CH432729A - Dispositif pour l'étude des cellules vivantes - Google Patents

Description

      Dispositif    pour     Pétude    des cellules vivantes    La présente invention a pour objet un dispositif des  tiné à être     utilisé        pour    l'étude des cellules vivantes,     telles     que bactéries,     protozoaires,    algues, champignons     micro-          scopiques,    cellules en culture, etc.  



  Le dispositif suivant l'invention est     caractérisé    en ce  qu'il est     constitué        par    l'assemblage de     deux    pièces  découpées     dans    une matière absorbante et     contenant          localement    une substance chimique     déterminée    et un  réactif indicateur approprié,

   l'une de     ces    pièces     étant          recouverte    d'une couche de     matière    étanche en vue de  réaliser des     conditions    de fermentation anaérobie     tandis     que l'autre est destinée à être mise en contact     avec    les  cellules vivantes à     étudier    de façon à former support  pour la migration     -du    réactif indicateur précité après  réaction avec les produits de dégradation provenant  éventuellement de l'action des cellules sur la substance  chimique.  



  Le dessin     annexé    montre à titre d'exemples plusieurs  formes de réalisation du dispositif suivant l'invention:  La     fig.    1 est une vue en plan d'un dispositif réalisé       conformément    à un premier mode de mise en oeuvre de  l'invention.  



  La     fig.    2 est un-,     coupe        suivant        II-II        (fig.    1).  



  La     fig.    3 est une vue en plan d'une autre forme de  réalisation.  



  La     fig.    4 est la coupe     correspondante    suivant IV-IV       (fig.    3).  



  La     fig.    5 et 6 montrent respectivement en coupe une  variante de la     fig.    2 et .de     1a        fig.    4.  



  La     fig.    7 est une vue en plan d'un dispositif suivant  un autre mode de mise en     oeuve    .de l'invention.  



  La     fig.    8 en est une     coupe    suivant     VIII-VIII        (fig.    7).  La     fig.    9 montre en plan la     disposition    d'une série de  dispositifs suivant la     fig.    7 sur le fond d'un récipient.  



  La     fig.    10 est une vue en plan d'une     variante    de la       fig.    7.  



  La     fig.    11 en est la     coupe        correspondante    suivant  XI-XI     (Fig.    10).  



  La     fig.    12 est une vue     analogue    à celle de la     fig.    9,  mais correspondant -au dispositif représenté à la     fig.    10.    La     fig.    13 est une vue en plan d'une autre forme de       réalisation    du     dispositif    suivant la     fig.    7.  



  Les     fig.    14 et 15 montrent en plan deux variantes de  la     fig.    13.  



  Le dispositif représenté aux     fig.    1 et 2     est        constitué     par l'assemblage de deux pièces 1 et 2     découpées        dans     une matière     absorbante,    (papier     buvard,papier        pour     séparations     électropho@rétiques,    papier échangeur d'ions,  tissu de fibres d e verre ou matières absorbantes analo  gues).

   Chaque pièce     présente    un profil     substantiellement     circulaire, étant noté que la pièce 1 est de diamètre légè  rement     plus    petit que     1e    disque 2. Les deux     pièces    sont       assemblées    en superposition au moyen d'une colle  appropriée, prévue perméable, et l'ensemble est recou  vert par une     couche    de matière étanche à l'air et à l'eau       (paraffine    ou     substance    analogue), laquelle     couche    laisse  à     découvert    la face libre de la pièce 2.  



  Préalablement à     l'assemblage,    la     pièce    1 a été  imprégnée d'un réactif indicateur     coloré    (indicateur de  pH par exemple), tandis que la pièce 2 a été imprégnée  de la     substance    chimique à essayer,     utilisée    à forte con  centration;     les    deux pièces ont été ensuite séchées, le  dispositif obtenu après assemblage     pouvant    ainsi être       conservé    aussi longtemps qu'on le désire.  



  Au moment de l'utilisation le     .dispositif    l-2-3 est  placé dans un récipient sur le fond     transparent    4     (fig.    2)  duquel repose un support     hydratant    et nutritif 5 (gel     d'a-          gar-,agar    ou     .analogue);    préalablement à 1a mise -en  place du     dispositif    on a étalé sur la surface du     support    5  une     couche    6 de la suspension     cellulaire    à étudier. Le  récipient est ensuite fermé et introduit à l'intérieur     d'une     étuve, le fond 4 étant tourné vers le haut.  



