CA1097340A - Derives de la cephalosporine, leur preparation et les compositions qui les contiennent - Google Patents

Abstract

Nouveaux dérivés de la céphalosporine, répondant à la formule générale: (I) dans laquelle R représente le radical carboxy ou un radical de formule générale: (II) dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène et R2 représente un radical alcoyle oontenant 1 à 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée, le radical étant facilement éliminable par voie enzymmatique, sous ses formes diastéréoisomères et leurs mélanges, ses sels d'addition avec les acides et éventuellement ses sels métalliques et ses sels d'addition avec les bases organiques azotées. Les produits selon l'invention sont particulièrement utiles dans le traitement des infections bactériennes.

Description

La pr~sente invention concerne de nouveaux dérivés de la céphalosporine de formule générale:

< ~ -CHI - CONH ~
NH2 = ~-- ~ ~ CH3 R . ;
leurs sels d'addition avec les acides et éventuellement leurs sels métalliques et leurs sels d'addition avec les bases orga~
niques azotées. L'invention vise également un procédé de préparation de ces nouveaux dérivés.
Dans la formule générale (I), R représente un radical carboxy libre ou sous forme de sel métallique ou sel d'addition avec une base organique, ou un radical de formule générale:
- CO - O - CH - OCO - R2 (II) , , Rl dans laquelle Rl représente un atome d'hydrogène et R2 repré-sente un radical alcoyle contenant 1 a 4 atomes de carbone en chaine droite ou ramifiée, le radical . Rl étant un radical facilement éliminable par voie enzymatique tel-que le radical pivaloyloxyméthyle.
Il est entendu que les produits de formule géné-rale (I) dérivent des formes D,L et DL de l'aminoacide de formule:

< ~ -CH - COOH (III) --^~

.et que les formes diastéréoisomeres ainsi résultantes des produits de formule générale (I) etleurs mélanges entrent dans le cadre de -- 1 -- . .

la présente invention.
Selon l'invention, les nouveaux produits de formule générale (I) sont obtenus par action de l'acide de formule (III) sous forme racémique ou optiquement active dont la fonction amine est préalablement protégée, ou d'un dérivé réactif de cet acide, sur une céphalosporine de formule générale:

= N ~ - CH3 (IV) R

dans laquelle R est défini comme précédemment.
Lorsque l'on utilise l'acide de formule (III), la protection du groupe amino s'effectue par toute méthode connue ~-en soi pour le blocage d'une fonction amine sans toucher au reste de la molécule. Il est nécessaire d'utiliser un groupement facilement éliminable tel que le groupement tertiobutoxycarbonyle ou trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyle. Il est particulièrement avantageux d'utiliser le groupement tertiobutoxycarbonyle, qui peut être introduit par action du dicarbonate de ditertiobutyle, de l'azidoformiate de tertiobutyle, du chloroformiate de tertio-butyle ou du carbonate mixte de tertiobutyle et p.nitrophényle.
Il est également possible de protéger le radical amino sous forme d'une énamine de formule générale:
< s3 CH - COOH

3 ~ H (V) ~0 . .~

dans laquelle le symbole R3 represente un radical alcoyle ~0~7340 contenant l à 4 atomes de carbone et le symbole R4 représente un radical alcoyle contenant l à 4 atomes de carbone, alcoyloxy dont la partie alcoyle contient 1 à 4 atome de carbone, ou phényle.
L'énamine de formule générale (V) peut être préparée selon la méthode décrite par E. DANE et coll., Chem Ber., 98, 789 (1965).
Lorsque R représente un radical carboxy, on effectue généralement la condensation du produit de formule (III) dont la fonction acide est libre et dont la fonction amine a été préala- -blement protégée sur l'acide amino-7 désacétoxy-3 céphalosporani-que dont la fonction acide a été préalablement protégée par un groupement facilement éliminable tel que le radical benzhy-dryle, tertiobutyle ou tricloro-2,2,2 éthyle.
Généralement, on effectue la condensation dans un solvant organique tel que le diméthylformamide, l'acétonitrile, le tétrahydrofuranne ou le chloroforme, en présence d'un agent de condensation tel qu'un carbodiimide (par exemple dicyclohexyl-carbodiimide) ou le N,N'-carbonyldiimidazole à une température comprise entre 0 et 40C puis élimine les groupements protec-teurs des fonctions amine et acide.
Selon la nature des groupements protecteurs, cette élimination peut être effectuée en une seule étape ou en deux étapes.
Lorsque le groupement protecteur de la fonction amine est un radical tertiobutyloxycarbonyle, selon la nature du groupement protecteur de la fonction acide, l'élimination s'ef-fectue: - en une seule phase par traitement en milieu acide lorsque la fonction acide est protégée par un groupement tertio-butyle ou benzhydryle. De préférence, on utilise l'acide tri-fluoroacétique en opérant à une température comprise entre 0 et 20C (et, dans le cas du radical benzhydryle, en présence '~' d'anisole) ou l'acide paratoluènesulfonique. Dans ces conditions le produit de formule générale (I) est obtenu sous forme de tri-fluoroacétate ou de paratoluènesulfonate, dont on peut libérer la fonction amine par toute méthode connue en soi pour obtenir une amine à partir de l'un de ses sels sans toucher au reste de la molécule. On opère notamment par mise en contact avec une résine échangeuse d'ions (par exemple une résine polystyrènea-mine, telle que l'Amberlite* IR-45) ou par action d'une base organique.
- par traitement par le zinc dans l'acide acétique, puis rempla-cement du radical tertiobutyloxycarbonyle par traitement en milieu acide, lorsque la fonction acide est protégée par le radical trichloro-2,2,2 éthyle. Le traitement en milieu acide s'effectue par l'acide trifluoroacétique; dans ces conditions, le produit de formule générale ~I) est obtenu sous forme de trifluoroacétate et l'amine libre peut être libérée de son sel dans les conditions décrites précédemment.
Lorsque le groupement protecteur de la fonction amine est un radical trichloro-2,2,2 éthoxycarbonyle, selon la nature du groupement protecteur de la fonction acide, l'élimination s'effectue:
- par traitement par le zinc dans l'acide acétique puis traite-ment en milieu acide, de préférence par action de l'acide tri-fluoroacétique, lorsque le groupement protecteur de la fonction acide est un radical tertiobutyle ou benzhydryle, - par traitement par le zinc dans l'acide acétique lorsque le groupement protecteur de la fonction acide est un radical trichloro-2,2,2 éthyle.
Lorsque la fonction amine est protégee sous forme d'énamine, selon la nature du groupement protecteur de la fonc-tion acide, l'élimination s'effectue.

