BRPI1014050A2 - composto, composição farmacêutica, e, uso de um composto - Google Patents

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Aurash Shahripour
Haifeng Tang
Nardos H. Teumelsan
Lihu Yang
Yuping Zhu
Shawn P. Walsh
Alexander Pasternak
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Meck Sharp & Dohme Corp.
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Abstract

COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, E, USO DE UM COMPOSTO Esta invenção se refere aos compostos tendo a Fórmula estrutural I: e seu sal farmaceuticamente aceitável que são inibidores de do canal de Potássio Medular Externo Renal (ROMK) (Kir1,1). Os compostos da Fórmula I são úteis como diuréticos e natriuréticos e portanto são úteis para a terapia e profilaxia de distúrbios que resultam da retenção de sal e água excessiva, incluem doenças cardiovasculares tais como hipertensão e insuficiência cardíaca crônica e aguda.

Description

“COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, E, USO DE UM COMPOSTO”
FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO O canal de Potássio Medular Externo Renal (ROMK) (Kirl,1) (ver por exemplo, Ho, K., et al., Cloning and expression of an inwardly rectifying ATP-regulated potassium channel, Nature, 1993, 362(6415): p. 31-8,1, 2; e Shuck, M. E, er al., Cloning and characterization of multiple forms of the human kidney ROM-K potassium channel, J Biol Chem, 1994, 269(39): p. 24261-70) é um “membro da família retificadora interno de canais de potássio expressados em duas regiões do rim: alça ascendente espessa de Henle (TALH) e duto coletor cortical (CCD) (ver Hebert, S. C., et al., Molecular diversity and regulation of renal potassium channels, Physiol Rev, 2005, 85(1): p. 319- 713). Na TALH, ROMK participa na reciclagem do potássio através da 15" membrana luminal que é crítica para a função do cotransportador de Na*/K*/2CY, a etapa determinadora de taxa para a reabsorção de sal nesta parte do nefrônio. No CCD, ROMK fornece um caminho para a secreção de potássio isto é intimamente ligado à absorção de sódio através do canal de sódio sensível à amilorida (ver Reinalter, S. C., er al., Pharmacotyping of hypokalaemic salt-losing tubular disorders, Acta Physiol Scand, 2004, 181(4): p. 513-21; e Wang, W., Renal Potassium channels: recent developments, Curr Opin Nephol Hipertens, 2004, 13(5): p. 549-55). Os inibidores seletivos do canal ROMK (também aqui aludidos como inibidores de ROMK ou os inibidores de ROMK) são prognosticados representar novos diuréticos para o tratamento da hipertensão e outras condições onde o tratamento com um diurético seria benéfico com responsabilidade potencialmente reduzidas (isto é, hipo- ou hipercalemia, novo início da diabete, dislipidemia) em relação aos agentes clínicos correntemente usados (ver Lifton, R. P., A. G. Gharavi e D. S. Geller,
Molecular mechanisms of human hipertension, Cell, 2001, 104(4): p. 545- 56). A genética humana (Ji, W., er al., Rare independent mutations in renal salt handling genes contribute to blood pressure variation, Nat Genet, 2008, 40(5): p. 592-9; e Tobin, M. D., er al., Common variants in genes underlying monogenic hipertension and hypotension and blood pressure in the general population, Hipertension, 2008, 51(6): p. 1658-64) e a ablação genética de ROMK em roedores (ver Lorenz, J. N., et al., Impaired renal NaCl absorption in mice lacking the ROMK potassium channel, a model for type II Bartter's syndrome, J Biol Chem, 2002, 277(40): p. 37871-80 e Lu, M., er al., Absence of small conductance K+ channel (SK) activity in apical membranes of thick ascending limb and cortical collecting duct in ROMK (Bartter's) knockout mice, J Biol Chem, 2002, 277(40): p. 37881-7) sustentam estas expectativas. Para o nosso conhecimento, os primeiros inibidores seletivos de molécula pequena de 15º ROMK foram relatados a partir de trabalho feito na Vanderbilt University como descrito em Lewis, L. M., er al., High-Thoughput Screening Reveals a Small-Molecule Inhibitor of Renal Outer Medullary Potassium Channel and Kir7.1, Mol Pharmacol, 2009, 76(5): p. 1094-1103.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO Um objeto da presente invenção é fornecer os compostos da Fórmula I 5 6 vinho Nine No I e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Os compostos da Fórmula I são inibidores do canal de ROMK (Kirl,1) e podem atuar como diuréticos e natriuréticos e são compostos — farmaceuticamente ativos valiosos para a terapia e profilaxia de doenças, que incluem, mas não são limitados a, doenças cardiovasculares tais como hipertensão e condições que resultam da retenção de sal e água excessiva.
Portanto, um objetivo da invenção é fornecer métodos de tratamento que compreendam administrar uma quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz de um composto da Fórmula I a um paciente em necessidade de um agente diurético e/ou natriurético. Um outro objetivo é fornecer o uso dos compostos da Fórmula I em combinação com outros agentes terapeuticamente eficazes, incluem outros medicamentos úteis para O tratamento da hipertensão e condições que resultam da retenção de sal e água excessiva. A invenção além disso se refere a processos para preparar os compostos da Fórmula I e composições farmacêuticas que compreendem os compostos da Fórmula [. Estes e outros objetivos estarão evidentes a partir da descrição aqui contida.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO A presente invenção está direcionada aos compostos tendo a fórmula estrutural I: Rº Rô éh Nine Nf 1 e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos em que: a No representa um anel heterocíclico selecionado do grupo que consiste de:
R “. q É >N “. “o oO LON, O, ; OQ. ; Nos e Ne Z ' é selecionado do grupo que consiste de:
XxX Ra x x xs x X'R Ro SN x a Rº AAA A So MES A, | REA A, pãa =/ SA às pão qi R RAN . ; z1i zo ; Zi Rº zv O — x Tr xe - - Rº 3h ã É o & e | o õ e R RR — = ; SS ; vi Rã ; nã z1-v Zz1-vi ZÍi-vil o é o SR Rº zizvii x x x x
V V Dx
CON COS Ago e RA > z1-ix não z1-x neo 7? é selecionado do grupo que consiste de: Y 1 1 R2 NY R A Y y RO xx / R? E“ Ds ly RE USO Í VV eb OS ] RR Fexs yo o R$ Re, ' Á Y , ze "Oz Ra z2i Rº oi O YZ Yº r - RO Ro E NZ SÊ % ax o + || o RO 1 RR ; Ro PE z2Y O z2-vi ro z2:Nii Ro ' Rº z2-vii VW xr DA
CO CÉP 1 — o R A Ras e RE = z2- pao z2x X é selecionado do grupo que consiste de -H, -OH, -Oalquila C1-3, -F, oxo (=O), NH» e -CH;; Y é selecionado do grupo que consiste de -H, -OH, -Oalquila C1-3, -F, oxo (=O), NH» e -CH;; X'eIL são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H e -CH;;
X?e Y? são cada um -O-;
contanto que quando X é oxo então X' é ausente e quando Y é oxo então IL é ausente;
e ainda contanto que quando nem X? nem Y? estão presente,
5 entãopelomenos um de X e Y é selecionado do grupo que consiste de -OH, - Oalquila C 1.3, -F e 0xo;
R' e R? são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H, -halo, -cicloalquila-C3-Ck, -ORº?, -SR3, -SORS$, - SOJR$, -(CH7),ORS e alquila Cy -Ck opcionalmente substituído com 1-3 de -F;
um de R?** e R?? é selecionado do grupo que consiste de -CN e - NO, e o outro é Rº;
um de R*º e Rº? é selecionado do grupo que consiste de -CN e -NO, e o outro é R”;
Ró e Rº são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H, -alquila C,., cicloalquila C3.6, -CF3, -CHF3, -CH2F e -CH,OH;
R7 é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;, -CF;, - CHF, -CH2r e -CH;OH;
Rº e R? são cada um independentemente selecionados do grupo
— que consiste de (a)-H, (b) halo, (c)-alquila C,.« opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F, (d)-cicloalquila C3.6, (e)-Oalquila C1.3 opcionalmente substituído com | a 3 de -F, (f)-OR$, (g)-CO, alquila Cy. opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F, (h)-(CH,)nORS, (1)-SR$, (1)-SORS, (k)-SO3R$, (1)- NHCORS e (m)- NHSO;R;
Rº e Rº são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de (a)-H, (b) halo, (c)-alquila C,.« opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F, (d)-cicloalquila C3.6, (e€)-Oalquila C1.3 opcionalmente substituído com | a 3 de -F, ()-OR$, (g)-CO, alquila C1.« opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F, (h)-(CH>)nORS, (1)-SR$, (1)-SORS, (k)-SOR$, (1)-NHCORS e (m)-
NHSO;R; Rº e Rí são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de (a)-H, (b) halo, (c)-alquila C,.« opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F, (d)-cicloalquila C3.6, (e€)-Oalquila C1.3 opcionalmente substituído com | a 3 de -F, ()-OR$, (g)-CO, alquila C1.« opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F, (h)-(CH>)nORS, (1)-SR$, (()-SOR$, (10-SO2R$, (1) NHCORS e (m)- NHSO;,R; n é um número inteiro selecionado de 1,2 e 3; e R$ é independentemente selecionado em cada ocorrência do grupo que consiste de -H, -cicloalquila C3« e -alquila Cy.; opcionalmente substituído com 1-3 de -F.
Em uma forma de realização desta invenção estão os compostos da Fórmula [, aqui aludidos como os compostos da Fórmula Ia e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que: Z' é selecionado do grupo que consiste de: XxX RR " NE N xXx x Rn KER E OL, NOS TOO: SA É TRS ia Pe ! EX RE zZ1 Rã ' Zi Rº ziv O xe x * À DZ . Rº? S Ro RAR a 2 RR LP ; Rã Re zv o ZI£i o zZI-vi Re e Re zivio 7? é selecionado do grupo que consiste de:
XxX gn . PO Naay Rs vv R
E EL NOS EO & o Re. E SA " z2 RO ze Ro z2i Ri z2v O Y2 á - À ROSA * R* % Rº RIR º RÁ | o : Rea Rea z22v O 24 Q zig º Re zavil X é selecionado do grupo que consiste de -H, -OH, -Oalquila C1-3, -F, oxo (=O), NH; e -CH;; Y é selecionado do grupo que consiste de -H, -OH, -Oalquila C1-3, -F, oxo (=O), NH; e -CH;; X' e IL são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H e -CH;; X?e Y? são cada um -O-; contanto que quando X é oxo então X' é ausente e quando Y é oxo então IL é ausente; e ainda contanto que pelo menos um de X e Y é selecionado do grupo que consiste de -OH, -Oalquila C1.3, -F e oxo; e todos os outros variáveis dentro da Fórmula Ia (por exemplo, R!, R?, R຺, Rº?, R%, Rº», etc) são como definidos na fórmula 1.
Quando nem Xº nem Y? estão presentes resultando em pelo menos um de X e Y sendo selecionado do grupo que consiste de -OH, - Oalquila C1-3, -F e oxo, isto significa que para um composto que não contém uma porção que contém Xº (zl-vi, z1-viii) nem uma porção que contém Y? (z2-vi, z2-viii) e que contém pelo menos umas porção que contém X (z1-i, z1- 11, z1-11, z1-iv, z1-ix, z1-x) ou porção que contém Y (72-1, z2-ii, 22-11, z2-iv, —z72-ix,z2-x), então pelo menos um de X e Y é selecionado do grupo que consiste de -OH, -Oalquila C1.3, -F e oxo.
Também abrangido dentro do escopo desta invenção estão os compostos da Fórmula I ou a Fórmula Ia bem como todas as outras fórmulas, formas de realização, classes e subclasses aqui descritas em que pelo menos um de X, Y, Xº e Y? está presente e quando nem X? nem Yº está presente, então pelo menos um de X e Y é selecionado de -OH, -Oalquila C 1.3, -F e oxo. — Quando pelo menos um de X, Y, Xº e Y? está presente, isto significa que o composto deve conter pelo menos uma de uma porção que contém (z1-1, z1-il, z1-11, zl-iv, z1-ix, z1-x), um porção que contém Y (72-i, 22-11, z2-il1, z2-iv, Z2-ix, z2-x), uma porção que contém Xº (zi-vi, zl-viii) ou uma porção que contém Y? (z2-vi, z2-viii). Em uma forma de realização desta invenção estão os compostos da Fórmula I ou a Fórmula Ia em que
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NO é selecionado do grupo que consiste de R? LONG, Nos Ne AN Em uma forma de realização desta invenção estão os compostos da Fórmula I ou Ia tendo a fórmula estrutural HI e os sais —farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos: 5 6 7énN Nida
1. Em uma outra forma de realização estão os compostos da Fórmula [ ou la tendo a fórmula estrutural IM e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos: R7 Rº Rô pi Netuz EA mm.
Em uma outra forma de realização estão os compostos da Fórmula 1 ou Ia tendo a fórmula estrutural IV e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos: Rº Rô | O y | Z'-CH-N N—CH—Z? IV. Em uma outra forma de realização estão os compostos da Fórmulal ou la tendo a fórmula estrutural V e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos: Rº Rô 1 | Z-CH-N( N=cH-Z22 V. Em uma outra forma de realização estão os compostos da Fórmula 1 ou Ia tendo a fórmula estrutural VI e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos: Rº Rô | ( $ | Z'-CH-N N—-CH—Z? VI.
Em uma outra forma de realização estão os compostos da Fórmula I ou Ia tendo a fórmula estrutural VII e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos: 5 Rô mor Z|-CH-N N—CH-Z? EA VII. Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos da Fórmula 1, Ia ou III tendo a fórmula estrutural VIII e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos: O Rº o Í A Rº Rô Pá N We
RXIOX A Rn vI Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II ou III tendo a fórmula estrutural VIIla e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos:
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TX » : ROM NONE vi, Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos da Fórmula 1, Ia ou VII tendo a fórmula estrutural IX e os sais — farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos:
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Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, III ou IV tendo a fórmula estrutural X e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos: Oo Re
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NO é selecionado de
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OD QONSS e Nos R' é selecionado de -H e -CH;; Rº é selecionado de -H e -CH;3; e
7? é selecionado de z2-ii, z2-iv, z2-v e z2-vi.
Na forma de realização A estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, III, IV, V, VI, ou VII em que Z' e 7? são selecionado do grupo que consiste de: (a) z1-i e 22-1; (b) z1-ii e 22-11; (c) z1-iii e z2-iii; (d) z1-iv e 22-iv; (e)zl-viez2-vi; (OD zl-viii e z2-viii; (g) z1-ix e 22-ix; e (h) z1-x e 22-Xx.
Na forma de realização B estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, III, IV, V, VI, ou VII em que Z' e 7? são selecionados como segue: (a) quando Z' é z1-i então 7? não é z2-i; (b) quando Z' é z1-ii então 7? não é 22- ii; (c) quando Z' é z1-iii então Z? não é z2-iii; (d) quando Z' é z1-iv então 7? nãoéz2iv; (e) quando Z' é zl-v então 7? não é z2-v ou z2-vii; (f) quando 2! é zl-vi então 7? não é z2-vi; (g) quando Z' é z1-vii então 7? não é z2-vii ou z2-v; (h) quando Z' é zl-viii então 2º não é z2-viii; (1) quando Z' é zl-ix então 7? não é z2-ix; e (j) quando Z' é z1-x então Zº não é z2-x.
Na forma de realização C estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, 1, II, IV, V, VI, VII, VIII, Villa ou IX ou na Forma de realização A ou B em que 7? é 7z2-1. Em uma classe da Forma de realização C estão os compostos em que um de R%º e R** é -CN e o outro é Rº.
Em uma sub-classe destes RÉ CN.
Na forma de realização D estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, II, IV, V, VI, VII, VIII, Villa ou IX ou na Forma de realização A ou B em que 7? é z2-ii ou z2-ix.
Em uma classe da Forma de realização D estão os compostos em que um de Rºa e R** é “CN e o outro é Rº.
Em uma sub-classe destes R*º é -CN.
Na forma de realização E estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, II, IV, V, VI, VII, VIII, Villa ou IX ou na Forma de realização A ou B em que 7? é z2-iii.
Na forma de realização F estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, II, IV, V, VI, VII, VIII, Villa ou IX ou na Forma de realização A ou B em que 7? é 7z2-iv.
Em uma classe da Forma de realização F estão os compostos em que R? é selecionado do grupo que consiste de -CH;3, -CH,CH;, ciclopropila, -F, -H e -OCH;; e Rº é selecionado de selecionado do grupo que consiste de -CH;3, -OCH; e -H. Em uma sub-classe destes estão os compostos em que Y é -OH, IL é -H, R é -CH; e Rº é -H.
Na forma de realização G estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, II, IV, V, VI, VII, VIII, Villa ou IX ou na Forma de realização A ou B em que 7? é z2-v. Em uma classe desta forma de realização estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, IM, IV, V, VI ou VII em que Z2' é selecionado do grupo que consiste de z1-i, z1-ii, z1-1i, z1-iv, z1-vi, z1-viil, zl-ix e zl-x. Em uma sub-classe destes, X é selecionado de -OH e -F e particularmente o mesmo é -OH. Na forma de realização H estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, 1, II, IV, V, VI, VII, VIII, Villa ou IX ou na Forma de realização A ou B em que 7? é z2-vi. Em uma classe desta forma de realização estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, IM, IV, V, VI ou VII em que Z2' é selecionado do grupo que consiste de z1-v, zl1-vi, zl1-vii e zl-viil. Em uma outra classe desta forma de realização estão os compostos em que Z' é selecionado do grupo que consiste de z1-i, z1-ii, z1-ii1, z1-iv, z1-ix ezl-xeX é selecionado de -H, -OH, -Oalquila C1.3, -F, oxo, NH, e -CH; e particularmente o mesmo é -H, -OH ou -F. Na forma de realização I estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, 1, II, IV, V, VI, VII, VIII, Villa ou IX ou na Forma de realização A ou B em que 7? é z2-vil. Em uma classe desta forma de realização estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, II, IV, V, Vl e VIT em que Z' é selecionado do grupo que consiste de z1-i, z1-ii, z1-ii1, z1-iv, z1-vi, z1-viii, z1-ix e z1-x,. Em uma sub-classe destes, X é selecionado de -OH e -F e particularmente o mesmo é -OH. Na forma de realização J estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, 1, II, IV, V, VI, VII, VIII, Villa ou IX ou na Forma de realização A ou B em que 7? é z2-viii.
Em uma classe desta forma de realização estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, IM, IV, V, VI ou VII em que Z2' é selecionado do grupo que consiste de z1-v, zl1-vi, zl1-vii e zl-viil.
Em uma outra classe desta forma de realização estão os compostos em que Z' é selecionado do grupo que consiste de z1-i, z1-11, z1-il1, z1-iv, zl-ixe zl-xe X é selecionado de -H, -OH, -Oalquila Cr3, -F, oxo, NH; e -CH; e particularmente o mesmo é -H , -OH ou -F.
Na forma de realização K estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, II, IV, V, VI, VII, VIII, Villa ou IX ou na Forma de realização A ou B emqueZ éz2-x.
Na forma de realização L estão os compostos das Fórmulas |, Ia, II, III, IV, V, VI ou VII, ou nas Formas de realização A, B, C, D, E, F, G, H,IouJe as classes e subclasses destes em que Z!, se outro modo indefinido, é z1-iv.
Em uma classe da Forma de realização L estão os compostos em que R' é selecionado do grupo que consiste de -CH3, -CH,CH;, ciclopropila, -F, - H e -OCH;; e R“º é selecionado de selecionado do grupo que consiste de -CH;, -OCH; e -H.
Em uma sub-classe destes estão os compostos em que X é -OH, X' é -H, R' é -CH;ze Rº é -H.
Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, III, IV, V, VII, VIII, Villa, IX ou X ou nas Formas de realização A, B, C, D, E, E, G, Hs, J, Il, Kou L e as classes e subclasses destes em que X e Y, quando ambos estão presentes, são cada um independentemente selecionados de -H, -OH, -F e -CH;3 e contanto que quando num de z1-vi, z1-viii, z2-vi e z2-viii estão presentes (isto é, quando —nemX?nem Y? estão presentes) no composto, então pelo menos um de X e Y é selecionado de -OH e -F.
Em uma classe destes, pelo menos um de Xe Y é - OH e o outro é selecionado de -H, -OH, -F e -CH;3. Em uma sub-classe destes X e Y, quando ambos estão presentes, são -OH.
Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos da Fórmula 1, III, IV, V, VI, VII, VIII ou IX ou Forma de realização B, C, D, E, F, G, H, Il, J, ou K ou L e as classes e subclasses destes em que quando apenas um de z1-vi, z1-vili, z2-vi e z2-viii está presente no composto, então X, quando presente e Y, quando presente, são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H, -OH, -Oalquila C1.3, -F, oxo, NH, e -CH;; contanto que quando X é oxo depois X' é ausente e quando Y é oxo depois IL é ausente. Em uma classe destes, X, quando presente e Y, quando presente, são cada um independentemente selecionado de -H, -OH, -F e -CH;. É mencionado que X ou Y estão presentes nos compostos desta forma de realização quando um de z1-i, z1-11, z1-iii, — zl-iv, Z1-ix, Z1-x, 22-1, 22-11, z2-1i, z22-iv, 22-1x ou 22-x está presente junto com um de z1-vi, z1-viii, z2-vi ou z2-viii. É mencionado ainda que os compostos em que um de z1-v, z1-vii, z22-v ou z2-vii está presente junto com um ou mais de zl-vi, zl-viil, z2-vi ou z2-vili também são abrangidos por esta forma de realização.
Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, III, IV, V, VI, VII, VIII ou IX ou Forma de realização B, C, D, E, F, G, H, | J, Kou L e as classes e subclasses destes em que quando apenas um de zl-v, zl-vii, z2-v ou z2-vii está presente no — composto, então pelo menos um de X, quando presente, ou Y, quando presente, é independentemente selecionado do grupo que consiste de -OH, - Oalquila C13, -F e oxo; contanto que quando X é oxo então X' é ausente e quando Y é oxo então IL é ausente. Em uma classe destes, um de X quando presente, ou Y quando presente, é selecionado de -OH e -F e mais — particularmente o mesmo é -OH. É mencionado que estão presentes em compostos desta forma de realização quando um de z1-i, z1-ii, z1-ili, zl-iv, Z1-1X, Z1-Xx, 22-1, 22-11, Z2-Hi, 22-iv, 22-1x ou 722-x está presente junto com um de z1-v, z1-vii, 22-v ou z2-vii. É ainda mencionado que os compostos em que um de z1-vi, z1-viii, z2-vi ou z2-viii está presente junto com um ou mais de zl-v, zl-vil, z22-v ou 72-vii também são abrangidos por esta forma de realização.
Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, Villa, IX ou X ou nas Formas de realização A, B, C, D, E, FE, G, Hs, Il, J, Kou L e as classes e subclasses destes em que X'! e Y!, quando ambos estão presentes, são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H e -CH;. Em uma classe destes X' e IL são ambos -H.
Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, Villa, IX ou X a Forma de realização A, B, C, D, E, FE, G, H, Il J] Kou L e as classes e subclasses destes em que R' e R?, quando ambos estão presentes, são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de (a)-H, (b)-F, (c)- Cl, (d)-Br, (e)-alquila C,1.3 opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F, (O) ciclopropila, (g8)-Oalquila C,.3 opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F e (h)-(CH))1-3 alquila-OH.
Em uma sub-classe destes R' e R? são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H, -CH;, - CH3CH;, ciclopropila, -F e -OCH;. Em uma outra sub-classe, pelo menos um de R' e R? é -CH; e o outro é selecionado de -H e -CH;3. Em uma outra sub-classe, R' e R? são ambos -CH;. Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, II, IV, V, VI, VII, VIII, Villa, EX ou X ou nas Formas de realização A, B, C, D, E, FE, G, Hs, Il, J, Kou L e as classes e — subclasses destes em que Rº e R$, quando ambos estão presentes, são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H, -CH; e -OCH; e mais particularmente Rº e Rº são ambos -H.
Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, IM, IV, V, VI ou VII ou nas Formas de realização A, B, C, D, E, FE, G, Hs, J, I, Kou L e as classes e subclasses destes em que um de R?ºe R??, quando presente, é -CN e o outro é Rº.
Em uma classe destes, Rºº é “CN e R?? é Rº e particularmente Rº é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;-OCH; e -F e mais particularmente o mesmo é -H, -CH; e —-OCH;3 Em uma outra classe destes, R?* “CN e R?ºº é Rº e particularmente, Rº é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;3, -OCH; e -F e mais particularmente o mesmo é -H, -CH; e -OCH;. Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, IM, IV, V, VI ou VII ou nas Formas de realização A, B, C, D, E, F, G, H, IJ, Kou Le as classes e subclasses destes em que Rº, quando presente, é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH; e -F.
Em uma classe destes, Rº é -H.
Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, Villa, IX ou X ou nas Formas de realização A, B, C, D, E, FE, G, Hs, Il, J, Kou L e as classes e subclasses destes em que R?, quando presente, é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH; e -F.
Em uma classe destes, R? é -H ou -CH;. Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, Villa, IX ou X ou nas Formas de realização A, B, C, D, E, FE, G, Hs, Il, J, Kou L e as classes e subclasses destes em que um de R**º e R*?, quando presente, é -CN e o outro é Rí.
Em uma classe destes, Rº é -CN e R** é Rí e particularmente RÉ é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH3, -OCH; e -F e mais particularmente o mesmo é -H, -CH; e -OCH;3. Em uma outra classe destes, R*Pé-CNeR*“éR!'e particularmente Rí é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;3, -OCH; e -F e mais particularmente o mesmo é -H, -CH; e -OCH;. Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, III, IV, V, VI, VII, VIII ou IX ou nas
Formas de realização A, B, C, D, E, FE G, Hs, Il J Kou Le as classes e subclasses destes em que Ró e Ró são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H e -CH;3. Em uma classe destes, Ró e Ró são ambos -H. Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, III ou VIII, ou nas Formas de realização A, B, C, D, E, FE, G, Hs, IJ, Kou L e as classes e subclasses destes em que RH. Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, IV, V, VI, VII, VIII, Villa ou IX ou nas Formas de realização A, B, C, D, E, E G, Hs, Il J Kou L e as classes e subclasses destes em que R$ é independentemente selecionado em cada ocorrência do grupo que consiste de -H, -cicloalquila C3.« e -alquila C13 opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F. Mais particularmente Rº é selecionado de -H, -CH;3, -CF3, -CHF>, -CH;CF; e ciclopropila.
Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, IV, V, VL ou VII e as classes e subclasses destes em que 7? é selecionado do grupo que consiste de z2-1, z2-ii, z2-iv, z2- v e z2-vi. Em uma classe destes estão os compostos em que 7? é selecionado do grupo que consiste de: vv RR v RR y 4b
EO O O Rº o o. | O da b CN
Y OS à Í (d) Aeon" (e) o : o *& o Ro Ss b e particularmente Z? é selecionado de (a), (b), (c) e (d) e mais particularmente o mesmo é (a) ou (d).
Em uma outra forma de realização desta invenção estão os compostos das Fórmulas 1, Ia, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, VIIla ou IX ou nas Formas de realização A, B, C, D, E, FE G, Hs, Il J Kou Le as classes e subclasses destes em que as variáveis (por exemplo, X, Y, R! até Rô, Rº etc.), quando presente em cada uma das Fórmulas ou Formas de realização, são definidos como segue: X e Y são cada um independentemente selecionados de -H, - OH, -F e -CH; contanto que pelo menos um de X e Y é selecionado de -OH e -F, particularmente em que pelo menos um de X e Y é -OH e o outro é selecionado de -H, -OH, -F e -CH; e mais particularmente em que X e Y são ambos -OH;
X' e IL são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H e -CH; e particularmente em que X' e IL são ambos -H;
R' e R? são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de (a)-H, (b)-F, (c)-Cl, (d)-Br, (e)-alguila C;;3 opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F, (f) ciclopropila, (g)-Oalquila C,.3 opcionalmente substituído com | a 3 de -F e (h)-(CH;)1-3 alquila-OH; e particularmente em que R' e R? são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H, -CH3-CH;CH;, ciclopropila, -F e -OCH;3, mais particularmente em que R' e R? são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H e -CH; e ainda mais particularmente em que pelo menos um de R' e R? é -CH;3 e o outro é selecionado de -H e -CH; e mais particularmente em que R!' e R? são ambos -CH;;
um de R?*º e R?? é -CN e o outro é Rº e particularmente em que Rº é -CNe R*º é Rº;
um de Rººe R** é “CN e o outro é Rí e particularmente em que RE CN e RO é RE; Ró e Rº são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H e -CH; e particularmente em que Ró e Rº são ambos -H; R' é -H; Rº é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH; e -F e particularmente em que Rº é -H; Rº? é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH; e -F e particularmente em que R* é -H; Rº e Rº são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H, -CH; e -OCH; e mais particularmente em que Rº e Rº são ambos -H; Rº é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;3, -OCH; e - F e mais particularmente o mesmo é -H, -CH; e -OCH;; R é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;3, -OCH; e - F e mais particularmente o mesmo é -H, -CH;3 e -OCH;; e R$ é independentemente selecionado em cada ocorrência do grupo que consiste de -H, cicloalquila-C3.; e -alquila Cy3 opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F e particularmente em que R$ é selecionado de -H, -CH;, -CF3, -CHF3, -CH3CF; e ciclopropila.
Em uma outra forma de realização desta invenção estão os — compostos das Fórmulas VIII, VIIJa ou IX em que 7? é selecionado do grupo que consiste de 7z2-i, z2-i1, z2-iv, z2-v e z2-vi.
Em uma classe destes estão os compostos em que 7? é selecionado do grupo que consiste de: Yv RR vYv R vY ar > Ro 9 TO o.
OZ ; DO S da O CN" Y ! o “O o es (d) CN (e) e (O Roe > o e particularmente Z? é selecionado de (a), (b), (c) e (d) e mais particularmente o mesmo é (a) ou (d). Em uma outra classe das Fórmulas VIII, VIIJa ou IX estão os compostos em que R!' é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;, - CH3CH;, ciclopropila, -F e -OCH; e mais particularmente o mesmo é -H ou - CH;3. Em uma outra classe das Fórmulas VIII, VIIla ou IX estão os compostos em que R“ é selecionado do grupo que consiste de -H e -CH;. Em uma outra classe das Fórmulas VIII, VIIla ou IX estão os compostos em que Y é selecionado do grupo que consiste de -H, -OH, -F e - CH; contanto que Y é -OH ou -F quando X não é -OH, -Oalquila C,3, -F ou 0x0; em uma sub-classe destes Y é -OH e em uma sub-classe diferente Y é - H, -F ou CH3. Em uma outra classe das Fórmulas VIII, VIIla ou IX estão os compostos em que R? é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;, - CH3CH;, ciclopropila, -F e -OCH; e mais particularmente o mesmo é -H ou - CH; e ainda mais particularmente o mesmo é -CH;3. Em uma outra classe das Fórmulas VIII, VIIla ou IX estão os compostos em que Rº é selecionado do grupo que consiste de -H e -CH; e mais particularmente Rº é -H.
Em uma outra classe das Fórmulas VIII, VIIla ou IX estão os compostos em que R*? é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;3z, -OCH;3 e -F e mais particularmente o mesmo é selecionado de -H, -CH; e -OCH;. em uma outra sub-classe das Fórmulas VIII, VIIJa ou IX estão os compostos em que R' é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;, - CH3CH;, ciclopropila, -F e -OCH; e mais particularmente o mesmo é -H ou - CH;; Rº é selecionado do grupo que consiste de -H e -CH;; 7? é selecionado — dogrupo que consiste de
Y Yv RR Yv RR v % nº > de O CN"
Y IO. So Z o % o (d) CN (e) e (O Ro DS b e particularmente Z? é selecionado de (a), (b), (c) ou (d) e mais particularmente o mesmo é (a) ou (d); Y é selecionado do grupo que consiste de -H, -OH, -F e -CH;3 contanto que Y é -OH ou -F quando X não é -OH, - Oalquila C13, -F ou oxo; R? é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;, -CH/CH;, ciclopropila, -F e -OCH; e mais particularmente o mesmo é -H ou - CH; e ainda mais particularmente o mesmo é -CH;3; Rº é selecionado do grupo que consiste de -H e -CH; e mais particularmente Rº é -H; e R** é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH;3, -OCH; e -F e mais particularmente o mesmo é selecionado de -H, CH; e -OCH;.
Como aqui usado exceto se de outro modo mencionado, “alquila” é intencionado a incluir grupos de hidrocarboneto alifáticos saturados tanto de cadeia ramificada quanto reta tendo o número específico de átomos de carbono. Às abreviações habitualmente usadas para os grupos alquila são usados por todo o relatório descritivo. Por exemplo o termo “alquila Ci.6” (ou “alquila Cr-C65”), significa grupos alquila de cadeia reta ou ramificada, inclui todos os isômeros, tendo o número específico de átomos de carbono e incluem todos os isômeros de hexila e pentila bem como n-, 1so-, sec- e terc-butila (butila, s-butila, i-butila, t-butila; Bu = butila), n- e i-propila (Pr = propila), etila (Et) e metila (Me).
O “cicloalquila” é um anel de alquila ciclizado tendo número indicado de átomos de carbono. Os exemplos de cicloalquila incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila e cicloexila. O anel de cicloalquila pode ser substituído em qualquer carbono disponível que resulta na criação de uma estrutura estável, inclui o carbono de anel que serve como o ponto de ligamento ao resto da molécula.
Em alguns casos o número de substituintes que podem estar opcionalmente presentes em uma porção é especificado, por exemplo mas não limitado a, 1 a 3 de -F (flúor). Por exemplo, um grupo alquila que pode ser opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F inclui, mas não é limitado a, -CH;, -CH/F, -CHF,, -CF3, -CH;CH3, -CH;-CH2F, .CH;-CHF,, .CHF-CH,F, . CH;CF3, -CHF-CHF,, -(CH;»);CH3, -CH(CF;)-CH3z, -(CH;);-CF3 - (CH>)-CH(CF;3)CH; e -(CH7);-CF3, como apropriado para o número definido de átomos de carbono para o grupo alquila dado.
Halo ou halogênio referem-se ao-F (flúor), -CI (cloro), -Br (bromo) e -I (iodo). Os halogênios preferidos são -F e -CI.
A menos que de outro modo expressamente representado ou descrito, às variáveis representadas em uma forma estrutural com um ligação “flutuante”, tal como cada um dos substituintes Rº, Rº, Rº e Rº na fórmula estrutural 1, são permitidos em qualquer átomo de carbono disponível no anel ao que cada um é ligado.
A presente invenção abrange todas as formas estéreo- — isoméricas dos compostos da Fórmula LI.
Os centros de assimetria que estão presentes nos os compostos da Fórmula I podem independentemente um do outro ter a configuração (R) ou a configuração (S). Quando as ligações ao carbono quiral são representadas como linhas retas nas fórmulas estruturais da invenção, é entendido que tanto a configuração (R) quanto (S) do carbono — quiral e consequentemente tanto os enantiômeros quanto suas misturas, são abrangidos dentro da fórmula.
Similarmente, quando um nome de composto é citado sem uma designação quiral para um carbono quiral, é entendido que tanto a configuração (R) quanto (S) do carbono quiral e consequentemente os enantiômeros individuais e suas misturas, são abrangidos pelo nome.
À produção dos estereoisômeros específicos ou suas misturas podem ser identificadas nos Exemplos onde tais estereoisômeros ou misturas foram obtidas, mas isto de nenhum modo limita a inclusão de todos os estereoisômeros e suas misturas de estarem dentro do escopo desta invenção. A invenção inclui todos os enantiômeros e diastereômeros possíveis e misturas de dois ou mais estereoisômeros, por exemplo misturas de enantiômeros e/ou diastereômeros, em todas as razões. Assim, os enantiômeros são um objeto da invenção na forma enantiomericamente pura, tanto como antípodas levorrotatórios quanto como dextrorrotatórios, na forma — deracematos e na forma de misturas de dois enantiômeros em todas as razões. No caso de um isomerismo cis/trans a invenção inclui tanto a forma cis quanto a forma trans bem como misturas destas formas em todas as razões. À preparação dos estereoisômeros individuais pode ser realizada, se desejada, pela separação de uma mistura pelos métodos habituais, por exemplo pela cromatografia ou cristalização, pelo uso de materiais de partida estereoquimicamente uniformes para a síntese ou pela síntese estereosseletiva. Opcionalmente uma derivação pode ser realizada antes de uma separação de estereoisômeros. À separação de uma mistura de estereoisômeros pode ser realizada em uma etapa intermediária durante a síntese de um composto da —Fórmulal ou a mesma pode ser feita em um produto racêmico final. À estereoquímica absoluta pode ser determinada pela cristalografia de raio-X dos produtos cristalinos ou intermediários cristalinos que são derivados, se necessário, com um reagente que contém um centro estereogênico da configuração conhecida. Onde os compostos desta invenção são capazes de — tautomerização, todos os tautômeros individuais bem como suas misturas são incluídos no escopo desta invenção. A presente invenção inclui todos os tais isômeros, bem como sais, solvatos (incluem hidratos) e sais solvatados de tais racematos, enantiômeros, diastereômeros e tautômeros e suas misturas.
Referência aos compostos desta invenção como aqueles de uma fórmula ou forma de realização específicas, por exemplo, a Fórmula I (que inclui os compostos das Fórmulas II-X e todas as suas formas de realização) qualquer outro genérico tendo a fórmula estrutural ou composto específicos aqui descritos ou reivindicados, são intencionados a abranger o composto ou compostos específicos que caem dentro do escopo da Fórmula ou forma de realização, incluem sais destes, particularmente sais, solvatos farmaceuticamente aceitáveis de tais compostos e suas formas salinas solvatadas, onde tais formas são possíveis a menos que de outro modo especificadas.
Nos compostos da Fórmula 1, os átomos podem exibir sua abundância isotópica natural, ou um ou mais dos átomos podem ser artificialmente enriquecidos em um isótopo particular tendo o mesmo número atômico, mas uma massa atômica ou número de massa diferentes da massa atômica ou número de massa predominantemente encontrada na natureza. À presente invenção é intencionada a incluir todas as variações topicamente adequadas dos compostos da Fórmula IL. Por exemplo, as formas isotópicas diferentes de hidrogênio (H) incluem prótio ('H) e deutério (H). O prótio é o isótopo de hidrogênio predominante encontrada na natureza. O enriquecimento para o deutério pode proporcionar certas vantagens — terapêuticas, tais como aumentar a meia-vida in vivo ou reduzir as exigências de dosagem, ou podem fornecer um composto útil como um padrão para caracterização das amostras biológicas. Os compostos isotopicamente enriquecidos dentro da Fórmula I podem ser preparados sem experimentação imprópria pelas técnicas convencionais bem conhecidas por aqueles — habilitados na técnica ou pelos processos análogos a aqueles aqui descritos nos Esquemas e Exemplos usando reagentes e/ou intermediários isotopicamente enriquecidos apropriados.
Quando os compostos da Fórmula I contêm um ou mais grupos ácidos ou básicos a invenção também incluem os sais fisiológica ou toxicologicamente aceitáveis correspondentes, em particular os sais farmaceuticamente utilizáveis. Assim, os compostos da Fórmula I que contêm grupos ácidos podem usados de acordo com a invenção, por exemplo, como sais de metal alcalino, sais de metal alcalino terroso ou como sais de amônio.
Osexemplos de tais sais incluem mas não são limitados aos sais de sódio, sais de potássio, sais de cálcio, sais de magnésio ou sais com amônia ou aminas orgânicas tais como, por exemplo, etilamina, etanolamina, trietanolamina ou aminoácidos. os compostos da Fórmula I que contêm um ou mais grupos básicos, isto é grupos que podem ser protonados, podem ser usados de acordo coma invenção na forma de seus sais de adição de ácido com ácidos inorgânicos ou orgânicos como, por exemplo mas não limitado a, sais com cloreto de hidrogênio, brometo de hidrogênio, ácido fosfórico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido benzenossulfônico, ácido metano-sulfônico, ácido p-toluenossulfônico, ácidos naftalenodissulfônico, ácido oxálico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido tartárico, ácido láctico, ácido salicílico, ácido benzóico, ácido fórmico, ácido propiônico, ácido piválico, ácido dietilacético, ácido malônico, ácido succínico, ácido pimélico, ácido fumárico, ácido maléico, ácido málico, ácido sulfônico, ácido fenilpropiônico, ácido glicônico, ácido ascórbico, ácido isonicotínico, ácido cítrico, ácido — adípico, etc. Se os compostos da Fórmula I simultaneamente contêm grupos ácidos e básicos na molécula a invenção também inclui, além das formas salinas mencionadas, sais internos ou betaínas (zuiteríons). Os sais podem ser obtidos a partir dos compostos da Fórmula I pelos métodos habituais que são conhecidos pela pessoa habilitada na técnica, por exemplo pela combinação com um ácido ou base orgânicos ou inorgânicos em um solvente ou dispersante, ou pela troca aniônica ou troca catiônica de outros sais. À presente invenção também inclui todos os sais dos compostos da Fórmula I que, devido a compatibilidade fisiológica baixa, não são diretamente adequados para o uso em produtos farmacêuticos mas podem ser usados, por exemplo, como intermediários para reações químicas ou para a preparação dos sais fisiologicamente aceitáveis (isto é, farmaceuticamente).
Além disso, os compostos da presente invenção podem existir na forma amorfa e/ou um ou mais formas cristalinas e como tais todas as formas amorfas e cristalinas e suas misturas dos compostos da Fórmula I são intencionados a ser incluídos dentro do escopo da presente invenção. Além disso, alguns dos compostos da presente invenção podem formar solvatos com água (isto é, um hidrato) ou solventes orgânicos comuns. tais solvatos e hidratos, particularmente os solvatos e hidratos farmaceuticamente aceitáveis, dos presentes compostos são do mesmo modo abrangidos dentro do escopo desta invenção, junto com as formas não solvatadas e anidras.
Qualquer — modificação — de um pró medicamento farmaceuticamente aceitável de um composto desta invenção que resulta na conversão in vivo para um composto dentro do escopo desta invenção é também dentro do escopo desta invenção. Por exemplo, os ésteres opcionalmente podem ser fabricados pela esterificação de um grupo do ácido carboxílico disponível ou pela formação de um éster em um grupo hidróxi disponível em um composto. Similarmente, as amidas instáveis podem ser fabricadas. Os ésteres ou amidas farmaceuticamente aceitáveis dos compostos — desta invenção podem ser preparados para atuar como pró medicamento que pode ser hidrolisado de volta a um ácido (ou-COO-dependendo do pH do fluído ou tecido onde a conversão ocorre) ou forma hidróxi particularmente in vivo e como tais são abrangidos dentro do escopo desta invenção. Os exemplos das modificações do pró medicamento farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não são limitados a, ésteres de alquila C,.;« e ésteres de alquila C,.« substituídos com fenila.
Consequentemente, os compostos dentro do genérico tendo as fórmulas estruturais, formas de realização e compostos específicos aqui descritos e reivindicados abrangem sais, todos os estereoisômeros e tautômeros possíveis, formas físicas (por exemplo, amorfas e formas cristalinas), suas formas de solvato e hidrato e qualquer combinação destas formas, bem como os seus sais, suas formas de pró medicamento e sais de suas formas de pró medicamento, onde tais formas são possíveis a menos que —deoutromodo especificadas.
Os compostos da Fórmula I de acordo com a invenção são inibidores de ROMK e são portanto útil como agentes diuréticos e/ou natriuréticos. Os inibidores de ROMK ajudam a aumentar a urinação e aumenta o volume de urina e também para prevenir ou reduzir a reabsorção — do sódio nos rins levando á excreção aumentada de sódio e água. Portanto, os compostos são úteis para o tratamento ou profilaxia de distúrbios que se beneficiam da excreção aumentada de água e sódio do corpo. Consequentemente, um objetivo da presente invenção é fornecer um método para inibir ROMK que compreende administrar um composto da Fórmula I 15" em uma quantidade eficaz inibidora de ROMK a um paciente em necessidade do mesmo. A inibição de ROMK pelos os compostos da Fórmula I pode ser examinada, por exemplo, em qualquer um dos ensaios de atividade descritos abaixo. Um outro objetivo é fornecer um método para provocar diurese, natriurese ou ambas, que compreende administrar um composto da Fórmula I emum uma quantidade terapeuticamente eficaz a um paciente em necessidade do mesmo.
Devido a sua atividade como agentes diuréticos e natriuréticos, esta invenção fornece ainda o uso dos compostos da Fórmula I nos métodos para o tratamento de, prevenção de ou redução de risco para desenvolver — condições médicas que se beneficiam da excreção aumentada de água e sódio, tal como mas não limitada a um ou mais de hipertensão, insuficiência cardíaca (tanto aguda quanto crônica, também conhecida como insuficiência cardíaca cognitiva) e/ou outras condições que resultam da retenção de água e sal excessivos. Isto inclui ainda o uso dos compostos da Fórmula I nos métodos para o tratamento de, prevenção de ou redução do risco para desenvolver um ou mais distúrbios tais como hipertensão arterial pulmonar (PAH), doença cardiovascular, diabete, disfunção endotelial, disfunção diastólica, angina do peito estável e não estável, trombose, restenose, infarto do miocárdio, acidente vascular cerebral, insuficiência cardíaca, hipertonia pulmonar, aterosclerose, cirrose hepática, ascite, pré-eclampsia, edema cerebral, nefropatia, síndrome nefrótico, insuficiência renal aguda e crônica, hipercalcemia, doença de Dent, doença de Meniere, estados edematosos e outras condições para as quais um diurético teria benefício terapêutico ou — profilático. os compostos da invenção podem ser administrados a um paciente tendo, ou em risco de ter, um ou mais condições para que um diurético teria benefício terapêutico ou profilático tal como aqueles aqui descritos.
No geral, os compostos que são os inibidores de ROMK podem ser identificados como aqueles compostos que, quando testados, têm um ICso de 5 uM ou menos, preferivelmente de 1 uM ou menos e mais preferivelmente de 0,25 uM ou menos, em pelo menos um dos seguintes ensaios: 1) o Ensaio de Fluxo de *Rb*, 2) o Ensaio de Fluxo de Tálio, 3) o Ensaio de Eletrofisiologia. Estes ensaios são descritos em mas detalhes mais abaixo.
A quantidade de dosagem do composto pode ser administrada dependendo do caso individual e é, como é habitual, para ser adaptada às circunstâncias individuais para se obter um efeito ótimo. Assim, a mesma depende da natureza e severidade do distúrbio a ser tratado e também do sexo, idade, peso e responsividade individual do ser humano ou animal a ser — tratado, na eficácia e duração da ação dos compostos usados, se a terapia é aguda ou crônica ou profilática, ou se outros compostos ativos são administrados além dos compostos da Fórmula I. Uma consideração destes fatores está bem dentro da competência do médico ordinariamente habilitado para o propósito de determinar a quantidade de dosagem terapeuticamente eficaz ou profilaticamente eficaz necessária para prevenir, agir contra, ou deter o progresso da condição. É esperado que o composto será administrado cronicamente em uma base diária para uma duração de tempo apropriada para tratar ou prevenir a condição médica relevante ao paciente, inclui um curso de terapia que dura dias, meses, anos ou a vida do paciente.
No geral, uma dose diária de aproximadamente de 0,001 a 100 mg/kg, preferivelmente de 0,001 a 30 mg/kg, em particular de 0,001 a 10 mg/kg (em cada caso mg por kg de peso corporal) é apropriado para a administração a um adulto pesando aproximadamente 75 kg de modo a obter —osresultados desejados. A dose diária é preferivelmente administrada em uma dose única ou, em particular quando quantidades grandes são administradas, podem ser divididas em várias, por exemplo duas, três ou quatro doses individuais e podem ser, por exemplo mas não limitado a, 0,1 mg, 0,25 mg, 0,5 mg, 0,75 mg, 1 mg, 1,25 mg, 2,5 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 40 mg, 50 mg, 75 mg, 100 mg, etc., em uma base diária. Em alguns casos, dependendo da resposta individual, a mesma pode ser necessária para desviar para cima ou para baixo da dose diária dada. Além disso, o composto pode ser formulado para a liberação imediata ou modificada tal como liberação prolongada ou controlada.
O termo “paciente” inclui animais, preferivelmente mamíferos e especialmente seres humanos, que usam os presentes agentes ativos para a profilaxia ou tratamento de uma condição médica. A administração do medicamento ao paciente inclui tanto a auto-administração quanto a administração ao paciente por uma outra pessoa. O paciente pode estar em — necessidade de tratamento para um doença ou condição médica existentes, ou pode desejar tratamento profilático para prevenir ou reduzir o risco para desenvolver a dita doença ou condição médica ou desenvolver complicações de longa duração de uma doença ou condição médica.
O termo uma quantidade terapeuticamente eficaz é intencionado significar que um medicamento ou agente farmacêutico que evocará a resposta biológica ou médica de um tecido, um sistema, animal ou ser humano que está sendo procurado por um pesquisador, veterinário, doutor médico ou outro clínico. Uma quantidade profilaticamente eficaz é intencionada significar que um medicamento farmacêutico que impedirá ou reduzirá o risco de ocorrência do evento biológico ou médico que é procurado seja prevenido em um tecido, um sistema, animal ou ser humano por um pesquisador, veterinário, doutor médico ou outro clínico. É entendido que uma quantidade de dosagem diária específica pode ser simultaneamente tanto uma quantidade terapeuticamente eficaz, por exemplo, para o tratamento de hipertensão quanto uma quantidade profilaticamente eficaz, por exemplo, para a prevenção ou redução do risco de infarto do miocárdio ou prevenção e redução do risco para as complicações relacionadas com a hipertensão. Nos métodos de tratamento desta invenção, os inibidores de 15" ROMK podem ser administrados por intermédio de qualquer via adequada de administração tal como, por exemplo, oral, parenteral, ou retalmente nas formulações unitárias de dosagem que contém carreadores, adjuvantes e veículos não tóxicos convencionais farmaceuticamente aceitáveis. O termo parenteral como aqui usado inclui injeções subcutâneas, técnicas de injeção ou infusão intravenosa, intramuscular, intrasternal. As formulações orais são preferidas, particularmente unidades de dosagem oral sólida tais como pílulas, tabletes ou cápsulas.
Consequentemente, “esta invenção também fornece composições farmacêuticas compreendidas de um composto da Fórmula I e um carreador farmaceuticamente aceitável. Para o uso oral, as composições farmacêuticas desta invenção que contém o ingrediente ativo podem estar nas formas tais como pílulas, tabletes, pastilhas, comprimidos, suspensões aquosas ou oleosas, pós ou grânulos dispersáveis, emulsões, cápsulas duras ou moles, ou xaropes ou elixires. As composições intencionadas para o uso oral podem ser preparadas de acordo com qualquer método conhecido na técnica para a fabricação de composições farmacêuticas e tais composições podem conter um ou mais agentes selecionados do grupo que consiste de agentes adoçantes, agentes flavorizantes, agentes corantes e agentes conservantes de modo a fornecer preparações farmaceuticamente elegantes e saborosas. Os tabletes contêm o ingrediente ativo em mistura com excipientes não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis, que são adequados para a fabricação de tabletes. Estes excipientes por exemplo, podem ser diluentes inertes, tais como carbonato de cálcio, carbonato de sódio, lactose, manitol, fosfato de cálcio ou fosfato de sódio; agentes de granulação e desintegração, por exemplo, amido de milho, ou ácido algínico; agentes aglutinantes, por exemplo amido, gelatina ou acácia e agentes lubrificantes, por exemplo, estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco.
As composições farmacêuticas também podem conter outros aditivos habituais, por exemplo, agentes de umectação, estabilizadores, emulsificadores, dispersantes, conservantes, adoçantes, corantes, flavorizantes, aromatizantes, espessantes, diluentes, substâncias tamponizadoras, solventes, solubilizantes, agentes para a obtenção de um efeito de depósito, sais para alterar a pressão osmótica, agentes de — revestimento ou antioxidantes.
As formas de dosagem oral de liberação imediata e de liberação controlada com o tempo podem ser utilizadas, bem como as formas de dosagem oral entericamente revestidas. Os tabletes podem ser não revestidos ou eles podem ser revestidos por técnicas conhecidas para propósitos estéticos, para mascarar sabor ou por outras razões. Os revestimentos também podem ser usados para retardar a desintegração e absorção no trato gastrointestinal e deste modo fornecer uma ação prolongada em um período longo. Por exemplo, um material de retardo de tempo tal como monoestearato de glicerila ou diestearato de glicerila podem ser utilizados.
As formulações para o uso oral também podem ser apresentadas como cápsulas de gelatina dura em que o ingrediente ativo é misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caulim, ou como cápsulas de gelatina mole em que os ingredientes ativos são misturados com água ou solventes miscíveis tais como propileno glicol, PEGs e etanol, ou um meio oleoso, por exemplo óleo de amendoim, parafina líquida, ou óleo de oliva.
As suspensões aquosas contêm o material ativo em mistura com excipientes adequados para a fabricação de suspensões aquosas. As suspensões oleosas podem ser formuladas colocando-se em suspensão o ingrediente ativo em um óleo vegetal, por exemplo óleo de amendoim, óleo de oliva, óleo de gergelim ou óleo de coco, ou em óleo mineral tal como parafina líquida. As suspensões oleosas podem conter um agente espessante, por exemplo cera de abelha, parafina dura ou álcool cetílico. Agentes adoçantes e agentes flavorizantes podem ser adicionados para fornecer uma preparação oral saborosa. Estas composições podem ser preservadas pela adição de um antioxidante tal como ácido ascórbico. Xaropes e elixires podem ser formulados com agentes adoçantes, por exemplo glicerol, — propileno glicol, sorbitol ou sacarose.
A presente invenção também abrange um processo para preparar uma composição farmacêutica que compreende combinar um composto da Fórmula I com um carreador farmaceuticamente aceitável. Também é abrangida a composição farmacêutica que é fabricada —combinando-se um composto da Fórmula I com um carreador farmaceuticamente aceitável. O carreador é compreendido de um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Além disso, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto desta invenção pode ser usada para a preparação de um medicamento útil para inibir ROMK, para provocar diurese e/ou natriurese, e/ou para tratar, prevenir ou reduzir o risco para qualquer uma das condições médicas aqui descritas, em quantidades de dosagem aqui descritas.
A quantidade de composto ativo da Fórmula I e/ou sais —farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos na composição farmacêutica pode ser, por exemplo mas não limitado a, de 0,1 a 200 mg, preferivelmente de 0,1 a 50 mg, por dose em uma base em peso do ácido livre/base livre, mas dependendo do tipo da composição farmacêutica e potência do ingrediente ativo a mesma também poderia ser mais baixa ou mais alta. As composições farmacêuticas usualmente compreendem de 0,5 a 90 por cento em peso do composto ativo em uma base de ácido livre/base livre.
Os compostos da Fórmula I inibem ROMK. Devido à esta propriedade, além do uso como compostos farmaceuticamente ativos na medicina humana e medicina veterinária, eles também podem ser utilizados como uma ferramenta científica ou como ajuda para investigações bioquímicas em que um tal efeito sobre ROMK é intencionado e também para propósitos de diagnóstico, por exemplo no diagnóstico in vitro de amostras de célula ou amostras de tecido. Os compostos da Fórmula I também podem ser utilizados como intermediários para a preparação dos outros compostos —farmaceuticamente ativos.
Um ou mais agentes farmacologicamente ativos adicionados podem ser administrados em combinação com um composto da Fórmula [. Um agente (ou agentes) ativo adicional é intencionado a significar um agente farmaceuticamente ativo (ou agentes) diferente do composto da Fórmula LI. No geral, qualquer agente ou agentes ativos adicionais adequados, incluem mas não limitado a agentes anti-hipertensivos, agentes anti-ateroscleróticos tais como um composto modificador de lipídeo, agentes antidiabéticos e/ou agentes antiobesidade podem ser usados em qualquer combinação com o composto da Fórmula I em uma formulação de dosagem única (uma combinação medicamentosa de dose fixa), ou podem ser administrados ao paciente em uma ou mais formulações de dosagem separadas que permitam a administração concorrente ou sequencial dos agentes ativos (co-administração dos agentes ativos separados). Os exemplos de agentes ativos adicionais que podem ser utilizados incluem mas não são limitados a inibidores da enzima que converte angiotensina (por exemplo, alacepril, benazepril, captopril, ceronapril, cilazapril, delapril, enalapril, enalapril, fosinopril, imidapril, lisinopril, moveltipril, perindopril, quinapril, ramipril, espirapril, temocapril ou trandolapril), antagonistas do receptor de angiotensina II também — conhecido como bloqueadores do receptor de angiotensina ou ARBs (por exemplo, losartan isto é, COZAARGQO, valsartan, candesartan, olmesartan, telmesartan e qualquer um destes medicamentos usados em combinação com hidroclorotiazida tal como HYZAARO), inibidores de endopeptidase neutra (por exemplo, tiorfan e fosforamidon), antagonistas de aldosterona, inibidores derenina (por exemplo derivados de uréia de di- e tri-peptídeos (Ver Pat. U.S. Nº 5.116.835), aminoácidos e derivados (Patentes U.S. 5.095.119 e
5.104.869), cadeias de amino ácido ligadas pelas ligações não peptídicas (Patente U.S. 5.114.937), derivados de di- e tri-peptídeo (Patente U.S.
5.106.835), peptidil amino diáis (Patentes U.S. 5.063.208 e 4.845.079) e — carbamatos de peptidil beta-aminoacil aminodiol (Patente U.S. 5.089.471); também, uma variedade de outros análogos de peptídeo como divulgado nas seguintes Patentes U.S. 5.071.837, 5.064.965, 5.063.207, 5.036.054,
5.036.053, 5.034.512 e 4.894.437 e inibidores de renina de molécula pequena (incluem diol sulfonamidas e sulfinilas (Patente U.S. 5.098.924), derivados de — N-morfolino (Patente U.S. 5.055.466), alcoóis N-heterocíclicos (Patente U.S.
4.885.292) e pirrolimidazolonas (Patente U.S. 5.075.451); também, derivados de pepstatina (Patente U.S. 4.980.283) e derivados de flúor e cloro de peptídeos que contém estatona (Patente U.S. 5.066.643), enalcreína, RO 42- 5892, A 65317, CP 80794, ES 1005, ES 8891, SQ 34017, alisquiren hemifumarato — de — (2(S),4(S),5(S),7(S)-N-(2-carbamoil-2-metilpropil)-5- amino-4-hidróxi-2,7-diisopropil-8-[4-metóxi-3-(3-metoxipropóxi)-fenil]- octanamida) SPP600, SPP630 e SPP635), antagonistas do receptor de endotelina, vasodilatadores (por exemplo nitroprussida), bloqueadores do canal de cálcio (por exemplo, amlodipina, nifedipina, veraparmil, diltiazem, galopamil, niludipina, nimodipinas, nicardipina), ativadores do canal de potássio (por exemplo, nicorandil, pinacidila, cromacalim, minoxidil, aprilcalim, loprazolam), diuréticos (por exemplo, hidroclorotiazida), simpatolíticos, medicamentos bloqueadores beta-adrenérgicos (por exemplo, propranolol, atenolol, bisoprolol, carvedilol, metoprolol, ou tartarato de metoprolol), medicamentos bloqueadores alfa adrenérgicos (por exemplo, doxazocin, prazocin ou alfa metildopa) agonistas alfa adrenérgicos centrais, vasodilatadores periféricos (por exemplo hidralazina), agentes que diminuem lipídeo (por exemplo, inibidores da HMGCoA redutase tais como sinvastatina, lovastatina, pravastatina, atorvastatina e rosuvastatina e inibidores da absorção de colesterol tais como ezetimibe); niacina nas formas de liberação imediata ou de liberação controlada e particularmente niacina em combinação com um antagonista de DP tal como laropiprant (TREDAPTIVES) e/ou com um inibidor da HMG-CoA redutase; agonistas do receptor de niacina tais como acipimox e acifran, bem como agonistas parciais do receptor de niacina; agentes de alteração metabólica incluem agentes sensibilizadores de insulina e compostos relacionados para o tratamento da diabete tais como biguanidas (por exemplo, metformina), meglitinidas (por exemplo, repaglinida, nateglinida), sulfoniluréias (por exemplo, clorpropamida, glimepirida, glipizida, gliburida, tolazamida, tolbutamida), tiazolidinodionas também aludidas como glitazonas (por exemplo, pioglitazona, rosiglitazona), inibidores da alfa glicosidase (por exemplo, acarbose, miglitol), inibidores da dipeptidil peptidase (por exemplo, sitagliptin, saxagliptin), alcalóides de ergotina (por exemplo, bromocriptina),
medicações de combinação tais como JANUMETO (sitagliptin com metformina) e medicações contra a diabete injetáveis tais como acetato de exenatide e pramlintide; ou com outros medicamentos benéficos para a prevenção ou o tratamento das doenças mencionadas acima incluem mas não limitados adiazóxido.
