto em um banho de óleo pré-equilibrado e refluxo por 2 horas. O produto bruto foi concentrado no rotovap para remover metanol, diluído com diclorometano, lavado com solução de hidróxido de sódio a 0,5M e extraído. O solvente foi removido e o produto bruto foi purificado usando a HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA a 0,1% mencionada acima com um gradiente de B a 20-100% para dar (13 mg, 58%) de um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,94 (d, 7=6,78 Hz, 6 H), 1,91 (dt, 7=13,55, 6,78 Hz, 1 H), 2,91 (s, 3 H), 3,18 (d, 7=7,28 Hz, 2 H), 3,33 (t, 7=5,02 Hz, 2 H), 4,30 (t, 7=5,14 Hz, 2 H), 7,21 (d, 7=8,78 Hz, 1 H), 7,26 (t, 7=8,78 Hz, 2 H), 7,50 - 7,59 (m, 1 H), 7,60 - 7,68 (m, 1 H), 7,81 - 8,00 (m, 5 H). LCMS m/z 504,31 (M+H), Rt 1,538 min. HPLC Rt 6,435 min. (Sunfire C18), 97,1 % de pureza e 11,376 min. (XBridge fenila C18), 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0296
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(2-ureidoetoxi)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de 2 dram foi adicionada 5-(2-(2-aminoetoxi)-5
399/543 (isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida (22,7 mg, 0,045 mmol) em etanol (2 mL) junto com água (0,667 mL) e cianeto de potássio (5,34 pL, 0,135 mmol). O frasco foi vedado e a mistura aquecida até 80° C com agitação por 24 horas. 3 equivalentes adicionais de cianato de potássio foram adicionados à mistura de reação e o frasco novamente tampado e aquecido por 3 dias. A mistura de reação bruta foi evaporada, diluída com acetonitrila, filtrada e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA a 0,1% onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 30x1 OOmrn em um gradiente de 30100% de B e uma taxa de fluxo de 40 mUmin durante 8 minutos com retenção de 6 minutos. O solvente foi evaporado para dar 10 mg (40%) de um sólido branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ TFA a 0,1% / HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / TFA a 0,1% I HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ TFA a 0,1% com um gradiente de B a 20-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna PHENOMENEX® Gemini C18 3pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a ΣΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de
400/543 amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THFd8) δ ppm 0,94 (d, 7=6,53 Hz, 6 H), 1,82 -1,98 (m, 1 H), 2,88 (d, 7=4,77 Hz, 3 H), 3,14 - 3,23 (m, 2 H), 3,47 (q, 7=4,94 Hz, 2 H), 4,03 (t, 7=4,52 Hz, 2 H), 5,55 (s amplo, 1 H), 6,18 (s amplo, 1 H), 7,03 (d, 7=8,53 Hz, 1 H), 7,21 - 7,32 (m, 2 H), 7,46 - 7,51 (m, 1 H), 7,51 - 7,56 (m, 1 H), 7,56 - 7,62 (m, 1 H), 7,80 (dd, 7=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 7,84 (d, 7=4,52 Hz, 1 H), 7,91 - 8,02 (m, 3 H), 8,22 (d, 7=1,25 Hz, 1 H).LCMS Rt 1,988 min, m/z 547,24 (M+H). HPLC Rt 8,126 min. (Sunfire C18), 99,7 % de pureza e 11,214 min. (Gemini C18), 99,5% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0297
5-(2-(3-(1,3-Dioxoisoindolin-2-il)propoxi)-5(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-de) δ ppm 0,93 (d, 7=6,78 Hz, 6 H), 1,81 - 1,97 (m, 1 H), 2,09 (m, 2 H), 2,90 (d, 7=4,77 Hz, 3 H), 3,12 - 3,26 (m, 2 H), 3,79 (t, 7=6,65 Hz, 2 H), 4,11 (t, 7=5,90 Hz, 2 H), 7,03 (d, 7=8,78 Hz, 1 H), 7,16 - 7,28 (m, 2 H), 7,45 (d, 7=4,27 Hz, 1 H), 7,48 - 7,51 (m, 1 H), 7,51 7,56 (m, 1 H), 7,59 (dd, 7=8,78, 1,76 Hz, 1 H), 7,65 - 7,74 (m, 4 H), 7,79 7,90 (m, 3 H), 8,08 - 8,24 (m, 2 H). LCMS m/z 648,19 (M+H), Rt 2,458 min. HPLC Rt 10,158 min. (Sunfire C18), 99,4 % de pureza e 12,111 min. (Gemini C18), 99,7% de pureza.
401/543
Figure BRPI0918174A2_D0298
5-(2-(2-Aminoetoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,93 (d, 7=6,53 Hz, 6 H), 1,82 - 1,93 (m, 1 H), 2,15 (m, 2 H), 2,91 (d, 7=4,52 Hz, 3 H), 3,08 - 3,24 (m, 4 H), 4,17 (t, 7=5,65 Hz, 2 H), 7,06 (d, 7=8,53 Hz, 1 H), 7,18 - 7,28 (m, 2 H), 7,47 (dd, 7=8,53, 1,76 Hz, 1 H), 7,53 - 7,66 (m, 2 H), 7,82 (dd, 7=8,53, 2,26 Hz, 2 H), 7,90 (d, 7=2,26 Hz, 1 H), 7,95 (d, 7=1,51 Hz, 1 H), 7,97 - 8,05 (m, 2 H), 8,28 (s amplo, 2 H). LCMS Rt 1,537 min, m/z 518,16 (M+H). HPLC Rt 10,734 min. (Sunfire C18), 99,2% de pureza e 10,881 min. (Gemini C18), 99,3% de pureza. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu I LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma PHENOMENEX® Gemini C18 3pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio 10mM com um gradiente de B
402/543 a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto.
Figure BRPI0918174A2_D0299
5-(2-(Difluormetoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de micro-ondas pequeno foram adicionados 2-(4fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(isobutilcarbamoil) fenil)-/V-metilbenzofuran-3carboxamida (23,02 mg, 0,05 mmol), acetonitrila (400 pL), água (400 pL) e 2-cloro-2,2-diflúor-1-feniletanona (47,6 mg, 0,250 mmol). O frasco foi vedado e a mistura de reação foi submetida a aquecimento com micro-ondas (BIOTAGE® Initiator) a 110° C por 8 minutos. A mistura de reação bruta foi diluída mais com acetonitrila, filtrada e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA a 0,1% onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 30x100mm em um gradiente de 30-100% de B e a taxa de fluxo de 40 mL/min durante 10 minutos com retenção de 10 minutos. O solvente foi evaporado para dar produto (35%) como um sólido branco. 1H RMN (500 MHz, THF-d8) δ ppm 0,86 - 1,01 (m, 6 H), 1,89 (dt, J = 13,50, 6,83 Hz, 1 H), 2,90 (d, J = 4,58 Hz, 3 H), 3,12 - 3,28 (m, 2 H), 6,61 7,04 (m, 1 H), 7,18 - 7,27 (m, 2 H), 7,31 (d, J = 8,54 Hz, 1 H), 7,49 (dd, J = 8,55, 1,83 Hz, 1 H), 7,53 (d, J = 4,27 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 8,55 Hz, 1 H), 7,78 (t, J = 5,49 Hz, 1 H), 7,82 (d, J = 1,22 Hz, 1 H), 7,91 (dd, J = 8,55, 2,44 Hz, 1 H), 7,98 (d, J = 2,14 Hz, 1 H), 8,09 - 8,17 (m, 2 H). LCMS m/z 511,21 (M+H), Rt 2,393 min. HPLC Rt 12,213 min. (Sunfire C18), 99,3 % de pureza e 15,427 min. (XBridge C18), 99,8% de pureza. Os dados de LC/MS foram
403/543 obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com umacoluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de 30-100% de Β (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna Waters Fenil XBridge C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 30-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto.
3-Bromo-A/-isobutil-5-isopropoxibenzamida
A um frasco de rosca em cima grande foram adicionados ácido 3-bromo-5-hidroxibenzoico (1 g, 4,61 mmols), piridina (10 mL), Λ/1((etilimino)metileno)-/V3,/\/3-dimetilpropano-1,3-diamina, HCI (0,972 g, 5,07 mmols) (EDAC) junto com 2-metilpropan-1 -amina (0,504 mL, 5,07 mmols). O frasco foi tampado e a mistura agitada de um dia para o outro. A mistura de reação foi acidificada com 10 mL de uma solução de HCI a 1M fria. A mistura foi diluída com diclorometano, extraída, lavada com salmoura e seca em sulfato de magnésio. A mistura de reação foi filtrada, então adicionada em cima de um cartucho de sílica-gel Thomson de 240 g. O produto foi eluído com metanol a 0-12% (3000mL) em diclorometano para dar 3-bromo-5-hidróxi-/V404/543 isobutilbenzamida (95%) como um sólido amarelo. LCMS Rt 1,632 min, m/z 273,99 (M+H), 93% de pureza. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1 % I HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de 30100% de B (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. Ao tubo vedado foram adicionados 3-bromo-5-hidróxi-/V-isobutilbenzamida (380,4 mg, 1,398 mmol), DMF (15 mL), 2-iodopropano (0,210 mL, 2,097 mmols) e carbonato de potássio (290 mg, 2,097 mmols). O tubo foi vedado e aquecido para 90° C da noite para o dia. A mistura de reação foi resfriada, transferida para um funil de separação, diluída com acetato de etila e extraída. A solução orgânica foi lavada com HCI a 1M, salmoura, seca em sulfato de magnésio, filtrada e evaporada até secar. O óleo laranja resultante foi absorvido em diclorometano e purificado usando a BIOTAGE® Horizon com uma coluna de sílica-gel Thomson 110g empregado metanol 0-5%> e 2000 mL de solvente para dar um rendimento quase quantitativo de
3-bromo-A/-isobutil-5-isopropoxibenzamida como um sólido amarelo claro. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1 %> / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minu
405/543 tos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de 30-100% de B (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,87 -1,04 (m, 6 H), 1,23 - 1,37 (m, 6 H), 1,79 - 2,00 (m, 1 H), 3,25 (t, 4=6,40 Hz, 2 H), 4,57 (dt, 4=12,05, 6,02 Hz, 1 H), 6,29 (s amplo, 1 H), 7,08 - 7,19 (m, 1 H), 7,21 7,26 (m, 1 H), 7,38 (s, 1 H). LCMS Rt 2,413 min, m/z 315,01 (M+H), 95% de pureza.
3-Bromo-/V-isobutil-4-(trifluormetoxi)benzamida
A um frasco de rosca em cima grande foram adicionados ácido 3-bromo-4-(trifluormetoxi)benzoico (100 mg, 0,351 mmol), piridina (5 mL), 2metilpropan-1-amina (0,038 mL, 0,386 mmol), /V1-((etilimino)metileno)N3,N3-dimetilpropano-1,3-diamina, HCI (EDAC) (74,0 mg, 0,386 mmol) e HATU, hexafluorfosfato de 2-(7-aza-1/7-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3tetrametilurônio, (400 mg, 1,053 mmol) previamente sintetizados. O frasco foi tampado e agitado da noite para o dia em temperatura ambiente. A mistura de reação bruta foi diluída com metanol e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando metanol/água/TFA a 0,1% onde o solvente A era metanol a 10% / água a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era água a 10% / metanol a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10pm C18 30x1 OOrnm em um gradiente de B a 30-100% e uma taxa de fluxo de 40 mL/min durante 9 minutos com retenção de 11 minutos para dar 75 mg (62%) de um sólido amarelo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%
406/543
I HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna PHENOMENEX® Gemini C18 3pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,98 -1,11 (m, 6 H), 1,91 - 2,09 (m, 1 H), 3,22 - 3,30 (m, 2 H), 7,57 (dd, 4=8,53, 1,51 Hz, 1 H), 7,96 (dd, 4=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 8,25 (d, 4=2,01 Hz, 1 H), 8,68 (s amplo, 1 H). HPLC Rt 17,141 min. (Sunfire C18), 99,5 % de pureza e 15,912 min. (Gemini C18), 100% de pureza. LCMS Rt 2,367 min, m/z 341,99 (M+H).
Figure BRPI0918174A2_D0300
Br
3-Bromo-/\/-(1-fenilciclopropil)-4-(trifluormetoxi)benzamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,40 (d, J = 4,52 Hz, 4 H), 7,16 - 7,30 (m, 1 H), 7,32 - 7,41 (m, 4 H), 7,58 (dd, 4 = 8,66, 1,38 Hz, 1 H), 7,99 (dd, 4= 8,66, 2,13 Hz, 1 H), 8,28 (d, 4= 2,01 Hz, 1 H), 9,42 (s amplo, 1 H). LCMS Rt 2,56 min, m/z 401,97 (M+H). HPLC Rt 15,171 min. (Sunfire C18), 98,8 % de pureza e 16,066 min. (Gemini C18), 100% de pureza.
407/543
Figure BRPI0918174A2_D0301
Br
3-Bromo-A/-(1-(piridin-2-il)ciclopropil)-4-(trifluormetoxi)benzamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,70 - 1,80 (m, 2 H), 1,80 1,91 (m, 2 H), 7,57 (dd, 7=8,78, 1,25 Hz, 1 H), 7,76 - 7,88 (m, 2 H), 8,03 (dd, 7=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 8,33 (d, 7=2,01 Hz, 1 H), 8,43 (t, 7=8,03 Hz, 1 H), 8,63 (d, 7=5,52 Hz, 1 H). LCMS Rt 1,420 min, m/z 402,95 (M+H). HPLC Rt 5,611 min. (Sunfire C18), 93,8 % de pureza e 11,206 min. (Gemini C18), 98,4% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-/V-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan2-il)benzofuran-3-carboxamida
A um tubo vedado foram adicionados trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (2,000 g, 4,79 mmols), dioxana (20 mL), trietilamina (1,993 mL, 14,38 mmols), 4,4,4',4',5,5,5',5'octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (4,87 g, 19,17 mmols) e finalmente PdCI2(dppf) (0,235 g, 0,144 mmol). O frasco recebeu fluxo de N2, foi vedado e aquecido da noite para o dia em um banho de óleo a 80° C. A mistura de reação foi resfriada, diluída com diclorometano e lavada com solução de HCI a 0,1 M, então salmoura. A mistura marrom foi passada por um tampão de sulfato de magnésio/CELITE® 1:1 para dar um sólido marro escuro após evaporação do solvente. O produto bruto foi absorvido em 50 mL de diclorometano e adicionado à parte superior de um cartucho de sílica-gel Thomson de 240 g pré-equilibrado. O produto foi eluído com metanol 0-2% em diclorometano para dar um rendimento de 80% de 2-(4-fluorfenil)-/V-metil-5(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzofuran-3-carboxamida como um sólido castanho. 1H RMN (400 MHz, THF-de) δ ppm 1,34 (s, 12 H), 2,92
2,95 (m, 3 Η), 7,20 (t, 7=8,91 Hz, 2 H), 7,50 (d, 7=8,28 Hz, 2 H), 7,74 (dd,
408/543
7=8,28, 1,00 Hz, 1 H), 8,08 - 8,13 (m, 2 H), 8,14 (s, 1 H). LCMS m/z 396,18 (M+H), Rt 2,455 min, 90% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-isopropoxifenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de micro-ondas de tamanho médio foram adicionados 1 (465 mg, 1,0 mmol), dioxana (15 mL), água (1,500 mL), 3-bromo-/Visobutil-5-isopropoxibenzamida (377 mg, 1,200 mmol), diciclo-hexil(2',6'dimetoxibifenil-2-il)fosfina (82 mg, 0,200 mmol), fosfato de potássio, tribásico (849 mg, 4,00 mmols) e finalmente acetato de paládio(ll) (44,9 mg, 0,200 mmol). O frasco foi tampado e submetido a aquecimento com micro-ondas (150° C) em um BIOTAGE® Initiator por 13 minutos. A mistura de reação foi diluída com 150mL de diclorometano, lavada com solução de HCI a 1M, então água e finalmente salmoura. A solução foi filtrada em um tampão de 1:1 de CELITE®/sulfato de magnésio, então evaporada para dar um óleo marrom. O produto bruto foi absorvido em diclorometano e adicionado à parte superior de um cartucho de sílica-gel BIOTAGE® de 100 g pré-equilibrado. O produto foi eluído com uma mistura de solvente de metanol em diclorometano a 0-3% para dar produto como um sólido castanho claro. (51%). 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,95 (d, 7=6,53 Hz, 6 H), 1,35 (d, 7=6,02 Hz, 6 H), 1,83-1,98 (m, 1 H), 2,90 - 2,98 (m, 3 H), 3,14-3,29 (m, 2 H), 4,66-4,82 (m, 1 H), 7,18 - 7,25 (m, 2 H), 7,26 - 7,29 (m, 1 H), 7,38 - 7,42 (m, 1 H), 7,48 (m, 1 H), 7,58 - 7,65 (m, 2 H), 7,65 - 7,72 (m, 2 H), 7,96 (d, 7=1,00 Hz, 1 H), 8,08 - 8,16 (m, 2 H). LCMS Rt 2,588 min, m/z 503,25 (M+H), 98% de pureza.
409/543
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(trifluormetoxi)fenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida
Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ TFA a0,1% / HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água I TFA a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5mm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna PHENOMENEX® Fenil XBridge C18 3,5mm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonate de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,94 (dd, 7=6,78, 2,26 Hz, 6 H), 1,82 - 1,97 (m, 1 H), 2,90 (d, 7=4,77 Hz, 3 H), 3,12 - 3,24 (m, 2 H), 7,17 - 7,29 (m, 2 H), 7,47 (dd, 7=8,53, 1,76 Hz, 2 H), 7,61 (d, 7=8,53 Hz, 1 H), 7,71 - 7,81 (m, 2 H), 7,83 (d, 7=1,26 Hz, 1 H), 7,92 7,98 (m, 1 H), 7,99 - 8,05 (m, 1 H), 8,07 - 8,15 (m, 2 H). LCMS Rt 2,565min, m/z 529,13 (M+H). HPLC Rt 11,166 min. (Sunfire C18), 99,5 % de pureza e 11,813 min. (Fenila XBridge C18), 86,7% de pureza.
410/543
Figure BRPI0918174A2_D0302
2-(4-Fluorfenil)-/V-metil-5-(5-(1 -fenilciclopropilcarbamoil)-2(trifluormetoxi) fenil)benzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,20 - 1,39 (m, 4 H), 2,89 (d, 4=4,52 Hz, 3 H), 7,06 - 7,15 (m, 1 H), 7,17 - 7,27 (m, 4 H), 7,29 - 7,35 (m, 2 5 H), 7,44 (s amplo, 1 H), 7,47 (m, 2 H), 7,61 (d, 4=8,53 Hz, 1 H), 7,83 (d,
4=1,26 Hz, 1 H), 7,98 (dd, 4=8,66, 2,38 Hz, 1 H), 8,05 (d, 4=2,01 Hz, 1 H), 8,08 - 8,15 (m, 2 H), 8,50 (s amplo, 1 H). LCMS Rt 2,796 min, m/z 589,23 (M+H). HPLC Rt 11,419 min. (Sunfire C18), 98,9 % de pureza e 12,424 min. (Fenila XBridge C18), 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0303
2-(4-Fluorfenil)-/V-metil-5-(5-(1 -(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)2-(trifluormetoxi)fenil)benzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,21 - 1,33 (m, 2 H), 1,62 1,70 (m, 2 H), 2,89 (d, 4=4,77 Hz, 3 H), 7,01 (m, 1 H), 7,18 - 7,28 (m, 2 H), 7,40 (d, 4=8,03 Hz, 1 H), 7,43 (s amplo, 1 H), 7,46 - 7,58 (m, 3 H), 7,62 (d,
4=8,53 Hz, 1 H), 7,86 (d, 4=1,26 Hz, 1 H), 8,04 (dd, 4=8,66, 2,38 Hz, 1 H),
8,07 - 8,17 (m, 3 H), 8,36 - 8,42 (m, 1 H), 8,57 (s amplo, 1 H). LCMS Rt 1,768 min, m/z 590,13 (M+H). HPLC Rt 7,645 min. (Sunfire C18), 99,0 % de pureza e 12,041 min. (Fenila XBridge C18), 99,9% de pureza.
411/543
Figure BRPI0918174A2_D0304
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-hidróxi-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um RBF de 250mL foi adicionada 2-(4-fluorfenil)-5-(3(isobutilcarbamoil)-5-isopropoxifenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida (1,3409 g, 2,67 mmols) em diclorometano (20 mL). O frasco foi vedado com um septo, posto sob N2 e agitado por 5 minutos. A esta mitura foi então adicionado tricloroborano a 1M (frio) (8,00 mL, 8,00 mmols) em diclorometano. A solução foi agitada em temperatura ambiente por 6 horas. A mistura de reação foi resfriada para 0o C e metanol foi adicionado para extinguir a reação. O frasco foi deixado aquecer até a temperatura ambiente e os voláteis foram removidos para dar um rendimento quantitativo de um sólido castanho. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (d, J = 6,78 Hz, 6 H), 1,97 2,12 (m, 1 H), 3,01 - 3,12 (m, 3 H), 3,29 (t, J = 6,53 Hz, 2 H), 7,27 - 7,40 (m, 4 H), 7,64 (s, 1 H), 7,72 (s, 2 H), 7,98 (s, 1 H), 8,03 (dd, J = 8,66, 5,40 Hz, 2 H), 8,56 (s amplo, 1 H). LCMS Rt 2,157 min, m/z 461,03 (M+H), 97,6% de pureza.
σ''
Figure BRPI0918174A2_D0305
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-metoxifenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pure
412/543 za de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna Waters XBridge Fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,87 - 1,03 (m, 6 H), 1,83 - 1,99 (m, 1 H), 2,93 (d, 7=4,77 Hz, 3 H), 3,16 - 3,25 (m, 2 H), 3,88 (s, 3 H), 7,18 - 7,26 (m, 2 H), 7,29 - 7,32 (m, 1 H), 7,42 (dd, 7=2,38, 1,38 Hz, 1 H), 7,50 (s amplo, 1 H), 7,57 - 7,66 (m, 2 H), 7,71 (s amplo, 2 H), 7,97 (d, 7=1,25 Hz, 1 H), 8,08 8,16 (m, 2 H). LCMS m/z 475,22 (M+H), Rt 2,373 min.. HPLC Rt 10,268 min. (Sunfire C18), 96,7 % de pureza e 12,104 min. (XBridge fenila C18), 99,2% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0306
Figure BRPI0918174A2_D0307
5-(3-(2-(Dimetilamino)etoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,95 (d, 7 = 6,78 Hz, 6 H), 1,87 -1,98 (m, 1 H), 2,89 (s, 6 H), 2,93 (d, 7 = 4,52 Hz, 3 H), 3,21 (t, 7 = 6,40 Hz, 2 H), 3,47 - 3,54 (m, 2 H), 4,54 - 4,64 (m, 2 H), 7,22 (t, 7 = 8,66 Hz, 2 H), 7,42 (s, ΐ H), 7,51 (s amplo, 1 H), 7,58 (d, J = 5,27 Hz, 1 H), 7,61 (s, 1 H),
413/543
7,62 - 7,69 (m, 1 Η), 7,80 (s, 1 Η), 7,83 (s amplo, 1 Η), 7,98 (s, 1 Η), 8,12 (dd, J = 8,91, 5,40 Hz, 2 H). LCMS Rt 1,543 min, m/z 532,28 (M+H). HPLC Rt 6,816 min. (Sunfire C18), 96,0 % de pureza e 12,073 min. (XBridge Fenila
Figure BRPI0918174A2_D0308
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-(2-(piridin-3il)etoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,94 (d, J = 6,53 Hz, 6 H), 1,83 - 1,98 (m, 1 H), 2,92 (d, J = 4,27 Hz, 3 H), 3,13 - 3,30 (m, 4 H), 4,32 4,47 (m, 2 H), 7,22 (t, J = 8,66 Hz, 2 H), 7,32 (s, 1 H), 7,41 - 7,53 (m, 3 H), 7,55 - 7,67 (m, 2 H), 7,72 (s amplo, 2 H), 7,91 - 8,01 (m, 2 H), 8,11 (dd, J = 8,03, 5,52 Hz, 2 H), 8,55 (s amplo, 1 H), 8,72 (s amplo, 1 H). LCMS Rt 1,632 min, m/z 566,26 (M+H). HPLC Rt 7,216 min. (Sunfire C18), 98,1 % de pureza e 12,073 min. (XBridge Fenila C18), 99,0% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0309
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-(2-(piperidin-3il)etoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Waters Acquity SDS I LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Acquity UPLC BEH 1,7pm C18, 2,1 x 50mm, com um gradiente de B a 2-98% (B = HPLC a 100% de grau acetonitrila/ TFA a 0,05%), (A = HPLC a 100% de grau água / TFA a 0,05%), em 2,2 minutos em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC foi deter
414/543 minada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ TFA a 0,1% com um gradiente de B a 20-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,99 (d, 4=6,78 Hz, 6 H), 1,36 (dd, 4=12,30, 3,01 Hz, 1 H), 1,69 - 1,89 (m, 3 H), 1,91 - 2,16 (m, 4 H), 2,77 (t, 4=12,17 Hz, 1 H), 2,87 - 2,95 (m, 1 H), 3,23 (d, 4=7,03 Hz, 2 H), 3,29 - 3,40 (m, 4 H), 3,43 - 3,52 (m, 1 H), 4,19 (t, 4=6,02 Hz, 2 H), 7,24 (t, 4=8,78 Hz, 2 H), 7,36 (dd, 4=1.0,54, 1,51 Hz, 2 H), 7,58 - 7,68 (m, 2 H), 7,70 (s, 1 H), 7,87 - 7,98 (m, 3 H). LCMS m/z 572,16 (M+H). HPLC Rt 6,518 min. (Sunfire C18), 98% de pureza.
NH
5-(3-(4-Aminobutoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,99 (d, 4=6,78 Hz, 6 H), 1,86 - 2,04 (m, 5 H), 2,95 - 3,00 (m, 3 H), 3,06 (t, 4=7,15 Hz, 2 H), 3,21 - 3,27 (m, 2 H), 4,19 (t, 4=5,40 Hz, 2 H), 7,23 - 7,31 (m, 2 H), 7,38 (dd, 4=3,76, 1,25 Hz, 2 H), 7,64 - 7,70 (m, 2 H), 7,71 (s, 1 H), 7,91 - 7,99 (m, 3 H), 8,60 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 532,00 (M+H). HPLC Rt 6,386 min. (Sunfire C18), 100% de pureza.
5-(3-(2-(1 H-lmidazol-1-il)etoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4415/543 fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (d, 9=6,78 Hz, 6 H), 2,03 (d, 9=6,78 Hz, 1 H), 3,05 (s, 3 H), 3,31 (d, 9=7,03 Hz, 2 H), 4,62 (t, 9=4,77 Hz, 2 H), 4,79 (s amplo, 2 H), 7,35 (t, 9=8,78 Hz, 2 H), 7,49 (d, 9=2,76 Hz, 2 H), 7,68 (s, 1 H), 7,73 - 7,77 (m, 2 H), 7,83 (s, 1 H), 7,88 (s, 1 H), 7,98 8,07 (m, 3 H), 9,17 (s, 1 H). LCMS m/z 555,00 (M+H). HPLC Rt 6,295 min. (Sunfire C18), 95,2% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-(2-(piridin-4il)etoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,05 (d, 9=6,53 Hz, 6 H),
1,95 - 2,09 (m, 1 H), 3,04 (s, 3 H), 3,24 - 3,33 (m, 2 H), 3,54 (t, 9=5,90 Hz, 2 H), 4,60 (t, 9=5,77 Hz, 2 H), 7,27 - 7,38 (m, 2 H), 7,41 - 7,49 (m, 2 H), 7,71 7,75 (m, 2 H), 7,78 (t, 9=1,51 Hz, 1 H), 7,96 - 8,05 (m, 3 H), 8,12 (d, 9=6,53 Hz, 2 H), 8,80 (d, 9=6,78 Hz, 2 H). LCMS m/z 566,00 (M+H). HPLC Rt 6,4921 min. (Sunfire C18), 98,6% de pureza.
o
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-(prop-2-yniloxi)fenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,07 (d, 9=6,78 Hz, 6 H), 1,94 - 2,18 (m, 1 H), 3,00 - 3,13 (m, 4 H), 3,30 (d, 9=7,03 Hz, 2 H), 4,94 -
4,98 (m, 2 H), 7,27 - 7,42 (m, 2 H), 7,47 - 7,59 (m, 2 H), 7,68 - 7,79 (m, 2 H), 7,82 (t, 9=1,51 Hz, 1 H), 7,98 - 8,11 (m, 3 H). LCMS m/z 499,00 (M+H). H-
416/543
PLC Rt 9,984min. (Sunfire C18), 99,4% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0310
5-(3-(Ciclopropilmetoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,48 (d, 7=14,81 Hz, 2 H),
0,72 (d, 7=7,78 Hz, 2 H), 1,06 (d, 7=6,53 Hz, 6 H), 1,51-1,59 (m, 1 H), 1,98 2,10 (m, 1 H), 3,05 (s, 3 H), 3,30 (d, 7=7,03 Hz, 2 H), 4,04 (d, 7=6,78 Hz, 2 H), 7,33 (t, 7=8,66 Hz, 2 H), 7,43 (s, 2 H), 7,49 (s amplo, 1 H), 7,75 (d, 7=9,04 Hz, 3 H), 7,97 - 8,09 (m, 3 H). LCMS m/z 515,17 (M+H). HPLC Rt 10,878 min. (Sunfire C18), 91,4% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0311
Figure BRPI0918174A2_D0312
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-(piridin-3-ilmetoxi)fenil)A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (d, 7=6,78 Hz, 6 H), 2,03 (dt, 7=13,55, 6,78 Hz, 1 H), 3,04 (s, 3 H), 3,30 (d, 7=7,03 Hz, 2 H), 5,52 (s, 2 H), 7,33 (t, 7=8,78 Hz, 2 H), 7,59 (dd, 7=6,40, 1,38 Hz, 2 H), 7,69 - 7,80 (m, 2 H), 7,84 (s, 1 H), 7,96 - 8,09 (m, 4 H), 8,64 (d, 7=8,28 Hz, 1 H), 8,83 (d,
7=4,52 Hz, 1 H), 9,02 (s, 1 H). LCMS m/z 552,05 (M+H). HPLC Rt 6,401 min. (Sunfire C18), 100% de pureza.
417/543
Figure BRPI0918174A2_D0313
Figure BRPI0918174A2_D0314
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(furan-3-ilmetoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (d, 7=6,53 Hz, 6 H),
1,96 - 2,14 (m, 1 H), 3,06 (s, 3 H), 3,30 (d, 7=7,03 Hz, 2 H), 5,19 (s, 2 H),
6,64 (s, 1 H), 7,33 (t, 7=8,78 Hz, 2 H), 7,51 (s, 2 H), 7,59 (s amplo, 1 H), 7,70
- 7,82 (m, 4 H), 8,01 (d, 7=11,54 Hz, 3 H). LCMS m/z 541,00 (M+H). HPLC Rt 10,426 min. (Sunfire C18), 90,0% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0315
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-(2-(piperidin-4il)etoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (d, 7=6,53 Hz, 6 H),
1,96 - 2,14 (m, 1 H), 3,06 (s, 3 H), 3,30 (d, 7=7,03 Hz, 2 H), 5,19 (s, 2 H), 6,64 (s, 1 H), 7,33 (t, 7=8,78 Hz, 2 H), 7,51 (s, 2 H), 7,59 (s amplo, 1 H), 7,70 - 7,82 (m, 4 H), 8,01 (d, 7=11,54 Hz, 3 H). LCMS m/z 572,17 (M+H). HPLC Rt 6,571 min. (Sunfire C18), 95,8% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0316
Figure BRPI0918174A2_D0317
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-propoxifenil)-AZmetilbenzofuran-3-carboxamida
418/543
H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,87 - 0,98 (m, 6 H), 1,07 (t,
7=7,40 Hz, 3 H), 1,79 - 1,96 (m, 3 H), 2,93 (d, 7=4,52 Hz, 3 H), 3,21 (t, 7=6,40 Hz, 2 H), 4,05 (t, 7=6,53 Hz, 2 H), 7,22 (t, 7=8,66 Hz, 2 H), 7,30 (s amplo, 1 H), 7,39 - 7,56 (m, 2 H), 7,56 - 7,79 (m, 4 H), 7,97 (s, 1 H), 8,12 (dd, 7=8,53, 5,52 Hz, 2 H). LCMS m/z 503,15 (M+H). HPLC Rt 11,141 min. (Sunfire C18), 98,9% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-etoxifenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (d, 7=6,78 Hz, 6 H), 1,47 -1,62 (m, 3 H), 1,92 - 2,15 (m, 1 H), 3,05 (s, 3 H), 3,30 (d, 7=7,03 Hz, 2 H), 4,26 (q, 7=6,94 Hz, 2 H), 7,33 (t, 7=8,78 Hz, 2 H), 7,43 (s, 2 H), 7,70 7,83 (m, 3 H), 7,97 - 8,09 (m, 3 H). LCMS m/z 489,00 (M+H). HPLC Rt 10,464 min. (Sunfire C18), 93,7% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-(2-metoxietoxi)fenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,86 - 1,05 (m, 6 H), 1,82 2,02 (m, 1 H), 2,86 - 3,04 (m, 3 H), 3,21 (t, 7=6,40 Hz, 2 H), 3,34 - 3,45 (m, 3 H), 3,72 (t, 7=4,77 Hz, 2 H), 4,21 (t, 7=4,77 Hz, 2 H), 7,22 (t, 7=8,78 Hz, 2 H), 7,33 (s, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,49 (s amplo, 1 H), 7,55 - 7,83 (m, 4 H), 7,97 (s, 1 H), 8,12 (dd, 7=8,78, 5,52 Hz, 2 H). LCMS m/z 519,10 (M+H). HPLC Rt 9,676min. (Sunfire C18), 100% de pureza.
419/543
Figure BRPI0918174A2_D0318
Figure BRPI0918174A2_D0319
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-(2-(2-metil-1A/-imidazol1-il)etoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,99 (d, 4=6,53 Hz, 6 H), 1,90 - 2,03 (m, 1 H), 2,78 (s, 3 H), 2,94 - 3,02 (m, 3 H), 3,23 (d, 4=7,03 Hz, 2 5 H), 4,53 (t, 4=4,89 Hz, 2 H), 4,65 (t, 4=4,89 Hz, 2 H), 7,22 - 7,32 (m, 2 H),
7,38 (d, 4=1,51 Hz, 2 H), 7,46 (d, 4=2,01 Hz, 1 H), 7,63 - 7,69 (m, 3 H), 7,75 (t, 4=1,51 Hz, 1 H), 7,91 - 8,00 (m, 3 H). LCMS m/z 569,12 (M+H). HPLC Rt 6,340 min. (Sunfire C18), 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0320
Figure BRPI0918174A2_D0321
(S)-2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-(pirrolidin-210 ilmetoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1,06 (d, J=6,78 Hz, 6 H),
1,98 - 2,12 (m, 2 H), 2,16 - 2,32 (m, 2 H), 2,34 - 2,48 (m, 1 H), 3,04 (s, 3 H), 3,31 (d, 4=7,03 Hz, 2 H), 3,44 - 3,55 (m, 2 H), 4,12 - 4,22 (m, 1 H), 4,34 (dd,
4=10,54, 8,28 Hz, 1 H), 4,51 - 4,62 (m, 1 H), 7,27 - 7,42 (m, 2 H), 7,49 - 7,59 (m, 2 H), 7,71 - 7,82 (m, 2 H), 7,85 (s, 1 H), 7,97 - 8,10 (m, 3 H). LCMS m/z
544,12 (M+H). HPLC Rt 6,326 min. (Sunfire C18), 95,8% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0322
420/543
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-((5-metilisoxazol-3il)metoxi)fenil)-W-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,92 - 0,99 (m, 6 H), 1,83 -
1,99 (m, 1 H), 2,40 (s, 3 H), 2,90 - 2,98 (m, 3 H), 3,17 - 3,27 (m, 2 H), 5,18 5,25 (m, 1 H), 6,17 - 6,25 (m, 1 H), 7,17 - 7,27 (m, 2 H), 7,41 - 7,46 (m, 1 H), 7,47 - 7,54 (m, 2 H), 7,57 - 7,68 (m, 3 H), 7,68 - 7,74 (m, 1 H), 7,76 (d, 7=1,51 Hz, 1 H), 7,98 (d, 7=1,26 Hz, 1 H), 8,07 - 8,19 (m, 2 H). LCMS m/z 556,00 (M+H). HPLC Rt 10,106 min. (Sunfire C18), 90,0% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-((5-metilisoxazol-3il)metoxi)fenil)-/\/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, THF-d8) δ ppm 0,98 (d, 7=6,71 Hz, 6 H), 1,88
- 2,01 (m, 1 H), 2,92 - 3,00 (m, 3 H), 3,20 - 3,27 (m, 2 H), 5,17 (s, 2 H), 6,42 (dd, 7=3,05, 1,83 Hz, 1 H), 6,53 (d, 7=3,36 Hz, 1 H), 7,21 - 7,30 (m, 3 H), 7,43 (d, 7=1,53 Hz, 1 H), 7,55 (d, 7=12,51 Hz, 1 H), 7,59 - 7,66 (m, 3 H), 7,67
- 7,71 (m, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 8,02 (s, 1 H), 8,13 - 8,18 (m, 2 H). LCMS m/z 541,17 (M+H). HPLC Rt 10,401 min. (Sunfire C18), 90,0% de pureza.
5-(3-(Ciclobutilmetoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (500 MHz, THF-d8) δ ppm 0,95 (d, 7=6,71 Hz, 6 H), 1,86
- 2,02 (m, 6 H), 2,10 - 2,21 (m, 2 H), 2,87 - 2,97 (m, 3 H), 3,20 (d, 7=6,71 Hz,
H), 4,07 (d, 7=6,71 Hz, 2 H), 7,23 (t, 7=8,85 Hz, 2 H), 7,32 (s, 1 H), 7,43 (s,
421/543
Η), 7,57 - 7,63 (m, 2 Η), 7,63 - 7,68 (m, 1 Η), 7,73 (s, 1 Η), 7,79 - 7,86 (m,
Η), 7,99 (s, 1 Η), 8,09 - 8,16 (m, 2 Η). LCMS m/z 529,00 (M+H). HPLC Rt 11,771 min. (Sunfire C18), 94,2% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0323
Figure BRPI0918174A2_D0324
Figure BRPI0918174A2_D0325
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-(isobutilcarbamoil)-5-((5-metil-1,3,4oxadiazol-2-il)metoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,90 - 1,02 (m, 6 H), 1,84 2,00 (m, 1 H), 2,50 (s, 3 H), 2,94 (d, 7=4,77 Hz, 3 H), 3,17 - 3,27 (m, 2 H),
5,39 (s, 2 H), 7,18 - 7,29 (m, 2 H), 7,46 - 7,56 (m, 3 H), 7,58 - 7,68 (m, 2 H),
7,71 (s amplo, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 8,00 (d, 7=1,51 Hz, 1 H), 8,08 - 8,21 (m, 2 H). LCMS m/z 557,11 (M+H). HPLC Rt 8,964 min. (Sunfire C18), 92,0% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0326
Figure BRPI0918174A2_D0327
5-(3-(2-(1/-/-1,2,4-T riazol-1 -il)etoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2(4-fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,87 - 1,01 (m, 6 H), 1,83 1,98 (m, 1 H), 2,93 (d, 7=4,52 Hz, 3 H), 3,13 - 3,26 (m, 2 H), 4,49 (t, 7=5,14 Hz, 2 H), 4,61 (t, 7=5,02 Hz, 2 H), 7,19 - 7,27 (m, 2 H), 7,28 - 7,33 (m, 1 H),
7,39 - 7,42 (m, 1 H), 7,43 - 7,52 (m, 1 H), 7,57 - 7,66 (m, 2 H), 7,71 - 7,77 (m, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,96 (d, 7=1,00 Hz, 1 H), 8,06 - 8,17 (m, 3 H), 8,30 (s, 1
H). LCMS m/z 556,11 (M+H). HPLC Rt 7,969 min. (Sunfire C18), 92,0% de pureza.
422/543
Figure BRPI0918174A2_D0328
5-(3-(Cianometoxi)-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida 1Η RMN (500 MHz, THF-d8) δ ppm 0,96 (d, 4=6,71 Hz, 6 H), 1,85 - 1,98 (m, 1 H), 2,85 - 2,98 (m, 3 H), 3,16 - 3,27 (m, 2 H), 5,11 (s, 2 H), 7,18 7,29 (m, 2 H), 7,42 - 7,49 (m, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,60 - 7,71 (m, 2 H), 7,79 7,88 (m, 2 H), 8,00 (s, 1 H), 8,08 - 8,19 (m, 2 H). LCMS m/z 500,00 (M+H). HPLC Rt 9,584 min. (Sunfire C18), 95,9% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0329
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)bifenil-3-il)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de micro-ondas BIOTAGE® foram adicionados 1,4dioxana (2,0 mL), água (200 pL), diciclo-hexil(2',6'-dimetoxibifenil-2-il)fosfina (16,42 mg, 0,040 mmol), 5-(3-cloro-5-(isobutilcarbamoil) fenil)-2-(4-fluorfenil)N-metilbenzofuran-3-carboxamida (96 mg, 0,2 mmol), fosfato de potássio tribásico (170 mg, 0,800 mmol), acetato de paládio(ll) (8,98 mg, 0,040 mmol) e ácido fenilborônico (73,2 mg, 0,600 mmol). O frasco foi tampado, desgaseificado, recebeu fluxo de N2 e foi aquecido no micro-ondas por 15 minutos a 150° C. O solvente foi removido em um Termo/Savant SPEEDVAC® e o produto bruto foi dissolvido em DMF (1,8 mL) e purificado através de HPLC preparativa usando uma HPLC Prep. Shimadzu empregando acetonitrila/água/TFA a 0,1% onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / acetonitrila a
423/543
90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 30x100mm em um gradiente de B a 30-100% e uma taxa de fluxo de 40 mL/min durante 8 minutos com retenção de 10 minutos. Os tubos com o produto desejado foram evaporados da noite para o dia em um Savant/Termo SPEEDVAC®. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de graü acetonitrila/ TFA a 0,1% I HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / TFA a 0,1% I HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/TFA a 0,1% com um gradiente de B a 20-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna Waters XBridge fenila C18 3pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 20-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 0,99 (d, 7=6,78 Hz, 6 H), 1,92 - 2,05 (m, 1 H), 2,91 - 3,03 (m, 3 H), 3,21 - 3,27 (m, 2 H), 7,25 (t, 7=8,78 Hz, 2 H), 7,36 - 7,42 (m, 1 H), 7,49 (t, 7=7,53 Hz, 2 H), 7,65 - 7,70 (m, 1 H), 7,75 (d, 7=8,28 Hz, 3 H), 7,91 - 7,98 (m, 2 H), 8,00 (d, 7=1,51 Hz, 1 H), 8,03 - 8,10 (m, 3 H). LCMS m/z 521,33 (M+H), Rt 2,715 min. HPLC (Sunfire C18) Rt 11,531 min, 95% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt 12,868 min, 92% de pureza.
424/543
Figure BRPI0918174A2_D0330
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-hidróxi-3-(isobutilcarbamoii)fenil)-A/metilbenzofuran-3-carboxamida
A um tubo vedado de 350mL foram adicionados 2-(4-fluorfenil)5-(3-(isobutilcarbamoil)-4-metoxifenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida (1,14 g, 2,4 mmols), dicloroetano (250 mL) e complexo de tribrometo de boro-sulfeto de metila (6,0 g, 19,2 mmolses). O recipiente foi vedado e a mistura aquecida com agitação a 90° C da noite para o dia. A mistura de reação foi resfriada para 0o C e 100mL de metanol frio foram adicionados e a mistura agitada por 30 minutos, então evaporada até quase secar. A adição de metanol seguido por evaporação foi repetida para dar um sólido castanho (78%). Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/TFA a 0,1% / HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / TFA a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma coluna LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ TFA a 0,1% com um gradiente de B a 40-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna Gemini C18 3pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 50-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10 mM / HPLC a 5% de grau
