CA1340731C - Heteropolysaccharide bm07, procede permettant son obtention et son application dans divers types d'industries - Google Patents
Heteropolysaccharide bm07, procede permettant son obtention et son application dans divers types d'industriesInfo
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Abstract
Les hétéropolysaccharides employés dans des domaines industriels présentent de nombreuses insuffisances parmi lesquelles on peut citer une manque de stabilité à la température. Maintenant le hétéropolysaccharide BM07 obvie aux inconvénients précités. Il est susceptible d'être obtenu par fermentation d'un milieu comportant au moins une source de carbone assimilable, par une souche Agrobacterium tumefaciens I-736, un de ses recombinants, ou un de ses mutants. L'hétéropolysaccharide BM07 peut être employé dans des domaines industriels aussi varies que, notamment l'agrochimie, l'agro-alimentaire, l'industrie pétrolière et les cosmétiques.
Description
-tJOUVEL 1-IETEROPOLYSACCHARIDE BM07, l'ROCEDE PERMETTANT SON OBTENTION
ET SON APPLICAT:(ON DANS DIVERS TYPES D'INDUSTRIES
La présente in«ention concerne un nouvel hétéropolysaccharide, un procédé permettant son obtention par fermentation par un microorganisme, ainsi que son application dans divers types d'industries.
Les hétéropol5~saccharides sont des molécules de haut poids moléculaire contenant: au mopns deux types de monosaccharides formant un motif de base polymérisé.
L'un des hétéropolysac:charides les plus employés dans des domaines industriels aussi variés que, notamment l'agrochimie, l'agro-alimentaire, l'industrie pétrolière, les cosmétiques, etc, est la gomme Xanthane.
Cependant, malgré ses potentialités la gomme Xanthane présente de nombreuses insuffisances parmi lesquelles on peut citer un manque de stabilité à la température, aux pH acide et alcalin ainsi que dans Ies milieux fortement salins.
D'autres hétéropolysac:charides ont par la suite été mis sur le marché. Parmi ces derniers on peut citer l'hétéropolysaccharide développé par la société SHE:LL sous la marque SHELL-FLO S ~ . Après des analyses effectuées par la demanderesse, il a pu être mis en évidence que cet hétéropolysaccharide comportait des motifs dérivés du glucose, du galactose, et de soels des acides pyruvique, succinique et acétique.
Mais cet hétéropolysaccharide a montré lui aussi des insuffisances en particulier lorsçlu'il est soumis à des températures élevées, de l'ordre de 80°C. Afin d'obvier aux inconvénients précités, la demanderesse a mis au point un nouvel hétéropolysaccharide qui non seulement est stable à la température, dans des solutions salines, basiques ou acides, mais qui de plus présente de fortes propriétés rhéologiques aux fait~les concentrations, un pouvoir de suspension élevé, une dissolution rapicle dans l'eau de ville comme dans l'eau distillée.
Un premier objet de l'invention est donc un tel hétéropolysaccharide.
~~~o~~~
ET SON APPLICAT:(ON DANS DIVERS TYPES D'INDUSTRIES
La présente in«ention concerne un nouvel hétéropolysaccharide, un procédé permettant son obtention par fermentation par un microorganisme, ainsi que son application dans divers types d'industries.
Les hétéropol5~saccharides sont des molécules de haut poids moléculaire contenant: au mopns deux types de monosaccharides formant un motif de base polymérisé.
L'un des hétéropolysac:charides les plus employés dans des domaines industriels aussi variés que, notamment l'agrochimie, l'agro-alimentaire, l'industrie pétrolière, les cosmétiques, etc, est la gomme Xanthane.
Cependant, malgré ses potentialités la gomme Xanthane présente de nombreuses insuffisances parmi lesquelles on peut citer un manque de stabilité à la température, aux pH acide et alcalin ainsi que dans Ies milieux fortement salins.
D'autres hétéropolysac:charides ont par la suite été mis sur le marché. Parmi ces derniers on peut citer l'hétéropolysaccharide développé par la société SHE:LL sous la marque SHELL-FLO S ~ . Après des analyses effectuées par la demanderesse, il a pu être mis en évidence que cet hétéropolysaccharide comportait des motifs dérivés du glucose, du galactose, et de soels des acides pyruvique, succinique et acétique.
Mais cet hétéropolysaccharide a montré lui aussi des insuffisances en particulier lorsçlu'il est soumis à des températures élevées, de l'ordre de 80°C. Afin d'obvier aux inconvénients précités, la demanderesse a mis au point un nouvel hétéropolysaccharide qui non seulement est stable à la température, dans des solutions salines, basiques ou acides, mais qui de plus présente de fortes propriétés rhéologiques aux fait~les concentrations, un pouvoir de suspension élevé, une dissolution rapicle dans l'eau de ville comme dans l'eau distillée.
Un premier objet de l'invention est donc un tel hétéropolysaccharide.
~~~o~~~
- 2 -Un deuxième objet de l'invention est un procédé de préparation de cei: hété:ropolysaccharide.
Un troisième objet de l'invention est l'applica tion dudit hétéropolysaccharide dans divers types d'industries.
La présente invention concerne donc un nouvel hétéropolysaccharide BM07, caractérisé en ce qu'il est susceptible d'être obtenu par fermentation d'un milieu comportant au moins unes source de carbone assimilable, par une souche Agrobacterium tumefaciens I-736, un de ses recombinants ou un de ses mutants.
Ladite souche Agrobactérium tumefaciens a été
déposée conformément au Traité de Budapest auprès tie 'l'a Collection Nation~sle de Culture des Microorganismes (CN CM) le ler mars 1988, oû elle est publiquement accessible sous le No. I - 736. Cettf; souche provient de la Collection Nationale de Baci=éries Phytopathogène et est répertoriée sous le numéro CNBP 291 dans le catalogue 1974 de l'organisme curateur.
La culture pure d'Agrobacterium tumefaciens I-736 peut être effectu~~e en tube gélose incliné (slant) incubé à
une température: comprise entre 26 et 32oC, et plus généralement entrE~ 28 et 32oC.
A ces t~~mpéra.tures et notamment sur des milieux à
base de MY agar ~~t de Bennett agar, dont les compositions sont indiquées ci-des:~ous, on a pu observer la formation d'un tapis mucoide bactérien recouvrant la totalité du slant dès 20 heures.
Les milieu; d'entretien suivants ont été
considérés comme :particulièrement avantageux pour la culture d'Agrobacterium tumefaciens I-736:
.~~~073I
- 2a -Milieu MY Agar ( en g/:L j Soya-Peptones 5 Extrait de levure 3 Extrait de malt 3 Glucose 10 Agar 20 13~0'~~1
Un troisième objet de l'invention est l'applica tion dudit hétéropolysaccharide dans divers types d'industries.
La présente invention concerne donc un nouvel hétéropolysaccharide BM07, caractérisé en ce qu'il est susceptible d'être obtenu par fermentation d'un milieu comportant au moins unes source de carbone assimilable, par une souche Agrobacterium tumefaciens I-736, un de ses recombinants ou un de ses mutants.
Ladite souche Agrobactérium tumefaciens a été
déposée conformément au Traité de Budapest auprès tie 'l'a Collection Nation~sle de Culture des Microorganismes (CN CM) le ler mars 1988, oû elle est publiquement accessible sous le No. I - 736. Cettf; souche provient de la Collection Nationale de Baci=éries Phytopathogène et est répertoriée sous le numéro CNBP 291 dans le catalogue 1974 de l'organisme curateur.
La culture pure d'Agrobacterium tumefaciens I-736 peut être effectu~~e en tube gélose incliné (slant) incubé à
une température: comprise entre 26 et 32oC, et plus généralement entrE~ 28 et 32oC.
A ces t~~mpéra.tures et notamment sur des milieux à
base de MY agar ~~t de Bennett agar, dont les compositions sont indiquées ci-des:~ous, on a pu observer la formation d'un tapis mucoide bactérien recouvrant la totalité du slant dès 20 heures.
Les milieu; d'entretien suivants ont été
considérés comme :particulièrement avantageux pour la culture d'Agrobacterium tumefaciens I-736:
.~~~073I
- 2a -Milieu MY Agar ( en g/:L j Soya-Peptones 5 Extrait de levure 3 Extrait de malt 3 Glucose 10 Agar 20 13~0'~~1
3.
- Milieu T G Y Agar (produit par l'institut Pasteur) (en g/1) Peptones 5 Extrait de levures 2,5 Glucose 1 Agar 20 - Milieu Bennett Agar (en g/1) Peptones 1 Extrait de viandes 1 NZ Amine A 0 2 (Produit par la Sté Sheffield Chemical) Glucose 10 Agar 20 Milieu T.S Agar (produit par la Sté Bio-Mërieux) (en g/1) Bio trypcase 17 Bio soyase 3 KzHPO, 2,5 NaCl 5 Glucose 2,5 Agar 20 La souche Ac~robacterium tumefaciens I-736 peut également étre cultivée en boîte de Petri, par exemple sur milieu MY agar ou TGY agar.
Dans ces conditions les colonies sont visibles dès 24 à 30 heures, et présentent les caractéristiques suivantes, à 48 heures - taille : 2 à 3 mm de diamètre - aspect lisse et peu bombé
- couleur brun-jaune très clair - colonies à bord net et moins mucoïde sur boîte de Petri que sur slant.
La souche Agrobacterium tumefaciens I-736 peut utiliser les sucres suivants - glucose - saccharose - hydrolysats d'amidon l ~.34073:~
- Milieu T G Y Agar (produit par l'institut Pasteur) (en g/1) Peptones 5 Extrait de levures 2,5 Glucose 1 Agar 20 - Milieu Bennett Agar (en g/1) Peptones 1 Extrait de viandes 1 NZ Amine A 0 2 (Produit par la Sté Sheffield Chemical) Glucose 10 Agar 20 Milieu T.S Agar (produit par la Sté Bio-Mërieux) (en g/1) Bio trypcase 17 Bio soyase 3 KzHPO, 2,5 NaCl 5 Glucose 2,5 Agar 20 La souche Ac~robacterium tumefaciens I-736 peut également étre cultivée en boîte de Petri, par exemple sur milieu MY agar ou TGY agar.
Dans ces conditions les colonies sont visibles dès 24 à 30 heures, et présentent les caractéristiques suivantes, à 48 heures - taille : 2 à 3 mm de diamètre - aspect lisse et peu bombé
- couleur brun-jaune très clair - colonies à bord net et moins mucoïde sur boîte de Petri que sur slant.
La souche Agrobacterium tumefaciens I-736 peut utiliser les sucres suivants - glucose - saccharose - hydrolysats d'amidon l ~.34073:~
4.
et plus difficilement l'am:idon natif et le lactose.
Le glucose et le saccharose sont des sucres préférés.
I1 a pu ëtre mis en évidence que, d'une manière générale l'hétéropolysacchar;Lde BMO'1 comporte des motifs dérivés du glucose, du galactose et des acides pyruvique, succinique et ~.cétique ou des sels de ces acides, généralement selon des proportions molaires respectivement de 5-8/1-2/0,5-2/O,fi-2/0,05-2 de préférence de 6 -7,5 / 1 - 1,5/ 0,5 -1/ 0,5 - 1/0,05-0,2 et plu: préférentiellement encore de 7 / 1 / 0,5 -1 / 0, 5 - 1 / 0, 05 -- 0, 1.
Lesdits acide=s pyru«ique, succinique et acétique se présentent généralement sous forme de sels tels que des sels de sodium, de potassium, de calcium ou d'ammonium.
Les méthodes d'analyse de l'hétéropolysaccharide BM07 qui ont permis de déterminer' sa formule brute telle que spécifiée ci-dessus, ont pour principe la dètermination des éléments constitutifs (sucres et acides) après hydrolyse dudit hétéropolysaccharide BM07 et dosages chromatographiques par étalonnage interne ou externe.
Ainsi, le dosage des sucres a été réalisé de la manière suivante 100 mg d'hétéropoly_>acchari.de BM07 sont hydrolysés en tubes hermétiques par 5 ml d'acide tri.fluoroacétique molaire à 105°C pendant trois à six heures.
Cette opération est suivie d'une évaporation à sec et d'une reprise du résidu se>.c dans 5 ml de pyridine contenant 15 mg de sorbitol en tant qu'étalon interne ; puis d'une silylation sur 1 ml de solution pyridinique par 0,9 ml d'hexamethyldisilazane. La silylation est catalysée par 0,1 ml. d'acide trifluoroacétique.