- par hydrolyse en milieu acide dilué, par exemple en présence * Marque de commerce " lQ97340 :

d'acide chlorhydrique, puis traitement par l'acide trifluoroa-cétique, lorsque le groupement protecteur de la fonction acide est un radical tertiobutyle ou benzhydryle, - par hydrolyse en milieu acide, par exemple en présence d'acide chlorhydrique, puis traitement par l'acide trifluoroacétique, lorsque le groupement protecteur de la fonction acide est un radical trichloro-2,2,2 éthyle.
Lorsque R représente un radical de formule générale (II) tel que défini précédemment, on effectue généralement la condensation de l'acide de formule (III) sur le dérivé de formule générale (IV) dans un solvant organique tel que le diméthylfor-mamide ou le chloroforme en présence d'un agent de condensation tel qu'un carbodiimide (par exemple dicyclohexylcarbodiimide) ou le N,N'-carbonyldiimidazole à une température comprise entre 0 et 40C, puis on élimine le groupement protecteur de la .
fonction amine dans les conditions décrites ci-dessus.
Lorsque l'on utilise un dérivé de l'acide de formule (III), il est avantageux de mettre en oeuvre l'anhydride, un anhydride mixte ou un ester réactif de formule générale~

S
3 CH - COOR5 (VI) dans laquelle R5 représente un radical succinimido, benzotriazo-lyl-l, dinitro-2,4 phényle et dont la fonction amine a été
préalablement protégée; il est également avantageux de mettre en oeuvre le chlorure d'acide en faisant réagir le chlorhydrate du chlorure de l'acide de formule (III) sur la cephalosporine de formule générale (IV). Il est aussi possible d'utiliser l'anhy-dride de Leuchs.
Lorsque l'on met en oeuvre l'anhydride mixte, l'anhy-~X

dride de Leuchs ou le chlorure d'acide (qui peuvent être préparésin si~ . Qn effectue la condensation dans un solvant organique tel_ : Z

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que le tétrahydrofuranne, le chloroforme ou le chlorure de méthylène, en pré~ence d~un accepteur d~acide tel qu'une ba~e or-ganique azotée comme la pyridine ou la .triéthylamine, ou dans un .
milieu hydroorganique en présence d~un agent alcalin de conden-sation tel que le bicarbonate de ~odium et l'on opare à une tem-parature compri~e entre -40 et +40 C pui~ remplace éventuellement le groupement protecteur de la fonction amine par un atome dthydrogène Dan~ ~e cas où R repré~ente un radical carboxy, il n~e~t pa~ néce~saire de protéger la fonction acide.
~or~que l'on met en oeuvre un ester réa~tif de formule générale (VI) on op~re généralement en présence de triéthylamine dan~ un solvant organique tel que le diméthylformamide à une température compri~e entre 0 et 40C pui~ remplace le groupement protecteur de la fonction ~mine par un atome d'hydrogène. Dans - le cas o~ R représente un radical carboxy, il n'eæt pas néces~aire de protéger la fonction acide. ...
~acide de formule ~III) peut être obtenu:
a) soit par déformylation de l'acide ~-formylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique Généralement, la réaction ~'effectue en milieu acide aqueux a une température comprise entre 0 et 100C. De préférence, on utili~e un acide minéral tel que l'acide chlorhydrique en colu-tion dans l~eau à une température voisine de 100 C.
~acide ~-formylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique peut être obtenu par ~aponification de l'ester corre~pondant de formule générale:
(~II) < ~ - ~H - COOR6 <S ~ = IC - COOR6 dans laquelle R~ repré~ente un radical alcoyle contenant 1 ~ 4 ` '"` 1C~7340 atomes de carbone, en opérant dans des conditions qui permettent de saponiier l'ester en l'acide correspondant Sans toucher au reste de la molécule.
Généralement, on traite l'ester à saponifier par un hydroxyde alcalin en milieu hydro-alcoolique à une température comprise entre 0 et 50 C. De préférence on utilise l'ester méthylique ou éthylique et effectue la saponification en milieu hydrométhanolique ou hydro-éthanolique à une température voisine de 5C.
L'ester de formule générale (VII) peut être obtenu par action d'un isocyanoacétate de formule générale:
CN - CH - COOR6 (VIII) dans laquelle R6 est défini comme précédemment sur la dithia-l, 3 cyclohexanone-5.
Généralement, la réaction s'effectue dans un solvant organique anhydre tel que le tétrahydrofuranne en présence d'un agent alcalin de condensation tel que le tertiobutylate de potas-sium et en opérant à une température comprise entre -70 et 0C. .
L'isocyanoacétate de formule générale (VIII) peut être préparé selon la méthode décrite par U. SCHOLLKOPF et coll., Chem. Ber., 108, 1580 (1975).
La dithia-1,3 cyclohexanone-5 peut être préparée selon la méthode décrite par E.G. HOWARD et R.V. LINDSEY, J. Amer.
Chem. Soc., 82, 158 (1960).
Les formes optiquement actives de l'acide de formule (III) peuvent être obtenues à partir du racémique par application de méthodes physico-chimiques ou par voie enzymatique.
b) soit par saponification de l'ester de formule générale:

/ ~ /
\S ~ NH COOtBu (IX) 1~97340 dan~ laquelle R représente un radical alcoyle con~enant 1 à 4 atome~ de carbone, sui~ie de l'élimination du gr~upement protec-teur de la fonction amine.
On effectue aYantageu~ement la saponi~ication en milieu hydroalcoolique par txaitement par un hydroxyde alcalin ~ une température comprise entre O et 50 C.
De préférence .on utili~e la ~oude, et l'on traite l'ester méthylique ou éthylique en.milieu hydro-méthanolique ou hydro-éthanolique à une température voisine de 20 C.
~or~que l'on désire obtenir un produit de formule (III) dan~ lequel la fonction amine e~t 7ibre, l'élimination du grou-~pement protecteur s'effectue généralement en présence d'acide .. ;
trifluoracétique à une température- comprise entre O et 30C.
~or~que l'on dé~ire obtenir les formes D ou ~ de 11acide ~
de formule (III) il peut ~tre avantageux d'effectuer la séparation de~ formes optiquement active~ avant l'élimination du groupement protecteur de la fonction amine.
Par exemple, on peut traiter la forme racémique par la quinine dans un solvant tel que la méthyléthglcétone.
~es 3el~ de~ forme~ D et ~ sont purifié~ par ~ristalli-sation; les acides libres D et ~ sont isolés ~ partir de ce3 sels, pui~ le groupement protecteur de.la fonction amine e3t éli-m$né pour obtenir les formes D et ~ de l'aminoacide de formule (III).
~'ester de formule générale (IX) peut 8tre ~btenu par ac-tion du tert~butylate de potassium ~ur un produit de ~ormule gé-nérale:
~S . , (X) 30 S ~ -COO t.~u ~1~97340 dan~ laquelle R7 est défini comme précédemment.
On opère généralement dan~ un solvant organique tel que le tétrahydrofuranne à une température comprise entre -78 et 0C.
~ e produit de formule générale (X) peut e~tre obtenu par action d~un isothiocyanato a~étate d~alcoyle (par exemple d~éthy-le) sur la dithia-1,3 cyclohexanone-5, en présence de tert'buty-late de pota~ium, suivie de 17action du dicarbonate de ditert, butyle.
On opère généralement dans un solvant tel que le tétrahy-drofuranne à une température comprise entre -78 et O C.
~ e produit de formule générale (IV) dans laquelle R repré-sente le radical carboxy est l~acide amino-7 désacétoxy-3 cépha-losporanique (ou 7-ADCA); il peut Btre obtenu soit ~ partir d'une pénicilline 3elon le procédé qui .fait llobjet du.brevet belge 747 382, soit par dé~acétoxylation de l~acide amino-7 céphalospo-ranique (ou 7-ACA) selon le procédé qui fait l'objet du brevet belge 779 034.
~ e produit.de formule générale (IV) dans laquelle R repré-sente un radical de formule générale (II) dans laquelle Rl et R2 sont définis comme précédemment, peut être préparé à partir de l~acide amino-7 désacétoxy-3 céphalosporanique par toute méthode ¢onnue en 80i pour préparer un ester à partir dlun acide sans toucher au reste de la molécule, Généralement, on fait réagir un ~el alcalin ou un sel d~amine tertiaire de l'acide ~mi n o-7 dé~acétoxy-3 céphalosporani-que sur un halogénure de ~ormule générale:

. Z - lH - OCO - R2 (XI) "` 1097340 dans laquelle Rl et R2 sont définis comme précédemment et Z
repr~sente un atome d~halogène, dans un solvant inerte tel que le diméthylformamide, à une température comprise entre 0 et ~0 C.
~es produits de formule générale ~XI) peu~ent etre pré-- paré~ selon la méthode dé~rite dans le brevet canadien numero .007.~34. `
Selon liinvention, les produits de formule générale (I) dan~ laquelle R représente un radical de formule générale (II) ~ ~`
dans laquelle Rl et R2 sont définis comme précédemment peuvent aussi ~tre obtenus par estérification d~un produit de formule gé-nérale (I) dans laquelle R représente un radical carboxy et dont la fonction amine a été préalablement protégée par toute méthode connue e~ aoi pour préparer un ester à partir d'un acide san~
toucher au reste de la molécule.
G~néralementJ on fait réagir un sel alcalin ou un sel d'amine tertiaire d'un produit de formule générale (I) tel que défini ci-dessus dont la fonction amine a été préalablement pro-tégée, sur un halogénure de formule générale (XI) dans laquelle Rl, R2 et Z sont définis comme précédemment. De préférence, on opare dan3 un solvant inerte tel ~ue le diméthylformamide, ~ une température comprise entre 0 et 30 C~ puis on élimine le groupe protecteur de la fonction amine par toute méthode connue en soi.
~ es formes diastéreoisom~e~ des produits de formule gené-rale (I~ peu~ent aussi ~t~e obtenues ~ partir de Ieur mélange par application de méthodes connues. Il est po~sible d~effectuer cette s~paration aux dî~férents stades de la s~nthèse. Par exemple, la séparation peut être réalisée par chromatographie, sur un support oonvenable, d~un produit de formule générale (I) dont les fonctions amine et acide ~ont protégees. I,es diasteréoisomères de~ produits de formule générale (I) sont alors isolés apr~s élimination des groupements protecteurs dans les conditions habituelles.

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~[)97340 ~ es nouveaux produits selon l~invention peuvent etre éventuellement purifiés par des méthodes physiques telles que la cristallisation ou la chromatographie.
~ es nouveaux produits selon l~invention peuvent ~tre traIlsformés en ~els d'addition a~ec les acides. Selon le pro-cédé de la présente invention, le~ produits sont généralement ob-tenus sous forme de trifluoroacétate ou d~ paratoluènesulfonate.
Le~ produits de formule générale (I) obtenu~ SOU5 forme de ces sels peuvent etre libérés et transf~rmés en sels d'autres acides selon les méthodes habituelles.
~ es produits de formule générale (I) dans laquelle R
représente le radical carboxy peu~ent aussi être transformés en sels métalliques ou en sel~ d'addition avec les bases organiques azotées ~elon les méthodes connues en soi. Ces sel~ peu~ent être obtenus par action d~une base métallique (par exemple alcaline ou alcalino-terreuse) ou d'une amine sur un produit de formule géné-rale (I) dans un solvant approprié tel qu'un alcool, un éther ou l'eau ~ par réaction d'échange avec un sel d~un acide organique.
~e sel formé pr~cipite, après concentration éventuelle de sa solution, il est séparé par filtration ou décantationr ~ es nouveaux dérivés de la céphalosporine selon la présen-te invention présentent des propriétés anti~actériennes particu-lièrement intéressantes. Ils manifestent une activité remarqua-ble in vitro et in vivo sur les germes Gram-positifs et Gram-négatifs.
In vitro, les produits selon l'invention se sont montrés actifs à une concentration comprise entre 2 et 15 ~g/cm3 sur des souches de staphylocoques ~ensibles a la pénicilline G (Staphylo-coccus aureus Smith), ~ une concentration comprise entre 10 e~
150 ~g/cm3 sur des souches de staphylocoques résistances ~ la pénicilline G (Staphylococcus aureus MB 9), à une concentration comprise entre 0,125 et 1,5 ~g/cm3 sur Streptococcus pyogenes ` ~97340 Dig 7, ~ une concentration comprise entre 2 et 30~hg/cm3 ~ur Escherichia ~oli souche Monod, à une concentrationcoomprise entre 4 et 30 ~g/cm3 sur Klebsiella pneumoniae, ~ une concentration comprise entre 1 et 8 ~g/cm3 sur Salmonella typhi, à une con- ;
centration comprise entre 1 et 8 ~g/cm3 sur Shigella flexneri et à une concentration comprise entre 5 et 20 kvg/cm3 sur Proteus mixabilis.
In vivo, les produit~ se sont montrés actifs sur les in-fections expérimentales de la souris à Staph~lococcus aureus Smith (sensible ~ la pén~cilline G) à une dose comprise entre 0,05 et 0,6 mg/kg par voie oral~;ou sous-cutanée et ~ ~scherichia coli à une dose compri~e entre 1 et 6 mg/kg par voie orale ou sous-cutanée.
Par voie sous-cutanée, chez la souris, les produits se montrent atoxiques a la dose de 2,5 g/kg.
Dtun intér8t tout particulier sont les produits de formule générale (I) dans laquelle R représente un radical carboxy, et notamment le produit pour lequel l'aminoacide lié au noyau cépha-losporine est ~OU9 forme D.
~a présente invention concerne également des compositions pharmaceutiques utilisables en thérapeutique qui contiennent com-me produit actif au moins un produit de formule générale (I) en association avec un ou plusieurs diluants ou adjuvants pharmaceu~
tiquement acceptables. Ces compositions peuvent être utili~ées par voie orale, parentérale ou rectale.
Comme compositions solides pour admistration orale peuvent être utilisés des comprimés, des pilules, des poudres ou des gra-nulés. Dans ces compositions, le produit actif selon l'invention est mélangé à un ou plusieurs diluant~ ou adjuvants inertes, tels que ~accharose, lactose ou amidon. Ces compositions peuvent également comprendre des substances autres que les diluants, par exemple un lubrifiant tel que le stéarate de magnésium ~97340 Comme composition~ uides pour administration orale, on peut utiliser des émulsions pharmaceutiquement acceptables, de~ solutions, de~ suspension~, des sirops e~ des élixirs conte-nant des diluants inerte~ tels que l'eau ou l'huile de paraf~ine.
~es composition~ peuvent également comprendre des substances au-tres que les diluants, par exemple des produits mouillant~, édul-corants ou aromatisants.
~ eq compo~itions pour administration parentérale peuvent ~tre de~q solutions stériles aqueuses ou non aqueuses, des suspen-sion~ ou des émulsion~. Comme ~olvant ou véhicule on peut emplo-yer le propylaneglycol, le polyéthylèneglycol, le~ huile~ végéta-les, en particulier l'huile d'olive et les esters organiques injectables, par exemple l'oléate d'éthyle.Ces compositions peu-vent également contenir des adjuYants, en particulier des agent~
mouillants, émulsiflants ou dispersants. ~a stérili~ation p~ut se faire de plu~ieurs façon~, par exemple à l'aide d'un fil~re bacté-riologique, en incorporant à la composition de~ agent~ ~térilisants, par irradiation ou par chauffage ~lles peuvent ~tre également préparées sous forme de compositions solide~ stériles qui peuvent etre dissoutes au moment de l'emploi dans de lteau stérile ou tout autre milieu ~térile injectable.
~ es compositions pour administr~tion rectale sont de3 ~uppositoires qui peuvent contenir, outre le produit actif, des excipient~ tels que le beurre de cacao ou la suppo-cire En thérapeutique humaine, les composition~ selon l'inven-tion sont particulièrement utiles dans le traitement des infections d'origine bactérienne.
Dlune façon générale, le médecin déterminera la posologie qu'il estime la plus appropriée en fonction de l'âge, du poias, du degré de l'infection et des autre~ facteurs propres au su~et à
tràiter. Généralement, les doses sont comprises entre 1 et 12 g par ~our de produit actif par voie orale, intramu~culaire ou ~.~97340 ;;

