CH131283A - Verfahren zur Reindarstellung von spezifischem Streptokokken-Pseudoglobulin aus Blutserum, sowie aus Exsudaten und Transsudaten erkrankter Individuen. - Google Patents

Description

  Verfahren zur     Reindarstellung    von spezifischem     Streptokokken-Pseudoglobulin     aus Blutserum, sowie aus     Exsudaten    und     Transsudaten    erkrankter Individuen.    Es ist bekannt, dass sich im Blutserum  voll Patienten nach dem Überstehen einer  Infektionskrankheit nicht unwesentliche       Mengen    von spezifischen Immunstoffen vor  finden.

   Aus dieser Tatsache wurde eine  praktische Folgerung dadurch gezogen, dass  man     das    Blutserum von Individuen nach  überstandener Krankheit, also sogenanntes       Rekonvaleszentenserum,    als Schutzmittel ge  gen die betreffende Krankheit bei gesunden  und als Heilmittel bei an derselben Krank  heit erkrankten Individuen verwandte.     E¯     ist fernerhin bekannt, dass im Blutserum von  Individuen, welche an einer Infektions  krankheit leiden oder überhaupt der Ein  wirkung von Antigenen unterliegen, Stoffe  enthalten sind, welche entweder die Infek  tion auf andere Individuen zu übertragen  befähigt sind, oder welche zum mindesten  bei gesunden Individuen Krankheitserschei  nungen derselben     Art    auszulösen vermögen.

    Im ersten Falle handelt es sich um belebte    Stoffe, also unmittelbar um Krankheits  erreger (Bakterien oder andere Virusarten),  im letzteren Falle um sogenannte Toxine,  welche im Blute und in dem übrigen Säfte  strom erkrankter Individuen zu kreisen  pflegen. Man weiss auch, dass die gleichen  Stoffe sich- in pathologischen Ergüssen,  nämlich in     Exsudaten    und     Transsudaten,     vorfinden, die sich infolge von Infektions  krankheiten in vielen Fällen in den Körper  höhlen erkrankter Individuen ansammeln. Es  wurde nun die Beobachtung gemacht, dass  die Menge von Antikörpern und Antigenen  in derartigen pathologischen Ergüssen im  allgemeinen grösser ist als die Menge an die  sen spezifischen Stoffen im Blutserum der  gleichen Patienten.  



  ' Es ist verständlich, dass die gleich  zeitige Anwesenheit von lebenden Erregern  und von unbelebten Antigenen (Toxinen)  neben den eigentlichen Immunstoffen die  Anwendung des Blutserums und ebenso die      Anwendung von     Exsudaten    und Trans       sudaten    als Schutz- und Heilmittel bei an  dern Individuen sehr beträchtlich erschwert,  ja sogar in vielen Fällen vollkommen     un-          :rröglich    macht, da mit ihrer Anwendung       stets    die Gefahr der krankmachenden Wir  kung verbunden sein muss.  



  Es wurde nun gefunden, dass eine     lZeindar-          stellung    von spezifischem     Streptokokken-          Pseudoglobulin    aus     Blutserum,    sowie aus       Exsudaten        und        Transsudat    en erkrankter In  dividuen dadurch ermöglicht ist, dass nach  der durch     elektroosmotische    Behandlung und  Filtrieren erfolgten Abtrennung des     Eiglo-          bulins    und der in diesem enthaltenen Anti  gene das Pseudoglobulin aus der vom  Niederschlage befreiten Lösung durch Fäl  lung mit     Neutralsalzen    abgeschieden,

   der  erhaltene Niederschlag in Wasser gelöst  und     diese    Lösung auf     elektroosmotischem     Wege gereinigt wird.  



  Zur Durchführung dieses Verfahrens  verfährt man beispielsweise folgendermassen:  Die betreffenden Flüssigkeiten werden  zunächst durch Zentrifugieren oder Filtrieren  von den in ihnen enthaltenen festen Bestand  teilen getrennt. Hierauf werden dieselben in  den Mittelraum eines     elektroosmotischen          Dreizellenapparates    gebracht, dessen     hatho-          disches        Diaphragma    aus Futtertuch (dicht  gewebtes Segeltuch), während das     anodische          Diaphragma    aus Chromgelatine auf Wolle  oder     Chinonleder    besteht.

