CH670642A5 - - Google Patents

Description

DESCRIPTION

L'invention concerne l'emploi des dérivés d'isoquinoléine tels que définis dans la revendication 1.

(i) Inhibition de la formation des peroxydes de lipides

Il est bien connu qu'une membrane cellulaire qui est constituée d'une couche double de lipides devient plus fragile lorsque les lipides qu'elle contient subissent une peroxydation et que des modifications 5 de la structure de la membrane cellulaire se produisent. Les médicaments pharmaceutiques qui inhibent la formation de peroxydes de lipides sont donc considérés comme efficaces pour maintenir à la fois les conditions normales de la membrane cellulaire et sa stabilité vis-à-vis des Stimuli extérieurs.

10 Par exemple, les peroxydes de lipides ont récemment été considérés comme un facteur responsable de l'artériosclérose ou des maladies artérioscléreuses. Comme les études fondamentales portant sur les peroxydes de lipides ont considérablement progressé au point qu'une quantité extrêmement faible de peroxydes de lipides dans le 15 sérum peut être déterminée quantitativement, il devient possible d'étudier la formation et la quantité des peroxydes de lipides comme indice d'évaluation clinique ou expérimentale des maladies liées à l'artériosclérose ou de l'artériosclérose expérimentale [voir «The Saishin Igaku» (en japonais), vol. 36, p. 659 (1981)]. L'intervention 20 des peroxydes de lipides dans l'éclosion pathologique et le développement de l'artériosclérose a été démontrée par de nombreux faits résultant des statistiques cliniques, des dossiers, de l'analyse des fonctions des plaquettes sanguines, des observations expérimentales biochimiques et pathologiques, des expériences sur l'animal et 25 autres.

Certaines fonctions pharmacologiques des peroxydes de lipides ont été maintenant élucidées. Les peroxydes de lipides favorisent la coagulation et l'adhérence des plaquettes sanguines, et une migra-3Q tion radicalaire à partir des peroxydes de lipides produit des lipoprotéines de densité anormalement basse (LDL modifiées) qui sont facilement ingérées par les macrophages. En conséquence, la formation des cellules mousseuses est accélérée et du cholestérol dérivé des LDL se dépose sur la paroi artérielle. De plus, on sait également que la modification des protéines dans les cellules endothéliales sous l'effet des peroxydes de lipides provoque des lésions des cellules ainsi que leur mort et leur dégradation [voir Domyaku Koka, «The Journal of Japan Atherosclerosis Society», vol. 8, p. 295 (1982)].

Il ressort de ces faits que, s'il était possible d'inhiber la formation 40 des peroxydes de lipides, on pourrait espérer éviter la sclérose, par exemple des vaisseaux sanguins. De plus, en dehors de la destruction de la membrane cellulaire dans laquelle des peroxydes de lipides se forment et d'une altération aiguë du tissu cellulaire, lorsque les peroxydes de lipides libérés par les cellules atteignent une forte concen-45 tration dans le sérum, les peroxydes de lipides peuvent provoquer des troubles de divers tissus périphériques, une atrophie des vaisseaux sanguins et la coagulation des plaquettes sanguines par formation de Prostaglandines dans les plaquettes. Par exemple, ime coagulation importante des plaquettes sanguines provoque une throm-50 bose, la destruction de la membrane lysosomiale provoque une inflammation, et la lésion des membranes des érythrocytes provoque une hémolyse. Egalement, un emphysème pulmonaire peut être provoqué par des altérations des membranes alvéolaires.

On considère donc qu'un composé capable d'inhiber fortement 55 la formation de peroxydes de lipides est efficace pour la prévention et/ou le traitement des états pathologiques ci-dessus.

(ii) Inhibition de la libération des enzymes lysosomiales et de la production d'oxygène actif

60 Récemment, la théorie des Prostaglandines, que l'on considérait comme une théorie importante pour la compréhension des causes des inflammations chroniques, a suscité certains doutes, et on a proposé à sa place une théorie de l'oxygène actif.

Bien que les leucocytes polynucléaires et les macrophages aient 65 une activité phagocytaire et soient donc considérés comme des cellules qui digèrent les substances étrangères et détruisent les bactéries rsqu'elles envahissent l'organisme, ces actions des leucocytes polynucléaires et des macrophages contre les bactéries et/ou les com-

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plexes antigènes/anticorps entraînent la production d'oxygène actif 02~ ■ ou • OH, ce qui entraîne une lésion directe des tissus et la libération d'enzymes lysosomiales.

Il existe de nombreuses publications qui révèlent la relation étroite entre l'inflammation et les lysosomes et le 02~ • libéré par les leucocytes. Par exemple la présence d'oxygène actif au site inflammatoire a été confirmée dans des expériences portant sur un modèle animal de l'inflammation, et une inhibition de l'œdème à la carragé-nine chez l'animal, de l'arthrite à l'adjuvant et du phénomène inverse d'Arthus chez le rat par la SOD (superoxyde-dismutase) a également été observée. De plus, on a également mentionné que la SOD est efficace dans l'administration locale à un malade atteint de rhumatisme, qui est une inflammation chronique typique [voir «The Saishin Igaku» (en japonais), vol. 35, N° 7, pp. 1343-1349 (1980), Y. Shiokawa et coll.].

Actuellement la polyarthrite rhumatoïde, la néphrite, la goutte rhumatismale et maladies similaires sont également considérées comme des inflammations chroniques en rapport avec les lysosomes. Toutes ces maladies provoquent une libération anormale d'enzymes lysosomiales provoquant des symptômes inflammatoires accompagnés de douleur. La libération prolongée d'enzymes lysosomiales par les cellules peut provoquer une inflammation chronique. En même temps, l'oxygène actif, y compris 02~~ • qui est produit par les leucocytes polynucléaires, peut également provoquer des lésions des tissus, ce qui entraîne un accroissement du site inflammatoire, et un passage à la chronicité peut se produire.

Donc, si la libération des enzymes lysosomiales et la production d'oxygène actif sont efficacement inhibées, cela peut vraisemblablement entraîner une inhibition de l'accentuation de la chronicité inflammatoire.

(iii) Inhibition de la libération d'histamine

Il est bien connu que les mastocytes sont des cellules granulaires basophiles qui présentent une métachromasie positive aux colorants basiques se répartissant de façon très générale dans les tissus con-jonctifs et qui libèrent de l'histamine et des leucotriènes, qui sont des médiateurs de la réaction allergique.

On considérait à ce jour que les tissus conjonctifs n'avaient qu'une fonction de support de l'organisme. Actuellement, on peut considérer les tissus conjonctifs comme un agent de régulation de diverses actions cellulaires, par exemple l'apport de substances nutritives aux cellules; l'élimination des métabolites cellulaires; la conservation de l'environnement cellulaire; la protection des cellules contre les invasions exogènes par établissement d'un site inflammatoire, ou similaires. D'autre part, les progrès récents de la biologie et de la biochimie cellulaires ont à nouveau attribué aux mastocytes en soi un rôle important comme cellules intervenant dans diverses actions physiologiques [voir Taisha, «Metabolism and Disease», vol. 13, N° 5, numéro spécial contenant des articles sur les mastocytes, Na-kayama Shoten, Japon (en japonais)].

