BRPI1005695B1 - Compostos, processo para a preparação de um composto, combinação de um composto, composição farmacêutica, usos de um composto, dispositivo e kit - Google Patents

Abstract

COMPOSTOS, PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE UM COMPOSTO, COMBINAÇÃO DE UM COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, USOS DE UM COMPOSTO, DISPOSITIVO E KIT. A presente invenção refere-se a inibidores da enzima fosfodiesterase 4 (PDE4). Mais particularmente, a presente invenção refere-se a compostos que são derivados de álcool 1-fenil-2- piridinil alquila, métodos de preparação desses compostos, composições compreendendo esses compostos, combinações e usos terapêuticos destes (I) em que n ser 0 ou 1; R1 e R2 poder ser os mesmos ou diferentes e são selecionados do grupo consistindo de: - C1-C6 alquila linear ou ramificado; - OR3 em que R3 é C1-C6 alquila opcionalmente substituído por um ou mais grupos C3-- C7 cicloalquila; e - HNSO2R4 em que R4 é C1-C4 alquila opcionalmente substituído por um ou mais átomos de halogênio ou com um grupo C1-C4 alquila, em que, no mínimo, um R1 e R2 é HNSO2R4. As outras variáveis são definidas nas reivindicações.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001]. A presente invenção refere-se a inibidores da enzima fosfodiesterase 4 (PDE4). Mais particularmente, a invenção relaciona-se a derivados de álcool 1-fenil-2-piridinil alquila, os processos para a preparação destes, composições compreendendo-os, combinações e usos terapêuticos destes.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002]. A obstrução das vias aéreas caracteriza diversas doenças respiratórias severas, incluindo asma e doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC). Eventos que levam à obstrução das vias aéreas incluem edema das paredes das vias aéreas, produção de muco elevada e inflamação.

[003]. Medicamentos para tratamento de doença respiratórias, como asma e DPOC, são atualmente administrados através de inalação. Uma das vantagens da via inalatória sobre a via sistêmica é a possibilidade de distribuição do medicamento diretamente no local de ação, evitando quaisquer efeitos colaterais sistêmicos, dessa forma, resultando em uma resposta clínica mais rápida e uma razão terapêutica maior.

[004]. Corticosteróides inalados são a terapia de manutenção atual de escolha para asma e juntamente com β2-agonistas broncodilatadores para alívio de sintoma agudo, eles formam o suporte principal da terapia atual para a doença. A administração atual da DPOC é amplamente sintomática através de terapia broncodilatadora com anticolinérgicos inalados e agonistas de β2-adrenoceptor inalados. Entretanto, corticosteróides não reduzem a resposta inflamatória na DPOC como eles fazem na asma.

[005]. Outra classe de agentes terapêuticos que estão sob investigação em vista de seus efeitos anti-inflamatórios para o tratamento de doenças respiratórias inflamatórias, como asma e DPOC, é representada pelos inibidores das enzimas fosfodiesterase (PDEs), em particular, do tipo fosfodiesterase 4 (denominada, doravante, PDE4).

[006]. Vários compostos que agem como inibidores da PDE4 foram divulgados. Entretanto, a utilidade dos diversos inibidores da PDE4 da primeira geração, como rolipram e piclamilast, foi limitada devido a seus efeitos colaterais indesejáveis, como náusea e êmese, devido a sua ação na PDE4 no sistema nervoso central e secreção de ácido gástrico devido à ação na PDE4 nas células parietais no intestino.

[007]. A causa dos referidos efeitos colaterais foi amplamente investigada.

[008]. Revelou-se que a PDE4 existe em duas formas distintas, representando diferentes conformações, que foram criadas como local de ligação de rolipram de alfa afinidade ou HPDE4, especialmente presentes no sistema nervoso central e em células parietais e local de ligação de rolipram de baixa afinidade ou LPDE4 (Jacobitz, S et al Mol. Pharmacol, 1996, 50, 891-899), é que encontrado nas células imunes e inflamatórias. Ao mesmo tempo em que ambas as formas parecem exibir atividade catalítica, elas diferem com relação a sua sensibilidade aos inibidores. Em particular, compostos com afinidade maior para LPDE4 parecem menos propensos a induzir efeitos colaterais, como náusea, êmese e secreção gástrica elevada.

[009]. O esforço de acertar a LPDE4 resultou em uma leve melhora na seletividade para os inibidores de PDE4 de segunda geração, como cilomilast e roflumilast. Entretanto, mesmo esses compostos não são fornecidos com uma boa seletividade relacionada à LPDE4.

[0010]. Compostos com atividade de inibição de LPDE4 seletiva são descritos na publicação internacional WO2009/018909.

[0011]. Álcool 1-fenil-2-piridinil alquila e seu uso como inibidores de PDE4 são também descritos na publicação WO2008/006509.

[0012]. A presente invenção descreve um conjunto de novos inibidores de PDE4 potentes tendo excelente seletividade de LPDE4.

[0013]. De forma surpreendente, revelou-se que a presença de substituintes sulfonamido no resíduo de benzoato melhora a potência.

[0014]. Além disso, revelou-se, de forma surpreendente, que os enantiômeros (-) dos derivados de sulfonilamido da invenção são mais potentes do que os enantiômeros (+) e racematos correspondentes.

[0015]. Revelou-se agora que um efeito terapêutico inesperadamente benéfico, particularmente um efeito sinergístico, é obtido no tratamento de doenças inflamatórias ou obstrutivas do trato respiratório quando os compostos de fórmula (I) são usados em combinação com um β2-agonista de longa ação.

DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO

[0016]. A presente invenção refere-se a compostos de fórmula geral (I), agindo como inibidores da enzima fosfodiesterase 4 (PDE4), os processos para a preparação destes, composições compreendendo-os e usos terapêuticos destes (I) em que: n é 0 ou 1; R1 e R2 podem ser os mesmos ou diferentes e são selecionados do grupo consistindo de: - C1-C6 alquila linear ou ramificado, opcionalmente substituído por um ou mais átomos de halogênio; - OR3 em que R3 é C1-C6 alquila linear ou ramificado opcionalmente substituído por um ou mais átomos de halogênio ou grupos C3-- C7 cicloalquila; e - HNSO2R4 em que R4 é C1-C4 alquila linear ou ramificado opcionalmente substituído por um ou mais átomos de halogênio; em que, no mínimo, um de R1 e R2 é HNSO2R4.

[0017]. A presente invenção também abrange os hidratos, solvatos, complexos de adição farmaceuticamente aceitáveis sais inorgânicos ou orgânicos destes, por exemplo, sais de sódio, potássio e lisina.

[0018]. A presente invenção também refere-se a um processo para a preparação de compostos de fórmula (I), conforme relatado no Esquema 1, que compreende a reação de aldeído (1) com metildicloropiridina (2) para obter álcool racêmico (3), que é condensado com um ácido quiral, como (S)-naproxeno ou ácido (S)- acetilmandélico para obter respectivamente uma mistura diastereomérica (10) ou (5), que é separada em dois diastereoisômeros simples, respectivamente (11) e (13) ou (6) e (8) por cromatografia, cristalização ou outros métodos bem conhecidos, fornecendo após divisão, respectivamente, alcoóis enantioméricos (-) (12) e (+) (14) ou (+) (7) e (-) (9), que através de reação com um ácido benzóico adequado (15) fornecem compostos de fórmula geral (I).

[0019]. A presente invenção também refere-se a um processo para a preparação de compostos de fórmula (I), em que n é 0, conforme relatado no Esquema 1, que compreende a reação de álcool enantiomérico (+) (14) com um ácido benzóico (15).

[0020]. A presente invenção também refere-se a um processo para a preparação de compostos de fórmula (I), em que n é 1 , conforme relatado no Esquema 1, que compreende a oxidação de álcool enantiomérico (+) (14) através de um agente oxidante como ácido 3-cloroperbenzóico, ácido peracético ou peróxido de hidrogênio para obter o enantiômero (+) do álcool (7), que através de reação com um ácido benzóico de fórmula (15) fornece composto de fórmula (I), em que n é 1.

[0021]. A presente invenção também refere-se a um processo para a preparação de compostos de fórmula (I), em que n é 1, conforme relatado no Esquema 1, que compreende a oxidação de ésteres de fórmula (I), em que n é 0 através de um agente oxidante, como ácido 3-cloroperbenzóico, ácido peracético ou peróxido de hidrogênio.

[0022]. A presente invenção também se direciona ao COMPOSTO intermediário de fórmula geral (II) em que n é conforme definido acima e o átomo de carbono representado por um asterisco abaixo mostram uma configuração (S).

