BRPI0923494B1 - éster de diol e de ácido graxo poli-insaturado como agente anti-acne, composição farmacêutica ou cosmética, método de tratamento cosmético da acne ou da dermatite seborreica e processo de preparo do referido composto - Google Patents

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "ÉSTER DE DIOL E DE ÁCIDO GRAXO POLI-INSATURADO COMO AGENTE ANTI-ACNE, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA OU COSMÉTICA, MÉTODO DE TRATAMENTO COSMÉTICO DA ACNE OU DA DERMATITE SEBORREI-CA E PROCESSO DE PREPARO DO REFERIDO COMPOSTO". A presente invenção refere-se a ésteres de alcano diol e de ácido graxo poli-insaturado, mais particularmente a ômegas 3 e a ômegas 6, assim como às composições farmacêuticas e cosméticas que os contêm, ao respectivo processo de preparo e à respectiva utilização, notadamente no tratamento da acne e da dermite seborreica.

Os alcanos diol são compostos utilizados em numerosos domínios, tais como a cosmetologia ou a agro-alimentícia. Podem-se, em particular, citar suas utilizações como conservante, graças a suas propriedades bacteriostáticas. Assim, os alcanos diol constituem um meio de luta contra as colonizações fúngicas e bacterianas e contribuem a uma proteção de numerosos produtos cosméticos ou agro-alimentícios (Faergemann J, Fre-driksson T. Sabouraudia: 1980; 18, 287-293). Esses dióis apresentam um largo espectro de atividade e são notadamente eficazes face às espécies fúngicas e bacterianas de tipo Gram + (Harb NA, Toama MA. Drug Cosmet Ind: 1976; 118, 40). Além disso, a quase ausência de resistência adquirida nos microorganismos permite aos alcanos diol ser parceiros importantes na elaboração de estratégias anti-resitência, notadamente face ao estafilococo dourado (Faergemann J, Fledner T, Larsson P: 2005; 85, 203-205; WO 2004/112765). Enfim, sua tolerância muito boa permite uma utilização fre-qüente e em doses que ultrapassam vários porcento.

Em particular, os alcanos diol 1,2 têm atividades bacteriostáticas, as quais são amplamente utilizadas como conservantes (JP-A 51091327) ou no tratamento de patologias como a acne na qual a componente microbiana exerce um papel chave na etiologia (US 6123953). Outras aplicações dos alcanos diol 1,2 são também descritos como propriedades protetoras face os odores corporais, graças ao seu efeito antisséptico (US 5516510; WO 2003/000220) ou antimicósicos (WO 2003/069994). Da mes- ma forma, associações de alcano diol 1,2 com outros compostos são descritas, com, como resultante um efeito antimicrobiano sinérgico. Assim, são reivindicadas neste último âmbito das associações para lutar contra os microorganismos na origem os odores corporais (US 2005/228032) ou implicados na formação das lesões acneicas (US 2007/265352, EP 1598064).

Os ácidos graxos poli-insaturados (AGPI) se repartem em duas categorias: os ômegas 3 (ω3) e os ômegas 6 (ω6). Além de seus efeitos me-tabólicos, eles são capazes de modificar a expressão de genes codificando para proteínas intracelulares. Esses efeitos gênicos das AGPI ocorreríam via receptores nucleares denominados PPARS (peroxysome proliferator activated receptor). Os PPARS pertencem à família dos receptores nucleares hormonais de tipo esteroídiano. Eles formam heterodímeros com os receptores RXR (Retinoic X Receptor) do ácido retinoico e modulam a expressão de genes. Assim, os AGPI ω3 seriam reguladores relativos da resposta inflama-tória, inibindo a via de ativação NF-kB por intermédio da indução da expressão de IkBa, o inibidor maior da via NF-kB (Ren J and Chung SH. J Agric Food Chem. 2007 55:5073-80). Além disso, os AGPI ω3 têm uma ação inibi-dora sobre a síntese do ácido araquidônico em proveito da síntese dos ácidos docosa-hexanoicos e eico-sapentanoicos (Calder PC. Lipids: 2001; 36, 1007-24).

Durante a acne, o excesso de sebo no infundibulum pilar representa um ambiente propicio para a colonização por Propionibacteríum acnes (P. acnes). Uma correlação pôde assim ser estabelecida entre o grau de colonização por P. acnes do canal pilo-sebáceo e o aparecimento do microco-medon. Além disso, foi mostrado que essa colonização era mais importante nos sujeitos acneicos comparativamente aos sujeitos sadios (Brown S, Shali-ta A. Acne vulgaris. Lancet 1998; 351:187-6). P.acnes induz via os receptores da imunidade inata a produção de citoquinas pró-inflamatórias NF-kB dependentes como IL-8. Depois esses mediadores vão influenciar notadamente a migração dos polinucleares neu-trófilos em direção ao local inflamatório onde terão por missão matar as bactérias. Essa resposta inflamatória é um fenômeno normal é necessário para eliminação do patógeno no tecido infectado. Todavia, uma ativação excessiva e não regulada chega às lesões inflamatórias acneicas. Assim, foi mostrado que a taxa de IL-8 é correlacionada ao número de neutrófilos mobilizados na lesão acneica inflamatória (Abd El All HS et al. Diagn. Pathol. 2007; 2:4). A colonização bacteriana em um paciente acneico é associada mais frequentemente ao aparecimento de lesões inflamatórias acneicas: encontra-se, por exemplo, um maior número de polinucleares neutrófilos, mas também taxas mais elevadas de IL-8 no meio dos canais foliculares fortemente colonizados em relação a canais ligeiramente colonizados em sujeitos não acneicos. As taxas desses marcadores inflamatórios parecem correlacionados à carga bacteriana. Mas muitas questões permanecem em suspenso como na causa da colonização, ou um modo do desenrolar que chega à formação das lesões. Qualquer que seja o papel da colonização bacteriana, como fator de progressão da doença, é revelado. O tratamento atual para a acne menor a moderada ou inflamatória corresponde a uma aplicação tópica de ativos antibacterianos que agem contra a colonização notadamente por P. acnes em associação com anti-inflamatórios (Shalita A., J. Eur. Acad. Dermatol. Venereol. 2001; 15 :43).

