CA1042424A

CA1042424A - Procede de preparation d'un derive de la gentamine et ses sels_

Info

Publication number: CA1042424A
Application number: CA221,705A
Authority: CA
Inventors: Jean-Claude Gasc; Jean-Bernard Chazan; Daniel Coussediere
Original assignee: Roussel Uclaf SA
Current assignee: Sanofi Aventis France
Priority date: 1974-03-12
Filing date: 1975-03-10
Publication date: 1978-11-14
Also published as: FR2263733B2; FR2263733A2

Abstract

L'invention a pour objet un procédé de préparation de la 4-O-(2',6'-diamino 2',3'.4'.6'-tétradéoxy .alpha.,D-érythro-hexopyrannosyl) 6-O-(3"-méthylamino 3",4",6"-tridésoxy .alpha.,Dxylohexopyrannosyl) 2-désoxystreptamine et de ses sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques. Les composés obtenus selon l'invention possèdent une activité antibiotique.

Description

~` lO~Z~Z~
La présente invention a pour ob~et un procédé de préparation de la 4-0-( 2 ~ ~ 6 ~ -diamino 2 ~ ~ 3 ~ ~ 4 ~ 9 6 ~ -tétradé sOxy Q~ rythrohexopyrarmo~1) 6-0-(3"-méthyl~mino 3",4",6"-tridé-80~y a,D-~ylohexopyra2~osyl) 2-d~soxystreptamine de formule I:
. .

'~' 10 ~_ H
ainsi que de ses 8el8 d~addition avec le3 a~ides m~néraux ou or~aniques.
De tels sels peuvent atre par exemple un chlorhy-.. drate~ un bromhydrate, un nitrate~ un sulfate, un phosphate, ;
un acétate~ un formiate~ un benzoate~ un mal~ate~ un fum3rate~
un succinate~ un tartrate~ un citrate~ un oxalate~ un benzylate~
un glyoxylate~ un aspartate~ un alcanesul~onate ou un aryl-sulfonateO
~e produit de formule I et ses sels thérapeutiquement compatibles peu~ent être employés pour la préparation de ¢ompositions pharmaceutiques qui renferment lesdits produits titre de principe actif O
~es produits obtenus par le procéd~ de l~invention pos~edent une très intéressante activit~ antibiotique, d~une $:
part sur les bactéries gram+ telles que les Staphylocoques~
les Streptocoques et notamment les Staphylocoques pénicillino-résistants, et d~autre part, sur les bactéries gram- et , . , ~ ,,''' ,' . . ` . ., ~

1~)4;~4;2~
notamment sur le~ bactéries coliformes.
Ces propri~t~s rendent apte~ le produit de formule I, ainsi que ses sels th~rapeutiqueme~t compatibles, ~ 8tre utilisés ~ titre de médicaments notamment dans le traitement ; de~ staphylococcies telles que septicémies ~ staphylocoques, -~
'! staphylococcieæ malignes de la face~ staphylococ~ies cutanées~
pyodermites~ plaies 3eptiques et suppurantes, anthrax, phlegmons, éré~ypèles, staphylococcies aigui~s primitives ou -~
i post-grippales, bronchopneumonies, ~uppurations pulmonaires et collibacilloses. Ce~ produits peu~ent être utilisés par voie ;
parentérale, buccale, rectale ou par voie locale en appli-oat~on topique sur la peau ou le3 muqueuses.
Ils peuvent ~tre présentés par exemple SOU9 formie de solution~ ou de suspensions in~ectables, de poudres ~tériles pour préparations in~ectables extemporanées, de comprimés, de comprimés enrobés, de capsules, de sirops, de suppositoires~
de crèmes, de pommades et de pr~paration en aérosols~ Ce~
`formes pharmaceutiques sont préparées selon les proc~d~s ¢lassiques. ~a dose usuelle~ variable selon le produit utilisé, . . .
le su~et traité et l~a~fection en cause~ peut 8tre par exemple ~; de 100 mg à 1 g par jour chez l'homme par ~oie parentérale.
~e procédé~ obJet de l~in~entlQn~ e~t caract~risé
en ce que l~on fait réagir le produit de iormule II:

C~ NHC02CH3 2 3 NNoo2cH3 02CH3 ~ (II) .. ','~ :;

~ .
~ 2 ~
..