[0023]. A presente invenção também ensina composições farmacêuticas compreendendo um composto de fórmula (I) e um ou mais veículos e/ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[0024]. A presente invenção, em particular, descreve preparações farmacêuticas adequadas para administração por inalação.

[0025]. A presente invenção também trata de combinações de um composto de fórmula (I) com um segundo componente selecionado das classes de β2 agonistas de longa ação, antagonistas M3 e corticosteróides.

[0026]. A presente invenção também contempla combinações de um composto de fórmula (I) com um β2 agonista de longa ação, selecionado do grupo consistindo de carmoterol, GSK-642444, indacaterol, milveterol, arformoterol, formoterol, salbutamol, formoterol, levalbuterol, terbutalina, AZD-3199, BI-1744-CL, LAS-100977, bambuterol, isoproterenol, procaterol, clenbuterol, reproterol, fenoterol e ASF-1020.

[0027]. A presente invenção também versa combinações de um composto de fórmula (I) com um antagonista M3, selecionado do grupo consistindo de aclidínio, tiotrópio, ipratrópio e oxitrópio.

[0028]. A presente invenção também aborda combinações de um composto de fórmula (I) com um corticosteróide, selecionado do grupo consistindo de dexametasona, fluticasona, furoato de fluticasona, prednisolona, betametasona, budesonida, mometasona, furoato de mometasona, triancinolona acetonida, ciclesonida, TPI-1020, beclometasona, dipropionato de beclometasona, prednisona, deflazacort, hidrocortisona, QAE-397 e flunisolida.

[0029]. Em uma configuração preferida, a presente invenção fornece combinações de um composto de fórmula (I) com formoterol ou carmoterol.

[0030]. A presente invenção também fornece o uso de compostos de fórmula (I) como um medicamento.

[0031]. A presente invenção também refere-se a compostos de fórmula (I) para uso na prevenção ou tratamento de qualquer doença em que a atividade dos receptores de PDE4 é implicada e a inibição da atividade do receptor de PDE4 é desejada.

[0032]. Além disso, a presente invenção fornece um método para prevenção e/ou tratamento de qualquer doença em que a atividade dos receptores de PDE4 é implicada e a inibição da atividade do receptor de PDE4 é desejada, o referido método compreendendo a administração a um paciente em necessidade desse tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula geral (I).

[0033]. O uso e método acima descrito compreende um composto de fórmula (I) tanto sozinho como combinado com outros ingredientes ativos entre aqueles previamente reportados.

[0034]. As doenças supracitadas em que atividade dos receptores de PDE4 é implicada e a inibição da atividade do receptor de PDE4 é desejada, compreende doenças do trato respiratório, caracterizada pela obstrução das vias aéreas, como asma e DPOC.

[0035]. Em um aspecto adicional, a presente invenção refere-se ao uso de compostos de fórmula (I) para a inibição da atividade do receptor de PDE4 in vitro.

[0036]. A presente invenção também refere-se a um dispositivo que pode ser um inalador de pó seco de dose única ou múltipla, um inalador de dose medida e um nebulizador de névoa suave compreendendo um composto de fórmula (I).

[0037]. A presente invenção também refere-se a um kit compreendendo as composições farmacêuticas de compostos de fórmula (I) isolados ou em combinação com ou em mistura com um ou mais veículos e/ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis e um dispositivo que pode ser um inalador de pó seco de dose única ou múltipla, um inalador de dose medida ou um nebulizador de névoa suave.

DEFINIÇÕES

[0038]. O termo “átomos de halogênio”, conforme usado no presente relatório descritivo, inclui flúor, cloro, bromo e iodo, preferivelmente cloro.

[0039]. Conforme usada no presente relatório descritivo, a expressão “C1-Cx alquila linear ou ramificado” onde x é um inteiro maior de 1, tal como C1-C6 ou C1-C4 alquila, refere-se a grupos alquila de cadeia reta ou ramificada em que o número de átomos de carbono está na variação 1 a x (por exemplo, 1 a 6 ou 1 a 4). Grupos alquila particulares são metila, etila, n-propila, isopropila, t-butila, pentila, hexila e outros.

[0040]. Opcionalmente, nos referidos grupos, um ou mais átomos de hidrogênio pode ser substituído por átomos de halogênio, preferivelmente cloro ou fluor.

[0041]. Conforme usada no presente relatório descritivo, a expressão “C3-C7 cicloalquila”, refere-se aos grupos hidrocarboneto não-aromáticos contendo 3 a 7 átomos de carbono de anel. Exemplos incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclohexila e cicloheptila.

[0042]. Salvo indicação em contrário, quando referido a compostos quirais, o grau de pureza “substancialmente puro” no presente relatório descritivo significa, no mínimo, mais do que 97% quiralmente puro, preferivelmente, mais do que 99% e mais preferivelmente, mais do que 99,9%. FIGURA

[0043]. A figura mostra a existência de uma ação sinergística para uma configuração preferida da presente invenção.

[0044]. AO = Ovoalbumina

[0045]. C1 = Éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2- (3,5-dicloro-piridin-4-il)-etil de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4- metanosulfonilamino-benzóico

[0046]. CARM = carmoterol

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0047]. A presente invenção refere-se a compostos agindo como inibidores da enzima fosfodiesterase 4 (PDE4).

[0048]. Os referidos compostos inibem a conversão de nucleotídeos cíclicos, em particular, adenosina monofosfato cíclica (cAMP), em suas formas de 5’-mononucleotídeo inativas.

[0049]. Nas vias aéreas, as respostas fisiológicas a níveis intracelulares elevados de nucleotídeos cíclicos, em particular, de cAMP, levam à supressão da atividade das células imunes e pró- inflamatórias, como mastócitos, macrófagos, linfócitos T, eosinófilos e neutrófilos, resultando em uma diminuição da liberação dos mediadores inflamatórios, que incluem citocinas, como IL-1, IL-3 e fator-alfa de necrose tumoral (TNF-α). Leva também a um relaxamento do músculo liso das vias aéreas e uma diminuição no edema.

[0050]. O local catalítico da PDE4 foi previamente identificado: compreende principalmente uma região hidrofóbica na qual duas subcavidades estão presentes, por exemplo, S0 e S1 e uma região hidrofílica contendo os íons de metal Zn2+e Mg2+, que, por sua vez, compreende a subcavidade S2 se espalhando ao redor dos íons de metal e uma subcavidade S3, que se ramifica aproximadamente 90° do meio da cavidade hidrofóbica.

[0051]. A maioria dos compostos conhecidos é fornecida com uma metade capaz de interagir com as subcavidades S0 e S1 da região hidrofóbica, como um grupo catecol substituído e com outra metade capaz de interagir indiretamente com os íons de metal da subcavidade S2, por exemplo, um heterociclo, como piridina ou pirrolodina.

[0052]. A presente invenção refere-se a compostos que podem manter as interações com as subcavidades S0 e S1 através da metade de catecol substituído e a interação com a região de íons de metal através do anel de piridina como outros inibidores de PDE4 conhecidos, mas diferenciando-se deles devido à presença de um grupo adicional capaz de estabelecer uma interação adicional com a subcavidade S3.

[0053]. Em particular, a presente invenção relaciona-se a compostos de fórmula geral (I), conforme definido anteriormente, incluindo os sais inorgânicos e orgânicos, hidratos, solvatos ou complexos de adição farmaceuticamente aceitáveis destes (I)

[0054]. Os grupos preferidos de compostos de fórmula (I) são aqueles em que: - R1 é HNSO2R4, R2 é OR3 e n é 0; - R1 é HNSO2R4, R2 é OR3 e n é 1; - R1 é HNSO2R4, em que R4 é metila, R2 é OR3, em que R3 é - iclopropilmetila e n é 0; - R1 é HNSO2R4, em que R4 é metila, R2 é OR3, em que R3 é ciclopropilmetila e n é 1; - R1 é C1-C6 alquila linear ou ramificado, R2 é HNSO2R4 e n é 0; - R1 é metila, R2 é HNSO2R4, em que R4 é metila e n é 0; - R1 é C1-C6 alquila linear ou ramificado, R2 é HNSO2R4 e n é 1; - R1 é metila, R2 é HNSO2R4, em que R4 é metila e n é 1; - R2 é C1-C6 alquila linear ou ramificado, R1 é HNSO2R4 e n é 0; - R2 é metila, R1 é HNSO2R4, em que R4 é metila e n é 0; - R2 é C1-C6 alquila linear ou ramificado, R1 é HNSO2R4 e n é 1; - R2 é metila, R1 é HNSO2R4, em que R4 é metila e n é 1; - R1 é OR3, R2 é HNSO2R4 e n é 0; - R1 é OR3, R2 é HNSO2R4 e n é 1; - R1 é OR3, em que R3 é ciclopropilmetila, R2 é HNSO2R4 e R4 é metila e n é 1; - R1 é OR3, R2 é HNSO2R4 e n é 1; - ambos R1 e R2 são HNSO2R4 e n é 0; - ambos R1 e R2 são HNSO2R4, em que R4 é metila e n é 0; - ambos R1 e R2 são HNSO2R4 e n é 1; - ambos R1 e R2 são HNSO2R4, em que R4 é metila e n é 1.