Le dosage des sucres est ensuite effectué par chromatographie en phase gazeuse à détection F'.I.D, sur colonne capillaire en verre de 25 m de longueur et de 0,25 mm de diamètre, chargée de phase méthylsilicone présentant une épai~;seur de' film de 0,14 u. Le gaz vecteur utilisé est l'hydrogène, avec ur~ débit de 2 ml/minute.
Le dosage de L'acide pyruvique est réalisé à partir d'une solution mère obtenue par hydrolyse de 80 mg d'hétéropolysaccharide BM07 au moyen de 5 ml d'acide chlorhydridue 4N pendant 1 heure à 105°C, puis ajout de 2 mg d'acide cétoglutarique (constituant l'étalon interne) et ajustement à 25 ml par de L'eau distillée.
el
et plus difficilement l'am:idon natif et le lactose.
Le glucose et le saccharose sont des sucres préférés.
I1 a pu ëtre mis en évidence que, d'une manière générale l'hétéropolysacchar;Lde BMO'1 comporte des motifs dérivés du glucose, du galactose et des acides pyruvique, succinique et ~.cétique ou des sels de ces acides, généralement selon des proportions molaires respectivement de 5-8/1-2/0,5-2/O,fi-2/0,05-2 de préférence de 6 -7,5 / 1 - 1,5/ 0,5 -1/ 0,5 - 1/0,05-0,2 et plu: préférentiellement encore de 7 / 1 / 0,5 -1 / 0, 5 - 1 / 0, 05 -- 0, 1.
Lesdits acide=s pyru«ique, succinique et acétique se présentent généralement sous forme de sels tels que des sels de sodium, de potassium, de calcium ou d'ammonium.
Les méthodes d'analyse de l'hétéropolysaccharide BM07 qui ont permis de déterminer' sa formule brute telle que spécifiée ci-dessus, ont pour principe la dètermination des éléments constitutifs (sucres et acides) après hydrolyse dudit hétéropolysaccharide BM07 et dosages chromatographiques par étalonnage interne ou externe.
Ainsi, le dosage des sucres a été réalisé de la manière suivante 100 mg d'hétéropoly_>acchari.de BM07 sont hydrolysés en tubes hermétiques par 5 ml d'acide tri.fluoroacétique molaire à 105°C pendant trois à six heures.
Cette opération est suivie d'une évaporation à sec et d'une reprise du résidu se>.c dans 5 ml de pyridine contenant 15 mg de sorbitol en tant qu'étalon interne ; puis d'une silylation sur 1 ml de solution pyridinique par 0,9 ml d'hexamethyldisilazane. La silylation est catalysée par 0,1 ml. d'acide trifluoroacétique.
Le dosage des sucres est ensuite effectué par chromatographie en phase gazeuse à détection F'.I.D, sur colonne capillaire en verre de 25 m de longueur et de 0,25 mm de diamètre, chargée de phase méthylsilicone présentant une épai~;seur de' film de 0,14 u. Le gaz vecteur utilisé est l'hydrogène, avec ur~ débit de 2 ml/minute.
Le dosage de L'acide pyruvique est réalisé à partir d'une solution mère obtenue par hydrolyse de 80 mg d'hétéropolysaccharide BM07 au moyen de 5 ml d'acide chlorhydridue 4N pendant 1 heure à 105°C, puis ajout de 2 mg d'acide cétoglutarique (constituant l'étalon interne) et ajustement à 25 ml par de L'eau distillée.
el
5.
Le dosage est alors effectué par Chromatographie Liquide Haute Performance (HPLC) au moyen d'une colonne chargée de silice greffée C,b de 5 u de diamètre, dont la; longueur est de 250 mm et le diamètre de 4,6 mm. L'éluant utilisé est un mélange 50/50 en volume d'acide phosphorique 0,02 M ert d'acÉ~tonitrile. Le débit est de 1,5 ml/minute.
La détection de l'aci.de pyruvique se fait par Ultra-violets à
375 nm.
Le dosage de l'acides succinique se fait après hydrolyse de l'hétéropolysaccharide BM07 dans les mémes conditions que celles utilisées pour le do~>age de l'acide pyruvique. Le dosage est direct, par étalonnage externe. La solution étalon d'acide succinique utilisée contient 8 mg d'acide succinique dans 25 ml d'eau.
On utilise à nouveau la technique de la CLHP sur des colonnes Aminex HPX87H O de BIORAD CJ . L'éluant est l'acide sulfurique 0,01 N, et le débit est de 0,,8 ml/m:Lnute. La détection de l'acide succinique est réfractométrique.
Le dosage de :L'acide acétique se fait après hydrolyse de 300 à
350 mg d'hétéropolysaccharide BM07 par 5 ml d'acide trifluoroacétique 4 N à 120°C pendant troi:~ heures. Puis on ajoute 30 mg d'acide propionique en tant qu'étalon interne et on dose par Chromatographie en phase gazeuse à déte~~tion F.I.D.
Pour le dosage, on utilise une colonne en verre de 2 m de long et de 3 mm de diamètre remplie de phase FFAP à 5 ~ et d'acide phosphorique à 1 ~ absorbés sur chromosorb G O {AW DMCS) de 80 à 100 mesh. Le gaz vecteur est 1'hé?-:~:,~ avec un débit de 30 ml/minute.
L'hétéropolysaccharide BM07, provenant de différents échantillons, présente généralement les propriétés suivantes 1. Sa viscosité intrinsëque est comprise entre 30 et 250 dl/g et plus particulièrement comprise entre 140 et 250 dl/g et préférentiE:llement comprise entre 150 et 240 dl/g.
La viscosité intrinsèque (n) telle que spécifiée est déterminée par ex:trapo7_ation à concentration nulle de la viscosité réduite n-nc-,formule dans laquelle:
rl o t~
Le dosage est alors effectué par Chromatographie Liquide Haute Performance (HPLC) au moyen d'une colonne chargée de silice greffée C,b de 5 u de diamètre, dont la; longueur est de 250 mm et le diamètre de 4,6 mm. L'éluant utilisé est un mélange 50/50 en volume d'acide phosphorique 0,02 M ert d'acÉ~tonitrile. Le débit est de 1,5 ml/minute.
La détection de l'aci.de pyruvique se fait par Ultra-violets à
375 nm.
Le dosage de l'acides succinique se fait après hydrolyse de l'hétéropolysaccharide BM07 dans les mémes conditions que celles utilisées pour le do~>age de l'acide pyruvique. Le dosage est direct, par étalonnage externe. La solution étalon d'acide succinique utilisée contient 8 mg d'acide succinique dans 25 ml d'eau.
On utilise à nouveau la technique de la CLHP sur des colonnes Aminex HPX87H O de BIORAD CJ . L'éluant est l'acide sulfurique 0,01 N, et le débit est de 0,,8 ml/m:Lnute. La détection de l'acide succinique est réfractométrique.
Le dosage de :L'acide acétique se fait après hydrolyse de 300 à
350 mg d'hétéropolysaccharide BM07 par 5 ml d'acide trifluoroacétique 4 N à 120°C pendant troi:~ heures. Puis on ajoute 30 mg d'acide propionique en tant qu'étalon interne et on dose par Chromatographie en phase gazeuse à déte~~tion F.I.D.
Pour le dosage, on utilise une colonne en verre de 2 m de long et de 3 mm de diamètre remplie de phase FFAP à 5 ~ et d'acide phosphorique à 1 ~ absorbés sur chromosorb G O {AW DMCS) de 80 à 100 mesh. Le gaz vecteur est 1'hé?-:~:,~ avec un débit de 30 ml/minute.
L'hétéropolysaccharide BM07, provenant de différents échantillons, présente généralement les propriétés suivantes 1. Sa viscosité intrinsëque est comprise entre 30 et 250 dl/g et plus particulièrement comprise entre 140 et 250 dl/g et préférentiE:llement comprise entre 150 et 240 dl/g.
La viscosité intrinsèque (n) telle que spécifiée est déterminée par ex:trapo7_ation à concentration nulle de la viscosité réduite n-nc-,formule dans laquelle:
rl o t~
- 6 -- 0 est la viscosité de la solution - r~o est la viscosité du solvant - C est la concentration en hétéropolysaccharide BM07, en utilisant l'équation de Huggins:
n - I10 --_.__ _ C.n~ + k' (n)2 . C
rl o (~
k' étant la constante d.e Huggins au ler plateau Newtonien La viscosité spécifique r~ -no est mesurée de la no façon suivante:
On prépare une solution mère à 0,2 g/1 de l'hété-ropolysaccharide BM07 dans une solution aqueuse 0,1 M NaCl.
On prépare ensuite une gamme de solutions comportant l'hétéropolysaccharide BM07 à des concentrations comprises entre 0,03 et 0,1 g/1 par dilution de la solution mère avec la solution aqueuse 0,1 M NaCl.
Les mesures sont ensuite effectuées à 23°C au moyen d'un viscosimètre LOW SHEAR.
On trace la courbe de viscosité spécifique en fonction de la concentration et l'on extrapole à
concentration nulle.
2. La masse moléculaire de l'hétéropolysaccharide BM07 mesurée par diffusion de la lumière est généralement comprise entre 6f106 et. 10X106, de préférence comprise entre 6,5X106 et 9,5X106.
II. L'hétéropolysaccharide BM07 présente de très bonnes propriétés rhéologiques en solution dans l'eau distillée et ceci notamment aux faibles concentrations.
Mais de plus ces propriétés se maintiennent fort bien quand v ,~340f~~~
- 6a -l'hétéropolysaccharide est soumis à l'influence de conditions sévère~~, en ~>articulier aux pH fortement acide et basique, en milieu fortement ionique et à la température.
Ainsi on a pu constater que:
1. Des solutions à 0,1~ en poids de l'hétéropolysacch.aride BM07 dans l'eau distillée à 250 présentent des v.iscosi.tés à 24 heures supérieures à 350 mPa.s et plus particulièrement comprises entre 400 et 700 mPa.s; les viscosités étant mesurées à un gradient de vitesse de 1 s 1 au moyen. d'un viscosimètre LOW SHEAR*
* (marque de commerce) A
~~~o~~~
n - I10 --_.__ _ C.n~ + k' (n)2 . C
rl o (~
k' étant la constante d.e Huggins au ler plateau Newtonien La viscosité spécifique r~ -no est mesurée de la no façon suivante:
On prépare une solution mère à 0,2 g/1 de l'hété-ropolysaccharide BM07 dans une solution aqueuse 0,1 M NaCl.
On prépare ensuite une gamme de solutions comportant l'hétéropolysaccharide BM07 à des concentrations comprises entre 0,03 et 0,1 g/1 par dilution de la solution mère avec la solution aqueuse 0,1 M NaCl.
Les mesures sont ensuite effectuées à 23°C au moyen d'un viscosimètre LOW SHEAR.
On trace la courbe de viscosité spécifique en fonction de la concentration et l'on extrapole à
concentration nulle.
2. La masse moléculaire de l'hétéropolysaccharide BM07 mesurée par diffusion de la lumière est généralement comprise entre 6f106 et. 10X106, de préférence comprise entre 6,5X106 et 9,5X106.
II. L'hétéropolysaccharide BM07 présente de très bonnes propriétés rhéologiques en solution dans l'eau distillée et ceci notamment aux faibles concentrations.
Mais de plus ces propriétés se maintiennent fort bien quand v ,~340f~~~
- 6a -l'hétéropolysaccharide est soumis à l'influence de conditions sévère~~, en ~>articulier aux pH fortement acide et basique, en milieu fortement ionique et à la température.
Ainsi on a pu constater que:
1. Des solutions à 0,1~ en poids de l'hétéropolysacch.aride BM07 dans l'eau distillée à 250 présentent des v.iscosi.tés à 24 heures supérieures à 350 mPa.s et plus particulièrement comprises entre 400 et 700 mPa.s; les viscosités étant mesurées à un gradient de vitesse de 1 s 1 au moyen. d'un viscosimètre LOW SHEAR*
* (marque de commerce) A
~~~o~~~
7.
2. L'hétéropolysaccharide BM07 montre de bonnes propriétés rhéologiques en milieu salir, et notamment dans des solutions salines à
base de CaCl~, de Na~SO, et de NaCl.
