BRPI1015493A2

BRPI1015493A2 - Composições farmacêuticas estabilizadas para combater a formação de biofilmes

Info

Publication number: BRPI1015493A2
Authority: BR
Inventors: Jose Rosito Jr
Original assignee: Lebon Produtos Quimicos Farmaceuticos Ltda
Priority date: 2010-12-10
Filing date: 2010-12-10
Publication date: 2014-02-11

Abstract

COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS PARA COMBATER A FORMAÇÃO DE BIOFILMES A presente invenção se relaciona a um processo de produção e de envase que garante a estabilidade das composições farmacêuticas para combater a formação de biofilmes e modo de armazenamento das mesmas. Mais especificamente se relaciona a um processo de produção e de envase de composições farmacêuticas estabilizadas compreendidas de agentes quelantes que sequestram os cátions cálcio, magnésio e ferro estabilizadores da matriz da cobertura extracelular polimérica, podendo estar associados a antibióticos, corantes ou álcoois que agem nas bactérias sinergeticamente, combatendo a formação de biofilmes. Também é descrito um modo de armazenamento das ditas composições estabilizadas que garante estabilidade das ditas composições estabilizadas por um período de tempo prolongado.

Description

COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS PARA COMBATER A FORMAÇÃO DE BIOFILMES

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção se relaciona a um processo de produção e de 5 envase que garante a estabilidade das composições farmacêuticas para combater a formação de biofilmes e modo de armazenamento das mesmas. Mais especificamente se relaciona a um processo de produção e de envase de composições farmacêuticas estabilizadas compreendidas de agentes quelantes que seqüestram os cátions cálcio, magnésio e ferro estabilizadores da matriz da 10 cobertura extracelular polimérica, podendo estar associados a antibióticos, corantes ou álcoois que agem nas bactérias sinergeticamente, combatendo a formação de biofilmes, e modo de armazenamento das ditas composições que garante estabilidade das ditas composições estabilizadas por um período de tempo prolongado.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

Os biofilmes, complexos ecossistemas microbianos, podem ser formados por populações desenvolvidas a partir de uma única, ou de múltiplas espécies, estas associações de microrganismos e de seus produtos extracelulares constituem uma forma de proteção ao seu desenvolvimento, 20 fomentando relações simbióticas e permitindo a sobrevivência em ambientes hostis, podem ser encontrados em uma variedade de superfícies bióticas (vivas) e/ou abióticas (inertes).

Geralmente, a dinâmica de formação de um biofilme ocorre em etapas distintas. Inicialmente temos os organismos denominados colonizadores 25 primários, que se aderem a uma superfície, geralmente contendo proteínas ou outros compostos orgânicos. As células aderidas passam a se desenvolver, originando microcolônias que sintetizam uma matriz de polímeros extracelulares (EPS), que passam a atuar como substrato para a aderência de microrganismos denominados colonizadores secundários. Estes colonizadores secundários 30 podem se aderir diretamente aos primários, ou promoverem a formação de coagregados com outros microrganismos e então se aderirem aos primários. O biofilme contém partículas de proteínas, lipídeos, fosfolipídios, carboidratos, sais minerais e vitaminas.

Existem evidências de que espécies diferentes possam se juntar nos 5 microfilmes e levar a maior resistência a antimicrobianos, com uma espécie capaz de degradar ou inativar o antibiótico eficiente contra a outra. Estas microcolônias têm ecologia diferente das formas planctônicas: elas proliferam mais devagar, prejudicando, portanto, sua resposta a muitos antibióticos que agem essencialmente quando as células se dividem; elas estão mais protegidas tanto IOdos antibióticos, que têm dificuldade de acesso aos nichos onde elas estão, quanto da resposta do hospedeiro, pois as células de defesa do hospedeiro, como os neutrófilos, têm maior dificuldade de entrar nesta matriz para fagocitá-las.

Os biofilmes têm várias aplicações positivas, dentre os benefícios proporcionados na indústria de alimentos, pode-se citar a produção de 15 fermentados, como o vinagre, ácido cítrico, na produção de “sherry”; aplicações farmacêuticas através da produção de metabólitos secundários e processos biológicos para a extração de metais a partir de minério; o tratamento de efluentes e de água potável; assim como a produção de biopolímeros para usos diversos. Os biofilmes também têm utilidade na indústria do petróleo, no que diz respeito ao 20 melhoramento da recuperação do petróleo em zonas subterrâneas permeáveis.

