Procédé de préparation de nouveaux o)-phényl-dithiobiurets
L'objet de la présente invention est un procédé de préparation de nouveaux o)-phényl-dithiobiurets ; ces nouvelles substances se sont montrées actives contre l'infection poliomyélitique expérimentale de la souris.
Ces nouveaux composés correspondent à la formule suivante:
EMI1.1
dans laquelle R et R' représentent un atome d'hydrogène et/ou un groupement alcoyle substitué ou non, ou forment avec l'atome d'azote qui les sépare, un hétérocycle, par exemple celui de la pyrrolidine, de la pipéridine ou de la morpholine. De préférence,
R + R' totalisent 4 atomes de carbone, car on a constaté que le composé dans lequel R et R' sont des radicaux méthyle, montre une légère activité qui s'accroît considérablement avec le diéthylamide.
Le remplacement des groupes éthyle par des radicaux propyle et isopropyle ne supprime pas l'acti vitrer, mais la diminue.
Par contre, le monobutylamide (R = H ; R' nbutyle), possède une grande activité comparable à celle du diéthylamide.
Les radicaux R et R' peuvent, comme mentionné ci-dessus, être des restes aliphatiques simples ou appartenir à un cycle carbo-azoté, tel que celui de la pyrrolidine la pipéridine ou la morpholine
EMI1.2
Les nouveaux composés correspondant à la formule générale susmentionnée sont obtenus selon la présente invention par les étapes suivantes 1) Obtention d'une amide de l'acide p-nitrobenzoï
que par condensation du chlorure de p-nitroben
zoyle, ou d'un ester p-nitrobenzoïque avec une
amine aliphatique primaire ou secondaire ou une
amine alicyclique secondaire pour obtenir l'amide
nitré;
2) réduction de la fonction nitro en amino, suivant
les méthodes habituelles et 3) condensation du p-amino-carboxamide avec
l'acide isopersulfocyanique à chaud, de préférence
en présence d'un solvant hydrosoluble tel que le
dioxane, au sein duquel le dithiobiuret cristallise
généralement par refroidissement, mélangé à du
soufre, ce dernier pouvant être éliminé par lavage
du précipité au sulfure de carbone, après quoi le
dithiobiuret brut est purifié de préférence par dis
solution dans une solution alcaline diluée, suivie
de reprécipitation par le gaz carbonique.
Les nouveaux composés sont des substances blanches, microcristallines, très peu solubles dans l'eau, d'un caractère acide très faible, peu altérables à l'air à l'état sec, mais aisément oxydables en solution alcaline.
Les composés obtenus selon les procédés de l'invention sont capables de réduire, dans une proportion considérable, la mortalité des animaux par arrêt du processus infectieux consécutif à l'inoculation intracrânienne.
Des souris blanches, inoculées avec le virus de
Lansing sous forme d'une émulsion de système nerveux central total d'animaux ayant succombé à l'infection, fournissent une mortalité de 70 à 100 /o dans un délai de 30 jours, avec une courbe qui présente deux maxima.
Un premier maximum précoce, entre le 3me et le 8me jour et un deuxième, du 15me au 25rye jour, ce dernier étant le plus important.
Jusqu'au 12me jour, la mortalité est de 25 à 35 O/o, du 12me au 30nue jour, elle oscille entre 45 et 65 /o.
Les composés chimiques ici considérés, n'exercent qu'une action modérée sur la phase première de la mortalité, mais administrés aux animaux, per os, à partir du 12me jour, à la dose quotidienne de 500 mg par kilo, ils se montrent capables d'arrêter la propagation de l'infection, réduisant la mortalité de cette deuxième phase dans une proportion de 45 à 75 O/o.
Les animaux survivants ne présentent jamais de paralysies.
Cette technique expérimentale de traitement à partir du 12me jour, a été choisie, afin de se rapprocher des conditions de la clinique humaine.
La toxicité de ces substances est extrêmement faible et l'homme les supporte à hautes doses, sans autre inconvénient qu'une modification passagère et rapidement réversible de la formule leucocytaire.
Chez les souris infectées par le virus grippal (souche PR 8), les corps ici considérés, diminuent la mortalité de 45 o/o pour une infection de sévérité moyenne.