Plus particulièrement, on a constaté que des solutions à 0,3 % en poids dudit hétéropol.ysaccharide BM07 dans une solution saline (dont la composition figure ci.-dessous), présentaient généralement des viscosités à 2 heures comprises entre x:000 et 3500 mPa.s, et plus particulièrement comprises entre 2500 et 3000 mPa.s, les viscosités étant mesurées avec un rhéomètre Carrimed ~ à un gradient de vitesse de 1 s-' ; la solution saline ayant la composition suivante NaCl 91,71 g CaC12,2H~C 10,41 <~
Mg C1~, 10,12 q 6H~0 BaCl~, ZH~C0,113 g NaHCo~ 0,195 g Eau distilleqsF> 1 D'autre part des solui:ions à 0,2 % en poids d'hétéropolysaccharide BM07 dans des solui:ions aqueuses à 20 % de NaCl présentent des viscosités à 24 heures comprises entre 1600 et 2400 mPa.s et de préférence comprises entre 1700 et 2100 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre LOW SHEAR à un gradient de vitesse de 1 s-'.
3. Des solutions aqueuses à 0,2 % en poids d'hétéropolysaccharide BM07, à pH 1,7 et à ~'.5°C, présentent une viscosité à 24 heures comprise entre 1000 et 2500 mPa.s, plus particulièrement comprise entre 1400 et 2000 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre LOW
SHEAR, à un gradient de vitrasse de 1 s-'.
4. Des solutions aqueuses à 0,2 % en poids d'hétéropolysaccharide BM07, à pH 11,8 et à 25°C, présentent une viscosité à 24_ heures comprise entre 1000 et 2500 ml~a.s, ;plus particulièrement comprise entre 1400 et 2000 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre LOW
SHEAR, à un gradient de vitesse de 1 s-'.
~.r3~~'~3:I
-5. Des solutions d'hétéropolysaccharide BM07 à 0,2 % en poids dans l'eau distillée, soumises à une température de 80°C durant 24 heures, présentent gênéralemc~nt des viscosités comprises entre 500 et 2500 mPa s et plus particuliêrement comprises entre 1000 et 2000 mPa s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre LOW SHEAR, à un gradient de vitesse de 1 s-'.
6. Avantageusement, des solutions aqueuses â 0,2~ en poids dudit hétéropolys.accharide à pH 7 et 25oC, présentent une viscosité à 24 heures comprises entre 1000 et 2500 mPa.s, et plus particulièrement comprises entre 1400 et 2000 mPa.s, les viscosités étant mesurêes au moyen d'un viscosimètre LOW
SHEAR, à un gradient de vitesse de 1 s 1.
On a également constaté que l'hétéropolysaccharide BM07 présente un bon pouvoir de suspension. Le poûvoir de suspension des solutions d'hétéropoiysaccharide BM07 peut étre apprécié au moyen du test suivant:
une éprouvette MEGAL * de 100 ml est remplie dans sa totalité
(volume occupé de 130 ml.; par une solution à C,1 % en poids d'hétéropolysaccharide EM07 dans de l'eau distillée. La densité de la solution est alors voisine de 1.
Une bille de polyamides 6,6, d'un diamètre de 3 mm et d'une densité
de l,î?5 est posée à. la surface du liquide, sans ~aitesse initiale. Le temps de chute de la bille est mesuré jusqu'à ce qu'elle parvienne au fond de l'éprouvette, soit après ûn parcours de chute de 23,5 cm. Afin d'obtenir un temps moyen, ce test est répété plusieurs fois. Le temps m~rn d2 chute est généralement supérieur à 2000 secondes, et plus particulièrement est compris entre 3000 et 15000 secondes.
à titre comparatif, une solution à O,1 % en poids de gomme hanthane présente, dans les mêmes conditions, un temps de chute compris entre environ 60 et 350 secondes.
La présente i:wention a également trait â un procédé de préparation de l'hétéropolysaccharide BM07 tel que décrit ci-dessus.
* (marque de earmerce) 1340'31 - 8a -Ce procédé de préparation dudit hétéropolysaccharide consiste en la fermentation d'un milieu comportant au moins une source de carbone assimilable, par une souche Agrobacterium tumefaciens T-736 un de ses recombinants ou un de ses mutants.
Outre ladite =source de carbone assimilable, 'e milieu de ferme.~tation pe~~t aurai renfermer au moins une source d'azote, de préférence une source d'aa:ote organigue et éventuellement un ou plusieurs sels minéraur_.
. ~3~0,~~1 9.
Le milieu est innoculé de manière classique par la souche Agrobacterium tumefaciens I-736.
Lorsque le volume du milieu de fermentation est important, on peut avantageusement l'irmoculer au moyen d'un milieu innoculum, ensemencé
par un milieu de préculture liquide ; ce dernier étant préalablement ensemencé lui-méme par une culture pure d'Agrobacterium tumefaciens I-736.
Selon le procédé de l'invention on peut utiliser en va~lL yu~
milieu innoculum, tout mi7~ieu employé classiquement à cet effet, et avantageusement un milieu de nature minérale. En tant que milieu de préculture on peut citer par exemple le milieu YM bioth DIFCO Ref.
07101 et de préférence un milieu préparé à partir des composés suivants - Soya - peptones 5 g/1 - Extrait de malt 3 g/1 - Extrait de levure 3 g/1 - Glucose ou saccharose 10 g/1 Le pH naturel de ce milieu est de 7 à 7,2 et n'est pas ajusté.
A titre de source organique de carbone constitutive du milieu de fermentation on peut citer des sucres tels que le glucose, le saccharose, les hydrolysats d'amidon, et éventuellement le lactose ou l'amidon natif, ainsi que les mélanges de ces sucres. Le glucose et le saccharose sont des sucres préférës. La concentration en source organique de carbone dans le milieu de fermentation peut être comprise entre 1 et 100 g/1 et de préférence entre 15 et 60 g/1.
A titre de source organique d'azote on peut citer la caséine et les caséinates, les hydrol.ysats de poisson, les farines de blé, de maïs ou de soja, les e~xtrait~~ de levure (levure de boulanger, levure de bière, levures lact:iques...) Les dry distillers solubles, les protéines de pomme de terre, le corn steap liquor (CSL) et les solubles de CSL qui sont obtenus par dilut~~on du CSL, suivie d'une élimination des particules solides par centrifugation, débourbage ou décantation. Le CSL, et tout spéc.~alemen~t les solubles de CSL, ont été jugés comme particulièrement avantageux dans le cadre de la présente invention.
La concentrav~ion en source organique azotée dans le milieu de fermentation peut <âtre comprise entre 3 et 80 g/1 et de préférence entre et 50 g/1.
i0. i3~0'~31 On peut citer à i:itre de sels minéraux que l'on peut éventuellement introduire dans le milieu de fermentation, les sulfates tels que les sulfate; de magnésium, de manganèse, de zinc, de fer, les carbonates tels que le c<rrbonate de calcium, les sels de calcium solubles, les phosphates tels que les phosphates de potassium, de sodium.
La concentration de chacun de ces sels minéraux dans le milieu de fermentation peut varier eni:re 0,01 et 5 g/1 et de préférence entre 0,05 et 2 g/1.
Le milieu dea fermentation peut également renfermer des oligoéléments tels que des i:races de sels de cobalt et/ou de molybdène, ainsi que des vitamines et des nucléotides.
La fermentation peut É~tre réalisée à des pressions comprises entre 1 et 4, bar à une température comprise entre 25 et 35°C, de préférence entre 28 et 32°C, dans des conditions aérobies submergées.
Le pH du milieu de fermentation peut étre compris entre 5 et 9 et de préférence entre fi et 8. Le pH peut être ajusté, selon le cas, avec une base telle que l.a soucie ou la potasse ou avec un acide tel que l'acide sulfurique, l'acide phosphorique, l'acide chlorhydrique ou l'acide nitrique. Le milieu de fermentation, placé par exemple, dans une cuve ou un récipient de fermentation, peut être avantageusement soumis à
une agitation.
Cette agitation peut être exercée par exemple au moyen d'un secoueur réciproque, d'un sfacoueur giratoire, d'un mobile d'agitation ou d'une colonne à bul:Les. Le temps de fermentation est habituellement supérieur à 30 heures, mai: est généralement compris entre 40 et 90 heures.
Les rendements de fermentation sont généralement supérieurs à 40 plus particulièrement compris entre 55-75 % et tout particulièrement compris entre 60 et 75 % en poids d'hétéropolysaccharide BM07 produit par rapport à la source de carbone mise en oeuvre.
L'hétéropolysaccharide BM07 peut être séparé du milieu de fermentation.
Pour ce f<üre le mo~ît de fermentation renfermant I'hét.éropolysacchari~~e BM07 peut être avantageusement chauffé à des températures comprises entre 80 et 120°C, pendant 10 à 60 minutes et de préférence entre 15 ~et 45 minutes.
13~0'~31 11.
Le moût soums.s au traitement thermique ci-dessus présente avantageusement un pH compris entre 6 et 8.
Cependant ce pH peut ~~tre ajusté si nécessaire, avec selon le cas, une base ou un acide..
Ces derniers peuvent É~tre choisis parmi les bases et les acides mentionnés ci-dessus utili:~és pour l'ajustement du pH du milieu de fermentation.
La récupération de l'hétéropolysaccharide BM07 du moût de fin de fermentation peut alors être réalisée par précipitation dudit hétéropolysaccharide au moyE~n d'un liquide organique miscible avec l'eau et dans lequel l'hétéropo:lysaccharide est insoluble ou pratiquement insoluble.
A titre de liquides organiques convenables selon la présente invention on peut cii=er l'acétone, les alcools tels que l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, le butanol, le tertio-butanol.
L'isopropanol est plu: particulièrement préféré dans le cadre de la présente invention.
Le volume de l.Lquide organique utilisé est généralement 2 à 3 fois celui du volume de moût à tn~aiter.
La précipitation de :1'hétéropolysaccharide BM07 par un liquide organique peut également être réalisée en présence de sels tels que les sulfates, chlorures ou phosphates de sodium, de potassium, ou de calcium.
L'hétéropolysaccharide BM07 une fois précipité, peut ensuite être séparé du liquide or~~anique par filtration, centrifugation ou essorage.
Les fibres obtenues peuvent être déshydratées par exemple au moyen d'acétone ou d'un alcool te:l que l'éthanol, le propanol, l'isopropanol ou le tertio-butanol.
Le poids d'al<~ool nécessaire pour effectuer cette opération de déshydratation est ~~énèral~ement de 1 à 10 fois celui des fibres à
traiter.
Les fibres déshydratées peuvent subir de nouvelles opérations de filtration de centrifugation ou d'essorage.
Les fibres peuvent ensuite ëtre séchées, broyées et tamisées de façon à obtenir une ,.poudre d'hétéropolysaccharide BM07. Cette poudre est habituellement de co~,~leur crème-beige.
e~
Afin d'obtenir_ une poudre encore plus pure, il est possible de traiter soit le moût des fermentation, soit une solution aqueuse reccnstituée à partir de la poudre obtenue selon le procédé dé~:it ci-dessus, au .woyen d'une ou plusieurs enzymes.
A titre d'enzymes pouvant convenir à cet effet, on peut citer les protéases, les mutanases, les lipoprotéases, les cellulases et les cr~itinases.
La purification enzymatique peut étre associée ou remplacée par Ces p:océdés physiques de purification tels que les divers modes de lO filtration, de dialyse, ou par les différentes techniques de chromatographie.
Les raoùts de f~~rmenta~ion et les solutions aqueuses reconstit~~ées d'hétérogollsacchari~~e BMO"', ayant subi ou .ucn un .:aitement de pur_fication peuver:v étre concentrés. Lâ concentration peut ?tre avantageuse dans certains c~3s rotammPnt dans la !r~esu_-e où les coùts de 'ransport peuvent éW-e ainsi réduits_ ne plus, les solut_c..;~s cor_centrées peuvent ~tr~ t.lu~ rapidement mises en oeuvre que les poudres d'hétérooolysacchari<ie BM07.. La concentration peut Ftr? ~-éalisée par des t~chniq~.:2~ telles que ''évaporation, l'ultrafiltration, ou par diafiltration.