[0055]. Será evidente aos técnicos no assunto que compostos de fórmula geral (I) contem um centro assimétrico na posição de -CHO- e, portanto, existem como estereoisômeros ópticos.

[0056]. Portanto, além do racemato, a invenção também refere- se aos enantiômeros (-) ou (+), com configuração (S) no átomo de carbono representado com o asterisco abaixo.

[0057]. A presente invenção também refere-se a um composto intermediário de formula (II) em que átomo de carbono representado por um asterisco abaixo mostram uma configuração (S).

[0058]. Os compostos de fórmula (I) mostram uma atividade inibitória in vitro em direção da enzima PDE4 na variação nM e eles são dotados de uma boa atividade nos pulmões mediante administração intratraqueal em um modelo animal de DPOC.

[0059]. Eles também exibiram em alguns casos níveis pulmonares sustentados nos pulmões, sendo indetectáveis no plasma, que é um índice de uma ação sistêmica curta.

[0060]. De acordo com as configurações preferidas, a presente invenção fornece os compostos relatados abaixo:

[0061]. Os compostos acima descritos foram convenientemente identificados como enantiômeros (-), no entanto, apresentam a configuração (S) no átomo de carbono marcado com um asterisco abaixo. Assim, estes mesmos compostos podem ser também identificados de acordo com a seguinte tabela:

[0062]. Vantajosamente, os compostos da invenção são caracterizados pela seletividade em direção da LPDE4 maior do que aquela em direção da HPDE4, conforme obtida pela determinação de sua IC50.

[0063]. No caso de LPDE4, a IC50 é a concentração molar do composto de teste produzindo 50% de inibição de desaparecimento de cAMP, avaliado conforme descrito em Cortijo J et al Br J Pharmacol 1993, 108: 562-568, enquanto no caso de HPDE4, a IC50 é a concentração molar do composto de teste produzindo 50% de inibição da ligação de [H3] rolipram, avaliada conforme descrito em Duplantier AJ et al J Med Chem 1996; 39: 120-125.

[0064]. Preferivelmente, a razão de IC50 de HPDE4/LPDE4 para os compostos da invenção é maior de 5, preferivelmente maior de 10, mas preferivelmente maior de 20 e mais preferivelmente maior de 100.

[0065]. Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados convencionalmente de acordo com métodos conhecidos. Alguns dos processos que podem ser usados são descritos abaixo e relatados no Esquema 1.

Procedimento para a preparação de compostos de fórmula (I)

[0066]. De acordo com uma configuração particular da presente invenção, os compostos de fórmula (I) podem ser preparados, por exemplo, seguindo as vias sintéticas descritas no Esquema 1.

[0067]. Álcool racêmico (3) pode ser preparado através da reação de aldeído (1) com metildicloropiridina (2).

[0068]. Via 1 - Álcool racêmico (3) pode ser separado em enantiômeros (-) (12) e (+) (14) por métodos conhecidos, como através de reação da mistura racêmica com um auxiliar quiral adequado, dessa forma, obtendo uma mistura de diastereoisômeros. Esses diastereoisômeros podem ser separados por cristalização ou por cromatografia ou pelo uso de enzimas de acordo com métodos conhecidos. Subsequentemente, o auxiliar quiral pode ser removido para fornecer o álcool quiral desejado como um enantiômero único. Alternativamente, a mistura racêmica de álcool pode ser separada através de cromatografia com uma fase estacionária quiral, de acordo com métodos conhecidos (Ref: “Enantiomer Separation: Fundamentals and Practical Methods” F. Toda, Springer-Verlag 2004; “Drug Stereochemistry: Analytical Methods and Pharmacology”, Irving W. Wainer, CRC Press, 1993).

[0069]. Em particular, álcool racêmico (3) pode ser condensado com um ácido quiral, como (S)-naproxeno e a mistura diastereoisomérica obtida (10) pode ser separada em dois diastereoisômeros únicos (11) e (13) por cromatografia. Após a separação dos ésteres diastereoisoméricos únicos por hidrólise em um solvente aquoso ou por alcoólise em um solvente alcoólico, usando condições ácidas ou básicas, intermediários de álcool puro enantioméricos (-) (12) e (+) (14) podem ser obtidos.

[0070]. Via 2 - Racemato (4), obtido por oxidação de racemato (3), pode ser reagido com um ácido quiral, como ácido (S)- acetilmandélico, dessa forma, obtendo uma mistura de dois diastereoisômeros (5). Por trituração com éter dietílico e cristalização em um solvente, como isopropanol, etanol ou metanol, ou por separação cromatográfica, ésteres diastereoméricos únicos (6) e (8) podem ser obtidos.

[0071]. Após a separação dos ésteres diastereoméricos únicos por hidrólise em um solvente aquoso ou por alcoólise em um solvente alcoólico, usando condições ácidas ou básicas, intermediários de álcool puro enantioméricos (+) (7) e (-) (9) podem ser obtidos.

[0072]. Compostos de fórmula geral (I) em que n é 0 podem ser preparados por reação de álcool enantiomérico (+) (14) com um ácido benzóico não substituído ou mono-substituído ou polisubstituído (15) na presença de uma base forte adequada, como diisopropilamida de lítio (LDA), NaH ou dimetilaminopiridina (DMAP) e na presença de um agente condensador , como cloridrato de 1 -Etil-3-[3- dimetilaminopropil]carbodiimida (EDC) ou N-hidróxibenzotriazol (HOBT) em um solvente como diclorometano. Outros solventes podem ser usados, como dimetilformida (DMF), tetrahidrofurano (THF), clorofórmio, dioxano ou qualquer outro solvente aprótico conhecido pelos técnicos no assunto. Em uma configuração particular, a reação pode também ser realizada

[0073]. Compostos de fórmula (I) em que n é 1 podem ser preparados por ésteres oxidantes de fórmula (I) em que n é 0 através de um agente oxidante, como ácido 3-cloroperbenzóico, ácido peracético ou peróxido de hidrogênio em solventes como clorofórmio, diclorometano ou ácido acético (via B).

[0074]. Alternativamente, compostos de fórmula (I) em que n é 1 podem também ser preparados ao primeiramente oxidar o enantiômero de álcool oxidante (+) (14), através das condições operacionais acima descritas, dessa forma, obtendo enantiômero de álcool (+) (7). Subsequentemente a reação entre o enantiômero de álcool obtido com um ácido benzóico de fórmula (15), conforme descrito acima para ésteres de fórmula (I) em que n é 0 (via A).

[0075]. A separação de enantiômeros (+) (7) e (-) (9) do álcool racêmico (4), que podem ser obtidos por oxidação de álcool racêmico (3) através de métodos conhecidos, pode ser obtida por métodos conhecidos, conforme descrito acima para separação de enantiômeros de álcool racêmico (3).

[0076]. Um técnico no assunto deve estar ciente de que variações opcionais às etapas sintéticas relatadas no esquema 1 podem ser aplicadas também à preparação dos compostos da presente invenção.

[0077]. O acima referenciado refere-se em particular, à ordem das reações que podem ser realizadas de modo a obter os compostos ou intermediários desejados, bem como à escolha das condições operativas a serem adaptadas, incluindo solventes, agentes oxidantes opcionais, agentes de condensação e a gostar.

[0078]. Como exemplo, no caso de estarem presentes substituintes quimicamente reativos em qualquer dos materiais de partida ou seus intermediários, que possam dar origem a reações secundárias indesejadas, pode ser realizada proteção adequada desses mesmos substituintes antes de a reação ocorrer.

[0079]. Por analogia, a desproteção subsequente pode ser então realizada, de modo a obter novamente o substituinte quimicamente reativo ou grupo acima descrito na forma livre.

[0080]. A proteção e desproteção de grupos funcionais é descritas em “Protective Groups in Organic Chemistry" 3a edição, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1999) e "Protecting Groups", P.J. Kocienski, Georg Thieme Verlag (1994).