intraveineuse pour un adulte.
~ es exemples suivants, donnés ~ titre non limitatif, mon-trent comment l'invention peut se mettre en pratique.
EXEMP~E 1 A une solution de 13 g d'acide D~L-~-tert-butoxycarbony-lamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique dan~ 160 cm3 de tétrahydro-furanne on ajoute, 90US agitation, 6,25 cm3 de triéthylamine.
On refroidit le mélange à -10C et ajoute goutte ~ goutte 5,8 cm3 de ¢hloroformiate d'isobutyle. ~e mélange réactionnel est agité
pendant 10 minutes à -10C pUi9 on a~oute une solution de 9,54 g d'amino-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~ .2.07 octène-2 dans un mélange de tétrahydrofuranne (140 cm3), d'eau (140 cm3) et de triéthylamine (6,25 cm3). On agite le mélange réactionnel à 0C pendant 30 minute~ puis à 20C pendant 90 minu-tes. ~es solvants sont évaporés sous pression réduite (20 mm de mercure) à 30 C. On a~oute 300 cm3 d'eau et 50 cm3 de ~olution aqueuse saturée de bicarbcnate de sodium puis on extrait avec 500 cm3 d'acétate d'éthyle. ~a phase aqueuse est ~éparée et aci-difiée ju9qu~ pH = 2,0 par addition d'acide chlorhydrique 4N en présen¢e de 500 cm3 d'acétate d'éthyle. On sépare la phase orga-nique et extrait de nouveau avec 200 cm3 d'acétate d'ethyle. ~esdeu~ dernières phases organiques réunies ~ont lavée~ avec 150 cm3 de solution aqueuse saturée de chlorure de sodium puis séchées sur sulfate de sodium et filtrées en présence de noir décolorant.
On concentre à sec sous pression réduite (20 mm de mercure) à
30 C pour obtenir 18,7 g de ~ ,~-~-tert-butoxycarbonylamino (dithi-inne-1,3 yl-5) acétamid~ -7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicycloL~.2.~ octène-2 sous la forme d'une méringue blanche.
-On di~sout 2,7 g de ~ ,~ tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido7-7 carboxy-2 méthyi-3 oxo-8 thia-5 aza-1 bicyclo~ .2. ~ octène-2 dans 3 cm3 d'anisole et 15 cm3 1~97340 d1acide trifluoroacétique. ~a ~olution obtenue est agitée 15 minutes à 20 C~ On concentre ^~à sec sou~ pression réduite (0,5mm - de mercur~) à 30 C. ~e résidu est rep,r~ avec 15 ~m3 d'acétate d~éthyle puis on ajoute 100 cm3 d'oxyde d~i~opropyle. Il appara~t un précipité blanc qui est séparé p~r ~iltration. On obtient ainsi 2,4 g de trifluoroacétate de D,~ amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo ~ ~4.2 0/ octène-2 brut sous forme de solide blanc.
Une solution de 11,9 g de trifluoroacétate de /D,~ amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido/-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~ .2.~ oct~ne-2 dans 500 cm3 d~eau di~tillée est extraite avec trois foi~ 100 cm3 d~acétate d'éthyle. ~a phase aqueuse est traitée par 50 cm3 de résine hl~m;de Amberlite IR-45 (OH ~) jusqu'à ce que le pH soit stabilisé ver~
5,25 (environ une heure). ~a résine est séparée par filtration.
~a phase aqueuse est lyophilisée. On obtient ainsi 5,7 g de /D,L- ~-amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamidoT-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~ .2.07 octène-2 dont les caractéri3-tiques sont les suivants:
~ 7D = + 131,2 ~ 2 (c = 0,98 ; eau) -Analyse élémentaire: % Calc. C 43,39 H 4,42 N 10,84 0 16,52 S 24,83 % Tr, C 42,6 H 3,8 N 10,7 S 24,6 -Spectre IR: bandes caractéristiques 3300-220~ cm (NH amide et NH

1755 cm : carbonyl du~ -lactame 1575 cm : -COOH
~'acide D,~- ~-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique peut être préparé de la maniare ~uivante-- A une suspension de 19,1 g d'acide D,~-d -amino (di-thii~-ne-1,3 yl-5) acétique dans un mélange de 130 cm3 de dioxanne et 1~97340 de 130 cm3 d'eau, on ajoute successivement 10,6 g de carbonate de sodium pui~ une ~olution de 24 g de dicarbonate de di-tert-butyle dans 130 cm3 de dioxanne. Cette suspen~ion est agitée pendant 18 heures ~ 20 C. ~es ~olvants sont évapoxés SOUB pression résuite (20 mm de mercure) à 40C. On ajoute 200 cm3 d-teau et 50 cm3 d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium.
On lave troig fois avec 300 cm3 d'acetate d'éthyle. ~a phase aqueuse est acidifiée jus~u'~ pH = 1,5 aYec de l'acide e~lorhy-drique 4N. On extrait avec deu~ fois 250 cm3 d'acétate d'éthyle.
Les extraits organiques réunis sont lavé~ par 150 cm3 de solution saturée de chlorure de ~odium et ~échés sur sulfate de sodium.
~a solution e~t traitée par du noir décolorant pui~ filtrée, et concentrée à ~ec sous pression réduite (20 mm de mercure) à 30C.
On obtient 26 g d'acide D,~ tert-butoxycarbonylamino (dithi-inne-1,3 yl-5) acétique sous la forme d'une méringue blanche ~ 'acide D,~- ~ -amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique peut ~tre préparé de la mani~re suivante:
Une ~uspen~ion ae 63 g d'acide D,~- ~-formylamino (dithi-inne-1,3 yl-5) acétique aans 320 cm3 d'acide chlorhydrique 4H est chauffée à 90 C ~u~qu'~ di~olution complète. On refroidit à 20 C
et traite par du noir décolorant. ~a ~olution est filtrée puis amenée à pH = 4,5 par addition de soude 4N. ~e précipité apparu e~t séparé par filtration. On obtient ainsi 41 g d'acide D,~d-amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique sous forme de solide blanc fondant vers 270 C avec décomposition.
~ 'acide D,~X-formylamino (dithiinne~1,3 yl-5) acétique peut etre préparé de la manière suivante:
Une su~pension de 72 g de mélange en équilibre de ~_formylamino (dihydro-4,5 dithiinne-1,3 ylidène-5) acétate d'éthyle et de D,~lo_formylamino (dithii~ne-1,3 yl-5) acétate d'éthyle dan~ 720 cm3 d'éthanol et 200 cm3 d'eau est refroidie à

5C. On ajoute 3Q cm3 de soude 4N. I.e mélange réactionnel est `-agité pendant g0 minutes à 5C. On concentre jusqu'à un voLume de 100 cm3 sous pression réduite (20 mm de mercure). La solution obtenue est refroidie en bain de glace et acidifiée jusqu'a pH =