Vários métodos para preparar os compostos desta invenção são descritos nos Esquemas e Exemplos que seguem.
Os materiais de partida e intermediários são adquiridos, fabricados a partir de procedimentos conhecidos, ou como de outro modo ilustrados.
O grupo Ar mostrado nos esquemas abaixo pode representar qualquer um dos grupos aromáticos substituídos ou grupos heterocíclicos substituídos encontrados em Z' ou 7? como anteriormente definidos.
A preparação dos compostos 11, 12 e 13 é detalhada no Esquema 1. Tratamento de eletrófilo 1-2 (tal como brometo, iodeto, mesilato, ou tosilato) com 1-Boc piperazina 1-1 sob condições básicas (tais como na presença de trietilamina) produz o aduto de alquilação 1-3. O grupo de proteção de Boc (Greene, T.; Wuts, P.
G. M.
Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, Inc., Nova Iorque, NY 1991) de 1-3 pode ser removido sob condições ácidas, tais como com TFA ou HCLl. — Alternativamente, a piperazina pode ser protegida com um outro grupo de proteção tal como Cbz e subsequentemente removida pela hidrogenólise.
À alquilação subsequente de 1-4 com bromo-cetona 1-5 (o grupo Ar-CO representa um exemplo de Z!') na presença de uma base tal como trietilamina dão origem aos compostos I1. A carbonila benzílica de Il pode ser reduzida ao álcool correspondente com agentes de redução padrão tais como o boroidreto de sódio para produzir 12 (o grupo Ar-CHOH-representa um exemplo de Z!). O composto 12 pode ser convertido para I3 (o grupo Ar-CHF- representa um exemplo de Z') tratando-o com agentes de fluoração tal como DAST (Hudlicky, M.
Organic Reactions, 1988, 35).
ESQUEMA | Boc. Boc- N 2 HCl e am MO e. 11 1-2 13 O. Br
HAN LON Z A Ar N NaBH,
E TAL e 14 RaN n
A
SONY DAST DONOS OH (UONÇZ mnA—]=.=. F LON
P B Mais no geral, os compostos da Fórmula 12 também podem ser preparados pela sequência detalhada no Esquema 2. Tratar os epóxidos 2-1 com 1l-Boc Piperazina comercial nas temperaturas elevadas dão origem ao álcool 2-2 (Nomura, Y. et al. Chemical & Pharmaceutics Bulletin, 1995, 43(2), 241-6). Alternativamente, a piperazina pode ser protegida com um outro grupo de proteção tal como Cbz. O grupo Ar-CHOH- no 2-2 representa um exemplo de Z!. O grupo Boc pode ser removido sob condições ácidas tais como com TFA ou HCl para produzir piperazina 2-3 (se a piperazina é protegida com um grupo de proteção de Cbz, depois que o grupo é removido usando hidrogênio e um catalisador tal como Pd/C). A ligação de 2-3 e 2-4 pode ser obtida pela alquilação sob condições básicas onde 2-4 é um eletrófilo onde A é brometo, iodeto, mesilato, ou tosilato, ou pelas condições de aminação redutiva padrão onde 2-4 é um aldeído com A sendo um oxigênio de carbonila (por exemplo usando o boroidreto de sódio ou boroidreto triacetóxi de sódio).
ESQUEMA 2 HAND aquecer Ar LON. mnm—]À= Ar HO! 2-1 11 "Boc 2-2 Ar
VON AP AS om LL nº — 2 om L nz 23 24
P Os compostos da Fórmula 13 também podem ser preparados a partir do álcool 2-2 previamente descritos no Esquema 2 (Esquema 3). O tratamento do álcool 2-2 com um reagente de fluoração tal como DAST dão origem ao fluoreto 3-1 (Hudlicky, M. Organic Reactions, 1988, 35). O grupo Ar-CHF no 3-1 representa um exemplo de Z!. O grupo Boc pode ser removido sob condições ácidas para produzir piperazina 3-2, que pode ser depois ligada ao 2-4 por intermédio das condições de reação de alquilação ou amidação redutiva descrita acima no Esquema 2. ESQUEMA 3 Ar HCI A! — DONO, DAST TO OH NON oc "Boc 2-2 3-1
NÃ Ar. N N- N Na Z a —/ CT O A =— F 3-2 2-4 B Os epóxidos 2-1 podem ser preparados seguindo o método detalhado no Esquema 4A. O tratamento do 4-1 (onde A? é brometo, iodeto, ou sulfonato de trifluorometano) com vinil trifluoroborato de potássio comercialmente disponível 4-2 (Molander, G.; Luciana, A. Journal of Organic Chemistry, 2005, 70(10), 3950-3956) sob condições de ligação catalisadas por paládio com um ligando de fosfina apropriado dão origem ao estireno 4-3 (Molander, G.; Brown, A. Journal of Organic Chemistry, 2006, 71(26), 9681- 9686). As olefinas podem ser convertidas aos epóxidos correspondentes 2-1 sob condições de epoxidação padrão com, por exemplo, m-CPBA (Fringuelli, F. et al. Organic Preparations and Procedures International, 1989, 21(6), 757- 761). Se o grupo Ar contém um heterociclo isto não é compatível com uso de m-CPBA, depois uma sequência de duas etapas que envolve a formação de um intermediário de bromoidrina com, por exemplo, Br7/água, seguida pela formação de epóxido com base (por exemplo NaCO;) pode ser substituída. O —epóxido racêmico pode ser resolvido sob condições de cromatografia de HPLC quiral para produzir seus enantiômeros, que podem ser usados no lugar de 2-1 de acordo com Esquema 2.
ESQUEMA 4A AN A? C &- F - AN Ze o
F 1 +2 43 R Resolução quiral < ASA S 71 72 " 24 Alternativamente, epóxidos enantiopuros 7-1 ou 7-2 podem ser preparados como mostrado no Esquema 4B. O tratamento do 4-1 (onde A? é brometo, iodeto, ou sulfonato de trifluorometano) com éter vinil butílico comercialmente disponível 4-2b sob condições de paládio catalisadas com um ligando adequado (por exemplo Pd(OAc), DPPP) pode fornecer os éteres de enol 4-3b. O tratamento com NBS ou outros reagentes similares produziu as — bromometil cetonas 4-4b correspondentes. Estes podem ser submetidos a uma variedade de condições de redução de cetonas assimétrica, por exemplo com uma enzima que pode afetar uma tal transformação com enantiosseletividade alta. O tratamento subsequente com uma base tal como trietilamina leva a ciclização, produzindo os epóxidos enantioenriquecidos 7-2 (ou dependendo do agente de redução assimétrico 7-1). ESQUEMA 4B [Pd] NBS Ago ROB To o TA, 4k1 4-2b 4-3h O-n-Bu redução da = a cetona assimétrica ” a 5 & EN 72 º O Composto 14, que é substituído em ambas as posições — benzílicas com um grupo OH, pode ser preparado seguindo a sequência detalhada no Esquema 5. A ligação do epóxido 2-1 ao lI-Boc piperazina comercial 1-1 nas temperaturas elevadas leva à formação de álcool 2-2. Alternativamente, a 1-Cbz piperazina pode ser usada no lugar da 1-Boc piperazina 1-1. O grupo Ar-CHOH- no 2-2 representa um exemplo de Z!. A remoção do grupo Boc de 2-2 sob condições ácidas, tal como com HCl ou TFA, dá 2-3 (se o grupo de proteção na piperazina foi Cbz, depois o mesmo pode ser removido usando, por exemplo, hidrogênio e um catalisador tal como Pd/C). É frequentemente benéfico para o sucesso da reação de abertura do epóxido subsequente para converter 2-3 para sua forma de base livre pela 15" lavagem com uma solução de base aquosa.
A forma de base livre de 2-3 pode ser depois ligada ao epóxido à direita, que é preparada de uma maneira similar como descrito no Esquema 4, para produzir o composto 14. O grupo Ar'- CHOH- no 2-2 representa um exemplo de 7?.
ESQUEMA 5 AND aquecer HCl Ar. — Ar —— E b% SO 21 14 OH Ngoc 2-2 A SD.
Fr Ar Oh aquecer SONO OH — om LUNA, 2-1 2-3 14 Os compostos desta classe que carregam os mesmos padrões de substituição aromática (Z' é o mesmo como Z?) podem ser preparados em uma etapa tratando-se o epóxido 2-1 com piperazina nas temperaturas elevadas em solventes tais como etanol ou DMSO (Esquema 6). Os grupos Ar-CHOH- no 14' representa os exemplos de Z' ou 7?. ESQUEMA 6 Ar HN aquecer SONO OH Ar ><) LONE —D—— or LUNA, H' 214 14 A estereoquímica de epóxido é conservada durante a reação de abertura do anel.
Assim, reagir o epóxido enantio-puro com piperazina nas temperaturas elevadas dão origem ao isômero (R,R) ou (S,S) de 14º (Esquema 7). O mesmo isômero (R,S) de 14º pode ser preparado em uma sequência de abertura de epóxido escalonada com os dois enantiômeros da epóxido (Esquema 7). Os grupos de Ar-CHOH- no 14' representam os exemplos de 2! ou 7?.
ESQUEMA 7 Ar IN aquecer Di OH
A >< (ON TX oH AL 71 14 (S,S)-I' ARA, " aquecer r NO) oH ASA Oh ..———A—.— dn LUNA, e (RR) 72 11 NO aquecer Rr He! A —. — DN UA Gean 71 " 73 pas ASONON A aquecer NONO OH oH nº MNA, 74 , mm RIU O Composto 15, que é substituído em ambas as posições benzílicas com um átomo de flúor, pode ser preparado tratando-se o composto 14 com reagentes de fluoração tais como DAST em uma etapa (Esquema 8). Os gruposde Ar-CHF- no 14' representam os exemplos de Z' ou 7?. ESQUEMA 8 Ar Ar MONO od DAST VN FE om LUNA, o EF LONA, 14 15 A preparação dos compostos 16 pode ser obtida seguindo a sequência detalhada no Esquema 9. Tratar o epóxido 2-1 com 1-Boc piperazina comercialmente disponível nas temperaturas elevadas dão origem ao álcool 2-2 (Nomura, Y. et al. Chemical & Farmacêuticas Bulletin, 1995, 43(2), 241-6). O grupo hidroxila de 2-2 pode ser convertido ao fluoreto pelo tratamento de tal reagente de fluoração como DAST (Hudlicky, M. Organic
Reactions, 1988, 35). A remoção do grupo Boc 3-1 sob condições ácidas tais como TFA dão origem ao piperazina 3-2. A piperazina 32 pode ser lavada com uma solução de base aquosa seguida pela extração com solventes orgânicos para gerar a forma de base livre.
A base livre de 3-2 pode ser ligada ao epóxido5-l nas temperaturas elevadas para produzir o composto 16. Os grupos Ar-CHF- e Af-CHOH- no 16 representam os exemplos de Z' ou 7?. ESQUEMA 9 < em aquecer "EMO DAST 2-1 14 2.2 “Boc “TO — Ol rar 3-1 Pos 3-2 5-1 aquecer Ar N H so OS, 16 Procedimentos Gerais.
As reações sensíveis à umidade ou ar foram realizadas sob — nitrogênio ou argônio usando solventes e reagentes anidros.
O progresso das reações foi determinado pela cromatografia analítica de camada fina (TLC) usualmente realizada com placas de TLC pré-revestidas da E.
Merck, gel de sílica 60E-254, espessura da camada 0,25 mm ou cromatografia líquida- espectrometria de massa (LC-MS). Tipicamente o sistema de LC-MS analítico usado consistiu de uma plataforma Waters ZQ com ionização por eletropulverização no modo de detecção de fon positivo com uma HPLC série 1100 da Agilent com autoamostrador.
A coluna foi usualmente um Waters Xterra MS C18, 3,0 x 50 mm, 5 um.
A taxa de fluxo foi de 1 ml/min e o volume de injeção foi de 10 ul Adetecçãode UV foina faixa de 210 a 400 nm.
A fase móvel consistiu do solvente A (água mais 0,06 % de TFA) e solvente B (acetonitrila mais 0,05 % de TFA) com um gradiente de 100 % de solvente A por 0,7 min trocando para 100 % de solvente B em 3,75 min, mantido por 1,1 mM, depois revertendo para 100 % de solvente A em 0,2 min. As purificações pela HPLC Preparativa foram usualmente realizadas usando um sistema direcionado de espectrometria de massa. Usualmente eles foram realizados em um Waters Cromomatography Workstation configurada com Sistema LC-MS que consiste de: Sistema MS ZQ simples quad Waters com Ionização por Eletropulverização, Bomba de Gradiente Waters 2525, Injetor/Coletor Waters 2767, Detetor PDA Waters 996, as Condições de MS de: 150 a 750 amu, Eletropulverização Positiva, Coleção Deflagrada por MS e uma coluna Waters Sunfire C-18 5 mícron, 30 mm (id) x 100 mm. As fases móveis consistiram de misturas de acetonitrila (10 a 100 %) em água que contém 0,1 % de TFA. As taxas de fluxo foram mantidas a 50 ml/min, o volume de injeção foi 1800 ul e a faixa de detecção de UV foi de 210 a 400 nm. Os gradientes de fase móvel foram otimizados para os compostos individuais.
As reações realizadas usando irradiação de microonda foram normalmente realizadas usando um Otimizador Emrys fabricado pela Personal Chemistry, ou um Iniciador fabricado pela Biotage. A concentração — das soluções foi realizada em um evaporador rotativo sob pressão reduzida. À cromatografia cintilante foi usualmente realizada usando um aparelho de Cromatografia cintilante Biotage (Dyax Corp.) em gel de sílica (32 a 63 mM, 60 À de tamanho de poro) em cartuchos pré-empacotados do tamanho mencionado. Os espectros de 'H RMN foram adquiridos em espectrômetros —de500MHz em soluções de CDCI; a menos que de outro modo mencionado. As mudanças químicas foram relatadas em partes por milhão (ppm). Tetrametilsilano (TMS) foi usado como referência interna em soluções de CD;ClI e picos de CH;OH residuais ou TMS foram usados como referência interna em soluções de CD;OD. As constantes de ligação (J) foram relatadas em hertz (Hz). A cromatografia analítica quiral foi usualmente realizada em uma das colunas Chiralpak AS, Chiralpak AD, Chiralcel OD, Chiralcel IA, ou Chiralcel OJ (250 x 4,6 mm) (Daicel Chemical Industries, Ltd.) com a porcentagem mencionada de etanol em hexano (% de Et/Hex) ou isopropanol em beptano (% de IPA/Hep) como sistemas de solvente isocráticos. À cromatografia preparativa quiral foi usualmente conduzida em uma das colunas Chiralpak AS, Chiralpak AD, Chiralcel OD, Ciralcel IA, ou Chiralcel OJ (20 x 250 mm) (Daicel Chemical Industries, Ltd.) com os sistemas de solvente isocráticos desejados identificados na cromatografia analítica quiral ou pelas condições de fluido supercrítico (SFC). Onde os tempos de retenção são fornecidos, eles não são intencionados a serem uma característica definitiva de um composto particular, visto que os tempos de retenção variarão dependendo das condições cromatográficas e equipamento usado. Exceto onde o produto cristalino é mencionado no Exemplo 3B (Método 2), a terminologia que se refere ao processo de cristalização, cristais ou seus semelhantes na seção de Intermediários e Exemplos é usada para descrever o processo e o produto que resulta da precipitação de um produto sólido a partir da solução e não necessariamente significa que o sólido precipitado foi determinado estar em uma forma física cristalina.
As abreviações aqui usadas incluem:-C(O)CH;3 (Ac); ácido acético (ACOH);-OC(O)CH;3 (OAc); aquoso (aq); Cbz (benzilóxi-carbonila); N, N-diisopropiletilamina (DIEA); dietilamina (DEA); N,N-dimetilformamida (DMF); acetato de etila (EtOAc); éter dietílico (éter ou Et7O); éter de petróleo (PE); grama(s) (g); hora(s) (h ou h); 2-propanol (IPA); álcool isobutílico (IBA); espectro de massa (ms ou MS); microlitro(s) (ul); miligrama(s) (mg); mililitro(s) (ml); milimol (mmol); minuto(s) (min); éter metil butílico (MTBE); hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-ilóxi)tripirrolidino-fosfônio (PyBOP); tempo de retenção (tR); temperatura ambiente (rt ou RT); solução saturada aquosa de cloreto de sódio (salmoura); ácido trifluoroacético (TFA);
tetraidorofurano (THF); cromatografia cintilante (FC); cromatografia líquida (LC); cromatografia líquida-espectroscopia de massa (LCMS ou LC-MS); cromatografia de fluido supercrítico (SFC); t-butiloxicarbonila (Bac ou BOC); trifluoreto de dietilamino enxofre (DAST); diclorometano (DCM); dimetilacetamida (DMA; DMAC); sulfóxido de dimetila (DMSO); 1,3- Bis(difenilfosfino)propano (DPPP); ácido acético (HOAc); ácido 3- cloroperoxibenzóico (m-CPBA); metila (Me); metanol (MeOH); N- bromossuccinamida (NBS); cromatografia de camada fina (TLC); hidreto de diisobutilalumínio (DIBAL-H); Tmax (temperatura máxima); fosfato de —nicotinamida adenina dinucleotídeo (NADP).
Os seguintes são os procedimentos para a preparação dos compostos usados nos seguintes Exemplos, ou que podem ser substituídos no lugar dos compostos usados nos seguintes Exemplos que podem não ser comercialmente disponíveis.
INTERMEDIÁRIO | o
O 5-Oxirano-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 5-alil-2-benzofurano-1(3H)-ona Um frasco de fundo redondo, de 22 litros, de 4 bocas equipado com um agitador mecânico, termopar, borbulhador de nitrogênio e condensador foi carregado com 5-bromoftalida (650 g, 3,0 mol), aliltri-n- butilestanho (1200 g, 3,6 mol), tetracis trifenilfosfino de paládio (100 g, 0,089 mol), cloreto de lítio (250 g, 5,9 mol) e tolueno (8,8 litros). A mistura foi evacuada e fluxada com nitrogênio 3 vezes e depois foi agitada a 100ºC por 4 horas. Depois de esfriar lentamente até a temperatura ambiente, a mistura foi —filtradae concentrada. O sólido resultante foi purificado pela cromatografia em coluna de gel de sílica (heptano: acetato de etila, 0-> 40 %) para fornecer 5-alil-2-benzo-furano-1(3H)-ona.
'H RMN (500 MHz, CD;OD) ô 7,83 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,38 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 7,33 (s, 1 H), 5,98 (m, 1 H), 5,29 (s, 2H), 5,11-5,18 (m, 2H), 3,52 (d, J = 8,2 Hz, 2H); LC/MS: [(M + 1)* =175,1; tg =2,9 min.
Etapa B: 5-(2-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-alil-2-benzofurano-1(3H)-ona (1,53 g, 8/78 mmol) foi dissolvido em metanol (30 ml). O THF foi adicionado para solubilizar o material de partida. A mistura resultante foi esfriada em um banho de gelo seco-acetona (-78ºC) e ozona foi borbulhado na reação até que a cor da mistura mudasse par ao laranja. O nitrogênio foi borbulhado na reação por um minuto para remover o excesso de ozona. O boroidreto de sódio (0,65 g, 2,9 mmol) foi adicionado a-78ºC e a mistura de reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente. A mistura de reação foi parcialmente concentrada e depois absorvida em acetato de etila e água. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para fornecer 5-(2-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)- ona.
H RMN (500 MHz, CD;OD) 6 7,77 (m, 1 H), 7,37-7,A1 (m, 2H), 5,23 (s, 2H), 3,92 (m, 2H), 2,99 (m, 2H); LC/MS: [(M + D]J*=179,1; tr = 1,4 min.
—EtapaC:5-Oxirano-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução de 5-(2-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)-ona (0,50 g, 2,8 mmol) e EtN (0,65 ml, 4,7 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado cloreto de metanossulfonila (0,24 ml, 3,1 mmol) a 0ºC. Depois de 15 min. a mistura de reação foi vertida em cloreto de amônio saturado e extraída com diclorometano. Os orgânicos combinados foram lavados com HCl 1 N, a solução saturada de bicarbonato de sódio e salmoura, depois secada (MgSO;,) e concentrada a vácuo. O resíduo (LC/MS: [(M + DJ* = 257,2; tg-0,45 min) foi redissolvido em diclorometano (5 ml) e tratado com DBU (0,80 ml, 5,3 mmol) e agitado 2 horas. A monitoração pela TLC mostrou conversão para a olefina.
A mistura de reação foi diluída com água e extraída com diclorometano.
Os orgânicos combinados foram lavados com HCl 1 N, a solução saturada de bicarbonato de sódio e salmoura, depois secados (MgSO;,) e concentrados a vácuo.
A olefina resultante (LC/MS: [(M +DJ'=161,2; tg = 0,86 min) foi dissolvida em diclorometano (5 ml) e tratada com ácido meta-cloro perbenzóico (0,90 g, 3,7 mmol) a 0ºC.
Depois de 3 horas, a mistura foi diluída com a solução saturada de bicarbonato de sódio e extraída duas vezes com diclorometano.
Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados (MgSO;,), filtrados e — concentrados a vácuo.
O epóxido bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de gel de sílica (5-> 80 % EtOAc: hexano) para fornecer a 5-Oxirano- 2-il-2-benzoftiran-1(3H)-ona. 'H RMN (500 MHz, CD;OD) ô 7,84 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,55 (s, 1 HD, 7,52 (d, J =8,0 Hz, 1 H), 5,38 (s, 2H), 4,05 (dd, J=2,6,3,9 Hz, 1 DD, 3,21 (dd,J=4,3,5,4 Hz, 1 HD, 2,82 (dd, J=2,4,5,5 Hz, 1 HD; LC/MS: [(M + 1))*=177,1; tg-0,32 min.
INTERMEDIÁRIO 2 o | Br 5-bromo-4-metil-2-benzofuran-1(3H)-ona Etapa A: (3-bromo-2-metilfenil)]|metano] A uma solução de ácido 3-bromo-2-metil benzóico (35 g, 163 mmol) em THF (200 ml) foi adicionado o Complexo de Borano-THF (1,0 M, 212 ml, 212 mmol). A mistura foi deixada agitar por 24 horas.
A TLC mostrou uma única mancha do produto.
A reação foi extinta com água.
O solvente de THF foi removido sob pressão reduzida.
O sólido resultante foi — dissolvido em acetato de etila (500 ml), lavado com HC1 1 N, carbonato de sódio e salmoura.
A camada orgânica foi secada em sulfato de sódio e concentrada para produzir (3-bromo-2-metilfenil)-metanol. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3) 6 7,76 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 7,63 (d, J =8,0 Hz, 1 H), 5,30 (s, 2H), 2,42 (s, 3H). Etapa B: 5-bromo-4-metil-2-benzofitran-1(3H)-ona A um frasco carregado com (3-bromo-2-metilfenil)]metanol (6,0 g, 30 mmol) foi adicionada uma solução de TFA 1 M de Trifluoroacetato de Tálio (16,2 g, 29,8 mmol). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A análise pela TLC não mostrou material de partida remanescente. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo foi bombeada sob alto vácuo por 30 min para assegurar a remoção completa do TFA. Ao resíduo foi depois adicionado Cloreto de Paládio (II) (529 mg, 2,98 mmol), Cloreto de lítio (2,53 g, 59,7 mmol), óxido de magnésio (2,41 g, 59,7 mmol) e MeOH (150 ml). A reação foi fluxada com CO duas vezes e mantida sob CO na temperatura ambiente. A análise pela LC mostrou uma mancha de produto — grande dentro de 2 horas. À esta solução foi adicionado acetato de etila para precipitar os sais. A solução preta foi filtrada através de uma almofada de celite, lavada com EtOAc, absorvida em sílica e purificada pela cromatografia em gel de sílica para produzir 5-bromo-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 7,71 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 7,58(d/J=8,0Hz,1H),5,25 (s, 2H), 2,37 (s, 3H). INTERMEDIÁRIO 3 Oo
O 4-metil-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 5-etenil-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-Bromo-4-metil-2-benzofurano-1(31])-ona (598 mg, 4,47 — mmol), vinil trifluoroborato de potássio (507 mg, 2,23 mmmol, PdCl-(dppf)- CHCl;Aduto (182 mg, 0,223 mmmol) e TEA (0,622 ml, 4,47 mmol) foram adicionados a 10 ml de etanol em um tubo de microonda de 20 ml.
O tubo foi tubo foi selado e desgaseificado, depois aquecido até 140ºC por 20 min.
À análise pela LC-MS mostrou o pico do produto.
A mistura de reação foi diluída com acetato de etila, lavada com salmoura duas vezes, secada e evaporada até a secura.
O produto bruto foi purificado pela cromatografia de MPLC usando uma coluna de Redi-sep de 120 g e sistema de solvente de 0 a 80 % de ETOAC/Hexano para produzir 5-etenil-4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona. 'H RMN (500 MHz, CDCI3): à ppm 7,76 (d, J =8 Hz, 1 H), 7,03 (dd, J = 11, 17 Hz, 1 H), 5,84 (d, J= 17 Hz, 1 ), 5,55 (d J= 11 Hz, 1 HD, 5,29(s,2H),2,34(s, 3H). LC-MS: M + 1= 175; tg = 2,42 min Etapa B: 4-metil-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-etenil-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona (1,46 g, 8,38 mmol) foi adicionada ao DCM (25 ml) a 0ºC depois mCPBA (2,89 g, 16,8 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite.
À mistura de reação foi lavada uma vez com cada um de Na7S,O; saturado aquoso, NaHCO; e salmoura.
À camada orgânica foi secada em NasSO,, filtrada e evaporada até a secura. o material bruto foi purificado pela cromatografia de MPLC através da coluna de Redi-sep de 120 g eluindo com o sistema de solvente de 080 % de EtOAc/hexano para produzir 4-metil-5- —oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona alvo. 'H RMN (500 MHz, CDCI3): ô ppm 7,77 (d, J=8 Hz, 1 H), 7,43 (d, J =8 Hz, 1 H), 5,30 (s, 2 H), 4,12 (s, 1 H), 3,27 (t, J =4 Hz, 1 H), 2,735 (dd, J =2,2,5,5 Hz, 1 H) , 2,43 (s, 3H). LC- MS: M + 1 = 191; tg =2,2 min.
INTERMEDIÁRIOS 3A E 3B (Método 1) o o Q io O, elução lenta 3A elução rápida 3B —3A:4-metil-5-[(2,5)-oxiran-2-11]-2-benzofurano-1(3H)-ona 3B: 4-metil-5-([ (2R)-oxiran-2-i1]-2-benzofurano-1(3H)-ona
4-metil-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)-ona racêmica foi resolvida em uma coluna ChiralPakº AD-H (5 x 25 cm) sob condições de cromatografia de fluido supercrítico (SFC) em um instrumento de SFC preparativa Berger MGIII. O racemato foi diluído a 50 mg/ml em 1: 1 DCM: —MeOH. A separação foi realizada usando 10 % de EtOH/CO;, taxa de fluxo 200 ml/min, 100 bar, 25ºC. As injeções de 500 ul foram espaçadas a cada 2,12 min. O epóxido rápido (4-metil-5-[(2R)-oxiran-2-11]-2-benzofitran- 1(3H)-ona, 3B) eluído a 5,2 min e o epóxido lento (4-metil-5-[(2,5)-oxiran2- 11)-2-benzofizan-1(3H)-ona, 3A) eluído a 5,6 min.
Alternativamente, a resolução também pode ser obtida usando uma fase móvel de 8 % de MeOH/98 % de CO, com um taxa de fluxo de 100 ml/min. Neste caso a amostra foi preparada dissolvendo-se em metanol, 20 mg/ml e usando um | ml de volume por injeção. Depois da separação, as frações foram secadas por intermédio de evaporador rotativo na temperatura debanho40ºC.
A estereoquímica absoluta de cada enantiômero foi deduzida com base na determinação de estrutura cristalina por raio X de um composto final fabricado com 3B (EXEMPLO 2A) e pelo éster de Mosher e análise de HMN de éster de Trost dos ésteres fabricados partindo de 3B (usando 4-[(2R- —2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil)piperazino-1- carboxilato de terc-butila, preparada como descrito na síntese do INTERMEDIÁRIO (R)-8). ambos os isômeros de epóxido encontraram utilidade na presente invenção.
INTERMEDIÁRIO 3B (Método 2) ()
O —4-metil-S5-[(2R)-oxiran-2-i1]-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 3-hidroximetil-2-metil fenol
A um RB de 5 litros de 3 bocas equipado com agitador suspenso foi carregada NaBH4 (87,0 g, 2,30 mol) e THF (3,0 L) e a pasta fluida resultante foi esfriada a 10ºC.
À pasta fluida foi depois adicionado ácido 3-hidróxi-2-metil benzóico (175 g, 1,15 mol) às porções em 20 min (Tmax 17ºC). Uma pasta fluida agitável formou-se e foi envelhecida por um adicional de 45 min de 10 a 15ºC depois que BF3-OEt2 (321 ml, 2,53 moles) foi adicionado lentamente em 1,5 hora.
A pasta fluida foi envelhecida de 10ºC a 15ºC por 2 h depois ensaiada quanto a conclusão da reação (98,5 % de conversão). A pasta fluida foi esfriada a < 10ºC e extinta com 931 ml de —MeOH lentamente em 1,5 h (evolução de gás). A pasta fluida resultante foi envelhecida durante a noite na temperatura ambiente.
O lote foi esfriado a < 10ºC depois extinta com HCI 1 N (1,5 L) para se obter uma solução homogênea (pH da solução — 1), que foi envelhecida por 30 min e depois os solventes — orgânicos foram removidos pela evaporação rotativa até aproximadamente 1,8 L do volume de reação total (a temperatura do banho foi ajustada a 50ºC; a temp interna do concentrado depois da evaporação rotativa foi de — 40ºC). A pasta fluida foi mantida a 45ºC por 30 min depois esfriada lentamente a 15ºC.
Os sólidos foram filtrados e lavados com água fria (15ºC) (2 x 300 ml), fornecendo 3-hidroximetil-2-metil fenol. 'H RMN (400 MHz, DMSO-ds): 8 9,11 (s, 1 H), 6,95 (, J = 7,8 Hz, 1 HD), 6,82 (d, J] =7,4 Hz, 1 H), 6,71 (d, J =7,8 Hz, 1 H), 4,93 (t, J = 5,5 Hz, 1 H), 4,44 (d J=5,5 Hz, 2H), 2,06 (s, 3H). Etapa B: 4-Bromo-3-hidroximetil-2-metil fenol 3-Hidroximetil-2-metil fenol (113,9 g, 824,0 mmoles) foi — dissolvido em uma mistura de acetonitrila (850 ml) e ácido trifluoroacético (750,0 ml, 9,735 mmoles) em um frasco de 3 bocas de 5 L sob nitrogênio.
À mistura de reação foi esfriada a-33ºC.
N-bromo-succinimida (141 g, 791 mmoles) foi adicionada em 15 minutos, com a temperatura durante a adição na faixa de -35 a-33ºC.
A mistura de reação foi deixada agitar por um adicional de 15 min tempo durante o qual a temperatura diminuiu para-40ºC.
O banho de esfriamento foi removido e carbonato de potássio (741,0 g, 5,358 mmoles) diluído com água até um total de 1,0 L foi adicionado.
À desgaseificação foi observada e a temperatura aumentada até 25ºC.
MTBE (1,5L) foi adicionado e a mistura de reação foi transferida para um funil de separação.
As camadas foram separadas.
A camada aquosa foi diluída com água (500 ml) e extraída com MTBE (1 L) + EtOAc (500 ml) e depois MTBE (500 ml) + EtOAc (250 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (240 ml) e secadas em sulfato de sódio.
O sulfato de sódio foi removido pela filtração, lavado com adicional de MTBE e concentrado sob pressão reduzida.
MTBE (684 ml, 2 volumes) foi adicionado e a suspensão foi aquecida a 40ºC para produzir uma solução homogênea.
A solução foi deixada esfriar até a temperatura ambiente.
Seis volumes de heptano foram adicionados e a suspensão foi agitada durante a noite.
A suspensão foi filtrada eos cristais foram lavados com heptano:MTBE 4:1 (500 ml), seguido por heptano (500 ml). O sólido foi secado sob vácuo, fornecendo 4-bromo-3- hidroximetil-2-metil fenol. 'H RMN (400 MHz, DMSO-d; ): 8 9,52 (s, 1 H), 7,21 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 6,71 (d, J=8,6 Hz, 1 H), 4,88 (t, J = 5,1 Hz, 1 H), 4,59 (d J = 5,1Hz,2H),2,23(s,3H) Etapa C: 5-Hidróxi-4-metil-3H-isobenzofurano-1-ona A um frasco de 2 L de 3 bocas equipado com agitador suspenso, entrada de N, e condensador foram carregados 4-bromo-3- hidroximetil-2-metil fenol (100 g, 461 mmoles), CuCN (83,0 g, 921 mmoles) ebDMF(500ml).A solução foi espargida com N, por 15 min depois aquecida a 145ºC para obter uma solução homogênea.
A solução foi envelhecida a 145ºC por 2 h, depois a mistura de reação foi esfriada a 95ºC. 41,5 ml de água foram adicionados (espargidos com N,) e a reação envelhecida por 20 h.
A reação foi esfriada até a temperatura ambiente depois os sólidos filtrados através de solka flok e a torta lavada com 50 ml de DMF.
A um frasco de 3 L que contém 1 L de FtOAc foi adicionado o filtrado de DMF.
Um revestimento precipitado formou-se no fundo do frasco.
A suspensão de DMF/EtOAc foi filtrada através de solka flok e a torta foi lavada com 250 ml —deFtOAc.0O filtrado resultante foi lavado com 5 % de solução de salmoura (3 x 500 ml). As camadas aquosas foram extraídas com 500 ml de EtOAc e os orgânicos combinados foram secados em MgSOA4, filtrados e evaporados.
Os sólidos foram empastados em 250 ml de MTBE na temperatura ambiente depois filtrados e lavados com 100 ml de MTBE.
Os sólidos foram secados sob vácuo na temperatura ambiente, fornecendo 5-hidróxi-4-metil-3H- isobenzofuran-1-ona. 'H RMN (400 MHz, DMSO-d; ): ô 10,52 (s, 1 H), 7,51 (d J= 8,3 Hz, 1 H), 6,99 (d, J =8,3 Hz, 1 H), 5,28 (s, 2H), 2,07 (s, 3H). Etapa D: Éster 4-metil-1-o0xo-1,3-diidro-isobenzofurano-5-ílico do ácido trifluorometanossulfônico 5-Hidróxi-4-metil-3H-isobenzofurano-l-ona (46,8 g, 285 mmoles) foi colocada em suspensão em diclorometano (935 ml) no frasco de fundo redondo de 2 litros equipado com agitador suspenso sob nitrogênio.
Trietilamina (59,5 ml, 427 mmoles) foi adicionado e a mistura de reação foi — esfriada em um banho de gelo a 3,8ºC.
Anidrido trifluorometanossulfônico (67,4 ml, 399 mmoles) foi adicionado via funil de adição em 50 min, mantendo a temperatura < 10ºC.
Depois de agitar a mistura de reação por um adicional de 15 min, a mistura de reação foi extinta com água (200 ml), depois agitada com DARCOG KB (carbono ativado, 25 g) por 15 min.
À mistura bifásica foi filtrada em Solka floc, lavando com adicional de diclorometano e transferida para um funil de separação, onde a mesma foi diluída com adicional de água (300 ml). As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com água (500 ml) e 10 % de salmoura (200 ml). A solução de diclorometano foi secada em sulfato de sódio, filtrada e evaporada.
O sólido vermelho alaranjado foi absorvido em gel de sílica (27,5 g) e eluído através de uma almofada de gel de sílica (271 g) com 25 % de acetato de etila/hexanos.
A solução resultante foi concentrada sob vácuo com a cristalização do produto durante a concentração.
A suspensão foi filtrada, o sólido lavado com heptano e secado sob vácuo e nitrogênio, fornecendo o éster 4-metil-1-0x0-1,3-diidro-isobenzofuran-5-ílico do ácido trifluorometanossulfônico. 'H RMN (400 MHz, CDCI; ): 6 7,87 (d, J = 84 Hz, 1 H), 7,47 (d, J =8,4 Hz, 1 HD), 5,32 (s, 2H), 2,41 (s, 3H) Etapa E: 5-(1-Butóxi-vinil)-4-metil-3H-isobenzofurano-1-ona A um frasco de 1 L 3 bocas foi carregado o éster 4-metil-1- oxo-1,3-diidroisobenzofurano-5-lico do ácido trifluorometanossulfônico (63,0 g, 213 mmoles), DMF (315 ml), éter butil vinílico (138 ml, 1063 mmoles) depois Et;N (35,6 ml, 255 mmoles). A solução foi espargida com N, por 20 min.
À solução foi adicionado Pd(OAc), (1,19 g, 5,32 mmoles) e 155 DPPP (2,41 g, 5,85 mmoles) e espargida por um adicional de 10 min depois aquecida a 80ºC.
Depois de um envelhecimento de 1 hora, a solução foi esfriada a < 10ºC depois extinta com 630 ml de EtOAc e lavada com 5 % de NH,CI (2 x 315 ml), 10 % de salmoura (2 x 315 ml), secada em MgSO,, filtrada, concentrada pela evaporação rotativa e fluxada com EtOAc (3 x 100 ml) para remover o éter butil vinílico em excesso, fornecendo 5-(1-butóxi- vinil)-4-metil-3H-isobenzofurano-1-ona bruto. 'H RMN (400 MHz, DMSO-d; ): 85 7,67 (d, J=7,7 Hz, 1 HD, 7,48 (d, 1 =7,7 Hz, 1 H), 5,42 (s, 2H), 4,54 (d, J =2,3 Hz, 1 H), 4,27 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 3,85 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,27 (s, 3H), 1,71-1,64 (m, 2H), 1,46- 1,37 (m,2H),0,92(tJ=7,4Hz,3H) Etapa F: 5-(2-Bromo-acetil)-4-metil-3H-isobenzofurano-1-ona A um frasco de 3 bocas de 1 litro equipado com agitador suspenso foi adicionada 5-(1-butóxi-vinil)-4-metil-3H-isobenzofurano-1-ona bruta (55,8 g) e THF (315 ml). A solução foi esfriada até < 5ºC depois que água (79 ml) foi adicionada e a solução foi mantida a < 5ºC.
O NBS (41,6 g) foi depois adicionado às porções enquanto mantendo a Tmax = 19ºC.
À solução foi depois aquecida até a temperatura ambiente por 30 minutos.
HBr (48 %, 0,241 ml) foi adicionado e a reação foi envelhecida na temperatura ambiente por aproximadamente | hora depois que 236 ml de água foram depois adicionados ao lote.
Um banho de água é usado para manter a temperatura a 20ºC.
Mais 315 ml de água foram adicionados (composição de solvente 1:2 THF:água) e a pasta fluida foi esfriada até 15ºC.
Os sólidos resultantes foram filtrados e lavados com THF:água 1:2 frio (15ºC): 150 ml —delavagem de deslocamento seguidos por 100 ml de lavagem de pasta fluida.
Os sólidos foram secados sob vácuo na temperatura ambiente para fornecer 5- (2-bromo-acetil)-4-metil-3H-isobenzofurano-l1-ona. 'H RMN (400 MHz, DMSO-ds): 8 7,99 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,82 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 5,49 (s, 2H), 4,92 (s, 2H), 2,33 (s, 3H)
Etapa G: 4-metil-S-[(2R)-oxiran-2-i1]-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-(2-Bromo-acetil)-4-metil-3H-isobenzofuran-l-ona (48,8 eg, 181 mmoles) foi carregada a um frasco de fundo redondo de 3 bocas de 5 litros equipado com agitador suspenso, termopar e manta de aquecimento. 2- Propanol (1,22 litro) foi adicionado, seguido por 610 ml de tampão de fosfato — de potássio 0,1 M no pH 7. A solução de tampão (610 ml) foi carregada em um erlenmeyer de 1,0 litro e 244 g de NADP foram adicionados ao erlenmeyer e rotacionado até dissolver.
Uma enzima de redução, KRED MIF- 20 (2,44 g) (disponível da Codexis, Inc., 200 Penobscot Drive, Redwood City, CA 94063, www.codexis.com, tel. 1650-421-8100) foi adicionado ao frasco — de erlenmeyere a mistura foi rotacionada até dissolver os sólidos.
A solução resultante foi adicionada ao frasco de fundo redondo de 5 L, que foi depois aquecido a 28ºC e envelhecido por 6 horas, ponto no qual a reação foi esfriada até a temperatura ambiente e trietilamina (50,2 ml, 360 mmoles) foi adicionada.
A solução resultante foi envelhecida a 40ºC por 1 h.
A solução de pasta fluida leve foi esfriada até a temperatura ambiente, depois que 122 g de NaCl foram adicionados. A solução foi envelhecida na temperatura ambiente depois extraída com 1,22 L de acetato de isopropila (IPAc). A camada aquosa foi re-extraídas com 400 ml de IPAc e os orgânicos combinados foram lavados com 400 ml de solução de salmoura a 20 %, secada em MgSO,, filtrada e concentrada pela evaporação rotativa. Os sólidos resultantes foram absorvidos em 100 ml IPAc (pasta fluida espessa). Hexanos foram adicionados (400 ml) e a suspensão envelhecida na temperatura ambiente depois filtrada e lavada com solução 5:1 de Hexanos:IPAc (150 ml). Os sólidos cristalinos foram secados sob vácuo na temperatura ambiente para fornecer 4-metil-5-[(2R)-oxiran-2-i1]-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3): 8 7,75 (d, J =8,1 Hz, 1 H), 7,42 (d, J =8,1 Hz, 1 H), 5,28 (s, 2H), 4,10 (dd, J = 4,0, 2,8, 1 H), 3,26 (dd, J = 5,6, 4,0, 1 H), 2,72 (dd, J = 5,6, 2,8, 1 HD), 2,42 (s, 3H) INTERMEDIÁRIO 4 Oo
TA N
OH q.
o 1,1-dimetiletil-4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-o0xo-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetillpiperazino-1-carboxilato A um tubo de microonda de 25 ml foram adicionados 4-metil- 5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona (1,2 g, 6,0 mmoles, 1,0 eq) e piperazino-l-carboxilato de terc-butila (1,7 g, 9,0 mmoles, 1,5 eq). À mistura foi adicionado EtOH (15 ml). A reação foi aquecida em um aparelho de microonda a 150ºC por 30 min. A mistura de reação foi concentrada até a secura. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna cintilante produzindo o 1,1-dimetiletil-4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-
benzofurano-5-il)etil |piperazino-1-carboxilato. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3, 5 em ppm): 7,80 (1H, s), 7,26 (1H, s), 5,25 (2H, s), 5,10 (1H, dxd, J = 3,0 Hz, J = 10,8 Hz), 3,50 (4H, m), 2,73 (2H, m), 2,53-2,40 (4H, m), 2,28 (3H, s, Me), 1,47 (9H, s). LC-MS (IE, m7):377,1][M+1];tg=2,] min. INTERMEDIÁRIO 5
O
DO F O. HCI Cloridrato de 5-(1-fluoro-2-piperazin-1-iletil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)- ona Etapa A: 1,1-dimetiletil-4-[2-fluoro-2-(4-metil-1-0x0-1,3- —diidro-2-benzofuran-5-iDetil]piperazino-1-carboxilato 1,1-Dimetiletil-4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil Ipiperazino-lI-carboxilato (0,500 g, 1,46 mmol) foi adicionado a um frasco de 25 ml que contém uma barra agitadora e dissolvido em THF (4 m)). À solução foram adicionados DAST (0,232 ml, 1,76 mmol) e trietilamina (0,175 ml, 1,33 mmol) e subsequentemente agitados por 45 min; a LC bem como a TLC (hexanos/EtOAc = 1/0,3) indicaram que reação foi até a conclusão. A mistura de reação foi concentrada até a secura, absorvida em gel de sílica e carregada em coluna de sílica. O composto 1,1-dimetiletil-4-[2- fluoro-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofuran-5-il)etil |piperazino-1- — carboxilato foi obtido. Etapa B: Cloridrato de 5-(1-fluoro-2-piperazin-l-iletil)-4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona 1,1-Dimetiletil-4-[2-fluoro-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofuran-5-il)etil |piperazino-1-carboxilato (0,18 g) foi tratado com HCI 4 Mem dioxano (4 ml) e agitada na temperatura ambiente por 1 h. A mistura foi depois concentrada até a secura. A análise pela LC indicou a remoção completa do grupo Boc e formação do composto cloridrato de 5-(1-fluoro-2- piperazin-1-iletil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (DMSO, 500 MHz), ô 7,744 (d, J =7,5 Hz, 1 H), 7,612 (d, J=7,5 Hz, 1 H), 6,264-6,167 (m, 1 H), 5,382 (s, 2H), 3,362-3,309 (m, 2H), 3,255-3,125 (m, 8H), 3,078-3,049 (m,1H),2,499(s,3H) INTERMEDIÁRIO 6
O
DO Ove OX He! Cloridrato — de —4-metil-5-[1-(metilóxi)-2-piperazin-1-iletil]|-2-benzofuran- 1(3H)-ona Etapa A: 1,1-dimetiletil-4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-S-il)-2- —(metilóxi)etil]l-piperazino-l-carboxilato 1,1-Dimetiletil-4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil Ipiperazino-lI-carboxilato (0,10 g, 0,27 mmoles) foi combinado em um frasco de 50 ml com DMF (2 ml) e DCM (1 ml) e o frasco foi colocado em um banho de esfriamento a-20ºC. A mistura foi depois tratada com NaH (0,021 g, 0,53 mmol) e agitada por 30 minutos, seguido pela adição de iodometano (0,0414 ml, 0,664 mmol) a-20ºC. A mistura resultante foi agitada por mais 1 h depois que a análise pela LC bem como TLC (5 % MeOH em DCM) indicaram que a reação foi até a conclusão. A mistura de reação foi extinta pela adição de MeOH e agitada por 10 min na temperatura ambiente. A mistura de reação foi concentrada até a secura, dissolvida em EtOAc e absorvida em gel de sílica onde a mesma foi separada na coluna de sílica; para obter 1,1-dimetiletil-4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)-2-(metilóxi)etil]-piperazino-1!-carboxilato foi isolado.
Etapa B: cloridrato de 4-metil-5-[1-(metilóxi)-2-piperazin-1-iletil]-2- — benzofurano-1(3H)-ona 1,1-Dimetiletil-4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-
5-11)-2-(metilóxi)etil Jpiperazino-1l-carboxilato foi tratado com HCl 4 M em dioxano (4 ml) e agitados na temperatura ambiente por 1 h. A mistura de reação foi concentrada até a secura. A análise pela LC indicou a remoção completa do grupo Boc e formação do composto cloridrato de 4-metil-5-[1- —(metilóxi)-2-piperazin-l-iletil]l-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (DMSO, 500 MHz), ô 7,747 (d, J =7,5 Hz, 1 HD), 7,577 (d, 1] =7,5 Hz, 1 H), 5,402- 5,388 (m, 2H), 5,113 (d, J=9 Hz, 1 H), 3,850 (s, 3H), 3,496-3,327 (m, 811), 3,228-3,140 (m, 3H), 2,500 (s, 3H). INTERMEDIÁRIO 7
O
TA * OX HCI Cloridrato de 5-[1-(etilóxi)-2-piperazin-l1-iletil]-4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona Etapa A: 1,1-dimetiletil-4-[2-(etilóxi)-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-iDetil]piperazino-1-carboxilato 1,1-Dimetiletil-4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- —Dbenzofurano-5-il)etilJpiperazino-l-carboxilato (0,15 g, 0,40 mmol) em um frasco de 50 ml foi dissolvido em DMF (1,5 ml) e DCM (1,5 ml) e o frasco foi colocado em um banho de esfriamento a-30ºC. A mistura foi depois tratada com NaH (0,023 g, 0,99 mmol) e a mistura resultante foi agitada por 30 minutos, seguido por tratamento com iodoetano (0,080 ml, 0,99 mmol) a- 30ºC.A mistura resultante foi agitada por mais 1 h depois que a LC bem como a TLC (5 % de MeOH em DCM) indicaram que a reação foi até a conclusão. A mistura de reação foi extinta com MeOH e agitada por 10 min na temperatura ambiente. A mistura de reação foi depois concentrada até a secura, dissolvida em EtOAc e absorvida em gel de sílica onde a mesma foi — separada em coluna de sílica para produzir de 1,1-dimetiletil-4-[2-(etilóxi)-2- (4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil |piperazino-1-carboxilato.
'H RMN (CDCl;3, 500 MHz), ô 7,683 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,554 (d, J=8 Hz, 1 H), 5,200 (s, 2H), 3,356 (s, 1H), 2,899-2,810 (m, SH), 2,703- 2,660 (m, 8H), 2,253 (m, 2H), 1,405 (s, 3H), 1,386 (s, 9H). Etapa B: Cloridrato de 5-[1-(etilóxi)-2-piperazin-l-iletil]-4-metil-2- — benzofurano-1(3H)-ona. 1,1-Dimetiletil-4-[2-(etilóxi)-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil Jpiperazino-1-carboxilato foi tratado com HCl 4 M em dioxano (4 ml) e agitada na temperatura ambiente por 1 h. A mistura de reação foi concentrada até a secura. A análise pela LC indicou a remoção completa do grupo Boc e a formação do cloridrato de 5-[1-(etilóxi)-2- piperazin-1-iletil]|-4-metil-2-benzofuran-1(3H)-ona. LC-MS (IE, m/z): 305 [M + 1]*; tg-0,69 min INTERMEDIÁRIO 8 o o CX Cloreto de 1-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5S-il)-etil]- piperazin-l-io terc-Butil-4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo- furano-5-il)etil piperazino-lI-carboxilato (800 mg, 2,1 mmoles, 1,0 eq) foi tratado com HCl 4 N em dioxano (4 ml). A reação foi agitada na temperatura ambiente por 3 h e depois concentrada. O produto foi secado sob bomba de alto vácuo por 6 horas. O intermediário é frequentemente convertido para a base livre correspondente antes do uso dividindo-se entre solução saturada de NasxCO; e CHCI;3-IPA (3:1). LC-MS (IE, nn/z): 277,1 [M + 1); tg = 0,4 min. INTERMEDIÁRIO (R)-8 (base livre) o
DO
5-[(1R)-1-hidróxi-2-piperazin-1-iletil|-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona Ao tubo de microonda de 20 ml carregado com 4-metil-5- [(2R)-oxiran-2-il]-2-benzofurano-1(3H)-ona (1020 mg, 5,40 mmoles) e uma barra agitadora foi adicionado 1-Boc piperazina (800 mg, 4,3 mmoles) e EtOH(15ml).O tubo foi selado e aquecido em um aparelho de microonda a 150ºC por 1 hora.
O produto bruto foi absorvido em gel de sílica e purificado pela cromatografia cintilante (Hexanos-EtOAc com 10 % de EtOH: 0 a 100 % de gradiente) e o solvente removido para produzir terc-butil-4-[(2R-2-hidróxi- 2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofuran-5-il)etil |piperazino-l-carboxilato.
LCMS M + 1 (calc. 377,20, encontrado 377,13). Este produto foi tratado com TFA puro por 15 minutos para remover o grupo Boc.
Depois da remoção do TFA sob pressão reduzida, o resíduo foi coletado em NaHCO; aq e retro- extraído com CHCI;3-IPA (3:1). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas em sulfato de sódio e concentradas para produzir 5-[(1R)-1-hidróxi-2- —piperazin-l-iletil]-4-metil-2-benzofurano-1(3/1)-ona. 'H RMN (DMSO-d;, 500 MHz) 6 7,68 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 7,65 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 5,38, 5,35 (sistema AB, J = 15,4,J = 16,7, 2H), 5,06 (dd, J =3,9 Hz, J] =3,7 Hz, 1 H), 3,76 (m, 1 H), 2,72 (m, 4H), 2,42 (m, 4H), 2,34 (d, J =3,8 Hz, 1 H), 2,32 (d, J =3,8 Hz, 1 H), 2,24 (s, 3H); LC/MS: (IE, m/2)[M+1]*"=277,03. INTERMEDIÁRIO 9 O, o “E 4,6-dimetil-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: ácido 3-bromo-2,4-dimetilbenzóico Ácido 2,4-Dimetilbenzóico (7,00 g, 46,6 mmoles) e NBS (12,4 —g 69,9 mmoles) foram dissolvidos em TFA (150 ml). A mistura foi depois aquecida a 50ºC durante a noite.
A análise pela LC bem como TLC
(hexanos/EtOAc = 1/1) indicaram que a reação foi até a conclusão.
O solvente foi removido a vácuo e o resíduo resultante foi dissolvido em DCM, absorvido em gel de sílica e carregado em uma coluna MPLC de sílica para a separação.
O produto desejado foi separado usando o sistema de solvente de — hexanos/EtOAc (1/1) para produzir o ácido 3-bromo-2,4-dimetilbenzóico.
O ácido 5-bromo-2,4-dimetilbenzóico isomérico não desejado também foi isolado. 'H RMN (CDCl;3, 500 MHz), ô 7,868 (d, J =7,5 Hz, 1 Hd), 7,2 (d J = 7,5 Hz, 1H),2,793 (s, 3H), 2,526 (s, 3H). Etapa B: (3-bromo-2,4-dimetilfenil)]metano]
O ácido 3-Bromo-2,4-dimetilbenzóico (6,50 g, 28,4 mmoles), em THF (50 ml) foi tratado com complexo de borano tetraidrofurano (42,6 ml, 42,6 mmoles) e agitados por 12 h.
A análise pela LC indicou que a reação foi até a conclusão.
A solução foi concentrada até a secura, redissolvida em DCM e lavada com salmoura.
A camada orgânica foi secada em Na3SO,,
filtrada e concentrada.
O (3-bromo-2,4-dimetilfenil )]metanol resultante foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. 'H RMN (CDCl;3, 500 MHz), 8 7,227 (d, J=7,5 Hz, 1 H), 7,122 (d, J =7,5 Hz, 1 H), 4,730 (m, 2H), 2,492 (s, 3H), 2,456 (s, 3H). Etapa C: 5-bromo-4,6-dimetil-2-benzofuran-1(3H)-ona
(3-bromo-2 4-dimetilfenil) metanol (2,0 g, 9,3 mmoles) e trifluoroacetato de tálio (III) (7,50 g, 14,0 mmoles) foram adicionados a um frasco de 250 ml que contém uma barra agitadora.
O frasco foi depois colocado em um banho de esfriamento a 0ºC.
Ao frasco foi adicionado TFA (150 ml) lentamente.
A mistura resultante foi depois agitada na temperatura
— ambiente durante a noite.
O TFA foi removido sob pressão reduzida a 30ºC e o resíduo resultante foi redissolvido em dicloroetano e concentrado duas vezes (2 X 100 ml). O resíduo foi depois bombeado sob alto vácuo por 45 min.
Ao resíduo seco foi depois adicionado dicloreto de paládio (165 mg, 0,930 mmol), cloreto de lítio (788 mg, 18,6 mmoles) e cloreto de magnésio
(750 mg, 18,6 mmoles). A mistura resultante foi dissolvida em MeOH (160 ml). A mistura foi depois desgaseificada e purgada com CO (3 vezes). O frasco sob CO foi agitado na temperatura ambiente por 4 horas; a cor da mistura de reação mudou de branco para creme depois para amarronzado.
À corda reação depois finalmente mudou de amarronzado para preto tempo no qual a reação foi até a conclusão como evidenciado pela análise de LC bem como TLC (hexanos/EtOAc = 1/0,3). A mistura de reação foi depois vertida em um Frasco de erlenmeyer de 1 L que contém DCM (400 ml) e EtOAc (400 ml). A solução foi depois passada através de um tampão de celite e enxaguada — várias vezes com DCM até que todo o material aorgânico passasse através.
À solução foi depois concentrada até a secura, re-dissolvida em DCM, absorvida em gel de sílica e separada em coluna de sílica para dar a 5-bromo-4,6- dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona.
LC-MS: M + 1 =242 Etapa D: 5-etenil-4,6-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-Bromo-4,6-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona (375 mg, 1,56 mmol), vinil trifluoroborato de potássio (417 mg, 3,11 mmoles), Pd(dppf)Cl, (127 mg, 0,156 mmol) e trietilamina (409 ul, 3,11 mmoles) foram combinados juntos em EtOH (10 ml) e aquecidos a 140ºC por 30 min.
À análise pela LC bem como TLC (hexanos/EtOAc = 1/0,3) indicaram que a — reação foi até a conclusão.
A mistura de reação foi depois diluída com EtOAc, lavada com NaCl, secada em NasSO,, filtrada e concentrada até a secura.
O resíduo resultante foi depois re-dissolvido em diclorometano, absorvido em gel de sílica, concentrado e carregado em uma coluna de MPLC sílica para a separação para produzir 5-etenil-4,6-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (CDCl3, 500 MHz), ô 7,626 (s, 1H), 6,771-6,712 (m, 1H), 5,746-5,723 (m, 1 HD, 5,383-5,346 (m, 1H), 5,254 (s, 2H), 2,415 (s, 3H), 2,349 (s, 3H). Etapa E: 4,6-dimetil-S-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-Etenil-4,6-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona (150 mg, 0,797 mmol), mCPBA (275 mg, 1,59 mmol), foram combinados juntos em DCM (20 ml) e agitados na temperatura ambiente por 12 h.
A mistura de reação foi depois diluída com DCM e lavada com solução de Na7S2O;3, solução de NaHCO; e salmoura.
A camada orgânica foi secada em Na7SO;,, filtrada e concentrada até a secura.
O resíduo resultante foi depois re-dissolvido em DCM, absorvido em gel de sílica, concentrado e carregado em coluna de sílica para a separação dando a 4,6-dimetil-5-oxiran-2-il-2-benzofurano- 1(3H)-ona. 'H RMN (CDCl;3, 500 MHz), ô 7,591 (s, 1 H), 7,296 (s, 1H), 5,252 (s, 2H) 4,028 (s, 1 HD, 3,762-3,749 (m, 1H), 3,299 (s, 1 H), 2,524 (s, 3H), 2,423 (s, 3H) INTERMEDIÁRIO 10 o Br O 4-bromo-5-oxiran-2-i11l-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 4,5-dibromo-2-benzofurano-1(3H)-ona A um frasco contendo uma barra agitadora foi adicionado 5- bromo-2-benzofurano-1(3H)-ona (12,0 g, 56,3 mmoles) e NBS (15 g, 84 mmoles). Ácido tríflico (50 ml) foi depois adicionado a 0ºC e a mistura resultante foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitar por 2 dias.
A análise de TLC da mistura de reação mostrou a reação completa.
A mistura — de reação foi vertida em gelo e a camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, água, secada em Na7SO;, filtrada e concentrada até a secura.
O resíduo foi depois absorvido em gel de sílica e submetido à purificação em uma coluna de MPLC de sílica para dar 4,5-dibromo-2-benzofurano-1(3H)- ona.
LC-MS: M + 1 =291 — EtapaB:4-bromo-5-etenil-2-benzofurano-1(3H)-ona 4,5-Dibromo-2-benzofurano-1(3H)-ona (3,00 g, 10,3 mmoles),
vinil trifluoroborato de potássio (12,7 g, 20,6 mmoles) e Pd (dppf)Cl, (839 mg, 1,03 mmol) em TEA (2,7 ml) e EtOH (15 ml) foram aquecidos a 60ºC por 2 h.
A análise pela TLC mostrou reação limpa e completa.
A mistura de reação foi diluída com EtOAc (500 ml), lavada com salmoura, secada em sulfato de sódio, filtrada e concentrada.
O resíduo resultante foi submetido à purificação em gel de sílica para dar 4-bromo-5-etenil-2-benzofurano-1(3H)- ona. 'H RMN (CDCI;3, 500 MHz), ô 7,867 (d, J =8 Hz, 1 H), 7,768 (d, J=7,5 Hz, 1 H), 7,184-7,127 (m, 1 HD), 5,957 (d, J] = 17,5 Hz, 1 HD), 5,643 (dJ=11Hz,1H),5,251 (m, 2H) Etapa C: 4-bromo-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução de 4-bromo-5-etenil-2-benzofurano-1(3H)-ona (2,00 g, 8,37 mmoles) em DCM (20 ml) foi lentamente adicionado MCPBA (2,60 g, 8,37 mmoles) a 0ºC.