Par exemple, de nouvelles découvertes sur la pathogenèse de la recto-colite hémorragique ont été récemment rassemblées. Le symptôme principal de cette maladie, c'est-à-dire l'apparition d'une inflammation persistance de la muqueuse du côlon, peut reposer sur une altération du mécanisme protecteur contre l'invasion d'un antigène, tel qu'une bactérie, à travers l'intestin et sur l'établissement d'une auto-immunité vis-à-vis de la muqueuse du côlon.

Cette maladie est associée à une allergie immédiate et à une allergie retardée. Dans la phase aiguë, la pathologie repose sur l'établissement de l'allergie immédiate dans la muqueuse du côlon. En fait, une concentration élevée de l'histamine dans le plasma, une augmentation des éosinophiles dans la muqueuse du côlon, une diminution des mastocytes et similaires sont observées dans cette phase. En correspondance avec l'allergie immédiate, la formation de substances vasostimulantes et des troubles de la microcirculation dans l'intestin peuvent apparaître, et divers symptômes de la phase aiguë semblent dus à l'augmentation de la perméabilité de la muqueuse du côlon et au renforcement de la paralysie musculaire.

On a précédemment mentionné que le cromoglycate, qui peut inhiber la dégranulation des mastocytes, c'est-à-dire qui est un inhibiteur de la libération de l'histamine, peut être efficace contre la rec-to-colite hémorragique. En d'autres termes, on peut s'attendre qu'un composé susceptible de présenter une activité inhibitrice puissante de la libération d'histamine par les mastocytes sera particulièrement efficace pour le traitement de la recto-colite hémorragique.

On a récemment établi que l'histamine joue un rôle important non seulement comme médiateur de l'inflammation aiguë dans le stade primaire, mais également comme régulateur de la chronicité de l'inflammation. Par exemple, les fibroblastes ont un ou plusieurs récepteurs à l'histamine, et on peut considérer que l'histamine accélère la production de collagène. D'autres part, le fait que les mastocytes augmentent dans les tissus fibreux a également été confirmé.

En conséquence, on peut considérer que, si l'on exerce une action quelconque inhibant la libération d'histamine, l'accélération de la fibrose, c'est-à-dire l'accroissement de la production de collagène, peut être indirectement inhibtée dans les tissus présentant un degré élevé de chronicité de l'inflammation. Les composés qui possèdent ces dernières propriétés et qui, simultanément, peuvent inhiber la formation des peroxydes de lipides, la libération des enzymes lysosomiales et la production d'hygiène actif, seraient donc utiles à des po-sologies raisonnables dans le traitement par exemple des maladies s'accompagnant d'une propagation anormale de fibres, en particulier pour l'inhibition efficace de la fibrose pulmonaire, le traitement des chéloïdes après une opération et l'inhibition efficace d'une propagation anormale des fibres due à une lésion ou similaires.

Un premier but de l'invention est donc de fournir une catégorie de composés pouvant posséder un tel ensemble de propriétés distinctes. Dans leur recherche de tels composés, les présents inventaires se sont finalement intéressés à un composé connu sous le nom de trito-qualine, ce composé pouvant être désigné par le nom chimique: 7-amino-4,5,6-triéthoxy-3-(5,6,7,8-tétrahydro-4-méthoxy-6-méthyl-l,3-dioxolo-[4,5-g]-isoquinoléine-5-yl-)phtalide, C26H32N20 et étant représenté par la formule développée (I) suivante:

<0

N-CH

OCntî

OCH

"OC., H

O

La tritoqualine est un composé que l'on utilise en clinique comme médicament efficace contre les maladies allergiques appelées allergies de type I, telles que la pollinose, l'asthme et l'urticaire. En fait, la tritoqualine est connue pour avoir des propriétés inhibitrices en ce qui concerne l'activité de l'histidine-décarboxylase, une enzyme connue pour catalyser la décarboxylation de l'histidine en histamine.

K. Ishii et coll. ont également effectué une étude clinique des effets thérapeutiques de la tritoqualine comme inhibiteur de l'histidine-décarboxylase dans l'hépatite chronique active, lorsqu'on soupçonne l'hyperhistaminémie d'être la cause des lésions hépatiques chez des malades atteints d'hépatite chronique active. En fait, ils ont mentionné [«Nihon Shokakibyo Gakkai Zasshi», 74 (9), 1187-1194 (1977) et «Gastroenterologia Japonica», 13 (2), 105-110 (1978)] les résultats obtenus par administration de doses journalières comprises entre 600 et 1600 mg de tritoqualine à 13 malades atteints d'hépatite chronique active. Une amélioration nette des fonctions hépatiques et une diminution de la fibrose avec infiltration cellulaire ont été observées sur des échantillons de biopsie hépatique prélevés aux malades, en particulier pour les doses de 1200 à 1600 mg/jour de tritoqualine.

Bien que K. Ishii et coll. n'aient pas mentionné d'effets secondaires importants, ce résultat n'a pas été confirmé lorsque des protoco5

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les thérapeutiques semblables ont été appliqués à un nombre plus important de malades. En fait, des effets secondaires parfois assez sévères, plus particulièrement des vertiges et des nausées, ont été observés chez une proportion importante des malades traités, bien que d'autres aient paru mieux tolérer la dose relativement élevée de médicament. Ces différences de tolérance n'ont pas été expliquées.

Donc, parmi les divers buts de l'invention, l'un des principaux est de remédier au moins en partie aux difficultés rencontrées dans le programme thérapeutique élargi portant sur des malades atteints d'affections hépatiques, et notamment de trouver des moyens pour éviter les effets secondaires qui sont apparus chez une proportion importante des malades traités par la tritoqualine.

Un but plus général de l'invention est d'ouvrir de nouveaux domaines d'emploi de la tritoqualine et de composés chimiquement homologues dans le traitement de maladies associées à une production excessive in vitro de peroxydes de lipides et, plus particulièrement, la sclérose des vaisseaux sanguins et les maladies apparentées, y compris les maladies dans lesquelles interviennent également une libération incontrôlée des enzymes lysosomiales et une surproduction d'oxygène libre et/ou une production excessive d'histamine.

D'autres buts de l'invention sont en relation avec l'emploi de la tritoqualine et d'homologues chimiques de celle-ci pour la production de compositions pharmaceutiques plus particulièrement orientées vers les nouveaux domaines d'emploi entrant dans le cadre de la présente description ainsi que de compositions pharmaceutiques convenant mieux au traitement de certaines des maladies pour lesquelles l'emploi de la tritoqualine était envisagé, mais avec au moins une diminution, sinon l'absence totale d'effets secondaires.

On a découvert que toutes les propriétés biologiques qui ont été précédemment mentionnées sont simultanément possédées par les composés de formule I. Cela est illustré par les exemples ci-après.