[0081]. De acordo com o presente processo para a preparação dos compostos da presente invenção, e suas variantes, os materiais de partida de fórmula (1) e (2), bem como qualquer reagente adicional [(por exemplo de fórmula (15)], auxiliar de quiralidade , solvente ou agente a ser empregado, é conhecido ou pode ser facilmente preparado de acordo com métodos conhecidos.

[0082]. A presente invenção também fornece composições farmacêuticas de compostos de fórmula (I) em mistura com um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, aqueles descritos na Apostila de Ciências Farmacêuticas de Remington, XVII Ed., Mack Pub., N.Y., U.S.A. [EUA].

[0083]. Exemplos incluem diluentes (como sacarose, manitol, lactose, amidos) e excipientes conhecidos, incluindo agentes de suspensão, solubilizadores, agentes de tamponamento, ligantes, desintegrantes, conservantes, corantes, aromatizantes, lubrificantes e afins. Cápsulas de liberação prolongada, comprimidos e géis também são vantajosos na administração dos compostos da presente invenção.

[0084]. A administração dos compostos da presente invenção pode ser realizada de acordo com as necessidades do paciente, por exemplo, oralmente, nasalmente, parenteral mente, por exemplo, subcutaneamente, intravenosamente, intramuscularmente, intrasternalmente e por infusão, por inalação, retalmente, vaginalmente, topicamente, localmente, transdermicamente e por administração ocular. Várias formas de dosagem oral sólida podem ser usadas para administração dos compostos da invenção, incluindo formas sólidas como comprimidos, cápsulas de gel, cápsulas, capsulets, grânulos, lozenges e pós a granel.

[0085]. Várias formas de dosagem oral líquida podem também ser usadas para administração dos compostos da invenção, incluindo soluções aquosas e não-aquosas, emulsões, suspensões, xaropes e elixires. Essas formas de dosagem podem também conter diluentes inertes adequados conhecidos, como água e excipientes adequados conhecidos, como conservantes, agentes umectantes, adoçantes, aromatizantes, bem como agentes para emulsificar e/ou suspender os compostos da invenção. Os compostos da invenção podem ser injetados, por exemplo, intravenosamente, na forma de uma solução estéril isotônica. Outras preparações também são possíveis.

[0086]. Supositórios para administração retal dos compostos da invenção podem ser preparados através da mistura do composto com um excipiente adequado, como manteiga de cacau, salicilatos e polietilenoglicóis.

[0087]. Formulações para administração vaginal podem estar na forma de creme, gel, pasta, espuma ou fórmula em spray contendo, além do princípio ativo, veículos convencionais.

[0088]. Para administração tópica, a composição farmacêutica pode estar na forma de cremes, pomadas, unguentos, loções, emulsões, suspensões, géis, soluções, pastas, pós, sprays e colírios adequados para a administração à pele, ao olho, ao ouvido ou nariz. Administração tópica pode também envolver administração transdérmica, por exemplo, através de adesivos transdérmicos.

[0089]. Para o tratamento das doenças do trato respiratório, os compostos da invenção são preferivelmente administrados por inalação.

[0090]. Preparações inaláveis incluem pós inaláveis, aerossóis de contagem contendo propelente ou formulações inaláveis sem propelente.

[0091]. Para a administração com um pó seco, inaladores de dose única ou múltipla conhecidos a partir da técnica podem ser utilizados. Nesse caso, o pó pode ser preenchido em cápsulas de gelatina, plástico ou outras cápsulas, cartuchos ou embalagens de blíster ou em um reservatório.

[0092]. Um diluente ou catalisador, geralmente não-tóxico e quimicamente inerte aos compostos da invenção, por exemplo, lactose ou qualquer outro aditivo adequado para melhorar a fração respiratória pode ser adicionado aos compostos em pó da invenção.

[0093]. Aerossóis de inalação contendo gás propelente, como hidrofluoralcanos podem conter os compostos da invenção em solução ou em forma dispersa. As formulações direcionadas por propelente também podem conter outros componentes, como co-solventes, estabilizadores e opcionalmente outros excipientes.

[0094]. As formulações inaláveis sem propelente, compreendendo os compostos da invenção, podem estar na forma de soluções ou suspensões em um meio aquoso, alcoólico ou hidroalcoólico e podem ser distribuídas por nebulizadores a jato ou ultrassônicos conhecidos a partir da técnica ou por nebulizadores de névoa suave, como Respimat®.

[0095]. Os compostos da invenção podem ser administrados como o único agente ativo ou em combinação com um ou mais princípios ativos farmacêuticos diferentes, incluindo aqueles atualmente usados no tratamento de distúrbios respiratórios, por exemplo, β2-agonistas, corticosteróides e antagonistas M3.

[0096]. As dosagens dos compostos da invenção dependem de uma variedade de fatores, incluindo a doença particular a ser tratada, a severidade dos sintomas, a via de administração, a frequência do intervalo de dosagem, o composto particular utilizado, a eficácia, o perfil de toxicologia e o perfil farmacocinético do composto.

[0097]. Vantajosamente, os compostos de fórmula (I) podem ser administrados, por exemplo, em uma dosagem compreendida entre 0,001 e 1000mg/dia, preferivelmente entre 0,1 e 500mg/dia.

[0098]. Quando eles forem administrados via inalação, a dosagem dos compostos de fórmula (I) é vantajosamente compreendida entre 0,01 e 20mg/dia, preferivelmente entre 0,1 e 10mg/dia.

[0099]. Preferivelmente, os compostos de fórmula (I) isolados ou combinados com outros princípios ativos podem ser administrados para a prevenção e/ou tratamento de qualquer doença respiratória obstrutiva, como asma, bronquite crônica e doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC).

[00100]. Entretanto, os compostos de fórmula (I) podem ser administrados para a prevenção e/ou tratamento de qualquer doença em que a atividade dos receptores de PDE4 é implicada e a inibição da atividade do receptor de PDE4 é desejada ou um estado da doença que seja mediada pela atividade de PDE4 (por exemplo, um estado da doença na qual PDE4 é superexpressada ou superativa). Exemplos dessas doenças incluem: estados de doença alérgica, como dermatite atópica, urticária, rinite alérgica, conjuntivite alérgica, conjuntivite vernal, granuloma eosinofílica, psoríase, artrite inflamatória, artrite reumatóide, choque séptico, colite ulcerativa, doença de Crohn, ferimento de reperfusão do miocárdio e cérebro, glomerulonefrite crônica, choque endotóxico, fibrose cística, restenose arterial, arterosclerose, queratose, espondilite reumatóide, osteoartrite, estado febril, diabetes mellitus, pneumoconiose, eczema de contato tóxico e alérgico, eczema atópico, eczema seborréico, líquen simples, queimadura de sol, coceira na área anogenital, alopecia areata, cicatrizes hipertróficas, lúpus eritematoso discóide, lúpus eritematoso sistêmico, piodermias foliculares e de área ampla, acne endógena e exógena, acne rosácea, doença de Beghet, nefrite púrpura anafilactóide, doença de intestino inflamatório, leucemia, esclerose múltipla, doenças gastrintestinais, doenças autoimunes e afins.

[00101]. Elas também incluem distúrbios neurológicos e psiquiátricos, como mal de Alzheimer, esclerose múltipla, amilolaterosclerose (ALS), atrofia de sistemas múltiplos (MSA), esquizofrenia, mal de Parkinson, doença de Huntington, doença de Pick, depressão, derrame e ferimento do cordão espinhal.

[00102]. A presente invenção agora será descrita adicionalmente através dos seguintes exemplos.

EXEMPLOS EXEMPLO 1 Preparação de 1-(3-(Ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2- (3,5-dicloro-piridin-4-il)-etanol (3)

[00103]. Uma solução de 3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi- benzaldeído (5,00g) e 3,5-dicloro-4-metilpiridina (2,57g) em 50ml de THF seco é resfriada para -30°C.

[00104]. t-butóxido de potássio sólido (tBuOK, 1,96g) é adicionado em porções, mantendo a temperatura entre -30°C e -20°C, dessa forma, obtendo uma solução vermelho escuro. Após conclusão da adição, a mistura é agitada a -30°C durante 1h. Uma solução aquosa saturada de NH4Cl (50ml) é, então, adicionada à mistura de reação, mantendo a temperatura entre -5°C e -10°C. A cor da mistura de reação muda para amarelo.

[00105]. A mistura é, então, extraída com EtOAc. A camada orgânica é seca sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado. O resíduo é tratado com 30ml de uma mistura de éter de petróleo/EtOAc = 8/2; o precipitado é filtrado e seco, obtendo 4,83g do composto de título, que é empregado na próxima etapa sem purificação adicional.

[00106]. MS/ESI+404-406 [MH] +.