425/543 metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (500 MHz, THF-d8) δ ppm 0,97 (d, 7=6,71 Hz, 6 H), 1,83 - 2,07 (m, 1 H), 2,92 (d, 7=4,88 Hz, 3 H), 3,24 (t, 7=6,41 Hz, 2 H), 6,96 (d, 7=8,55 Hz, 1 H), 7,23 (t, 7=8,70 Hz, 2 H), 7,50 - 7,55 (m, 1 H), 7,55 - 7,59 (m, 2 H), 7,67 (dd, 7=8,55, 2,14 Hz, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,99 (d, 7=2,14 Hz, 1 H), 8,09 (dd, 7=8,70, 5,34 Hz, 2 H), 8,35 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 461,18 (M+H), Rt 2,613 min. HPLC (Sunfire C18) Rt 10,033 min, 100% de pureza e (Gemini C18) Rt 9,748 min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0331
2-(4-Fluorfenil)-/V-metil-5-(5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)2-(trifluormetil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
A um frasco de micro-ondas BIOTAGE® foram adicionados 2-(4fluorfenil)-A/-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzofuran-3carboxamida (39,5 mg, 0,1 mmol), dioxana (2 mL), água (0,200 mL), 3-cloroA/-(1-(piridin-2-il)ciclopropil)-4-(trifluormetil)benzamida (37,5 mg, 0,110 mmol) (Preparada a partir do acoplamento de ácido 3-cloro-4-(trifluormetil)benzoico com bicloreto de 1-(piridin-2-il)ciclopropanamina e usando HATU e N,N-Diisopropiletilamina em DMF em r.t.), diciclo-hexil(2',6'-dimetoxibifenil-2il)fosfina (S-Fos, 8,21 mg, 0,020 mmol), fosfato de potássio tribásico (85 mg, 0,400 mmol) e finalmente acetato de paládio(ll) (4,49 mg, 0,020 mmol). O frasco foi tampado e submetido a aquecimento em micro-ondas (100° C) por 10 minutos. Após esfriar a mistura de reação, o solvente foi removido e o produto bruto foi purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 19 x 150mm em um gradiente de B a 20-100% e a taxa de fluxo de 25 mL/min durante 20 minutos com retenção de 5 minu
426/543 tos. O solvente foi removido dando 11,2 mg (20% de rendimento) da piridilcarboxamida desejada como um sólido amarelo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau metanol), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna Gemini C18 3,0pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,22 - 1,33 (m, 2 H), 1,63 1,69 (m, 2 H), 2,87 (d, 7=4,77 Hz, 3 H), 7,03 (dd, J=7,40, 4,89 Hz, 1 H), 7,23 (t, 7=8,66 Hz, 2 H), 7,33 (d, 7=8,28 Hz, 1 H), 7,40 (d, 7=7,53 Hz, 2 H), 7,52 7,63 (m, 2 H), 7,73 (d, 7=1,25 Hz, 1 H), 7,90 (d, 7=8,03 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 8,05 - 8,16 (m, 3 H), 8,40 (d, 7=4,77 Hz, 1 H), 8,69 (s, 1 H). LCMS Rt = 2,193min, m/z 574,3 (M+H). HPLC Rt = 7,435 min. (Sunfire C18), 97,5 % de pureza e 11,823 min. (Gemini C18), 100% de pureza.
427/543
Figure BRPI0918174A2_D0332
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(isobutilcarbamoil)-2-(2-(morfolin-2il)etoxi)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida, TFA
A um frasco de 2 dram foram adicionados 2-(4-fluorfenil)-5-(2hidróxi-5-(isobutilcarbamoil)fenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida (46,0 mg, 0,1 mmol), DMF (2 mL), 4,0 equivalentes (60pL, 0,400mmol) de DBU, 1,8-Diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (0,4mmol) e 4,0 equivalentes de 2-(2bromoetil)morfolino-4-carboxilato de terc-butila (236 mg, 0,400 mmol). O frasco foi tampado e a mistura de reação aquecida por dezoito horas a 85° C. O produto bruto foi purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 19 x 150 mm em um gradiente de B a 20100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 20 minutos com retenção de 10 minutos. A mistura de solvente foi removida em um rotovap e o sólido branco resultante (19,2mg) foi absorvido em 2mL de dicloroetano contendo 200pL de ácido trifluoracético. A mistura ácida foi agitada por 60 minutos. Os voláteis foram então removidos, o processo repetido novamente dando 20mg (29% de rendimento, 2 etapas) de 2-(4-fluorfenil)-5-(5(isobutilcarbamoil)-2-(2-(morfolin-2-il)etoxi)fenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida. TFA como um sólido branco. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX400. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradien
428/543 te de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma coluna Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,93 (d, 4=6,53 Hz, 6 H), 1,87 (m, 3 H), 2,90 (d, 4=4,77 Hz, 3 H), 3,08 - 3,12 (m, 2 H), 3,16 - 3,20 (m, 2 H), 3,31 (d, 4=9,54 Hz, 2 H), 3,95 - 4,11 (m, 3 H), 4,23 - 4,31 (m, 1 H), 4,35 (s amplo, 1 H), 7,08 (d, 4=8,78 Hz, 1 H), 7,25 (t, 4=8,66 Hz, 2 H), 7,45 (dd, 4=8,53, 1,76 Hz, 1 H), 7,54 (t, 4=5,65 Hz, 1 H), 7,62 (d, 4=8,53 Hz, 1 H), 7,84 (dd, 4=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 7,88 (d, 4=2,01 Hz, 1 H), 7,91 (d, 4=4,02 Hz, 1 H), 7,98 - 8,07 (m, 3 H). LCMS m/z 574,5 (M+H), Rt = 2,390 min. HPLC (Sunfire C18) Rt = 6,870 min, 99,3% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt = 10,973 min, 99,2% de pureza.
2-(2-bromoetil)morfolino-4-carboxilato de terc-butila
A um frasco de fundo redondo de 25mL foram adicionados 2(morfolin-2-il)etanol (100 mg, 0,762 mmol), DCM (1 mL) e trietilamina (0,106 mL, 0,762 mmol). Dicarbonato de di-terc-butila (0,177 mL, 0,762 mmol) em DCM (1 mL) foi então adicionado em gotas com seringa. A mistura foi agita
429/543 da em temperatura ambiente sob nitrogênio por 3 horas. Os voláteis foram removidos e RMN foi feita do óleo incolor (176 mg, 100% de rendimento, 96% de pureza). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,39 (s, 9 H), 1,47 1,61 (m, 2 H), 2,83 (s amplo, 1 H), 3,28 - 3,42 (m, 3 H), 3,46 (q, 9=6,10 Hz, 2 H), 3,68 (d, 9=11,29 Hz, 1 H), 3,76 (d, 9=10,38 Hz, 2 H), 4,45 (t, 9=5,04 Hz, 1 H).
A um frasco de fundo redondo de 25mL a 0 °C foram adicionados 2-(2-hidroxietil)morfolino-4-carboxilato de terc-butila (0,176 g, 0,762 mmol), DCM (4 mL), 1/7-imidazol (0,104 g, 1,524 mmol), perbromometano (0,379 g, 1,143 mmol) e trifenilfosfina (0,190 g, 0,723 mmol). A mistura foi agitada da noite para o dia lentamente atingindo a temperatura ambiente. A solução amarela foi diluída mais com 50 mL de DCM, lavada com água, salmoura, seca em sulfato de sódio e filtrada. O produto bruto foi então passado por um tampão de sílica-gel e o solvente foi removido para dar 213mg de um óleo amarelo claro.
1H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 1,40 (s, 9 H), 1,94 (q, 9=6,86 Hz, 1 H), 2,56 - 2,66 (m, 1 H), 2,76 - 2,91 (m, 1 H), 3,35 - 3,47 (m, 4 H), 3,50 - 3,61 (m, 1 H), 3,68 (s amplo, 1 H), 3,74 - 3,86 (m, 2 H).
Figure BRPI0918174A2_D0333
5-(2-(2-(Dimetilamino)etoxi)-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-
2- (4-fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida, TFA
A um frasco de micro-ondas pequeno foram adicionados 2-(4fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-/V-metilbenzofuran-
3- carboxamida (11,3mg, 0,022 mmol) (obtida da desmetilação do precursor metóxido usando complexo de tribrometo de boro-sulfeto de metila (1,2dicloroetano, 90° C)), dioxana (2 mL), trifenilfosfina (105 mg, 0,400 mmol), 2
430/543 (dimetilamino)etanol (0,025 mL, 0,250 mmol) e azodicarboxilato de di-tercbutila (69,1 mg, 0,300 mmol). O frasco foi encaixado e a mistura de reação submetida a aquecimento com micro-ondas (140° C) por 20 minutos em um inibidor BIOTAGE®. O solvente foi removido sob uma corrente de nitrogênio e o produto bruto absorvido em 2mL de acetonitrila e purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Sunfire 5pm C18 19 x 150mm em um gradiente de B a 20-100% e uma taxa de fluxo de 20 mL/min durante 20 minutos com retenção de 5 minutos. O solvente foi removido para dar 14,5mg (90% de rendimento) de 5-(2-(2-(dimetilamino)etoxi)-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida, sal de TFA como um sólido branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ TFA a 0,1% / HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / TFA a 0,1% / HPLC a 10% de grau metanol), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente octogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna Gemini C18 3,0pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10 mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10 mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de
431/543 grau água / bicarbonato de amônio a 10 mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. O espectro de RMN foi registrado em temperatura ambiente usando um espectrômetro Bruker DRX400. Mudanças químicas foram relatadas em ppm com relação ao solvente deuterado usado. Constantes de acoplamento foram relatadas em hertz. Multiplicidade de pico foi relatada usando as abreviações que seguem: s (singleto), d (dupleto), dd (dupleto de dupletos), t (tripleto), m (multipleto), br (amplo). 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,22 - 1,27 (m, 2 H), 1,28 - 1,33 (m, 2 H), 2,70 (s, 6 H), 2,90 (d, 9=4,52 Hz, 3 H), 3,41 - 3,46 (m, 2 H), 4,47 - 4,53 (m, 2 H), 7,06 - 7,12 (m, 1 H), 7,14 - 7,27 (m, 5 H), 7,28 - 7,35 (m, 2 H), 7,47 (dd, 9=8,53, 1,76 Hz, 1 H), 7,54 7,61 (m, 2 H), 7,89 (dd, 9=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 7,94 (dd, 9=4,02, 2,01 Hz, 2 H), 8,03 - 8,10 (m, 2 H), 8,28 (s, 1 H). LCMS m/z 592,4 (M+H), Rt = 2,065 min. HPLC Rt = 7,025 min. (Sunfire C18), 95,2 % de pureza e 11,979 min. (Gemini C18), 95,7% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0334
5-(2-(2-(Dimetilamino)etoxi)-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3carboxamida, TFA
Os dados de LC/MS foram obtidos em uma coluna de LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau metanol), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC
432/543 foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente octogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna PHENOMENEX® Gemini C18 3,0pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-ds) δ ppm 1,32 - 1,37 (m, 2 H), 1,59 1,65 (m, 2 H), 2,77 (s, 6 H), 2,90 (d, 4=4,77 Hz, 3 H), 3,47 - 3,54 (m, 2 H), 4,48 - 4,55 (m, 2 H), 7,17 (d, J=8,53 Hz, 1 H), 7,20 - 7,27 (m, 2 H), 7,31 (dd, 4=6,90, 5,65 Hz, 1 H), 7,49 - 7,59 (m, 2 H), 7,61 - 7,70 (m, 2 H), 7,86 (td, 4=7,78, 1,51 Hz, 1 H), 7,94 (dd, 4=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 7,97 (d, 4=1,00 Hz, 1 H), 7,99 - 8,09 (m, 3 H), 8,54 (d, 4=4,27 Hz, 1 H), 9,07 (s, 1 H). LCMS Rt = 2,412 min, m/z 593,4 (M+H). HPLC Rt = 5,185 min. (Sunfire C18), 96,4 % de pureza e 11,558 min. (Gemini C18), 98,2% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-metóxi-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 10 pM C18, 3,0 x
433/543
50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1% I HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau metanol), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 5 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com a coluna PHENOMENEX® Gemini C18 3,0 pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,31 - 1,40 (m, 2 H), 1,56 - 1,65 (m, 2 H), 2,82 (d, 7=4,52 Hz, 3 H), 3,85 (s, 3 H), 7,24 (d, 7=8,53 Hz, 1 H), 7,30 (dd, 7=6,78, 5,52 Hz, 1 H), 7,39 (t, 7=8,91 Hz, 2 H), 7,46 (d, 7=8,03 Hz, 1 H), 7,52 (dd, 7=8,53, 1,76 Hz, 1 H), 7,68 - 7,75 (m, 2 H), 7,86 (s, 1 H), 7,93 - 8,02 (m, 4 H), 8,45 (d, 7=4,52 Hz, 1 H), 8,49 (d, 7=4,27 Hz, 1 H), 9,23 (s, 1 H). LCMS Rt = 2,557 min, m/z 536,10 (M+H). HPLC Rt = 6,683 min. (Sunfire C18), 96,3 % de pureza e 11,493 min. (Gemini C18), 99,5% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(1-(piridin-2434/543 il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de fundo redondo de 100mL equipado com um condensador de refluxo foram adicionados 2-(4-fluorfenil)-5-(2-metóxi-5-(1(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (400 mg, 0,747 mmol), DCE (42 mL) e complexo de tribrometo de boro-sulfeto de metila (1868 mg, 5,97 mmolses). A solução foi posta sob nitrogênio e agitada da noite para o dia a 90° C. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, extinta com metanol e evaporada até quase secar. A mistura foi absorvida em 10 mL de metanol e purificada em uma HPLC preparativa Shimadzu empregando metanol/água/ácido trifluoracético a 0,1% onde o solvente A era metanol a 10%/ água a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / metanol a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10pm C18 30x1 OOmrn em um gradiente de B a 40-100% e uma taxa de fluxo de 40 mL/min durante 10 minutos com retenção de 5 minutos. O solvente foi evaporado dando 234mg (60% de rendimento) de 2-(4-fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida como um sólido branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau metanol), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF d8) δ ppm 1,25 -1,31 (m, 2 H), 1,59 -1,66 (m, 2 H), 2,90 (d, 4=4,52 Hz, 3 H), 6,91 (d, 4=8,53 Hz, 1 H), 7,08 (dd, 4=6,90, 5,40 Hz, 1 H), 7,17 - 7,24 (m, 2 H), 7,45 - 7,65 (m, 5 H), 7,79 (dd, 4=8,41, 2,13 Hz, 1 H), 7,88 (d, 4=1,25 Hz, 1 H), 7,93 (d, 4=2,01 Hz, 1 H), 8,08 - 8,17 (m, 2 H), 8,39 - 8,45 (m, 1 H), 8,49 (s amplo, 1 H). LCMS Rt = 1,495 min, m/z 522,33 (M+H), 94% de pureza.
435/543
OH
Figure BRPI0918174A2_D0335
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-(2-hidroxietoxi)-5-(1fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de tampa de rosca pequeno foram adicionados 2-(4fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-/V-metilbenzofuran3-carboxamida (19,5 mg, 0,037 mmol) em DMF (1,3 mL), (2bromoetoxi)(ferc-butil)dimetilsilano (0,024 mL, 0,112 mmol) e DBU (1,8diazabiciclo [5,4,0]undec-7-eno, 0,023 mL, 0,150 mmol). O frasco foi tampado e agitado a 80° C por 18 horas. A DMF foi removida sob uma corrente de nitrogênio para dar 5-(2-(2-(ferc-butildimetilsililoxi) etoxi)-5-(1-fenilciclopropil carbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida como um óleo castanho. À mistura foi então adicionado 1,3mL de tetra-hidrofurano junto com 2 eq. de HCI a 1M (0,075 mL 0,075 mmol). A solução foi agitada por 1 hora em temperatura ambiente. A mistura de reação foi transferida para um funil de separação, diluída com acetato de etila, lavada sequencialmente com bicarbonato de sódio, salmoura e seca em sulfato de magnésio. A mistura de produto foi filtrada e o solvente foi evaporado. O produto bruto foi absorvido em 1,8mL de acetonitrila e 200pL de DMF e purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Sunfire C18 19 x 150mm em um gradiente de B a 20-100% e uma taxa de fluxo de 20 mL/min durante 20 minutos com retenção de 5 minutos. 15,2mg de 2-(4-fluorfenil)-5-(2-(2hidroxietoxi)-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-/V-metilbenzofuran-3carboxamida (70% de rendimento, 2 etapas) foram obtidos após evaporação do solvente. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shi436/543 madzu I LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1% I HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1% I HPLC a 10% de grau metanol), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna Gemini C18 3,0pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol I bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,20 - 1,27 (m, 2 H), 1,28 1,36 (m, 2 H), 2,87 - 2,96 (m, 3 H), 3,75 - 3,83 (m, 3 H), 4,10 (t, 7=4,89 Hz, 2 H), 7,04 - 7,13 (m, 2 H), 7,16 - 7,25 (m, 4 H), 7,29 - 7,35 (m, 2 H), 7,43 (d, 7=4,27 Hz, 1 H), 7,51 - 7,59 (m, 2 H), 7,87 (dd, 7=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 7,94 (d, 7=2,26 Hz, 1 H), 8,02 (s, 1 H), 8,11 - 8,18 (m, 2 H), 8,25 (s, 1 H). LCMS Rt = 2,671 min, m/z 565,3 (M+H). HPLC Rt = 9,454 min. (Sunfire C18), 95,0 % de pureza e 11,611 min. (Gemini C18), 99,7% de pureza.
437/543
Figure BRPI0918174A2_D0336
2-(4-Fluorfenil)-5-(2-(2-hidroxietoxi)-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5mm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,23 - 1,29 (m, 2 H), 1,62 1,68 (m, 2 H), 2,91 (d, 7=4,77 Hz, 3 H), 3,80 (t, 7=4,77 Hz, 2 H), 4,13 (t, 7=4,89 Hz, 2 H), 6,99 (m, 1 H), 7,14 (d, 7=8,53 Hz, 1 H), 7,17 - 7,25 (m, 2 H),
438/543
7,37 - 7,47 (m, 2 Η), 7,49 - 7,61 (m, 3 Η), 7,93 (dd, 7=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 8,00 (d, 7=2,26 Hz, 1 H), 8,03 - 8,06 (m, 1 H), 8,11 - 8,18 (m, 2 H), 8,33 (s, 1 H), 8,35 - 8,41 (m, 1 H). LCMS m/z 566,4 (M+H), Rt = 2,038 min. HPLC (Sunfire C18) Rt = 5,916min, 100% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt = 10,474min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0337
5-(2-(2-Amino-2-oxoetoxi)-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2(4-fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de tampa de rosca pequendo foram adicionados 2(4-fluorfenil)-5-(2-hidróxi-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida (15,6 mg, 0,030 mmol) em DMF (2 mL), 2bromoacetamida (41,4 mg, 0,300 mmol) e DBU (1,8-diazabiciclo [5,4,0]undec-7-eno, 0,060 mL, 0,400 mmol). O frasco foi tampado e agitado a 75° C da noite para o dia. A mistura de reação bruta foi resfriada, evaporada, absorvida em 2 mL de acetonitrila e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1 % e solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna XTERRA® C18 19 x 100mm em um gradiente de B a 25100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 12 minutos com retenção de 8 minutos. O solvente foi evaporado da noite para o dia dando 9,9 mg (54,9% de rendimento) de carboxamida como um sólido branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1 % /
439/543
HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna Gemini C18 3,0pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10 mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,21 -1,26 (m, 2 H), 1,26 - 1,33 (m, 2 H), 2,87 - 2,92 (m, 3 H), 4,47 (s, 2 H), 7,05 - 7,13 (m, 2 H), 7,15 - 7,25 (m, 4 H), 7,27 - 7,34 (m, 2 H), 7,45 - 7,51 (m, 1 H), 7,52 7,61 (m, 2 H), 7,84 - 7,92 (m, 2 H), 7,93 - 8,00 (m, 2 H), 8,09 - 8,20 (m, 3 H), 8,29 (s, 1 H). LCMS Rt = 2,522min, m/z 578,3(M+H). HPLC Rt = 8,693 min. (Sunfire C18), 91,0 % de pureza e 11,423 min. (Gemini C18), 92% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0338
5-(2-(2-Amino-2-oxoetoxi)-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida
Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de
440/543 condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna PHENOMENEX® Gemini C18 3,0pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,25 -1,37 (m, 2 H), 1,57 -1,67 (m, 2 H), 2,88 - 2,96 (m, 3 H), 4,49 (s, 2 H), 6,51 (s amplo, 1 H), 6,79 (s amplo, 1 H), 7,10 (d, 7=8,78 Hz, 1 H), 7,17 - 7,27 (m, 3 H), 7,52 7,66 (m, 4 H), 7,72 - 7,82 (m, 1 H), 7,94 (dd, 7=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 7,99 (s, 1 H), 8,03 (d, 7=2,26 Hz, 1 H), 8,08 - 8,18 (m, 2 H), 8,50 (d, 7=4,27 Hz, 1 H), 8,91 (s amplo, 1 H). LCMS Rt = 2,578min, m/z 580,3 (Μ + 2H). HPLC Rt = 9,368 min. (Sunfire C18), 96,0 % de pureza e 10,756 min. (Gemini C18), 97,9% de pureza.
441/543
Figure BRPI0918174A2_D0339
5-(2-(2-Aminoetoxi)-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida, TFA
A um frasco de 2 dram foi adicionada 2-(4-fluorfenil)-5-(2-hidróxi5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-/\/-metilbenzofuran-3-carboxamida (40,2 mg, 0,078 mmol) em 3 mL de DMF junto com 3 eq. de 2-(2bromoetil)isoindolino-1,3-diona (58,8 mg, 0,232 mmol) e 4 eq. de DBU (1,8diaza biciclo [5,4,0]undec-7-eno, 0,046 mL, 0,308 mmol). O frasco foi tampado e agitado a 75° C da noite para o dia. A mistura de reação bruta foi evaporada, absorvida em 2 mL de acetonitrila e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético a 0,1% onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna XTERRA® C18 19 x 100mm em um gradiente de B a 25-100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 12 minutos com retenção de 8 minutos. O solvente foi evaporado dando 10,7mg do intermediário ftalimida como um sólido branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau metanol), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. LCMS m/z 694,4 (M+H), Rt = 3,128 min, 93,7% de pureza. A um frasco de tampa de rosca pequeno foram adicionados o intermediário de ftalimida, 5-(2-(2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etoxi)-5-(1-fenilciclo- propilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida (10,7 mg, 0,015
4A2I5A3 mmol) em 2mL de metanol e hidrazina anidra (0,780 μΙ_, 0,025 mmol). O frasco foi posto em um banho de óleo pré-equilibrado ajustado para 75° C e a solução refluxada por 90 minutos. O produto foi resfriado até a temperatura ambiente e o solvente foi evaporado. O óleo resultante foi diluído com 10mL de DCM, lavado com 1 mL de NaOH a 0,5M e extraído. O solvente foi evaporado e o produto bruto foi absorvido em 1,8mL de acetonitrila e 200pL de DMF e purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a
10%) / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Sunfire C18 19 x 150mm em um gradiente de B a 20-100% e uma taxa de fluxo de 20 mL/min durante 20 minutos com retenção de 5 minutos. O solvente foi evaporado dando 7,0mg (14% de rendimento, 2 etapas) de 5-(2-(2aminoetoxi)-5-(1-fenilciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N15 metilbenzofuran-3-carboxamida, TFA como um sólido branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ES1+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau 20 água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10%> de grau metanol), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ ácido trifluoracético a 25 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de sol30 vente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna Gemini C18 3,0pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de
443/543 grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,21 -1,27 (m, 2 H), 1,28 - 1,35 (m, 2 H), 2,89 (d, 9=4,77 Hz, 3 H), 3,39 (t, 9=4,77 Hz, 2 H), 4,38 (t, 9=5,02 Hz, 2 H), 7,05 - 7,13 (m, 1 H), 7,16 - 7,28 (m, 5 H), 7,29 - 7,35 (m, 2 H), 7,49 - 7,60 (m, 2 H), 7,62 (s amplo, 1 H), 7,87 (dd, 9=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 7,96 - 8,05 (m, 3 H), 8,07 (d, 9=1,00 Hz, 1 H), 8,30 (s, 1 H). LCMS Rt = 2,023 min, m/z 564,3 (M+H). HPLC Rt = 6,931 min. (Sunfire C18), 100% de
Figure BRPI0918174A2_D0340
5-(2-(2-Aminoetoxi)-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2(4-fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida, 2 TFA
Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi
444/543 então confirmada com um sistema de solvente octogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,23 - 1,33 (m, 2 H), 1,60 1,67 (m, 2 H), 2,89 (d, 4=4,77 Hz, 3 H), 3,41 (t, 4=5,14 Hz, 2 H), 4,40 (t, 4=5,14 Hz, 2 H), 6,58 (s amplo, 2 H), 7,01 - 7,11 (m, 1 H), 7,16 - 7,29 (m, 3 H), 7,46 (d, 4=8,03 Hz, 1 H), 7,52 - 7,70 (m, 4 H), 7,93 (dd, 4=8,53, 2,26 Hz, 1 H), 7,98 - 8,05 (m, 3 H), 8,07 (s, 1 H), 8,41 (d, 4=4,77 Hz, 1 H), 8,56 (s, 1 H). LCMS m/z 565,4 (M+H), Rt = 1,628 min. HPLC (Sunfire C18) Rt = 5,048 min, 99,9% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt = 10,531 min, 100% de pureza.
5-Bromo-2,4-dimetóxi-/V-(1-(piridin-2-il)ciclopropil)benzamida
A um frasco de fundo redondo de 250mL foi adicionado clorofórmio (60 mL) junto com ácido 2,4-dimetoxibenzoico (2,0g, 10,98 mmols). A solução foi resfriada para 0o C e bromo (0,566mL, 10,98 mmols) foi adicionado em gotas durante 5 minutos. A solução foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada da noite para o dia. O sólido resultante foi filtrado, lavado com clorofórmio e seco sob vácuo para dar 2,49g (8,6 mmols, 78% de rendimento) de ácido 5-bromo-2,4-dimetoxibenzoico como um sólido amarelo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 30mm, com um gradiente de B 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 2 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 1,0 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) õ ppm 3,88 (s, 3 H), 3,95 (s, 3 H), 6,78 (s, 1 H), 7,86 (s, 1 H). LCMS Rt = 1,453min, m/z 262,99 (M+H), 93% de pureza.
445/543
A um frasco de 2 dram foram adicionados ácido 5-bromo-2,4dimetoxibenzoico (1,044 g, 4mmols), DMF (48,2 mL), Λ/,/V-Diisopropiletilamina (2,79 mL, 16,00 mmols), 1-(piridin-2-il)ciclopropanamina, 2 HCI (0,911 g, 4,40 mmols) e finalmente HATU hexafluorfosfato de (2-(3H[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametil isourônio (V), 6,08 g, 16,00 mmols). O frasco foi tampado e agitado por 16 horas em temperatura ambiente. A mistura de reação bruta foi diluída com 10mL de DCM, lavada com 5 mL de HCI a 1M, extraída, lavada com 20mL de salmoura e seca em sulfato de magnésio. A solução foi passada por uma tampão de sílica-gel e evaporada até secar. Trituração com 20mL de dietil éter deu 1,6 grama de 5bromo-2,4-dimetóxi-/V-(1-(piridin-2-il)ciclopropil)benzamida como um sólido castanho (76% de rendimento). 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,22 1,32 (m, 2 H), 1,59 - 1,67 (m, 2 H), 3,94 (s, 3 H), 4,02 (s, 3 H), 6,72 (s, 1 H), 7,09 (m, 1 H), 7,47 (d, 4=8,03 Hz, 1 H), 7,62 (td, 4=7,72, 1,88 Hz, 1 H), 8,20 (s, 1 H), 8,39 - 8,52 (m, 2 H). LCMS Rt = 2,162 min, m/z 379,2 (M+2H), 96% de pureza.
Ácido 5-bromo-2-metóxi-4-metilbenzoico
Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 30mm, com um gradiente de B a 0-100% (Β = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% 10% de grau metanol), em 2 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Sólido amarelo, 63,5% de rendimento. LCMS Rt = 1,545 min, m/z 246,99 (M+H), 90% de pureza. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,21 - 2,44 (m, 3 H), 3,82 (s, 3 H), 7,17 (s, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 12,72 (s amplo, 1 H).
5-Bromo-2-metóxi-4-metil-/V-(1-(piridin-2-il)ciclopropil)benzamida Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2,0 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ á
446/543 cido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Sólido castanho, 68% de rendimento, 100% de pureza. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,34 - 1,42 (m, 2 H), 1,58 - 1,66 (m, 2 H), 2,39 (s, 3 H), 3,96 (s, 3 H), 7,05 (s, 1 H), 7,40 (dd, 4=6,90, 5,90 Hz, 1 H), 7,76 (d, 4=8,03 Hz, 1 H), 7,97 (td, 4=7,78, 1,76 Hz, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 8,60 (d, 4=5,27 Hz, 1 H), 8,88 (s, 1 H). LCMS Rt = 3,525 min, m/z 362,88 (M+H), 98% de pureza.
4-hidróxi-2-metoxibenzoato de metila
A um frasco Erlenmeyer de 250mL foram adicionados 4-amino2-metoxibenzoato (7,5 g, 41,4 mmols) e uma solução a 25% de ácido sulfúrico (40 mL, 188 mmols). A solução foi resfriada para 0o C e solução saturada de nitrito de sódio (4,29 g, 62,2 mmols) foi adicionada em gotas. A mistura laranja foi agitada por 15 minutos. A solução de diazônio resultante foi então despejada muito lentamente em um frasco de 1L contendo 500mL de ácido sulfúrico a 3%. A solução foi agitada por 5 minutos, então transferida para um funil de separação. A mistura de reação foi diluída com 150mL de DCM, extraída, seca em sulfato de magnésio e concentrada para um sólido vermelho. O sólido resultante foi triturado com hexano para dar 5,71 gramas do fenol desejado como um pó vermelho (73% de rendimento). Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 30mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% 10% de grau metanol), em 2 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3,67 - 3,72 (m, 3 H), 3,74 (s, 3 H), 6,39 (dd, 4=8,66, 2,13 Hz, 1 H), 6,45 (d, 4=2,13 Hz, 1 H), 7,59 (d, 4=8,66 Hz, 1 H). LCMS Rt = 1,070 min, m/z 183,09 (M+H), 96% de pureza.
4-(2-amino-2-oxoetoxi)-5-bromo-2-metoxibenzoato de metila
A um tubo vedado foram adicionados 2-bromoacetamida (2,272
447/543 g, 16,47 mmols), DMF (50 mL), carbonato de césio (7,15 g, 21,96 mmols) e 4-hidróxi-2-metoxibenzoato de metila (1,00 g, 5,49 mmols). O tubo foi vedado e aquecido por 16 horas a 85° C. A mistura de reação foi diluída com DCM, lavada sequencialmente com 10mL de HCI a 1M, água e salmoura. A solução foi seca em sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido para dar 1,2 grama de 4-(2-amino-2-oxoetoxi)-2-metoxibenzoato de metila (78% de rendimento) como um pó amarelo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 30mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% 10% de grau metanol), em 2 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 3,71 - 3,76 (m, 3 H), 3,80 - 3,84 (m, 3 H), 4,45 (s, 2 H), 6,56 (dd, 9=8,66, 2,38 Hz, 1 H), 6,65 (d, 9=2,26 Hz, 1 H), 6,77 (s amplo, 1 H), 6,92 (s amplo, 1 H), 7,75 (d, 9=8,78 Hz, 1 H). LCMS Rt = 1,385 min, m/z 240,2 (M+H), 92% de pureza.
A um frasco de fundo redondo de 250mL foram adicionados 4(2-amino-2-oxoetoxi)-2-metoxibenzoato de metila (1,2 g, 5,14 mmols) e clorofórmio (40 mL). A mistura foi posta sob uma atmosfera de nitrogênio e esfriada para 0° C. Bromo (0,263 mL, 5,14 mmols) foi adicionado em gotas (em 3mL de clorofórmio) e a solução foi deixada aquecer até a temperatura ambiente da noite para o dia. O sólido laranja foi esfriado com um banho gelado, filtrado, lavado sequencialmente com clorofórmio frio, então dietil éter. O produto foi seco sob vácuo dando 1,7 grama (91% de rendimento) de 4-(2amino-2-oxoetoxi)-5-bromo-2-metoxibenzoato de metila como um sólido laranja. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 30mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% 10% de grau metanol), em 2 minutos com retenção de
448/543 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) õ ppm 3,76 (s, 3 H), 3,88 (s, 3 H), 4,63 (s, 2 H), 6,76 (s, 1 H), 7,10 (s amplo, 2 H), 7,96 (s, 1 H). LCMS Rt = 1,793 min, m/z 319,1 (M+H), 90% de pureza.
5-(2,4-Dimetóxi-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de micro-ondas foram adicionados 5-bromo-2,4dimetóxi-/V-(1-(piridin-2-il)ciclopropil)benzamida (41,5 mg, 0,110 mmol), 2-(4fluorfenil)-/V-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzofuran-3carboxamida (39,5 mg, 0,1 mmol), dioxana (2,00 mL), água (0,200 mL), diciclo-hexil(2',6'-dimetoxibifenil-2-il)fosfina (S-Phos, 8,21 mg, 0,020 mmol), fosfato de potássio tribásico (85 mg, 0,400 mmol) e acetato de paládio(ll) (4,49 mg, 0,020 mmol). O solvente foi removido e a mistura de reação bruta foi absorvida em 2mL de acetonitrila e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 3,5pm C18 4,6x150mm em um gradiente de B a 20-100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 20 minutos com retenção de 10 minutos. O solvente foi evaporado dando 18,1 mg (30,4% de rendimento) da piridilcarboxamida desejada como um sólido amarelo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 10pm C18, 3,0 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau metanol), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 5 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de
449/543 grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna PHENOMENEX® Gemini C18 3,0 pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,26 - 1,37 (m, 2 H), 1,60 - 1,67 (m, 2 H), 2,89 (d, 7=4,77 Hz, 3 H), 3,87 (s, 3 H), 4,07 (s, 3 H), 6,78 (s, 1 H), 7,10 - 7,23 (m, 3 H), 7,39 - 7,44 (m, 1 H), 7,46 - 7,52 (m, 2 H), 7,57 (d, 7=7,78 Hz, 1 H), 7,68 (td, 7=7,72, 1,63 Hz, 1 H), 7,74 (d, 7=1,25 Hz, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 8,11 - 8,19 (m, 2 H), 8,47 (d, 7=4,52 Hz, 1 H), 8,59 (s, 1 H). LCMS m/z 566,2 (M+H), Rt = 2,608 min. HPLC (Sunfire C18) Rt = 6,816min, 93,9% de pureza e (Gemini C18) Rt = 11,676min, 95,8% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida
Síntese alternativa. A um tubo vedado foram adicionados 5bromo-2-metóxi-4-metil-/V-(1-(piridin-2-il)ciclopropil) benzamida (1,9024 g, 5,27 mmols), dioxana (70 mL), 2-(4-fluorfenil)-/V-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzofuran-3-carboxamida (2,529 g, 6,40 mmols), carbonato de césio (2,57 g, 7,90 mmols), água (14,00 mL) e finalmente tetracis(trifenilfosfino)paládio(0) (0,304 g, 0,263 mmol). O recipiente foi vedado e aquecido por 16 horas a 85° C em um banho de óleo. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com 20 ml de DCM e passada por um tampão de CELITE®. A solução escura resultante foi concentrada para um óleo cinza. A este resíduo foram adicionados 20 ml de HCI a 0,5N, seguido por 20 ml de água. O frasco foi resfriado em um banho gelado por 30 minutos e os sólidos resultantes foram coletados através de filtragem e lavados com 10 ml de água e secos sob vácuo. O produto bruto foi absorvido em 1:1 de acetato de etila/hexano e passado por um tampão de sílica-gel. Sol
450/543 vente foi removido dando 1,65 grama do produto como um sólido castanho claro.
4-(2-amino-2-oxoetoxi)-5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metoxibenzoato de metila
A um tubo vedado foram adicionados 4-(2-amino-2-oxoetoxi)-5bromo-2-metoxibenzoato de metila (318 mg, 1,0 mmol), dioxana (30 mL), água (6,00 mL), 2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)benzofuran-3-carboxamida (593 mg, 1,500 mmol), carbonato de césio (489 mg, 1,500 mmol), e tetracis(trifenilfosfino)paládio(0) (23,11 mg, 0,020 mmol). O recipiente foi vedado e a mistura aquecida da noite para o dia a 85° C. A mistura de reação foi resfriada, diluída com 200mL de DCM, lavada sequencialmente com 50mL de HCI a 1M, então salmoura. O produto foi extraído e a solução amarela resultante foi evaporada até secar. As camadas aquosas foram combinadas, esfriadas por 5 minutos em um banho gelado e os sólidos que se formaram foram filtrados e secos sob vácuo. Os sólidos foram então combinados e triturados sequencialmente com dietil éter, então acetonitrila gelada (10mL cada) dando 171,6mg (30% de rendimento) de 4-(2-amino-2-oxoetoxi)-5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metoxibenzoato de metila como um sólido branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma
451/543 retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna Waters XBridge Fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,04 (s, 3 H), 3,92 (s, 3 H), 4,03 (s, 3 H), 4,71 (s, 2 H), 6,85 (s, 1 H), 7,33 (t, 7=8,78 Hz, 2 H), 7,57 - 7,64 (m, 1 H), 7,66 - 7,73 (m, 1 H), 7,87 (s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 8,00 - 8,08 (m, 2 H). LCMS m/z 507,3 (M+H), Rt = 2,635 min. HPLC Rt = 8,193 min. (Sunfire C18), 100% de pureza e Rt = 10,678 min. (XBridge Fenila C18), 100% de pureza.