L'hétéropolysaccharide BM07 peut ètre appliqué avantageusement dans de nombreux: domaines :industriels où sont déjà utilisés d'autres polymères hydrosolub~.es_ Dans ces applicatiorls, l'hétéropolysaccharide BM07 est principalement employé en tant qu'adent épaississant, agent de suspension ou en tant qu'agent stabilisant de disE.~.ersions et ceci dans une large gamme de PH, en présence ou non der sels, de tensioactifs non-ioniques ou anioniques ou d'autres additif~_ Dans ce:~ applications on utilise généralement de 0,001 à 2% en poids, de préférence entre 0,1 et 1% en poids d'hétéropolysacclzarise BM07 par rapport au poids de la com-position qui le :renfer:me_ Ainsi, :L'hétéropolysaccharide 8M07 peut être employé:
1340'31 - 12a -dans l'industrie pétrolière par exemple dans les fluides de forage, en récupération assistëe du pétrole, dans les compositions ui;ilisé~ss pour la fracturation des forma-tions souterraines et: dans celles destinées au traitement des puits, - dans les compo:~itions céramiques, - dans l'industri.e alimentaire, notamment en tant qu'agent de suspension ou épaississant, - dans les peintures, .Les colles, les encres, - dans les cosmétig;ues, en particulier dans les shampooings, Les crèmes, les lotions et les pâtes dentifrices, - dans les compositions. destinées â l'agrochimie, notamment dans les "flowables" en tant qu'agent de suspension, - dans l'industrie papetière, notamment pour le couchage du papier, - dans les compo~>ition:~ lubrifiantes, - dans les nettoyants industriels destinés au traitement des surfaces mÉ~talliques, - en tant qu'agent stabilisant de dispersions aqueuses diverses comme les dispersions de charbon micronisé, - dans l'industrie textile, notamment dans les compositions pâteuses destinées à l'impression des motifs, - dans l'industrie des explosifs, - pour la préparation des bétons et des plâtres, notamment en vue de leur color<~tion, - dans les nettoyants ménagers ou industriels, notamment en tant qu'agent épaississant et en tant qu'agent stabilisant des particules abrasives. Tout particulièrement l'hétéropolysacharide BM07 peut être utilisé comme épaississant dans des compositions aqueuses acides contenant en solution aqueuse un acide organique ou minéral.
A titre d'acide organique, on peut citer des acides monvcarboxyliques tels l'acide formique, l'acide acétique, l'acide chloroacétique, l'acide lactique, l'acide ascorbique, l'acide tannique, des acides dicarboxyliques tels l'acide fumarique, l'acide malonique, l'acide succinique, l'acide glut:arique, l'acide itaconique, l'acide tartrique, des acides. tricarboxyliques comme l'acide citrique.
De préférence, on utilise l'hétérosacharide BM07 en tant qu'agent épaississant dans des compositions aqueuses acides contenant en solut:ion aqueuse un acide organique ayant une constante de dissociation pK â 25°C supérieure ou égale à 2 et/ou au moins un sel d''un acide organique ou minéral de pK
supérieur ou égal à 2 et: d'une base forte.
A titre d'acide minéral, on peut citer l'acide chlorhydrique, l'acide phosphorique, l'acide nitrique ou l'acide sulfurique.
Tous ces acides peuvent être utilisés seuls ou en mélange entre eux. Les proportions relatives d'acide et d'hétéro-polysaccharide peuvent varier dans une large mesure en fonction de facteurs tels que la nature propre de chacun de ces composés, la vii>cosité désirée et l'application spécifique choisie.
Généralement on utilise entre 1 et 4og d'acide, entre o,ool et 2~ d'hétéropolysaccharide BM07 et entre 55 et 98,99 d'eau.
Des quantités d'hétéropolysaccharide BM07 comprise entre 0,1 et 1~ sont toutefois préfërées.
...~;
1340'~3I
- 13a -Ces compositions peuvent être prêparées de toute manière souhaitable par mélange des différents composés dans l'eau.
I1 est préférable de dissoudre initialement l'hétéropolysaccharide EM07 dans l'eau puis d'ajouter le ou les acides.
,t 14.
Lesdites composition: peuvent éventuellement contenir divers autres ingrédients utilisés dans les formulations acides tels que des agents tension-actifs, des colorants, des détergents, des parfums, des bactéricides et des abrasif:5.
Lesdites compositions peuvent étre plus spécifiquement destinées au nettoyage des surîaces, a~u détartrage des surfaces en porcelaine et métallique et au décapage des surfaces métalliques.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaitront à la lecture des exemples et des figures 1 et 2 ci-aprés qui représentent l'évolution de la viscosité en fonction du gradient de vitesse, de solutions dans l'eau distillée, à respectivement, 0,1 et 0,2 % en poids d'hét~~ropolyaaccharide 8M07 et de gomme xanthane.
Exemple 1 : Procédé ~9e prép~3ration de l'hétéropolysaccharide BM07 sur un milieu minéral de production_ On fait fermenter par une souche Agrobacterium tumefaciens I-736 un milieu renfermant (en g/1) .
CSL (corn steap liqu~~r) 11 K ~ HP0 . 4 MgSO,; , "H~ 0 O, 5 Saccharose 25 Eau potable qsp 1 1 Ce milieu est fermenté par ladite souche à une température de 28°C, dans les conditions suivantes - Fermentation dans un erlenmeyer de 500 ml, contenant un volume utile de 100 ml.
Ce milieu est soumis à une agitation de 220 tours/mn au moyen d'un seceucur giratoire sous une amplitude de 5 cm.
- Fermentation en cuve de 10 1 contenant un volume utile de 6 1.
Le milieu est soumis à une agitation de 270 tours/mn obtenue au moyen de pales à carré évidé.
Le milieu est aéré sous un débit d'air de 500 1/h.
- Fermentation en cuve de 20 litres BIOLAFFITE ~ contenant un volume utile de 15 litres.
Le milieu est soumis à un.e agitation de 400 tours/mn obtenue au moyen de mobiles de type RUSHTON ~ .
Le milieu est aéré sous ~r. débit d'air de 825 1/h.
_ 1~44'~31 15.
Les résultats obtenus figurent dans le tableau I suivant TABLEAU I
Fin de fermentation Rendement Viscosit erlenmeyer 80 h 72 ~ 6 400 mPa.s cuve de 10 1 100 h 67 % 9 000 mPa.s cuve de 20 1 90 h 66 % 6 800 mPa.s Dans ce tableau I , la fin d~ fermentation correspond à la consommation totale ou quasi totale du saccharose et le rendement correspond au rapport en ~ entre ie poids d'hétéropolysaccharide BM07 obtenu sur le poids ce saccharose mis en oeuvre.
La viscosité es;t celles du moût de fin de fermentation, mesurée au moyen d'un viscosimètre Brookfield LVT ~ avec une aiguille cylindrique 4, â 30 touYS;~mir~.
Exemple 2 : Récupérat.ion de l'hétéropolysaccharide BM07 du moût de fermenta t: ion.
La récupération de l'hétéropolysaccharide a été effectuée à partir de 2 kg de moût obtenu par fermentation d'un milieu organique de production, contenu clans une cuve de 20 1, selon l'exemple 1.
Le moût est traité thermiquement à 90°C pendant 30 mn.
Au moât ainsi traité ~>ont ajoutés 2300 ml d'alcool isopropylique (IPA). La précipitatz.~~~ est effectuée en préserlce de 150 g de sulfate de sodium.
Les fibres issues de ~.a précipitation sont ensuite déshydratées 2 fois en présence de .200 ml d'IPA.
Les fibres sont: alor;> essorées, dilacérées et séchées dans une étuve â 85°C.
La matiëre sèche récoltée est broyée et tamisée.
Gr! obtient alors une poudre d'hétéropolysaccharide BM07 de couleur creme.
._ ~.340T~31 16.
Exem le 3 : Propriétés rhéologiques de l'hétéropolysaccharide BM07 dans l'eau distillée à pH7.
La viscosité et le seuil d'écoulement de solutions dans l'eau distillée à pH7, de l'hétéropolysaccharide BM07 à différentes concentrations, ont été testés.
Les essais ont été réalisés à partir d'une poudre d'hétéropolysaccharide BM07 telle qu'obtenue à l'exemple 2.
Des solutions à. 0,2 % et à 0,3 %, en poids d'hétéropolysaccharide BM07 sont préparées par addition dans l'eau distillée de ladite poudre d'hétéropolysaccharicle, suivie d'une agitation au moyen d'un agitateur type RAYNERI ~ à une vitessEe de 1 000 à 1 200 tours/mn, pendant 15 mn.
La mise en solution est c:emplète au bout de ces 15 mn ~3ans l'eau distillée.
Des solutions à 0,1 ~ en poids d'hëtéropolysaccharide sont obtenues par simple dilution àans l'eau distil_lëe des solutions à 0,2 précédentes.
Les essais sont réalisés à une température de 25°C, 24 heures après la préparation des solutions.
Des essais com~~aratif;s ont été réalisés dans les mémes conditions avec du RHODOPOL 23 ~ (gomme xanthane produits par la Société RHONE
POULENC).
Les mesures des valeurs des seuils d'écoulement et des viscosités des essais 1 à 4 ont été effectuées au moyen d'un viscosimètre L0W SHEAR
et au moyen d'un RHEOMAT 30 pour les mesures des essais 5 et 6.
Les résultats obtenus figurent dans le tableau II suivant ~.34t~~3I
a' a) O O G O O O
U! O O C O O tn al li7 N c~ r Q~ V' ~
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_ c.7M OJ o~ a7 7 m O c-7 r, N
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.. , Ce tableau montrE~ clairement que l'hétéropolysaccharide BM07 en solution dans l'eau distil7.ée est plus pseudoplastique que la gomme xanthane placée dans les mérnes conditions.
Une solution à 0,1 % en poids d'hétéropolysaccharide présente les mènes caractéristiques qu'une solution de gomme xanthane à 0,2 %.
Les figures 1 et ~) ci-après, illustrent l'évolution de 1a viscosité en fonction du gradient de vitesse, de solutions dans l'eau distillée à, re~~pective~ment, 0,1 et 0,2 % en poids d'hét~ropolysaccharicie BM07 et de gomme xanthane (RHODOPOL 23 O ). Les mesures des viscositÉ~s ont été effectuées dans les mêmes conditions que celïas décrites ci-dessus.
Exemple 4 : Propriétés rhéo:Logiques de l'hétéropolysaccharide BM07 dans l'eau de ville <3 pH 7 à ~2° HT.
Les essais ont été réalisés sur des solutions à v,l et 0,2 ~ en poids d'hétéropolysaccharide BM07 dans de l'eau de ville à pH 7, ceci dans les mêmes condiJ~ions que dans l'exemple 3.
On note cependant que la mise en solution de l'hétéropolysaccharic9e BM07 est encore plus facile dans l'eau distillëe que dans l'eau de vi.Lle.
Les résultats ~jes esaais ainsi que ceux des essais comparatifs réalisés dans les mènes conditions avec du RHODOPOL 23 O , figurent dans ie Tableau III suivant.
Les viscosités et les seuils d'écoulement ont été mesurés au moyen d'un viscosimètre LO'~7 SHEAR dans les essais 7 et 9 et avec un RHEOMAT 30 pour l'essai 8.
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w 13~0'~31 Exemple 5 : Influence du pH, de la température et du cisaillement sur les propriétés rhéologiques de l'hétéropolysaccharide BM07 L'influence du pH sur les propriëtês rhéologiques de 1 ' h~t.éropol;rsacc:harids~ BM07 a été eaarni.né sur des scl utiens à 0, 2 %
en poids dudit hétéropol;rsaccha;~ide BM07 telles que décrites dans l'exemple 3, mais; où le pH est sort de 1,7 (après addition d'une quantité
suffisante d'acide formique) soit de 11,8 (après addition d'une quantité
_.~ffisan'~e d~_ .~~~n~,~) .
Les essais ont été I'éa.:l.sés à une température ds ''?°~, 24 heures, 7 jours et 1 mn;s ~ipr~~s lc? I.n°~LVarati.on des ~~~olutions.
L'influence de l.a température a été examinée sur des solutions à
0,2 ~ en poids d'hét:éropolysaccharide BM07 telles que décrites dans l'exemple 3.
Les mesures ont été réalisées sur de telles solutions, soumises à
l!ne tettlp~?rature de 80"C pendent 1 heure et 24 heures.
Afin d'apprécier l'effet du cisaillement sur des solutions à 0,2 ô
en poids d'hét~ropolyç~acchari.de BM07 telles que décrites à l'exemple 4, *
on soumet ces solutions s. un cisaillement par un ULTRA TURRAY, 1ANKE-KUNKEL TP 18-20 à une vitesse maximale d'envi.ron ?,0000 tot:rs/mn pendant 5 minutes, ce~~i. juste après la préparation des solutions. Les mesures sont effectu é s 24 heures après cette opération.
na.~ ~.oS~lS COmj7~3Yatif°= sont donnés pour des solutions à 0,2 ~ en RI-IODOPOL 23 P (Société Rhône-Poulenr_), traitées dan, les mémes conditions.
Les mesut~es sont effectuées au moyen d'un viscosimètre LOW SHEAR.