Un premier mode de réalisation de la présente invention fournit un procédé pour la production d'une composition médicamenteuse pour un traitement comprenant: (i) l'inhibition de la formation de peroxydes de lipides, (ii) l'inhibition de la libération des enzymes lysosomiales et la production d'oxygène actif, et/ou (iii) l'inhibition de la libération d'histamine, traitements qui comprennent l'administration d'un composé ou dérivé d'isoquinoléine représenté par la formule générale:

(I)

ou d'un sel correspondant, où Y indique un atome d'oxygène ou de soufre; R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 et R9 indiquent indépendamment un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupe alcoyle, un groupe hydroxyle, un groupe alcoxy, un groupe alcoyl-halogénosubstitué, un groupe thioalcoyle, un groupe amino ou un groupe nitro; sinon deux groupes adjacents de R1 à R4 ou R6 à R9 peuvent former ensemble un cycle fermé d'un groupe alcoylène

;(ch2)

m où m est l'entier 3 ou 4 ou d'un groupe alcoylènedioxy où n est l'entier 1,2 ou 3; et Rs indique un atome d'hydrogène, un groupe alcoyle, un groupe hydroxyle ou un groupe alcoxy.

L'invention va maintenant être décrite de façon plus détaillée.

Dans la formule (I), les groupes alcoyles et alcoylhalogénosubsti-tués ont normalement 1 à 3 atomes de carbone. On préfère particulièrement les groupes méthyles et éthyles. Les groupes alcoxy et thioalcoxy ont normalement 1 à 3 atomes de carbone. L'atome d'halogène est normalement le brome ou le chlore, et l'atome d'halogène du groupe alcoylhalogénosubstitué est normalement le fluor, le brome ou le chlore.

Les dérivés d'isoquinoléine représentés par la formule (I) peuvent par exemple être préparés de la façon suivante.

Le composé (I), où R6 et/ou R9 sont un atome d'halogène ou un groupe nitro, peut être obtenu par réaction de condensation d'un composé de formule:

(II)

20

dans laquelle R1 à R5 sont comme défini ci-dessus et X~ est un anion tel que I", Br-, Cl-, CH30S03- ou OH-, et un dérivé de phtalide de formule:

6

7

,r

(III)

dans laquelle R6 à R9 et Y sont comme défini ci-dessus, sous réserve qu'au moins un de R6 et R9 soit un halogène ou un groupe nitro. Le 35 composé (I) dans lequel R6 et/ou R9 sont un groupe amino peut être préparé par réduction du groupe nitro de R6 et/ou R9 du produit de condensation ci-dessus en le groupe amino.

La réaction de condensation s'effectue généralement par chauffage des composés réagissants (II) et (III) dans un milieu alcoolique 40 tel que le méthanol et l'éthanol à une température de 40 à 100° C pendant 1 à 20 heures. Le groupe nitro peut être réduit en le groupe amino au moyen d'un agent réducteur quelconque du groupe nitro, par exemple le chlorure stanneux, l'étain-acide chlorhydrique et le fer-acide chlorhydrique ou par hydrogénation catalytique. 45 Les composés de formule (III), dont certains sont connus, peuvent être obtenus par nitration ou halogénation d'un dérivé de phtalide de formule:

6

r

(IV)

ss dans laquelle R6 à R9 et Y sont comme défini ci-dessus, sous réserve qu'au moins un de R6 et R9 soit un atome d'hydrogène comme décrit dans «Justus Liebig's Annalen der Chemie», 98, 46 (1860).

Les sels d'ammonium des dihydro-isoquinoléines substituées représentées par la formule (II), dont certains sont également connus, 60 peuvent être obtenus par réaction d'une dihydro-isoquinoléine substituée de formule:

1

(V)

5

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dans laquelle R1 à R4 sont comme défini ci-dessus avec un composé R5X de façon habituelle. Le composé de formule (V) peut être obtenu selon le procédé décrit dans «Organic Reactions», 6, 74 (1951).

Le composé de formule (I), dans lequel R® et R9 sont tous deux autres qu'un halogène ou un groupe nitro ou amino, peut être obtenu par réduction d'un composé répondant à la formule suivante:

dans laquelle R1 à R4 sont comme défini ci-dessus avec un acide car-boxylique répondant à la formule suivante:

(ix)

R'

R-

(vi)

dans laquelle R1 à R9 et Y sont comme défini ci-dessus. Le produit réduit est le composé (I) dans lequel R5 est un atome d'hydrogène. La N-alcoylation et la N-hydroxylation du produit ainsi réduit peuvent produire le composé (I) dans lequel R5 est respectivement un groupe alcoyle ou un groupe hydroxyle. Le composé (I) dans lequel R5 est un alcoxy peut être produit par N-hydroxylation du produit réduit suivi d'une O-alcoylation.

La réduction du composé (VI) est généralement effectuée par hydrogénation catalytique avec du palladium, de l'oxyde de platine ou du nickel de Raney, comme catalyseur, ou au moyen du borohy-drure de sodium, dans un milieu constitué de méthanol, d'éthanol, etc. La N-alcoylation peut être effectuée au moyen d'un composé al-coylique halogéné. En particulier, la N-méthylation est effectuée par emploi de formaline-acide formique. La N-hydroxylation peut être effectuée avec des agents oxydants, tels que le peroxyde d'hydrogène. La O-alcoylation des dérivés N-hydroxylés peut être obtenue par exemple par emploi de composés alcoylés halogénés.

Le composé de formule (VI) peut être obtenu par condensation d'un composé répondant à la formule suivante:

(VII)

dans laquelle R6 à R9 et Y sont comme défini ci-dessus. La réaction de couplage peut être effectuée par emploi d'un agent de couplage habituel, par exemple le dicyclohexylcarbodiimide ou un chlorocar-bonate d'alcoyle, ou par transformation de l'acide carboxylique en chlorure d'acide. Le composé (IX) peut être synthétisé par exemple selon le procédé décrit dans «Journal of Chemical Society», 127, 740 (1925).

Des exemples du composé actif (I) selon l'invention que l'on peut préparer comme précédemment décrit figurent ci-dessous:

ch3o

"TêO-

oc2h5

oc2h5 oc2h5

2-méthy]-6-méthoxy-l-(4,5,6-triéthoxy-7-amino-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine

OC2H5

oc2h5

o nh.

2-méthyl-6,7,8-triméthoxy-l-(4,5,6-triétoxy-7-amino-3-phtalidyl)-1,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine

dans laquelle R1 à R9 et Y sont comme défini ci-dessus selon le procédé décrit dans «Journal für praktische Chemie», 313,923 (1971). La réaction de condensation est généralement effectuée par chauffage du composé (VII) avec de l'oxychlorure de phosphore ou du pentoxyde de phosphore, comme agent de condensation, soit sans solvant soit dans un solvant tel que le benzène, le toluène, le chlorure de méthylène ou le chloroforme.

Sinon, le composé de formule (VII) peut être obtenu par la réaction de couplage d'un composé répondant à la formule suivante:

A

,2

n-ch3

oc2h5

0A^Toc2H5

oc2h5

<

nh-

2-méthyl-6,7-méthylènedioxy-l-(4,5,6-triéthoxy-7-amino-3-phtali-dyl)-l,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine ch.

o

.n-ch3

R

r"

(VIII) 65

oc2H5

O

2H5

2"5

NH-

2,5-diméthyl-l-(4,5,6-triéthoxy-7-amino-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahy-dro-isoquinoléine

670 642

0°G-c,

%1° o

3

?C2H5 oc2h5

ch3o

CH-jO

O

OC2h5

n-ch

3

M02

nh2

2-méthyl-6,7-éthylénedioxy-l-(4,5,6-triéthoxy-7-amino-3-phtalidyl)-1,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine

©Û1-CH3 oc2h5

°C1oXOC2H5

Il OC2H5 0 nh2

2-méthyl-l-(4,5,6-triéthoxy-7-amino-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine ch-jci och.

o och3

2-méthyl-6,7-diméthoxy-l-(4-nitro-6,7-diméthoxy-3-phtalidyl)-1,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine

CH3O

ch.

