EXTRAIT ET COMPOSITION DERMATOLOGIQUE LE COMPRENANT POUR LE TRAITEMENT DES PEAUX SENSIBLES DOMAINE DE L'INVENTION La presente invention concerne un nouvel extrait bacterien qui pent etre utile dans la protection et/ou le traitement de la peau sensible et/ou de la peau intolerante reactive, notamment par une action ciblee sur 1'inflammation neurogene cutanee. L'invention a egalement pour objet des compositions cosmetiques ou dermatologiques comprenant un tel extrait bacterien comme agent actif. ETAT DE LA TECHNIQUE ANTERIEURE L'epiderme est un epithelium pluristratifie qui exerce une fonction barriere de protection contre son environnement et ses agressions. Parmi ses multiples fonctions physiologiques, l'epiderme possede celle de constituer une barriere a la fois biologique, physique et chimique contre 1'invasion de 1'organisme par les microorganismes. Cette propriete de barriere physique de l'epiderme est notamment liee a sa structure. Ainsi l'epiderme est conventionnellement divise en une couche basale de keratinocytes constituant la couche germinative de l'epiderme, une couche dite epineuse constituee de plusieurs couches de cellules polyedriques et enfin, un ensemble de couches superieures appele couche cornee (ou stratum corneum), constituee de keratinocytes au stade terminal de leur differenciation appeles corneocytes. Les proprietes de barriere chimique de l'epiderme dependent, notamment, de la liberation a la surface de ce dernier de nombreux peptides antimicrobiens. Un dysfonctionnement de 1'organisation structurelle cellulaire epidermique, ou un defaut de la fonction barriere chimique de l'epiderme, peut se traduire par un etat inflammatoire cutane. L'inflammation est une reaction de defense immunitaire normale de 1'organisme a une agression de type : infectieuse,5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 2 thermique, mecanique, chimique, lesionnelle ou encore allergique. Elle se caracterise en quatre points qui sont : la rongeur, la chaleur, le gonflement et la douleur. L'inflammation cutanee aigiie est une reponse immediate a un agent agresseur, de courte duree (quelques jours ou semaines), d'installation souvent brutale et caracterisee par un gonflement intense. Les inflammations aigiies guerissent spontanement ou avec un traitement. La chronicite apparait lorsque 1'inflammation ne guerit pas spontanement, persiste ou s'aggrave pendant plusieurs mois voire plusieurs annees. La reaction inflammatoire est un processus dynamique comportant plusieurs etapes successives : vasculaire (vasodilatation), la diapedese des leucocytes et le chimiotactisme des cellules immunitaires et pour finir la detersion. La diapedese leucocytaire correspond a la traversee active des parois vasculaires et a 1'accumulation de cellules immunitaires circulantes, les lymphocytes, les neutrophiles et les monocytes dans le foyer lesionnel. Les neutrophiles ont pour fonction d'attirer d'autres cellules inflammatoires par chimiotactisme et de nettoyer le site lese en secretant des substances antimicrobiennes et des proteases. Les monocytes migrent par chimiotactisme et se differencient en macrophages nettoyant la zone lesee. Ils secretent des facteurs de croissances, des cytokines inflammatoires, comme IL-1, notamment IL-ip, TNFa, des proteases, des prostaglandines et des IFNs permettant le maintien et/ou 1'amplification de 1'inflammation. La detersion est consecutive a la phase vasculaire et contemporaine de la diapedese leucocytaire. Il s'agit de 1'elimination des tissus necroses et des agents pathogenes. L'inflammation neurogene cutanee se definit comme 1'induction et/ou 1'amplification d'un processus inflammatoire primaire par les terminaisons nerveuses, ainsi il s'agit d'une inflammation de la peau induite par 1'activation des fibres nerveuses intra-epidermiques qui secretent des neuropeptides tels que la substance P. L'inflammation neurogene cutanee est5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 particulierement impliquee dans les peaux sensibles, les peaux intolerantes reactives voire dans des dermatoses inflammatoires prurigineuses. Le prurit est defini comme une sensation deplaisante qui provoque le besoin de se gratter. Il emerge depuis pen la notion de pruricepteurs, recepteurs specifiques permettant de percevoir le prurit, mais leur distinction de la famille des recepteurs nociceptifs reste encore debattue. Ces pruricepteurs utilisent les fibres intra-epidermiques de type Ao et surtout celles de type C. Ils secretent des neuropeptides : la substance P, le calcitonin gene related peptide (CGRP) et le vasoactive intestinal peptide (VIP). Depuis peu, le role des proteases (trypsine, cathepsine G, thrombine etc.) dans 1'induction du prurit a ete clairement etabli. En effet, leur recepteur PAR-2 a ete defini comme la deuxieme grande voie d'activation du prurit (Misery et al., Nat. Rev. Neurol 10, 408- 416, 2014). Les fibres nerveuses intradermiques interagissent directement ou indirectement avec les cellules cutanees et les cellules du systeme endocrinien, lymphatique et immunitaire. Ces communications ont conduit a la definition d'un systeme neuroimmuno-endocrino-cutane. Pour fonctionner, ce systeme necessite un langage commun constitue de molecules de differentes natures, les neuromediateurs, les cytokines et des facteurs de croissance. Ces molecules sont synthetisees et liberees par les cellules de la peau, les cellules immunitaires residentes et recrutees, ainsi que par les terminaisons nerveuses intra-epidermiques. Les cellules epidermiques et dermiques peuvent egalement produire des neuromediateurs, des enzymes, des neurotrophines, des cytokines, des chemokines et des facteurs de croissance. Ces mediateurs regulent 1'innervation cutanee et la reponse inflammatoire. En cas d'inflammation, les cellules immunitaires en transit ou presentes constitutivement dans la peau, peuvent s'activer sous 1'action de ces mediateurs secretees par les terminaisons nerveuses sensorielles et les cellules de la peau. Ce processus5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 4 conduit a une seconde vague de liberation de cytokines et neuromediateurs, qui engendrent une boucle d'amplification de 1'inflammation. Un nouveau concept emerge depuis peu, suggerant que les keratinocytes sont egalement des acteurs majeurs de 1'inflammation neurogene cutanee. L'inflammation neurogene cutanee generee par des neuropeptides est impliquee dans la reactivite des peaux sensibles et aussi des peaux intolerantes. La notion de peau sensible reflete le niveau de sensibilite de la peau de chacun. S'il est possible d'avoir une peau sensible a tout age, cela est extremement repandu chez les bebes et les personnes agees. La peau des bebes a une epaisseur representant environ un cinquieme de celle de la peau des adultes, elle est par consequent extremement sensible aux agressions chimiques, physiques et microbiennes, ainsi qu'aux rayons UV. La fonction de barriere de la peau des adultes, quant a elle, s'affaiblit progressivement avec l'age, parallelement au ralentissement des processus metaboliques. Le vieillissement de la peau entraine peu a peu une deficience en lipides, ce qui la rend plus facilement irritable par les substances alcalines telles que le savon. Lorsque la peau presente un seuil de sensibilite tres bas, c'est-a-dire qu'elle reagit