En ce qui concerne la poliomyélite, à titre d'exemples, on indiquera, qu'au cours de 13 expériences différentes portant sur un total de 170 animaux témoins et de 170 souris traitées avec le diéthylamide du p-carboxy-phényl dithiobiuret, la mortalité chez les témoins fut du 12111e au 30tune jour de 75 /0 contre 28 o/o seulement chez les animaux recevant journellement 10 mg per os, soit une réduction de la mortalité de 61,2 'o.
Pour le monobutylamide du p-carboxyphényldithiobiuret, sur un total de 70 animaux traités, dans les mêmes conditions que précédemment, au cours de 7 expériences différentes, la mortalité fut de 61 O/o chez les 70 témoins, contre 18 o/o chez les animaux traités, soit une réduction de la mortalité de 69,8 O/o.
On a, en outre, constaté que la présence de groupes alcooliques dans les radicaux R et R' diminue ou annule l'activité.
Les exemples suivants illustrent l'invention; on peut évidemment faire varier la nature de l'amine, celle des solvants utilisés pour effectuer les condensations ou les températures réactionnelles.
Exemple 1
Préparation du morpholiele
du p-carboxyphényl-diéhiobiurer
Dans la solution de 76 g de chlorure de p-nitrobenzoyle dans 160 cm de toluène, on introduit sous agitation, 85 g de morpholine diluée dans 160 ccm de toluène, la température étant maintenue vers 20"C par refroidissement extérieur. On ajoute de l'eau pour dissoudre le chlorhydrate de morpholine.
On filtre pour séparer une fraction de l'amide qui sera jointe au produit d'évaporation du toluène après lavage de celui-ci à l'eau. Rendement quantitatif.
P.F. 107-1080 C (Siebenmann, Schnitzer, J. A.
Chem. Soc., 65, 2126 (1943) : P.F. 1011060).
L'amide nitré est réduit par catalyse au sein de l'éthanol, à la pression ordinaire, par l'oxyde de platine d'Adams. Après évaporation de l'alcool on reprend par l'éther de pétrole. P.F. 1340 C.
Dans 40 ccm de dioxane, on introduit 22, 7 g d'amino-amide précédemment obtenu, avec 15 g d'acide isopersulfocyanique, et porte le mélange 3 heures au bain-marie immergé. On essore le précipité obtenu par refroidissement et lave au sulfure de carbone, puis au méthanol froid.
Les dernières traces de soufre sont éliminées en dissolvant le précipité humide dans la soude N/2, on décolore éventuellement au noir animal et précipite au CQ. On essore, lave à l'eau, puis au méthanol, on dessèche à l'abri de l'air le morpholide du p-carboxyphenyl-dithiobiuret.
EMI2.1
Le corps se décompose par chauffage progressif et fond sans netteté vers 1850 C. P.F. instantané: 200-205o C en se décomposant.
Exemple 2
Prépararion du N-butylamide
du p-carboxyph ényldithiobjuret
Le monobutylamide du p-carboxyphényldithiobiuret est préparé dans les conditions identiques à celles de l'exemple 1, par remplacement de la morpholine par la monobutylamine, en quantité équimoléculaire.
Le monobutylbenzamide para-nitré est peu soluble dans le toluène et se sépare presque complètement.
I1 fond à 103-1040C [Wenker. J. Am. Chem.
Soc., 60, 1081 (1938)]. L'amide para-aminé, P.F. 98 990 C (Wenker, ibidem), est très soluble dans l'alcool et cristallise dans l'éther isopropylique.
21,5 g de l'amino-amide précédent,
15 g d'acide isopersulfocyanique,
40 ccm de dioxane, sont portés 3 heures au bain-marie immergé.
Ici le dithiobiuret substitué ne se sépare pas par refroidissement, la majeure partie du soufre est éliminée par filtration, on ajoute progressivement de l'eau, pour séparer le produit de la réaction, on l'essore, lave à l'eau et avec très peu de méthanol.
On le dissout dans 250 ccm d'eau, 15 ccm de soude 10 N, filtre avec du charbon décolorant et précipite au CO2. P.F. instantané 185-1900 C (en se décomposant).