20

och.

o och.

25 2-méthyl-6,7-diméthoxy-l-(4-amino-6,7-diméthoxy-3-phtalidyl)-1,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine och.

h-ch-

30

o och.

2-hydroxy-6,7-diméthoxy-l-(6,7-diméthoxy-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine ch3o, ch3o n-och-

och.

35 3

2-méthyl-6,7-diméthoxy-l-[6,7-diméthoxy-3-(l-thiophtalidyl)]-1,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine n-ch.

och 3

o och3

2,6,7-triméthoxy-l-(6,7-dimét]ioxy-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine

45

och.

2-méthyl-6-liydroxy-l-(6,7-diméthoxy-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahy-dro-isoquinoléine och.

o och-

2-méthyl-6,7-diméthoxy-l-(6,7-diméthoxy-3-ph.talidyl)-1,2,3,4-tétra-hydro-isoquinoléine

50

55

och.

och-

o och-

2-méthyI-6,7-diméthoxy-l-(4-bromo-6,7-diméthoxy-3-phtalidyl)-1,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine o och.

2-méthyl-6-méthylthio-(6,7-diméthoxy-3-plitalidyl)-l,2,3,4-tétrahy-dro-isoquinoléine

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La présente invention comprend, comme composé actif, un sel convenant en pharmacie des dérivés d'isoquinoléine ci-dessus, par exemple des sels minéraux tels que ceux formés avec l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide iodhydrique, l'acide sulfurique, 65 l'acide nitrique ou l'acide phosphorique; ou des sels organiques tels que ceux de l'acide acétique, l'acide citrique, l'acide maléique, l'acide fumarique, l'acide succinique, l'acide lactique, l'acide tartrique ou l'acide benzoïque.

L'invention concerne donc plus particulièrement un procédé de production d'un médicament pour le traitement de l'homme ou d'un animal, comprenant l'administration d'une quantité d'un composé de formule (I) efficace pour inhiber la formation de peroxydes de lipides, procédé qui est efficace pour maintenir la stabilité de la membrane cellulaire et est utile dans le traitement et la prévention des maladies associées aux peroxydes de lipides, en particulier l'athérosclérose, la sclérose artérielle et les maladies artérioscléreuses, l'agrégation anormale des plaquettes sanguines, les thromboses, l'emphysème pulmonaire et les troubles des tissus périphériques.

L'invention concerne de plus un procédé de production d'un médicament pour une thérapeutique comprenant l'administration d'une quantité d'un composé de formule (I) qui est efficace pour inhiber la libération des enzymes lysosomiales et la production d'oxygène actif. La réactivité cellulaire aux composés de formule (I) est spécifique des cellules inflammatoires et, par conséquent, les autres cellules, telles que les cellules sanguines, par exemple les érythrocytes ou les plaquettes, sont peu modifiées. Les composés actifs ont une forte affinité pour les cellules inflammatoires et inhibent la réaction des cellules inflammatoires contre des stimulations externes par pénétration dans la membrane cellulaire pour s'associer aux lipides qu'elle contient. Dans les tissus inflammatoires, les composés de formule (I) inhibent également la chronicité de l'inflammation qui est due à une détérioration et/ou à une prolongation de l'inflammation due à un trouble tissulaire provoqué par l'oxygène actif ou qui est due à une destruction tissulaire par les enzymes lysosomiales et similaires. On peut de façon avantageuse remplacer par les composés de formule (I) la SOD qui, en raison de son poids moléculaires élevé, ne peut pas être administrée par voie orale et qui risque de provoquer une réaction antigène/anticorps. Donc, la gamme d'emploi de la SOD est limitée. En revanche, dans le procédé de la présente invention, les dérivés d'isoquinoléine ou leurs sels peuvent être administrés par voie orale. Donc, le procédé de l'invention est efficace pour le traitement de la polyarthrite rhumatoïde, de l'arthrite déformante, de la goutte rhumatismale, de diverses inflammations chroniques et similaires.

L'invention concerne de plus la production de médicaments pour un procédé thérapeutique qui comprend l'administration d'une quantité d'un composé de formule (I) qui, en plus des actions précitées, est efficace pour inhiber fortement la libération d'histamine par les mastocytes. Par conséquent, le procédé de l'invention concerne également la production d'un médicament qui est efficace contre diverses maladies dans lesquelles l'histamine intervient également. En, d'autres termes, les dérivés d'isoquinoléine de formule (I) ou leurs sels sont efficaces contre des maladies, par exemple la recto-colite hémorragique, que l'on peut actuellement considérer comme associées aux mastocytes selon les résultats récents d'études des mécanismes pharmacologiques.

Le procédé de l'invention est de plus efficace pour la production de médicaments pour l'inhibition de l'accroissement pathologique de la production de collagène dans les tissus atteints d'un degré de chronicité inflammatoire, pour la thérapeutique de maladies s'ac-compagnant d'une propagation anormale de fibres, en particulier de la fibrose pulmonaire, ou consécutives à une lésion ou à une intervention chirurgicale (traitement des chéloïdes).

Dans le procédé d'inhibition de la formation des peroxydes de lipides, en particulier en excès de la quantité normalement tolérée par un hôte sain, le dérivé actif d'isoquinoléine décrit précédemment peut être administré par voie orale ou parentérale. Des exemples des voies parenterales sont les voies d'administration sous-cutanée, intraveineuse, intramusculaire et intrapéritonéale. La dose du composé actif dépend de l'âge, de l'état de santé, du poids corporel du malade et des complications associées. Cependant, la dose préférable peut de façon typique se situer dans la gamme de 50 à 2000 mg, en particulier de 100 à 500 mg par jour, qui peuvent être administrés de préférence par voie orale en une ou plusieurs fois.

L'administration orale peut être effectuée sous forme de comprimés, de capsules, de poudres ou d'élixirs et, d'autre part, l'adminis670 642

tration parentérale peut être effectuée sous forme de liquides ou de suspensions stérilisés. L'ingrédient actif peut être accompagné de supports et d'adjuvants solides ou liquides non toxiques convenant en pharmacie.

On peut citer comme exemple de support solide la gélatine et similaires. Les capsules, comprimés ou poudres préparés avec un tel support solide, comprennent généralement 5 à 95%, et de préférence 25 à 90%, en poids de l'ingrédient actif.

Comme exemple de support liquide, on peut citer l'eau, les huiles végétales telles l'huile d'arachide, l'huile de soja et l'huile de sésame et toute autre huile animale et huile synthétique convenant en pharmacie. En général, on préfère comme support liquide une solution salée physiologique, une solution de dextrose ou de saccharose et des glycols tels que le propylèneglycol et le polyéthylèneglycol. En particulier une solution injectable contenant une solution salée physiologique comprend 0,5 à 20% en poids, de préférence 1 à 10% en poids, de l'ingrédient actif.