de maniere exacerbee a la moindre agression exterieure, on parlera de peau intolerante, voire de peau intolerante reactive. Les peaux intolerantes sont plus vulnerables aux agressions exterieures et se caracterisent par un inconfort quotidien et une forte irritabilite. Certains signes, plus ou moins marques, permettent de les reconnaitre. La peau intolerante du visage presente par exemple des rougeurs et des picotements. Elle tire, chauffe ou demange. Elle peut egalement procurer des sensations de brulure. Les peux intolerantes5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 5 presentent generalement un terrain allergique et sont par consequent, particulierement sensibles aux composants des soins cosmetiques. La peau sensible est en fait une peau sujette aux picotements, echauffements, fourmillements et demangeaisons, parfois accompagnees de rougeurs. Ces sensations d'inconfort apparaissent de faqon exacerbee en reaction a des stimuli qui ne declencheraient pas d'irritation sur une peau normale. Cette hyper-sensibilite de la peau resulte d'une diminution de son seuil de tolerance. Plus la peau est sensible, plus son seuil de tolerance est faible et lorsque le seuil de tolerance est au plus bas, on parlera de peau intolerante. Cette hyper-sensibilite peut s'expliquer par differents facteurs : Une reaction inflammatoire qui se developpe au contact de substances chimiques irritantes comme certains savons, les detergents menagers ou la pollution ; le seuil declenchant des ces substances permettant ainsi d'evoquer la peau sensible ou la peau intolerante. Une alteration de la fonction barriere de I'epiderme. Ce phenomene favorise alors une deshydratation de la peau et surtout la penetration d'agents potentiellement irritants ; Des facteurs psychologiques, comme le stress ; Des facteurs hormonaux ; Des facteurs physiques comme le soleil, les changements de temperature (chaud/froid), le vent, la climatisation, le chauffage, 1'eau calcaire. La peau est recouverte d'un film protecteur, appele film hydrolipidique de surface. Ce film en constitue la barriere la plus externe, ainsi que la plus fragile, la plus perturbee et la plus representative de la sante de la peau ; il est constitue en grande partie des corps gras excretes par les glandes sebacees et des lipides provenant de la degradation des cellules lors de la5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 6 phase de keratinisation des cellules cornees, ainsi que de composes hydrophiles, tels que 1'eau de la sueur, le glycerol, 1'uree, les facteurs naturels d'hydratation de la peau, les seis, les metabolites de la flore cutanee, etc. Ce film de surface est tres expose et tres sensible aux stress environnementaux, aux habitudes d'hygiene, et a 1'etat de la peau. Il s'avere important de preserver, et meme d'ameliorer, cette fonction barriere, et ce d'autant plus pour les peaux les plus sensibles. Et, s'il est connu que les populations a peaux intolerantes dont la barriere cutanee est fragilisee necessitent des soins avec des agents hydrolipidiques physio-mimetiques, notamment des agents emollients et hydratants physiologiques, il est en outre important d'eviter la mise en contact de la peau avec toute substance susceptible de degrader le film hydrolipidique de surface, telle qu'un agent tensioactif ou un conservateur. La peau sensible ou intolerante releve d'un mecanisme non allergique et implique une reaction inflammatoire sans reconnaissance d'un allergene specifique. Les mecanismes physiopathologiques de 1'hyper-reactivite cutanee ne sont pas clairement elucides mais on tend a identifier deux types de facteurs, qui peuvent etre concourants. D'un cote il y a 1'alteration de la barriere cutanee via la perte en eau et 1'alteration des lipides intercorneocytaires. La peau devient plus sensible aux irritants et stimuli externes et 1'irritation, meme minime, entraine le relargage de cytokines inflammatoires et de composes de la cascade arachidonique. D'un autre cote, un trouble neurologique peut etre responsable de la sensibilite, de la reactivite de la peau. Les fibres nerveuses parvenant jusqu'aux cellules de 1'epiderme produisent, sous 1'influence de stimuli externes, des neuromediateurs (comme la substance P) a 1'origine d'une inflammation neurogene, c'est 1'inflammation neurogene cutanee.5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 On a done un besoin en composition capable de traiter, prevenir, proteger les peaux sensibles, les peaux intolerantes dont la composante inflammatoire est une inflammation neurogene. La presente invention a pour objet de repondre a ces besoins, e'est-a-dire proposer une composition qui protege et/ou ameliore I'etat de la peau sensible, voire de la peau intolerante, en diminuant ou inhibant 1'inflammation neurogene cutanee. Pour la premiere fois, la demanderesse a mis en evidence les proprietes benefiques dans la regeneration tissulaire et la cicatrisation des lesions cutanees d'un extrait bacterien issu d'une souche bacterienne (ou bacterie) LMB64 isolee a partir d'une nappe phreatique. Cette bacterie a ete decrite par la demanderesse dans la demande de brevet WO2012/085182. Plus particulierement, etaient decrits et exemplifies les extraits denommes SO, EO et ESO, respectivement constitues du surnageant de culture separe de la biomasse, de la biomasse de cellules lysees, et du surnageant apres incubation de la culture a pH basique pendant plusieurs heures. Les fractions EO et ESO etaient testees et il etait montre que ces extraits EO et ESO avaient la capacite d'induction des cytokines et de maturation de cellules de Langherans (pour EO) ainsi que d'activation des recepteurs TLR2/TLR4/TLR5, d'antagonisme de recepteurs PARs et d'induction des peptides antimicrobiens (pour ESO). Ces resultats permettaient d'envisager 1'utilisation de tels extraits dans le traitement de maladies inflammatoires comme le prurit, le psoriasis, 1'eczema ou encore la dermatite atopique.5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 8 RESUME DE L'INVENTION Les inventeurs ont de faqon surprenante mis en evidence 1'efficacite d'un nouvel extrait bacterien particulier dans la prevention et/ou le traitement de 1'inflammation neurogene cutanee. En effet, les inventeurs ont demontre que cet extrait bacterien presente un effet inhibiteur sur la liberation par les keratinocytes d'IL-10 et de TNF-a induites par la substance P. DESCRIPTION DETAILLEE Selon un premier mode de realisation, la presente invention a pour objet un extrait bacterien selon 1'invention ainsi que son utilisation dans la prevention et/ou le traitement de 1'inflammation neurogene cutanee. De maniere particuliere, la prevention et/ou le traitement de 1'inflammation neurogene cutanee comprend, ou consiste en, la protection et/ou le traitement de la peau sensible ou de la peau intolerante. De maniere particuliere, la prevention et/ou le traitement de 1'inflammation neurogene cutanee comprend, ou consiste en, la protection et/ou le traitement de la peau sensible. De maniere particuliere, la prevention et/ou le traitement de 1'inflammation neurogene cutanee comprend, ou consiste en, la protection et/ou le traitement de la peau intolerante. La bacterie LMB64 a ete caracterisee et definie comme appartenant a la classe des Beta-proteobacteria, sous famille des Neisseriaceae, et probablement