2,0 par addition d'acide chlorhydrique 4N. Le précipité apparu est séparé par filtration. On obtient ainsi 67 g d'acide D,L-~-formylamina (dithiinne-1,3 yl-5) acétique brut sous forme de solide blanc.
Le mélange de ~-formylamino (dihydro-4,5 dithiinne-1,3 ylidène-5) acétate d'éthyle et de D,L-~-formylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétate d'étyle peut être préparé de la manière suivante:
Une solution de 27,2 g tert-butylate de potassium ,-dans 200 cm3 de tétrahydrofuranne est refroidie à 0C. On a]oute goutte à goutte une solution de 25 g d'isocyanoacetate d'éthyle dans 150 cm3 de tétrahydrofuranne. On agite encore pendant une heure à 0C puis on ajoute une solution de 29,6 g de dithia-1,3 cyclohexanone-5 dans 375 cm3 de tétrahydrofuranne. Le mélange reac-tionel est encore agité pendant 90 minutes à 0C. On ajoute 50 cm3 d'acide acétique et sépare le précipité par filtration. Les solvants sont évaporés sous pression réduite (20 mm de mercure) à
30C. Le résidu est repris dans 2500 cm3 de chlorure de méthylène.
On extrait avec un mélange de 500 cm3 d'eau et de 300 cm3 de so-lution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium. La phase orga-nique est encore lavée avec 500 cm3 d'eau et séchée sur sulfate de sodium. La solution est traitée par du noir décolorant, fil-trée, puis concentrée à sec sous pression réduite (20 mm de mer-cure) à 30C. Le résidu est fortement agité avec 400 cm3 d'éther éthylique. Le précipité obtenu est séparé par filtration. On obtient ainsi 18,5 g de ~-formylamino (dihydro-4,5 dithiinne-1,3 ylidène-5) acétate d'éthyle. Le filtrat est concentré à sec sous pression réduite (20 mm de mercure) à 20 C. Le résidu est purifié

par chromatographie sur une colonne (diamètre 3,7 cm; hauteur 47 cm) contenant 250 g de silice. On élue avec deux litres de mélange chlorure de méthylène-acétate d'éthyle (85-15 en volumes). On obtient ainsi 4,4 g d'un mélange de ~-formylamino ;
(dihydro-4,5 dithiinne-1,3 ylidène-5) acétate d'éthyle et de ~-formylamino (dithiinne-1,3 yl~5) acétate d'éthyle. ... ~r L'isocyanoacétate d'éth~le peut être préparé selon U.
SCHOLLKOPF, D. HOPPE et R. JENTSCH, Chem. Ber., 108, 1580 (1975).
La dithia-1,3 cyclohexanone-5 peut être préparée 10 selon E.G. HOWARD et R.V. LINDSEY, J. Amer. Chem. Soc., 82, 158 (1960).

A une solution agitée de 102 g d'acide D-~-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique dans 1330 cm3 de tétrahydrofuranne, on ajoute 49 cm3 de triéthylamine. On refroidit le mélange à -10C et on ajoute goutte à goutte 48,4 cm3 de chloroformiate d'isobutyle. Le mélange réactionnel est agité pendant 15 minutes à -10C puis on ajoute une solution de 75 g d'amino-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo 20 ~4.2. ~ octène-2 dans un mélange de 1190 cm3 de tétrahydrofuranne et de 49 cm3 de triéthylamine. On agite le mélange réactionnel à 0C pendant 1 heure puis à 20C pendant 2 heures. Le solvant est évaporé sous pression réduite (20 mm de mercure) à 40C.
On ajoute 1000 cm3 d'eau et 200 cm3 de solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, puis on extrait avec 1000 cm3 d'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est acidifiée à pH = 2 par addition d'acide chlorhydrique 4N en présence de 1000 cm3 d'acétate d'éthyle.
On sépare la phase organique et extrait encore deux fois avec 500 cm3 d'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont réunies, 30 lavées avec 1000 cm3 de solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, séchées sur sulfate de magnésium, filtrées et concentrées à sec sous pression réduite (20 mm de mercure) à 30C. Le résidu est traité avec 1500 cm 3 de -1~97340 cyclohexane. B'insoluble est essoré et seché. On obtient ainsi 158,5 g de /D- ~-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido7-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicylo~ .2.07 octane-2 brut sous la ~orme d'une poudre blanche.
On diæsout 354,5 g de produit obtenu dans les conditions décrites ci-dessu~ dans 1770 cm3 de méthanol à 35 C. On ajoute 145 cm3 de dicyclohexylamine puis 1770 cm3 dlacétone. On laisse reposer le mélange pendant 90 minutes à O C puis on essore et sèche les cristaux sous pression réduite (]~m de mercure) à 20 C.
On obtient ainsi ~26~4 g du sel de dicyclhoxylami~e de ~D~-t~rt-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétami~o~-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo/4.2.0/ octane-2 sous forme de cristaux blancs.
Une suspension de 29,5 g du sel ainsi obtenu dans 300 cm3 d'eau est acidifiée à pH = 2 par addition d'acide chlorhydrique 4N en pré~ence de 300 cm3 d'acétate d'éthyle. On sépare la phase organique et extrait encore deux fois avec au total 150 cm3 d'acé-tate d'éthyle. Le~ phases organiques sont réunies, lavées avec 150 cm3 de solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, séchée~
sur sulfate de sodium, filtrées et concentrées ~ sec sous pression réduite (20 mm de mercure) à 30 C, On obtient ainsi 21,5 g de /D-~-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamiAo~-7 oarboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l ~icyclo~402.0~ octène 2 sous la ~orme d'un ~olide blanc.
Spectre IR (KBr): bandes caractéristiques 3320 cm 1 (NH amide et carbamate) 1770 cm 1 (carbonyle du ~-lactame) 1700 cm 1 (carbonyle de l'acide et du carbamate) 1680 cm 1 (carbonyle de l'amide) 1390 et 1365 cm 1 (tert-butyle) Une solution de 20,3 g de ~D-~ - tert-butoxycarbonylamino 1~97340 (dithiinne-1,3 yl-5) acétamid~ -7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~ .2.07 octane-2 dans 200 cm3 d~acide trifluoroacé-tique est agitée pendant 20 minutes à 20 C environ. Cette solu-tion e~t ajoutée en 30 minutes, sous agitation, dans 1000 cm3 d~éther éthylique à O C. ~e précipité est essoré et séché 80US
pression réduite (1 mm de mercure) à 20 C. On obtient ainsi 15,7 g du trifluoroacétate de ~ -~-amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétami-do/-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~ .2.0~ -octène-2, que l'on disæout dans 750 cm3 d~acétone. On ajoute alor~ ~,2 cm3 de triéthylamine pour obtenir un pH = 4,8. ~e préci-~ité est essoré et lavé avec 400 cm3 d'éther éthylique. On ob-tient ainsi 10,6 g de ~ -~-amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido7-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~ .2.~ octane-2 sous forme d~un solide beige.
On dissout 14,45 g de /D-~-amino (dithiinne-1,3 yl-5) acé-mido/-7 carboxy-2 métnyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo/4.2.0/
octène-2 ainsi préparé dans 750 cm3 d~eau, puis on ajoute 750 cm3 d'acétonitrile. Au bout d'une heure, les cristaux ~ont éssorés et séchés sous pression réduite (1 mm de mercure) ~ 20 C. On ob-tient ainsi 9,8 g de ~ -a-amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétam~do~-7 car~oxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo[4.2.0~ octène-2 ~ous la forme de cristaux blancs.
~ 137 1 2 (c - 1, bicarbonate de sodium O,l N) Analyse élémentaire: % calc. C 43,39 H 4,42 N 10,84 0 16,52 S 24,83 % ~r. 43,9 4,9 103 16,6 23,5 ~acide D-~-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique peut être obtenu de la m~nièr~ suivante:
On chauffe à reflux une solution de 212 g d'acide D,~-~-tert-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) ac~etique et de 236 g de quinine dana 4300 cm3 de méthyléth~lcétone On lais~e refroi-dir, laisse pendant 3 heures sous agitation et sépare par filtration 169 g de cristaux blancs que l'on écarte. ~e filtrat est agité pendant 16 heures ~ température ambiante. Une filtra-tion permet d'isoler 150 g de cristaux blancs.
Une ~uspension de 375 g de cristaux ainsi obtenus dans 3750 cm3 de méthyléthylcétone est chauffée ~ 80 C jusqu'à disso-lution complate. On lai~se refroidir la solution puis on sépare par ~iltration les cristaux obtenus. On obtient ainsi 187 g de sel de quinine de l'acide D-~_tert-butoxycarbonylamino (dithiin-ne-1,3 yl-5) acétique SOU8 forme de cristaux blancs.
Gn ajoute 98,5 g de sel de quinine de l'acide D-~-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique à un mélange agi-té de 2 litres d'eau et 2 litres d'ether éthylique en maintenant le pH à 11 par addition de soude 4N. Après dis~olution on décante la phase aqueuse et acidifi~ ~ pH = 1 par addition d'acide chlorhy-drique 4N en présence d'un litre d'éther éthylique. On décante la phase organique, extrait encore avec un litre d'éther éthylique.
~es extrait~ organiques sont réunis et séchés sur sulfate de magné-sium. On concentre a sec sous pression réduite (20 mm de mercure) à 30 C. On obtient ainsi 41,7-g d'acide D_~-tert-butoxycarbonyla-mino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique sous la for~e d'une huile jaune.
5 g de l'acide ainsi obtenu ~ont dissous dans un mélange de 10 cm3 d'oxyde d'isopropyle et de 25 cm3 de cyclohexane à reflux. Aprè~
refroidissement les cristaux sont essorés. On obtient ainsi 4 g d'acide D-o~tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique ~ous forme de cristaux blancs fondant à 110 C (PF inst. Kofler).
r~ = 121 + 2 (c = 1, diméthylformamide) ~'acide D,~-o_tert-butoxyca~bonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique peut être obtenu de la mani~re suivante:
Une suspension de 0,96 g de ~-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-4,5 dithiinne-1,3 ylidène-5) acétate d'éthyle dans 7 cm3 d'éthanol et 3,3 cm3 de soude N est agitée pendant 90 minutes à
20~. On concentre jusqu'à un volume de 5 cm3 sous pression 1C~97340 ,,;;