Une forme pharmaceutique liquide pour l'administration orale est une suspension ou un sirop comprenant 0,5 à 10% en poids de l'ingrédient actif. Son support peut être choisi parmi les agents d'aromatisation, les sirops ou les micelles convenant en pharmacie.

Les exemples suivants sont présentés pour mieux illustrer l'invention. Ces exemples ne doivent pas être considérés comme limitant la portée de l'invention.

Exemple 1

OC., H

3

OC,H

NO

(2)

.0

<

.N-CH

O

CH.O

OH

N-CH

N-CH

CH - O

OC

OC

OC,H

NO

H H

(3)

(4)

A 26,1 g (0,11 mol) de cotarnine (1) on ajoute 34,2 g (0,11 mol) de 4,5,6-triéthoxy-7-nitrophtalide (2) et 88 ml de méthanol. On chauffe la solution à reflux pendant 10 heures. Après refroidissement, on ajoute 176 ml de méthanol et 66 ml de méthylisobutylcé-tone et on agite à la température ordinaire pendant 1 heure. On sépare par filtration les cristaux non dissous, on lave avec 50 ml de méthanol et on sèche. On obtient 37,0 g de 2-méthyl-6,7-méthyJène-dioxy-8-méthoxy-l-(4,5,6-triéthoxy-7-nitro-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine (3) avec un rendement de 64%.

A un mélange de 26,5 g (0,05 mol) du produit (3), on ajoute 11,9 g (0,1 mol) de poudre d'étain, 100 ml d'acétone et 117 ml d'acide chlorhydrique 1ÌN en une période de 1,5 heure en refroidissant avec un bain d'eau. Après agitation à la température ordinaire pendant 1 heure, on évapore l'acétone sous pression réduite. On extrait la couche aqueuse deux fois avec 150 ml de dichloroéthane et on ajoute progressivement, aux couches combinées de dichloroéthane, 150 ml d'une solution aqueuse à 10% d'hydroxyde de sodium. On sépare la couche de dichloroéthane et on lave deux fois avec 100 ml d'une solution aqueuse à 1% du sel disodique de l'acide éthylènediaminetétracétique puis avec 100 ml d'eau. Après séchage sur sulfate de magnésium anhydre, on chasse le solvant par distillation. La recristallisation du résidu dans la méthyléthylcétone fournit

7

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

670 642

23,0 g (rendement 92%) de tritoqualine (4) : point de fusion 180-181° C et IR (KBr, cm-1) = 3470, 3350, 2990, 2950, 2900, 2810, 1740,1490,1380,1265, 1090 et 1035.

Exemple 2

2-Ethyl-6,7-mêthylènedioxy-8-méthoxy-l-(4,5,6-triéthoxy-7-nitro- ou amino-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahydro-isoquinolêine

OCH-(1)

OCH. (2)

Dans 15 ml d'acétone on dissout 4,04 g (19,7 mmol) de 6,7-mé- 15 thylènedioxy-8-méthoxy-3,4-dihydro-isoquinoléine (1), puis on ajoute 6,15 g (39,4 mmol) d'iodure d'éthyle, puis on chauffe à reflux pendant 1,5 heure. Après refroidissement à une température d'environ 10° C, on sépare par filtration les cristaux précipités, on lave avec 2 ml d'acétone et on sèche pour obtenir 5,55 g d'iodure de 2- 20 éthyl-6,7-méthylènedioxy-8-méthoxy-3,4-dihydro-isoquinolinium(2) avec un rendement de 78%. Le composé (2) ainsi obtenu a un point de fusion de 157° C après recristallisation dans l'éthanol et a le spectre IR (KBr) suivant: 2980,1655,1615,1495, 1380,1340,1300, 1240,1100 et 1045 cm-1. 25

OS

ch3O

'C2HS

OS

M-C2HS

(2)

CH30 OH (3)

A 4,24 g (11,7 mmol) d'iodure de 2-éthyl-6,7-méthylènedioxy-8-méthoxy-3,4-dihydro-isoquinolinium (2) on ajoute 60 ml d'eau, puis on ajoute 3 ml d'une solution aqueuse à 25% d'hydroxyde de sodium après refroidissement à environ 15° C. On extrait deux fois le

45

produit traité par l'hydroxyde (3) avec 40 ml et 20 ml de chlorure de méthylène et, après séchage sur sulfate de magnésium anhydre, on concentre sous pression réduite.

On ajoute au résidu 3,64 g (11,7 mmol) de 4,5,6-triéthoxy-7-nitrophtalide et 8,5 ml de méthanol, puis on chauffe le mélange à reflux pendant 3 heures. Après refroidissement, on rajoute 8,5 ml de méthanol, puis on agite le mélange à la température ordinaire pendant 1 heure. On sépare par filtration les cristaux précipités, on lave deux fois avec du méthanol (2x4 ml) et on sèche pour obtenir 3,10 g de 2-éthyl-6,7-méthylènedioxy-8-méthoxy-l-(3,4,5,6-tri-éthoxy-7-nitro-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine(4) avec un rendement de 49%.

On dissout 3,10 g (5,7 mmol) du composé (4) dans 14,8 ml d'acide acétique, puis on ajoute 8,18 g de chlorure stanneux dihy-draté dans 9,0 ml d'acide chlorhydique concentré en refroidissant par l'eau. Après agitation à la température ordinaire pendant 3,5 heures, on ajoute 110 ml d'eau et 70 ml de chloroforme, puis on ajoute progressivement une solution aqueuse à 25% d'hydroxyde de sodium dans un bain glacé jusqu'à ce que le pH de la couche aqueuse soit d'environ 11.

On ajoute 8 g de Célite-545 et on agite le mélange réactionnel pendant 15 minutes, puis on filtre à travers une couche de Célite-545. On lave la couche de célite avec du chloroforme (2 x 50 ml) et on combine le filtrat et les liquides de lavage. On lave ensuite la couche chloroformique séparée avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium (50 ml), on sèche sur sulfate de magnésium anhydre et on chasse le solvant par distillation sous pression réduite.

On ajoute au résidu 10 ml de méthanol et 1,0 g d'hydroxyde de potassium à 85% et on chauffe le mélange à reflux pendant 2 heures. Après refroidissement, on sépare par filtration les cristaux précipités et on lave avec du méthanol (2x2 ml). On reprend dans un mélange de 30 ml de chloroforme et de 15 ml d'eau, et on ajoute de l'acide chlorhydrique concentré jusqu'à ce que le pH de la couche aqueuse soit d'environ 2. Après 10 minutes d'agitation, on ajuste le pH de la couche aqueuse à environ 11 avec une solution aqueuse à 25% d'hydroxyde de sodium et on sépare. On extrait la couche aqueuse avec 10 ml de chloroforme et on lave les couches chlorofor-miques combinées avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium (15 ml). Après séchage sur sulfate de magnésium anhydre, on chasse le solvant par distillation sous pression réduite et on recristallise le résidu dans l'éthanol pour obtenir 1,96 g de 2-éthyl-6,7-méthylènedioxy-8-méthoxy-l-(4,5,6-triéthoxy-7-amino-3-phtalidyl)-1,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine (5) avec un rendement de 67%.

