CH482831A - Verfahren zur Gewinnung von Lysergsäure-Derivaten - Google Patents

Description

      Verfahren        zur        Gewinnung    von     Lysergsäure-Derivaten       Das Hauptpatent Nr. 468 465 beschreibt ein Ver  fahren zur     Gewinnung    von     6-Methyl-Aa,

  9-ergalen-          8-carbonsäure    durch     saprophytische    Züchtung eines  neuen     konidienbildenden    Pilzstammes der     Species        Cla-          viceps        paspali    Stevens et Hall in     Submerskultur        resp.          Fermenterkultur    und anschliessende Extraktion der       6-Methyl-Qe@9-ergolen-8-carbonsäure    aus dem Kultur  filtrat auf an sich bekannte Weise.

   Dieser Pilz wurde  beim     United        States    Department of     Agriculture        (Nort-          liern        Utilisation    Research     and        Development    Division),       Peoria,        Ill.    hinterlegt und erhielt dort die Bezeichnung       NRRL    3080.  



  Es wurde nun gefunden, dass man aus diesem     Pilz-          stamm    durch Bestrahlung mit ultraviolettem Licht und  anschliessende Behandlung mit     Äthylenimin    auf an sich  bekannte Weise Mutanten gewinnen kann, die mehr       6-Methyl-Q8,9-ergolen-8-carbonsäure    zu bilden ver  mögen als der Ausgangsstamm.

       Eine    dieser Mutanten  wurde beim     United        States    Department of     Agriculture          (Northern        Utilisation    Research     and        Development    Divi  sion),     Peoria,        lll.    unter der Bezeichnung     NRRL    3167  deponiert.  



  Erfindungsgemäss kann man hierbei vorteilhafter  weise wie folgt verfahren:  Man suspendiert     Konidien    des Pilzstammes       NRRL    3080 in Wasser und verteilt diese Suspension  auf die     Agaroberfläche    einer mit     Malzagar    ausgegosse  nen     Petrischale.    Danach werden pro     Petrischale    ca.  1000 Sporen ausgesät.

   Die     Agaroberfläche    wird dann  mit ultraviolettem Licht bestrahlt, bis pro Platte nur  noch 5-10     Konidien    auskeimen; dieses entspricht einer       Abtötungsrate        von.        99-99,5        9/a    (Abstand von der Licht  quelle, z. B. Hanaulampe und Belichtungsdauer werden  in     Vorversuchen    empirisch ermittelt).

   Aus den überle  benden Sporen entstehen im Verlauf von 10-14 Tagen  bei 22      makroskopisch    sichtbare     Kolonien.        Diese    wer  den weiter     überimpft,    um auf die im Hauptpatent be  schriebene Weise Kulturen mit     Konidien    zu gewinnen.    Aus den so gewonnenen Mutanten werden mit  Hilfe von Züchtungsversuchen (z. B. in einer der im  Hauptpatent beschriebenen Kulturen) diejenigen  Stämme ausgewählt, die sich durch ein besonders  hohes     Alkaloidbildungsvermögen    auszeichnen und  einer weiteren     mutagenen    Behandlung mit Hilfe von       Äthylenimin    unterworfen.

   Hierfür werden die     Konidien     bei 24  während 2 Stunden     in        einer    1     %oigen        Äthylen-          iminlösung        suspendiert,        die    Sporen     mittels    eines       Membranfilters    von der Lösung getrennt, auf dem Fil  ter mit sterilem Wasser gewaschen und dann auf     Agar-          platten        ausgeimpft.    Bei dieser     Behandlung    beträgt die       Abtötungsrate    ca. 99 9/0.  



  Von den überlebenden Stämmen werden wiederum,  wie oben beschrieben, die Mutanten mit dem höchsten       Alkaloidbildungsvermögen    ausgewählt und gegebenen  falls noch 5-10 Male einer     mutagenen    Behandlung mit       Athylenimin    unterworfen.

   So erhält man beispielsweise  bei     6-facher    Wiederholung dieser Behandlung einen  besonders stark     alkaloidbildenden    Stamm, der beim       United        States    Department of     Agriculture        (Northern          Utilisation    Research     and        Development    Division),     Peo-          ria,   <B>111.</B> unter der Bezeichnung     NRRL    3167 deponiert  wurde.  



  Bei der Züchtung der Mutante     NRRL    3167 in der  im     Hauptpatentgesuch    beschriebenen Schüttelkultur  wird nach Aufarbeitung des Kulturfiltrates eine Aus  beute von 3330     mg/1    an Gesamtalkaloiden ermittelt;  davon sind 89     9/o        6-Methyl-A8,9-ergolen-8-carbonsäure     und     119/o        Clavinalkaloide.    In der im     Hauptpatentge-          such    beschriebenen     Fermenterkultur    produziert diese  Mutante 2480     mg/1    an Gesamtalkaloiden; davon 93 9/0       6-Methyl-/\8,11-ergolen-8-carbonsäure.  

Claims (1)

1. PATENTANSPRUCH Verfahren zur Gewinnung von 6-Methyl-OB#9- ergolen-8-carbonsäure durch Züchtung des konidienbil- denden Stammes von Calviceps paspali Stevens et Hall nach dem Patentanspruch des Hauptpatentes Nr. 468 465, dadurch gekennzeichnet, dass man zur Züchtung Mutanten dieses Pilzstammes, die ein höhe res Alkaloidbildungsvermögen aufweisen als der Aus gangsstamm, verwendet. UNTERANSPRUCH Verfahren nach Patentanspruch, dadurch gekenn zeichnet, dass man als Mutante den Pilzstamm NRRL 3167 verwendet.