No entanto, na área da medicina a presença de células aderidas em instrumentos médicos pode ser um grave problema uma vez que uma pequena contaminação bacteriológica requer uma desinfecção rápida e adequada de forma a evitar a contaminação cruzada. Surge então, a necessidade de desenvolver 25 estratégias de controle dos microrganismos de modo a reduzir ou eliminar este problema. Para tal, frequentemente recorre-se à utilização de desinfetantes.

Com a resistência aumentada, os métodos conhecidos de desinfecção não são suficientes e requerem altas doses de desinfetante, o que não é ambientalmente correto. A matriz de EPS, é possivelmente responsável pela persistência das infecções relacionadas com biofilmes, e pode até proteger os microrganismos de antibióticos, e por ser altamente hidratada também fornece resistência à radiação UV e à desidratação.

5 Diminuir ou prevenir a formação de biofilmes parece possível mas, é

difícil: em equipamentos de respiradores ficou claro que tanto clorexidina como peróxido de hidrogênio ou hipoclorito tem menos efeito sobre a flora residente em biofilmes que em bactérias planctônicas.

Técnicas de como fazer catheter lock, um selo com alta concentração

IOde antibióticos, seja como tratamento ou seja como profilaxia da infecção intravascular ligada a cateteres, é uma das técnicas que usamos para tratar ou evitar esta infecção e o sucesso não é definitivamente uma coisa constante, se bem que exista eficiência tanto para evitar como para tratá-la.

ESTADO DA TÉCNICA

O estado da técnica revela meios para a remoção de biofilmes

incluindo detergentes ativos sobre a superfície (alteram a tensão superficial do biofilme); oxidantes; agentes quelantes (seqüestram o cálcio, o magnésio e o ferro); agentes antimicrobianos de ação sinérgica (tratamento das infecções bacterianas com antibióticos), antifúngicos e bacteriófagos.

A US005362754 - PREPARAÇÕES FARMACÊUTICAS COM M-EDTA

E USOS DERIVADOS, revela composições farmacêuticas de uma mistura de Minociclina e EDTA (M-EDTA) formuladas em uma solução de salina estéril, ditas preparações são estáveis por um período de tempo muito curto para fins comerciais.

A PI0108105-5 A2 - EQUIPAMENTO DENTÁRIO E MÉTODO DE

OPERAÇÃO DESSE EQUIPAMENTO, revela uma unidade operacional dentária e o uso de uma solução aquosa para uso no tratamento do biofilme para utilização em tratamentos dentários.

A Pl 0701331-0 - COMPOSIÇÕES ÚTEIS PARA A ELIMINAÇÃO DE BIOFILMES MICROBIANOS, revela composições que compreendem agentes quelantes podendo estar associadas a antibióticos, corantes ou álcoois, porém não contempla métodos para estabilizar ditas composições.

Porém as composições descritas apresentam uma estabilidade muito aquém 5 da esperada para que sejam comercialmente viáveis.

Portanto, a literatura técnica não descreve nem sugere composições com estabilidade prolongada para a eliminação da formação de biofilmes, tais composições sendo descritas e reivindicadas no presente pedido.

SUMÁRIO

A presente invenção se relaciona a um processo de produção e de

envase que garante a estabilidade e um modo de armazenamento das composições farmacêuticas com M-EDTA e usos derivados. Composições farmacêuticas estabilizadas de uma mistura de Minociclina e EDTA (M-EDTA) através de um processo de produção e envase, garantindo um período de tempo suficientemente prolongado.

Mais especificamente a presente invenção se relaciona a um processo de produção e de envase e um modo de armazenamento das composições farmacêuticas que garante a estabilidade das ditas composições farmacêuticas devido a ausência de contato com o oxigênio e pela não exposição direta à luz, 20 ditas composições farmacêuticas compreendidas de agentes quelantes que seqüestram os cátions cálcio, magnésio e ferro estabilizadores da matriz da cobertura extracelular polimérica, podendo estar associadas a antibióticos, corantes ou álcoois que agem nas bactérias sinergeticamente, combatendo a formação de biofilmes.