Les propriétés physiques du composé N° 5 figurent dans le tableau I. Les composés Nos 3,4 et 6 du tableau I sont également préparés de façon semblable.

Tableau I

Composé n"

y r1

r2

r3

r4

r5

r6

r7

r8

r'

Poinl de fusion (°c)

IR (KBr) (cm"')

1

o h

<>

CH3O

ch3

oc2h5

OC2hs oc2h5

nh2

180-181

3470, 3350, 2990, 2950, 2900, 2810, 1740, 1490, 1380, 1265, 1090, 1035

2

o h

<0>

ch3o ch3

h h

och3

OCH3

176

3

o h

CH30

A

0 0 v ch3

oc2Hs oc2h5

oc2hs nh2

184-185

3525, 3420, 2980, 2940, 2900, 1730, 1445, 1380, 1050, 1030

4

o h

<s>

ch3o ch3

oc2h5

oc2h5

oc2hs no2

147,5-149,5

2990, 1770, 1550, 1485, 1380, 1345, 1100, 1045, 1015

5

o h

A

0 0

M

CH3O

c2hs oc2h5

oc2h5

oc2h5

nh2

158-159

3520, 3410, 2980, 2930, 2900, 1725, 1480, 1380, 1255, 1065, 1035

6

o h

chjo chjo h

ch,

oc2h5

OC2Hs oc2hs nh2

142-143

3460, 3370, 2980, 2940, 1745, 1515, 1470, 1380, 1270, 1025

4

9

670 642

Les propriétés biologiques et pharmacologiques des composés de l'invention sont de plus illustrées par les exemples suivants. Ces exemples qui utilisent des composés représentatifs de la catégorie totale de composés ne doivent pas être considérés comme ayant un quelconque caractère limitatif. Certaines des utilisations cliniques desdits composés sont également illustrées de façon non limitative.

Exemple 3

On prépare des peroxydes de lipides in vitro en utilisant des mi-crosomes hépatiques de rats. On prépare les microsomes de façon habituelle à partir de rats à jeun depuis 24 heures et on en ajuste la concentration finale à 15-18 mg de protéines/ml.

Aux microsomes ainsi préparés, on ajoute du Fe(N03)3, de l'ADP (adénosine diphosphate), du NADPH (nicotinamide adénine dinucléotide phosphate), du glucose 6-phosphate et de la glucose 6-phosphate-déshydrogénase pour que les concentrations finales de ces additifs soient respectivement de 200 p.M, 7 mM, 7,5 mM, 20 mM et 2,0 UI.

On incube le mélange obtenu à 37° C pour produire les peroxydes de lipides. On mesure l'activité d'inhibition de la formation des peroxydes de lipides que possèdent le composé N° 1 et la vitamine E. On détermine la quantité de peroxydes de lipides selon la méthode TBA [méthode au thiobarbiturate, «Biochemical Medicine», vol. 15, p. 212 (1976)] et on l'exprime en la quantité (nmol) de MDA (dialdé-hyde malonique) dans 1 mg de protéines.

Les résultats figurent dans le tableau II.

Tableau II

Quantité de MDA produite (nmol/mg de protéines)

Composé (dose en |iM)

Période d'incubation

5 min

10 min

Témoin

2,15±0,14

2,76 ±0,14

Composé N° 1

3,3

1,80±0,12

2,25 ±0,21

10

1,71 ±0,12

1,80±0,06

33

1,50 ±0,05

1,62 ±0,02

100

1,37 ±0,02

1,37±0,05

Vitamine E

10

2,37 ±0,21

100

2,06 ±0,001

2,62 ±0,07

1000

2,06 ±0,016

2,29 ±0,14

Exemple 4

On produit des peroxydes de lipides in vitro dans des membranes cellulaires en utilisant des hépatocytes isolés au moyen de collagê-nase.

On prépare les hépatocytes isolés selon le procédé de perfusion de collagénase à partir du foie d'un rat auquel on a administré pendant une semaine du phénobarbital dans l'eau de boisson. On recueille les hépatocytes isolés (1 x 106 cellules/ml de solution de Hanks contenant 1% de sérumalbumine bovine et 10 mM d'Hepes, pH 7,4) dans une fiole conique dans laquelle on place les composés étudiés. On incube ensuite les cellules à 37° C et on produit des peroxydes de lipides par addition de tétrachlorure de carbone (5 mM).

On mesure l'activité d'inhibition de la formation des peroxydes de lipides des composés figurant dans le tableau I et de la vitamine E. On détermine la quantité de peroxydes de lipides selon la méthode de Mihara et coll. [Yakugaku Zasshi, «Journal of the Phar-maceutical Society of Japan», vol. 102, N° 7, 670-677 (1982)] et on l'exprime par le taux d'inhibition (%) de la formation de peroxydes de lipides après addition de tétrachlorure de carbone.

Les résultats figurent dans le tableau III.

Tableau III

Composé N°

Concentration (nM)

% d'inhibition au MDA libre (3 heures)

1

10

77,3

2

10

42,4

3

10

76,9

4

10

28,6

5

10

68,6

6

10

47,6

Vitamine E

10

13

Exemple 5

Les peroxydes de lipides augmentent dans le foie des rats traités par le CC14. On administre par voie orale à des rats, à la dose de 2 ml/kg, du tétrachlorure de carbone à 25% V/V dans l'huile d'olive. Après 24 heures, la quantité de peroxydes de lipides dans le foie des rats traités par le tétrachlorure de carbone s'élève à environ 6 fois celle des rats non traités. On détermine la quantité de peroxydes de lipides selon la méthode de Mihara et coll. comme dans l'exemple 3 et on l'exprime en la quantité (nmol) de MDA dans 1 g de foie. On mesure l'activité d'inhibition de la formation des peroxydes de lipides du composé N" 1 et de la vitamine E.

On administre le composé N° 1 par voie orale aux rats traités par le tétrachlorure de carbone sous la forme d'une suspension dans l'agent tensio-actif Tween 80 en une quantité de 25, 50 ou 100 mg/kg par jour pendant 9 jours avant le traitement par le tétrachlorure de carbone.

Les résultats figurent dans le tableau IV.

Tableau IV

Composé (dose: mg/kg)

Quantité de MDA produite (nmol/g de foie)

Non traités

59,6 ±7,2

Témoins ne recevant que du CC14

328,2± 35,8

Composé N° 1

25 50 100

333,0 ±54,3 328,5 ±50,8 171,0±23,6*

Vitamine E 50

104,0 ±18,4**

*P<0,05 **P<0,01

Exemple 6

Dans les 20 heures qui suivent l'injection de 10 ml de caséine à 1 % dans la cavité abdominale d'un cobaye, de nombreux leucocytes polynucléaires apparaissent dans la cavité. On peut déterminer l'activité des leucocytes polynucléaires dans un système in vitro. En résumé, l'addition de myristate-acêtate de phorbol PMA comme stimulant dans un tube à essai contenant un tampon et les leucocytes polynucléaires provoque une production de 02_ • par les leucocytes polynucléaires. Simultanément la libération d'enzymes lysosomiales et la production de leucotriènes sont également provoquées [voir Wei Hsueh et coll., «Nature», 290 (23), 710-713 (1981)].

Dans un tel système la production de 02~ • est fortement inhibée lorsqu'on ajoute le PMA au système après incubation préalable en présence des composés indiqués dans le tableau I.