d'un nouveau genre non encore defini. L'analyse de la sequence du gene codant pour l'ARN ribosomique (ARNr) 16S a permis de situer cette bacterie proche5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 9 des genres Chromobacterium, Paludimonas, Lutelia et Glubenkania, avec lesquels elle partage 95% de similarity de sequence. Cette bacterie, non-pathogene, est une bacterie a Gram negatif qui a ete isolee a partir de la nappe phreatique. Plus particulierement, la bacterie LMB64 se presente sous la forme d'un batonnet d'une longueur aux alentours de 2,3pm ± 0,3pm et d'une largeur aux alentours de 1,0pm ± 0,1pm. Une particularity de cette bacterie est la presence d'un flagelle polaire. Le gene codant pour l'ARNr 16S a ete presque totalement sequence (1487 pb, correspondant a la sequence SEQ ID No. 1). La bacterie LMB64 possede un plasmide circulaire de 10948 pb. Ce plasmide a ete entierement sequence et la sequence est representee en la sequence SEQ ID No. 2. Selon une autre forme de realisation, une bacterie dont est issu un extrait bacterien selon 1'invention comprend au moins un plasmide comprenant la sequence SEQ ID No. 2, ou toute sequence presentant au moins 80% d'identite avec la sequence SEQ ID No. 2, de maniere avantageuse au moins 85%, au moins 90%, au moins 95%, encore au moins 97% et plus preferentiellement encore au moins 98% d'identite avec la sequence SEQ ID No. 2. Aussi, une bacterie dont est issu 1'extrait bacterien selon 1'invention est une bacterie non-pathogene a Gram negatif appartenant a la classe des Betaproteobacteria, sous-famille des Neisseriaceae, ladite bacterie comprenant un ARNr 16S comprenant la sequence SEQ ID No. 1, ou toute sequence presentant au moins 80%, encore au moins 90%, au moins 95%, au moins 97% d'identite avec la sequence SEQ ID No. 1 et ladite bacterie comprenant au moins un plasmide comprenant la sequence SEQ ID No. 2, ou toute sequence presentant au moins 80% d'identite avec la sequence SEQ ID No. 2, de maniere avantageuse au moins 85%, au moins 90%, au moins 95%, encore au moins 97% et plus preferentiellement encore au moins 98% d'identite avec la sequence SEQ ID No. 2. A titre d'exemple une telle bacterie est representee par la souche LMB64 qui a ete deposee au nom de la demanderesse a la5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 10 Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM), Institut Pasteur, Paris, le 8 avril 2010 sous la reference I- 4290. Ayant ces informations genotypiques, associees aux caracteristiques de croissance en milieu non sulfure, de la nature non filamenteuse de cette bacterie, un homme du metier n'aurait pas difficulty a trouver/identifier une autre bacterie permettant d'obtenir un extrait bacterien selon 1'invention. Une telle identification d'une autre bacterie certes legerement differente genotypiquement mais rassemblant les criteres phenotypiques de 1'invention quant a 1'extrait bacterien peut etre realise apres un travail de selection qui n'est en aucun cas insurmontable et ce sur la base des informations contenues dans la presente demande ainsi que celles contenues dans la demande WO2012/085182 associees aux connaissances generales de 1'homme du metier. Par « pourcentage d'identity » entre deux sequences d'acides nucleiques au sens de la presente invention, on entend designer un pourcentage de nucleotides identiques entre les deux sequences a comparer, obtenu apres le meilleur alignement (alignement optimal, ce pourcentage etant purement statistique et les differences entre les deux sequences etant reparties au hasard et sur toute leur longueur. Les comparaisons de sequences entre deux sequences d'acides nucleiques sont traditionnellement realisees en comparant ces sequences apres les avoir alignees de maniere optimale, ladite comparaison pouvant etre realisee par segment ou par « fenetre de comparaison ». L'alignement optimal des sequences pour la comparaison peut etre realise, outre manuellement, au moyen de l'algorithme d'homologie locale de Smith et Waterman (1981)[Ad. App. Math. 2 :482], au moyen de l'algorithme d'homologie locale de Neddleman et Wunsch (1970) [J. Mol. Biol. 48 : 443], au moyen de la methode de recherche de similarity de Peason et Lipman (1988) [Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85 : 2444], au moyen de logiciels informatiques utilisant ces5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 11 algorithmes (GAP, BESTFIT, FASTA et TFASTA dans le Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, WI, ou encore par les logiciels de comparaison BLAST N ou BLAST P). Le pourcentage d'identite entre deux sequences nucleiques est determine en comparant ces deux sequences alignees de maniere optimale dans laquelle la sequence d'acides nucleiques a comparer peut comprendre des additions ou des deletions par rapport a la sequence de reference pour un alignement optimal entre ces deux sequences. Le pourcentage d'identite est calcule en determinant le nombre de positions identiques pour lesquelles le nucleotide est identique entre les deux sequences, en divisant ce nombre de positions identiques par le nombre total de positions dans la fenetre de comparaisons et en multipliant le resultat obtenu par 100 pour obtenir le pourcentage d'identite entre ces deux sequences. Par exemple, on pourra utiliser le programme BLAST, « BLAST 2 sequences » (Tatusova et al., « Blast 2 sequences - anew tool for comparing protein and nucleotide sequences », FEMS Microbiol Lett. 174 :247-250) disponible sur le site http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gorf/bl2.html, les parametres utilises sont ceux donnes par defaut (en particulier pour les parametres « open gap penaltie » : 5, et « extension gap penaltie » : 2 ; la matrice choisie est par exemple la matrice « BLOSUM 62 » proposee par le programme). Le pourcentage d'identite entre les deux sequences a comparer est calcule directement par le programme. Il est egalement possible d'utiliser d'autres programmes comme les logiciels « ALIGN » ou « Megalign » (DNASTAR). Une bacterie selon 1'invention, en particulier la bacterie LMB64, comprend au moins un plasmide comprenant la sequence SEQ ID No. 2, ou toute sequence presentant au moins 80%, de preference 85%, 90%, 95% et 98% d'identite avec ladite sequence SEQ ID No. 2. D'autres caracteristiques de ladite bacterie, en5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 12 particulier la bacterie LMB64, seront detaillees plus loin dans les exemples. De maniere generale, le terme « extrait bacterien selon 1'invention » est utilise pour decrire 1'ensemble comprenant les composes solubles presents dans le cytosol de la bacterie, obtenus apres I'isolement des cellules bacteriennes du milieu de fermentation, leur lyse, en particulier par congelationdecongelation, une re-suspension dans un solvant aqueux et et la recuperation la fraction liquide comprenant les composants cytosoliques, les composes intracellulaires solubles des cellules, les composes/molecules membranaires solubles, les composes/molecules transmembranaires solubles, les composes/molecules periplasmiques solubles ainsi que les composes/molecules flagellaires solubles, en particulier les proteines. Par composes/molecules membranaires solubles, composes/molecules transmembranaires solubles, composes/molecules periplasmiques solubles ainsi que