EXEMPLO 2 Preparação de 1-(3-(Ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2- (3,5-dicloro-1-óxi-piridin-4-il)-etanol (4)

[00107]. O composto (3) (13,0g) é dissolvido em CH2Cl2 (250ml), então, ácido m-cloroperbenzóico (16,5g) é adicionado e a solução resultante é agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. Na2S2O3 (25,4g) é adicionado e a mistura é vigorosamente agitada em r.t. durante 1 hora. O resíduo sólido é filtrado, a solução é lavada com NaOH a 1N (3x100ml), então, a fase orgânica é seca sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado para fornecer 10,3g do produto desejado (4) como um sólido branco, que é usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[00108]. MS/ESI+420-422 [MH]+

EXEMPLO 3 Preparação de éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)- 2-(3,5-dicloro-1-óxi-piridin-4-il)-etil de ácido Acetóxi-fenil-acético (5, mistura de diastereoisômeros)

[00109]. O composto (4) (19,95g), ácido (S)-acetilmandélico (9,22g), cloridrato de 1-etil-3-[3-dimetilamino propil]carbodiimida (18g) e 4-dimetilaminopiridina (2,89g) são dissolvidos, sob atmosfera de N2, em CH2Cl2 seco (300ml). A mistura de reação é agitada em temperatura ambiente durante a noite. Uma solução aquosa a 5% de NaHCO3 (200ml) é adicionada e a fase aquosa é extraída com CH2Cl2 (3x100ml). As fases orgânicas combinadas são secas sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto de título (5) como mistura de dois diastereoisômeros (32g); a separação dos dois diastereoisômeros é descrita nos Exemplos 4 e 6.

EXEMPLO 4 Preparação de éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)- 2-(3,5-dicloro-1-óxi-piridin-4-il)-etil de ácido (+)-Acetóxi-fenil-acético (6)

[00110]. A mistura diastereomérica crua (5) (32g) é triturada com Et2O (100ml), sonicada e filtrada. O procedimento é repetido quatro vezes a fim de obter uma mistura sólida enriquecida em diastereoisômero (6). Esse sólido é cristalizado de iPrOH (80ml) e filtrado para fornecer 9,65g do composto (6) com pureza diastereomérica > 95%. A pureza diastereomérica é determinada por análise de HPLC e por HPLC quiral analítica realizada em coluna Chiracel OD (eluição isocrática com hexano:isopropanol 40:60, fluxo 0,45ml/min, tempo de retenção = 27,2 min).

[00111]. MS/ESI+596, 598 [MH] +

[00112]. '1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) ppm 8,57 (s, 2 H), 7,27 - 7,44 (m, 5 H), 6,91 - 7,18 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,71 - 6,79 (m, 2 H), 5,95 (dd, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 3,72 (dd, 1 H), 3,60 (dd, 1 H), 3,41 (dd, 1 H), 3,23 (dd, 1 H), 2,13 (s, 3 H), 1,07 - 1,31 (m, 1 H), 0,48 - 0,72 (m, 2 H), 0,21 - 0,44 (m, 2 H)

[00113]. [α]D= +14° (c=0,54, MeOH)

EXEMPLO 5 Preparação de (+)-1-(3-Ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)- 2-(3,5-dicloro-1-óxi-piridin-4-il)-etanol (7)

[00114]. O composto (6) (6,42g) é suspenso em metanol (350ml), então, uma solução saturada de NaHCO3 (175ml) é adicionada. A suspensão branca é vigorosamente agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação é diluída com CH2Cl2 (700ml) e lavada com uma solução aquosa a 5% de NaHCO3 (300ml); a fase aquosa é extraída com CH2Cl2 (2x300ml), as camadas orgânicas combinadas são secas sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado sob vácuo. O sólido branco cru obtido é triturado com Et2O (2x100ml) e filtrado para fornecer 3,88g do composto (7) com pureza enantiomérica > 99%. A pureza enantiomérica é determinada por HPLC quiral analítica realizada em coluna Chiracel OD (eluição isocrática com hexano:isopropanol 30:70, fluxo 0,35ml/min, tempo de retenção = 22,3 min).

[00115]. MS/ESI+420-422 [MH] +

[00116]. '1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) ppm 8,51 (s, 2 H), 7,11 (d, 1 H), 7,05 (d, 1 H), 6,88 (dd, 1 H), 7,01 (t, 1 H), 5,59 (d, 1 H), 4,84 (dd, 1 H), 3,89 (dd, 1 H), 3,84 (dd, 1 H), 3,18 (dd, 1 H), 3,02 (dd, 1 H), 1,03 - 1,35 (m, 1 H), 0,46 - 0,67 (m, 2 H), 0,24 - 0,46 (m, 2 H)

[00117]. [α]D = +68° (c=0,5, MeOH)

EXEMPLO 6 Preparação de éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)- 2-(3,5-dicloro-1-óxi-piridin-4-il)-etil de ácido (+)-Acetóxi-fenil-acético (8)

[00118]. A mistura diastereomérica crua (5) é triturada com Et2O (100ml), sonicada e filtrada. O procedimento é repetido quatro vezes e os filtrados são coletados e evaporados sob pressão reduzida para fornecer uma mistura sólida enriquecida em diastereoisômero (8), que é cristalizado de iPrOH (100ml) para fornecer 6,4g do composto (8) como um sólido branco com pureza diastereomérica > 99%. A pureza diastereomérica é determinada por análise de HPLC e por HPLC quiral analítica realizada em coluna Chiracel OD (eluição isocrática com hexano:isopropanol 40:60, fluxo 0,45ml/min, tempo de retenção = 21,6 min).

[00119]. MS/ESI+596, 598 [MH]+

[00120]. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) ppm 8,27 (s, 2 H), 7,27 - 7,45 (m, 5 H), 7,20 (d, 1 H), 7,08 (d, 1 H), 7,00 (dd, 1 H), 7,08 (t, 1 H), 5,97 (dd, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 3,93 (dd, 1 H), 3,89 (dd, 1 H), 3,33 (dd, 1 H), 3,17 (dd, 1 H), 2,07 (s, 3 H), 1,14 - 1,38 (m, 1 H), 0,50 - 0,71 (m, 2 H), 0,21 - 0,47 (m, 2 H)

[00121]. [α]D = +26° (c=0,55, MeOH)

EXEMPLO 7 Preparação de (-)-1-(3-Ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)- 2-(3,5-dicloro-1-óxi-piridin-4-il)-etanol (9)

[00122]. O composto (8) (1,18g) é suspenso em metanol (50ml), então, uma solução saturada de NaHCO3 (25ml) é adicionada. A suspensão branca é vigorosamente agitada em temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura de reação é diluída com CH2Cl2 (700ml), então, uma solução aquosa a 5% de NaHCO3 (300 ml) é adicionada e as fases são separadas. A fase aquosa é extraída com CH2Cl2 (2x100ml), as camadas orgânicas combinadas são secas sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado sob vácuo. O sólido branco cru obtido é triturado duas vezes com Et2O (50ml) e uma vez com CH2Cl2 (20ml), então, é filtrado para fornecer 0,74g do composto (7) com pureza enantiomérica > 99%. A pureza enantiomérica é determinada por HPLC quiral analítica realizada em coluna Chiracel OD (eluição isocrática com hexano:isopropanol 30:70, fluxo 0,35ml/min, tempo de retenção = 24,0 min).

[00123]. MS/ESI+420-422 [MH] +

[00124]. '1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) ppm 8,51 (s, 2 H), 7,11 (d, 1 H), 7,05 (d, 1 H), 6,88 (dd, 1 H), 7,01 (t, 1 H), 5,59 (d, 1 H), 4,84 (dt, 1 H), 3,89 (dd, 1 H), 3,84 (dd, 1 H), 3,18 (dd, 1 H), 3,02 (dd, 1 H), 1,08 - 1,32 (m, 1 H), 0,47 - 0,66 (m, 2 H), 0,26 - 0,45 (m, 2 H)

[00125]. [α]D = -61° (c=0,5, MeOH)

EXEMPLO 8 Éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2-(3,5-dicloro- piridin-4-il)-etil de ácido 2-(6-Metóxi-naftalen-2-il)-propiônico (10, mistura de diastereoisômeros 11 e 13)

[00126]. O composto (3) (12,0g) é dissolvido em DMF (100ml), então, ácido (S)-2-(6-metóxi-naftalen-2-il)-propiônico (7,5g), 4- dimetilaminopiridina (3,6g) e cloridrato de 1-etil-3-[3- dimetilaminopropil]carbodiimida (5,7g) são adicionados. Após agitação em rt durante 4 horas, água (1000ml) é adicionada. A mistura é extraída com EtOAc (500ml x 2), as camadas orgânicas combinadas são secas sobre sulfato de sódio e o solvente é evaporado sob pressão reduzida para produzir 17,0g de um óleo, que é cristalizado de EtOH, dessa forma, obtendo 11,5g do composto de título como mistura de diastereoisômeros (11) e (13).