Ácido 4-(2-amino-2-oxoetoxi)-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metoxibenzoico
A um frasco de fundo redondo de 50mL foi adicionado 4-(2àmino-2-oxoetoxi)-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2metoxibenzoato de metila (171,6 mg, 0,295 mmol) em uma mistura 1:1 de metanol (7mL) e THF (7 mL). A esta solução foram então adicionados 4 eq. de hidróxido de sódio aquoso a 1M (1,2 mL, 1,2 mmol). A mistura de reação foi agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. O solvente foi removido e o produto bruto foi diluído com 50 mL de DCM/acetato de etila, 1:1, lavado sequencialmente com 10mL de HCI a 1M, então salmoura. A solução de produto foi seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada até secar. As camadas aquosa foram combinadas, resfriadas em um banho gelado e o produto formado nas laterais do frasco foi filtrado e seco sob vácuo. Os sólidos foram combinados, absorvidos em 10mL de DMF e purificados usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando metanol/água/ ácido trifluoracético onde e solvente A era metanol a 10%/ água a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e solvente o B era água a 10% / metanol a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10pm C18 30x1 OOmrn
452/543 em um gradiente de B a 40-100% e uma taxa de fluxo de 40 mL/min durante 12 minutos com retenção de 10 minutos, o solvente foi removido dando 87mg (60% de rendimento) de ácido 4-(2-amino-2-oxoetoxi)-5-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metoxibenzoico como um pó branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu /
LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 30mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau metanol), em 2 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 5 100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/
HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma coluna Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, DMF-d7) δ ppm 2,97 (d, 7=4,52 Hz, 3 H), 4,02 (s, 3 H), 4,79 (s, 2 H), 6,97 (s, 1 H), 7,31 (s amplo, 1 H), 7,38 7,46 (m, 2 H), 7,51 (s amplo, 1 H), 7,67 - 7,77 (m, 2 H), 7,92 (s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 8,09 - 8,16 (m, 2 H), 8,35 (d, 1 H). LCMS m/z 493,00 (M+H), Rt = 1,618 min. HPLC (Sunfire C18) Rt = 7,108 min, 100% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt = 6,383 min, 99,3% de pureza.
453/543
NH?
Figure BRPI0918174A2_D0341
5-(2-(2-Amino-2-oxoetoxi)-4-metóxi-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de 25mL foram adicionados ácido 4-(2-amino-2oxoetoxi)-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2metoxibenzoico (48,8 mg, 0,099 mmol), DMF (2 mL), A/-etil-/V-diisopropilpropan-2-amina (0,069 mL, 0,396 mmol), 1-(piridin-2il)ciclopropanamina (19,94 mg, 0,149 mmol) e finalmente HATU hexafluorfosfato de (2-(3H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametil isourônio (V), 151 mg, 0,396 mmol). O frasco foi vedado com um septo, posto sob N2 e agitado em temperatura ambiente da noite para o dia. O produto bruto foi purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1 % e solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 19 x 150mm em um gradiente de B a 20-100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 22 minutos com retenção de 8 minutos. O solvente foi removido dando 53,0 mg (87% de rendimento) de 5-(2-(2-amino-2-oxoetoxi)4-metóxi-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil) fenil)-2-(4-fluorfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida como um pó amarelo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ácido
454/543 trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, DMF-d7) δ ppm 1,46 - 1,53 (m, 2 H), 1,69 - 1,76 (m, 2 H), 2,96 (d, 9=4,77 Hz, 3 H), 4,16 (s, 3 H), 4,82 (s, 2 H), 7,04 (s, 1 H), 7,34 (s amplo, 1 H), 7,36 - 7,48 (m, 3 H), 7,52 (s amplo, 1 H), 7,66 - 7,78 (m, 3 H), 7,92 - 8,01 (m, 2 H), 8,03 (d, 9=2,76 Hz, 1 H), 8,08 - 8,14 (m, 2 H), 8,36 (d, 9=4,77 Hz, 1 H), 8,57 - 8,62 (m, 1 H), 8,94 (s, 1 H). LCMS m/z 609,5 (M+H), Rt = 2,030 min. HPLC (Sunflre C18) Rt = 5,800 min, 99,4% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt = 9,546 min, 99,7% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0342
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-hidróxi-2-metil-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de fundo redondo de 250mL foram adicionados 2(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-A/metilbenzofuran-3-carboxamida (1,0008 g, 1,821 mmol) e DCM (18 mL). A solução foi posta sob uma atmosfera de nitrogênio e resfriada para 0o C. À mistura castanha foi adicionado em gotas tricloroborano a 1M (9,10 mL, 9,10 mL). A mistura foi deixada aquecer lentamente para temperatura ambiente
455/543 da noite para o dia. A mistura de reação foi resfriada para 0o C e 100mL de metanol frio foram adicionados e a mistura agitada por 30 minutos, então evaporada até quase secar. A adição de metanol seguido por evaporação foi repetida para dar um sólido castanho (82% de rendimento). Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a ΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ acetato de amônio a 10mM/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / acetato de amônio a 10mM/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,26 - 1,37 (m, 2 H), 1,57 - 1,66 (m, 2 H), 2,28 (s, 3 H), 3,02 (d, 7=4,02 Hz, 3 H), 6,77 (s, 1 H), 7,18 (t, 7=8,78 Hz, 3 H), 7,32 (d, 7=8,28 Hz, 1 H), 7,51 (d, 7=8,53 Hz, 1 H), 7,69 - 7,79 (m, 1 H), 7,83 - 7,97 (m, 3 H), 8,08 (s, 1 H), 8,22 - 8,39 (m, 4 H), 8,66 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 536,5 (M+H), 534,4 (Μ - H), Rt = 3,446 min, 90% de pureza.
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-isopropóxi-2-metil-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxarnida, TFA
A um frasco de micro-ondas foram adicionados 2-(4-fluorfenil)-5(4-hidróxi-2-metil-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-/\/metilbenzofuran-3-carboxamida (16,6 mg, 0,031 mmol), dioxana (2 mL), trifenilfosfina (32,5 mg, 0,124 mmol), diazeno-1,2-dicarboxilato de (E)-di-tercbutila (21,41 mg, 0,093 mmol) e propan-2-ol (5,92 pL, 0,077 mmol). O frasco foi vedado e submetido a aquecimento com micro-ondas (140° C) por 20 minutos. O produto bruto foi purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A
456/543 era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 19 x 150mm em um gradiente de B a 20100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 20 minutos com retenção de 5 minutos. O solvente foi removido dando 6 mg (25% de rendimento) de 2-(4-fluorfenil)-5-(4-isopropóxi-2-metil-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida como um pó incolor. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonate de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 1,24 - 1,31 (m, 2 H), 1,46 (d, 4=6,02 Hz, 6 H), 1,64 - 1,69 (m, 2 H), 2,29 (s, 3 H), 2,89 (d, 4=4,52 Hz, 3 H), 4,83 - 4,95 (m, 1 H), 6,98 - 7,04 (m, 1 H), 7,07 (s, 1 H), 7,16 - 7,24 (m, 2 H), 7,26 (dd, 4=8,28, 1,76 Hz, 1 H), 7,47 (d, 4=8,03 Hz, 2 H), 7,52 - 7,59 (m,
457/543
Η), 7,62 (d, 4=1,26 Hz, 1 Η), 7,95 (s, 1 Η), 8,11 - 8,19 (m, 2 Η), 8,36 - 8,43 (m, 1 Η), 8,61 (s, 1 H). LCMS m/z 578,4 (M+H), Rt = 2,746 min. HPLC (Sunfire C18) Rt = 7,695 min, 98,38% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt = 12,003 min, 95,9% de pureza.
2-cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoato de metila
A um tubo vedado de 150mL foram adicionados trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (0,5 g, 1,198 mmol), dioxana (7,18 mL), água (1,437 mL), tetracis (trifenilfosfino)paládio(O) (0,028 g, 0,024 mmol), ácido 4-cloro-3-(metoxicarbonil) fenil borônico (0,385 g, 1,797 mmol) e carbonato de césio (0,586 g, 1,797 mmol). O tubo foi vedado e aquecido em um banho de óleo da noite para o dia a 85 °C. A mistura de reação foi resfriada; o produto bruto foi diluído com 100mL de acetato de etila, lavado sequencialmente com 50mL de água, então salmoura. A solução de produto foi seca em sulfato de magnésio e filtrada. Solvente foi evaporado para dar um sólido amarelo bruto. O sólido foi triturado com dietil éter (30mL x2) e hexano (30mL x1) e então seco sob vácuo para dar 394mg de um sólido de cor marfim (53% de rendimento). Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 2,92 (d, 4=4,77 Hz, 3 H), 3,91 (s, 3 H), 7,18 - 7,27 (m, 2 H), 7,52 - 7,55 (m, 1 H), 7,57 (d, 4=8,53 Hz, 1 H), 7,63 (d, 4=1,25 Hz, 2 H), 7,82 (dd, 4=8,41,2,38 Hz, 1 H), 7,96 - 8,00 (m, 1 H), 8,09 - 8,17 (m, 3 H). LCMS m/z 438,3 (M+H), Rt = 3,518 min, 90 % de pureza.
458/543
Figure BRPI0918174A2_D0343
2'-cloro-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)bifenil-2-carboxilato de metila
A um frasco de micro-ondas foram adicionados dioxana (6 mL), água (0,600 mL), diciclo-hexil(2',6'-dimetoxi bifenil-2-il)fosfina (S-Fos, 16,42 mg, 0,040 mmol), 2-cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metil carbamoil)benzofuran-5il)benzoato de metila (87,6 mg, 0,2 mmol), fosfato de potássio tribásico (0,170 g, 0,800 mmol), acetato de paládio(ll) (8,98 mg, 0,040 mmol) e ácido 2-clorofenilborônico (0,094 g, 0,600 mmol). O frasco foi tampado, desgaseificado, recebeu fluxo de N2 e aquecido no micro-ondas por 10 minutos a 130° C. O solvente foi removido e a mistura de reação bruta foi absorvida em 4 mL de acetonitrila e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com a coluna Waters Sunfire 5pm C18 19x150mm em um gradiente de B a 20-100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 20 minutos com retenção de 10 minutos. O solvente foi removido para dar 43,8mg (80% de rendimento) de 2'cloro-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)bifenil-2carboxilatode metila como um sólido amarelo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 2,92 2,97 (m, 3 H), 3,60 - 3,62 (m, 3 H), 7,19 - 7,26 (m, 2 H), 7,27 - 7,34 (m, 3 H), 7,37 (d, 7=8,03 Hz, 1 H), 7,41 - 7,45 (m, 1 H), 7,46 - 7,52 (m, 1 H), 7,62
459/543
7,67 (m, 1 Η), 7,68 - 7,73 (m, 1 Η), 7,92 (dd, J=7,91, 2,13 Hz, 1 H), 8,05 (d, 4=1,25 Hz, 1 H), 8,12 - 8,19 (m, 2 H), 8,29 (d, 4=2,01 Hz, 1 H). LCMS m/z 514,2 (M+H), Rt =3,908 min, 93% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0344
Ácido 2'-cloro-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)bifenil-2-carboxilico
A um frasco de fundo redondo de 25mL foram adicionados 2'cloro-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)bifenil-2-carboxilato de metila (43,8 mg, 0,079 mmol), metanol (1 mL), THF (1 mL) e 8 equivalentes de uma solução a 1M de hidróxido de sódio (0,63 mL, 0,63 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 48 horas. O produto bruto foi diluído com 20 mL de acetato de etila, tornado ácido com HCI a 0,5M, extraído, lavado com salmoura, seco em sulfato de sódio, filtrado e evaporado até secagem dando 47,2 mg (96% de rendimento) de ácido 2'-cloro-4-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-5-metilbifenil-2-carboxílico como um sólido amarelo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. LCMS m/z 500,2 (M+H), Rt = 3,426 min, 90% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0345
460/543
5-(2'-Cloro-2-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)bifenil-4-il)-2-(4fluorfenil)-/V-metilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de 25 mL foram adicionados ácido 2'-cloro-4-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)bifenil-2-carboxílico (39,6 mg, 0,079 mmol), DMF (2 mL), /V-etil-/V,A/-isopropilpropan-2-amina (0,055 mL, 0,317 mmol), 1 -(piridin-2-il) ciclopropanamina (15,94 mg, 0,119 mmol) e finalmente HATU hexafluorfosfato de (2-(3H-[1,2,3]triazol [4,5-b]piridin-3-il)1,1,3,3-tetrametilisourônio (V), (120 mg, 0,317 mmol). O frasco foi vedado e a mistura agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. O produto bruto foi purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 19 x 150mm em um gradiente de B a 20-100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 20 minutos com retenção de 10 minutos. O solvente foi removido dando 40,7mg (70% de rendimento) de 5-(2'-cloro-2(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)bifenil-4-il)-2-(4-fluorfenil)-/Vmetilbenzofuran-3-carboxamida como um sólido branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma coluna LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi
461/543 então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-ds) δ ppm 0,90 - 1,10 (m, 2 H), 1,42 -
I, 53 (m, 2 H), 2,94 (d, 7=4,52 Hz, 3 H), 7,11 (dd, 7=6,90, 5,40 Hz, 1 H), 7,18 - 7,27 (m, 2 H), 7,30 - 7,43 (m, 5 H), 7,44 - 7,49 (m, 1 H), 7,52 - 7,58 (m, 1 H), 7,59 - 7,67 (m, 2 H), 7,73 (dd, 7=8,53, 1,76 Hz, 1 H), 7,81 (dd, 7=7,78, 2,01 Hz, 1 H), 7,95 - 8,01 (m, 2 H), 8,06 (d, 7=1,51 Hz, 1 H), 8,09 - 8,17 (m, 2 H), 8,41 (d, 7=4,02 Hz, 1 H). LCMS m/z 617,3 (M+H), Rt = 2,765 min. HPLC (Sunfire C18) Rt = 7,823 min, 100% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt =
II, 871 min, 99,8% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0346
5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-hidróxi-4metilbenzoato de metila
A um frasco de fundo redondo de 100mL foi adicionado 5-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metóxi-4-metilbenzoato de metila (350,5 mg, 0,783 mmol) em DCM (8 mL). A esta solução foi então adicionada, sob nitrogênio, uma solução a 1M de tricloreto de boro (3,92 mL, 3,92 mmols) e a mistura foi agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. A mistura de reação foi resfriada em um banho de gelo e 10 mL de metanol foram lentamente adicionados. O solvente foi removido sob vácuo. O frasco foi novamente esfriado, 25mL de metanol gelado foram adicionados e o sólido resultante foi filtrado para dar 264,5mg (78% de rendimento) de 5(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-hidróxi-4-metilbenzoato de metila como um sólido incolor marfim. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm
462/543 usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, DMF-d7) δ ppm 2,30 (s, 3 H), 2,95 (d, 7=4,77 Hz, 3 H), 3,98 (s, 3 H), 7,02 (s, 1 H), 7,38 - 7,48 (m, 3 H), 7,68 - 7,73 (m, 2 H), 7,76 (d, 7=8,53 Hz, 1 H), 8,08 - 8,15 (m, 2 H), 8,33 (s amplo, 1 H). LCMS Rt = 3,636, m/z 434,3 (M+H), 100% de pureza.
CF3
Figure BRPI0918174A2_D0347
5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metil-2(trifluormetilsulfoniloxi)benzoato de metila
A um frasco de fundo redondo de 25mL foram adicionados 5-(2(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-hidróxi-4-metilbenzoato de metila (260 mg, 0,600 mmol), DCM (6 mL), trietilamina (0,166 mL, 1,200 mmol) e 1,1,1-triflúor-/V-fenil-/V-(trifluormetilsulfonil)metanossulfonamida (321 mg, 0,900 mmol). A solução foi agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. À mistura de reação foi então adicionada DMF (6 mL) junto com trietilamina (0,166 mL, 1.200 mmol) e 1,1,1-triflúor-/V-fenil-/V(trifluormetilsulfonil)metanossulfonamida (321 mg, 0,900 mmol). A mistura foi aquecida para 65° C por quarenta e oito horas. A mistura de produto bruto foi retornada para temperatura ambiente, diluída com 100mL de DCM, lavada sequencialmente com 50mL de HCI a 0,1 M frio, água e salmoura. O solvente foi evaporado e o produto bruto resultante foi triturado com 10mL de dietil éter (x2) para dar 180,7 mg (44,7% de rendimento) de um sólido de cor marfim. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluora
463/543 cético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,37 (s, 3 H), 2,82 (d, 7=4,58 Hz, 3 H), 3,88 (s, 3 H), 7,36 - 7,47 (m, 3 H), 7,56 - 7,65 (m, 2 H), 7,78 (d, 7=8,54 Hz, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 7,95 - 8,05 (m, 2 H), 8,47 (d, 1 H). LCMS m/z 566,3 (M+H), Rt = 3,913 min, 90% de pureza.
Cl
2'-cloro-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-5metilbifenil-2-carboxilato de metila
A um tubo vedado pequeno foram adicionados 5-(2-(4-fluorfenil)3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metil-2-(trifluormetilsulfoniloxi)benzoato de metila (67,3 mg, 0,1 mmol), dioxana (3 mL), água (0,600 mL), ácido 2clorofenilborônico (18,76 mg, 0,120 mmol), carbonato de césio (32,6 mg, 0,100 mmol) e tetracis(trifenilfosfino)paládio(0) (2,311 mg, 2,000 pmols). O tubo foi vedado e aquecido da noite para o dia a 80° C. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente, filtrada em um tampão de CELITE® e concentrada quase até secar sob uma corrente de nitrogênio. A mistura de reação bruta foi absorvida em 6 mL de acetonitrila e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 3,5pm C18 19 x 150mm em um gradiente de B a 30-100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 20 minutos com retenção de 10 minutos. O solvente foi removido dando 48 mg (89% de rendimento) de 2'-cloro-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)-5-metilbifenil-2-carboxilato de metila como um sólido branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna
464/543
PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a ΟΙ 00% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1% I HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. 1H RMN (500 MHz, THFd8) δ ppm 2,35 (s, 3 H), 2,91 (d, 9=4,58 Hz, 3 H), 3,57 (s, 3 H), 7,21 - 7,26 (m, 3 H), 7,27 - 7,30 (m, 1 H), 7,30 - 7,34 (m, 2 H), 7,38 (dd, 9=8,39, 1,68 Hz, 1 H), 7,41 - 7,44 (m, 1 H), 7,50 (d, 9=4,27 Hz, 1 H), 7,63 (d, 9=8,24 Hz, 1 H), 7,75 (d, 9=1,53 Hz, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 8,13 - 8,19 (m, 2 H). LCMS m/z 528,4 (M+H), Rt = 4,036 min, 98,3% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0348
Ácido 2'-cloro-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)-5-metil bifenil-2-carboxílico
A um frasco de fundo redondo de 25 mL foram adicionados 2'cloro-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-5-metilbifenil-2carboxilato de metila (48 mg, 0,091 mmol), THF (2,2 mL), metanol (2,2 mL) e hidróxido de sódio aquoso a 1M (0,728 mL, 0,728 mmol). O frasco foi vedado e agitado em temperatura ambiente por 48 horas. Os voláteis foram removidos e o produto bruto foi diluído com 30 mL de acetato de etila, lavado sequencialmente com 10 mL de HCl a 1M, salmoura, seco em sulfato de sódio, filtrado e evaporado até secar. O produto resultante foi triturado com 10 mL de dietil éter dando 47,2 mg (96% de rendimento) de ácido 2'-cloro-4(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-5-metilbifenil-2-carboxílico como um sólido amarelo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau ace
465/543 tonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, DMF-d7) δ ppm 2,42 (s, 3 H), 2,97 (d, J=4,52 Hz, 3 H), 7,30 (s, 1 H), 7,39 - 7,48 (m, 5 H), 7,50 - 7,57 (m, 2 H), 7,78 - 7,85 (m, 2 H), 7,99 (s, 1 H), 8,10 - 8,17 (m, 2 H), 8,35 - 8,43 (m, 1 H). LCMS m/z 514,3 (M+H), Rt = 3,950 min, 95,4% de pureza.
Cl
5-(2'-Cloro-5-metil-2-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)bifenil-4il)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida, TFA
A um frasco de 25 mL foram adicionados ácido 2'-cloro-4-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-5-metilbifenil-2-carboxílico (47,2 mg, 0,087 mmol), DMF (2 mL), A/-etil-/V,/V-di-isopropil propan-2-amina (0,061 mL, 0,349 mmol), 1-(piridin-2-il)ciclopropanamina (17,56 mg, 0,131 mmol) e finalmente HATU hexafluorfosfato de (2-(3H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-3-il)1,1,3,3-tetrametilisourônio(V), 133 mg, 0,349 mmol). O frasco foi vedado com um septo, posto sob N2 e agitado em temperatura ambiente por 5 horas. O produto bruto foi purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 19 x 150mm em um gradiente de B a 30-100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 20 minutos com retenção de 10 minutos. O solvente foi evaporado para dar 66,1 mg (92% de rendimento) de 5(2'-cloro-5-metil-2-(1-(piridin-2-il)ciclopropil carbamoil)bifenil-4-il)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida como um sólido branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente
466/543 de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ ácido trifluoracético com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna de LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,85 - 0,96 (m, 1 H), 0,99 - 1,09 (m, 1 H), 1,38 - 1,53 (m, 2 H), 2,33 (s, 3 H), 2,90 (d, J=4,52 Hz, 3 H), 7,07 - 7,14 (m, 1 H), 7,20 - 7,28 (m, 3 H), 7,30 - 7,36 (m, 3 H), 7,37 - 7,42 (m, 2 H), 7,44 - 7,49 (m, 1 H), 7,56 (d, J=4,52 Hz, 1 H), 7,58 - 7,65 (m, 3 H), 7,77 (d, J=1,51 Hz, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 8,10 - 8,18 (m, 2 H), 8,37 - 8,42 (m, 1 H). LCMS m/z 631,39 (M+H), Rt = 2,925 min. HPLC (Sunfire C18) Rt = 8,118 min, 99,9% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt = 11,519min, 100% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0349
Ácido 2-cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico
Procedimento alternativo: A um tubo vedado de 150 mL foram adicionados 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il trifluormetanos
467/543 sulfonato (1,0 g, 2,4 mmols), dioxana (14,4 mL), água (2,9 mL), tetracis(trifenil fosfino)paládio(O) (0,055 g, 0,048 mmol), ácido 5-borono-2clorobenzoico (0,720 g, 3,59 mmol) e carbonato de césio (1,171 g, 3,59 mmol). O tubo foi vedado e aquecido em um banho de óleo da noite para o dia a 85 °C. A mistura de reação foi resfriada, diluída com 150 mL de acetato de etila, lavada sequencialmente com 20 mL de HCI 0,5M, então salmoura. A solução de produto foi filtrada em um tampão de CELITE®, então evaporada até secar. O sólido resultante foi absorvido em 10 mL de DMF e acetonitrila 1:1 e purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 3,5pm C18 4,6x150mm em um gradiente de B a 50-100% e uma taxa de fluxo de 40 mL/min durante 20 minutos com retenção de 5 minutos. Solvente foi evaporado dando 319,5mg (32 % de rendimento) de ácido 2cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico como um pó branco. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 10pm C18, 3,0 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau metanol/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% 10% de grau metanol), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 5 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, DMSO-dg) δ ppm 2,83 - 2,91 (m, 3 H), 7,35 - 7,45 (m, 2 H), 7,65 (d, J=8,53 Hz, 1 H), 7,69 - 7,75 (m, 1 H), 7,76 - 7,82 (m, 1 H), 7,85 - 7,93 (m, 2 H), 7,98 - 8,05 (m, 2 H), 8,08 (d, J=2,26 Hz, 1 H), 8,43 - 8,53 (m, 1 H), 13,50 (s amplo, 1 H). LCMS m/z 424,0 (M+H), Rt = 3,105min, 100% de pureza.
468/543
5-(4-Cloro-3-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida
A um frasco de fundo redondo de 250 mL foram adicionados ácido 2-cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoico (0,299 g, 0,705 mmol), 1-(piridin-2-il)ciclopropanamina (0,142 g, 1,058 mmol), DMF (8,50 mL), A/-etil-A/,/V-di-isopropilpropan-2-amina (0,493 mL, 2,82 mmols) e HATU hexafluorfosfato de (2-(3H-[1,2,3]triazol[4,5-b]piridin-3il)-1,1,3,3-tetrametilisourônio (V), 1,073 g, 2,82 mmols). O frasco foi vedado, posto sob N2 e agitado da noite para o dia em temperatura ambiente. A mistura de reação foi diluída com 50 mL de acetato de etila, lavada com 5 mL de HCI a 1M, extraída, seca em sulfato de magnésio, filtrada e evaporada para um óleo vermelho. A mistura de reação bruta foi então evacuada até quase secagem, absorvida em 8 mL de metanol e DMF 1:1 e purificada usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando metanol/água/ ácido trifluoracético onde solvente A era metanol a 10%/ água a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / metanol a 90% / ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna PHENOMENEX® Luna 10pm C18 30x1 OOmrn em um gradiente de B a 50-100% e uma taxa de fluxo de 40 mL/min durante 8 minutos com retenção de 7 minutos. O solvente foi evaporado dando 261,3 mg (66,4% de rendimento) de 5-(4-cloro-3-(1-(piridin-2-il)ciclopropil carbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-A/-metilbenzofuran-3-carboxamida como um sólido amarelo claro. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna Waters Sunfire 5pm C18, 4,6 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 3 minutos com uma retenção de 1 minuto em uma taxa de 4 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a 20100% (B = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1 %/
469/543
HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma LC analítica Shimadzu com uma coluna PHENOMENEX® Gemini C18 3,0pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 20-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM I HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,33 -1,40 (m, 2 H), 1,56 - 1,64 (m, 2 H), 2,83 - 2,91 (m, 3 H), 7,27 (dd, 4=6,78, 5,27 Hz, 1 H), 7,35 7,45 (m, 2 H), 7,63 (d, 4=8,28 Hz, 1 H), 7,69 - 7,96 (m, 7 H), 7,97 - 8,06 (m, 2 H), 8,50 (d, 4=4,52 Hz, 2 H), 9,34 (s, 1 H). LCMS m/z 540,39 (M+H), Rt = 1,643min, 94,2% de pureza. HPLC (Sunfire C18) Rt = 6,388min, 94% de pureza e (Gemini C18) Rt = 11,238min, 99,6% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0350
2'-carbamoil-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)bifenil-2-carboxilato de metila
A um frasco de micro-ondas foram adicionados dioxana (9 mL), água (0,900 mL), ácido 2-carbamoilfenilborônico (148 mg, 0,900 mmol), 2cloro-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)benzoato de metila (131 mg, 0,3 mmol), fosfato de potássio tribásico (255 mg, 1,200 mmol), diciclo-hexil (2',6'-dimetoxibifenil-2-il)fosfina (S-Fos, 24,63 mg, 0,060 mmol) e acetato de paládio(ll) (13,47 mg, 0,060 mmol). O frasco foi tampado, desgaseificado, recebeu fluxo de N2 e aquecido no micro-ondas por 13 minutos a 130° C. A mistura de reação foi filtrada e o solvente removido sob uma corrente de nitrogênio. O produto bruto foi absorvido em 4 mL de acetonitrila e purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitri
470/543 la/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunflre 5pm C18 19x150mm em um gradiente de B a 20-100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 20 minutos com retenção de 10 minutos. O solvente foi removido dando 58,3mg (36% de rendimento) de 2'-carbamoil-4-(2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)bifenil-2-carboxilato de metila como um sólido amarelo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 2,93 (d, 4=4,52 Hz, 3 H), 3,62 (s, 3 H), 6,35 (s amplo, 2 H), 7,09 - 7,15 (m, 1 H), 7,22 (t, 4=8,91 Hz, 2 H), 7,31 - 7,43 (m, 3 H), 7,52 (d, 4=4,27 Hz, 1 H), 7,58 - 7,71 (m, 3 H), 7,81 (dd, 4=8,03, 2,01 Hz, 1 H), 8,01 (d, 4=1,25 Hz, 1 H), 8,09 - 8,20 (m, 3 H). LCMS m/z 523,3 (M+H), Rt = 3,051 min, 96% de pureza.
Figure BRPI0918174A2_D0351
Ácido 2'-carbamoil-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbarnoil) benzofuran-5-il)bifenil-2-carboxílico
A um frasco de fundo redondo de 25 mL foram adicionados 2'carbamoil-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)bifenil-2carboxilato de metila (58,3 mg, 0,107 mmol), metanol (1 mL), THF (1 mL) e 8 equivalentes de uma solução a 1M de hidróxido de sódio (0,856 mL, 0,856 mmol). A mistura foi diluída com 20 mL de acetato de etila, tornada ácida com HCI a 0,5M e o produto bruto foi extraído, lavado com salmoura e seco em sulfato de sódio. A solução de produto foi filtrada e evaporada até secar
471/543 dando 52 mg (98% de rendimento) de ácido 2'-carbamoil-4-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)bifenil-2-carboxílico como um sólido amarelo. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu / LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% / HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. LCMS m/z 509,3
Figure BRPI0918174A2_D0352
4-(2-(4-Fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-/V2-(1(piridin-2-il)ciclopropil) bifenil-2,2'-dicarboxamida, TFA
A um frasco de fundo redondo de 25 mL foram adicionados ácido 2'-carbamoil-4-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)bifenil-2carboxílico (52mg, 0,104 mmol), DMF (2 mL), A/-etil-A/,/V-isopropilpropan-2amina (0,075 mL, 0,429 mmol), 1-(piridin-2-il)ciclopropanamina (21,57 mg, 0,161 mmol) e finalmente HATU hexafluorfosfato de (2-(3H-[1,2,3]triazol[4,5b]piridin-3-il)-1,1,3,3-tetrametilisourônio (V), 163 mg, 0,429 mmol). O frasco foi vedado e a mistura agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. O produto bruto foi purificado usando uma HPLC preparativa Shimadzu empregando acetonitrila/água/ ácido trifluoracético onde o solvente A era acetonitrila a 10% / água a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% e o solvente B era água a 10% / acetonitrila a 90%/ ácido trifluoracético a 0,1% com uma coluna Waters Sunfire 5pm C18 19 x 150mm em um gradiente de B a 20-100% e uma taxa de fluxo de 25 mL/min durante 20 minutos com retenção de 10 minutos. O solvente foi evaporado dando 2 rotâmeros conforme mostrado aci
472/543 ma. Os dados de LC/MS foram obtidos em uma LC analítica Shimadzu I LC MICROMASS® Platform (ESI+) a 220nm usando o conjunto de condições que segue: coluna PHENOMENEX® Luna 3pm C18, 2 x 50mm, com um gradiente de B a 0-100% (B = HPLC a 90% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 10% de grau água), (A = HPLC a 90% de grau água / ácido trifluoracético a 0,1% I HPLC a 10% de grau acetonitrila), em 4 minutos com retenção de 1 minuto em uma taxa de 0,8 mL/minuto. Pureza de HPLC foi determinada usando uma LC analítica Shimadzu a 254nm e 256nm com uma coluna Waters Sunfire C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/acetonitrila/ácido trifluoracético a 0,1% com um gradiente de B a ΙΟΙ 00% (Β = HPLC a 95% de grau acetonitrila/ ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água I ácido trifluoracético a 0,1%/ HPLC a 5% de grau acetonitrila), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto. A pureza de HPLC foi então confirmada com um sistema de solvente ortogonal e coluna usando uma coluna LC analítica Shimadzu com uma Waters XBridge fenila C18 3,5pm 4,6 x 150mm empregando água/metanol/bicarbonato de amônio a 10mM com um gradiente de B a 10-100% (B = HPLC a 95% de grau metanol/ bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau água), (A = HPLC a 95% de grau água / bicarbonato de amônio a 10mM / HPLC a 5% de grau metanol), em 10 minutos com uma retenção de 10 minutos em uma taxa de 1 mL/minuto.
Isômero A: 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,53 - 0,79 (m, 2 H), 1,36 (d, 7=4,27 Hz, 2 H), 2,95 (d, 7=4,52 Hz, 3 H), 6,79 (s amplo, 1 H), 6,88 - 7,00 (m, 2 H), 7,16 - 7,26 (m, 4 H), 7,39 (td, 7=7,72, 1,88 Hz, 1 H), 7,46 - 7,53 (m, 3 H), 7,57 - 7,61 (m, 1 H), 7,61 - 7,65 (m, 2 H), 7,69 (ddd, 7=10,23, 8,22, 1,88 Hz, 2 H), 7,91 (d, 7=2,01 Hz, 1 H), 8,04 (d, 7=1,51 Hz, 1 H), 8,13 - 8,19 (m, 2 H), 8,25 - 8,31 (m, 1 H), 9,01 (s, 1 H). LCMS m/z 625,4 (M+H), Rt = 2,310 min. HPLC (Sunfire C18) Rt = 6,796 min, 100% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt = 10,793 min, 100% de pureza.
Isômero B: 1H RMN (400 MHz, THF-d8) δ ppm 0,64 - 0,92 (m, 2 H), 1,39 (d, 7=4,02 Hz, 2 H), 2,93 (d, 7=4,77 Hz, 3 H), 6,76 (s amplo, 1 H),
473/543
6,88 (dd, 4=6,90, 5,14 Hz, 1 H), 6,96 (d, 4=8,03 Hz, 1 H), 7,11 - 7,18 (m, 1 H), 7,20 - 7,30 (m, 3 H), 7,31 - 7,43 (m, 3 H), 7,50 (s amplo, 1 H), 7,59 (dd, 4=7,15, 1,88 Hz, 1 H), 7,62 - 7,67 (m, 1 H), 7,68 - 7,76 (m, 2 H), 7,82 (dd, 4=7,78, 2,01 Hz, 1 H), 7,92 (d, 4=1,76 Hz, 1 H), 8,07 (d, 4=1,76 Hz, 1 H), 8,09 - 8,17 (m, 2 H), 8,26 (d, 4=4,27 Hz, 1 H), 8,98 (s, 1 H). LCMS m/z 625,4 (M+H), Rt = 2,275 min. HPLC (Sunfire C18) Rt = 6,688 min, 100% de pureza e (XBridge fenila C18) Rt = 10,821 min, 100% de pureza.
4-flúor-2-(4-fluorfenil)-5-hidroxibenzofuran-3-carboxilato de etila
A uma mistura de 2-(4-fluorfenil)-5-hidroxibenzofuran-3carboxilato de etila (500 mg, 1,665 mmol) em acetonitrila (10 mL) em r.t. sob N2 foi adicionado 1-(clorometil)-4-flúor-1,4-diazoniabiciclo[2,2,2]octano tetrafluorborato (708 mg, 1,998 mmol). A mistura foi agitada em r.t. (a mistura se tornou amarelo brilhante) por 20 horas. A mistura foi evaporada. O resíduo foi adicionado com 10 ml de H2O. A parte aquosa decantada, e o resíduo lavado mais com 2 x 5 ml de H2O. A mistura foi dissolvida em MeOH (cerca de 10 ml) e o insolúvel filtrado. O filtrado foi purificado através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação. Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 60, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada =12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,44 - 7,24 min. (Detecção por UV a 220 nm). As frações desejadas foram combinadas e evaporadas para dar um sólido amarelo. O sólido amarelo foi purificado mais através de cromatografia rápida BIOTAGE® Horizon (EtOAc 0 a 70% /Hexano, coluna de sílica-gel de 3 x 80 g) para dar um sólido amarelo claro (108,9 mg). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,95 (m, 2H), 7,26 (t sobrepondo com dd, 2H), 7,25 (dd, 1H), 7,03 (t, 4= 8,39, 1H), 4,39 (q, 4= 7,17, 2H), 1,36 (t, 4 = 7,17, 3H). 19F RMN (470,45 MHz, CD3OD) δ 112,36, 142,29. A posição do átomo F em C4 foi confirmada através de 1H-1H através de correlação de ligação entre H6 e H7, 1H-13C HMBC e acoplamento de F-C4 em 13C RMN (125,75 MHz, CD3OD) (δ144,8 ppm, d, 4 = 247, C4). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Wa
474/543 ters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 319,14, HPLC Rt = 1,718 min. As frações menores coletadas em cerca de 7,69-8,20 min foram confirmadas através de 1H-1H através de correlação de ligação, 1H-13C HMBC e acoplamento de F-C6 em 13C RMN (125,75 MHz, CD3OD) (δ 152,5 ppm, d, J = 242 Hz, C6) ser o isômero do átomo F em C6 (C4 : C6 cerca de 3:1 com base em HPLC preparativa área % do traço de UV); 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,04 (dd, J = 8,55, 5,49, 2H), 7,59 (d, J = 8,85, 1H), 7,38 (d, J = 10,07, 1H), 7,25 (t, J = 8,70, 2H), 4,40 (q, J = 7,17, 2H), 1,41 (t, J = 7,17, 3H). 19F RMN (470,45 MHz, CD3OD) δ 112,29, 138,52, LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 319,14, HPLC Rt = 1,798 min.