Os tratamentos são iniciados geralmente após o aparecimento de um certo número de lesões inflamatórias acneicas.

Um dos problemas maiores da terapia antiacneica continua de encontrar um tratamento adaptado, isto é, proporcional à gravidade da acne, e iniciado desde que possível, isto é, desde a primo-colonização contra o desenvolvimento de lesões acneicas inflamatórias.

Os inventores descobriram assim, de maneira surpreendente, que os ésteres de alcano diol e do ácido graxo poli-insaturado, e mais particularmente de ômegas 3 ou 6, permitia ter uma ação antibacteriana e anti-inflamatória desde a primo colonização por P. acnes no canal folicular, essa ação sendo, por outro lado, proporcional à colonização.

Com efeito, apareceu que os ésteres de alcano diol e de AGPI são reconhecidos e clivados especificamente pela lipase bacteriana (P. ac- nes), permitindo assim, por divagem da ligação éster, a liberação de dois ativos nas atividades complementares, a saber o diol antibacteriano, capaz de lutar contra a colonização por P. acnes e o AGPI anti-inflamatório, que bloqueia o recrutamento dos neutrófilos e assim a cascata inflamatória característica da acne. A liberação desses dois ativos induz, portanto, uma resposta adaptada, isto é, proporcional à colonização por P. acnes, desde a primo colonização e assim bloqueia a evolução dessa patologia, a qual leva ao aparecimento de lesões acneicas inflamatórias. Por outro lado, a bactéria P. acnes estando presente em sujeitos que não apresentam lesões acneicas, esses ésteres permitiríam também prevenir o agravamento da lesão acneica, agindo desde a formação do comedon e inibindo a cascata inflamatória característica da acne.

Esses ésteres já foram descritos na literatura (WO 98/18751; Sugiura et al., J. Biol. Chem. 1999, 274(5), 2794-2801), mas não por suas propriedades biológicas.

Assim, a presente invenção tem por objeto um composto de fórmula geral (I) a seguir: para a qual: - n representa um número inteiro compreendido entre 1 e 15, de preferência, entre 1 e 10; - m representa 0,1,2 ou 3, e - R representa a cadeia hidrocarbonada de um ácido graxo poli-insaturado escolhido dentre os ômegas 3 e os ômegas 6.

Por "ácido graxo poli-insaturado", entende-se, no sentido da presente invenção, um ácido carboxílico (R1C02H) linear, compreendendo de 10 a 28, de preferência, de 16 a 24, e ainda, de preferência, de 18 a 22, átomos de carbono (incluindo o átomo de carbono da função ácido carboxílico) e compreendendo pelo menos duas, de preferência, dois a seis, duplas ligações C=C, essas duplas ligações tendo, de preferência, uma configuração cis.

Por "cadeia hidrocarbonada de um ácido graxo poli-insaturado" entende-se no sentido da presente invenção, a cadeia hidrocarbonada (R1) ligada à função ácida do ácido graxo poli-insaturado (RICO2H). R1 representa, portanto, uma cadeia hidrocarbonada linear, compreendendo de 9 a 27, de preferência, de 15 a 23, e ainda, de preferência, de 17 a 21, átomos de carbono e compreendendo pelo menos dois, de preferência, 2 a 6, duplas ligações C=C, essas duplas ligações tendo, de preferência, uma configuração cis. Assim, no caso do ácido linoleico com a seguinte fórmula: a cadeia hidrocarbonada considerada é a seguinte cadeia: Por "ômega 3", entende-se, no sentido da presente invenção, um ácido graxo poli-insaturado, tal como definido acima, para 0 qual a primeira dupla ligação da cadeia corresponde à terceira ligação carbono-carbono, contando a partir da extremidade oposta à função ácido carboxílico, conforme está ilustrado no caso do ácido α-linoleico abaixo: Os ômegas 3 podem ser, em particular, 0 ácido α-linoleico, 0 ácido estearidônico, 0 ácido eicosatrienoico, 0 ácido eicosatetraenoico, 0 ácido eicosapentaenoico, 0 ácido docosapentaenoico, 0 ácido docosa-hexaenoico, 0 ácido tetracosapentaenoico e 0 ácido tetracosa-hexaenoico, e, de preferência, trata-se do ácido α-linolênico ou 0 ácido estearidônico, que possui propriedades anti-inflamatórias.

Por "ômega 6", entende-se, no sentido da presente invenção, um ácido graxo poli-insaturado, tal como definido acima, para 0 qual a primeira dupla ligação da cadeia corresponde à sexta ligação carbono-carbono, contando a partir da extremidade oposta à função ácido carboxílico, conforme é ilustrado no caso do ácido linoleico abaixo: Os ômegas 6 podem ser em particular o ácido linoleico, o ácido gama-linolênico, o ácido eicosadienoico, o ácido-di-homo-gama-linolênico, o ácido araquidônico, o ácido docosatetraenoico, o ácido docosapentaenoico, o ácido adrênico e o ácido calêndico, e, de preferência, trata-se do ácido linoleico que possui propriedades sebo - reguladoras.

Em particular, n poderá representar 1, 2, 3, 4 ou 5, e, de preferência, 5.

Vantajosamente, n > 3 e, de preferência, n > 5.

De maneira vantajosa, m vale 0 ou 1.

Vantajosamente, n + m > 3 e, de preferência, n + m > 5.