Donc, on effectue des mesures en utilisant les leucocytes polynucléaires (LP) induits par la caséine à 1 % et le PMA (phorbol-12-myristate-13-acétate) comme stimulant. On agite tout d'abord, à 37° C, 1830 ni de tampon phosphate à pH 7,4, 50 ni de cytochrome

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

670642

10

C (Cyt C) dans la sérumalbumine bovine, 20 (il d'un échantillon (composé) et 50 (il de LP. Après addition de 50 (il de PMA à une concentration finale de 125 ng/ml, on suit les variations de la réduction du site C par l'absorption à 550 nm. Le nombre des LP par tube est de 2 x 106 cellules.

Les résultats figurent dans le tableau V.

Tableau V

Tableau VI

Concentration

Inhibition

CI50

PrtmnfïQP N°

V'ViXipUüV .L'I

(UM)

(%)

(jiM)

1

•l

3,3

15,4

10,0

53,9

33,0

58,8

15,9

3

3,3

34,9

10,0

59,9

33,0

66,2

7,2

5

3,3

49,2

10,0

65,8

33,0

60,3

1,8

6

3,3

0,9

10,0

14,0

33,0

41,1

45,1

Exemple 7

On peut étudier expérimentalement la libération d'histamine in vitro par l'emploi de mastocytes provenant de la cavité abdominale de rats. Après incubation préalable des mastocytes en présence d'un anticorps de type IgE, c'est-à-dire un anticorps IgE préparé par sensibilisation d'un lapin avec une protéine provenant de l'épiderme d'un ascaride, l'addition d'un antigène IgE correspondant, c'est-à-dire de la protéine préparée à partir de l'épiderme d'un ascaride, provoque la libération d'histamine par les mastocytes. Cette libération d'histamine peut également être provoquée par l'addition d'un composé stimulant artificiel, le composé 48/80, ou d'ATP (adénosine triphosphate) aux mastocytes.

Une forte activité inhibitrice de la libération d'histamine des composés Nos 1 et 3 figurant dans le tableau I a été confirmée par l'étude in vitro utilisant le composé 48/80 comme stimulant et la protéine extraite de l'épiderme d'ascaride.

On recueille de façon classique les mastocytes dans la cavité abdominale de rats mâles Wistar pesant 400-450 g. Après incubation préalable de 5 x 104 cellules dans du tampon de Krebs-Ringer à pH 7,4 pendant 10 minutes, on ajoute 0,1 ng/ml du composé 48/80. Après incubation pendant encore 10 minutes, on sépare les cellules par centrifugation à 3000 tr/min pendant 15 minutes. Ensuite, on mesure quantitativement l'histamine dans le surnageant selon la méthode de Shore décrite dans «J. Phar. Exp. Ther.», vol. 127,182-186 (1959). Comme témoin, on mesure la quantité totale d'histamine contenue dans les mastocytes. On calcule selon l'équation suivante un rapport de la quantité d'histamine libérée après le traitement avec le composé 48/80 comme stimulant à la quantité totale d'histamine comme témoin:

Composé* N°

Concentration (UM)

% d'inhibition

CI50

3,3

4,7

1

10,0

56,3

8,5 (iM

33,0

90,7

3,3

-1,5

3

10,0

18,0

16,2 nM

33,0

91,3

* dissous dans HCl 0,1N.

30

40

% d'inhibition :

quantité d'histamine après le traitement quantité totale d'histamine dans les mastocytes Les résultats figurent dans le tableau VI. —>

x 100

60

Les exemples 8 à 10 suivants illustrent la préparation de comprimés et de granules de la présente invention.

Exemple 8

On mélange, avec un granulateur-sécheur fluidisé, 15 kg de tritoqualine, 1,11 kg d'amidon de maïs, 4,65 kg d'amidon de pomme de terre et 2,7 kg d'avicel. On pulvérise le mélange obtenu avec une so lution aqueuse préalablement préparée à 5% d'hydroxypropylcellu-lose ayant un faible degré de substitution pour former des granules et on sèche les granules obtenus. On place les granules séchés dans un mélangeur en V et on ajoute 2,7 kg d'avicel. Ensuite, on ajoute

0,54 kg d'un mélange de stéarate de magnésium et de talc dans un rapport pondéral de 1/1 et on presse en comprimés pesant 182 mg.

Sur la surface des comprimés obtenus, on applique à raison de

6 mg/cm2 un revêtement comprenant 6,1 parties en poids d'hydroxy-

propylméthylcellulose, 1,2 partie en poids de polyéthylèneglycol

6000, 1,8 partie en poids d'oxyde de titane, 0,9 partie en poids de talc, une petite quantité de silicone et 90 parties en poids d'eau.

Le comprimé obtenu se désintègre en 10 minutes. De plus,

il ne présente pas de modification sous une lampe fluorescente à 1200 000 lx • h et en lumière solaire directe.

Exemple 9

On mélange, avec un granulateur-sécheur fluidisé, 20 kg de tritoqualine, 0,76 kg d'amidon de maïs, 2,4 kg d'amidon de pomme de terre et 1,35 kg d'avicel. On pulvérise les granules mélangés avec

14 kg d'une solution aqueuse préalablement préparée à 5% d'hy-droxypropylcellulose ayant un faible degré de substitution, puis on sèche. Après transfert des granules obtenus dans un mélangeur en V, on rajoute 1,35 kg d'avicel et on mélange. On ajoute ensuite 0,54 kg d'un mélange 1/1 (en poids) de stéarate de magnésium et de talc et on façonne en comprimés pesant 270 mg.

Pour préparer des comprimés protégés contre la lumière et stables à la lumière, on forme un revêtement comme dans l'exemple 3.

Exemple 10

Après mélange de 2000 g de tritoqualine, 5000 g d'amidon de maïs, 700 g d'hydroxypropylcellulose ayant un faible degré de substitution et 300 g d'hydroxypropylméthylcellulose, on ajoute 4000 g d'eau et on malaxe. Après granulation dans un granulateur cylindrique muni d'une toile ayant des mailles de 0,8 mm, on sèche les granules à 60° C pendant 1 heure, puis on ajuste leur taille avec un oscillateur. On tamise les granules obtenus pour obtenir des granules séparés aux tamis d'environ 1-0,25 mm d'ouverture de maille.

On munit les granules obtenus d'un revêtement à raison de 18% en poids. Le revêtement est constitué de 5 parties en poids d'hydroxypropylméthylcellulose, 7,5 parties en poids d'oxyde de titane, 1 partie en poids de polyéthylèneglycol 6000,2 parties en poids de talc, 0,5 partie en poids de stéarate de magnésium et 74 parties en poids d'éthanol. On ajoute aux granules enrobés 2% en poids de talc et on tamise le mélange obtenu pour obtenir un produit séparé aux tamis d'environ 1-0,2 mm d'ouverture de maille.

Le produit obtenu a un temps de désintégration de 1-2 minutes. .

L'exemple suivant illustre un essai sur l'animal utilisant des chiens beagles auxquels le médicament est administré par voie orale.

; Exemple 11

On administre de la tritoqualine par voie orale à des chiens beagles mâles âgés de 9 semaines pesant 9,5-12 kg, Hazleton, à jeun ou 30 minutes après un repas à la dose de 200 mg/kg.