Ácido 4-flúor-2-(4-fluorfenil)-5-hidroxibenzofuran-3-carboxílico
A uma mistura de 4-flúor-2-(4-fluorfenil)-5-hidroxibenzofuran-3carboxilato de etila (108,9 mg, 0,342 mmol) em uma mistura de MeOH (2 mL)/TF (2 mL) em r.t. sob N2 foi adicionado hidróxido de sódio (1,0 mL, 1,0 mmol) (1M aq.). A mistura foi agitada a 100° C por 1,5 hora. A mistura foi resfriada para r.t, adicionada com 1,5 ml de HCI a 1N e então adicionados 10 ml de H2O. Os precipitados brancos foram filtrados e lavados com H2O 3 x 2 ml e secos (73 mg). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (m, 2H), 7,25 (t sobrepondo com dd, 2H), 7,24 (dd, 1H), 7,02 (t, J = 8,39, 1H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3
475/543 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 291,01, HPLC Rt = 1,478 min.
4-Flúor-2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-N-metilbenzofuran-3carboxamida
A uma mistura de ácido 4-flúor-2-(4-fluorfenil)-5hidroxibenzofuran-3-carboxílico (73 mg, 0,252 mmol), metilamina, HCI (25,5 mg, 0,377 mmol), hidrato de HOBT (65,5 mg, 0,428 mmol) e cloridrato de EDC (87 mg, 0,453 mmol) em r.t. sob N2 foi adicionada N,N-diisopropiletilamina (0,220 mL, 1,258 mmol). A mistura foi agitada em r.t. por 16 horas. Após concentração, a mistura foi adicionada com 5 ml de HCI a 1N e então 14 ml de H2O. O sólido branco foi filtrado e lavado com 3 x 5 ml de H2O e seco (64 mg). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,89 (dd, J = 8,09, 5,34, 2H), 7,25 (t sobrepondo com dd, 2H), 7,23 (dd, 1H), 6,99 (t, J = 8,55, 1H), 2,96 (s, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 304,06, HPLC Rt = 1,262 min.
Trifluormetanossulfonato de 4-Flúor-2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il
A uma suspensão branca de 4-flúor-2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida (64 mg, 0,211 mmol) em CH2CI2 (2 mL) em r.t. sob N2 foi adicionada trietilamina (0,059 mL, 0,422 mmol). A mistura foi resfriada para 0 °C, e então adicionada 1,1,1-triflúor-N-fenil-N(trifluormetilsulfonil)metanossulfonamida (113 mg, 0,317 mmol). A mistura foi então agitada em r.t. (a suspensão branca se transformou em uma solução amarelo clara após agitação por cerca de 10 minutos) por 2 horas e 35 min. A mistura foi deixada descansar em r.t. da noite para o dia e então evaporada. O resíduo foi esfriado em um banho de água gelada, adicionado com 2 mL de H2O. Os sólidos foram filtrados e lavados com 3 x 2 mL de H2O e se
476/543 cos (94 mg). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,95 (m, 2H), 7,59 (dd, J = 9,00, 1,00, 1H), 7,50 (dd, J = 9,00, 7,50, 1H), 7,30 (t, J = 8,55, 2H), 2,99 (s, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 436,04, HPLC Rt = 1,678 min.
Figure BRPI0918174A2_D0353
5-(4-flúor-2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2metóxi-4-metilbenzoato de metila
Uma mistura dos trifluormetanossulfonato de 4-flúor-2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (suposto 0,211 mmol), 2metóxi-4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metila (0,078 g, 0,253 mmol), (Ph3P)4Pd (0,024 g, 0,021 mmol) e carbonato de césio (0,103 g, 0,317 mmol) acima preparados em uma mistura de H2O (0,2 mL)/1,4-dioxana (1 mL) foi agitada a 95 °C por 2 horas 30 min. A mistura foi deixada descansar em r.t. da noite para o dia. A mistura foi diluída com 3,5 ml 1,4-dioxana, filtrada em um disco Whatman PVDF de 0,45 (com lavagem de 3 x 1 ml). O filtrado foi concentrado. A mistura foi adicionada com 3,5 ml de HCI a 1N e então 6 ml de H2O (sólido amarelo depositado na parede do frasco). A parte aquosa foi decantada e o resíduo lavado com 3 x 2 ml de H2O e seco. LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 466,27, HPLC Rt= 1,708 min.
477/543
Mr~
I HN.
HO.
Figure BRPI0918174A2_D0354
F
Ácido 5-(4-flúor-2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)-2-metóxi-4-metilbenzoico
Ao 5-(4-flúor-2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2metóxi-4-metilbenzoato de metila preparado acima (suposto 0,211 mmol) em uma mistura de MeOH (2 ml_)/THF (2 mL) em r.t. sob N2 foi adicionado hidróxido de sódio (0,84 mL, 0,84 mmol). A mistura foi agitada em r.t. por 24 horas. A mistura foi adicionada com 2 ml de HCI a 1N e concentrada até que sólidos esbranquiçados se formassem. A mistura foi adicionada com 5 ml de H2O, os sólidos filtrados e lavados com 3 x 2 ml de H2O e secos (75,1 mg). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,95 (m, 2H), 7,73 (s, 1H), 7,51 (d, J = 8,24, 1H), 7,30-7,25 (t sobrepondo com m, 3H), 7,13 (s, 1H), 3,99 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,28 (s, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo - 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 452,23, HPLC Rt = 1,582.
MeO.
4-Flúor-2-(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(pirimidin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de ácido 5-(4-flúor-2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metóxi-4-metilbenzoico (30 mg, 0,066 mmol), 1-(pirimidin-2-il)ciclopropanamina, TFA (33,1 mg, cerca de 75% puro, suposto 0,133 mmol) e tetrafluorborato de 2-(1 H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)1,1,3,3-tetrametilisourônio (64,0 mg, 0,199 mmol) em DMF (1 mL) em r.t. sob N2 foi adicionada Ν,Ν-di-isopropiletil amina (0,058 mL, 0,332 mmol). A mistu
478/543 ra foi agitada em r.t. por 20 horas. A mistura foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final
B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Detecção por UV a 220 nm, Coleta da Fração: 7,25-7,73 min. O resíduo após evaporação das frações combinadas foi purificado mais através de TLC preparativa (duas placas de 500 um x 20 x 20 cm, MeOH a 5%/CH2CI2) para dar 4-flúor10 2-(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1 -(pirimidin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida como um sólido branco. TLC analítica Rf = 0,32 (MeOH a 5%/CH2CI2). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,65 (d, J = 4,88, 2H), 7,95 (m, 2H), 7,89 (s, 1H), 7,50 (d, J = 8,55, 1H), 7,28 (t, J = 8,70, 2H), 7,28-7,25 (m sobrepondo com t, 1H), 7,23 (t, J =
4,88, 1H), 7,17 (s, 1H), 4,09 (s, 3H), 2,95 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 1,79 (m, 2H),
1,51 (m, 2H). 19F RMN (470,45 MHz, CD3OD) δ 112,81, 123,16, LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Iní20 cio B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 569,38, HPLC Rt = 1,660 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a
95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início
B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 rrrm, Rt = 6,29 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,18 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%30 NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5
479/543 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,39 min.
Figure BRPI0918174A2_D0355
Figure BRPI0918174A2_D0356
4-Flúor-2-(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(pirimidin-2il)propilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
4-Flúor-2-(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(pirimidin-2il)propilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida foi formada como um subproduto em quantidade menor durante a síntese de 4-flúor-2-(4fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(pirimidin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida conforme acima descrito e foi isolada durante purificação através de HPLC de fase reversa preparativa (Coleta da Fração: 7,82 - 8,48 min). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 9,08 (d, J = 7,32, 1H), 8,87 (d, J = 4,88, 2H), 8,70 (q, J = 4,58, 1H), 7,94 (m, 2H), 7,78 (s, 1H), 7,62 (d, J = 8,24, 1H), 7,46 (t, J = 4,88, 1H), 7,42 (t, J = 9,00, 2H), 7,30 (dd, J = 8,39, 7,17, 1H), 7,24 (s, 1H), 5,16 (m, 1H), 4,08 (s, 3H), 2,80 (d, J = 4,58, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,97 (m, 2H), 0,82 (t, J = 7,32, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 571,35, HPLC Rt = 1,743 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,33 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,69 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%- NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada
480/543 = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 10,23 min.
MeO
HN
5-(5-(Etilcarbamoil)-4-metóxi-2-metilfenil)-4-flúor-2-(4-fluorfenil)N-metilbenzofuran-3-carboxamida
5-(5-(Etilcarbamoil)-4-metóxi-2-metilfenil)-4-flúor-2-(4-fluorfenil)N-metilbenzofuran-3-carboxamida foi formada como um subproduto em quantidade menor durante a síntese de 4-flúor-2-(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2metil-5-(1-(pirimidin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3carboxamida conforme acima descrito e foi isolada durante purificação através de TLC preparativa (a faixa da direita acima a faixa de produto em maior quantidade). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) 57,95 (m, 2H), 7,81 (s, 1H), 7,51 (d, J= 8,55, 1H), 7,30-7,25 (t sobrepondo com dd, 3H), (7,13 (s, 1H), 4,04 (s, 3H), 3,46 (q, J = 7,17, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,25 (t, J = 7,17, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 479,30, HPLC Rt = 1,670 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,94 mín; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,31 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%- NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%NH4HCO3a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: X481/543
Bridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,20 min.
2,4-dimetil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metila
Uma mistura de 5-iodo-2,4-dimetilbenzoato de metila (1 g, 3,45 mmols), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (1,050 g, 4,14 mmols), acetato de potássio (1,015 g, 10,34 mmols) e PdCI2(dppf)(Cl2CH2) ([1,T-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(ll), diclorometano) (0,284 g, 0,345 mmol) em DMF (25 mL) sob N2 foi agitada a 100 °C for 20 horas. A mistura foi resfriada para r.t., adicionada com 30 ml de H2O. O sólido escuro foi filtrado e lavado com 3 x 5 ml de H2O e seco. O sólido foi purificado através da cromatografia rápida BIOTAGE® Horizon (EtOAc/Hexano 0 a 70%) para dar o produto como um sólido branco (442,7 mg). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) 08,26 (s, 1H), 7,11 (s, 1H), 3,88 (s, 3H), 2,56 (s, 3H), 2,53 (s, 3H), 1,37 (s, 12H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 291,14, HPLC Rt = 1,933 min.
Figure BRPI0918174A2_D0357
Ácido 3-(4-flúor-2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)-4-metilbenzoico
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 422,19, HPLC Rt = 1,653 min.
482/543
Figure BRPI0918174A2_D0358
Figure BRPI0918174A2_D0359
4-Flúor-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1 -(pirimidin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
Purificação foi realizada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,80-7,18 min. (Detecção por UV a 220 nm). O material obtido foi purificado mais através de TLC preparativa (placa de 500 um x 20 x 20 cm, MeOH a 5%/CH2CI2). TLC analítica Rf = 0,35 (MeOH a 5%/CH2CI2). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,64 (d, J = 4,88, 2H), 7,96 (m, 2H), 7,90 (dd, J = 7,93, 1,83, 1H), 7,84 (d, J = 1,83, 1H), 7,54 (d, J = 8,54, 1H), 7,46 (d, J = 7,93, 1H), 7,34-7,27 (m sobrepondo com t, 3H), 7,22 (t, J = 4,88, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 1,77 (m, 2H), 1,46 (m, 2H). 19F RMN (470,45 MHz, CD3OD) δ 112,72, 123,10. LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 539,32, HPLC Rt = 1,585 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,64 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 4,66 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%- NH4HCO3 a 10 mM, Início
483/543
B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,43 min.
MeO
HN
5-(5-(terc-Butilcarbamoil)-4-metóxi-2-metilfenil)-4-flúor-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação foi realizada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,68 - 9,29 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,88 (dd, J = 8,55, 5,19, 2H), 7,72 (s, 1H), 7,43 (d, J= 8,55, 1H), 7,23-7,17 (m de sobreposição, 3H), 7,06 (s, 1H), 3,98 (s, 3H), 2,89 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,41 (s, 9H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 507,33, HPLC Rt = 1,837 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 10,19 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,50 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada
484/543 = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 11,25 min.
Figure BRPI0918174A2_D0360
5-(4-flúor-2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2,4dimetilbenzoato de metila
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 450,11, HPLC Rt = 1,852 min.
Figure BRPI0918174A2_D0361
Ácido 5-(4-flúor-2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)-2,4-dimetilbenzoico 1H RMN (500 MHz, CD3OD) 07,95 (m, 2H), 7,80 (s, 1H), 7,51 (d, J = 8,55, 1H), 7,30-7,25 (s e m de sobreposição, 4H), 2,96 (s, 3H), 2,63 (s, 3H), 2,23 (s, 3H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 436,09, HPLC Rt= 1,735 min.
Figure BRPI0918174A2_D0362
Figure BRPI0918174A2_D0363
485/543
5-(2,4-Dimetil-5-(1-(pirimidin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-4flúor-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação foi realizada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Sunfire Prep C18 19 x 100 5um, Coleta da Fração: 6,93 - 7,43 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6, os picos eram geralmente amplos) δ 8,93 (s, 1H), 8,71 (s amplo, 1H), 8,68 (m, 2H), 7,93 (m, 2H), 7,65 (m, 1H), 7,44 (m, 2H), 7,33 (m, 2H), 7,27 (m, 1H), 7,25 (m, 1H), 2,81 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,57 (s, 2H), 1,33 (s, 2H). 19F RMN (470,45 MHz, DMSOd6) δ 110,88, 121,61. LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 553,22, HPLC Rt = 1,645 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,26 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,23 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,00 min.
486/543
HN.
MeO.
Figure BRPI0918174A2_D0364
F
5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2,4dimetilbenzoato de metila
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 432,10, HPLC Rt= 1,928 min.
HN
HO.
Ácido 5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2,4dimetilbenzoico
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 418,10, HPLC Rt = 1,810 min.
HN
5-(2,4-Dimetil-5-(1-(pirimidin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação foi realizada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a
487/543
10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Sunfire Prep C18 19 x 100 5um, Coleta da Fração: 7,75 - 8,16 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,67 (d, J = 4,88, 2H), 7,97 (m, 2H), 7,65 (s sobreposto com d, 1H), 7,64 (d, J = 8,50, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,38 (dd, J = 8,55, 1,83, 1H), 7,28 (t, J = 8,85, 2H), 7,24 (t, J = 4,88, 1H), 7,22 (s, 1H), 2,95 (s, 3H), 2,52 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 1,76 (m, 2H), 1,46 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 535,23, HPLC Rt = 1,722 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,24 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,62 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%NH4HCO3 a 10mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,24 min.
Figure BRPI0918174A2_D0365
5-(5-(1-Cianociclopropilcarbamoil)-4-metóxi-2-metilfenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solven
488/543 te A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente Β = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 498,21, HPLC Rt= 1,647 min.
Figure BRPI0918174A2_D0366
2-(4-Fluorfenil)-5-(5-(1-(N-hidroxicarbamimidoil) ciclopropilcarbamoil)-4-metóxi-2-metilfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Purificação foi realizada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 30, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 10 min, Tempo de Parada =12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 6,82 - 7,62 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) 57,96 (dd, J = 8,24, 5,80, 2H), 7,88 (s, 1H), 7,63 (d, J = 8,24, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,32 (d, J = 8,54, 1H), 7,28 (t, J = 8,70, 2H), 7,13 (s, 1H), 4,05 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 1,67 (m, 2H), 1,50 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 531,22, HPLC Rt = 1,457 min.
Figure BRPI0918174A2_D0367
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(5-metil-1,2,4-oxadiazol3-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(5-metil-1,2,4-oxadiazol
489/543
3-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida foi preparada a partir de 2-(4-fluorfenil)-5-(5-(1-(Nhidroxicarbamimidoil)ciclopropilcarbamoil)-4-metóxi-2-metilfenil)-Nmetilbenzofuran-3-carboxamida sob condições similares conforme descrito, mas usando PhMe como um solvente. A mistura bruta foi purificada através de TLC preaprativa (placas de 20 x 20 cm x 500 um, MeOH a 5%/CH2CI2) para dar o produto, que foi purificado mais através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 7,95 - 8,47 min. (Detecção por UV a 220 nm). TLC analítica Rf = 0,38 (5 % de MeOH/CH2CI2). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,97 (dd, J = 7,93, 5,49, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,62 (d, J = 8,24, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,33 (d, J= 8,55, 1H), 7,27 (t, J= 8,39, 2H), 7,11 (s, 1H), 4,05 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,54 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 1,60 (m, 2H), 1,45 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 555,34, HPLC Rt = 1,735 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,75 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 5,93 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min,
490/543
Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 11,98 min.
Figure BRPI0918174A2_D0368
5-(2-Cloro-5-(1-cianociclopropilcarbamoil)-4-metoxifenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 518,20, 520,18, HPLC Rt= 1,692 min.
Figure BRPI0918174A2_D0369
5-(2-Cloro-5-(1-(N-hidroxicarbamimidoil)ciclopropilcarbamoil)-4metoxifenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 551,21, HPLC Rt= 1,478 min.
Figure BRPI0918174A2_D0370
5-(2-Cloro-4-metóxi-5-(1-(5-metil-1,2,4-oxadiazol-3il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
A mistura fot primeiro purificada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A =
491/543
MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 60, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 5 min, Tempo de Parada = 6 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: WatersSunfire 19 x 50 mm S5, Coleta da Fração: 3,85 - 4,21 min. (Detecção por UV a 220 nm). O resíduo obtido após evaporação das frações desejadas foi purificado mais através de TLC preparativa (MeOH a 5%/CH2CI2, placas de 20 cm x 20 cm x 0,5 mm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 7,98 (dd sobrepondo com, J = 5,19, 2H), 7,97 (s, 1H), 7,71 (d, J = 1,22, 1H), 7,65 (d, J = 8,55, 1H), 7,45 (dd, J= 8,55, 1,83, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,28 (t, J= 8,85, 2H), 4,05 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,54 (s, 3H), 1,61 (m, 2H), 1,46 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 575,10, HPLC Rt = 1,817 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 7,92 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 6,21 min.
H
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(5-fenil-1,2,4-oxadiazol-3il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
A mistura foi primeiro purificada através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Wa
492/543 ters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 9,11 - 9,39 min. (Detecção por UV a 220 nm) para isolar o produto desejado. O resíduo após evaporação das frações desejadas foi purificado mais através de TLC preparativa (MeOH a 5%/CH2CI2, placa de 20 cm x 20 cm x 0,5 mm). TLC analítica Rf = 0,52 (MeOH a 5%/CH2CI2). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,11 (d, J = 7,02, 2H), 7,99 (m, 2H), 7,84 (s, 1H), 7,83 (m sobrepondo com s, 1H), 7,68-7,64 (m de sobreposição, 3 H), 7,60-7,57 (m de sobreposição, 2 H), 7,45 (d, J = 8,55, 1H), 7,40 (d, J= 8,24, 1,83, 1H), 7,28 (m, 2H), 2,96 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 1,72 (m, 2H), 1,50 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 4 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 587,20, HPLC Rt = 1,950 min.
HO
Ácido 3-flúor-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 408,15, HPLC Rt= 1,757 min.
F
5-(3-Flúor-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4
493/543 fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
O produto precipitou da mistura de reação durante o acoplamento de ácido 3-flúor-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico (0,068 mmol de escala) com bicloreto de 1-(piridin-2il)ciclopropanamina (TBTU, iPr2NET, DMF, r.t.). A mistura foi diluída com 4 ml de H2O, o sólido esbranquiçado filtrado e lavado com 3 x 2 ml de H2O. O sólido foi lavado mais com 3 x 1 ml de MeOH e seco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (s, 1H), 8,52 (d, J = 4,58, 1H), 8,47 (d, J = 3,97, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,03-8,00 (m de sobreposição, 3H), 7,83 (m de sobreposição, 3H),
7,73 (d, 1H), 7,70 (dt sobrepondo com d, 1H), 7,43-7,40 (m de sobreposição, 3H), 7,17 (dd, J = 6,87, 5,34, 1H), 2,88 (d, J = 4,27, 3H), 1,59 (m, 2H), 1,32 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 524,25, HPLC Rt = 1,512 min.
Eto
2-flúor-3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoato de etila
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 436,01, HPLC Rt= 1,820 min.
494/543
HO
Figure BRPI0918174A2_D0371
Ácido 2-flúor-3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)benzoico
LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 408,01, HPLC Rt = 1,623 min.
5-(2-Flúor-3-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
O produto foi obtido como um sal de TFA após purificação através de HPLC de fase reversa preparativa Shimadzu-VP usando o método de separação Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =10 min, Tempo de Parada = 12 min, Taxa de Fluxo = 25 mL/min, Coluna: Waters-Sunfire 19 x 100 mm S5, Coleta da Fração: 8,11 - 8,43 min. (Detecção por UV a 220 nm). 1H RMN (500 MHz, CD3OD) δ 8,64 (d, 7= 5,19, 1H), 8,42 (t, 7 = 7,78, 1H), 7,97 (dd, 7= 8,24, 5,49, 2H), 7,91 (d, 7= 8,24, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,80 (q, 7= 6,61, 2H), 7,76 (t, 7= 7,17, 1H), 7,71 (d, 7 = 8,55, 1H), 7,60 (d, 7 = 8,24, 1H), 7,43 (t, 7 = 7,78, 1H), 7,29 (t, 7 = 8,55, 2H), 2,97 (s, 3H), 1,84 (m, 2H), 1,74 (m, 2H). LC/MS foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS® Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%-H2O a 90%TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3
495/543 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 524,08, HPLC Rt = 1,417 min. HPLC analítica foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e 254 nm. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeCN a 5%-H2O a 95%TFA a 0,1%, Solvente B = MeCN a 95%-H2O a 5%-TFA a 0,1%, Início B% = 10, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 15 min, Tempo de Parada =18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: Sunfire C18, 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 8,57 min; Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 x 150 mm, Rt = 9,09 min. Método de HPLC analítica: Solvente A = MeOH a 5%-H2O a 95%-NH4HCO3 a 10 mM, Solvente B = MeOH a 95%-H2O a 5%-NH4HCO3 a 10 mM, Início B% = 50, Final B% = 100, Tempo de Gradiente =15 min, Tempo de Parada = 18 min, Taxa de Fluxo = 1 ml/min, Coluna: XBridge fenila 3,5 um, 4,6 <150 •1. mm, Rt= 12,08 min.
3-(4-Fluorfenil)-3-oxopropanoato de etila
A uma suspensão de carbonato de dietila (7,69 g, 65,14 mmols, 1,8 eq.) e NaH (lavado com hexano) (90,47 mmols, 2,5 eq) em THF seco (30 ml) p-fluoracetofenona (36,19 mmols) foi adicionada em gotas a 60° C. A reação foi mantida em refluxo suave através do ajuste da temperatura e da taxa de adição (exotérmica). Após a adição estar completa, a reação foi aquecida em refluxo por 4 h, e então resfriada para temperatura ambiente. A mistura de reação foi despejada cuidadosamente em ácido acético gelado (6,0 ml) e água (20 ml). O produto foi extraído com éter e as camadas de éter combinadas foram lavadas com bicarbonate aquoso saturado, salmoura e secas. Éter foi evaporado e o produto bruto foi purificado através de cromatografia de coluna de sílica-gel (60-120) usando EtOAc a 2%/hexanos como eluente. Rendimento: 7,3 g (96 %). 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 1,27 (t, 3H, J = 7,12 Hz), 3,96 (s, 2H), 4,24 (q, 2H, J = 7,12 Hz), 7,17 (t, 2H, J = 7,59 Hz), 7,98 (m, 2H). LCMS : (ES+) m/z = 211 (M+H).
2-(4-fluorfenil)-5-hidroxibenzofuran-3-carboxilato de etila
A uma solução agitada de cloreto de zinco (8,39 g, 1,14 mmol, 1 eq) em tolueno em temperatura ambiente, 3-(4-fluorfenil)-3-oxopropanoato de etila (13 g, 2,74 mmols, 1 eq) foi adicionado e agitado a 70° C por 15 min.
496/543
Benzoquinona (6,66 g, 0,72 mmol, 1 eq) foi adicionada em porções na mistura de reação e agitada na mesma temperatura por 15-20 min. Aparelho Dean-stark foi montado e a mistura de reação foi aquecida a 140° C por 12 h e resfriada até a temperatura ambiente. O término da reação foi julgado através de TLC. EtOAc foi adicionado à massa de reação e filtrado através de um papel filtro, para remover o material inorgânico. Salmoura foi adicionada à mistura de reação (filtrada) e extraída, seca em sulfato de sódio e concentrada para dar o material bruto. Ela foi purificada mais através de cromatografia de coluna usando sistema de EtOAc a 10% /Hexano. Rendimento: 8,0 g (43 %). 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 1,38-1,42 (t, 3H, J = 7,14 Hz), 4,374,42 (q, 2H, J= 7,13 Hz), 5,2 (br s, 1H), 6,87-6,9 (q, 1H, J= 3,81 Hz), 7,147,18 (q, 2H, J= 5,82 Hz), 7,36-7,39 (d, 1H, J= 8,80 Hz), 7,50-7,51 (d, 1H, J = 2,56 Hz), 8,00-8,03 (m, 2H). LCMS : (ES+) m/z = 301 (M+H).
Ácido 2-(4-fluorfenil)-5-hidroxibenzofuran-3-carboxílico
A uma mistura de 2-(4-fluorfenil)-5-hidroxibenzofuran-3carboxilato (1 g, 3,5 mmols, 1 eq) em uma mistura 1:1 de MeOH/THF em temperatura ambiente foram adicionados 5 eq. de NaOH e aquecidos para 60° C por 3 h. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e para 0o C em um banho de água gelada, ela foi acidificada lentamente com HCI a 1,5N e então concentrada. A mistura com precipitados brancos foi diluída com água e filtrada para dar o sólido. Ela foi lavada mais com água e seca a vácuo. Rendimento: 0,9 g (94,6 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 6,82-6,85 (m, 1H), 7,35-7,40 (m, 3H), 7,46-7,49 (d, 1H, J = 8,84 Hz), 8,02-8,05 (m, 2H), 9,4 (s, 1H), 13,05 (s, 1H). LCMS : (ES-) m/z = 271,1.
2-(4-Fluorfenil)-5-hidróxi-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de ácido 2-(4-fluorfenil)-5-hidroxibenzofuran-3carboxílico (1 g, 3,7mmols, 1 eq), metilamina em THF (solução a 2 M) (0,689 g, 21,5 mmols, 1 eq), HOBT (0,83 g, 6,2 mmols, 1,7 eq), EDC.HCI (1,24 g, 6,6 mmols, 1,8 eq) em DMF em temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionada di-isopropil etilamina (2,32 g, 18,5 mmols, 3,0 eq). A mistura transparente foi agitada em temperatura ambiente por 12 h. A LCMS indicou o produto desejado. A mistura foi concentrada, resfriada em um banho de á
497/543 gua gelada, diluída mais com água. O sólido branco foi filtrado e lavado com água e seco a vácuo. Rendimento: 0,85 g (90 %).1H RMN (400MHz, DMSOd6): δ 2,81-2,82 (d, 3H, J = 4,5Hz), 6,80-6,83 (m, 1H), 6,94-6,95 (d, 1H, J = 2,3 Hz), 7,34-7,38 (t, 2H, J= 8,7 Hz), 7,44-7,47 (d, 1H, J= 8,8 Hz), 7,90-7,93 (m, 2H), 8,39-8,40 (d, 1H, J = 4,4 Hz), 9,3 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 286,1 (M+H).
trifluormetanossulfonato de 2-(4-Fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila
A uma mistura de 2-(4-fluorfenil)-5-hidróxi-N-metilbenzofuran-3carboxamida (5 g, 17,5 mmols, 1 eq) em diclorometano (50 ml) em temperatura ambiente sob N2 foi adicionada trietilamina (2,6 g, 26 mmols, 1,5 eq). A mistura foi resfriada para 0 °C e então adicionada 1,1,1-triflúor-N-fenilN(trifluormetilsulfonil) metano sulfonamida (7,5 g, 21 mmols, 1,2 eq). A mistura foi então agitada em temperatura ambiente por 12 h. A mistura de reação foi concentrada, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica é lavada mais duas vezes com água, seca em sulfato de sódio e concentrada para dar o produto. O produto foi purificado adicionalmente através de cromatografia de coluna usando 230-400 sílica-gel e EtOAc/Hexano 50 %. Rendimento: 6,2 g (85 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,83-2,84 (d, 3H, 7 = 4,6 Hz), 7,40-7,44 (t, 2H, 7= 8,9 Hz), 7,51-7,53 (m, 1H), 7,75-7,76 (d, 1H, 7 = 2,52 Hz), 7,88-7,90 (d, 1H, 7 = 8,96 Hz), 7,94-7,98 (m, 2H),) 8,518,52 (d, 1H, 7 = 4,6 Hz). LCMS : (ES+) m/z = 418(M+H).
3-(2-(4-Fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4metilbenzoato
A uma mistura de trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (3,5 g, 8,4 mmols, 1 eq), ácido borônico (1,95 g, 10,1 mmols, 1,2 eq), em 1,4-dioxana/H2O (5:1) foi adicionado carbonato de césio (8,21 g, 26 mmols, 3 eq) e o gás nitrogênio foi passado pela mistura por 10 min. Então trifenilfosfino paládio (0,97 g, 0,8 mmol, 0,1 eq.) foi adicionado à mistura de reação e o gás nitrogênio foi novamente passado pela mistura por 10 min. A mistura de reação acima foi aquecida em microondas por uma hora a 90° C. Cerca de 50 ml de água são adicionados à
498/543 mistura de reação e extraídos com EtOAc. A camada orgânica foi lavada mais duas vezes com água e seca em sulfato de sódio e concentrada para dar o produto. O produto obtido foi purificado adicionalmente através de cromatografia de coluna usando EtOAc a 40% /Hexano como eluente. Rendimento; 1,5 g (40 %) 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,32 (s, 3H), 2,812,82 (d, 3H, J = 4,56 Hz), 3,85 (s, 3H), 7,39-7,43 (t, 2H, J = 8,9 Hz), 7,397,43 (m, 1H), 7,49-7,51 (d, 1H, J= 8,16 Hz), 7,56 (s, 1H), 7,75-7,77 (d, 1H, J = 8,6), 7,83 (s, 1H), 7,89-7,91 (d, 1H, J = 7,82 Hz), 7,98-8,02 (m, 2H), 8,488,49 (d, 1H, J = 4,6 Hz).LCMS : (ES+) m/z = 418 (M+H).
Ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4metilbenzoico
A uma mistura de 3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoato de metila (1 g, 2,4 mmols, 1 eq) em em uma mistura 1:1 de MeOH/TF em temperatura ambiente foram adicionados 5 eq. de NaOH e aquecidos para 60° C por 5 h. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e então em um banho gelado, extinta lentamente com HCI a 1,5N e então concentrada. A mistura com precipitados brancos foi diluída com água e filtrada para dar o sólido. Ela foi lavada mais com água e seca a vácuo. Rendimento: 0,850 g (90 %). Este ácido foi também preparado através do acoplamento de trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila com ácido 4-metil-3(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoico (CS2CO3, (Ph3)4Pd, H2O/1,4-dioxana (1:5), 90 °C) de uma maneira similar à descrita. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,32 (s, 3H), 2,82-2,83 (d, 3H, J = 4,6 Hz), 7,36-7,48 (m, 6H), 7,56-7,57 (d, 1H, J= 1,44 Hz), 7,75-7,77 (d, 1H, J = 8,48 Hz), 7,818,03 (m, 2H), 8,46-8,48 (d, 1H, J = 4,7 Hz), 12,92 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 404,0 (M+H).
1- (Pirimidin-2-il)ciclopropanamina
2- Ciano pirimidina (5 g, 47,6 mmols, 1 eq) foi absorvida em THF seco sob atmosfera de argônio, então isopropóxido de titânio (17 ml, 57,1 mmols, 1,2 eq.) foi adicionado lentamente em temperatura ambiente e a mistura de reação foi agitada por 15 min. Brometo de etil magnésio (solução a
499/543
1M) em THF (107 ml, 809 mmolse, 2,5 eq.) foi adicionado através de seringa lentamente em temperatura ambiente, (durante a adição de EtMgBr a massa de reação ficou preta). Então a massa de reação foi agitada por uma hora. BF3,EtO (16,7 ml, 119,0 mmols, 2,5 eq) foi adicionado lentamente através de seringa a 0o C. Amistura foi deixada atingir temperatura ambiente e agitada por mais uma hora. 50 ml de água foram adicionados à mistura de reação e filtrados em CELITE® e o leito lavado com água e acetato de etila. A massa de reação foi basificada com solução de NaOH a 10% (pH = 9), então extraída com DCM e lavada com solução de salmoura. O produto requerido foi purificado através de cromatografia de coluna de sílica-gel (230-400) usando DCM/metanol como o eluente. Rendimento: 2,1 g (30 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-de): δ 1,49-1,52 (m, 2H), 1,59-1,62 (m, 2H), 7,47-7,49 (t, 1H, J = 4,80), 8,83-8,84 (d, 2H, J = 4,80).
Figure BRPI0918174A2_D0372
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(pirimidin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoico (0,1 g, 0,25 mmol, 1 eq), 1(pirimidin-2-il)ciclopropanamina (0,041 g, 0,3 mmol, 1,2 eq) (60% de pureza), HOBT (0,057 g, 0,42 mmol, 1,7 eq), EDC.HCI (0,086 g, 0,44 mmol, 1,8 eq) em DCM em temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionada diisopropiletilamina (0,16 g, 1,3 mmol). A mistura transparente foi agitada em temperatura ambiente por 12 h. A mistura foi concentrada, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada adicionalmente com água, seca em sulfato de sódio e concentrada. O produto obtido foi purificado adicionalmente através de cromatografia de coluna (alumina neutra) usando metanol a 0,5%/DCM e finalmente purificado através de HPLC preparativa. Rendimento: 0,15 g (14 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,331,36 (m, 2H), 1,59-1,61 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,82-2,83 (d, 3H, J = 4,8 Hz), 7,26-7,29 (t, 1H, J = 4,8 Hz), 7,39-7,45 (m, 4H), 7,59 (s, 1H), 7,76-7,78 (d,