Vantajosamente, a cadeia hidrocarbonada provém de um ácido graxo poli-insaturado escolhido dentre o ácido α-linoleico, o ácido estearidô-nico, o ácido eicosatrienoico, o ácido eicosatetraenoico, o ácido eicosapen-taenoico, o ácido docosapentaenoico, o ácido docosa-hexaenoico, o ácido tetracosapentaenoico e o ácido tetracosa-hexaenoico, o ácido linoleico, o ácido gama-linolênico, o ácido eicosadienoico, o ácido-di-homo-gama-linolênico, o ácido araquidônico, o ácido docosatetraenoico, o ácido docosapentaenoico, o ácido adrênico e o ácido calêndico. De preferência, o ácido graxo poli-insaturado será escolhido dentre o ácido α-linolênico, o ácido es-tearidônico e o ácido linoleico, e ainda, de preferência, dentre o ácido a-linolênico e o ácido linoleico.

Em particular, os compostos da invenção podem ser escolhidos dentre as seguintes moléculas: 1 2 3 4 5 A presente invenção tem também por objeto um composto de fórmula (I), tal como definido acima para sua utilização como medicamento, notadamente destinado ao tratamento da acne ou da dermatite seborreica. A presente invenção refere-se também à utilização de um composto de fórmula geral (I), tal como definido acima, para a fabricação de um medicamento, destinado notadamente ao tratamento da acne ou da dermite seborreica. A presente invenção refere-se também a um método de tratamento da acne ou da dermite seborreica que compreende a administração de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral (I), tal como definido acima a uma pessoa que nem necessidade dele. A presente invenção tem também por objeto uma composição farmacêutica ou cosmética, compreendendo pelo menos um composto de fórmula (I), tal como definido acima em associação com pelo menos um ex-cipiente farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável, adaptado notadamente a uma administração percutânea.

Na presente invenção, entende-se designar por "farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável", o que é útil no preparo de uma composição farmacêutica ou cosmética, que é geralmente seguro, não tóxico e nem biologicamente, nem em outros termos, não desejável, e que é aceitável para uma utilização terapêutica ou cosmética, notadamente por aplicação tópica.

As composições farmacêuticas ou cosméticas, de acordo com a invenção, poderão se apresentar sob as formas que são habitualmente conhecidas para uma administração tópica, isto é, notadamente as loções, as espumas, os géis, as dispersões, as emulsões, os shampoos, os sprays, os soros, as máscaras, os leites corporais ou os cremes, com excipientes que permitam notadamente uma penetração cutânea, a fim de melhorar as propriedades e a acessibilidade do princípio ativo. Vantajosamente, tratar-se-á de um creme.

Essas composições contêm geralmente, além do(s) composto^), segundo a presente invenção, um meio fisiologicamente aceitável, em geral à base de água ou de solvente, por exemplo, alcoóis, éteres ou glicóis. Elas podem também conter agentes tensoativos, agentes complexantes, conservantes, agentes estabilizantes, emulsionantes, espessantes, gelifican-tes, umectantes, emolientes, oligo-elementos, óleos à base de essência, perfumes, corantes, agentes matificantes, filtros químicos ou minerais, agentes hidratantes ou águas termais, etc.

Essas composições podem, além disso, conter outros princípios ativos levando a um efeito complementar ou eventualmente sinérgico.

Vantajosamente, as composições, de acordo com a presente invenção, compreenderão de 0,01% a 10% em peso, de preferência, de 0,1% a 1%, do(s) composto(s) de fórmula (I) em relação ao peso total da composição.

Essas composições são mais particularmente destinadas ao tratamento da acne ou da dermite seborreica. A presente invenção tem também por objeto um método de tratamento cosmético da acne ou da dermite seborreica, compreendendo a aplicação sobre a pele de uma composição cosmética, tal como definida acima. A presente invenção tem também por objeto um processo de preparo de um composto de fórmula (I), tal como definido acima por acoplamento de um ácido graxo poli-insaturado, escolhido dentre os ômegas 3 e os ômegas 6, função ácido carboxílico se acha sob a forma livre ou ativada, e de um diol de fórmula (II) a seguir;

Para a qual n representa um número inteiro compreendido entre 1 e 15, e de preferência entre 1 e 10 e m representa 0,1, 2 ou 3.

Em particular, n poderá representar 1, 2, 3, 4 ou 5 e, de preferência, 5. Vantajosamente, n > 3 e, de preferência, n > 5.

De maneira vantajosa, m vale 0 ou 1.

Vantajosamente, n + m > 3 e, de preferência, n + m > 5.

Por "forma livre", entende-se, no sentido da presente invenção, que a função ácido carboxílico do AGPI não é protegida e representa, portanto, um grupamento CO2H. O AGPI é, portanto, sob uma forma RICO2H, tal como definida anteriormente.

Por "forma ativada", entende-se, no sentido da presente invenção, uma função ácido carboxílico modificada, de maneira a torná-la mais ativa face os nucleófilos. Essas formas ativadas são bem conhecidas do técnico e podem ser, em particular, um cloreto de ácido (COCI). O AGPI ativado sob a forma de um cloreto de ácido responde então à fórmula R1COCI.

De acordo com um primeiro modo de realização particular da invenção, 0 ácido graxo poli-insaturado é utilizado sob sua forma de ácido livre. Nesse caso, a reação de acoplamento será realizada em presença de um agente de acoplamento, tal como di-isopropil carbodi-imida (DIC), 0 dici-clo-hexil carbodi-imida (DCC), 0 clodridrato de 1-(3-dimetil amino propil)-3-etil carbodi-imida (EDC), 0 carbonil di-imidazol (DCI), 0 2-H-benzotriazol-1-il)- 1,1,3,3-tetra metil urânio hexa-fluoro fosfato (HBTU), 0 2-(1H-benzo tria-zol -1-il)-1,1,3,3-tetra metil urânio tetra fluoro borato (TBTU) ou 0 0-(7-azo benzo triazol-1-il)-1,1,3,3-tetra metil urânio hexa-fluoro fosfato (HATU), eventualmente associado a um auxiliar de acoplamento, tal como 0 N-hidróxi succinimida (NHS), 0 N-hidróxi benzo triazol (HOBt), 0 3,4-di-hidro-3-hidróxi-4-oxo-1,2,3-benzo triazol (HOOBt), 0 1-hidróxi-7-aza benzo triazol (HOAt), a dimetil amino piridina (DMAP) ou 0 N-hidróxi - sulfo-succinimida (sulfo NHS).