O frasco foi aquecido até a temperatura 15" ambientee a mistura foi depois agitada por 12 horas.
A análise pela TLC bem como LC indicaram que a reação foi até a conclusão.
A mistura de reação foi lavada com NasS,O; aquoso, NaHCO; e água.
A camada orgânica foi lavada com salmoura e depois concentrada até a secura.
O resíduo foi purificado em gel de sílica para dar 4-bromo-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (CDCI;3, 500 MHz), ô 7,896 (d, J] = 8 Hz, 1 H), 7,547 (d, J=7,5 Hz, 1 H), 5,274 (m, 2H), 4,273 (s, 1 HD, 3,314 (s, 1 HD), 2,733 (s, 1 H). INTERMEDIÁRIO 11 Oo Cl o 4-cloro-S-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona — Etapa A:2-cloro-3-(hidroximetil)fenol A uma solução de 2-cloro-3-hidroxibenzaldeído (8,10 g, 51,7 mmoles) em MeOH foi adicionado NaBH, (1,96 g, 51,7 mmoles) a 0ºC.
À reação foi deixada agitar por 30 minutos.
A TLC mostrou conversão limpa para uma mancha mais polar.
A reação foi diluída com EtOAc (400 ml), lavada com água e salmoura, secada em sulfato de sódio e concentrada.
O 2- cloro-3-(hidroximetil)fenol bruto foi usado na etapa B sem outra purificação.
Etapa B: 4-bromo-2-cloro-3-(hidroximetil)fenol Ao frasco carregado com 2-cloro-3-(hidroximetil)fenol da Etapa A e uma barra agitadora foi adicionado NBS (10,8 g, 60,5 mmoles) e TFA (50 ml). A reação foi deixada agitar por 16 horas na temperatura ambiente.
A TLC mostrou a reação completa neste ponto.
O solvente foi removido sob vácuo.
O resíduo foi re-dissolvido em EtOAc, lavado com água e purificado pela cromatografia cintilante em gel de sílica.
Um par de regio- isômeros foi coletado da separação.
A mancha menos polar foi o 4-bromo-2- cloro-3-(hidroximetil)fenol desejado de acordo com a análise de RMN noe. 'HRMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 6,92 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 4,96 (s, 2H). Etapa C: 4-cloro-5-hidróxi-2-benzofurano-1(3H)-ona A um frasco carregado com 4-bromo-2-cloro-3- (hidroximetil)fenol (244 g, 10,3 mmoles) e uma barra agitadora foi — adicionado CuCN (2,76 g, 30,8 mmoles) e DMF (25 ml). O frasco foi adaptado com um condensador e purgado três vezes com nitrogênio.
À solução foi depois aquecida a 145ºC por 2 horas.
Neste ponto, água (0,555 ml, 30,8 mmoles) foi adicionada à reação via uma seringa e a reação foi mantida a 100ºC por mais 24 horas.
A reação foi esfriada até a temperatura ambiente, diluída com DCM (100 ml) e filtrada através de uma almofada de celite para remover os sólidos.
O filtrado foi lavado com NH,OAc saturado, secado em sulfato de sódio, concentrado e purificado pela cromatografia cintilante em gel de sílica.
A 4-cloro-5-hidróxi-2-berizofurano-1(3H)-ona foi coletada depois da remoção dos solventes. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 9,13 (amplo, 1 H), 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 7,19 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 5,23 (s, 2H). Etapa D: 4-cloro-5-etenil-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução fria de 4-cloro-5-hidróxi-2-benzofurano-1(3H)- ona(1,39g,7,53mmoles) em DCM (25 ml) foi adicionada Base de Hunig (3,29 ml, 18,8 mmoles) e anidrido trifluorometanossulfônico (2,54 ml, 15,1 mmoles). A mistura foi deixada agitar por 16 horas.
A análise pela TLC mostrou o consumo completo de todo o material de partida.
A reação foi diluída com Hexano e lavada com água.
A solução foi secada com sulfato de — sódio, concentrada e purificada pela cromatografia cintilante em uma coluna de sílica.
O solvente foi removido sob pressão reduzida para dar o triflato intermediário.
LC-MS (M + 1 =317). Ao triflato foram adicionados uma barra agitadora, vinil trifluoroborato de potássio (1,33 g, 9,90 mmoles), PdCl>(dppf) (0,243 g, 0,332 mmol), trietilamina (1,89 ml, 13,3 mmoles) e iso-propanol (50 ml). A mistura foi purgada três vezes com nitrogênio e aquecida a 60ºC por 2 horas.
A TLC mostrou reação completa neste ponto.
A maior parte do solvente foi removida sob vácuo.
O resíduo bruto foi diluído com EtOAc (200 ml), lavado com salmoura, secado em sulfato de sódio, absorvido em gel de sílica e purificado — pela cromatografia cintilante para dar a 4-cloro-5-etenil-2-benzofuran-1(3H)- ona. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 7,82 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 7,70 (d, J =8,0 Hz, 1 H), 7,18 (dd, J=11,17,5 Hz, 1 H), 5,97 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 5,65 (d, J=11 Hz, 1 HD), 5,31 (s, 2H). —EtapaE:d4-cloro-5-oxiran-2-il-2-benzafurano-1(3H)-ona A uma solução de 4-cloro-5-etenil-2-benzofurano-1(3H)-ona (1,1 g, 5,7 mmoles) em DCM (40 ml) foi adicionado m-CPBA (1,9 g, 8,5 mmoles). A solução foi deixada agitar na temperatura ambiente por 16 horas.
A análise pela TLC e LC mostrou a formação do produto desejado, junto com algum material de partida não tocado. A reação foi diluída com DCM (200 ml), lavada com Na7sS;O; e NaCO; aquosos, secada em sulfato de sódio, concentrada e purificada pela cromatografia cintilante em gel de sílica para produzir 4-cloro-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona.
'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 7,86 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 7,48 (d, J=8,0 Hz, 1 HD), 5,34 (s, 2H), 4,33 (m, 1 HD), 3,33 (m, 1 H), 2,75 (m, 1H).
INTERMEDIÁRIO 12 (racemato e os enantiômeros individuais) o EX, Oo 6-metil-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 5-prop-2-en-1-il-2-benzofuran-1(3H)-ona Uma mistura de 5-bromo-2-benzofurano-1(3H)-ona (15,0 g, 70,4 mmoles), alil-tributil-estanano (25,6 g, 77,5 mmoles), LiCI (11,8 g, 282 mmoles) e Pd(PPh3)s (1,2 g, 1,0 mmol) em 100 ml de tolueno foi aquecida sob N, de 90 a 100ºC durante a noite. Depois de esfriar até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com 250 ml de EtOAc e filtrada. O filtrado foi lavado com água e salmoura, secado em Na7SO, anidro e concentrado até a secura. O resíduo foi purificado via coluna (DCM/Éter de Petróleo-1:5) para dar a 5-prop-2-en-1-11-2-benzo-furano-1(3H)-ona. Etapa B: 5-(2-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução de 5-prop-2-en-1-11l-2-benzofuran-1(3H)-ona (13,5 g, 45,2 mmoles) em 200 ml de DCM/MeOH (V/V = 1:1) foi borbulhado Os; a-78ºC por 30 min e N, foi borbulhado por mais 15 min a-78ºC. Depois 20 ml de MeyS foram adicionados e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite antes de concentrar até a secura. O resíduo foi — dissolvido em MeOH (100 ml) e depois esfriado até 0ºC. NaBH, (5,90 g, 155 mmoles) foi adicionado em porções. A mistura resultante foi agitada a 0ºC por | h, depois extinta com ácido cítrico (aq.) e extraídas três vezes com EtOAc.
As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCO; (aq.) e salmoura, secadas em Na7sSO, anidro e concentradas até a secura.
O resíduo foi purificado via cromatografia de coluna (EtOAc/Éter de Petróleo = 1:5) —paradara5-(Q-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,86 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,41 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,38 (s, 1 HD), 5,29 (s, 2H), 3,92-3,98 (m, 2H), 3,01 (t, J-6,4 Hz, 2H). Etapa C: 5-(2-hidroxietil)-6-iodo-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução esfriada (0ºC) de 5-(2-hidroxietil)-2- benzofurano-1(3H)-ona (9,00 g, 50,6 mmoles) em 100 ml de TfOH foi adicionado NIS (12,5 g, 55,6 mmoles), depois a mistura foi agitada a 0ºC por 2 horas e depois vertida em água gelada (500 ml). A solução foi extraídas três vezes com 500 ml de EFtOAc e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCO; saturado e salmoura, secadas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas.
O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna (EtOAc/Éter de Petróleo-1:5) para dar a 5-(2-hidroxietil)-6-iodo-2- benzofurano-1(3H)-ona desejada (6 g) e o sub-produto isomérico 5-(2- hidroxietil)-4-10do-2-benzofurano-1(3H)-ona, 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,84 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,46 (d, J] =7,8 Hz, 1 HD), 5,09 (s, 2H), 3,93 (q, J = 6,3 Hz, 2H), 3,16 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 1,45 (t, J =5,5 Hz, 1 DD.
Etapa D: 5-(2-hidroxietil)-6-metil-2-benzofuran-1(3H)-ona A um frasco carregado com 5-(2-hidroxietil)-6-iodo-2- — benzofurano-1(3H)-ona (6,00 g, 19,7 mmoles) e uma barra agitadora foi adicionado Pd7(dba); (452 mg, 0,493 mmol), PPh;3 (1 g, 4 mmoles) e NMP (50 ml). A mistura foi purgada com N, e aquecida a 50ºC por 10 min, seguida pela adição de CulI (375 mg, 1,97 mmol). Depois a mistura foi aquecida por mais 10 min, Sn(CH;3)a (5,30 g, 29,6 mmoles) foi adicionado na reação e a mesma foi aquecida a 120ºC por 2 h.
Depois de esfriada até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com NH,CI saturado (200 ml) e extraída com EtOAc (3*200 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secadas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas.
O resíduo foi purificado pela prep-HPLC para dar 5-(2-hidroxietil)-6-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm 7,72 (s, 1 H), 7,33 (s, 1 ED, 5,27 (s, 2H), 3,93 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 3,01 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,44 (s, 3H). Etapa E: Metanossulfonato de 2-(6-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetila A uma solução de 5-(2-hidroxietil)-6-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona (1,20 g, 6,25 mmoles) e TEA (2,5 g, 25 mmoles) em DCM (100 ml) foi adicionado MsCI (1,40 g, 12,5 mmoles) a 0ºC.
A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite, depois foi lavada com água e —salmoura.
À camada orgânica foi secada e concentrada até a secura.
O metanossulfonato de 2-(6-metil-1-o0x0-1,3-diidro-2-benzo-furano-5-il)etila coletado foi usado para a etapa seguinte sem nenhuma purificação.
Etapa F: 5-etenil-6-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma mistura de metanossulfonato de 2-(6-metil-1-0x0-1,3- — diidro-2-benzofuran-5-il)etila (2,00 g, 7,41 mmoles) e TEA (5 ml) em DCM (50 ml) foi adicionado DBU (5 ml) lentamente a 0ºC.
A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite e depois foi diluída com 50 ml de DCM, lavada com HCI 2 N em três vezes e salmoura.
A camada orgânica foi secada e concentrada até a secura.
O resíduo foi purificado pela prep-TLC para dar 5- — etenil-6-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona.
Etapa G: 6-metil-5-oxiran-2-il-2-benzofuran-1(3H)-ona A uma solução de 5-etenil-6-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona (1,00 g, 5,75 mmoles) em 50 ml de DCM foi lentamente adicionado mCPBA (3,50 g, 17,4 mmoles) em 50 ml de DCM a 0ºC.
A mistura foi aquecida até a
T2 temperatura ambiente e agitada por 2 dias.
A mistura foi lavada com Na/SO; aquoso até que o papel indicado de KI não mudou de cor.
A camada orgânica foi lavada com salmoura e depois concentrada.
O resíduo foi purificado via coluna de sílica para dar o produto 6-metil-5-oxiran-2-il-2-benzofuran-1(3H)- ona LC-MS M + 1 (calc. 191, encontrado 191). Os enantiômeros do produto foram resolvidos via HPLC quiral (Coluna: Chiralpak AD-H 250*4,6 mm D.LI., 5 um; Fase móvel: metanol 15 % em MeCN). Isômero A: LC-[MS M + 1] 191. Isômero B: LC-[MS M + 1] 191. INTERMEDIÁRIO 13 o 6 * 4-(metilóxi)-S-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: (3-Bromo-2-metoxifenil)metanol Em um frasco de fundo redondo de 250 ml, ácido 3-bromo-2- metoxibenzóico (4,0 g, 17 mmoles, 1,0 eq) foi dissolvido em THF (100 ml). A solução foi esfriada até 0ºC.
À solução acima foi adicionada às gotas complexo de borano/THF (1 N, 17,3 ml, 17,3 mmoles). A solução foi aquecida até a temperatura ambiente e deixada agitar na temperatura ambiente —porl5 horas.
A reação foi extinta com a adição de cloreto de amônio aquoso e concentrada.
À mistura foi diluída com EtOAc, lavada com HCI 1 N seguido por solução aquosa de bicarbonato de sódio, salmoura e água.
A fase orgânica foi secada em MgSOA4, filtrada e concentrada.
O produto bruto foi usado sem purificação.
LC-MS (IE, m/z): 200,95 [M + 1-OH]*; tg = 2,27 min.
Etapa B: 5-Bromo-4-metóxi-2-benzofurano-1(3H)-ona
A um frasco carregado com (3-bromo-2-metoxifenil)-metanol (3,0 g, 14 mmoles, 1,0 eq) foi adicionado trifluoroacetato tálico (10,0 g, 18,4 mmoles, 1,3 eq). À mistura acima foi adicionado ácido trifluoroacético (25 ml). A reação foi agitada na temperatura ambiente por 16 horas, depois concentrada.
O TFA em excesso foi removido usando bomba de alto vácuo.
Ao resíduo foi adicionado cloreto de paládio (245 mg, 1,38 mmol, 0,1 eq), óxido de magnésio (1,10 g, 27,6 mmoles, 2,0 eq) e metanol (35 ml). A reação foi fluxada com monóxido de carbono três vezes e agitada sob CO na temperatura ambiente por 2 horas.
A esta solução foi adicionado acetato de etila.
A mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e lavada com EtOAc.
O filtrado foi concentrado e carregado na coluna de gel de sílica.
As frações — contendo — 5-bromo-4-metóxi-2-benzofurano-1(3H)-ona — foram concentradas. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3, 6 em ppm): 7,72 (1H, aromático, d, J=8,0 Hz), 7,49 (1H, aromático, d, J = 8,0 Hz), 5,44 (2H, s, CH, lactona), 4,00 3H, s, Me). LC-MS (IE, m/z): 244,88 [M + 1]*; tg = 2,67 min.
Etapa C: 4-Metóxi-5-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona A um frasco de fundo redondo de 100 ml foi adicionada 5- Bromo-4-metóxi-2-benzofurano-1(3H)-ona (430 mg, 1,8 mmol, 1,0 eq), trifluoro(vinil)borato de potássio (474 g, 3,5 mmoles, 2,0 eq), complexo de —[1,1'bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano (1:1) (144 mg, 0,2 mmol, 0,1 eq) e trietilamina (493 ul, 3,5 mmoles, 2,0 eq). À mistura acima foi adicionado etanol (12 ml). O frasco foi desgaseificado e enchido com nitrogênio.
A reação foi aquecida ao refluxo por 12 horas.
À mistura foi depois diluída com EtOAc, filtrada através de uma almofada de celite e lavada com salmoura.
A fase orgânica foi secada em Na7SO;,, filtrada e purificada pela cromatografia em coluna cintilante usando biotage e os sistemas de solvente (0 a 50 % de EtOAc/Hexano). As frações contendo o produto desejado foram coletadas e concentradas até 4-metóxi-5-vinil-2- benzofurano-1(3H)-ona.
'H RMN (500 MHz, CDCI;3,) ô em ppm: 7,62 (1H, aromático, d, J=7,9 Hz), 7,55 (1H, aromático, d, J = 7,9 Hz), 7,02 (1H, -CH=CH,, dxd, J=11,3 Hz, J =17,8 Hz), 5,79 (1H, d, J = 17,7 Hz), 5,24 (1H, -CH-CH;,, d, J = 11,3 Hz), 5,39 2H, s), 3,88 3H, Me, s). —EtapaD:4-Metóxi-5-oxiran-2-11l-2-benzofurano-1(3H)-ona 4-Metóxi-5-vinil-2-benzofuran-1(3H)-ona (120 mg, 0,63 mmol, 1,0 eq) foi adicionada em um frasco de fundo redondo de 100 ml e dissolvido em diclorometano (5 ml). A solução foi esfriada até 0ºC e ácido 3- cloroperoxibenzóico (327 mg, 1,89 mmol, 2,0 eq) foi adicionado às porções. A mistura foi depois purgada com N, e agitada na temperatura ambiente por 18 horas. À solução acima foi adicionada água (5 ml). O produto bruto foi extraído com diclorometano. A fase orgânica foi lavada com salmoura (5 ml), secada em Na SO, anidro, filtrada, concentrada e purificada pela cromatografia em coluna cintilante (hexano/FEtOAc O a 50 %). O produto desejado foi obtido. 'H RMN (500 MHz, CDCl;3, 8 em ppm): 7,56 (IH, aromático, d, J = 7,6 Hz), 7,31 (1H, aromático, d, J = 7,6 Hz), 5,50 2H, m, CH, lactona), 4,23 (1H, m), 4,02 3H, s, Me), 3,22 (1H, m), 2,72 (IH, m). INTERMEDIÁRIO 14
O to “o 2-[4-Metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDpropanal Etapa A:4-metil-S-prop-2-en-1-il-2-benzofuran-1(3H)-ona Uma mistura de 5-bromo-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona (980 mg, 4,3 mmoles), alil-tributilestanano (1,7 g, 5,2 mmoles), LiCl (550 mg, 12,9 mmoles) e Pd(PPh;3)s (0,1 g) em tolueno anidro foi agitada ao refluxo sob N, durante a noite. O solvente foi removido sob pressão reduzida eo resíduo foi purificado com cromatografia em coluna de gel de sílica para dar o produto 4-metil-5-prop-2-en-1-il-2-benzofurano-1(3H)-ona.
Etapa B: ácido (4-metil-1-ox0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il) acético A uma solução agitada de 4-metil-S-prop-2-en-1-il-2- benzofurano-1(3H)-ona (2,10 g, 11,2 mmoles) em CCl, (50 ml), acetonitrila (50 ml) e água (75 ml) foi adicionado periodato de sódio (12 g, 55,8 mmoles) eóxido de rutênio hidratado (210 mg) e a mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente durante a noite.
A mistura foi diluída com 100 ml de DCM e 100 ml de água.
A camada orgânica foi secada em sulfato de sódio anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado com cromatografia em coluna de gel de sílica para produzir o ácido (4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2- —benzofurano-5-il)acético.
Etapa C: (4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDacetato de 1,1- dimetiletila A uma solução de ácido (4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2- benzofuran-5-il)acético (100 mg, 0,48 mmol) em DCM anidro (10 ml) foi adicionado 1,1-dimetiletil-N,N-bis(1-metiletil)imidocarbamato (485 mg, 2,50 mmoles) às gotas a 0ºC sob N,. Depois a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite.
A mistura foi filtrada e o filtrado foi lavado com HCl 2 N e salmoura, secado em sulfato de sódio anidro e concentrado.
O resíduo foi purificado pela TLC preparativa para dar (4-metil-1-0x0-1,3- —diidro-2-benzofurano-5-il)acetato de 1,1-dimetiletila. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) ô ppm 7,70 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,38 (d, J =7,0 Hz, 1 H), 5,25 (s, 2H), 3,67 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 1,44 (s, 9H). Etapa D: 1,1-dimetiletil-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)- propanoato Uma solução de (4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- il)acetato de 1,1-dimetiletila (770 mg, 3,1 mmoles) em 30 ml de THF anidro foi esfriada a-78ºC.
NaHMDS (4,0 mmoles) foi adicionado à reação às gotas a-78ºC.
Depois da adição, a mistura foi agitada a-78ºC por 1 h e depois CH;I (462 mg, 3,20 mmoles) foi adicionado às gotas a-78ºC.
A reação foi aquecida até a temperatura ambiente lentamente e agitada na temperatura ambiente durante a noite. A reação foi extinta com solução de NH,CI e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado via TLC preparativa para produzir 1,1-dimetiletil-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- il)propanoato. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,67 (dy J=7,8 Hz, 1 H), 7,37 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 5,19 (s, 2H), 3,80 (dd, J =7,0 Hz, 1 H), 2,24 (s, 3H), 1,40 (d, J=7,0 Hz, 1 HD), 1,32 (s, 9H). Etapa E: Ácido 2-(4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)-propanóico A uma solução de 1,1-dimetiletil-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro- 2-benzofurano-5-il)propanoato (400 mg, 1,4 mmol) em 10 ml de DCM anidro foi adicionado TEA (2,5 ml) às gotas na temperatura ambiente. Depois a mistura foi agitada por 1 hora. O solvente foi removido sob vácuo para dar o ácido 2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)propanóico bruto, que foi usado para a etapa seguinte sem purificação. Etapa F: 5-(2-hidróxi-1-metiletil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução do ácido 2-(4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)propanóico (300 mg, 1,4 mmol) em 18 ml de THF anidro foi — adicionado BH;3. THF (2 ml, 2 mmoles) às gotas a 0ºC. Depois a mistura foi aquecida até a temperatura ambiente lentamente e depois agitada por 3 horas. Depois a mistura foi extinta com MeOH e o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi purificado via prep-TLC para dar a 5-(2-hidróxi-1-metiletil)-4- metil-2-benzofurano-1(3H)-ona.
'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,73 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,40 (d, J =7,8 Hz, 1 HD), 5,23 (s, 2H), 3,77 (d, J=7,0 Hz, 2H), 3,36-3,42 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 1,27 (d, J =7,0 Hz, 3H).
Etapa G: 2-(4-Metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il) propanal 5-(2-Hidróxi-1-metiletil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona
TI (161 mg, 0,781 mmol, 1,0 eq) foi dissolvido em DCM (6 ml). À solução acima foi adicionado Periodinano de Dess-Martin (397 mg, 0,937 mmol, 1,2 eq). A reação foi agitada na temperatura ambiente por 2 horas.
À reação foi adicionado DCM (10 ml), Na2S2O; (6 ml) e HzO (6 ml). A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 30 minutos e formaram-se duas camadas.
À camada do fundo foi separada e lavada com NaHCO; aquoso, salmoura e água, secada em Na7sSO;, filtrada e concentrada até a secura.
O produto bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação. 'H RMN (500 MHz, CDCl;3, B em ppm): 9,70 (1H, s, CHO), 7,79 (1H,d,J=7,8 Hz), 7,28 (1H, d, J=7,8 Hz), 5,28 2H, s), 3,27 (IH, m), 2,32 3H, s), 1,50 3H, d, J =7,2 Hz). INTERMEDIÁRIO 15 o » Me Me no 4-metil-5-(1-metil-2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzafurano-5-il)propil]- —piperazino-l-carboxilato de terc-Butila Em um frasco de fundo redondo de 100 ml, 2-(4-metil-1-0x0- 1,3-diidro-2-benzofuran-5-il)propanal (100 mg, 0,49 mmol, 1,0 eq) e Boc- piperazina (91 mg, 0,49 mmol, 1,0 eq) foi dissolvido em DCM (10 ml). À solução acima foi adicionado triacetoxiboroidreto de sódio (208 mg, 0,98 —mmol,2,0eg).A reação foi agitada na temperatura ambiente por 16 horas.
À reação foi depois diluída com DCM (10 ml), lavada com bicarbonato aquoso, água e salmoura.
A fase orgânica foi secada em MgSO,, filtrada e concentrada.
O produto foi obtido depois da purificação pela cromatografia em coluna cintilante (5 % de MeOH/DCM). LC-MS (IE, m/z): 375,41 [M + 1)*; te = 2,47 min.
Etapa B: 4-Metil-5-(1-metil-2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona 4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)propil]- piperazino-1l-carboxilato de terc-Butila (160 mg, 0,43 mmoles) foi agitada em TFA (3 ml) na temperatura ambiente por 3 horas. A reação foi concentrada e —bombeada em bomba de alto vácuo durante a noite para dar o produto desejado, que pode ser convertido à sua base livre dividindo-se entre um solvente orgânico e solução saturada de NaHCO;. LC-MS (IE, m/z): 275,38 [M + 1]*; te = 0,38 min. INTERMEDIÁRIO 16 o
O Oh HCl Cloridrato de 5-(2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 5-(1,3-dioxolan-2-ilmetil)-2-benzofurano-1(3H)-ona Um frasco de fundo redondo de três bocas de 5 L equipado com uma barra agitadora, válvula firestone, termopar, condensador e manta de aquecimento foi carregado com tetrafluoroborato de tri-t-butil fosfônio (500 mg, 1,72 mmol), acetato de paládio (II) (250 mg, 1,1 mmol) e 5-bromo- 2-benzofurano-1(3H)-ona (100 g, 469 mmoles). DMF (1,88 L) foi adicionado ao frasco e a mistura foi desgaseificada três vezes alternando-se vácuo e purga de nitrogênio. Solução de bromo(1,3-dioxolan-2-ilmetil)zinco comercialmente disponível (1,033 L, 516 mmoles) foi adicionada via cânula e a mistura foi mais uma vez desgaseificada três vezes. A mistura foi depois aquecida a 85ºC por 5 h. A análise pela HPLC-MS indicou que a reação não foi completa. A mistura foi agitada a 85ºC por 5 horas mais. A mistura foi depois deixada retornar até a temperatura ambiente durante a noite. 2- metilTHF (2 L) e salmoura foram adicionados e a mistura foi agitada por 5 min. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída mais uma vez com 2-metilTHF. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas três vezes com salmoura (4 L cada uma), secadas em MgSO;,, filtradas e concentradas.
O produto bruto foi purificado pela cromatografia cintilante (cartucho de sílica de 1,5 kg), eluindo com O a 20 % de acetato de etila em diclrometano para produzir 5-(1,3-dioxolan-2-ilmetil)-2-benzofurano-1(3H)- ona MS:m/z2221(M+I1)*. Etapa B: (1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDacetaldeído 5-(1,3-Dioxolan-2-ilmetil)-2-benzofuran-1(3H)-ona (61 g, 280 mmoles) foi combinada com água (2,2 L) em um frasco de fundo redondo de 5 L equipado com um adaptador de Claisen, termopar, barra agitadora e — borbulhador de nitrogênio.
Solução aquosa de HCI (2 M, 1,14 L, 2,29 moles) foi adicionada e a mistura resultante foi aquecida a 40ºC por 8 h.
Depois que a mistura foi agitada durante a noite na temperatura ambiente.
A mistura foi extraída três vezes com 2 L de acetato de etila.
As camadas orgânicas combinadas foram concentradas para dar (1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDacetaldeído.
MS: m/z 177 (M + 1)*. Etapa — C: 1,1-dimetiletil-4-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iletil piperazino-1l-carboxilato Um frasco de fundo redondo de 5 L de três bocas equipado com um borbulhador de nitrogênio, termopar e barra agitadora foi carregado — com (l-oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)acetaldeído (46,1 g, 262 mmoles) e diclorometano (1 L). 1-Boc-piperazina (48,7 g, 262 mmoles) em | L de diclorometano foi adicionada e a mistura foi agitada por 5 min.
Triacetoxiboroidreto de sódio (111 g, 523 mmoles) foi adicionado em porções na temperatura ambiente e a mistura resultante foi agitada por 1 h.
Água (1 L) — foi adicionada e a mistura foi agitada por 10 min.
Depois que a evolução de gás cessou a camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com cloreto de metileno (1 L). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura e concentradas.
O produto bruto foi purificado pela MPLC em gel de sílica eluindo com um gradiente de O a 100 % de solução a 5
% de metanol /DCM (Solvente A) a DCM puro (Solvente B) para produzir 1,1-dimetiletil-4-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil |piperazino-1- carboxilato. Etapa D: Cloridrato de 5-(2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona Ao 1,1-dimetiletil-4-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- il)etil |piperazino-1-carboxilato (120 g, 347 mmoles) em dioxano (800 ml) foi adicionado HCl 4 N em dioxano (87,0 ml, 347 mmoles) e a mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi concentrada e armazenada sob vácuo durante a noite para produzir o —cloridrato de 5-(2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona. Este pode ser usado como tal ou convertido para a base livre dividindo-se entre um solvente orgânico e solução saturada de NAHCO;. MS: m/z 247 (M + 1)*. INTERMEDIÁRIO 17 Oo
O Du, He!
LO NH Cloridrato de 4-metil-5-(2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 4-metil-S-prop-2-en-1-il-2-benzofuran-1(3H)-ona A um frasco carregado com 5-bromo-4-metil-2-benzo-furano- 1(3H)-ona (320 mg, 1,409 mmol) e uma barra agitadora foi adicionado alil tri- n-butilestanho (0,655 ml, 2,11 mmoles), PAd(PPh3) a (244 mg, 0,211 mmol), cloreto de lítio (179 mg, 4,23 mmoles) e tolueno (15 ml). A reação foi — purgada com nitrogênio 2 vezes depois foi aquecida ao refluxo por 4 horas. O produto foi separado pela cromatografia em gel de sílica para dar a 4-metil-5- prop-2-en-1-il-2-benzofurano-1(3H)-ona. Etapa B: (4-metil-1-0x0-13-diidro-2-benzofuran-5-il) acetaldeído Uma solução da olefina acima (220 mg, 1,2 mmol) em MeOH (20ml) foi esfriada a-78ºC. A esta solução foi borbulhado ozona até que a reação virou para azul. O nitrogênio foi borbulhado através da reação para expulsar o ozona em excesso, seguido pela adição de DMS (0,870 ml, 11,7 mmoles). A reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente.
O produto bruto foi purificado pela cromatografia cintilante para produzir (4- —metil-l-oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)acetaldeído. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 9,78 (s, 1 H), 7,75 (d, J=7,5 Hz, 1 H), 7,34 (d J=7,5 Hz, 1 H), 5,27 (s, 2H), 3,90 (s, 2H), 2,23 (s, 3H). Etapa C: 1,1-dimetiletil-4-(2-[4-metil-1-ox0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil|piperazino-1-carboxilato A uma solução de (4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- il)acetaldeído (160 mg, 0,84 mmoles) e I-Boc piperazina (234 mg, 1,26 mmol) em MeOH (5 ml) foi adicionado NACNBH; (149 mg, 2,52 mmoles) e umas poucas gotas de ácido acético.
A reação foi deixada agitar na temperatura ambiente por 16 horas.
A TLC neste ponto mostrou reação boa e completa.
A reação foi diluída com EtOAc (100 ml), lavada com solução aq. de NaHCO; e salmoura, secada em NasSO,, absorvida em gel de sílica e purificada pela MPLC. 1,1-Dimetiletil-4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil |piperazino-1-carboxilato foi coletado depois da remoção do solventes.
LCMS: m/z 361 (M + 1)*. Etapa D: Cloridrato de 4-metil-5-(2-piperazin-1-iletil)-2-benzofuran-1(3H)- ona 1,1-Dimetiletil-4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano- 5-il)etil Jpiperazino-1l-carboxilato (245 mg) foi tratado com HCl 4N em solução de dioxano e a reação foi monitorada até a conclusão.
A mistura foi — concentrada para produzir o cloridrato de 4-metil-5-(2-piperazin-1-iletil)-2- benzofurano-1(3H)-ona.
O cloridrato pode ser convertido à base livre como necessário dividindo-se entre solvente orgânico (EtOAc, DCM, ou 30 % de IPA/CHCI;3) e solução de Na;CO; saturada. 'H RMN (500 MHz, DMSO) ô ppm 12,4 (amplo, 1 H), 9,80
(amplo, 2H), 7,71 (d, J=7,5 Hz, 1 HD), 5,53 (d, J =7,5 Hz, 1 H), 5,44 (s, 2H), 3,81 (m, 2H), 3,64-3,27 (m, 10H). INTERMEDIÁRIO 18 MeoO.
H 2-(metilóxi)-4-(2-oxoetil)benzonitrila — Etapa A: (3-metóxi-4-[[(trifluorometil)sulfonil Jóxi)fenil) acetato de etila (4-hidróxi-3-metoxifenil) acetato de etila, 12 g, 57 mmoles] foi dissolvido em diclorometano anidro (200 ml). 4-Dimetilamino-piridina (0,70 2, 0,10 equiv) foi adicionado, seguido por trietilamina (9,6 ml, 69 mmoles). À solução foi depois esfriada a-78ºC em um banho de gelo seco e acetona enquanto sob nitrogênio.
Anidrido trifluorometanossulfônico (9,6 ml, 57 mmoles) foi lentamente adicionado e a mistura de reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente.
A mistura de reação foi depois diluída com diclorometano (200 ml) e lavada com água (2 x 100 ml). A camada orgânica foi secada em MgSO;,, filtrada e concentrada até a secura sob pressão reduzida para produzir (3-metóxi-4-([(trifluorometil)sulfonil Jóxi)fenil) acetato de etila, que foi usado sem outra purificação.
LC/MS [(M + 1) COLEt]* = 269,0; tg = 3,5 min.
Etapa B: (4-ciano-3-metoxifenil) acetato de etila (3-metóxi-4-(|[(trifluorometil)sulfonil Jóxi )fenil)acetato de etila (16,69) foi dissolvido em dimetilformamida anidra (100 ml). Cianeto de zinco (34 g, 29 mmoles) foi adicionado e a solução foi purgada completamente com nitrogênio.
Tetracis(trifenilfosfino)paládio(O0) (5,6 g, 4,9 mmoles) foi depois adicionado e a mistura de reação foi aquecida a 80ºC por 4 h.
Depois —dedeixara mistura de reação esfriar até a temperatura ambiente e diluir com água (200 ml), acetato de etila (400 ml) foi adicionado e a mistura foi filtrada para remover quaisquer sólidos.
O filtrado foi transferido para um funil de separação e as camadas separadas.
A camada aquosa foi re-extraída com acetato de etila (2 x 100 ml). As camadas orgânicas foram combinadas e secadas em sulfato de magnésio.
Os orgânicos secos foram depois filtrados e evaporados até a secura sob pressão reduzida e a dimetilformamida em excesso foiremovida pela evaporação a vácuo a 65ºC por 1,5 h para produzir o produto bruto.
O produto bruto foi purificado através de cromatografia em gel de sílica (acetato de etila/hexanos, 2:3) para produzir o (4-ciano-3- metoxifenil) acetato de etila. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), 6 7,67 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,0 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 4,10 (q, J=7,1 Hz, 2H), 3,89(s,3H),3,78 (s, 2H), 1,19 (t,J=7,1 Hz, 3H); LC/MS (M + 1)* =220,17; tg = 1,36 min.
Etapa C: 4-(2-Hidroxietil)-2-metoxibenzonitrila LiBH, (1,7 ml, 3,4 mmoles, 2 M em THF) foi adicionado a uma solução agitada de (4-ciano-3-metoxifenil)acetato de etila (0,50 g, 24 —mmoles) em THF (25 ml) a 0ºC.
A solução resultante foi agitada por 12 h.
Água (15 ml) foi adicionada e a solução resultante foi extraída com diclorometano (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secadas em MgSO;,, filtradas e evaporadas sob pressão reduzida.
O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna eluindo com EtOAc-Hexanos (7:3 1:1) para dar a 4-(2-hidroxietil)-2-metoxibenzonitrila. "H RMN (500 MHz, CDCI;3) 6 7,52 (d, 1 H, J=7,0 Hz), 6,91 (d, IH, J=7,8 Hz ), 6,88 (s, 1 ED, 3,95 (s, 3H), 3,92 (t, 2H, J = 6,4 Hz), 2,93 (t, 2H, J = 6,4 Hz); LCMS: [(M + 1))*=178,3; tg =2,1 min.
Etapa D: 2-Metóxi-4-(2-oxoetil)benzonitrila A uma solução agitada de 4-(Q-hidroxietil)-2-metoxi- benzonitrila (1,5 g, 8,5 mmoles) em CH3Cl, seco (30 ml) a 0ºC foi adicionado periodinano de Dess-Martin (3,6 g, 8,5 mmoles) em uma porção.
A mistura foi agitada por 12 h na temperatura ambiente e extinta com uma mistura 1:1 de NasS;O; saturado (40 ml) e NaHCO; saturado (40 ml). A mistura resultante foi diluída com CH3Cl, (70 ml) e as camadas foram separadas.
A fase aquosa foi extraída com CH;Cl; (2 x 50 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (NaSO,4) e concentradas a vácuo para dar 2-metóxi-4-(2-oxoetil)benzonitrila.
O resíduo foi usado na — etapa seguida sem outra purificação. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) 8 9,77 (s, 1H), 7,52 (d, 1 H,J=8,8 Hz), 6,86 (dd, 1H), J=1,1 Hz), 6,79 (s, 1 H), 3,92 (s, 3H), 3,76 (s, 2HD; LCMS: [(M + 1)]* = 176,26; tg = 1,98 min.
INTERMEDIÁRIO 18 (método 2) MeoO.
H 2-(metilóxi)-4-(2-oxoetil)benzonitrila Etapa A: 2-(metilóxi)-4-prop-2-en-l-ilbenzonitrila A um frasco de 50 ml que contém uma barra agitadora foram adicionados 2-metóxi-4-bromobenzonitrila (0,30 g, 1,4 mmol), paládio tetracis (82 mg, 0,071 mmoles), aliltri-n-butilestanho (0,877 ml, 2,83 mmoles) e cloreto de lítio (0,120 g, 2,83 mmoles). A mistura resultante foi depois dissolvida em tolueno anidro (16 ml); o frasco foi colocado em um banho de óleo e aquecido a 130ºC; a LC bem como a TLC (hexanos/EtOAc-110,3) indicaram que a reação foi até a conclusão.
O frasco foi tirado do banho de óleo e esfriado até a temperatura ambiente.
Ao frasco foi vertido EtOAc (40 ml) e a mistura foi transferida em um funil de separação e lavada com NaCl aquoso.
A fase orgânica foi secada em Na7sSO;, filtrada e concentrada até a secura.
A mesma foi depois dissolvida em DCM e absorvida em gel de sílica.
O gel de sílica foi depois carregado em uma coluna de sílica para a separação com os sistemas de solvente de hexanos/EtOAc (1/0,3); isto deu a 2- (metilóxi)-4-prop-2-en-1-ilbenzonitrila.
LC-MS (IE, m/z): 174 [IM + Il; tg = 2,10min.
Etapa B: 2-(metilóxi)-4-(2-oxoetil)benzonitrila A um frasco de 25 ml que contém uma barra agitadora foi adicionado o composto 2-(metilóxi)-4-prop-2-en-l-ilbenzonitrila (0,150 g, 0,866 mmol) e MeOH (8 ml). O frasco foi colocado em um banho frio de - 78ºC.
Ozona foi borbulhado através do frasco por cerca de 10 min. seguido pela adição de sulfeto de dimetila (1,5 ml, 0,024 mmol). O frasco foi tirado do banho frio e agitado na temperatura ambiente por 1 h; a LC indicou a conclusão da reação.
A mistura de reação foi concentrada até a secura para dar a 2-(metilóxi)-4-(2-oxoetil)-benzonitrila.
LC-MS (IE, m/z): 176 [M + 1]+; tg = 1,49 min.
INTERMEDIÁRIO 19 MeO.
Me —2-(metilóxi)-4-(2-oxopropil)benzonitrila Etapa A: 4-(2-Hidroxipropil)-2-metoxibenzonitrila A uma solução agitada de 2-metóxi-4-(2-oxoetil)-benzonitrila (1,5 g, 8,5 mmoles) em diclorometano (30 ml) a 0ºC foram adicionados 2,8 ml (8,5 mmoles) de uma solução 3,0 M de brometo de metilmagnésio em THF.
A mistura de reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada por 12 h.
A reação foi depois extinta pela adição de 10 ml de ácido clorídrico 1 N e extraída com diclorometano (2 x 30 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secados com sulfato de magnésio, filtrados e concentrados a vácuo.
O resíduo bruto foi purificado em sílica (30 % de —EtOAc/hexanos como eluente) para produzir 4-(2-hidroxipropil)-2- metoxibenzonitrila. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) 8 747 (d, 1 5, J=7,8 Hz), 6,85 (dd, 1 H, J=3,4 Hz), 6,82 (s, 1 HD), 4,05 (m, 1 HD), 3,93 (d, 2H), 3,91 (s, 3H), 1,25 (d, 2H, J =6,1 Hz); LCMS: [(M + 1)]* = 192,30; tR = 2,39 min.
Etapa B: 2-Metóxi-4-(2-oxopropil)benzonitrila A uma solução agitada de 4-(2-hidroxipropil)-2-metóxi- benzonitrila (1,5 g, 7,6 mmoles) em CH3Cl, seco (30 ml) a 0ºC foi adicionado periodinano de Dess-Martin (4,2 g, 9,9 mmoles) em uma porção.
A mistura foi agitada por 12 h na temperatura ambiente e extinta com uma mistura 1:1 de Na SO; saturado (20 ml) e NaHCO; saturado (20 ml). A mistura resultante foi diluída com CH3xCl, (50 ml) e as camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com CH;Cl; (2 x 50 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (NaSO,4) e concentradas a vácuo para dar 2-metóxi-4-(2-oxopropil)benzonitrila. O resíduo bruto foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3) ô 7,55 (dd, 1 H,J=1,6 Hz), 6,87 (d, 1 H,J=7,8 Hz ), 6,83 (s, 1 HD), 3,96 (s, 3H), 3,79 (s, 2H), 2,25 (s, 3H); LCMS: [(M + 1)]-190,32; tR 2,31 min. INTERMEDIÁRIO 20 MeO
AV 2-(metilóxi)-4-oxiran-2-ilbenzonitrila Etapa A: Trifluorometanossulfonato de 4-Formil-2-metoxifenila A uma solução de vanilina (20,0 g, 131 mmoles) em DMF (200 ml) na temperatura ambiente foi adicionado carbonato de potássio (36 g, 263 mmoles) e trifluorometanossulfonato de 4-nitrofenila (54,0 g, 197 mmoles) e a mistura de reação foi agitada por 8 h. EtOAc (600 ml) foi adicionado à mistura de reação e a camada orgânica foi lavada três vezes com água, secada, filtrada e concentrada. O composto bruto foi depois purificado pela cromatografia cintilante (acetato de etila/hexanos 1:9 — 3:7) para — fornecer o trifluorometanossulfonato de 4-formil-2-metoxifenila. 'H RMN (CDCl;3, 500 MHz) ô 10,02 (s, 1 H), 7,60 (s, 1 E), 7,55 (d, J=8,1 Hz, 1 H), 7,45 (d, J =8,0 Hz, 1 H), 4,04 (s, 3H); LC/MS (IE, m/z) 284,98 [M + 1]*; te 3,31 min. Etapa B: 4-Formil-2-metoxibenzonitrila Uma mistura de trifluorometanossulfonato de 4-formil-2- metoxifenila (37,0 g, 130 mmoles), cianeto de zinco (61,0 g, 521 mmoles) e tetracis trifenilfosfino paládio (0) (22,6 g, 19,5 mmoles) em DMF (300 ml)
foram agitados a 110ºC por 8 h.
EtOAc foi adicionado à mistura de reação e a camada orgânica foi lavada duas vezes com água, secada, filtrada e concentrada.
O produto bruto foi depois purificado pela cromatografia de coluna (gel de sílica, acetato de etila/hexanos 3:7) que produziu a 4-formil-2- —metoxibenzonitrila. 'H RMN (CDCl3, 500 MHz) 8 10,08 (s, 1H), 7,80 (d, J=7,5 Hz, 1 H), 7,55 (d, J =7,5 Hz, 1H), 7,51 (s, 1 H), 4,06 (s, 3H); LC/MS (IE, m/z) 162,07 [M + 1]*. Etapa C: 2-Metóxi-4-(oxiran-2-il)benzonitrila A uma solução esfriada de NaH (0,16 g, 3,9 mmoles) em THF (40 ml) foi adicionada às gotas uma solução de iodeto de trimetilsulfônio (0,91 g, 4,5 mmoles) em DMSO (20 ml). A mistura resultante foi agitada a 0ºC sob N, por 20 min.
A solução de 4-formil-2-metoxibenzonitrila (0,60 g, 3,7 mmoles) em THF (20 ml) foi adicionado.
A mistura de reação resultante foi agitada a 0OºC sob N, por | hora e depois a mesma foi aquecida gradualmente até a temperatura ambiente e agitada nesta temperatura por 12 horas.
O material de partida foi consumido como indicado pela TLC (25 % de acetato de etila/hexanos). A mistura de reação foi esfriada até 0ºC e extinta pela adição às gotas de água.
A mistura foi extraída com acetato de etila (2 x 70 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, salmoura, depois secadas (MgSO,) e filtradas.
O filtrado foi concentrado a vácuo.
O resíduo foi purificado via cromatografia de coluna (gel de sílica, 10 a 30 % de EtOAc-hexanos) para produzir a 2-metóxi-4-(oxiran-2-il)- benzonitrila. 'H RMN (CDCl;3, 500 MHz) 5 7,57 (d, J] = 8 Hz, 1 H), 6,99 (dd, J=1,1Hz,J=1,2 Hz, 1H), 6,89 (s, 1 HD), 3,97 (s, 3H), 3,94-3,92 (m, 1H), 3,22 (dd, I= 5,2, Hz, J =4,1 Hz, 1H), 2,77 J =2,5 Hz, 1 HD; LC/MS (IE, m/z) 176,33 [IM + 1 ]|*; te = 2,55 min.
INTERMEDIÁRIO 21 Me Meo.
Oo 4-(1-metil-2-0xoetil)-2-(metilóxi)benzonitrila Etapa A: 2-(4-ciano-3-metoxifenil)propanoato de etila A uma solução em suspensão de NaH (0,18 g, 4,6 mmoles, dispersão a 60 % em óleo mineral) em THF (50 ml) a ºC sob atm de N, foi adicionada uma solução de (4-ciano-3-metoxifenil) acetato de etila (1,0 g, 4,6 mmoles) em THF (10 ml) às gotas e a mistura foi agitada por 30 min na mesma temperatura.
A mistura foi depois deixada aquecer até a temperatura ambiente.
A mistura foi depois deixada esfriar de volta até 0ºC.
Iodeto de metila (0,28 ml, 4,6 mmoles) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 1 h.
A mistura de reação foi acidificada com ácido clorídrico 1 M e extraída com EtOAc.
A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em sulfato de sódio anidro e concentrada a vácuo.
O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de gel de sílica (hexano/EtOAc 15/1) para dar o 2- (4-cian-3-metoxifenil) propanoato de etila. 'H RMN (500 MHz , CDCI3) ô 7,53 (d, 1IH, J =8 Hz), 6,98 (d, 1 H,J=8 Hz), 6,95 (s, 1 HD), 4,17 (q, 2H,J = 3,4 Hz), 3,97 (s, 3H), 3,76 (q, 1 H, J=9,1 Hz), 1,53 (d, 3H, J=7,1 Hz), 1,25 (t, 3H, J =7,1 Hz); LCMS: [(M + 1)]* 234,28; tr 3,12 min.
Etapa B: 4-(1-Hidroxipropan-2-il)-2-metoxibenzonitrila LiBH, (0,55 ml, 1,1 mmol, 2 M em THF) foi adicionado a uma solução agitada de 2-(4-ciano-3-metoxifenil) propanoato de etila (0,17 g, 0,73 mmol) em THF (25 ml) a 0ºC.
A solução resultante foi agitada por 12 h.
Água (15 ml) foi adicionada e a solução resultante foi extraída com diclorometano (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secadas em MgSO;,, filtradas e evaporadas sob pressão reduzida.
O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna eluindo com EtOAc-Hexanos (7:3 1:1) para dar a 4-(1-hidroxipropan-2-il)-2-metoxibenzonitrila. 'H RMN (500
MHz, CDCI3) ô 7,49 (d, 1 H, J=7,9 Hz ), 6,88 (dd, 1 H,J=1,4 Hz), 6,83 (s, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,72 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 2,97 (q, 1 H,J=6,8 Hz), 1,28 (d, 3H,J = 6,9 Hz); LCMS: [(M + 1)]*=192,32; tg = 2,32 min. —EtapaC:2-Metóxi-4-(1-oxopropan-2-il)benzonitrila A uma solução agitada de 4-(I-hidroxipropan-2-11)-2- metoxibenzonitrila (0,12 g, 0,63 mmoles) em CHCl; seco (30 ml) a 0ºC foi adicionado periodinano de Dess-Martin (0,35 g, 0,82 mmol) em uma porção. A mistura foi agitada por 12 h na temperatura ambiente e extinta com uma mistura 1:1 de NasS,O; saturado (20 ml) e NaHCO; saturado (20 ml). À mistura resultante foi diluída com CH.Cl, (50 ml) e as camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com CH,Cl, (2 x 50 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (NaSO,) e concentrada a vácuo para dar a 2-metóxi-4-(1-oxopropan-2-il)benzonitrila bruta. O resíduo bruto foi usado em reações subsequentes sem outra purificação. LCMS: [(M + 1)]* 190,32; tg-2,47 min. INTERMEDIÁRIO 22 Me Me
SO
NC H 4-(1,1-dimetil-2-0xoetil)-2-(metilóxi)benzonitrila Etapa A: (3-metóxi-4-(|[(trifluorometilsulfonilJóxi)fenil) acetato de etila (4-hidróxi-3-metoxifenil) acetato de etila (120 g, 57,1 mmoles) foi dissolvido em diclorometano anidro (200 ml) 4 Dimetilaminopiridina (0,70 g, 0,10 equiv) foi adicionada, seguida por trietilamina (9,55 ml, 68,5 mmoles). A solução foi depois esfriada em um banho de gelo seco e acetona enquanto sob nitrogênio. Anidrido trifluorometanossulfônico (9,60 ml, 57,1 mmoles) foi lentamente adicionado e a mistura de reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente.
A mistura de reação foi depois diluída com diclorometano (200 ml) e lavada com água (2 x 100 ml). A camada orgânica foi secada em sulfato de magnésio, filtrada e concentrada até a secura sob pressão reduzida para produzir o (3-metóxi-4- ([(trifluorometilsulfonil)óxi )-fenil)acetato de etila bruto.
LC/MS [(M + 1)- COLEt]* = 269,0; tg = 3,5 min.
Etapa B: (4-ciano-3-metoxifenil) acetato de etila O (3-metóxi-4-([(trifluorometil)sulfonil Jóxi fenil)acetato de etila bruto (16,61 g) foi subsequentemente dissolvido em dimetil-formamida —anidra (100 ml). Cianeto de zinco (3,42 g, 29,1 mmoles) foi adicionado e a solução foi purgada totalmente com nitrogênio.
Tetracis(trifenilfosfino) paládio(O) (5,61 g, 4,85 mmoles) foi depois adicionado e a mistura de reação foi aquecida a 80ºC por 4 h.
Depois deixando a mistura de reação esfriar até a temperatura ambiente e diluindo com água (200 ml), acetato de etila (400 ml) foi adicionado.
As camadas combinadas foram filtradas para remover quaisquer sólidos, o filtrado transferido a um funil de separação e as camadas separadas.
A camada aquosa foi re-extraída com acetato de etila (2 x 100 ml), as porções orgânicas foram combinadas e secadas em sulfato de magnésio.
Os orgânicos secos foram depois filtrados e evaporados até a secura sob pressão reduzida e a dimetilformamida em excesso foi removida pela evaporação a vácuo a 65ºC por 1,5 h para produzir o composto do título bruto (20 g). O produto bruto foi purificado através de cromatografia em gel de sílica (acetato de etila/hexanos, 2:3) para produzir (4-cian-3-metoxifenil) acetato de etila. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), 8 7,67 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1H), 7,0 (d, J=8,0Hz,1H),4,10(q,J=7,l Hz, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,78 (s, 2H), 1,19 (t, J =7,1 Hz, 3H); LC/MS (M + 1)* =220,17; tg = 1,36 min.
Etapa C: 2-(4-ciano-3-metoxifenil)-2-metilpropanoato de etila A uma solução em suspensão de NaH (0,365 g, 9,12 mmoles, dispersão a 60 % em óleo mineral) em THF (50 ml) a ºC sob N, atm foi adicionado uma solução de (4-ciano-3-metoxifenil) acetato de etila (1,0 g, 4,56 mmoles) em THF (10 ml) às gotas e a mistura foi agitada por 30 min na mesma temperatura.
A mistura foi depois deixada aquecer até a temperatura ambiente.
A mistura foi depois deixada esfriar de volta para ºC.
Iodeto de metila (0,570 ml, 9,12 mmoles) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por | h.
A mistura de reação foi acidificada por ácido clorídrico 1 Me extraídas com EtOAc.
A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em sulfato de sódio anidro e concentrada a vácuo.
O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna de gel de sílica (hexano/EtOAc 15/1) para dar 2-(4-ciano-3-metoxifenil)-2-metilpropanoato de etila. 'H RMN (500 MHz , CDCI3) 3 7,54 (d, 1H, J =8,0 Hz), 7,02 (dd, 1H, J=1,6 Hz), 6,95 (d 1 H,J= 1,4 Hz), 4,17 (q, 2H, J = 7,2 Hz), 3,96 (s, 3H), 1,61 (s, 6H), 1,23 (t, 3H, J= 7,1 Hz); LCMS: [(M + 1)]* = 248,33; tg = 3,28 min.
Etapa D: 4-(1-Hidróxi-2-metilpropan-2-il)-2-metoxibenzonitrila LiBH, (0,485 ml, 0,971 mmol, 2 M em THF) foi adicionado a uma solução agitada de 2-(4-ciano-3-metoxifenil)-2-metilpropanoato de etila (0,160 g, 0,647 mmol) em THF (25 ml) a 0ºC.
A solução resultante foi agitada por 12 h.
Água (15 ml) foi adicionada e a solução resultante foi extraída com diclorometano (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secadas em MgSO,, filtradas e evaporadas sob pressão reduzida.
O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna eluindo com EtOAc- Hexanos (7:3 — 1:1) para dar uma mistura inseparável que contém primariamente — 4-(1-hidróxi-2-metilpropan-2-il)-2-metoxibenzonitrila. !H RMN (500 MHz, CDCI;3) ô 7,55 (d, 1 H, J=8,0 Hz), 6,88 (d, 1 Hs, J=8,0 Hz ),7,02(s, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,69 (s, 2H), 1,38 (s, 6H); LCMS: [(M + D)J* = 206,35; tg = 2,65 min.
Etapa E: 2-metóxi-4-(2-metil-1 -oxopropan-2-il)benzonitrila A uma solução agitada de 4-(1-hidróxi-2-metilpropan-2-il)-2- metoxibenzonitrila (0,120 g, 0,585 mmol) em CHCl; seco (30 ml) a 0ºC foi adicionado periodinano de Dess-Martin (0,322 g, 0,760 mmol) em uma porção. A mistura foi agitada por 12 h na temperatura ambiente e extinta com uma mistura 1:1 de NasS,O; saturado (20 ml) e NaHCO; saturado (20 ml). À mistura resultante foi diluída com CH.Cl, (50 ml) e as camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com CHxCl; (2 x 50 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (NaSO,) e concentradas a vácuo para dar o aldeído bruto. O resíduo bruto foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. LCMS: [(M+ 1)]* = 204; tg = 2,95 min. INTERMEDIÁRIO 23 MeO O.
H
FE — S5-fluoro-2-(metilóxi)-4-(2-oxoetil)benzonitrila Etapa A: 4-Ciano-2-fluoro-5-metoxifenil)propanodioato de di-terc-butila Uma suspensão de NaH (60 % em óleo mineral, 0,33 g, 8,3 mmoles) em DMF seco (20 ml) foi agitada e esfriada até 0ºC e malonato de di-terc-butila (1,5 g, 7,1 mmoles) foi adicionado. A mistura foi deixada aquecer até a temperatura ambiente antes da adição de 4,5-difluoro-2- metoxibenzonitrila (1,0 g, 5,9 mmoles). A mistura foi aquecida a 80ºC por 4 h com agitação, depois a mistura de reação foi esfriada na temperatura ambiente e vertida em uma mistura de água gelada (100 ml) e AcOEt (100 ml). As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada sucessivamente com água e salmoura, depois secada em Na7SO, e concentrada. O resíduo foi purificado pela cromatografia cintilante (gel de sílica, ELOAc/hexanos, 0 — 10 %) para dar o (4-ciano-5-fluoro-2-metoxifenil) propanodioato de di-terc- butila. LCMS: [(M + 1)-t-Bu, CO2-t-Bur = 210,1; tg = 2,2 min. Etapa B: Ácido (4-Ciano-2-fluoro-5-metoxifenil) acético Ácido trifluoroacético (5 ml) foi adicionado a uma solução de (4-ciano-5-fluoro-2-metoxifenil) propanodioato de di-terc-butila (1,3 g, 28 mmoles) em diclorometano (5 ml) na temperatura ambiente.
A mistura de reação foi agitada durante a noite, depois concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi tratado com Et7O (10 ml) para induzir a cristalização.
Os cristais foram coletados pela filtração para dar o ácido (4-ciano-2-fluoro-5- metoxifenil) acético. 'H RMN (500 MHz, CD;OD) ô 7,44 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 7,19 (d, J=5,4 Hz, 1 H), 3,96 (s, 3H), 3,78 (s, 2H); LC/MS: [(M + 1))º210,1; tg = 0,62 min.
Etapa C: (4-Ciano-2-fluoro-S-metoxifenil)acetato de metila A uma solução de ácido (4-ciano-2-fluoro-S-metoxifenil) acético (5,0 g, 24 mmoles) em metanol (50 ml) a 0ºC foi adicionado cloreto de tionila (2,3 ml, 31 mmoles) às gotas.
A mistura aquecida lentamente até a temperatura ambiente e agitada 12 h, depois foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo para fornecer (4-Ciano-2-fluoro-5-metoxifenil)acetato de metila 'H RMN (500 MHz, CD;OD) ô 7,35 (d, J =5,3 Hz, 1 H), 7,19 (dy J = 5,4 Hz, 1 HD), 3,96 (s, 3H), 3,82 (s, 3H), 3,81 (s, 2H). Etapa D: 5-Fluoro-4-(2-hidroxietil)-2-metoxibenzonitrila A uma solução de (4-Ciano-2-fluoro-5-metoxifenil)acetato de metila (5,0 g, 22 mmoles) em THF (50 ml) a 0ºC foi adicionado boroidreto de lítio (14,6 ml, 29,1 mmoles). A reação foi agitada por 12 h, depois foi diluída com solução de cloreto de amônio saturado e extraída três vezes com acetato de etila.
As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (NasSO;), filtradas e concentradas.
A cromatografia em coluna de gel de sílica (50 — 100 % de EtOAc:hex.) forneceu 5-fluoro-4-(2-hidroxietil)-2- metoxibenzonitrila. 'H RMN (500 MHz, CD;OD) 6 7,19 (d, J=5,3 Hz, 1 DD, 6,89 (d, J=5,4 Hz, 1 H), 4,21 (br s, 1 H), 3,88 (s, 3H), 3,82 (m, 2H), 2,92 (m, 2H); LC/MS: [(M + 1)]* = 196,2; tg = 0,58 min.