Il répond à la formule:
EMI3.1
Exemple 3
Préparation de l'hydroxyéthylamide
du p-carboxyphényldithiobiuret
48 g de chlorure de p-nitrobenzoyle sont condensés avec 40 g d'aminoéthanol au sein du chloroforme dans lequel l'amide nitré est peu soluble. Il fond à 1310C (Hill, Powell, J. Am. Chem. Soc., 67, 1462 (1945) ; Brintzinger, Koddebusch, B. 82 (1949), p.
202).
L'amino-amide obtenu par réduction catalytique et recristallisable dans l'éther isopropylique, fond à 119-1200 C.
15 g d'acide isopersulfocyanique
20 g d'amino-amide
40 ccm de dioxane sont portés 3 heures au bain-marie; on précipite à l'eau, essore, lave à l'eau, redissout dans la soude diluée, sépare le soufre par filtration, reprécipite par le CO2, le dithiobiuret
EMI3.2
fond à 1850 C par chauffage lent. P.F. instantané: 2000 C (décomposition).
Exemple 4
Préparation du pipéridide
du p-carboxyphényldithiobiuret
Le pipéridide du p-carboxyphényldithiobiuret (G. 847) se prépare d'une manière identique à l'exemple 1. L'amide nitré fond à 120 C (Franchimont, Van Rijn, Friedmann, Rec. Trav. Chim.
Pays-Bas, 26, 232 ; Wenker, J. Am. Chem. Soc., 60, 1081).
L'amino-amide est obtenu par réduction catalytique dans l'alcool. I1 fond à 1620 C.
Le dithiobiuret substitué fond à 205-2100 (déc.).
EMI3.3
Exemple 5
Préparation du pyrrolidide
du p-carboxyphényldithiobiuret
En remplaçant la pipéridine par la pyrrolidine dans l'opération précédente, on obtient le corps de formule:
EMI3.4
fondant à 200-2050 C avec décomposition.
Poudre blanche presque insoluble dans l'eau, soluble dans les alcalis dilués, soluble dans l'alcool.
Les corps intermédiaires sont:
l'amide nitré : P.F. 95-960
L'amide aminé: P.F. 1820.
Exemple 6
Préparation du diéthylamide
du p-carboxyphényldithiobiuret
EMI3.5
La condensation du chlorure de p-nitrobenzoyle avec la diéthylamine, dans les conditions ci-dessus décrites, conduit à l'amide nitré. P.F. 65o C (J. Am.
Chem. Soc., 60 (1933), p. 1081).
La réduction du groupement nitro peut être faite avantageusement par la poudre de fer au sein du butanol aqueux à l'ébullition. La para-aminodiéthylbenzamide fond à 1250 C (Wenker, ibidem).
Le dithiobiuret préparé comme précédemment au sein du dioxane, cristallise par refroidissement. Purifié comme il a été dit, il se présente sous forme d'une poudre microcristalline blanche, pratiquement insoluble dans l'eau, peu soluble dans le méthanol et l'éthanol (1,2 g pour 1000).
P.F. instantané: 220-225o C (décomposition).
Process for the preparation of novel o) -phenyl-dithiobiurets
The object of the present invention is a process for the preparation of novel o) -phenyl-dithiobiurets; these new substances have been shown to be active against experimental poliomyelitis infection in mice.
These new compounds correspond to the following formula:
EMI1.1
in which R and R 'represent a hydrogen atom and / or a substituted or unsubstituted alkyl group, or together with the nitrogen atom which separates them, form a heterocycle, for example that of pyrrolidine, piperidine or morpholine. Preferably
R + R 'total 4 carbon atoms, because it has been observed that the compound in which R and R' are methyl radicals, shows a slight activity which increases considerably with diethylamide.
The replacement of ethyl groups by propyl and isopropyl radicals does not suppress the vitreous activity, but decreases it.
On the other hand, monobutylamide (R = H; R 'nbutyl) has a high activity comparable to that of diethylamide.
The radicals R and R 'can, as mentioned above, be simple aliphatic residues or belong to a carbo-nitrogenous ring, such as that of pyrrolidine, piperidine or morpholine.