Les _~~ésvlt.at> d~>s e4s~äis figurent au Tableau IV ci-dessous On pe~it constater à la lA~=ture de ce Tableau que la tenue des F~ropriétés rhéologiques de l'hétérepolysaccharide BM07, soumis notamment à l'influence d'un pH acide ou basique, est très bonne, et est tout à
fait comparable à la tenue dans l'eau distillée, ceci notamment sur une p~~riode de 1 mois.
* ( moque de catmmene ) 13~0'~31 - c:
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- ) P y~ __ _ .. 1'~40'l~1 Exemple 6 . Influence d'un milieu fortement ionique sur les propriétés rhéologiques de l'hétéropolysaccharide BM07 Les essais 18 à 23 ont été réalisés sur des solutions à 0,2 % en poids d'hétêropolysaccharide BM07 comportant 20 ~ de NaCl_ Ces solutions sent préparées à partir d'une solution mère à base d'eau distillée de l'hétéropolysaccharide BM07 tel qu'obtenu dans l'exemple 2 ; la solution mère est diluée par une solution NaCl jusqu'à
obtention des cancentrations en hétéropolysacrharide BM07 et en NaCi désirées.
Les essais ont été effectués 24 heures, 7 jours et 1 mois après la préparation des solutions, maintenues à 22°C.
Des essais comparatifs ont êté réalisés dans les mëmes conditions sur des solutions à 0,2 % en RHODOPOL 23O obtenues selon le même procédé. Les mesures des viscosités et des seuils d'écoulement ont été
effectuées avec un viscosimètre LOW SHEAR .
Les résultats des essais figurent dans le tableau V ci-dessous.
_ 1340'31 I r-i O O O O O O
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In _ 13~0~31 -2ç-Les essais 24 ~~ 26 et 27 à 29 ont été réalisés sur des solutions à
0,3 % en poids d'héte~ropoly:~accharide BM07 préparées également dans les conditions données à l'exemple 3, par addition dudit hétéropolysaccharide dans dc~ l'eau distillée contenant 10 ~ en poids de 2,~de Na2S0, ou de NaCl. Lea essais ont été effectués 4 heures, 7 jours et 1 mois après la préparation des solutions, maintenues dans le cas des essais 24 à 26 à 22"C et dans le cas des essais 27 à 29 à 40°C. Les mesures des viscosii:és oni= été réalisées au moyen d'un rhéomètre BROOKFIELD L.V.T. à 60 tours/minute.
Les résultats des essais 24 à 26 et 27 à 29 figurent respectivement dans l.es tableaux VI et VII ci-dessous.
Propriétés rhéologiques de l'hétéropolysaccharide BM07 dans des solutions salines à 10 % et à 22°C
Viscosit (en Essai Nature du sel mPa.s) aprs 4 heures 7 jours 1 mois 24 CaCl~ 530 650 640 25 Naz 50., 560 680 640 26 NaCl 500 620 580 1~~0731 -25 "
Tableau VII
Propriétés rhéologiques de l'hétéropolysaccharide BM07 dans cies solutions salines à 10 % et à 40°C
Viscosit i el (en mPa.s) d aprs :
N
t Essa ure 4 heures 7 jours 1 mois u g a 27 CaCl., 550 610 630 28 Na~ Sc)4 620 510 450 29 NaCl 590 460 -Exemple 7 Les essais 30 .st 31 montrent la bonne tenue â la température des solutions d'hétéropolysacch~aride BM07 comparativement à des solutions de SHELL-FLO S O .
Le SHELL-FLO S ~ est un hétéropolysaccharide developpé par la société SHELL et qui comporte des motifs dérivés du glucose, du galactose et des sels des acides pyruvique, acétique et succinique.
1340'31 Des solutions dans l'eau distillée à 0,3 % en poids en hétéropolysaccharide BM07 sont préparées dans les conditions décrites à
l'exemple 3.
De la mëme façon, on prépare des solutions à 0,3 % en SHELL-FLO S O.
Ces solutions :ont soumises à une température de 80°C pendant 30 minutes. Après 2 Heures de repos, les viscosités et les seuils d'écoulement des so7.utions traitées sont mesurés avec un rhéomètre Carrimed CS 50.
Les résultats figurent: dans le tableau VIII suivant Tableau VIII
Essai Solution 0,3 % en : Seuil Viscosit d'coulement (en mPa.s) (en mPa) 1 s -' 30 Htropolyaaccharude BM07 1080 2415 31 SHELL FLO :~ ~ 66 323 ~~~~,~~1 Exemple B
Utilisation de l''.étéropalysccharide BM07 dans des compositions détar t_rantes ;
on réalise une compo=~ition détartrante en introduisant dans un flacon - hétéropolysaccharic.e BM07 0,25 - eau 87,70 - acide formique i0 - nonylphénoiéthox~~? _ ( 12 OE: ) 2 - parfum et colorant CS,05 Le pH de cette compo=;ition est de 1,4.
La stabilité de cette composition est èvaluée en fonction de la température et du temps de ~>tockage, par mesure de sa viscosité au moyen d'un Rhéomat 30 dans une large gamme de gradient de vitesse (O,ls-1 à
100s-1) et d'un viscosimètre Brookfield LVT à 20 t/
Les mesures sont eff~ectuée~> à 20°C et les résultats obtenus figurent dans le Tableau IX suivant ~.340'~31 ro a~ ~
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2. L'hétéropolysaccharide BM07 montre de bonnes propriétés rhéologiques en milieu salir, et notamment dans des solutions salines à
base de CaCl~, de Na~SO, et de NaCl.
Plus particulièrement, on a constaté que des solutions à 0,3 % en poids dudit hétéropol.ysaccharide BM07 dans une solution saline (dont la composition figure ci.-dessous), présentaient généralement des viscosités à 2 heures comprises entre x:000 et 3500 mPa.s, et plus particulièrement comprises entre 2500 et 3000 mPa.s, les viscosités étant mesurées avec un rhéomètre Carrimed ~ à un gradient de vitesse de 1 s-' ; la solution saline ayant la composition suivante NaCl 91,71 g CaC12,2H~C 10,41 <~
Mg C1~, 10,12 q 6H~0 BaCl~, ZH~C0,113 g NaHCo~ 0,195 g Eau distilleqsF> 1 D'autre part des solui:ions à 0,2 % en poids d'hétéropolysaccharide BM07 dans des solui:ions aqueuses à 20 % de NaCl présentent des viscosités à 24 heures comprises entre 1600 et 2400 mPa.s et de préférence comprises entre 1700 et 2100 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre LOW SHEAR à un gradient de vitesse de 1 s-'.
3. Des solutions aqueuses à 0,2 % en poids d'hétéropolysaccharide BM07, à pH 1,7 et à ~'.5°C, présentent une viscosité à 24 heures comprise entre 1000 et 2500 mPa.s, plus particulièrement comprise entre 1400 et 2000 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre LOW
SHEAR, à un gradient de vitrasse de 1 s-'.
4. Des solutions aqueuses à 0,2 % en poids d'hétéropolysaccharide BM07, à pH 11,8 et à 25°C, présentent une viscosité à 24_ heures comprise entre 1000 et 2500 ml~a.s, ;plus particulièrement comprise entre 1400 et 2000 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre LOW
SHEAR, à un gradient de vitesse de 1 s-'.
~.r3~~'~3:I
-5. Des solutions d'hétéropolysaccharide BM07 à 0,2 % en poids dans l'eau distillée, soumises à une température de 80°C durant 24 heures, présentent gênéralemc~nt des viscosités comprises entre 500 et 2500 mPa s et plus particuliêrement comprises entre 1000 et 2000 mPa s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre LOW SHEAR, à un gradient de vitesse de 1 s-'.
6. Avantageusement, des solutions aqueuses â 0,2~ en poids dudit hétéropolys.accharide à pH 7 et 25oC, présentent une viscosité à 24 heures comprises entre 1000 et 2500 mPa.s, et plus particulièrement comprises entre 1400 et 2000 mPa.s, les viscosités étant mesurêes au moyen d'un viscosimètre LOW
SHEAR, à un gradient de vitesse de 1 s 1.
On a également constaté que l'hétéropolysaccharide BM07 présente un bon pouvoir de suspension. Le poûvoir de suspension des solutions d'hétéropoiysaccharide BM07 peut étre apprécié au moyen du test suivant:
une éprouvette MEGAL * de 100 ml est remplie dans sa totalité
(volume occupé de 130 ml.; par une solution à C,1 % en poids d'hétéropolysaccharide EM07 dans de l'eau distillée. La densité de la solution est alors voisine de 1.
Une bille de polyamides 6,6, d'un diamètre de 3 mm et d'une densité
de l,î?5 est posée à. la surface du liquide, sans ~aitesse initiale. Le temps de chute de la bille est mesuré jusqu'à ce qu'elle parvienne au fond de l'éprouvette, soit après ûn parcours de chute de 23,5 cm. Afin d'obtenir un temps moyen, ce test est répété plusieurs fois. Le temps m~rn d2 chute est généralement supérieur à 2000 secondes, et plus particulièrement est compris entre 3000 et 15000 secondes.
à titre comparatif, une solution à O,1 % en poids de gomme hanthane présente, dans les mêmes conditions, un temps de chute compris entre environ 60 et 350 secondes.
La présente i:wention a également trait â un procédé de préparation de l'hétéropolysaccharide BM07 tel que décrit ci-dessus.
* (marque de earmerce) 1340'31 - 8a -Ce procédé de préparation dudit hétéropolysaccharide consiste en la fermentation d'un milieu comportant au moins une source de carbone assimilable, par une souche Agrobacterium tumefaciens T-736 un de ses recombinants ou un de ses mutants.
Outre ladite =source de carbone assimilable, 'e milieu de ferme.~tation pe~~t aurai renfermer au moins une source d'azote, de préférence une source d'aa:ote organigue et éventuellement un ou plusieurs sels minéraur_.
. ~3~0,~~1 9.
Le milieu est innoculé de manière classique par la souche Agrobacterium tumefaciens I-736.
Lorsque le volume du milieu de fermentation est important, on peut avantageusement l'irmoculer au moyen d'un milieu innoculum, ensemencé
par un milieu de préculture liquide ; ce dernier étant préalablement ensemencé lui-méme par une culture pure d'Agrobacterium tumefaciens I-736.
Selon le procédé de l'invention on peut utiliser en va~lL yu~
milieu innoculum, tout mi7~ieu employé classiquement à cet effet, et avantageusement un milieu de nature minérale. En tant que milieu de préculture on peut citer par exemple le milieu YM bioth DIFCO Ref.
07101 et de préférence un milieu préparé à partir des composés suivants - Soya - peptones 5 g/1 - Extrait de malt 3 g/1 - Extrait de levure 3 g/1 - Glucose ou saccharose 10 g/1 Le pH naturel de ce milieu est de 7 à 7,2 et n'est pas ajusté.
A titre de source organique de carbone constitutive du milieu de fermentation on peut citer des sucres tels que le glucose, le saccharose, les hydrolysats d'amidon, et éventuellement le lactose ou l'amidon natif, ainsi que les mélanges de ces sucres. Le glucose et le saccharose sont des sucres préférës. La concentration en source organique de carbone dans le milieu de fermentation peut être comprise entre 1 et 100 g/1 et de préférence entre 15 et 60 g/1.
A titre de source organique d'azote on peut citer la caséine et les caséinates, les hydrol.ysats de poisson, les farines de blé, de maïs ou de soja, les e~xtrait~~ de levure (levure de boulanger, levure de bière, levures lact:iques...) Les dry distillers solubles, les protéines de pomme de terre, le corn steap liquor (CSL) et les solubles de CSL qui sont obtenus par dilut~~on du CSL, suivie d'une élimination des particules solides par centrifugation, débourbage ou décantation. Le CSL, et tout spéc.~alemen~t les solubles de CSL, ont été jugés comme particulièrement avantageux dans le cadre de la présente invention.
La concentrav~ion en source organique azotée dans le milieu de fermentation peut <âtre comprise entre 3 et 80 g/1 et de préférence entre et 50 g/1.
i0. i3~0'~31 On peut citer à i:itre de sels minéraux que l'on peut éventuellement introduire dans le milieu de fermentation, les sulfates tels que les sulfate; de magnésium, de manganèse, de zinc, de fer, les carbonates tels que le c<rrbonate de calcium, les sels de calcium solubles, les phosphates tels que les phosphates de potassium, de sodium.
La concentration de chacun de ces sels minéraux dans le milieu de fermentation peut varier eni:re 0,01 et 5 g/1 et de préférence entre 0,05 et 2 g/1.