[00127]. 1H NMR (200 MHz, CDCl3) ppm 8,43 e 8,60 (2s, 1H cada, 2H), 7,51-7,68 (m, 3H), 7,10-7,23 (m, 3H), 6,85-6,97 (m, 2H), 6,51-6,68 (m, 1H), 6,22-6,97 (t, 1H, CHF2), 6,00-6,13 (m, 1H), 3,93-3,95 (s, 3H, OCH3), 3,723,84 (m, 2H), 3,07-3,57 (m, 3H), 1,42-1,45 (d, 3H, CH3), 0,94-1,25 (m, 1H), 0,51-0,67 (m, 2H), 0,12-0,36 (m, 2H).

[00128]. MS/ESI+616, 618 [MH] +

EXEMPLO 9 Éster 1-(3-ciclopropil-metóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2-(3,5-dicloro- piridin-4-il)-etil de ácido (+)-2-(6-Metóxi-naftalen-2-il)-propiônico (segundo diastereoisômero eluído) (13)

[00129]. O composto é isolado da mistura diastereomérica do exemplo 8 por separação por HPLC usando uma coluna Daisogel a 10μm, 50mx300mm; eluente: n-hexano/metil-terc-butil-éter/álcool isopropílico: 90/9,9/0,1; fluxo: 80 ml/min.; carregamento: 300mg por injeção; tempo de eluição: de 11 a 20 min. As frações coletadas são evaporadas e o resíduo é cristalizado de n-hexano/álcool isopropílico.

[00130]. 1H NMR (200 MHz, CDCl3) ppm 8,60 (s, 2H), 7,68-7,75 (m, 2H), 7,58-7,59 (m, 1H), 7,27-7,29 (d, 1H), 7,12-7,24 (m, 2H), 6,98-7,04 (m, 1H), 6,736,78 (dd, 1H), 6,67-6,68 (d, 1H), 6,60-7,35 (t, 1H, CHF2), 5,99-6,06 (m, 1H), 3,843,87 (m, 4H), 3,47-3,55 (m, 2H), 3,32-3,41 (dd, 1H), 3,22-3,29 (m, 1H), 1,33-1,37 (d, 3H, CH3), 0,96-1,03 (m, 1H), 0,43-0,52 (m, 2H), 0,13-0,21 (m, 2H).

[00131]. MS/ESI+616, 618 [MH] +

[00132]. [α]D = +52.8 ° (c=0,5, MeOH)

EXEMPLO 10 Éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2-(3,5-dicloro- piridin-4-il)-etil de ácido (+)-2-(6-Metóxi-naftalen-2-il)-propiônico (primeiro diastereoisômero eluído) (11)

[00133]. O composto é isolado da mistura diastereomérica do exemplo 8 por separação por HPLC usando uma coluna Daisogel a 10μm, 50mx300mm; eluente: n-hexano/metil-terc-butil-éter/álcool isopropílico: 90/9,9/0,1; fluxo: 80 ml/min.; carregamento: 300mg por injeção; tempo de eluição: de 7 a 10 min. As frações coletadas são evaporadas e o resíduo é cristalizado de n-hexano/álcool isopropílico.

[00134]. 1H NMR (200 MHz, CDCl3) ppm 8,27 (s, 2H), 7,64-7,80 (m, 2H), 7,56-7,57 (m, 1H), 7,28-7,29 (d, 1H), 7,14-7,20 (m, 3H), 6,68-7,42 (t, 1H, CHF2), 6,93-6,98 (m, 2H), 6,00-6,07 (m, 1H), 3,88-3,92 (m, 4H), 3,71-3,84 (m, 2H), 3,39-3,51 (dd, 1H), 3,16-3,25 (dd, 1H), 1,33-1,37 (d, 3H, CH3), 1,08-1,23 (m, 1H), 0,50-0,59 (m, 2H), 0,34-0,26 (m, 2H).

[00135]. MS/ESI+616, 618 [MH] +

[00136]. [α]D = +45 ° (c=0,5, MeOH)

EXEMPLO 11 (+)-1-(3-Ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2-(3,5-dicloro- piridin-4-il)-etanol (14)

[00137]. A uma suspensão de éster 1-(3-ciclopropil metóxi-4- difluorometóxi-fenil)-2-(3,5-dicloro-piridin-4-il)-etil de ácido (+)-2-(6-metóxi- naftalen-2-il)-propiônico (13) (14,0g), em metanol (110ml), terc-butóxido de potássio (5,1g) é adicionado. A mistura resultante é agitada em rt durante 2 horas, obtendo uma solução clara. Água é lentamente adicionada sob agitação para precipitação incipiente (solução turva).

[00138]. Após agitação durante 60 minutos adicionais, o sólido precipitado é filtrado, lavado com água e dissolvido em clorofórmio (100ml). A solução é seca sobre sulfato de sódio e o solvente removido sob vácuo. O resíduo é cristalizado em clorofórmio/hexano = 1/2,5 para obter 8,1 de sólido branco.

[00139]. 1H NMR (200 MHz, CDCl3) ppm δ 8,45 (s, 2H), 7,19-7,08 (d, 1H), 7,06-7,00 (d, 1H), 6,95-6,85 (dd, 1H), 6,99-6,24 (t, 1H, CHF2), 5,18-5,00 (m, 1H), 3,98-3,78 (m, 2H), 3,54-3,35 (m, 1H), 3,31-3,15 (m, 1H), 2,04-1,94 (d, 1H, OH), 1,40-1,14 (m, 1H), 0,75-0,53 (m, 2H), 0,50-0,29 (m, 2H).

[00140]. MS/ESI+404, 406 [MH] +.

[00141]. [α]D = +9,35 ° (c=1, CHCl3).

EXEMPLO 12 (-)-1-(3-Ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2-(3,5-dicloro- piridin-4-il)-etanol (12)

[00142]. Começando a partir do diastereoisômero (11), seguindo o procedimento do Exemplo 10, álcool (12) é obtido.

[00143]. MS/ESI+404, 406 [MH] +.

[00144]. [α]D = - 9,15° (c=1, CHCl3).

EXEMPLO 13 Preparação de álcool (7) por oxidação de álcool (14)

[00145]. O composto (14) (3,0g) é dissolvido em CH2Cl2 (100ml). Ácido m-cloroperbenzóico a 70% (5,4g) é adicionado e a solução resultante é agitada em temperatura ambiente durante 18 horas. Na2S2O3 sólido (5g) é, então, adicionado e a mistura é vigorosamente agitada em r.t. durante 30 minutos. O resíduo sólido é filtrado; a solução orgânica é diluída com 100ml adicionais de CH2Cl2 e lavada com solução de NaHCO3 saturada aquosa (3x100ml). A camada orgânica é seca sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado. O resíduo é triturado em EtOAc (20ml) para fornecer 1,9g do produto desejado 7 como um sólido branco, que é usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[00146]. 1H NMR (200 MHz, CDCl3) ppm 8,14 (s, 2H), 7,18-7,09 (d, 1H), 7,07-7,02 (d, 1H), 6,92-6,83 (dd, 1H), 7,01-6,22 (t, 1H, CHF2), 5,10-4,96 (m, 1H), 3,96-3,84 (d, 2H), 3,45-3,29 (m, 1H), 3,23-3,07 (m, 1H), 3,24-3,17 (d, 1H, OH), 1,41-1,67 (m, 1H), 0,75-0,53 (m, 2H), 0,50-0,29 (m, 2H).

[00147]. MS/ESI+420, 422 [MH] +

[00148]. [α]D = + 65,0° (c=0,5, MeOH)

EXEMPLO 14 Preparação de álcool (9) por oxidação de álcool (12)

[00149]. O álcool (9) pode ser obtido seguindo o procedimento descrito no Exemplo 13, usando álcool (12) no lugar do álcool (14) como material inicial.