104'2424 avec un agent acide pour obtenir le produit de formule III: .
, . :

- ., j~ fH2NHC02CH3 2 3 ;~ , /~ O~ HC02CH3 " ~' j,! NHC02CH3 OH ~
' -que l~on ~ait réagir sur le produit de ~ormule IV: ~ ~
' 10 ' .'`:'-, , ....

CH2C6H5 (IV) ~ .
en pré~ence d~un catalyseur pour obten~r le produit corres- :
pondant SOU3 iorme d~un mélange d~anomères a et ~ de :
formule~ V et VI: , ,~ ~ ' .j .
.~ .

C02C~3 O ~

NHCo2 CH3 ~ o l ( V?
~ ~ ~a o2c2~ 1 N~

30~ - ~ . OCH2C6H
'i; ': :.' : . ,.:' ' ~ 3 ~

~ et: 10424Z~
CH2NHco2cH~ 2 3 <~ j 2C~3 NHC02CH3 o .: CH
~ (VI) ':.
Si ~

, 2 6 5 : 10 mélange que l~on réduit par l~h~droga~e en pré~ence dlun catalyseur pour obtenir le mélange des produits de ~ormules ~II et VIII: CH2NHC02CH3~Hco2cH3 ~002CH3 ~ ~

:~NHC02CH O
(VII) 20 , \~

. ~ts :.
CH2NHC02CH3 7HC02cH3 O~HI ~NHC02CH3 ~; \ A ~W (VIII) :

~: NHC02C~I3 IH3 o ~ OH
,~ . . . .

_ 4 _ . -. .

10~24Z4 ~

mélange dont on s~pare, si dé sir~, le produi t VII, pui s que 11 on traite ce mélange ou le produit VII par un agent alcalin pour obtenir soit le m~lange des produits de formules I et IX:

r ~H H ~ H2 ;~
\_ ~ 0 ~ . ' H
ets ~ ~ ~ lH2 :~ ~0--~
~ :~
~ ~ (IX~

OH
~, ,''.
.~
m~lange~ dont on sépare le produit de fcrmule I cherch~
80it le produit de ~ormule I lui-mame~ produit de iormule I
que l~on soumet~ si désiré~ dans les deux cas~ à l~action d~un scide m~néral ou organique, pour en obtenir le sel ¢orrespondant.
Dan8 des conditions préférentielles de mise en oeu~re du procéd~ éno~cé ci-dessu~ on op~re comme suit:

~, ~ 5 ~

~ ~04Z424 l~agent acide que l'on fait r~agir sur le produit de formule II est avantageusement une résine ~changeuse d'ions mise sous ~orme acide; mais on peut ~galement utiliser une solution aqueuqe dlun acide minéral ou organique tel que, par exemple?
1~acide sulfurique, l~acide chlorh~drique~ 1~acide acétique ou l~acide ~ormique. Ia condensation entre les produits de ~ormule III et IV est une réaction du type habituellement désigné sous le nom de réaction de KOENIGS-KNORR; elle est donc réalis~e en présence d'un catalyseur qui est avantageu-seme~t constitu~ par du cyanure mercurique; mais on peut :
~galement utiliser un autre sel de mercure, un sel d~argent ou de ¢admium ou une amlne tertiaire telle que la collidine par exemple. ;
Comme catalyseur d~hydrogénation pour trans~ormer le mélange des produits de formules V et VI en mélange des produits de formules VII et VIII, on utilise avantageusement le pallsdium déposé sur charbon, mais on peut également utiliser des sels de palladium ou bien du platine, des dériv~s du platine et d'autres catalyseurs usuels tels que ao le rhodium~ le ruth~nium ou le n$ckel.
~agent alcalin que l~on utili8e pour libérer les fon¢tion8 amines du mélange de8 produits de ~ormules VII et VIII est avantageu8ement de la baryte dissoute dan8 de l~eau;
mai~ on peut également utiliser d~autres bases aqueuses comme, par exemple~ l~hydroxyde de sodium ou de potassium.
~a séparation des produits de iormules VII et VIII
ou I et IX peut être réalisée par les méthodes habituelles;
on utilise avantageusement 1~ chromatographie sur silice;
~ai~ on peut également utilis~r la chromatographie sur alumine, sur cellulose, sur silicate de magnésium ou encore la cristal-li8ation fractionnée ou la méthode dite de séparation -,.