EMI1.2
The new compounds corresponding to the above-mentioned general formula are obtained according to the present invention by the following steps 1) Obtaining an amide of p-nitrobenzoic acid
than by condensation of p-nitroben chloride
zoyl, or a p-nitrobenzoic ester with a
primary or secondary aliphatic amine or a
secondary alicyclic amine to obtain the amide
nitre;
2) reduction of the nitro function to amino, following
the usual methods and 3) condensation of p-amino-carboxamide with
hot isopersulfocyanic acid, preferably
in the presence of a water-soluble solvent such as
dioxane, in which dithiobiuret crystallizes
usually by cooling, mixed with
sulfur, which can be washed off
carbon disulfide precipitate, after which the
crude dithiobiuret is preferably purified by dis
solution in dilute alkaline solution, followed by
reprecipitation by carbon dioxide.
The new compounds are white, microcrystalline substances, very poorly soluble in water, of a very weak acidic character, little alterable in air in the dry state, but easily oxidizable in alkaline solution.
The compounds obtained according to the methods of the invention are capable of reducing, in a considerable proportion, the mortality of animals by stopping the infectious process subsequent to intracranial inoculation.
White mice, inoculated with the
Lansing as a total central nervous system emulsion from animals succumbing to infection, provides 70-100% mortality within 30 days, with a curve showing two maxima.
A first early maximum, between the 3rd and the 8th day and a second, from the 15th to the 25th day, the latter being the most important.
Until the 12th day, the mortality is 25 to 35 O / o, from the 12th to the 30th day, it oscillates between 45 and 65 / o.
The chemical compounds considered here exert only a moderate action on the first phase of mortality, but administered to animals, orally, from the 12th day, at a daily dose of 500 mg per kilo, they show themselves capable to stop the spread of infection, reducing the mortality of this second phase by a proportion of 45 to 75 O / o.
The surviving animals never show paralysis.
This experimental technique of treatment from the 12th day, was chosen in order to be closer to the conditions of the human clinic.
The toxicity of these substances is extremely low and man withstands them at high doses, with no other inconvenience than a temporary and rapidly reversible modification of the leukocyte formula.
In mice infected with the influenza virus (strain PR 8), the bodies considered here, reduce mortality by 45% for an infection of moderate severity.
With regard to poliomyelitis, as examples, it will be indicated that during 13 different experiments involving a total of 170 control animals and 170 mice treated with p-carboxy-phenyl dithiobiuret diethylamide, the mortality in the controls was from 12111 to the 30th day of 75/0 against 28% only in animals receiving 10 mg per os daily, ie a reduction in mortality of 61.2%.
For p-carboxyphényldithiobiuret monobutylamide, out of a total of 70 animals treated, under the same conditions as previously, during 7 different experiments, the mortality was 61 O / o in the 70 controls, against 18 o / o in the treated animals, a reduction in mortality of 69.8 O / o.
It has, moreover, been observed that the presence of alcoholic groups in the radicals R and R 'decreases or cancels the activity.
The following examples illustrate the invention; it is obviously possible to vary the nature of the amine, that of the solvents used to carry out the condensations or the reaction temperatures.
Example 1
Preparation of morpholiele
p-carboxyphenyl-diéhiobiurer
Into the solution of 76 g of p-nitrobenzoyl chloride in 160 cm 3 of toluene, 85 g of morpholine diluted in 160 ccm of toluene are introduced with stirring, the temperature being maintained at around 20 ° C. by external cooling. 'water to dissolve morpholine hydrochloride.
It is filtered to separate a fraction of the amide which will be joined to the evaporation product of the toluene after washing the latter with water. Quantitative yield.
P.F. 107-1080 C (Siebenmann, Schnitzer, J. A.
Chem. Soc., 65, 2126 (1943): P.F. 1011060).
Nitro amide is reduced by catalysis in ethanol, at ordinary pressure, by Adams platinum oxide. After evaporation of the alcohol, the residue is taken up in petroleum ether. P.F. 1340 C.
22.7 g of the amino-amide obtained above are introduced into 40 ccm of dioxane with 15 g of isopersulfocyanic acid, and the mixture is taken for 3 hours in an immersed water bath. The precipitate obtained is filtered off by cooling and washed with carbon disulphide, then with cold methanol.