composes/molecules flagellaires solubles, il faut comprendre proteines et autres composes solubles contenus dans le cytoplasmique, voire dans 1'espace periplasmique, dans 1'espace membranaire ou transmembranaire ou dans le flagelle, et qui sont liberes par la lyse d'une bacterie selon 1'invention. Ces proteines et composes sont obtenus par le procede selon 1'invention, c'est a dire la recuperation de la phase liquide suivant une separation liquide/solide menee sur la masse cellulaire de bacteries lysees, par exemple par congelationdecongelation, apres isolement de cette masse cellulaire du milieu de fermentation. Ces proteines ou composes intracellulaires cytosoliques, membranaires, periplasmiques et/ou flagellaires solubles comprennent par exemple les ribosomes, les5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 13 enzymes associees au metabolisme cellulaire, des lipopolysaccharides, des sucres, des lipoproteines, membranaires et periplasmiques, liberes par la lyse et solubles dans 1'eau ou dans un solvant aqueux. Les bacteries se multiplient par fission binaire, c'est-adire que chaque bacterie grandit puis se divise en deux cellules filles separees par un septum de division forme par la paroi cellulaire. Durant la division, l'ADN se duplique ainsi que les autres constituants. Divers systemes enzymatiques de synthese et de degradation participent a la division cellulaire. La croissance bacterienne est 1'accroissement ordonne de tous les composants de la bacterie. Elle aboutit a 1'augmentation du nombre de bacteries. Au cours de la croissance, il se produit, d'une part, un appauvrissement du milieu de culture en nutriments et, d'autre part, un enrichissement en biomolecules secretees et excretees dans le milieu de culture par la bacterie et solubilisees dans ce milieu ainsi qu'en sous-produits du metabolisme. Par 1'expression « milieu de culture », il faut comprendre tout milieu comprenant au moins les nutriments necessaires pour la croissance et la multiplication des bacteries. Les bacteries peuvent etre cultivees en milieu liquide, solide ou semi-liquide. De preference, le milieu de culture est un milieu liquide permettant la croissance et la recuperation de la biomasse et permettant I'obtention d'un extrait bacterien selon l'invention. Un milieu de culture adequat contient des nutriments favorisants la croissance et la multiplication des bacteries. De maniere generale, un milieu de culture convenable pourra comprendre de 1'eau une source de carbone, une source d'azote et des seis. On pourra evoquer le « milieu de fermentation » ou culture bacterienne qui correspond au milieu de culture contenant les bacteries en fin de croissance et developpement.5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 14 En pratique, 1'extrait bacterien selon 1'invention, en particulier un extrait de la bacterie LMB64, peut etre obtenu a partir d'une culture d'une bacterie selon 1'invention dans un milieu de culture permettant la croissance, le developpement et la multiplication de ladite bacterie et la recuperation des cellules apres leur separation de la phase liquide, par exemple centrifugation, sous la forme d'un culot ou biomasse. Cette biomasse est soumise a un traitement permettant de permeabiliser et deteriorer les membranes et parois cellulaires - par exemple par congelation-decongelation. L'obtention de 1'extrait selon 1'invention peut se faire en reprenant la biomasse traitee, en particulier decongelee, avec un tampon basique puis un effectuant une separation solide/liquide du melange, par exemple par centrifugation. On obtient ainsi une phase aqueuse representant 1'extrait selon 1'invention. La recuperation de la biomasse a partir du milieu de fermentation peut se faire par tout moyen de separation liquide/solide. Plus particulierement il est done possible, par les techniques connues par l'homme de l'art, d'isoler la biomasse cellulaire contenant majoritairement des cellules entieres, debris cellulaires comprenant des proteines de surface et/ou des proteines localisees dans 1'espace periplasmique de la bacterie de la fraction liquide contenant les solutes residuels du milieu de culture et les biomolecules excretees par la bacterie et solubilisees dans le milieu de fermentation. A titre illustratif, la separation liquide/solide peut etre realisee par une technique choisie parmi : la centrifugation, la sedimentation, la filtration, 1'ultrafiltration, la decantation. De maniere preferee, la separation liquide/solide est realisee par centrifugation milieu de fermentation contenant la culture bacterienne afin de separer, d'un cote la phase solide, e'est-a-dire le culot de biomasse, contenant cellules et debris5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 15 cellulaires et d'un autre cote la phase liquide, c'est-a-dire le surnageant comprenant les molecules solubles excretees lors de la fermentation et composes residuels du milieu de culture non consommes par la bacterie. La phase solide, ie la biomasse obtenue, en particulier le culot de centrifugation, est soumise a une etape entrainant la rupture des membranes des cellules, par exemple une congelation, suivie d'une decongelation. La congelation peut etre realisee a toute temperature negative permettant la solidification de 1'eau, la formation de cristaux intracellulaires et intermembranaires et done une rupture, au moins partielle, des membranes. En particulier, la congelation peut etre menee a une temperature de -10°C, voire de -20°C, voire encore de -30°C, de - 40°C, de -50°C de -60°C, voire encore de -80°C environ. Preferentiellement, la congelation est faite a -20°C environ. La duree et la vitesse de congelation ne sont pas critiques en soi. La duree de congelation pourra etre fonction de la temperature et par exemple une duree d'une a plusieurs heures est convenable. La phase solide mise congelee pourra aussi bien etre conservees plusieurs jours, semaines ou mois meme si ce n'est pas necessaire. La vitesse de congelation, ou de decongelation, n'est pas non plus critique et on cherchera des conditions permettant 1'alteration des parois et membranes bacteriennes. Par decongelation en entend un retour a une temperature positive permettant une fusion des cristaux de glace. Cette etape de permeabilisation et rupture des parois et membranes peut aussi etre realisee par des moyens chimiques,5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 16 ultrasoniques ou mecaniques tels que des detergents, agents chaotropiques, billes de verres, par exemple. Cette etape permet la liberation des composes intracellulaires cytoplasmiques solubles et qui sont done presents dans cette phase solide de cellules lysees ou endommagees. A cette phase solide est ensuite ajoutee une phase liquide sous la forme d'un solvant aqueux pour effectuer une resuspension des cellules lysees ou endommagees et extraire les composes solubles cytoplasmiques solubles dans ledit solvant. Le solvant aqueux est preferentiellement un tampon, en particulier un tampon basique. D'une maniere preferee ce tampon basique est un tampon Tris ou un tampon arginine ou un tampon Tris-arginine. De preference il s'agit d'un tampon arginine. La concentration en arginine pourra etre comprise entre 0.1 et 1 M, particulierement environ 0.3 a 0.5 M. La concentration en Tris pourra etre comprise entre 1 a 100 mM, particulierement 