... . _.. -:.' - 104Z~24 ~ contre-coura~tO On utilise pour mener ~ bien de telle~ :
; séparations dif~rents solYants ou m~langes de solvants organiques purs ou aqueuxO Ia ~alification du produit de ~ormule I peut 8tre réalisée par les m~thodes usuelles. Elle ~ ~;
peut ~tre obtenue par action sur ce produit d'acides tels que par exemple les acides chlorhydrique~ bromhydrique, nitrique, sulfurique, phosphorique, acétique, formique, benzoique, mal~ique, fumarique, succinique, tartrique, citrique, oxalique, ~i benzylique, glyoxylique, aspartique, alcane sulfoniques et arylsulfoniquesO Cette salification est réalis~e de pr~férence dans un solvant ou un mélange de solvants, tels que l'eau, l'éther éthylique, l'éthanol ou l'acétoneO
¦ ~e produit de formule IV utilisé dans le procédé de l'in~ention peut 8tre pr~paré selon un procédé décrit dans le brevet belge n 814 724. -.
Ce procédé est caractérisé en ce que l'on fait réagir le produdt de formule X:

~H :

. ~ a2~s (X~
02H5 ....
avec un agent alcalln à température ordinaire pour obtenir le produit de ~ormule XI:

~2 ., \~, ~C2H5 que l'on traite par un halogénure de benzyle en présence d'un agent alcalin pour obtenir le produit de formule XII:
.

CH3 i~ 4 Z 4 24 ~0 ~H

)C2H5 . OC~ C6H5 (~II) .. .
que l'on traite par l'anhydride acétique dan~ l'acide acétique, en présence d'un acide fort, pour obtenir le produit de formule XIII:
~. 10 CH3 COC ~ (XIII) , OCH2C6H5 que l'on traite par de l'acide chlorhydrique anhydre en présence de chlorure d'acétyle au sein d'un solvant or~anique pour obtenir le produit cherché de formule I~. -~ trait ondulé 9 qui relie les substituants de l'atome de carbone en position 1 du cycle des produits de iormules IV, X, XI, XII et XIII~indique que ce~ substituants peuvent se trouver en position ou ~ de ce cycle~ Ces produits existent don¢ sous forme d'anom~re a ou ~ ou 50U8 ,~
iorme d'un mélange de ces anomères.
~e procédé de l'invention permet d'obtenir le produit intermédiaire nou~eau de formule III:
IH2NHCO2C~3 ~HC02CH3 r ~H ~ ~HC2 ~aO2CH3 OH

~es exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la ~imiterO :~
- . ' '; ' .

Z~Z4 Exemple 1; 4-0-(2'l6'-diamino 2' ! 3'~4'56'-tétradésox~ ~,D-~rxthrohexo~yrannosyl~ 5-0-(3"-mét~ylamino 3" 4",6"-tridésoxy Sta_e A~ 4'-dideso3~ ~-tetracarbom -tho~ n~amine On dissout 54,6 g de 31,4'-didésoxy 5,6-0-cyclo-he~ylidène N-tétracarbométhoxy néamine (préparée selon J. of Antibiotics~ 1971, 24, 711) dans 546 cm3 de méthanol contenant 27,3 g de résine ~ch~n~euse dlions de type sul~onique mise 80U~ forme acide. On agite vigoureusement le mélange pendant seize heures puis ~iltre la resine. On évapore le filtrat à
se¢ 80US vide et on triture le résidu obtenu avec de l'éther isopropylique. Qn essore les cr~staux obtenus que l'on met en suspension dans du chlorure de méthylène~ agite cette suspension et a~oute de l'éther isopropylique. On essore le précipité obtenu, ce qui donne 37 g de 3',4'-didésoxy N-tétracarbométho~y néamine sous forme de cristaux incolores fondant à 233C. /~/20 = +53 (c = 0,5 ~, diméthylformamide).
Stade ~: 4-0~ 6'- ~ -carb,ométhoxy2 diamino 2' ~' 4' 6'-tétra-, _~_____ ____ _ ___ ____________ ___________-- ~ __ _-- --_---- ~:
~soxy_cLD-é~throhexo~rannos~ / 6-0/2l'-0-ben~l/3"- ~ -carbé- .~
____ ___ ________ _____ ____________ ____ ______ :
thoxy_~-mét ~ ) amino 3",4"~6"-tridésox~_a,D-x~lohexopyra~-nosyl/ 1~3-dlméthylo~yoarbongl 2-déso~ streptamine.
_ ----. ___________ ----_-------- -------- ---- ------ -- -- ~:
Qn di~sout 20~5 g de l-O-acétyl 2-0-benzyl 3-(N-car-béthoxy N-méthyl) amino 3,4,6-trid~soxy D-xylohexopyranose ~; dsns 300 cm3 de dioxane contenant 6~ d'acide chlorhydrique gazeux et 75 cm3 de chlorure d'acétyle. On porte à 37C
pendant une heure et demie puis évapore sous vide. On reprend le r~sidu obtenu dans 50 cm3 de dioxane et on verse la solution obtenue dans une solution à 60C de 14 g de 3~,4~_didésoxy N-t~tracarbométhoxy néamine dans 250 cm3 de dioxane contenant 17 g de cyanure mercurique. Qn maintient sous agitation 60-C pendant vingt-deux heures puis évapore le dioxane.
,, .