Le milieu dea fermentation peut également renfermer des oligoéléments tels que des i:races de sels de cobalt et/ou de molybdène, ainsi que des vitamines et des nucléotides.
La fermentation peut É~tre réalisée à des pressions comprises entre 1 et 4, bar à une température comprise entre 25 et 35°C, de préférence entre 28 et 32°C, dans des conditions aérobies submergées.
Le pH du milieu de fermentation peut étre compris entre 5 et 9 et de préférence entre fi et 8. Le pH peut être ajusté, selon le cas, avec une base telle que l.a soucie ou la potasse ou avec un acide tel que l'acide sulfurique, l'acide phosphorique, l'acide chlorhydrique ou l'acide nitrique. Le milieu de fermentation, placé par exemple, dans une cuve ou un récipient de fermentation, peut être avantageusement soumis à
une agitation.
Cette agitation peut être exercée par exemple au moyen d'un secoueur réciproque, d'un sfacoueur giratoire, d'un mobile d'agitation ou d'une colonne à bul:Les. Le temps de fermentation est habituellement supérieur à 30 heures, mai: est généralement compris entre 40 et 90 heures.
Les rendements de fermentation sont généralement supérieurs à 40 plus particulièrement compris entre 55-75 % et tout particulièrement compris entre 60 et 75 % en poids d'hétéropolysaccharide BM07 produit par rapport à la source de carbone mise en oeuvre.
L'hétéropolysaccharide BM07 peut être séparé du milieu de fermentation.
Pour ce f<üre le mo~ît de fermentation renfermant I'hét.éropolysacchari~~e BM07 peut être avantageusement chauffé à des températures comprises entre 80 et 120°C, pendant 10 à 60 minutes et de préférence entre 15 ~et 45 minutes.
13~0'~31 11.
Le moût soums.s au traitement thermique ci-dessus présente avantageusement un pH compris entre 6 et 8.
Cependant ce pH peut ~~tre ajusté si nécessaire, avec selon le cas, une base ou un acide..
Ces derniers peuvent É~tre choisis parmi les bases et les acides mentionnés ci-dessus utili:~és pour l'ajustement du pH du milieu de fermentation.
La récupération de l'hétéropolysaccharide BM07 du moût de fin de fermentation peut alors être réalisée par précipitation dudit hétéropolysaccharide au moyE~n d'un liquide organique miscible avec l'eau et dans lequel l'hétéropo:lysaccharide est insoluble ou pratiquement insoluble.
A titre de liquides organiques convenables selon la présente invention on peut cii=er l'acétone, les alcools tels que l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, le butanol, le tertio-butanol.
L'isopropanol est plu: particulièrement préféré dans le cadre de la présente invention.
Le volume de l.Lquide organique utilisé est généralement 2 à 3 fois celui du volume de moût à tn~aiter.
La précipitation de :1'hétéropolysaccharide BM07 par un liquide organique peut également être réalisée en présence de sels tels que les sulfates, chlorures ou phosphates de sodium, de potassium, ou de calcium.
L'hétéropolysaccharide BM07 une fois précipité, peut ensuite être séparé du liquide or~~anique par filtration, centrifugation ou essorage.
Les fibres obtenues peuvent être déshydratées par exemple au moyen d'acétone ou d'un alcool te:l que l'éthanol, le propanol, l'isopropanol ou le tertio-butanol.
Le poids d'al<~ool nécessaire pour effectuer cette opération de déshydratation est ~~énèral~ement de 1 à 10 fois celui des fibres à
traiter.
Les fibres déshydratées peuvent subir de nouvelles opérations de filtration de centrifugation ou d'essorage.
Les fibres peuvent ensuite ëtre séchées, broyées et tamisées de façon à obtenir une ,.poudre d'hétéropolysaccharide BM07. Cette poudre est habituellement de co~,~leur crème-beige.
e~
Afin d'obtenir_ une poudre encore plus pure, il est possible de traiter soit le moût des fermentation, soit une solution aqueuse reccnstituée à partir de la poudre obtenue selon le procédé dé~:it ci-dessus, au .woyen d'une ou plusieurs enzymes.
A titre d'enzymes pouvant convenir à cet effet, on peut citer les protéases, les mutanases, les lipoprotéases, les cellulases et les cr~itinases.
La purification enzymatique peut étre associée ou remplacée par Ces p:océdés physiques de purification tels que les divers modes de lO filtration, de dialyse, ou par les différentes techniques de chromatographie.
Les raoùts de f~~rmenta~ion et les solutions aqueuses reconstit~~ées d'hétérogollsacchari~~e BMO"', ayant subi ou .ucn un .:aitement de pur_fication peuver:v étre concentrés. Lâ concentration peut ?tre avantageuse dans certains c~3s rotammPnt dans la !r~esu_-e où les coùts de 'ransport peuvent éW-e ainsi réduits_ ne plus, les solut_c..;~s cor_centrées peuvent ~tr~ t.lu~ rapidement mises en oeuvre que les poudres d'hétérooolysacchari<ie BM07.. La concentration peut Ftr? ~-éalisée par des t~chniq~.:2~ telles que ''évaporation, l'ultrafiltration, ou par diafiltration.
L'hétéropolysaccharide BM07 peut ètre appliqué avantageusement dans de nombreux: domaines :industriels où sont déjà utilisés d'autres polymères hydrosolub~.es_ Dans ces applicatiorls, l'hétéropolysaccharide BM07 est principalement employé en tant qu'adent épaississant, agent de suspension ou en tant qu'agent stabilisant de disE.~.ersions et ceci dans une large gamme de PH, en présence ou non der sels, de tensioactifs non-ioniques ou anioniques ou d'autres additif~_ Dans ce:~ applications on utilise généralement de 0,001 à 2% en poids, de préférence entre 0,1 et 1% en poids d'hétéropolysacclzarise BM07 par rapport au poids de la com-position qui le :renfer:me_ Ainsi, :L'hétéropolysaccharide 8M07 peut être employé:
1340'31 - 12a -dans l'industrie pétrolière par exemple dans les fluides de forage, en récupération assistëe du pétrole, dans les compositions ui;ilisé~ss pour la fracturation des forma-tions souterraines et: dans celles destinées au traitement des puits, - dans les compo:~itions céramiques, - dans l'industri.e alimentaire, notamment en tant qu'agent de suspension ou épaississant, - dans les peintures, .Les colles, les encres, - dans les cosmétig;ues, en particulier dans les shampooings, Les crèmes, les lotions et les pâtes dentifrices, - dans les compositions. destinées â l'agrochimie, notamment dans les "flowables" en tant qu'agent de suspension, - dans l'industrie papetière, notamment pour le couchage du papier, - dans les compo~>ition:~ lubrifiantes, - dans les nettoyants industriels destinés au traitement des surfaces mÉ~talliques, - en tant qu'agent stabilisant de dispersions aqueuses diverses comme les dispersions de charbon micronisé, - dans l'industrie textile, notamment dans les compositions pâteuses destinées à l'impression des motifs, - dans l'industrie des explosifs, - pour la préparation des bétons et des plâtres, notamment en vue de leur color<~tion, - dans les nettoyants ménagers ou industriels, notamment en tant qu'agent épaississant et en tant qu'agent stabilisant des particules abrasives. Tout particulièrement l'hétéropolysacharide BM07 peut être utilisé comme épaississant dans des compositions aqueuses acides contenant en solution aqueuse un acide organique ou minéral.
A titre d'acide organique, on peut citer des acides monvcarboxyliques tels l'acide formique, l'acide acétique, l'acide chloroacétique, l'acide lactique, l'acide ascorbique, l'acide tannique, des acides dicarboxyliques tels l'acide fumarique, l'acide malonique, l'acide succinique, l'acide glut:arique, l'acide itaconique, l'acide tartrique, des acides. tricarboxyliques comme l'acide citrique.
De préférence, on utilise l'hétérosacharide BM07 en tant qu'agent épaississant dans des compositions aqueuses acides contenant en solut:ion aqueuse un acide organique ayant une constante de dissociation pK â 25°C supérieure ou égale à 2 et/ou au moins un sel d''un acide organique ou minéral de pK
supérieur ou égal à 2 et: d'une base forte.
A titre d'acide minéral, on peut citer l'acide chlorhydrique, l'acide phosphorique, l'acide nitrique ou l'acide sulfurique.
Tous ces acides peuvent être utilisés seuls ou en mélange entre eux. Les proportions relatives d'acide et d'hétéro-polysaccharide peuvent varier dans une large mesure en fonction de facteurs tels que la nature propre de chacun de ces composés, la vii>cosité désirée et l'application spécifique choisie.
Généralement on utilise entre 1 et 4og d'acide, entre o,ool et 2~ d'hétéropolysaccharide BM07 et entre 55 et 98,99 d'eau.
Des quantités d'hétéropolysaccharide BM07 comprise entre 0,1 et 1~ sont toutefois préfërées.
...~;
1340'~3I
- 13a -Ces compositions peuvent être prêparées de toute manière souhaitable par mélange des différents composés dans l'eau.
I1 est préférable de dissoudre initialement l'hétéropolysaccharide EM07 dans l'eau puis d'ajouter le ou les acides.
,t 14.
Lesdites composition: peuvent éventuellement contenir divers autres ingrédients utilisés dans les formulations acides tels que des agents tension-actifs, des colorants, des détergents, des parfums, des bactéricides et des abrasif:5.
Lesdites compositions peuvent étre plus spécifiquement destinées au nettoyage des surîaces, a~u détartrage des surfaces en porcelaine et métallique et au décapage des surfaces métalliques.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaitront à la lecture des exemples et des figures 1 et 2 ci-aprés qui représentent l'évolution de la viscosité en fonction du gradient de vitesse, de solutions dans l'eau distillée, à respectivement, 0,1 et 0,2 % en poids d'hét~~ropolyaaccharide 8M07 et de gomme xanthane.
Exemple 1 : Procédé ~9e prép~3ration de l'hétéropolysaccharide BM07 sur un milieu minéral de production_ On fait fermenter par une souche Agrobacterium tumefaciens I-736 un milieu renfermant (en g/1) .
CSL (corn steap liqu~~r) 11 K ~ HP0 . 4 MgSO,; , "H~ 0 O, 5 Saccharose 25 Eau potable qsp 1 1 Ce milieu est fermenté par ladite souche à une température de 28°C, dans les conditions suivantes - Fermentation dans un erlenmeyer de 500 ml, contenant un volume utile de 100 ml.
Ce milieu est soumis à une agitation de 220 tours/mn au moyen d'un seceucur giratoire sous une amplitude de 5 cm.
- Fermentation en cuve de 10 1 contenant un volume utile de 6 1.
Le milieu est soumis à une agitation de 270 tours/mn obtenue au moyen de pales à carré évidé.
Le milieu est aéré sous un débit d'air de 500 1/h.
- Fermentation en cuve de 20 litres BIOLAFFITE ~ contenant un volume utile de 15 litres.
Le milieu est soumis à un.e agitation de 400 tours/mn obtenue au moyen de mobiles de type RUSHTON ~ .
Le milieu est aéré sous ~r. débit d'air de 825 1/h.
_ 1~44'~31 15.
Les résultats obtenus figurent dans le tableau I suivant TABLEAU I
Fin de fermentation Rendement Viscosit erlenmeyer 80 h 72 ~ 6 400 mPa.s cuve de 10 1 100 h 67 % 9 000 mPa.s cuve de 20 1 90 h 66 % 6 800 mPa.s Dans ce tableau I , la fin d~ fermentation correspond à la consommation totale ou quasi totale du saccharose et le rendement correspond au rapport en ~ entre ie poids d'hétéropolysaccharide BM07 obtenu sur le poids ce saccharose mis en oeuvre.
La viscosité es;t celles du moût de fin de fermentation, mesurée au moyen d'un viscosimètre Brookfield LVT ~ avec une aiguille cylindrique 4, â 30 touYS;~mir~.
Exemple 2 : Récupérat.ion de l'hétéropolysaccharide BM07 du moût de fermenta t: ion.
La récupération de l'hétéropolysaccharide a été effectuée à partir de 2 kg de moût obtenu par fermentation d'un milieu organique de production, contenu clans une cuve de 20 1, selon l'exemple 1.
Le moût est traité thermiquement à 90°C pendant 30 mn.
Au moât ainsi traité ~>ont ajoutés 2300 ml d'alcool isopropylique (IPA). La précipitatz.~~~ est effectuée en préserlce de 150 g de sulfate de sodium.