[00150]. MS/ESI+420, 422 [MH] +

[00151]. [α]D =-60,6° (c=0,5, MeOH) EXEMPLO 15 Preparação de éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)- 2-(3,5-dicloro-1-piridin-4-il)-etil de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4- metanosulfonilamino-benzóico (C1) Etapa 1: Éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2-(3,5- dicloro-piridin-4-il)-etil de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4-(N-terc - butóxicarbonil-N-metanosulfonil)-amino benzóico

[00152]. Cloridrato de 1-Etil-3-[3-dimetilamino propil]carbodiimida (2,85g) é adicionado a uma solução de álcool (14) (2,0g), 4- dimetilaminopiridina (0,3g), ácido 3-ciclopropilmetóxi-4-(N-terc- butóxicarbonil-N-metanosulfonil)-amino-benzóico (2,0g) em CH2Cl2 seco (180ml) em r.t. sob atmosfera de nitrogênio.

[00153]. Após agitação em r.t. durante a noite, a mistura é lavada com HCl aquoso a 5% (2x100ml); a fase orgânica é separada e lavada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (2x100ml), seca sobre Na2SO4 e evaporada para secagem. O cru é purificado por cromatografia rápida em sílica gel em eluição de gradiente (hexano/EtOAc 10/1 a 6/4) para produzir 1,4g do composto de título. Etapa 2: Preparação de C1

[00154]. Éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2-(3,5- dicloro-piridin-4-il)-etil de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4-(N-terc- butóxicarboni-N-metanosulfonil)-amino-benzóico (1,4g) é dissolvido em CH2Cl2 (140ml). Uma solução a 4M de HCl em dioxano (40ml) é adicionada e a mistura resultante é agitada em r.t. durante 24 horas. A mistura de reação é, então, evaporada para secagem e o resíduo é triturado em iPrOH (50ml) e subsequentemente em EtOH (50ml), seguido por Et2O (70ml) para produzir 0,880g de composto (C1).

[00155]. Caracterização analítica de C1 é relatada na Tabela 1. Tabela 1

[00156]. Analogamente, os seguintes compostos podem ser preparados: • Éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2-(3,5-dicloro- piridin-4-il)-etil de ácido 4-Ciclopropilmetóxi-3-metanosulfonilamino- benzóico, • Éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2-(3,5-dicloro- piridin-4-il)-etil de ácido 3,4-Bis-metanosulfonilamino-benzóico, • Éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2-(3,5-dicloro- piridin-4-il)-etil de ácido 3-Metanosulfonilamino-4-metil-benzóico, • Éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)-2-(3,5-dicloro— 1-óxi-piridin-4-il)-etil de ácido 4-Metanosulfonilamino-3-metil-benzóico.

EXEMPLO 16 Preparação de éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)- 2-(3,5-dicloro-1-óxi-piridin-4-il)-etil de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4- metanosulfonilamino-benzóico (C2)

[00157]. O composto (C2) é preparado de acordo com o mesmo procedimento sintético do Exemplo 15, começando a partir do intermediário de álcool (7). Alternativamente, o composto (C2) pode ser preparado começando a partir do composto (C1) conforme descrito no Exemplo 17 a seguir.

EXEMPLO 17 Preparação de éster 1-(3-ciclopropilmetóxi-4-difluorometóxi-fenil)- 2-(3,5-dicloro-1-óxi-piridin-4-il)-etil de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4- metanosulfonilamino-benzóico (C1)

[00158]. O composto (C1) (0,69g) é dissolvido em CH2Cl2 (20ml). Ácido m-cloroperbenzóico a 70% (0,355g) é adicionado e a solução resultante é agitada em temperatura ambiente durante 18 horas. Na2S2O3 sólido (0,244g) é, então, adicionado e a mistura é vigorosamente agitada em r.t. durante 30 minutos. O resíduo sólido é filtrado; a solução orgânica é diluída com 20ml adicionais de CH2Cl2 e lavada com solução de NaHCO3 saturada aquosa (3x20ml). A fase orgânica é seca sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado. O resíduo é triturado em EtOH (20ml) para fornecer 0,710g do composto desejado (C2) como um sólido branco.

[00159]. Os compostos a seguir foram preparados seguindo a mesma via, usando reagentes adequados: Tabela 2

[00160]. Os intermediários de ácido carboxílico empregados na síntese dos compostos finais descritos são comercialmente disponíveis ou já são conhecidos ou sintetizados de acordo com métodos conhecidos. EXEMPLO 18 Síntese de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4-(N-terc-butóxicarbonil-N- metano-sulfonil)-amino-benzóicoEsquema 2 Etapa 1: Éster metílico de ácido 3-Hidróxi-4-nitro-benzóico

[00161]. Ácido 3-Hidróxi-4-nitro-benzóico (10g) é dissolvido em MeOH (500ml). H2SO4 a 96% (2ml) é adicionado e a mistura é aquecida a 60°C durante 18 horas. A mistura de reação é concentrada a aproximadamente 200ml, diluída com EtOAc (200ml) e lavada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (2x20ml). A camada orgânica é seca sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado para produzir 10,5g do intermediário desejado.

Etapa 2: Éster metílico de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4-nitro- benzóico

[00162]. Éster metílico de ácido 3-Hidróxi-4-nitro-benzóico (10,5g) é dissolvido em DMF seco (150ml) sob atmosfera de N2. K2CO3 (24,3g), KI (2,6g) e brometo de ciclopropilmetil (10,3ml) são adicionados e a mistura é agitada a 50°C durante 6 horas. A mistura de reação é diluída com água (300ml) e extraída com Et2O (2x200ml); as camadas orgânicas combinadas são secas sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado para produzir 12,7g do intermediário desejado.

Etapa 3: Éster metílico de ácido 4-Amino-3-ciclopropilmetóxi- benzóico

[00163]. Éster metílico de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4-nitro- benzóico (12,7g) é dissolvido em MeOH (100ml) e EtOAc (100ml); Pd/C a 10% (1,0g, suspenso em 20ml de água) é adicionado e a mistura é hidrogenada em um aparato Parr (H2: 20psi) durante 5 horas. HCl a 37% é adicionado (10ml) e hidrogenação é continuada durante 2 horas adicionais para obter conversão completa. O catalisador é filtrado sobre uma almofada de celita, a mistura é diluída com EtOAc (200ml) e lavada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (2x100ml). A camada orgânica é seca sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado para produzir 10,7g do intermediário desejado.

Etapa 4: Éster metílico de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4- metanosulfonilamino-benzóico

[00164]. 3-(ciclopropilmetóxi)-4-aminobenzoato de metila (8,86g) é dissolvido em piridina (80mL) em temperatura ambiente sob atmosfera de N2. Cloreto de metanosulfonila (4,04mL) é adicionado e a mistura é agitada em r.t. durante 18 horas. A mistura de reação é evaporada para secagem, o cru é tratado com HCl a 1N (500mL) e extraído com CH2Cl2 (3x200mL). A camada orgânica é seca sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado para produzir 11,7g do intermediário desejado.

[00165]. MS/ESI+300 [MH] +

Etapa 5: Éster metílico de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4-(N-terc- butóxicarbonil-N-metanosulfonil)-amino-benzóico

[00166]. Éster metílico de ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4- metanosulfonilamino-benzóico (3,0g) é dissolvido em CH2Cl2 (150ml). Dimetilaminopiridina (DMAP, 1,22g) e Boc2O (2,18g) são adicionados e a mistura é agitada em r.t. durante 1 hora. A mistura de reação é lavada com HCl aquoso a 5% (2x50ml), a camada orgânica é seca sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado. O resíduo é titulado em Et2O e filtrado para produzir 4,0g do intermediário desejado que é usado nas próximas etapas sem purificação adicional.

Etapa 6: Ácido 3-Ciclopropilmetóxi-4-(N-terc-butóxicarbonil-N- metanosulfonil)-amino-benzóico

[00167]. Éster metílico de ácido Ciclopropilmetóxi-4-(N-terc- butóxicarbonil-N-metanosulfonil)-amino-benzóico (4,0g) é dissolvido em MeOH (100ml). NaOH a 1N (15ml) é adicionado e a mistura resultante é agitada em r.t. durante 1 ano, então, é aquecida a 50°C durante 2 horas. A mistura de reação é, então, diluída com EtOAc (250ml) e lavada com HCl a 1N (2x100ml). A camada orgânica é seca sobre Na2SO4 e o solvente é evaporado para produzir 3,5g do derivado de ácido desejado.

[00168]. MS/ESI+386 [MH] +. Legenda * NMR s = única d = dupla t = trio q = quarteto dd = dobro de duplas m = múltiplo br = amplo ESI = eletrospray

ATIVIDADE FARMACOLÓGICA DOS COMPOSTOS DA INVENÇÃO EXEMPLO 19 Determinação in vitro da atividade inibidora de PDE4 no ensaio de células mononuclesares do sangue periférico (PBMCs)

[00169]. O ensaio, que é baseado na atividade inibidora conhecida exercida pelos inibidores da PDE4 na liberação de fator-alfa de necrose tumoral (TNF-α) induzida por lipopolissacarídeos (LPS) nas células mononuclesares do sangue periférico (PBMCs), é realizado de acordo com um método previamente descrito (Hatzelmann A et al J. Pharmacol. Exp. Ther. 2001; 297:267-279; Draheim R et al J. Pharmacol. Exp. Ther. 2004; 308:555-563.