Vantajosamente, o acoplamento será realizado em presença de um carbodi-imida (notadamente DIC, DCC ou EDC) e de dimetil amino piridina. De preferência, o acoplamento será realizado em presença de cloridrato de 1-(3-dimetil amino propil)-3-etil carbodi-imida ou de di-isopropil carbodi-imida e de dimetil amino piridina.

De acordo com um segundo modo de realização particular da invenção, o ácido graxo poli-insaturado é utilizado sob sua forma ativada, e mais particularmente sob a forma de um cloreto de ácido. Nesse caso, a reação de acoplamento será vantajosamente realizada em presença de piridina e de dimetil amino piridina. A presente invenção será melhor compreendida com base nos exemplos não limitativos que se seguem. DESCRIÇÃO DAS FIGURAS: Figura 1: Colocação em evidência da lipase P. acnes (33 kDa) nas lesões acneicas inflamatórias (M corresponde a marcadores de tamanho; A corresponde às lesões acneicas inflamatórias; B corresponde aos comedons fora de inflamação).

Figura 2: Estudo da hidrólise dos ésteres da invenção pela lipase recombinante do P. acnes, após duas horas de incubação. A coluna cinza claro representa os resultados obtidos com o al-fa-linolenato de 3-hidróxi butila, a coluna cinza escuro representa os resultados obtidos com o alfa-linolenato de 2-hidróxi pentila, a coluna escura representa os resultados obtidos com o alfa-linolenato de 2-hidróxi octila, a coluna branca representa os resultados obtidos com o alfa-linolenato de 3-hidróxi nonila e a coluna hachuriada representa os resultados obtidos com o trilino-lenato de glicerila.

Figura 3: Atividade dos AGPI sobre a liberação de interleucina 8 pelos queratinócitos humanos HaCaT estimulados por PMA/A23187 (agentes pró-inflamatórias).

Figuras 4A, 4B e 4C: efeitos dos AGPI sobre a produção de ei-cosanóides (metabólitos ciclo oxigenados (CICLO); metabólitos lipoxigena-dos (LIPÓX); ácido araquidônico (AA)) no decorrer de uma resposta inflama- tória induzida por PMA/A23187.

As colunas brancas representam a prova (isto é, um meio rea-cional sem AGPI); as colunas cinza claro correspondem à atividade do AGPI a 2,3 pg/mL; as colunas cinza escuro correspondem à atividade do AGPI a 11,5 pg/mL e as colunas escuras correspondem à atividade do AGPI a 23 pg/mL. A figura 4A corresponde ao ácido α-linolênico, a figura 4B corresponde ao ácido estearidônico e a figura 4C corresponde ao ácido linolei-co. ABREVIATURAS UTILIZADAS: APCI ionização química com pressão atmosférica CMI concentração mínima inibidora DPM desintegração por minuto ESI ionização por eletrospray HPLC cromatografia líquida de autodesempenho RMN ressonância magnética nuclear Rf relação ao fronte SM espectro de massa UFC unidade que forma colônia Exemplo 1: Síntese dos compostos da invenção 1.1 Processo geral A: a partir do ácido graxo insaturado O ácido graxo insaturado é colocado em solução em 20 ml de CH2 Cl2 anidro sob circulação de N2. Um carbodi-imida (agente de acoplamento) (1,1 equivalente) e a dimetil amino piridina (0,5 equivalente) são em seguida acrescentados diretamente. Após agitação do meio à temperatura ambiente durante 5-10 minutos, 0 diol (5 equivalente) é acrescentado. O meio é agitado vigorosamente durante 18 horas, sob N2, ao abrigo da luz. A fase orgânica é então extraída com CH2 Cl2, depois levada com solução saturada de NaCI, secada sobre MgS04, filtrada e concentrada. O produto bruto é um óleo amarelo que é purificado por cromatografia aberta, sílica-gel (0:22 x 3,5 cm), acondicionamento CHCI3.