20 mM. Le pH du tampon basique pourra etre compris entre 8 et 12, et de preference entre 9 et 11. Cette etape de resuspension permet d'extraire les composes solubles cytoplasmiques contenus dans la biomasse de cellules lysees ou endommagees. Enfin, on procede a la separation liquide/solide pour recuperer une phase aqueuse liquide, en particulier une phase aqueuse liquide tamponnee, contenant des composes intracellulaires cytoplasmiques solubles.5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 17 Cette phase liquide obtenue represente ainsi 1'extrait selon 1'invention. Le ratio phase solide/phase liquide aqueuse pour 1'etape de resuspension peut etre compris entre 1 et 10% w/v. L'emploi d'un tampon basique permet de permeabilier encore plus les membranes externes et de favoriser la diffusion des molecules depuis 1'espace periplasmique vers le milieu liquide. L'emploi d'un tampon basique permet en outre de stabiliser les composes, en particulier les proteines solubles et d'eviter leur agregation sur une longue periode de stockage ainsi que leur degradation par 1'action des proteases. Une ou plusieurs etapes de filtration peuvent realisees pour clarifier 1'extrait et aboutir a un extrait selon 1'invention, extrait purifie. La filtration pourra etre realisee par tout moyen adequat permettant une clarification de la phase liquide, ou de la phase liquide tamponnee. Une telle clarification par filtration permet 1'elimination des particules en suspension qui n'auraient pas ete eliminees lors de la seconde etape de separation liquide/solide et vise a obtenir un extrait bacterien selon 1'invention purifie, limpide. La filtration peut etre realisee par tout moyen de filtration, ultrafiltration ou diafiltration. De maniere avantageuse la filtration est effectuee par filtration sur filtre ou cartouche a filtre presentant un seuil de 0,4pm, preferentiellement 0,2pm. Dans ce cas, 1'extrait bacterien est caracterise en ce que les composes presents dans 1'extrait bacterien ont une taille inferieure ou egale a 0,2pm. A titre prefere, il peut etre utilise des filtres ou prefiltres non charges electrostatiquement afin d'eviter toute absorption des biomolecules responsables de tout ou partie de5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 18 l'activite de 1'extrait. Les differentes etapes seront decrites plus en details dans les exemples. Il faut comprendre que toute modification du procede, des milieux, des enchainements d'etapes qui parait evidente pour un homme du metier au regard de la presente description devra etre consideree comme entrant dans le champ de la presente invention. Selon une forme d'execution, le procede selon 1'invention consiste en un procede de preparation d'un extrait bacterien selon 1'invention, ledit procede comprenant les etapes de : a) Mise en culture d'une bacterie selon 1'invention, en particulier LMB64, dans un milieu approprie pour obtenir une culture bacterienne ; b) separation liquide/solide de ladite culture et elimination de la phase liquide ; c) lyse cellulaire de la phase solide, d) resuspension de la phase solide lysee dans une phase liquide aqueuse, preferentiellement tamponnee, e) separation liquide/solide et recuperation de la phase liquide, f) Optionnellement filtration de la phase liquide. Selon un mode prefere, 1'etape c) de lyse cellulaire de la phase solide est realisee par congelation suivie de decongelation. Selon un mode particulier, la bacterie est une bacterie non pathogene a Gram negatif appartenant a la classe des betaproteobacteria, sous-famille des Neisseriaceae, comprenant un ARNr 16S comprenant la sequence SEQ ID No. 1, ou toute sequence presentant au moins 80% d'identite avec la sequence SEQ ID No. 1, plus particulierement il s'agit de la bacterie LMB64.5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 19 De maniere preferentielle, la bacterie comprend au moins un plasmide comprenant la sequence SEQ ID No.2, ou toute sequence presentant au moins 80% d'identite avec la sequence SEQ ID No.2. Selon un mode de realisation, la presente invention vise un extrait bacterien obtenu, ou susceptible d'etre obtenu, par un procede selon 1'invention tel que decrit supra. Dans un mode de realisation, 1'invention vise un extrait bacterien selon 1'invention, en particulier un extrait obtenu ou susceptible d'etre obtenu par un procede selon 1'invention, pour son utilisation pour la prevention, le traitement, la prevention et le traitement de 1'inflammation neurogene cutanee. De maniere avantageuse, 1'inflammation neurogene cutanee comprend la peau sensible et/ou la peau intolerante. Selon un autre mode de realisation, 1'invention vise une composition cosmetique ou dermatologique comprenant au moins un extrait bacterien selon 1'invention, avec au moins un excipient cosmetiquement ou dermatologiquement acceptable, pour son utilisation dans la prevention, le traitement, la prevention et le traitement de 1'inflammation neurogene cutanee. Selon un autre mode de realisation, 1'invention vise une composition cosmetique ou dermatologique comprenant au moins un extrait bacterien selon 1'invention, avec au moins un excipient cosmetiquement ou dermatologiquement acceptable, pour son utilisation dans la protection et/ou le traitement des peaux sensibles ou intolerantes. En particulier il s'agit de peaux sensibles ou intolerantes ayant pour origine une inflammation neurogene cutanee. L'invention concerne egalement 1'utilisation d'une5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 20 composition cosmetique ou dermatologique comprenant au moins un extrait bacterien selon 1'invention, avec au moins un excipient cosmetiquement ou dermatologiquement acceptable, pour la fabrication d'un medicament destine a la prevention, le traitement, la prevention et le traitement de 1'inflammation neurogene cutanee. L'invention concerne egalement une methode de prevention et/ou de traitement de 1'inflammation neurogene cutanee comprenant 1'administration a un individu en ayant besoin, d'une quantite efficace d'une composition cosmetique ou dermatologique comprenant au moins un extrait bacterien selon 1'invention, avec au moins un excipient cosmetiquement ou dermatologiquement acceptable. De maniere avantageuse, 1'inflammation neurogene cutanee comprend la peau sensible et/ou la peau intolerante. Dans la presente invention, on entend designer par « cosmetiquement ou dermatologiquement acceptable » ce qui est utile dans la preparation d'une composition cosmetique ou dermatologique qui est generalement sur, non toxique et ni biologiquement ni autrement non souhaitable et qui est acceptable pour une utilisation cosmetique ou dermatologique, notamment par application topique. Selon un mode de realisation particulier, la composition selon 1'invention se presente sous une forme adaptee a une application topique. Les compositions cosmetiques ou dermatologiques selon 1'invention pourront se presenter sous les formes qui sont habituellement connues pour une administration topique, c'est-adire notamment les lotions, les mousses, les gels, les dispersions, les emulsions, les sprays, les serums, les masques ou les cremes, les gelees, notamment les gelees micellaires, avec des excipients permettant notamment une penetration cutanee afin5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 21 d'ameliorer les proprietes