Etapa E: 5-Fluoro-2-metóxi-4-(2-oxoetil)benzonitrila A uma solução de 5-fluoro-4-(2-hidroxietil)-2-metoxibenzo-
nitrila (175 mg, 0,900 mmol) em diclorometano (4 ml) foi adicionado periodinano de Dess-Martin (0,53 g, 1,2 mmol). A solução foi agitada por 2 h na temperatura ambiente, depois foi diluída com NaHCO; (sat.) e Na3S,O; (sat.) e agitada por 30 min. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com diclorometano duas vezes. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados (MgSO;,), filtrados e concentrados para fornecer o aldeído desejado, que foi usado diretamente sem outra purificação. INTERMEDIÁRIO 24 MeO
F 5-Fluoro-2-metóxi-4-oxiran-2-ilbenzonitrila A uma solução de 5-fluoro-4-(2-hidroxietil)-2- metoxibenzonitrila (0,68 g, 3,5 mmoles) e Et;N (0,82 ml, 5,9 mmoles) em diclorometano (5 ml) foi adicionado cloreto de metanossulfonila (0,33 ml, 4,2 mmoles) a 0ºC. Depois de 15 min. a mistura de reação foi vertida em cloreto de amônio saturado e extraídas com diclorometano. Os orgânicos combinados foram lavados com HCI | N, a solução saturada de bicarbonato de sódio e salmoura, depois secada (MgSO,) e concentrada a vácuo. O resíduo foi re- dissolvido em diclorometano (5 ml), tratado com DBU (0,79 ml, 5,2 mmoles) e agitada por 2 h. a monitoração pela TLC mostrou a conversão para a olefina. A mistura de reação foi diluída com água e extraída com diclorometano. Os — orgânicos combinados foram lavados com HCl | N, a solução saturada de bicarbonato de sódio e salmoura, depois secada (MgSO,) e concentrada a vácuo. A olefina resultante foi dissolvida em diclorometano (5 ml) e tratada com ácido meta-cloro perbenzóico (0,72 g, 4,2 mmoles) a 0ºC. Depois de 3 horas, a mistura foi diluída com a solução saturada de bicarbonato de sódio e extraída com diclorometano (duas vezes). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados (MgSO;), filtrados e concentrados a vácuo. O epóxido bruto foi purificado pela cromatografia em coluna de gel de sílica (5 — 80 % EtOAc:hexano) para fornecer 5-fluoro-2-metóxi-4-oxiran-2- ilbenzo-nitrila. 'H RMN (500 MHz, CD;OD) ô 7,32 (d, J = 5,3 Hz, 1 HD), 6,82 (d, J=5,4 Hz, tH), 4,19 (m, 1 H), 3,96 (s, 3H), 3,27 (m, 1 H), 2,76 (m, 1 H); LC/MS: [(M + 1)]*= 194,1; tg = 0,58 min. INTERMEDIÁRIO 25 o. Cl o.
CN óxido de (2-Cloro-4-cian-3-metoxifenil)etileno Etapa A: (R,S)-2-(2-cloro-4-cian-3-fluorofenil)]Mmalonato de t-Butila, metila Malonato de t-butila, metila (7,5 g, 43 mmoles) em DMF (50 ml) foiesfriada em um banho de gelo antes que NaH (60 % em óleo mineral, 1,0 g, 42 mmoles) fosse adicionado às porções em 5 minutos com evolução de hidrogênio. A suspensão foi deixada aquecer até a temperatura ambiente por 30 minutos tempo no qual tudo foi em solução. 3-Cloro-2,4- difluorobenzonitrila (5,0 g, 28,8 mmoles) foi adicionado como um sólido e a reação foi aquecida a 90ºC por 4 horas e depois na temperatura ambiente por 12 horas. A TLC (15 % de acetato de etila/hexanos) indicou ainda algum material de partida mas predominantemente produto em um Rf levemente mais baixo. A reação foi diluída com éter e extinta em água que contém HCl 2 N. A mistura foi extraída duas vezes com éter e as camadas de éter foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato de sódio e concentradas a vácuo. O produto bruto foi absorvido em metanol:diclorometano 1:1 (50 ml) e trimetilsilil-diazometano 2 M em éter foi adicionado até que a cor amarela persistiu para re-esterificar qualquer ácido. O diazometano em excesso foi extinto com ácido acético e a mistura foi reconcentrada. A mistura de produto foi separada pela cromatografia cintilante (5 a 10 % de acetato de etila/hexanos, Depois de 10 a 20 %) para produzir primeiro algum material de partida recuperado, depois uma mistura de produto e (R,S)-2-(2-cloro-6-
9% ciano-3-fluorofenil )]|malonato de t-butila, metila isomérico pela RMN (900 mg), seguido por isômero do produto do título limpo. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 1,46 (s, 9H), 3,79 (s, 3H), 5,15 (s, 1 HD, 7,448 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 7,56 (dd, J=6,0,8,2, 1 HD. — EtapaB:(2-cloro-4-ciano-3-fluorofenil)acetato de metila Uma solução de (R,S)2-(2-cloro-4-ciano-3-fluorofenil)- malonato de t-butila, metila (4,80 g, 14,6 mmoles) em 1:1 TFA:diclorometano (50:50 ml) foi agitada na temperatura ambiente por 20 horas e depois concentrada a vácuo.
O resíduo foi absorvido em metanol e aquecido ao refluxo até que a descarboxilação foi completa pela HPLC/MS e TLC.
À mistura foi reconcentrada e o resíduo foi purificado pela cromatografia cintilante (10 a 40 % de acetato de etila/hexanos) para produzir isômero do produto do título limpo. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 3,73 (s, 3H), 3,86 (s, 2H), 7,234 (d, J =8,0 Hz, 1 H), 7,56 (dd, J=6,1,8,0 Hz, 1 HD.
EtapaC: (2-cloro-4-ciano-3-metoxifenil)acetato de metila Uma solução de (2-cloro-4-ciano-3-fluorofenil)acetato de metila (1,40 g, 6,15 mmoles) em metanol (30 ml) foi dividido em dois frascos de microonda (MW) de 20 ml.
Carbonato de potássio (2x 850 mg) foi adicionado a cada frasco de MW.
Cada um foi aquecido em um microonda a — 130ºC por 60 minutos tempo no qual HPLC/MS indicou que nenhum material de partida foi deixado e o produto foi todo hidrolisado ao ácido.
A maior parte do metanol foi removido a vácuo e o resíduo foi diluído com água, acidificado com HCl 2 M e a mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila.
As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato de sódio e concentradas a vácuo.
O produto bruto foi absorvido em metanol:diclorometano 1:1 (50 ml) e trimetilsilildiazometano 2 M em éter foi adicionado até que a cor amarela persistiu para re-esterificar o ácido.
O diazometano em excesso foi extinto com ácido acético e a mistura foi concentrada.
O resíduo foi purificado pela cromatografia cintilante (40 % de
DCM /hexanos a 100 % de DCM) para dar o produto do título. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) ô ppm 3,73 (s, 3H), 3,83 (s, 2H), 4,07 (s, 3H), 7,139 (dy J=8,1 Hz, 1 H), 7,468 (d J=8,0, 1 HD.
Etapa D: 2-(2-Cloro-4-ciano-3-metoxifenil)etanol A uma solução de (2-cloro-4-ciano-3-metoxifenil)acetato de metila (700 mg, 2,92 mmoles) em THF (30 ml) foi adicionado boroidreto de lítio a 2 M (1,46 ml, 2,92 mmoles) e a reação foi agitada na temperatura ambiente por 16 horas.
A reação foi diluída com éter e extinta em água que contém HCl 2 N.
A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila e as camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato de sódio e concentradas a vácuo.
A mistura de produto foi separada pela cromatografia cintilante (10 a 40 % de acetato de etila/hexanos) para produzir o produto do título. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 3,10 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,94 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 4,08 (s, 3H), 7,175 (d, J=7,8 Hz, 1 Hd), 746 (d J=7,8 Hz, 1 HD.
Etapa E: metanossulfonato de 2-(2-cloro-4-ciano-3-metoxifeniD etila Uma solução de 2-(2-cloro-4-ciano-3-metoxifenil)etanol (205 mg, 0,969 mmol), DIPEA (0,846 ml, 4,84 mmoles) e piridina (0,078 ml, 0,969 mmol) em DCM (3 ml) foi tratado às gotas com cloreto de mesila (0,110 ml, 1,417 mmol). A reação foi agitada por 2 horas e foi depois diluída com DCM e lavada duas vezes com ácido cítrico aq., depois lavada com salmoura e secada em sulfato de sódio.
O resíduo foi purificado pela cromatografia cintilante (20 a 50 % de acetato de etila/hexanos) para produzir o intermediário do título. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3) ô ppm 3,00 (s, 3H), 3,30 (t, J = 6,6Hz,2H),4,11 (s, 3H), 4,50 (t,J=6,6 Hz, 2H), 7,189 (d J=8,0 Hz, 1 DD, 7,508 (d, J=8,0 Hz, 1 H). Etapa F: (2-Cloro-4-cian-3-metoxifenil)etileno Uma solução de metanossulfonato de 2-(2-cloro-4-ciano-3- metoxifenil)etila (207 mg, 0,714 mmol) em DCM (4 ml) foi tratada com DBU
(0,538 ml, 3,57 mmoles) e agitada durante a noite a 40ºC.
A TLC (50 % acetato de etila/hexanos) mostrou a conversão completa para uma faixa de UV intensa mais rápida para o produto.
A reação foi depois diluída com DCM e ácido cítrico aq. e a mistura foi extraída duas vezes com DCM.
As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato de sódio e concentradas a vácuo.
A purificação do resíduo pela cromatografia cintilante (5 a 20 % de acetato de etila/hexanos) produziu o intermediário do título. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3) ô ppm 4,09 (s, 3H), 5,59 (d, J = 11 Hz, 1 HD), 5,87 (d, J = 17,4 Hz, 1 Hd), 7,11 (dd, J=11 Hz, 174 Hz, 1 DD, 7,40(d,J=8,3Hz,1H),7,47(dJ=83Hz,1H). Etapa G: Óxido de (2-Cloro-4-ciano-3-metoxifenil)etileno Uma solução de (2-cloro-4-ciano-3-metoxifenil)etileno (120 mg, 0,620 mmoles) em DCM (6 ml) foi tratada com 85 % de m-CPBA (208 mg, 0,930 mmol) e agitada por 5 horas na temperatura ambiente.
A reação foi depois diluída com DCM e agitada com bicarbonato de sódio saturado contendo um pouco de bissulfito de sódio.
A mistura foi depois extraída duas vezes com DCM e as camadas orgânicas foram lavadas com uma outra porção de bicarbonato de sódio e salmoura, secados em sulfato de sódio e concentrada a vácuo para produzir o epóxido do título bruto. 'H RMN (500 MHz, CDCI;)ôppm2,68 (dd,J=2,6,5,8 Hz, 1 H), 3,28 (dd, J=4,1,5,5 Hz, 1 H), 4,12 (s, 3H), 4,24 (dd, J = 2,5, 3,9 Hz, 1 ), 7,13 (dt J=80 Hz, 1 H), 7,52(d J=80Hz, 1 H). INTERMEDIÁRIO 26 Cl CN Óxido de (2-Cloro-4-cian-5-metoxifenil)etileno —EtapaA:2-(2-cloro-4-ciano-S-fluorofenil)Mmalonato de di-t-butila Ao hidreto de sódio (60 % em óleo mineral, 3,75 g, 94 mmoles) sob nitrogênio foi adicionado DMF seco (150 ml) e a suspensão foi esfriada em um banho de gelo. Malonato de di-t-butila (8,1 g, 37,5 mmoles) foi adicionado às gotas em 15 minutos via seringa com evolução de hidrogênio. A suspensão foi agitada por 30 minutos tempo depois do qual 5- cloro-2 4-difluorobenzonitrila (5,0 g, 28,8 mmoles) em DMF (10 ml) foi — adicionado às gotas em 15 minutos e a reação foi aquecida a 80ºC por 12 horas quando a TLC (15 % de acetato de etila/hexanos) indicou principalmente produto. A reação foi diluída com éter e extinta em água que contém cloreto de amônio aq. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila e as camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secadas em — sulfato de sódio e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado em gel de sílica (2 a 10 % de acetato de etila/hexanos) para dar o produto do título. À RMN indicou que cerca de uma mistura 6:1 de produto e do 2-(4-cloro-2- ciano-5-fluorofenil)]Mmalonato de di-t-butila isomérico. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) ô ppm 1,46 (s, 18H), 5,05 (s, 1 H), 7,55 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 7,71 (d,J = 6,0, 1 H) (isômero maior) e 1,46 (s, 18H), 4,95 (s, 1 H), 7,63 (d, J =8,3 Hz, 1H), 7,78 (d, J=6,0, 1 H) (isômero menor).
Etapa B: (2-cloro-4-ciano-5-fluorofenil)acetato de metila Uma solução de 2-(2-cloro-4-ciano-5-fluorofenil)]malonato de di-t-butila (9,10 g, 24,6 mmoles) em TFA:diclorometano 1:2 (25:50 ml) foi agitada na temperatura ambiente por 3 horas e depois concentrada a vácuo para dar um sólido (5,05 g) depois duas vezes evaporando o tolueno. Uma alíquota de 4 g de sólido foi absorvida em metanol:diclorometano 1:1 (50 ml) e trimetilsilildiazometano 2 M em éter foi adicionado até que a cor amarela persistiu. O diazometano em excesso foi extinto com ácido acético e a mistura — foi concentrada. O resíduo foi purificado pela cromatografia cintilante (5 a 15 % de acetato de etila/hexanos que contém 5 % de DCM para a solubilidade) para dar a separação do isômero de Rr; mais alto de 4-cloro-2-ciano-5- fluorofenila e produto ainda impuro do isômero do título. A cromatografia cintilante foi repetida (50 a 100 % de DCM/hexanos) para produzir o produto do título limpo pela RMN. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 3,72 (s, 3H), 3,79 (s, 2H), 7,21 (d, J=8,9 Hz, 1 H), 7,62 (d J=5,8 Hz, 1 DD.
Etapa C: (2-cloro-4-ciano-S-metoxifenil)acetato de metila Uma solução de (2-cloro-4-ciano-5-fluorofenil)acetato de metila (1,40 g, 6,15 mmoles) em metanol (30 ml) foi dividido em dois frascos de microondas de 20 ml.
Carbonato de potássio (2x 850 mg) foi adicionado a cada frasco.
Cada um foi aquecido em um microondas a 130ºC por 60 minutos tempo no qual a HPLC/MS indicou que nenhum material de partida foi deixado e o produto foi todo hidrolisado para o ácido.
À maior parte do metanol foi removida a vácuo e o resíduo foi diluído com água, acidificado com HCl 2 M e a mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila.
As camadas orgânicas foram lavada com salmoura, secadas em sulfato de sódio e concentrada a vácuo.
O produto bruto foi absorvido em —metanol:diclorometano 1:1 (50 ml) e trimetilsilil-diazometano 2 M em éter foi adicionado até que a cor amarela persistiu para re-esterificar o ácido.
O diazometano em excesso foi extinto com ácido acético e a mistura foi concentrada.
A cromatografia cintilante (40 % de DCM/hexanos a 100 % de DCM) deu o (2-cloro-4-ciano-5-metóxi-fenil)acetato de metila. 'H RMN (400 MHz, CDCI3)ôppm3,73 (s, 3H), 3,83 (s, 2H), 4,07 (s, 3H), 7,139 (d, J=8,1 Hz, 1 H), 7,468 (d J=8,0, 1 HD.
Etapa D: 2-(2-cloro-4-cian-5-metoxifenil)etanol A uma solução de (2-cloro-4-ciano-5-metoxifenil)acetato de metila (200 mg, 0,835 mmol) em THF (5 ml) foi adicionado boroidreto de lítio 2 M (0,835 ml, 1,67 mmol) e a reação foi agitada na temperatura ambiente por 16 horas.
A reação foi diluída com éter e extinta em água contendo HCl 2 N.
A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila e as camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato de sódio e concentradas a vácuo.
A mistura de produto foi separada pela MPLC (40+S;
20 a 60 % de acetato de etila/hexanos) para produzir o produto do título. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 3,04 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,93 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,93 (s, 3H), 6,927 (s, 1 H), 7,536 (s, 1 HD.
Etapa E: Metanossulfonato de 2-(2-Cloro-4-cian-S-metoxifeniDetila Uma solução de 2-(2-cloro-4-ciano-5-metoxifenil)etanol (205 mg, 0,969 mmol), DIPEA (0,846 ml, 4,84 mmoles) e piridina (0,0780 ml, 0,969 mmol) em DCM (3 ml) foi tratada às gotas com cloreto de mesila (0,110 ml, 1,42 mmol). A reação foi agitada por 2 horas e foi depois diluída com DCM e lavada duas vezes com ácido cítrico aq., depois lavada com —salmoura e secada em sulfato de sódio.
A purificação do resíduo pela cromatografia cintilante (20 a 50 % de acetato de etila/hexanos) produziu o intermediário do título. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) 5 ppm 2,99 (s, 3H), 3,24 (t, 1= 6,6 Hz, 2H), 3,95 (s, 3H), 4,49 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 6,962 (s, 1 H), 7,563 (s, 1 HD.
EtapaF: (2-Cloro-4-ciano-5-metoxifenil)etileno Uma solução de metanossulfonato de 2-(2-cloro-4-ciano-5- metoxifenil)etila (274 mg, 0,945 mmol) em DCM (4 ml) foi tratada com DBU (0,712 ml, 4,73 mmoles) e agitada por 3 horas a 50ºC, depois na temperatura ambiente por 12 horas.
A TLC (50 % de acetato de etila/hexanos) mostrou a — conversão completa para uma faixa de UV intensa mais rápida para o produto.
A reação foi depois diluída com DCM e ácido cítrico aq. e a mistura foi extraída duas vezes com DCM.
As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato de sódio e concentrada a vácuo.
A purificação do resíduo pela cromatografia cintilante (10 a 20 % de acetato de etila/hexanos) produziu o intermediário do título. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3) ô ppm 3,98 (s, 3H), 5,59 (d, J = 11 Hz, 1 H), 5,86 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 7,09 (dd, J = 11, 17,4 Hz, 1 HD, 7,115 (s, 1 HD), 7,557 (s, 1 ED.
Etapa G: Óxido de (2-Cloro-4-ciano-5-metoxifenil)etileno
Uma solução de (2-cloro-4-cian-5S-metoxifenil)etileno (130 mg, 0,671 mmol) em DCM (6 ml) foi tratada com 85 % de m-CPBA (226 mg, 1,10 mmol) e agitada por 5 horas na temperatura ambiente quando uma outra porção de m-CPBA (115 mg) foi adicionada.
A reação agitada na temperatura ambiente por mais 16 horas e foi depois diluída com DCM e agitada com bicarbonato de sódio saturado que contém um pouco de bissulfito de sódio.
À mistura foi depois extraída duas vezes com DCM e as camadas orgânicas foram lavadas com uma outra porção de bicarbonato de sódio e salmoura, secados em sulfato de sódio e concentrada a vácuo para produzir o epóxido do título bruto. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 2,67 (dd, J = 2,6, 5,8 Hz, 1 H), 3,28 (dd, J = 4,1, 5,5 Hz, 1 H), 3,95 (s, 3H), 4,22 (dd, J =2,5,3,9 Hz, 1 H), 6,91 (s, 1 H), 7,564 (s, 1 H). INTERMEDIÁRIO 27 F.
A. 6-fluoro-2-metil-3-oxiran-2-ilbenzonitrila Etapa A: 3-bromo-6-fluoro-2-metilbenzonitrila A uma solução esfriada (0ºC) de 2-fluoro-6-metil-benzonitrila (5,0 g, 37 mmoles) em 100 ml de HSO, concentrado foi adicionado NBS (6,93 g, 38,9 mmoles). Depois a mistura foi agitada a 0ºC por 3 horas e — vertida em água gelada (1 L). A solução foi extraída três vezes com EtOAc (200 ml) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secadas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas.
O resíduo foi purificado pela cromatografia cintilante em gel de sílica para dar a 3-bromo-6-fluoro-2-metil-benzonitrila. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm 7,71-7,74 (m, 1 H), 6,95 (t, J=8,6 Hz, 1 H), 2,62 (s, 3H). Etapa B: 3-etenil-6-fluoro-2-metilbenzonitrila
Uma mistura de 3-bromo-6-fluoro-2-metilbenzonitrila (8,8 g, 41 mmoles), tributil(vinil) estanho (14,3 g, 45,2 mmoles), LiCl (5,20 g, 123 mmoles) e Pd(PPh3), (2,3 g, 2,0 mmoles) em tolueno (200 ml) foi aquecida de 100 a 110ºC sob N, durante a noite. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna para obter a 3-etenil-6-fluoro-2- metilbenzonitrila. "H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 7,54-7,58 (m, 1 E), 6,95 (t, J = 8,6 Hz, 1 H), 6,73-6,81 (m, 1 H), 5,54 (d, J = 17,2 Hz, 1 H), 5,34 (d, J=11,0 Hz, 1 H), 2,47 (s, 3H). Etapa C: 6-fluoro-2-metil-3-oxiran-2-ilbenzonitrila A uma solução esfriada (0ºC) de 3-etenil-6-fluoro-2- metilbenzonitrila (6,05 g, 37,6 mmoles) em 200 ml de DCM foi adicionado m-CPBA (15,30 g, 85 % de pureza, 75,16 mmoles). Depois a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 12 horas e diluída com DCM (300 ml), lavada com NasSO; saturado (4 X 300 ml) e salmoura, secada em sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna para se obter a 6-fluoro-2-metil-3-oxiran-2- ilbenzonitrila. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) à ppm 7,41-7,44 (m, 1 H), 7,02 (t, J=8,6 Hz, 1 H), 3,95 (t, J] =3,1 Hz, 1 H), 3,16-3,19 (m, 1 HD), 2,60-2,62 (m, 4H). INTERMEDIÁRIO 28
O
NC 3-metil-2-(metilóxi)-4-oxiran-2-ilbenzonitrila Etapa A: 4-bromo-2-fluoro-3-metilbenzonitrila A uma solução de DIPA (12,1 g, 0,120 mmol) em 20 ml de THF seco foram adicionados 2,5 M de n-BuLi (44 ml, 0,11 mmol) às gotas —sobAra-78ºC e depois a reação foi deixada aquecer até 0ºC. Depois de agitar por | hora, a solução foi adicionada a uma solução de 4-bromo-2- fluorobenzonitrila (20 g, 0,1 mmoles) em 200 ml de THF seco às gotas a-
78ºC sob Ar e a mistura foi agitada por 3 horas, depois Mel (15,6 g, 0,110 mmol) foi adicionado em uma porção e a mistura foi agitada por mais 30 minutos.
Depois a reação foi extinta com NH,CI aq. e extraída com EtOAc (200 ml X 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, — salmoura, secadas e concentradas até um óleo marrom, que foi purificado pela coluna de gel de sílica para dar a 4-bromo-2-fluoro-3-metilbenzonitrila.
Etapa B: 4-bromo-3-metil-2-(metilóxi)benzonitrila Sódio (3,00 g, 130 mmoles) foi adicionado em porções em 80 ml de metanol e a mistura foi agitada por 20 min até que o sódio fosse completamente dissolvido.
Depois 4-bromo-2-fluoro-3-metilbenzonitrila (8,00 g, 37,3 mmoles) foi adicionado e a solução foi submetida a refluxo por 4 horas antes de esfriar.
A mistura de reação foi vertida em gelo/água (300 ml) e o precipitado resultante foi coletado pela filtração.
O sólido produzido foi secado sob pressão reduzida a 40ºC para dar a 4-bromo-3-metil-2- (metilóxi)benzonitrila. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) 8 ppm 7,39 (d, J =8,0 Hz, 1 H), 7,28 (d, J =8,0 Hz, 1 H), 4,00 (s, 3H), 2,37 (s, 3H). Etapa C: 4-etenil-3-metil-2-(metilóxi)benzonitrila A mistura de 4-bromo-3-metil-2-(metilóxi)benzonitrila (8,10 g, 35,8 mmoles), vinil trifluoroborato de potássio (6,24 g, 46,6 mmoles) e PdCl>(dppo (0,55 g, 0,70 mmol) em 160 ml de EtOH e 40 ml de TEA foram submetidos a refluxo sob Ar por 4 horas.
A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna (PE: EtOAc = 20:1) para produzir a 4-etenil-3-metil-2-(metilóxi)benzonitrila. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,38 (d, J= 84 Hz, 1 H), 7,26(d,;J=8,4Hz,1H),6,85-6,92 (m, 1 HD), 5,70 (d, J=17,6 Hz, 1 H), 5,45 (d, J=10,8 Hz, I H), 3,94 (s, 3H), 2,26 (s, 3H). Etapa D: 3-metil-2-(metilóxi)-4-oxiran-2-ilbenzonitrila Uma mistura de 4-etenil-3-metil-2-(metilóxi)benzonitrila (3,90 2, 22,5 mmoles) e m-CPBA (85 %, 11,7 g, 67,6 mmoles) em 300 ml de DCM foi agitada na temperatura ambiente por 120 horas. A mistura de reação foi esfriada até 0ºC e foi lavada subsequentemente com NaHCO; saturado (50 ml), NasSO; saturado (50 ml), NaOH a 5 % (50 ml X 2) e salmoura (50 ml), secados em NasSO, anidro e concentrados. O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna (PE: EtOAc = 20:1) para produzir a 3-metil-2- (metilóxi)-4-oxiran-2-ilbenzo-nitrila. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,39 (dy J=8,8 Hz, 1 H), 7,03 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 3,95-3,97 (m, 4 ID, 3,17-3,19 (m, 1 HD), 2,60-2,62 (m, 1 H). INTERMEDIÁRIO 29 MeO
A IA Me S-metil-2-(metilóxi)-4-oxiran-2-ilbenzonitrila Etapa A: 4-Hidróxi-S-metóxi-2-metilbenzaldeído A uma solução de 2-metóxi-5-metilfenol (50,0 g, 362 mmoles) em CH3Cl7 (1000 ml) a-5ºC foram adicionados cloreto de titânio (IV) (80,0 ml, 724 mmoles) lentamente via seringa (a temperatura interna foi mantida abaixo de 0ºC durante a adição) e éter diclorometil metílico (52,9 ml, 593 mmoles). Depois de ser agitada na temperatura ambiente por 3 h, a mistura foi vertida em água gelada. O precipitado resultante foi coletado pela filtração e depois lavado com EtOAc e EtO para produzir 4-Hidróxi-S-metóxi-2- —metilbenzaldeído. 'HRMN (CDCl;3) ô 10,22 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 HD, 6,81 (s, 1 H), 6,14 (s, 1 H), 3,96 (s, 3H), 2,62 (s, 3H); LC/MS: (IE, m/z0) (M + 1)* = 167,0; tR 2,06 min. Etapa B: Trifluorometanossulfonato de 4-Formil-2-metóxi-5-metilfenila A uma solução de 4-Hidróxi-S-metóxi-2-metilbenzaldeído (20,0 g, 122 mmoles) em DMF (200 ml) na temperatura ambiente foi adicionado carbonato de potássio (33,3 g, 241 mmoles) e trifluoro-
metanossulfonato de 4-nitrofenila (49,0 g, 181 mmoles) e a mistura de reação foi agitada por 8 h.
EtOAc (600 ml) foi adicionado à mistura de reação e a camada orgânica foi lavada três vezes com água, secada, filtrada e concentrada.
O composto bruto foi depois purificado pela cromatografia cintilante (acetato de etila/hexanos 1:90 — 3:7) para fornecer trifluorometanossulfonato de 4-formil-2-metóxi-5-metilfenila. 'H RMN (CDCl3, 500 MHz) 5 10,34 (s, 1 HD), 7,53 (s, 1 H), 7,16 (s, 1 H), 3,99 (s, 3H), 2,67 (s, 3H); LC/MS: (IE, m/z) [M + 1]* = 298,97; tg = 3,44 min.
Etapa C: 4-Formil-2-metóxi-5-metilbenzonitrila Uma mistura de trifluorometanossulfonato de 4-formil-2- metóxi-5-metilfenila (35,0 g, 117 mmoles), cianeto de zinco (55,1 g, 469 mmoles) e tetracis trifenilfosfino paládio (0) (20,34 g, 17,60 mmoles) em DMF (300 ml) foi agitada a 110ºC sob atmosfera de nitrogênio por 8 horas.
EtOAc foi adicionado à mistura de reação e a camada orgânica foi lavada duas vezes com água, secada, filtrada e concentrada.
O produto bruto foi depois purificado pela cromatografia de coluna (gel de sílica, acetato de etila/hexanos 3:7) que produziu a 4-formil-2-metóxi-5-metil-benzonitrila. 'H RMN (CDCl;3, 500 MHz) ô 10,39 (s, 1 H), 7,47 (s, 1 HD), 7,44 (s, 1 H), 4,02 (s, 3H), 2,66 (s, 3H); LC/MS: (IE, m/z) [M + 1]* = 176,06; tg = 2,71 min. —EtapaD:2-Metóxi-S-metil-4-(oxiran-2-il)benzonitrila A uma solução esfriada de NaH (1,20 g, 30,0 mmoles) em THF (300 ml) foi adicionado às gotas uma solução de iodeto de trimetilsulfônio (8,74 g, 42,8 mmoles) em DMSO (80 ml). A mistura resultante foi agitada a 0ºC sob N, por 20 min.
A solução de 4-formil-2- —metóxi-S-metilbenzonitrila (5,00 g, 28,5 mmoles) em THF (60 ml) foi adicionada.
A mistura de reação resultante foi agitada a 0ºC sob N, por 1 hora e depois a mesma foi aquecida gradualmente até a temperatura ambiente e agitada nesta temperatura por 12 horas.
O material de partida foi consumido como indicado pela TLC (25 % de acetato de etila/hexanos). A mistura de reação foi esfriada até 0ºC e extinta com a adição às gotas de água. A mistura foi extraída com acetato de etila (2 x 200 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, salmoura, depois secadas (MgSO,) e filtradas. O filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado via cromatografia de coluna (gel de sílica, 10 a 30 % de EtOAc-hexanos) para produzir a 2-metóxi-5-metil-4-(oxiran-2-il)benzonitrila. 'H RMN (CDCI;3, 500 MHz) 3 7,35 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 4,01 (s, 1 H), 3,92 (s, 3H), 3,25 (s, 1 DD, 2,65 (d, J=2,6 Hz, 1 H), 2,37 (s, 3H); LC/MS: (IE, m/z) [M + 1]1* = 190,0; tr = 2,85 min. INTERMEDIÁRIO 30 a
NC 2-fluoro-4-oxiran-2-ilbenzonitrila Etapa A: Ácido (4-ciano-3-fluorofenil) acético Uma solução de diisopropilamina seca (16,5 g, 163 mmoles) em THF seco (150 ml) sob nitrogênio foi esfriada com um banho de gelo seco/acetona a-78ºC e n-butil lítio (2,50 M em hexano, 65,2 ml) foi adicionado lentamente. A solução resultante foi aquecida até a temperatura ambiente por 10 min e depois mais uma vez esfriada a-78ºC. HMPA (30,0 ml, 168 mmoles) foi adicionado, seguido por uma solução de 2-fluoro-4- metilbenzonitrila (20,0 g, 148 mmoles) em 50 ml de THF seco. Depois de agitar a-78ºC por 2 horas, CO, foi borbulhado através da solução por 20 min e depois a mistura foi aquecida lentamente até O0ºC. Depois HCI 1 N foi adicionado até o pH = 2 e a mistura foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura e secadas em sulfato de sódio anidro e concentrada para produzir o ácido (4-ciano-3-fluorofenil) acético. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 7,58-7,61 (m, 1H), 7,19- 7,21 (m, 2H), 3,72 (s, 2H). Etapa B: 2-fluoro-4-(2-hidroxietil)benzonitrila
A uma solução de ácido (4-ciano-3-fluorofenil)acético (25,6 g, 143 mmoles) em 150 ml de THF seco foi esfriada em gelo/água e depois BH;3/Me,S (10 M, 15,7 ml, 157 mmoles) foi adicionado lentamente.
A reação foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada durante a noite.
A mistura — foiextintacom MeOH e concentrada até a secura.
O resíduo foi dividido entre água e EtOAc.
As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato de sódio anidro e concentradas para produzir a 2-fluoro-4-(2- hidroxietil)benzo-nitrila. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,52-7,56 (m, 1H), 7,11-7,15 (m, 2H), 3,89 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,92 (t, J = 6,3 Hz, 2H). —EtapaC: Metanossulfonato de 2-(4-ciano-3-fluorofeniDetila Uma solução de 2-fluoro-4-(2-hidroxietil)benzonitrila (22,5 g, 136 mmoles) e MsCIl (23,3 g, 205 mmoles) em 200 ml de DCM seco foi adicionado às gotas TEA (27,5 g, 273 mmoles) a 0ºC.
A mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente durante a noite antes de concentrar até a secura.
O resíduo foi dissolvido em 300 ml de EtOAc e lavado com HCl 1 Ne salmoura, secado em Na SO, anidro e concentrado para produzir o metanossulfonato de 2-(4-ciano-3-fluoro-fenil)etila bruto.
MS m/z 244 (M + D*. Etapa D: 4-etenil-2-fluorobenzonitrila Uma solução de metanossulfonato de 2-(4-cian-3- fluorofenil)etila (35,0 g, 144 mmoles) e trietilamina (50 ml) em DCM (200 ml) foi adicionado DBU (50 ml) às gotas à OºC.
Depois de agitar na temperatura ambiente durante a noite, a solução foi diluída com DCM, lavada com HCl 1 N e salmoura e secada em sulfato de sódio anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna para dar 4-etenil-2- fluorobenzonitrila. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 7,53-7,57 (m, 1 HD, 7,20-7,26 (m, 2H), 6,64-6,71 (m, 1 HD), 5,48-5,90 (m, 2H). Etapa E: 2-fluoro-4-oxiran-2-ilbenzonitrila A uma solução de 4-etenil-2-fluorobenzonitrila (18,0 g, 122 mmoles) em 200 ml de DCM foi lentamente adicionado mCPBA (74,8 g, 367,347 mmoles) em porções a 0ºC. A mistura foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. A solução foi lavada com Na7SO; aquoso até que o papel de KI não mudasse de cor. As camadas orgânicas foram — lavadas com salmoura e depois concentradas. O resíduo foi purificado via cromatografia de coluna para dar 2-fluoro-4-oxiran-2-ilbenzonitrila. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) ô ppm 7,59-7,62 (m, 1 H), 7,12-7,22 (m, 2H), 3,89-3,91 (m, 1H), 3,20-3,22 (m, 1H), 2,72-2,74 (m, 1H). INTERMEDIÁRIO 31
V
CN — 1-formil-2,3-diidro-1H-indeno-4-carbonitrila Etapa A: 1-0x0-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila A uma solução de 4-bromo-2,3-diidro-1H-inden-1-ona (1,00 g, 4,74 mmoles) em 5 ml de DMF foi adicionado Zn(CN); (556 mg, 4,74 mmoles) e Pd(PPh3)a (77 mg, 0,14 mmol) e a mistura de reação foi agitada sob irradiação de microonda por 1 h a 165ºC. O solvente foi removido a vácuo para produzir o composto bruto, que foi purificado via cromatografia de coluna para produzir 1-0x0-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila. Etapa B: (1E)-1-[(metilóxi)metilideno]-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila Bis(trimetilsilil)>amida de sódio (2 ml, 4 mmoles, 2 M em THF) foi adicionado a uma suspensão agitada de cloreto de (metóxi metil)trifenilfosfônio (1,47 g, 4,29 mmoles) em THF seco (20 ml) a 0ºC por 35 min e uma solução de 1-0x0-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila (450 mg, 2,86 mmoles) em THF (10 ml) adicionado em 10 min. A mistura foi agitada a 0ºC por 2 h e na temperatura ambiente por 1 h. Água foi adicionada e a mistura foi dividida entre EtOAc e salmoura. A camada orgânica foi secada e concentrada. O produto bruto foi purificado via prep-TLC (PE:EtOAc = 10:1)
para “produzir a (1E)-1-[(metilóxi)metilideno]-2,3-diidro-1H-indeno-4- carbonitrila. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 8,00 (d, J = 8,3 Hz, 0,4 E), 7,42 (d, J = 8,3 Hz, 0,6H), 7,30-7,40 (m, 1 HD), 7,18-7,22 (m, 1 HD), 6,70 (s, 0,6H), 6,22 (s, 0,4H), 3,72 (s, 3H), 3,15 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 2,70-2,82 (m,
28. Etapa C: 1-formil-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila Uma solução de (1E)-1-[(metilóxi)metilideno]-2,3-diidro-1H- indeno-4-carbonitrila (250 mg, 1,05 mmol) em DCM (5 ml) foi adicionado BBr; às gotas a-78ºC sob N,. Depois a mistura foi agitada nesta temperatura por3h A mesma foi vertida em solução gelada saturada de NaHCO; e extraída com DCM. A camada orgânica foi lavada com salmoura e secada em Na7SO,. O solvente foi removido a vácuo para dar a 1-formil-2,3-diidro-1H- indeno-4-carbonitrila bruta (150 mg, bruto), que é usada diretamente para a etapa seguinte. 'H RMN (400 MHz, CDCI;) ô ppm 9,72 (s, 1 H), 7,54 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,34 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 3,76 (s, 1 H), 3,18-3,24 (m, 2H), 2,42- 2,58 (m, 2H). INTERMEDIÁRIO 32 O" o
CN 1-(piperazin-1-ilmetil)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-5-carbonitrila — Etapa A: 2-(2-bromofenil)etanol Uma solução do ácido (2-bromofenil) acético (100 g, 0,46 mmol) em THF seco (2 L) foi adicionado NaBH, (29 g, 0,77 mol) em porções. Os conteúdos foram esfriados até 0ºC, e BF;.Et6O (123 ml, 0,77 mol) foi adicionado às gotas em 1 h. A mistura foi deixada aquecer a 25ºC e —agitadapor 16h. A reação foi esfriada até 0ºC e cuidadosamente extinta com hidróxido de sódio aquoso. Os conteúdos foram agitados por 3 h e depois extraídos com EtOAc. A camada orgânica foi secada e concentrada para dar o 2-(2-bromofenil )etanol. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 6 7,54-7,56 (m, 1 H), 7,23-7,28 (m,2H),,7,07-7,11(m,1H),3,88(s,J=6,6 Hz, 2H), 3,03 (1, J = 6,8 Hz, 2H). Etapa B: 5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromeno-1-carboxilato de metila TiCl, (76 g, 0,4 mol) foi adicionado em um período de 10 min a uma mistura esfriada com gelo de 2-(2-bromofenil)etanol (20 g, 0,1 mol) e bis(etilóxi)acetato de etila (21,1 g, 0,120 mol) em 120 ml de CH;NO;. Depois de agitar por 10 min, o banho de gelo foi removido e a mistura foi deixada agitar na temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi vertida em HCl 1 N gelado/aquoso. Extraída com DCM e retro-lavada com HCl 1 Ne salmoura, secada em sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado com cromatografia em coluna de gel de sílica para dar o produto 5-
15. bromo-3,4-diidro-1H-isocromeno-I1-carboxilato de metila. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 8 7,42-7,47 (m, 1 H), 7,29 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,02 (t J=8,0 Hz, 1H), 5,22 (s, 1 HD), 4,16-4,26 (m, 3H), 3,95-4,01 (m, 1 HD), 3,46-3,63 (m, 1 H), 2,99-3,03 (m, 1 HD), 1,24 (t, J=8,0 Hz, 3H). Etapa C: Ácido 5-bromo-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1-carboxílico A uma solução de 5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromeno-1- carboxilato de metila (12,1 g, 42,4 mmoles) em 200 ml de MeOH/THF/H;O (2/2/1) foi adicionado LiOH.H,O (5,34 g, 0,127 mol) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 30 min. Os solventes foram removidos sob vácuo e o resíduo foi adicionado a 100 ml de água e extraído com éter. À — camada aquosa foi depois acidificada com HCl 4 N ao pH = 4 a 5 em banho de gelo e extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato de sódio anidro e concentradas para produzir o ácido 5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromeno-1-carboxílico. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) 8 7,41-7,47 (m, 2H), 7,05 (t, J =
8,0 Hz, 1 H), 5,27 (s, 1 H), 4,19-4,25 (m, 1 H), 3,95-4,00 (m, 1 H), 2,80 (t,J= 6,0 Hz, 2H). Etapa D: 5-bromo-N-metil-N-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1- carboxamida Uma mistura do ácido 5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromeno-1- carboxílico (9,10 g, 35,4 mmoles) e CDT (4,14 g, 42,5 mmoles) em 200 ml de DCM seco foi agitada na temperatura ambiente por 30 min e depois O,N- dimetil-hidroxilamina (5,99 g, 42,5 mmoles) foi adicionada.
A mistura resultante foi agitada durante a noite.
Os solventes foram removidos sob —vácuoeo resíduo foi purificado com cromatografia em coluna de gel de sílica para dar a 5-bromo-N-metil-N-(metilóxi)-3,4-diidro-1H-isocromeno-1- carboxamida. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) 6 7,40 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 6,99 (t, J=8,0 Hz, 1 H), 6,93 (d, J=8,0 Hz, 1 HD), 5,63 (s, 1 H), 4,23-4,28 (in, 1 H), 3,87-3,92 (m, 1 HD, 3,71 (s, 3H), 3,19 (s, 3H), 2,71-2,87 (m, 2H). Etapa E: 5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromeno-1-carbaldeído Uma solução de 5-bromo-N-metil-N-(metilóxi)-3,4-diidro-1H- isocromeno-1l-carboxamida (3,0 g, 10 mmoles) em 60 ml de THF anidro foi esfriada a-30ºC e depois DIBAL-H (20 mmoles) foi adicionado.
A mistura foi agitada a-30ºC por 1 hora.
A reação foi extinta com água, extraída com DCM.
A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em sulfato de sódio anidro e concentrada.
O 5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromeno-1-carbaldeído bruto foi usado para a etapa seguinte sem purificação.
Etapa F: 1,1-dimetiletil-4-[(5-bromo-3, 4-diidro-1 H-isocromen-1-il)- metil]piperazino-1-carboxilato Uma solução de 5-bromo-3,4-diidro-l1H-isocromeno-1- carbaldeído (1,62 g, 6,72 mmoles), amina (1,25 g, 6,/2 mmoles) e NaBH(OAc); (7,12 g, 33,6 mmoles) em 50 ml de DCM anidro foi agitada na temperatura ambiente durante a noite.
A mistura de reação foi adicionada com 50 ml de DCM e lavada com salmoura.. A camada orgânica foi secada em sulfato de sódio anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado com cromatografia em coluna de gel de sílica para dar 1,1-dimetiletil-4-[(5-bromo- 3 ,4-diidro-1 H-isocromen-1-il)metil |piperazino-1-carboxilato. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 6 7,43 (d, J = 8,0 Hz, 1 HD, 7,14 (dJ=80Hz,1H),7,04 (t,J=8,0 Hz, 1 H), 4,90 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 4,15- 4,21 (m, 1 HD), 3,71-3,77 (m, 1 HD), 3,48-3,49 (M, 4H), 3,36 (t, J = 4,0 Hz, | H), 2,76-2,81 (m, 2H), 2,50-2,54 (m, 4H), 2,41 (s, 1 HD, 1,45 (s, 9H). Etapa G: 1,1-dimetiletil-4-[(5-ciano-3,4-diidro-1 H-isocromen-1-il)- metil]piperazino-1-carboxilato Uma solução de 1,1-dimetiletil-4-[(5-bromo-3,4-diidro-1H- isocromen-1-il)metil |piperazino-lI-carboxilato (210 mg, 0,51 mmoles), Pd(PPh;3)a (118 mg, 0,100 mmol) e Zn(CN),; (120 mg, 1,0 mmol) em 10 ml de DMF anidro foi a 120ºC em atmosfera de N, por 2 horas.
Depois de esfriada na temperatura ambiente, a mistura foi dividida entre EtOAc e água.
À camada orgânica foi secada em sulfato de sódio anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado com prep-TLC para produzir 1,1-dimetiletil-4-[(5- ciano-3,4-diidro-1H-isocromen-1-il)metil]piperazino-1-carboxilato.
Etapa H: 1-(piperazin-1-ilmetil)-3,4-diidro- 1 H-isocromeno-5- carbonitrila Uma solução de 1,1-dimetiletil-4-[(5-ciano-3,4-diidro-1H- isocromen-1-il)metil |piperazino-lI-carboxilato (150 mg, 0,42 mmoles) em 10 ml de DCM foi adicionado 5 ml de HCl 4 N/dioxano e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 2 horas.
Os solventes foram removidos sob vácuo para produzir a 1-(piperazin-1-ilmetil)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-5- carbonitrila. 'H RMN (400 MHz, MeOD) 6 7,77 (d, J] = 8,0 Hz, 1 H), 7,72 (d, J=8Hz, 1 H), 7,45 (t, J =8,0 Hz, 1 H), 4,11-4,17 (m, 1 H), 3,82-3,88 (m, 9H), 3,55-3,61 (m, 2H), 2,87-2,99 (m, 2H).
INTERMEDIÁRIO 33 Ox
O
CN 1-formil-3,4-diidro-1 H-isocromeno-S-carbonitrila Etapa A: 2-(2-bromofenil)etanol Uma solução do ácido (2-bromofenil) acético (100 g, 0,46 mmol) em THF seco (2 L) foi adicionado NaBH, (29 g, 0,77 mol) em porções. Os conteúdos foram esfriados até 0ºC e BF3.EtO (123 ml, 0,770 mol) foi adicionado às gotas em 1 h. A mistura foi deixada aquecer a 25ºC e agitada por 16 h. A reação foi esfriada até 0ºC e cuidadosamente extinta com hidróxido de sódio aquoso. Os conteúdos foram agitados por 3 h e depois extraídos com EtOAc. A camada orgânica foi secada e concentrada para dar 2-(2-bromofenil)etanol. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 8 7,54-7,56 (m, 1H), 7,23-7,28 (m, 2 H), 7,07-7,11 (m, 1 H), 3,88 (s, J = 6,6 Hz, 2H), 3,03 (1, J = 6,8 Hz, 2H). Etapa B: Ácido 5-bromo-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1-carboxílico Uma solução de 2-(2-bromofenil)etanol (40 g, 0,2 mol) e ácido glioxílico (16 g, 0,22 mol) em 100 ml de ácido trifluoacético foi submetida a refluxo durante a noite. O solvente foi concentrado. Água e hidróxido de amônio foram adicionados ao resíduo para ajustar o pH da solução em 7. À solução foi extraída com éter dietílico e a camada aquosa foi ajustada a cerca de3comHCll1lM e depois a solução foi extraída com acetato de etila. À camada orgânica foi secada e evaporada. O resíduo foi usado sem purificação para dar o ácido 5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromeno-!1-carboxílico. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô 7,52 (d, J=7,6 Hz, 1 H), 7,12 (t, J =7,8 Hz, 2 HD), 5,33 (s, 1 HD, 4,27-4,33 (m, 1 H), 3,99-4,06 (m, 1 H), 2,87-2,89 (m, 2H). —EtapaC:(5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromen-1-il)metanol Uma solução do ácido 5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromeno-1-
carboxílico (0,500 g, 1,94 mmoles) em 1 ml de THF foi adicionado BH;.THF (3,88 ml, 3,88 mmoles) às gotas a 0ºC.
A mistura foi agitada a 0ºC por 2h.
A reação foi extinta com água e hidróxido de sódio aquoso (1 N, 2 ml). Os conteúdos foram agitados por 3 h e depois extraídos com EtOAc.
A camada orgânica foi secada e concentrada para dar (5-bromo-3,4-diidro-1H-
isocromen-1-il)]metanol. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) 8 7,41 (t, J=2,4 Hz, 1 H), 6,97-7,04 (m, 2 H), 4,75-4,77 (m, 1 HD), 3,88-3,92 (m, 1 HD), 3,73-3,79 (m, 2H), 2,71-2,86 (m, 2H). Etapa D: 1-(hidroximetil)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-S-carbonitrila
Uma mistura de (5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromen-1-il)- metanol (390 mg, 1,6 mmol), Zn(CN), (113 mg, 0,960 mmol), TMEDA (0,37 mg), xantfos (4,6 mg) e Pd(dba); (2,6 mg) em DMF anidro foi submetida à microonda 10 min a 100ºC.
A reação foi extinta com água e extraída com EtOAc.
A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada e concentrada.
O resíduo foi purificado com prep-HPLC para dar 1-(hidroximetil)-3,4-diidro- I1H-isocromeno-5-carbonitrila. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) 5: 7,49-7,50 (m, 1H), 7,24-7,48 (m, 2 HD), 4,76-4,78 (m, 1 HD), 4,17-4,22 (m, 1 HD), 3,76-3,95 (m, 3H), 3,01-3,09 (m, 1 HD), 2,89-2,95 (m, 1 H). Etapa E: 1-formil-3,4-diidro- 1 H-isocromeno-5-carbonitrila
A uma solução de 1-(hidroximetil)-3,4-diidro-1 H-isocromeno- 5-carbonitrila (0,16 g, 0,85 mmol) em 4 ml de DCM foi adicionado reagente de Dess-Martin (0,72 g, 1,7 mmol) em uma porção a 0ºC.
A mistura foi agitada a 0ºC por 1 hora e depois agitada na temperatura ambiente durante a noite.
À mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado para dar 1-
formil-3 4-diidro-1 H-isocromeno-5-carbonitrila. "H RMN (400 MHz, CDCI;) 8 9,71 (s, 1 HD), 7,93-7,95 (m, 1 HD), 7,64-7,68 (m, 1 H), 4,99 (s, 1 H), 4,03- 4,09 (m, 2H), 2,99-3,04 (m, 2H).
INTERMEDIÁRIO 34 OMe Br. ra o (LN 1-[[-6-bromo-7-(metilóxi)-3 4-diidro-1 H-isocromen-1-il]metil |-piperazina Etapa A: 2-[3-bromo-4-(metilóxi)fenil] etanol A uma solução do ácido [3-bromo-4-(metilóxi)fenil] acético (10,0g,40,8 mmoles) em THF anidro (50 ml) foi adicionado BH3.(CH3))S (5,3 ml, 53 mmoles) às gotas a 0ºC.
A mistura resultante foi agitada a 0ºC por 3 h.
A mistura foi depois tratada com MeOH até que a evolução de gás cessou e depois concentrada sob pressão reduzida.
O resíduo foi depois dividido entre água e EtOAc.
As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secadas em NaSO, e concentradas para dar o 2/3-bromo-4- (metilóxi)fenil Jetanol bruto, que foi usado sem outra purificação na etapa seguinte.
Etapa B: 6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1-carboxilato de metila A uma mistura resfriada com gelo de 2-[3-bromo-4- (metilóxi)fenil Jetanol (9,5 g, 41 mmoles) e bis(etilóxi)acetato de etila (8,7 g, 48 mmoles) em 60 ml de CH3NO, foi adicionado TiCl, (31,2 g, 169 mmoles) em um período de 20 min.
Depois de agitar por 10 min, o banho de gelo foi removido e a mistura foi deixada agitar na temperatura ambiente durante a — noite.
A mistura foi vertida em HCl IN gelado/aquoso.
Extraída pelo DCM e retrolavada com HCI | N e salmoura, secada em sulfato de sódio anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado via cromatografia de coluna para dar o 6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1-carboxilato de metila.
Etapa — C: Ácido — 6-bromo-7-(metilóxi)-34-diidro-1 H-isocromeno-1- — carboxílico A uma solução de 6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1H-
isocromeno-l-carboxilato (12 g, 38 mmoles) em 50 ml de MeO0OH/THF/H;yO (2/2/1) foi adicionado LiOH.H,O (4,79 g, 114 mmoles) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite.
Os solventes foram removidos sob vácuo e ao resíduo foi adicionado 50 ml de água e a mistura foi extraída com éter A camada aquosa foi depois acidificada com HCl 4 N ao pH - 3 em banho de gelo e extraída com EtOAc.
As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato de sódio anidro e concentradas para dar o ácido 6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1H-isocromeno-!1- carboxílico.
Etapa D: 6-bromo-N-metil-N,7-bis(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1- carboxamida Uma mistura do ácido 6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1H- isocromeno-l-carboxílico (5,9 g, 21 mmoles) e CDT (4,0 g, 25 mmoles) em 60 ml de DCM seco foi agitada na temperatura ambiente por 0,5 hora e depois O, N-dimetil-hidroxilamina (2,4 g, 25 mmoles) foi adicionado.
A mistura resultante foi agitada durante a noite.
Os solventes foram removidos sob vácuo e o resíduo foi purificado pela coluna para dar a 6-bromo-N-metil-N,7- bis(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1-carboxamida.
Etapa E: 6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1-carbaldeído Uma solução de 6-bromo-N-metil-N,7-bis(metilóxi)-3,4-diidro- 1H-isocromeno-1-carboxamida (800 mg, 2,4 mmoles) em 20 ml de THF anidro foi esfriada a-78ºC e depois DIBAL-H (4,8 ml, 4,8 mmoles, 1 M) foi adicionado.
A mistura foi agitada a-78ºC por | h.
A reação foi extinta com água e extraída com DCM.
A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em — sulfato de sódio anidro e concentrada.
O 6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1H- isocromeno-! -carbaldeído resultante foi usado sem outra purificação.
Etapa F: 1,1-dimetiletil-4-([6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromen- 1-il]Jmetil |piperazino-1-carboxilato A uma solução de 6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1H-
isocromeno-l-carbaldeído (700 mg, 2,6 mmoles) em 20 ml de DCM foi adicionado piperazino-l-carboxilato de 1,1-dimetiletila (481 mg, 2,60 mmoles) e NaBH(OAc); (2,7 g, 12 mmoles) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A reação foi diluída com DCM e lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada em Na7SO, anidro e concentrada. O resíduo foi purificado pela prep-TLC para dar o 1,1- dimetiletil-4-([6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromen-1il]- metil |piperazino-1!-carboxilato. Etapa G: 1-([6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromen-1-il]metil )- —piperazina A uma solução de 1,1-dimetiletil-4-([6-bromo-7-(metilóxi)- 3,4-diidro-1 H-isocromen-1-il |metil |piperazino-1I-carboxilato (150 mg, 0,34 mmoles) em 5 ml de DCM foi adicionado 5 ml do TFA e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por | h. A reação foi concentrada e a 1-([6-bromo-7- (metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromen-1-il]metil |piperazina foi diretamente usada na etapa seguinte. INTERMEDIÁRIO 35
NH 7 Fon
CN 5-fluoro-1-(piperazin-1-ilmetil)-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila Etapa A: Ácido 3-(2-bromo-3-fluorofenil)propanóico A um frasco carregado com 2-bromo-l-(bromometil)-3- fluorobenzeno (2,0 g, 7,5 mmoles) e uma barra agitadora foi adicionado malonato de dimetila (20,0 ml, 174 mmoles). A solução foi esfriada até 0ºC em um banho de gelo. A esta solução foi cuidadosamente adicionado hidreto de sódio (0,597 g, 14,9 mmoles) em porções pequenas. Quando a adição foi feita, areação foi mantida agitando por mais 30 minutos. A reação foi extinta com NH,CI, extraída com EtOAc, lavada com salmoura, secada em NasSO, e concentrada.
O resíduo foi dissolvido em ácido acético (50 ml). A esta solução foi adicionado HCI (50 ml, 330 mmoles) e a reação foi aquecida ao refluxo por 16 horas.
A análise pela LC mostrou a formação do ácido — desejado.
A maior parte do solvente foi removida em um evaporador rotativo.
A solução remanescente foi diluída com 50 ml de água e extraída com éter (50 ml x 3). Os extratos foram combinados e lavados com NaOH 1 N (50 ml x 2). Neste ponto, todo o ácido foi em THF aquoso como o sal.
As lavagens aquosas foram combinadas, acidificadas e retro extraídas com DCM (100 ml x2). Os extratos foram combinados, secados em Na7zSO, e concentrados para produzir o ácido 3-(2-bromo-3-fluorofenil)propanóico.
Etapa B: 4-bromo-5-fluoro-2,3-diidro-1H-inden-1-ona Um frasco carregado com PPA (20 ml) e uma barra agitadora foi aquecido a 90ºC.
Ácido 3-(2-Bromo-3-fluorofenil)-propanóico (2,0 g) foi carregado à mistura.
A mistura de reação foi aquecida a 100ºC e todos os sólidos lentamente dissolvidos.
A mistura de reação foi vertida em água gelada e alguns sólidos felpudos precipitaram.
Os sólidos foram coletados pela filtração para produzir a 4-bromo-5-fluoro-2,3-diidro-1 H-inden-1-ona.
LC-MS M + 1 (calc. 229, encontrado 229). —EtapaC: 5-fluoro-l1-0x0-2,3-diidro-1H-indeno-4-carbonitrila A um tubo de microonda carregado com 4-bromo-5-fluoro- 2,3-diidro-1 H-inden-1-ona (500 mg, 2,2 mmoles) e uma barra agitadora foi adicionado Pd.(dba); (40,0 mg, 0,044 mmoles), S-phos (45 mg, O,11 mmoles), cianeto de zinco (333 mg, 2,84 mmoles), DMF (15 ml) e água (0,15 ml), O tubo foi selado e purgado três vezes com nitrogênio.
A reação foi depois aquecida a 175ºC por 3 minutos em um reator de microonda.
A TLC mostrou a formação do produto desejado, junto com uma pequena quantidade do aduto de dimetilanilina.
A mistura de produto bruto foi diluída com EtOAc, lavada com salmoura, secada em sulfato de sódio, absorvida em sílica e purificada pela MPLC.
Depois da remoção do solvente, a 5-fluoro-1-0x0- 2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila foi coletada.
LC-MS M + 1 (calc. 176,05, encontrado 276,17). Etapa D: 5-fluoro-1-metilideno-2,3-diidro- 1 H-indeno-4-carbonitrila Trifenilfosfino brometo de metila (816 mg, 2,28 mmoles) foi dissolvido em THF (10 ml) e colocado em um banho de esfriamento a-20ºC.
A mistura foi depois tratada com n-butil lítio (913 ul, 2,28 mmoles) e agitada por 20 min. a-20ºC.
À mistura foi depois adicionado 5-fluoro-1-o0x0-2,3- diidro-1H-indeno-4-carbonitrila (200 mg, 1,14 mmoles) via cânula e — subsequentemente agitada por 20 min a-20ºC; a LC bem como a TLC (hexanos/EtOAc = 1/0,3) indicaram que a reação foi semi completa.
À mistura foi vertido NH,C1 e a solução foi transferida em funil de separação, diluída com EtOAc, lavada com NH,CI, NaCl, secada em NasSO,, filtrada e concentrada até a secura.
O resíduo foi depois absorvida em gel de sílica e separado em uma coluna de sílica com os sistemas de solvente de hexanos/EtOAc (1/0,3) para dar 5-fluoro-1-metilideno-2,3-diidro-1H-indeno- 4-carbonitrila.
LC-MS (1E, m/z): 174 [M + 1]*; tg =2,10 min.
Etapa E: 5-fluoro-1-(hidroximetil)-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila 5-Fluoro-1-metilideno-2,3-diidro-1H-indeno-4-carbonitrila (100 mg, 0,577 mmol) em THF (6 ml) a 0ºC foi tratada com borano tetraidorofurano (1 M, 0,751 ml, 0,751 mmol). A mistura resultante foi agitada durante a noite na temperatura ambiente; a análise de LC indicou o consumo do material de partida.
À mistura foi adicionada uma combinação de peróxido de hidrogênio (0,083 ml, 0,81 mmol) e NAOH 2 M (0,404 ml, 0,808 mmol). A mistura resultante foi depois agitada por 2 horas.
A análise de LC indicou a conclusão da reação.
A mistura de reação foi diluída com EtOAc, lavada com salmoura, secada em NasSO,, filtrada e concentrada até a secura.
O resíduo foi absorvido em gel de sílica e carregado em coluna de sílica para a separação com os sistemas de solvente de hexanos/EtOAc (1/1) para dar o produto desejado 5-fluoro-1-(hidroximetil)-2,3-diidro-1 H-indeno-4- carbonitrila.
Etapa E: 1,1-dimetiletil-4-[(4-ciano-5-fluoro-2,3-diidro-1 H-inden-1-il)- metil]piperazino-1-carboxilato 5-Fluoro-1-(hidroximetil)-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila (0,055 g, 0,29 mmol) em DCM (4 ml) foi adicionado a um frasco contendo uma barra agitadora; o frasco foi depois colocado em um banho de resfriamento a 0ºC.
À mistura foi depois adicionado periodinano de Dess- Martin (0,183 g, 0,431 mmol) e a solução resultante foi subsequentemente agitada por 2h; A análise de LC indicou a conclusão da reação.
À mistura foi depois adicionado DCM (10 ml) e NasS,O; aq. (10 ml) e a mistura foi subsequentemente agitada por 2 h.
A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com DCM, lavada com NaCl, secada em NasSO,, filtrada e concentrada até a secura; o resíduo orgânico resultante (0,060 g, 0,13 mmol) foi dissolvido em MeOH (10 ml). A esta solução foi adicionado piperazino-lI-carboxilato — de terc-butila (0,118 eg 0,634 mmol), cianoboroidreto de sódio (0,199 g, 3,17 mmoles) e poucas gotas de ACOH.
