CH631546A5 - Verfahren und vorrichtung zur messung der konzentration von niedrigmolekularen verbindungen in komplexen medien. - Google Patents

Verfahren und vorrichtung zur messung der konzentration von niedrigmolekularen verbindungen in komplexen medien. Download PDF

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CH631546A5
CH631546A5 CH1635376A CH1635376A CH631546A5 CH 631546 A5 CH631546 A5 CH 631546A5 CH 1635376 A CH1635376 A CH 1635376A CH 1635376 A CH1635376 A CH 1635376A CH 631546 A5 CH631546 A5 CH 631546A5
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dialyzer
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Gambro Ab
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Description

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Bestimmung der Konzentration einer niedrigmolekularen Verbindung in einem komplexen Medium, zum Beispiel Blut. Das erfindungsgemässe Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, dass ein kleinerer Teil des komplexen Mediums via einer semipermeablen Membrane dialysiert wird, wonach die Messung am Dialysat ausgeführt wird.
Dialyseverfahren und Vorrichtungen zur Ausführung solcher Verfahren, insbesondere zur Bestimmung des Glucosege-haltes im Blut, sind schon lange bekannt. Von besonderem Interesse ist hier die US-PS Nr. 3 483 990: Sie beschreibt ein System zur Glucosebestimmung, bei welchem der Glucosege-halt nach einer enzymatischen Reaktion in der Dialyseflüssigkeit kontinuierlich gemessen wird. Insofern entspricht die vorliegende Erfindung dem System zur Glucosebestimmung der erwähnten Patentschrift, das Ziel wird aber nach einem ganz anderen Prinzip erreicht. Ziel der früheren Erfindung ist es, eine möglichst grosse Menge Glucose so rasch wie möglich, unter Verwendung sowohl der Ultrafiltration als auch der Diffusion (d.h. nach dem üblichen Dialysemodus), dem Messgerät zuzuführen. Bei dem vorliegenden Verfahren hingegen soll nur ein kleiner Bruchteil der Menge an niedrigmolekularer Verbindung, und nur durch Diffusion, in die Dialyseflüssigkeit gelangen. Die Ultrafiltration wird ausgeschlossen, indem in der Dialyseflüssigkeit ein höherer Druck als in dem komplexen Medium aufrechterhalten wird. Auf diese Weise wird die Dialyse nach dem erfindungsgemässen Verfahren von dem Druck im komplexen Medium weitgehend unabhängig (im Gegensatz zum bereits beschriebenen Verfahren), da die Diffusion vom Druck unabhängig ist, während die Ultrafiltration von dem Druckunterschied auf beiden Seiten der Membrane herrührt.
Die Konzentrationsbestimmung der niedrigmolekularen 5 Verbindung wird vorzugsweise in Zusammenhang mit einer en-zymatisch erzwungenen chemischen Reaktion, beispielsweise Oxydation oder Hydrolyse, der niedrigmolekularen Verbindung unter Bildung von leichter analysierbaren Verbindungen ausgeführt. Hierbei wird die Messung in gewissen Fällen erleichtert, io falls das Dialysat mit einer Reagenzlösung und/oder einem zweckmässigen Puffer verdünnt wird, bevor die Analyse erfolgt.
Das Verfahren gemäss der Erfindung soll vor allem bei der Messung der Glukosekonzentration im Blut zur Anwendung kommen. Bei einer solchen Anwendung wird als Dialysator 15 zweckmässigst eine «Hohlfaserniere» mit vorzugsweise nur einer oder wenigen Hohlfasern benutzt, um die das Blut unter Überführung von niedrigmolekularen Verbindungen zur durchströmenden Dialyseflüssigkeit geleitet wird, wobei ein Dialysat gebildet wird, an dem die Messung erfolgt. Der Dialysefluss 2c durch jede einzelne Hohlfaser wird hierbei zweckmässigst separat gesteuert. Hierdurch wird der Fluss durch eine Hohlfaser unabhängig vom Fluss durch eine andere Hochfaser. Dies wird zweckmässigst dadurch zustandegebracht, dass jede Hohlfaser einen separaten Einlauf und/oder separaten Auslauf erhält und 25 mit separaten Pumpmechanismen verbunden wird.