A presente invenção compreende também composições farmacêuticas

estabilizadas compreendidas de agentes quelantes que seqüestram os cátions cálcio, magnésio e ferro estabilizadores da matriz da cobertura extracelular polimérica, podendo estar associadas a antibióticos, corantes ou álcoois que agem nas bactérias sinergeticamente para combater a formação de biofilmes. BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

Aspectos da presente invenção se tornarão aparentes na descrição a seguir que é dada somente como um exemplo e com referências aos desenhos que a acompanham em que:

5 A Figura 1 representa o estudo da estabilidade LONGA DURAÇÃO da

composição de M-EDTA, em relação ao Cloridrato de Minociclina;

A Figura 2 representa o estudo da estabilidade LONGA DURAÇÃO composição de M-EDTA, em relação ao Edetato dissódico.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Um objeto da presente da invenção é um processo de produção e de

envase das composições estabilizadas de Minociclina e EDTA (M-EDTA) na forma de pó caracterizado pela ausência de contato com oxigênio e incidência de Iuz no envase e armazenamento.

Como o oxigênio presente no ar atmosférico pode induzir a degradação 15 via oxidação da composição de Minociclina e EDTA devem ser utilizados recipientes que garantam a ausência de oxigênio e Iuz para a estabilidade prolongada da composição. A degradação via oxidação da composição pode ser minimizada através da retirada de todo o ar (oxigênio) da embalagem, compactando o pó e reduzindo o espaço vazio. Ou então pelo preenchimento de 20 dito espaço vazio com um gás inerte (ex. Nitrogênio).

Por ausência de oxigênio entende-se a presença de uma reduzida quantidade de oxigênio, incapaz de oxidar a composição.

Por ausência de Iuz entende-se a presença de uma reduzida quantidade de luz, incapaz de causar a fotólise da composição.

Pode-se envasar o produto M-EDTA em qualquer tipo de embalagem

que seja compatível com os princípios ativos da composição estabilizada e que permita a extração do ar (oxigênio) ou preenchimento do espaço vazio com um gás inerte do seu interior, evitando desta forma a oxidação do produto M-EDTA, o que garantirá uma estabilidade prolongada.

Os materiais para envase utilizados são preferencialmente recipientes estéreis vazios, de uso único e descartável. Foi utilizada, por exemplo, uma 5 seringa com volume interno de 3mL da marca BD (Becton, Dickinson and Company). Esta seringa atende as exigências de qualidade para embalar um produto estéril, podendo permanecer hermética pelo período de tempo desejado, porém não deve ser entendido como limitante.

Para para vedar o orifício onde a agulha é acoplada foi utilizado um tampão de borracha atóxica com o objetivo de evitar entrada de ar (oxigênio). Deste modo, após o envase, a seringa permanece fechada nas duas extremidades

A Iuz solar pode prover a energia necessária para uma reação de degradação (fotólise). As reações fotolíticas podem ser prevenidas através da 15 exclusão da dita luz. Os efeitos da dita Iuz podem ser minimizados armazenando- se o produto em embalagens revestidas ou que bloqueiem totalmente a entrada da Iuz ou que filtrem determinados comprimentos de onda que catalizam as reações de degradação.

O processo de preparação da composição é compreendido pelas seguintes etapas:

1. Fracionar as quantidades pesando as matérias primas cristalizadas em recipientes estereis;

2. Dessecar e esterilizar através do calor seco em temperatura em torno de 80°C por cerca de 20 minutos;

3. Transferir as matérias primas cristalizadas dessecadas para o recipiente de homogeneização. Tampar e proteger da Iuz solar direta; 4. Misturar até completa homogeneização, em torno de 20 minutos à 850 rpm, em condições ambientais de temperatura em torno de 15 a 35°C e umidade relativa do ar em torno de 50 a 65%, protegido da Iuz solar direta;

5. Dosificar a composição para que seja envasada a quantidade necessária,

5 6. Remover a haste (com o pistão de borracha) do recipiente de envase;

7. Tampar o orifício da extremidade oposta ao orifício de envase com um tampão de borracha atóxica;

8. Posicionar o corpo do recipiente na posição vertical de forma que seja possível envasar a composição na forma de pó (M-EDTA) através do orifício

onde foi retirada a haste (com o pistão) do dito recipiente;

9. Acoplar a haste do dito recipiente (com o pistão), após envasar a dita composição na forma de pó (M-EDTA);

10. Inverter a posição do dito recipiente para posição vertical inversa (com o tampão para cima e a haste para baixo). Isto evita o extravasamento de pó pela

extremidade;

11. Empurrar a haste do dito recipiente e ao mesmo tempo afrouxar o dito tampão de borracha da outra extremidade, facilitando desta forma a extração do ar (oxigênio) do interior do corpo do dito recipiente;

12. Empurrar a haste do dito recipiente até que o pistão de borracha entre em contato com a composição na forma de pó (M-EDTA), exercendo uma leve

pressão até que o pó seja compactado garantindo a total expulsão do ar (oxigênio);

13. Fixar o tampão de borracha atóxica garantindo uma boa vedação;

14. Armazenar o produto após ser envasado em embalagem que garanta o abrigo da exposição direta à Iuz e da umidade.

Outro objeto da presente invenção são composições estabilizadas que compreendem um agente quelante caracterizado por seqüestrar o cálcio, o magnésio e o ferro da matriz da cobertura extracelular polimérica.