À mistura de reação foi depois agitada durante a noite sob N,. A análise de LC indicou a conclusão da reação.
A mistura de reação foi concentrada até a secura, re-dissolvida em EtOAc, lavada com NaHCO;, secada em NasSO;,, filtrada e concentrada até a secura.
O resíduo foi absorvido em gel de sílica e carregado em uma coluna de sílica para a separação com o sistema de solvente de 5 % de DCM em MeOH para dar o produto desejado, 1,1- dimetiletil-4-[(4-ciano-5-fluoro-2,3-diidro-1 H-inden-1-il)metil|-piperazino-1- — carboxilato.
LC-MS (IE, m/z): 360 [M + 1)"; t=2,55 min.
Etapa G: 5-fluoro-1-(piperazin-1-ilmetil)-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila A uma solução 1,1-dimetiletil-4-[(4-ciano-5-fluoro-2,3-diidro- 1 H-inden-1-il)metil |piperazino-1I-carboxilato (0,060g8) em DCM (2 ml) foi adicionado HCl 4 N (2 ml) na temperatura ambiente.
A mistura foi deixada agitar na temperatura ambiente por 2 horas. Os solventes foram removidos em um evaporador rotativo e o resíduo foi redissolvido em solução aq de NaHCO;. A solução foi extraída com IPA-CHCI;3 (3:1) duas vezes (50 ml cada). As extrações foram combinadas, secadas em sulfato de sódio e concentradas para dar a 5-fluoro-l-(piperazin-1-ilmetil)-2,3-diidro-1H- indeno-4-carbonitrila. LC-MS (1E, m/z): 260 [M + 1]*. INTERMEDIÁRIO 36 O.
RIAA
LQONH 6-(piperazin-1-ilmetil)-1,6,7,8-tetraidro-3H-indeno[4,5-c]furan-3-ona Etapa A: 3-bromo-2-but-3-en-1-ilbenzoato de metila A um frasco carregado com LDA recém preparado (42 mmoles) a partir de n-BuLi e i-Pr.NH foi gotejada uma solução de ácido 3- bromo-2-metilbenzóico (3,0 g, 14 mmoles) a-78ºC. A reação virou imediatamente para vermelho. Depois de agitar a mistura por 15 minutos, brometo de alila (8,4 g, 70 mmoles) foi gotejado na reação. A reação foi 15" deixada aquecer até 0ºC. A reação foi extinta com HCI | N e extraída com EtOAc (100 ml X 2). Os extratos foram combinados, lavados com salmoura, secados em sulfato de sódio e concentrados para dar um óleo amarelo claro. O óleo foi dissolvido em tolueno (30 ml) e metanol (10 ml) e tratado com TMSdiazometano em excesso (10 ml, 2,0 M em éter). O TMSdiazometano em excesso foi extinto com ácido acético quando a TLC indicou que a reação foi feita. A mistura foi concentrada e o produto bruto foi purificado pela cromatografia em gel de sílica para produzir 3-bromo-2-but-3-en-1-ilbenzoato de metila. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) 6 ppm 7,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,76 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 7,15 (t, 8,0 Hz, 1 H), 5,98 (m, 1 HS), 5,12 (d 17 Hz, 1 DD), 5,04(d/J=10Hz,1H),3,94 (s, 3H), 3,18 (m, 2H), 241 (m, 2H). Etapa B: 1-metilideno-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carboxilato de metila A um tubo de microonda carregado com 3-bromo-2-but-3-en-
I-ilbenzoato de metila (800 mg, 3,0 mmoles) e uma barra agitadora foi adicionado acetato de Paládio(II) (67 mg, 0,30 mmol), trifenilfosfina (310 mg, 1,19 mmol), carbonato de potássio (2,46 g, 18,0 mmoles) e acetonitrila (20 ml). O tubo de reação foi selado e a solução foi purgada três vezes com nitrogênioe aquecida em um aparelho de microonda a 120ºC por 10 minutos.
A TLC mostrou uma mancha azul grande logo abaixo do SM.
O produto foi isolado pela cromatografia em gel de sílica.
LC- MS M + 1 (calc. 189, encontrado 189). Etapa C: 2,3-diidro-1 H-indeno-1,4-diildimetanol A uma solução de l1-metilideno-2,3-diidro-1H-indeno-4- carboxilato de metila (1,4 g, 7,4 mmoles) em THF (15 ml) foi adicionado o Complexo de Borano-THF (1,0 M, 9,7 ml, 9,7 mmoles) a 0ºC.
A mistura foi deixada agitar por 3 horas.
À reação foi adicionado hidróxido de sódio 2 N (7,5 ml, 15 mmoles) e 30 % de peróxido de hidrogênio (1,7 ml, 15 mmoles). A mistura foi depois deixada aquecer até a temperatura ambiente.
A análise de LC mostrou a reação completa dentro de 30 minutos.
A reação foi neutralizada com NH,CI, diluída com água, extraída com EtOAc, secada em sulfato de sódio e purificada pela cromatografia em gel de sílica.
O hidroxiéster intermediário (1,1 g) foi coletado depois da remoção dos — solventes.
A uma solução em DCM (10 ml) do hidroxiéster (750 mg, 3,6 mmoles) foi adicionado DIBAL-H (18 ml, 18 mmoles) a-78ºC.
A reação foi deixada agitar por 16 h, aquecendo até a temperatura ambiente lentamente.
À reação foi diluída com DCM (30 ml) e trabalhada com sal de Roschelle.
À camada orgânica foi separada usando um funil de separação, secada em — sulfato de sódio e o produto bruto foi purificada pela cromatografia em gel de sílica para produzir 2,3-diidro-1 H-indeno-1,4-diildimetanol. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 7,25-7,30 (m, 3H), 4,72 (s, 3H), 3,85 (m, 2H), 3,42 (m, 1 H), 3,03 (m, 1 H), 2,95 (m, 1 H), 2,34 (m, 1 H), 2,04 (m, 1 E). Etapa D: 6-(hidroximetil)-1,6,7,8-tetraidro-3H-indeno[4,5-c]furano-3-ona
A um frasco carregado com 2,3-diidro-lIH-indeno-1,4- diildimetanol (210 mg, 1,2 mmol) e uma barra agitadora foi adicionado Trifluoroacetato de Tálio (770 mg, 1,4 mmol) e TFA (2 ml) a 0ºC.
A mistura foi deixada agitar por 16 horas.
A LC mostrou que nenhum SM foi deixado nesteponto.Os voláteis foram removidos sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em DCM e concentrado duas vezes para efetuar a remoção azeotrópica de todo o TFA.
Depois de bombear o resíduo sob alto vácuo por 20 minutos, cloreto de paládio (21 mg, 0,18 mmol), cloreto de lítio (75 mg, 1,8 mmol), óxido de magnésio (190 mg, 4,7 mmoles) e MeOH (10 ml) foram — adicionados ao frasco.
A mistura foi tratada sob uma atmosfera de CO por 2 horas.
A esta mistura foi adicionado DCM e EtOAc para precipitar todos os sólidos inorgânicos.
A solução bruta foi filtrada através de uma almofada de celite e o filtrado foi coletado, absorvido em gel de sílica e purificado pela MPLC para produzir a 6-(hidroximetil)-1,6,7,8-tetraidoro-3H-indeno[4,5- clfurano-3-ona. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 7,79 (dy J=8,0 Hz, 1 H), 7,52 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,27 (s, 2H), 3,91 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,85 (dd, J] = 6,0, 3,5 Hz, 1 HD), 3,50 (m, 1 H), 3,00 (m, 1H), 2,93 (m, 1 Hd), 245 (mn, 1 H), 2,14 (m, 1 AD. —EtapaE:3-0x0-3,6,7,8-tetraidro-1H-indeno[4,5-c]furano-6-carbaldeído A uma solução de 6-(hidroximetil)-1,6,7,8-tetraidoro-3H- indeno[4,5-c]furano-3-ona (55 mg, 0,27 mmol) em DCM (5 ml) foi adicionado periodato de Dess-Martin (171 mg, 0,400 mmol). A reação foi deixada agitar na temperatura ambiente por 3 horas.
A análise de LC mostrou a formação do produto desejado e houve pouco SM deixado.
A solução foi diluída com DCM (30 ml) e à esta foi adicionado Na7sS,O; (solução aq a 10 %, 15 ml) para consumir o reagente de Dess-Martin em excesso.
A mistura foi agitada até que as duas camadas separaram-se.
À camada de DCM de fundo foi coletada, lavada com NaxCO; aq, secada em sulfato de sódio e concentrada para dar 3-0x0-3,6,7,8-tetraidoro-lHindeno[4,5-c]furano-6- carbaldeído.
LC-MS (IE, m/z): 203 [M + 1]*; te = 0,58 min.
Etapa F: 1,1-dimetiletil-4-[(3-0x0-3,6,7,8-tetraidro-1 H-indeno [4,5-e]-furan- 6-iDmetil]piperazino-1-carboxilato Ao 3-0x0-3,6,7,8-tetraidro-1 H-indeno[4,5-c]furano-6- carbaldeído obtido acima foi adicionado 1-Boc piperazina (110 mg, 0,59 mmol), NACNCH; (186 mg, 3,0 mmoles), MeOH (6 ml) e três gotas de ácido acético.
A mistura foi depois deixada agitar na temperatura ambiente durante a noite.
A análise de LC mostrou a reação completa.
A solução bruta foi — depois concentrada até a secura, redissolvida em EtOAc (50 ml), lavada com NaHCO; e salmoura, secada em sulfato de sódio e purificada pela cromatografia em gel de sílica cintilante para fornecer 1,1-dimetiletil-4-[3- 0x0-3,6,7,8-tetraidro-1 H-indeno[4,5-c]-furano-6-il )]Mmetil |piperazino-1- carboxilato.
LC-MS (IE, m/z): 373 [M + 1]*; tr =2,51 min, Etapa G: 6-(piperazin-1-ilmetil)-1,6,7,8-tetraidro-3H-indeno [4,5-c]-furano-3- ona A uma solução da SM (0,050 g) em DCM (2 ml) foi adicionado HCl 4 N (2 ml) na temperatura ambiente.
A mistura foi deixada agitar na temperatura ambiente por 3 horas.
Os solventes foram removidos em um evaporador rotativo e o resíduo foi redissolvido em solução aq de NaHCO;. A solução foi extraída com IPA-CHCI;3 (3:1) duas vezes (50 ml cada). As extrações foram combinadas, secadas em sulfato de sódio e concentradas para dar 6-(piperazin-1-ilmetil)-1,6,7,8-tetraidro-3H-indeno[4,5- c]furano-3-ona.
LC-MS (IE, m/z): 273 [M + 1]*. INTERMEDIÁRIOS 37A e 37B o.
NO O. O.
OH 5-[2-(3,8-diazabiciclo[3,2,1]oct-3-il)-1-hidroxietil |-4-metil-2-benzofurano-
1(3H)-ona Etapa A: 5-(1-hidróxi-2-[8-(fenilmetil)-3,8-diazabiciclo[3,2,1] oct-3-ilJetil)- 4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma mistura de 4-metil-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)- ona(1,0g, 3,7 mmoles) e 8-(fenilmetil)-3,8-diazabiciclo[3,2,1]octano (748 mg, 3,68 mmoles) em 2 ml de DMSO foi aquecida sob condição de microonda (150ºC) por 1 hora.
Depois de esfriá-la, a mistura foi diluída com água (50 ml), extraída com EtOAc (3 X 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secadas em Na7SO,, depois — concentrada.
O resíduo foi purificado pela TLC (MeOH/DCM = 1:15) para se obter 5-(1-hidróxi-2-[8-(fenilmetil)-3,8-diazabiciclo[3,2,1]oct-3-ilJetil )-4- metil-2-benzofurano-1(3H)-ona.
Os dois isômeros foram separados pela cromatografia de SFC quiral para obter dois isômeros simples, isômero A e isômero B com o mesmo MS m/z 393 (M + 1)*. Etapa B: 5-[2-(3,8-diazabiciclo[3,2,1]oct-3-il)-1-hidroxietil|-4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona A uma solução do isômero A da Etapa A (230 mg, 0,585 mmol) em 50 ml de EtOAc foram adicionados 100 mg de Pd/C e a mistura foi agitada na temperatura ambiente sob atmosfera de H, durante a noite.
À mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado.
O resíduo foi purificado pela prep-TLC (MeOH/DCM-1:15) para dar um isômero (37A) de 5-[2-(3,8-diazabiciclo[3,2,1]oct-3-i1)-1-hidroxietil]-4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona.
MS m/z 303 (M + 1)*. A uma solução do isômero B da Etapa A (210 mg, 0,536 mmol) em 50 ml de EtOAc foram adicionados 100 mg de Pd/C sob Area mistura foi agitada na temperatura ambiente sob atmosfera de H, durante a noite.
A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado.
O resíduo foi purificado pela prep-TLC (MeOH/DCM= 1:15) para dar o segundo isômero (37B) de 5[2-(3,8-diazabiciclo[3,2,1] oct-3-il1)-1-hidroxietil]-4-metil-
2-benzofurano-1(3H)-ona.
MS m/z 303 (M + 1)*. INTERMEDIÁRIO 38 (e isômeros separados) O.
NI O. a.
OH 5-[2-(2,5-diazabiciclo[2,2,2]0ct-2-il)-1-hidroxietil|-4-metil-2-benzo-furano- 1(3H)-ona Etapa A: 1,1-dimetiletil-5-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0xo-1,3-diidro-2- benzofurano-5-iDetil]-2,5-diazabiciclo[2,2,2]octano-2-carboxilato Uma mistura de 4-metil-5-oxiran-2-11-2-benzofuran-1(3H)-ona (700 mg, 3,68 mmoles) e 2,5-diazabiciclo[2,2,2 Joctano-2-carboxilato de 1,1- dimetiletila (748 mg, 3,68 mmoles) em 2 ml de DMSO foi aquecida sob condição de microonda (150ºC) por 1 hora.
Depois de esfriar até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com água (50 ml), extraída com EtOAc (3 X 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secadas em NasSO;,, depois concentradas.
O resíduo foi purificado pela TLC (MeOH/DCM= 1:15) para obter 1,1-dimetiletil-5-[2-hidróxi-2-(4- —metil-I1-0xo0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-ul)etil]-2,5- diazabiciclo[2,2,2]octano-2-carboxilato como uma mistura de 4 isômeros, que foi separada pela cromatografia de SFC quiral para obter quatro isômeros quirais ou misturas de isômero A, B, C e D com o mesmo MS m/z 403 (M + 1)*. Etapa B: 5-[2-(2,5-diazabiciclo[2,2,2]oct-2-il)-1-hidroxietil|-4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona Uma solução de isômeros A, B, C e D da Etapa À acima (150 a 490 mg) em 5 ml de DCM foram adicionados 5 ml do TFA e a mistura foi agitada por 2 h antes de concentrar.
Os resíduos foram depois dissolvidos em 20 ml de CH;CN e adicionados 500 mg de NasCO;. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite e depois filtrada.
O filtrado foi concentrado para dar os isômeros simples das aminas livres correspondentes de 5-[2-(2,5-diazabiciclo[2,2,2]oct-2-il)-1-hidroxietil]|-4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona (38A, 38B, 38C e 38D) com o mesmo MS m/z 303 (M + 1)*. INTERMEDIÁRIO 39 o. nl O 5-[2-Q,5-diazabiciclo[2,2,1]hept-2-il)-1-hidroxietil|-4-metil-2-benzofuran- 1(3H)-ona Etapa A: fenilmetil-5-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-ox0-1,3-diidro-2-benzofurano- 5-iDetil|-2,5-diazabiciclo[2,2,1 lheptano-2-carboxilato Uma mistura de 4-metil-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)- ona (700 mg, 3,68 mmoles) e 2,5-diazabiciclo[2,2,1 ]heptano-2-carboxilato de fenilmetila (748 mg, 3,68 mmoles) em 2 ml de DMSO foi aquecida sob condição de microonda (150ºC) por 1 hora.
Depois de esfriar até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com água (50 ml), extraída com EFtOAc (3 X 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secadas em NasSO,, depois concentradas.
O resíduo foi purificado pela TLC (MeOH/DCM-1:15) para obter o produto racêmico (950 mg), que foi separado pela cromatografia de SFC quiral para se obter misturas de dois isômeros dos Isômeros A e Isômeros B de fenilmetil-5-(2-hidróxi-2-(4-metil- 1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)-etil]-2,5-diazabiciclo[2,2,1 ]heptano-2- — carboxilato com o mesmo MS m/z 423 (M + 1)*. Etapa B: 5-[2-(02,5-diazabiciclo[2,2,1]hept-2-il)-1-hidroxietil]-4-metil-2- benzofurano-1(3 H)-ona Uma solução de isômeros A de fenilmetil-5-[2-hidróxi-2-(4- metil-1-o0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil]-2,5-diazabiciclo[2,2,1] —heptano-2-carboxilato (340 mg, 0,804 mmol) em 50 ml de EtOAc foi adicionado 100 mg de Pd/C sob Ar e a mistura foi agitada na temperatura ambiente sob atmosfera de H, durante a noite. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado pela prep-TLC (MeOH/DCM = 1:15) para dar os isômeros A de 5-[2-(2,5- diazabiciclo[2,2,1]hept-2-il)-1-hidroxietil]-4-metil-2-benzofuran-1(3H)-ona. MSm/z2289(M+1)*.
Uma solução de isômeros B de fenilmetil-5-[2-hidróxi-2-(4- metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil]-2,5-diazabiciclo[2,2,1] heptano-2-carboxilato (470 mg, 1,114 mmol) em 50 ml de FtOAc foi adicionado 100 mg de Pd/C sob Ar e a mistura foi agitada na temperatura ambiente sob atmosfera de H, durante a noite. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado pela prep-TLC (MeOH/DCM = 1:15) para dar os isômeros B de 95-[/2-02,5- diazabiciclo[2,2,1]hept-2-il)-1-hidroxietil-1-4-metil-2-benzofurano-1(3H)- ona. MS m/z 289 (M + 1)*.
INTERMEDIÁRIO 40 o Br
O 5-(bromoacetil)-4,6-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 5-acetil-4,6-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona Ao tubo de microonda de 20 ml que contém uma barra agitadora foram adicionados 4,6-dimetil-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)- ona (da síntese do INTERMEDIÁRIO 9, 1,0 £, 4,2 mmoles), tetracis(trifenilfosfino)paládio (0) (0,240 g, 0,207 mmol) e tributil(1-Etóxi- vinil) estanho (2,20 g, 6,22 mmoles); à mistura foi adicionado tolueno anidro (18 ml) e o tubo foi tampado, desgaseificado e purgado com N. O tubo foi depois colocado em um banho de óleo e aquecido a 110ºC por 12 h; a LC — indicou alguma formação de produto. O tubo foi tirado do banho de óleo e esfriado até a temperatura ambiente. A solução foi concentrada até a secura sob pressão reduzida e o resíduo resultante foi depois tratado com HCl 4 M (10 ml); a solução resultante foi agitada na temperatura ambiente por 1 h; A análise de LC indicou a conclusão da reação. A solução foi concentrada até a secura e o resíduo foi re-dissolvido em DCM, foi absorvido em gel de sílica e — foidepois carregado em coluna de sílica para a separação com os sistemas de solvente de Hexanos/EtOAc (1/1); isto produziu a 5-acetil-4,6-dimetil-2- benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (CDCl;3, 500 MHz), 6 7,645 (s, 1 HD), 5,271 (s, 2H), 2,558 (s, 3H), 2,393 (s, 3H), 2,623 (s, 3H). LC-MS (IE, m/z): 205 [M + 1)1*; tr = 3,08 min. Etapa B: 5-(bromoacetil)-4,6-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução de 5-acetil-4,6-dimetil-2-benzofuran-1(3H)- ona (370 mg, 1,8 mmol) em THF (4 ml) foi adicionado dibrometo de cobre (ID) (486 mg, 2,20 mmoles) na temperatura ambiente. A mistura foi deixada agitar na temperatura ambiente por 16 horas. A TLC mostrou a formação do produto desejado. A reação foi diluída com EtOAc (100 ml), lavada com salmoura, secada em sulfato de sódio e purificada pela cromatografia em gel de sílica cintilante. A 5-(Bromoacetil)-4,6-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona foi coletada depois da remoção do solvente. 'H RMN (CDCl;3, 500 MHz), ô 7,671 (s, 1 HD), 5,286 (s, 2H), 4,314 (s, 2H), 2,414 (s, 3H), 2,288 (s, 3H) INTERMEDIÁRIO 41
O NÓS O.
CN 4-Metóxi-6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila Etapa A: 5-Bromo-2-cloro-4-metoxipiridina A uma solução de 2-cloro-4-metoxipiridina (10,0 g, 69,7 mmoles) em 50 ml de ácido sulfúrico a 0ºC foi adicionado NBS. A mistura de reação foi deixada agitar e aquecida até a temperatura ambiente por 2 hora e depois aquecida a 60ºC por 5 h. Depois a mesma foi esfriada até a temperatura ambiente e neutralizada com NaOH 1 N (pH - 7), diluída com água (50 ml) e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 100 ml). As camadas orgânicas foram lavadas com água (2 x 50 ml), NaHCO; sat., salmoura, secadas em Mg7SO, e concentradas para fornecer um óleo, que foi — submetido à cromatografia.
Na eluição com O a 25 % de EtOAc/hexanos, o produto final foi obtido. 'H RMN (500 MHz, DMSO-d;s), ô 8,4 (s, 1 HD, 7,29 (s, 1 HD), 3,97 (s, 3H); LC/MS (M + 1)* = 223,81; tg = 2,75 min.
Etapa B: 6-Cloro-4-metoxipiridino-3-carbonitrila Uma solução de 5-bromo-2-cloro-4-metoxipiridina (5,0 g, 22,48 mmoles) em DMF (80 ml) foi purgado com nitrogênio por 15 min.
Neste ponto, Zn(CN); (3,96 g, 33,7 mmoles) e Pd(Ph3;P), (2,60 g, 2,25 mmoles) foram adicionados, sucessivamente.
A suspensão resultante foi agitada a 95ºC por 12 h sob atm de nitrogênio.
A mistura de reação foi —esfriada até a temperatura ambiente, filtrada para remover o sólido inorgânico.
O solvente (DMF) foi evaporado para fornecer o resíduo bruto como um óleo, que foi purificado em gel de sílica e eluído com O a 30 % de acetato de etila/hexanos para produzir o produto. 'H RMN (500 MHz, DMSO-d;s), ô 8,69 (s, 1 HD, 7,50 (s, 1 H), 4,04 (s, 3H); LC/MS (M+W = 168,96; tg = 2,05 min. —EtapaC:6-Etenil-4-metoxipiridino-3-carbonitrila Um tubo de microonda de 20 ml foi carregado com 6-cloro-4- metoxipiridino-3-carbonitrila (200,0 mg, 1,2 mmoles), Dbis(difenil- fosfino)ferroceno]dicloropaládio(II), complexo com diclorometano (97,0 mg, 0,12 mmol), vinil trifluoroborato de potássio (318,0 mg, 2,37 mmoles) e — trietilamina (0,33 ml, 2,37 mmoles) e EtOH (6 ml). O tubo de microonda foi evacuado e enchido com nitrogênio (duas vezes) e aquecido a 140ºC.
Depois de 1 h, a mistura de reação foi diluída com água e extraída com EtOAc.
As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secadas em Na7SO,. Os extratos foram concentrados e submetidos à cromatografia em uma coluna de SiO, (0 a 30 % de EtOAc/hexanos como eluente). À evaporação do solvente produziu o composto do título. 'H RMN (500 MHz, DMSO-d;s), 6 8,65 (s, 1 ED, 6,89 (s, 1H), 6,83 (dd, J = 10,7 Hz, 1 H), 6,42 (d, J =7,3 Hz, 1H), 5,70 (d, J = 10,6 Hz, 1 H) 4,05 (s, 3H); LC/MS (M + 1)* = 161,03; tg 1,67 min.
Etapa D: 6-(2-Bromo-1-hidroxietil)-4-metoxipiridino-3-carbonitrila Uma solução de 6-etenil-4-metoxipiridino-3-carbonitrila (80,0 mg, 0,499 mmol) em 1,4-dioxano (8 ml) e HO (4 ml) foi tratado com N- bromossuccinimida (89,0 mg, 0,499 mmol, 1,0 equiv). A mistura de reação foi deixada agitar na temperatura ambiente durante a noite.
A mistura de reação foi vertida em H,O (8 ml) e extraída com EtOAc (3 x 30 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaCl saturado aquoso (1 x 30 ml), secadas em Na7SO,. A evaporação do solvente deu um óleo que foi purificado em SiO, (0 a 30 % de EtOAc/hexanos como eluente) produzindo 6-(2-bromo-l-hidroxietil)-4-metóxi-piridino-3-carbonitrila. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), 5 8,65 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 5,05 (t, J] = 5,4 Hz, 1 HD), 4,05 (s, 3H), 3,85 (dd, J = 4,5 Hz, 1 H), 3,75 (dd, J = 6,1 Hz, 1 H); LC/MS (M + 1)* = 240,89; tg = 1,31 min. —EtapaE:4-Metóxi-6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila Uma solução de 6-(2-bromo-1-hidroxietil)-4-metóxi-piridino- 3-carbonitrila (74,0 mg, 0,288 mmol) em metanol anidro (7 ml) foi tratado com carbonato de sódio (61,0 mg, 0,576 mmol, 2,0 equiv) e deixada agitar na temperatura ambiente durante a noite.
O solvente foi evaporado.
O resíduo foi — absorvido em EtOAc (30 ml) e lavado com água e salmoura.
Depois de secar em Na7SO,, a camada orgânica foi removida e o resíduo foi purificado em SiO;, (10 a 45 % de EtOAc/hexanos como eluente) para produzir 4-metóxi-6- (oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), 8 8,64 (s, 1 H), 6,87 (s, 1 ED,
4,08 (dd, J = 2,6 Hz, J = 2,3 Hz, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,26 (dd, J = 4,6 Hz, J = 5,4 Hz, 1H), 2,87 (dd, J =2,2 Hz, J = 2,4 Hz, 1H); LC/MS (M + 1)* =177,11; tr = 1,68 min. INTERMEDIÁRIO 42
O & D
CN —6-(Oxiran-2-11) piridino-3-carbonitrila Etapa A: 6-Etenilpiridino-3-carbonitrila A uma solução agitada de 6-bromopiridino-3-carbonitrila (2,0 £, 10,9 mmoles), em EtOH (70 ml) foram adicionados bis[(difenilfosfino) ferroceno]dicloropaládio(II), complexo com diclorometano (0,892 mg, 0,10 mmol), vinil trifluoroborato de potássio (2,93 g, 21,9 mmoles), trietilamina (3,0 ml, 21,9 mmoles) e água (0,5 ml). A mistura de reação foi aquecida ao refluxo. Na conclusão como determinada pela HPLC de fase reversa-MS (1 a 2h) e TLC (eluente: 10 % de acetato de etila em hexanos), a reação foi esfriada até a temperatura ambiente e depois foi diluída com água e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secadas em MgSO,. Os extratos foram concentrados e submetidos à cromatografia em uma coluna de SiO, (0 a 20 % de EtOAc/hexanos como eluente). A evaporação do solvente produziu 6-etenilpiridino-3-carbonitrila. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3), ô 8,85 (s, 1 H), 7,94-7,93 (m, 1 —H),6,89-6,83(m,1H) 7,45 (d,J=8,2Hz,1H),6,85 (dd, J=10,8,Hz, 1 DD, 6,42 (d, J=17,4 Hz, 1 H); LC/MS (M + 1)* = 131,06. Etapa B: 6-(Oxiran-2-il) piridino-3-carbonitrila Uma solução de 6-etenilpiridino-3-carbonitrila (0,742 g, 5,70 mmoles) em uma razão de 2:1 de HO:tBuOH (30 ml) foi tratado com N- — bromossuccinimida em porções em 5 min (1,07 g, 5,99 mmoles) e agitada a 40ºC por 1 h. Depois de esfriar a 5ºC, a reação foi basificada com a adição às gotas de solução de hidróxido de sódio (0,684 g m 5 ml de H5O, 17,1 mmoles) e agitada por mais 1 h. A mistura de reação foi vertida em HO (10 ml) e extraída com EtOAc (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaCl saturado aquoso (1 x 30 ml) e secadas em MgSO,. À evaporação do solvente e purificação em SiO, (0 a 30 % de EtOAc/hexanos como eluente) forneceu 6-(oxiran-2-il) piridino-3-carbonitrila. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3), 5 8,87 (s, 1 H), 7,99 (d J=8,1 Hz, 1 H), 7,40 (d, J =8,1 Hz, 1 H), 4,11 (s, 1 H), 4,08 (dd, J=2,6 Hz, J=2,3 Hz, 1 H), 3,29 (m, 1 H), 2,94 (m, 1 H); LC/MS (M + 1)* = 147,09. A resolução dos epóxidos foi realizada (prep SFC, 160 ml/min., 10 % de MeOH em SC CO2, AD-H) para fornecer: Isômero A: (M + 1)* = 147,09. Isômero B: (M + 1)* = 147,09. INTERMEDIÁRIO 43 o
NES ú,
CN 4-Metil-6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila A 4-Metil-6-(oxiran-2-il) piridino-3-carbonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do INTERMEDIÁRIO 42 partindo de 6-cloro-4-metilpiridino-3-carbonitrila. LC/MS (M + 1)*- 161,13. INTERMEDIÁRIO 44
O &* >
CN —S-Metil-6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila A 5-Metil-6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do INTERMEDIÁRIO
42 partindo de 6-cloro-5-metilpiridino-3-carbonitrila. LC/MS (M + 1)* = 161,10. INTERMEDIÁRIO 45
O NÓS
CN 2-Metil-6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila A 2-Metil-6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do INTERMEDIÁRIO 42 partindo de 6-cloro-2-metilpiridino-3-carbonitrila. LC/MS (M + 1)* = 161,16. INTERMEDIÁRIO 46 Oo
CN —S5-cloro-6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila A 5-Cloro-6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do intermediário 42 partindo de 5,6-dicloropiridino-3-carbonitrila. LC/MS (M + 1)* = 180,99. INTERMEDIÁRIO 47 o
O ” 4-ciclopropil-S-oxiran-2-il-2-benzofuran-1(3H)-ona Etapa A: 5-bromo-4-iodo-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução esfriada (0ºC) de 5-bromo-2-benzofurano-
1(3H)-ona (50 g, 0,235 mol) em ácido trifluorometanossulfônico (400 ml) foi adicionada N-iodossuccinimida (55,5 g, 0,247 mol). A mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente durante a noite, depois vertida lentamente em água gelada (2 L), filtrados e o filtrado extraído com EtOAc.
As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secadas e concentradas para dar a 5-bromo-4-iodo-2-benzofurano-1(3H)-ona.
Etapa B: 5-bromo-4-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma mistura de 5-bromo-4-iodo-2-benzofurano-1(3H)-ona (1 £, 2,95 mmoles), viniltrifluoroborato de potássio (474 mg, 3,54 mmoles) e —Pd(dpph)Cl, (200 mg) em 20 ml de TEA e 20 ml de EtOH foi aquecida ao refluxo sob N, por 2 horas.
A TLC mostrou a reação completa.
A maior parte do solvente foi removida e o resíduo foi dissolvido em EtOAc (100 ml). À solução foi lavada com HCI 0,1 N, bicarbonato de sódio e salmoura, secada em sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer 5-bromo-4-vinil-2- benzofurano-1(3H)-ona.
Etapa C: 5-bromo-4-ciclopropil-2-benzofuran-1(3H)-ona A uma mistura esfriada (0ºC) de 5-bromo-4-vinil-2- benzofurano-1(3H)-ona (2,2 g, 9,21 mol) e PAd(OAc), (100 mg) em EtOAc (50 ml) foi adicionada uma solução de CH,N, em éter (100 ml) lentamente.
À — mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente durante a noite, depois extinta com ácido acético, filtrada e o filtrado lavado com água e salmoura, secada e concentrada para fornecer a 5-bromo-4-ciclopropil-2-benzofurano- 1(3H)-ona.
Etapa D: 4-ciclopropil-5-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma mistura de 5-bromo-4-ciclopropil-2-benzofurano-1(3H)- ona (760 mg, 3,004 mmoles), viniltrifluoroborato de potássio (805 mg, 6,008 mmoles) e Pd(dppfCl, (100 mg) em 20 ml de TEA e 20 ml de EtOH foi aquecida ao refluxo sob N, por 8 horas.
Quando a TLC mostrou reação completa a maior parte do solvente foi removida e o resíduo foi dissolvido em
EtOAc (100 ml). A solução foi lavada com HCI 0,1 N, bicarbonato de sódio e salmoura, secada em sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O óleo resultante foi purificado pela cromatografia de coluna para dar 4-ciclopropil-5-vinil-2- benzofurano-1(3H)-ona.
'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,74 (d, J=8,6 Hz, 1 H), 7,67 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,34-7,41 (m, 1 HD), 5,81 (d, J = 17,2 Hz, 1 HD), 5,50 (d, J= 11,0 Hz, 1 H), 5,38 (s, 2H), 1,84-1,90 (m, 1 H), 1,04-1,09 (m, 2H), 0,61-0,65 (m, 2H). Etapa E: 4-ciclopropil-5S-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona: A uma solução de 4-ciclopropil-5-vinil-2-benzofurano-1(3H)- ona (440 mg, 2,2 mmoles) em 50 ml de DCM foi lentamente adicionado mCPBA (1,14 g, 6,6 mmoles) em 50 ml de DCM a 0ºC. Depois de aquecer até a temperatura ambiente, a mistura foi agitada por 12 horas. A mistura foi lavada com Na7zSO; aquoso até que o papel de KI não mudasse de cor. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura e depois concentradas. O resíduo foi purificado via prep-TLC para dar o produto 4- ciclopropil-5-oxiran-2-i1l-2-benzofurano-1(3H)-ona.
'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,77 (d, J=8,6 Hz, 1 H), 7,39 (d, J=7,8 Hz, 1 HD), 5,39 (s, 2H), 4,43-4,45 (m, 1 H), 3,26-3,28 (nm, 1 HD), 2,68-2,/70(m,1H),1,94-2,01 (m, 1 H), 1,08-1,12 (m, 2H), 0,65-0,75 (m, 2H). INTERMEDIÁRIO 48 o
O seu 4-etil-S-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 5-bromo-4-etil-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma mistura de 5-bromo-4-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona (2,0g,8,37 mmoles) e Pd/C (400 mg) em 50 ml de MeOH foi agitada na temperatura ambiente sob H2 (1 atm) durante a noite e depois filtrada. O filtrado foi concentrado.
O óleo resultante foi purificado pela cromatografia de coluna para dar 5-bromo-4-etil-2-benzofuran-1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,71 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,59 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 5,28 (s, 2H), 2,76 (q, ] = 7,4 Hz, 2H), 1,21 ((,J=7A4 H,3H.
Etapa B: 4-etil-S-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma mistura de 5-bromo-4-etil-2-benzofurano-1(3H)-ona (1,81 g, 7,51 mmoles), viniltrifluoroborato de potássio (1,21 g, 9,01 mmoles) e Pd(dppf)Cl, (200 mg) em 20 ml de TEA e 20 ml de EtOH foi aquecida ao refluxo sob N, durante a noite e depois concentrada.
O óleo resultante foi purificado pela cromatografia de coluna para dar 4-etil-S-vinil-2-benzofurano- 1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 7,73 (d, J =7,8 Hz, 1 H), 7,66 (d, J =7,8 Hz, 1 H), 7,00-7,07 (m, 1 HD, 5,82 (d, J=17,2 Hz, 1 HD), 5,51 (d,J = 11,0 Hz, 1 H), 5,28 (s, 2H), 2,69 (q, J] = 7,4 Hz, 2H), 1,19 (t, J=7,A Hz, 3H.
Etapa C: 4-etil-S-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma solução de 4-etil-5-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona (1,1 g, 5,85 mmoles) em 50 ml de DCM foi lentamente adicionado mCPBA (3,60 g, 85 % de pureza, 17,6 mmoles) em 50 ml de DCM a 0ºC.
Aquecida até a temperatura ambiente, a mistura foi agitada por 3 dias.
A mistura foi lavada com Na7SO; aquoso até que o papel de KI não mudasse de cor.
As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura e concentradas.
O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna para dar o produto 4-etil- 5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI;) ô ppm 7,715(d,J=8,6Hz,1H),7,41 (d,J=7,8 Hz, 1 H), 5,30 (s, 2H), 4,11-4,13 (m, 1 H), 3,23-3,25 (m, 1 H), 2,75-2,82 (m, 2H), 2,70-2,72 (m, 1 HD), 1,27 (,J = 7,4 Hz, 3H).
INTERMEDIÁRIO 49 o Ss.
O 4,7-dimetil-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: Ácido 3-Bromo-2,5-dimetilbenzóico Uma solução do ácido 2,5-dimetilbenzóico (20 g, 133 mmoles) em 100 ml de ácido sulfúrico conc. foi esfriada até 0ºC e depois N- bromossuccinimida (24 g, 139 mmoles) foi adicionada. A reação foi agitada a 0ºC por 1,5 hora. A mistura foi vertida em gelo/água, extraída com EtOAc, lavada com salmoura, secada em sulfato de sódio anidro e concentrada. O produto bruto foi purificado pela cromatografia de coluna para produzir o ácido 3-bromo-2,5-dimetil-benzóico. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,73 (s, 1 HD), 7,60 (s, 1 HD), 2,66 (s, 3 H), 2,343 (s, 3 HD. Etapa B: (3-bromo-2,5-dimetilfenil)]metano] A uma solução do ácido 3-bromo-2,5-dimetilbenzóico (3,5 g, mmoles) em THF anidro foi adicionado complexo de borano-THF (1,0 M, 155 25 ml, 25 mmoles) a 0ºC, depois a reação foi aquecida até a temperatura ambiente durante a noite. A reação foi extinta com MeOH e concentrada para produzir (3-bromo-2,5-dimetilfenil)]metano]. Etapa C: 5-bromo-4,7-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução de (3-bromo-2,5-dimetilfenil)]|metanol (1,6 g, 7,4 mmoles) em ácido trifluoroacético (20 ml) foi adicionado TI/OOCF;3)3 (4 £, 7,4 mmoles) na temperatura ambiente, depois a reação foi agitada na temperatura ambiente durante a noite sob N,. A mistura foi concentrada sob pressão. Os resíduos sólidos, LiCIl (0,6 g, 14,9 mmoles), MgO (0,6 g, 14,9 mmoles) e PdCl, (0,13 g, 0,74 mmoles) em MeOH foram agitados sob CO a 1 —MPa durante a noite. EtOAc foi adicionado à mistura e filtrados. A fase orgânica foi concentrada para produzir 5-bromo-4,7-dimetil-2-benzofuran-
1(3H)-ona.
Etapa D: 4,7-dimetil-5-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma mistura de 5-bromo-4,7-dimetil-2-benzofurano-1(3H)- ona (0,7 g, 2,9 mmoles), viniltrifluoroborato de potássio (0,544 g, 4 mmoles) e Pd(dpphXCls (0,07 g) em 20 ml de EtOH e 20 ml de TEA foi submetida a refluxo sob N, por 4 horas.
A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna para produzir a 4,7-Dimetil-5-vinil-2- benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 7,30 (s, 1 H), 6,85-6,92 (m,1H),5,70(d,J=17,3 Hz, 1 H), 5,40 (d, J=11,0 Hz, 1 HD), 5,18 (s, 2H), 2,64 (s, 3 H), 2,24 (s, 3 H). Etapa E: 4,7-dimetil-S-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução de 4,7-dimetil-5-vinil-2-benzofurano-1(3H)- ona (04 g, 2,1 mmoles) em 60 ml de DCM foi lentamente adicionado mCPBA (85 %, 0,7 g, 4,2 mmoles) a 0ºC.
Depois de aquecer até a temperatura ambiente, a mistura foi agitada por 48 horas.
A mistura foi lavada subsequentemente com NaHCO; saturado, NaSO; aquoso, NaOH a 5 % e salmoura.
A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna para produzir a 4,7-dimetil-S-oxiran-2-11-2- — benzofurano-1(3H)-ona como um sólido branco. 'H RMN (400 MHz, CDCI;) 5 ppm 7,07 (s, 1 H), 5,13 (s, 2H), 3,96-3,98 (m, 1 HD), 3,14-3,16 (m, 1 H), 2,61-2,63 (m, 1 H), 2,56 (s, 3 H), 2,24 (s,3 H). INTERMEDIÁRIO 50 o É o —4-fluoro-S-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 5-Bromo-4-fluoro-2-benzofurano-1(3H)-ona
Uma solução de n-BuLi (40 ml, 100 mmoles) foi adicionado às gotas a uma solução de diisopropilamina (10,6 g, 105 mmoles) em 150 ml de THF a-70ºC.
A mistura foi agitada a 0ºC por 15 minutos e depois mais uma vez esfriada a-70ºC.
Uma solução de ácido 4-bromo-3-fluorobenzóico (10 g, 45,7 mmoles, em 50 ml de THF) foi adicionado às gotas.
A mistura resultante foi agitada a-70ºC por 1 hora depois gás CH,O (gerado aquecendo-se 5,1 g de Para formaldeído a 200ºC) foi borbulhado na mistura.
A mistura resultante foi agitada a-70ºC por 1 hora depois deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada por mais 2 horas.
Gás HCl foi borbulhado na suspensão por 15 — minutos para dar uma solução clara.
A mistura foi diluída com 1 L de EtOAc e lavada subsequentemente com água, Na;CO; saturado e salmoura, secada em Na7SO, anidro e concentrada para dar 5-bromo-4-fluoro-2-benzofurano- 1(3H)-ona como sólido branco. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) 8 ppm 7,72-7,75 (m, 1 HD, 7,58 (dJ=80Hz,1H),5,36(s,2H). Etapa B: 4-fluoro-5-vinil-3H-isobenzofurano-1-ona Uma mistura de 5-bromo-4-fluoro-2-benzofuran-1(3H)-ona (5,0 g, 21,6 mmoles), viniltrifluoroborato de potássio (4,4 g, 32,5 mmoles) e Pd(dppfCl, (500 mg) em 100 ml de TEA e 100 ml de EtOH foi aquecida ao refluxo sob N, por 4 horas e depois concentrada.
O óleo resultante foi purificado pela cromatografia de coluna para dar 4-fluoro-5-vinil-3H- isobenzofurano-1-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,67-7,68 (m, 2H), 6,90-6,97 (m, 1 H), 6,00 (d, J = 17,2 Hz, 1 H), 5,60 (d, J = 11,0 Hz, 1 H), 5,35 (s, 2H). —EtapaC:4fluoro-5-oxiranil-3H-isobenzofurano-1-ona A uma solução de 4-fluoro-5-vinil-3H-isobenzofurano-1-ona (4,0 g, 17,3 mmoles) em 100 ml de DCM foi lentamente adicionado mCPBA (6,0 g, 85 % de pureza, 34,6 mmoles) em 50 ml de DCM a 0ºC.
Depois de aquecer até a temperatura ambiente, a mistura foi agitada durante a noite.
À mistura foi lavada com Na7SO; aquoso até que o papel de KI não mudasse de cor. As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura e depois concentrada. O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna para dar o produto 4- fluoro-5-oxiranil-3H-isobenzofurano-1-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,71 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,37-7,40 (m,111), 5,37 (s, 2H), 4,21-4,22 (m, 1 HD, 3,25-3,27 (m, 1 HD, 2,80- 2,82 (m, 1 HD. INTERMEDIÁRIO 51 o F O.
O T7-fluoro-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: Ácido 2,4-dibromo-6-fluorobenzóico Uma solução de n-BuLi (20 ml, 50,0 mmoles) foi adicionado às gotas a uma solução de diisopropilamina (5,6 g, 55,0 mmoles) em 200 ml de THF a-70ºC. A mistura foi agitada a 0ºC por 15 minutos e depois resfriada a-70ºC. Uma solução de 1,3-dibromo-5-fluorobenzeno (12,7 g, 50,0 mmoles, 15" em 5O0mlde THF) foi adicionado às gotas. A mistura resultante foi agitada a- 70ºC por 2 horas depois vertida em gelo seco fresco e agitada durante a noite. A mistura foi diluída com | L de éter e lavada com água duas vezes. À camada de água combinada foi lavada com éter depois acidificada até o pH 2 com ácido clorídrico e extraída com EtOAc duas vezes, A camada de EtOAc combinada foi lavada com salmoura, secada em NasSO, anidro e concentrada para dar o ácido 2,4-dibromo-6-fluorobenzóico como sólido branco. 'H RMN (400 MHz, ds-DMSO) ô ppm 7,85 (s, 1 HD), 7,76 (d, J =8,8 Hz, 1H). Etapa B: 5-bromo-7-fluoro-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma solução de n-BuLi (36,7 ml, 91,6 mmoles) foi adicionada às gotas a uma solução do ácido 2,4-dibromo-6-fluoro-benzóico (13,0 g, 43,6 mmoles, em 200 ml de THF) a-70ºC.
A solução resultante foi agitada por 15 minutos antes que o gás CH,O (gerado aquecendo-se 5,1 g de Para formaldeído a 200ºC) foi borbulhado na mistura a-70ºC.
A suspensão foi agitada por 1 hora depois aquecida até a temperatura ambiente e agitada por mais2 horas.
Gás de HCI foi borbulhado na suspensão por 15 minutos para dar uma solução clara.
A mistura foi diluída com 1 L de FtOAc e lavada subsequentemente com água, Na;CO; saturado e salmoura, depois secada em Na7SO, anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna (PE:EtOAc = 5:1) para dar a 5-bromo-7-fluoro-2-benzofurano-1(3H)- —onacomo sólido branco. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) ô ppm 7,46 (s, 1 H), 7,36 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 5,29 (s, 2H). Etapa C: 7-fluoro-5-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma mistura de 5-bromo-7-fluoro-2-benzofurano-1(3H)-ona (4,6 g, 20,0 mmoles), viniltrifluoroborato de potássio (2,9 g, 22 mmoles) e Pd (dppD2Cl (0,5 g) em 40 ml de EtOH e 40 ml de TEA foi submetida a refluxo sob Ar por 4 horas.
Depois da concentração, o resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna (PE: EtOAc = 20:1) para produzir 7-fluoro-5-vinil-2- benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,23 (s, 1 E), 7,17 (d(J=10,0 Hz, 1 HD), 6,70-6,77 (m, 1 H), 5,89 (d, J=17,2 Hz, 1 HD), 5,51 (d, J=11,2 Hz, 1 H), 5,28 (s, 2H). Etapa D: 7-fluoro-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)-ona mCPBA (85 %, 9,9 g, 48,9 mmoles) foi adicionado a uma solução de 7-fluoro-5-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona (2,9 g, 16,3 mmoles) em300mldeDCM a0ºC.A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 16 horas antes de ser esfriada até 0ºC.
A mistura foi lavada sequencialmente com NaHCO; saturado (50 ml), Na2SO; aquoso (50 ml x 2), NaOH a 5 % (50 ml) e salmoura, depois concentrada.
O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna eluído com DCM para produzir 7-fluoro-5-oxiran-2-
11-2-benzofurano-1(3H)-ona como sólido branco. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) ô ppm 7,20 (s, 1 H), 7,09 (d, J = 9,6 Hz, 1 HD), 5,29 (s, 2 H), 3,94-3,96 (m, 1 HD), 3,21-3,24 (m, 1 H), 2,75-2,77 (m, 1 H); MS m/z 195 (M + 1)*. INTERMEDIÁRIO 52
O F SS
O T7-fluoro-4-metil-5-oxiran-2-il-2-benzofuran-1(3H)-ona Etapa A: Ácido 3-bromo-5-fluoro-2-metil-benzóico A uma solução esfriada (0ºC) do ácido 5-fluoro-2-metil- benzóico (20 g, 130 mmoles) em ácido sulfúrico conc. (200 ml) foi — adicionada N-bromossuccinimida (24,3 g, 136 mmoles) às porções. A mistura resultante foi agitada a 0ºC por 3 horas, depois aquecida até a temperatura ambiente e agitada por 16 horas. Depois a mistura foi vertida lentamente em água gelada (2 L) e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secadas e concentradas para fornecer o ácido 3-bromo-5-fluoro-2-metil-benzóico, que foi usado diretamente na etapa seguinte. Etapa B: (3-bromo-5-fluoro-2-metil-fenil)-metano]l A uma solução esfriada (0ºC) do ácido 3-bromo-5-fluoro-2- metil-benzóico (3 g, 12,9 mmoles) em THF seco (20 ml) foi adicionado complexo de borano THF (25,8 ml, 1 M em THF, 25,8 mmoles) lentamente. A mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente durante a noite, depois extinta com MeOH e concentrada. O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna para dar (3-bromo-5-fluoro-2-metil-fenil)-metanol. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,25 (dd, J =8,6 Hz, J=31 Hz, 1 HD, 7,15(dd,J=8,6Hz,J=2,3Hz, 1 H), 4,71 (s, 2H), 2,33 (s, 3H). Etapa C: 5-Bromo-7-fluoro-4-metil-3H-isobenzofurano-1-ona
A uma solução de (3-bromo-5-fluoro-2-metil-fenil)-metanol (1,7 g, 7,76 mmoles) em ácido trifluoroacético (20 ml) foi adicionado TI(CF;$COO); (4,2 g, 7,76 mmoles). A mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente durante a noite, depois concentrada até a secura.
O — resíduo foi dissolvido em MeOH (50 ml). À mistura foi adicionado PdCl, (137 mg, 0,776 mmol), LiCl (652 mg, 15,5 mmoles) e MgO (652 mg, 15,5 mmoles). A mistura resultante foi reagida sob uma atmosfera de CO (50 psi (345 kPa)) na temperatura ambiente durante a noite e depois filtrada.
O filtrado foi concentrado e o resíduo foi purificado pela cromatografia de — coluna para dar a 5-bromo-7-fluoro-4-metil-3H-isobenzofurano-1-ona.
Etapa D: 7-Fluoro-4-metil-5-vinil-3H-isobenzofurano-1-ona Uma mistura de 5-bromo-7-fluoro-4-metil-3H-isobenzo- furano-1l-ona (0,6 g, 2,45 mmoles), viniltrifluoroborato de potássio (492 mg, 3,67 mmoles) e Pd(dppfCl, (100 mg) em 20 ml de TEA e 20 ml de EtOH foi aquecida ao refluxo sob N, por 4 horas e depois concentrada.
O óleo resultante foi purificado pela prep-TLC para dar a 7-fluoro-4-metil-5-vinil- 3H-isobenzofurano-l-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,26 (d, J = 9,4 Hz, 1 H), 6,89-6,97 (m, 1 H), 5,80 (d, J= 17,2 Hz, 1 HD), 5,60 (d, J= 11,0 Hz, 1H), 5,23 (s, 2H), 2,24 (s, 3H). —EtapaE:7-Fluoro-4-metil-5S-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma solução de 7-fluoro-4-metil-5-vinil-3H-isobenzo-furano- 1-ona (420 mg, 1,71 mmoles) em 10 ml de DCM foi lentamente adicionado mCPBA (741 mg, 85 % de pureza, 3,43 mmoles) em 10 ml de DCM a 0ºC.
Depois de aquecer até a temperatura ambiente, a mistura foi agitada durante a noite A mistura foi lavada com NasSO; aquoso até que o papel de KI não mudasse de cor.
As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura e depois concentradas.
O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna para dar o produto 7-fluoro-4-metil-S-oxiranil-3H-isobenzofurano-l-ona. — Os enantiômeros do produto foram resolvidos via SFC (Coluna: Quiralpak AD-H
250*4,6 mm D.L., 5 um; Fase móvel: metanol (0,05 % de DEA) em CO, de 5 % a 40 %; Taxa de fluxo: 2,35 ml/min; Comprimento de onda: 220 nm). MS m/z 209 (M + 1)”. INTERMEDIÁRIO 53
O
O —6-Ciclopropil-S-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 5-(2-Hidroxietil)-6-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona A um frasco de 500 ml contendo uma barra agitadora foi adicionada — 5-(2-hidroxietil)-6-iodo-2-benzofurano1(3H)-ona (5 g, 164 mmoles), viniltrifluoroborato de potássio (3,3 g, 24,7 mmoles), Pd(dppf)Cl, (0,6 g, 0,822 mmol) e TEA (2,3 ml). A mistura foi depois dissolvida em EtOH (50 ml) e aquecida a 100ºC em um banho de óleo de silicona por 2 h; a TLC mostrou a reação completa. O frasco foi esfriado até a temperatura ambiente, tratado com EtOAc (150 ml) e vertido em um funil de separação e lavado com salmoura (2 x 100 ml). A camada orgânica foi depois separada, secada (Na/SO,), filtrada e concentrada até a secura. O resíduo orgânico resultante foi dissolvido em DCM e absorvido em gel de sílica e purificado pela MPLC (hexanos/EtOAc; 1/1 eluente) para fornecer 5-(2-Hidroxietil)-6- vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (500 MHz, CD;CI) ô 8,03 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 E), 7,023-7,08 (m, 1 HD), 5,79 (d, J 17 Hz, 1 H), 547 (dy J=11 Hz, 1 HD, 5,31- 5,36 (m, 3H), 3,91-3,94 (m, 2H), 3,08-3,11 (m, 2H). Etapa B: 6-Ciclopropil-5-(2-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)-ona A um frasco de 100 ml que contém uma barra agitadora foi adicionado 5-(2-Hidroxietil)-6-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona (0,9 g, 4,41 —mmoles)ediacetato de paládio (0,049 g, 0,220 mmol), seguido pela adição de um diazometano recém preparado (3,7 g, 88 mmoles) em éter dietílico (10 ml) em um curso de 20 minutos. A mistura resultante foi depois agitada na temperatura ambiente em um ambiente protegido por 1 h. Quando a reação foi completa, o solvente foi concentrado até a secura, dissolvido em FEtOAc e lavado com salmoura, secado (Na7SO;), filtrado e concentrado até a secura. O resíduo resultante foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação.
'H RMN (500 MHz, CD;CI1) 6 7,56 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 H) 5,28- 5,32 (m, 3H), 3,97-4,03 (m, 3H), 3,23-3,26 (m, 2H), 1,81-1,73 (m, 4H); LC/MS: [(M + 1)]* =219.
Etapa C: 6-Ciclopropil-5-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona A um frasco de 100 ml contendo uma barra agitadora foi — adicionado o composto 6-ciclopropil-5-(2-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)- ona, (0,5 g, 2,29 mmoles), TEA (20 ml) seguido pela adição de diclorometano (25 ml). O frasco foi colocado em um banho de esfriamento de ºC e lentamente tratado com cloreto de metanossulfonila (6,5 ml, 83 mmoles). À mistura resultante foi depois agitada por 20 min. TLC (hexanos/EtOAc = 1/1) indicou a conclusão da reação. A mistura foi vertida em cloreto de amônio saturado e extraída com DCM. Os orgânicos combinados foram lavados com HCl 1 N, a solução saturada de bicarbonato de sódio e salmoura, depois secada (NasSO,) e concentrada a vácuo. O resíduo (LC/MS: [(M + 1)* = 297; tr = 1,01 min) foi dissolvido em diclorometano (25 ml) e tratado com DBU (0,7ml,4,/72mmoles) e agitada por 2 h. O monitoramento pela TLC mostrou a conversão para a olefina. A mistura de reação foi diluída com água e extraída com diclorometano. Os orgânicos combinados foram lavados com HCI 1 N, solução saturada de bicarbonato de sódio e salmoura, depois secada (Na7sSO;y) e concentrada a vácuo. O material foi usado na etapa seguinte sem — outra purificação. Etapa D: 6-Ciclopropil-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona 6-Ciclopropil-5-vinil-2-benzofuran-1(3H)-ona (0,45 g, 2,25 mmoles) foi dissolvido em diclorometano (10 ml) e tratado com ácido meta- cloro perbenzóico (1 g, 6,3 mmoles) a 0ºC e agitada por 12 h. A TLC indicou a conclusão da reação; a mistura foi diluída com solução saturada de bicarbonato de sódio e extraída com diclorometano (2x). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados (Na SO;), filtrados e concentrados a vácuo.
O epóxido foi purificado pela cromatografia em coluna de gel de sílica (hexanos/EtOAc = 1/1) para dar 6-Ciclopropil-5- oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona.
O oxirano foi redissolvido ainda em uma coluna quiral dando dois isômeros: Oxirano A-'H RMN (500 MHz, CD;CI1) 6 7,63 (s, 1 HD), 7,41 (s, 1 H), 5,29-5,33 (m, 2H), 4,21-4,42 (m, 1 HD, 3,16-3,34 (m, 1 HD), 2,71-2,72 (m,1H)2,09-2,11 (m, 1 HD, 1,07-1,14 (m, 2H), 0,76-0,88 (m, 2H). Oxirano B-'H RMN (500 MHz, CD;CI) 6 7,63 (s, 1 HD), 7,41 (s, 1 HD), 5,29-5,30 (m, 2H), 4,412-4,42 (m, 1 HD), 3,31-3,33 (m, 1H), 2,71-2,72 (m, 1 HD), 2,09-2,12 (m, 1H), 1,07-1,60 (m, 2H), 0,76-0,87 (m, 2H) INTERMEDIÁRIO 54 E “O o 7-Metóxi-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)-ona Etapa A: 4-alil-2-formil-6-metoxibenzoato de metila A um frasco contendo 5-alil-2-hidróxi-3-metoxibenzaldeído (5,0 g, 26,0 mmoles) e N-fenil-trifluorometanossulfonimida foi adicionado DCM (75 ml). O frasco foi colocado a 0ºC e tratado com EtN (4 ml) e agitado por 2 dias na temperatura ambiente.
A mistura foi diluída com diclorometano e lavada com HCl | N, solução saturada de bicarbonato de sódio e salmoura, depois secada (Na7SO,) e concentrada.
O resíduo em um frasco foi tratado com dppf (0,18 g, 0,45 mmoles), PdOAc»> (0,1 g, 0,44 mmoles) e Et3;N (8 ml, 56 mmoles) seguidos pela adição de DMF (45 ml) e —MeOH(Ç30ml).A mistura de reação foi depois desgaseificada e purgada com CO 3 vezes e agitada sob CO por 6 h a 70ºC.
Quando a LC indicou o consumo do material de partida, a solução foi concentrada até a secura. O resíduo orgânico foi purificado pela MPLC (hexanos/EtOAc = 1/0,2) para fornecer 4-alil-2-formil-6-metóxi-benzoato de metila. LC/MS: [(M + DJ* =
236. — EtapaB:5-Alil-7T-metóxi-2-benzofurano-1(3H)-ona A um frasco carregado com 4-alil-2-formil-6-metóxi-benzoato de metila (0,77 g, 1 mmol) foi adicionado boroidreto de sódio (0,36 g, 9,33 mmoles); a mistura foi depois dissolvida em MeOH (10 ml) e agitada por 18 h na temperatura ambiente. A LC indicou a conclusão da reação. A mistura foi diluída com EtOAc (150 ml) e lavada com salmoura (2 X 100 ml). A camada orgânica foi depois separada, secada (Na-SO;), filtrada e concentrada a vácuo. O resíduo resultante foi purificado pela MPLC (hexanos/EtOAc = 1/0,5) para fornecer 5-alil-7-metóxi-2-benzofurano-1(3H)-ona. LC/MS: [(M + 1)]*=205. EtapaC: (7-Metóxi-l1-oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il) acetaldeído A um frasco contendo 5-alil-7-metóxi-2-il-2-benzofurano- 1(3H)-ona (0,24 g, 1,18 mmoles) em MeOH (10 ml) a-78ºC foi borbulhado ozona por 10 min. seguido pela adição de sulfeto de dimetila (5 ml). À mistura resultante foi agitada por 1 h na temperatura ambiente. A LC indicou —queareação foi até a conclusão. A mistura foi diluída com a solução saturada de bicarbonato de sódio e extraída com EtOAc (2x). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados (Na7SO;,), filtrados e concentrados a vácuo para dar (7-metóxi-1-oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDacetaldeído. LC/MS: [(M + 1)]*=207. —EtapaD:5-(2-Hidroxietil)-7-metóxi-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma solução de (7-metóxi-1-oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5- il)acetaldeído (0,12 g, 0,58 mmoles) foi tratada com o boroidreto de sódio (0,05 g, 1,45 mmoles) e metanol (10 ml); a mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente por 1 h. A solução foi concentrada até a secura,
dissolvido em EtOAc e lavada com água, secada (Na7SO;), filtrada e concentrada a vácuo para dar a 5-(2-hidroxietil)-7-metóxi-2-benzofurano- 1(3H)-ona.