  On     comprend    que les produits provenant de la  dégradation de la substance chimique     contenue        .dans    la  pièce 2 au contact de la     suspension        cellulaire    6,     diffusent          dans        cette        pièce    2, en même temps que le réactif indica  teur dont est     imprégnée    la     pièce    1.

   On conçoit     par    ail  leurs que les     conditions    d'anaérobiose déterminées par  la     couche    3 favorisent l'apparition rapide de résultats  nets et précis, lesquels peuvent être     facilement    examinés      sur la face     libre    de la pièce 2 par le lecteur à     travers    le  fond transparent 4 du récipient.     E    va de soi qu'on peut       disposer    à     l'intérieur    d'un même récipient plusieurs     dis-          positifs    1-2-3,     convenablement    répartis.  



  Dans la variante montré aux     fig.    3 et 4, les deux piè  ces référencées 11 et 12, sont assemblées l'une à l'autre       ,en    juxtaposition     suivant        une    sécante     commune    ,a, l'en  semble, de ces pièces étant     recouvert    par une     couche    de  matière     étanche    13.  



  On     comprend    que dans l'une et l'autre variantes la  couche de matière étanche 23     (fig.    5) ou 33     (fig.    6) peut  n'intéresser que la seule surface de la pièce 1,     respacti-          vement    11, qui renferme     1e    réactif indicateur.  



       Dans    le mode ide mise en     oeuvre        id'e        l'invention        il        lus-          tré    aux     fig.    7 et 8, les deux     pièces    1011 et 102     sont          assemblées    en juxtaposition suivant la sécante a,     comme     dans le     cas    des     fig.    3 et 4.

   Toutefois, la plus petite de ces  pièces, à     savoir    la     pièce    101, -est     simultanément    impré  gnée de la substance     chimique    à essayer et du     réactif    in  dicateur coloré;

   il     suffit    à cet effet de plonger cette     pièce     101, avant assemblage .avec la pièce 102, dans     un     mélange     liquide        contenant    la substance chimique à     haute     concentration et le     réactif        indicateur,        ladite    pièce étant  ensuite séchée.

   La     couche    de matière étanche 103 est  constituée     par    une bande souple ou     pellicule    en acétate de  cellulose, chlorure de,     polyvinyle    ou matière     analogue,     étant noté que cette bande recouvre entièrement la     pièce     101 et laisse à .découvert une     partie    de la     surface   <B>de,</B> 1a  pièce 102.  



  On comprend que si la     matière    absorbante qui     ,cons-          titue    la pièce 102 est     telle    qu'elle     retient    par     capillarité     une     quantité    d'eau     suffisante,    il n'est plus     nécessaire,     pour     maintenir    le     dispositif    à l'état humide, de, le dispo  ser à la     surface    d'un gel     d'agar-agar    ou autre support  hydratant.

   A cet effet il suffit     que    la pièce 102 soit réa  lisée en une matière hautement     absorbante,        telle    qu'un  papier     recouvert    par flockage d'un tapis de     fibres    de  verre     perpendiculaires    au plan     dudit    papier, ou une  trame     fibreuse,        par    exemple une étoffe non     tissée    de       fibranne-viscose,    imprégnée de     carboxy-méthyl-cellu-          lose,    d'une     hemi-cellulose    ou d'une substance analogue.  



  En pareil cas, lorsqu'on désire utiliser le     dispositif     suivant l'invention, on dispose celui-ci sur un support       quelconque    à fond     transparent,        par    exemple sur le fond  104 d'une boîte de, Pétri. On     ensemmence    le     dispositif     en déposant :sur la partie de la     pièce    102 qui n'est pas       recouverte    par     la    bande 103 un nombre de gouttes de  suspension cellulaire suffisant     pour    imbiber complète  ment l'ensemble 101-102 par capillarité.

   Après une  période d'incubation à une     température        convenable,        on     peut étudier l'action des     cellules        vivantes    ;sur la sub  stance chimique dont est imprégnée la pièce 101 par  examen de, la     coloration    de la     pièce    102.

   On conçoit en  effet que le réactif     indicateur        diffuse    de la     pièce    101 vers  la pièce 102 en même     temps    que les produits de dégra  dation de la     substance    chimique     considérée;

      cette     diffu-          sion    s'effectue à     travers    la sécante a et le virage de     l'in-          dictateur        ,apparaît    de manière     particulièrement    nette et  rapide au     niveau    de     la        frange    ou     frontière    de -diffusion.  