Em uma incorporação da presente invenção as composições estabilizadas compreendem agentes quelantes em concentração que variam 5 entre 0,1 a 65,0% em peso/volume da composição e um veiculo farmacologicamente aceito.

Os agentes quelantes são selecionados do grupo compreendido por EDTA, acido cítrico e citrato de sódio, ou uma combinação dos mesmos.

Por EDTA entende-se o ácido etilenodiaminotetracético e/ou seus sais

derivados.

Outro objeto da presente invenção são composições estabilizadas que compreendem também a associação com um antibiótico, que oferece um efeito sinergético contra as bactérias.

Em uma incorporação da presente invenção as composições estabilizadas são compreendidas por agentes quelantes em concentrações na faixa de 0,1 a 65,0% em peso/volume da composição, antibiótico de 0,1 a 3,0% em peso/volume e um veículo farmacologicamente aceito.

O antibiótico utilizado em particular é a minociclina, um derivado semissintético das tetraciclinas, com efetiva ação contra bactérias gram-positivas. 20 A Minociclina não tem uso sistêmico (IM ou IV), apenas VO para infecção de pele, gerando menor risco se houver resistência. A Minociclina não é alergênica. A associação de minociclina e EDTA, em altas concentrações locais, tem efeito sinérgico e potencializa a destruição de bactérias, fungos e biofilmes.

Outro objeto da presente invenção são composições estabilizadas que também podem estar associadas a um corante catiônico ou a álcoois, que podem auxiliar na erradicação do biofilme.

Em uma incorporação da presente invenção as composições estabilizadas são compreendidas por agentes quelantes em concentrações na faixa de 0,1 a 65,0% em peso/volume da composição, azul de metileno de 0,01 a 5,0% em peso/volume da composição e um veiculo farmacologicamente aceito.

Em outra incorporação da presente invenção as composições estabilizadas são compreendidas por agentes quelantes em concentrações na 5 faixa de 0,1 a 65,0% em peso/volume da composição, álcool etílico de 30,0 a 99,0% em peso/volume e um veiculo farmacologicamente aceito.

Ainda em outra incorporação da presente invenção as composições estabilizadas são compreendidas por agentes quelantes em concentrações na faixa de 0,1 a 65,0% em peso/volume da composição, antibiótico de 0,1 a 3,0% IOem peso/volume da composição, ácido cítrico de 0,1 a 5,0% em peso/volume da composição, citrato de sódio de 5,0% a 50% em peso/volume da composição, azul de metileno de 0,01 a 5,0% em peso/volume da composição, álcool etílico de 30,0 a 99,9% em peso/volume da composição e um veiculo farmacologicamente aceito.

O veículo farmacologicamente aceito é selecionado do grupo

compreendido por água, soro fisiológico ou uma combinação dos mesmos.

TESTE COMPARATIVO DA ERRADICAÇÃO DO BIOFILME:

Foram realizados testes para avaliar os resultados da erradicação dos biofilmes microbianos pelas composições estabilizadas descritas em uma incorporação da presente invenção. Foi desenvolvido um protocolo comparativo com a Heparina, usualmente utilizada na prevenção de infecção em cateter de hemodiálise.

Previamente às sessões de hemodiálise de pacientes renais crônicos aleatoriamente, foram coletadas hemoculturas seriadas de 2 em 2 dias a partir de 15 cateteres tipo duplo lúmen.

Após a diálise, as amostras foram separadas em dois grupos, a partir do composto utilizado para a oclusão da Iuz dos cateteres:

>Grupo A= em 8 cateteres a Iuz foi ocluída com heparina; >Grupo B= em 7 cateteres a Iuz foi ocluída com a composição estabilizada da presente invenção.

As hemoculturas foram incubadas e monitoradas pela técnica BactAIert (Organon) e a identificação microbiana realizada através de provas bioquímicas 5 bem conhecidas no estado da técnica.