et 1'accessibility du principe actif. Avantageusement, il s'agira d'une creme, une creme riche, une lotion, un soin yeux, un soin UV. Ces compositions contiennent generalement, outre les composes de 1'extrait bacterien selon 1'invention, un milieu physiologiquement acceptable, en general a base d'eau ou de solvant, par exemple des alcools, des ethers ou des glycols. Elles peuvent egalement contenir des agents tensioactifs, des agents complexants, des conservateurs, des agents stabilisants, des emulsifiants, des epaississants, des gelifiants, des humectants, des emollients, des oligo-elements, des huiles essentielles, des parfums, des colorants, des agents matifiants, des filtres chimiques ou mineraux, des agents hydratants, des eaux thermales, etc. Avantageusement, les compositions selon la presente invention comprendront 0,05 a 10% en poids, de preference 0,1 a 5% en poids, de maniere encore preferee 0,5 a 3% en poids de 1'extrait bacterien selon 1'invention par rapport au poids total de la composition. La composition selon 1'invention apporte une protection qui reste confortable tout au long de la journee. Elle peut en particulier etre appliquee aux peaux sensibles, les peaux reactives, et notamment aux peaux de bebe. De preference, la composition selon la presente invention est utilisee pour prevenir, proteger et/ou traiter les peaux sensibles. D'une maniere generale, les peaux sensibles se definissent par une reactivite particuliere de la peau. Cette reactivite cutanee se traduit classiquement par la manifestation de signes d'inconfort en reponse a la mise en contact du sujet avec un element declenchant qui peut avoir diverses origines. Il peut s'agir de 1'application d'un produit cosmetique en surface de la peau sensible, de la prise d'aliments, de 1'exposition a des variations brutales de temperatures, a la pollution atmospherique5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 22 et/ou a des rayons ultra-violets ou infrarouges. Il existe egalement des facteurs associes avec l'age et le type de peau. Ainsi les peaux sensibles sont plus frequentes parmi les peaux seches ou grasses que parmi les peaux normales. Au sens de la presente invention, les peaux sensibles couvrent les peaux irritables et les peaux intolerantes. De telles compositions peuvent etre fabriquees selon des procedes bien connus de I'homme du metier. L'invention sera mieux comprise a la lecture des exemples ci-dessous qui I'illustrent sans en limiter la portee. Exemple 1 : Culture de la bacterie LMB64 A titre d'exemple non limitatif, des milieux de culture preferes contiennent du chlorure d'ammonium, du sulfate de magnesium et de 1'extrait de levure. A noter egalement, comme cela ressort entre autres de la demande WO2012/085182, d'autres milieux similaires pourront etre utilises et doivent done etre consideres comme faisant partie integrante de la presente description. Toute adaptation de 1'Homme de l'art doit egalement etre consideree comme partie de 1'invention. Un exemple de procede de culture est decrit ci-dessous. Il convient de rappeler ici que cet exemple n'a de valeur qu'illustrative et ne doit aucunement etre considers comme limitatif. La souche LMB64 est cultivee en trois etapes, a savoir un premier inoculum, une preculture (ou prefermentation) en mode batch et enfin une culture mais en mode fed-batch (ajout de glucose). Inoculum : Un tube de la WCB LMB64 est utilise pour ensemencer un Erlenmeyer contenant 1000mL de milieu sterile. L'erlenmeyer est5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 23 ensuite place dans le shaker incubateur sous agitation. Lorsque la densite cellulaire du bouillon est suffisante, la culture est arretee. Les cellules sont alors raises en refroidissement jusqu'a transfert dans le prefermenteur. Preculture : le prefermenteur est ensuite rempli avec environ 16 L de milieu puis sterilisee a plein. Deux flacons satellites sont connectes sur le prefermenteur apres sterilisation de la cuve puis des blocs d'ajout : Un flacon contenant une solution sterile de glucose a 50%. Cette solution (glucose batch preculture) est transferee immediatement dans le milieu de culture pour atteindre la concentration initiale de glucose de 20g/L. L'erlenmeyer contenant 1'inoculum decrit plus haut a 1'etape Inoculum est ensemence dans le prefermenteur. La preculture est lancee puis regulee automatiquement. A titre d'exemple, il peut etre mentionne les parametres suivants : temperature, vitesse d'agitation, pression, debit d'air ou encore Po2. La croissance des cellules est suivie par une mesure de la densite optique a 620nm. La preculture est arretee par refroidissement lorsqu'elle atteint une densite suffisante. Culture : le fermenteur est ensuite rempli avec 127 L de milieu ajuste a pH 7,0 puis sterilise a plein. Trois flacons satellites sont utilises : Un flacon contenant une solution sterile de glucose. Cette solution est transferee immediatement dans le milieu de culture pour atteindre la concentration initiale de glucose de 20g/L. Un flacon d'antimousse. Cet antimousse sera ajoute automatiquement pendant la culture pour controler le niveau de mousse dans la cuve. Un flacon de glucose fedbatch. Cette solution sera ajoutee en cours de culture pour supporter la croissance des cellules.5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 24 La culture est lancee puis regulee automatiquement. A titre d'exemple, il peut egalement etre mentionne les parametres suivants : temperature, pH, agitation, pression, debit d'air Po2. Apres epuisement du glucose initialement present dans le milieu (remontee de Po2), l'ajout de la solution glucose fedbatch est declenche et permet une croissance des cellules a haute densite. La fermentation est arretee apres consommation totale du glucose. A ce stade, le mout de fermentation est refroidi automatiquement. Tout au long de la culture, la croissance des cellules est suivie par une mesure de la densite optique a 620nm. La quantite de biomasse seche (g/L) obtenue en fin de culture est determinee en utilisant une methode ponderale. Exemple 2 : extraction de la fraction selon 1'invention L'exemple ci-dessous est donne a titre illustratif d'un mode de realisation prefere, mais ne doit pas etre considere comme limitatif. L'extrait bacterien selon 1'invention est obtenu de maniere generale apres centrifugation du resultat de l'etape de culture afin d'eliminer le surnageant et de garder la biomasse, c'est a dire les cellules, les proteines de surface, les proteines localisees dans 1'espace periplasmique et des proteines intracellulaires de la bacterie (presence due a l'etape de congelation). Pour l'etape de centrifugation, la ligne de transfert du fermenteur a la centrifugeuse est sterilisee. Le mout de fermentation est ensuite separe par centrifugation continue sur une centrifugeuse. La centrifugation est conduite a 150 L/h (± 30 L/h) avec une vitesse de rotation du bol de 10900 ± 1000 rpm. Les cellules sont recuperees dans une poche a usage unique. Le surnageant est elimine a 1'uperisation. Cette etape de centrifugation est suivie d'une etape de congelation a -20°C pendant du culot pendant au moins 1 heure. Cent dix litres de tampon d'extraction Tris Arginine sont sterilises dans le fermenteur. Les cellules auparavant5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 25 decongelees a temperature