500/543
1H, J = 8,4 Hz), 7,86-7,87 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 7,98-8,02 (m, 2H), 8,47-8,50 (m, 1H), 8,67-8,68 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 9,20 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 521,2 (M+H). Coluna : Ascentis Express C18 (5X2,1 mm-2,7pm). FaseM A : 2% de MeCN - 98% de H2O-NH4COOH a 10mM. FaseM B : 98% de MeCN 5 2% de H2O-NH4COOH a 10mM. Fluxo : 1mL/Min.
Tempo % de A % de B
0,0 100,0 0
1,5 0,0 100,0
3,2 0,0 100,0
3,6 100,0 0,0
RT min : 1,908, comprimento de onda:220nm. Método de HPLC:
Coluna : ZORBAX® C18 (4,6X150mm-5,0pm)
A : Tampão : Acetato de amônio a 20mM
B : Metanol
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :19,7
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :19,7
Método de HPLC:
Sunfire C18 (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : ACN :Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
501/543
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :17,2 Comprimento de onda : 220 nm, RT min :17,2 Método de HPLC:
XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :15,764 Comprimento de onda : 220 nm, RT min :15,764 Ácido 3-flúor-5-iodo-4-metilbenzoico
Ácido 3-flúor-4-metilbenzoico (1 g, 6,48 mmols, 1 eq) foi dissolvido em ácido trifluormetanossulfônico (10 ml) e a reação foi resfriada para 0o C. N-lodossuccinimida (1,46 g, 6,48 mmols, 1 eq) foi adicionada à solução acima em porção e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 14 h. Em seguida a solução acima foi vertida em 50 ml de água gelada, o sólido obtido foi filtrado. O sólido foi dissolvido em acetato de etila, lavado com solução de tiossulfato de sódio e salmoura, a camada orgânica foi concentrada para obter o produto desejado como um sólido marrom claro. Rendimento: 1,5 g (83 %). 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 2,35 (s, 3H), 7,68 (d, 1H, J = 8 Hz), 8,14 (s, 1H). 13,50 (amplo, 1H).
3-flúor-5-iodo-4-metilbenzoato de metila
Ácido 3-flúor-5-iodo-4-metilbenzoico (1,3 g, 4,6 mmols, 1 eq) foi dissolvido em metanol e tratado com ácido sulfúrico concentrado (0,49 ml, 9,2 mmols, 2 eq). A solução acima foi agitada a 50° C por 15 h. Em seguida o solvente foi removido e ao resíduo resultante dietiléter foi adicionado e a camada orgânica foi lavada com solução de bicarbonate de sódio a 10% e água. Finalmente, a camada orgânica foi concentrada e purificada através
502/543 de cromatografia de coluna de sílica-gel rápida usando sílica-gel 240-400 usando EtOAc a 10% em hexano como o eluente. Rendimento: 1 g (77 %). 1H RMN (400MHz CDCI3). õ 2,39 (s, 3H), 3,90 (s, 3H), 7,64 (d, 1H, J= 8 Hz), 8,25 (s, 1H).
3-flúor-4-metil-5-(3,3,4,4-tetrametilborolan-1-il)benzoato de metila
Uma mistura de 3-flúor-5-iodo-4-metilbenzoato de metila (0,85 g, 2,89 mmols, 1 eq), acetato de potássio (1,41 g, 14,45 mmols, 5 eq), bispinacolatodiboro (1,1 g, 4,33 mmols, 1,5 eq) e 1,1-bis (difenilfosfino)ferroceno)dicloropaládio (II) (0,047 g, 0,057 mmol, 0,02 eq) foi dissolvida em DMF e a reação foi agitada a 90° C por 18 h. Em seguida, o solvente foi removido, água foi adicionada e extraída com diclorometano, a camada orgânica foi lavada com HCI a 2M, cloreto de lítio a 10% e salmoura. A camada orgânica foi concentrada e hexano foi adicionado. O sólido obtido foi filtrado e seco para dar o produto desejado como um sólido branco. Rendimento: 0,35 g, (41 %). 1H RMN (400MHz CDCI3): δ 1,35(s, 12H), 2,49 (s, 3H), 3,90 (s, 3H), 7,69-7,71 (d, 1H, J= 8 Hz), 8,18 (s, 1H).).
Figure BRPI0918174A2_D0373
3-flúor-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4metilbenzoato de metila
A uma mistura de trifluormetanossulfonato 2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (0,5 g, 1,2 mmol, 1 eq), éster borônico (0,42 g, 1,4 mmol, 1,2 eq) em 1,4-dioxana/H2O (5:1) foi adicionado carbonato de césio (1,17 g, 3,6 mmols, 3 eq) e o gás nitrogênio foi passado pela solução por 10 minutos. Então tetracistrifenilfosfino paládio (0,14 g, 0,12 mmol, 0,1 eq) foi adicionado e o gás nitrogênio foi passado novamente através da solução por 15 min. A mistura de reação acima foi aquecida em micro-ondas por uma hora a 90° C. Cerca de 100 ml de água são adicionados à mistura de reação e extraídos com EtOAc. A camada orgânica foi lavada duas vezes com água, seca e concentrada para dar o produto. O produto obtido foi adi
503/543 cionalmente purificado através de cromatografia de coluna usando EtOAc a 40 % /Hexano como o eluente. Rendimento: 0,5 g (40 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,23 (d, 3H, J = 1,9 Hz), 2,82-2,83 (d, 3H, J = 4,6 Hz), 3,8 (s, 3H), 7,39-7,43 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 7,39-7,43 (1H, m), 7,61 (s, 1H), 7,70-7,72 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,78-7,80 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,99-8,03 (m, 2H), 8,498,51 (d, 1H, J = 4,7 Hz). LCMS : (ES+) m/z = 436 (M+H). PHENOMENEX® Luna C18 (4,6X3,0mm-5,0pm). FaseM A : 10% de CH3OH -H2O a 90%NH4Oac a 10mM. FaseM B : 90% de CH3OH -H2O a 10%- NH4OAc a 10mM. Fluxo : 5 ml/Min.
Tempo B%
0,0 0,0
2,0 100,0
3,0 0,0
RT min : 2,135, comprimento de onda: 220nm
Figure BRPI0918174A2_D0374
Ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4metilbenzoico
A uma mistura de 3-flúor-5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoato de metila (0,3 g, 0,68 mmol, 1 eq) em uma mistura 1:1 de MeOH/THF em temperatura ambiente foram adicionados 5 eq. de NaOH e aquecidos para 60° C por 5 h. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e então resfriada em um banho de água gelada. Ela foi acidificada lentamente com HCI a 1,5N e então concentrada. A mistura com precipitados brancos foi diluída com água e filtrada para dar o sólido. Ela foi lavada mais com água e seca a vácuo. Rendimento: 0,2 g (60 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,22 (s, 3H), 2,82-2,84 (d, 3H, J = 4,6 Hz), 7,39-7,43 (m, 3H,), 7,61 (s, 1H), 7,66-7,70 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 7,66-7,70 (m, 1H), 7,78-7,80 (d, 1H, J= 8,5 Hz), 8,01-8,03 (m, 2H), 8,49-8,51 (d, 1H, J = 4,76 Hz), 13,2 (s, 1H). LCMS : (ES-) m/z = 420,0 (M-H). CHROMOLIT® SpeedROD C18 (4,6X3,0mm-5,0pm). FaseM A : CH3OH a 10%504/543
H2O a 90%-TFA a 0,1%. FaseM B : CH3OH a 90%-H2O a 10%-TFA a 0,1%.
Fluxo: 5 ml/Min
Tempo % de B
0,0 0,0
2,0 100,0
3,0 0,0
RT min : 2,040, comprimento de onda: 220 nm.
1- (Piridin-2-il)ciclopropanamina
2- Ciano piridina (5 g, 48,0 mmols, 1 eq) foi absorvida em THF seco sob atmosfera de argônio. A esta mistura foi adicionado isopropóxido de titânio (17 ml, 57,6 mmols, 1,2 eq) em temperatura ambiente. A massa de reação foi agitada por 15 min. Brometo de etil magnésio (solução a 1M) em THF (107 ml, 809 mmols, 2,5 eq) foi adicionado através de seringa lentamente em temperatura ambiente, (durante a adição de EtMgBr a massa de reação ficou preta). Então a massa de reação foi agitada por uma hora e BF3,Et2O (16,7 ml, 120,0 mmols, 2,5 eq) foi adicionado lentamente a 0 °C. Após o término do processo de adição, a massa de reação foi deixada atingir temperatura ambiente e a agitação continuada por mais uma hora. Finalmente, 50 ml de água foram adicionados e a massa de reação foi filtrada em CELITE®. O leito foi lavado adicionalmente com água e acetato de etila. O filtrado foi basificado com solução de NaOH a 10% (pH = 9), então extraído com DCM e lavado com solução de salmoura, o produto requerido foi purificado através de cromatografia de coluna de sílica-gel (60-120) usando DCM/metanol como o eluente. Rendimento: 1,3 g (23 %). 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 1,12-1,14 (m, 2H), 1,27-1,29 (m, 2H), 2,12 (s amplo, 2H), 7,037,07 (t, 1H), 7,33-7,35 (d, 1H), 7,60-7,62 (t, 1H), 8,48-8,49 (d, 1H).
Figure BRPI0918174A2_D0375
5-(3-Flúor-2-metil-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de ácido 3-flúor-5-(2-(4-fluorfenil)-3
505/543 (metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metil benzoico (0,2 g, 0,47 mmol, 1 eq), 1(piridin-2-il)ciclopropanamina (0,075 g, 5,5 mmols, 1,2 eq) (60% de pureza), HOBT (0,81 g, 0,015 mmol, 1,7 eq), EDC.HCI (0,16 g, 00,83 mmol, 1,8 eq) em DCM em temperatura ambiente e sob nitrogênio foi adicionada diisopropiletilamina (0,30 g, 2,3 mmols, 5,0 eq). A mistura transparente foi agitada em temperatura ambiente por 12 h. A mistura foi concentrada, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica é lavada adicionalmente com água, seca em sulfato de sódio e concentrada. O produto obtido foi purificado adicionados através de cromatografia de coluna (alumina neutra) usando Metanol a 0,5%/DCM e purificação adicional foi feita usando HPLC preparativa. Rendimento: 0,1 g (50 %). 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 1,391,42 (m, 2H), 1,67-1,70(m, 2H), 2,21-2,22 (d, 3H, J = 2,24 Hz), 2,9-3,0 (d, 3H, 9 = 4,88 Hz), 5,98-5,99 (s, 1H), 7,06-7,09 (dd, 1H, 9= 5,2, 7,2 Hz), 7,187,36 (m, 5H), 7,53-7,62 (m, 4H), 7,76 (d, 1H, 9= 1,36 Hz), 7,94-7,97 (m, 2H), 8,4 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 538,2 (M+H). LCMS Método : Coluna : Atlantis dC18 (50X4,6mm-5pm). A: ΝΗ4ΟΑο a 10mM. B : acetonitrila. Fluxo : 1mL/Min.
Tempo % de B
0,0-3,0 30-95
3,0-4,0 95
4,0-4,5 95-30
4,5-6,0 30
RT min : 3,665, comprimento de onda:220nm
Info do Método de HPLC:
Sunfire C18 (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A: Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN Tampão (95:5)
Fluxo: 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
506/543
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :10,441 Comprimento de onda : 220 nm, RT min :10,441 Pureza : 96%
XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN : Tampão (95:5)
Fluxo: 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :9,592 Comprimento de onda : 220 nm, RT min :9,592 Pureza : 95,9 %
3,5-di-hidróxi-4-metilbenzoato de metiia
Ácido 3,5-di-hidróxi-4-metilbenzoico (5,0 g, 29,79 rnmols, 1,0 eq) e PTSA (1,13 g, 5,94 rnmols, 0,2 eq) foram dissolvidos em 50 ml de metanol e a mistura foi aquecida para refluxo por 6 h. Metanol foi evaporado. O sólido resultante foi lavado com solução de bicarbonato de sódio a 10%. A solução aquosa foi extraída três vezes com acetato de etila. A camada orgânica combinada foi seca em sulfato de sódio e evaporada sob vácuo. Rendimento : 5,25 g (96 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,98 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 6,93(s, 2H), 9,53(s, 2H). LCMS : (ES+) m/z = 183 (M+H) Método: Coluna : PHENOMENEX® Luna C18 (4,6x30) mm, 5 microns. FaseM A : MeOH a 10% -H2O a 90% - NH4OAc a 10mM. FaseM B : MeOH a 90% -H2O a 10% - NH4OAc a 10mM. Fluxo : 5 ml/min
Tempo (min.) % de A % de B
0,0 100,0 0,0
2,0 0,0 100,0
3,0 0,0 0,0
RT min : 0,956
Comprimento de onda : 220 nm
507/543
3-(benziloxi)-5-hidróxi-4-metilbenzoato de metila
3,5-di-hidróxi-4-metilbenzoato de metila (3,5 g, 19,22 mmols, 1,0 eq) foi dissolvido em 300 ml de DMF. A esta solução carbonato de potássio (2,52 g, 18,26 mmols, 0,95 eq) foi adicionado. A esta suspensão agitada, brometo de benzila (3,12 g, 18,26 mmols, 0,95 eq) (diluído com 50ml de DMF) foi adicionado em gotas durante um período de 3 h. A solução foi agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. A DMF foi evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi lavado com água e o produto foi extraído três vezes com DMC. As camadas de DCM combinadas foram secas em sulfato de sódio e evaporadas sob vácuo. O produto requerido foi purificado através de cromatografia de coluna de sílica-gel (240-400) usando acetato de etila a 10%/hexano como o eluente. Rendimento: 1,6 g (30 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,07 (s, 3H), 3,81 (s, 3H), 5,14 (s, 2H), 7,08 (s, 1H), 7,14 (s, 1H), 7,33-7,35 (d, 1H, J = 7,04 Hz), 7,39-7,42 (t, 2H, J = 7,40 Hz), 7,46-7,48 (d, 2H, J = 7,48 Hz), 9,78 (s, 1H).
3-(benziloxi)-4-metil-5-(trifluormetilsulfoniloxi)benzoato de metila
3-(benziloxi)-5-hidróxi-4-metilbenzoato de metila (3,0 g, 11,02 mmols, 1,0 eq) foi dissolvido em DCM seguido por /V-fenil bis (trifluormetilsulfonimida) (5,9 g, 16,53 mmols, 1,5 eq). A esta solução agitada, TEA (3,34 g, 33,06 mmols, 3,0 eq) foi adicionada em gotas. A solução resultante foi agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. A esta massa de reação água foi adicionada e a camada de DCM foi separada. A camada aquosa foi extraída duas vezes com DCM. A camada de DCM combinada foi seca em sulfato de sódio e evaporada. O óleo resultante foi purificado através de cromatografia de coluna de sílica-gel (60-120) usando acetato de etila a 5%/hexano como o eluente. Rendimento: 4,0 g (80 %). 1H RMN (400MHz, DMSO): δ 2,26 (s, 3H), 3,90 (s, 3H), 5,77 (s, 2H), 7,36-7,39 (d, 1H, J = 8,20 Hz), 7,43-7,45 (t, 2H, J= 7,60 Hz), 7,51 (s, 3H), 7,70 (s, 1H).
3-(benziloxi)-4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)benzoato de metila
À solução de 3-(benziloxi)-4-metil5(trifluormetilsulfoniloxi)benzoato de metila (1,2 g, 2,96 mmols, 1,0 eq) em
508/543
1,4-dioxana foi adicionado PdCI2(dppf) em complexo de DCM (242 mg, 0,296 mmol, 0,1 eq) seguido por bis(pinacolato)diboro (1,5 g, 5,93 mmols, 2,0 eq). A esta solução agitada, TEA (1,5 g, 14,83 mmols, e 5,0 eq) foi adicionada. A mistura de reação foi lentamente aquecida para 110° C e mantida por dois dias em um tubo vedado. 1,4-Dioxana foi evaporada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionada água e a camada aquosa foi extraída três vezes com DCM. A camada de DCM combinada foi seca em sulfato de sódio e evaporada sob vácuo. O bruto foi purificado através de cromatografia de coluna de sílica-gel (60-120) usando acetato de etila a 1%/hexano como o eluente. Rendimento: 0,8 g (70 %). 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 1,39 (s, 12H), 2,53 (s, 3H), 3,91 (s, 3H), 5,17 (s, 2H), 7,33-7,35 (d, 1H, J= 7,36 Hz), 7,39-7,42 (t, 2H, J = 7,50 Hz), 7,48-7,50 (d, 2H, J = 7,40 Hz), 7,67-7,68 (d, 1H, J = 1,20 Hz), 8,00-8,01 (d, 1H, J = 1,40 Hz).
Figure BRPI0918174A2_D0376
3-(benziloxi)-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-
4-metilbenzoato de metila
A uma mistura de trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (0,5 g, 1,2mmol, 1 eq), éster borônico (0,55 g, 1,4 mmol, 1,2 eq), em 1,4-dioxana/H2O (5:1) foi adicionado carbonato de césio (1,37 g, 4,2 mmols, 3eq) e o gás nitrogênio foi passado novamente por 15 minutos. A mistura de reação acima foi aquecida em micro-ondas por uma hora a 90° C. Cerca de 100 ml de água são adicionados à mistura de reação e extraídos com EtOAc. A camada orgânica foi lavada mais duas vezes com água e seca em sulfato de sódio e concentrada para dar o produto. O produto obtido foi purificado mais através de cromatografia de coluna usando sílica-gel 60-120 e sistema de EtOAc a 40%/Hexano. Rendimento: 0,3 g (48 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,20 (s, 3H), 2,82-2,83 (d, 3H, J = 4,6 Hz), 3,8 (s, 3H), 5,3 (s, 2H), 7,39-7,46 (m, 6H), 7,52-7,56 (m, 4H), 7,62 (s, 1H), 7,76-7,78 (d, 1H, J = 8,44 Hz), 7,99-8,03 (m, 2H), 8,49-8,50 (d, 1H, J = 4,52 Hz). LCMS : (ES+) m/z = 524,0 (M+H). CHROMOLIT® SpeedROD
509/543
C18 (4,6X3,0mm-5,0pm). FaseM A: CH3OH a 10%-H2O a 90%-TFA a 0,1%.
FaseM B : CH3OH a 90%-H2Q a 10%-TFA a 0,1%. Fluxo : 5 ml/Min.
Tempo % de B
0,0 0,0
2,0 100,0
3,0 0,0
RT min : 2,303, comprimento de onda : 220 nm
Figure BRPI0918174A2_D0377
Ácido 3-(benziloxi)-5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil) benzofuran-5-il)-4-metilbenzoico
A uma mistura de 3-(benziloxi)-5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoato de metila (0,3 g, 0,57mmol, 1 eq) em uma mistura 1:1 de MeOH/THF em temperatura ambiente foram adicionados 5 eq. de NaOH, e a mistura resultante foi aquecida para 60° C por 5h. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e então esfriada em banho de água gelada. A mistura de reação foi acidificada com HCI a 1,5N e então concentrada. A mistura com precipitados brancos foi diluída com água e filtrada para dar o sólido. Ela é lavada mais com água e seca a vácuo. Rendimento: 0,2 g (70 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,19 (s, 3H), 2,82-2,83 (d, 3H, J = 4,56 Hz), 5,27 (s, 2H), 7,34-7,46 (m, 6H), 7,507,55 (m, 4H), 7,60 (s, 1H), 7,75-7,77 (d, 1H, J = 8,44 Hz), 7,99-8,03 (m, 2H), 8,49-8,50 (d, 1H), 13,0 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 510 (M+H). Ascentis Express C18 (5,0X2,1-2,7pm). FaseM A : MeCN a 2% - H2O a 98% NH4COOH a 10mM. FaseM B: MeCN a 98%- H2O a 2%-NH4COOH a 10mM. Fluxo: 5 ml/Min.
Tempo % de A % de B
0,0 100,0 0,0
1,5 0,0 100,0
3,2 0,0 100,0
3,6 100,0 0,0
510/543
RT min : 1,963, comprimento de onda : 220 nm
Figure BRPI0918174A2_D0378
5-(3-(Benziloxi)-2-metil-5-(1-(piridin-2- il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida À mistura de ácido 3-(benziloxi)-5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoico (0,2 g, 0,40 mmol, 1 eq), 1(piridin-2-il)ciclopropanamina (0,064 g, 0,47 mmol, 1,2 eq) (60 % de pureza), HOBT (0,68 g, 0,012 mmol, 1,7 eq), EDC.HCI (0,064 g, 0,72 mmol, 1,8 eq) em DCM em temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionada diisopropiletilamina (0,26 g, 2,0 mmols, 5,0 eq.). A mistura transparente foi agitada em temperatura ambiente por 12 h. A mistura foi concentrada, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada mais com água, seca em sulfato de sódio e concentrada. O produto obtido foi purificado mais através de cromatografia de coluna (alumina neutra) usando Metanol a 0,5%/DCM e HPLC preparativa. Rendimento: 0,17 g (70 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,26-1,27 (m, 2H), 1,54-1,56 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,81-2,82 (s, 3H), 5,26 (s, 2H) 7,13-7,15 (q, 1H, J = 4,4 Hz), 7,30-7,43 (m, 6H), 7,58 (d, 4H), 7,65-7,69 (t, 2H, J = 3,9 Hz), 7,74-7,79 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,97-8,01 (m, 2H), 8,43-8,48 (dd, 2H, J = 4,89 Hz), 9,186 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 626 (M+H) Ascentis Express C18 (5,0X2,1-2,7pm). FaseM A : MeCN a 2% - H2O a 98% - NH4COOH a 10mM. FaseM B : MeCN a 98% -l2O a 2% - NH4COOH a 10mM, Fluxo : 5 ml/Min.
Tempo % de A % de B
0,0 100,0 0,0
1,5 0,0 100,0
3,2 0,0 100,0
3,6 100,0 0,0
Figure BRPI0918174A2_D0379
511/543
2-(4-Fluorfenil)-5-(3-hidróxi-2-metil-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-etilbenzofuran-3-carboxamida
A uma solução de ácido 3-(benziloxi)-5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoico (0,17 g, 0,27 mmol, 1 eq) em DCM foi adicionado BCI3 em DCM (0,32 g, 2,7 mmols, 10 eq). A mistura transparente foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. LCMS mostrou o produto desejado. A mistura foi extinta com NaHCO3 a 10% e extraída com EtOAc. A camada orgânica é lavada mais com água, seca em sulfato de sódio e concentrada. O produto obtido foi purificado mais através de cromatografia de coluna (alumina neutra) usando Metanol a 0,5%/DCM e foi purificado mais com HPLC preparativa. Rendimento: 0,048 g (33 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,22-1,24 (m, 2H), 1,51-1,53 (m, 2Η), 2,09 (s, 3H,), 2,82-2,83 (s, 3H, J = 4,4 Hz), 7,12-7,15 (q, 1H), 7,30-7,32 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,37-7,43 (m, 5H), 7,58 (s, 1H), 7,65-7,69 (t, 1H, J= 8 Hz), 7,74-7,76 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,97-8,01 (m, 2H), 8,43-8,48 (dd, 2H, J = 16, 4,8 Hz), 9,18 (s, 1H), 9,77 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 536,2 (M+H). Coluna : Ascentis Express C18 (5X2,1mm-2,7pm). FaseM A : MeCN a 2% - H2O a 98%NH4COOH a 10mM. FaseM B : MeCN a 98% -H2O a 2%- NH4COOH a 10mM. Fluxo: 1mL/Min.
Tempo % de A % de B
0,0 100,0 0
1,5 0,0 100,0
3,2 0,0 100,0
3,6 100,0 0,0
RT min : 1,862, comprimento de onda:220nm
Info do Método de HPLC:
Sunfire C18 (4,6X150)mm, 3,5 microns Tampão : TFA 0,05% em água pH 2,5 Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5) Fase Móvel B : MeCN : Tampão (95:5) Fluxo : 1 ml/min
512/543
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :9,255
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :9,255
Pureza: 95,2%
XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5 Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :9,046
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :9,046
Pureza: 95,8%
2-Flúor-3-iodo-4-metilbenzonitrila
Uma solução de 2,2,6,6-tetrametil-4-piperidina (TMP) (550 mg, 3,93 mmols, 2,1 eq) em THF (5 ml) foi resfriada para -78° C sob atmosfera de nitrogênio. N-Butil lítio (1,6M em hexano, 1,52 ml, 3,96 mmols, 2,1 eq.) foi adicionado lentamente mantendo a temperatura abaixo de -70° C. Após a adição, a mistura de reação foi aquecida até -50° C e agitada por uma hora. A solução transparente ficou túrbida indicando a formação de sal. A mistura de reação foi resfriada para -80° C e uma solução de 2-flúor-4metilbenzonitrila (250 mg, 1,85 mmol, 1,0 eq) em THF (1 ml) foi lentamente adicionada mantendo a temperatura abaixo de -70° C. A mistura foi então aquecida para -50° C e agitada por 30 minutos. A mistura foi novamente esfriada para -78° C e uma solução saturada de iodo (516 mg, 2,03 mmols, 1,1
513/543 eq.) em THF (1 ml) foi adicionada lentamente mantendo a temperatura abaixo de -70° C. Após adição, a mistura foi aquecida para temperatura ambiente. A mistura de reação foi vertida em uma solução saturada de Na2S2O3 (10 ml) e agitada por 30 minutos. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura e secas em sulfato de sódio. Os voláteis foram evaporados sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado sob cromatografia de coluna de sílica-gel (60-120) usando acetato de etila a 0,5%/hexano como eluente. Rendimento: 187 mg (38 %). 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 2,55 (s, 3H), 7,13-7,15 (d, 1H, J = 7,92 Hz), 7,48-7,50 (t, 1H, J = 4,80 Hz).
Ácido 2-flúor-3-iodo-4-metilbenzoico
Uma mistura de 2-flúor-3-iodo-4-metilbenzonitrila (450 mg, 1,71 mmol, 1,0 eq) em 2 ml de dioxana e ácido sulfúrico a 60% (2 ml) foi aquecida a 115° C em um banho de óleo por 12 h. Após a mistura ser resfriada até a temperatura ambiente, ela foi despejada em 10 g de gelo. O sólido castanho foi filtrado, lavado com água seguido por acetato de etila. O sólido coletado foi seco para dar ácido 2-flúor-3-iodo-4-metilbenzoico como um sólido cristalino castanho. O filtrado foi transferido para um funil de separação. A camada de acetato de etila foi separada, lavada com salmoura, seca em sulfato de sódio e concentrada para dar mais ácido 2-flúor-3-iodo-4-metilbenzoico. Rendimento: 450 mg (93 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,48 (s, 3H), 7,27-7,29 (d, 1H, J = 8,00 Hz), 7,74-7,78 (t, 1H, J = 7,82 Hz), 13,2 (b, 1H).
2-flúor-3-iodo-4-metilbenzoato de metila
À solução de ácido 2-flúor-3-iodo-4-metilbenzoico (450 mg, 1,6 mmol, 1,0 eq) em metanol (5 ml), quantidade catalítica de HCI concentrado (0,1 ml) foi adicionada. A solução resultante foi aquecida para refluxo a 80° C da noite para o dia. Metanol foi evaporado. A este resíduo foi adicionada água e a camada aquosa foi extraída três vezes com acetato de etila. Os extratos de acetato de etila combinados foram secos em sulfato de sódio, filtrados e evaporados para dar 2-flúor-3-iodo-4-metilbenzoatode metila. Rendimento: 450 mg (95 %). 1H RMN (400MHz, DMSO): δ 2,49 (s, 3H), 3,85
514/543 (s, 3H), 7,30-7,32 (d, 1H, J = 7,84 Hz), 7,76-7,80 (t, 1H, J = 7,82 Hz). LCMS : (ES+) m/z = 295 (M+H).
2-flúor-4-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)benzoato de metila
À solução de 2-flúor-3-iodo-4-metilbenzoato de metila (1,1 g,
3,74 mmols, 1,0 eq) em DMSO foi adicionado [1,1bis(difenilfosfino)ferroceno]-dicloropaládio (305 mg, 0,37 mmol, 0,1 eq) seguido por bis(pinacolato)diboro (1,9 g, 7,48 mmols, 2,0 eq). A esta solução, acetato de potássio (1,83 g, 18,7 mmols, 5,0 eq) foi adicionado e o gás nitrogênio passado por 10 minutos. A solução resultante foi irradiada com microondas a 80° C por 40 minutos. A mistura de reação foi extinta com solução de bromo. A camada aquosa foi extraída três vezes com acetato de etila. A camada orgânica combinada foi seca em sulfato de sódio e a camada de acetato de etila transparente foi evaporada sob vácuo. O bruto foi purificado através de cromatografia de coluna de sílica-gel (60-120) usando acetato de etila a 1%/hexano como eluente. Rendimento: 400 mg (36 %). 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 1,38 (s, 12H), 2,46 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 6,98-7,00 (d, 1H, J = 7,84 Hz), 7,81-7,85 (t, 1H, J = 7,82 Hz). LCMS : (ES+) m/z = 295 (M+H).
Figure BRPI0918174A2_D0380
2-flúor-3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4metilbenzoato de metila
A uma mistura de trifluormetanossulfonato de 2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (0,4 g, 0,96 mmol, 1 eq), éster borônico (0,366 g, 1,24 mmol, 1,3 eq), em 1,4-dioxana/H2O (5:1) foi adicionado carbonato de césio (0,938 g, 2,87 mmols, 3 eq) e o gás nitrogênio foi passado por 10 minutos. Então tetracistrifenilfosfina paládio (0,111 g, 0,095 mmol, 0,1 eq) foi adicionado à mistura de reação e gás nitrogênio foi novamente passado pela mistura por 15 min. A mistura de reação acima foi aquecida em micro-ondas por uma hora a 90° C. Cerca de 100 ml de água são adiciona515/543 dos à mistura de reação e extraídos com EtOAc. A camada orgânica foi lavada mais duas vezes com água e seca em sulfato de sódio, concentrada para dar o produto. O produto obtido foi purificado mais através de cromatografia de coluna usando sílica-gel 60-120 e EtOAc a 25%/Hexano como eluente. Rendimento: 0,320 g (76 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,19 (s, 3H), 2,81-2,82 (d, 3H, J = 4,64 Hz), 3,85 (s, 3H), 7,31-7,34 (d, 2H, J = 8,28 Hz), 7,39-7,44 (t, 2H, J = 8,90 Hz), 7,54 (s, 1H), 7,79-7,85 (m, 2H), 7,97-8,01 (m, 2H), 8,45-8,46 (d, 1H, J = 4,32 Hz LCMS : (ES+) m/z = 436 (M+H). Método: Coluna : CHROMOLIT® SpeedRod C18 (4,6x30)mm, 5 microns. FaseM A : MeOH a 10% -H2O a 90% - TFA a 0,1%. FaseM B : MeOH a 90% -l2O a 10% - TFA a 0,1%. Fluxo : 5 ml/min. __________
Tempo (min.) % de A % de B
0,0 100,0 0,0
2,0 0,0 100,0
3,0 0,0 0,0
RT min : 2,034
Figure BRPI0918174A2_D0381
Comprimento de onda : 220 nm
HO
Ácido 2-flúor-3-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5il)-4-metilbenzoico
A uma mistura de 3-flúor-5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoato de metila (0,320 g, 1 eq) em uma mistura 1:1 de MeOH/THF, solução a 1M de NaOH (0,088 g, 2,20 mmols, 3,0 eq) foi adicionada e aquecida para 90° C por 3h. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e a seguir em um banho de água gelada. Ela foi acidificada com HCI a 1,5N e os voláteis foram evaporados. A mistura com precipitado branco foi diluída com água e filtrada para dar o produto. Ela foi lavada mais com água e seca a vácuo. Rendimento: 0,220 g (71 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,17 (s, 3H), 2,81-2,82 (d, 3H, J = 4,60 Hz), 7,28-7,33 (m, 2H, J = 4,33 Hz), 7,39-7,44 (m, 2H, J = 8,88 Hz),
516/543
7,53 (d, 1H, J = 1,24 Hz), 7,78-7,83 (m, 2H, J = 5,93 Hz), 7,97-8,01 (m, 2H), 8,45-8,47 (d, 1H, J = 4,60 Hz), 13,13 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 422,0 (M+H). Método: Coluna : CHROMOLIT® SpeedRod C18 (4,6x30)mm, 5 microns. FaseM A : MeOH a 10% -H2O a 90% - TFA a 0,1%. FaseM B : MeOH a 90% —H2O a 10% - TFA a 0,1%. Fluxo : 5 ml/min.
Tempo (min.) %A B%
0,0 100,0 0,0
2,0 0,0 100,0
3,0 0,0 0,0
RT min : 1,961
Comprimento de onda : 220 nm
Figure BRPI0918174A2_D0382
5-(2-Flúor-6-metil-3-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
À solução de ácido 2-flúor-3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoico (0,1 g, 0,273 mmol, 1,0 eq) em DMF (5,0 ml), 1-(piridin-2-il)ciclopropanamina (0,038 g, 0,285 mmol, 1,2 eq), TBTU (0,130 g, 0,403 mmol, 1,7 eq) e DIPEA (0,154 g, 1,187 mmol, 5,0 eq) foram adicionados. A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 12 h sob atmosfera de nitrogênio. DMF foi concentrada e a este resíduo água foi adicionada e extraída com acetato de etila. A camada orgânica combinada foi seca em sulfato de sódio e acetato de etila foi evaporado. O bruto foi purificado através de TLC preparativa eluída com hexano/EtOAc (5:5). O produto foi purificado mais através de recristalização com DCM e hexano. Rendimento: 0,045 g (39 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,23-1,25 (m, 2H), 1,51-1,54 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,81-2,82 (d, 3H, 7 = 4,0 Hz), 7,13-7,15 (t, 1H, 7= 3,78 Hz), 7,27-7,29 (d, 1H, 7= 8,00 Hz), 7,33-7,35 (d, 1H, 7 = 4,26 Hz), 7,39-7,44 (m, 3H, 7 = 5,26 Hz), 7,56-7,60 (t, 2H, 7 = 7,56 Hz), 7,68-7,72 (m, 1H), 7,80-7,82 (d, 1H, 7= 8,44 Hz), 7,96-8,00 (m, 2H), 8,43-8,49 (m, 2H), 9,12 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 538,0 (M+H). Método: Coluna : CHROMO517/543
LIT® SpeedRod C18 (4,6x30) mm, 5 microns. FaseM A : MeOH a 10% -H2O a 90% - TFA a 0,1%. FaseM B : MeOH a 90% -H2O a 10% - TFA a 0,1%. Fluxo : 5 ml/min.
Tempo (min.) % de A % de B
0,0 100,0 0,0
2,0 0,0 100,0
3,0 0,0 0,0
RT min : 1,813
Comprimento de onda : 220 nm
Método de HPLC:
Coluna : Sunfire C18 (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min: 10,566 (Pureza :
98,287%)
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :10,041 (Pureza : 97,3%)
Coluna : XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
518/543
Comprimento de onda : 254 nm, RT min : 10,041 (Pureza : 98,3%)
Comprimento de onda : 220 nm, RT min : 10,041 (Pureza : 97,3%)
2-Metiloxazol-4-carbonitrila
Cloridrato de etilacetimidato (25 g, 340 mmols, 1 eq) e aminoacetonitrila (38,5 g, 410 mmols, 1,2 eq) foram suspensos em diclorometano (300 ml) em temperatura ambiente. Trietilamina (148,4 ml, 380 mmols, 1,1 eq) foi adicionada em gotas durante 1 hora. Após o término da adição, a mistura de reação foi resfriada para 0o C, água (125 ml) foi adicionada, a camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com 50 ml de diclorometano. A mistura de diclorometano combinada foi concentrada para 50 ml. Dietil éter (500 ml) foi adicionado a esta solução, que foi então resfriada para 0o C. Etilformiato (13,93 g, 190 mmols, 0,55 eq) foi adicionado à solução acima seguido pela adição de terc-butóxido de potássio (20,6 g, 172 mmols, 0,51 eq). A reação foi deixada agitar em temperatura ambiente por 90 minutos e a 50° C por 90 minutos. Clorotrimetilsilano (56,5g, 520 mmols, 1,5 eq) foi adicionado em condição de refluxo e a reação foi agitada a 50° C por 5 h. Em seguida água foi adicionada e o produto foi extraído com diclorometano e a camada orgânica foi lavada com água e purificada através de cromatografia de coluna dando produto como óleo incolor. Rendimento: 6 g (16 %) rendimento geral. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,5 (s, 3H), 8,07 (s,1H).
1- (2-Metiloxazol-4-il)ciclopropanamina
2- Metiloxazol-4-carbonitrila (5 g, 46,1 mmols, 1 eq) foi dissolvida em THF seco em temperatura ambiente e à qual isopropóxido de titânio(IV) (16 ml, 655 mmols, 1,2 eq) foi adicionado em gotas durante um período de 15 minutos. A mistura resultante foi agitada por 10 minutos e brometo de etil magnésio (85 ml, 17 volumes) foi adicionado lentamente em gotas em temperatura ambiente e a reação foi agitada por 1 hora. Em seguida, eterato de BF3 (16,7 ml, 115 mmols, 2,5 eq) foi lentamente adicionado em temperatura ambiente e a solução acima foi agitada em temperatura ambiente por 3 h.
519/543
Finalmente água foi adicionada e o pH foi trazido para 10 usando solução de hidróxido de sódio a 10%. A mistura de reação foi extraída com diclorometano, concentrada e purificada através de cromatografia combif/as/?. Rendimento: 1,5 g (20 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 0,93 (m, 2H), 1,00 (m, 2H), 1,98 (s amplo, 2H), 2,39 (s, 3H), 7,33 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 138,9 (M+H).
Figure BRPI0918174A2_D0383
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(1-metil-1H-pirazol-3-il) ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoico (0,15 g, 0,37 mmol, 1 eq), 1-(2-metiloxazol-4-il)ciclopropanamina (0,066 g, 0,47, 1,2 eq), HOBT (0,092 g, 0,68 mmol, 1,7 eq), EDC.HCI (0,14 g, 0,73 mmol, 1,8 eq) em DCM em temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionada di-isopropiletilamina (0,26 g, 2,2 mmols, 5,0 eq). A mistura transparente foi agitada em temperatura ambiente por 12 h. A mistura foi concentrada, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica é lavada mais com água, seca em sulfato de sódio e concentrada. O produto obtido foi purificado mais através de cromatografia de coluna (alumina neutra) usando Metanol a 0,5%/DCM como um eluente seguido por HPLC preparativa. Rendimento: 0,02 g (20 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,10-1,13 (m, 2H), 1,21-1,24 (m, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,81-2,82 (d, 3H, J = 4,6 Hz), 7,38-7,43 (m, 4H), 7,57 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,75-7,71 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,80-7,81 (s e m, 2H), 7,97-8,01 (m, 2H), 8,47-8,48 (d, 1H, J = 4,76 Hz), 9,1 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 524,2 (M+H). Método de LCMS : CHROMOLIT® SpeedROD C18 (4,6X3,0mm-5,0pm). FaseM A : MeCN a 2% - H2O a 98% - NH4COOH a 10mM. FaseM B : MeCN a 98% -H2O a 2% - NH4COOH a 10mM. Fluxo : 1mL/Min.
Tempo B%
0,0 0,0
520/543
Tempo B%
2,0 100,0
3,0 100,0
RT min : 2,018, comprimento de onda : 220 nm
Método de HPLC:
Sunfire C18 (4,6X150) mm, 3,5 microns Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5 Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5) Fase Móvel B : MeCN .Tampão (95:5) Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :10,757 Comprimento de onda : 220 nm, RT min :10,757 Pureza: 96,7%
XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN : Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :9,993
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :9,993
Pureza: 96,7%
1-(Pirimidin-5-il)ciclopropanamina
5-Ciano pirimidina (5 g, 47,6 mmols, 1 eq) foi absorvida em THF seco sob atmosfera de argônio, então isopropóxido de titânio (17 ml, 57,1
521/543 mmols, 1,2 eq) foi adicionado lentamente em temperatura ambiente e a massa resultante foi agitada por 15 min. À solução agitada acima, brometo de etil magnésio foi adicionado (solução a 1M em THF, 107 ml, 809,3 mmols, 2,5 eq) lentamente através de seringa em temperatura ambiente. (Durante a adição de EtMgBr, a massa de reação ficou preta). Então a massa de reação foi agitada por uma hora, BF3,EtO (16,7 ml, 119,0 mmols, 2,5 eq) foi adicionado lentamente através de seringa a 0o C. Então a reação foi deixada atingir temperatura ambiente e a agitação foi continuada por mais uma hora. Finalmente a reação foi extinta através da adição de 50 ml de água e a massa de reação foi passada por CELITE® e o leito foi lavado com água e acetato de etila. O filtrado foi basificado com solução de NaOH a 10% (pH = 9) e então extraído com DCM e lavado com solução de salmoura. O produto requerido foi purificado através de cromatografia de coluna de sílica-gel (60-120) usando DCM/metanol como o eluente. Rendimento: 0,1 g (5 %) 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): 1,04-1,08 (q, 2H, J = 3,96 Hz), 1,181,25 (q, 2H, J = 3,96 Hz), 8,26 (d, 2H), 9,05 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 136 (M+H).
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(pirimidin-5il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoico (0,1 g, 0,25 mmol, 1 eq), 1(pirimidin-5-il)ciclopropanamina (0,041 g, 0,3 mmol, 1,2 eq) (60% de pureza), HOBT (0,057 g, 0,42 mmol, 1,7 eq), EDC.HCI (0086 g, 0,44 mmol, 1,8 eq) em DCM em temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionada diisopropiletilamina (0,162 g, 1,2 mmol, 5,0 eq). A mistura transparente foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. A mistura foi concentrada, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica é lavada mais com água, seca em sulfato de sódio e concentrada. O produto obtido foi purificado mais através de cromatografia de coluna (alumina neutra) u522/543 sando metanol a 0,5%/DCM e finalmente ele foi purificado através de HPLC preparativa. Rendimento: 0,02 g (20 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,34-1,35 (m, 2H), 1,41-1,42 (m, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,81-2,82 (d, 3H, J = 4,56 Hz), 738-7,45 (m, 4H), 7,58 (d, 1H, J = 0,96 Hz), 7,75 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,81 (s, 1H), 7,83 (m, 1H), 7,98-8,01 (m, 2H), 8,46-8,47 (d, 1H, J = 4,6 Hz), 8,64 (s, 2H), 9,01 (s, 1H), 9,31 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 521,2(M+H). LCMS Método : Coluna : Ascentis Express C18 (5X2,1mm-2,7pm). FaseM A : ACN a 2% - H2O a 98% - NH4COOH a 10mM. FaseM B : ACN a 98%H2O a 2% - NH4COOH ai 10mM. Fluxo : ImL/Min.
Tempo % de A % de B
0,0 100,0 0
1,5 0,0 100,0
3,2 0,0 100,0
3,6 100,0 0,0
RT min : 1,825, comprimento de onda: 220 nm
Método de HPLC:
Sunfire C18 (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :10,061
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :10,061 Pureza : 92,3 %
XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN Tampão (95:5)
523/543
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :9,542
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :9,542
Pureza : 92,5 %
-(1 -Metil-1 H-pirazol-3-il)ciclopropanamina
Brometo de etil magnésio (2,5 rnols, 1 M em éter) foi adicionado a -78° C a uma solução de uma 1-metil-1 H-pirazol-3-carbonitrila (0,5 g, 1 mmol) e Ti(O/-Pr)4 (1,1 mmol) em Et2O (5 mL). A solução amarela foi agitada por 10 min. Após a solução ser aquecida para temperatura ambiente (1 h), BF3.OEt2 (2 mmols) foi adicionado. Após a mistura ser agitada por 1 h, HCI a 1N e éter foram adicionados. NaOH (10%) foi adicionado às duas fases transparentes resultantes e a mistura foi extraída com éter. As camadas de éter combinadas foram secas (Na2SO4), filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel (Et2O). 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 0,94-1,05 (m, 4H), 2,32 (s, 2H), 3,83 (s, 3H), 5,92 (d, 1H), 7,23-7,24 (d, 1H). LCMS : (ES+) m/z observada 137,7.
Figure BRPI0918174A2_D0384
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(1 -metil-1 H-pirazol-3il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoico (0,15 g, 0,37 mmol, 1 eq), 1-(1-metil-1 H-pirazol-3-il)ciclopropanamina (0,061 g, 0,44 mmol, 1,2 eq), HOBT (0,057 g, 0,42 mmol, 1,7 eq), EDC.HCI (0,086 g, 0,44 mmol, 1,8 eq) em DCM em temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionada diisopropiletilamina (0,16 g, 1,2mmol, 5,0 eq). A mistura transparente foi agita
524/543 da em temperatura ambiente por 12 h. A mistura foi concentrada, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada mais com água, seca em sulfato de sódio e concentrada. O produto obtido foi purificado adicionalrnente através de cromatografia de coluna (alumina neutra) usando Metanol a 0,5%/DMC e finalmente HPLC preparativa. Rendimento: 0,06 g (40 %) 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,12-1,16 (m, 2H), 1,20-1,23 (m, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,82-2,83 (d, 3H, J = 4,64 Hz), 3,37 (s, 3H), 5,9-6,0 (d, 1H, J = 2,12 Hz), 7,39-7,48 (m, 5H), 7,58 (d, 1H, J = 1,68 Hz), 7,75-7,77 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 7,81-7,83 (t, 2H, J = 2,87 Hz), 7,98-8,46 (m, 2H), 8,47-8,48 (d, 1H, J = 4,52 Hz), 9,14 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 523,2 (M+H). LCMS Método : Coluna : Ascentis Express C18 (5X2,1mm-2,7pm). FaseM A : MeCN a 2% - H2O a 98% - NH4COOH a 10mM. FaseM B : MeCN a 98% -
12O a 2% - NH4COOH a 10mM. Fluxo : ImL/Min.
Tempo % de A % de B
0,0 100,0 0,0
1,0 70,0 30,0
2,5 0,0 100,0
4,0 0,0 100,0
RT min : 1,882, comprimento de onda : 220 nm
Info do Método de HPLC:
Sunfire C18 (4,6X150)mm, 3,5 microns Tampão : TFA 0,05% em água pH 2,5 Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5) Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5) Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
25 100
30 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :16,999
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :16,999
Pureza: 96%
525/543
XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5 Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5) Fase Móvel B : MeCN rTampão (95:5) Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :15,556 Comprimento de onda : 220 nm, RT min :15,556 Pureza: 97 % 2-metóxi-4-metilbenzoato de metila
Ácido metil 2-metóxi-4-metilbenzoico (1,5 g, 9,0 mmols, 1 eq) foi dissolvido em DMF, iodeto de metila (0,86 ml, 13,5 mmol, 1,5 eq) foi adicionado a ele seguido pela adição de carbonato de potássio (3,11 g, 22,5 mmols, 2,5 eq). A mistura acima foi agitada em temperatura ambiente por 12 h. Finalmente, a mistura de reação foi passada por CELITE®. O filtrado foi evaporado, água foi adicionada e o produto foi extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com água e concentrada. Rendimento: 1,6 g (98 %). 1H RMN (400MHz, CDCh): δ 2,31 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 6,77 (s, 1H), 6,79 (d, 1H), 7,14 (d, 1H).
5-iodo-2-metóxi-4-metilbenzoato de metila
2-metóxi-4-metilbenzoato de metila (1,5 g, 8,32 mmols, 1 eq) foi dissolvido em metanol. A esta solução foi adicionado em gotas monocloreto de iodo (6,75 g, 41,6 mmols, 5 eq) em metanol em temperatura ambiente. A mistura de reação foi aquecida a 50° C por 15 h. Finalmente, metanol foi concentrado, diluído com água e extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com HCI a 0,1N (50 ml), água (100 ml) e solução de salmoura (100 ml). O produto foi purificado através de cromatografia de coluna usando sílica-gel 60-120 e usando acetato de etila a 5%/hexano como eluente. Rendimento: 1,7 g (80 %).1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 2,44 (s, 3H), 3,86
526/543 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 6,86 (s, 1H), 8,20 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 307,0 (M+H).
2-metóxi-4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)benzoato de metila
5-iodo-2-metóxi-4-metilbenzoato de metila (1,5 g, 4,9 mmols, 1 eq), Bispinacolatodiboro (1,49 g, 5,8 mmols, 1,2 eq), acetato de potássio (1,44 g, 14,7 mmols, 3 eq) e Pd(dppf)CI2 (0,4 g, 0,49 mmol, 0,1 eq) foram dissolvidos em DMF. Gás nitrogênio foi passado pela mistura por 10 minutos e a mistura foi agitada a 90° C por 14 horas. Em seguida a solução foi passada por CELITE®. O filtrado foi evaporado e diluído com água e extraído com acetato de etila e purificado através de cromatografia de coluna usando sílica-gel 60-120 e usando acetato de etila a 20%/hexano como eluente. Rendimento: 1,2 g (80 %).1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 1,33 (s, 12H), 2,56 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 3,91 (s, 3H), 6,75 (s, 1H), 8,21 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 307,2 (M+H).
5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metóxi-4metilbenzoato de metila
Metil-2-metóxi-4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)benzoato (1,2 g, 3,92 mmols, 1 eq), trifluormetanossulfonato de 2-(4fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-ila (1,6 g, 3,92 mmols, 1 eq), Carbonato de césio (3,8 g, 11,7 mmols, 3 eq) e Tetracis trifenilfosfinopaládio (0,13 g, 0,11 mmol, 0,03 eq) foram dissolvidos em 1,4-dioxana/água e a solução acima foi agitada a 90° C por 10 h. Então a mistura de reação foi diluída com água e o produto foi extraído com acetato de etila e purificado através de cromatografia combiffash usando acetato de etila a 40%/hexano como eluente. Rendimento: 0,95 g (55 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,3 (s, 3H), 2,82 (d, J = 4,6 Hz, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 7,15 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,64 (m, 2H), 7,65 (m, 2H), 7,74 (d, 1H, J = 8,48 Hz), 8,00-8,01 (m, 2H), 8,48 (d, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 448 (M+H).
527/543
Figure BRPI0918174A2_D0385
Ácido 5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2metóxi-4-metilbenzoico
5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metóxi-4metilbenzoato de metila (0,9 g, 2 mmols, 1 eq) e hidróxido de sódio (0,4 g, 10 mmols, 5 eq) foram dissolvidos em metanol/água (20/5 ml) e a reação foi agitada a 50 °C por 10 h. Então a mistura de reação foi concentrada e diluída com água e o pH da solução foi trazido para 3 usando HCI concentrado. O sólido obtido foi filtrado e seco da noite para o dia. Rendimento: 0,72 g (82 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 2,29 (s, 3H), 2,87 (d, 3H), 3,87 (s, 3H), 7,09 (s, 1H), 7,40-7,60 (m, 3H), 7,57 (m, 2H), 7,65 (d, 1H, J= 8,74 Hz), 7,988,01 (m, 2H), 8,46 (q, 1H, J = 4,40 Hz), 12,5 (br s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 434 (M+H) Método : FaseM A : água; FaseM B : acetonaa 0,1% em água; Fluxo : 2mL/Min.
Tempo B%
0-20 100
RT min : 1,741
Comprimento de onda : 220 nm
LCMS adicional foi realizada usando instrumento Shimadzu-VP com detecção por UV a 220 nm e Waters MICROMASS®. Método de HPLC: Solvente A = MeOH a 10%/ H2O a 90%/ TFA a 0,1%, Solvente B = MeOH a 90% / H2O a 10% / TFA a 0,1%, Início B% = 0, Final B% = 100, Tempo de Gradiente = 2 min, Tempo de Parada = 3 min, Taxa de Fluxo = 5 ml/min, Coluna: PHENOMENEX® Luna, 3,0 x 50 mm, S10; (ES+) m/z (M+H)+ = 434,10, HPLC Rt = 1,653 min.
Figure BRPI0918174A2_D0386
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(pirimidin-2il)ciclopropilcarbamoil) fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
528/543
A uma mistura de ácido 5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metóxi-4-metilbenzoico (0,2 g, 0,46 mmol, 1 eq), 1-(pirimidin-2-il)ciclopropanamina (0,074 g, 0,55 mmol, 1,2 eq), HOBT (0,105 g, 0,77 mmol, 1,7 eq), EDC.HCI (0,0,158 g, 0,82 mmol, 1,8 eq), em DCM em temperatura ambiente e sob atmosfera de nitrogênio foi adicionada di-isopropiletilamina (0,297 g, 2,2 mmols, 5,0 eq). A mistura transparente foi agitada em temperatura ambiente por 12 h. A mistura foi concentrada, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada mais com água, seca em sulfato de sódio e concentrada. O produto obtido foi purificado mais através de cromatografia de coluna (alumina natural) usando Metanol a 0,5%/DCM e HPLC preparativa. Rendimento: 0,055 g (45%).1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,43-1,44 (m, 2H), 1,59-1,62 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,81-2,82 (d, 3H, 4 = 4,56 Hz), 4,01 (s, 3H), 7,17 (s, 1H), 7,26-7,29 (t, 1H, 4 = 4,8 Hz), 7,33-7,36 (dd, 1H, 4= 8,4, 4 Hz), 7,38-7,43 (t, 2H, 4 = 8,8 Hz), 7,507,51 (d, 1H, 4 = 1,6 Hz), 7,72-7,76 (m, 2H), 7,97-8,01 (m, 2H), 8,48-8,49 (d, 1H, 4 = 4,4 Hz), 8,7 (d, 2H, 4 = 4,8 Hz), 8,87 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z =
551,2 (M+H). Coluna : Ascentis Express C18 (5X2,1mm-2,7pm). FaseM A: MeCN a 2% - 98% a H2O - NH4COOH a 10mM. FaseM B : MeCN a 98% H2O a 2% - NH4COOH a 10mM. Fluxo : 1mL/Min
Tempo %A B%
0,0 100,0 0,0
1,0 70,0 30,0
2,5 0,0 100,0
4,0 0,0 100,0
RT min : 1,946, comprimento de onda:220nm
Método de HPLC:
Sunfire C18 (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
529/543
Tempo % de B
0 10
25 100
30 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :18,209 Comprimento de onda : 220 nm, RT min :18,209 Pureza: 99,4%
XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min _______=
Tempo % de B
0 10
25 100
30 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :16,549
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :16,549
Pureza: 99,5 %
Figure BRPI0918174A2_D0387
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(2-meti’loxazol-4il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Ácido 5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2metóxi-4-metilbenzoico (0,15 g, 0,34 mmol, 1 eq), 1-(2-metiloxazol-4il)ciclopropanamina (0,047 g, 0,34 mmol, 1 eq), EDCI.HCI (0,076 g, 0,4 mmol, 1,2 eq), HOBT (0,054 g, 0,4 mmol, 2 eq) e TEA (0,14 ml, 1,02 mmol, 3 eq) foram dissolvidos em diclorometano e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 14 h. A reação foi diluída com água e o produto foi extraído com diclorometano e purificado através de HPLC preparativa dando o
530/543 produto desejado. Rendimento: 47 mg (25 %) 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,12-1,15 (m, 2H), 1,21-1,24 (m, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,81-2,82 (d, 3H, J = 4,60 Hz), 3,95 (s, 3H), 7,12 (s, 1H), 7,31-7,32 (m, 1H), 7,34-7,40 (t, 2H, J = 3,21 Hz), 7,56 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,97-8,01 (m, 2H), 8,46-8,48 (m, 1H), 8,67 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z =
554,2 (M+H). Coluna : Ascentis Express C18 (5X2,1mm-2,7pm). FaseM A: ACN a 2% - H2O a 98% - NH4COOH a 10mM. FaseM B: ACN a 98% -H2O a 2%- NH4COOH a 10mM. Fluxo : 1ml/Min.
Tempo % de A % de B
0,0 100,0 0
1,0 70,0 30,0
2,5 0,0 100,0
4,0 0,0 100,0
RT min : 1,964, comprimento de onda : 220 nm
Método de HPLC:
Sunfire C18 (4,6X150)mm, 3,5 microns Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5 Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5) Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5) Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :11,403
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :11,402 Pureza: 98,8 %
XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
531/543
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :10,588
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :10,588
Figure BRPI0918174A2_D0388
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1 -(1 -metil-1 H-pirazol-3il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de ácido 5-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2-metóxi-4-metilbenzoico (0,15 g, 0,35 mmol, 1 eq), 1-(1-metil-1 H-pirazol-3-il)ciclopropanamina (0,058 g, 0,42 mmol,
1,2 eq), HOBT (0,08 g, 0,069 mmol, 1,7 eq), EDC.HCI (0,073 g, 0,014mmol, 1,8 eq, em DCM em temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionada diisopropiletilamina (0,297 g, 2,2 mmols, 5,0 eq). A mistura transparente foi agitada em temperatura ambiente por 12 h. A mistura foi concentrada, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica é lavada mais com água, seca em sulfato de sódio e concentrada. O produto obtido foi purificado mais através de cromatografia de coluna (alumina neutra) usando Metanol a 0,5%/DMC e a purificação final foi feita através de HPLC preparativa. Rendimento: 0,06 g (45 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,18-1,20 (m, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,81-2,82 (d, 3H, J = 4,64 Hz), 3,73 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 6,06-6,07 (d, 1H, J = 2,4 Hz), 7,12 (s, 1H), 7,32-7,34 (dd, 1H, J = 8,4, 1,6 Hz), 7,38,-7,42 (t, 2H, J = 8,8 Hz), 7,48,-7,49 (d, 2H, J = 2,34 Hz), 7,59 (s, 1H), 7,71-7,73 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,97-7,97-8,01 (m, 2H), 8,47-8,48 (d, 1H, J = 4,8 Hz), 8,69 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 553,2 (M+H). Coluna : Ascentis Express C18 (5X2,1 mm-2,7pm). FaseM A : MeCN a 2% - H2O a 98% NH4COOH a 10mM. FaseM B : MeCN a 98% - H2O a 2%-NH4COOH a 10mM. Fluxo: 1mL/Min.
532/543
Tempo % de A % de B
0,0 100,0 0
1,5 0,0 100,0
3,2 0,0 100,0
RT min : 1,937, comprimento de onda : 220 nm
Método de HPLC:
Sunfire C18 (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :11,289
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :11,289
Pureza: 99,3 %
XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5 Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5) Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5) Fluxo : 1 ml/min
| Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :10,548
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :10,548
Pureza: 99,5 %
1-(1 -Metil-1 H-imidazol-4-il) ciclopropanamina
1-Metil-1H-imidazol-4-carbonitrila (0,5 g, 4,6 mmols, 1 eq) foi
533/543 dissolvida em THF e à qual isopropóxido de titânio (1,6 g, 4,6 mmols, 2,5 eq.) foi adicionado em gotas durante 15 minutos. A mistura foi agitada por 15 minutos em temperatura ambiente e então brometo de etil magnésio (1, 6 g, 11,5 mmols, 2,5 eq) foi adicionado em temperatura ambiente durante 15 minutos. A mistura de reação foi agitada por 1 h. Eterato de BF3 (0,8 g, 5,6 mmols, 2,2 eq) foi adicionado e a mistura agitada em temperatura ambiente por 1 h. Solução de NaOH a 1N foi adicionada à mistura para trazer o pH para 9-10. A massa de reação foi filtrada em CELITE® e o filtrado lavado com DCM. A mistura orgânica foi concentrada e o resíduo purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel usando clorofórmio a 10%/metanol. Rendimento: 0,6 g 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 0,97 (t, J= 3,4 Hz, 2H), 1,00 (t, J=3,4 Hz, 2H), 3,63 (s, 3H), 7,28 (s, 1H), 7,31 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 138,2 (M+H).
Figure BRPI0918174A2_D0389
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1 -(1 -metil-1 H-imidazol-4il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Ácido 5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2metóxi-4-metilbenzoico (0,2 g, 1 eq), 1 -(1 -metil-1 H-imidazol-4-il) ciclopropanamina (0,07 g, 1,1 eq), EDCI.HCI (0,13 g, 1,5 eq), HOBT (0,094 g, 1,5 eq) e TEA (0,19 ml, 3 eq) foram dissolvidos em diclorometano e a solução acima foi agitada em temperatura ambiente por 18 h. Mais tarde água foi adicionada e a camada orgânica foi separada. A camada orgânica foi lavada com água e o produto bruto foi purificado através de HPLC preparativa. Rendimento: 24,69 mg (10 %) 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 1,39 (s, 4H), 2,30 (s, 3H), 2,99-3,01 (d, J = 4,6 Hz, 3H), 3,81 (s, 3H), 4,04 (s, 3H), 5,90 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 7,16-7,25 (m, 3H), 7,24 (s, 1H), 7,51 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,98-7,99 (m, 3H), 8,29 (s, 1H), 8,95 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 553,2 (M+H). Método: Coluna : Ascentis Express C18 (5X2,1mm-2,7pm). FaseM A : ACN a 2% - H2O a 98% - NH4COOH a 10mM. FaseM B : ACN a 98% H2O a 2%- NH4COOH a 10mM. Fluxo : 1mL/Min.
534/543
Tempo % de A % de B
0,0 100,0 0
1,5 0,0 100,0
3,2 0,0 100,0
RT min : 1,854
Comprimento de onda : 220 nm
Coluna de HPLC:
Sunfire C18 (4,6X150)mm, 3,5 microns Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5) Fase Móvel B : MeCN :Tampão (95:5) Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
25 100
30 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :11,685
Comprimento de onda : 220 nm, RT min : 11,685
Pureza : 99,1%
Coluna de HPLC:
XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão: MeCN (95:5)
Fase Móvel B : TFA a 0,05% em MeCN : Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
| Tempo % de B
0 10
25 100
30 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :13,396
Comprimento de onda : 220 nm, RT min : 13,396
Pureza : 96,5%
535/543
Método de HPLC preparativa:
Coluna : Simmetry C18 (19X250X1 Ομ)
Fase Móvel: TFA a 0,1% (A), MeCN (B)
Gradiente:
Tempo Fluxo A B
0 15ml/min 95 5
10 15ml/min 55 45
RT: 10,5 min
1-(5-Metilisoxazol-3-il)ciclopropanamina
5-Metilisoxazol-3-carbonitrila (1,0 g, 1 mmol) foi dissolvida em THF. Ti (O/-Pr) 4 (1,2 mmol) foi adicionado em gotas durante um período de 5-10 minutos e a mistura de reação foi agitada em r.t. por 15 min. Ela foi então resfriada para 0o C e EtMgBr (2,5 mmols) foi adicionado em gotas durante um período de 10-15 min. Ela foi agitada a 0° C por 15 min e então agitada em r.t. por uma hora. A mistura foi novamente resfriada para 0o C e BF3OEt2 (2 mmols) foi adicionado em gotas durante um período de 5-10 min a 0o C. Após a mistura ser agitada por 10 min a 0o C e 1 h em r.t., NaOH a 1N foi adicionado a 0° C. DCM foi adicionado à mistura de reação que foi então agitada por 5-10 min. Esta solução alcalina foi filtrada em CELITE® e lavada com DMC. A camada orgânica foi concentrada e resíduo purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel usando clorofórmio a 10%/metanol. Rendimento: 0,6g 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 0,96-1,05 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 5,59 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z oobservado 138,7.
Figure BRPI0918174A2_D0390
2-(4-Fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(5-metilisoxazol-3il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida
A uma mistura de ácido 3-(2-(4-fluorfenil)-3(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-4-metilbenzoico (0,15 g, 0,37 mmol, 1 eq), amina (0,06 g, 0,43 mmol, 1,2 eq), HOBT (0,084 g, 0,62 mmol, 1,7 eq), EDC.HCI (0,127 g, 0,087 mmol, 1,8 eq) em DCM em temperatura ambiente
536/543 sob nitrogênio foi adicionada di-isopropiletilamina (0,239 g, 1,8 mmol, 5,0 eq). A mistura transparente foi agitada em temperatura ambiente por 12 h. LCMS mostrou o produto desejado. A mistura foi concentrada, diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica é lavada mais com água, seca em sulfato de sódio, filtrada e então concentrada. O produto obtido foi purificado mais através de cromatografia de coluna (alumina neutra) usando Metanol a 0,5%/DCM e HPLC preparativa. Rendimento: 0,03 g (20 %). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6): δ 1,24-1,29 (m, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,81-2,82 (d, 3H, 7 = 4,6 Hz), 6,05 (s, 1H), 7,38-7,44 (m, 4H), 7,57 (d, 1H, 7 = 1,6 Hz), 7,75-7,82 (m, 3H), 7,97-8,0 (m, 2H), 8,46-8,47 (m, 1H), 9,24 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 524,2 (M+H). LCMS Método : Coluna : Ascentis Express C18 (5X2,1mm-2,7pm). FaseM A : ACN a 2%- H2O a 98%- NH4COOH a 10mM. FaseM B : ACN a 98% -H2O a 2%- NH4COOH a 10mM. Fluxo : ' mL/Min
Tempo % de A % de B
0,0 100,0 0
1,5 0,0 100,0
3,2 0,0 100,0
RT min : 1,966, comprimento de onda : 220nm
Método de HPLC:
Coluna : Atlantis T3 (4,6X150mm-5,0pm)
A : Tampão : Acetato de amônio a 20mM em Água
B : MeCN
Fluxo: 1 ml/min
Tempo % de B
20 0
35 5
35 30
100 35
100 40
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :15,155
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :15,155
537/543
Método de HPLC:
Sunfire C18 (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : MeCN (95:5)
Fase Móvel B : ACN :Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :18,678 Comprimento de onda : 220 nm, RT min :18,678 Pureza: 99,4%
XBridge fenila (4,6X150)mm, 3,5 microns
Tampão : TFA a 0,05% em água pH 2,5
Fase Móvel A : Tampão : ACN (95:5)
Fase Móvel B : ACN :Tampão (95:5)
Fluxo : 1 ml/min
Tempo % de B
0 10
12 100
15 100
Comprimento de onda : 254 nm, RT min :17,135
Comprimento de onda : 220 nm, RT min :17,135
Pureza: 99,5%
5-Metiltiazol-2-carbaldeído
A uma solução de BuLi (5 mmols) em éter a -78 °C foi adicionada em gotas uma solução de 5-metiltiazol (5 rnols) em éter a -78° C por 1,5 hora. A solução de DMF (5 mmols) em éter foi adicionada de uma vez e a reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada da noite para o dia. Gelo foi adicionado à mistura seguido pela adição lenta de HCI a 4N. A mistura foi extraída com éter. A camada aquosa foi trazida para pH 7,5
538/543 com NaHCO3 sólido e extraída com éter. Os extratos etéreos combinados foram secos, filtrados e concentrados para dar o resíduo bruto, que foi purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel usando EtOAc a 10%/Hexano. Rendimento: 6 g 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 2,56 (s, 3 H), 7,79 (s, 1H), 9,90 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z = 128 (M+H).
5-Metiltiazol-2-carbaldeído oxima
A uma solução de 5-metiltiazol-2-carbaldeído (4,8 rnmols) em DCM foram adicionados piridina (4,8 mmols) e HONH2,HCI (4,8 mmols). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 12 horas, então diluída com DCM e extraída com água. O extrato orgânico foi seco, filtrado e concentrado para obter oxima bruta. Rendimento:
g; LCMS : (ES+) m/z = 143 (M+H).
5-Metiltiazol-2-carbonitrila
5-Metiltiazol-2-carbaldeído oxima (4,2 rnmols) foi dissolvida em DCM e adicionada com CDI (4,3 rnmols) em porções. A mistura de reação foi agitada em r.t. da noite para o dia e então adicionada com água. A mistura foi extraída com DCM e a camada orgânica foi seca e concentrada para dar o resíduo bruto, que foi purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel usando EtOAc a 10%/Hexano. Rendimento: 3,2 g; 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 2,59 (s, 3 H), 7,71 (s, 1H).
1-(5-Metiltiazol-2-il)ciclopropanamina
5-Metilitiazol-2-carbonitrila (1,0 g, 1 mmol) foi dissolvida em THF. Ti(O/-Pr)4 (1,2 mmol) foi adicionado em gotas à mistura durante um período de 5-10 min e a mistura de reação foi agitada em r.t. por 15 min. Ela foi então resfriada para 0o C e EtMgBr (2,5 rnmols) foi adicionado em gotas durante um período de 10-15 min. A mistura de reação foi agitada novamente a 0o C por 15 min e então agitada em temperatura ambiente por 1 h. BF3..OEt2 (2,5 rnmols) foi então adicionado em gotas durante um período de 5-10 min à mistura que foi resfriada novamente para 0o C. Após a mistura ser agitada por 10 min a 0o C e 1h em temperatura ambiente, NaOH a 1N foi adicionado à mistura esfriada para 0o C. DCM foi adicionado à mistura de reação e agitado por 5-10 min. Esta solução alcalina foi filtrada em CELITE® e lavada
539/543 com DCM. A camada orgânica foi concentrada e o resíduo purificado através de cromatografia rápida em sílica-gel usando clorofórmio a 10%/metanol. Rendimento: 0,6 g; 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 1,20 (m, 2H) 1,31 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 7,26 (s, 1H). LCMS : (ES+) m/z observada 154,7,
2-(4-Fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(5-metiltiazol-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida
Ácido 5-(2-(4-fluorfenil)-3-(metilcarbamoil)benzofuran-5-il)-2metóxi-4-metilbenzoico (0,2 g, 1 eq), 1-(5-metiltiazol-2-il)ciclopropanamina (0,07 g, 1 eq), EDCI.HCI (0,13 g, 1,5 eq), HOBT (0,094 g, 1,5 eq) e TEA (0,19 ml, 3 eq) foram dissolvidos em diclorometano e a solução acima foi agitada em temperatura ambiente por 18 h. Então água foi adicionada à mistura e a camada orgânica foi separada. A camada orgânica foi lavada com água e o produto foi purificado através de HPLC preparativa. Rendimento: 65 mg (25 %); 1H RMN (400MHz, CDCI3): δ 1,43-1,46 (m, 2H), 1,74-1,77 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 3,01-3,03 (d, J = 5,2 Hz, 3H), 4,04 (s, 3H), 5,89 (m, 1H), 6,91 (s, 1H), 7,16 (t, 2H), 7,27 (m, 2H), 7,51 (d, J = 4 Hz, 1H), 7,66 (s, 1H), 8,00 (m, 2H), 8,13 (s, 1H), 8,7 (s,1H). LCMS : (ES+) m/z = 570,2 (M+H).
Procedimento geral: 5-(5-(1-Cianociclopropilcarbamoil)-2metilfenil)-2-(4-fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida (448 mg) foi dissolvida em butan-1-ol (22,50 mL) e distribuída uniformemente em 15 hidrazidas pré-pesadas em frascos de micro-ondas (tamanho de 2-5 mL) e seguido pela adição de K2CO3 (8,85 mg) como um sólido. O frasco recebeu fluxo de argônio e foi tampado, então aquecido a 165° C por 30 minutos em um reator de micro-ondas BIOTAGE®. As amostras foram secas no SPEEDVAC®, dissolvidas em DMF (1,8 mL) e purificadas através de HPLC preparativa. Método de purificação: Cw313a (19x100mm): Solvente A = 5:95 de MeCN:Água; Solvente B = 95:5 de MeCN:Água; Modificador = NH4OAc a 10 mM; 0' (25 mL/min) = B a 30%, 0,5' (12,5 mL/min) = B a 30%, 2' (12,5 mL/min) = B a 30%, 2,5' = B a 30%, 22' = 95% B, 36' = B a 95%. Pureza de HPLC foi determinada usando a Waters ZQ com Espectrômetro de massa ESCi. Solvente A = 5:95 de MeCN:Água; Solvente B = 95:5 de MeCN:Água;
540/543
Modificador = NH4OAc a 10 mM. O tempo de retenção foi registrado em minutos.
Método Analítico A:
Waters XBridge 4,6x50mm 5 um C18v
Tempo % de B Fluxo (mL/min)
0,00' 5 2,00
8,00' 95 2,00
9,00' 95 2,00
9,01' 5 2,00
10,00 5 2,00
Estrutura Rt de HPLC % de Pureza íon de Ms Obs. Método de HPLC
0 \=/ 4,73 89,3 587,33 A
4,76 90,6 587,33 A
Cl c/Wtoo-. \=/ 5,44 88,5 620,37 A
° Ayto^O7 \=/ 5,4 93,4 616,33 A
m to\ to -—N /—λ /J’-n r γγ \^o ci-—\ ) J /—< to 5,37 100 620,187 A
ο /?-ν toto Nto° toto-to υ Ο \=J 3,85 98,3 553,181 A
tototo 5 100 616,218 A
tototo \^to o \=/ 5,84 88,8 620,29 A
541/543
Estrutura Rt de HPLC % de Pureza Ion de Ms Obs. Método de HPLC
4,86 100 616,166 A
4,28 100 552,208 A
4,32 100 552,207 A
4,37 95 587,153 A
4,94 94,9 578,118 A
Figure BRPI0918174A2_D0391
1H RMN (600 MHz, <DMSO-d6_CDCI3>) δ ppm 1,41 (s amplo, 2 H) 1,62 (s amplo, 2 H) 2,28 - 2,47 (m, 3 H) 2,89 (d, 7=4,69 Hz, 3 H) 7,29 7,51 (m, 5 H) 7,66 (s, 1 H) 7,75 (d, 7=8,79 Hz, 1 H) 7,86 - 7,99 (m, 2 H) 8,05 (dd, 7=8,20, 5,86 Hz, 2 H) 8,44 (d, 7=4,10 Hz, 1 H) 8,61 (s amplo, 1 H) 9,17 (s, 1 H) 9,32 (s amplo, 2 H).
Figure BRPI0918174A2_D0392
1H RMN (600 MHz, <DMSO-d6_CDCI3>) δ ppm 1,42 (s amplo, 2 H) 1,61 (s amplo, 2 H) 2,22 - 2,44 (m, 3 H) 2,56 - 2,63 (m, 3 H) 7,32 - 7,55 (m, 4 H) 7,66 (s, 1 H) 7,76 (d, 7=8,79 Hz, 1 H) 7,89 - 8,03 (m, 2 H) 8,04 (dd, 7=8,50, 5,57 Hz, 2 H) 8,44 (d, 7=4,10 Hz, 1 H) 8,66 (d, 7=4,10 Hz, 2 H) 9,33 (s amplo, 1 H) 14,09 (s amplo, 1 H).
Figure BRPI0918174A2_D0393
1H RMN (600 MHz, <DMSO-d6_CDCI3>) δ ppm 1,42 (s amplo, 2 H) 1,60 (s amplo, 2 H) 2,37 (s, 3 H) 2,89 (d, 7=4,10 Hz, 3 H) 7,31 - 7,51 (m, 4 H) 7,51 - 7,59 (m, 1 H) 7,66 (s, 1 H) 7,75 (d, 7=8,20 Hz, 1 H) 7,80 - 7,94 (m,
542/543
Η) 8,05 (dd, 4=8,20, 5,86 Hz, 2 H) 8,27 (s, 1 H) 8,44 (d, 4=4,10 Hz, 1 H)
9,31 (s amplo, 1 H) 13,93 (s amplo, 1 H).
1H RMN (600 MHz, <DMSO-d6_CDCh>) δ ppm 1,40 (s amplo, 2 H) 1,60 (s amplo, 2 H) 2,36 (s, 3 H) 2,89 (d, 4=4,69 Hz, 3 H) 3,86 (s, 3 H) 7,23 - 7,49 (m, 5 H) 7,53 (s amplo, 1 H) 7,55 - 7,62 (m, 1 H) 7,65 (s, 1 H)
7,75 (d, 4=8,20 Hz, 1 H) 7,90 (d, 4=8,20 Hz, 1 H) 8,05 (dd, 4=8,20, 5,86 Hz, 1 H) 8,27 (s, 1 H) 8,44 (d, 4=4,69 Hz, 1 H) 9,31 (s amplo, 1 H) 13,77 (s amplo, 1 H).
1H RMN (600 MHz, <DMSO-d6_CDCI3>) δ ppm 1,40 (s amplo, 2
H) 1,60 (s amplo, 2 H) 2,37 (s, 3 H) 2,89 (d, 4=4,69 Hz, 3 H) 7,32 - 7,54 (m, 4 H) 7,65 (s, 1 H) 7,75 (d, 4=8,79 Hz, 1 H) 7,85 - 7,96 (m, 1 H) 7,96 - 8,11 (m, 3 H) 8,27 (s, 1 H) 8,43 (s amplo, 1 H) 9,31 (s, 1 H) 13,84 (s amplo, 1 H).
1H RMN (600 MHz, <DMSO-d6_CDCI3>) δ ppm 1,39 (s amplo, 2
H) 1,57 (s amplo, 2 H) 2,36 (s, 3 H) 2,89 (d, 4=4,69 Hz, 3 H) 7,36 - 7,60 (m, 3 H) 7,75 (d, 4=8,20 Hz, 1 H) 7,85 - 7,96 (m, 1 H) 8,04 (dd, 4=8,20, 5,27 Hz, 2
H) 8,27 (s, 1 H) 8,43 (d, 4=4,69 Hz, 1 H) 9,27 (s amplo, 1 H) 14,10 (s amplo, 1 H).
1H RMN (600 MHz, <DMSO-d6_CDCI3>) δ ppm 1,41 (s amplo, 2 H) 1,61 (s amplo, 2 H) 2,37 (s, 3 H) 2,89 (d, 4=4,69 Hz, 3 H) 7,28 - 7,58 (m, 4 H) 7,65 (s, 1 H) 7,75 (d, 4=8,79 Hz, 1 H) 7,86 - 8,02 (m, 1 H) 8,02 - 8,18 (m, 3 H) 8,27 (s, 1 H) 8,44 (d, 4=4,10 Hz, 1 H) 9,31 (s amplo, 1 H) 13,90 (s am543/543 pio, 1 Η).
Figure BRPI0918174A2_D0394
1H RMN (600 MHz, <DMSO-d6_CDCI3>) δ ppm 1,39 (s amplo, 2 H) 1,59 (s amplo, 2 H) 2,36 (s amplo, 3 H) 2,89 (d, J=4,10 Hz, 3 H) 3,85 (s, 3 H) 6,99 (m, 2H) 7,29 - 7,54 (m, 4 H) 7,65 (s, 1 H) 7,75 (d, J=8,20 Hz, 1 H) 7,82 - 7,99 (m, 3 H) 7,99 - 8,14 (m, 2 H) 8,27 (s, 1 H) 8,43 (s amplo, 1 H) 9,29 (s, 1 H) 13,63 (s amplo, 1 H).
Será evidente a um versado na técnica que a presente invenção não é limitada aos exemplos ilustrativos acima, e que ela pode ser concretizada em outras formas específicas sem se afastar dos seus atributos essenciais. É então desejado que os exemplos sejam considerados em todos os aspectos como ilustrativos e não restritivos, referência sendo feita às reivindicações apensas, ao invés dos exemplos acima, e todas as mudanças que estiverem dentro do significado e faixa de equivalência das reivindicações pretendem então ser compreendidas aqui.