Ao todo foram realizadas 160 hemoculturas, sendo 84 exames nos 8 cateteres do Grupo A (Heparina) e 6 exames nos 7 cateteres do Grupo B (Composição estabilizada da presente invenção).

No Grupo A, o tempo total de observação foi de 248 dias e o tempo médio de permanência, por cateter, foi de 31 dias.

No Grupo B, o tempo total de observação foi de 203 dias e o tempo de permanência, por cateter, foi de 29 dias.

RESULTADOS:

No Grupo A 8 hemoculturas foram positivas, com uma incidência de 9,52% de contaminação;

No Grupo B 1 hemocultura foi positiva, com uma incidência de 1,31% de contaminação.

Foram identificados Staphylococcus aureus (4 amostras), Klebsiella pneumoniae (4 amostras) e Streptococcus pneumoniae (1 amostra).

Quanto à contaminação específica de cateteres, esta ocorreu em 4 do

Grupo A (4:84 exames), com incidência de 4,76% e em 1 cateter do Grupo B (1:76 exames), com incidência de 1,31%.

Dessa forma, a composição estabilizada da presente invenção contendo minociclina e EDTA, aplicada na Iuz de cateteres de hemodiálise, quando comparada com heparina, combate de modo significativo a contaminação destes cateteres. ESTUDO PA ESTABILIDADE LONGA DURAÇÃO

O estudo da estabilidade LONGA DURAÇÃO da composição de M- EDTA, associação de Cloridrato de Minociclina + Edetato dissódico tem por objetivo verificar se ocorrem alterações nas características físicas, químicas, 5 biológicas e microbiológicas, por influência de fatores ambientais como a temperatura, umidade, Iuz ou por outros fatores relacionados às propriedades físicas ou químicas do produto, durante o prazo de validade esperado. Objetiva, ainda, verificar a compatibilidade ou interação do produto terminado com as embalagens primárias. Os resultados dos testes serão usados para estabelecer a 10 vida útil, confirmar um prazo de validade definitiva, e recomendar as condições de armazenamento.

DESCRICÃO DO PRODUTO:

Nome Composição de M-EDTA: Associação de Cloridrato de Minociclina + Edetato dissódico Denominação Comum Cloridrato de Minociclina: DCB 04648.02.1 Brasileira Edetato dissódico: DCB 00117.02-1 Forma Farmacêutica Pó para preparar solução asséptica Uso Prevenir infecção de cateteres Formula e composição do Cloridrato de minociclina ativo Edetato dissódico Concentração por amostra Minociclina: 9 mq + Edetato dissodico: 90 mg A matéria prima Cloridrato de Minociclina, tem a forma de cristais amarelos, solúveis em água e álcool. O Edetato dissódico (EDTA) é constituído de pó branco, solúvel em água. A mistura dos sais tem aparência homogênea e cor levemente amarelada.

Os métodos abrangem os parâmetros organolépticos, físico-químicos, biológicos e microbiológicos.

Atributo analítico Método Aspecto do produto Físicõ-químjco (organoléptico) Identificação Químico Doseamento do ativo EDTA Complexometria Doseamento do ativo Minociclina HPLC Cromatografia Líquida, terceirizado Solubilidade Físico químico Determinação do peso médio Gravimetria Esterilidade

Microbiológico para bactérias e fungos

TEOR DQ PRINCIPIO ATIVO E MÉTODO ANALÍTICO CORRESPONDENTE PRINCIPIO ATIVO 1:

Nome: Cloridrato de minociclina. Contem não < 890 pg e não > IOOOpg por mg.

Aspecto: Pó cristalino, amarelo, levemente solúvel em água (50mg/mL), 5 largamente solúvel em álcool e em soluções de álcalis, insolúvel em éter e clorofórmio, P.M = 493,94.

Solubilidade: Solúvel em água, 50mg/mL, largamente solúvel em álcool e em álcalis, insolúvel em éter e clorofórmio.

pH: 3,5 -4,5 (solução 10 mg/mL).

Identificação: Absorção no IV (197 K), previamente seca à 100°C, 2 horas.

Perda por dessecação: 4,3 a 8,0%.

Impurezas: b) Metais pesados: No máximo 50 ppm = 0,005

Calculo:

50 mg — 1000 g 1 mL — 0,1 mg

x--1g : x = 0,05 mg y — 0,05 mg. y=0,05mLdeSP

Doseamento: Método por cromatografia líquida (HPLC).