~ g , .. ,.
.,~, .~ .

On ajoute 150 cm3 d'eau e~ extrait au chlorure de méthyl~neO
Apr~s séchage de la phase organique sur sulfate de ~odium et evaporation à sec, on chromatographie le r~sidu ~ur silice en éluant avec un mélange chloroforme-acétone ~6-4)o On obtient 12~7 g de 4-0-/2'~6~-(N-carbométhoxy) diamino 2l,3~4~6~-té-tradésoxy a,D~érythropyrannosyl/ 6-0-/2"-0-benzyl 3"-(N-carbé-tho~y N-méthyl) amino 3",4"~6"-tridésoxy a,D-xylohexopyr~nnos~l/
1~3-diméthyloxycarbonyl 2-désoxy streptamine. Chromatographie sur couche mince, Rfo ~ 0~4 (silice ; chloroforme-acétone 5-5)~
~e produit obtenu est un mélange des deux anomères a et ~ en position 1~o , Stade C. 4-0 ~2'L6~-(N-carbométhox~ diamino 2~3~ 4~c6~-tétradéso~ a~D-é~throhexo~ranno~ 6-0 ~3'~-(N-carbéthoxy ________ __ --_ -- -------- , N-métb2~) amino 3" 4" 6"-tridésox~ a D-~lohexoP~rannos~l~
_____ ____ ___~ __ _______ __~__ ___ ~ _ _ _ ___ _ .
~ dimét~lo3~carbon 1 2-désox~ stre~taminel ______ _ _--_-- ------------------ -- ------ -- -- :
On dissout 10,4 g du produit obtenu au stade précédent dans 120 cm~ dléthanol. Qn ajoute 6 g de palladium 6ur charbon à 10% et 0,7 cm3 d~aoide chlorhydrique concentré.
On agite en atmosph~re d~bydrogène pendant une heureO On ~iltre le catalyseur et ~eutralise le ~iltrat ~ l~aide d~une r~sine échangeuse d'ions mi~e sOu8 forme basique. Qn sépare la résine et amène à sec~ 80u8 ~ide~ la solutionO On obtient 7~9 g du mélange de~ anomères ~ et ~ que l~on peut séparer par chromatographie sur silice en éluant avec le mélange ¢hloro~orme-acétone (1-l)o ;
Anomère : R~. = 0~2 (9ilice, chloroforme-acétone 1-1) Anomère ~: R~. = 0~23 (silice, chloroforme-acëtone 1-1) ~
Stade D 4-0-/2~ 6l~diamino 2~ L3 ~ 4~ 6~-tétradésox~ Q~D- . ~:
____~__L_ __________ __.a__L_ __________ __ __ ~throhexo~yrannos~l~ 6-0-~3"-mét~ylamino 3",4",6"-tridésox~
c~D-x~lohexo~yrannos~l~ 2-déso3~stre~tamine __ ___ _ ____ _ _______ ____ ______ , .
Rn dissout 7,9 g du produit obtenu au stade précédent dans 30 cm3 d~éthanol et on ajoute cette solution à une ..-... ...
, _ 10 _ ~.:, ~04Z424 ~iolution portée ~ 80C de 80 g de baryte hydratée dans lOO cm~
d'eau contenant 20 cm3 d'~thanol. On maintient sous agitation ~ 80C pendant slx heures puis refroidit et ~iltre le mélange réactionnel. On amène le filtrat ~ pH 3 ~ l'aide d'acide sulfurique normal~ filtre de nouveau et neutralise le filtrat ~ l'aide d'une réæine échan~euse d'ionæ miæe SOU8 forme baæique. On sépare la résine et am~ne à sec le 3 ~iltrat.
On obtient un produit amorphe que l'on purifie par paæsage sur ~ne colonne de réæine échangeuæe d'ions de type -carboxylique mise sous forme ammonium par ~lution ~ l'aide -~
d'ammoniaque 0,2 ~. ~e produit ainsi obtenu (1,94 g) est i s~paré en chacun de æes anomères en poæition 1 1l, par chroma-tographie æur silice à l'aide d'un m~lange chloroforme-méthanol-ammoniaque (2-2-0,5). On obtient ainsi 450 mg d'anomère ~ du produit attendu et 930 mg d'anomère ~.
Anomere ~: Rf. = 0~15(silice, chloroforme-méthanol-ammoniaque