Claims (14)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula R2 R20 R3
    Figure BRPI0918174A2_C0001
    em que, R1 é R5R6N; alcóxi; (alcoxicarbonilamino)alcóxi; (alquilfenil)alcóxi; (carboxi)alquenila; (alcoxicarbonil)alquenila; (benziloxicarbonil)alquenila; ((Ndimetilbenzil)aminocarbonil)alquenila; ou fenila onde a dita fenila é substituída com 1-2 substítuintes selecionados do grupo consistindo em halo, ciano, alquila, haloalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, (carboxi)alquila, alcóxi, hidroxialquilóxi, alcoxialquilóxi, benzilóxi, tetra-hidropiranilóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, alquilsulfonila, (carboxi)alquenila, (alcoxicarbonil)alquenila, alquilcarboxamido, alcoxicarboxamido, alquilsulfamido, (alquilsulfamido)alquila, Ar5, SO2NR15R16 e CONR7R8; e onde a dita fenila é também substituída com 0-2 substítuintes selecionados do grupo consistindo em halo; nitro; alquila; cicloalquila; haloalquila; aminoalquila; hidroxialquila; alcoxialquila; hidróxi; alcóxi; OR17; cicloalcóxi; amino; alquilamino; dialquilamino; alquilcarboxamido; alcoxicarboxamido; alcoxialquilcarboxamido; furanila, tienila ou pirazolila substituída com 0-2 substítuintes alquila; piridinila substituída com 0-2 substitutes halo, ciano, alquila, hidróxi, alcóxi, amino ou alquilaminocarbonila; pirimidinila; pirimidinodionila; aminopirimidinila; indolila; isoquinolinila; ou fenila substituída com 0-2 substítuintes selecionados do grupo consistindo em halo, alquila, cianoalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, amino, carbóxi, alcoxicarbonila, aminocarbonila, alquilaminocarbonila, dialquilaminocarbonila, alquilcarboxamido, carboxialquenila e fenila;
    R2 é hidrogênio, halo, nitro, amino, fenila ou R5R6N;
    R3 é ciano, alcoxicarbonila, (cicloalquil)oxicarbonila, (alquilsulfonil)aminocarbonila, CONR11R12, (R11)(R12)NCONH, triazolila, tiazolila ou tetrazolíla;
    R4 é fenila substituída com 0-2 substítuintes halo;
    R5é hidrogênio, alquila ou alquilsulfonila;
  2. 2/11
    R6 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila, alcoxialquila ou alquilsulfonila;
    R7 é hidrogênio, alquila, alquenila, alquinila, cianoalquila, haloalquila, hidroxialquila, di-hidroxialquila, alcoxialquila, oxoalquila, aminoalquila, (alquilamino)alquila, (dialquilamino)alquila, (cicloalquil)alquila, cicloalquila, (alquil)cicloalquila, (hidroxialquil)cicloalquila, (tetra-hidrofuranil)alquila, (tetrahidropiranil)alquila, (carboxi)alquila, (alcoxicarbonil)alquila, (alqueniloxicarbonil)alquila, (alcoxicarbonil)hidroxialquila, (CONR13R14)alquila, (CONR13R14)(hidroxialquil)alquila, (CONR13R14)cicloalquila, (alquilcarbonil)aminoalquila, (fenil)alquila, (piridinil)alquila, alquilsulfonila, fenilsulfonila, r9 R10 R9 R10 r9 R10
    Ar2, Ar3, *R19, *^Ar1, ou AA'Ar1;
    R8 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila;
    ou R7R8N, tomados juntos, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, di-hidroindolila ou isoindolinila, e são substituído com 0-2 substituintes selecionados de alquila, hidroxialquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, dialquilcarboxamido, alquilcarbonilamino, alcoxicarbonilamino, piridinila e fenila onde a dita fenila é substituída com 0-2 substituintes halo ou alquila;
    ou onde R7R8N, tomados juntos, são , (quinuclidiniljamino, (quinuclidinil)(alquil)amino, (metilpirrolidinil)(alquil)amino, ((imidazolil)alquil)(hidroxialquil)amino, (alquiltiazolil)amino, ((carboxamido)ciclopentanil)amino, ((halofenil)ciclopentanil)amino, 3Hespiro(isobenzofuranil)piperidinila, (hidroxiindanil)amino ou
    Figure BRPI0918174A2_C0002
    R9é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila;
    R10 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila; ou R9 e R10, tomados juntos, são etileno, propileno, butileno, pentileno ou hexileno;
    R11 é hidrogênio, alquila ou cicloalquila;
  3. 3/11
    R12 é hidrogênio, alquila ou cicloalquila;
    ou R11 e R12, tomados junto com o nitrogênio ao qual eles estão ligados, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila;
    R13 é hidrogênio, alquila, cianoalquila, haloalquila, alquenila, alquinila ou tiazolila;
    R14 é hidrogênio ou alquila;
    R15 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila, cicloalquila ou benzila;
    R16 é hidrogênio ou alquila;
    ou R15 e R16, tomados junto com o nitrogênio ao qual eles estão ligados, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila;
    R17 é haloalquila, cianoalquila, (cicloalquil)alquila, hidroxialquila, alcoxialquila, aminoalquila, (R18)alquila, (Ar4)alquila, alquinila ou aminocicloalquila;
    R18 é CONH2, H2NCONH, dibenzilamino, ftalimido, amino, alquilamino, dialquilamino, azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila onde azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila é substituída com 0-3 substituintes alquila ou alcoxicarbonila;
    R19 é ciano, hidroxialquila, morfolinilalquila, carbóxi, alcoxicarbonila, cicloalquilsulfoxamido, ((alquil)pirazolil)amino, ((alquil)isoxazolil)amino, (tiadiazolil)amino, (triazinil)amino ou alquinilaminocarbonila;
    R20 é hidrogênio, halo, alquila ou alcóxi;
    R21 é hidrogênio, halo, alquila ou alcóxi;
    Ar1 é fenila, naftalenila, piridinila, furanila, tienila, pirrolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, imidazolila, oxazolila, tiazolila, oxadiazolila, oxadiatiazolila, triazolila, tetrazolila, pirazinila, pirimidinila ou benzotiazolila, e é substituída com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, cicloalquila, haloalquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, amino, alquilamino, dialquilamino, aminocarbonila, piridinila, fenila, halofenila, alquilfenila, e alcoxifenila;
    Ar2 é fenila, bifenila ou piridinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, ciano, hidróxi, alcóxi e carbóxi;
    Ar3 é pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, imidazolila, oxazolila, tiazolila, triazolila, oxadiazolila, oxatiadiazolila, pirimidinila ou pirizinila e é subs
  4. 4/11 tituido com 0-2 substituintes selecionados de hidróxi, alquila, hidroxialquila e CONR13R14;
    Ar4 é furanila, tienila, pirrolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, imidazolila, oxadiazolila, tiadiazolila, triazolila, piridinila, indolila ou fenila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, haloalquila, hidroxila, e alcóxi; e
    Ar5 é pirrozolila, imidazolila ou oxadiazolila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de alquila, carbóxi, alcoxicarbonila, benzila, e fenila;
    ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
    2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R20 e R21 são hidrogênio.
    3. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que
    R1 é R5R6N; (carboxi)alquenila; (alcoxicarbonil)alquenila; (benziloxicarbonil)alquenila; ou fenila onde a dita fenila é substituída com 1-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em ciano, alquila, alcóxi, hidroxialquila, alcoxialquila, hidroxialquilóxi, alcoxialquilóxi, haloalquila, benzilóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, aiquiisulfoniia, (carboxi)alquenila, (alcoxicarbonil)alquenila, alquilcarboxamido, alcoxicarboxamido, alquilsulfamido, (alquilsulfamido)alquila, tetra-hidropiranilóxi, Ar5, SO2NR15R16 e CONR7R8; e onde a dita fenila é também substituída com 0-1 substituinte selecionado do grupo consistindo em halo; alquila; hidroxialquila; alcoxialquila; hidroxila; alcóxi; OR17; cicloalcóxi; amino; alquilamino; dialquilamino; alquilcarboxamido; alcoxialquilcarboxamido; furanila; indolila; isoquinolinila; piridinila substituída com 0-2 substituintes halo, alquila, hidróxi ou alcóxi; pirazolila substituída com 0-2 substituintes alquila; e fenila substituída com 0-2 substituintes halo, alquila, cianoalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, aminocarbonila, alquilaminocarbonila, dialquilaminocarbonila, alquilcarboxamido, carboxialquenila ou fenila;
    R2 é hidrogênio, nitro ou R5R6N;
    R3 é ciano, alcoxicarbonila, (cicloalquil)oxicarbonila, (alquilsulfo
  5. 5/11 nil)aminocarbonila, CONR11R12, (R11)(R12)NCONH, triazolila, tiazolila ou tetrazolila;
    R4 é fenila substituída com 0-2 substituintes halo;
    R5 é hidrogênio, alquila ou alquilsulfonila;
    R6 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila, alcoxialquila ou alquilsulfonila;
    R7 é hidrogênio, alquila, alquenila, alquinila, cianoalquila, haloalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, oxoalquila, aminoalquila, (alquilamino)alquila, (dialquilamino)alquila, (cicloalquil)alquila, cicloalquila, (alquil)cicloalquila, (hidroxialquil)cicloalquila, (tetra-hidrofuranil)alquila, (tetrahidropiranil)alquila, (carboxi)alquila, (alcoxicarbonil)alquila, (alcoxicarbonil)hidroxialquila, (CONR13R14)alquila, (alquilcarbonil)aminoalquila, (feRXR1° nil)alquila, (piridinil)alquila, alquilsulfonila, fenilsulfonila, Ar2, Ar3, * r19,
    R® R10 R® R10
    JX. xC Ar1 * Ar1, * ou
    R8é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila;
    ou R7R8N, tornados juntos, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila ou di-hidroindolila e são substituídos com 0-2 substituintes selecionados de alquila, hidroxialquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, dimetilcarboxamido, alquilcarbonilamino, alcoxicarbonilamino, piridinila e fenila onde fenila é substituída com 0-2 substi 'Ar1 · tuintes selecionados de halo e alquila;
    ou onde R7R8N, tomados juntos, são ; (quinuclidinil)(alquil)amino, (metilpirrolidinil)(alquil)amino, (alquiltiazolil)amino, ((carboxamido)ciclopentanil)amino, ((halofenil)ciclopentanil)amino ou (hidroxiindanil)amino;
    R9é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila;
    R10 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alcoxialquila;
    ou R9 e R10, tornados juntos, são etileno, propileno, butileno ou pentileno;
    R11 é hidrogênio, alquila ou cicloalquila;
  6. 6/11
    R12 é hidrogênio, alquila ou cicloalquila;
    ou R11 e R12, tomados junto com o nitrogênio ao qual eles estão ligados, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila;
    R13é hidrogênio, alquila, cianoalquila, alquenila ou alquinila;
    R14 é hidrogênio ou alquila;
    R15é hidrogênio ou alquila;
    R16 é hidrogênio ou alquila;
    R17 é haloalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, alquinila, (R18)alquila ou (Ar4)alquila;
    R18 é CONH2, dibenzilamino, amino, alquilamino, dialquilamino, azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila onde azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila é substituída com 0-3 substituintes selecionados de alquila e alcoxicarbonila;
    R19 é ciano, ((alquil)pirazolil)amino, ((alquil)isoxazolil)amino (tiadiazolil)amino ou (triazinil)amino;
    Ar1 é fenila, naftalenila, piridinila, tienila, tiazolila ou pirazinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de alquila, halo, hidróxi, alcóxi, amino, alquilamino e dialquilamino;
    Ar2 é fenila, bifenila ou piridinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, ciano, hidróxi e alcóxi;
    Ar3 é pirazolila, isoxazolila, tiazolila, pirimidinila ou pirizinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de alquila e hidroxialquila;
    Ar4 é pirrolila, imidazolila, piridinila, indolila ou fenila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, hidroxila e alcóxi; e
    Ar5 é pirrozolila, imidazolila ou oxadiazolila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de alquila, carbóxi, alcoxicarbonila, benzila e fenila;
    ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
    4. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que
    R1 é alcóxi; (alcoxicarbonilamino)alcóxi; (alquilfenil)alcóxi; (carboxi)alquenila; ((N-dimetilbenzil)aminocarbonil)alquenila; ou fenila onde a
  7. 7/11 dita fenila é substituída com 1-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em halo, ciano, alquila, haloalquila, hidroxialquila, (carboxi)alquila, alcóxi, hidroxialquilóxi, tetra-hidropiranilóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, (carboxi)alquenila, alquilcarboxamido, alcoxicarboxamido, (alquilsulfamido)alquila, Ar5, SO2NR15R16 e CONR7R8; e onde a dita fenila é também substituída com 0-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em halo; nitro; alquila; cicloalquila; haloalquila; aminoalquila; hidróxi; alcóxi; OR17; cicloalcóxi; amino; alcoxicarboxamido; furanila, tienila ou pirazolila substituído com 0-2 substituintes alquila; piridinila substituída com 0-2 substituintes halo, ciano, alquila, hidróxi, alcóxi, amino ou alquilaminocarbonila; pirimidinila; pirimidinodionila; aminopirimidinila; indolila; isoquinolinila; e fenila substituída com 0-2 substituintes selecionados de halo, cianoalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, alcóxi, amino, carbóxi, aminocarbonila, alquilaminocarbonila, alquilcarboxamido e carboxialquenila;
    R2 é hidrogênio, halo, nitro, amino, fenila ou R5R6N;
    R3 é CONR11R12;
    R4 é fenila substituída com 0-2 substituintes halo;
    R5é hidrogênio ou alquilsulfonila;
    R6 é hidrogênio, alquila, hidroxialquila ou alquilsulfonila;
    R7 é hidrogênio, alquila, alquinila, cianoalquila, haloalquila, hidroxialquila, di-hidroxialquila, alcoxialquila, oxoalquila, (dialquilamino)alquila, (cicloalquil)alquila, cicloalquila, (alquil)cicloalquila, (hidroxialquil)cicloalquila, (tetra-hidrofuranil)alquila, (tetra-hidropiranil)alquila, (carboxi)alquila, (alcoxicarbonil)alquila, (alqueniloxicarbonil)alquila, (alcoxicarbonil)hidroxialquila, (CONR13R14)alquila, (CONR13R14)(hidroxialquil)alquila, (CONR13R14) cicloalquila, (alquilcarbonil)aminoalquila, (fenil)alquila, alquilsulfonila, fenilsulfonila, R® R10 R® R10 R® R10
    Ar2, Ar3, * R19, * Ar1, ou
    R8 é hidrogênio, alquila ou alcoxialquila;
    ou R7R8N, tomados juntos, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, di-hidroindolila ou isoindolinila, e são substituídos com 0-2 substituintes selecionados de alquila, hidroxialquila, alcoxialquila, hidróxi, alcoxicarbonila, dialquilcarboxamído, alquilcarbonilamino, piridinila e
  8. 8/11 fenila onde a dita fenila é substituída com 0-2 substituintes halo ou alquila;
    ou onde R7R8N, tomados juntos, são ( (quinuclidinil)amino, (quinuclidinil)(alquil)amino, (metilpirrolidinil)(alquil)amino, ((imidazolil)alquil)(hidroxialquil)amino, (alquiltiazolil)amino, ((carboxamido)ciclopentanil)amino, ((halofenil)ciclopentanil)amino, 3H-espiro (isobenzo furanil)piperidinila, (hidroxi-indanil)amino ou
    Figure BRPI0918174A2_C0003
    R9 é hidrogênio, alquila ou hidroxialquila;
    R10é hidrogênio ou alquila;
    ou R9 e R10, tomados juntos, são etileno ou propileno; R11 é alquila;
    R12 é hidrogênio;
    R13 é hidrogênio, alquila, cianoalquila, haloalquila, alquenila ou tiazolila;
    R14 é hidrogênio ou alquila;
    R15é alquila, hidroxialquila, cicloalquila ou benzila;
    R16 é hidrogênio;
    ou R15 e R16, tomados junto com o nitrogênio ao qual eles estão ligados, são azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila;
    R17 é haloalquila, cianoalquila, (cicloalquil)alquila, hidroxialquila, alcoxialquila, aminoalquila, (R18)alquila, (Ar4)alquila, alquinila ou aminociclo alquila;
    R18 é CONH2, H2NCONH, dibenzilamino, ftalimido, amino, dialquilamino, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila onde azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila é substituída com 0-3 substituintes alquila ou alcoxicarbonila;
    R19 é ciano, hidroxialquila, morfolinilalquila, carbóxi, alcoxicarbonila, cicloalquilsulfoxamido, ((alquil)pirazolil)amino, ((alquil)isoxazolil)amino, (tiadiazolil)amino, (triazinil)amino ou alquinilaminocarbonila;
    Ar1 é fenila, naftalenila, piridinila, furanila, pirazolila, isoxazolila, imidazolila, oxazolila, tiazolila, oxadiazolila, triazolila, tetrazolila, pirazinila,
  9. 9/11 pirimidinila ou benzotiazolila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, cicloalquila, haloalquila, alcoxialquila, hidróxi, alcóxi, amino, aminocarbonila, piridinila, fenila, halofenila, alquilfenila e alcoxifenila;
    Ar2 é fenila, bifenila ou piridinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, ciano, hidróxi, alcóxi e carbóxi;
    Ar3 é pirazolila, isoxazolila, tiazolila, triazolila, pirimidinila ou pirizinila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de hidróxi, alquila e CONR13R14;
    Ar4 é furanila, pirrolila, pirazolila, isoxazolila, imidazolila, oxadiazolila, triazolila, piridinila, indolila ou fenila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de halo, alquila, haloalquila e hidróxi; e
    Ar5 é pirrozolila, imidazolila ou oxadiazolila e é substituído com 0-2 substituintes selecionados de alquila, alcoxicarbonila, benzila, e fenila;
    ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
    5. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que R1 é fenila substituída com um substituinte CONR7R8 e também substituída com 0-2 substituintes halo, alquila ou alcóxi; R2 é hidrogênio, halo ou R5R6N; R3 é CONR11R12; R4 é monofluorfenila; R5 é alquilsulfoni-
    R9 R1°
    Ia; R6é hidroxialquila; R7 é * Ar1 r8 θ hidrogênio; R9 é alquila; R10 é alquila ou R9 e R10, tomados juntos, são etileno ou propileno; R11 é alquila; R12 é hidrogênio; e Ar1 é fenila, piridinila, pirimidinila, isoxazolila, oxazolila ou oxadiazolila e é substituída com 0-1 substituinte halo ou alquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
    6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é fenila substituída com 1-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em halo, ciano, alquila, haloalquila, hidroxialquila, (carboxi)alquila, alcóxi, hidroxialquilóxi, tetra-hidropiranilóxi, carbóxi, alcoxicarbonila, (carboxi)alquenila, alquilcarboxamido, alcoxicarboxamido, (alquilsulfamidojalquila, Ar5, SO2NR15R16 e CONR7R8; e onde a dita fenila é também substituída com 0-2 substituintes selecionados do grupo consistindo em halo; nitro; alquila; cicloalquila; haloalquila; aminoalquila; hidróxi; alcóxi; OR17; cicloalcóxi; amino; alcoxicarboxamido; furanila, tienila ou pirazolila substituí
  10. 10/11 da com 0-2 substituintes alquila; piridinila substituída com 0-2 substituintes halo, ciano, alquila, hidróxi, alcóxi, amino ou alquilaminocarbonila; pirimidinila; pirimidinodionila; aminopirimidinila; indolila; isoquinolinila; e fenila substituída com 0-2 substituintes selecionados de halo, cianoalquila, hidroxialquila, alcoxialquila, alcóxi, amino, carbóxi, aminocarbonila, alquilaminocarbonila, alquilcarboxamido e carboxialquenila.
    7. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é fenila substituída com 1 substituinte CONR7R8 e também substituída com 0-2 substituintes halo, alquila ou alcóxi.
    8. Composto, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pe- RXR1°
    Io fato de que R7 é * A|r1 e pelo menos um de R9 e R10 não é hidrogênio.
    9. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo consistindo em:
    2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(pirimidin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida;
    4-flúor-2-(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(pirimidin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida;
    4- flúor-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(pirimidin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida;
    2-(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(pirimidin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida;
    2-(4-fluorfen il)-5-(4-metóxi-2-metil-5-( 1 -(3-metil-1,2,4-oxad iazol5-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida;
    2-(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(5-metil-1,2,4-oxadiazol3-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida;
    2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(piridin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida;
    5- (3-flúor-2-metil-5-(1-(piridin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-2-(4fluorfenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida;
    2-(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(5-metiltiazol-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida;
    2-(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(5-metilisoxazol-311/11 il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida;
    2-(4-fluorfenil)-5-(4-metóxi-2-metil-5-(1-(5-metiloxazol-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida;
    2-(4-fluorfenil)-6-(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metil-5-(3(2-fenilpropan-2-ilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida;
    2-(4-fluorfenil)-6-(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metil-5-(3(1 -fenilciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida; e
    2-(4-fluorfenil)-5-(3-(1-(4-fluorfenil)ciclopropilcarbamoil)fenil)-6(N-(2-hidroxietil)metilsulfonamido)-N-metilbenzofuran-3-carboxamida;
    ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
    10. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é 4-flúor-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1-(pirimidin-2il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida da fórmula
    Figure BRPI0918174A2_C0004
    ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
  11. 11. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido na reivindicação 1, e um veículo farmaceuticamente aceitável.
  12. 12. Composição, de acordo com a reivindicação 11, caracterizada pelo fato de que o composto é 4-flúor-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5(1-(pirimidin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.
  13. 13. Uso de um composto, como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser na preparação de uma composição para o tratamento de infecção por hepatite C em um paciente.
  14. 14. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o composto é 4-flúor-2-(4-fluorfenil)-N-metil-5-(2-metil-5-(1(pirimidin-2-il)ciclopropilcarbamoil)fenil)benzofuran-3-carboxamida ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
BRPI0918174A 2008-09-11 2009-09-08 composto que apresenta atividade contra o vírus da hepatite c (hcv), sua composição e seu uso BRPI0918174A2 (pt)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US9600508P 2008-09-11 2008-09-11
PCT/US2009/056166 WO2010030592A1 (en) 2008-09-11 2009-09-08 Compounds for the treatment of hepatitis c