Os três produtos seguintes foram preparados segundo 0 proces- so A com o di-isopropil carbodi-imida como agente de acoplamento. (9Z,12Z,15Z)-Octadeca-9,12.15-trienoato de 3-hidróxi butila (C22H38O3) (α-linolenato de 3-hidróxi butila) Condições de purificação: gradiente de purificação: CHCI3 / A-cOEt: 95/5, depois CHCI3 / AcOEt: 9/1 Óleo translúcido (rendimento: 69%) Rf(CHCI3/AcOEt: 9/1) = 0,5 RMN (1H, CDCI3) δ (ppm): 0,98 (t, 3H, CH3{a)); 1,22 (d, 3H, CH3 (v)). 1,31 (m, 8H, CH2(0, n, m, [})i 1,6 (m, 2H, CH2(p)), 1,8 (m, 2H, CH2(t)), 2,1 (m, 4H, CH2(2k,b)); 2,3 (t, 2H, CH2{q)); 2,8 (m, 4H, CH2(h,e)); 3,85 (m, 1H, CH (u)); 4,1-4,3 (m, 2H, CH2 (s)); 5,4 (m, 6H, CH M,f,g,i,j)), RMN (13C, CDCI3) δ (ppm): 14,24 (CH3 (a)); 20,46 (CH2 (b)); 23,42 (CH3 (v)); 25,01 (CH2 (P)); 25,5 (CH2 (e)); 25,59 (CH2 (h)); 27,16 (CH2 (k)); 29,06 (CH2 (0, n)); 29,07 (CH2 (m)); 29,53 (CH2 (l)); 34,3 (CH2 (q)); 38,1 (CH2 (t)); 61,51 (CH2 (S)); 64,89 (CH (u)); 127,08 (CH (c)); 127,6 (CH ω); 128,22 (CH (f)); 128,26 (CH (g)); 130,22 (CH (i)); 131,93 (CH (d)); 174,2 (C=0 (r)), SM: ESI+ [M+H]+=351,2 (100%); [M+Na]+=373,3 (48%) APCI + [M+Hf = 351,2 (M calculado = 350,2) (9Z,12Z,15Z)-Octadeca-9,12,15-trienoato de 2-hidróxi pentila (C23H4o03) (α-linolenato de 2-hidróxi pentila) Condições de purificação: CHCI3 / AcOEt: 98/2 Óleo translúcido (rendimento: 45%) Rf(CHCI3/AcOEt: 97/3)=0,58 RMN (1H, CDCI3) δ (ppm): 1 (m, 6H, CH3 (w, a)); 1,25 (m, 10H, CH2 (o, n,m, I,v)); 1,5 (m, 4H, CH2 (p,u)); 1,65 (m, 4H, CH2 (b,k)); 2,1 (m, 2H, CH2 {e)); 2,4 (t, 2H, CH2 (q)); 2,8 (m, 2H, CH2 (h)); 3,9 (m, 1H, CH (t)); 4,1-4,3 (m, 2H, CH2 (s)); 5,4(m, 6H, CH (d.d.f.g.i.jj), RMN (13C, CDCI3) δ (ppm): 14,2 (CH3 (a, w)); 18,6 (CH2 (v, b)); 25,5 (CH2 (P)); 25,5 (CH2 (P)); 27,16 (CH2 (e)); 28,9 (CH2 (h)); 29,1 (CH2 (k)); 29,4 (CH2 (o, „,); 29,5 (CH2 (m)); 34,17 (CH2 (q)); 35,41 (CH2 (u)); 68,53 (CH (t)); 69,76 (CH2 {s)); 128,22 (CH (c)); 129,58 (CH ü)); 130,22 (CH (f) CH (g)); 130,81 (CH 0); 131,93 (CH (d)); 174,05 (C=0(r)), SM: APCI + [M+Hf = 365,1 (M calculado = 364,3) (9Z.12Z,15Z)-Octadeca-9,12,15-trienoato de 3-hidróxi nonila (C27H4803) (α-linolenato de 3-hidróxi nonila) Condições de purificação: CHCI3 / AcOEt: 96/4 Óleo translúcido (rendimento: 73%) Rf (CHCb / AcOEt: 97/3) = 0,64 RMN (1H, CDCI3) δ (ppm): 0,95 (m, 3H, CH3 (aa)); 1 (m, 3H, CH3 (a)), 1,4 (m, 16H, CH2 (o, n, m, i, w,x,y, z))i 1 >5 (m, 2H, CH2 (vj); 1,6-1,8 (m, 4H, CH2 {p, t)); 2 (m, 4H, CH2 (k, b)); 2,3 (t, 2H, CH2 (q)); 2,8 (m, 4H, CH2 (h, e)); 3,7 (m, 1H, CH (u)); 4,1-4,3 (m, 2H, CH2 (s)); 5,4 (m, 6H, CH (d.d.f,a. í.d). RMN (13C, CDCIs) δ (ppm): 14 (CH3 (a, aa)); 20,4 (CH2 (b)); 22,5 (CH2 (z)); 25,09 (CH2 (P)); 25,26 (CH2 (w)); 25,58 (CH2 (e, h)); 27,17 (CH2 {k)); 29,06-29,3 (CH2 (x, 0, n, m, 0); 31,7 (CH2 w); 34,5 (CH2 (q)); 37,45 (CH2 (t)); 37,58 (CH2M; 61,59 (CH2 (s)); 68,72 (CH (u)); 127,08 (CH (c)); 127,71 (CH 0)); 128,21 (CH (fj); 128,26 (CH (g)); 130,22 (CH (i)); 131,94 (CH (d)); 174,9 (0=0 (r)), SM: ESI+ [M+H]+=421,1 (100%); [M+Na]+=443,1 (92%) O produto seguinte foi preparado segundo o processo A com o cloridrato de 1-(3-dimetil amino propil)-3-etil carbodi-imida como agente de acoplamento. (9Z,12Z,15Z)-Octadeca-9,12,15-trienoato de 2-hidróxi octila (C26H4603) (α-linolenato de 2-hidróxi octila) Condições de purificação; CHCI3 / AcOEt: 98/2 Óleo translúcido (rendimento: 37%) Rf (CHCb / AcOEt: 98/2) = 0,72 RMN (1H, CDCI3) δ (ppm): 0,88 (m, 3H, CH3 {z)); 0,97 (t, 3H, CH3 (a))> 1,31 (m, 16H, CH2 (0, n, m, i, v, w,x, y)), 1,47 (m, 2H, CH2 (U)); 1,65 (m, 2H, CH2 (p,); 2,02 (m, 4H, CH2 (b, k)); 2,4 (t, 2H, CH2 (q>); 2,8 (m, 4H, CH2 (e, h)); 3,9 (m, 1H, CH (t)); 4,1-4,3 (m, 2H, CH2(s)); 5,4 (m, 6H, CH m.uí.í)), RMN (13C, CDCI3) δ (ppm): 14,2 (CH3 (a, w>); 18,6 (CH2 (v, b)); 22,7 (CH2 (y)); 25,5 (CH2 (p)); 25,5 (CH2 (p)); 27,16 (CH2 (e)); 28,9 (CH2 (h)); 29,1 (CH2 (k)); 29,4 (CH2 (0, n)); 29,5 (CH2 (m)); 29,9 (CH2 {w)); 31,7 (CH2 w); 34,17 (CH2 (q)); 35,41 (CH2 (u)); 68,53 (CH (t)); 69,76 (CH2 (s)); 128,22 (CH {c)); 129,58 (CH (jj); 130,22 (CH (f) CH (g)); 130,81 (CH (i)); 131,93 (CH (d)); 174,05 (C=0(r)), SM: APCI+ [M+H]+=407,3 (calculated M=406,34) 1.2 Processo geral B: a partir de um cloreto de ácido qraxo poli- insaturado. 0 cloreto de linoleíla (6,7.10-3 mol) e a dimetil amino piridina (DMAP) (0,1 equivalente) são acrescentados, sob circulação de nitrogênio, a uma solução de diol (5 equivalente) na piridina (20 ml). Após agitação vigorosa durante 18 horas sob N2, à temperatura ambiente e ao abrigo da luz, o meio reacional é levado a seco. A fase orgânica é em seguida extraída com AcOEt, depois lavada com H20 e NH/CI', secada sobre MgS04, filtrada e concentrada. O produto bruto é um óleo marrom que é purificado por croma-tografia aberta, silica-gel (0:22 x 3,5 cm), acondicionamento CHCI3. O produto seguinte foi preparado segundo o processo B com o pentileno glicol como diol. (9Z,12Z)-Qctadeca-9,12- dienoato de 2-hidróxi pentila (C23H42O3) (linolenato de 2-hidróxi pentila) Condições de purificação: CHCI3 / AcOEt: 98/2 Óleo translúcido Rf (CHCI3 / AcOEt: 98/2) = 0,54 RMN (1H, CDCI3) δ (ppm): 0,9 (m, 6H, CH3 (a, w)) 1,3 (m, 16H, CH2 (o, n.m.i.b.c.d.M)); 1,45 (m, 2H, CH2 (u)); 1,65 (m, 2H, CH2 (p)); 2 (m, 4H, CH2 (k.e)); 2,3 (t, 2H, CH2 (q)); 2,8 (m, 2H, CH2 (h)); 3,8 (m, 1H, CH {t)); 4,14,3 (m, 2H, CH2(S)); 5,4 (m, 4H, CH (f,gijij)), RMN (13C, CDCI3) δ (ppm): 14,2 (CH3 (a,w)); 18,6 (CH2 (v)); 22,6 (CH2 {bj); 25 (CH2 (p)); 25,6 (CH2 (h)); 27,2 (CH2 (e, h)); 29 (CH2 (0)); 29,1 (CH2 (nj); 29,3 (CH2 (d)); 29,4 (CH2 (m)); 29,6 (CH2 („); 31,4 (CH2 (c)); 34,1 (CH2 {q)); 36,2 (CH2 (u>); 69 (CH2 (s)); 70 (CH (t)); 127,78 (CH (g)); 127,91 (CH (0); 129,94 (CH ¢0):130,22 (CH ω); 174,05 (C=0 (r)), SM: ESI+ [M+H]+=367,3 (100%); [M+Na]+=389,3 (80%) Exemplo 2: Composição, de acordo com a invenção.