réduite (20 mm de mercure) à 30C. La solution obtenue est acidifiée jusqu'à pH = 2,0 par addition d'acide chlorhydrique N en présence de 25 cm3 d'éther éthylique. La phase organique est décantée et séchée sur sulfate de sodium. La solution est filtrée et concentrée à sec sous pression réduite (20 mm de mer-cure) à 30C. On obtient ainsi 0,85 g d'acide D,L-~-tert butoxy-carbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique dont les caractéris-tiques sont les suivantes:
Analyse élémentaire: % calc C 45,34 H 5,88 N 4,80 0 21,97 S 22,01 % tr. 44,8 5,7 4,7 21,5 L'~-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-4,5 dithiinne-1,3 ylidène-5) acétate d'éthyle peut être préparé de la manière suivante:
Une solution de 5,35 g de tert-butylate de potassium dans 40 cm3 de tétrahydrofuranne est refroidie à -70C. On ajoute goutte à goutte une solution de 9 g de tert-butoxycarbonyl-

3 éthoxycarbonyl-4 thioxo-2 oxa-l dithia-7,9 aza-3 spiro ~4.5~
décane dans 40 cm3 de tétrahydrofuranne. On agite encore pendant 3 heures puis on ajoute 2,9 g d'acide acétique et laisse le mé-lange réactionnel se réchauffer jusqu'à 20C. Le tétrahydrofuranneest évaporé sous pression réduite (20 mm de mercure) à 30C.
Le résidu est dissous dans 25 cm3 d'acétate d'éthyle. La solution est lavée avec 25 cm3 d'eau, puis séchée sur sulfate de sodium.
On filtre la solution et concentre à sec sous pression réduite (20 mm de mercure~. On obtient un résidu solide que l'on traite avec 100 cm3 d'éther de pétrole. Le précipité est essoré et séché sous pression réduite. On obtient ainsi 5,3 g d'~-tert-butoxycarbonylamino (dihydro-4,5 dithiinne-1,3 ylidène-5) acétate d'éthyle sous la forme d'un solide beige fondant à 154C (PF inst.

Kofler).
Le tert-butoxycarbonyl-3 éthoxycarbonyl-4 thioxo-2 ,~

` 1097340 oxo-l dithia-7,9 aza-3 spiro ~4.5J décane peut être préparé
de la manière suivante:
Une solution de 4,6 g de tert-butylate de potassium dans 40 cm3 de tétrahydrofuranne est refroidie à -70C. On ajoute goutte à goutte une solution de 5,8g d'isothiocyanatoacétate d'éthyle et de 5,4 g de dithia-1,3 cyclohexanone-5 dans 80 cm3 de tétrahydrofuranne. Au bout de 40 minutes, la solution est réchauffée à 0C environ et l'on ajoute une solution de 8,75 g de dicarbonate de di-tert-butyle dans 10 cm3 de tétrahydrofuranne.
On agite encore pendant 12 heures à 20C environ puis on concen-tre à sec sous pression réduite (20 mm de mercure) à 30C. Le résidu est dissous dans 150 cm3 de chlorure de méthylène, on ajoute 3 cm3 d'acide acétique et sépare l'insoluble par filtra-tion. Le filtrat est concentré à sec sous pression réduite (20 mm de mercure) à 30C. Le résidu est cristallisé dans 100 cm3 d'éther éthylique puis essoré et séché sous pression réduite (1 mm de mercure) à 20C. On obtient ainsi 9,8 g de tert-butoxy-carbonyl-3 éthoxycarbonyl-4 thioxo-2 oxa-l dithia-7,9 aza-3 spiro ~4.5~ décane sous forme de cristaux blancs fondant à 125C
(PF inst. Kofler).
L'isothiocyanatoacétate d'éthyle peut être préparé
selon D. IIOPPE et R. FOLLMANN, Chem. Ber., 109, 3047 (1976).
~XT~MPL~ 3 .. .. _ _ .
24 g de ~b-~- tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido~-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo ~4.2.0~ octène-2 obtenus dans les conditions décrites préccdemment sont dissous dans 750 cm3 d'acétonitrile. On ajoute 18,7 g d'acide p-toluènesulfonique et laisse reagir à 20C pendant 20 heures environ. On ajoute 40 cm3 d'eau et traite avec du noir décolorant. La solution est filtrée et 17,2 cm3 de trié-thylamine sont ajoutés lentement jusqu'à pH = 4,8. Les cristaux sont essorés et séchés sous pression réduite (1 mm de mercure) à

~097340 20C. On obtient ainsi 17,7g de ~D-~-amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido~-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo C4.2.0 octène-2 dont les caractéristiques sont indentiques à celles du produit obtenu dans l'exemple 2.

