CH380301A

CH380301A - Procédé de fabrication de préparations injectables d'insuline à action retardée

Info

Publication number: CH380301A
Application number: CH5313757A
Authority: CH
Inventors: Schlichtkrull Jorgen
Original assignee: Novo Terapeutisk Labor As
Priority date: 1956-12-01
Filing date: 1957-11-27
Publication date: 1964-07-31
Also published as: DK92662C

Description


  
 



  Procédé de fabrication de préparations injectables d'insuline à action retardée
 La présente invention a pour objet un procédé de fabrication de préparations injectables d'insuline à action retardée.



   Il est connu de fabriquer des préparations injectables d'insuline avec effet retardé en préparant une suspension de cristaux d'insuline dans un milieu aqueux injectable dont le pH est compris entre 5 et 9 et qui contient une quantité telle d'au moins un métal favorisant la   cristallisation    de l'insuline, que les cristaux d'insuline en suspension fixent par réaction chimique, une partie du métal favorisant la cristallisation contenue dans ce milieu aqueux.



  On obtient ainsi une suspension de cristaux d'insuline qui présente une teneur en métaux favorisant la cristallisation supérieure à celle qu'ils présentaient avant d'tre mis en suspension dans le milieu aqueux.



   On a trouvé depuis, aussi surprenant que cela paraisse, que la formation de cristaux d'insuline à teneur en métal particulièrement élevée dans le milieu aqueux n'est pas nécessaire pour obtenir une action retardée cliniquement intéressante.



   La présente invention a pour objet un procédé pour la préparation de suspensions injectables de cristaux d'insuline, dérivées de glandes pancréatiques de bovidés et ayant la forme de rhomboèdres à artes bien marquées, limitées par des faces cristallines planes, dans un milieu aqueux contenant des ions d'au moins un métal favorisant la cristallisation de l'insuline, caractérisé en ce qu'on limite la réaction chimique entre les cristaux suspendus d'insuline et les ions dudit métal de façon à former des cristaux d'insuline ne contenant pas plus de 0,21 milliéquivalent de métal par gramme de cristaux suspendus.



   L'action retardée des préparations d'insuline ainsi produites est due à l'origine de l'insuline et à la forme particulière des cristaux d'insuline et ne dépend pas de la présence d'une teneur élevée en métaux dans les cristaux en suspension. L'action retardée la plus prolongée de ces préparations est obtenue lorsque l'insuline utilisée provient entièrement de pancréas de bovidés. Une action initiale de valeur quelconque peut tre obtenue par l'utilisation simultanée de cristaux d'insuline dérivés d'autres glandes pancréatiques, telles que le pancréas de porc, ces cristaux ayant également la forme de rhomboèdres à artes bien marquées limités par des faces cristallines planes.

   Un effet initial peut également tre obtenu en utilisant des cristaux d'insuline dérivés de pancréas de bovidés mais ayant la forme d'étoiles, de rhomboèdres déformés, de paires de rhomboèdres, de citrons ou cristaux arrondis similaires qui, s'ils se trouvaient seuls en suspension aqueuse, ne présenteraient pas d'action retardée notable.



   Le milieu de suspension pour les cristaux d'insuline peut avoir un pH compris entre 5 et 8, mais il est indiqué de donner au milieu de suspension aqueux un pH d'environ 7 (6,5 à 7,5) étant donné que les suspensions sont particulièrement stables dans cette zone de pH limitée.



     I1    est de pratique courante dans la production de préparations injectables d'insuline, d'utiliser des substances tampon afin de maintenir les   prépare    tions au pH voulu. Certaines de   oes    substances tampon, telles que les tampons au phosphate et au citrate, se combinent aux ions de métal favorisant la cristallisation au pH 7 de manière qu'il n'y ait pas   d'ions    de métal libre susceptibles de se combiner aux cristaux d'insuline de sorte que ces derniers ne peuvent pas se charger d'ions provenant du milieu de pH 7 avec formation de cristaux présentant une teneur en métal supérieure.  