ambiante sont transferees dans le fermenteur via la pompe peristaltique. Le temps de contact necessaire est compris entre 1 et 7 heures. La concentration cible en Tris et arginine apres ajout dans la poche a usage unique est aux alentours de 0,3M en L-arginine et 20mM en Tris. Le mout de fermentation est ensuite separe par centrifugation continue sur une centrifugeuse. La centrifugation est conduite a 100 L/h (± 30 L/h) avec une vitesse de rotation du bol de 10900 ± 1000 rpm. Les debourbages partiels sont inities automatiquement en fonction de la turbidite de 1'effluent avec une consigne a 20% de turbidite. Une serie de debourbages totaux est declenchee manuellement a la moitie du volume a separer. Le surnageant est recupere dans une poche a usage unique. Les cellules sont eliminees a 1'uperisation. Deux etapes de filtration sont realisees en ligne, afin de clarifier le surnageant et aboutir a un extrait bacterien selon 1'invention exempt de germes. Le pilotage de la filtration est realise grace au systeme de filtration/repartition. La cartouche de filtration en profondeur a usage unique est placee dans son carter de filtration. Les manifolds de filtration sont equipes de leurs manometres permettant la securisation de 1'etape de filtration. Le module de pre filtration est rince avec environ 92L ± 5L d'eau purifiee puis la poche de produit a filtrer est connectee et mise sous agitation. Enfin, la cartouche de filtration 0,2pm 30" en PES est connectee au reste du systeme de filtration. La filtration est realisee a un debit initial de 240L/h ± 10L grace a une pompe peristaltique. Lorsque la pression en amont des filtres atteint 1,2 bars le debit de filtration est diminue. La totalite du produit filtre est recupere sterilement dans un container equipe d'une poche a usage unique de 400L. La poche de produit filtre est pesee sur le plateau balance puis stockee a +5°C jusqu'a repartition. Apres utilisation, le filtre sterilisant est deconnecte puis controle par un test d'integrite.5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 26 Exemple 3 : Effet de 1'extrait bacterien selon 1'invention sur 1'inflammation neurogene cutanee Le but de cette etude est d'evaluer les proprietes modulatrices de 1'extrait bacterien selon 1'invention dans 1'inflammation cutanee. Pour ce faire une approche experimentale in vitro basee sur la mesure de production et de liberation de TNF-a (Tumor Necrosis Factor-alpha) et d'IL-ip (Interleukin-1 beta) par des keratinocytes epidermiques humains, actives par la substance P, est proposee comme modele in vitro de 1'inflammation neurogene cutanee. Protocole L'etude est realisee sur des keratinocytes epidermiques normaux humains, ces cellules sont obtenues a partir de prepuces de nouveau-nes. Ces cellules sont raises en culture dans un milieu sans serum selon des procedures classiques en laboratoire. Le dosage des marqueurs de 1'inflammation neurogene cutanee est realise sur ces keratinocytes cultives dans un milieu en absence (condition contrble) ou en presence des composes a tester (extrait bacterien selon 1'invention et produit de reference), et exposes ou pas a la substance P. Les keratinocytes sont traites 3 heures avant le stress induit par la substance P et durant les 24 heures suivantes. Les niveaux de cytokines pro inflammatoires (TNF-a et IL-1P) sont quantifies 24h apres 1'induction du stress inflammatoire par l'ajout de la substance P (0,5pM). Simultanement, le compose CP96345, un inhibiteur selectif NK-1R est teste a lpM comme produit de reference. Chaque condition experimentale est conduite sur deux donneurs differents de keratinocytes. Les productions de TNF-a et IL-ip sont mesurees dans les milieux d'incubation et quantifiees par ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). L'analyse statistique (*p<0,05 ; **p<0,01 ou ***p<0,001) est determinee sur le pourcentage d'inhibition en utilisant un test non-parametrique car les donnees ne passent pas5 10 15 20 25 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 27 le test de normalite, suivi par le test de comparaison multiple de Dunn comme post-test. Les resultats sur la liberation IL-ip (pg/mg de proteine totale) sont resumes dans le tableau 1 ci-dessous : Groupes cone IL-ip (pg/ml) % Inh Stats moyenne e.s. Cont SP(-) 122,2 11,8 - P<0,001 Cont SP(+) 241,2 18,3 NK-1R inh IpM 132,5 12,1 91 P<0,05 Compose selon 1'invention 1 ,64pg/ml 143,2 9,2 80 NS 5,45pg/ml 127,7 8,4 93 P<0,05 16,36pg/ml 125,7 10,2 96 P<0,01 Cone : concentrations, Inh : inhibition, Stats : statistique versus Cont (+) ; E.s. : Erreur standard a la moyenne ; Cont : controls (sans produit a tester) ; SP (-) : sans substance P ; SP (+) : en presence de substance P. L'exposition des keratinocytes a la substance P induit une liberation importante et statistiquement significative d'lL-ip. Le traitement par le CP96345 a 1 pM reduit fortement (91%, P<0,05) la production d'lL-ip. Ce resultat est tres probant, 1'utilisation de cet inhibiteur NK-1R a permis de valider ce test. Le traitement des keratinocytes avec le compose selon 1'invention permet une inhibition concentration-dependante de la liberation d'lL-ip induite par la substance P. Si la premiere concentration testee (l,64pg/ml de proteines) n'atteint pas la significativite, elle reduit tout de meme de 80% cette liberation d'lL-ip. Aux concentrations de 5,45pg/ml et 16.36pg/ml (pl/ml de proteine), cette inhibition est statistiquement significative (93% et 96% d'inhibition, p<0,05 et p<0,01, respectivement).5 10 15 20 25 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 28 Les resultats sur la liberation de TNF-a (pg/mg de proteine totale) sont resumes dans le tableau 2 ci-dessous : Groupes cone TNF-a (pg/ml) % Inh Stats moyenne e.s. Cont SP(-) 4,1 0,7 - P<0,01 Cont SP(+) 9,9 0,8 NK-1R inh IpM 4,6 0,9 90 P<0,001 extrait selon 1'invention 1,64pg/ml 6,1 0,5 63 NS 5,45pg/ml 5,9 0,6 68 NS 16,36pg/ml 5,4 0,6 77 P<0,01 Cone : concentrations, Inh : inhibition, Stats : statistique versus Cont (+) ; E.s. : Erreur standard a la moyenne ; Cont : controle (sans produit a tester) ; SP (-) : sans substance P ; SP (+) : en presence de substance P. L'exposition des keratinocytes a la substance P induit une liberation importante et statistiquement significative de TNF-a. Le traitement par le CP96345 a 1 pM reduit fortement (90%, P<0,05) la production de TNF-a. Ce resultat est egalement tres probant, 1'utilisation de cet inhibiteur NK-1R a permis de valider ce test. Le traitement des keratinocytes avec 1'extrait bacterien selon 1'invention permet une inhibition concentrationdependante de la liberation de TNF-a induite par la substance P. La plus faible concentration testee de 1'extrait bacterien selon 1'invention inhibe la liberation de TNF-a de 60%. Meme si cette inhibition n'atteint pas le seuil de significativite, I'effet concentration-reponse mis en evidence montre clairement que 1'extrait bacterien selon 1'invention est tres actif sur ce test. A la concentration de 16.36pg/ml de proteine, cette inhibition est statistiquement significative (77% d'inhibition p<0,01). Ainsi les inventeurs mettent en evidence qu'un extrait bacterien selon 1'invention est capable d'inhiber significativement la production de cytokines produites via la5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 29 substance P, cet extrait bacterien selon 