Dem Fachmann ist klar, dass das erfindungsgemässe Verfahren natürlich auch zur quantitativen und/oder qualitativen Bestimmung von niedrigmolekularen Verbindungen in anderen komplexen Medien als Blut angewendet werden kann, beispiels-30 weise in mikrobiologischen Zuchtkammern.
Bei den vorstehend beschriebenen Verfahren können niedrigmolekulare Verbindungen vom komplexen Medium zur Dialyselösung in Richtung zu einem höheren Druck diffundieren. 35 Falls die Dialyse hierbei während einer kurzen bestimmten Zeit erfolgt, führt dies zum Resultat, dass nur ein sehr geringer Teil der niedrigmolekularen Verbindungen vom komplexen Medium fortgeführt wird. Die erhaltene Konzentration der niedrigmolekularen Verbindungen im Dialysat wird hierbei viel niedriger als 40 im komplexen Medium. Die Konzentration der niedrigmolekularen Verbindungen im Dialysat wird jedoch praktisch direkt proportional zur Konzentration im komplexen Medium.
Bei der Messung von Glukose im Blut wird das Dialysat mit einem Enzym in Kontakt gebracht, vorzugsweise Glukoseoxy-45 dase, zweckmässigst auf einer festen Matrix, zum Beispiel porösem Glas, immobilisiert. Glukoseoxydase katalysiert die Oxydation von Glukose unter Verbrauch von Sauerstoff, Bildung von Wasserstoffperoxyd und Entbindung von Protonen. Der Unterschied der Konzentration von 02, H+ oder H202, der vor bzw. so nach der enzymatischen Reaktion mit zweckmässigen Elektroden oder photometrisch, beispielsweise durch Ausnutzung eines pH-Indikators, leicht zu bestätigen ist, gibt somit eine Antwort, die durch Proportionalität unmittelbar die Glukosekonzentration im komplexen Medium anzeigt.
55 Die Messresultate werden zweckmässigst direkt in einem Computer ausgewertet.
Zur Messung von Glukosekonzentrationen kann als Enzym auch das Enzym Hexokinase zusammen mit Adenosintriphos-phat (ATP) benutzt werden, wobei Glukose-6-Phosphat und 60 Adenosindiphosphat (ADP) unter Veränderung gebildet werden, die man messen kann, zum Beispiel Wärmeentwicklung. Selbstverständlich ist es gleichfalls möglich, die Glukose an einem elektrochemischen Prozess zu beteiligen, beispielsweise in einer Verbrennungszelle mit Glukose und Sauerstoff als Reak-65 tanten und auf diesem Wege ein quantitatives Mass für die Glukosekonzentration zu erhalten.
Wird das erfindungsgemässe Verfahren bei der Messung von Penicillin angewendet, benutzt man als Enzym zweckmäs
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sigst Penicillinase, wobei die erfolgte pH-Veränderung bestimmt werden kann.
Bei der Anwendung des erfindungsgemässen Verfahrens zur Messung von Cholesterol wird als Enzym zweckmässigst Chol-esteroloxydase benutzt, wobei die Messung an der Änderung der Konzentration von Oz und/oder H202 erfolgen kann.
Bei der Anwendung des erfindungsgemässen Verfahrens zur Messung von Harnsäure ist es zweckmässig, als Enzym Uricase zu nehmen, wobei die Messung an der Änderung des pH-Wer-tes erfolgen kann.
Bei der Anwendung des erfindungsgemässen Verfahrens zur Messung von Harnstoff ist es angebracht, als Enzym Urease zu benutzen, wobei gebildete NH3 und/oder NH4 oder die Erhöhung des pH-Wertes bestimmt werden können.
Bei der Anwendung des erfindungsgemässen Verfahrens zur Messung eines beliebigen Substrates eines beliebigen Enzyms kann die Bestimmung in den meisten Fällen mit Hilfe eines Thermistors unter Nutzbarmachung der Temperaturveränderung, die bei enzymatischen Prozessen nahezu ausnahmlos erfolgt, ausgeführt werden.