LC/MS: [(M + 1)]* = 209. Etapa E: 7-Metóxi-5-vinil-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma solução em diclorometano de 5-(2-hidroxietil)-7-metóxi- 2-benzofurano-1(3H)-ona foi colocada esfriada até 0ºC e lentamente tratada com cloreto de metanossulfonila (0,11 ml, 1,4 mmol) e TEA (0,2 ml, 1,44 mmol). A mistura resultante foi depois agitada por 20 min.
TLC (hexanos/EtOAc = 1/1) indicou a conclusão da reação.
A mistura foi vertida em cloreto de amônio saturado e extraída com diclorometano.
Os orgânicos combinados foram lavados com HCI 1 N, solução saturada de bicarbonato de sódio e salmoura, depois secados (Na SO,) e concentrados a vácuo.
Ao resíduo (LC/MS: [(M + 1)]* = 287; tg 0,81 min) (0,16 g, 0,56 mmol) foi adicionado DBU (0,19 ml, 1,26 mmol) e diclorometano (2 ml) e agitada por 2 h.A monitoração pela TLC mostrou a conversão para a olefina.
A mistura de reação foi diluída com água e extraída com diclorometano.
Os orgânicos combinados foram lavados com HCI 1 N, solução saturada de bicarbonato de sódio e salmoura, depois secada (Na:SO,) e concentrada até a secura.
O óleo resultante foi usado na etapa seguinte sem outra purificação.
EtapaF:7-Metóxi-S-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução de 7-metóxi-5-vinil-2-benzofuran-1(3H)-ona em DCM (5 ml) foi adicionado ácido metacloro perbenzóico (0,18 g, 1,05 mmol) a 0ºC e agitada por 12 h.
A TLC indicou a conclusão da reação; a mistura foi diluída com a solução saturada de bicarbonato de sódio e extraídas com DCM (2x). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados (Na7SO;y), filtrados e concentrados a vácuo.
O epóxido resultante foi purificado pela cromatografia em coluna de gel de sílica (hexanos/EFtOAc = 1/1) para dar a 7-metóxi-5-oxiran-2-11l-2-benzofuran- 1(3H)-ona.
LC/MS: [(M + 1)]* = 207.
INTERMEDIÁRIO 55 à
N NO (NH 5-[2-(piperazin-1-iDetil]-2,1,3-benzoxadiazol Etapa A: 5-(prop-2-en-1-il)-2,1,3-benzoxadiazol Não
AIN 5-Bromo-2,1,3-benzoxadiazol (10 g, 50,3 mmoles) foi dissolvido em tolueno (300 ml) e tratado com cloreto de lítio (6,39 g, 151 mmoles) , Pd(Ph3P),s (2,90 g, 2,51 mmoles) e aliltributilestanano (18,66 ml, 60,3 mmoles). A mistura desgaseificada e submetida a refluxo sob N, por 3 horas. A mistura de reação virou para preto. A mistura de reação vertida em água e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, secada e evaporada até a secura. O resíduo foi submetido à cromatografia através de coluna com 120 g de ISCO Redi-Sep e eluído com 0 a 10 % de acetato de etila/hexano para produzir 5-(prop-2-en-1-11)-2,1,3- benzoxadiazol. Etapa B: 5-[2-(piperazin-1-iDetil]-2,1,3-benzoxadiazol À —
N NO (ONA 5-(Prop-2-en-1-i1)-2,1,3-benzoxadiazol (480, 3,0 mmoles) foi dissolvido em DCM e esfriados a-78ºC. Ozona foi borbulhado até que a mistura de reação atingisse um tom azulado, depois nitrogênio foi borbulhado através da mistura para livrar-se do ozona em excesso. Boc-piperazina (558 mg, 3,0 mmoles) foi depois adicionado seguido por triacetoxiboroidreto de — sódio (2541 mg, 11,99 mmoles). A mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. A mistura de reação foi vertida em NaOH 1 N e extraída com acetato de etila duas vezes. A camada de acetato de etila foi secada em MgSOA4, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado através de uma coluna com 40 g de Redi-sep para produzir 4-[2-(2,1,3-benzoxadiazol-5-il)etil Jpiperazino-1-carboxilato de terc- butila, que foi dissolvido em dioxano e tratado com 7 ml de HCl 4 M em —dioxano. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi evaporado, depois o resíduo foi absorvido em acetato de etila e feito alcalino pela adição de NaOH 1 N. O acetato de etila foi separado, lavado com salmoura, depois secado em Na7SO, e evaporado até a secura. O resíduo foi purificado pela cromatografia de MPLC usando 5 % de (1 NH,OH: 10 MeOH) em 95 % de DCM para produzir 5-[2-(piperazin-1- iDetil 1-2,1,3-benzoxadiazol. 'H RMN (600 MHz, CDCI3): 6 7,72 (d, J = 9,2 Hz, 1 H), 7,28 (d, 3 = 9,2 Hz, 1H), 2,92 (t, J =4,9 Hz, 2H), 2,88 (t, J=7,6 Hz, 1 H), 2,65 (t, J=7,6 Hz, IH) LC-MS: M + 1= 233. INTERMEDIÁRIO 56 Não
TIA Oo 5-(oxiran-2-11)-2,1,3-benzoxadiazol Etapa A: 5-etenil-2,1,3-benzoxadiazol Não SIA, 5-Bromo-2,1,3-benzoxadiazol (5,5 g 27,6 mmoles), —vinilfluoroborato de potássio (7,40 g, 55,3 mmoles) e PdCl-(dppf)- CH;Cl7Aduto (1,088 g, 1,332 mmol) foram colocados em suspensão em etanol (75 ml) depois adicionado TEA (7,70 ml, 55,3 mmoles). A mistura de reação foi depois desgaseificada e aquecida ao refluxo por 3 horas. A reação foi diluída com acetato de etila e lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada em Na7sSO:;, filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado através de um tampão de gel de sílica de 330 g ISCO Redi-Sep e eluído com
20 % de ETOAc/hexano para produzir 5-etenil-2,1,3-benzoxadiazol. 'H RMN (600 MHz, CDCI;3): 6 ppm 7,81 (d J=9,3 Hz, 1 H), 7,66 (s, 1 H), 7,63 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 6,35 (d, J = 10,9 Hz, 0,5H), 6,80 (d, J = 10,9 Hz, 0,5H), 5,94 (d. J = 17,5 Hz, 1 ), 5,55(d J= 11 Hz, 1 AD. — EtapaB: 5-(oxiran-2-i1)-2,1,3-benzoxadiazol Não
IA Oo 5-Etenil-2,1,3-benzoxadiazol (2,82 g, 19,30 mmoles) foi dissolvido em DCM (100 ml) depois adicionado mCpBA (9,99 g, 57,9 mmoles) e agitada por 48 horas. A mistura de reação foi lavada com 10 % de NaS7O; aquoso (1 x 25 ml), depois com NaOH 1 N (1 x 25 ml), seguido por — salmoura (1 x 25 ml) e secados em NasSO;,. A mistura foi filtrada e evaporada até a secura. O resíduo foi purificado pela MPLC usando com 120 g de ISCO Redi-sep e eluído com O % a 400 % do sistema de solvente EtOAc/hexano para produzir 5-(oxiran-2-il)-2,1,3-benzoxadiazol. 'H RMN (600 MHz, CDCI;3): 6 ppm 7,83 (d, J=9,8 Hz, 1 H), 15º 7,82(s,1 H),7,24 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 3,98 (t, J=3,8 Hz, 1 H), 3,4 (t, J = 4,5 Hz, 1 H), 2,84 (dd, J=5,2Hz,J=2,5Hz,1 H). INTERMEDIÁRIOS 57A e 57B O fe “ “O OH “ OMe OMe Etapa A: 4-[2-(5-ciano-4-metóxi-2-piridil)-2-hidróxi-etill piperazino-1l- carboxilato de terc-butila o BAN oH tn Ns OMe Um vaso de Pirex de 20 ml foi carregado com barra agitadora magnética, (1,68 g, 9,54 mmoles) de 4-metóxi-6-(oxiran-2-il)piridino-3- carbonitrila, (2,66 g, 14,3 mmoles) de piperazino-lcarboxilato de terc-butila e 10 ml de EtOH.
Depois o mesmo foi introduzido no reator de microonda e irradiado a 150ºC por 1 h.
A mistura foi esfriada até a temperatura ambiente e o solvente foi evaporado e o resíduo resultante foi purificado pela cromatografia de coluna (gel de sílica, 1 a 10 % de MeOH/diclorometano) que produziu o produto como uma mistura isomérica.
LC/MS: (IE, m/z) 307,09 [(M + 1)-t-Bu]*. Esta mistura foi separada ainda nos seus enantiômeros usando SFC-HPLC um 21 x 250 mm em uma coluna Quiralpak AD-H, eluindo com 10 % de MeOH/CO, + 0,2 % de IBA com um taxa de fluxo de 70 ml/min, 100 bar, 50 mg/ml em (1:1 MeOH:MeCN), 40C, 220 nm, Th = 200. O Enantiômero A eluiu em torno de 4,56 min e o Enantiômero B eluiu em torno de 5,72 min.
Isômero A: HPLC analítica quiral (coluna 4,6 x 250 mm Quiralpak AD-H, 15 % de MeOH (0,2 % de IBA)/CO;, eluindo a 24 ml/min): tg = 4,56 min.
LC/MS: (IE, m/z) tg-2,25 min; [(M + 1)-t-Bu] = 307,07. Isômero B: HPLC analítica quiral (coluna 4,6 x 250 mm Quiralpak AD-H, 15 % de MeOH (0,2 % de IBA)/CO;, eluindo a 24 —ml/min):tk=5,/2min.
LC/MS: (IE, m/z) tg = 2,25 min; [(M + 1)-tBu]* = 307,07. Etapa B: 6-(1-Hidróxi-2-piperazin-1-il-etil)-4-metóxi-piridino-3-carbonitrila “O OH & OMe O Enantiômero A de 4-[2-(5-ciano-4-metóxi-2-piridil)-2- hidróxi-etil |piperazino-l-carboxilato de terc-butila (1,30 g, 3,59 mmoles) foi — dissolvido em 5 ml do TFA e agitada na temperatura ambiente por 2 h.
À mistura foi concentrada a 4 do volume original e diluída com 10 ml de éter dietílico. O precipitado foi filtrado e secado sob alto vácuo para oferecer o sal de TFA da amina. Este intermediário foi diluído com 5 % de bicarbonato de sódio aquoso seguido pela adição de NaOH 10 N para levar o pH da extração acima de 10. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas foram secadas em MgSO;,, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o produto. LC/MS: (IE, m/z) tg = 0,39 min; [IM + 1]* = 263,12 O Enantiômero B de 4-[2-(5-ciano-4-metóxi-2-piridil)-2- hidróxi-etil |piperazino-l-carboxilato de terc-Butila (1,0 g, 2,76 mmoles) foi dissolvido em 5 ml do TFA e agitada na temperatura ambiente por 2 h. À mistura foi concentrada a 4 do volume original e diluída com 10 ml de éter dietílico. O precipitado foi filtrado e secado sob alto vácuo para oferecer o sal de TFA da amina. Este intermediário foi diluído com 5 % de bicarbonato de sódio aquoso seguido pela adição de NaOH 10 N para levar o pH da extração acimade 10. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas foram secadas em MgSO;,, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o produto. LC/MS: (IE, m/z) tg = 0,62 min; [M + 1]* = 263,09 EXEMPLO |
ATIRA — 6-([4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil|piperazin-1-1l Ymetil)-8,9-diidro-1 H-furo[3 4-flisocromen-3(6H)-ona Etapa A: 5-bromo-4-iodo-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução de 5-bromo-2-benzofurano-1(3H)-ona (5,00 g, 23,5 mmoles) a 0ºC em TfOH (100 ml) foi adicionado NIS (5,55 g, 24,6 —mmoles). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite; À análise de LC da mistura de reação indicou a conclusão da reação. A mistura de reação foi depois vertida lentamente em água gelada (1 L) com agitação. À solução foi depois adicionado EtOAc (500 ml) e subsequentemente agitada por 10 min.
A mistura foi filtrada e a camada orgânica separada.
A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 X 200 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (500 ml), salmoura (500 ml), secadas em Na7SO,, filtradas, concentradas até a secura; a mesma foi absorvida em gel de sílica e separada com o sistema de solventes de (hexanos/EtOAc = 1/1) para produzir a 5-bromo-4-iodo-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,80 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,5 Hz, 1 HD, 5,07 (s, 2H). Etapa B: 5-bromo-4-prop-2-en-1-il-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma mistura de 5-bromo-4-iodo-2-benzofurano-1(3H)]-ona (2,42 g, 7,13 mmoles), aliltributilestanho (2,36 g, 7,13 mmoles), LiCl (1,50 g, 35,7 mmoles) e Pd (PPh;3), (200 g, 0,173 mmol) em tolueno (50 ml) foi aquecida de 90 a 100ºC sob N, durante a noite; a LC indicou que a reação foi até a conclusão, à solução foi vertida EtOAc (100 ml) e lavada com salmoura.
A camada orgânica foi secada em Na7SO;, filtrada e concentrada até a secura, absorvida em gel de sílica e foi depois separado em coluna de gel de sílica para dar 5-bromo-4-prop-2-en-1-il-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,795 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,680 (d, J =8 Hz, 8,5 Hz, IH), — 5,938-5,925 (m, 1H), 5,302 (s, 2H), 5,192-5,172 (m, 1 HD), 5,075-5,041 (m, 1 H), 3,611-3,599 (m, 2H) Etapa C: 5-bromo-4-(2-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução de 5-bromo-4-prop-2-en-1-il-2-benzofurano- 1(3H)-ona (1,27 g, 5,02 mmoles) em MeOH (50 ml) e DCM (50 ml) foi — borbulhado O; a-78ºC até que a solução virou para azul; o ozona em excesso foi removido em alto vácuo.
Depois que a cor da solução mudou para incolor, NaBH, (0,8 g, 20 mmoles) foi adicionado à mistura de reação e subsequentemente agitada na temperatura ambiente por 30 min; LC e TLC indicaram que a reação foi até a conclusão; o solvente foi removido em alto vácuo, o resíduo foi depois re-dissolvido em EtOAc e lavado com água, secado em Na7SO;, filtrado e concentrado até a secura.
O resíduo orgânico foi absorvido em gel de sílica e foi separado na coluna de gel de sílica para dar 5- bromo-4-(2-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, — CDCl;3)ôppm7,7(d,J=7,8Hz,1H),7,5(d,J=7,8 Hz, 1 HD), 5,37 (s, 2H), 3,94 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,98 (t, J = 6,3 Hz, 2H) Etapa D: 5-etenil-4-(2-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)-ona Uma mistura de 5-bromo-4-(2-hidroxietil)-2-benzofuran- 1(3H)-ona (0,460 g, 1,78 mmoles), tributil(vinil)estanho (0,676 g, 2,13 mmoles), LiCl (0,224 g, 5,33 mmoles) e Pd (PPh;3)a (0,10 g, 0,087 mmol) em tolueno (50 ml) foi aquecida de 100 a 110ºC sob N, durante a noite; a TLC indicou que a reação foi até a conclusão e à solução foi vertido EtOAc (100 ml) e lavada com salmoura, água, secada em Na7sSO;, filtrada e concentrada até a secura.
O resíduo foi depois absorvido em gel de sílica e separado em coluna de sílica para dar 5-etenil-4-(2-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,74 (d, J =7,8 Hz, 1 H), 7,67 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,00-7,07 (m, 1H), 5,79-5,84 (m, 1 HD), 5,50-5,53 (m, 1 H), 5,35 (s, 2H), 3,86 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,93 (t, ] = 6,3 Hz, 2H). Etapa E: 4-(2-hidroxietil)-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-Etenil-4-(2-hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)-ona (1,2 g, 5,9 mmoles) foi adicionada a um frasco contendo uma barra agitadora.
Ao frasco foi depois adicionado diclorometano (20 ml). O frasco foi colocado em um banho de esfriamento de 0ºC; ao frasco foi vertido mCPBA (1,5 g, 8,8 mmoles) e a mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente durante a —noite;aLC bem como a TLC (hexanos/EtOAc = 1/1) indicaram que a reação foi até a conclusão.
A solução foi tratada com diclorometano e lavada com NaHCO;, Na7sS,O; e água, a camada orgânica foi depois secada em Na3:SO,, filtrada e concentrada até a secura, a mesma foi depois tratada com ACOH (20 ml) e agitada durante a noite; a LC indicou a formação de produto ciclizado.
O solvente foi removido e o resíduo resultante foi absorvido em gel de sílica e 6-(hidroximetil)-8,9-diidro-1 H-furo[3,4-f]lisocromen-3(6H)-ona foi isolado com os sistemas de solvente de hexanos/EtOAc (1/1). 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,807 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,337 (d, J = 8 Hz, 1 H), 5,279 (s, 2H) 4,985 (s,1H),4,302-4,302 (m, 1 H), 4,183-4,084 (m, 2H), 3,954-3,912 (m, 2H), 3,006-2,944 (m, 1 H), 2,717-2,686 (m, 1 H), 2,179-2,172 (m, 2H) Etapa E 3-0Xx0-3,6,8,9-tetraidro-1 H-furo[3,4-flisocromen-6-il)metil-4- metilbenzenosulfonato 6-(Hidroximetil)-8,9-diidro-1H-furo[3,4-f]lisocromen-3(6H)- —ona, em DCM (10 ml) foi tratada com cloreto de p-toluenossulfonila (0,40 g, 2,3 mmoles); à mistura foi adicionada piridina (2 ml) e a mistura resultante agitada na temperatura ambiente por 12 h. a TLC (hexanos/EtOAc = 1/0,5) e a LC indicaram o consumo do material de partida e a formação do produto desejado.
A mistura de reação foi tratada com diclorometano e lavada com NaCl, água e secada em Na7SO;, filtrada e concentrada até a secura, absorvida em gel de sílica e foi depois submetida à purificação em gel de sílica; (3-0x0-3,6,8,9-tetraidro-1H-furo|3,4-flisocromen-6-il)]metil-4- metilbenzenossulfonato foi isolado com o sistema de solvente de hexanos/EtOAc (1/0,5). 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 7,781 (d, J=8 Hz,1H),7,727(d,J=8Hz,1H),7,367 (d J=8 Hz, 1 H), 7,257 (d, J =8,5 Hz, 1 H), 7,206 (d, J =8 Hz, 1 HD), 5,253 (s, 2H), 5,110 (s, 1 HD), 4,481-4,452 (m, 2H), 4,419-4,385 (m, 2H), 4,196-4,153 (m, 2H), 2,495 (s, 3H). Etapa G: 6-((4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil|piperazin-1-1l Ymetil)-8,9-diidro-1H-furo[3,4-f] isocromen-3(6H)-ona A um tubo de microonda de 5 ml foram adicionados (3-0x0- 3,6,8,9-tetraidro-1 H-furo[3,4-flisocromen-6-il )]|metil-4-metilbenzeno- sulfonato (50 mg, 0,13 mmol), a base livre gerada pela lavagem com bicarbonato aquoso do cloreto de 1-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etillpiperazin-l-io (55 mg, 0,20 mmol) e uma barra agitadora; a mistura foi dissolvida em acetonitrila (2,5 ml). O tubo foi tampado, desgaseificado e purgado com N,. O tubo foi depois colocado em um reator de microonda e aquecido a 120ºC por 1 h; a LC indicou a formação do produto desejado. A solução foi concentrada até a secura, dissolvida em MeOH(3,5ml), filtrada e foi depois submetida à HPLC direcionada à massa para a purificação para dar 6-((4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il )-metil)-8,9-diidro-1H-furo[3,4- flisocromen-3(6H)-ona, como uma mistura de isômeros que pode ser parcialmente separada sob as condições de purificação. LC-MS (1E, m/z): 478 [M+1]*. EXEMPLO Ae 1B
TQSGIFA o e isômeros 1A e 1B separados (68)-6-([4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil|piperazin-1-1l Ymetil)-8,9-diidro-1 H-furo[3,4-f] isocromen-3(6H)-ona e (6R)-6-([4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetillpiperazin-1-il Ymetil)-8,9-diidro-1H-furo|3,4-f] isocromen-3(6H)-ona (6S8)-6-((4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil Ipiperazin-1-il | metil)-8,9-diidro-1 H-furo[3,4-f]- isocromen-3(6H)-ona e (6R)-6-((4-[2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il |metil)-8,9-diidro-1Hfuro[3,4- — flisocromen-3(6H)-ona como dois isômeros únicos foram preparados da mesma maneira como o EXEMPLO 1 (mistura de isômeros) exceto que a 4- metil-5-[(2R)-oxiran-2-i1]-2-benzofurano-1(3H)-ona foi usada como o reagente de epóxido e a mistura final de dois isômeros foi separada usando cromatografia de SFC com uma coluna OJ-H.
EXEMPLO 2 o o o 5,5' -[piperazino-1 ,4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil) |bis(4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona) A um tubo de microonda carregado com 4-metil-5-oxiran-2-il- 2-benzofurano-1(3H)-ona (194 mg, 1,00 mmoles) e piperazina (40 mg, 0,46 mmol) foi adicionada uma barra agitadora e EtOH (4 ml). O tubo foi selado e aquecido em um aparelho de microonda a 150ºC por 90 minutos. O produto bruto foi absorvido em gel de sílica e purificado pela cromatografia cintilante (MeOH-DCM 0 a 7 % de gradiente). Depois da remoção dos solventes, 5,5'- —[piperazino-1l 4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil)]bis(4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona) foi coletado.
'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 7,79 (s, 4H), 5,25 (s, 4H), 5,10 (dd, J = 10,5, 3,0 Hz, 2H), 4,01 (amplo, 2H), 2,90 (amplo, 4H), 2,69-2,50 (m, 6H), 2,44 (dd, J = 10,5, 13 Hz, 2H), 2,29 (s, 6H). LCMS M + 1 (calc. 467, encontrado 467).
Os três isômeros de 5,5'-[piperazino-1,4-diilbis(1- hidroxietano-2,1-diil)]bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona), foram resolvidos em uma coluna IA analítica (5 1), com o isômero R,R (EXEMPLO 2A) eluindo primeiro a 17,4 min, isêômero R,S (EXEMPLO 2C) eluindo em — seguida a 21,0 min e o isômero S,S (EXEMPLO 2B) eluindo por último a 22,6 min.
EXEMPLO 2A Oo
O Y NÓ oH
OH O o Oo 5,5 -(piperazino-1 4-diilbis[(1R)-1-hidroxietano-2,1-diil]) bis(4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona) Método 1: Ao tubo de microonda de 20 ml carregado com 4-metil-5-[02R)- oxiran-2-11]-2-benzofurano-1(3H)-ona (972 mg, 5,11 mmoles) e piperazina (200 mg, 2,3 mmoles) foi adicionada uma barra agitadora e EtOH (16 ml). O tubo foi selado e aquecido em um aparelho de microonda a 150ºC por 90 minutos. O produto bruto foi absorvido em gel de sílica e purificado pela cromatografia cintilante (MeOH-DCM 0 a 7 % de gradiente). Depois da remoção dos solventes, a 5,5'-(piperazina-1,4-diilbis[(1-hidroxietano-2,1- diil] )bis(4-metil-2-benzo-furano-1(3H)-ona) foi coletada. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 7,80 (s, 4H), 5,25 (s, 4H), 5,11 (d, J=10,5 Hz, 2H), 4,00 (amplo, 2H), 2,90 (amplo, 4H), 2,69-2,50 (m, 6H), 2,44 (t, J= 11 Hz, 2H), 2,29 (s, 6H); LCMS M + 1 (calc. 467, encontrado 467).
Método 2: piperazina (4,51 g, 52,4 mmoles) e 4-metil-5-[(2R)- oxiran-2-i1]-2-benzofurano-1(3H)-ona (20,0 g, 105 mmoles) foram carregadas em um frasco de fundo redondo de 500 ml de 3 bocas, equipado com um condensador de refluxo, sob nitrogênio. Tolueno (80,0 ml, 751 mmoles) e N,N-dimetilacetamida (80 ml, 854 mmoles) foram adicionados para fornecer uma suspensão. A mistura de reação foi aquecida a 110ºC, tornando-se homogênea a 25ºC. Depois de agitar por 4,5 h a 110ºC, a temperatura foi aumentada para 115ºC para direcionar a reação para a frente. Depois de agitar por 48 h, a mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente. No esfriamento, a cristalização ocorreu. Água foi adicionada por intermédio de funil de adição (45 ml), gerando uma pasta fluida espessa.
À suspensão foi filtrada e os sólidos foram lavados com 4:1 água: DMA (60 ml), seguido por água (2 x 35 ml). O sólido foi secado no funil sob vácuo com uma varredura de nitrogênio até massa constante. 5,5'-(piperazina-1 4-diilbis[(1R)-1- —hidroxietano-2,1-diil]l)bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) foi isolado. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 7,80 (s, 4H), 5,25 (s, 4H), 5,11 (d, J=11 Hz, 2H), 4,30-3,51 (amplo, 2H), 2,90 (amplo, 4H), 2,69-2,50 (m, 6H), 2,44 (t, J= 11 Hz, 2H), 2,30 (s, 6H). Os compostos da presente invenção são aminas e podem portanto ser convertidos a uma variedade de sais pelo tratamento com qualquer um de vários ácidos.
Por exemplo, o Composto do EXEMPLO 2A pode ser convertido a várias formas salinas diferentes como mostrada nos seguintes exemplos representativos.
Estes são exemplos selecionados e não são intencionados a serem uma lista exaustiva; numerosos sais adicionais podem ser preparados em uma maneira similar usando uma variedade de ácidos.
EXEMPLO 2A-1l (sal de di-HClI): Dicloridrato de 5,5'-(piperazino-1,4- diilbis[(1R)-1-hidroxietano-2,1-diil])bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) A um frasco na forma de pêra de 250 ml carregado com a base livre (1,2 g, 2,6 mmoles) e uma barra agitadora foi adicionado DCM.
A solução foi agitada até que todos os sólidos foram desmanchados.
A esta solução foi adicionado HCI 4 N em dioxano (2,6 ml, 4,0 eq) e a mistura foi deixada agitar por mais 15 minutos.
O solvente foi removido em um evaporador rotativo e o produto foi deixado secar em uma bomba de alto — vácuo até que não houvesse nenhuma mudança no peso.
O produto foi determinado ser o dicloridrato de 5,5'-(piperazino-1 4-diilbis[(1R)1- hidroxietano-2,1-diil] )bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona). EXEMPLO 2A-2 (sal de HCl): Cloridrato de 5,5'-(piperazino- 1,4-diilbis[(1R)-1-hidroxietano-2,1-diil] )bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-
ona) A um frasco de 20 dracmas (70 g) carregado com a base livre (160 mg, 0,34 mmol) e uma barra agitadora foi adicionado 0,1 M de HCI em IPA. A solução foi deixada agitar na temperatura ambiente por 30 minutos e depois aquecida a 40ºC por 1 hora. O solvente foi removido sob vácuo e o produto resultante foi deixado em uma bomba de alto vácuo por 16 horas. O produto correspondeu ao cloridrato de 5,5º-(piperazino-1 4-diilbis[(1R)-1- hidroxietano-2,1-diil])bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona).
EXEMPLO 2A-3 (mono-hidrato do sal de di-HCl): hidrato do —dicloridrato de 5,5" -(piperazino-1 4-diilbis[(1R)-1-hidroxietano-2,1- diil] )bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) A um frasco carregado com a base livre (1,0 g, 2,1 mmoles) e uma barra agitadora foi adicionado HCl 1 N (50 ml). A mistura foi deixada agitar até que todos os sólidos dissolveram. O solvente foi removido em um evaporador rotativo e o produto resultante foi deixado em uma bomba de alto vácuo por 16 horas. O produto foi determinado ser o hidrato do dicloridrato de — 5,5-(piperazino-1,4-diilbis[(1R)-1I-hidroxietano-2,1-diil] )bis(4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona).
EXEMPLO 2A-4 (sal de H2SO;y): sulfato de 5,5'-(piperazino- 1,4-diilbis[(1R)-1-hidroxietano-2,1-diil])bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)- ona) (sal) A um frasco de 100 ml carregado com uma solução da base livre (154 mg, 0,330 mmol) em DMF:MeOH (3:1) (20 ml) e uma barra agitadora foi adicionado H2SO, 0,1 M (3,3 ml). A solução foi deixada agitar na temperatura ambiente por 30 minutos e depois aquecida a 40ºC por 2 horas. Muitos sólidos formaram durante este tempo. O solvente foi removido sob vácuo e os sólidos brancos foram deixados em alto vácuo por 16 horas para produzir o sulfato de 5,5'-(piperazino-1,4-diilbis[(1R)-1-hidroxietano- 2,1-diil] )bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) (sal).
EXEMPLO 2B o NON oH Í, ANO o Oo 5,5" -(piperazino-1 ,4-diilbis[(1S)-hidroxietano-2,1-diil] )bis(4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona) A um tubo de microonda de 20 ml carregado com 4-metil-5- [2S)-oxiran-2-11]-2-benzofurano-1(3H)-ona (980 mg, 5,15 mmoles) e piperazina (200 mg, 2,3 mmoles) foram adicionados uma barra agitadora e EtOH (16 ml). O tubo foi selado e aquecido em um aparelho de microonda até 150ºC por 90 minutos. O produto bruto foi absorvido em gel de sílica e purificado pela cromatografia cintilante (MeOH-DCM 0 a 7 % de gradiente). Depois da remoção dos solventes, 5,5'-(piperazino-1,4-diilbis[(1S)-1- hidroxietano-2,1-diil])bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) foi coletado (560 mg). 'H RMN (500 MHz, CDCI3) ô ppm 7,80 (s, 4H), 5,25 (s, 4H), 5,11 (d, J=11 Hz, 2H), 4,30-3,51 (amplo, 2H), 2,90 (amplo, 4H), 2,69-2,50 (m, 6H), 244 (t,J=11 Hz, 2H), 2,30 (s, 6H); LCMS M + 1 (calc. 467, encontrado 467). EXEMPLO 2C o to.
Y NO OH ou AAos Oo o 5-((1R)-1-hidróxi-2-(4-[(28)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-ilDetilJpiperazin-1-il jetil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona
Ao tubo de microonda de 20 ml carregado com 5-[(1R)-1- hidróxi-2-piperazin-1-iletil|-4-metil-2-benzofuran-1(3H)-ona (166 mg, 0,600 mmol) e uma barra agitadora foram adicionados 4-metil-5-[(2S)-oxiran-2-il]- 2-benzofurano-1(3H)-ona (171 mg, 0,900 mmol) e etanol (10 ml). A mistura — foi aquecida em um aparelho de microonda até 150ºC por 90 minutos. Depois da reação esfriada, DCM (5 ml) foi adicionado ao tubo. A mistura foi deixada repousar na temperatura ambiente durante a noite. Muitos sólidos precipitaram durante este tempo; estes foram coletados pela filtração. À análise de HPLC quiral mostrou que o material foi em 95 % de ee puro 5- [(1IR)-l-hidróxi-2-(4-[(2S)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofuran-5-il)etilJpiperazin-1-il )etil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (500 MHz, DMSO-dº) 5 ppm 7,74 (s, 4H), 5,43 (m, 4H), 6,60-5,80 (amplo, 2H), 5,33 (s, 2H), 3,40 (amplo, 8H), 3,09 (amplo, 4H), 2,32 (s, 6H); LCMS M + 1 (calc. 467, encontrado 467). EXEMPLO 3 o
TX
NON OH Raso.
O
O 5,5' -[piperazino-1 ,4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil) ]|bis(6-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona) A reação foi conduzida em uma maneira similar às condições de abertura de epóxido gerais como mostrado para o EXEMPLO 2 partindo de 6-metil-S-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona. — 5,5'-[piperazinal,4- diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil) |bis(6-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona), foi purificado pela HPLC de fase reversa preparativa. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3) ô ppm 7,77 (s, 2H), 7,67 (s, 2H), 5,27 (s, 4H), 5,07 (m, 2H), 4,30-3,70 (amplo, 2H), 2,95-2,80 (m, 3H), 2,65-2,50 (m, SH), 2,42 (s, 6H), 2,37 (m,
2H); LCMS M + 1 (calc. 467, encontrado 467). EXEMPLO 4 o NM OH Br Br OH TO
O
O 5,5-[piperazino-1 A-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil)]bis(4-bromo-2- benzofuran-1(3H)-ona) A reação foi conduzida em uma maneira similar às condições de abertura de epóxido gerais mostradas para o EXEMPLO 2 partindo de 4- bromo-5-oxiran-2-il-2-benzofuran-1(3H)-ona. 5,5' -[piperazino-] -diilbis(1- hidroxietano-2,1-diil)]bis(4-bromo-2-benzofurano-1(3H)-ona), uma mistura de três diastereômeros foi purificada pela HPLC de fase reversa preparativa.
LCMS M + 1 (calc. 597, encontrado 597). EXEMPLO 5 o NON OH Cl
CI OH TO O
O 5,5-[piperazino-1 A-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil)]bis(4-cloro-2- benzofurano-1(3H)-ona A reação foi conduzida em uma maneira similar às condições de abertura de epóxido gerais mostradas no EXEMPLO 2 partindo de 4-cloro- 5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona. A purificação pela HPLC de fase reversa preparativa produziu a 5,5'-[piperazino-1 4-diilbis(1-hidroxietano- 2,1-diil) ]bis(4-cloro-2-benzofurano-1(3H)-ona. LCMS M + 1 (cale. 507,
encontrado 507). EXEMPLO 6 o
DA OH Hon o o 5,5' -[piperazino-1 ,4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil) ]bis(2-benzofurano- 1(3H)-ona A reação foi conduzida em uma maneira similar às condições de abertura de epóxido gerais mostradas para o EXEMPLO 2 partindo de 5- Oxirano-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona. A purificação pela HPLC de fase reversa preparativa produziu a 5,5'-[piperazino-1,4-diilbis(1-hidroxietano- 2,1-diil) ]bis(2-benzofurano-1(3H)-ona).
'H RMN (500 MHz, CD;OD) diastereômero A: 6 7,78 (d, J] = 8,5 Hz, 2H), 7,64 (s, 1 H), 7,55 (d, J=7,5 Hz, 2H), 5,40 (s, 4H), 4,84 (m, 2H), 2,41-2,69 (sobreposição de m's, 12H); diastereômero B: 7,78 (d, J=8,5 Hz, 2H), 7,64 (s, 1 HD), 7,55 (d, J =7,5 Hz, 2H), 5,30 (s, 4H), 4,03 (m, 2H), 2,41-2,69 (sobreposição de m's, 12H); LC/MS: [(M + 1)]*=438,5.
EXEMPLO 7 O, NOW om oem 4 TO
O 5,5 -[piperazino-1 ,4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil) |bis[4-(metilóxi)-2- benzofurano-1(3H)-ona]. A reação foi conduzida sob as condições de abertura de epóxido gerais como mostradas para o EXEMPLO 2 (a 130ºC por 60 min) — partindo de 4-(metilóxi)-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona. A purificação pela TLC preparativa produziu 5,5'-[piperazino-1 4-diilbis-(1-
hidroxietano-2,1-diil)]bis[4-(metilóxi)-2-benzofurano-1(3H)-ona]. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3) é em ppm: 7,88 (2H, aromático, d, J=7,6 Hz), 7,64 (2H, aromático, d, J = 7,6 Hz), 5,48 (4H, s), 5,14 CH, m), 3,96 (6H, s), 3,0-2,1 (12 H, m). LC-MS (1E, m/z): 499,02 [M + 1]*. EXEMPLO 8
LÍÇOIHA º OH Y O 5,5 -[piperazino-1 4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil) Ibis(4,6-dimetil-2- benzofurano-1(3H)-ona) A reação foi conduzida sob as condições de abertura de —epóxido gerais como mostradas para o EXEMPLO 2 (a 160ºC por 60 min). O produto bruto foi purificado pela HPLC preparativa direcionada à massa para dar o produto desejado, 5,5'-[piperazino-1,4-diilbis(1-hidroxietano-2,1- diil) ]bis(4,6-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona). LC-MS (IE, m/z): 495 [M + 1]. EXEMPLO 9 (e isômeros separados) o, O IS 2 o O. Ve OH E HO vó O 5,5-[(2-metilpiperazino-1 4-diil)bis(1-hidroxietano-2,1-diil) |bis(4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona) Uma mistura de 4-metil-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)- ona (700 mg, 3,684 mmoles) e 2-metilpiperazina (184 mg, 1,842 mmol) em 2 —mlde DMSO foi aquecida sob condição de microonda (150ºC) por 1 hora. Depois de esfriá-la, a mistura foi diluída com água (50 ml), extraídas com EtOAc (3 X 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secadas em NasSO;,, depois concentradas. O resíduo foi purificado pela prep-HPLC para obter dois picos (pico | e pico 2). Cada pico foi separado ainda pela cromatografia de SFC quiral para obter três isômeros quirais para cada um (de 8 isômeros seis foram obtidos, embora dois possam ser misturas de 2 isômeros). Isômero A 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 6 ppm 7,76 (s, 4H), 5,20 (s, 4H), 5,00-5,16 (m, 2H), 2,30-3,30 (m, 11H), 2,26 (s, 6H), 1,16-1,18 (m, 3H). MS m/e 481 (M + 1)*. Isômero B 'H RMN (400 MHz, CDCI3) à ppm 7,78 (s,s, 4H), 5,24 (s, 4H), 5,06-5,15 (m, 2H), 3,02-3,26 (m, 2H), 2,28-2,82 (m, 9H), 2,26 (s,6H),1,16-1,18 (m, 3H). MS m/e 481 (M + 1)". Isômero C 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 6 ppm 7,78 (s, 4H), 5,24 (s, 4H), 5,09-5,12 (m, 2H), 3,22-3,28 (m, 1H), 3,12-3,18 (m, 1 HD), 2,72- 2,80 (m, 3H), 2,35-2,68 (m, 6H), 2,28 (s, 6H), 1,13 (d, J = 6,3 Hz, 3H). MS m/e 481 (M+1)*. Isômero D 'H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 ppm 7,68-7,74 (m, 4H), 5,32 (s, 4H), 5,18-5,24 (m, 2H), 2,50-3,38 (m, 11H), 2,32 (s,s, 6H), 1,04 (d, J=6,4 Hz, 3H). MS m/e 481 (M + 1)*. Isômero E 'H RMN (400 MHz, CD;OD) 6 ppm 7,68-7,76 (m, 4H), 5,34 (s, 4H), 5,18-5,24 (m, 2H), 2,50-2,96 (m, 11H), 2,32 (s,s, 6H), 1,02 (d)J=6,4Hz,3H).MS m/e 481 (M+1)". Isômero F 'H RMN (400 MHz, CD;OD) ô ppm 7,70-7,80 (m, 4H), 5,35 (s, 4H), 5,20-5,30 (m, 2H), 2,50-3,35 (m, 11H), 2,33 (s,s, 6H), 1,22 (d, J=6,4 Hz, 3H). MS m/e 481 (M + 1)*. EXEMPLO 10 (três isômeros separados) Oo À e, OU ' Me OH — O ve —5,5'-[14-diazepano-1,4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil)]bis(4-metil-2- benzofuran-1(3H)-ona)
A reação foi conduzida em uma maneira similar às condições de abertura de epóxido gerais como mostradas para o EXEMPLO 2 (a 150ºC por 60 min) partindo de 4-metil-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona e 1,4- diazepano. A purificação pela TLC preparativa (MeOH/DCM = 1:15) produziu 5,5'-[1,4-diazepano-1 4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil) |bis(4-metil- 2-benzofurano-1(3H)-ona). A mistura resultante de isômeros foi depois separada para todos os três diastereômeros puros pela cromatografia SFC quiral. Isômero 1 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 6 ppm 7,76 (s, 4H), 5,22 (s, 4H), 4,98-5,00 (m, 2H), 2,98-3,04 (m, 4H), 2,78-2,84 (m, 6H), 2,38- 2,44 (m, 2H), 2,26 (s, 6H), 1,92-1,98 (m, 2H); MS m/e 481 (M + 1)* Isômero 2 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 6 ppm 7,78 (s, 4H), 5,23 (s, 4H), 4,98-5,02 (m, 2H), 2,97-3,05 (m, 4H), 2,78-2,85 (m, 6H), 2,36- 2,45 (m, 2H), 2,24 (s, 6H), 1,90-1,97 (m, 2H); MS m/e 481 (M + 1)*. Isômero 3 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 6 ppm 7,72 (s, 4H), 5,20 (s, 4H), 4,92-4,96 (m, 2H), 2,88-3,00 (m, 4H), 2,70-2,82 (m, 6H), 2,32- 2,38 (m, 2H), 2,20 (s, 6H), 1,82-1,94 (m, 2H); MS m/e 481 (M + 1)*. EXEMPLO 11 O,
NF o + To o Oo 5,5 -(piperazino-1,4-diilbis(1-fluoretano-2,1-diil) ]bis(4-metil-2-benzofurano- —16H)-ona 5,5" -[piperazino-1 ,4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil)]bis(4- metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) (28 mg, 0,060 mmol, 1,0 eq) foi dissolvido em THF (5 ml). A solução foi esfriada até O0ºC. À solução acima foi adicionado DAST (17 ul, 0,13 mmol, 2,2 eq). A reação foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada nesta temperatura por 30 min. A reação foi extinta com a adição de NH,CI aquoso. A mistura foi diluída com DCM, lavada com bicarbonato aquoso, água e salmoura. A fase orgânica foi secada em MgSO,, filtrada e concentrada. O produto foi obtido depois da purificação pela cromatografia em coluna cintilante. 'H RMN (500 MHz, CDCI;3, 5 em ppm): 7,79 (2H, s), 7,61 (2H, d, J =8,0 Hz), 5,93 (2H, m), 5,26 (4H, s), 4,0-2,5 (m), 2,30 (6H, s); LC-MS (IE, m/2): 471,1 [IM + 1]*. EXEMPLO 12 o
DD o o 5-(1-hidróxi-2-[4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofuran-5-il)- — etillpiperazin-1-il Yetil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona 4-Metil-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona (60 mg, 0,31 mmol, 1,2 mmol) e 4-metil-5-(2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona (68 mg, 0,26 mmol, 1,0 eq) foram colocados em suspensão em etanol (5 ml) em um tubo de microonda. O tubo foi tampado, desgaseificado sob vácuo e —purgado com gás nitrogênio. A mistura foi aquecida a 150ºC por 30 min sob irradiação de microonda. A mistura foi depois concentrada e purificada pela cromatografia em coluna cintilante (O a 10 % de MeOH/DCM). 'H RMN (500 MHz, CDCl;3, à em ppm): 7,80 (2H, brs), 7,70 (1H, d, J =7,8 Hz), 7,35 (1H, d, J =7,8 Hz), 5,25 (4H, brs), 5,10 (1H, dd, J = 3,1 Hz,J=10,6Hz),3,0-2,4 (14H, m), 2,30 3H, s), 2,29 3H, s); LC-MS (IE, m/z): 451,4 [M + 1]*.
EXEMPLO 13 o
OD NÓ OH Me Lo N Aos
O o 5-(1-hidróxi-2-(4-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil|piperazin-1-il Yetil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-(1-Hidróxi-2-(4-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- ibDetillpiperazin-l-iljetil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 12 partindo de 4-metil-5-oxiran-2-il-2-benzofuran-1(3H)-ona e 5-(2-piperazin-1-iletil)-2- benzofurano-1(3H)-ona.
'H RMN (500 MHz, CDCl3, 6 em ppm): 7,80 (2H, m), 7,70 (1IH,d/J=7,8 Hz), 7,35 (1H, d,J=7,8 Hz), 5,25 (4H, brs), 5,10 (1H, dd, J = 3,1 Hz, J=10,6 Hz), 3,0-2,4 (14H, m), 2,30 3H, s), 2,29 3H, s); LC-MS (IE, m/z): 437,4 [M + 1]*. EXEMPLO 14 o
TO NON OH Me Me TO
O
O 5-((1R)-1-hidróxi-2-[4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetillpiperazin-1-il etil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-(1R)-1-hidróxi-2-(4-[2-(4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il )etil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do
EXEMPLO 12 partindo de 4-metil-5-[(2R)-oxiran-2-il]-2-benzofurano-1(3H)- ona e 4-metil-5-(2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (500 MHz, CDCI;, 6 em ppm): 7,79 (2H, m), 7,70 (IH, d, J =7,9 Hz), 7,35 (1H, d, J =7,9 Hz), 5,25 (4H, brs), 5,10 (1H, dd, J =2,8 Hz, J=10,2 Hz),3,0-24(14H,m),, 2,30 3H, s), 2,28 3H, s); LC-MS (IE, m/z): 451,53 [M + 1]*. EXEMPLO 15 o Do NÓ OH Me de o o o 5-((1S)-1-hidróxi-2-(4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil|piperazin-1-1] Yetil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-((1S)-1-hidróxi-2-(4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- —benzofurano-5-il)etilJpiperazin-1-il jetil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 12 partindo de 4-metil-5-[(2S)-oxiran-2-il]-2-benzofurano-1(3H)- ona e 4-metil-5-(2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona.
'H RMN (500 MHz, CDCl3, 8 em ppm): 7,79 (2H, m), 7,70 (1H,d/J=7,9 Hz), 7,35 (1H, d, J=7,9 Hz), 5,25 (4H, h-s), 5,10 (1H, dd, J = 2,8 Hz, J=10,2 Hz), 3,0-2,4 (14H, m), 2,30 3H, s), 2,28 3H, s); LC-MS (IE, m/z): 451,52 [M + 1)”.
EXEMPLO 16 o NÓ OH Me Me Me TOO
O Oo
5-(2-[4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetil]- piperazin-1-il |-1-metiletil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-(2-(4-[2-Hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo- furano-5-il)etil Ipiperazin-1-i1)-1-metiletil)-4-metil-2-benzofuran-1(3H)-ona foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 12 partindo de 4-metil-5-oxiran-2-11-2-benzofurano1(3H)-ona (58 mg, 0,31 mmol, 1,2 mmol) e 4-metil-5-(1-metil-2-piperazin-1-iletil)-2- benzofurano-1(3H)-ona. 'H RMN (500 MHz, CDCl3, ô em ppm): 7,78 (4H, brs), 7,34 C2H,d,J=7,9 Hz), 7,40 (2H, d, J=7,9 Hz), 5,25 2H, s), 5,23 2H, s), 5,06 (2H, m), 3,4-2,3 (m), 2,30 (3H, s), 2,26 3H, s); LC-MS (IE, m/z): 465,40 [M + 1]*. EXEMPLO 17 o
TO
NNW OH [x AO
O o 5-(2-[4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5S-iDetil]- —piperazin-1-il)-1-(metilóxi)etil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona Cloridrato de 4-Metil-5-[1-(metilóxi)-2-piperazin-1-iletil]|-2- benzofurano-1(3H)-ona (40 mg, 0,14 mmol), 4-metil-5-oxiran-2-11-2- benzofurano-1(3H)-ona (79 mg, 0,41 mmol), foram adicionados a um tubo de microonda de 5 ml que contém uma barra agitadora; à mistura foi adicionado EtOH(2ml)eTHF (0,5 ml). O tubo foi tampado, desgaseificado e purgado com N>. O mesmo foi depois colocado em um reator de microonda e aquecido a 120ºC por | hora; a LC indicou a conclusão da reação. A solução foi concentrada até a secura, dissolvida em MeOH (3,5 ml), filtrada e foi depois purificada pela HPLC direcionada à massa para dar a 5-[2-(4-[2-hidróxi-2-(4-
metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il)-1- (metilóxi)etil]|-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona.
LC-MS (IE, m/z): 481 [M + 1]*. EXEMPLOS 18 E 19 o o OEt Po F CC? OH A pH Nu | EXEMPLO 18 “Wo EXEMPLO 19 o
O O o EXEMPLO 18: 5-(1-(etilóxi)-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-iDetil]piperazin-1-il etil)-4-metil-2-benzo-furano-1(3H)-ona EXEMPLO 19: 5-(1-fluoro-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-iDetil]piperazin-1-il etil)-4-metil-2-benzofurano-1-(3H)-ona 4-Metil-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)ona (75 mg, 0,394 mmol, 1,2 mmol) e 5-(1-fluoro-2-piperazin-1-iletil)-4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona (90 mg, 0,323 mmol, 1,0 eq) foram colocados em suspensão em etanol (30 ml). A mistura foi aquecida a 150ºC por 30 min sob irradiação de microonda. A mistura foi concentrada e purificada pela cromatografia em coluna cintilante (O a 10 % de MeOH/DCM) para produzir o produto esperado 5-(1I-fluoro-2-[4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- il)etil piperazin-1-11 jetil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona bem como sub- produto 5-(1-(etilóxi)-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil |piperazin-1-il Jetil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona. EXEMPLO 19: 'H RMN (500 MHz, CDCI;3, ô em ppm): 7,81 (1H, d, J=8,0 Hz),7,79QH, brs), 7,63 (1H, d,J=8,0 Hz), 5,96 (1H, dd, 1 =8,0 Hz, J = 48,3 Hz), 5,27 2H, s), 5,25 (2H, s), 5,09 (1H, m), 3,00-2,36 (m), 2,31 GH, s),
2,28 3H, s); LC-MS (IE, m/z): 469,1 [M + 1]. EXEMPLO 18: 'H RMN (500 MHz, CDCI;3, ô em ppm): 7,76 (2H, d, J = 5,5 Hz), 7,75 (4H, m), 7,61 (2H, d, J = 8,1 Hz), 5,24 (2H, s), 5,22 (2H, s), 5,06 (1H,m),4,83(1H,m), 3,35 (2H, m) 2,8-2,2 (18H, m), 1,19 GH, m). LC-MS (IE, m/z): 495,1 [M + 1]*. EXEMPLO 20 Ho = o O o º
O 6-(14-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetil]- piperazin-1-il |metil)-1,6,7,8-tetraidro-3H-indeno[4,5-c]furano-3-ona 6-(Piperazin-1-ilmetil)-1,6,7,8-tetraidro-3H-indeno[4,5-c]- furan-3-ona (40 mg, 0,15 mmol) e 4-metil-5-oxiran-2-il-2-benzofurano- 1(3H)-ona (55 mg, 0,29 mmol), foram adicionados a um tubo de microonda de 5 ml que contém uma barra agitadora; à mistura foi adicionado EtOH (2,5 ml). O tubo foi tampado, desgaseificado e purgado com N>. O mesmo foi depois colocado em um reator de microonda e aquecido a 150ºC por 30 min; a LC indicou a formação do produto desejado. A solução foi concentrada até a secura, dissolvida em MeOH (3,5 ml), filtrada e foi depois submetida à purificação pela HPLC direcionada à massa para dar a 6-((4-[2-hidróxi-2-(4- metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il | metil)-1,6,7,8- tetraidro-3H-indeno [4,5-c] furano-3-ona. LC-MS (IE, m/z): 463 [M + 1]*. EXEMPLO 21 O OMe CD OO”
HO
4-(1-hidróxi-2-(4-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetil piperazin-1- il jetil)-2-(metilóxi)benzonitrila 4-(1-Hidróxi-2-(4-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)- etil]piperazin-1-il Jetil)-2-(metilóxi)benzonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 12 partindo de 5-(2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona e 2-(metilóxi)-4-oxiran-2- ilbenzonitrila. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), ô 7,84 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1H), 7,6 (d, J =7,7 Hz, 1 H), 7,60 (s, 1H), 7,54 (d J=7,8 Hz, 1 H), 7,33(s,1H),7,18(d,J=8,0Hz,1H), 54 (s, 2H), 5,26 (d, J=8,0 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,82 (bs, 4H), 3,42 (bs, 4H), 3,25 (bs, 4H); LC/MS (M + 1)* 422,33. EXEMPLO 22 o OMe CDAOO” Me HO 4-(1-hidróxi-2-(4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo-furano-5-iDetil-2- (metilóxi)-4-oxiran-2-ilbenzonitrila 4-(1-hidróxi-2-(4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo-furan- 5-il)etil-2-(metilóxi)-4-oxiran-2-ilbenzonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 12 partindo de 4-metil-5- (1-metil-2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona e 2-(metilóxi)-4- —oxiran-2-ilbenzonitrila. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), 6 7,76 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 7,67 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,50 (d, J =7,8 Hz, 1 H), 7,35 (s, 1HD, 7,19 (d J = 8,0 Hz, 1 H), 5,40 (s, 2H), 5,27 (d, J = 9,8 Hz, 1 H), 4,40 (bs, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,85-3,43 (m, 8H), 3,38-3,22 (m, 6H), 2,33 (s, 3H); LC/MS (M + 1)* = 436,40. Os 2 isômeros individuais de 4-(1-hidróxi-2-(4-[2-(4-metil-1-
oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil-2-(metilóxi)-4-oxiran-2-il-benzonitrila foram obtidos pela cromatografia SFC quiral (Método Info: 4,6 x 150mm QuiralCel OJ-H, 2,5 ml/min, 100 bar, 30 % de MeOH* IBA/CO, a 35ºC). Caracterização para o Isômero I (que elui mais rápido da HPLC quiral) e —Isômero2 (que ilui mais lento da HPLC quiral) estão abaixo. Isômero I: 'H RMN (500 MHz, DMSO-d;s), 8 7,65 (d, J=7,7 Hz, 1 H), 7,59 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,41 (d, J =73 Hz, 1 H), 7,22 (s, 1 HD, 7,08 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 5,37 (s, 2H), 5,29 (d, J =3,8 Hz, 1 H), 4,77 (bs, 1 H), 3,91 (s, 3H), 2,87 (t, J =7,6 Hz, J=8,0 Hz, 2H), 2,40-2,38 (m, 12H), 2,25 (s 3H); LC/MS (M + 1)*=436,53.
Isômero 2: 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), 6 7,65 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,59 (d, J=7,5 Hz, 1 H), 7,41 (d, J =7,8 Hz, 1 H), 7,22 (s, 1 HD, 7,08 (d, J=7,7 Hz, 1 H), 5,37 (s, 2H), 5,29 (d, J =3,9 Hz, 1 H), 4,76 (bs, 1 H), 3,91 (s, 3H), 2,87 (t, J =7,5 Hz, J =8,0 Hz, 2H), 2,55-2,38 (m, 12H), 2,25 (s 3H); LC/MS (M + 1)*=436,50. EXEMPLO 23 o OMe DAS"
HO É 5-fluoro-4-(1-hidróxi-2-(4-(2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetil]- piperazin-1-il Yetil)-2-(metilóxi)benzonitrila 5-fluoro-4-(1-hidróxi-2-(4-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzo- —furano-5-il)etillpiperazin-1-il jetil)-2-(metilóxi)benzonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 12 partindo de 5-(2-piperazin-1-iletil)-2-benzofurano-1(3H)-ona e 5-fluoro-2-(metilóxi)- 4-oxiran-2-ilbenzonitrila.
LC/MS (M + 1)* = 440,54.
EXEMPLO 24 o OMe
DNA Me Ho F 5-fluoro-4-(1-hidróxi-2-(4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil|piperazin-1-11 Yetil)-2-(metilóxi)benzonitrila 5-fluoro-4-(1-hidróxi-2-(4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- — benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-il Yetil)-2-(metilóxi)benzonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 12 partindo de 4-metil-5-(1-metil-2-piperazin-1-iletil)-2- benzofurano-1(3H)-ona e 5-fluoro-2-(metilóxi)-4-oxiran-2-ilbenzonitrila.
LC/MS (M + 1)* = 454,55. EXEMPLO 25 (Todos os quatro isômeros separados) Oo O OH Me Me OH O o Oo 5,5º-[3,5-diazabiciclo[3,2,1 loctano-3,8-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil)]bis(4- metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) Uma mistura de isômero (37A) de 5-[2-(3,8-diazabiciclo [3,2,1 Joct-3-il)-1-hidroxietil]-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona (53 mg, 0,175 mmol) e 4-metil-S-oxiran-2-11-2-benzofuran-1(3H)-ona (57 mg, 0,210 mmol) em 2 ml de DMSO foi aquecida sob condição de microonda (150ºC) por 1 hora. Depois de esfriar até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com água (50 ml) e extraída com EtOAc (3 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secadas em Na7SO;., depois — concentradas. O resíduo foi purificado pela prep-TLC (MeOH/DCM = 1:15) e depois separado pela cromatografia SEC quiral para obter dois isômeros separados A e B de 5,5º-[3,8-diazabiciclo[3,2,1 Joctano-3,8-diilbis(1- hidroxietano-2,1-diil)]-bis(4-metil-2-benzofuran-1(3H)-ona).
Isômero A 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,78 (d, J=3,1 Hz, 4H), 5,24 (s, 4H), 5,05-5,10 (m, 2H), 3,50 (bs, 1 HD), 3,26 (bs, 1 HD, 3,00- 3,05 (m,1H),2,55-2,85 (m, 5H), 2,30-242 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,85-2,01 (m, 4H). MS m/z 493 (M + 1)*.
Isômero B 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 6 ppm 7,78 (s, 4H), 5,22 (s, 4H), 4,95-5,06 (m, 2H), 3,42 (bs, 1H), 3,20 (bs, 1H), 2,96-3,00 (m, 1H), 2,64-2,72 (m, 3H), 2,48-2,58 (m, 2H), 2,26-2,38 (m, 2H), 2,25 (s, 6H), 1,90-2,00 (m, 4H). MS m/z 493 (M + 1)*.
Uma mistura de isômero (37B) de 5-[2-(3,8-diazabiciclo[3,2,1] oct-3-il)-1-hidroxietil]|-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona (45º mg, 0,149 mmol) e 4-metil-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)-ona (57 mg, 0,210 mmol) em 2 ml de DMSO foi aquecida sob condição de microonda (150ºC) por 1 hora. Depois de esfriar até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com água (50 ml) e extraída com FtOAc (3 X 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secadas em Na7SO,, depois concentradas. O resíduo foi purificado pela prep-TLC (MeOH/DCM = 1:15) e depois separado pela cromatografia SFC quiral para obter dois isômeros C e D separados de 5,5-[3,8-diazabiciclo[3,2,1]octano-3,8-diilbis(1-hidroxietano- 2,1-diil) ]bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona).
Isômero C 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 6 ppm 7,78 (s, 4H), 5,24 (s, 4H), 5,05-5,10 (m, 2H), 3,52 (bs, 1 HD), 3,00-3,04 (m, 1H), 2,62-2,74 (m, 4H), 2,34-2,44 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,14-2,26 (m, 2H), —1,96-2,04 (m, 4H).
MS m/z 493 (M + 1)*.
Isômero D 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 6 ppm 7,76 (s, 4H), 5,22 (s, 4H), 5,06-5,12 (m, 2H), 3,50 (bs, 1 H), 3,42 (bs, 1H), 3,00-3,05 (m, 1H), 2,58-2,88 (m, SH), 2,32-2,44 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,90-
2,02 (m, 4H). MS m/z 493 (M + 1)”. EXEMPLO 26 (todos os 8 isômeros separados) o mM OH Me Me “Co o o 5,5-[2,5-diazabiciclo[2,2,2]octano-2,5-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil)]-bis(4- —metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) Em quatro reações separadas, os isômeros A a D de 5-[2-(2,5- diazabiciclo[2,2,2]oct-2-il)-1-hidroxietil]|-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona (cerca de 100 mg, 0,33 mmol) e 4-metil-5-oxiran-2-11-2-benzofurano-1(3H)- ona (95 mg, 0,50 mmol) em 2 ml de DMSO foram aquecidos sob condição de —microonda (150ºC) por 1 hora. Depois de esfriar até a temperatura ambiente, as misturas foram diluídas com água (20 ml), extraídas com EtOAc (3 X 20 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secadas em Na7sSO;, depois concentradas. Os resíduos foram purificados pela TLC preparativa (MeOH/DCM = 1:15) para se obter 5,5"-[2,5- diazabiciclo[2,2,2]octano-2,5-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil) |bis(4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona) como 4 misturas de dois isômeros, que foram separados pela cromatografia SFC quiral para se obter dois isômeros simples para cada um (total de oito).