2-2-0,5) Anomère ~: Rf. = 0~3 (silice~ chloroforme-méthanol-ammoniaque 2-2-0~5) ~e 1-0-acétyl 2-0-benzyl 3-(N-carbéthoxy N-méthyl) amino 3~4,6-tridésoxy D-xylohexopyranose utilisé au départ du stade ~ peut être obtenu de la ~açon uivante:
I Stade 1: éth~l 3-(N-carbéthox~ N-m~t ~l) amino 3,4 6-tridésox~
_______ __ ____ ___________ _______ ________ _L____ __ D-~ylohexo~ranoside __ ______ ___-- ___ On dissout 67 g d'éthyl 3-(N-carbéthoxy N-m~thyl) amino 3,4,6-tridésoxy 2-0-~thoxycarbonyl D-xylohexopyranoside (préparé selon JO Org. Chem., 1965, 30, 1287) dans 500 cm3 `~ d'éthanol~ pUi8 a~oute 200 cm3 de soude 2 No ~;
On agite une heure ~ température ambiante puis on dilue ~ l'eau et extrait au chlorure de méthyl~ne. On lave la phase organique à l'eau et on l'~vapore ~ sec sous videO

, - ~04Z~24 On obtient 57 g de produit attendu sous forme d'une huile ~aune que l'on utilise tel quel dans le stade suivantO
Stade 2: et~ 2-0-benz~ 3~ N-carbetho~ N-met~l) amino -tridso~_D~aohexo~an_s d_ -On met en ~uspension 12 g dlhydrure de ~odium en d~spersion dans l'huile minérale dans 300 cm3 de tétrahydro-~urane. On a~oute, sous agitation, la solution de 57 g du produit obtenu au stade précédent dans 100 cm3 de tétrahydro-furane. Qn chauffe ~ l'ébullition au reflux pendant quinze ;
minutes~ puis refroidit à 25C. Qn a~oute 29 cm3 de bromure de benzyle et lai~se pendant ~uinze heures ~ température ~-ambianteO On dilue à l'eau et extrait à l'acétate d'éthyle Après évaporation de llacétate dléthyle, on chromatographie l'huile obtenue sur silice à l'aide d'un mélange benzène-acétate dléthyle (8 : 2). On obtient 60 g de produit attendu sous forme d'un solide cristallisé blanc. F. = 65C.
S_a_e 3- l_O_ace~l 2-0- _nz2~ (N-carb~thoxy N-méth~l~ amino ~ 4~6-tridésox~ D-_y~ohexo~yranose ~ -____ ___ ___ _____ ___ . , . .
On ~ait barboter de l'acide chlorhydrique gazeux Jusqu'~ saturation~ dans un m~lange de 600 cm3 d'acide acétique et 60 cm3 d'anhydride acétique ~ 25Co Gn a~out~ 60 g du produit obtenu au atade précédent et on lai~se seize heures ~; température ambiante en maintenant le barbotage d'acide chlorhydrique. On évapore alors à sec, sous vide~ sans dépasser 40C.
On chromatographie l'huile obtenue 8ur silioe ~
l'aide d'un m~lange ohloroforme-acétone (9 : 1 )o ~
On obtlent 60 g de produit attendu sOu9 ~orme d'un soIide cristalli~é bla~cO
~ 30~ ~'anomère a a ~t~ obtenu pur par recristallisation ;~ dsn8 l'éther isopropyliqueO F. = 87C.
`~' ` ' ' '''' ' - . .