Es ist angebracht, die Messung unter Konstanthaltung von Druck und Temperatur im Dialysator, und falls das Analyseinstrument hierfür empfindlich ist, auch der Messtelle selbst, vorzunehmen.
Wählt man die Dialysemembrane dünn mit relativ kleinen Poren, so wird die Ultrafiltration von Wasser gering. Hierbei wird die Diffusion über der Membrane hauptsächlich entscheidend. Die Dialyseleistung (Dialysanz, clearance) verändert sich damit bei angemessenen Druckveränderungen so unerheblich, dass es praktisch nicht notwendig ist, einen konstanten Druck zu halten. Es ist jedoch wünschenswert, dass der Druck in der Dialyselösung etwas höher ist, als in dem umgebenden komplexen Medium, da die schwache Ultrafiltration, die trotz allem stattfindet, das Risiko einer Ablagerung an den Hohlfasern von hochmolekularen Substanzen und Zellen vermindert.
Bei der Messung von Glukosekonzentrationen kann es angebracht sein, das Dialysat mit einer schwach sauren Lösung zu verdünnen, um den pH-Wert zum pH-Optimum des Enzyms zu senken. Falls eine photometrische Bestimmung der Glukosekonzentration erwünscht ist, kann zweckmässigst ein anderes Enzymbett, das beispielsweise immobilisierte Peroxydase enthält, für eine zweite enzymatische Reaktion zwischen Wasserstoffperoxyd und einem Substrat, das eine Farbreaktion verursacht, beispielsweise Ortho-Toluidin benutzt werden. Das Substrat für diese zweite Enzymstufe kann dann, von den Umständen abhängig, vor oder nach dem Glukoseoxydasebett zugesetzt werden.
Die Erfindung betrifft auch eine Vorrichtung zur Ausführung des vorstehend beschriebenen Verfahrens. Diese Vorrichtung ist durch Mittel zur Ausführung der Dialyse eines kleineren Teils des komplexen Mediums gekennzeichnet, wobei zu diesen Mitteln eine oder mehrere Leitungen zur Zuleitung von Dialyseflüssigkeiten bzw. Ableitung des erhaltenen Dialysates zu einem Messgerät gehören.
Der Dialysator besteht zweckmässigst aus einem Hohlfaser-dialysator mit vorzugsweise einer oder zwei hohlen semipermeablen Fasern mit separaten Eingängen, durch die die Dialyseflüssigkeit geleitet werden soll.
Als Alternative zum erwähnten Hohlfaserdialysator kann auch eine oder können einige semipermeable Hohlfasern, die Schlauchanschlüsse aufweisen, direkt in dem komplexen Medium angebracht werden.
Ferner gehören zur erfindungsgemässen Vorrichtung zweckmässigst Mittel zur Verdünnung des Dialysates durch Wasser, Puffer und/oder geeignete Reagenzien.
Die Analyse wird in gewissen Fällen dadurch ermöglicht, dass zur erfindungsgemässen Vorrichtung zwischen dem Dialysator und einem Messgerät ein Enzymbett eingeschaltet wird,
zum Beispiel ein Glasbett mit immobilisiertem Enzym zur Umwandlung des Stoffes, der gemessen werden soll, zu leichter messbaren Verbindungen. Die gewünschte enzymatische Veränderung kann selbstverständlich auch dadurch erreicht wer-5 den, dass die Verdünnungslösimg nach dem Dialysator und/ oder der Dialyseflüssigkeit das gewünschte Enzym in freier Form enthält.
Praktisch hat es sich als zweckmässig erwiesen, das Messgerät zur direkten Auswertung der erhaltenen Messresultate di-lo rekt an einen Computer anzuschalten.
Die Erfindung wird nachstehend unter Hinweis auf die beigefügten Zeichnungen näher beschrieben, auf denen als Beispiel bevorzugte Ausführungen der erfindungsgemässen Vorrichtung dargestellt sind. Es zeigen:
15 Fig. 1 ein Blockschema der Vorrichtung,
Fig. 2A, 2B und 2C drei zueinander winkelrechte Sichten eines Hohlfaserdialysators, der als Detail zur Vorrichtung gemäss Fig. 1 gehören kann,
Fig. 3A einen Plattendialysator, der als Detail zu einer Vor-2orichtung gemäss Fig. 1 gehören kann,
Fig. 3B einen Schnitt längs Linie HI-III in Fig. 3 A,
Fig. 4 zwei Enzymbetten, die als Detail zu Fig. 1 gehören können.