Les fibres issues de ~.a précipitation sont ensuite déshydratées 2 fois en présence de .200 ml d'IPA.
Les fibres sont: alor;> essorées, dilacérées et séchées dans une étuve â 85°C.
La matiëre sèche récoltée est broyée et tamisée.
Gr! obtient alors une poudre d'hétéropolysaccharide BM07 de couleur creme.
._ ~.340T~31 16.
Exem le 3 : Propriétés rhéologiques de l'hétéropolysaccharide BM07 dans l'eau distillée à pH7.
La viscosité et le seuil d'écoulement de solutions dans l'eau distillée à pH7, de l'hétéropolysaccharide BM07 à différentes concentrations, ont été testés.
Les essais ont été réalisés à partir d'une poudre d'hétéropolysaccharide BM07 telle qu'obtenue à l'exemple 2.
Des solutions à. 0,2 % et à 0,3 %, en poids d'hétéropolysaccharide BM07 sont préparées par addition dans l'eau distillée de ladite poudre d'hétéropolysaccharicle, suivie d'une agitation au moyen d'un agitateur type RAYNERI ~ à une vitessEe de 1 000 à 1 200 tours/mn, pendant 15 mn.
La mise en solution est c:emplète au bout de ces 15 mn ~3ans l'eau distillée.
Des solutions à 0,1 ~ en poids d'hëtéropolysaccharide sont obtenues par simple dilution àans l'eau distil_lëe des solutions à 0,2 précédentes.
Les essais sont réalisés à une température de 25°C, 24 heures après la préparation des solutions.
Des essais com~~aratif;s ont été réalisés dans les mémes conditions avec du RHODOPOL 23 ~ (gomme xanthane produits par la Société RHONE
POULENC).
Les mesures des valeurs des seuils d'écoulement et des viscosités des essais 1 à 4 ont été effectuées au moyen d'un viscosimètre L0W SHEAR
et au moyen d'un RHEOMAT 30 pour les mesures des essais 5 et 6.
Les résultats obtenus figurent dans le tableau II suivant ~.34t~~3I
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.. , Ce tableau montrE~ clairement que l'hétéropolysaccharide BM07 en solution dans l'eau distil7.ée est plus pseudoplastique que la gomme xanthane placée dans les mérnes conditions.
Une solution à 0,1 % en poids d'hétéropolysaccharide présente les mènes caractéristiques qu'une solution de gomme xanthane à 0,2 %.
Les figures 1 et ~) ci-après, illustrent l'évolution de 1a viscosité en fonction du gradient de vitesse, de solutions dans l'eau distillée à, re~~pective~ment, 0,1 et 0,2 % en poids d'hét~ropolysaccharicie BM07 et de gomme xanthane (RHODOPOL 23 O ). Les mesures des viscositÉ~s ont été effectuées dans les mêmes conditions que celïas décrites ci-dessus.
Exemple 4 : Propriétés rhéo:Logiques de l'hétéropolysaccharide BM07 dans l'eau de ville <3 pH 7 à ~2° HT.
Les essais ont été réalisés sur des solutions à v,l et 0,2 ~ en poids d'hétéropolysaccharide BM07 dans de l'eau de ville à pH 7, ceci dans les mêmes condiJ~ions que dans l'exemple 3.
On note cependant que la mise en solution de l'hétéropolysaccharic9e BM07 est encore plus facile dans l'eau distillëe que dans l'eau de vi.Lle.
Les résultats ~jes esaais ainsi que ceux des essais comparatifs réalisés dans les mènes conditions avec du RHODOPOL 23 O , figurent dans ie Tableau III suivant.
Les viscosités et les seuils d'écoulement ont été mesurés au moyen d'un viscosimètre LO'~7 SHEAR dans les essais 7 et 9 et avec un RHEOMAT 30 pour l'essai 8.
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w 13~0'~31 Exemple 5 : Influence du pH, de la température et du cisaillement sur les propriétés rhéologiques de l'hétéropolysaccharide BM07 L'influence du pH sur les propriëtês rhéologiques de 1 ' h~t.éropol;rsacc:harids~ BM07 a été eaarni.né sur des scl utiens à 0, 2 %
en poids dudit hétéropol;rsaccha;~ide BM07 telles que décrites dans l'exemple 3, mais; où le pH est sort de 1,7 (après addition d'une quantité
suffisante d'acide formique) soit de 11,8 (après addition d'une quantité
_.~ffisan'~e d~_ .~~~n~,~) .
Les essais ont été I'éa.:l.sés à une température ds ''?°~, 24 heures, 7 jours et 1 mn;s ~ipr~~s lc? I.n°~LVarati.on des ~~~olutions.
L'influence de l.a température a été examinée sur des solutions à
0,2 ~ en poids d'hét:éropolysaccharide BM07 telles que décrites dans l'exemple 3.
Les mesures ont été réalisées sur de telles solutions, soumises à
l!ne tettlp~?rature de 80"C pendent 1 heure et 24 heures.
Afin d'apprécier l'effet du cisaillement sur des solutions à 0,2 ô
en poids d'hét~ropolyç~acchari.de BM07 telles que décrites à l'exemple 4, *
on soumet ces solutions s. un cisaillement par un ULTRA TURRAY, 1ANKE-KUNKEL TP 18-20 à une vitesse maximale d'envi.ron ?,0000 tot:rs/mn pendant 5 minutes, ce~~i. juste après la préparation des solutions. Les mesures sont effectu é s 24 heures après cette opération.
na.~ ~.oS~lS COmj7~3Yatif°= sont donnés pour des solutions à 0,2 ~ en RI-IODOPOL 23 P (Société Rhône-Poulenr_), traitées dan, les mémes conditions.
Les mesut~es sont effectuées au moyen d'un viscosimètre LOW SHEAR.
Les _~~ésvlt.at> d~>s e4s~äis figurent au Tableau IV ci-dessous On pe~it constater à la lA~=ture de ce Tableau que la tenue des F~ropriétés rhéologiques de l'hétérepolysaccharide BM07, soumis notamment à l'influence d'un pH acide ou basique, est très bonne, et est tout à
fait comparable à la tenue dans l'eau distillée, ceci notamment sur une p~~riode de 1 mois.
* ( moque de catmmene ) 13~0'~31 - c:
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:.y ~~ ~ 1s~ 1 -~ ~-, ; --i ~r-~ ~ --s .-i ,--s .-i i j !
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- ) P y~ __ _ .. 1'~40'l~1 Exemple 6 . Influence d'un milieu fortement ionique sur les propriétés rhéologiques de l'hétéropolysaccharide BM07 Les essais 18 à 23 ont été réalisés sur des solutions à 0,2 % en poids d'hétêropolysaccharide BM07 comportant 20 ~ de NaCl_ Ces solutions sent préparées à partir d'une solution mère à base d'eau distillée de l'hétéropolysaccharide BM07 tel qu'obtenu dans l'exemple 2 ; la solution mère est diluée par une solution NaCl jusqu'à
obtention des cancentrations en hétéropolysacrharide BM07 et en NaCi désirées.
Les essais ont été effectués 24 heures, 7 jours et 1 mois après la préparation des solutions, maintenues à 22°C.
Des essais comparatifs ont êté réalisés dans les mëmes conditions sur des solutions à 0,2 % en RHODOPOL 23O obtenues selon le même procédé. Les mesures des viscosités et des seuils d'écoulement ont été
effectuées avec un viscosimètre LOW SHEAR .
Les résultats des essais figurent dans le tableau V ci-dessous.
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In _ 13~0~31 -2ç-Les essais 24 ~~ 26 et 27 à 29 ont été réalisés sur des solutions à
0,3 % en poids d'héte~ropoly:~accharide BM07 préparées également dans les conditions données à l'exemple 3, par addition dudit hétéropolysaccharide dans dc~ l'eau distillée contenant 10 ~ en poids de 2,~de Na2S0, ou de NaCl. Lea essais ont été effectués 4 heures, 7 jours et 1 mois après la préparation des solutions, maintenues dans le cas des essais 24 à 26 à 22"C et dans le cas des essais 27 à 29 à 40°C. Les mesures des viscosii:és oni= été réalisées au moyen d'un rhéomètre BROOKFIELD L.V.T. à 60 tours/minute.
Les résultats des essais 24 à 26 et 27 à 29 figurent respectivement dans l.es tableaux VI et VII ci-dessous.
Propriétés rhéologiques de l'hétéropolysaccharide BM07 dans des solutions salines à 10 % et à 22°C
Viscosit (en Essai Nature du sel mPa.s) aprs 4 heures 7 jours 1 mois 24 CaCl~ 530 650 640 25 Naz 50., 560 680 640 26 NaCl 500 620 580 1~~0731 -25 "
Tableau VII
Propriétés rhéologiques de l'hétéropolysaccharide BM07 dans cies solutions salines à 10 % et à 40°C
Viscosit i el (en mPa.s) d aprs :
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t Essa ure 4 heures 7 jours 1 mois u g a 27 CaCl., 550 610 630 28 Na~ Sc)4 620 510 450 29 NaCl 590 460 -Exemple 7 Les essais 30 .st 31 montrent la bonne tenue â la température des solutions d'hétéropolysacch~aride BM07 comparativement à des solutions de SHELL-FLO S O .
Le SHELL-FLO S ~ est un hétéropolysaccharide developpé par la société SHELL et qui comporte des motifs dérivés du glucose, du galactose et des sels des acides pyruvique, acétique et succinique.
1340'31 Des solutions dans l'eau distillée à 0,3 % en poids en hétéropolysaccharide BM07 sont préparées dans les conditions décrites à
l'exemple 3.
De la mëme façon, on prépare des solutions à 0,3 % en SHELL-FLO S O.
Ces solutions :ont soumises à une température de 80°C pendant 30 minutes. Après 2 Heures de repos, les viscosités et les seuils d'écoulement des so7.utions traitées sont mesurés avec un rhéomètre Carrimed CS 50.
Les résultats figurent: dans le tableau VIII suivant Tableau VIII
Essai Solution 0,3 % en : Seuil Viscosit d'coulement (en mPa.s) (en mPa) 1 s -' 30 Htropolyaaccharude BM07 1080 2415 31 SHELL FLO :~ ~ 66 323 ~~~~,~~1 Exemple B
Utilisation de l''.étéropalysccharide BM07 dans des compositions détar t_rantes ;
on réalise une compo=~ition détartrante en introduisant dans un flacon - hétéropolysaccharic.e BM07 0,25 - eau 87,70 - acide formique i0 - nonylphénoiéthox~~? _ ( 12 OE: ) 2 - parfum et colorant CS,05 Le pH de cette compo=;ition est de 1,4.
La stabilité de cette composition est èvaluée en fonction de la température et du temps de ~>tockage, par mesure de sa viscosité au moyen d'un Rhéomat 30 dans une large gamme de gradient de vitesse (O,ls-1 à
100s-1) et d'un viscosimètre Brookfield LVT à 20 t/
Les mesures sont eff~ectuée~> à 20°C et les résultats obtenus figurent dans le Tableau IX suivant ~.340'~31 ro a~ ~
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Claims (55)
1. Hétéropolysaccharide BM07 caractérisé en ce qu'il est obtenu par fermentation d'un milieu comportant au moins une source de carbone assimilable, par une souche Agrobacterium tumefaciens I-736, un de ses recombinants, ou un de ses mutants.
2. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, caractérisé en ce que sa viscosité intrinsèque est comprise entre 30 et 250 dl/g.
3. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, caractérisé en ce que sa viscosité intrinsèque est comprise entre 140 et 250 dl/g.
4. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, caractérisé en ce que sa viscosité intrinsèque est comprise entre 150 et 240 dl/g.
5. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, 2 ou 3, caractérisé en ce que des solutions à 0,1% en poids dudit hétéropolysaccharide BM07 dans l'eau distillée â 25°C
présentent des viscosités à 24 heures supérieures à 350 mPa~s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscomètre de marque LOW SHEAR à un gradient de vitesse de 1 s-1.
présentent des viscosités à 24 heures supérieures à 350 mPa~s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscomètre de marque LOW SHEAR à un gradient de vitesse de 1 s-1.
6. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 4, caractérisé en ce que des solutions à 0,1% en poids dudit hétéropolysaccharide BM07 dans l'eau distillée à 25°C
présentent des viscosités à 24 heures comprises entre 400 et 700 mpa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscomètre de marque LOW SHEAR à un gradient de vitesse de 1 s -1.
présentent des viscosités à 24 heures comprises entre 400 et 700 mpa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscomètre de marque LOW SHEAR à un gradient de vitesse de 1 s -1.
7. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, 2 , 3 ou 4 , caractérisé en ce que des solutions à 0,2% en poids dudit hétéropolysaccharide BM07 dans des solutions aqueuses à 20% en poids de NaCl, présentent des viscosités à 24 heures comprises entre 1600 et 2400 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre de marque LOW SHEAR à un gradient de vitesse de 1 s -1.
8. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 6, caractérisé en ce que des solutions à 0,2 % en poids dudit hétéropolysaccharide BM07 dans des solutions aqueuses à 20%
en poids de NaCl, présentent des viscosités à 24 heures comprises entre 1700 et 2100 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre de marque LOW SHEAR, à
un gradient de vitesses de 1 s -1.
en poids de NaCl, présentent des viscosités à 24 heures comprises entre 1700 et 2100 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre de marque LOW SHEAR, à
un gradient de vitesses de 1 s -1.
9. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, 2, 3, 4 ou 6, caractérisé en ce que des solutions aqueuses à 0,2% en poids dudit hétéropolysaccharide à pH 7 et 25°C, présentent une viscosité à 24 heures comprise entre 1000 et 2500 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre de marque LOW SHEAR, à un gradient de vitesse de 1 s -1.
10. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 8, caractérisé en ce que des solutions aqueuses à 0,2% en poids dudit hétéropolysaccharide à pH 7 et 25°C, présentent une viscosité à 24 heures comprise entre 1400 et 2000 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre de marque LOW SHEAR à un gradient de vitesse de 1 s -1.
11. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, 2, 3, 4, 6 ou 8, caractérisé en ce que des solutions aqueuses à 0,2 % en poids dudit hétéropolysaccharide, et dont le pH est de 1,7 et la température de 25°C, présentent une viscosité à 24 heures comprise entre 1000 et 2500 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre de marque LOW SHEAR, à un gradient de vitesse de 1 s -1.
12. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 10, caractérisé en ce que des solutions aqueuses à 0,2% en poids dudit hétéropolysaccharide, et dont le pH est de 1,7 et la température de 25°C, présentent une viscosité à 24 heures comprise entre 1400 est 2000 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre de marque LOW SHEAR, à
un gradient de vitesses de 1 s -1.
un gradient de vitesses de 1 s -1.
13. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8 ou 10, caractérisé en ce que des solutions aqueuses à 0,2% en poids dudit hétéropolysaccharide, et dont le pH est de 11,8 et la température de 25°C, présentent une viscosité à 24 heures comprise entre 1000 et 2500 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre de marque LOW SHEAR, à un gradient de vitesse de 1 s -1.
14. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 12, caractérisé en cep que des solutions aqueuses à 0,2% en poids dudit hétéropolysaccharide, et dont le pH est de 11,8 et la température de 2.5°C, présentent une viscosité à 24 heures comprise entre 1400 et 2000 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre de marque LOW SHEAR, à
un gradient de vitesse de 1 s-1.
un gradient de vitesse de 1 s-1.
15. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10 ou 12, caractérisé en ce que des solutions à 0,2% en poids dudit hétéropolysaccharide dans l'eau distillée, soumises à une température de 80°C durant 24 heures, présentent des viscosités à 24 heures comprises entre 500 et 2500 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre de marque LOW SHEAR, à un gradient de vitesse de 1 s-1.
16. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 14, caractérisé en ce que' des solutions à 0,2% en poids dudit hétéropolysaccharide dans l'eau distillée, soumises à une température de 80°C durant 24 heures, présentent des viscosités à 24 heure, comprises entre 1000 et 2000 mPa.s, les viscosités étant mesurées au moyen d'un viscosimètre de marque LOW SHEAR, à u.n gradient de vitesse de 1 s-1.
17. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12 ou 14, caractérisé en ce qu'il présente une masse moléculaire comprise entre 6X10 6 et 10X10 6.
18. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 16, caractérisé en ce qu'il présente une masse moléculaire comprise entre 6,5X10 6 et 9,5X10 6.
19. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12 ou 16, caractérisé en ce qu'il comporte des motifs dérivés du glucose, du galactose et des acides pyruvique, succinique et acétique ou des sels de ces acides.
20. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 18, caractérisé en ce qu'il comporte des motifs dérivés du glucose, du galactose et des acides pyruvique, succinique et acétique ou des sels de ces acides.
21. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 19, caractérisé en ce qu'il comporte des motifs dérivés du glucose, du galactose et des acides pyruvique, succinique et acétique ou des sels de ces acides selon des proportions molaires, respectivement de 5-8/1-2/0,5-2/0,5-2/0,05-2.
22. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 20, caractérisé en ce qu'il comporte des motifs dérivés du glucose, du galactose et des acides pyruvique, succinique et acétique ou des sels de ces acides selon des proportions molaires, respectivement de 5-8/1-2/0,5-2/0,5-2/0,05-2.
23. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 22, caractérisé en ce que lesdites proportions molaires sont respectivement 6-7,5/1-1,5/0,5-1/0,5-1/0,05-0,2.
24. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 23, caractérisé en ce que lesdites proportions molaires sont respectivement 7/1/0,5-1/0,5-1/0,05-0,1.
25. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 18, 20, 21, 22 ou 23, caractérisé
en ce que lesdits acides pyruvique, succinique et acétique se présentent sous forme de sels.
en ce que lesdits acides pyruvique, succinique et acétique se présentent sous forme de sels.
26. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 24, caractérisé en ce que lesdits acides pyruvique, succinique et acétique se présentent sous forme de sels.
27. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 25, caractérisé en ce que lesdits acides se présentent sous forme de sels de sodium, de potassium, de calcium ou d'ammonium.
28. Hétéropolysaccharide BM07 selon la revendication 26, caractérisé en ce que lesdits acides se présentent sous forme de sels de sodium, de potassium, de calcium ou d'ammonium.
29. Procédé pour la préparation d'un hétéropolysaccharide BM07 tel que défini à la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 18, 20, 21, 22, 23, 24, 26, 27 ou 28, caractérisé en ce que l'on procède à la fermentation d'un milieu comportant au moins une source de carbone assimilable par une souche d'Agrobacterium tumefaciens I-736, un de ses mutants, ou un de ses recombinants.
30. Procédé selon la revendication 29, caractérisé en ce que ladite source de carbone assimilable est le glucose, la saccharose ou un hydrolysat d'amidon.
31. Procédé selon la revendication 29, caractérisé en ce que la concentration en source de carbone assimilable présente dans le milieu de fermentation est comprise entre 1 et 100 g/l.
32. Procédé selon la revendication 30, caractérisé en ce que la concentration en source de carbone assimilable présente dans le milieu de fermentation est comprise entre 15 et 60 g/1.
33. Procédé selon la revendication 29, caractérisé en ce que le milieu de fermentation comprend au moins une source d'azote organique.
34. Procédé selon la revendication 33, caractérisé en ce que la source d'azote organique peut être la caséine et les caséinates, les farines de blé, de mais ou de soja, les extraits de levures, les dry distillers solubles, les protéines de pomme de terre, le corn steep liquor et les solubles de corn steep liquor.
35. Procédé salon la revendication, 34, caractérisé en ce que la source d'azote organique est le corn steep liquor ou les solubles du corn steep liquor.
36. Procédé selon la revendication 33, 34 ou 35, caractérisé en ce que la concentration en source d'azote organique dans le milieu de fermentation est comprise entre 3 et 80 g/1.
37. Procédé selon la revendication 33, 34 ou 35, caractérisé en ce que le milieu de fermentation comprend au moins un sel minéral.
38. Procédé selon la revendication 36, caractérisé en ce que le milieu de fermentation comprend au moins un sel minéral.
39. Procédé selon la revendication 37, caractérisé en ce que le sel minéral est un sulfate ou un carbonate.
40. Procédé selon la revendication 38, caractérisé en ce que le sel minéral est un sulfate ou un carbonate.
41. Procédé selon la revendication 39 ou 40, caractérisé
en ce que la concentration en sel minéral est comprise entre 0,01 et 5 g/1.
en ce que la concentration en sel minéral est comprise entre 0,01 et 5 g/1.
42. Procédé selon la revendication 29, caractérisé en ce qu'il est réalisé à des pressions comprises entre 1 et 4 bar, à des températures comprises entre 25 et 35°C dans des conditions aérobies submergées.
43. Procédé selon la revendication 29, caractérisé en ce que le pH du milieu de fermentation est compris entre 5 et 9.
44. Procédé selon la revendication 29, caractérisé en ce que le pH du milieu de fermentation est compris entre 6 et 8.
45. Procédé selon la revendication 29, caractérisé en ce que les rendements de fermentation sont de 40 à 75% en poids d'hétéropolysaccharide BM07 produit par rapport à la source de carbone mise en oeuvre.
46. Procédé selon la revendication 29, caractérisé en ce que l'hétéropolysaccharide BM07 est séparé d'un moût obtenu à la suite de la fermentation selon les étapes suivantes:
- on chauffe le moût de fermentation entre 80 et 120°C
pendant 10 à 60 minutes, - on précipite ledit hétéropolysaccharide BM07 au moyen d'un liquide organique miscible avec 1'eau, - on sépare l'hétéropolysaccharide BM07 du liquide organique par filtration, centrifugation ou essorage.
- on chauffe le moût de fermentation entre 80 et 120°C
pendant 10 à 60 minutes, - on précipite ledit hétéropolysaccharide BM07 au moyen d'un liquide organique miscible avec 1'eau, - on sépare l'hétéropolysaccharide BM07 du liquide organique par filtration, centrifugation ou essorage.
47. Procédé selon la revendication. 46, caractérisé en ce que ledit liquide organique est l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, le butanol, le tertio-butanol.
48. Procédé selon la revendication 46 ou 47, caractérisé
en ce qu'une fois l'hétéropolysaccharide BM07 séparé du moût de fermentation, il est déhydraté, séché, broyé et tamisé.
en ce qu'une fois l'hétéropolysaccharide BM07 séparé du moût de fermentation, il est déhydraté, séché, broyé et tamisé.
49. Application d'un hétéropolysaccharide BM07 tel que défini à la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 18, 20, 21, 22, 23, 24, 26, 27 ou 28, en tant qu'agent épaississant.
50. Application d'un hétéropolysaccharide BM07 tel que défini à la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 18, 20, 21, 22, 23, 24, 26, 27 ou 28, en tant qu'agent de suspension.
51. Application d'un hétéropolysaccharide BM07 tel que défini à la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 18, 20, 21, 22, 23, 24, 26, 27 ou 28, dans les industries pétrolières, agrochimique, alimentaire, cosmétique, papetière, textile, des explosifs ainsi que dans les compositions céramiques et lubrifiantes, dans les peintures, les colles, les encres, les bétons, les plâtres, les nettoyants ménagers ou industriels et en tant qu'agent stabilisant de dispersions aqueuses.
52. Application d'un hétéropolysaccharide BM07 tel que défini à la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 18, 20, 21, 22, 23, 24, 26, 27 ou 28, en tant qu'agent épaississant dans des compositions aqueuses acides contenant en solution aqueuse un acide organique ayant une constante de dissociation pk à 25°C supérieure ou égale à 2 et/ou au moins un sel d'un acide organique ou minéral de pk supérieur ou égal à 2 et d'une base forte.
53. Application selon la revendication 52, caractérisée en ce que ledit acide est l'acide formique, l'acide acétique, l'acide citrique ou l'acide tannique.
54. Application selon la revendication 52, caractérisée en ce que lesdites compositions sont destinées au nettoyage des surfaces, au détartrage des surfaces en porcelaine et au décapage des surfaces métalliques.
55. Application selon la revendication 53, caractérisée en ce que lesdites compositions sont destinées au nettoyage des surfaces, au détartrage des surfaces en porcelaine et au décapage des surfaces métalliques.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CA000605480A CA1340731C (fr) | 1989-07-12 | 1989-07-12 | Heteropolysaccharide bm07, procede permettant son obtention et son application dans divers types d'industries |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CA000605480A CA1340731C (fr) | 1989-07-12 | 1989-07-12 | Heteropolysaccharide bm07, procede permettant son obtention et son application dans divers types d'industries |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CA1340731C true CA1340731C (fr) | 1999-09-07 |
Family
ID=33315143
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CA000605480A Expired - Fee Related CA1340731C (fr) | 1989-07-12 | 1989-07-12 | Heteropolysaccharide bm07, procede permettant son obtention et son application dans divers types d'industries |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CA (1) | CA1340731C (fr) |
-
1989
- 1989-07-12 CA CA000605480A patent/CA1340731C/fr not_active Expired - Fee Related
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