       Comme    montré à la     fig.    9, on peut     disposer    sur le  fond 104     d'un    même récipient une série de dispositifs  suivant les     fig.    7 et 8, chacun de     ceux-ci    étant     fixé    par  une même bande 103 prévue     suffisamment    longue à     cet     effet.

   On     comprend    que si les pièces 101 de ces disposi  tifs ont été imprégnées de substances chimiques     diffé-          rentes,    on peut     ainsi    procéder simultanément à une série    d'études séparées     concernant    un même type de     cellules          vivantes.     



  Dans la variante de     réalisation    représentée aux  fi-. 10 et 11, le dispositif     comprend    une     przmiere    pièce  111 en matière absorbante,     découpée    de manière à pré  senter un     profil    ovale.

   Cette pièce 111 est     disposée    sur  une seconde pièce 112, de même profil     mais    de dimen  sions nettement plus     grandes,    fortement désaxée par  rapport à la     premiere.    La     pièce    111 est, avant séchage,       imprégnée    avec la     substance    chimique à essayer et avec  le     réactif    convenable.

       L'ensemble    est recouvert par une  couche de matière     étanche,        par    exemple par une bande       d'acétate    de cellulose 113, qui n'intéresse qu'une partie  seulement de la surface de la pièce     inférieure    112.  



  Le dispositif ainsi     constitué    est alors disposé contre  le fond d'un récipient     transparent.    Les     extrémités        dépas-          santes    de     1a    bande 113 assurent la     fixation    du dispositif  sur le fond -de ce récipient.  



  On conçoit que     l'utilisation    .d'un tel     dispositif    est  identique à     celle    décrite en référence aux     fig.    7 et 8. La  suspension cellulaire à étudier est disposée sur la partie       dépassante    de la pièce     inférieure    112, en quantité suffi  sante pour humecter l'ensemble du dispositif. Les vira  ges ou     autres        réactions    apparaissent rapidement sur la  pièce 112 au     niveau    de la frange de     diffusion    du réactif  indicateur et peuvent être lus à travers le fond transpa  rent du     récipient.     



  Comme montré à la fia. 12, il va de soi que la bande  113 peut, comme dans le cas de la     fig.    9, être prévue       suffisamment    longue pour assurer la     fixation    simultanée  de plusieurs     dispositifs    sur le fond 114 d'un même     réci-          pient,    lequel peut présenter en plan tout     profil    .désiré.  



       Dans    la forme -de     réalisation    représentée à la     fig.    13,       lie        @dispositif    -est     @directem!ent    obtenu en découpant une  ébauche unique 120 dans une feuille de matière absor  bante appropriée.

   Cette ébauche 120 présente une partie  ou pièce 121 et une     partie    ou pièce 122, toutes -eux à  profil     circulaire    mais de     diamètres    .différents.     Préalable-          ment    au découpage de,     cette    ébauche :on ,a :

  appliqué     ,sur    la  feuille de matière absorbante une bande 123 d'acétate  de     celluloses        .ou        .matière    analogue,     cette        btrsde    étant       dimensionnée    de     façon    à laisser à     découvert    sur     l'ébau-          chz        découpée    une petite surface 121 a sur la pièce 121 et  une     surface    plus grande 122a sur la pièce 122.  



  Une fois l'ébauche     ainsi        réalisée    on imprègne la  pièce 121 d'un mélange composé de la substance chimi  que à étudier et du     réactif    indicateur; cette     imprégnation     peut se     faire    soit en déposantRTI ID="0002.0209"WI="13" HE="4" LX="1682" LY="1970">  quelques    gouttes du       mélange    liquide précité sur la surface     découverte    121a,  soit en amenant cette     dernière    :au contact dudit mélange.

    Lors de     l'utilis-ation    du     dispositif,        il    suffit -de déposer sur  la surface découverte 122a la     suspension        cellulaire    en  quantité     suffisante    pour     imbiber    l'ensemble .du dispositif,  lequel est     placé    sur le fond d'un .récipient approprié.  



       iOn    .comprend que l'ébauche peut     présenter    tout     pro-          fil    désiré approprié. A la     fig.    14 on :a représenté une  ébauche 130     comprenant    une partie ou pièce 131 à pro  fil     substantiellement        circulaire,    à laquelle fait suite une  partie ou pièce 132 à     profil        rectangulaire    allongé;

   la       couche    133 de matière étanche     laisse    à découvert une  lunule 131a     pour    l'imprégnation,     ainsi    qu'une surface  132a pour le dépôt de     la    suspension cellulaire envisagée.