Uma formulação, de acordo com a invenção, sob a forma de creme, tem a seguinte composição (as quantidades são dadas em percentagens mássicas em relação ao peso total da composição):_________________ *EDTA = ácido etileno-diamina-tetra-acético Exemplo 3: Resultados dos testes biológicos 3.1 Estudo da ação da lipase P. acnes sobre os compostos da invenção.

Em uma primeira etapa, foi demonstrado por western blot, que a lipase do P. acnes é muito induzida nas lesões inflamatórias de sujeitos ac-neicos comparativamente com retiradas feitas nos indivíduos sadios (ver figura 1).

Em uma segunda etapa, procede-se ao estudo da ação da lipa- se recombinante do P. acnes sobre os compostos da invenção, conforme descrito abaixo. A reação enzimática foi realizada, incubando-se o substrato com concentração desejada (no caso, 500 μΜ) no tampão TRIS (deixado à temperatura ambiente uma antes do começo dos testes), depois iniciada por adição da enzima e incubação a 37°C. Os testes foram realizados em frascos em vidro âmbar de 2 ml. Um controle é realizado, não se colocando enzima para seguir a hidrólise espontânea eventual do substrato no tampão. Uma tomada de teste de 10 μΙ é realizada a cada tempo desejado no decorrer da cinética, depois congelado para parar a reação. O ácido linolênico liberado é então derivatizado com o Antri-ldiazometano (ADAM) que forma um complexo fluorescente com o ácido graxo. O produto formado é então separado por HPLC, depois quantificado com o auxílio de uma faixa de aferição de ácido linolênico comercial derivatizado nas mesmas condições.

Conforme mostra a figura 2, pudemos mostrar que os compostos da invenção dão origem a uma reação de hidrólise em presença de P. acnes, já que se observa a formação do ácido a-linoiênico.

Assim, a hidrólise dos compostos da invenção P. acnes permite liberar o diol, por um lado, e o AGPI, por outro. A expressão da lipase é, portanto, uma condição necessária para observar a divagem dos compostos da invenção, e, portanto, para obter um efeito terapêutico. Por outro lado, a lipase P. acnes estando essencialmente presente nos sujeitos acneicos, conforme mostra a figura 1, os compostos da invenção deveríam permitir uma resposta adaptada para cada pessoa. 3.2 Estudo da atividade antibacteriana dos dióis obtidos após hidrólise dos compostos da invenção.

Esses dióis respondem à seguinte fórmula geral (II): com n representando um número inteiro compreendido entre 0 e 15 e m representando 0,1, 2 ou 3.

Testes foram realizados com 8 cepas microbianas, utilizando o método de diluição descrito abaixo.