Isômero A 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,68-7,72 (m, 4H),5,15 (s, 4H), 5,09-5,13 (m, 2H), 3,60-3,66 (m, 2H), 2,96 (s, 2H), 2,86- 2,90 (m, 2H), 2,75-2,77 (m, 2H), 2,47-2,61 (m, 4H), 2,23 (s, 6H), 1,93-2,03 (m, 2H), 1,66-1,73 (m, 2H). MS m/z 493 (M + 1)*.
Isômero B 'H RMN (400 MHz, CDCI3) à ppm 7,68-7,72 (m, 4H), 5,18 (s, 4H), 4,95-5,01 (m, 2H), 3,38-3,44 (m, 1 HD), 3,07-3,18 (m, 2H),
2,76-2,91 (m, 4H), 2,67-2,69 (m, 1H), 2,41-2,52 (m, 2H), 2,24 (d, J=9,7 Hz, 6H), 1,94-2,07 (m, 4H). MS m/z 493 (M + 1)*.
Isômero C 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) 5 ppm 7,68-7,72 (m, 4H), 5,15 (s, 4H), 4,90-4,93 (m, 2H), 3,04-3,07 (m, 2H), 2,92-2,95 (m, 4H), 2,81-2,85 (m, 2H), 2,40-2,45 (m, 2H), 2,22 (s, 6H), 1,97-2,06 (m, 2H), 1,69- 1,75 (m, 2H). MS m/z 493 (M + 1)*.
Isômero D 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) à ppm 7,68-7,72 (m, 4H), 5,18 (s, 4H), 4,86-4,93 (m, 2H), 3,28-3,31 (m, 1 H), 3,13-3,15 (n, 1 DD, 2,97-2,99 (m, 1 H), 2,80-2,87 (m, 2H), 2,63-2,71 (m, 3H), 2,32-2,44 (m, 2H), 2,23(d,J=9,5 Hz, 6H), 1,87-2,00 (m, 2H), 1,61-1,73 (m, 2H). MS m/z 493 (M+1)*.
Isômero E 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 7,68-7,72 (m, 4H), 5,15 (s, 4H), 4,88-4,93 (m, 2H), 3,04-3,07 (m, 2H), 2,80-2,95 (m, 4H), 2,66-2,72 (m, 2H), 2,40-2,45 (m, 2H), 2,22 (s, 6H), 1,97-2,06 (m, 2H), 1,66- 15º 1,77 (m, 2H). MS m/z 493 (M + 1)*.
Isômero F 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,68-7,72 (m, 4H), 5,15 (s, 4H), 5,00-5,07 (m, 2H), 3,48-3,51 (m, 1 HD), 3,11-3,33 (m, 3H), 2,83-2,99 (m, 4H), 2,48-2,57 (m, 2H), 2,23 (d, J] = 6,4 Hz, 6H), 1,89-2,00 (m, 2H), 1,64-1,79 (m, 2H). MS m/z 493 (M + 1)*.
Isômero G 'H RMN (400 MHz, CDCI3) à ppm 7,68-7,72 (m, 4H), 5,18 (s, 4H), 4,93-4,96 (m, 2H), 3,38-3,41 (m, 2H), 2,84-2,88 (m, 2H), 2,71-2,73 (m, 2H), 2,37-2,42 (m, 2H), 2,22 (s, 6H), 1,90-2,00 (m, 2H), 1,60- 1,66 (m, 2H). MS m/z 493 (M + 1)*.
Isômero H 'H RMN (400 MHz, CDCI;3) à ppm 7,68-7,72 (m, 4H),5,15 (s, 4H), 4,91-4,98 (m, 2H), 3,35-3,38 (m, 1 HD, 3,14-3,17 (m, 2H), 2,81-2,90 (m, 2H), 2,74-2,77 (m, 2H), 2,66-2,68 (m, 1H), 2,37-2,49 (m, 2H), 2,23 (d, J=10,1 Hz, 6H), 1,90-2,60 (m, 2H), 1,61-1,73 (m, 2H). MS m/z 493 (M+1)*.
EXEMPLO 27 Oo OQ OH Me Me OH OS o Oo 5,5 [2,5-diazabiciclo[2,2,1 lheptano-2,5-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil)]bis(4- metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) Em vasos separados os Isômeros A e B de 5,5º-[2,5- —diazabiciclo(2,2,1]heptano-2,5-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil) |bis(4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona) (80 mg a 250 mg, 0,33 mmol) e 4-metil-5-oxiran-2- 11l-2-benzofurano-1(3H)-ona (1,5 eq.) em 2 ml de DMSO foram aquecidos sob condições de microonda (150ºC) por 1 hora. Depois de esfriar até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com água (20 ml), extraída com EtOAc (3 X 20 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secadas em NasSO;,, depois concentradas. O resíduo foi purificado pela TLC (MeOH/DCM = 1:15) para obter 5,5º-[2,5-diazabiciclo[2,2,1] heptano-2,5-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil) |bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)- ona) como misturas de isômeros, que foram separadas pela cromatografia SFC quiral para produzir três isômeros únicos de cada um.
Isômero A: MS m/z 479 (M + 1)*.
Isômero B: 'H RMN (400 MHz, CDCI3) à ppm 7,68-7,74 (m, 4H), 5,18 (s, 4H), 4,02-5,18 (m, 2H), 3,60-3,66 (m, 2H), 2,90-3,28 (m, 6H), 2,50-2,60 (m, 2H), 2,26 (s, 6H), 1,52-1,60 (m, 2H). MS m/z2 479 (M + 1)*.
Isômero C: 'H RMN (400 MHz, CDCI3) à ppm 7,68-7,72 (m, 4H), 5,18-5,20 (m, 4H), 5,04-5,12 (m, 2H), 2,500-3,70 (m, 10H), 2,24-2,28 (m, 6H), 1,50-1,65 (m, 2H). MS m/z 479 (M + 1)*. Isôômero D: 'H RMN (400 MHz, CDCI3) à ppm 7,68-7,72 (m, 4H), 5,14-5,20 (s, 4H), 4,78-4,82 (m, 1 H), 3,96-4,00 (m, 1H), 3,68-3,82 (m, 2H), 3,14-3,30 (m, 2H), 2,35-3,00 (m,
6H), 2,18 (s,s, 6H), 1,54-1,74 (m, 2H). MS m/z 479 (M + 1)*.
Isômero E: 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm 7,72-7,80 (m, 4H), 5,22 (s, 4H), 4,90-5,00 (m, 2H), 3,40-3,50 (m, 2H), 3,00-3,10 (m, 2H), 2,64-2,78 (m, 6H), 2,26 (s, 6H), 1,74-1,78 (m, 2H). MS m/z 479 (M + 1)*.
Isômero F: 'H RMN (400 MHz, CD;OD) ô ppm 7,68-7,74 (m, 4H), 5,18 (s, 4H), 5,00-5,12 (m, 2H), 3,62-3,74 (m, 2H), 3,14-3,40 (m, 2H), 2,50-2,86 (m, 6H), 2,26 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,82-1,96 (m, 2H). MS m/z 479 (M+1)*.
EXEMPLO 28 o
Q OH F
CN —6-fluoro-3-(1-hidróxi-2-[4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0xo-1,3-diidro-2- benzofurano-5-iDetil]piperazin-1-il etil)-2-metilbenzonitrila 6-Fluoro-2-metil-3-oxiran-2-ilbenzonitrila (69,2 mg, 0391 mmol), 5-(1-hidróxi-2-piperazin1-iletil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona (54,0 mg, 0,195 mmoles) foram dissolvidas em FEtOH (5 ml) depois submetidas à microonda a 150ºC por 1 hora. Evaporado o etanol e o resíduo foi purificado pela hplc direcionada à massa para produzir 6-fluoro-3-(1- hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- il)etilpiperazin-1-il jetil)-2-metilbenzonitrila.
'H RMN (500 MHz, DMSO;): ô ppm 7,83 ((, J=8Hz, 1 H), 7,72(s,2H),7,38 (t,J=8,5 Hz, 1 H), 5,35-5,43 (q, 2 HD, 5,28 (d, J =7,5 Hz, 1H), 5,16 (t,J=6 Hz, 1H), 3,16-3,41 (b, 7H), 3,06-3,07 (m, 5H), 2,55 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).
LC-MS: M + 1 = 454.
EXEMPLO 29 o
O O So 5-cloro-4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-iDetil]piperazin-1-il etil)-2-(metilóxi)benzonitrila Uma solução de óxido de (2-cloro-4-ciano-5-metoxifenil) etileno (45,50 mg, 0,22 mmol) e 5-(1-hidróxi-2-piperazin-1-iletil)-4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona (0,50 mg, 0,18 mmol) em DMSO (2,00 ml) foi agitada a 150ºC via microonda por 1 hora. Adicionado salmoura e EtOAc, a camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas foram secadas em Na7SO, e concentrada. O resíduo foi purificado via prep-TLC para dar o produto puro como uma mistura de isômeros que foram separados via prep-HPLC quiral para produzir os 4 isômeros resolvidos de 5-cloro-4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1- oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il jetil)-2- (metilóxi)benzonitrila.
Isômero 1: 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,78 (s, 2H), 7,48 (s, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 5,24 (s, 2H), 5,08-5,11 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 2,81-2,89 (m, 6H), 2,53-2,58 (m, 6H), 2,28 (s, 3H); MS m/e 486 (M + 1)”. Isômero 2: 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,79 (s, 2H), 7,49(s,1H),,7,35 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 5,09-5,11 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 2,82- 2,89 (m, 6H), 2,55-2,61 (m, 6H), 2,29 (s, 3H); MS m/e 486 (M + 1)*.
Isômero 3: 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,79 (s, 2H), 7,50 (s, 1H), 7,35 (s, 1 HD), 5,25 (s, 2H), 5,12 (d, 2H), 3,96 (s, 3H), 2,95-2,32 (m, 12H), 2,29 (s, 3H); MS m/e 486 (M + 1)*.
Isômero 4: 'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,78 (s, 2H), 7,49 (s, 1 HD, 7,35 (s, 1H), 5,24 (s, 2H), 5,09-5,11 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 2,82- 2,89 (m, 6H), 2,55-2,61 (m, 6H), 2,28 (s, 3H); MS m/e 486 (M + 1). EXEMPLO 30 o
O O So 4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil|piperazin-1-1] Yetil)-S-metil-2-(metilóxi)benzonitrila 4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil |piperazin-1-il Jetil)-S-metil-2-(metilóxi)benzonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese dos EXEMPLOS 2C e 28 a 29 partindo de 5-(1-hidróxi-2-piperazin-1-iletil)-4- metil-2-benzofurano-1(3H)-ona e S5-metil-2-(metilóxi)-4-oxiran-2- ilbenzonitrila. LC/MS (M + 1)* = 466,02. EXEMPLO 31 o OMe IL IO “ Me HO 4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetillpiperazin-1-il etil)-2-(metilóxi)benzonitrila 4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil Ipiperazin-1-il )etil)-2-(metilóxi)benzonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese dos EXEMPLOS 2C e 28 a 29 partindo de 5-(1-hidróxi-2-piperazin-1-iletil)-4- — metil-2-benzofurano-1(3H)-ona e 2-(metilóxi)-4-oxiran-2-ilbenzonitrila. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), 8 7,77 (bs, 1 H), 7,74 (bs,
2H), 7,36 (bs, 1 HD), 7,19 (d, J=7,3 Hz, 1 H), 6,48 (bs, 1 H), 5,58 (bs, 1 HD, 5,42 (dd, J = 8,7 Hz, 2H), 5,26 (bs, 1 H), 3,95 (s, 3H), 3,92-3,76 (m, SH), 3,75-3,42 (m, 4H), 3,40-3,21 (m, 4H), 2,36 (s, 3H); LC/MS (M + 1)* = 452,35.
Os 4 isômeros individuais de 4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2- (4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofuran-5-il)etil Jpiperazin-1-il jetil)-2- (metilóxi)benzonitrila foram obtidos pela cromatografia SFC quiral (4,6 x 250 mm de QuiralCel 0,1-H, 2,4 ml/min, 100 bar, 4 a 40 % de MeOH: MEeCN/CO, a 35ºC); isômero 1: tg = 7,049 min, isômero 2: tg = 7,308 min, isômero 3: tg = 7,740 min, isômero 4: tg 7,869 min.
EXEMPLO 32 o OMe DL O ” Me HO E 5-fluoro-4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-iDetil]piperazin-1-il etil)-2-(metilóxi)benzonitrila 5-fluoro-4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-5-il)etil |piperazin-1-il jetil)-2-(metilóxi)-benzonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese dos EXEMPLOS 2C e 28 a 29 partindo de 5-(1-hidróxi-2-piperazin-1-iletil)-4- metil-2-benzofigan-1(3H)-ona e 5-fluoro-2-(metilóxi)-4-oxiran-2- ilbenzonitrila.
LC/MS (M + 1)* = 470,56.
EXEMPLO 33 Oo ou Me OMe Me HO 4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil|piperazin-1-1] Yetil)-3-metil-2-(metilóxi)benzonitrila
4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil |piperazin-1-il )etil)-3-metil-2-(metilóxi)benzonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese dos EXEMPLOS 2C e 28 a 29 partindo de 5-(1-hidróxi-2-piperazin-1-iletil)-4- —metil-2-benzofurano-1(3H)-ona e 3-metil-2-(metilóxi)-4-oxiran-2- ilbenzonitrila. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), 8 7,72 (m, 3H), 7,46 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 5,60 (d, J =9,6 Hz, 1 H), 5,46 (bs, 1 H), 5,42 (dd, J = 8,9 Hz, 2H), 4,12-3,73 (m, 4H), 3,65-3,45 (m, 4H), 3,42-3,22 (m, SH), 2,37 (s, 3H), 2,32(s,3H); LC/MS (M + 1)* = 466,02. EXEMPLO 34 o F IDLOTO á Me HO 2-fluoro-4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-iDetil]piperazin-1-il etil)benzonitrila 2-fluoro-4-(1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il jetil)benzonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese dos EXEMPLOS 2C e 28 a 29 partindo de 5-(1-hidróxi-2-piperazin-1-iletil)-4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona e 2-fluoro-4-oxiran-2-ilbenzonitrila. 'H RMN (500 MHz, DMSO- dçs),367,98(m, 1H), 7,74 (m, 1 H), 7,71 (m, 1 H), 7,60 (d, J=10,5 Hz, 1 DD, 7,52 (d, J=7,9 Hz, 1 H), 5,56 (d, J =7,7 Hz, 1 HD), 5,42 (dd, J = 8,3 Hz, 2H), 5,38 (bs, 1H), 3,95-3,42 (m, 6H), 3,40-3,18 (m, 6H), 2,36 (s, 3H); LC/MS (M + 1)* = 440,02.
EXEMPLO 35 o
DO F O OMe
MU 4-(2-[4-[2-fluoro-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetil]- piperazin-1-il Yetil)-2-(metilóxi)benzonitrila Cloridrato — de — 5-(1-Fluoro-2-piperazin-1-iletil)-4-metil-2- — benzofurano-1I(3H)-ona (30 mg, 0,11 mmol), 2-(metilóxi)-4-(2-oxoetil)- benzonitrila (37 mg, 0,22 mmol), cianoboroidreto de sódio (67 mg, 1,078 mmoles) foram adicionados a um frasco de 25 ml que contém uma barra agitadora; ao frasco foi adicionado MeOH (3 ml) e poucas gotas de ACOH. À mistura de reação foi subsequentemente agitada por 12 h; a LC indicou que a reação foi até a conclusão. A solução foi concentrada até a secura, redissolvida em EtOAc (15 ml) e lavada com NaHCO; aq. e NaCl aq.. A fase orgânica foi secada em Na7sSO;, filtrada e concentrada até a secura. A mesma foi depois mais uma vez re-dissolvida em MeOH (3,5 ml), filtrada e passada rapidamente na HPLC direcionada à massa para a separação para dar o produto desejado. LC-MS (IE, m/z): 450 [M + 1]*. EXEMPLO 36 o
DO EQ ao
SU 4-(2-[4-[2-(4-metil- 1 -0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-11)-2-(metilóxi)- etillpiperazin-1-il Yetil)-2-(metilóxi)benzonitrila Cloridrato de 4-Metil-5-[1-(metilóxi)-2-piperazin-1-iletil]|-2- —benzofuran-I(3H)-ona (50 mg, 0,17 mmol), 2-(metilóxi)-4-(2-oxoetil)-
benzonitrila (60 mg, 0,34 mmol), cianoboroidreto de sódio (108 mg, 1,72 mmol) e uma barra agitadora foram adicionados a um frasco de 25 ml e poucas gotas de ACOH. A mistura resultante foi depois dissolvida em MeOH (3 ml) e agitada por 12 h; a análise pela LC indicou que a reação foi até a conclusão. À mistura de reação foi tratada com EtOAc (20 ml) e lavada com NaHCO; aq., NaCl aq. A fase orgânica foi depois secada em Na7SO;,, filtrada e concentrada até a secura; o resíduo resultante foi depois dissolvido em MeOH (3,5 ml), filtrado e passado rapidamente na HPLC direcionada à massa para a separação para dar o produto desejado. LC-MS (IE, m/z): 481 [M + 10% EXEMPLO 37 o
DO & Tl ouve
MU 4-(2-[4-[2-(etilóxi)-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofuran-5-iDetil]- piperazin-1-il Yetil)-2-(metilóxi)benzonitrila Cloridrato de 5-[1-(Etilóxi)-2-piperazin-1-iletil]-4-metil-2- Dbenzofurano-1I(3H)-ona (50 mg, 0,16 mmol), 2-(metilóxi)-4-(2-oxoetil)- benzonitrila (40 mg, 0,23 mmol), cianoboroidreto de sódio (14 mg, 1,7 mmol) e uma barra agitadora foram adicionados a um frasco de 25 ml e poucas gotas de AcOH. A mistura resultante foi depois dissolvida em MeOH (3 ml) e agitada por 12 h; a análise pela LC indicaram que a reação foi até a conclusão. A mistura de reação foi tratada com EtOAc (20 ml) e lavada com NaHCO; aq. e NaCl aq. A fase orgânica foi depois secada em Na7sSO;, filtrada e concentrada até a secura; o resíduo resultante foi depois dissolvido em MeOH (3,5 ml), filtrado e passado rapidamente na HPLC direcionada à massa para a separação para dar o produto desejado. LC-MS (IE, m/z): 464 [M + 1]*.
EXEMPLO 38 o OMe tato Me Me 4-(2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofuran-5-il)- etillpiperazin-1-il)-1-metiletil)-2-(metilóxi)benzonitrila A 2-metóxi-4-(1-oxopropan-2-il)benzonitrila (0,020 g, 0,106 mmol) foram adicionados diclorometano (15 ml) e cloridrato de 5-[1-hidróxi- 2-(piperazin-1-il)etil|-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona — [(0,037 g O116 mmol), em diclorometano (2 ml) e trietilamina (0,029 ml, 0,211 mmol)J e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 0,5 h. triacetoxiboroidreto de sódio (0,112 g, 0,529 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada —natemperatura ambiente por 24 horas.
A reação foi extinta com água (5 ml) e os orgânicos foram extraídos com EtOAc (2 x 40 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (20 ml) e salmoura (20 ml) e secadas (MgSO;y). A filtração seguida pela concentração produziu um resíduo oleoso, que foi purificado via HPLC de fase reversa direcionada à massa seguido por evaporação e secagem da fração pura obtida que depois converteu para sal de HCl pela trituração em HCl 1 M em éter dietílico (0,50 ml, 2 h). À evaporação e secagem sob vácuo forneceu a 4-(2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1- oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il)-1-metil-etil)-2- (metilóxi)benzonitrila. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), 8 7,75 (bs, 1 H), 7,73 (d, J = 3,6 Hz, 1 H), 7,70 (d, J =8,0 Hz, 1 H), 7,29 (s, 1 ), 7,10 (d J=8,0 Hz, 1 H), 5,53 (d, J] =8,7 Hz, 1 H), 5,41 (dd, J = 8,5 Hz, 2H), 3,95 (s, 3H), 2,95-2,65 (m, 9H), 3,55-3,25 (m, 4H), 2,33 (s, 3H), 1,32 (bs, 3H); LC/MS (M + 1)* = 450,53.
EXEMPLO 39 o OMe Me 4-(2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetil]- piperazin-1-il Ypropil)-2-(metilóxi)benzonitrila A 4-(2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo- furano-S-il)etillpiperazin-1-il)propil)-2-(metilóxi)benzonitrila foi preparada em uma maneira similar como descrita para a preparação do EXEMPLO 38 partindo do cloridrato de 5-[1-hidróxi-2-(piperazin-1-il)etil]-4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona e 2-metóxi-4-(2-oxopropil)-benzonitrila. LC/MS (M + 1)* = 450,57. EXEMPLO 40 o o
O 5-([4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo-furano-5- iDetilpiperazin-1-il Yacetil)-4,6-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona A um tubo de microonda de 5 ml foram adicionados 5- (bromoacetil)-4,6-dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona (0,220 g, 0,777 mmol), cloreto de 1-[2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- il)etillpiperazin-l-io (0,215 g, 0,777 mmol) e uma barra agitadora; a mistura foi dissolvida em THF (2 ml). O tubo foi tampado, desgaseificada e purgado com N,. O tubo foi depois colocado em um banho de óleo e aquecido a 50ºC por 12 h; a LC indicou a formação do produto desejado. A solução foi concentrada até a secura, dissolvida em MeOH (3,6 ml), filtrada e foi depois submetida à purificação pela HPLC direcionada à massa para dar a 5-((4-
[2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- il)etil piperazin-1-11)acetil)-4,6-dimetil-2-benzofurano1(3H)-ona. LC-MS (IE, m/z): 479 [M 11+. EXEMPLO 41 o OMe LDO O”
É 4-(1-fluoro-2-[4-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetillpiperazin-1- il tetil)-2-(metilóxi)benzonitrila Foi preparada em uma maneira similar como descrito no EXEMPLO 11 partindo de 4-(I-hidróxi-2-(4-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil |piperazin-1-il )etil)-2-(metilóxi)benzonitrila. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), ô 7,80 (d, J=3,9 Hz, 1 H), 7,66 (s, 1 H), 7,57 (bs, 1 HD), 7,49 (bs, 1 HD), 7,29 (bs, 1 H), 7,13 (s, 1 HD), 7,18 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 4,11 (bs, 2H), 3,94 (bs, 2H), 3,60 (s, 3H), 3,45 (bs, 8H); LC/MS (M + 1)* =424,31. EXEMPLO 42
PO XSO S A Oro, 1-(4-nitrofenil)-2-(4-[2-(4-nitrofenil)etil Ipiperazin-1-1l |etanona Etapa A: Cloridrato de 1-[2-(4-nitrofenil)etil Ipiperazina Trietilamina (22,6 ml, 161 mmoles) foi adicionado a uma solução agitada de BOC-piperazina (10,0 g, 53,7 mmoles) e brometo de 4- nitrofenetila (12,4 g, 53,7 mmoles) em 100 ml de DMF depois da mistura foi — aquecida a 50ºC por 16 h. A mistura de reação foi vertida em água e extraída três vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas três vezes com água, três vezes com HCl 0,1 N, mais uma vez com água, depois finalmente com salmoura. A camada orgânica foi secada em MgSOs., filtrados, a maior parte do solvente foi removido sob pressão reduzida e hexano foi adicionado. O precipitado resultante foi filtrado e lavado com hexano para produzir o intermediário protegido por Boc. À análise pela LC-MS mostrou M + H 336 e M-55 280 para pico principal a 24 min. O intermediário foi tratado com HCl 4 N em dioxano (Aldrich) para produzir cloridrato de 1-[2-(4-nitrofenil)-etil|piperazina. 'H RMN (500 MHz, DMSO): 6 ppm 9,80 (b, 1 H), 8,21 (d, J= 8,5 Hz, 2H), 7,59 (d, J =8,5 Hz, 2H), 3,2-3,8 (m, 12 H); LC-MS: M + 1 = 236.
Etapa B: 1-(4-nitrofenil)-2-(4-[2-(4-nitrofenil)etil |piperazin-1-il |etanona 2-Bromo-1-(4-nitrofenilJetanona (269 mg, 1,10 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de cloridrato de 1-[2-(4-nitrofenil)- etilJpiperazina (200 mg, 0,736 mmol) seguido por base de Hunig, depois foi agitada na temperatura ambiente por 1 h. A mistura de reação foi vertida em solução saturada de NH,CI e extraída duas vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, depois salmoura. À camada orgânica foi secada em MgSO,, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado pela TLC preparativa usando o sistema de solvente de 5 % de MeOH/DCM para produzir 1-(4-nitrofenil)-2-(4-[2-(4-nitrofenil)etil] piperazin-1-il Jetanona.
'H RMN (500 MHz, CDCI;3): 5 ppm 8,32 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 8,19 (d, J =8,5 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 3,87 (s, 2H), 3,31 (s, 4 DD, 2,86 (t, J =7,5 Hz, 2H), 2,55 (t, J =7,5 Hz, 2H), 245 (b, 4H); LC-MS: M+ 1 = 399,4.
EXEMPLO 43
OH O 1-(4-nitrofenil)-2-(4-[2-(4-nitrofenil)etil Ipiperazin-1-il jetanol
O boroidreto de sódio (8,0 mg, 0,21 mmol) foi adicionado a 1- (4-nitrofenil)-2-(4-[2-(4-nitrofenil)etil |piperazin-1-il)Jetanona (20 mg, 0,050 mmol) em etanol (1 ml) e agitada na temperatura ambiente por 2 h. A mistura de reação foi vertida em água e extraída duas vezes com EtOAc, duas vezes com salmoura, depois foi secada em MgSO, e evaporada até a secura. O material bruto foi purificado pela TLC preparativa usando o sistema de solvente de 5 % de (10 % de NH,OH em MeOH): 95 % de DCM de para produzir 1-(4-nitrofenil)-2-(4-[2-(4-nitrofenil )etil |piperazin-1-il jetanol. LC-MS: M + 1 = 401. EXEMPLO 44
F O 1-[2-fluoro-2-(4-nitrofenil)etil |-4-[2-(4-nitrofenil)etil] piperazina DAST (6,6 ul, 0,050 mmol) foi adicionado a 1-(4-nitrofenil)- 2-(4-[2-(4-nitrofenil)etil Ipiperazin-1-1l )etanol (10 mg, 0,025 mmol) em DCM (1 ml) e a mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente por 72 h. 15" Depois NaOH 1 N foi adicionado e a mistura foi extraída duas vezes com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secadas em MgSO;, filtradas e evaporadas até a secura. O produto bruto foi purificado pela HPLC preparativa — direcionada à massa para produzir 1-[2-fluoro-2-(4- nitrofenil)etil|-4-[2-(4-nitrofenil)etil |piperazina. LC-MS: M + 1 = 403. EXEMPLO 45
OH E NO> 2,2º -piperazino-1 4-diilbis[1-(4-nitrofenil)etano]
Etapa A: 2,2º-piperazino-1,4-diilbis[1-(4-nitrofenil)Jetanona 2-bromo-1-(4-nitrofenil)Jetanona (3,117 g, 12,77 mmoles) foi adicionada a uma solução de piperazina (0,500 g, 5,80 mmoles) e N,N- diisopropiletilamina (4,06 ml, 23,2 mmoles) em THF (25 ml) a 0ºC. À misturade reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e foi agitada por 14 h. A mistura de reação foi vertida em água e extraída duas vezes com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secadas em MgSO, depois filtradas e evaporadas até a secura. O resíduo foi purificado pela MPLC usando um 120 g. Coluna Redi-sep e eluindo com O % a 5 % do sistema de solvente de MeOH/DCM para produzir a 2,2º-piperazino-1,4-diilbis[1-(4- nitrofenil)etanona] (1,9 g, 79 %). LC-MS: M + 1 =413. Etapa B: 2,2 -piperazino-1,4-diilbis[1-(4-nitrofenil)etano] NaBH, (308 mg, 8,15 mmoles) foi adicionado a uma solução em 25 ml etanol de 2,2 -piperazino-1 4-diilbis[1-(4-nitrofenil)Jetanona] (400 mg, 0,970 mmol) a O0ºC. A mistura de reação foi deixada aquecer até temperatura ambiente e agitada durante a noite. A mistura de reação foi vertida em água e extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura duas vezes, depois secadas em —MgSO,, filtradas e evaporadas até a secura. O resíduo foi purificado pela TLC preparativa usando 5 % de metanol em DCM para produzir 2,2 -piperazino- 1,4-diilbis[1-(4-nitrofenil)etanol]. 'H RMN (500 MHz, DMSO): 5 ppm 8,25 (d, J = 8,5 Hz, 4H), 7,69 (d, J =8,5 Hz, 4H), 5,19 (d, J = 10 Hz, 2H), 3,77 (s, 2H), 3,56-3,59 (b, 6H),3,37(d,)J=13Hz,2H),3,28(t,J=13Hz,2H). LC-MS: M + 1 =417. EXEMPLO 46
PAOCOO & ON NO,
1,4-bis[2-fluoro-2-(4-nitrofenil)etil |piperazina DAST (464 mg, 2,88 mmoles) foi adicionado a 2,2- piperazino-1,4-diilbis[1-(4-nitrofenil)etanol] (a partir do EXEMPLO 44, 300 mg, 0,720 mmol) em DCM (10 ml) a 0ºC.
A mistura de reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada durante a noite.
A mistura de reação foi vertida em água fria e extraída duas vezes com DCM.
As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas em MgSO;,, filtradas e evaporadas até a secura.
O material bruto foi purificado pela TLC preparativa usando o sistema de solvente de 5 % de (10 % de NH,OH em MeOH): 95 % de DCM para produzir a 1,4-bis[2-fluoro-2-(4- nitrofenil)etil |piperazina. 'H RMN (500 MHz, DMSO): 5 ppm 8,29 (d, J = 8,5 Hz, 4H), 7,70 (d, J] = 8,5 Hz, 4H), 6,17 (d, J=9 Hz, 1 H), 6,07 (d, J =9 Hz, 1 H), 3,40 (m, 2H), 3,25 (d, J = 14,5 Hz, 2 H), 3,03-3,20 (m, 8H). LC-MS: M + 1=421. EXEMPLO 47 SRA o S o 1,1 -(piperazino-1 4-diildimetanodiil)bis(3,4-diidro-1 H-isocromeno-5- carbonitrila Etapa A: 1-[(5-bromo-3, 4-diidro-1 H-isocromen-1-il)metil] piperazina Uma solução de 1,1-dimetiletil-4-[(5-bromo-3,4-diidro-1H- isocromen-1-il)metil |piperazino-1I-carboxilato (480 mg, 1,2 mmol) em 10 ml de DCM foi adicionado 10 ml de HCl 4 N/dioxano e depois agitada na temperatura ambiente por 2 horas.
Os solventes foram removidos sob vácuo para produzir 1-[(5-bromo-3,4-diidro-1 H-isocromen-1-il)metil]piperazina. 'H —RMN (400 MHz, MeOD)36ô 7,55 (d,J=8,0 Hz, 1H),7,27 (d,J=8,0 Hz, 1 H), 7,19 (t, J=8,0 Hz, 1 H), 3,34 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 4,23-4,29 (n, 1 H),
3,92-3,95 (m, 1H), 3,85-3,90 (m, 1 H), 3,84 (brs, 4H), 3,64-3,/71 (m, 6H), 3,58-3,61(m, 1 H). Etapa B: 1,4-bis[(5-bromo-3,4-diidro-1 H-isocromen-1-il)metil]|-piperazina A uma solução de 1-[(5-bromo-3, 4-diidro-1H-isocromen-1- ilmetillpiperazina (160 mg, 0,52 mmol) em DCM/MeOH (1:1, 5 ml) foi adicionado DIEA (134 mg, 1,03 mmol) e depois a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 10 min.
Depois AcOH (62 mg, 1,03 mmol), NaCNBH; (65 mg, 1,03 mmol) e 5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromeno-!1- carbaldeído (125 mg, 0,516 mmol) foram adicionados na mistura.
A solução de reação foi agitada na temperatura ambiente durante a noite.
À mistura de reação foi adicionada água e extraídos com DCM.
A camada orgânica foi secada em sulfato de sódio anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado com prep-TLC para dar o produto 1,4-bis[(5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromen- 1-il)metil]piperazina.
Etapa C: 1,1º-(piperazino-1,4-diildimetanodiil)bis(3,4-diidro-1 H-isocromeno- 5-carbonitrila Uma solução de 1,4-bis[(5-bromo-3,4-diidro-1H-isocromen-1- il)metil]piperazina (130 mg, 0,24 mmol), Pd(PPh;3)a (56 mg, 0,050 mmol) e Zn(CN); (85 mg, 0,73 mmol) em 5 ml de DMF anidro foi a 120ºC em — atmosfera de N, por 6 horas.
Depois de esfriada até a temperatura ambiente, a mistura foi dividida entre EtOAc e água.
A camada orgânica foi secada em sulfato de sódio anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado com prep-TLC para produzir 1,1º-(piperazino-1 4-diildimetanodiil)bis(3,4-diidro-1H- isocromeno-5-carbonitrila) 'H RMN (400 MHz, MeOD) ô: 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,53 (d, J =8,0 Hz, 2H), 7,39 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 5,13 (d, J] = 8,0 Hz, 2H), 4,22- 4,27 (m, 2H), 3,83-3,89 (m, 2H), 3,37-3,41 (m, 2H), 3,20-3,25 (m, 10H), 3,10-3,12 (m, 2H), 2,92-3,08 (m, 2H).
EXEMPLO 48
A o NAN
CR Oo 1-(14-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetil piperazin-1-il Ymetil)-3,4- diidro-1 H-isocromeno-5-carbonitrila Uma mistura de 1-formil-3,4-diidro-1H-isocromeno-5- carbonitrila (65 mg, 0,35 mmol), cloridrato de 5-(2-piperazin-1-iletil)-2- benzofurano-1(3H)-ona (100 mg, 0,35 mmol), DMA (45 mg, 0,35 mmol), AcOH (21 mg, 0,35 mmol) em 3 ml de DCM foi agitada 30 min na temperatura ambiente e depois NaBH(OAc); (440 mg, 2,1 mmoles) foi adicionado. A mistura foi agitada durante a noite na temperatura ambiente. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas em NaSO,. anidro, concentradas e o resíduo foi purificado pela prep-HPLC para dar 1- (14-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2-benzofuran-5-il)etil |piperazin-1-11) metil)-3,4- diidro-1H-isocromeno-5-carbonitrila. 'H RMN (400 MHz, MeOD) ô 7,68- 15º 7,69 (m, 1 H),7,60-7,61 (m, 1 H), 7,48-7,50 (m, 3H), 7,47-7,49 (m, 1H), 5,32 (s, 2H), 5,18-5,19 (m, 1H), 4,20-4,22 (m, 1 HD), 3,79-4,02 (m, 1 HD), 3,30-3,55 (m, 12H), 2,80-3,21 (m, 4H). MS: m/z 418 (M + 1)*. EXEMPLO 49
NC
AA ó TO o
O —1-(14-[2-(4-metil-1-ox0-1,3-diidro-2-benzofurano-5S-iDetil piperazin-l-
il +metil)-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1| H-isocromeno-6-carbonitrila Etapa A: (2-hidroxifenil)acetato de metila A uma solução do ácido (2-hidroxifenil)acético (11 g, 72,3 mmoles) em 100 ml de MeOH foi adicionado SOC, (17,2 g, 144,7 mmoles) a OºC.A mistura foi agitada a 50ºC durante a noite.
A reação foi concentrada.
O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna para dar (2- hidroxifenil)acetato de metila.
Etapa B: (3-bromo-2-hidroxifenil)acetato de metila A uma solução de (2-hidroxifenil) acetato de metila (14,0 g, 84,3 mmoles) em 100 ml de DCM foi adicionado diisopropil-amina (1,70 g, 16,8 mmoles) e NBS (15 g, 84,2 mmoles) a 0ºC.
A mistura foi agitada a 0ºC por | h.
A reação foi vertida em HCl 1 N, extraída com DCM e concentrada para dar o (3-bromo-2-hidroxifenil)acetato de metila bruto.
Etapa C: [3-bromo-2-(metilóxi)fenilJacetato de metila A uma solução de (3-bromo-2-hidroxifenil)acetato de metila (18,7 g, 76,3 mmoles) em 200 ml de DMF foi adicionado K;CO; (52,7 g, 382 mmoles), Mel (14,0 ml, 229 mmoles). A mistura foi agitada a 50ºC por 3 horas.
A solução de reação foi diluída com EtOAc e água.
A camada orgânica foi secada em sulfato de sódio anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna para dar [3-bromo-2-(metilóxi)fenil Jacetato de metila.
Etapa D: 2-[3-bromo-2-(metilóxi)fenil Jetano] A uma solução de [3-bromo-2-(metilóxi)fenilJacetato de metila (8,20 g, 31,7 mmoles) em 200 ml de THF seco sob N, na temperatura ambiente foi adicionado LiBH, (32 ml, 63,32 mmoles, 2 M THF). Depois de 1,5 hora, a reação foi aquecida ao refluxo por 3 horas e depois esfriada até a temperatura ambiente.
A solução foi vertida em EtOAc/HCl solução | Ne as camadas foram separadas.
A camada orgânica foi lavada com água, Na;CO; saturado e salmoura, secada em Na7SO, anidro e concentrada para dar 2-[3-
bromo-2-(metilóxi)fenil] etanol Etapa E: 6-bromo-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1-carboxilato de metila Bromo-2-(metilóxi)fenilJetanol (6 g 26,0 mmoles) e bis(etilóxi)acetato de etila (5,50 g, 31,1 mmoles) em 60 ml de CH;NO;. Depois de agitada por 10 min, o banho de gelo foi removido e a mistura foi deixada agitar na temperatura ambiente durante a noite.
A mistura foi vertida em gelo/HCI 1 N aquoso.
Extraída por DCM e retrolavada com HCl 1 Ne salmoura, secada em sulfato de sódio anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado via cromatografia em coluna para dar 6-bromo-5-(metilóxi)-3,4- diidro-1 H-isocromeno-1-carboxilato de metila.
Etapa EF: Ácido 6-bromo-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1- carboxílico A uma solução de 6-bromo-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1H- isocromeno-l-carboxilato de metila (650 mg, 2,06 mmoles) em 20 ml de MeOH/THF/H,O (2/2/1) foi adicionado LiOH.H,O (347 mg, 8,25 mmoles) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite.
Os solventes foram removidos sob vácuo e o resíduo foi adicionado 50 ml de água e extraído com éter.
A camada aquosa foi depois acidificada com HCl 4 N até o pH=3em banho de gelo e extraída com FtOAc.
As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas em sulfato de sódio anidro e concentradas para dar o ácido 6-bromo-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1H- isocromeno-1-carboxílico.
Etapa G: 6-bromo-N-metil-N,5-bis(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1- — carboxamida Uma mistura do ácido 6-bromo-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1H- isocromeno-l-carboxílico (600 mg, 2,08 mmoles) e CDI (475 mg, 2,93 mmoles) em 20 ml de DCM seco foi agitada na temperatura ambiente por 0,5 hora e depois O,N-dimetil-hidroxilamina (285 mg, 2,93 mmoles) foi adicionado.
A mistura resultante foi agitada durante a noite.
Os solventes foram removidos sob vácuo e o resíduo foi purificado pela TLC preparativa para dar 6-bromo-N-metil-N,5-bis(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1- carboxamida. —EtapaH:6-bromo-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1H-isocromeno-1-carbaldeído A uma solução de 6-bromo-N-metil-N,5-bis(metilóxi)-3,4- diidro-1H-isocromeno-1-carboxamida (300 mg, 0,9 mmol) em 20 ml de THF anidro foi esfriada a-30ºC e depois DIBAL-H (1,3 ml, 1,3 mmol, IM) foi adicionado.
A mistura foi agitada a-30ºC por 2 horas.
A reação foi extinta com água ce extraída com DCM.
A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em sulfato de sódio anidro e concentrada.
O 6-bromo-5-(metilóxi)-3,4- diidro-1H-isocromeno-1-carbaldeído bruto foi usado para a etapa seguinte sem purificação.
Etapa 1: 1,1-dimetiletil-4-([6-bromo-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromen-1- illmetil)piperazino-l-carboxilato A uma solução de 6-bromo-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1H- isocromeno-1l-carbaldeído (230 mg, 0,85 mmol) em 10 ml de DCM foi adicionado piperazino-1l-carboxilato de 1,1-dimetiletila (189 mg, 1,02 mmol) e NaBH(OAc); (720 mg, 3,4 mmoles) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite.
A reação foi diluída com DCM e lavada com salmoura.
A camada orgânica foi secada em NazSO, anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado pela prep-TLC para dar 1,1-dimetiletil-4-([6-bromo-5- (metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromen-1-il]-metil |piperazino-1-carboxilato). Etapa J: 1,1-dimetiletil-4-([6-ciano-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromen-1- —illmetil)piperazino-l-carboxilato A uma solução de 1,1-dimetiletil-4-([6-bromo-5-(metilóxi)- 3,4-diidro-1 H-isocromen-1-il |metil |piperazino-I-carboxilato (50 mg, 0,11 mmol), Pd(PPh;3), (20 mg) e Zn(CN),; (26 mg, 0,23 mmol) em 5 ml de DMF anidro foi a 110ºC em atmosfera de N, durante a noite.
A reação foi esfriada na temperatura ambiente, extraída por EtOAc, lavada por água depois por salmoura. A camada orgânica foi secada em sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado com prep-TLC para produzir 1,1- dimetiletil-4-([6-ciano-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromen-4- illmetil)piperazino-l-carboxilato).
Etapa K: 5-(metilóxi)-l-(piperazin-1-ilmetil)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-6- carbonitrila A uma solução de 1,1-dimetiletil-4-([6-ciano-5-(metilóxi)-3,4- diidro-1H-isocromen-1-il]Jmetil | piperazino-1l-carboxilato (30 mg, 0,08 mmol) em 5 ml de DCM foi adicionado 5 ml do TFA foi agitada na temperatura ambiente por 1 hora e a reação foi concentrada. A 5-(metil-6xi)-1-(piperazin- 1-ilmetil)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-6-carbonitrila bruta resultante foi diretamente usada na etapa seguinte.
Etapa L: 1-(14-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetil]- —piperazin-1-il Ymetil)-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-6-carbonitrila A uma solução de 5-(metilóxi)-l-(piperazin-1-ilmetil)-3,4- diidro-1 H-isocromeno-6-carbonitrila (0,04 mmoles) em 5 ml de DCM foi adicionado (4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-S-ilacetaldeído (da Etapa B, Intermediário 17, 11 mg, 0,06 mmol) e NABH(OAc); (34 mg, 0,16 mmol), a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A reação foi diluída com DCM e lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada em Na7SO, anidro e concentrada. O resíduo foi purificado pela prep-TLC para dar — 1-((4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1- 11 | metil)-5-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-6-carbonitrila.
'H RMN (400 MHz, CDCI3) & ppm 7,62 (d, — Hz, 1 HD), 7,33 (d, J=8,6 Hz, 1 H), 7,28 (d, Hz, 1 H), 6,98 (d, J =7,8 Hz, 1 HD), 5,17 (s, 2H), 4,80-4,90 (m, 1 H), 4,08-4,13 (m, 1 H), 3,98 (s, 3H), 3,60-3,67 (m, 1 H), 2,49- 2,79 (m, 16H), 2,24 (s, 3H).
EXEMPLO 50 OMe
NC Tras o LN “O. OMe 1,1 -(piperazino-1 4-diildimetanodiil)bis[7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H- isocromeno-6-carbonitrila Etapa A: 1,4-bis( [6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromen-1- illmetilipiperazina A uma solução de 1-([6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1H- isocromen-1-il]metil |piperazina (100 mg, 0,3 mmol) em 5 ml de DCM foi adicionado 6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-1-carbaldeído (81 mg, 0,30 mmol) e NaBH(OAc); (127 mg, 0,6 mmol). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com DCM e lavada com salmoura. A camada orgânica foi secada em Na7SO, anidro e concentrada. O resíduo foi purificado pela prep-TLC para dar a 1,4-bis([6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1H-isocromen-1-il]Jmetil) piperazina. EtapaB: 1,1º-(piperazina-1,4-diildimetanodiil)bis[7-(metilóxi)-3,4-diidro-1H- isocromeno-6-carbonitrila Uma solução de 1,4-bis ([6-bromo-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1H- isocromen-1-il]Jmetil |piperazina (30 mg, 0,05 mmol), PAd(PPh3), (10 mg) e Zn(CN),; (58 mg, 0,10 mmol) em 8 ml de DMF anidro foi aquecida a 110ºC —sobuma atmosfera de N, durante a noite. A mistura de reação foi esfriada na temperatura ambiente, extraídas com EtOAc, lavada com água depois com salmoura. A camada orgânica foi secada em sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado com prep-TLC para produzir o composto do título.
'H RMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,22 (s, 2H), 6,94 (s, 2H), 4,11-4,02 (m, 2H), 3,71 (s, 6H), 3,59 (s, 4H), 2,51-2,89 (m, 14H). EXEMPLO 51 MeO
OO o Oo 1-(14-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetillpiperazin-1- illmetil)-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-6-carbonitrila Etapa A: 1,1-dimetiletil-4-([6-ciano-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromen-1- il]metil | piperazino-1-carboxilato Uma solução de 1,1-dimetiletil-4-([6-bromo-7-(metilóxi)-3,4- diidro-1 H-isocromen-1-il]metil )piperazino-lI-carboxilato (350 mg, 0,79 mmol), PA(PPh3)a (180 mg, 0,15 mmol) e Zn(CN),; (187 mg, 1,60 mmol) em 10 ml de DMF anidro foi aquecida a 110ºC sob uma atmosfera de N2 durante a noite. A reação foi esfriada até a temperatura ambiente, extraída com EtOAc, lavada com água depois por salmoura. A camada orgânica foi secada em sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado com prep- 155 TLC para produzir 1,1-dimetiletil-4-([6-ciano-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1H- isocromen-1-il]metil |piperazino-1-carboxilato. Etapa B: 7-(metilóxi)-l-(piperazin-1-ilmetil)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-6- carbonitrila A uma solução de 1,1-dimetiletil-4-([6-ciano-7-(metilóxi)-3,4- — diidro-IH-isocromen-1-il]metil |piperazino-lI-carboxilato (270 mg, 0,697 mmol) em 5 ml de DCM foi adicionado 5 ml do TFA e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 1 h. A mistura de reação foi concentrada para produzir 7-(metilóxi)-1-(piperazin-1-ilmetil)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-6- carbonitrila. O resíduo foi diretamente usado na etapa seguinte. Etapa C: 1-([4-[2-(4-Metil-1-oxo-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetil]- piperazin-1-il)metil)-7-(metilóxi)-3,4-diidro-1 H-isocromeno-6-carbonitrila
A uma solução de 7-(metilóxi)-l-(piperazin-1-ilmetil)-3,4- diidro-1H-isocromeno-6-carbonitrila (50 mg, 0,18 mmol) em 5 ml de DCM foi adicionado (4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2-benzofuran-5-il)-acetaldeído (da Etapa B, Intermediário 17, 33 mg, 0,18 mmol) e NABH(OAc); (100 mg, 0,5 mmol). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite.
À mistura de reação foi diluída com DCM e lavada com salmoura.
A camada orgânica foi secada em Na7SO, anidro e concentrada.
O resíduo foi purificado pela prep-TLC para dar o composto do título. 'H RMN (400 MHz, MeOD) ô ppm 7,65 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,45 (d, J =7,0 Hz, 2H), 6,99 (s, 1 HD), 5,34 (s, 2H),5,14-5,17 (m, 1 HD), 4,14-4,19 (m, 1 HD, 3,92 (s, 3H), 3,74-3,80 (m, 1 H), 3,46-3,50 (m, 1H), 3,31-3,35 (m, 2H), 3,04-3,27 (m, 10H), 2,86-2,94 (m, IH), 2,68-2,74 (m, 1 H), 2,34 (s, 3H); MS m/e 462 (M + 1)*. EXEMPLO 52 o se.
Me OH O x Ns OMe 6-(1-Hidróxi-2-[4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0xo-1,3-diidro-2-benzo-furano-5- iDetillpiperazin-1-il Jetil)-4-metoxipiridino-3-carbonitrila A um tubo de microonda foram adicionados 4-metóxi-6- (oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila (20,0 mg, 0,114 mmol), 5-[1-hidróxi-2- (piperazin-1-il)etil]-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona (37,6 mg, 0,136 mmol, como uma base livre) e EtOH (3,0 ml). A mistura foi aquecida no microonda —por30minal150ºC.O solvente foi evaporado e o produto bruto foi purificado pela cromatografia de HPLC de fase reversa direcionada à massa para dar o composto do título como uma espuma branca amarelada (sal de TFA). Além disso, o produto foi tratado com HCI 1 M éter dietílico (1 ml) para dar o final produto como um sal de HCI.
'H RMN (500 MHz, DMSO-ds), ô 8,79 (s, 1 H), 7,74 (m, 2H), 7,39 (s, IND), 5,41 (dd, J = 5,9 Hz, J=5,6 Hz, 1 HD), 5,38 (bs, 1 HD), 4,99 (bs, 1 H), 4,03 (s, 3H), 3,99-3,42 (m, 8H), 3,05-2,99 (m, 4H), 2,31 (s, 3HD; LC/MS: (1E, m/z) [([M + 1)]* =453,11. EXEMPLOS 52A e 52B b o
O O Me ÔH Fã O a O oH W = OMe * “Os. 6-[(1S)-1-hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-iDetil]piperazin-1-il etil|-4-metoxipiridino-3-carbonitrila e 6-[(1R)-1-hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo-1,3-diidro-2- benzofuran-5-iDetillpiperazin-1-il |etil | -4-metoxipiridino-3-carbonitrila 6-[(1S)-1-Hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il jetil]|-4-metoxipiridino-3- carbonitrila e 6-[(1R)-1-hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il Yetil | -4-metóxi-piridino-3- carbonitrila foram cada um individualmente preparados em uma maneira 15" análoga ao EXEMPLO 2C a partir de 4-metil-5-[(2R)-oxiran-2-11]-2- benzofurano-1(3H)-ona e os isômeros A ou B de 6-[1-hidróxi-2-(piperazin-l- il)etil|-4-metoxipiridino-3-carbonitrila. 52A: LC/MS: (IE, m/2) [([M + 1)]* = 453 52B: LC/MS: (IE, m/2) [([M + 1)]* = 453 EXEMPLO 53 o o o
5-(14-[(28)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)- etillpiperazin-1-il acetil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução de cloreto de oxalila (71 ul, 0,82 mmol) em DCM (30 ml) foi gotejado DMSO (120 ul, 1,6 mmol) a-78ºC. Depois de agitara mistura por 10 minutos, uma solução em DCM de 5,5 -(piperazino- 1,4-diilbis[(1S)-1-hidroxietano-2,1-diil Ibis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) (380 mg, 0,82 mmol) foi adicionado na reação. A reação foi agitada por mais 20 minutos antes que TEA (570 ul, 4,1 mmoles) fosse adicionado à mistura de reação. A reação foi depois deixada aquecer até a temperatura ambiente lentamente. A análise de TLC mostrou duas novas manchas logo acima da SM. A análise de LC sugeriu a formação da mono-cetona bem como da di- cetona. A reação foi diluída com DCM, lavada com água, secada em sulfato de sódio e purificada pela cromatografia cintilante. O produto do título foi coletado depois da remoção do solvente. 'H RMN (500 MHz, CDCI3) é ppm 7,83 (d J=8 Hz, 1 H), 7,79-7,76 (m, 3H), 5,31 (s, 2H), 5,24 (s, 2H), 5,08 (dd, J= 11,25 Hz, 1 HD, 3,76 (s, 2H), 2,86 (amplo, 2H), 2,70 (amplo, 4H), 2,62-2,51 (m, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,45-2,39 (m, 1H), 2,27 (s, 3H); LCMS M + 1 (calc. 465,19, encontrado 465,35). EXEMPLO 54 O.
OH O 5-(1-hidróxi-2-[4-[(28)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo- furano-5-iDetilpiperazin-1-il)-1-metiletil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona A uma solução de 5-((4-[(2S)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il )acetil)-4-metil-2-benzo-furano- 1(3H)-ona (50 mg, 0,108 mmol) em THF (2 ml) em um frasco de 25 ml foi adicionado metil lítio (2 mg, 0,1 mmol) a 0ºC. A mistura de reação foi agitada por 20 min.; a análise de LC indicou a formação do produto desejado. À solução foi concentrada até a secura, dissolvida em MeOH (3,5 ml), filtrada e foi depois purificada pela HPLC direcionada à massa para dar 5-(1-hidróxi-2- (4-[(2S8)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- il)etilipiperazin-1-il]-1-metiletil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona.
LC-MS (IE, m/z): 481 [M + 1]*. EXEMPLO 55 no HS “DS DAS NC o 5-fluoro-1-([4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofuran-5- iDetil|piperazin-1-1l Ymetil)-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila 5-Fluoro-1-(piperazin-1-ilmetil)-2,3-diidro-1 H-indeno-4- — carbonitrila (60 mg, 0,23 mmol), 4-metil-5-oxiran-2-11-2-benzofuran-1(3H)- ona (88 mg, 0,46 mmol), foram adicionados a um tubo de microonda de 5 ml que contém uma barra agitadora; à mistura foi adicionado EtOH (2,5 ml). O tubo foi tampado, desgaseificado e purgado com N>. O mesmo foi depois colocado em um reator de microonda e aquecido a 120ºC por | hora; a LC indicou a formação de algum produto desejado.
O tubo foi mais uma vez colocado em um reator de microonda e aquecida mais uma vez a 150ºC por 30 min; a LC indicou a formação de mais produto.
A solução foi concentrada até a secura, re-dissolvido em DCM (20 ml) e foi depois absorvida em gel de sílica.
A mesma foi depois carregada em uma coluna de sílica para a — separação com o sistema de solvente de (10 % de MeOH em DCM), para dar 5-fluoro-1-([4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5- il)etil piperazin-1-11) metil)-2,3-diidro-1 H-indeno-4-carbonitrila.
LC-MS (IE, m/z): 450 [M + 1]*.
EXEMPLO 56 o OMe Me Me Me 4-(2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano-5-iDetil]- piperazin-1-il |-1,1-dimetiletil)-2-(metilóxi)benzonitrila A 4-(2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo- furano-S-il)etillpiperazin-1-il)-1,1-dimetiletil)-2-(metilóxi)benzonitrila foi preparada em uma maneira similar como descrita para a preparação dos EXEMPLO 38. LC/MS (M + 1)* = 464,56. EXEMPLO 57A e 57B
O
DD Me ÔH Ss |> S. 6-(1-Hidróxi-2-[4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo- —furano-S-iDetillpiperazin-1-il |etil)piridino-3-carbonitrila A um tubo de microonda foram adicionados isômero B de 6- (oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila (330 mg, 2,26 mmoles), 5-[(1R)-1-hidróxi- 2-(piperazin-1-il)etil|-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona — (686 mg, 2,48 mmoles, como uma base livre) e EtOH (7,0 ml). A mistura foi aquecida no —microonda por 60 min a 140ºC. O solvente foi evaporado e o produto bruto foi purificado pela MPLC em gel de sílica (0 — 10 % de CH;CH::MeOH) para fornecer 6-(1-Hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro- 2-benzofurano-5-il)etil |piperazin-1-il jetil)-piridino-3-carbonitrila como um isômero simples. Além disso, o produto foi tratado com HCI 1 M éter dietílico — para dar o produto final como um sal de HCl. 'H RMN (500 MHz, DMSO- ds), 6 8,92 (s, 1 H), 8,28 (dd, 1,9 Hz, J=2,0 Hz, 1 H), 7,68-7,63 (m, 3H), 5,48 (d, J = 4,8 Hz, 1 H), 5,37 (d, J = 2,2 Hz, 2H), 5,20 (d, J =3,9 Hz, 1 H), 5,03
(m, 1 HD), 4,78 (m, 1 H), 2,64 (dd, J=4,1, 1 H),2,55-2,41 (m, 8H), 2,33 (dd, 3 =3,7 Hz, 1 H), 2,24 (s, 3H); LC/MS: (IE, m/z) [(M + 1)]* = 423,04 (57A). O isômero que corresponde à inversão do estereocentro da —hidroxila benzílica também foi preparado em uma maneira similar paryindo com o isômero A de 6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila (57B): LC/MS: [(M + 1)]*=423. EXEMPLOS 58A e 58B Oo Do Pl Me Di 6-(1-Hidróxi-2-[4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo- —furan-S-iDetillpiperazin-1-il Yetil)-4-metilpiridino-3-carbonitrila A um tubo de microonda foram adicionados 4-metil-6-(oxiran- 2-il)piridino-3-carbonitrila (40 mg, 0,25 mmol), 5-[(1R)-l-hidróxi-2- (piperazin-1-il)etil]-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona (69 mg, 0,25 mmol, como uma base livre) e EtOH (3,0 ml). A mistura foi aquecida no microonda por60mina l140ºC.O solvente foi evaporado e o produto bruto foi purificado pela SFC quiral prep (30 % de MeOH (0,1 % de DEA)/CO, na coluna OJ) para fornecer 6-(1-hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro- 2-benzofurano-5-il)etil |piperazin-1-il jetil)-4-metilpiridino-3-carbonitrila como isômeros individuais.
Além disso, os produtos foram tratados com HCl 1M éter dietílico para dar os produtos finais como sais de HCI.
Isômero A (584): LC/MS: (IE, m/z) [([M + 1)]* = 437,07 (Pico 1 de HPLC quiral). Isômero B (58B): LC/MS: (IE, m/z) [[M +D]J* = 437,07 (Pico 2 de HPLC quiral).
EXEMPLO 59 o Do Me > SS 6-(1-Hidróxi-2-[4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo- furan-5-iDetil Ipiperazin-1-il etil)-S-metilpiridino-3-carbonitrila 6-(1-Hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-il Jetil)-S-metilpiridino-3- carbonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 58 partindo de 5-[(1R)-1l-hidróxi-2-(piperazin-l- il)etil|-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona e 5-metil-6-(oxiran-2-il)-piridino-3- carbonitrila.
Isômero A: LC/MS: (IE, m/z) [([M + 1)]* = 437,06. Isômero B: LC/MS: (IE, m/z) [([M + 1)]* = 437,06. EXEMPLOS 60A e 60B Oo
DD Me ÔH a |> S. 6-[1-Hidróxi-2-[4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-3H-isobenzofurano-5- iDetil|piperazin-1-ilJetil]-2-metil-piridino-3-carbonitrila 6-[1-Hidróxi-2-[4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-3H-iso- benzofurano-5-il)etil |piperazin-1-ilJetil]-2-metil-piridino-3-carbonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 58 partindo de 5-[(1R)-1-hidróxi-2-(piperazin-1-il)etil|-4-metil-2- benzofuran-1(3H)-ona e 2-metil-6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila. —Isômero A (604): LC/MS: (IE, m/z) [([M + 1)]* = 437,08 (Pico 1 da HPLC quiral). Isômero B (60B): LC/MS: (IE, m/z) [[M + 1)]* = 437,07 (Pico 2 da HPLC quiral). EXEMPLO 61 Oo
DD Me ÔH Ss Cc CÁ Sy 5-Cloro-6-[1-hidróxi-2-[4-[(2R)-2-hidróxi-2-[4-metil-1-0xo0-3H- —isobenzofurano-5-il)etillpiperazin-1-ilJetil !piridino-3-carbonitrila 5-Cloro-6-[1-hidróxi-2-[4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0- 3H-isobenzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-ilJetil Ipiridino-3-carbonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 58 partindo de 5-[(1R)-1-hidróxi-2-(piperazin-1-il)etil|-4-metil-2- —benzofurano-1(3H)-ona e 5-cloro-6-(oxiran-2-il)piridino-3-carbonitrila. Isômero A: LC/MS: (IE, m/z) [([M + 1)]* = 457,17. Isômero B: LC/MS: (IE, m/z) [([M + 1)]* = 457,15. EXEMPLO 62 Oo
QD Me OH NÃ
SN 4-[1-Hidróxi-2-[4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-o0xo-3H-isobenzofurano-5- iDetillpiperazin-1-ilJetil lbenzonitrila 4-[1-Hidróxi-2-[4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-o0x0-3H-isobenzo- furano-5-il)etil Ipiperazin-1-il Jetil lbenzonitrila foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese dos EXEMPLOS 2C e 28 a 29 partindo de 5-[(1R)-1-hidróxi-2-(piperazin-1-il)etil]|-4-metil-2-benzo-furano-1(3H)-ona —ed4-(oxiran-2-il)benzonitrila.