   Des métaux connus qui favorisent la cristalli
 sation de l'insuline sont le zinc, le cobalt, le nickel et le cadmium et le cuivre, le manganèse et le fer sous forme bivalente.   I1    vaut mieux utiliser du zinc comme métal favorisant la cristallisation, soit seul, soit combiné à un ou plusieurs des autres métaux.



     I1    vaut mieux utiliser comme milieu de suspension pour les cristaux d'insuline un milieu rendu isotonique par exemple au moyen de chlorure de sodium et d'y ajouter un agent conservant tel que du paraoxybenzoate de méthyle.



   Les exemples ci-dessous illustrent des modes de mise en oeuvre préférés du procédé selon l'invention.



   Exemple   1   
 On produit un mélange stérile contenant 1,7 O/o d'insuline provenant de pancréas de boeuf, 0,013   0/    de zinc, sous forme de chlorure de zinc,   0, 1 M    d'acétate de sodium et 7   O/o    de chlorure de sodium, ainsi qu'une quantité telle d'acide chlorhydrique stérile que la valeur du pH du mélange devienne 5,5, ce qui produit la cristallisation de   Insuline    dissoute sous forme de rhomboèdres à artes bien marquées et à faces cristallines planes qui contiennent environ 0,7   O/o    de zinc, correspondant à 0,21 milliéqulvalent de zinc par gramme et présentent une activité biologique d'environ 23 unités internationales par milligramme.



   Au lieu de chlorure de sodium une quantité correspondante d'un chlorure d'un autre métal alcalin, d'ammonium ou de métaux alcalino-terreux peuvent tre utilisés. De mme les bromures et iodures correspondants peuvent tre utilisés, à condition toutefois que la concentration en ions halogènes du milieu de cristallisation soit supérieure à 0,2 mole par litre, mais ne dépasse pas 4 moles par litre.



   Une partie de la suspension de cristaux d'insuline telle que produite ci-dessus, est diluée avec neuf parties d'eau stérile contenant   0, 11 e/o    de paraoxybenzoate de méthyle, à la suite de quoi le pH de la suspension est ramené à 7 par addition d'hydroxyde de sodium   1N.    Les cristaux d'insuline dans cette suspension finale présenteront une teneur en zinc d'environ 0,7 %.



   Exemple 2
 On prépare les deux solutions stériles de base suivantes:
 A) 3,48 g de cristaux d'insuline provenant de pancréas de boeuf et contenant   0,78 0/o    de zinc sont mis en suspension dans 50 millilitres d'eau et dissous par addition de 4 millilitres d'acide chlorhydrique   1N.    La solution est diluée avec de l'eau jusqu'à 100 millilitres.



   B) 1/50 M d'acétate de sodium et 45 g de chlorhydrate de triéthanolamine sont dissous dans de l'eau et la solution portée à 100 millilitres, cette eau contenant une quantité suffisante de NaOH pour que le mélange de A et B soit amené au pH 5,5.



   Les solutions (A) et (B) sont mélangées dans un becher dans des conditions stériles et, au cours de quelques heures, les cristaux d'insuline apparaissent sous forme de rhomboèdres à artes bien marquées présentant des faces cristallines planes.



   La suspension de cristaux d'insuline ainsi produite est diluée avec une quantité telle d'eau stérile    contenant 0, 11 /o de paraoxybenzoate de méthyle,    que la suspension finale de cristaux contiendra 40 unités internationales d'insuline par millilitre après que la suspension a été ajustée au pH 7 par addition d'hydroxyde de sodium 1 N.



   Exemple 3
 2,40 g de cristaux d'insuline dérivés de pancréas de boeuf et contenant 0,8   o/o    de zinc, sont mis en suspension dans 50 millilitres d'eau stérile et dissous par addition de 22 millilitres d'acide chlorhydrique stérile   0, 1 N,    après quoi la solution est diluée à 100 millilitres avec de l'eau stérile. On ajoute à cette solution 80 millilitres d'une solution aqueuse stérile d'urée contenant 22 grammes d'urée et 20 millilitres d'une solution stérile préparée de la façon suivante:
 50 g d'acide citrique sont dissous dans 200 millilitres d'eau. On ajoute à cette solution   28, 5 g    de
NaOH et 200 millilitres d'une solution de chlorure de zinc contenant 1   o/o    d'ion zinc, après quoi la solution est diluée à 500 millilitres avec de l'eau.