As CMI são determinadas por micrométodo em meio líquido. As diluições sucessivas de razão 2 dos produtos testados no molho de cultura (Tripcase Soja) são realizadas em microplacas com 96% poços em um volume final de 0,1 ml. Os poços são inseminados com 0,01 ml das suspensões bacterianas tituladas a aproximadamente 107 UFC/ml. As microplacas são incubadas em condições ótimas de crescimento e a CMI é lida visualmente. A tabela 1 a seguir apresenta os resultados obtidos com diferentes dióis. As colunas "STASE" representam a atividade bacteriostática e as colunas "CIDIE" representam a atividade bactericida dos dióis (1% corres-3onde a uma concentração de 10 mg/ml).____________________________________^ Tabela 1 O efeito antibacteriano observado está em acordo com a literatura, a saber que a atividade está em relação com o comprimento de cadeia do diol (Frankenfeld JW, Mohan RR, Squibb RL. J. Agric Food Chem. 1975; 23 : 418-425). Assim, o nonano-diol 1,3 e o octano-diol 1,2 são bacteriostáti- cos e bactericidas (gram+, gram-, fúngicas) em uma faixa de concentração que vai de 6,25 a 0,78 mg.mr1. Deve ser observado que o derivado nonano aparece como aquele que apresenta a atividade a mais marcada para a cepa P. acnes com notadamente um efeito bacteriostático e bactericida encontrado, respectivamente a 1,56 mg.ml'1 e 3,12 mg.mr1. 3.3 Estudo cinético da atividade antibacteriana do octano diol 12- O estudo cinético da atividade antibacteriana do octano diol 1, 2 foi realizado, avaliando-se a letalidade das bactérias no decorrer do tempo por contagem das UFC (Unidades que Formam Colônia) residuais após contato da solução teste com a suspensão bacteriana.

As cepas bacterianas utilizadas são: Staphylococcus aureus ATCC6538 e Propionibacterium acnes ATCC6919. O meio de cultura utilizado para Staphylococcus aureus ATCC6538 é a Gelose Tripcase Soja, enquanto que o meio de cultura utilizado por Propionibacterium acnes ATCC6919 é a gelose de Schaedler. Soluções mães, contendo 1% e 0,5% de octano diol 1,2 são preparadas extemporaneamente em 1% de poli-sorbato 20 (qsp água PPI), depois ajustadas com pH 7 com uma solução de NaOH a 0,1N.

Um volume de 5 ml de cada uma das soluções, mas é insemina-do com 50 pl de suspensão bacteriana titulando aproximadamente 1,108UFC/ml.

Após cada tempo de contato (tempos de contatos testados : 5 min, 15 min, 30 min e 60 min), uma contagem das bactérias residuais é feito por tomada de uma alíquota de 1 ml neutralizada por 9 ml de Molho Tripcase Soja e 10% de poli-sorbato 80. A contagem é realizada por inclusão de 1 ml da mistura neutralizada e de 4 diluições seriadas a 1/10 nas geloses de cultura correspondentes.

As geloses são incubadas em 36°C +/- 1°C em atmosfera aeró-bica para S. aureus e anaeróbica para P. acnes (Generbag Anaer, Biomé-rieux) durante 72 horas, depois as UFC são contadas. A tabela 2 a seguir apresenta os resultados obtidos.________________________ Tabela 2 - com R significa "Redução". Trata-se da relação entre o número de bactérias inoculadas e o número de bactérias inoculadas e o número de bactérias residuais, após contato da solução teste com a suspensão bacteri-ana. A ação bactericida do octano diol foi examinada sobre duas espécies bacterianas (P. acnes, S. aureus) nas duas seguintes concentrações 0,5% e 1%. Com pH fisiológico e à concentração mais baixo (0,5%), uma diminuição superior a 99,9% da população notadamente do P. acnes é observada após um tempo de contato de uma hora. 3.4 Estudo da atividade anti-inflamatória dos AGPI obtidos após hidrólise dos compostos da invenção. O potencial anti-inflamatório dos AGPI foi testado sobre querati-nócitos humanos (HACAT) estimulados por PMA/A23187. Os resultados obtidos são apresentados nas figuras 3,4A, 4B e 4C.

As mudanças induzidas por esses AGPI são avaliadas sobre a produção dos eicosanóides e de uma citoquina inflamatória, a interleucina 8, no decorrer de um processo inflamatório acionado por PMA/A23187.

Estudo da secreção de IL8 (figura 3): As células HaCaT são incubados sobre placas 96 poços durante 24 horas em presença das AGPI, enxaguadas, depois estimuladas por PMA/A23187; o que flutua é recuperado ao cabo de seis horas de estimulação e o IL8 é quantificada em quite ELISA OptEIA™ comercializado por BD

Pharmingen.

Estudo do metabolismo do ácido araquidõnico (AA) (figuras 4A. 4B, 40: Os queratinócitos HaCaT foram incubados em placa 24 poços em presença de 1 pCi [3H]M durante 18 horas sob uma atmosfera de 5% C02. Para testar a capacidade dos AGPI de modular a resposta inflamatória dos queratinócitos, os HaCaT [3H] marcados são pré-tratados com os AGPI 24 horas, enxaguados, depois estimulados por 500 nM de PMA e 1 μΜ de A23187 durante 5 horas. O [3H]AA e os metabólitos relaxados pelos HaCat no meio de cultura são extraídos por cromatografia sobre colunas. O purificado é evaporado sob N2. O resíduo seco é retomado por metanol e depositado sobre placas de sílicas em camadas finas previamente ativadas a 100°C durante 1 hora. O solvente de migração é a fase orgânica da mistura acetato de etila / água / isooctano / ácido acético (110:100:50:20, v/v). O AA [3H] e os metabólitos (6-keto-ProstaGlandine Fia, 6k-PGFia; ProstaGlandine (PG) FaE2D2, Tromboxano (TX) B2, Leucotrienos (LT) B4, C4, D4) são identificados por um escâner BERTHOLD TLC.