In Fig. 1 ist ein Reservoir für das komplexe Medium, das 25 analysiert werden soll, mit R bezeichnet. Via Leitung 1 wird das Medium mit Hilfe einer Pumpe PI nach einem Dialysator 2 hingepumpt. Besteht das Medium beispielsweise aus Blut, kann es zweckmässig sein, mit einer Pumpe P2 Heparin aus einem Reservoir 3 via Leitungen 4 nach einem nahe dem Einlauf von 30 Leitung 1 befindlichen Punkt zu pumpen. Dies geschieht dann, um die Koagulation des Blutes zu vermeiden.
Der Dialysator kann beispielsweise so gestaltet sein, wie in grösserem Masstabe in Fig. 2A, 2B und 2C oder in Fig. 3A und 3B dargestellt ist. In Fig. 2A, 2B und 2C besteht der Dialysator 35 aus einem Rohr 2, an das Leitung 1 durch einen Rohrstutzen 2a angeschlossen worden ist. Am anderen Ende des Dialysators ist Leitung 5 zur Ableitung des untersuchten Mediums durch einen Rohrstutzen 2b angeschlossen. Ferner ist der Dialysator in diesem Falle mit drei weiteren Rohrstutzen, 2c1; 2<^ und 2d ausge-40 rüstet, die zur Einführung bzw. Ausführung von zwei dünnen Hohlfasern 2e1 und 2e2 aus semipermeablem Membranenmaterial, beispielsweise regenerierter Zellulose, angebracht sind.
Das untersuchte Medium wird dann, wie aus Fig. 1 hervorgeht, via einem Druckmesser 6 und einem Druckregulator 7 45 durch eine Fortsetzung von Leitung 5 nach Reservoir R zurückgeleitet.
Mittels einer Pumpe P3 mit mehreren Kanälen wird die Dia-lysefiüssigkeit von einem Reservoir 8 durch Leitungen 9a und 9b zu den Rohrstutzen 2cj und 2c2 hingeleitet. An dieser wird 50 die Dialyseflüssigkeit in die Hohlfasern 2e1 und 2e2 eingeführt, um dann via Rohrstutzen 2d in eine Leitung 10 abgeleitet zu werden. Direkt nach dieser Leitung 10 wird mit Hilfe der gleichem Pumpe P3 die Pufferlösung und/oder Reagenzlösung von einem Reservoir 11 via einer Leitung 12 hingeleitet. Mit 13a 55 und 13b werden Druckmesser in Leitung 9a und 9b bezeichnet. Das verdünnte Dialysat wird dann, falls eine Differenzialmes-sung erforderlich ist, via Messtelle 15a und weiter durch eine Einheit 14, die immobilisiertes Enzym enthält, nach einer Messstelle 15 geleitet, zum Beispiel einer Messelektrode oder einem 60 Photometer, und weiter durch eine Leitung 16 via einem Durchflussmesser 17 oder einer Tropfkammer 24 mit Tropfenzähler zur Kontrolle der Durchflussgeschwindigkeit, und nach einem Abflussgefäss 18 herunter. In Fig. 1 sind sowohl ein genereller Durchflussmesser 17, als auch eine Tropfkammer 24 dargestellt. 65 Eines von beiden könnte natürlich fortfallen.
Das beispielsweise durch die Messelektrode oder Photozelle 15 erhaltene Resultat wird via einer Leitung 19 und der eigentlichen Messeinheit 20 einem Computer 21 zugeführt.
In Fig. 3 A und 3B besteht der Dialysator statt dessen aus einem Rohr 3, an das Leitung 1 durch einen Rohrstutzen 3b angeschlossen ist. Am anderen Ende des Dialysators ist Leitung 5 zur Ableitung des untersuchten Mediums durch einen gleichen Rohrstutzen 3b angeschlossen. Ferner ist der Dialysator in diesem Falle mit weiteren zwei Rohrstutzen 3c und 3d ausgerüstet, die zu Einführung bzw. Ableitung der Dialyseflüssigkeit unter der semipermeablen Membrane, die mit 3e bezeichnet ist, angeordnet sind.