11

670 642

La tritoqualine a été micronisée avec un broyeur à jets PJM-100 NP, Nihon Newmatic Kogyo KK, Japon (10% ou plus de 3 micromètres ou moins, 80% de 3-5 micromètres et 10% ou moins de 15 micromètres ou plus; moyenne 7 micromètres) ou a été séparée avec un tamis d'environ 0,15 mm d'ouverture de maille. On met les 5 particules obtenues en suspension dans une solution aqueuse à 1% de Tween 80 avant l'emploi. On utilise donc la tritoqualine sous la forme d'une suspension à une concentration de 100 mg/ml.

Avant l'administration et 0,5,1,2, 3 et 5 heures après l'administration, on prélève 1 ml de sang dans la veine de la patte avant, on 10 l'introduit dans un tube à centrifuger revêtu de BHA Venoject contenant de l'héparine, Thermo Inc., et on centrifuge. On introduit 100 ni du plasma ainsi obtenu dans un petit tube à essai en verre que l'on a revêtu de 1 }j.g de BHA. On ajoute dans le tube 190 jj.1 de nos-capine (100 ng dans 1 ml d'acêtonitrile) comme étalon interne et 15

Enfin, l'invention concerne de plus les composés répondant à la formule (I) précédente et qui sont en soi nouveaux, en particulier ceux que l'on peut représenter par la formule générale (I) ci-dessus,

sous réserve que cette dernière ne couvre pas les composés 1, 2, 5 et 6 précédemment cités en exemple. 35

De façon semblable, l'invention concerne de plus des compositions pharmaceutiques contenant l'un quelconque des composés de formule (I) comme limité par la réserve précitée, en association avec un véhicule pharmaceutique, de préférence un véhicule approprié à l'administration orale de ladite composition pharmaceutique. Donc, 40 les nouvelles compositions pharmaceutiques préférées de l'invention peuvent être sous la forme de l'une quelconque des compositions préférées ayant été précédemment décrites plus particulièrement en relation avec la tritoqualine, en dehors du fait que la tritoqualine est remplacée par l'un quelconque des nouveaux composés envisagés. 45

10 |il d'acêtonitrile. Après 1 minute de mélange, on centrifuge à 3000 tr/min pendant 5 minutes.

On soumet le surnageant obtenu à une Chromatographie liquide haute pression dans les conditions décrites ci-dessus.

Les mesures quantitatives de la tritoqualine dans le plasma sont effectuées selon la méthode de l'étalon interne. On calcule l'aire sous la courbe (AUC) avec la formule des trapèzes.

Conditions de la Chromatographie liquide haute pression:

colonne: Zorbax C-8 4,6 x 250 mm solvant: acétonitrile aqueux à 80%, 2,5 mM, Pic B-7 débit: 1,5 ml/min détecteur: fluoromètre, Hitachi 650-10LC, Ex 340 nm, Em 440 nm pompe: Altex A100

L'AUC des concentrations sanguines pour les 5 heures suivant l'administration figure dans le tableau VII.

Les nouvelles compositions pharmaceutiques particulièrement préférées de l'invention contiennent également les gammes des doses préférées qui ont été précédemment définies ici, en fonction du domaine d'utilisation thérapeutique auquel on les destine.

L'invention concerne de plus les médicaments emballés comprenant l'un quelconque des composés définis ci-dessus pour lesdits procédés thérapeutiques, lesdits médicaments emballés comprenant un emballage et éventuellement une notice séparée, ledit emballage et/ou ladite notice comprenant des instructions pour l'emploi desdits médicaments. L'invention concerne de façon encore plus particulière les médicaments emballés dans lesquels lesdites instructions fournissent des directives destinées à l'utilisateur lorsque cet utilisateur est atteint des affections hépatiques précitées, ces directives visant à permettre un ajustement approprié du programme d'absorption des doses journalières précitées relativement à l'absorption des repas.

Tableau VII: A UC de la concentration de la tritoqualine dans le sang pour 5 heures

A jeun

30 min après le repas

L/lllcQ

N°

Micronisation

<0,15 mm

Micronisation

<0,15 mm

<0,15 mm

(200 mg/kg)

(200 mg/kg)

(200 mg/kg)

(200 mg/kg)

(50 mg/ml)

1

125,3

674,5

861,5

186,8

2

76,8

281

720,5

702,3

176

3

500,5

13,5

522

1012,5

152,3

4

62

0

610

748,3

126,5

5

654,3

20,3

500,5

498,8

181,5

323,4 ±300

88,0 ±118,9

605,5 ±94,9

764,7 ±190,8

164,6 ±25,1

R

Claims (4)

670 642

1 R

dans laquelle Y indique un atome d'oxygène ou de soufre, R1, R2, R3, R4, R5, R®, R7, R8 et R9 indiquent indépendamment un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupe alcoyle, un groupe hydroxyle, un groupe alcoxy, un groupe alcoyle halogénosubstitué,— un groupe thioalcoyle, un groupe amino ou un groupe nitro; ou deux groupes adjacents de R1 à R4 ou R6 à R9 forment un cycle fermé d'un groupe alcoylène où m est 3 ou 4 ou d'un groupe alcoylènedioxy où n est 1, 2 ou 3; et R5 indique un atome d'hydrogène, un groupe alcoyle, un groupe hydroxyle ou un groupe alcoxy pour la production d'une composition pharmaceutique destinée au traitement de maladies associées à une production excessive de peroxydes de lipides dans laquelle les composés sont en une quantité efficace pour inhiber la formation des peroxydes des lipides et la production d'oxygène actif, la libération d'enzymes lysosomiales par les leucocytes polynucléaires et les macrophages et la libération d'histamine par les mastocytes.

1. Utilisation des dérivés d'isoquinoléine ou d'un de leurs sels de formule:

2. Utilisation selon la revendication 1 pour la production d'une composition pharmaceutique destinée au traitement de l'athérosclérose, de l'atériosclérose et des maladies artérioscléreuses, d'une agrégation et d'une adhérence anormales des plaquettes sanguines et au traitement et à la prévention de la thrombose, de l'emphysème pulmonaire et des troubles des tissus périphériques.

2

REVENDICATIONS

3. Utilisation selon l'une des revendications 1 ou 2, où ledit dérivé d'isoquinoléine est la tritoqualine.

4. Utilisation selon l'une des revendications 1 ou 2, où ledit dérivé d'isoquinoléine est choisi parmi: la2-méthyl-6,7-méthylènedioxy-8-méthoxy-l-(6-méthoxy-7-méthoxy-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine, la2-méthyl-6-méthoxy-7,8-méthylènedioxy-l-(4,5,6-triéthoxy-7-amino-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine, la2-méthyl-6,7-méthylènedioxy-8-méthoxy-l-(4,5,6-triéthoxy-7-nitro-3-phtalidyl)-1,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine,

la 2-éthyl-6,7-méthylènedioxy-8-méthoxy-l-(4,5,6-triéthoxy-7-amino-3-phtalidyl)-l,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléme, la2-méthyl-6,7-diméthoxy-l-(4,5,6-triéthoxy-7-amino-3-phtalidyl)-1,2,3,4-tétrahydro-isoquinoléine.