~042424 Analyse : C1g ~ ~ 6 calcul~ : C ~0 62,45 H% 7,45 N% 3~83 trouv~ : 62~7 7,7 3~7 lfate de 4-0-(2',6'-diamino ?7~3'.4'~6'-tétradé-80x~ ~D-er,YthrohexoP~rannosyl) 6-0-~3"-mbt~ylamino 3".4".6"-,, On dissout 930 mg de l'an~mère ~ obtenu ~ l'exemple -~précédent dans 15 cm3 d'eau. On neutrali~e la solution obtenue ~ l'aide d'acide sul~urique normal en ~uivant la neutralisation à l'aide d'un pH-mètre. On utilise ainsi 8~4 cm3 d'acide. On a~oute du charbon acti~ ~ la solution obtenue, filtre et concentre le filtrat sous vide. On ajoute du méthanol~ ce qui fait précipiter le sul~ate attendu. Cn obtient 1~24 g de sulfate de 4-o-(2t~6~-di~m~no 2',3',4',6'-tétradésoxy a,DLérythrohexopyrannosyl) 6-0-(3"-méthylamino

3"~4"~6"-tridésoxy a,D-xylohexopyrannosyl) 2-désoxystreptamine -~
sous ~orme d'un solide blanc de formule Clg~ gN506~ 5/2 H2S04.
20 = ~91 (c = 0~6 %~ eau)O
Pr~aration d'une co osition in~ectable On a réalisé une préparation pour injection de iormule:
- Produit dé¢rit a l'exemple 1 ~................... 50 mg ~- Excipient aqueux stérlle .. ~,....................... 1 cm3 Etude ~harmacologiaue des Produits décrits aux exemple~ 1 et 2:
~, Q) Activité antibactérienne in vitro -- --------____________ ~ 'activité antibactérienne a été mesurée in vitro par la méthode des dilutions en milieu liquide.
On pr~pare une série de tubes dans lesquels on , répartit une même quantité de milieu nutritif~ On distribue ~;~ 30 des quantit~s croissantes de l'antibiotique étudié puis chaque tube est ensemencé aveo une souche bactérienne. Après une incubation de ~ingt-qustre ou guarsnte-huit heures :

_ 13 _ lO~Z424 l~étuve à 37C~ l'inhibition de la croissance bactérienne ~:
est appréci~e par transillumination, ce qui permet de d~terminer le~ concentrations minimale~ inhibitrices (CMI) :; du produit, exprimés ici en yg/cm3~ Dans les tableaux sui~ants le produit décrit à l~exemple 1 sera désigné par produit A, celul décrit ~ l~exemple 2 par produit B~
.' .
. _ .._ ._ .~r__ _ ~ _ . Pr )duit A
I Souche~ 24 H 48 H
. ' ~
, . ~ _ ~:
, Staphylococcus Ox~ord U.C. 1061 0,5 0,5 ,' énicillino-sensible :: :
Staphylococcus aureus U.C. 1128 0~5 0~5 énicillino-résistant :
treptococcus hemolyticus 905 20 40 Streptococcus faecalis 5432 >100 _ Bacillus subtilis ~ 0,02 0,05 scherichia Coli U.`C. 1020 2 2 . seudomonas pyocyanea 7403 5 10 Elebeiella pneumoniae 52145 0,2 0,2 ¦ 20 Proteus mirabilis A 235 :.
I' - . . . ~
. Prodult B ! .. .. .
Souches . _ ._. __ _.. .

. . .
Staphylococcus aureus 4546 0~4 0,6 Staphylocoocus aureus 5159 0~6 1 Staph~lococcus aureus 397 0~2 0~2 Enterobacter aerogenes 6086 1 1 .. Enterobacter cloaca 681 0,6 0,6 ..
Proteus vulgaris A 232 5 10 Proteus morga~ii A 236 3 5 Pseudomonas pyocyanea 8054 15 . 20 Pseudomonas pyocyanea W 13 2393 10 20 Pseudomonas pyocyanea W 4 8429 5 10 . . - - ~ '" '~' , , ~ 4 ~6)4Z4~4 . . ~ . ~ . ~
i Produit ~ (Suite~
Souches _ _ .