On dissout 18,7 g de ~D,L-~-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido~-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~4.2.0~ octène-2, préparé selon l'exemple 1, dans 200 cm3 de tétrahydrofuranne, puis on ajoute une solution de 7,45g de diphényldiazométhane dans 50 cm3 de tétrahydrofuranne.
On agite pendant 16 heures à 20C. On évapore à sec sous pression réduite (20 mm de mercure) à 30C. Le résidu est repris dans 350 cm3 d'acétate d'éthyle. La couche organique est lavée par 100 cm3 de solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium puis séchée sur sulfate de sodium. La solution est traitée au noir décolorant et filtrée. On concentre à sec sous pression réduite (20 mm de mercure) à 30C. Le résidu est purifié par chromato- -~
graphie sur une colonne (diamètre: 4,5 cm; hauteur: 54 cm) con-tenant 400 g de silice. On elue successivement avec des mélanges acétate d'éthyle-cyclohexane de concentration croissante en acé-tate d'éthyle (10-90 en volumes, 1000 cm3; 20-80 en volumes, 1000 cm3; 25-75 en volumes, 1000 cm3). En receuillant des frac-tions de 100 cm3, on concentre à sec les fractions 35 à 45 sous pression réduite (20 mm de mercure) à 30C. On obtient ainsi 10 g de ~,L-~-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido~-7 benzhydryloxycarbonyl-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo ~4.2.0~ octène-2 sous forme d'une méringue blanche.
Le produit brut de l'estérification de 13,6 g de ~,L-~-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1-,3 yl-5) acétamido~-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~4.2.0~ octène-2 par le diphényldiazométhane est chromatographié sur une colonne contenant 1200g de gel de silice (diamètre: 6,6 cm; hauteur:

73 cm). On élue successivement, en recueillant des fractions de 250 cm3, par 150~ cm3 de mélange cyclohexane-acétate d'éthyle (90-10 en volumes), 1500 cm3 de mélange cyclohexane-acétate d'éthyle (~5-15 en volumes), 1500 cm3 de mélange cyclohexane-~;~
acétate d'éthyle (75-25 en volumes) 15Q0 cm3 de mélange cyclohexa-~
ne-acétate d'éthyle (70-30 en volumes) et 50~0 cm3 de mélange `
cyclohexane-acétate d'éthyle (65-35 en volumes). ;
Les fractions 35 à 37 ~élution par le mélange cyclo-hexaneacétate d'éthyle (65-35 en volumes)~ fornissent, après évaporation, 1,83 g de ~ -tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamidoJ-7 benxhydryloxycarbonyl-2méthyl-3 oxo-8 thia-S aza-l bicyclo~4 2.0~ octène-2. Après recristallisation dans 165 cm3 de méthanol, on obtient 1,19 g de ce produit sous forme de cristaux blancs.
Les fractions 38 à 40 fornissent 3,09 g d'un mélange des formes D et L.
Les fractions 41 à 45 fournissent après évaporation, 3,09 g d'un produit qui est recristallisé dans 150 cm3 d'éthanol.
On obtient ainsi 2,01 g de ~-a-tert-butoxycarbonylamino (dithiin-ne-1,3 yl-5) acétamido~-7 benzhydryloxycarbonyl-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~4.2.0~ octène-2 sous forme de cristaux blancs.
On dissout 1,09 g de ~D-~-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido~-7 benzhydryloxycarbonyl-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~4.2.0~ octène-2 dans 1,3 cm3 d'ani- , sole et 50 cm3 d'acide trifluroacétique. La solution obtenue est agitée pendant 15 minutes à 20C, puis concentrée à sec sous pression réduite (0/5 mm de mercure) à 30C. Le résidu est dissous dans 5 cm3 d'acétate d'éthyle. La solution obtenue est versée dans 40 cm3 d'oxyde d'isopropyle. Le précipité obtenu est séparé par filtration. On obtient ainsi 0,94 g d'une poudre blanche que l'on dissout dans 20 cm3 d'eau et 10 cm3 d'acide chlorhydrique 0,lN. La phase aqueuse est lavée deux fois par ~1 15 cm3 d'acétate d'éthyle puis traitée sous agitation par 15 cm3 de résine humide Amberlite IR-45 (OH ) jusqu'à ce que le pH se stabilise vers 5,0. La résine est séparée par filtration et le filtrat lyophilisé~ On obtient ainsi 0,33 g de ~D-~-amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido~-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~4.2.0~ octène-2 ~aJ20 = + 128 + 4 (c = 1,020 , eau) Analyse élémentaire:
% Calc. C 43,39 H 4,42 N 10,84 0 16,52 S 24,83 ~ Tr. 39,7 3,5 10,0 22,1 Spectre de RMN du proton:
ô (ppm) (CF3COOH) : 2,40 (s, CH3 en-3, 3H) ; 3,46 ~s, -CH2-S-céphème, 2H);3,55 (s, -CH2-S- dithiinne, 2H) ; 4,06 (s, -S-CH2-S-2H) ; 5,15 (s, -fH-CO-lH) ; 5,26 (d, J = 511z, H en -6) ;
N <
5,80 (d, J = 5Hz, H en -7) ; 7,06 )s, -CH=, lH).
Ce produit a une concentration minimale bactériosta-tique de 2~y/cm3 sur Staphylococcus aureus Smith, 15 ~g/cm3 sur Staphylococcus aureus MB 9, Escherichia coli et Klebsiella pneu-moniae~

En opérant de la même manière à partir de 1,99 g dè f L-~-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamido~
-7 benzhydryloxycarbonyl-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo ~4.2ØJ octène-2, on obtient 0,57 g de ~ -amino (dithiinne-1,3 yl-S) acétamido~-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~4.2.0J octène-2.
~20 = ~ 120 + 2 (c = 1,012 , eau) Analyse élémentaire:
~ Calc. C 43,39 II 4,42 N 10,84 0 16,52 S 24,83 ~ Tr. 42,7 3,8 11,1 24,5 ~ .

~97340 Spectre de RMN du proton;
ô ~ppm) (CF3COOH) ; 2,43 (s~CH3-en -3, 3H) ; 3,43 (s, -CH2-S-céphème. 2H) ; 3,55 (s, -CH2-S- dithiinne, 2H) ; 4,06 ~s, -S-CH2-S-, 2H) ; 5~13 (s, -C~H-CO-, lH) ; 5,26 (d, J- 5Hz, H en -6) ;

5,7n-. ~ ., .

. .

, ~G ~

., , . ., .:-- : . ,. : , -:~

(d, J = 5Hz, H en -7) ; 7,03 (s, -CH=, lH).
EXEMP~E 5 A une solution de 10 g d'acide D-L-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,3 yl-5) acétique dans 100 cm3 de diméthylformamide, on ajoute 11,3 g d'amino-7 méthy~_~ oxo-8 pivaloyloxyméthoxycar-bonyl-2 thia-5 aza-l bicyclo~ .2.~ oct~ne-2 et 7,1 g de dicyclo-he~ylcarbodiimide, ~e mélange réactionnel est agité pendant 2 heures pui~ filtré. ~e filtrat est dilué avec 300 cm3 dtacétate d'éthyle et 500 cm3 d'eau. ~a phase organique est décantée et la-vée avec 100 cm3 d'eau puis avec 100 cm3 de solution aqueu~e satu-rée de bicarbonate de sodium pUi9 séchée ~ur sulfate de sodium et filtrée en présence de noir décolorant. On concentre ~ sec ~ous pression réduite (20 mm de mercure) à 30C. ~e résidu est chroma-tographié sur une colonne (diamètre 3,5 cm, hauteur 35 cm) conte-nant 150 g de silice. On élue successivement avec des mélanges acétate d'éthyle-cyclohexane de concentration crois~ante en acétate d'éthyle (10-90 en volume~, 500 cm3 ; 20-80 en volumes, 500 cm3 ;
30-70 en volumes, 500 cm3 ; 40-60 en volumes, 2000 cm3). On recueille de~ fractions de 200 cm3. On concentre à sec les frac-tion~ 14 à 21 ~ou~ pression réduite (20 mm de mercure) ~ 30 C. On obtient ainsi 8 g de ~ -Q-tert-butoxycarbonylamino (dithiinne-1,~
yl-5) acétamido/-7 méthyl-3 oxo-8 pivaloyloJxyméthoxycarbonyl-Z
thia-5 aza-1 bicyclo~ .2.07 oct~ne-2 90U~ la forme d'une meringue orangée.
~ e produit ainsi préparé est dissov~ dans 50 cm3 d'acide trifluoroacétique et agité 15 minutes à 20 C. On concentre ~ sec SOU9 pression réduite (o,5 mm de mercure) à 30 C. Le résidu est dissou3 dans 200 cm3 d'eau. On lave la solution avec 100 cm3 d'é-ther. ~.a phase aqueu~e est couverte avec 250 cm3 d'acétate d'éthy-le et agitée. On ajoute sous agitation 100 cm3 de ~olution aqueu-se saturée de bicarbonate de sodium. ~a pha~e organique es~