   Durch die     elektro-          osmotische    Behandlung entzieht man den  betreffenden Flüssigkeiten zunächst alle  Elektrolyte, wodurch das unlösliche Globu  lin, nämlich das Eiglobulin, im     isoelektri-          schen    Punkt zur     Abscheidung    kommt. Mit  diesem Eiglobulin werden alle Antigene und  alle in den     Exsudaten    ursprünglich vorhan  denen Krankheitserreger zur     Abscheidung     gebracht. Man trennt dann in der salzfreien  Flüssigkeit den Bodensatz, also das Eu  globulin, von den flüssigen     Bestandteilen     durch Filtrieren oder Zentrifugieren. Letz  tere enthalten nur noch Pseudoglobulin und  Albumin.

   Die durch das Filtrieren oder  Zentrifugieren erhaltene völlig klare Flüs-         sigkeit    wird nach bekannten Methoden einer  Salzfällung     -unterworfen,    durch welche eine  Trennung von Albumin und Pseudoglobulin  herbeigeführt werden kann. Der erhaltene,  aus Pseudoglobulin bestehende Niederschlag  wird hierauf in Wasser gelöst und     wiederum     der Einwirkung des elektrischen Stromes  in dem oben beschriebenen     Dreizellenapparat     unterworfen. Man erhält hierbei eine voll  kommen klare, salzfreie Flüssigkeit, welche  im chemischen .Sinne nur Pseudoglobulin  in Lösung und damit verbunden     spezifische     Immunstoffe in reichlicher Menge enthält.

         Ausfährungsbeispiel:     In dem Blutserum von mit     Strepto-          kokken    behandelten oder an durch     Strepto-          kokken    hervorgerufenen eitrigen Prozessen  erkrankten Tieren finden sich grosse     Mengen     von Antikörpern.

   Zur     Reinclarstellung    der  diese Antikörper beinhaltenden     Pseudo-          g        )-        obulinfraktion    des gesamten Serumeiweisses  <B>1</B>  wird folgenderweise vorgegangen.: 3 Liter  Blutserum werden in den Mittelraum eines       Dreizellenapparates    gebracht und der Ein  wirkung des elektrischen Stromes unter  worfen. Die Spannung beträgt anfänglich  nur 20 bis<B>3</B>0 Volt, während die Strom  stärke zirka 10 bis 12     Amp,    beträgt. Inner  halb von etwa zwei Stunden sinkt die  Stromstärke auf     0,5    bis 0,2     Amp.,    während  die Spannung auf 220 Volt ansteigt.

   In  der Flüssigkeit scheidet sich nunmehr; und  zwar bei einer     Wasserstoffionenkonzen-          tratioir        vors    etwa 6,4     pH.,    ein flockiger Nieder  schlag ab, welcher     finit    Hilfe der Zentrifuge  gesammelt     wird.     



  Die vom Bodensatz befreite, völlig klare  Flüssigkeit wird mit kristallinischem Mag  nesiumsulfat gesättigt oder mit so viel  gesättigter     Ammoniumsulfatlösung    versetzt,       dass    alle Pseudoglobuline abgeschieden wer  den. In beiden Fällen erhält man einen  reichlichen Niederschlag, welcher mit Hilfe  der Zentrifuge oder durch     Filtration    von  der     iiberstehenden    Lösung getrennt     werden     kann.

   Der Niederschlag wird in wenig       ),Wasser    gelöst und     wird    zur     Beseitiigung         der überschüssigen Schwefelsäure in be  kannter Weise mit     Bariumacetat    versetzt  und vom abgeschiedenen     Bariumsulfat        ab-          filtriert.    Die klare Lösung wird dann er  neut in dem oben beschriebenen Dreizellen  apparat der Elektroosmose     unterworfen.     Man erhält eine völlig klare Flüssigkeit,  welche gegebenenfalls im Vakuum unter  Vermeidung hoher Temperaturen konzen  triert oder zur Trockne eingedampft wer  den kann.

   Aus den angewandten 3 Litern  Blutserum erhält man im Durchschnitt  0,5     -r        Euglobulin    und etwa 1     gr        trockenes          Paraglobulin,    welches zum Gebrauch als       Heilmittel    gegen     Streptokokken    in physiolo  gischer Kochsalzlösung aufzulösen ist.

Claims (1)

1. PATENTANSPRUCH: Verfahren zur Reindarstellung von spe zifischem Streptokokken-Pseudoglobulin aus Blutserum, sowie aus Exsudaten und Trans sudaten erkrankter und.

   behandelter Indi viduen, dadurch gekennzeichnet, dass nach der durch elektroosmotische Behandlung und Filtrieren erfolgten Abtrennung des Euglobulins und der in diesem enthaltenen Antigene das Pseudoglobulin aus der vom Niederschlag befreiten Lösung durch Fäl lung mit Neutralsalzen 'abgeschieden, der erhaltene Niederschlag in Wasser gelöst und diese Lösung auf elektroosmotischem Wege gereinigt wird.