LC/MS: (IE, m/z) [(M + 1)]* = 422,07. EXEMPLO 63 o
DD F OH Ho o Oo 5,5 -[piperazino-1 4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil) |bis(4-fluoro-2- benzofurano-1(3H)-ona) 5,5" -[piperazino-1 ,4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil)]bis(4- fluoro-2-benzofurano-1(3H)-ona) foi preparado em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 2 partindo de 4-fluoro-5- oxiranil-3H-isobenzofurano-l-ona e piperazina. Os isômeros do produto foram obtidos via resolução SFC (Coluna: Quiralcel OJ = H 100*4,6 mm D.I., 5 um; Fase móvel: 40 % de iso-propanol (0,05 % de DEA) em CO;; Taxa de fluxo: 4,5 ml/min; Comprimento de onda: 220 nm). Isômero A: 'H RMN (400 MHz, MeOD) 6 ppm 7,83-7,86 (m, 2H), 7,74 (d, J =8,0 Hz, 2H), 5,42-5,46 (m, 6H), 3,03-3,35 (m, 12H). Isômero B: 'H RMN (400 MHz, MeOD) ô ppm 7,86-7,89 (m, 15º 2H),7,77(d,J=8,0 Hz, 2H), 5,45-5,48 (m, 6H), 3,13-3,33 (m, 12H). Isômero C: 'H RMN (400 MHz, MeOD) ô ppm 7,86-7,89 (m, 2H), 7,77 (d, J=8,0 Hz, 2H), 5,43-5,48 (m, 6H), 3,05-3,26 (m, 12H). EXEMPLO 64 Oo F OH Po
O É O
5,5' -[piperazino-1 ,4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil)]bis(7-fluoro-4-metil-2- benzofuran-1(3H)-ona) 5,5-[piperazino-] A4-diilbis(1-hidroxietano-2,1-diil)]bis(7- fluoro-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do EXEMPLO 2 partindo de 7-Fluoro-4- metil-5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona e piperazina. 'H RMN (400 MHz, MeOD) ô ppm 7,47 (d, J = 10,3 Hz, 1 H), 5,34-5,44 (m, 6H), 3,51-3,58 (m, 8H), 3,17-3,19 (m, 4H), 2,31 (s, 6H). EXEMPLOS 65A e 65B o
TO o Oo 5-[IR)-1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(6-metil-1-0x0-1,3-diidro-2-benzo- furano-5-iDetil piperazin-1-il )etil --4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-[(1R)-1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(6-metil-1-oxo-1,3-diidro- 2-benzofurano-5-il)etil piperazin-1-11 jetil]-4-metil-2-benzo-furano-1(3H)-ona foi preparada em uma maneira similar àquela descrita para a síntese do 15º EXEMPLO 58 partindo de 5-[(1R)-1-hidróxi-2-(piperazin-1-il)etil]|-4-metil-2- benzofurano-1(3H)-ona e isômero B de 6-metil-5-oxiran-2-il-2-benzofuran- 1(3H)-ona (65B). 'H RMN 500 MHz, DMSO) ô 7,64-7,76 (m, 4H), 5,36-5,43 (m, 4H), 2,48-2,51 (m, 16H) 10H), 2,43 (s, 3H), 2,29 (s, 3H); LC/MS: [(M + 1DJ'=467;tk=1,99 min. O produto obtido a partir do isômero À de 6-metil-5-oxiran-2- il-2-benzofurano-1(3H)-ona foi também preparada (65A): LC/MS: [(M + DJ* = 467.
EXEMPLO 66 o o 5-(2-[4-[2-(2,1,3-benzoxadiazol-5-iDetil Ipiperazin-1-11)-1-hidroxietil)-2- benzofurano-1(3H)-ona 5-(2-([4-[2-(2,1,3-benzoxadiazol-5-i1)etil Jpiperazin-1-il)-1- — hidroxietil)-?-benzofuran-1(3H)-ona foi preparada em uma maneira similar como para a síntese descrita no EXEMPLO 12 partindo de 5-[2-(piperazin-1- iDetil]-2,1,3-benzoxadiazol e 5-oxiran-2-il-2-benzofurano-1(3H)-ona. LC/MS: [(M + 1)]*=409.
EXEMPLO 67 o
O 5-[1R)-2-(4-[2-(2,1,3-benzoxadiazol-5-iDetil piperazin-1-il )-1-hidroxietil]- 4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona 5-[(1R)-2-(4-[2-(2,1,3-benzoxadiazol-5-il)etil |piperazin-1-il)- 1-hidroxietil]-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona foi preparada em uma maneira similar como para a síntese descrita no EXEMPLO 12 partindo de 5- [2-(piperazin-1-il)etil]|-2,1,3-benzoxadiazol e 4-metil-5-1(2R)-oxiran-2-11]-2- benzofurano-1(3H)-ona. LC/MS: [(M + 1)]* =423. EXEMPLO 68A e 68B
LA AA o Oo o o
5-[01R)-2-[4-[(28)-2-(2,1,3-benzoxadiazol-5-il)-2-hidroxietil piperazin-1-il)- 1-hidroxietil )|-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona e 5-[(1R)-2-(4-[2R)-2- (2,1,3-benzoxadiazol-5-i1)-2-hidroxietil piperazin-1-il )-1-hidroxietil]-4-metil- 2-benzofurano-1(3H)-ona Os compostos do título foram preparados como descrito para a síntese dos EXEMPLOS 57 e 58 partindo de 5-[(1R)-1-hidróxi-2-(piperazin- 1-i1)etil --4-metil-2-benzofurano-1(1H)-ona e 5-(oxiran-2-11)-2,1,3- benzoxadiazol. Os dois diastereômeros resultantes foram resolvidos pela SFC prep em coluna Quiralcel OJ 30 x 200 mm eluindo com 70 ml/min de 30 % de metanol (0,2 % de DEA)/CO, a 35ºC com pressão de 100 bar.
Os Isômeros A e B tiveram tempos de retenção de 7,07 e 8,24 respectivamente.
Isômero A-sal de TFA: 'H RMN (500 MHz, CDOD;): à ppm 7,99 (s, 1H), 7,95 (d, J =9,3 Hz, 1 H), 7,84 (d, J =8 Hz, 1 H), 7,76 (d J=8 Hz,1H),7,63 (dd, J=9,5 Hz, 1 H), 5,52 (dd, J = 9,75 Hz, 3,7 Hz, 1 H), 5,38 (d, 1,5 Hz, 2H), 5,24 (dd, J = 9,5 Hz, 3,05 Hz, 1 H) 3,68 (b, 4H), 3,63 (b, 4H), 3,27-3,41 (m, 4H), 24 (s, 3H). LC-MS: M + 1 = 439.
Isômero B: 'H RMN (500 MHz, DMSO): ô ppm 7,96 (d, J = 9,3 Hz, 1 HD), 7,86 (d, J = 0,8 Hz, 1 H), 7,64 (q, 2H), 7,60 (dd, J =7,75 Hz, 0,75Hz,1H),5,35(d,J=4Hz,2H),5,01-5,03 (m, 1 HD), 4,79-4,82 (m, 1 HD), 2,31-2,55 (m, 12H), 2,22 (s, 3H). LC-MS: M + | = 439.
A seguinte tabela contém exemplos adicionais que foram preparados de uma maneira similar àquela que foi descrita nos exemplos acima usando intermediários que são conhecidos ou para os quais as sínteses — foram descritas acima. A estereoquímica é como mostrada onde indicada. Em alguns casos os produtos foram preparados como misturas de isômeros, que em alguns casos foram separados.
TABELA | EXEMPLO 69 o LC/MS: [(M+1)]* = O 481. Y NO) OH
OH LON o Oo EXEMPLO 70 Isômero À 9 LC/MS: [(M+1)]* = 481 7 o Isômero B Y N q OH
OH LON o (9) EXEMPLO 72 Isômero À 9 LC/MS: [(M+1)]* = 7 o 467. Isômero B N q OH
OH LON o
O EXEMPLO 74 o LC/MS: [(M+1)]* = o 471.
N OH F OH So o Oo EXEMPLO 75
O LC/MS: [(M+1)]* = O 471.
N OH
F OH OS o
O
EXEMPLO 76 Isômero À o TI o LC/MS: [(M+1)]* = 519 Isômero B N q OH ómr ln o o EXEMPLO 78 o LC/MS: [(M+1)]* = 495 o
NO OH
OH LON o
O EXEMPLO 79 Isômero À o LC/MS: [(M+1)]* = 495 80 o Isômero B N q OH
OH CL N o o EXEMPLO 81 o F LC/MS: [(M+1)]* = 475 o
NO OH OH ( Nn o o) EXEMPLO 82 o LC/MS: [(M+1)]* = O 483.
NOS OH OH LL n o o o EXEMPLO 83 Isômero À o LC/MS: [(M+1)]* = 84 Oo 493. Isômero B Y NO OH ôm (n o o
EXEMPLO 85 o LC/MS: [(M+1)]* = O 453.
NOW OH oH L n N
SS
SN Ox EXEMPLO 86 o LC/MS: [(M+1)]* = 479
O
NOW OH oH L n N
SS
SN Ox EXEMPLO 87 Isômero À o LC/MS: [(M+1)]* = 88 O 493. Isômero B y N q OH
OH LON Oo Oo Vários ensaios podem ser usados para medir a inibição funcional do canal ROMK pelos compostos da presente invenção. Um ensaio primário que pode ser usado é um ensaio do efluxo de 86Rb+ funcional que mede a capacidade de ROMK para permear *ºRb*, na ausência ou presença de composto de teste. Sob as condições de controle, as células carregadas com S6Rb* e incubadas em meio isento de Rb+ demonstram um efluxo dependente de tempo do isótopo, a taxa da qual depende vários canais funcionais. Quando as células são incubadas na presença de um inibidor de canal, o efluxo de S6Rb* é impedido em uma maneira dependente da concentração e valores ICso da inibição pelos compostos podem ser acuradamente determinados. Este ensaio foi estabelecido com linhagens de célula que expressam canais ROMK de ser humano, rato ou cão e pode operar no formato de 96 ou 384 reservatórios. De maneira importante, os ensaios de efluxo de *Rb* de ser humano, rato e cão podem ser realizados na presença de até 100 % de soro permitindo, portanto, uma estimativa precisa do efeito da proteína que se liga na atividade inibidora dos compostos de interesse. Um outro ensaio funcional de ROMK faz uso da capacidade do tálio para permear através de canais ROMK abertos e aumentar a fluorescência de um corante anteriormente carregado nas células. Sob condições de controle, as células carregadas com corante e expostas ao meio que contém tálio demonstram um aumento dependente de tempo na fluorescência, a taxa da qual depende vários canais funcionais. Quando as células são incubadas na presença de um inibidor de canal, o aumento na fluorescência é atenuado em uma maneira dependente da concentração e os valores ICs de inibição pelos compostos podem ser — precisamente determinados. Este ensaio foi estabelecido com linhagens de célula que expressam canais ROMK de ser humano ou rato e opera em formato de 384 reservatórios. Um outro ensaio para a avaliação dos compostos da presente invenção e para a avaliação do mecanismo de ação dos compostos da Fórmula I conta com a medição da corrente elétrica que é gerada conforme o potássio permeia através do canal. Para estes experimentos eletrofisiológicos, três plataformas diferentes, IonWorks, QPatch, ou patch clamp manual, são usados, dependendo do protocolo experimental sob consideração. lonWorks opera em um formato de 384 reservatórios e permite a determinação precisa dos valores de IC,” para os inibidores. Os exemplos — dos compostos da presente invenção (listados acima) todos tiveram potências de pelo menos 1 uM ou mais baixa em um ou mais dos três ensaios aqui descritos.
Ensaio de Efluxo de *Rb* Condições de Cultura de Célula- Células CHO-DHFR-que expressam estavelmente hoMK1 (K;1,1) são cultivadas a 37ºC em um incubador umidificador a 10 % de CO, em Meio de Dulbecco Modificado de Iscove — (Gibco — 12440) —suplementado com Suplemento HT, Penicilina/Estreptomicina/Glutamina, G418 (500 ug/ml) e 10 % de FBS. As células são semeadas em Microplacas Opacas Brancas Packard CulturPlate
Tratadas Estéreis e para Cultura de Tecido em uma concentração de 5,0E5- 7,0E5 células/ml-PerkinElmer 6005680 (96 reservatórios); Corning 3707 (384 reservatórios) em meio completo contendo 1,5 uCi/ml de Rubídio-86. As células são incubadas em incubador a 37ºC-10 % de CO, durante a noite. No —diado experimento, o meio é removido e as células são lavadas com tampão de ensaio com baixo K. O efluxo de *Rb* é iniciado depois da adição de tampão de ensaio + composto de teste seguido por 35 min de incubação na temperatura ambiente. O componente sensível a ROMK de efluxo é definido na presença de 10 mM de BaCb. O tampão de ensaio é removido e transferido para uma placa e as células são solubilizadas na presença de SDS. A radioatividade associada com o ensaio e a placa de célula é determinada. Protocolo em Etapas
1. Remover o meio de célula e lavar as células com tampão de ensaio com baixo K (126,9 mM de NaCl, 4,6 mM de KCl, 2 mM de CaCLb,, 1 mM de MgCb, 10 mM de Hepes/NaOH; pH 7,4) * 200 ul para placa de 96 reservatórios; 70 ul para placa de 384 reservatórios
2. Adicionar tampão de ensaio (121,5 mM de NaCl, 10 mM de KCl, 2 mM de CaCL, 1 MM de MgCbh, 10 mM de Hepes/NaOH; pH 7,4) + — composto de teste para as células * 100 ul para a placa de 96 reservatórios; 50 ul para a placa de 384 reservatórios
3. Incubar na temperatura ambiente (22 a 24ºC) por 35 min
4. Remover o tampão de ensaio adicioná-lo a uma placa de 96 — ou384 reservatórios que contenha Microscint-20 * Placa de 96 reservatórios: 100 ul de tampão, 170 ul de MicroScint 20 (para TopCount) * Placa de 384 reservatórios: 20 ul de tampão, 50 ul de Optiphiase (para MicroLux)
5. Remover completamente o tampão de ensaio remanescente da placa de célula
6. Solubilizar as células com 1 % de SDS; depois adicionar MicroScint ou Optiphase * placa de 96 reservatórios: 30 ul de SDS, 170 ul de MicroScint 20 (para TopCount) * placa de 384 reservatórios: 20 ul de SDS, 50 ul de Optiphiase (para MicroLux)
7. Selar tanto a placa de célula quanto a de sobrenadante e — contar Cálculo de Dados- A radioatividade associada com a placa de ensaio é normalizada para a radioatividade total (placas de ensaio + célula) para fornecer % de efluxo, sob cada condição. A % de efluxo na presença de 10 mM de BaCl, é subtraída de cada ponto experimental para
15. fornecer o componente sensível a ROMK de efluxo de *Rb*. Na ausência de composto de teste, este número corresponde a 100 % de efluxo de controle. Os valores ICs,º representam a concentração do composto que inibe 50 % do efluxo de ROMK. Normalmente, um composto de controle é incluído para confirmar que o ensaio esteja dando resultados — compatíveis comparados com as medições anteriores, embora o controle não seja requerido para a obtenção dos resultados para os compostos de teste. O controle pode ser qualquer composto da Fórmula I da presente invenção, preferivelmente com uma potência de ICsº, de menos do que 1 UM neste ensaio. Alternativamente, o controle pode ser um outro composto (fora do escopo da Fórmula L) que tenha uma potência de ICs, neste ensaio de menos do que 1 uM. Os exemplos representativos de dados coletados para os compostos da presente invenção usando o Ensaio de Efluxo de *Rb* são mostrados na Tabela 2 abaixo.
TABELA 2 Ensaio do Fluxo de Tálio Condições de Cultura de Célula- As células HEK293 que estavelmente expressam hoMK (hK;i1,1) são cultivadas a 37ºC em um incubador umidificado a 10 % de CO, em meio de cultivo completo: Meio de Eagle Modificado de Dulbecco suplementado com aminoácidos não essenciais, Penicilina/Estreptomicina/Glutamina, G418 e FBS.
Em > 80 % de confluência, aspirar o meio do frasco e enxaguar com 10 ml de PBS isento de Cálcio/Magnésio.
Adicionar 5 ml de 1X tripsina (preparada em PBS isento de Ca/Mg) ao frasco T-225 e retornar o frasco para o incubador a 37ºC/CO,; por 2 a 3 minutos.
Para deslocar a célula, bater suavemente a lateral do frasco com sua mão.
Triturar as células completamente e depois transferir as células para 25 ml de meio completo.
Centrifugar a 1.500 rpm por 6 min seguido por recolocação em suspensão em meio de crescimento completo e determinar a concentração de célula.
Para a re-semeadura típica, células 4E6/frasco T-225 atingirão > 80 % de confluência em 4 dias.
Sob condições de cultivo ideais e práticas de cultura de tecido apropriadas, esta linhagem de célula é estável por 40 a 45 passagens.
Componentes do Kit FluxOR (Invitrogen F10017) * Reagente FluxORº (Componente A) * Tampão de Ensaio FIuxORº (Componente B)-I0X Concentrado * “Concentrado PowerLoadº (Componente C)-100X Concentrado
* Probenecid (Componente D)-A amostra liofilizada é mantida a-20ºC.
Solúvel em água, 100X depois da solubilização em 1 ml de água.
Armazenar a 4ºC. * Tampão isento de Cloreto FluxORº (Componente E)-SX Concentrado * Sulfato de potássio (K2SO,s) Concentrado (Componente F)- 125 mM em água.
Armazenar a 4ºC. * Sulfato de tálio (TISO,) Concentrado (Componente G)-50 mM em água.
Armazenar a 4ºC * DMSO (sulfóxido de dimetila, Componente H)-1 ml (100 %) Preparação de Reagente- Soluções de Trabalho FluxOR * 1000X Reagente FiuxORº: Reconstituir um frasco de componente A em 100 ul de DMSO; Misturar bem; Armazenar alíquotas de 10u41a20ºC * Tampão de Ensaio 1X FluxORº: Diluir o Componente B 10 vezes com água; Ajustar o pH até 7,4 com Hepes/NaOH; Filtrar e armazenar a 4ºC * Probenecid/Tampão de Ensaio: 100 ml de Tampão de Ensaio 1X FluxORº; 1 ml de componente D reconstituído; Armazenar a 4ºC * Tampão de Carga (por microplaca): 10 ul de 1000X Reagente FiuxORº; 100 ul do Componente C; 10 ml de Probenecid/Tampão de Ensaio * Tampão de Composto (por microplaca): 20 ml de Probenecid/Tampão de Ensaio; 0,3 mM de ouabaína (10 mM de ouabaína em água podem ser armazenados em garrafa ambar/folha de alumínio na temperatura ambiente); Composto de Teste * 1X Tampão isento de Cloreto FluxORº: Preparar 1X solução de trabalho em água.
Pode ser armazenado na temperatura ambiente
* Tampão Estimulante (preparado a 5X concentração final em 1X Tampão isento de cloreto FluxORº): 7,5 mM de sulfato de tálio e 0,75 mM de sulfato de potássio (para dar uma concentração de ensaio final de 3 mM de Tálio/0,3 mM de Potássio). Armazenar a 4ºC quando não em uso. Se mantida estéril, esta solução é boa durante meses.
Protocolo de ensaio-O ensaio de fluxo de tálio funcional em canal de ROMK é realizado em 384 reservatórios, usando o instrumento FLIPR-Tetra. As células HEK-hKirl,1 são semeadas em microplacas de Poli- D-Lisina e mantidas em um incubador a 37ºC-10 % de CO, durante a noite.
No dia do experimento, o meio de cultivo é recolocado com o tampão de carga de reagente FiuxORº e incubados, protegidos da luz, na temperatura ambiente (23 a 25ºC) por 90 min. O tampão de carga é recolocado com Tampão de Ensaio + composto de teste seguido por 30 min de incubação na temperatura ambiente, onde o estimulante de Tálio/Potássio é adicionado à microplaca.
Protocolo em Etapas
1. Semear as células HEK-hKirll (50 ul a 20.000 células/reservatório) em Microplacas revestidas com PDL de 384 reservatórios
2. Permitir que as células adiram durante a noite em incubador a 37ºC/10 % de CO, umidificado
3. Remover completamente o meio de cultivo de célula da microplaca e substituir com 25 ul de tampão de carga
4. Incubar a Microplaca na temperatura ambiente, protegida da —luz,por90 min
5. Remover o tampão de carga e substituir com 25 ul de 1x Tampão de Ensaio + composto de teste.
6. Incubar a microplaca na temperatura ambiente, protegida da luz, por 30 min
7. No FLIPR-Tetra 384: Adicionar solução de estimulante (Tálio/Potássio) à microplaca e monitorar a fluorescência. Excitação = 400 nm, Emissão = 460 & 580 nm. Coletar os dados por 10 min.
Cálculo dos Dados-A intensidade da fluorescência de reservatórios que contém 3 uM de um inibidor de ROMK de controle Padrão da presente invenção é usado para definir o componente sensível em ROMK do fluxo de tálio. A fluorescência na presença de compostos de teste é normalizada aos valores de controle para fornecer % de mudança de fluorescência. Os valores ICsº representam a concentração do composto que inibe 50 % do sinal de fluxo de tálio em ROMK.
Padrão de Ensaio- Normalmente, um composto de controle é incluído para confirmar que o ensaio está dando resultados compatíveis comparados com as medições anteriores, embora o controle não seja requerido para se obter os resultados para os compostos de teste. O controle pode ser qualquer composto da Fórmula I da presente invenção, preferivelmente com uma potência de IC; de menos do que 1 uM neste ensaio. Alternativamente, o controle pode ser um outro composto (fora do escopo da Fórmula 1) que tenha uma potência ICs,o neste ensaio de menos do que | uM.
Os exemplos representativos dos exemplos de dados coletados para os compostos da presente invenção usando o Ensaio de Fluxo de Tálio são mostrados na Tabela 3 abaixo.
TABELA 3
Ensaio de Eletrofisiologia O bloco de correntes de Kirl,1 (ROMKI1) foi examinado pelo clampe de voltagem de célula inteira (Hamill er al.
Pfluegers Archives 391: 85-100 (1981)) usando a plataforma de eletrofisiologia automatizada —IonWorks Quattro (Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Células do ovário do hamster chinês que expressam estavelmente canais Kirl,1 foram mantidas em frascos T-75 em meio de cultura de célula em um incubador a 10 % de CO, umidificado a 37ºC.
Antes de um experimento, a expressão de Kirl,1 foi induzida pela incubação durante a noite com | mM de butirato de sódio.
No dia do experimento, as células foram dissociadas com 2,5 ml de Versene (Invitrogen 15040-066) por aproximadamente 6 min a 37ºC e colocados em suspensão em 10 ml de solução de banho que contém (em mM): 150 de NaCl, 10 de KCl, 2,7 de CaCbh,, 0,5 de MgCb, 5 de HEPES, pH 7,4. Depois da centrifugação, a pelota de célula foi recolocada em suspensão em aproximadamente 4,0 ml de solução de banho e colocada no instrumento IonWorks.
A solução intracelular consistiu (em mM) de: 80 de gliconato de K, 40 de KCl, 20 de KF, 3,2 de MgCbh, 3 de EGTA, 5 de Hepes, pH 7,4. O acesso elétrico ao citoplasma foi obtido pela perfuração em 0,13 mg/ml de anfotericina B por 4 min.
A anfotericina B (Sigma A-4888) foi preparada — como uma solução a 40 mg/ml em DMSO.
Os protocolos de voltagem e os registros de corrente foram realizados usando o sistema de software/hardware HT da IonWorks.
As correntes foram amostradas a 1 kHz.
Nenhuma correção para os potenciais de junção de líquido foi usado.
O pulso de teste, consistindo de uma etapa de 100 ms até O mV a partir de um potencial de — contenção de -70 mV, seguido por uma elevação de voltagem de 100 ms de - 70 mV para +70 mV, foi aplicado antes e depois de um período de incubação com 6 mM de composto.
Os compostos de teste foram preparados pela diluição em soluções de estoque em DMSO na solução de banho em 3x a concentração final e colocado no instrumento em placas de polipropileno de
96 reservatórios. As amplitudes de corrente foram medidas usando o software da IonWorks. Para avaliar a potência do composto, o bloco fracional durante a etapa de voltagem até O mV foi calculado em Microsoft Excel (Microsoft, Redmond, CA) e as curvas de resposta de dose foram ajustadas com Igor Pro
4.0 (WaveMetrics, Lake Oswego, OR). Normalmente, um composto de controle é incluído para confirmar que o ensaio está dando resultados compatíveis comparados com as medições anteriores, embora o controle não seja requerido para se obter os resultados para os compostos de teste. O controle pode ser qualquer composto da Fórmula I da presente invenção, preferivelmente com uma potência IC; de menos do que 1 uM neste ensaio. Alternativamente, o controle pode ser um outro composto (fora do escopo da Fórmula 1) que tenha uma potência ICs, neste ensaio de menos do que 1 uM.
Os exemplos representativos dos dados coletados para os compostos da presente invenção usando as titulações do ensaio de eletrofisiologia de ROMK são mostrados na Tabela 4 abaixo.
TABELA 4 Ensaio de Diurese de Rato Protocolos experimentais para avaliar a eficácia diurética dos compostos da presente invenção em ratos Sprague-Dawley (SD):
1. Ratos SD machos adultos são aclimatizados ao alojamento único em gaiolas de metabolismo por pelo menos três (3) dias antes do seu uso na triagem de diurese. Os ratos tiveram acesso at lib a alimento e água.
2. Para a maioria dos estudos o procedimento será remover os silos de alimento e as garrafas de água das gaiolas metabólicas 1 a 2 h antes — do início da triagem de diurese. Os ratos serão dosados com composto (ver abaixo) e 30 minutos mais tarde dosados com água ou solução salina oralmente a 18 mg/kg para induzir o esvaziamento e colocados nas gaiolas metabólicas onde a urina é coletada nas 4 horas seguintes.
Para os estudos selecionados um jejum durante a noite pode ser necessário se cargas de solução salina/água maiores do que aquelas descritas acima são requeridas. Para estes estudos uma dose de solução salina ou água de até 27 ml/kg será dada.
3. A seguir do período de jejum (usualmente | a 2 horas mas algumas vezes durante a noite), os animais são removidos das gaiolas de metabolismo e temporariamente alojados em gaiolas caixa de sapato para a dosagem. O composto ou veículo são dosados em 70 % de PEG200 ou Imwitor:Tween (dependendo das propriedades físicas do composto) a 1 ml/Kg PO.
4. O período de tempo de 30 min entre a dosagem do composto e a carga de água/solução salina pode ser modificado dependendo da biosisponibilidade do composto que é testado.
5. A urina é coletada de cada animal por até 4 horas na temperatura ambiente.
6. O volume de urina coletado de cada animal é medido e registrado. A urina é centrifugada, aliquotada e congelada (-20ºC) até analisada.
7. Sangue (150 a 200 ul) pode ser obtido dos animais tratados pela sangria da veia jugular para os níveis de exposição do plasma ao composto.
Nota: Os ratos podem ser re-testados com compostos adicional depois de 1 semana de recuperação enquanto alojados em gaiolas de metabolismo. Dados = Média/sem. Os dados analisados pelo ANOVA de uma via e comparação de Dunnett de tratamentos para veículo. O diurético conhecido, hidroclorotiazida, dosado PO a 10 ou 25 mg/kg, pode ser usado como um controle positivo neste modelo.
Os Exemplos Nº 2A, 2C, 31 (mistura de 4 isômeros), 34, 52A, 52B, 57A e 65A foram testados usando o modelo de diurese de rato SD. Os resultados mostraram uma faixa de mudança de cerca de 2 a cerca de 9 vezes, isto é, aumento, no volume de urina em relação ao grupo de controle de veículo com base em uma dose PO de 1 mg/kg ou 3 mg/kg.
Ensaios de Rato Espontaneamente Hipertensivo (SH) O rato espontaneamente hipertensivo (SH) exibe hipertensão dependente da idade que não requer a administração de agentes exógenos para elevar a pressão sanguínea nem requer o uso de uma dieta de sal alto para elevar a pressão sanguínea. Assim lembra a hipertensão essencial humana e fornece uma oportunidade para avaliar a dependência da dose de novos agentes quanto a sua capacidade para diminuir a pressão sanguínea.
Protocolos experimentais para avaliar a eficácia na diminuição da pressão sanguínea dos compostos da presente invenção em ratos espontaneamente hipertensivos (SH): Ratos espontaneamente hipertensivos (SH, machos, 6 meses, Charles River) foram implantados com um dispositivo de telemetria DST TAI 1PA-CA40 (Data Sciences, Inc., St. Paul, MN) sob anestesia de isoflurano ou cetamina/metomidina. O cateter da unidade de telemetria foi inserido dentro da aorta descendente via a artéria femoral e o dispostivo de telemetria foi implantado subcutaneamente na área do flanco esquerdo. Os animais foram deixados recuperar da cirurgia por 14 dias antes do início de qualquer estudo. A pressão sanguínea, frequência cardíaca e sinais de atividade de ratos — consciente, movendo-se livremente foram registrados continuamente por 30 segundos a cada 10 minutos. HCTZ (25 mg/kg/dia, PO) foi incluído como um diurético de referência em uma dose dando aproximadamente a eficácia máxima em SH. A eficácia em diminuir a pressão sanguínea dos compostos da presente invenção comparada com o controle de veículo foi avaliada a seguir de uma única gavagem oral a cada dia para uma duração típica de três a catorze dias.
Os dados foram coletados como médias horárias e as mudanças na pressão sanguínea foram calculadas subtraindo-se os dados de linha de base do controle de veículo em uma base horária.
Os números de Exemplo 2A, 52A, 52B, 57A, 584, 58B, 60A, 65A e 65B foram avaliados nas doses PO, QD de 3 mg/kg ou 10 mg/kg e resultaram em reduções típicas na pressão sanguínea sistólica média diária (24 h) variando de 8 mmHg a 32 mmHg nos últimos dias dos estudos.
Embora a invenção tenha sido descrita com referência a certas de suas formas de realização particulares, numerosas formas de realização alternativas estarão evidentes para aqueles de habilidade na técnica a partir das divulgações aqui descritas.
A recitação ou descrição de um composto específico nas reivindicações (isto é, uma espécie) sem uma designação de estereoconfiguração específica, ou com uma tal designação para menos do que todos os centros quirais, é intencionado a abranger o racemato, misturas racêmicas, cada enantiômero individual, uma mistura diastereoisomérica e cada diastereômero individual do composto onde tais formas são possíveis devido à presença de um ou mais centros assimétricos.
Todas as patentes, pedidos de patente e publicações aqui citados são incorporados por referência
—nasuatotalidade.

Claims (36)

REIVINDICAÇÕES
1. Composto, caracterizado pelo fato de que tem a fórmula estrutural I: 6
EA Z'ToH=N N—CH-Z? NA 1 e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos em que:
FA No NS
NA o representa um anel heterocíclico selecionado do grupo que consiste de: R ss ss EK x
EA SN CARA N. N Les : Nos : Nos . We > Z' é selecionado do grupo que consiste de: 1 x XxX R xx” e qn !. x X' Rn “ Rã DA SS by & PA A IDO dida > o REA ea E * ; zo Bo REM da, FSEN Rº ztiv O x x Á s Rº E) NA > LA | * A RE RA o . Ro Rã zo dm q dio Re cz x x x x
N Oro OE Rº Aga Re eso E: ZE neo ESC 7 é selecionado do grupo que consiste de:
NY Rn x Nº ão vyR BA pas Rº, == % s — Roz ço 2 Ri O Yº Ye = .. x “OE % Re RE, e RI LP : Rº E nv O z2xi À zig ' Rê zasvil xx! RX
PA i dr f mi e z2-k pao 2x : X é selecionado do grupo que consiste de -H, -OH, -Oalquila C1-3, -F, oxo (=O), NH; e -CHs; Y é selecionado do grupo que consiste de -H, -OH, -Oalquila C1-3, -F, oxo (=O), NH, e -CH3; s X' e Y' são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H e -CH;s; X? e Yº são cada um -O-; contanto que quando X é oxo então X' é ausente e quando Y é oxo então Y' é ausente; e ainda contanto que quando nem Xº nem Y” estão presente, então pelo menos um de X e Y é selecionado do grupo que consiste de -OH, - Oalquila C1.3, -F e oxo; R' e R? são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H, -halo, -cicloalquila-C3-Cs, -OR”, -SRó, -SOR, - 15º SORÉ,-(CH)) OR e alquila C1-Cs opcionalmente substituído com 1-3 de -F; um de R**º e Rº* é selecionado do grupo que consiste de -CN e - NO, e o outro é R*; um de R** e R** é selecionado do grupo que consiste de -CN e -NO, e o outro é RE
| 3 Rº e Ró são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H, -alquila C1.6, cicloalquila C3-6, -CF;3, -CHF3, -CH2F e -CH,OH; R? é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH3, -CF;, - CHF,-CH2;,e-CHOH; Rº e Rº são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de (a)-H, (b) halo, (c)-alquila C1., opcionalmente substituído com 1a 3 de -F, (d)-cicloalquila C3-6, (e)-Oalquila C1.3 opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F, (N)-OR$, (g)-CO, alquila C1.s opcionalmente substituído com 1a3de-F,(h)(CH)nOR, (i)-SR$, ()-SORº, (1)-SO2R5, (1)- NHCOR e (m)- NHSO,R*; Rº e Rº são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de (a)-H, (b) halo, (c)-alquila Cr. opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F, (d)-cicloalquila C3-6, (e)-Oalquila C1.3 opcionalmente substituído comla3de-F, (0)-OR, (9)-CO, alquila C1.6 opcionalmente substituído com 1 a 3 de -E, ()-(CH2)nORS, (i)-SRº, G6)-SOR, (k)-SORº, (1)-NHCORS e (m)- NHSOR*; Rº e Rí são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de (a)-H, (b) halo, (c)-alquila C1-6 opcionalmente substituído com 1a3de-F,(d)-cicloalquila C3-6, (e)-Oalquila C1-3 opcionalmente substituído com | a 3 de -F, (9-OR*, (g8)-CO, alquila C1-6 opcionalmente substituído com 1 a 3 de -F, (h)-(CHo)nOR, (i)-SR, (G6)-SORS, (1)-SOR, (1) NHCOR" e (m)- NHSOR*; n é um número inteiro selecionado de 1, 2 e 3;e R$ é independentemente selecionado em cada ocorrência do grupo que consiste de -H, -cicloalquila C3.6 e -alquila C1.5 opcionalmente substituído com 1-3 de -F.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que pelo menos um de X, Y, X2 e Y2 está presente e quando nem
X2 nem Y2 estão presentes, então pelo menos um de X e Y é selecionado do grupo que consiste de -OH, -Oalguila Cr, -E 6 0X0.0 08 sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado : — pelofatodequeZl é selecionado do grupo que consiste de: x x x x R XxX Rn ao N x X' Rn SA fee no NÍ E RX | RE 4 CEA SO pa É RS = à ' zo ' al Rã , FSEI R zxbhv O x x - - RO ab Í e lo E is Ê * RIOS, RA ; Rêe Rã 2 Avi vii a o as o, Se . Re zívil, 7? é selecionado do grupo que consiste de: 1 vw Ny! Rº NY Rn " DO Y Y Rº nas “SAVE O OS NI io al À th. eme ML & ão Re, = SA ; mi RUC pd ço Za Ri O Y Yr Es ar % À E. Ro % Ro "o RE | RS Le ; Ré Re z22Y O za O zig e REAd X é selecionado do grupo que consiste de -H, -OH, -Oalquila C1-3, -F, oxo, NH; e -CH;; Y é selecionado do grupo que consiste de -H, - OH, -Oalquila C1-3, -F, oxo, NH, e -CHs; X' e Yl são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H e -CH;; e X? e Y2 são cada um -O-; contanto que quando X é oxo então X' é ausente e quando Y é oxo então Y' é ausente;
Ss e ainda contanto que pelo menos um de X e Y é selecionado do grupo que consiste de -OH, -Oalquila C1-3, -F e oxo e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. 4, Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizado — pelofatodeque Z' é selecionado do grupo que consiste de: 1 1 RI xx ms e. x x? Rº NÃ fre So NES OE AÊ L SALAO % a $-C Ss to e Í RETA nã En/ S 3a : A " zo nO Zi Ro , Zi Rº zv O x x Í & Ro 3d WA A, É dos e. RR RA , Rã Rã ZW o Zi o Zizi Re e Ro io 72 é selecionado do grupo que consiste de: 1 nx ny RR MOR Roe A " NE RE gia Ra e eo O TAS E | RA A gua En/ A í 22 ROO ni ge E ze Rº zh O P Yº Í -! RO RO o a * % E O ENO 4: RE RR : Re Roe z22v O z2i O zig í Rô z2vii e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
5. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que
ON No NS no é selecionado do grupo que consiste de
: w | Ss “ À Ó) rs q * O NON, No, NO, ml e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
6. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que Z! é zl-iv e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
7. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que tem uma fórmula estrutural VIII: o Rº
Ê NON A RUXCOX — R vm e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
8. Composto de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que X e Y são cada um independentemente selecionados de -H, - OH,-Fe-CH; contanto que pelo menos um de X e Y seja selecionado de - OH e -F e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
9. Composto de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que Z2 é selecionado do grupo que consiste de z2-1, 22-41, 22-iv, z2-v e z2-vi e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
10. Composto de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que R' e R? são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de (a)-H, (b)-F, (0)-Cl, (d)-Br, (e)-alguila C1-3 opcionalmente substituído com 1-3 de -F, (9) ciclopropila, (g)-Oalquila C1-3 opcionalmente substituído com 1-3 de -F e (h)-(CH>)is alquila-OH e os sais — farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
11. Composto de acordo com a reivindicação 10, caracterizado | pelo fato de que um de R4a e R4b é -CN e o outro é RÍ; e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
12. Composto de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que Ré selecionado do grupo que consiste de -H, -CH3, -OCH; e -F e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
13. Composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que R e R$ são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H e -CH; e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
14. Composto de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que Rº e RÍ são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste de -H, -CH; e -OCH; e Rº é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH; e -F e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
15. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem uma fórmula estrutural VIII: o Rº d A Rô Rô o Ns
RXX E R vI e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que 7? é selecionado de z2-vi e z2-vili, X é selecionado do grupo que consiste de -H, -OH, -Oalquila 1-3, -F, oxo, NH2 e-CH; e X1 é selecionado do grupo que consiste de -H e -CH3; ou 7? é selecionado de z2-ix e 22X, e pelo menos um de X e Y é selecionado do grupo que consiste de -OH, -Oalquila C1.3, -F e oxo e o outro é selecionado de -H, -OH, -Oalquila C1-3,-F, oxo, NH; e -CH;.
16. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado — pelo fato de quetema fórmula estrutural VIIa:
1 o Rº
O
NO d 2 Rom LONA vim e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos em que: R1 é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH; e -OCH;3; Rº é selecionado do grupo que consiste de -H e -CH;; Z? é selecionado do grupo que consiste de 2 A o ) BA 4 Sã. A Dos So R ' DD (o) . > E SON:
RS
Y Os : [ia 6 a DORA en E o O Ro — e O E o Y é selecionado do grupo que consiste de -H, -OH, -F e -CHs; R? é selecionado do grupo que consiste de -H, -CH; e OCH; Rº é selecionado do grupo que consiste de -H e -CH;; e R** é selecionado do grupo que consiste de -H, -OCH; e -F.
17. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fatode quetema fórmula estrutural X o Rº
TI ON N Nm Z
RUN e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos em que:
ON No NÃ 7 é selecionado de
- Rn Vs “à NON « DD, ; R' é selecionado de -H e -CH;s; Rº é selecionado de -H e -CH;3; e 7º é selecionado de z2-ii, z2-iv, 22-V e z2-vi.
18. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado —pelofatodequeé selecionado do grupo que consiste de: 6-(f4-[2-hidróxi-2-(4-metil- 1-0x0-1 3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil]-piperazin-1-il) metil)-8,9-diidro-1H-furo[3,4-flisoeromen-3(6H)-ona; 5,5 -[piperazino-1 ,4-diilbis(1 -hidroxietano-2,1-diil)]bis(4- metil-2-benzofuran-1(3H)-ona); 5,5”-(piperazino-1,4-diilbis[(1R)-1-hidroxietano-2,1- diil]) bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona); 5,5'-fpiperazino-l A-diilbis[(18)-1 -hidroxietano-2,1- diil)+bis(4-metil-2-benzofurano-1(3 H)-ona); 5-(UR)-1-hidróxi-2-(4-[(28)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3- diidro-2-benzofuran-5-il)etillpiperazin-1 ilJetil)-4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona; 5,5'-[piperazino-] A-diilbis(1 -hidroxietano-2,1-diil)]bis(6- metil-2-benzofuran-1(3H)-ona); 5,5*-[piperazino-] A-diilbis(1-hidroxi: etano-2,1-diil)]bis(4- bromo-2-benzofurano-1(3H)-ona); 5,5'-[piperazino-] A-diilbis(1 -hidroxietano-2,1-diil)]bis(4- cloro-2-benzofurano-1(3H)-ona; 5,5*-[piperazino-] A-diilbis(1 -hidroxietano-2,1-diil)]bis(2- benzofurano-1(3H)-ona); 5,5'-[piperazino-1 4-diilbis(1 hidroxietano-2,1-diil)]bis[4- (metilóxi)-2-benzofurano-1(3H)-ona];
5,5”-[piperazino-1 4-diilbis(1-hidroxietano-2,1 -diiD]bis(4,6- dimetil-2-benzofurano-1(3H)-ona); 5,5” -[(2-metilpiperazino-1 ,4-dii)bis(1 -hidroxietano-2,1- diil)]bis(4-metil-2-benzofurano-] (3H)-ona); 5,5”-[1,4-diazepano-1 ,4-diilbis(1-hidroxietano-2,] -diiD)]bis(4- metil-2-benzofuran-1(3H)-ona); 5,5º-[piperazino-1 ,4-diilbis(1 -fluoretano-2,1-diil)]bis(4-metil- 2-benzofurano-1(3H)-ona); 5-(1-hidróxi-2-(4-[2-(4-metil-1-0x0- 1,3-diidro-2-benzofurano- S-iDetil]-piperazin-1-ilY etil)-4-metil-2-benzofurano-] (3H)-ona; 5-(1-hidróxi-2-(4-[2-(1-0x0-1,3 -diidro-2-benzofurano-5- il)etilJpiperazin-1-il Yetil)-4-metil-2-benzofurano-] (3H)-ona; 5-((1R)-1-hidróxi-2- f4-[2-(4-metil-1-0x0-] 3-diidro-2- benzofurano-ó-il)etil]piperazin-1-il) etil)-4-metil-2. -benzofurano-1(3H)-ona; 5-((18)-1-hidróxi-2-(4-[2-(4-metil-1-0x0- 1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-il yetil)-4-m etil-2-benzofurano-1(3H)-ona; 5-(2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0- 1,3-diidro-2-benzofurano- 5-il)etil]-piperazin-1-il 3-1 metiletil)-4-metil-2-benzofurano-1 (3H)-ona; 5-(2- (4-[2-hidróxi-2-(4-metil- 1-0x0-1,3-diidro-2-benzofurano- —S-iDetil]l-piperazin-1-il)-l -(metilóxi)etil)-4-meti 1-2-benzofurano-1(3H)-ona; 5-(1-(etilóxi)-2- (4-[2-hidróxi-2-(4-metil- 1-0x0-1,3-diidro-2- benzo-furano-S5-il)etilpiperazin-1-il3 etil )-4-metil-2-benzofurano-]1 (3H)-ona; S-(1-fluoro-2-(4-| [2-hidróxi-2-(4-metil-1 -oxo- 1,3-diidro-2- benzofuran-ó-il)etil]Jpiperazin-1-il Jetil)-4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona; 6-(f4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0xo- 1,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil]-piperazin-1-il+metil)-]1 ,6,7,8-tetraidro-3H-indeno[4,5 -c]furano-3-ona; 4-(1-hidróxi-2-(4-[2-(1-0x0-1 ,3-diidro-2-benzofurano-5- iDetil]-piperazin-1-il; etil)-2-(metilóxi)benzonitrila; 4-(1-hidróxi-2-(4- [2-(4-metil-] -oxo-] ,3-diidro-2-benzofurano-
: 5-iletil] -2-(metilóxi)-4-oxiran-2-ilbenzonitrila; S-fluoro-4-(1-hidróxi-2-(4-[2-(1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil]-piperazin-1-il 3 eti 1)-2-(metilóxi)benzonitrila; | 5-fluoro-4-(1-hidróxi-2-4-[2-(4-metil-] -oxo-1,3-diidro-2- — benzofurano-ó-il)etil]piperazin-1-il) etil)-2-(metilóxi)benzonitrila; 5,5º-[3,8-diazabiciclo[3,2,] Joctano-3,8-diilbis(1 -hidroxietano- 2,1-diil)] bis(4-metil-2-benzofurano-1 (3H)-ona); 5,5”-[2,5-diazabiciclo[2,2,2]octano-2,5-diilbis( I-hidroxietano- 2,1-diil)]bis(4-metil-2-benzofurano-] (3H)-ona); 5,5º-[2,5-diazabiciclo[2,2,1 Jheptano-2,5-diilbis(1- hidroxietano-2,1-diil)] bis(4-metil-2-benzofuran-1(3 H)-ona); 6-fluoro-3-(1-hidróxi-2- (4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0- 1,3- diidro-2-benzofurano-S-il)etil|piperazin-1-ily etil)-2-metilbenzonitrila; 5-cloro-4-(1-hidróxi-2- f4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0- 1,3- diidro-2-benzofurano-5-il)eti I]piperazin-1-il) etil)-2-(meti lóxi)benzonitrila; 4-(1-hidróxi-2-( 4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0- 1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-iletil)-5 -metil-2-(metilóxi)benzonitrila; 4-(1-hidróxi-2-( 4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-ox0-1,3 -diidro-2- benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-il) etil)-2-(metilóxi)benzonitrila; 5-fluoro-4-(1-hidróxi-2- (4-| [2-hidróxi-2-(4-metil- 1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-5-il)etil]piperazin-] il etil)-2-(metilóxi)benzonitrila; 4-(1-hidróxi-2- (4-[2-hidróxi-2-(4-metil- 1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-ily etil)-3 -metil-2-(metilóxi)benzonitrila; 2-fluoro-4-(1-hidróxi-2-(4- [2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo-] 3- diidro-2-benzofurano-5-il)etil |piperazin-l il )etil)benzonitrila; 4-(2-f 4-[2-fluoro-2-(4-metil-] -oxo-1,3-diidro-2-benzofurano- S-il)etil]piperazin-1-il etil)-2-(metilóxi)benzonitrila, 4-(2-(4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3 -diidro-2-benzofurano-5-il)-2- (metilóxi) etil]piperazin-1-ily etil)-2-(meti lóxi)benzonitrila;
4-(2-(4-[2-(etilóxi)-2-(4-metil-]1 -oxo-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)-etil]piperazin-1-i1) etil )-2-(metilóxi)benzonitrila; 4-(2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-] -oxo-1,3-diidro-2-benzofurano- 5-il)etil]-piperazin-1-il)-1 -metiletil)-2-(metilóxi)benzonitrila; 4-(2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-] -oxo-1,3-diidro-2-benzofaran- 5-il)etil]-piperazin-1-il) propil)-2-(metilóxi)benzonitrila;
5-(14- [(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil- 1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-ó-il)etil]piperazin-1-1l acetil)-4,6-dimetil-2-benzofuran-1 GHA)- ona;
4-(1-fluvoro-2-(4-[2-(1-0x0-1 ,3-diidro-2-benzofurano-5- il)etil]piperazin-1-1l3 etil)-2-(metilóxi)benzonitrila; 1-(4-nitrofenil)-2-(4- [2-(4-nitrofenil)etil |piperazin-] - il+etanona; 1-(4-nitrofenil)-2- (4-[2-(4-nitrofenil)etil piperazin-] -il etanol; 5 1 -[2-fluoro-2-(4-nitrofenil)etil]-4-| [2-(4- nitrofenil)etil]piperazina 2,2º-piperazino-] A-diilbis[ 1-(4-nitrofenil)etanol]; 1,4-bis [2-fluoro-2-(4-nitrofenil)etil]piperazina; 1,1º-(piperazino-] A-diildimetanodiil)bis(3 A-diidro-1H- — isocromeno-5-carbonitrila); 1-(f4-[2-(1-0x0-]1 3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil]piperazin- 1-il+metil)-3 A-diidro-1 H-isocromeno-5-carbonitrila; 1-(f4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3 -diidro-2-benzofuran-5- iD)etil]piperazin-1-ily metil)-5-(metilóxi)-3 4-diidro-1H-isocromeno-6- carbonitrila; 1,1º-(piperazino-] A-diildimetanodi iDbis[7-(metilóxi)-3,4- diidro- 1H-isocromeno-6-carbonitrila]; 1-((4-[2-(4-metil-1-0xo-] ,3-diidro-2-benzofurano-5- iD)etil]piperazin-1-ily metil)-7-(metilóxi)-3 A-diidro-1 H-isocromeno-6-
: carbonitrila; |
6-(1-Hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0- 1,3-diidro-2-
benzofurano-5-il)etil |piperazin-1-il etil)-4-metoxipiridino-3-carbonitrila; 5-(14- [(2S)-2-hidróxi-2-(4-metil-1 -oxo-1,3-diidro-2-
— benzofurano-5-il)-etil]piperazin-1-ily acetil)-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-
ona; S-(1-hidróxi-2-(4-[(28)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0- 1,3-diidro-
2-benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-il)-1 -metiletil)-4-metil-2-benzofuran-
1(3H)-ona;
S-fluoro-1-(14-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo-1 ,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-il Ymetil)-2,3-diidro-] H-indeno-4- carbonitrila;
4-(2-14- [2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-] ,3-diidro-2-benzofurano- 5-il)etil]-piperazin-1-il-1,1 -dimetiletil)-2-(metilóxi)benzonitrila;
6-(1-Hidróxi-2- [4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-]1 ”
diidro-2-benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-ily etil)piridino-3-carbonitrila;
6-(1-Hidróxi-2- (4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil- 1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-ily etil)-4-metilpiridino-3- carbonitrila;
6-(1-Hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-5-il)etilpiperazin-1-ily etil)-S-metilpiridino-3- carbonitrila;
6-(1-Hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-3H- isobenzofurano-5-il)etil|piperazin-1-il) etil)-2-metil-piridino-3-carbonitrila; 5-Cloro-6-[1-hidróxi-2-[4-[(2R)-2-hidró: xi-2-(4-metil-1-oxo- 3H-isobenzofurano-5-il)etilpiperazin-1-ilJetil ]piridino-3-carbonitrila; 4-[1 Hidróxi-2-[4-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-3H- isobenzofurano-5-il)etil ]piperazin-1-i Ietil]benzonitrila; 5,5'-[piperazino-1 ,4-diilbis( 1-hidroxietano-2,1-diil)]bis(4-
: 14 : fluoro-2-benzofurano-1(3H)-ona); 5,5”-[piperazino-1 4-diilbis(1-hidroxietano-2,] -diil)Jbis(7- fluoro-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona); S-[(1R)-1-hidróxi-2-(4-[2-hidróxi-2-(6-metil-1-0x0-] ,3-diidro- f 2-benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-il )etil]-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona; 5-(2-(4-[2-(2,1 ,3-benzoxadiazol-5-il)etil piperazin- 1-i13-1- hidroxietil)-2-benzofurano-1(3H)-ona; 5-[(1R)-2-14-[2-(2,] 3-benzoxadiazol-5-il)etilJpiperazin-1-il)- 1-hidróxi-etil]-4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona; 5-[(1R)-2-(4-[(25)-2-(2,1,3-benzoxadiazol-5-il)-2- hidroxietil]piperazin-1-ily 1-hidroxietil]-4-metil-2-benzofurano-1 (3H)-ona; 5-[(1R)-2-(4-[(2R)-2-(2,]1 ,3-benzoxadiazol-5-il)-2- hidroxietil]piperazin-1-il)-1 -hidroxietil|-4-metil-2-benzofurano-] (3H)-ona; e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
19. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo que consiste de: o
O o o
O Se o bs
À 15 : Q o
Q o o
Q De e r o No o o o Ore OH IL, fo) o q Da OH
OH NS o o o De a
OH TOR o o
. SET
N OH o Ep oO o o TONS oH ôn Lo o o o o o
NO O ôm LO n o o o
O NO o! OR Ls AN eo &
S
N 2 o
O NO q om ln AN e
SN e O.
Q
O
NO OR ôn LL o o e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
17 |
20. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo que consiste de: (68)-6-((4-[(2R)-2-hbidróxi-2-(4-metil-1-0x0- 1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil piperazin-1-il Ymetil)-8,9-diidro-1 H-furo[3,4- — jlisocromen-3(6H)-ona; (6R)-6-((4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3 -diidro-2- benzofurano-5-il)etil ]piperazin-1-il +metil)-8,9-diidro-] H-furo[3,4- flisocromen-3(6H)-ona; 5,5 -[piperazino-1 4-diilbis(1 -hidroxietano-2,1-diil)]bis(4- —metil-2-benzofurano-1(3H)-ona); 5,5” -(piperazino-1,4-diilbis[( 1R)-I-hidroxietano-2, 1-diil]bis(4- metil-2-benzofurano-1(3H)-ona); 5,5º-fpiperazino-1,4-diilbis[(1 S)-1-hidroxietano-2,1- diil]) bis(4-metil-2-benzofurano-1(3 H)-ona); 5-((1R)-1-hidróxi-2- ([4-[(28)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-S-il)etilJpiperazin-1-ily etil)-4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona; 5,5'-[piperazino-] A-diilbis(1-hidroxietano-2,1 -diil)]bis(6- metil-2-benzofurano-1(3H)-ona); 5-((1R)-1-hidróxi-2- (4-[2-(4-metil-1-0x0-1,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etilJpiperazin-1-il)etil)-4-metil -2-benzofuran-1(3H)-ona; S-((1S)-1-hidróxi-2-(4-[2-(4-metil-1-0x0-] ,3-diidro-2- benzofurano-5-il)etil ]piperazin-1-il) etil)-4-metil-2-benzofurano-1 (3H)-ona; 6-(14-[2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3 -diidro-2-benzofurano-S- —iDetill-piperazin-1-il)metil)-1 6,7,8-tetraidro-3H-indeno[4,5-c] furano-3-ona; 5,5*-[2,5-diazabiciclo[2,2, 1]heptano-2,5-diilbis(1- hidroxietano-2,1 -diil)]bis(4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona); 6-[(18)-1-hidróxi-2- f4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0- 1,3- | diidro-2-benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-il)etil] -4-metoxipiridino-3-
carbonitrila 6-[1R)-1-hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0xo0-1,3- diidro-2-benzofuran-5-il)etil piperazin-1-11) etil]-4-metoxipiridino-3- carbonitrila; 6-[(1S)-1-hidróxi-2-(4- [(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo-1,3- diidro-2-benzofurano-S-il)etil Jpiperazin-1-il )etilJpiridino-3 -carbonitrila; 6-[(1R)-1-hidróxi-2-(4-| [(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1 3+ diidro-2-benzofurano-S-il)etil ]piperazin-1-il eti I]piridino-3-carbonitrila; 6-[(18S)-1-hidróxi-2- (4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-1,3- diidro-2-benzofurano-S-il)etilJpiperazin-1-ily etil]-4-metilpiridino-3- carbonitrila; 6-[(1R)-1-hidróxi-2- (4- [(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo-1,3- diidro-2-benzofurano-S-il)etil Jpiperazin-1-ily etil]-4-metilpiridino-3- carbonitrila;
6-[(1S)-1-hidróxi-2-(4- [(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0-]1 3º diidro-2-benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-il) etil ]-2-metilpiridino-3- carbonitrila;
6-[(1R)-I-hidróxi-2- ([4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0- 1,3- diidro-2-benzofuran-5-il)etil piperazin-1-il) etil]-2-metilpiridino-3-
—carbonitrila;
5-[(1R)-1-hidróxi-2- [4-[(2R)-2-hidróxi-2-(6-metil-] -oxo-1,3- diidro-2-benzofuran-5-il)etil|piperazin-1-il Tetil]-4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona;
S-[(1R)-1-hidróxi-2-(4-[(28)-2-hidróxi-2-(6-metil-1-0x0-1,3-
— diidro-2-benzofurano-5 iDetil|piperazin-1-il) etil]-4-metil-2-benzofurano-
1(3H)-ona; e
5-(1-hidróxi-2- [4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-] -oxo-1,3-diidro- 2-benzofurano-ó-il)etil]piperazin-1-il) etil)-4,6-dimetil-2-benzofurano- 16H)-
| ona;
e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
21. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é 5,5” -(piperazino-1 4-diilbis[(1R)-1-hidroxietano-2,1-diil]) bis(4-metil-2-benzofurano-1(3H)-ona) o
DO o o Ss ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
22. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é 6-[UR)-L-hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0xo- 1,3 -diidro-2-benzofuran-5-il)etil|piperazin-1-il) etil]piridino-3-carbonitrila o De oH me 6H LN E eNs O. S N . ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
23. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é 6-[(1S)-1-hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0x0- 1,3-diidro-2-benzofuran-S-il)etil]piperazin-1-il etil]piridino-3-carbonitrila o Der oH Me ÔH SD. — SS Oo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. |
24. Composto de acordo com à reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é 5-[(1R)-1-hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(6-metil-1-0xo- 1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil Jpiperazin-1-il Jetil]-4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona o
NOW OH
OH À Í
TOO o o , ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
25. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é 5-[(1R)-1-hidróxi-2-(4-[(28)-2-hidróxi-2-(6-metil-1-0x0- 1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)eti INpiperazin-1-il etil] -4-metil-2-benzofurano- 1(3H)-ona o
O
Y NO OH
OH LON o bh ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
26. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que 6 6-[(1R)-I-hidróxi-2-(4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-0xo- 1 3-diidro-2-benzofurano-5-il)etilIpiperazin- 1-il)etil]-4-metoxipiridina-3- carbonitrila o
O
PR Me OH N N
SO = q OMe ? ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
. 21
27. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado | pelo fato de que 6-[(18S)-1-hidróxi-2- (4-[(2R)-2-hidróxi-2-(4-metil-1-oxo- 1,3-diidro-2-benzofurano-5-il)etil]piperazin-1-il)etil)-A-metoxipiridina-3- carbonitrila
O o Me OM Lo NAN TO,
ÚF SS OMe - Ss ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
28. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido na reivindicação 1 e um carreador farmaceuticamente aceitável e opcionalmente um outro agente ativo.
29, Uso de um composto como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um medicamento utilizável para inibir ROMK.
30. Uso de um composto como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um medicamento utilizável para provocar diurese, natriurese ou ambos.
31. Uso de um composto como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um medicamento utilizável para o tratamento de hipertensão.
32. Uso de um composto como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um medicamento utilizável —parao tratamento de insuficiência cardíaca.
33. Uso de um composto como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um medicamento utilizável para o tratamento ou profilaxia de um ou mais distúrbios selecionados do grupo consistindo de cirrose hepática, insuficiência renal aguda e crônica,
= 22 síndrome nefrótica, hipertensão arterial pulmonar, doença cardiovascular, diabete, disfunção endotelial, disfunção diastólica, angina do peito estável e não estável, trombose, restenose, infarto do miocárdio, acidente vascular cerebral, insuficiência cardíaca, hipertonia pulmonar, aterosclerose, ascite, — pré-eclampsia, edema cerebral, nefropatia, hipercalcemia, doença de Dent, doença de Meniere e cálculos renais.
34. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 28, caracterizada pelo fato de que agente ativo é losartan, valsartan, candesartan, olmesartan, telmesartan e que é opcionalmente adicionalmente compreendido de hidroclorotiazida.
35. Uso de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de compreender adicionalmente administrar “uma quantidade terapeuticamente eficaz de losartan, valsartan, candesartan, olmesartan, telmesartan e opcionalmente hidroclorotiazida.
36. Uso de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de compreender adicionalmente administrar “uma — quantidade terapeuticamente eficaz de losartan, valsartan, candesartan, olmesartan, telmesartan e opcionalmente hidroclorotiazida.
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