   Le pH du mélange de cristallisation est ajusté à 6 au moyen de NaOH 1 N et le mélange est agité doucement. Au cours de quelques heures, l'insuline cristallise sous forme de rhomboèdres à artes bien marquées, limités par des faces cristallines planes.



   La suspension de cristaux d'insuline ainsi produite est diluée avec une quantité telle d'eau stérile contenant   0,11 0/o    de paraoxybenzoate de méthyle, que la suspension finale de cristaux contiendra 40 unités internationales d'insuline par millilitre après que la suspension ait été ajustée au pH 7 par addition d'hydroxyde de sodium 1 N.



   Exemple 4
 1,20 g de cristaux d'insuline provenant de pancréas de   boeuf    et contenant 0,8   o/o    de zinc sont mis en suspension dans 66 millilitres d'eau et dissous par addition de 1,6 millilitre d'acide chlorhydrique 1 N. Après stérilisation de la solution, on ajoute 22,5 g de formamide et 10 millilitres d'une solution stérile préparée de la façon suivante:
 50 g d'acide citrique sont dissous dans 200 millilitres d'eau. On ajoute à cette solution 28,5 g de
NaOH et 200 millilitres d'une solution aqueuse de chlorure de zinc contenant   1 0/o    d'ions zinc, après quoi la solution est diluée à 500 millilitres.



   Le pH du mélange de cristallisation est de 6 et, après agitation pendant quelques heures, L'insuline cristallise sous forme de rhomboèdres à artes bien marquées, limités par des faces cristallines planes.  



   La suspension de cristaux d'insuline ainsi produite est diluée avec une quantité telle d'eau stérile    contenant 0,11  /0 de paraoxybenzoate de méthyle,    que la suspension finale de cristaux contiendra 40 unités internationales d'insuline par millilitre après que la suspension a été ajustée au pH 7 par addition d'hydroxyde de sodium 1 N.



   Exemple 5
 On prépare une solution stérile contenant 1,7   O/o    d'insuline extraite de pancréas de bceuf, 0,13   O/o    de zinc sous forme de chlorure de zinc, 0,05 M de citrate de sodium et 7   o/o    de chlorure de sodium, et la cristallisation de l'insuline à partir de ce mélange est produite par addition d'une quantité telle d'acide chlorhydrique que le pH du mélange devient 6.



  Les cristaux produits ont la forme de rhomboèdres à artes bien marquées, avec des faces cristallines planes et contiennent environ   0,7 0/o    de zinc, ce qui correspod à   0,21    milliéquivalent de zinc par gramme.



   La suspension de cristaux d'insuline ainsi produite est diluée avec une quantité telle d'eau stérile contenant   0,11 0/o    de paraoxybenzoate de méthyle, que la suspension finale de cristaux contiendra 40 unités internationales d'insuline par millilitre après que la suspension a été ajustée au pH 7 par addition d'hydroxyde de sodium 1 N. En raison de la teneur en tampon à base de citrate du milieu de cristallisation, la teneur en zinc des cristaux en suspension n'augmentera pas lorsque le pH de la suspension est amené à 7.

Claims

REVENDICATION Procédé pour la préparation de suspensions injectables de cristaux d'insuline dérivés de glandes pancréatiques de bovidés et ayant la forme de rhomboèdres à artes bien marquées limités par des faces cristallines planes, dans un milieu aqueux contenant des ions d'au moins un métal favorisant la cristallisation de l'insuline, caractérisé en ce qu'on limite la réaction chimique entre les cristaux suspendus d'insuline et les ions dudit métal de façon à former des cristaux d'insuline ne contenant pas plus de 0,21 milliéquivalent de métal par gramme de cristaux suspendus.

SOUS-REVENDICATION Procédé selon la revendication, caractérisé en ce que les ions métalliques sont des ions de zinc.