~)97340 décantée, ~échée ~ur sulfate de sodium et filtrée en pré~ence de noir décolorant. On concentre ~ 15 cm3 sou~ pre~siDn réduite (20 mm de mercure) ~ 30C. On ajoute 100 cm3 dléther éthylique pUi9 on ajoute, goutte ~ goute, 10 cm3 de solution 2,7 N d'acide chlo-rhydrique a~ydre dan~ l'éther. On agite pendant m minute~ pUi8 on es~ore le précipité. On obtient ainsi 4,8 g de chlor~ydrate de [D-o-amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamid~ -7 méthyl-3 pivaloyloxy- -métho~ycarbonyl-2 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo~ .2.~ DGtène-2 ~ous la forme dlune poudre-blaw he.
Analyse élémentaire:
% Calc. C 44,64 H 5,24 Cl 6,59 N 7,81 0 17,84 S 17,~8 % Tr. 45,3 5.4 6,7 ~,9 17,7 ~amino-7 méthyl-3 oxo-8 pivaloyloxyméthoxycarbonyl-2 thia-5 aza-l bicyclo~4.2.01 octène-2 peut 8tre préparé selon la méthode décrite dan~ le brevet allemand 1 951 012.
~e3 exemples suivants, donnés à titre non limitatif, illus-trent des compositions ~elon l~invention.
EXEMP~E A
On prépare une solution injectable ayant la compo~ition suivante: ~ rD-d-amlno (dithiinne-1,3 yl-5) acétamidb1-7 carboxy-2 méthyl-3 oxo-8 thia-5 aza-l bicyclo_4.2.0J octène-2 .............. ..250 mg -chlorure de sodium ~........................ 0............. ..1,5 mg -soluté injectable ........................................ ..2 cm3 EXEMPIæ B
On prépare ~elon la méthode habituelle de~ comprimé~ ~ ant la composition suivante:
-~D,~-C~amino (dithiinne-1,3 yl-5) acétamid~ -7 méthyl-~ carboxy-2 oxo-8 thia-5 aza-l bicycloL~.2.07 octène-2................ ..500 mg -amidon ..................................... ~............. ..200 mg - silice précipitée ................................... .... . 45 mg -stéarate de magnésium ...................... ~............. ....5 mg~

Claims (7)

Les réalisations de l'invention, au sujet desquelles un droit exclusif de propriété ou de privilège est revendiqué, sont définies comme il suit:

1. Procédé de préparation des dérivés de la céphalosporine, répondant à la formule générale:

(I) dans laquelle R représente le radical carboxy ou un radical de formule générale:
(II) dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène et R2 repré-sente un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée, le radical étant facile-ment éliminable par voie enzymatique, sous ses formes diastéré-oisomères et leurs mélanges, ses sels d'addition avec les aci-des et éventuellement ses sels métalliques et ses sels d'addi-tion avec les bases organiques azotées, caractérisé en ce que:
a) l'on fait réagir l'acide de formule:

(III) sous forme racémique ou optiquement active, dont la fonction amine est préalablement protégée, ou un dérivé réactif de cet acide, sur une céphalosporine de formule générale:

(IV) dans laquelle R a la signification précitée, puis élimine les groupes protecteurs pour obtenir un produit de formule (I) ci-des-sus, ou b) pour obtenir un produit de formule générale (I) dans laquelle R représente un radical de formule (II) telle que définie ci-dessus, on estérifie un produit de formule (1) pour lequel R
représente on radical carboxy et dont la fonction amine est préa-lablement protégée, puis élimine le groupement protecteur de la fonction amine, et c) le cas échéant, sépare en ses diastéréoisomères le pro-duit de formule (I) obtenu contenant un mélange des diastéréoiso-méres et dont les fonctions amine et acide sont éventuellement protégées, puis élimine les groupements protecteurs, et d) le cas échéant, transforme le produit de formule (I) obtenu ou chaque diastéréoisomère obtenu en un sel d'addition avec un acide pharmaceutiquement acceptable ou, lorsque R représente un radical carboxy, en un sel métallique pharmaceutiquement acceptable ou en un d'addition avec une base organique azotée pharmaceutique-ment acceptable.

2 Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on effectue la condensation de l'acide de formule (III) dont la fonction acide est libre et dont la fonction amine est préalablement protégée sur l'acide amino-7 désacétoxy-3 céphalosporine dont la fonction acide est préalablement protégée, puis élimine les grou-pements protecteurs des fonctions amine et acide pour obtenir un produit de formule (I) dans laquelle R représente un radical carboxy.

3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on effectue la condensation de l'acide de formule (III) dont la fonction amine est préalablement protégée sur une céphalosporine de formule (IV) dans laquelle R représente un radical de formule (II) définie ci-dessus, puis élimine le groupement protecteur de la fonction amine pour obtenir un produit de formule (I) dans laquelle R représente un radical de formule (II) tel que définie précédemment.

4. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'on fait réagir le produit de formule (I) obtenu dans laquelle R
représente un radical carboxy, sous forme de sel alcalin ou sel d'amine tertiaire et dont la fonction amine est préalablement pro-tégée, sur un halogénure de formule:

dans laquelle R1 et R2 ont la signification précitée et Z repré-sente un atome d'halogène, puis élimine le groupement protecteur de la fonction amine pour obtenir un produit de formule (I) dans laquelle R représente un radical de formule (II) tel que définie précédemment.

Les dérivés de la céphalosporine, répondant à la formu-le générale:
(I) dans laquelle R représente le radical carboxy ou un radical de for-mule générale:

(II) dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène et R2 repré-sente un radical alcoyle contenant 1 à 4 atomes de carbone en chaîne droite ou ramifiée, le radical étant facilement éliminable par voie enzymatique, sous ses formes diastéréoisomères et leurs mélanges, ses sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables, ses sels métalliques pharmaceutiquement acceptables et ses sels d'addition avec les bases organiques azotées pharmaceutiquement acceptables, cha-que fois qu'ils sont obtenus par un procédé selon la revendica-tion 1 ou ses équivalents chimiques manifestes.

6. Les dérivés de formule générale (I) selon la revendication 5, caractérisés en ce que R représente un radi-cal carboxy, chaque fois qu'ils sont obtenus par un procédé
selon la revendication 2 ou ses équivalents chimiques manifestes.

7. Les dérivés de formule générale (I) selon la revendication 5, caractérisés en ce que R représente un radical de formule (II) dans laquelle R1 et R2 ont les significations précitées, chaque fois qu'ils sont obtenus par un procédé selon les revendications 3 ou 4 ou leurs équi-valents chimiques manifestes.