Assim, a figura 3 mostra a atividade de certos AGPI sobre a liberação de interleucina 8 (IL-8) pelos queratinócitos humanos HaCaT estimulados por PMA/A23187. Um efeito inibidor sobre a secreção de IL-8 dos queratinócitos estimulados é claramente demonstrado para o ácido γ-linolênico e particularmente para o ácido a-linolênico.

Da mesma forma, a pré-incubação dos queratinócitos com um AGPI, tal como o ácido α-linolênico, o ácido estearidônico ou o ácido linolei-co, inibe significativamente a liberação de ácido araquidõnico e também aquelas dos metabólitos ciclo oxigenados e lipoxigenados da cascata inflamatória (figuras 4A, 4B e 4C).

Assim, o conjunto dos resultados obtidos confirma a atividade inflamatória dos ácidos graxos poli-insaturados ω-3 ou ω-6 e, em particular, do ácido a-linolênico.

Os compostos, de acordo com a invenção, são, portanto, úteis para o tratamento da acne. O esquema etiológico da dermite seborreica a- presentando similitudes com aquele da acne, os compostos da invenção são também potencialmente úteis para o tratamento da dermite seborreica. Com efeito, o microorganismo na origem da resposta inflamatória no âmbito dessa patologia, o Malassezia, secreta das lipases (DcAngelis YM et al. J. Invest Dermatol. 2007; 127; 2138-46) no nível do couro cabeludo que podem também ser aproveitadas para liberar os dois ativos, o alcano diol com propriedades antifúngicas e o AGPI, tal como o ácido α-linolênico com propriedades anti-inflamatórias. Além disso, certos ácidos graxos como o ácido linoleico são ativadores dos receptores nucleares PPARa, os quais exercem um efeito sebo-regulador marcado (Downie MM et al. BR J Dermatol. 2004; 151:766-75). Assim, os conjugados diol-ácido linoleico podem ser utilizados, em particular para limitar a seborreia em diversas indicações como a acne e a dermatite seborreica.

REIVINDICAÇÕES

Claims (14)

1, Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a seguinte fórmula geral (I): na qual: - n representa um número inteiro compreendido entre 1 e 15; - m representa 0, 1, 2 ou 3, e - R representa a cadeia hidrocarbonada de um ácido graxo poli-ínsaturado escolhido dentre os ômegas 3 e os ômegas 6.

2, Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que n é compreendido entre 1 e 10.

3, Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que n representa 1, 2, 3, 4 ou 5,

4, Composto de acordo qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que m representa 0 ou 1.

5, Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que o ácido graxo poli-insaturado é escolhido dentre o ácido α-linoleico, o ácido estearidônico, o ácido eicosatrienoico, o ácido eícosatetraenoíco, o ácido eicosapentaenoico, o ácido docosapentae-noico, o ácido docosa-hexaenoico, o ácido tetracosapentaenoico, o ácido tetracosa-hexaenoico, o ácido linoleico, o ácido gama-linolênico, o ácido ei-cosadienoico, o ácido-di-homo-gama-linolênico, o ácido araquidônico, o ácido docosatetraenoico, o ácido docosapentaenoico, o ácido adrênico e o ácido caléndico e de preferência, o ácido α-linolênico, o ácido estearidônico ou o ácido linoleico.

6, Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que é escolhido dentre as seguintes moléculas:

7. Composto de fórmula (I) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de ser para utilização como medicamento.

8. Composto de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o medicamento é destinado ao tratamento de acne ou da der-matite se borrei ca,

9. Composição farmacêutica ou cosmética, caracterizada pelo fato de que compreende pelo menos um composto de fórmula (I) como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em associação com pelo menos um excipiente farmaceuticamente ou cosmeticamente aceitável.

10. Composição farmacêutica ou cosmética de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que compreende 0,01 a 10% em peso, de preferência, 0,1% a 1% em peso, do(s) composto(s) de fórmula (I) em relação ao peso total da composição.

11. Processo de preparo de um composto de fórmula (I) como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é por acoplamento de um ácido graxo poli-ínsaturado escolhido dentre os ômegas 3 e os ômegas 6, cuja função ácido carboxílico se acha sob a forma livre ou ativada, e de um díol com a seguinte fórmula (II); na qual n representa um número inteiro compreendido entre 1 e 15, e, de preferência, entre 1 e 10, e m representa 0, 1,2 ou 3, e, de preferência, 0 ou 1.

12. Processo de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a reação de acoplamento é realizada a partir do ácido graxo poli-insaturado, cuja função ácido carboxílico se acha sob a forma livre, em presença de um agente de acoplamento escolhido no grupo constituído pela di-isopropil carbodi-imida, pela diciclo-hexil carbodi-imida, pelo clodridrato de 1 -(3-dimetil amino propil)-3-etil carbodi-imida, pelo carbonil di-imidazol, pelo hexafluoro fosfato de 2-H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil urônio, pelo tetrafluoroborato de 2-(1 H-benzotriazol -1-il)- 1,1,3,3-tetrametil urônio ou pelo hexafluorofosfato de 0-(7-azo benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil urônio, eventualmente associado a um auxiliar de acoplamento escolhido no grupo constituído pela N-hidróxi succinimida, pelo N-hidróxi benzotriazol, pelo 3,4-di-hidro-3-hidróxi-4-oxo-1,2,3-benzotriazol, pelo 1-hidróxi-7-aza benzotriazol, pela dimetil amino piridina ou pela N-hidróxi-sulfo-succinimida.

13. Processo de acordo com a reivindicação 11 ou 12, caracterizado pelo fato de que o agente de acoplamento e o cloridrato de 1-(3-dimetil amino propil)-3-etil carbodi-imida e o auxiliar de acoplamento é a dimetil amino piridina.

14. Processo de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a reação de acoplamento é realizada a partir do ácido graxo poli-insaturado, cuja função ácido carboxílico é ativada sob a forma de um cloreto de ácido, notadamente em presença de piridina e de dimetil amino piridina.