Aus praktischen Gründen sind die Rohrstutzen 3c und 3d in einem losen, deckelartigen Teil 3f geformt, der mit Hilfe einer Schnappvorrichtung 3g auch dazu dient, Membrane 3e festzuklemmen.
In Fig. 4 ist angedeutet, wie die Enzymeinheit 14 aus zwei hintereinander geschalteten Enzymbetten, angeschlossen an Leitung 10 vom Dialysator (2) und Leitung 12 für die Verdün5 631546
nungsflüssigkeit oder dergleichen bestehen kann. Eine alternative Verdünnungsstelle zwischen den beiden Enzymbetten ist hierbei mit 12a angedeutet. Dieses System kann genutzt werden, um eine Farbveränderung zu bewirken und zu messen, 5 wobei es an einen Photometer 15b angeschlossen wird. Das Dialysat wird dann durch Leitung 16 nach einem eventuellen Durchflussmesser und weiter nach dem in Fig. 1 gezeigten Abflussbehälter 18 geleitet.
Die Erfindung ist natürlich nicht auf das vorstehend be-lo schriebene Ausführungsbeispiel beschränkt, sondern im Rahmen der vorstehenden Patentansprüche veränderlich. Zum Beispiel können zwei oder mehrere der vorerwähnten Pumpen beigeordnet werden, indem beispielsweise eine Schlauchpumpe zur Einwirkung auf zwei oder mehrere Schläuche gebracht wird. 15 Die erfindungsgemässe Vorrichtung eignet sich ebenfalls zur Messung anderer komplexer Medien als Blut.
C
4 Blatt Zeichnungen

Claims (32)

631546 PATENTANSPRÜCHE
1. Verfahren zur Messung des Gehaltes einer niedrigmolekularen Verbindung in einem komplexen Medium, dadurch gekennzeichnet, dass ein kleinerer Teil des komplexen Mediums via einer semipermeablen Membrane (2e) dialysiert wird, wonach die Messung am Dialysat erfolgt.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass eine oder mehrere rohrförmige semipermeable Membranen direkt in eine Quelle des komplexen Mediums, beispielsweise eine mikrobiologische Zuchtkammer oder eine Blutprobe, eingesetzt werden, wobei die Dialyseflüssigkeit durch die rohrförmige Membrane oder die Membranen geführt wird, wobei diese Membrane bzw. diese Membranen von dem komplexen Medium umgeben sind, wonach das gebildete Dialysat zur Messung aus dem komplexen Medium abgeleitet wird.
3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass die Messung am Dialysat nach oder in Verbindung mit einer chemischen Veränderung der niedrigmolekularen Verbindung mit Hilfe eines oder mehrerer Enzyme ausgeführt wird.
4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, dass das Enzym oder die Enzyme auf einer festen Matrix, zum Beispiel Glas, immobilisiert sind.
5 kose das Enzym Hexokinase zusammen mit Adenosintriphos-phat (ATP) benutzt wird, wobei Glukose-6-Phosphat und Ade-nosindiphosphat (ADP) gebildet wird unter messbarer pH-Veränderung und Wärmeentwicklung.
5. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das komplexe Medium, biespielsweise eine mikrobiologische Zuchtkammer oder eine Blutprobe, nach der Dialyse zur Quelle dieses Mediums zurückgeleitet wird.
6. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Dialysat mit Wasser, Puffer oder Reagenzlösung verdünnt wird, bevor die Messung erfolgt.
7. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass als Dialysator (2) eine «Hohlfaserniere» mit vorzugsweise nur einer oder wenigen Hohlfasern (2e) oder ein kleinerer «Plattendialysator» (Fig. 3) mit äusserst kleinem Volumen auf der Dialyseseite benutzt wird.
8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass der Dialysedurchfluss durch jede Hohlfaser unabhängig voneinander aber vorzugsweise gleich ist, dadurch, dass jede Hohlfaser einen separaten Einlauf erhält und via Schläuchen mit separaten Pumpmechanismen verbunden wird.
9. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass die rohrförmige, semipermeable Membrane, Hohlfaser und/oder Schlauchanschlüsse auf der Seite, die zum komplexen Medium, beispielsweise einer mikrobiologischen Zuchtkammer oder einer Blutprobe, weist, von einem Antikoagulans umgeben ist, zum Beispiel Heparin, das an der Oberfläche immobilisiert ist.
10. Verahren nach Anspruch 1 oder 3, dadurch gekennzeichnet, dass das Dialysat vor der Messung an einem Glasbett (14) mit einem oder mehreren immobilisierten Enzymen vorbeigeführt wird, wobei eine Reaktion oder eine Sequenz von Reaktionen unter Bildung eines Produktes oder Verbrauch eines Substrates, das direkt gemessen werden kann, zum Beispiel die Bildung eines gefärbten Produktes, Änderung der 02-Kon-zentration, Bildung von H202 und/oder Änderung der H+-konzentrauon, erioigi.
11. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Messresultat in Computer ausgewertet wird.
12. Verfahren nach einem der Ansprüche 1,3,4 und 10, dadurch gekennzeichnet, dass als Enzym für die Messung von Glukose das Enzym Glukosoxidase benutzt wird, wobei 02 verbraucht und H202 gebildet wird und der pH-Wert sinkt, welche Veränderungen alle mit verschiedenartigen Elektroden einfach gemessen werden können und, falls eine Farbreaktion gewünscht wird, das Enzymbett ausser Glukosoxidase auch das Enzym Peroxidase nach der Glukosoxidase im Durchflussystem enthält, wobei dadurch eine Farbreaktion zustandekommt, dass der Verdünnungslösung nach dem Dialysator oder Glukosoxi-dasebett ein geeignetes Substrat zur Peroxidase zugeführt wird,
beispielsweise Ortho-Toluidin, wobei ein gefärbtes Produkt gebildet wird.
13. Verfahren nach einem der Ansprüche 1,3,4 und 10, dadurch gekennzeichnet, dass als Enzym zur Messung von Glu-
14. Verfahren nach einem der Ansprüche 1,3,4 und 10,
lc dadurch gekennzeichnet, dass für die Messung von Penicillin als Enzym Penicillinase benutzt wird, wobei die erfolgte pH-Änderung gemessen werden kann.
15 Enzym Cholesteroloxidase benutzt wird, wobei die Messung am gebildeten Wasserstoffperoxid und/oder dem verbrauchten Sauerstoff erfolgen kann.
15. Verfahren nach einem der Ansprüche 1,3,4 und 10, dadurch gekennzeichnet, dass zur Messung von Cholesterol als
16. Verfahren nach einem der Ansprüche 1,3,4 und 10, dadurch gekennzeichnet, dass zur Messung der Konzentration
17. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, dass bei einem beliebig untersuchten Substrat die Temperatur-
18. Verfahren anch einem der Ansprüche 1,10 und 17, dadurch gekennzeichnet, dass die Messung unter Konstanthal-
19. Verfahren nach Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet, dass die Dialyse unter Bedingungen ausgeführt wird, die das System hauptsächlich unabhängig von Druckvariationen mass chen, was erreicht wird, indem Dialysemembranen mit kleinen
Poren gewählt werden und der Dialyseflüssigkeit ein höherer Druck als dem des umgebenden Mediums gegeben wird, so dass wesentlich die Diffusion und nicht die Ultrafiltration bestimmend für die Dialyseeffektivität wirkt, wobei gleichzeitig durch
40 die schwache Ultrafiltration zum komplexen Medium hin das Risiko einer Ablagerung an den Membranen reduziert wird.
20. Verfahren nach einem derAnsprüche 1,3,4 und 10, dadurch gekennzeichnet, dass das Dialysat vor einem ersten Enzymbett und/oder vor einem eventuellen zweiten Enzymbett
45 mit Wasser, Puffer und/oder Reagenzlösung verdünnt wird.