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BRPI0918174A2 true BRPI0918174A2 (pt) 2019-10-01

Family

ID=41226922

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BRPI0918174A BRPI0918174A2 (pt) 2008-09-11 2009-09-08 composto que apresenta atividade contra o vírus da hepatite c (hcv), sua composição e seu uso

Country Status (19)

Country Link
US (1) US8048887B2 (pt)
EP (1) EP2326633B1 (pt)
JP (1) JP5685191B2 (pt)
KR (1) KR20110059875A (pt)
CN (1) CN102209717B (pt)
AR (1) AR073740A1 (pt)
AU (1) AU2009291966B2 (pt)
BR (1) BRPI0918174A2 (pt)
CA (1) CA2736988A1 (pt)
CL (2) CL2011000527A1 (pt)
CO (1) CO6382110A2 (pt)
EA (1) EA019185B1 (pt)
IL (1) IL211509A0 (pt)
MX (1) MX2011002410A (pt)
NZ (1) NZ591172A (pt)
PE (1) PE20110806A1 (pt)
TW (2) TW201014836A (pt)
WO (1) WO2010030592A1 (pt)
ZA (2) ZA201101739B (pt)

Families Citing this family (58)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7994171B2 (en) * 2008-09-11 2011-08-09 Bristol-Myers Squibb Company Compounds for the treatment of hepatitis C
US8198449B2 (en) * 2008-09-11 2012-06-12 Bristol-Myers Squibb Company Compounds for the treatment of hepatitis C
WO2010043721A1 (en) 2008-10-17 2010-04-22 Oryzon Genomics, S.A. Oxidase inhibitors and their use
CA2741648A1 (en) * 2008-10-30 2010-05-06 Merck Sharp & Dohme Corp. 2,5-disubstituted phenyl carboxamide orexin receptor antagonists
US8993808B2 (en) 2009-01-21 2015-03-31 Oryzon Genomics, S.A. Phenylcyclopropylamine derivatives and their medical use
SG177308A1 (en) * 2009-06-22 2012-02-28 Hoffmann La Roche Novel biphenyl and phenyl-pyridine amides
US8859555B2 (en) 2009-09-25 2014-10-14 Oryzon Genomics S.A. Lysine Specific Demethylase-1 inhibitors and their use
EP2486002B1 (en) 2009-10-09 2019-03-27 Oryzon Genomics, S.A. Substituted heteroaryl- and aryl- cyclopropylamine acetamides and their use
WO2011106573A2 (en) 2010-02-24 2011-09-01 Oryzon Genomics, S.A. Lysine demethylase inhibitors for diseases and disorders associated with hepadnaviridae
US9616058B2 (en) 2010-02-24 2017-04-11 Oryzon Genomics, S.A. Potent selective LSD1 inhibitors and dual LSD1/MAO-B inhibitors for antiviral use
US8324212B2 (en) 2010-02-25 2012-12-04 Bristol-Myers Squibb Company Compounds for the treatment of hepatitis C
AR080433A1 (es) * 2010-03-02 2012-04-11 Merck Sharp & Dohme Derivados de benzofurancarboxamidas utiles para tratar o prevenir infecciones por vhc y composiciones farmaceuticas que los contienen.
WO2011112191A1 (en) * 2010-03-11 2011-09-15 Bristol-Myers Squibb Company Compounds for the treatment of hepatitis c
US8354410B2 (en) 2010-03-11 2013-01-15 Bristol-Meyers Squibb Company Compounds for the treatment of hepatitis C
MX2012012111A (es) 2010-04-19 2013-05-30 Oryzon Genomics Sa Inhibidores de demetilasa-1 especifica de lisina y su uso.
US8324239B2 (en) 2010-04-21 2012-12-04 Novartis Ag Furopyridine compounds and uses thereof
WO2011140333A1 (en) 2010-05-07 2011-11-10 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Identification of stabilizers of multimeric proteins
US8445497B2 (en) 2010-06-30 2013-05-21 Bristol-Myers Squibb Company Compounds for the treatment of hepatitis C
WO2012013727A1 (en) 2010-07-29 2012-02-02 Oryzon Genomics S.A. Cyclopropylamine derivatives useful as lsd1 inhibitors
SI2598482T1 (sl) 2010-07-29 2018-09-28 Oryzon Genomics, S.A. Inhibitorji demetilaze lsd1 na osnovi arilciklopropilamina in njihova medicinska uporaba
EP2616461A4 (en) 2010-08-26 2014-03-26 Rfs Pharma Llc POTENTIVE AND SELECTIVE INHIBITORS OF HEPATITIS C VIRUS
WO2012045883A1 (en) 2010-10-08 2012-04-12 Oryzon Genomics S.A. Cyclopropylamine inhibitors of oxidases
CN103269586B (zh) 2010-10-26 2015-07-15 普雷西迪奥制药公司 丙型肝炎病毒抑制剂
WO2012072713A2 (en) 2010-11-30 2012-06-07 Oryzon Genomics, S.A. Lysine demethylase inhibitors for diseases and disorders associated with flaviviridae
US8507683B2 (en) * 2010-12-09 2013-08-13 Bristol-Myers Squibb Company Compounds for the treatment of hepatitis C
CN106986862A (zh) 2010-12-22 2017-07-28 Abbvie 公司 丙型肝炎抑制剂及其用途
WO2012107498A1 (en) 2011-02-08 2012-08-16 Oryzon Genomics S.A. Lysine demethylase inhibitors for myeloproliferative disorders
WO2013033901A1 (en) * 2011-09-08 2013-03-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Heterocyclic-substituted benzofuran derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2013033899A1 (en) * 2011-09-08 2013-03-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Substituted benzofuran compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2013033900A1 (en) * 2011-09-08 2013-03-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
RS58475B1 (sr) 2011-10-20 2019-04-30 Oryzon Genomics Sa Jedinjenja (hetero)aril ciklopropilamina kao lsd1 inhibitori
CN107266345B (zh) 2011-10-20 2021-08-17 奥瑞泽恩基因组学股份有限公司 作为lsd1抑制剂的(杂)芳基环丙胺化合物
US9303020B2 (en) 2012-02-08 2016-04-05 Bristol-Myers Squibb Company Compounds for the treatment of hepatitis C
EP2831066B1 (en) 2012-03-27 2016-10-05 Bristol-Myers Squibb Company Benzofuran derivatives for the treatment of hepatitis c
WO2013163466A1 (en) * 2012-04-25 2013-10-31 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hepatitis c virus
US9169214B2 (en) 2012-12-21 2015-10-27 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Compounds and compositions that bind and stabilize transthyretin and their use for inhibiting transthyretin amyloidosis and protein-protein interactions
JP2016505011A (ja) * 2013-01-10 2016-02-18 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｃ型肝炎の治療用の大環状ベンゾフランおよびアザベンゾフラン化合物
WO2014121416A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic heterocycle compounds and methods of use thereof for the treatment of hepatitis c
US8962651B2 (en) 2013-03-13 2015-02-24 Bristol-Myers Squibb Company Compounds for the treatment of hepatitis C
EP2970174B1 (en) * 2013-03-14 2017-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Fused furans for the treatment of hepatitis c
WO2014205593A1 (en) * 2013-06-24 2014-12-31 Merck Sharp & Dohme Corp. Substituted benzofuran compounds and methods of use thereof for treatment of viral diseases
WO2015088958A1 (en) * 2013-12-13 2015-06-18 Bristol-Myers Squibb Company A novel compound for the treatment of hepatitis c
ES2688554T3 (es) * 2014-03-21 2018-11-05 Bristol-Myers Squibb Company Compuestos de azabenzofurano que contienen ciano para el tratamiento de la hepatitis C
EP3119769A1 (en) * 2014-03-21 2017-01-25 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Cyanoamino (aza)benzofuran compounds for the treatment of hepatitis c
US20160045609A1 (en) 2014-08-14 2016-02-18 Mamoun M. Alhamadsheh Conjugation of pharmaceutically active agents with transthyretin ligands through adjustable linkers to increase serum half-life
WO2016133963A1 (en) * 2015-02-19 2016-08-25 Bristol-Myers Squibb Company Benzofurans substituted with secondary benzamide as hcv inhibitors
WO2016133961A1 (en) * 2015-02-19 2016-08-25 Bristol-Myers Squibb Company Benzofurans substituted with bicyclic secondary benzamide as hcv inhibitors
US10131645B2 (en) 2015-02-19 2018-11-20 Bristol-Myers Squibb Company Benzofurans substituted with primary benzamide as HCV inhibitors
US10570108B2 (en) 2015-02-19 2020-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Substituted benzofuran compounds for the treatment of hepatitis C
CN107406435A (zh) * 2015-02-23 2017-11-28 百时美施贵宝公司 新的治疗丙型肝炎的化合物
US11161837B2 (en) 2016-03-21 2021-11-02 Bristol-Myers Squibb Company Benzofuran derivatives for the treatment of hepatitis C
CN116730920A (zh) 2017-02-17 2023-09-12 文涵治疗有限公司 Ag-10的制备方法、其中间体及其盐
KR102512548B1 (ko) 2017-12-22 2023-03-22 삼성디스플레이 주식회사 유기 전계 발광 소자 및 유기 전계 발광 소자용 함질소 화합물
MA52137A (fr) 2018-03-23 2021-01-27 Eidos Therapeutics Inc Méthodes de traitement de l'amylose ttr à l'aide d'ag10
AU2019321583C1 (en) 2018-08-17 2025-11-27 Eidos Therapeutics, Inc. Formulations of AG10
EP3886854A4 (en) 2018-11-30 2022-07-06 Nuvation Bio Inc. Pyrrole and pyrazole compounds and methods of use thereof
CN114174283B (zh) * 2019-07-18 2023-05-12 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 作为nmt抑制剂的化合物及其应用
WO2025147320A1 (en) * 2024-01-03 2025-07-10 Kymera Therapeutics, Inc. Stat6 inhibitors and uses thereof

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS57123181A (en) 1981-01-23 1982-07-31 Mitsubishi Paper Mills Ltd Preparation of pyrazolo (1,5-a) pyridine derivative
PE20020506A1 (es) 2000-08-22 2002-07-09 Glaxo Group Ltd Derivados de pirazol fusionados como inhibidores de la proteina cinasa
EP1372642A1 (en) 2001-03-30 2004-01-02 SmithKline Beecham Corporation Use of pyrazolopyridines as therapeutic compounds
UA79834C2 (en) * 2002-11-01 2007-07-25 Viropharma Inc Benzofuran compounds, compositions and methods for treatment and prophylaxis of hepatitis c viral infections and associated diseases
US7868037B2 (en) * 2004-07-14 2011-01-11 Ptc Therapeutics, Inc. Methods for treating hepatitis C
TW200815384A (en) * 2006-08-25 2008-04-01 Viropharma Inc Combination therapy method for treating hepatitis C virus infection and pharmaceutical compositions for use therein
EP2134683A2 (en) * 2007-02-12 2009-12-23 Intermune, Inc. Novel inhibitors hepatitis c virus replication
GB0707000D0 (en) 2007-04-12 2007-05-30 Istituto Di Ricerche D Biolog Antiviral agents
JP2011512341A (ja) 2008-02-14 2011-04-21 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 抗ウイルス性複素環化合物
WO2009137500A1 (en) 2008-05-05 2009-11-12 Wyeth 6-substituted benzofuran compounds to treat infection with hepatitis c virus
WO2009137493A1 (en) 2008-05-05 2009-11-12 Wyeth 2-substituted benzofuran compounds to treat infection with hepatitis c virus

Also Published As

Publication number Publication date
IL211509A0 (en) 2011-07-31
JP2012502101A (ja) 2012-01-26
ZA201101739B (en) 2012-08-29
CL2011001224A1 (es) 2011-09-16
KR20110059875A (ko) 2011-06-07
EA201100390A1 (ru) 2011-10-31
EP2326633B1 (en) 2015-12-16
US8048887B2 (en) 2011-11-01
TW201014836A (en) 2010-04-16
EP2326633A1 (en) 2011-06-01
ZA201105720B (en) 2012-08-29
EA019185B1 (ru) 2014-01-30
AU2009291966B2 (en) 2014-08-28
CN102209717A (zh) 2011-10-05
CL2011000527A1 (es) 2011-08-12
WO2010030592A1 (en) 2010-03-18
PE20110806A1 (es) 2011-10-31
CO6382110A2 (es) 2012-02-15
US20100093694A1 (en) 2010-04-15
MX2011002410A (es) 2011-04-05
CN102209717B (zh) 2015-02-18
AU2009291966A1 (en) 2010-03-18
NZ591172A (en) 2012-12-21
CA2736988A1 (en) 2010-03-18
JP5685191B2 (ja) 2015-03-18
TW201124403A (en) 2011-07-16
AR073740A1 (es) 2010-12-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2009291966B2 (en) Compounds for the treatment of hepatitis C
AU2021381437B2 (en) Novel spiropyrrolidine derived antiviral agents
US8309558B2 (en) Compounds for the treatment of hepatitis C
AU2015373996B2 (en) Derivatives and methods of treating hepatitis B infections
AU2018361364B2 (en) Novel, highly active amino-thiazole substituted indole-2-carboxamides active against the hepatitis B virus (HBV)
US7456165B2 (en) HCV NS5B inhibitors
WO2011112191A1 (en) Compounds for the treatment of hepatitis c
JP2022506337A (ja) Ｂ型肝炎ウイルス（ｈｂｖ）に対して活性を有する６，７－ジヒドロ－４ｈ－ピラゾロ［１，５－ａ］ピラジンインドール－２－カルボキサミド
WO2007033175A1 (en) Indolobenzazepine hcv ns5b inhibitors
EP2542545A1 (en) Inhibitors of hepatitis c virus ns5b polymerase
JP2022530522A (ja) Ｂ型肝炎ウイルス（ｈｂｖ）に対し活性な新規のインドール－２－カルボキサミド
CN102892767A (zh) 治疗丙型肝炎的化合物
JP2022512870A (ja) Ｂ型肝炎ウイルス（ｈｂｖ）に対して活性を有する新規尿素６，７－ジヒドロ－４ｈ－ピラゾロ［１，５－ａ］ピラジン
JP2018509401A (ja) Ｃ型肝炎の治療のための新規化合物
TW202106685A (zh) 抗b型肝炎病毒(hbv)之新穎苯基及吡啶基脲活性劑
EP3873899A1 (en) Novel urea 6,7-dihydro-4h-pyrazolo[4,3-c]pyridines active against the hepatitis b virus (hbv)
TW202031660A (zh) 具抗b型肝炎病毒（hbv）活性之6,7-二氫-4h-吡唑并[1,5-a]吡脲

Legal Events

Date Code Title Description
B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]

Free format text: DE ACORDO COM O ARTIGO 229-C DA LEI NO 10196/2001, QUE MODIFICOU A LEI NO 9279/96, A CONCESSAO DA PATENTE ESTA CONDICIONADA A ANUENCIA PREVIA DA ANVISA. CONSIDERANDO A APROVACAO DOS TERMOS DO PARECER NO 337/PGF/EA/2010, BEM COMO A PORTARIA INTERMINISTERIAL NO 1065 DE 24/05/2012, ENCAMINHA-SE O PRESENTE PEDIDO PARA AS PROVIDENCIAS CABIVEIS.

B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B08F Application dismissed because of non-payment of annual fees [chapter 8.6 patent gazette]

Free format text: REFERENTE A 11A ANUIDADE.

B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]
B08K Patent lapsed as no evidence of payment of the annual fee has been furnished to inpi [chapter 8.11 patent gazette]

Free format text: EM VIRTUDE DO ARQUIVAMENTO PUBLICADO NA RPI 2595 DE 29-09-2020 E CONSIDERANDO AUSENCIA DE MANIFESTACAO DENTRO DOS PRAZOS LEGAIS, INFORMO QUE CABE SER MANTIDO O ARQUIVAMENTO DO PEDIDO DE PATENTE, CONFORME O DISPOSTO NO ARTIGO 12, DA RESOLUCAO 113/2013.

B350 Update of information on the portal [chapter 15.35 patent gazette]