1'invention est done efficace dans le traitement de 1'inflammation neurogene cutanee. Exemple 4 : Effet de I'extrait bacterien selon 1'invention sur le profil d'expression genique de 1'immunite innee dans un modele de keratinocytes epidermiques normaux humains La fonction barriere de la peau inclut aussi une defense contre les micro-organismes. L'epithelium joue un role actif dans les defenses innees de 1'hote. Les systemes antimicrobiens cutanees reposent entre autres sur la presence de certains lipides de surface et de certaines proteines constitutives. Ces proteines possedent des activites antimicrobiennes. De plus, 1'acidification de la surface epidermique joue un role important sans la defense antimicrobienne cutanee. La peau agit ainsi non seulement comme une barriere physique, mais aussi comme une barriere chimique. Il existe egalement une composante adaptative de 1'immunite innee reposant sur la secretion inductible de peptides antimicrobiens. Ces derniers jouent un role important comme mediateurs de 1'inflammation en ayant des effets sur les cellules epitheliales et inflammatoires, en influenpant la proliferation cellulaire et la production de cytokines. Leur mode d'action consiste a rompre la membrane plasmique des microbes infectieux ou a penetrer dans le microorganisme afin d'interferer avec le metabolisme intracellulaire. Les peptides antimicrobiens les plus etudies dans la peau sont les p-defensines et les cathelicidines. Les p-defensines humaines constituent la classe majeure des peptides antimicrobiens retrouves dans les epitheliums humains et quatre d'entre elles ont ete identifiees dans la peau, HBD 1-4. Bien qu'elles appartiennent a la meme famille, elles sont regulees par des voix differentes. La pdefensine 2 humaine (hBD2), un peptide de 4kDa se liant a l'heparine est 1'un des principaux peptides antimicrobiens cutanes. L'expression des peptides hBD2 est inductible soit par5 10 15 20 25 30 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 30 la secretion de cytokines (IL-la et IL-ip et TNF-a) traduisant un etat inflammatoire, soit par contact avec une bacterie ou un champignon. Le but de cette etude est d'evaluer les effets de 1'extrait bacterien selon 1'invention sur 1'expression genique de keratinocytes epidermiques normaux humains par une technique de RT-PCR sur 2 genes relies a 1'immunite innee. L'etude est realisee sur des keratinocytes epidermiques normaux humains issus de trois donneurs. Ces cellules sont utilisees a leur troisieme passage. Ces cellules sont mises en culture dans un milieu standard supplement^ en EGF (Epidermal Growth factor), de PE (Pituitary extract) et de gentamycine, selon des procedures classiques en laboratoire. L'extrait bacterien selon 1'invention est teste a trois concentrations, 0,4 ; 2 et lOpg/ml (pg/ml de proteines). Simultanement, le chlorure de calcium est teste a l,5mM comme produit de reference. Les keratinocytes sont ensemences en plaques de 24 puits (50000 cellules par puits) et mises en culture pendant 24 heures dans un milieu de culture. Le milieu est ensuite remplace par un milieu d'essai contenant ou pas (condition controle, DMSO) 1'extrait bacterien selon 1'invention, ou le chlorure de calcium (produit de reference), les cellules sont incubees dans ces conditions pendant 48 heures. A la fin de cette periode d'incubation, les cellules sont lavees dans une solution tamponnee et immediatement congelees a une temperature de -80°C. L'expression des marqueurs est analysee par la methode de RT-qPCR sur l'ARN total extrait des cellules et ce dans chaque condition. L'ARN total est extrait dans chaque echantillon en utilisant le reactif Tripure Isolation® selon les instructions du fournisseur. La quantite et la qualite d'ARN sont evaluees par electrophorese capillaire. L'ADNc est synthetise par5 10 15 20 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 31 transcription reverse de l'ARN total en presence d'oligo(dT) et de « Transcriptor Reverse Transcriptase ». La quantite d'ADNc est ensuite ajustee avant 1'etape de PCR (Polymerase Chain Reaction). La PCR est realisee en utilisant le systeme LightCycler® de Roche selon les donnees du fournisseur. Les donnees sont analysees par le logiciel Microsoft Excel. L'incorporation de fluorescence dans l'ADN amplifie est continuellement mesuree pendant les cycles de PCR. Il en resulte dans une representation graphique entre I'intensite de fluorescence et le nombre de cycles de PCR une valeur d'expression relative pour chaque marqueur. La technique PCR utilisee dans cette etude inclut 2 genes de reference (RPL13A et TBP), ces genes sont utilises pour la normalisation des donnees, puisque leur expression est constitutive et done theoriquement stable. Par consequent le niveau d'expression des genes cibles est compare a la moyenne du niveau d'expression de ces 2 marqueurs de reference pour toutes les conditions. Le parametre RQ (relative Quantification) est definie comme 1'expression relative /100. Tous les resultats sont exprimes en facteur multiplicatif il represente le nombre de fois que le gene est surexprime si RQ >1 ou sous-exprime si RQ<1. Le tableau 3 ci-dessous permet de classer les effets des conditions traitees vs controle Classification des effets Facteur de multiplication (FC) Forte stimulation FC > 3 Stimulation 3 > FC > 2 Legere stimulation, a confirmer 2 > FC > 1,5 - 1,5 > FC > -1,5 Legere inhibition, a confirmer -1,5 > FC > -2 Inhibition -2 > FC > -3 Forte inhibition -3 > FC Pas d'expression Nombre de cycles > 335 10 15 20 GA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 32 L'analyse statistique est realisee par une comparaison intergroupe par un test de Student non-apparie. Resultats Le traitement des keratinocytes epidermiques normaux humains avec 1.5mM de chlorure de calcium utilise comme controle positif induit une forte expression des genes cibles dans 1'immunite innee, ce resultat permet de valider les conditions experimentales (tableau 4). Pam : peptides antimicrobiens Chlorure de calcium (1,5 mM) genes Moyenne Ecart type sem Immunite innee HBD2 5,8 6,1 3,5 PAM S100A7 4,1 3,8 2,2 Le tableau 5 resume les effets de 1'extrait bacterien selon 1'invention aux trois concentrations testees Pam : peptides antimicrobiens Extrait bacterien (0,2pg/ml) genes Moyenne Ecart type sem Immunite innee PAM HBD2 4,5 3,16 1,83 S100A7 2,1 0,39 0,23 Extrait bacterien (l,0pg/ml) Immunite innee PAM HBD2 21,0 12,29 7,10 S100A7 3,9 1,61 0,93 Extrait bacterien (5,0pg/ml) Immunite innee PAM HBD2 596,4 546,48 315,51 S100A7 10,6 6,56 2,055 10 15 20 CA 03100594 2020-11-17 WO 2019/229248 PCT/EP2019/064211 33 Les inventeurs mettent en evidence que toutes les concentrations testees de 1'extrait bacterien selon 1'invention induisent 1'expression des genes HBD2 et S100A7 et de faqonconcentration-dependante. L'extrait bacterien selon 1'invention a la capacite d'augmenter 1'induction de peptides antimicrobiens. Par cette stimulation de I'immunite innee, les peptides antimicrobiens induisent la defense cutanee et participent a la protection de la barriere cutanee. L'ensemble de ces resultats, c'est-a-dire une diminution de 1'inflammation neurogene cutanee combinee a une aide a la protection de la barriere cutanee permet de montrer que 1'extrait bacterien selon 1'invention agit reellement sur les peaux sensibles et/ou intolerantes.