20 von Harnsäure oder Harnstoff als Enzym Uricase bzw. Urease benutzt wird, wobei die Messung am pH-Wert und/oder für Harnstoff am gebildeten NH4+ und/oder NH3 erfolgt.
21. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 20, dadurch gekennzeichnet, dass das komplexe Medium Blut ist.
22. Vorrichtung zur Ausführung des Verfahrens nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass Mittel zur Ausführung so der Dialyse eines Meineren Teiles des komplexen Mediums vorhanden sind, wobei zu diesen Mitteln eine oder mehrere Leitungen zur Zufuhr von Dialyseflüssigkeit bzw. Ableitung des erhaltenen Dialysates zu einem Messgerät (15,20) gehören.
23. Vorrichtung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeich-
55 net, dass die erwähnten Mittel zur Ausführung der Dialyse aus einem im wesentlichen kompletten Dialysator bestehen, zu dem Leitungen zur Zuleitung und Ableitung des zu untersuchenden komplexen Mediums bzw. zur Zuleitung von Dialyseflüssigkeit und Ableitung des erhaltenen Dialysates gehören.
so
24. Vorrichtung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass die erwähnten Mittel zur Ausführung der Dialyse ausser den erwähnten Leitungen im wesentlichen aus nur einer oder wenigen Hohlfasern aus semipermeablem Membranmaterial besteht, welche in dem untersuchten Medium direkt an-
65 bringbar ist bzw. sind.
25. Vorrichtung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass der Dialysator aus einem Hohlf aserdialysator (2) besteht, mit vorzugsweise nur einer oder wenigen hohlen Fasern
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(2e) aus einem semipermeablen Membranenmaterial, beispielsweise regenerierter Cellulose, wobei Dialyseflüssigkeit durch die Hohlfasern (2e) geleitet wird, die durch eine längliche Kammer laufen, in der das erwähnte komplexe Medium enthalten ist.
25 Veränderung zur Messung nutzbar gemacht wird, die die enzy-matische Reaktion verursacht, beispielsweise mittels eines oder mehrerer Thermistoren.
26. Vorrichtung nach Anspruch 22 mit einem Plattendialy-sator (fig. 3), dadurch gekennzeichnet, dass eine Membrane durch eine Befestigungsanordnung längs einem oder mehreren Teilen der Wand des Dialysators festgesetzt ist, durch die die Dialyseflüssigkeit gepumpt werden kann.
27. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 22 bis 26, dadurch gekennzeichnet, dass Mittel (11, P3) zur kontinuierlichen Verdünnung des Dialysators mit Wasser, Puffer und/oder Reagenzlösung vorhanden sind.
28. Vorrichtung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass zwischen dem Dialysator (2) und einem Messgerät (15, 20) ein oder mehrere Enzymbetten mit einem oder mehreren immobilisierten Enzymen in jedem Bett eingeschaltet sind, zum Beispiel Glasbetten zur Umwandlung der Verbindung, die bestimmt werden soll, unter Bildung eines leicht bestimmbaren Produktes oder Entstehung einer Veränderung.
29. Vorrichtung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass ein mit dem Messgerät (15,20) zusammengeschalteter Computer (21) zur Auswertung des erhaltenen Messresultates sowie Mittel (22,23, P4, P5) zur direkten Nutzbarmachung dieses Resultates bei der Behandlung des komplexen Mediums, dessen Gehalt an einer niedrigmolekularen Verbindung untersucht wird, vorhanden sind.
30. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 22 bis 27, dadurch gekennzeichnet, dass der Durchfluss durch das Messgerät von einem Durchflussmesser, beispielsweise einem Tropfenzähler (24), kontrolliert wird.
30 tung von Druck und/oder Temperatur im Dialysator (2) und/ oder an der Messteile (15) selbst erfolgt.
31. Anwendung des Verfahrens nach Anspruch 1 zur Messung des Gehaltes an einer niedrigmolekularen chemischen Verbindung im Blut.
32. Anwendung gemäss Anspruch 31 des Verfahrens gemäss Anspruch 8.
CH1635376A 1975-12-31 1976-12-27 Verfahren und vorrichtung zur messung der konzentration von niedrigmolekularen verbindungen in komplexen medien. CH631546A5 (de)

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