[00170]. PBMCs humanas crioconservadas (100μl/poço) são incubadas em placas de 96 poços (105células/poço), durante 30 minutos, na presença ou ausência (50 microl) dos compostos de teste, cujas concentrações variam de 10-12M a 10-6M. Subsequentemente, LPS (3ng/ml) é adicionado.

[00171]. Após incubação de 18 horas a 37°C em um incubador umidificado sob uma atmosfera de 95% de ar e 5% de CO2, o meio de cultura é coletado e TNF-α medido por ELISA.

[00172]. Os resultados com relação aos compostos C1 a C6, expressados como média + limites de confiança de 95% da concentração molar do composto de teste produzindo 50% de inibição da liberação de TNF-α induzida por LPS (IC50), são comparados entre 0,06 e 4,4nM. Os efeitos dos compostos testados são calculados como porcentagem de inibição da liberação de TNF-α, assumindo a produção de TNF-α induzida por LPS na ausência do composto inibidor como 100% e produção de TNF-α basal de PBMCs na ausência de LPS como 0%.

EXEMPLO 20 A avaliação da capacidade de inibição da LPDE4 de baixa afinidade versus a capacidade de competir com a HPDE4 de alta afinidade.

[00173]. A afinidade em direção de LPDE4 e HPDE4 é avaliada conforme previamente descrita respectivamente em Cortijo J et al Br J Pharmacol 1993, 108: 562-568 e Duplantier AJ et al J Med Chem 1996; 39: 120-125.

[00174]. A concentração do composto de teste varia entre 10-12M e 10-5M. Os valores de afinidade em direção de LPDE4 e HPDE4 testados nos compostos C1 a C6 estão compreendidos entre 82 e 477.

[00175]. No caso de LDPE4, a IC50 é a concentração molar do composto de teste que produz 50% de inibição do desaparecimento de cAMP, enquanto no caso de HPDE4, a IC50 é a concentração molar do composto de teste que produz 50% de inibição da ligação de [H3] rolipram.

[00176]. Os resultados indicam que os compostos da invenção inibem LPDE4 com afinidade subnanomolar e são consideravelmente mais seletivos para LPDE4 versus HPDE4.

EXEMPLO 21 Atividade sinergística da combinação de dose fixa de Carmoterol/C1 na contração induzida por carbachol na traqueia de cobaias.

[00177]. Segmentos traqueais em ziguezague são obtidos das cobaias machos, sensibilizadas com Ovoalbumina (OA) e duas preparações são obtidas de uma traqueia. Cada preparação é colocada em banho de órgão a 20ml, preenchido com solução de Krebs-Henseleit normal oxigenada (O2 a 95% e CO2 a 5%) e mantida a 37°C. Preparações traqueais são conectadas a transdutores de força isométrica sob um tom de descanso de 1g. Após um período de equilíbrio de 60 minutos, preparações traqueais são pré-tratadas durante 30 minutos com C1 (10-7 M), Carmoterol (3*10-10M), a associação de C1 e Carmoterol ou veículo, respectivamente, seguida pela administração cumulativa de OA (10-10- 10-5g/ml). No final da administração de OA, uma concentração máxima de carbachol (10-5M) é adicionada para obter a contração máxima de cada preparação. Os efeitos são expressados como valores percentuais da resposta máxima induzida por carbachol (100%).

[00178]. Pré-tratamento de 30 minutos da preparação com C1 (107M) causou uma inibição da contração induzida por OA de 23%. De forma similar, a inibição produzida por Carmoterol (3*10-10M) é 18%.

[00179]. A combinação de C1 (10-7M) e Carmoterol (3*10-10M) causou uma redução da contração induzida por OA de 93%.

[00180]. Esse estudo mostra que tanto o carmoterol quanto o C1 são potentes em antagonizar a contração induzida por carbachol nas vias aéreas de cobaia. Além disso, em conformidade com seu mecanismo de ação molecular complementar, na estrutura de um agonismo-antagonismo funcional, combinações fixadas mostram efeito sinergístico no controle de contração colinérgica na traqueia de cobaia.

Claims (17)

1. COMPOSTO caracterizado pelo fato de que possui a fórmula geral (I) como enantiômeros (-) (I) em que: n é 0 ou 1; R1 e R2 podem ser os mesmos ou diferentes e são selecionados do grupo consistindo de: - C1-C6 alquila linear ou ramificado, opcionalmente substituído por um ou mais átomos de halogênio; - OR3 em que R3 é C1-C6 alquila linear ou ramificado opcionalmente substituído por um ou mais átomos de halogênio ou grupos C3-- C7 cicloalquila; e - HNSO2R4 em que R4 é C1-C4 alquila linear ou ramificado opcionalmente substituído por um ou mais átomos de halogênio, em que, no mínimo, um de R1 e R2 é HNSO2R4, sais inorgânicos e orgânicos farmaceuticamente aceitáveis.

2. COMPOSTO de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é HNSO2R4, em que R4 é metil, R2 é OR3, em que R3 é ciclopropilmetil e n é 0.

3. COMPOSTO de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é HNSO2R4, em que R4 é metil, R2 é OR3, em que R3 é ciclopropilmetil e n é 1.

4. COMPOSTO de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é OR3, R2 é HNSO2R4 em que R4 é metil e n é 1.

5. COMPOSTO de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é metil, R2 é HNSO2R4 em que R4 é metil e n é 1.

6. COMPOSTO de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que ambos R1 e R2 são HNSO2R4, em que R4 é metil e n é 0.

7. COMPOSTO de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que ambos R1 e R2 são HNSO2R4, em que R4 é metil e n é 1

8. PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE UM COMPOSTO conforme definidos pelas as reivindicações de 1 a 7, caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de reação de aldeído (1) (1) com metildicloropiridina (2) (2) para obter álcool racêmico (3), que é opcionalmente oxidado com o derivado de N-óxido correspondente (4) F (3) condensado (3) ou (4) com um ácido quiral, como (S)-naproxeno ou ácido (S)-acetilmandélico para obter respectivamente uma mistura diastereomérica (10) separando a mistura diastereoisomérica (10) ou (5) em dois diastereoisômeros simples, respectivamente (11) (11) (13) (6) e (8) por cromatografia, cristalização, fornecendo após divisão, respectivamente, álcoois enantioméricos (+) (14) benzoico adequado (15) obtendo compostos de fórmula geral (I), em que R1 e R2 são conforme definidos na reivindicação 1.

9. COMPOSTO, caracterizado pelo fato de que possui a fórmula geral (II) em que n é conforme definido na reivindicação 1 e o átomo de carbono representado por um asterisco abaixo mostram uma configuração (S).

10. COMBINAÇÃO DE UM COMPOSTO conforme definido nas reivindicações 1 a 7, caracterizado por apresentar um segundo componente ativo farmacêutico, selecionado das classes de β2 agonistas, antagonistas M3 e corticosteroides.

11. COMBINAÇÃO de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o segundo componente ativo é formoterol ou carmoterol.

12. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA caracterizada pelo fato de que compreende um composto de fórmula (I) conforme definido nas reivindicações 1 a 7, ou uma combinação de acordo com as reivindicações 10 ou 11, e um ou mais veículos e/ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

13. USO DE UM COMPOSTO de fórmula (I), conforme definido pelas reivindicações de 1 a 7, caracterizado por ser na preparação de um medicamento para a prevenção e/ou tratamento de uma doença do trato respiratório, caracterizada pela obstrução das vias aéreas, como asma e DPOC.

14. USO DE UM COMPOSTO de fórmula (I), conforme definido pelas reivindicações de 1 a 7, caracterizado por ser na preparação de um medicamento para a prevenção e/ou tratamento de rinite alérgica.

15. USO DE UM COMPOSTO de fórmula (I), conforme definido pelas reivindicações de 1 a 7, caracterizado por ser na preparação de um medicamento para a prevenção e/ou tratamento de dermatite atópica.

16. DISPOSITIVO caracterizado por compreender a composição farmacêutica da reivindicação 12.

17. KIT caracterizado pelo fato de que compreende a composição farmacêutica da reivindicação 12 e um dispositivo que pode ser um inalador de pó seco de dose única ou múltipla, um inalador de dose medida ou um nebulizador de névoa suave.