__ . . ..... - . . ,... ... _ - .. ,, . .
Pseudomonas pyocyanea 7468 3 5 Escherichia Coli 8679 0~6 1 Escherichia Coli 7693 1 1 .
._ - . __, ............. _ . ... .
b) Activité antibactérienne in ~i~o:
______ ______________________ ~'activité antibactérienne a ét~ mesurée in vivo ~ur une infection exp~rimentale ~ staphylococcus aureus ~ 54146. 90 souris d'un poids moyen de 22 g sont réparties en 9 séries de 10 sourisO On pratique une infection intrapéri- `~
tonéale avec 0,5 cm3 d'une culture de staphylococcus aureus 54146 en bouillon nutritif Pasteur dilu~ au quart a~ec de l'eau distill~e st~rile. Qn traite par adminitration sous- :
cutanée de produit ~ par trois fois, une heure~ cinq heures et ~ingt-trois heures après l'infection; on note la mortalit~
de~ temps dii~érents apr~s l'in~ection et le nombre de souris urvivantes apr~s huit jours. ~es résultats sont ~.
résumés dans le tableau suivantO
- -. ....... .. ._._ . . . ~ .... _ Dose totale Mortali~é à .
admini~tree Survie a~
en base 5H7H 22H 48H 56 H 72H 94H 168H 8~me jouu libre) _ _ _ _ _ ~
Eau distil- l 7 2 _ _ _ _ _ O
- . _ _ .. - . . . .
Produit ~ .
(0,1 mg) _ _ 1 6 1 1 1 _ O
Produit B
(0.2 m~) _ 1 2 1 . fi _ Produit ~
~ _ _ 10 Produit ~ :
: (0,4 mg) _ _ ~ 10 _ -~ es r~sultats pr~cédents montrent la bonne activité
antibiotique des produits A et B.

:

Claims

Les réalisations de l'invention, au sujet desquelles un droit exclusif de propriété ou de privilège est revendiqué, sont définies comme il suit:

1. Procédé de préparation de la 4-O-(2',6'-diamino 2',3',4',6'-tétradésoxy .alpha.,D-érythrohexopyrannosyl) 6-O-(3"-méthylamino 3",4",6"-tridésoxy .alpha.,D-xylohexopyrannosyl) 2-désoxystreptamine de formule I

(I) ainsi que de ses sels d'addition non toxiques et pharmaceuti-quement acceptables avec les acides minéraux ou organiques, caractérisé en ce que l'on fait réagir le produit de formule II:

(II) avec un agent acide pour obtenir le produit de formule III:

(III) que l'on fait réagir sur le produit de formule IV:

(IV) en présence d'un catalyseur pour obtenir le produit corres-pondant sous forme d'un mélange d'anomères .alpha. et .beta. de formules V et VI:

(V) et:

(VI) mélange que l'on réduit par l'hydrogène en présence d'un catalyseur pour obtenir le mélange des produits de formules VII et VIII:

(VII) et:

(VIII) mélange dont on sépare, le cas échéant, le produit VII, puis que l'on traite ce mélange ou le produit VII par un agent alcalin pour obtenir soit le mélange des produits de formules I et IX:

(I) et (IX) mélange dont on sépare le produit de formule I cherche, soit le produit de formule I lui-même, produit de formule I que l'on soumet, le cas échéant, dans les deux cas, à l'action d'un acide minéral ou organique pour en obtenir le sel non toxique et pharmaceutiquement acceptable correspondant.

2. Le produit de formule I et ses sels non toxiques et pharmaceutiquement acceptables tels que définis à la revendication 1, chaque fois qu'ils sont obtenus par un procédé selon la reven-dication 1 ou ses équivalents chimiques manifestes.

3. Procédé selon la revendication 1, pour la prépa-ration du sulfate 4-O(2',6'-diamino 2',3',4',6'-tétradésoxy .alpha.,D-érythrohexopyrannosyl) 6-O-(3"-méthylamino 3",4",6"-tridésoxy .alpha.,D-xylohexopyrannosyl) 2-désoxystreptamine, caractérisé par le fait que l'on fait réagir une solution aqueuse de 4-O(2',6'-diamino 2',3',4',6'-tétradésoxy .alpha.,D-erythrohexopyrannosyl) 6-O-(3"-méthylamino 3",4",6"-tridesoxy .alpha.,D-xylohexopyrannosyl) 2-désoxystreptamine de formule (I) avec de l'acide sulfurique.

4. Le sulfate 4-O(2',6'-diamino 2',3',4',6'-tétra-désoxy .alpha.,D-érythrohexopyrannosyl) 6-O-(3"-méthylamino-3",4",6"-tridesoxy .alpha.,D-xylohexopyrannosyl 2-désoxy-streptamine, chaque fois qu'il est obtenu par un procédé selon la revendication 3 ou ses équivalents chimiques manifestes.