    Dans la variante de la     fig.    15,     l'ébauche        140,est    décou  pée de manière à présenter .deux parties ou pièces 141 et  142 à     profil        rectangulaire;

          ici    encore la     couche    143 de  matière étanche laisse à     découvert    deux zones 141 a et       142a    pour     l'imprégnation,        respectivement        peur    le     dépot         de la suspension     cellulaire.    Il va de soi que dans les deux  variantes des     fig.    14 et 15, la pièce 132, respectivement  142, peut     comporter    un prolongement présentant en  plan tout     profil    approprié,

   ledit     prolongement        pouvant     notamment être     conformé    de façon à faciliter 1a mani  pulation du dispositif.  



  On notera     d'ailleurs    que le terme  pièce  doit être  pris dans un sens très     large    pour désigner toute surface  découpée dans une feuille et présentant en plan un     profil     quelconque.  



  Dans tous     les    cas     ,on        comprend.    que le     dispositif    sui  vant l'invention peut être réalisé de manière simple et  économique. De plus et     surtout    son     utilisation    est     parti-          culièrement    pratique puisqu'elle     permet    l'obtention  rapide de résultats nets et précis.

Claims (1)

1. REVENDICATION Dispositif pour l'étude des cellules vivantes, caracté risé en ce qu'il est constitué par l'assemblage de deux pièces découpées dans une matière absorbante et conte nant localement une substance chimique déterminée et un réactif indicateur approprié,

   l'une de ces pièces étant recouverte .d'une couche de matière étanche en vue de réaliser des conditions de fermentation anaérobie tandis que l'autre est destinée à être mise en contact avec les cellules vivantes à étudier de façon à former support pour la migration du réactif indicateur précité après réaction avec les produits de dégradation provenant éventuellement de l'action des cellules sur la substance chimique.

   SOUS-REVENDICATIONS 1. Dispositif suivant la revendication, caractérisé en ce que la substance chimique est renfermée, à l'état sec, à l'intérieur de la pièce qui est destinée à être mise en contact avec les cellules vivantes. 2.

   Dispositif suivant la revendication et la sous-re- vendication 1, caractérisé en ce que la couche de matière étanche recouvre simultanément les deux pièces en lais sant à découvert l'une seule des faces de la pièce qui est destinée à être mise en contact avec les cellules vivantes. 3.

   Dispositif suivant la revendication, caractérisé en ce que la substance chimique et le réactif indicateur sont tous deux renfermés dans la pièce qui est recouverte par la couche de matière étanche.

   4. Dispositif suivant la revendication et la sous-re- vendication 3, caractérisé en ce que la pièce qui est des tinée à être mise en contact avec les cellules vivantes est réalisée en une matière absorbante susceptible de s'im biber d'une quantité de liquide suffisante pour que ladite pièce constitue directement support hydratant après

   imbibition avec une suspension cellulaire. 5. Dispositif .suivant la revendication et les sous-re- vendications 1 et 3, caractérisé en ce que les deux pièces sont assemblées en superposition. 6.

   Dispositif suivant 1a revendication et les sous-re- vendications 1 et 3, caractérisé en ce que les deux pièces sont assemblées en juxtaposition. 7. Dispositif suivant la revendication et les sous-re- vendications 1 et 3, caractérisé .en ce que la couche de matière étanche est constituée par une bande de matière souple. 8.

   Dispositif suivant la revendication et la sous-re- vendication 7, caractérisé en ce que la bande souple dépasse de part et d'autre du dispositif de manière à assurer la fixation simultanée de plusieurs dispositifs sur le fond d'un même récipient.

   9. Dispositif suivant 1a revendication et les sous- revendications 3 et 4, caractérisé en ce que les pièces sont constituées par deux ;parties. ,d'une même ébauche obtenue par découpage dans une feuille de matière ab sorbante.

   10. Dispositif suivant 1a revendication et les sous-re- vendications 3, 4, 7 et 9, caractérisé en ce que la couche de matière étanche laisse à .découvert d'une part une partie de la pièce correspondante pour l'imbibition du mélange liquide renfermant la substance chimique et le réactif indicateur,

   et d'autre part une partie de la pièce qui est destinée à être mise en contact avec les cellules vivantes à étudier, de manière à permettre l'imbibition de la suspension cellulaire. 11.

   Dispositif suivant la revendication et les sous-re- vendications 3 et 5, -caractérisé en ce que les deux pièces présentent un profil ovale, la pièce recouverte par la couche de matière étanche, prévue de surface réduite, étant fortement désaxée par rapport à celle destinée à être mise en contact .avec les cellules vivantes à étudier.