The last traces of sulfur are removed by dissolving the wet precipitate in N / 2 soda, it is optionally decolorized with animal black and precipitated with CQ. The mixture is filtered off, washed with water and then with methanol, the morpholide of p-carboxyphenyl-dithiobiuret is dried in the absence of air.
EMI2.1
The body decomposes on gradual heating and melts bluntly around 1850 C. Instantaneous P.F.: 200-205o C as it decomposes.
Example 2
Preparation of N-butylamide
p-carboxyph enyldithiobjuret
The p-carboxyphényldithiobiuret monobutylamide is prepared under the conditions identical to those of Example 1, by replacing the morpholine with monobutylamine, in an equimolecular amount.
Para-nitrated monobutylbenzamide is sparingly soluble in toluene and separates almost completely.
It melts at 103-1040C [Wenker. J. Am. Chem.
Soc., 60, 1081 (1938)]. Para-amino amide, m.p. 98,990 C (Wenker, ibidem), is very soluble in alcohol and crystallizes from isopropyl ether.
21.5 g of the above amino-amide,
15 g of isopersulfocyanic acid,
40 ccm of dioxane are worn for 3 hours in an immersed water bath.
Here the substituted dithiobiuret does not separate by cooling, most of the sulfur is removed by filtration, water is gradually added to separate the reaction product, it is drained, washed with water and with very little methanol.
It is dissolved in 250 ccm of water, 15 ccm of 10 N sodium hydroxide, filtered with decolorizing charcoal and precipitated with CO2. Instant m.p. 185-1900 C (decomposing).
It responds to the formula:
EMI3.1
Example 3
Preparation of hydroxyethylamide
p-carboxyphenyldithiobiuret
48 g of p-nitrobenzoyl chloride are condensed with 40 g of aminoethanol in chloroform in which the nitrated amide is sparingly soluble. It melts at 1310C (Hill, Powell, J. Am. Chem. Soc., 67, 1462 (1945); Brintzinger, Koddebusch, B. 82 (1949), p.
202).
The amino-amide obtained by catalytic reduction and recrystallizable from isopropyl ether, melts at 119-1200 C.
15 g of isopersulfocyanic acid
20 g of amino-amide
40 cc of dioxane are worn for 3 hours in a water bath; precipitated with water, drained, washed with water, redissolved in dilute sodium hydroxide, the sulfur separated by filtration, reprecipitated with CO2, dithiobiuret
EMI3.2
melts at 1850 C by slow heating. Instantaneous m.p .: 2000 C (decomposition).
Example 4
Preparation of piperidide
p-carboxyphenyldithiobiuret
The piperidide of p-carboxyphenyldithiobiuret (G. 847) is prepared in an identical manner to Example 1. The nitro amide melts at 120 C (Franchimont, Van Rijn, Friedmann, Rec. Trav. Chim.
Netherlands, 26, 232; Wenker, J. Am. Chem. Soc., 60, 1081).
The amino amide is obtained by catalytic reduction in alcohol. It melts at 1620 C.
The substituted dithiobiuret melts at 205-2100 (dec).
EMI3.3
Example 5
Preparation of pyrrolidide
p-carboxyphenyldithiobiuret
By replacing piperidine with pyrrolidine in the previous operation, we obtain the body of formula:
EMI3.4
melting at 200-2050 C with decomposition.
White powder almost insoluble in water, soluble in dilute alkalis, soluble in alcohol.
The intermediate bodies are:
nitrated amide: M.P. 95-960
Amino amide: m.p. 1820.
Example 6
Preparation of diethylamide
p-carboxyphenyldithiobiuret
EMI3.5
The condensation of p-nitrobenzoyl chloride with diethylamine, under the conditions described above, results in the nitrated amide. M.p. 65o C (J. Am.
Chem. Soc., 60 (1933), p. 1081).
The reduction of the nitro group can be carried out advantageously by the iron powder in the aqueous butanol at the boiling point. Para-aminodiethylbenzamide melts at 1250 C (Wenker, ibidem).
The dithiobiuret prepared as above in dioxane, crystallizes on cooling. Purified as has been said, it is in the form of a white microcrystalline powder, practically insoluble in water, sparingly soluble in methanol and ethanol (1.2 g per 1000).
Instant m.p .: 220-225o C (decomposition).