Fase móvel: Preparar oxalato de amônio 0,2M, dimetilformamida, EDTA 0,1 M. Ajustar pH 6.2-6.5 com hidróxido de tetrabutil-amônio 0,4 M. Passar por membrana filtrante. Preparação Standard: 500 pg de minociclina por mL de água. 20 Solução resolução: 2 mg minociclina/ml água. Transferir 5 mL para balão volumétrico de 25 mL. Aquecer 60°C. Esfriar. Completar. Ensaio: Transferir 50 mg de minociclina para frasco volumétrico de 100 mL. Completar o volume com 100 mL de água. Misturar. Sistema cromatográfico: Cromatógrafo líquido com detector 280nm, 4,6 -mm x 3 -cm, coluna 10 - pm, L7. Procedimento: Separadamente injetar volumes iguais (10μΙ_) de preparação Standard e preparação ensaio e medir a resposta ao maior pico. Calcular a concentração em pg/mg, pela fórmula: 100 (C/W) (ru/rs).

C=concentração; W=peso em mg; ru e rs = maior pico da preparação ensaio e 5 Standard.

Esterilidade: Bactérias- Incubar nos meios TSA1 TSB e Tioglicolato, 24-72 h, à 37°C. Não deve haver crescimento de colônias. Fungos - Incubar em meio Sabouraud, 24 - 168 h, à 24°C. Não deve haver crescimento de colônias.

Referências: USP 25, página 633.

PRINCIPIO ATIVO 2:

Nome: Edetato dissódico, EDTA, Ácido Etilenodiaminotetracético, Edetato de sódio, Tritriplex.

Aspecto: Pó cristalino, cor branca, praticamente inodoro, P.M = 372.24.

Solubilidade: Parcialmente solúvel em água, praticamente insolúvel em álcool e éter.

pH: 4,0 - 6,0 (solução aquosa a 5%).

Identificação: a) Em 5 mL de água adicionar 2 gotas de tiocianato de amônio + 2 gotas de cloreto férrico. A solução fica vermelha. Adicionar 50 mg de EDTA. Misturar. A cor vermelha desaparece, tornando-se amarela, b) Teste da chama, com alça de Pt, produz cor amarelo ouro.

Perda por dessecação: A 150°C/6 horas, não < de 8,7% e não >11,4% do peso.

Impurezas: a) Cálcio: Em solução 1:20 adicionar 2 gotas de vermelho de metila SI. Neutralizar com NH40H 6N. Acidificar com HCL 3N e 1 mL de oxalato de amônio. Não deve formar precipitado, b) Metais pesados: No máximo 50 ppm = 0,005

Calculo: 50 mg — 1000 g 14/15

1 mL ------ 0,1 mg

x — 1 g : x = 0,05 mg y ------- 0,05 mg : y= 0,05 mL de SP

Doseamento: Volumetria de complexação, ou Espectrofotometria por absorção atômica. Transferir 10 mL da solução amostra para erlenmeyer de 250 mL. 5 Adicionar 50 mL de água, 10 mL de tampão cloreto de amônio-amônia SR e 1 mL de solução indicadora negro de eriocromo T , SR (1:2000) Titular com cloreto de zinco 0,05 M, até cor azul intensa.

N0 de milimol de EDTA = N0 de milimol ZnCI2 = Volume x Molaridade = V gasto x

0,05.

Massa de EDTA em 10mL = N0 de milimóis x Mol.

Esterilidade: Bactérias: Incubar em meio TSA, 24-168 h, à 37°C. Não deve haver crescimento de colônias. Fungos: Incubar em meio Sabouraud, 24 - 168 h, à 24°C. Não deve haver crescimento de colônias.

Referências: Farmacopéia dos Estados Unidos do Brasil, Il e USP 25, pág 633.

DISCUSSÃO DOS RESULTADOS:

Com relação à interpretação dos resultados tabelados, conforme visto nas Figuras 1 e 2, referente aos atributos analisados, observa-se que os dados obtidos se mantiveram dentro dos limites de aceitabilidade não indicando tendência de perder a estabilidade.

O resultado dos testes de estabilidade de longa duração, executados

conforme determina o Guia para Estudo da Estabilidade, da ANVISA, em amostras de três lotes piloto da composição de M-EDTA, associação de Cloridrato de minociclina + Edetato dissódico, indica que o produto quando submetido à ação de fatores ambientais como temperatura, umidade, ausência de oxigênio e 25 protegido da luz, conserva sua estabilidade, sem degradação, sendo compatível com as embalagens primárias, podendo-se indicar um período de validade de no minimo 24 meses. INTERAÇÃO PO PRODUTO COM A EMBALAGEM PRIMÁRIA:

Pe cada lote piloto foram retiradas amostras para avaliar a ocorrência de interação do produto com a embalagem primária. A avaliação dos resultados da análise referente ads atributos: aspecto, identificação e doseamento 5 demonstraram compatibilidade. Em análises por HPLC não foram detectados picos referentes a impurezas ou compostos de decomposição, concluindo-se pela compatibilidade do produto com a embalagem.

ESTABILIPAPE PO PROPUTO RECONSTITUÍPO:

O ativo após ser reconstituído em água WFI ou NaCI 0,9%, permanece estável, por 30 dias, se conservado em geladeira à 5 0C, ao abrigo da luz.

Peve ser entendido que a intenção nas reivindicações é cobrir todas as modificações das incorporações da invenção aqui descrita com o propósito de ilustração e que não constituem um afastamento do espirito e escopo da invenção ou um fator de limitação.

Claims

1. PROCESSO DE PRODUÇÃO E DE ENVASE DAS COMPOSIÇÕES ESTABILIZADAS DE MINOCICLINA E EDTA caracterizado pela ausência de oxigênio e incidência de luz no envase e armazenamento da composição.

2. PROCESSO DE PRODUÇÃO E DE ENVASE DAS COMPOSIÇÕES ESTABILIZADAS, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pela estabilidade da composição ser obtida pela ausência de oxigênio e incidência de luz no envase e armazenamento da composição.

3. PROCESSO DE PRODUÇÃO E DE ENVASE DAS COMPOSIÇÕES ESTABILIZADAS , de acordo com as reivindicações 1 e 2, caracterizado por ser compreendido pelas etapas de: - Fracionar as quantidades pesando as matérias primas cristalizadas em recipientes estereis; - Dessecar e esterilizar através do calor seco em temperatura em torno de 80°C por cerca de 20 minutos; - Transferir as matérias primas cristalizadas dessecadas para o recipiente de homogeneização. Tampar e proteger da luz solar direta; - Misturar até completa homogeneização, em torno de 20 minutos à 850 rpm, em condições ambientais de temperatura em torno de 15 a 35°C e umidade relativa do ar em torno de 50 a 65%, protegido da luz solar direta; - Dosificar a composição para que seja envasada a quantidade necessária, - Remover a haste (com o pistão de borracha) do recipiente de envase; - Tampar o orifício da extremidade oposta ao orifício de envase com um tampão de borracha atóxica; - Posicionar o corpo do recipiente na posição vertical de forma que seja possível envasar a composição na forma de pó (M-EDTA) através do orifício onde foi retirada a haste (com o pistão) do dito recipiente; - Acoplar a haste do dito recipiente (com o pistão), após envasar a dita composição na forma de pó (M-EDTA); - Inverter a posição do dito recipiente para posição vertical inversa (com o tampão para cima e a haste para baixo). Isto evita o extravasamento de pó pela extremidade; - Empurrar a haste do dito recipiente e ao mesmo tempo afrouxar o dito tampão de borracha da outra extremidade, facilitando desta forma a extração do ar (oxigênio) do interior do corpo do dito recipiente; - Empurrar a haste do dito recipiente até que o pistão de borracha entre em contato com a composição na forma de pó (M-EDTA)1 exercendo uma leve pressão até que o pó seja compactado garantindo a total expulsão do ar (oxigênio); - Fixar o tampão de borracha atóxica garantindo uma boa vedação; - Armazenar o produto após ser envasado em embalagem que garanta o abrigo da exposição direta à luz e umidade.

4. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS DE MINOCICLINA E EDTA PARA COMBATER A FORMAÇÃO DE BIOFILMES caracterizadas por serem obtidas através de um processo de produção e de envase que previne a oxidação e a fotólise pela ausência de contato com oxigênio e de incidência de luz no envase e armazenamento das ditas composições.

5. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com a reivindicação 4, caracterizadas por serem obtidas através de um processo de produção e de envase compreendendo as etapas de: - Fracionar as quantidades pesando as matérias primas cristalizadas em recipientes estereis; - Dessecar e esterilizar através do calor seco em temperatura em torno de 80°C por cerca de 20 minutos; - Transferir as matérias primas cristalizadas dessecadas para o recipiente de homogeneização. Tampar e proteger da luz solar direta; - Misturar até completa homogeneização, em torno de 20 minutos à 850 rpm, em condições ambientais de temperatura em torno de 15 a 35°C e umidade relativa do ar em torno de 50 a 65%, protegido da luz solar direta; - Dosificar a composição para que seja envasada a quantidade necessária, - Remover a haste (com o pistão de borracha) do recipiente de envase; - Tampar o orifício da extremidade oposta ao orifício de envase com um tampão de borracha atóxica; - Posicionar o corpo do recipiente na posição vertical de forma que seja possível envasar a composição na forma de pó (M-EDTA) através do orifício onde foi retirada a haste (com o pistão) do dito recipiente; - Acoplar a haste do dito recipiente (com o pistão), após envasar a dita composição na forma de pó (M-EDTA); - Inverter a posição do dito recipiente para posição vertical inversa (com o tampão para cima e a haste para baixo). Isto evita o extravasamento de pó pela extremidade; - Empurrar a haste do dito recipiente e ao mesmo tempo afrouxar o dito tampão de borracha da outra extremidade, facilitando desta forma a extração do ar (oxigênio) do interior do corpo do dito recipiente; - Empurrar a haste do dito recipiente até que o pistão de borracha entre em contato com a composição na forma de pó (M-EDTÁ), exercendo uma leve pressão até que o pó seja compactado garantindo a total expulsão do ar (oxigênio); - Fixar o tampão de borracha atóxica garantindo uma boa vedação; - Armazenar o produto após ser envasado em embalagem que garanta o abrigo da exposição direta à Iuze da umidade.

6. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com a reivindicação 4, caracterizadas por compreender gentes quelantes e um veículo farmacologicamente aceito.

7. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com as reivindicações 4 a 6, caracterizadas pelos gentes quelantes serem selecionados do grupo compreendido por EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético), ácido cítrico ou citrato de sódio ou a combinação dos mesmos

8. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com as reivindicações 4 a 7, caracterizadas pelos gentes quelantes estarem em concentração na faixa de 0,1 a 65,0% em peso/volume da composição.

9. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com a reivindicação 4 a 7, caracterizadas por compreender agentes quelantes em concentração na faixa de 0,1 a 65,0% em peso/volume da composição, antibiótico e um veiculo farmacologicamente aceito.

10. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com a reivindicação 9, caracterizadas pelo antibiótico ser minociclina.

11. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com as reivindicações 9 e 10, caracterizadas pelo antibiótico estar em uma concentração entre 0,1 a 3,0% em peso/volume da composição.

12. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com a reivindicação 4 a 11, caracterizadas por compreender gentes quelantes e um corante catiônico ou álcoois.

13. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com a reivindicação 12, caracterizadas pelo corante ser azul de metileno.

14. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com as reivindicações 12 e 13, caracterizadas pelo azul de metileno estar em uma concentração entre 0,01 a 5,0% em peso/volume da composição.

15. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com a reivindicação 12, caracterizadas pelo álcool ser álcool etílico.

16. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com a reivindicação 15, caracterizadas pelo álcool estar em uma concentração entre 30,0 a 99,9% em peso/volume da composição.

17. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com as reivindicações 7 e 12, caracterizadas por compreender agentes quelantes em concentração que varia entre 0,1 a 65,0% em peso/volume da composição, azul de metileno em uma concentração entre 0,01 a 5,0% em peso/volume da composição, álcool etílico em uma concentração entre 30,0 a 99,0% em peso/volume e um veiculo farmacologicamente aceito.

18. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com a reivindicação 4, caracterizadas por compreender agentes quelantes em concentração que varia entre 0,1 a 65,0% em peso/volume da composição, minociclina entre 0,1 a 3,0% em peso/volume da composição, ácido cítrico entre0,1 a 5,0% em peso/volume da composição, citrato de sódio entre 5,0% a 50% em peso/volume da composição, azul de metileno entre 0,01 a 5,0% em peso/volume da composição, álcool etílico entre 30,0 a 99,9% em peso/volume da composição e um veiculo farmacologicamente aceito.

19. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ESTABILIZADAS, de acordo com as reivindicações 4 a 18, caracterizadas pelo fato do veiculo farmacologicamente aceito ser selecionado dentre água, soro fisiológico ou a combinação dos mesmos.

20. RECIPIENTE DE ACONDICIONAMENTO caracterizado por ser dotado de meios de garantir que o produto após ser envasado e embalado seja mantido ao abrigo da exposição direta à luz e sem contato com oxigênio.